BG64642B1 - Фармацевтичен състав с продължително освобождаване на лекарствени средства, капсулирани в микрочастици на хиалуронова киселина - Google Patents

Фармацевтичен състав с продължително освобождаване на лекарствени средства, капсулирани в микрочастици на хиалуронова киселина Download PDF

Info

Publication number
BG64642B1
BG64642B1 BG102969A BG10296998A BG64642B1 BG 64642 B1 BG64642 B1 BG 64642B1 BG 102969 A BG102969 A BG 102969A BG 10296998 A BG10296998 A BG 10296998A BG 64642 B1 BG64642 B1 BG 64642B1
Authority
BG
Bulgaria
Prior art keywords
microparticles
hgh
hyaluronic acid
release
group
Prior art date
Application number
BG102969A
Other languages
English (en)
Other versions
BG102969A (bg
Inventor
Myung-Jin Kim
Sun-Jin Kim
Oh-Ryong KWON
Original Assignee
Lg Chemical Ltd.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=19501732&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=BG64642(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Lg Chemical Ltd. filed Critical Lg Chemical Ltd.
Publication of BG102969A publication Critical patent/BG102969A/bg
Publication of BG64642B1 publication Critical patent/BG64642B1/bg

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A61K9/0024—Solid, semi-solid or solidifying implants, which are implanted or injected in body tissue
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
    • A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/1629—Organic macromolecular compounds
    • A61K9/1652—Polysaccharides, e.g. alginate, cellulose derivatives; Cyclodextrin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

Фармацевтичният състав включва протеин или пептид, капсулиран в твърди микрочастици на хиалуронова киселина или нейна неорганична сол, като размерът на микрочастиците е от 0,1 до 40 m.

Description

Област на изобретението
Настоящото изобретение се отнася до фармацевтичен състав с продължително освобождаване на протеиново или пептидно лекарство, капсулирано в твърди микрочастици на хиалуронова киселина или нейни соли, както и до съдържащ го инжекционен състав.
Протеиновите или пептидните лекарствени средства обикновено се приемат чрез инжектиране поради бавното им абсорбиране при прием през устата. Веднъж инжектирани, тяхното in vivo действие продължава само за кратък период от време и поради тази причина при необходимост от дългосрочно лечение се налага допълнително инжектиране. Например лечението на деца, страдащи от дефицит на хипофизен хормон на растежа, се извършва чрез ежедневно инжектиране на рекомбиниран човешки хормон на растежа за период от повече от 6 месеца. Следователно, фармацевтичен състав с продължително освобождаване на лекарствени средства, който състав не изисква неефикасни дневни приеми, е крайно необходим в такива случаи.
Типичен фармацевтичен състав с продължително освобождаване на протеиново или пептидно лекарство, например човешки хормон на растежа, се приготвя чрез капсулиране на лекарство в микрочастици на биохимично разложим полимерен матричен материал, който бавно освобождава лекарственото средство при in vivo разпадане. В този смисъл са проведени обширни проучвания за развитие на разложими по биохимичен път полимери, подходящи за употреба във фармацевтични състави с продължително освобождаване на лекарствени средства, като за ефективни за тази цел са определени разложимите по биохимичен път полиестери като полилактид, полигликолид, поли(лактид-ко-гликолид), поли-орто-естер и полианхидрид [М. Chasin и R. Langer, et al., Biodegradable Polymers as Drug Delivery System, Mercel Dekker (1990) и J. Heller, Adv. Drug Del. Rev., 10, 163 (1993)].
Проведени са и други проучвания за получаване на фармацевтични състави с продължително освобождаване на лекарствени средства, които използват естествени полимерни материали, каквито са желатин, колаген, цитозан, карбоксиметил целулоза, алгинат и хиалуронова киселина. Естественият полимер в общия случай формира гел при поставянето му във водна среда и този вид високо вискозна гел матрица, чрез която лекарството се разпространява много бавно, се използва в получаването на състави с продължително освобождаване на лекарствени средства.
Например US5416017 разкрива инжекционен състав с продължително освобождаване от еритропоетин, който състав използва гел, съдържащ от 0.01% до 3% хиалуронова киселина; JP No 1 -287041(1989) описва инжекционен състав с продължително освобождаване на инсулин, който състав използва гел, получен с 1% хиалуронова киселина; и JP No 2-00213(1990) съобщава за фармацевтичен състав с продължително освобождаване от калцитонин, елканонин или човешки хормон на растежа, използващ гел, съдържащ 5% хиалуронова киселина. По подобен начин Meyer et al., разработват фармацевтичен състав с продължително освобождаване от гранулоцит-колониестимулиращ фактор, който състав използва гел, съдържащ от 0.5 до 4% хиалуронова киселина [James Meyer, et al., J. Controlled Release, 35, 67 (1995)].
Приемането на такива състави чрез инжектиране изисква използване на игли за спринцовки с широк отвор, защото гелът, съдържащ и малък процент хиалуронова киселина, има голям вискозитет от порядъка на 107 сентипоаза. Понеже инжектираният гел се разрежда от телесните течности, възможността за задържане на лекарственото средство бързо намалява и като резултат поддържането на освобождаване на лекарството продължава за не повече от един ден. Например JP No 1-287041(1989) разкрива, че когато инжекционен състав с продължително освобождаване на инсулин, съдържащ 1% хиалуронова киселина, се слага на зайци, терапевтичният ефект от снижаване на нивото на кръвната глюкоза не продължава за повече от 24 h. Също така се отчита, че концентрацията на лекарственото средство в кръвта намалява до по-малко от 1/ 10 спрямо първоначалната концентрация за по малко от 24 h, когато опитните животни са инжектирани със състав от 2% хиалуронова киселина, съдържащ гранулоцит-колониестимулиращ фактор [James Meyer, et al., J. Controlled Release, 35, 67 (1995)] или състав от 1.5% хиалуронова киселина, съдържащ интерферон- и плазма протеин^ 5416017).
Следователно, фармацевтичен състав с продължително освобождаване на лекарствени средства на базата на гел на хиалуроновата киселина притежава сериозния недостатък, че освобождаването на лекарството не може да се поддържа за по-дълъг период от 24 h.
Естествената хиалуронова киселина или нейните неорганични соли се разтварят само във вода. Хиалуронова киселина-бензил естер HYAFF™, от друга страна, се разтваря не само във вода, но и в органичен разтворител, например диметилсулфаоксид. Лекарствени състави, съдържащи твърди микрочастици от такива хидрофобни производни на хиалуроновата киселина и лекарствени състави, капсулирани в тях, се приготвят по общоприетия метод на екстракция емулсия-разтворител [N. S. Nidghtinger, et al., Proceed. Intern. Symp. Control. Rel. Bioact. Meter., 22nd, Paper No 3205 (1995); L. Ilum, et al., J. Controlled Rel., 29, 133 (1994)]. Такава подготовка обикновено се извършва по следния начин: протеиново лекарство се разпръсква в диметилсулфаоксиден разтвор на хиалуронова киселина - бензил естер и получената дисперсия се прибавя към минерално масло за образуване на емулсия. Органичен разтворител, например етилацетат, се добавя към емулсията за извличане на диметилсулфаоксида; по този начин се получават микрочастици, съдържащи лекарственото средство и хиалуронова киселина - бензил естера.
При метода, съществува проблем, че протеиновото лекарство може да бъде денатурирано чрез контакта си с органичния разтворител или с хидрофобния хиалуронова киселина-бензил естер. В действителност съставът микрочастици от гранулоцит макрофаг-колониестимулиращ фактор (GM-CSF), приготвен чрез използване на изцяло естерифицирана производна на хиалуроновата киселина, се съобщава, че освобождава само около 25% от GM-CSF през първите няколко дни и никакво количество след 17 дни [N. S. Nigghtlinger, et al., Proceed. Intern.
Symp. Control. Rel. Bioact. Mater., 22nd, Paper No 3205 (1995)]. В този случай основното количество лекарствено средство е изгубено, най-вероятно благодарение на денатурирането му чрез взаимодействието му с хиалуронова киселинабензил естер и/или органичния разтворител.
Същност на изобретението
Задача на настоящето изобретение е да осигури подобрен фармацевтичен състав с продължително освобождаване на протеиново или пептидно лекарствено средство.
В съответствие с една от задачите на настоящето изобретение се осигурява фармацевтичен състав с продължително освобождаване, включващ микрочастици на хиалуронова киселина или нейна неорганична сол и протеиново или пептидно лекарство, капсулирано в споменатите микрочастици, като средният размер на микрочастиците варира от 0. 1 до 40 т.
Кратко описание на чертежите
Гореизложените и други цели и характеристики на настоящото изобретение ще станат очевидни от следващото описание на изобретението във връзка с придружаващите го чертежи, от които:
Фигура 1 показва времезависимите промени в освободеното количество човешки хормон на растежа (hGH) in vitro;
Фигура 2А и 2В - устойчивостта на състава с продължително освобождаване съгласно настоящото изобретение, съдържащ hGH чрез използване на обратнофазова високоефективна течна хроматография (A: hGH, освободен от състава съгласно настоящето изобретение и В: воден hGH контрол);
Фигура ЗА и ЗВ - стабилността на състава с продължително освобождаване съгласно настоящото изобретение, съдържащ hGH, чрез изключваща размери хроматография (A: hGH, освободен от състава съгласно настоящето изобретение и В: воден hGH контрол);
Фигура 4 - сравнени времезависимите промени в нарастване на теглото на плъхове джуджета, третирани с изобретения състав с продължително освобождаване на човешки хормон на растежа, с тези на конвенционалните състави;
Фигура 5 представя разликите между времезависимите промени в нарастване на теглото на плъхове джуджета, третирани с изобретения състав с продължително освобождаване на човешки хормон на растежа, и тези на конвенционалните състави;
Фигура 6 - времезависимите промени в концентрацията на човешки хормон на растежа (hGH) в кръвта; и
Фигура 7 - времезависимите промени в нарастване на теглото на плъхове джуджета, третирани с изобретения състав с продължително освобождаване на човешки хормон на растежа, в сравнение с тези на конвенционалните състави;
Подробно описание на изобретението
Фармацевтичният състав с продължително освобождаване на лекарствени средства съгласно настоящето изобретение, включва твърди микрочастици на хиалуроновата киселина или нейна сол и протеиново или пептидно лекарство, капсулирано в споменатите микрочастици. Изобретеният състав превъзхожда конвенционалните състави, получени на основата на гел на хиалуроновата киселина, по отношение на характеристиките на освобождаване и леснотата при манипулиране: а именно инжекционен състав, приготвен чрез използване на изобретените микрочастици, е по-лесен за инжектиране поради ниския си вискозитет, като съставът освобождава лекарственото средство in vivo с постоянна скорост за по-дълъг период от време.
Съставът съгласно изобретението има и преимуществото, че не се получава денатуриране на лекарственото средство преди 100%-то му освобождаване от състава.
Съставът от микрочастици съгласно изобретението със среден размер на частиците в обхвата от 0.1 до 40 pm, за предпочитане от 0.1 до 10 pm, може да се приготви чрез спрей-изсушаване или изсушаване чрез замразяване на воден разтвор, съдържащ протеиново или пептидно лекарство и хиалуронова киселина или нейна сол. При необходимост към разтвора може да се добави стабилизатор.
Примерни лекарствени средства, които могат да бъдат използвани в приготвянето на състава от твърди микрочастици на това изобретение, включват човешки хормон на растежа, го вежди соматотропин, свински соматотропин, хормон, предизвикващ отделяне на хормон на растежа, пептид, предизвикващ отделяне на хормон на растежа, гранулоцит-колониестимулиращ фактор, гранулоцит макрофаг-колониестимулиращ фактор, макрофаг-колониестимулиращ фактор, еритропоетин, костен морфогенетичен протеин, интерферон, инсулин, атриопептин-Ш, моноклонално антитяло, THF, макрофагактивиращ фактор, интерлевкин, тумор денатуриращ фактор, инсулиноподобен растежен фактор, епидермален растежен фактор, тъканен плазминогенен активатор и урокинеза.
Представителни неорганични соли на хиалуроновата киселина, които могат да бъдат използвани в приготвянето на състава от твърди микрочастици съгласно изобретението, включват натриеви, калиеви, литиеви, калциеви, амониеви, магнезиеви, цинкови, медни и кобалтови соли.
Някои от използваните в това изобретение стабилизатори са полизахарид, протеин, аминокиселина, липид, мастна киселина, полиетилен гликол, неорганична сол и повърхностно активно вещество.
Съставът микрочастици с продължително освобождаване на лекарствени средства съгласно изобретението може да съдържа протеинов или пептиден препарат в количество от 1 до 90 wt% на базата на теглото на състава и по желание - стабилизатор в количество от 1 до 90 wt% на базата на теглото на състава.
Препаратът за инжектиране с продължително освобождаване на лекарствените средства съгласно изобретението се приготвя чрез диспергиране в инжекционна среда на състава от микрочастици от изобретението в количество от 0.01 до 10 wt% на базата на теглото на инжекционния препарат. При необходимост може да се добави дисперсант или консервант. Типичната инжекционна среда, която може да се използва в инжекционния препарат съгласно изобретението, включва буферен воден разтвор, етанол, пропиленгликол, полиетиленгликол, растително масло, минерално масло, сквален, рибено масло, моно-, ди- и триглицерид или смес от изброените.
Примерни растителни масла са царевично масло, зехтин, соево, слънчогледово масло, масло от семената на памука, фъстъчено масло, сусамово масло и смес от изброените.
Може да се приготви аерозолен препарат, съдържащ състав от микрочастици с продължително освобождаване съгласно изобретението. Приготвеният аерозолен препарат може да се прилага към носната или бронхиалната лигавица, където съставът микрочастици освобождава лекарственото средство по контролиран начин.
Следващите примери и тест примери имат за цел да илюстрират настоящето изобретение, без да ограничават обхвата му.
Пример 1: Приготвяне на микрочастици
Към 5 тМ фосфат буфер салин (PBS), съдържащ 2 mg/ml човешки хормон на растежа (hGH), се добавя Tween 80 в концентрация от 0.01 wt%. Натриев хиалуронат с молекулно тегло от 1,000,000 се прибавя към тях в концентрация от 2 mg/ml. Полученият разтвор се поставя в спрей-центрофуга (Buchi 190) при скорост 3 ml/min за приготвяне на микрочастиците. Температурата на входящия въздух в центрофугата е 85°С. Средният диаметър на така получените микрочастици е 3.0 цт.
Пример 2: Приготвяне на микрочастица
Към 5 mM PBS, съдържащ 1 mg/ml човешки хормон на растежа (hGH), се добавя Tween 80 в концентрация от 0.01 wt%. Натриев хиалуронат с молекулно тегло от 2,000,000 се прибавя към тях в концентрация от 1 mg/ml. Полученият разтвор се поставя в спрей-центрофуга (Buchi 190) при скорост 2 ml/min за приготвяне на микрочастиците. Температурата на входящия въздух в центрофугата е 85°С. Средният диаметър на така получените микрочастици е 2.0 цт.
Пример 3: Приготвяне на микрочастици
Към 5 mM PBS, съдържащ 0.1 mg/ml човешки хормон на растежа (hGH), се добавя Tween 80 в концентрация от 0.01 wt%. Натриев хиалуронат с молекулно тегло от 2,000,000 се прибавя към тях в концентрация от 0.9 mg/ml. Полученият разтвор се поставя в спрей-центрофуга (Buchi 190) при скорост 3 ml/min за приготвяне на микрочастиците. Температурата на входящия въздух в центрофугата е 85°С. Средният диаметър на така получените микрочастици е 2.0 цт.
Тест пример 1: In vitro тест за освобождаване
Микрочастиците, приготвени в примери 1, 2 и 3 съответно, се държат в суспенсия в буфер (150 тМ натриев хлорид, 10 тМ фосфат и 0.05% натриев азид, pH 7.4), така че концентрацията на hGH достига 1.0 mg/ml. Получената по този начин дисперсия се поставя във фурна и освобождаването на hGH се проверява в 37°С бъркачка. В определеното за вземане на проби време получената дисперсия се центрофугира при 800 g за 10 min за получаване на надутаечно вещество и се отделя фракция от него, съответстваща на 1/10 от цялата дисперсия. Към дисперсията се добавя същото количество буфер и тестът за освобождаване продължава при 37 С. Концентрацията на hGH в надутаечната фракция се измерва по метода на Lowry и чрез високоефективна течна хроматография (HPLC), за да се определи количеството на освободени hGH за съответното време. Резултатите са посочени във фиг. 1.
Фиг. 1 показва времезависимите промени в освободеното количество hGH in vitro. Както е посочено във фиг. 1, скоростта на освобождаване на hGH е по-ниска, защото молекулното тегло на хиалуроновата киселина е по-високо и съдържанието на hGH е по-ниско. В действителност микрочастицата, получена в Пример 3, показва по-ниска скорост на освобождаване. Тези резултати показват, че периодът на продължително освобождаване на лекарственото средство може да се контролира чрез регулиране на молекулното тегло на хиалуроновата киселина, на съдържанието на hGH и др. Микрочастиците, приготвени съгласно настоящето изобретение, показват постоянна скорост in vitro до 70%-вото освобождаване на hGH, без първоначално експлозивно освобождаване.
Тест пример 2: Устойчивост на hGH в микрочастици
За да се потвърди, че hGH в микрочастиците, обект на изобретението, е идентичен с водния hGH, използван за получаване на микрочастиците, hGH, отделян от микрочастиците от in vitro освобождаващия тест, се оценява чрез използване на обратнофазова високоефективна течна хроматография (RP-HPLC) и изключваща размера хроматография (SEC).
Денатурирането на hGH, дължащо се на окисляване, може да се потвърди чрез RP-HPLC и резултатите са отразени на фиг. 2А и 2В.
Фиг. 2А и 2В показват устойчивостта на състава с продължително освобождаване съг ласно изобретението, съдържащ hGH чрез RPHPLC, като фиг. 2А представлява RP-HPLC профила на hGH, освободен от състава от изобретението, а фиг. 2В - воден hGH контрол.
Денатурирането на hGH, дължащо се на съединяване, може да се потвърди чрез SEC и резултатите са посочени на фиг. ЗА и ЗВ.
Фиг. ЗА и ЗВ показват устойчивостта на състава с продължително освобождаване съгласно изобретението, съдържащ hGH чрез SEC, като фиг. ЗА представлява SEC профила на hGH, освободен от състава, а фиг. ЗВ - воден hGH контрол.
Както е показано на фиг. 2А, 2В, ЗА и ЗВ, hGH, освободен от изобретения състав, е идентичен с водния hGH контрол и съдържанието на hGH мономер е по-голямо от 95%. Тези резултати показват, че денатурирането на hGH не се осъществява по време на приготвянето на изобретените състави от микрочастици и освободените от тях лекарствени средства при 37°С.
Тест пример 3: In vivo тест за освобождаване
Плъхове джуджета с наследствено ниско отделяне на хормони на растежа се подлагат на опит за установяване на качествата на продължително освобождаване на микрочастиците от настоящето изобретение.
Микрочастиците с продължително освобождаване, подготвени в пример 1, се разпръскват в смес от пропиленгликол и етанол (7:3(v/ ν)), така че да се получи концентрация от 5 mg/ ml. Получената дисперсия се разрежда с буферен воден разтвор (150 mM NaCl и 10 тМ фосфат, pH 7.4), така че концентрацията на hGH да стане 0.5 mg/ml.
Осемнадесет плъха джуджета на възраст седем седмици със средно телесно тегло от 103 g са разделени на три групи, всяка състояща се от по шест животни. На плъховете от първата група се слага подкожно инжекция с 0.1 ml от подготвената по-горе дисперсия от микрочастици (съответстваща на 50 mg hGH) дневно за период от две седмици (Експериментална група). На плъховете от втората група се инжектира Eutropin, наличен в търговската мрежа hGH препарат за водно инжектиране, при същите условия (Сравнителна група). На плъховете от третата група не се слага hGH (нетретирана Контролна група). Плъховете се претеглят всеки ден за измерване на промяната в телесното им тегло.
Фиг. 4 сравнява времезависимите промени в нарастване на теглото на плъховете от Експерименталната група, Сравнителната група и Контролната група.
Както е показано на Фиг. 4, плъховете от Експерименталната група показват постоянно увеличение на теглото за период от две седмици, което е повече от това на Сравнителната и на Контролната група. Тези резултати показват, че изобретеният състав от микрочастици е по-ефективен в сравнение с конвенционалните препарати, благодарение на неговите качества за продължително освобождаване.
Тест пример 4: In vivo тест за освобождаване
Микрочастиците с постоянно освобождаване, приготвени в пример 2, се разпръскват в масло от семена на памук, така че концентрацията на hGH да стане 1.5 mg/ml.
плъха джуджета на възраст 7 седмици със средно телесно тегло от 105 g се разделят на четири групи, всяка от по 6 плъха. На плъховете от първата група се слага подкожно инжекция с 0.1 ml от подготвената по-горе дисперсия от микрочастици (съответстваща на 150 mg hGH) всеки 3 дни за период от две седмици (Експериментална група). На плъховете от втората група се инжектира Eutropin при същите условия (Сравнителна група 1). Плъховете от третата група се инжектират с Eutropin, съответсващ на 50 mg hGH дневно за период от 2 седмици (Сравнителна група 2). Плъховете от четвъртата група не се инжектират с hGH (нетретирана Контролна група). Плъховете се претеглят всеки ден за измерване на промяната в телесното им тегло.
Фиг. 5 сравнява времезависимите промени в нарастване на теглото на плъховете от Експерименталната група, Сравнителните групи и Контролната група.
Както се вижда от фиг. 5, плъховете от Експерименталната група показват по-голямо увеличение на теглото в сравнение с това на плъховете от Сравнителните групи и на Контролната група. Плъховете от Сравнителна група 1 показват значително нарастване на теглото през първия ден, но показват и по-ниско нарастване на теглото в сравнение с плъховете от Контролната група през втория и третия ден след инжектирането. Плъховете от Експерименталната група и
Сравнителна група 2 показват постоянно нарастване на теглото. Тези резултати доказват, че изобретеният състав от микрочастици има качества на ефективно продължително освобождаване, продължаващо поне 3 дни.
Тест пример 5: In vivo тест за освобождаване
Микрочастиците с продължително освобождаване, приготвени в пример 2, се разпръскват в масло от семена на памук, така че концентрацията на hGH да стане 1.5 mg/ml.
заека със средно телесно тегло от 2.5 kg се разделят на две групи, всяка от по 4 животни. Зайците от едната група се инжектират с дисперсия от микрочастици, подготвена по-горе, в количество, съответстващо на 3,700 mg от hGH (Експериментална група). Зайците от другата група не се инжектират с hGH (Контролна група).
След инжектирането се взимат кръвни проби от зайците ежедневно за период от 6 дни.
Количеството hGn в кръвните проби се определя чрез RIA (радио-имуно анализ) метод.
Фиг. 6 разкрива времезависимите промени в концентрацията на човешки хормон на растежа в кръвта.
Както се вижда от фиг. 6, количеството hGH в кръвта се поддържа в диапазона от 0 до 11 ng/ml за четири дни след приема и постепенно намалява след петия ден. Този резултат показва, че изобретеният състав от микрочастици има постоянна скорост на освобождаване през четирите дни, след което скоростта на освобождаване постепенно намалява. Този резултат съответства на резултата от Тест пример 1, където скоростта на in vivo освобождаване на hGH е линейна до 70% -то освобождаване на hGH. В противовес, концентрацията на hGH в кръвта на Контролната група е под концентрацията, установена чрез RIA метод (1 ng/ml), и съответно може да бъде игнорирана.
Пример 4: Приготвяне на микрочастици и in vitro тест за освобождаване (Стъпка 1) Приготвяне на микрочастици
Към 5 mM PBS, съдържащ 2 mg/ml говежди соматотропин (bST), се добавя Tween 80 в концентрация от 0.01 wt%. Добавя се натриев хиалуронат с молекулно тегло от 1,000,000 в концентрация от 2 mg/ml. Полученият разтвор се поставя в спрей-центрофуга (Buchi 190) при ско рост от 3 ml/min за получаване на микрочастици. Температурата на входящия въздух в центрофугата е 85°С. Средният диаметър на получените по този начин микрочастици е 3.0 цт.
(Стъпка 2) In vitro тест за освобождаване Провежда се in vitro тест за освобождаване чрез използване на микрочастиците, получени в Стъпка 1, в съответствие с метода от Тест пример 1, и се оценява устойчивостта на освободения bST в съответствие с метода от Тест пример 2.
Освободеният bST се определя количествено и качествено чрез провеждане на SEC. Като резултат се освобождават повече от 85% bST за 72 h, като не настъпва денатуриране на bGH.
Пример 5: Приготвяне на микрочастици и in vitro тест за освобождаване (Стъпка 1) Приготвяне на микрочастици
Към 5 mM PBS, съдържащ 2 mg/ml свински соматотропин (pST), се добавя Tween 80 в концентрация от 0.01 wt%. Добавя се натриев хиалуронат с молекулно тегло от 1,000,000 в концентрация от 2 mg/ml. Полученият разтвор се поставя в спрей-центрофуга (Buchi 190) при скорост от 3 ml/min за получаване на микрочастици. Температурата на входящия въздух в центрофугата е 85°С. Средният диаметър на получените по този начин микрочастици е 3.0 т.
(Стъпка 2) In vitro тест за освобождаване Провежда се in vitro тест за освобождаване чрез използване на микрочастиците, получени в Стъпка 1, в съответствие с метода от Тест пример 1, и се оценява устойчивостта на освободения pST в съответствие с метода от Тест пример 2.
Освободеният pST се определя количествено и качествено чрез провеждане на SEC. Като резултат се освобождават повече от 90% pST за 72 h, като не настъпва денатуриране на pST.
Пример 6: Приготвяне на микрочастици и in vitro тест за освобождаване (Стъпка 1) Приготвяне на микрочастици
Към 5 mM PBS, съдържащ 0.4 mg/ml гранулоцит макрофаг-колониестимулиращ фактор (GM-CSF), се добавя Tween 80 в концентрация от 0.01 wt%. Добавя се натриев хиалуронат с молекулно тегло от 1,000,000 в концентрация от
1.6 mg/ml. Полученият разтвор се поставя в спрей-центрофуга (Buchi 190) при скорост от 3 ml/min за получаване на микрочастици. Темпе ратурата на входящия въздух в центрофугата е 85°С. Средният диаметър на получените по този начин микрочастици е 3.0 μπι.
(Стъпка 2) In vitro тест за освобождаване Провежда се in vitro тест за освобождаване чрез използване на микрочастиците, получени в Стъпка 1, в съответствие с метода от Тест пример 1, и се оценява устойчивостта на освободения GM-CSF в съответствие с метода от Тест пример 2.
Освободеният GM-CSF се определя количествено и качествено чрез провеждане на SEC. Като резултат се освобождават повече от 92% GM-CSF за 72 h, като не настъпва денатуриране на GM-CSF.
Пример 7: Приготвяне на микрочастици и in vitro тест за освобождаване (Стъпка 1) Приготвяне на микрочастици
Към 5 mM PBS, съдържащ 1000 Ш/т1 еритропоетин (ЕРО) и 0.5 mg/ml серум албумин, се добавя Tween 80 в концентрация от 0.01 wt%. Добавя се натриев хиалуронат с молекулно тегло от 1,000,000 в концентрация от 2.5 mg/ml. Полученият разтвор се поставя в спрей-центрофуга (Buchi 190) при скорост от 3 ml/min за получаване на микрочастици. Температурата на входящия въздух в центрофугата е 85°С. Средният диаметър на получените по този начин микрочастици е 3.0 μπι.
(Стъпка 2) In vitro тест за освобождаване Провежда се in vitro тест за освобождаване чрез използване на микрочастиците, получени в Стъпка 1, в съответствие с метода от Тест пример 1, и се оценява устойчивостта на освободения ЕРО в съответствие с метода от Тест пример 2.
Освободеният ЕРО се определя количествено и качествено чрез провеждане на SEC. Като резултат се освобождават повече от 70% ЕРО за 72 h, като не настъпва денатуриране на ЕРО.
Пример 8: Приготвяне на микрочастици и in vitro тест за освобождаване (Стъпка 1) Приготвяне на микрочастици
Към 5 mM PBS, съдържащ 2 х 105 IU/ml интерферон-α, 0.2 mg/ml D-манитол и 0.2 mg/ ml серум албумин, се добавя Tween 80 в концентрация от 0.01 wt%. Добавя се натриев хиалуронат с молекулно тегло от 1,000,000 в концентрация от 2.5 mg/ml. Полученият разтвор се поставя в спрей-центрофуга (Buchi 190) при ско рост от 3 ml/min за получаване на микрочастици. Температурата на входящия въздух в центрофугата е 105°С. Средният диаметър на получените по този начин микрочастици е 3.5 μπι.
(Стъпка 2) In vitro тест за освобождаване Провежда се in vitro тест за освобождаване чрез използване на микрочастиците, получени в Стъпка 1, в съответствие с метода от Тест пример 1, и се оценява устойчивостта на освободения интерферон-α в съответствие с метода от Тест пример 2.
Освободеният интерферон-α се определя количествено и качествено чрез провеждане на RP-HPLC. Като резултат се освобождават повече от 90% интерферон-α за 72 h, като не настъпва денатуриране на интерферон-а.
Пример 9: Приготвяне на микрочастици и in vitro тест за освобождаване (Стъпка 1) Приготвяне на микрочастици
Към 5 mM PBS, съдържащ 2 х 105 IU/ml интерферон-γ, 0.2 mg/ml глицин и 0.2 mg/ml серум албумин, се добавя Tween 80 в концентрация от 0.01 wt%. Добавя се натриев хиалуронат с молекулно тегло от 1,000,000 в концентрация от 2.5 mg/ml. Полученият разтвор се поставя в спрей-центрофуга (Buchi 190) при скорост от 3 ml/min за получаване на микрочастици. Температурата на входящия въздух в центрофугата е 105°С. Средният диаметър на получените по този начин микрочастици е 3.5 pm.
(Стъпка 2) In vitro тест за освобождаване Провежда се in vitro тест за освобождаване чрез използване на микрочастиците, получени в Стъпка 1, в съответствие с метода от Тест пример 1, и се оценява устойчивостта на освободения интерферон-γ в съответствие с метода от Тест пример 2.
Освободеният интерферон-γ се определя количествено и качествено чрез провеждане на RP-HPLC. Като резултат се освобождават повече от 85% интерферон-γ за 72 h, като не настъпва денатуриране на интерферон-γ.
Пример 10: Приготвяне на микрочастици и in vitro тест за освобождаване (Стъпка 1) Приготвяне на микрочастици
Към 10 mM PBS, съдържащ 20 IU/ml инсулин, се добавя Tween 80 в концентрация от 0.01 wt%. Добавя се натриев хиалуронат с молекулно тегло от 1,000,000 в концентрация от 2 mg/ml. Полученият разтвор се поставя в спрей центрофуга (Buchi 190) при скорост от 3 ml/min за получаване на микрочастици. Температурата на входящия въздух в центрофугата е 85°С. Средният диаметър на получените по този начин микрочастици е 3.0 цт.
(Стъпка 2) In vitro тест за освобождаване Провежда се in vitro тест за освобождаване чрез използване на микрочастиците, получени в Стъпка 1, в съответствие с метода от Тест пример 1, и се оценява устойчивостта на освободения инсулин в съответствие с метода от Тест пример 2.
Освободеният инсулин се определя количествено и качествено чрез провеждане на RPHPLC. Като резултат се освобождават повече от 95% инсулин за 72 h, като не настъпва денатуриране на инсулина.
Пример 11: Приготвяне на микрочастици и in vitro тест за освобождаване (Стъпка 1) Приготвяне на микрочастици
Към 5 mM PBS, съдържащ 2 mg/ml инсулиноподобен растежен фактор, се добавя Tween 80 в концентрация от 0.01 wt%. Добавя се натриев хиалуронат с молекулно тегло от 1,000,000 в концентрация от 2 mg/ml. Полученият разтвор се поставя в спрей-центрофуга (Buchi 190) при скорост от 3 ml/min за получаване на микрочастици. Температурата на входящия въздух в центрофугата е 85°С. Средният диаметър на получените по този начин микрочастици е 3.0 μπι.
(Стъпка 2) in vitro тест за освобождаване Провежда се in vitro тест за освобождаване чрез използване на микрочастиците, получени в Стъпка 1, в съответствие с метода от Тест пример 1, и се оценява устойчивостта на освободения инсулиноподобен растежен фактор в съответствие с метода от Тест пример 2.
Освободеният инсулиноподобен растежен фактор се определя количествено и качествено чрез провеждане на RP-HPLC. Като резултат се освобождават повече от 90% инсулиноподобен растежен фактор за 72 h, като не настъпва денатуриране на инсулиноподобния растежен фактор.
Сравнителен Пример 1: Приготвяне на гел препарат и in vitro тест за освобождаване (Стъпка 1) Приготвяне на гел препарата
Към 5 mM PBS, съдържащ 2.3 mg/ml hGH, се добавя натриев хиалуронат с молекулно тегло от 2,000,000 в концентрация от 20 mg/ml за получаване на 2% хиалуронов гел препарат, съдържащ hGH.
(Стъпка 2) In vitro тест за освобождаване Полученият в Стъпка 1 гел препарат се тества по процедурата от Тест пример 1. Като резултат 100% hGH се освобождава за време от 1 h. Този резултат показва, че гел препаратът освобождава лекарствено средство за по-кратък период от време в сравнение с изобретените микрочастици, защото той лесно се разрежда с вода.
Сравнителен Пример 2: Приготвяне на гел препарат и тест за освобождаване (Стъпка 1) Приготвяне на гел препарата
Към 5 mM PBS, съдържащ 1.5 mg/ml hGH, се добавя натриев хиалуронат с молекулно тегло от 2,000,000 в концентрация от 20 mg/ml за получаване на нетечен гел препарат, съдържащ hGH.
ml от така получения гел препарат се разпределя в 2 ml масло от семена на памук и сместа се хомогенизира за образуване на емулсия.
(Стъпка 2) In vitro тест за освобождаване плъха джуджета на възраст 7 седмици със средно телесно тегло от 95 g се разделят на четири групи, всяка от по 6 плъха. На плъховете от една от групите се слага подкожно инжекция с 0.3 ml от подготвената в Стъпка 1 емулсия (съответстваща на 150 mg hGH (Група 1).
За да се сравни ефективността на емулсията с други препарати, на плъховете от другите две групи се слагат съответно дисперсия, съдържаща микрочастици, приготвени в пример 2, разпределени в масло от семена на памук, така че концентрацията на hGH да стане 150 mg (Група 2) и Eutropin, съответстващ на 150 mg hGH (Група 3). Плъховете от последната група не се инжектират с hGH препарат (Контролна група). Наблюдават се промените в теглото на плъховете за период от 6 дни след приема.
Фиг. 7 показва времезависимите промени в теглото на плъховете джуджета, третирани с изобретения препарат с продължително освобождаване на човешки хормон на растежа в сравнение с тези на конвенционалните препарати. Като резултат времезависимите промени в теглото на плъховете джуджета, третирани с хиалуроновия гел препарат, са подобни на тези на групата, третирана с Eutropin. Телесното тегло на плъховете джуджета, третирани с хиалуроновия гел препарат намалява до 2 или 3 дни след приема и е подобно на това на плъховете от Контролната група. Плъховете от групата, третирана с изобретения състав, показват постоянно нарастване на теглото в по-голяма степен от това на останалите групи, като достига до 150% през периода от 6 5 дни.
Сравнителен пример 3:
Приготвяне на състав от микрочастици чрез използване на натрий-карбоксиметил целулоза и in vivo и in vitro тест за освобождаване (Стъпка 1) Приготвяне на състава от микрочастици
Към 5 mM PBS, съдържащ 0.2 mg/ml hGH, се добавя Tween 80 в концентрация от 0.01 wt%. Прибавя се натриев карбоксиметил целулоза (Na-CMC, средно ниво на вискозитет) в концентрация от 1.8 mg/ml. Полученият разтвор се поставя в спрей-центрофуга (Buchi 190) при скорост от 3 ml/min за приготвяне на микрочастиците. Температурата на входящия въздух в центрофугата е 85°С. Средният диаметър на получените по този начин микрочастици е 3.0 цт.
(Стъпка 2) In vitro тест за освобождаване Полученият в Стъпка 1 състав от микрочастици се тества по процедурата от Тест пример 1 и резултатите са посочени в таблица 1.
Таблица 1
Време (час) 0 1 3 5 7 24 48 72 144
Освободено количество hGH (%) 0 32 40 48 52 57 63 65 65
Както е посочено в таблица 1, времезависимите промени в in vitro теста за освобождаване на състава от микрочастици, приготвен в 25 Стъпка 1, се различава от този на изобретените микрочастици. По този начин става видно зле балансираното освобождаване, при което повече от 30% от hGH се освобождават през първия 1 h, други 30% се освобождават до 48 h, след 30 което освобождаването става незначително. Тези резултати показват, че освобождаването на лекарствени средства е зле балансирано поради взаимодействието между протеиновото лекарство и матрицата, като възможността за денату- 3 5 риране е значителна, когато естествен карбохид ратен полимер с по-силна хидрофобност от хиалуроновата киселина се използва като материал за матрицата.
(Стъпка 3) In vivo тест за освобождаване Съставът от микрочастици, приготвен в Стъпка 1, се разпределя в масло от семена на памук. Получената дисперсия се слага на плъхове джуджета на възраст 7 седмици в количество от 300 mg hGH на животно, като нетретирана група от животни се използва като Контролна група. Нарастването на теглото на плъховете се измерва за период от 7 дни и резултатите са показани в таблица 2 като акумулирано нарастване на теглото.
Таблица 2
Време (ден) Ден 1 Ден 2 Ден 3 Ден 4 Ден 5 Ден 6 Ден 7
Контролна група 0.6 0.8 3.3 5.5 7.6 6.7 7.4
Na-CMC състав група 5.2 3.3 6.4 8.3 10.5 9.4 9.0
Както е посочено в таблица 2, плъховете, третирани с микрочастиците, подготвени в Стъпка 1, показват нарастване на теглото, подобно на това на плъховете, третирани с хиалуроновия гел препарат от Сравнителен пример 2. Те по- 5 казват увеличение на теглото само през първия ден, като телесното тегло намалява през втория ден. Те показват нарастване на теглото в по-малка степен от това на Контролната група и найнакрая показват нарастване на теглото, подобно на това на Контролната група през седмия ден. Тези резултати показват, че Na-CMC състав има по-слаби качества и концентрация в сравнение с изобретената хиалуронова микрочастица, независимо че Na-CMC е естествен карбохидратен полимер, както и хиалуроновата киселина.
Сравнителен Пример 4:
Приготвяне на състав от микрочастици чрез използване на хиалуронова киселина-бензил естер и in vivo и in vitro тест за освобождаване (Стъпка 1) Приготвяне на състава от микрочастици
Естествена хиалуронова киселина и бензил алкохол влизат в химическа реакция за получаване на хиалуронова киселина-бензил естер, след което се приготвят микрочастици, съдържащи hGH, по описания по-долу начин.
Към 5 mM PBS, съдържащ 2 mg/ml hGH, се добавя Tween 80 в концентрация от 0.01 wt%.
Полученият разтвор се поставя в спрей-центрофуга (Buchi 190) при скорост от 3 ml/min за приготвяне на микрочастиците. Температурата на входящия въздух в центрофугата е 85°С. Средният диаметър на получените по този начин микрочастици е 2.5 μιη.
Получените по този начин микрочастици се разпределят в диметилсулфоксид (DMSO), съдържащ 6% хиалуронова киселина-бензил естер, и получената дисперсия се прибавя към минерално масло, съдържащо повърхностноактивно вещество, Aracel ATM (ICI, USA) и сместа се хомогенизира за получаване на микроемулсия. Получената микроемулсия съдържа постоянна фаза на минералното масло и дисперсионна фаза на хиалуронова киселина-бензил естер/ DMSO разтвор, съдържащ hGH.
С разбъркваме към микроемулсията се добавя етил ацетат, след което DMSO се екстрахира с етил ацетат и хиалуронова киселина-бензил естерът се втвърдява за получаване на частици хиалуронова киселина-бензил естер, съдържащи hGH частици. Средният диаметър на крайно получените частици е 5.5 μιη, а съдържанието на hGH е 45%.
(Стъпка 2) In vitro тест за освобождаване Получените в Стъпка 1 микрочастици се тестват по процедурата от Тест пример 1 и резултатите са посочени в таблица 3.
Таблица 3
Време (час) 0 1 3 5 7 24 48 72 144
Освободено количество hGH (%) 0 15 21 23 25 27 28 30 30
Както е посочено в таблица 3, в микрочастиците, подготвени чрез увеличаване на хидрофобностга на естествената хиалуронова киселина чрез използване на хиалуронова киселинабензил естер, трудно се получава освобождаване на hGH след първите 5 h. Причината да не се освобождава hGH е в силното взаимодействието между протеиновото лекарство (hGH) и хиалуронова киселина-бензил естер матрицата.
(Стъпка 3) In vivo тест за освобождаване
Микрочастиците, приготвени в Стъпка 1, се разпределят в масло от семена на памук. Получената дисперсия се слага на плъхове джуджета на възраст 7 седмици в количество от 300 mg hGH на животно, като нетретирана група от животни се използва като Контролна група. Нарастването на теглото на плъховете се измерва за период от 7 дни и резултатите са показани в таблица 4 като акумулирано нарастване на теглото.
Таблица 4
Време (ден) Ден 1 Ден 2 Ден 3 Ден 4 Ден 5 Ден 6 Ден 7
А 1.2 2.3 3.6 5.7 6.6 7.3 8.2
В 3.6 27 5.4 6.3 7.1 8.4 8.0
А: Контролна група
В: група с хиалуронова киселина-бензил естер състав от микрочастици
Както е посочено в таблица 4, съставът от хиалуронова киселина-бензил естер микрочастици трудно достига ефективност след първия ден.
Настоящото изобретение е описано от гледна точка на гореизложените аспекти, като се има предвид, че различни модификации и промени могат да бъдат направени и те също да попадат в обхвата на изобретението, определен от приложените претенции.

Claims (6)

  1. Патентни претенции
    1. Фармацевтичен състав с продължително освобождаване, включващ микрочастици на хиалуроновата киселина или нейна неорганична сол и протеиново или пептидно лекарство, капсулирано в споменатите микрочастици, като размерът на микрочастиците варира от 0.1 до 40 μπι, и стабилизатор, избран от група, състояща се от полизахариди, протеини, аминокиселини, липиди, мастни киселини, полиетиленгликол, неорганични соли, повърхностно активни вещества и техни смеси.
  2. 2. Състав съгласно претенция 1, характеризиращ се с това, че средният размер на микрочастиците варира от 1 до 10 μπι.
  3. 3. Състав съгласно претенция 1, характеризиращ се с това, че лекарството се избира от група, съдържаща хормони на човешкия растеж, волски соматотропин, свински соматотропин, хормони на растежа, отделящи хормони, отделящи пептид хормони на растежа, гранулоцитколония стимулиращ фактор, гранулоцит макрофаг-колония стимулиращ фактор, макрофаг-колония стимулиращ фактор, еритропоетин, костен морфогенетичен протеин, интерферон, инсулин, атриопептин-Ш, моноклонални антитела, TNF, макрофагактивиращ фактор, интерлевкин, тумор денатуриращ фактор, инсулиноподобен фактор на растежа, епидермичен фактор на растежа, тьканен плазминогенен активатор, урокиназа и техни смеси.
  4. 4. Състав съгласно претенция 1, характеризиращ се с това, че неорганичната сол се избира от група, състояща се от натриеви, калиеви, литиеви, калциеви, амониеви, магнезиеви, цинкови, медни и кобалтови соли на хиалуроновата киселина.
  5. 5. Инжекционен състав, включващ продължително разтворим състав съгласно претенция 1, диспергиран в среда за инжектиране.
  6. 6. Състав съгласно претенция 5, характеризиращ се с това, че включва диспергиращи или консервиращи вещества.
BG102969A 1997-04-01 1998-11-30 Фармацевтичен състав с продължително освобождаване на лекарствени средства, капсулирани в микрочастици на хиалуронова киселина BG64642B1 (bg)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1019970012046A KR100236771B1 (ko) 1997-04-01 1997-04-01 히아루론산을 이용한 약물의 서방성 미세입자 제형

Publications (2)

Publication Number Publication Date
BG102969A BG102969A (bg) 1999-09-30
BG64642B1 true BG64642B1 (bg) 2005-10-31

Family

ID=19501732

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
BG102969A BG64642B1 (bg) 1997-04-01 1998-11-30 Фармацевтичен състав с продължително освобождаване на лекарствени средства, капсулирани в микрочастици на хиалуронова киселина

Country Status (25)

Country Link
US (3) US20080063727A1 (bg)
EP (1) EP0918535B1 (bg)
JP (1) JP3445283B2 (bg)
KR (1) KR100236771B1 (bg)
CN (1) CN1132625C (bg)
AR (1) AR011208A1 (bg)
AT (1) ATE285245T1 (bg)
AU (1) AU721929B2 (bg)
BG (1) BG64642B1 (bg)
BR (1) BR9804802B1 (bg)
CA (1) CA2256596C (bg)
DE (1) DE69828252T2 (bg)
DK (1) DK0918535T3 (bg)
ES (1) ES2232939T3 (bg)
HU (1) HUP0000737A3 (bg)
ID (1) ID20584A (bg)
IL (1) IL127220A (bg)
MY (1) MY132812A (bg)
NZ (1) NZ333019A (bg)
PL (1) PL195223B1 (bg)
PT (1) PT918535E (bg)
TR (1) TR199802500T1 (bg)
TW (1) TW514532B (bg)
WO (1) WO1998043664A1 (bg)
ZA (1) ZA982533B (bg)

Families Citing this family (40)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6221854B1 (en) * 1996-03-05 2001-04-24 Orquest, Inc. Method of promoting bone growth with hyaluronic acid and growth factors
KR100236771B1 (ko) * 1997-04-01 2000-02-01 성재갑 히아루론산을 이용한 약물의 서방성 미세입자 제형
JP4234803B2 (ja) * 1997-10-27 2009-03-04 久光製薬株式会社 薬物放出速度が制御された医薬組成物
WO1999059543A1 (en) * 1998-05-20 1999-11-25 Highchem Company., Ltd. A pharmaceutical formulation for nasal administration
AU4356299A (en) * 1998-06-29 2000-01-17 White Spot Ag Utilization of growth factors for the production of medicaments
DK1140198T3 (da) 1999-01-13 2008-03-10 Alchemia Oncology Pty Ltd Anvendelse af hyaluronan til fremstilling af et lægemiddel til forögelse af cytotoksiske lægemidlers virkningsgrad
DK1071407T3 (da) * 1999-01-18 2014-10-20 Lg Life Sciences Ltd Lipofile mikropartikler indeholdende et proteinlægemiddel eller et antigen og formulering omhandlende samme
SE9904121D0 (sv) 1999-11-15 1999-11-15 Gustaf Jederstroem Hydrophobe biomolecular structure
US7785625B2 (en) 2000-01-14 2010-08-31 Lg Life Sciences, Limited Lipophilic-coated microparticle containing a protein drug and formulation comprising same
JP4751556B2 (ja) 2000-02-28 2011-08-17 ジーンシーグス， インコーポレイテッド ナノカプセルカプセル化システムおよび方法
GB0004827D0 (en) * 2000-02-29 2000-04-19 Quadrant Holdings Cambridge Compositions
AUPQ879500A0 (en) * 2000-07-14 2000-08-10 Meditech Research Limited Hyaluronan as cytotoxic agent, drug presensitizer and chemo-sensitizer in the treatment of disease
US9066919B2 (en) * 2000-07-14 2015-06-30 Alchemia Oncology Pty Limited Hyaluronan as a chemo-sensitizer in the treatment of cancer
JP4931282B2 (ja) * 2000-10-02 2012-05-16 日本ケミカルリサーチ株式会社 生理活性ペプチド含有粉末
CA2433037C (en) 2000-12-28 2010-12-21 Takeda Chemical Industries, Ltd. Sustained-release preparation
WO2002085399A1 (fr) * 2001-04-20 2002-10-31 Takeda Chemical Industries, Ltd. Preparations contenant un peptide
CA2458856C (en) * 2001-08-27 2011-02-15 Meditech Research Limited Improved therapeutic protocols
GB0129489D0 (en) * 2001-12-10 2002-01-30 Quadrant Healthcare Uk Ltd Sustained-release compositions
TW200526253A (en) * 2003-11-14 2005-08-16 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Cross-linked polysaccharide microparticles and process for producing the same
WO2005116130A1 (en) * 2004-05-27 2005-12-08 Novozymes Biopolymer A/S A fast dissolving dried hyaluronic acid product
TW200612991A (en) 2004-09-07 2006-05-01 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Process for producing water-soluble hyaluronic acid modification
TW200640492A (en) * 2005-02-21 2006-12-01 Lg Life Sciences Ltd Sustained release composition of protein drug
US8017152B2 (en) 2005-05-27 2011-09-13 Stratosphere Pharma Ab Cores and microcapsules suitable for parenteral administration as well as process for their manufacture
JP5465431B2 (ja) * 2005-07-27 2014-04-09 アルケミア オンコロジー ピーティーワイ リミテッド ヒアルロナンを用いる治療プロトコル
US8319625B2 (en) * 2005-09-01 2012-11-27 Simplexgrinnell Lp Fire alarm textual notification related application
WO2007028196A1 (en) * 2005-09-07 2007-03-15 Alchemia Oncology Pty Limited Therapeutic compositions comprising hyaluronan and therapeutic antibodies as well as methods of treatment
US20090023629A1 (en) 2005-12-23 2009-01-22 Altus Pharmaceuticals Inc. Compositions comprising polycation-complexed protein crystals and methods of treatment using them
KR100939983B1 (ko) 2006-10-31 2010-02-03 주식회사 엘지생명과학 히아루론산-소수성 폴리 아미노산 공중합체
HRP20161040T1 (hr) 2008-04-29 2016-12-16 Ascendis Pharma Growth Disorders Division A/S Pegilirani rekombinantni spojevi ljudskog hormona rasta
FR2931360B1 (fr) * 2008-05-20 2012-05-18 Centre Nat Rech Scient Nanoparticules contenant un peptide, vecteurs les contenant et utilisations pharmaceutiques desdits nanoparticules et vecteurs
WO2010123290A2 (ko) 2009-04-22 2010-10-28 (주)알테오젠 체내 지속성을 유지함으로 체내 반감기가 증가된 단백질 또는 펩티드 융합체, 및 이를 이용하여 체내 반감기를 증가시키는 방법
CA2783296C (en) 2009-12-15 2019-01-15 Ascendis Pharma As Growth hormone composition
CA2833676C (en) * 2011-06-14 2019-04-23 Ipsen Pharma S.A.S. A sustained-release composition containing peptides as active ingredient
US9399019B2 (en) * 2012-05-09 2016-07-26 Evonik Corporation Polymorph compositions, methods of making, and uses thereof
US9902753B2 (en) 2012-06-05 2018-02-27 Cj Healthcare Corporation Method of purifying a long-acting human growth hormone
WO2015018461A1 (fr) 2013-08-09 2015-02-12 Genbiotech Compositions therapeutiques comprenant d'acide hyaluronique
CA2959660A1 (en) 2014-09-03 2016-03-10 Genesegues, Inc. Therapeutic nanoparticles and related compositions, methods, and systems
IL251906B2 (en) 2014-11-18 2024-04-01 Ascendis Pharma Endocrinology Div A/S Novel polymeric hgh prodrugs
DK3220892T3 (da) 2014-11-21 2021-11-08 Ascendis Pharma Endocrinology Div A/S Langtidsvirkende væksthormondoseringsformer
CA3131817A1 (en) 2019-03-04 2020-09-10 Ascendis Pharma Endocrinology Division A/S Long-acting growth hormone dosage forms with superior efficacy to daily somatropin

Family Cites Families (25)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4971782A (en) * 1983-09-14 1990-11-20 Peroxydent Group Periodontal composition and method
US4851521A (en) * 1985-07-08 1989-07-25 Fidia, S.P.A. Esters of hyaluronic acid
JPH0725689B2 (ja) * 1986-10-07 1995-03-22 中外製薬株式会社 顆粒球コロニ−刺激因子を含有する徐放性製剤
JPH02213A (ja) * 1987-10-19 1990-01-05 Taiho Yakuhin Kogyo Kk 生理活性ペプチド持続製剤
JPH01287041A (ja) * 1988-05-13 1989-11-17 Rooman Kogyo:Kk 徐放性製剤
JPH03215430A (ja) * 1990-01-19 1991-09-20 Kita Kiyoshi 関節腔抗凝固剤
US5707644A (en) * 1989-11-04 1998-01-13 Danbiosyst Uk Limited Small particle compositions for intranasal drug delivery
IT1243390B (it) * 1990-11-22 1994-06-10 Vectorpharma Int Composizioni farmaceutiche in forma di particelle atte al rilascio controllato di sostanze farmacologicamente attive e procedimento per la loro preparazione.
JPH04282322A (ja) * 1991-03-08 1992-10-07 Denki Kagaku Kogyo Kk 生物活性ペプチド製剤
JP3283288B2 (ja) * 1991-03-08 2002-05-20 電気化学工業株式会社 生理活性ペプチド製剤
JPH0565231A (ja) * 1991-03-12 1993-03-19 Takeda Chem Ind Ltd エリスロポエチンの持続性製剤
IT1247472B (it) * 1991-05-31 1994-12-17 Fidia Spa Processo per la preparazione di microsfere contenenti componenti biologicamente attivi.
JP3449738B2 (ja) * 1991-07-10 2003-09-22 武田薬品工業株式会社 水溶性組成物
JPH05186364A (ja) * 1991-08-01 1993-07-27 Takeda Chem Ind Ltd 水溶性組成物
ATE154241T1 (de) * 1991-10-01 1997-06-15 Takeda Chemical Industries Ltd Mikropartikeln-zusammenfassung zur verlängerten freigabe und herstellung derselbe
JPH08198772A (ja) * 1994-11-25 1996-08-06 Kirin Brewery Co Ltd 顆粒球コロニー刺激因子含有粉末経鼻投与製剤
KR100201352B1 (ko) * 1995-03-16 1999-06-15 성재갑 단일주사 백신 제형
US5641749A (en) * 1995-11-29 1997-06-24 Amgen Inc. Method for treating retinal ganglion cell injury using glial cell line-derived neurothrophic factor (GDNF) protein product
KR100236771B1 (ko) * 1997-04-01 2000-02-01 성재갑 히아루론산을 이용한 약물의 서방성 미세입자 제형
US7276251B2 (en) * 1997-04-01 2007-10-02 Lg Life Sciences, Ltd., Inc. Sustained-release composition of drugs encapsulated in microparticles of hyaluronic acid
JPH09309843A (ja) * 1996-05-21 1997-12-02 Shiseido Co Ltd ヒアルロン酸含有経肺投与用製剤
US6113947A (en) * 1997-06-13 2000-09-05 Genentech, Inc. Controlled release microencapsulated NGF formulation
TW577758B (en) * 1997-10-27 2004-03-01 Ssp Co Ltd Intra-articular preparation for the treatment of arthropathy
JP4234803B2 (ja) * 1997-10-27 2009-03-04 久光製薬株式会社 薬物放出速度が制御された医薬組成物
DK1071407T3 (da) * 1999-01-18 2014-10-20 Lg Life Sciences Ltd Lipofile mikropartikler indeholdende et proteinlægemiddel eller et antigen og formulering omhandlende samme

Also Published As

Publication number Publication date
ATE285245T1 (de) 2005-01-15
BG102969A (bg) 1999-09-30
US20130230598A1 (en) 2013-09-05
HUP0000737A2 (hu) 2000-09-28
BR9804802A (pt) 1999-08-17
IL127220A (en) 2004-12-15
ES2232939T3 (es) 2005-06-01
TW514532B (en) 2002-12-21
WO1998043664A1 (en) 1998-10-08
CA2256596C (en) 2005-12-13
CN1132625C (zh) 2003-12-31
MY132812A (en) 2007-10-31
US20080063727A1 (en) 2008-03-13
DE69828252T2 (de) 2005-11-10
CA2256596A1 (en) 1998-10-08
NZ333019A (en) 1999-08-30
AU6524198A (en) 1998-10-22
EP0918535A1 (en) 1999-06-02
ZA982533B (en) 1998-09-30
ID20584A (id) 1999-01-21
PT918535E (pt) 2005-03-31
US20110020458A1 (en) 2011-01-27
JPH11513047A (ja) 1999-11-09
JP3445283B2 (ja) 2003-09-08
HUP0000737A3 (en) 2003-05-28
TR199802500T1 (xx) 1999-06-21
EP0918535B1 (en) 2004-12-22
IL127220A0 (en) 1999-09-22
DE69828252D1 (de) 2005-01-27
HK1020885A1 (en) 2000-05-26
CN1222857A (zh) 1999-07-14
AR011208A1 (es) 2000-08-02
AU721929B2 (en) 2000-07-20
DK0918535T3 (da) 2005-04-18
KR19980075759A (ko) 1998-11-16
KR100236771B1 (ko) 2000-02-01
PL195223B1 (pl) 2007-08-31
PL330230A1 (en) 1999-05-10
BR9804802B1 (pt) 2011-04-19

Similar Documents

Publication Publication Date Title
BG64642B1 (bg) Фармацевтичен състав с продължително освобождаване на лекарствени средства, капсулирани в микрочастици на хиалуронова киселина
US6465425B1 (en) Microencapsulation and sustained release of biologically active acid-stable or free sulfhydryl-containing proteins
Cleland et al. Recombinant human growth hormone poly (lactic-co-glycolic acid) microsphere formulation development
US7276251B2 (en) Sustained-release composition of drugs encapsulated in microparticles of hyaluronic acid
KR100356550B1 (ko) 펩티드의금속염을함유한서방성제제
US20030064105A1 (en) Lipophilic-coated microparticle containing a protein drug and formulation comprising same
US7785625B2 (en) Lipophilic-coated microparticle containing a protein drug and formulation comprising same
AU2002358831B2 (en) Prolonged release biodegradable microspheres and method for preparing same
DE69838750T2 (de) Zeitverzögerte gelzusammensetzungen mit verlängerter wirkstoffverabreichung
EP0138216B1 (en) Sustained-release ifn preparation for parenteral administration
JP2002533378A (ja) タンパク質の徐放用ポリオール／油懸濁液
CN1671357B (zh) 短暂贮存制剂
MX2008008924A (es) Formulaciones farmaceuticas que comprenden dextrano con peso molecular de 1.0-100kda y procesos para su preparacion.
KR100329336B1 (ko) 히아루론산을 이용한 단백질 약물의 서방성 미세 입자 제형
JPH08225454A (ja) マイクロスフェア製剤
JPH0512328B2 (bg)
JP2001522813A (ja) 新規のｉｇｆ−ｉ組成物およびその使用
MXPA99010284A (en) Sustained-release delayed gels
HK1020885B (en) Sustained-release composition of drugs encapsulated in microparticles of hyaluronic acid