CN1152011C

CN1152011C - 维生素d类似物及其药物用途

Info

Publication number: CN1152011C
Application number: CNB008076448A
Authority: CN
Inventors: K��ɭ; K·汉森
Original assignee: Leo Pharmaceutical Products Ltd AS
Current assignee: Leo Pharma AS
Priority date: 1999-04-23
Filing date: 2000-04-12
Publication date: 2004-06-02
Anticipated expiration: 2020-04-12
Also published as: HK1045497A1; PT1178960E; US6537980B1; HK1045497B; HUP0200812A2; EP1178960A1; NZ515138A; CN1351589A; JP2002543062A; DE60006379D1; EP1178960B1; RU2223953C2; AU768037B2; CA2371165A1; ES2208300T3; DK1178960T3; DE60006379T2; WO2000064869A1; ATE253555T1; AU3956700A

Abstract

本发明涉及通式为(I)的化合物及其与可药用酸的可体内水解酯，其中R¹和R²可以相同或不同，代表(C₁-C₄)烷基，和R³代表氢、卤素、(C₁-C₄)烷基、或O-(C₁-C₄)烷基。所述的化合物在人用或兽用方面具有利用价值。

Description

维生素D类似物及其药物用途

化合物

本发明涉及迄今未知的维生素D化合物，该类化合物在诱导分化和抑制某些细胞(包括皮肤细胞和肿瘤细胞)的不良增殖方面显示出强的活性，以及显示出抗炎和免疫调节作用，涉及含有这些化合物的药物制剂及制剂的剂量单位，并且涉及它们在治疗和预防如下疾病中的应用：以异常细胞分化和/或细胞增殖为特征的疾病，例如癌症，白血病，骨髓纤维变性，和牛皮癣，以及其他多种疾病状态包括甲状旁腺机能亢进，特别是于肾衰竭有关的继发性甲状旁腺机能亢进，糖尿病，高血压，痤疮，脱发，皮肤老化，AIDS，神经变性疾病例如阿尔茨海默氏疾病，宿主抗移植物反应，移植排斥，炎症性疾病例如类风湿性关节炎和哮喘，还涉及用于防止和/或治疗类固醇诱导的皮肤萎缩，和涉及促进骨生成和治疗骨质疏松症。

研究显示1α，25-二羟基-维生素D₃(1，25(OH)₂D₃)可影响白介素的作用和/或产生(Muller，K.等，Immunol，Lett.，1988年，17：361-366页)，这表明此类化合物在治疗以免疫系统机能障碍为特征的疾病方面具有潜力，所述疾病例如自身免疫疾病，AIDS，宿主抗移植物反应和移植排斥，或其他以白介素-1生成异常为特征的病症，例如炎症疾病如类风湿性关节炎和哮喘。

研究还表明1，25(OH)₂D₃可刺激细胞分化并抑制细胞过度增殖(Abe，E.等，Proc.Natl.Acad.Sci.，U.S.A.，1981年，78：4990-4994页)，这表明此类化合物在治疗以异常细胞增殖和/或细胞分化为特征的疾病如白血病、骨髓纤维变性和牛皮癣方面具有潜力。

另外，1，25(OH)₂D₃或其前药1α-OH-D₃还被建议可用于治疗高血压(Lind，L.等，Acta Med.Scand，1987年，222：423-427页)和糖尿病(Inomata，S.等，Bone Minera.，1986年，1：187-192页)。有关遗传性维生素D抗性与脱发间联系的最近研究暗示了1，25(OH)₂D₃的另一适应征：用1，25(OH)₂D₃治疗可促进毛发生长(Editorial，Lancet，1989年，3月4：478页)。同时，局部施用1，25(OH)₂D₃可减少雄性Syrian仓鼠耳部皮脂腺大小的事实表明：这种化合物可用于治疗痤疮(Malloy V.L.等，The TricontinentalMeeting for Investigative Dermatology，华盛顿，1989年)。

然而，已知1，25(OH)₂D₃对钙代谢的有力作用严格限制了1，25(OH)₂D₃对这些适应症的治疗前景；升高的血药浓度将很快引起高钙血。因此，该化合物及其某些合成的有效类似物将不适于用作需以较高剂量连续给药治疗的疾病，例如牛皮癣、白血病或免疫疾病。

最近许多有关维生素D类似物的描述显示：与体内对钙代谢的作用相比，它们在体外诱导细胞分化/抑制细胞增活性殖方面具有一定的选择性(通过测定升高的血清钙浓度和/或升高的尿钙排泄)，这对于所能安全给予的剂量有不利的限制。基于这种选择性，已开发出其中的第一类药物钙泊三醇(calcipotriol)(INN)或钙泊三烯(calcipotriene)(USAN)，并且作为牛皮癣的安全的局部治疗药物得到广泛认同。

对在此基础上选择出的另一维生素D类似物—断钙醇(Seocalcitol)[1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-(5’-乙基-5’-羟基-庚-1’(E)，3’(E)-双烯-1’-基)-9，10-断孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯]的研究，证实了经全身给予亚毒性剂量的维生素D类似物可在体内抑制乳腺癌细胞增殖(Colston，K.W.等，Biochem.Pharmacol.1992年，44：2273-2280页和Mathiasen，I.S.等，J.Steroid Biochem.Molec.Biol.，1993年，46：365-371页)。

因此，对具有预期治疗活性和最小毒性的维生素D类似物有持续的需求。具有与本发明化合物相似结构的化合物公开于EP522013。然而，该化合物有明显的皮肤刺激性，并且不太适于局部给药或局部治疗皮肤病。

本发明化合物提供迄今未公开的维生素D类似物，它们具有免疫抑制和细胞增殖抑制活性，但是没有升高血钙水平和皮肤刺激性等副作用。

本发明涉及通式I化合物及其与可药用酸的可体内水解酯：

(I)

其中R¹和R²可以相同或不同，代表(C₁-C₄)烷基，和R³代表氢、卤素、(C₁-C₄)烷基、或O-(C₁-C₄)烷基。

试验性手性碳原子的构型(式I和1a(如下)中星号)可以为R或S式。在本发明优选化合物中，用星号标明的碳原子被同一烷基替代(R¹＝R²)并且因此为非手性的。

具体地说，本发明涉及通式1a的化合物：

插入原文3页式1

其中R¹、R²和R³如上述定义。

式1a化合物优选其中R¹和R²独立地为甲基或乙基，并且R³为氢、F、Cl、甲基、乙基或甲氧基的化合物。此外，式1a化合物优选R³位于4-或5-位。式1a化合物进一步优选R¹和R²均为甲基且R³为氢、F或甲基。式1a化合物最优选R³为氢、5-甲基或4-F，且R¹和R²均为甲基。

本发明还包括纯的式I化合物的非对映异构体或此类非对映异构体的混合物。

本发明特别优选的化合物及其与可药用酸的可体内水解酯选自：

1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-[((3-(2-羟基-2-丙基)-苯基)-甲氧基)-甲基]-9，10-断-孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯；

1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-[((3-(2-羟基-2-丙基)-5-甲基-苯基)-甲氧基)-甲基]-9，10-断-孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯；

1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-[((3-(2-羟基-2-丙基)-5-甲氧基-苯基)-甲氧基)-甲基]-9，10-断-孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯；

1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-[((3-(2-羟基-2-丙基)-4-氟-苯基)-甲氧基)-甲基]-9，10-断-孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-烯。

在此所用的术语″烷基″指通过从任一碳原子除去氢而衍生于烷烃任何单价基团，并且包括正烷基(n-烷基)的下组(subclasses)和伯、仲和叔烷基，并且含有多个特定碳原子例如(C₁-C₄)烷基如甲基、乙基、正-丙基和异丁基。烷烃指具有通式C_nH_2n+2的支链或非支链脂族烃，并且全部氢原子和饱和碳原子组成。

经图I所示的路线，采用Tetrahedron 43 4609(1987年)描述的维生素D衍生物1可制备式1a化合物。同法也可制得式I化合物的邻位和对位取代类似物。

化合物1可用NaBH₄还原成醇2，它可以两种方法转化成式III化合物。化合物2可用具有A-C(R₁)(R₂)-C₆H₃(R₃)-CH₂-Z(A为经适当保护的羟基，例如四氢吡喃基氧基或三烷基甲硅烷基氧基；Z为离去基团如Cl、Br、I或甲苯磺酰基；C₆H₃(R₃)为邻-亚苯基、间位-亚苯基或对位-亚苯基)构造的侧链烷化，或者化合物2的羟基可转化为离去基团，例如经甲苯磺酰化形成化合物II，然后在碱性条件下用具有式A-C(R₁)(R₂)-C₆H₃(R₃)-CH₂OH构造的侧链处理而转化成化合物III

化合物III向1a的转化包括光异构化和脱保护步骤，这与合成其它维生素D类似物的最后步骤类似，参见EP0227826。

具有A-C(R₁)(R₂)-C₆H₃(R₃)-CH₂-Z构造的侧链可以是已知的化合物或按PCT/DK90/00323描述制得。具有A-C(R₁)(R₂)-C₆H₃(R₃)-CH₂OH构造的侧链可以是已知的化合物，或者用A-C(R₁)(R₂)-C₆H₃(R₃)-CH₂-Z经简单水解制得。

路线1

反应路线注解：

a)还原，例如用NaBH₄。

b)在碱如KOH、KOBut或KH条件下，有或没有催化剂如18-冠醚-6，于无水溶剂如THF中用具有A-C(R₁)(R₂)-C₆H₃(R₃)-CH₂-Z片段的侧链烷基化。

c)将OH转化为离去基团X，例如可采用X＝O-Ts的甲苯磺酰化。

d)在碱如NaH存在下，于无水溶剂如DMF中与具有A-C(R₁)(R₂)-C₆H₃(R₃)-CH₂OH构造的侧链反应。

e)在三重敏化剂例如蒽存在下，用hν异构化。

f)用TBAF或HF脱保护。

在本说明书使用了以下标准缩略语：

But＝叔丁基，DMF＝N，N-二甲基甲酰胺，Et＝乙基，Ether＝乙醚，Me＝甲基，PPTS＝对甲苯磺酸吡啶鎓，Py＝吡啶，TBAF＝氟化四丁基铵，TBS＝叔丁基二甲甲硅烷，THF＝四氢呋喃，THP＝四氢-4H-吡喃-2-基，Ts＝甲苯磺酰基，TES＝三乙基甲硅烷基。

药理学方法

供证明式1化合物效力的比较数据见下表A。在下面的列标题：″HaCaT，rel.″、″Calc.，rel.″、″受体结合rel.″和″皮肤刺激性评分″加以说明。

为了评估并比较试验化合物对皮肤细胞的抗增殖活性例如抗牛皮癣效力，采用了一种自动无致死的、非致瘤性人皮肤角质形成细胞株，经体内HaCaT试验测定³H-胸苷摄入(Mork Hansen，C.等，J.Invest.Dermatol.1996年，1：44-48页)。在表A的″HaCaT，rel.″列，列出了实施例1化合物100对皮肤细胞的抗增殖活性(相对于1，25(OH)₂D₃，骨化三醇)；如表所示，化合物100对皮肤细胞的抗增殖活性与先有技术中的骨化三醇相同。

通常，1，25(OH)₂D₃对生物器官钙平衡的典型作用包括对钙血和钙尿活性的影响，而这种作用对于本发明维生素D类似物来说是不良的，本发明化合物通过选择性抑制某些细胞增殖，即可获得所需的无钙血作用和无皮肤刺激性。可用已知方法经鼠体内测定化合物的钙血活性(Binderup，L.，Bramm，E.，Biochem.Pharmacol.1988年，37：889-895页)。在表A中的″Calc.，rel.″列，列出了实施例1化合物100的钙血活性(相对于1，25(OH)₂D₃)；如表所示，与骨化三醇和先有技术EP522013中的化合物111相比，本发明化合物100的钙血活性非常低。

另外，采用已知方法(Binderup，L.，Bramm，E.，Biochem.Pharmacol.1988年，37：889-895页)，测定了本发明化合物对维生素D受体的结合，并与骨化三醇作了比较。

皮肤刺激性实验采用无毛豚鼠。采用Randomised occlusivepatch试验48小时。试验中，分别给予3个剂量水平(500μg/ml、50μg/ml和5μg/ml)的每种类似物和安慰剂溶液。对皮肤刺激性的评估采用盲法(blinded)并以临床分级和对皮肤血流(激光多普勒灌注造影，LDPI)和红斑(Minolta ChromaMeter)的客观测量为基础。此外，还测定了表皮厚度，它可作为表皮增殖的一个征兆。

刺激性评分标准如下：

0 无刺激性物质

+ 与骨化三醇比较，刺激性不明确或非常低的

物质

++ 与骨化三醇比较，刺激性非常低的物质

+++ 刺激性与骨化三醇同一水平的的物质

++++ 比骨化三醇更刺激的物质

++++ 与骨化三醇比较，刺激性非常高的物质

+

从表A中可见，化合物100的刺激性明显低于先有技术化合物，并且在HaCaT-试验(牛皮癣模型)中的效力与1，25(OH)₂D₃相似，其钙血活性可以忽略，可与EP522013中的化合物111相比。

表A：化合物100和参考化合物的生物学试验

化合物	皮肤刺激性评分	受体结合rel.**，¤	HaCaTrel.**，¤	Calc.rel.**
化合物	皮肤刺激性评分	受体结合rel.**，¤	HaCaTrel.**，¤	Calc.rel.**	钙泊三醇	+++	0.5	2	0.005
骨化三醇	+++	1	1	1	钙泊三醇	+++	0.5	2	0.005
骨化三醇	+++	1	1	1	100，Ex.1	+	0.01	1	0.001
Ref.	++++	0.5	40	0.07	100，Ex.1	+	0.01	1	0.001

表A注解：

**相对于1，25(OH)₂D₃的数值；该值大于1则表明此化合物比1，25(OH)₂D₃更具活性。

¤1，25(OH)₂D₃的IC50与化合物IC50的比值，其中IC50为与对照品比较，50％抑制³H-胸苷结合所需的浓度。

Ref参考化合物(EP522013的化合物)

本发明式I化合物在结构上与EP522013公开的式I化合物密切相关。然而，与EP522013化合物相比，本发明化合物的皮肤刺激性令人惊奇地低。为了证明这种惊奇的效果，对实施例1化合物100与EP522013的化合物111作了比较。两者结构上的唯一区别是连接C₂₂的氧与苯环间的链长度不同：EP522013化合物111中的氧与苯环直接连接，而本发明化合物100中的氧则是通过亚甲基与苯环连接。

本发明化合物旨在用于药物组合物，所述组合物可用于上述人或兽疾病局部或全身治疗。

本发明化合物可与其它药物或治疗形式联用。在治疗牛皮癣时，本发明化合物可与例如类固醇或其它治疗如光-或UV光-疗法或PUVA疗法联用。在治疗癌症时，本发明化合物可与其它抗癌药物或抗癌疗法例如放射治疗联用。在预防移植排斥和移植物对宿主反应时，或在治疗自身免疫疾病时，本发明化合物与其它免疫抑制或免疫调节药物或疗法例如环孢菌素的联用是有益的。

对于要达到的治疗效果而言，所需式I化合物的量当然可随特定化合物、给药途径和所治疗的哺乳动物的不同而变化。本发明化合物可经非肠道的、关节内、肠道内或局部途径给药。本发明化合物在肠内给药时可很好地吸收，这也是治疗全身疾病时的优选给药途径。在治疗皮肤病如牛皮癣或者眼部疾病时，优选采用局部或肠内给药。

活性组分可以粗制化学药品形式单独给药，优选采用其药物制剂形式给药。活性组分一般占制剂重量的0.1ppm-0.1％。

因此，本发明兽用和人用制剂包括活性组分及与其结合的可药用载体和其它适宜治疗组分。所述载体必须是″可接受的″，这意味着可与制剂的其它组分配伍且对接受者无害。

制剂包括如适于经口服、眼部、直肠、非肠道(包括皮下、肌内和静脉内)、经皮、关节内和局部、鼻部或口腔给药的形式。

术语“剂量单位”指一种适于给予病人的单剂量单位，它易于处理和包装，其中含有物理和化学稳定的单位剂量的活性物质或与固体或液体药用稀释剂或载体的混合物。

制剂适于为剂量单位形式，并且可采用任何药剂学已知方法制备。所用方法均包括将活性组分掺入含有一种或多种助剂的载体中的步骤。通常，将活性组分均匀且紧密地掺入液体载体或细粉碎的固体载体中，然后，如果有需要，可将产物制成所需形式的制剂。

本发明适于口服给药的制剂可以是例如胶囊剂、小药囊(sachets)、片剂或锭剂的单剂量(discrete units)形式，其中每个均含有预定量的活性组分；粉末或颗粒形式，溶液形式或水性液体或非水性液体中的混悬液形式；或水包油乳剂或油包水乳剂形式。也可以丸剂、药糖剂或糊剂给予活性组分。

适于直肠给药的制剂可为掺有活性组分和载体的栓剂，或者为灌肠剂。

适于非肠道给药的制剂通常包括含活性组分的无菌油性或水性制剂，优选与接受者血液等渗。经皮给药制剂可为硬膏剂或贴剂形式。

适于关节内或眼部给药的制剂可以是微晶形式活性组分的无菌水性制剂，例如为水性的微晶混悬液。脂质体制剂或可生物降解聚合物系统也可用于本发明活性组分的关节内和眼部给药。

适于局部或眼部给药的制剂包括液体或半液体制剂，例如搽剂、洗液、凝胶、敷剂(applicants)、水包油或油包水乳剂如霜剂、软膏或糊剂；或溶液或混悬液如滴剂。

适于鼻或口腔给药的制剂包括粉末、自抛射和喷雾制剂，例如气雾剂和雾化剂。

除了前面提到过的组分，本发明制剂中还含有一种或多种附加组分组分，例如稀释剂、粘合剂、防腐剂等。

组合物可进一步含有用于治疗上述病理学病症的其它治疗活性化合物，例如用于治疗免疫疾病的其它免疫抑制剂，或用于治疗皮肤病的类固醇。

本发明涉及治疗患有一种上述病理学病症的病人的方法，该方法包括将有效量的一种或多种式1化合物给予对此有需要的病人，其中化合物可单独给予或与一种多种赋形剂或其它用于治疗所述病理学病症的治疗活性化合物联用。采用本发明化合物和/或更有治疗活性化合物的治疗可同时或间歇给药。

在全身治疗中，每日剂量为0.001-2μg/kg体重，优选为0.002-0.3μg/kg哺乳动物体重，例如给予0.003-0.3μg/kg式I化合物，给予成人的典型每日剂量为0.2-25μg。在皮肤病的局部治疗中，给予含有0.1-1000μg/g、优选1-500μg/g、更优选10-250μg/g式I化合物的软膏、霜或洗液。局部眼用时，可给予含有0.1-1000μg/g、优选1-500μg/g、更优选10-250μg/g式I化合物的软膏、滴剂或凝胶。也可制成每单位剂量含有0.05-100μg、优选0.1-50μg式I化合物的口服组合物，优选为片剂、胶凝剂或滴剂。

在下面的一般方法、制备和实施例中将对本发明作进一步描述：

一般方法、制备和实施例

概述

表2列出了式I的示例化合物，制备1-8的中间体列于表1中。

对于核磁共振光谱(300MHz)，所引用的氘核氯仿溶液化学位移值(δ)是相对于内标四甲基硅烷(δ＝0)或氯仿(δ＝7.25)的值。该值是多峰，其定义为(双峰(d)，三峰(t)，四峰(q))或者是不在大致中间点(m)处，除非是指一个范围(s＝单峰，b＝宽)。偶合常数(J)的单位为赫兹(Hz)，通常至最接近的单位。

醚是经钠干燥的乙醚。THF用二苯甲酮钠干燥。石油醚指戊烷馏分。除非另有所指，反应通常在室温氩气氛下进行。处理步骤是指：用特定溶剂(与有机反应溶剂不同)稀释，用水再用盐水萃取，用无水MgSO₄干燥并与真空下浓缩得到残余物。色谱法采用硅胶。

表1 制备式III如IV化合物

化合物编号制备编号路线1式 R¹ R² R³ A

4 3 III Me Me H O-THP

5 4 IV Me Me H O-THP

6 5 III Me Me 5-Me O-THP

7 6 IV Me Me 5-Me O-THP

8 7 III Me Me 5-OMe O-THP

9 8 IV Me Me 5-OMe O-THP

10 10 III Me Me H O-TES

11 11 IV Me Me H O-TES

表2 式1a的示例化合物

化合物编号实施例编号 R¹ R² R³

100 1 Me Me H

101 2 Me Me 5-Me

102 3 Me Me 5-OMe

100 4 Me Me H

103 Et Et H

104 Et Et 5-Me

105 Me Me 4-F

一般方法

一般方法1：经化合物2烷化反应制备式III化合物

向无水四氢呋喃(10ml)中的化合物2(862mg，1.5mmol)溶液中加入氢化钾(1.0ml 20％混悬于油中)和具有A-C(R₁)(R₂)-C₆H₃(R₃)-CH₂-Z构造的侧链(6,75mmol)，然后强力搅拌反应混合物。18-冠醚-6(650mg，5.8mmol)溶于无水四氢呋喃(5ml)中，然后滴加到反应液中，用时20分钟。再搅拌90分钟后，小心向反应液中加入水(40ml)。当反应停止或，反应混合物用醚(100ml)稀释，有机相用水(3×50ml)和含水饱和氯化钠(50ml)连续萃取。真空干燥并除去溶剂后，产物用色谱法(硅胶；以含10％醚的石油醚为洗脱液)纯化得到所需的无色油状化合物。

一般方法2：式III化合物异构化为相应的5(Z)异构体IV

于室温氩气下，用TQ 718-Z2(Hanau)型高压紫外灯照射Pyrex烧瓶中含有式III化合物(1mmol)、蒽(800mg，4.5mmol)和三乙胺(1滴)的二氯甲烷(60ml)溶液35分钟。溶液过滤并并于真空下浓缩。残余物用色谱法(硅胶；以含10％醚的石油醚为洗脱液)纯化得到所需的无色油状化合物。

一般方法3：式IV化合物脱保护为相应的式I化合物

式IV化合物(1mmol)溶于乙酸乙酯中(1.0ml)。强力搅拌下加入乙腈(25ml)。加入含5％氢氟酸的8∶1乙腈/水(12ml)，反应混合物于于室温氩气下搅拌45分钟。加入乙酸乙酯(150ml)，然后反应混合物用饱和水性碳酸氢钠溶液(150ml)、水(3×60ml)和饱和水性氯化钠(50ml)连续萃取，然后用硫酸镁干燥并于真空下浓缩。残余物用色谱法(200g硅胶；以含20％戊烷的乙酸乙酯为洗脱液)纯化得到标题化合物。

制备

制备1： 1(S)，3(R)-双-叔丁基二甲基-甲硅烷氧基-20(R)-羟甲基 -9，10-断孕甾-5(E)，7(E)，10(19)-三烯(化合物2)

用氢硼化钠(0.35g)处理含醛1(5g)的THF(20ml)和乙醇(70ml)的搅拌的冰冷溶液。反应10分钟后，将化合物分配于乙酸乙酯和水中，有机相用盐水洗涤并干燥，真空下浓缩得到标题化合物，¹H NMR：δ＝0.05(bs，12H)，0.56(s，3H)，0.86(s，9H)，0.89(s，9H)，0.96(d，3H，J＝7)，1.1-2.1(m，15H)，2.31(bd，1H)，2.55(dd，1H，J＝14和5)，2.86(bd，1H)，3.48(dd，1H，J＝10和7)，3.71(dd，1H，J＝11和4)，4.21(m，1H)，4.52(m，1H)，4.93(bs，1H)，4.98(bs，1H)，5.82(d，1H，J＝11.5)，和6.44(d，1H，J＝11.5)。

制备3： 1(S)，3(R)-双-叔丁基二甲基-甲硅烷氧基-20(R)-对-甲苯磺酰氧 -甲基-9，10-断孕甾-5(E)，7(E)，10(19)-三烯(化合物3)

将化合物2(5g)溶于二氯甲烷(25ml)和吡啶(3ml)，于搅拌和冰冷过程中向溶液中加入的对-甲苯磺酰氯(2.5g)。反应混合物保持5℃过夜后，分配于乙酸乙酯和水中。有机层用饱和硫酸铜溶液(两次)、水、5％碳酸氢钠溶液和盐水连续洗涤，然后干燥并于真空下浓缩。残余物用色谱法(200g硅胶；以含5％醚的石油醚为洗脱液)纯化得到标题化合物，(甲醇中熔点为98-100℃)，¹H NMR：δ＝0.035(s，3H)，0.044(s，3H)，0.051(s，3H)，0.056(s，3H)，0.45(s，3H)，0.85(s，9H)，0.88(s，9H)，0.89(d，3H，J＝6)，1.15-2.05(m，14H)，2.28(bd，1H)，2.44(s，3H)，2.52(dd，1H，J＝14 and 5)，2.84(bd，1H)，3.81(m，1H)，4.11(m，1H)，4.20(m，1H)，4.51(m，1H)，4.93(bs，1H)，4.97(bs，1H)，5.79(d，1H，J＝11)，6.42(d，1H，J＝11)，7.33(bd，2H)，7.78(bd，2H)。

制备3：化合物4

方法：一般方法1

起始物：2-(2-(3-溴甲基苯基)-2-丙氧基)-四氢-4H-吡喃¹H NMRδ＝7.42(s，1H)，7.3(m，3H)，6.44(d，1H)，5.61(d，1H)，4.98(s，1H)，4.93(s，1H)，4.51(dd，1H)，4.46(s，2H)，4.42(m，1H)，4.21(m，1H)，3.93(m，1H)，3.54(dd，1H)，3.39(m，1H)，3.27(t，1H)，2.85(d，1H)，2.54(dd，1H)，2.30(d，1H)，2.01(t，1H)，1.95-1.30(m，19H)，1.66(s，3H)，1.50(s，3H)，0.98(d，3H)，0.91(s，9H)，0.89(s，9H)，0.53(s，3H)，0.06(s，12H)。

制备4：化合物5

方法：一般方法2

起始物：化合物4

¹³C

NMRδ＝148.1，147.0，140.6，138.4，134.9，127.8，125.9，125.9，124.8，124.8，124.8，124.7，122.9，117.8，111.0，95.2，77.7，74.5，72.8，71.8，67.3，63.2，56.0，53.2，45.8，45.4，44.6，39.7，36.0，32.0，31.9，28.6，26.7，26.3，25.7，25.6，25.2，23.2，21.8，20.5，18.0，17.9，17.1，12.2，-4.9，-5.0，-5.3。

制备5：化合物6

方法：一般方法1

起始物：2-(2-(3-溴甲基-5-甲基苯基)-2-丙氧基)-四氢-4H-吡喃¹H NMRδ＝7.21(s，1H)，7.15(s，1H)，7.05(s，1H)，6.44(d，1H)，5.81(d，1H)，4.98(s，1H)，4.94(s，1H)，4.54(dd，1H)，4.43(s，2H)，4.40(m，1H)，4.21(m，1H)，3.95(m，1H)，3.54(dd，1H)，3.35(m，1H)，.25(t，1H)，2.86(d，1H)，2.34(s，3H)，2.30(d，1H)，2.0(t，1H)，1.95-1.20(m，19H)，1.65，(s，3H)，1.48(s，3H)，0.98(d，3H)，0.90(s，9H)，0.85(s，9H)，0.53(s，3H)，0.05(s，12H)。

制备6：化合物7

方法：一般方法2

起始物：化合物6

¹H NMRδ＝7.21(s，1H)，7.15(s，1H)，6.90(s，1H)，6.22(d，1H)，6.00(d，1H)，5.17(s，1H)，4.85(s，1H)，4.4-4.3(m，4H)，4.18(m，1H)，3.95(m，1H)，3.53(dd，1H)，3.35(m，1H)，3.24(t，1H)，2.78(d，1H)，2.41(d，1H)，2.34(s，3H)，2.21(dd，1H)，1.95(t，1H)，1.9-1.25(m，19H)，1.65(s，3H)，1.48(s，3H)，0.99(d，3H)，0.90(s，18H)，0.25(s，3H)，0.07(s，12H)。

制备7：化合物8

方法：一般方法1

起始物：2-(2-(3-溴甲基-5-甲氧基苯基)-2-丙氧基)-四氢-4H-吡喃¹H NMRδ＝6.98(s，1H)，6.92(d，1H)，6.79(s，1H)，6.44(d，1H)，5.83(d，1H)，4.98(s，1H)，4.93(s，1H)，4.5(dd，1H)，4.45(m，3H)，4.21(m，1H)，3.95(m，1H)，3.80(s，3H)，3.55(dd，1H)，3.40(m，1H)，3.26(t，1H)，2.87(d，1H)，2.56(dd，1H)，2.32(d，1H)，2.01(t，1H)，1.95-1.40(m，19H)，1.64(s，3H)，1.48(s，3H)，1.00(d，3H)，0.93(s，9H)，0.85(s，9H)，0.53(s，3H)，0.05(s，12H)。

制备8：化合物9

方法：一般方法2

起始物：化合物8

¹H NMRδ＝6.98(s，1H)，6.91(s，1H)，6.82(s，1H)，6.21(d，1H)，6.00(d，1H)，5.17(s，1H)，4.85(s，1H)，4.46(s，2H)，4.40(m，1H)，4.35(m，1H)，4.17(m，1H)，3.95(m，1H)，3.80(s，3H)，3.55(dd，1H)，3.38(m，1H)，3.25(t，1H)，2.80(d，1H)，2.42(dd，1H)，2.2(dd，1H)，1.96(t，1H)，1.95-1.2(m，19H)，1.64(s，3H)，1.48(s，3H)，0.98(d，3H)，0.88(s，18H)，0.52(s，3H)，0.05(s，12H)。

制备9： 2-(3-溴甲基苯基)-2-三乙基甲硅烷氧基-丙烷(propan)

将咪唑(10.1g，148mmol)溶于无水DMF(100ml)中，然后加入三乙基氯硅烷(15.6ml，148mmol)，反应于室温氩气下搅拌30分钟。滴加溶于无水DMF(100ml)中的2-(3-溴甲基苯基)-2-丙醇(17.0g，74mmol)，用时15分钟。再搅拌15分钟后加入乙酸乙酯(1100ml)，混合物用1N盐酸(2×50ml)、水(3×200ml)和饱和的含水氯化钠(200ml)连续萃取，用硫酸镁干燥并于真空下浓缩。残余物用色谱法(硅胶，含1％醚的戊烷洗脱液)纯化得到无色油状标题化合物。

¹H NMRδ＝7.50(t，1H)，7.41(dt，1H)，7.29(t，1H)，7.23(dt，1H)，4.50(s，2H)，1.57(s，6H)，0.95(t，6H)，0.59(q，9H)。

制备10：化合物10

方法：一般方法1

起始物：2-(3-溴甲基苯基)-2-三乙基甲硅烷氧基-丙烷

¹H NMRδ＝7.43(m，1H)，7.37(m，1H)，7.27(t，1H)，7.17(m，1H)，6.45(d，1H)，5.82(m，1H)，4.98(m，1H)，4.94(m，1H)，4.53(dd，1H)，4.48(s，2H)，4.22(m，1H)，3.54(dd，1H)，3.26(dd，1H)，2.86(m，1H)，2.55(dd，1H)，2.32(m，1H)，2.08-1.20(m，14H)，1.56(s，6H)，0.99(d，3H)，0.94(t，9H)，0.90(s，9H)，0.86(s，9H)，0.58(q，6H)，0.53(s，3H)，0.06(m，12H)。

制备11：化合物11

方法：一般方法2

起始物：化合物10

¹H NMRδ＝7.45-7.10(m，4H)，6.22(d，1H)，6.01(d，1H)，5.18(d，1H)，4.86(d，1H)，4.47(s，2H)，4.39(m，1H)，4.18(m，1H)，3.54(dd，1H)，3.25(dd，1H)，2.81(d，1H)，2.44(dd，1H)，2.21(dd，1H)，2.041.15(m，14H)，1.56(s，6H)，0.98(d，3H)，0.93(t，9H)，0.87(s，18H)，0.58(q，6H)，0.52(s，3H)，0.06(s，12H)。

实施例1

1(S)3(R)-二羟基-20(R)-[((3-(2-羟基-2-丙基)-苯基)-甲氧基)- 甲基]-9，10-断-孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物100)

方法：一般方法3

起始物：化合物5

¹³C NMRδ＝149.2，147.6，142.9，138.8，133.0，128.2，126.0，124.9，123.6，123.5，117.1，111.8，74.7，73.0，72.5，70.8，66.8，56.2，53.5，45.7，45.3，42.8，39.8，36.1，31.8，29.0，26.8，23.5，22.1，17.3，12.4。

实施例2

1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-[((3-(2-羟基-2-丙基)-5-甲基-苯基)-甲氧基)-甲基]-9，10-断-孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物101)

方法：一般方法3

起始物：化合物7

¹H NMRδ＝7.24(s，1H)，7.21(s，1H)，7.04(s，1H)，6.36(d，1H)，6.02(d，2H)，5.32(s，1H)，4.99(s，1H)，4.44(s，2H)，4.39(m，2H)，4.21(m，1H)，3.55(dd，1H)，3.24(dd，1H)，2.62(d，1H)，2.58(d，1H)，2.35(s，3H)，2.30-1.20(m，14H)，1.56(s，6H)，0.98(d，3H)，0.54(s，3H)。

实施例3

1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-[((3-(2-羟基-2-丙基)-5-甲氢基-苯基)- 甲氧基)-甲基]-9，10-断-孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物 102)

方法：一般方法3

起始物：化合物9

¹H NMR 5＝7.01(s，1H)，6.97(s，1H)，6.80(s，1H)，6.36(d，1H)，6.02(d，1H)，5.32(s，1H)，4.99(s，1H)，4.46(s，2H)，4.41m，1H)，4.20(m，1H)，3.81(s，3H)，3.58(dd，1H)，3.25(t，1H)，2.81(dd，1H)，2.57(dd，1H)，2.3(dd，1H)，2.0-1.3(m，14H)，1.56(s，6H)，0.99(d，3H)，0.54(s，3H)。

实施例4

1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-[((3-(2-羟基-2-丙基)-苯基)-甲氧基)- 甲基]-9，10-断-孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物100)

方法：一般方法3

起始物：化合物11

¹³C NMRδ＝142.9，147.6，142.9，138.8，133.0，128.2，26.0，124.9，123.6，123.5，117.1，111.8，74.7，73.0，72.5，70.8，66.8，56.2，53.5，45.7，45.3，42.8，39.8，36.1，31.8，29.0，26.8，23.5，22.1，17.3，12.4。

实施例5

含化合物100的胶囊

将化合物100溶于花生油中，浓度为1μg化合物111/ml油。加热混合10重量份的明胶、5重量份的甘油、0.08重量份的山梨酸钾和14重量份的蒸馏水，形成明胶软胶囊。然后每个胶囊填入含100μl化合物111的油液，这样每个胶囊含有0.1μg化合物100。

实施例6

含化合物100的皮肤用霜

将0.05mg化合物100溶于1g杏仁油中。向溶液中加入40g矿物油和20g自乳化蜂蜡。将混合物加热液化。加入40ml热水后，混合混合物。每100g所得霜剂中含有约0.5g化合物100。

实施例7

含化合物100的可注射溶液

一种注射溶液含有：

10μg 化合物100

15.4mg 磷酸二钠二水合物

2mg 磷酸二氢钠二水合物

0.8mg 氯化钠

5mg 抗坏血酸钠

5mg Solutol^HS 15

加1ml水成注射液。

Claims

1.通式为(I)的化合物及其与可药用酸的可体内水解酯，

其中R¹和R²可以相同或不同，代表(C₁-C₄)烷基，和R³代表氢、(C₁-C₄)烷基、或O-(C₁-C₄)烷基。

2.如权利要求1的具有通式1a的化合物及其与可药用酸的可体内水解酯，

3.权利要求1或2的化合物，其中R¹代表甲基或乙基。

4.权利要求1或2的化合物，其中R²代表甲基或乙基。

5.权利要求1或2的化合物，其中R³代表氢，甲基，乙基或甲氧基。

6.权利要求1或2的化合物，其中R³位于5-位。

7.权利要求1或2的化合物，其中R¹和R²均代表甲基，且R³代表氢或甲基。

8.权利要求1或2的化合物，其中R³代表5-甲基。

9.权利要求1或2的化合物，选自：

1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-[((3-(2-羟基-2-丙基)-5-甲氧基-苯基)-甲氧基)-甲基]-9，10-断-孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯；及其与可药用酸的可体内水解酯。

10.含有有效量的如权利要求1-9之一化合物的药物组合物，还含有可药用载体和/或辅剂。

11.权利要求10的药物组合物，为剂量单位形式。

12.权利要求11的药物组合物，所述剂量单位含有0.05-100μg的如权利要求1-9之一化合物。

13.权利要求12的药物组合物，其中化合物含量为0.1-50μg。

14.权利要求1-9之一化合物在制备治疗或预防以异常的细胞分化和/或细胞增殖为特征的疾病或者免疫系统失衡的药物中的用途。

15.权利要求14的用途，所述疾病选自癌，牛皮癣，皮肤老化和甲状旁腺机能亢进。