CS9100215A2

CS9100215A2 - Derivatives of hexahydropyrrolo /2,3-b/ indole, method of their preparation and their application as drugs

Info

Publication number: CS9100215A2
Application number: CS91215A
Authority: CS
Inventors: Gerald Joseph Oomalley; Richard Charles Allen; John Irving White
Original assignee: Hoechst Roussel Pharma
Priority date: 1990-02-01
Filing date: 1991-01-30
Publication date: 1991-09-15
Also published as: TW206228B; CA2035397C; NO175899C; HUT60499A; EP0440145A1; JPH04330076A; AU7011191A; AU629094B2; FI910448A0; NZ236944A; FI94759B; ZA91725B; IL97113A0; CZ281612B6; PL288904A1; NO175899B; KR910021401A; FI910448A7; JP3042902B2; CA2035397A1

Description

JUDr &ΗΪ

KA ÍW 94 PRAHA ít iíčná 25 >»

-J

Deriváty hexahydropyrroloC2,3-b]indolu, způsob jejichpřípravy a jejich použití jako léčiv

Oblast techniky

Vynález se týká nových karbamátů, ureidoderivátů,amidů a příbuzných derivátů hexahydropyrrolot2,3-b]indo-lu, způsobu jejich přípravy a jejich použití jako léčiv.

Podstata vynálezu

Byly nalezeny nové sloučeniny obecného vzorce 1

Ri

ve kterém X znamená atom kyslíku, atom síry, skupinu NH, N-(niŽ-ší)alkylovou skupinu nebo N-aryl(nižší)alkylovou sku-pinu, Y znamená atom vodíku, atom fluoru, atom chloru, atombromu, nitroskupinu, nižší alkylovou skupinu, nižšíalkoxyskupinu nebo tri(nižší )alkylsilylovou skupinu, R^ znamená nižší alkylovou skupinu, halogenem substi-tuovanou nižší alkylovou skupinu, arylovou skupinu,aryl(nižší)alkylovou skupinu, cykloalkylovou skupi-nu, heteroarylovou skupinu nebo heteroaryl(nižší)-alkylovou skupinu, 2 znamená atom vodíku, nižší alkylovou skupinu nebo aryl(nižší)alkylovou skupinu, R^ znamená nižší alkylovou skupinu nebo aryl(nižší)-alkylovou skupinu, R^ znamená atom vodíku, nižší alkylovou skupinu, nižší alkenylovou skupinu, nižší alkinylovou skupinu, aryl-(nižší)alkylovou skupinu, formylovou skupinu, (niž-ší )alkylkarbonylovcu skupinu, aryl(nižší)alkylkarbo-nylovcu skupinu nebo (nižší)alkoxykarbonylovou sku-pinu , R^ znamená atom vodíku nebo nižší alkylovou skupinu am znamená číslo 0 nebo 1, s tím, že když m znamená nulu, R^ může rovněž znamenatatom vodíku.

Uvedené sloučeniny jsou použitelné ke zmírnění růz-ných poruch paměti, pro které je charakteristický cholin-ergní deficit, jako je tomu například v případě Alzheime-rovy nemoci.

Pokud není uvedeno jinak, mají v části popisné a vpatentových nárocích dále definované obecné výrazy násle-dující významy: Výraz "nižší alkylová skupina" označuje přímou neborozvětvenou alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku. Jakopříklady takovéto alkylové skupiny lze jmenovat methylovouskupinu, ethylovou skupinu, n-propylovcu skupinu, isopro-pylovou skupinu, n-butylovou skupinu, isobutylovou sku-pinu, sek.butylovou skupinu, terč.butylovou skupinu, jakoži přímou nebo rozvětvenou pentylovou skupinu a hexylovouskupinu. Výrazskupinu se "nižší alkenylová skupina" označuje alkenylovou2 až 6 atomy uhlíku a s jednou dvojnou vazbou. Výraz "nižšískupinu se 2 až 6 alkinylová skupina" označuje alkinylovouatomy uhlíku a s jednou trojnou vazbou. 3 Výraz "cykloalkylové skupina" označuje cykloalkylo-vou skupinu se 3 až 7 atomy uhlíku v kruhu. Tato cyklo-alkylová skupina může být substituována 1 nebo 2 nižšímialkylovými skupinami. Výraz "halogen" označuje atom. fluoru, atom chloru,atom bromu nebo atom jodu. Výraz "nižší alkylové skupina substituovaná haloge-nem" označuje nižší alkylovou skupinu, která je substi-tuována jedním nebo několika atomy halogenu. Výraz "aryl" či "arylová skupina" označuje tam, kdese vyskytuje, nesubstituovanou fenylovcu skupinu nebofenylovou skupinu, substituovanou 1, 2 nebo 3 substituentyzvolenými ze souboru, který je tvořen nižší alkylovcuskupinou, atomem halogenu, nitroskupinou, nižší alkoxy-skupinou, hydroxyskupinou nebo trifluormethylovou skupinou. Výraz "heteroarylová skupina" znamená všude tam, kdese vyskytuje, skupinu znázorněnou vzorci

přičemž

Rg znamená atom vodíku nebo nižší alkylovou skupinu.

Sloučeniny obecného vzorce I podle vynálezu se při-pravují syntézou, která je popsána v dále uvedeném sché-matu.

Ve strukturních vzorcích, znázorňující sloučeninypodle vynálezu, znamenají silně vyznačené čáry (—»)vycházející z atomu uhlíku v poloze 3a a z atomu uhlíku v poloze 8a 1,2,3,3a,8,8a-hexahydropyrrolo[2,3-bJindolo- vého kruhového systému, že dva substituenty jsou nad střední.rovinou tricyklického systému, zatímco tečkované čáry (.....znamenají, že dva substituenty jsou pod střední rovinou tricyklického systému, a vlnovkou (-WVO)naznačené čáry znamenají, že oba dva substituenty jsoubud nad nebo pod zmíněnou střední rovinou. Z důvodu kon-firmačního sférického napětí musí být dva substituentyv polohách 3a a 8a bud oba nad zmíněnou střední rovinounebo oba pod zmíněnou střední rovinou. Tak jsou vevzorcích I, II a III substituenty na atomech uhlíku v po-loze 3a a 8a cis, pokud jsou na téže straně tricyklické-ho systému. V případě, že zmíněné substituenty jsou obanad střední rovinou tricyklického systému, bude tato kon-figurace označována jako 3aS-cis a pokud jsou oba substi-tuenty pod střední rovinou kruhu, bude konfigurace ozna-čována jako 3aR-cis. Tyto dva typy konfigurace jsou zná-zorněny níže.

3aS - cis (II)

3áR - cis (ΠΙ) V popisné části, jakož i v patentových nárocích - po-kud je třeba vyjádřit jednoduchým vzorcem, že sloučeninouje JaS-cis nebo 3aR-cis isomer či racemická nebo jiná směstěchto dvou sloučenin - obsahuje vzorec vlnovkou naznačenéčáry, jak je uvedeno níže.

Pod rozsah patentových nároků, spadají jak zmíněnécis-isomery, tj. 3aS-cis-isomer a 3a-R-cis-isomer každéze sloučenin uvedené jmenovitě nebo strukturním vzorcem,i když je v popisné části někdy z úsporných důvodů zmí-něn pouze jeden isomer. Pod rozsah předmětu vynálezuspadají tedy všechny směsi 3aS-cis- a 3aR-cis-isomerůvčetně racemické směsi (poměr 3aS-cis : 3aR-cis = 1:1).

Schéma syntézy: v V popisu níže znázorněných jednotlivých, stupňů syn-tézy mají obecné symboly X, Y, m a R^ až R& shora uvedenévýznamy, pokud není uvedeno jinak.

Stupeň A:

Za použití sloučeniny vzorce II, ve kterém y' zname- ná atom vodíku, atom fluoru, atom chloru, atom bromu, niž- ší alkylovou skupina, nižší alkoxyskupinu nebo tri(niž-ší )alkylsilylovou skupinu a podle schématu syntézy, popsa-ného Julianem a Piklem (J. Amer. Chem. Soc., 57. 563(1935)), Ιζθ připravit sloučeninu vzorce III, jak je zná-zorněno níže. Podrobnosti syntézy jsou obsaženy v citova-ném článku.

(Π) AI Cl·, -H cich2cn

XX A Y- 0

NaOEt

Ν' R, R, H, ch2ch2nh2

Pd

'CH?CN

R-t (III)

Stupeň B:

Sloučenina vzorce III se nechá reagovat s kovovým so-díkem a ethanolem v podstatě týmž způsobem, jako popisujíJulian a Pikl ve shora citované publikaci, za vzniku slou-čeniny vzorce IV. Podrobnosti týkající se této reakce jsouobsaženy ve shora citovaném článku.

(III) + Na + C2H5OH

(IV)

Stupeň C:

Sloučenina vzorce III se uvádí v reakci s ethyleste-rem chlormravenčí kyseliny a poté se získaný produkt ne-chá reagovat s lithiumaluminiumhydridem v podstatě stejnýmzpůsobem, jako popisují Yu a Brossi, Heterocycles, 27, 1709 (1988) za vzniku sloučeniny vzorce V.

Stupen D:

Sloučenina vzorce IV se nechá reagovat s haloge-nidem obecného vzorce R4' - Hal , vě kterém znamená nižší alkylovou skupinu, nižší alkenylovouskupinu, nižší alkinylovou skupinu nebo aryl(nižší)-alkylovou skupinu a

Hal znamená atom chloru nebo atom bromu, o sobě známým způsobem za vzniku sloučeniny obecného vzorce VI. (IV) + R4' - Hal

Stupeň E

Sloučenina vzorce IV se nechá reagovat se smíšenýmanhydridem kyseliny mravenčí a kyseliny octové nebo sanhydridem kyseliny mravenčí o sobě známým způsobem zavzniku sloučeniny obecného vzorce VII. (IV) + H - C - O - C - CH3

O O

'*·

Stupeň F

Sloučenina vzorce IV se uvádí v reakci se sloučeninouobecného vzorce R7 - G - Cl,

I H 0 10 ve kterém R? znamená nižší alkylovou skupinu, aryl(nižší)alkylovouskupinu nebo nižší alkoxyskupinu, o sobě známým způsobem za vzniku sloučeniny obecného vzor-ce VIII.

Stupeň G

Sloučenina vzorce IX získaná ze stupně B, C, D, Enebo F se uvádí v reakci s nitroniumtetrafluoroborátem(NO2BF4) za vzniku sloučeniny obecného vzorce1X. Tatoreakce se provádí ve vhodném rozpouštědle, jako v aceto-nitrilu, při teplotě kolem'-50 až do 82 °C. Je výhodné,jestliže molární poměr sloučeniny vzorce IX ku sloučenině NOgBF^ činí asi 1,0 až 1,1.

(IX) + NO2BF4

(X) 11

Stupeň Η

Sloučenina vzorce IXa, která se získá ze stupně B, C,D, E nebo F se nechá reagovat se sloučeninou vzorce NC^BF^v podstatě stejným způsobem jako ve stupni G, s tím rozdí-lem, že molérní poměr mezi sloučeninou vzorce IXa oNOgBF^ činí výhodně 2,0 až 2,2, ža vzniku sloučeniny obecněho vzorce XI.

(IXa)

(XI)

Stupen I

Sloučenina vzorce XII získaná ze stupně G nebo H sehydrogenuje za přítomnosti platinového nebo palladiovéhokatalyzátoru, jako je oxid platiČitý nebo palladium na uhlí,za vzniku sloučeniny obecného vzorce XIII. Vzhledem k tomu,že sloučenina vzorce XIII je relativně nestálou látkou,používá se pro níže popsanou následující reakci bez izola-ce z reakčního roztoku. 12

Stupeň J

Sloučenina vzorce XIII se uvádí v reakci s isokyaná-tem obecného vzorce R-jNCO , ve kterém má R-^ jiný význam než vodík, za vzniku sloučeni-ny vzorce XIV. Tato reakce se provádí ve vhodném rozpou-štědle, jako je ethylacetát, při teplotě od -78 do 78 °C.

(XIIIJ + RjNCO

Ri

H

N

(Xiv) 13 -

Stupeň K

Sloučenina vzorce XIV se neché reagovat se silnoubází, jako je sek.butyllithium za vzniku odpovídájídíhoaniontu a ten se poté uvádí v reakci s halogenidem obec-ného vzorce R2 - Hal , ve kterém R2 má jiný význam než atom vodíku a

Hal znamená atom chloru nebo atom bromu, o sobě známým způsobem za vzniku sloučeniny obecnéhovzorce XV. (XIV) + sec-BuLi + R2-Hal-►

Ri r2

N

C

O

Stupeň L

Sloučenina vzorce XIII se nechá reagovat se slouče-ninou vzorce XVI nebo se sloučeninou vzorce XVII za pří-tomnosti báze, jako triethylaminu nebo/a 4-dimethylamino-pyridinu, za vzniku sloučeniny obecného vzorce XVIII, vekterém X' znamená atom kyslíku nebo atom síry. Tatoreakce se provádí ve vhodném rozpouštědle, jako v ethyl-acetátu, při teplotě -78 až 78 °C. - 14 - (XIID + Rj-O-C-CI Rj-S-C-Clnebo

0 O (χνυ (XVII) R, x’=o, s X'

Jestliže při shora uvedené rakci znamená R^ terč.butylovou skupinu, používá se místo sloučeniny vzorceXVI nebo XVII di-terc.butyldikarbonátu.

Stupeň M

Sloučenina vzorce XVIII se uvádí v reakci se silnoubází, jako je sek.butyllithium, a výsledný aniont se po-té nechá reagovat s halogenidem obecného vzorce R2 - Hal , ve kterém má jiný význam než atom vodíku aHal znamená atom chloru nebo atom bromu,o sobě známým způsobem za vzniku sloučeniny vzorce XIX. - 15 - (XVIII) + sefc-BuLi + R2 - Hal (R^H)

Ri

Týž produkt lze rovněž získat reakcí sloučeninyvzorce XVIII s bis(trimethylsilyl)amidem lithným vzor-ce sí(ch3)3

Li

sí(ch3)3 ve vhodném rozpouštědle, jako tetrahydrofuranu, a násle-dující reakcí vzniklé anionické sloučeniny s disulfátemvzorce R2 - 0 - so2 - 0 - r2 nebo s mesylátem vzorce R2 - 0 - S02 - CH3nebo s chloridem či bromidem vzorce R2C1 nebo R2Br 16 ve vhodném rozpouštědle, jako v tetrahydrofuranu.

Stupeň N

Jako alternativní provedení ke stupni L, který bylpopsán shora, lze zavést atom chloru, a tom bromu nebonitroskupinu na atom uhlíku v poloze 7 sloučeniny vzor-ce XVIII, ve kterém Y znamená atom vodíku, za vznikusloučeniny vzorce XX, ve kterém Y znamená atom chloru,atom bromu nebo nitroskupinu. Sloučenina vzorce XVIIIase pak nechá reagovat s N-chlorsukcinimidem, N-bromsuk-

Cinimidera nebo se sloučeninou vzorce N0J3F. za vzniku2 4 sloučeniny vzorce XX, ve kterém Y znamená chlor, bromnebo nitroskupinu, vždy o sobě známým způsobem.

Y = Cl, Br nebo NC^ (XX) 17 -

Stupeň O

Sloučenina vzorce XIII se nechádem kyseliny mravenčí, připravovanéhomravenčí a dicyklohexylkarbodiimidu,vzorce XXI. Tato reakce se provádí vrozpouštědla, jako tetrahydrofuranu,50 °C. reagovat s anhydri-in šitu z kyselinyza vzniku sloučeninypřítomnosti vhodnéhopři teplotě asi 0 a N<

Shora uvedenou reakci lze alternativně rovněž prová-dět za použití smíšeného anhydridu s kyselinou mravenčí as kyselinou octovou o sobě známým způsobem.

Stupeň P

Sloučenina vzorce XIII se nechá reagovat s chloridemkyseliny obecného vzorce R1 - CO - Cl, o sobě známým způsobem, za vzniku sloučeniny vzorce XXII. 18 Η

(XXII)

Stupeň Q

Sloučenina vzorce XlXa, získaná ze stupně M, se převedena sloučeninu vzorce XXIII. Tato přeměna se provádí zahřívánímsloučeniny vzorce XlXa na teploty asi 150 až 250 °C. Potomse sloučenina vzorce XXIII nechá reagovat s isokyanátem obec-ného vzorce R-^NGO , stejným způsobem jako ve stupni J za vzniku sloučeniny vzor-ce XXIV.

(XlXa) 19 R2

(XXIII)

(XXIV)

Stupen R

Sloučenina vzorce XXIII se nechá reagovat s chloridemkyseliny obecného vzorce

Rx - CO - Cl ,

v podstatě stejným způsobem jako ve stupni P, za vznikusloučeniny vzorce XXV 20 (XXIII) + Rj-CO-Čl >

O

H R3 R4(XXV)

Sloučeniny vzorce I podle předloženého vynálezu lzepoužít k léčení různých poruch paměti, pro které je cha-rakteristické snížení cholinergní funkce, jako je Alzhei-merova choroba.

Tato prospěšnost se projevuje schopností uvedenýchsloučenin inhibovat enzym acetyIcholinesterázu a tím zvy-šovat hladinu acetylcholinu v mozku.

Test ke zjištění inhibiční schopnosti:

Cholinesterázy se nacházejí v celém těle, tj. jak vmozku tak i v séru. Avšak pouze distribuce mozkové acetylcholinesterázy (AChE) je ve vztahu s centrální cholin-ergní inerVací. Předpokládá se, že tato inervace je zeslabena u pacientů postižených Alzheimerovou chorobou. Protovyvolávají specifické inhibitory mozkové acetylcholinesterázy (AChE) (na rozdíl od sérové AChE) méně vedlejšíchúčinků a tedy nižší toxicitu než fysostigmin (tj. nespecifický inhibitor AChE). Při pokusech in vitro byla zjiště-na inhibice účinnosti acetylcholinesterázy v krysím stri-atu. 21

Inhibice účinnosti acetylcholinesterázy v krysím striatuin vitro

Acetylcholinesteráze (AChE), která se někdy nazývávlastní nebo specifickou cholinesterázou, se nacházív nervových buňkách, kosterních svalech, haldkém svalstva,rázných žlázách a v červených krvinkách. Acetylcholineste-rázu (AChE) lze rozlišit od jiných cholinesteráz specifič-ností substrátu a inhibitoru a oblastní distribucí. Jejídistribuce v mozku je ve vztahu s cholinergní inervacía subfrakcionace ukazuje nejvyšší obsah v nervových za-končeních. Všeobecně se soudí, že fyziologická role acetylcho-linesteráfcy (AChE) spočívá v rychlé hydrolýze a inaktiva-ci acetylcholinu. Inhibitory AChE vykazují výrazné choli-nomimetické účinky v cholinergicky inervovaných efektorechorgánů a byly terapeuticky použity při léčení glakkomu,těžké svalové ochablosti (myasthenie) a paralytickéhoilea. Avšak z nedávných výzkumů lze soudit, že inhibitoryAChE mají též blahodárné účinky při léčení Alzheimerovydemence. Níže popsaná metoda byla použita při zkoumáníúčinnosti proti cholinesteráze podle tohoto vynálezu.

Jedná se o modifikaci metody, kterou popsal Ellman a další(Biochem. Fharmacol. 2, 98 (1961)).

Postup: A. Reakční činidla: 1. 0,05M fosfátový pufr, pH 7,2 (a) 6,85 g NaH2P04*H20/100 ml desti-lované vody (b) 13,40 g Na2HP04*7 H20/100 ml deštilované vody (c) roztok (a) se přidá k roztoku (b)za dosažení hodnoty pH 7,2 (d) zředění 1:10 22 2. Pufr substrátu chromogenu (a) 9,9 mg 5,5-dithiobisnitrobenzoovékyseliny (DTNB) (0,25 ml) (b) 99 mg S-aeetylthiocholinchloridu(5 mmol) (c) doplnit do 100 ml pomocí 0,05Mfosfátového pufru, pH 7,2 (činidlo 1) 3. Pro většinu pokusů se připraví 2 mM zá-sobní roztok testované sloučeniny vevhodném rozpouštědle a z tohoto zásobní-ho roztoku se připraví zřeúovací řadytak, že konečná koncentrace v předinku-bačním stádiu činí od 10 do 10 M. V závislosti na účinnosti testované slou-čeniny mohou být použity různé koncentra-ce. B. Příprava tkáně:

Samcům krys (Wistar) se usekne hlava, mozkyse rychle vyjmou a uvolní se corpora striata,zjistí se hmotnost a provede se homogenisa-ce v 19 objemech (přibližně 7 mg proteinu/ml)0,05M fosfátového pufru, pH 7,2 za použitíhomogenizátoru (Potter-Elvehjem). Alikvo-tní část homogenizátu (50 mikrolitrů) sepřidá k 50 mikrolitrům vehikula s různýmikoncentracemi testované sloučeniny a směsse preinkubuje 10 minut při teplotě míst-nosti . C. Test 1. Pro rutinní stanovení ΙΟ^θ se použijestanovení účinnosti acetyIcholinesterá- - 23 - zy na analyzátoru (Abbott Sichromatic,ADA-100)

Nastavení přístroje: filtr: 450-415inkubační teplota: 30 °Cdesetinná tečka: 0000,doba analýzy: 5 minutotáčky karuselu: 3směr reakce: dolů konečný bodředění 1:101

Po 10 minutách preinkubace enzymu s inhi-bitorem se vzorky smísí s pufrem substrá-tu chromogenu pomocí analyzátoru ABA-100.Za použití indikačního zařízení analyzá-tor ABA-100 automaticky zaznamenává ba-revnou reakci a po 15 minutách tisknevýsledky v jednotkách enzymu. 2. Aktivita enzymu se dá rovněž měřit pomocíspektrofotometru (Gilford 250). Této me-tody se používá pro správnější kinetickáměření.

Nastavení přístroje: lampa: filtr: vlnová délka:šířka štěrbiny:selekce:kalibrovaná viditelné světlobez filtru412 nm0,2 mm malý otvorabsorbance: 1,0 jednotky absorban-ce na celý rozsah stupnice 24 rychlost posunu

Reakční činidlamu vzorku

Referenční vzorek: C,8 ml 0,05M fosfátového pufru 0,8 ml pufru substrátu chromo-genu papíru zapisovače: 0,5 cm/min se přidají k referenční-

Vzorek: 0,8 ml 0,05M fosfátovéhopufru 0,8 ml pufru substrátuchromogenu 10 mikrolitrů enzymu(momogenát tkáně).

Nejdříve se stanoví účinnost neinhibováného enzymu(homogenát tkáně). Testované sloučeniny se rozpustí vevhodném rozpouštědle a po vhodném zředění se přidají k ve-hikulu (pufr). Reakční rychlost se stanoví na základě sklo-nu zaznamenávané změny absorbance. Skutečná rychlost (Mol//litr/min) se může vypočítat podle následujícího vzorce: rychlost (mol/litr/min) = sklon/ (1,36 x 10^) Výsledky tohoto pokusu pro některé sloučeniny podlevynálezu a pro srovnávací sloučeninu (fysostigmin) jsouobsaženy v tabulce 1: - 25 inhibiční koncentrace (^uM) AChE mozku

Tabulka 1 sloučenina l,2,3,3a,8,8a-hexahydro-5-(fe- 14,0 noxykarbonylamino)-l,3a,8-tri-methylpyrroloC 2,3-b]indol-oxalát 5-(4-chlorfenoxykarbonylamino)- 1,1 -1,2,3,3a,8,8a-hexahydro-l,3a,8--trime thylpyrrolot 2,3-b]indol--oxalát fysostigmin (srovnávací sloučenina) 0,034

Tato prospěšnost je dále demonstrována schopností uve-dených sloučenin k obnovení cholinergicky snížené pamětipři testu na vyhýbání ?e tmě (Dark Avoidance Assay).

Test na vyhýbání se tmě: Při tomto, testu se zkoumají myši na jejich schopnostzapamatovat si nepříjemný podnět po dobu 24 hodin. i\íyšse umístí do komůrky obsahující temnou přihrádku; silněrozžhavené světlo zahání my$ do temné přihrádky, kde jije pomocí kovových destiček na podlaze udělen elektrickýšok. Zvíře se odstraní z testovacího zařízení a po 24hodinách se znovu testuje na schopnost zapamatovat sielektrický šok.

Jestliže se zvířatům, před jejich umístěním do testo-vací komůrky, podá skopolamin, tj. anticholinergní pro-středek, o kterém je známo, že je příčinou snížení paměti,pak po 24 hodinách zvířa znovu vstoupí do temné přihrádkykrátce po opětovném umístění do testovací komůrky. Tato 26 účinnost skopolaminu je blokována účinnou testovanousloučeninou, což se projevuje v delším intervalu předopětovným vstupem do temné přihrádky. Výsledky pro účinnou sloučeninu jsou vyjádřenyjako procento skupiny zvířat, u kterých je účinnostskopolaminu blokována, což se projevuje prodlouženímintervalu mezi jejich umístěním do testovací komůrkya jejich opětovným vstupem do temné přihrádky. Výsledky tohoto testu pro některé ze sloučeninpodle předloženého vynálezu a pro fysostigmin (srovnávací sloučenina) jsou uvedeny v tabulce 2.

Tabulka 2 sloučenina dávka (mg/kgtělesné % zvířat, u nichždošlo ke zvráceníparnětového deficitu s. c.) vyvolaného aminem 5-(terč.butoxykarbo- 0,31 33 nylamino)-l,2,3,3a,8, 1,25 20 8a-hexahydro-l,3a,8- 5,0 27 trimethylpyrrolo- [2,3-b]indol-oxalát 5- (benzoxykarbcnylam.i- 0,3 28 no )-1,2,3,3a,8,8a-hexa- 1,0 21 hydro-1,3a,8-trimethyl- 3,0 21 pyrrolot 2,3-b]indol l,2,3,3a,8,8a-hexahydrc- -5-(fenoxykarbonylami- 0,16 53 no)-l,3a,8-trimethyl- 0,31 40 pyrroloC 2,3-b]indol- 5,0 21 -oxalát Srovnávací sloučeniny: Tacrine 0,63 13 Pilocarpine 5,0 13 - 27 - Účinná množství sloučenin podle tohoto vynálezuse roohóu aplikovat pacientovi kteroukoli z různých me-tod, například perorálně ve formě tobolky nebo tablet,parenterálně ve formě sterilních roztoků nebo suspenzí,a v některých případech intravenosně ve formě sterilníchroztoků. Volná báze finálních produktů, rovněž jejíúčinné množství, se může formulovat a aplikovat ve forměsvých farmaceuticky použitelných adičních solí s kyseli-nami, a to z důvodů stálosti, možnosti krystalizace,zvýšené rozpustnosti apod.

Kyseliny použitelné pro přípravu farmaceutickypoužitelných adičních solí sloučenin podle vynálezu za-hrnují anorganické kyseliny, jako je kyselina chlorovo-díková, kyselina bromovodíková, kyselina sírová, kyseli-na dusičná, kyselina fosforečná a kyselina chloristá,jakož i organické kyseliny, jako je vinná kyselina,citrónová kyselina, octová kyselina, jantarová kyselina,maleinová kyselina, fumarová kyselina a ščvalová kyseli-na. Účinné sloučeniny podle předloženého vynálezu semohou aplikovat perorálně, například společně s inertnímředidlem nebo s poživatelnou nosnou látkou, nebo mohoubýt uzavřeny v želatinových kapslích, nebo mohou být slisovány do tablet. Pro účely orální terapeutické aplikacese mohou účinné sloučeniny podle vynálezu mÍ3it spolu spomocnými látkami a používat ve formě tablet, pastilek,kapslí, elixírů, suspenzí, sirupů, oplatek, žvýkací gumyapod. Tyto přípravky obsahují alespoň 0,5 % účinné látkyToto množství se však může pohybovat v závislosti nazvláštnosti aplikační formy a může obvykle činit mezi 4až asi 70 % hmotnostními·. Množství účinné látky v tako-vých směsích má být takové, aby se získala vhodná dávka.Výhodně se směsi a přípravky podle předloženého vynálezupřipravují tak, aby jednotková forma orální dávky obsa- - 28 hovala mezi 1,0 a 300 mg účinné sloučeniny.

Tablety, pilulky, kapsle, pastilky apod. mohouobsahovat rovněž následující složky: pojidlo, jako jemikrokrystalické celulóza, arabská guma nebo želatina;pomocnou látku, jako je škrob nebo laktosa; složkuusnadňující rozpad., jako je alginová kyselina, Primo-gel, kukuřičný škrob apod.; lubrikátor, jako je horeč-naté sůl kyseliny stearové nebo Sterotex; kluznou lát-ku, jako je koloidní oxid křemičitý; a sladidlo, jako jesacharosa nebo sacharin. Přidávat se mohou rovněž aroma-tizující prostředky, jako je máta peprná, methylsalicy-lát nebo pomerančová příchut. Jestliže je jednotkovouformou dávky kapsle, pak může obsahovat navíc k látkámshora uvedeného typu ještě kapalnou nosnou látku, jakoje mastný olej. Jiné formy jednotkových dávek mohou obsahovat ještě další různé látky, které modifikují fyzikál-ní stav nebo jednotkovou dávku, jako jsou napříkladpovlékací prostředky. Tak se mohou tablety nebo pilulkypovlékat cukrem, šelakem nebo jinými enterickými povlé-kacími prostředky. Sirup může obsahovat navíc k aktivnímsloučeninám sacharosu nebo sladidlo a určité konzervačníprostředky, barviva, barevné a aromatizující prostředky.Látky používané pro přípravu těchto různých směsí majíbýt farmaceuticky čisté a v používaném množství nemajíbýt toxické.

Pro účely parenterální terapeutické aplikacese mohou účinnú sloučeniny podle tohoto vynálezu převá-dět na roztok nebo suspenzi. Tyto přípravky mají obsaho-vat alespoň 0,1 % účinné látky, avšak mohou obsahovat0,5 až asi 30 % hmotnostních účinné látky. Množství účinné látky v takových směsích se volí tak, aby se získalavhodná dávka. Výhodnými směsmi a přípravky podle vyná-lezu jsou takové, které umožňují připravit jednotkovoudávku pro parenterální aplikaci, která obsahuje mezi0,5 a 100 mg účinné látky. - 29

Roztoky nebo suspenze mohou rovněž obsahovatnásledující složky: sterilní ředidlo, jako je voda proinjekční účely, solný roztok, stálé oleje, polyethylen-glykoly, glycerol, propylenglykol nebo jiná syntetickározpouštědla; antibakteriální prostředky, jako je ben-zylalkohol nebo methylparabeny; antioxidační prostředky,jako je kyselina askorbová nebo hydrogensiřičitan sodný;kompexotvorné prostředky, jako je ethylendiamintetra-octová kyselina; pufry, jako jsou acetáty, citráty nebofosfáty a prostředky k úpravě tonicity, jako je chloridsodný nebo dextrosa. Přípravek pro parenterální aplika-ci může být uzavřen do použitelných injekčních stříkačeknebo ampulí ze skla nebo plastů, obsahujících násobnoudávku. Příklady sloučenin podle vynálezu zahrnují nížeuvedené sloučeniny stejně jako jejich 3aR-cis is OHI erya racemické směsi obsahující 3aS-cis a 3aR-cis isomery: 1,2,3,3a,8,8a-hexahydro-5-nitro-l,3a,8-trime thylpyrrolo-C2,3-blindol, 5,7-dinitro-l,2,3,3a,8,8a-hexahydro-l,3a,8-trimethyl-pyrrolot2,3-blindol, 1,2,3,3a,8,8a-hexahydro-5-(methylaminokarbonylamino)--1,3a,8-trimethylpyrroloE 2,3-blindol, l,2,3,3a,8,8a-hexahydro-5-(methoxykarbonylamino)-l,3a,8--trimethylpyrroloL 2,3-blindol, 5-(ethoxykarbonylamino)-l,2,3,3a,8,8a-hexahydro-l,3a,8--trimethylpyrroloL 2,3-blindol, 1,2,3,3a,8,8a-hexahydro-5-(trichlorethoxykarbonylamino)--l,3a,8-trimethylpyrroloL 2,3-blindol, 5-(propoxykarbonylamino)-l,2,3,3a,8,8a-hexahydro-l,3a,8--trimethylpyrroloL2,3-blindol, - 30 - 5-(terč.batoxykarbonylamino )-1,2,3,3a,8,8a-hexahydro--1,3a,8-trimethylpyrrolo[ 2,3-b]indol, 1,2,3,3a,8,8a-hexahydro-5-(fenoxykarbonylamino)-l,3a,8--trimethylpyrroloC 2,3-b]indol, 5- (4-me thoxyfenoxykarb ony lamino )-1,2,3,3a,8,8a-hexahy.dro--1,3a,8-trimethylpyrroloC2,3-b]indol, 5-(4-chlorfenoxykarbonylamino)-1,2,3,3a,8,8a-hexahydro--1,3a,8-trimethylpyrroloC 2,3-b]indol, 5-(2,6-dimethylfenoxykarbonylamino)-l,2,3,3a,8,8a-hexa-hydro-1,3a,8-trimethylpyrroloC 2,3-blindol, 5-(benzoxykarbonylamino)-l,2,3,3a,8,8a-hexahydro-l,3a,8--trimethylpyrroloC 2,3-b]indol, 5-(4-chlorbenzoylamino)-l,2,3,3a,8,8a-hexahydro-l,3a,8--trime thylpyrroloC 2,3-b]indol, 5-(terč.butoxykarbony1-N-methylamino)-l,2,3,3a,8,8a--hexahydro-1,3a,8-trimethylpyrroloC2,3-b]indol, 5- (methylaminokarbonyl-N-me thylamino)-l,2,3,3a,8,8a--hexahydro-1,3a,8-trimethylpyrroloC 2,3-b]indol, 1,2,3,3a,8,8a-hexahydro-5-(3-me thylfenoxykarbonylmethyl-amino)-1,3a,8-trimethylpyrroloC2,3-b]indol, 1,2,3,3a,8,8a-hexahydro-5-(2,4,6-trichlorfenoxykarbonyl-amino)-6-trime thy lsily 1-1,3a, 8-trime thylpyrroloC 2,3-b]-indol, 6- brom-5- (4-f^uorf enoxykarb ony lamino )-l ,2,3,3a,8,8a--hexahydro-l,3a,8-trimethylpyrroloC 2,3-b]indol, 1,2,3,3a,8,8a-hexahydro-5-(methoxykarbonylmethylamino)--1,3a,6,8-tetraměthylpyrroloC 2,3-b]indol, 5-(4-dimethylaminofenoxykarbonylamino)-l,2,3,3a,8,8a--hexahydro-6-trimethylsilyl-l,3a,4,8-tetraměthylpyrrolo-C2,3-b]indol, - 31 - 5,7—bis—(terč.butoxykarbonylamino)-l,2,3,3a,8,8a-hexa-hydro-l,3a,8-trimethylpyrrolol2,3-b]indol, 5-(4-trifluormethylfenoxykarbonylamino)-l,3a-dimethyl--8-ethyl-l,2,3,3a,8,8a-hexahydropyrrolo[2,3-b]indol, 1,2,3,3a,8,8a-hexahydro-5-(3-thienyl)oxykarbonylamino--1,3a,8-trimethylpyrroloC 2,3-b] indol, . 1,2,3,3a,8,8a-hexahydro-6-me thoxy-5-(4-Cpyridinylmetho-xykarbonylamino)-1,3a,8-trimethylpyrroloC2,3-b]indol, 5- (butylthiokarbonylamino)-l,2,3,3a,8,8a-hexahydro-l,3a,8-trimethylpyrroloC 2,3-b]indol, 1,2,3,3a,8,8a-hexahydro-5-(2-thi ořenkarbonylamino)-1,3a,8-trimethylpyrroloC 2,3-b]indol, 1,2,3,3a,8,8a-hexahydro-5-(2-me thylpropionylamino)-1,3a,8-trimethylpyrroloC 2,3-b]indol, 5-benzoylamino-l,2,3,3a,8,8a-hexahydro-l,3a,8-trimethyl-pyrroloC 2,3-b] indol, 5-ethyloxalylamino-l,2,3,3a,8,8a-hexahydro-l,3a,8-tri-methylpyrroloC 2,3-b]indol, 1,2,3,3a,8,8a-hexahydro-5-fenoxykarbonylamino-3a,8--dimethyl-l-propargylpyrroloC2,3-b]indol, 1,2,3,3a,8,8a-hexahydro-5-me thoxykarbonylamino-l-me thoxy-karbonyl-8-methylpyrroloC 2,3-b]indol a 1-acety1-1,2,3,3a,8,8a-hexahydro-8-methy 1-5-fenoxykarb o-nylaminopyrroloC 2,3-b]indol. Následující příklady slouží k bližšímu objasněnítohoto vynálezu. Tyto příklady však rozsah vynálezu vžádném směru neomezují. - 32 - Příklady provedeni vynálezu Příklad 1 1,2,3,3a,8,8a-hexahydro-5-nitro-l,3a,8-trircethylpyrro-loL2,3-b]indol K míchanému roztoku 25,0 g 1,2,3,3a,8,8a-hexahydro-l,3a,8-trimethylpyrrolo[2,3-b]indolu v 500 ml acetonitrilu se při teplotě 0 °C přikape v průběhu 30 minut 18,65nitroniumtetrafluoroborátu rozpuštěného v 500 ml aceto-nitrilu. Reakční směs se míchá 1 hodinu při teplotě 0 °Ga potom se během další hodiny nechá teplota reakční směsivystoupit na teplotu místnosti. K reakční směsi se přidáled a zředěný roztok hydngenuhličitanu sodného a potom800 ml methylenchloridu. Vrstvy se oddělí a vodná vrstvase dvakrát extrahuje vždy 200 ml methylenchloridu. Orga-nické vrstvy se spojí, vysuší se síranem sodným a za-hustí se. Získá se olej, který se dvakrát extrahuje nasilikagelu nejprae za použití směsi 2,5 % methanolu aethylacetátu a potom směsi 2% methanolu a methylenchlo-ridu jako elučního činidla. Získá se 7,7 g l,2,3,3a,8,8a--hexahydro-5“nitro-l,3a,8-trimethylpyrrolo[2,3-b]indolu.Analýza pro: C13H16N3°2 vypočteno 63,14 % C, 6,94 % H, 16,99 % N; nalezeno 62,86 % C, 6,90 % H, 16,82 % N. - 33 - Příklad 2 5,7-dinitro-l,2,3,3a,8,8a-hexahydro-l,3a,8-trime thyl-pyrroloC 2,3-b]indol K míchanému roztoku 3,7 g 1,2,3,3a,8,8a-hexa-hydro-l,3a,8-trimethylpyrroloC2,3-b]indolu ve 100 mlacetonitrilu se při teplotě 0 °C přikape v průběhu 30minut roztok 5,1 g nitroniumtetrafluoroborátu ve 100 mlacetonitrilu. Reakční směs se míchá při teplotě 0 °Cpo dobu 1 hodiny a potom se teplota reakční směsi necháv průběhu 1 další hodiny vystoupit na teplotu místnosti.K reakční směsi se přidá led a zředěný roztok hydrogen-uhličitanu sodného a poté 200 ml methylenchloridu.

Vrstvy se oddělí a vodná fáze se dvakrát extrahuje vždy50 ml methylenchloridu. Organické vrstvy se spojí, vysu-ší se síranem sodným a zahustí se. Získá se olej, kterýse chromatografuje na silikagelu za použití směsi hexanua acetonu v poměru 2:1 jako elučního činidla. Získá se 1,8 g 5,7-dinitro-l,2,3,3a,8,8a-hexahydro-l,3a,8-tri-methylpyrroloC 2,3-b]indolu.

Analýza pro: C13H16N4°4 vypočteno 53,40 % C, 5,53 % H, 19,17 % N; nalezeno 53,11 % C, 5,44 % H, 19,14 % N. Příklad 3 1,2,3,3a,8,8a-hexahydro-5-(me thylaminokarbonylamino)--l,3a,8-trimethylpyrroloC 2,3-b]indol-mesotartrát-hemi-hydrét 2,6 g 1,2,3,3a,8,8a-hexahydro-5-nitro-l,3a,8--trimethylpyrroloC2,3-b]indolu se rozpustí ve 100 mlethylacetátu a provádí se hydrogenace v Paarově hydro- - 34 hydrogenačním přístroji za přítomnosti 250 mg oxidu platičitého jako katalyzátoru při tlaku 0,316 MPa. Redukceje ukončena během 3 hodin. Reakční směs po redukci sezfiltruje přímo do baňky vypláchnuté dusíkem. Směs seochladí na teplotu 0 °C, v průběhu 2 hodin se přidá roztok 0,6 g methylisokyanátu ve 100 ml ethylacetátu asměs se míchá další 2 hodiny při teplotě místnosti.

Směs se promyje dvakrát vždy 100 ml vody, vysuší sesíranem sodným, zahustí se a zbytek po zahuštění 3e Čistí metodou velmi rychlé chromatografie za použití směá15 % methanolu a ethylacetátu jako elučního činidla.Čisté frakce se zahustí, přičemž se získá 1,05 g1,2,3,3a,8,8a-hexahydro-5~(methylaminokarbonylamino)--1,3a,8-trimethylpyrroloí2,3-b]indolu. Meso-tartrát sepřipravuje rozpuštěním volné báze ve 200 ml etheru a 10ml methanolu,a přidáním roztoku meso-vinné kyseliny vetheru.

Analýza pro: °15Η22Ν4Ο7'Ο4Η6Ο6· 1/2 «2° vypočteno 52,64 % C,, 6,75 % H, 12,92 % N; nalezeno 52,66 % C, 6,47 % H, 12,90 % N. Příklad 4 1,2,3,3a,8,8a-hexahydro-5“(methoxykarbonylamino)-l,3a,8-trimethylpyrroloC 2,3-b]indol-oxalát 1,0 g l,2,3,3a,8,8a-hexahydro-5-nitro-l,3a,8--trimethylpyrroloí2,3-b]indolu se rozpustí ve ICO mlethylacetátu a získaný roztok se hydrogenuje v Paarověhydrogenační aparatuře při tlaku 0,316 Mpa za použití100 mg oxidu platičitého jako katalyzátoru. Redukce jeukončena v průběhu 2 hodin. Reakční směs po redukci se - 35 - zfiltruje přímo do baňky propláchnuté dusíkem. Potom sepřidá 50 mg 4-dimethylaminopyridinu, směs se ochladí nateplotu 0 °G a v průběhu 1 hodiny se přidá roztok 0,54 gdimethylpyrokarbonátu v 50 ml ethylacetátu. Směs se za-hustí a zbytek po zahuštění se čistí metodou velmi rychléchromatografie na silikagelu za použití směsi 15 % methanolu a ethylacetátu jako eluČního ěinidla. Čisté frakceskýtají po zahuštění 0,4 g l,2,3,3a,8,8a-hexahydro-5--(methyloxykarbonylamino)-l,3a,8-trimethylpyrroloC2,3-b]indolu. Oxalát se připravuje rozpuštěním volné báze vetheru a v minimálním množství methanolu a přidáním roztoku kyseliny šíavelové v etheru.

Analýza pro: C15H21N3°2-C2H2°4 vypočteno 55,87 % C, 6,08 % H, 11,50 % N;nalezeno 55,66 % C, 6,28 % H, 11,42 % N. Příklad 5 5-(ethoxykarbonylamino )-1,2,3,3a,8,8a-hexahydro-l,3a,8--trimethylpyrroloC2,3-b]indol-oxalát 1,0 g l,2,3,3a,8,8a-hexahydro-5-nitro-l,3a,8-tri-methylpyrroloÍ2,3-b]indolu se rozpustí ve 100 ml ethyl-acetátu a získaný roztok se hydrogenuje v Paarově hydro-genačním přístroji při tlaku 0,316 MPa za použití 100 mgoxidu platičitého jako katalyzátoru. Redukce je ukončenaběhem 2 hodin. Směs po redukci se zfiltruje přímo dobaňky, která byla předtím vypláchnuta dusíkem. Potom sepřidá 50 mg 4-dimethylaminopyridinu a 0,14 g triethyl-aminu, směs se ochladí na 0 °C a k takto ochlazené aněsise přidá během 1,5 hodiny roztok 0,44 g ethylesteruchlormravenčí kyseliny v 70 ml ethylacetátu. Směs se pro- - 36 - myje vodou (2 x 1OC ml), vysuší se síranem sodným a čistíse metodou velmi rychlé chromatografie na silikagelu zapoužití směsi 15 % methanolu a ethylacetátu jako elučníhočinidla, čisté frakce se zahustí, přičemž se získá 0,6 g5-ethoxykarbonylamino-1,2,3,3a,8,8a-hexahydro-l,3a,8--trimethylpyrroloC2,3-b]indolu. Oxalát se připravujerozpuštěním volné báze ve 200 ml etheru a v minimálníma přidáním roztoku kyseliny množství (20 ml) methanoluátavelové v etheru.

Analýza pro: C16H23N302-C2H204 vypočteno 56,97 % C, 6,65 %nalezeno 56,93 % C, 6,58 % H, 11,07 % N; H, 11,03 % N. Příklad 6 1,2,3,3a,8,8a-hexahydro-5-(tnichlorethoxykarbonylamino)--1,3a,8-trimethylpyrroloí 2,3-b]indol 2,2 g l,2,3,3a,8,8a-hexahydro-5-nitro-l,3a,8--trimethylpyrroloC2,3-b]indolu se rozpustí ve 100 mlethylacetátu a získaný roztok se hydrogenuje v Paarověaparatuře při tlaku 0,316 MPa za použití 160 mg oxiduplatičitého jako katalyzátoru. Redukce je ukončena bě-hem 3 hodin. Reakční směs po redukci se zfiltruje přímodo banky vypláchnuté dusíkem. Ke směsi se přidá 0,109 g4-dimethylaminopyridinu a 0,89 g triethylaminu, směs seochladí na teplotu 0 °C a k takto ochlazené směsi seběhem 2 hodin přidá roztok trichlorethylesteru chlormra-venčí kyseliny (1,88 g) ve 100 ml ethylacetátu. Směs sepromyje vodou (2 x 100 ml), vysuší se síranem sodným,zahustí se a čistí se metodou velmi rychlé chromá tografLena silikagelu za použití směsi 15 % methanolu a ethyl-acetátu jako elučního činidla. Čisté frakce se zahustí - 37 - přičemž se získá 0,6 g 1,2,3,3a,8,8a-héxahydro-5-(tri-chlore thoxykarbonylamino)-l,3 a ,8-trime thylpyrrolot 2,3-b]indolu.

Analýza pro:C16H20C13N3°2 vypočteno 48,90 % G, 5,14 % H, 10,70 % N;nalezeno 49,08 % C, 5,06 % H, 10,77 % N. Příklad 7 5-(propoxykarbonylamino)-cis-l,2,3,3a,8,8a-hexahydro--1,3a,8-trimethylpyrroloC 2,3-b]indol-oxalát

Do Paarovy láhve o obsahu 500 ml se předloží0,370 g oxidu platičitého jako katalyzátoru a 1,51 g5-nitro-l,2,3,3a,8,8a-hexahydro-l,3a,8-trimethylpyrrolo- l2,3-b]indolu ve 250 ml ethylacetátu pro vysoceúčinnoukapalinovou chromatografii (HPLC). Tato láhev se připojína Paarovu aparaturu, propláchne se vodíkem, a protře-pává se při teplotě místnosti a při průměrném tlaku vodí-ku 0,387 MPa. Po 24 hodinách se roztok zfiltruje za úče-lem odstranění katalyzátoru a filtrát se vede přímo dobaňky vypláchnuté dusíkem. K mechanicky míchanému rozto-ku se přidá 0,66 g triethylaminu, 0,19 g 4-dimethylami-no pyridinu a navíc 50 ml ethylacetátu pro vysoceúčinnoukapalinovou chromatografii. Roztok se ochladí na teplotu0 °C za použiti směsi ledu a vody a potom se k němupřikape roztok 0,72 g propylesteru chlormravenčí kyseli-ny ve 150 ml ethylacetátu pro vysoceúčinnou kapalinovouchromatografii. Reakce se sleduje chromatografii na ten-ké vrstvě silikagelu. Reakce se rychle ukončí přidáním150 ml vody a výsledná směs se intenzivně míchá 5 minut - 38 a potom se přenese do dělící nálevky. Vodná fáze se odstra-ní a dá se stranou. Vysušená organická fáze (pomocí síra-nu sodného) se zfiltruje a zahustí se za sníženého tlakuza vzniku tmavého oleje. Olej obsahuje vícesložkovou směs,které se rozděluje vysoceúěinnou kapalinovou chromatogra-fií na silikagelu. Čistý olej se rozpustí ve 150 ml abso- .lutního diethyletheru a za míchání se k němu přikape vnepatrném nadbytku bzvodá kyselina šíavelová v absolutnímdiethyletheru. Výsledný pevný produkt se izoluje filtra-cí pod atmosférou inertního plynu a promyje se na filtrumalými podíly absolutního diethyletheru. Získá se 1,07 goxalátu ve formě drobivé pevné látky o teplotě tání 153až 155 °C (rozklad).

Analýza pro: θ17Η25Ν3°2 * C2H2°4 vypočteno 58,00 % C, 6,92 % H, 10,68 % N; nalezeno 58,66 % C, 6,88 % H, 10,95 % N. Příklad 8 5-(terč. butoxykarbonylamino)-l,2,3,3a,8,8a-hexahydro-l,3a,8-trimethylpyrrolo[2,3-b]indol-oxalát 1,9 g- 1,2,3,3a,8,8a-hexahydro-5-nitro-l,3a,S--trimethylpyrroloC2,3-b]indolu se rozpustí v ethylacetátua hydrogenuje se v Paarově aparatuře při tlaku 0,316 MPaza použití oxidu platičitého jako katalyzátoru. Za 2 hodi-ny je redukce ukončena. Redukční směs se filtruje přímodo baňky, která byla před tím vypláchnuta dusíkem a kte-rá obsahuje 1,8 g di-terc.butyldikarbonátu. Potom sepřidá 85 mg 4-dimethylaminopyridinu a reakční směs se mí-chá 3 hodiny při teplotě místnosti. Potom se přidá 50 mlvody a vrstvy se oddělí. Ethylacetátový roztok se vysu-ší síranem sodným a zahustí se. Získá se olej, který sečistí chromatografováním na silikagelu za použití směsi - 39 15 % methanolu a ethylacetátu jako elučního činidla.Čisté frakce se spojí a zahustí se. Získá se 800 mgvolné báze, která se převede na oxalát rozpuštěním ve100 ml etheru a přidáním roztoku 300 mg štavelové ky-seliny ve 25 ml etheru.

Analýza pro: C18H27N3°6·°2Η4°4 vypočteno 58,95 % C, 7,17 % H, 10,31 % N; nalezeno 58,81 % C, 7,10 % H, 10,21 % N. Příklad 9 l,2,3,3a,8,8a-hexahydro-5-(fenoxykarbonylamino)-l,3a,8--trimethylpyrroloL 2,3“b]indol-oxalát 2,2 g l,2,3,3a,8,8a-hexahydro-5-nitro-l,3a,8-tri-methylpyrroloL2,3-b]indolu se rozpustí ve 100 ml ethyl-acetátu a hydrogenuje se v Paarově aparatuře při 0,316MPa za použití 220 mg oxidu platičitého jako katalyzáto-ru. Redukce je ukončena během 2 hodin. Redukční směs sezfiltruje přímo do baňky vypláchnuté dusíkem. K filtrá-tu se přidá 0,10C,g 4-dimethylaminopyridinu a 0,9 gtriethylaminu, směs se ochladí na teplotu 0 °C a během 1,5 hodiny se přidá roztok 1,4 g fenylchlorformiátu ve10C ml ethylacetátu. Směs se promyje vodou (2 x 100 ml),vysuší se síranem sodným, zahustí se a čistí se metodouvelmi rychlé chromatografie za použití směsi 15 % metha-nolu a ethylacetátu jako elučního činidla, čisté frakcese zahustí, přičemž se získá 0,66 g 1,2,3,3a,8,8a-hexa-hydro-5-(fenoxykarbonylamino)-l,3a,8-trimethylpyrrolo-L2,3-b]indolu, který se převede na oxalát rozpuštěnímve 200 ml etheru.a 20 ml methanolu a přidáním roztoku0,16 g kyseliny šlavelové v etheru. 40

Analýza pro: C22H23N3°2*G2H2°4 vypočteno 61,82 % C, 5,90 % H, 9,83 % N;nalezeno 61,75 % 0, 5,93 % H, 10,04 % N. Příklad 10 5-(4-methoxyfenoxykarbonylamino)-l,2,3,3a,8,8a-hexahydro-1,3a,8-trimethylpyrrolo[2,3-b]indol-oxalát 3,8 g l,2,3,3a,8,8a-hexahydro-5-nitro-l,3a,8-tri-methylpyrroloí2,3-b]indolu se rozpustí ve 200 ml ethyl-acetátu a hydrogenuje se v Paarově aparatuře při 0,316Mpa za použití 380 mg oxidu platičitého jako katalyzáto-ru. Redukční směs se filtruje přímo do baňky vypláchnutédusíkem. Potom se přidá 183 mg 4-dimethylaminopyridinua 3,0 g triethylaminu a směs se ochladí na 0 °C předpřidáním roztoku 2,8 g 4-methoxyfenylesteru chlormraven-čí kyseliny v 60 ml ethylacetátu v průběhu 1,5 hodiny.Směs se promyje vodou (2 x 100 ml), vysuší se síranemsodným, zahgstí se a čistí se metodou velmi rychlé chro-matografie. Čisté frakce se zahustí, přičemž se získá1,0 g5-(4-methoxyfenoxykarboňylamino)-l,2,3,3a,8,8a--hexahydro^l,3a,8-trimethylpyrrolo[2,3-b]indolu. Oxalátse připravuje rozpuštěním volné báze ve 200 ml diethyl-etheru a přidáním 240 mg kyseliny štavelové ve 40 mldiethyletheru.

Analýza pro: C21H25N3°3*C2H2°4 vypočteno nalezeno 60,39 % C,59,97 % C, 5,95 % H, 9,18 % Nj5,88 % H, 9,35 % N. 41 - Příklad 11 5-(4-chlorfenoxykarbonylamino)-l,2,3,3a,8,Sa-hexahydro- -1,3a,8-trimethylpyrrolo[2,3-b]indol-oxalát

Do Paarovy láhve o obsahu 500 ml se předloží0,450 g oxidu platičitého jako katalyzátoru a 7,23 g5-nitro-l,2,3,3a,S,8a-hexahydro-l,3a,8-trimethylpyrrolo-E2,3-b]indolu ve 250 ml ethylacetátu pro vysoceúčinnou.kapalinovou chromatografii. Láhev se upevní na Paarovuaparaturu, propláchne se plynným vodíkem, a protře pávase při teplotě místnosti při průměrném tlaku vodíku0,386 MFa. Po 24 hodinách se roztok filtruje přímo do V - banky vypláchnuté dusíkem k odstranění hydrogenačního ka-talyzátoru. K mechanicky míchanému roztoku se přidá 2,94g triethylaminu, 0,37 g 4-dimethylaminopyridinu a navíc40 ml ethylacetátu pro vysoceúčinnou kapalinovou chroma-tografii. Roztok se ochladí na teplotu 0 °C za použitílázně tvořené směsí ledu a vody a k takto ochlazenémuroztoku se přikape roztok 5,54 g 4-chlorfenylesteru chlor-mravenčí kyseliny ve 250 ml ethylacetátu pro vysoce účin-nou kapalinovou chromatografii. Reakce se sleduje chroma-tografováním na tenké vrstvě silikagelu. Reakce serychle ukončí přidáním 150 ml vody a výsledná směs seintenzivně míchá po dobu 10 minut a potom se přenese dodělicí nálevky. Vodná fáze se odstraní a dá se stranou.Vysušená organická fáze (pomocí síranu sodného) se zfil-truje a zahustí se za sníženého tlaku za vzniku tmavépěny. Tato pěna je představována vícesložkovou směsí,která se rozdělí preparativni vysoceúčinnou kapalinovouchromatografií na silikagelu. Získá se 1,51 g čistéhooleje. Čistý olej se rozpustí ve 250 ml bezvodého diethyletheru a získaný roztok se zfiltruje. K filtrátu se zamíchání přikape v nepatrném nadbytku bezvodá kyselina v štavelové v bezvodém diethyletheru. Výsledná sraženinase izoluje filtrací pod atmosférou inertního plynu a 42 promyje se na filtru malými podíly bezvodého diethyl etheru. Získá se drobivá pevná látka o teplotě tání 110 °C (rozklad).

Analýza pro C20H22C1N302*C2H404 vypočteno 57,21 % C, 5,24 % H, 9,10 % N;nalezeno 57,23 % C, 5,35 % H, 9,36 % N. Příklad 12 5-(2,6-dime thylfenoxykarbonylamino)-1,2,3,3a,8,8a-hexa-hydro-l,3a,8-trimethylpyrrolo[ 2,3-b]indol 3,0 g l,2,3,3a,8,8a-hexahydro-5-nitro-l,3a,8-tri-methylpyrroloE2,3-b]indolu se rozpustí ve 200 ml ethyl-acetátu a hydrogenuje se v Paarově aparatuře při tlaku0,316 MPa za použití 300 mg oxidu platičitého jako kata-lyzátoru. Redukční směs se filtruje přímo do baňky vyplách-nuté dusíkem. Potom se přidá 145 mg 4-dimethylaminopyridinua 2,4 g triethylaminu a směs se ochladí na teplotu 0 °C. V průběhu 1,5 hodiny se přidá roztok 2,2 g 2,6-dimethyl-fenylesteru chlormravenčí kyseliny v 60 ml ethylacetáfcu.Směs se promyje 2 x 100 ml vody, vysuší se síranem, sodnýma čistí se metodou velmi rychlé chromatografie na sili-kagelu. Čisté frakce se zahustí. Získá se 2,04 g 5-(2,6--dimethylfenoxykarbonylamino)-l,2,3,3a,8,8a-hexahydro--1,3a,8-trimethylpyrroloi 2,3-b]indolu.

Analýza pro: C22H27N3°2 vypočteno 72,30 % C, 7,45 % H, 11,50 % N; nalezno 71,86 % C, 7,43 % H, 11,56 % N. 43 Příklad 13 5-(benzoxykarbonylamino )—1, 2,3,3a.,8,8a-hexahydro-l,3a,8--trimethylpyrrolot2,3-blindol 2,2 g l,2,3,3a,8,8a-hexahydro-5-nitro-l,3a,8--trimethylpyrroloL2,3-blindolu se rozpustí ve 100 mlethylacetátu a hydrogenuje se v Paarově aparatuře při0,316 MPa za použití 220 mg oxidu platičitého jako ka-talyzátoru. Redukce je ukončena během 2 hodin. Redukčnísměs 3e zfiltruje přímo do baňky vypláchnuté dusíkem.

Potom se přidá 0,100 g 4-dimethylaminopyridinu a 0,9 gtriethylaminu, směs se ochladí na 0 °C a během 1,5 ho-diny se přidá 1,5 g benzylesteru chlormravenčí kyselinyve 100 ml ethylacetátu. Směs se promyje 2 x 100 ml vody,vysuší se síranem sodným, zahustí se a čistí se metodouvelmi rychlé chrcmatografie na silikagelu za použitísměsi 15 % methanolu a ethylacetátu jako elučního činidla.Čisté frakce se zahustí. Získá se 1,2 g 5-(benzoxykarbo-nylamino )-1,2,3,3a,8,8a-hexahydro-l,3a,8-trimethylpyrro-loC2,3-bJindolu.

Analýza pro: C21H25N3°2 vypočteno 71,75 % C, 7,18 % H, 11,96 % N; nalezno 71,70 % C, 7,16 % H, 11,98 % N. Příklad 14 5-(4-chlorbenzoylamino)-l,2,3,3a,8,8a-hexahydro-l,3a,8--trimethylpyrroloL 2,3-blindol 6,8 g l,2,3,3a,8,8a-hexahydro-5-nitro-l,3a,8--trimethylpyrroloL2,3-blindolu se rozpustí ve 300 mlethylacetátu a hydrogenuje se v Paarově aparatuře při 44 tlaku 0,316 MPa za použití 680 mg oxidu platičitého ja-ko katalyzátoru. Redukční směs se filtruje přímo do baň-ky propláchnuté dusíkem, potem se přidá 330 mg 4-dimethyl-aminopyridinu a 5,5 g triethylaminu a směs se ochladína teplotu 0 °C. Pak se přidá roztok 4,4 g 4-chlorbenzoylchloridu ve 100 ml etb$.acetátu v průběhu 1,5 hodiny.

Směs se promyje 2 x 150 ml vody, vysuší se síranem sod-ným, zahustí se a čistí se metodou velmi rychlé chroma-tografie. Čisté frakce se zahustí za vzniku 2,5 g 5-(4--chlorbenzoylamino)-l,2,3,3a,8,8a-hexahydro-l,3a,8--trimethylpyrroloC2,3-blindolu ve formě pevné látky.

Analýza pro: C20H22C1N3° vypočteno 67,50 % C, 6,23 % H, 11,81 % N; nalezeno 67,20 % C, 6,30 % H, 11,$1 % N. Příklad 15 5-(terč.butoxykarbony1-N-methylamino)-l,2,3,3a,8,8a--hexahydro-l,3a,8-trimethylpyrrolol2,3-b1 indol 1,7 8 5-(terc.butyloxykarbonylamino)-l,2,3,3a,8,8a-hexahydro-l,3a,8-trimethylpyrrolo[2,3-b]indolu serozpustí v 15 ml absolutního tetrahydrofuranu pod atmo-sférou dusíku a ochladí se na teplotu -78 °C na láznitvořené směsí pevného oxidu uhličitého a acetonu. Pomo-cí injekční stříkačky se pak přidá 7,2 mllM roztokulithiumbisí trimethylsilyDamidu v tetrahydrof uranu.Roztok se míchá 15 minut při teplotě -78 °C, pak senechá teplota vysoupit na tepltítu místnosti a znovu seochladí na -78 °G. Pak se přidá pomocí injekční stříkač-ky 0,74 g dimethylsulfátu v 5 ml tetrahydrofuranu.

Směs se míchá 1 hodinu, potom se nechá zahřát na teplotu - 45 - místnosti a přidáním vody se reakce ukončí. Potom sepřidá ICO ml ethylacetáu a směs se promývá 20 ml solan-ky, vysuší se síranem sodným, zahustí se a čistí semetodou velmi rychlé chromatografie za použití směsi 15 %aethanolu a ethylacetátu. Čisté frakce se zahustí. Získáse 0,42 g 5-(terc.butoxykarbonyl-N-methylamino)-l,2,3,3a,8,8a-hexahydro-l,3a,8-trimethylpyrrolo[2,3-b]indolu. Příklad 16 5-(N-methylaminokarbony1-N-methylamino)-l,2,3,3a,8,8a--hexahydro-l,3a,8-trimethylpyrrolo[2,3-b]indol 100 mg 5-(terč.butoxykarbony1-N-methylamino )-1,2, 3,3a,8,8a-hexahydro-l,3a,8-trimethylpyrrolo[ 2,3-b]indo-lu se zahřívá pod atmosférou dusíku bez rozpouštědla naolejové lázni na teplotu 200 až 210 °C. Po 1 hodině bylochromatografováním na tenké vrstvě silikagelu zjištěno,že došlo ke konversi na novou sloučeninu. Baňka se poténechá ochladit na teplotu místnosti, přidá se 5 ml di-chlormethanu a potom se pomalu v průběhu 45 minut přidároztok 18 mg methylisokyanátu ve 3 ml dichlormethanu.Směs se promyje 2 ml vody, vysuší se síranem sodným, za-hustí se a čistí se methodou velmi rychlé chromatografieza použití směsi 15 % methanolu a ethylacetátu jako eluČ-ního činidla, čisté frakce se . zahustí. Získá se 0,05 g5-(methylaminokarbony1-N-methylamino)-l,2,3,3a,8,8a--hexahydro-1,3a,8-trimethylpyrrolOL 2,3-b]indolu.

Claims

46 - aSQr. V& PATENTOVÉ NÁROKY

1. Deriváty hexahydropyrrolo[2,3-b]indolu obecnéhovzorce I

ve kterém X znamená atom kyslíku, atom síry, skupinu NH, N-(niž-ší)alkylovou skupinu nebo N-aryl(nižší)alkylovou sku-pinu, Y znamená atom vodíku, atom fluoru, atom chloru, atombromu, nitro3kupinu, nižší alkylovou 3kupinu, nižšíalkoxyskupinu nebo tri(nižší )alkylsilylovou skupinu, R^ znamená nižší alkylovou skupinu, halogenem substi-tuovanou nižší alkylovou skupinu, arylovou skupinu,aryl(nižší)alkylovou skupinu, cykloalkylovou skupi-nu, heteroarylovou skupinu nebo heteroaryl(nižší)-alkylovou skupinu, znamená atom vodíku, nižší alkylovou skupinu nebearyl(nižší )alkylovou skupinu, R^ znamená nižší alkylovou skupinu nebo aryl(nižší)-alkylovou skupinu, R^ znamená atom vodíku, nižší alkylovou skupinu, nižší alkenylovou skupinu, nižší alkinylovou skupinu, aryl-(nižší ) alky lovou skupinu, forrcylovou skupinu, (niž-ší )alkylkarbonylovou skupinu, aryl(nižší)alkylkarbo- - 47 nylovou skupinu nebo (nižšíJalkoxykarbonylovou sku-pinu , R^ znamená atom vodíku nebo nižší alkylovou skupinu am znamená číslo 0 nebo 1, 3 tím, že když m znamená nulu, R^ může rovnčž znamenatatom vodíku^ jakož i jejich farmaceuticky použitelné adiční soli skyselinami.

2. Způsob výroby sloučenin obecného vzorce I

ve kterém X znamená atom kyslíku, atom síry, skupinu NH, N-(niž-ší)alkylovou skupinu nebo Ν-aryl(nižší)alkylovou sku-pinu, Y znamená atom vodíku, atom fluoru, atom chloru, atombromu, nitroskupinu, nižší alkylovou skupinu, nižšíalkoxyskupinu nebo tri(nižší )alkylsilylovou skupinu, znamená nižší alkylovou skupinu, halogenem substi-tuovanou nižší alkylovou skupinu, arylovou skupinu,aryl(nižší)alkylovou skupinu, cykloalkylovou skupi-nu, heteroarylovou skupinu nebo heteroaryl(nižší)-alkylovou 3kupinu, 48 R2 znamená atom vodíku, nižší alkylovou skupinu nebearyl(nižší)alkylovou skupinu, znamená nižší alkylovou skupinu nebo aryl(nižší)-alkylovou skupinu, R^ znamená atom vodíku, nižší alkylovou skupinu, nižšíalkenylovou skupinu, nižší alkinylovou skupinu, aryl(nižší.) alkylovou skupinu , f omylovou skupinu, (niž-ší )alkylkarbony lovců skupinu, aryl(nižší)alkylkarbo-nylovou skupinu nebo (nižší)alkoxykarbonylovou sku-pinu, znamená atom vodíku nebo nižší alkylovou skupinu am znamená číslo 0 nebo 1, s tím, že když m znamená nulu, R-^ může rovněž znamenatatom vodíku, nebo jejich farmaceuticky použitelných adičních solí skyselinami, vyznačující se tím, že se a) nechá reagovat sloučenina obecného vzorce XIII

ve kterém R^, a Y mají shora uvedené významy, s isokyanátem obecného vzorce R^NCO , ve kterém 49 R^ má shora uvedený význam s výjimkou atomu vodíku, za vzniku sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém R^,Rp a Y mají shora uvedené významy, X znamená skupinu NH a R2 znamená atom vodíku, b) sloučenina obecného vzorce I, získaná ve stupni a) se popřípadě alkyluje působením halogenidu obecnéhovzorce R2-Hal , ve kterém R2 má shora uvedený význam s výjimkou atomu vodíku, za vzniku sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém R^,Rp R^, R^, Y a Rg mají shora definované významy s touvýjimkou, že R2 nemůže znamenat atom vodíku, nebo se c) nechá reagovat sloučenina obecného vzorce XIIIse sloučeninou obecného vzorce XVIa R^-X^-COCl (XVIa), ve kterém R-j· má shora definovaný význam, rial znamená atom chloru nebo atom bromu a X' znamená atom kyslíku nebo atom síry, za vzniku sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém R^,Rp R^ a R^ mají shora uvedené významy, x' znamenákyslík nebo síru a R2 znamená atom vodíku a tím, žekdyž při shora uvedené reakci R^ znamená terc.butylo-vou skupinu, pak se místo sloučeniny obecného vzorceXVIa používá di-terč.butyldikarbonátu, nebo se 50 d) sloučenina obecného vzorce I, získané ve stupni c)shora, alkyluje púdobením halogenidu obecného vzorce R^Hal nebo disulfétu obecného vzorcer2oso2or2 nebo mesylátu obecného vzorce r2oso2ch3 , kde R2 iná shora definovaný význam s výjimkou atomu vodíku,a Hal znamená atom chloru, atom bromu nebo atom jodu, za vzniku sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém R-^, R2,R^, R^, R^ a Y mají shora uvedený význam s výjimkou,že R2 nemůže znamenat atom vodíku a x' znamená atomkyslíku nebo atom síry, nebo se e) sloučenina obecného vzorce I, získaná ve stupni c),ve kterém R^> R2, Rp a R^ mají shora definované význa-my, X“’ znamená atom kyslíku nebo atom síry a Y znamenáatom vodíku, nechá popřípadě reagovat s N-chlorsukcinimi-dem, N-bromsukcinimidem nebo se sloučeninou vzorce N023F4 za vzniku sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém Y zna-mená chlor, brom nebo nitroskupinu na atomu uhlíku v po-loze 7, Rj_, R2» ^2’ ^4 a ^5 mají shora definované význa-my a x' znamená atom kyslíku nebo atom síry, nebo se - 51 - f) sloučenina obecného vzorce XIII popřípadě uvádív reakci s anhydridem kyseliny mravenčí nebo se smíšenýmanhyčridem kyseliny mravenčí a kyseliny octové za vzni-ku sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém R^ znamenáatom vodíku, m znamená nulu, R^, R^, R^ a Y mají shorauvedený význam a Rg znamená vodík, nebo se g) sloučenina obecného vzorce XIII popřípadě uvádív reakci s chloridem kyseliny obecného vzorce R-jCOCl, ve kterém Rj_ má shora uvedený význam, za vzniku sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém m zna-mená nulu, Rg znamená atom vodíku a R^, Rj, R^ a R^ majíshora uvedené významy, nebo se h) sloučenina obecného vzorce I, získaná ve stupni d)shora, ve kterém Xz znamená atom kyslíku, R^ Znamenáterč. butylovou skupinu, R^, R^, R^ a Y mají shora uve-dené významy a R£ má shora definovaný význam s výjimkouatomu vodíku, při teplotě asi 150 až 200 °C převede naamin, a ve druhém stupni se popřípadě nechá reagovatvzniklý amin obecného vzorce XXIII

Y H (XXIII), 52 ve kterém Rp R^, R^ a Y mají shora uvedené významy aR^ má shora uvedený význam s výjimkou vodíku, » s isokyanátem obecného vzorce R-jNCO, ve kterém R^ má shora uvedený význam s výjimkou vodíku, za vzniku sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém X zna-mená skupinu NH, R^, Rj, R^, R^ a Y mají shora uvedenývýznam a Rg má shora uvedený význam s výjimkou vodíku,nebo se i) nechá reagovat sloučenina obecného vzorce XXIIIs chloridem kyseliny obecného vzorce R^COCl, ve kterém R^ má shora uvedený význam, za vzniku sloučeniny obecnéhovzorce I, ve kterém m zna-mená nulu, Rp R^, R^ a Y mají shora uvedený význam aR, a R? mají shora uvedené významy s výjimkou atomu vo-díku.

3. Způsob podle bodu 2, vyznačující * se tím, že Y znamená atom vodíku a X znamená É atom kyslíku nebo skupinu NH.

4. Způsob podle bodu 3, vyznačujícísetím, že R2 znamená atom vodíku nebo nižšíalkylovou skupinu a R^, R^ a R^ znamenají nižší alkylo-vou skupinu. - 53

5. Způsob podle bodu 2, vyznačujícíse tím, že se připravuje 1,2,3,3a,8,8a-hexa-hydro-5-(fenoxykarb onylamino)-1,3a,8-trime thylpyrrolo-C2,3-b]indol.

6. Způsob podle bodu 2, vyznačujícís e ti m , že se připravuje 5-(4-chlorfenoxykarbo-nylamino)-l, 2,3,3a,8,8a-hexahydro-l,3a,8-trime thylpyrro-lo[2,3-b]indol.

7. Způsob podle bodu 2, vyznačujícíse tím, že se připravuje 5-(terc.butoxykarbonyl-amino)-1,2,3,3a, 8,8a-hexahydro-l, 3a ,8-trime thylpyrrolo-C2,3-b]indol.

8. Způsob podle bodu 2, vyznačujícíse tím, že se připravuje 5-(benzoxykarbonylami-no)-l,2,3,3a,8,8a-hexahydro-l,3a,8-trimethylpyrrolo- C 2,3-b]indol.

9» Použití sloučenin definovaných v bodě 1 propřípravu léčiva pro zmírnění různých poruch paměti, prokteré je charakteristický nedostatečný cholinergníefekt, jako je Alzheimerova choroba.