HUT75559A - Subtilisin bpn'variants having decreased adsorption and increased hydrolysis - Google Patents
Subtilisin bpn'variants having decreased adsorption and increased hydrolysis Download PDFInfo
- Publication number
- HUT75559A HUT75559A HU9603031A HU9603031A HUT75559A HU T75559 A HUT75559 A HU T75559A HU 9603031 A HU9603031 A HU 9603031A HU 9603031 A HU9603031 A HU 9603031A HU T75559 A HUT75559 A HU T75559A
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- asp
- glu
- amino acid
- asn
- ser
- Prior art date
Links
- 108010056079 Subtilisins Proteins 0.000 title claims description 63
- 102000005158 Subtilisins Human genes 0.000 title claims description 62
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 title description 17
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 title description 16
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 title description 14
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 title 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 116
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 113
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 claims description 108
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 claims description 89
- 239000003599 detergent Substances 0.000 claims description 30
- -1 substituent amino acid Chemical class 0.000 claims description 28
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 27
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical class 0.000 claims description 25
- 239000004753 textile Substances 0.000 claims description 24
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 claims description 18
- 239000004744 fabric Substances 0.000 claims description 17
- 108090000787 Subtilisin Proteins 0.000 claims description 15
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 12
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 7
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 claims description 6
- 206010029897 Obsessive thoughts Diseases 0.000 claims description 4
- VBKBDLMWICBSCY-IMJSIDKUSA-N Ser-Asp Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(O)=O VBKBDLMWICBSCY-IMJSIDKUSA-N 0.000 claims description 2
- 235000020776 essential amino acid Nutrition 0.000 claims 2
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 claims 2
- CKAJHWFHHFSCDT-WHFBIAKZSA-N Asp-Glu Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O CKAJHWFHHFSCDT-WHFBIAKZSA-N 0.000 claims 1
- AFWBWPCXSWUCLB-WDSKDSINSA-N Pro-Ser Chemical compound OC[C@@H](C([O-])=O)NC(=O)[C@@H]1CCC[NH2+]1 AFWBWPCXSWUCLB-WDSKDSINSA-N 0.000 claims 1
- 108010038633 aspartylglutamate Proteins 0.000 claims 1
- 108010031719 prolyl-serine Proteins 0.000 claims 1
- 102220268734 rs1555338682 Human genes 0.000 description 111
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 88
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 88
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 88
- 102220283192 rs397509301 Human genes 0.000 description 80
- 102220492893 Activator of RNA decay_S204D_mutation Human genes 0.000 description 79
- 102200001470 rs387907160 Human genes 0.000 description 42
- 102220548715 Caspase recruitment domain-containing protein 14_A216T_mutation Human genes 0.000 description 38
- 102220120384 rs886042566 Human genes 0.000 description 33
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 28
- 102200078012 rs104895325 Human genes 0.000 description 28
- 102200001095 rs119475042 Human genes 0.000 description 28
- 102220045290 rs2235002 Human genes 0.000 description 28
- 102220518084 Anosmin-1_Y217D_mutation Human genes 0.000 description 27
- 102220508411 Glutathione S-transferase A1_A216H_mutation Human genes 0.000 description 27
- 102200029475 rs200313585 Human genes 0.000 description 27
- 102220536859 ATP-dependent RNA helicase DHX15_Y217H_mutation Human genes 0.000 description 26
- 102220504979 Serine/threonine-protein kinase receptor R3_G219D_mutation Human genes 0.000 description 26
- 102220198924 rs752781534 Human genes 0.000 description 25
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 25
- 102200105167 rs104886075 Human genes 0.000 description 23
- 102200130889 rs118204057 Human genes 0.000 description 22
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 21
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- 102200140250 rs1057520038 Human genes 0.000 description 20
- 102200094891 rs121913566 Human genes 0.000 description 20
- 102200109297 rs387906825 Human genes 0.000 description 20
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 19
- 102220065751 rs762313827 Human genes 0.000 description 19
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 19
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 18
- 102220013614 rs397516692 Human genes 0.000 description 18
- 101100392772 Caenorhabditis elegans gln-2 gene Proteins 0.000 description 16
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 16
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 16
- 102220470791 Protein MON2 homolog_S63D_mutation Human genes 0.000 description 16
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L sodium carbonate Substances [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 16
- 102220499813 Carbonic anhydrase 2_N62D_mutation Human genes 0.000 description 15
- 102220551400 Cellular tumor antigen p53_V203E_mutation Human genes 0.000 description 15
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 15
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 15
- 102220555755 UNC5C-like protein_Y217A_mutation Human genes 0.000 description 15
- 239000000047 product Substances 0.000 description 15
- 102200040174 rs1553567473 Human genes 0.000 description 15
- 102200027755 rs199475651 Human genes 0.000 description 15
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 15
- 102200034332 rs7901902 Human genes 0.000 description 14
- 102220323784 rs1438685841 Human genes 0.000 description 13
- 102220602951 CCAAT/enhancer-binding protein beta_T220D_mutation Human genes 0.000 description 12
- 102220568823 Dual specificity mitogen-activated protein kinase kinase 1_G65V_mutation Human genes 0.000 description 12
- 102200077865 rs28936687 Human genes 0.000 description 12
- 239000010457 zeolite Substances 0.000 description 12
- 229910021536 Zeolite Inorganic materials 0.000 description 11
- HNPSIPDUKPIQMN-UHFFFAOYSA-N dioxosilane;oxo(oxoalumanyloxy)alumane Chemical compound O=[Si]=O.O=[Al]O[Al]=O HNPSIPDUKPIQMN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 102200048631 rs121909302 Human genes 0.000 description 11
- 102220331243 rs1484238484 Human genes 0.000 description 11
- 102200105632 rs730882003 Human genes 0.000 description 11
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 11
- 102220469272 Hexokinase-4_Y214A_mutation Human genes 0.000 description 10
- 102220640252 Mitochondrial 2-oxoglutarate/malate carrier protein_T220E_mutation Human genes 0.000 description 10
- 150000008051 alkyl sulfates Chemical class 0.000 description 10
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 9
- 102200046956 c.608T>C Human genes 0.000 description 9
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 9
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 9
- 102200112910 rs1361024832 Human genes 0.000 description 9
- 102220271143 rs774491699 Human genes 0.000 description 9
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 9
- 102220575769 4-galactosyl-N-acetylglucosaminide 3-alpha-L-fucosyltransferase 9_N62Q_mutation Human genes 0.000 description 8
- 101100533230 Caenorhabditis elegans ser-2 gene Proteins 0.000 description 8
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 8
- 102220504974 Serine/threonine-protein kinase receptor R3_G211S_mutation Human genes 0.000 description 8
- 102220548673 Tectonin beta-propeller repeat-containing protein 1_Q59E_mutation Human genes 0.000 description 8
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 8
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 description 8
- 235000013772 propylene glycol Nutrition 0.000 description 8
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 8
- 102220503750 Replication factor C subunit 3_T66N_mutation Human genes 0.000 description 7
- 102220548687 Tectonin beta-propeller repeat-containing protein 1_T66P_mutation Human genes 0.000 description 7
- BGRWYDHXPHLNKA-UHFFFAOYSA-N Tetraacetylethylenediamine Chemical compound CC(=O)N(C(C)=O)CCN(C(C)=O)C(C)=O BGRWYDHXPHLNKA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000000551 dentifrice Substances 0.000 description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 7
- 102220252848 rs1381356440 Human genes 0.000 description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- 102220605419 DNA-(apurinic or apyrimidinic site) endonuclease_N212D_mutation Human genes 0.000 description 6
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 102000004882 Lipase Human genes 0.000 description 6
- 108090001060 Lipase Proteins 0.000 description 6
- 239000004367 Lipase Substances 0.000 description 6
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 6
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 6
- MTHSVFCYNBDYFN-UHFFFAOYSA-N diethylene glycol Chemical compound OCCOCCO MTHSVFCYNBDYFN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 6
- 238000005187 foaming Methods 0.000 description 6
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 6
- 235000019421 lipase Nutrition 0.000 description 6
- 102220615929 C-C chemokine receptor type 5_G97E_mutation Human genes 0.000 description 5
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 5
- 240000008881 Oenanthe javanica Species 0.000 description 5
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 5
- 239000002518 antifoaming agent Substances 0.000 description 5
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 5
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 5
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 5
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- 239000002324 mouth wash Substances 0.000 description 5
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 5
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 5
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 5
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- OARDBPIZDHVTCK-UHFFFAOYSA-N 2-butyloctanoic acid Chemical compound CCCCCCC(C(O)=O)CCCC OARDBPIZDHVTCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229920002126 Acrylic acid copolymer Polymers 0.000 description 4
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 4
- 108010059892 Cellulase Proteins 0.000 description 4
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 4
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102220632810 EH domain-containing protein 1_V203P_mutation Human genes 0.000 description 4
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 4
- 102220637846 Interleukin-1 receptor-associated kinase-like 2_T66E_mutation Human genes 0.000 description 4
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 102220611782 Mitochondrial import inner membrane translocase subunit Tim23B_S105E_mutation Human genes 0.000 description 4
- WHNWPMSKXPGLAX-UHFFFAOYSA-N N-Vinyl-2-pyrrolidone Chemical compound C=CN1CCCC1=O WHNWPMSKXPGLAX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000004115 Sodium Silicate Substances 0.000 description 4
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 4
- ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N Uracil Chemical compound O=C1C=CNC(=O)N1 ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 4
- 229940106157 cellulase Drugs 0.000 description 4
- 239000004927 clay Substances 0.000 description 4
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 4
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 4
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 4
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 4
- 238000005498 polishing Methods 0.000 description 4
- 229920000058 polyacrylate Polymers 0.000 description 4
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 4
- 102200007243 rs121918541 Human genes 0.000 description 4
- 102200058374 rs61755797 Human genes 0.000 description 4
- 102220080886 rs759604513 Human genes 0.000 description 4
- 150000004760 silicates Chemical class 0.000 description 4
- PUZPDOWCWNUUKD-UHFFFAOYSA-M sodium fluoride Chemical compound [F-].[Na+] PUZPDOWCWNUUKD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- NTHWMYGWWRZVTN-UHFFFAOYSA-N sodium silicate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-][Si]([O-])=O NTHWMYGWWRZVTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229910052911 sodium silicate Inorganic materials 0.000 description 4
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 4
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 4
- 235000019832 sodium triphosphate Nutrition 0.000 description 4
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 4
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 4
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 4
- HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 2-Aminoethan-1-ol Chemical compound NCCO HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000013142 Amylases Human genes 0.000 description 3
- 108010065511 Amylases Proteins 0.000 description 3
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 description 3
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 description 3
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 3
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102220586968 Equilibrative nucleoside transporter 4_T220S_mutation Human genes 0.000 description 3
- 102220518877 Filamin-A_A200S_mutation Human genes 0.000 description 3
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- BPQQTUXANYXVAA-UHFFFAOYSA-N Orthosilicate Chemical compound [O-][Si]([O-])([O-])[O-] BPQQTUXANYXVAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 3
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 3
- 102220590126 Zinc finger protein 185_S163D_mutation Human genes 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 3
- 235000019418 amylase Nutrition 0.000 description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 3
- 229940077388 benzenesulfonate Drugs 0.000 description 3
- SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-M benzenesulfonate Chemical compound [O-]S(=O)(=O)C1=CC=CC=C1 SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 102220362997 c.297C>G Human genes 0.000 description 3
- 102220363285 c.598G>A Human genes 0.000 description 3
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 3
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 3
- 108010089804 glycyl-threonine Proteins 0.000 description 3
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 3
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 3
- 229940044652 phenolsulfonate Drugs 0.000 description 3
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 3
- 229920001296 polysiloxane Polymers 0.000 description 3
- 229920005996 polystyrene-poly(ethylene-butylene)-polystyrene Polymers 0.000 description 3
- 229940052586 pro 12 Drugs 0.000 description 3
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 3
- 102200145349 rs111033299 Human genes 0.000 description 3
- 102200028522 rs398122939 Human genes 0.000 description 3
- 102200047002 rs61752065 Human genes 0.000 description 3
- 102220082845 rs746405080 Human genes 0.000 description 3
- 102220099575 rs878853725 Human genes 0.000 description 3
- 102220122514 rs886043111 Human genes 0.000 description 3
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 3
- FQENQNTWSFEDLI-UHFFFAOYSA-J sodium diphosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O FQENQNTWSFEDLI-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 3
- 229940048086 sodium pyrophosphate Drugs 0.000 description 3
- 239000003760 tallow Substances 0.000 description 3
- HLZKNKRTKFSKGZ-UHFFFAOYSA-N tetradecan-1-ol Chemical class CCCCCCCCCCCCCCO HLZKNKRTKFSKGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000019818 tetrasodium diphosphate Nutrition 0.000 description 3
- 239000001577 tetrasodium phosphonato phosphate Substances 0.000 description 3
- 239000000606 toothpaste Substances 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-GSVOUGTGSA-N (R)-(-)-Propylene glycol Chemical compound C[C@@H](O)CO DNIAPMSPPWPWGF-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 2
- GHPCICSQWQDZLM-UHFFFAOYSA-N 1-(4-chlorophenyl)sulfonyl-1-methyl-3-propylurea Chemical compound CCCNC(=O)N(C)S(=O)(=O)C1=CC=C(Cl)C=C1 GHPCICSQWQDZLM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GZMAAYIALGURDQ-UHFFFAOYSA-N 2-(2-hexoxyethoxy)ethanol Chemical compound CCCCCCOCCOCCO GZMAAYIALGURDQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004382 Amylase Substances 0.000 description 2
- MGSVBZIBCCKGCY-ZLUOBGJFSA-N Asp-Ser-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O MGSVBZIBCCKGCY-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000035404 Autolysis Diseases 0.000 description 2
- 101100505076 Caenorhabditis elegans gly-2 gene Proteins 0.000 description 2
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 206010057248 Cell death Diseases 0.000 description 2
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 2
- 238000001712 DNA sequencing Methods 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ROSDSFDQCJNGOL-UHFFFAOYSA-N Dimethylamine Chemical compound CNC ROSDSFDQCJNGOL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QXNVGIXVLWOKEQ-UHFFFAOYSA-N Disodium Chemical compound [Na][Na] QXNVGIXVLWOKEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102220586998 Equilibrative nucleoside transporter 4_E206D_mutation Human genes 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 239000007987 MES buffer Substances 0.000 description 2
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 2
- QZXSMBBFBXPQHI-UHFFFAOYSA-N N-(dodecanoyl)ethanolamine Chemical compound CCCCCCCCCCCC(=O)NCCO QZXSMBBFBXPQHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 240000002853 Nelumbo nucifera Species 0.000 description 2
- 235000006508 Nelumbo nucifera Nutrition 0.000 description 2
- 235000006510 Nelumbo pentapetala Nutrition 0.000 description 2
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 2
- LDEBVRIURYMKQS-WISUUJSJSA-N Ser-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CO LDEBVRIURYMKQS-WISUUJSJSA-N 0.000 description 2
- 102000012479 Serine Proteases Human genes 0.000 description 2
- 108010022999 Serine Proteases Proteins 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000004280 Sodium formate Substances 0.000 description 2
- 229920002125 Sokalan® Polymers 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- 102220507339 Tyrosine-protein kinase STYK1_S204G_mutation Human genes 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 239000003945 anionic surfactant Substances 0.000 description 2
- 230000003254 anti-foaming effect Effects 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 239000007844 bleaching agent Substances 0.000 description 2
- KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N boric acid Chemical compound OB(O)O KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004327 boric acid Substances 0.000 description 2
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 2
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- OSGAYBCDTDRGGQ-UHFFFAOYSA-L calcium sulfate Chemical compound [Ca+2].[O-]S([O-])(=O)=O OSGAYBCDTDRGGQ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000000679 carrageenan Substances 0.000 description 2
- 229920001525 carrageenan Polymers 0.000 description 2
- 235000010418 carrageenan Nutrition 0.000 description 2
- 229940113118 carrageenan Drugs 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 2
- 235000015218 chewing gum Nutrition 0.000 description 2
- 229960004106 citric acid Drugs 0.000 description 2
- 229910052570 clay Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000012459 cleaning agent Substances 0.000 description 2
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 2
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- 239000007938 effervescent tablet Substances 0.000 description 2
- 125000001301 ethoxy group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])O* 0.000 description 2
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 2
- 229910021485 fumed silica Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N glycyl-DL-alpha-alanine Natural products OC(=O)C(C)NC(=O)CN VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YMAWOPBAYDPSLA-UHFFFAOYSA-N glycylglycine Chemical compound [NH3+]CC(=O)NCC([O-])=O YMAWOPBAYDPSLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IIRDTKBZINWQAW-UHFFFAOYSA-N hexaethylene glycol Chemical compound OCCOCCOCCOCCOCCOCCO IIRDTKBZINWQAW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 2
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 2
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 2
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 2
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 2
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 2
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 229940051866 mouthwash Drugs 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 229960003330 pentetic acid Drugs 0.000 description 2
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 2
- USHAGKDGDHPEEY-UHFFFAOYSA-L potassium persulfate Chemical compound [K+].[K+].[O-]S(=O)(=O)OOS([O-])(=O)=O USHAGKDGDHPEEY-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 102220224495 rs1060503668 Human genes 0.000 description 2
- 102220285668 rs1555281105 Human genes 0.000 description 2
- 102220333092 rs1556523682 Human genes 0.000 description 2
- 150000003333 secondary alcohols Chemical class 0.000 description 2
- 230000028043 self proteolysis Effects 0.000 description 2
- 108010048818 seryl-histidine Proteins 0.000 description 2
- 229920002545 silicone oil Polymers 0.000 description 2
- 229910021647 smectite Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 2
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011775 sodium fluoride Substances 0.000 description 2
- 235000013024 sodium fluoride Nutrition 0.000 description 2
- HLBBKKJFGFRGMU-UHFFFAOYSA-M sodium formate Chemical compound [Na+].[O-]C=O HLBBKKJFGFRGMU-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 235000019254 sodium formate Nutrition 0.000 description 2
- RPACBEVZENYWOL-XFULWGLBSA-M sodium;(2r)-2-[6-(4-chlorophenoxy)hexyl]oxirane-2-carboxylate Chemical compound [Na+].C=1C=C(Cl)C=CC=1OCCCCCC[C@]1(C(=O)[O-])CO1 RPACBEVZENYWOL-XFULWGLBSA-M 0.000 description 2
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 2
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 2
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 2
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 2
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 2
- UNXRWKVEANCORM-UHFFFAOYSA-I triphosphate(5-) Chemical compound [O-]P([O-])(=O)OP([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O UNXRWKVEANCORM-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 2
- 229940035893 uracil Drugs 0.000 description 2
- UHVMMEOXYDMDKI-JKYCWFKZSA-L zinc;1-(5-cyanopyridin-2-yl)-3-[(1s,2s)-2-(6-fluoro-2-hydroxy-3-propanoylphenyl)cyclopropyl]urea;diacetate Chemical compound [Zn+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O.CCC(=O)C1=CC=C(F)C([C@H]2[C@H](C2)NC(=O)NC=2N=CC(=CC=2)C#N)=C1O UHVMMEOXYDMDKI-JKYCWFKZSA-L 0.000 description 2
- FTLYMKDSHNWQKD-UHFFFAOYSA-N (2,4,5-trichlorophenyl)boronic acid Chemical compound OB(O)C1=CC(Cl)=C(Cl)C=C1Cl FTLYMKDSHNWQKD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CUVLMZNMSPJDON-UHFFFAOYSA-N 1-(1-butoxypropan-2-yloxy)propan-2-ol Chemical compound CCCCOCC(C)OCC(C)O CUVLMZNMSPJDON-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RWNUSVWFHDHRCJ-UHFFFAOYSA-N 1-butoxypropan-2-ol Chemical compound CCCCOCC(C)O RWNUSVWFHDHRCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JCTXKRPTIMZBJT-UHFFFAOYSA-N 2,2,4-trimethylpentane-1,3-diol Chemical compound CC(C)C(O)C(C)(C)CO JCTXKRPTIMZBJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CFPOJWPDQWJEMO-UHFFFAOYSA-N 2-(1,2-dicarboxyethoxy)butanedioic acid Chemical compound OC(=O)CC(C(O)=O)OC(C(O)=O)CC(O)=O CFPOJWPDQWJEMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SXGZJKUKBWWHRA-UHFFFAOYSA-N 2-(N-morpholiniumyl)ethanesulfonate Chemical compound [O-]S(=O)(=O)CC[NH+]1CCOCC1 SXGZJKUKBWWHRA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RWLALWYNXFYRGW-UHFFFAOYSA-N 2-Ethyl-1,3-hexanediol Chemical compound CCCC(O)C(CC)CO RWLALWYNXFYRGW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- POAOYUHQDCAZBD-UHFFFAOYSA-N 2-butoxyethanol Chemical compound CCCCOCCO POAOYUHQDCAZBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UPGSWASWQBLSKZ-UHFFFAOYSA-N 2-hexoxyethanol Chemical compound CCCCCCOCCO UPGSWASWQBLSKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 3-(dimethylamino)propyliminomethylidene-ethylazanium;chloride Chemical compound Cl.CCN=C=NCCCN(C)C FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TYMLOMAKGOJONV-UHFFFAOYSA-N 4-nitroaniline Chemical compound NC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 TYMLOMAKGOJONV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OCKGFTQIICXDQW-ZEQRLZLVSA-N 5-[(1r)-1-hydroxy-2-[4-[(2r)-2-hydroxy-2-(4-methyl-1-oxo-3h-2-benzofuran-5-yl)ethyl]piperazin-1-yl]ethyl]-4-methyl-3h-2-benzofuran-1-one Chemical compound C1=C2C(=O)OCC2=C(C)C([C@@H](O)CN2CCN(CC2)C[C@H](O)C2=CC=C3C(=O)OCC3=C2C)=C1 OCKGFTQIICXDQW-ZEQRLZLVSA-N 0.000 description 1
- XSVSPKKXQGNHMD-UHFFFAOYSA-N 5-bromo-3-methyl-1,2-thiazole Chemical compound CC=1C=C(Br)SN=1 XSVSPKKXQGNHMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RLMISHABBKUNFO-WHFBIAKZSA-N Ala-Ala-Gly Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(O)=O RLMISHABBKUNFO-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- LBJYAILUMSUTAM-ZLUOBGJFSA-N Ala-Asn-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O LBJYAILUMSUTAM-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- VGPWRRFOPXVGOH-BYPYZUCNSA-N Ala-Gly-Gly Chemical compound C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)NCC(O)=O VGPWRRFOPXVGOH-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- OBVSBEYOMDWLRJ-BFHQHQDPSA-N Ala-Gly-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)N OBVSBEYOMDWLRJ-BFHQHQDPSA-N 0.000 description 1
- HHRAXZAYZFFRAM-CIUDSAMLSA-N Ala-Leu-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O HHRAXZAYZFFRAM-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- GNKVBRYFXYWXAB-WDSKDSINSA-N Asn-Glu-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O GNKVBRYFXYWXAB-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- NTWOPSIUJBMNRI-KKUMJFAQSA-N Asn-Lys-Tyr Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 NTWOPSIUJBMNRI-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- NPZJLGMWMDNQDD-GHCJXIJMSA-N Asn-Ser-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O NPZJLGMWMDNQDD-GHCJXIJMSA-N 0.000 description 1
- UXHYOWXTJLBEPG-GSSVUCPTSA-N Asn-Thr-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O UXHYOWXTJLBEPG-GSSVUCPTSA-N 0.000 description 1
- UQBGYPFHWFZMCD-ZLUOBGJFSA-N Asp-Asn-Asn Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O UQBGYPFHWFZMCD-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- LIVXPXUVXFRWNY-CIUDSAMLSA-N Asp-Lys-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O LIVXPXUVXFRWNY-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- 239000005711 Benzoic acid Substances 0.000 description 1
- 102220615887 C-C chemokine receptor type 5_L96V_mutation Human genes 0.000 description 1
- 125000006539 C12 alkyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- CBOCVOKPQGJKKJ-UHFFFAOYSA-L Calcium formate Chemical compound [Ca+2].[O-]C=O.[O-]C=O CBOCVOKPQGJKKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 108010084185 Cellulases Proteins 0.000 description 1
- 102000005575 Cellulases Human genes 0.000 description 1
- RKWGIWYCVPQPMF-UHFFFAOYSA-N Chloropropamide Chemical compound CCCNC(=O)NS(=O)(=O)C1=CC=C(Cl)C=C1 RKWGIWYCVPQPMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YASYEJJMZJALEJ-UHFFFAOYSA-N Citric acid monohydrate Chemical compound O.OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O YASYEJJMZJALEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RPNUMPOLZDHAAY-UHFFFAOYSA-N Diethylenetriamine Chemical compound NCCNCCN RPNUMPOLZDHAAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SNRUBQQJIBEYMU-UHFFFAOYSA-N Dodecane Natural products CCCCCCCCCCCC SNRUBQQJIBEYMU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 description 1
- PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N Ethylenediamine Chemical compound NCCN PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102220505245 GRB2-associated-binding protein 2_S210E_mutation Human genes 0.000 description 1
- SITLTJHOQZFJGG-XPUUQOCRSA-N Glu-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O SITLTJHOQZFJGG-XPUUQOCRSA-N 0.000 description 1
- RLFSBAPJTYKSLG-WHFBIAKZSA-N Gly-Ala-Asp Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O RLFSBAPJTYKSLG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- AIJAPFVDBFYNKN-WHFBIAKZSA-N Gly-Asn-Asp Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)CN)C(=O)N AIJAPFVDBFYNKN-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- HKSNHPVETYYJBK-LAEOZQHASA-N Gly-Ile-Glu Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)CN HKSNHPVETYYJBK-LAEOZQHASA-N 0.000 description 1
- CVFOYJJOZYYEPE-KBPBESRZSA-N Gly-Lys-Tyr Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O CVFOYJJOZYYEPE-KBPBESRZSA-N 0.000 description 1
- JJGBXTYGTKWGAT-YUMQZZPRSA-N Gly-Pro-Glu Chemical compound NCC(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O JJGBXTYGTKWGAT-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- IALQAMYQJBZNSK-WHFBIAKZSA-N Gly-Ser-Asn Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O IALQAMYQJBZNSK-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- SOEGEPHNZOISMT-BYPYZUCNSA-N Gly-Ser-Gly Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O SOEGEPHNZOISMT-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- OLIFSFOFKGKIRH-WUJLRWPWSA-N Gly-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CN OLIFSFOFKGKIRH-WUJLRWPWSA-N 0.000 description 1
- RHRLHXQWHCNJKR-PMVVWTBXSA-N Gly-Thr-His Chemical compound NCC(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CN=CN1 RHRLHXQWHCNJKR-PMVVWTBXSA-N 0.000 description 1
- LYZYGGWCBLBDMC-QWHCGFSZSA-N Gly-Tyr-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC2=CC=C(C=C2)O)NC(=O)CN)C(=O)O LYZYGGWCBLBDMC-QWHCGFSZSA-N 0.000 description 1
- GBYYQVBXFVDJPJ-WLTAIBSBSA-N Gly-Tyr-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)NC(=O)CN)O GBYYQVBXFVDJPJ-WLTAIBSBSA-N 0.000 description 1
- VPZXBVLAVMBEQI-VKHMYHEASA-N Glycyl-alanine Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)CN VPZXBVLAVMBEQI-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- BZAQOPHNBFOOJS-DCAQKATOSA-N His-Pro-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O BZAQOPHNBFOOJS-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- 102220603161 Homeobox protein SIX3_V95P_mutation Human genes 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IPYVXYDYLHVWHU-GMOBBJLQSA-N Ile-Asn-Met Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)O)N IPYVXYDYLHVWHU-GMOBBJLQSA-N 0.000 description 1
- QIHJTGSVGIPHIW-QSFUFRPTSA-N Ile-Asn-Val Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)O)N QIHJTGSVGIPHIW-QSFUFRPTSA-N 0.000 description 1
- WKXVAXOSIPTXEC-HAFWLYHUSA-N Ile-Asp Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(O)=O WKXVAXOSIPTXEC-HAFWLYHUSA-N 0.000 description 1
- KEKTTYCXKGBAAL-VGDYDELISA-N Ile-His-Ser Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N KEKTTYCXKGBAAL-VGDYDELISA-N 0.000 description 1
- SVBAHOMTJRFSIC-SXTJYALSSA-N Ile-Ile-Asn Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N SVBAHOMTJRFSIC-SXTJYALSSA-N 0.000 description 1
- QCSFMCFHVGTLFF-NHCYSSNCSA-N Leu-Asp-Val Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O QCSFMCFHVGTLFF-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- LESXFEZIFXFIQR-LURJTMIESA-N Leu-Gly Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O LESXFEZIFXFIQR-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- LAPSXOAUPNOINL-YUMQZZPRSA-N Leu-Gly-Asp Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(O)=O LAPSXOAUPNOINL-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- KUIDCYNIEJBZBU-AJNGGQMLSA-N Leu-Ile-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O KUIDCYNIEJBZBU-AJNGGQMLSA-N 0.000 description 1
- ZRHDPZAAWLXXIR-SRVKXCTJSA-N Leu-Lys-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O ZRHDPZAAWLXXIR-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- UCBPDSYUVAAHCD-UWVGGRQHSA-N Leu-Pro-Gly Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(O)=O UCBPDSYUVAAHCD-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- 102220553342 Lipoprotein lipase_A98T_mutation Human genes 0.000 description 1
- IXHKPDJKKCUKHS-GARJFASQSA-N Lys-Ala-Pro Chemical compound C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)N IXHKPDJKKCUKHS-GARJFASQSA-N 0.000 description 1
- GQFDWEDHOQRNLC-QWRGUYRKSA-N Lys-Gly-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN GQFDWEDHOQRNLC-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- 102220470056 M-phase inducer phosphatase 3_S191D_mutation Human genes 0.000 description 1
- 241000288147 Meleagris gallopavo Species 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 102220561259 Myocardin-related transcription factor B_L96A_mutation Human genes 0.000 description 1
- 102220561290 Myocardin-related transcription factor B_L96D_mutation Human genes 0.000 description 1
- QPCDCPDFJACHGM-UHFFFAOYSA-N N,N-bis{2-[bis(carboxymethyl)amino]ethyl}glycine Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(=O)O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O QPCDCPDFJACHGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YBAFDPFAUTYYRW-UHFFFAOYSA-N N-L-alpha-glutamyl-L-leucine Natural products CC(C)CC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(O)=O YBAFDPFAUTYYRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SITLTJHOQZFJGG-UHFFFAOYSA-N N-L-alpha-glutamyl-L-valine Natural products CC(C)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(O)=O SITLTJHOQZFJGG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010079364 N-glycylalanine Proteins 0.000 description 1
- WTBIAPVQQBCLFP-UHFFFAOYSA-N N.N.N.CC(O)=O.CC(O)=O.CC(O)=O.CC(O)=O.CC(O)=O Chemical compound N.N.N.CC(O)=O.CC(O)=O.CC(O)=O.CC(O)=O.CC(O)=O WTBIAPVQQBCLFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006057 Non-nutritive feed additive Substances 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 101150004094 PRO2 gene Proteins 0.000 description 1
- 102220581101 Phosphatidylinositol 4-phosphate 3-kinase C2 domain-containing subunit alpha_S259E_mutation Human genes 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 229920000388 Polyphosphate Polymers 0.000 description 1
- JQOHKCDMINQZRV-WDSKDSINSA-N Pro-Asn Chemical compound NC(=O)C[C@@H](C([O-])=O)NC(=O)[C@@H]1CCC[NH2+]1 JQOHKCDMINQZRV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- HAEGAELAYWSUNC-WPRPVWTQSA-N Pro-Gly-Val Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O HAEGAELAYWSUNC-WPRPVWTQSA-N 0.000 description 1
- LPGSNRSLPHRNBW-AVGNSLFASA-N Pro-His-Val Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](C(C)C)C([O-])=O)NC(=O)[C@H]1[NH2+]CCC1)C1=CN=CN1 LPGSNRSLPHRNBW-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- POQFNPILEQEODH-FXQIFTODSA-N Pro-Ser-Ala Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O POQFNPILEQEODH-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- FNGOXVQBBCMFKV-CIUDSAMLSA-N Pro-Ser-Glu Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O FNGOXVQBBCMFKV-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- BGWKULMLUIUPKY-BQBZGAKWSA-N Pro-Ser-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 BGWKULMLUIUPKY-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Propanedioic acid Natural products OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102220630911 Receptor-interacting serine/threonine-protein kinase 1_S161E_mutation Human genes 0.000 description 1
- 102220613710 Semaphorin-3D_G97N_mutation Human genes 0.000 description 1
- ZUGXSSFMTXKHJS-ZLUOBGJFSA-N Ser-Ala-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O ZUGXSSFMTXKHJS-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- WOUIMBGNEUWXQG-VKHMYHEASA-N Ser-Gly Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O WOUIMBGNEUWXQG-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- IOVHBRCQOGWAQH-ZKWXMUAHSA-N Ser-Gly-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O IOVHBRCQOGWAQH-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 1
- ZIFYDQAFEMIZII-GUBZILKMSA-N Ser-Leu-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O ZIFYDQAFEMIZII-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- XNCUYZKGQOCOQH-YUMQZZPRSA-N Ser-Leu-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(O)=O XNCUYZKGQOCOQH-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- JWOBLHJRDADHLN-KKUMJFAQSA-N Ser-Leu-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O JWOBLHJRDADHLN-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- SRKMDKACHDVPMD-SRVKXCTJSA-N Ser-Lys-His Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)N SRKMDKACHDVPMD-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- PBUXMVYWOSKHMF-WDSKDSINSA-N Ser-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CO PBUXMVYWOSKHMF-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- MQUZANJDFOQOBX-SRVKXCTJSA-N Ser-Phe-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O MQUZANJDFOQOBX-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- ZKBKUWQVDWWSRI-BZSNNMDCSA-N Ser-Phe-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O ZKBKUWQVDWWSRI-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- XQJCEKXQUJQNNK-ZLUOBGJFSA-N Ser-Ser-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O XQJCEKXQUJQNNK-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- 229910004298 SiO 2 Inorganic materials 0.000 description 1
- 102220523246 Sodium channel protein type 1 subunit alpha_A98P_mutation Human genes 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N Succinic acid Natural products OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ULUAUXLGCMPNKK-UHFFFAOYSA-N Sulfobutanedioic acid Chemical compound OC(=O)CC(C(O)=O)S(O)(=O)=O ULUAUXLGCMPNKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LXWZOMSOUAMOIA-JIOCBJNQSA-N Thr-Asn-Pro Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N)O LXWZOMSOUAMOIA-JIOCBJNQSA-N 0.000 description 1
- YKRQRPFODDJQTC-CSMHCCOUSA-N Thr-Lys Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN YKRQRPFODDJQTC-CSMHCCOUSA-N 0.000 description 1
- SGAOHNPSEPVAFP-ZDLURKLDSA-N Thr-Ser-Gly Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O SGAOHNPSEPVAFP-ZDLURKLDSA-N 0.000 description 1
- XZUBGOYOGDRYFC-XGEHTFHBSA-N Thr-Ser-Met Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O XZUBGOYOGDRYFC-XGEHTFHBSA-N 0.000 description 1
- GWEVSGVZZGPLCZ-UHFFFAOYSA-N Titan oxide Chemical compound O=[Ti]=O GWEVSGVZZGPLCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102220510530 Transcription initiation factor TFIID subunit 10_K217R_mutation Human genes 0.000 description 1
- MJBBMTOGSOSAKJ-HJXMPXNTSA-N Trp-Ala-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O MJBBMTOGSOSAKJ-HJXMPXNTSA-N 0.000 description 1
- HHPSUFUXXBOFQY-AQZXSJQPSA-N Trp-Thr-Asn Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)N)O HHPSUFUXXBOFQY-AQZXSJQPSA-N 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- GFHYISDTIWZUSU-QWRGUYRKSA-N Tyr-Asn-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCC(O)=O GFHYISDTIWZUSU-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- HPYDSVWYXXKHRD-VIFPVBQESA-N Tyr-Gly Chemical compound [O-]C(=O)CNC(=O)[C@@H]([NH3+])CC1=CC=C(O)C=C1 HPYDSVWYXXKHRD-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- PLVVHGFEMSDRET-IHPCNDPISA-N Tyr-Ser-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC3=CC=C(C=C3)O)N PLVVHGFEMSDRET-IHPCNDPISA-N 0.000 description 1
- 102220577898 Tyrosine-protein phosphatase non-receptor type substrate 1_L96S_mutation Human genes 0.000 description 1
- VMRFIKXKOFNMHW-GUBZILKMSA-N Val-Arg-Ser Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N VMRFIKXKOFNMHW-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 238000005377 adsorption chromatography Methods 0.000 description 1
- 108010076324 alanyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 125000005037 alkyl phenyl group Chemical group 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 229940025131 amylases Drugs 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 125000000129 anionic group Chemical group 0.000 description 1
- 108010047857 aspartylglycine Proteins 0.000 description 1
- 230000002358 autolytic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 239000002585 base Substances 0.000 description 1
- VSJAMWDKZCYCKN-UHFFFAOYSA-N benzenesulfonyl nonaneperoxoate Chemical compound CCCCCCCCC(=O)OOS(=O)(=O)C1=CC=CC=C1 VSJAMWDKZCYCKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000010233 benzoic acid Nutrition 0.000 description 1
- YKGYQYOQRGPFTO-UHFFFAOYSA-N bis(8-methylnonyl) hexanedioate Chemical compound CC(C)CCCCCCCOC(=O)CCCCC(=O)OCCCCCCCC(C)C YKGYQYOQRGPFTO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004061 bleaching Methods 0.000 description 1
- 229910021538 borax Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000005282 brightening Methods 0.000 description 1
- QQIRJGBXQREIFL-UHFFFAOYSA-N butanedioic acid;ethane-1,2-diamine Chemical class NCCN.OC(=O)CCC(O)=O QQIRJGBXQREIFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102220407853 c.284T>A Human genes 0.000 description 1
- 102220636013 cAMP-dependent protein kinase catalytic subunit alpha_L96Q_mutation Human genes 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004281 calcium formate Substances 0.000 description 1
- 235000019255 calcium formate Nutrition 0.000 description 1
- 229940044172 calcium formate Drugs 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 150000007942 carboxylates Chemical class 0.000 description 1
- 125000002057 carboxymethyl group Chemical group [H]OC(=O)C([H])([H])[*] 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 1
- 238000005277 cation exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 229940112822 chewing gum Drugs 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 150000001860 citric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229960002303 citric acid monohydrate Drugs 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 239000008139 complexing agent Substances 0.000 description 1
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 239000007822 coupling agent Substances 0.000 description 1
- MWKFXSUHUHTGQN-UHFFFAOYSA-N decan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCO MWKFXSUHUHTGQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002939 deleterious effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 229940028356 diethylene glycol monobutyl ether Drugs 0.000 description 1
- 229940090960 diethylenetriamine pentamethylene phosphonic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 238000004851 dishwashing Methods 0.000 description 1
- NZIAJMSMIOISDK-UHFFFAOYSA-L disodium 2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylic acid sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O.OC(=O)CC(O)(CC(O)=O)C(O)=O NZIAJMSMIOISDK-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- PMPJQLCPEQFEJW-HPKCLRQXSA-L disodium;2-[(e)-2-[4-[4-[(e)-2-(2-sulfonatophenyl)ethenyl]phenyl]phenyl]ethenyl]benzenesulfonate Chemical group [Na+].[Na+].[O-]S(=O)(=O)C1=CC=CC=C1\C=C\C1=CC=C(C=2C=CC(\C=C\C=3C(=CC=CC=3)S([O-])(=O)=O)=CC=2)C=C1 PMPJQLCPEQFEJW-HPKCLRQXSA-L 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 125000003438 dodecyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- MOTZDAYCYVMXPC-UHFFFAOYSA-N dodecyl hydrogen sulfate Chemical compound CCCCCCCCCCCCOS(O)(=O)=O MOTZDAYCYVMXPC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940043264 dodecyl sulfate Drugs 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- DUYCTCQXNHFCSJ-UHFFFAOYSA-N dtpmp Chemical compound OP(=O)(O)CN(CP(O)(O)=O)CCN(CP(O)(=O)O)CCN(CP(O)(O)=O)CP(O)(O)=O DUYCTCQXNHFCSJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 230000007071 enzymatic hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006047 enzymatic hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- HGVSZIWPYBQNOR-UHFFFAOYSA-N ethane-1,2-diol;propane-1,3-diol Chemical compound OCCO.OCCCO HGVSZIWPYBQNOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N ethylene glycol Natural products OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940071106 ethylenediaminetetraacetate Drugs 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 239000002979 fabric softener Substances 0.000 description 1
- 239000010419 fine particle Substances 0.000 description 1
- 230000037433 frameshift Effects 0.000 description 1
- 108010079413 glycyl-prolyl-glutamic acid Proteins 0.000 description 1
- 108010082286 glycyl-seryl-alanine Proteins 0.000 description 1
- 108010050848 glycylleucine Proteins 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N hydrogen chloride Substances Cl.Cl IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000041 hydrogen chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 1
- 239000003752 hydrotrope Substances 0.000 description 1
- WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N hydroxyacetaldehyde Natural products OCC=O WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- JEIPFZHSYJVQDO-UHFFFAOYSA-N iron(III) oxide Inorganic materials O=[Fe]O[Fe]=O JEIPFZHSYJVQDO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007794 irritation Effects 0.000 description 1
- 238000012933 kinetic analysis Methods 0.000 description 1
- 238000003367 kinetic assay Methods 0.000 description 1
- 108010083708 leucyl-aspartyl-valine Proteins 0.000 description 1
- 108010044311 leucyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010034529 leucyl-lysine Proteins 0.000 description 1
- 238000012417 linear regression Methods 0.000 description 1
- 239000007937 lozenge Substances 0.000 description 1
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 159000000003 magnesium salts Chemical class 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 239000011976 maleic acid Substances 0.000 description 1
- CQDGTJPVBWZJAZ-UHFFFAOYSA-N monoethyl carbonate Chemical class CCOC(O)=O CQDGTJPVBWZJAZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000004682 monohydrates Chemical class 0.000 description 1
- LNOPIUAQISRISI-UHFFFAOYSA-N n'-hydroxy-2-propan-2-ylsulfonylethanimidamide Chemical compound CC(C)S(=O)(=O)CC(N)=NO LNOPIUAQISRISI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UZZYXUGECOQHPU-UHFFFAOYSA-M n-octyl sulfate Chemical compound CCCCCCCCOS([O-])(=O)=O UZZYXUGECOQHPU-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 229940067739 octyl sulfate Drugs 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 1
- JCGNDDUYTRNOFT-UHFFFAOYSA-N oxolane-2,4-dione Chemical compound O=C1COC(=O)C1 JCGNDDUYTRNOFT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003002 pH adjusting agent Substances 0.000 description 1
- 238000010979 pH adjustment Methods 0.000 description 1
- 239000006072 paste Substances 0.000 description 1
- RGSFGYAAUTVSQA-UHFFFAOYSA-N pentamethylene Natural products C1CCCC1 RGSFGYAAUTVSQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002304 perfume Substances 0.000 description 1
- 229940116254 phosphonic acid Drugs 0.000 description 1
- PTMHPRAIXMAOOB-UHFFFAOYSA-N phosphoramidic acid Chemical class NP(O)(O)=O PTMHPRAIXMAOOB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 229920000075 poly(4-vinylpyridine) Polymers 0.000 description 1
- 238000002264 polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 229920005646 polycarboxylate Polymers 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 description 1
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 description 1
- 239000001205 polyphosphate Substances 0.000 description 1
- 235000011176 polyphosphates Nutrition 0.000 description 1
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 150000003138 primary alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 108010029020 prolylglycine Proteins 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ULWHHBHJGPPBCO-UHFFFAOYSA-N propane-1,1-diol Chemical compound CCC(O)O ULWHHBHJGPPBCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 239000011435 rock Substances 0.000 description 1
- 102200046954 rs104894015 Human genes 0.000 description 1
- 102220219773 rs1060500176 Human genes 0.000 description 1
- 102200109815 rs121909519 Human genes 0.000 description 1
- 102220289524 rs1250849257 Human genes 0.000 description 1
- 102200126172 rs1350566881 Human genes 0.000 description 1
- 102220126479 rs145164937 Human genes 0.000 description 1
- 102220005153 rs33922018 Human genes 0.000 description 1
- 102200098675 rs72549322 Human genes 0.000 description 1
- 102220057677 rs730881845 Human genes 0.000 description 1
- 102220310433 rs754214510 Human genes 0.000 description 1
- 102220343127 rs778638155 Human genes 0.000 description 1
- 102200093149 rs77938727 Human genes 0.000 description 1
- 102220075485 rs796052363 Human genes 0.000 description 1
- 102220021967 rs80357384 Human genes 0.000 description 1
- 102200005670 rs886039765 Human genes 0.000 description 1
- 229940085605 saccharin sodium Drugs 0.000 description 1
- 125000003607 serino group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C(O[H])([H])[H] 0.000 description 1
- 108010071207 serylmethionine Proteins 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 239000000344 soap Substances 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 229940079842 sodium cumenesulfonate Drugs 0.000 description 1
- DZCAZXAJPZCSCU-UHFFFAOYSA-K sodium nitrilotriacetate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CN(CC([O-])=O)CC([O-])=O DZCAZXAJPZCSCU-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000004328 sodium tetraborate Substances 0.000 description 1
- 235000010339 sodium tetraborate Nutrition 0.000 description 1
- QEKATQBVVAZOAY-UHFFFAOYSA-M sodium;4-propan-2-ylbenzenesulfonate Chemical compound [Na+].CC(C)C1=CC=C(S([O-])(=O)=O)C=C1 QEKATQBVVAZOAY-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- MWNQXXOSWHCCOZ-UHFFFAOYSA-L sodium;oxido carbonate Chemical compound [Na+].[O-]OC([O-])=O MWNQXXOSWHCCOZ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 230000007928 solubilization Effects 0.000 description 1
- 238000005063 solubilization Methods 0.000 description 1
- 239000001384 succinic acid Substances 0.000 description 1
- UZZYXUGECOQHPU-UHFFFAOYSA-N sulfuric acid monooctyl ester Natural products CCCCCCCCOS(O)(=O)=O UZZYXUGECOQHPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910021653 sulphate ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- FAGUFWYHJQFNRV-UHFFFAOYSA-N tetraethylenepentamine Chemical class NCCNCCNCCNCCN FAGUFWYHJQFNRV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000004685 tetrahydrates Chemical class 0.000 description 1
- 108010061238 threonyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 235000010215 titanium dioxide Nutrition 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 1
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K trisodium citrate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229940038773 trisodium citrate Drugs 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 108010020532 tyrosyl-proline Proteins 0.000 description 1
- 108010003137 tyrosyltyrosine Proteins 0.000 description 1
- 125000000391 vinyl group Chemical group [H]C([*])=C([H])[H] 0.000 description 1
- 229920002554 vinyl polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
- C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
- C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
- C11D3/16—Organic compounds
- C11D3/38—Products with no well-defined composition, e.g. natural products
- C11D3/386—Preparations containing enzymes, e.g. protease or amylase
- C11D3/38609—Protease or amylase in solid compositions only
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/64—Proteins; Peptides; Derivatives or degradation products thereof
- A61K8/66—Enzymes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q11/00—Preparations for care of the teeth, of the oral cavity or of dentures; Dentifrices, e.g. toothpastes; Mouth rinses
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
- C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
- C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
- C11D3/16—Organic compounds
- C11D3/38—Products with no well-defined composition, e.g. natural products
- C11D3/386—Preparations containing enzymes, e.g. protease or amylase
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
- C12N9/52—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from bacteria or Archaea
- C12N9/54—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from bacteria or Archaea bacteria being Bacillus
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Oral & Maxillofacial Surgery (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Birds (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Detergent Compositions (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
A találmány különféle tisztítószerekben felhasználható új enzimvariánsokra és az új enzimvariánsokat kódoló génekre vonatkozik.
A természetes előfordulású proteinek legnagyobb csoportját az enzimek alkotják. Az enzimek egyes osztályai eltérő jellegű kémiai reakciókat katalizálnak (azaz saját fogyásuk nélkül alkalmasak az adott reakciók gyorsítására). Az enzimek egyik osztályába a proteázokként ismert enzimek tartoznak, amelyekről köztudott, hogy képesek más proteineket hidrolizálni. A hidrolízisben egy adott vegyület két vagy több kisebb vegyületre bomlik, amelynek során a felhasított kémiai kötés egyik oldala egy vízmolekulának a hidrogénjét, másik oldala pedig a vízmolekula hidroxilcsoportját veszi fel. A mosószer készítményekbe adalékanyagként beépített, természetes előfordulású vagy géntechnikai módszerekkel előállított proteázok alkalmazásával már a korábbiakban is felhasználást nyert a proteinek hidrolizálhatósága. A ruházaton előforduló szennyeződések közül igen sok protein jellegű anyag, így a széles spektrumú proteázok rendkívül nagy mértékben képesek elősegíteni az ilyen szennyezőanyagok eltávolítását .
Sajnálatos módon ezeknek a proteineknek a természetes, bakteriális környezetben tapasztalt hatékonysága gyakran nem reprodukálható a természetestől eltérő mosási körülmények között. A természetes környezettől eltérő körülmények közötti felhasználás szempontjából az enzim proteáz jellemzői, például a hőstabilitás, a pH-stabilitás, az oxidatív stabilitás és a szubsztrátspecifitás nem szükségszerűen optimálisak.
• · · · ·· ·· «· • ······ • · · · · ··· ··· • · Λ « · • · · · · ·>· ·
- 3 A proteáz aminosav-szekvenciája határozza meg a proteáz jellemzőit. A proteáz aminosav-szekvenciájának a változása (a változásnak az aminosav-szekvenciában lévő helyétől, jellegétől és/vagy kiterjedésétől függően) különböző mértékben megváltoztathatja az enzim jellemzőit, sőt akár inaktiválhatja az enzimet. A proteáz mosási körülmények közötti hatékonyságának fokozása céljából számos próbálkozás történt már annak érdekében, hogy a proteázok vad típusú aminosav-szekvenciájának megváltoztatásával javítsák a proteáz tulajdonságait. A probléma ilyen jellegű megoldására tett kísérletek között szerepelt az aminosav-szekvenciának a meglehetősen eltérő körülmények közötti hőstabilitás és oxidációs stabilitás javítása érdekében történő megváltoztatása.
A technika állásában ismertetett különböző megoldások ellenére állandó igény van a különféle felületek tisztítására felhasználható új, hatékony proteázvariánsok iránt.
A jelen találmány egyik tárgya olyan szubtilizin enzimvariánsokra vonatkozik, amelyek a vad típusú enzimnél jobb hidrolitikus eredményekkel rendelkezik.
Ugyancsak a jelen találmány tárgyát képezik az ilyen szubtilizin enzimvariánsokat tartalmazó tisztítókészítmények.
A találmány a vad típusú szubtilizin BPN' aminosav-szekvenciához képest módosított aminosav-szekvenciával rendelkező olyan szubtilizin BPN' variánsokra vonatkozik, ahol a vad típusú aminosav-szekvencia egy első hurokrégiót, egy második hurokrégiót, egy harmadik hurokrégiót, egy negyedik hurokrégiót és egy ötödik hurokrégiót tartalmaz, és a módosított aminosav-szekvencia a hu• · · · · · • »····* ··· · · ··· ··· • · · · · itt ·· ·· ·
- 4 rokrégiók közül egyben vagy többen, specifikusan azonosított helyeken más aminosavakat tartalmaz, mint a vad típusú szubtilizin
BPN' , amelynek eredményeként a szubtilizin BPN' variáns a vad típusú szubtilizin BPN'-hez képest kisebb mértékben adszorbeálódik egy oldhatatlan szubsztráthoz, illetve fokozottan hidrolizál egy oldhatatlan szubsztrátot. A találmány tárgyát képezik az ilyen szubtilizin BPN' variánsokat kódoló DNS-szekvenciák is. Ugyancsak a találmány részét képezik az ilyen szubtilizin BPN' variánsokat tartalmazó, különféle felületek megtisztítására szolgáló készítmények is.
I. Szubtilizin variánsok
A találmány olyan szubtilizin enzimekre, különösen szubtilizin BPN' enzimekre vonatkozik, amelyeket az enzimet kódoló különféle nukleotidszekvenciák mutációja útján módosítottunk, és így megváltoztattuk az enzimek aminosav-szekvenciáit. A találmány szerinti módosított szubtilizin enzimek (a továbbiakban: szubtilizin BPN' variánsok) a vad típusú szubtilizinhez képest kisebb mértékben adszorbeálódnak egy oldhatatlan szubsz-tráthoz, illetve fokozottan hidrolizálnak egy oldhatatlan szubsztrátot. A találmány magában foglalja az ilyen szubtilizin BPN' variánsokat kódoló mutáns géneket is.
A találmány szerinti szubtilizin enzimek a proteázokként ismert enzimek osztályába tartoznak. A proteázok a peptidkötések hasítására szolgáló katalizátorok. A proteázok egyik típusát a szerin proteáz alkotja. A szerin proteázt megkülönböztető jellemzője az, hogy az aktív helynél egy esszenciális szerin-csoport van jelen.
- 5 • · · · · · • ······ ··· « · ··· · · · • « · * · • a · · · «φ ·
Alaposan alátámasztott az a megfigyelés, amely szerint az oldható szubsztrátok enzimatikus hidrolízisének sebessége az enzim koncentrációjának emelésével arányosan nő. Ennek alapján feltételezhető volna, hogy a felületileg kötött, például a számos tisztítási felhasználás esetén számba jövő szubsztrátok esetén a felületi koncentráció fokozásával növekedne a hidrolízis sebessége. Bizonyos esetekben ez igaz is [Brode, P. F. III and D. S. Rauch, Langmuir, 8y 1325-1329 (1992)]. Az enzim felületi koncentrációjának változtatásakor oldhatatlan szubsztrátok esetén lineáris összefüggést állapítottak meg a hidrolízis sebessége és a felületi koncentráció között [Rubingh, D. N. and M. D. Bauer, Polymer Solutions, Blends and Interfaces, ed. I. Noda and D. N. Rubingh, Elsevier, 464 (1992)]. Timikor azonban ezt az alapelvet megkíséreltük alkalmazni az olyan variáns proteázok vizsgálata során, amelyek jobb tisztító hatást nyújtanak, meglepő módon nem tapasztaltuk azt, hogy a jobban adszorbeálódó enzimek jobb tisztító hatást nyújtanának. Tény, hogy számunkra is meglepő módon a korábbi megfigyelésekkel ellentétes eredményre jutottunk: egy enzim szubsztráthoz történő adszorpciójának csökkenése a szubsztrát fokozott hidrolízisét eredményezte (azaz jobb tisztító hatáshoz vezetett).
Anélkül, hogy bármilyen elméleti magyarázathoz kötnénk magunkat, úgy véljük, hogy amikor az egyik variánst egy másikhoz hasonlítjuk, a jobb hatás annak az eredménye, hogy a kevésbé adszorbeálódó enzimek kötődése is gyengébb, így lényegesen mobilisabbak azon a felületen, amelyről az oldhatatlan protein szubsztrátot el kívánjuk távolítani. Összehasonlítható enzimoldat···· · · · · ·· • ····«* ··· · · · · · ··· • · · β · • «♦ · · *·» ·
- β koncentrációk esetén ez a fokozott mobilitás nagyobb előnyöket biztosít, mint amelyek akkor érhetők el, ha az enzimet nagyobb koncentrációban juttatjuk a felületre.
Az alábbiakban ismertetett mutációk azt célozzák, hogy megváltoztassuk (azaz csökkentsük) az enzimnek a felületileg kötött szennyezőanyagokhoz történő adszorpcióját. A szubtilizin BPN'ben bizonyos aminosavak külső hurkokat képeznek az enzimmolekulán. Ezeket a hurkokat a leírásban első, második, harmadik, negyedik és ötödik hurokrégióként hivatkozzuk. Az 59-66. pozíciók alkotják az első hurokrégiót; a 95-107. pozíciók képezik a második hurokrégiót; a harmadik hurokrégiót a 126-133. pozíciók hozzák létre; a 154-167. pozíciók alkotják a negyedik hurokrégiót; a 187-191. pozíciók képezik az ötödik hurokrégiót; és a hatodik hurokrégiót a 199-220. pozíciók hozzák létre [a pozíciók számozása megegyezik a vad típusú szubtilizin BPN' aminosav-szekvenciájában (azaz az 1. számú szekvenciában) alkalmazott számozással].
Véleményünk szerint ezek a hurokrégiók szignifikáns szerepet játszanak az enzimmolekulának egy felületileg kötött pepiidhez történő adszorpciójában, és ily módon a hurokrégiók közül egyben vagy többen lévő specifikus mutációk szignifikáns hatást gyakorolnak az adszorpcióra. Anélkül, hogy bármilyen elméleti magyarázathoz kötnénk magunkat, úgy véljük, hogy a hurokrégiók legalább két ok miatt igen lényegesek a szubtilizin BPN' molekula adszorpciójának szempontjából. 1. A hurokrégiókat alkotó aminosavak szoros kapcsolatba kerülhetnek az olyan felületekkel, amelyekhez a molekula hozzáfér. 2. A hurokrégióknak a szubtili- 7 zin BPN' molekula aktív helyéhez és kötőzsákjához viszonyított közelsége révén a hurokrégiók szerepet játszanak az enzimnek a felületileg kötött szubsztrátokhoz (peptid/protein szennyeződésekhez) történő katalitikusán produktív adszorpciójában.
A leírásban alkalmazott variáns kifejezés egy olyan enzimet jelent, amely a vad típusétól eltérő aminosav-szekvenciával rendelkezik.
A leírásban alkalmazott mutáns szubtilizin BPN' DNS--szekvencia kifejezés egy szubtilizin BPN' variánst kódoló DNS-szekvenciára vonatkozik.
A leírásban alkalmazott vad típusú szubtilizin BPN' kifejezés egy olyan enzimet jelent, amely az 1. számú szekvenciával írható le. A szubtilizin BPN' aminosav-szekvenciájának leírása megtalálható továbbá következő helyen: Wells, J. A., E. Ferrari,
D. J. Henner, D. A. Esteli and Ε. Y. Chen, Nucleic Acids Research,
Vol. II, 7911-7925 (1983).
A leírásban alkalmazott szubtilizin BPN' vad típusú aminosav-szekvencia kifejezés magában foglalja az 1. számú szekvenciát, valamint az olyan 1. számú szekvenciát, amely a következő pozíciókétól eltérő helyeken vannak módosítva: 59-66, 95-107,
126-133, 154-167, 187-191 és 199-220.
A leírásban alkalmazott hidrofilebb aminosav kifejezés az olyan aminosavakra vonatkozik, amelyek nagyobb hidrofilitással rendelkeznek, mint egy adott, az alábbi hidrofilitási táblázatban megadott aminosav. Az alábbi hidrofilitási táblázat (1.
táblázat) a növekvő hidrofilitás sorrendjében sorolja fel az aminosavakat [lásd: Hopp, T. P. and Woods, K. R., Proceedings of ··· · · ·* · ··« ··· ·· ·· ·
- 8 the National Academy of Science USA, 78, 3824-3828 (1981) ] .
1. táblázat
Aminosav Hidrofilitási érték
| Trp | -3,4 |
| Phe | -2,5 |
| Tyr | -2, 3 |
| Leu, Ile | 1,8 |
| Val | -1,5 |
| Met | -1,3 |
| Cys | -1,0 |
| Ala, His | -0, 5 |
| Thr | -0,4 |
| Pro, Gly | -0,0 |
| Gin, Asn | 0,2 |
| Ser | 0,3 |
| Arg+, Lys+, Glu-, Asp- | 3,0 |
Az 1. táblázat azt is jelzi, hogy mely aminosavak hordoznak töltést (ez a jellemző körülbelül 8-9-es pH-értéken alapul). Pozitív töltésű aminosav az Arg és a Lys, negatív töltésű aminosav a Glu és az Asp, míg a további aminosavak semlegesek. Az egyik előnyös találmány szerinti megoldásban a helyettesítő aminosav semleges vagy negatív töltésű, még előnyösebben negatív töltésű (azaz Glu vagy Asp).
Ennek megfelelően az az állítás, miszerint a Gln-t egy azonos vagy nagyobb hidrofilitású, semleges vagy negatív töltésű • ··*··« • · · · · · · · · · · « « · · · • · · ·· ·· ·
- 9 aminosavval helyettesítjük, azt jelenti, hogy a Gln-t (a Glnnal azonos hidrofilitású) Asn-nal vagy (a Gln-nál nagyobb hidrofilitású) Ser-nel, Glu-val vagy Asp-val helyettesítjük; ezek mindegyike semleges vagy negatív töltésű, valamint a Gln-nál nagyobb hidrofilitású. Hasonlóképpen az az állítás, amelynek értelmében a Pro-t egy nagyobb hidrofilitású, semleges vagy negatív töltésű aminosavval helyettesítjük, azt jelenti, hogy a
Pro-t Gln-nal, Asn-nal, Ser-nel, Glu-val vagy Asp-val helyettesítjük .
Az egyik találmány szerinti megoldás értelmében a szubtilizin BPN' variáns a szubtilizin BPN' vad típusú aminosav-szekvenciának egy olyan módosított aminosav-szekvenciájával rendelkezik, ahol a módosított aminosav-szekvencia az első, második, harmadik, negyedik és ötödik hurokrégiók közül egyben vagy többen, egy vagy több pozícióban olyan helyettesítést tartalmaz, amelynek eredményeként a szubtilizin BPN' variáns a vad típusú szubtilizin BPN'-hez képest kisebb mértékben adszorbeálódik egy oldhatatlan szubsztráthoz, illetve fokozottan hidrolizál egy oldhatatlan szubsztrátot.
Egy másik találmány szerinti megoldás értelmében a szubtilizin BPN' variáns továbbá a hatodik hurokrégióban is tartalmaz egy vagy több helyettesítést.
Egy előnyös találmány szerinti megoldás értelmében az egy vagy több hurokrégió egy vagy több pozíciójában lévő helyettesítő aminosav az 1. táblázat alapján semleges vagy negatív töltésű, valamint azonos vagy nagyobb hidrofilitású, előnyösen nagyobb hidrofilitású, mint a vad típusú szubtilizin BPN' adott
- 10 helyén lévő aminosav.
A. Helyettesítések az első hurokrégióban
Amennyiben az első hurokrégióban történik helyettesítés, a helyettesítés a következő pozíciók közül egyben vagy többen fordul elő: 59, 60, 61, 62, 63, 65 vagy 66.
| Ha a 59 | pozícióban | történik | helyettesítés, | a | helyettesítő |
| aminosav Asn, | Asp, Glu vagy Ser. | ||||
| Ha a 60 | pozícióban | történik | helyettesítés, | a | helyettesítő |
| aminosav Glu. | |||||
| Ha a 61 | pozícióban | történik | helyettesítés, | a | helyettesítő |
| aminosav Asp, | Gin, Glu vagy Ser. | ||||
| Ha a 62 | pozícióban | történik | helyettesítés, | a | helyettesítő |
| aminosav Asp, | Gin, Glu vagy Ser. | ||||
| Ha a 63 | pozícióban | történik | helyettesítés, | a | helyettesítő |
| aminosav Asp | vagy Glu. | ||||
| Ha a 65 | pozícióban | történik | helyettesítés, | a | helyettesítő |
| aminosav Asn, | Asp, Gin, Glu, Pro vagy Ser. | ||||
| Ha a 66 | pozícióban | történik | helyettesítés, | a | helyettesítő |
| aminosav Asn, | Asp, Gin, Glu, Gly, | Pro vagy Ser. |
B. Helyettesítések a második hurokrégióban
Amennyiben a második hurokrégióban történik helyettesítés, a helyettesítés a következő pozíciók közül egyben vagy többen fordul elő: 95, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105,
106 vagy 107.
Ha a 95 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Alá, Asn, Asp, Cys, Gin, Glu, Gly, His, Met, Pro, Ser vagy Thr.
- 11 ···· · · · · ·· • ······ ··· · · ··· ··· « « t # * ·»· ·· ·· ·
Ha aminosav
Ser, Thr
Ha aminosav
Ha aminosav
Ha aminosav
Ha aminosav
Ha aminosav
Ha aminosav
Ha aminosav
Ha aminosav
Pro, Ser
Ha aminosav
Ha aminosav
Phe, Pro
Ha
| i 96 | pozícióban | történik | helyettesítés, | a | helyettesítő |
| Alá, | Asn, Asp, ( | lys, Gin, | Glu, Gly, His, | Ile, Met, Pro, | |
| vagy | Val. | ||||
| i 97 | pozícióban | történik | helyettesítés, | a | helyettesítő |
| Asn, | Asp, Gin, Glu, Pro vagy Ser. | ||||
| a 98 | pozícióban | történik | helyettesítés, | a | helyettesítő |
| Asn, | Asp, Gin, Glu, Gly, | His, Pro, Ser vagy | Thr. | ||
| i 99 | pozícióban | történik | helyettesítés, | a | helyettesítő |
| Glu. | |||||
| i 100 | pozícióban | történik | helyettesítés, | a | helyettesítő |
| Asn, | Asp, Gin, Glu, Pro vagy Ser. | ||||
| i 101 | pozícióban | történik | helyettesítés, | a | helyettesítő |
Asp vagy Glu.
| i 102 | pozícióban | történik | helyettesítés, | a | helyettesítő |
| Asn, | Asp, Gin, Glu, Pro vagy Ser. | ||||
| i 103 | pozícióban | történik | helyettesítés, | a | helyettesítő |
| Asn, | Asp, Glu vagy Ser. | ||||
| ι 104 | pozícióban | történik | helyettesítés, | a | helyettesítő |
| Alá, | Asn, Asp, Cys, Gin, | Glu, Gly, His, | Ile, Leu, Met, | ||
| Thr | vagy Val. | ||||
| ι 105 | pozícióban | történik | helyettesítés, | a | helyettesítő |
Asp vagy Glu.
| l 106 | pozícióban történik | helyettesítés, | a helyettesítő |
| Alá, | Asn, Asp, Cys, Gin, | Glu, Gly, His, | Ile, Leu, Met, |
| Ser, | Thr, Tyr vagy Val. | ||
| . 107 | pozícióban történik | helyettesítés, | a helyettesítő |
aminosav Alá, Asn, Asp, Cys, Gin, Glu, Gly, His, Leu, Met, Pro, ···· ·· ·· · · • ·····«
- 12 Ser, Thr vagy Val.
C. Helyettesítések a harmadik hurokrégióban
Amennyiben a harmadik hurokrégióban történik helyettesítés, a helyettesítés a következő pozíciók közül egyben vagy többen fordul elő: 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132 vagy 133.
Ha a 126 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Alá, Asn, Asp, Cys, Gin, Glu, Gly, His, Ile, Met, Pro,
Ser, Thr vagy Val.
Ha a 127 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Asn, Asp, Gin, Glu, Pro vagy Ser.
Ha a 128 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Asn, Asp, Gin, Glu, Gly vagy Ser.
Ha a 129 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Asn, Asp, Gin, Glu, Gly vagy Ser.
Ha a 130 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Asp vagy Glu.
Ha a 131 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Asn, Asp, Gin, Glu, Gly vagy Ser.
Ha a 132 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Asp vagy Glu.
Ha a 133 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Asn, Asp, Gin, Glu, Gly, His, Pro, Ser vagy Thr.
D. Helyettesítések a negyedik hurokrégióban
Amennyiben a negyedik hurokrégióban történik helyettesítés, a helyettesítés a következő pozíciók közül egyben vagy többen fordul elő: 154, 155, 156, 157, 158, 159, 160, 161, 162, 163,
164, 165, 166 vagy 167.
···· ·· · · ·· • ··♦··♦ ··· · · ··· ··· • « · « · ··« · · * · ·
| Ha a 154 | pozícióban történik | helyettesítés, | a | helyettesítő |
| aminosav Asn, | Asp, Gin, Glu, Pro vagy Ser. | |||
| Ha a 155 | pozícióban történik | helyettesítés, | a | helyettesítő |
| aminosav Asp, | Gin, Glu vagy Ser. | |||
| Ha a 156 | pozícióban történik | helyettesítés, | a | helyettesítő |
| aminosav Asp. | ||||
| Ha a 157 | pozícióban történik | helyettesítés, | a | helyettesítő |
| aminosav Asn, | Asp, Gin, Glu, Pro vagy Ser. | |||
| Ha a 158 | pozícióban történik | helyettesítés, | a | helyettesítő |
| aminosav Asn, | Asp, Gin, Glu, Gly, | Pro vagy Ser. | ||
| Ha a 159 | pozícióban történik | helyettesítés, | a | helyettesítő |
aminosav Asp vagy Glu.
| Ha a 160 | pozícióban | történik | helyettesítés, | a | helyettesítő |
| aminosav Asn, | Asp, Gin, Glu, Pro vagy Ser. | ||||
| Ha a 161 | pozícióban | történik | helyettesítés, | a | helyettesítő |
| aminosav Asp vagy Glu. | |||||
| Ha a 162 | pozícióban | történik | helyettesítés, | a | helyettesítő |
aminosav Asp vagy Glu.
| Ha a 163 | pozícióban | történik | helyettesítés, | a | helyettesítő |
| aminosav Asp vagy Glu. | |||||
| Ha a 164 | pozícióban | történik | helyettesítés, | a | helyettesítő |
| aminosav Asn, | Asp, Gin, Glu, Gly, | Pro vagy Ser. | |||
| Ha a 165 | pozícióban | történik | helyettesítés, | a | helyettesítő |
| aminosav Ala, | Asn, Asp, | Cys, Gin, | Glu, Gly, His, | Met, Pro, Ser | |
| vagy Thr. | |||||
| Ha a 166 | pozícióban | történik | helyettesítés, | a | helyettesítő |
aminosav Asn, Asp, Gin, Glu, Pro vagy Ser.
···· ·· ·· ·· • ·····♦ ··· · · *·· ··· « · · · · •·· ·· ♦· »
- 14 Ha a 167 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Ala, Asn, Asp, Cys, Gin, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Met,
Pro, Ser, Thr vagy Val.
E. Helyettesítések az ötödik hurokrégióban
Amennyiben az ötödik hurokrégióban történik helyettesítés, a helyettesítés a következő pozíciók közül egyben vagy többen fordul elő: 187, 188, 189, 190 vagy 191.
Ha a 187 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Asn, Asp, Gin, Glu, Gly, His, Pro, Ser and Thr.
Ha a 188 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Asp vagy Glu.
Ha a 189 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Ala, Asn, Asp, Cys, Gin, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Met,
Pro, Ser, Thr, Tyr vagy Val.
Ha a 190 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Asp vagy Glu.
Ha a 191 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Asp vagy Glu.
F. Helyettesítések a hatodik hurokrégióban
Amennyiben a hatodik hurokrégióban történik helyettesítés, a helyettesítés a következő pozíciók közül egyben vagy többen fordul elő: 199, 200, 201, 202, 203, 204, 205, 206, 207, 208,
209, 210, 211, 212, 213, 214, 215, 216, 217, 218, 219 vagy 220.
Ha a 199 pozícióban történik helyettesítés, a 199 pozícióban lévő helyettesítő aminosav Cys, Ala, His, Thr, Pro, Gly,
Gin, Asn, Ser, Asp vagy Glu.
Ha a 200 pozícióban történik helyettesítés, a 200 pozíció• · · • ·
- 15 bán lévő helyettesítő aminosav His, Thr, Pro, Gly, Gin, Asn,
Ser, Asp vagy Glu.
Ha a 201 pozícióban történik helyettesítés, a 201 pozícióban lévő helyettesítő aminosav Gly, Gin, Asn, Ser, Asp vagy Glu.
Ha a 202 pozícióban történik helyettesítés, a 202 pozícióban lévő helyettesítő aminosav Pro, Gin, Asn, Ser, Asp vagy Glu.
Ha a 203 pozícióban történik helyettesítés, a 203 pozícióban lévő helyettesítő aminosav Met, Cys, Alá, His, Thr, Pro,
Gly, Gin, Asn, Ser, Asp vagy Glu.
Ha a 204 pozícióban történik helyettesítés, a 204 pozícióban lévő helyettesítő aminosav Asp, vagy Glu.
Ha a 205 pozícióban történik helyettesítés, a 205 pozícióban lévő helyettesítő aminosav Leu, Val, Met, Cys, Alá, His,
Thr, Pro, Gly, Gin, Asn, Ser, Asp vagy Glu.
Ha a 206 pozícióban történik helyettesítés, a 206 pozícióban lévő helyettesítő aminosav Pro, Asn, Ser, Asp, vagy Glu.
Ha a 207 pozícióban történik helyettesítés, a 207 pozícióban lévő helyettesítő aminosav Asp vagy Glu.
Ha a 208 pozícióban történik helyettesítés, a 208 pozícióban lévő helyettesítő aminosav Pro, Gly, Gin, Asn, Ser, Asp vagy
Glu.
Ha a 209 pozícióban történik helyettesítés, a 209 pozícióban lévő helyettesítő aminosav lle, Val, Met, Cys, Alá, His,
Thr, Pro, Gly, Gin, Asn, Ser, Asp vagy Glu.
Ha a 210 pozícióban történik helyettesítés, a 210 pozícióban lévő helyettesítő aminosav Alá, Gly, Gin, Asn, Ser, Asp vagy
Glu.
- 16 Ha a 211 pozícióban történik helyettesítés, a 211 pozícióban lévő helyettesítő aminosav Alá, Pro, Gin, Asn, Ser, Asp vagy
Glu.
Ha a 212 pozícióban történik helyettesítés, a 212 pozícióban lévő helyettesítő aminosav Gin, Ser, Asp vagy Glu.
Ha a 213 pozícióban történik helyettesítés, a 213 pozícióban lévő helyettesítő aminosav Trp, Phe, Tyr, Leu, Ile, Val,
Met, Cys, Alá, His, Thr, Pro, Gly, Gin, Asn, Ser, Asp vagy Glu.
Ha a 214 pozícióban történik helyettesítés, a 214 pozícióban lévő helyettesítő aminosav Phe, Leu, Ile, Val, Met, Cys,
Alá, His, Thr, Pro, Gly, Gin, Asn, Ser, Asp vagy Glu.
Ha a 215 pozícióban történik helyettesítés, a 215 pozícióban lévő helyettesítő aminosav Thr, Pro, Gin, Asn, Ser, Asp vagy
Glu.
Ha a 216 pozícióban történik helyettesítés, a 216 pozícióban lévő helyettesítő aminosav His, Thr, Pro, Gly, Gin, Asn,
Ser, Asp vagy Glu.
Ha a 217 pozícióban történik helyettesítés, a 217 pozícióban lévő helyettesítő aminosav Leu, Ile, Val, Met, Cys, Alá,
His, Thr, Pro, Gly, Gin, Asn, Ser, Asp vagy Glu.
Ha a 218 pozícióban történik helyettesítés, a 218 pozícióban lévő helyettesítő aminosav Gin, Ser, Asp vagy Glu.
Ha a 219 pozícióban történik helyettesítés, a 219 pozícióban lévő helyettesítő aminosav Pro, Gin, Asn, Ser, Asp vagy Glu.
Ha a 220 pozícióban történik helyettesítés, a 220 pozícióban lévő helyettesítő aminosav Pro, Gly, Gin, Asn, Ser Asp vagy
Glu
9 99 • ······ • 9 9 9 9 ··· ·* · • · · · * ··· ·· ♦· ·
- 17 G. Az enzimvariánsok előállítása
1. példa
Mutáns BPN' DNS-szekvenciák
Egy, a vad típusú szubtilizin BPN' gént [Mitchinson, C. and
J. A. Wells, Biochemistry, 28, 4807-4815 (1989)] tartalmazó pSS-5 fágmidot CJ236 Escherichia coli ung-törzsbe transzformálunk, és a VCSM13 segédfág alkalmazásával egyszálú, uraciltartalmú DNS templátot hozunk létre [Kunkel, T. A., J. D. Roberts and R. A.
Zakuor, Methods in Enzymology, 154, 367-382 (1987); ennek módosítása: Yuckenberg, P. D., F. Witney, J. Geisselsoder and J.
McClary, Directed Mutagenesis - A Practical Approach, ed. Μ. J.
McPherson, 27-48 (1991)]. A Zoller és Smith módszere [Zoller, Μ.
J., and M. Smith, Nucleic Acids Research, 10, 6487-6500, (1982] szerinti egyetlen primer helyre irányuló mutagenezis módosítást alkalmazzuk valamennyi mutáns előállítására [lényegében annak megfelelően, ahogyan azt Yuckenberg ismertette: Yuckenberg, P. D.,
F. Witney, J. Geisselsoder and J. McClary, Directed Mutagenesis - A
Practical Approach, ed. M. J. McPherson, 27-48 (1991)]. Egy Applied
Biosystem Inc. 380B DNS szintetizáló berendezés alkalmazásával oligonukleotidokat állítunk elő. A mutagenezis reakciótermékeket
MM294 Escherichia coli törzsbe (American Type Culture Collection
E. coli 33625) transzformáljuk. Valamennyi mutáns szerkezetét
DNS szekventálással igazoljuk, majd az izolált DNS-t a BG2036
Bacillus subtilis expresszáló törzsbe [Yang, Μ. Y., E. Ferrari and D. J. Henner, Journal of Bacteriology, 160, 15-21 (1984)] transzformáljuk. Néhány mutáns esetén egy, a megfelelő hurokban lévő kereteltolódásos stop kodon mutációt alkalmazunk az uracil • ·
- 18 ·-« · templát előállításához. A 217 pozícióban lévő megfelelő leolva-
| sási | keret | tárolásához és az | 59, 60 | , 61, 62, | 63, | 64, 65, 66; | 95, |
| 96, | 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, | 105, | 106, 107; | 126, | |||
| 127, | 128, | 129, 130, 131, 132, | 133; | 154, 155, | 156 | , 157, 158, | 159, |
| 160, | 161, | 162, 163, 164, 165, | 166, | 167; 187, | 188 | , 189, 190, | 191; |
| 199, | 200, | 201, 202, 203, 204, | 205, | 206, 207, | 208 | , 209, 210, | 211, |
| 212, | 213, | 214, 215, 216, 217 | , 218, | 219 és | 220 | pozíciókban | lévő |
random helyettesítések kódolásához oligonukleotidokat hozunk létre (az ezeknél a kodonoknál lévő mindhárom bázis esetén mind a négy nukleotid ekvimoláris és/vagy változó keverékei). A keretleolvasási stop és a funkcionális enzim termelése szempontjából korrekt mutációkat a kazeinemésztő képességük alapján azonosítjuk. A random helyettesítéseket DNS szekvenálással határozzuk meg.
2. példa
Fermentáció
Az adott szubtilizin mutánst tartalmazó Bacillus subtilis sejteket (BG2036) LB-glükóz leves egy liternyi tenyészetében közép-log fázisig növesztjük, majd 10 literes össztérfogatban egy
Biostat ED fermentorba (B. Braun Biotech, Inc., Allentown,
Pennsylvania) inokuláljuk. A fermentációs közeg élesztő extraktumot, keményítőt, habzásgátlót, puffereket és nyomokban ásványi anyagokat tartalmaz [lásd: Fermentation: A Practical Approach, Ed.
B. McNeil and L. M. Harvey (1990)]. A fermentáció ideje alatt a levest állandó 7,0-es pH-értéken tartjuk. A mutagenizált plazmid antibitikus szelekciójához klóramfenikolt adunk a rendszerhez. A • · · · · · · · • ······ ··· · · ·«· ««« • · « · « • · · ·· ·· ·
- 19 sejteket egy éjszakán keresztül 37 °C hőmérsékleten körülbelül 60-as A60q értékig növesztjük, majd learatjuk.
3. példa
Tisztítás
A tiszta enzim kinyerése érdekében a fermentlét a következő lépéseknek megfelelően kezeljük. A fermentlét centrifugálással megtisztítjuk a Bacillus subtilis sejtektől, majd — egy 100K szelekciós membránnal eltávolítva a finom részecskéket — derítjük. Ezt követően a keveréket egy 10K szelekciós membránon betöményítjük, az ionerősség csökkentése érdekében áramlásos dialízisnek vetjük alá, majd a pH értékét 0,025 M MES (2-morfolino-etánszulfonsav) puffer alkalmazásával 5,5-re állítjuk be. A további tisztításhoz az enzimet egy kationcserés kromatográfiás oszlopra vagy egy affinitás adszorciós kromatográfiás oszlopra visszük, majd az oszlopról egy nátrium-klorid vagy egy propilénglikol gradienssel eluáljuk [lásd: Scopes, R. K., Protein Purification Principles and Practice, Springer-Verlag, New York (1984)] .
A gradiens elúció során gyűjtött frakciók esetén az aktív enzim koncentrációjának meghatározásához a pNA módszert [DelMar,
E.G., C. Largman, J.W. Brodrick and M.C. Geokas, Anal. Biochem.,
99, 316-320 (1979)] alkalmazzuk. A vizsgálat az oldható szukcinil-alanil-alanil-prolil-fenilalanin-p-nitro-anilid (sAAPF-pNA) szintetikus szubsztrátnak az enzim által való hidrolízise során felszabaduló p-nitro-anilin képződési sebességét méri. A hidrolízis reakcióból származó sárga szín kialakulásának • ······ • ·· · · ·** ·«· • · * · · ··« ·· ·· *
- 20 sebességét 410 nm hullámhosszon mérjük egy spektrofotométeren;
ez az érték arányos az aktív enzim koncentrációjával. A teljes proteinkoncentráció meghatározásához ezenkívül 280 nm hullámhosszon is mérjük az abszorbanciát. Az aktív enzim/összes protein arány adja az enzimtisztaságot; ezt használjuk fel a törzsoldat számára összeöntendő frakciók azonosítására.
Annak érdekében, hogy elkerüljük az enzim tárolás közbeni autolízisét, azonos tömegű propilénglikolt adunk a kromatográfiás oszlopról nyert, összeöntött frakciókhoz. A tisztítási eljárás befejezésekor SDS-PAGE (dodecil-szulfát/poliakrilamid gélelektroforézis) alkalmazásával ellenőrizzük az enzim törzsoldat tisztaságát. Az abszolút enzimkoncentrációt egy aktív hely titrálási módszerrel határozzuk meg, amelynek során II-T típusú tripszin inhibitor/pulyka tojásfehérje rendszert (Sigma Chemical
Company, St. Louis, Missouri, USA) alkalmazunk. A mért konverziós tényezők megmutatják azokat az enzimmolekula különböző pozícióiban történt változásokat, amelyek a pNA oldható szubsztráttal szemben a vad típusénál nagyobb aktivitású enzimvariánst eredményezik.
A felhasználásra történő előkészítés során egy Sephadex-G25 (Pharmacia, Piscataway, New Jersey, USA) méretkizárásos oszlopon engedjük át az enzim törzsoldatot, és így eltávolítjuk a propilénglikolt, majd lecseréljük a puffért. A MES puffért
0,01 M kalcium-kloridot tartalmazó 0,1 M Tris [2-amino-2-(hidroxi-metil)-1,3-propándiol] pufferre cseréljük, majd a pH értékét hidrogén-kloriddal 8,6-re állítjuk be. Valamennyi kísérletet 25 °C hőmérsékleten termosztált Tris pufferben, 8,6-es pH-érték ttf ·· »* ** • ····«· •«· » · ··· «·· « · * · · ·«< « · · · ·
- 21 mellett hajtjuk végre.
H. Az enzimvariánsok jellemzése
4. példa
A felületmodell előállítása
Az sAAPF-pNA szubsztrát (Bachem, Inc., Torrance, Kalifornia, USA) kovalens kötéséhez hordozóként amino-propillal szabályozott pórusméretű üveget (CPG) (CPG Inc., Fairfield, New Jersey, USA) alkalmazunk. A reakciót dimetil-szulfoxidban hajtjuk végre. Kapcsolószerként l-etil-3-[3-(dimetil-amino)-propil]-karbodiimid—hidrokloridot (EDC) alkalmazunk. A reakció előrehaladását pNA vizsgálattal követjük nyomon. Miután a reakció teljessé vált, az oldószer feleslegét eltávolítjuk, majd a CPG:sAAPF-pNA-t dimetil-szulfoxiddal és kétszer desztillált vízzel mossuk. Ezt követően a terméket szárítószekrényben körülbelül 70°C hőmérsékleten, nitrogénáram alatt szárítjuk. Az immobilizált szubsztrát előállítását a Brode és Rauch által ismertetett eljárásnak megfelelően végezzük [Brode, P.F. III, and D.S. Rauch, Langmuir,
1325-1329 (1992)].
A CPG-nek 62 000 ± 7000 pNA molekula/pm2 értékű felülete van. A felszín nem változik a CPG Inc. által a kapott CPG-re megadott 50,0 m2/g értékhez képest. Ez arra utal, hogy az sAAPE-pNA-nak a CPG történő kötése során a 48,6 nm (486 angström) átlagos átmérőjű porózus szerkezet nem károsodik.
5. példa
A felületi hidrolízis vizsgálata
- 22 ···· »· «··
A CPG:sAAPF-pNA alkalmazásával egyetlen kísérletben mérhetjük egy enzimvariáns adszorpcióját és egy CPG-kötött peptid hidrolízisét. Egy Tris puffért és CPG:sAAPF-pNA-t tartalmazó, előzetesen gázmentesített lombikba bemérjük az enzimvariáns törzsoldatának kis mennyiségét. A lombikot egy csuklós mozgást végző rázógépen 90 percen keresztül rázatjuk, amelynek során a rázógépet különböző időközönként (például az adszorpciós hidrolízis kezdeti fázisaiban minden két percben, ezt követően húsz percenként, majd a kísérlet vége felé tíz percenként) megállítjuk. A CPG:sAAPF-pNA-t hagyjuk kiülepedni és az oldatból mintát veszünk. A kísérleti eljárást, valamint az adszorpció és a hidrolízis számításait a Brode által ismertetetteknek [Brode, P. F.
III and D. S. Rauch, Langmuir, !3, 1325-1329 (1992)] megfelelően hajtjuk végre.
Valamennyi enzimet megvizsgáljuk az autolízissel szembeni stabilitásuk szempontjából; az enzimek nem mutathatnak észrevehető autolitikus veszteséget a kísérlet időtartama alatt. Ennek megfelelően az enzimadszorpció meghatározható az oldat kiürülésének mérése útján. Az enzimvariáns kezdeti koncentrációja és az egyes időpontokban mért koncentrációja közötti különbség adja az adszorbeált enzimmennyiséget. A felületről lehidrolizált pNA mennyiségét úgy határozzuk meg, hogy megállapítjuk a minta egy részletének a 410 nm hullámhosszon mért abszorbanciáját. A hidrolizált pNA teljes mennyiségét úgy számoljuk ki, hogy összeadjuk a mintaként kivett mennyiséget és a lombikban visszamaradt mennyiséget. Ezt az értéket annak a pNA mennyiségnek a kivonásával korrigáljuk, amely a 8,6-es pH értékű Tris pufferben enzim ···· »· «·· • · · · · · ··· · · »·· • · · · · ·** *» ·· ♦
- 23 jelenléte nélkül hidrolizálódik. Ez az alaphidrolízis — az enzim hatékonyságától függően — a teljes hidrolízis 7-29 %-át jelenti.
6. példa
Az oldható szubsztrát kinetikai analízise
Az oldható sAAPF-pNA szubsztrát hidrolíziseinek sebességeit úgy határozzuk meg, hogy egy DU70 spektrofotométeren 410 nm hullámhosszon az idő függvényében mérjük az abszorbancia növekedését. A 6-10 nanomol/1 értékre beállított enzimkoncentrációt állandó értéken tartjuk, miközben a szubsztrát koncentrációját az egyes kinetikai meghatározások során 90-700 μΜ sAAPF-pNA értékek között változtatjuk. Egy 900 másodperces időintervallum minden egyes másodpercében mérjük az abszorbanciát, majd az adatokat felvisszük egy Lotus™ halmazlapra (Lotus Development Corporation, Cambridge, Massachusetts, USA) . A kinetikai paraméterek elemzését a standard Lineweaver—Burk-analízissel végezzük, amelyben a v0 érték megállapításához a kísérlet kezdeti részének (általában az első percnek) az adatait egy lineáris regressziós görbéhez illesztjük. A KM és kkat értékek meghatározásához a v0 és Sq adatokat grafikusan, a standard inverz módszernek megfelelően ábrázoljuk.
I. A szubtilizin BPN' variánsok példái
Az alábbi 2-25. táblázatban példaszerűen bemutatjuk azokat a találmány szerinti szubtilizin BPN' variánsokat, amelyeknek a felületileg kötött szubsztrátokhoz történő adszorpciója csökkentett mértékű, valamint amelyek a felületileg kötött szubsztrá24 tokát fokozottan hidrolizálják. A specifikus mutációk leírása során első helyen a vad típusban előforduló eredeti aminosavat, második helyen a pozíció számát, harmadik helyen pedig a helyettesítő aminosavat tüntetjük fel.
. táblázat
1. hurok - egyszeres mutációjú variánsok Gln59Asn Gln59Asp Gln59Glu Gln59Ser Asp60Glu AsnőlAsp AsnölGln AsnőlGlu Asn61Ser Asn62Asp Asn62Gln Asn62Glu Asn62Ser Ser63Asp Ser63Glu Gly65Asn Gly65Asp Gly65Gln Gly65Glu Gly65Pro Gly65Ser Thr66Asn Thr66Asp ThrőőGln Thr66Glu ThrőőGly ThrőőPro ThrőőSer
3. táblázat
1. hurok - kétszeres Gln59Ser + AspőOGlu + AsnőlGlu + Gln59Ser + AsnőlGln + AsnőlSer + Gln59Glu + AspőOGlu + mutációjú variánsok Asn62Glu AsnőlSer Asn62Ser Gly65Gln Gly65Asn Asn62Asp AsnőlGln Gly65Gln
Gln59Asp + Asn61Asp + Gln59Ser + Gln59Asn + Asn62Asp + Gln59Asn + AsnölSer + Gln59Ser + Asp60Glu + AsnölGlu + AspöOGlu + Asn62Gln + AsnölSer + AspöOGlu + Ser63Glu + AspöOGlu + Gln59Ser + Asn62Asp + AsnölGln + Gln59Asp + Ser63Asp + Ser63Glu + Asn62Glu + AsnölAsp + Gly65Pro + Gln59Ser + AspöOGlu + Ser63Asp + AsnölGln + Asn61Asp + Gln59Glu + Gln59Ser + Gln59Asp + Gln59Asn + Ser63Glu + AsnölSer + Asn62Ser +
Gly65Pro Gly65Asn Asn62Asp Gly65Gln ThrööGly Asn62Glu Ser63Glu AspöOGlu ThrööGln ThrööGly Asn62Gln Gly65Pro ThrööSer Gly65Pro Gly65Pro ThrööSer AsnölGlu Gly65Gln Ser63Asp Gly65Asn ThrööPro ThrööAsn Thr66Asn Gly65Ser ThrööSer Asn62Ser Gly65Ser Gly65Ser Ser63Glu Asn62Ser Gly65Pro Asn61Asp Asn62Ser GlyööSer ThrööSer Ser63Asp Gly65Pro
4. táblázat
1. hurok - háromszoros mutációjú variánsok
| Gln59Ser | + | Ser63Asp | + | Gly65Pro |
| Asn62Gln | + | Gly65Ser | + | Thr66Asp |
| Gln59Ser | + | AspöOGlu | + | Thr66Gln |
| Gln59Asn | + | Ser63Glu | + | Thr66Pro |
| AsnölSer | + | Gly65Asn | + | Thr66Glu |
| Ser63Glu | + | Gly65Ser | + | ThrööAsn |
| Asn62Asp | + | Gly65Ser | + | Thr66Gly |
| Gln59Ser | + | Asn62Asp | + | ThrööPro |
| Gln59Ser | + | Asp60Glu | + | AsnölGln |
| AsnölGln | + | Ser63Asp | + | Gly65Ser |
| Asn62Glu | + | Gly65Asn | + | ThrööGln |
• ·
Asp60Glu
Asn62Ser
Gln59Asp
Asn62Ser
Asn61Asp
Asp60Glu
AspöOGlu
AspőOGlu
Gln59Ser
Asn61Asp
Asn61Glu
Gln59Asp
Gln59Asp
Asn62Asp
Asn62Glu
Asn62Asp
Gln59Ser
Asn62Glu
AsnőlAsp
Gln59Glu
AspöOGlu
Asp60Glu
Gln59Ser + Gly65Asn + Ser63Asp + Asn62Gln + Ser63Glu + Asn62Ser + Asn61Gln + AsnőlGln + Gly65Pro + Asn61Glu + Asn62Asp + Asn62Glu + Asp60Glu + Asp60Glu + Ser63Asp + Ser63Glu + Ser63Glu + Asn62Asp + Ser63Asp + Asn62Asp + AspöOGlu + Asn62Glu + Asn61Glu + Asp60Glu + Thr66Ser + Thr66Gln + Gly65Pro + Thr66Gly + Gly65Asn + Asn62Ser + Gly65Ser + Thr66Asn + Asn62Asp + Gly65Pro + Thr66Gln + Thr66Gln + Thr66Pro + Gly65Asn + Gly65Asn + Gly65Gln + Ser63Glu + Gly65Ser + Ser63Glu + Asn61Glu + Ser63Asp + Ser63Glu + Asn62Glu
5. táblázat
1. hurok - négyszeres mutációjú variánsok
| Gln59Ser | + | AspöOGlu | + | Gly65Gln | + | Thr66Gln |
| Gln59Ser | + | Asn62Ser | + | Ser63Asp | + | Gly65Gln |
| Asp60Glu | + | Asn62Ser | + | Gly65Pro | + | Thr66Gln |
| Asn62Gln | + | Ser63Glu | + | Gly65Pro | + | Thr66Gln |
| Asn61Gln | + | Asn62Gln | + | Ser63Asp | + | Gly65Pro |
| Gln59Asn | + | AspöOGlu | + | AsnőlGln | + | Gly65Asn |
| Gln59Glu | + | Asn62Ser | + | Gly65Pro | + | Thr66Ser |
| Gln59Asn | + | Asn61Asp | + | Asn62Asp | + | Thr66Asn |
| Gln59Asp | + | Asp60Glu | + | Asn62Ser | + | Gly65Ser |
| Asn61Gln | + | Asn62Asp | + | Ser63Glu | + | Thr66Gln |
| Asp60Glu | + | Asn61Asp | + | Asn62Glu | + | Gly65Ser |
| Asn61Asp | + | Asn62Glu | + | Ser63Glu | + | Thr66Ser |
| Asn61Asp | + | Asn62Glu | + | Ser63Asp | + | Gly65Ser |
| Gln59Glu | + | Asp60Glu | + | Asn61Asp | + | Gly65Ser |
| Asp60Glu | + | Asn62Asp | + | Ser63Glu | + | Thr66Pro |
| AspöOGlu | + | Asn62Glu | + | Ser63Glu | + | Thr66Asn |
| AspőOGlu | + | Asn62Glu | + | Ser63Asp | + | Gly65Ser |
| Asp60Glu | + | Asn61Asp | + | Ser63Glu | + | Thr66Asn |
| Gln59Ser | + | Asp60Glu | + | Asn61Asp | + | Ser63Asp |
| Asp60Glu | + | Asn61Asp | + | Ser63Asp | + | Gly65Pro |
| Asp60Glu | + | Asn61Asp | + | Ser63Asp | + | Thr66Gly |
| Asp60Glu | + | Asn61Asp | + | Ser63Glu | + | Gly65Asn |
| Gln59Ser | + | Asp60Glu | + | Asn62Asp | + | Thr66Gly |
| Asp60Glu | + | Asn62Asp | + | Gly65Ser | + | Thr66Pro |
| AspőOGlu | + | Asn61Gln | + | Asn62Glu | + | Gly65Ser |
| Gln59Ser | + | Asp60Glu | + | Asn62Asp | + | Gly65Gln |
···· ·· · · ·· • ······ ··· · · · · · ··· • · « · · ··· ·· ·· ·
- 27 AspöOGlu + Asp60Glu + Gln59Ser + AspőOGlu + Gln59Asn + Asp60Glu +
AsnőlSer AsnőlSer Asp60Glu Ser63Glu Asp60Glu Ser63Glu + Asn62Gln + Ser63Asp + AsnőlGln + Gly65Ser + Ser63Asp + Gly65Pro + Ser63Glu + Thr66Pro + Ser63Glu + Thr66Asn + Gly65Gln + Thr66Ser
6. táblázat
2. hurok - egyszeres mutációjú variánsok Val95Ala Val95Asn Val95Asp Val95Cys Val95Gln Val95Glu Val95Gly Val95His Val95Met Val95Pro Val95Ser Val95Thr Leu96Ala Leu96Asn Leu96Asp Leu96Cys Leu96Gln Leu96Glu Leu96Gly Leu96His Leu96Ile Leu96Met Leu96Pro Leu96Ser Leu96Thr Leu96Val Gly97Asn Gly97Asp Gly97Gln Gly97Glu Gly97Pro Gly97Ser Ala98Asn Ala98Asp Ala98Gln Ala98Glu Ala98Gly Ala98His Ala98Pro Ala98Ser Ala98Thr Asp99Glu GlylOOAsn • · · · • ·
GlylOOAsp GlylOOGln GlylOOGlu GlylOOPro GlylOOSer SerlOlAsp SerlOlGlu Glyl02Asn Glyl02Asp GlylO2Gln GlylO2Glu Glyl02Pro GlylO2Ser GlnlO3Asn Glnl03Asp GlnlO3Glu Glnl03Ser TyrlO4Ala TyrlO4Asn TyrlO4Asp TyrlO4Cys TyrlO4Gln TyrlO4Glu TyrlO4Gly TyrlO4His TyrlO4Ile TyrlO4Leu TyrlO4Met Tyrl04Pro Tyrl04Ser TyrlO4Thr TyrlO4Val Seri05Asp Seri05Glu TrplOőAla TrplOőAsn TrplO6Asp Trpl0 6Cys TrplOőGln TrplOőGlu TrplOőGly TrplOőHis TrplOőIle TrplOőLeu TrplOőMet TrplOőPhe TrplOőPro TrplOőSer TrplOőThr TrplO6Tyr TrplOőVal IlelO7Ala Ilel07Asn IlelO7Asp • · • «····· ··· · · ··· ··· • · · · · ··· ·· ·· ·
- 29 IlelO7Cys IlelO7Gln IlelO7Glu IlelO7Gly IlelO7His Ilel07Leu IlelO7Met Ilel07Pro IlelO7Ser IlelO7Thr IlelO7Val
7. táblázat
2. hurok kétszeres mutációjú variánsok
Val 95Gln Gly 97Ser Seri05Glu Asp 99Glu Alá 98Gln Gly 97Asp GlylOOSer Leu 96Ser Asp 99Glu Leu 96Asn GlylO2Gln TyrlO4Leu Tyrl04Pro Gly 97Ser GlylOOPro Val 95Asn Val 95Met Asp 99Glu GlylOOAsn GlnlO3Ser Glyl02Asp GlylO2Ser SerlOlAsp Leu 96Cys Asp 99Glu Glyl02Asp Gly 97Ser GlnlO3Asp Alá 98His Seri05Glu Leu 96His Gly 97Pro Val 95Thr GlylOOAsp Val 95Pro Glnl03Asn Alá 98His TrplO6Asn + SerlOlGlu + GlylOOGln + TrplO6Gly + GlnlO3Asn + TrplO6Thr + IlelO7Thr + GlylO2Gln + SerlOlGlu + IlelO7Ala + Asp 99Glu + TrplO6Asp + TrplO6Glu + IlelO7Asp + SerlOlAsp + SerlOlGlu + Alá 98Asp + IlelO7Gly + TrplO6Cys + TrplO6Thr + Trpl06Pro + GlnlO3Ser + TrplO6Gln + Glyl02Pro + TrplOőAsp + GlylO2Ser + TrplO6Val + TrplOőPhe + TyrlO4Thr + GlylOOGln + TrplO6Leu + TyrlO4Thr + SerlOlGlu + TrplOőIle + TyrlO4Ile + GlnlO3Asn + TrplOőIle + Glyl02Pro + IlelO7His • ·
Val 95Gln Gly 97Asp GlylOOSer Val 95Asp TyrlO4Ala GlylOOPro Leu 96Cys Val 95Gly GlylO2Gln Ala 98Gly GlylOOAsp Val 95Glu SerlOlGlu Leu 96Val GlylO2Glu GlylO2Glu Ala 98Gln GlylOOGln Gly 97Glu SerlOlAsp Ala 98His Gly 97Asp + Leu 96Asp + Ala 98Gln + SerlOlGlu + TyrlO4Gly + SerlO5Asp + SerlO5Glu + TyrlO4Leu + GlylOOSer + TyrlO4Ser + TrplOőPhe + TrplO6Phe + Ala 98Gln + TyrlO4Asn + SerlOlAsp + GlnlO3Asn + TrplO6Gly + GlylOOAsp + GlnlO3Ser + TyrlO4Leu + GlylO2Ser + SerlOlAsp + GlnlO3Asn
8, táblázat
2. hurok - háromszoros mutációjú variánsok
| Val | 95Gln | + | Leu 96Thr | + | SerlOlGlu |
| Ala | 98His | + | GlnlO3Glu | + | TrplO6Cys |
| Ala | 98Gln | + | SerlOlGlu | + | TyrlO4Met |
| SerlOlAsp | + | Glnl03Ser | + | IlelO7Cys | |
| Ala | 98Pro | + | Asp 99Glu | + | Glyl02Pro |
| Val | 95Pro | + | Gly 97Glu | + | GlylOOGln |
| SerlOlGlu | + | Glyl02Pro | + | Ilel07His | |
| Leu | 96Pro | + | GlylOOPro | + | Glyl02Asn |
| GlylOOGlu | + | Glyl02Asn | + | TrplOőTyr | |
| Ala | 98Asn | + | GlnlO3Glu | + | IlelO7Ser |
| Gly | 97Pro | + | GlylOOAsp | + | TrplO6Met |
| Glnl03Asn | + | Tyrl04Leu | + | Seri05Asp | |
| Gly | 97Pro | + | Ala 98Gln | + | Tyrl04Cys |
| Ala | 98Gly | + | GlylOOGlu | + | Glnl03Ser |
| Leu | 96Ile | + | Gly 97Pro | + | Seri05Asp |
| Ala | 98Pro | + | GlylOOPro | + | IlelO7Ala |
| Val | 95Pro | + | Glnl03Asp | + | IlelO7Met |
| Val | 95Gln | + | SerlOlGlu | + | TrplOöPhe |
| Leu | 9 6 Val | + | SerlOlGlu | + | Ilel07Pro |
| Leu | 96Gly | + | Gly 97Glu | + | TrplOöThr |
| Gly | 97Asp | + | TyrlO4Ser | + | TrplO6His |
| Gly | 97Ser | + | GlylOOPro | + | TyrlO4Cys |
| GlnlO3Ser | + | Seri05Asp | + | IlelO7His | |
| Ala | 98Glu | + | TyrlO4Cys | + | Trpl0 6Phe |
| Val | 95Gln | + | GlylOOPro | + | GlylO2Ser |
| Val | 95Ala | + | GlylO2Asp | + | Tyrl04Ser |
| Val | 95Ala | + | Leu 96Met | + | SerlO5Asp |
• ·
- 31 GlylO2Gln + Leu 96Asn + GlylOOPro + Gly 97Asp + Ala 98Gln + Leu 96Thr + Val 95Ser + GlylOOGln + Gly 97Glu + Leu 96Ala + Val 95His + Val 95Pro + GlnlO3Asn + Gly 97Ser + Val 95Glu + Leu 96Gln + Leu 96Pro + Gly 97Asn + Gly 97Asn + Glyl02Pro + GlylOOSer + Leu 96Thr + Leu 96Cys + Leu 96Thr + Leu 96Ala + Gly 97Asn + Val 95Gln + Asp 99Glu + TyrlO4Glu + Leu 96Glu + TyrlO4Met + Gly 97Asp + Val 95Ala +
TrplO6Leu + Gly 97Glu + GlylO2Gln + Ala 98Asn + GlylOOPro + GlylOOAsn + Leu 96Asn + SerlO5Glu + TyrlO4Thr + Ala 98Gln + Gly 97Gln + GlylO2Asn + TrplOőIle + Ala 98Glu + Leu 96Ile + Ala 98Ser + SerlOlGlu + Ala 98Pro + Ala 98Glu + TrplO6Ala + GlylO2Glu + GlylO2Glu + TrplOöLeu + SerlO5Glu + GlylOOAsp + SerlOlGlu + SerlOlAsp + GlylOOAsp + SerlO5Asp + SerlOlGlu + SerlO5Asp + GlylOOAsp + Gly 97Asp +
IlelO7Gly
Ilel07Pro GlnlO3Glu TrplO6Leu TrplO6His Ser105Glu Gly 97Pro Trpl0 6Gln TrplO6Val GlylOOGlu SerlOlGlu GlnlO3Glu IlelO7Ala TyrlO4Gln IlelO7Gln Asp 99Glu Glyl02Pro GlylOOPro GlylOOAsn Ilel07Pro Trpl0 6Cys IlelO7Val Ilel07Pro TrplO6Tyr SerlOlAsp Glyl02Asp Glyl02Asp TrplOőPhe IlelO7Asp TrplOőVal Ilel07Asp TrplOőPro Asp 99Glu
9. táblázat
2. hurok - háromszoros mutációjú variánsok
| Leu | 96Gln | + | Gly | 97Ser | + | SerlOlGlu | + | TrplOőVal |
| Val | 95Ala | + | Ala | 98Gln | + | GlylOOAsn | + | Glnl03Asp |
| Val | 95Gln | + | TyrlO4Ile | + | TrplOőGly | + | Ilel07Pro | |
| Val | 95Met | + | Leu | 96Gly | + | GlylOOPro | + | TrplOőGly |
| Ala | 98Gln | + | GlylOOPro | + | TyrlO4Thr | + | TrplOőHis | |
| Gly | 97Pro | + | Ala | 98His | + | GlylOOPro | + | IlelO7Asp |
| Ala | 98Pro | + | GlylOOGlu | + | Trpl0 6Ser | + | IlelO7Met | |
| Leu | 96Gln | + | Gly | 97Ser | + | Seri05Asp | + | IlelO7Val |
| Ala | 98Gly | + | SerlOlAsp | + | Trpl0 6Ala | + | IlelO7Gln | |
| Val | 95Ser | + | Gly | 97Ser | + | Asp 99Glu | + | Glnl03Ser |
| Leu | 96Thr | + | Gly | 97Ser | + | Asp 99Glu | + | TyrlO4Asn |
| Val | 95Thr | + | Leu | 96Gln | + | Ala 98Pro | + | Seri05Glu |
| Val | 95Gly | + | Gly | 97Ser | + | Tyrl04Asn | + | TrplOőGlu |
| Leu | 96Gln | + | Gly | 97Ser | + | TyrlO4Thr | + | IlelO7Glu |
| Val | 95Ser | + | Leu | 96Pro | + | GlylOOGln | + | SerlOlAsp |
| Leu | 9 6Met | + | GlylOOSer | + | SerlOlAsp | + | TrplOőAsn | |
| Leu | 96Ile | + | Ala | 98Ser | + | GlylOOPro | + | GlylO2Glu |
• «
| - 32 - | |||||||
| Val | 9 5 Asn | + | Alá 98Gly | + | GlnlO3Ser | + | TyrlO4Val |
| Gly | 97Asn | + | Asp 99Glu | + | GlylO2Asn | + | TrplO6His |
| Gly | 97Ser | + | GlylO2Asp | + | GlnlO3Asp | + | IlelO7Hís |
| Val | 95Pro | + | GlylOOGlu | + | SerlOlGlu | + | TyrlO4Gly |
| Alá | 98Pro | + | GlylOOAsp | + | SerlOlAsp | + | IlelO7Cys |
| Leu | 96Gly | + | SerlOlAsp | + | GlylO2Asp | + | IlelO7Gly |
| Val | 95His | + | TyrlO4Asp | + | SerlO5Asp | + | TrplO6Ala |
| Glyl02Pro | + | SerlO5Asp | + | TrplO6Asp | + | IlelO7Thr | |
| Leu | 96Glu | + | Alá 98Gln | + | GlylO2Asp | + | Tyrl04Pro |
| Alá | 98Thr | + | Asp 99Glu | + | GlylOOGlu | + | SerlOlGlu |
| Gly | 97Ser | + | Alá 98Glu | + | Asp 99Glu | + | GlylOOGlu |
| Leu | 9 6 Asp | + | Gly 97Glu | + | GlylOOGlu | + | IlelO7Asn |
| Leu | 9 6 Asn | + | GlylOOAsp | + | SerlOlAsp | + | GlylO2Glu |
| Val | 95Gly | + | SerlOlGlu | + | GlylO2Asp | + | GlnlO3Asp |
| Val | 95His | + | Leu 96Glu | + | GlylOOGln | + | SerlOlGlu |
| Leu | 96Glu | + | GlylOOGln | + | SerlOlAsp | + | GlylO2Ser |
| Gly | 97Asp | + | GlylOOAsp | + | Glyl02Pro | + | IlelO7Gly |
| Gly | 97Glu | + | Asp 99Glu | + | GlylOOPro | + | TyrlO4Ser |
| Leu | 96Ile | + | Gly 97Gln | + | GlnlO3Glu | + | Seri05Glu |
| GlnlO3Asp | + | Seri05Asp | + | Trpl0 6Asn | + | Ilel07His | |
| Val | 95Pro | + | Alá 98Pro | + | GlnlO3Glu | + | SerlO5Asp |
| Val | 95His | + | Asp 99Glu | + | SerlOlGlu | + | Glyl02Pro |
| Leu | 9 6 Asn | + | Asp 99Glu | + | GlylOOAsn | + | SerlOlGlu |
| Alá | 98Asp | + | Asp 99Glu | + | SerlOlAsp | + | Ilel07Pro |
| Leu | 96Thr | + | Gly 97Glu | + | GlylOOGlu | + | GlylO2Asp |
| Val | 95Glu | + | GlylO2Asp | + | TyrlO4Ser | + | Ilel07Glu |
| Leu | 96Gly | + | GlylO2Asp | + | GlnlO3Asp | + | SerlO5Glu |
| GlylO2Glu | + | GlnlO3Glu | + | SerlO5Glu | + | TrplO6Cys | |
| Asp | 99Glu | + | SerlOlGlu | + | GlylO2Glu | + | Glnl03Asn |
| Asp | 99Glu | + | SerlOlGlu | + | GlylO2Glu | + | TrplO6Gly |
| GlylO2Glu | + | Glnl03Asn | + | TyrlO4Asp | + | Ilel07Thr | |
| Val | 95His | + | Leu 96Val | + | GlnlO3Glu | + | IlelO7Glu |
| Gly | 97Ser | + | GlylO2Ser | + | GlnlO3Glu | + | IlelO7Glu |
| Val | 95Glu | + | Leu 96Asp | + | GlnlO3Asp | + | IlelO7Asn |
| Val | 95Thr | + | GlylO2Glu | + | TrplO6Tyr | + | IlelO7Asp |
| Val | 95Glu | + | Gly 97Glu | + | Alá 98Gly | + | GlylOOAsp |
| Leu | 96Ala | + | Gly 97Pro | + | Alá 98Asp | + | SerlOlAsp |
| Val | 95Asp | + | Leu 96Asp | + | TyrlO4Glu | + | IlelO7Ser |
| Val | 95Pro | + | GlylO2Glu | + | Tyrl04Pro | + | SerlO5Asp |
| Leu | 9 6 Asn | + | Glyl02Asp | + | Glnl03Asn | + | SerlO5Glu |
| Leu | 96Asn | + | Glyl02Asp | + | TyrlO4Ala | + | Seri05Glu |
| Leu | 96Ser | + | Gly 97Gln | + | GlylO2Glu | + | Seri05Asp |
| Leu | 96Thr | + | Asp 99Glu | + | GlylO2Asp | + | IlelO7Gly |
10. táblázat
3. hurok - egyszeres mutációjú variánsok Leul2 6Ala Leul2 6Asn Leul2 6Asp Leul2 6Cys Leul2 6Gln Leul2 6Glu • · • ······ ··· · · · · · ··· • · · · *
- 33 Leul2 6Gly Leul26His Leul2 6Ile Leul26Met Leul2 6Pro Leul2 6Ser Leul2 6Thr Leul26Val Glyl27Asn Glyl27Asp Glyl27Gln Glyl27Glu Glyl27Pro Glyl27Ser Glyl28Asn Glyl28Asp Glyl28Gln Glyl28Glu Glyl28Pro Glyl28Ser Prol29Asn Prol29Asp Prol29Gln Prol29Glu Prol29Gly Prol29Ser Serl30Asp Serl30Glu Glyl31Asn Glyl31Asp Glyl31Gln Glyl31Glu Glyl31Pro Glyl31Ser Serl32Asp Serl32Glu Alal33Asn Alal33Asp Alal33Gln Alal33Glu Alal33Gly Alal33His Alal33Pro Alal33Ser Alal33Thr
11. táblázat
3. hurok kétszeres mutációjú variánsok
Leul2 6Gln Glyl3lGln Prol29Asp Glyl28Ser + Serl30Glu + Alal33Asn + Glyl31Gln + Serl30Glu • ·
Leul2 6Pro Glyl27Asp Leul2 6Asp Glyl31Asn Glyl27Pro Glyl2 8Asn Prol2 9Gln Glyl28Pro Glyl28Gln Glyl28Asn Leul26Val Leul26Val Leul2 6Cys Glyl27Asp Glyl28Pro Glyl27Ser Leul2 6His Glyl31Pro Glyl27Ser Prol2 9Asn Leul2 6Val Prol29Gly Leul26Val Prol29Glu Prol29Gly Leul2 6His Glyl28Asn Glyl27Pro Glyl27Gln Glyl28Pro Glyl28Asn Leul2 6Cys Prol2 9Asn Leul2 6Ser Glyl28Glu Prol29Asn Leul2 6Ser Prol29Gln Glyl27Asp Glyl28Gln Glyl27Pro Prol29Gln Leul26Val Glyl28Ser Leul2 6Asn Leul2 6Ile Glyl28Ser Glyl27Ser Leul2 6Cys Glyl27Pro Leul2 6His Glyl31Ser Glyl31Pro Glyl31Asp + Alal33Gly + Alal33Gly + Prol29Gln + Alal33Gln + Glyl31Glu + Glyl31Asp + Serl30Glu + Serl30Asp + Prol29Ser + Prol29Gly + Serl30Asp + Prol29Ser + Prol29Glu + Alal33Thr + Prol29Glu + Glyl31Asp + Prol29Asp + Alal33Glu + Glyl28Ser + Glyl31Glu + Prol29Asp + Alal33Asp + Serl30Glu + Alal33Pro + Serl30Asp + Glyl28Glu + Serl32Glu + Serl32Asp + Prol29Gln + Prol29Asp + Serl30Glu + Prol29Asn + Serl32Glu + Serl32Asp + Glyl31Ser + Serl30Asp + Serl32Glu + Glyl31Pro + Glyl28Gln + Prol29Glu + Prol29Gly + Alal33Gln + Glyl28Asp + Serl32Glu + Prol29Gly + Alal33Gly + Glyl31Gln + Serl30Asp + Serl32Asp + Serl30Glu + Alal33Asp + Alal33Glu + Alal33Gln + Alal33Ser • · ··
- 35 Leul26Asp + Alal33Asn Leul26Glu + Prol29Gln
12. táblázat
3. hurok - háromszoros mutációjú variánsok
| Leul2 6His | + | Prol29Glu | + | Alal33Asn |
| Leul2 6Asp | + | Glyl28Ser | + | Glyl31Gln |
| Prol29Asn | + | Glyl31Ser | + | Serl32Glu |
| Glyl28Pro | + | Prol29Asn | + | Serl30Glu |
| Glyl28Gln | + | Serl30Glu | + | Alal33Ser |
| Glyl31Gln | + | Serl32Glu | + | Alal33Gln |
| Glyl2 8Asp | + | Glyl31Ser | + | Alal33Asn |
| Glyl31Ser | + | Serl32Asp | + | Alal33Pro |
| Prol29Ser | + | Glyl31Gln | + | Alal33Glu |
| Glyl28Asn | + | Serl30Glu | + | Glyl31Gln |
| Leul2 6Gly | + | Glyl27Gln | + | Glyl31Pro |
| Leul2 6Pro | + | Glyl27Glu | + | Glyl28Pro |
| Leul2 6Ser | + | Prol2 9Ser | + | Serl32Asp |
| Glyl28Ser | + | Serl32Glu | + | Alal33Asn |
| Leul2 6Val | + | Serl32Glu | + | Alal33Gln |
| Prol29Gly | + | Serl30Glu | + | Glyl31Pro |
| Leul2 6Thr | + | Glyl27Pro | + | Alal33Asn |
| Leul2 6His | + | Serl30Asp | + | Alal33Pro |
| Leul2 6Cys | + | Glyl27Ser | + | Prol29Ser |
| Leul2 6Gly | + | Serl32Asp | + | Alal33Ser |
| Glyl28Gln | + | Prol29Gln | + | Glyl3lAsn |
| Glyl2 8Asp | + | Glyl31Asn | + | Alal33His |
| Leul2 6Cys | + | Serl30Glu | + | Alal33Gly |
| Glyl27Ser | + | Serl30Asp | + | Alal33Gly |
| Leul2 6His | Prol29Asn | + | Serl30Asp | |
| Leül2 6Asn | + | Glyl31Asp | + | Alal33Gln |
| Leul2 6Met | + | Glyl28Asn | + | Serl32Asp |
| Leul2 6Glu | + | Glyl27Gln | + | Alal33His |
| Leul2 6Met | + | Serl32Asp | + | Alal33His |
| Serl30Glu | + | Glyl31Gln | + | Alal33Gln |
| Glyl27Pro | + | Glyl28Ser | + | Alal33Ser |
| Leul2 6Ala | + | Prol29Gly | + | Serl32Glu |
| Glyl31Asn | + | Serl32Asp | + | Alal33Asn |
| Leul2 6Val | + | Glyl31Asp | + | Alal33Ser |
| Leul2 6Ser | + | Glyl27Asn | + | Alal33Gln |
| Prol29Gln | + | Serl30Glu | + | Alal33His |
| Leul2 6Met | + | Glyl27Ser | + | Serl30Asp |
| Leul2 6Cys | + | Prol29Asn | + | Glyl31Asp |
| Prol29Ser | + | Serl30Asp | + | Alal33Asn |
| Leul2 6Ser | + | Prol29Gly | + | Serl32Glu |
| Glyl27Ser | + | Prol29Gln | + | Serl32Asp |
| Glyl27Pro | + | Glyl28Asn | + | Prol2 9Gln |
| Leul2 6His | + | Serl32Asp | + | Alal33Asn |
| Glyl28Pro | + | Prol29Glu | + | Alal33Thr |
| Prol29Ser | + | Glyl31Glu | + | Alal33Pro |
| Leul2 6His | + | Glyl28Pro | + | Prol2 9Gln |
| Leul2 6Met | + | Glyl27Asp | + | Glyl28Asp |
·«· · « · <* · «·· • · * · · ·«· · · ·· ·
- 36 • ··
Glyl28Pro + Glyl31Glu + Serl32Asp Glyl31Asp + Serl32Glu + Alal33Pro Glyl28Glu + Prol29Glu + Alal33Asn Prol29Ser + Serl32Glu + Alal33Glu Leul26Asn + Serl30Glu + Glyl31Asp Prol29Asn + Serl30Glu + Glyl31Asp Leul26His + Serl30Glu + Glyl31Glu Prol29Glu + Serl30Asp + Glyl31Asn Glyl27Ser + Prol29Asp + Serl30Asp Serl30Asp + Glyl31Asp + Serl32Asp Glyl28Asp + Serl30Glu + Glyl31Asn Leul26Met + Glyl28Glu + Serl30Asp Glyl28Asp + Prol29Asn + Serl30Glu
13. táblázat
3. hurok - négyszeres mutációjú variánsok
| Leul26Ser | + | Prol29Asn | + | Serl30Asp | + | Alal33His |
| Leul2 6Met | + | Prol29Ser | + | Serl32Glu | + | Alal33Asn |
| Glyl27Ser | + | Glyl31Gln | + | Serl32Glu | + | Alal33Gln |
| Leul2 6Asn | + | Glyl27Pro | + | Glyl28Glu | + | Prol29Gly |
| Leul26Asn | + | Prol29Gly | + | Glyl31Asp | + | Alal33Gly |
| Leul2 6Gly | + | Prol29Gly | + | Serl32Glu | + | Alal33Pro |
| Leul2 6Gly | + | Glyl27Asp | + | Prol29Gly | + | Glyl31Pro |
| Glyl27Asn | + | Prol29Gln | + | Glyl31Asp | + | Alal33Gly |
| Leul26Pro | + | Glyl27Ser | + | Glyl28Gln | + | Serl30Glu |
| Leul2 6Ala | + | Glyl27Gln | + | Prol2 9Asn | + | Serl30Glu |
| Leul2 6Asn | + | Glyl27Ser | + | Serl30Glu | + | Alal33Thr |
| Glyl28Gln | + | Prol29Gln | + | Serl30Asp | + | Glyl31Ser |
| Leul26His | + | Glyl28Ser | + | Glyl31Ser | + | Serl32Asp |
| Leul2 6Gln | + | Prol29Ser | + | Serl30Asp | + | Alal33His |
| Leul2 6Val | + | Glyl28Pro | + | Pro12 9Asn | + | Alal33Asp |
| Leul26Val | + | Prol29Gly | + | Serl30Glu | + | Alal33Thr |
| Leul2 6Thr | + | Glyl27Pro | + | Serl32Glu | + | Alal33Thr |
| Glyl2 8Asp | + | Prol2 9Gly | + | Glyl31Pro | + | Alal33Ser |
| Leul26Asn | + | Glyl28Glu | + | Prol29Gln | + | Glyl31Pro |
| Leul2 6Pro | + | Glyl27Pro | + | Prol29Ser | + | Serl30Asp |
| Glyl27Pro | + | Glyl28Gln | + | Glyl31Glu | + | Serl32Glu |
| Leul2 6Ile | + | Glyl27Gln | + | Glyl31Asp | + | Serl32Glu |
| Leul26Val | + | Glyl31Asp | + | Serl32Asp | + | Alal33Pro |
| Glyl28Asp | + | Prol2 9Asp | + | Glyl31Asn | + | Alal33Pro |
| Prol29Asn | + | Glyl31Ser | + | Serl32Asp | + | Alal33Asp |
| Leul2 6Gln | + | Glyl31Pro | + | Serl32Asp | + | Alal33Asp |
| Glyl27Pro | + | Serl30Glu | + | Glyl31Glu | + | Alal33His |
| Leul2 6Gln | + | Prol29Gln | + | Serl30Asp | + | Glyl31Glu |
| Glyl27Ser | + | Serl30Asp | + | Glyl31Glu | + | Alal33Gln |
| Leul2 6Ser | + | Glyl27Pro | + | Prol29Glu | + | Serl30Glu |
| Serl30Glu | + | Glyl31Glu | + | Serl32Glu | + | Alal33Ser |
| Glyl27Gln | + | Serl30Glu | + | Glyl31Asp | + | Serl32Asp |
| Glyl28Gln | + | Serl30Glu | + | Glyl31Asp | + | Seri32Asp |
| Glyl27Asn | + | Serl30Glu | + | Glyl31Asp | + | Seri32Asp |
| Glyl27Ser | + | Pro12 9Asp | + | Serl30Glu | + | Glyl31Glu |
| Glyl27Asn | + | Prol2 9Asp | + | Serl30Asp | + | Glyl31Asp |
•··· ·9 • · · • · * η V • · · » « · · ·
| - 37 - | ||||||
| Glyl28Asn | + | Prol29Glu | + | Serl30Glu | + | Glyl31Asp |
| Leul2 6Ser | + | Glyl28Asp | + | Serl30Glu | + | Alal33Pro |
| Glyl27Asn | + | Glyl28Asp | + | Serl30Glu | + | Alal33Pro |
| Glyl28Glu | + | Serl30Glu | + | Glyl31Pro | + | Alal33His |
| Leul26Val | + | Serl30Asp | + | Serl32Asp | + | Alal33Asn |
| Prol29Ser | + | Serl30Glu | + | Serl32Asp | + | Alal33Gly |
| Leul26His | + | Serl30Glu | + | Serl32Asp | + | Alal33His |
| Leul2 6Ala | + | Serl30Glu | + | Serl32Glu | + | Alal33Asn |
| Glyl27Pro | + | Glyl28Gln | + | Serl30Asp | + | Serl32Glu |
| Leul2 6Ser | + | Serl30Asp | + | Glyl31Pro | + | Serl32Asp |
| Serl30Glu | + | Glyl31Pro | + | Serl32Glu | + | Alal33Ser |
| Glyl28Gln | + | Serl30Asp | + | Glyl31Ser | + | Serl32Glu |
| Leul26Ala | + | Prol29Asn | + | Serl30Asp | + | Serl32Glu |
| Glyl27Gln | + | Glyl28Pro | + | Prol29Glu | + | Glyl31Asp |
| Glyl28Gln | + | Prol2 9Asp | + | Glyl31Glu | + | Alal33Asn |
| Leul2 6Asn | + | Prol29Glu | + | Glyl31Asp | + | Alal33Ser |
| Leul2 6Met | + | Prol2 9Glu | + | Glyl31Glu | + | Alal33Thr |
| Glyl27Asp | + | Glyl28Gln | + | Prol29Asp | + | Alal33Gln |
| Leul2 6His | + | Prol29Gly | + | Glyl31Glu | + | Alal33Glu |
| Glyl28Glu | + | Prol2 9Gly | + | Glyl31Asp | + | Alal33Asn |
| Prol29Gly | + | Serl30Glu | + | Serl32Asp | + | Alal33Glu |
| Leul2 6Gln | + | Serl30Glu | + | Serl32Glu | + | Alal33Glu |
| Leul2 6Gly | + | Prol29Asp | + | Serl30Glu | + | Serl32Glu |
| Prol29Asp | + | Serl30Glu | + | Glyl31Ser | + | Serl32Asp |
14. táblázat
4. hurok - egyszeres mutációjú variánsok Glyl54Asn Glyl54Asp Glyl54Gln Glyl54Glu Glyl54Pro Glyl54Ser Asnl55Asp Asnl55Gln Ásni55Glu Asnl55Ser Glul56Asp Glyl57Asn Glyl57Asp Glyl57Gln Glyl57Glu Glyl57Pro Glyl57Ser Thrl58Asn Thrl58Asp Thrl58Gln Thrl58Glu Thrl58Gly Thrl58Pro Thrl58Ser Serl59Asp ·»·· ··
- 38 Serl59Glu Glyl60Asn Glyl60Asp GlylöOGln Glyl60Glu Glyl60Pro Glyl60Ser Seri61Asp Seri61Glu Seri62Asp Seri62Glu Serl63Asp Serl63Glu Thrl64Asn Thrl64Asp Thrl64Gln Thrl64Glu Thrl64Gly Thrl64Pro Thrl64Ser Vall65Ala Vall65Asn Vall65Asp Vall65Cys Vall65Gln Vall65Glu Vall65Gly Vall65His Vall65Met Vall65Pro Vall65Ser Vall65Thr Glyl66Asn Glyl66Asp Glyl66Gln Glyl66Glu Glyl66Pro Glyl66Ser Tyrl67Ala Tyrl67Asn Tyrl67Asp Tyrl67Cys Tyrl67Gln Tyrl67Glu Tyrl67Gly Tyrl67His Tyrl67Ile Tyrl67Leu Tyrl67Met Tyrl67Pro Tyr167Ser Tyrl67Thr Tyrl67Val • · · · ·· ·· ·· ······ • · · · · ··· ··· • · · · · ··· ·· ·· ·
15. táblázat
4. hurok - kötszere Asnl55Ser Glyl54Ser Glyl54Glu Asnl55Glu Glyl57Pro Glyl54Ser Seri61Glu Glyl54Gln Asnl55Asp Thrl64Asn Asnl55Glu Glul56Asp Glyl54Pro Asnl55Ser Thrl58Pro Thrl64Gln Glyl57Gln Thrl58Asn Glyl54Asn Glyl57Gln Thrl64Asp Glyl60Asp Glyl54Glu Glul56Asp Asnl55Ser Glyl57Gln Thrl64Ser Serl59Glu Thrl64Glu Thrl58Gly Seri61Asp Glyl54Glu Glyl60Asp Seri62Glu Glyl57Asn Seri61Asp Ásni55Asp Glul56Asp Glyl54Pro Glyl54Ser Glyl60Pro Ser161Glu Serl62Glu Glyl54Asn Seri61Glu GlylőOGln Glyl54Glu Glyl60Ser Glyl57Glu Glyl60Asp s mutációjú variánsok + Glul56Asp + Tyrl67Gln + Vall65Ala + Thrl64Pro + Serl59Asp + SerlőlAsp + Vall65Pro + SerlőlGlu + Thrl58Pro + GlylőőGln + Tyrl67His + Thrl58Gly + Glyl57Glu + Tyrl67Asp + Glyl66Asp + Tyrl67Glu + Thrl58Glu + Serl62Asp + Tyrl67Glu + SerlőlAsp + Tyrl67Ala + Vall65His + Glyl57Ser + Tyrl67Ile + Thrl58Asp + Thrl64Pro + Tyrl67Ile + Tyrl67Thr + Vall65Gln + GlylőOSer + GlylőőPro + GlylőőSer + Vall65Asn + Vall65Gln + Serl59Glu + Vall65Asn + Vall65Pro + GlylöőSer + Serl59Asp + Tyrl67Cys + Thrl64Asp + Vall65Gly + Tyrl67Asn + Glyl66Glu + Tyrl67Ala + Vall65Pro + Vall65Gly + Serl63Asp + Thrl58Asn + Vall65Pro
- 40 ··· · • · • · · · ·
Glyl60Asn + Thrl64Gln + Asnl55Ser + SerlőlGlu + Serl62Asp + Glyl54Glu + Glyl54Ser + Glyl57Asp + Serl63Glu + Glyl54Pro +
Seri62Asp Glyl66Gln Thrl58Gln Tyrl67Gly Glyl66Ser Thrl58Gly Thrl58Ser Glyl60Pro Vall65His Glyl66Asp
16. táblázat
4. hurok - háromszoros mutációjú variánsok
Glyl54Gln Glyl54Ser Asnl55Glu Glyl57Asn Glul56Asp Glyl60Pro Glyl54Ser Glyl60Asn Glyl60Ser Thrl58Gln Glyl57Gln Seri62Glu Glyl57Ser Glyl54Ser Thrl58Ser Glul56Asp Glyl54Gln Seri63Glu Glyl57Asp Glyl57Asn GlylöOGln Glyl54Asn Glul56Asp Thrl58Asn Glyl54Asn Asnl55Glu Thrl58Glu Asnl55Gln Asnl55Ser Glyl54Gln Seri63Glu Asnl55Ser Glyl57Asp Seri63Asp Seri63Asp Glul56Asp Glyl57Gln Seri61Asp Glyl54Asn + Asnl55Ser + Glyl60Asp + Glyl57Ser + Serl59Asp + GlylőOSer + Serl62Glu + Glul56Asp + Serl62Glu + Vall65Gly + Serl62Asp + Serl62Glu + Thrl64Gln + Vall65Met + Glul56Asp + Serl61Asp + Glyl57Ser + Asnl55Asp + Vall65Thr + Thrl58Gln + Serl59Asp + Serl63Glu + Asnl55Asp + Thrl58Asn + Glyl60Glu + Glyl57Pro + Glyl57Ser + GlylőOSer + Glul56Asp + Serl62Glu + Thrl58Gly + Vall65Ala + Glyl60Glu + Thrl64Ser + Thrl64Glu + Thrl64Asp + Glyl57Asp + Glyl66Asp + Serl62Glu + Serl59Glu + Glul56Asp + Tyrl67Gln + Thrl64Pro + Glyl60Ser + Vall65Thr + Thrl64Asn + Thrl58Gln + Glyl66Ser + Glyl66Gln + Tyrl67Val + Tyrl67Leu + Vall65Cys + Glyl66Glu + Glyl66Pro + Thrl64Gly + GlylőOAsn + Glyl66Ser + Tyrl67Pro + Vall65Ser + Glyl66Ser + Vall65Met + Glyl57Pro + Vall65Cys + Thrl64Pro + Thrl58Gln + Thrl58Gln + Tyrl67Val + Thrl64Ser + Vall65Met + Glyl66Asp + Glyl66Asn + Thrl64Gln + Glyl66Pro + Tyrl67Met + Vall65Met + Thrl64Gln + Tyrl67Glu + Tyrl67His + Serl62Glu • · • · • · ·
Serl59Asp + Serl59Glu + Thrl58Asp + SerlölGlu + Serl61Glu + Asnl55Glu + Glyl57Glu + Serl61Asp + Glyl57Glu + Glyl57Glu + Glyl57Asp + Serl59Glu + Serl59Asp + Thrl58Asp + Thrl58Glu + Thrl58Glu + Glyl57Ser + Thrl58Asp + Thrl58Glu + Glul56Asp + Asnl55Glu +
Seri62Glu Glyl60Ser SerlőlGlu Seri63Asp Seri63Glu Glul56Asp Thrl64Glu Serl63Glu Thrl58Gln Serl59Asp Serl63Glu Seri63Asp Seri63Asp Seri61Asp Serl62Asp Serl62Asp Thrl58Asp Serl63Glu Serl63Asp Glyl66Glu Glyl57Pro + Vall65Cys + Serl61Asp + Serl62Glu + Thrl64Ser + Vall65His + Thrl58Glu + Vall65Gly + Thrl64Glu + Serl59Glu + Tyrl67Cys + Thrl64Glu + Thrl64Gly + Thrl64Asn + Serl63Glu + Thrl64Asn + Vall65Thr + Serl62Glu + Thrl64Asn + Tyrl67Gly + Tyrl67Ile + Thrl64Asp
17. táblázat
4. hurok - négyszeres mutációjú variánsok
Serl59Glu + Asnl55Ser + Glyl57Asn + Thrl58Ser + Glyl54Ser + Glyl57Gln + Glyl57Asn + Glul56Asp + Glul56Asp + Asnl55Gln + Thrl58Gly + Serl59Asp + Glyl54Pro + Glyl54Asn + Asnl55Ser + Glyl57Asn + GlylőOGlu + Asnl55Glu + Asnl55Asp + Asnl55Asp + Glyl54Ser + Glyl54Asn + Glul56Asp + Glul56Asp + Glyl54Pro + Glyl54Ser + Glyl57Pro + Glyl54Asn +
Thrl64Ser Glyl57Pro Vall65Pro Glyl60Gln Glyl57Pro Glyl60Asp Glyl60Asp Thrl58Ser Thrl58Pro Glul56Asp Glyl60Ser Glyl60Gln Thrl64Gln Glyl60Pro Glyl57Asn Thrl58Asn Seri61Asp Glul56Asp Glul56Asp Glul56Asp Thrl58Gln Asnl55Gln Glyl57Glu Glyl57Glu Glyl57Pro Glyl57Asn Glyl60Pro Seri61Glu + Vall65Thr + Vall65Ser + Glyl66Glu + Vall65His + Serl63Glu + Thrl64Ser + Vall65Cys + Vall65Asn + Thrl64Gln + Thrl64Gly + Serl63Asp + Glyl66Ser + Vall65Gly + SerlőlGlu + Thrl64Gln + Serl63Glu + Vall65Met + Thrl58Gln + Vall65Asn + Glyl60Ser + Serl62Glu + Serl63Glu + Glyl60Gln + Thrl58Ser + Thrl58Asp + Thrl58Glu + Glyl66Asp + Serl62Glu + Glyl66Pro + GlylőöGlu + Tyrl67Val + Glyl66Asp + Thrl64Ser + Vall65Asn + Tyrl67Leu + Glyl66Pro + Vall65Pro + Vall65Thr + Tyrl67Asn + Tyrl67Pro + Glyl66Asp + Glyl66Pro + Tyrl67Asp + Vall65Gln + Tyrl67Pro + Glyl66Pro + Glyl66Asn + Thrl64Asn + Serl63Glu + Thrl64Glu + Thrl64Gly + Vall65Cys + Serl59Asp + Serl59Glu + Tyrl67Glu + Tyrl67Asn • ♦ ·
Glyl54Asp + Glyl54Gln + Thrl58Ser + Asnl55Ser + Glyl57Asn + Glyl54Asn + Glyl57Gln + Glyl60Glu + Glyl54Asp + Glyl54Asp + Glyl54Gln + Serl59Glu + Serl59Asp + Glul56Asp + Glul56Asp + Asnl55Gln + Serl63Glu + SerlölAsp + Serl61Asp + Glyl57Pro + Glyl54Pro + Asnl55Asp + Glul56Asp + Thrl58Gln + Glyl54Gln + Asnl55Ser + Glyl54Gln + Glul56Asp + GlylöOGlu + Glyl60Glu + Asnl55Asp + Asnl55Ser +
Asnl55Asp + Serl59Glu + Serl59Asp + Glul56Asp + Serl59Asp + Glul56Asp + Glyl60Asp + Serl62Asp + Asnl55Ser + Glul56Asp + Glyl57Pro + Serl61Asp + SerlőlAsp + Thrl58Glu + Thrl58Asp + Thrl58Asp + Thrl64Asp + Serl63Asp + Serl63Glu + Serl59Glu + Glul56Asp + Glul56Asp + Serl59Asp + Serl59Asp + Serl59Asp + GlylőOAsp + Glyl60Asp + GlylőOPro + Serl63Asp + Serl63Glu + Thrl58Pro + Glul56Asp +
Thrl64Gln + Glyl60Glu + GlylőOAsp + Glyl57Asp + SerlölGlu + Glyl57Glu + Serl62Asp + Thrl64Asn + Glul56Asp + Glyl57Glu + Serl59Asp + Glyl66Ser + Glyl66Pro + Vall65Ala + Glyl66Pro + Thrl64Asp + Vall65Met + Vall65Thr + Thrl64Gln + Serl6lAsp + Serl63Asp + Thrl58Asp + Thrl64Asp + Serl63Glu + Serl63Asp + Serl62Glu + Serl62Glu + Vall65Pro + Thrl64Gly + Thrl64Pro + Serl63Glu + Serl63Asp +
Glyl66Asn Serl61Asp SerlőlAsp Thrl58Glu Serl62Glu Thrl64Glu Vall65Thr Glyl66Gln Thrl64Ser Thrl58Gly Seri61Asp Tyrl67His Tyrl67Ser Glyl66Gln Tyrl67Ala Tyrl67Val Glyl66Glu Tyrl67His Glyl66Asn Serl63Glu Thrl64Glu Thrl64Asn Vall65Ala Vall65Cys Glyl66Pro Thrl64Asp Thrl64Glu Glyl66Glu Tyrl67Leu Glyl66Gln Thrl64Asp Glyl66Glu
18. táblázat
5. hurok - egyszeres mutációjú variánsok Alal87Asn Alal87Asp Alal87Gln Alal87Glu Alal87Gly Alal87HÍs Alal87Pro Alal87Ser Alal87Thr Seri 8 8Asp Serl88Glu Phel89Ala Phel89Asn Phel89Asp Phel89Cys Phel89Gln Phel89Glu
- 43 Phel89Gly Phel8 9His Phel89Ile Phel89Leu Phel89Met Phel8 9Pro Phel8 9Ser Phel8 9Thr Phel89Tyr Phel89Val Seri90Asp Serl90Glu Serl91Asp Serl91Glu
19. táblázat
| 5. hurok - kétszeres | mutációjú variánsok | |
| Alal87Asp | + | Phel89Gln |
| Alal87Ser | + | Serl88Asp |
| Serl88Glu | + | Phel89Pro |
| Alal87Asp | + | Phel89His |
| Alal87Asn | + | Serl91Glu |
| Alal87Gln | + | Seri91Asp |
| Alal87Glu | + | Phel89Pro |
| Alal87Pro | + | Phel89Asp |
| Serl88Asp | + | Phel89Cys |
| Phel89His | + | Serl91Asp |
| Serl88Glu | + | Phel89Ala |
| Alal87His | + | Serl88Asp |
| Alal87Asn | + | Serl88Glu |
| Serl88Glu | + | Phel89Gln |
| Alal87Asp | + | Phel89Ser |
| Serl88Asp | + | Phel89Val |
| Alal87Gln | + | Serl88Glu |
| Alal87Ser | + | Serl88Glu |
| Alal87Pro | + | Seri91Asp |
| Serl8 8Glu | + | Phel89Val |
| Phel89Ser | + | Serl91Glu |
| Alal87Gly | + | Serl91Glu |
| Alal87Asn | + | Seri91Asp |
| Alal87Thr | + | Serl91Asp |
| Alal87His | + | Serl88Glu |
| Serl88Glu | + | Phel89Gly |
| Alal87Ser | + | Phel89Ile |
| Serl88Glu | + | Phel89Met |
| Phel89Asn | + | Seri91Asp |
| Alal87Gln | + | Phel89Tyr |
| Alal87Gln | + | Serl91Glu |
| Alal87Ser | + | Phel89Ala |
| Phel89Val | + | Seri91Asp |
| Serl88Glu | + | Phel89Leu |
| Alal87Pro | + | Serl88Glu |
• ···
- 44 Phel89Asn + Phel89Ile + Alal87Glu + Alal87His + Serl88Asp + Alal87Gly + Serl88Asp + Alal87Gly + Alal87Gln + Phel89Tyr + Alal87Ser + Alal87Thr + Alal87Asn + Alal87Gly + Alal87Gly + Phel89Cys + Alal87Asp + Serl88Asp + Serl88Asp + Alal87Asn + Alal87Pro + Phel89Met + Alal87Thr + Phel89Ala + Phel89Leu +
Serl91Glu Ser191Asp Phel89Met Serl91Glu Phel89Tyr Phel89Val Phel89Gln Phel89Tyr Phel89Asp Serl91Glu Serl91Asp Serl88Glu Serl88Asp Serl88Asp Phel8 9Cys Serl91Glu Phel8 9Gly Phel89Leu Phel89Gly Phel8 9Asp Serl91Glu Seri91Asp Serl88Asp Serl91Glu Serl91Glu
20. táblázat
5. hurok - háromszoros mutációjú variánsok
| Alal87Pro | + | Phel89Cys | + | Serl91Glu |
| Alal87Thr | + | Phel89Tyr | + | Serl91Glu |
| Alal87Ser | + | Serl88Glu | + | Phel89Ser |
| Alal87Gln | + | Phel89Asn | + | Serl91Glu |
| Alal87Gln | + | Serl88Asp | + | Phel89His |
| Alal87Gln | + | Serl88Glu | + | Phel89His |
| Alal87Gly | + | Serl88Asp | + | Phel89Met |
| Alal87Gly | + | Serl88Asp | + | Phel89Cys |
| Alal87Pro | + | Phel89His | + | Serl91Glu |
| Alal87Pro | + | Phel89Gln | + | Serl91Glu |
| Alal87Asn | + | Serl88Asp | + | Phel89Asn |
| Alal87Gly | + | Serl88Glu | + | Phel89Ser |
| Alal87Gln | + | Phel89Met | + | Serl91Asp |
| Alal87Gly | + | Seri 8 8Asp | + | Phel89Pro |
| Alal87Thr | + | Phel89His | + | Serl91Asp |
| Alal87Asn | + | Serl88Glu | + | Phel89Cys |
| Alal87Gln | + | Phel89Val | + | Serl91Glu |
| Alal87Pro | + | Phel8 9Met | + | Serl91Glu |
| Alal87Ser | + | Serl88Glu | + | Phel89His |
| Alal87Ser | + | Phel89Gln | + | Seri91Asp |
| Alal87Gln | + | Serl88Asp | + | Phel89Pro |
| Alal87Gly | + | Serl88Asp | + | Phel89Gly |
| Alal87His | + | Phel89Gln | + | Serl91Glu |
| Alal87Thr | + | Seri 8 8Glu | + | Phel89Ile |
- 45 ··· ··
| Alal87Pro | + | Phel89Gly | + | Serl91Glu |
| Alal87Thr | + | Phel8 9Met | + | Serl91Glu |
| Alal87Gly | Phel89Thr | Serl91Glu | ||
| Alal87Gln | + | Phel89Leu | + | Serl91Glu |
| Alal87Thr | + | Phel89Thr | + | Serl91Asp |
| Alal87Gln | + | Serl88Asp | + | Phel8 9Met |
| Alal87Pro | + | Phel89Ser | + | Serl91Glu |
| Alal87Asp | + | Serl88Glu | + | Phel89Val |
| Alal87Glu | + | Serl88Glu | + | Phel89Ser |
| Alal87Asp | + | Serl88Glu | + | Phel8 9Met |
| Alal87Asp | + | Serl88Asp | + | Phel89Gln |
| Alal87Asp | + | Serl88Glu | + | Phel8 9Cys |
| Alal87Asp | + | Serl88Glu | + | Phel89Tyr |
| Alal87Glu | + | Serl88Glu | + | Phel89Tyr |
| Alal87Asp | + | Seri 8 8Asp | + | Phel89Gly |
| Alal87Glu | + | Serl88Glu | + | Phel89Leu |
| Alal87Asp | + | Serl88Glu | + | Phel89Ser |
| Alal87Glu | + | Serl88Asp | + | Phel89Gly |
| Alal87Asp | + | Serl88Asp | + | Phel8 9Pro |
| Alal87Asp | + | Seri 8 8Glu | + | Phel89His |
| Alal87Glu | + | Serl88Glu | + | Phel89Thr |
| Alal87Glu | + | Serl88Asp | + | Phel89Ile |
| Alal87Glu | + | Serl88Asp | + | Phel8 9Asn |
| Alal87Ser | + | Serl88Glu | + | Phel89Glu |
| Alal87Gly | + | Serl88Asp | + | Phel89Glu |
| Alal87Gly | + | Serl88Glu | + | Phel89Asp |
| Alal87Pro | + | Serl88Glu | + | Phel89Asp |
| Alal87Asp | + | Serl88Glu | + | Phel89Glu |
| Alal87Glu | + | Serl88Asp | + | Phel89Asp |
| Alal87Asp | + | Serl88Glu | + | Phel8 9Asp |
| Alal87Glu | + | Serl88Glu | + | Phel89Glu |
| Alal87Gly | + | Phel89Glu | + | Seri91Asp |
| Alal87Gly | + | Phel89Glu | + | Serl91Glu |
| Alal87Thr | + | Phel89Glu | + | Serl91Glu |
| Seri 8 8Glu | + | Phel89Glu | + | Serl91Glu |
| Serl88Glu | + | Phel89Glu | + | Serl91Asp |
21. táblázat
5. hurok - négyszeres mutációjú variánsok
| Alal87Ser | + | Serl88Glu | + | Phel89Asp | + | Seri91Asp |
| Alal87Pro | + | Serl88Glu | + | Phel89Glu | + | Serl91Glu |
| Alal87His | + | Serl88Glu | + | Phel89Asp | + | Serl91Glu |
| Alal87Gly | + | Serl88Asp | + | Phel89Asp | + | Serl91Glu |
| Alal87His | + | Serl88Glu | + | Phel89Glu | + | Seri91Asp |
| Alal87Thr | + | Serl8 8Asp | + | Phel89Asp | + | Seri91Glu |
| Alal87Asn | + | Serl88Glu | + | Phel89Glu | + | Serl91Glu |
| Alal87Pro | + | Serl88Asp | + | Phel89Glu | + | Serl91Glu |
| Alal87Pro | + | Serl8 8Asp | + | Phel89Asp | + | Seri91Asp |
| Alal87Ser | + | Serl88Glu | + | Phel89Asp | + | Serl91Glu |
| Alal87His | + | Serl8 8Asp | + | Phel89Glu | + | Seri91Asp |
| Alal87Thr | + | Serl88Glu | + | Phel89Asp | + | Seri91Asp |
| Alal87Asn | + | Serl88Asp | + | Phel89Glu | + | Serl91Glu |
Alal87Gln Alal87Gly Alal87Glu Alal87Glu Alal87Asp Alal87Asp Alal87Asp Alal87Glu Alal87Glu Alal87Glu Alal87Glu Alal87Glu Alal87Glu Alal87Asp Alal8 7Glu Alal87Asp Alal87Glu Alal87Asp Alal87Glu Alal87Glu Alal87Asp Alal87Asp Alal87Glu Alal87Asp Alal87Asp Alal87Asp Alal87Asp Alal87Glu Alal87Asp Alal87Glu Alal87Asp Alal87Asp Alal87Glu Alal87Asp Alal87Asp Alal87Gly Alal87His Alal87Thr Alal87Ser Alal87Ser Alal87Thr Alal87Ser Alal87Asn Alal87Gln Alal87Asn Alal87Gly Alal87His + Serl88Glu + Serl88Asp + Serl88Asp + Serl88Glu + Serl88Asp + Serl88Glu + Serl88Glu + Serl88Glu + Serl88Asp + Serl88Glu + Serl88Glu + Serl88Glu + Serl88Glu + Serl88Glu + Serl88Glu + Serl88Asp + Serl88Asp + Serl88Asp + Serl88Asp + Serl88Asp + Serl88Glu + Serl88Asp + Serl88Glu + Serl88Asp + Serl88Asp + Serl88Asp + Serl88Asp + Serl88Glu + Serl88Asp + Serl88Asp + Serl88Asp + Serl88Glu + Serl88Asp + Serl88Glu + Serl88Glu + Serl88Glu + Serl88Asp + Serl88Asp + Serl88Glu + Serl88Asp + Serl88Asp + Serl88Glu + Serl88Glu + Serl88Asp + Serl88Asp + Serl88Asp + Serl88Asp + Phel89Asp + Phel89Glu + Phel89Gly + Phel89Met + Phel89Ile + Phel89Leu + Phel89Thr + Phel89Leu + Phel89Tyr + Phel89Gln + Phel89Cys + Phel89Gln + Phel89Pro + Phel89Ser + Phel89Cys + Phel89Leu + Phel89Ile + Phel89His + Phel89His + Phel89Val + Phel89Gly + Phel89Cys + Phel89Asn + Phel89Thr + Phel89Ile + Phel89Ala + Phel89Val + Phel89Ala + Phel89Ser + Phel89Asn + Phel89Cys + Phel89Cys + Phel89Ser + Phel89Tyr + Phel89Ala + Phel89Thr + Phel89Met + Phel89Ser + Phel89Met + Phel89Ser + Phel89Tyr + Phel89Ala + Phel89Gly + Phel89Asn + Phel89His + Phel89Ser + Phel89Val + Serl91Glu + Serl91Glu + Serl91Asp + Serl91Asp + Serl91Glu + Serl91Asp + Serl91Asp + Serl91Asp + Serl91Asp + Serl91Asp + Serl91Glu + Serl91Glu + Serl91Glu + Serl91Glu + Serl91Asp + Serl91Asp + Serl91Asp + Serl91Glu + Serl91Asp + Serl91Asp + Serl91Glu + Serl91Asp + Serl91Glu + Serl91Glu + Serl91Asp + Serl91Glu + Serl91Glu + Serl91Glu + Serl91Asp + Serl91Asp + Serl91Glu + Serl91Asp + Serl91Glu + Serl91Glu + Serl91Asp + Serl91Asp + Serl91Glu + Serl91Asp + Serl91Asp + Serl91Asp + Serl91Glu + Serl91Asp + Serl91Asp + Serl91Glu + Serl91Glu + Serl91Glu + Serl91Asp
22. táblázat
Több hurokban lévő kétszeres mutációjú variánsok
Leu 96Gly + Ser204Glu
Gin 59Ser + Asn 62Ser • ·
- 47 Val 95Gln + TyrlO4Cys + Glyl27Gln + Serl88Glu + Gly 97Gln + Gln206Asp + Asp őOGlu + Thrl58Asp + Pro210Gln + TyrlO4Glu + Tyrl67Pro + IlelO7Leu + Gly 97Glu + Thr 66Pro + Alal33Gly + SerlO5Glu + Tyrl67Asp + SerlőlGlu + Ser 63Asp + Leu 96Gln + Alá 98Gly + Leu 96Asn + Ser 63Asp + Thrl58Gln + Leul26Gln + Serl59Asp + SerlOlAsp + GlylOOAsn + Gin 59Asp + Glyl57Glu + TrplOőPro + Ala216Ser + Thr őőGln + GlylO2Gln + Asn212Ser + Gln206Ser + TyrlO4Glu + Val 95Asp + TyrlO4Asp + Thr 66Pro + Asn 61Glu + Asp őOGlu + Prol29Gln + GlylőOAsp + SerlőlGlu + Leu 96Pro + TrplOőAsn + SerlOlAsp + Alal33Gln + SerlOlAsp + IlelO7Ala + Alal33Thr + Phel89Ser + Gly 97Asp +
Asn218Asp Lys213Glu Ala216Pro Gly215Asn IlelO7Ala Tyr217Thr Gln2 0 6Asn Gln2 0 6Ser Gly215Asn Ilel07Leu Gly211Glu Alal87Asp Thrl64Pro Val203Cys Tyr217Ser Phel89Val Alal87Thr Ala216Thr GlnlO3Ser Prol29Glu Tyr214Glu Asn212Ser Phel89Leu Lys213Glu GlylőOAsp Tyr217Gln Val203Ala Gly215Glu Glyl31Gln Leu209Pro Tyr217Ile Gly219Asp Leul2 6Asn Gly219Asp Lys213Asp Lys213Glu Ásni55Gln Leul2 6Ser GlylőőGln Ser204Glu Phel89Pro Tyrl67Ala Gln206Asp Ala216Asn GlylőőAsn GlylOOAsp Val203Asn Glyl27Ser Val203Asp Gly202Ser GlylőOAsn Tyr214Ile Ser2 04Asp TrplOőPhe • · ·
- 48 Gin 59Asn Pro201Ser Serl62Glu Gly 65Ser Lys213Asp Val203Ala Ala216Thr Glyl31Asn TyrlO4Glu Glyl27Ser TrplO6Gly Asn 62Ser Seri63Asp Pro201Gln GlylOOGln Serl30Glu Asp 60Glu Asnl55Glu Ala 98Gln Pro201Asn Thr 66Ser Leul2 6Glu Asn 61Ser Thr 66Ser Prol29Ser Ala216Asp Serl30Glu Asn 62Asp Val 95Ser GlylOOPro Asnl55Gln Pro12 9Asp SerlOlGlu Alal87Pro Val 95Gly Gly202Pro Gly 97Ser Tyrl67Asp Thr 66Ser Ala216Thr Ala200Asn Asp 60Glu Val 95Thr Val203Asn GlylO2Asp Serl30Asp TyrlO4Ala Leu 96Met SerlOlAsp SerlOlAsp Val 95Asn TyrlO4Asn Gly2 02Asn Gin 59Glu + Glul56Asp + Lys213Glu + Gly202Gln + Gln206Asp + Ala216Pro + Lys213Asp + Tyr217Pro + Asn218Glu + Glyl31Pro + Thrl58Asp + Serl32Asp + Alal87Ser + Phel89Ser + Gly215Glu + Tyr217Thr + Glyl54Asn + Tyr214Thr + Tyr217Gln + Glyl02Asn + Gly219Asp + Glyl27Gln + Ala216Thr + Asnl55Glu + Glyl57Asp + Thrl64Gln + Tyr217Val + Tyr217Leu + Tyr214Leu + Phel89Val + Serl59Asp + Ser204Glu + Val203Ser + Thrl58Asn + Asn218Asp + Serl61Asp + Ala216Gln + Gly215Asp + Gln206Ser + Asn212Glu + Tyr217Gln + Tyr217Ala + Val203Pro + Tyr217Met + Lys213Glu + Val203Gly + Alal33Thr + Glyl66Ser + Tyr217Asp + Glyl02Pro + Thr220Pro + Ala216Pro + Prol29Asp + Gln206Asp + IlelO7Cys • · · • ·
Thr 66Glu Val 95Met Ser204Glu Pro210Glu Leul2 6Pro Prol29Asp IlelO7Gly Thr 66Glu Asnl55Asp Gly21lAsp Ala216Asp Thrl58Gly GlylOOGlu Alá 98Ser Glnl03Asn Glyl54Gln Leul2 6Pro Ala216His Glyl54Glu Gly 97Ser TrplOőIle GlylO2Ser Glyl54Glu Lys213Glu Asn 62Asp Thr 66Gly Glyl57Pro Gin 59Asp Leu 96Met Alá 98Gly Asn 62Gln Glyl27Asn Glyl60Pro Leu 96Thr Trpl06Phe Glyl31Pro Gly 65Gln Glyl27Asn Alal33Asn Ser204Glu Glul56Asp Asp 60Glu Asn 61Gln Pro21OAsn Alal33Asp Gly219Ser Serl91Asp Glyl60Glu Seri62Glu Alá 98Gln Val 95Asp Tyrl04Ser GlylOOPro Gly 97Asp
Tyrl04Pro Asp 99Glu Gly211Pro Gly219Ser Ser2 04Glu Ala200His Gly215Pro Gln206Asn Leu209His Tyr217Val Thr220Gln Ser204Asp IlelO7Ser Glyl54Asn Ala216Glu Pro210Gln Ala216His Tyr217Leu Tyr217Ser Tyrl67Thr Ala216Gly Phel8 9Gly Gly219Asn Ala216Pro Leul26Ser Gln206Glu Val203Cys Tyr214Ser GlylOOSer Lys213Asp Leu 96Asp Gln20 6Glu Gly219Asn Tyr217Ala Tyr217Thr Lys213Glu Asp 99Glu Glyl28Gln Glyl54Asn Gly215Ser Pro210Ser Gln206Ser Ala216Asn Asn212Asp Val203Asn Thr220Gly Val203Thr Ala216Thr Ala216Gln Tyr217Asn Gln206Asn Ser204Asp Phel89Gln Tyr217His
9 99
- 50 Gln206Ser Alal87Asn Alá 98Gly Thrl64Asn Val203Gln TrplOöCys Thrl58Ser Serl88Asp Glyl57Asn Seri 8 8Asp Glyl28Asn Leul2 6Asn Glyl27Asp Gin 59Glu Seri32Asp Glyl66Ser Seri63Glu Alá 98His Alá 98Pro Glyl60Asn Gln206Asn Glnl03Ser Alal33Gly Serl32Glu Asn 61Gln Leul2 6Ala Gln2 0 6Asp Gln2 0 6Glu Glyl57Ser GlylööGlu Ser18 8Glu Thr 66Glu Glyl02Pro Val 95Gln Ser191Glu Asp 99Glu GlylOOAsn Glyl66Pro Gin 59Asn Leul2 6His Thr 66Pro TrplOöHis Tyrl67Leu Val 95Thr IlelO7Ser Phel8 9Tyr Gly 65Asn Tyrl67Val Gly 97Gln Asp 99Glu Leul2 6Cys Leul2 6Cys Seri91Asp GlylOOGln + Gly211Asn + Serl88Asp + Asp 99Glu + Phel89Cys + Gln206Ser + Glyl57Ser + GlylöOSer + Tyr217Gly + Phel89Met + Ala216Asn + GlylööSer + Ala216Ser + Gln206Asn + Leu 96His + Tyr217Ala + Gly219Glu + Val203Met + Tyr217Met + Serl30Asp + Ser204Glu + Gly215Asp + Serl30Asp + Thr220Gly + Ala216Gln + IlelO7His + Glyl31Glu + Thr220Gly + Tyr217Cys + Pro210Asp + Tyr214Gln + Ala216His + GlylööGln + GlylööGlu + TyrlO4Ile + Gly219Ser + Asn218Gln + SerlO5Glu + Pro210Asn + Thrl64Ser + Tyr214Ala + Lys213Asp + Gly211Ser + Ser204Glu + Alal33Gly + Gln206Glu + Lys213Asp + Asn218Asp + Lys213Glu + Serl32Glu + Glyl02Pro + Ala216Asp + Glyl27Ser + Ala216Asn + Glyl54Asp • ·
Asn 61Asp + Serl61Asp + Ile205Gln + Asn 62Gln + IlelO7Met + Leul26Ile + Alá 98His + Asn 61Asp + Asnl55Glu + Asnl55Gln + Asnl55Glu + Lys213Asp + Glyl27Pro + Ser204Asp + Glul56Asp + Glyl27Glu + GlylOOAsn + Gly211Gln + Alal87Asp + Ala216Glu + Ser204Asp + Glyl31Ser + GlylOOAsn + SerlO5Asp + Ser204Asp + Tyr214Met + Ser 63Glu + Ilel07Cys + TrplOőGly + GlylO2Asp + Asp 99Glu + Lys213Glu + Alal33Ser + Asp 60Glu + Asn 62Gln + Tyrl67Ala + Glul56Asp + Glyl31Pro + Lys213Glu + Glyl60Ser + Asnl55Ser + Asp 60Glu + Thrl64Gln + Serl62Asp + GlylOOGlu + GlylőOPro + Thr 66Gly + TyrlO4Ile + Pro201Gln + Glnl03Glu + Serl63Glu + Glyl27Ser + Gln206Asn + Pro210Glu +
Gly211Ser Phel8 9Leu Ala216Glu Tyr217Leu Seri61Asp Tyr217Ser Seri62Asp Glyl28Ser Gly215Gln Ser2 04Asp Thr220Gln Tyr217His Ser204Glu Tyr217Ala Val203Gly Alal33His Glyl31Ser Lys213Asp Phel8 9Leu Tyr217Cys Ala216Thr Thrl58Asp Gln206Asn Glyl31Gln Tyr214Val Tyr217lle Thrl64Asn Ala216Pro Gln2 0 6Asp Thrl64Pro Ala216Gln Ala216Gln Pro210Glu Tyrl04Asn IlelO7Cys Gly211Asp Tyr217lle Leu209Pro Asn218Gln Val203Glu Tyrl67Ala Phel89Gly Gly219Ser Gln206Asn TyrlO4Asn Gln206Ser Ala216Gly Gly215Pro Ala216Thr Alal33Asn Phel89His Tyr217Ser Leu2 09His Ala216Gln
- 52 Asn 62Ser + SerlőlGlu + Val203Gly + Alá 98Glu + Vall65Gln + Glyl54Ser + Pro201Gly + SerlőlAsp + Asnl55Glu + Leu 96Glu + Thrl58Ser + Ser 63Glu + Val 95Asn + GlylO2Asn + Thr 66Gly + Glyl57Ser + Alá 98Asp + Asp 99Glu + Thr 66Ser + GlnlO3Asp + Thr 66Glu + Glyl27Gln + Phel89Ile + Alal33Gln + Serl30Asp + Leul26Ile + Glyl54Asn + Thr 66Pro + GlnlO3Asn + Phel89Met + Leul26Asn + Pro210Gly + Leul26Val + Gln206Ser + Leu 96Asn + Leul26Pro + Val203His + Tyrl67Ala + TrplOőAsn + Glyl27Ser + Lys213Glu + Val 95Thr + Thrl58Gly + Gly 97Pro + Phel89Ile + Leu 96Gln + Gln206Glu + Glyl54Ser + Serl32Asp + Prol29Gln + Alá 98Asn + Gly211Gln + TrplOőCys + Leu 96His +
Gln206Asn Gly219Asn Asn212Glu Leul2 6Met Ser204Asp Ala216His Gly211Glu Gly219Gln Thr220Asn IlelO7Leu Gly215Ser Prol29Ser Seri63Glu Leul2 6Glu Ala216Pro Thrl58Glu Alal87Ser Thrl64Gln SerlO5Glu Glyl54Pro Tyr217His Ser204Glu Tyr217Thr Lys213Asp Tyr217Thr Asn212Ser Gln206Asp Glul56Asp Lys213Asp Gln206Asp Glyl54Gln Gly215Glu Ala216Pro Tyr217His Lys213Asp Ala216Ser Gly211Asp Tyr217Asp Gln206Asn Seri61Glu Gly219Asn Thr208Gly Ser204Glu TrplOőTyr Val203His Lys213Glu Ala216Thr Asnl55Glu Tyr214Asn Alal33Pro Glyl27Asp Asn218Asp Seri63Asp Ala216Gly
- 53 Gly 97Asn Asn őlSer Pro210Asn Asp őOGlu Thrl64Asn Tyr214Val Leul2 6His Glyl28Gln Seri62Glu Gln206Glu Thrl64Pro Val203Ser Gln2 0 6Asn Ser 63Asp GlylO2Gln SerlOlGlu Gin 59Ser SerlOlGlu Glyl31Asn GlylO2Ser Thrl58Ser Asp 99Glu Val 95Gly Ala200Ser Serl88Glu Tyr214His Thrl58Glu Asnl55Gln Thr 66Ser Thr 66Gly Seri05Asp Glyl02Pro TrplOőGly Asnl55Asp
Ser204Asp Glyl57Asp Tyr217His TyrlO4Ala Ala200Gly Ala216Asp Ala216Ser Asn212Asp Gln206Ser Ala216Ser Thr22OAsp Gly219Asp Gly219Asp IlelO7Gln Val203Ala Vall65Gln GlylőőGlu Tyr217Ser Alal87Glu Tyr214Gly Thr220Glu Gly215Gln Thr220Asp Tyr214Val Ala216Asn Ala216Asp Phel89Asn Serl91Asp Leul2 6Ser Gln206Asp Tyr214Thr Thrl64Gln Pro210Gly Thr220Gln
23. táblázat
Több hurokban lévő háromszoros mutációjú variánsok
| Gin | 59Ser | + | Leu 96Gly | + | Ser204Glu |
| Asn | 62Ser | + | Val 95Gln | + | Asn218Asp |
| Tyrl04Cys | + | Glyl27Gln | + | Lys213Glu | |
| Serl88Glu | + | Gly215Asn | + | Ala216Pro | |
| Gly | 97Gln | + | IlelO7Ala | + | Glyl57Glu |
| Seri62Glu | + | Pro210Gln | + | Gly215Asn | |
| Thr | őőPro | + | Val203Cys | + | Tyr217Ser |
| Seri05Glu | + | Alal33Gly | + | Phel89Val | |
| Leu | 9 6 Asn | + | Asn212Ser | + | Tyr214Glu |
| Gin | 5 9 Asp | + | Glyl31Gln | + | Leu209Pro |
| TrplOőPro | + | Glyl57Glu | + | Tyr217Ile | |
| Thr | 6 6Gln | + | Leul26Asn | + | Serl88Glu |
| Asn212Ser | + | Lys2l3Asp | + | Gly219Gln | |
| Val | 95Asp | + | Leul2 6Ser | + | Asnl55Gln |
| Asn | 61G1U | + | Thr őőPro | + | Phel89Pro |
• · · • ·
- 54 Glyl60Asp + GlylőőAsn + Ala216Asn TrplOőAsn + Glyl27Ser + Val203Asn SerlOlAsp + Ilel07Ala + Gly202Ser Alal33Thr + Phel89Ser + Tyr214Ile Gin 59Asn + Gly 97Asp + TrplOőPhe Glyl57Pro + Pro210Gly + Ala216Glu GlylőOSer + Asn212Ser + Tyr217Thr Asn 62Gln + Gln206Asn + Ala216Ser Prol29Ser + Gly215Glu + Tyr217Pro Ala 98Asn + Tyr217His + Thr220Gly Val203Gly + Gly211Glu + Ala216Asn Glyl27Glu + Tyr214Asn + Ala216His TrplOőPro + Alal33Pro + Gln206Asp Val 95Ser + Glyl28Glu + Tyr217Cys Serl59Asp + GlylőőGln + Gly219Gln Leu 96Val + Glul56Asp + Glyl57Pro Alal33Gly + Thr208Pro + Tyr214Pro TrplOőAsn + Glyl28Pro + Val203Met Gly 65Ser + Glyl02Asn + Alal87His Ala200Gln + Gln206Glu + Tyr217His GlnlO3Ser + Glul56Asp + Ala216Ser Gin 59Asn + Ala216Thr + Gly219Pro GlylO2Ser + Pro210Asp + Tyr217Ile GlylOOGlu + IlelO7Ser + Thrl58Gly Ala 98Glu + Glyl54Gln + Pro210Gln GlnlO3Glu + Leul26Pro + Ala216His Lys213Glu + Ala216His + Tyr217Leu Glyl54Glu + Tyrl67Thr + Tyr217Ser Gly 97Ser + TrplOőIle + Ala216Gly GlylO2Ser + Phel89Gly + Gly219Asn Glyl57Pro + GlylőOAsp + Val203Cys Leu 96Met + Ala 98Gly + GlylOOSer Glyl27Asn + GlylőOPro + Gln206Glu Leu 96Thr + Tyr217Ala + Gly219Asn TrplOőPhe + Lys213Glu + Tyr217Thr Glyl02Glu + Glyl27Asn + Glyl28Gln Alal33Asn + Glyl54Asn + SerlőlAsp Asn őlGln + Gln206Ser + Ala216Asn Ser204Asp + Gly219Ser + Thr220Gly Ala 98Gln + Serl59Glu + Tyr217Asn Gly 97Asp + GlylOOPro + Phel89Gln Gln206Ser + Gly211Asn + Tyr217His Ala 98Gly + Alal87Asn + Serl88Asp Asp 99Glu + Thrl64Asn + Phel89Cys TrplOőCys + Glyl57Ser + Gln20őSer Glyl57Asn + Serl88Asp + Tyr217Gly GlylőőSer + Serl88Asp + Ala216Asn Leul26Asn + Glyl28Asn + Ala216Ser Leu 96His + Serl32Asp + Tyr217Ala Ala 98His + Lys213Glu + Tyr217Met Ala 98Pro + Serl30Asp + GlylőOAsn Serl30Asp + Alal33Gly + Thr220Gly Asn őlGln + IlelO7His + Asn218Glu Gln206Glu + Tyr217Cys + Thr220Gly
Glyl57Ser + Val 95Gln + TyrlO4Ile + Asp 99Glu + Glyl31Glu + Leul26His + Thr 66Pro + TrplO6His + Val 95Thr + Gly 97Gln + Leul26Cys + GlylOOGln + Asn 62Gln + Leul26Ile + Prol29Glu + Glyl27Glu + Glyl31Ser + Glyl31Ser + GlylOOAsn + Gly 97Glu + IlelO7Cys + TrplO6Gly + Alal33Ser + Asn 62Gln + Glyl31Pro + Asnl55Ser + Asp 60Glu + Glyl60Pro + Thr 66Gly + TyrlO4Ile + Glyl27Ser + Serl88Glu + Asn 62Ser + Alá 98Glu + Glyl54Ser + Pro201Gly + SerlőlAsp + Asn 62Glu + GlylO2Asn + Glyl27Gln + Alal33Gln + Serl30Asp + Leul26Ile + Thr 66Pro + Leul26Asn + Leul26Val + Gln206Ser + Leu 96Asn + Ser 63Asp + Glyl27Ser + Val 95Thr + Gly 97Pro + Leu 96Gln + Serl32Asp +
Pro210Asp Glyl02Pro Serl91Glu GlylOOAsn Glyl66Pro Thrl64Ser Gly211Ser Tyrl67Leu Alal33Gly Glyl02Pro Seri91Asp Glyl54Asp Ala216Glu Serl61Asp Asnl55Gln Alal33His Gly211Gln Thrl58Asp SerlO5Asp Glyl60Gln Lys213Asp Gln206Asp Lys213Glu Ilel07Cys Leu209Pro Tyrl67Ala Thrl64Gln Ser204Glu GlylOOAsp Gly215Pro Lys213Asp Gln206Asn Gln206Asn Leul26Met Serl61Glu Gly211Glu Gly219Gln Thrl58Ser Leul2 6Glu Ser204Glu Phel89Ile Asn212Ser Glyl54Asn Glnl03Asn Glyl54Gln Gly215Glu Lys213Asp Leul2 6Pro TrplOöAsn Serl61Glu Thr208Gly TrplO6Tyr Phel89Ile Alal33Pro + Tyr214Gln + Glyl66Glu + Gly219Ser + Asn218Gln + Pro210Asn + Tyr214Ala + Lys213Asp + Ser204Glu + Gln206Glu + Serl32Glu + Ala216Asn + Gly211Ser + Tyr217Leu + Tyr217Ser + Thrl58Gln + Val203Gly + Lys213Asp + Ala216Thr + Gln206Asn + Thrl64Asn + Ala216Pro + Ala216His + Ala216Gln + Thrl64Asp + Tyr217Ile + Phel89Gly + Gly219Ser + Gln206Ser + Ala216Gly + Ala216Thr + Tyr217Ser + Leu209His + Pro210Glu + Val203Gly + Ala216His + Ala216Thr + Thr220Asn + Gly215Ser + Ala216Pro + Tyr217Thr + Lys213Asp + Tyr217Thr + Gln206Asp + Lys213Asp + Pro210Gly + Ala216Pro + Tyr217His + Ala216Ser + Gln206Asn + Gly219Asn + Lys213Glu + Asn218Glu + Val203His + Tyr214Asn • ·
- 56 Alá 98Asn + Leu 96His + Pro210Asn + Asp 60Glu + Glyl57Asn + GlylOOAsp + Leul26His + Ser 63Asp + SerlOlGlu + Asp 99Glu + Ala200Ser + Asnl55Gln + Thr 66Gly + Glyl02Pro + Trpl06Gly + Thrl58Gly + Glyl54Gln + Asp 60Glu + Glyl31Ser + Glyl28Gln + Gly 97Asn + Glyl60Asp + Gin 59Asp + Glyl54Ser + Ser 63Glu + Glyl57Pro + Thrl64Glu + Thr 66Pro + TrplO6Met + IlelO7Thr + Leul26Pro + Tyrl67His + Val 95Pro + Val 95His + Val 95Ala + Asp 60Glu + GlylőOAsn + GlylO2Gln + Asn 62Gln + GlylOOPro + SerlO5Glu + Thr 66Gly + GlnlO3Asn + Asp 60Glu + Gin 59Glu + Asn 61Glu + Asn 62Gln + SerlO5Glu + GlylOOSer + Gly 97Pro + GlylOOSer + Serl32Asp + Gin 59Asp + GlnlO3Asn +
Glyl27Asp Gly 97Asn Gly215Glu TrplO6Tyr Phel89Val Thrl64Asn Gln206Asp IlelO7Gln GlylO2Gln Thrl58Ser Ser204Glu Thrl58Glu SerlO5Asp Thrl64Gln Asnl55Asp Alal87Gln Tyrl67Cys Alá 98His Ile205Val Vall65Cys IlelO7Gln Glyl66Pro Glyl54Ser Vall65His Prol29Ser Thrl58Ser Gly215Ser Asp 99Glu Alal87Ser Glul56Asp Glyl31Asn Gly219Pro Trpl0 6Ile Gln2 0 6Asn Alal87Ser Asn 62Gln Alal87Gly TrplO6His Serl88Glu Gly202Gln IlelO7Thr Glyl31Asp Alal87Ser Thrl64Pro Asn212Ser Glyl66Gln GlylőOGln Tyrl67Ala Asnl55Ser Leul2 6Ala Glyl31Gln Alal87Pro Gln206Asn IlelO7Asn + Gly211Gln + Ala216Gly + Tyr217His + Prol29Gln + Asn218Asp + Ala200Gly + Ala216Ser + Val203Ala + Vall65Gln + Gly215Gln + Tyr214Val + Phel89Asn + Tyr214Thr + Pro210Gly + Thr220Gln + Ser204Glu + Ser204Glu + Glyl02Pro + Ala216Asp + Gly211Gln + Glyl66Gln + Tyr214Ile + Asn218Gln + Ser204Glu + Tyr217Gly + Lys213Glu + Ala216Asn + Tyr217Cys + Tyr217lle + Tyr217Cys + Tyr217Leu + Thr220Glu + Tyr217Gly + Lys213Glu + Tyr217Glu + Tyrl67Ile + Gln206Ser + Serl63Glu + Pro210Gln + Ala216Ser + Glyl31Pro + Phel89Ser + Ser204Glu + Ala216Ser + Tyr217Ser + Gly215Pro + Gly219Ser + Tyr217Ser + Tyr217Asn + Glyl57Gln + Phel89Glu + Gln206Asn + Tyr217Ile + Alal33Ser · · ·
- 57 Glyl28Gln + Thr őőGlu + Asp őOGlu + Serl32Asp + Asn 62Asp + Gin 59Asn + Val 95Ser + Ala216Pro + Ser 63Asp + Gly 97Asn + Alá 98His + GlylO2Asn + IlelO7Val + TyrlO4Leu + Pro201Asn + Glyl66Asn + Alá 98Ser + Alal33His + Alá 98Glu + Leu 96Ile + Tyrl67Thr + Leu 96Gln + Glyl27Glu + Glyl60Ser + TyrlO4Ser + Asn 62Ser + Leu 96Cys + Glyl31Gln + Asp őOGlu + GlylO2Glu + Asn 62Gln + Gly 97Pro + Thr őőPro + Gly 97Asn + TyrlO4Ala + Glyl57Asn + Alal33His + Leul26Gln + Asn 61Asp + Thr őőPro + Ser204Glu + Ser204Asp + Ser204Asp + GlnlO3Asn + Gly202Gln + Ser204Glu + Ser204Asp + Tyrl67Ala + Gly211Asp + Gly211Asp + Tyrl67Val + Asp 60Glu + GlylőOGlu + Ser204Glu +
Prol29Asn Trpl0 6Ala Gly 65Asn Glyl57Asn Ile205Thr Gly 65Pro Glyl02Ser Tyr217Pro Glyl27Ser Glyl54Gln Trpl0 6Val Ilel07Gln Lys213Glu Gln206Glu Pro21OAsn Ile205Asn Gln2 0 6Ser Seri 8 8Asp Glyl31Pro Serl88Asp Gln2 0 6Ser SeriőlGlu Thrl58Pro Lys213Glu Leul26His GlylőOGlu Thrl64Ser Phel89Ile Gly 65Gln Glyl28Ser Val 95Gly Glyl54Asp Leu 96Val Asnl55Glu Tyrl67Glu Asn218Glu Thrl64Gln Serl59Glu Asn 62Asp GlylOOGlu Ile205Gln Ala216Glu Ala216Asp Ser204Glu Ser204Glu Gln206Asp Gln206Glu Ser204Asp Lys213Glu Lys213Glu Gly211Asp Asn 62Asp Serl62Glu Gln206Asp + Ala216Asp + Alal87Ser + Tyr214Ser + Ala216Ser + Gln206Ser + Val 95Asp + Lys213Asp + Asn218Ser + Thr220Asn + Ala216Asn + Ala216Gln + Serl62Asp + Ala216Ser + Thr220Asn + Gly211Gln + Ala216Thr + Gly215Ser + Tyr217Gly + Glyl57Pro + Val203His + Tyr217His + Ala216Thr + Pro201Gly + Ala216Ser + Tyr214His + Ala216His + Ser204Asp + Val203Asp + Thr őőAsn + Ala216Gln + Gln206Asn + Asn218Gln + Ala216Pro + Tyr214Val + Ala216Pro + Thr220Gly + GlylőőSer + Glyl60Asp + Glyl28Ser + SerlOlGlu + Ala216Glu + Tyr217Cys + Thr220Gln + Ala216Glu + Asn218Asp + Ala216Asp + Ala216Asp + Tyr217Asp + Ala216Thr + Tyr217Pro + Lys213Glu + Tyr217Leu + Ala216Thr + Tyr217Leu • · · · • · » * * ·
- 58 Ser204Glu + Gln206Glu + Ala216Thr Ilel07Cys + Ser204Glu + Gln206Glu Ser204Glu + Gln206Glu + Gly215Asn SerlőlAsp + Serl63Asp + Ala216His Thrl64Pro + Gln206Glu + Tyr217Asp Asp 60Glu + Gln206Asn + Pro210Asp Asp 60Glu + Tyrl04Asn + Pro210Glu Alal87Glu + Val203Glu + Asn218Glu Serl30Glu + Glyl66Glu + Phel89Tyr Thrl58Asp + Serl62Glu + Gln206Ser Glyl54Asp + Val203Ser + Gly219Asp Serl88Glu + Serl91Asp + Ala216Asn Asp 60Glu + Gly 97Glu + Asp 99Glu Thrl64Pro + Ser204Glu + Gly219Glu Asp 99Glu + GlylO2Asp + Ala216Gln Ser204Glu + Gln206Asn + Gly215Asp Ser204Asp + Gln206Asp + Tyr214Asp Thr 66Asp + Gly211Glu + Lys213Asp SerlOlGlu + Leul26Glu + Tyr214His Asn 61Glu + Leu 96Glu + IlelO7Leu Asp 60Glu + Leu 96Glu + Glyl66Pro SerlOlGlu + Glyl27Glu + Alal87Gln Ser 63Glu + Glyl31Asn + Lys213Glu Ser 63Asp + Phel89Leu + Lys213Glu SerlO5Glu + Serl32Glu + Tyrl67Gly Ser204Asp + Ala216Glu + Thr220Glu Ser204Glu + Lys213Asp + Gly215Asp Asp 99Glu + SerlOlAsp + Tyrl04Asp Ser 63Asp + Pro210Glu + Tyr217Glu Thrl58Gln + Gln206Asp + Lys213Asp Gln206Glu + Lys213Glu + Ala216His Glyl57Asp + Tyr214Gly + Thr220Asp Ser 63Glu + GlylOOSer + Tyr217Asp GlylOOGlu + GlnlO3Asp + Gln206Asn Glyl54Glu + Serl63Asp + Val203Met Val 95Gly + Lys213Asp + Ala216Glu Gin 59Asn + Leul26Glu + Prol29Glu Ser204Glu + Gln206Asp + Lys213Glu Alal87Asp + Ser204Glu + Gln206Glu Ser 63Glu + Ser204Glu + Ala216Asp Asn 61Asp + Ser 63Asp + Ala216Glu Prol29Glu + Asnl55Glu + Serl63Asp Ser 63Asp + IlelO7Leu + Asn212Asp Gln206Asp + Pro210Asp + Asn212Asp Glul56Asp + Serl63Glu + Gly219Asp IlelO7Glu + Glyl31Ser + Serl32Asp GlylOOAsn + Gly211Asp + Gly215Glu GlnlO3Asp + Glyl27Glu + Ala216Gln Serl30Asp + Glyl31Asp + Lys213Glu GlylOOAsp + SerlOlGlu + Serl63Asp Prol29Asp + Serl30Asp + Tyr217Glu Val203Asp + Ser204Glu + Lys213Glu Serl32Asp + Ala216Glu + Tyr217Glu SerlOlGlu + Alal87Glu + Serl88Glu » ·· ·· *· ·· • «··«·· ·«· « · ·«· *·· • · « « · ··· ·· ·· ·
- 59 Alá 98Asp + Asp 99Glu + Ser204Asp Ser204Asp + Gln206Asp + Asn212Asp GlnlO3Asp + Glul56Asp + Serl91Glu Serl32Asp + Ser204Glu + Ala216Asp Alá 98Glu + Ser204Glu + Ala216Glu Ser204Asp + Lys213Asp + Asn218Glu Ser204Glu + Gly211Asp + Tyr217Asp Serl62Asp + Glyl66Asp + Asn212Ser Glyl28Glu + Glyl66Glu + Gln206Glu Asp 60Glu + Asn 62Glu + Ser204Asp Asp 99Glu + SerlOlAsp + Glyl54Glu Glnl03Ser + Gln206Glu + Gly219Asp Phel89Asp + Pro210Asp + Lys213Glu Asn 61Asp + SerlOlGlu + Glyl28Asp Thr 66Glu + Glyl66Gln + Ala216Glu SerlOlGlu + Ser204Glu + Gln206Asp Glyl57Glu + Ser204Glu + Gln206Glu Asp 99Glu + Ser204Asp + Gln206Glu Gly 97Glu + Ser204Glu + Gln206Asp SerlOlAsp + GlylO2Ser + SerlO5Asp Serl61Glu + Serl63Asp + Gln206Asp Serl30Asp + Serl32Glu + Asn212Glu Serl30Glu + Serl32Glu + Glyl60Asp Prol29Glu + Glyl31Glu + Gly215Glu Asn 62Gln + Thrl58Asp + Glyl66Glu Serl32Glu + Gln206Glu + Tyr217Asp Asp 60Glu + Phel89His + Asn212Glu Glyl31Glu + Lys213Asp + Gly215Glu Serl59Glu + Serl63Glu + Ser204Glu Thrl58Glu + Serl62Asp + Gly219Asp TyrlO4Glu + Serl32Glu + Asn212Asp Asp 99Glu + Glul56Asp + Serl59Glu Ser 63Glu + Serl88Asp + Serl91Asp Serl88Asp + Serl91Glu + Ala216Asp Gin 59Glu + Serl88Asp + Serl91Asp Ser204Glu + Lys213Glu + Gly219Glu Asp 60Glu + Ser204Asp + Gly219Asp Leul26Asp + Glyl66Asp + Ser204Asp Thrl64Glu + Serl88Glu + Gln206Ser Asp 60Glu + Gln206Glu + Lys213Asp SerlO5Asp + Leul26Glu + Thr220Asp Asp 99Glu + Glul56Asp + Serl88Asp Gin 59Glu + Asn 62Asp + Alal87Glu Glyl66Glu + Val203Asp + Gln206Glu Asnl55Glu + Alal87Glu + Lys213Asp Thr 66Asp + Ser204Glu + Lys213Asp Ser 63Asp + Serl88Glu + Asn218Glu Ser 63Asp + SerlO5Asp + Lys213Asp SerlO5Asp + Serl32Glu + Gln206Glu Ser 63Asp + Gly 97Asp + Asnl55Asp Ser 63Glu + SerlOlAsp + SerlO5Asp Thrl64Glu + Gln206Glu + Lys213Glu Leul26Glu + Gln206Asp + Lys213Asp Glyl31Glu + Gln206Asp + Lys213Asp »··· · • « · · ··· ·*· • · • · ·
- 60 Ser 63Asp + Glyl60Glu + Alal33Glu + Ser 63Glu + Lys213Asp + Serl30Asp + Asp 99Glu + Asn 61Asp + Glyl02Asp + Glyl27Asp + Thr 66Glu + Glyl54Asp + GlylO2Asp + GlnlO3Asp + Tyrl67His + Asp 60Glu + GlnlO3Glu + Asp 60Glu + GlnlO3Glu + Ala 98Asp + Serl88Asp +
TrplOőAsp Lys213Glu Lys213Asp Gln2 0 6Asp Ala216Asn Alal87Asp Seri 8 8Glu Seri 8 8Glu Ser2 04Glu Serl9lGlu Gly 97Glu Alal87Glu Glyl54Glu Serl32Asp Serl91Glu Glul56Asp Glyl54Glu Ásni55Glu Seri61Glu Serl32Asp Ser204Asp + Tyr217Glu + Ala216Glu + Ala216Asp + Gly215Gln + Tyr217Glu + Ser204Glu + Asn218Asp + Asn218Glu + Thr220Glu + Lys213Asp + Tyr217Cys + Gly215Asp + Serl88Glu + Gln206Glu + Asn218Asp + GlylőOGlu + Asn218Asp + Serl59Asp + Serl91Asp + Glyl66Glu + Tyr214Val
24. táblázat
Több hurokban lévő négyszeres mutációjú variánsok
| Gin 59Ser | + | Asn 62Ser | + | Leu 96Gly | + | Ser204Glu |
| Glyl27Gln | + | Serl88Glu | + | Gly215Asn | + | Ala216Pro |
| Asn 62Gln | + | IlelO7Ala | + | Gln2 0 6Asp | + | Tyr217Thr |
| Asn 61Ser | + | Leu 96His | + | Glyl57Pro | + | Ala216Gly |
| Leu 96Gln | + | Glyl27Gln | + | Glul56Asp | + | Thr220Asn |
| Thrl58Glu | + | Gly202Ser | + | Gln206Ser | + | Thr220Ser |
| Gly 97Asn | + | Seri05Asp | + | Gly215Ser | + | Ala216Ser |
| Leul2 6Thr | + | Gly211Gln | + | Lys213Asp | + | Ala216Ser |
| GlylOOAsp | + | TrplO6Asn | + | Glyl27Ser | + | Val203Asn |
| IlelO7Ala | + | Glyl60Asn | + | Glyl66Asp | + | Gly2 02Ser |
| Alal33Thr | + | Phel89Ser | + | Tyr214Ile | + | Ala216Glu |
| Asn 62Ser | + | Seri63Asp | + | Phel89Ser | + | Pro201Gln |
| Ala 98Gln | + | Glyl02Asn | + | Pro201Asn | + | Gly219Asp |
| Thr 66Ser | + | Leul2 6Glu | + | Glyl27Gln | + | Ala216Thr |
| Prol29Ser | + | Thrl64Gln | + | Ala216Asp | + | Tyr217Val |
| Glyl28Gln | + | Thrl58Gln | + | Gln206Asn | + | Asn212Asp |
| Glyl57Ser | + | Gln206Glu | + | Tyr217Cys | + | Thr220Gly |
| Val 95Gln | + | TyrlO4Ile | + | Serl91Glu | + | Gly219Ser |
| Gin 59Asn | + | Gly 97Asn | + | Glyl54Pro | + | Asn218Ser |
| Prol29Gly | + | Thrl58Asn | + | Gln206Asn | + | Gly211Pro |
| Ala 98His | + | TrplO6His | + | Gln206Asn | + | Lys213Asp |
| Leul26Ile | + | Ser204Glu | + | Gln206Asn | + | Tyr217Thr |
| Gin 59Glu | + | Asn 62Gln | + | Phel8 9Leu | + | Val203Ala |
| Prol29Gln | + | Glyl54Pro | + | Alal87Thr | + | Lys213Glu |
| Ser 63Glu | + | Thrl64Asn | + | Gln206Ser | + | Pro21OAsn |
| Leu 96Met | + | Glnl03Asn | + | Alal33Ser | + | Ser204Glu |
| TrplOőAla | + | Glyl54Pro | + | Alal87Asn | + | Gly219Pro |
| Asn 62Glu | + | Glyl02Pro | + | Glyl60Asn | + | Asn218Ser |
LA O L
Thr 66Gly + Glyl02Asp + Leul26Met + Leu 96Glu + Serl30Asp + Thr 66Gly + GlnlO3Asp + Leul26Pro + Prol29Ser + Glyl28Gln + GlylőOAsp + GlnlO3Ser + Asn 61Asp + Gly 65Gln + Asn 62Gln + Thr 66Pro + Val 95Pro + Asp 99Glu + Asn 61Gln + IlelO7Gln + Val 95Thr + Thrl58Pro + Trpl06Pro + GlylO2Asn + GlylőOAsn + IlelO7Ser + GlnlO3Asn + Asn 61Ser + Tyrl04Gly + Glyl02Pro + Asn 61Ser + Thrl58Asn + Gly 65Gln + Glyl28Asn + Leul26Asn + Thr 66Ser + GlylO2Asn + Serl32Glu + Asn 62Glu + Thr208Pro + GlylOOGln + TyrlO4Asp + Leu 96Gln + Glyl28Asn + GlnlO3Ser + Leul26Ser + Thrl64Gly + Serl59Asp + Gly 65Asn + Glnl03Asn + Glyl28Glu + Alá 98His + Glyl28Ser + Glyl27Gln +
GlylOOAsp + Pro201Gln + Val203Gly + IlelO7Leu + Alal33Gln + GlylOOSer + TyrlO4Ile + Ser204Asp + Glyl57Asn + Vall65Cys + Glyl66Pro + Glyl66Asn + TyrlO4Ser + Glyl31Gln + Thr 66Asp + Gly 97Pro + TyrlO4Gly + Trpl06Ala + Val 95Asp + Val203Ser + Gly202Gln + Val203Gly + Asnl55Asp + Glyl57Ser + Val203Thr + Glyl28Asn + Prol29Gly + Ser 63Asp + Prol29Ser + Glyl31Asp + Val 95Gln + Alal87Gly + Gly 97Pro + Serl59Glu + Asnl55Gln + TyrlO4Val + Glyl28Gln + Thrl58Gln + Leu 96Ile + Pro210Gly + Glyl60Asn + Glyl54Pro + Leul26Thr + Alal87Pro + Glyl57Glu + Thrl64Glu + Val203Met + Val203Asn + Gln206Asp + IlelO7Cys + Asnl55Gln + Serl62Glu + Thrl64Asn + Glyl57Ser +
TyrlO4Ile + Gly215Pro + Asn212Glu + Thrl58Ser + Asn212Ser + Leul26Gly + Glyl28Gln + Gln206Asn + Thrl64Glu + Gly211Gln + Gly211Ser + Tyr214Ile + Leul26His + Phel89Ile + Val 95Gly + Glyl54Asp + Glyl27Ser + Pro201Gln + Glyl02Asn + Ser204Asp + Ser204Asp + Lys213Glu + Gln206Ser + Tyrl67Ala + Pro210Glu + Asnl55Glu + Glyl66Gln + Thr 66Gly + Gln206Ser + Asnl55Ser + Ser204Asp + Tyr217Ala + Serl30Glu + Pro201Ser + Gly202Gln + Glyl54Glu + Serl61Glu + Thrl64Asn + Gly211Ser + Ala216Thr + Pro201Gly + Alal87Asn + Serl62Glu + Pro201Gly + Thrl58Gln + Val203Pro + Ala216Asp + Ile205Asn + Ala216Gly + Thrl64Asp + Thrl58Ser + Gln206Asn + Ser204Glu + Serl59Asp +
Ala216Gly Ala216Thr Gly219Asn Gly215Ser Tyr217Thr Ala216Glu Tyr217Cys Thr208Asn Ala200Ser Lys213Glu Tyr214Ile Gly215Pro Tyr214His Val203Asp Gln206Asn Ala216Pro Gly215Asp Ala216Gly Alal87Asn Gly215Ser Ala216Asn Tyr217Ser Tyr214Ala Ala216Asn Asn218Gln Ala216Gly Thr220Gly Glyl54Ser Gly219Ser Tyr217His Ala216Gln Gly219Asp Pro210Asn Tyr217Val Asn212Ser Gly2l5Asn Tyr217Met Gln206Asn Gly219Ser Tyr217Met Asn212Asp Val203Ser Tyr217Val Ser204Glu Ala216Gln Gly211Gln Tyr217Gln Pro21OSer Tyr217His Val203Thr Glyl60Ser Tyr217Gly Tyr217Gly Tyr217Val • ·
- 62 Glyl57Asn + Gln206Asn + Tyr217Val + Gly219Pro Thr 66Ser + Alal33Thr + Serl63Asp + Thr208Gln Leu 96Thr + Glyl31Asp + Gln206Asn + Ala216Gly Asn 61Ser + Serl32Glu + Gly211Ser + Asn218Gln GlylOOSer + TyrlO4Ala + Ser204Asp + Gly211Gln Leu 96His + Alá 98Glu + Prol29Gln + Alal33Asn Asn 62Glu + Glyl28Gln + Alal87Asn + Gly215Ser Leu 96Ile + Glyl57Ser + Val203Ala + Ala216Ser Asn őlGln + Val 95Thr + GlylőOAsp + Ala216His Leu 96Cys + Glyl28Pro + Serl91Glu + Thr2O8Asn TrplOőAla + Glyl31Gln + Val203Ala + Tyr214Gln Asn őlSer + Ala216Gln + Tyr217Leu + Gly219Asn TyrlO4Gly + SerlO5Glu + Thrl58Ser + Leu209Thr Alal33Ser + Phel89Thr + Asn212Glu + Tyr217Thr TyrlO4Ser + Thrl58Gly + Thrl64Glu + Ala216Pro Gin 59Asn + Thr őőAsn + Thrl64Gly + Alal87Pro IlelO7His + Glyl57Ser + Lys.213Glu + Tyr217Asn Glyl27Ser + Gln206Asp + Gly215Gln + Tyr217Leu Leul26Gly + Glyl31Glu + Tyrl67Met + Thr220Gln Thrl58Gln + Lys213Glu + Gly215Ser + Tyr217Gly Asn őlGln + Leul26Gly + Thrl64Ser + Asn218Asp Asn 62Asp + Prol29Gly + Gln206Ser + Ala216His Asp őOGlu + Val 95Gln + Leul26Pro + Val203Thr GlnlO3Glu + IlelO7Val + Phel89Asn + Ala216Thr IlelO7Thr + Prol29Gln + Lys213Glu + Tyr217Thr TyrlO4His + Glyl54Gln + Glyl57Asp + Tyr217Ser Gin 59Asn + TrplOőCys + Ala200Thr + Ala216Gln Thr őőGln + Gly 97Ser + Glyl27Pro + Tyr217Asp GlylOOAsn + Ser204Asp + Pro210Ser + Tyr214Gly Asn 62Ser + Ilel07Gly + Leul26Cys + Thr220Gly Leul26His + Glyl54Asp + Asn218Gln + Thr220Asn SerlOlGlu + Glyl57Gln + Tyr214Pro + Ala216His Asn 62Gln + Serl62Glu + Val203Ser + Ala216Thr TyrlO4Gln + TrplOőGly + Leul26Asp + Asn212Gln Gin 59Ser + Val 95Pro + Gly202Asn + Tyr217Ser Leu 96Pro + GlylőOAsp + SerlőlGlu + GlylőőAsn Serl59Glu + GlylőOAsp + Tyrl67Gly + Phel89Val Asn212Glu + Lys213Glu + Ala216Ser + Tyr217Gln Thrl58Asp + Serl59Asp + Gly215Asn + Ala216Thr Alá 98Asp + Asp 99Glu + Thrl64Gln + Alal87Ser Gly 97Pro + Glyl31Pro + Glyl54Asp + Asnl55Asp GlylO2Ser + TrplOőGln + Glyl57Glu + Phel89Asp GlylOOGln + Ser204Glu + Tyr214Ile + Ala216Glu Val 95Pro + Ser204Glu + Ala216Gly + Asn218Glu Ser204Glu + Ile205Gln + Pro210Gly + Asn218Asp Gly 97Ser + Glyl54Asn + Gln206Asp + Gly215Asp Gly 97Asp + Alá 98Gln + Asp 99Glu + Glyl54Ser Thrl58Gln + Vall65Met + Gly211Glu + Lys213Glu GlylőOGlu + Serl62Asp + Tyrl67lle + Gly219Ser Asn őlSer + Thr őőSer + Asnl55Glu + Glyl57Asp Thrl58Asp + Serl59Asp + Thrl64Asp + Gly211Asn Val 95Asp + GlylO2Glu + Alal87Pro + Tyr217Pro Asn 62Glu + GlylOOAsp + Thr208Asn + Tyr217His Ser204Asp + Gln206Glu + Gly211Gln + Ala216His ···· ·· ·· ·· • ······
Glyl54Asn + Ser204Glu + Gln206Asp + Tyr217Thr Thr 66Gln + Serl30Glu + Serl32Asp + Thrl58Pro Asp 60Glu + Gly 65Asn + Thr 66Glu + Tyr214Ser Asp 60Glu + Gln206Ser + Pro210Glu + Gly219Ser Thrl58Asp + Serl63Glu + Serl91Glu + Ile205Gly Ser204Asp + Gly215Gln + Ala216Glu + Gly219Asp Thrl58Asp + Alal87Asp + Phel89Glu + Tyr217Met Glyl28Gln + Prol29Asn + Val203Asp + Ala216Asp Gly 97Asn + IlelO7Gln + Ser204Glu + Gly219Glu TrplO6Asn + Glyl57Gln + Ser204Asp + Gly219Asp Glyl27Asp + Glyl28Asn + Serl30Asp + Gly219Gln Val 95Ser + Prol29Gly + Asnl55Glu + Serl88Glu Asnl55Asp + Serl88Asp + Phel89Asn + Ala216Gly TrplO6Phe + Ser204Asp + Gln206Asp + Tyr214Asp Asn 62Asp + Gly 97Gln + Pro210Asp + Gly211Glu Val 95Asp + TyrlO4Asp + Leul26Ser + Asnl55Gln GlylOOAsn + Gln206Asp + Lys213Glu + Ala216Asp Gln206Asp + Lys213Asp + Ala216Glu + Tyr217Asn Glyl02Gln + Asnl55Glu + Val203Glu + Asn218Asp Gin 59Glu + Thr 66Glu + Glyl02Pro + Glyl66Gln Leul26Cys + Glyl57Asp + Serl63Asp + Ala216His Thr 66Asp + Gln206Asp + Ala216Asp + Gly219Pro Asn 62Asp + Ser 63Glu + Glyl31Asn + Lys213Glu Leul26Asn + Prol29Asn + Serl91Asp + Gly219Glu Thr 66Asp + GlylOOAsn + Glyl27Ser + Lys213Glu IlelO7Val + Phel89Asp + Val203Glu + Ala216Gln Ser 63Asp + Val 95Ser + Lys213Asp + Ala216Ser Ilel07His + Val203Cys + Tyr214Glu + Tyr217Asp Asn 62Ser + SerlO5Asp + Trpl06Gly + Serl32Asp Ser 63Glu + Len 96Cys + Pro210Glu + Ala216Glu Alal87Gly + Gly215Asp + Tyr217Thr + Asn218Glu GlylőOSer + Gln206Glu + Lys213Glu + Ala216Ser Glyl31Pro + Phel89Leu + Gln206Glu + Lys213Glu Prol29Asn + Alal33Gln + Gln206Glu + Lys213Glu Alá 98His + Glyl54Glu + Serl63Asp + Tyr217Met Val203His + Gln206Glu + Gly211Glu + Lys213Asp Leul26Ala + Ser204Glu + Gln206Asp + Lys213Glu Ilel07Leu + Glyl57Glu + Val203His + Gly219Glu Alá 98Glu + Glyl02Asp + SerlO5Glu + Leu209Thr Thr 66Gln + Lys213Glu + Ala216Glu + Asn218Glu Ser204Glu + Gln206Asn + Pro210Glu + Gly215Asp Glyl27Asp + Serl32Asp + Glyl54Asp + Vall65Gln Ser 63Glu + Val203His + Asn212Glu + Tyr217Leu Gln206Glu + Lys213Glu + Tyr217Ala + Asn218Glu Gln206Asp + Lys213Glu + Ala216Asn + Asn218Asp Glyl57Pro + Serl88Glu + Ser204Glu + Ala216Asp Gin 59Glu + Thr 66Asp + GlylOOGln + Gly215Glu TrplOőSer + Alal87Asp + Gln206Glu + Tyr217Asp Serl59Glu + Asn212Gln + Gly215Asp + Ala216Glu GlylőOAsp + Serl61Asp + Gln206Asp + Tyr214Asn Thr 66Glu + Tyrl67Gln + Gln206Glu + Gly211Pro Prol29Asn + Serl63Glu + Tyr217Glu + Asn218Glu Asnl55Glu + Glul56Asp + Ser204Glu + Tyr214Thr Gin 59Asp + Serl62Asp + Serl63Glu + Ala216Thr ·· ·
| 64 | ||||||
| Leul2 6Pro | + | Seri62Glu | + | Seri63Glu | + | Tyr217Glu |
| GlylOOGlu | + | Val203Cys | + | Asn212Asp | + | Lys213Glu |
| Ser105Glu | + | Alal87Ser | + | Val203Glu | + | Ser204Asp |
| Glnl03Asp | + | Serl63Glu | + | Thrl64Glu | + | Pro201Gln |
| Val 95Gln | + | Glul56Asp | + | Glyl57Asp | + | Lys213Glu |
| Seri62Glu | + | Thrl64Gln | + | Ala216Asp | + | Tyr217Glu |
| Asp 99Glu | + | GlylOOGlu | + | Serl59Glu | + | Ala216Thr |
| Alá 98Glu | + | Asp 99Glu | + | TrplO6Gly | + | Glyl54Asp |
| Asn 62Glu | + | Ser 63Glu | + | Prol29Ser | + | Asnl55Asp |
| Asn 61Glu | + | Gln206Glu | + | Ala216Glu | + | Tyr217Cys |
| Thr 66Pro | + | GlnlO3Asp | + | Glul56Asp | + | Seri91Asp |
| Asp 60Glu | + | Ser204Asp | + | Ala216Asp | + | Tyr217Ile |
| SerlO5Asp | + | Ser204Asp | + | Gln206Ser | + | Ala216Glu |
| Thrl58Asn | + | Seri62Asp | + | Ser204Asp | + | Asn218Asp |
| Gin 59Asp | + | Glyl57Ser | + | Ser204Asp | + | Asn218Asp |
| Gly 97Ser | + | Glyl28Glu | + | Gln206Glu | + | Gly215Asp |
| TrplOöAsp | + | Val203Cys | + | Ser2 04Glu | + | Tyr217Glu |
| SerlO5Glu | + | Alal87Thr | + | Ser204Glu | + | Tyr217Glu |
| Gly 97Asn | + | Asnl55Glu | + | Seri63Glu | + | Tyr214Val |
| Val 95Asp | + | TrplOöGlu | + | Alal87Pro | + | Val203Asp |
| GlnlO3Asp | + | TrplO6Glu | + | Glyl28Asn | + | Seri62Asp |
| Glyl28Glu | + | Serl30Asp | + | Serl88Glu | + | Ala216Gln |
| GlnlO3Asp | + | SerlO5Glu | + | Glyl54Glu | + | Ala216Thr |
| Serl59Glu | + | Gly211Glu | + | Lys213Asp | + | Tyr217Gly |
| Gin 59Asn | + | Serl88Asp | + | Gly211Glu | + | Lys213Glu |
| IlelO7Glu | + | Gly211Glu | + | Lys213Asp | Ί- | Tyr217Gln |
| Serl59Asp | + | Serl62Glu | + | Pro210Glu | Ι | Ala216Asn |
| Asp 60Glu | + | Asn 62Asp | + | Serl91Asp | + | Tyr217Leu |
| Asp 60Glu | + | Ser 63Asp | + | IlelO7Asn | + | Phel89Glu |
| Leu 96Cys | + | GlylőőAsp | + | Pro210Asp | + | Lys213Asp |
| Val 95Glu | + | Alá 98Asn | + | Glyl02Glu | + | Serl62Glu |
| Ser 63Asp | + | Tyrl67His | + | Ala216Glu | + | Gly219Glu |
| TyrlO4Asp | + | Thrl58Asp | + | Serl91Glu | + | Asn218Ser |
| Glyl54Pro | + | Serl59Glu | + | Ser2 04Asp | + | Gln206Asp |
| GlylO2Glu | + | Ser204Asp | + | Gln206Glu | + | Tyr217His |
| Ásni55Gln | + | Seri63Asp | + | Ser204Glu | + | Gln206Glu |
| Glyl31Asp | + | Thrl58Gln | + | Ser2 04Asp | + | Gln2 0 6Asp |
| Tyrl67Asp | + | Ser204Glu | + | Gln206Glu | + | Tyr217Asn |
| Gly 97Asp | + | Alal33Gly | + | Ser204Asp | + | Gln206Asp |
| Glyl27Asp | + | Ser204Glu | + | Gln206Glu | + | Tyr214Asn |
| GlylO2Glu | + | Glyl27Gln | + | Asnl55Asp | + | Thr220Asp |
| Gly 97Glu | + | Serl30Glu | + | Tyrl67Asp | + | Tyr217Val |
| Asn 62Glu | + | Alal87Gly | + | Pro21OAsp | + | Ala216Glu |
| SerlOlAsp | + | SerlO5Asp | + | Ala216His | + | Tyr217His |
| Serl30Asp | + | Serl32Glu | + | Asn212Glu | + | Ala216Gln |
| Serl30Glu | + | Serl32Glu | + | Glyl60Asp | + | Thr220Gly |
| GlylOOGlu | + | TyrlO4Thr | + | Serl30Asp | + | Serl32Asp |
| Gin 59Ser | 4- | Glyl60Asp | + | Gln206Glu | + | Tyr217Asp |
| Glyl27Asp | + | Prol29Glu | + | Serl88Asp | + | Gln2 0 6Asn |
| Serl59Asp | + | Thrl64Glu | + | Phel89His | + | Lys213Glu |
| Asn 61Asp | + | Gly 97Asp | + | Serl59Glu | + | Thr220Ser |
| Serl59Glu | + | Seri63Glu | + | Ser204Glu | + | Tyr217Ser |
| Thrl58Asp | + | Serl62Glu | + | Alal87Pro | + | Ala216Glu |
| Leu 96Val | + | Thrl58Glu | + | Seri62Asp | + | Gly219Asp |
• ·
- 65 Asp 99Glu + Val 95Asp + Asn 61Glu + Asn 62Asp + GlylO2Asp + Serl88Asp + Asp 60Glu + Thr 66Asp + Asn 62Glu + Asn 61Ser + GlylOOGlu + Asp 60Glu + Alá 98Glu + Glyl28Gln + SerlOlGlu + Serl32Asp + Asn 61Glu + Glnl03Glu + Gin 59Glu + Ser 63Glu + Gin 59Asp + Ser 63Glu + Asp 60Glu + TrplO6Met + Ser 63Asp + GlylO2Asp + Gin 59Ser + Glyl27Pro + Ser 63Asp + Thr 66Gln + Glyl28Asp + Glul56Asp + Asp 99Glu + Serl63Asp + Glyl54Glu + Glyl54Asp + Glyl54Ser + Glyl57Ser + SerlOlGlu + GlylOOAsp + Asn 62Ser + Thr 66Asn + Glyl57Asn + Glyl27Glu + Asp 99Glu + Asp 60Glu + Gin 59Asp + SerlOlGlu + Ser 63Glu + GlylO2Gln + Val 95Glu + SerlO5Glu + GlnlO3Asp + Asp 60Glu +
Thrl58Asp + Glyl31Asn + Asp 99Glu + Glyl66Ser + SerlO5Asp + Serl91Glu + Gly 97Asp + Leu 96Glu + Thr 66Asp + Alá 98Asp + Tyrl04Glu + Leul26Asn + Glyl54Pro + Alal33Glu + Glyl54Asn + Asnl55Asp + Asnl55Asp + Glyl60Asn + GlylOOGlu + SerlOlAsp + Thr 66Asp + SerlOlGlu + Val 95Ala + Serl91Glu + Glyl60Asp + Glyl57Asn + SerlO5Asp + Serl62Glu + SerlO5Asp + Glyl28Glu + Glyl57Asn + Gln206Glu + Glyl57Pro + Gln206Asp + Serl63Glu + Glyl57Asn + Glyl57Asp + Thrl58Glu + Glyl54Pro + Lys213Glu + Thrl58Glu + IlelO7Val + Pro201Gln + Thrl58Pro + Alal33Gly + Serl88Glu + Leu 96Glu + Prol29Asp + Serl63Asp + GlylőOGlu + Asp 99Glu + Alal33Glu + Serl32Glu + SerlOlAsp +
Serl62Asp + Serl63Asp + Ser204Asp + Ser204Asp + Tyrl67Ala + Ala216Gly + TrplO6Asn + Phel89Gly + Tyrl04Pro + Asnl55Asp + Serl30Glu + Gln206Glu + Glul56Asp + Alal87Glu + Gly211Glu + Thrl58Glu + Alal87Asp + Gln206Glu + Thrl64Pro + Glyl31Ser + TyrlO4Val + Alal33His + Lys213Glu + Lys213Glu + Lys213Asp + Serl62Glu + Serl62Asp + Serl91Glu + Serl32Asp + Glul56Asp + Pro210Gln + Lys213Glu + Gln206Asp + Lys213Glu + Pro210Gln + Serl63Asp + Lys213Glu + Lys213Asp + Lys213Asp + Ala216Asp + Ser204Asp + Lys213Asp + Lys213Glu + Alal87Asp + Serl88Glu + Gln206Ser + Glyl31Gln + Thrl58Asn + Ala216Asp + Serl91Glu + Gly215Glu + Val203Glu + Serl62Glu + Thrl64Gly +
Val203Met Serl91Glu Tyr217Gly Gly215Glu Gly211Glu Tyr217Glu Serl59Glu Gly215Asp Glyl66Asp Serl88Glu Asnl55Gln Lys213Asp Serl88Glu Serl91Asp Tyr214Glu Ala216Thr Asn212Gln Asn218Glu Gly211Asp Val203Pro Alal33Asp Ala216Glu Tyr217Ala Gly219Glu Ala216His Serl91Glu Serl91Asp Asn212Asp Ala216His Ala216Asp Thr220Glu Ala216Asn Lys213Glu Tyr217Ala Tyr217Asp Ser204Glu Ala216Glu Ala216Asp Ala216Glu Tyr217Leu Thr220Asp Tyr217Asp Tyr217Asp Ser204Glu Thr220Glu Asn218Glu Serl32Asp Val203Ser Tyr217Gln Lys213Glu Asn218Gln Asn218Gln Gln206Ser Lys213Asp
Gin 59Asp + Asp 99Glu + GlnlO3Asn + Alal87Pro Asp 60Glu + Serl59Asp + Tyrl67Leu + Serl88Asp Asn 62Glu + Serl63Glu + Gly211Glu + Ala216His Asn 62Glu + Serl32Asp + Pro210Gly + Gly211Glu GlylO2Asn + Serl62Asp + Gln206Asp + Gly219Asp Serl88Asp + Ser204Asp + Tyr217Leu + Thr220Gln Ser 63Glu + Glyl66Gln + Ala216Thr + Asn218Glu GlnlO3Glu + Glyl31Glu + Tyr217Thr + Thr220Glu Asp 60Glu + Phel89His + Asn212Glu + Ala216Asp Asnl55Gln + Gly215Glu + Tyr217Pro + Gly219Asp GlylO2Asn + Leul26Glu + Serl30Glu + Lys213Asp Alá 98Asp + Glyl66Glu + Pro210Asp + Tyr214Gln Asn 62Glu + Asnl55Ser + Lys213Asp + Tyr217Leu Asp 60Glu + SerlO5Glu + Lys213Glu + Thr220Gln Asp 60Glu + Gln206Ser + Lys213Asp + Asn218Asp Ser 63Glu + Gly 97Gln + GlnlO3Asp + Gln206Asp Ser 63Glu + Val 95Ala + Serl30Asp + Gln206Asp Ser 63Asp + IlelO7Met + Serl91Asp + Gln206Asp Prol29Asn + Serl30Asp + Lys213Glu + Tyr217Glu Prol29Asn + Serl91Glu + Lys213Asp + Tyr217Glu Gly 97Gln + GlylO2Asp + Prol29Glu + Phel89Gln Gin 59Asn + Serl62Glu + Phel89Asp + Ser204Asp Glyl27Pro + Glyl28Glu + Phel89Glu + Ser204Asp Leu 96Pro + SerlO5Asp + Serl30Glu + Alal33Gly Tyrl67His + Serl91Glu + Asn212Glu + Asn218Asp Asn 61Glu + Thrl58Gln + Lys213Asp + Tyr217Asn Gin 59Asp + Glyl57Asp + Gln206Ser + Asn218Asp Glyl54Ser + Serl63Glu + Serl88Glu + Ser204Asp Leu 96Asn + Serl30Asp + Serl88Asp + Ser204Glu IlelO7Asp + Serl88Asp + Ser204Asp + Gln206Asn Gln206Glu + Ala216Gly + Tyr217Leu + Thr220Asp GlylO2Glu + Leul26Cys + Serl30Glu + Tyr214Asp Asn 62Glu + GlylőOAsp + Lys213Glu + Ala216Gly SerlOlAsp + TrplOőMet + Glyl54Asp + Serl62Asp Asp 60Glu + Glyl02Glu + Gln206Asn + Ala216Asp Glul56Asp + Gln206Ser + Pro210Asp + Tyr217Asp Prol29Glu + Serl59Asp + Gln206Glu + Tyr217Pro Prol29Asp + Serl59Glu + Lys213Asp + Tyr217His Serl05Glu + TrplOöLeu + Glyl27Glu + Serl63Glu SerlOlAsp + Alal33Gln + Serl91Asp + Val203Asp Ser 63Glu + Serl30Asp + Tyr217Gln + Gly219Asp Glyl31Asp + Serl63Asp + Glyl66Asn + Ser204Asp Ilel07Asp + Gln206Ser + Asn212Glu + Ala216Asp Leul26Gly + Serl30Asp + Glyl54Asn + Asn218Asp Gin 59Asp + SerlO5Asp + Glyl66Gln + Ser204Asp Asn 61Asp + Serl05Glu + Alal87Gln + Ala216Gly Serl05Asp + Phel89Ile + Lys213Glu + Gly219Gln Ser 63Glu + Glyl31Gln + Ser204Glu + Gly219Asn Glyl57Pro + Thrl64Glu + Gln206Asn + Lys213Asp Leu 96Ile + SerlOlAsp + Gln206Glu + Tyr214Ala Thr 66Gln + Leu 96Met + Tyrl67Glu + Serl88Glu Tyrl04Cys + GlylőOAsp + Ile205Pro + Ala216Glu Asp 60Glu + Serl30Asp + Pro201Gln + Ala216Gly Ilel07Asp + Serl91Asp + Gln206Asp + Ala216Thr • ·
- 67 Gin 59Asp + Val 95Gln + Asn 62Asp + Glnl03Glu + SerlOlAsp + Leul26Ile + GlylOOGlu + GlnlO3Asn +
Val 95Asn TyrlO4Cys Gly 97Asn Ser204Asp Seri62Asp Glyl2 8Asp GlylőOSer Serl32Asp + SerlOlGlu + + Lys213Glu + + Ala 98Ser + + Gln206Asn + + GlylőőSer + + Pro210Ser + + GlylőőGlu + + Serl63Glu +
Seri63Glu Asn218Asp Ser162Glu Ala216Pro Tyr217Thr Asn218Glu Ala216Thr Serl88Asp
25. táblázat
Több hurokban lévő ötszörös mutációjú variánsok
Val 95Gln + Asn 61Ser + Leu 96Gln + GlylOOGln + Asn 62Ser + Thr 66Ser + Gly 97Asn + Prol29Gly + Gly 65Ser + Leu 96Met + Asn őlGln + Thr őőGly + Leul26Ile + Leul26Val + Leu 96Asn + TrplOőAsn + SerlOlGlu + Asp őOGlu + Prol29Glu + Leu 96Ile + Asn őlGln + GlylőOAsn + Glyl28Asn + Gly 65Ser + TyrlO4Gly + Asn őlSer + Gly 65Gln + TrplOőSer + Leu 96Met + GlylOOGlu + Asn 62Glu + GlylO2Asp + Serl32Glu + Ala 98Pro + Glyl27Pro + GlylOOAsn + Glyl57Asn + Leu 96Thr + GlylOOSer + SerlOlAsp + Thr őőGly +
TyrlO4Cys + Leu 96His + Glyl27Gln + Tyrl67Cys + TrplOőGly + Glyl27Gln + Glyl54Pro + Serl32Glu + Gly 97Gln + GlnlO3Asn + TrplOőAla + TyrlO4Ile + Serl30Asp + Gln206Ser + Leul26Pro + Glyl27Ser + GlylO2Gln + Ala 98Gly + GlylőOPro + Tyrl67Thr + Val 95Asp + Val203Thr + Asnl55Glu + Val 95Met + Prol29Ser + Val 95Gln + Gly 97Pro + Glyl28Asn + Leul26Asn + Thrl58Gln + Leu 96Ile + Tyrlő7Ala + Thrl58Pro + TrplOőPro + Alal33Asn + TrplOőPro + Ser204Asp + Glyl31Asp + TyrlO4Ala + Prol29Ser + GlylO2Asn +
Glyl27Gln Glyl57Pro Glul56Asp Serl88Glu Serl32Asp Pro201Asn Gln206Asn Thrl58Asn Glyl28Ser Alal33Ser Gly211Pro Gly211Glu Glyl54Asn Pro210Gly Lys213Asp SeriőlGlu Ilel07Gln Ilel07Ser GlylőőAsn Serl88Asp GlylO2Asn Pro210Glu GlylőőGln GlylOOAsn Seri63Glu Ser204Asp Serl30Glu Serl59Glu Asnl55Gln Thrl64Asn Gly 97Ser Pro210Gly Phel89Thr GlylőOPro Thrl64Glu Glyl27Ser Gln206Asn Alal33Thr Thrl64Asp Phel89Val TyrlO4His + Lys213Glu + Val203Asp + Tyr214Ala + Val203Gln + Alal87Ser + Ala216Thr + Pro210Glu + Vallő5Thr + Lys213Asp + Glyl54Pro + Asn218Asp + Gly215Pro + Asn212Ser + Gly215Glu + Ala216Ser + Gln206Asn + Vall65Gln + Glyl57Ser + Alal87Pro + Val203His + Glyl31Asn + Asn218Gln + Ala216Gly + Glyl31Asp + Gln206Ser + Pro210Gly + Glyl54Ser + Pro201Ser + Serl88Glu + Gln206Asn + Gly211Ser + Ala216Thr + Ala200Gln + Ala216Asn + Gly211Gln + Lys213Glu + Tyr217Val + Gln206Asn + Gly211Gln + Pro201Asn + TrplOőThr + Ala216Pro + Ala216Gly + Thr220Asn + Ala216His + Phel89Ser + Gly219Asp + Gly211Pro + Gln206Asn + Gly219Gln + Gly219Pro + Gly219Asn + Ala216Gly + Tyr217Thr + Ala216Pro + Tyr217His + Gly219Asn + Val203Ala + Thrl64Ser + Gly202Ser + Gln206Ser + Alal87Asn + Thr220Gln + Thr220Gly + Tyr214Gly + Gly219Ser + Ala216Gln + Pro210Asn + Tyr217Val + Gly202Gln + Ala216Thr + Gly219Ser + Tyr217Met + Tyr214Ala + Tyr217Asp + Tyr214Thr + Tyr214Ala + Gly219Pro + Ala216Gly + Thr220Ser + Ala216Ser + Alal87Asn • * • » · · • · · · · • · · «- · ··· ··· • · · « · ··* ·· «· ·
- 68 Thr őőAsn Glyl28Gln Alal33Ser TyrlO4Ser Gin 59Asn Gly 97Gln Thr őőAsn Asp 60Glu IlelO7Asp Val 95Ser TrplOőThr Glyl28Pro TrplOőGln Asp őOGlu Gin 59Asn Asn 62Ser Asn 62Gln Gin 59Asn Thr őőSer Glyl28Pro Gin 59Ser GlnlO3Ser Gly 97Pro Leul26Asn Glyl57Ser Alal33Thr GlylOOGln Glyl27Asp GlylOOGln Glul56Asp Glyl57Gln Leul26Gly Leu 96Ser Asnl55Glu Asn 62Asp Val 95Asp Glyl54Glu IlelO7Leu TrplOőIle GlylOOAsp Alal33Pro Thr őőGly GlylOOGlu Leul26His Asp őOGlu Leu 96Cys Ser 63Asp Gin 59Asp SerlOlGlu Asn 62Asp Asp őOGlu Asp őOGlu GlylO2Gln Asn őlSer + GlylO2Glu + Glyl54Asn + Glyl57Ser + Thrl58Gly + GlnlO3Asn + GlylO2Asp + Gln206Glu + Thr őőGly + GlylőOAsn + TrplOőCys + Thrl58Ser + Alal87Ser + Leul26Gly + Val 95Gln + TrplOőCys + IlelO7Gly + Thrl58Glu + Asp őOGlu + Asnl55Gln + Phel89Met + Asn 62Ser + Glyl28Gln + Prol29Gln + Thrl58Gln + Ser204Glu + Phel89Ser + Glyl54Asn + Glyl28Glu + TrplOőThr + Thrl58Asp + Val203Asp + Prol29Glu + Serl30Asp + GlylőOAsn + Gly 97Gln + TyrlO4Glu + Thrl58Asp + Glyl54Asp + Asnl55Ser + Leul26Asp + Gln206Glu + SerlOlGlu + Glyl02Glu + Alal87Glu + Leu 96Asn + IlelO7Ala + Thrl58Gly + Asn 62Asp + Glyl27Glu + Ser 63Glu + Gly 97Asp + Val 95Glu + Glyl54Glu + Thr őőSer + TrplOőGly + Tyrl67Gly + Phel89Thr + Thrl64Glu + Thrl64Gly + Glyl27Ser + Tyr214Ile + Leu 96Gly + Val203Pro + Vall65Gln + Thrl64Pro + Gln206Asn + Thrl64Ser + Leul26Pro + Ala200Thr + Leul26Cys + Val203Ser + TrplOőPhe + Val203Gln + Val203Gly + Leu 96Gly + Ser204Glu + Glyl57Asn + Vall65Met + Gln206Asp + Ser204Asp + Ser204Glu + Glyl54Glu + Serl30Asp + Tyrl67Gly + Ser204Asp + Glyl31Glu + GlylőőGlu + GlylőőGlu + TrplOőGly + Leul26Ser + Phel89Glu + Glyl57Glu + Serl59Asp + Glyl27Ser + Tyr214Ala + GlylO2Asn + TyrlO4Glu + Val203Glu + Prol29Gln + Alal33Pro + Gln206Asp + GlylOOGlu + Alal87Gln + GlylOOAsp + Ala 98Glu + Asp 99Glu + Asnl55Glu + Leul26Glu + GlylőőSer + Tyr217Leu + Gly202Asn + Gln206Asn + Alal87Pro + Phel89Gln + Ala216Thr + Ala216His + Gly211Pro + Pro210Gln + Ser204Glu + Asn212Ser + Val203Gln + Glyl57Asn + Gly211Gln + Pro210Glu + Gly215Ser + Glyl54Gln + Gln206Glu + Ser204Glu + Ser204Glu + Gly211Asn + Ser204Asp + Gly211Glu + Tyr217Cys + Gln206Asp + Gln206Asp + Glyl57Asn + Tyrl67Glu + Pro201Gln + Ala216Pro + Tyrl67Met + Ala216Gln + Tyr217Cys + Pro2lOAsp + Asnl55Gln + Gly215Asn + Val203His + Serl91Glu + Prol29Gln + Asn218Glu + Leul26Glu + Asnl55Gln + Gln206Asp + Gly211Glu + Glyl57Asp + Tyr214Asp + Phel89Tyr + Gln206Asn + Glyl31Asn + Phel89His + SerlOlAsp + Serl91Asp + Asnl55Glu + Ala216Thr + Asn218Glu + Asn212Glu + Ala216Pro + Thr220Asp + Tyr217Leu + Tyr217Cys + Tyr217Asn + Gly219Asn + Tyr217Glu + Thr220Pro + Gly215Asp + Asn218Asp + Val203Thr + Ala216Gln + Thr22OGly + Ala216Thr + Thr208Pro + Tyr217His + Ala216Glu + Asn218Asp + Asn218Glu + Asn218Glu + Lys213Glu + Thr220Gly + Tyr214Ile + Tyr217Thr + Phel89Ser + Tyr217Thr + Gly215Ser + Gly219Asp + Thr22OGln + Tyr217Ile + Thr220Asp + Asn212Gln + Gln206Ser + Tyr217Met + Gly219Glu + Ala216Thr + Thr22OSer + Gly219Ser + Ala216Pro + Val203Ala + Asn218Glu + Tyr217Met + GlylőOAsp + Tyr217Asp + Tyr214Met + Tyr217Ile + Lys213Glu + Gly211Glu + Vall65Thr + Gln206Asp + Glyl57Asp
- 69 Prol29Asn + Asn 61Ser + Gin 59Asn + Phel89Gln + Alá 98His + Leu 96Met + Gly 97Pro + Vall65Ser + Serl91Glu + Glyl02Pro + Asnl55Asp + GlylőOSer + Alá 98Thr + Glyl27Pro + Leul26Met + SerlOlAsp + Val 95Ala + Asnl55Glu + TrplOőPro + Prol29Ser + Tyrl04Val + Leu 96Asp + Serl59Glu + Gin 59Asp + GlnlO3Ser + Val 95Glu + Val 95Glu + Ser 63Asp + GlylőOAsp + Leu 96His + GlylOOGlu + SerlO5Glu + Asp őOGlu + GlnlO3Asp + Val 95Gln + Thrl58Asp + SerlO5Asp + Gin 59Glu + GlnlO3Asp + Alá 98Asp + Glyl54Asp + Asn őlGlu + Glyl57Ser + Val 95Thr + TyrlO4His + Glyl28Asp + Asn 62Glu + GlylőőAsp + Ser13OAsp + Gly 97Pro + Glyl54Asp + Asn őlGln + Gin 59Asp + Alal33Gly +
Alal33Gln + Gln206Asp + Glyl28Asn + Val203Gly + Glyl54Glu + Prol29Gly + Ser204Glu + Lys213Glu + Ser204Glu + Asnl55Asp + Gly215Pro + Ser204Glu + Alal87Ser + Ser204Glu + Prol29Glu + Ser204Asp + Tyrl67Asp + Glul56Asp + Glyl27Asp + Ser204Asp + Leul26Asp + Gly 97Asp + Asn212Gln + Asn 62Glu + Tyrl04Ala + Glul56Asp + Gly215Glu + GlylőOAsp + SerlőlAsp + TrplOőAsp + SerlOlAsp + Alal87Ser + TrplOőAsn + Serl63Glu + GlylOOAsn + Serl59Asp + TrplOőGlu + Asp őOGlu + SerlőlGlu + Asp 99Glu + Asnl55Asp + TyrlO4Ser + Thrl58Glu + Glyl57Glu + Asnl55Glu + Glyl57Asn + Val 95Ala + Gln206Ser + Serl63Asp + Serl32Asp + Serl91Asp + IlelO7His + Alá 98Glu + Glyl54Asp +
Phel89Ile Lys213Glu Ala200Thr Gln206Asp Seri63Asp Glyl54Glu Lys213Asp Tyr214Cys Gln2 0 6Asp Ala216Glu Ala216Glu Gln206Glu Ser204Glu Gln206Glu Seri63Glu Gln206Glu Ser204Glu Thrl64Asp Serl30Asp Gln206Glu Glyl57Asp GlnlO3Asp Lys213Glu Ser 63Glu Val203Asp Glyl57Asp Ala216Glu SerlőlGlu Tyrl67Met Gln206Asn TrplOőMet Val203Glu Val203Glu Thrl64Glu Glul56Asp Ser204Glu Thrl64Asn Tyrl04Asn Seri62Asp SerlO5Glu Ser204Glu Gln206Glu Gln206Asp Serl88Glu Glyl57Asn Pro210Gln GlylOOAsp Gly215Pro Tyrl67Ser Thrl58Gly Lys213Asp Ser204Glu GlylO2Asp Gln206Glu + Gln206Glu + Tyr217Ala + Gln206Glu + Lys213Asp + Val203Met + Serl63Glu + Ala216Glu + Ala216Glu + Tyr214His + Tyr217His + Tyr217Ser + Lys213Glu + Gln206Glu + Lys213Glu + Phel89Thr + Ala216Asn + Gln206Glu + Ser204Glu + Asnl55Asp + Pro210Asp + Serl63Asp + Tyr217Cys + Gly215Asp + Prol29Ser + Gln206Asp + Tyr214Gly + Tyr217Leu + Val203Ser + Ser204Asp + Asn218Asp + Serl62Asp + Ser204Asp + Ser204Glu + Pro201Gln + Glyl57Asp + Gly215Asn + Ala216Asp + Serl91Glu + Gln206Ser + Thrl64Gln + Ala216Gln + Ala216Glu + Lys213Asp + Ser204Glu + Tyrl67Glu + Asn218Glu + Lys213Glu + Tyr217Asp + Serl91Asp + Ser204Glu + Tyr214Ala + Lys213Glu + SerlO5Glu + Gly215Glu + Lys213Glu + Gly219Asn + Lys213Glu + Tyr217Pro + Tyr217Met + Tyr217Ser + Gly219Ser + Tyr217Pro + Ala216Asp + Asn218Glu + Asn218Glu + Ala216Ser + Lys213Asp + Tyr217Ala + Asn218Ser + Tyr217Glu + Tyr217Glu + Tyr214Thr + Gly219Gln + Asn218Glu + Thrl64Asp + Gly219Asp + Ala216Glu + Asnl55Asp + Lys213Glu + Thr220Asp + Gly219Ser + Tyr217Cys + Tyr217Ala + Gly219Asp + Thrl64Pro + Ala216Gly + Ala216Gln + Ala216Pro + Lys213Glu + Tyr217Cys + Gly219Ser + Pro201Gln + Tyr217His + Alal87Ser + Tyr217Ala + Tyr217Cys + Ala216Asp + Ala216Asp + Gly202Ser + Thr220Glu + Tyr217His + Gly219Asp + Tyr217Met + Ala216Asp + Tyr217Asn + Asn218Glu + Leu209Thr + Thr220Gln • ·
- 70 Glyl54Asn Leu 96Glu Serl62Glu Val 95Asp Glyl54Glu Gly 97Glu Thr őőGly GlnlO3Glu Thr őőGln Prol29Asn Serl59Asp Asp 99Glu Glnl03Glu Asn 62Ser Glyl60Glu Asp őOGlu Glyl54Glu SerlO5Asp Asn 62Glu Asn 62Asp Asp őOGlu Ser162Glu Gly 97Glu Glyl28Glu Asp 60Glu Gly 97Asp Ser 63Glu Serl30Glu Val 95Glu Thr őőGly Asp őOGlu Leul26Val Asp 99Glu Val 95Asp Glyl54Asp Asn 62Glu Asn 62Glu Asn 62Asp Glul56Asp Serl59Glu GlylOOPro Glyl02Asp Asp 99Glu Val 95Cys Leu 96Glu Glyl27Pro Ser 63Glu Ser 63Glu TrplOőTyr Serl91Glu Val 95Gly Thr őőGlu Asp őOGlu Asn 61Asp + GlylőOSer + Alá 98Asn + Thrl64Glu + IlelO7Asp + GlylőőAsp + Asp 99Glu + GlnlO3Asp + SerlO5Glu + Thrl64Asp + Glyl31Gln + Serl62Glu + SerlOlAsp + TyrlO4Gly + Serl32Asp + Serl62Asp + Ser 63Asp + Glul56Asp + TrplOőGly + GlylOOGlu + Prol29Gly + GlylOOAsn + Thrl64Glu + Serl30Glu + Serl63Glu + Asn őlGlu + SerlOlAsp + IlelO7Gln + Serl32Glu + Serl30Asp + GlylOOGlu + Glyl28Glu + Thrl58Glu + Serl59Glu + Prol29Asn + Alal87Gly + Gly 97Asp + Gly 97Asp + Gly 97Asp + Serl63Asp + Serl63Glu + Asnl55Gln + Alal87Asp + Thrl58Asp + Gly 97Pro + Asp 99Glu + Serl62Glu + Serl91Asp + Phel89Ile + Phel89Asp + Gln206Glu + Thrl58Asp + GlylőőGlu + Asp 99Glu + Ser 63Asp + GlylőőGlu + + Tyrl67Asn + + Thr208Gln + + Tyrl67His + + Lys213Asp + + Glul56Asp + + TrplOőGlu + + Thrl58Ser + + Val203His + + Thrl64Glu + + Gln206Ser + + Glyl3lAsn + + Thrl64Pro + + GlylőOGlu + + Tyrl67Ile + + Serl30Glu + + Pro210Glu + + Glyl27Asp + + Glyl57Asn + + Alal33Gly + + Ser204Asp + + Val203Thr + + Tyrl67Asp + + GlylőőGlu + + Alal87Gly + + TyrlO4Glu + + Gln206Asp + + GlylőOAsp + + Serl32Glu + + Glnl03Asp + + Gln206Asn + + Val203Met + + Thrl64Glu + + Thrl64Gln + + Gly215Asp + + GlylOOAsn + + Glul56Asp + + Ser204Asp + + Gln206Ser + + Phel89His + + Serl59Asp + + Serl88Asp + + Serl62Asp + + Serl63Glu + + Serl59Glu + + Serl91Glu + + Gln206Asp + + Val203Met + + Pro210Asp + + Ala216Gly + + SerlőlAsp + + Phel89Val + + Gln206Glu + + GlnlO3Glu +
Gln206Asp Gln206Glu Ala216Asp Serl88Glu Ala216Ser Tyrl67Ala Glyl28Asn Leu209Thr Gly211Glu Gly211Glu Pro210Glu Lys213Glu Pro210Asp Serl62Glu Ser204Glu Gly202Gln Lys213Asp Glyl54Asp GlylőőGlu Ser204Asp Gln206Glu Ser204Asp Tyr217Val Gln206Glu Lys213Glu SerlőlGlu Ala216Asp Ala216Gln Ala200Gly Serl32Asp Pro210Glu Lys213Asp Tyrl67Leu Ala216Glu Tyr217Thr Ser204Glu Val203Cys Tyr214Leu Gly215Asp Ser204Glu Seri63Asp Val203His Val203Met Seri91Asp Gln2 0 6Asn Gly211Glu Ala216Asp Gln206Asp Lys213Glu Tyr217Leu Alal87Pro Serl91Glu Gly211Pro Lys213Asp + Gly215Asp + Gly215Glu + Tyr217Glu + Thr220Asn + Tyr217Cys + Ala216Pro + Serl62Asp + Lys213Glu + Lys213Glu + Lys213Asp + Tyr214Ala + Gly215Ser + Asn212Glu + Ala216His + Gly219Ser + Gly215Ser + Asn218Gln + Vall65Gln + Tyr217Leu + Gln206Asp + Pro210Ser + Asn212Ser + Gly219Ser + Ala216Ser + Ala216Glu + Tyr217Val + Thr220Glu + Thr220Gly + Tyr217His + Tyr217Asn + Ala216Gln + Gly215Glu + Gln206Ser + Asn218Glu + Asn218Glu + Tyr217Cys + Ala216Gly + Tyr217Leu + Ala216Asp + Tyr217Ser + Ser204Glu + Ser204Asp + Ala216Thr + Ser204Asp + Ala216Thr + Asn212Asp + Tyr217Gln + Gly211Glu + Asn218Glu + Thr220Asp + Asn218Asp + Gly219Ser + Ala216Glu + Tyr217Pro • ·
- 71 TyrlO4Glu + Asn 62Asp + Asn 61Asp + Glyl27Glu + Leu 96Glu + Asp 60Glu + Tyrl67Pro + Gly 97Ser + GlylO2Asn + Asn 61Ser + Glul56Asp + Asp 99Glu + Serl30Asp + Glyl27Glu + Alá 98Glu + Gin 59Ser + Gly 97Pro + GlnlO3Asp + Asp 60Glu + Serl30Glu + Asp 60Glu + Leu 96His + Gin 59Ser + Glyl27Glu + GlnlO3Glu + Ser 63Asp + Asp 60Glu + Gly 97Asp + Asn 62Asp + Alá 98Pro + Ser 63Asp + Asp 60Glu + Asp 60Glu + IlelO7Asp + Ser 63Asp + Asnl55Glu + Ser 63Asp + Ser 63Asp + Thr 66Glu + Thrl58Asp + Ser 63Glu + Gly 97Ser + Val 95Glu + Gin 59Glu + Alá 98His + Ser 63Asp + Glyl27Glu + Serl62Asp + Glyl57Glu + GlylőOGlu + Asp őOGlu + TyrlO4Cys + TyrlO4Asp + Serl32Glu +
Glyl28Gln Ser2 04Asp GlylOOAsp Glyl57Gln Gly 97Ser Leu 96Cys Ser204Asp Seri05Asp GlylőOAsn Alá 98Asp Ser204Asp Glyl57Pro GlylőOAsn Glul56Asp Asp 99Glu Val 95Glu Glyl28Glu IlelO7Asp Gln206Glu Thrl64Glu Ser 63Glu Serl30Glu Glul56Asp Asnl55Asp Glyl60Asn Gly202Pro Leu 96Glu GlnlO3Asp Thr 66Glu Prol29Asp Glul56Asp GlylO2Gln Thrl58Gln Glyl31Asp GlylOOGlu Glyl57Glu Ilel07Met Val 95Ala GlylOOGln Seri61Asp Serl62Asp SerlOlAsp Asp 99Glu Thr 66Asp SerlOlGlu GlylőOAsp Serl62Glu Alal87Glu Phel89Tyr Seri61Asp Serl59Asp Seri62Glu Glyl28Asn Glyl57Ser + Serl32Glu + + Gly215Glu + + TrplOőAla + + Ser204Asp + + GlylOOGlu + + Gly 97Glu + + Lys213Glu + + Asnl55Glu + + Thrl64Glu + + Asnl55Asp + + Gln206Glu + + Ser204Glu + + Ser204Glu + + Ser204Glu + + TrplOőGly + + Alá 98Asn + + Lys213Asp + + Glyl57Pro + + Lys213Asp + + Val203Met + + Glyl54Asp + + Glul56Asp + + GlylőOGlu + + Alal87His + + Gln206Glu + + Lys213Asp + + Thrl58Gln + + Phel89Ala + + Tyrl04Pro + + Serl30Asp + + Gln206Glu + + SerlO5Glu + + Lys213Glu + + Ala216Asp + + GlnlO3Asp + + Gln206Asn + + Prol29Asn + + Asp 99Glu + + GlnlO3Asp + + Gln206Asp + + Alal87Gln + + Val203Cys + + Ser204Asp + + Serl63Asp + + GlylőőGln + + Val203Ala + + Serl63Glu + + Pro201Gln + + Val203Glu + + Tyrl67Glu + + Thrl64Glu + + Lys213Glu + + Serl30Asp + + Serl63Asp +
Asn212Asp Ala216Gln Asn212Gln Lys213Asp Gln206Asp Ser204Glu Ala216His Glyl66Asp Gln206Asn Serl88Glu Lys213Glu Gln206Asp Gln206Asn Gln206Asp Glyl54Asp SerlO5Glu Ala216Glu Tyrl67Glu Gly215Pro Ser204Asp GlylőőSer Tyrl67Glu Gly211Glu Ala216Glu Tyr214Gly Gly215Gln GlylöőPro Gln206Ser Serl32Asp Lys213Glu Lys213Glu Thrl64Gln Ala216Gln Tyr217His Gln206Asn Pro210Asp Seri91Asp Leul26Thr Lys213Asp Tyr217Cys Gly211Asn Tyr214Glu Gly215Glu Pro2 OlGln Serl88Asp Ser204Asp Lys213Asp Gln206Asp Ser204Glu Gly202Asn Phel89His Asn218Asp Glyl57Ser Asn212Asp + Ala216Ser + Tyr217Leu + Lys213Asp + Ala216Glu + Lys213Asp + Gly215Asn + Gly219Glu + Val203Asn + Thr220Asp + Val203Ser + Ala216Pro + Lys213Glu + Gly215Asp + Tyr214Pro + Asn218Glu + Gln206Glu + Asn218Glu + Ala216Glu + Asn218Glu + Gln206Asp + Serl88Asp + Lys213Glu + Lys213Glu + Tyr217His + Asn218Glu + Asn218Asp + Gln206Asp + Lys213Asp + Asn212Asp + Tyr217Glu + Ala216Pro + Gly211Glu + Tyr217Val + Asn218Asp + Gly219Asp + Ala216Glu + Gly219Glu + Serl63Asp + Ala216Asn + Gly219Asp + Lys213Asp + Tyr217Asp + Asn218Gln + Gly215Glu + Val203Asp + Gln206Glu + Ala216His + Tyr217Glu + Lys213Glu + Gln206Glu + Lys213Glu + Gly219Glu + Ser204Glu + Lys213Glu
- 72 *♦·
Gly 97Asp + SerlOlGlu + Asp 99Glu + Serl30Glu + Gin 59Asn + Asp 60Glu + Serl30Asp + Asn 61Asp + Glyl02Pro + Glul56Asp + Thr 66Pro + Glyl31Pro + Ala 98Glu + TyrlO4Leu + Ser 63Glu + Thrl58Glu + TrplOSThr + Ala 98Ser + Tyrl04Pro + Leul26Asn + SerlőlAsp + Asn 61Asp + Val 95Asp + Leu 96Glu + SerlOlGlu + Asp 99Glu + Leu 96Ala + Ala 98Glu + Asn 61Glu + Gly 97Asp + Leul26Ala + Val 95Glu + Asn 61Glu + GlylO2Asp + Serl30Asp + Alal33Asp + Serl32Glu + Glyl57Glu + Thr 66Ser + Asp 99Glu + Thr 66Ser + Asp 60Glu + Ser 63Glu + Prol29Gly + Glyl31Asp + GlylO2Asp + Glyl31Asp + Gin 59Asn + Ala 98Glu + GlnlO3Asp + Val 95Asp + SerlOlAsp + Thr 66Glu + Val 95Asp +
Ala 98Asp + Thrl58Gln + GlylOOAsp + Serl61Glu + TyrlO4Asp + SerlOlGlu + Serl59Asp + GlylOOAsp + Glyl31Asp + Ser204Asp + Glnl03Asp + Phel89Leu + Glyl57Ser + Thrl58Glu + Ala 98Gln + Glyl66Asn + Glyl54Ser + Alal87Glu + Serl59Asp + Asnl55Glu + Val203His + Serl63Asp + TrplO6Glu + GlylOOAsp + Ser204Asp + Serl59Glu + Glnl03Asp + SerlO5Glu + Serl59Glu + SerlOlAsp + Glyl31Glu' + Ala 98Asn + GlylOOAsn + Glyl27Ser + Asnl55Gln + Serl59Glu + Thrl64Asp + Tyrl67Asp + Serl30Glu + Serl59Glu + SerlO5Asp + Glyl27Asp + Serl30Asp + Serl59Glu + Glul56Asp + TrplO6Glu + Serl61Asp + Serl88Asp + Glyl57Asp + TrplO6Tyr + Glyl31Gln + GlnlO3Glu + Glyl28Pro + Glyl31Glu +
Prol29Glu Alal87Glu Ásni55Asp Ser162Asp Thrl58Asp Ser204Glu Seri63Glu Trpl0 6Pro Serl88Asp Gln2 0 6Asp Glul56Asp Seri91Glu Gln206Asp Gly202Ser GlylO2Asn Pro210Glu Glyl57Asp Lys213Asp Gly202Asn Thrl64Asn Ser204Asp Val203His SerlölGlu TrplOöCys Gly211Glu Serl62Glu Leul26Val Glyl54Glu Gln206Ser Alal33Glu Ser204Glu GlylO2Glu Prol29Asp Thrl58Asp Thrl58Glu SerlölAsp Ser204Asp Ser204Glu Thrl58Glu Ser204Glu Serl59Glu Ser204Glu Gln206Asp Serl88Glu Seri62Glu Serl59Glu Serl63Asp Gln20 6Asp Thrl64Asp GlylőOAsp Serl59Asp SerlölGlu Glyl54Asp Serl63Asp + Tyrl67Leu + Serl88Glu + Glyl66Gln + Thrl64Asn + Serl91Glu + Gln206Ser + Pro210Gln + Glyl28Glu + Ser204Glu + Asn212Asp + Serl91Glu + Gln206Glu + Lys213Asp + Gln206Glu + Serl30Asp + Lys213Glu + Lys213Glu + Gly215Gln + Lys213Glu + Lys213Asp + Gly211Asp + Ser204Glu + Alal87Pro + Serl88Glu + Lys213Asp + Ser204Asp + Glyl28Asp + Glul56Asp + Pro210Glu + Gln206Glu + Pro210Asp + Serl62Asp + Serl63Glu + GlylőOGlu + Serl91Asp + Ser2O4Asp + Gln206Glu + Gln206Glu + Ser204Glu + Gln206Glu + Ser204Glu + Gln206Glu + Ala216Gly + Phel89Cys + Alal87Pro + Pro210Gln + GlylőőAsn + Gly211Glu + Phel89Thr + Lys213Glu + Ala216Asp + Gln206Glu + Thrl64Asp + Serl91Glu + Gln206Asp + Gln206Glu + Ser204Glu + Gly211Asp + Asn218Glu + Pro210Asp + Tyr217Asp + Tyr217Asp + Gln206Glu + Ala216His + Gln206Asp + Lys213Glu + Gly215Gln + Lys213Glu + Tyr217Glu + Thr220Glu + Ala216Glu + Ala216Asp + Ala216Asp + Ala216Glu + Tyr217Asp + Tyr217Asp + Ser204Asp + Gln206Asp + Gly215Asn + Gly219Asn + Ser204Asp + Phel89Pro + Ala216Glu + Gly219Pro + Lys213Glu + Ser204Glu + Asn218Ser + Lys213Glu + Gly215Glu + Ala216Gln + Tyr217Pro + Ala216Asn + Gln206Glu + Tyr217Pro + Gln206Asp + Tyr214Asn + Asn218Asp + Ser204Asp + Tyr214Gly + Thr220Asp + Ser204Asp + Tyr217Glu + Lys213Asp + Gly215Asp + Asn218Asp + Ala216His + Ser204Glu + Gln206Asn
Val 95Ser Asn 62Asp Ser 63Asp Gin 59Asp Val 95Glu Serl32Glu SerlOlAsp Thr 66Asp Asn 62Glu Ilel07Asp Serl05Asp Asnl55Asp SerlOlGlu Gin 59Glu Alal33Asp GlnlO3Glu Ser 63Glu SerlOlGlu Asp 60Glu Glnl03Ser Glyl02Asn Thr 66Gln Asp 99Glu Thr 66Asp Ser 63Asp Glyl02Pro Gin 59G1U Asp 60Glu Asp 60Glu SerlOlAsp SerlOlAsp Serl32Asp Glnl03Asp Leu 96Ile Thr 66Glu Alá 98Asp Ser 63Glu Gin 59Glu Ser 63Glu Glyl02Asp SerlO5Asp Asp őOGlu SerlOlGlu Gin 59Glu Gly 97Asp TyrlO4Asp Serl32Glu Leu 96Thr Asp 60Glu + Alá 98Glu + Leul26His + Serl30Glu + Glyl57Asp + Asp 99Glu + Glyl54Gln + Glyl31Pro + Leu 96Glu + Glyl66Gln + Alal87Asp + Serl59Glu + Serl63Asp + Glyl31Asn + GlylőOAsp + SerlölGlu + TyrlO4Cys + Glyl60Asp + Leul26Glu + Leu 96Glu + Serl30Asp + Serl62Asp + Asp 99Glu + Glnl03Asp + Prol29Asp + Gly 97Asp + TyrlO4Ala + Asn 62Gln + Serl62Glu + Ilel07Glu + GlylO2Ser + SerlO5Asp + Asnl55Glu + Glyl28Asp + Glyl28Asp + GlnlO3Asp + Serl32Asp + Prol29Glu + Gly 97Asp + GlnlO3Glu + Glyl57Asn + Serl62Asp + Val 95Glu + TrplO6Asp + GlylOOGln + Serl30Asp + Glyl54Asp + Glyl54Glu + Alal33Glu + Asp 99Glu + SerlOlAsp + Glyl31Pro + Thrl58Pro + Gln206Glu + Gly215Asp + Glyl57Glu + Serl88Asp + Glul56Asp + Serl88Glu + Serl91Asp + Serl91Asp + Vall65Asn + Asnl55Glu + Serl88Asp + Thrl64Asp + SerlölGlu + Tyrl67Met + Serl88Glu + Glyl28Asn + Alal33Gly + Gln206Asp + Glnl03Glu + Glyl57Asn + Serl59Glu + Tyrl67Ala + Glul56Asp + GlnlO3Glu + Ala200Gln + Glyl57Asp + Tyrl04Glu + Val203Asp + Gly211Pro + Serl63Asp + Serl91Glu + Ser204Glu + GlylőőGlu + Val203Met + Glyl28Asp + IlelO7Ser + Serl62Glu + Serl91Asp + TrplOőGly + Thrl64Glu + Glyl57Asp + Gln206Asp + GlylőOAsn + Serl63Glu + Asnl55Glu + Leul26Gly + Glyl31Asp + Lys213Glu + Ala216Glu + Tyr214Val + Ala216Asn + SerlőlAsp + Serl91Glu + Val203His + Gly211Glu + Gln206Asp + Lys213Asp + Gln206Ser + Alal87Glu + Val203Glu + Ser204Asp + Thrl64Asp + Lys213Asp + Lys213Asp + Serl30Glu + Gln206Glu + Tyr217Gly + Val203Ser + Lys213Asp + Lys213Asp + Serl88Asp + Tyrl67Glu + Glyl31Glu + Val203Glu + GlylőOGlu + Phel89Asp + Ala216His + Lys213Glu + Alal87Glu + Gly202Asn + Lys213Asp + Pro210Asp + Lys213Glu + Serl59Glu + Glul56Asp + Serl91Glu + Pro210Gly + Prol29Glu + Ser204Asp + Gly211Asp + Lys213Asp + Serl63Asp + Pro210Gly + Lys213Asp + Serl30Asp + Phel89Asp + Tyr217Asp + Tyr217Ile + Asn218Asp + Tyr217Ile + Tyr214Ser + Gln206Glu + Gly215Asp + Ala216His + Ala216Thr + Ala216Thr + Lys213Glu + Lys213Asp + Tyr217Ile + Asn218Ser + Lys213Glu + Asn218Asp + Ala216Asn + Gln206Glu + Gly219Asp + Gly219Asp + Tyr217Asp + Ala216Gln + Tyr217His + Ser204Glu + Ser204Glu + Phel89Leu + Gly211Asp + Phel89Ser + Lys213Glu + Tyr217His + Asn218Asp + Tyr217Ile + Gln206Glu + Gly219Ser + Tyr214Gln + Gly219Asp + Ala216Ser + Lys213Asp + Ser204Glu + Gly211Glu + Serl59Asp + Pro210Ser + Tyr217Glu + Ala216Asn + Ser204Glu + Asn212Asp + Ala216Asp + Serl62Glu
·· · ·
Ί4
II. Tisztitókószítmónyek
Egy további, találmány szerinti megoldás olyan, proteinszerű szennyeződésektől megtisztítandó különféle felületek tisztítására szolgáló készítményekre vonatkozik, amelyek egy vagy több, találmány szerinti enzimvariáns hatásos mennyiségét tartalmazzák. Az ilyen tisztítószerek körébe tartoznak — egyebek mellett — például a következők: kemény felületek tisztítására szolgáló, bármilyen formájú (például folyékony vagy szemcsés) mosószerek (detergens kompozíciók) ; textilanyagok tisztítására szolgáló, bármilyen formájú (például folyékony, szemcsés vagy darabos) mosószerek; bármilyen formájú mosogatószerek; bármilyen formájú szájtisztító készítmények (például fogápoló szerek, fogkrémek és szájvíz kompozíciók); bármilyen formájú (például folyékony vagy tablettázott) fogtisztító készítmények; valamint bármilyen formájú (például folyékony vagy tablettázott) kontaktlencse-tisztító készítmények. A jelen leírásban alkalmazott hatásos mennyiségű enzimvariáns vagy az enzimvariáns hatásos mennyisége kifejezés az enzimvariánsnak az adott tisztítószerben lévő azon mennyiségére vonatkozik, amely a szükséges enzimaktivitás eléréhez szükséges. Az ezen a területen jártas szakember a hatásos mennyiségek értékét a következő tényezők figyelembevételével egyszerűen meg tudja határozni: az alkalmazott egyedi enzimvariáns, a tisztítási alkalmazás; a tisztítószer egyedi összetétele, a készítmény halmazállapota (például folyékony, szilárd) és formája (például szemcsés, darabos) stb. A találmány szerinti tisztítószerek egy vagy több, találmány szerinti enzimvariánst előnyösen körülbelül 0,0001 tömeg% és körűibe• ·
- 75 lül 10 tömeg%, még előnyösebben körülbelül 0,001 tömeg% és körülbelül 1 tömeg%, még ennél is előnyösebben körülbelül 0,01 tömeg% és körülbelül 0,1 tömeg% közötti mennyiségben tartalmaznak.
Az alábbiakban további részletek ismertetésével bemutatunk számos olyan tisztítószert, amelyekben felhasználhatók a találmány szerinti enzimvariánsok. Amennyiben másképpen nem jelezzük, valamennyi rész, százalék és arány tömegrészre, tömegszázalékra és tömegarányra vonatkozik.
A jelen leírásban alkalmazott nem textiltisztító készítmények kifejezés a kemény felületek tisztítására szolgáló készítményeket, a mosogatószereket, a szájtisztító kompozíciókat, a fogtisztító készítményeket, valamint a kontaktlencsék tisztítására szolgáló kompozíciókat foglalja magában.
A. Tisztítószerek kemény felületekhez, edényekhez és textilekhez
A találmány szerinti enzimeket felhasználhatjuk az olyan esetekben alkalmazandó detergens kompozíciókban, ahol nagy habzásra és az oldhatatlan szubsztrát alapos eltávolítására van szükség. így a találmány szerinti enzimvariánsokat különféle hagyományos összetevőkkel együtt például a következő készítményekké formálhatjuk: kemény felületek tisztítószerei, mosogatószerkészítmények, mosodai készítmények stb. Az ilyen készítmények folyékony, szemcsés, darabos stb. formákban lehetnek. A készítményeket korszerű, 30-60 tömeg% felületaktív anyagot tartalmazó koncentrált mosószerekké is formálhatjuk.
A tisztítószerek adott esetben és előnyösen anionos, nemionos, kettős ionos (zwitterionos) stb. felületaktív anyagokat is ···
- 76 tartalmazhatnak. Az ilyen felületaktív anyagok jellegzetesen körülbelül 5 tömeg! és körülbelül 35 tömeg! közötti mennyiségben vannak jelen a készítményekben.
A találmány szerinti készítményekben felhasználható felületaktív anyagok példái közé tartoznak — egyebek mellett — a következők: szokásos 11-18 szénatomos alkil-benzolszulfonátok, valamint primer és véletlenszerű (random) alkil-szulfátok; CH3 (CH2) x (CHOSO3M+) CH3 és CH3 (CH2) y (CHOSO3~M+) általános képletű 10-18 szénatomos szekunder (2,3) alkil-szulfátok, amelyek képletében x és (y+1) legalább 7-es, előnyösen legalább 9-es értékű egész szám, és M egy vízoldható kationt, előnyösen nátriumiont jelent; 10-18 szénatomos alkil-alkoxi-szulfátok (különösen az 1-5 EO értékű etoxi-szulfátok); 10-18 szénatomos alkilalkoxi-karboxilátok (különösen az 1-5 EO értékű etoxi-karboxilátok); 10-18 szénatomos alkil-poliglikozidok és megfelelő szulfátéit poliglikozidjaik; 12-18 szénatomos alfa-szulfonált zsírsavészterek; 12-18 szénatomos alkil- és alkil-fenol-alkoxilátok (különösen etoxilátok és vegyes etoxilát/pro-poxilátok);
12-18 szénatomos betainok és szulfo-betainok (szultainok); 1018 szénatomos amin-oxidok; stb. A találmány szerinti készítményekben előnyösen alkil-alkoxi-szulfátokat (AES) és alkil-alkoxi-karboxilátokat (AEC) alkalmazunk. (A formáló igényeitől függően az ilyen felületaktív anyagoknak a fentiekben említett amin-oxidokkal és/vagy bétáin vagy szültain felületaktív anyagokkal alkotott kombinációi is előnyösek lehetnek.) A szokásosan használt egyéb felületaktív anyagok felsorolása megtalálható az általánosan ismert szakkönyvekben. A különösen jól használható felületaktív anyagok közé tartoznak az 5 194 639. számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban ismertetett 10-18 szénatomos N-metil-glükamidok.
A találmány szerinti készítmények sokféle egyéb, a mosó-tisztító kompozíciókban alkalmazott összetevőket tartalmazhatnak; ilyenek például — egyebek mellett - a következők: egyéb hatóanyagok, hordozók, hidrotrópok, feldolgozási segédanyagok, festékek vagy pigmentek, oldószerek a folyékony kompozíciókhoz stb. Amennyiben a habzás további erősítésére van szükség, habzásfokozókat, például 10-16 szénatomos alkil-amidokat építhetünk be a készítményekbe; ezeknek az adalékanyagoknak a mennyisége jellegzetesen körülbelül 1 tömeg% és körülbelül 10 tömeg% közötti értékű. A habzásfokozók egyik jellgezetes osztályát a 10-14 szénatomos monoetanol- és dietanol-amidok alkotják. Ugyancsak előnyös, ha a habzásfokozókat a fentiekben említett nagy habzású egyéb felületaktív anyagokkal, például amin-oxidokkal, betainokkal és szultainokkal együtt használjuk. A további habzás biztosítása érdekében kívánt esetben jellegzetesen körülbelül 0,1 tömeg% és körülbelül 2 tömeg% közötti mennyiségben oldható magnéziumsókat, például magnézium-kloridot, magnézium-szulfátot stb. adhatunk a készítményekhez.
A folyékony mosószer készítmények hordozóként vizet és egyéb oldószereket tartalmazhatnak. Alkalmas oldószerek a kis molekulatömegű primer és szekunder alkoholok, amilyen például a metanol, az etanol, a propanol és az izopropil-alkohol. A felületaktív anyagok szolubilizálására az egyértékű alkoholok az előnyösek, de például 2-6 szénatomos, 2-6 hidroxicsoportot tar·· β · • · · · · • ··· «·· • · · talmazó poliolokat, például 1,3-propándiolt, etilénglikolt, glicerint és 1,2-propándiolt is felhasználhatunk. Ezeket a hordozókat körülbelül 5 tömeg% és körülbelül 90 tömegS, jellegzetesen körülbelül 10 tömeg% és körülbelül 50 tömeg% közötti mennyiségben tartalmazhatják a készítmények.
A találmány szerinti mosószer készítményeket előnyösen úgy formáljuk, hogy a vizes mosási műveletkben történő felhasználás során a mosóvíz körülbelül 6,8 és körülbelül 10 közötti pHértékkel rendelkezzen. Ennek megfelelően a késztermékeket jellegzetesen ebben a pH-tartományban formáljuk. Az előírt felhasználási mennyiségek esetén a pH szabályozására puffereket, bázisokat, savakat stb. alkalmazhatunk; ezek a módszerek a szakember számára jól ismertek.
A kemény felületek tisztítására szolgáló és a textiltisztító kompozíciók formálása során szükség lehet különféle hatásfokozók körülbelül 5 tömeg% és körülbelül 50 tömeg% mennyiségben történő alkalmazására. A jellegzetes hatásfokozók körébe — egyebek mellett — például a következő anyagok tartoznak: 1-10 mikrométeres zeolitok, polikarboxilátok, például cifrátok és oxidiszukcinátok, rétegelt szilikátok, foszfátok stb. Az egyéb szokásos hatásfokozók felsorolása megtalálható az általánosan ismert szakkönyvekben.
Hasonlóképpen szükség lehet a formálás során különféle további enzimek, például cellulázok, lipázok, amilázok és proteázok alkalmazására; ezeket a további enzimeket általában körülbelül 0, 001 tömeg% és körülbelül 1 tömeg% közötti mennyiségben tartalmazzák a készítmények. A különféle detergens és textilkí- 79 mélő enzimek jól ismertek a mosodai mosószerek területén.
A találmány szerinti készítményekben jellegzetesen körülbelül 1 tömeg% és körülbelül 15 tömeg! közötti mennyiségben különféle fehérítővegyületeket, például perkarbonátokat, perborátokat stb. is alkalmazhatunk. Kívánt esetben a szakterületen ismert fehérítő aktivátorokat, például tetraacetil-etilén-diamint, (nonanoil-oxi)-benzolszulfonátot stb. is tartalmazhatnak a találmány szerinti készítmények. Az utóbbi komponenseket általában körülbelül 1 tömeg! és körülbelül 10 tömeg% közötti mennyiségben alkalmazzuk.
A találmány szerinti készítményekben az előbbieken kívül különféle szennytaszító szereket, különösen amino-foszfonátokat és etilén-diamin-szukcinátokat, különféle agyagszennyeződést eltávolító szereket, különösen etoxílezett tetraetilén-pentamint, különféle diszpergálószereket, különösen poliakrilátokat és poliaszpartátokat, különféle aviválószereket, különösen anionos fényesítőszereket, különféle habzásgátló szereket, különösen szilikonokat és szekunder alkoholokat, különféle textillágyító szereket, különösen smektit agyagokat stb. is alkalmazhatunk; ezeket az összetevőket általában körülbelül 1 tömeg! és körülbelül 35 tömeg! közötti mennyiségben használjuk a készítményekben. Az általános ismert szakkönyvek és a szabadalmi dokumentumok részletesen ismertetik az ilyen jellegű, szokásosan alkalmazott anyagokat.
A találmány szerinti tisztítószerekben enzimstabilizátorokat is használhatunk. Az ilyen enzimstabilizátorok közé tartozik — egyebek mellett — a propilénglikol (amelyet előnyösen körűibe-
lül 1-10 tömeg% mennyiségben használunk), a nátrium-formiát (ezt előnyösen körülbelül 0,1-1 tömeg% mennyiségben alkalmazzuk), valamint a kalcium-formiát (az utóbbit előnyösen ugyancsak körülbelül 0,1-1 tömeg% mennyiségben tartalmazzák a kompozíciók).
1. Kemény felületek tisztítására szolgáló készítmények
A jelen leírásban alkalmazott kemény felületek tisztítására szolgáló készítmények kifejezés kemény felületek, például padlók, falak, fürdőszobai csempék stb. tisztítására szolgáló, folyékony vagy szemcsés detergens kompozíciókat jelöl. A találmány szerinti, kemény felületek tisztítására szolgáló készítmények egy vagy több, találmány szerinti enzimvariáns hatásos mennyiségét tartalmazzák; a kompozíciók előnyösen körülbelül 0,001 tömeg% és körülbelül 10 tömeg%, még előnyösebben körülbelül 0,01 tömeg% és körülbelül 5 tömeg%, még ennél is előnyösebben körülbelül 0,05 tömeg% és körülbelül 1 tömeg% közötti menynyiségben tartalmazzák az aktív enzimet. Az előbbiekben említett egy vagy több, találmány szerinti enzimvariánson kívül a kemény felületek tisztítására szolgáló készítmények általában felületaktív anyagot és vízoldékony, komplexképző hatásfokozót is tartalmaznak. Bizonyos speciális termékekben, például az ablaktisztító permetekben viszont esetenként nem használunk felületaktív anyagokat, mivel ezek filmszerű/csíkos maradékot hagyhatnak az üvegfelületeken.
Jóllehet az adott esetben alkalmazott felületaktív anyagok bizonyos esetekben a találmány szerinti készítményeknek csak alig 0,1 tömeg%-át alkotják, azonban a készítmények jellegzetesen körülbelül 0,25 tömeg% és körülbelül 10 tömeg%, még előnyö- 81 sebben körülbelül 1 tömeg% és 5 tömeg% közötti mennyiségben tartalmaznak felületaktív anyagot.
A készítmények jellegzetesen körülbelül 0,5 tömeg% és körülbelül 50 tömeg%, előnyösen körülbelül 1 tömeg% és körülbelül tömeg% közötti mennyiségben mosóhatás-fokozót is tartalmaznak. Előnyösen a pH értékének körülbelül 8-12 közötti tartományban kell lennie. Amennyiben szükség van a pH beállítására, szokásos pH-beállító szereket, például nátrium-hidroxidot, nátrium-karbonátot vagy sósavat alkalmazhatunk.
A készítményekben oldószerek is lehetnek. Az alkalmas oldószerek közé tartoznak — egyebek mellett — például a következők:
glikol-éterek, például dietilénglikol-monohexil-éter, dietilénglikol-monobutil-éter, etilénglikol-monobutil-éter, etilénglikol-monohexil-éter, propilénglikol-monobutil-éter, dipropilénglikol-monobutil-éter, valamint diolok, például 2,2,4-trimetil-1,3-pentándiol és 2-etil-l,3-hexándiol. Az adott esetben alkalmazott oldószerek jellegzetesen körülbelül 0,5-15 tomeg%, előnyösen körülbelül 3-11 tömeg% mennyiségben vannak jelen a készítményekben .
Amennyiben a készítményt eredeti formájában visszük fel a felületre és ezt követően nem alkalmazunk öblítést, annak érdekében, hogy a kompozíció gyorsabban párologjon el a felületről, nagy illékonyságú oldószereket, például izopropil-alkoholt vagy etanolt is alkalmazhatunk a találmány szerinti készítményben. Az adott esetben alkalmazott illékony oldószerek jellegzetesen körülbelül 2 tömeg% és körülbelül 12 tömeg% közötti mennyiségben vannak jelen a kompozíciókban.
A találmány szerinti, kemény felületek tisztítására szolgáló készítményeket az alábbi példákon keresztül ismertetjük részletesebben .
7-12. példa
| Kemény felületek tisztítására szolgáló folyékony készítmények | |||||
| Komponens | 7 | 8 | Példa száma 9 10 | 11 | 12 |
| Seri05Glu | 0, 05 | 0,50 | 0, 02 0,03 | 0, 10 | 0, 03 |
| Glyl27Gln+Ala216Pro | - | - | - | 0,20 | 0, 02 |
| Na2DIDA* | |||||
| EDTA** | - | - | 2,90 2,90 | - | - |
| Na-citrát | - | - | - | 2, 90 | 2,90 |
| Na-C12alkil-benzol- | 1,95 | - | 1,95 - | 1,95 | - |
| szulfonát | |||||
| Na-C12alkil-szulfát | - | 2,20 | 2,20 | - | 2,20 |
| Na-C12(etoxi) -*** | - | 2,20 | 2,20 | - | 2,20 |
| szulfát | |||||
| C12 dimetil-amin- | - | 0, 50 | 0,50 | - | 0,50 |
| -oxid | |||||
| Na-kuménszulfonát | 1,30 | - | 1, 30 - | 1,30 | - |
| Hexil-karbitol*** | 6, 30 | 6, 30 | 6, 30 6, 30 | 6, 30 | 6, 30 |
| Víz**** | 100 %-ra |
dinátrium-N-(dietilénglikol)-N^N-imino-diacetát Na4-etilén-diamin-diecetsav k k k k dietilénglikol-monohexil-éter valamennyi készítmény pH-ja 7-re állítva.
···· ·* ·* ·· • ······ ··· * · ··· ···
...· ·..· .·
- 83 A 7-10. példában a SerlO5Glu variánst a 2-25. táblázatban felsorolt szubtilizin BPN' variánsokkal helyettesítve lényegében hasonló eredményeket kapunk.
A 11-12. példában a Glyl27Gln + Ala216Pro variánst a 2-25.
táblázatban felsorolt szubtilizin BPN' variánsok kombinációival helyettesítve lényegében hasonló eredményeket kapunk.
13-18. példa
Kemény felületek tisztítására és háztartási rozsda eltávolítására szolgáló permetkészítmények
| Komponens | 13 | 14 | Példa 15 | száma 16 | 17 | 18 |
| Tyrl04Ile+Gly215Pro | 0,50 | 0, 05 | 0, 60 | 0, 30 | 0,20 | 0,30 |
| Asp99Glu | - | - | - | - | 0,30 | 0, 10 |
| Na-oktil-szulfát | 2, 00 | 2, 00 | 2,00 | 2,00 | 2,00 | 2, 00 |
| Na-dodecil-szülfát | 4, 00 | 4, 00 | 4,00 | 4,00 | 4,00 | 4,00 |
| nátrium-hidroxid | 0, 80 | 0, 80 | 0, 80 | 0, 80 | 0,80 | 0, 80 |
| szilikát (Na) | 0, 04 | 0, 04 | 0, 04 | 0, 04 | 0,04 | 0,04 |
| illatanyag | 0,35 | 0, 35 | 0,35 | 0, 35 | 0,35 | 0,35 |
| víz | 100 | %-ra |
A termék pH-ja körülbelül 7.
A 13-16. példában a TyrlO4Ile + Gly215Pro variánst a 2-25.
táblázatban felsorolt szubtilizin BPN' variánsokkal helyettesítve lényegében hasonló eredményeket kapunk.
A 17-18. példában a TyrlO4Ile + Gly215Pro és az Asp99Glu variánst a 2-25. táblázatban felsorolt szubtilizin BPN' variánsok kombinációival helyettesítve lényegében hasonló eredményeket kapunk.
*4»
2. Mosogatószerek
A találmány szerinti mosogatószerek egy vagy több, találmány szerinti enzimvariánst tartalmaznak. A jelen leírásban alkalmazott mosogatószer kifejezés magában foglalja az edények tisztítására szolgáló készítmények valamennyi formáját, egyebek mellett szemcsés és folyékony formáit is. A találmány szerinti mosogatószereket az alábbi példákon keresztül mutatjuk be.
19-24. példa
Mosogatószer
| Komponens | 19 | Példa száma | ||||
| 20 | 21 | 22 | 23 | 24 | ||
| Glu59Ser+Leu96Gly | 0, 05 | 0, 50 | 0, 02 | 0,40 | 0, 10 | 0, 03 |
| +Ser204Glu | ||||||
| Lys96Gly+Ser204Glu | - | - | - | - | 0, 40 | 0, 02 |
| C12~C14 N-metil- | 0, 90 | 0, 90 | 0, 90 | 0,90 | 0, 90 | 0, 90 |
| -glükamid | ||||||
| C12 etoxi(1)szulfát | 12,00 | 12,00 | 12, 00 | 12,00 | 12, 00 | 12, 00 |
| 2-metil-undekánsav | 4,50 | 4,50 | 4, 50 | 4,50 | 4,50 | 4,50 |
| C12 etoxi(2)karboxilát | 4,50 | 4,50 | 4, 50 | 4,50 | 4,50 | 4,50 |
| C12 alkohol-etoxilát(4) | 3, 00 | 3, 00 | 3, 00 | 3,00 | 3,00 | 3, 00 |
| C12 amin-oxid | 3, 00 | 3, 00 | 3, 00 | 3,00 | 3, 00 | 3, 00 |
| Na-kuménszulfonát | 2, 00 | 2, 00 | 2, 00 | 2,00 | 2, 00 | 2, 00 |
| etanol | 4,00 | 4,00 | 4, 00 | 4,00 | 4,00 | 4,00 |
| Mg++ (mint MgCl2) | 0, 20 | 0,20 | 0,20 | 0, 20 | 0,20 | 0, 20 |
| Ca++ (mint CaCl2) | 0, 40 | 0,40 | 0, 40 | 0,40 | 0,40 | 0, 40 |
| ví z | 100 | %-ra |
A termék pH-ját 7-re állítjuk be.
»··· ··
- 85 A 19-22. példában a Gln59Ser + Leu96Gly + Ser204Gly variánst a 2-25. táblázatban felsorolt szubtilizin BPN' variánsokkal helyettesítve lényegében hasonló eredményeket kapunk.
A 23-24. példában a Gln59Ser + Leu96Gly + Ser204Gly és a
Lys96Gly + Ser204Glu variánst a 2-25. táblázatban felsorolt szubtilizin BPN' variánsok kombinációival helyettesítve lényegében hasonló eredményeket kapunk.
3. Textiltisztító készítmények
A találmány szerinti textiltisztító készítmények egy vagy több, találmány szerinti enzimvariánst tartalmaznak. A jelen leírásban alkalmazott textiltisztító készítmény kifejezés magában foglalja a textilek tisztítására szolgáló kompozíciók valamennyi formáját, egyebek mellett szemcsés, folyékony és darabos formáit is. A textiltisztító készítmények előnyösen folyadékformában vannak.
a. Szemcsés textiltisztító készítmények
A találmány szerinti szemcsés textiltisztító készítmények hatásos mennyiségben egy vagy több, találmány szerinti enzimvariánst tartalmaznak. A készítmények előnyösen körülbelül 0,001 tömeg% és körülbelül 10 tömeg%, még előnyösebben körülbelül 0,005 tömeg% és körülbelül 5 tömeg%, legelőnyösebben körülbelül
0,01 tömeg% és körülbelül 1 tömeg% közötti mennyiségben tartalmazzák az aktív enzimet. Az egy vagy több enzimvariánson kívül a szemcsés textiltisztító készítmények jellegzetesen legalább egy felületaktív anyagot, egy vagy több hatásfokozót, valamint bizonyos esetekben fehérítőszert tartalmaznak.
A találmány szerinti szemcsés textiltisztító készítményeket az alábbi példákon keresztül mutatjuk be.
25-28. példa
Szemcsés textiltisztító készítmény
| Példa | száma | ||||
| Komponens | 25 | 26 | 27 | 28 | |
| SerlOlAsp | 0, 10 | 0,20 | 0, 03 | o, | 05 |
| Thr66Glu | - | - | 0, 02 | 0, | 05 |
| C13 lineáris alkil-benzolszulfonát 22,00 | 22, 00 | 22, 00 | 22, | 00 | |
| foszfát [mint nátrium- | 23, 00 | 23, 00 | 23,00 | 23, | 00 |
| -tripolifoszfát] | |||||
| nátrium-karbonát | 23, 00 | 23,00 | 23, 00 | 23, | 00 |
| nátrium-szilikát | 14, 00 | 14,00 | 14, 00 | 14, | 00 |
| zeolit | 8,20 | 8,20 | 8,20 | 8, | 20 |
| kelátképző (dietilén-triamin- 0,40 | 0,40 | 0, 40 | 0, | 40 | |
| -pentaecetsav) | |||||
| nátrium-szulfát | 5, 50 | 5, 50 | 5, 50 | 5, | 50 |
| víz | 100 | %-ra | |||
| A 25-26. példában a | SerlOlAsp | variánst a 2 | -25. | táblázatban |
felsorolt szubtilizin BPN' variánsokkal helyettesítve lényegében hasonló eredményeket kapunk.
A 27-28. példában a SerlOlAsp és a Thr66Glu variánst a
2-25. táblázatban felsorolt szubtilizin BPN' variánsok kombinációival helyettesítve lényegében hasonló eredményeket kapunk.
• · • ······ ··· · · ··* ··· ··· ·· ·· ·
- 87 29-32. példa
Szemcsés textiltisztító készítmény
| Komponens | 29 | Példa 30 | száma 31 | 32 |
| Val95Asp+Leul2 6Ser+Asnl55Gln | 0, 10 | 0,20 | 0, 03 | 0, 05 |
| Gly65Ser+Glyl02Asn+Val203Glu | - | - | 0, 02 | 0, 05 |
| C]_2 alkil-benzolszulfonát | 12,00 | 12,00 | 12,00 | 12,00 |
| zeolite A (1-10 mikrométer) | 26, 00 | 26, 00 | 26, 00 | 26, 00 |
| 2-butil-oktánsav | 4, 00 | 4,00 | 4,00 | 4,00 |
| C12-C14 szekunder(2,3)alkil- | 5, 00 | 5, 00 | 5, 00 | 5, 00 |
| -szulfát nátriumsó | ||||
| nátrium-citrát | 5, 00 | 5, 00 | 5, 00 | 5, 00 |
| optikai fehérítő | 0, 10 | 0,10 | 0,10 | 0, 10 |
| nátrium-szül fát | 17,00 | 17,00 | 17,00 | 17, 00 |
| víz és egyebek | 100 | %-ra |
A 29-30. példában a Val95Asp + Leul26Ser + Asnl55Gln variánst a 2-25. táblázatban felsorolt szubtilizin BPN' variánsokkal helyettesítve lényegében hasonló eredményeket kapunk.
A 31-32. példában a Val95Asp + Leul26Ser + Asnl55Gln és a
Gly65Ser + GlylO2Asn + Val203Glu variánst a 2-25. táblázatban felsorolt szubtilizin BPN' variánsok kombinációival helyettesítve lényegében hasonló eredményeket kapunk.
• ······ ··> · · · · · ·· · • · · · · ··· · · ·· ·
- 88 33-36. példa
Szemcsés textiltisztító készítmény
| Komponens | 33 | Példa 34 | száma 35 | 36 | |
| Ser63Glu | 0, 10 | 0,20 | 0, 03 | 0, | 05 |
| Leu96Asn + Lys213Asp | - | - | 0, 02 | o, | 05 |
| C13 lineáris alkil-benzolszulfonát | 22,00 | 22, 00 | 22,00 | 22, | 00 |
| foszfát [mint nátrium- | 23, 00 | 23, 00 | 23,00 | 23, | 00 |
| -tripolifoszfát] | |||||
| nátrium-karbonát | 23, 00 | 23, 00 | 23, 00 | 23, | 00 |
| nátrium-szilikát | 14,00 | 14,00 | 14, 00 | 14, | 00 |
| zeolit | 8,20 | 8,20 | 8,20 | 8, | 20 |
| kelátképző (dietilén- | 0, 40 | 0, 40 | 0, 40 | 0, | 40 |
| -triamin-pentaecetsav) | |||||
| nátrium-szülfát | 5, 50 | 5, 50 | 5, 50 | 5, | 50 |
| víz | 100 | %-ra | |||
| A 33-34. példában a Ser63Glu variánst a 2 | -25. | táblázatban |
felsorolt szubtilizin BPN' variánsokkal helyettesítve lényegében hasonló eredményeket kapunk.
A 35-36. példában a Ser63Glu és a Leu96Asn + Lys213Asp variánst a 2-25. táblázatban felsorolt szubtilizin BPN' variánsok kombinációival helyettesítve lényegében hasonló eredményeket kapunk .
• · · · • ·
- 89 37-40. példa
Szemcsés textiltisztító készítmény
| Komponens | 37 | Példa 38 | száma 39 | 40 |
| Asn62Ser+Ser163Asp+Phel8 9Ser | 0, 10 | 0,20 | 0,03 | 0, 05 |
| +Ala216Glu | ||||
| Gly97Ser+TrplO6Ile+Tyr217Leu | - | - | 0, 02 | 0, 05 |
| C12 alkil-benzolszulfonát | 12,00 | 12,00 | 12,00 | 12,00 |
| zeolit A (1-10 mikrométer) | 26, 00 | 26, 00 | 26, 00 | 26, 00 |
| 2-butil-oktánsav | 4,00 | 4,00 | 4,00 | 4,00 |
| c12_c14 szekunder (2,3) | 5, 00 | 5, 00 | 5, 00 | 5, 00 |
| alkil-szulfát nátriumsó | ||||
| nátrium-citrát | 5, 00 | 5, 00 | 5, 00 | 5, 00 |
| optikai fehérítő | 0, 10 | 0, 10 | 0, 10 | 0, 10 |
| nátrium-szulfát | 17,00 | 17, 00 | 17, 00 | 17,00 |
| víz és egyebek | 100 | %-ra |
A 37-38. példában az Asn62Ser + Serl63Asp + Phel89Ser +
Ala216Glu variánst a 2-25. táblázatban felsorolt szubtilizin
BPN' variánsokkal helyettesítve lényegében hasonló eredményeket kapunk.
A 39-40. példában az Asn62Ser + Serl63Asp + Phel89Ser +
Ala216Glu és a Gly97Ser + TrplO6Ile + Tyr217Leu variánst a 2-25.
táblázatban felsorolt szubtilizin BPN' variánsok kombinációival helyettesítve lényegében hasonló eredményeket kapunk.
« · · ·
- 90 41-42. példa
Szemcsés textiltisztító készítmény
| Komponens | Példa száma | |
| 41 | 42 | |
| lineáris alkil-benzolszulfonát | 11,4 | 10, 70 |
| faggyú alkil-szulfát | 1, 80 | 2,40 |
| C14-15 alkil-szulfát | 3, 00 | 3, 10 |
| 7-szeresen etoxilezett C14_15 alkohol | 4, 00 | 4,00 |
| 11-szer etoxilezett faggyú alkohol | 1, 80 | 1,80 |
| diszpergálószer | 0, 07 | 0,1 |
| szilikonolaj | 0, 80 | 0, 80 |
| trinátrium-citrát | 14,00 | 15, 00 |
| citromsav | 3, 00 | 2,50 |
| zeolit | 32, 50 | 32, 10 |
| maleinsav/akrilsav kopolimer | 5, 00 | 5, 00 |
| dietilén-triamin-pentametilén- | 1,00 | 0,20 |
| -foszfonsav | ||
| Ala98Asp + Alal87Ser | 0,30 | 0, 30 |
| lipáz | 0,36 | 0, 40 |
| amiláz | 0, 30 | 0, 30 |
| nátrium-szilikát | 2,00 | 2,50 |
| nátrium-szulfát | 3, 50 | 5, 20 |
| poli(vinil-pirrolidon) | 0, 30 | 0, 50 |
| perborát | 0, 5 | 1 |
| fenol-szulfonát | 0,1 | 0,2 |
| peroxidáz | 0,1 | 0,1 |
| egyebek | 100-ra | 100-ra |
- 91 43-44. példa
Szemcsés textiltisztító készítmény
| Komponens | Példa száma | |
| 43 | 44 | |
| Na-(lineáris C12 alkil)-benzolszulfonát 6, 5 | 8,0 | |
| nátrium-szülfát | 15, 0 | 18,0 |
| zeolit A | 26, 0 | 22,0 |
| nátrium-nitril-triacetát | 5, 0 | 5, 0 |
| poli(vinil-pirrolidon) | 0, 5 | 0,7 |
| tetraacetil-etilén-diamin | 3, 0 | 3,0 |
| bórsav | 4,0 | - |
| perborát | 0, 5 | 1 |
| fenol-szulfonát | 0, 1 | 0,2 |
| Gln59Ser+Asn62Ser+Leu96Gly | 0,4 | 0,4 |
| +Ser204Gln | ||
| töltőanyagok (például szilikátok, | 100-ra | 100-ra |
| illatanyagok, víz) |
I
- 92 45. példa
Kompakt szemcsés textiltisztító készítmény
Komponens tömeg% alkil-szulfát 8,0 alkil-etoxi-szulfát 2,0
3-szor és 7-szer etoxilezett C25 és C45 alkoholkeverék 6,0 polihidroxi-zsírsavamid 2,5 zeoiit 17,0 rétegezett szilikát/citrát 16,0 karbonát 7,0 maleinsav/akrilsav kopolimer 5,0 szennyoldó polimer 0,4 (karboxi-metil)-cellulóz 0,4 poli(4-vinil-piridin)-M-oxid 0,1 viní1-imídazol és vinil-pirrolidon kopolimer 0,1
PEG2000 0,2
Val95Gln + TyrlO4Glu + Glyl27Gln 0,5 + Lys213Glu + Ala216Asp lipáz 0,2 celluláz 0,2 tetraacetil-etilén-diamin 6,0 perkarbonát 22,0 etilén-diamin-diborostyánkősav 0,3 habzásgátló 3,5 dinátrium-{4,4'-bisz[(2-morfolino-4-anilino-6- 0,25
-s-triazinil)-amino]-stilbén]-2,2'-diszulfonát dinátrium-4,4'-bisz(2-szulfo-sztiril)-bifenil 0,05 víz, illatanyag és egyebek 100-ra • ·
46. példa
Szemcsés textiltisztító készítmény
Komponens tömeg!
lineáris alkil-benzolszulfonát 7,6
C16-C18 alkil-szulfát 1,3
7-szer etoxílezett C14_15 alkohol 4,0 koko-alkil-dimetil- (hidroxi-etil) -ammónium-klorid 1,4 diszpergálószer 0,07 szilikonolaj 0,8 trinátrium-citrát 5,0 zeolit 4A 15, 0 maleinsav/akrilsav kopolimer 4,0 dietilén-triamin-pentametilén-foszfonsav 0,4 perborát 15,0 tetraacetil-etilén-diamin 5,0 szmektit agyag 10,0 poli(oxi-etilén) (MT 300 000) 0,3
Ser63Glu+Thrl04Asn+Gln206Ser+Tyr217Thr 0,4 lipáz 0,2 amiláz 0,3 celluláz 0,2 nátrium-szilikát 3,0 nátrium-karbonát 10,0 (karboxi-metil)-cellulóz 0,2 színélénkítők 0,2 víz, illatanyag és egyebek 100-ra
47. példa
Szemcsés textiltisztító készítmény
| Komponens | tömeg% |
| lineáris alkil-benzolszulfonát | 6, 92 |
| faggyú alkii-szulfát | 2, 05 |
| 7-szer etoxilezett C14-15 alkohol | 4,4 |
| 3-szor etoxilezett C12-is alkil-etoxi-szulfát | 0, 16 |
| zeolit | 20, 2 |
| citrát | 5, 5 |
| karbonát | 15, 4 |
| szilikát | 3, 0 |
| maleinsav/akrilsav kopolimer | 4,0 |
| (karboxi-metil)-cellulóz | 0, 31 |
| szennyoldó polimer | 0, 30 |
| Asn62Ser+Trpl06Gly+Serl32Asp+Alal87Ser | 0,2 |
| +Phel89Ser | |
| lipáz | 0,36 |
| celluláz | 0, 13 |
| perborát—tétrahidrát | 11, 64 |
| perborát—monohidrát | 8,7 |
| tetraacetil-etilén-diamin | 5, 0 |
| dietilén-triamin-pentametilén-főszfonsav | 0, 38 |
| magnézium-szülfát | 0,40 |
| színélénkítő | 0, 19 |
| illatanyag, szilikon, habzásgátló | 0, 85 |
| egyebek | 100-ra |
- 95 b. Folyékony textiltisztító készítmények
A találmány szerinti folyékony textiltisztító készítmények hatásos mennyiségben egy vagy több, találmány szerinti enzimvariánst tartalmaznak. A kompozíciók előnyösen körülbelül 0,005 tömeg! és körülbelül 5 tömeg!, még előnyösebben körülbelül 0,01 tömeg% és körülbelül 1 tömeg! közötti mennyiségben tartalmazzák az aktív enzimet. Az egy vagy több enzimvariánson kívül a folyékony textiltisztító készítmények jellegzetesen egy anionos felületaktív anyagot, egy zsírsavat, egy vízoldható detergens-hatásfokozót és vizet tartalmaznak.
A találmány szerinti folyékony textiltisztító készítményeket az alábbi példákon keresztül mutatjuk be.
48-52. példa
Folyékony textiltisztító készítmény
Példa száma
Komponens 4 8 4 9 50 51 52
| Serl61Glu + Gly219Asn 0,05 | 0, | 03 | o, | 30 | 0,03 | o, | 10 |
| Asn62Ser + IlelO7Ala | - | - | 0,01 | o, | 20 | ||
| + Glu206Asp t Tyr217Thr | |||||||
| C12-14 alkil-szulfát Na-só 20,00 | 20, | 00 | 20, | 00 | 20,00 | 20, | 00 |
| 2-butil-oktánsav 5,00 | 5, | 00 | 5, | 00 | 5, 00 | 5, | 00 |
| nátrium-citrát 1,00 | Íz | 00 | 1, | 00 | 1,00 | 1, | 00 |
| etoxilezett (3) alkohol 13,00 | 13, | 00 | 13, | 00 | 13,00 | 13, | 00 |
| monoetanol-amin 2,50 | 2, | 50 | 2, | 50 | 2,50 | 2, | 50 |
| víz/propilénglikol/etanol (100:1:1) | 10( | D % | -ra |
• ·
- 96 A 48-50. példában a SerlőlGlu + Gly219Asn variánst a 2-25.
táblázatban felsorolt szubtilizin BPN' variánsokkal helyettesítve lényegében hasonló eredményeket kapunk.
Az 51-52. példában a Serl61Glu + Gly219Asn és az Asn62Ser +
IlelO7Ala + Glu206Asp + Tyr217Thr variánst a 2-25. táblázatban felsorolt szubtilizin BPN' variánsok kombinációival helyettesítve lényegében hasonló eredményeket kapunk.
53-57. példa
Folyékony textiltisztító készítmény
Példa száma
| Komponens | 53 | 54 | 55 | 56 | 57 |
| Serl01Asp+Ilel07Ala+Gly202Ser | 0, 05 | 0, 03 | 0, 30 | 0, 03 | 0, 10 |
| Val95Thr+Thr2 0 8Gly | - | - | - | 0, 01 | 0,20 |
| C12-14 alkil-szulfát Na-só | 20, 00 20, 00 | 20, 00 | 20, 00 | 20, 00 | |
| 2-butil-oktánsav | 5, 00 | 5, 00 | 5, 00 | 5, 00 | 5, 00 |
| nátrium-citrát | 1,00 | 1,00 | 1, 00 | 1,00 | 1,00 |
| etoxílezett (3) C10 alkohol 13,00 | 13, 00 | 13, 00 | 13, 00 | 13,00 | |
| monoetanol-amin | 2,50 | 2,50 | 2, 50 | 2, 50 | 2, 50 |
| víz/propilénglikol/etanol (100 | : 1:1) | 100 % | -ra |
Az 53-55. példában a SerlOlAsp + IlelO7Ala + Gly202Ser variánst a 2-25. táblázatban felsorolt szubtilizin BPN' variánsokkal helyettesítve lényegében hasonló eredményeket kapunk.
Az 56-57. példában a SerlOlAsp + IlelO7Ala + Gly202Ser és a
Val95Thr + Thr208Gly variánst a 2-25. táblázatban felsorolt szubtilizin BPN' variánsok kombinációival helyettesítve lényegében hasonló eredményeket kapunk.
• ·
- 97 58-59. példa
Szemcsés textiltisztító készítmény
| Komponens | Példa 58 | száma 59 |
| C12-14 alkenil-borostyánkősav | 3, 0 | 8, 0 |
| citromsav—monohidrát | 10, 0 | 15, 0 |
| nátrium-(C12-i5 alkil)-szulfát | 8,0 | 8, 0 |
| etoxilezett (2) C^is alkohol nátrium-szulfátja | - | 3,0 |
| etoxílezett (7) C12_15 alkohol | - | 8, 0 |
| etoxilezett (5) C12-15 alkohol | 8,0 | - |
| dietilén-triamin-pentametilén-foszfonsav | 0, 2 | - |
| oleinsav | 1,8 | - |
| etanol | 4, 0 | 4,0 |
| propándiol | 2,0 | 2,0 |
| Asp60Glu + Gln206Asn | 0,2 | 0, 2 |
| poli(vinil-pirrolidon) | 1,0 | 2,0 |
| habzásgátló | 0, 15 | 0, 15 |
| NaOH | pH 7 | , 5-re |
| perborát | 0, 5 | 1 |
| fenol-szulfonát | 0,1 | 0,2 |
| peroxidáz | 0,4 | 0,1 |
| víz és egyebek | 100 tömegrészre |
Az 58-59. példában az Asp60Glu + Gln206Asn variánst a 2-25. táblázatban felsorolt szubtilizin BPN' variánsokkal helyettesítve lényegében hasonló eredményeket kapunk.
- 98 60-62. példa
Folyékony textiltisztító készítmény Példa száma
| Komponens | 60 | 61 | 62 |
| citromsav | 7,10 | 3, 00 | 3, 00 |
| zsírsav | 2,00 | - | 2, 00 |
| etanol | 1,93 | 3,20 | 3,20 |
| bórsav | 2,22 | 3, 50 | 3, 50 |
| monoetanol-amin | 0,71 | 1,09 | 1, 09 |
| 1,2-propándiol | 7,89 | 8,00 | 8,00 |
| nátrium-kumén-szulfonát | 1,80 | 3, 00 | 3, 00 |
| nátrium-formiát | 0,08 | 0, 08 | 0, 08 |
| nátrium-hidroxid | 6,70 | 3, 80 | 3, 80 |
| szilikon habzásgátló szer | 1,16 | 1, 18 | 1, 18 |
| Ser210Glu | 0,0145 | - | - |
| Gly97Glu + Thrl64Pro | - | 0, 0145 | - |
| Asn62Glu + Thrl58Ser + Gly215Ser | - | - | 0,0145 |
| lipáz | 0,200 | 0,200 | 0, 200 |
| celluláz | - | 7, 50 | 7, 50 |
| szennyoldó polimer | 0,29 | 0, 15 | 0, 15 |
| habzásgátló szerek | 0,06 | 0, 085 | 0, 085 |
| fényesítő 36 | 0,095 | - | - |
| fényesítő 3 | - | 0, 05 | 0, 05 |
| C12 alkil-benzolszulfonsav | 9, 86 | - | - |
| C12-i5 alkil-polietoxilát (2, 5) sulfate | 13,80 | 18,00 | 18,00 |
| C12 glükózamid | - | 5, 00 | 5, 00 |
| ci2-i3 alkil-polietoxilát (9) | 2,00 | 2,00 | 2,00 |
| víz, illatanyag és egyebek | 100 %-ra |
c. Darabos textiltisztító készítmények
A szennyezett textilek kézi mosására alkalmas találmány szerinti darabos textiltisztító készítmények hatásos mennyiség• ·
- 99 ben egy vagy több, találmány szerinti enzimvariánst tartalmaznak. A kompozíciók előnyösen körülbelül 0,001 tömeg% és körülbelül 10 tömeg%, még előnyösebben körülbelül 0,01 tömeg% és körülbelül 1 tömeg% közötti mennyiségben tartalmazzák az aktív enzimet .
A találmány szerinti darabos textiltisztító készítményeket az alábbi példákon keresztül mutatjuk be.
63-66. példa
Darabos textiltisztító készítmény
| Komponens | Példa száma | |||
| 63 | 64 | 65 | 66 | |
| Gly97Glu + Thrl64Pro | 0, 3 | - | 0,1 | 0, 02 |
| Ala98Ser + Glyl54Asn | - | - | 0,4 | 0, 03 |
| *-12-16 alkil-szulfát nátriumsó | 20, 0 | 20, 0 | 20, 0 | 20, 00 |
| Ci2_i4 N-metil-glükamid | 5, 0 | 5, 0 | 5, 0 | 5, 00 |
| Na- (C21--13 alkil) -benzolszulfonát | 10, 0 | 10, 0 | 10, 0 | 10, 00 |
| nátrium-karbonát | 25, 0 | 25, 0 | 25, 0 | 25, 00 |
| nátrium-pirofoszfát | 7,0 | 7,0 | 7,0 | 7,00 |
| nátrium-tri(polifoszfát) | 7,0 | 7,0 | 7,0 | 7, 00 |
| zeolit A (0,1-0,10 μπι) | 5, 0 | 5, 0 | 5, 0 | 5, 00 |
| (karboxi-metil)-cellulóz | 0,2 | 0,2 | 0,2 | 0,20 |
| poliakrilát (MT 1400) | 0,2 | 0,2 | 0,2 | 0,20 |
| kókuszdió-monoetanol-amid | 5, 0 | 5, 0 | 5, 0 | 5, 00 |
| fényesítő, illatanyag | 0,2 | 0,2 | 0,2 | 0, 20 |
| kalcium-szülfát | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,00 |
| magnézium-szülfát | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1, 00 |
| viz | 4,0 | 4,0 | 4,0 | 4,00 |
| töltőanyag* | 100 | %-ra |
A szokásosan alkalmazott töltőanyagok (kalcium-karbonát, talkum, agyag, szilikátok stb.) közül választjuk ki.
• ·
- 100 A 63-64. példában a Gly97Glu + Thrl64Pro variánst a 2-25.
táblázatban felsorolt szubtilizin BPN' variánsokkal helyettesítve lényegében hasonló eredményeket kapunk.
A 65-66. példában a Gly97Glu + Thrl64Pro és a Ala98Ser +
Glyl54Asn variánst a 2-25. táblázatban felsorolt szubtilizin BPN' variánsok kombinációival helyettesítve lényegében hasonló eredményeket kapunk.
67-70. példa
Granulált textiltisztító készítmények
| Példa | száma | |||
| Komponens | 67 | 68 | 69 | 70 |
| Val203Glu | 0, 3 | - | 0,1 | 0, 02 |
| GlylOOGlu + Ilel07Ser | - | 0,3 | 0,4 | 0, 03 |
| Na-(C12-i6 alkil)-szulfát | 20,0 | 20,0 | 20, 0 | 20, 00 |
| ci2-i4 N-metil-glükamid | 5, 0 | 5, 0 | 5, 0 | 5, 00 |
| Na- (C11_13 alkil) -benzolszulfonát | 10, 0 | 10, 0 | 10, 0 | 10, 00 |
| nátrium-karbonát | 25, 0 | 25, 0 | 25, 0 | 25, 00 |
| nátrium-pirofőszfát | 7,0 | 7,0 | 7,0 | 7, 00 |
| nátrium-tripolifoszfát | 7,0 | 7,0 | 7,0 | 7, 00 |
| zeolit A (0,1-0,10 μπι) | 5, 0 | 5, 0 | 5, 0 | 5, 00 |
| (karboxi-metil)-cellulóz | 0,2 | 0, 2 | 0,2 | 0,20 |
| poliakrilát (MT 1400) | 0,2 | 0,2 | 0,2 | 0,20 |
| kókuszdió-monoetanol-amid | 5, 0 | 5, 0 | 5, 0 | 5, 00 |
| fényesítő, illatanyag | 0,2 | 0,2 | 0,2 | 0,20 |
| kalcium-szulfát | 1,0 | 1,0 | 1, 0 | 1, 00 |
| magnézium-szulfát | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,00 |
| víz | 4,0 | 4,0 | 4,0 | 4,00 |
| töltőanyag* | 100 | %-ra |
A szokásosan alkalmazott töltőanyagok (kalcium-karbonát, talkum, agyag, szilikátok stb.) közül választjuk ki.
• ·· • · ··· ··· • · · · · • · · · ·
- 101 A 67. példában a Val203Glu variánst a 2-25. táblázatban felsorolt szubtilizin BPN' variánsokkal helyettesítve lényegében hasonló eredményeket kapunk.
A 68. példában a GlylOOGlu + IlelO7Ser variánst a 2-25.
táblázatban felsorolt szubtilizin BPN' variánsokkal helyettesítve lényegében hasonló eredményeket kapunk.
A 69-70. példában a Val203Glu és a GlylOOGlu + IlelO7Ser variánst a 2-25. táblázatban felsorolt szubtilizin BPN' variánsok kombinációival helyettesítve lényegében hasonló eredményeket kapunk.
B. További tisztitőkészítmónyek
A kemény felületek tisztítására szolgáló, a mosogató- és a textiltisztító készítményeken kívül egy vagy több, találmány szerinti enzimvariáns beépíthető további tisztítókészítményekbe is, amelyek felhasználására ott kerül sor, ahol egy oldhatatlan szubsztrát hidrolízisére van szükség. Az ilyen további tisztítókészítmények közé tartoznak — egyebek mellett — például a szájtisztító készítmények, a fogtisztító készítmények, valamint a kontaktlencsék tisztítására szolgáló készítmények.
1. Szájtisztító készítmények
Egy további találmány szerinti megoldás értelmében egy vagy több, találmány szerinti enzimvariánst olyan készítményekbe építünk be, amelyek proteinszerű szennyezőanyagoknak a fogakról vagy műfogsorokról történő eltávolítására szolgálnak. A jelen leírásban alkalmazott száj tisztító készítmények kifejezés — egyebek mellett — például a következőket foglalja magában: fogápoló szerek, fogkrémek, fogmosó gélek, fogporok, szájvizek, • ······
- 102 szájpermetek, szájgélek, rágógumik, gyógycukorkák, illatszeres zacskók, tabletták, biogélek, profilaktikus paszták, fogkezelő oldatok stb. A szájtisztító készítmények körülbelül 0,0001 tömeg! és körülbelül 20 tömeg!, előnyösen körülbelül 0,001 tömeg!
és körülbelül 10 tömeg!, még előnyösebben körülbelül 0,01 tömeg!
és körülbelül 5 tömeg! közötti mennyiségben egy vagy több, találmány szerinti enzimvariánst, valamint egy gyógyszerészetileg elfogadható hordozót tartalmaznak. A jelen leírásban alkalmazott gyógyszerészetileg elfogadható kifejezés azt jelenti, hogy az adott hatóanyagok, gyógyszerek vagy inért összetevők (ésszerű előny/kockázat arány mellett) káros toxicitás, inkompatibilitás, instabilitás, irritáció, allergiás válaszreakció stb. nélkül érintkezhetnek a humán és alacsonyabb rendű állati szövetekkel.
A szájtisztító készítmények gyógyszerészetileg elfogadható szájtisztító hordozó komponensei általában körülbelül 50 tömeg! és 99,99 tömeg!, előnyösen körülbelül 65 tömeg! és körülbelül
99,99 tömeg!, még előnyösebben körülbelül 65 tömeg! és 99 tömeg!
mennyiségben vannak jelen a készítményekben.
A találmány szerinti szájtisztító készítményekben felhasználható gyógyszerészetileg elfogadható hordozó komponensek és adott esetben alkalmazott összetevők az ezen a területen jártas szakember számára jól ismertek. Rendkívül sokféle kompozíció típust, hordozó komponenst és adott esetben alkalmazható összetevőt ismertetnek — egyebek mellett — például az 5 096 700., az
028 414. és az 5 028 415. számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban.
A találmány szerinti szájtisztító készítményeket az alábbi • · · ··· · · ··· «·· • · · · · •♦· ·· ·· ♦
- 103 példákon keresztül mutatjuk be.
71-74. példa
Fogápoló készítmény
| Komponens | 71 | Példa 72 | . száma | |
| 73 | 74 | |||
| Gln59Asp+Ala98Glu+Glyl02Asp | 2,000 | 3,500 | 1,500 | 2,000 |
| +Serl05Glu+Leul09Thr | ||||
| szorbit (70 %-os vizes oldat) | 35,00035,00035,00035,000 | |||
| PEG-6* | 1,000 | 1,000 | 1,000 | 1, 000 |
| SiO2 fogcsiszoló** | 20,00020,000 20,00020,000 | |||
| nátrium-fluorid | 0,243 | 0,243 | 0,243 | 0,243 |
| titán(IV)-oxid | 0,500 | 0, 500 | 0, 500 | 0, 500 |
| szacharin nátriumsó | 0,286 | 0,286 | 0,286 | 0,286 |
| nátrium-alkil-szulfát | 4,000 | 4,000 | 4, 000 | 4, 000 |
| (27,9 %-os vizes oldat) | ||||
| ízesítőanyag | 1,040 | 1,040 | 1, 040 | 1, 040 |
| karboxi-vinil-polimer*** | 0,300 | 0, 300 | 0, 300 | 0, 300 |
| Carrageenan* * * * | 0, 800 | 0, 800 | 0, 800 | 0, 800 |
| víz | 100 | %-ra |
PEG-6 = 600-as molekulatömegű polietilénglikol,
Zeident 119-ként azonosított precipitált szilicium-dioxid (J. M. Huber), *** Carbopol (B. F. Goodrich Chemical Company), **** Iota Carrageenan (Hercules Chemical Company).
A 71-74. példában a Gln59Asp + Ala98Glu + GlylO2Asp +
SerlO5Glu + Leu209Thr variánst a 2-25. táblázatban felsorolt
- 104 szubtilizin BPN' variánsokkal helyettesítve lényegében hasonló eredményeket kapunk.
75-78. példa
Szájvíz készítmények
| Komponens | 75 | Példa 76 | száma 77 | 78 |
| Leu96Thr + Glyl28Asp | 3, 00 | 7,50 | 1, 00 | 5, 00 |
| + Alal33Glu + Asnl55Glu | ||||
| + Lys213Asp + Ala216Asp | ||||
| SDA 40 alkohol | 8,00 | 8,00 | 8, 00 | 8, 00 |
| ízesítőanyag | 0, 08 | 0,08 | 0, 08 | 0, 08 |
| emulgeátor | 0, 08 | 0, 08 | 0, 08 | 0, 08 |
| nátrium-fluorid | 0, 05 | 0,05 | 0, 05 | 0, 05 |
| glicerin | 10, 00 | 10, 00 | 10, 00 | 10, 00 |
| édesítőszer | 0, 02 | 0, 02 | 0, 02 | 0, 02 |
| benzoesav | 0, 05 | 0,05 | 0, 05 | 0, 05 |
| nátrium-hidroxid | 0,20 | 0,20 | 0,20 | 0,20 |
| színezőanyag | 0, 04 | 0, 04 | 0,04 | 0, 04 |
| víz | 100 %-ra |
A 75-78. példában a Leu96Thr + Glyl28Asp + Alal33Glu +
Asnl55Glu + Lys213Asp + Ala216Asp variánst a 2-25. táblázatban felsorolt szubtilizin BPN' variánsokkal helyettesítve lényegében hasonló eredményeket kapunk.
• · · · * * · « · · · · • » · • · ·
- 105 • ·
79-82. példa Gyógycukorka készítmény
| Komponens | 79 | Példa 80 | száma 81 | 82 |
| Serl32Asp + Tyr217Leu | 0, 01 | 0, 03 | 0, 10 | 0,02 |
| szorbit | 17, 50 | 17,50 | 17,50 | 17,50 |
| mannit | 17, 50 | 17,50 | 17,50 | 17,50 |
| keményítő | 13, 60 | 13, 60 | 13, 60 | 13, 60 |
| édesítőszer | 1,20 | 1,20 | 1,20 | 1,20 |
| ízesítőanyag | 11,70 | 11,70 | 11,70 | 11,70 |
| színezőanyag | 0, 10 | 0, 10 | 0, 10 | 0, 10 |
| kukoricaszirup | 100 | %-ra | ||
| A 25-26. példában a | Serl32Asp | + Tyr217Leu | variánst a 2-25. |
táblázatban felsorolt szubtilizin BPN' variánsokkal helyettesítve lényegében hasonló eredményeket kapunk.
83-86. példa Rágógumi készítmény
| Példa | száma | ||||
| Komponens | 83 | 84 | 85 | 86 | |
| Thr66Pro+Glnl03Asn+Lys213Asp | 0, 03 | 0, 02 | 0,10 | o, | 05 |
| kristályos szorbit | 38, 44 | 38,40 | 38,40 | 38, | 40 |
| Paloja-T gumialap* | 20, 00 | 20, 00 | 20, 00 | 20, | 00 |
| szorbit (70 %-os vizes oldat) | 22, 00 | 22, 00 | 22,00 | 22, | 00 |
| mannit | 10, 00 | 10, 00 | 10, 00 | 10, | 00 |
| glicerin | 7, 56 | 7,56 | 7,56 | 7, | 56 |
| ízesítőanyag | 1,00 | 1,00 | 1,00 | Íz | 00 |
L. A. Dreyfus Company.
• *
- 106 A 83-86. példában a Thr66Pro + GlnlO3Asn + Lys213Asp variánst a 2-25. táblázatban felsorolt szubtilizin BPN' variánsokkal helyettesítve lényegében hasonló eredményeket kapunk.
2. Műfogsortisztító készítmények
Egy további találmány szerinti megoldás olyan, műfogsoroknak a szájüregen kívüli tisztítására szolgáló műfogsortisztító készítményekre vonatkozik, amelyek egy vagy több, találmány szerinti enzimvariánst tartalmaznak. A találmány szerinti műfogsortosztító készítmények hatásos mennyiségben, előnyösen körülbelül 0,0001 tömeg! és körülbelül 50 tömeg!, még előnyösebben körülbelül 0,001 tömeg! és körülbelül 35 tömeg!, legelőnyösebben körülbelül 0,01 tömeg! és körülbelül 20 tömeg! közötti mennyiségben egy vagy több enzimvariánst, valamint egy műfogsortisztító hordozót tartalmaznak. A különféle műfogsortisztító készítmények formái, például a pezsgőtabletták stb. a szakterületen jól ismertek (lásd például az 5 055 305. számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírást) , és általában alkalmasak arra, hogy a proteinszerű szennyezőanyagoknak a műfogsorokról történő eltávolítására szolgáló egy vagy több enzimvariánst be lehessen építeni a kompozíciókba.
A találmány szerinti műfogsortisztító készítményeket az alábbi példákon keresztül mutatjuk be.
• ·· · · *>·>
• · · · · · · •·· · * ·«· ··· • » · · · ··· ♦ · ·· «
- 107 87-90. példa
Kétrétegű műfogsortisztító pezsgőtabletta
| Példa | száma | |||
| Komponens | 87 | 88 | 89 | 90 |
| Savas réteg | ||||
| Gln59Glu+Ser63Glu+Val95Met | 1,0 | 1,5 | 0, 01 | 0, 05 |
| +Gly97Pro+Tyr217Ala | ||||
| borkösav | 24,0 | 24,0 | 24,00 | 24, 00 |
| nátrium-karbonát | 4,0 | 4,0 | 4,00 | 4, 00 |
| amido-kénsav | 10, 0 | 10, 0 | 10, 00 | 10, 00 |
| PEG 20 000 | 4,0 | 4,0 | 4,00 | 4, 00 |
| nátrium-hidrogén-karbonát | 24, 5 | 24,5 | 24,50 | 24,50 |
| kálium-perszulfát | 15, 0 | 15, 0 | 15, 00 | 15, 00 |
| nátrium-pirofoszfát | 7,0 | 7,0 | 7,00 | 7,00 |
| pirogén szilicium-dioxid | 2,0 | 2,0 | 2,00 | 2,00 |
| TAED* | 7,0 | 7,0 | 7, 00 | 7,00 |
| ricinoleil-szülfoszukcinát | 0, 5 | 0,5 | 0,50 | 0,50 |
| ízesítőanyag | 1,0 | 1,0 | 1,00 | 1,00 |
| Alkálikus réteg | ||||
| nátrium-perborát—monohidrát | 32, 0 | 32, 0 | 32, 00 | 32,00 |
| nátrium-hidrogén-karbonát | 19, 0 | 19, 0 | 19, 00 | 19, 00 |
| EDTA | 3, 0 | 3, 0 | 3, 00 | 3, 00 |
| nátrium-tripolifőszfát | 12, 0 | 12, 0 | 12, 00 | 12,00 |
| PEG 20 000 | 2, 0 | 2, 0 | 2, 00 | 2, 00 |
| kálium-perszulfát | 26, 0 | 26, 0 | 26, 00 | 26, 00 |
| nátrium-karbonát | 2, 0 | 2,0 | 2, 00 | 2, 00 |
| pirogén szilicium-dioxid | 2, 0 | 2, 0 | 2, 00 | 2,00 |
| színezőanyag/ízesítőanyag | 2,0 | 2,0 | 2, 00 | 2,00 |
tetraacetil-etilén-diamin *·«· ·« • »··««· •·· · · ··· »w· • · » · · • «· ·V ·« ·
- 108 A 87-90. példában a Gln59Glu + Ser63Glu + Val95Met + Gly97Pro + Tyr217Ala variánst a 2-25. táblázatban felsorolt szubtilizin BPN' variánsokkal helyettesítve lényegében hasonló eredményeket kapunk.
3. Kontaktlencse-tisztító készítmények
Egy további, találmány szerinti megoldás egy vagy több találmány szerinti enzimvariánst tartalmazó, kontaklencsék tisztítására szolgáló készítményekre vonatkozik. A kontaktlencse-tisztító készítmények hatásos mennyiségben, előnyösen körülbelül 0,01 tömeg! és körülbelül 50 tömeg!, még előnyösebben körülbelül 0,01 tömeg! és körülbelül 20 tömeg!, legelőnyösebben körülbelül 1 tömeg! és körülbelül 5 tömeg! közötti mennyiségben egy vagy több enzimvariánst, valamint egy kontaktlencse-tisztító hordozót tartalmaznak. A különféle kontaktlencse-tisztító készítmények formái, például a tabletták, folyadékok stb. a szakterületen jól ismertek (lásd például a 4 863 627. számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírást, az 1988. május 24-én újra érvénybe helyezett Re. 32 672. számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírást, a 4 609 493., a 4 690 793., a 4 614 549. és a 4 285 738. számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírást), és általában alkalmasak arra, hogy a proteinszerű szennyezőanyagoknak a kontaktlencsékről történő eltávolítására szolgáló egy vagy több enzimvariánst be lehessen építeni a készítményekbe.
A találmány szerinti kontaktlencse-tisztító készítményeket az alábbi példákon keresztül mutatjuk be.
·· ·· • ···««· •·· · · «·· »«· • · » · · ··· ·· «· ·
- 109 tut »·
91-94. példa
Enzimes kontaktlencse-tisztító oldat
| Példa | száma | ||||
| Komponens | 91 | 92 | 93 | 94 | |
| Serl91Glu + Gly219Ser | 0,01 | 0, 5 | 0, 1 | 2, | 0 |
| glükóz | 50, 00 | 50, 0 | 50, 0 | 50, | 0 |
| nemionos felületaktív anyag | 2,00 | 2,0 | 2,0 | 2, | 0 |
[poli(oxi-etilén)/poli(oxi-propilén) kopolimer] anionos felületaktív anyag 1,00 [poli(oxi-etilén)-alkil-fenil-éter nátrium-szülfo-észter'
1,0
1,0
1, 0
| nátrium-klorid | 1, 00 | 1,0 | 1,0 | 1,0 |
| bórax | 0, 30 | 0, 3 | 0, 3 | 0, 3 |
| ví z | 100 | %-ra |
A 91-94. példában a Serl91Glu + Gly219Ser variánst a 2-25. táblázatban felsorolt szubtilizin BPN' variánsokkal helyettesítve lényegében hasonló eredményeket kapunk.
Jóllehet a fentiekben csak egyedi, találmány szerinti megoldásokat ismertettünk, az ezen a területen jártas szakember számára nyilvánvaló, hogy a találmány terjedelmén belül számos további változtatás és módosítás végezhető. Hangsúlyozni kívánjuk, hogy a találmánynak a mellékelt szabadalmi igénypontok által meghatározott oltalmi köre magában foglalja valamennyi ilyen jellegű módosítást is.
- 110 SZEKVENCIÁK JEGYZÉKE
AZ 1. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI (i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
| (A) | HOSSZ: | 275 | aminosav |
| (B) | TÍPUS: | aminosav | |
| (D) | TOPOLÓGIA: | lineáris |
(ii) A MOLEKULA TÍPUSA: protein
| Ala 1 | (xi) Gin | AZ Ser | 1. SZÁMÚ SZEKVENCIA | LEÍRÁSA: | Lys | Ala | Pro | Ala 15 | Leu | ||||||
| Val | Pro 5 | Tyr | Gly | Val | Ser | Gin 10 | Ile | ||||||||
| His | Ser | Gin | Gly | Tyr | Thr | Gly | Ser | Asn | Val | Lys | Val | Ala | Val | Ile | Asp |
| 20 | 25 | 30 | |||||||||||||
| Ser | Gly | Ile | Asp | Ser | Ser | His | Pro | Asp | Leu | Lys | Val | Ala | Gly | Gly | Ala |
| 35 | 40 | 45 | |||||||||||||
| Ser | Met | Val | Pro | Ser | Glu | Thr | Asn | Pro | Phe | Gin | Asp | Asn | Asn | Ser | His |
| 50 | 55 | 60 | |||||||||||||
| Gly | Thr | His | Val | Ala | Gly | Thr | Val | Ala | Ala | Leu | Asn | Asn | Ser | Ile | Gly |
| 65 | 70 | 75 | 80 | ||||||||||||
| Val | Leu | Gly | Val | Alá | Pro | Ser | Ala | Ser | Leu | Tyr | Ala | Val | Lys | Val | Leu |
| 85 | 90 | 95 | |||||||||||||
| Gly | Ala | Asp | Gly | Ser | Gly | Gin | Tyr | Ser | Trp | Ile | Ile | Asn | Gly | Ile | Glu |
| 100 | 105 | 110 | |||||||||||||
| Trp | Ala | Ile | Ala | Asn | Asn | Met | Asp | Val | Ile | Asn | Met | Ser | Leu | Gly | Gly |
| 115 | 120 | 125 | |||||||||||||
| Pro | Ser | Gly | Ser | Ala | Ala | Leu | Lys | Ala | Ala | Val | Asp | Lys | Ala | Val | Ala |
| 130 | 135 | 140 | |||||||||||||
| Ser | Gly | Val | Val | Val | Val | Ala | Ala | Ala | Gly | Asn | Glu | Gly | Thr | Ser | Gly |
| 145 | 150 | 155 | 160 | ||||||||||||
| Ser | Ser | Ser | Thr | Val | Gly | Tyr | Pro | Gly | Lys | Tyr | Pro | Ser | Val | Ile | Ala |
| 165 | 170 | 175 | |||||||||||||
| Val | Gly | Ala | Val | Asp | Ser | Ser | Asn | Gin | Arg | Ala | Ser | Phe | Ser | Ser | Val |
| 180 | 185 | 190 |
- 111 Gly Pro Glu Leu Asp Val Met Alá 195 200
Leu Pro Gly Asn Lys Tyr Gly Alá 210 215
Pro His Val Alá Gly Alá Alá Alá 225 230
Trp Thr Asn Thr Gin Val Arg Ser 245
Leu Gly Asp Ser Phe Tyr Tyr Gly 260
Alá Alá Gin 275
Pro Gly Val Ser Ile Gin 205
Tyr Asn Gly Thr Ser Met 220
Leu Ile Leu Ser Lys His 235
Ser Leu Glu Asn Thr Thr 250
Lys Gly Leu Ile Asn Val 265 270
Ser Thr
Alá Ser
Pro Asn 240
Thr Lys 255
Gin Alá
112
Claims (11)
- SZABADALMI IGÉNYPONTOK1. Szubtilizin BPN' variáns, amely a szubtilizin BPN' vad típusú aminosav-szekvencia módosított aminosav-szekvenciájával rendelkezik, ahol a vad típusú aminosav-szekvencia egy első hurokrégiót, egy második hurokrégiót, egy harmadik hurokrégiót, egy.negyedik hurokrégiót és egy ötödik hurokrégiót tartalmaz, azzal jellemezve, hogy a módosított aminosav-szekvencia egy vagy több hurokrégiója egy vagy több pozíciójában helyettesítést tartalmaz, aholA. ha az első hurokrégióban történik helyettesítés, a helyettesítés a következő pozíciók közül egyben vagy többen fordul elő: 59, 60, 61, 62, 63, 65 vagy 66; ahola. ha az 59 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Asn, Asp, Glu vagy Ser;b. ha a 60 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Glu;c. ha a 61 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Asp, Gin, Glu vagy Ser;d. ha a 62 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Asp, Gin, Glu vagy Ser;e. ha a 63 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Asp vagy Glu;f. ha a 65 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Asn, Asp, Gin, Glu, Pro vagy Ser;g. ha a 66 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Asn, Asp, Gin, Glu, Gly, Pro vagy Ser;• ·- 113 B. ha a második hurokrégióban történik helyettesítés, a helyettesítés a következő pozíciók közül egyben vagy többen fordul elő: 95, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104,105, 106 vagy 107; ahola. ha a 95 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Alá, Asn, Asp, Cys, Gin, Glu, Gly, His,Met, Pro, Ser vagy Thr;b. ha a 96 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Alá, Asn, Asp, Cys, Gin, Glu, Gly, His,Ile, Met, Pro, Ser, Thr vagy Val;c. ha a 97 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Asn, Asp, Gin, Glu, Pro vagy Ser;d. ha a 98 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Asn, Asp, Gin, Glu, Gly, His, Pro, Ser vagy Thr;e. ha a 99 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Glu;
f. ha a 100 pozícióban tesítő aminosav Asn, történik Asp, Gin, helyettesítés, Glu, Pro vagy a Se helyet- r; g. ha a 101 pozícióban történik helyettesítés, a helyet- tesítő aminosav Asp vagy Glu; h. ha a 102 pozícióban történik helyettesítés, a helyet- tesítő aminosav Asn, Asp, Gin, Glu, Pro vagy Ser; i. ha a 103 pozícióban történik helyettesítés, a helyet- tesítő aminosav Asn, Asp, Glu vagy Ser; j · ha a 104 pozícióban történik helyettesítés, a helyet- tesítő aminosav Alá, Asn, Asp, Cys, Gin, Glu, Gly,114His, Ile, Leu, Met, Pro, Ser, Thr vagy Val;k. ha a 105 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Asp vagy Glu;l. ha a 106 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Alá, Asn, Asp, Cys, Gin, Glu, Gly,His, Ile, Leu, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Tyr vagy Val;m. ha a 107 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Alá, Asn, Asp, Cys, Gin, Glu, Gly,His, Leu, Met, Pro, Ser, Thr vagy Val; ha a harmadik hurokrégióban történik helyettesítés, a helyettesítés a következő pozíciók közül egyben vagy többen fordul elő: 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132 vagy 133;ahola. ha a 126 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Alá, Asn, Asp, Cys, Gin, Glu, Gly,His, Ile, Met, Pro, Ser, Thr vagy Val;b. ha a 127 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Asn, Asp, Gin, Glu, Pro vagy Ser;c. ha a 128 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Asn, Asp, Gin, Glu, Gly vagy Ser;d. ha a 129 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Asn, Asp, Gin, Glu, Gly vagy Ser;e. ha a 130 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Asp vagy Glu;f. ha a 131 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Asn, Asp, Gin, Glu, Gly vagy Ser;g. ha a 132 pozícióban történik helyettesítés, a helyet- 115 tesítő aminosav Asp vagy Glu;h. ha a 133 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Asn, Asp, Gin, Glu, Gly, His, Pro, Ser vagy Thr;D. ha a negyedik hurokrégióban történik helyettesítés, a helyettesítés a következő pozíciók közül egyben vagy többen fordul elő: 154, 155, 156, 157, 158, 159, 160, 161, 162,163, 164, 165, 166 vagy 167; ahola. ha a 154 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Asn, Asp, Gin, Glu, Pro vagy Ser;b. ha a 155 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Asp, Gin, Glu vagy Ser;c. ha a 156 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Asp;d. ha a 157 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Asn, Asp, Gin, Glu, Pro vagy Ser;e. ha a 158 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Asn, Asp, Gin, Glu, Gly, Pro vagy Ser;f. ha a 159 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Asp vagy Glu;g. ha a 160 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Asn, Asp, Gin, Glu, Pro vagy Ser;h. ha a 161 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Asp vagy Glu;i. ha a 162 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Asp vagy Glu;j. ha a 163 pozícióban történik helyettesítés, a helyet116m.tesítő aminosav Asp vagy Glu;ha a 164 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Asn, Asp, Gin, Glu, Gly, Pro vagy Ser;ha a 165 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Alá, Asn, Asp, Cys, Gin, Glu, Gly,His, Met, Pro, Ser vagy Thr;ha a 166 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Asn, Asp, Gin, Glu, Pro vagy Ser; ha a 167 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Alá, Asn, Asp, Cys, Gin, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Met, Pro, Ser, Thr vagy Val;E. ha az ötödik hurokrégióban történik helyettesítés, a helyettesítés a következő pozíciók közül egyben vagy többen fordul elő: 187, 188, 189, 190 vagy 191; ahola. ha a 187 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Asn, Asp, Gin, Glu, Gly, His, Pro, Ser and Thr;b. ha a 188 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Asp vagy Glu;c. ha a 189 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Alá, Asn, Asp, Cys, Gin, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Met, Pro, Ser, Thr, Tyr vagy Val;d. ha a 190 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Asp vagy Glu; ése. ha a 191 pozícióban történik helyettesítés, a helyettesítő aminosav Asp vagy Glu;miáltal a szubtilizin BPN' variáns a vad típusú szubtilizin117BPN'-hez képest kisebb mértékben adszorbeálódik egy oldhatatlan szubsztráthoz, illetve fokozottan hidrolizál egy oldhatatlan szubsztrátot. - 2. Egy 1. igénypont szerinti szubtilizin BPN' variáns, amelyben egy vagy több helyettesítés fordul elő az első hurokrégióban .
- 3. Egy 1. igénypont szerinti szubtilizin BPN' variáns, amelyben egy vagy több helyettesítés fordul elő a második hurokrégióban .
- 4. Egy 1. igénypont szerinti szubtilizin BPN' variáns, amelyben egy vagy több helyettesítés fordul elő a harmadik hurokrégióban .
- 5. Egy 1. igénypont szerinti szubtilizin BPN' variáns, amelyben egy vagy több helyettesítés fordul elő a negyedik hurokrégióban .
- 6. Egy 1. igénypont szerinti szubtilizin BPN' variáns, amelyben egy vagy több helyettesítés fordul elő az ötödik hurokrégióban .
- 7. Egy 1-6. igénypontok bármelyike szerinti szubtilizinBPN' variáns, amelyben a szubtilizin BPN' vad típusú aminosav-szekvencia egy hatodik hurokrégiót is tartalmaz, azzal jellemezve, hogy a módosított aminosav-szekvencia egy vagy több helyettesítést tartalmaz a hatodik hurokrégióban, és a hatodik hurokrégióban lévő helyettesítések a 199, 200, 201, 202, 203,204, 205, 206, 207, 208, 209, 210, 211, 212, 213, 214, 215, 216,217, 218, 219 vagy 220 pozíciók közül egyben vagy többen fordulnak elő, ahol • ·- 118 a. ha a 199 pozícióban történik helyettesítés, a 199 pozícióban lévő helyettesítő aminosav Cys, Alá, His,Thr, Pro, Gly, Gin, Asn, Ser, Asp vagy Glu;b. ha a 200 pozícióban történik helyettesítés, a 200 pozícióban lévő helyettesítő aminosav His, Thr, Pro,Gly, Gin, Asn, Ser, Asp vagy Glu;c. ha a 201 pozícióban történik helyettesítés, a 201 pozícióban lévő helyettesítő aminosav Gly, Gin, Asn,Ser, Asp vagy Glu;d. ha a 202 pozícióban történik helyettesítés, a 202 pozícióban lévő helyettesítő aminosav Pro, Gin, Asn,Ser, Asp vagy Glu;e. ha a 203 pozícióban történik helyettesítés, a 203 pozícióban lévő helyettesítő aminosav Met, Cys, Alá,His, Thr, Pro, Gly, Gin, Asn, Ser, Asp vagy Glu;f. ha a 204 pozícióban történik helyettesítés, a 204 pozícióban lévő helyettesítő aminosav Asp, vagy Glu;g. ha a 205 pozícióban történik helyettesítés, a 205 pozícióban lévő helyettesítő aminosav Leu, Val, Met,Cys, Alá, His, Thr, Pro, Gly, Gin, Asn, Ser, Asp vagyGlu;h. ha a 206 pozícióban történik helyettesítés, a 206 pozícióban lévő helyettesítő aminosav Pro, Asn, Ser,Asp, vagy Glu;i. ha a 207 pozícióban történik helyettesítés, a 207 pozícióban lévő helyettesítő aminosav Asp vagy Glu;j . ha a 208 pozícióban történik helyettesítés, a 208 po- 119 « ·· ··· • *
zícióban lévő helyettesítő aminosav Pro, Gly, Gin, Asn, Ser, Asp vagy Glu; k. ha a 209 pozícióban történik helyettesítés, a 209 po — zícióban lévő helyettesítő aminosav Ile, Val, Met, Cys, Alá, His, Thr, Pro, Gly , Gin, Asn, Ser , Asp vagy Glu; 1. ha a 210 pozícióban történik helyettesítés, a 210 po- zícióban lévő helyettesítő aminosav Alá, Gly, Gln, Asn, Ser, Asp vagy Glu; m. ha a 211 pozícióban történik helyettesítés, a 211 po— zícióban lévő helyettesítő aminosav Alá, Pro, Gin, Asn, Ser, Asp vagy Glu; n. ha a 212 pozícióban történik helyettesítés, a 212 po- zícióban lévő helyettesítő aminosav Gin, Ser , Asp vagy Glu; o. ha a 213 pozícióban történik helyettesítés, a 213 po— zícióban lévő helyettesítő aminosav Trp, Phe, Tyr, Leu, Ile, Val, Met, Cys, Alá, His, Thr, Pro, Gly, Gin, Asn, Ser, Asp vagy Glu; P· ha a 214 pozícióban történik helyettesítés, a 214 po— zícióban lévő helyettesítő aminosav Phe, Leu, Ile, Val, Met, Cys, Alá, His, Thr, Pro, Gly, Gin, Asn, Ser, Asp vagy Glu; q. ha a 215 pozícióban történik helyettesítés, a 215 po- zícióban lévő helyettesítő aminosav Thr, Pro, Gln, Asn, Ser, Asp vagy Glu; r. ha a 216 pozícióban történik helyettesítés, a 216 po- 120zícióban lévő helyettesítő aminosav His, Thr, Pro, Gly, Gin, Asn, Ser, Asp vagy Glu; ha a 217 pozícióban történik helyettesítés, a 217 po- zícióban lévő helyettesítő aminosav Leu, Ile, Val, Met, Cys, Alá, His, Thr, Pro, Gly, Gin, Asn, Ser, Asp vagy Glu; ha a 218 pozícióban történik helyettesítés, a 218 po- zícióban lévő helyettesítő aminosav Gin, Ser, Asp vagy Glu; ha a 219 pozícióban történik helyettesítés, a 219 po- zícióban lévő helyettesítő aminosav Pro, Gin, Asn, Ser, Asp vagy Glu; ésv. ha a 220 pozícióban történik helyettesítés, a 220 pozícióban lévő helyettesítő aminosav Pro, Gly, Gin,Asn, Ser Asp vagy Glu. - 8. Egy, a kemény felületek tisztítására szolgáló tisztítókészítmények, a mosogatószerek, a szájtisztító készítmények, a műfogsortisztító készítmények, a kontaktlencse-tisztító készítmények és a textiltisztító készítmények csoportjából kiválasztott tisztítókészítmény, azzal jellemezve, hogy a tisztító készítmény egy 1-7. igénypontok bármelyike szerinti szubtilizin BPN' variánst és egy tisztítószer-hordozót tartalmaz.
- 9. A 8. igénypont szerinti tisztítókészítmény, azzal jellemezve, hogy a tisztítókészítmény egy kemény felületek tisztítására szolgáló készítmény.
- 10. A 8. igénypont szerinti tisztítókészítmény, azzal jellemezve, hogy a tisztítókészítmény egy textiltisztító ké•··· ··- 121 szítmény.
- 11. Egy 1-7. igénypontok bármelyike szerintiBPN' variánst kódoló mutáns BPN' gén.szubtilizin
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US23793994A | 1994-05-02 | 1994-05-02 | |
| US28746194A | 1994-08-11 | 1994-08-11 | |
| US08/394,011 US6436690B1 (en) | 1993-09-15 | 1995-03-03 | BPN′ variants having decreased adsorption and increased hydrolysis wherein one or more loop regions are substituted |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| HU9603031D0 HU9603031D0 (en) | 1997-01-28 |
| HUT75559A true HUT75559A (en) | 1997-05-28 |
Family
ID=27399035
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HU9603031A HUT75559A (en) | 1994-05-02 | 1995-03-16 | Subtilisin bpn'variants having decreased adsorption and increased hydrolysis |
Country Status (13)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6436690B1 (hu) |
| EP (1) | EP0758388A1 (hu) |
| JP (1) | JPH09511652A (hu) |
| CN (1) | CN1151761A (hu) |
| AU (1) | AU2159195A (hu) |
| BR (1) | BR9507597A (hu) |
| CA (1) | CA2189426C (hu) |
| CZ (1) | CZ321696A3 (hu) |
| HU (1) | HUT75559A (hu) |
| IL (1) | IL113048A0 (hu) |
| MX (1) | MX9605357A (hu) |
| PE (1) | PE27897A1 (hu) |
| WO (1) | WO1995030010A1 (hu) |
Families Citing this family (94)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6436690B1 (en) * | 1993-09-15 | 2002-08-20 | The Procter & Gamble Company | BPN′ variants having decreased adsorption and increased hydrolysis wherein one or more loop regions are substituted |
| US6440717B1 (en) * | 1993-09-15 | 2002-08-27 | The Procter & Gamble Company | BPN′ variants having decreased adsorption and increased hydrolysis |
| US6599730B1 (en) * | 1994-05-02 | 2003-07-29 | Procter & Gamble Company | Subtilisin 309 variants having decreased adsorption and increased hydrolysis |
| US5837516A (en) * | 1995-03-03 | 1998-11-17 | Genentech, Inc. | Subtilisin variants capable of cleaving substrates containing basic residues |
| US5780285A (en) * | 1995-03-03 | 1998-07-14 | Genentech, Inc. | Subtilisin variants capable of cleaving substrates containing dibasic residues |
| US6455295B1 (en) * | 1995-03-08 | 2002-09-24 | The Procter & Gamble Company | Subtilisin Carlsberg variants having decreased adsorption and increased hydrolysis |
| US6475765B1 (en) * | 1995-03-09 | 2002-11-05 | Procter & Gamble Company | Subtilisin DY variants having decreased adsorption and increased hydrolysis |
| IL117350A0 (en) * | 1995-03-09 | 1996-07-23 | Procter & Gamble | Proteinase k variants having decreased adsorption and increased hydrolysis |
| US6682924B1 (en) * | 1995-05-05 | 2004-01-27 | Novozymes A/S | Protease variants and compositions |
| DE19535082A1 (de) | 1995-09-21 | 1997-03-27 | Henkel Ecolab Gmbh & Co Ohg | Pastenförmiges Wasch- und Reinigungsmittel |
| DE19615776A1 (de) | 1996-04-20 | 1997-10-23 | Henkel Kgaa | Löslichkeitsverbessertes Enzymgranulat |
| DE19636035A1 (de) | 1996-09-05 | 1998-03-12 | Henkel Ecolab Gmbh & Co Ohg | Pastenförmiges Wasch- und Reinigungsmittel |
| US6300116B1 (en) | 1996-11-04 | 2001-10-09 | Novozymes A/S | Modified protease having improved autoproteolytic stability |
| BR9712473B1 (pt) | 1996-11-04 | 2009-08-11 | variantes de subtilase e composições. | |
| DE19703364A1 (de) | 1997-01-30 | 1998-08-06 | Henkel Ecolab Gmbh & Co Ohg | Pastenförmiges Wasch- und Reinigungsmittel |
| US6284246B1 (en) | 1997-07-30 | 2001-09-04 | The Procter & Gamble Co. | Modified polypeptides with high activity and reduced allergenicity |
| CN1272137A (zh) | 1997-08-29 | 2000-11-01 | 诺沃挪第克公司 | 蛋白酶变体及组合物 |
| ATE385254T1 (de) | 1997-08-29 | 2008-02-15 | Novozymes As | Proteasevarianten und zusammensetzungen |
| EP0913458B1 (en) * | 1997-10-22 | 2004-06-16 | The Procter & Gamble Company | Liquid hard-surface cleaning compositions |
| RU2269572C2 (ru) * | 1997-10-23 | 2006-02-10 | Джененкор Интернэшнл, Инк. | Варианты протеазы, замещенные в нескольких положениях |
| AR016969A1 (es) * | 1997-10-23 | 2001-08-01 | Procter & Gamble | VARIANTE DE PROTEASA, ADN, VECTOR DE EXPRESIoN, MICROORGANISMO HUESPED, COMPOSICIoN DE LIMPIEZA, ALIMENTO PARA ANIMALES Y COMPOSICIoN PARA TRATAR UN TEXTIL |
| ES2368718T3 (es) | 1997-10-23 | 2011-11-21 | Danisco Us Inc. | Variantes de subtilisina con múltiples sustituciones. |
| WO2000071686A1 (en) † | 1999-05-20 | 2000-11-30 | Novozymes A/S | Subtilase enzymes of the i-s1 and i-s2 sub-groups having at least one additional amino acid residue between positions 97 and 98 |
| US6780629B2 (en) | 1997-11-21 | 2004-08-24 | Novozymes A/S | Subtilase enzymes |
| US6773907B2 (en) | 1997-11-21 | 2004-08-10 | Peter Kamp Hansen | Subtilase enzymes |
| AU1225099A (en) | 1997-11-21 | 1999-06-15 | Novo Nordisk A/S | Protease variants and compositions |
| US6908757B1 (en) | 1998-03-26 | 2005-06-21 | The Procter & Gamble Company | Serine protease variants having amino acid deletions and substitutions |
| WO1999049056A1 (en) | 1998-03-26 | 1999-09-30 | The Procter & Gamble Company | Serine protease variants having amino acid substitutions |
| US6495136B1 (en) | 1998-03-26 | 2002-12-17 | The Procter & Gamble Company | Proteases having modified amino acid sequences conjugated to addition moieties |
| CA2345127A1 (en) * | 1998-09-22 | 2000-03-30 | The Procter & Gamble Company | Personal care compositions containing subtilisin enzymes bound to water insoluble substrates |
| US6831053B1 (en) | 1998-10-23 | 2004-12-14 | The Procter & Gamble Company | Bleaching compositions comprising multiply-substituted protease variants |
| US6376450B1 (en) | 1998-10-23 | 2002-04-23 | Chanchal Kumar Ghosh | Cleaning compositions containing multiply-substituted protease variants |
| DE19857687A1 (de) | 1998-12-15 | 2000-06-21 | Henkel Ecolab Gmbh & Co Ohg | Pastenförmiges Waschmittel |
| WO2000037626A1 (en) * | 1998-12-18 | 2000-06-29 | Novozymes A/S | Subtilase enzymes of the i-s1 and i-s2 sub-groups having an additional amino acid residue in an active site loop region |
| EP1803817B1 (en) | 1998-12-18 | 2011-04-06 | Novozymes A/S | Subtilase enzymes of the I-S1 and I-S2 sub-groups having an additional amino acid residue in an active site loop region |
| WO2000071688A1 (en) | 1999-05-20 | 2000-11-30 | Novozymes A/S | Subtilase enzymes of the i-s1 and i-s2 sub-groups having at least one additional amino acid residue between positions 126 and 127 |
| EP1183339B2 (en) | 1999-05-20 | 2013-03-13 | Novozymes A/S | Subtilase enzymes of the i-s1 and i-s2 sub-groups having at least one additional amino acid residue between positions 129 and 130 |
| EP1183341B2 (en) | 1999-05-20 | 2012-05-02 | Novozymes A/S | Subtilase enzymes of the i-s1 and i-s2 sub-groups having at least one additional amino acid residue between positions 127 and 128 |
| EP1183343B2 (en) | 1999-05-20 | 2013-11-27 | Novozymes A/S | Subtilase enzymes of the i-s1 and i-s2 sub-groups having at least one additional amino acid residue between positions 125 and 126 |
| DE60040282D1 (de) | 1999-05-20 | 2008-10-30 | Novozymes As | SUBTILASE ENZYME DER I-S1 UND I-S2 UNTERGRUPPEN MIT MINDESTENS EINER ZUSäTZLICHEN AMINOSäURE ZWISCHEN POSITION 132 UND 133 |
| AU4393000A (en) † | 1999-05-20 | 2000-12-12 | Novozymes A/S | Subtilase enzymes of the i-s1 and i-s2 sub-groups having at least one additionalamino acid residue between positions 128 and 129 |
| CA2376045A1 (en) * | 1999-07-22 | 2001-02-01 | The Procter & Gamble Company | Subtilisin protease variants having amino acid substitutions in defined epitope regions |
| US6946128B1 (en) | 1999-07-22 | 2005-09-20 | The Procter & Gamble Company | Protease conjugates having sterically protected epitope regions |
| CZ2002171A3 (cs) | 1999-07-22 | 2002-06-12 | The Procter & Gamble Company | Proteinázový konjugát, čistící prostředek a prostředek osobní péče |
| CA2379712A1 (en) | 1999-07-22 | 2001-02-01 | The Procter & Gamble Company | Subtilisin protease variants having amino acid deletions and substitutions in defined epitope regions |
| EP1212397A1 (en) * | 1999-09-09 | 2002-06-12 | The Procter & Gamble Company | A detergent composition containing a protease |
| US6727085B2 (en) | 1999-12-15 | 2004-04-27 | Fanoe Tina Sejersgaard | Subtilase variants having an improved wash performance on egg stains |
| US6777218B1 (en) | 2000-03-14 | 2004-08-17 | Novozymes A/S | Subtilase enzymes having an improved wash performance on egg stains |
| EP2258835A1 (en) * | 2000-04-28 | 2010-12-08 | Novozymes A/S | Lipolytic enzyme variant |
| US6803222B2 (en) | 2000-11-22 | 2004-10-12 | Kao Corporation | Alkaline proteases |
| DK200101090A (da) | 2001-07-12 | 2001-08-16 | Novozymes As | Subtilase variants |
| US7153820B2 (en) | 2001-08-13 | 2006-12-26 | Ecolab Inc. | Solid detergent composition and method for solidifying a detergent composition |
| DE10153792A1 (de) | 2001-10-31 | 2003-05-22 | Henkel Kgaa | Neue Alkalische Protease-Varianten und Wasch- und Reinigungsmittel enthaltend diese neuen Alkalischen Protease-Varianten |
| DE10162728A1 (de) | 2001-12-20 | 2003-07-10 | Henkel Kgaa | Neue Alkalische Protease aus Bacillus gibsonii (DSM 14393) und Wasch-und Reinigungsmittel enthaltend diese neue Alkalische Protease |
| DE10162727A1 (de) | 2001-12-20 | 2003-07-10 | Henkel Kgaa | Neue Alkalische Protease aus Bacillus gibsonii (DSM 14391) und Wasch-und Reinigungsmittel enthaltend diese neue Alkalische Protease |
| US20030157645A1 (en) * | 2001-12-21 | 2003-08-21 | Direvo Bio Tech Ag. | Subtilisin variants with improved characteristics |
| DE10163884A1 (de) | 2001-12-22 | 2003-07-10 | Henkel Kgaa | Neue Alkalische Protease aus Bacillus sp. (DSM 14392) und Wasch- und Reinigungsmittel enthaltend diese neue Alkalische Protease |
| MXPA04006811A (es) * | 2002-01-16 | 2004-10-11 | Genencor Int | Variantes de proteasa substituidas con multiplos. |
| ATE450606T1 (de) * | 2002-01-16 | 2009-12-15 | Genencor Int | Mehrfachsubstituierte proteasevarianten |
| TWI319007B (en) * | 2002-11-06 | 2010-01-01 | Novozymes As | Subtilase variants |
| US7888093B2 (en) * | 2002-11-06 | 2011-02-15 | Novozymes A/S | Subtilase variants |
| DE10260903A1 (de) * | 2002-12-20 | 2004-07-08 | Henkel Kgaa | Neue Perhydrolasen |
| BRPI0409992A (pt) | 2003-05-07 | 2006-05-09 | Novozymes As | enzima subtilase, polinucleotìdeo isolado, construção de ácido nucleico, vetor de expressão recombinante, célula hospedeira recombinante, método para produzir a subtilase, composição limpadora ou detergente, usos de uma subtilase e de uma composição limpadora ou detergente, e, métodos para limpar ou lavar louças, lavar uma superfìcie dura ou lavar roupas e para remover manchas de ovo de uma superfìcie dura ou de roupas para lavar |
| WO2005040372A1 (en) | 2003-10-23 | 2005-05-06 | Novozymes A/S | Protease with improved stability in detergents |
| EP1700904A1 (en) | 2005-03-11 | 2006-09-13 | Unilever N.V. | Liquid detergent composition |
| EP1700907A1 (en) | 2005-03-11 | 2006-09-13 | Unilever N.V. | Liquid bleaching composition |
| US20070161531A1 (en) * | 2005-07-08 | 2007-07-12 | Novozymes A/S | Subtilase variants |
| JP2009534022A (ja) | 2006-04-20 | 2009-09-24 | ノボザイムス アクティーゼルスカブ | 卵のシミに対する洗浄能力が向上したサビナーゼ変異体 |
| US8093200B2 (en) | 2007-02-15 | 2012-01-10 | Ecolab Usa Inc. | Fast dissolving solid detergent |
| CN101675160A (zh) | 2007-04-30 | 2010-03-17 | 丹尼斯科美国公司 | 蛋白质水解产物稳定金属蛋白酶洗涤剂制剂的用途 |
| EP2677023B1 (en) | 2007-10-18 | 2018-09-05 | Ecolab Inc. | Pressed, waxy, solid cleaning compositions and methods of making them |
| CA2726451A1 (en) * | 2008-06-06 | 2009-12-10 | Danisco Us Inc. | Compositions and methods comprising variant microbial proteases |
| MX2011004803A (es) * | 2008-11-11 | 2011-06-16 | Danisco Inc | Composiciones y metodos que comprenden una variante de subtilisina. |
| US8728790B2 (en) * | 2009-12-09 | 2014-05-20 | Danisco Us Inc. | Compositions and methods comprising protease variants |
| MX2012006616A (es) | 2009-12-09 | 2012-06-21 | Procter & Gamble | Productos para el cuidado de las telas y el hogar. |
| US20110150955A1 (en) | 2009-12-23 | 2011-06-23 | Shannon Elizabeth Klingman | Products and Methods for Reducing Malodor from the Pudendum |
| CN101824467B (zh) * | 2009-12-29 | 2012-07-18 | 广州益善生物技术有限公司 | Cyp2d6基因突变检测液相芯片及检测方法 |
| EP3095861B1 (en) * | 2010-05-06 | 2019-06-26 | The Procter and Gamble Company | Consumer products with protease variants |
| CA2856820C (en) | 2011-05-20 | 2019-10-29 | Ecolab Usa Inc. | Acid formulations for use in a system for warewashing |
| EP2902471A1 (en) | 2011-05-20 | 2015-08-05 | Ecolab USA Inc. | Non-phosphate detergents and non-phosphoric acids in an alternating alkali/acid system for warewashing |
| WO2013001087A2 (en) * | 2011-06-30 | 2013-01-03 | Novozymes A/S | Method for screening alpha-amylases |
| WO2013088266A1 (en) | 2011-12-13 | 2013-06-20 | Ecolab Usa Inc. | Concentrated warewashing compositions and methods |
| CN104011204A (zh) | 2011-12-20 | 2014-08-27 | 诺维信公司 | 枯草杆菌酶变体和编码它们的多核苷酸 |
| EP2607468A1 (en) | 2011-12-20 | 2013-06-26 | Henkel AG & Co. KGaA | Detergent compositions comprising subtilase variants |
| JP2015509364A (ja) * | 2012-02-17 | 2015-03-30 | ノボザイムス アクティーゼルスカブ | サブチリシン変異体およびそれをコードするポリヌクレオチド |
| US9745543B2 (en) | 2012-09-10 | 2017-08-29 | Ecolab Usa Inc. | Stable liquid manual dishwashing compositions containing enzymes |
| ES2982202T3 (es) | 2013-09-09 | 2024-10-15 | Ecolab Usa Inc | Método de lavado de vajilla basado en la eliminación sinérgica de manchas mediante una nueva combinación de quelantes |
| AU2013399899B2 (en) | 2013-09-09 | 2016-10-13 | Ecolab Usa Inc. | Synergistic stain removal through novel chelator combination |
| JP6254693B2 (ja) | 2013-10-24 | 2017-12-27 | エコラボ ユーエスエー インコーポレイティド | 表面から汚れを除去する組成物及び方法 |
| DE102016204814A1 (de) | 2016-03-23 | 2017-09-28 | Henkel Ag & Co. Kgaa | Verbesserte Reinigungsleistung an Protein sensitiven Anschmutzungen |
| DE102016204815A1 (de) * | 2016-03-23 | 2017-09-28 | Henkel Ag & Co. Kgaa | Proteasen mit verbesserte Enzymstabilität in Waschmittel |
| WO2019180111A1 (en) | 2018-03-23 | 2019-09-26 | Novozymes A/S | Subtilase variants and compositions comprising same |
| US12157869B2 (en) | 2019-07-10 | 2024-12-03 | Jeffrey Dean Lindsay | Methods and compositions for reducing persistent odor in clothing and mitigating biofilms on various materials |
| WO2021022045A1 (en) | 2019-07-31 | 2021-02-04 | Ecolab Usa Inc. | Personal protective equipment free delimer compositions |
Family Cites Families (60)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| IE81141B1 (en) * | 1983-06-24 | 2000-04-05 | Genencor Int | Procaryotic carbonyl hydrolases |
| US5310675A (en) * | 1983-06-24 | 1994-05-10 | Genencor, Inc. | Procaryotic carbonyl hydrolases |
| US4760025A (en) * | 1984-05-29 | 1988-07-26 | Genencor, Inc. | Modified enzymes and methods for making same |
| US5371190A (en) * | 1984-05-29 | 1994-12-06 | Genencor International, Inc. | Substrate assisted catalysis |
| US5182204A (en) * | 1984-05-29 | 1993-01-26 | Genencor International, Inc. | Non-human carbonyl hydrolase mutants, vectors encoding same and hosts transformed with said vectors |
| US5244791A (en) * | 1984-05-29 | 1993-09-14 | Genecor International, Inc. | Methods of ester hydrolysis |
| US5371008A (en) * | 1984-05-29 | 1994-12-06 | Genencor International, Inc. | Substrate assisted catalysis |
| US5155033A (en) * | 1989-01-06 | 1992-10-13 | Genencor, Inc. | Subtilisins modified at position 225 resulting in a shift in catalytic activity |
| US5972682A (en) * | 1984-05-29 | 1999-10-26 | Genencor International, Inc. | Enzymatically active modified subtilisins |
| US5346823A (en) * | 1984-05-29 | 1994-09-13 | Genencor, Inc. | Subtilisin modifications to enhance oxidative stability |
| US5801038A (en) * | 1984-05-29 | 1998-09-01 | Genencor International Inc. | Modified subtilisins having amino acid alterations |
| US5185258A (en) * | 1984-05-29 | 1993-02-09 | Genencor International, Inc. | Subtilisin mutants |
| WO1987004461A1 (en) | 1986-01-15 | 1987-07-30 | Amgen | THERMALLY STABLE AND pH STABLE SUBTILISIN ANALOGS AND METHOD FOR PRODUCTION THEREOF |
| JPS63502959A (ja) * | 1986-02-12 | 1988-11-02 | ジェネックス、コ−ポレ−ション | 突然変異誘発及びスクリ−ニング方法並びに生成物 |
| US4990452A (en) * | 1986-02-12 | 1991-02-05 | Genex Corporation | Combining mutations for stabilization of subtilisin |
| US4908773A (en) * | 1987-04-06 | 1990-03-13 | Genex Corporation | Computer designed stabilized proteins and method for producing same |
| US5013657A (en) | 1988-04-12 | 1991-05-07 | Bryan Philip N | Subtilisin mutations |
| US4980288A (en) * | 1986-02-12 | 1990-12-25 | Genex Corporation | Subtilisin with increased thermal stability |
| US5240632A (en) * | 1986-03-26 | 1993-08-31 | Amway Corporation | Machine dishwasher water spot control composition |
| DE3750916T2 (de) * | 1986-04-30 | 1995-06-01 | Genencor Int | Mutante einer nicht menschlichen Carbonyl-Hydrolase, für diese kodierende DNS-Sequenzen und Vektoren und durch diese Vektoren transformierte Wirte. |
| NZ221627A (en) | 1986-09-09 | 1993-04-28 | Genencor Inc | Preparation of enzymes, modifications, catalytic triads to alter ratios or transesterification/hydrolysis ratios |
| BR8805647A (pt) * | 1987-02-27 | 1989-10-31 | Gist Brocades Nv | Processo para clonagem molecular e expressao de genes que codificam para enzimas proteoliticas |
| US5260207A (en) * | 1987-04-06 | 1993-11-09 | Enzon Labs Inc. | Engineering of electrostatic interactions at metal ion binding sites for the stabilization of proteins |
| ATE371029T1 (de) * | 1987-04-06 | 2007-09-15 | Novozymes As | Regelung von elektrostatischen interaktionen an metallionen-bindungsstellen zur stabilisierung von proteinen |
| US4914031A (en) * | 1987-04-10 | 1990-04-03 | Amgen, Inc. | Subtilisin analogs |
| DK6488D0 (da) * | 1988-01-07 | 1988-01-07 | Novo Industri As | Enzymer |
| AU595096B2 (en) * | 1988-02-10 | 1990-03-22 | Astra Pharmaceuticals Pty Ltd | Plastic cartridge and syringe |
| US5324653A (en) * | 1988-02-11 | 1994-06-28 | Gist-Brocades N.V. | Recombinant genetic means for the production of serine protease muteins |
| CN1056187C (zh) | 1988-02-11 | 2000-09-06 | 金克克国际有限公司 | 新的蛋白水解酶及其在洗涤剂中的应用 |
| US6287841B1 (en) * | 1988-02-11 | 2001-09-11 | Genencor International, Inc. | High alkaline serine protease |
| US5246849A (en) * | 1988-04-12 | 1993-09-21 | Enzon, Inc. | Thermally stable serine proteases |
| US5116741A (en) * | 1988-04-12 | 1992-05-26 | Genex Corporation | Biosynthetic uses of thermostable proteases |
| US5118623A (en) * | 1988-05-27 | 1992-06-02 | Solvay Enzymes, Inc. | Bleach stable enzymes |
| JPH03505976A (ja) | 1989-05-17 | 1991-12-26 | アムジエン・インコーポレーテツド | 多重突然変異スブチリシン |
| DK316989D0 (da) | 1989-06-26 | 1989-06-26 | Novo Nordisk As | Enzymer |
| EP0405902A1 (en) | 1989-06-26 | 1991-01-02 | Unilever Plc | Enymatic detergent compositions |
| EP0405901B1 (en) | 1989-06-26 | 2004-09-01 | Unilever Plc | Enzymatic detergent compositions |
| US5665587A (en) * | 1989-06-26 | 1997-09-09 | Novo Nordisk A/S | Modified subtilisins and detergent compositions containing same |
| US5352603A (en) * | 1989-08-31 | 1994-10-04 | Kali-Chemie Ag | Highly alkaline proteases |
| US6271012B1 (en) * | 1989-10-11 | 2001-08-07 | Genencor International, Inc. | Protease muteins and their use in detergents |
| DE4009534A1 (de) * | 1990-03-24 | 1991-09-26 | Henkel Kgaa | Fluessiges handreinigungsmittel |
| DK97190D0 (da) * | 1990-04-19 | 1990-04-19 | Novo Nordisk As | Oxidationsstabile detergentenzymer |
| US5629173A (en) * | 1990-08-09 | 1997-05-13 | Genentech, Inc. | Methods of use of serine protease variants having peptide ligase activity |
| DE69131834T2 (de) * | 1990-08-09 | 2000-05-31 | Genentech, Inc. | Serinproteasevarianten mit peptidligase aktivität |
| DK271490D0 (da) * | 1990-11-14 | 1990-11-14 | Novo Nordisk As | Detergentkomposition |
| EP0563169B2 (en) | 1990-12-21 | 2006-04-12 | Novozymes A/S | ENZYME MUTANTS HAVING A LOW DEGREE OF VARIATION OF THE MOLECULAR CHARGE OVER A pH RANGE |
| US5482849A (en) * | 1990-12-21 | 1996-01-09 | Novo Nordisk A/S | Subtilisin mutants |
| US5340735A (en) * | 1991-05-29 | 1994-08-23 | Cognis, Inc. | Bacillus lentus alkaline protease variants with increased stability |
| DE4224125A1 (de) * | 1991-07-27 | 1993-01-28 | Solvay Enzymes Gmbh & Co Kg | Verfahren zur verbesserung der stabilitaet von enzymen und stabilisierte enzyme |
| US5275945A (en) * | 1991-10-08 | 1994-01-04 | Vista Chemical Company | Alkaline proteases stable in heavy-duty detergent liquids |
| AU682314B2 (en) | 1992-07-17 | 1997-10-02 | Genencor International, Inc. | High alkaline serine proteases |
| US5567601A (en) * | 1993-06-01 | 1996-10-22 | University Of Maryland | Subtilisin mutants lacking a primary calcium binding site |
| US5470733A (en) * | 1993-06-01 | 1995-11-28 | University Of Maryland | Calcium free subtilisin mutants |
| US6436690B1 (en) * | 1993-09-15 | 2002-08-20 | The Procter & Gamble Company | BPN′ variants having decreased adsorption and increased hydrolysis wherein one or more loop regions are substituted |
| JPH09502610A (ja) | 1993-09-15 | 1997-03-18 | ザ、プロクター、エンド、ギャンブル、カンパニー | 吸着性が減少して加水分解性が増加したズブチリシンｂｐｎ′変異体 |
| JP2888986B2 (ja) * | 1993-10-14 | 1999-05-10 | ザ、プロクター、エンド、ギャンブル、カンパニー | プロテアーゼ酵素を含んでなる漂白組成物 |
| HU219851B (hu) * | 1993-10-14 | 2001-08-28 | The Procter And Gamble Company | Proteáz tartalmú tisztítókészítmények |
| ES2364774T3 (es) * | 1994-02-24 | 2011-09-14 | HENKEL AG & CO. KGAA | Enzimas mejoradas y detergentes que las contienen. |
| US6599730B1 (en) * | 1994-05-02 | 2003-07-29 | Procter & Gamble Company | Subtilisin 309 variants having decreased adsorption and increased hydrolysis |
| US5780285A (en) * | 1995-03-03 | 1998-07-14 | Genentech, Inc. | Subtilisin variants capable of cleaving substrates containing dibasic residues |
-
1995
- 1995-03-03 US US08/394,011 patent/US6436690B1/en not_active Expired - Fee Related
- 1995-03-16 BR BR9507597A patent/BR9507597A/pt not_active Application Discontinuation
- 1995-03-16 MX MX9605357A patent/MX9605357A/es unknown
- 1995-03-16 JP JP7528205A patent/JPH09511652A/ja not_active Ceased
- 1995-03-16 CA CA002189426A patent/CA2189426C/en not_active Expired - Fee Related
- 1995-03-16 CN CN95193941A patent/CN1151761A/zh active Pending
- 1995-03-16 WO PCT/US1995/003176 patent/WO1995030010A1/en not_active Ceased
- 1995-03-16 HU HU9603031A patent/HUT75559A/hu unknown
- 1995-03-16 AU AU21591/95A patent/AU2159195A/en not_active Abandoned
- 1995-03-16 CZ CZ963216A patent/CZ321696A3/cs unknown
- 1995-03-16 EP EP95914713A patent/EP0758388A1/en not_active Withdrawn
- 1995-03-20 IL IL11304895A patent/IL113048A0/xx unknown
- 1995-04-03 PE PE1995265539A patent/PE27897A1/es not_active Application Discontinuation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| MX9605357A (es) | 1997-12-31 |
| CA2189426C (en) | 2002-09-17 |
| CZ321696A3 (en) | 1997-05-14 |
| EP0758388A1 (en) | 1997-02-19 |
| US6436690B1 (en) | 2002-08-20 |
| HU9603031D0 (en) | 1997-01-28 |
| CA2189426A1 (en) | 1995-11-09 |
| AU2159195A (en) | 1995-11-29 |
| BR9507597A (pt) | 1997-10-07 |
| CN1151761A (zh) | 1997-06-11 |
| WO1995030010A1 (en) | 1995-11-09 |
| PE27897A1 (es) | 1997-08-13 |
| IL113048A0 (en) | 1995-06-29 |
| JPH09511652A (ja) | 1997-11-25 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| HUT75559A (en) | Subtilisin bpn'variants having decreased adsorption and increased hydrolysis | |
| US6599730B1 (en) | Subtilisin 309 variants having decreased adsorption and increased hydrolysis | |
| US6455295B1 (en) | Subtilisin Carlsberg variants having decreased adsorption and increased hydrolysis | |
| EP0719339B1 (en) | Subtilisin bpn' variants with decreased adsorption and increased hydrolysis | |
| US6451574B1 (en) | Proteinase K variants having decreased adsorption and increased hydrolysis | |
| JP3642735B2 (ja) | プロテアーゼ複合体 | |
| US6475765B1 (en) | Subtilisin DY variants having decreased adsorption and increased hydrolysis | |
| KR20020021398A (ko) | 정의된 에피토프 구역에 아미노산 치환을 가진 서브틸리신프로테아제 변이체 | |
| MXPA02000843A (es) | Variantes de subtilisina proteasa que tienen supresiones de aminoacidos y sustituciones en regiones de epitope definidas. | |
| CZ280097A3 (cs) | Varianty termitasy mající sníženou adsorbci a zvýšenou hydrolýzu | |
| WO1996028558A9 (en) | Thermitase variants having decreased adsorption and increased hydrolysis | |
| US6440717B1 (en) | BPN′ variants having decreased adsorption and increased hydrolysis |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| DFA9 | Temporary protection cancelled due to abandonment |