JPH02169511A - 皮膚化粧料 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は、トランスグルタミナーゼと水溶性多価アルコ
ールとを含有してなる皮膚老化防止効果（荒肌改善効果
、保湿効果等）と美肌効果に優れた皮膚化粧料に関する
。

〔従来の技術及び発明が解決しようとする課題〕皮膚は
、個体を外的環境から守る役割、即ち異物の侵入を防ぎ
、体液の喪失を防ぐ役割を果たしている。皮膚の水分は
、真皮から表皮の基底細胞層、更に角質層へと外層に向
うにつれて減少する水分含量の勾配が存在し、常に皮膚
内部から外層部へ、移動し、角質層を通じて外部へ蒸散
している。

この水分蒸散は主に角質層の緻密な細胞組織からなる防
御機能により制御されている。老化した皮膚や非常に乾
燥した皮膚においては、皮膚表面が乾燥して滑らかさが
なく、角質細胞の剥離現象や荒れ肌状態になることが認
められている。このような場合、皮膚の水分保持機能が
低下していることが認められている。即ち、角質層の防
御機能による通常の制御限界を超えた状態にあるか、あ
るいは防御機能が衰えていることに由来するものである
。

このような皮膚の問題点を解決する方法として皮膚表面
の角質層及び層板顆粒の組織を緻密化し、その防御機能
を賦活することができれば、これによって皮膚の水分保
持機能が充進され、皮膚は健常な状態に保持されると共
に、乾燥皮膚の改善ないしは修復が可能となると考えら
れる。しかし、実際的に皮膚表面の状態を改善し、老化
皮膚、乾燥皮膚を真に改善するような皮膚化粧料はなく
、適当な水分と油分を与える親水性の皮膚保湿剤と油性
の皮膚柔軟剤を皮膚化粧料に配合することが行われてい
る。いずれの成分も皮膚老化防止効果や美肌効果を発揮
するには至らなかった。

また、皮膚角質層の構築に関与するトランスグルタミナ
ーゼにより改良した蛋白質を応用した化粧料（特開昭６
ｌ−１７２８０７）も提案されているが、安全性、経口
安定性の改善にまでは至らなかった。

本発明は、荒肌改善効果、保湿効果等の皮膚老化防止効
果、美肌効果、安全性、経日安定性に優れた皮膚化粧料
を提供することを目的としている。

〔！１題を解決するための手段〕 そこで、本発明者等は、上述の考え方に基づき、皮膚の
最外層である角質層の生化学的な生成メカニズム構成成
分について、鋭意研究した結果、タンパク質修飾酵素ト
ランスグルタミナーゼと水溶性多価アルコールを配合し
てなる皮膚化粧料は、老化皮膚や乾燥皮膚に適用した時
に、皮膚の表面及び皮膚の最外層である角質層に直接的
に作用し、それらの表面構造を緻密化することにより、
乾燥皮膚を改善し、水分保持機能を高め、皮膚の像質性
を改善する。更に、柔軟性１弾力性を与える美肌効果を
有することを見出し本発明を完成するに至った。

本発明は、トランスグルタミナーゼと水溶性多価アルコ
ールとを含有してなる皮膚化粧料である。

また、更にカルシウム塩を含有してなる皮膚化粧料であ
る。

本発明に用いるトランスグルタミナーゼ（ＥＣ２、３，
２，１３，以下ＴＧａｓｅと略す）は、クンバク質修飾
酵素の一つであり、タンパク質、ペプチド中のグルタミ
ン残基のγ−カルボキシルアミド基と、リシン残基のε
−アミノ基との間の反応を触媒し、ε−（Ｔ−グルタミ
ル）リジン結合を介する架橋形成反応を触媒する。ＴＧ
ａｓｅは、動物の諸組織、血液細胞に存在するが、特に
血液由来のフィブリン蛋白質の凝固反応や表皮細胞、毛
髪の角化反応に関与する。中でも表皮の角化に際しては
、ＴＧａｓｅは必須の因子であり、角質細胞膜の形成を
行い、非常に強固な皮膚の最外層を横築する。ＴＧａｓ
ｅは、インビボにおける表皮由来の蛋白質の架橋反応も
触媒することも分かっている。更に、ＴＧａ　ｓ　ｅは
２価のカルシウムイオンやライソゾーム系の酵素である
カテブシンＤにより活性化することも知られている。

ＴＧａ　ｓ　ｅは、主に皮膚最外層に存在する遊離のグ
ルタミン残基とリシン残基との反応を触媒し、ε−（Ｔ
−グルタミル）リジン結合からなる架橋を形成すること
により、表面構造を緻密化し、乾燥皮膚の改善、水分保
持機能の光道９皮膚の像質性の改善を行い、更に皮膚に
柔軟性７弾力性を与える美肌効果を発揮する。

本発明に用いるＴＧａ　ｓ　ｅは、モルモット、ラット
、ブタ、ウシ、ヒツジなどの哺乳動物の肝臓。

血清、血小板９毛嚢１表皮などから既知の方法により抽
出・精製し使用できる。また、微生物由来のものも使用
できる。

上記ＴＧａ　ｓ　ｅとともに本発明に用いる水溶性多価
アルコールは、上記ＴＧａ　ｓ　ｅの水溶液中での経口
的劣化を抑制する働きをするもので、例えば、エチレン
グリコール、プロピレングリコール。

ジプロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール
、１，４−ブチレングリコール、ジブチレングリコール
、グリセリン、ジグリセリン、グルコース、マルトース
、マルチトール、シュークロース、フラクトース、キシ
リトール、ソルビトール、スレイトール、エリスリトー
ルなどのが挙げられる。これらは単独で用いても２種以
上を併用してもよい。

更に、ＴＧａｓｅの活性を増強するためにはカルシウム
塩を同時に使用することが好ましい。例えば、塩化カル
シウム、酢酸カルシウム、乳酸カルシウム、ステアリン
酸カルシウム、グルコン酸カルシウム、炭酸カルシウム
、酸化カルシウム水酸化カルシウムが使用できる。より
好ましくは、塩化カルシウム、酢酸カルシウム、乳酸カ
ルシウム等の＊溶性カルシウム塩を使用すると活性の増
強は著しい。

また、従来から酵素の安定化に使用されているデキスト
リン、サイクロデキストリン、デンプン。

カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロ
ース、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール　
ペクチン、マンナン、アラビアゴムゼラチン、コラーゲ
ン、アルギン酸塩、キサンタンガム等の水溶性高分子を
ＴＧａ　ｓ　ｅと組み合わせて皮膚化粧料に配合した場
合、更に安定性が向上する。

更に、ＴＧａｓｅをポリアルキレングリコールやデキス
トラン硫酸等に既知の方法により固定化するか公報５９
−２３７５４に記載の如く絹フイブロイン蛋白質により
包括するなどの方法により、安定化することも可能であ
る。

本発明の皮膚化粧料は、上記ＴＧａ　ｓ　ｅと、水溶性
多価アルコールとを用い、通常の化粧料と同様にして製
造することができる０例えば、精製水にＴＧａ　ｓ　ｅ
と水溶性多価アルコールとを均一に混合することにより
スキンローシランを得ることができる。また、油性物質
や乳化剤を組み合わせることにより化粧用乳液や化粧用
クリームを得ることができる。勿論、上記化粧料には、
必要に応じて着色剤、防腐剤、紫外線吸収剤、酸化防止
剤などの添加物を適宜配合することができる。

本発明の化粧料において、トランスグルタミナーゼの配
合量は、０．００００１重量％（以下ｗｔ％と略記する
）から０．１　ｗ　ｔ％となるように設定することが好
適である。即ち、０．００００１　ｗ　ｔ％未満では酵
素の働きが充分でなく、０．１ｗｔ％を超えてもその増
加分に見合うた効果の向上はなく、皮膚刺激が強くなる
などの傾向が認められるからである。　また、水溶性多
価アルコールの配合量は、ＴＧａｓｅの５０〜５０００
倍（重量基準）となるように設定することが好適である
。５０倍よりも少ないと皮膚化粧料の経口安定性が低下
して変色や変臭を生起しやすくなり、５０００倍を超え
ると皮膚化粧料の感触がべたついて好ましくない。

更に、本発明に使用するカルシウム塩は、化粧料中に０
．　ＯＯ１〜０．５　ｗ　ｔ％配合することにより酵素
活性の働きをより高めることができる。

〔実施例〕

次に、この発明を実施例にもとづいて説明する。

尚、実施例に示す荒肌改善効果試験、角質改善効果試験
、実用試験、経口安定性試験は次のようにして行った。

（荒肌改善効果試験） 荒れ肌、乾燥皮膚を訴える中高年被験者２０名の下脚を
対象として４週間続塗布効果を調べた。

被験者の左側下脚試験部位に１日１回約１ｇの試料を塗
布し、試験開始前及び終了後の皮膚の状態を下記の判定
基準により判定した。右側下脚は試料を塗布せず対照と
した。

皮膚乾燥度の判定基準 （例えば、＋→−１＋十→±）を有効、１段階改善され
た場合をやや有効９、変化がなかった場合を無効とした
。試験結果は有効、やや有効となった被験者の人数で示
した。

（角質改善効果試験） 前述の荒肌改善効果試験開始前後の被験者皮膚にメンデ
ィングテープにチバン製）を接着し、これを剥離した時
テープに付着した角質細胞の状態を走査型電子顕微鏡に
よって詳細に調べた。そして、下記の基準により皮膚角
質細胞抗剥離性を解析し、角質改善効果を求めた。

：正常 ±　　：軽微乾燥、落屑なし ＋　　：乾燥、落屑軽度 ＋＋：乾燥、落屑中等度 ＋＋＋：乾燥、落屑顕著 試験前後の試験部位と対照部位の判定結果を比較し、皮
膚乾燥度が２段階以上改善された場合角質改善効果の判
定基準 評価点１ニスケールを認めず ２：小スケール点在 ３：小〜中スケール顕著 ４：大スケール顕著 評価は、４週間連続塗布後の試験部位の評価点と対照部
位のそれとの差が２点以上の場合を有効、１点の場合を
やや有効、０点の場合を無効とした。

判定結果は、有効あるいはやや有効と回答した被験者の
人数で示した。

（実用試験） 荒れ肌、小皺、乾燥肌等を訴える女子被験者（３５から
５５才）２０人に試料を１日朝タ２回連続３ケ月間塗布
し、その直後の下記項目について評価を行った。

評価項目 ｆ’ｌＡ潤性：皮膚に潤いが生じたと答えた人数平滑性
：皮膚が滑らかになったと答えた人数弾力性：皮膚に張
りが生じたと感じた人数刺激性：塗布時に刺激を惑じた
と答えた人数かぶれ二使用期間中に肌がかぶれたと答え
た人数 （経日安定性試験） 試料を密封、遮光の条件下、４５℃の恒温槽に３Ｍ月間
放置した後、色と匂いの変化の有無を観察した。

実施例１ Ｊ、Ｃｏｎｎｅｌｌａｎらの方法（ジャーナル・オブ・
バイオロジカルケミストリー　２４６巻、１０９３頁、
１９７１年）及び特開昭５９　１７５８８４に記載され
る方法に従い、モルモット肝臓よりＴＧａ　ｓ　ｅを調
製した。モルモットの新鮮な肝Ｒ５００ｇに０．２５Ｍ
シュークローズ溶液１．５℃を加えてポリトロン（キネ
マチカ社製）によりホモジネートを調製し、遠心分離に
より上清中からＴＧａｓｅの粗分画を得た。この分画を
ＤＥＡＲセルロースカラムクロマＩ・グラフィー（２ｍ
ＭＥＤＴＡ、５ｍＭ）リス塩酸緩衝液Ｐ　Ｈ７，５）及
び１０％アガロースゲルカラムクロマトグラフィー（Ｂ
ｉｏｇｅ　ｌ、０．５Ｍ）により、精製を行った。最終
的に限外濾過と凍結乾燥によりＴＧａ　ｓ　ｅを得た。

上記の方法により得たＴＧａ　ｓ　ｅを用い、下記のよ
うな原料組成にしてこれらの成分を均一に混合すること
によりスキンローシロンを得た。

組成　　　　　　　　　　配合量（ｗｔ％）ＴＧａｓｅ
　　　　　　　　Ｏ，０１ 塩化カルシウム　　　　　０．１ グリセリン　　　　　　１０．　ＯＯ 精製水　　　　　　総量を１００とする残量下記のよう
な原料組成にしてこれらの成分を均一に混合することに
よりスキンローションを得た。

組成　　　　　　　　　　　配合ｆｆｉ（ｗｔ％）ＴＧ
ａｓｅ　　　　　　　　　Ｏ，１ 乳酸カルシウム　　　　　　０．１ １．３−ブチレングリコール　１０．０精製水　　　　
　　総量を１００とする残量実施例２ 実施例１と同様にして得たＴＧａ　ｓ　ｅを用い、下記
のような原料組成にしてこれらの成分を均一に混合する
ことによりスキンローションを得た。

組成　　　　　　　　　　　配合１ｉ（ｗｔ％）ＴＧａ
ｓｅ　　　　　　　　Ｏ，０００１酢酸カルシウム　　
　　　０．０５ プロピレングリコール　　１．　ＯＯＯＯ精製水　　　
　　　総量をｌＯＯとする残量実施例３ 実施例１と同様にして得たＴＧａｓｅを用い、実施例４ 実施例１と同様にして得たＴＧａｓｅを用い、下記のよ
うな原料組成にしてこれらの成分を均一に混合すること
によりスキンローションを得た。

組成　　　　　　　　　　　配合１ｉｉ（ｗＬ％）ＴＧ
ａｓｅ　　　　　　　　　０．１ ジプロピレングリコール　　５．０ 精製水　　　　　　総量を１００とする残量実施例５ 実施例１と同様にして得たＴＣ；ａ　ｓ　ｅを用い、下
記のような原料組成にして油相と水相を調製した。そし
て、８０゛Ｃに加熱した油相に同じ＜８０°Ｃに加熱し
た水相を加えて、均一に撹拌しながら速やかに冷却しス
キンミルクを得た。

組成　　　　　　　　　　　配合１（ｗｔ％）（油相） 流動パラフィン　　　　　２０．　ＯＯセチルアルコー
ル　　　　　５．００ ポリオキシエチレンソルビタン モノオレート　　　　　　５．００ （水相） Ｇａ５ｅ 塩化カルシウム ジグリセリン メチルパラベン 精製水 ０．０１ ０．２ ５．００ ０、ＩＯ 総量を１００とする残量 実施例６ 実施例１と同様にして得たＴＧａ　ｓ　ｅを用い、下記
のような原料組成にして油相と水相を調製した。そして
、８０　’Ｃに加熱した油相に同しく８０“Ｃに加熱し
た水相を加えて、均一に撹拌しながら速やかに冷却しス
キンクリームを得た。

組成　　　　　　　　　　　　配合Ｉｔ（ｗｔ％）（油
相） ミリスチン酸オクチルドデシル　３５．　ＯＯセチルア
ルコール　　　　　　　　５．００セチルパルミテート
　　　　　　　２．００セスキステアリン酸ソルビタン
　　３．００（水相） ＴＧａｓｅ　　　　　　　　　　　　　Ｏ，０１グリセ
リン　　　　　　　　　１５．　ＯＯボオキシエチレン
ソルビタン モノオレート（２０Ｅ、０．）　　　　　　　５．００
メチルパラベン　　　　　　　　　０．１０精製水　　
　　　　総量を１００とする残量比較例１ 実施例１と同様にして得たＴＧａ　ｓ　ｅを用い、下記
のような原料組成にしてこれらの成分を均一に混合する
ことによりスキンローションを得た。

組成　　　　　　　　　　　　配合量（ｗｔ％）ＴＧａ
ｓｅ　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．０
１塩化カルシウム　　　　　　　　０．１精製水　　　
　　総■を１００とする残量比較例２ 特開昭６１−１７２８０７の実施例１に記載の方法で架
橋高分子蛋白質を得た。即ち、牛乳αＳ１カゼイン５０
ｇを５ｍＭ塩化カルシウム、２０ｍＭジチオスレイトー
ル含有のＯ，Ｌ　Ｍ　トリス−塩酸緩衝液（ｐＨ７，６
）１ＯＮに溶解し、本発明の実施例１と同様にして得た
ＴＣ；ａｓｅｌｇを添加し、３７°Ｃで３０分間インキ
ュベートし反応させた。

反応終了後、透析操作により脱塩し更に凍結乾燥により
粉末状の白色架橋高分子化物を得た。この架橋高分子化
物を、ＴＧａ　ｓ　ｅの代わりに５％配合し、精製水を
その分域じる他は実施例５と同様に均一に撹拌すること
により、スキンミルクを得た。

比較例３ 下記のような原料組成を均一に混合することによりスキ
ンローションを得た。

組成　　　　　　　　　　　配合１　（ｗ　ｔ％）グリ
セリン　　　　　　　　１０．００精製水　　　　　総
量を１００とする残量上記のようにして得られた６種類
の実施別品及び３ＭＢの比較別品について、前記の手順
に従って各試験を行い評価した。その結果を第１表に示
した。この表からも判るように、実施別品はいずれもＴ
Ｃ；ａｓｅを単独で用いた比較例１．ＴＧａｓｅの作用
により得られた架橋タンパク質を含む比較例２、水溶性
多価′２ルコールを単独で用いた比較例３よりも肌の改
善に優れた効果を示した。

そして、比較例１、比較例２のような皮膚への刺激やか
ぶれもない。また、比較別品で問題となる経口安定性も
、実施別品では全く問題がない。

〔発明の効果〕

以上に述べたように、本発明の皮膚化粧料は、ＴＧａ　
ｓ　ｅ及び水溶性多価アルコールとが含有されているた
め、これを用いると、肌荒れを起こすことなく肌の乾燥
化、老化を防止することができる。しかも、この化粧料
は、色や匂いが経口的に変化することがなく、長期間安
心して使用することができるという利点を有する。

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. （１）トランスグルタミナーゼと水溶性多価アルコール
   とを含有してなる皮膚化粧料。
2. （２）更に、カルシウム塩を含有してなる請求項１記載
   の皮膚化粧料。