JPH08505054A

JPH08505054A - 分子フラッシュ

Info

Publication number: JPH08505054A
Application number: JP6515455A
Authority: JP
Inventors: ジョージエークラウス; スーザンエルカーペンター; ジャコブダブリュペトリッチ
Original assignee: アイオアステートユニバーシティーリサーチファンデーションインコーポレーテッド
Priority date: 1992-12-23
Filing date: 1993-12-22
Publication date: 1996-06-04
Also published as: US5780287A; US6160024A; US5786198A; EP0675955A4; AU5959994A; US5952311A; WO1994014956A1; EP0675955A1

Abstract

(57)【要約】本発明は、ウイルス不活化し、腫瘍細胞を破壊するための化合物、組成物および方法に関する。これらの方法には、感光性化合物およびエネルギー供与物質を含有する化合物を細胞内に添加することが含まれ、それらは任意に化学的な鎖により結びっけられている。また化学的にエネルギー供与物質を活性化する手段を細胞内に導入し、その光により感光性物質を活性化して腫瘍あるいはウイルスを破壊する。その感光性物質には、ヒペリシン、ポルフィリンあるいはその類似物が、またエネルギー供与物質には、ルシフェリンあるいはその類似物が望ましい。それらの物質を合成する方法も示す。さらに、エネルギー供与物質は、活性化物質により活性化される。その活性化物質の発現は制御され、それはウイルスに感染したあるいは腫瘍の細胞内でのみ発現する。活性化物質の制御するは、多くの方法によって達成される。その一つは、活性化物質をコードした遺伝子を含有し、その遺伝子がプロモーターにより制御されている発現プラスミドを構築する。そのプロモーターは、ウイルスの複製あるいは腫瘍細胞内に発現する蛋白質の濃度上昇により活性化するという方法である。

Description

【発明の詳細な説明】分子フラッシュ発明の背景この数年光感作療法（PDT）は、ウイルスおよび癌に対する化学療法の有望な手段として期待されてきた。光感作療法が可能であるのは、いくつかの光活性分子が腫瘍に感染した細胞に親和性があることによる。適当な波長の光が存在すると、光活性分子はその光を吸収し、ウイルスを不活化し、またウイルスに感染した細胞あるいは腫瘍細胞を破壊する。通常使用されている光活性分子には、ヘマトポルフィリン誘導体（HpD）、プルプリン類、フタロシアニン類などが含まれる。現在スペクトルの赤色領域に最大吸収を持つ光活性分子を調製することが注目されている。なぜなら、この領域の光は組織への浸透に最適であるからである。確かに、新規な光活性分子を創り出すにあたって、これまでの一般的な戦略は、単なる既存品の改良であった。PDTの大きな欠点として、光の浸透しない身体領域での治療には適用できないことがあげられる。モアンは、″Yearly Review： Porphyrin Photosensitization and Photother apy，″Photochemistry and Photobiology Vol．43，No．6，pp．681-690(1986) （全文を参考文献として添付した）の中で、ポルフィリン類の腫瘍局在性とその光感作癌療法への利用について発表している。その治療法とは、まず直接感光性物質を注射する。それに続き投与可能な一重項酸素のスカベンジャーを与え、起こる可能性のある副作用を軽減するというものである。感光性物質分子は体外にある光源の影響を受ける。モアンらは特に、赤色光の組織への浸透は限られたものであるということから、光感作療法は大きな腫瘍の除去には使用できないと言っている。メルエロらは、″Therapeutic Agents with Dramatic Antiretroviral Activi ty and Little Toxicity at Effective Doses：Aromatic Polycyclic Diones Hy pericin and Pseudohypericin，″Proc．Natl．Acad．Sci.，Vol．85，pp．5230 -5 234，JuIy 1988，（全文を参考文献として添付した）の中で、植物中の天然物であるヒペリシン（hypericin）は、フレンド白血病ウイルスおよび放線白血病ウイルスの複製を、in vitroおよびin vivo両方において阻害することを示した。メルエロらはまた、レトロウイルスが引き起こす疾病を防ぐために十分な量のヒペリシンをマウスに投与しても、望ましくない副作用は外観上現れなかったと述べている。メルエロらは、ヒペリシンはin vitroにおいてHIVの蔓延を低減することが可能であると報告している。メルエロらは、ヒペリシンは直接ヴィリオンを不活化すると推定している。感染した組織あるいは細胞を培養する際の培地にヒペリシンを添加すると、添加がウイルスを回収する直前の場合、実際に培養上清中の逆転写酵素（RT）活性が減少する。しかし、ヒペリシンは精製されたRTを直接阻害しない。したがって、ヒペリシンはウイルス粒子を不活化するものと考えられる。チャーンらは、″Photodynamic Inactivation of Simian Immunodeficiency V irus，″J．of Virological Methods，Vol．26．pp．125-132(1989)（全文を参考文献として添付した）の中で、光感作によるサル免疫不全ウイルス（SIV）の不活化について発表している。ある種のジヘマトポルフィリンエーテル（DHE）はin vitroにおいてSIVの感染力を不活化するのに使用された。その際DHEはレーザービームにより活性化された。実験は、まずSIVをDHEとともに培地に懸濁し、遮光した状態でインキュベートした。次にフローセル中に懸濁液を流し、光を照射した。目的の細胞を洗浄し、培地中に入れ、染色した。著者らは、この処理がエンベロープを持つウイルス由来の感染性物質が引き起こす危険（これは輸血中に起こる可能性がある）を減らすのに有効であろうと言っている。ラヴィーらは、″Studies of Mechanisms of Action of the Antiretroviral Agents Hypericin and Pseudohypericin,″Proc．Natl．Acad．Sci.，Vol.86，p p．5963-5967，August(1989)（全文を参考文献として添付した）の中で、ヒペリシンおよびシュード（擬似）ヒペリシンは抗レトロウイルス活性を持つことを発表している。特にヒペリシンおよびシュードヒペリシンは、マウスレトロウイルスの蔓延をin vivoおよびin vitro両方において抑制する。ヒペリシンおよびシュードヒペリシン処置により、マウスおよびヒトウイルスの逆転写酵素は完全に不活化される。これらの化合物は、試験動物に注射により投与された。ハドソンらは、″Antiviral Activities of Hyperacin，″Antiviral Researc h， Vol．15，pp．101-112(1991)（全文を参考文献として添付した）の中で、ヒペリシンはマウス巨細胞ウイルス（MCMV）、シンドビスウイルス、およびHIV-1 を不活化することを発表している。そこではヒペリシンの抗ウイルス作用は可視光によって増強された。ラヴィーらの米国特許第4,898,891号、第5,049,589号および第5,047,435号（それぞれを参考文献として添付した）の中で、ヒペリシンおよびシュードヒペラシンの諸々の抗ウイルス作用について明らかにされている。米国特許第4,898,89 1号では、活性成分であるヒペリシンを含有した抗ウイルス薬剤とウイルス性感染を処置する際のその薬剤の使用法が発表されている。米国特許第5,047,435号でも、ヒペリシンを使ったウイルス性感染の処置法が発表されている。米国特許第5,049,589号では、ヒペリシンを含有した抗ウイルス性エアロゾル薬剤が発表されている。最後に、マシューズらは、″Photodynamic Therapy of Viral Contaminants w ith Potential for Blood Banking Applicaions，″ Trasnfusion，Vol．28，No .1，pp．81-83(1988)，（全文を参考文献として添付した）の中で、ウイルス性の汚染物を根絶する光感作療法を発表している。その発表された方法では、感光性物質としてヘマトポルフィリン誘導体を使用する。ヘマトポルフィリン誘導体を静止した液体の系の中で光と作用させ、エンベロープを持つウイルスを不活化させる。ヘマトポルフィリンは、ポルフィリン化合物の一つで、腫瘍細胞と親和性があることが知られている。したがって、ヘマトポルフィリン誘導体を使って腫瘍細胞やウイルス類を選択的に破壊することができる。このマシューズらの方法には、血奨体外導出法すなわち血液を生体から取り出し、ヘマトポルフィリンと光で処理するやり方も含まれている。また、マシューズらの方法では、外部の光源として可視光が使われている。そこで光活性物質とエネルギー源とを結合することが必要とされる。これにより、光感作療法が体のあらゆる部位に適用できるようになる。また、ウイルスに感染した細胞あるいは腫瘍細胞にだけ効力のある光感作療法を提供することも必要である。したがって、エネルギー源の活性化は、ウイルスに感染した細胞あるいは腫瘍細胞内で選択的に起こらなければならない。本発明が提供するエネルギー源により、従来の技術の諸問題を克服できる。本発明で使用するエネルギー源は広い波長領域で発光し、光活性物質はそれを吸収する。このエネルギー源は、ほかの物質により化学的に活性化される。この反応はウイルスに感染した細胞あるいは腫瘍細胞内だけで発現するように制御されている。したがって、感光性物質の活性化はウイルスに感染した細胞あるいは腫瘍細胞内だけで起こる。この系の効率はエネルギー転移に支配され、それはドナーおよびアクセプター、すなわちエネルギー源および光活性物質間の距離およびそれらの配向状態に依存する。そこで発明者はエネルギー源と光活性物質をつなぐ化学鎖も開発した。このような鎖でつながれた連結化合物を使用することにより、体内で化学的に活性化する光源をin vivoに導入することができるようになり、抗ウイルスおよび腫瘍治療に対する応用の幅が広がった。発明の概要本発明の目的は、抗ウイルス性の組成物を提供することにある。本発明の更なる目的は、その抗ウイルス性の組成物において使用される連結化合物を提供することにある。本発明のその他の目的の一つは、抗腫瘍性の組成物を提供することである。本発明のその他の目的の一つは、その抗腫瘍性の組成物において使用される連結化合物を提供することにある。本発明のその他の目的の一つは、前述の連結化合物を調製する際の中間生成物として使用されるヒペリシン類似物を提供することにある。本発明のその他の目的の一つは、前述の連結化合物を調製する際の中間生成物として使用されるルシフェリンとその類似物を提供することにある。本発明のその他の目的の一つは、前述のルシフェリン類似物の前駆体の合成法を提供することにある。本発明のその他の目的の一つは、前述の連結化合物の合成法を提供することにある。本発明の更に他の目的の一つは、前述の連結化合物を活性化する手段を提供することにある。本発明の更に他の目的の一つは、前述の連結化合物を活性化する発現プラスミドを提供することにある。本発明の更に他の目的の一つは、前述の発現プラスミドを含有するリポソームを提供することにある。本発明の更に他の目的の一つは、前述の発現プラスミドを含有するトランスフェクションされた細胞を提供することにある。本発明の更に他の目的の一つは、前述の組み込み発現プラスミドの安定な複製を含有する真核細胞を提供することにある。本発明の更に他の目的の一つは、前述の真核細胞が産生するをウイルス性のベクターを提供することにある。本発明の更に他の目的の一つは、ウイルスを不活化する方法を提供することにある。本発明の更に他の目的の一つは、腫瘍細胞を破壊する方法を提供することにある。これらに追加される本発明の目的および利点については、一部が後述の説明の中で明らかとなるか、あるいは本発明を実施することにより学びとることが可能である。本発明の目的および利点は、特に添付請求の範囲に示した手段およびその組み合わせにより実現することができる。ここで具体的に実施かつ記載ような目的を達成するために、本発明はウイルスを不活化あるいは腫瘍細胞を破壊する組成物を調製するのに必要なものを提供する。この組成物は望ましくは三つの成分を含む。第一の成分は、光を感知することのできる化学物質である。これ以後「感光性物質」と呼ぶ。第二の成分は、エネルギー供与物質である。第三の成分は、エネルギー供与物質からのエネルギー転移あるいは発光を活性化する化学的な手段を含有する。本発明では、望ましいエネルギー供与物質としては、天然の光源であるルシフェリンあるいはその類似物を使用する。望ましい感光性物質は、ヒペリシン、ポルフィリンあるいはそれらの類似物である。抗ウイルス性組成物と同様に抗腫瘍性組成物においても望ましいものとしては、ヒペリシン、ポルフィリンあるいはその類似物が、望ましくは化学的な連結剤又は結合剤（chemical tether or clemical linker）を介して、ルシフェリンあるいはその類似物に結合されている。したがって、本発明の望ましい実施例においては、抗ウイルス性あるいは抗腫瘍性組成物の第一および第二の成分、すなわち感光性物質とエネルギー放出物質とは、化学的な連結剤で結合し、連結化合物を形成する。ここで使用されるような化学的な「連結剤（chemical tether）」あるいは「結合剤（clemical linker）」とは、二環式の化合物からなる化学的な連結鎖である。望ましい連結化合物であるヒペリシンとルシフェリンの結合性は、エネルギー転移の効率や細胞膜内でヒペリシンが相互作用する能力に影響を与える可能性がある。前述のヒペリシン・ルシフェリン連結化合物は、望ましくは活性化したヒペリシンとルシフェリン類似物との縮合反応によって調製する。そのルシフェリン類似物は、既知の化合物から合成する。本発明の提供する抗ウイルス組成物および抗腫瘍性組成物は、第三の成分をも含有しており、それはエネルギー供与物質からのエネルギー転移や発光を促進する化学的な手段を含んでいる。本発明におけるこの化学的な手段とは、遺伝的要素による統制の下に遺伝子がコードする活性化物質のことである。この活性化物質を制御するDNAは、宿主細胞の転写因子が認識する調節用動機物質を、ウイルス調節用蛋白質が認識する動機物質とともに作用可能な形で含有する。ここで言う「調節用要素」（調節用核酸配列）とは、いつ、どんな水準で活性化物質をコードしたDNAを発現させるかを決定する、なにもコードしていない領域（配列）のことである。このような調節用要素の中には、プロモーター、エンハンサー、転写および翻訳の開始および終了を規定する配列などが含まれる。ここで言う「核酸配列」とは、一般にポリヌクレオチド分子のことを言う。正確には隣接する五炭糖の３’と５’炭素間のフォスフォジエステル結合により線状に重合したヌクレオチドを言う。ルシフェリンは、本発明における望ましいエネルギー供与分子である。この物質は、ルシフェラーゼ、ATPおよび酸素分子と反応する、すなわちルシフェラーゼがルシフェリンを活性化すると、エネルギー転移や発光が起こる。したがって、この場合ルシフェラーゼは活性化物質であり、ルシフェリンはエネルギー供与物質である。このように、本発明のもう一つの実施例はルシフェラーゼの発現を制御しようとするものであり、ルシフェラーゼはウイルスに感染した細胞あるいは腫瘍細胞中でのみ発現する。抗ウイルス性組成物の活性化物質を制御するには、まず発現プラスミドの構築により達成するのが望ましい。この発現プラスミドは、プロモーターに制御された活性化物質がコードされている。活性化物質をコードしたDNA配列は、発現プラスミドなどのような、発現にとって適切な配向性と正確な解読を可能とする枠組みをもつベクターに挿入される。望ましくは、この抗ウイルス性組成物がエンベロープを有するウイルスの不活化だけでなく、あらゆるウイルスの不活化に利用できる方がよい。さらに、この抗ウイルス性組成物は、単純ヘルペスウイルスなどのDNAエンベロープを有するウイルスやレンチウイルス（HIVおよびEIAVなど）などのRNAエンベロープを有するウイルスの不活化に利用するのが望ましい。発現プラスミドは、たとえばレトロウイルスの長い末端重複のようなエンベロープを有するウイルスのプロモーターに制御されたルシフェラーゼ遺伝子を有することが望ましい。このプロモーターは、その複製ウイルスにより活性化されるようなものが選ばれる。その結果、ルシフェリンの発現が増大し、ルシフェリンの活性化やヒペリシンの光による活性化が起こる。このように、光による活性化はウイルスに感染した細胞に局在化され、これにより感光性物質の抗ウイルス活性を集中できる。発現プラスミドはリポソームへの包含などの様々な既知の方法により導入することが可能である。他の使用可能な既知の方法に、これらに限られるわけではないが、裸のDNAを用いる方法、マイクロインジェクション法、あるいはリン酸カルシウム沈殿法などがある。治療における最終的な応用としては、ウイルス性ベクターの構築が必要であり、それはウイルスを媒介とする遺伝子療法あるいは他のすでに知られた遺伝子治療技法により細胞に導入される。このようなウイルス性ベクターは、株化細胞中に発現プラスミドを安定に組み込むことにより構築される。ウイルス性ベクターは、この株化細胞より生産される。もしこの連結化合物が抗腫瘍性組成物中で使用されるとすれば、活性化物質の制御は発現プラスミドの構築により達成されるのが望ましい。この発現プラスミドは、プロモーターの制御の下、たとえばシフェラーゼなどの活性化物質をコードする遺伝子を含んでいる。この実施例においては、ルシフェリンがエネルギー供与物質となる。このプロモーターは、腫瘍細胞内で発現する蛋白質の濃度が高まることにより活性化される。このプロモーターが活性化されると、ルシフェリンを活性化し、またある実施例では感光性物質であるヒペリシンを光活性化するルシフェラーゼの発現が増大する。このように、光による活性化は腫瘍細胞内に局在化される。これにより感光性物質の抗腫瘍活性を集中することができる。発現プラスミドは、抗腫瘍性組成物を活性化する化学物質を制御するために使用され、抗ウイルス性組成物の時に述べたものと同様の方法で導入することが可能である、その方法とは、これらに限られるわけではないが、裸のDNAを用いる方法、マイクロインジェクション法、あるいはリン酸カルシウム沈殿法などがある。治療における最終的な応用としては、ウイルス性ベクターの構築が必要であり、それはウイルスを媒介とする遺伝子療法あるいは他のすでに知られた遺伝子治療技法により細胞に導入される。このようなウイルス性ベクターは、株化細胞中に発現プラスミドを安定に組み込むことにより構築される。ウイルス性ベクターは、この株化細胞より生産される。本発明における連結化合物は、感光性物質とエネルギー供与物質との縮合反応により合成される。本発明の望ましい実施例では、連結化合物はポルフィリンあるいはヒペリシン又はそれらの類似物とルシフェリンあるいはその類似物との縮合により合成される。本発明における抗ウイルス性組成物は、連結化合物を含み、ウイルスを不活性化する方法に用いられる。しかしながら、この抗ウイルス性組成物は、その他のウイルスを不活性化する方法に用いられる。この抗ウイルス性組成物は、好ましくはＤＮＡまたはＲＮＡエンベロープを有するウイルスのいずれかの不活性化に用いられる。好ましい方法において、抗ウイルス性組成物の第一成分及び第二成分は、ウイルスに完成した細胞に薬学的に効果のある量投与する。その場合、連結化合物の形成で投与することが好ましい。更に、エネルギー転移または発光を活性化する化学的である抗ウイルス性組成物の第三成分を同時にウイルスに感染した細胞に投与する。前述したように、そこでは第三成分がエネルギー供与物質を活性化し、更にウイルスを不活性化する感光性物質を活性化する。本発明は連結化合物を含有する抗ウイルス性組成物を提供するが、これは新生物形成細胞を破壊して腫瘍を治療することにも使用できる。望ましい方法としては、抗腫瘍性組成物の第一および第二成分を、新生物形成細胞に薬学的に効果のある量投与する。その場合、連結化合物の形での投与が望ましい。さらに、エネルギー転移あるいは発光を活性化する化学的手段である抗腫瘍性組成物の第三成分を同時に新生物形成細胞に投与する。前に述べたように、そこでは第三成分がエネルギー供与物質を活性化し、さらに新生物形成細胞を破壊する感光性物質を活性化する。図面の簡単な説明図１は、ルシフェラーゼ触媒によりルシフェリンが酸化するときの化学蛍光の発光スペクトルと赤色域でのヒペリシンの吸収スペクトルとを比較したグラフである。図２は、ルシフェラーゼ触媒によりルシフェリンが酸化するときの化学蛍光の発光スペクトルの経時変化を示したグラフである。各反応物の濃度はいかのとおりである。［ルシフェラーゼ］=2.67x 10^-7 M,［ルシフェリン］=1.18x10^-6M, ［ATP］=5x10^-5 M；緩衝溶液は、25mM グリシルグリシン、15mM MgSO₄、4mM E GTA、15mM K₃ PO₄を使用し、pHは7.75である。反応は25℃で行う。図３は、EIAV LTRに制御されたルシフェラーゼ遺伝子を含有する発現プラスミドを示した図である。図４は、ルシフェリンおよびルシフェラーゼ存在下でのヒペリシンの抗ウイルス活性を示す。図５は、EIAVあるいはETat存在下でのED細胞中のルシフェラーゼの発現を示す。発明の詳細な説明本発明の望ましい実施例について以下に詳しく述べ、その諸原理を説明する。本発明は、ウイルスを不活化する組成物に関する。その組成物は、３つの成分からなり、第一成分は感光性物質を、第二成分はエネルギー転移物質を、第三成分は発光あるいはエネルギー転移を抑制する化学的手段をそれぞれ含有する。同時に本発明は、これらの成分を合成する方法にも関する。エネルギー供与性分子は、光活性物質が吸収できる範囲内の広い波長域で、エネルギーあるいは光を放出しなければならない。ここで使用されている感光性物質とは、光あるいはエネルギー転移によって活性化される物質のことである。天然にある望ましいエネルギー源は、ルシフェリンあるいはその類似物である。ルシフェラーゼ、ATPおよび酸素分子がルシフェリンと反応すると、３重項状態からの長い寿命の発光、すなわち燐光が起こる。ルシフェリンとその類似物は、520-680 nmの波長の光を発する。ルシフェリンは、ルシフェラーゼにより活性化されない限り、光あるいはエネルギーを放出しない。このように、ルシフェラーゼの発現を制御すれば、ルシフェリンの活性化を制御することができる。感光性物質については、ヒペリシン、他のキノン類、ヘマトポルフィリン誘導体、フタロシアニン類やポルフィリンの中から選ぶのが望ましい。ある特定の実施例としては、感光性物質としてヒペリシンを使用する。ヒペリシンは、540-66 0 nmの範囲の光を吸収する。光により活性化されたヒペリシンは、量子効率0.74 で一重項酸素を生成する。一つの実施例において、ヒペリシンおよびルシフェリン／ルシフェラーゼ（市販品）を、ウイルスの存在下、遮光状態で好気的条件の下に混合する。一つの例としては、レンチウイルス、特にウマ感染性貧血ウイルス（EIAV）を使用する場合がある。ルシフェラーゼはルシフェリンを活性化しそれによりルシフェリンは、光を発し、ヒペリシンを光活性化し、EIAVの感染力を低下させる。ルシフェリンからヒペリシンへのエネルギー転移効率は、エネルギー供与物質とアクセプター、すなわち感光性物質の間の距離と配向性に依存する。エネルギー転移効率を最適なものとするには、エネルギー供与物質を感光性物質に化学的な連結剤又は結合剤によって結びつければよい。この化学的な連結剤又は結合剤は、２環式の化合物である。このように本発明の実施例では、第一成分と第二成分は連結化合物を形成するのが望ましい。感光性物質とエネルギー供与物質との結合性は、エネルギー転移効率−−束縛された構造−−あるいは感光性物質が細胞膜と相互作用する力いずれにも影響を及ぼす可能性がある。感光性物質とエネルギー供与物質を結合する試みは、ドナーとアクセプターとの間のエネルギー転移効率が最大となることを目指している。これらの２成分がお互いにそれぞれ分離および配向していると、最大の転移効率が得られるであろう。特に、望ましい実施例としてヒペリシンおよびルシフェリン又はルシフェリンの類似物とのの結合があげられる。ヒペリシンは望ましい感光性物質である。なぜなら、ヒペリシンは投与量が低い場合、望ましくない副作用を起こさないことがすでに報告されているからである。メルエロらのProc．Natl．Acad．Sci．，V ol．85，pp．5230-5234，July 1988，を参考文献として全文添付したのでこれを参照してください。本発明の望ましい実施例として、活性化したヒペリンの類似物、ヒペリシン無水物あるいはハロゲン化物を連結化合物を調製するための中間生成物として使用することがあげられる。これらの無水物およびハロゲン化物の化学式は次の通りである。この無水物は３段階の反応のみでヒペリシンより調製できる。まず、ヒペリシンをアセチル化し、次にクロム酸で酸化して２価の酸とする。これをDCCと反応させると無水物の合成が完了する。ハロゲン化物は、アセチル化の後ベンジル基を介したハロゲン化（benzylic halogenation）を行う。本発明の他の実施例として、感光性物質として以下の化学式に示すポルフィリンを使用することがあげられる。ここでＺ¹−Ｚ⁶は、１〜１５個の炭素を持つアルキルあるいはアルケニル基を示す。ルシフェリンとその類似物を使用して、ポルフィリン類、ヒペリシンやその他のキノン類のような光活性物質と組み合わせて、連結化合物を形成することができる。これらの連結化合物においては、選択した光活性物質の吸収スペクトルとエネルギー供与物質の発光スペクトルとが重なり合うことを実証しなければならない。ルシフェリンが酸化するると、560 nmを中心とした幅の広い波長領域で発光が起こり、それは可視スペクトルの赤色域の555と600nmに２つの強い吸収帯を持つヒペリシン吸収スペクトルと重なり合う。ルシフェラーゼ触媒によりルシフェリンが酸化するときの化学蛍光の発光スペクトルと可視スペクトルの赤色域でのヒペリシンの吸収スペクトルを比較するためにした図１を参照して下さい。ここでのスペクトルの重なりがルシフェリンとヒペリシンの組み合わせを可能にする。ルシフェリンがルシフェラーゼ触媒により酸化する間、消費される基質１分子あたり光子１個が生成する。図２は、ルシフェリンの化学蛍光反応の経時変化の一例を示す。ルシフェリンあるいはその類似物を結合することにより、ルシフェラーゼがルシフェリン基質を認識し、それに結合する仕組みを壊してはならない。したがって、この連結化合物の調製に使われるルシフェリン類似物は、以下に示す化学式が表す連結化合物が望ましい。化学的連結鎖は、Ｒ₁，Ｒ₂，Ｒ₃あるいはＲ₄いずれの部位に結合していてもよい。ＸおよびＸ’は、次にあげるＳ，Ｏ，Ｈ，Ｈ，ＣＨ＝ＣＨあるいはＮＲ₄の中の１つであればよい。Ｒ₁が連結鎖の結合する部位であるとすると、Ｒ₁は−ＣＯ₂（ＣＨ₂）_nＹとなり、ｎは２〜１５；ＹはＯＨ，ＳＨあるいはＮＨ₂；Ｒ₂〜Ｒ₄はＨとなる。Ｒ₂が連結鎖の結合する部位であるとすると、Ｒ₂は次にあげる、−（ＣＨ₂）_nＣＯ₂Ｈおよび−Ｓ（ＣＨ₂）_nＹの中の１つでよく、ｎは１〜１５；ＹはＯＨ，ＳＨあるいはＮＨ₂；Ｒ₁およびＲ₃〜Ｒ₄はＨとなる。Ｒ₃が連結鎖の結合する部位であるとすると、Ｒ₃は−ＣＯ₂Ｈおよび−（ＣＨ₂）_nＹの中の１つでよく、ｎは１〜１５；ＹはＯＨ，ＳＨあるいはＮＨ₂；Ｒ₁〜Ｒ₂およびＲ₄ はＨとなる。Ｒ₄が連結鎖の結合する部位であるとすると、Ｒ₄は−（ＣＨ₂）_nＹとなり、ｎは２〜１５；ＹはＯＨ，ＳＨあるいはＮＨ₂；Ｒ₁〜Ｒ₃はＨとなる。上記の化学式は、Ｒ₁〜Ｒ₃がＨ、ＸおよびＸ’がともにＳの場合にルシフェリンを表す。ルシフェリン類似物には、使用するものにより何通りもの合成法がある。まず、ベンゾチアゾールからの中間生成物を使い、上記の化学式にあるルシフェリン類似物を形成する。用いたベンゾチアゾールの化学式は次の通りである。ベンゾチアゾールは、次に示す電子欠乏性のイミノキノンに硫化水素を加えて合成する。できた付加生成物を脱水し、ルシフェリン類似物を形成させる。第二の中間生成物であるベンゾチアゾール水酸化二トリルの化学式は次の通りである。ＲはＭｅ，ＨあるいはＰｈＣＨ₂である。このベンゾチアゾール水酸化ニトリルは、青酸イオンをクロロアルコキシベンゾチアゾールに添加し、ベンゾチアゾールニトリルを形成させるために、さらにそれを脱アルキル化してつくる。ルシフェリン類似物は、システインあるいはその置換体に上記の中間生成物のいずれかを添加して合成する。いったんルシフェリン類似物を合成したら、それらを活性化ヒペリシンと縮合反応せ、次の化学式に示す連結性分子を形成させる。ＸおよびＸ’次にあげるＳ，Ｏ，Ｈ，Ｈ，ＣＨ＝ＣＨあるいはＮＲ₄の中の一つであればよい。分子の化学的連結はルシフェリン類似物の４つの部位：Ｒ₁，Ｒ₂，Ｒ₃あるいはＲ₄の中の一カ所で起こる。この連結がＲ₁で形成される場合には、連結化合物の化学式は次のようになる。Ｒ₁は−ＣＯ₂（ＣＨ₂）_nＺとなり、ｎは２〜１５；Ｒ₂〜Ｒ₄はＨ；ＺはＯ，ＳあるいはＮＨ；ＡはＯあるいはＨ，Ｈ；ＧはＣＨ₃，ＣＯ₂Ｈ，ＣＯ₂ＭｅあるいはＣＨ₂Ｂｒとなる。Ｒ₂が連結部位であれば、化合物の化学式は次のようになる。Ｒ₂は次にあげる、−（ＣＨ₂）_nＣＯＺ及び−Ｓ（ＣＨ₂）_n+1Ｚの内の１つであればよく、ｎは１〜１５；Ｒ₁、Ｒ₃及びＲ₄はＨ；ＺはＯ，ＮＨ，Ｓ；ＡはＯ又はＨ，Ｈ；ＧはＣＨ₃，ＣＯ₂Ｈ，ＣＯ₂Ｍｅ，ＣＨ₂Ｂｒである。Ｒ₃が連結部位であるとき、この化合物の化学式は次のようになる。Ｒ₃は次にあげる、−ＣＯＺおよび−（ＣＨ₂）_nＺ中の一つであればよく、ｎは１〜１５；Ｒ₁〜Ｒ₂およびＲ₄はＨ；ＺはＯ，ＮＨあるいはＳ；ＡはＯあるいはＨ，Ｈ；ＧはＣＨ₃，ＣＯ₂Ｈ，ＣＯ₂ＭｅあるいはＣＨ₂Ｂｒとなる。Ｒ₄が連結部位であるときには、化合物の化学式は次のようになる。Ｒ₄は−（ＣＨ₂）_nＺとなり、ｎは２〜１５；Ｒ₁〜Ｒ₃はＨ；ＺはＯ，ＮＨあるいはＳ；ＡはＯあるいはＨ，Ｈ；ＧはＣＨ₃，ＣＯ₂Ｈ，ＣＯ₂ＭｅあるいはＣＨ₂Ｂｒとなる。連結化合物は、上で述べたポルフィリン化合物と結合したルシフェリン類似物含有してもよい。ルシフェリン−ヒペリシン連結化合物の場合も同様に、結合部位は、Ｒ₁，Ｒ₂，Ｒ₃あるいはＲ₄であってもよい。ポルフィリンは、２つのカルボニルのどちらにも結合する。ルシフェリン−ポルフィリン連結化合物は、ヒペリシンがポルフィリンであることを除き、ルシフェリン−ヒペリシン連結化合物と同様の構造をしている。すなわち、ルシフェリンと結合部分は、上で述べたものと同様の構造を保っている。連結化合物がヒペリシンの代わりにポルフィリンを含有する場合には、一般的に次の化学式で示される。化学鎖は、上で明らかにしように、Ｒ₁，Ｒ₂，Ｒ₃あるいはＮＲ₄を介したＸによって結合する。Ｚ¹−Ｚ⁶は、それぞれ１〜１５個の炭素原子を含むアルキルあるいはアルケニル基である。本発明はさらに、感光性化学物質を含有する第一成分を有し、腫瘍細胞を破壊する組成物にも関する。前に明らかにしたように、この組成物は、エネルギー供与物質である第二成分、発光あるいはエネルギー転移を制御する手段を含んでいる第三成分を有する。また、本発明はこれらの成分の合成法にも関する。このエネルギー供与分子は、感光性物質が吸収できる広い波長帯でエネルギーあるいは光を放出しなければならない。抗腫瘍性組成物は、上で述べたようにエネルギー供与物質としてルシフェリンあるいはその類似物を、感光性物質としてポルフィリン、ヒペリシンあるいはその類似物を含有するのが望ましい。前に述べたように、これらのエネルギー供与物質と感光性物質は、前述の範囲内で選択した化学鎖によってお互いに結合している。望ましい形の抗腫瘍性組成物の中に使用する連結化合物には、（１）ルシフェリン類似物と（２）ヒペリシンあるいはポルフィリンを含有するのが望ましく、それらは以前に述べた方法で合成する。本発明の提供する連結化合物には、上で定義したような化学鎖で結合した感光性物質とエネルギー供与物質の組み合わせであれば、どのようなものが含まれていてもよい。そこでは、エネルギー供与分子が感光性分子を十分に活性化し、その抗ウイルスあるいは抗腫瘍活性を維持する。化学鎖は、（１）ドナーからアクセプターへのエネルギー転移速度、（２）光生成反応における触媒の基質認識能に基づき選択する。酵素による触媒反応の速度と量子効率を測定し、反応性に対する潜在的な阻害効果を調べなければならない。抗ウイルス性組成物をエンベロープを持つDNAあるいはRNAウイルスによる感染症の治療に使用する場合には、その第一成分と第二成分を連結化合物の形にし、経口または静脈注射により投与するのが望ましい。いずれの場合にも、薬学的に効果のある量を投与する。薬学的に効果のある量とは、ここで述べられている分野の技術に習熟した者が決定した量を指す。さらに、連結化合物の形を取る第一および第二成分の投与量については、一回の治療につき体重１キログラムあたりおよそ0.001から100,000マイクログラムが望ましい。さらに望ましくは、一回の治療につき体重１キログラムあたりおよそ１から50,000マイクログラムがよい。特定のウイルスを抑制する際の持続性および投与あるいは治療の回数については、患者により異なり、それは患者の疾病の重症度および段階そして全身状態に依存する。また、連結化合物の毒性（もし存在すれば）と同様に、活性化物質自体にも依存する。これについては、ここで述べられている分野の技術に習熟した者が決定することができる。各々の治療に必要な連結化合物の総投与量は、分割してあるいは一回で投与されてもよい。第一成分と第二成分の望ましい形の連結化合物は、毎日１回あるいはそれ以上、週に１または２回、あるいは患者の状態および疾病の段階に応じて投与してよい。この技術に習熟した者が最適な治療頻度を検討するであろうし、それはこの技術の周知の方法に従った実験により決定することができる。たとえば、投与量と頻度についてマトリックスをつくり、患者群を割り当てるやり方である。この実験を計画するにあったては、本発明の提供する化合物の組織への蓄積性を考慮しなければならない。本発明は、レンチウイルスによる感染症を治療するための薬用組成物とその配合をも提供する。その第一成分と第二成分は連結化合物の形を取るのが望ましく、それは通常の哺乳類のウイルス感染症治療に使用される、たとえば錠剤、カプセル、カプレット、静脈注射（以下「静注」という）あるいは経口用溶液などの個体あるいは液体に製剤される。本発明における配合は、薬効を示す量の活性成分である連結化合物（前に述べた）内容物としてを含有する。たとえば、非経口的治療薬は、滅菌した生理食塩水におよそ0,001から100,000マイクログラムの上で述べた本発明の提供する連結化合物を配合したものでよい。どのような形態の投与法においても、一回の投与に含まれる活性な内容物の含有量が、必ずしも薬効を示す量である必要はない。なぜなら、カプセル、錠剤、静注あるいはその組み合わせで、複数回投与することにより薬効を示すのに必要な量を投与することが可能であるからである。本発明に従ったすべての配合において、薬学的に使用可能な担体、希釈剤、充填剤、塩およびこの技術分野でよく知られた他の材料を使用することは可能である。これらの選択は、投与形式および目的により、この分野で習熟した技術者（当業者）が決定する。たとえば、錠剤の配合はよく知られた固体の担体を使い、常法に従って行う。固体の担体としては、澱粉、糖、ベントナイト、シリカや通常使われるものがあげられる。プロピレングリコール、ベンジルアルコール、イソプロパノール、エタノール、ジメチルスルフォキサイド（DMS0）、ジメチルアセトアミドあるいは他の生物学的に使用可能な有機溶媒あるいは水溶液（ｐＨが７以上、望ましくは８程度）などは、希釈剤、担体あるいは溶媒として使用可能であり、本発明の組成物を含有する固体あるいは液体の薬用配合の調製に使用される。さらに使用を制限されない担体および希釈剤には、例えば炭水化物類、アルブミン及び／又はその他の血漿蛋白質成分が含まれる。このその他の血漿蛋白質成分とは、たとえば低密度リポ蛋白質、高密度リポ蛋白質、およびこれらの血清蛋白質と結合した脂質類などをいう。これらの脂質類には、フォスファチジルコリン、フォスファチジルセリン、フォスファチシジルエタノールアミンおよびトリグリセリドなどの中性脂質類が含まれる。脂質担体には、さらにトコフェロール、レチノール酸、サイクロデキストラン類を使用してもかまわない。この技術分野でよく知られている、たとえば坐薬のような半個体の配合も考えられる。望ましい非経口的投与形態の中には、たとえば本発明の提供する連結化合物を約0.1から100,000マイクログラム含有する生理食塩水なども含まれてよい。本発明で使用されるカプセル類は、薬学的に使用可能な材料、たとえばゼラチンやセルロース誘導体などで、できていればどのようなものでもよい。静注法と同様、徐放性の経口および経皮的投与システムも考えられる。望ましいルシフェリン−ヒペリシン連結分子を含有する抗ウイルス性組成物には、光生成反応を触媒し、ヒペリシンを活性化するルシフェラーゼが必要である。光源の活性化は特によく制御され、ヒペリシンは必要とされる場所でのみ、光により活性化する。ルシフェリン活性化の制御は、ルシフェラーゼの発現を制御することにより行われる。本発明の一つの実施例では、抗ウイルス性組成物中の活性化物質の発現を制御することを目指している。この抗ウイルス性組成物の第三成分、すなわちエネルギー転移を活性化するための化学的手段を含有する成分は、活性化物質の発現を制御する役割がある。望ましい抗ウイルス性組成物においては、この活性化物質はルシフェラーゼである。ルシフェラーゼの発現は、ルシフェラーゼをコードした遺伝子をプロモーターが制御することにより制御する。このプロモーターは、ウイルスが複製を作ることにより活性化する。このようなプロモーターによってルシフェラーゼの発現を制御するようにすれば、ウイルスが複製を作るとルシフェラーゼの発現が増加する。その結果、ルシフェリンが活性化し、光によるヒペリシンの活性化がおこる。これにより、ウイルス感染細胞に局剤化し、それによってヒペリシンの抗ウイルス活性が集中する。特に、ルシフェラーゼの発現はウイルスに感染した細胞に対し発現プラスミドを構築することにより制御する。その発現プラスミドには、プロモーターにより制御された形でルシフェラーゼをコードした遺伝子が含まれており、このプロモーターは、ウイルスが複製を作ることにより活性化する。このようなプロモーターの中には、ベルクー（Berkhout）らが、Cell，59：273-282，(1989)；Cell，6 2：757-767，(1990)；J．Virol．66：139-149(1992)，（各々を参考文献として添付した）の中で述べているHIV TAR（この配列は参考文献として添付した）、あるいはフィールズらが、Virology，第２版，1990で、マッケムらが、J．Virol. ，44：939-949，(1982)で（各々を参考文献として添付した）述べている単純ヘルペスウイルスのアルファ遺伝子のプロモーター中にある交感エンハンサー配列（この配列は参考文献として添付した）、およびカーペンターらが、J．Virol. ，65(3)；1605-1610(1991)，（参考文献として添付した）で述べている図１に示したEIAVの長い末端反復（この配列は参考文献として添付した）などが含まれる。図３は、EIAV LTRに制御されたルシフェラーゼ遺伝子を含有する発現プラスミドの一例を示す。このEIAV LTRを含有するプラスミドをウマ皮膚細胞（ED）に感染させると、そこにEIAVまたはウイルス性の活性化蛋白質、Tatのいずれかが存在場合には、ルシフェラーゼが発現する。しかし、正常なED細胞中ではルシフェラーゼの発現は起こらない。一つの実施例では、ウマ皮膚細胞に感染させる前に、このプラスミドをいったんリポソームの中に入れる。細胞中にDNAを導入する方法はどのようなものであっても、ここに述べている遺伝子転写および治療にとって十分である。知られている細胞へのDNA転写法には、ウイルス性ベクターを使用する方法、マイクロインジェクション法、リポソームを介する方法、リン酸カルシウム沈殿法および単純な裸のDNAを転写する方法などがある。リムら、Molec．and Cel．B1o.，7(10)：3459-3465(1987)；カシドら、PNAS，87：473-477(1990)；ギルボア、エリ、Retrovirus and Disease，A cademic Press，Inc．pgs．95-111(1989)；カントフら、PNAS 83；6563-6567(19 86)；カシドら、PNAS，87：473-477(1990)；カントフら、J．Exp．Med.，166；2 19-234(1987)；コルネッタら、J．Virol，Meth．，23：187-194(1989)およびカルバーら、PNAS，88：3155-3159(1991)を参照（それぞれ文献の発表内容を参考文献として添付した）。抗ウイルス性組成物の第三成分、すなわちエネルギー転移を活性化する手段を含有する成分は、遺伝子治療技術を使って患者に導入するのが望ましい。一つの実施例では、その治療法にレトロウイルスを介した遺伝子治療法が含まれ、そこではたとえばルシフェラーゼのような活性化物質をコードしたDNAを持つレトロウイルスベクターを最終的に構築することになる。この活性化物質をコードしたDNAは、ウイルスに感染した細胞内で活性化するレトロウイルス性修飾プロモーターにより制御される。一つの実施例における治療法では、まずレトロウイルス性LTR、レトロウイルスパッケージング配列およびルシフェラーゼをコードしたDNAを含有するプラスミドベクターを構築する。さらにそのベクターは、選択標識、例えばネオマイシンに対する抵抗性をコードしたDNAを含んでいてもよい。このプラスミドは、真核細胞あるいはその株化細胞、望ましくはパッケージ細胞に導入されるのがよい。このパッケージ細胞は、安定に組み込まれたプロウイルス配列を格納しており、レトロウイルスの構造蛋白質が発現させるのに十分な能力を持つが、パッケージングやプロウイルスDNAから転写されるRNAの複製に必要な配列を欠いている。プラスミドベクターの導入に続き、安定に組み込まれたプラスミドDNAを含有した細胞を、発現する選択マーカーにより同定する。プロウイルス構造蛋白質がキャプシッドとしてベクター配列を包むと、レトロウイルス粒子を作るようになり、このレトロウイルス粒子は制御されたプロモーターの制御の下に活性化物質をコードした遺伝物質が含まれる。このようなレトロウイルス粒子を作るトランスフェクションした細胞が生産細胞として望ましい。また、これらの細胞が作り出したウイルス粒子がレトロウイルスベクターとして望ましい。このウイルスベクターは、様々な方法でヒトあるいは哺乳類細胞内に導入可能である。一つの方法として、不活化すべきウイルスに感染した患者から細胞、たとえばリンパ球を取り除くというやり方がある。それらの取り除いた細胞を、構築したウイルスベクターを使って、あるいはリポソームを介した転写のような他のDNA導入法によって感染させる。そのDNAがリポソームを介した転写のより導入されるとすれば、そのリポソームには、活性化物質の発現を制御するプロモーターをコードしたプラスミドDNAおよび活性化物質が含有される。また、いくつかの実施例ではそれに加えて選択マーカーもその中に含有される。活性化物質をコードした遺伝子を含有する患者の細胞は、選択マーカーを使って選択する。すなわち、細胞がネオマイシン抵抗性を示せば、それらを選択する。選択した細胞を増殖させ、患者に戻す。それに代わる方法として、上で述べたようにして生産細胞として構築した株化細胞を直接患者に導入し、in vivoで感染させるやり方がある。さらに、ウイルスベクターを直接患者に導入することも可能である。上で述べた実施例のそれぞれにおいて、活性化物質をコードしたDNAは、安定に組み込まれた形で患者の細胞内に存在する。活性化物質の発現は、ウイルスに感染した細胞においてのみ高濃度で発現するように制御される。遺伝子治療あるいはその他の周知技術による第三成分の投与頻度は、どれくらいの期間挿入DNA が発現し、またどれくらいの期間挿入DNAを含有する細胞が生存できるかによって決まるであろう。望ましいくは連結化合物の形を取る第一成分と第二成分が、上に述べたような手段および量で投与されなければならない。高濃度で活性化物質を発現している細胞、すなわちウイルスに感染した細胞では、エネルギー供与物質が感光性物質を活性化し、順次ウイルスを不活化する。本発明の特定な実施例の一つにおいて、この連結化合物はHIV、RNAレンチウイルスを不活化するために使用される。この連結化合物は、ヒペリシンおよびルシフェリン類似物を、それぞれ第一および第二成分として含み、ここで述べたような方法で投与する。ルシフェラーゼを含有する第三成分は、以下の（１）から（４）を含有するウイルスベクターを構築して投与する。（１）HIV TARおよびNF- kBおよびSP-1部位の上流側あるいはTATを介した活性化に必要な配列を有するプロモーター、（２）パッケージング配列、（３）ルシフェラーゼ遺伝子、（４）ネオマイシン抵抗性マーカーNeo^r。株化されたパッケージング細胞には、HIVが複製を作るCD4⁺細胞を標的とするためのHIV env/gp 120を発現するプロウイルスが含まれるが、パッケージング配列は含まれない。こうしてできたウイルスベクター系は、患者の細胞にin vivoあるいはex vivoで感染させる。いったん遺伝物質が患者の細胞に組み込まれると、ルシフェラーゼは高濃度でHIVに感染した細胞のみにおいて発現する。発現したルシフェラーゼは連結化合物として投与したルシフェリン類似物を活性化する。ルシフェリン類似物は、順次連結化合物として投与した感光性物質を活性化する。いったんルシフェリン類似物が活性化すると、感光性物質はHIVを不活化する。エネルギー供与物質を活性化する物質、ある実施例ではそれらはルシフェラーゼおよびルシフェリンをさす、を制御する手段については、この組成物を腫瘍細胞破壊に使用する場合には、抗ウイルス性組成物に使用したものと同じものは使用しない。特に抗腫瘍性組成物の第三成分は、活性化物質をコードするDNAを含有しており、それは発現プラスミドに存在する。このDNAは、癌胚抗原（CEA）プロモーターのような異なるプロモーターにより制御される。活性化物質の発現が増加するのは、たとえばCEA蛋白質のようなある種の蛋白質の濃度が上昇する場合である。このように、プロモーターの活性化は、腫瘍細胞内でのみ濃度が上昇するある種の蛋白質により引き起こされる。したがって、活性化物質、すなわちルシフェラーゼの発現は、腫瘍細胞のみに局在化される。腫瘍細胞への遺伝子の転写は、ここで述べたウイルス感染細胞中へ転写法によって起こすことができる。すなわち、ウイルスベクター、リポソームを介した転写、マィクロィンジェクションおよび裸のDNA転写のような既知の方法を使えばよい。感光性物質およびエネルギー供与物質、あるいはそれらを鎖で連結したもの、および化学的な活性化手段を含有する組成物を使って、ウイルスを不活化あるいは腫瘍細胞を破壊する。この組成物を使って、おそらくどのようなウイルス、望ましくはDNAおよびRNAエンベロープウイルスも不活化できるであろう。望ましい DNAエンベロープウイルスの例として、単純ヘルペスウイルスがあげられる。また、RNAエンベロープウイルスの例には、レンチウイルスであるEIAVおよびHIVが含まれる。感光性物質（成分１）およびエネルギー供与物質（成分２）、これらはできれば連結化合物の形が望ましいが、これらをエネルギー供与物資質を活性化する化学的手段（成分３）とともにウイルスに感染した細胞の中に導入する。上で述べたように望ましい実施例では、複製されたウイルスがプロモーターを活性化し、ルシフェラーゼの発現を増大させる。それがルシフェリンを活性化し、その光によりヒペリシンを活性化する。その結果、ウイルスが不活化される。しかしながら、活性化物質の発現は、活性化物質の発現がそれに代わる手段で制御されてよく、それによりウイルスに感染した細胞中での活性化物質の発現が増大するればよい。本発明は、新生物形成細胞、望ましくは悪性細胞を破壊する方法をも提供する。このように、腫瘍、望ましくは保因者の治療に使用できる。新生物形成細胞を破壊する方法は、ウイルスを不活化する方法と同様であり、感光性物質（成分１）およびエネルギー供与物質（成分２）、これらはできれば連結化合物の形が望ましいが、これらをエネルギー供与物質を活性化する化学的手段（成分３）とともに腫瘍細胞の中に導入する。しかし、この望ましい実施例の場合、腫瘍細胞に存在するある種の蛋白質の濃度が上昇すると、活性化物質の発現が増大する。これによりエネルギー供与物質が活性化し、その光によって感光性物質が活性化する。その結果、腫瘍細胞が破壊される。もう一度言うと、活性化物質の発現は、使用可能なものであればどんな手段によって制御してもよい。特定の問題あるいは環境に、本発明およびそれが教示するものを適用するに際しては、ここで教示していることに照らして、この技術分野で通常に熟練した者が行える範囲内でのみ適用できることを理解しておかなければならない。本発明の提供する化合物および組成物、それらを調製する方法およびおよび使用法の例を、次に示す。次にあげるものは、本発明の望ましい実施例である。例１ヒペリシンおよびルシフェリンを含有する抗ウイルス性組成物の試験まず、ヒペリシンおよびルシフェリン／ルシフェラーゼ（市販品）をEIAVの存在下、有酸素および遮光状態で混合した。その手順は以下の通りである。材料および方法ハンクス平衡塩類溶液に懸濁したEIAVを10倍の連続希釈によって希釈し、得られた試料に等量のルシフェラーゼアッセイ緩衝液を混合する。ルシフェラーゼアッセイ緩衝液の組成は、25mM グリシルグリシン、ｐＨ7.8、15mM ＭｇＳＯ₄、４mM ＥＧＴＡ、150mM ＫＰＯ₄、２mM ＡＴＰおよび１mM ＤＴＴである。ルシフェリンおよびルシフェラーゼは、それぞれ最終濃度が0.4mMおよび1.6x10^-7M となるように添加した。45分間遮光状態でインキュベートして反応させた。10倍の連続希釈をした試料は、ポリブレンの存在下10⁶個のＥＤ細胞上にインキュベートした。細胞は５日間３７℃でインキュベートした後、100％メタノールで固定、EIAVの存在を確かめるために、以前に述べたカーぺンターら、J．Virol . ，65(3)：1605-1610(1991)（全文を参考文献として添付した）の方法で染色した。EIAVに感染した細胞のコロニー数を定量化し、mlあたりのコロニー形成単位（FFU/ML）として表現した。結果これらの実験の結果は、化学蛍光により活性化されるヒペリシンは、その濃度に依存することを示した（図４）。さらに、ヒペリシンの抗ウイルス性は、我々が以前に白色光を使った実験で観測した結果の１〜５％の効果しかなかった。カーペンターおよびクラウス、Photochem．and Photobio.，53(2)：169-174(1991) （全文を参考文献として添付した）、これらの結果は、ルシフェラーゼが触媒するルシフェリンの反応により発生する光が、in vitroにおいてヒペリシンを活性化することを示している。例２連結化合物の調製の際に使用するヒペリシン類似物の合成ヒペリシンを０℃のエーテルークロロホルム中で撹拌しながらアセチル化し、２価の酸を形成させ、更にできた懸濁液をクロム酸によって酸化した（H.J.バンクスら、Aust．J．Chem.，1976，29，1509）。それにジシクロヘキシルカルボジイミドを添加した（1.3eq）。この懸濁液をゆっくり暖め、１日かけて室温に戻した。沈殿は濾過した。濾過したものを濃縮すると無水物（不安定）ができ、それを下に述べるように直ちに合成したルシフェリン類似物と反応させた。例３−４ルシフェリンとその類似物の前駆体の合成前駆体Ａ−ベンゾチアゾール０℃の２−ヒドロキシ−５−アミノ安息香酸メチルエステルの溶液に、撹拌しながら蓚酸クロロエチル（1.2eq）とピリジン（1.3eq）の塩化メチレン溶液（１Ｍ）を添加した。一晩中撹拌してから、溶媒を取り除き、ヘキサン：酢酸エチルを用いたクロマトグラフィーにかけた。このジエステルアミド（１eq）を酢酸（１Ｍ）に溶解した。この溶液に1.2eq の四酢酸鉛を添加した。できた沈殿を濾過、洗浄し、次の段階に使用した。イミノキノン（１eq）をピリジン（１Ｍ）に溶解し、０℃で過剰の硫化水素と反応させた。一晩かけて室温に戻してから、その溶液を５０℃に加温し、冷却、真空中で濃縮した。残留物を酢酸エチル：塩化メチレンを用いたクロマトグラフィーで精製した。このとき、２段階わたるベンゾチアゾールの収率は45％であった。２：NMR(CDCl₃)：1.17(t，J=7Hz，3H)，3.75(s，3H)，4.25(q，j=7Hz，2H) ，7.45(AB quartet，2H)。前駆体Ｂ−ベンゾチアゾール水酸化二トリル２−クロロ−６−アルコキシベンゾチアゾール１当量のＤＭＳＯ（１Ｍ）溶液（C.G.スタックウィッシュJ．Am．Chem．Soc.，1949，3417.）に、５当量の青酸ナトリウムを添加する。この溶液を８０℃で８時間温め、その後室温まで一晩かけて冷却した。完全に反応後、残留物をヘキサン：酢酸エチルを用いたカラムクロマトグラフィーで精製した。このときのシアノベンゾチアゾールの収率は60％であった。この化合物におけるＲがメチルである場合は、アルドリッチケミカルカンパニーから購入したサンプルが信頼できるのものであるで保証された。このシアノベンゾチアゾール（１eq）を塩化メチレン（１Ｍ溶液）に溶解し、０℃に冷却した。それを、1.5当量の三臭化ホウ素あるいは過剰の三塩化ホウ素ガスで処理した。この溶液を一晩かけて室温に戻し、真空にして溶媒を取り除いた。残留物をヘキサン：酢酸エチルを用いたクロマトグラフィーで精製した。このときのベンゾチアゾール水酸化二トリルの収率は７５％であった。この物質のスペクトルは、塩酸ピリジニウム（メチルエステルの場合）との反応で生成する物質のスペクトルと同一であった。例５前駆体からのルシフェリン及びその類似物の合成上記で合成した前駆体ＡおよびＢは、ホワイトの方法、j．Am．Chem．Soc．， 1969，91，2178（参考文献として添付した）に従って、それぞれ別々にシステイン基と置換反応させ、ルシフェリンあるいはルシフェリン類似物を形成させた。例６Ａ−６Ｃ連結化合物形成のためのルシフェリン類似物と活性化ヒペリシンおよびポルフィリンとの結合６Ａ−ヒペリシン２塩基酸無水物より１：１塩化メチレン／ＤＭＦ中にヒペリシン無水物（1.0eq）を溶かした0.5Ｍ溶液を０℃に冷却し、それにルシフェリン類似物（1.1eq）の溶液を添加する。この溶液を５時間以上室温で撹拌する。溶媒を真空にして取り除くと、未精製の連結分子と少量のルシフェリン類似物が得られる。この未精製物を、冷却した炭酸水素ナトリウムの飽和溶液とエーテルの間で分配する。この水層を冷却した１Ｍ塩酸で酸性化すると、非晶質の固体として連結化合物が得られる。６Ｂ−ビス−ブロモメチルヒペリシンより１：１塩化メチレン／ＤＭＦ中にルシフェリン類似物（１eq）を溶かした１Ｍ溶液を０℃に冷却し、それに水素化ナトリウム（1.0eq）を添加する。この懸濁液を０℃で３０分間撹拌し、ビス−ブロモメチルヒペリシン（１eq）をＤＭＦに溶かした１〜２Ｍの溶液を、約１mmol／秒の速度で添加する。室温に戻し、５時間以上反応させる。連結分子は真空にして濃縮することにより分離した後、エーテルを使って粉砕する。６Ｃ−活性化したポルフィリンよりアルドリッチケミカルカンパニーより購入した市販品のプロトポルフィリンＩＸ１当量を１：１塩化メチレン／ＤＭＦ中に溶かした１Ｍ溶液に室温でジシクロヘキシルカルボジイミド（１eq）を添加し、続いてルシフェリン類似物（１eq）を加える。この溶液を室温で８時間撹拌する。真空にして溶媒を取り除き、未精製物を冷却した飽和炭酸水素ナトリウム溶液で処理する。それを濾過して、ジシクロヘキシル尿素を取り除く。水層は冷却した１Ｍ塩酸を使って注意深く酸性化する。連結分子が、非晶質の固体として分離する。例７ EIAVプロモーターにより制御されたルシフェラーゼの発現ルシフェラーゼは、以下で説明するように、発現プラスミド中に配置したルシフェラーゼ遺伝子を使って生成させる。この遺伝子は、EIAVの長い反復末端プロモーターにより制御される。プラスミドDNAをin vitroでウマ細胞に導入し、細胞溶解のルシフェラーゼ活性をアッセイすることにより試験した。ルシフェラーゼおよびEIAVの長い末端重複をコード下遺伝子を含有する発現プラスミドの構築材料および方法プラスミド． EIAV 253と呼ばれるラムダEMBL4中にあるEIAVの単離物MA-1の完全なプロウイルスクローン、カーぺンターら、J．Vir．65(3)：1605-1610(1991)，（全文を参考文献として添付した）を、カーペンターら、J．Vir．65(3)：1605- 1610(1991)，の方法にしたがって得た。それをEcoR１で切断し、このプロウイルス性の挿入部をEcoR１で限定切断したpUC19に通常のクローニング技法により連結した。完全なEIAVプロウイルスを含有するプラスミドp26Aは、染色コロニーハイブリッド形成法およびエンドヌクレアーゼ限定切断により同定した。p26AをBs tN１およびNar１で切断した。MA-１の完全な長い末端重複（LTR）を含有する322 塩基対（bp）の断片と４bpの側配列を電気泳動により分離し、さらに電解溶出により単離した。カーペンターら、J．Virol．，65(3)，1605-1610(1991)，図１（参考文献として添付した）に示すMA-１の部分配列を参照して下さい（これも参考文献として添付した）。このLTRは、7909-8231番目に位置する。終端部には、E．coli DNAポリメラーゼIをコードするクレノー断片で満たされている。その終端部は、HindIIIリンカーを付け加えて修飾し、HindIIIで限定切断されたpUC19 と連結した。そして、その断片を E．coli jM109の中に入れて形質転換した。LT R挿入部を含有するコロニーは、前と同じような方法で同定し、それぞれのプラスミドは再培養により精製した。プラスミドDNAは、イオン交換クロマトグラフィーにより単離した。LTR断片は、HindIIIを使って摘出し、電気泳動と電解溶出により精製した。その精製されたＬＴＲ断片は、HindIIIで限定切断されたpGL-Basic（プロメガバイオテック、マディソン、ウィスコンシン州）に連結し、jM109の中に入れて形質転換した。そして、陽性のコロニーを染色ハイブリッド形成法により同定した。プラスミドDN Aは、12個のハイブリッド陽性コロニーから単離した。また、LTR挿入部がルシフェラーゼ遺伝子に対してどういう方向を取るかは、エンドヌクレアーゼの限定切断によって決定した。ＬＴＲ挿入部が順方向（pMA-1LTR/LucF）あるいは逆方向（pMA-1LTR/LucR）に入っている単一クローンを選択し、その先の遺伝子発現機能の評価分析を行った。さらに、SV40プロモーターに制御されたルシフェラーゼを持つ制御プラスミド、ルシフェラーゼはコードしているがプロモーターを持たないプラスミド、標準 pGL2および塩基性pGL2をプロメガバイオテック（マディソン、ウィスコンシン州）から購入し、ルシフェラーゼのアッセイに使用した。プラスミド、pRS Etai M は、国立癌研究所（フレデリック、メリーランド州）のデーヴィッド・ダース博士から提供を受けた。このプラスミドは、ラウス肉腫ウイルスプロモーターの制御の下、EIAV活性化蛋白質Tatを発現する。トランスフェクション．これらの研究に使用した細胞には、ウマ皮膚（ED）細胞（ATCC CCL57）とEIAVから単離したMA-１に慢性的に感染しているED細胞が含まれる。カーペンターら、J．Virol．，65(3)，1605-1610(1991)、カーペンターら、J，Virol.，63，2492-2496(1989)，両者の全文を参考文献として添付した。ルシフェラーゼの発現を分析するため、60mmの組織培養用プレートに５ｘ１０⁵／プレートの濃度で細胞を播種し、次の日にトランスフェクターゼ試薬（ＢＲＬ）を使ってトランスフェクションさせた。ほとんどの場合細胞は、100-300ngのpRS Etat-Mの存在にかかわらず、10μgのルシフェラーゼ発現プラスミド（pMA-１ L TR/LucF、pMA-１ LTR/LucR、標準pGL2および塩基性pGL2）によりトランスフェクションした。トランスフェクション後４８時間たってから、細胞を溶解し、市販の試薬（プロメガ）を使ってルシフェラーゼの発現をアッセイした。実験室で調製した溶解用の緩衝液および分析用の試薬も、比較のため試験した。ルシフェラーゼ分析．ルシフェラーゼ活性を測定すると、基質であるルシフェリンを添加したときの光の生成量がわかる。10μlの細胞溶解物を350μlの反応用緩衝液と混合した。この緩衝液中は、25mM グリシルグリシン、ｐＨ7.8、５m M ＡＴＰ、15mM ＭｇＳＯ₄、ｐＨ7.8、４mM ＥＧＴＡ、および１mM ＤＴＴを含む。試料をSLM 8000C蛍光分光光度計に入れ、25mM グリシルグリシン、 15 mM ＭｇＳＯ₄、４mM ＥＧＴＡおよび２mM ＤＴＴを含む溶液に溶かした0.2M ルシフェリン200μlを注入し、出てくる光を波長560nmで60秒間測定した。結果 MA-１ LTRをルシフェラーゼ遺伝子の上流側含有するプラスミドは、上に述べた標準的なクローニング技法により得られた。ＥＤ細胞、MA-１に感染したED細胞およびEIAV Tat（ETat）にもトランスフェクションしたED細胞中において、プラスミドの機能が現れた。ウイルスの感染あるいは複製が存在しないED細胞中においては、ルシフェラーゼの発現はベースラインの水準でしか起こらなかった（図２）。ルシフェラーゼの発現は、ウイルスに感染した細胞およびETatにもトランスフェクションした細胞の両者において検出できた。既知のモル濃度の市販のルシフェラーゼ（シグマ、セントルイス、ミズーリ州）を使って得られる標準曲線を基に、これらの実験で得られた測定値を外挿した。細胞溶解物中のルシフェラーゼのモル濃度は、1.8x10^-13から3x10^-12Ｍあるいはそれ以上の範囲にあった。比較的低い濃度のルシフェラーゼが観測されるのは、おそらくED細胞中の低いトランスフェクション効率によるものであろう（カーペンター、未発表の観測結果）。本発明に関し、いくつかの特定の実施例をこれまで述べてきたが、この技術に熟練した人々にとって、多くの代替物、改良物および変形物を作るのは可能であろう。従って本発明は、添付した特許請求の範囲の示す精神および領域に含まれる可能性のあるすべての代替物、改良物および変形物を包含することを意図する。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩ // Ａ６１Ｋ 31/335 9454−4Ｃ 31/41 9454−4Ｃ 31/425 9454−4Ｃ 38/46 Ｃ０７Ｈ 21/04 8615−4ＣＣ１２Ｎ 9/02 9359−4Ｂ 9455−4ＣＡ６１Ｋ 37/54 (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＴ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＨＵ，ＪＰ，ＫＰ，ＫＲ，ＬＫ，ＬＵ，ＭＧ，ＭＮ，ＭＷ，ＮＬ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＫ，ＵＡ (72)発明者カーペンタースーザンエルアメリカ合衆国アイオア州エイムズアイオアステートユニバーシティーパンメルドライブギルマンホールデパートメントケミストリー (72)発明者ペトリッチジャコブダブリュアメリカ合衆国アイオア州エイムズアイオアステートユニバーシティーパンメルドライブギルマンホールデパートメントケミストリー

Claims

【特許請求の範囲】１．ウイルスを不活化するための組成物において、ａ．特定の範囲の波長の光あるいはエネルギーを吸収して活性化する感光性物質であって、ヘマトポルフィリン類似物、ヒペリシン、その他のキノン類、フタロシアニン類およびポルフィリン類からなるグループから選ばれる感光性物質と、ｂ．活性化したときに、前記感光性物質が吸収できる範囲内でエネルギーを転移するあるいは光を発するエネルギー供与物質と、ｃ．前記エネルギー供与物質からのエネルギー転移あるいは発光を活性化する化学的手段と、からなることを特徴とする組成物。２．請求項１の組成物において、前記感光性物質の分子と前記エネルギー供与物質の分子が互いに化学的な鎖で連結された組成物。３．請求項２の組成物において、前記感光性物質がキノンまたはポルフィリンであり、また前記エネルギー供与物質がルシフェリンまたはその類似物である組成物。４．請求項３の組成物において、前記感光性物質がヒペリシンまたはその類似物である組成物。５．請求項４の組成物において、前記ヒペリシン類似物が次の化学式を有する組成物。６．請求項５の組成物において、前記ルシフェリンが次の化学式を有し、式中、Ｒ₁，Ｒ₂，Ｒ₃あるいはＲ₄は化学的な鎖であり、またＸおよびＸ’はＳ，Ｏ，Ｈ，Ｈ，ＣＨ＝ＣＨあるいはＮＲ₄から選択される組成物であって、このとき、Ｒ₁が上記の化学的な鎖であれば、Ｒ₁は−ＣＯ₂（ＣＨ₂）_nＹであり、ｎは２〜１５、Ｒ₂〜Ｒ₄はＨ、ＹはＯＨ，ＳＨ，ＮＨ₂であり、Ｒ₂が上記の化学的な鎖であれば、Ｒ₂は−（ＣＨ₂）_nＣＯ₂Ｈおよび−Ｓ（ＣＨ₂）_n+1Ｙであり、ｎは１〜１５、Ｒ₁およびＲ₃〜Ｒ₄はＨ、ＹはＯＨ，ＮＨ₂あるいはＳＨであり、Ｒ₃が上記の化学的な鎖であれば、Ｒ₃は−ＣＯ₂Ｈおよび−（ＣＨ₂）_nＹから選択され、ｎは１〜１５、Ｒ₁、Ｒ₂およびＲ₄はＨ、ＹはＯＨ，ＳＨあるいはＮＨ₂であり、Ｒ₄が上記の化学的な鎖であれば、Ｒ₄は−（ＣＨ₂）_nＹとなり、ｎは２〜１５、Ｒ₁〜Ｒ₃はＨ、ＹはＯＨ，ＮＨ₂あるいはＳＨとなる組成物。７．請求項６の組成物において、前記感光性物質と前記エネルギー供与物質が、次の化学式を有する連結化合物を構成し、式中、Ｒ₁が上記の化学的な鎖で、ＸおよびＸ’は請求項６で定義した構造を有し、Ｒ₁は−ＣＯ₂（ＣＨ₂）_nＺで、ｎは２〜１５、Ｒ₂〜Ｒ₄はＨ、ＺはＯ，ＮＨあるいはＳ、ＡはＯあるいはＨ，Ｈ、ＧはＣＨ₃，ＣＯ₂Ｈ，ＣＯ₂ＭｅあるいはＣＨ₂Ｂｒである組成物。８．請求項６の組成物において、前記感光性物質と前記エネルギー供与物質が、次の化学式を有する連結化合物を構成し、式中、Ｒ₂が上記の化学的な鎖で、ＸおよびＸ’は請求項６で定義した構造を有し、Ｒ₂は−（ＣＨ₂）_nＣＯＺおよび−Ｓ（ＣＨ₂）Ｚから選択され、ｎは１〜１５、Ｒ₁，Ｒ₃およびＲ₄はＨ、ＺはＯ，ＮＨあるいはＳ、ＡはＯあるいはＨ，Ｈ、ＧはＣＨ₃，ＣＯ₂Ｈ，ＣＯ₂ＭｅあるいはＣＨ₂Ｂｒである組成物。９．請求項６の組成物において、前記感光性物質と前記エネルギー供与物質が、次の化学式を有する連結化合物を構成し、式中、Ｒ₃が上記の化学的な鎖で、ＸおよびＸ’は請求項６で定義した構造を持ち、Ｒ₃は−ＣＯＺおよび−（ＣＨ₂）_nＺから選択され、ｎは１〜１５、Ｒ₁〜Ｒ₂ およびＲ₄はＨ、ＺはＯ，ＮＨあるいはＳ、ＡはＯあるいはＨ，Ｈ、ＧはＣＨ₃，ＣＯ₂Ｈ，ＣＯ₂ＭｅあるいはＣＨ₂Ｂｒである組成物。１０．請求項６の組成物において、前記感光性物質と前記エネルギー供与物質が、次の化学式を有する連結化合物を構成し、式中、Ｒ₄が上記の化学的な鎖で、Ｘは請求項６で定義した構造を持ち、Ｒ₄は−（ＣＨ₂）_nＺで、ｎは２〜１５、Ｒ₁〜Ｒ₂およびＲ₄はＨ、ＺはＯ，ＮＨあるいはＳ、ＡはＯあるいはＨ，Ｈ、ＧはＣＨ₃，ＣＯ₂Ｈ，ＣＯ₂ＭｅあるいはＣＨ₂Ｂｒである組成物。１１．請求項７から１０の組成物において、前記のルシフェリンあるいはその類似物を活性化する化学的手段が発現プラスミドからなり、その発現プラスミドがルシフェラーゼをコードする遺伝子を含有する組成物。１２．請求項１１の組成物において、前記遺伝子がプロモーターにより制御され、そのプロモーターは前記ウイルスの複製により活性化する組成物。１３．請求項１２の組成物において、前記ウイルスがレンチウイルスであり、また前記プロモーターがレンチウイルスの長い末端重複あるいはその一部である組成物。１４．次の化学式を有する連結化合物において、式中、ＸおよびＸ’はＳ，Ｏ，Ｎ，Ｈ，Ｈ，ＣＨ＝ＣＨあるいはＮＲ₄から選択され、Ｒ₁が上記の化学的な鎖で−ＣＯ₂（ＣＨ₂）_nＺの形を取り、このときｎは２〜１５、Ｒ₂〜Ｒ₄はＨ、ＺはＯ，ＮＨあるいはＳ、ＡはＯあるいはＨ，Ｈ、ＧはＣＨ₃，ＣＯ₂Ｈ，ＣＯ₂Ｈ，ＣＯ₂ＭｅあるいはＣＨ₂Ｂｒである化合物。１５．次の化学式を有する連結化合物において、式中、ＸおよびＸ’はＳ，Ｏ，Ｈ，Ｈ，ＣＨ＝ＣＨあるいはＮＲ₄から選択され、Ｒ₂は−（ＣＨ₂）_nＣＯＺおよび−Ｓ（ＣＨ₂）_nＺから選択され、このときｎは１〜１５、Ｒ₁，Ｒ₃およびＲ₄はＨ、ＺはＯ，ＮＨあるいはＳ、ＡはＯあるいはＨ，Ｈ、ＧはＣＨ₃，ＣＯ₂Ｈ，ＣＯ₂ＭｅあるいはＣＨ₂Ｂｒである化合物。１６．次の化学式を有する連結化合物において、式中、ＸおよびＸ’はＳ，Ｏ，Ｈ，Ｈ，ＣＨ＝ＣＨあるいはＮＲ₄から選択され、Ｒ₃は−ＣＯＺおよび−（ＣＨ₂）_nＺから選択され、このときｎは１〜１５、Ｒ₁，Ｒ₂およびＲ₄はＨ、ＺはＯ，ＮＨあるいはＳ、ＡはＯあるいはＨ，Ｈ、ＧはＣＨ₃，ＣＯ₂Ｈ，ＣＯ₂ＭｅあるいはＣＨ₂Ｂｒである化合物。１７．次の化学式を有する連結化合物において、式中、ＸはＳ，Ｏ，Ｈ，Ｈ，ＣＨ＝ＣＨあるいはＮＲ₄から選択され、Ｒ₄は−（ＣＨ₂）_nＺで、このときｎは２〜１５、Ｒ₁〜Ｒ₃はＨ、ＺはＯ，ＮＨあるいはＳ、ＡはＯあるいはＨ，Ｈ、ＧはＣＨ₃，ＣＯ₂Ｈ，ＣＯ₂ＭｅあるいはＣＨ₂Ｂｒである化合物。１８．請求項１４から１７に示した連結化合物を調製する際に中間生成物として使用され、次の化学式を有するヒペリシン類似物。１９．請求項１４から１７に示した連結化合物を調製する際に中間生成物として使用され、次の化学式を有するルシフェリン類似物において、式中、Ｒ₁，Ｒ₂，Ｒ₃あるいはＲ₄は上記の化学的な鎖を示し、ＸおよびＸ’はＳ，Ｏ，Ｈ，Ｈ，ＣＨ＝ＣＨあるいはＮＲ₄から選択され、Ｒ₁が上記の化学的な鎖であれば、Ｒ₁は−ＣＯ₂（ＣＨ₂）_nＹとなり、このときｎは２〜１５、Ｒ₂〜Ｒ₄はＨ、ＹはＯＨ，ＳＨあるいはＮＨ₂であり、Ｒ₂が上記の化学的な鎖であれば、Ｒ₂は−（ＣＨ₂）_nＣＯ₂Ｈおよび−Ｓ（ＣＨ₂）_n+1Ｙから選択され、このときｎは１〜１５、Ｒ₁およびＲ₃〜Ｒ₄ はＨ、ＹはＯＨ，ＮＨ₂あるいはＳＨとなり、Ｒ₃が上記の化学的な鎖であれば、Ｒ₃は−ＣＯ₂Ｈおよび−（ＣＨ₂）_nＹから選択され、このときｎは１〜１５、Ｒ₁〜Ｒ₂およびＲ₄はＨ、ＹはＯＨ，ＮＨ₂あるいはＳＨとなり、Ｒ₄が上記の化学的な鎖であれば、Ｒ₄は−（ＣＨ₂）_nＹとなり、ｎは２〜１５、Ｒ₁〜Ｒ₃はＨ、ＹはＯＨ，ＮＨ₂あるいはＳＨとなるルシフェリン類似物。２０．請求項１４の連結化合物を合成する方法において、ヒペリシンあるいはその類似物と、次の化学式に示すルシフェリン類似物であって、式中、ＸおよびＸ’はＳ，Ｏ，Ｈ，Ｈ，ＣＨ＝ＣＨあるいはＮＲ₄から選択され、Ｒ₁が上記の化学的な鎖で、Ｒ₁は−（ＣＨ₂）_nＣＯ₂Ｈであり、このときｎは１〜１５、Ｒ₁およびＲ₃〜Ｒ₄はＨ、ＹはＯＨ，ＳＨあるいはＮＨ₂であるルフェリシン類似物とを縮合反応させるステップを含む方法。２１．請求項１５の連結化合物を合成する方法において、ヒペリシンあるいはその類似物と、次の化学式に示すルシフェリン類似物であって、式中、ＸおよびＸ’はＳ，Ｏ，Ｈ，Ｈ，ＣＨ＝ＣＨあるいはＮＲ₄から選択され、Ｒ₂が上記の化学的な鎖で、Ｒ₂は−（ＣＨ₂）_nＣＯ₂Ｈおよび−Ｓ（ＣＨ₂）_n+ ₁ Ｙから選択され、このときｎは１〜１５、Ｒ₁，Ｒ₃〜Ｒ₄はＨ、ＹはＯＨ，ＮＨ₂ あるいはＳＨであるルフェリシン類似物とを縮合反応させるステップを含む方法。２２．請求項１６の連結化合物を合成する方法において、ヒペリシンあるいはその類似物と、次の化学式に示すルシフェリン類似物であって、式中、ＸおよびＸ’はＳ，Ｏ，Ｈ，Ｈ，ＣＨ＝ＣＨあるいはＮＲ₄から選択され、Ｒ₃が上記の化学的な鎖で、Ｒ₃は−ＣＯ₂Ｈおよび−（ＣＨ₂）_nＹから選択され、このときｎは１〜１５、Ｒ₁〜Ｒ₂およびＲ₄はＨ、ＹはＯＨ，ＮＨ₂あるいはＳＨであるルフェリシン類似物とを縮合反応させるステップを含む方法。２３．請求項１７の連結化合物を合成する方法において、ヒペリシンあるいはその類似物と、次の化学式に示すルシフェリン類似物であって、式中、ＸおよびＸ’はＳ，Ｏ，Ｈ，Ｈ，ＣＨ＝ＣＨあるいはＮＲ₄から選択され、Ｒ₄が上記の化学的な鎖で、Ｒ₄は−（ＣＨ₂）_nＹであり、このときｎは２〜１５、Ｒ₁〜Ｒ₃はＨ、ＹはＯＨ，ＮＨ₂あるいはＳＨであるルフェリシン類似物とを縮合反応させるステップを含む方法。２４．ウイルスを不活化する発現プラスミドであって、プロモーターによって制御されたルシフェラーゼ遺伝子を含み、前記プロモーターが前記ウイルスの複製により活性化する発現プラスミド。２５．請求項２４の発現プラスミドにおいて、前記ウイルスがレンチウイルスであり、また前記プロモーターがレンチウイルスの長い末端重複あるいはその一部である発現プラスミド。２６．請求項２４の発現プラスミドを含有するリポソーム。２７．請求項２６のリポソームでトランスフェクションした細胞。２８．安定に組み換えられた請求項２４の発現プラスミドの複製を含有するを真核細胞。２９．請求項２８の真核細胞から作製したウイルスベクター。３０．腫瘍細胞を破壊するための組成物において、ａ．特定の範囲の波長の光あるいはエネルギーを吸収して活性化する感光性物質であって、キノン類、ポルフィリン類およびヒペリシンからなるグループから選ばれる感光性物質と、ｂ．活性化したとき、前記感光性物質が吸収できる範囲でエネルギーを転移あるいは光を発するエネルギー供与物質と、ｃ．前記エネルギー供与物質からのエネルギー転移あるいは発光を活性化する化学的手段と、からなることを特徴とする組成物。３１．請求項３０の組成物において、前記感光性物質の分子と前記エネルギー供与物質の分子が互いに化学的な鎖で連結された組成物。３２．請求項３１の組成物において、前記エネルギー供与物質がルシフェリンまたはその類似物であり、前記感光性物質が、ポルフィリンである組成物。３３．請求項３２の組成物において、前記化学的活性手段はルシフェラーゼ又はその他の活性物質をコードする遺伝子を含有する発現プラスミドからなる組成物。３４．請求項３３の組成物において、前記遺伝子がプロモーターにより制御され、そのプロモーターは前記腫瘍細胞によって発現される蛋白質の濃度が上昇することにより活性化する組成物。３５．腫瘍細胞を破壊する発現プラスミドにおいて、プロモーターにより制御されたルシフェラーゼ遺伝子を含み、そのプロモーターは前記腫瘍細胞が発現する蛋白質の濃度が上昇することにより活性化する発現。３６．請求項３５の発現プラスミドを含有するリポソーム。３７．請求項３６のリポソームでトランスフェクションした細胞。３８．安定に組み換えられた請求項３５の発現プラスミドの複製を含有するを真核細胞。３９．請求項３８の真核細胞から作製したウイルスベクター。４０．ウイルスを不活化する方法において、ａ．前記ウイルスに感染した細胞中に活性化物質をコードしたDNA導入し、そこで前記ウイルスが複製を作ることにより前記活性化物質の発現を増大させる、ｂ．前記細胞中に化合物を導入し、その化合物は、ヘマトポルフィリン類似物、プルプリン、フタロシアニンおよびポルフィリンから選択した特定の範囲内の光あるいはエネルギーを吸収する感光性物質と、前記活性化物質により活性化したとき、前記範囲の波長の光あるいはエネルギーを放出するエネルギー供与物質と、であり、ここで、感光性物質は、化学的な鎖で任意に前記エネルギー供与物質と結びつけられている、上記ａ、ｂ２つのステップを有する方法。４１．請求項４０の方法において、前記DNAが発現プラスミドに存在し、また前記DNAはプロモーターにより制御され、そのプロモーターは前記ウイルスが複製を作ることにより活性化する方法。４２．請求項４１の方法において、前記発現プラスミドがリポソーム中に存在する方法。４３．請求項４０の方法において、前記DNAがウイルスベクターに存在する方法。４４．請求項４１の方法において、前記発現プラスミドの複製が真核細胞中に安定に組み込まれた方法。４５．請求項４４の方法において、前記真核細胞が前記DNAを含有するウイルス性ベクターを産生する方法。４６．請求項４０の方法において、前記DNAと前記化合物の導入はin vivoで起こる方法。４７．請求項４０の方法において、前記DNAと前記化合物の導入はex vivoで起こる方法。４８．請求項４０の方法において、前記感光性物質が次の化学式を有するヒペリシン類似物である方法。４９．請求項４８の方法において、前記エネルギー供与物質がルシフェリンあるいはその類似物で、前記活性化物質がルシフェラーゼである方法。５０．請求項４９の方法において、前記ルシフェリンあるいはその類似物が次の化学式を有し、式中、Ｒ₁，Ｒ₂，Ｒ₃あるいはＲ₄は上記の化学的な鎖を示し、ＸおよびＸ’はＳ，Ｏ，Ｈ，Ｈ，ＣＨ＝ＣＨあるいはＮＲ₄から選択され、Ｒ₁が上記の化学的な鎖であれば、Ｒ₁は−ＣＯ₂（ＣＨ₂）_nＹとなり、このときｎは２〜１５、Ｒ₂〜Ｒ₄はＨ、ＹはＯＨ，ＳＨあるいはＮＨ₂であり、Ｒ₂が上記の化学的な鎖であれば、Ｒ₂は−（ＣＨ₂）_nＣＯ₂Ｈおよび−Ｓ（ＣＨ₂）_n+1Ｙから選択され、このときｎは１〜１５、Ｒ₁およびＲ₃〜Ｒ₄はＨ、ＹはＯＨ，ＮＨ₂あるいはＳＨであり、Ｒ₃が上記の化学的な鎖であれば、Ｒ₃は−ＣＯ₂Ｈおよび−（ＣＨ₂）_nＹから選択され、このときｎは１〜１５、Ｒ₁、Ｒ₂およびＲ₄はＨ、ＹはＯＨ，ＮＨ₂あるいはＳＨであり、Ｒ₄が上記の化学的な鎖であれば、Ｒ₄は−（ＣＨ₂）_nＹとなり、ｎは２〜１５、Ｒ₁〜Ｒ₃はＨ、ＹはＯＨ，ＮＨ₂あるいはＳＨである方法。５１．請求項５０の方法において、前記感光性物質および前記ルシフェリンあるいはその類似物が、化学的な鎖により結び付けられ、前記連結化合物は次の化学式を有し、式中、ＸはＳ，Ｏ，Ｎ，Ｈ，Ｈ，ＣＨ＝ＣＨあるいはＮＲ₄からなるグループから選択され、Ｒ₁が上記の化学的な鎖で−ＣＯ₂（ＣＨ₂）_nＺの形であり、このときｎは２〜１５、Ｒ₂〜Ｒ₄はＨ、ＺはＯ，ＮＨあるいはＳ、ＡはＯあるいはＨ，Ｈ、ＧはＣＨ₃，ＣＯ₂Ｈ，ＣＯ₂Ｈ，ＣＯ₂ＭｅあるいはＣＨ₂Ｂｒである化合物。５２．請求項５０の方法において、前記感光性物質および前記ルシフェリンあるいはその類似物が、化学的な鎖により結び付けられ、前記連結化合物が次の化学式を有し、式中、ＸおよびＸ’はＳ，Ｏ，Ｈ，Ｈ，ＣＨ＝ＣＨあるいはＮＲ₄からなるグループから選択され、Ｒ₂は上記の化学的な鎖で、−（ＣＨ₂）_nＣＯＺおよび−Ｓ（ＣＨ₂）_n+1Ｚからなるグループから選択され、このときｎは１〜１５、Ｒ₁，Ｒ₃〜Ｒ₄はＨ、ＺはＯ，ＮＨあるいはＳ、ＡはＯあるいはＨ，Ｈ、ＧはＣＨ₃，ＣＯ₂Ｈ，ＣＯ₂ＭｅあるいはＣＨ₂Ｂｒである化合物。５３．請求項５０の方法において、前記感光性物質および前記ルシフェリンあるいはその類似物が、化学的な鎖により結び付けられ、前記連結化合物が次の化学式を有し、式中、ＸおよびＸ’はＳ，Ｏ，Ｈ，Ｈ，ＣＨ＝ＣＨあるいはＮＲ₄からなるグループから選択され、Ｒ₃が上記の化学的な鎖で、−ＣＯＺおよび−（ＣＨ₂）_nＺからなるグループから選択され、このときｎは１〜１５、Ｒ₁〜Ｒ₂およびＲ₄はＨ、ＺはＯ，ＮＨあるいはＳ、ＡはＯあるいはＨ，Ｈ、ＧはＣＨ₃，ＣＯ₂Ｈ，ＣＯ₂ＭｅあるいはＣＨ₂Ｂｒである化合物。５４．請求項５０の方法において、前記感光性物質および前記ルシフェリンあるいはその類似物が、化学的な鎖により結び付けられ、前記連結化合物が次の化学式を有し、式中、ＸおよびＸ’はＳ，Ｏ，Ｈ，Ｈ，ＣＨ＝ＣＨあるいはＮＲ₄からなるグループから選択され、Ｒ₄が上記の化学的な鎖で、−（ＣＨ₂）_nＺで、このときｎは２〜１５、Ｒ₁〜Ｒ₃はＨ、ＺはＯ，ＮＨあるいはＳ、ＡはＯあるいはＨ，Ｈ、ＧはＣＨ₃，ＣＯ₂ Ｈ，ＣＯ₂ＭｅあるいはＣＨ₂Ｂｒである化合物。５５．新生物形成細胞を破壊する方法において、ａ．上記の新生物形成細胞中に活性化物質をコードしたDNA導入し、そこで上記腫瘍細胞内で発現したタンパク質の濃度の上昇によって、上記の活性化物質の発現が増大し、ｂ．上記の新生物形成細胞中に化合物を導入し、その化合物は、ポルフィリン類、ヒペリシン類及びその他のキノン類から選択した特定の範囲内の光あるいはエネルギーを吸収することによって活性化する感光性物質と、前記活性化物質により活性化したとき、上記範囲の波長の光あるいはエネルギーを放出することによって、活性化するエネルギー供与物質と、であり、前記感光性物質は化学的な鎖で任意に前記エネルギー供与物質と結びつけられている、上記ａ、ｂステップを有することを特徴とする方法。５６．請求項５５の方法において、前記DNAが発現プラスミドに存在する方法。５７．請求項５６の方法において、前記発現プラスミドがリポソーム中に存在する方法。５８．請求項５６の方法において、前記発現プラスミドが真核細胞中に安定に組み込まれている方法。５９．請求項５８の方法において、前記真核細胞が前記DNAを含有するウイルス性ベクターを産生する方法。６０．請求項５５の方法において、前記DNAと前記化合物の導入がin vivoで起こる方法。６１．請求項５５の方法において、前記DNAと前記化合物の導入がex vivoで起こる方法。６２．請求項５５の方法において、前記エネルギー供与物質がルシフェリンであり、前記活性化物質がルシフェラーゼである方法。６３．請求項６２の方法において、前記感光性物質がポルフィリンである方法。６４．ウイルスを不活化する組成物において、ａ．特定の範囲の波長の光あるいはエネルギーを吸収して活性化する感光性物質であって、ヘマトポルフィリン類似物、ヒペリシン、その他のキノン類、フタロシアニン類およびポルフィリン類からなるグループから選択される物質と、ｂ．活性化したとき、前記感光性物質が吸収できる範囲でエネルギーを転移するあるいは光を発するエネルギー供与物質と、からなることを特徴とする組成物。６５．請求項６４の組成物において、前記感光性物質の分子と前記エネルギー供与物質の分子が互いに化学的な鎖で連結された組成物。６６．腫瘍細胞を破壊して腫瘍を治療するための組成物において、ａ．特定の範囲の波長の光あるいはエネルギーを吸収して活性化する感光性物質であって、キノン類、ポルフィリン類、およびヒペリシンからなるグループとから選択される物質と、ｂ．活性化したとき、前記感光性物質が吸収できる範囲でエネルギーを転移するあるいは光を発するエネルギー供与物質と、からなることを特徴とする組成物。６７．請求項６６の組成物において、前記感光性物質の分子と前記エネルギー供与物質の分子が互いに化学的な鎖で連結された組成物。