JPS5811941B2 - ブラディキニン環状類似体 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は公知の天然組織ホルモン、ブラデイキニンの新
規な合成類似体に関する。

ブラディキニン並びにブラディキニンにアミノ酸が逐次
性いてなる他のペプチド、例えばカリジン、メチオニル
リジルブラディキニン、動物及び昆中毒のキニン類は生
物自然界に広く沢山在って動物及び人間の生化学的及び
生理学的反応を調節する重要な役目を果している。

人間のいろいろな疾病及び病理状態はブラディキニン及
び関連ペプチドの生成及び分解の動力学上の障害に関係
している。

従って、これらの反応に影響を及ぼし、かつ変化させる
効力をもつブラデイキニン類似体と代謝拮抗物質とが早
急に必要になっている（Ｔ、Ｓ。

Ｐａ５ｋｈｉｎａ：「心臓血管系の病理学の生化学的原
理（Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ
ｏｆ ｐａｔｈｏｌｏｇｙｏｆ ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ
ｕｌａｙ ｓｙｓｔｅｍ）」“Ｍｏ１ｅｃｕｌａｒＰｒ
ｉｎｃｉｐｌｅｓ ｏｆ Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ”、Ｍ、
、“Ｍｅｄｉｃｉｎａ”１９６６．１２３−１７８頁；
Ａ、Ａ、Ｄｚｉｚｉｎｓｋｙ、Ｏ，Ａ。

Ｇｏｍａｚｋｏｖ、；“Ｋ１ｎ１ｎｓ ｉｎ ｐｈｙｓ
ｉｏｌｏｇｙ ａｎｄｐａｔｈｏｌｏｇｙ ｏｆ ｃａ
ｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ ｓｙｓｔｅｍ”Ｎｏｖｏｓ
ｉｂｉｒｓｋ、１９７６（ロシア語））。

天然のブラデイキニン自体はこれらの目的に役立たない
。

その主な欠点は作用持続時間が短いこと〔（ブラデイキ
ニンの人血中での半減期は３０秒である） （Ｋ、Ａ、
Ｓａａｍｉｉ、Ｔ、に、Ｅｓｋｅｓ。

“Ａｍ、Ｊ、Ｐｈｙｓｉｏｌ、”２０３，２６１（１９
６２）〕及び生物学的作用の範囲が広いこと、即ち、選
択性のないことである。

それ故、このホルモンは平滑筋循環系、毛細血管透過性
に影響を及ぼすし、かつ他の多くの作用を示す（Ｅ、５
ｃｈｒｏｅｄｅｒ、Ｃ。

Ｌｕｅｂｋｅ、；“ペプチド”第２巻、Ｍ、、“Ｍｉｒ
”。

１９６９．１１２−１１７頁（ロシア語）〕。

従ってブラデイキニンを治療適用すると耐容し得ない副
作用を来たし得る。

１７０種以上数えられるブラデイキニン合成類似体につ
いても同じことが言える（「Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ
ＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ」
第２５巻、「ブラデイキニン、カリジン及びカリクレイ
ン」Ｅｄ、Ｅ、Ｇ、Ｅｒｄｏｓ・Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖ
ｅｒｌａｇ、Ｂｅｒｌｉｎ ＨｅｉｄｅｌｂｅｒｇＮｅ
ｗ Ｙｏｒｋ、１９７０，１−７６８頁）。

それらのうちに著しい選択性及び延長した生物学的作用
を有する化合物は見出せなかった。

本発明はブラデイキニンのもつ欠点を克服する化合物を
提供することにある。

本発明の目的はブラデイキニンのＮ末端アルギニンをＬ
−リジンで置換し、かつブラデイキニンの６位のセリン
をグリシンで置換し、他方のアルギニンのカルボニル基
及び前記リジンのε−アミノ基によって形成したペプチ
ド結合で閉環してなる下記式を有するシクロ−〔（Ｎε
−１−Ｌ−リジン、６−グリシン）−ブラデイキニン〕
であるブラデイキニン環状類似体： （上式中、Ｌｙｓはリジン残基、Ｐｒｏはプロリン残基
、Ｇｌｙはグリシン残基、ＰｈｅはＬ−フェニルアニラ
ン残基、ＡｒｇはＬ−アルギニン残基を示すを提供する
ことによって達成される。

本発明による化合物は半減期が著しく延長され特異的選
択作用を有するもので、即ち、治療適用の観点から有益
な特性を有する。

ラット血圧降下に関する試験で、（５０μｇ／Ｋｇの用
量の）ブラデイキニン環状類似体（以下、ＢＣＡと称す
る）はブラデイキニンとほぼ等しい活性を示す。

けれども、ブラデイキニンが投与後１分生で作用が完全
に消失するとすれば、ＢＣＡはこれを一回投与するだけ
で血圧を３時間の間安定して低下させる。

同時にＢＣＡはキニン類にとって非常に特有の趨筋性の
活性を示さず（ラット回腸の収縮に関する試験）、即ち
これは著しい作用の選択性を有する。

上記式の目的化合物は、本発明に従って下記工程からな
る方法で得られる。

（ａ） ベンジルオキシカルボニルプロリンをグリシ
ンのｔ−ブチルエステルと反応させてベンジルオキシカ
ルボニルプロリルグリシンのｔ−ブチルエステルを得る
； （ｂ） 上記工程（ａ）の生成物を水添してプロリル
グリシンのｔ−ブチルエステルを得る； （ｃ）ｔ−ブトキシカルボニルニトロアルギニンをα−
ベンジルオキシカルボニルリジンのｐ−ニトロフェニル
エステルと反応させてα−ベンジルオキシカルボニル、
ε−ｔ−ブトキシカルボニルニトロアルギニルリジンの
ｐ−ニトロフェニルエステルを得る； （ｄ） 上記工程（ｃ）の生成物をプロリンと反応さ
せてα−ベンジルオキシカルボニル、ε−（ｔ−ブトキ
シカルボニルニトロアルギニル）リジルプロリンを得る
； （ｅ） 上記工程（ｄ）の生成物をトリフルオロ酢酸
で処理してα−ベンジルオキシカルボニル、ε−にトロ
アルギニル）リジルプロリンのトリフルオロアセテート
を得る； （ｆ） ｔ−ブトキシカルボニルフェニルアラニンの
ｐ−ニトロフェニルエステルをグリシンと反応させてｔ
−ブトキシカルボニルフェニルアラニルグリシンを得る
； （ｇ） 上記工程（ｆ）の生成物をプロリルフェニル
アラニンのｐ−ニトロベンジルエステルと反応させてｔ
−ブトキシカルボニルフェニルアラニルグリシルプロリ
ルフェニルアラニンｐ−ニトロベンジルエステルを得る
； （ｈ） 上記工程（ｇ）の生成物をヒドラジンヒトレ
ートで処理してｔ−ブトキシカルボニルフェニルアラニ
ルグリシルプロリルフェニルアラニンのヒドラジドを得
る； （ｉ） 上記工程（ｅ）及び（ｈ）の生成物を反応さ
せてα−ベンジルオキシカルボニル、ε−（ｔ−ブトキ
シカルボニルフェニルアラニルグリシルプロリルフェニ
ルアラニルニトロアルギニル）リジルプロリンを得る； （ｊ）上記工程（ｂ）及び（ｉ）の生成物を反応させて
α−ベンジルオキシカルボニル、ε−（ｔ−ブトキシカ
ルボニルフェニルアラニルグリシルプロリルフェニルア
ラニルニトロアルギニル）リジルプロリルグリシンのｔ
−ブチルエステルを得る；（ｋ）上記工程（ｊ）の生成
物をα−ベンジルオキシカルボニル、ε−（フェニルア
ラニルグリシルプロリルフェニルアラニルニトロアルギ
ニル）リジルプロリルプロリルグリシンの塩酸塩に変形
する； （１）上記工程（ｋ）の生成物を環化してシクロ−〔α
−ベンジルオキシカルボニル、ε−（フェニルアラニル
グリシルプロリルフェニルアラニルニトロアルギニル）
リジルプロリルプロリルグリシル〕を得る： （ｍ） 上記工程（１）の生成物を水添してシクロ−
〔（Ｎε−１−Ｌ−リジン、６−グリシン）ブラディキ
ニン〕を得る。

ＢＣＡの合成工程を要約すると下記のようになる；グリ
シン以外の上記アミノ酸は全てＬ−配置をとる。

開放毛管内で測定した融点は補正していない。

得られた個々の化合物はシルフォール（Ｓｉｌｕｆｏｌ
）ＵＶ ２５４のプレート上で系（Ａ）クロロホルム：
エタノール：酢酸エチル：酢酸：水（８５：５：８：２
：０．２５）；（Ｂ）クロロホルム：エタノール：ｎ−
ブタノール：酢酸エチル：水（１０：６：４：３：１）
；（Ｃ）クロロホルム：メタノール：水（４０：３０：
５）；（Ｄ）ブタノール：酢酸：水（４：１：１）；（
Ｅ）酢酸エチル：ピリジン：酢酸：水（５：５：１：３
）中におけるＴＬＣ（薄層クロマトグラフィー）によっ
て、並びに１Ｎもしくは５Ｎ酢酸中濾紙ＦＮ１６上の電
気泳動法によって調べた。

ヒスチジンについては電気泳動法による移動度ＥＨｉｓ
を調べた。

物質のスポットは紫外線におけるクロマトグラムを調査
して並びにニンヒドリンもしくは塩素−ベンジジン試薬
を用いて噴霧して検出した。

全ての化合物に関する元素分析のデータはＣ，Ｎ、Ｈの
計算含量と十分に一致していた。

化合物を同定するのに６０ｍ±のＰＭＲを用いた。

シグナルの化学シフト、形及び強度は予想の構造に相当
していた。

アミノ酸分析はペプチド加水分解後に脱気した管中にお
いて、１１０℃２４時間で実施した。

（ａ） ベンジルオキシカルボニルプロリルグリシン
のｔ−ブチルエステル（Ｅ８−９） ベンジルオキシカルボニルプロリン１０．０ｇ（４０ｍ
ｍｏｌ）をジメチルホルムアミド５０ｍ１に溶かし、
Ｎ−メチルモルホリン４．４５ｍｌ（４０ｍ ｍｏｌ）
並びにジメチルホルムアミド１０ｍ１中のイソブチルク
ロロカーボネート５．３０ｍｌ（４０ｍ ｍｏｌ）の冷
溶液を一１５℃で滴加した。

次いで、この反応混液を一１５℃で３０分間攪拌し、そ
してジメチル・ホルムアミド１００ｍ１中のグリシンｔ
−ブチルエステルの亜燐酸塩１０．６ｇ（５０ｍ ｍｏ
ｌ）の冷懸濁液及びＮ−メチルモルホリン０．５６ｍｌ
（５０ｍ ｍｏｌ）を加えた。

この混液を一１５℃で１５時間攪拌し、次に反応容器を
一１０℃で１５時間保った。

溶媒を真空蒸発させ、この残渣を酢酸エチル１００ｍ１
及び水１００ｍ１の混液に溶かし、酢酸エチル層を１０
％炭酸水素カリウム溶液及び１０％硫酸水素カリウム溶
液及び水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し
、そして蒸発した。

得られた油はエーテルとヘキサンの（１：１）混液で処
理して結晶した。

収量：９．２ｇ（６３％） 融点 ７１−７２℃ 〔α〕２０Ｄ＝−４９，０゜ （Ｃ＝２、ジメチルホルムアミド） Ｒｆ＝０．５５（Ａ）；０．６４（Ｂ）；０．６８（Ｃ
）（ｂ）プロリルグリシンのｔ−ブチルエステル（Ｆ８
−９） パラジウム黒の存在下エタノール５０ｍ１の溶液中で前
記工程（ａ）で得たベンジルオキシカルボニルプロリル
グリシンのｔ−ブチルエステル５．０ｇ（１３，８ｍ
ｍｏｌ）を５時間水和した。

触媒を濾過した後、溶媒を蒸発させ、この残渣を乾燥エ
ステルとヘキサンの１：２混液に溶かし、そして再び蒸
発したところ、結晶化が起った。

蒸発完了後無色の結晶物質を得た。収量 ２．８ｇ（８
９％） 融点 ５６−５７℃ 〔α〕２０Ｄ＝−３８，６゜ （Ｃ＝１、ジメチルホルムアミド） ＥＨｉｓ＝０．８３（１Ｎ酢酸 Ｒｆ＝０．２８（Ｃ）；０．１５（Ｄ）；０．７０（Ｅ
）（ｃ）α−ベンジルオキシカルボニル−ε−（ｔ−ブ
トキシカルボニル）ニトロアルギニルリジンのｐ−ニト
ロフェニルエステル（Ｃ５−６）−１５°においてジメ
チルホルムアミド１００ｍ１中のｔ−ブトキシカルボニ
ルニトロアルギニン１２．８ｇ（３４，３ｍ ｍｏｌ）
及びＮ−メチルモルホリン３．８０ｍ１（３４，３ｍ
ｍｏｌ）の溶液にイソブチルクロロカーボネート４．６
３ｍ１（３４，３ｍ ｍｏｌ）を加えた。

次に、α−ベンジルオ）キシカルボニルリジンのｐ−ニ
トロフェニルエステルのクロロヒトレート粉末１０．０
ｇ（２２，８ｍ ｍｏｌ）を加えた。

この混合物を一１０℃で３０分間攪拌し、次にジメチル
ホルムアミド５０ｍ１中のＮ−メチルモルホリン２．５
５ｍ１（２２，８ｍ ｍｏｌ）の溶液を２時間の間滴加
した。

−２０℃で３０分間攪拌した後、β−ジメチルアミノエ
チルアミン１．３３ｍ１（１２，１ｍ ｍｏｌ）を加え
た。

３０分間攪拌した後、溶媒を蒸発し、この残渣を酢酸エ
チル１００ｍ１及び水１００ｍ１の混液に溶かした。

酢酸エチル層を１０％炭酸水素カリウム溶液及び１０％
硫酸水素カリウム溶液（２回）並びに水で洗浄した。

この層を硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、そして蒸
発させた。

黄色がかった無定形物質を得た。

収量 １３．５ｇ（８５，５％） Ｒｆ＝０．８０（Ａ）；０．９０（Ｄ） 〔α〕２０Ｄ＝−２０，９゜ （Ｃ＝１、ジメチルホルムアミド） （ｄ） α−ベルジルオキシカルボニル−ε−（ｔブ
チルオキシカルボニルニトロアルギニルリジルプロリン
（Ｄ５−７） 上記工程（ｃ）で得たα−ベンジルオキシカルボニル−
ε−（ｔ−ブトキシカルボニル）ニトロアルギニルリジ
ンのｐ−ニトロフェニルエステル１０．０ｇ（１４，２
ｍ ｍｏｌ）をジメチルホルムアミド１００ｍ１に溶か
し、微粉砕したプロリン２．４６ｇ（２１，４ｍｍｏｌ
）の及びＮ−メチルモルホリン１．６６ｍ１（１，４９
ｍ ｍｏｌ）を加え、そしてマグネテイツクスターラ上
で２０時間攪拌した。

次いで溶媒を蒸発させ、この残渣を酢酸エチル１００ｍ
１及び１０％硫酸水素カリウム溶液１００ｍ１の混液に
溶かし、水層を分離し、そして酢酸エチル層を１０％硫
酸水素カリウム溶液で、そして次に１０％炭酸水素カリ
ウム溶液で抽出した。

水−炭酸水素塩層を分離し、過剰の１０％硫酸水素カリ
ウム溶液で中和し、そしてｐＨ２にして酢酸エチル（２
×１００ｍ１）で抽出した。

この抽出液を硫酸マグネシウムで乾燥し、沖過し、そし
て蒸発した。

無色の無定形物質を得た。

収量 ７．９ｇ（８２，０％） 〔α〕２０Ｄ＝２３．１゜ （Ｃ＝１、ジメチルホルムアミド） Ｒｆ＝０．５４（Ａ）；０．８１（Ｄ） （ｅ） α−ベンジルオキシカルボニル−ε−にトロ
アルギニル）−リジルプロリンのトリフルオロアセテー
ト（Ｅ５−７） ０℃に冷却しながらトリフルオロ酢酸及び塩化メチレン
の（１：１）混液に上記工程（ｄ）で得たα−ベンジル
オキシカルボニル−ε−（ｔ−ブチルオキシカルボニル
ニトロアルギニル）−リジルプロリン５．０ｇ（７，３
７ｍｍｏｌ）を溶かし、次に２０分間室温に保ち、次い
で乾燥するまで室温で蒸発させた。

この残渣を乾燥エーテルと擦り合わせ、得られた固体物
質を濾過し、そして濾紙上で乾燥エーテルを用いて洗っ
た。

無色の無定形物質の収量は５．０ｇ（９８，％）であっ
た。

ＥＨｉｓ＝０．４９（５Ｎ酢酸） 〔α〕２０Ｄ＝１１．１゜ （Ｃ＝１、ジメチルホルムアミド） Ｒｆ＝０．５７（Ｃ）；０．７０（Ｅ） （ｆ） ｔ−ブトキシカルボニルフェニルアラニルグ
リシン（Ｃ１−２） ジメチルホルムアミド２００ｍ１及び水２０ｍ１の混液
中にｔ−ブトキシカルボニルフェニルアラニンのｐ−ニ
トロフェニルエステル６．４ｇ（１６，６ｍｍｏｌ）、
グリシン１．１３ｇ（１５ｍｍｏｌ）及びＮ−メチルモ
ルホリン１．６７ｍｌ（１５ｍｍｏｌ）を溶かした。

この溶液を２０時間室温に保ち、蒸発させ、そして残っ
た油は１０％炭酸水素カリウム水溶液８０ｍ１及び酢酸
エチル５０ｍ１の混液に溶かした。

酢酸エチル層を分離し、そして水層をエーテル（５０ｍ
ｌ）で抽出して過剰の１０％硫酸水素カリウム水溶液で
中和し、そしてｐＨ２にした。

得られた溶液を酢酸エチルで抽出しく５０ｍ１×２回）
、この抽出液を水洗（５０ｍｌ）し、そして無水硫酸マ
グネシウム上で乾燥し、濾過し、そして乾燥するまで蒸
発させた。

無色の結晶物質を得た。収量４．０ｇ（８２，７％）分
析するために、この物質を酢酸エチルから結晶化した。

融点１６５℃で分解。

〔α〕２０Ｄ＝−９，０°（Ｃ＝１、ジメチルホルムア
ミド） Ｒｆ＝０．８５（Ａ）；０．９０（Ｂ）；０．８８（Ｃ
）（ｇ） ｔ−ブトキシカルボニル−フェニルアラニル
グリシルプロリル−フェニルアラニンのｐ−ニトロベン
ジルエステル（Ｄｌ−４） 上記工程（ｆ）で得たｔ−ブトキシカルボニルフェニル
アラニルグリシン２．８０ｇ（８，７ミリモル）を乾燥
ジメチルホルムアミド５０ｍ１に溶かし、ペンタフルオ
ロフェノール１．８４ｇ（１０ｍｍｏｌ）を加え、−２
０℃に冷却し、そしてジシクロヘキシルカルボジイミド
１．９０ｇ（９，２ｍｍｏｌ）を導入し、次いで後者の
物質が溶けるまで振盪し、そして０℃で３０分間保った
。

次いでプロリルフェニルアラニンのｐ−ニトロベンジル
エステルの臭化水素酸塩（Ｃ３−４）４．１５ｇ（８，
７ｍｍｏｌ）〔Ａ、Ｐ、Ｐａｖａｒｓ、Ｇ、Ｉ。

Ｃｈｉｐｅｎｓ、“Ｚｈ、 ０ｂｓｈｃｈ、Ｋｈｉｍ、
”４１゜４５９（１９７１）〕及び〕〕〕Ｎ−メチルモ
ルホリン０．９７ｍ１８ｍｍｏｌ）を加えた。

この混液を室温に保ち、媒体のｐＨを監視した（湿った
指示紙上に溶液−滴を置いた。

反応の際ｐＨを８に保つためにＮ−メチルモルホリンを
満願した。

アミン成分を導入した３時間後、この混液を蒸発し、こ
の残渣に塩化メチレン１００ｍ１を加え、濾過した。

この濾液を１０％炭酸水素カリウム溶液、１０％硫酸水
素カリウム溶液及び水で逐次洗浄し、次に無水硫酸マグ
ネシウム上で乾燥し、濾過し、そして蒸発した。

得られた油は乾燥エーテルと擦り合わせて結晶化した。

収量 ５．４ｇ（８８，４％） 融点 １２５−１５６℃ 〔α〕２０Ｄ＝−４５，６゜ （Ｃ＝１、ジメチルホルムアミド） Ｒｆ＝０．８８（Ａ）；０．９１（Ｂ）；０．９１（Ｄ
）（ｈ） ｔ−ブトキシカルボニルフェニルアラニル
グリシルプロリルフェニルアラニンのヒドラジド（Ｅｌ
−４） 上記工程（ｇ）で得られたｔ−ブトキシカルボニル−フ
ェニルアラニルグリシルプロリル−フェニルアラニンの
ｐ−ニトロベンジルエステル３．０ｇ（４，２６ｍｍｏ
ｌ）及びヒドラジンヒトレート１．０ｍｌをエタノール
３０ｍ１中７０℃で１時間加熱し、次いで濾過し、この
濾液に水５０ｍ１を加え、そして−１０℃で２０時間保
ち、濾過し、そして濾紙上の結晶を５０％水性エタノー
ル３０ｍ１で、次いで水を用いてこの濾液が中性の反応
を示すまで洗った。

Ｐ２Ｏ５上で乾燥した。収量 ２．３０ｇ（９２，８％
） 融点 １４０−１６０℃ 〔α〕２０Ｄ＝−５９，８゜ （Ｃ＝１、ジメチルホルムアミド） Ｒｆ＝０．９３（Ａ）；０．９２（Ｂ）；０．９１（Ｄ
）（ｉ） α−ベンジルオキシカルボニル−ε−（ｔ
−ブトキシカルボニルフェニルアラニルグリシルプロリ
ルフェニルアラニルニトロアルギニル）リジルプロリン
（Ｆｌ−７） 上記工程（ｈ）で得たｔ−ブトキシカルボニルフェニル
アラニルグリシルプロリルフェニルアラニンのヒドラジ
ド２．１ｇ（３，６２ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミ
ド５０ｍ１に溶かし、−３０℃に冷却し、そして−７０
℃に冷却した、テトラヒドロフラン中の乾燥塩化水素の
４．５Ｎ溶液３．５ｍ１（１５，７ｍ ｍｏｌ）及び酢
酸エチル２０ｍ１の混液を攪拌しながら添加した。

次いで、冷却した酢酸エチル１０ｍ１中の亜硝酸ｔ−ブ
チル０．４５ｍ１（３，８７ｍｍｏｌ）の溶液を一３０
℃で満願した。

この混液を一２５℃で３０分間保持し、次にＮ−メチル
モルホリン１．７６ｍ１（１５，８ｍｍｏｌ）を加え、
次にジメチルホルムアミド５０ｍ１中の（前記工程（ｅ
）で得た）α−ベンジルオキシカルボニル−ε−にトロ
アルギニル）−リジルプロリンのトリフルオロアセテー
ト２．６８ｇ（３，８７ｍｍｏｌ）及びＮ−メチルモル
ホリン０．４４ｍ１の溶液を追加した。

この混合物を一１０℃で３日間保ち、蒸発させ、この残
渣を塩化メチレン１００ｍ１と水１００ｍ１との混液に
溶かした。

この塩化メチレンの層を分別し、次に１０％炭酸水素カ
リウム溶液、１０％硫酸水素カリウム溶液及び水（１０
０ｍｌだけ）で順次洗浄し、無水硫酸マグネシウム上で
乾燥し、濾過し、そして蒸発させた。

得られた油はエーテルと酢酸エチルとの１：１混液で擦
り合わせて結晶化させた。

収量 ３．５０ｇ（８５，８％） 融点 １４０−１７７℃ 〔α〕２０Ｄ＝−４４，１゜ （Ｃ＝１、ジメチルホルムアミド） Ｒｆ＝０．５３（Ａ）；０．８４（Ｂ）；０．８７（Ｄ
）（ｊ） α−ベンジルオキシカルボニル−ε−（ｔ
−ブトキシカルボニルフェニルアラニルグリシルプロリ
ルフェニルアラニルニトロアルギニル）リジルプロリル
プロリルグリシンのｔ−ブチルエステル（Ｇ１−９） 上記工程（ｉ）で得られたα−ベンジルオキシカルボニ
ル−ε−（ｔ−ブトキシカルボニルフェニルアラニルグ
リシルプロリルフェニルアラニルニトロアルギニル）リ
ジルプロリン２．７０ｇ２．４０ｍｍｏｌ）をジメチル
ホルムアミド４０ｍ１に溶かし、０℃に冷却し、そして
ジシクロヘキシルカルボジイミド−ペンタフルオロフェ
ノールコンプレックス“コンプレックス”（Ｊ。

Ｋｏｖａｃｓ Ｌ、Ｋ１５ｆａｌｕｄｙ、Ｍ、Ｑ、Ｃｅ
ｐｒｉｎｉ 「Ｊ。

Ａｍ、Ｃｈｅｍ、Ｓｏｃ、」８９，１８３．（１９６７
））２．１９ｇ（２，８９ｍｍｏｌ）及びプロリルグリ
シンのＬ−ブチルエステル（Ｆ８−９）１．１ｇ（４，
８ｍｍｏｌ）を加えた。

この混液を室温に２０時間保ち、蒸発させ、この残渣を
塩化メチレン５０ｍ１に溶かし、濾過し、この濾液を１
０％硫酸水素カリウム溶液５０ｍ１及び水５０ｍ１で洗
った。

無水硫酸マグネシウム上で乾燥し、濾過し、蒸発した。

この残渣を最少限の容量の塩化メチレンに２回溶かし、
そしてエーテルで沈殿させた。

収量 ２．８ｇ（８７，２％） 融点 １５．０−１９３℃（分解） 〔α〕２０Ｄ＝−６０．３゜ （Ｃ＝１、ジメチルホルムアミド） Ｒｆ＝０．５７（Ａ）；０．６８（Ｂ）；０．６０（Ｄ
）（ｋ） α−ベンジルオキシカルボニル−ε−（フ
ェニルアラニルグリシルプロリルフェニルアラニルニト
ロアルギニル）リジルプロリルプロリルグリシンの塩酸
塩（Ｈｌ−９） 上記工程（ｊ）で得られたα−ベンジルオキシカルボニ
ル−ε−（ｔ−ブトキシカルボニルフェニルアラニルグ
リシルプロリルフェニルアラニルニトロアルギニル）リ
ジルプロリルプロリルグリシンのＬ−ブチルエステル１
．８ｇ（１，３４６ｍｍｏｌ）をトリフルオロ酢酸及び
塩化メチレンの（１：１）混液２０ｍ１に０℃で溶かし
、室温で２０分間保持し、そして０℃で蒸発させた。

この残渣を乾燥エーテル５０ｍ１と擦り合わせて結晶化
させ、乾燥ジメチルホルムアミド１０ｍ１に溶かし、テ
トラヒドロフラン中の無水塩化水素の４．５Ｎ溶液０．
３３ｍ１（１，５ｍ ｍｏｌ）を加え、そして乾燥エー
テル１００ｍ１で沈殿させた。

収量 １．５５ｇ（９５％） 〔α〕２０Ｄ＝−７７，８゜ 融点 １４０−１９２℃ Ｒｆ＝０．７３（Ｃ）；０．７４（Ｅ） （１） シクロ−〔α−ベンジルオキシカルボニル−
ε−（フェニルアラニルグリシルプロリルフェニルアラ
ニルニトロアルギニル）リジルプロリルプロリルグリシ
ル〕（１１−９） 上記工程（ｋ）で得たα−ベンジルオキシカルボニル−
ε−（フェニルアラニルグリシルプロリルフェニルアラ
ニルニトロアルギニル）リジルプロリルプロリルグリシ
ンの塩酸塩１．１ｇ（０，９１ｍｍｏｌ）をジメチルホ
ルムアミド２１（使用直前に酸化バリウム上で乾燥し、
そしてニンヒドリン上で蒸留する）に溶かし、そして乾
燥アルゴンの雰囲気中０℃で１．５ｇ（１，９８ｍｍｏ
ｌ）のジシクロヘキシルカルボジイミド−ペンタフルオ
ロフェノールコンプレックス（１：３）“コンプレック
スＦ”（Ｊ、Ｋｏｖａｃｓ、Ｌ。

Ｋ１５ｆａｌｕｄｙ、Ｍ、Ｑ、Ｃｅｐｒｉｎｉ、「Ｊ、
Ａｍ。

Ｃｈｅｍ、Ｓｏｃ、」８９，１８３（１９６７））を攪
拌しながら加えた。

次いで、室温においてアルゴン雰囲気中攪拌しながら、
ジメチルホルムアミド３００ｍ１に溶かしたトリエチル
アミン０．１９ｍ１（１，３８ｍｍｏｌ）を６時間で加
えた。

得られた混合物を室温で２日間保ち、そして２８℃で蒸
発させた。

残留油を乾燥エーテルと擦り合わせることによって結晶
化させ、濾過し、濾紙上の残渣をエーテルで洗い、次い
で水洗した。

得られた生成物は系（Ｂ）中でＴＬＣにかけた。Ｒｆ＝
０．６の物質は所要のシクロペプチドと仮定された（主
要環化生成物の一つがクロマトグラフィーでは移動性で
あり、紫外線及びベンジン試薬で検出された）。

環化混合物はカラム（２×１００ｃｍ）上、シリカゲル
（平均粒子サイズ２０μでチェコスロバキアの ケマポ
ール（Ｃｈｅｍａｐｏｌ）”の５／４０μシリカゲルの
フラクションから得た）で予備精製した。

溶離剤としてクロロホルム：エタノール：ｎ−ブタノー
ル：酢酸エチルの１０：６：４：３の系を用い、ジシク
ロヘキシル尿素及び沢山のペプチド種の物質を分離した
。

前記仮定したシクロペプチドを含むフラクションはカラ
ム（３×２５０ｃｍ）上で系（Ｂ）を溶離剤として用い
シリカゲル（平均粒子サイズ２０μ）でも一度精製し、
２０ｍ１宛のフラクションを集めて２８０ｎｍ（“Ｕｖ
ｉｃｏｒｄ ■”）での吸収を記録した。

フラクション５５ないし６６を蒸発させ、この残渣をエ
ーテルで処理した。

結晶物質１０２ｍｇ（９，７３％）を得た。

融点１６３−１６５℃クロマトグラフィーでは純粋であ
った。

（“メルク”プレート上で６種の系のＴＬＣで試験した
）。

Ｒｆ＝０．４７（Ｂ） 分子量： 測定値１．０２４（尿素融解を利用して凝固点降下法で
測定） （Ａ、Ｙａ、Ｂｅｒｌｉｎ、“Ｌａｂｏｒａ−
ｔｏｒｙ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ
Ｃｈｅｍｉ−ｓｔｒｙ”、Ｍ、、Ｇｏｓｋｈｉｍｉｚ
ｄａｔ、１９６３゜３４８（ロシア語）） 計算値 １１６３．３１３ 〔α〕２０Ｄ＝−６４．１ （Ｃ＝０．５、ジメチルホルムアミド） Ｒｆ＝０．３７（Ａ）；０．４３（Ｂ）；０．８９（Ｃ
）；０．３７（Ｄ）；０．９６（Ｅ） （ｍ）シクロ−〔（ε−フェニルアラニルグリシルプロ
リルフェニルアラニルアルギニル）リジルプロリルプロ
リルグリシルジアセテート（シクロ〔（Ｎε１−Ｌ−リ
ジン−６−グリシン）ブラデイキニン〕（Ｊｌ−９） 酢酸５ｍｌに上記工程（１）で得られたシクロ−〔α−
ベンジルオキシカルボニル−ε−（フェニルアラニルグ
リシルプロリルフェニルアラニルニトロアルギニル）リ
ジルプロリルプロリルグリシル〕５０ｍｇ（０，０４３
ｍｍｏｌ）を溶かし、そしてパラジウム黒の存在下２０
時間水和した。

次いでこの触媒を濾去し、そしてこの濾液を凍結乾燥し
た。

この残渣は水１０ｍ１から凍結乾燥して、次にも一度水
１０ｍ１に溶かし、膜濾過器“シンポア（Ｓｙｎｐｏｒ
ｅ）”を通して濾過し、そして凍結乾燥した。

白色の脆い粉末を得た。クロマトグラフィーでは均質で
あった。

〔α〕２０Ｄ＝−７６° （Ｃ＝０．６５．Ｈ２Ｏ）収
量 ４５．７ｍｇ（９６％） ＲＨｉｓ＝０．６５（ＩＮ酢酸）、Ｒｆ＝０．６９（Ｅ
）アミノ酸分析ニ ブロリン２．８３、グリシン１．９０、フェニルアラニ
ン１．９３、リジン１．００、アルギニン１．２３ 本則のトリプシン分離（Ｔ、Ｄｅｖｅｎａｉ、Ｙａ。

Ｇｅｒｇｅｉ、“Ａｍ１ｎｏ ａｃｉｄｓ、ｐｅｐｔｉ
ｄｅｓ。

ｐｒｏｔｅｉｎｓ”Ｍｌ、“Ｍｉｒ、”、１９７６１６
８（ロシア語））では、ペプチドの環状構造を立証する
物質がただ１つ（ＥＨｉｓ＝０．８２ＩＮ酢酸）生成さ
れていた。

麻酔したラットにおけるシクロ−〔（Ｎε−１−Ｌ−リ
ジン、６−グリシン）ブラデイキニン〕の血圧降下作用
の試験ではＢＣＡはブラデイキニンとは違って著しく延
長した効果を有することが証明された。

ＢＣＡの限界濃度は５μｇ／ｋｇ（ブラデイキニンでは
０．５μｇ／ｋｇ）であった。

ＢＣＡ５０μｇ／ｋｇの濃度において、ブラデイキニン
と比較すると等圧効果を有するが、その作用はかなり持
続する。

ＢＣＡの場合、血圧は１−２時間の間３０−４０ｍｍ低
下して、引続いて（投与開始時から２〜３時間）当初の
値の４０−５０％を回復する。

摘出したラットの子宮及び回腸における試験管内実験で
（Ｊ、Ｍ、ｖａｎ Ｒｏｓｓｕｍ、“Ａｒｃｈ、Ｉｎｔ
、Ｐｈａ−ｒｍａｃｏｄｙｎ、”１４３，２９９（１９
６３））、１Ｏ−１０−１Ｏ−５／ｌ濃度のＢＣＡは天
然のブラデイキニンに特有の趨筋性効果は有していない
ことが確証された。

これらの濃度ではＢＣＡはブラデイキニンの趨筋活性に
影響を及ぼさない。

血管透過性の増大効果（Ｎ、１５ｏｋａｎｅ「ＴｈｅＯ
ｃｈａｎｏｍｉｚｕ Ｍｅｄ、Ｊ、」１３，３６２（１
９６５））はブラデイキニンよりＢＣＡにおける作用の
方が低い。

この反応はそれぞれ１ｍｇ／ｋｇ及び２５μｇ／ｋｇの
濃度で比較できる。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ ブラデイキニンのＮ末端アルニギンをＬ−リジンで
   置換し、かつブラディキニンの６位のセリンをグリシン
   で置換し、残りのアルギニンのカルボニル基及び前記リ
   ジンのε−アミン基によって形成したペプチド結合で閉
   環してなる下記式を有するシクロ−〔（Ｎ−１−Ｌ−リ
   ジン、６−グリシン）−ブラデイキニン〕であるブラデ
   ィキニン環状類似体： 式 （上式中、Ｌｙｓはリジン残基、Ｐｒｏはプロリン残基
   、Ｇｌｙはグリシン残基、ＰｈｅはＬ−フェニルアラニ
   ン残基、ＡｒｇはＬ−アルギニン残基を示す）。