JPS5924998B2 - 抗生物質ｓｕｍ−３およびその製造法 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は新抗性物質ＳＵＭ−３およびその無毒性酸付加
塩ならびにその製造法に関する。

抗性物質ＳＵＭ−３の無毒性酸付加塩はＳＵＭ−３、１
分子と薬理的に許容される無毒性の酸１〜４当量との反
応により生成されるモノ、ジ、トリ、テトラ塩を意味す
る。該無毒性の酸としては塩酸、臭化水素酸、ヨク化水
素酸、硫酸、リン酸、炭酸、硝酸などの無機酸、酢酸、
フマル酸、リンゴ酸、クエン酸、マンデル酸、アスコル
ビン酸、酒石酸、コハク酸などの有機酸があげられる。
本発明者らは、種々の微生物を用いて抗性物質の生産性
について研究した。

その結果ミクロモノスポラ属に属するある種の微生物の
培養物中に既知の抗性物質とは種々のクロマトグラフィ
ーに於る挙動が異なる抗性物質が存在することを見い出
した。本発明者らは該物質を該培養物中より精製単離し
、その理化学的性状を調べた結果、該物質が、式 ＣＨ２ＮＨＣＨ３ＮＨＣＨ３ ウ。

。。□二。Ｎ−。

Ｎ□ＯＨで示される構造を有し、かつ該物質が新規な抗
生物質であることをみいだし、これを抗生物質フ ＳＵ
Ｍ−３と命名した。

以下、本抗生物質ＳＵＭ−３ならびにその製造法につい
て詳細に説明する。

本発明にかかわる抗生物質ＳＵＭ−３の遊離塩基の理化
学的性状は次の通りである。

５（１）塩基性の白色粉末 （２）元素分析値 Ｃ：４９．５１％ 本物質の水溶液の紫外部吸収スペクトルは２２０３６０
ｎｍの間で特徴的な吸収極大を示さず、末端吸収を示す
のみである。

（６）比旋光度 （７）本物質は、水にきわめて易溶、メタノールにも溶
け、エタノール、アセトンにもやや溶けるが、クロロホ
ルム、ベンゼン、酢酸エチル、酢酸ブチル、エーテル、
ブタノール、石油エーテル、ｎ−ヘキサンなどの有機溶
媒には不溶である。

（８）呈色反応： ニンヒドリン反応：陽性 過マンガン酸カリ反応：陽性 エルソンモルガン反応：陰性 ビウレツト反応：陰性 （９）マススベクトルリ 本物質のマススペクトルは次のような分子イオンおよび
フラグメントイオンを与える。

ｍ／Ｅ４６４（Ｍ＋），４３４，４０２−，３５１，３
４７，３３４，３２３，３０６，２９０，２８９，２７
２，１９２，１６０，１４３０（１０）本物質のプロト
ン該磁気共鳴スペクトル（重水）（ＰＤｌｌ．３）は次
の値を示す。

δ１．２０（３Ｈ，ｓ），１．２０〜１．９０（５Ｈ，
ｍ），１．９０〜２．２１（１Ｈ，ｍ），２．３１（３
Ｈ，ｓ），２．５０（３Ｈ，ｓ），２．５８（１Ｈ，ｄ
Ｊ＝１０．８Ｈｚ），２．６０（２Ｈ，ｄＪ＝６．６Ｈ
ｚ），２．６４〜３．１０（２Ｈ，ｍ），３．３０（１
Ｈ，ｄＪ＝１２．３Ｈｚ），３．３１〜３．６２（３Ｈ
，ｍ），３．７５（１Ｈ，ｄ，ｄＪ＝３．９，１０．８
Ｈｚ），４．０５（１Ｈ，ｄＪ二１２．２Ｈｚ），３．
６２〜４．１１（２Ｈ，ｍ），５．１５（１Ｈ，ｄＪ＝
３．７Ｈｚ），５．２７（１・Ｈ，ｄＪ＝３．９Ｈｚ）
（１１）本物質の炭素核磁気共鳴スペクトルは次の値を
示す（δＰｐｍ）。

（１２）本物質の各種展開剤によるペーパークロマトグ
ラフイ一および薄層クロマトグラフイ一のＲｆ値は、第
１〜第３表の通りである。

なお、既知抗生物質との比較のために、近縁と思われる
ものを選び、そのもののＲｆ値を併記する。上昇式ペー
パークロマトグラフイ一（ペーパーとして東洋淵紙煮５
１を使用し２８℃で展開）での抗生物質ＳＵＭ−３のＲ
ｆ値シリカゲル薄層クロマトグラフイ一〔Ｅ．Ｍｅ−Ｒ
ｃｋ製 ＫｉｅｓｅｌＧｅｌ６Ｏ（室温で行う。

展開時間３時間）〕でのＲｆ値※ 展開剤１：１０％酢
酸アンモニウム、メタノール（１：１）（容量比）展開
剤：クロロホルム、メタノール、濃アンモニア水（１：
１：１）（容量比）の下層部※※ 特開昭５４−５９２
０２号公報に記載された抗生物質※※※ 原点からの該物質の距離 ＲｆＣｌ値＝ １ 原点からのジエンタマイシンＣ１の距離※※※※
特開昭５３−５６６４０号公報に記載された抗生物質
〔第 ３表〕 展開剤として、クロロホルム、メタノール、１７％アン
モニア水（２：１：１）（容量比）の下層部を用いた上
昇式ペーパークロマトグラフイ一（室温で行う。

展開時間１２時間）でのＲｆ値※ 特開昭５３−５６６
４０号公報に記載された抗生物質※※ 特開昭５３−９
０２４１号公報に記載された抗生物質※※※ 特開昭５
３−１４４５４７号公報に記載された抗生物質※※※※
特開昭５４−１９９３９号公報に記載された抗生物質
※※※※※ 特開昭５４−５９２０２号公報に記載され
た抗生物質次に抗生物質ＳＵＭ−３の抗菌スペクトル（
ＭＩＣγ／ａ）を第４表に示す。

測定はＰＨ７．２の培地を使用し、寒天稀釈法による。
培地はハード・インフユージヨン・プロス（ＤｉｆｃＯ
）を用いた。※ ジエンタマイソンアセチルトランスフ
エラーゼタイプＩを産生※※ ジエンタマイシンヌタレ
オチジルトランスフエラーゼを産生※※※ カナマイシ
ンアセチルトランスフエラーゼを産生このように抗生物
質ＳＵＭ−３は広範囲のグラム陽性菌や陰性菌に対して
きわめて強い抗菌力を有している。

その広範囲で強力な抗菌性の中でも、従来有効な抗生物
質が少ないとされてきたプロテウス属やブシユードモナ
ス属の菌に対してもきわめて有効であることは著しい特
徴である。またいろいろな既知抗性物質に耐性なエツシ
エリヒア・コリに対しても強力な抗菌力を有している。
以上述べたようなきわめてすぐれた抗菌性を有する抗性
物質ＳＵＭ−３は、抗菌性として医薬上有用である。

さらに抗生物質ＳＵＭ−３は実験室用ガラス器具および
装置の清掃など、衛生上の目的で洗滌剤に用いることも
できる。つぎに本物質を既知の抗生物質と比較してみる
。

ミウロモノスポラ属菌の生産する水溶性、塩基性で且つ
広範囲の抗菌スペクトルを有する抗生物質としては、ジ
エンタマイシンＣＯｍｐｌｅｘ（Ｍ．Ｊ．Ｗｅｉｎｓｔ
ｅｉｎらＡｎｔｉｍｉｃｒＯｂ．Ａｇ．ＣｈｅｍＯｔｈ
ｅｒ．，ｌ９６３，ｌおよびＤ．Ｊ．ＣＯＯｐｅｒらＪ
・Ｉｎｆｅｃｔ．Ｄｉｓｌｌ９，３４２，ｌ９６９，Ｊ
．Ａ．ＷｅｉｔｚらＡｎｔｉｍｉｃｒＯｂ．Ａｇ．Ｃｈ
ｅｍＯｔｈｅｒ．，２，４６４，ｌ９７２）、アンチバ
イオチツク煮４６０（特公昭４６−１６２５３号公報）
、シソマイシン（Ｍ．Ｊ．Ｗｅｉｎｓｔｅｉｎら、Ｊ．
ＡｎｔｉｂｉＯｔｉｃｓ，２３，５５ｌ，５５５，５５
９，ｌ９７Ｏ）、ペルダマイシン（Ｍ．Ｊ．Ｗｅｉｎｓ
ｔｅｌｎら、ＡｎｔｉｍｉｃＯｒｂ．Ａｇ．ＣｈｅｍＯ
ｔｈｅｒ．，７，２４６，ｌ９７５）、アンチバイオチ
ツクＧ−５２（Ｊ．Ａ．Ｍａｒｑｕｅｚら、Ｊ．Ａｎｔ
ｉｂｌＯｔｉｃｓ，２４，４８３，ｌ９７６、およびＰ
．Ｊ．Ｌ．Ｄａｎｉｅｌｓら、Ｊ．ＡｎｔｉｂＯｔｉｃ
ｓ，２４，４８８，ｌ９７６），ＸＫ一６２−２（特公
昭５０−３９１５５号公報）、ホーテイマイシンＡ（特
公昭５１−４５６７５号公報）、ホーテイマイシンＣ（
特開昭５２−１８８８８号公報）、ホーテイマイシンＤ
（特開昭５３−５６６４０号公報に記載），ＸＫ−６２
−３（特開昭５３−１４４５４７号公報に記載），ＸＫ
−６２−４（特願昭５２−８３０３８号明細書に記載）
，ＳＵ−２（特開昭５４−５９２０２号公報に記載）な
どの抗生物質がある。しかしながら第１，２および３表
に示されるように、ペーパークロマトグラフイ一及び薄
層クロマトグラフイ一の挙動に於て抗生物質ＳＵＭ−３
は上記のいずれとも異つている。さらにミクロモノスポ
ラ属に属する微主物以外の放射菌が生産する水溶性、塩
基性で且つ広範囲の抗菌スペクトルを有する抗生物質と
して、ストレプトマイシン、リボスタマイシン、リビド
マイシン、ネオマイシン、カナマイシン、パロモマイシ
ン、ネブラマイシンなどがあげられるが、抗性物質ＳＵ
Ｍ−３は第３表から明らかなのごとく、Ｒｆ値において
これらの抗生物質とは区別される。さらに、ＰＭＲやＣ
ＭＲｌマススペクトルのデータから明らかになつた抗生
物質ＳＵＭ−３の化学構造（前記）と同じ構造をもつ物
質は既知物質の中からは見出すことはできず、以上のこ
とから抗生物質ＳＵＭ−３は新規な抗性物質と考えられ
る。

次に本発明における抗生物質ＳＵＭ−３の製造法につい
て説明する。

抗生物質ＳＵＭ−３はミクロモノスポラ属に属する抗生
物質ＳＵＭ−３生産性菌株を栄養培地に培養し、培養物
中に抗性物質ＳＵＭ−３を生成、蓄積せしめ、該培養物
から該抗生物質を採取することによつて得ることができ
る。

本発明において利用される微生物としては、ミクロモノ
スポラ属に属する抗生物質ＳＵＭ−３生産菌〔例えば、
ミクロモノスボラ・サガミエンシスＳＵ−２（微工研菌
寄４２３０号），（ＮＲＲＬｌｌ，ｌ８２）（特開昭５
４−５９２０２号公報に記載）〕があげられる。

この菌種の菌学的性質は特公昭５０−３９１５５号に記
載されている。抗生物質ＳＵＭ−３を製造するための培
養は次の方法により行なう。即ち本発明において用いる
微生物の培養においては通常の放射菌の培養法が一般に
用いられる。

培養のための栄養源としてはいろいろのものが用いられ
る。炭素源としてはブドウ糖、澱粉、デキストリン、マ
ンノース、フラグドーズ、シユークローズ、糖蜜などが
単独または組み合わせて用いられる。無機および有機窒
素源としては塩化アンモニウム、硫酸アンモニウム、尿
素、硝酸アンモニウム、硝酸ナトリウム、などがまた天
然窒素源としてはペプトン、肉工キズ、酵母工キズ、乾
燥酵母、コーン、スチープ・りカー、大豆粉、カザミノ
酸、ソリユブルベジタブル・プロテイン、綿実ガスなど
が単独または組み合せて用いられる。そのほか必要に応
じて食塩、塩化カリウム、炭酸カルシウム、燐酸塩など
の無機塩類を適当に加えるほか、使用菌の生育や抗生物
質ＳＵＭ−３の生産を促進する有機物や無機物を適当に
加えることができる。培養法としては、液体培養法、と
くに深部攪拌培養法がもつとも適している。

培養温度は２５〜４００，ｐＨは中性付近で培養するこ
とが望ましい。液体培養で通常１Ｅ１．ないし１２日間
培養を行うと抗生物質ＳＵＭ−３が培養液中に蓄積され
る。培養液中の生成量が最大に達したときに、培養を停
止し、培養液中より目的物を精製単離する。培養液から
の抗生物質ＳＵＭ−３の精製単離は微生物代謝産物を、
その培養液から単離するためにふつう用いられる分離・
精製の方法が利用される。

抗生物質ＳＵＭ−３は、前述の如く水溶性、塩基性物質
なので、いわゆる水溶性・塩基性抗生物質の精製によく
用いられる方法により精製を行うことができる。

すなわちカチオン交換樹脂による吸脱着法、セルロース
カラムクロマトグラフイ一，セフアデツクスＬＨ−２０
カラムによる吸脱着法、シリカゲルクロマトグラフイ一
，カーボンクロマトグラフイ一などの方法を適当に組み
合わせて行うことができる。また本物質の遊離塩基はア
セトンに溶けるが、硫酸塩は同溶媒に溶けにくいので、
この点を利用して本物質の遊離塩基または硫酸塩を単離
・精製することができる。次に培養液から抗生物質ＳＵ
Ｍ−３の精製・単離の一例を示す。

培養終了後、倍養液から固形物を除き、得られる培溶淵
液を、弱アルカリ性に調整した後、カチオン交換樹脂ア
ンバーライトＲＣ−５０（口ーム・アンド・ハース社製
、Ｕ．Ｓ．Ａ．）（ＮＨ４十型）に通して活性物質を吸
着し、水洗後２Ｎ−アンモニア水で活性物質を溶出する
。

活性区分を集め減圧濃縮後、弱アルカリ性に調整し、こ
れをアンバーライトＣＧ−５０タイプｌ（ローム・アン
ド・ハース社製、Ｕ．Ｓ．Ａ．）（ＮＨ４＋）型に通し
て活性物質を吸着せしめる。水洗後稀アンモニア水で活
性物質を溶出する。数個の微量成分が溶出された後、抗
生物質ＳＵＭ−３を含む活性区分が溶出されてくる。

抗生物質ＳＵＭ−３を含む活性区分を集め減圧下で濃縮
乾固して粗抗生物質ＳＵＭ−３の白色粉末を得る。つぎ
にこれを水に溶かし弱アルカリ性に調整し、バイオレツ
クス７０（バイオラットＬａｂ．製、Ｕ．Ｓ．Ａ．）に
通して吸着させた後、水洗後、稀アンモニア水で活性区
分を溶出する。数個の微量成分が溶出された後、抗生物
質ＳＵＭ−３が溶出されてくる。この区分を集めて減圧
濃縮し、残渣を少量の水に溶かし、凍結乾燥を行うこと
により精製された抗生物質ＳＵＭ−３を得ることができ
る。上記の精製工程中の活性区分（抗生物質ＳＵＭ一３
）の動向は、東洋Ｐ紙煮５１を用い上昇式ペーパークロ
マトグラフイ一によりチエツクする。

展開溶媒としては、クロロホルム、メタノール、１７％
アンモニア水（容量比２：１：１）の下層を用い、６〜
１６時間室温にて展開する。なお本発明化合物である抗
生物質ＳＵＭ−３は抗生物質ＸＫ−６２−２（サガミシ
ン特公昭５０一３９１５５号公報に記載）を原料として
実施例３に示す工程により化学的にも合成できる。

すなわち抗生物質ＸＫ−６２−２の１位のアミノ基以外
のアミノ基を保護した後に公知の手法を用いて１位のア
ミノ基を水酸基に変換し、アミノ保護基を除去する事に
より抗生物質ＳＵＭ−３を合成することができる。以下
に実施例によつて本発明の抗生物質ＳＵＭ３の製造法に
ついて具体的に説明するが、これらは単なる一例であつ
て何ら本発明を限定するものではない。

〔実施例 １〕 Ａ．ミクロモノスポラ・サガミエンシスＳＵ−２の培養
：種菌としてミクロモノスポラ・サガミエンシス（Ｍｉ
ｃｒＯｍＯｎＯｓｐＯｒａｓａｇａｍｉｅｎｓｉｓ）Ｓ
Ｕ−２（微工研菌寄第４２３０号ＮＲＲＬｌｌ，ｌ８２
）を用いた。

第１種培地としては、スタビローズＫ〔松谷化学（株）
製〕２％（Ｗ／）（以下同じ）、グルコース０，５％、
ペプトン０，５％、酵母工キズ０．５％、肉工キズ０．
３％、炭酸カルシウム０．２％（殺菌前ＰＨ８．Ｏ）の
培地を用いた。

種菌１白金耳を、大型試験管中１０ｄの上記培地に植菌
し、３０℃で３日間振盪培養する。この種培養液１０ｍ
１を２１バツフル付きエルレンマイヤーフラスコ中に入
つた３５０ｍ１の第２種培地に植菌する。第２種培地の
組成は第１種培地の組成と同じである。第２種培養は３
０℃で２日間振盪培養する。この種培養液１．５１（フ
ラスコ５本分）を３０１容量のジヤーフアーメンタ一中
の第３種倍地１５１に植菌し、３４℃で２４時間通気攪
拌方式（回転数２５０ｒｐｍ、通気量１５１／Ｍｌｎ）
により培養を行う。第３種培地の組成は第１種培地の組
成と同じである。最後にこの第３種培養液１５２を３０
０１容量のタンク中の発酵培地１５０１に植菌する。発
酵培地組成はスタビローズＫ４％、ソイビーンミール（
ＳＯｙｂｅａｎｍｅａｌ）１％、フアーマメデイア（Ｐ
ｈａｒｍａｍｅｄｉａ）（ＴｒａｄｅｒｓＯｉｌＭｉｌ
ＣＯｍｐａｎｙ製Ｕ．Ｓ．Ａ．）２％、大豆カゼイン０
．５％、燐酸２カリウム０．０２５％、硫酸マグネシウ
ム０．０５％、カルシウムフィチッ０．２％、コーンオ
イル（ＣＯｒｎＯｉｌ）０．１％、硫酸第１鉄０．０１
５％，Ｌ−グルタミン０．０００１％，Ｌ−シスチン０
．００５％，β−アラニン０．００５％、ニコチン酸０
．０００５％、パントテン酸カルシウム０，０００５％
、硫酸亜鉛（７水塩）０．０００５％、カリウム明ばん
（２４水塩）０．００１％、モリブデン酸アンモニウム
（４水塩）０．０２５％（殺菌前ＰＨ８．Ｏ）の培地を
用いた。この発酵は３０℃で３日間通気攪拌培養方式（
回転数１８０ｒｐｍ、通気量１５０１／Ｍｉｎ）により
行う。Ｂ．抗生物質ＳＵＭ−３の精製単離 前記培養終了後、培養液のＰＨを１２Ｎ一硫酸でＰＨ２
Ｏに調整し、８０℃で１０分間加熱撹拌する。

そののち淵過助剤としてラジオライト＋６００〔昭和化
学工業（株）製〕を２Ｋ７加え、菌体を淵別する。この
淵液をダイヤイオンＨＲＫ−２５（三菱化成製）（ＮＨ
誌型）１０１を充填したカラムに通し、流水液は捨てる
。水で樹脂を洗滌後２Ｎ−アンモニア水で溶出し、活性
物質のある画分を減圧下で３０１まで濃縮する。濃縮液
を６Ｎ塩酸でＰＨ８．Ｏに調整したのちアンバーライト
ＩＲＣ−５０（ＮＨ４＋型）４１を充填したカラムに通
し、水洗後、２Ｎ−アンモニア水で溶出し、活性区分を
減圧下で乾固する。残渣を水に溶かし、ＰＨ８．Ｏに調
整した後アンバーライトＣＧ−５０タイブＩ（ＮＨ４ｌ
型）２００Ｔｎ１を充填したカラムに通し、水洗後０．
２Ｍ一塩化アンモニウムを含む０．１Ｎアンモニア水に
て溶出する。始めに数個の微量成分が溶出されたあと活
性区分として本物質を含む活性区分が溶出されてくる。
この画分を集めて６Ｎ塩酸にてＰＨ７．８に調整後アン
バーライトＲＣ５Ｏ（ＮＨｊ型）５０ｍ１を充填したカ
ラムに通塔し、水洗後１Ｎ−アンモニア水で溶出する。
活性物質を含む区分を濃縮し、凍結乾燥を行なうと、粗
粉末５６．３Ｗ１ｆが得られた。これを少量の水に溶か
し、ＰＨ７．８に調整後、バイオレツクス７０（ＮＨ４
＋型）１０ｍ１を充填したカラムに通し、水洗後、０．
１Ｍ酢酸アンモニウムを含む０．０６Ｎ−アンモニア水
で溶出する。溶出画分を５ａずつ分取し、活性区分を前
述の方法にて検出し抗生物質ＳＵＭ−３に相当する画分
を集める。この画分を６Ｎ塩酸でＰＨ７．７に調整し、
アンバーライトＣＧ−５０タイプＩ（ＮＨ４＋型）１０
ｍ１を充填したカラムに通し、水洗後１−Ｎ′アンモニ
ア水で溶出し、活性区分を集めて減圧下で濃縮後、凍結
乾燥を行う抗生物質ＳＵＭ−３の遊離塩基５．５巧の精
製標品が得られた。

実施例 ２ 実施例１と同様に実施して得られた抗生物質ＳＵＭ−３
遊離塩基５巧を水２ＴＬ１に溶かし、０．０５Ｎ硫酸０
．９Ｔ１１を加える。

この溶液を凍結乾燥することにより抗生物質ＳＵＭ−３
硫酸塩の粉末７０７ｎｖが得られた。実施例 ３ 抗生物質ＳＵＭ−３の合成： Ａ．ｌ−Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル一２′，６′ジ一
Ｎ−ベンジルオキシカルボニルＸＫ−６２−２の調製：
２７，６′−ジ一Ｎ−ベンジルオキシカルボニルーＸＫ
−６２−２（特開昭５０−１０１３３６号公報に記載）
１．４９を２０ｍ１のテトラヒドロフランに溶解し、ｔ
−ブチル−Ｓ−４，６−ジメチルピリミジン−２−イル
チオカルボネート４８０巧を加え室温にて１８時間放置
した。

反応混合物を濃縮し、残渣に１０ｍ１のクロロホルムを
加えこれを溶解し、シリカゲル（Ｋｉｅｓｅ−１ｇｅ１
６０Ｅ．タルク社製以下シリカゲルは同一のものを使用
した。）８０９を充填した内径２，５？のカラムに通す
。溶出はクロロホルム−メタノール（１０：１容量比）
で行つた。２０ｄずつのフラクシヨンに集めフラクシヨ
ン６４〜９４を合せ溶媒を留去すると９６０ηの白色粉
末が得られた。

この粉末は下記の性質を示し、１−Ｎ−ｔ−ブトキシカ
ルボニル一２′，６′−ジ一Ｎ−ベンジルオキシカルボ
ニルＸＫ−６２−２と同定した。収率６０．３％００・
シリカゲル薄層クロマトグラフイ一（以下ＴＬＣと略す
）のＲｆ値（展開剤クロロホルムリメタノール：１４％
アスモニア水４：１：１の下層） ０．６６○核磁気共
鳴吸収スペクトル（メタノールＤ４） δ（Ｐｐｍ）１．１０（３Ｈ，ｓ），１．４３（９Ｈ，
ｓ），２．５３（３Ｈ，ｓ）２．９３（３Ｈ，ｓ），５
．０１（４Ｈ，ｓ），７．２７（５Ｈ，ｓ），７．３３
（５Ｈ，ｓ）Ｂ．３，２′，６′，３′Ｌテトラ−Ｎ−
ベンジルオキシカルボニルＸＫ−６２−２の調製：前記
Ａ工程によつて得られた、１−Ｎ−ｔ−ブトキシカルボ
ニル２１，６′−ジ一Ｎ−ベンジルオキシカルボニル一
ＸＫ−６２−２９００ｍｆを４５ｄのテトラヒドロフラ
ンに溶解し、室温にて６８０Ｗ９（２，５倍モル）のＮ
−ベンジルオキシカルボニルオキシコハク酸イミドを加
え攪拌しつつ８時間反応させる。

反応混合物を濃縮乾固し、得られた淡黄色粉末を１０Ｗ
ＬＩのクロロホルムに溶解し、トリフルオロ酢酸５ａを
加え、室温にて３０分放置する。反応混合物を濃縮し、
残渣に酢酸エチル１００ｍ１を加え、飽和炭酸水素ナト
リウム水溶液１００ｄにて２回、水１００ｄにて２回、
洗滌後、酢酸エチル層を分離し、溶媒を留去する。以下
前記のＡ項と同様にシリカゲルカラムクロマトグラフイ
一により精製し、フラクシヨン１２〜５０を合せ溶媒を
留去すると８４０ＴＨｉの白色粉末が得られた。この粉
末は次の物性値を示し、３，２′，６′，３″−テトラ
Ｎ−ベンジルオキシカルボニルＸＫ−６２−２と同定し
た。収率７７．６％○ シリカゲルＴＬＣＯＲｆ値（展
開剤クロロホルムリメタノール＝９：１） ０．３７○
核磁気共鳴吸収スペクトル（メタノールＤ４） δ（Ｐｐｍ）１．０２（３Ｈ，ｓ），２，８３（３Ｈ，
ｓ），３．０６（３Ｈ，ｓ），５．０７（６Ｈ，ｓ）５
．１３（２Ｈ，ｓ），７．３４（２０Ｈ，ｓ）Ｃ．抗生
物質ＳＵＭ−３の合成：上記Ｂ工程によつて得られた３
，２′，６′，３″テトラ−Ｎ−ベンジルオキシカルボ
ニルＸＫ６２−２６００〜を５０％酢酸水溶液１５７１
Ｌ１！とテトラヒドロフラン１５ｄの混合溶液に溶解し
、氷令しつつ、３０％亜硝酸ナトリウム水溶液３ａを滴
下後同温度にて１時間攪拌を続ける。

反応混合物を１００７ｎ１の水中にそそぎ、酢酸エチル
１００ｄにて２回抽出する。酢酸エチル層を飽和炭酸水
素ナトリウム水溶液１００ｍ１、水１００ａで洗滌後分
離し、溶媒を留去する。残渣を５０Ｗ１１のメタノール
に溶解し、２Ｎ塩酸０．５ＴｆＬ１とパラジウム炭酸触
媒１００Ｔ１１ｆを加え、常温常圧にて水素を通気させ
ながら３時間還元水素化分解を行う。触媒を淵過して得
られる淵液を濃縮し、残渣に５０ｍ１の水を加え、１Ｎ
水酸化ナトリウムにてＰＨ６に調整する。この水溶液ア
ンバーライトＣＧ−５０（ＮＨ４＋型）１００ａを充填
した内径２，５ｃｍのカラムに通す。カラムを水５００
ｍ１にて洗滌し次いで０．２Ｎアンモニア水にて溶出し
、１０Ｔｎ１ずつのフラクシヨンに集める。フラクシヨ
ン２０〜４６を合せ、アンモニア水を留去すると６３Ｗ
！ｆの白色粉末が得られた。この粉末は物性値、生物活
性共に発酵によつて得られた抗生物質ＳＵＭ−３と完全
に一致し、抗生物質ＳＵＭ−３と同定した。

（収率２２．６％）なお前記の処理において、フラクシ
ヨン５０〜７２を合せ溶媒を留去すると１０５ｍｆの白
色粉末が得られ、この粉末は下記物性値を示し、１−デ
アミノ一１−エピハイドロキシ−ＸＫ６２−２（１−エ
ピ−ＳＵＭ−３）と同定した。

（収率３７．７％）（１）シリカゲルＴＬＣ（７）Ｒｆ
値 展開剤；クロロホルム、メタノール、濃アンモニア水（
１：１：１）（容量比）の下層ＲｆＣ２：０，８８ （２）施光度 〔α〕青＝＋１９６．５（（Ｃ＝０．２，Ｈ２０）（３
）核磁気共鳴吸収スペクトル（重水）δ（Ｐｐｍ）１．
２０（３Ｈ，ｓ）１．３〜１．８（６Ｈ，ｍ）２，３２
（３Ｈ，ｓ）２．５０（３Ｈ，ｓ）５，０４（１Ｈ，ｄ
）５．１５（１Ｈ，ｄ）（４） Ｃ−１３核磁気共鳴吸
収スペクトル（重水）（５）マススペクトル （ｍ／ｅ
）４６４（Ｍ＋），４３５，４０２，３５１，３４７，
３３４，３２３，３０６，２９０，２８９，２７２，１
９２，１６０，１４３（６）元素分析値、分子量、分子
式は、抗生物質ＳＵＭ−３と同じである。

以上から１−エピ山ＳＵＭ−３はＳＵＭ ３と同じ平面構造をもつものであることが明らかにされ
た。

１−エピ−ＳＵＭ−３の抗菌スペクトル （ＭＩＣ，γ／ｄ）。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 式 ▲数式、化学式、表等があります▼ で示される抗性物質ＳＵＭ−３およびその無毒性酸付加
   塩。 ２ ミクロモノスポラ属に属する抗性物質ＳＵＭ−３生
   産菌を栄養培地に培養し、培養液中に抗生物質ＳＵＭ−
   ３を生成せしめ、該培養物から該抗生物質を採取するこ
   とを特徴とする抗生物質ＳＵＭ−３の製造法。