JPS6133558B2 - - Google Patents
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- JPS6133558B2 JPS6133558B2 JP53122277A JP12227778A JPS6133558B2 JP S6133558 B2 JPS6133558 B2 JP S6133558B2 JP 53122277 A JP53122277 A JP 53122277A JP 12227778 A JP12227778 A JP 12227778A JP S6133558 B2 JPS6133558 B2 JP S6133558B2
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- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P1/00—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes
- C12P1/04—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes by using bacteria
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/38—Pseudomonas
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- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
本発明は新規抗生物質SB−72310およびその塩
ならびにその製造法に関する。 本発明者らは、新規な抗生物質の探索を目的と
して多数の微生物を土壌より分離し、その産生す
る抗生物質を分離探索したところ、ある種の微生
物が新規な抗生物質を産生すること、該微生物が
シユードモナス属に属すること、該微生物を適宜
の培地に培養することによつてグラム陽性細菌お
よびグラム陰性細菌に対て抗菌力を示す抗生物質
を培地中に蓄積しうることなどを知り、この抗生
物質を単離し、その物理化学的および生物学的諸
性質から、当該抗生物質が新規な抗生物質である
ことを確め、これを抗生物質SB−72310と称する
ことにした。 さらに抗生物質SB−72310の生産条件について
も検討を加え、抗生物質SB−72310生産菌の資化
しうる硫黄化合物を培地に添加して培養すること
により、抗生物質SB−72310の生産量が著しく増
大することを見出した。本発明者らは、これらの
知見に基づいてさらに研究を重ねた結果、本発明
を完成した。 本発明は、１抗生物質SB−72310およびその塩
２シユードモナス属に属する抗生物質SB−
72310生産菌を培地に培養し、培養物中に抗生物
質SB−72310を生成蓄積せしめ、これを採取する
ことを特徴とする抗生物質SB−72310の製造法、
である。 なお、本願では抗生物質SB−72310を単に
「SB−72310」と称することもある。 本発明で使用される抗生物質SB−72310生産菌
としては、シユードモナス（Pseudomonas）属
に属し、抗生物質SB−72310を産生する能力を有
するものであれば如何なる微生物でもよい。 抗生物質SB−72310生産菌の例としては、たと
えば本発明者らによつて兵庫県西宮市の土壌より
採取したシユードモナス属SB−72310株（以下、
「SB−72310株」と略称することもある。）があげ
られる。 シユードモナス属SB−72310株の菌学的性状は
下記のとおりである。 (a) 形 態 肉汁寒天斜面上で28℃、２日間培養後の観察
では、細胞は直径0.8〜1.1μ、長さ1.6〜4.1μ
の桿状で、多形性を示さない。運動性があり、
極鞭毛を有する。胞子を形成せず、また細胞貯
蔵物としてポリーベーターヒドロキシ酪酸を蓄
積する（R.Y.ステイニアら、ジヤーナル・オ
ブ・ジエネラル・マイクロバイオロジー
（Journal of General Microbiology）第43巻、
第159頁、1966年）。グラム染色は陰性で、抗酸
性を示さない。 (b) 各種培地上での生育状態 28℃で培養し、１ないし14日間にわたつて観
察した。 肉汁寒天平板培養：３日間培養で直径１な
いし３mmの円形、隆起状、全縁の集落を形成
する。表面は平滑、不透明、灰白色を呈す
る。拡散性色素は生成しない。 肉汁寒天斜面培養：中程度の糸状の生育を
示し、不透明、灰白色を呈する。 肉汁液体培養：混濁状に生育し、少量の沈
澱を生じ、菌膜を形成する。 肉汁ゼラチン穿刺培養：液化する。 リトマス・ミルク：ペプトン化する。 (c) 生理的性質 硝酸塩の還元：陽性 脱窒反応：陰性 MR（メチルレツド）テスト：陰性 VP（フオーゲス・プロスカウエル）テス
ト：陰性 インドールの生成：陰性 硫化水素の生成：陰性 デンプンの加水分解：陰性 クエン酸の利用：陽性 無機窒素源の利用 (i) 硝酸カリウム：陽性 (ii) 硫酸アンモニウム：陽性 色素の生成：認められない ウレアーゼ：陽性 オキシダーゼ：陽性 カタラーゼ：陽性 生育の範囲 (i) PH：PH4.0〜8.85で生育するが、最適PH
は4.5〜7.0。 (ii) 温度：８〜42℃で生育するが最適温度は
24〜36℃。 酸素に対する態度：好気的 Ｏ−Ｆ（オキシダテイブ−フアーメンタテ
イブ）テスト〔ヒユー・レイフソン
（Hugh・Leifson）法〕：酸化的 糖からの酸およびガスの生成：Ｌ−アラビ
ノース、Ｄ−キシロース、Ｄ−グルコース、
Ｄ−マンノース、Ｄ−フラクトース、Ｄ−ガ
ラクトース、麦芽糖、シヨ糖、トレハロー
ス、Ｄ−ソルビツト、Ｄ−マンニツト、イノ
シツトおよびグリセリンをそれぞれ１W/V
％含むペプトン水で微弱な酸の生成が認めら
れるが、ガスの生成は認められない。 各種炭素源の利用性：各種炭素源を含む無
機塩培地（リン酸２カリウム0.7W/V%、リ
ン酸１カリウム0.3W/V%、硫酸アンモニウ
ム0.1W/V%、食塩0.1W/V%、硫酸マグネシ
ウム・７水塩0.01W/V%）で14日間培養した
結果を第１表に示す。
ならびにその製造法に関する。 本発明者らは、新規な抗生物質の探索を目的と
して多数の微生物を土壌より分離し、その産生す
る抗生物質を分離探索したところ、ある種の微生
物が新規な抗生物質を産生すること、該微生物が
シユードモナス属に属すること、該微生物を適宜
の培地に培養することによつてグラム陽性細菌お
よびグラム陰性細菌に対て抗菌力を示す抗生物質
を培地中に蓄積しうることなどを知り、この抗生
物質を単離し、その物理化学的および生物学的諸
性質から、当該抗生物質が新規な抗生物質である
ことを確め、これを抗生物質SB−72310と称する
ことにした。 さらに抗生物質SB−72310の生産条件について
も検討を加え、抗生物質SB−72310生産菌の資化
しうる硫黄化合物を培地に添加して培養すること
により、抗生物質SB−72310の生産量が著しく増
大することを見出した。本発明者らは、これらの
知見に基づいてさらに研究を重ねた結果、本発明
を完成した。 本発明は、１抗生物質SB−72310およびその塩
２シユードモナス属に属する抗生物質SB−
72310生産菌を培地に培養し、培養物中に抗生物
質SB−72310を生成蓄積せしめ、これを採取する
ことを特徴とする抗生物質SB−72310の製造法、
である。 なお、本願では抗生物質SB−72310を単に
「SB−72310」と称することもある。 本発明で使用される抗生物質SB−72310生産菌
としては、シユードモナス（Pseudomonas）属
に属し、抗生物質SB−72310を産生する能力を有
するものであれば如何なる微生物でもよい。 抗生物質SB−72310生産菌の例としては、たと
えば本発明者らによつて兵庫県西宮市の土壌より
採取したシユードモナス属SB−72310株（以下、
「SB−72310株」と略称することもある。）があげ
られる。 シユードモナス属SB−72310株の菌学的性状は
下記のとおりである。 (a) 形 態 肉汁寒天斜面上で28℃、２日間培養後の観察
では、細胞は直径0.8〜1.1μ、長さ1.6〜4.1μ
の桿状で、多形性を示さない。運動性があり、
極鞭毛を有する。胞子を形成せず、また細胞貯
蔵物としてポリーベーターヒドロキシ酪酸を蓄
積する（R.Y.ステイニアら、ジヤーナル・オ
ブ・ジエネラル・マイクロバイオロジー
（Journal of General Microbiology）第43巻、
第159頁、1966年）。グラム染色は陰性で、抗酸
性を示さない。 (b) 各種培地上での生育状態 28℃で培養し、１ないし14日間にわたつて観
察した。 肉汁寒天平板培養：３日間培養で直径１な
いし３mmの円形、隆起状、全縁の集落を形成
する。表面は平滑、不透明、灰白色を呈す
る。拡散性色素は生成しない。 肉汁寒天斜面培養：中程度の糸状の生育を
示し、不透明、灰白色を呈する。 肉汁液体培養：混濁状に生育し、少量の沈
澱を生じ、菌膜を形成する。 肉汁ゼラチン穿刺培養：液化する。 リトマス・ミルク：ペプトン化する。 (c) 生理的性質 硝酸塩の還元：陽性 脱窒反応：陰性 MR（メチルレツド）テスト：陰性 VP（フオーゲス・プロスカウエル）テス
ト：陰性 インドールの生成：陰性 硫化水素の生成：陰性 デンプンの加水分解：陰性 クエン酸の利用：陽性 無機窒素源の利用 (i) 硝酸カリウム：陽性 (ii) 硫酸アンモニウム：陽性 色素の生成：認められない ウレアーゼ：陽性 オキシダーゼ：陽性 カタラーゼ：陽性 生育の範囲 (i) PH：PH4.0〜8.85で生育するが、最適PH
は4.5〜7.0。 (ii) 温度：８〜42℃で生育するが最適温度は
24〜36℃。 酸素に対する態度：好気的 Ｏ−Ｆ（オキシダテイブ−フアーメンタテ
イブ）テスト〔ヒユー・レイフソン
（Hugh・Leifson）法〕：酸化的 糖からの酸およびガスの生成：Ｌ−アラビ
ノース、Ｄ−キシロース、Ｄ−グルコース、
Ｄ−マンノース、Ｄ−フラクトース、Ｄ−ガ
ラクトース、麦芽糖、シヨ糖、トレハロー
ス、Ｄ−ソルビツト、Ｄ−マンニツト、イノ
シツトおよびグリセリンをそれぞれ１W/V
％含むペプトン水で微弱な酸の生成が認めら
れるが、ガスの生成は認められない。 各種炭素源の利用性：各種炭素源を含む無
機塩培地（リン酸２カリウム0.7W/V%、リ
ン酸１カリウム0.3W/V%、硫酸アンモニウ
ム0.1W/V%、食塩0.1W/V%、硫酸マグネシ
ウム・７水塩0.01W/V%）で14日間培養した
結果を第１表に示す。
【表】
【表】
註：＋：生育あり
±：微弱な生育あり
−：生育なし
その他の性質 (i) マロン酸の利用性：陽性 (ii) フエニルアラニンの脱アミノ反応：陰性 (iii) デカルボキシラーゼ活性 (a) アルギニン：陽性 (b) リジン：陰性 (c) オルニチン：陰性 (iv) アルギニン・ジヒドロラーゼ活性：陽性 (v) エスクリンの加水分解性：陽性 (vi) ツイーン（Tween）80の加水分解性：
陽性 (vii) DNAのGC（グアニン−シトシン）含
量：64.3モル％ 以上の菌学的性質を有するSB−72310株をバー
ジーズ・マニユアル・オブ・デターミナテイブ・
バクテリオロジー（Bergy′s Manual of
Determinative Bacteriology）第７版および第８
版の記載と照合すると、SB−72310株はグラム陰
性桿菌で、好気性で、極鞭毛を有して運動性があ
り、オキシダーゼ陽性、カタラーゼ陽性であると
ころからシユードモナダセー科に属することは明
らかである。さらに栄養要求性がなく、ポリ−β
−ヒドロキシ酪酸を蓄積すること、またアルギニ
ン・ジヒドロラーゼを有するということなどの性
質から検索すると、シユードモナス・シユードア
ルカリゲネス（Pseudomonas
pseudoalcaligenes）、シユードモナス・シユード
マレイ（P.pseudomallei）、シユードモナス・マ
レイ（P.mallei）およびシユードモナス・カリオ
フイリ（P.caryophylli）に近縁と考えられる。
しかし、シユードモナス・シユードアルカリゲネ
スは、炭水化物としてはフラクトースだけしか利
用できないという点で、シユードモナス・シユー
ドマレイはほとんどの株で脱窒が認められるこ
と、またでんぷんを加水分解することおよび栄養
源の資化性の点で、シユードモナス・マレイは非
運動性であること、および脱窒が認められる点
で、シユードモナス・カリオフイリは、黄緑色の
非螢光水溶性色素を生じ、脱窒を行なう点で、い
ずれもSB−72310株とは明らかに区別される。 したがつて、本菌株はシユードモナス属の新種
に属すると考えられる。そこでSB−72310株の生
育最適PHが4.5〜7.0とシユードモナス属細菌とし
てはやや低い特徴にもとづいて本菌をシユードモ
ナス・メソアシドフイラ（Pseudomonas
mesoacidophila）と命名した。 なお、本菌株SB−72310株は工業技術院微生物
工業技術研究所にFERM−Ｐ No.4653として、
財団法人発酵研究所にIFO 13884として、ジ・ア
メリカン・タイプ・カルチヤー・コレクシヨン
（The American Type Culture Collection U.S.
A.）にATCC−31433として、それぞれ寄託され
ている。 本発明に用いられるシユードモナス属細菌は一
般にその性状が変化しやすく、たとえば紫外線、
Ｘ線、化学薬品（例、ニトロソグアニジン、エチ
ルメタンスルホン酸）などを用いる人工変異手段
で容易に変異しうるものであり、どの様な変異株
であつても本発明の対象とするSB−72310の生産
能を有するものはすべて本発明に使用することが
できる。 SB−72310生産菌の培養に際しては、炭素源と
しては、たとえばグルコース、シユークロース、
マルトース、廃糖蜜、グリセロール、油脂類
（例、大豆油、オリーブ油など）、有機酸類（例、
クエン酸、コハク酸、グルコン酸など）など菌が
資化しうるものが適宜用いられる。窒素源として
は、たとえば大豆粉、棉実粉、コーン・ステイー
プ・リカー、乾燥酵母、酵母エキス、肉エキス、
ペプトン、尿素、硫酸アンモニウム、硝酸アンモ
ニウム、塩化アンモニウム、リン酸アンモニウム
などの有機窒素化合物や無機窒素化合物が利用で
きる。また、無機塩としては、たとえば塩化ナト
リウム、塩化カリウム、炭酸カルシウム、硫酸マ
グネシウム、リン酸一カリウム、リン酸二ナトリ
ウムなどの通常細菌の培養に必要な無機塩類が単
独もしくは適宜、組合せて使用される。 シユードモナス属に属する抗生物質SB−72310
生産菌の資化しうる硫黄化合物、たとえば硫酸塩
（例、硫酸アンモニウムなど）、チオ硫酸塩（例、
チオ硫酸アンモニウムなど）、亜硫酸塩（例、亜
硫酸アンモニウム）などの無機硫黄化合物、含硫
アミノ酸（例、シスチン、システイン、Ｌ−チア
ゾリジン−４−カルボン酸）、ヒポタウリン、含
流ペプチド（例、グルタチオン）などの有機硫黄
化合物または、これらの混合物を培地に添加する
と目的物の生成量が増大することが見出された。
該硫黄化合物を培地に添加するときの濃度は0.01
〜1.0W/V%、さらに好ましくは0.02〜0.5W/V%
である。該硫黄化合物を培地中に添加して培養す
ると、SB−72310の生成量が増大し、工業上きわ
めて有利である。 また、硫酸第１鉄、硫酸銅などの重金属類、ビ
タミンB1、ビオチンなどのビタミン類なども必
要に応じて添加される。さらにシリコーンオイル
やポリアルキレングリコールエーテルなどの消泡
剤や界面活性剤を培地に添加してもよい。その他
菌の発育を助け、SB−72310の生産を促進するよ
うな有機物や無機物を適宜に添加してもよい。 培養方法としては、一般の抗生物質の生産方法
と同様に行なえばよく、固体培養でも液体培養で
もよい。液体培養の場合は静置培養、撹拌培養、
振盪培養、通気培養などいずれを実施してもよい
がとくに通気撹拌培養が好ましい。又培養温度は
およそ15℃〜35℃の範囲が好ましく、培地のPHは
約４〜８の範囲でおよそ８時間〜168時間、好ま
しくは24時間〜144時間培養する。 生成したSB−72310は主として培養液中に存
在するので、培養物を遠心分離あるいは過によ
つて上清液と菌体とに分離し、その上清液から精
製するのが有利である。しかし、培養物から、直
接に精製することも可能である。 本物質の力価測定は、たとえばコマモナス・テ
リゲナ（Comamonas terigena）IFO 12685株を
試験菌として、SB−72310を標準品として、TSA
（トリプテイケース・ソイ・アガー（Baltimore
Biologicals Limited、U.S.A.製）培地を用いる
カツプ法、ペーパーデイスク法により実施でき
る。 SB−72310を採取するには、微生物が生産する
代謝産物を採取するのに通常用いられる手段を適
宜利用することができる。たとえば遠心分離によ
つて菌体を除去したのち、その液から一般に有
効物質を分離、採取、精製する方法を用いる。す
なわち適当な溶媒に対する溶解性および溶解度の
差、溶液からの析出法および析出速度の差、種々
の吸着親和力の差、イオン交換体によるイオン交
換クロマトグラフイーあるいは減圧濃縮、凍結乾
燥、結晶化、再結晶、乾燥などの手段が単独ある
いは任意の順序に組合わせて、または反復して用
い、利用される。 その１例を示すと次のとおりである。すなわち
培養終了培養液を過し、得られる液を活性炭
カラムに通過させ、吸着されるSB−72310を親水
性有機溶媒系を用いて溶出させる。親水性有機溶
媒系として用いられるものには、アセトン、メチ
ルエチルケトン、メチルイソブチルケトンなどの
低級ケトン類、メタノール、エタノール、イソプ
ロパノール、プロパノール、ブタノール等の低級
アルコール類の単独または混合溶媒と水との混合
溶液があげられる。またイオン交換樹脂としては
当該物質が酸性物質であるため、アニオン交換樹
脂〔アンバーライトIRA−400、402、米国アンバ
ーライト社製造；ダウエツクス−１、米国ダウ・
アンド・ケミカル社製造；ダイヤイオンSA−
21A、三菱化成製造〕等のCl型等が有利に利用出
来る。吸着した当該物質の溶出には食塩等の水溶
液を用い有効物質を溶出する。溶出液の脱塩には
再び活性炭のカラムクロマトグラフイーを行う。
次に有効物質を溶出した溶出液を濃縮した後、ア
セトン等を加えて析出する沈澱を取したのち、
アセトン、エーテル等で洗浄後乾燥すると淡褐色
の粉末が得られる。得られた粉末をさらに精製す
るには、DEAEセフアデツクス（スエーデン フ
アルマシア社製）のカラムクロマトグラフイーが
有利に利用出来る。すなわち、DEAEセフアデツ
クスＡ−25をリン酸緩衝液（PH6.6）で洗浄した
後、さきに得られた粉末を水に溶解した液を通
過、吸着せしめ、同緩衝液で洗浄後、0.5W/V%
食塩を含ませた緩衝液で溶出する。得られた有効
区分をPH3.0に調整後、再び活性炭カラムに通
し、20V/V%メタノール水で洗浄する。ついで含
水アセトンで溶出し、有効区分を減圧濃縮後、ア
セトンを加えるとSB−72310が得られる。また本
品は金属塩およびアンモニウム塩を形成する。金
属塩としては、たとえばナトリウム塩、カリウム
塩、リチウム塩などが挙げられる。 後述の実施例１で得られたSB−72310の物理化
学的性質はつぎのとおりである。 (1) 融点：110℃以上である。 (2) 外観：白色粉末 (3) 元素分析値：（％） 五酸化リン上で40℃、６時間減圧乾燥したも
の。 Ｃ 34.40 34.18（34.40±0.5） Ｈ 5.56 5.54（ 5.50±0.5） Ｎ 13.30 13.65（13.45±0.5） Ｓ 7.56 7.75（ 7.75±0.5） （Ｏ 38.90±1.0） (4) 分子量 400±20（滴定法による。） 推定分子式（上記の実測値より） C12H20N4SO9・（H2O） 計算値
Ｃ 34.78；Ｈ 5.35；Ｎ 13.52；Ｓ 7.74(%) (5) 比旋光度 〔α〕２３ Ｄ＋0.5゜±５゜（Ｃ＝0.93、H2O） (6) 紫外線吸収スペクトル： 末端吸収のみ（21nｍ以上以上に特異な吸収
を示さない。） (7) 赤外線吸収スペクトル：（第１図） 臭化カリウム錠による吸収スペクトルの主要
ピークはつぎの通りである。 3440（ｓ）、2920（ｍ）、2850（ｍ）、2600
（ｗ）、1770（ｓ）、1650（ｓ）、1530（ｓ）、
1458（ｍ）、1390（ｗ）、1340（ｗ）、1280
（sh）、1240（ｓ）、1210（sh）、1180（ｍ）、
1118（ｗ）、1043（ｓ）、792（ｗ）、632（ｓ）
（cm-1） （ただし、ｓ、ｍ、ｗは強、中、弱を、shは肩
を、それぞれ示す。） (8) 溶媒に対する溶解性： 石油エーテル、ヘキサン、ジエチルエーテ
ル、ベンゼン、酢酸エチル、クロロホルムには
不溶。エタノール、ピリジン、アセトンには難
溶。メタノール、ジメチルスルフオキシドには
可溶。水には易溶。 (9) 呈色反応： ニンヒドリン、過マンガン酸カリウム試薬に
は陽性。塩化第２鉄−フエリシアン化カリウム
試薬、坂口反応、モーリツシユ試薬には陰性。
エールリツヒ試薬には擬陽性。 (10) 塩基性、酸性、中性の区別：酸性物質 (11) 核磁気共鳴スペクトル（ジメチルスルフオキ
シド中100MHZ）δ3.31ppmにＯ−CH3のシグ
ナルを認める。 (12) 安定性： PH３〜PH７の水溶液は60℃、10分間の加熱に
は安定。PH8.5以上では不安定。 後述の実施例２で得られたSB−72310・ナトリ
ウム塩の物理化学的性状はつぎのとおりである。 (1) 融点：110℃以上である。 (2) 外観：白色粉末 (3) 元素分析値：（％） 五酸化リン上で40℃、６時間減圧乾燥したも
の。 Ｃ 31.75 31.68 Ｈ 5.19 5.11 Ｎ 12.68 12.57 Ｓ 7.16 7.10 Na 5.01 4.95 (4) 分子量： 分子中Naを１モル含有するとすれば 438±５（滴定法による） 推定分子式（上記の実測値より） C12H19N4SO9Na・2H2O 計算値 Ｃ 31.72；Ｈ 5.10；Ｎ 12.33；
Ｓ 7.06 ；Na 5.06 (5) 比旋光度： 〔α〕２３ Ｄ＋8.5゜±５゜（Ｃ＝0.91、H2O） (6) 紫外線吸収スペクトル：末端吸収のみ (7) 赤外線吸収スペクトル：（第２図） 臭化カリウム錠による吸収スペクトルの主要
ピークはつぎの通りである。 3430（ｓ）、3250（sh）、3000（ｍ）、1770
（ｓ）、1640（ｓ）、1530（ｓ）、1450（ｗ）、
1405（ｗ）、1343（ｗ）、1280（sh）、1245
（ｓ）、1180（ｗ）、1118（ｗ）、1050（ｓ）、820
（ｗ）、785（ｗ）、632（ｓ）、（cm-1） （ただし、ｓ、ｍ、ｗは強、中、弱を、shは肩
を、それぞれ示す。） (8) 溶媒に対する溶解性： 石油エーテル、ヘキサン、ジエチルエーテ
ル、ベンゼン、酢酸エチル、クロロホルム、ア
セトンには不溶。メタノール、エタノール、ピ
リジンには難溶。ジメチルスルフオキシドには
可溶。水には易溶。 (9) 呈色反応： ニンヒドリン、過マンガン酸カリウム試薬に
は陽性。塩化第２鉄−フエリシアン化カリウム
試薬、坂口反応、モーリツシユ試薬には陰性。
エールリツヒ試薬には擬陽性。 (10) 安定性： PH３〜PH７の水溶液は60℃、10分間加熱には
安定。PH8.5以上では不安定。 SB−72310の遊離形のものを塩にするには、た
とえば遊離酸の水溶液に約当モルの水酸化ナトリ
ウムを添加し凍結乾燥するとナトリウム塩が得ら
れる。 またSB−72310の塩を遊離形のものにするには
たとえば、SB−72310ナトリウム塩の水溶液に約
１規定の塩酸を加えPH約3.0とした後活性炭で脱
塩操作を行うと遊離形が得られる。 以上のSB−72310の物理化学的性質およびその
他の物理化学的性質のデータから本物質の化学構
造式は次のとおりであると決定された。 次にSB−72310の生物学的性状について述べ
る。SB−72310およびそのナトリウム塩の各種微
生物に対する抗菌スペクトルは第２表に示すとお
りである。この表から明らかなように抗生物質
SB−72310はグラム陽性菌および陰性菌に有効で
ある。 抗生物質SB−72310・ナトリウム塩の急性毒性
はマウスに対する静脈内投与で500mg/Kgでは死亡
例を認めず、低毒性である。
±：微弱な生育あり
−：生育なし
その他の性質 (i) マロン酸の利用性：陽性 (ii) フエニルアラニンの脱アミノ反応：陰性 (iii) デカルボキシラーゼ活性 (a) アルギニン：陽性 (b) リジン：陰性 (c) オルニチン：陰性 (iv) アルギニン・ジヒドロラーゼ活性：陽性 (v) エスクリンの加水分解性：陽性 (vi) ツイーン（Tween）80の加水分解性：
陽性 (vii) DNAのGC（グアニン−シトシン）含
量：64.3モル％ 以上の菌学的性質を有するSB−72310株をバー
ジーズ・マニユアル・オブ・デターミナテイブ・
バクテリオロジー（Bergy′s Manual of
Determinative Bacteriology）第７版および第８
版の記載と照合すると、SB−72310株はグラム陰
性桿菌で、好気性で、極鞭毛を有して運動性があ
り、オキシダーゼ陽性、カタラーゼ陽性であると
ころからシユードモナダセー科に属することは明
らかである。さらに栄養要求性がなく、ポリ−β
−ヒドロキシ酪酸を蓄積すること、またアルギニ
ン・ジヒドロラーゼを有するということなどの性
質から検索すると、シユードモナス・シユードア
ルカリゲネス（Pseudomonas
pseudoalcaligenes）、シユードモナス・シユード
マレイ（P.pseudomallei）、シユードモナス・マ
レイ（P.mallei）およびシユードモナス・カリオ
フイリ（P.caryophylli）に近縁と考えられる。
しかし、シユードモナス・シユードアルカリゲネ
スは、炭水化物としてはフラクトースだけしか利
用できないという点で、シユードモナス・シユー
ドマレイはほとんどの株で脱窒が認められるこ
と、またでんぷんを加水分解することおよび栄養
源の資化性の点で、シユードモナス・マレイは非
運動性であること、および脱窒が認められる点
で、シユードモナス・カリオフイリは、黄緑色の
非螢光水溶性色素を生じ、脱窒を行なう点で、い
ずれもSB−72310株とは明らかに区別される。 したがつて、本菌株はシユードモナス属の新種
に属すると考えられる。そこでSB−72310株の生
育最適PHが4.5〜7.0とシユードモナス属細菌とし
てはやや低い特徴にもとづいて本菌をシユードモ
ナス・メソアシドフイラ（Pseudomonas
mesoacidophila）と命名した。 なお、本菌株SB−72310株は工業技術院微生物
工業技術研究所にFERM−Ｐ No.4653として、
財団法人発酵研究所にIFO 13884として、ジ・ア
メリカン・タイプ・カルチヤー・コレクシヨン
（The American Type Culture Collection U.S.
A.）にATCC−31433として、それぞれ寄託され
ている。 本発明に用いられるシユードモナス属細菌は一
般にその性状が変化しやすく、たとえば紫外線、
Ｘ線、化学薬品（例、ニトロソグアニジン、エチ
ルメタンスルホン酸）などを用いる人工変異手段
で容易に変異しうるものであり、どの様な変異株
であつても本発明の対象とするSB−72310の生産
能を有するものはすべて本発明に使用することが
できる。 SB−72310生産菌の培養に際しては、炭素源と
しては、たとえばグルコース、シユークロース、
マルトース、廃糖蜜、グリセロール、油脂類
（例、大豆油、オリーブ油など）、有機酸類（例、
クエン酸、コハク酸、グルコン酸など）など菌が
資化しうるものが適宜用いられる。窒素源として
は、たとえば大豆粉、棉実粉、コーン・ステイー
プ・リカー、乾燥酵母、酵母エキス、肉エキス、
ペプトン、尿素、硫酸アンモニウム、硝酸アンモ
ニウム、塩化アンモニウム、リン酸アンモニウム
などの有機窒素化合物や無機窒素化合物が利用で
きる。また、無機塩としては、たとえば塩化ナト
リウム、塩化カリウム、炭酸カルシウム、硫酸マ
グネシウム、リン酸一カリウム、リン酸二ナトリ
ウムなどの通常細菌の培養に必要な無機塩類が単
独もしくは適宜、組合せて使用される。 シユードモナス属に属する抗生物質SB−72310
生産菌の資化しうる硫黄化合物、たとえば硫酸塩
（例、硫酸アンモニウムなど）、チオ硫酸塩（例、
チオ硫酸アンモニウムなど）、亜硫酸塩（例、亜
硫酸アンモニウム）などの無機硫黄化合物、含硫
アミノ酸（例、シスチン、システイン、Ｌ−チア
ゾリジン−４−カルボン酸）、ヒポタウリン、含
流ペプチド（例、グルタチオン）などの有機硫黄
化合物または、これらの混合物を培地に添加する
と目的物の生成量が増大することが見出された。
該硫黄化合物を培地に添加するときの濃度は0.01
〜1.0W/V%、さらに好ましくは0.02〜0.5W/V%
である。該硫黄化合物を培地中に添加して培養す
ると、SB−72310の生成量が増大し、工業上きわ
めて有利である。 また、硫酸第１鉄、硫酸銅などの重金属類、ビ
タミンB1、ビオチンなどのビタミン類なども必
要に応じて添加される。さらにシリコーンオイル
やポリアルキレングリコールエーテルなどの消泡
剤や界面活性剤を培地に添加してもよい。その他
菌の発育を助け、SB−72310の生産を促進するよ
うな有機物や無機物を適宜に添加してもよい。 培養方法としては、一般の抗生物質の生産方法
と同様に行なえばよく、固体培養でも液体培養で
もよい。液体培養の場合は静置培養、撹拌培養、
振盪培養、通気培養などいずれを実施してもよい
がとくに通気撹拌培養が好ましい。又培養温度は
およそ15℃〜35℃の範囲が好ましく、培地のPHは
約４〜８の範囲でおよそ８時間〜168時間、好ま
しくは24時間〜144時間培養する。 生成したSB−72310は主として培養液中に存
在するので、培養物を遠心分離あるいは過によ
つて上清液と菌体とに分離し、その上清液から精
製するのが有利である。しかし、培養物から、直
接に精製することも可能である。 本物質の力価測定は、たとえばコマモナス・テ
リゲナ（Comamonas terigena）IFO 12685株を
試験菌として、SB−72310を標準品として、TSA
（トリプテイケース・ソイ・アガー（Baltimore
Biologicals Limited、U.S.A.製）培地を用いる
カツプ法、ペーパーデイスク法により実施でき
る。 SB−72310を採取するには、微生物が生産する
代謝産物を採取するのに通常用いられる手段を適
宜利用することができる。たとえば遠心分離によ
つて菌体を除去したのち、その液から一般に有
効物質を分離、採取、精製する方法を用いる。す
なわち適当な溶媒に対する溶解性および溶解度の
差、溶液からの析出法および析出速度の差、種々
の吸着親和力の差、イオン交換体によるイオン交
換クロマトグラフイーあるいは減圧濃縮、凍結乾
燥、結晶化、再結晶、乾燥などの手段が単独ある
いは任意の順序に組合わせて、または反復して用
い、利用される。 その１例を示すと次のとおりである。すなわち
培養終了培養液を過し、得られる液を活性炭
カラムに通過させ、吸着されるSB−72310を親水
性有機溶媒系を用いて溶出させる。親水性有機溶
媒系として用いられるものには、アセトン、メチ
ルエチルケトン、メチルイソブチルケトンなどの
低級ケトン類、メタノール、エタノール、イソプ
ロパノール、プロパノール、ブタノール等の低級
アルコール類の単独または混合溶媒と水との混合
溶液があげられる。またイオン交換樹脂としては
当該物質が酸性物質であるため、アニオン交換樹
脂〔アンバーライトIRA−400、402、米国アンバ
ーライト社製造；ダウエツクス−１、米国ダウ・
アンド・ケミカル社製造；ダイヤイオンSA−
21A、三菱化成製造〕等のCl型等が有利に利用出
来る。吸着した当該物質の溶出には食塩等の水溶
液を用い有効物質を溶出する。溶出液の脱塩には
再び活性炭のカラムクロマトグラフイーを行う。
次に有効物質を溶出した溶出液を濃縮した後、ア
セトン等を加えて析出する沈澱を取したのち、
アセトン、エーテル等で洗浄後乾燥すると淡褐色
の粉末が得られる。得られた粉末をさらに精製す
るには、DEAEセフアデツクス（スエーデン フ
アルマシア社製）のカラムクロマトグラフイーが
有利に利用出来る。すなわち、DEAEセフアデツ
クスＡ−25をリン酸緩衝液（PH6.6）で洗浄した
後、さきに得られた粉末を水に溶解した液を通
過、吸着せしめ、同緩衝液で洗浄後、0.5W/V%
食塩を含ませた緩衝液で溶出する。得られた有効
区分をPH3.0に調整後、再び活性炭カラムに通
し、20V/V%メタノール水で洗浄する。ついで含
水アセトンで溶出し、有効区分を減圧濃縮後、ア
セトンを加えるとSB−72310が得られる。また本
品は金属塩およびアンモニウム塩を形成する。金
属塩としては、たとえばナトリウム塩、カリウム
塩、リチウム塩などが挙げられる。 後述の実施例１で得られたSB−72310の物理化
学的性質はつぎのとおりである。 (1) 融点：110℃以上である。 (2) 外観：白色粉末 (3) 元素分析値：（％） 五酸化リン上で40℃、６時間減圧乾燥したも
の。 Ｃ 34.40 34.18（34.40±0.5） Ｈ 5.56 5.54（ 5.50±0.5） Ｎ 13.30 13.65（13.45±0.5） Ｓ 7.56 7.75（ 7.75±0.5） （Ｏ 38.90±1.0） (4) 分子量 400±20（滴定法による。） 推定分子式（上記の実測値より） C12H20N4SO9・（H2O） 計算値
Ｃ 34.78；Ｈ 5.35；Ｎ 13.52；Ｓ 7.74(%) (5) 比旋光度 〔α〕２３ Ｄ＋0.5゜±５゜（Ｃ＝0.93、H2O） (6) 紫外線吸収スペクトル： 末端吸収のみ（21nｍ以上以上に特異な吸収
を示さない。） (7) 赤外線吸収スペクトル：（第１図） 臭化カリウム錠による吸収スペクトルの主要
ピークはつぎの通りである。 3440（ｓ）、2920（ｍ）、2850（ｍ）、2600
（ｗ）、1770（ｓ）、1650（ｓ）、1530（ｓ）、
1458（ｍ）、1390（ｗ）、1340（ｗ）、1280
（sh）、1240（ｓ）、1210（sh）、1180（ｍ）、
1118（ｗ）、1043（ｓ）、792（ｗ）、632（ｓ）
（cm-1） （ただし、ｓ、ｍ、ｗは強、中、弱を、shは肩
を、それぞれ示す。） (8) 溶媒に対する溶解性： 石油エーテル、ヘキサン、ジエチルエーテ
ル、ベンゼン、酢酸エチル、クロロホルムには
不溶。エタノール、ピリジン、アセトンには難
溶。メタノール、ジメチルスルフオキシドには
可溶。水には易溶。 (9) 呈色反応： ニンヒドリン、過マンガン酸カリウム試薬に
は陽性。塩化第２鉄−フエリシアン化カリウム
試薬、坂口反応、モーリツシユ試薬には陰性。
エールリツヒ試薬には擬陽性。 (10) 塩基性、酸性、中性の区別：酸性物質 (11) 核磁気共鳴スペクトル（ジメチルスルフオキ
シド中100MHZ）δ3.31ppmにＯ−CH3のシグ
ナルを認める。 (12) 安定性： PH３〜PH７の水溶液は60℃、10分間の加熱に
は安定。PH8.5以上では不安定。 後述の実施例２で得られたSB−72310・ナトリ
ウム塩の物理化学的性状はつぎのとおりである。 (1) 融点：110℃以上である。 (2) 外観：白色粉末 (3) 元素分析値：（％） 五酸化リン上で40℃、６時間減圧乾燥したも
の。 Ｃ 31.75 31.68 Ｈ 5.19 5.11 Ｎ 12.68 12.57 Ｓ 7.16 7.10 Na 5.01 4.95 (4) 分子量： 分子中Naを１モル含有するとすれば 438±５（滴定法による） 推定分子式（上記の実測値より） C12H19N4SO9Na・2H2O 計算値 Ｃ 31.72；Ｈ 5.10；Ｎ 12.33；
Ｓ 7.06 ；Na 5.06 (5) 比旋光度： 〔α〕２３ Ｄ＋8.5゜±５゜（Ｃ＝0.91、H2O） (6) 紫外線吸収スペクトル：末端吸収のみ (7) 赤外線吸収スペクトル：（第２図） 臭化カリウム錠による吸収スペクトルの主要
ピークはつぎの通りである。 3430（ｓ）、3250（sh）、3000（ｍ）、1770
（ｓ）、1640（ｓ）、1530（ｓ）、1450（ｗ）、
1405（ｗ）、1343（ｗ）、1280（sh）、1245
（ｓ）、1180（ｗ）、1118（ｗ）、1050（ｓ）、820
（ｗ）、785（ｗ）、632（ｓ）、（cm-1） （ただし、ｓ、ｍ、ｗは強、中、弱を、shは肩
を、それぞれ示す。） (8) 溶媒に対する溶解性： 石油エーテル、ヘキサン、ジエチルエーテ
ル、ベンゼン、酢酸エチル、クロロホルム、ア
セトンには不溶。メタノール、エタノール、ピ
リジンには難溶。ジメチルスルフオキシドには
可溶。水には易溶。 (9) 呈色反応： ニンヒドリン、過マンガン酸カリウム試薬に
は陽性。塩化第２鉄−フエリシアン化カリウム
試薬、坂口反応、モーリツシユ試薬には陰性。
エールリツヒ試薬には擬陽性。 (10) 安定性： PH３〜PH７の水溶液は60℃、10分間加熱には
安定。PH8.5以上では不安定。 SB−72310の遊離形のものを塩にするには、た
とえば遊離酸の水溶液に約当モルの水酸化ナトリ
ウムを添加し凍結乾燥するとナトリウム塩が得ら
れる。 またSB−72310の塩を遊離形のものにするには
たとえば、SB−72310ナトリウム塩の水溶液に約
１規定の塩酸を加えPH約3.0とした後活性炭で脱
塩操作を行うと遊離形が得られる。 以上のSB−72310の物理化学的性質およびその
他の物理化学的性質のデータから本物質の化学構
造式は次のとおりであると決定された。 次にSB−72310の生物学的性状について述べ
る。SB−72310およびそのナトリウム塩の各種微
生物に対する抗菌スペクトルは第２表に示すとお
りである。この表から明らかなように抗生物質
SB−72310はグラム陽性菌および陰性菌に有効で
ある。 抗生物質SB−72310・ナトリウム塩の急性毒性
はマウスに対する静脈内投与で500mg/Kgでは死亡
例を認めず、低毒性である。
【表】
本発明によつて得られるSB−72310は、上記抗
菌スペクトルから明らかなように、グラム陰性
菌、グラム陽性菌に対して抗菌力を示す。したが
つて、哺乳動物（例、マウス、ラツト、イヌ、
人）および家禽（例、ニワトリ、アヒル）の上記
細菌の感染症の治療に用いることができる。 SB−72310をたとえば大腸菌感染症の治療薬と
して用いるには、たとえばSB−72310を生理的食
塩水に溶解して注射剤として非経口的に皮下また
は筋肉内に15〜60mg／Kg／日投与する。また経口
剤として、抗生物質SB−72310を乳糖と混合して
カプセル剤とし、SB−72310として60〜400mg／
Kg／日投与する。 また、本発明によつて得られるSB−72310は、
殺菌剤として用いることができる。たとえばSB
−72310を0.1〜1.0W/V%の濃度で蒸留水に溶解
した液剤、またはワセリン、ラノリンを基剤と
し、１ｇあたりSB−72310を15〜60mg含有する軟
膏剤として、上記の動物の手、足、眼、耳などの
殺菌、消毒に用いることができる。 また、SB−72310は新しい医薬品の合成中間体
としても極めて有望な化合物である。 以上の諸性質を有する抗生物質SB−72310を、
既知抗生物質と比較してみると、まず水溶性酸性
物質でＳを含有する抗生物質としては、ペニシリ
ン類、セフアロスポリン類があげられるが、本品
は紫外部吸収を示さないことからセフアロスポリ
ン類とは異なり、また本品の核磁気共鳴ペクトル
でＯ−メチルのシグナルが認められることおよ
び、酸加水分解によつてグルタミン酸が検出され
ることから、天然に得られているペニシリン類、
セフアロスポリン類とは一致しないことが明らか
である。 また、シユードモナス属細菌によつて産生され
る抗生物質としては数多くのものが知られている
が、水溶性酸性物質でＳを含有する抗細菌性抗生
物質は全く知られていない。またシユードモナス
属細菌以外の微生物の産生する既知抗生物質のい
ずれとも物理化学的および生物学的性状を異にし
ている。したがつて本抗生物質は新規化合物であ
ると判断される。 次に実施例をもつてさらに詳細に本発明の内容
を説明するが、これによつて本発明が限定される
ものではない。パーセントは、特にことわりのな
いかぎり重量／容量％を示す。 実施例 １ 栄養寒天斜面上に生育させたシユードモナス・
メソアシドフイラSB−72310（FERM−Ｐ
No.4653；IFO 13884；ATCC−31433）の菌株
を、グルコース１％、ポリペプトン（大五栄養化
学社製）0.5％、肉エキス0.5％、食塩0.5％（PH
7.0）からなる培地500mlを含む２容坂口フラス
コ２本に接種して、28℃で48時間往復振盪培養し
その培養物を種菌とする。 次に、シユークロース1.5％、酵母エキス0.3
％、硫酸アンモニウム0.2％、リン酸第１カリウ
ム0.6％、リン酸第２カリウム0.3％、硫酸マグネ
シウム0.05％、食塩0.05％からなる培地120を
200容ステンレス製発酵槽に入れ、120℃で20分
間蒸気滅菌したのち、前記種菌を接種した。つい
で温度28℃、通気量120／分、撹拌回転数180r.
p.m.の条件下で78時間培養した。この培養物を
シヤープレス遠心分離機にかけ、菌体を分離し、
上清液110をえた。PH4.2に調整したのち活性炭
（クロマト用「白サギ」武田薬品工業製）15を
充てんしたカラムに通し活性物質を吸着させ水45
で洗滌後、50V/V%アセトン水45で溶出し
た。溶出液を10宛分画し、コマモナス・テリゲ
ナIFO 12685を被検菌として有効区分をしらべ、
フラクシヨンNo.2〜３を集めて水20を加えた
後、ダウエツクス−１（Cl）（米国 ダウ・アン
ド・ケミカル社製）10を詰めたカラムに通し
た。水25で洗滌後、５％食塩水50で溶出し
た。有効区分を集めPH4.0に調整後、再び活性炭
カラム（８）に通し、水24で洗滌後20V/V%
メタノール水で溶出を行つた。有効区分を50mlま
で減圧濃縮した後、アセトン200mlを加え、析出
する沈でんを取、アセトン50ml、エーテル100
mlで洗滌後、減圧乾燥すると粗物質12ｇが得られ
た。 ここに得られた粗物質10ｇをＭ／100リン酸緩
衝液（PH6.6）500mlに溶解した後、同緩衝液で緩
衝化されたDEAE Sephadex Ａ−25（スエーデ
ン、フアルマシア社製造）カラム200mlに通過さ
せ吸着せしめた。同緩衝液400mlでカラムを洗滌
後、0.5％食塩を添加した同緩衝液で溶出を行つ
た。有効フラクシヨンを集め、Ｎ−塩酸を添加し
て液性をPH3.2に調整した後活性炭カラム60mlに
通過させた。同カラムを水200ml、20V/V%メタ
ノール水100mlで洗滌した後、50V/V%アセトン
水で溶出を行い、有効フラクシヨンを集めて減圧
下に濃縮した後、メタノール５mlを加えて溶解
し、アセトン100mlを加え冷所に放置した。析出
した沈澱を取し、エーテルで洗滌後、五酸化リ
ン上で減圧下、40℃、６時間乾燥すると、3.8ｇ
の粉末が得られた。その赤外線吸収スペクトルを
第１図に示す。 元素分析値 Ｃ 34.40、Ｈ 5.56、Ｎ 13.30、 Ｓ 7.56％ 実施例 ２ 実施例１で得られたSB−72310遊離体2.0ｇを
水45mlに溶解後、冷却しながら−水酸化ナトリウ
ム約4.5mlを加えた後、PHを測定しながら注意し
てＮ−水酸化ナトリウムを加えPH6.5に調整した
後、凍結乾燥を行ない白色粉末SB−72310・モノ
ナトリウム塩2.1ｇが得られた。本品を40℃６時
間減圧乾燥したものの赤外線吸収スペクトルは第
２図に示される。また元素分析値はＣ 31.75、
Ｈ 5.19、Ｎ 12.68、Ｓ 7.16、Na 5.01％であ
つた。 実施例 ３ 栄養寒天斜面上に生育させたシユードモナス・
メソアシドフイラSB−72310FERM−Ｐ
No.4653；IFO 13884；ATCC−31433）の菌体を
グリセリン３％、グルコース0.1％、ポリペプト
ン（大五栄養化学社製）0.5％、肉エキス0.5％、
食塩0.5％（PH6.5）からなる培地40mlを200ml三
角フラスコに接種して28℃で48時間、回転式振盪
培養機上で培養したものを種菌とする。 次に種菌１mlを200ml三角フラスコ内の種々の
硫黄化合物を前述の培地40mlに移植して28℃で96
時間回転振盪培養したところ、第３表に示すよう
にSB−72310の生産量の増大が認められた。
菌スペクトルから明らかなように、グラム陰性
菌、グラム陽性菌に対して抗菌力を示す。したが
つて、哺乳動物（例、マウス、ラツト、イヌ、
人）および家禽（例、ニワトリ、アヒル）の上記
細菌の感染症の治療に用いることができる。 SB−72310をたとえば大腸菌感染症の治療薬と
して用いるには、たとえばSB−72310を生理的食
塩水に溶解して注射剤として非経口的に皮下また
は筋肉内に15〜60mg／Kg／日投与する。また経口
剤として、抗生物質SB−72310を乳糖と混合して
カプセル剤とし、SB−72310として60〜400mg／
Kg／日投与する。 また、本発明によつて得られるSB−72310は、
殺菌剤として用いることができる。たとえばSB
−72310を0.1〜1.0W/V%の濃度で蒸留水に溶解
した液剤、またはワセリン、ラノリンを基剤と
し、１ｇあたりSB−72310を15〜60mg含有する軟
膏剤として、上記の動物の手、足、眼、耳などの
殺菌、消毒に用いることができる。 また、SB−72310は新しい医薬品の合成中間体
としても極めて有望な化合物である。 以上の諸性質を有する抗生物質SB−72310を、
既知抗生物質と比較してみると、まず水溶性酸性
物質でＳを含有する抗生物質としては、ペニシリ
ン類、セフアロスポリン類があげられるが、本品
は紫外部吸収を示さないことからセフアロスポリ
ン類とは異なり、また本品の核磁気共鳴ペクトル
でＯ−メチルのシグナルが認められることおよ
び、酸加水分解によつてグルタミン酸が検出され
ることから、天然に得られているペニシリン類、
セフアロスポリン類とは一致しないことが明らか
である。 また、シユードモナス属細菌によつて産生され
る抗生物質としては数多くのものが知られている
が、水溶性酸性物質でＳを含有する抗細菌性抗生
物質は全く知られていない。またシユードモナス
属細菌以外の微生物の産生する既知抗生物質のい
ずれとも物理化学的および生物学的性状を異にし
ている。したがつて本抗生物質は新規化合物であ
ると判断される。 次に実施例をもつてさらに詳細に本発明の内容
を説明するが、これによつて本発明が限定される
ものではない。パーセントは、特にことわりのな
いかぎり重量／容量％を示す。 実施例 １ 栄養寒天斜面上に生育させたシユードモナス・
メソアシドフイラSB−72310（FERM−Ｐ
No.4653；IFO 13884；ATCC−31433）の菌株
を、グルコース１％、ポリペプトン（大五栄養化
学社製）0.5％、肉エキス0.5％、食塩0.5％（PH
7.0）からなる培地500mlを含む２容坂口フラス
コ２本に接種して、28℃で48時間往復振盪培養し
その培養物を種菌とする。 次に、シユークロース1.5％、酵母エキス0.3
％、硫酸アンモニウム0.2％、リン酸第１カリウ
ム0.6％、リン酸第２カリウム0.3％、硫酸マグネ
シウム0.05％、食塩0.05％からなる培地120を
200容ステンレス製発酵槽に入れ、120℃で20分
間蒸気滅菌したのち、前記種菌を接種した。つい
で温度28℃、通気量120／分、撹拌回転数180r.
p.m.の条件下で78時間培養した。この培養物を
シヤープレス遠心分離機にかけ、菌体を分離し、
上清液110をえた。PH4.2に調整したのち活性炭
（クロマト用「白サギ」武田薬品工業製）15を
充てんしたカラムに通し活性物質を吸着させ水45
で洗滌後、50V/V%アセトン水45で溶出し
た。溶出液を10宛分画し、コマモナス・テリゲ
ナIFO 12685を被検菌として有効区分をしらべ、
フラクシヨンNo.2〜３を集めて水20を加えた
後、ダウエツクス−１（Cl）（米国 ダウ・アン
ド・ケミカル社製）10を詰めたカラムに通し
た。水25で洗滌後、５％食塩水50で溶出し
た。有効区分を集めPH4.0に調整後、再び活性炭
カラム（８）に通し、水24で洗滌後20V/V%
メタノール水で溶出を行つた。有効区分を50mlま
で減圧濃縮した後、アセトン200mlを加え、析出
する沈でんを取、アセトン50ml、エーテル100
mlで洗滌後、減圧乾燥すると粗物質12ｇが得られ
た。 ここに得られた粗物質10ｇをＭ／100リン酸緩
衝液（PH6.6）500mlに溶解した後、同緩衝液で緩
衝化されたDEAE Sephadex Ａ−25（スエーデ
ン、フアルマシア社製造）カラム200mlに通過さ
せ吸着せしめた。同緩衝液400mlでカラムを洗滌
後、0.5％食塩を添加した同緩衝液で溶出を行つ
た。有効フラクシヨンを集め、Ｎ−塩酸を添加し
て液性をPH3.2に調整した後活性炭カラム60mlに
通過させた。同カラムを水200ml、20V/V%メタ
ノール水100mlで洗滌した後、50V/V%アセトン
水で溶出を行い、有効フラクシヨンを集めて減圧
下に濃縮した後、メタノール５mlを加えて溶解
し、アセトン100mlを加え冷所に放置した。析出
した沈澱を取し、エーテルで洗滌後、五酸化リ
ン上で減圧下、40℃、６時間乾燥すると、3.8ｇ
の粉末が得られた。その赤外線吸収スペクトルを
第１図に示す。 元素分析値 Ｃ 34.40、Ｈ 5.56、Ｎ 13.30、 Ｓ 7.56％ 実施例 ２ 実施例１で得られたSB−72310遊離体2.0ｇを
水45mlに溶解後、冷却しながら−水酸化ナトリウ
ム約4.5mlを加えた後、PHを測定しながら注意し
てＮ−水酸化ナトリウムを加えPH6.5に調整した
後、凍結乾燥を行ない白色粉末SB−72310・モノ
ナトリウム塩2.1ｇが得られた。本品を40℃６時
間減圧乾燥したものの赤外線吸収スペクトルは第
２図に示される。また元素分析値はＣ 31.75、
Ｈ 5.19、Ｎ 12.68、Ｓ 7.16、Na 5.01％であ
つた。 実施例 ３ 栄養寒天斜面上に生育させたシユードモナス・
メソアシドフイラSB−72310FERM−Ｐ
No.4653；IFO 13884；ATCC−31433）の菌体を
グリセリン３％、グルコース0.1％、ポリペプト
ン（大五栄養化学社製）0.5％、肉エキス0.5％、
食塩0.5％（PH6.5）からなる培地40mlを200ml三
角フラスコに接種して28℃で48時間、回転式振盪
培養機上で培養したものを種菌とする。 次に種菌１mlを200ml三角フラスコ内の種々の
硫黄化合物を前述の培地40mlに移植して28℃で96
時間回転振盪培養したところ、第３表に示すよう
にSB−72310の生産量の増大が認められた。
第１図は、抗生物質SB−72310の赤外線吸収ス
ペクトル（KBr法）を、第２図は、抗生物質SB
−72310・ナトリウム塩の赤外線吸収スペクトル
（KBr法）を、それぞれ示す。
ペクトル（KBr法）を、第２図は、抗生物質SB
−72310・ナトリウム塩の赤外線吸収スペクトル
（KBr法）を、それぞれ示す。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 次の物理化学的性状を有する抗生物質SB−
72310およびその塩 (1) 融点：110℃以上である。 (2) 外観：白色粉末 (3) 元素分析値：（％） Ｃ 34.40±0.5 Ｈ 5.50±0.5 Ｎ 13.45±0.5 Ｏ 38.90±1.0 Ｓ 7.75±0.5 （40℃、６時間五酸化リン上で減圧乾燥したも
の。） (4) 分子量：400±20（滴定法による。） (5) 比旋光度：〔α〕２３ Ｄ＋0.5゜±５゜（Ｃ＝
0.93、H2O） (6) 紫外線吸収スペクトル：210nｍ以上に特異
な吸収を示さない。 (7) 赤外線吸収スペクトル：臭化カリウム錠によ
る吸収スペクトルの主な吸収（波数）は次のと
おりである： 1770、1650、1530、1240、1043。 (8) 溶解性：石油エーテル、ヘキサン、ジエチル
エーテル、ベンゼン、酢酸エチル、クロロホル
ムに不溶。エタノール、ピリジン、アセトンに
難溶。メタノール、ジメチルスルホキシドに可
溶。水に易溶。 (9) 呈色反応：ニンヒドリン、過マンガン酸カリ
ウム試薬に陽性。塩化第二鉄−フエリシアン化
カリウム試薬、坂口反応、モーリツシユ試薬に
陰性。 エールリツヒ試薬に擬陽性。 (10) 塩基性、酸性、中性の区別：酸性物質。 ２ シユードモナス属に属する抗生物質SB−
72310生産菌を培地に培養し、培養物中に抗生物
質SB−72310を生成蓄積せしめ、これを採取する
ことを特徴とする抗生物質SB−72310の製造法。 ３ 培地中にシユードモナス属に属する抗生物質
SB−72310生産菌の資化しうる硫黄化合物を添加
して培養する特許請求の範囲第２項記載の方法。 ４ 硫黄化合物が硫酸アンモニウム、亜硫酸アン
モニウム、チオ硫酸アンモニウム、システイン、
シスチン、Ｌ−チアゾリジン−４−カルボン酸、
ヒポタウリンまたはグルタチオンである特許請求
の範囲第３項記載の方法。
Priority Applications (11)
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|---|---|---|---|
| JP12227778A JPS5549394A (en) | 1978-10-03 | 1978-10-03 | Antibiotic substance sb-72310 |
| US05/971,090 US4225586A (en) | 1978-10-03 | 1978-12-15 | Antibiotic SB-72310 |
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| DE19792939333 DE2939333A1 (de) | 1978-10-03 | 1979-09-28 | Antibiotikum sb-72310 und verfahren zu seiner herstellung |
| ES484597A ES484597A1 (es) | 1978-10-03 | 1979-09-29 | Metodo de producir antibioticos a partir de organismos del genero pseudomonus. |
| CH886479A CH644871A5 (de) | 1978-10-03 | 1979-10-02 | Antibiotikum sb-72310 und verfahren zu seiner herstellung. |
| FR7924541A FR2449099A1 (fr) | 1978-10-03 | 1979-10-02 | Nouvel antibiotique sb-72310 et son procede d'obtention a partir d'un microorganisme appartenant au genre pseudomonas |
| IT26201/79A IT1193505B (it) | 1978-10-03 | 1979-10-02 | Antibiotico prodotto da microorganismi del genere pseudomonas e relativo procedimento di preparazione |
| BE0/197454A BE879170A (fr) | 1978-10-03 | 1979-10-03 | Nouvel antibiotique sb-72310, sa preparation et son utilisation |
| DK414079A DK148659C (da) | 1978-10-03 | 1979-10-03 | Fremgangsmaade til fremstilling af et antibiotikum benaevnt isosulfazecin eller antibiotikum sb-72310 og mikroorganismekultur til anvendelse ved udoevelse af fremgangsmaaden |
| GB7934348A GB2032913B (en) | 1978-10-03 | 1979-10-03 | Antibiotic sb-72310 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP12227778A JPS5549394A (en) | 1978-10-03 | 1978-10-03 | Antibiotic substance sb-72310 |
Publications (2)
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|---|---|
| JPS5549394A JPS5549394A (en) | 1980-04-09 |
| JPS6133558B2 true JPS6133558B2 (ja) | 1986-08-02 |
Family
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Family Applications (1)
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|---|---|---|---|
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Country Status (11)
| Country | Link |
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| JP (1) | JPS5549394A (ja) |
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| CH (1) | CH644871A5 (ja) |
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Cited By (1)
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|---|---|---|---|---|
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|---|---|---|---|---|
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-
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- 1979-10-03 BE BE0/197454A patent/BE879170A/fr not_active IP Right Cessation
- 1979-10-03 DK DK414079A patent/DK148659C/da not_active IP Right Cessation
Cited By (1)
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