JPS6211053A

JPS6211053A - ビフイズス菌の耐酸性増強剤

Info

Publication number: JPS6211053A
Application number: JP60147739A
Authority: JP
Inventors: Yukio Kadooka; 幸男門岡; Tetsuji Hirota; 廣田　哲二; Norio Kawanishi; 川西　悟生
Original assignee: Snow Brand Milk Products Co Ltd
Current assignee: Snow Brand Milk Products Co Ltd
Priority date: 1985-07-05
Filing date: 1985-07-05
Publication date: 1987-01-20

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】産業上皇剋里公立本発明は、ビフィズス菌の耐酸性を増強させるための物
質、特にビフィズス菌の生菌を含むｐＨ約４．０〜４．
３の発酵乳のような食品に添加して該発酵乳に含まれる
ビフィズス菌の耐酸性を増強させるのに利用されるビフ
ィズス菌の耐酸性増強剤に関する。

ここでいう“ビフィズス菌”とは、ビフィドバクテリウ
ム属に属する一群の微生物を意味するものであって、一
般にビフィズス菌と称せられることから、ここではビフ
ィズス菌という用語を用いることにする。

従米企肢血桓豊員近年、ビフィズス菌は、母乳栄養児の腸内菌叢中量も優
勢な細菌であるのみならず、腸内菌叢の詳細な生態が解
明されるに伴ない人工栄養児や成人においても優勢菌と
して存在していることが明らかにされてきている。特に
、最近はビフィズス菌の生理的意義や健康上との関連性
について多方面から研究がなされており、その効果とし
て■腸内における腐敗菌の抑制作用、■腸内における病
原菌生育の抑制作用、０体内における毒性アミン類の産
生抑制作用、■腸管内病原菌の感染防禦および■生体に
おける免疫賦活作用等についての知見が得られている。

したがって、このようなビフィズス菌の作用に鑑み、乳
児、成人を含むヒトの健康維持、増進を目的としてビフ
ィズス生菌を含む種々の飲食品が多く製造されている。

特にビフィズス生菌を含む各種発酵乳飲料は嗜好性、栄
養性および風味の点で優れ、ており、加うるに活力のあ
る生菌を直接摂取し得ることから、優れた食品として広
く普及している。

しかしながら、ビフィズス菌は、■その増殖および生残
性の点で酷しい嫌気的環境を必要とすること、■一般に
耐酸性が弱く、発酵乳製品のようなｐＨの低い環境では
菌が死滅すること、■殊に、製造工程で製品への混入が
避けられない微量溶存酸素の存在下では、上記低ｐＨに
おける死滅性が−そう加速されること、および■一般に
発酵乳飲料ではｐＨ４，０〜４．３前後のものが風味が
最良であって、嗜好上置も好ましいのにかかわらず、ビ
フィズス菌の死滅性はｐＨ４，３以下で著しく高くなる
ため、上記飲料のｐｆｌを４．３以上、多くは４．５以
上に保持することが余儀なくされる等の多くの問題点が
ある。

従来、上述したようなｐＨの低い環境下でのビフィズス
菌の生残性を改善する目的で、発酵乳等の製品の製造工
程や製品組成の変更を始め、自然界からの耐酸性ビフィ
ズス菌の分離ならびに製品中の溶存酸素の低減等につい
て多くの検討がなされているが、未だ上記菌の生残性の
問題点は十分に解決されていない。

■が　ンしようとする５　占本発明者は、上述したような状況に鑑み、ｐＨの低い環
境下でのビフィズス菌の生残性の改善について従来とは
異なる観点から検討し、上記生残性を改善するための物
質を広く探索した結果、ｐＨ４，３以下でのビフィズス
菌の耐酸性を著しく増強し得る物質を見出し、本発明を
なすに至った。

すなわち、本発明は、ビフィズス生菌を含むｐＨ４，０
〜４．３程度の発酵乳様食品に添加して、ビフィズス生
菌の生残性を高めるためのビフィズス菌の耐酸性増強剤
を提供することを目的とする。

以下本発明の詳細な説明する。

皇皿坐１虞本発明の特徴は、（１）豚のような哺乳動物の肝臓の熱
水抽出物、もしくは（２）該熱水抽出物の沈澱画分を活
性成分とするビフィズス菌の耐酸性増強剤にある。

上記活性成分としての熱水抽出物ならびにそれの沈澱画
分は通常凍結乾燥された形態で用いられ。

る。なお、これらの活性成分は、はとんど無味、無臭で
ある。

。　占を１′するための本発明で活性成分として用いる上記肝臓の熱水抽出物な
らびにそれの沈澱画分は下記のようにして調製される。

肝臓の熱水抽出物：新鮮な豚等の肝臓を細断後、これに等量程度の水を加え
て２０分間程度煮沸して抽出を行なう。得られた熱水抽
出液を冷却した後、濾過および遠心分離により固形分を
除去し、ついで凍結乾燥する。

肝臓熱水抽出物の沈澱画分：下記（イ）〜（ニ）に示す各種方法により調製し得る。

（イ）上記のようにして得られた肝臓の熱水抽出液に冷
却後、乳酸、酢酸または塩酸等の酸を添加してｐＨを４
．０に調整することにより生成する沈澱を遠心分離で回
収する。

得られた沈澱を少量の水に熔解し、ついで凍結乾燥する
。

（ロ）上記熱水抽出液に冷却後、トリクロル酢酸を該抽
出液に対して１２重量％以下の割合で添加することによ
り生成する沈澱を同様に回収して凍結乾燥する。

（ハ）上記熱水抽出液に冷却後、エタノールを５０重量
％添加することにより生成する沈澱を同様に回収して凍
結乾燥する。

（ニ）上記熱水抽出液に冷却後、硫酸アンモニウムを４
０％飽和させることにより生成する沈澱を同様に回収し
て、凍結乾燥する。

本発明では、上述のようにして調製して得られる肝臓の
熱水抽出物ならびにその沈澱画分を活性成分として、ビ
フィズス生菌を含む発酵乳のような食品に、０．１）ｍ
ｆ量％以上添加して用いる。

血ユ少菫来次に、上記活性成分を、ビフィズス菌を用いて製造した
発酵乳に添加した場合のビフィズス菌の生残性を試験し
た結果を示す。

試験方法発酵乳の調製：ラクトバチルス・ブルガリクス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌ
ｌｕｓｂｕｌｇａｒｉｃｕｓ）とストレプトコッカス・
テルモフィルス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ　ｔｈｅ
ｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）またはラクトバチルス・アシドフ
ィルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ　ａｃｉｄ。

ｐｈｉｌｕｓ）を、無脂乳固形分８重量％と乳脂肪１重
量％を含む培地（ｐＨ４，０〜４．３）に接種して培養
して得られた培養物に、ビフィズス菌としてビフィドバ
クテリウム・ロンガム（Ｂｉｆｕｄｂａｃｔｅｒｉｕｍ
　ｌｏｎｇｕｍ　５ＢＴ−２９２８）を変法ガムブイヨ
ンで培養、集菌し、洗浄した菌懸濁液を１０”　／＋１
以上になるように接種して発酵乳（ｐＨ４，００〜４．
３０）を調製した。なお、保存中のｐｏの低下、変動を
避けるため、培養物は８０℃で５分間加熱殺菌したもの
を用いた。

ビフィズス菌の生残性の測定：上記発酵乳に対し、上述のようにして調製した豚ならび
に牛肝臓の熱水抽出物（凍結乾燥したもの）０．３重量
％添加し、１０℃で１０日間保保存後フィズス菌の生菌
数を測定した。なお表金試料ともｐＨの測定は、抽出物
添加後に測定、調整し、また、保存後にも測定してｐｎ
が変動していないことを確認した。結果は表１に示すと
おりである。なお、対照として上記熱水抽出物を添加し
ないものについても生菌数を測定した結果を併せて表１
に示した。

表１にみられるとおり、ｐ）ｌ　４．３０では本発明に
係る活性成分を添加したものは、対照と比べて大きな差
異がないけれども、ｐＨ４，１５ではその効果が顕著で
あり、ｐＨ４，００でも１０日間の保存で３．３Ｘ　１
０Ｓの生菌の生残がみられる。

また、上記発酵乳に対し、前記（イ）〜（ニ）の方法に
よりｍｓ！！シた豚ならびに牛肝臓の熱水抽出物の各沈
澱画分（凍結乾燥したもの）をそれぞれ添加し、同様に
保存後のビフィズス菌の生菌数を測定した結果を表２に
示す。

表２にみられるとおり、本発明に係る活性成分を添加し
たものは、いずれも対照に比べて生菌の生残性が著しく
高いことがわかる。なお、１２％トリクロル酢酸の上滑
画分を０．３重量％添加したものは、生菌の生残性がな
い。

さらに、本発明に係る活性成分は、溶存酸素量の多い系
においても、ビフィズス生菌の生残性に対しても下記に
示す試験結果にみられるとおり、顕著な効果を示す。

試験方法上述のようにして調製した発酵乳の試料を二つの試験区
に分け、一方にはスターラーで攪拌して空気を十分に溶
は込ませ、他方には窒素ガスを吹き込んで空気を完全に
置換した後密栓したものに、それぞれ活性成分を添加し
て、１０℃で７日間保存後のビフィズス菌の生菌数を測
定した。結果は表３に示すとおりである。

表３にみられるとおり、対照でも、酸素の溶存していな
い系では１．４Ｘ１０Ｓ７ｍｌの生菌数を示すことから
、低いｐｕ環境下でのビフィズス菌の生残に及ぼす酸素
の影響が極めて強いことが認められる。しかし、本発明
に係る活性成分を添加した場合は、酸素が溶存している
系においてもビフィズス菌の生残性が非常に高いことか
ら、溶存酸素の影響が極めて低いことがわかる。

したがって、本発明によると、従来の発酵乳のように、
その製造工程における攪拌、均質化、添加物の混入、容
器への充填等の作業過程、さらには製品流通過程での空
気の混入を避けるための条件設定や選択に配慮を払う必
要がなくなり、その結果製品コストを低下させることも
可能となる利点がある。

次に、ビフィドバクテリウム属に属し、人への腸管定着
性が強く、且つ、各種の発酵乳や食品に広く用いられて
いるビフィズス菌に対するｐＨ耐性への保護効果につい
て下記により検討した。

前記同様にして調製した発酵乳（ｐＨ４，０）に対し、
豚肝臓抽出液の硫酸アンモニウム４０％飽和沈澱画分の
凍結乾燥物を０．３％接種し、これに対し、各種の培養
菌体懸濁液を接種した。

結果は表４に示すとおりである。

また、本発明における活性成分としての肝臓熱水抽出物
ならびにそれの沈澱画分の凍結乾燥品は、前述したよう
にほとんど無味、無臭であって、それらを各種発酵乳等
に所定量添加しても風味に影響を及ぼすことが全くなく
、加うるに、衛生上および栄養上の点でも何ら問題がみ
られない。

以下に実施例を示して本発明およびその効果を具体的に
説明する。

実施例１豚の肝ｍｌ　１０ｋｇを細断後、これに等量の水を加え
て２０分間煮沸して抽出液を得た。

この抽出液を冷却した後濾過および遠心分離して固形分
を除去し、次いで凍結乾燥して熱水抽出物的６００ｇを
得た。

一方、無脂乳固形分８％（重量）と乳脂肪２％（重量）
を含む牛乳を殺菌したものに、ストレプトコッカス・テ
ルモフィルスとビフィドバクテリウム・ロンガムを接種
して常法に従って培養し、ｐＨ４，３３、ビフィズス菌
数２．６Ｘ１０”　／ｍｌの発酵乳を得た。

この発酵乳に対し、上記熱水抽出物０．３％（重量）添
加し、均質化処理して容器に充填し、１０℃で保存した
。７日間保存後、発酵乳のｐＨは４．１３に低下したが
、ビフィズス菌数は？、８　Ｘ　１０６／ｌｏ　ｊ！で
あった。なお、上記熱水抽出物を添加しない対照では７
日間保存後のビフィズス菌数は６．ｌＸ１０◆／１ａｌ
ｌにまで低下した。

実施例２実施例１に記載したと同様の手順で得た熱水抽出液に、
冷却後エタノールを５０％（重量）添加して生成した沈
澱を遠心分離により回収し、これを少量の水に溶解した
ものを凍結乾燥してエタノール沈澱画分３７ｇを得た。

得られた沈澱画分を、実施例１に記載したと同様の手順
で調製した発酵乳（ｐＨ４，２５、ビフィズス菌数１．
４ｘｌＯ”　／ｒａｔ）　ニ対シ、０．１　％　（重Ｊ
ｉ）　ｇ加し、均質化処理して容器に充填し、１０℃で
保存した。

７日間保存後、発酵乳のｐＨは４．０８に低下したがビ
フィズス菌数は５．４Ｘ１０６７ｍｌであった。

なお、沈澱画分無添加の対照では、ビフィズス菌数は１
．２Ｘ１０’　／１Ｉｌｌｌにまで低下した。

実施例３実施例１に記載したと同様の手順で得た熱水抽出液に、
冷却後７０％乳酸を加えてｐＨを４．０に調整して生成
すした沈澱を回収し、これを少量の水に熔解したものを
凍結乾燥して乳酸沈澱画分２７ｇを得た。

得られた沈澱画分を、実施例１に記載したと同様な手順
で調製した発酵乳（ｐＨ４，３０、ビフィズス菌数２．
２Ｘ１０”　／ｒａｇ）に対して０．１％（重量）添加
し、実施例１と同様にして保存した。

７日間保存後、発酵乳のｐｏは４．１３に低下したが、
ビフィズス菌数は７．６　Ｘ　１０６／ｍ　ｊ！であっ
た。

なお、沈澱画分無添加の対照では、ビフィズス菌数は１
．４Ｘ１０’　／ｌ１ｌｌｌにまで低下した。

Claims

【特許請求の範囲】

（１）哺乳動物の肝臓の熱水抽出物を活性成分とするビ
フイズス菌の耐酸性増強剤。
（２）上記肝臓が豚肝臓である特許請求の範囲第（１）
項記載の耐酸性増強剤。
（３）熱水抽出物は凍結乾燥されたものである特許請求
の範囲第（１）項記載の耐酸性増強剤。
（４）哺乳動物の肝臓の熱水抽出物の沈澱画分を活性成
分とするビフイズス菌の耐酸性増強剤。
（５）上記熱水抽出物の沈澱画分は、該抽出物に乳酸、
酢酸または塩酸を添加し、ｐＨ４．０に調整して沈澱さ
せた画分を凍結乾燥したものである特許請求の範囲第（
４）項記載の耐酸性増強剤。
（６）上記熱水抽出物の沈澱画分は、該抽出物に対しト
リクロル酢酸を１２重量％以下になるように添加して沈
澱させた画分を凍結乾燥したものである特許請求の範囲
第（４）項記載の耐酸性増強剤。
（７）上記熱水抽出物の沈澱画分は、該抽出物にアルコ
ールを５０重量％添加して沈澱させた画分を凍結乾燥し
たものである特許請求の範囲第（４）項記載の耐酸性増
強剤。
（８）上記熱水抽出物の沈澱画分は、該抽出物に対して
硫酸アンモニウムを４０％飽和させて沈澱させた画分を
凍結乾燥したものである特許請求の範囲第（４）項記載
の耐酸性増強剤。