JPS62148413A

JPS62148413A - タバコ立枯病およびナス科植物青枯病の防除方法

Info

Publication number: JPS62148413A
Application number: JP60288013A
Authority: JP
Inventors: Shigeki Nishikawaji; 茂樹西川路; Mine Fujimori; 嶺藤森; Akio Onishi; 昭男大西; Hiroshi Tanaka; 博田中
Original assignee: Japan Tobacco Inc
Current assignee: Japan Tobacco Inc
Priority date: 1985-12-23
Filing date: 1985-12-23
Publication date: 1987-07-02
Also published as: JPH0482124B2

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】３、発明上の利用分野［産業上の利用分野］タバコ植物のタバコ立枯病は学名シュドモナス′ソラナ
シアラム（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　ｓｏｌａｎａｃｅ
ａｒｕｍ）細菌（別名タバコ立枯病菌）の感染によって
発病する土壌伝染性病害であり、難防除病害として認識
されている。本発明は、学名シュドモナス・ソラナシア
ラム（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　ｓｏｌａｎａｃｅａｒ
ｕｍ）に属する１系統の細菌を生きたまま、高分子物質
を用いて固定化し、かくして得られた該細菌固定化物を
土壌に施用することによってタバコ立枯病およびナス科
植物青枯病を防除する方法に関するものである。

［従来の技術］一般に土壌病害の発生は、単一作物の連作により土壌中
に高密度で病原菌が生存し、かかる土壌環境下に同一の
作物を栽培することが大きな原因と考えられている。タ
バコ立枯病およびナス科植物青枯病に対する防除方法と
して、現在クロルピクリンや臭化メチルなどの土壌消毒
剤を用いる土壌殺菌消毒が広く行なわれているが、この
ような殺菌方法は、土壌中に生息する有益な微生物を含
めて無差別に殺菌し、栽培土壌を「死んだ土」にしてし
まう欠点がある。さらに、これらの使用により薬害や公
害の発生する恐れもあり、また土壌中に有害な臭素や過
剰の塩素が蓄積されることにもなる。

本発明者らは、前述の土壌病防除剤使用に代わる有効な
防除方法として、先に加熱殺菌処理した細菌シュドモナ
ス・ソラナシアラム・　Ｍ２３Ｒ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎ
ａｓ　ｓｏｌａｎａｃｅａｒｕｍ　Ｍ２３Ｒ）　　を土
壌に施用することを特徴とする前記したナス科植物の土
壌病害防除方法について発明を行なった（特公昭５９−
２４１２６号公報）。

サラに、シュドモナス・ソラナシアラムに属する１系統
の細菌であるシュドモナス・ソラナシアラム゛Ｍ４Ｓ　
　（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　ｓｏｌａｎａｃｅａｒｕ
ｍ　Ｍ４Ｓ　）（以下、　Ｍ４Ｓと略記する）を生きた
ままナス科植物の根部に接種することを特徴とする前記
したナス科植物の土壌病害防除方法について特許出願を
行なったところである（特開昭６０−１８６２３０号）
。

また、最近植物病原菌防除活性を有する微生物の固定化
複合体の製造法（特開昭６０−１８０５８８および特開
昭６０−１８０５８９号公報）が開示されており。

植物病原菌拮抗微生物固定化物を用いたキラリのつる割
れ病、ナスの青枯病およびトマトの萎凋病についての防
除効果の記載がある。

［発明が解決しようとする問題点コ本願発明は、前記の生きたＭ４Ｓを用いたタバコ立枯病
等を対象とする土壌病害防除方法の改良に関するもので
ある。

本発明の目的は前記特開昭６０−１８６２３０号公報記
載の発明方法よりも、さらに優れた防除効果を発揮する
タバコ立枯病　およびナス科植物青枯病の防除方法を提
供するものである。

前記特開昭６０−１８６２３０号公報記載の発明方法（
以下、　ＭｄＳ生菌生菌苗根植接種処理法う）は、移植
前に移植苗の根部（通常は苗床でポットにより区画され
た状態の土壌中に苗が１本植えられている。）をポット
ごと１時間前後Ｍ４Ｓ菌のツ濁液中に浸漬したのち１本
画に移植する方法であり、移植作業時にこのような浸漬
作業を行なうことは。

農作業が繁雑かつ労力を必要とする問題点がある。

また、移植後日時が経過してくると、根が伸長し根圏が
拡大してくるのに伴い、防除効果が低下してくる。これ
は１日時の経過に伴い、菌の生存環境が元のポット土壌
の外域に及びにくいこと、および菌が死滅または減少し
てくることによるものと考えられ、防除効果の持続性に
問題がある。

［問題点を解決するための手段］上述の欠点に着目しこれを克服するため、移植後苗の生
長に伴う拡大された根圏に防除菌を配置丈ること、およ
び防除菌の生存環境を改良することにより、防除効果の
持続性を維持する防除方法として本発明に想到した。す
なわち９本発明は生きた細菌シュドモナス・ソラナシア
ラム・Ｍ４Ｓを高分子物質を用いて固定化し、かくして
得られた固定化物を土壌に施用することを特徴とするタ
バコ立枯病の防除方法である。以下１本゛発明方法につ
いて詳細に説明する。

本発明に用いられるＭ４Ｓは微工研菌寄第７３７０号と
して、　１９８３年１２月１４日に工業技術院微生物工
業技術研究所に寄託されている。これは、タバコ立枯病
菌として知られるシュドモナス・ソラナシアラム・Ｕ−
７菌株からの突然変異によって得られたもので、病原性
を有する同細菌と競合してよく生育し、かつ同細菌の生
育を阻害し、さらにナス科植物に対して病原性を全（有
さない特徴を有する公知の菌株である。

ト１４Ｓを培養する方法は９例えば公知のＣＰＧ培地（
カザミノ酸１ｇ、ブドウ糖１０ｇ、ペプトン１０　ｇ　
。

水１００１００Ｏに接種し、　２Ｂ−３０°Ｃで４８時
間前後振盪培養する。こうして得られた培養液を遠心分
離器を用いて集菌し、湿菌体を得る。この湿菌体を高分
子物質あるいはそのモノマーを用いて固定化を行なう。

菌体の固定化方法は、包括法として公知の方法（「酵素
工学」、福井三部らｍ、　ｐ１５７−２０２）でよい。

すなわち、天然物質であるデンプンおよびその誘導体、
コンニャク粉およびその精製物、ゼラチン、アルギン酸
およびその塩、あるいはカラギーナン等の藻類由来の多
糖質物質などの高分子物質をゾル状にし、前記湿菌体を
加えてゲル化させればよい。また、ポリアクリルアミド
やアクリルアミドアクリル酸コポリマーのモノマーを前
記湿菌体を加えてゲル化させてもよい。さらに、ポリビ
ニルアルコール、光硬化性樹脂等のプレボリマーを前記
湿菌体を加えてゲル化さ−Ｕ゛て固定化する方法も可能
である。得られた固定化物に含まれるＭ４Ｓの生きてい
る細菌数は１×１０５個／ｍ１以上、好ましくは１×１
０　個／ｍ１以上である必要がある。

かくして得られたＭ４Ｓ固定化物を土壌に施用すること
により、タバコ立枯病およびナス科植物青枯病に対して
、すぐれた防除効果を発揮する。施用方法は、特に限定
されないが２本圃に基肥を施す日もしくは畦を成形する
日から移植当日に、　１０ｍ２当たり２を程度土壌とよ
く混ぜ合わせて施用する。堆肥その他の肥料と混用して
も差支えない。

この発明の方法により病害防除対象とされる植物は、タ
バコ、トマト、ナス、ピーマン、ジャガイモなどのナス
科植物で、対象とされる病害はシュドモナス・ソラナシ
アラムＩＩ薗によって引きおこされるタバコ立枯病およ
びナス科植物青枯病である。

［作用］Ｍ４Ｓによるタバコ立枯病およびナス科植物青枯病の防
除機作は、　Ｍ４Ｓが植物体に侵入した後、防除効果を
発揮する点に特徴を有する。この点から。

従来のＭＪＳ生菌苗根部接種処理法による以外に防除効
果を発揮し得ないと考えられていた。

本発明方法は、　Ｍ４Ｓの固定化物を苗移植前に。

土壌中に混入する点に特徴があり、土壌中の生きたＭ４
Ｓが移植後の植物の根に侵入して、　Ｍ４Ｓの特異的作
用により植物自身が持っている防除反応を引き起こすこ
と、さらに、　Ｍ４Ｓが抗病原菌物質を分泌することに
より、防除効果が発揮される。とくに、移植後に新に伸
長した根にも、順次±１１中に混入した固定化物中のＭ
４Ｓが侵入し、防除効果を発揮する点に本発明方法の優
れた点がある。従来の７１４Ｓ生菌根部接種処理法にお
いて、一旦根に侵入したＭ４Ｓは、茎へ移行・増殖する
ことは、実験的に確かめられているが、新に伸長した根
には移行しないため、同法の効果が持続性に欠けること
となるのである。

本発明方法の効果は、以下の実施例において明らかであ
る。

実施例１カザミノ酸０．１％、ブドウ糖１％、ペプトン１％を含
む液体培地にＭ４Ｓを接種し、３０°Ｃで４２時間培養
した。培養液を遠心分離器を用いて集菌し湿菌体を得た
。湿菌体１０ｇに対して、３％アルギン酸すトリウム水
溶液３０００ｍｌを用いてアルギン酸すトリウム懸濁液
を調製し、これを１．５％塩化カルシウム水溶液中に滴
下させる方法により、直径２〜３ｍｍの球状のアルギン
酸カルシウムによるＭ４Ｓの固定化物を得た。

得られた固定化物はおよそ１×ｌＯ個／ｍｌのバ４Ｓを
含んでいた。

日本たばこ（株）宇都宮試験場内のタバコ立枯病汚染圃
場でタバコを栽培した。圃場は３区に分け、　（１）本
願発明のＭｄＳ生菌固定化物土壌処理区、　　（２）Ｍ
ＪＳ生菌苗根部接種処理区、　（３）無処理区とした。

（１）本願発明のＭｄＳ生菌固定化物土壌処理区の処理
は以下の通り行なった。すなわち、前記の方法で調製し
て得られた固定化物をタバコ移植２週間前の基肥入れ時
に堆肥に混入して、　１０ｍ２当たり２Ｌとなるようタ
バコ圃場に施用した。タバコ苗の移植は慣行に従った。

＜２）ＭｄＳ生菌苗根部接種処理区は先の発明の処理方
法に従って行なった。すなわち、実施例１の方法と同様
にして得られた湿菌体を蒸留水に−び濁し処理液を調製
した。懸濁液中の細菌濃度は懸濁液１ｍｌ当たり１０１
囚であった。こうして調製した処理液を処理槽に入れ、
深さ２ｃｍとし、その中にビニール製ポット　（１辺２
８．５ｃｍ）に植えたタバコ苗を１時間浸漬した。この
処理はタバコ苗を本圃に移植する当日に行なった。

（３）無処理区は対照区として、何の処理も行なわず、
慣行に従ってタバコ苗を移植した。

苗を本圃に移植後、タバコ立枯病の発病状態を調査した
。発病程度は以下に示す指数を用いて。

平均罹病指数を求め、これより防除率を算出した。

指数　　　０　：　健全１　：　下位葉１−２枚が萎凋３　；　半数の葉が萎凋５　：　全集が貧化萎凋１０　：　枯死防除率（％）（処理区の平均罹病指数）＝（１−、）ｘｌｏｏ（対照区の平均罹病指数）・苗を移植８４日後の調査結果を表−１に示した。

表−１酵母エキス１％、ブドウＩ！ｉ１．５％を含む液体培地
にＭ４Ｓを接種し、３０°Ｃで４８時間培養した。培養
液を遠心分離器を用いて集菌し湿菌体を得た。湿菌体１
ｇに対して滅菌水を用いて２００ｍ　ｌの菌体）ひ濁液
を調製した。一方、　１８．７％アクリルアミド（アク
リルアミドを９６％、　　Ｎ、Ｎ”−メチレンビスアク
リルアミドを４％含む）水溶液７５０ｍ１．０．２３％
Ｎ。

Ｎ、Ｎ”、Ｎ゛−テトラメチルエチレンジアミン水溶液
２５０ｍ１および０．２８％過硫酸アンモニウム水溶液
５００ｍ１をそれぞれ調製した。これら３種類の水溶液
と菌体懸濁液を混合したのち静置すると混合液は固化し
た。この固化物をメツシュを用いて２〜３ｍｍの立方体
となし、　　Ｍ４Ｓ固定化物を得た」得られた固定化物
はおよそ１×ｌＯ個／ｍｌの１ｌＩＳを含んでいた。

前記の方法で調製して得られた固定化物を用いて、トマ
ト青枯病の発生を調べた。すなわち、乾土１ｇあたりｌ
Ｘ１０３個の菌数になるように、病原性のあるトマト青
枯病菌を加えた黒ボク土に対して、１１５０の割合で固
定化物を加えた土をボットに入れ、その日のうちに、こ
こに播種後２０日経過したトマト苗を移植した。対照と
して、先のトマト肯枯病菌を加えた黒ボク土をポットに
入れ。

同様にトマト苗を移植した。

苗を移植後４５日目にトマト青枯病の発病状況を調査し
た。発病程度、防除率は実施例１と同様にして求めた。

その結果を表−２に示した。

表−２実施例３カザミノ酸０．１％、ブドウ糖１％、ペプトン１％を含
む液体培地にＨ４Ｓを接種し、３０°Ｃで４０時間培養
した。培養液を遠心分離器を用いて集菌し湿菌体を得た
。湿菌体１０ｇに対して、２．５％カラギーナン水溶液
３０００ｍｌを用いてカラギーナン懸濁液を調製し、こ
れを２％塩化カリウム水溶液中に滴下させる方法により
、直径２〜３ｍｍの球状のカラギーナンによるＨ４Ｓの
固定化物を得た。

得られた固定化物はおよそｌＸＩＯ３個／ｍｌのＨ４Ｓ
を含んでいた。

日本たばこ（株）宇都宮試験場内のタバコ立枯病汚染圃
場でタバコを栽培した。圃場は３区に分け、（１）本願
発明のＭＪＳ生菌固定化物土壌処理区、（２）ＭＪＳ生
菌苗根部接種処理区および（３）無処理区とした。

（１）本願発明のＭＪＳ生菌固定化物土壌処理区の処理
は以下の通り行なった。すなわち、上記の方法で調製し
て得られた固定化物をタバコ移植１週間前の基肥入れ時
に、　ｉ（を肥に混入して、　ｌ０ｍ２当たり２ｆｔと
なるようタバコ圃場に施用した。

（２）　　Ｍ４ｓ生菌苗処理区は実施例１記載と同様の
方法によった。

苗を本圃に移植後、タバコ立枯病の発病状態を；ｊｊ１
査した。発病程度、防除率は実施例１と同様にして求め
た。

苗を移植７６日後の調査結果を表−３に示した。

表−３［発明の効果］実施例から明らかなように９本発明の方法によりタバコ
立枯病およびナス科植物青枯病を対象とするシュドモナ
ス・ソラナシアラム・ＭＪＳ生菌処理による土壌病害防
除効果を飛開的に増大することが可能となった。

手続補正書（自発）昭和６１年９月２日

Claims

【特許請求の範囲】

生きた細菌シュドモナス・ソラナシアラム・Ｍ４Ｓを高
分子物質を用いて固定化し、かくして得られた固定化物
を用いて同菌を生きたまま、土壌に施用することを特徴
とするタバコ立枯病およびナス科植物青枯病の防除方法
。