JPS62181218A - 感染防御剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 １、発明の背り貝 ［技術分野１ 本発明は感染防御剤に関するものであり、さらに詳しく
は中性多糖体１ｐ　＋らなる感染防御剤に関するｂので
ある。本発明の感染防御剤は生体に投与されて種々の微
生物特に細菌の感染に対する生体の防御力を増大させる
ものであり従って感染症の予防や治療に有効に使用され
る。

［先行技術］ 本発明？ｉ等は先にメリア・アザジラクタ樹皮の熱水抽
出物を精製して得られる多糖体ＭＡ９は強い抗腫瘍作用
やインターフェロン誘導作用を有することを見い出した
（特開昭５７−１７６９１４号、同５１−１７６９１５
号、同６０−４２３９２９号および同６０−４５５２１
号公報）。尚多糖体Ｍ△９は上記特許公開公報において
は多糖体Ｎ９Ｇ　Ｉと命名されているが両者は同一物質
である。

本発明者等は上記多糖体ＭＡ９の薬理作用についてさら
に研究した結果、本多糖体を投−リした初物が細菌の感
染にかかりにくいことを知り本発明を完成した。

■１発明の目的 本発明は生体に投与された場合に感染防御作用が大きく
かつ毒性の低い感染防御剤を提供することを目的とする
。

かかる目的を達成するため本発明は下記のイ）および／
または口）の多糖体を含有する感染防御剤よりなる。

イ）　α−（１→４）−グルカンの主鎖にアラビノース
がα−（１→６）結合し、グルコースとアラビノースの
構成割合が約５：１の中性多糖体。

口）　α−（１→４）−グルカンを主鎖とし、主鎖中に
β−（１→３）フコースを含み、分枝としてα−（１→
６）アラビノースを有し、グルコース、アラビノースお
よびフコースの構成割合が約５：２：１の中性多糖体。

本発明においては上記中性多糖体として多糖体ＭＡ９が
特に好適に使用される。

■１発明の詳細な説明 本発明において感染防御剤として好適に使用される多糖
体ＭＡ９は、メリア・アザジラクタ樹皮の熱水抽出物か
ら得られる中性の多糖体である。

メリア・アザジラクタは学名をメリア・アザジラクタ・
リンネ（Ｈｃｌｉａ　　ａｚａｄｉｒａｃｈｔａ　Ｌｉ
ｎｎ、）よたはアブジラクタ・インディカ　ジＶス（八
ｚａｃｌｉｒａｃｈｔａ　　１ｎｔｌｉｃａ　Ｊｕａｓ
）といい、熱帯地域に自生する高さ１０ｍ以上に達する
木本植物である。

従来メリア・アナジラクタ抽出物が種々な薬理作用を右
ザることは知られている。即ら、メリア・アザジラクタ
の樹皮、菓部、花部、梁部、枝部、根皮または樹脂を水
または親水性溶媒で抽出するかあるいは微粉砕して皮膚
化粧料を得る方法（特公昭５２−２８８５３　、同５２
−２８８５４および同５３−１０１２５）、上記メリア
・アザジラクタ原料を親水性溶媒および（または）熱水
で抽出して抗菌作用、胃腸・肝ｌ！機能改善作用を有す
る成分を得る方法（特公昭５３−１０１２４）および上
記メリア・アザジラクタ原料を疎水性溶媒で抽出して皮
膚疾患およびリュウマチの治療に有効な成分を得る方法
（特公昭５３−１３６８９）が報告されている。

しかしながら、メリア・アデジラクタ抽出物が感染防御
作用を有することはまだ報告されていない。

本発明における多糖体ＭＡ９は前記特開昭６０−４５５
２１号に記載の方法によって得られる◎即ち）メリア・
アザジラクタ樹皮を熱水Ｃ抽出し、抽出液を例えば次の
（＾）乃至（Ｃ）の方法で処理することによって得られ
る。

（Δ）上記抽出液を限外濾過し、得られた限外濾過内液
に低級アルコールを加え、生成する沈澱を採取する。

（Ｂ）　　上記抽出液を透析膜法またはアルコール沈澱
法により精製し、得られた精製物を水に溶解し、該水溶
液を分画分子邊約１ｘ１０３〜１×１０５乃至１ｘ１０
３〜２　Ｘ　１０５の分子篩剤を用いて分子篩処理し、
３つに分れる多糖体画分のうち最初の両分□から多糖体
を採取する。

（Ｃ）　　上記抽出液を透析膜法゛、アルコール沈澱法
または限外濾過□法で精製し、得られた精製抽出液を分
画分子量範囲の上限が７００〜５　、　Ｇｏ。

で下限が１００以下である架橋されたデキストランゲル
と接触させ、接触水溶液から多糖体を採取する。

上記の方法において、メリア・アザジラクタ樹皮を熱水
で抽出処理する操作は常法に従って行なわれる。即ら、
細断した樹皮に熱水を加えるか、あるいは、樹皮に水を
加え、その混合物を加熱沸騰させることによって実施さ
れる。抽出を１〜３気圧の加圧下に行うと多糖体の収率
および純度が向上する。加熱は沸騰水浴中または直火で
行うことができる。抽出時間は原料の品質等に従って適
宜決定されるが通常１乃至４８時間である。抽出終了後
、抽出混合物を濾過することにより熱水抽出液が得られ
る。このＪ：うな熱水抽出に先立って、該樹皮を有機溶
媒および（または）常温の水で抽出前処理することによ
り、不要部分を予め除去しておくことも望ましい。抽出
前処理に使用する溶媒としてはメタノール、エタノール
、プロパツール、ピリジン、アセ１−ンのような極性有
機溶媒、ベンゼン、トルエン、キシレン、ｎ−ヘキサン
、り【」ロホルム、四塩化炭素、酢酸エチルのような非
極性有機溶媒があげられる。

かくして１＋１られた熱水抽出液は、上述した（Ａ）乃
至（Ｃ，）の方法ににつて９８１＋′ｌ！される。

上記アルコール沈澱払において、アルコールの添加をｐ
Ｈ１〜３の条件で行うと生成物の純度が一層向上する。

上記の方法によって得られる多糖ＫＭＡ９は下記の物理
化学的特性を有する。

（イ）　色と形状 凍結乾燥品は白色粉末である。

（ロ）　赤外線吸収スペクトル Ｉ　Ｒｖ　ＫＢｒｃｍ−１：　３４００．２９３０．１
６３０ａｘ （ハ）　紫外線吸収スペクトル 水溶液中の測定で吸収極大を示さず末端吸収のみを示す
。

（ニ）　溶解性 水に可溶でメタノール、エタノール、アセトン、エーテ
ル、クロロホルム、酢酸エチル、ベンゼンおよびベキ１
ナン等の有機溶媒に不溶である。

（ホ）　呈色反応 フェノール硫酸反応、アンスロン硫酸反応に陽性でヨウ
素の添加により占緑色を呈する。

参考までに、上で（１られた多糖体ＭΔ９を万両分子は
約１Ｘ１０３〜２Ｘ１０５乃至１ｘ１０３〜８×１０５
のゲル濾過剤を充填したカラムにかり、蒸留水で溶離す
ると多糖体が２つの両分に分画される。

最初に溶出づる画分を多糖体ＭΔ９ａ、後に溶出する多
糖体をＭＡ９ｂとする。上記グル濾過剤どしてはデキス
トラングル、ポリアクリルアミドゲル、ポリビニル系の
ポリマーゲル、多孔性ガラスピーズ等が使用される。こ
れらは例えばセファデックス（３−２００，セファクリ
ルＳ−３００’（商品名、ファルマシア社製品、スエー
デン）、バイオグルＰ−３００（商品名、バイオラッド
拐製品、米国）、トヨバールトＩＷ−ｆ３０（商品名、
東洋費達工業着製品、日本）等の製品名で市販されてい
る。

多糖体ＭＡ９ａＪｊよび多糖体ＭＡ９ｂの帽１３よび物
理化学特性は下記の通りである。

芝更淋士し■とＬ イ）　　構　　造 α−（１→４）−グルカンの主鎖にアラビノースがα−
（１→６）結合し、グルコースとアラビノースの構成割
合が約５：１の中性多糖体。

口）　色と形状 凍結乾燥品は白色粉末である。

ハ）溶解性 水に可溶で、メタノール、エタノール、アセトン、エー
テル、クロロホルム、酢酸エチル、ベンゼン及びヘキサ
ン等の有機溶媒に不溶である。

二）　呈色反応 フェノール硫酸反応、アンスロン５Ａ酸反応に陽性ぐヨ
ウ素の添加により青緑色を♀する。

ボ）分子量 セファデックスＧ　−２００カラムゲルりロマトグラフ
ィで単一のピークを与え、分子量は約９４．０００であ
る。

へ）　比旋光度 （α〕　１；５二　十　１３６．０”　　　（Ｃ＝　　
０．５．　１−１２　０）１−）　　赤外線吸収スペク
トル Ｉ　Ｒｖ””　ｃｍ−’　：　３４００．２９３０．１
６２０ｍａ× チ）　紫外線吸収スペクトル 水溶液中の測定で吸収極大を示さず、末端吸収のみを示
す。

す）　　Ｃ核磁気共鳴スペクトル 重水中で外部３Ｋ　準にＴＭＳ　（テトラメブルシラン
）を使用して測定した１００ＨＩＩ２１３Ｃ核磁気共鳴
スペクトルは次の通りである。

δｐｉ１ｆｉｔ　：　６２．１．６２．７．６７．３．
７２．９．７４．８゜７８．１．７Ｌ７．８２．４．８
５．５．９９．２゜１０１．１．　１０８．９ 多Ｊｉ！■への」− イ）　描　造 α−（１→４）−グルカンを主鎖とし、主鎖中にβ−（
１→３）フコースを含み、分枝としてα−（１→６）ア
ラビノースを有し、グルコース、アラビノースおよびフ
コースの構成割合が約５：２：１の中性多糖体。

口）　色と形状 凍結乾燥品は白色粉末である。

ハ）溶解性 水に可溶で、メタノール、エタノール、アセトン、エー
テル、クロロホルム、酢酸エチル、ベンゼンおよびヘキ
サン等の有機溶媒に不溶である。

二）　呈色反応 フェノール硫−反応、アンスロン硫酸反応に陽性でヨウ
素の添加により青緑色を呈する。

ホ）　分子量 セファデックスＧ　−２００カラムゲルクロマトグラフ
イで単一のピークを与え、分子量は約２１．０００であ
る。

へ）　比旋光度 （１，：＋１４３．７”　（Ｃ＝　０．５．８２０）ト
）　赤外線吸収スベク１〜ル ＩＲｖに”　ｃｍ−’　：　３４００．２９３０．１６
３０ｍａ× ブ）　紫外線吸収スペクトル 水溶液中の測定で吸収極大を示さず、末端吸収のみを示
す。

す）　　Ｃ核磁気共鳴スペクトル 重水中で外部基準にＴＭＳ　（テトラメチルシラン）を
使用して測定した１００ＨＨ７１３Ｃ核磁気共鳴スペク
トルは次の通りである。

δｌｌｐｍ　：　１８．２．６２．３．６２．７．６７
．４．７１．１゜７２．０．７３．２．７４．９．７８
．３．７８．９゜８２．９．８３．９．８５．６．９９
．４．　１０１．２゜１０５．０．　１０９．１ 本発明の多糖体ＭＡ９は上記多糖体ＭＡ９ａおよび多糖
体ＭＡ９ｂの混合物とみることができ、多糖体ＭＡ９ａ
およびＭＡ９ｂは同様の薬理活性を示した。

本発明の多糖体ＭＡ９は後に試験例で示すように顕著な
感染防御作用を有し、毒性は極めて低いので経口または
非経口投与により各種の微生物の感染症特に細菌の感染
症の予防および治療に有効である。リルモネラ・エンテ
リテイディス、リステリア・モノシトゲネス等の感染に
対しては特に有効である。投与量は症状、年令、体重な
どによって異なるが、通常は成人に対して１日２５〜２
５００■であり、１〜４回に分けて繊与することができ
る。

本発明の多糖体は任意所要の製剤用担体または賦形剤を
用いて経口または非経口投与用に製剤化される。

経口投与用の錠剤、散剤、カプセル剤、顆粒剤等は慣用
の賦形剤例えば炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、ど
うもろこしでんぷん、馬鈴薯でんぷん、砂糖、ラクトー
ス、タルク、ステアリン酸マグネシウム、アラビアゴム
等を含有していてもよい。経口投与用液体製剤は水性ま
たは油性懸濁液、溶液、シロップ、エリキシル剤その他
であってもよい。

注射用製剤は溶液または懸濁液の形態であり、懸濁化剤
、安定剤または分散剤のような処方剤を含んでいてもよ
く、滅菌蒸留水、精油たとえばビーナツツ油、とうもろ
こし油あるいは非水溶媒、ポリエチレングリコール、ポ
リプロピレングリコール等を含有していてもよい。

直腸内投与のためには土用用組成物の形で提供され、周
知の製剤担体たとえばポリエチレングリコール、ラノリ
ン、ココナツツ油等を含有していてもよい。

次に本発明の多糖体ＭＡ９の試験例および製剤例を示し
て本発明をさらに具体的に説朗する。

試験例　１ 多糖体ＭＡ９を生理食塩水に溶かした溶液を５週令ｄｄ
Ｙマウス（１０匹）に１日おきに３同腹腔内投与する。

最終投与の翌日に各試験菌をｍｎに接種する。試験期間
中、マウスを清浄ルーム、清浄ケージ中で飼育する。菌
接種後、２日日および１０日１におけるマウスの生存数
を表１に示す。

表　　　　　　１ 試験例　２ 上記試験例１において菌を静脈内に接種した場合の結果
を表２に示す。

表　　　　　２ 試験例　３ 上記試験例１において多糖体Ｍ△９を経「１投与した場
合の結果を表３に爪す。

表　　　　　３ 試験例　４ 上記試験例１に、Ｊ３いて多糖体Ｍ△９を連日１５日間
経口投与し、菌を１０日１に接種した。菌の接種後２日
日および１０日１におりるマウスの生存数を表４に示ず
。

表　　　　　４ 以上の試験の結果から明らかなように、多糖体ＭＡ９は
細菌に対して強い感染防御作用を有することが明らかで
ある。

飯止崖ヱ 本発明の多糖体ＭＡ９を体重２０±１ｇのＩＣＲ雄性マ
ウスに投与して急性毒性試験を行なった結果、Ｌｌ）５
ｏＩｆｆは、腹腔内投与で６００ｍ９／に９以上、経口
投与では１０００ｒＲ９／に９以上であった。

製剤例　１ 多糖体Ｍ△９１１０００ＩＩを無菌５％注射用ブドウ糖
溶液５００ｄに溶解し、この溶液を５ｄずつバイアルに
無菌的に分注し、凍結乾燥した。かくして、１バイアル
中１０■の多糖体ＭＡ９を含む製剤を得た。用時、注射
用蒸留水に溶解して使用する。

製剤例　２ 上記製剤例１と同様にしてバイアル製剤をつくった。た
だし、無菌５％注射用ブドウ糖溶液５００ｍ１の代りに
生理食塩水５００ＦＩｄｌを使用した。用時、注射用蒸
留水に溶解して使用する。

ＩＶ、発明の具体的作用効果 本発明によれば、感染防御剤が提供される。即ら、本発
明によれば、多糖体Ｍ△９からなる感染防御剤が提供さ
れる。多糖体ＭＡ９は、メリア・アザジラクタ樹皮の熱
水抽出物から得られる多糖体であって、１１ｊ性が極め
て低く、各種の微生物特に細菌感染症の予防または治療
剤として有用である。

特許出願人　　　テ　ル　モ　株　式　会　社（ばか２
名）

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 下記イ）および／またはロ）の中性多糖体を含有する感
   染防御剤。 イ）α−（１→４）−グルカンの主鎖にアラビノースが
   α−（１→６）結合し、グルコースとアラビノースの構
   成割合が約５：１の中性多糖体。 ロ）α−（１→４）−グルカンを主鎖とし、主鎖中にβ
   −（１→３）フコースを含み、分枝としてα−（１→６
   ）アラビノースを有し、グルコース、アラビノースおよ
   びフコースの構成割合が約５：２：１の中性多糖体。