KR20000065152A

KR20000065152A - 4'-트리플루오로메틸비페닐-2-카복실산2-(2에이치-[1,2,4]트리아졸-3-일메틸)-1,2,3,4-테트라히드로-이소퀴놀린-6-일-아미드를제조하기위한방법및이의중간체

Info

Publication number: KR20000065152A
Application number: KR1019980708760A
Authority: KR
Inventors: 프랭크 존 어반
Original assignee: 디. 제이. 우드, 스피겔 알렌 제이; 화이자 인코포레이티드
Priority date: 1996-04-30
Filing date: 1997-03-13
Publication date: 2000-11-06
Also published as: EP0902785A1; ZA973696B; WO1997041111A1; ES2180935T3; EP0902785B1; ATE223400T1; AR006876A1; BR9709137A; PT902785E; US5998623A; DE69715188T2; CN1216988A; CA2252621A1; IL126202A0; CA2252621C; PL329739A1; ID17294A; DK0902785T3; TR199802163T2; AU2226697A

Abstract

본 발명은 a) 화학식 (III)의 화합물을 화학식 (X)의 화합물로 처리하고;

b) R이 R²인 경우, 추가로 단계 a)의 생성물을 산으로 처리함을 포함하는, 하기 화학식 (I)의 화합물의 제조 방법에 관한 것이다:

화학식 I

화학식 III

화학식 X

상기 식에서,

R은 H 또는 R²이고,

R²는 알릴, 또는 치환된 메틸기(이 때, 치환체는 아릴기가 니트로 및 (C₁-C₆)알콕시로부터 선택된 하나 이상의 치환체로 선택적으로 치환된 1 내지 3개의 (C₆-C₁₀)아릴기를 포함한다)로 이루어진 군으로부터 선택되고,

J는 할로겐 원자, 아지도기, (C₁-C₆)아실옥시기 또는 (C₆-C₁₀)아로일옥시기, 바람직하게는 염소 또는 브롬 원자와 같은 이탈기이다.

또한, 본 발명은 하기 화학식 (II)의 화합물에 관한 것이다:

화학식 II

상기 식에서,

R은 R²이고, R²는 상기 정의된 바와 같고, 바람직하게는 CH₃OC₆H₄CH₂-이다.

Description

4'-트리플루오로메틸비페닐-2-카복실산 [2-(2에이치-[1,2,4]트리아졸-3-일메틸)-1,2,3,4-테트라히드로-이소퀴놀린-6-일]-아미드를 제조하기 위한 방법 및 이의 중간체

마이크로소말 트리글리세라이드 전달 단백질(MTP)은 트리글리세라이드, 콜레스테릴 에스테르 및 인지질의 이동을 촉진시킨다. 이는 아테롬성 경화증 병변의 형성에 관여하는 생물학적 분자인 아포 B-함유 리포단백질의 조립체내에서 가능한 제제로서 고려되어 왔다. 유럽 특허원 제 0 643 057 A1 호, 유럽 특허원 제 0 584 446 A2 호 및 베테로(Wetterau) 등의 문헌 "Science, 258, 999-1001, (1992)"을 참조한다. 따라서, MTP를 저해하고/하거나 달리는 아포 B 분비를 저해하는 화합물은 아테롬성 경화증의 치료에 유용하다. 이러한 화합물은 또한 이는 MTP 및/또는 아포 B 분비를 저해함으로써 혈청 콜레스테롤 및 트리글리세라이드 농도가 감소될 수 있는 다른 질병 또는 질환의 치료에 유용하다. 이러한 질환은 과콜레스테롤혈증, 과트리글리세라이드혈증, 췌장염 및 비만증; 및 췌장염, 비만증 및 당뇨증과 연관된 과콜레스테롤혈증, 과트리글리세라이드혈증 및 과지질혈증을 포함한다.

발명의 요약

본 발명은,

a) 하기 화학식 (III)의 화합물을 하기 화학식 (X)의 화합물로 처리하고;

b) R이 R²인 경우, 추가로 단계 a)의 생성물을 트리플루오로아세트산(TFA), p-톨루엔설폰산(PTSA), 메탄- 또는 트리플루오로메탄설폰산 및 아세트산내의 HBr과 같은 산으로 처리함을 포함하는, 하기 화학식 (I)의 화합물을 제조하는 방법을 제공한다:

상기 식에서,

R은 H 또는 R²이고,

R²는 알릴, 및 치환된 메틸기(이 때, 치환체는 아릴기가 니트로 및 (C₁-C₆)알콕시로부터 선택된 하나 이상의 치환체와 선택적으로 치환된 1 내지 3개의 (C₆-C₁₀)아릴기를 포함한다)로 이루어진 군으로부터 선택되고,

참고로, "헤테로시클릭"이라는 잔기는 O, N 및 S로부터 독립적으로 선택된 하나 이상의 고리 헤테로원자를 함유하는 임의의 단일 고리 또는 융합된 고리 시스템을 의미한다. 따라서, 하나 이상의 카보시클릭 융합된 고리, 포화되거나 일부 불포화된 고리, 또는 방향족 고리(통상적으로 벤젠 고리)를 함유하는 폴리시클릭 융합된 고리 시스템은, 시스템이 또한 하나 이상의 전술된 헤테로 원자를 함유하는 하나 이상의 융합된 고리를 함유하는 한 헤테로시클릴의 정의내에 포함된다. 치환체로서, 이러한 헤테로시클릭 고리는 카보시클릭(예: 벤젠) 고리 또는 헤테로시클릭 고리로부터 분자의 나머지 부분에 부착될 수 있다.

참고로, "하나 이상의 고리"를 함유하는 잔기는 상기 잔기가 단일하거나 융합된 시클릭 잔기 또는 잔기들을 함유한다는 의미를 나타내고자 한다. 고리는 카보시클릭 또는 헤테로시클릭 고리, 포화되거나 일부 불포화된 고리, 및 방향족 또는 비방향족 고리일 수 있다.

참고로, 융합된 폴리시클릭 고리 시스템 또는 라디칼은 시스템내의 모든 고리가 융합됨을 의미한다.

참고로, 본원의 "할로"는 다른 지시가 없다면 플루오로, 클로로, 브로모 및 요오도를 포함한다.

참고로, "아릴" 치환체(예: (C₆-C₁₀)아릴)는 카보시클릭인 고리 또는 치환체를 의미한다. 하나 이상의 헤테로원자를 함유하는 방향족 잔기는 상기 서술된 바와 같이 "헤테로시클릭"이라는 용어의 하위 부류로서 포함된다.

참고로, "아실" 치환체는 카보닐기(이를 통해 치환체가 결합한다)에 부착된 지방족 또는 시클릭 탄화수소 잔기를 지칭한다.

참고로, "알킬" 및 "알콕시"는 시클릭 직쇄 라디칼 및, 잔기가 2개 이상의 탄소 원자를 함유하는 경우, 시클릭 분지쇄 라디칼 둘다를 포함하지만, 이는 참고로 "프로필" 또는 "프로폭시"와 같은 개별적 라디칼은 단지 직쇄("노말") 라디칼, 특히 "이소프로필" 또는 "이소프로폭시"와 같은 분지쇄 이성체를 포함하는 것으로 이해되어야 한다.

하기 식의 특정 중간체 및 이들의 호변이성체(tautomer)는 본 발명의 추가적인 특징으로서 추가로 제공된다.

상기 식에서, Y는 NH₂또는 NO₂이다.

당해 분야의 숙련자라면 상기 화합물이 몇몇 호변이성체적 형태로 존재할 것이고, 이들 모두는 본 발명에 포함됨을 알 것이다. 본 발명에 의해 제공된 다른 중간체는 하기 화학식 (II)의 화합물이다.

상기 식에서,

R은 R², 바람직하게는 CH₃OC₆H₄CH₂-이다.

본 발명은 하기 화학식 (I)의 4'-트리플루오로메틸비페닐-2-카복실산[2-(2H-[1,2,4]트리아졸-3-일메틸)-1,2,3,4-테트라히드로-이소퀴놀린-6-일]-아미드에 관한 것이다. 보다 구체적으로, 이는 화학식 (I)의 화합물을 제조하기 위한 개선된 방법 및 이의 중간체에 관한 것이다. 화학식 (I)의 화합물은 마이크로소말 트리글리세라이드 전달 단백질 C 및/또는 아포리포단백질 B(아포 B) 분비의 저해제이고, 따라서 아테롬성 경화증 및 이의 임상적 후유증의 예방 및 치료, 혈청 지질의 감소, 및 관련된 질병의 예방 및 치료에 유용하다.

이후의 반응식 및 설명에서, R, R², J, K 및 Y와 더불어 화학식 (I) 내지 (X)은 상기 정의된 바와 같다.

반응식 (1)에 제시된 바와 같이, 화합물 (IX)는 1,2,4-트리아졸과 식 R²K(여기서, K는 상기 정의된 바와 같은 할로이다)의 화합물을 반응시킴으로써 제조된다. 바람직한 R²K는 4-메톡시벤질 클로라이드이다. 반응은 N,N,-디(C₁-C₆)알킬카복스아미드[예: 디메틸아세트아미드(DMAC) 및 디메틸포름아미드(DMF)]; 케톤(예: 아세톤 및 메틸에틸케톤); (C₁-C₆)알칸올(예: 에탄올, 메탄올 및 이소프로판올); 및 이의 혼합물과 같은 극성 용매내에서 약 실온에서 수행된다. 본 발명의 수행에 유용한 염기는 알칼리 금속 수산화물, 탄화물 및 탄산 수소를 포함한다. 용매는 DMF이고, 염기는 NaOH인 것이 바람직하다.

화합물 (VIII)은 열수내에서 포름알데히드와 함께 화합물 (IX)을 가열시킴으로써 제조된다. 반응은 약 100 내지 약 135℃에서 외부 열 원료를 사용하여 환류 온도에서 수행된다. 과량으로 사용되는 포름알데히드는 이의 37%의 수용액(포르말린으로서 또한 공지된다) 또는 이의 선형 중합체의 형태(파라포름알데히드) 및 삼합체성 (트리옥산) 형태로서 공급될 수 있다. 파라포름알데히드를 열수에 분해하고, 트리옥산을 강산을 함유하는 수용액내에서 분해시켜 포름알데히드를 수득한다. 포름알데히드의 바람직한 원료는 포르말린이다.

화합물 (VII)은 트리페닐포스핀 및 디(C₁-C₆)알킬 또는 디피페리디닐 아조디카복실레이트의 존재하에 미쯔노부 반응(Mitsunobu reaction)에서 화합물 (VIII)을 프탈이미드로 처리함으로써 형성된다. 바람직한 아조디카보실레이트는 디이소프로필 에스테르이다. 반응은 테트라히드로푸란(THF), 이소프로필 에테르 및 디옥산과 같은 비양자성 용매내에 약 0 내지 약 65℃에서 수행될 수 있다. 바람직하게는, 반응은 THF내에 약 15℃에서 수행된다.

화합물 (VII)은 (C₁-C₆)알칸올, 예컨대 메탄올, 에탄올 또는 이소프로판올과 같은 비양자성 현탁 매질내에 현탁시키고 히드라진으로 처리함으로써 화합물 (VI)로 전환된다. 히드라진은 이의 수화물의 형태로 제공되는 것이 바람직하고, 바람직한 현탁 매질은 메탄올이다. 반응은 약 실온 내지 약 65℃, 바람직하게는 실온에서 수행될 수 있다.

R이 R²인 화합물 (IV)는 염기 및 비양자성 용매의 존재하에 화합물 (VI)을 하기 화학식 (V)의 화합물로 처리함으로써 형성된다:

상기 식에서,

Y는 할로, 및 선택적으로 치환된 (C₁-C₆)알킬- 또는 (C₁-C₆)아릴설포녹시기로부터 선택된다.

바람직하게는 CH₃SO₃(메실옥시)이다. 반응은 약 주위 온도 내지 용매의 환류 온도에서 질소 또는 아르곤과 같은 불활성 분위기하에 수행된다. 사용될 수 있는 염기는 트리(C₁-C₆)알킬아민, 피리딘 및 N-메틸모폴린과 같은 유기 염기이다. 비양자성 용매는 THF, CH₂Cl₂및 DMF를 포함한다. 반응은 용매의 환류 온도에서 질소하에 THF내에서 수행되는 것이 바람직하다. 바람직한 염기는 트리에틸아민이다. Y가 메실옥시인 화합물 (V)는 염기의 존재하에 불활성 분위기하에 저온에서 Y가 (C₁-C₆)할로알칸내의 OH인 화합물 (V)의 현탁액을 메실 클로라이드로 처리함으로써 제조될 수 있다. 본 태양의 수행에 유용한 염기는 전술된 염기로부터 선택될 수 있다. 불활성 분위기는 전술된 분위기로부터 선택될 수 있다. 온도는 약 -40℃ 내지 약 0℃이다. 반응은 트리에틸아민의 존재하에 약 -30℃에서 질소하에 수행되는 것이 바람직하다.

반응식 (3)에 제시된 바와 같이, R이 R²인 화합물 (IV)는 트리플루오로아세트산(TFA), p-톨루엔설폰산, 메탄 또는 트리플루오로메탄설폰산 및 아세트산내의 HBr, 바람직하게는 트리플루오로아세트산과 같은 산으로 처리함으로써 R이 H인 화합물 (IV)로 전환된다. 반응은 약 실온 내지 약 60℃, 바람직하게는 실온에서 수행될 수 있다. TFA는 순수하게 사용될 수 있거나 CH₂Cl₂내에 용해되어 사용될 수 있다.

R이 수소인 화합물 (IV)는 수소화 촉매 및 유기 용매의 존재하에 원자의 압력 약 1 내지 약 3 기압에서 수소로 처리함으로써 R이 수소인 화합물 (III)로 전환된다. 수소화 촉매는 Pd, Pt 및 라니(Raney) Ni를 포함한다. 금속은 염(예: Pd(OH)₂)의 형태로 또는 담체(예: 탄소)상에 사용될 수 있다. 수소화는 약 실온 내지 약 50℃, 바람직하게는 실온에서 수행된다. 바람직한 수소화 촉매는 10%의 Pd/C이고, 바람직한 용매는 메탄올이다.

R이 수소인 화합물 (III)은 용매 및 염기의 존재하에 할라이드, 아지드 및 혼합된 무수화물로부터 선택된 4'-트리플루오로메틸비페닐-2-카보닐기의 원료로 처리함로써 화합물 (I)로 전환된다. 반응은 약 실온 내지 약 50℃, 바람직하게는 실온에서 수행된다. 본 발명의 태양에 유용한 용매는 전술된 바와 같은 비양자성 용매, 할로알칸 및 이들의 혼합물을 포함한다. 바람직한 용매는 THF와 메틸렌 클로라이드의 혼합물이고, 이는 메틸렌 클로라이드내의 카보닐 화합물의 용액이 THF내에 R이 H인 화합물 (III)의 현탁액에 첨가되는 경우 형성된다.

다르게는, 반응식 (3)에 제시된 바와 같이, R이 R²인 화합물 (III)을 4'-트리플루오로메틸비페닐-2-카보닐 원료로 처리함으로써 화합물 (II)를 형성하고, 화합물 (II)를 전술된 바와 같이 트리플루오로아세트산(TFA), p-톨루엔설폰산, 메탄 또는 트리플루오로메탄설폰산 및 아세트산내의 HBr, 바람직하게는 트리플루오로아세트산과 같은 산으로 처리함으로써 화합물 (I)이 제조될 수 있다. 바람직하게는, R²는 p-CH₃OC₆H₄CH₂-이고, 4'-트리플루오로메틸비페닐-2-카보닐 원료는 클로라이드이다.

화학식 (I)의 화합물 및 이의 호변이성체는 산 부가염을 형성하고, "약학적으로 허용가능한 염"이라는 표현은 한정하지는 않지만 염화수소, 브롬화수소, 황산염, 황산수소염, 인산염, 인산수소염, 이인산수소염, 아세테이트, 숙시네이트, 시트레이트, 메탄설포네이트 및 p-톨루엔설포네이트염과 같은 염을 포함한다. 이는 또한 중부가염(polyaddtion salt)을 형성할 수 있다.

화학식 (I)의 화합물의 산 부가염 및 이의 호변이성체는 염기 형태와 적절한 산을 반응시킴으로써 쉽게 제조된다. 염이 일염기성 산의 염(예: 히드로클로라이드, 히드로브로마이드, p-톨루엔설포네이트, 아세테이트), 이염기성 산의 수소 형태(예: 황산수소염, 숙시네이트) 또는 삼염기성 산의 이수소 형태(예: 이인산수소염, 시트레이트)인 경우, 1몰당량 이상, 통상적으로는 산의 1몰 과량이 사용된다. 그러나, 황산염, 헤미숙시네이트, 인산수소염 또는 인산염과 같은 염이 요구되는 경우, 산의 적합하고 정확한 화학 당량이 일반적으로 사용될 것이다. 유리 염기 및 산은, 통상적으로 요구되는 염이 침전되는 보조-용매내에서 혼합되고, 달리는 비용매의 농축 및/또는 첨가에 의해 단리될 수 있다.

화학식 (I)의 화합물, 이의 호변이성체 및 이들의 약학적으로 허용가능한 염(본원 이후에 "활성 화합물"로 지칭됨)은 경구 투여가능하므로, 약학적으로 허용가능한 담체와 혼합하거나 경구 투여 형태에 적합하게 희석액과 혼합하여 사용된다. 적합한 약학적으로 허용가능한 담체는 불활성 고형 충진재 또는 희석액 및 멸균 수용액 또는 유기 용액을 포함한다. 활성 화합물은 하기 기술된 범위내에서 목적하는 투여량을 제공하기에 충분한 양으로 약학 조성물내에 존재할 것이다. 따라서, 경구 투여를 위해, 화합물은 적합한 고형물 또는 액체 담체 또는 희석액과 혼합되어 캡슐, 정제, 분말, 시럽, 용액, 현탁액 등의 형태를 가질 수 있다. 필요하면, 약학 조성물은 풍미제, 감미제, 부형제 등과 같은 추가 성분을 함유할 수 있다. 전술된 바와 같은 화학식 (I)의 화합물 및 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하고 활성 화합물을 포함하는 약학 조성물은, 아테롬성 경화증, 췌장염, 비만증, 과콜레스테롤혈증, 과트리글리세라이드혈증, 과지질혈증 및 당뇨증을 포함하는 질환의 치료에 적합하다.

다른 메카니즘이 또한 포함될 수 있지만, 활성 화합물은 아포 B 분비를 저해하거나 감소시킨다(예: MTP의 저해). 이 화합물은 아포 B, 혈청 콜레스테롤 및/또는 트리글리세라이드 농도가 상승되는 임의의 질병 또는 질환에 유용하다. 따라서, 본 발명은 추가로 아포리포단백질 B의 분비를 감소시키는데 충분한 양의 전술된 바와 같은 화학식 (I)의 화합물을 아테롬성 경화증, 췌장염, 비만증, 과콜레스테롤혈증, 과트리글리세라이드혈증, 과지질혈증 및 당뇨증으로부터 선택된 질환의 치료가 필요한 포유류, 특히 인간에 투여함을 포함하는, 상기 질환의 치료 방법을 제공한다. 선행의 질환의 아군은 아테롬성 경화증, 비만증, 췌장염 및 당뇨증을 포함한다. 보다 구체적으로, 아군은 아테롬성 경화증을 포함한다.

활성 화합물에 대해 본원에 사용된 바와 같은 "치료하는"이라는 용어는 예방 및 질병 치료를 포함한다.

정제, 환제, 캡슐 등은 또한 검 트라가칸쓰, 아카시아, 옥수수 전분 또는 젤라틴과 같은 결합제; 인산이칼슘과 같은 부형제; 옥수수 전분, 감자 전분, 알긴산과 같은 붕해제; 마그네슘 스테아레이트와 같은 윤활제; 및 수크로스, 락토스 또는 사카린과 같은 감미제를 함유할 수 있다. 투여 단위 형태가 캡슐인 경우, 이는 상기 유형의 물질과 더불어 지방유와 같은 액체 담체를 함유할 수 있다.

다양한 다른 물질은 코팅제로서 존재할 수 있거나 투여 단위체의 물리적 형태를 개질시킬 수 있다. 예를 들면, 정제는 셀락(shellac), 당 또는 이들 둘다로 코팅될 수 있다. 시럽 또는 엘릭시르제는 활성 성분과 더불어 감미제로서 수크로스, 보존제로서 메틸 및 프로필파라벤, 체리 또는 오렌지향과 같은 염료 및 풍미제를 함유할 수 있다.

활성 화합물은 또한 비경구 투여될 수 있다. 비경구 투여에 있어서, 화합물은 멸균 수성 매질 또는 유기 매질과 혼합되어 주사용 용액 또는 현탁액을 형성할 수 있다. 이들 활성 화합물의 용액 또는 현탁액은 수중에서 히드록시프로필셀룰로스와 같은 계면 활성제와 적절하게 혼합되어 제조될 수 있다. 분산액은 또한 호마유 또는 땅콩유, 에탄올, 물, 폴리올(예: 글리세롤, 프로필렌 글리콜 및 액체 폴리에틸렌 글리콜), 이의 적합한 혼합물, 식물성 오일, N-메틸 글루카민, 폴리비닐피롤리돈 및 오일내의 이들의 혼합물과 더불어 화합물의 수용성 약학적으로 허용가능한 염의 수용액내에서 제조될 수 있다. 저장 및 사용의 일반적인 조건하에서, 이들 제조물은 보존제를 함유하여 미생물의 성장을 막는다. 이후에, 이런 방식으로 제조된 주사용 용액은 정맥내, 복강내, 피하 또는 근육내로 투여될 수 있다.

주사용에 적합한 약학적 형태는 멸균 수용액 또는 분산액, 및 멸균 주사용 용액 또는 분산액의 즉석 제조를 위한 멸균 분말을 포함한다. 모든 경우에서, 형태는 멸균되어야 하고, 어느 정도는 유동적이어서 용이하게 주사기내에 존재하여야 한다. 제조 및 저장의 조건하에 안정적이어야 하고, 박테리아 및 진균류와 같은 미생물의 오염 작용에 대해 보존되어야 한다.

투여되는 활성 화합물의 투여량은 일반적으로 치료되어야 할 질환의 위중성 및 투여의 경로를 고려하여 당해 분야에 잘 공지된 원리에 따라 변화될 것이다. 일반적으로, 활성 화합물은 온혈동물(예: 인간)에 투여되어, 통상적으로 단일하게 또는 분할하여 투여되는 일일 투여량인 유효 투여량이 예컨대 투여량 약 0.1 내지 약 15mg/체중kg, 바람직하게는 약 1 내지 약 5mg/체중kg내로 허용될 것이다. 허용된 총 일일 투여량은 일반적으로 1 내지 1000mg, 바람직하게는 5 내지 350mg일 것이다.

활성 화합물은 다른 지질 강하제를 포함하는 다른 약학 제제와 혼합하여 사용될 수 있다. 이러한 제제는 콜레스테롤 생합성 저해제, 특히 HMG CoA 리덕타제 저해제 및 스쿠알렌 신테타제 저해제; 담즙산 금속 이온 봉쇄제(sequestrant); 피브레이트(fibrate); 콜레스테롤 흡수 저해제; 및 니아신(niacin)을 포함한다.

시험 화합물은 임의의 하기 스크린에서 활성이 있으면 활성적인 것으로 고려된다.

활성 화합물의 활성은 HepG2 세포내에서 아포 B 분비의 저해를 측정함으로써 검사될 수 있다.

HepG2 세포는, 약 70%가 융합될 때까지, 5%의 이산화탄소를 함유하는 습한 분위기에서 96-웰 배양 플레이트내에 둘베코의 개질된 이글스 배지(Dulbecco's Modified Eagles Medium)와 태아 소 혈청(성장 배지; 기브코(Gibco))의 혼합물에서 성장된다. 이후에, 시험 화합물은 10 내지 20mM의 디메틸 설폭사이드내에 용해된 후, 성장 배지에 1μM로 희석된다. 이 저장액의 1:1 희석액은 성장 배지내에서 제조되고, 각각의 100μL는 HepG2 세포를 함유하는 96-웰 배양 플레이트의 웰에 개별적으로 첨가된다. 24시간 후, 성장 배지는 수집되고, 아포 B 및 대조군으로서의 아포 A1 농도를 위한 특정 ELISA에 의해 검정된다. 저해제는 아포A1의 분비에 영향을 미치지 않고 배지내로의 아포B 분비를 감소시키는 화합물로 정의된다. 아포B를 위한 ELISA는 하기와 같이 수행된다. 인간 아포B에 대한 단클론성 항체[케미콘(Chemicon)]는 인산염 완충된 염수/아지드(PBS + 0.02%의 Na 아지드) 1mL당 5μg으로 희석되고, 100μL가 96-웰 플레이트[NUNC 막시소르브(Maxisorb)]의 각각의 웰에 첨가된다. 실온에서 밤새도록 배양된 후, 항체 용액은 제거되고, 웰은 PBS/아지드로 3회 세척된다. 플라스틱상의 비특정 위치는 PBS/아지드내에 제조된 1%(w/v)의 소 혈청 알부민(BSA)의 용액내에서 1 내지 3시간 동안 배양 웰에 의해 블록화된다. HepG2 세포 또는 아포B 기준 세포로부터의 성장 배지의 다양한 희석액(PBS/아지드내의 0.004%의 트윈 20/1%의 BSA로 제조됨) 100μL은 각각의 웰에 첨가되고 18시간 동안 배양된다. 제 2 항체, 염소 항-인간 아포B(케미콘)의 1/1000 희석액 100μL을 첨가하기 전에, 웰은 흡입되고 3회 세척된다(PBS내의 0.1%의 트윈 20). 실온에서 3시간 동안 배양한 후, 이 용액은 흡입되고, 웰은 다시 상기와 같이 3회 세척된다. 이후에, 알칼리 포스파타제[시그마(sigma)]에 공액 결합된 토끼 항-염소 IgG의 1:1600 희석액(PBS/1%의 BSA/2mM의 MgCl₂중) 100μL가 각각의 웰에 첨가되고, 실온에서 1시간 동안 배양된다. 흡입된 후, 웰은 상기와 같이 4회 세척되고, pH 9.5인 25mM의 중탄산나트륨 및 2mM의 MgCl₂내의 1mg/mL의 p-니트로페닐포스페이트(pNPP; 시그마) 100μL가 각각의 웰에 첨가되고 20 내지 30분 동안 배양된 후, 반응은 0.2N의 NaOH 50μL의 첨가에 의해 종결된다. 각각의 웰의 흡수치는 405nm로 기록되고, 배경의 흡수치는 650nm로 기록된다. 아포B 농도는 동일한 검정내에서 평행을 이루는 정제된 LDL 기준 물질들로부터 작성된 표준 곡선으로부터 계산된다. 아포A1은, 아포A1에 대한 항체(케미콘)가 아포B에 대한 항체를 대신하여 사용되고 항원 배양이 실온 대신 37℃에서 수행되는 것을 제외하고, 유사한 방식으로 측정된다.

또한, 활성은 시험 화합물이 MTP 활성을 직접 저해하는 경우 확인될 수 있다.

화합물에 의한 MTP 활성의 저해는 가용성 인간 MTP의 존재하에 방사선 표지된 트리글리세라이드의 공여체 소포로부터 수용체 소포로의 이동의 저해를 관찰함으로써 측정될 수 있다. MTP를 제조하는 공정은 웨터로(Wetterau) 및 질버스밋트(Zilversmit)의 방법[문헌(Biochem. Biophys. Acta(1986) 875:610)]을 기초로 한다. 요약하면, -80℃에서 동결된 인간 간 덩어리를 얼음상에서 녹이고, 분쇄하고, 0.25M의 빙냉 수크로스로 수회 헹궈낸다. 모든 후속 단계들은 얼음상에서 수행된다. 0.25M의 수크로스내의 50%의 균질물은 포터-엘베젬 테플론(Potter-Elvehjem Teflon) 막자를 사용하여 제조된다. 균질물은 0.25M의 수크로스로 1:1로 희석되고, 4℃에서 20분 동안 10,000 × g에서 원심분리된다. 펠릿트는 수크로스내에서 재현탁되고, 20분 동안 10,000 × g에서 재원심분리된다. 상청액은 혼합되고, 마이크로솜은 75분 동안 105,000 × g에서 원심분리에 의해 펠릿트화된다. 상청액은 버려지고, 마이크로소말 펠릿트는 0.25M의 수크로스의 최소 부피내에서 현탁되고, pH 8.0인 0.15M의 트리스-HCl로 처음의 간 중량 1g당 3mL로 희석된다. 이 현탁액은 12개의 분획으로 분리되고, 75분 동안 105,000 × g에서 원심분리된다. 상청액은 버려지고, 마이크로소말 펠릿트는 필요할 때까지 -80℃에서 동결 저장된다. 검정하기 전 MTP를 제조하기 위해, 녹은 펠릿트는 pH 7.4인 차가운 50mM의 트리스-HCl, 50mM의 KCl, 5mM의 MgCl₂의 혼합물 12mL내에 현탁되고, 0.54%의 디옥시콜레이트(pH 7.4) 용액 1.2mL는 서서히 혼합 첨가되어 마이크로소말 막이 파열된다. 서서히 혼합하면서 얼음상에서 30분 동안 배양된 후, 현탁액은 75분 동안 105,000 × g에서 원심분리된다. 가용성 MTP 단백질을 함유하는 상청액은 pH 7.4인 검정 완충액(150mM의 트리스-HCl, 40mM의 NaCl, 1mM의 EDTA, 0.02%의 NaN₃)을 4회 변화시키면서 2 내지 3일 동안 투석된다. 인간 간 MTP는 4℃에서 저장되고, 사용 바로 전에 검정 완충액으로 1:5로 희석된다. MTP 제조물은 30일 미만 동안 저장하면서 이동 활성의 현저한 소실은 나타내지 않는다.

리포솜은 실온에서 질소하에 검정 완충액내의 400μM의 에그 포스파티딜콜린(PC), 75μM의 소 심장 카디오리핀 및 0.82μM의¹⁴C-트리올레인(110 Ci/몰)의 분산액을 욕조 초음파 처리함으로써 제조된다. 클로로포름내의 지질이 적정량으로 첨가되고, 검정 완충액으로 수화하기 전에 질소 스트림하에 건조된다. 수용체 리포솜은 실온에서 질소하에 검정 완충액내의 1.2mM의 PC, 2.3μM의 트리올레인 및 30pM의³H-PC(50 Ci/몰)의 분산액을 욕조 초음파 처리함으로써 제조된다. 공여체 및 수용체 리포솜은 7℃에서 2시간 동안 160,000 × g에서 원심분리된다. 작은 단층 리포솜을 함유하는 상청액의 상부 80%는 조심스럽게 제거되고, 이동 검정에 사용되기까지 4℃에서 저장된다.

MTP 활성은 가용성 MTP 및 시험 화합물과 함께 공여체 및 수용체 소포를 혼합함으로써 개시되는 이동 검정을 사용하여 측정된다. 시험 화합물을 함유하는 5%의 BSA(대조군) 100μL 또는 5%의 BSA 100μL는 검정 완충액 500μL, 공여체 리포솜 100μL, 수용체 리포솜 200μL 및 희석된 MTP 단백질 100μL에 첨가된다. 45분 동안 37℃에서 배양한 후, 트리글리세라이드 이동은 검정 완충액내의 50%(w/v)의 DEAE 셀룰로스 현탁액 500μ을 첨가함으로써 종결된다. 4분 동안 진탕한 후, DEAE 셀룰로스에 결합된 공여체 리포솜은 저속의 원심분리에 의해 선택적으로 침전된다. 수용체 리포솜을 함유하는 상청액의 분취량이 측정되고,³H 및¹⁴C 측정치는 첫 순서의 반응 과정을 사용하는 수용체 리포솜의 회복률 및 트리글리세라이드 이동율을 계산하는데 사용된다. 시험 화합물에 의한 트리글리세라이드 이동의 저해는¹⁴C 방사선 동위 원소가 시험 화합물이 존재하지 않는 대조군에 비해 감소하는 것으로 나타낸다.

MTP 저해제로서 시험 화합물의 활성은 또한 하기 시험에 따라 생체내에서 측정될 수 있다.

경구 가바즈(gavage)(0.25mL/25체중g)에 의해 0.5%의 메틸 셀룰로스 수용액에 현탁된 시험 화합물이 수컷 마우스(20 내지 30g; 다양한 균주)에 투여된다. 화합물 용액은 마우스가 마취되기 전에 수일에 걸쳐 많은 횟수로 또는 다르게는 90분 동안 1회 투여되고, 혈액은 혈청의 제조를 위해 수집된다. 혈청은 시판중인 효소적 검정[와코 파인 케미칼스(Wako Fine Chemicals)의 트리글리세라이드 지(triglyceride G)]에 의해 트리글리세라이드 농도가 검정된다. MTP 저해제는 이들의 능력에 의해 비히클이 투여된 대조 마우스에 비해 혈청 트리글리세라이드를 저하시키는 것으로 정의된다.

본 발명은 하기 실시예에 의해 예시된다. 그러나, 본 발명이 이들 실시예의 특정 설명에 한정되지 않음을 알아야 된다.

당해 분야의 숙련자에게 공지된 정제 및 분리의 통상적인 방법 및/또는 기술은 본 발명의 화합물을 단리시키는데 사용될 수 있다. 이러한 기술은 모든 유형의 크로마토그래피(HPLC, 실리카 겔과 같은 통상적인 흡수체를 사용하는 칼럼 크로마토그래피, 및 박막 크로마토그래피), 재결정화, 및 상이한(즉, 액체-액체) 추출 기술을 포함한다.

제조예 1

1-(4-메톡시벤질)-1,2,4-트리아졸

1,2,4-트리아졸(7.5g, 0.109몰)을 디메틸포름아미드(50mL)내에 용해시키고, 10℃에서 빙욕내에서 질소 분위기하에 교반시키고, 이 동안 수산화나트륨의 일부 분쇄된 펠릿트(17.5g, 0.438몰)를 한번에 첨가하여 약 25℃까지의 발열 반응을 일으켰다. DMF내의 4-메톡시벤질 클로라이드의 용액(15mL, 0.111몰)을 25℃에서 5분에 걸쳐 적가하였다. 4시간 동안 실온에서 교반한 후, 에틸 아세테이트 및 물을 첨가하였다. 층들을 분리시키고, 수성층을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 물로 4회, 염수로 1회 세척하고, 황산마그네슘상에서 건조시켰다. 혼합물을 여과시키고, 여액 용매를 진공하에 증발시켜 오일로서 69%의 수율인 표제 생성물(14.15g)을 수득하였다:¹H NMR(CDCl₃)δ8.00(s, 1), 7.93(s, 1), 7.19(d, 2), 6.88(d, 2), 5.23(s, 2), 3.78(s, 3). 질량 스펙트럼: m/z 109(M + 1).

제조예 2

5-(히드록시메틸)-1-(4-메톡시벤질)-1,2,4-트리아졸

제조예 1의 표제 생성물(7.6g, 40밀리몰)을 37%의 포름알데히드 수용액(25mL)내에 용해시키고, 4일 동안 130℃의 오일 욕조내에 환류하에 가열하였다. 히드록시메틸화의 과정을, 용리액으로서 에틸 아세테이트:클로로포름 3:1을 사용하여 실리카 겔상에서 TLC에 의해 모니터링하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물에 붓고, 에틸 아세테이트로 2회 추출하였다. 합쳐진 유기층을 1N의 NaOH, 물 및 염수로 세척하였다. 황산마그네슘상에서 용액을 건조시킨 후, 증발시켜 조생성물을 수득하고, 이를 헥산내에서 소량의 2-프로판올로 슬러리화시켜 4.9g(56%)의 수율로 융점이 95 내지 100℃인 표제 생성물을 수득하였다:¹H NMR(CDCl₃)δ7.72(s, 1), 7.21(d, 2), 6.85(d, 2), 5.70(bs, 1, OH), 5.32(s, 2), 4.69(s, 2), 3.78(s, 3).¹³C NMR(CDCl₃)δ159.6, 149.8, 145.6, 129.2, 127.0, 114.3, 55.3, 54.9, 52.0, IR(KRr) 1610, 1585, 1512cm^-1. 질량 스펙트럼: m/z 220(M + 1).

C₁₁H₁₃N₃O₂의 계산 분석치: C, 60.26; H, 5.98; N, 19.17. 실측치: C, 60.30; H, 6.16; N, 19.66.

구조를 단결정 X-선 분석에 의해 확인하였다.

제조예 3

5-(프탈이미도메틸)-1-(4-메톡시벤질)-1,2,4-트리아졸

제조예 2의 표제 생성물(8.5g, 38.8밀리몰), 트리페닐포스핀(11.2g, 42.7밀리몰) 및 프탈이미드(6.3g, 42.7밀리몰)를 실온에서 테트라히드로푸란(125mL)내에 용해시켜 혼탁한 용액을 수득하였다. 테트라히드록푸란(40mL)내의 디이소프로필 아조디카복실레이트의 용액(8.4mL, 42.7밀리몰)을 빙수욕으로 약 15℃를 유지하면서 40분에 걸쳐 적가하였다. 첨가하는 동안, 생성물은 백색 고형물로서 침전되었다. 반응 혼합물을 밤새도록 실온에서 교반한 후, 헥산(125mL)으로 희석하였다. 30분 동안 교반한 후, 백색 고형물로서 표제 생성물을 수집하고, 헥산으로 세척하고, 진공하에 건조시켰다(12.2g, 91%의 수율; 융점 167 내지 172℃):¹H NMR(CDCl₃)δ7.85(s, 1), 7.81(m, 2), 7.69(m, 2), 7.09(d, 2), 6.77(d, 2), 5.43(s, 2), 4.89(s, 2), 3.72(s, 3).¹³C NMR(CDCl₃)δ150.9, 145.6, 134.2, 131.8, 128.3, 127.0, 123.6, 114.3, 112.9, 112.1, 55.2, 52.0, 32.8. IR(KRr) 1772, 1720, 1689, 1612, 1586, 1519cm^-1. 질량 스펙트럼: m/z 349(M + 1).

C₁₉H₁₆N₄O₃의 계산 분석치: C, 65.50; H, 4.63; N, 16.08. 실측치: C, 65.35; H, 4.80; N, 16.18.

제조예 4

5-(아미노메틸)-1-(4-메톡시벤질)-1,2,4-트리아졸

제조예 3의 표제 생성물(5g, 14.4밀리몰)을 메탄올(50mL)내에 현탁시키고, 히드라진 수화물(1.6mL, 32밀리몰)을 교반하면서 첨가하였다. 수분 후, 맑은 용액이 수득되었고, 반응 혼합물을 밤새도록 실온에서 교반하는 동안 프탈로일히드라지드가 침전하였다. 반응 혼합물을 메틸렌 클로라이드(50mL)로 희석시키고, 히드라지드의 슬러리를 45분 동안 교반하고, 여과시키고, 고형물을 메틸렌 클로라이드로 세척하였다. 여액을 진공하에 증발시키고, 잔여물을 메틸렌 클로라이드 및 1N의 NaOH내에 용해시켰다. 수성층은 pH가 12였다. 층들을 분리시키고, 수성층을 메틸렌 클로라이드로 추출하고, 유기층을 합하였다. 유기층을 염수로 세척하고 황산마그네슘상에서 건조시킨 후, 진공하에 용매를 증발시켜, 무색 오일로서 97%(3g)의 수율로 표제 생성물을 수득하였다:¹H NMR(CDCl₃)δ7.79(s, 1), 7.12(d, 2), 6.81(d, 2), 5.27(s, 2), 3.88(s, 2), 3.74(s, 3), 1.59(bs, 2, NH₂).¹³C NMR(CDCl₃)δ150.3, 145.6, 130.4, 129.0, 128.8, 127.3, 114.3, 55.3, 51.7, 37.7.

제조예 5

2-[2-(4-메톡시벤질)-2H-[1,2,4]트리아졸-3-일메틸]-6-니트로-1,2,3,4-테트라히드로-이소퀴놀린

1) 2-(2-히드록시에틸)-5-니트로벤질 알콜(6.38g, 32.4밀리몰) 및 트리에틸아민(11.3mL, 81밀리몰)을 질소하에 메틸렌 클로라이드(100mL)내에 현탁시키고, 교반하면서 -30℃로 냉각시켰다. 메틸렌 클로라이드(32mL)내의 메탄설포닐 클로라이드의 용액(5.5mL, 71.2밀리몰)을 15분에 걸쳐 적가하였다. 30분 후, 냉각 욕조를 제거하고, 1N의 HCl(130mL)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 교반하고, 층들을 분리시켰다. 유기층을 물, 포화 중탄산나트륨 용액 및 염수로 세척하였다. 유기층을 황산마그네슘상에서 건조시키고, 여과시켰다. 여액을 진공하에 증발시켜 94%(10.7g)의 수율로 황색 고형물을 수득하였고, 이는 추가의 정제없이 사용되었다:¹H NMR(CDCl₃)δ8.17(m, 2), 7.66(d, 1), 5.39(s, 2), 4.50(t, 2), 3.28(t, 2), 3.10(s, 3), 3.00(s, 3).

2) 제조예 4의 표제 생성물(1.1g, 5밀리몰) 및 트리에틸아민(1.8mL, 12.7밀리몰)을 질소 분위기하에 테트라히드로푸란(15mL)내에 용해시키고, 테트라히드로푸란(10mL)내의 단계 1)의 생성물의 용액(1.75g, 5밀리몰)을 적가하였다. 생성된 용액을 2시간 동안 실온에서 및 밤새도록 환류시키면서 교반하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고, 메틸렌 클로라이드 및 1N의 NaOH를 첨가하였다. 층들을 분리시키고, 수성층을 추가의 메틸렌 클로라이드로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 물 및 염수로 세척하고, 황산마그네슘상에서 건조시켰다. 조생성물을 메틸렌 클로라이드로부터 회수하고, 클로로포름중 30%의 에틸 아세테이트로 실리카 겔상에서 크로마토그래피에 의해 정제시켜, 서서히 고형화되는 황색 오일로서 63%(1.2g)의 수율로 표제 생성물을 수득하였다:¹H NMR(CDCl₃)δ7.98(m, 2), 7.88(s, 1), 7.10(m, 3), 6.76(d, 2), 5.40(s, 2), 3.81(s, 2), 3.73(s, 3), 3.63(s, 2), 2.95(t, 2), 2.80(t, 2).¹³C NMR(CDCl₃)δ159.4, 151.4, 150.4, 145.6, 141.5, 135.6, 129.0, 127.4, 123.7, 123.7, 120.8, 114.1, 112.1, 55.5, 55.2, 53.1, 52.1, 50.1, 29.0. IR(KRr) 1610, 1584, 1517cm^-1. 질량 스펙트럼: m/z 380(M + 1).

제조예 6

2-(2H-[1,2,4]트리아졸-3-일메틸)-6-니트로-1,2,3,4-테트라히드로-이소퀴놀린

제조예 5의 표제 생성물(8.8g, 23.2밀리몰)을 트리플루오로아세트산(88mL)내에 용해시키고, 밤새도록 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 진공하에 증발시켜 메틸렌 클로라이드내에 용해되는 오일을 수득하였다. 용액을 1N의 HCl 용액으로 2회 추출하고, 혼합된 산성 추출물을 메틸렌 클로라이드로 1회 세척하였다. 산성 추출물을 새로운 메틸렌 클로라이드로 적층시키고, pH를 10%의 수성 탄산나트륨으로 10으로 조절하여 표제 생성물이 침전되었고, 이를 수집하고 물 및 메틸렌 클로라이드로 세척하였다: 3.99g, 66% 수율, 융점 163 내지 166℃:¹H NMR(CDCl₃)δ8.20(s, 1), 7.97(d, 1), 7.92(dd, 1), 7.30(s, 1), 3.82(s, 2), 3.73(s, 2), 2.92(t, 2), 2.76(t, 2).¹³C NMR(DMSO-d₆)δ147.8, 146.2, 143.2, 136.5, 128.2, 123.8, 120.8, 55.1, 53.4, 49.6, 28.9. 질량 스펙트럼: m/z 260(M + 1).

C₁₂H₁₃N₅O₂(O.15CH₂Cl₂)의 계산 분석치: C, 53.65; H, 4.93; N, 25.98. 실측치: C, 53.65; H, 4.93; N, 25.75.

실시예 1

6-아미노-2-(2H-[1,2,4]트리아졸-3-일메틸)-1,2,3,4-테트라히드로이소퀴놀린

제조예 6의 표제 생성물(4.46g, 17.4밀리몰)을 메탄올(220mL)내에 용해시키고, 4시간 동안 50psi(약 345kPa)에서 10%의 탄소상의 팔라듐(2.23g)상에서 수소화시켰다. 촉매를 셀라이트(Celite, 상품명)를 통해 여과시킴으로써 제거하고, 여액내의 메탄올을 진공하에 증발시켜, 91%(3.56g)의 수율로 백색 고형물로서 표제 생성물을 수득하였다: 융점 191 내지 193℃;¹H NMR(디메틸설폭사이드-d₆)δ6.65(d, 1), 6.32(dd, 1), 6.28(d, 1), 4.79(s, 2), 3.71(s, 2), 3.41(s, 2), 3.34(s, 2).¹³C NMR(디메틸설폭사이드-d₆)δ155.9, 147.0, 134.5, 127.1, 122.4, 113.8, 112.7, 55.4, 53.9, 50.9, 29.2. IR(KBr) 1633, 1612, 1584, 1513cm^-1. 질량 스펙트럼: m/z 230(M + 1).

C₁₂H₁₅N₅의 계산 분석치: C, 62.86; H, 6.59; N, 30.55. 실측치: C, 62.49; H, 6.39; N, 30.45.

실시예 2

4'-트리플루오로메틸-비페닐-2-카복실산-2-(2H-[1,2,4]트리아졸-3-일메틸)-1,2,3,4-테트라히드로-이소퀴놀린-6-일]-아미드(1)

A) 실시예 1의 생성물(3.3g, 14.5밀리몰)을 트리에틸아민(2.23mL, 15.9밀리몰)과 함께 메틸렌 클로라이드(100mL) 및 테트라히드로푸란(40mL)내에 현탁시켰다. 메틸렌 클로라이드(40mL)내의 4'-트리플루오로메틸비페닐-2-카보닐 클로라이드의 용액(4.13g, 14.5밀리몰)을 적가하는 동안, 현탁액을 실온에서 교반하고, 반응 혼합물을 밤새도록 교반하였다. 수중(440mL) 탄산나트륨(17g, 0.2몰)을 첨가하고, 혼합물을 15분 동안 교반하였다. 층들을 분리시키고, 수성층을 메틸렌 클로라이드로 2회 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, 황산마그네슘상에서 건조시키고, 진공하에 증발시켜 포움으로서 표제 생성물을 수득하였다. 이는 선행 물질과 동일하다.¹H NMR(CDCl₃)δ13.88(bs, 1), 10.21(s, 1), 7.74(d, 2), 7.67 내지 7.48(m, 6), 7.31(s, 1), 7.20(dd, 1), 6.91(d, 1), 3.73(s, 2), 3.56(s, 2), 2.73(m, 4). IR(KBr) 1651, 1618, 1603, 1541, 1510cm^-1. 질량 스펙트럼: m/z 478(M⁺).

B) 실시예 4의 생성물(0.49g, 8.2밀리몰)을 트리플루오로아세트산(5mL)내에 용해시키고, 밤새도록 실온에서 교반하였다. 휘발성 물질을 진공하에 제거하고, 잔여물을 에틸 아세테이트내에 용해시키고, 10%의 수성 탄산나트륨을 이에 첨가하였다. 층들을 분리시키고, 유기층을 염수로 세척하고, 황산마그네슘상에서 건조시켰다. 용매를 진공하에 제거하여 표제 생성물을 수득하였다. 이는 공정 A로부터 수득된 표제 생성물과 동일하다.

실시예 3

6-아미노-2-(2-(4-메톡시-벤질)-2H-[1,2,4]트리아졸-3-일메틸)-1,2,3,4-테트라히드로-이소퀴놀린

2-[2-(4-메톡시벤질)-2H-[1,2,4]트리아졸-3-일메틸]-6-니트로-1,2,3,4-테트라히드로-이소퀴놀린(0.5g, 1.3밀리몰)을 메탄올(25mL)내에 3시간 동안 50psi(약 345kPa)에서 10%의 Pd/C(0.25g)상에 수소화시켰다. 반응 혼합물을 여과시키고, 용매를 진공하에 증발시켰다. 에틸 아세테이트 및 물을 첨가하고, pH를 고형 탄산나트륨을 사용하여 10으로 조절하였다. 층들을 분리시키고, 수성층을 추가 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, 황산마그네슘상에서 건조시키고, 여과시키고, 진공하에 증발시켜 87%(0.4g)의 수율로 오일을 수득하였다:¹H NMR(CDCl₃)δ7.86(s, 1), 7.18(d, 2), 6.79(m, 3), 6.48(m, 2), 5.42(s, 2), 3.76(s, 3), 3.73(s, 2), 3.50(s, 2), 2.80(m, 2), 2.69(m, 2). IR(KBr) 1613, 1587, 1513cm^-1. 질량 스펙트럼: m/z 348(M⁺- 1).

실시예 4

4'-트리플루오로메틸비페닐-2-카복실산[2-(2-(4-메톡시벤질)-2H-[1,2,4]트리아졸-3-일메틸)-1,2,3,4-테트라히드로-이소퀴놀린-6-일]아미드

실시예 3의 표제 생성물(0.38g, 1.1밀리몰) 및 트리에틸아민(0.17mL, 1.2밀리몰)을 메틸렌 클로라이드(14mL)내에 용해시키고, 실온에서 교반하면서 메틸렌 클로라이드(40mL)내의 4'-트리플루오로메틸비페닐-2-카보닐 클로라이드의 용액(0.31g, 1.1밀리몰)을 적가하였다. 4시간 후, 10%의 탄산나트륨 수용액을 첨가하고, 혼합물을 30분 동안 교반하였다. 메틸렌 클로라이드층을 염수로 세척하고, 황산마그네슘상에서 건조시키고, 진공하에 증발시켜 경질의 포움으로서 97%(0.63g)의 수율로 표제 생성물을 수득하였다:¹H NMR(CDCl₃)δ7.79(s, 1), 7.72(d, 1), 7.64(d, 2), 7.58 내지 7.34(m, 6), 7.12(d, 2), 7.01(s, 1), 6.90 내지 6.72(m, 4), 5.38(s, 2), 3.73(s, 3), 3.69(s, 2), 3.50(s, 2), 2.79(t, 2), 2.68(t, 2). IR(KBr) 1668, 1615, 1599, 1567, 1536, 1514cm^-1. 질량 스펙트럼: m/z 598(M⁺+ 1).

Claims

a) 하기 화학식 (III)의 화합물을 하기 화학식 (X)의 화합물로 처리하고;

b) R이 R²인 경우, 추가로 단계 a)의 생성물을 산으로 처리함을 포함하는, 하기 화학식 (I)의 화합물의 제조 방법:

화학식 I

화학식 III

화학식 X

상기 식에서,

R은 H 또는 R²이고,

R²는 알릴, 또는 치환된 메틸기(이 때, 치환체는 아릴기가 추가로 니트로 및 (C₁-C₆)알콕시로부터 선택된 하나 이상의 치환체로 선택적으로 치환된 1 내지 3개의 (C₆-C₁₀)아릴기를 포함한다)로 이루어진 군으로부터 선택되고,

J는 할로겐 원자, 아지도기, (C₁-C₆)아실옥시기 또는 (C₆-C₁₀)아로일옥시기, 바람직하게는 염소 또는 브롬 원자와 같은 이탈기이다.
제 1 항에 있어서,

상기 산이 트리플루오로아세트산(TFA), p-톨루엔설폰산(PTSA), 메탄- 또는 트리플루오로메탄설폰산 및 아세트산내의 HBr로 이루어진 군으로부터 선택되는 방법.
제 2 항에 있어서,

상기 산이 트리플루오로아세트산인 방법.
제 1 항에 있어서,

R이 상기 정의된 바와 같은 화학식 (III)의 화합물이,

a) 하기 화학식 (IV)의 화합물을 수소화 촉매의 존재하에 수소로 처리하여 R이 R²인 화학식 (III)의 화합물을 형성하거나; 또는

b) 1) 하기 화학식 (IV)의 화합물을 산으로 처리하고,

2) 단계 1)의 생성물을 수소화 촉매의 존재하에 수소로 처리하여 R이 수소인 화학식 (III)의 화합물을 형성함으로써 제조되는 방법:
제 4 항에 있어서,

화학식 (IV)의 화합물이, 하기 화학식 (VI)의 화합물을 염기의 존재하에 하기 화학식 (V)의 화합물로 처리함으로써 제조되는 방법:

화학식 VI

화학식 V

상기 식에서, Y는 상기 정의된 바와 같다.
a) R이 R²인 화학식 (VI)의 화합물을 염기의 존재하에 하기 화학식 (V)의 화합물로 처리함으로써 R이 R²인 화학식 (IV)의 화합물을 제조하는 단계;

b) 1) i) R이 R²인 화합물 (IV)를 TFA로 처리하여 R이 H인 화합물 (IV)를 형성하고;

ii) R이 H인 화합물 (IV)를 수소화 촉매의 존재하에 수소로 처리하여 R이 H인 화합물 (III)을 형성하고;

iii) R이 H인 화합물 (III)을 화합물 (X)로 처리하거나; 또는

2) i) R이 R²인 화합물 (IV)를 수소화 촉매의 존재하에 수소로 처리하여 R이 R²인 화합물 (III)을 형성하고;

ii) R이 R²인 화합물 (III)을 화합물 (X)로 처리하여 R이 R²인 화합물 (II)를 형성하고;

iii) R이 R²인 화합물 (II)을 TFA로 처리하는 단계를 포함하는,

화학식 (I)의 화합물의 제조 방법:

화학식 V

상기 식에서, Y는 상기 정의된 바와 같다.
제 4 항에 있어서,

상기 수소화 촉매가 Pd/C, Pd(OH)₂, 라니(Raney) 니켈 및 PtO₂로부터 선택되는 방법.
제 7 항에 있어서,

상기 수소화 촉매가 Pd/C인 방법.
하기 식의 화합물 및 이의 호변이성체(tautomer):

상기 식에서, Y는 NH₂또는 NO₂이다.
제 9 항에 있어서,

Y가 NH₂인 화합물 및 이의 호변이성체.
제 9 항에 있어서,

Y가 NO₂인 화합물 및 이의 호변이성체.
하기 화학식 (II)의 화합물:

화학식 II

상기 식에서,

R은 R²이고,

R²는 상기 정의된 바와 같다.
제 12 항에 있어서,

R²가 CH₃OC₆H₄CH₂-인 화합물.