KR20020033093A - 위암 위험의 예측 방법 및/또는 위암의 진단 방법 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 암 발병 위험의 예측 방법, 특히 헬리코박터로 감염된 환자에서의 위암 발병 위험의 예측 방법 및/또는 위암의 진단 방법에 관한 것이다.

Description

위암 위험의 예측 방법 및/또는 위암의 진단 방법 {METHODS FOR PREDICTING AND/OR DIAGNOSING THE RISK OF GASTRIC CANCER}
헬리코박터 필로리 감염은 이제 위암 발병에 대한 필수적인 예비 요건으로서 인식된다. 약 30 % 의 인구가 이 박테리아로 감염되고, 통상 만성 위염이 존재한다. 이는 위 또는 십이지장 궤양과 병발될 수 있거나, 또는 비궤양성 소화불량으로서 존재할 수 있다. 대단히 많은 수의 보균자가 증상이 없다. 그러나, 헬리코박터 필로리를 갖는 소수의 환자에서, 그들의 상태가 신생물로의 단계들 (상피 세포 화생 (metaplasia) 및 형성장애 (dysplasia) 포함) 에 연관되어 있다. 이러한 진화의 원인이 되는 요인은 복합적이지만, 지리학적, 환경적 및 유전적 매개변수가 연관된다. 숙주 반응이 특히 중요하다. 현재 증거는, Th1 (인터루킨-4 (IL-4) 가 아닌, γ인터루킨 (γIFN) 의 생성을 특징으로 함) 으로 알려진 특정 T 세포 반응이 점막 손상을 촉진시킨다는 이론을 뒷받침하고 있다. 이와 다르게는, 상기 싸이토카인 (γIFN 및 IL-4) 의 균형있는 생성을 포함하고, 점막 손상으로부터 보호를 돕는 Th0 반응이 발생할 수 있다. 신생물 전환 및 종양 진행과 관련된 점막 싸이토카인 반응의 패턴은 기재되어 있지 않다.
헬리코박터 필로리 감염의 현재 취급 현황
헬리코박터 필로리는 만성 위염 및 소화성 궤양으로 유인하는 일련의 사건의 필수 성분이다. 항생제로의 감염 근절은 소화성 궤양의 80 내지 90 % 의 치료율을 유도한다. 널리 허용되는 치료 패러다임은 항체 분석을 사용하는 감염 검출, 이어서 미리 내시경 진단없이 항생제 치료의 조합을 기초로 하고 있다. 근절 치료 전의 내시경은 일반적으로 '위험' 증상 (예를 들면, 심한 통증, 출혈) 이 발생하거나, 위암의 상당한 위험이 존재하는 경우에 허용된다. 그러나, 내시경은 그 자체의 위험과 관련된 과정이며, 가능한 피해야 한다.
현재, 헬리코박터 감염이 있는 환자에서 위암의 예측 또는 진단을 허용하는비칩습성 (non-invasive) 테스트가 있다. 상기 테스트는 "고위험" 카테고리에 있는 것으로 동정되지 않는, 상대적으로 약한 증상이 있고, 그렇지 않으면 자동적으로 그의 부수적 위험을 갖는 내시경을 겪어야 하는 것이 요구되는 환자에 대해 특히 가치가 있다. "위험 증상"을 가지며, 여전히 내시경이 요구될 수 있는 환자에서도, 상기 비침습성 테스트는 진단 보충 도구로서 사용될 수 있다. 실제 이 변화는 건강 경제에 대한 상당한 충격을 갖는다.
본 발명의 목적은 종래 기술의 하나 이상의 단점을 극복 또는 개선하고, 유용한 대안을 제공하는 것이다.
발명의 개요
놀랍게도, 위암 또는 전암 (precancer) 병소 (화생 및 형성장애) 가 존재하는 경우, 헬리코박터 감염 환자에서 점막 IgG2 항 헬리코박터 필로리 항체 및 γIFN 수준이 감소되고, IL-4 수준이 상승되는 것이 발견되었다. 이러한 변화는 또한 상기 환자의 혈액에서 반영된다. 그러나, 상기 변화는 헬리코박터 필로리가 위 점막에 콜로니를 형성하는 다른 장애에서 관찰되지 않는다.
본 발명은 암 발병 위험의 예측 방법, 특히 헬리코박터 필로리 (Helicobater pylori) 로 감염된 대상자에서의 위암 발병 위험의 예측 방법 및/또는 위암의 진단 방법에 관한 것이다.
도 1 은 위 암 또는 전-암 병소 (화생 또는 형성장애) 를 갖는 대상자로부터의 위 점막 배양물의 상층액에서의 IL-4 의 검출에 관한 것이다. 병발되지 않은 헬리코박터 필로리 감염 (또는 양성 소화성 궤양) 에서, 싸이토카인의 Th1 패턴 (예를 들면, γINF) 가 발견된다.
도 2 는 점막 생검으로부터 IL-4 의 분비 및 헬리코박터 필로리 항원으로 자극된 혈액 T 세포 간의 높은 수준의 상관성을 설명한다. IL-4 는 만성 위염이 병발되지 않고, 헬리코박터 필로리 감염된 비처리 대상자에서 항원 자극 T-세포로부터 분비되지 않는다.
도 3 은 헬리코박터 필로리 감염 대상자의 위 점막에서의 싸이토카인 (IL-8, IL-4 및 γIFN) 생성에 관한 것이다.
도 4 는 다양한 위장 장애를 갖는 헬리코박터 필로리로 감염된 대상자의 혈청에서의 IgG1 및 IgG2 항-헬리코박터 필로리 항체 수준에 관한 것이다.
도 5 는 다양한 위장 장애를 갖는 헬리코박터 필로리로 감염된 대상자의 혈청에서의 IgG1 및 IgG2 항-헬리코박터 필로리 항체 수준에 관한 것이다.
바람직한 구현예의 설명
본 발명은 이제 비제한적인 실시예를 참고로 더욱 상세하게 설명될 것이다.
혈액 및 위 점막의 총 IgG 항-헬리코박터 필로리 항체 수준은 헬리코박터 필로리 상태의 지표로서 사용될 수 있음은 이미 공지되었다. 그러므로, 하기 실시예에서, IgG 항-헬리코박터 필로리가 헬리코박터 필로리 상태의 일반 지표로서 유용할 수 있지만, 본 발명은 또한 위암의 예측제로서 또는 진단에서 사용될 수 있는 IgG2 서브클래스의 측정에 관한 것으로 여겨질 것이다.
인간 시료에서 싸이토카인 및 항체의 측정 기술은 당업계 공지이고, 프로토콜 및 시약은 용이하게 입수할 수 있다. 사용되는 기술의 일부의 예를 하기에 일부의 측정이 수행될 수 있는 방법의 설명으로서 나타낸다.
달리 나타내지 않는한, 표준 문헌 및 실험실 매뉴얼로부터 확인될 수 있는 표준 기술이 적용될 것이다.
제 1 국면에 따라, 본 발명은 하기를 포함하는 헬리코박터 감염 대상자에서의 위암 진단 방법 및/또는 위암 발병 위험의 결정 방법을 제공한다:
a) 대상자에서의 IgG2 항-헬리코박터 필로리 항체 수준의 결정;
b) 미리 결정된 대조군의 IgG2 항-헬리코박터 필로리 항체 수준과 IgG2 항-헬리코박터 필로리 항체 수준의 비교 (여기서, 대조군과 비교되는 대상자에서의 IgG2 항-헬리코박터 필로리 항체의 수준에서의 감소는 위암의 존재 및/또는 발병 위험의 증가를 나타냄).
제 2 국면에 따라, 본 발명은 하기를 포함하는, 헬리코박터 감염 대상자에서의 위암 진단 방법 및/또는 위암 발병 위험의 결정 방법을 제공한다:
a) 대상자에서의 γIFN 수준의 결정;
b) 미리 결정된 대조군 γIFN 수준과 γIFN 수준의 비교 (여기서, 대조군과 비교된 대상자에서의 γIFN 의 수준의 감소는 위암의 존재 및/또는 발병 위험의 증가를 나타냄).
제 3 국면에 따라, 본 발명은 하기를 포함하는, 헬리코박터 감염 대상자에서의 위암 진단 방법 및/또는 위암 발병 위험의 결정 방법을 제공한다:
a) 대상자에서의 IL-4 수준의 결정;
b) 미리 결정된 대조군 IL-4 수준과 IL-4 수준의 비교 (여기서, 대조군과 비교되는 대상자에서의 IL-4 수준의 상승은 위암의 존재 및/또는 발병 위험의 감소를 나타냄).
제 4 국면에 따라, 본 발명은, 제 1 국면에 따른 방법 및/또는 제 2 국면에 따른 방법 및/또는 제 3 국면에 따른 방법의 조합을 포함하는, 헬리코박터 감염 대상자에서의 위암 진단 방법 및/또는 위암 발병 위험의 결정 방법을 제공한다.
제 5 국면에 따라, 본 발명은 제 2 국면에 따른 방법 및 제 3 국면에 따른 방법의 조합을 포함하는, 헬리코박터 감염 대상자에서의 위암 진단 방법 및/또는 위암 발병 위험의 결정 방법을 제공한다.
바람직하게는, 헬리코박터 감염은 헬리코박터 필로리 감염이다.
바람직하게는, IgG2 항-헬리코박터 필로리 항체, γIFN 및/또는 IL-4 수준은 예를 들면, 혈액, 타액, 위액 등과 같은 생물학적 액체의 시료에서의 검출에 의해 결정된다.
바람직하게는, IgG2 항-헬리코박터 필로리 항체, γIFN 및/또는 IL-4 의 측정은 동시에 헬리코박터 필로리 상태의 지표를 제공하는 방법을 제공하거나, 또는 동시에 그와 함께 수행될 수 있다.
바람직하게는, IgG2 항-헬리코박터 필로리 항체, γIFN 및/또는 IL-4 은 근접 대상자 분석에 의해 검출된다. 그러나, 분석은 또한 실험실 기초 테스트일 수있다. 다른 공지의 측정 방법이 또한 효과적으로 사용될 수 있는 것으로 여겨지지만, 바람직하게는 분석은 항체 분석이다. 가장 바람직하게는, 분석은 ELISA 이다.
제 6 국면에서, 본 발명은 하기에 의한 헬리코박터 감염 대상자에서 위암의 진단 방법 및/또는 위암 위험의 예측 방법을 제공한다:
a) 대상자 혈액에서의 IgG2 항-헬리코박터 필로리 항체 및/또는 γIFN 및/또는 IL-4 생성 세포의 빈도 결정; 및
b) 미리 결정된 대조군 수준과 대상자 혈액의 IgG2 항-헬리코박터 필로리 항체 및/또는 γIFN 및/또는 IL-4 생성 세포의 빈도 비교 (여기서, 대상자 혈액의 IgG2 항-헬리코박터 필로리 항체 및/또는 γIFN 생성 세포의 수준의 감소 및/또는 IL-4 생성 세포의 상승은 위암의 존재 및/또는 발병 위험의 증가를 나타냄).
혈액을 정제하여 풍부해진 백혈구 집단을 제공할 수 있고, 백혈구 세포 집단을 더 분획화하여 특정 세포 집단을 얻을 수 있다는 것은 당업자들에게 명백할 것이다.
바람직하게는, IgG2 항-헬리코박터 필로리 항체 및/또는 γIFN 및/또는 IL-4 의 측정 전에, IgG2 항-헬리코박터 필로리 항체 및/또는 γIFN 및/또는 IL-4 생성 세포는 헬리코박터 필로리 항원으로 자극될 수 있다.
제 7 국면에 따라, 본 발명은 하기에 의한 헬리코박터 감염 대상자에서 위암의 진단 방법 및/또는 위암 위험의 예측 방법을 제공한다:
a) 대상자의 점막에서의 IgG2 항-헬리코박터 필로리 항체 및/또는 γIFN 및/또는 IL-4 생성 세포의 빈도 결정; 및
b) 미리결정된 대조군 수준과 대상자의 위 점막에서의 IgG2 항-헬리코박터 필로리 항체 및/또는 γIFN 및/또는 IL-4 생성 세포의 빈도 비교 (여기서, 대상자 위 점막에서의 IgG2 항-헬리코박터 필로리 항체 및/또는 γIFN 생성 세포의 수준의 감소 및/또는 IL-4 생성 세포의 상승은 위암의 존재 및/또는 발병 위험의 증가를 나타냄).
바람직하게는, 세포는 생검 시료로부터 유래된다.
바람직하게는, IgG2 항-헬리코박터 필로리 항체 및/또는 γIFN 및/또는 IL-4 생성 세포는 유량 세포계산법에 의해 검출된다.
대조군의 IgG2 항-헬리코박터 필로리 항체, γIFN 및/또는 IL-4 의 수준은 정상 개체, 즉 설정된 헬리코박터 필로리 감염되지 않는 자들로부터 수득된 생물학적 액체의 시료에서 설정될 수 있거나, 또는 병발되지 않은 만성 위염 또는 비증상 감염 등을 갖는 헬리코박터 필로리 감염 대상자로부터의 시료에서 설정될 수 있다. 대상자가 이어서 수행되는 특정 경우, 대조군 수준은 내부 수준, 즉 대상자 자신의 대조군 수준일 수 있다.
본 발명의 방법은 또한 IgG2 항-헬리코박터 필로리 항체, γIFN 및/또는 IL-4 의 측정 방법에 의한 화생 또는 형성장애와 같은 전 암 병소의 진단 및/또는 발병 위험의 결정에 사용될 수 있다.
다른 매개변수, 예를 들면, 총 IgG2 항-헬리코박터 필로리 항체에 대한 IgG2 항-헬리코박터 필로리 항체, γIFN 또는 IL-4의 비는 화생 및 형성장애가 존재하는상황을 포함하는 위의 전암 또는 암 상태의 예측제로서 또는 진단에서 유용할 수 있다. 전암 또는 암 상태의 예측 및/또는 진단의 세밀함은 IL-4:γIFN, IgG2:총IgG2 또는 IgG2:IgG1 의 비와 같은 유용한 특이적 비가 사용되는 것을 요구할 수 있다. 그러나, 다른 비가 또한 유용할 수 있다.
본 발명의 내용에서, 약어 "γIFN" 및 "IFNγ" 는 싸이토카인 γ감염을 의미하기 위해 명세서 중에서 번갈아 사용되었다.
실시예 1
혈액 시료에서의 싸이토카인 및 항체 수준의 결정
표준 분석은 단일클론성 항-IL-4 (MoAb) 로 96-웰 마이크로타이터 플레이트의 마이크로웰을 코팅시키는 것을 포함한다. 항체의 제거 및 PBS/트윈 20 으로의 세척후, 전혈 100 ㎕ 을 동일 부피의 AIM-V 배지를 포함하는 각 웰에 첨가하였다. 24 시간 동안 37 ℃ 에서 인큐베이션한 후, ELISA 에 의한 γIFN 의 측정을 위해혈장 상층액을 회수한다 (도 1). 각 웰에서의 IL-4 MoAb 에 의해 포획된 IL-4 의 양을 ELISA 에 의해 측정한다 (도 1 및 2). 응고된 혈액으로부터의 혈청 또는 혈장 상층액 (상기) 에서의 IgG1 및 IgG2 서브클래스 항-헬리코박터 필로리수준 또는 IgG2/IgG 비를 ELISA 에 의해 측정한다 (도 4, 5). 모든 시료를 분석시까지 -80 ℃ 에서 보관한다.
IL-4 단독, 또는 동시에 IL-4 및 항-헬리코박터 필로리 IgG 항체의 측정에 대한 분석 시스템
96-웰 평평한 바닥 마이크로타이터 플레이트의 웰을 중탄산나트륨 완충액 pH 8.5 중의 2 ㎍/mL 의 단일클론성 항-IL-4 포획 항체로 코팅한다. 항체 용액의 제거후, 동일 부피의 새로 수합된 전혈을 각 웰에 첨가한다. 37 ℃ 에서 24 시간 동안 인큐베이션한 후, 회수되고 IL-4 가 결합된 혈장 상층액을 비오틴화된 항-IL-4 항체 및 스트렙아비딘-퍼옥시다제 콘쥬게이트와의 반응에 의해 검출한다. IL-4 의 양을 적당한 기준을 갖는 플레이트 판독기에서 발색을 판독함으로써 측정한다.
동일 플레이트 상에서, IgG 항-헬리코박터 필로리 항체를, 혈장 상층액을 4 ㎍/mL 의 헬리코박터 필로리 항원으로 코팅된 웰에 첨가하고, ELISA 분석을 사용함으로써 검출한다. 결과를 표 1 에 나타내었다.
전혈에서의 IL-4 생성 및 항-헬리코박터 필로리 IgG 항체
대상자 IL-4 생성 (pg/mL) 헬리코박터 필로리IgG (ELISA 지수)
S1S2S3S4S5S6S7S8S9S10S11 42.779.413.49108.259.418.19.419.4156.6415.19.4 0.6961.611.860.951.830.674.323.223.483.420.12
실시예 2 위 점막에서의 IL-4 및 γIFN 생성 세포의 빈도
위 T 세포를 내시경에서 수득된 생검 조직으로부터 단리한다. 조직을 1mM 디티오트레이톨 및 1mM EDTA 중에서 헹구어 상피 세포 및 상피내 세포를 제거한 후, 2 내지 3 시간 동안 40 U 콜라게나제 (Worthington Biochemical) 를 포함하는 무혈청 AIM-V 배지에서 고유판 T 세포를 추출하였다. 소화되지 않은 물질의 제거후, 트리판 블루 배제법에 의한 단일클론성 세포의 생활력은 >90% 였다. 개체 생검으로부터 단리된 위 단일클론성 세포는 벌크 배양에서 항원 매개 재자극에 대해 통상적으로 매우 낮다 (약 0.503X105세포/생검). 그러므로, 각 세포 단리물에서 IL-4 및 γIFN 생성체 빈도를 세포내 염색에 의해 결정한 후, 3-색 유량 세포계산법을 사용하여 FACS Vatage 상에서 분석한다. 단리된 위 세포는 PMA 및 이오노마이신으로 활성화되고, PedCP-CD3 단일클론성 항체 (Becton Dickinson) 로 염색되고, 이어서 상기 기재된 FITC-γIFN 및 PE-IL-4 단일클론성 항체로 세포내 염색에 대해 프로세싱된다.
상기와 달리 나타내지 않는 한, 표준 실험실 문헌으로부터 확인될 수 있는표준 기술이 사용되었다.
표 2 는 상기 테스트를 기초로 하여 수행될 수 있는 예측/진단의 예를 제공한다.
IgG 항-헬리코박터 필로리IgG 항체 + veIL-4 - ve 암 위험도 낮음나이를 나타내지 않은 내시경지표 단독
IgG 항-헬리코박터 필로리IgG 항체 + veIL-4 + ve 암 위험도 높음초기 내시경 필요중재
IgG 항-헬리코박터 필로리IgG 항체 - veIL-4 - ve 헬리코박터 필로리감염의 증거 없음
실시예 3 말초 혈액에서의 IL-4 및 γIFN 생성 세포의 빈도
상이한 대상자 중에서 IL-4 및 γIFN 의 싸이토카인-생성체 빈도를 측정하기 위해 세포내 싸이토카인 염색 및 유량 세포계산법에 의한 검출을 사용하였다. 이는 위 생검 조직으로부터 수득된 결과를 비교할 수 있도록 하며, 제한 희석 배양 후, 연이은 항원 재자극에 의한 분석은 생검당 단리 세포의 적은 수로 인해 불가능하다. 말초 혈액 단일클론성 세포 또는 전혈은 포르볼 미리스테이트 아세테이트 (PMA, 50 ng/mL) 및 1 μM 이오노마이신으로, 4 내지 5 시간 동안 2 μM 모넨신의 존재하에 활성화되고, 고정되고, 투과되고, FITC/PE 라벨링 γIFN/IL-4 (Bectin-Dickinson) 로 염색된다. 이어서, γIFN 및 IL-4 빈도는 이소타입 IgG 대조군을 매칭하고, 임파구에 대해 게이팅하여, 유량 세포 분석에 의해 분석된다.
헬리코박터 필로리 감염되거나, 또는 감염되지 않은 대상자로부터의 말초 혈액 중의 IL-4 및 γIFN 생성 세포의 빈도는 표 3 및 표 4 에 나타낸다. γIFN:IL-4 생성 세포의 비는 비감염 대상자보다 헬리코박터 필로리 감염 대상자에서 더 높았다.
Hp 재조합 항원 (Hp 3010 의 시트레이트 합성효소) 으로 자극된 단기 배양물을 사용하여, 순환 IL-4 및 γIFN 분비 세포의 빈도의 정량적 평가를 결정하기 위해 제한 희석 분석을 사용한다. 비보호 재조합 항원 Hp-0162 를 음성 대조군으로서 사용한다. 세포 농도 당 24 복제로 105내지 2.5X103세포로 2배 희석을 사용하여 V-형 바닥 96-웰 마이크로플레이트에 세포를 접종한다. 배양물을 시트레이트 합성효소 또는 Hp 3010 항원의 미리결정된 농도로 rIL-2 (5 U/mL) 의 존재하에 3일간 자극하였다. 대조군은 배지중에 비반응 세포 또는 반응 세포 및 항원 없이 rIL-2 를 포함한다. IL-4 는 불안정하므로, 항체 포획법이 매칭된 항체 짝 (Endogen/CSL) 을 사용하여 ELISA 에 의해 측정된 결합 IL-4 에 사용된다. γIFN 생성을 표준 방법에 의해 상층액 중에서 측정한다. 적당하게 타당한 컴퓨터 소프트웨어를 사용하여 최대 가능성법에 의해 IL-4 및 γIFN 을 생성하는 말초 혈액 단일클론성 세포 빈도를 계산한다.
헬리코박터 필로리 항체 양성 대상자에서의 싸이토카인 생성 세포
대상자 γIFN (%) IL-4 (%) γIFN:IL-4 비
S1S2S3S4S5 18.325.426.09.614.8 2.53.311.52.65.6 7.37.62.33.72.6
평균 ±SE 4.7 ±1.15*
헬리코박터 필로리 항체 음성 대상자에서의 싸이토카인 생성 세포
대상자 γIFN (%) IL-4 (%) γIFN:IL-4 비
S6S7S8S9S10 24.88.98.129.925.9 28.33.02.629.117.2 0.93.03.11.01.5
평균 ±SE 1.9 ±0.48*
*p = 0.054
도 1 내지 5 는 다양한 위장 상태, 즉 역류, 위염, 십이지장 궤양, 위 궤양 및 위암을 갖는 대상자의 연구에서 하기 예시된 테스트를 이용하여 수득된 결과를 제공한다. 도면은 자가-설명적이고, IgG2, γIFN 및 IL-4 가 헬리코박터 필로리감염 환자에서 위암의 예측제로서 및 위암의 진단에서 사용될 수 있음을 나타낸다.
특정 실시예를 참고로 하여 본 발명을 설명하였지만, 본 발명의 개념의 취지 또는 의도로부터 이탈하지 않으면서 많은 다른 형태로 본 발명이 구현될 수 있음은 당업자들에 의해 인식될 것이다.

Claims (22)

  1. 하기를 포함하는, 헬리코박터 감염 대상자에서의 위암의 진단 방법 및/또는 위암 발병 위험의 결정 방법:
    a) 대상자에서의 IgG2 항-헬리코박터 필로리 항체 수준의 결정;
    b) 미리 결정된 대조군의 IgG2 항-헬리코박터 필로리 항체 수준과 IgG2 항-헬리코박터 필로리 항체 수준의 비교 (여기서, 대조군과 비교되는 대상자에서의 IgG2 항-헬리코박터 필로리 항체의 수준에서의 감소는 위암의 존재 및/또는 발병 위험의 증가를 나타냄).
  2. 하기를 포함하는, 헬리코박터 감염 대상자에서의 위암 진단 방법 및/또는 위암 발병 위험의 결정 방법:
    a) 대상자에서의 γIFN 수준의 결정;
    b) 미리 결정된 대조군 γIFN 수준과 γIFN 수준의 비교 (여기서, 대조군과 비교된 대상자에서의 γIFN 의 수준의 감소는 위암의 존재 및/또는 발병 위험의 증가를 나타냄).
  3. 하기를 포함하는, 헬리코박터 감염 대상자에서의 위암 진단 방법 및/또는 위암 발병 위험의 결정 방법:
    a) 대상자에서의 IL-4 수준의 결정;
    b) 미리 결정된 대조군 IL-4 수준과 IL-4 수준의 비교 (여기서, 대조군과 비교되는 대상자에서의 IL-4 수준의 상승은 위암의 존재 및/또는 발병 위험의 감소를 나타냄).
  4. 제 1 항에 따른 방법 및/또는 제 2 항에 따른 방법 및/또는 제 3 항에 따른 방법의 조합을 포함하는, 헬리코박터 감염 대상자에서의 위암 진단 방법 및/또는 위암 발병 위험의 결정 방법.
  5. 제 2 항에 따른 방법 및 제 3 항에 따른 방법의 조합을 포함하는, 헬리코박터 감염 대상자에서의 위암 진단 방법 및/또는 위암 발병 위험의 결정 방법.
  6. 제 1 항 내지 제 6 항 중 어느 한 항에 있어서, 헬리코박터 감염이 헬리코박터 필로리 (Helicobater pylori) 감염인 방법.
  7. 제 1 항 내지 제 7 항 중 어느 한 항에 있어서, IgG2 항-헬리코박터 필로리 항체, γIFN 및/또는 IL-4 수준이 생물학적 액체의 시료에서의 검출에 의해 결정되는 방법.
  8. 제 7 항에 있어서, 생물학적 액체가 혈액인 방법.
  9. 제 7 항에 있어서, 생물학적 액체가 타액인 방법.
  10. 제 7 항에 있어서, 생물학적 액체가 위액인 방법.
  11. 제 1 항 내지 제 10 항 중 어느 한 항에 있어서, IgG2 항-헬리코박터 필로리 항체, γIFN 및/또는 IL-4 의 측정이 동시에 헬리코박터 필로리 상태의 지표를 제공하는 방법을 제공하거나, 또는 동시에 그와 함께 수행될 수 있는 방법.
  12. 제 1 항 내지 제 11 항 중 어느 한 항에 있어서, IgG2 항-헬리코박터 필로리 항체, γIFN 및/또는 IL-4 이 근접 대상자 분석에 의해 검출되는 방법.
  13. 제 1 항 내지 제 11 항 중 어느 한 항에 있어서, 분석이 실험실 기초 테스트인 방법.
  14. 제 12 항 또는 제 13 항에 있어서, 분석이 항체 분석인 방법.
  15. 제 14 항에 있어서, 항체 분석이 ELISA 인 방법.
  16. 하기에 의한 헬리코박터 감염 대상자에서 위암의 진단 방법 및/또는 위암 위험의 예측 방법:
    a) 대상자 혈액에서의 IgG2 항-헬리코박터 필로리 항체 및/또는 γIFN 및/또는 IL-4 생성 세포의 빈도 결정; 및
    b) 미리 결정된 대조군 수준과 대상자 혈액의 IgG2 항-헬리코박터 필로리 항체 및/또는 γIFN 및/또는 IL-4 생성 세포의 빈도 비교 (여기서, 대상자 혈액의 IgG2 항-헬리코박터 필로리 항체 및/또는 γIFN 생성 세포의 수준의 감소 및/또는 IL-4 생성 세포의 상승은 위암의 존재 및/또는 발병 위험의 증가를 나타냄).
  17. 제 16 항에 있어서, 혈액을 정제하여 풍부해진 백혈구 집단을 제공하는 방법.
  18. 제 17 항에 있어서, 백혈구 집단을 더 분획화하여 특정 세포 집단을 수득하는 방법.
  19. 제 16 항 내지 제 18 항 중 어느 한 항에 있어서, IgG2 항-헬리코박터 필로리 항체 및/또는 γIFN 및/또는 IL-4 생성 세포가, IgG2 항-헬리코박터 필로리 항체 및/또는 γIFN 및/또는 IL-4 의 측정 전에, 헬리코박터 필로리 항원으로 자극되는 방법.
  20. 하기에 의한, 헬리코박터 감염 대상자에서 위암의 진단 방법 및/또는 위암 위험의 예측 방법:
    a) 대상자의 점막에서의 IgG2 항-헬리코박터 필로리 항체 및/또는 γIFN 및/또는 IL-4 생성 세포의 빈도 결정; 및
    b) 미리결정된 대조군 수준과 대상자의 위 점막에서의 IgG2 항-헬리코박터 필로리 항체 및/또는 γIFN 및/또는 IL-4 생성 세포의 빈도 비교 (여기서, 대상자 위 점막에서의 IgG2 항-헬리코박터 필로리 항체 및/또는 γIFN 생성 세포의 수준의 감소 및/또는 IL-4 생성 세포의 상승은 위암의 존재 및/또는 발병 위험의 증가를 나타냄).
  21. 제 20 항에 있어서, 세포가 생검 시료로부터 유래되는 방법.
  22. 제 20 항 또는 제 21 항에 있어서, IgG2 항-헬리코박터 필로리 항체 및/또는 γIFN 및/또는 IL-4 생성 세포가 유량 세포계산법에 의해 검출되는 방법.
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