WO1987001390A1 - Procede de production de l-threonine par fermentation - Google Patents
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
- C12P13/04—Alpha- or beta- amino acids
- C12P13/08—Lysine; Diaminopimelic acid; Threonine; Valine
Definitions
- the present invention relates to the production of L-threon by fermentation.
- L-threonine has been produced by a fermentation method using a microorganism belonging to the genus Providencia (former Blotex in the case of lettuce species).
- Examples of the production method include a method using L-sololysin-requiring strains (Machiko Sho 43-4440) and a-amino / 3/3 hydrochloride.
- a method that uses a strain that is resistant to shivaleric acid and requires L-iso-isocyanine is required (Abstracts of Japanese Society of Agricultural Chemistry, p. 9 (1970)). Yes.
- the present inventors have conducted intensive studies on a method for producing L-threonine by a more advantageous fermentation method, and as a result, they belong to the genus Providencia. It has been found that mutants that are resistant to the metabolic metabolites of different microorganisms can produce and accumulate significant amounts of L-threon. The present invention has been reached.
- the present invention relates to the resistance of a microorganism belonging to the genus Providencia to the methionine metabolite antagonist of a microorganism capable of producing L-lethreon. Cultivating a microorganism having the bacterium to produce and accumulate L-threon in the culture medium; This is a method for producing L-leonin by a fermentation method, which is characterized in that L-leonin is collected.
- the mutation ⁇ that is resistant to a methionine antimetabolite of a microorganism belonging to the genus Providencia has a significant amount of L-threonine. None that can be generated and stored in a computer is known.
- the microorganism used in the present invention belongs to the genus Brovidencia (animals, pharmacological and / or data kinetic). , 9th edition, pp. 494-496), which are microorganisms that are resistant to methine antimetabolites.
- methionine antimetabolites include, for example, echionin, norloisin, crotonylalanin, crotonolinore Glycine, Introduction-North Fox, etc. As long as it has such properties, even if it has properties such as other requirements and other drug resistances, it is also included in the scope of the present invention.
- a methionine antimetabolite is used.
- Characteristics to improve threonine productivity such as L-Iso n-Isine requirement for high-resistance strains, a-Rinomin ⁇ -Hide ⁇ Kishi Valeric acid resistance, etc. Can be used by using a mutant strain obtained by a normal mutagenesis operation.
- the auxotrophy to L-isolysin is in a broad sense and includes incomplete deletions (so-called Leaky types). This also includes the case where the requirement is satisfied with the biosynthetic precursor of L-isolysin.
- Representative examples of the mutation sou used in the present invention include, for example, the following.
- Providencia ettger i TY- 1 (PERM ⁇ -871), Providencia Rettger i TY—2 (F £ R BP-872).
- Induction of mutated beads can be relatively easily performed by conventional mutagenesis. That is, in order to obtain a mutant strain resistant to a meteonin antimetabolite, the parent strain is irradiated with ultraviolet light or a mutagenic agent (for example, N-medium). Chill N'-N-to-one N-N-toro guanidine, ethyl methansulfonate, etc.) After the treatment, a strain that can grow on a solid medium containing an amount of a methionine antimetabolite that does not allow the parent strain to grow may be collected.
- a mutagenic agent for example, N-medium
- the methionine antimetabolite-tolerant strain according to the present invention is defined as a methionine anine antimetabolite-resistant strain obtained by culturing in a medium added to a methine ninine antimetabolite concentration of 4 rn / nt.
- the growth rate after 50 hours should be 50% or more, preferably 70% or more, when no growth is added.
- the growth was measured by measuring the absorbance of the culture at 660 nm, and the absorbance of the culture without the addition of the methionine antimetabolite of each strain was defined as 100%. It is indicated by the relative absorbance when passing.
- Methion antimetabolites for example, ethionin, can be used to test for tolerance using commercially available products.
- the medium for producing L-threonine in the present invention is a normal medium containing a carbon source, a nitrogen source, an inorganic ion and, if necessary, other organic minute components. It is.
- carbon dioxide include glucose, flags, hydrolysates of starch and cellulose, sugars such as molasses, fumaric acid, quinic acid, and the like.
- Organic acids such as succinic acid, alcohols such as glycerol, etc. are 2 to 15%, and nitrogen sources are used, such as ammonium acetate.
- Inorganic ammonium such as organic ammonium salt, ammonium sulfate, ammonium chloride, ammonium phosphate, ammonium nitrate, etc.
- Pum salt, ammonia gas, ammonia water, urea, etc. are 0.5-4.0%, and organic trace nutrients are required substances such as isoloisin; 0.001 ⁇ 0.4%, or required If necessary, a medium containing an appropriate amount of 0 to 4%, such as constable breaker, peptone, yeast excretion, etc., is suitably used. . In addition to these, a small amount of potassium phosphate, magnesium sulfate, ferrous sulfate heptahydrate, manganese sulfate 4-hexahydrate, etc. is added. .
- Culture is preferably under aerobic conditions. During the culture, the pH of the medium was between 5 and 9, and the temperature was between 24 and 37. C, and shaking or aerating for 48-120 hours to obtain favorable results, and any method can be used for the culture process. Both the semi-continuous method and the patch method can be applied.
- the culture solution from which the cells have been slowly removed is prepared with hydrochloric acid to pH 2 and then passed through a strongly acidic cation-ion exchange resin, then adsorbed with dilute ammonia water. After the components are eluted and deammonified, alcohol is added to the concentrate, and the crystals formed during storage under cooling are collected, and the L-threonine is added.
- Bacterial cells of Providencia lettgeri IN 417 fi (a-amino- ⁇ -hydroxyl-valeric acid-resistant, L-isoloisin-requiring) Then, the cells were irradiated with ultraviolet rays by a usual method, and the cells were added to L-echioun 10 in an agar plate medium (Dalcos 1%, ammonium sulfate 0.3%, phosphoric acid The first culm 0.05%, It was spread on 0.15% of phosphoric acid 2nd manganese, 0.04% of magnesium sulfate heptahydrate, and 0.01% of L-isoloisin. Next, at 30, cultivate 4 to 6, cultivating the large colonies produced, and separating the large colonies produced by the bacterium into L-echionin-resistant strains (Providencia). ⁇ Let's get ⁇ -1 and ⁇ - 2).
- Each strain shown in Table 1 below was cultured with shaking at 30'C for 16 hours in a liquid bouillon medium, and the grown cells were collected and washed with saline.
- the suspension of the cells was added to a minimal medium containing L-echionin at a ratio of 0, 4, 8, 16 / ⁇ (medium composition: Golcose L0%, sulfuric acid, respectively).
- cultured at 30'C for 24 hours and the growth of each strain was examined.
- a fermentation medium 50 having the following composition was placed in a flask with 1 ⁇ shaking and steam-sterilized at 120 ° C for 10 minutes. In addition, 30% in a seed culture medium containing 2% glucose, 1% polypeptone, 1% yeast yeast, and 0.5% NaC ⁇ . C. The culture solution 5 of each strain shown in Table 2 that had been cultured with shaking for 1.6 hours was transferred, and cultured at 30 ° C for 150 times for 90 hours under the condition of an amplitude of 3%.
- L-threonine is one of the essential amino acids and is important as a pharmaceutical and feed additive.
- microorganisms I ⁇ , c which is the document that describes the following items had been attached
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Description
明 細 書
発 酵法 に よ る L ー ス レ オ ニ ン の 製法
技術分野
本発 明 は 発 酵法 に よ る L ー ス レ オ - ン の 製法 に関す る。
背景技術
従 来、 プ ロ ビ デ ン シ ァ 属 （ レ ト ゲ リ 種 に 関 し ては 旧 ブ ロ テ ク ス 属） の 微生物 を用 い た ^ 酵法 に よ る L — ス レ オ ニ ン の 製造 方法 と して は 、 L ー ィ ソ ロ イ シ ン 要 求性株 を 用 い る 方法 （待公 昭 43— 4440 号公報） や、 a—ァ ミ ノ ー /3 — ハ イ ド ロ キ シ 吉 草酸 に 耐性 を有 し 、 力 つ L 一 イ ソ 口 ィ シ ン 要求性株 を 用 い る 方 法 （ 日 本 農 芸化学会講演要 旨 p. 9 ( 1970 ) ) が知 ら れ て い る 。
し 力 し な 力； ら 、 か か る 従来 の微生物 を用 い た方 法は 、 L ー ス レ オ ニ ン の 蓄積量力； ま だ十分満足 で き る も の で は な カゝ つ た 。
発 明 の開示
本発明 者 ら は 、 よ り 有利 な 発 酵法 に よ る L — ス レ オ ニ ン の製 造方法に つ い て 鋭意研 究 し た結 果 、 プ ロ ビ デ ン シ ァ 属 に 属 す る 微生物 の メ チ ォ - ン代 謝掊 抗物 質に つい て 耐 性 を 有す る 変異 株が著量 の L — ス レ オ - ン を生成 蓄積 せ し め る こ と を 見 出 し 、 本発明 に到達 し た 。
す な わ ち、 本発明 は 、 ブ ロ ビ デ ン シ ァ （ Providencia )属 に 属 し 、 L ー ス レ オ - ン 生産能 を有 す る 微生物 の メ チ ォ ユ ン 代 謝拮抗物質 に耐性 を有す る微 生物を 培養 し て、 培 養液中 に L ー ス レ オ - ン を生成 蓄積せ し め 、 該培養液 か
ら L ー ス レ オ ニ ン を採取す る こ と を特徴 と す る 発酵法に よ る L ー ス レ オ ニ ン の 製法 であ る。
ブ π ビ デ ン シ ァ属 に属す る微生物の メ チ 才 ニ ン 代謝拮 抗物質 に耐性 を有 する微生物の変異株 は、 こ れ ま で に分 離 さ れ た こ と 力； な い。 ま た 、 本発 明 の ご と く 、 プ ロ ビ デ ン シ ァ 属 に属す る微生物の メ チ ォ ニ ン 代謝拮抗物質に 耐 性 を 有する変異侏が L —ス レ オ ニ ン を著量 に生成 蓄積せ し め得 る こ と は 、 ま っ た く 知 ら れ て い ない 。
発明 を実施す る ため の最良 の形態 次 に本発明 を詳細 に説明 する 。
本発明 で用 い ら れ る 微生物は ブ ロ ビ デ ン シ ァ属 に属 .し ( パ ー ジ 一 の ア ニ マ ル · 才 ブ， · デ タ ー ミ ネ ィ テ ィ ブ * バ ク テ リ ォ ロ ジ 一、 第 9 版、 第 4 94 〜 4 96 頁 の 記載に従 う も の で あ る ） 、 メ チ 才 - ン 代謝拮抗物質 に耐性を 有す る 微生物 で あ る 。 こ こ で 、 メ チ ォ ニ ン 代謝拮抗物質 と し て は 、 例 え ば ェ チ ォ ニ ン 、 ノ ル ロ イ シ ン 、 ク ロ ト ノ ィ ル ァ ラ ニ ン 、 ク ロ ト ノ ィ ノレ グ リ シ ン ·、 メ チ 才 - ン ス ノレ フ ォ キ シ ム 等が挙げ ら れ る 。 かかる 性質 を有 して いれば、 他 の 要求性、 他の薬剤抵抗性等 の性質 を も つ も の で も 本発明 の 範囲 に含ま れ る。 - 本発明 で用 い られ る微生物は、 上記耐性 に加え て、 好 ま し く は L ー ィ ソ ロ イ シ ン に対 する 栄養要求性を有 し 、 力 => ό ス レ オ ニ ン 生合成系 に おレヽ て ス レ 才 ニ ン の フ ィ 一 ド パ ッ ク コ ン ト ロ ー ル に抵抗性 を有する も のであ る。
す なわ ち、 本発明 におい ては、 メ チ ォ ニ ン 代謝拮抗物
質耐 性株 に L 一イ ソ n イ シ ン 要求性、 a — 了 ミ ノ ー β — ハ イ ド π キ シ 吉草酸耐 性等 のス レ オ ニ ン 生産性 を向上せ し め る 特性 を、 通常 の変異誘 導操作 に よ っ て付与 し た変 異株を使用 す る こ と も で き る。
こ こ に レ、 う L —イ ソ ロ イ シ ン に対す る 栄養要求性 と は、 広 義 の意味 で あ り 、 不完全欠失 型 （いわゆ る Leaky 型） も 含 む も の であ り 、 さ ら に 、 L 一イ ソ ロ イ シ ン の生合成 前駆物質 で要求 性が満足 さ れ る場合 も 含む も の で あ る 。
本発 明 で用 い ら れ る変異 洙の代表的 な も の と し ては 、 例え ば以 下の も のが あ る 。
プ ロ ビ デ ン シ ァ · レ ト ゲ リ （ Providencia ettger i ) TY- 1 (PERM ΒΡ-871 ) , ブ ロ ビ デ ン シ ァ · レ ト ゲ リ ( Providenc ia Rettger i ) TY— 2 (F£R BP-872 ) 。
こ れ ら の変異 株は 、ブ 。 ビ デ ン シ 了 * レ ト ゲ リ ATC C 21 1 1 8 ( L — イ ソ ロ イ シ ン 要求性） ；^ ら 得 ら れ た α —ァ ミ ノ 一 3 — ハ イ ド π キ シ 吉草酸耐性株ブ 。 ビ デ ン シ ァ .レ ト ゲ リ Ι Ν 4— 7 H ( a — ア ミ ノ ー /3 — ハ イ ド ロ キ シ 吉草酸耐 性、 L 一 イ ソ π イ シ ン 要求性） よ り 誘 導 さ れた も ので、 メ チ ォ = ン 代謝拮抗物質 の う ち 、 L 一 ヱ チ ォ ニ ン に耐性 を 有す る 変 異株 で あ る 。
変異珠 の誘導 は、 通常 の変異処理 法に よ っ て比較的容 易 にで き る 。 す な わち 、 メ テ オ ニ ン 代謝拮抗物質に耐性 を有 する 変異株 を得 る には 、 親株'を紫外線照射す るか、 あ る い は変異誘 発剤 （例 え ば N — メ チ ル ー N'—二 ト 口 一 N —二 ト ロ ソ グ ァ 二 ジ ン 、 ェ チ ル メ タ ン ス ル ホ ン 酸等）
で処理 し た後、 親株が生育 で き ない よ う な 量の メ チ ォ ニ ン 代謝拮抗物質 を含む固体培地 で生育 で き る よ う な 菌株 を採取すれば よ い。
本発明 に おけ る メ チ ォ - ン 代謝拮抗物質耐 性株 と は 、 メ チ 才 ニ ン 代謝拮抗物質濃度が 4 rn/nt と な る よ う に添加 し た培地で培養 した時 の 2 4 時間後 の 生育度 が無添加 の 場合 の 5 0 %以上 好 ま し く は 7 0 % 以上 の も の を レ、 う 。 こ こ で生育度は、 培養液 の 660 nm に お け る 吸光度を測 定 し、 各菌株の メ チ ォ ニ ン 代謝拮抗物質を 添加 し てい な い培養液 の吸光度を 100 % と し て表 わ し た場合 の相対吸 光度 で示す。 耐性を検定す る場合の メ チ ォ - ン 代謝拮抗 物質、 例 えば ェチォ ニ ン は 、 市販の も のを用 い る こ と力； で き る 。
本発明 におけ る L ー ス レ オ ニ ン 生産用 の培地 は炭素源、 窒素源、 無機 イ オ ン お よ び必要に応 じ てそ の 他 の有機微 量成分を 含有 す る通常 の培地 で あ る 。 炭素 嫫 と し ては 、 グ ル コ ー ス 、 フ ラ グ ト 一 ス 、 でん粉お よ び セ ル ロ ー ス の 加水分解物、 糖蜜等の糖類、 フ マ ー ル 酸 、 ク ヱ ン 酸 、 コ ハ ク 酸等の 如 き有機酸 、 グ リ セ ロ ー ル の如 き ア ル コ ー ル 類等 を 2 〜 1 5 % 、 窒素源 と して、 酢酸 ア ン モ - ク ム の 如 き 有機 ア ン モ - ク ム 塩、 硫酸 ア ン モ - ク ム 、 塩化 ア ン モ - ク ム 、 リ ン 酸 ア ン モ ニ ゥ ム 、 硝酸ア ン モ - ゥ ム の 如 き無機 ア ン モ ニ ゥ ム 塩、 ア ン モ ニ ア ガ ス 、 ア ン モ ニ ア水、 尿素等を 0.5 〜 4.0 %、 有機微量栄養素 と しては、 一 ィ ソ ロ イ シ ン等の被要求物質力； 0.001 〜 0.4 %、 ま たは 必
要 に応 じ て コ ー ン ス テ ィ ー ブ リ カ ー 、 ペ プ ト ン 、 酵母 ェ キ ス 等 0〜 4 % をそ れぞれ適当 量含有 す る 培地 が好適 に 用 い ら れ る 。 こ れ ら の 他 に リ ン 酸 カ リ ウ ム 、 硫酸 マ グ ネ シ ク ム 、 硫酸 第 1 鉄 7 水和物、 硫酸 マ ン ガ ン 4 — 6 水和 物 等が少 量添 加 さ れ る 。
培養 は、 好気 的条 件が望 ま し い。 培 養 の 間 、 培地 の pH は 5 カ ら 9 に 、 温度 は 2 4 〜 3 7 。C に 調節 し 、 4 8 〜 120 時 間 振 と う ま た は通 気培養 すれば好 ま し い結 果が得 ら れ 培 養 ブ α セ ス は 任意 の方法が採用 で き 、 連続 法、 半連 続 法 、 パ ッ チ 法 い ずれ も 適 用 で き る 。
培 養液 よ り L —ス レ オ ニ ン を採 取す る に は 、 例 え ば 次 の 方法に よ る 。
菌体 を徐去 し た培養 戸 液 を pH 2 に 塩酸 で 調 製 し た の ち 、 強酸 性 カ チ オ ン イ オ ン 交 '渙樹脂 に 通 液後 、 希 ア ン モ - ァ 水 で 吸着成分 を 溶出 し 、 脱 ア ン モ ニ ア 後 、 濃 縮 す る こ れ に ア ル コ ー ル を 添加 し 、 冷却保 存下 で 生成 し た結 晶 を 集 め 、 L —ス レ オ ニ ン を得 る こ と 力； で き る 。
実施例 1
A . ( L 一ェ チ ォ ニ ン 耐性変 異株 の 取得）
プ ロ ビ デ ン シ ァ .レ ト ゲ リ I N 4一 7 fi ( a ー ァ ミ ノ 一 β 一 ハ イ ド ロ キ シ 吉 草酸 耐性、 L ー ィ ソ ロ イ シ ン 要求 性） の 菌体 に 、 通 常 の 方法 で 紫外線照射 し 、 こ の細 胞 を L 一 ェ チ ォ ユ ン 1 0 添加 し た 寒天平板培 地 （ ダ ル コ ー ス 1 %、 硫安 0. 3 % 、 リ ン 酸第 1 カ リ ク ム 0.05 % 、
リ ン 酸第 2 カ リ ク ム 0.15 %、 硫酸 マ グ ネ シ ウ ム 7 水和 物 0.04 % 、 L ー ィ ソ ロ イ シ ン 0.01 % を 含む最少培地） に 塗布 し た。 次に 30 で にて 4 〜 6 曰 閭 培 養 し 、 生 じ た大 き な コ ロ ニ ー を釣菌分離 し て 、 L — ェ チ ォ ニ ン 耐 性株 （ プ ロ ビ デ ン シ ァ · レ ト ゲ リ ΤΥ— 1 お よ び ΤΥ— 2 ) を 取得 し た 。
B . ( L — ェ チ ォ ニ ン 耐 性変異株 の 耐 性度）
下記 第 1 表に示 す各菌株 を 液体 ブ イ ヨ ン 培地 を用 い て 30 'C で 16 時間 振 と う 培養 し 、 生 育 し た 菌体 を 集 菌 し生 理食塩水 で洗 浄 し た 。 こ の 菌 体の 懸 濁液 を 、 L 一 ェ チ ォ ニ ン を各 々 0 , 4 , 8 , 1 6 /Ά の 割合 で含 む最少 培地 （培地 組成 ： グ ル コ ー ス L0 %、 硫 安 0.3%、 リ ン 酸 第 1 カ リ ゥ ム 0.05 % 、 リ ン 酸第 2 カ リ ク ム 0.15 %、 硫酸 マ グ ネ シ ウ ム 7 水和物 0.01 %、 L 一 イ ソ ロ イ シ ン 0.01 % ) 5 に植 菌 し て 、 30 'C に て 24 時 間培養 し 、 各 菌株 の生育度 を 調べた 。 、そ の結果は 、 第 〖 表 に 示す と お り で あ り 、 本発 明方法で使用 す る ヱ チ 才 - ン に耐性 な変異株 （ ブ 口 ビ デ ン シ ァ · レ ト ゲ リ TY— 1 ま たは プ ロ ビ デ ン シ ァ · レ ト ゲ リ T Y"— 2 ) で は 、 親株 の ブ.。 ビ デ ン シ ァ *レ ト ゲ リ IN 4— 7 H と 比 較 し て、 高 濃度 の
L — ェ チ ォ ニ ン に よ っ て生育が阻害 さ れ ず、 強 い ヱ チ ォ ニ ン 耐性 を獲得 し て い る 'こ と を示 し て レ、 る 。
1 表
(注） 培養液 の 660 nm に おけ る 吸光度 を測定 し、 各菌抹の ； L 一 ェ チ ォ ニ ン を添加 し て い ない培 養液 の吸光度 を 100 % と し て表わ し た 。 実施例 2
下記 の組成 の発 酵用培地 50 を 1 ^ 容振 と う フ ラ ス コ に入 れ、 120 °C で 10.分間 蒸気殺菌 した 。 こ れ に 、 あ ら ；^ じ め グ ル コ ー ス 2 % 、 ポ リ ペ プ ト ン 1 % 、 酵母 ェ キ ス 1 % 、 NaC^ 0.5 % を 含む 種培養培地で 3 0 。C 、 1.6時 間 振 と う 培養 し た第 2 表 に示 す各菌株の 培養液 5 を移 し、 30 °C にて 150 回 分、 振幅 3 «» の条件下 9 0 時間 培養 し た 。
発 酵用培地組成
グ ル コ ー ス 8 %
(NH,)2 S04 2 %
H2 PO4 0.1 %
MgSO^ · 7H20 0.04 %
Fe卄 2
Mn 2 if»
Lーィ ソロイシン 0.005^
CaC03 (別滅菌） 3 %
fl 7.0 (KOHで中和） 2 表
実施 例 3
第 3 表 に示す各菌 株を、 液体 ブ イ ヨ ン 培地 で、 30 で 1 6 時間 振 と う 培養 し 、 こ れを実施例 2 の発 酵用 培地 の う ち （NH< SO を 0.5 %、 ダ ル コ 一 ス を 4.0 % と した培 地 800 W を分注 した ガ ラ ス 製小型ジ ャ 一 フ プ 一 メ ン タ 一 へ 10 % と な る よ う に接種 し た。 30 °C にて、 800 rpm、 通気量 1 vm に て通気攪拌培養 を開 始 した 。 pH 調節 お よ び窒素 源の供 給は、 25 %ア ン モ ニ ア 水に て行 な い 、
pHは、 6.5 〜 8.0 に維持 し た。 グ ル コ ー ス 、 KH2 PO* お よ び MgS04 · 7Η20 を適宜添加 しな力； ら 、 70 時間培養し た と こ ろ 第 3 表に示す よ う な結果 を得 た。
第 3 表
L0
プ ロ ビ デ ン シ ァ · レ ト ゲ リ Τ Υ— 1 の培養液 よ り 菌体を 除 き 、 そ の 500 W を 強 力 チ オ ン 交換樹脂ダ イ ヤ イ オ ン S Κ · 1 β ( Η型） の カ ラ ム に通 し た。 カ ラ ム を水洗後、 2 Ν ア ン モ ニ ア水 で カ ラ ム の吸着成分 を溶出 し 、 脱色後減
15 圧澳縮 し た。 こ れ に ヱ タ ノ 一 ル を加 え 、 冷却 し、 生成 し た結晶 を集 め て乾燥 し た結 果、 純度 96 % 以上 の L ー ス レ オ ニ ン の結晶 8.4 が得 られ た。
産業上 の利用可能性
L ー ス レ オ ニ ン は必須 ア ミ ノ 酸 の 1 つ で あ り 、 医薬品、 0 飼料添加物 と し て重 要であ る 。
BUDAPEST TREATY ON THE INTERNATIONAL RECOGNITION OF THE DEPOSIT
特許手铳上の微生物の寄託の国際的承認 OF MICROORGANISMS FOR THE PURPOSES
OF PATENT PROCEDURE
に関するブダぺスト条約
RECEIPT IN THE CASE OF AN ORIGINAL
下記国際寄託当局によつて規則 7.1に従い
DEPOSIT
凳行される
issued pursuant to Rule 7. 1 by the INTERNA原寄託についての受託証 TIONAL DEPOSITARY AUTHORITY identified at the bottom of this page.
氏名 （名称）
寄託者
あ て 名
i . 微生物の表示
(寄託者が付した識別のための表示） (受託番号）
微ェ研条寄第 8 7 1
TY-1
(FERM BP - 8 7 1
I. 科学的性質及び分類学上の位置
I瀾の微生物には， 次の事項を記載した文書が添付されていた。
Ξ 科学的性質
a 分類学上の位置
DI. 受領及び受託 本国際寄託当局は， 昭和 60 年 2 月 12 日 （原寄託日）に受領した I欄の微生物を 受託する。 （昭和 60年 2 月 12 日に寄託された @ェ研 *第 8079号より移管）
W. 国際寄託当局
通商産業省工業技術院微生物工業技術研究所 名 称
あて名：
)
1-3, Higas i 1 chome Yatafae-machi Tsukuba-gun Ibaraki-ken
305, JAPAN
昭和 60 年 （1985 ) 8月 15 曰
BUDAPEST TREATY ON THE INTERNATIONAL RECOGNITION OF THE DEPOSIT
特許手铳上の微生物の寄託の国際的承認、 OF MICROORGANISMS FOR THE PURPOSES
OF PATENT PROCEDURE
、に 5ϋするブダペスト条約 J
RECEIPT IN THE CASE OF AN ORIGINAL
下記国際寄託当局によって規則 7. 1に従い
DEPOSIT
発 ί亍される
issued pursuant to Rule 7. 1 by the INTERNA原寄託についての受託証 TIONAL DEPOSITARY AUTHORITY identified at the bottom of this page. 氏名 （名称） [レも拭^ t
寄託者
あ て 名 凉辦央区 s«m町 2丁目 2 ¾
I . 微生物の表不
(寄託者が付した識別のための表示） (受託番号）
微工研条寄第 8 7 2
TY-2
(FERM BP— 8 7 2
Π . 科学的性質及び分類学上の位置
I瀾の微生物には， 次の事項を記載した文書が添付されていた c
3 科学的性質
S 分類学上の位置
I . 受領及び受託 本国際寄託当局は， 昭和 60 年 2 月 12 日 （原寄託日）に受領した 1攔の微生物を 受託する。 （昭和 60年 2 月 12 日に寄託された微ェ研 S¾T第 8080号より移管）
IV. 国際寄託当局
名 称：
あて名：
)
1-3, Higashi 1 chome Yatabe-machi Tsukuba-gun Ibaraki-ken
305, JAPAN
昭和 60 年 Π 985 ) 8 月 " 1 5 曰
Claims
請 求 の 範 囲
(1) ブ ロ ビ デ ン シ ァ （ Providencia )属 に属 し、 メ チ ォ 二 ン 代謝拮抗物質に耐性を 有 し、 かつ L ー ス レ オ ニ ン 生 産能 を有す る微生 ^を培養 し て培養液中 に L ー ス レ オ
5 ニ ン を生成蓄積せ し め、 該培養液 よ り L ー ス レ オ - ン を採取す る こ と を持徴 と す る 発酵法に よ る L ー ス レ オ ニ ン の 製法。
プ ロ ビ デ ン シ ァ （ Providencia ) 属に属 し、 メ チ ォ 二 ン 代謝拮抗物質 に耐性を有 し 、 かつ L ー ス レ オ ニ ン 生 L0) 産能 を有す る 微生物。
(3) 微生物力； a — ア ミ ノ ー /3 — ハ イ ド ロ キ シ 吉草酸に耐 性で L ー ィ ソ コ ィ シ ン を生育 に要求す る こ と を特徵 と す る 特許請求の 範囲第 2 項記載 の微生物。
Priority Applications (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP19850904153 EP0243496A4 (en) | 1985-08-26 | 1985-08-26 | PROCESS FOR PRODUCING L-THREONINE BY FERMENTATION. |
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