WO1996024041A1

WO1996024041A1 - Method of fixedly supporting biopsy specimen, fixedly supporting agent, and embedding cassette

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Publication number: WO1996024041A1
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Inventors: Teiji Takezaki
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Description

明細書生検試料の定着支持方法とその定着支持剤及び包埋カセット技術分野この発明は、臨床医が病気の診断及び治療法を決めるため、人体から採取した生検試料を包埋処理して病理検査室等で顕微鏡検査することのできる薄切り標本にするまでのいくつかの処理工程のうち、生検試料を変質しないように定着すると共に包埋カセット内に支持するための定着支持方法及びそれに必要な包埋カセット及び定着支持剤に関する：背景技術従来、この種の作業を行う際は、臨床医が、不透明な多孔板で形成された蓋付きの偏平な包埋カセットの中に生検試料を容して蓋を閉じ、その包埋カセットを生検試料の変質防止剤の入っているカプセルの中に入れて病理検査室等の検査場所に送る

病理検査室等では、該包埋カセットを前記カプセルから取り出し、包埋カセッ卜の蓋をあけてその中に入っている生検試料とそこに添付されている伝票の記載事項とを照合し、両者の同一性を確認する。その後、その生検試料を再び包埋カセッ卜の中に容して、その包埋カセットをアルコールまたはキシレン等の入っている各容器に夫々入れて、前記生検試料を順次脱水、脱脂、透徹およびパラフィンまたは樹脂等からなる包埋剤に漬けて各処理を行う：

その後、包埋容器の蓋を開けて生検試料を包埋容器内からピンセット等で直接摘んで取り出して、予め用意されている別の包埋皿上に載せ換えるその包埋皿上の生検試料の上方に、前記包埋カセットを、その多孔板で形成されている底板の部分を生検試料に若干空間を隔てて対向させて配置し、その上から熔融したパラフィンまたは樹脂等からなる包埋剤を注ぎ込んで、該生検試料を該包埋カセットの一部分と共に前記包埋剤で包埋する。この伏態で前記包埋剤を冷却して、包埋カセッ卜と生検試料を前記包埋剤で一体的に固形化して包埋ブ口ックを形成する。

そして、病理医が、該包埋ブロック中の生検試料を包埋剤ごとミクロトームで薄切りし、その薄切り切片を顕微鏡で検査する。

従来の包埋カセットを用いて行う上述の処理は、以下の点で改良を要する：第一に、包埋作業を行う際、生検試料を包埋皿の上に載せ換えるときにピンセットで直接摘むので、それを局部的に挫滅して検査試料を傷め、その結果生検試料の検査に支障を来すおそれがある。

第二に、一つの包埋カセットの中に複数の生検試料を、例えばその採取の順や採取位置の順に配置して収容する場合、これらの生検試料を別の包埋皿に載せ換える際、誤って前記の配置と異なる配置で載せ換えるおそれがある。また、載せ換え作業の際、他の包埋カセットの生検試料を混ぜてしまったり、入れ違えたりするおそれがある。このような場合は、その後行われる生検試料の顕微鏡検査の結果に重大な影響を及ぼす：

第三に、生検試料は、包埋された後病理医により検査の必要な部分がミクロトームにより薄切りされ、顕微鏡により検査される：しかし、生検試料の包埋作業を行う者は、前記医師とは別の者なので、臨床医が検査を希望する部分を把握することが困難であり、従って、臨床医の希望するように薄切りできるように該生検試料を包埋皿上に配置することが困難である：すなわち、病理医が、生検試料の検査を要する箇所を適切に薄切りすることが極めて困難である：第四に、包埋カセット内の生検試料と、包埋カセットに添付されている伝票の記載内容とを照合するときは、その都度カセットの蓋を開けるため、その確認作業に手間がかかる。また蓋を開けた際に、収容されている生検試料が脱落するおそれがある：

第五に、包埋カセットは多孔板で形成されているため、生検試料が、その大きさによっては、その孔から流失するおそれがある第六に、包埋ブロックは、薄切りする際に刃により加えられる力によって壊れない程度の強度が必要なので、ある程度以上の厚さを必要とする。大きな病院ゃ検查場においては、処理する包埋ブロックの数は膨大な数になるので、これらの包埋ブロックを重ねて保管する場所を確保するためには、包埋ブロックの厚さはできるだけ薄いほうが好ましい- この発明の第一の目的は、生検試料を包埋皿上に載せる際、ピンセット等で摘まんで、その生検試料を局部的に挫滅して傷めることがないようにすることである。

第二の目的は、一つの包埋カセッ卜の中に複数の生検試料を所定の配置で容した場合、包埋皿上にそれらを載せ換える際、誤ってその配置と異なる状態で包埋皿上に配置したり、別の生検試料と混同したりする機会をなくすことである。

第三の目的は、病理医が、包埋された生検試料の検査を要する箇所を適切に薄切りすることができ、適切に検査を行なえるようにすることである

第四の目的は、包埋カセッ卜に収容されている生検試料と、包埋カセッ卜に添付されている伝票に記載されている事項の同一性を確認する作業を容易にすることである。また、その確認作業の際に、生検試料を誤って紛失しないようにすることである =

第五の目的は、該生検試料が包埋カセッ卜の多孔板の孔から流出することがないようにすることである。

第六の目的は、包埋ブロックの強度を変えずに、その厚さを薄くすることである。発明の開示この発明は、少なくとも蓋または容器の底面の何れかが透明な多孔板で形成された偏平な包埋カセッ卜の内部に生検試料を収容し、該生検試料の周囲にグルコマンナンと防腐剤とからなる定着支持剤を充塡して、生検試料を変質しないように定着すると共に、包埋カセット内で移動しないように支持し、これらをカプセル中の変質防止剤を混入したアルコール類又はァセトン等のゲル化剤に浸漬して該定着支持剤をゲル化することによつて生検試料を前記包埋カセット中に一体的に支持する方法に関する =

このようにして包埋カセット中に定着支持された伏態の生検試料は、該包埋カセットごとアルコール中に浸漬されて脱水、脱脂され、次にキシロールに漬けられて脱アルコール（透徹）される：定着支持された生検試料は、その後包埋カセットの中から定着支持剤中に埋め込まれているゲル状ブロックの状態で取り出され、そのまま包埋皿上に載置される- 次に、包埋皿上に載置された該ゲル伏ブロックの上方に、生検試料を取り出して空になった包埋カセットの容器を、その容器の底面が該ブロックに対向するように、ブロックから若干の間隙をおいて配置する：そして、該容器の上方から熔融状態のパラフィンまたは樹脂等からなる包埋剤を該容器が埋まるまで注入し、その後冷却固化する。このようにして、該包埋剤の中に、定着支持剤で定着された生検試料と包埋カセットの容器とを共に包埋する

またこの発明は、水に防腐剤を加えた溶媒でマンナンの精粉を溶解することによって得られる生検試料の定着支持剤に関する。

さらにこの発明は、蓋と容器とからなる包埋カセッ卜において、平面状枠体平面状の枠体の中央部を該平面状枠体の一側面に向けて突設して偏平な容器を形成し、少なくとも該蓋と容器の底面の一方を透明な多孔板で形成し、また同容器の開口部の周囲における平面状枠体に突条縁を該平面伏枠体の他側面に向けて突設し、さらに前記容器の周囲における平面状枠体にその両側面に通ずる連通孔を形成した生検試料の包埋カセッ卜に関する。図面の簡単な説明第 1図は、この発明の生検試料の定着支持方法の実施例における定着支持剤注入過程を示す縦断面図である- 第 2図は、第 1図の一部分の拡大断面図である =

第 3図は、同上の方法におけるゲル化過程を示す縦断面図である。

第 4図は、同上の方法における脱水、脱脂、透徹して包埋剤を浸透する各過程を示す縦断面図である- 第 5図は、同上の方法における定着支持剤に埋設された生検試料の状態を示す縦断面図である。

第 6図は、同上の方法によって得られた生検試料の包埋過程を示す縦断面図である- 第 7図は、第 6図に示す包埋過程を終了した生検試料の伏態を示す縦断面図である

第 8図は、第 6図に示す生検試料を薄切りする状態の縦断面図である第 9図は、第 8図に示す包埋ブロックの薄切り切片である：

第 1 0図は、本発明の包埋カセッ卜の容器の実施例の斜面図である。

第 1 1図は、この発明の他の実施例における第 1図に相当する状態の縦断面図である：

第 1 2図は、また他の実施例の第 1 0図と同じ状態の縦断面図である：第 1 3図は、従来の包埋カセットの斜面図である- 第 1 4図は、第 1 3図に示す包埋カセッ卜の蓋の斜面図である」

第 1 5図は、第 1 3図に示す包埋カセットを用いた包埋ブロックにおける第 8図の伏態に相当する縦断面図である。発明を実施するための最良の形態この発明の実施例を添付図面によって説明する。

まず第 1図に示すように、包埋カセット 4の容器 4 2をシャーレ 1 2の上に置いて、その容器 4 2の内部に生検試料 5を収容する。該生検試料 5の上方及ぴ全周囲に、精製した水溶性繊維マンナン（天然多糖グルコマンナン（gluco- mannan) ) と、例えばホルマリンのような防腐剤とからなる定着支持剤 6を定着支持剤容器 13から矢印 A 6に示すように流し込んで充塡するこのようにして、該生検試料 5を変質しないように定着し、包埋カセット 4の容器 42内に支持する。

この際、第 2図に示すように、生検試料 5を、臨床医の希望する検査面 16 が容器 42の底面 1に接着するように置く。

包埋カセット 4は、第 3図、第 4図、および第 10図〜第 12図に示す如く、長方形の平面状枠体 41の中央部を該平面状枠体 41の下面に向けて突設して形成した下縁部 43を有する偏平な容器 42と、蓋 3とからなり、蓋 3および容器 42の底面 1の少なくとも一方が透明な多孔板 2で形成されている：該容器 42の開口縁の周囲における平面伏枠体 41の上面に突条縁 44を形成し、さらに前記容器 42の周囲における平面伏枠体 41に、その上下両側面に通ずる連通孔 45を形成している- 前記容器 42の一端部に前方掛止片 46を形成し、対向する他端部に後方掛止片 47を形成し、これらに前記蓋 3を着脱自在に嵌合する。

前記定着支持剤 6は、黒皮部分を厚く剝ぃたこんにやく芋の荒粉を搗いて、それを風選して得られる精製マンナン 8.4 gを、ホルマリン現液 10 Om 1、第 1 リン酸ナトリゥム（NaH₂ PO. ■ H₂ O) 4.0 g、無水第 2リン酸ナトリウム（Na₂ HPO, ) 6.5g、蒸留水 90 Om 1からなる 10%中性緩衝ホルマリン 100 Om 1の溶媒に溶解して得られる。

このようにして得られる定着支持剤の成分のひとつである水溶性食物繊維は、元来その構造及び性状が通液性であり、多くの染色色素に染まらないので、生検標本を染色する際に生検試料との区別が明確になり、染色状態の生検標本の観察を妨げることがない =

定着支持剤の定着とは、蛋白質の凝固作用を利用して、生の組織を経時的に変質しないようにその状態を凝固固定し、生検試料の各成分の形態を生体にあつたときのそれに近い状態に保つことである。また、支持とは、生検試料が包埋カセット内で移動しないように、それらを包埋カセットの容器の底面上面に確実に接着してその位置を保つことである：第 1図に示す伏態の容器 4 2に蓋 3を嵌合させ、これを第 3図に示すようにカプセル 1 4とその蓋 1 5内に入れられている 5 0 %メタノールとホルマリンからなるゲル化剤 7に浸漬して、該定着支持剤 6をゲル化する。このようにして生検試料 5を前記包埋カセット 4の容器 4 2中に一体的に支持し、この状態で臨床室から病理検査室に郵送等で移動する

前述のグルコマンナンのゲル化剤 7としては、例えばアルコールホルマリン、アルコール、アセトン、ポリエチレングリコール、グリセリン等が用いられる病理検査室において、カプセル 1 4から、生検試料 5が固定されている包埋カセット 4を取り出して、第 4図に示す様にそこに予め用意されている処理容器 9内のアルコール等の高脱水処理剤 8 aに浸す：その後順次別の処理容器内の脱脂剤 8 b、透徹剤 8 cに順次浸して（図示していない）、脱水、脱脂、および透徹処理し、ゲル化した定着支持剤及び生検試料にパラフィンまたは樹脂等からなる包埋剤を浸透させる- その後処理容器 9内から包埋カセット 4を取り出し、さらにその包埋カセット 4の中から生検試料 5を第 5図に示すように定着支持剤 6中に埋設されているゲル状ブロック 3 6の状態で取り出して、第 6図に示すように、包埋皿 1 0 上に生検試料の検査面が下を向くように載置する：

更に第 6図に示すように、該ゲル状ブロック 3 6の上部に、生検試料を取り出して空になった容器 4 2をを、該ブロック 3 6と若干の間隙をおいて、その底面が該ブロック 3 6と対向するように配置する：そして、該容器 4 2の上方から熔融伏態のパラフィン 1 1を容器 4 2が埋まるまで注入し、これを冷却固化する：すなわち、固化したパラフィン 1 1の中に、定着支持剤に埋設された生検試料 5が包埋カセット 4の容器 4 2と共に包埋された状態となる

パラフィン 1 1は、多孔板 2の孔及び連通孔 4 5を通じて、ゲル状ブロック 3 6の周囲及び平板伏枠体 4 1の下面で閉じられた空間に流れ込み、この部分に充塡される：合成樹脂とパラフィンの性質上、両者は剝離し易いが、上記のようにすると、パラフィン 1 1が容器 4 2の多孔板の孔及び連通孔 4 5に入り込んだまま固化するので、容器 4 2を介してパラフィンが一体となり、両者は 96/ 0196

- 8 - 剝離しにくくなる。

平板状枠体 4 1の下面は包埋皿 1 0の内面に密着し、かつ平板状枠体 4 1の上面に突条縁 44が形成されているので、該平板状枠体 4 1の上面にパラフィンが流れ込むことを防止できる。従って、パラフィン 1 1は平板状枠体 4 1の上面や縁に付着することがなく、その後、ミクロトームの支持台 1 9に包埋ブロックを取り付ける際に、パラフィン 1 1が支持台に触れることがなく、取り付けの妨げにならない。

パラフィン 1 1が固化した後、包埋皿 1 0を取り除くと、第 7図に示すように、パラフィン 1 1の中に、生検試料 5と包埋カセット 4の容器 4 2を共に埋設した状態の包埋ブロック 1 8を得る：

その後、第 8図に示すように、該包埋ブロック 1 8を生検試料の薄切り面が上になるように支持台 1 9に設置して保持し、ミクロトームの刃 1 7を矢印 A 1 7方向に往復動して薄切りし、第 9図に示すような生検試料の薄切り切片 2 0を得る：

第 8図に示すように、合成樹脂製の包埋カセット 4の高さ hは、両側の支持台 1 9、 1 9で支持されている包埋ブロック 1 8を刃 1 7で薄切りする際、包埋ブロック 1 8が実用上変形しない程度の剛性を保てるような高さにする必要がある包埋カセット 4の肉厚 t。が例えば 1 . 5 mmの場合、その高さ hは、 5 mm以上にすることが必要である - また、この場合に、容器 4 2とパラフィン 1 1が剝離しないような強度を得るためには、容器 4 2の内側におけるパラフィン 1 1の厚さ t ,を、 3 . 5 mm 以上にすることが必要である：

さらに、上述のように包埋ブロック 1 8を刃 1 7で薄切りする際、各生検試料 5の中の特定の生検試料 5 aの所望の切断面 S₅を得たいときは、該刃 1 7 を矢印 A 1 7方向に対して若干傾斜 0して矢印 B 1 7方向に往復動しなければならない：このときは、刃 1 7が支持台 1 9の上面に近づき、場合によっては支持台 1 9によってその運動が妨げられる- 前記刃 1 7の往復運動の妨げにならないようにするためには、パラフィン 1 1の支持台 1 9の上面からの厚さを 6 mm以上にする必要がある。図示するように、包埋ブロック 18における平面状枠体 41と支持台 19の上面は同一高さとなるので、上記の理由により、平面状枠体より上部のパラフィン 11の厚さ t₂は 6mm以上にする必要がある。

包埋ブロック全体の厚さ tは、次のように求められる。

容器 42の周囲の枠体 41上におけるパラフィン 11の厚さ t₂から突出容器 42の高さ h,を除いたパラフィン 11の厚さを 1₃とすると、包埋ブロック全体の厚さ tは、包埋カセット 4の高さ hとパラフィン 11の厚さとの和、すなわち、

t = h + ΐ₃ すなわち t = h+ ( t₂ - h. ) · · · (1)

で示される：

(1) 式に、十分な強度をもった包埋ブロックを得るために必要な数値、例えば、 hを 5mm、 t₂を 6mm、 h,を 2.5mmとしてあてはめると、包埋ブロックの厚さ tは、 t = 5mm+ (6mm- 2.5mm) =8.5mm. となる。

これに対して、第 15図に示すように、上記と同様の条件で従来の包埋カセット 34を用いて包埋ブロック 38を形成した場合の包埋ブロックの厚さを求める。この包埋ブロック 38には、第 8図に示すように、その高さ h,に相当する部分が全くない。従って、 h,=0となるので、第 15図の包埋ブロック 38の厚さ tは、

t = 5 mm+ 6mm= 11 mm

となる。

従って、この例により、本発明の包埋ブロック 18の厚さ tを従来例のそれと比較すると、その差は、 11mm— 8.5mm=2.5mmとなる：すなわち、本発明の包埋ブロック 18の、その薄切り時に従来の包埋ブロックと同程度の強度を保つことができる厚さは、前記実施例によれば、従来の包埋ブロックに比べて 2.5 mm薄くすることができる：

このため、膨大な数（例えば万単位）の包埋ブロックを重ねて保管しておく際、その保管場所の容積を従来と比較して著しく減少させることができる-. なお第 1 3図の多孔板 3 2及び第 1 4図の蓋 3 3は夫々本発明の前記実施例の多孔板 2及び蓋 3に相当するものである。

この発明の実施例を添付図面の第 1図乃至 8及び第 1 0図で説明したが、この発明はその実施例のみに限定されるものでなく、本発明の要旨の範囲内においてその構成を部分的に変更したり付加して実施することが可能である：例えば、包埋カセット 4の容器 4 2の底面 1は、前記実施例のように透明な材料で形成する代わりに、第 1 1図に示すように、該底面 1の中央部に格子 2 2付の窓孔 2 1を形成し、その窓孔 2 1に透明な多孔材で形成した通液性のシ一卜伏薄片 3 1を嵌合しておくこともできる

この場合、通液性のシ一ト状薄片 3 1として通液性のクロスまたは和紙等 (図示していない）を用いることができる- なお、この第 1 1図及び後述の第 1 2図中、前述の実施例で用いた図面符号と同一の図面符号の部分は、その部分の名称及び機能についても同様である。この第 1 1図の実施例のように、窓孔 2 1に通液性のシート状薄片 3 1を嵌合する代りに、第 1 2図に示す如く窓孔 2 1に多孔皿 2 4を嵌合し、その周囲に張り出すように形成した鍔 2 3を該窓孔 2 1の周縁に掛け止めておくこともできる：

さらに、前記定着支持剤 6は前述の実施例のほかに、黒皮部分を厚く剝いたこんにゃく芋の荒粉を搗いて、それを風選して得られる精製マンナン 8 . 4 g をホルマリン原液 2 0 O m 1、生理食塩水 8 O O m lからなる 2 0 %ホルマリン生理食塩水 1 O O O m lの溶媒に溶解して得ることも可能である：

またさらに前記定着支持剤 6を得る際に用いる防腐剤は、前述の実施例のほかに、ホルムアルデヒド、パラホルムアルデヒド、グルタールアルデヒド、氷酢酸、チモール、クレオソート、クレゾ一ル等を用いることができる.

さらにまた、前述の実施例はゲル状プロックの包埋剤として熔融伏態のパラフィン 1 1を注入し、これを冷却固化して包埋する方法について述べている力、'、この包埋方法もこれだけに限定されるものでなく、次のような二つの実施例のようにすることができる。

その 1つの実施例は、パラプラスト · ピッコライト（paraplast-piccolyte) 二重包埋法と称するものであって、これはテルペン系 3—ピネンから合成された炭水化物樹脂で高い融点（摂氏 1 1 5度）をもつ白色物質のピッコライトを乳鉢で細かくし、それを摂氏 6 0度に熔かしたパラプラストに 1 0 %の割合で熔かし、これを冷却して固化した状態で保存し、これとは別に用意されたグルコマンナン（定着支持剤）に支持された生検試料を前述の如く脱水 ·パラフィン浸透後の最終包埋の段階で前記固化した状態の 1 0 %ピッコライト混合パラプラストを摂氏 6 0度以上に上げないように再度熔かした液に入れて包埋する: その他の実施例は、ヒストレジンプラス（ライカ社）包埋法と称するものであって、下記の①〜⑧の工程からなっている：

① 生検試料をゲル化したグルコマンナンで固定した後、脱水をアルコールかアセトンまたはグリコールメタクリレート（GMA) のいずれかで行なラ =

② ベーシックレジン（Basic Resin) ( HEMA ：ジヒドロキシェチルメタクリレート及び可塑剤としてのヒドロキシエーテル） 1 0 O m 1にァクチベータベンゾールぺロキシド（Activator benzoylperoxide) (反応開始剤：ペルォキシドルシドール C H 5 0 ) 0 . 6 gを混和させ摂氏 4度に冷却してヒストレジンプラス浸漬液を得る：

③ 摂氏 4度に冷却されたヒストレジンプラス浸漬液 Aの中に該定着支持剤で支持された生検試料を入れて浸漬する：

④ その後、ヒストレジンプラス浸漬液 A (摂氏 4度） 3 0 m lに硬化剤

(hardener) 1 m 1を摂氏 4度で混和してヒストレジンプラス包埋液 Bを得る：

⑤ 摂氏 4度にて浸漬後の該定着支持剤で支持されている生検試料をヒストレジンプラス包埋液 Bの中に入れて、摂氏 4度のまま 5分間攪拌する ⑥ 予め冷却しておいたヒストレジン包埋用モールドトレイの中に、摂氏 4 度のヒストレジンプラス包埋液 Bを流し込み、該定着支持剤で支持された試料をその中に入れて検査薄切面を下にして配置する：

⑦ そして素早く P Eフオイル（フィルム）を試料の入っている包埋樹脂の上に被せて完全に密封する。この際ヒストレジンプラスは酸素により重合が阻害され固化しない（重合固化の時間は摂氏 4度で 3時間以上）： ⑧ その後、ブロックホルダー（支持台）に、試料の包埋された重合固化した樹脂を支持固定する。

この発明は上述のとおりであり、以下のような効果を奏する。

第一に、包埋カセッ卜の中から生検試料を取り出して別の包埋皿の上に載せ換える際、ピンセッ卜で直接摘ままないで定着支持剤を介して摘むことができ、生検試料を傷めることがなく、その結果生検試料の検査に支障を来すおそれがない—

第二に、複数の生検試料を包埋カセットから包埋皿に載せ換える際、生検試料の配置を間違えたり、別の包埋カセットの生検試料と混同したりするおそれがないので、その後行われる生検試料の顕微鏡検査の結果に重大な影響を及ぼすことがない。

第三に、病理医が、包埋された生検試料の検査を要する箇所を適切に薄切りすることができ、適切に検査を行える：

第四に、包埋カセッ卜の蓋及び容器の底面の少なくとも一方が透明な多孔板で形成されているので、包埋カセッ卜の蓋を開けずに確認作業ができ、 ^容されている生検試料と、添付されている伝票に記載されている事項の同一性を確認する作業が容易となる。また、生検試料を誤って紛失するおそれがなくなる：第五に、該生検試料が包埋カセットの多孔板の孔から流出するおそれがない第六に、包埋ブロックの厚みを薄くすることができるので、包埋ブロックを多数個（例えば万単位）保管する際、その保管場所の容積を従来と比較して著しく減少させることができる。産業上の利用可能性以上のように、この発明は、生検試料を包埋カセット内に確実に ^容するのに適している。また、生検試料を紛失したり、傷めたり、他の生検試料と混同したりすることなく、一連の包埋作業を行うのに適している- 従って、病理医が生検試料を採取し、別の作業者がそれらを包埋し、また病理医が包埋された生検試料の検査を要する箇所を適切に薄切りして、適切に検査を行うために有用である。

また、一定の容積の場所に従来よりも多くの数の包埋カセットを保管することができるために、その管理者の経済的負担を軽減するのにも有用である

Claims

請求の範囲

1 . 蓋と容器の少なくとも一方を透明な多孔板で形成された偏平な包埋カセットに生検試料を収容し、その生検試料の周囲の空間にマンナンと防腐剤とからなる透明な定着支持剤を注入して、その中に生検試料を埋め込み、その状態の定着支持剤を該マンナンのゲル化剤からなる液中に浸潰してゲル化することを特徴とする生検試料の定着支持方法。

2 . 水に防腐剤を加えた溶媒でマンナンの精粉を溶解することを特徴とする生検試料の定着支持剤：

3 . 水に加える防腐剤がその中に少なくともホルムアルデヒドを含有していることを特徴とする請求の範囲第 2項記載の生検試料の定着支持剤：

4 . 蓋と容器とからなる包埋カセッ卜において、平面伏枠体の中央部を該平面状枠体の一側面に向けて突設して偏平な容器を形成し、少なくとも該蓋および容器の底面の一方を透明な多孔板で形成し、また同容器の開口部の周縁における該平面伏枠体の他側面に向けて突条縁を突設し、さらに前記容器の周囲における平面状枠体にその両側面に通ずる連通孔を形成することを特徴とする生検試料の包埋カセット：

5 . 透明な多孔板で形成されている容器の底面がその中央部に格子付き窓孔を形成され、その窓孔に通液性のシート状薄片を嵌合されていることを特徴とする請求の範囲第 4項記載の生検試料の包埋カセット。

6 . 偏平な容器の底面が、その中央部に形成された格子付の窓孔に透明な合成樹脂製の多孔シー卜で形成した通液性のシート状薄片を嵌合することによって形成されていることを特徴とする請求の範囲第 4項記載の生検試料の包埋カセッ卜。

7 . 偏平な容器の底面がその中央部に形成された格子付の窓孔に透明な織布で形成した通液性のシート状薄片を嵌合することによって形成されていることを特徴とする請求の範囲第 4項記載の生検試料の包埋カセット。

8 . 格子付の窓孔に嵌合される通液性の多孔シート状薄片が、周囲に鍔を張り出している多孔皿で形成されていることを特徴とする請求の範囲第 6項記載の生検試料の包埋カセット。