WO1998057628A1

WO1998057628A1 - Composition capable de supprimer le facteur de risque pendant l'exercice

Info

Publication number: WO1998057628A1
Application number: PCT/JP1998/002616
Authority: WO
Inventors: Shuji Nakajuma; Tetsuya Murakami; Yoichi Sekiguchi
Original assignee: Nippon Suisan Kaisha Ltd
Current assignee: Nissui Corp
Priority date: 1997-06-16
Filing date: 1998-06-15
Publication date: 1998-12-23
Anticipated expiration: 1999-12-16
Also published as: US6313167B1; EP1004303A4; TW501914B; EP1004303A1; EP1004303B1

Description

明細書運動時の危険因子除去能を有する組成物技術分野

本発明は、食品、予防および医療の分野に利用できる運動時危険因子除去能を有する組成物に関する。また、本発明は、スポーツ愛好家、スポ―ッをしたい人、持久力の向上を目指す人などの健常人のための運動能力を高める食品に関する。さらにまた、本発明は、有酸素能力を高め、長距離走の競技力向上の補助的な手段として有効である運動能力向上栄養食品に関する。背景技術

運動することによって体内の代謝が円^となり、成人病に対する危険因子が除かれるということから、運動の奨励が行われている。医学的にも心筋梗塞患者などのリハビリテーションとしての運動効果についてかなりの報告がみられる。しかし一方で、スポーツ時の穂々な疾病や合併症がスポーツ医学上問题となっており、その一つに「スポーツ性貧血」、

「突然死」がある。

スポーツ性貧血の原因は、運動時のタンパク代謝の高進や鉄の摂取の不足に起因する赤血球産生不足、運動時に産出される乳酸などの化学的物質による溶血、運動時の衝擊などの物理的作用による溶血などが考えられている。

また、突然死例では多くの場合慢性の基礎疾患が認められるが、しかし中には形態学的な基礎疾患が判然としないものもあり、確定診断に苦慮することも多い,，スポーツ中の急死例はいままで多くの報告があるが、競技種別ではランニング、ジヨギング、マラソンなど走る目的のものが圧倒的に多く、ついでバスケットポール、野球、水泳などに突然死するものが多くみられた。一般に突然死の場合には、潜在性の基礎的器質的疾患が認められる場合と基礎的器質的変化が軽度か、あるいは明らかな器質的変化が認められない場合があり、前者の場合には自覚症状があり医療を受けている人もあるので問題になることは少ない。しかし後者の場合には本人は自覚症状を欠き、健康診断を受けたとしても異常なしと判定され、その後にスポ―ッなどの行為が誘因となつて突然死するために社会的にも問題になることが極めて多く、若年者の原因不明の急性心不全（いわゆるポックリ病）は後者に属しており、しばしば過激な運動やしごきなどと関連して問題となることが多いのである。さてこの若年者の急性心不全の本態については未だ不明で諸説がある力、一般的には一見健康で体格にも壮健な若年男性（男性に圧倒的に多い）が急なうなり声などをあげて倒れ突然死する。そして、剖検上でも心臓の拡張を伴った軽度の心肥大、冠状動脈や大動脈などの血管系の菲薄狭小などの所見がみられるが動脈硬化はほとんどない。運動時や運動後に不整脈を惹起して突然死する可能性を +分に考慮する必要があると考える。

—方、 E P Aや D H Aの生理作用としては、血中の中性脂質、総コレステロールの減少、 H D L コレステロールの增加、血小板凝集能の低下、血液粘度の低下、赤血球変形能の増加などが知られている。現象的には、血液がサラサラして固まりにくくなるということである。また、 D H A については、脳の細胞膜組織の中に多量に存在することから、学習機能など神経組織に関係する機能に影響することが期待され盛んに研究が進められている。順天堂大の沢木らは、リレハンメル冬季ォリンピックで好成績をおさめたノルゥヱ一の選手が栄養補助食品として D H Aや E P Aを利用していることに注目し、陸上長距離選手を対象に D H A、 E P Aの摂取がトレーニング効果に及ぼす影響について研究した。その結果、彼らの競技成績に大きな差を認め、 D H A、 E P Aの摂取が毛細血管への酸素運搬能力の向上を引き起こすことを推察している。

今後、これら脂肪酸の運動機能に及ぼす影響に関する研究がますます活発化するものと思われるが、研究成果によって裏付けされた具体的な実用化技術の開発が待たれるところである。また、赤血球変形能の低下と赤血球膜硬化の関係は数種の疾患で報告されており、赤血球膜の流動性の増加は、赤血球の脆弱化の危険性が考えられ、それらの知見に基づく予防および医療の分野に利用できる運動時危険因子除去剤の開発が待たれるところである。発明の開示

本発明の目的は、スポーツ性貧血を防止する健康食品、運動時の突然死などの危険を予防する健康食品、予防医薬品の分野に利用できる運動時危険因子除去能を有する組成物を提供することにある。本発明の目的は、スポーツのプロ、スポーツ選手、スポーツ愛好家、スポーツをしたい人、持久力の向上を目指す人などの健常人のための 31動時危険因子除去能を有する組成物を、スポーツ用食品あるいは薬剤組成物として、提供することにある。また、本発明の目的は、スポーツ愛好家、スポーツをしたい人、持久力の向上を目指す人などの健常人のための運動能力を高める食品を提供することにある。また、本発明の目的は、有酸素能力を高め、長距離走の競技力向上の補助的な手段として有効である運動能力向上栄養食品を提供することにある。運動時の血液レオ口ジ一の変化が突然死の原因ではないかと考えられている。

本発明者らは、 "海産食糧は血液粘度を改善させるのではないか" との作業仮説を立て、魚肉摂取量の多い漁民と漁民に比べ比較的魚肉摂取量の少ない農民を対象とした疫学調査、魚油濃縮物、高度精製したエイコサペンタエン酸ェチルエステル（ E P A . E E ) 基礎、臨床実験を行い、魚油成分中に含まれる E P Aが血液粘度を改善させることをすでに見いだした。

その後、へ-て-レオ口ジ一の面から E P Aの作用機序を主として赤血球膜を対象に検討してきた。

そして、本発明者らは、 n — 3系高度不飽和脂肪酸が平常時の血液レォロジ一に作用するだけでなく、運動による血液レオロジ一の好ましくない変化を抑制することを初めて見いだし、運動時の突然死などの危険を予防する健康食品、予防医薬品を提供することを可能にした。本発明は、 n — 3系高度不飽和脂肪酸を有効成分として含有することを特徴とする運動時の危険因子除去能を有する組成物を要旨としている。上記の危険因子除去能がスポーツ性貧血防止能であり、したがって本発明は、 n — 3系高度不飽和脂肪酸を有効成分として含有することを特徴とするスポーツ性貧血防止能を有する組成物を要旨としている。上記の n 一 3系高度不飽和脂肪酸は、 n— 3高度不飽和脂肪酸または/およびその誘導体である。上記の n— 3高度不飽和脂肪酸は、エイコサペンタェン酸および /またはドコサへキサェン酸である。上記の n— 3系高度不飽和脂肪酸は、好ましくは魚油などの天然のトリグリセライドの形態である。本発明の運動時の危険因子除去能を有する組成物は、食品組成物、特にスポーツ用食品として適している。あるいは薬剤組成物として用いることができる。その場合、 n— 3系高度不飽和脂肪酸の誘導体は、薬剤として許容される塩、エステルまたはアミドである。また、本発明者らは、持久力向上のための補助的な手段としてこれまでにビタミン E、 Cゃスクアレン（ S q u a 1 e n e ：深海鮫の肝油主成分）などの服用を試みてきた。その効果について実験室内での運動能力テスト、及び生化学的な実験結果から、ビタミン £、 Cでは両者が相乗的に働くことで運動能力の向上に対する有効性を見いだし、またスクァレンも同様に鍛練された長距離選手の有酸素能力に有効であるという知見を得た。それらの成果を踏まえて、本発明は、最近、ミクロ循環での酸素供給を高め、有酸素運動能力を高める効果がある食品のひとつとされている η— 3高度不飽和脂肪酸に注目することとした。魚油に含まれている η— 3高度不飽和脂肪酸の有効性に関する科学的証明は少なく ' 競技力の高い長距離選手における事例的な研究もほとんどなされていない。最大酸素摂取量は、最大限の努力で! 分間程度続けられる運動をするときに、その人が体内に取り込むことのできる酸素量であり、高いほど良い。被験者以外の人間も含んだ 1 7人の最大酸素摂取量を測定した。結果を表 1に示した。最大酸素摂取量は平均すると 70 · 7 ± 4. 1 m l /k _g/分である。人類の限界が 8 3〜 8 5 m 1 /k g/分であると言われており、平地でのトレーニング、あるいは何らかの処置に対する応答については、数値的には通常人よりも高レベルな被験者においては、摂取により 3〜 5 %の変化があれば十分に意味のある改善であると考えられる。

氏名身長体重運動時間最大換気量最大酸素摂取量最高'し、拍数最高呼吸数呼吸の効率一回換気量呼吸交換比 cm kg 1Z分 1/分 ml /kg /分拍 /分 ml/1 ml/1 ml

Y. Y 168.0 56.8 18分 06秒 125.8 4.044 71.2 182 56.0 32.1 2248 1.16

τ. κ 184.0 67.8 17 14 159.3 4.503 66.4 180 64.0 28.3 2489 1.04

Τ. 0 165.0 47.3 16 52 lb.4 3.375 71.4 191 66.0 29.2 1750 1.08

Υ . Ν 176.0 60.1 17 42 124.7 3. G92 61.3 200 65.0 29.6 1890 1.09

Τ. Μ 177.0 57.7 18 08 157.3 4.275 74.1 205 68.0 27.2 2314 1.07

κ. κ 168.0 57.3 17 21 151.9 4.179 72.9 194 94.0 27.5 1617 1.07

―

S . 0 169.0 5 .4 17 46 147.8 4.183 75.5 198 96.0 28.3 1541 1.05

Μ. Κ 181.0 71.8 17 13 157.8 68.1 173 68.0 31.0 2322 1.03

I—¹

Ν. S 166.0 53.2 18 40 126.9 3.640 68.4 196 68.0 28.7 1867 1.08

Η. S 173.0 59.5 17 40 153.9 4.485 75.4 202 65.0 29.1 2332 1.03

S . Μ 166.5 51.9 18 16 120.9 3.648 70.3 196 90.0 30.2 1344 1.06

i

Κ.. 1 1 lb. U 00. L 18 19 4.508 72.1 UU D4. U άυ. b Udb 1. id

Τ. Η 173.0 65.2 18 21 159.5 4.736 72.6 191 73.0 29.7 2194 1.06

Μ. F 172.0 53.8 17 52 138.5 3.874 72.0 200 76.0 28.0 1823 1.09

Τ. S 167.0 53.4 18 23 162.3 4.051 75.9 209 98.0 25.0 1657 1.08

Μ. S 180.0 63.5 17 38 154.7 4.517 71.1 209 72.0 29.2 2149 1.13

Τ. Τ 179.0 59.9 IT 14 132.7 3.780 63.1 202 62.0 28.5 2141 1.15

上記の危険因子除去能が、最大酸素摂取量及び無気的閾値を少なくとも 3 %向上する機能であり、したがって本発明は、 n— 3系高度不飽和脂肪酸を有効成分として含有することを特徴とする最大酸素摂取量及び無気的閾値を少なくとも 3 %向上する機能を有する組成物を要旨としている。

健常人が運動能力を高める食品であり、したがって本発明は、 n— 3 系高度不飽和脂肪酸を含有し、最大酸素摂取量及び無気的閾値を少なくとも 3 %向上する機能を有することを特徴とする健常人が運動能力を高める食品を要旨としている。

より具体的には本発明は、エイコサペンタエン酸および/またはドコサへキサェン酸を含有し、最大酸素摂取量及び無気的閾値を少なくとも 3 %向上する機能を有することを特徴とする健常人が運動能力を高める食品を要旨としている。

上記の食品は、液状または固形である。また、上記の食品は、カプセルに入っている態様を包含している。本発明において、 n — 3系高度不飽和脂肪酸は、 n - 3高度不飽和脂肪酸または/およびその誘導体を使用する。食品用組成物の場合は遊離脂肪酸およびまたはグリセリドエステルを、薬剤用組成物の場合は遊離脂肪酸、それの薬剤として許容される塩、エステルまたはアミドを使用する。

より具体的に例示すれば、精製魚油、エイコサペンタエン酸および/ またはドコサへキサェン酸の濃度を高めた精製魚油、構成脂肪酸のうち n - 3系高度不飽和脂肪酸が 6 0 %以上残りは中鎖脂肪酸であるような吸収性を高めた油脂組成物などの n - 3系高度不飽和脂肪酸を主成分とする油脂組成物、あるいはエイコサペンタヱン酸またはそのグリセリド等の誘導体を多く含有する天然油脂から得られる任意の脂肪酸またはそのエステルの混合物を用いることができ、たとえば、イワシ、サバ、二シン、サンマ等の魚、ナンキヨクオキアミ、ッノナシォキアミ、コぺポ —ダ等の動物性海洋ブランクトン等の適宜なものから得られる脂肪酸またはエステルの混合物を使用することができる。上記精製魚油は、イワシ油、マグロ油、サンマ油、二シン油、サバ油、タラ肝油、イカ油、メンヘーデン油などを脱酸、脱色、脱臭、脱ガム、脱ロウなどの精製方法で処理したものである。 E P A、 D H Aの合計含量が 2 0重量％以上の精製魚油、コレステロール 0 . 1 %以下、 E P A , D H A高含有量の無味無臭の魚油が例示される。魚油の精製は、原料から採取した遊離脂肪酸、臭気成分、着色成分などが含まれている粗原油からこれらを除去するために行う力、精製法としてはアルカリ精製法、蒸気吹込法、吸着法などがあり、任意に組み合わせて行われる。アルカリ精製法は脱酸法ともいい、粗製油に水酸化ナトリウムを加えて魚油中の遊離脂肪酸をフーッ（石鹼、 f 0 0 t S ) にすると共に、フーッに不純物を吸着または溶解させ、これを除去して粗製油を精製する方法である。蒸気吹込法は、精製油を減圧下で 1 5 0 °C 前後に加熱し、これに水蒸気を吹き込んで臭気成分を除去する方法である。また吸着法は、活性炭、酸性白土などの吸着剤を用いて粗製油中の着色成分や臭気成分を吸着 · 除去する方法である。これらの公知精製方法を駆使することにより魚油を無味無臭まで精製し、さらに魚油からコレステロールを実質的に除去する。本発明の実施例においては魚油をコレステロール 0 . 1 %以下、 E P A , D H A高含 1 0 有量の無味無臭の魚油に調製して使用する。本発明の実施例において使用する無味無臭の魚油に含まれる E P A， D HA等の脂肪酸は卜リグリセリドの形態で存在している。 E P A, D H Aの含有量は、例えば、 E P A 1 8 %、 D HA 8〜 1 2 %のもの、 E P A 2 8 %、 D HA 1 2 %のもの、 E P A 5〜 8 %、 D HA 2 2 %のもののように、使用用途等によつて任意に変化させることができる。いずれのものもコレステロールの含有量は 0. 1 %以下である。上記高純度 E P A、そのエステルは、エイコサペンタエン酸及び/またはその誘導体を含む天然油脂から得られる脂肪酸またはそのエステルの混合物を高真空下で複数の蒸留塔によって精密蒸留して炭素数 2 0の脂肪酸またはそのエステルを主成分とする留分を取得し、次いでこの留分を逆相分配系のカラムクロマトグラフィーによつて分画精製して製造する。上記高純度 D HA、そのエステルについてもほぼ同様の操作により得られる。本発明の運動時の危険因子除去能を有する組成物は、運動時の突然死などの危険を予防する健康食品、予防医薬品の分野の利用に適しているスポーツのプロ、スポーツ選手、スポーツ愛好家、スポーツをしたい人、持久力の向上を目指す人などの健常人のための運動時危険因子除去能を有する組成物を、スポーツ用食品として使用することができる。また薬剤組成物として使用することもできる。本発明を運動時の突然死などの危険を予防する健康食品として用いる場合、必須成分である 3系高度不飽和脂肪酸の他に、任意的成分として、通常食品に添加されるビタミン類、炭水化物、色素、香料など適宜配合することができる。また、必要に応じて乳化剤を添加することもできる。乳化剤としてはグリセリン脂肪酸エステル、しょ糖脂肪酸ェステル、ソルビタン脂肪酸エステル、大豆リン脂質、プロピレングリコール脂肪酸エステルが用いられ、これらは単独又は組合せて用いられる。食品は液状または固形の任意の形態で食することができる。ゼラチンなどで外包してカプセル化した軟カプセル剤として食することができる。カプセルは、例えば、原料ゼラチンに水を加えて溶解し、これに可塑剤

(グリセリン、 D —ソルビ卜ールなどを加えることにより調製したゼラチン皮膜でつくられる。上記組成物は、 n _ 3系高度不飽和脂肪酸またはそれの薬剤として許容される塩、エステルまたはアミドを有効成分とする運動時の危険因子除去薬剤として利用可能であり、その場合、上記 n — 3系高度不飽和脂肪酸は、エイコサペンタエン酸およびまたはドコサへキサェン酸であり、酸自体のみならずそれの薬剤として許容される塩、エステルまたはアミドとして使用される。該薬剤は、 n — 3系高度不飽和脂肪酸を単独で製剤として用いることができるほか、製薬上使用できる担体もしくは希釈剤を加えた製剤組成物に加工したものを用いることもできる。このような製剤または薬剤組成物は、経口または非経口の経路で投与することができる。例えば、経口投与用の固体または流体（ゲルおよび液体）の製剤または薬剤組成物は、タブレツト、カプセル、錠剤、丸剤、粉末、顆粒もしくはゲル調製品の形態をとる。製剤または薬剤組成物の正確な投与量は、その目的とする使用形態および処置時間により変化するため、担当の医師または獣医が適当であると考える量になる。 n — 3系高度不飽和脂肪酸を有効成分とする運動時の危険因子除去薬剤たる製剤または薬剤組成物は、他の薬理学上活性のある物質による投与と組み合わせて 1 もよいことは明らかである。本発明の健常人が運動能力を高める食品は、スポーツ愛好家、スポーッをしたい人、持久力の向上を目指す人などの健常人が運動能力を高める食品として毎日の栄養補給として食する。毎日栄養補給を続けると健常人は有酸素能力が高まり運動能力が高まる。

本発明を健常人が運動能力を高める食品として用いる場合も、上記の運動時の突然死などの危険を予防する健康食品として用いる場合と同様に、任意的成分を適宜配合することができる。血液粘度に影響を及ぼす因子として、赤血球変形能、へマ卜クリット値、血漿粘度等多岐にわたり、これらの因子は相互に影響しあって粘性を変化させているものと思われる。 E P Aの場合は、これらのうち、赤血球の変形能を改善させることによると考えられる。赤血球変形能は、血球の表面積/体積比、赤血球内部粘度、膜の粘弾性等によって決定される。

健常人に精製魚油を 1 0週間投与したところ、魚油摂取群、非摂取群共にへマ卜卜クリッ卜値には変化が認められなかったが、魚油摂取群で赤血球変形能の有意な上昇が認められ、魚油非摂取群に認められた降伏値の上昇は魚油摂取群では認められなかつた。図面の簡単な説明

第 1図は、チーム全体の 2年間の n — 3脂肪酸の服用前後（ 1 9 9 4 年は 1 9 9 5年と同時期）の 1 0 , 0 0 0 mの記録の変化を示した図面である。

第 2図は、同一グループの 2年間の n— 3脂肪酸の服用前後（ 1 9 9 4年は 1 9 9 5年と同時期）の 1 0， 0 0 0 mの平均記録の変化を示した図面である。

第 3図は、健常人における E P A含有精製魚油 1 0週間投与の赤血球変形能の変化を示した図面である。

第 4図は、健常人における E P A含有精製魚汕 1 0週間投与の降伏値

〔（回転高） shear rate 375sec- ¹〕の変化を示した図面である。

第 5図は、健常人における E P A含有精製魚油 1 0週間投与の降伏値

〔（回転低） shear rate 37· 5se ¹〕の変化を示した図面である。

第 6図は、健常人における E P A含有精製魚油 1 0週間投与のへマロクリット値の変化を示した図面である。

第 7図は、魚油摂取群の赤血球脂肪酸組成の変化を示した図面である。第 8図は、対照群の赤血球脂肪酸組成の変化を示した図面である。第 9図は、健常人における E P A— E E 4週間投与の赤血球浸透圧 (溶血開始時）への影響を示した図面である。なお、グラフの縦軸は赤血球の浸透圧。

第 1 0図は、健常人における E P A — E E 4週間投与の赤血球膜浸透圧（最大溶血時）への影響を示した図面である。

第 1 1図は、健常人における E P A - E E 4週問投与の赤血球浸透圧 (溶血終了時）への影響を示した図面である。

発明を実施するための最良の形態

以下に本発明について具体的な実施例をもって説明するが、本発明はこれらの実施例によつて何ら制限を受けるものではない。実施例 1

本実施例は、 n— 3脂肪酸を被験者に実験的に一定期間服用させ、実際の競技パフォーマンス（ 1 0， 0 0 0 m) に与える影響を順天堂大学体力測定研究室の協力を得ながら検討を行った。実験の方法として順天堂大学陸上競技部の選手の 2年間の 1 0, 00 0 mの記録を基に比較検討を行った。初年度と次年度の両年に実施したトレーニングは年間卜レーニング計画の中で、量、質ともに同等の内容のもので、ほぼ同様の環境下で行われた。検討された 1 0， 000 mの記録は両年ともにほぼ同時期に計測されたものを資料とした。初年度の 1 9 94年には n— 3脂肪酸は服用せず、次年度の 1 9 9 5年は 4力月間（ 7月〜 1 0月末）に渡り、毎日、 n— 3脂肪酸のカプセル 6錠を被験者に朝 3錠、夕 3錠規則正しく服用させ服用前後の記録に与える n— 3脂肪酸の影響を考察した。

2年間の順天堂大学陸上競技部の選手の 1 0 , 0 00 mの記録の変化を表 2、表 3に示した。 n— 3脂肪酸を服用した 1 9 9 5年の 1 0， 0 00 mの記録の変化において、チーム全体では服用後の方が平均で一 5 1. 0秒の短縮であった（表 2，第 1図）。

また、 2年間の平均記録の変化を比較すると、 1 9 94年の一 5. 4 秒（ + 0. 3 %) の短縮に比べて 1 9 9 5年ではさらに 4 5. 6秒短縮し— 5 1. 0秒（+ 2. 8 %) という有意な変化結果を示した（表 4) 。同一グループの 2年間の服用前後（ 1 9 94年は 1 9 9 5年と同時期）の 1 0, 0 00 mの記録の変化においても、 n— 3脂肪酸を服用した 1 9 9 5年の方が 1 9 94年よりも平均で— 1 4秒の短縮を示した（表 5，第 2図）。

このような 1 0, 000 mの記録の短縮の背景を考察する上で、 2年間にほぼ同様のトレーニングを実施したことを前提とすると、被験者の持久力能力に対して卜レーニング効果に加えて補助的に摂取した n— 3 脂肪酸の有効性が示唆された。

n一 3脂肪酸の有効性として、これまでに筋肉内毛細血管の血流量の増加や、線維素溶解能と赤血球変形能が高まることによる末梢の酸素供給などが報告されている。これらはいずれも有酸素運動能力に関連する諸機能の向上が期待される影響を考えられ、本実施例の被験者にも同様の影響が現れていることが推察される。その結果、 n— 3脂肪酸を服用した年としなかった年の 1 0， 0 0 0 mの記録の短縮に著しい差が現れたものと思われた。

一般的にトレーニングの効果は専門的なトレーニングを開始後、初期ほど顕著に現れ、年月を経るほど効果が低下すると言われている。また、競技レベル（記録）の低い時期ほど記録の向上率も高いことも同様である。この点からもハイレベルの現役ァスリ一卜を対象とした本実験で見られた記録の向上は特異な変化と考えられる。以上のことから n— 3脂肪酸を一定期間服用することが、有酸素能力を高め、長距離走の競技力向上の補助的な手段として有効であることが示唆された。

1 6

表 2

く 0. 01 有意差有り

* ρ<0. 05 意¾：¾り

(差の項目の一（マ付ス）は記録の向上を、 + (プラス）は低下を示す）表 3

有意差なし表 4

*Ρく 0. 05 1 8

表 5

(注. 1994年の前後は 1995年の n— 3服用の前後の時期と同じ）参考例 1

《平常時の血液レオロジ—に対する作用》

エイコサペンタエン酸 [ Eicosapentaenoic acid ( E P A u ο： s, n - 3 ) 〕の赤血球 Fragility (変形能）におよぼす影響

《要旨》

E P A . E E 3. 6 gZ d a yを 4週間投与することにより、赤血球溶血開始値、最大溶血値、溶血終了値とも投与前に比べ低浸透圧側に有意に移行しており赤血球膜強化が示唆された。本実験のように赤血球変形能の増加と膜の強化が同時に測定されたのは意義深く、投与の安全性のみならず、血管壁や体細胞が柔軟で安全性に富んだ細胞になることが考えられた。

《目的》

血液粘度に影響を及ぼす因子として、赤血球変形能、へマトクリツ卜値、血漿粘度等多岐にわたり、これらの因子は相互に影響しあって粘性を変化させているものと思われる。 E P Aの場合は、これらのうち、赤血球の変形能を改善させることによると考えられる。赤血球変形能は、血球の表面積/体積比、赤血球内部粘度、膜の粘弾性等によって決定される。 E P Aの場合は、膜の流動性によるものと考えられる。血液、特に赤血球の大きさを毛細血管内をスムーズに通過できる形に変形できるように、赤血球に柔軟性を付与することができる。

一方、赤血球変形能の低下と赤血球膜硬化の関係は数種の疾患で報告されており、赤血球膜の流動性の増加は、赤血球の脆弱化の危険性が考えられる。

そこで本実験では、健常人に E P A · E Eを 4週間投与し、 E P Aの赤血球 F r a g i 1 i t yに及ぼす影響について、 C o i l

P l a n e t C e n t r i f u g e法で検討した。この方法は、木村らによって開発された赤血球膜浸透圧抵抗を測定する方法である。

《方法》

いわし可食部から精製した E Ρ Α · Ε Εを 1 日 3. 6 g . 健常人 1 0 人（平均年齢 3 6才）に 4週間投与した。

採血は、 R e i d' s らの方法を準用して行った。すなわち血液 0. 5 m 1が水柱 3 0 c mのフ k圧下で、 5 ^の11 11 じ 1 e o p o r e m e m b r a n e f i l t e rを通過する時間を測定し、へマ卜クリッ卜値から 3 0秒間に通過した血球量（V_RBCml/ 3 Osec) に変算し、赤血球変形能の指標とした。

統計処理は、 s t u d e n t t — t e s t ( p a i r e d ) を用い、有意水準は、両側危険率 5 %とした。

《結果》

E P A · E Eを健常人 1 0人に 1 日 3. 6 g、 4週間投与することにより、赤血球膜中 E P A含量は、 2. 0 1 ± 0. 3 5 m o i %から 4. 00 ± 0. 34 m o 1 %に増加した。血液レオ口ジー的因子の測定結果を表 6に示した。

血液粘度の降伏値（shear rate) (回転低） = 3 7. 5 s e c ¹は有意（Pく 0. 0 1 ) に低下し、降伏値（shear rate) (回転高） = 3 7 20

5 s e c ¹も有意（ Pく 0. 00 1 ) に低下を示した。赤血球変形能は有意（Pく 0. 05 ) な上昇が認められ、血漿粘度は有意（ Pく 0. 0

5 ) な低下が認められた。

赤血球膜浸透圧抵抗の測定結果（A) (B ) (C ) を第 9〜 1 1図に示した。

( A) 溶血開始時の赤血球の浸透圧、投与前（ 1 0 0. 7 ± 3. 1 3 mOsm) から投与後（ 9 6. 5 ± 2. 42m0sm) 、（B) 最大溶血時の赤血球の浸透圧は、投与前（ 8 6. 1 ± 2. 1 8m0sm) から投与後（ 82.

6 ± 2. 3 2 mOsm) 、（C) 溶血終了時の赤血球の浸透圧は、投与前 ( 6 9. 4 ± 2. 76 mOsm) から投与後（ 6 9. 4 ± 2. 7 6 mOsm) , にそれぞれ有意（Pく 0. 01 ) に低下した。表 6

《考察》

本実験では、赤血球膜中 E P A含量は、 2. 0 1 ± 0. 3 5 m o l % 2 1 から 4. 0 0 ± 0. 3 4 m o 1 %と約 2倍に增加し、また、血液粘度の有意な低下と赤血球変形能の有意な増加が認められた。

赤血球膜中の月旨質は、 free cholesterol ( F C ) , phosphatidyl ethanol amine (P E) ， phospharidyl serine ( P S ) , phosphataidy 1 choline ( P C ) および sphingmye 1 in ( SM) があり、 P Eと P Sは脂質の二重層の内層に多く、 P Cと S Mは主として外層に分布し、 F Cは内外層にわたって均一に存在する。これらのうち P Cは膜に流動性を与え、 F Cと S Mは粘性を高めて膜をこわばらせる。膜を固くする点では、 S Mは F Cより強力だといわれる。 E P A · E E 3 · 6 / d a y投与した田村らの報告では、血小板各リン脂質分画中のァラキドン酸 (A A) 及び E P A含量の測定で、 P C、 P E中の A A含量は有意に低下し、 E P Aは、 P C、 P E、 P I及び P S中で増加していたと報告しており、赤血球においても同様に考えられる。特に、膜の流動性を増加させる P C中で A Aの低下と E P Aの増加は興味深し、。脂肪酸中で最も粘性の低い E P Aが膜中の P C中で特に增加していることは、 E P A含量と膜の流動性の関係が示唆されるが、膜の脆弱化の危険性が考えられる。本実験の Ε Ρ Α · Ε Ε 3. 6 g d a yを 4週間投与することにより、赤血球の溶血開始値、最大溶血値、溶血終了値とも投与前に比べ浸透圧側に有意に移行しており、赤血球膜強化が示唆された。

本実験で赤血球変形能の増加と膜の強化が同時に測定されたのは意義深く、投与の安全性のみならず、血管壁や体細胞が柔軟性で安全性に富んだ細胞になることが考えられた。実施例 2

《運動時の血液レオ口ジ一の変化に対する作用》

1. 服用量 ·使用製剤 2 2

1 ) E P Aとして 1. 6 gZ日を目途に摂取する。

2 ) E P A 2 8 , D H A 1 2 %含有精製魚油カプセル 3 0 0 m _g 1 8粒/日を朝晚食直後 9粒ずつ服用する。

2. 被験者数

1 ) 1群 6名 X 2群！: E P A投与群（Fish)、E P A非投与群（non - fish))

3. 試験方法

1 ) 表 7に示すスケジュールで高地卜レーニングに入る 1 0週間前より高地卜レーニング終了時まで E P A投与群は精製魚油力プセルを 1 8粒/日摂取する。

2 ) 各群とも、投与開始時、高地卜レーニング開始時、高地卜レ— 二ング終了時に次項に述べる項目につき測定する。表 7

開始月高地トレ-ニング開始 2ヶ月高地トレ-ニング終了 4ヶ月半投与開始投与終了

初回 2回目 3回目採血採血採血運動能力測定運動能力測定運動能力測定

4. 測定項.目

1 ) 生化学的項目

測定項目 ( a ) 脂肪酸組成（血漿、赤血球膜リン脂質）

( b ) 赤血球変形能

( c ) 降伏値

( d ) ァミノ酸組成

2 ) 生理学的項目（運動能力）

( 1 ) 測定項目

( a ) 最大酸素摂取量

(b ) MS S (Ma x i m a l S t e a d y S t a t e ) 測定： E P A投与 ·非投与群における持久性の変化及び改善を検討。

各トレーニングの前後に安静時の血液を採取し、上述した項目について分析を行う。各トレーニングの前後に 2種類のスピ— ドでの走行後、血中乳酸濃度を測定し、 4 m m o 1 Z 1 に相当する走行スピードを求める（MS S) 。この M S Sを指標に持久性の改善を検討する。

《結果》

第 3〜 8図および表 8〜表 9に示すように、魚油摂取群、非摂取群共にへマトクリツト値には変化が認められなかったが、魚油摂取群で赤血球変形能の有意な上昇が認められ、魚油非摂取群に認められた全血粘度の上昇は魚油摂取群では認められなかつた。

V OA/ s一 s一

Group A»^;5 AW50 Ht し 3 S St n

Start Group A (EPA administration) 5. 67±0. 530 3. 80+0. 309 46. 6+2. 30 0. 162+0. 052

Group B(Control ) 5. 73±0. 245 3. 84+0. 194 47. 1+1. 08 0. 156+0. 0366

Before tra ining Group A (EPA administration) 6. 08+0. 32 Γ- 3. 82+0. 172 47. 5+1. 23 r*0. 238+0. 0545 -

Group B(Control ) 5. 87+0. 540 3. 90+0. 226 47. 7+1. 17 - 0. 181+0. 0512

After training Group A (EPA administration) r*5. 63+0. 478 - 3. 79+0. 250* 47. 0+1. 27*， 0. 162±0. 0637

Group B(ControI ) - 6. 15+0. 484 4. 05+0. 191 - 49. 2+2. 32 - 0. 230Ϊ0. 1464

： pく 0. 1 pく 0. 05

9 産業上の利用可能性

運動時の突然死などの危険を予防する健康食品、予防医薬品の分野に利用できる運動時危険因子除去能を有する組成物を提供することができる。スポーツのプロ、スポーツ選手、スポーツ愛好家、スポーツをしたい人、持久力の向上を目指す人などの健常人のための運動時危険因子除去能を有する組成物を、特にスポーツ用食品として提供することができる。

健常人（スポーツ愛好家、スポーツをしたい人、持久力の向上を目指す人など）のための運動能力を高める食品を提供することができる。スポ一ッ選手のための有酸素能力を高め、長距離走の競技力向上の補助的な手段として有効である運動能力向上栄養食品を提供することができる。

Claims

請求の範囲

1 . n - 3系高度不飽和脂肪酸を有効成分として含有することを特徴とする運動時の危険因子除去能を有する組成物。

2 . 上記の危険因子除去能がスポ―ッ性貧血防止能である請求項 1の運動時の危険因子除去能を有する組成物。

3 . 上記の n - 3系高度不飽和脂肪酸が、 n - 3高度不飽和脂肪酸または Zおよびその誘導体である請求項 1または 2の運動時の危険因子除去能を有する組成物。

4 . 上記の n— 3高度不飽和脂肪酸が、エイコサペンタエン酸および /またはドコサへキサェン酸である請求項 3の運動時の危険因子除去能を有する組成物。 '

5 . 上記の n— 3系高度不飽和脂肪酸が、天然の卜リグリセライドの形態である請求項 1ないし 4のいずれかの運動時の危険因子除去能を有する組成物。

6 . 上記の n - 3系高度不飽和脂肪酸が、魚油である請求項 5の運動時の危険因子除去能を有する組成物。

7 . 食品組成物である請求項 1ないし 6のいずれかの運動時の危険因子除去能を有する組成物。

8 . スポーツ用食品である請求項 7の運動時の危険因子除去能を有する組成物。

9 . 薬剤組成物である請求項 1ないし 6のいずれかの運動時の危険因子除去能を有する組成物。

1 0 . n — 3系高度不飽和脂肪酸の誘導体が、薬剤として許容される塩、エステルまたはアミドである請求項 9の運動時の危険因子除去能を有する組成物。

11. 上記の危険因子除去能が、最大酸素摂取量及び無気的闆値を少なくとも 3 %向上する機能である請求項 1の運動時の危険因子除去能を有する組成物。

12. 健常人が運動能力を高める食品である請求項 11の運動時の危険因子除去能を有する組成物。

13. 上記の n - 3系高度不飽和脂肪酸が、エイコサペンタエン酸および /またはドコサへキサェン酸である請求項 11または 12の運動時の危険因子除去能を有する組成物。

14. 液状または固形である請求項 12または 13の運動時の危険因子除去能を有する組成物。

15. カプセルに入っている請求項 14の運動時の危険因子除去能を有する組成物。