WO2006088394A2 - Method for producing means protecting an organism against ionising radiation - Google Patents

Method for producing means protecting an organism against ionising radiation Download PDF

Info

Publication number
WO2006088394A2
WO2006088394A2 PCT/RU2006/000078 RU2006000078W WO2006088394A2 WO 2006088394 A2 WO2006088394 A2 WO 2006088394A2 RU 2006000078 W RU2006000078 W RU 2006000078W WO 2006088394 A2 WO2006088394 A2 WO 2006088394A2
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
radiation
humic substances
power
humic
substances
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Ceased
Application number
PCT/RU2006/000078
Other languages
English (en)
French (fr)
Other versions
WO2006088394A3 (en
Inventor
Valery Pavlovich Shipov
Evgeny Sergeevich Pigarev
Elena Ivanovna Fedoros
Nadezhda Petrovna Trofimova
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
RDINNOVATION APS
Original Assignee
RDINNOVATION APS
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by RDINNOVATION APS filed Critical RDINNOVATION APS
Priority to DK06733214.8T priority Critical patent/DK1864674T3/da
Priority to ES06733214T priority patent/ES2434036T3/es
Priority to SI200631685T priority patent/SI1864674T1/sl
Priority to PL06733214T priority patent/PL1864674T3/pl
Priority to EP06733214.8A priority patent/EP1864674B1/en
Publication of WO2006088394A2 publication Critical patent/WO2006088394A2/ru
Publication of WO2006088394A3 publication Critical patent/WO2006088394A3/ru
Anticipated expiration legal-status Critical
Ceased legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/02—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution from inanimate materials
    • A61K35/10—Peat; Amber; Turf; Humus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/16—Emollients or protectives, e.g. against radiation
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P39/00—General protective or antinoxious agents

Definitions

  • the invention relates to methods for producing means of protecting the body from ionizing radiation based on natural substances, and more specifically, to methods for producing such substances based on humic compounds and can be used in the development of pharmaceuticals to reduce the harmful effects of external radiation damage to living creatures and accelerate the elimination of compounds heavy metals, including radioactive, from the body.
  • Radioprotectors Substances that have the ability to protect a living organism from the external effects of ionizing radiation are usually called radioprotectors.
  • the action of the radioprotector appears, as a rule, in the case when they are introduced into the body shortly (usually 10-30 minutes) before exposure to radiation.
  • these drugs like many other radioprotectors, are characterized by a low efficiency of the drug after irradiation (as a therapeutic or therapeutic agent).
  • Special methods of protection against radiation damage include measures to accelerate the elimination of radionuclides from the body that enter it and are located in organs and tissues.
  • the radionuclides incorporated into the body lead to the so-called internal exposure, which has some features compared to external exposure, in which the radiation source acts on the body while in the external environment.
  • the danger is not only easily penetrating gamma radiation (as in the case of external exposure), but also beta and especially alpha radiation, less penetrating the body when external exposure.
  • radiation damage also depends on the half-life of the radionuclide, its tissue distribution and the rate of excretion from the body.
  • drugs are also used, often sorbents (and complexing agents) that bind radionuclides to structures that are quickly excreted from the body.
  • humic substances for the decontamination of soil contaminated with radionuclides is known, for example, the method described in (A, RF, N ° 208898).
  • the method includes treating objects with water containing humic acids (humic substances), followed by removal from solutions of radionuclide contaminants, the treatment is carried out with natural waters of humid climatic zones containing fulvic acids of at least 60 mg / l with a pH of 3.5-6.5.
  • humic substances for removing radionuclides from the body have been found by the authors.
  • a known method of obtaining a means of protecting the body from ionizing radiation namely, a substance having the property of a radioprotector (US Pat. RF Xs 2183124), from natural raw materials, in accordance with which humic substances and water are obtained from natural raw materials a solution of humic substances is treated with ammonium molybdate.
  • the specified treatment with ammonium molybdate is carried out at a temperature of 40 ⁇ 5 0 C under the influence of wave radiation, namely ultrasound, with a radiation power of 40 W / cm 2 , with a frequency of 22 kHz for 4-8 minutes.
  • the method uses humic substances derived from oxidized wood lignin.
  • the resulting substance was tested for radioprotective efficacy.
  • the results of studies showed that the obtained substance has radioprotective efficacy in conditions of general relatively uniform radiation of mice in the bone marrow and intestinal dose ranges.
  • the basis of the present invention is the task to create such a method of obtaining a means of protecting the body from ionizing radiation, which would provide a more uniform and more stable during storage of the product while maintaining its radioprotective activity by reducing the content of high molecular weight fraction.
  • the problem is solved in that in the method of obtaining a means of protecting the body from ionizing radiation based on humic substances, in accordance with which the aqueous solution is processed, containing humic substances, and ammonium molybdate by wave radiation, in accordance with the invention, the content of ammonium molybdate is up to 0.4 parts by weight for 1 hour humic substances, the specified processing is carried out to a content of high molecular weight fraction of humic substances of not more than 5%.
  • the most effective processing is carried out at a radiation power of 5 W / cm 3 with a frequency of 22 kHz for 5-20 minutes.
  • radiation can be selected in the microwave frequency range from 30 to 0.3 GHz, with a power of 0.5 to 50 kW, most effectively with a microwave irradiation power of 5 W / cm 3 and a frequency of 2.45 GHz, while maintaining the temperature of the processed product in the range of 60-70 0 C for 30-90 minutes
  • humic substances obtained from oxidized wood lignin which allows for increased repeatability of the results.
  • Fig. L depicts the dependence of the change in the copper content in the blood of mice when using preparations obtained in a known manner and in accordance with the invention
  • Figure 2 depicts the dependence of the copper content in the urine of mice using drugs obtained in a known manner and in accordance with the invention
  • Fig. 3 depicts the dependence of the properties of humic substances on the processing time for the selected processing mode
  • Figure 4 depicts the dependence of the properties of humic substances from the processing time for another selected processing mode
  • Preparation 1 in the process of wave treatment in accordance with the prototype method, ammonium molybdate in powder form was introduced into an aqueous solution of humic substances in an amount of 0.4 g per 1 g of humic substances.
  • Preparation 2 (indicated in tables as “Pp.2”) was obtained in the same way, but with a ratio of ammonium molybdate to humic substances of 0.2: 1.
  • the preparation 3 (indicated in the tables as “Pr.Z”) was distinguished by the fact that it did not contain ammonium molybdenum acid.
  • the radioprotective effectiveness of the substances obtained by the proposed method was tested on outbred male mice weighing 18-20 g.
  • Irradiation was carried out on an X-ray machine under the following conditions: voltage 180 kV, current 15 mA, filter 0.5 mm Cu + 1.0 mm Al, focal length 70 cm, dose rate 0.355 Gy / min, irradiation direction: back-chest. Absorbed doses for animals of various groups were 2,4,6,8,10, 15 and 20 Gy
  • mice To irradiate mice, 10 animals were placed in plastic cases. False-irradiated animals were used to control the effectiveness of radiation exposure, which were placed in canisters under an X-ray machine with the anode tube turned off at the same time as the irradiated ones.
  • the animals of the experimental and control groups were irradiated simultaneously, after which they were kept under standard conditions. Dosimetric control was carried out using an individual dosimeter.
  • the resulting substances (Preparations 1, 2, and 3) in the form of a 1% solution in physiological saline in a volume of 0.2 ml were administered to experimental animals intramuscularly at a dose of 100 mg / kg (2 mg per individual).
  • the drugs were administered 1 time per day for 5, 4, 3 and 2 days before radiation exposure.
  • the total dose of drugs for 4 days was 400 mg / kg (8 mg per individual).
  • mice were used, which, according to the same schemes as in
  • the animals of the experimental and control groups were monitored for a month before irradiation and 30 days after radiation exposure. 0
  • the results of the study showed that the obtained substance has radioprotective efficacy under conditions of general relatively uniform irradiation of mice in the bone marrow and intestinal dose ranges.
  • Table 1 presents data on the dynamics of the death of mice after 5 irradiation with different doses.
  • Table 2 presents the indicators of the death and survival of mice after irradiation with different doses to the indicators of the radioprotective efficacy of the preparations.
  • the percentage of death of animals was calculated by dividing the absolute number of dead animals by their total number in the study group, followed by multiplication by 100.
  • the average life expectancy (LIF) of dead animals was calculated by adding the number of days lived by each dead animal after irradiation, and then dividing this indicator by the number of dead animals in the study group.
  • the index of life expectancy was expressed in days.
  • the percent protection of the drug was calculated as the difference between the percent survival of animals from the experimental and control groups.
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) The survival index (And survival) was calculated as the ratio of the percentage of survival of mice in the experimental group to the same indicator in the control group.
  • K protection The protection coefficient (K protection) was calculated as the ratio of the difference between the percentage of death of mice in the control (% death of control) and experimental (% death of experience) groups to the percentage of death in control (% death of control):
  • the average life expectancy of dead animals after irradiation in the bone marrow dose range ranged from 16 (4 Gy) to 9 days (8 Gy). After irradiation in the intestinal dose range (10 Gy), 100% mortality was observed, and the animals lived on average 3.22 days.
  • the FID of the proposed drugs when irradiating mice with a minimally lethal dose was 1.28, with a semi-lethal dose of 1.26, with minimal absolutely lethal doses of 1.27 for Preparation 1; 1.25 for Preparation 2 and 1.24 for Preparation 3, i.e. when mice were irradiated in the medullary dose range (from 4 to 8 Gy), the PID did not change with an increase in the absorbed dose. 78
  • the properties of the obtained substances as complexones for protection against damage by heavy (including radioactive) metals were tested on outbred male mice weighing 18-20 g. Copper in the composition of copper sulfate was chosen as a heavy metal, which was administered to the animals once orally at a dose of 500 mg / kg (or about 10 mg per animal), which is equivalent to 200 mg / kg (or 4 mg per animal) of atomic copper. For administration, the calculated amount of copper sulfate was dissolved in 0.5 ml of physiological saline.
  • the control group received only copper sulfate.
  • the experimental groups additionally received the substances obtained according to Example 1 (Preparation 1, Preparation 2 and Preparation 3). These substances in the form of a 1% solution in physiological saline in a volume of 0.2 ml were administered intraperitoneally to experimental animals at a dose of 100 mg / kg (2 mg per individual). Intraperitoneal administration to rodents is an intravenous analogue. The drugs were administered 1 time per day on -1, 0, 1 and 2 day of the experiment. The total dose of drugs for 4 days was 400 mg / kg (8 mg per individual).
  • Trilon B sodium salt of ethylenediaminetetraacetic acid - EDTA.
  • Compound preparation was administered in the same mode as Preparations 1-3 - 0.2 ml of a 0.5% solution intraperitoneally per
  • Fig.l The dynamics of changes in the copper content in the blood of the studied animals is shown in Fig.l.
  • the abscissa axis indicates the time of sampling, along the ordinate axis the copper content in the blood of mice, ⁇ g / g.
  • Curves 1, 2, and 3 show the time dependence of the copper content of mice in the blood, with the introduction of the drug 1, 2, and 3, respectively
  • curve 4 shows the time dependence of the copper content of mice in the blood with the introduction of Trilon B
  • curve 5 shows the same for control group. It is shown that in the first 12-24 hours of the study, the concentration of copper in the blood increases, after which it decreases. It was found that in the experimental groups the copper content in the blood drops much faster than in the control group. Drugs 1 and 2 (with ammonium molybdenum acid) were slightly less effective than Drug 3 (not containing ammonium molybdenum acid).
  • Fig. 2 The dynamics of the excretion of copper with urine is shown in Fig. 2., where the absorption axis shows the time of sampling, the ordinate axis shows the copper content in the urine of mice, ⁇ g / g.
  • Curves 6, 7 and 8 show the dependence when using Preparations 1, 2 and 3, respectively, curve 9 - when using Trilon B, and curve 10 - the same for the control group.
  • the curves illustrate faster and more complete removal of heavy metal in the experimental versions than in the control.
  • Drugs 1 and 2 (with ammonium molybdenum acid) were slightly less effective than Drug 3 (not containing ammonium molybdenum acid).
  • the amount of high molecular weight fraction (X,%) was evaluated by comparing the color intensity of the starting spot and the residual spot after elution.
  • the dependence of the properties of humic substances of the preparations on the time of ultrasonic treatment at a power of 0.5 W / cm 3 and a frequency of 22 kHz is shown in Fig.Z.
  • Curve 11 shows the change in the amount of high molecular weight fraction of humic substances
  • curve 12 shows the change in color coefficient depending on the processing time. It can be seen from FIG.
  • the amount of the high molecular weight fraction of humic substances naturally decreases (from 18 to 1.5 percent), while the color coefficient first decreases (from 0.7 to 0, 35 on the site from 1 to 30 minutes), and then rises again (to 0, 69) i.e. the greatest dispersion effect under these frequency and power modes is achieved in the processing interval from 10 to 30 minutes.
  • the preparations were obtained analogously to examples 1 or 2, with the exception of the modes of ultrasonic treatment. Processing was carried out with a power of 5 W / cm 3 at a radiation frequency of 66 kHz. Processing time ranged from 2 to 30 seconds. In the obtained substance, the molecular weight and color coefficient were evaluated, as described in Example 3.
  • the dependence of the properties of the humic substances of the preparations on the time of ultrasonic treatment is shown in FIG. 4.
  • Curve 13 illustrates the dependence of the amount of high molecular weight fraction of humic substances
  • curve 14 - the color coefficient of the solution from the processing time for the specified parameters of wave radiation.
  • the preparations were obtained in the same way as described in examples 1 or 2, with the exception of the wave processing mode.
  • a microwave treatment with a power of 0.5 kW and a frequency of 2.45 GHz was used for dispersion, while maintaining the temperature within 40-50 0 C.
  • microwave treatment of the drug for 60 to 120 minutes provides the best product characteristics in terms of color coefficient and the amount of high molecular weight fraction of humic substances and can be used along with ultrasonic treatment.
  • Example 6
  • the claimed preparation was also active as a radioprotector, i.e. showed effectiveness when administered before irradiation, and as a therapeutic agent to accelerate the elimination of radionuclides from an organism already affected by radiation, moreover, its activity changes in one direction or another depending on the amount of ammonium molybdate in its composition.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Physical Or Chemical Processes And Apparatus (AREA)
  • Fodder In General (AREA)
  • Physical Water Treatments (AREA)
  • Radiation-Therapy Devices (AREA)

Description

Способ получения средства защиты организма от ионизирующего излучения
Область применения
Изобретение относится к способам получения средств защиты организма от ионизирующего излучения на основе природных веществ, а более точно, к способам получения таких веществ на основе гуминовых соединений и может быть использовано при разработке фармацевтических препаратов для снижения вредных последствий внешнего радиационного поражения живых существ и ускорения выведения соединений тяжелых металлов, в том числе радиоактивных, из организма.
Уровень техники
Вещества, обладающие свойствами защищать живой организм от внешнего воздействия ионизирующего излучения, обычно называют радиопротекторами. Действие радиопротектора проявляется, как правило, в том случае, когда они вводятся в организм незадолго (обычно за 10-30 мин) до воздействия излучения.
В настоящее время считается, что наиболее эффективными радиопротекторами являются представители двух классов соединений: меркаптоалкиламинов и индолилалкиламинов [1]. (1. Гончаренко E.H., Кудряшов Ю.Б. Химическая защита от лучевого поражения. M.: Изд-во МГУ,
1985. 147 с.)
Несмотря на доказанную эффективность этих препаратов, их использование ограничено вследствие высокой токсичности. Кроме того, для этих препаратов, как и для многих других радиопротекторов, характерна невысокая эффективность применения препарата после облучения (в качестве лечебного или терапевтического средства). К особым способам защиты от лучевого поражения относят мероприятия- по ускорению выведения из организма радионуклидов, поступивших в него и находящихся в органах и тканях. Инкорпорированные в организм радионуклиды приводят к так называемому внутреннему облучению, имеющему некоторые особенности по сравнению с внешним облучением, при котором источник излучения действует на организм, находясь во внешней среде. В частности, при внутреннем облучении опасность представляет не только легко проникающая гамма-радиация (как и в случае внешнего воздействия), но и бета- и особенно альфа-излучения, менее проникающие в организм при внешнем облучении. При внутреннем облучении лучевые повреждения зависят также от периода полураспада радионуклида, его тканевого распределения и скорости выведения из организма.
Помимо механических способов (частые бани, усиливающие потоотделение, промывание желудка, кишечника и пр.) применяются и препараты, часто сорбенты, (и комплексообразователи), связывающие радионуклиды в структуры, быстро выводящиеся из организма.
Известно применение гуминовых веществ для дезактивации зараженной радионуклидами почвы, например, способ, описанный в (А, РФ, N° 208898). Способ включает обработку объектов водой, содержащей кислоты гумусового типа (гуминовые вещества), с последующим удалением из растворов радионуклидных загрязнителей обработку ведут природными водами гумидных климатических поясов, содержащими фульвокислоты не менее 60 мг/л с рН 3,5-6,5.
Указаний на применение гуминовых веществ для выведения радионуклидов из организма авторами не обнаружено. Известен способ получения средства защиты организма от ионизирующего излучения, а именно вещества, обладающего свойством радиопротектора (пат. РФ Xs 2183124), из природного сырья, в соответствии с которым из природного сырья получают гуминовые вещества и водный раствор гуминовых веществ обрабатывают молибдатом аммония. Указанную обработку молибдатом аммония проводят при температуре 40 ± 50C под воздействием волнового излучения, а именно ультразвука, с мощностью излучения 40 Вт/см2, с частотой 22 кГц в течение 4-8 минут. В способе используют гуминовые вещества, полученные из окисленного древесного лигнина.
Полученное вещество испытывали на радиозащитную эффективность. Результаты исследований показали, что полученное вещество обладает радиозащитной эффективностью в условиях общего относительно равномерно- го облучения мышей в костномозговом и кишечном диапазоне доз.
Экспериментально показано, что среди гуминовых веществ наиболее активными являются водорастворимые вещества с молекулярными массами 500-10000 DA. Более тяжелые компоненты менее активны, так как имеют низкую растворимость и практически не усваиваются организмом. В концентрированных растворах гуминовых веществ (более 0,5-1%) достаточно часты межмолекулярные взаимодействия указанных соединений, а именно, реакции конденсации и полимеризации, что приводит к увеличению средней молекулярной массы.
В результате происходит нарушение однородности получаемого продукта, выпадение осадка, изменение физико-химических свойств и нестабильности препаратов при хранении. Так, при хранении в условиях искусственного старения в препарате, полученном известным способом, уже через 10-20 суток были выявлены инородные включения (высокомолекулярные соединения) и измененеия цветности, свидетельствующие об ухудшении физико-химических свойств препарата.
В основу настоящего изобретения поставлена задача создать такой способ получения средства защиты организма от ионизирующего излучения, который бы обеспечивал получение более однородного и более стабильного при хранении продукта при сохранении его радиозащитной активности путем снижения содержания высокомолекулярной фракции.
Поставленная задача решается тем, что в способе получения средства защиты организма от ионизирующего излучения на основе гуминовых веществ, в соответствии с которым проводят обработку водного раствора, содержащего гуминовые вещества, и молибдат аммония волновым излучением, в соответствии с изобретением содержание молибдата аммония составляет до 0,4 в.ч. на 1 в.ч. гуминовых веществ, указанную обработку осуществляют до величины содержания высокомолекулярной фракции гуминовых веществ не более 5%.
Экспериментально было установлено, что при снижении величины содержания высокомолекулярной фракции ниже указанного значения существенно повышается однородность и стабильность препарата при храиениj.. Целесообразно в качестве волнового излучения выбирать излучение в ультразвуковом диапазоне частот от 18 кГц до 66 кГц, при мощности излучения от 0,5 до 5 Вт/см3
Наиболее эффективно обработку проводить при мощности излучения 5 Вт/см3 с частотой 22 кГц в течение 5-20 мин. В качестве волнового излучения может быть выбрано излучение в микроволновом диапазоне частот от 30 до 0,3 ГГц, при мощности от 0,5 до 50 кВт, наиболее эффективно при мощности микроволнового облучения 5 Вт/см3 и частоте 2,45 ГГц, при поддержании температуру обрабатываемого продукта в пределах 60-70 0C в течение 30-90 мин. Целесообразно использовать гуминовые вещества, полученные из окисленного древесного лигнина, что позволяет обеспечить повышенную повторяемость результатов.
Изобретение иллюстрируется чертежами, на которых Фиг.l изображает зависимость изменение содержания меди в крови мышей при использовании препаратов, полученных известным способом и способом в соответствии с изобретением;
Фиг.2 изображает зависимость содержания меди в моче мышей при использовании препаратов, полученных известным способом и в соответствии с изобретением; Фиг.З изображает зависимость свойств гуминовых веществ от времени обработки при выбранном режиме обработки;
Фиг.4 изображает зависимость свойств гуминовых веществ от времени обработки при другом выбранном режиме обработки; Ниже описываются примеры реализации способа в соответствии с изобретением.
Пример 1
Для сравнения свойств препаратов, полученных известным и заявляемым способами, было изготовлено несколько препаратов.
Все препараты изготавливались путем волновой обработки водного раствора гуминовых веществ.
В Препарат 1 (в таблицах обозначен как «Пp.l») в процессе волновой обработки в соответствии со способом-прототипом в водный раствор гуминовых веществ ввели молибдат аммония в порошкообразном виде в количестве 0,4 г на 1 г гуминовых веществ.
Препарат 2 (в таблицах обозначен как «Пp.2») был получен таким же способом, но при соотношении молибдата аммония к гуминовым веществам 0,2:1. Препарат 3 (в таблицах обозначен как «Пp.З») отличался тем, что не содержал молибденовокислого аммония. Радиопротекторная эффективность полученных предлагаемым способом веществ проверялась на беспородных мышах-самцах массой 18-20 г.
Облучение осуществляли на рентгеновской установке при следующих условиях: напряжение 180 кВ, сила тока 15 мА, фильтр 0,5 мм Cu+ 1,0 мм Al, фокусное расстояние 70 см, мощность дозы 0,355 Гр/мин, направление облучения: спина-грудь. Поглощённые дозы для животных различных групп составляли 2,4,6,8,10, 15 и 20 Гр
Для облучения мышей помещали по 10 особей в пластиковые пеналы. В качестве контроля эффективности радиационного воздействия использовали ложнооблучённых животных, которых помещали в пеналах под рентгеновский аппарат с выключенной анодной трубкой на то же время, что и облучённых.
Животных опытных и контрольных групп облучали одновременно, после чего содержали в стандартных условиях. Дозиметрический контроль осуществляли с помощью индивидуального дозиметра.
Полученные вещества (Препараты 1, 2 и 3) в виде 1%-нoгo раствора в физиологическом растворе в объёме 0,2 мл вводили экспериментальным животным внутримышечно в дозе 100 мг/кг (2 мг на особь). Препараты вводили 1 раз в сутки за 5, 4, 3 и 2 дня до радиационного воздействия. Суммарная доза препаратов за 4 суток составила 400 мг/кг (8 мг на особь).
Для выявления радиомодифицирующей эффективности изучаемых препаратов использовали группы мышей, которым по тем же схемам, что и у
S животных опытных групп вводился физиологический раствор, после чего мышей подвергали радиационным воздействиям как описано выше
(контрольные группы).
Наблюдение за животными опытных и контрольных групп проводили в течение месяца до облучения и 30 суток после радиационного воздействия.0 Результаты исследований показали, что полученное вещество обладает радиозащитной эффективностью в условиях общего относительно равномерного облучения мышей в костномозговом и кишечном диапазоне доз.
Полученные результаты представлены в таблицах 1-4.
В таблице 1 представлены данные по динамике гибели мышей после 5 облучения различными дозами. В таблице 2 представлены показатели гибели и выживаемости мышей после облучения различными дозами к показатели р эаsдиозащитной эффективности препаратов.
0 с Таблица 1
Figure imgf000009_0001
Таблица 2
Показатели гибели и вьокиваемости мышей после облучения
Figure imgf000010_0001
В качестве критериев оценки радиомодифицирующей эффективности препаратов использовали следующие показатели:
Процент гибели животных (% гибели) рассчитывался путём деления абсолютного числа погибших животных на их общее количество в исследуемой группе с последующим перемножением на 100.
Процент выживаемости животных (% выживаемости) - оставшаяся доля от процента гибели
Средняя продолжительность жизни (СПЖ) погибших животных рассчитывалась путём сложения числа суток, прожитых каждым погибшим животным после облучения, и последующего деления этого показателя на число погибших животных в исследуемой группе. Показатель СПЖ выражали в сутках.
Процент защиты препарата (% защиты) рассчитывался как разница между процентами выживаемости животных опытной и контрольной группы.
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) Индекс выживаемости (И выживаемости) рассчитывался в виде соотношения процента выживаемости мышей в опытной группе к аналогичному показателю контрольной группы.
Коэффициент защиты (К зашиты) рассчитывался как отношение разницы между процентом гибели мышей в контрольной (% гибели контроля) и опытной (% гибели опыта) группах к проценту гибели в контроле (% гибели контроля):
К защиты = (% гибели контроля - % гибели опыта) / % гибели контроля Фактор изменения дозы (ФИД) рассчитывался как отношение доз облучения, вызывающих одинаковый биологический эффект (в частности CД50/30или CД50/5) при применении предложенных средств и без них:
ФИД = СД 50/30 с препаратом / СД 50/30 без препарата Из данных таблицы 1 видно, что гибель животных, не подвергшихся фармацевтической защите, определялась, начиная с дозы 4 Гр, а при дозах 8 Гр выживших после облучения животных не было. При определении показателей смертельных доз выявлено, что СД 16/30 составила 3,50 Гр, СД 50/30 - 5,33 Гр, СД 84/30- 7,15 Гр.
Средняя продолжительность жизни погибших животных после облучения в костно-мозговом диапазоне доз находилась в пределах от 16 (4 Гр) до 9 суток (8 Гр). После облучения в кишечном диапазоне доз (10 Гр) наблюдалась 100 % смертность, а животные жили в среднем 3,22 суток.
Как свидетельствуют данные таблицы 2, профилактическое применение предлагаемых средств сопровождалось снижением показателей гибели животных. При их профилактическом применении СД ιвт составила 4,71 Гр,
СД 5o/зo - 6,56 Гр, СД 84/зo - 8,75 Гр для Препарата 1; 8,41 Гр для Препарата 2 и
8, 26 Гр для Препарата 3.
ФИД предлагаемых средств при облучении мышей в минимально смертельной дозе составило 1,28, при полулетальной дозе - 1,26, при минимальных абсолютно смертельных дозах - 1,27 для Препарата 1; 1,25 для Препарата 2 и 1,24 для Препарата 3, т.е. при облучении мышей в костномозговом диапазоне доз (от 4 до 8 Гр) ФИД при увеличении поглощённой дозы практически не менялся. 78
10
Профилактическое применение полученных препаратов показало, что Препарат 1 (содержащий молибденовокислый аммоний в соотношении к гуминовым веществам 0,4:1) обладает наибольшим радиопротекторным эффектом, так как максимально (в 2 раза) увеличивает продолжительность жизни погибших животных при дозе 10 Гр, в то время как Препарат 2 (полученный по Прототипу, с сооотношением молибдат аммония: гуминовые вещества 0,2:1) увеличивает продолжительность жизни в 1,6 раз, а препарат без модибденовокислого аммония - в 1,5 раза.
Пример 2.
Свойства полученных веществ как комплексонов для защиты от поражения тяжелыми (в том числе радиоактивными) металлами проверялась на беспородных мышах-самцах массой 18-20 г. В качестве тяжелого металла была выбрана медь в составе сульфата меди, который вводился животным однократно перорально в дозе 500 мг/кг (или около 10 мг на животное), что эквивалентно 200 мг/кг (или 4 мг на животное) атомарной меди. Для введения расчетное количество сульфата меди растворялось в 0,5 мл физиологического раствора.
Контрольная группа получала только сульфат меди. Опытные группы дополнительно получали вещества, полученные по Примеру 1 (Препарат 1, Препарат 2 и Препарат 3). Эти вещества в виде 1%-нoгo раствора в физиологическом растворе в объёме 0,2 мл вводили экспериментальным животным внутрибрюшинно в дозе 100 мг/кг (2 мг на особь). Внтрутрибрюшинное введение дл грызунов является аналогом внутривенного. Препараты вводили 1 раз в сутки на -1, 0, 1 и 2 день эксперимента. Суммарная доза препаратов за 4 суток составила 400 мг/кг (8 мг на особь).
В качестве препарата сравнения использовали Трилон Б (Динатриевую соль этилендиаминтетрауксусной кислоты - ЭДТА). Препарат сранения вводили в том же режиме, что и Препараты 1-3 - по 0,2 мл 0,5% раствора внутрибрюшинно на
- 1,0, 1 и 2 дни эксперимента.
Исследовалось содержание меди в крови и моче животных. Схема отбора образцов представлена в таблице 3. Таблица 3.
Схема экспе имента
Figure imgf000013_0001
Динамика изменения содержания меди в крови исследованных животных приведена на фиг.l. На оси абсцисс указано время отбора образцов, по оси ординат содержание меди в крови мышей, мкг/г. Кривые 1, 2 и 3 показывают зависимость содержания меди в крови мышей от времени, при введениия Препарата 1, 2 ,и 3 соответственно, кривая 4 показывает зависимость содержания меди в крови мышей от времени при введении трилона Б, а кривая 5 - то же для контрольной группы. Показано, что в первые 12-24 часов исследования концентрация меди в крови нарастает, после чего происходит ее снижение. Обнаружено, что в опытных группах содержание меди в крови падает значительно быстрее, чем в контрольной группе. Препараты 1 и 2 (с молибденовокислым аммонием) были несколько менее эффективны, чем Препарат 3 (не содержащий молибденовокислого аммония).
Динамика выведения меди с мочой показана на фиг.2., где по оси абсции показано время отбора образцов, по оси ординат - содержание меди в моче мышей, мкг/г. Кривые 6, 7 и 8 показывают зависимость при использовании Препаратов 1, 2 и 3 соответственно, кривая 9 - при использовании трилона Б, а кривая 10 - то же для контрольной группы. Кривые иллюстрируют более быстрое и полное выведение тяжелого металла в опытных вариантах, чем в контрольном. Препараты 1 и 2 (с молибденовокислым аммонием) были несколько менее эффективны, чем Препарат 3 (не содержащий молибденовокислого аммония). Пример 3
Препараты для исследовавши получали как в Примере 1 или 2, за исключением времени обработки ультразвуком. Время обработки колебалось от 1 минуты до 180 минут. Для препаратов оценивалась цветность растворов (D445 / D665), изменение которой косвенно свидетельствует о развитии процессов конденсации и полимеризации молекул, и молекулярная масса. Цветность оценивалась для растворов выравненной концентрации 0,001% на спектрофотометре с использованием кюветы 10 мм. Молекулярная масса оценивалась методом тонкослойной хроматографии на пластинке «cилyфoл» («Silufol», производитель фирма «Chemapol», Чехия), с использованием обычного элюента в соотношении 1:4. Количество высокомолекулярной фракции (X, %) оценивали сравнением интенсивности окраски стартового пятна и остаточного пятна после элюирования. Зависимость свойств гуминовых веществ препаратов от времени ультразвуковой обработки при мощности 0,5Bт/cм3 и частоте 22 кГц приведена на фиг.З. Кривая 11 показьюает изменение количества высокомолекулярной фракции гуминовых веществ, а кривая 12 - изменение коэффициента цветности в зависимости от времени обработки. Из фиг.З видно, что при увеличении времени обработки ультразвуком при указанных параметрах волнового излучения количество высокомолекулярной фракции гуминовых веществ закономерно снижается (от 18 до 1,5 процентов), в то время как коэффициент цветности сначала снижается (от 0,7 до 0,35 на участке от 1 до 30 минут), а затем снова повышается (до 0, 69) Т.е. наибольший эффект диспергирования при этих режимах частоты и мощности достигается в интервале обработки от 10 до 30 минут.
Пример 4
Препараты получали аналогично примерам 1 или 2, за исключением режимов ультразвуковой обработки. Обработка производилась с мощностью 5 Вт/см3 при частоте излучения 66 кГц. Время обработки колебалось от 2 до 30 секунд. В полученной субстанции оценивали молекулярную массу и коэффициент цветности, как описано в примере 3. Зависимость свойств гуминовых веществ препаратов от времени ультразвуковой обработки (при мощности 5 Вт/см3 и частоте 66 кГц) показана на фиг.4. Кривая 13 иллюстрирует зависимость количества высокомолекулярной фракции гуминовых веществ, а кривая 14 - коэффициента цветности раствора от времени обработки при указанных параметрах волнового излучения.
При увеличении времени обработки ультразвуком с частотой 66 кГц при мощности 5 Вт/см3 количество высокомолекулярной фракции гуминовых веществ также закономерно снижается, а оптимальные значения коэффициента цветности регистрируются при режимах обработки от 5 до 20 секунд.
Результаты проведенных экспериментов показывают, что сходный результат достигается при различных режимах ультразвуковой обработки, причем время обработки находится в обратной зависимости от мощности и частоты ультразвука.
Пример 5
Препараты получали аналогично тому, как это описано в примерах 1 или 2, за исключением режима волновой обработки. В этом случае для диспергирования использовали микроволновую обработку мощностью 0.5 кВт и частотой 2.45 ГГц, при поддержании температуры в пределах 40-500C.
Данные о влиянии времени микроволновой обработки (при мощности 0.5 Вт и частоте 2.45 ГГц) на свойства препарата приведены в таблице 4.
Таблица 4.
Figure imgf000015_0001
Как следует из таблицы, микроволновая обработка препарата в течение 60- 120 минут обеспечивает наилучшие характеристика продукта по коэффициенту цветности и количеству высокомолекулярной фракции гуминовых веществ и может применяться наряду с ультразвуковой обработкой. Пример 6
Стабильность препаратов, полученных так, как это было описано в примерах 3-4 и имеющих оптимальные показатели молекулярной массы и цветности, была изучена в экспериментах по «ycкopeннoмy cтapeнию», которые заключались в хранении препаратов при температуре 600C в течение 45 суток. Контролем стабильности служили показатели рН, количество молекулярных агрегатов (проявляющих себя как инородные включения при флюориметрическом анализе) и изменение показателя цветности. Основные результаты представлены ниже.
Изменение рН растворов при хранении в условиях «ycкopeннoгo cтapeния» образцов препарата, изготовленных в соответствии с различными вариантами заявляемого способа, приведено в таблице 5.
Для обозначения режимов обработки в таблицах использованы сокращенные обозначения: УЗ - ультразвуковая обработка, MB - микроволновая обработка.
Таблица 5.
Figure imgf000016_0001
Хранение в условиях «ycкopeннoгo старения* образцов препарата, приготовленных в соответствии с различными вариантами заявляемого способа, и число образцов, показавших наличие инородных включений (по данным флюориметрического анализа серии из 100 образцов), приведено в таблице 6.
Таблица 6
Figure imgf000017_0001
Изменение коэффициентов цветности образцов препарата различных вариантов приготовления в условиях ускоренного cтapeния» приведено в таблице 7.
Таблица 7.
Figure imgf000017_0002
T/RU2006/000078
16
Тест на «ycкopeннoe cтapeниe» показал, что препараты, полученные в соответствии с изобретением, обладают более высокими характеристиками стабильности, а именно коэффициентом цветности и наличию инородных включений, по сравнению с прототипом, по истечении установленного срока ускоренного старения. При этом показатели кислотности оказались примерно одинаковыми для образцов, полученных в соответствии с заявляемым способом и способом-прототипом.
Заявленный препарат проявил активность и как радиопротектор, т.е. показал эффективность при его введении до облучения, и как терапевтические средство для ускорения выведения радионуклидов из уже пораженного излучением организма, причем его активность изменяется в ту или иную сторону в зависимости от количества молибдата аммония в его составе.

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. Способ получения средства защиты организма от ионизирующего излучения на основе гуминовых веществ, в соответствии с которым проводят обработку водного раствора, содержащего гуминовые вещества и молибдат аммония, волновым излучением, отличающийся тем, что количество молибдата аммония составляет до 0,4 в.ч. на 1 в.ч. гуминовых веществ, а указанную обработку волновым излучением осуществляют до величины содержания высокомолекулярной фракции гуминовых веществ не более 5%.
2. Способ получения радиопротектора по п.1 , отличающийся тем, что в качестве волнового излучения выбирают излучение в ультразвуковом диапазоне частот от 18 кГц до 66 кГц, а мощность излучения при этом составляет от 0,5 до 5 Вт/см3.
3. Способ получения радиопротектора по п.1, отличающийся тем , что обработку проводят при мощности излучения 5 Вт/см с частотой 22 кГц в течение 5-20 мин.
4. Способ получения по п.1, отличающийся тем, что в качестве волнового излучения выбирают излучение в микроволновом диапазоне частот от 30 до 0,3 ГTц,a мощность излучения при этом составляет от 0,5 до 50 кВт, U2006/000078
18
5. Способ получения по п.4., отличающийся тем, что что при мощности микроволнового облучения 5 Вт/см3 и частоте 2,45 ГГц, поддерживают температуру обрабатываемого продукта в пределах 60-700C в течение 30-90 мин.
6. Способ по любому из п.п.1-5, отличающийся тем, что гуминовые вещества получают окислением древесного лигнина.
PCT/RU2006/000078 2005-02-17 2006-02-17 Method for producing means protecting an organism against ionising radiation Ceased WO2006088394A2 (en)

Priority Applications (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DK06733214.8T DK1864674T3 (da) 2005-02-17 2006-02-17 Fremgangsmåde til fremstilling af et middel til beskyttelse af en organisme mod ioniserende bestråling
ES06733214T ES2434036T3 (es) 2005-02-17 2006-02-17 Procedimiento para producir medios de protección de un organismo contra la radiación ionizante
SI200631685T SI1864674T1 (sl) 2005-02-17 2006-02-17 Postopek za izdelavo sredstva za zaščito organizma pred ionizirajočimi sevanji
PL06733214T PL1864674T3 (pl) 2005-02-17 2006-02-17 Sposób wytwarzania środków chroniących organizm przed promieniowaniem jonizującym
EP06733214.8A EP1864674B1 (en) 2005-02-17 2006-02-17 Method for producing means protecting an organism against ionising radiation

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2005104289/15A RU2350353C2 (ru) 2005-02-17 2005-02-17 Способ получения средства защиты организма от ионизирующего излучения
RU2005104289 2005-02-17

Publications (2)

Publication Number Publication Date
WO2006088394A2 true WO2006088394A2 (en) 2006-08-24
WO2006088394A3 WO2006088394A3 (en) 2007-01-11

Family

ID=36916863

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/RU2006/000078 Ceased WO2006088394A2 (en) 2005-02-17 2006-02-17 Method for producing means protecting an organism against ionising radiation

Country Status (9)

Country Link
EP (1) EP1864674B1 (ru)
CY (1) CY1114569T1 (ru)
DK (1) DK1864674T3 (ru)
ES (1) ES2434036T3 (ru)
PL (1) PL1864674T3 (ru)
PT (1) PT1864674E (ru)
RU (1) RU2350353C2 (ru)
SI (1) SI1864674T1 (ru)
WO (1) WO2006088394A2 (ru)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
UA116535C2 (uk) 2012-03-30 2018-04-10 Рдінновейшн Апс Сполуки бензолполікарбонових кислот та їх застосування як лікарських засобів

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2022968C1 (ru) * 1992-05-12 1994-11-15 Ефименко Инэсса Александровна Соединения на основе палладия и производных ароматических аминов и способ их получения
RU2034558C1 (ru) * 1993-07-01 1995-05-10 Дамбинова Светлана Александровна Вещество, обладающее радиозащитной активностью, и способ его получения
RU2164411C1 (ru) * 2000-06-21 2001-03-27 Орлов Юрий Александрович Биоактивный экстракт на основе мумиесодержащего сырья и способ его получения
RU2183124C1 (ru) * 2000-09-19 2002-06-10 РДИнновейшн Апс Способ получения радиопротектора

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
See references of EP1864674A4 *

Also Published As

Publication number Publication date
SI1864674T1 (sl) 2013-12-31
ES2434036T3 (es) 2013-12-13
DK1864674T3 (da) 2013-11-04
WO2006088394A3 (en) 2007-01-11
PT1864674E (pt) 2013-11-18
EP1864674A4 (en) 2012-07-18
CY1114569T1 (el) 2016-10-05
EP1864674A2 (en) 2007-12-12
PL1864674T3 (pl) 2014-03-31
RU2005104289A (ru) 2006-07-27
EP1864674B1 (en) 2013-08-07
RU2350353C2 (ru) 2009-03-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Li et al. Detoxification of Deoxynivalenol by 60Co γ-ray irradiation and toxicity analyses of radiolysis products
JPWO1995014484A1 (ja) 生体内フリーラジカル生成剤
RU2350353C2 (ru) Способ получения средства защиты организма от ионизирующего излучения
Karasova et al. Encapsulation of oxime K027 into cucurbit [7] uril: In vivo evaluation of safety, absorption, brain distribution and reactivation effectiveness
Chan et al. Pharmacologic evaluation of ammonium tetrathiomolybdate after intravenous and oral administration to healthy dogs
Nishimura et al. Radioprotective effect of chitosan in sub-lethally X-ray irradiated mice.
Blackett et al. Radiation modifying effect of the free radical norpseudopelletierene-N-oxyl on normal bone marrow stem cells in vitro and in vivo
Schwartz et al. Modification of radiosensitivity by porphyrins: studies of tumors and other systems
RU2183124C1 (ru) Способ получения радиопротектора
Kartalović et al. Determination of niclosamide and its metabolites in liver and muscles of common carp (Cyprinus carpio) fingerlings
Plakas et al. Pharmacokinetics, tissue distribution and metabolism of acriflavine and proflavine in the channel catfish (Ictalurus punctatus)
RU2707119C2 (ru) Способ коррекции биохимического статуса новорожденных телят
US20080145450A1 (en) Delivery or removal of metals from biological systems
Paquet, B. Montegue, E. Ansoborlo, MH Henge-Napoli, P. Houpert, PW Durbin, KN Raymond Efficacy of 3, 4, 3-LIHOPO for reducing neptunium retention in the rat after simulated wound contamination
Malvisi et al. Tissue distribution and residue depletion of thiamphenicol after multiple oral dosing in seabass (Dicentrarchus labrax L.) and seabream (Sparus aurata L.)
RU2837735C1 (ru) Способ получения препарата для лечения животных при радиационно-кадмиевом поражении
Szot et al. Removal of239Pu from mice with 3, 4, 3 LICAM (C) or N, N′, N ″, N‴-tetra-(2, 3-dihydroxybenzoyl)-spermine
Worobey et al. Preliminary studies on the bioavailability and disposition of bioincurred carrot residues of [14C] linuron and [14C] 3, 4‐dichloroaniline in rats
Taha et al. Effect of acute and chronic exposure to titanium dioxide nanoparticles on the weight of body and some organs of Japanese quail
Feola Effects of iodoacetamide and X rays on a murine ascites tumor
Witting et al. Lead elimination by ICRF 158 in rats after chronic lead exposure
CN112220849A (zh) 柚子肉水提物粉末,其制备,排铅作用及应用
Lapina et al. Phytosorbent prepared from sunflower seed husks prevents mercuric chloride accumulation in kidney and muscle of adult rabbits
Hosseini et al. The effects of icariin on stereological parameters in mice kidneys treated with acrylamide
CN112220854A (zh) 柚子皮水提物粉末,其制备,排铅作用及应用

Legal Events

Date Code Title Description
NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 2006733214

Country of ref document: EP

WWP Wipo information: published in national office

Ref document number: 2006733214

Country of ref document: EP