WO2009094866A1 - Dicycloazaalkane derivates, preparation processes and medical uses thereof - Google Patents

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WO2009094866A1
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Peng Cho Tang
Zhigang Lin
Hejun Lu
Fuqiang Zhao
Li Li
Fanglong Yang
Jianhong Fu
Lin Wang
Guangyuan Shen
Dongliang Guan
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Shanghai Hengrui Pharmaceutical Co Ltd
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    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
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    • C07D209/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D209/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring
    • C07D209/52—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring condensed with a ring other than six-membered
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links

Definitions

  • the present invention relates to a bicyclic azaalkyl derivative, a process for producing the same, a pharmaceutical composition containing the same, and a therapeutic agent thereof In particular as a dipeptidyl peptidase inhibitor (DPPIV).
  • DPPIV dipeptidyl peptidase inhibitor
  • BACKGROUND OF THE INVENTION Diabetes is a multi-pathogenic metabolic disease characterized by chronic hyperglycemia accompanied by disorders of sugar, fat and protein metabolism caused by defects in insulin secretion and/or function. Diabetes is a very old disease. It is caused by an absolute or relative lack of insulin in the human body. The blood glucose level is increased, and then a large amount of sugar is excreted from the urine, and there are polydipsia, polyuria, polyphagia, weight loss, and dizziness. , fatigue and other symptoms.
  • DPPIV Dipeptidyl Peptidase-IV
  • a serine protease that cleaves N-terminal dipeptidase in a peptide chain containing a proline residue at the secondary end, although DPPIV has no physiological effects on mammals. It is fully confirmed, but it plays an important role in neuroenzyme metabolism, T-cell activation, cancer cell metastasis into the endothelium and HIV virus entry into lymphoid cells (W098/19998).
  • DPPIV can prevent the secretion of glucagon-like peptide (GLP)-1, in particular, it can cleave the N-terminal group-propadipeptide enzyme of GLP-1 from the active form of GLP- 1 (7-36) NH 2 into inactive degradation of GLP-l (9-36) NH 2 (Endocrinology, 1999, 140: 5356 ⁇ 5363). Due to physiological conditions, the half-life of intact GLP-1 in circulating blood is very short, and the inactive metabolites after DPPIV degrades GLP-1 can bind to GLP-1 receptor antagonistic activity GLP-1, thereby shortening the physiology of GLP-1. reaction.
  • DPPIV inhibitors completely protect endogenous and even exogenous GLP-1 from being inactivated by DPPIV, greatly increasing the physiological activity of GLP-1 (5 to 10 times), due to GLP-1 secretion of pancreatic insulin It is an important stimulator and can directly affect the distribution of glucose.
  • DPPIV inhibitors play a very good role in the treatment of non-insulin dependent diabetes mellitus (NIDDM) (US6110949).
  • NIDDM non-insulin dependent diabetes mellitus
  • R is selected from the group consisting of an alkyl group, a cycloalkyl group, a ⁇ alkyl group, an aryl group, a heteroaryl group, an aminoacyl group, an amide alkyl group, a heterocyclic aminoalkyl group or an aminoalkyl group, wherein the heterocyclic ring is five yuan a heterocyclic or six-membered heterocyclic ring, and the heterocyclic ring is further substituted by one or more alkyl, aryl, heteroaryl, haloalkyl, haloalkoxy, hydroxy, amino, alkylamino, amide, aminyl, cyano , a block group, an alkoxy group, an aryloxy group, an aminoalkyl group, a hydroxyalkyl group, a heterocycloalkyl group, a carboxylic acid, a carboxylic acid ester or a halogen;
  • an alkyl group, a cycloalkyl group, a heterocycloalkyl group, an aryl group, a heteroaryl group, -C(0)NR 3 R 4 -C(0)R 3 -C(0)OR 3 wherein an alkyl group , a cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl or heteroaryl group may be further substituted by one or more alkyl, aryl, hydroxy, amino, alkoxy, aryloxy or heterocycloalkyl groups;
  • R 2 is selected from a hydrogen atom or an alkyl group, wherein the alkyl group is further substituted with one or more substituents selected from a cycloalkyl group or an aryl group;
  • R 3 and each independently selected from a hydrogen atom, an alkyl group, a cycloalkyl group, an aryl group, a heteroaryl group or a heterocycloalkyl group, wherein an alkyl group, a cycloalkyl group, an aryl group, a heteroaryl group or a heterocycloalkyl group may be further One or more alkyl, cycloalkyl, aryl, heteroaryl, alkoxy, cycloalkoxy, aryloxy, heteroaryloxy, halogen, hydroxy, amino, cyano, hydroxyalkyl, hetero Substituted by a cycloalkyl, heterocycloalkoxy, trifluoromethyl, carboxylic acid or carboxylic acid ester;
  • R 3 and R 4 may form a 3 to 8 membered heterocyclic group together with the N atom, wherein the 5 to 8 membered heterocyclic ring may further contain one or more N, 0 or S atoms, and a 3 to 8 membered heterocyclic ring. Further may be further substituted by one or more alkyl, aryl, heteroaryl, haloalkyl, haloalkoxy, hydroxy, amino, cyano, alkoxy, aryloxy, hydroxyalkyl, heterocycloalkyl, carboxy Substituted by acid, carboxylic acid ester, halogen or -NR 3 R 4 ; n is 0 to 4. Further, the present invention includes a compound represented by the following formula (IA) or a pharmaceutically acceptable salt thereof:
  • R is selected from the group consisting of an alkyl group, a cycloalkyl group, a ⁇ alkyl group, an aryl group, a heteroaryl group, an aminoacyl group, an amide alkyl group, a heterocyclic aminoalkyl group or an aminoalkyl group, wherein the heterocyclic ring is five yuan a heterocyclic or six-membered heterocyclic ring, and the heterocyclic ring is further substituted by one or more alkyl, aryl, heteroaryl, haloalkyl, haloalkoxy, hydroxy, amino, alkylamino, amide, aminyl, cyano , a block group, an alkoxy group, an aryloxy group, an aminoalkyl group, a hydroxyalkyl group, a heterocycloalkyl group, a carboxylic acid, a carboxylic acid ester or a halogen;
  • R 2 is selected from a hydrogen atom or an alkyl group, wherein the alkyl group is further substituted with one or more substituents selected from a cycloalkyl group or an aryl group;
  • R 3 and each independently selected from a hydrogen atom, an alkyl group, a cycloalkyl group, an aryl group, a heteroaryl group or a heterocycloalkyl group, wherein an alkyl group, a cycloalkyl group, an aryl group, a heteroaryl group or a heterocycloalkyl group may be further One or more alkyl, cycloalkyl, aryl, heteroaryl, alkoxy, cycloalkoxy, aryloxy, heteroaryloxy, halogen, hydroxy, amino, cyano, hydroxyalkyl, hetero Substituted by a cycloalkyl, heterocycloalkoxy, trifluoromethyl, carboxylic acid or carboxylic acid ester;
  • R 3 and R 4 may form a 3 to 8 membered heterocyclic group together with the N atom, wherein the 5 to 8 membered heterocyclic ring may further contain one or more N, 0 or S atoms, and a 3 to 8 membered heterocyclic ring. Further may be further substituted by one or more alkyl, aryl, heteroaryl, haloalkyl, haloalkoxy, hydroxy, amino, cyano, alkoxy, aryloxy, hydroxyalkyl, heterocycloalkyl, carboxy Substituted by acid, carboxylic acid ester, halogen or -NR 3 R4.
  • R is
  • R 5 is selected from a hydrogen atom, an alkyl group, a cycloalkyl group, an aryl group, a heteroaryl group or a heterocycloalkyl group, wherein the alkyl group, the cycloalkyl group, the aryl group, the heteroaryl group or the heterocycloalkyl group may be further one or a plurality of alkyl, cycloalkyl, aryl, heteroaryl, alkoxy, cycloalkoxy, aryloxy, heteroaryloxy, halogen, hydroxy, amino, alkylamino, cyano, hydroxyalkyl, Substituted by a heterocycloalkyl group, a heterocycloalkoxy group, a carboxylic acid or a carboxylic acid ester;
  • R 7 are each independently selected from the group consisting of alkyl, aryl, heteroaryl, haloalkyl, haloalkoxy, hydroxy, amino, cyano, aryl, alkoxy, aryloxy, hydroxyalkyl, heterocycloalkyl a carboxylic acid, a carboxylic acid ester or a halogen;
  • W is a carbon, sulfur or oxygen atom, and when W is carbon, it may be further substituted by or R 7 .
  • the present invention includes the compound represented by the following (IB) or a pharmaceutically acceptable salt thereof:
  • alkyl, cycloalkyl group, heterocycloalkyl group, aryl group, heteroaryl group, -C(0)NR 3 R4 -C(0)R 3 -C(0)OR 3 wherein alkyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl or heteroaryl is further selected from one or more selected from the group consisting of alkyl, aryl, hydroxy, amino, alkoxy, aryl Substituted by a substituent of an oxy or heterocycloalkyl group;
  • R 2 is selected from a hydrogen atom or an alkyl group, wherein the alkyl group is further substituted with one or more substituents selected from a cycloalkyl group or an aryl group;
  • the heterocyclic ring further contains one or more N, 0 or S
  • R 5 is selected from a hydrogen atom, an alkyl group, a cycloalkyl group, an aryl group, a heteroaryl group or a heterocycloalkyl group, wherein the alkyl group, the cycloalkyl group, the aryl group, the heteroaryl group or the heterocycloalkyl group is further one or more Selected from alkyl, cycloalkyl, aryl, heteroaryl, alkoxy, cycloalkoxy, aryloxy, heteroaryloxy, halogen, hydroxy, amino, alkylamino, cyano, hydroxyalkyl Substituted by a substituent of a heterocycloalkyl, heterocycloalkoxy, carboxylic acid or carboxylic acid ester;
  • R 7 are each independently selected from the group consisting of alkyl, aryl, heteroaryl, haloalkyl, haloalkoxy, hydroxy, amino, cyano, aryl, alkoxy, aryloxy, hydroxyalkyl, heterocycloalkyl a carboxylic acid, a carboxylic acid ester or a halogen;
  • W is a carbon, sulfur or oxygen atom, and when W is carbon, it may be further substituted by ⁇ or ⁇ .
  • the present invention includes a compound represented by the following formula (IC) or a pharmaceutically acceptable salt thereof:
  • R 2 is selected from a hydrogen atom or an alkyl group, wherein the alkyl group is further substituted with one or more substituents selected from a cycloalkyl group or an aryl group;
  • R 3 and each independently selected from a hydrogen atom, an alkyl group, a cycloalkyl group, an aryl group, a heteroaryl group or a heterocycloalkyl group, wherein the alkane a group, a cycloalkyl group, an aryl group, a heteroaryl group or a heterocycloalkyl group further selected from one or more selected from the group consisting of alkyl, cycloalkyl, aryl, heteroaryl, alkoxy, cycloalkoxy, aryloxy Substituted by a substituent of a heteroaryloxy group, a halogen, a hydroxyl group, an amino group, a cyano group, a hydroxyalkyl group, a heterocycloalkyl group, a heterocycloalkoxy group, a trifluoromethyl group, a carboxylic acid or a carboxylic acid ester; 3 and R4 together with the N atom form a 3 to 8
  • R 5 is selected from a hydrogen atom, an alkyl group, a cycloalkyl group, an aryl group, a heteroaryl group or a heterocycloalkyl group, wherein the alkyl group, the cycloalkyl group, the aryl group, the heteroaryl group or the heterocycloalkyl group is further one or more Selected from alkyl, cycloalkyl, aryl, heteroaryl, alkoxy, cycloalkoxy, aryloxy, heteroaryloxy, halogen, hydroxy, amino, alkylamino, cyano, hydroxyalkyl Substituted by a substituent of a heterocycloalkyl, heterocycloalkoxy, carboxylic acid or carboxylic acid ester;
  • R 7 are each independently selected from the group consisting of alkyl, aryl, heteroaryl, haloalkyl, haloalkoxy, hydroxy, amino, cyano, aryl, alkoxy, aryloxy, hydroxyalkyl, heterocycloalkyl a carboxylic acid, a carboxylic acid ester or a halogen;
  • W is a carbon, sulfur or oxygen atom, and when W is carbon, it may be further substituted by or R 7 .
  • the pharmaceutically acceptable salt described in the present invention is a salt of the compound of the present invention and an acid selected from the group consisting of hydrochloric acid, p-toluenesulfonic acid, tartaric acid, maleic acid, lactic acid, methanesulfonic acid, sulfuric acid, phosphoric acid, and lemon. Acid, acetic acid or trifluoroacetic acid. Preference is given to p-toluenesulfonic acid, hydrochloric acid, tartaric acid or trifluoroacetic acid.
  • the present invention includes compounds having the structures described below and salts thereof:
  • the present invention relates to a compound represented by the following formula (ID) which is an intermediate for the synthesis of the compound of the formula (I) of the present invention:
  • R 3 and each independently selected from a hydrogen atom, an alkyl group, a cycloalkyl group, an aryl group, a heteroaryl group or a heterocycloalkyl group, wherein the alkyl group, the cycloalkyl group, the aryl group, the heteroaryl group or the heterocycloalkyl group is further one Or a plurality selected from an alkyl group, a cycloalkyl group, Aryl, heteroaryl, alkoxy, cycloalkoxy, aryloxy, heteroaryloxy, halogen, hydroxy, amino, cyano, hydroxyalkyl, heterocycloalkyl, heterocycloalkoxy, tri Substituting a substituent of a fluoromethyl group, a carboxylic acid or a carboxylate; and R 3 and R 4 together with the N atom form a 3 to 8 membered heterocyclic group, wherein the 5 to 8 membered heterocyclic ring further contains one or more N
  • the present invention relates to a process for the preparation of a compound of the formula (IB), which comprises:
  • the intermediate (ID) is reacted with a different amine, substituted sodium borohydride in a suitable solvent (such as methanol, ethanol) at room temperature under basic conditions (such as triethylamine) to obtain the formula ( IB) compound.
  • a suitable solvent such as methanol, ethanol
  • basic conditions such as triethylamine
  • azabicycloalkenyl compound is reacted with trimethylsilyl cyanide at room temperature in a suitable solvent (e.g., dichloromethane) under the action of silver perchlorate to obtain an azabicyclocyano compound;
  • a suitable solvent e.g., dichloromethane
  • the azabicyclic cyano compound is reacted with a suitable acid (e.g., hydrochloric acid) in a suitable solvent (e.g., ethanol) at room temperature to give an azabicyclic amino compound;
  • a suitable acid e.g., hydrochloric acid
  • a suitable solvent e.g., ethanol
  • the azabicyclic amino compound is reacted with a halide in a solvent of a basic solvent such as N,N-dimethylformamide to give a compound of the formula (IB).
  • the present invention relates to a process for the preparation of a compound of the formula (IB), which comprises:
  • the azabicyclocyano compound is reacted with a halide in a suitable solvent (such as tetrahydrofuran) under lithium hexamethyldisilazide to obtain an R 2 -substituted azabicyclocyano compound;
  • a suitable solvent such as tetrahydrofuran
  • R 2 -substituted azabicyclocyano compound is hydrolyzed by an acid to obtain an R 2 -substituted azabicyclocarboxy compound
  • R 2 -substituted azabicyclocyano compound is reacted with a reducing agent (DIBAL-H) in an appropriate solvent (for example, dichloromethane) to reduce the cyano group to an aldehyde group, and the obtained aldehyde is In a tetrahydrofuran/water mixed solvent, reacting with sodium dihydrogen phosphate, sodium chlorite and 2-methyl-2-butene in an ice bath to obtain an R 2 -substituted azabicyclocarboxy compound;
  • DIBAL-H reducing agent
  • an appropriate solvent for example, dichloromethane
  • the aziridine compound of the R 2 -substituted azabicyclocarboxylate is subjected to azidation under basic conditions (such as triethylamine) and ethyl chloroformate to obtain an azabicycloazide compound;
  • the azabicycloazide compound is heated in a suitable solvent (such as toluene), stirred in an acidic solution, and the pH is adjusted to be basic to obtain a substituted azabicyclic amino compound;
  • the R 2 -substituted azabicyclic amino compound is reacted with a halide in a basic solvent such as N,N-dimethylformamide to give a compound of the formula (IB).
  • the present invention relates to a process for the preparation of a compound of the formula (IC), which comprises:
  • the intermediate (ID) is reacted in a suitable solvent (e.g., tetrahydrofuran) with a reducing agent (e.g., tri-tert-butylaluminum hydride) to obtain an azabicyclo hydroxy compound;
  • a suitable solvent e.g., tetrahydrofuran
  • a reducing agent e.g., tri-tert-butylaluminum hydride
  • the azabicyclo hydroxy compound is reacted with an alkaline reagent (e.g., triethylamine) or methanesulfonyl chloride in an appropriate solvent (e.g., dichloromethane) to give an azabicyclomethanesulfonate compound;
  • an alkaline reagent e.g., triethylamine
  • methanesulfonyl chloride e.g., dichloromethane
  • the azabicyclomethanesulfonate compound is heated in an alkaline reagent (such as N,N-dimethylformamide solvent) with potassium phthalimide to obtain a phthalimide-substituted aza Bicyclic compound;
  • an alkaline reagent such as N,N-dimethylformamide solvent
  • a phthalimide-substituted azabicyclo compound in a suitable solvent (such as ethanol), and heating with hydrazine to obtain an azabicyclic amino compound;
  • azabicyclic amino compound is heated in a suitable solvent (e.g., dichloromethane) with a halide to give a compound of the formula (ic).
  • a suitable solvent e.g., dichloromethane
  • R is:
  • R 5 is selected from a hydrogen atom, an alkyl group, a cycloalkyl group, an aryl group, a heteroaryl group or a heterocycloalkyl group, wherein the alkyl group, the cycloalkyl group, the aryl group, the heteroaryl group or the heterocycloalkyl group is further one or more Selected from alkyl, cycloalkyl, aryl, heteroaryl, alkoxy, cycloalkoxy, aryloxy, heteroaryloxy, halogen, hydroxy, amino, alkylamino, cyano, hydroxyalkyl Substituted by a substituent of a heterocycloalkyl, heterocycloalkoxy, carboxylic acid or carboxylic acid ester;
  • R 7 are each independently selected from the group consisting of alkyl, aryl, heteroaryl, haloalkyl, haloalkoxy, hydroxy, amino, cyano, aryl, alkoxy, aryloxy, hydroxyalkyl, heterocycloalkyl a carboxylic acid, a carboxylic acid ester or a halogen;
  • W is a carbon, sulfur or oxygen atom, and when W is carbon, it may be further substituted by ⁇ or ⁇ .
  • the present invention further comprises subjecting the obtained compound of the formula (IB) or (IC) to a reaction in an acid solution of methanol, dichloromethane or ethyl acetate to obtain an acid addition product salt.
  • the present invention relates to a pharmaceutical composition comprising a therapeutically effective amount of a compound of the present invention or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and a pharmaceutically acceptable carrier.
  • the present invention relates to the use of a compound of the present invention or a pharmaceutically acceptable salt thereof for the preparation of a medicament for dipeptidyl peptidase (DPPIV) inhibitor.
  • DPPIV dipeptidyl peptidase
  • the formula is present in a free form or in the form of an acid addition salt, and provides a pharmaceutically acceptable (non-toxic, physiologically acceptable) salt;
  • Permissible salts include hydrochloride, p-toluenesulfonate, tartrate, maleate, lactate, methanesulfonate, sulfate, phosphate, citrate, acetate or trifluoroacetate . Preference is given to p-toluenesulfonate, hydrochloride, tartrate and trifluoroacetate.
  • Alkyl means a saturated aliphatic hydrocarbon group including straight chain and branched chain groups of 1 to 20 carbon atoms. Preference is given to medium-sized alkyl groups having 1 to 10 carbon atoms, such as methyl, ethyl, propyl, 2-propyl, n-butyl, isobutyl, tert-butyl, pentyldenyl. More preferred are lower alkyl groups having 1 to 4 carbon atoms, such as methyl, ethyl, propyl, 2-propyl, n-butyl, isobutyl or t-butyl groups and the like.
  • the alkyl group may be substituted or unsubstituted, and when substituted, preferred groups are halogen, hydroxy, lower alkoxy, aryl, aryloxy, heteroaryl, heterocycloalkyl, C(0)R. 3 and C(0)NR 3 R 4 .
  • Cycloalkyl means a 3 to 8 membered all carbon monocyclic, all carbon 5/6 or 6/6 fused or polycyclic fused ring (“fused" ring system means each in the system The rings share an adjacent pair of carbon atoms) groups with other rings in the system, wherein one or more of the rings may contain one or more double bonds, and none of the rings have a fully conjugated ⁇ -electron system.
  • cycloalkyl group examples include a cyclopropyl group, a cyclobutyl group, a cyclopentyl group, a cyclopentene group, a cyclohexane group, a cyclohexadiene group, an adamantane, a cycloheptane, a cycloheptatriene or the like.
  • the cycloalkyl group can be substituted or unsubstituted.
  • the substituent is preferably one or more substituents independently selected from lower alkyl, trihaloalkyl, halogen, hydroxy, lower alkoxy, aryl (optionally selected from one or more groups) a group substituted, the substituents are independently of each other a halogen, a hydroxyl group, a lower alkyl group or a lower alkoxy group), an aryloxy group (which may be selected by one or more groups, and the substituents are independently of each other a halogen, a hydroxyl group, Lower alkyl or lower alkoxy), 6-membered heteroaryl (having 1 to 3 nitrogen atoms in the ring, the carbon in the ring is optionally substituted by one or more groups, the substituents being independently of each other halogen, a hydroxy, lower alkyl or lower alkoxy), 5-membered heteroaryl (having 1 to 3 heteroatoms selected from the group consisting of nitrogen, oxygen and sulfur, the carbon and nitrogen atoms of which
  • Alkenyl refers to an alkyl group as defined above consisting of at least two carbon atoms and at least one carbon-carbon double bond. Representative examples include, but are not limited to, vinyl, 1-propenyl, 2-propenyl, 1-, 2- or 3-butenyl, and the like.
  • Block group refers to an alkyl group as defined above consisting of at least two carbon atoms and at least one carbon-carbon triple bond. Representative examples include, but are not limited to, an E-block, a 1-propyl block, a 2-propyl block, a 1-, 2- or 3-butyl block, and the like.
  • Aryl means a group having at least one aromatic ring structure, that is, an aromatic ring having a conjugated ⁇ -electron system, including a carbocyclic aryl group, a heteroaryl group, and a biaryl group.
  • the aryl group may be optionally substituted by one or more substituents selected from the group consisting of halogen, trihalomethyl, hydroxy, SR, nitro, cyano, alkoxy and alkyl.
  • Heteroaryl means an aryl group having from 1 to 3 heteroatoms as ring atoms, the remaining ring atoms being carbon, and heteroatoms including oxygen, sulfur and nitrogen.
  • the ring may be a 5- or 6-membered ring.
  • Examples of the heterocyclic aryl group include furyl, thienyl, pyridyl, pyrrole, N-alkylpyrrolyl, pyrimidinyl, pyrazinyl, imidazolyl and the like.
  • Heterocycloalkyl means a monocyclic or fused ring radical having from 5 to 9 ring atoms in the ring wherein one or two ring atoms are selected from nitrogen, oxygen or S(0)n (where n is an integer) From 0 to 2), the remaining ring atoms are carbon. These rings may also have one or more double bonds, however, these rings do not have a fully conjugated pi- electron system.
  • Unsubstituted heterocycloalkyl includes, but is not limited to, pyrrolidinyl, piperidino, piperazino, morpholinyl, thiomorpholinyl, homopiperazine, etc., heterocycloalkyl can be substituted or Unsubstituted.
  • the substituents are preferably one or more, more preferably one, two or three, and even more preferably one or two, independently selected from lower alkyl, trihaloalkyl, halogen, hydroxy, lower A group consisting of an alkoxy group, a cyano group, and an acyl group.
  • the heteroaryl group may be selected from one or two substituents independently selected from halogen, lower alkyl, trihaloalkyl, hydroxy, decyl, cyano, oxime-amido or carboxy.
  • Hydrolysis means a hydrazine group.
  • Alkoxy means -0-(indenyl) and -0-(unsubstituted cycloalkyl). Representative examples include, but are not limited to, methoxy, ethoxy, propoxy, butoxy, cyclopropoxy, cyclobutoxy, cyclopentyloxy, cyclohexyloxy, and the like.
  • Haloalkoxy means -0-(haloalkyl). Representative examples include, but are not limited to, trifluoromethoxy, tribromomethoxy, and the like.
  • Aryloxy means -0-aryl and -0-heteroaryl, and aryl and heteroaryl are as defined above. Representative examples include, but are not limited to, phenoxy, pyridyloxy, furanoxy, thienyloxy, pyrimidinyloxy, pyrazinyloxy and the like and derivatives thereof.
  • Alkylthio means -0-(fluorenyl) and -0-(unsubstituted cycloalkyl). Representative examples include, but are not limited to, methylthio, ethylthio, propylthio, butylthio, cyclopropylthio, cyclobutylthio, cyclopentylthio, cyclohexylthio, and the like.
  • Arylthio means -S-aryl and -S-heteroaryl, and aryl and heteroaryl are as defined above. Representative examples include, but are not limited to, phenylthio, pyridylthio, furylthio, thiophenothionyl, pyrimidinyl, and the like, and derivatives thereof,
  • acyl means a -C(0)-R" group, wherein R" is selected from hydrogen, lower alkyl, trihalomethyl, unsubstituted cycloalkyl, aryl (optionally one or more, Preferably one, two or three substituents, the substituents being selected from the group consisting of lower alkyl, trihalomethyl, lower alkoxy and halogen), heteroaryl (bonded via a ring carbon) (optionally By one or more, preferably one, two or three substituents, the substituent is selected from the group consisting of lower alkyl, trihalomethyl, lower alkoxy and halogen) and heteroalicyclic (via ring carbon bond)
  • X is optionally substituted by one or more, preferably one, two or three substituents selected from lower alkyl, trihalo a group consisting of a base, a lower alkoxy group and a halogen).
  • Representative acyl groups include, but are not limited to, acetyl, triflu
  • Thioxo refers to a -C(S)-R" group, wherein R" is as defined above.
  • Halogen means fluoro, chloro, bromo or iodo, preferably fluoro or chloro.
  • Trifluoromethyl means -CF 3 .
  • Amino means -NH 2 .
  • Carboxylic acid means -COOH.
  • Carboxylic ester means -COOR, wherein R is alkyl or cycloalkyl.
  • Haldroxyalkyl means -(CH2)rNH2, wherein 1" is 1 to 4.
  • Optional or “optionally” means that the event or environment described subsequently may, but need not, occur, including where the event or environment occurs or does not occur.
  • optionally substituted with an alkyl group means that the alkyl group may, but need not, be present, and the description includes the case where the heterocyclic group is substituted with an alkyl group and the case where the heterocyclic group is not substituted with an alkyl group.
  • “Pharmaceutical composition” means a mixture of one or more of the compounds described herein, or a physiologically/pharmaceutically acceptable salt or prodrug thereof, with other chemical components, such as a physiological/pharmaceutically acceptable carrier. And excipients.
  • the purpose of the pharmaceutical composition is to facilitate the administration of the compound to the organism.
  • tert-butyl-5-oxo-hexahydro-cyclopentadienylpyrrole-2-carboxylate is reacted with trifluoroacetic acid in a suitable solvent such as dichloromethane to give hexahydro Cyclopentadienpyrrole-5-one trifluoroacetate; hexahydrocyclopentadienpyrrole-5-one trifluoroacetate is reacted with an acid chloride or ester in the presence of a base to give a compound of the formula (ID)
  • the intermediate (ID) is reacted with a different amine, substituted sodium borohydride in a suitable solvent (such as methanol, ethanol) at room temperature under basic conditions (such as triethylamine) to obtain a general formula. (IB) compound.
  • the intermediate (ID) compound is added to the above solution at room temperature to obtain an azabicycloalkenyl compound; an azabicycloalkenyl compound.
  • a suitable solvent such as dichloromethane
  • reacting with trimethylsilyl cyanide at room temperature under the action of silver perchlorate to obtain azabicyclocyano compound
  • azabicyclocyano compound in a suitable solvent such as Ethanol
  • a suitable acid such as hydrochloric acid
  • the azabicyclic amino compound is reacted with a halide in a solvent of a basic solvent such as N,N-dimethylformamide.
  • the intermediate (ID) is reacted with a reducing agent (such as tri-tert-butyloxylithium) in a suitable solvent (such as tetrahydrofuran) in an ice bath to obtain an azabicyclohydroxy compound; the azabicyclic hydroxy compound is in a suitable solvent.
  • a reducing agent such as tri-tert-butyloxylithium
  • a suitable solvent such as tetrahydrofuran
  • the compound of the formula (IB) or (IC) is purified and reacted in an acid solution of methanol, dichloromethane or ethyl acetate to obtain an acid addition product salt.
  • the present invention relates to a pharmaceutical composition
  • a pharmaceutical composition comprising a therapeutically effective amount of a compound or a salt thereof and a pharmaceutical carrier, or the use of a compound of the formula of the present invention or a salt thereof for the preparation of a medicament for dipeptidyl peptidase inhibitor.
  • the present invention also provides a composition comprising a pharmaceutically effective amount of the above compound, and the use of the compound for the preparation of a dipeptidyl peptidase inhibitor.
  • ⁇ is given in units of parts per million (ppm).
  • the NMR was measured by a Bruker AVANCE-400 nuclear magnetic apparatus, and the solvent was deuterated chloroform (CDC1 3 ), deuterated dimethyl sulfoxide (DMSO-D 6 ), deuterated methanol (CD 3 OD), and the internal standard was four.
  • tetramethylsilane (TMS) chemical shifts are 10- 6 (ppmM given in units glance.
  • the MS was measured using a FINMGAN LCQAd (ESI) mass spectrometer.
  • the average inhibition rate of the kinase and the IC 5Q value were determined by NovoStar microplate reader (BMG, Germany). Thin layer silica gel was used in Yantai Yellow Sea HSGF254 or Qingdao GF254 silica gel plate.
  • CD 3 OD deuterated methanol
  • tert-Butyl-5-oxo-hexahydro-cyclopentadienpyrrole-2-carboxylate le (0.32 g, 1.42 mmol) was dissolved in 10 mL of dichloromethane with stirring. Acetic acid (3.27 mL, 42.7 mmol) was reacted at 0 ° C for 30 min. The solvent was evaporated to dryness crystals crystals crystals crystals Next step.
  • Cis-5-(2-(2-cyanopyrrol-1-yl)-2-oxoethylamino)-N,N-dimethyl-hexahydrocyclopentadienpyrrole-2-amide lh 200 mg, 0.687 mmol was dispersed in 10 mL of dichloromethane, 2 mL of 0.5N hydrochloric acid diethyl ether solution was added to the ice bath, and the solvent was evaporated to dryness, and 10 mL diethyl ether was added, and the precipitate was centrifuged to obtain the title product cis-5-(2) -(2-cyanopyrrolidin-1-yl)-2-oxoethylamino)-N,N-dimethyl-hexahydrocyclopentadienpyrrole-2-amide hydrochloride 1 (180 mg, white Powder), yield 80%.
  • Disperse-1-(2-step-hydroxyacetyl)-octahydrocyclopentadienpyrrole-5-ylamino)acetyl)-2-cyano-pyrrolidine 3b was dispersed in 10 mL of diethyl ether under ice bath 2 mL of 0.5 N hydrochloric acid in diethyl ether was added, and the precipitate was centrifuged to obtain the title product cis-1-(2-(2-(2-hydroxyacetyl)-octahydrocyclopentadienpyrrole-5-ylamino)acetyl.
  • Base -2-cyano-pyrrolidine hydrochloride 3 (100 mg, white powder).
  • Cis-l 2 piperidine-1-carbonyl)-octahydrocyclopentadienpyrrole-5-ylamino)acetyl)-2-cyano-pyrrolidine hydrochloride
  • the cis-1-(2-(2-acetyl-octahydrocyclopentadienpyrr-5-ylamino)acetyl)-2-cyano-pyrrolidine 5b obtained in the previous step was dispersed in 20 mL of diethyl ether. 4 mL of 0.5 N hydrochloric acid diethyl ether solution was added to the ice bath, and the precipitate was centrifuged to obtain the title product cis-1-(2-(2-acetyl-octahydrocyclopentadipyrrole-5-ylamino)acetyl). 2-cyano-pyrrolidine 5 (0.23 g, white powder).
  • trans-l-(2-chloro-ethyl)-pyrrole-2-cyano 334 mg, 1.94 mmol
  • 20 mL of trans-5-amino-hexahydrocyclopentadiene was added.
  • Pyrrole-2-carboxylic acid N,N-dimethylformamide 10 (1 (; 290 mg, 1.46 mmol) in methylene chloride.
  • the residue gives trans-5-(2-(2-cyanopyrrol-1-yl)-2-oxoethylamino)-N,N-dimethyl-hexahydrocyclopentadienpyrrole-2 - Amide 10e, used directly in the next reaction.
  • trans-5-(2-(2-cyanopyrrol-1-yl)-2-oxoethylamino)-N,N-dimethyl-hexahydrocyclopentadienpyrrole-2 obtained in the previous step - amide 10e was dissolved in 10 mL of dichloromethane with stirring, and stirred for 2 hours by adding 2 mL of trifluoroacetic acid to give trans-5-(2-(2-cyanopyrrol-1-yl)-2-oxoethylamino -N,N-Dimethyl-hexahydrocyclopentadienpyrrole-2-amide trifluoroacetate 10 (201 mg, white solid).
  • N-Dimethylformamide was purified by silica gel column chromatography to give the title product 5-[2-(2-cyano-pyrrolidin-1-yl)-2-oxo-ethylamino]-5- Base-hexahydrocyclopentadienpyrrole-2-carboxylic acid dimethylamide lid (135 mg, colorless oily liquid), yield: 42.3 %. Recovery of 5-amino-5-methyl-hexahydrocyclopentadienpyrrole-2-carboxylic acid dimethylamide llc (130 mg).
  • EtOAc EtOAc
  • EtOAc EtOAc TLC
  • the following point was 5-cyano-5-methyl-hexahydrocyclopentadienpyrrole-2-carboxylic acid.
  • Carboxamide 12b (2.411 g, pale yellow oil).
  • Tetrapyrrole-2C1H)-carbamoyl 13 (0.16 g, 0.44 mmol) was dissolved in 5 mL of dichloromethane with stirring, and 5 mL of tartaric acid (65.6 mg, 0.44 mmol) in acetone was added dropwise, and the reaction was carried out for 30 minutes at room temperature.
  • the aqueous phase was extracted with ethyl acetate (30 mL*5), and the organic phase was combined, dried over anhydrous magnesium sulfate, filtered and filtered. The obtained residue was purified to silica gel column chromatography toield , Yield: 84%.
  • 2-carboxylic acid dimethylamide 17a (56 mg, 0.132 mmol) was dissolved in 1 mL of ethyl acetate with stirring, and 1 mL of a solution of tartaric acid in acetone was added and stirred for 30 minutes. A white solid precipitated and a small amount of n-hexane was added. Stirring was continued and filtration gave the title product 5-benzyl-5-[2-(2-cyano-pyrrolidin-1-yl)-2-oxo-ethylamino]-hexahydrocyclopentadiene pyrrole 2-carboxylic acid dimethylamide tartrate 17 (50 mg, white solid), yield: 67%.
  • the following method was used to determine the inhibition of DPPIV/DPP8/DPP9 enzymatic activity by the compounds of the invention.
  • the ability of the compounds of the invention to inhibit the inhibition of pure DPPIV/DPP8/DPP9 enzyme activity was examined.
  • the inhibition rate or semi-inhibitory concentration of each compound, IC 5Q (the concentration of the compound measured when the enzyme activity is inhibited to 50%), is determined by a fixed amount of the enzyme mixed substrate and different concentrations of the test compound.
  • Tris Buffer Prepare 100 mL of 2 mM Tris buffer, dissolve 0.0242 g of Tris in approximately 90 mL of d3 ⁇ 40, adjust pH to 8.00 with HC1 and NaOH, and finally add d3 ⁇ 40 to 100 mL.
  • DPPIV enzyme CalBiochem Catalog no. 317630
  • DPPIV - GloTM substrate Promega Catalog no. G8350
  • dH 2 0 to lmM. e. DPPIV — Glo. Buffer Promega Catalog no.G8350
  • the ratio of mixed substrate and DPPIV-Glo. is 1:49. Mix the vibrations to mix thoroughly. Allow to stand at room temperature for 30-60 minutes before use.
  • Tris Buffer Prepare 100 mL of 2 mM Tris buffer, dissolve 0.0242 g of Tris in approximately 90 mL of d3 ⁇ 40, adjust pH to 8.00 with HC1 and NaOH, and add d3 ⁇ 40 to 100 mL.
  • DPP8 enzyme Bioscience Catalog no. 80080
  • the reaction was used at a final concentration of 0.1 ng/100 assay.
  • test compound 2 L was added to each tube, and 2 L DMSO was added to the negative control blank control.
  • the ratio of mixed substrate and DPP8-Glo. is 1:49. Mix the vibrations to mix thoroughly. Allow to stand at room temperature for 30-60 minutes before use.
  • Tris Buffer Prepare 100 mL of 2 mM Tris buffer, dissolve 0.0242 g Tris in approximately 90 mL d3 ⁇ 40, adjust pH to 8.00 with HC1 and NaOH, and add d3 ⁇ 40 to 100 mL.
  • test compound 2 L was added to each tube, and 2 L DMSO was added to the negative control blank control.
  • Test drug 150-300Lx, 12 hours and nights alternate. Test drug:
  • Preparation method Accurately weigh the drug, add double distilled water, and prepare 0.5, 0.15 and 0.05mg/mL suspension respectively. (Note: Although the compound is shown to be soluble in water on the receiving sample, it is found to be poorly water soluble in the test. It can be dissolved at low concentrations, but the concentration is
  • Dosage Oral administration: 1, 3, 10 mg/kg, volume 20 mL/kg.
  • Preparation method Accurately weigh the drug, add it in double distilled water, mix well, prepare 1.5mg/mL solution, and then dilute to 0.5, 0.15 and 0.05mg/mL transparent solution.
  • mice Normal male ICR mice were randomly divided into groups, 6 in each group, which were blank control, positive control group, and different dose administration groups.
  • the specific grouping is as follows:
  • Glucose kit was used to measure the glucose content in the serum. 250 ⁇ 1 enzyme working solution was added, 5 ⁇ 1 serum was added, and a blank tube (add 5 ⁇ 1 double distilled water) and a standard tube (add 5 ⁇ 1 glucose standard solution), and mix, 37°. C water bath for 20 minutes, zero by blank tube, colorimetric determination at OD505nm.
  • Serum glucose content BG (mmol / l) OD / OD X 5.55
  • BG (mmol / l) OD / OD X 5.55
  • Test 1 Calculate the percentage of blood glucose drop at 30 minutes after sugar feeding and the area under the curve AUC test results: Test 1:
  • mice Male ICR mice were orally administered with double distilled water, different doses of the test article, Example 1, and Example 2 after 6 hours of fasting. Each group was given an oral glucose tolerance test after 30 minutes of administration. The results showed that the serum glucose concentration of the mice in the blank control group was significantly increased after oral administration of 2.5 g/kg of glucose, and peaked at 30 minutes.
  • Example 1 Low, medium and high levels of blood glucose in the three dose groups were significantly lower than those in the blank control group at 30 minutes, and the percentages of blood glucose decreased by 19.16%, 22.85 and 31.85%, respectively.
  • mice Male ICR mice were orally administered with double distilled water, different doses of the test substance, Example 1, and Example 2 after 6 hours of fasting. Each group was given an oral glucose tolerance test 30 minutes after administration. The results showed that the serum glucose concentration of the blank control group was significantly increased after oral administration of 2.5 g/kg of glucose, and reached the peak at 30 minutes.
  • the blood glucose of the mice in each dose group of SHR1039 was significantly lower than that of the blank control group at 30 minutes after the administration of sugar (P ⁇ 0.01), compared with the blank control group, decreased by 26.10%, 30.24 and 32.05%, respectively.
  • the blood glucose of the SHR1040 low, medium and high dose groups was significantly lower than that of the blank control group at 30 minutes, and the percentage of blood glucose decreased by 24.51%, 26.96% and 27.75%, respectively. in conclusion:
  • test compound Example 1 had significant hypoglycemic effects in the oral glucose tolerance test in normal ICR mice.
  • test compound Example 1 showed a good dose-effect relationship. Effect of DPPIV inhibitory compounds on oral glucose tolerance in KKAy mice
  • test animals The effects of the test compound Example 1 and Example 2 on the oral glucose tolerance of type 2 diabetes KKAy mice were observed, and the hypoglycemic effect in vivo was initially evaluated. Test animals:
  • Test drug 150-300Lx, 12 hours and nights alternate. Test drug:
  • Preparation method Accurately weigh the drug, add it in double distilled water, mix well, prepare a 3mg/mL suspension, and then dilute it into 1, 0.3 and O.lmg/mL transparent solution.
  • mice Normal KKAy mice were divided into body weight and fasting blood glucose after 6 hours of fasting, and 5 rats in each group were blank control and different dose administration groups. The specific experiment is as follows:
  • Test 1 Male KKAy mice were orally administered with double distilled water and different doses of the test article after fasting for 6 hours. Each group was given an oral glucose tolerance test after 30 minutes of administration. The results showed that the serum glucose concentration of the blank control group was significantly increased after oral administration of 1.5 g/kg of glucose, and peaked at 30 minutes.
  • mice Female KKAy mice were orally administered with double distilled water and different doses of the test substance after fasting for 6 hours.
  • Example 1 each group was given an oral glucose tolerance test 30 minutes after administration. The results showed that the serum glucose concentration of the mice in the blank control group was significantly increased after oral administration of 2.5 g/kg of glucose, and peaked at 30 minutes.
  • Example 1 Blood glucose and blank control at 30 minutes after the administration of the mice in the 3 and 10 mg/kg groups. Compared with the group, the decrease rate was 40.63% and 24.68%.
  • mice Male KKAy mice were orally administered with double distilled water and different doses of the test article 6 hours after fasting. Each group was given an oral glucose tolerance test 30 minutes after administration. The results showed that the serum glucose concentration of the blank control group was significantly increased after oral administration of 1.5 g/kg of glucose, and peaked at 30 minutes.
  • mice Female KKAy mice were orally administered with double distilled water and different doses of the test article 6 hours after fasting. Each group was given an oral glucose tolerance test 30 minutes after administration. The results showed that the serum glucose concentration of the mice in the blank control group was significantly increased after oral administration of 2.5 g/kg of glucose, and peaked at 30 minutes.
  • test compound Example 1 and Example 2 all had a certain hypoglycemic effect in the oral glucose tolerance test of type 2 diabetes KKAy mice.

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Description

双环氮杂烷类衍生物、 其制备方法及其在医药上的用途 技术领域 本发明涉及一种双环氮杂烷类衍生物、其制备方法及含有该衍生物的药物组合 物以及其作为治疗剂特别是作为二肽基肽酶抑制剂 (DPPIV)的用途。 背景技术 糖尿病是一种多病因的代谢疾病， 特点是慢性高血糖， 伴随因胰岛素分泌及 / 或作用缺陷引起的糖、 脂肪和蛋白质代谢紊乱。 糖尿病是一种非常古老的疾病， 是由于人体内胰岛素绝对或相对缺乏而引起的血中葡萄糖浓度升高， 进而糖大量 从尿中排出， 并出现多饮、 多尿、 多食、 消瘦、 头晕、 乏力等症状。
二肽基肽酶一 IV(DPPIV)是一种丝氨酸蛋白酶， 它可以在次末端含有一个脯氨 酸残基的肽链里裂解 N—末端二肽酶， 尽管 DPPIV对哺乳动物的生理作用还没有 得到完全的证实， 但其在神经酶代谢， T一细胞激活， 癌细胞转移入内皮及 HIV病 毒进入淋巴样细胞过程中都起到重要的作用 (W098/19998)。
最近， 有研究表明 DPPIV可以阻止胰升糖素样肽 (GLP)-l的分泌， 尤其， 它可 以裂解 GLP-1中 N-末端的组 -丙二肽酶， 使其从活性形式的 GLP-1(7-36)NH2降解 为无活性的 GLP-l(9-36)NH2(Endocrinology， 1999， 140： 5356〜5363)。 由于生理 情况下， 循环血中完整 GLP-1的半衰期很短， DPPIV降解 GLP-1后的无活性代谢 物能与 GLP-1受体结合拮抗活性 GLP-1从而縮短了对 GLP-1的生理反应。而 DPPIV 抑制剂能完全保护内源性甚至外源性的 GLP-1 不被 DPPIV 灭活， 极大的提高 GLP-1的生理活性 (5〜10倍)， 由于 GLP-1对胰腺胰岛素的分泌是一个重要的刺激 器并能直接影响葡萄糖的分配， DPPIV抑制剂对非胰岛素依赖型糖尿病 (NIDDM) 的治疗起到很好的作用 (US6110949)。 发明内容 本发明涉及一种由通式 (I)表示的化合物或其药学上可接受的盐：
Figure imgf000003_0001
R选自烷基、 环烷基、 ^代烷基、 芳基、 杂芳基、 胺酰烷基、 酰胺烷基、 杂环 胺酰烷基或氨烷基， 其中所述杂环为五元杂环或六元杂环， 且该杂环进一步被一 个或多个烷基、 芳基、 杂芳基、 卤代烷基、 卤代烷氧基、 羟基、 氨基、 烷氨基、 酰胺基、 胺酰基、 氰基、 块基、 烷氧基、 芳氧基、 氨烷基、 羟烷基、 杂环烷基、 羧酸、 羧酸酯或卤素取代；
选自氢原子、烷基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、 -C(0)NR3R4 -C(0)R3 -C(0)OR3, 其中烷基、 环烷基、 杂环烷基、 芳基或杂芳基可以进一步被一个或多 个烷基、 芳基、 羟基、 氨基、 烷氧基、 芳氧基或杂环烷基所取代；
R2选自氢原子或烷基，其中烷基进一步被一个或多个选自环烷基或芳基的取代 基所取代；
R3和 分别选自氢原子、 烷基、 环烷基、 芳基、 杂芳基或杂环烷基， 其中烷 基、 环烷基、 芳基、 杂芳基或杂环烷基可以进一步被一个或多个烷基、 环烷基、 芳基、 杂芳基、 烷氧基、 环烷氧基、 芳氧基、 杂芳氧基、 卤素、 羟基、 氨基、 氰 基、 羟烷基、 杂环烷基、 杂环烷氧基、 三氟甲基、 羧酸或羧酸酯所取代；
同时 R3和 R4可以与 N原子一起形成一个 3〜8元的杂环基，其中 5〜8元杂环 内可以进一步含有一个或多个N、 0或 S原子， 并且 3〜8元杂环上可以进一步被 一个或多个烷基、 芳基、 杂芳基、 卤代烷基、 卤代烷氧基、 羟基、 氨基、 氰基、 烷氧基、 芳氧基、 羟烷基、 杂环烷基、 羧酸、 羧酸酯、 卤素或 -NR3R4所取代； n是 0〜4。 进一步， 本发明包括下述通式 (IA)表示的化合物或其药学上可接受的盐：
Figure imgf000004_0001
R选自烷基、 环烷基、 ^代烷基、 芳基、 杂芳基、 胺酰烷基、 酰胺烷基、 杂环 胺酰烷基或氨烷基， 其中所述杂环为五元杂环或六元杂环， 且该杂环进一步被一 个或多个烷基、 芳基、 杂芳基、 卤代烷基、 卤代烷氧基、 羟基、 氨基、 烷氨基、 酰胺基、 胺酰基、 氰基、 块基、 烷氧基、 芳氧基、 氨烷基、 羟烷基、 杂环烷基、 羧酸、 羧酸酯或卤素取代；
选自氢原子、烷基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、 -C(0)NR3R4 -C(0)R3 -C(0)OR3, 其中烷基、 环烷基、 杂环烷基、 芳基或杂芳基可以进一步被一个或多 个烷基、 芳基、 羟基、 氨基、 烷氧基、 芳氧基或杂环烷基所取代； R2选自氢原子或烷基，其中烷基进一步被一个或多个选自环烷基或芳基的取代 基所取代；
R3和 分别选自氢原子、 烷基、 环烷基、 芳基、 杂芳基或杂环烷基， 其中烷 基、 环烷基、 芳基、 杂芳基或杂环烷基可以进一步被一个或多个烷基、 环烷基、 芳基、 杂芳基、 烷氧基、 环烷氧基、 芳氧基、 杂芳氧基、 卤素、 羟基、 氨基、 氰 基、 羟烷基、 杂环烷基、 杂环烷氧基、 三氟甲基、 羧酸或羧酸酯所取代；
同时 R3和 R4可以与 N原子一起形成一个 3〜8元的杂环基，其中 5〜8元杂环 内可以进一步含有一个或多个N、 0或 S原子， 并且 3〜8元杂环上可以进一步被 一个或多个烷基、 芳基、 杂芳基、 卤代烷基、 卤代烷氧基、 羟基、 氨基、 氰基、 烷氧基、 芳氧基、 羟烷基、 杂环烷基、 羧酸、 羧酸酯、 卤素或 -NR3R4所取代。 优选地， 在通式 (I)所示的化合物或其盐中， R为
Figure imgf000005_0001
R5选自氢原子、烷基、环烷基、 芳基、 杂芳基或杂环烷基， 其中烷基、环烷基、 芳基、 杂芳基或杂环烷基可以进一步被一个或多个烷基、 环烷基、 芳基、 杂芳基、 烷氧基、 环烷氧基、 芳氧基、 杂芳氧基、 卤素、 羟基、 氨基、 烷氨基、 氰基、 羟 烷基、 杂环烷基、 杂环烷氧基、 羧酸或羧酸酯所取代；
和 R7各自分别选自烷基、 芳基、 杂芳基、 卤代烷基、 卤代烷氧基、 羟基、 氨基、 氰基、 块基、 烷氧基、 芳氧基、 羟烷基、 杂环烷基、 羧酸、 羧酸酯或卤素;
W为碳、 硫或氧原子， 当 W为碳时， 可以进一步被 或 R7所取代。 进一步， 本发明包括下述 （IB)表示的化合物或其药学上可接受的盐：
其中： R是
Figure imgf000005_0002
选自氢原子、烷基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、 -C(0)NR3R4 -C(0)R3 -C(0)OR3, 其中烷基、 环烷基、 杂环烷基、 芳基或杂芳基进一步被一个或多个选 自烷基、 芳基、 羟基、 氨基、 烷氧基、 芳氧基或杂环烷基的取代基所取代；
R2选自氢原子或烷基，其中烷基进一步被一个或多个选自环烷基或芳基的取代 基所取代；
和 分别选自氢原子、 烷基、 环烷基、 芳基、 杂芳基或杂环烷基， 其中烷 基、 环烷基、 芳基、 杂芳基或杂环烷基进一步被一个或多个选自烷基、 环烷基、 芳基、 杂芳基、 烷氧基、 环烷氧基、 芳氧基、 杂芳氧基、 卤素、 羟基、 氨基、 氰 基、 羟烷基、 杂环烷基、 杂环烷氧基、 三氟甲基、 羧酸或羧酸酯的取代基所取代； 同时 R3和 与 N原子一起形成一个 3〜8元的杂环基，其中 5〜8元杂环内进 一步含有一个或多个 N、 0或 S原子， 并且 3〜8元杂环进一步被一个或多个选自 烷基、 芳基、 杂芳基、 卤代烷基、 卤代烷氧基、 羟基、 氨基、 氰基、 烷氧基、 芳 氧基、 羟烷基、 杂环烷基、 羧酸、 羧酸酯、 卤素或 -NR3R4的取代基所取代；
R5选自氢原子、烷基、环烷基、 芳基、 杂芳基或杂环烷基， 其中烷基、环烷基、 芳基、 杂芳基或杂环烷基进一步被一个或多个选自烷基、 环烷基、 芳基、 杂芳基、 烷氧基、 环烷氧基、 芳氧基、 杂芳氧基、 卤素、 羟基、 氨基、 烷氨基、 氰基、 羟 烷基、 杂环烷基、 杂环烷氧基、 羧酸或羧酸酯的取代基所取代；
和 R7各自分别选自烷基、 芳基、 杂芳基、 卤代烷基、 卤代烷氧基、 羟基、 氨基、 氰基、 块基、 烷氧基、 芳氧基、 羟烷基、 杂环烷基、 羧酸、 羧酸酯或卤素；
W为碳、 硫或氧原子， 当 W为碳时， 可以进一步被 ^或^所取代。
进一步， 本发明包括下述通式 (IC)表示的化合物或其药学上可接受的盐：
其中： R是
Figure imgf000006_0001
选自氢原子、烷基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、 -C(0)NR3R4 -C(0)R3 -C(0)OR3, 其中烷基、 环烷基、 杂环烷基、 芳基或杂芳基进一步被一个或多个选 自烷基、 芳基、 羟基、 氨基、 烷氧基、 芳氧基或杂环烷基的取代基所取代；
R2选自氢原子或烷基，其中烷基进一步被一个或多个选自环烷基或芳基的取代 基所取代；
R3和 分别选自氢原子、 烷基、 环烷基、 芳基、 杂芳基或杂环烷基， 其中烷 基、 环烷基、 芳基、 杂芳基或杂环烷基进一步被一个或多个选自烷基、 环烷基、 芳基、 杂芳基、 烷氧基、 环烷氧基、 芳氧基、 杂芳氧基、 卤素、 羟基、 氨基、 氰 基、 羟烷基、 杂环烷基、 杂环烷氧基、 三氟甲基、 羧酸或羧酸酯的取代基所取代; 同时 R3和 R4与 N原子一起形成 3〜8元的杂环基，其中 5〜8元杂环内进一步 含有一个或多个 N、 0或 S原子，并且 3〜8元杂环进一步被一个或多个选自烷基、 芳基、 杂芳基、 卤代烷基、 卤代烷氧基、 羟基、 氨基、 氰基、 烷氧基、 芳氧基、 羟烷基、 杂环烷基、 羧酸、 羧酸酯、 卤素或 -NR3R4的取代基所取代；
R5选自氢原子、烷基、环烷基、 芳基、 杂芳基或杂环烷基， 其中烷基、环烷基、 芳基、 杂芳基或杂环烷基进一步被一个或多个选自烷基、 环烷基、 芳基、 杂芳基、 烷氧基、 环烷氧基、 芳氧基、 杂芳氧基、 卤素、 羟基、 氨基、 烷氨基、 氰基、 羟 烷基、 杂环烷基、 杂环烷氧基、 羧酸或羧酸酯的取代基所取代；
和 R7各自分别选自烷基、 芳基、 杂芳基、 卤代烷基、 卤代烷氧基、 羟基、 氨基、 氰基、 块基、 烷氧基、 芳氧基、 羟烷基、 杂环烷基、 羧酸、 羧酸酯或卤素;
W为碳、 硫或氧原子， 当 W为碳时， 可以进一步被 或 R7所取代。 本发明中所述的药学上可接受的盐为本发明化合物与选自下列的酸形成的盐： 盐酸、 对甲苯磺酸、 酒石酸、 马来酸、 乳酸、 甲磺酸、 硫酸、 磷酸、 柠檬酸、 乙 酸或三氟乙酸。 优选为对甲苯磺酸、 盐酸、 酒石酸或三氟乙酸。
具体地， 本发明包括如下所述结构的化合物及其盐:
Figure imgf000007_0001
-
Figure imgf000008_0001
Figure imgf000009_0001
Figure imgf000010_0001
进一步， 本发明涉及一种如下列通式 (ID)所示的化合物， 其作为本发明通式 (I) 化合物合成的中间体：
Figure imgf000010_0002
(I D)
其巾：
选自氢原子、烷基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、 -C(0)NR3R4 -C(0)R3 -C(0)OR3 , 其中烷基、 环烷基、 杂环烷基、 芳基或杂芳基进一步被一个或多个选 自烷基、 芳基、 羟基、 氨基、 烷氧基、 芳氧基或杂环烷基的取代基所取代；
R3和 分别选自氢原子、 烷基、 环烷基、 芳基、 杂芳基或杂环烷基， 其中烷 基、 环烷基、 芳基、 杂芳基或杂环烷基进一步被一个或多个选自烷基、 环烷基、 芳基、 杂芳基、 烷氧基、 环烷氧基、 芳氧基、 杂芳氧基、 卤素、 羟基、 氨基、 氰 基、 羟烷基、 杂环烷基、 杂环烷氧基、 三氟甲基、 羧酸或羧酸酯的取代基所取代; 同时 R3和 R4与 N原子一起形成 3〜8元的杂环基，其中 5〜8元杂环内进一步 含有一个或多个 N、 0或 S原子，并且 3〜8元杂环进一步被一个或多个选自烷基、 芳基、 杂芳基、 卤代烷基、 卤代烷氧基、 羟基、 氨基、 氰基、 烷氧基、 芳氧基、 羟烷基、 杂环烷基、 羧酸、 羧酸酯、 卤素或 -NR3R4的取代基所取代。 本发明涉及通式 （ID) 所示化合物的制备方法， 包括：
Figure imgf000011_0001
冰浴下，将原料叔丁基 -5-氧代-六氢-并环戊二烯吡咯 -2-羧酸酯在适宜的溶剂中 二氯甲烷)与三氟乙酸下反应得到六氢并环戊二烯吡咯 -5-酮三氟乙酸盐；
Figure imgf000011_0002
六氢并环戊二烯吡咯 -5-酮三氟乙酸盐在碱存在下与酰氯或酯类反应得到通式 (ID) 的化合物；
本发明涉及通式 （IB) 所示化合物的制备方法， 包括：
Figure imgf000011_0003
将所述的中间体 (ID)室温条件下在适宜的溶剂 (如甲醇、 乙醇)中与的不同胺、 取代的硼氢化钠， 在碱性条件下 (如三乙胺)反应得到通式 (IB)化合物。 本发明涉及通式 （IB) 所示化合物的制备方法， 包括:
Figure imgf000012_0001
将叔丁醇钾和甲基三苯基磷碘的甲苯溶液加热后， 在室温下将中间体 (ID)化合 物加入到上述溶液中反应， 得到氮杂双环烯基化合物；
Figure imgf000012_0002
氮杂双环烯基化合物在合适的溶剂中 (如二氯甲烷)， 在高氯酸银作用下室温下 与三甲基硅氰反应得到氮杂双环氰基化合物；
Figure imgf000012_0003
将氮杂双环氰基化合物在合适的溶剂中 (如乙醇)与适宜的酸 (如盐酸)在室温下 反应得到氮杂双环氨基化合物；
Figure imgf000012_0004
将氮杂双环氨基化合物在碱性溶剂 (如 N，N-二甲基甲酰胺)溶剂中与卤化物反 应得到通式 (IB)化合物。 本发明涉及通式 （IB) 所示化合物的制备方法， 包括:
Figure imgf000012_0005
D) 将中间体 (ID)化合物和对甲苯磺酰甲基异腈在适宜的溶剂中 (如乙二醇二甲醚) 发生异氰化反应得到氮杂双环氰基化合物；
Figure imgf000013_0001
氮杂双环氰基化合物在在适宜的溶剂中 (如四氢呋喃)， 在六甲基二硅基胺基锂 作用下与卤化物反应， 得到 R2取代的氮杂双环氰基化合物；
Figure imgf000013_0002
R2取代的氮杂双环氰基化合物在酸的作用下水解得到 R2取代的氮杂双环羧基 化合物；
或者 R2取代的氮杂双环氰基化合物在适宜的溶剂中 (如二氯甲烷)，在冰浴下与 还原剂 (DIBAL-H)反应， 先将氰基还原成醛基， 得到的醛在四氢呋喃 /水混合溶剂 中， 在冰浴下与磷酸二氢钠、 亚氯酸钠和 2-甲基 -2-丁烯反应， 得到 R2取代的氮杂 双环羧基化合物；
Figure imgf000013_0003
将 R2取代的氮杂双环羧基化合物在碱性条件下 (如三乙胺)及氯甲酸乙酯作用 发生叠氮化反应得到氮杂双环叠氮基化合物；
Figure imgf000013_0004
氮杂双环叠氮基化合物在适宜的溶剂中 (如甲苯)加热， 再在酸性溶液中搅拌， 并调节 pH为碱性， 得到 取代的氮杂双环氨基化合物；
Figure imgf000014_0001
将 R2取代的氮杂双环氨基化合物在碱性溶剂中 (如 N，N-二甲基甲酰胺)， 与卤 化物反应得到通式 (IB)化合物。 本发明涉及通式 （IC) 所示化合物的制备方法， 包括:
Figure imgf000014_0002
将中间体 (ID)在适宜的溶剂中 (如四氢呋喃)，冰浴下与还原剂 (如三叔丁基氧铝 锂氢）反应得到氮杂双环羟基化合物；
Figure imgf000014_0003
氮杂双环羟基化合物在适宜的溶剂中 (如二氯甲烷)， 冰浴下与碱性试剂（如三 乙胺）、 甲磺酰氯反应得到氮杂双环甲磺酸基化合物；
Figure imgf000014_0004
氮杂双环甲磺酸基化合物在碱性试剂中（如 N，N-二甲基甲酰胺溶剂）与邻苯二 甲酰亚胺钾盐加热反应得到邻苯二甲酰亚胺取代的氮杂双环化合物；
Figure imgf000015_0001
邻苯二甲酰亚胺取代的氮杂双环化合物在适宜的溶剂中 (如乙醇)， 与肼加热得 到氮杂双环氨基化合物；
Figure imgf000015_0002
氮杂双环氨基化合物在适宜的溶剂中 (如二氯甲烷)， 与卤化物加热， 反应得到 通式 (ic)化合物。 优选地， R为:
Figure imgf000015_0003
R5选自氢原子、烷基、环烷基、 芳基、 杂芳基或杂环烷基， 其中烷基、环烷基、 芳基、 杂芳基或杂环烷基进一步被一个或多个选自烷基、 环烷基、 芳基、 杂芳基、 烷氧基、 环烷氧基、 芳氧基、 杂芳氧基、 卤素、 羟基、 氨基、 烷氨基、 氰基、 羟 烷基、 杂环烷基、 杂环烷氧基、 羧酸或羧酸酯的取代基所取代；
和 R7各自分别选自烷基、 芳基、 杂芳基、 卤代烷基、 卤代烷氧基、 羟基、 氨基、 氰基、 块基、 烷氧基、 芳氧基、 羟烷基、 杂环烷基、 羧酸、 羧酸酯或卤素；
W为碳、 硫或氧原子， 当 W为碳时， 可以进一步被 ^或^所取代。
进一步，本发明还包括将得到的通式 (IB)或 (IC)化合物经纯化后在酸的甲醇、二 氯甲烷或乙酸乙酯溶液中反应， 得到其酸加成产物盐。 进一步， 本发明涉及一种药物组合物， 其含有治疗有效剂量的本发明化合物 或其药学上可接受的盐， 和药学上可接受的载体。 进一步，本发明还涉及本发明化合物化合物或其药学上可接受的盐在制备二肽 基肽酶 (DPPIV)抑制剂药物中的用途。 在本发明通式 所表述的化合物或其盐中，通式 以游离态或者以酸加成盐的 形式存在， 并提供医药上允许的 (非毒性的， 生理允许的)盐； 所述的医药上允许的 盐包括盐酸盐、 对甲苯磺酸盐、 酒石酸盐、 马来酸盐、 乳酸盐、 甲磺酸盐、 硫酸 盐、 磷酸盐、 柠檬酸盐、 乙酸盐或三氟乙酸盐。 优选为对甲苯磺酸盐、 盐酸盐、 酒石酸盐及三氟乙酸盐。 发明的详细说明
除非有相反陈述， 下列用在说明书和权利要求书中的术语具有下述含义。
"烷基"指饱和的脂族烃基团， 包括 1至 20个碳原子的直链和支链基团。 优 选含有 1至 10个碳原子的中等大小烷基， 例如甲基、 乙基、 丙基、 2-丙基、 正丁 基、 异丁基、 叔丁基、 戊基登。 更优选的是含有 1至 4个碳原子的低级烷基， 例 如甲基、 乙基、 丙基、 2-丙基、 正丁基、 异丁基或叔丁基等。 烷基可以取代的或未 取代的， 当被取代时， 优选的基团为卤素、 羟基、 低级烷氧基、 芳基、 芳氧基、 杂芳基、 杂环烷基、 C(0)R3和 C(0)NR3R4。
"环烷基"指 3至 8元全碳单环、全碳 5元 /6元或 6元 /6元稠合环或多环稠合 环（ "稠合"环系意味着系统中的每个环与体系中的其他环共享毗邻的一对碳原子) 基团， 其中一个或多个环可以含有一个或多个双键， 单没有一个环具有完全共轭 的 π 电子系统。 环烷基的实例有环丙基、 环丁基、 环戊基、 环戊烯、 环己烷、 环 己二烯、 金刚烷、 环庚烷、 环庚三烯等。 环烷基可以是取代或未取代的。 当被取 代时， 取代基优选为一个或多个取代基， 独立地选自由低级烷基、 三卤烷基、 卤 素、 羟基、 低级烷氧基、 芳基 (可选自被一个或多个基团取代， 取代基是彼此独立 地是卤素、羟基、低级烷基或低级烷氧基)、芳氧基 (可选自被一个或多个基团取代， 取代基彼此独立地是卤素、 羟基、 低级烷基或低级烷氧基)、 6元杂芳基 (环中具有 1至 3个氮原子， 环中的碳可选地被一个或多个基团取代， 取代基彼此独立地是卤 素、 羟基、 低级烷基或低级烷氧基)、 5元杂芳基 (具有 1至 3个选自氮、 氧和硫的 杂原子， 该基团的碳和氮原子可选地被一个或多个基团取代， 取代基彼此独立地 是卤素、 羟基、 低级烷基或低级烷氧基)、 或 5或 6元杂环烷基 (具有 1至 3个选自 氮、 氧和硫地杂原子， 该基团地碳和氮原子 (如果有的话)， 可选地被一个或多个基 团取代， 取代基彼此独立地是卤素、 羟基、 低级烷基或低级烷氧基)、 巯基、 （低级 烷基)硫基、 芳硫基 (可选地被一个或多个基团取代， 取代基彼此独立地是卤素、 羟 基、 低级烷基或低级烷氧基)、 氰基。 酰基、 硫代酰基、 0-氨基甲酰基、 Ν-氨基甲 酰基、 0-硫代氨基甲酰基、 Ν-硫代氨基甲酰基、 C-酰氨基、 Ν-酰氨基、 硝基、 Ν- 磺酰氨基、 S-磺酰氨基、 C(0)R3、 C(0)NR3R4和 -C(0)OR3。
"烯基"指由至少两个碳原子和至少一个碳-碳双键组成的如上述定义的烷基。 代表性实例包括但不限于乙烯基、 1-丙烯基、 2-丙烯基、 1-， 2-或 3-丁烯基等。 "块基"指至少两个碳原子和至少一个碳-碳三键组成的如上所定义的烷基。 代表性实例包括但不限于乙块基、 1-丙块基、 2-丙块基、 1-， 2-或 3-丁块基等。
"芳基"指具有至少一个芳环结构的基团， 即具有共轭的 π电子体系的芳环， 包括碳环芳基、 杂芳即和联芳基。 所述的芳基可以由一个或多个选自以下的取代 机任选取代： 卤素、 三卤甲基、 羟基、 SR、 硝基、 氰基、 烷氧基和烷基。
"杂芳基"指具有 1至 3个杂原子作为环原子， 其余的环原子为碳的芳基， 杂 原子包括氧、 硫和氮。 所述环可以是 5元或 6元环。 杂环芳基基团的实例包括呋 喃基、 噻吩基、 吡啶基、 吡咯、 N-烷基吡咯基、 嘧啶基、 吡嗪基、 咪唑基等。
"杂环烷基"指单环或稠环基团， 在环中， 具有 5至 9个环原子， 其中一个或 两个环原子选自氮、 氧或 S(0)n (其中 n是整数 0至 2)的杂原子， 其余环原子为碳。 这些环还可以具有一个或多个双键、 不过， 这些环不具有完全共轭的 π电子系统。 未取代的杂环烷基包括但不限于吡咯烷基、 哌啶子基、 哌嗪子基、 吗啉基、 硫代 吗啉基、 高哌嗪其等、 杂环烷基可以是取代的或未取代的。 当被取代时， 取代基 优选为一个或多个， 更优选一个、 两个或三个， 进而更优选一个或两个， 独立地 选自由低级烷基、 三卤烷基、 卤素、 羟基、 低级烷氧基、 氰基和酰基组成的组。 优选地， 杂芳基可选自被一个或两个取代基取代， 取代基独立地选自卤素、 低级 烷基、 三卤烷基、 羟基、 巯基、 氰基、 Ν-酰氨基或羧基。
"羟基"指 -ΟΗ基团。
"烷氧基"指 -0-(浣基)和 -0-(未取代地环烷基)。 代表性实例包括但不限于甲 氧基、 乙氧基、 丙氧基、 丁氧基、 环丙氧基、 环丁氧基、 环戊氧基、 环己氧基等。
"卤代烷氧基 "指 -0- (卤代烷基)。代表性实例包括但不限于三氟甲氧基、三溴 甲氧基等。
"芳氧基"指 -0-芳基和 -0-杂芳基， 芳基和杂芳基定义同上。代表性实例包括 但不限于苯氧基、 吡啶氧基、 呋喃氧基、 噻吩氧基、 嘧啶氧基、 吡嗪氧基等及其 衍生物。
"巯基"指 -SH基团。
"烷硫基"指 -0-(浣基)和 -0-(未取代的环烷基)。代表性实例包括但不限于甲硫 基、 乙硫基、 丙硫基、 丁硫基、 环丙硫基、 环丁硫基、 环戊硫基、 环己硫基等。
"芳硫基"指 -S-芳基和 -S-杂芳基， 芳基和杂芳基定义同上。 代表性实例包括 但不限于苯硫基、 吡啶硫基、 呋喃硫基、 噻吩硫基、 嘧啶硫基等及其衍生物、
"酰基"指 -C(0)-R"基团， 其中 R"选自由氢、 低级烷基、 三卤甲基、 未取代 的环烷基、 芳基 (可选地被一个或多个， 优选一个、 两个或三个取代基， 取代基选 自由低级烷基、 三卤甲基、 低级烷氧基和卤素组成的组)、 杂芳基 (通过环碳键合 的) (可选地被一个或多个，优选一个、两个或三个取代基，取代基选自由低级烷基、 三卤甲基、 低级烷氧基和卤素组成的组)和杂脂环基 (通过环碳键合的 X可选地被一 个或多个， 优选一个、 两个或三个取代基取代， 取代基选自由低级烷基、 三卤甲 基、低级烷氧基和卤素组成的组)。代表性酰基包括但不限于乙酰基、三氟乙酰基、 苯甲酰基等。
"硫代酰基"指 -C(S)-R"基团， 其中 R"的定义同上。
"乙酰基"指 -C(0)CH3基团。
"卤素"指氟、 氯、 溴或碘， 优选氟或氯。
"三氟甲基"指 -CF3。
"氰基"指 -CN。
"氨基"指 -NH2。
"羧酸"指 -COOH。
"羧酸酯"指 -COOR, 其中 R为烷基或环烷基。
"羟烷基"指 -(CH2)rNH2， 其中 1"是 1〜4。
"可选"或 "可选地"意味着随后所描述地事件或环境可以但不必发生， 该 说明包括该事件或环境发生或不发生地场合。 例如， "可选被烷基取代地杂环基 团"意味着烷基可以但不必存在， 该说明包括杂环基团被烷基取代的情形和杂环 基团不被烷基取代的情形。
"药物组合物"表示一种或多种本文所述化合物或其生理学上 /药学上可接受 的盐或前体药物与其他化学组分的混合物， 其他组分例如生理学 /药学上可接受的 载体和赋形剂。 药物组合物的目的是促进化合物对生物体的给药。 本发明化合物的合成方法
为了完成本发明的目的， 本发明采用如下技术方案： 合成方案 I
Figure imgf000018_0001
冰浴下， 叔丁基 -5-氧代-六氢-并环戊二烯吡咯 -2-羧酸酯在适宜的溶剂中 (如二 氯甲烷)中与三氟乙酸下反应得到六氢并环戊二烯吡咯 -5-酮三氟乙酸盐； 六氢并环 戊二烯吡咯 -5-酮三氟乙酸盐在碱存在下与酰氯或酯类反应得到通式 (ID)的化合物; 将所述的中间体 (ID)室温条件下在适宜的溶剂 (如甲醇、 乙醇)中与的不同胺、 取代 的硼氢化钠， 在碱性条件下 (如三乙胺)反应得到通式 (IB)化合物。 合成方案 Π
Figure imgf000019_0001
将叔丁醇钾和甲基三苯基磷碘的甲苯溶液加热后， 在室温下将中间体 (ID)化合 物加入到上述溶液中反应， 得到氮杂双环烯基化合物； 氮杂双环烯基化合物在适 宜的溶剂中 (如二氯甲烷)，在高氯酸银作用下室温下与三甲基硅氰反应得到氮杂双 环氰基化合物； 将氮杂双环氰基化合物在合适的溶剂中 (如乙醇)与适宜的酸 (如盐 酸)在室温下反应得到氮杂双环氨基化合物；将氮杂双环氨基化合物在碱性溶剂 (如 N，N-二甲基甲酰胺)溶剂中与卤化物反应得到通式 (IB)化合物。 合成方案 ΠΙ
Figure imgf000019_0002
将中间体 (ID)化合物和对甲苯磺酰甲基异腈在适宜的溶剂中 (如乙二醇二甲醚) 发生异氰化反应得到氮杂双环氰基化合物； 氮杂双环氰基化合物在在适宜的溶剂 中 (如四氢呋喃)， 在六甲基二硅基胺基锂作用下与卤化物反应， 得到 R2取代的氮 杂双环氰基化合物； R2取代的氮杂双环氰基化合物在酸的作用下水解得到 R2取 代的氮杂双环羧基化合物，或者 R2取代的氮杂双环氰基化合物在适宜的溶剂中 (如 二氯甲烷)， 在冰浴下与还原剂 (DIBAL-H)反应， 先将氰基还原成醛基， 得到的酸 在四氢呋喃 /水混合溶剂中， 在冰浴下与磷酸二氢钠、 亚氯酸钠和 2-甲基 -2-丁烯反 应，得到 R2取代的氮杂双环羧基化合物； 将 R2取代的氮杂双环羧基化合物在碱性 条件下 (如三乙胺)及氯甲酸乙酯作用下发生叠氮化反应得到氮杂双环叠氮基化合 物； 氮杂双环叠氮基化合物在适宜的溶剂中 (如甲苯)加热， 再在酸性溶液中搅拌， 并调节 pH为碱性， 得到 R2取代的氮杂双环氨基化合物； 将 R2取代的氮杂双环氨 基化合物在碱性溶剂中 (如 N，N-二甲基甲酰胺)， 与卤化物反应得到通式 (IB)化合 物。
Figure imgf000020_0001
将中间体 (ID)在适宜的溶剂中 (如四氢呋喃)，冰浴下与还原剂（如三叔丁基氧 锂氢）反应得到氮杂双环羟基化合物；氮杂双环羟基化合物在适宜的溶剂中 (如二氯 甲烷)， 冰浴下与碱性试剂（如三乙胺）、 甲磺酰氯反应得到氮杂双环甲磺酸基化合 物； 氮杂双环甲磺酸基化合物在碱性试剂中（如 N，N-二甲基甲酰胺溶剂)与邻苯二 甲酰亚胺钾盐加热反应得到邻苯二甲酰亚胺取代的氮杂双环化合物； 邻苯二甲酰 亚胺取代的氮杂双环化合物在适宜的溶剂中 (如乙醇)，与肼加热得到氮杂双环氨基 化合物； 氮杂双环氨基化合物在适宜的溶剂中 (如二氯甲烷)， 与卤化物加热， 反应 得到通式 (IC)化合物。
进一步， 通式 (IB)或 (IC)化合物经纯化后在酸的甲醇、 二氯甲烷或乙酸乙酯溶 液中反应， 得到其酸加成产物盐。
本发明涉及一种药物组合物， 其含有治疗有效剂量的化合物或其盐和药学载 体， 或者本发明通式化合物或其盐在制备二肽基肽酶抑制剂药物中的用途。 换言 之， 本发明还提供含有药物有效剂量的上述化合物的组合物， 以及所述的化合物 在制备二肽基肽酶抑制剂中的用途。 具体实施方式
以下结合实施例用于进一步描述本发明， 但这些实施例并非限制着本发明的
实施例 化合物的结构是通过核磁共振 (1H NMR)或质谱 (MS)来确定的。 1H NMR位移
(δ)以百万分之一 (； ppm)的单位给出。 NMR的测定是用 Bruker AVANCE-400核磁仪， 测定溶剂为氘代氯仿 (CDC13)、 氘代二甲基亚砜 (DMSO-D6)、 氘代甲醇 (CD3OD)， 内标为四甲基硅烷 (TMS)， 化学位移是以 10—6(ppmM乍为单位给出。
MS的测定用 FINMGAN LCQAd (ESI)质谱仪。
激酶平均抑制率及 IC5Q值的测定用 NovoStar酶标仪 (德国 BMG公司） 薄层硅胶使用烟台黄海 HSGF254或青岛 GF254硅胶板
柱层析一般使用烟台黄海硅胶 200〜300目硅胶为载体。 DMSO-D6: 氘代二甲基亚砜;
CDC13: 氘代氯仿；
CD3OD: 氘代甲醇；
实施例 1
5-(2-(SM2-氰基吡咯 -1-基) -2-氧代乙氨基) -N，N-二甲基-六氢并环戊二烯吡咯 -2 酰胺盐酸盐
Figure imgf000021_0001
第一步
[2-(2-氨基甲酰-吡咯烷 -1-基) -2-氧代-乙基] -氨基甲酸叔丁酯 lb的制备 将 N-叔丁氧基羰基-甘氨酸 la g， 28.56 mmol)和 L-脯氨酰胺 (3.25 g， 28.50 mmol)溶于 75 mL N，N-二甲基甲酰胺中， 冷却到 0°C， 搅拌下加入 1-羟基苯并三唑 (11.8 g, 87.3 mmol), N-乙基 -Ν'- (二甲氨基丙基) -碳二亚胺 (11.3 g， 59 mmol), 三 乙胺 (12.1 mL， 87.3 mmol), 自然升至室温， 搅拌过夜， 次日薄层色谱跟踪反应至 原料完全消失后， 低于 50°C蒸去 N，N-二甲基甲酰胺， 用乙酸乙酯萃取反应液 (200 mLx3), 合并有机相， 用 50 mL饱和氯化钠溶液洗涤， 有机相用无水硫酸钠干燥， 过滤， 滤液减压浓縮， 残留物用乙酸乙酯重结晶， 得到标题产物 [2-(2-氨基甲酰- 吡咯烷 -1-基) -2-氧代-乙基] -氨基甲酸叔丁酯 lb(7.42 g， 白色粉末)， 产率 95.8 %。 MS m/z (ESI): 272.1(M+1)。
第二步
[2-(2-氰基-吡咯烷 -1-基) -2-氧代-乙基] -氨基甲酸叔丁酯 lc的制备 氮气氛下， 在一个干燥的三口瓶中依次加入 286 mL吡啶， [2-(2-氨基甲酰 -B比咯 烷 -1-基) -2-氧代-乙基] -氨基甲酸叔丁酯 lb(13.5 g， 49.8 mmol), 咪唑 (7.11 g， 104.6 mmol), 反应体系冷却到 -35°C， 搅拌下滴加三氯氧磷 (；19 mL， 204.2 mmol), 并在 该温度下继续反应 1小时， 随后自然升至室温， 反应 0.5小时后， 低温蒸干吡啶， 乙酸乙酯稀释， 加水， 用乙酸乙酯萃取反应液 (200 mIX3)， 合并有机相， 用 50 mL 饱和氯化钠溶液洗涤， 有机相用无水硫酸钠干燥， 过滤， 滤液减压浓縮， 用硅胶 柱色谱法纯化所得残余物， 得标题产物 [2-(2-氰基-吡咯烷 -1-基) -2-氧代-乙基] -氨基 甲酸叔丁酯 lc(10.7 g， 白色粉末)， 产率 84.9%。
MS m/z (ESI): 254.3(M+l
第三步
l-(2-氨基乙酰基) -2-氰基-吡咯烷盐酸盐 Id的制备
将 [2-(2-氰基 -B比咯烷 -1-基) -2-氧代-乙基] -氨基甲酸叔丁酯 lc(13.7g， 54.2 mmol) 搅拌下溶解于 140 mL乙醚和 40 mL水中， 冰浴下滴加 37%的盐酸溶液 (90 mL), 冰浴下反应 1小时， 蒸干溶剂， 乙醚分散离心， 得到标题产物 1-(2-氨基乙酰基) -2- 氰基-吡咯烷盐酸盐 ld(10 g， 白色粉末)， 产率 98 %。
MS m/z (ESI): 154.4(M+l
第四步
六氢并环戊二烯吡咯 -5-酮三氟乙酸盐 If的制备
将叔丁基 -5-氧代-六氢-并环戊二烯吡咯 -2-羧酸酯 le(0.32 g， 1.42 mmol)搅拌下 溶解于 10 mL二氯甲烷中， 冰浴下加入三氟乙酸 (3.27 mL, 42.7 mmol), 0°C下反 应 30 分钟， 减压蒸干溶剂得到标题产物六氢并环戊二烯吡咯 -5-酮三氟乙酸盐 If 的粗产品， 直接用于下一步。
MS m/z (ESI): 126.4(M+l
第五步
N，N-二甲基 -5-氧代-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸酯 lg的制备 将上一步六氢并环戊二烯吡咯 -5-酮三氟乙酸盐 If 的粗产品搅拌下溶解于 15 mL乙腈中， 冰浴冷却下加入碳酸钾 (0.24 g， 1.71 mmol), 再滴加 N，N-二甲基氨甲 酰氯 (0.14 mL， 1.56 mmol), 室温下反应 2小时， 蒸掉溶剂， 加入 50 mL水， 用乙 酸乙酯 (50 mLx3)萃取， 合并有机相， 用 50 mL饱和氯化钠溶液洗涤， 乙酸乙酯相 用无水硫酸镁干燥， 过滤， 滤液减压浓縮， 用硅胶柱色谱法纯化所得残余物， 得 到标题产物 N，N-二甲基 -5-氧代-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸酯 lg(0.19 g， 浅黄色 油状物)， 产率 68.3 %。
MS m/z (ESI): 197.4(M+l
1H NMR (DMSO-D6, 400MHz) 3.56(m, 2H), 2.85(m, 2H), 2.7(s, 6H)， 2.81(m, 2H), 2.5(m, 2H), 2.0 l(m, 2H)。 第六步
顺 -5-(2-(2-氰基吡咯 -1-基) -2-氧代乙氨基) -N，N-二甲基-六氢并环戊二烯吡咯 -2- 酰胺 lh的制备
将 1-(2-氨基乙酰基) -2-氰基 -B比咯烷盐酸盐 ld(0.36 g， 1.91 mmol)搅拌下溶解于 20 mL甲醇，加入 N，N-二甲基 -5-氧代-六氢-并环戊二烯吡咯 -2-酰胺 .25 g， 1.28 mmol)及三乙酰氧基硼氢化钠 (1.22 g， 5.74 mmol), 室温反应 3小时， 反应液浓縮， 加用 20 mL饱和碳酸钠溶液， 然后用二氯甲烷 (20 mLx lO)萃取反应液， 合并有机 相， 用 10 mL饱和氯化钠溶液洗涤， 二氯甲烷层用无水硫酸钠干燥， 过滤， 滤液 减压浓縮， 用硅胶柱色谱法纯化得到残余物， 得到标题产物顺 -5-(2-(2-氰基吡咯 -1- 基) -2-氧代乙氨基) -N，N-二甲基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-酰胺 lh (0.3 g， 白色粉末)， 产率 53 %。
MS m/z (ESI): 334.5(M+l
第七步
顺 -5-(2-(2-氰基吡咯 -1-基) -2-氧代乙氨基) -N，N-二甲基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-酰胺 盐酸盐 1的制备
将顺 -5-(2-(2-氰基吡咯 -1-基) -2-氧代乙氨基) -N，N-二甲基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-酰胺 lh(200 mg， 0.687 mmol)分散于 10 mL二氯甲烷中， 冰浴下加入 2 mL 0.5N 的盐酸乙醚溶液，蒸干溶剂，加入 10 mL乙醚，沉淀物离心，得标题产物顺 -5-(2-(2- 氰基吡咯 -1-基) -2-氧代乙氨基) -N，N-二甲基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-酰胺盐酸盐 1(180 mg, 白色粉末)， 产率 80%。
1H NMR (CD3OD, 400MHz) 4.82(dd, 1H， J尸 4Hz， J2=5.2Hz), 4.02 (dd， 2H, Ji=J2=16.4Hz), 3.62-3.25(m, 7H), 2.76(s, 6H)， 2.51-1.49(m, 10H)。 实施例 2
顺 -甲基 -5-(2-(S (2-氰基吡咯 -1-基) -2-氧代乙氨基) -六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸酯 盐酸盐
Figure imgf000023_0001
Figure imgf000024_0001
第一步
甲基 5-氧代-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸酯 2a的制备 将六氢并环戊二烯吡咯 -5-酮三氟乙酸盐 lf(0.559 g， 2.34 mmol)搅拌下溶解于 20 mL乙腈中， 冰水浴下依次加入碳酸钾 (0.646 g， 4.68 mmol)和氯甲酸甲酯 (0.22 mL, 2.8 mmol), 自然升温， 室温反应过夜， 减压蒸干溶剂， 加入 50 mL水， 用乙 酸乙酯 (50 mLx3)萃取， 合并有机相， 依次用 50 mL饱和氯化钠溶液和 50 mL水洗 涤， 乙酸乙酯相用无水硫酸镁干燥过夜， 过滤， 滤液减压浓縮， 用硅胶柱色谱法 纯化所得残余物，得到标题产物甲基 5-氧代-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸酯 2a(0.25 g， 无色油状物)， 产率 58.4 %。
MS m/z (ESI): 184(M+l
第二步
顺 -甲基 -5-(2-(2-氰基吡咯小基 )-2-氧代乙氨基) -六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸酯 2b 的制备
将 1-(2-氨基乙酰基) -2-氰基 -B比咯烷盐酸盐 ld(0.43 g， 2.29 mmol)搅拌下溶解于
20 mL甲醇中， 加入甲基 5-氧代-六氢-并环戊二烯吡咯 -2-羧酸酯 2a(0.28 g， 1.53 mmol)及三乙酰氧基硼氢化钠 (1.46 g， 6.88 mmol), 室温反应 3小时， 反应液浓縮， 加用 20 mL饱和碳酸钠溶液，然后用二氯甲烷 (20 mLx3)萃取反应液，合并有机相， 用 10 mL饱和氯化钠溶液洗涤， 二氯甲烷层用无水硫酸钠干燥， 过滤， 滤液减压 浓縮， 用硅胶柱色谱法纯化得到的产品顺 -甲基 -5-(2-(2-氰基吡咯 -1-基) -2-氧代乙氨 基) -六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸酯 2b(0.22 g， 白色粉末)， 产率 41 %。
MS m/z (ESI): 357(M+l
第三步
顺 -甲基 -5-(2-(2-氰基吡咯小基 )-2-氧代乙氨基) -六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸酯盐酸 盐 的制备
将顺 -甲基 -5-(2-(2-氰基吡咯 -1-基) -2-氧代乙氨基) -六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 酯 2b分散于 10 mL乙醚中，冰浴下加入 2 mL 0.5 N的盐酸乙醚溶液，沉淀物离心， 得标题产物顺 -甲基 -5-(2-((S)-2-氰基吡咯 -1-基 2-氧代乙氨基) -六氢并环戊二烯吡 咯 -2-羧酸酯盐酸盐 2(200 mg， 白色粉末)。
1H NMR (CD3OD, 400ΜΗζ) 4.7 l(m, 1H), 3.93(m, 2H), 3.59-3.28(m, 10H), 2.64(m,
2H), 2.34(m, 2H), 2.17(m, 2H), 2.08(m, 2H)。 实施例 3
-l-(2-(2-(2-羟基乙酰基) -八氢并环戊二烯吡咯 -5-基氨基)乙酰基 )-2-氰基-吡咯烷 盐酸盐
Figure imgf000025_0001
第一步
2-(2-羟基乙酰基) -六氢并环戊二烯吡咯 -2-酮 3a的制备 将六氢并环戊二烯吡咯 -5-酮三氟乙酸盐 lf(764.8 mg， 3.2 mmol)和 2-羟基乙酸 (267.5 mg， 3.52 mmol)搅拌下溶解于 10 mL乙腈中， 冰水浴下加入羟基乙酸 (1.3 g， 9.6 mmol)和 1-乙基 -3-二甲氨丙基-碳二亚胺盐酸盐 (1.23 g， 6.4 mmol)和三乙胺 (1.3 mL, 9.6 mmol), 撤掉冰水浴， 在 25 °C下反应过夜， 蒸干溶剂， 加入 20 mL乙酸 乙酯， 抽滤， 用 20 mL水洗涤滤液， 乙酸乙酯层用无水硫酸镁干燥， 抽滤， 滤液 减压浓縮，用硅胶柱色谱法纯化得到残余物，得到标题产物 2-(2-羟基乙酰基) -六氢 并环戊二烯吡咯 -2-酮 3aC0.375 g， 无色油状物)， 产率 64 %。
MS m/z (ESI): 184(M+l) o
第二步
顺 -l-(2-(2-(2-羟基乙酰基) -八氢并环戊二烯吡咯 -5-基氨基)乙酰基 )-2-氰基-吡咯烷
3b的制备
将 2-(2-羟基乙酰基) -六氢并环戊二烯吡咯 -2-酮 3a(0.375 g， 2.05 mmol)和 1-(2- 氨基乙酰基) -2-氰基-吡咯烷盐酸盐 ld(0.78 g， 4.1 mmol)搅拌下溶解于 10 mL四氢 呋喃和 5 mL甲醇中， 室温下反应 0.5小时后， 加入三乙酰氧基硼氢化钠 (0.87 g， 4.1 mmol), 室温反应过夜，减压浓縮反应液，加 50 mL甲醇和碳酸钾 (2 g， 7 mmol) 搅拌 0.5 小时， 减压抽滤， 滤液减压浓縮， 用硅胶柱色谱法纯化得到产品顺 -1-(2-(2-(2-羟基乙酰基) -八氢并环戊二烯吡咯 -5-基氨基)乙酰基 )-2-氰基-吡咯烷 3， 直接用于下一步反应。 MS m/z (ESI): 357(M+l
第三步
顺 -l-(2-(2-(2-羟基乙酰基) -八氢并环戊二烯吡咯 -5-基氨基)乙酰基 )-2-氰基-吡咯烷 第 盐酸盐 3的制备
将顺 -1-(2步- 羟基乙酰基) -八氢并环戊二烯吡咯 -5-基氨基)乙酰基 )-2-氰基-吡 咯烷 3b分散于 10 mL乙醚中， 冰浴下加入 2 mL 0.5 N的盐酸乙醚溶液， 沉淀物离 心， 得到标题产物顺 -1-(2-(2-(2-羟基乙酰基) -八氢并环戊二烯吡咯 -5-基氨基)乙酰 基) -2-氰基-吡咯烷盐酸盐 3(100 mg， 白色粉末)。 实施例 4
顺 -1 2 2 哌啶 -1-羰基) -八氢并环戊二烯吡咯 -5-基氨基)乙酰基 )-2-氰基-吡咯烷盐 酸盐
Figure imgf000026_0001
第一步
2- (哌啶 -1-羰基) -六氢并环戊二烯吡咯 -5-酮 4a的制备 将六氢并环戊二烯吡咯 -5-酮三氟乙酸盐 lf(478 mg， 2 mmol)搅拌下溶解于 20 mL二氯甲烷中， 加入碘代 [3-(1-哌啶甲酰基)咪唑小甲基盐 ](0.96 g， 3 mmol)和三 乙胺 (0.84 mL， 6 mmol), 室温下反应过夜， 加入 20 mL水淬灭反应， 用二氯甲浣 (50 mLx3)萃取， 合并有机相， 依次用 50 mL 10 %柠檬酸溶液和 50 mL饱和氯化钠 溶液洗涤， 二氯甲烷相用无水硫酸镁干燥， 抽滤， 滤液减压浓縮， 用硅胶柱色谱 法纯化得到残余物， 得到标题产物 2- (哌啶 -1-羰基) -六氢并环戊二烯吡咯 -5-酮 4a(0.41 g, 无色油状物)， 产率 87 %。
MS m/z (ESI): 237(M+l
第二步
顺小(2-(2 哌啶 -1-羰基) -八氢并环戊二烯吡咯 -5-基氨基)乙酰基 )-2-氰基-吡咯烷 4b 的制备 将 2- (；哌啶 -1-羰基) -六氢并环戊二烯吡咯 -5-酮 4aC0.41 g， 1.74 mmol)和 1-( 氨 基乙酰基) -2-氰基-吡咯烷盐酸盐 ld(0.5 g， 2.6 mmol)溶解于 50 mL四氢呋喃中， 力口 入 5 g硫酸钠和 0.05 mL乙酸， 室温下反应 0.5小时后， 加入三乙酰氧基硼氢化钠 (1.1 g， 5.2 mmol), 室温反应 3小时后， 减压浓縮反应液， 加入 50 mL饱和碳酸钠 溶液， 用乙酸乙酯 (50 mLx3)萃取， 合并有机相， 依次用 50 mL饱和氯化钠溶液和 50 mL水洗涤， 乙酸乙酯层用无水硫酸镁干燥， 抽滤， 滤液减压浓縮， 用硅胶柱色 谱法纯化得到标题产物顺 -1-(2-(2- (哌啶 -1-羰基) -八氢并环戊二烯吡咯 -5-基氨基)乙 酰基) -2-氰基-吡咯烷 4b， 直接用于下一步反应。
MS m/z (ESI): 410(M+l) o
第三步
顺 -1 2 2 哌啶 -1-羰基) -八氢并环戊二烯吡咯 -5-基氨基)乙酰基 )-2-氰基-吡咯烷盐 酸盐 4的制备
将顺 -1-(2-(2- (哌啶 -1-羰基) -八氢并环戊二烯吡咯 -5-基氨基)乙酰基 )-2-氰基-吡 咯烷 4b分散于 10 mL乙醚中， 冰浴下加入 2 mL 0.5 N的盐酸乙醚溶液， 沉淀物离 心， 得到标题产物顺 -1-(2-(2- (哌啶 -1-羰基) -八氢并环戊二烯吡咯 -5-基氨基)乙酰 基 )-2-氰基-吡咯烷盐酸盐 4(0.16 g， 白色粉末)。
1H NMR (CD3OD, 400MHz) δ 4.83(dd, 1H， Ji=3.0Hz, J2=5.8Hz), 4.09 (dd， 2H, Ji=J2=13.1Hz), 3.70-3.30(m, 10H), 2.72(m, 2H), 2.47(m, 2H), 2.31-2.00(m, 5H)， 1.66-1.52(m, 8H)。 实施例 5
顺 -l-(2-(2-乙酰基-八氢并环戊二烯吡咯 -5-基氨基)乙酰基 )-2-氰基 -吡咯烷酸盐
Figure imgf000027_0001
2-乙酰基-六氢并环戊二烯吡咯 -5-酮 5a的制备 将六氢并环戊二烯吡咯 -5-酮三氟乙酸盐 lf(717 mg， 3 mmol)搅拌下溶解于乙腈 (20 mL)中， 冰水浴下加入二碳酸二叔丁酯 (0.42 mL， 4.5 mmol)和三乙胺 (0.98 mL， 9 mmol),冰水浴下反应过夜，蒸干溶剂，加入 50 mL水，用乙酸乙酯萃取 (50 mLx3), 合并有机相， 用 50 mL饱和氯化钠溶液洗涤， 用无水硫酸镁干燥， 抽滤， 滤液减 压浓縮， 用硅胶柱谱法纯化得到残余物， 得到标题产物 2-乙酰基-六氢并环戊二烯 吡咯 -5-酮 5a(0.36 g， 无色油状物)， 产率 72 %。
MS m/z (ESI): 168.4(M+1)。
第二步
顺 -l-(2-(2-乙酰基-八氢并环戊二烯吡咯 -5-基氨基)乙酰基 )-2-氰基-吡咯烷 5b的制 备
将 2-乙酰基-六氢并环戊二烯吡咯 -5-酮 5a(0.36 g， 2.15 mmol)和 1-(2-氨基乙酰 基) -2-氰基-吡咯烷盐酸盐 ld(0.614 g， 3.23 mmol)溶解于 50 mL四氢呋喃中， 加入 5 g硫酸钠和 0.05 mL乙酸，室温下反应 0.5小时后，加入三乙酰氧基硼氢化钠 (1.37 g， 6.46 mmol), 室温反应 3小时后， 减压浓縮反应液， 加入 50 mL饱和碳酸钠溶 液， 用乙酸乙酯 (50 mIX3)萃取， 合并有机相， 依次用 50 mL饱和氯化钠溶液和 50 mL水洗涤， 乙酸乙酯层用无水硫酸镁干燥， 抽滤， 滤液减压浓縮， 用硅胶柱色谱 法纯化得到标题产物顺 -1-(2-(2-乙酰基-八氢并环戊二烯吡咯 -5-基氨基)乙酰基 )-2- 氰基-吡咯烷 5b， 直接用于下一步反应。
MS m/z (ESI): 305.5(M+l)o
第三步
顺 -l-(2-(2-乙酰基-八氢并环戊二烯吡咯 -5-基氨基)乙酰基 )-2-氰基-吡咯烷盐酸盐 5 的制备
将上一步所得顺 -1-(2-(2-乙酰基-八氢并环戊二烯吡咯 -5-基氨基)乙酰基 )-2-氰 基-吡咯烷 5b分散于 20 mL乙醚中， 冰浴下加入 4 mL 0.5 N的盐酸乙醚溶液， 沉 淀物离心， 得到标题产物顺 -1-(2-(2-乙酰基-八氢并环戊二烯吡咯 -5-基氨基)乙酰 基) -2-氰基 -吡咯烷酸盐 5(0.23 g， 白色粉末)。
1H NMR (CD3OD， 400MHz) δ 4.7 l(m, 1H), 3.92(m, 2H), 3.69-3.37(m, 7H), 2.69(m, 2H), 2.33(m, 2H), 2.13(m, 2H), 2.04-2.00(m, 5H)， 1.48(m, 2H)。 实施例 6
顺 -5-[2-(2-氰基吡咯烷 -1-基) -2-氧代-乙氨基]六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸异丙胺盐 酸盐
Figure imgf000029_0001
第一步
N-异丙基 -5-氧代-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸酯 6a的制备 将六氢并环戊二烯吡咯 -5-酮三氟乙酸盐 lf(717 mg， 3 mmol)搅拌下溶解于 20 mL二氯甲烷，冰水浴下加入异氰酸酯 (9 mL， 9 mmol)和三乙胺 (1.7 mL， 12 mmol) 室温反应过夜， 加 50 mL水， 用二氯甲烷 (50 mLx3)萃取， 合并有机相， 依次用 50 mL 10 %柠檬酸溶液和 50 mL饱和氯化钠溶液洗涤， 二氯甲烷相用无水硫酸镁干 燥， 抽滤， 滤液减压浓縮， 用硅胶柱色谱法纯化得到残余物， 得到标题产物 N-异 丙基 -5-氧代-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸酯 6a(0.3 g， 无色油状物)， 产率 47.6 % MS m/z (ESI): 211(M+l
第二步
顺 -5-[2-(2-氰基吡咯烷 -1-基) -2-氧代-乙氨基]六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸异丙胺 6b 的制备
将 N-异丙基 -5-氧代-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸酯 6a(0.3 g， 1.43 mmol)和
(S)-l-(2-氨基乙酰基) -2-氰基 -B比咯烷盐酸盐 ld(0.407 g， 2.14 mmol)溶解于 50 mL四 氢呋喃中， 加入 5 g硫酸钠和 0.05 mL乙酸， 室温下反应 0.5小时后， 加入三乙酰 氧基硼氢化钠 (0.9 g， 4.3 mmol),室温反应 3小时后，减压浓縮反应液，加入 50 mL 饱和碳酸钠溶液， 用乙酸乙酯 (50 mLx3)萃取， 合并有机相， 依次用 50 mL饱和氯 化钠溶液和 50 mL水洗涤， 乙酸乙酯层用无水硫酸镁干燥， 抽滤， 滤液减压浓縮， 用硅胶柱色谱法纯化得到标题产物顺 -5-[2-(2-氰基吡咯烷 -1-基) -2-氧代-乙氨基]六 氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸异丙胺 6b， 直接用于下一步反应。
MS m/z (ESI): 384(M+l
第三步
顺 -5-[2-(2-氰基吡咯烷 -1-基) -2-氧代-乙氨基]六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸异丙胺盐 酸盐 6的制备
将上一步所得的顺 -5-[2-(2-氰基吡咯烷 -1-基) -2-氧代-乙氨基]六氢并环戊二烯 吡咯 -2-羧酸异丙胺 6b分散于 10 mL乙醚中， 冰浴下加入 2 mL 0.5 N的盐酸乙醚 溶液，沉淀物离心，得到标题产物顺 -5-[2-(2-氰基吡咯烷 -1-基) -2-氧代-乙氨基]六氢 并环戊二烯吡咯 -2-羧酸异丙胺盐酸盐 6(80 mg， 白色粉末)。
1H NMR (CD3OD, 400MHz) δ 4.70(m, 1H)， 3.92(m, 2H), 3.76-3.32(m, 8H)， 2.63-1.41(m, 10H), 1.01(d， 6H， J=6Hz)。
实施例 7
顺- i-p-p- (吗啡啉 -4-羰基) -八氢并环戊二烯吡咯 -5-基氨基)乙酰基） -2-氰基-吡咯烷 盐酸盐
Figure imgf000030_0001
2_ (吗啡啉 -4-羰基) -六氢并环戊二烯吡咯 -5-酮 7a的制备 将六氢并环戊二烯吡咯 -5-酮三氟乙酸盐 lf(574 mg， 2.4 mmol)搅拌下溶解于 20 mL乙腈中， 冰水浴下加入碳酸钾 (0.397 g， 2.88 mmol), 滴加吗啡啉 -4-酰氯 （0.323 mL, 2.64 mmol), 冰水浴下反应过夜， 蒸干溶剂， 加入 50 mL水， 用乙酸乙酯萃 取 (50 mLx3)， 合并有机相， 用 50 mL饱和氯化钠溶液洗涤， 用无水硫酸镁干燥， 抽滤， 滤液减压浓縮， 用硅胶柱谱法纯化得到残余物， 得到标题产物 2- (吗啡啉 -4- 羰基) -六氢并环戊二烯吡咯 -5-酮 7a(0.572 g， 无色油状物)， 产率 77.3 %。
MS m/z (ESI): 239(M+l) o
第二步
顺- i-p-p- (吗啡啉 -4-羰基) -八氢并环戊二烯吡咯 -5-基氨基)乙酰基） -2-氰基-吡咯烷
7b的制备
将 2- (；吗啡啉 -4-羰基) -六氢并环戊二烯吡咯 -5-酮 7a(0.64 g， 2.69 mmol)和 1-(2- 氨基乙酰基) -2-氰基-吡咯烷盐酸盐 ld(0.764 g， 4.03 mmol)溶解于 50 mL四氢呋喃 中， 加入 5 g硫酸钠和 0.05 mL乙酸， 室温下反应 0.5小时后， 加入三乙酰氧基硼 氢化钠 (1.71 g， 8.07 mmol), 室温反应 3小时后， 减压浓縮反应液， 加入 50 mL饱 和碳酸钠溶液， 用乙酸乙酯 (50 mIX3)萃取， 合并有机相， 依次用 50 mL饱和氯化 钠溶液和 50 mL水洗涤， 乙酸乙酯层用无水硫酸镁干燥， 抽滤， 滤液减压浓縮， 用硅胶柱色谱法纯化得到标题产物顺 -1-(2-(2- (吗啡啉 -4-羰基) -八氢并环戊二烯吡 咯 -5-基氨基)乙酰基） -2-氰基-吡咯烷 7b， 直接用于下一步反应。
MS m/z (ESI): 376.7(M+l)o
第三步
顺- i-p-p- (吗啡啉 -4-羰基) -八氢并环戊二烯吡咯 -5-基氨基)乙酰基） -2-氰基-吡咯烷 盐酸盐 7的制备
将上一步所得的顺 -1-(2-(2- (吗啡啉 -4-羰基) -八氢并环戊二烯吡咯 -5-基氨基)乙 酰基） -2-氰基-吡咯烷 7b分散于 10 mL乙醚中，冰浴下加入 2 mL 0.5 N的盐酸乙醚 溶液， 沉淀物离心， 得到标题产物顺 -1-(2-(2- (吗啡啉 -4-羰基) -八氢并环戊二烯吡咯 -5-基氨基)乙酰基）-2-氰基-吡咯烷盐酸盐 7(30 mg， 白色粉末)， 产率 3 %。 实施例 8
顺 -1-(2-(2- (吡咯烷 -1-羰基) -八氢并环戊二烯吡咯 -5-基氨基)乙酰基 )2-氰基-吡咯烷 盐酸盐
Figure imgf000031_0001
第一步
2- (吡咯烷 -1-羰基) -六氢并环戊二烯吡咯 -5-酮 8a的制备 将六氢并环戊二烯吡咯 -5-酮三氟乙酸盐 lf(478 mg， 2 mmol)搅拌下溶解于 20 mL 二氯甲烷中， 加入吡咯烷小酰氯 (0.276 mL, 2.5 mmol)和三乙胺 (0.84 mL, 6 mmol), 室温下反应过夜， 加入 10 %柠檬酸溶液调节 PH值为 4， 用二氯甲烷 (50 mLx3)萃取， 合并有机相， 用 50 mL饱和氯化钠溶液洗涤， 二氯甲烷相用无水硫酸 镁干燥， 抽滤， 滤液减压浓縮， 用硅胶柱色谱法纯化得到残余物， 得到标题产物 2- (吡咯烷 -1-羰基) -六氢并环戊二烯吡咯 -5-酮 8a(0.26 g，无色油状物)，产率 58.5 %。 MS m/z (ESI): 223(M+l
第二步
-l-(2-(2- (吡咯烷 -1-羰基) -八氢并环戊二烯吡咯 -5-基氨基)乙酰基 )2-氰基-吡咯烷
8b的制备
将 2- (；吡咯烷 -1-羰基) -六氢并环戊二烯吡咯 -5-酮 8aC0.26 g， 1.17 mmol)和 1-( 氨基 乙酰基 )-2-氰基-吡咯烷盐酸盐 ld(0.33 g， 1.75 mmol)溶解于 50 mL四氢呋喃中， 加 入 5 g硫酸钠和 0.05 mL乙酸， 室温下反应 0.5小时后， 加入三乙酰氧基硼氢化钠 (0.75 g, 3.5 mmol), 室温反应 3小时后， 减压浓縮反应液， 加入 50 mL饱和碳酸 钠溶液， 用乙酸乙酯 (50 mLx3)萃取， 合并有机相， 依次用 50 mL饱和氯化钠溶液 和 50 mL水洗涤， 乙酸乙酯层用无水硫酸镁干燥， 抽滤， 滤液减压浓縮， 用硅胶 柱色谱法纯化得到标题产物顺 -1-(2-(2- (吡咯烷 -1-幾基) -八氢并环戊二烯吡咯 -5-基 氨基)乙酰基 )2-氰基-吡咯烷 8b， 直接用于下一步反应。
MS m/z (ESI): 396(M+l
第三步
顺 -l-(2-(2- (吡咯烷 -1-羰基) -八氢并环戊二烯吡咯 -5-基氨基)乙酰基 )2-氰基-吡咯烷 盐酸盐 8的制备
将上一步所得的顺 -1-(2-(2- (吡咯烷 -1-羰基) -八氢并环戊二烯吡咯 -5-基氨基)乙 酰基) 2-氰基-吡咯烷 8b分散于 10 mL乙醚中， 冰浴下加入 2 mL 0.5 N的盐酸乙醚 溶液， 沉淀物离心， 得到标题产物顺 -1-(2-(2- (吡咯烷 -1-幾基) -八氢并环戊二烯吡咯 -5-基氨基)乙酰基 )2-氰基-吡咯烷盐酸盐 8(90 mg， 白色粉末)。
1H NMR (CD3OD， 400MHz) 4.72(m, 1H), 4.09(m， 2H), 3.43-3.30(m, 11H), 2.62(m, 2H), 2.35(m, 2H), 2.18(m, 2H), 2.08(m, 2H), 1.77(m, 4H)。 实施例 9
顺 -5-(2-(2-氰基吡咯 -1-基) -2-氧代乙氨基) -N，N-二甲基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-酰胺 三氟乙酸盐
Figure imgf000032_0001
将实施例 1 所得的顺 -5-(2-(2-氰基吡咯 -1-基) -2-氧代乙氨基) -N，N-二甲基 -六氢 并环戊二烯吡咯 -2-酰胺 lh(157 mg， 0.54 mmol)分散于 10 mL二氯甲烷中， 冰浴下 加入 2 mL三氟乙酸搅拌 0.5小时，沉淀物 心，得到标题产物顺 -5-(2-(2-氰基吡咯 -1-基) -2-氧代乙氨基) -N，N-二甲基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-酰胺三氟乙酸盐 9(201 mg， 白色粉末)。
1H NMR (CDC13, 400MHz) δ 4.74(t, 1H, J=5.2Hz), 3.98(d, 1H, J=15.6Hz)， 3.79(d, 1H, J=15.6Hz), 3.57-3.25(m, 7H), 2.75(s, 6H)， 2.55(m, 2H), 2.33(m, 2H), 2.20-2.08(m, 4H)， 1.74(m, 2H) o 实施例 10
反 -5-(2-(2-氰基吡咯 -1-基) -2-氧代乙氨基) -N，N-二甲基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-酰胺 三氟乙酸盐
Figure imgf000033_0001
第一步
顺 -5-羟基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸酯 N，N-二甲基酰胺 10a的制备 在氮气保护下， 在一个干燥的三口烧瓶中， 将 N，N-二甲基 -5-氧代 -六氢并环戊 二烯吡咯 -2-羧酸酯 lg(1.58 g， 8.06 mmol)搅拌下溶解于 30 mL四氢呋喃中， 冷却到 -25 °C , 并在该温度下， 滴加 30 mL三叔丁基氧铝锂氢 (2.45 g， 9.6 mmol)的四氢呋 喃溶液， 在一 25°C反应 2.5小时后， 加水淬灭反应， 加入 20 mL饱和氯化铵溶液， 自然升至室温， 分液， 水相用二氯甲烷 (50 mLx3)萃取， 合并有机相， 用 50 mL饱 和氯化钠溶液洗涤， 硫酸镁干燥有机相， 抽滤， 滤液减压浓縮， 用硅胶柱色谱法 纯化所得残余物， 得到标题产物顺 -5-羟基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸酯 N，N-二 甲基酰胺 10a(1.27 g， 无色油状物)， 产率 80%。
MS(m/z) (ESI): 199(M+ 1)。
第二步
顺 -2-二甲基氨甲酰基-八氢并环戊二烯吡咯 -5-甲磺酸酯 10b的制备 在氮气的保护下， 在干燥的单口烧瓶中将顺 -5-羟基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧 酸酯 N，N-二甲基酰胺 10a C1.69 g， 8.5 mmol)搅拌下溶解于 30 mL二氯甲烷中， 冰 盐浴冷却至 -5°C〜0°C之间， 依次加入三乙胺 (1.66 g， 14.45 mmol)和甲基磺酰氯 (2.2g, 21.74 mmol), 搅拌 0.5小时后自然升至室温， 在室温下反应 2小时， 减压 浓縮反应液， 加入 20 mL水， 用乙酸乙酯 (50 mLx6)萃取， 合并有机相， 用 50 mL 饱和氯化钠溶液洗涤， 硫酸镁干燥有机相， 抽滤， 滤液减压浓縮， 用硅胶柱色谱 法纯化所得的残余物，得到标题产物顺 -2-二甲基氨甲酰基-八氢并环戊二烯吡咯 -5- 甲磺酸酯 10b C1.94 g， 白色固体)， 产率 83%。
MS(m/z)(ESI): 277(M+ 1)
第三步
反 -5-(1，3-二氧代 -1,3-二氢-异吲哚 -2-基) -六氢并环戊二烯吡咯 -羧酸 二甲基酰胺
10c的制备
在氮气的保护下， 在干燥的单口瓶中将顺 -2-二甲基氨甲酰基-八氢并环戊二烯 吡咯 -5-甲磺酸酯 10b(l g， 3.6 mmol)搅拌下溶解于 20 mL N，N-二甲基甲酰胺中，加 入邻苯二甲酰亚胺钾盐 (993 mg， 5.4 mmol), 升温到 70°C， 反应 3小时， 减压浓縮 N，N-二甲基甲酰胺， 加入 20 mL水， 用乙酸乙酯 (50 mIX3)萃取， 合并有机相， 用 50 mL饱和氯化钠溶液洗涤， 硫酸镁干燥， 抽滤， 滤液减压浓縮， 得到标题产物反 -5-(1，3-二氧代 -1,3-二氢-异吲哚 -2-基) -六氢并环戊二烯吡咯-羧酸二甲基酰胺 10c(1.06 g, 白色固体)， 产率 90%， 产品直接用于下一步反应。
MS(m/z)(ESI): 328(M+ 1)。
第四步
反 -5-氨基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 N，N-二甲酰胺 10d的制备 在单口瓶中将反 -5-(1，3-二氧代 -1,3-二氢-异吲哚 -2-基) -六氢并环戊二烯吡咯-羧 酸二甲基酰胺 10c (lg， 3.06mmol)搅拌下溶解于 20 mL 95 %乙醇中，加入肼 (490 mg， 15.3 mmol), 加热回流反应 8小时， 冷却到室温， 抽滤， 滤液减压浓縮， 得到白色 的固体， 加入 25 mL甲醇， 抽滤， 滤液减压浓縮， 用碱性氧化铝柱色谱法纯化所 得残余物， 得到标题产物反 -5-氨基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 N，N-二甲酰胺
10d(290 mg, 无色油状物)， 产率 48 %。
MS(m/z)(ESI): 198(M+ 1)。
第五步
反 -5-(2-(2-氰基吡咯 -1-基) -2-氧代乙氨基) -N，N-二甲基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-酰胺 10e的制备
在干燥的单口烧瓶中加入反 -l-(2-氯-乙基) -吡咯 -2-氰基 (334 mg， 1.94 mmol), 加入 20 mL反 -5-氨基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 N，N-二甲酰胺 10(1(；290 mg， 1.46 mmol)的二氯甲烷溶液， 加热回流 48小时， 减压浓縮反应液， 用硅胶柱色谱法纯 化所得到的残余物， 得到反 -5-(2-(2-氰基吡咯 -1-基) -2-氧代乙氨基) -N，N-二甲基-六 氢并环戊二烯吡咯 -2-酰胺 10e， 直接用于下一步反应。
第六步
反 -5-(2-(2-氰基吡咯 -1-基) -2-氧代乙氨基) -N，N-二甲基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-酰胺 三氟乙酸盐 10的制备
将上一步得到的反 -5-(2-(2-氰基吡咯 -1-基) -2-氧代乙氨基) -N，N-二甲基-六氢并 环戊二烯吡咯 -2-酰胺 10e搅拌下溶解于 10 mL二氯甲烷中，加入 2 mL三氟乙酸搅 拌 0.5 小时， 得到反 -5-(2-(2-氰基吡咯 -1-基) -2-氧代乙氨基) -N，N-二甲基-六氢并环 戊二烯吡咯 -2-酰胺三氟乙酸盐 10(201 mg， 白色固体)。
MS(m/z)(ESI): 334(M+ 1)。
1H NMR (CDCls, 400MHz) δ 4.65(m， 1H), 3.93(d, 1H, J=15.2Hz), 3.74(d, 1H,
J=15.2Hz), 3.69-3.19(m, 7H), 2.77(s, 6H)， 2.18-1.96(m, 10H)。
实施例 11
5-[2-(2-氰基-吡咯烷 -1-基) -2-氧代-乙胺基 ]-5-甲基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二 甲基酰胺 对甲苯磺酸盐
Figure imgf000035_0001
第一步
5_亚甲基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺的制备 氮气保护下， 将叔丁醇钾 (7.17 g， 0.064 mol)和甲基三苯基磷碘 （25.8 g， 0.064 mol)搅拌下溶解于 150 mL甲苯中， 加热回流 3小时， 冷却至室温， 加入 30 mL的 N，N-二甲基 -5-氧代-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸酯 lg (5.0 g， 0.0255 mol)甲苯溶液， 30分钟后， 薄层色谱跟踪反应， 原料消失， 加入 30 mL水和 30 mL饱和氯化钠溶 液， 用乙酸乙酯 (200 mL X 4)萃取， 合并有机相， 干燥过夜。 抽滤， 滤液减压浓縮， 用硅胶柱色谱法纯化， 得到标题产物 5-亚甲基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲 基酰胺 lla(4.0 g， 浅黄色油状透明液体)， 收率： 80%。
MS m/z (ESI): 195.2(M+l)o
第二步
5-异氰基 -5-甲基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺的制备 在氮气保护下，将 5-亚甲基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 11a (1.6 g，
8.23 mmol)搅拌下溶解于 30 mL二氯甲烷中， 再依次加入三甲基硅氰 (4.08 g， 41.2 mmol)和高氯酸银 (5.12 g， 24.7 mmol)， 室温下搅拌过夜后， 用饱和碳酸氢钠溶液处 理部分反应液， 薄层色谱跟踪反应， 仍有大部分的原料剩余， 冰浴下， 加入 20 mL 饱和碳酸氢钠溶液， 反应放热， 10分钟后， 过滤， 除去固体， 分液后， 用乙酸乙 酯 (50 mLX 4)萃取， 合并有机相， 用无水硫酸镁干燥， 抽滤， 滤液减压浓縮， 用硅 胶柱色谱法纯化得到标题产物 5-异氰基 -5-甲基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲 基酰胺 lib (0.33 g， 淡黄色油状物)， 收率： 18.1 %。
GC-MS: 221.1(M+)。
1H NMR (CDCls, 400MHz) δ 3.31 (m， 4H)， 2.97(m, 2H), 2.84(s, 6H)， 2.32(m, 2H), 1.52(s，3H)， 1.46(m，2H)。 第三步
5-氨基 -5-甲基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺的制备 在冰浴下，将 0.38 mL的 6N的盐酸加入 5-异氰基 -5-甲基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 lib (0.388 g， 1.75 mmol)的 15 mL乙醇溶液中， 撤掉冰浴， 在 室温下反应 1.5小时， 薄层色谱跟踪反应， 原料消失， 加入 20 mL饱和碳酸氢钠溶 液淬灭反应， 用二氯甲烷 (50 mL X 3)萃取， 合并有机相， 蒸干溶剂， 用硅胶柱色谱 法纯化得到标题产物 5-氨基 -5-甲基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 11c (0.28 g, 黄色油状物)， 收率： 75.7%。
MS m/z (ESI): 212.2(M+1)。
第四步
5-[2-(2-氰基-吡咯烷 -1-基) -2-氧代-乙胺基 ]-5-甲基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二 甲基酰胺的制备
将 5-氨基 -5-甲基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 11c (200 mg， 0.92 mmol)搅拌下溶解于 8 mL的 N，N-二甲基甲酰胺中，加入 1-(2-氯-乙酰基) -吡咯烷 -2- 氰基 (175 mg， 1.02 mmol), 室温下反应过夜后， 在 40〜50°C水浴中， 减压除去 N，N- 二甲基甲酰胺， 用硅胶柱色谱法纯化， 得到标题产物 5-[2-(2-氰基-吡咯烷 -1-基) -2- 氧代-乙胺基 ]-5-甲基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 lid (135 mg， 无色 油状液体)， 收率： 42.3 %。 回收 5-氨基 -5-甲基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲 基酰胺 llc (130 mg)。
MS m/z (ESI): 348.2(M+1)。 第五步
5-[2-(2-氰基-吡咯烷 -1-基) -2-氧代-乙胺基 ]-5-甲基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 对甲苯磺酸盐的制备
在冰浴下， 将 5-[2-(2-氰基-吡咯烷 -1-基) -2-氧代-乙胺基 ]-5-甲基-六氢并环戊二 烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 lid (20 mg， 0.057 mmol)和一水合对甲苯磺酸 (12 mg， 0.063 mmol)搅拌下溶解于 2 mL的二氯甲烷中， 搅拌 10分钟后， 撤掉冰浴， 蒸干 反应液中溶剂， 得到油状物， 加入 5 mL乙酸乙酯， 剧烈搅拌， 有白色固体析出， 抽滤， 得到的白色固体为标题产物 5-[2-(2-氰基-吡咯烷 -1-基) -2-氧代-乙胺基 ]-5-甲 基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 对甲苯磺酸盐 11(26 mg， 白色固体)， 收率： 86.8 %。
MS m/z (ESI): 348.2(M+1)。
1H NMR (CDCls, 400MHz) δ 7.68(d, 2H), 7.17(d, 2H), 3.72(m, 1H), 3.68(m, 1H)， 3.58(m, 1H), 3.30(m, 4H)， 2.98(s, 2H), 2.81(s, 6H)， 2.55(m, 2H), 2.22(m, 4H)， 2.05(m, 2H), 1.62(m, 2H), 1.56(s, 3H)。 实施例 12
5-[2-(2-氰基-吡咯烷 -1-基) -2-氧代-乙胺基 ]-5-甲基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二 甲基酰胺对甲苯磺酸盐
Figure imgf000037_0001
12e 12f 12g
第一步
5-氰基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺的制备 在冰浴下， 将 N，N-二甲基 -5-氧代-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸酯 lg (12.9 g， 0.066 mol)和对甲苯磺酰甲基异腈 (14.2 g， 0.0727 mol)搅拌下溶解于 240 mL乙二醇 二甲醚中， 滴加叔丁醇钾 (14.8 g， 0.132 mol)的叔丁醇溶液， 滴毕， 撤掉冰浴， 室温 下反应过夜， 薄层色谱跟踪， 反应完全， 加入 100 mL水， 50 mL饱和氯化钠溶液， 用乙酸乙酯 (200 mLx3)萃取， 合并有机相， 用无水硫酸钠干燥， 抽滤， 滤液减压浓 縮， 用硅胶柱层析法纯化， 得到标题产物 5-氰基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二 甲基酰胺 12a(7.0 g， 浅黄色油状液)， 收率： 51 %。
MS m/z (ESI): 208.1(M+l
1H NMR (DMSO-D6, 400MHz) 3.5-3.0(m, 4H)， 2.75(s, 6H)， 2.6(m, 1H)， 2.1-1.5(m, 6H)。 第二步
5-氰基 -5-甲基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 在氮气保护下， 将 5-氰基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 12a (4.2 g， 20.2 mmol)和碘甲烷(；11.5 g， 80.8 mmol)搅拌下溶解于 100 mL干燥的四氢呋喃， 在 室温下， 滴加六甲基二硅基胺基锂 (80.8 mL， 80.8 mmol), 室温下反应 2小时， MS 检测反应结束， 加入 100 mL水， 用乙酸乙酯 (200 mIX3)萃取， 无水硫酸钠干燥， 抽滤， 滤液减压浓縮， 得到油状物， 薄层色谱显示为两个较近的点， 用硅胶柱色 谱法纯化， 下面的点为 5-氰基 -5-甲基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 12b(2.411 g， 浅黄色油状物)。
MS m/z (ESI): 222.2(M+l
1H NMR (CDCls, 400MHz) 3.44(m, 2H), 3.3(m, 2H), 2.85(s, 6H)， 2.77(m, 2H), 2.06(m, 2H), 2.00(m, 2H), 1.36(s, 3H)。 第三步
2-二甲基氨甲酰基 -5-甲基-八氢-并环戊二烯吡咯 -5-羧酸的制备 将 5-氰基 -5-甲基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 12b (6.99 g， 31.6 mmol)搅拌下溶解于 90 mL的 36%盐酸中， 油浴 50°C下搅拌 48小时， 薄层色谱跟 踪反应， 原料消失， 反应结束， 加入 150 mL水， 冰浴下用碳酸钾固体中和反应液， 调节 pH为 6左右， 用乙酸乙酯 (150 mLx3)萃取， 再用二氯甲烷 (150 mIX3)萃取， 合并有机相， 用无水硫酸钠干燥， 抽滤， 滤液减压浓縮， 得到标题产物 2-二甲基 氨甲酰基 -5-甲基-八氢-并环戊二烯吡咯 -5-羧酸 12c(7.0 g， 黄色液体)， 收率： 92%， 直接用于下一步反应。
MS m/z (ESI): 241.2(M+l
第四步
5-氨基 -5-甲基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺的制备 在冰浴下，将 2-二甲基氨甲酰基 -5-甲基-八氢-并环戊二烯吡咯 -5-羧酸 12c (1.0 g， 4.2 mmol)搅拌下溶解于 25 mL丙酮中，在 -5 °C下，滴加三乙胺 (463.5 mg， 4.58 mmol) 和氯甲酸乙酯 (497 mg， 4.58 mmol)的 10 mL丙酮溶液， 在 -5 °C下， 反应 15分钟， 加入叠氮化钠 (546 mg， 8.4 mmol)的 10 mL水溶液， 在 -5 °C继续反应 30分钟， 加入 25 mL水淬灭反应， 用乙酸乙酯 (50 mLx3)萃取， 无水硫酸钠干燥， 抽滤， 减压浓 滤液， 得到一粗产品 -5- (叠氮基羰基) -N，N，5-三甲基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-氨甲酰 12d (700 mg, 黄色油状物
第五至第六步
将此黄色油状物 5- (叠氮基羰基) -N，N，5-三甲基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-氨甲酰 12d (700 mg)加入到 20 mL甲苯中回流 2小时，蒸干甲苯，得到产品 (3aS，5r，6aR 5- 异氰酰 -N，N，5-三甲基-六氢并环戊二烯吡咯 -2(1H)- 氨甲酰 12e， 冰浴下滴加 8 mL 的 8N盐酸， 搅拌 30分钟， 薄层色谱跟踪反应原料消失， 在冰浴下， 用 3N氢氧 化钠调节 PH>12， 用乙酸乙酯 (15 mLx3)萃取， 合并有机相， 用无水硫酸镁干燥， 抽滤， 滤液减压浓縮， 用硅胶柱色谱法纯化得到标题产物 5-氨基 -5-甲基-六氢并环 戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 12f(500 mg， 浅黄色油状液体)。
MS m/z (ESI): 212.2(M+l)o
1H NMR (DMSO-D6, 400MHz) δ 3.5-3.0(m, 4H)， 2.72(s, 6H)， 1.7-1.3(m, 6H)， 1.04(s， 3H)。 第七步
5-[2-(2-氰基-吡咯烷 -1-基) -2-氧代-乙胺基 ]-5-甲基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二 甲基酰胺的制备
将 5-氨基 -5-甲基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 12f (332 mg, 1.57 mmol)搅拌下溶解于的 10 mL的 N，N-二甲基甲酰胺 /CH2C12(1 : 1)混合溶剂中， 加入 1-(2-氯-乙酰基) -吡咯烷 -2-氰基 (217 mg， 1.26 mmol)， 室温下反应过夜， 抽干溶剂， 用硅胶柱色谱法纯化， 得到标题产物 5-[2-(2-氰基-吡咯烷 -1-基) -2-氧代-乙胺基 ]-5- 甲基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 12g(240 mg, 无色油状物)， 收率： 55 %。
MS m/z (ESI): 348.2(M+1)。
第八步
5-[2-(2-氰基-吡咯烷 -1-基) -2-氧代-乙胺基 ]-5-甲基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二 甲基酰胺对甲苯磺酸盐的制备
将 5-[2-(2-氰基-吡咯烷 -1-基) -2-氧代-乙胺基 ]-5-甲基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧 酸 二甲基酰胺 12g (150 mg, 0.43 mmol)和一水合对甲苯磺酸 (82 mg, 0.43 mmol)搅 拌下溶解于 4 mL的二氯甲烷中， 搅拌 10分钟后， 蒸干反应液中溶剂， 得到标题 产物 5-[2-(2-氰基-吡咯烷 -1-基) -2-氧代-乙胺基 ]-5-甲基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧 酸 二甲基酰胺 对甲苯磺酸盐 12 (220 mg， 淡黄色固体)， 收率： 95.3 %。
MS m/z (ESI): 348.2(M+1)。
1H NMR (DMSO-D6, 400MHz) δ 4.82(m, 1H), 3.97(s, 2H), 3.79(m, 2H), 3.49(m, 2H)， 3.21(m, 4H)， 2.75(s, 6H)， 2.62(m, 2H), 2.19(m, 2H), 1.92-1.61(m, 3H), 2.06(m, 3H)， 1.2(s, 3H) o 实施例 13
5-(2-(-2-氰基 -4-氟吡咯烷 -1-基) -2-氧代乙基氨基) -N，N，5-三甲基 -六氢并环戊二烯吡 咯 -2-氨甲酰 酒石酸盐
Figure imgf000040_0001
第一步
(2S，4R)-l-(叔丁氧羰基) -4-羟基吡咯烷 -2-羧酸的制备 将羟脯氨酸 13aC60 g， 0.458 mol)加入到 750 mL四氢呋喃 /水 (；2:1)混合溶剂中， 加入 252 mL 10%的氢氧化钠溶液，加入 750 mL二碳酸二叔丁酯 (136 g， 0.624 mol) 的四氢呋喃 /水 (2:1)溶液， 室温下反应过夜， 加入 500 mL乙酸乙酯， 分液， 有机层 丢弃， 水相用浓盐酸调节 PH为 2， 用 1.5 L乙酸乙酯萃取， 饱和氯化钠溶液洗涤， 无水硫酸钠干燥， 抽滤， 滤液减压浓縮， 得到标题产物 (2S，4R)-1- (叔丁氧羰基 )-4- 羟基吡咯烷 -2-羧酸 13b(86.4 g， 无色油状物)， 收率： 80%。 第二步
(2S，4R)-叔丁基 2-氨甲酰 -4-羟基吡咯烷 -1-羧酸酯的制备 氩气氛下， 将 (2S，4R)-1- (叔丁氧羰基 )-4-羟基吡咯烷 -2-羧酸 13 86.4 g， 0.374 mol)搅拌下溶解于 1.2 L四氢呋喃中， 加入三乙胺 (41 g， 0.411 mol), 冷却至 -15 °C， 加入氯甲酸乙酯 (43.84 g， 0.411 mol), 搅拌 10分钟后， 加入 236.8 mL氨水， 在 2 小时内慢慢升温至 5°C， 再加入 32 g氯化铵， 搅拌 30分钟后停止， 分液， 有机相 用无水硫酸干燥， 水相用乙酸乙酯 (100 mLx2)萃取， 合并有机相， 蒸干溶剂， 真空 抽干溶剂， 得到标题产物 (2S，4R)-叔丁基 2-氨甲酰 -4-羟基吡咯烷 -1-羧酸酯 13c(74 g， 白色固体)， 收率： 86%。 第三步
(2S，4R)-叔丁基 2-氰基 -4-羟基吡咯烷 -1-羧酸酯的制备 氩气氛下，将 (2S，4R)-叔丁基 2-氨甲酰 -4-羟基吡咯烷 -1-羧酸酯 13 74 g， 0.3217 mol)搅拌下溶解于 740 mL吡啶中， 冷却至 -20°C， 滴加三氟乙酸酐 (169 g，. 0.804 mol), 滴毕升至室温反应， 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 加入水淬灭反应， 加入 0.8 L乙酸乙酯，搅拌，分液，有机相用 500 mL饱和氯化钠溶液洗涤，再用 400 mL 浓盐酸中和吡啶至微酸性，再用 300 mL 2M氢氧化钠溶液洗涤，用 500 mL饱和氯 化钠溶液洗涤， 无水硫酸镁干燥， 抽滤， 滤液减压浓縮， 得到标题产物 (2S，4R)-叔 丁基 2-氰基 -4-羟基吡咯烷 -1-羧酸酯 13d(49.7 g， 黄褐色油状物)， 收率： 73 %。 第四步
(2S，4S)-叔丁基 2-氰基 -4-氟吡咯烷 -1-羧酸酯的制备 氩气氛下，将 (2S，4R 叔丁基 2-氰基 -4-羟基吡咯烷 -1-羧酸酯 13d(49.7 g， 0.2344 mol)搅拌下溶解于 1130 mL二氯乙烷中，冷却至 -30°C，加入三氟化二乙氨基硫 (56.7 g, 0.3516 mol), 反应 45分钟后升至 -5 °C， 自然升至室温， 反应过夜， 薄层色谱跟 踪反应， 原料消失， 缓慢加入饱和碳酸氢钠溶液， 剧烈冒泡， 冷却， 使温度控制 在 20°C以下， 直到反应液 PH大于 7， 加入冰水， 加入 500 mL二氯甲烷， 分液， 依次用 500 mL饱和硫酸氢钠溶液和 500 mL饱和氯化钠溶液洗涤， 无水硫酸镁干 燥， 抽滤， 滤液减压浓縮， 浓縮过程中温度低于 38°C， 得到标题产物 (2S，4S)-叔丁 基 2-氰基 -4-氟吡咯烷 -1-羧酸酯 13e(50 g， 棕黄色固体)， 产率： 100%。 第五步
2S，4S)-4-氟 -2-氰基吡咯烷的制备
氩气氛下， 将 C2S，4S)-叔丁基 2-氰基 -4-氟吡咯烷 -1-羧酸酯 13eCl g， 4.6 mmol) 搅拌下溶解于 2 mL乙酸乙酯中， 冷却至 15°C， 加入 2.5 mL 3M氯化氢的 1，4-二氧 六环溶液， 室温下搅拌 2小时， 在 25°C以下反应 5小时， 薄层色谱有原料， 把浑 浊的反应液过滤， 母液再在室温下搅拌 2 小时， 又有白色固体析出， 过滤， 母液 继续搅拌 2小时， 过滤， 合并过滤出来的白色固体， 得到标题产物 (2S，4S)-4-氟 -2- 氰基吡咯烷 13f(15.6 g， 白色固体)， 收率： 76.6%。
第六步
(2S，4S)-l-(2-氯乙酰基) -4-氟 -2-氰基吡咯烷的制备 氩气氛下， 将氯代乙酰氯 (11.13 g， 98.5 mmol)搅拌下溶解于 120 mL二氯甲烷 中， 冷却至 0°C， 将(28，48)-4-氟-2-氰基吡咯烷13 11.4§，75.7 11^101)搅拌下溶解于 400 mL二氯甲烷中，加入三乙胺 (16.1 g， 158.97 mmol),在 30分钟内将此溶液滴加 到氯代乙酰氯的二氯甲烷溶液中， 在 0°C反应 2小时， 加入 200 mL水， 150 mL二 氯甲烷，萃取分液，有机相用少量饱和硫酸氢钠溶液洗涤至中性，再依次用 300 mL 水和 300 mL饱和氯化钠溶液洗涤， 无水硫酸钠干燥， 抽滤， 滤液减压浓縮， 用硅 胶柱色谱法纯化所得残余物， 得到标题产物 (2S，4S)-l-(2-氯乙酰基) -4-氟 -2-氰基吡 咯烷 13g(8 g， 白色晶体)， 收率： 60%。
参考文献： WO2003002553。
第七步
5-(2-(2-氰基 -4-氟吡咯烷 -1-基) -2-氧代乙基氨基) -N，N，5-三甲基 -六氢并环戊二烯吡 咯 -2-氨甲酰的制备
氮气氛下， 将 5-氨基 -5-甲基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 12f(130 mg， 0.616 mmol), (2S，4S)-l-(2-氯乙酰基) -4-氟 -2-氰基吡咯烷 13g(117.4 mg， 0.616 mmol)和碳酸钾 (85 mg， 0.616 mmol)搅拌下溶解于 2 mL二氯甲烷与 2 mL N，N-二甲 基甲酰胺的混合溶剂中， 室温下反应过夜， 薄层色谱跟踪反应， 原料基本消失， 减压浓縮除掉反应液中的二氯甲烷和 N，N-二甲基甲酰胺， 用硅胶柱色谱法纯化所 得残余物， 得到标题产物 5-(2-(2-氰基 -4-氟吡咯烷 -1-基) -2-氧代乙基氨基) -N，N，5- 三甲基-六氢并环戊二烯吡咯 -2(1H)-氨甲酰 13h(0.13 g， 无色油状液体)， 收率： 58 %。
第八步
5-(2-(2-氰基 -4-氟吡咯烷 -1-基) -2-氧代乙基氨基) -N，N，5-三甲基 -六氢并环戊二烯吡 咯 -2(1H)-氨甲酰 酒石酸盐的制备
室温下，将 5-(2-(2-氰基 -4-氟吡咯烷 -1-基) -2-氧代乙基氨基) -N，N，5-三甲基 -六氢 并环戊二烯吡咯 -2C1H)-氨甲酰 13(0.16 g， 0.44 mmol)搅拌下溶解于 5 mL二氯甲烷 中， 滴加 5 mL酒石酸 (65.6 mg， 0.44 mmol)的丙酮溶液， 室温下反应 30分钟， 有白 色固体析出， 过滤， 用丙酮洗涤固体， 得到标题产物 5-(2-(2-氰基 -4-氟吡咯烷 -1- 基) -2-氧代乙基氨基) -N，N，5-三甲基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-氨甲酰 酒石酸盐 13(0.18 g, 白色固体)， 收率： 82%。
1H NMR (DMSO-D6, 400ΜΗζ) δ 5.76(m, 1H), 5.46(m, 1H), 5.0(m, 1H), 4.08-4.05(m, 4H)， 3.97(m, 2H), 3.69(m, 2H), 2.73(s, 6H)， 2.6 l(m, 2H), 1.87(m, 3H), 1.57(m, 3H), 1.18(s, 3H), 1.9(m， 2H)。 实施例 14
5-苄基 -5-[2-(2-氰基 -4-氟-吡咯烷 -1-基 2-氧代 -乙基氨基] - 六氢并环戊二烯吡咯 -2- 羧酸 二甲基酰胺 酒石酸盐
Figure imgf000043_0001
5-苄基 -5-氰基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺的制备 氮气氛下， 将 5-氰基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 12a(4.0 g， 19.3 mmol)搅拌下溶解于 60 mL四氢呋喃中， 加入苄氯 (5.4 g， 42.5 mmol), 室温搅拌下 滴加六甲基二硅基胺基锂 (42.5 mL, 42.5 mmol),室温下搅拌 4小时，薄层色谱跟踪 反应至原料消失， 加入 50 mL水淬灭反应， 用乙酸乙酯萃取， 合并有机相， 用无 水硫酸钠干燥， 抽滤， 滤液减压浓縮， 用硅胶柱色谱法纯化所得残余物， 得到标 题产物 5-苄基 -5-氰基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 14a(2.6 g， 淡黄色 固体)， 收率： 46 %。
第二步
5_苄基 -5-甲酰基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺的制备 将 5-苄基 -5-氰基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 14a(2.0 g， 6.7 mmol) 搅拌下溶剂于 100 mL二氯甲烷中， 在 0°C下滴加二异丁基氢化铝 (20.2 mL, 20.2 mmol), 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 加水淬灭反应， 用乙酸乙酯萃取， 合并有 机相， 用无水硫酸钠干燥， 抽滤， 滤液减压浓縮， 用硅胶柱色谱法纯化所得残余 物， 得到标题产物 5-苄基 -5-甲酰基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 14b(729 mg, 无色油状液体)， 收率： 36 %。
第三步
5_苄基 -2-二甲基氨基甲酰-八氢并环戊二烯吡咯 -5-羧酸的制备 氮气氛下， 将 5-苄基 -5-甲酰基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 14b(0.729 g， 2.43 mmol)搅拌下溶解于 28 mL四氢呋喃和 14 mL水的混合溶剂中， 在 0°C下， 加入二水合磷酸二氢钠 (1.14 g， 7.29 mmol), 亚氯酸钠 (0.66 g， 7.29 mmol) 和 2-甲基 -2-丁烯 (0.513 g， 7.32 mmol), 在 0°C下反应 2小时， 薄层色谱跟踪反应至 原料消失， 加入乙酸乙酯萃取反应液， 合并有机相， 用无水硫酸镁干燥， 抽滤， 滤液减压浓縮， 用硅胶柱色谱法纯化所得残余物， 得到标题产物 5-苄基 -2-二甲基 氨基甲酰-八氢并环戊二烯吡咯 -5-羧酸 14c(0.76 g， 无色油状液体)， 收率： 98 %。 MS m/z (ESI): 317.3(M+l)o
1H NMR (DMSO-D6, 400MHz) δ 7.5-7.0(m, 5H)， 3.24(m, 2H), 3.1(m, 2H), 2.76(s, 2H), 2.7(s, 6H)， 2.68(m, 2H), 1.99-1.55(m, 4H)。 第四步
5_苄基 -2-二甲基氨基甲酰-八氢并环戊二烯吡咯 -5-羰基 叠氮化物的制备 冰浴下， 将 5-苄基 -2-二甲基氨基甲酰-八氢并环戊二烯吡咯 -5-羧酸 14c(0.86 g， 2.72 mmol)搅拌下溶解于 30 mL丙酮中， 在 -5 °C下， 依次滴加三乙胺 (0.303 g， 2.99 mmol), 15 mL氯甲酸乙酯 (0.325 g， 2.99 mmol)的丙酮溶液， 搅拌 15分钟， 滴加 15 mL叠氮化钠 (0.353 g， 5.44 mmol)的水溶液， 搅拌 30分钟， 薄层色谱跟踪反应至原 料消失， 浓縮掉丙酮， 用乙酸乙酯萃取， 合并有机相， 用无水硫酸钠干燥， 抽滤， 滤液减压浓縮， 得到标题产物 5-苄基 -2-二甲基氨基甲酰-八氢并环戊二烯吡咯 -5- 羰基 叠氮化物 14d(0.9 g， 浅黄色油状液体)， 收率： 97 %。
第五步
5-苄基 -5-异氰酰基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺的制备 将 5-苄基 -2-二甲基氨基甲酰-八氢并环戊二烯吡咯 -5-羰基 叠氮化物 14d(1.0 g， 2.72 mmol)搅拌下溶解于 20 mL甲苯中， 加热回流 1.5小时， 浓縮掉甲苯， 所得残 余物为标题产物 5-苄基 -5-异氰酰基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 14e， 直接用于下一步反应。
第六步
5-氨基 -5-苄基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺的制备 室温下， 将上一步得到的 5-苄基 -5-异氰酰基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二 甲基酰胺 14e中滴加 12 mL的 8 N的盐酸， 搅拌 30分钟， 用 4 N的氢氧化钠溶液 调节 PH为 9， 用乙酸乙酯萃取， 合并有机相， 无水硫酸钠干燥， 抽滤， 滤液减压 浓縮， 用硅胶柱色谱法纯化所得残余物， 得到标题产物 5-氨基 -5-苄基 -六氢并环戊 二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 14f(0.55 g， 无色油状液体)， 收率： 70 %。
第七步
5-苄基 -5-[2-(2-氰基 -4-氟-吡咯烷 -1-基 2-氧代 -乙基氨基] - 六氢并环戊二烯吡咯 -2- 羧酸 二甲基酰胺的制备
将 5-氨基 -5-苄基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 14f(0.1 g， 0.35 mmol)搅拌下溶解于 4 mL二氯甲浣/ N，N-二甲基甲酰胺 (V/V=l/1)混合溶剂中，加入 (2S，4S)-l-(2-氯乙酰基 4-氟 -2-氰基吡咯烷 13g(66.5 mg， 0.35 mmol)和碳酸钾 (49 mg， 0.35 mmol), 在 40°C下反应 12小时， 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 浓縮掉反应 液， 用硅胶柱色谱法纯化所得残余物， 得到标题产物 5-苄基 -5-[2-(2-氰基 -4-氟-吡 咯烷 -1-基) -2-氧代 -乙基氨基] - 六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 14g(87 mg， 白色固体)， 收率： 56%。
MS m/z (ESI): 442.2(M+l)o
第八步
5-苄基 -5-[2-(2-氰基 -4-氟-吡咯烷 -1-基 2-氧代 -乙基氨基] - 六氢并环戊二烯吡咯 -2- 羧酸 二甲基酰胺 酒石酸盐的制备
将 5-苄基 -5-[2-(2-氰基 -4-氟-吡咯烷 -1-基) -2-氧代 -乙基氨基] - 六氢并环戊二烯 吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 14g(87 mg， 0.197 mmol)搅拌下溶解于 3 mL二氯甲烷中， 滴加 3 mL酒石酸的丙酮溶液， 室温下反应 30分钟， 浓縮掉溶剂， 加入乙酸乙酯 及丙酮重结晶， 得到标题产物 5-苄基 -5-[2-(2-氰基 -4-氟-吡咯烷 -1-基) -2-氧代 -乙基 氨基] -六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 酒石酸盐 14(80 mg， 白色固体)， 收率： 68 %。
1H NMR (DMSO-D6, 400ΜΗζ) δ 7.32-7.2(m, 5H)， 5.55(d， 1H), 5.41(d， 1H), 4.97(m, 1H), 4.31(s, 2H), 4.08(m, 1H)， 4.0-3.5(m, 6H)， 2.81(s, 2H), 2.78(s, 6H)， 2.5(m, 2H), 2.0(m, 3H), 1.6-1.3(m, 6H)。 实施例 15
5-环己基甲基 -5-[2-(2-氰基-吡咯烷 -1-基) -2-氧代 -乙基氨基] - 六氢并环戊二烯吡咯
-2-羧酸 二甲基酰胺 酒石酸盐
Figure imgf000045_0001
15
Figure imgf000046_0001
第一步
5-氰基 -5-环己基甲基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺的制备 将 5-氰基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 12a(3.66 g， 17.6 mmol)搅拌 下溶解于 150 mL四氢呋喃中， 滴入溴甲基环己烷 (6.2 g， 35.2 mmol), 滴加六甲基 二硅基胺基锂 (35.2 mL， 35.2 mmol),室温下反应 2小时，薄层色谱跟踪反应至原料 消失， 加入 150 mL饱和氯化铵溶液， 用乙酸乙酯 (60 mIX3)萃取， 合并有机相， 无水硫酸镁干燥， 抽滤， 滤液减压浓縮， 用硅胶柱色谱法纯化所得残余物， 得到 标题产物 5-氰基 -5-环己基甲基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 15a(2.2 g， 黄色固体)， 收率： 41.5 %。
MS m/z (ESI): 304.5(M+l)o
第二步
5-环己基甲基 -5-甲酰基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺的制备 在 0°C下， 将 5-氰基 -5-环己基甲基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 15a(1.2 g， 3.95 mmol)搅拌下溶解于 30 mL二氯甲烷中， 冰浴下滴加二异丁基氢化 铝 C11.8 mL， 11.8 mmol)， 反应 1小时后， 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 加入 100 mL饱和酒石酸钾钠溶液， 搅拌至溶液透明， 用乙酸乙酯 (100 mLx3)萃取， 合并有 机相， 无水硫酸镁干燥， 抽滤， 滤液减压浓縮， 用硅胶柱色谱法纯化所得残余物， 得到标题产物 5-环己基甲基 -5-甲酰基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 15b(0.4 g, 微黄色油状物)， 收率： 33 %。
MS m/z (ESI): 307.4(M+1)。
第三步
5-环己基甲基 -2-二甲基氨基甲酰-八氢并环戊二烯吡咯 -5-羧酸的制备 将 5-环己基甲基 -5-甲酰基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 15b(0.713 g， 2.33 mmol)搅拌下溶解于 60 mL四氢呋喃和 30 mL水的混合溶剂中， 在 0°C下， 加入二水合磷酸二氢钠（1.09 g， 6.99 mmol), 亚氯酸钠 (0.79 g， 6.99 mmol)和 2-甲基 -2-丁烯 (0.62 mL, 7.0 mmol), 在 0°C下反应 2小时， 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 蒸干四氢呋喃， 加入乙酸乙酯萃取水相， 合并有机相， 用无水硫酸镁干燥， 抽滤， 滤液减压浓縮， 用硅胶柱色谱法纯化所得残余物， 得到标题产物 5-环己基甲基 -2- 二甲基氨基甲酰-八氢并环戊二烯吡咯 -5-羧酸 15c(0.75 g， 黄色固体)，收率： 100%。 MS m/z (ESI): 323.3(M+1)。
第四步
5-环己基甲基 -2-二甲基氨基甲酰-八氢并环戊二烯吡咯 -5-羰基 叠氮化物的制备 冰浴下， 将 5-环己基甲基 -2-二甲基氨基甲酰-八氢并环戊二烯吡咯 -5-羧酸 15c(0.75 g， 2.33 mmol)搅拌下溶解于 20 mL丙酮中， 在 0至 -5 °C下滴加三乙胺 (0.36 mL, 2.56 mmol), 加入 2 mL氯甲酸乙酯 (0.25 mL, 2.56 mmol)的丙酮溶液， 搅拌 15 分钟， 加入 2 mL叠氮化钠 (0.303 g， 4.66 mmol)的水溶液， 维持温度在 0至 -5°C， 继续反应 30分钟， 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 蒸干反应液中的丙酮， 加入 10 mL水， 用乙酸乙酯 (10 mLX 5)萃取， 合并有机相， 无水硫酸镁干燥， 抽滤， 滤液 减压浓縮， 所得残余物为标题产物 5-环己基甲基 -2-二甲基氨基甲酰-八氢并环戊二 烯吡咯 -5-羰基 叠氮化物 15d(0.79 g， 黄色油状物)， 直接用于下一步反应。
第五步
5-环己基甲基 -5-异氰酰基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺的制备 将 5-环己基甲基 -2-二甲基氨基甲酰-八氢并环戊二烯吡咯 -5-羰基 叠氮化物 15d(；0.79 g，2.27 mmol)搅拌下溶解于20 mL甲苯中， 加热回流 1小时， 薄层色谱跟 踪反应至原料消失， 蒸干反应液， 得到的残余物为标题产物 5-环己基甲基 -5-异氰 酰基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 15e(0.65 g， 灰色固体)， 直接用于下 一步反应。
MS m/z (ESI): 320.4(M+l
第六步
5_氨基 -5-环己基甲基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺的制备 冰浴下， 将 10 mL的 8 N盐酸滴入 5-环己基甲基 -5-异氰酰基-六氢并环戊二烯 吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 15e(0.65 g， 2.03 mmol)中， 撤掉冰浴， 在 50°C下反应 20 分钟， 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 加入浓氨水至反应液 PH大于 8， 用乙酸乙 酯 (30 mL*5)萃取水相， 合并有机相， 用无水硫酸镁干燥， 抽滤， 滤液减压浓縮， 用硅胶柱色谱法纯化所得残余物， 得到标题产物 5-氨基 -5-环己基甲基 -六氢并环戊 二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 15f(0.5 g， 灰色油状物)， 收率： 84%。
MS m/z (ESI): 294.3(M+l
第七步
5-环己基甲基 -5-[2-(2-氰基-吡咯烷 -1-基) -2-氧代 -乙基氨基] - 六氢并环戊二烯吡咯
-2-羧酸 二甲基酰胺的制备
将 5-氨基 -5-环己基甲基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 15f(0.115 g，
0.39 mmol)搅拌下溶解于 10 mL 二氯甲浣/ N，N-二甲基甲酰胺 < /V=l/l)中， 加入 l-(2-氯-乙酰基) -吡咯烷 -2-氰基 (54 mg， 0.31 mmol), 在 50°C下反应 2小时， 薄层色 谱跟踪反应至原料消失，减压浓縮除掉反应液中的二氯甲烷和 N，N-二甲基甲酰胺， 用硅胶柱色谱法纯化所得残余物，得到标题产物 5-环己基甲基 -5-[2-(2-氰基-吡咯烷 -1-基) -2-氧代 -乙基氨基] - 六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 15g(113 mg， 无色油状液体)， 收率： 67%。
MS m/z (ESI): 430.5(M+1)。
第八步
5-环己基甲基 -5-[2-(2-氰基-吡咯烷 -1-基) -2-氧代 -乙基氨基] - 六氢并环戊二烯吡咯
-2-羧酸 二甲基酰胺 酒石酸盐的制备
将 5-环己基甲基 -5-[2-(2-氰基-吡咯烷 -1-基) -2-氧代 -乙基氨基] - 六氢并环戊二 烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 15g(113 mg， 0.263 mmol)搅拌下溶解于 10 mL乙酸乙酯 中， 滴加 2 mL酒石酸的丙酮溶液， 搅拌 30分钟后， 过滤， 得到标题产物 5-环己 基甲基 -5-[2-(2-氰基-吡咯烷 -基 )-2-氧代 -乙基氨基] - 六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 酒石酸盐 15(40 mg， 白色固体)。
1H NMR (DMSO-Dg, 400ΜΗζ) δ 5.2(m, 1H)， 4.77(s, 2H), 4.18(m， 3H), 4.02(m, 1H)， 3.63(m, 2H), 3.32(m, 2H), 2.73(s, 6H)， 2.58(m, 2H), 2.16-1.87(m， 9H)， 1.59-1.19(m， 8H)。 实施例 16
5-环戊基 -5-[2 2-氰基-吡咯烷 -1-基) -2-氧代 -乙基氨基] -六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧 酸 二甲基酰胺 酒石酸盐
Figure imgf000048_0001
Figure imgf000049_0001
16e 16f 16
第一步
5-氰基 -5-环戊基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺的制备 氮气氛下，将 5-氰基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 12a搅拌下溶解 于 30 mL N，N-二甲基甲酰胺中， 加入碘代环戊烷 (5.4 g， 27.5 mmol)， 滴加六甲基二 硅基胺基锂 (27.5 mL， 27.5 mmol),室温下搅拌 2小时，薄层色谱跟踪反应至原料消 失， 加入 10 mL水， 浓縮掉 N，N-二甲基甲酰胺， 用乙酸乙酯萃取， 合并有机相， 用无水硫酸钠干燥， 抽滤， 滤液减压浓縮， 用硅胶柱色谱法纯化所得残余物， 得 到标题产物 5-氰基 -5-环戊基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 16a(2.6 g， 浅黄色固体)， 收率： 42%。
MS m/z (ESI): 276.2(M+l
Figure imgf000049_0002
第二步
5-环戊基 -5-甲酰基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺的制备 在 0 °C下， 将 5-氰基 -5-环戊基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 16a(0.817 g， 2.97 mmol)搅拌下溶解于 40 mL二氯甲烷中， 冰浴下滴加二异丁基氢 化铝(8.9 mL，8.9 mm0l)， 反应 45分钟后， 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 蒸干二 氯甲烷，加入 100 mL饱和酒石酸钾钠溶液，搅拌至溶液透明，用乙酸乙酯 (100 mLx4) 萃取， 合并有机相， 无水硫酸镁干燥， 抽滤， 滤液减压浓縮， 用硅胶柱色谱法纯 化所得残余物， 得到标题产物 5-环戊基 -5-甲酰基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二 甲基酰胺 16b(0.266 g， 淡黄色油状物)， 收率： 32%。
MS m/z (ESI): 279.3(M+1)。
第三步
5-环戊基 -2-二甲基氨基甲酰-八氢并环戊二烯吡咯 -5-羧酸的制备
将 5-环戊基 -5-甲酰基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 16b(0.266 g， 0.955 mmol)搅拌下溶解于 20 mL四氢呋喃和 10 mL水的混合溶剂中， 在 0°C下， 加入二水合磷酸二氢钠 (0.448 g， 2.87 mmol), 亚氯酸钠 (0.26 g， 2.87 mmol)和 2-甲基 -2-丁烯 (0.24 mL, 2.88 mmol),在 0°C下反应 2小时，薄层色谱跟踪反应至原料消失， 蒸干四氢呋喃， 加入乙酸乙酯萃取水相， 合并有机相， 用无水硫酸镁干燥， 抽滤， 滤液减压浓縮， 用硅胶柱色谱法纯化所得残余物， 得到标题产物 5-环戊基 -2-二甲 基氨基甲酰-八氢并环戊二烯吡咯 -5-羧酸 16^0.28 g， 黄色固体)， 收率： 99.6 %。 MS m/z (ESI): 295.5(M+l
第四步
5-环戊基 -2-二甲基氨基甲酰-八氢并环戊二烯吡咯 -5-羰基 叠氮化物的制备 冰浴下，将 5-环戊基 -2-二甲基氨基甲酰-八氢并环戊二烯吡咯 -5-羧酸 16^0.28 g，
6.95 mmol)搅拌下溶解于 20 mL丙酮中， 在 0至 -5 °C下滴加三乙胺 (0.15 mL, 1.05 mmol), 2 mL氯甲酸乙酯 (Ο.Ι mL, 1.05 mmol)的丙酮溶液， 搅拌 15分钟后， 加入 叠氮化钠 (0.124 g， 1.9 mmol)的水溶液， 在反应 30分钟， 薄层色谱跟踪反应至原料 消失， 蒸干丙酮， 加入 10 mL水， 用乙酸乙酯萃取， 合并有机相， 无水硫酸镁干 燥， 抽滤， 滤液减压浓縮， 得到标题产物 5-环戊基 -2-二甲基氨基甲酰 -八氢并环戊 二烯吡咯 -5-羰基 叠氮化物 16d(0.287 g， 黄色油状物)， 收率： 95 % , 直接用于下一 步反应。
第五步
5-环戊基 -5-异氰酰基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺的制备 将 5-环戊基 -2-二甲基氨基甲酰-八氢并环戊二烯吡咯 -5-羰基 叠氮化物
16d(0.287 g, 0.9 mmol)搅拌下溶解于 10 mL甲苯中， 加热回流 1小时， 薄层色谱跟 踪反应至原料消失， 蒸干溶剂， 得到标题产物 5-环戊基 -5-异氰酰基-六氢并环戊二 烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 16e， 直接用于下一步反应。
MS m/z (ESI): 292.3(M+l
第六步
5-氨基 -5-环戊基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺的制备 冰浴下，向上一步得到的 5-环戊基 -5-异氰酰基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二 甲基酰胺 16e中滴加 10 mL 8N的盐酸， 撤掉冰浴， 在 50°C下反应 15分钟， 薄层 色谱跟踪反应至原料消失， 加入浓氨水调节反应液 PH大于 8， 用乙酸乙酯萃取， 合并有机相， 用无水硫酸镁干燥， 抽滤， 滤液减压浓縮， 用硅胶柱色谱法纯化所 得残余物， 得到标题产物 5-氨基 -5-环戊基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰 16f(0.18 g, 黄色油状液体)， 收率： 81.8 %。
MS m/z (ESI): 266.2(M+l
第七步
5-环戊基 -5-[2 2-氰基-吡咯烷 -1-基) -2-氧代 -乙基氨基] -六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧 酸 二甲基酰胺的制备 氮气氛下， 将 5-氨基 -5-环戊基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 16f(0.108 g， 0.407 mmol)和 1-(2-氯-乙酰基) -吡咯烷 -2-氰基 (70 mg， 0.407 mmol)搅拌 下溶解于 3 mL的 N，N-二甲基甲酰胺， 加入碳酸钾 (57 mg， 0.407 mmol), 油浴 80 °C下反应过夜， 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 浓縮反应液， 用硅胶柱色谱法纯 化所得残余物， 得到标题产物 5-环戊基 -5-[2-(2-氰基-吡咯烷 -1-基) -2-氧代-乙基氨 基] -六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 16g(100 mg， 无色油状液体)， 收率： 61.3 %。
MS m/z (ESI): 402.3(M+l)o
第八步
5-环戊基 -5-[2 2-氰基-吡咯烷 -1-基) -2-氧代 -乙基氨基] -六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧 酸 二甲基酰胺 酒石酸盐的制备
将 5-环戊基 -5-[2-(2-氰基-吡咯烷 -1-基) -2-氧代 -乙基氨基] - 六氢并环戊二烯吡 咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 16g(102 mg， 0.254 mmol)搅拌下溶解于 2 mL乙酸乙酯中， 加入 3 mL酒石酸的丙酮溶液， 搅拌 30分钟， 有白色固体析出， 加入少量正己烷， 继续搅拌，过滤，得到标题产物 5-环戊基 -5-[2-(2-氰基-吡咯烷 -1-基) -2-氧代-乙基氨 基] -六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 酒石酸盐 16(88 mg， 白色固体)， 收 率： 65 %。 实施例 17
5-苄基 -5-[2-(2-氰基-吡咯烷 -1-基) -2-氧代 -乙基氨基] - 六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 酒石酸盐
Figure imgf000051_0001
第一步
5-苄基 -5-[2-(2-氰基-吡咯烷 -1-基) -2-氧代 -乙基氨基] - 六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺的制备
氮气氛下，将 5-氨基 -5-苄基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 14f(0.1 g， 0.35 mmol)、 l-(2-氯-乙酰基) -吡咯烷 -2-氰基 (120.4 mg， 0.7 mmol)和碳酸钾 (49 mg， 0.35 mmol)搅拌下溶解于 3 mL的 N，N-二甲基甲酰胺， 油浴 80°C下反应过夜， 薄层 色谱跟踪反应至原料消失， 浓縮反应液， 用硅胶柱色谱法纯化所得残余物， 得到 标题产物 5-苄基 -5-[2-(2-氰基-吡咯烷 -1-基) -2-氧代 -乙基氨基] - 六氢并环戊二烯吡 咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 17a(56 mg， 无色油状液体)， 收率： 40 %。
MS m/z (ESI): 424.3(M+l)o
第二步
5-苄基 -5-[2-(2-氰基 -B比咯烷小基 )-2-氧代 -乙基氨基] - 六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 酒石酸盐的制备
将 5-苄基 -5-[2 2-氰基 -B比咯烷 -1-基) -2-氧代 -乙基氨基] - 六氢并环戊二烯吡咯
-2-羧酸 二甲基酰胺 17a(56 mg， 0.132 mmol)搅拌下溶解于 1 mL乙酸乙酯中， 加入 l mL酒石酸的丙酮溶液， 搅拌 30分钟， 有白色固体析出， 加入少量正己烷， 继续 搅拌，过滤，得到标题产物 5-苄基 -5-[2-(2-氰基-吡咯烷 -1-基) -2-氧代 -乙基氨基] - 六 氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 酒石酸盐 17(50 mg， 白色固体)， 收率： 67 %。
1H NMR (DMSO-Dg, 400ΜΗζ) δ 7.32-7.19(m, 5H)， 4.78(m, 1H), 4.23(s, 2H), 3.8-3.0(m, 8H)， 2.75(s, 2H), 2.73(s, 6H)， 2.18(m, 2H), 2.16(m, 2H), 1.87(m, 3H), 1.35(m, 3H)。 实施例 18
K2-(2-氰基 -4-氟-吡咯烷 -1-基) -2-氧代 -乙基氨基] -5-甲基-六氢并环戊二烯吡咯 -2- 羧酸 二甲基酰胺 对甲苯磺酸盐
Figure imgf000052_0001
第一步
氰基 -4-氟-吡咯烷 -1-基) -2-氧代-乙胺基 ]-5-甲基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧 酸 二甲基酰胺的制备 氮气氛下，将 5-氨基 -5-甲基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 11c (1.3 g， 7.58 mmol)、 （2S，4S)-l-(2-氯乙酰基) -4-氟 -2-氰基吡咯烷 13g(1.74 g， 9.1 mmol)、 碳 酸钾 (1.26 g， 9.1 mmol)及 30 mL的 N，N-二甲基甲酰胺和 18 mL二氯甲烷加入反应 瓶中， 油浴 30°C下反应过夜后， 薄层色谱跟踪反应， 原料消失， 减压除去 N，N-二 甲基甲酰胺， 用硅胶柱色谱法纯化， 得到标题产物 5-[2-(2-氰基 -4-氟-吡咯烷 -1- 基) -2-氧代 -乙基氨基] -5-甲基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 18a (1.39 g， 白色固体)， 收率： 50%。
MS m/z (ESI): 348.2(M+1)。
第二步
5-[2-(2-氰基-吡咯烷 -1-基) -2-氧代-乙胺基 ]-5-甲基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 对甲苯磺酸盐的制备
室温下， 将 5-[2-(2-氰基 -4-氟-吡咯烷 -1-基 2-氧代 -乙基氨基] -5-甲基-六氢并环 戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 18a (0.9 g， 2.47 mmol)搅拌下溶解于 5 mL的二氯甲 烷中， 再将一水合对甲苯磺酸 (469 mg， 2.47 mmol)搅拌下溶解于 3 mL丙酮中， 将 对甲苯磺酸的丙酮溶液滴加入上述溶液中， 滴加过程中有白色沉淀逐渐产生， 搅 拌 30分钟后， 加 1 mL正己烷搅拌， 过滤， 得到的标题产物 5-[2-(2-氰基 -4-氟-吡 咯烷 -1-基) -2-氧代 -乙基氨基] -5-甲基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 对 甲苯磺酸盐 18(1.3 g， 白色固体)， 收率： 93 %。
MS m/z (ESI): 366.1(M+1)。
1H NMR (DMSO-D6, 400MHz) δ 7.74(d, 2H), 7.29(d, 2H), 5.57-5.44(m, 1H)， 5.07(m,
1H), 4.19-4.07(m, 4H), 3.49(m, 2H), 3.35(m, 2H), 3.0(m, 2H), 2.9(s, 6H)， 2.6(m, 2H),
2.39(m, 5H)， 1.57(m, 2H), 1.34(s, 3H)。 实施例 19
5-乙基 -5-[2 2-氰基-吡咯烷 -1-基) -2-氧代 -乙基氨基] - 六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 酒石酸盐
Figure imgf000053_0001
19
Figure imgf000054_0001
第一步
5-氰基 -5-乙基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 在氮气保护下， 将 5-氰基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 12a (3.0 g， 14.5 mmol)搅拌下溶解于 60 mL干燥的四氢呋喃， 加入碘乙烷 (4.52 g， 29 mmol)在 室温下， 滴加六甲基二硅基胺基锂 (29 mL， 29 mmol), 室温下反应 2小时， 薄层色 谱跟踪反应， 原料消失， 加入 20 mL水， 用乙酸乙酯 (200 mIX3)萃取， 无水硫酸 钠干燥， 抽滤， 滤液减压浓縮， 得到油状物， 薄层色谱显示为两个较近的点， 用 硅胶柱色谱法纯化， 得到 5-氰基 -5-乙基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 19a(1.64 g, 浅黄色油状物)。
MS m/z (ESI): 236.3(M+1)。
1H NMR (DMSO-D6, 400MHz) δ 3.5-3.0(m, 4H)， 2.7(s, 6H)， 1.9-1.2(m, 8H)， 1.19(m, 3H)。
第二步
2-二甲基氨甲酰基 -5-乙基-八氢-并环戊二烯吡咯 -5-羧酸的制备 将 5-氰基 -5-乙基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 19a (1.54 g， 6.55 mmol)搅拌下溶解于 60 mL二氯甲烷中， 在 0°C下滴加二异丁基氢化铝 (19.6 mL, 19.6 mmol), 滴毕， 在 0°C下搅拌 30分钟， 薄层色谱跟踪反应， 原料消失， 反应结 束， 加入 1.5 mL水， 用无水硫酸钠干燥， 抽滤， 滤液减压浓縮， 得到标题产物 5- 乙基 -5-甲酰基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 19b(0.4 g， 淡黄色液体)， 收率： 26 %。
MS m/z (ESI): 239.1(M+l)o
第三步
5-乙基 -2-二甲基氨基甲酰-八氢并环戊二烯吡咯 -5-羧酸的制备 将 5-乙基 -5-甲酰基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 19b (0.4 g， 1.68 mmol)搅拌下溶解于 18 mL四氢呋喃和 9 mL水的混合溶剂中， 加入二水合磷酸二 氢钠 (787 mg， 5.04 mmol), 亚氯酸钠 (0.454 g， 5.04 mmol)和 2-甲基 -2-丁烯 (354 mg， 5.06 mmol), 氮气氛下， 在 0°C下反应 2小时， 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 加 入乙酸乙酯萃取水相， 合并有机相， 用无水硫酸镁干燥， 抽滤， 滤液减压浓縮， 得到标题产物 5-乙基 -2-二甲基氨基甲酰-八氢并环戊二烯吡咯 -5-羧酸 19c(0.426 g， 淡黄色油状液体)， 收率： 100 %， 直接用于下一步反应。
MS m/z (ESI): 255.2(M+1)。
第四步
5-乙基 -2-二甲基氨基甲酰-八氢并环戊二烯吡咯 -5-羰基 叠氮化物的制备 冰浴下， 将 5-乙基 -2-二甲基氨基甲酰-八氢并环戊二烯吡咯 -5-羧酸 19c (0.56 g， 2.2 mmol)搅拌下溶解于 60 mL丙酮中，在 -5 °C下滴加三乙胺 (0.245 mg， 2.43 mmol), 加入 2 mL氯甲酸乙酯 (263 mg， 2.43 mmol)的丙酮溶液， 搅拌 15分钟， 加入 2 mL 叠氮化钠 C0.286 g， 4.4 mmol)的水溶液， 维持温度在 0至 -5 °C， 继续反应 30分钟， 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 加入 10 mL水， 用乙酸乙酯 (10 mL X 5)萃取， 合 并有机相， 无水硫酸镁干燥， 抽滤， 滤液减压浓縮， 所得残余物为标题产物 5-乙 基 -2-二甲基氨基甲酰-八氢并环戊二烯吡咯 -5-羰基 叠氮化物 19d(0.5 g， 淡黄色油 状物)， 直接用于下一步反应。
第五步
5-乙基 -5-异氰酰基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺的制备 将 5-乙基 -2-二甲基氨基甲酰-八氢并环戊二烯吡咯 -5-羰基 叠氮化物 19d (0.5 g， 1.86 mmol)搅拌下溶解于 30 mL甲苯中， 加热回流 2小时， 薄层色谱跟踪反应至原 料消失， 蒸干反应液， 得到的残余物为标题产物 5-乙基 -5-异氰酰基-六氢并环戊二 烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 19e， 直接用于下一步反应。
第六步
5-氨基 -5-乙基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺的制备 室温下， 将 12 mL的 8 N盐酸滴入上一步得到的 5-环己基甲基 -5-异氰酰基-六 氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 19e中，搅拌 30分钟，用 8N氢氧化钠溶液 调节 pH为 9-10， 用二氯甲烷 (30 mL X 5)萃取水相， 合并有机相， 用无水硫酸镁干 燥， 抽滤， 滤液减压浓縮， 用硅胶柱色谱法纯化所得残余物， 得到标题产物 5-氨 基 -5-乙基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 19f(0.3 g， 无色油状物)，收率： 71 %。
MS m/z (ESI): 226.2(M+1)。
第七步
5-乙基 -5-[2-(2-氰基-吡咯烷 -1-基) -2-氧代 -乙基氨基] - 六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺的制备
氮气氛下， 将 5-氨基 -5-乙基-六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 19f (0.202 g， 0.897 mmol) 1-(2-氯-乙酰基) -吡咯烷 -2-氰基 (185 mg， 1.07 mmol) 碳酸钾 (148 mg， 1.07 mmol)及 9 mL二氯甲浣/ N，N-二甲基甲酰胺 (V/V=l/1)混合溶剂加入 反应瓶中， 在 60°C下反应 2小时， 薄层色谱跟踪反应至原料消失， 减压浓縮除掉 反应液中的二氯甲烷和 N，N-二甲基甲酰胺， 用硅胶柱色谱法纯化所得残余物， 得 到标题产物 5-乙基 -5-[2-(2-氰基-吡咯烷 -1-基) -2-氧代 -乙基氨基] - 六氢并环戊二烯 吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 19g(120 mg， 淡黄色油状液体)， 收率： 40%。
MS m/z (ESI): 362.2(M+1)。
第八步
5-乙基 -5-[2-(2-氰基-吡咯烷 -1-基) -2-氧代 -乙基氨基] - 六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 酒石酸盐的制备
将 5-乙基 -5-[2-(2-氰基-吡咯烷 -1-基) -2-氧代-乙基氨基]- 六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 19g (120 mg， 0.33 mmol)搅拌下溶解于 1 mL乙酸乙酯中，滴加
2 mL酒石酸(50 mg，0.33 mmol)的丙酮溶液， 搅拌 30分钟后， 过滤， 得到标题产物
5-乙基 -5-[2-(2-氰基-吡咯烷 -1-基) -2-氧代 -乙基氨基] - 六氢并环戊二烯吡咯 -2-羧酸 二甲基酰胺 酒石酸盐 19(160 mg， 白色固体)， 收率： 94%。
MS m/z (ESI): 362.2(M+l)o
1H NMR (DMSO-D6, 400MHz) δ 4.79(m, 1H), 4.11(s， 2H), 3.65(m, 2H), 3.49(m, 2H),
3.22(m, 4H)， 2.75(s, 6H)， 2.55(m, 2H), 2.19(m, 2H), 2.09(m, 2H), 1.99(m, 2H), 1.51(m,
4H)，0.86(t， 3H)。 测试例 生物学评价
DPP IV/DPP8/DPP9抑制活性的测定
下面的方法是用来测定本发明化合物抑制 DPPIV/DPP8/DPP9酶活性的。 检测 了本发明中化合物抑制纯 DPPIV/DPP8/DPP9酶活性的抑制能力。每个化合物的抑 制率或半抑制浓度 IC5Q(把酶活性抑制至 50%时所测化合物的浓度)是以固定量的 酶混合底物及不同浓度的待测化合物来测定的。
DPP IV抑制活性的测定 材料和方法：
材料：
a. 白色 96孔板 (BMG)
b. Tris缓冲液： 制备 lOOmL 2mM的 Tris缓冲液， 将 0.0242g Tris溶解于约 90mL d¾0中， 用 HC1和 NaOH调节 pH到 8.00， 最后加 d¾0至 100mL。 c. DPPIV酶 (CalBiochem Catalog no.317630), 溶解于 Tris缓冲液中至 2mM。 d. DPPIV— Glo™底物 (Promega Catalog no.G8350)， 溶解于 dH20中至 lmM。 e. DPPIV— Glo.缓冲液 (Promega Catalog no.G8350)
f. 荧光素检测试剂 (Promega Catalog no.G8350)
g. DMSO
h. d¾0
操作：
按以下操作顺序进行：
I. 解冻 DPPIV— Glo.使用前缓冲并平衡到室温。
2. 使用前缓冲冻存的荧光素检测试剂。
3. 悬浮 DPPIV— Glo.在底物中加入超纯水轻微混合均匀后， 制成 ImM的底物。
4. 将荧光素检测试剂放入茶色瓶中， 加入 DPPIV— Glo.。 荧光素检测试剂应在 1 分钟内溶解。
5. 用 DMSO溶解所测化合物至最终操作浓度的 50倍。
6. 每个试管中加入 50倍浓度的所测化合物 2 L， 在反面对照合空白对照中加入 2 LDMSO。
7. 在每个试管中加入 46 L Tris缓冲液， 在空白对照中加入 48 L Tris缓冲液。
8. 在反面对照和测试样的每个试管中加入 2μΙ )ΡΡΐν酶。
9. 振动混合并离心试管。 将试管中物质全部转移到 96-well平板上。
10.混合底物和 DPPIV— Glo.比例为 1 :49。 振动混合至充分混合。 使用前在室温下 静置 30-60分钟。
I I.在每个 96-well平板孔中加入 5(^L DPPIV— Glo.和底物的混合液， 用封膜封住 平板。
12.用平板振荡器在 300-500rpm/30s下慢慢混合 96孔中物质。在室温下培养 30分 钟到 3小时。
13.记录发光。
抑制率定义： [1-(S-B)/(N-B)]*100%
S: 样品
B: 空白对照
N: 反面对照 DPP 8抑制活性的测定 材料和方法：
材料：
i. 白色 96孔板 (BMG)
j. Tris缓冲液： 制备 lOOmL 2mM的 Tris缓冲液， 将 0.0242g Tris溶解于约 90mL d¾0中， 用 HC1和 NaOH调节 pH到 8.00， 最后加 d¾0至 100mL。
k. DPP8酶 (Bioscience Catalog no.80080), 溶解于 25 mM Tris-HCl, pH8.0, 100 mM NaCl, 0.05 % Tween-20, 50 % glycerol, 3 mM DTT缓冲液中。反应使用终浓度为 0.1 ng/ 100 assay。
1. DPP8— Glo™底物 (Promega Catalog no.G8350), 溶解于 d¾0中至 lmM。
m. DPP8— Glo.缓冲液 (Promega Catalog no.G8350)
n. 荧光素检测试剂 (Promega Catalog no.G8350)
o. DMSO
p. d¾0
操作：
按以下操作顺序进行：
14.解冻 DPP8— Glo.使用前缓冲并平衡到室温。
15.使用前缓冲冻存的荧光素检测试剂。
16.悬浮 DPP8— Glo.在底物中加入超纯水轻微混合均匀后， 制成 ImM的底物。
17.将荧光素检测试剂放入茶色瓶中， 加入 DPP8— Glo.。 荧光素检测试剂应在 1 分钟内溶解。
18.用 DMSO溶解所测化合物至最终操作浓度的 50倍。
19.每个试管中加入 50倍浓度的所测化合物 2 L， 在反面对照合空白对照中加入 2 LDMSO。
20.在每个试管中加入 46 L Tris缓冲液， 在空白对照中加入 48 L Tris缓冲液。
21.在反面对照和测试样的每个试管中加入 2μΙ )ΡΡ8酶。
22.振动混合并离心试管。 将试管中物质全部转移到 96-well平板上。
23.混合底物和 DPP8— Glo.比例为 1 :49。振动混合至充分混合。使用前在室温下静 置 30-60分钟。
24.在每个 96-well平板孔中加入 5(^L DPP8— Glo.和底物的混合液，用封膜封住平 板。
25.用平板振荡器在 300-500rpm/30s下慢慢混合 96孔中物质。在室温下培养 30分 钟到 3小时。
26.记录发光。
抑制率定义： [1-(S-B)/(N-B)]* 100%
S: 样品
B: 空白对照
N: 反面对照 DPP 9抑制活性的测定
材料和方法：
材料：
q. 白色 96孔板 (BMG)
r. Tris缓冲液： 制备 lOOmL 2mM的 Tris缓冲液， 将 0.0242g Tris溶解于约 90mL d¾0中， 用 HC1和 NaOH调节 pH到 8.00， 最后加 d¾0至 100mL。
s. DPP9酶 (Bioscience Catalog no.80090), 溶解于 25 mM Tris-HCl, pH8.0, 100 mM
NaCl, 0.05 % Tween-20, 50 % glycerol, 3 mM DTT缓冲液中。反应使用终浓度为
0.01 ng/ 100 μL assay。
t.
u. DPP9— Glo™底物 (Promega Catalog no.G8350)， 溶解于 dH20中至 lmM。
v. DPP9— Glo.缓冲液 (Promega Catalog no.G8350)
w. 荧光素检测试剂 (Promega Catalog no.G8350)
x. DMSO
y. d¾0
操作：
按以下操作顺序进行：
27.解冻 DPP9— Glo.使用前缓冲并平衡到室温。
28.使用前缓冲冻存的荧光素检测试剂。
29.悬浮 DPP9— Glo.在底物中加入超纯水轻微混合均匀后， 制成 ImM的底物。 30.将荧光素检测试剂放入茶色瓶中， 加入 DPP9— Glo.。 荧光素检测试剂应在 1 分钟内溶解。
31.用 DMSO溶解所测化合物至最终操作浓度的 50倍。
32.每个试管中加入 50倍浓度的所测化合物 2 L， 在反面对照合空白对照中加入 2 LDMSO。
33.在每个试管中加入 46 L Tris缓冲液， 在空白对照中加入 48 L Tris缓冲液。
34.在反面对照和测试样的每个试管中加入 2μΙ )ΡΡ9酶。
35.振动混合并离心试管。 将试管中物质全部转移到 96-well平板上。
36.混合底物和 DPP9— Glo.比例为 1 :49。振动混合至充分混合。使用前在室温下静 置 30-60分钟。
37.在每个 96-well平板孔中加入 5(^L DPP9— Glo.和底物的混合液，用封膜封住平 板。
38.用平板振荡器在 300-500rpm/30s下慢慢混合 96孔中物质。在室温下培养 30分 钟到 3小时。
39.记录发光。
抑制率定义： [1-(S-B)/(N-B)]*100%
S: 样品
B: 空白对照
N: 反面对照 表 1 实施例 IC50数据
Figure imgf000060_0001
DPPIV抑制剂降血糖作用的初步评价
试验目的：
观察 DPPIV抑制剂类受试化合物实施例 1和 实施例 2对正常 ICR小鼠口服糖 耐量的影响， 初步评价其在体内的降血糖作用。 受试动物：
种属、 品系： ICR小鼠
来 源： 中国科学院上海实验动物中心， 合格证号： SYXK (沪) 2004-2005 体 重： 25〜30g
性 别： 雄性
动 物 数： 40只
伺 养 条 件： SPF级动物房伺养， 温度：22— 24°C， 湿度： 45— 80%， 光照：
150-300Lx, 12小时昼夜交替。 受试药物：
名 称： 实施例 1化合物
批 号： 01
颜色、 形态： 白色粉末
纯 度： 96.97%
提供单位： 上海恒瑞医药有限公司研发中心
配制方法： 准确称取药物， 加入双蒸水，分别配制成 0.5、 0.15及 0.05mg/mL 的混悬液。（注： 该化合物虽供试品接收单上显示易溶于水， 但实 验中发现其水溶性较差， 低浓度时基本能溶解， 但浓度为
0.5mg/mL 时仍有肉眼可见的颗粒存在。 我们也曾试用 1%CMC 配制该化合物， 但效果比双蒸水配制差。 ）
给药剂量： 口服给药： 1、 3、 10mg/kg, 容积 20mL/kg。
名 称： 实施例 2化合物
批 号： 01
颜色、 形态： 白色粉末
纯 度： 99.62%
提供单位： 上海恒瑞医药有限公司研发中心
配制方法： 准确称取药物， 加入双蒸水溶解， 充分混匀， 配成 1.5mg/mL 的 溶液， 然后稀释成 0.5、 0.15及 0.05mg/mL的透明溶液。
给药剂量： 口服给药： 1、 3、 10mg/kg, 容积 20mL/kg。 试验方法: 一、 药物对正常 ICR小鼠血糖的影响
取正常雄性 ICR小鼠， 按体重随机分组， 每组 6只， 分别为空白对照、 阳性 对照组， 以及不同剂量的给药组。 具体分组如下：
试验 1 :
空白对照： 口服双蒸水
给药组 1 口服 实施例 1化合物 lmg/kg
口服 实施例 1化合物 3mg/kg
口服 实施例 1化合物 10mg/kg
给药组 2 口服 实施例 2化合物 l mg/kg
口服 实施例 2化合物 3mg/kg
口服 实施例 2化合物 10mg/kg
试验 2:
空白对照： 口服双蒸水
给药组 1 口服 实施例 1化合物 lmg/kg
口服 实施例 1化合物 3mg/kg
口服 实施例 1化合物 10mg/kg
给药组 2 ： 口服 实施例 2化合物 l tng/kg
口服 实施例 2化合物 3mg/kg
口服 实施例 2化合物 10mg/kg
各组动物禁食 6小时后， 分别单次给予受试药物或双蒸水， 于给药后 30分钟 时口服葡萄糖 2.5g/kg， 于给糖前及给糖后 30、 60和 120分钟时取血， 测定血清葡 萄糖水平。 二、 血清葡萄糖测定方法：
采用葡萄糖试剂盒测定血清中的葡萄糖含量， 取 250μ1酶工作液， 加入 5μ1血 清， 同时设立空白管 (加入 5 μ1双蒸水)及标准管 (加入 5 μ1葡萄糖标液)， 混匀， 37°C 水浴 20分钟， 以空白管调零， OD505nm处比色测定。
血清葡萄糖含量 BG(mmol/l)=OD /OD X 5.55 数据处理和统计分析：
1、 采用均值士 SD及 Student-t test对数据进行统计学分析
2、 计算给糖后 30分钟时血糖下降百分率以及曲线下面积 AUC 试验结果: 试验 1：
雄性 ICR小鼠于禁食 6小时后口服双蒸水、 不同剂量的受试物实施例 1、 实施 例 2， 各组于给药 30分钟后， 做口服糖耐量试验。 结果显示， 空白对照组小鼠口 服葡萄糖 2.5g/kg后血清葡萄糖浓度明显升高， 30分钟时达到峰值。实施例 1化合 物低、 中、 高 3个剂量组小鼠的血糖在 30分钟时均明显低于空白对照组， 其血糖 下降百分率分别达 19.16%、 22.85和 31.85%。 实施例 2化合物各剂量组小鼠给糖 后 30分钟时血糖明显低于空白对照组 (P<0.01)， 与空白对照组相比， 分别下降了 25.54%、 25.92禾口 26.93%。 试验 2:
雄性 ICR小鼠于禁食 6小时后口服双蒸水、 不同剂量的受试物实施例 1、 实 施例 2， 各组于给药 30分钟后， 做口服糖耐量试验。 结果显示， 空白对照组小鼠 口服葡萄糖 2.5g/kg后血清葡萄糖浓度明显升高， 30 分钟时达到峰值； SHR1039 各剂量组小鼠给糖后 30分钟时血糖明显低于空白对照组 (P<0.01)， 与空白对照组 相比， 分别下降了 26.10%、 30.24和 32.05%。 SHR1040低、 中、 高 3个剂量组小 鼠的血糖在 30分钟时均明显低于空白对照组， 其血糖下降百分率分别达 24.51%、 26.96%和 27.75%。 结论：
本报告中的两次试验结果均显示，受试化合物实施例 1、 实施例 2在正常 ICR 小鼠口服糖耐量试验中均具有明显的降血糖作用。 其中， 受试化合物实施例 1 显 示出较好的量效关系。 DPPIV抑制类化合物对 KKAy小鼠口服糖耐量的影响 试验目的：
观察受试化合物实施例 1和 实施例 2对 II型糖尿病 KKAy小鼠口服糖耐量的 影响， 初步评价其在体内的降血糖作用。 受试动物：
种属、 品系： KKAy小鼠
来 源： 中国科学院上海实验动物中心， 合格证号： SYXK (沪) 2004-2005 体 重： 40〜55g
性 别： 雌性： 52只； 雄性： 33只
伺 养 条 件： SPF级动物房伺养， 温度：22— 24°C， 湿度： 45— 80%， 光照：
150-300Lx, 12小时昼夜交替。 受试药物：
名 称： 实施例 1化合物和 实施例 2化合物
配制方法： 准确称取药物， 加入双蒸水溶解， 充分混匀， 配成 3mg/mL的混 悬液， 然后稀释成 1、 0.3和 O.lmg/mL的透明溶液。
给药剂量： 口服给药： 1、 3、 10、 30mg/kg, 容积 10mL/kg。 试验方法：
受试物对 KKAy小鼠血糖的影响
取正常 KKAy小鼠， 禁食 6小时后按体重和空腹血糖分组， 每组 5只， 分别 为空白对照以及不同剂量的给药组。 具体实验如下：
试验 1 : 雄性 0704
空白对照： 口服双蒸水
SHR1039组 ： 口服 实施例 1化合物 10mg/kg
口服 实施例 1化合物 30mg/kg
试验 2: 雌性 0816
空白对照： 口服双蒸水
SHR1039组 ： 口服 实施例 1化合物 3mg/kg
口服 实施例 1化合物 10mg/kg
试验 3: 雄性 0712
空白对照： 口服双蒸水
SHR1040组 ： 口服 实施例 2化合物 3mg/kg
口服 实施例 2化合物 10mg/kg
试验 4: 雌性 0907
空白对照： 口服双蒸水
SHR1040组 ： 口服 实施例 2化合物 3mg/kg
口服 实施例 2化合物 10mg/kg
各组动物禁食 6小时后， 分别单次给予受试化合物或双蒸水， 于给药后 30分 钟时口服葡萄糖 2.5g/kg (雌性 KKAy小鼠)或 1.5g/kg (雄性 KKAy小鼠)，于给糖后 0、 30、 60和 120分钟时用血糖仪测定血清葡萄糖含量。 数据处理和统计分析-
3、 采用均值±80及 SY i - test或 Anova对数据进行统计学分析
4、 计算给糖后 30分钟时血糖下降百分率以及曲线下面积 AUC 试验结果：
四、 化合物实施例 1 : 试验 1、 2 雄性 KKAy小鼠于禁食 6小时后口服双蒸水及不同剂量受试物实施例 1， 各 组于给药 30分钟后， 做口服糖耐量试验。 结果显示， 空白对照组小鼠口服葡萄糖 1.5g/kg 后血清葡萄糖浓度明显升高， 30 分钟时达到峰值； 实施例 1 在 10 和 30mg/kg组小鼠给糖后 30分钟时血糖比空白对照组有所降低，与空白对照组相比， 分别下降了 16.22%和 17.15%。
雌性 KKAy小鼠于禁食 6小时后口服双蒸水及不同剂量受试物实施例 1， 各组 于给药 30 分钟后， 做口服糖耐量试验。 结果显示， 空白对照组小鼠口服葡萄糖 2.5g/kg后血清葡萄糖浓度明显升高， 30分钟时达到峰值； 实施例 1在 3和 10mg/kg 组小鼠给糖后 30分钟时血糖与空白对照组相比明显降低， 其下降率为 40.63%和 24.68%。
五、 化合物 实施例 2: 试验 3、 4
雄性 KKAy小鼠于禁食 6小时后口服双蒸水及不同剂量受试物实施例 2， 各 组于给药 30分钟后， 做口服糖耐量试验。 结果显示， 空白对照组小鼠口服葡萄糖 1.5g/kg 后血清葡萄糖浓度明显升高， 30 分钟时达到峰值； 实施例 2 在 10 和 30mg/kg组小鼠给糖后 30分钟时血糖比空白对照组有所降低，与空白对照组相比， 分别下降了 13.79%和 12.23%。
雌性 KKAy小鼠于禁食 6小时后口服双蒸水及不同剂量受试物实施例 2， 各组 于给药 30 分钟后， 做口服糖耐量试验。 结果显示， 空白对照组小鼠口服葡萄糖 2.5g/kg 后血清葡萄糖浓度明显升高， 30 分钟时达到峰值； 实施例 2 化合物 10mg/kg组小鼠给糖后 30分钟时血糖较空白对照组有所降低 (P=0.075， anova), 降 幅达 21.55%， 但由于个体差异较大， 无显著性差异。 结论：
受试化合物实施例 1和 实施例 2在 II型糖尿病 KKAy小鼠口服糖耐量试验中 均具有一定的降血糖作用。

Claims

权利要求
1. 一种由通式 (I)表示的化合物或其药学上可接受的盐:
R
/
Figure imgf000066_0001
其巾：
R选自烷基、 环烷基、 ^代烷基、 芳基、 杂芳基、 胺酰烷基、 酰胺烷基、 杂环 胺酰烷基或氨烷基， 其中所述杂环为五元杂环或六元杂环， 且该杂环进一步被一 个或多个选自烷基、 芳基、 杂芳基、 卤代烷基、 卤代烷氧基、 羟基、 氨基、 烷氨 基、 酰胺基、 胺酰基、 氰基、 块基、 烷氧基、 芳氧基、 氨烷基、 羟烷基、 杂环烷 基、 羧酸、 羧酸酯或卤素的取代基取代；
选自氢原子、烷基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、 -C(0)NR3R4 -C(0)R3 或 -C(0)OR3， 其中烷基、 环烷基、 杂环烷基、 芳基或杂芳基进一步被一个或多个 选自烷基、 芳基、 羟基、 氨基、 烷氧基、 芳氧基或杂环烷基的取代基所取代；
R2选自氢原子或烷基，其中烷基进一步被一个或多个选自环烷基或芳基的取代 基所取代；
R3和 R4分别选自氢原子、 烷基、 环烷基、 芳基、 杂芳基或杂环烷基， 其中烷 基、 环烷基、 芳基、 杂芳基或杂环烷基进一步被一个或多个选自烷基、 环烷基、 芳基、 杂芳基、 烷氧基、 环烷氧基、 芳氧基、 杂芳氧基、 卤素、 羟基、 氨基、 氰 基、 羟烷基、 杂环烷基、 杂环烷氧基、 三氟甲基、 羧酸或羧酸酯的取代基所取代； 同时 R3和 R4与 N原子一起形成 3〜8元的杂环基，其中 5〜8元杂环内进一步 含有一个或多个 N、 0或 S原子，并且 3〜8元杂环进一步被一个或多个选自烷基、 芳基、 杂芳基、 卤代烷基、 卤代烷氧基、 羟基、 氨基、 氰基、 烷氧基、 芳氧基、 羟烷基、 杂环烷基、 羧酸、 羧酸酯、 卤素或 -NR3R4的取代基所取代；
n是 0〜4。
2. 根据权利要求 1所述的化合物或其药学上可接受的盐， 包括下述通式 (IA)表示 的化合物或其药学上可接受的盐：
Figure imgf000067_0001
其巾：
R选自烷基、 环烷基、 ^代烷基、 芳基、 杂芳基、 胺酰烷基、 酰胺烷基、 杂环 胺酰烷基或氨烷基， 其中所述杂环为五元杂环或六元杂环， 且该杂环进一步被一 个或多个选自烷基、 芳基、 杂芳基、 卤代烷基、 卤代烷氧基、 羟基、 氨基、 烷氨 基、 酰胺基、 胺酰基、 氰基、 块基、 烷氧基、 芳氧基、 氨烷基、 羟烷基、 杂环烷 基、 羧酸、 羧酸酯或卤素的取代基取代；
选自氢原子、烷基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、 -C(0)NR3R4 -C(0)R3 或 -C(0)OR3， 其中烷基、 环烷基、 杂环烷基、 芳基或杂芳基进一步被一个或多个 选自烷基、 芳基、 羟基、 氨基、 烷氧基、 芳氧基或杂环烷基的取代基所取代；
R2选自氢原子或烷基，其中烷基进一步被一个或多个选自环烷基或芳基的取代 基所取代；
R3和 R4分别选自氢原子、 烷基、 环烷基、 芳基、 杂芳基或杂环烷基， 其中烷 基、 环烷基、 芳基、 杂芳基或杂环烷基进一步被一个或多个选自烷基、 环烷基、 芳基、 杂芳基、 烷氧基、 环烷氧基、 芳氧基、 杂芳氧基、 卤素、 羟基、 氨基、 氰 基、 羟烷基、 杂环烷基、 杂环烷氧基、 三氟甲基、 羧酸或羧酸酯的取代基所取代； 同时 R3和 R4与 N原子一起形成一个 3〜8元的杂环基，其中 5〜8元杂环内进 一步含有一个或多个 N、 0或 S原子， 并且 3〜8元杂环进一步被一个或多个选自 烷基、 芳基、 杂芳基、 卤代烷基、 卤代烷氧基、 羟基、 氨基、 氰基、 烷氧基、 芳 氧基、 羟烷基、 杂环烷基、 羧酸、 羧酸酯、 卤素或 -NR3R4的取代基所取代。
3. 根据权利要求 1或 2所述的化合物或其药学上可接受的盐， 其中 R为
Figure imgf000067_0002
R5选自氢原子、烷基、环烷基、 芳基、 杂芳基或杂环烷基， 其中烷基、环烷基、 芳基、 杂芳基或杂环烷基进一步被一个或多个选自烷基、 环烷基、 芳基、 杂芳基、 烷氧基、 环烷氧基、 芳氧基、 杂芳氧基、 卤素、 羟基、 氨基、 烷氨基、 氰基、 羟 烷基、 杂环烷基、 杂环烷氧基、 羧酸或羧酸酯的取代基所取代；
R6和 R7各自分别选自烷基、 芳基、 杂芳基、 卤代烷基、 卤代烷氧基、 羟基、 氨基、 氰基、 块基、 烷氧基、 芳氧基、 羟烷基、 杂环烷基、 羧酸、 羧酸酯或卤素; W为碳、 硫或氧原子， 当 W为碳时， 可以进一步被 或1 7所取代。
4. 根据权利要求 1所述的化合物或其药学上可接受的盐， 包括下述通式 (IB)表示 的化合物或其药学上可接受的盐：
Figure imgf000068_0001
其中： R是
Figure imgf000068_0002
Ri选自氢原子、烷基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、 -C(0)NR3R4 -C(0)R3、 -C(0)OR3， 其中烷基、 环烷基、 杂环烷基、 芳基或杂芳基进一步被一个或多个选 自烷基、 芳基、 羟基、 氨基、 烷氧基、 芳氧基或杂环烷基的取代基所取代；
R2选自氢原子或烷基，其中烷基进一步被一个或多个选自环烷基或芳基的取代 基所取代；
R3和 R4分别选自氢原子、 烷基、 环烷基、 芳基、 杂芳基或杂环烷基， 其中烷 基、 环烷基、 芳基、 杂芳基或杂环烷基进一步被一个或多个选自烷基、 环烷基、 芳基、 杂芳基、 烷氧基、 环烷氧基、 芳氧基、 杂芳氧基、 卤素、 羟基、 氨基、 氰 基、 羟烷基、 杂环烷基、 杂环烷氧基、 三氟甲基、 羧酸或羧酸酯的取代基所取代； 同时 R3和 R4与 N原子一起形成一个 3〜8元的杂环基，其中 5〜8元杂环内进 一步含有一个或多个 N、 0或 S原子， 并且 3〜8元杂环进一步被一个或多个选自 烷基、 芳基、 杂芳基、 卤代烷基、 卤代烷氧基、 羟基、 氨基、 氰基、 烷氧基、 芳 氧基、 羟烷基、 杂环烷基、 羧酸、 羧酸酯、 卤素或 -NR3R4的取代基所取代；
R5选自氢原子、烷基、环烷基、 芳基、 杂芳基或杂环烷基， 其中烷基、环烷基、 芳基、 杂芳基或杂环烷基进一步被一个或多个选自烷基、 环烷基、 芳基、 杂芳基、 烷氧基、 环烷氧基、 芳氧基、 杂芳氧基、 卤素、 羟基、 氨基、 烷氨基、 氰基、 羟 烷基、 杂环烷基、 杂环烷氧基、 羧酸或羧酸酯的取代基所取代；
R6和 R7各自分别选自烷基、 芳基、 杂芳基、 卤代烷基、 卤代烷氧基、 羟基、 氨基、 氰基、 块基、 烷氧基、 芳氧基、 羟烷基、 杂环烷基、 羧酸、 羧酸酯或卤素；
W为碳、 硫或氧原子， 当 W为碳时， 可以进一步被 R6或 R7所取代。
5. 根据权利要求 1所述的化合物或其药学上可接受的盐， 包括下述通式 (IC)表示 的化合物或其药学上可接受的盐：
Figure imgf000069_0001
(IC)
其中： R是
Figure imgf000069_0002
Ri选自氢原子、烷基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、 -C(0)NR3R4 -C(0)R3、 -C(0)OR3， 其中烷基、 环烷基、 杂环烷基、 芳基或杂芳基进一步被一个或多个选 自烷基、 芳基、 羟基、 氨基、 烷氧基、 芳氧基或杂环烷基的取代基所取代；
R2选自氢原子或烷基，其中烷基进一步被一个或多个选自环烷基或芳基的取代 基所取代；
R3和 R4分别选自氢原子、 烷基、 环烷基、 芳基、 杂芳基或杂环烷基， 其中烷 基、 环烷基、 芳基、 杂芳基或杂环烷基进一步被一个或多个选自烷基、 环烷基、 芳基、 杂芳基、 烷氧基、 环烷氧基、 芳氧基、 杂芳氧基、 卤素、 羟基、 氨基、 氰 基、 羟烷基、 杂环烷基、 杂环烷氧基、 三氟甲基、 羧酸或羧酸酯的取代基所取代； 同时 R3和 R4与 N原子一起形成 3〜8元的杂环基，其中 5〜8元杂环内进一步 含有一个或多个 N、 0或 S原子，并且 3〜8元杂环进一步被一个或多个选自烷基、 芳基、 杂芳基、 卤代烷基、 卤代烷氧基、 羟基、 氨基、 氰基、 烷氧基、 芳氧基、 羟烷基、 杂环烷基、 羧酸、 羧酸酯、 卤素或 -NR3R4的取代基所取代；
R5选自氢原子、烷基、环烷基、 芳基、 杂芳基或杂环烷基， 其中烷基、环烷基、 芳基、 杂芳基或杂环烷基进一步被一个或多个选自烷基、 环烷基、 芳基、 杂芳基、 烷氧基、 环烷氧基、 芳氧基、 杂芳氧基、 卤素、 羟基、 氨基、 烷氨基、 氰基、 羟 烷基、 杂环烷基、 杂环烷氧基、 羧酸或羧酸酯的取代基所取代；
R6和 R7各自分别选自烷基、 芳基、 杂芳基、 卤代烷基、 卤代烷氧基、 羟基、 氨基、 氰基、 块基、 烷氧基、 芳氧基、 羟烷基、 杂环烷基、 羧酸、 羧酸酯或卤素； W为碳、 硫或氧原子， 当 W为碳时， 可以进一步被 R6或 R7所取代。
6. 根据权利要求 1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述的盐为通式 (I) 化合物与选自下列的酸形成的盐： 盐酸、 对甲苯磺酸、 酒石酸、 马来酸、 乳酸、 甲磺酸、 硫酸、 磷酸、 柠檬酸、 乙酸或三氟乙酸。
7. 根据权利要求 6所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述的酸为对甲苯 磺酸、 盐酸、 酒石酸或三氟乙酸。
8. 根据权利要求 1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中包括如下结构的化 合物：
Figure imgf000070_0001
9. 一种药物组合物， 其含有治疗有效剂量的根据权利要求 1-8 中任一项所述的化 合物或其药学上可接受的盐和药学上可接受的载体。
10. —种如下列通式 (I-1D)所示的化合物， 其作为权利要求 1通式 (I)化合物合成的 中间体：
Figure imgf000071_0001
(ID)
其巾：
Ri选自氢原子、烷基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、 -C(0)NR3R4 -C(0)R3、 -C(0)OR3， 其中烷基、 环烷基、 杂环烷基、 芳基或杂芳基进一步被一个或多个选 自烷基、 芳基、 羟基、 氨基、 烷氧基、 芳氧基或杂环烷基的取代基所取代；
R3和 R4分别选自氢原子、 烷基、 环烷基、 芳基、 杂芳基或杂环烷基， 其中浣 基、 环烷基、 芳基、 杂芳基或杂环烷基进一步被一个或多个选自烷基、 环烷基、 芳基、 杂芳基、 烷氧基、 环烷氧基、 芳氧基、 杂芳氧基、 卤素、 羟基、 氨基、 氰 基、 羟烷基、 杂环烷基、 杂环烷氧基、 三氟甲基、 羧酸或羧酸酯的取代基所取代; 同时 R3和 R4与 N原子一起形成 3〜8元的杂环基，其中 5〜8元杂环内进一步 含有一个或多个 N、 0或 S原子，并且 3〜8元杂环进一步被一个或多个选自烷基、 芳基、 杂芳基、 卤代烷基、 卤代烷氧基、 羟基、 氨基、 氰基、 烷氧基、 芳氧基、 羟烷基、 杂环烷基、 羧酸、 羧酸酯、 卤素或 -NR3R4的取代基所取代。
11. 根据权利要求 10所示的中间体 (ID)的制备方法， 该方法包括：
Figure imgf000071_0002
冰浴下，将叔丁基 -5-氧代-六氢-并环戊二烯吡咯 -2-羧酸酯在溶剂中与 下反应得到六氢并环戊二烯吡咯 -5-酮三氟乙酸盐；
Figure imgf000071_0003
(ID)
六氢并环戊二烯吡咯 -5-酮三氟乙酸盐在碱存在下与酰氯或酯类反应得到通式 (ID) 的化合物。
12. 根据权利要求 11所述的方法， 其中所述溶剂为二氯甲烷。
13. 根据权利要求 4所示的通式 (IB)化合物的制备方法， 该方法包括：
Figure imgf000072_0001
B)
将所述的中间体 (ID)室温条件下在溶剂中与的不同胺、取代的硼氢化钠， 在碱 注条件下反应得到通式 (IB)化合物。
14. 根据权利要求 13所述的制备方法， 其中所述溶剂为甲醇或乙醇。
15. 根据权利要求 4所示的通式 (IB)化合物的制备方法， 该方法包括:
Figure imgf000072_0002
将叔丁醇钾和甲基三苯基磷碘的甲苯溶液加热后， 在室温下将中间体 (ID)化合 物加入到上述溶液中反应， 得到氮杂双环烯基化合物；
Figure imgf000072_0003
氮杂双环烯基化合物在合适的溶剂中，在高氯酸银作用下室温下与三甲基硅氰 反应得到氮杂双环氰基化合物；
Figure imgf000072_0004
将氮杂双环氰基化合物在合适的溶剂中与适宜的酸在室温下反应得到氮杂双 环氨基化合物；
Figure imgf000073_0001
(IB)
将氮杂双环氨基化合物在碱性溶剂溶剂中与卤化物反应得到通式 (IB)化合物。
16. 根据权利要求 15所述的方法， 其中氮杂双环烯基化合物与三甲基硅氰反应采 用的溶剂为二氯甲烷， 氮杂双环氰基化合物反应采用的溶剂为乙醇； 所述酸为盐 酸。
17. 根据权利要求 4所示的通式 (IB)化合物的制备方法， 该方法包括:
Figure imgf000073_0002
将中间体 (ID)化合物和对甲苯磺酰甲基异腈在适宜的溶剂中发生异氰化反应 氮杂双环氰基化合物；
Figure imgf000073_0003
氮杂双环氰基化合物在在适宜的溶剂中，在六甲基二硅基胺基锂作用下与卤化 物反应， 得到 R2取代的氮杂双环氰基化合物；
Figure imgf000073_0004
R2取代的氮杂双环氰基化合物在酸的作用下水解得到 R2取代的氮杂双环羧基 化合物；
R2取代的氮杂双环氰基化合物在适宜的溶剂中，在冰浴下与还原剂 (DIBAL-H) 反应， 先将氰基还原成醛基， 得到的醛在四氢呋喃 /水混合溶剂中， 在冰浴下与憐 酸二氢钠、 亚氯酸钠和 2-甲基 -2-丁烯反应， 得到 取代的氮杂双环羧基化合物;
Figure imgf000074_0001
将 R2取代的氮杂双环羧基化合物在碱性条件下及氯甲酸乙酯作用下发生 化反应得到取代的氮杂双环叠氮基化合物；
Figure imgf000074_0002
氮杂双环叠氮基化合物在适宜的溶剂中加热， 再在酸性溶液中搅拌， 并调节 pH为碱性， 得到 取代的氮杂双环氨基化合物；
Figure imgf000074_0003
、 5)
将 R2取代的氮杂双环氨基化合物在碱性溶剂中， 与卤化物反应得到通式 (IB) 化合物。
18. 根据权利要求 5所示的通式 (IC)化合物的制备方法， 该方法包括:
Figure imgf000074_0004
将中间体 (ID)在适宜的溶剂中， 冰浴下与还原剂反应得到氮杂双环羟基化合 物;
Figure imgf000075_0001
氮杂双环羟基化合物在适宜的溶剂中， 冰浴下与碱性试剂、 甲磺酰氯反应得到 氮杂双环甲磺酸基化合物；
Figure imgf000075_0002
氮杂双环甲磺酸基化合物在碱性试剂中与邻苯二甲酰亚胺钾盐加热反应得到 邻苯二甲酰亚胺取代的氮杂双环化合物；
Figure imgf000075_0003
邻苯二甲酰亚胺取代的氮杂双环化合物在适宜的溶剂中，与肼加热得到氮杂双 环氨基化合物；
Figure imgf000075_0004
氨基取代的氮杂双环化合物在适宜的溶剂中，与卤化物加热，反应得到通式 (IC) 化合物。
19. 根据权利要求 18所述的方法， 其中所述还原剂为三叔丁基氧铝锂氢。
20. 根据权利要求 12至 19中任一项所述的制备方法， 其中 R为：
R R7、
〇 R6
R5选自氢原子、烷基、环烷基、 芳基、 杂芳基或杂环烷基， 其中烷基、环烷基、 芳基、 杂芳基或杂环烷基进一步被一个或多个选自烷基、 环烷基、 芳基、 杂芳基、 烷氧基、 环烷氧基、 芳氧基、 杂芳氧基、 卤素、 羟基、 氨基、 烷氨基、 氰基、 羟 烷基、 杂环烷基、 杂环烷氧基、 羧酸或羧酸酯的取代基所取代；
R6和 R7各自分别选自烷基、 芳基、 杂芳基、 卤代烷基、 卤代烷氧基、 羟基、 氨基、 氰基、 块基、 烷氧基、 芳氧基、 羟烷基、 杂环烷基、 羧酸、 羧酸酯或卤素； W为碳、 硫或氧原子， 当 W为碳时， 可以进一步被 R6或 R7所取代。
21.根据权利要求 12至 19中任一项所述的制备方法，其中还包括将得到的通式 (IB) 或 (IC)化合物经纯化后在酸的甲醇、 二氯甲烷或乙酸乙酯溶液中反应， 得到其酸加 成产物盐。
22. 根据权利要求 1-8任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐在制备二肽基肽 酶抑制剂药物中的用途。
23. 根据权利要求 9所述的组合物在制备二肽基肽酶抑制剂药物中的用途。
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