WO2011035540A1

WO2011035540A1 - 作为酪氨酸激酶抑制剂的4-（取代苯胺基）喹唑啉衍生物

Info

Publication number: WO2011035540A1
Application number: PCT/CN2010/001449
Authority: WO
Inventors: 王晶翼; 范传文; 张龙; 郭宗儒; 李瀛; 杨绍波; 严守升; 朱建荣; 杨清敏; 张明会
Original assignee: Qilu Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Qilu Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2009-09-28
Filing date: 2010-09-20
Publication date: 2011-03-31
Anticipated expiration: 2012-03-28
Also published as: KR101648787B1; JP2013505899A; US20120208833A1; CN102030742B; KR20120125226A; US8916574B2; CA2775601A1; CN102030742A; ES2535176T3; EP2484678A4; CA2775601C; EP2484678A1; EP2484678B1

Description

作为酪氨酸激酶抑制剂的 4- (取代苯胺基)喹唑啉衍生物

技术领域

本发明属于医药化工领域，具体涉及一类新的具有抗肿瘤活性的

4- (取代苯胺基)喹唑啉类衍生物及其制备方法，以及 4- (取代苯胺基) 喹唑啉衍生物在作为用于治疗或辅助治疗哺乳动物（包括人)由受体酪氨酸激酶介导的肿瘤或受体酪氨酸激酶驱动的肿瘤细胞的增殖和迁移的药物方面的应用。背景技术

肿瘤是严重威胁人类生命和生活质量的主要疾病之一，据 WHO 统计，全世界每年死于肿瘤的患者约 690万。由于生存环境和生活习性的改变，在不良环境和一些不利因素的作用下，肿瘤的发病率和死亡率近年呈逐步上升趋势。

以往对肿瘤的治疗是通过发现肿瘤并破坏来实现的，现在随着对细胞信号传导途径研究的不断深入，人们对肿瘤细胞内部的癌基因及抗癌基因的作用了解的越来越深入，针对肿瘤的特异性分子靶点设计新的抗肿瘤药物越来越受到关注，成为研究的热点领域，而靶向抗肿瘤药物作为一种新的治疗方法也已经应用于临床，并在短短几年内得到了显著的进展。现在已知，蛋白酪氨酸激酶 (Protein tyrosine kinases, PTK)信号通路与肿瘤细胞的增殖、分化、迁移和凋亡有密切关系（Li Sun, et al., Drug Discov Today, 2000， 5， 344-353), 利用蛋白酪氨酸激酶抑制剂干扰或阻断酪氨酸激酶通路可以用于肿瘤治疗（Fabbro D., et al. , Curr Opin Pharmacol, 2002， 2， 374-381)。

蛋白酪氨酸激酶 (PTK)是在正常和异常增殖过程中起重要作用的癌蛋白和原癌蛋白家族中的成员，是一种能选择性地使不同底物的酪氨酸残基磷酸化的一种酶，它们催化 ATP的 γ-磷酸基转移到许多重要蛋白质的酪氨酸残基上，使酚羟基磷酸化。蛋白酪氨酸激酶分为受

tyrosine kinase, RTK), 非受体酪氨酸激酶以及 IR和 Janus激酶等 (Robinson D.R., et al., Oncogene, 2000， 19， 5548-5557), 其中多数为受体型酪氨酸激酶 (RTK)。受体酪氨酸激酶 (RTK) 是一类具有内源性蛋白酪氨酸激酶，参与多种细胞活动的调控，在启动细胞复制的促有丝分裂信号的传导中具有极其重要的地位，调控着细胞的生长与分化。所有的 RTK都属于 I型膜蛋白，其分子具有相似的拓朴结构：一个大的糖基化的胞外配体结合区，一个疏水的单次跨膜区，以及一个细胞内酪氨酸激酶催化结构域及调控序列。配体的结合 (如表皮生长因子 (EGF)与 EGFR的结合)导致受体细胞内部分编码的受体激酶活性激活，使靶蛋白中的关键酪氨酸磷酸化，导致增生信号跨越细胞质膜转导。

根据胞外配体结合区亚单位结构的不同，可以将受体酪氨酸激酶 (RTK)分成四个不同的亚类 (Ullrich A. et al. , Cell , 1990 , 61 , 203-212)：第一亚类 erbB家族包括表皮生长因子受体 (epidermal growth factor receptor, EGFR), HER2/Neu、 HER3/c— erbB3等；第二亚类包括胰岛素受体、胰岛素样生长因子 -l(IGF-l)受体等；第三亚类包括 PDGFR-ou PDGFR- > 集落刺激因子 -1受体 (CSF-IR)、 c— Kit等；第四亚类包括有 FGFR-1、 FGFR-2、 FGFR-3、 FGFR-4 等，其中第三、第四亚类在胞外分别有 5个和 3个免疫球蛋白样的结构域。 RTK与相应配体结合后，能触发受体的同源或异源二聚复合物的形成，激活 RTK, 催化 ATP上的磷酸基转移到受体的酪氨酸残基上，使其发生自磷酸化，受体自磷酸化可以起到两个作用，即激活内在的催化活性以及生成下游效应蛋白的结合位点，进而激活下游的信号分子 (朱孝峰等，药学学报， 2002， 37, 229-234; 邓小强等，药学学才艮， 2007, 42， 1232-1236)。

受体酪氨酸激酶 (RTK)主要信号转导途径是 Ras (retrovirus- associated DNA sequences) /Raf (rapidly accelerated fibrosarcoma) / MAPK (mitogen activated protein kinase,丝裂原活化蛋白激酵)途径和 PI-3K (phosphatidylinositol-3 kinase , 磷脂酰肌醇 -3-激酶) /Akt (protein kinase B, PKB)途径。 Ras/Raf/MAPK途径主要是调控细胞增殖和细胞生存过程。 MAPK是促细胞分裂的信号，活化的 MAPK 进入细胞核通过碑酸化作用激活转录因子 (如 Elkl、 Etsl、 c-Myc等），从而干扰细胞周期和细胞转化过程，最终导致肿瘤形成； MAPKs还能诱导蛋白及基质降解、促进细胞迁移、维持肿瘤生长 (Liebmann C.， et al.， Cell Signal, 2001， 13, 777-785). PI-3K/Akt信号转导途径涉及细胞生长、凋亡抑制、侵袭和转移过程，起着与 Ras/Raf/MAPK途径同等重要的作用。其中， Akt转移至细胞核，通过磷酸化调控多种转录因子 (如 FKHRL1、 NF-_kB、 Bcl-2等），从而抑制凋亡基因的表达； Akt还能磷酸化糖原合成激酶 -3 (glycogen synthase kinase 3, GSK-3) 和喷孔动物雷帕霉素乾蛋白 (mammalian target of rapamycin， mTOR), 从而上调周期蛋白 D (Cyclin D), 以及碑酸化一系列抑制蛋白（如 p21^clpI 和 p27^KIPI)，引起细胞周期变短，从而导致肿瘤发生 (Shaw R.J.,et al., Nature, 2006, 441 , 424-430)。因此 PTK催化受体鱗酸化的最终结果是促使细胞增殖、抑制细胞凋亡，与肿瘤的发生和发展直接相关。

已有研究结果表明 Bcr-abl、 EGFR、 HER等受体酪氨酸蛋白激酶在肿瘤患者体内呈现高表达。特别是 erbB家族 (如 EFGR、 HER2 等)过表达在很多人类癌症中都可以检测到，如非小细胞肺癌 (NSCLC) (Brafoender J.,et al., Clin Cancer Res, 2001， 7， 1850-1855)、白血病 (Jos6 Ignacio Martin-Suberoac, et al.， Cancer Genet Cvtogenet, 2001， 127， 174-176)、胃肠道癌症（Kapitanovic S., et al. , Gastroenterology, 2000， 112, 1103-1113； Ross J.S. ,et al., Cancer Invest, 2001， 19， 554-558)、乳腺癌（Klijn J.S.， et al.， Breast Cancer Res Treat, 1994， 29， 73-83)、前列腺癌（Scher H.I., et al., J Natl Cancer Inst, 2000， 92, 1866-1868)、卵巢癌（Hellstrom I" et al., Cancer Res, 2001， 61， 2420-2423)、头、颈癌（Shiga H.， et al.， Head Neck, 2000， 22, 599-608)等。随着对更多的人类肿瘤组织进行受体酪氨酸激酶的表达测试以及对 PTK信号途径与肿瘤之间的关系的研究日益深入，该类靶点必将给肿瘤的治疗方法带来革新。许多肿瘤细胞中存在着信号转导途径的异常，如上皮细胞来源的肿瘤中常见 EGFR家族受体过度表达，胶盾瘤中常见 PDEFR家族受体过度表达， CML中 Bcr-Abl过度激活等。作为一种或多种这种受体错误调节的结果，使得很多肿瘤变得临床上更具侵袭性，因而与患者较差的不良预后密切相关 (Ross J.S., et al.， Cancer Investigation, 2001 , 19, 554-568) 除了上述临床发现外，许多临床前研究还显示 erbB家族的酪氨酸激酶与细胞变异有关，即很多细胞系过渡表达一种或多种 erbB受体，以及 EFGR或 erbB2在被转染进非肿瘤细胞时具有转化这些细胞的能力。此外，很多临床前研究也显示：通过用小分子抑制剂或抑制性抗体去除一种或多种 erbB的活性，可以诱导抗增生效应（Mendelsohn J.， et al., Oncogene, 2000， 19, 6550-6565)。

近年来，人们致力于抑制细胞信号转导途径以开发新型靶点抗肿瘤药物。信号转导抑制剂下调肿瘤的生存和增殖信号 ,促进细胞凋亡，而不是通过细胞毒作用，因此选择性较高、毒副作用较小。目前已有十几种信号转导抑制剂应用于临床治疗肿瘤，主要为酪氨酸激酶抑制剂类抗肿瘤药物，其中 4- (取代苯胺基)喹唑啉结构类型的化合物开发的比较成熟，如针对 EGFR酪氨酸激酶靶点的小分子抑制剂吉非替尼 (Iressa)、埃罗替尼 (Tarceva)和拉帕替尼 (Lapatinib)等。

吉非替尼 (Gefitinib) , 商品名 Iressa (易瑞沙）， AstraZeneca开发的 EGFR酪氨酸激酶抑制剂，是最早进入临床研究的表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂，于 2002年在日本上市，次年在美国上市，用于治疗既往接受过化疗的晚期或转移性非小细胞肺癌 (NSCLC)。埃罗替尼 (Erlotinib), 商品名 Tarceva (特罗凯）， OSI公司开发的 EGFR酪氨酸激酶抑制剂，受让于 Genentech和罗氏公司。 2004年在美国上市，用于治疗 NSCLC和胰腺癌。属于第一代治疗 NSCLC的苯胺喹唑啉类小分子抑制剂，也是目前唯一被证实的对晚期非小细胞肺癌具有生存优势的 EGFR酪氨酸激酶抑制剂，对各类非小细胞肺癌患者均有效，且耐受性好，无骨髓抑制和神经毒性，能显著延长生存期，改善患者生活质量。拉帕替尼 (Lapatinib),商品名 Tycerb,是 GlaxoSmithKline 公司开发的 EGFR和 HER2的双重抑制剂，其对肿瘤增殖和生存的信号传导的抑制作用强于单一受体抑制剂。 2007年美国 FDA批准该品上市，适应症为与卡培他滨联合治疗过度表达 HER2和先前曾接收过化疗如蒽环类、紫杉烷类和曲妥珠单抗的晚期或转移性乳腺癌患者。

此外，专利申请公开号 WO 96/33977、 WO 97/30035、 WO 98/13354、 WO 00/55141 > WO 02/41882、 WO 03/82290和 EP 837 063 等公开了在 4-位上携带苯胺基取代和在 6-和 /或 7-位上携带取代基的某些喹唑啉衍生物，具有受体酪氨酸激酶活性。

小分子酪氨酸激酶抑制剂作为新的耙向抗肿瘤药物，为肿瘤的治疗和预防打开了一扇新窗口，而且其副作用轻微，有良好的耐受性。虽然目前已有 10多个小分子酪氨酸激酶抑制剂为临床肿瘤治疗作出了很大贡献，但仍然需要发现一些较之现有的酪氨酸激酶抑制剂具有更好的体内活性和 /或改良的药理学特性的另外的化合物。因此开发新的改进的或更高效的酪氨酸激酶抑制剂，更深入地了解该类药物与已知靶蛋白之间的关系以及其发挥抗肿瘤作用的机理对肿瘤临床治疗具有重要的意义。发明内容

本发明的目的是寻找具有有效的酪氨酸激酶抑制作用的新化合物。本发明人令人惊奇的发现，具有式 I结构的 4- (取代苯胺基)喹唑学行为。本发明基于此发现而得以完成，、 '

为此，本一方面提供了式 I化合物:

或其药学可接受的盐、溶剂合物，

其中， R 选自 d-6烷基亚砜基、一个或多个卤素取代的 d.₆烷基亚砜基、 d_₆烷基硫基、一个或多个卤素取代的 d.₆烷基硫基、 d_₆烷基酰胺基、 d.₆烷基磺酰胺基、一个或多个 ¾素取代的烷基磺酰

胺基、一个或多个卤素取代的 CM烷基磺酰基、或 δ ；和 R₂各自独立地选自氢、 d.6垸基、和一个或多个 ή素取代的 ^烷基。

才艮据本发明第一方面任一项所述的式 I化合物，其中所述的 R 选自 d.₆烷基亚砜基、一个或多个卤素取代的 d_₆烷基亚砜基。在本发明式 I化合物的一个实施方案中， R选自 d_₄烷基亚砜基、 1至 3 个卤素取代的 d_₄烷基亚砜基。

根据本发明第一方面任一项所述的式 I化合物，其中所述的 R 选自 d.₆烷基硫基、一个或多个卤素取代的 d_₆烷基硫基。在本发明式 I化合物的一个实施方案中， R选自 C,_₄烷基硫基、 1至 3个卤素取代的 d_₄烷基硫基。

根据本发明第一方面任一项所述的式 I化合物，其中所述的 R 选自 d_₆烷基酰胺基、 d.6烷基磺酰胺基、一个或多个卤素取代的 Ci_₆烷基磺酰胺基。在本发明式 I化合物的一个实施方案中， R选自 d.₄烷基酰胺基、烷基磺酰胺基、 1至 3个卤素取代的 d_₄烷基磺酰胺基。

根据本发明第一方面任一项所述的式 I化合物，其中所述的 R 选自一个或多个卤素取代的 d.6烷基磺酰基。在本发明式 I化合物的一个实施方案中， R选自 1至 3个卤素取代的 d_₄烷基磺酰基。

一方面任一项所述的式 I化合物，其中所述的 R

选自

，其中和如本发明第一方面式 I化合物所定义。在本发明式 I化合物的一个实施方案中， R选自

其中和各自独立地选自氢、 d.4烷基、和 1至 3个素取代的

C,_₄烷基，例如氢、曱基、乙基、三氟曱基。

根据本发明第一方面任一项所述的式 I化合物，其中，

R 选自 d_₄烷基亚砜基、 1至 3个卤素取代的 d.4烷基亚砜基、 d.4烷基硫基、 1至 3个卤素取代的烷基硫基、 d_₄烷基酰胺基、烷基磺酰胺基、 1至 3个卤素取代的 d.₄烷基磺酰胺基、 1至 3

个卤素取代的 d_₄烷基磺酰基、或

和 R₂各自独立地选自氢、 d.4烷基、和 1至 3个 ¾素取代的

Ci-4燒^^

根据本发明第一方面任一项所述的式 I化合物，其中所述的卤素选自氟、氯、或溴。在一个实施方案中，其中所述的素选自氟、或氯，优选氟。

根据本发明第一方面任一项所述的式 I化合物，其中所述的烷基是直链或支链的烷基基团。

根据本发明第一方面任一项所述的式 I化合物，其中所述的烷基选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、己基。在一个实施方案中，其中所述的烷基选自曱基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基。在一个实施方案中，其中所述的烷基选自曱基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基。

根据本发明第一方面任一项所述的式 I化合物，其中所述的药学可接受的盐选自：盐酸盐、硫酸盐、曱磺酸盐、二甲苯磺酸盐、富马酸盐、马来酸盐，或者这些盐的溶剂合物例如水合物。

根据本发明第一方面任一项所述的式 I化合物，其选自：

N-(⁴-(3-氟苄氧基) -3-氯苯基 )-6-(5-((2- (氨磺酰基）乙基氨基）曱基) -2-呋喃基) -喹唑啉 -4-胺； N-(4-(3-氟苄氧基) -3-氯苯基 )-6-(5-((2-(曱基亚砜基）乙基氨基)曱基) -2-呋喃基) -喹唑啉 -4-胺；

_N_(4-(3-氟苄氧基) -³-氯苯基 )-⁶-(⁵-((²-(曱硫基）乙基氨基）甲基) -2-呋喃基) -喹唑啉 -4-胺；

N-(4-(3-氟苄氧基) -3-氯苯基 )-6-(5-((2-(曱磺酰胺基）乙基氨基)甲基) -2-呋喃基) -喹唑啉 -4-胺；

N-(4-(3-氟苄氧基) -3-氯苯基 )-6-(5-((2-(2，2，2-三氟乙磺酰基）乙基氨基)甲基) -2-呋喃基) -喹唑啉 -4-胺；

N-(4-(3-氟苄氧基) -3-氯苯基 )-6-(5-((2- (三氟甲磺酰基）乙基氨基) 甲基) -2-呋喃基) -喹唑啉 -4-胺；

N-(4-(3-氟苄氧基) -3-氯苯基 )-6-(5-((2- (三氟甲硫基）乙基氨基)曱基) -2-呋喃基) -喹唑啉 -4-胺；

N-(4-(3-氟苄氧基) -3-氯苯基 )-6-(5-((2- (三氟曱基亚砜基）乙基氨基)甲基) -2-呋喃基) -喹唑啉 -4-胺；

N-(4-(3-氟苄氧基) -3-氯苯基 )-6-(5-((2-(2，2，2-三氟乙硫基）乙基氨基）曱基) -2-呋喃基) -喹唑啉 -4-胺;

N-(4-(3-氟苄氧基) -3-氯苯基 )-6-(5-((2-(2，2，2-三氟乙基亚砜基）乙基氨基)甲基) -2-呋喃基) -喹唑啉 -4-胺;

_N_(4-(3-氟苄氧基) -3-氯苯基 )-6-(5-((2-(乙酰胺基）乙基氨基）曱基) -2-呋喃基) -喹唑啉 -4-胺；

N-(4-(3-氟苄氧基) -3-氯苯基 )-6-(5-((2-(N-甲基胺磺酰基）乙基氨基)曱基) -2-呋喃基) -喹唑啉 -4-胺；

N-(4-(3-氟苄氧基) -3-氯苯基 )-6-(5-((2-(N-乙基胺磺酰基）乙基氨基)甲基) -2-呋喃基) -喹唑啉 -4-胺；和

N-(4-(3-氟苄氧基) 3-氯苯基 )-6-(5-((2-(2，2，2-三氟乙基磺酰胺基) 乙基氨基)甲基) -2-呋喃基) -喹唑啉 -4-胺；

或其药学可接受的盐、溶剂合物。

才艮据本发明第一方面任一项所述的式 I化合物，其选自：

N-(⁴-(³-氟苄氧基) _³-氯苯基 )-6-(⁵_((²- (氨磺酰基）乙基氨基）曱基) -2-呋喃基) -喹唑啉 -4-胺； N-(⁴-(3-氟苄氧基) -3-氯苯基 )-6-(5-((²_ (甲基亚砜基）乙基氨基)曱基) -2-呋喃基) -喹唑啉 -4-胺；

N-(4-(3-氟苄氧基 )-3-氯苯基 )-6-(5-((2-(甲硫基）乙基氨基）甲基) -2-呋喃基) -喹唑淋 -4-胺；

N-(4-(3-氟苄氧基) -3-氯苯基 )-6-(5-((2-(曱磺酰胺基）乙基氨基）曱基) -2-呋喃基) -喹唑啉 -4-胺；

N-(4-(3-氟苄氧基) -3-氯苯基 )-6-(5-((2-(2，2，2-三氟乙磺酰基）乙基氨基)甲基) -2-呋喃基) -喹唑啉 -4-胺；和

N-(4-(3-氟苄氧基) -3-氯苯基 )-6-(5-((2- (三氟甲磺酰基）乙基氨基) 甲基) -2-呋喃基) -喹唑啉 -4-胺，

或其药学可接受的盐、溶剂合物。

根据本发明第一方面任一项所述的式 I化合物，其选自：

N-(⁴-(³-氟苄氧基) -³-氯苯基 )-⁶_(⁵_((²- (氨磺酰基）乙基氨基）甲基) -2-呋喃基) -喹唑啉 -4-胺；

N-(4-(3-氟苄氧基) -3-氯苯基 )-6-(5-((2-(甲基亚砜基）乙基氨基)甲基) -2-呋喃基) -喹唑啉 -4-胺；

N-(4-(3-氟苄氧基) _³_氯苯基) -⁶-(⁵-((²-(曱硫基）乙基氨基）甲基) -2-呋喃基) -喹唑啉 -4-胺；

N-(4-(3-氟苄氧基) -3-氯苯基 )-6-(5-((2-(曱磺酰胺基）乙基氨基)甲基) -2-呋喃基) -喹唑啉 -4-胺；和

N-(4-(3-氟苄氧基) -3-氯苯基 )-6-(5-((2-(2，2，2-三氟乙磺酰基）乙基氨基)甲基) -2-呋喃基) -喹唑啉 -4-胺，

或其药学可接受的盐、溶剂合物。

本发明第二方面提供了本发明第一方面任一项所述式 I化合物的制备方法，其包括以下步骤：

a)使以下式 II化物或其盐或其反应性衍生物：

II

与以下式 III化合物或其适宜的盐

NH₂CH₂CH₂R

III

在适宜的碱存在下，在适宜的溶剂例如有机溶剂中进行反应；和

b)使反应混合物用适宜的还原剂处理，得到式 I化合物，其中 R基团如本发明第一方面任一项所述定义。

根据本发明第二方面任一项所述的制备方法，其中所述的碱可以是有机碱：三乙膝、三乙醇胺、烷基二甲基胺、甲醇钠等，也可以是无机碱：如氢氧化钠、氢氧化鉀、碳酸钠等。在一个实施方案中，所述的碱为三乙胺。

根据本发明第二方面任一项所述的制备方法，其中所述式 III化合物的盐选自：盐酸盐、硫酸盐、硝酸盐等。在一个实施方案中，所述的式 III化合物的盐为盐酸盐。

根据本发明第二方面任一项所述的制备方法，其中所述的还原剂选自：硼氢化钠、氰基硼氢化钠、三醋酸硼氢化钠等。在一个实施方案中，所述的还原剂为硼氢化钠。在另一个实施方案中，所述的还原剂为氰基硼氢化钠。

在本发明第二方面的制备方法中，如有必要，可以将式 II 和 NH₂CH₂CH₂R中的任意官能团予以保护。

在本发明第二方面的制备方法中，在必要情况下，在式 I化合物制备过程中，为防止有些基团 (如氨基、羟基等)发生不希望的反应，需要对这些基团予以保护，同时，在适当的时候予以去除保护基。这些实施例不胜枚举的，没有具体提及的保护基的使用和脱保护的方法也属于本发明的范围之内。

在本发明第二方面的制备方法中，其中所述的式 II化合物是本领域技术人员根据已有技术可以制备的，在一个示例性的方法中，式 II化合物可以参照文献制备，例如，参见： Kimberly G. Petrov, et al.， Bioorg. Med. Chem. Lett., 2006, 16: 4686-4691。

本发明第三方面涉及一种药物组合物，其包含本发明第一方面任一项所述的式 I化合物，以及任选的一种或多种药学可接受的载体或赋形剂。

本发明第四方面涉及本发明第一方面任一项所述的式 I化合物在制备用于治疗和 /或预防哺乳动物（包括人)与受体酪氨酸激酶相关的疾病或病症的药物中的用途。

本发明第四方面还涉及本发明第一方面任一项所述的式 I化合物在制备用于治疗或辅助治疗和 /或预防哺乳动物（包括人)由受体酪氨酸激酶介导的肿瘤或由受体酪氨酸激酶驱动的肿瘤细胞的增殖和迁移的药物中的用途。

根据本发明完全可以预期本发明化合物可用于治疗 erbB受体酪氨酸激酶敏感癌症，如 EGFR或 Her2高表达及 EGF驱动的肿瘤，包括实体肿瘤如胆管、骨、膀胱、脑 /中枢神经系统、乳房、结直肠、子宫内膜、胃、头和颈、肝、肺 (尤其是非小细胞肺癌）、神经元、食道、卵巢、胰腺、前列腺、肾脏、皮肤、睾丸、曱状腺、子宫和外阴等的癌症，和非实体肿瘤如白血病、多发性骨髓瘤或淋巴瘤等。为此，本发明上述短语"与受体酪氨酸激酶相关的疾病或病症"以及"由受体酪氨酸激酶介导的肿瘤，，或 "由受体酪氨酸激酶驱动的肿瘤细胞的增殖和迁移"中所涉及的肿瘤或癌症可以包括上述 erbB受体酪氨酸激酶敏感癌症，如 EGFR或 Her2高表达及 EGF驱动的肿瘤，包括实体肿瘤如胆管、骨、膀胱、脑 /中枢神经系统、乳房、结直肠、子宫内膜、胃、头和颈、肝、肺 (尤其是非小细胞肺癌）、神经元、食道、卵巢、胰腺、前列腺、肾脏、皮肤、睾丸、曱状腺、子宫和外阴等的癌症，和非实体肿瘤如白血病、多发性骨髓瘤或淋巴瘤等。

本发明第五方面涉及一种在有需要的哺乳动物中治疗和 /或预防与受体酪氨酸激酶相关的疾病或病症的方法，该方法包括给有需要的哺乳动物施用治疗有效量的本发明第一方面任一项所述的式 I 化合物。

本发明第五方面还涉及一种在有需要的哺乳动物中治疔或辅助治疗和 /或预防哺乳动物（包括人)由受体酪氨酸激酶介导的肿瘤或由受体酪氨酸激酶驱动的肿瘤细胞的增殖和迁移的方法，该方法包括给有需要的哺乳动物施用治疗有效量的本发明第一方面任一项所述的式 I化合物。

本发明第五方面进一步涉及一种在有需要的哺乳动物中治疗和 /或预防哺乳动物（包括人)的肿瘤或癌症的方法，该方法包括给有需要的哺乳动物施用治疗有效量的本发明第一方面任一项所述的式 I化合物，所述的肿瘤或癌症包括 erbB受体酪氨酸激酶敏感癌症，如 EGFR或 Her2高表达及 EGF驱动的肿瘤，包括实体肿瘤如胆管、骨、膀胱、脑 /中枢神经系统、乳房、结直肠、子宫内膜、胃、头和颈、肝、肺 (尤其是非小细胞肺癌）、神经元、食道、卵巢、胰腺、前列腺、肾脏、皮肤、睾丸、甲状腺、子宫和外阴等的癌症，和非实体肿瘤如白血病、多发性骨髓瘤或淋巴瘤等。

本发明第六方面涉及用于治疗和 /或预防与受体酪氨酸激酶相关的疾病或病症的药物组合物, 该药物组合物包括本发明第一方面任一项所述的式 I化合物，以及任选的一种或多种药学可接受的载体或赋形剂。

本发明第六方面还涉及用于治疗或辅助治疗和 /或预防哺乳动物（包括人)由受体酪氨酸激酶介导的肿瘤或由受体酪氨酸激酶驱动的肿瘤细胞的增殖和迁移的药物组合物，该药物组合物包括本发明第一方面任一项所述的式 I化合物，以及任选的一种或多种药学可接受的载体或赋形剂。

本发明第六方面进一步涉及用于治疗和 /或预防哺乳动物（包括人)的肿瘤或癌症的药物组合物，该药物组合物包括本发明第一方面任一项所述的式 I化合物以及任选的一种或多种药学可接受的载体或赋形剂，所述的肿瘤或癌症包括 erbB受体酪氨酸激酶敏感癌症，如 EGFR或 Her2高表达及 EGF驱动的肿瘤，包括实体肿瘤如胆管、骨、膀胱、脑 /中枢神经系统、乳房、结直肠、子宫内膜、胃、头和颈、肝、肺 (尤其是非小细胞肺癌)、神经元、食道、卵巢、胰腺、前列腺、肾脏、皮肤、睾丸、甲状腺、子宫和外阴等的癌症，和非实体肿瘤如白血病、多发性骨髓瘤或淋巴瘤等。

本发明第七方面涉及用于治疗和 /或预防与受体酪氨酸激酶相关的疾病或病症的本发明第一方面任一项所述的式 I化合物。

本发明第七方面还涉及用于治疗或辅助治疗和 /或预防哺乳动物（包括人）由受体酪氨酸激酶介导的肿瘤或由受体酪氨酸激酶驱动的肿瘤细胞的增殖和迁移的本发明第一方面任一项所述的式 I化合物。

本发明第七方面进一步涉及用于治疗和 /或预防哺乳动物（包括人)的肿瘤或癌症的本发明第一方面任一项所述的式 I化合物，所述的肿瘤或癌症包括 erbB受体酪氨酸激酶敏感癌症，如 EGFR或 Her2 高表达及 EGF驱动的肿瘤，包括实体肿瘤如胆管、骨、膀胱、脑 / 中枢神经系统、乳房、结直肠、子宫内膜、胃、头和颈、肝、肺 (尤其是非小细胞肺癌）、神经元、食道、卵巢、胰腺、前列腺、肾脏、皮肤、睾丸、甲状腺、子宫和外阴等的癌症，和非实体肿瘤如白血病、多发性骨髓瘤或淋巴瘤等。

本发明任一方面或该任一方面的任一项所具有的特征同样适用于其它任一方面或该其它任一方面的任一项，只要它们不会相互矛盾，当然在相互之间适用时，必要的话可对相应特征作适当修饰。在本发明中，例如，提及"本发明第一方面任一项，，时，该"任一项 "是指本发明第一方面的任一子方面；在其它方面以类似方式提及时，亦具有相同含义。

下面对本发明作进一步的描述。

本发明所引述的所有文献，它们的全部内容通过引用并入本文，并且如果这些文献所表达的含义与本发明不一致时，以本发明的表述为准。此外，本发明使用的各种术语和短语具有本领域技术人员公知的一般含义，即便如此，本发明仍然希望在此对这些术语和短语作更详尽的说明和解释，提及的术语和短语如有与公知含义不一致的，以本发明所表述的含义为准。

在本发明式 I化合物中，其中喹唑啉环可按如下示例性的顺序编号:

术语" 1¾素 "或" ¾代 "是指氟、氯、溴、和碘。

本发明中，当提及时，所釆用的术语 "烃基 "包括烷基、烯基和炔基。

本发明中，当提及时，所采用的术语 "烷基"、 "烯基 "和"炔基" 具有本领域公知的一般含义，它们是直链或支链的烃基基团，例如但不限于甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、烯丙基、丙烯基、丙炔基等，并且所述的"烷基"、 "烯基，，和"炔基" 可以统称为"烃基"或"链烃基"。

在本发明合成式 I化合物的方法中，反应所用的各种原材料是本领域技术人员根据已有知识可以制备得到的，或者是可以通过文献公知的方法制得的，或者是可以通过商业购得的。以上反应方案中所用的中间体、原材料、试剂、反应条件等均可以根据本领域技术人员已有知识可以作适当改变的。或者，本领域技术人负也可以根据本发明第二方面方法合成本发明未具体列举的其它式 I化合物。

本发明的式 I化合物可以与其它活性成分组合使用，只要它不产生其他不利作用，例如过敏反应。

本发明式 I所示的活性化合物可作为唯一的抗癌药物使用，或者可以与一种或多种其他抗肿瘤药物联合使用。联合治疔通过将各个治疗组分同时、顺序或隔开给药来实现。

本文所用的术语"组合物"意指包括包含指定量的各指定成分的产品，以及直接或间接从指定量的各指定成分的组合产生的任何产品本发明的化合物可以以衍生自无机酸或有机酸的药学可接受的盐的形式使用。词语"药学可接受的盐，，指在可靠的医学判断范围内，适合用于与人类和低等动物的组织接触而不出现过度的毒性、刺激、过敏反应等，且与合理的效果 /风险比相称的盐。药学可接受的盐是本领域公知的。例如， S. M. Berge, et al., J. Pharmaceutical Sciences, 1977， 66: 1中对药学可接受的盐进行了详细描述。所述盐可通过使本发明化合物的游离碱官能度与合适的有机酸反应，在本发明化合物的最终分离和纯化过程中原位制备或者单独制备。代表性的酸加成盐包括但不限于乙酸盐、己二酸盐、海藻酸盐、柠檬酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、二葡糖酸盐、甘油磷酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、富马酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、 2-羟基乙磺酸盐 (异硫代硫酸盐， isothionate)、乳酸盐、马来酸盐、甲磺酸盐、烟酸盐、 2-萘磺酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、 3- 苯基丙酸盐、苦味酸盐、新戊酸盐、丙酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、磷酸盐、谷氨酸盐、碳酸氢盐、对曱苯磺酸盐和十一烷酸盐。同样，碱性含氮基团可用以下物质季铵化：低级烷基化物如甲基、乙基、丙基和丁基的氯化物、溴化物和砩化物；硫酸二烷基酯如硫酸二甲酯、二乙酯、二丁酯和二戊酯；长链化物如癸基、十二烷基、十四烷基和十八烷基的氯化物、溴化物和碘化物；芳基烷基化物如苄基溴和苯乙基溴及其他。因此得到可溶于或分散于水或油的产品。可用来形成药学可接受的酸加成盐的酸实例包括无机酸如盐酸、氢溴酸、硫酸和磷酸，以及有机酸如草酸、马来酸、琥珀酸和柠檬酸。

碱加成盐可通过使本发明化合物的含羧酸部分与合适的碱反应 , 在本发明化合物的最终分离和纯化过程中原位制备，所述的碱例如药学可接受的金属阳离子的氢氧化物、碳酸盐和碳酸氢盐，或者氨或有机伯胺、仲胺或叔胺。药学可接受的盐包括但不限于基于碱金属或碱土金属的阳离子如锂、钠、钾、钙、镁和铝盐等，以及无毒的季铵和胺阳离子，包括铵、四曱基铵、四乙基铵、甲基铵、二甲基铵、三曱基铵、三乙基铵、二乙基铵和乙基铵等。可用于形成碱加成盐的其他代表性有机胺包括乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、哌啶、哌嗪等。

本发明式 I化合物还包括其异构体、消旋体、对映体、非对映体、对映体富集物、溶剂合物、和酯，本发明式 I化合物以及它的异构体、消旋体、对映体、非对映体、对映体富集物、溶剂合物、和酯还可以形成溶剂合物，例如水合物、醇合物等。上述化合物还可以是前药或可在体内代谢变化后释放出所述活性成分的形式。选择和制备适当的前药衍生物是本领域技术人员公知技术。一般来说，对于本发明的目的，与药学可接受的溶剂如水、乙醇等的溶剂合物形式与非溶剂合物形式相当。

可改变本发明药物组合物中各活性成分的实际剂量水平，以便所得的活性化合物量能有效针对具体患者、组合物和给药方式得到所需的治疗反应。剂量水平须根据具体化合物的活性、给药途径、所治疗病况的严重程度以及待治疗患者的病况和既往病史来选定。但是，本领域的做法是，化合物的剂量从低于为得到所需治疗效果而要求的水平开始，逐渐增加剂量，直到得到所需的效果。

当用于上述治疗和 /或预防或其他治疗和 /或预防时，治疗和 /或预防有效量的一种本发明化合物可以以纯形式应用，或者以药学可接受的酯或前药形式 (在存在这些形式的情况下)应用。或者，所述化合物可以以含有该目的化合物与一种或多种药物可接受赋形剂的药物组合物给药。词语"治疗和 /或预防有效量 "的本发明化合物指以适用于任何医学治疗和 /或预防的合理效果 /风险比治疗障碍的足够量的化合物。但应认识到，本发明化合物和组合物的总日用量须由主诊医师在可靠的医学判断范围内作出决定。对于任何具体的患者，具体的治疗有效剂量水平须根据多种因素而定，所述因素包括所治疗的障碍和该障碍的严重程度；所采用的具体化合物的活性；所釆用的具体组合物；患者的年龄、体重、一般健康状况、性别和饮食；所采用的具体化合物的给药时间、给药途径和排泄率；治疗持续时间；与所釆用的具体化合物组合使用或同时使用的药物；及医疗领域公知的类似因素。例如，本领域的做法是，化合物的剂量从低于为得到所需治疗效果而要求的水平开始，逐渐增加剂量，直到得到所需的效果。一般说来，本发明式 I化合物用于哺乳动物特别是人的剂量可以介于 0.001 ~ 1000 mg/kg 体重 /天，例如介于 0.01 ~ 100 mg/k 体重 /天，例如介于 0.01 ~ 10 mg/k 体重 /天。

运用本领域技术人员熟悉的药物载体可以制备成含有效剂量的本发明化合物的药物组合物。因此本发明还提供包含与一种或多种无毒药物可接受载体配制在一起的本发明化合物的药物组合物。所述药物组合物可特别专门配制成以固体或液体形式供口服给药、供胃肠外注射或供直肠给药。

所述的药物组合物可配制成许多剂型，便于给药，例如，口服制剂 (如片剂、胶嚢剂、溶液或混悬液)；可注射的制剂 (如可注射的溶液或混悬液，或者是可注射的干燥粉末，在注射前加入注射水可立即使用）。所述的药物组合物中载体包括: 口服制剂使用的粘合剂 (如淀粉，通常是玉米、小麦或米淀粉、明胶、曱基纤维素、羧曱基纤维素钠和 /或聚乙烯吡咯烷酮)，稀释剂 (如乳糖、右旋糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇、纤维素，和 /或甘油），润滑剂 (如二氧化硅、滑石、硬脂酸或其盐，通常是硬脂酸镁或硬脂酸钙，和 /或聚乙二醇)，以及如果需要，还含有崩解剂，如淀粉、琼脂、海藻酸或其盐，通常是藻酸钠，和 /或泡腾混合物，助溶剂、稳定剂、悬浮剂、无色素、矫味剂等，可注射的制剂使用的防腐剂、加溶剂、稳定剂等；局部制剂用的基质、稀释剂、润滑剂、防腐剂等。药物制剂可以经口服或胃肠外方式 (例如静脉内、皮下、腹膜内或局部)给药，如果某些药物在胃部条件下是不稳定的，可以将其配制成肠衣片剂。

更具体地说，本发明的药物组合物可通过口服、直肠、胃肠外、池内、阴道内、腹膜内、局部 (如通过散剂、软膏剂或滴剂）、口颊给予人类和其他哺乳动物，或者作为口腔喷雾剂或鼻腔喷雾剂给予。本文所用术语 "胃肠外"指包括静脉内、肌肉内、腹膜内、胸骨内、皮下和关节内注射和输液的给药方式。

适合于胃肠外注射的组合物可包括生理上可接受的无菌含水或非水溶液剂、分散剂、混悬剂或乳剂，及供重构成无菌可注射溶液剂或分散剂的无菌散剂。合适的含水或非水载体、稀释剂、溶剂或媒介物的实例包括水、乙醇、多元醇 (丙二醇、聚乙二醇、甘油等)、植物油 (如橄榄油）、可注射有机酯如油酸乙酯及它们的合适混合物。

这些组合物也可含有辅料，如防腐剂、湿润剂、乳化剂和分散剂。通过各种抗细菌剂和抗真菌剂，例如尼泊金酯类、三氯叔丁醇、苯酚、山梨酸等，可确保防止微生物的作用。还期望包括等渗剂，例如糖类、氯化钠等。通过使用能延迟吸收的物质，例如单硬脂酸铝和明胶，可达到可注射药物形式的延长吸收。

混悬剂中除活性化合物外还可含有悬浮剂，例如乙氧基化异十八醇、聚氧乙烯山梨醇和聚氧乙烯失水山梨糖醇酯、微晶纤维素、偏氢氧化铝、膨润土、琼脂和黄蓍胶或者这些物盾的混合物等。

在一些情况下，为延长药物的作用，期望减慢皮下或肌内注射药物的吸收。这可通过使用水溶性差的晶体或无定形物质的液体混悬剂来实现。这样，药物的吸收速度取决于其溶解速度，而溶解速度又可取决于晶体大小和晶型。或者, 胃肠外给药的药物形式的延迟吸收通过将该药物溶解于或悬浮于油媒介物中来实现。

可注射贮库制剂形式可通过在生物可降解聚合物如聚丙交酯- 聚乙交酯（polylactide-polyglycolide)中形成药物的微胶嚢基质来制备。可根据药物与聚合物之比和所采用的具体聚合物的性质，对药物释放速度加以控制。其他生物可降解聚合物的实例包括聚原酸酯类（poly(orthoesters))和聚酐类（poly(anhydrides))。可注射贮库制剂也可通过将药物包埋于能与身体组织相容的脂质体或微乳中来制备。

可注射制剂可例如通过用滤菌器过滤或通过掺入无菌固体组合物形式的灭菌剂来灭菌，所述固体组合物可在临用前溶解或分散于无菌水或其他无菌可注射介质。本发明化合物或其组合物可用口服方法或非胃肠道给药方式。口服给药可以是片剂、胶嚢剂、包衣剂，肠道外用药制剂有注射剂和栓剂等。这些制剂是按照本领域的技术人员所熟悉的方法制备的。为了制造片剂、胶袭剂、包衣剂所用的辅料是常规用的辅料，例如淀粉、明胶、阿拉伯胶，硅石，聚乙二醇，液体剂型所用的溶剂如水、乙醇、丙二醇、植物油 (如玉米油、花生油、橄榄油等)。含有本发明化合物的制剂中还有其它辅料，例如表面活性剂，润滑剂，崩解剂，防腐剂，矫味剂和色素等。在片剂、胶袭剂、包衣剂、注射剂和栓剂中含有本发明式 I化合物的剂量是以单元剂型中存在的化合物量计算的。在单元剂型中本发明式 I化合物一般含量为 l-5000mg，优选的单元剂型含有 10-500mg，更优选的单元剂型含有 20-300mg。具体地说，本发明可以提供的供口服给药的固体剂型包括胶嚢剂、片剂、丸剂、散剂和颗粒剂。在此类固体剂型中，活性化合物可与至少一种惰性的药物可接受赋形剂或载体如柠檬酸钠或磷酸二钙和 /或以下物质混合： a)填充剂或增量剂如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露糖醇和硅酸； b)粘合剂如羧甲基纤维素、海藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯树胶； c)保湿剂如甘油； d)崩解剂如琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、海藻酸、某些硅酸盐和碳酸钠； e)溶液阻滞剂如石蜡； f 吸收加速剂如季铵化合物； g)湿润剂如鲸蜡醇和甘油单硬脂酸酯； h)吸附剂如高岭土和膨润土以及 i)润滑剂如滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、十二烷基硫酸钠和它们的混合物。在胶嚢剂、片剂和丸剂的情况下，所述剂型中也可包含緩沖剂。

相似类型的固体组合物使用赋形剂例如乳糖及高分子量聚乙二醇等，也可用作软胶嚢和硬胶嚢中的填充物。

片剂、糖衣丸剂（dragees)、胶嚢剂、丸剂和颗粒剂的固体剂型可与包衣和壳料如肠溶衣材和医药制剂领域公知的其他衣材一起制备。这些固体剂型可任选含有遮光剂，且其组成还可使其只是或优先地在肠道的某个部位任选以延迟方式释放活性成分。可以使用的包埋组合物的实例包括高分子物质和蜡类。如果适合，活性化合物也可与一种或多种上述赋形剂配成微嚢形式。

供口服给药的液体剂型包括药学可接受的乳剂、溶液剂、混悬剂、糖浆剂和酏剂。液体剂型除含有活性化合物外还可含有本领域常用的惰性稀释剂，例如水或其他溶剂，增溶剂和乳化剂例如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苄醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、 1，3- 丁二醇、二甲基甲酰胺、油类 (特别是棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油）、甘油、四氢糠醇 (tetrahydrofurfuryl alcohol),聚乙二醇和脱水山梨糖醇的脂肪酸酯及它们的混合物。口服組合物除包含惰性稀释剂外还可包含辅料，例如湿润剂、乳化剂和悬浮剂、甜味剂、矫味剂和香味剂。

供直肠或阴道给药的组合物优选是栓剂。栓剂可通过将本发明化合物与合适的非刺激性赋形剂或载体例如可可脂、聚乙二醇或栓剂蜡混合来制备，它们在室温下为固体，但在体温下则为液体，因此可在直肠腔或阴道腔内熔化而释放出活性化合物。

本发明的化合物及其组合物还考虑用于局部给药。供局部给予本发明化合物的剂量形式包括散剂、喷雾剂、软膏剂和吸入剂。在无菌条件下将活性化合物与药学可接受的载体和任何所需的防腐剂、緩沖剂或推进剂混合。眼用制剂、眼软膏剂、散剂和溶液剂也被考虑在本发明范围内。

本发明化合物也可以脂质体形式给药。如本领域所公知，脂质体通常用磷脂或其他脂类物质制得。脂质体由分散于含水介质中的单层或多层水化液晶所形成。任何能够形成脂质体的无毒、生理上可接受和可代谢的脂质均可使用。脂质体形式的本发明组合物除含有本发明化合物外，还可含有稳定剂、防腐剂、赋形剂等。优选的脂类是天然和合成的磷脂和磷脂酰胆碱 (卵磷脂），它们可单独或者一起使用。形成脂质体的方法是本领域公知的。参见例如 Prescott, Ed., Methods in Cell Biology, Volume XIV, Academic Press, New York, N.Y. (1976), p. 33_e

本发明人惊奇地发现，结构式 I所示的喹唑啉衍生物对 EGFR 和 Her2酪氨酸激酶都显示了抑制活性，同时，对 EGFR和 Her2酪氨酸激酶高表达的细胞株有抑制作用，因此，本发明的化合物可用于

EGFR和 Her2受体酪氨酸激酶单独或部分介导的疾病，主要通过抑制一种或多种 EGFR家族酪氨酸激酶，并通过抑制激酶的活性产生抗增殖、抗迁移、促凋亡作用。具体地说，本发明的化合物可通过对 EGFR和 Her2酪氨酸激酶的抑制作用，用于预防和治疗一种或多种 erbB受体酪氨酸激酶敏感的肿瘤，尤其是 EGFR或 Her2高表达及 EGF驱动的肿瘤。包括实体肿瘤如胆管、骨、膀胱、脑 /中枢神经系统、乳房、结直肠、子宫内膜、胃、头和颈、肝、肺 (尤其是非小细胞肺癌)、神经元、食道、卵巢、胰腺、前列腺、肾脏、皮肤、睾丸、曱状腺、子宫和外阴的癌症，非实体肿瘤如白血病、多发性骨髓瘤或淋巴瘤。具体实施方式：

下面通过具体的制备实施例和生物学试验例进一步说明本发明，但是，应当理解为，这些实施例和试验例仅仅是用于更详细具体地说明之用，而不应理解为用于以任何形式限制本发明。

本发明对试验中所使用到的材料以及试猃方法进行一般性和 / 或具体的描述。虽然为实现本发明目的所使用的许多材料和操作方法是本领域公知的，但是本发明仍然在此作尽可能详细描述。本领域技术人员清楚，在下文中，如果未特别说明，本发明所用材料和操作方法是本领域公知的。

在本中，除非另外说明，其中：（i)温度以摄氏度 (。C)表示，操作在室温或温度环境下进行；（ii)有机溶剂用无水硫酸钠干燥，溶剂的蒸发用旋转蒸发仪减压蒸发，浴温不高于 60 。C ; (iii)反应过程用薄层色谱 (TLC)跟踪； (iv)终产物具有满意的质子核磁共振光错 ^H-NMR) 和质讲 (MS)数据。实施例 1: N-f4-f3-氟苄氧基) 3-氯苯基 6-f5- 2-f氨蹟酰基）乙基氨基）甲基) -2-呋喃基) -喹唑啉 -4-胺 ί化合物 1)的合成：

a.氨基 Cbz保护的牛磺酸钠盐的合成： CbzCI,二氧六环 o O

H₂N 、OH NaOH, H₂0 CbzHN^^^S、ONa

将牛磺酸 25.0g溶于 200ml的 1M NaOH溶液，剧烈搅拌下，同时滴加氯甲酸苄酯 (CbzCI, 51g)的二氧六环溶液和 300ml的 1M的氢氧化钠溶液。滴加完后，室温搅拌反应 lh, 乙酸乙酯萃取水相，减压浓缩水相得白色固体 46.1g，产率 82%。

b. 2-苄氧甲酰胺乙磺酰氯的合成：

CbzHN 3 ^soc|2.

ONa _CbzHN %^SP、_CI 在反应瓶中加入氨基 Cbz保护的牛磺酸钠盐 20.0g、 SOCI₂ (30ml) 和 DMF lml, 回流反应 3h，冷却至室温，过滤，减压蒸除溶剂得油状物 17.9g，产率 91%。

c 2-苄氧甲酰胺乙磺酰胺的合成：

o \ o ΝΗ₃ ·Η₂0 o \、_s々 o

CbzHN^^ 、CI ► CbzHN^^ 、NH₂

二氧六环

在反应瓶中加入 100ml氨水和 100ml二氧六环，冰浴条件下滴加 17.9g的 2-苄氧曱酰胺乙磺酰氯的乙腈 (30ml)溶液，滴加完后，室温搅拌反应 2h, 减压浓缩反应液，抽滤，水洗涤滤饼，干燥得白色固体 12.3g，产率 74%。

d. 2-甲酰胺基乙磺酰胺的合成： OHCHN, 、NH₂

在反应瓶中加入 2-苄氧甲酰胺乙磺酰胺 10.3g、 10%钯炭 (3.0g) 和 600ml甲醇，通入氢气，室温搅拌反应过夜，加入甲酸 35ml，搅拌 30min，过滤，减压浓缩得油状物 5.6g，产率 93%。

e. 2-磺酰胺乙胺盐酸盐的合成：

将 2-曱酰胺基乙磺酰胺加入无水乙醚中搅拌，通入盐酸气体，搅拌反应 3h, 过滤，无水乙醚洗涤滤饼，干燥得白色固体 4.6g，产 f. N-f 4-f 3-氟苄氧基) 3-氯苯基) -6-ί5- 2 氨蹟酰基）乙基氨基）甲基) -2-

将化合物 5-(4-(4-(3-氟苄氧基) -3-氯苯胺基) -6-喹唑淋基)呋喃 -2- 甲醛 2.4g溶于二氯曱烷 /曱醇 (3: 1)的混合溶液中，加入三乙胺 l.Og 搅拌反应 10min，加入 2-氨乙基磺酰胺盐酸盐 1.6g，室温搅拌反应， TLC检测原料反应完毕，冰浴下分批加入硼氢化钠 0.57g， TLC检测反应完毕，加入适量二氯曱烷，饱和氯化铵溶液洗涤，饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，柱层析得黄色固体 2.2_g，产率 74%。

^JH NM (600MHz, DMSO-d₆, 6ppm): 10.06 (s, 1H)， 9.1 (s， 1H), 8,58 (s， 1H)， 8.20 (dd, 1H, / = 1.8 Hz, J = 9 Hz), 8.15 (s， 1H)， 7.87 (d, 1H， J = 7.8 Hz), 7.82 (d, 1H， J = 8.4 Hz), 7.48 (d, 1H， J = 7.8 Hz), 7.34 (d， 1H， = 7.8 Hz), 7.32 (s， 1H)， 7.29 (d, 1H， = 9 Hz), 7.21 (d， 1H， J = 2.4 Hz), 7.18 (d, 1H， / = 1.8 Hz), 7.12 (s, 1H)， 5.23 (s, 2H), 3.42 (m, 2H), 3.35 (s， 2H)， 4.23 (s， 2H)， 3.13 (m, 2H).

MS (m/z): [M+H】+ 582.1。

将化合物 1溶解在四氢呋喃溶液中，緩慢滴加到对曱苯磺酸的乙醇溶液中，回流反应 2h，析出黄绿色沉淀。抽滤、干燥得到化合物 1的对甲苯磺酸盐。实施例 2: Ν-(4- -氟苄氧基) 3-氯苯基 6-i5-"2- (甲基亚砜基）乙基氨基〗甲基) -2-呋喃基) -喹唑啉 -4-胺 (化合物 2)的合成：

a. Boc保护的 2-巯基乙胺的合成：在反应瓶中加入二碳酸二叔丁酯 35.3g、 2-巯基乙胺盐酸盐 20.4g 和 200ml二氯甲烷冰浴条件下分批加入三乙胺 25ml，室温搅拌反应过夜，加入过量 0.5M的盐酸溶液洗涤，有机层用饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，蒸干溶剂得油状液体 8_g，产率 87%。

b. Boc保护的 2-甲硫基乙胺的合成：

_HS/^ HBoc ^N \_s/\^NHBoc

CH₃l

冰浴、氮气保护条件下，将 NaH 4.8g分批加入 Boc保护的 2- 巯基乙胺 28g的无水四氢呋喃 (250ml)溶液中，升至室温反应 lh，冰浴条件下滴加 12ml碘甲烷的四氢呋喃溶液，滴毕后室温反应约 lh，加入饱和碳酸钠溶液淬灭反应，将反应液倾入水中，乙酸乙酯萃取，有机相用饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，蒸干溶剂得油状液体。柱层析得到目标产物 14.2g，产率 47%。

c Boc保护的 2-甲亚砜基乙胺的合成：

、〜 c _高碘酸 , \_S〜NHB_0C

O

冰浴条件下，将 Boc保护的 2-曱硫基乙胺 14.0g溶于曱醇中，滴加高碘酸钠的水溶液，加毕后室温搅拌反应过夜，过滤，二氯甲烷洗涤滤饼，减压蒸除滤液中的有机试剂，加入饱和氯化钠溶液，乙酸乙酯萃取，无水硫酸镁干燥，过滤减压蒸除溶剂得油状物 13.2_g，产率 87%.

d. Boc保护的 2-甲亚砜基乙胺盐酸盐的合成：

o

、關 OC ^^ H₃ - C.

0

将 Boc保护的 2-甲亚砜基乙胺 12g溶于无水乙醚中，通入盐酸气体， TLC检测原料反应完毕，减压蒸除溶剂得油状物 6.8_g，产率 82%。 e. N-i4-f3-氟苄氧基) 3-氯苯基 6-f5-(Y2-f甲基亚砜基〗乙基氨基) 甲基) -2- 喹唑啉 -4-胺的合成：

将化合物 5-(4-(4-(3-氟苄氧基) -3-氯苯胺基) -6-喹唑啉基)呋喃 -2- 曱醛对甲苯磺酸盐 12 _g溶于二氯曱烷 /曱醇 (3: 1)的混合溶液中，加入 12ml三乙胺搅拌反应 10min，加入 2-曱亚砜乙胺盐酸盐 6.0g，室温搅拌反应， TLC 检测原料反应完毕，冰浴下分批加入硼氢化钠 2.0g, TLC 检测反应完毕，加入适量二氯甲烷，饱和氯化铵溶液洗涤，饱和氯化钠溶液洗涤,无水硫酸钠干燥，柱层析得黄色固体 7.3g，产率 69%。

'H-NM (600MHZ, DMSO-d₆, 5ppm): 9.92 (s, 1Η)， 9.044 (s, 1Η)， 8.92 (s， 1Η)， 8.41 (t, 1Η， = 6.6 Hz), 7.93 (d, 1H， = 7.8 Hz), 7.64 (dd, 1H， J = 2.4 Hz， / = 9 Hz), 7.50 (d, 1H， = 7.8 Hz), 7.48 (d, 1Η, = 9.6 Hz), 7.36 (d, 1H， = 9 Hz), 7.25 (d, 1Η, = 3.0 Hz), 7.22 (dd, 1H， = 2.4 Hz, = 9 Hz), 7.11 (d, 1H， J = 7.2 Hz), 7.25 (d, 1H, J = 3.0 Hz), 5.32 (s， 2H)， 4.47 (s， 2H)， 3.51 (t, 2H, J = 7.2 Hz), 2.67 (t, 2H， J = 7.2 Hz), 2.29 (s， 3H).

MS (m/z): [M+H]⁺ 565.5. 实施例 3: N-f4-f3-氟苄氧基) 3-氯苯基 6-f5- 2- (甲硫基）乙基氨基）甲基) -2-呋喃基) -喹唑啉 -4-胺匕合物 3)的合成：

将化合物 5-(4-(4-(3-氟苄氧基) -3-氯苯胺基) -6-喹唑啉基)呋喃 -2- 甲醛 lO.Og溶于二氯曱烷 /甲醇 (3: 1)的混合溶液中，加入三乙胺 4.3g 搅拌反应 lOmin, 加入 2-曱硫基乙胺盐酸盐 6.9g, 室温搅拌反应， TLC检测原料反应完毕，冰浴下分批加入硼氢化钠 2.4g， TLC检测反应完毕，加入适量二氯曱烷，饱和氯化铵溶液洗涤，饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，柱层析得黄色固体 6.5_g, 产率 56%。

¹H-NM (600MHz, DMSO-d₆, δρρηι): 9.93 (s， 1Η)， 8.73 (s, 1Η)， 8.55 (s, 1Η), 8.16 (d, 1H， / = 2.4 Hz), 8.01 (d， 1Η, = 2.4 Hz), 7.80 (d, 1H， /= 7.4 Hz), 7.74 (dd， 1Η, = 2.4 Hz， / = 9 Hz), 7.45 (m， 1H)， 7.34 (d， 1H， = 7.8 Hz), 7.32 (s， 1H)， 7.29 (d, 1H， J= 8.4 Hz), 7.19 (t, 1H, J = 8.4 Hz), 7.05 (d， 1H， J = 3.0 Hz), 6.48 (d, 1H， J = 3.0 Hz), 5.25 (s, 2H), 3.83 (s， 2H)， 2.77 (t, 2H， = 7.2 Hz), 2.59 (t, 2H, = 7.2 Hz), 2.04 (s， 3H).

MS (m/z):【M+H】+ 549.5. 实施例 4: Ν-Μ-ί3-氟苄氧基) 3-氯苯基 )-6-f5- 2- (甲磺酰胺基）乙基氨基)曱基) -2-呋喃基) -喹唑啉 -4-胺 (化合物 4)的合成:

a. 2-氨基乙胺基甲酸叔丁酯的合成：

〜NH₂ J≥^ _H2N〜_NHB0C

500ml反应瓶中加入 30ml乙二胺，冰浴条件下，滴加二碳酸二叔丁酯 18.0g的二氯曱烷溶液 (200ml), 自然升至室温反应过夜，加入 100ml二氯甲烷，依次用饱和碳酸钠溶液、饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压蒸除溶剂得淡黄色油状液体 10.9_g，产率 82.6%。

b. 2-曱磺酰胺基乙胺基甲酸叔丁酯的合成：

〜隱 oc ^{C H}3S0₂C. _{C H3S02HN}〜 N_{H BOC}

2 TEA

1000ml反应瓶中加入 2-氨基乙胺基曱酸叔丁酯 36.9g和 200ml 二氯曱烷，电磁搅拌，冰浴降温，加入 96ml三乙胺，緩慢滴加曱磺酰氯 35.9g的二氯曱烷溶液 200ml, 自然升至室温反应过夜，滴加冰水淬灭反应，分出有机层，水层用二氯曱烷萃取，合并有机层，依次用 5mol/L稀盐酸、饱和碳酸氢钠溶液和饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压蒸除溶剂得椋黄色固体 28.6_g，产率为 52.1%。

c. 氨乙基)甲磺酰胺盐酸盐的合成：

_{N H Boc} C₂H₅OH/CH₃OH so HN^^^NH2* ^HCI CH₃S0₂HN 〜 j^] CH₃S0₂HN

500ml反应瓶中加入 2-曱磺酰胺基乙胺基曱酸叔丁酯 (25g)及乙醇和曱醇的混合溶剂 350ml，电磁搅拌，通入干燥的氯化氢气体 3h，室温搅拌过夜，减压浓缩至小体积，抽滤，得棕灰色粉状固体 14.6g，产率 79.3%。

d. Ν-(4-ί3-氟苄氧基) 3-氯苯基 )-6-(5- 2- (甲磺酰胺基）乙基氨基) 甲基) -2-呋喃基) -喹唑啉 -4-胺的合成：

于室温下，将化合物 5-(4-(4-(3-氟苄氧基) -3-氯苯胺基) -6-喹唑啉基)呋喃 -2-甲醛 10.0g，化合物 N-(2-氨基乙基)甲烷磺酰胺的盐酸盐 6.5g, 三乙胺 14.6g在二氯甲烷 /曱醇 (3: 1)的混合溶液中搅拌过夜，然后用冰浴冷却到 0。C，于该温度下加入硼氢化钠 1.4g，升至室温继续搅拌过夜，加饱和碳酸氢钠淬灭反应，用乙酸乙酯萃取，有机相用饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，柱层析得到目标产物 5.7g，产率 45.0%。

^-NMR (300MHz, CDCI₃, δρριη): 8.65 (s, 1Η)， 8.62 (s， 1Η)， 8.28 (s， 1Η)， 7.84-7.73 (m， 3Η), 7.53 (d, 1Η, = 8.7 Hz), 7.33-7.28 (m, 1H), 7.19-7.15 (m， 2H)， 6.98 (t, 1H， J = 8.4 Hz), 6.86 (d, 1H / = 4.5 Hz), 6.57 (d, 1H, 7 = 1.8 Hz), 6.20 (d, 1H， = 1.8 Hz), 5.04 (s， 2H)， 3.73 (s, 2H)， 3.18(t, 2H， = 8.4 Hz),2.87 (s， 3H),2.78 (t， 2H， = 8.4);

¹³C-NMR (75MHz， CDC1₃， 5ppm): 164.4， 161.2, 157.8, 154.4， 153.7, 152.2, 150.7, 148.9, 139.0, 138.9, 132.4, 130.1， 130.0, 124.9, 128.6, 128.5， 124.9, 122.7， 122.4, 122.3, 115.3, 115.1， 114.8， 114.5， 113.9, 113.6, 109.7， 107.1, 70.1， 47.4, 45.2, 42.2， 40.0;

HR-MS (m/z): 计算结果： C₂₉H₂₇C1FN₅0₄S [M+H】+ 596.1529, 实测结果： 596.1533。实施例 5: N-f4-f3-氟苄氧基) 3-氯苯基 )-6-f5- 2-f2,2,2-三氟乙磺酰基）乙基氨基)甲基) -2-呋喃基) -喹唑啉 -4-胺 ί化合物 5)的合成：

a. 2,2,2-三氟乙基 - -甲基苯基)磺酸酯的合成：

将 2.1ml的 2，2，2-三氟乙醇和 4.4 ml三乙胺加入 100ml二氯甲烷中，水浴下分批加入对甲苯磺酰氯 5.0_g，加毕升至室温搅拌过夜。反应液水洗，饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，蒸干溶剂，得淡黄色油状液体 5.9g，产率 98.7%。

b. 2-巯基乙胺基甲酸叔丁酯的合成： (^Boc)2。 , ^/ NHBOC

HS ^ ² Et₃N

将二碳酸二叔丁酯 3.5g和 2-巯基乙胺盐酸盐 2.0g加入 200 ml 二氯曱烷中，冰浴条件下滴加 2.5ml三乙胺，然后升至室温搅拌反应过夜。反应液用 0.5M盐酸水溶液洗涤，饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，蒸干溶剂，得油状液体 2.7_g，产率 87.1%。

c 2-ί2,2,2-

将氢化钠 1.7_g加入到 30ml干燥的二曱基曱酰胺中，然后冰浴下分批加入 2-巯基乙胺基甲酸叔丁酯 7.5_g，加毕搅拌 lh，然后緩慢加入 2，2，2-三氟乙基 -(4-曱基苯基)磺酸酯，加毕升至室温搅拌过夜。将反应液倒入水中，乙醚萃取， 0.5M氢氧化钠水溶液洗涤，饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，蒸干溶剂，经柱层析分离得淡黄色油状液体 5.4g, 产率 53.8%。

d. 2-f 2,2,2-三氟：

将 2-(2，2，2-三氟乙硫基）乙胺基甲酸叔丁酯 ³.⁹g溶于 50ml二氯曱烷中，水浴下分批加入间氯过氧苯曱酸 12.2g，加毕升至室温搅拌反应 5h。用饱和亚硫酸氢钠水溶液淬灭反应，二氯曱烷萃取，合并有机层，饱和碳酸钠水溶液洗涤，饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，蒸干溶剂，得白色固体 3.9g，产率 89.4%。

e. 2 2,2,2-三氟乙磺酰基〗乙基氯化铵的合成：

将 2-(2，2，2-三氟乙砜基）乙胺基曱酸叔丁酯 3.9g加入到 60ml无水乙醚中，室温下通盐酸气体搅拌反应过夜。抽滤，乙醚洗涤，得白色固体 2.7g，产率 87.7%。

f. Ν 4-ί3-氟苄氧基) 3-氯苯基 )-6-f5- 2-f2,2,2-三氟乙磺酰基）乙基氨基)甲基) -2-呋喃基) -喹唑啉 -4-胺的合成:

于室温下，将化合物 5-(4-(4-(3-氟苄氧基) -3-氯苯胺基) -6-喹唑啉基)呋喃 -2-曱醛对甲苯磺酸盐 10.0g，化合物 2-(2，2，2-三氟乙砜基）乙胺的盐酸盐 7.1_g， 11ml三乙胺和无水硫酸钠 20g在二氯甲烷 /甲醇 (3: 1)混合溶液中搅拌过夜，然后用水浴冷却到 0。C , 于该温度下加入硼氢化钠 1.8g，自然升至室温, 继续搅拌过夜，加饱和碳酸氢钠淬灭反应，用乙酸乙酯萃取，有机相用饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，柱层析分离得到目标产物 5.4_g，产率 53.5%。

¹H-NMR (400MHz, 丙酮 -d₆， δρριη): 9.33 (s， 1H), 8.77-8.75 (m， 2H)， 8.30-8.28 (m， 1H)， 8.24 (s， 1H)， 7.97 (d, = 4.4 Hz, 1H), 7.90 (d， J = 4.4 Hz, 1H), 7.61 (q, 7 = 7.6 Hz, 1H), 7.53-7.35 (m, 3H), 7.24 (d, J = 0.8 Hz, 1H)， 7.28-7.24 (m，lH)， 7.08 (s, 1H), 6.60 (s, 1H)， 5.42 (s, 2H)， 4.73 (q, = 10 Hz, 2H). 3.60 (t, J = 6.0 Hz, 2H)， 3.40 (t, J = 6.0 Hz, 2H);

¹³C-NMR (100MHz, 丙酮 -d₆， dppm): 171.0, 165.3, 162.9, 158.9， 155.9, 155.5， 153.4, 151.6, 150.7, 141.2, 141.2， 134.7, 131.6, 131.5， 130.1, 129.7, 126.4, 125.0， 124.9, 123.3, 122.2, 116.9， 115.8, 115.0, 110.7, 108.6, 71.0, 57.5, 57.2, 56.9, 56.6, 46.6, 43.5， 33.8;

HR-MS (m/z): 计算结果： C₃₀H₂₅ClF₄N₄O₄S [Μ+ΗΙ+ 649·1294，实测结果： 649.1288。实施例 6: Ν-(4-ί3-氟苄氧基) 3-氯苯基 6-f5- 2-f三氟甲磺酰基) 乙基氨基)甲基) -2-呋喃基) -喹唑啉 -4-胺 (化合物 6)的合成：

于室温下，将化合物 5-(4-(4-(3-氟苄氧基) -3-氯苯胺基) -6-喹唑啉基)呋喃 -2-甲醛 240mg、化合物 2-三氟甲砜基乙胺盐酸盐 120mg， 0.2 ml三乙胺在 10ml二氯甲烷中混合后，加入 0.2ml冰醋酸，搅拌 4h 后，用水浴冷却到 0°C，于该温度下加入三醋酸硼氢化钠 500mg，升至室温继续搅拌 12h，加饱和碳酸氢钠淬灭反应，用乙酸乙酯萃取，有机相用饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，柱层析得到黄色固体 35.7mg，产率 11.1%。

¹H-NMR(400MHz, CDC1₃, 6ppm): 8.70 (s， 1H)， 8.27 (s， 1H)， 7.98-7.96 (m, 1H), 7.90-7.88 (m, 2H0, 7.84 (d, =1.2Hz, 1H), 7.54 (dd, =2.4Hz, =8.8Hz， 1H)， 7.39-7.34 (m， 1H)， 7.24-7.22 (m, 1H)， 7.04-6.97 (m， 2H)， 6.76 (d, /=1.2Hz, 1H)， 6.45 (d， /=1.6Hz, 1H)， 5.17 (s， 2H)， 3.92 (s， 2H), 3.55-3.49 (m， 2H), 3.37-3.34 (m， 2H);

¹³C-NMR (100MHz, CDC1₃， δρριη): 164.20, 161.75, 157.80, 154.97, 153.55, 151.06， 149.77, 49.57, 139.14, 139.07, 132.14, 130.17, 130.09, 129.25， 128.80, 128.18, 125.18， 124.06, 23.40, 123.34, 122.45, 122.43, 122.29, 120.81, 117.56， 115.34, 115.01, 114.95， 114.74, 114.18， 114.08, 113.86, 112.46, 07.11, 70.37, 47.87, 46.12, 45.74;

HR-MS (m/z): 计算结果： C₂₉H₂₃C1F₄N₄0₄S [M+H】+ 635.1137, 实测结果： 635.1142。

以上述化合物 6制备方法类似的操作步骤，不同的是将 2-三氟曱砜基乙胺盐酸盐替换为 2-曱砜基乙胺盐酸盐，可以容易地得到 N-(4-(3-氟苄氧基) 3-氯苯基 )-6-(5-((2-(曱磺酰基）乙基氨基)甲基) -2-呋喃基) -喹唑啉 -4-胺（化合物 61)。实施例 7: 其它化合物的制备

以下表中化合物 7至 14所示的式 I化合物可以通过与上述相应实施例相似的步骤：

I

生物学实脸

可以使用以下实验来测定本发明所述化合物对 EGFR酪氨酸激酶的抑制活性作用以及在体外作为 NCI-N87细胞和 BT474细胞抑制剂的作用。

A)蛋白酪氨酸激酶磷酸化测定

体外激酶分析用 Cell Signaling Technolog 公司的 HTScan EGF Receptor Kinase Assay Kit(#7909)和 HTScan HER2/ErbB2 Kinase Assay Kit(#7058)检测。操作步骤参照试剂盒说明书，该方法在体外检测待测化合物对 EGFR或 Her2受体酪氨酸激酶对底物肽磷酸化的抑制作用。室温下激酶反应緩沖液中温育 ATP和底物肽以及待测化合物，孵育一段时间后，加入终止液终止反应并将样品转移到链霉亲和素包被的 96孔板中，洗板并用 HRP标记的抗底物磷酸化抗体检测底物肽上的磷酸化水平，用 TMB显色， 2M硫酸中止反应。检测 450 nm吸收波长，计算 IC₅。值 (μΜ)。结果见下表 1。

Β)细胞增殖抑制

参考 Rusnak等， Cell Prolif , 2007, 40， 580-594中描述的方法进行试猃。细胞增殖抑制试猃采用人乳腺癌细胞 BT474和人胃癌细胞系 NCI-N87, BT474高表达 Her2受体， N87高表达 EGFR和 Her2 受体。

在含 10%胎牛血清、 2 mM谷氨酰胺和非必需氨基酸的 Dulbecco 改良 Eagle培养基 (DMEM)中，在 37 °C、 5% C0₂细胞培养箱中培养细胞，应用胰蛋白酶 /乙二胺四乙酸 (EDTA)从细胞培养瓶中收获细胞。细胞以 4000/孔 (0.1ml培养基)加入 96孔细胞培养板贴壁过夜，加入 0.1ml待测化合物的稀释液， DMSO的最终浓度为 0.25%，将细胞培养板在 37 5%的 C0₂条件下温育 72h。然后在显微镜下观察细胞形态的变化，然后每孔加入 50% (质量 /体积）的三氯乙酸 (Τ€Α)50μ1固定细胞。 TCA的终浓度为 10%, 静置 5min后在 4 V 冰箱中放置 l h，培养板各孔用去离子水冲洗 5遍，以去除 TCA, 甩干，空气干燥至无湿迹。每孔加 0.4% (质量 /体积)的 SRBlOO l, 室温放置 10min，弃去各孔内液体后用 1%乙酸沖洗 5遍，空气干燥后用 pH为 10.5， 10mM Tris base (三羟曱基氨基曱烷 )150μ1萃取，检测 540nm的吸收波长。结果 IC₅。值 (μΜ)见下表 1。

表 1: 本发明化合物对 EGFR和 Her2的抑制活性分析

化合物 4 0.01554 0.00706 0.01783 0.01672

化合物 5 0.01461 0.00808 0.03367 0.01885

化合物 6 0.03240 0.02560 0.05455 0.04974 在作为评价化合物生物学活性的一个重要的 "细胞增殖抑制试验" 中可以看到，本发明化合物具有较好的生物学活性。

另外，在同样的试验中，化合物 61也具有与化合物 6接近的生物学活性结果；化合物 7至 14也具有与化合物 2或 3接近的生物学活性结果。结果表明，本发明的式 I化合物是有效的酪氨酸激酶抑制剂。

C)体内生物学活性评价

BALB/cA-nude棵小鼠，雌性， 4-6周龄，体重 22±2 g，购自上海斯莱克实验动物有限责任公司， SPF级环境饲养。

1)单剂量化合物对人胃癌 NCI-N87棵小鼠移植瘤的疗效：将体外培养的 NCI-N87细胞接种于棵鼠右侧腋窝皮下，每只约接种 5xl0⁶个细胞，成瘤后体内传代两次。无菌条件下，取生长旺盛的瘤组织修剪成 1.5 mm³左右的瘤块，接种于棵小鼠右侧腋窝下。用游标卡尺测量瘤径，待肿瘤生长至 100-200 mm³后将动物随机分组 (d₀)。化合物 2、 3、 5及阳性对照 (化合物 61)给药剂量为 200 mg/kg，灌胃给药，每天一次，连续 28天，对照组给等量溶剂。给药期间，每周测量小鼠体重和瘤径 3次。根据测量数据计算肿瘤体积和相对肿瘤体积，肿瘤体积 (tumor volume, TV)的计算公式为： TV=l/2xaxb², 其中&、 b分别表示肿瘤长径和短径；相对肿瘤体积（relative tumor volume, RTV)计算公式为： RTV= V_t/V。，其中 V₀为分笼给药时（即 do)测量所得肿瘤体积， ¼为每一次测量时的肿瘤体积。抗肿瘤活性的评价指标为相对肿瘤增殖率 T/C(%)，计算公式如下： T/C(%)=(T_RTV / C_rtv)X100% , 其中 T_rtv为治疗组 RTV， C_RTV为阴性对照组 RTV。相对肿瘤抑制率计算公式为 1- T/C(%)。相对肿瘤抑制率≥60%，经统计学处理 7^0.05为药物有效。实脸结果如下表所示：表 2 单剂量人胃癌 NCI-N87棵小鼠移植瘤抑瘤试脸结果

体内活性筛选试验结果显示：对人胃癌 NCI-N87棵小鼠移植瘤模型，化合物 2的抑瘤率 (94.8%)明显高于化合物 61(89.8%), 其次为化合物 3，活性低于化合物 61(抑瘤率 84.6%)。化合物 2给药组 6只动物均出现肿瘤消退，阳性对照组 (化合物 61)有 5只出现肿瘤消退，化合物 3 给药组有 4只出现肿瘤消退。

2)单剂量化合物对人卵巢癌 SK-OV-3棵小鼠移植瘤的疗效：棵小鼠皮下接种人卵巢癌 SK-OV-3细胞，待肿瘤生长至 60-150mm3后，将动物随机分组 (d0)。化合物 2、 3、 5及阳性对照药 (化合物 61)给药剂量为 200 mg/kg，灌胃给药，每天一次，连续 21天，对照組给等量溶剂。给药期间，每周测量小鼠体重和瘤径 3次。肿瘤体积、相对肿瘤抑制率等计算方法如上所述。实脸结果表 3所示:

表 3 单剂量人卵巢癌 SK-OV-3棵小鼠移植瘤模型抑瘤试验结果

人卵巢癌 SK-OV-3棵小鼠移植瘤模型抑瘤活性实验结果显示：化合物 2的抑瘤率明显高于化合物 61(86% vs 79%), 其次为化合物 3，活性略低于化合物 61(抑瘤率 75%)。化合物 2给药组 2只动物出现肿瘤消退，而化合物 61对照组有 1只出现肿瘤消退。

3)不同剂量化合物对人卵巢癌 SK-OV-3棵小鼠移植瘤的疗效：棵小鼠皮下接种人卵巢癌 SK-OV-3 细胞，待肿瘤生长至 60-150mm³后，将动物随机分组 (d0)。每个化合物设 50 mg、 100 mg、 200 mg三个剂量组，阴性对照组给 200 mg/kg溶剂，阳性对照组 (化合物 61)给 200 mg/kg。灌胃给药，每天 1次，连续 21天。每周测 3 次瘤体积，称鼠重，记录数据。肿瘤体积、相对肿瘤抑制率等计算方法如上所述。实验结果如下表所示：

表 4 不同剂量人卵巢癌 SK-OV-3棵小鼠移植瘤模型抑瘤试验结果

不同剂量药物对人卵巢癌 SK-OV-3棵小鼠移植瘤抑瘤试验结果显示：化合物 2、化合物 3均能不同程度地抑制人卵巢癌 SK-OV-3 裸小鼠移植瘤的生长，抑制作用呈剂量依赖性。化合物 2活性最好，同等剂量时抑瘤率显著高于阳性对照药 (化合物 61)，且在 100 mg/kg 剂量时，即能达到对肿瘤的有效抑制 (抑瘤率 64%)。

以上结果显示该发明化合物对酪氨酸激酶驱动的肿瘤具有较好的抑瘤效果。

D)化合物 2的药代动力学评价：

健康 SD大鼠 8只，雄性，体重 200-220 g，随机分成 2组 (每组 4 只），分别单次灌胃给予化合物 2 和化合物 61，给药剂量均为 100 mg/kg, 给药体积为 10 ml/kg, 药物以 10%吐温 80加 90%去离子水配制。试验前禁食 12 h，自由饮水。给药后 2 h统一进食。于给药后 0.25， 0.5, 1.0, 2.0, 3.0, 5.0， 7.0, 9.0， 12和 24 h经大鼠眼球后静脉丛取血 0.3 ml, 置肝素化试管中， 11000 rpm离心 5 min, 分离血浆， 20。C保存。以液相色谱串联质谱法测定血浆中的原型药物及代谢物浓度。结果如表 5所示：

表 5.阳性对照、原形药物的药动学参数

*1. 血浆中检测到的阳性对照化合物 61;

化合物 2明显具有更好的吸收和生物利用度，同等剂量下，最大血药浓度或药时曲线下面积约为阳性对照的 2 倍。以原形药物的 AUC。__t计，与化合物 61对照组相比，化合物 2的相对生物利用度为 187%。

E 化合物 2对 hERG钾电流的影响：

用脂盾体转染法将含有 hERG基因的质粒转染于 HEK293细胞，用全细胞膜片钳记录模式，观察不同浓度的化合物 2 对体外表达 hERG钾电流（IKr ) 的抑制作用，以化合物 61作阳性对照，分析比较药物对 IKr作用的差异。

化合物 2 对 IKr 脉冲电流的半有效抑制剂量 IC50 为 10.06±0.96μΜ,对尾电流的半有效抑制剂量 IC50约是 9.24±0.33μΜ。化合物 61对 IKr脉沖电流的半有效抑制剂量 IC50为 1.09±0.045μΜ，对尾电流的半有效抑制剂量 IC50约是 0.98士 0.40μΜ。

就体外表达的 hERG钾离子通道而言化合物 2对其的抑制作用强度均低于化合物 61。以上结果提示，化合物 2具有更好的安全性。

Claims

权利要求

1 > 式 I

或其药学可接受的盐、溶剂合物，

其中，

R 选自 d_₆烷基亚砜基、一个或多个卤素取代的 <^₆烷基亚砜基、 d.₆烷基硫基、一个或多个卤素取代的 d.6烷基硫基、烷基酰胺基、 d.₆烷基磺酰胺基、一个或多个卤素取代的 d.₆烷基横酰

胺基、一个或多个卤素取代的烷基磺酰基、或 0 ；

1^和 R₂各自独立地选自氢、 d.₆烷基、和一个或多个 ¾素取代的 d_₆烷基。

2、：据权利要求 1的式 I化合物，其中所述的 R选自 d_₆烷基亚砜基、一个或多个卤素取代的 d_₆烷基亚砜基。

3、根据权利要求 1的式 I化合物，其中所述的 R选自 d.₆烷基硫基、一个或多个卤素取代的 d_₆烷基硫基。

4、根据权利要求 1的式 I化合物，其中所述的 R选自 d.6烷基酰胺基、 d_₆烷基磺酰胺基、一个或多个素取代的 d_₆烷基磺酰胺基。

5、根据权利要求 1的式 I化合物，其中

R 选自 d_₄烷基亚砜基、 1至 3个卤素取代的 d_₄烷基亚砜基、 d_₄烷基硫基、 1至 3个卤素取代的 d_₆烷基硫基、 d_₄烷基酰胺基、烷基磺酰胺基、 1至 3个卤素取代的 CM烷基磺酰胺基、 1至 3

个卤素取代的 d_₄烷基磺酰基、

和 R₂各自独立地选自氢、 CM烷基、和 1至 3个素取代的

6、根据权利要求 1至 5任一项所述的式 I化合物，其选自：

N-(4-(3-氟苄氧基) -3-氯苯基 )-6-(5-((2- (氨磺酰基）乙基氨基）甲基) -2-呋喃基) -喹唑啉 -4-胺；

N-(4-(3-氟苄氧基) -3-氯苯基 )-6-(5-((2-(甲基亚砜基）乙基氨基）曱基) -2-呋喃基) -喹唑啉 -4-胺；

N-(4-(3-氟苄氧基 )-3-氯苯基) -6-(5-((2-(甲硫基）乙基氨基）曱基) -2-呋喃基) -喹唑啉 -4-胺；

N-(4-(3-氟苄氧基) -3-氯苯基 )-6-(5-((2-(曱磺酰胺基）乙基氨基）甲基) -2-呋喃基) -喹唑啉 -4-胺；

N-(4-(3-氟苄氧基) -3-氯苯基 )-6-(5-((2- (三氟曱磺酰基）乙基氨基) 曱基) -2-呋喃基) -喹唑啉 -4-胺；

N-(4-(3-氟苄氧基) -3-氯苯基 )-6-(5-((2- (三氟曱硫基）乙基氨基）曱基) -2-呋喃基) -喹唑啉 -4-胺；

N-(⁴-(3-氟苄氧基) -3-氯苯基 )-6-(5-((2- (三氟曱基亚砜基）乙基氨基)甲基) -2-呋喃基) -喹唑啉 -4-胺；

N-(4-(3-氟苄氧基) -3-氯苯基 )-6-(5-((2-(2，2，2-三氟乙硫基)乙基氨基)曱基) -2-呋喃基) -喹唑啉 -4-胺； N-(⁴_(³_氟苄氧基) _³_氯苯基 )-⁶_(⁵-((²-(²，²,²-三氟乙基亚砜基）乙基氨基)甲基) -2-呋喃基) -喹唑啉 -4-胺；

N-(4-(3-氟苄氧基) -3-氯苯基 )-6-(5-((²-(乙酰胺基）乙基氨基）曱基) -2-呋喃基) -喹唑啉 -4-胺；

N-(4-(3-氟苄氧基) -3-氯苯基 )-6-(5-((2-(N-甲基胺磺酰基）乙基氨基)甲基) -2-呋喃基) -喹唑啉 -4-胺；

N-(4-(3-氟苄氧基) -3-氯苯基 )-6-(5-((2-(2，2，2-三氟乙基磺酰胺基) 乙基氨基)甲基) -2-呋喃基) -喹唑啉 -4-胺；

或其药学可接受的盐、溶剂合物。

7、权利要求 1至 6任一项所述的式 I化合物的制备方法，其包括以下步骤：

a)使以下式 II化

II

与以下式 III化合物或其适宜的盐

NH₂CH₂CH₂R

III

b)使反应混合物用适宜的还原剂处理，得到式 I化合物，其中 R基团如权利要求 1所述定义。

8、一种药物组合物，其包含权利要求 1至 6任一项所述的式 I 化合物，以及任选的一种或多种药学可接受的载体或赋形剂。

9、权利要求 1至 6任一项所述的式 I化合物在制备用于治疗和 /或预防哺乳动物（包括人)与受体酪氨酸激酶相关的疾病或病症的药物中的用途。

10、权利要求 1至 6任一项所述的式 I化合物在制备用于治疗或辅助治疗和 /或预防哺乳动物（包括人)由受体酪氨酸激酶介导的肿瘤或由受体酪氨酸激酶驱动的肿瘤细胞的增殖和迁移的药物中的用途；进一步地，.所述的与受体酪氨酸激酶相关的疾病或病症、由受体酪氨酸激酶介导的肿瘤、或由受体酪氨酸激酶驱动的肿瘤细胞的增殖和迁移包括 erbB受体酪氨酸激酶敏感癌症，如 EGFR或 Her2高表达及 EGF驱动的肿瘤，包括实体肿瘤如胆管、骨、膀胱、脑 /中枢神经系统、乳房、结直肠、子宫内膜、胃、头和颈、肝、肺 (尤其是非小细胞肺癌）、神经元、食道、卵巢、胰腺、前列腺、肾脏、皮肤、睾丸、曱状腺、子宫和外阴等的癌症，和非实体肿瘤如白血病、多发性骨髓瘤或淋巴瘤等。

11、在有需要的哺乳动物中治疗和 /或预防与受体酪氨酸激酶相关的疾病或病症的方法，该方法包括给有需要的哺乳动物施用治疗有效量的权利要求 1至 6任一项所述的式 I化合物。

12、在有需要的哺乳动物中治疗或辅助治疔和 /或预防哺乳动物 (包括人）由受体酪氨酸激酶介导的肿瘤或由受体酪氨酸激酶驱动的肿瘤细胞的增殖和迁移的方法，该方法包括给有需要的哺乳动物施用治疗有效量的权利要求 1至 6任一项所述的式 I化合物。

13、一种在有需要的哺乳动物中治疗和 /或预防哺乳动物（包括人)的肿瘤或癌症的方法，该方法包括给有需要的哺乳动物施用治疗有效量的权利要求 1至 6任一项所述的式 I化合物，所述的肿瘤或癌症包括 erbB受体酪氨酸激酶敏感癌症，如 EGFR或 Her2高表达及 EGF驱动的肿瘤，包括实体肿瘤如胆管、骨、膀胱、脑 /中枢神经系统、乳房、结直肠、子宫内膜、胃、头和颈、肝、肺 (尤其是非小细胞肺癌）、神经元、食道、卵巢、胰腺、前列腺、肾脏、皮肤、睾丸、甲状腺、子宫和外阴等的癌症，和非实体肿瘤如白血病、多发性骨髓瘤或淋巴瘤等。