WO2014126000A1 - 蛍光観察装置 - Google Patents

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Definitions

  • the present invention relates to a fluorescence observation apparatus.
  • Patent Document 1 Conventionally, there has been known a fluorescence observation apparatus that alternately acquires both a white light image and a fluorescence image of a living tissue in a time division manner (see, for example, Patent Document 1). According to Patent Document 1, even when the fluorescence wavelength is in the visible region and the fluorescence wavelength and the partial wavelength of the white light coincide with each other, the fluorescence and the white light are separated and photographed. be able to.
  • Patent Document 1 since a white light image and a fluorescent image are obtained alternately, there is a problem that the frame rate of each image becomes slow. In particular, since the observer mainly observes the white light image, the reduction in the frame rate of the white light image hinders the observation for the observer.
  • the present invention has been made in view of the circumstances described above, and is a fluorescence observation apparatus capable of acquiring a white light image and a fluorescent image in the visible region in parallel without slowing down the frame rate of the white light image.
  • the purpose is to provide.
  • the present invention provides the following means.
  • the present invention provides a light source unit that irradiates a living tissue with illumination light including excitation light, and captures a return light image of the living tissue by photographing a return light that returns from the living tissue by irradiation of the illumination light from the light source unit.
  • a fluorescence observation apparatus Provided is a fluorescence observation apparatus.
  • the illumination light from the light source unit is irradiated onto the living tissue, whereby the return light image obtained by photographing the form of the living tissue is generated by the return light image generation unit.
  • the excitation light included in the illumination light is irradiated onto the living tissue, whereby a fluorescent image obtained by photographing the fluorescence from the living tissue is acquired by the fluorescent image generation unit.
  • both the return light and the fluorescence have wavelengths in the visible region, but have different wavelengths, so that the return light image generation unit and the fluorescence image generation unit are separately photographed.
  • the return light image and the fluorescence image can be acquired in parallel without slowing down the frame rate of the return light image.
  • light having a wavelength of 490 nm to 530 nm has a sufficiently small effect on a living tissue and hardly contributes to acquisition of information on the form of the living tissue. Therefore, even if the illumination light does not include at least a part of wavelengths from 490 nm to 540 nm, it is possible to obtain a return light image equivalent to a white light image in which the form of the biological tissue is captured sufficiently clearly. .
  • the at least part of the wavelength region may be 510 nm to 530 nm.
  • the width of the at least part of the wavelength region may be 20 nm or more.
  • the light source unit includes a white light source that emits white light, and a filter that removes light in at least a part of a wavelength region from 490 nm to 540 nm from the white light emitted from the white light source,
  • a filter may be provided so as to be detachable at a subsequent stage of the white light source, and the illumination light may be substantially white light transmitted through the filter.
  • a living body when acquiring a fluorescent image, a living body is irradiated with substantially white light from which part of the wavelength region has been removed from white light as illumination light by inserting a filter after the white light source, so that the color of the living tissue is substantially reduced. It is possible to obtain a return light image that is accurately reproduced.
  • the return light image generation unit when the filter is inserted in the subsequent stage of the white light source, and when the filter is removed from the subsequent stage of the white light source, the return light image generation unit generates the filter, respectively.
  • the white balance switching unit can switch the white balance value required for the return light image at each time.
  • the light source unit may intermittently irradiate the living tissue with another excitation light that generates another fluorescence having a wavelength different from that of the illumination light and the fluorescence. In this way, two types of fluorescence can be imaged simultaneously when another excitation light is irradiated on the living tissue.
  • the said light source part may be provided with the near-infrared light source which emits a near-infrared light as said another excitation light.
  • the white light image and the fluorescent image in the visible region can be acquired in parallel without reducing the frame rate of the white light image.
  • FIG. 1 is an overall configuration diagram of a fluorescence observation apparatus according to a first embodiment of the present invention. It is a spectrum of the illumination light which the light source unit of FIG. 1 outputs, and the fluorescence excited by the excitation light contained in this illumination light. It is a figure explaining the effect
  • FIG. 6 is a spectrum of illumination light and near infrared light output from the light source unit of FIG. 5 and two fluorescences excited by two excitation lights included in the illumination light and near infrared light. It is a timing chart explaining operation
  • a fluorescence observation apparatus 1 which concerns on the 1st Embodiment of this invention is demonstrated with reference to FIGS. 1-4.
  • a fluorescence observation apparatus 1 according to the present embodiment is an endoscope apparatus, and as shown in FIG. 1, an elongated insertion part 2 inserted into a body, a light source unit (light source part) 3, and the light source unit
  • the illumination unit 4 that irradiates the illumination light L from 3 toward the living tissue X from the distal end 2a of the insertion portion 2, and the imaging that is provided at the distal end 2a of the insertion portion 2 and acquires image information S1 and S2 of the biological tissue X
  • the unit 5 includes an image processing unit 6 that processes the image information S1 and S2 acquired by the imaging unit 5, and a display unit 7 that displays the images G1 and G2 processed by the image processing unit 6. .
  • the light source unit 3 includes a white light source 31 such as a xenon lamp, a filter 32 that generates illumination light L by cutting out some wavelengths from white light emitted from the white light source 31, and the filter 32. And a coupling lens 33 for condensing the illumination light L.
  • the white light source 31 emits white light having a wavelength over the entire visible region.
  • the filter 32 transmits at least light with wavelengths of 400 nm to 490 nm and 540 nm to 610 nm and blocks light with wavelengths of 490 nm to 540 nm.
  • illumination light L that is substantially white light having a wavelength distribution obtained by removing a part of the wavelength region from the visible region and having a bipolar distribution is generated.
  • the illumination unit 4 includes a light guide fiber 41 disposed over almost the entire length of the insertion portion 2 in the longitudinal direction, and an illumination optical system 42 provided at the distal end 2a of the insertion portion 2.
  • the light guide fiber 41 guides the illumination light L collected by the coupling lens 33.
  • the illumination optical system 42 diffuses the illumination light L guided by the light guide fiber 41 and irradiates the living tissue X facing the distal end 2 a of the insertion portion 2.
  • the imaging unit 5 includes an objective lens 51 that condenses the light from the living tissue X, a beam splitter 52 that divides the light collected by the objective lens 51 into two, and the light that is divided by the beam splitter 52.
  • an image sensor 53 such as a color CCD and an image sensor 54 such as a high sensitivity monochrome CCD, and a barrier filter 55 disposed between the beam splitter 52 and the image sensor 54.
  • Reference numeral 56 denotes an imaging lens that focuses light collected by the objective lens 51 on the imaging surfaces of the imaging elements 53 and 54.
  • the barrier filter 55 blocks the return light of the illumination light L out of the light incident from the beam splitter 52 and selectively transmits fluorescence described later.
  • the image processing unit 6 generates a return light image G1 from the return light image information S1 acquired by the image sensor 53, and a fluorescence image G2 from the fluorescence image information S2 acquired by the image sensor 54. And a fluorescent image generation unit 62 for generation.
  • the return light image generation unit 61 and the fluorescence image generation unit 62 output the return light image G1 and the fluorescence image G2 to the display unit 7, respectively.
  • the image processing unit 6 may output the return light image G1 and the fluorescence image G2 to the display unit 7 after appropriately performing image processing such as noise removal.
  • the display unit 7 displays the return light image G1 and the fluorescence image G2 in parallel.
  • a fluorescent dye that accumulates in a lesioned part is administered to the biological tissue X in advance.
  • a fluorescent dye that is excited by light having a wavelength of 450 nm to 490 nm and generates fluorescence having a wavelength of 490 nm to 540 nm is used.
  • FIG. 1 shows that the present embodiment, as shown in FIG.
  • a fluorescein derivative having an excitation wavelength EXfl of about 450 nm to 500 nm and an emission wavelength EMfl of about 510 nm to 540 nm, which is used for labeling cancer. Is assumed.
  • the insertion portion 2 is inserted into the body, and the distal end 2a thereof is disposed opposite to the biological tissue X, and the illumination light L is irradiated from the distal end 2a of the insertion portion 2 to the biological tissue X by the operation of the light source unit 3.
  • the illumination light L is reflected on the surface of the living tissue X, and a part of the reflected illumination light L returns to the distal end 2a of the insertion portion 2.
  • the illumination light L includes excitation light having a wavelength of 450 nm to 490 nm for exciting the fluorescent dye. Therefore, the fluorescent dye contained in the living tissue X is excited by the irradiation of the illumination light L, and a part of the generated fluorescence returns to the distal end 2a of the insertion portion 2 together with the return light of the illumination light L.
  • the return light and the fluorescence of the illumination light L collected by the objective lens 51 at the tip 2a of the insertion portion 2 are divided into two by the beam splitter 52.
  • One image is captured by the image sensor 53 and acquired as the return light image information S1
  • the other image is captured by the image sensor 54 after only the fluorescence is extracted by the barrier filter 55 and acquired as the fluorescence image information S2.
  • the image sensor 53 captures both the return light and the fluorescence of the illumination light L. Since the fluorescence is sufficiently weak with respect to the return light, the return light image information S1 acquired by the image sensor 53 is It mainly includes information on the form of the biological tissue X.
  • a return light image G1 is generated from the return light image information S1
  • a fluorescence image G2 is generated from the fluorescence image information S2. Then, the return light image G1 and the fluorescence image G2 are displayed on the display unit 7.
  • FIG. 3 shows absorption spectra of main absorbers present in the living tissue X.
  • hemoglobin (Hb) and oxygenated hemoglobin (HbO 2 ) present in the blood strongly absorb light having a wavelength of 400 nm to 450 nm in the surface layer of the biological tissue X, and have a wavelength in the deep layer of the biological tissue X.
  • ⁇ -carotene accumulated in fat strongly absorbs light having a wavelength of 450 nm to 490 nm.
  • light having a wavelength of 600 nm to 610 nm is hardly absorbed by any of Hb, HbO 2 and ⁇ -carotene.
  • the illumination light L includes a wavelength region that is absorbed in fat and blood vessels and a wavelength region that is not absorbed in any of these. Therefore, the return light image G1 obtained by capturing the form of the living tissue X sufficiently clearly can be acquired in the same manner as the white light image acquired by illuminating the living tissue X with white light.
  • the wavelength range that is not important for the acquisition of the information of the form of the living tissue X and that has a small amount of information on the form ie, 490 nm to 540 nm, is excluded from the illumination light L, and the wavelength removed from the illumination light L
  • the fluorescence using the illumination light L in the region 490 nm to 540 nm it is possible to acquire both the return light image G1 and the fluorescence image G2 in parallel without slowing down the frame rate of the return light image G1. There is an advantage that you can.
  • the filter 32 may be detachably provided in the optical path between the white light source 31 and the coupling lens 33. In this way, by inserting the filter 32 into the optical path between the white light source 31 and the coupling lens 33, both the return light image G1 and the fluorescence image G2 can be acquired simultaneously as described above. .
  • the biological tissue X is irradiated with white light having a wavelength over the entire visible region as illumination light L by removing the filter 32 from the optical path. The return light image G1 accurately reproduced can be acquired.
  • the image processing unit 6 is provided with a white balance switching unit 63 that switches the white balance of the return light image G1, as shown in FIG. preferable.
  • the return light image G1 acquired when the filter 32 is inserted in the optical path and the return light image G1 acquired when the filter 32 is removed from the optical path have different wavelengths included in the illumination light L. Therefore, the appropriate white balance is different from each other. Therefore, by switching the white balance, specifically, the white balance value of the return light image G1 acquired when the filter 32 is inserted in the optical path, and the filter 32 is acquired when the filter 32 is removed from the optical path. By switching the white balance value of the returned light image G1 to an appropriate value, the color of the living tissue X can always be appropriately displayed on the display unit 7.
  • a fluorescence observation apparatus 1 according to the second embodiment of the present invention will be described with reference to FIGS.
  • the configuration different from that of the first embodiment will be mainly described, and the configuration common to the first embodiment will be denoted by the same reference numerals and description thereof will be omitted.
  • the light source unit 3 irradiates the living tissue X with another excitation light and acquires two types of fluorescence images G2 and G2 ′.
  • the light source unit 3 outputs near-infrared light L ′ (for example, a wavelength of 750 nm to 800 nm) as another excitation light in addition to the illumination light L including the above-described visible region excitation light.
  • 35 and a dichroic mirror 36 are further provided in the light source unit 3.
  • the light source unit 3 is configured to intermittently output near-infrared light L ′ from the near-infrared light source 34 in synchronization with imaging timing of the image sensor 54 in accordance with a control signal from a control unit (not shown).
  • the barrier filter 55 blocks the return light of the illumination light L and the near-infrared light L ′ out of the light incident from the beam splitter 52, and two fluorescences generated by the illumination light L and the near-infrared light L ′. Is selectively transmitted.
  • the fluorescence observation apparatus 1 configured as described above will be described with reference to FIGS. 6 and 7.
  • two types of fluorescent dyes accumulated in a lesioned part are administered to the biological tissue X in advance.
  • fluorescein is used as in the first embodiment.
  • the other fluorescent dye one that is excited by near-infrared light L ′ and generates fluorescence in a wavelength region different from the fluorescence of illumination light L and fluorescein is used.
  • the other fluorescent dye has an excitation wavelength EXicg that is a maximum at about 780 nm and an emission wavelength Emicg that is a maximum at about 845 nm, and is used for staining blood vessels.
  • ICG Indocyanine Green
  • the illumination light L is irradiated to the living tissue X from the distal end 2a of the insertion portion 2.
  • the image sensor 54 acquires the fluorescence image information S2 and S2 ′ for one frame, the output and stop of the near-infrared light L ′ from the light source unit 3 are stopped. Repeated alternately.
  • fluorescence image information S2 obtained by photographing fluorescence of only fluorescein is acquired by the image sensor 54 as in the first embodiment.
  • fluorescence image information S2 ′ obtained by photographing both fluorescein and ICG fluorescence is acquired by the image sensor 54.
  • the fluorescence image information S2 and S2 ′ are alternately input to the fluorescence image generation unit 62.
  • the fluorescence image generation unit 62 the fluorescence image G2 obtained by photographing the fluorescence of fluorescein and the fluorescence image G2 ′ obtained by photographing the fluorescence of both fluorescein and ICG from the alternately inputted fluorescence image information S2 and S2 ′ Is generated.
  • the image processing unit 6 subtracts the fluorescence image G2 generated immediately before the fluorescence image G2 ′ from the fluorescence image G2 ′ to generate a fluorescence image obtained by photographing only the fluorescence of the ICG, and the fluorescence image You may output to the display part 7.
  • the return light is generated by generating another fluorescence in the near-infrared region that does not interfere with the illumination light L and the fluorescence in the visible region.

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Abstract

本発明の蛍光観察装置（１）は、生体組織（Ｘ）に励起光を含む照明光（Ｌ）を照射する光源部（３）と、生体組織（Ｘ）からの照明光（Ｌ）の戻り光を撮影して戻り光画像（Ｇ１）を生成する戻り光画像生成部（６１）と、生体組織（Ｘ）からの蛍光を撮影して蛍光画像（Ｇ２）を生成する蛍光画像生成部（６２）とを備え、照明光（Ｌ）が、４９０ｎｍ～５４０ｎｍのうち少なくとも一部の波長領域を含まない可視光であり、励起光が、照明光（Ｌ）の一部の波長を有し、前記少なくとも一部の波長領域に含まれる波長の蛍光を発生させる。

Description

蛍光観察装置
　本発明は、蛍光観察装置に関するものである。
　従来、生体組織の白色光画像と蛍光画像の両方を時分割で交互に取得する蛍光観察装置が知られている（例えば、特許文献１参照。）。特許文献１によれば、蛍光の波長が可視領域であり、蛍光の波長と白色光の一部の波長とが一致している場合であっても、蛍光と白色光とを分離して撮影することができる。
特許第４５２０２１６号公報
　しかしながら、特許文献１においては、白色光画像と蛍光画像とを交互に取得するため、それぞれの画像のフレームレートが遅くなるという問題がある。特に、観察者は白色光画像を主として観察するため、白色光画像のフレームレートの低下は観察者にとって観察の妨げとなる。
　本発明は、上述した事情に鑑みてなされたものであって、白色光画像のフレームレートを遅くすることなく白色光画像と可視領域の蛍光画像とを並行して取得することができる蛍光観察装置を提供することを目的とする。
　上記目的を達成するため、本発明は以下の手段を提供する。
　本発明は、生体組織に励起光を含む照明光を照射する光源部と、該光源部からの前記照明光の照射によって前記生体組織から戻る戻り光を撮影して前記生体組織の戻り光画像を生成する戻り光画像生成部と、前記光源部からの前記励起光の照射によって前記生体組織から発生する蛍光を撮影して蛍光画像を生成する蛍光画像生成部とを備え、前記照明光が、４９０ｎｍ～５４０ｎｍにおける少なくとも一部の波長領域を含まない可視光であり、前記励起光が、前記照明光の一部の波長を有し、前記少なくとも一部の波長領域に含まれる波長の前記蛍光を発生させる蛍光観察装置を提供する。
　本発明によれば、光源部からの照明光が生体組織に照射されることにより、生体組織の形態を撮影した戻り光画像が戻り光画像生成部によって生成される。これと同時に、照明光に含まれている励起光が生体組織に照射されることにより、生体組織からの蛍光を撮影した蛍光画像が蛍光画像生成部によって取得される。
　この場合に、戻り光および蛍光は、共に可視領域の波長を有しつつ、互いに異なる波長を有しているので、戻り光画像生成部および蛍光画像生成部によって区別して撮影される。これにより、戻り光画像のフレームレートを遅くすることなく戻り光画像と蛍光画像とを並行して取得することができる。また、波長４９０ｎｍ～５３０ｎｍの光は生体組織との作用が十分に小さく、生体組織の形態の情報の取得にほとんど寄与しない。したがって、照明光が４９０ｎｍ～５４０ｎｍにおける少なくとも一部の波長を含んでいなくても、生体組織の形態が十分に鮮明に撮影された、白色光画像と同等の戻り光画像を取得することができる。
　上記発明においては、前記少なくとも一部の波長領域が、５１０ｎｍ～５３０ｎｍであってもよい。
　上記発明においては、前記少なくとも一部の波長領域の幅が、２０ｎｍ以上であってもよい。
　上記発明においては、前記光源部が、白色光を発する白色光源と、該白色光源から発せられた前記白色光から４９０ｎｍ～５４０ｎｍにおける少なくとも一部の波長領域の光を除去するフィルタとを備え、該フィルタが、前記白色光源の後段に挿脱可能に設けられ、前記照明光が、前記フィルタを透過した略白色光であってもよい。
　このようにすることで、蛍光画像を取得しないときには、フィルタを白色光源の後段から取り除くことにより可視領域全体の波長を含む白色光を照明光として生体組織に照射し、生体組織の色をより正確に再現した戻り光画像を取得することができる。一方、蛍光画像を取得するときには、フィルタを白色光源の後段に挿入することにより白色光から一部の波長領域が除去された略白色光を照明光として生体に照射し、生体組織の色を略正確に再現した戻り光画像を取得することができる。
　上記発明においては、前記フィルタが前記白色光源の後段に挿入されているとき、および、前記フィルタが前記白色光源の後段から取り除かれているときに、それぞれ前記戻り光画像生成部によって生成された前記戻り光画像のホワイトバランスを切り替えるホワイトバランス切替部を備えていてもよい。
　このようにすることで、白色光源の後段にフィルタが挿入されているときと取り除かれているときとで、照明光が含む波長が異なることに起因して戻り光画像において適切なホワイトバランス値が互いに異なる。各々のときの戻り光画像において必要となるホワイトバランス値にホワイトバランス切替部によって切り替えることができる。
　上記発明においては、前記光源部が、前記照明光および前記蛍光とは異なる波長を有するもう１つの蛍光を発生させるもう１つの励起光を間欠的に前記生体組織に照射してもよい。
　このようにすることで、もう１つの励起光が生体組織に照射されているときには２種類の蛍光を同時に撮影することができる。
　上記発明においては、前記光源部が、前記もう１つの励起光として近赤外光を発する近赤外光源を備えていてもよい。
　このようにすることで、可視領域の蛍光と近赤外領域の蛍光とを同時に撮影することができる。
　本発明によれば、白色光画像のフレームレートを遅くすることなく白色光画像と可視領域の蛍光画像とを並行して取得することができるという効果を奏する。
本発明の第１の実施形態に係る蛍光観察装置の全体構成図である。 図１の光源ユニットが出力する照明光と、該照明光に含まれる励起光によって励起される蛍光とのスペクトルである。 生体組織に対する照明光の作用を説明する図であり、生体組織に存在する主な光吸収体の吸収スペクトルである。 図１の蛍光観察装置の変形例を示す全体構成図である。 本発明の第２の実施形態に係る蛍光観察装置の全体構成図である。 図５の光源ユニットが出力する照明光および近赤外光と、これら照明光および近赤外光に含まれる２つの励起光によって励起される２つの蛍光とのスペクトルである。 図５の蛍光観察装置の動作を説明するタイミングチャートである。
（第１の実施形態）
　以下に、本発明の第１の実施形態に係る蛍光観察装置１について図１から図４を参照して説明する。
　本実施形態に係る蛍光観察装置１は、内視鏡装置であって、図１に示されるように、体内に挿入される細長い挿入部２と、光源ユニット（光源部）３と、該光源ユニット３からの照明光Ｌを挿入部２の先端２ａから生体組織Ｘに向けて照射する照明ユニット４と、挿入部２の先端２ａに設けられ、生体組織Ｘの画像情報Ｓ１，Ｓ２を取得する撮像ユニット５と、該撮像ユニット５によって取得された画像情報Ｓ１，Ｓ２を処理する画像処理ユニット６と、該画像処理ユニット６によって処理された画像Ｇ１，Ｇ２を表示する表示部７とを備えている。
　光源ユニット３は、キセノンランプのような白色光源３１と、該白色光源３１から発せられた白色光から一部の波長を切り出して照明光Ｌを生成するフィルタ３２と、該フィルタ３２によって生成された照明光Ｌを集光するカップリングレンズ３３とを備えている。白色光源３１は、可視領域全体にわたって波長を有する白色光を発する。フィルタ３２は、波長４００ｎｍ～４９０ｎｍおよび５４０ｎｍ～６１０ｎｍの光を少なくとも透過させるとともに、波長４９０ｎｍ～５４０ｎｍの光を遮断する。これにより、図２に実線で示されるように、可視領域のうち一部の波長領域が除去されて２極化した波長分布を有する略白色光である照明光Ｌが生成される。
　照明ユニット４は、挿入部２の長手方向のほぼ全長にわたって配置されたライトガイドファイバ４１と、挿入部２の先端２ａに設けられた照明光学系４２とを備えている。ライトガイドファイバ４１は、カップリングレンズ３３によって集光された照明光Ｌを導光する。照明光学系４２は、ライトガイドファイバ４１によって導光されてきた照明光Ｌを拡散させて、挿入部２の先端２ａに対向する生体組織Ｘに照射する。
　撮像ユニット５は、生体組織Ｘからの光を集光する対物レンズ５１と、該対物レンズ５１によって集光された光を２つに分割するビームスプリッタ５２と、該ビームスプリッタ５２によって分割された光をそれぞれ撮影するカラーＣＣＤのような撮像素子５３および高感度モノクロＣＣＤのような撮像素子５４と、ビームスプリッタ５２と撮像素子５４との間に配置されたバリアフィルタ５５とを備えている。
　符号５６は、対物レンズ５１によって集光された光を、各撮像素子５３，５４の撮像面に結像させる結像レンズである。
　バリアフィルタ５５は、ビームスプリッタ５２から入射された光のうち、照明光Ｌの戻り光を遮断し、後述する蛍光を選択的に透過させる。
　画像処理ユニット６は、撮像素子５３によって取得された戻り光画像情報Ｓ１から戻り光画像Ｇ１を生成する戻り光画像生成部６１と、撮像素子５４によって取得された蛍光画像情報Ｓ２から蛍光画像Ｇ２を生成する蛍光画像生成部６２とを備えている。戻り光画像生成部６１および蛍光画像生成部６２はそれぞれ、戻り光画像Ｇ１および蛍光画像Ｇ２を表示部７に出力する。画像処理ユニット６は、戻り光画像Ｇ１および蛍光画像Ｇ２をそれぞれ、ノイズ除去などの画像処理を適宜施した後に、表示部７に出力してもよい。
　表示部７は、戻り光画像Ｇ１および蛍光画像Ｇ２を並列に表示する。
　次に、このように構成された蛍光観察装置１の作用について説明する。
　本実施形態に係る蛍光観察装置１を用いて生体組織Ｘを観察するには、予め、例えば病変部に集積する蛍光色素を生体組織Ｘに投与しておく。蛍光色素は、波長４５０ｎｍ～４９０ｎｍの光によって励起され、波長４９０ｎｍ～５４０ｎｍの蛍光を発生するものが使用される。本実施形態においては、蛍光色素として、図２に示されるように、約４５０ｎｍ～５００ｎｍの励起波長ＥＸｆｌと、約５１０ｎｍ～５４０ｎｍの発光波長ＥＭｆｌとを有し、癌の標識に使用されるフルオレセイン誘導体を想定している。
　まず、体内に挿入部２を挿入してその先端２ａを生体組織Ｘに対向配置し、光源ユニット３の作動によって照明光Ｌを挿入部２の先端２ａから生体組織Ｘに照射する。生体組織Ｘにおいて、照明光Ｌが生体組織Ｘの表面において反射され、反射された照明光Ｌの一部が挿入部２の先端２ａに戻る。
　ここで、照明光Ｌは、蛍光色素を励起する波長４５０ｎｍ～４９０ｎｍの励起光を含んでいる。したがって、照明光Ｌの照射によって生体組織Ｘに含まれている蛍光色素が励起され、発生した蛍光の一部が照明光Ｌの戻り光と共に挿入部２の先端２ａに戻る。
　挿入部２の先端２ａにおいて対物レンズ５１によって集光された照明光Ｌの戻り光および蛍光は、ビームスプリッタ５２によって２つに分割される。そして、一方は撮像素子５３によって撮影されて戻り光画像情報Ｓ１として取得され、他方はバリアフィルタ５５によって蛍光のみが抽出された後に撮像素子５４によって撮影されて蛍光画像情報Ｓ２として取得される。ここで、撮像素子５３は、照明光Ｌの戻り光と蛍光の両方を撮影するが、蛍光は戻り光に対して十分に微弱であるので、撮像素子５３によって取得される戻り光画像情報Ｓ１は主として生体組織Ｘの形態の情報を含んだものとなる。
　次に、画像処理ユニット６において、戻り光画像情報Ｓ１から戻り光画像Ｇ１が生成され、蛍光画像情報Ｓ２から蛍光画像Ｇ２が生成される。そして、戻り光画像Ｇ１および蛍光画像Ｇ２が表示部７に表示される。
　ここで、照明光Ｌの生体組織Ｘに対する作用について説明する。図３は、生体組織Ｘに存在する主な吸収体の吸収スペクトルを示している。図３に示されるように、血液中に存在するヘモグロビン（Ｈｂ）および酸化ヘモグロビン（ＨｂＯ２）は、生体組織Ｘの表層において波長４００ｎｍ～４５０ｎｍの光を強く吸収し、生体組織Ｘの深層において波長５４０ｎｍ～５６５ｎｍの光を強く吸収する。脂肪に蓄積されるβカロテンは、波長４５０ｎｍ～４９０ｎｍの光を強く吸収する。また、波長６００ｎｍ～６１０ｎｍの光は、Ｈｂ、ＨｂＯ２およびβカロテンのいずれにもほとんど吸収されない。
　このことは、波長４００ｎｍ～４５０ｎｍの光と波長５４０ｎｍ～５６５ｎｍの光とを照明光Ｌとして用いることにより、生体組織Ｘの表層および深層に存在する血管の形態を撮影することができ、波長４５０ｎｍ～４９０ｎｍの光を照明光Ｌとして用いることにより、臓器の表面や粘膜下などに豊富に存在する脂肪の形態を撮影することができ、波長５８０ｎｍ～６１０ｎｍの光を照明光Ｌとして用いることにより生体組織Ｘの表面の形態を撮影することができることを意味している。
　生体組織Ｘの形態の情報を得るためには、主として血管、脂肪および表面形状の情報を得ることが重要となる。本実施形態によれば、照明光Ｌは、脂肪および血管において吸収される波長領域と、これらのいずれにおいても吸収されない波長領域とを含んでいる。したがって、白色光を生体組織Ｘに照明して取得した白色光画像と同様に生体組織Ｘの形態を十分に鮮明に撮影した戻り光画像Ｇ１を取得することができる。
　また、このように生体組織Ｘの形態の情報の取得に重要ではない波長領域あり、形態の情報量が少ない波長領域である４９０ｎｍ～５４０ｎｍを照明光Ｌから除き、照明光Ｌから除かれた波長領域４９０ｎｍ～５４０ｎｍにおいて照明光Ｌを利用して蛍光を発生させることにより、戻り光画像Ｇ１のフレームレートを遅くすることなく、戻り光画像Ｇ１および蛍光画像Ｇ２の両方を並行して取得することができるという利点がある。
　なお、本実施形態においては、フィルタ３２が、白色光源３１とカップリングレンズ３３との間の光路に挿脱可能に設けられていてもよい。
　このようにすることで、フィルタ３２を白色光源３１とカップリングレンズ３３との間の光路に挿入することにより、上述したように戻り光画像Ｇ１および蛍光画像Ｇ２の両方を同時に取得することができる。一方、戻り光画像Ｇ１のみを観察するときは、フィルタ３２を光路から取り除くことにより、可視領域全体にわたって波長を有する白色光を照明光Ｌとして生体組織Ｘに照射し、生体組織Ｘの色をより正確に再現した戻り光画像Ｇ１を取得することができる。
　このようにフィルタ３２を挿脱可能に構成する場合には、図４に示されるように、戻り光画像Ｇ１のホワイトバランスを切り替えるホワイトバランス切替部６３が画像処理ユニット６に備えられていることが好ましい。
　フィルタ３２が光路に挿入されているときに取得された戻り光画像Ｇ１と、フィルタ３２が光路から取り除かれているときに取得された戻り光画像Ｇ１とでは、照明光Ｌに含まれる波長が異なることに起因して適切なホワイトバランスが互いに異なる。そこで、ホワイトバランスを切り替えることで、具体的には、フィルタ３２が光路に挿入されているときに取得された戻り光画像Ｇ１のホワイトバランス値と、フィルタ３２が光路から取り除かれているときに取得された戻り光画像Ｇ１のホワイトバランス値とをそれぞれ適切な値に切り替えることで、常に生体組織Ｘの色を表示部７に適切に表示させることができる。
（第２の実施形態）
　次に、本発明の第２の実施形態に係る蛍光観察装置１について図５から図７を参照して説明する。本実施形態において、第１の実施形態と異なる構成について主に説明し、第１の実施形態と共通する構成については同一の符号を付して説明を省略する。
　本実施形態に係る蛍光観察装置１は、図５に示されるように、光源ユニット３が、もう１つの励起光を生体組織Ｘに照射し、２種類の蛍光画像Ｇ２，Ｇ２’を取得する点において、第１の実施形態と主に異なる。
　具体的には、光源ユニット３は、上述した可視領域の励起光を含む照明光Ｌに加えて、近赤外光Ｌ’（例えば、波長７５０ｎｍ～８００ｎｍ）をもう１つの励起光として出力する。図５においては、近赤外光Ｌ’を出力するための近赤外光源３４と、該近赤外光源３４からの近赤外光Ｌ’を白色光源３１の出力光軸上に合成するミラー３５およびダイクロイックミラー３６とがさらに光源ユニット３に備えられている。光源ユニット３は、図示しない制御部からの制御信号に従って、撮像素子５４の撮像のタイミングと同期して近赤外光源３４から間欠的に近赤外光Ｌ’を出力させるようになっている。
　バリアフィルタ５５は、ビームスプリッタ５２から入射された光のうち、照明光Ｌの戻り光および近赤外光Ｌ’を遮断し、照明光Ｌおよび近赤外光Ｌ’によって発生された２つの蛍光を選択的に透過させる。
　次に、このように構成された蛍光観察装置１の作用について図６および図７を参照して説明する。
　本実施形態に係る蛍光観察装置１を用いて生体組織Ｘを観察するには、予め、例えば病変部に集積する２種類の蛍光色素を生体組織Ｘに投与しておく。
　ここで、一方の蛍光色素としては、第１の実施形態と同様に、フルオレセインが使用される。他方の蛍光色素としては、近赤外光Ｌ’によって励起され、照明光Ｌおよびフルオレセインの蛍光とは異なる波長域の蛍光を発生するものが使用される。本実施形態においては、他方の蛍光色素として、図６に示されるように、約７８０ｎｍで極大となる励起波長ＥＸｉｃｇと、約８４５ｎｍで極大となる発光波長ＥＭｉｃｇとを有し、血管の染色に使用されるインドシアニングリーン（ＩＣＧ）を想定している。
　第１の実施形態と同様にして、照明光Ｌを挿入部２の先端２ａから生体組織Ｘに照射する。このときに、図７に示されるように、撮像素子５４が１フレーム分の蛍光画像情報Ｓ２，Ｓ２’を取得する毎に、光源ユニット３からの近赤外光Ｌ’の出力と停止とが交互に繰り返される。これにより、近赤外光Ｌ’が停止しているときには、第１の実施形態と同様に、フルオレセインのみの蛍光を撮影した蛍光画像情報Ｓ２が撮像素子５４によって取得される。一方、近赤外光Ｌ’が出力されているときには、フルオレセインとＩＣＧの両方の蛍光を撮影した蛍光画像情報Ｓ２’が撮像素子５４によって取得される。これら蛍光画像情報Ｓ２、Ｓ２'は、交互に蛍光画像生成部６２に入力される。
　蛍光画像生成部６２においては、交互に入力される蛍光画像情報Ｓ２，Ｓ２’から、フルオレセインの蛍光を撮影した蛍光画像Ｇ２と、フルオレセインおよびＩＣＧの両方の蛍光を撮影した蛍光画像Ｇ２’とが交互に生成される。なお、画像処理ユニット６は、蛍光画像Ｇ２’から該蛍光画像Ｇ２’の直前に生成された蛍光画像Ｇ２を減算することにより、ＩＣＧの蛍光のみを撮影した蛍光画像を生成し、該蛍光画像を表示部７に出力してもよい。
　このように、本実施形態によれば、第１の実施形態の効果に加えて、可視領域の照明光Ｌおよび蛍光と干渉しない近赤外領域においてもう１つの蛍光を発生させることにより、戻り光画像Ｇ１のフレームレートを遅くすることなく２種類の蛍光画像Ｇ２，Ｇ２’を取得することができるという利点がある。
１　蛍光観察装置
２　挿入部
３　光源ユニット（光源部）
３１　白色光源
３２　フィルタ
３３　カップリングレンズ
３４　近赤外光源
３５　ミラー
３６　ダイクロイックミラー
４　照明ユニット
４１　ライトガイドファイバ
４２　照明光学系
５　撮像ユニット
５１　対物レンズ
５２　ビームスプリッタ
５３，５４　撮像素子
５５　バリアフィルタ
５６　結像レンズ
６　画像処理ユニット
６１　戻り光画像生成部
６２　蛍光画像生成部
６３　ホワイトバランス切替部
７　表示部
Ｌ　照明光
Ｌ’　近赤外光
Ｇ１　戻り光画像
Ｇ２，Ｇ２’　蛍光画像

Claims (7)

  1. 　生体組織に励起光を含む照明光を照射する光源部と、
    　該光源部からの前記照明光の照射によって前記生体組織から戻る戻り光を撮影して前記生体組織の戻り光画像を生成する戻り光画像生成部と、
    　前記光源部からの前記励起光の照射によって前記生体組織から発生する蛍光を撮影して蛍光画像を生成する蛍光画像生成部とを備え、
    　前記照明光が、４９０ｎｍ～５４０ｎｍにおける少なくとも一部の波長領域を含まない可視光であり、
    　前記励起光が、前記照明光の一部の波長を有し、前記少なくとも一部の波長領域に含まれる波長の前記蛍光を発生させる蛍光観察装置。
  2. 　前記少なくとも一部の波長領域が、５１０ｎｍ～５３０ｎｍである請求項１に記載の蛍光観察装置。
  3. 　前記少なくとも一部の波長領域の幅が、２０ｎｍ以上である請求項１または請求項２に記載の蛍光観察装置。
  4. 　前記光源部が、
    　白色光を発する白色光源と、
    　該白色光源から発せられた前記白色光から４９０ｎｍ～５４０ｎｍにおける少なくとも一部の波長領域の光を除去するフィルタとを備え、
    　該フィルタが、前記白色光源の後段に挿脱可能に設けられ、
    　前記照明光が、前記フィルタを透過した略白色光である請求項１に記載の蛍光観察装置。
  5. 　前記フィルタが前記白色光源の後段に挿入されているとき、および、前記フィルタが前記白色光源の後段から取り除かれているときに、それぞれ前記戻り光画像生成部によって生成された前記戻り光画像のホワイトバランスを切り替えるホワイトバランス切替部を備える請求項４に記載の蛍光観察装置。
  6. 　前記光源部が、前記照明光および前記蛍光とは異なる波長を有するもう１つの蛍光を発生させるもう１つの励起光を間欠的に前記生体組織に照射する請求項１から請求項５のいずれかに記載の蛍光観察装置。
  7. 　前記光源部が、前記もう１つの励起光として近赤外光を発する近赤外光源を備える請求項６に記載の蛍光観察装置。
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