WO2015160124A1 - 설포라판 함량이 증가된 브로콜리의 제조방법 및 그로부터 제조된 브로콜리의 이용 - Google Patents

설포라판 함량이 증가된 브로콜리의 제조방법 및 그로부터 제조된 브로콜리의 이용 Download PDF

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WO2015160124A1
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broccoli
sulforaphane
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increased
electric field
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최혁준
최경숙
정중기
김건
이동언
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Bkbio Co ltd
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    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23B—PRESERVATION OF FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES; CHEMICAL RIPENING OF FRUIT OR VEGETABLES
    • A23B7/00—Preservation of fruit or vegetables; Chemical ripening of fruit or vegetables
    • A23B7/015—Preserving by irradiation or electric treatment without heating effect

Definitions

  • the present invention relates to a method for producing broccoli with increased sulforaphane content, broccoli prepared therefrom, a food composition comprising the broccoli, a feed composition or a cosmetic composition.
  • the present invention also relates to a method for preparing sulforaphane from broccoli prepared from the method for producing broccoli with increased sulforaphane content, a food composition, a feed composition or a cosmetic composition comprising the sulforaphane prepared therefrom.
  • Sulforaphane is an anti-cancer and antioxidant substance present in cruciferous vegetables, and is a kind of isothiocyanate obtained by hydrolysis of glucosinolate, a secondary metabolite present in cruciferous vegetables, by an enzyme. to be.
  • Fresh broccoli has a high glucosinolate content and a relatively low sulforaphane content.
  • the glucosinolate is bioconverted to sulfolapan, which significantly increases the content of sulfolapan in the mill. Therefore, the broccoli extract after crushing broccoli has significantly increased sulforaphane content compared to fresh broccoli, and this broccoli extract is known to be one of the causes of gastric cancer by inhibiting genetic modification due to oxidative damage by inducing the expression of antioxidant enzymes. It is known to inhibit the growth of Helicobacter pylori, which inhibits the production of gastric cancer by carcinogens in animal experiments.
  • Broccoli is used as a raw material of some processed foods, but most vegetables are ingested in the form of a salad.
  • it is generally boiled in steam or boiling water to soften the chewing texture of broccoli.
  • heat is applied to fresh broccoli, the glucosinolate is decomposed and the content is significantly reduced, and further, the sulforaphane content is also reduced.
  • High-voltage pulse electric field treatment is one of the non-thermal sterilization methods of microorganisms that act as decay, and is known as a method that can increase storage while less affecting flavor (Korean Patent Laid-Open No. 2000-0016830), and pretreatment for improving extraction yield Although it is known as one of the methods (Korean Patent Publication No. 10-2010-0052065), there has been no report on the effect of increasing the sulforaphane by using it in the processing of broccoli.
  • the present invention provides a method for preparing broccoli with increased sulforaphane content using a high-voltage pulse electric field treatment to consume broccoli with increased sulforaphane content in the form of raw or cut pieces cut to a suitable size without grinding the broccoli, and broccoli prepared therefrom It is an object to provide a food composition, feed composition or cosmetic composition containing the broccoli.
  • the present invention to solve the problem, the step of putting broccoli in a batch or continuous processing vessel containing a liquid medium; And performing 1 to 50 high-voltage pulse electric field treatments for 0.1 to 300 seconds at an electric field of 0.1 to 200 kV / cm and a frequency of 1 to 100 Hz in the liquid medium. to provide.
  • the high voltage pulse electric field treatment is preferably performed at 0.2 to 20 kV / cm for 1 to 50 seconds.
  • Broccoli in the step of placing in the processing container is preferably the raw material or its cut without undergoing a grinding or grinding process.
  • the liquid medium is preferably water, ethanol or a mixture thereof.
  • an organic acid such as acetic acid, citric acid, lactic acid or an inorganic salt such as salt may be further added.
  • a drying process After the step of performing the high-voltage pulse electric field treatment, it is preferable to go through a drying process, a grinding process, a drying after grinding or a grinding after drying.
  • the present invention is prepared by the above method, sulforaphane content is characterized in that the sulforaphane content is increased by 30% or more, preferably 50% or more, more preferably 100% to 1000% compared to broccoli before the high voltage pulsed electric field treatment Provides increased broccoli.
  • the usual sulforaphane content in fresh broccoli without high voltage pulsed electric field is typically 30 mg to 70 mg per 100 g dry weight of broccoli and averages about 40 mg, but through dechigging, the most common pretreatment before eating Most of the sulforaphane content in broccoli is lost.
  • the sulforaphane content of the broccoli raw material is 100 mg to 200 mg per 100 g of dry weight of broccoli by 1.5 to 8 times higher than the broccoli raw material before the treatment. Sulforaphane content is significantly increased.
  • the present invention provides a method for preparing a sulforaphane extract, characterized in that the sulforaphane is extracted with broccoli having increased sulforaphane content.
  • the sulforaphane extract may be extracted using water, an organic solvent or a mixture thereof as an extraction solvent.
  • the kind of organic solvent used at this time and the mixing ratio of water and an organic solvent are not specifically limited.
  • the organic solvent may be one or more solvents selected from the group consisting of lower alcohols, hexane, acetone, ethyl acetate, chloroform, and diethyl ether.
  • the lower alcohol may be an alcohol having 1 to 6 carbon atoms.
  • methanol, ethanol, propanol, butanol, normal-propanol, iso-propanol, normal-butanol, 1-pentanol, 2-butoxyethanol or ethylene glycol may be used as the lower alcohol.
  • Organic solvents include polar solvents such as acetic acid, dimethyl-formamide (DMFO) and dimethyl sulfoxide (DMSO), acetonitrile, ethyl acetate, methyl acetate, fluoroalkane, pentane, 2,2,4-trimethylpentane, and decane.
  • polar solvents such as acetic acid, dimethyl-formamide (DMFO) and dimethyl sulfoxide (DMSO), acetonitrile, ethyl acetate, methyl acetate, fluoroalkane, pentane, 2,2,4-trimethylpentane, and decane.
  • nonpolar solvents such as benzene, diethyl ether, diethyl sulfide, chloroform, dichloromethane, 1,2-dichloroethane, anneal, diethylamine, ether, carbon tetrachloride, and THF (Tetrahydrofuran).
  • the sulforaphane extract may be an extract by a water solvent, an ethanol extract, a methanol extract, or a mixed solvent of any two or more solvents selected from water, ethanol and methanol.
  • the preparation of the water extract may be prepared by extracting broccoli having an increased sulforaphane content for 2 to 48 hours with water of 40 to 100 ° C. by the method of the present invention. It may be prepared by extracting at 40 to 55 ° C. for 2 to 24 hours with water to which at least one enzyme selected from the group consisting of cellulase, biscozyme, alcalase and pepsin is added to increase.
  • Preparation of the ethanol extract or ethanol aqueous solution extract is broccoli with increased sulforaphane content by the method of the present invention 2 to 36 hours at 20 to 60 °C, preferably 40 to 50 °C in ethanol or 35 to 75 % by volume of ethanol aqueous solution It can be prepared by extracting for 2.5 to 6 hours, more preferably by extracting for 3 hours at 45 °C with 70 % by volume of ethanol aqueous solution.
  • the term 'extract' also includes fractions that additionally fractionate the extract. That is, the sulforaphane extract includes not only one obtained by using the above-described extraction solvent, but also one obtained by concentrating the sulforaphane by further applying a purification process thereto. In addition, fractions obtained by passing the extract or fraction through an ultrafiltration membrane having a constant molecular weight cut-off value, separation by various chromatography (manufactured for separation according to size, charge, hydrophobicity or affinity) Fractions obtained through various purification methods are also included in the sulfolapan extract of the present invention.
  • the present invention provides a food composition comprising broccoli with an increased sulforaphane content or a food composition comprising a sulforaphane extract prepared by the above method.
  • the broccoli or sulforaphane extract extracted from the sulforaphane content increased according to the present invention is used as an active ingredient additive of health functional food or general food
  • the broccoli or sulforaphane extract according to the present invention is added as it is or with other food or food ingredients. It can use together and can use suitably according to a conventional method.
  • the mixed amount of the active ingredient can be appropriately determined depending on the purpose of use, such as prevention, health or treatment.
  • the broccoli or sulfolapan extract according to the present invention may be added in an amount of 15 parts by weight or less, preferably 10 parts by weight or less based on the raw material in the manufacture of food or beverage.
  • the amount may be less than the above range, and the present invention has no problem in terms of safety in terms of using natural products or extracts therefrom. Can also be used in an amount greater than the range.
  • the foodstuff which can add the said substance is a dairy product including meat, sausage, bread, chocolate, candy, snacks, confectionery, pizza, ramen, other noodles, gum, ice cream, etc.
  • Various soups, beverages, teas, drinks, alcoholic beverages and vitamin complexes, etc. may include all foods in a conventional sense.
  • the beverage food of the health functional food according to the present invention may contain various flavors or natural carbohydrates as an additional ingredient, as in general drinks.
  • the above-mentioned natural carbohydrates may be monosaccharides such as glucose and fructose, disaccharides such as maltose and sucrose and polysaccharides such as dextrin and cyclodextrin, sugar alcohols such as xylitol, sorbitol and erythritol.
  • sweetening agent natural sweetening agents such as tautin and stevia extract, synthetic sweetening agents such as saccharin and aspartame, and the like can be used.
  • the ratio of the natural carbohydrate may be about 0.01 to 0.04 g, preferably about 0.02 to 0.03 g per 100 mL functional food according to the present invention.
  • the food composition for the improvement or prevention of inflammation or cancer is a variety of nutrients, vitamins, electrolytes, flavors, colorants, pectic acid and salts thereof, alginic acid and salts thereof, organic acids, protective colloidal thickeners, It may contain a carbonation agent used in pH adjusters, stabilizers, preservatives, glycerin, alcohols, carbonated drinks.
  • the food composition of the present invention may contain a flesh for preparing natural fruit juice, fruit juice beverage and vegetable beverage. These components can be used independently or in combination. The ratio of such additives is not limited but is generally selected in the range of 0.01 to 0.1 parts by weight relative to 100 parts by weight of the composition of the present invention.
  • the present invention provides a feed composition comprising broccoli having an increased sulforaphane content or a feed composition comprising a sulforaphane extract prepared by the above method.
  • the feed composition may be a feed or a feed additive.
  • the feed composition includes organic acids such as citric acid, fumaric acid, adipic acid, lactic acid, malic acid, phosphates such as sodium phosphate, potassium phosphate, acid pyrophosphate and polyphosphate (polyphosphate), polyphenols, catechins and alpha-tocopherols. It may further include any one or more of natural antioxidants, such as, rosemary extract, vitamin C, green tea extract, licorice extract, chitosan, tannic acid, phytic acid.
  • organic acids such as citric acid, fumaric acid, adipic acid, lactic acid, malic acid, phosphates such as sodium phosphate, potassium phosphate, acid pyrophosphate and polyphosphate (polyphosphate), polyphenols, catechins and alpha-tocopherols.
  • phosphates such as sodium phosphate, potassium phosphate, acid pyrophosphate and polyphosphate (polyphosphate)
  • polyphosphate polyphosphate
  • polyphenols
  • auxiliary ingredients such as amino acids, inorganic salts, vitamins, antibiotics, antibacterial substances, antioxidants, antifungal enzymes, live microbial preparations, and the like as the auxiliary components of the feed composition are grains, for example, wheat, oats, barley, corn And rice; Vegetable protein feed, such as rape, soybeans and sunflower; Animal protein feeds such as blood meal, meat meal, bone meal and fish meal; Sugars and dairy products, for example, dry powders consisting of various powdered milks and whey powders, and drying additives, and then liquid components and components which become liquids after heating, that is, lipids, for example, animals liquefied by heating, for example.
  • main components such as fats and vegetable fats can be used with substances such as nutritional supplements, digestion and absorption enhancers, growth promoters, disease prevention agents and the like.
  • the feed composition may be administered to the animal alone and in combination with other feed additives in an edible carrier.
  • the feed composition can be easily administered as a top dressing or directly mixed into the animal feed or separately from the feed, in a separate oral formulation, by injection or transdermal or in combination with other ingredients.
  • a single daily dose or divided daily doses can be used, as is well known in the art.
  • the dosage form of the composition may be prepared in an immediate release or sustained release formulation in combination with their non-toxic pharmaceutically acceptable edible carrier.
  • edible carriers can be solid or liquid, for example corn starch, lactose, sucrose, soy flakes, peanut oil, olive oil, sesame oil and propylene glycol.
  • the dosage form of the compound may be tablets, capsules, powders, torokies or sugar-containing tablets or top dressings in microdisperse form.
  • a liquid carrier it may be in the form of soft gelatin capsules or syrups or liquid suspensions, emulsions or solutions.
  • the dosage form may contain auxiliaries such as preservatives, stabilizers, wetting or emulsifying agents, solution promoters and the like.
  • the feed composition may be used by adding to the animal feed by dipping, spraying or mixing.
  • the feed composition can be applied to many animal diets including mammals, poultry and fish. More specifically, the diet is commercially important mammals such as pigs, cows, sheep, goats, laboratory rodents (rats, mice, hamsters and gerbils), furry animals (eg mink and fox), and Zoo animals (eg monkeys and tailless monkeys), as well as livestock (eg cats and dogs).
  • Commercially important poultry typically include chickens, turkeys, ducks, geese, pheasants and quails.
  • Commercially raised fish, such as trout may also be included.
  • the composition is mixed with the animal feed in an amount of about 1 g to 100 g per kg of feed on a dry weight basis.
  • the feed mixture is thoroughly mixed, and then a viscous granulated or granular material is obtained depending on the degree of grinding of the components. It is fed as a mash or formed into the desired discrete shape for further processing and packaging.
  • water it is preferable to add water to the animal feed, followed by a conventional pelletization, expansion, or extrusion process. Excess water may be removed to dryness.
  • the present invention provides a cosmetic composition comprising a broccoli with an increased sulforaphane content or a cosmetic composition comprising a sulforaphane extract prepared by the above method.
  • the cosmetic composition of the present invention may be prepared in the form of a preparation such as lotion (skin), lotion, essence, cream, pack.
  • the cosmetic composition may further comprise a suitable carrier, excipient or diluent commonly used in the manufacture of cosmetics.
  • the carrier, excipient or diluent may be purified water, oil, wax, fatty acid, fatty acid alcohol, fatty acid ester, surfactant, humectant, thickening agent, antioxidant, viscosity stabilizer, chelating agent , Buffers, lower alcohols, and the like. If necessary, a whitening agent, a moisturizer, a vitamin, a sunscreen, a perfume, a dye, and an antibacterial agent may be further included.
  • oil hydrogenated vegetable oil, perm oil, cottonseed oil, olive oil, palm oil, jojoba oil, avocado oil may be used, and waxes, beeswax, carnauba, candelilla, montan, ceresin, liquid paraffin, and lanolin are used as waxes.
  • Stearic acid, linoleic acid, linolenic acid, oleic acid may be used as fatty acids, and cetyl alcohol, octyl dodecanol, oleyl alcohol, pantenol, lanolin alcohol, stearyl alcohol, hexadecanol may be used as fatty acid alcohol.
  • Isopropyl myristate, isopropyl palmitate, butyl stearate may be used as the ester.
  • the surfactant include anionic surfactants such as sodium stearate, sodium cetyl sulfate, polyoxyethylene laurylether phosphate, sodium N-acyl glutamate; Cationic surfactants such as stearyldimethylbenzylammonium chloride and stearyltrimethylammonium chloride; Amphoteric surfactants such as alkylaminoethylglycine hydrochloride and lecithin; Glycerin monostearate, sorbitan monostearate, sucrose fatty acid ester, propylene glycol monostearate, polyoxyethylene oleyl ether, polyethylene glycol monostearate, polyoxyethylene sorbitan monopalmitate, polyoxyethylene coconut fatty acid monoethanol
  • Nonionic surfactants such as monoethanol arnide, polyoxypropylene glycol, polyoxyethylene
  • Glycerin, 1,3-butylene glycol, propylene glycol may be used as the hygroscopic agent, and ethanol or isopropanol may be used as the lower alcohol.
  • thickeners include sodium alginate, sodium caseate, gelatin agar, xanthan gum, starch, cellulose ethers (e.g. hydroxyethyl cellulose, methyl cellulose, carboxymethyl cellulose, hydroxy propylmethyl cellulose), polyvinylpyrrolidone, Polyvinyl alcohol, polyethylene glycol, sodium carboxymethyl cellulose and the like.
  • antioxidants butylated hydroxytoluene, butylated hydroxyanisole, propyl gallate, citric acid, ethoxyquin can be used, and chelating agents include disodium edetate and ethane hydroxy diphosphate.
  • Citric acid, sodium citrate, boric acid, borax, disodium hydrogen phosphate are available as buffers.
  • the method for producing broccoli with increased sulforaphane content using the high voltage pulsed electric field treatment of the present invention it is possible to consume broccoli with increased sulforaphane content in the form of raw or cut pieces cut to a suitable size without grinding the broccoli, and The sulforaphane may be extracted using broccoli having an increased sulforaphane content.
  • the high voltage pulse electric field treatment device does not need to be provided with a high-pressure pressure vessel, the processing time is very short, such as a few seconds or less than a few minutes, it is possible to operate in batch as well as continuous, it is advantageous to commercialization compared to the known techniques so far Do.
  • the broccoli and sulforaphane extracted from the increased sulforaphane content may be used as an active ingredient for exerting the functionalities of sulforaphane, such as antioxidant, anti-inflammatory and antioxidant properties of food compositions, feed compositions or cosmetic compositions.
  • Example 1A is a photograph of broccoli of Comparative Example 1 (left) and Example 1 (right) taken immediately after high voltage pulse electric field treatment.
  • Example 1B is a photograph of broccoli of Comparative Example 1 (left) and Example 1 (right) taken after storage at room temperature for 1 day after high voltage pulse electric field treatment.
  • 1C is a photograph of broccoli of Comparative Example 1 (left) and Example 1 (right) taken after 3 days storage at room temperature after high voltage pulsed electric field treatment.
  • 1D is a photograph of broccoli of Comparative Example 1 (left) and Example 1 (right) taken after 4 days storage at room temperature after high voltage pulsed electric field treatment.
  • FIG. 1E is a photograph of broccoli of Comparative Example 1 (left) and Example 1 (right) taken after 6 days storage after high voltage pulse electric field treatment.
  • the present invention to solve the problem, the step of putting broccoli in a batch or continuous processing vessel containing a liquid medium; And performing 1 to 50 high-voltage pulse electric field treatments for 0.1 to 300 seconds at an electric field of 0.1 to 200 kV / cm and a frequency of 1 to 100 Hz in the liquid medium. to provide.
  • Broccoli was fresh from Jeju-do cultivation and turnip was fresh from Ganghwa and used as a sample.
  • the high voltage pulse electric field treatment device used the model name ELCRACK HVP5 of the German Institute of Food Technology (Germany).
  • sulfolapan contained in the radish, turnip, cabbage, red cabbage, red cabbage, broccoli and cauliflower of Cruciferum were as follows.
  • UPLC system consists of Acquity UPLC system (Waters corporation, milford, MA), Binary solvent manager, Sample manager, MS system uses Waters Quattro Premier XE Tandem MS (Micromass UK limited), and Software uses Masslynx V4.1. .
  • red cabbage was about half of broccoli in sulfolapane content, but the glucopanin content of sulforaphane was less than 1/10. In the case of broccoli, it was also predicted that the sulforaphane content could be significantly increased by converting glucopanin into sulfolaphan.
  • the fresh broccoli is removed from the non-edible parts and the flower parts are cut by 50 g and placed in a batch processing container containing water of a high-voltage pulse electric field treatment device once under the conditions of electric field 2 kV / cm, frequency 10 Hz and processing time 10 seconds. Broccoli was processed.
  • broccoli was treated once under treatment conditions of an electric field of 2 kV / cm, a frequency of 20 Hz, and a treatment time of 10 seconds.
  • the fresh broccoli was removed from the non-edible portion, and 50 g of the flower parts were cut, and broccoli boiled in boiling water at 100 ° C. for 1 minute was used as Comparative Example 2.
  • the fresh broccoli was removed from the non-edible portion, the flower portion was cut by 50 g, and the milled product was pulverized for 2 minutes with a blender as Comparative Example 3.
  • the general bacterial counts contained in the broccoli of Examples 1 and 2 and Comparative Examples 1 and 2 were tested according to the general bacterial count test method of the Food Code, and the results are shown in Table 4.
  • the sample was taken from the flower part of broccoli by washing
  • Broccoli boiled in boiling water (Comparative Example 2) reduced the general bacteria of fresh broccoli (Comparative Example 1) by more than 99%, and showed the same sterilizing effect as that of Comparative Example 2 in Examples 1 and 2 treated with high-voltage pulse electric field.
  • Fresh broccoli (Comparative Example 1) or high voltage pulsed electric field treated broccoli (Example 1) did not show browning for 3 days at room temperature, but browned until day 4. Especially in the comparative example 1, the flower part of broccoli was crumbly from the 4th day.
  • shelf life of high voltage pulsed field broccoli could be expected to be at least equal to or longer than fresh broccoli.
  • Broccoli 50 g of Example 1 was hot air dried with hot air at 40 ° C. and then ground to prepare broccoli powder.
  • the sulforaphane content contained in the broccoli powder or sulfolapan extract powder of Examples 3 to 5 was analyzed by the method of Experimental Example 1 and is shown in Table 5.
  • Example 5 Example 5 Content (mg / solid content 100g) 1,210 445 1,830 3,580
  • Each fresh broccoli flower was placed in a batch treatment vessel containing water of a high voltage pulsed electric field treatment device, and broccoli was treated while changing the electric field, frequency, treatment time, and number of treatments, and sulforaphane content and sensory evaluation were performed.
  • the sensory evaluation was made with the fresh broccoli of Comparative Example 1 as the best 9 point for 20 skilled panelists, and the relative score was expressed by the 9 point scoring method.
  • Each fresh broccoli flower was treated once in a high voltage pulsed electric field treatment device under the conditions of 2 kV / cm electric field, frequency 5 Hz and processing time 5 seconds, and the liquid medium contained 50% by volume of ethanol in water and 20 weight of ethanol. It was placed in a batch treatment vessel containing 0.5% by weight aqueous solution, 0.5% by weight brine was treated with a high voltage pulse electric field, the sulforaphane content was analyzed and shown in Table 7.
  • composition ratios of the following formulation examples may be arbitrarily modified according to regional and ethnic preferences such as demand hierarchy, demand country, and usage.
  • tablets are prepared by tableting according to a conventional method for preparing tablets.
  • the above ingredients are mixed and filled into gelatin capsules to prepare capsules.
  • Vitamin B6 0.5 mg
  • composition ratio of the above-mentioned vitamin and mineral mixtures is a composition that is relatively suitable for the health functional food
  • the composition is mixed in a preferred embodiment, but the compounding ratio may be arbitrarily modified, and the above ingredients are mixed according to a conventional health functional food manufacturing method. Then, the granules may be prepared and used for preparing the nutraceutical composition according to a conventional method.
  • composition ratios of the following formulation examples may be arbitrarily modified according to regional and ethnic preferences such as demand hierarchy, demand country, and usage.
  • a soap is prepared by mixing the above components according to a conventional soap manufacturing method.
  • Citric acid 0.05% by weight
  • the lotion is prepared by mixing the above components in accordance with a conventional lotion production method.
  • the cream is prepared by mixing the above ingredients according to a conventional cream production method.
  • the pack is prepared by mixing the above components according to a conventional pack manufacturing method.
  • the method for producing broccoli with increased sulforaphane content using the high voltage pulsed electric field treatment of the present invention it is possible to consume broccoli with increased sulforaphane content in the form of raw or cut pieces cut to a suitable size without grinding the broccoli, and
  • the sulforaphane may be extracted using broccoli having an increased sulforaphane content.
  • the broccoli and sulforaphane extracted from the increased sulforaphane content may be used as an active ingredient for exerting the functionalities of sulforaphane, such as antioxidant, anti-inflammatory and antioxidant properties of food compositions, feed compositions or cosmetic compositions.

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Abstract

본 발명은 고전압 펄스 전기장 처리를 이용한 설포라판 함량이 증가된 브로콜리의 제조방법에 관한 것으로, 브로콜리를 분쇄하지 않고 원물 또는 적당한 크기로 자른 절단물의 형태로 설포라판 함량이 증가된 브로콜리를 섭취할 수 있도록 하고, 또한 상기 설포라판 함량이 증가된 브로콜리를 재료로 설포라판을 추출할 수 있게 한다. 상기 설포라판 함량이 증가된 브로콜리 및 그로부터 추출된 설포라판은 식품 조성물, 사료 조성물 또는 화장료 조성물의 항산화, 항염증, 항산화 등의 설포라판의 기능성을 발휘하기 위한 유효성분으로 활용될 수 있다.

Description

[규칙 제26조에 의한 보정 22.04.2015]　설포라판 함량이 증가된 브로콜리의 제조방법 및 그로부터 제조된 브로콜리의 이용
본 발명은 설포라판 함량이 증가된 브로콜리의 제조방법, 그로부터 제조된 브로콜리, 그 브로콜리를 포함하는 식품 조성물, 사료조성물 또는 화장료 조성물에 관한 것이다.
또한 본 발명은 설포라판 함량이 증가된 브로콜리의 제조방법으로부터 제조된 브로콜리로부터 설포라판을 제조하는 방법, 그로부터 제조된 설포라판을 포함하는 식품조성물, 사료 조성물 또는 화장료 조성물에 관한 것이다.
설포라판(Sulforaphane)은 십자화과 채소에 존재하는 항암, 항산화 물질로서, 십자화과 채소에 존재하는 2차 대사산물인 글루코시놀레이트(glucosinolate)가 효소에 의해 가수분해됨으로써 얻어지는 이소티오시아네이트(isothiocyanate)의 일종이다.
신선한 브로콜리에는 글루코시놀레이트의 함량이 높고 설포라판의 함량은 상대적으로 매우 낮다. 그러나 신선한 브로콜리를 분쇄하게되면 글루코시놀레이트가 설포라판으로 생물전환되어 함으로써 그 분쇄물에는 설포라판의 함량이 현저히 증가된다. 따라서 브로콜리를 분쇄한 후 추출한 브로콜리 추출물에도 설포라판 함량이 신선한 브로콜리에 비해 현저히 증가되어, 이러한 브로콜리 추출물은 항산화 효소의 발현 유도로 산화적 손상에 의한 유전자 변형을 억제하며, 위암의 발병의 한 원인으로 알려져 있는 헬리코박터 파이로리균의 성장을 억제하고, 동물실험에서 발암물질에 의한 위암의 생성을 저해하는 것으로 알려져 있다.
브로콜리는 일부 가공식품의 원재료로서 사용되기도 하지만 대부분 샐러드의 형태로 섭취되는 채소로서, 상기 브로콜리를 이용하여 샐러드를 제조할 경우 브로콜리의 씹는 질감을 부드럽게 하기 위하여 수증기 또는 끓는 물에 데치는 것이 일반적이다. 그러나 신선한 브로콜리에 열이 가해질 경우 글루코시놀레이트가 분해되어 함량이 현저히 감소되고, 나아가 설포라판 함량도 감소하게 된다.
고전압 펄스 전기장 처리는 변패 작용을 하는 미생물의 비열 살균 방법의 하나로서 풍미에 영향을 덜 주면서도 저장성을 늘릴 수 있는 방법으로 알려져 있으며(한국공개특허 특2000-0016830호), 추출 수율을 증진시키기 위한 전처리 방법의 하나로서 알려져 있으나(한국공개특허 제10-2010-0052065호), 이를 브로콜리의 가공에 이용하여 설포라판을 증대시키는 효과에 대해서는 보고된 바 없었다.
본 발명은 브로콜리를 분쇄하지 않고 원물 또는 적당한 크기로 자른 절단물의 형태로 설포라판 함량이 증가된 브로콜리를 섭취할 수 있도록 하는 고전압 펄스 전기장 처리를 이용한 설포라판 함량이 증가된 브로콜리의 제조방법, 그로부터 제조된 브로콜리, 그 브로콜리를 포함하는 식품 조성물, 사료조성물 또는 화장료 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
또한 본 발명은 고전압 펄스 전기장 처리를 이용한 설포라판 함량이 증가된 브로콜리의 제조방법으로부터 제조된 브로콜리로부터 설포라판을 제조하는 방법, 그로부터 제조된 설포라판을 포함하는 식품조성물, 사료 조성물 또는 화장료 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명은 상기 과제해결을 위하여, 브로콜리를 액상 매질이 담긴 회분식 또는 연속식 처리 용기에 넣는 단계; 및 상기 액상 매질에 전기장 0.1 내지 200 kV/cm 및 주파수 1 내지 100 Hz에서 0.1 내지 300초 동안 고전압 펄스 전기장 처리를 1 내지 50 회 수행하는 단계;를 포함하는 설포라판 함량이 증가된 브로콜리의 제조방법을 제공한다.
상기 고전압 펄스 전기장 처리는 0.2 내지 20 kV/cm에서 1 내지 50초 동안 수행하는 것이 바람직하다.
상기 처리 용기에 넣는 단계의 브로콜리는 분쇄 또는 마쇄공정을 거치지 않은 원물 또는 그 절단물인 것이 바람직하다.
상기 액상 매질은 물, 에탄올 또는 이들의 혼합액인 것이 바람직하다.
상기 액상 매질에는 아세트산, 구연산, 젖산 등의 유기산이나 소금 등의 무기염류가 더 첨가될 수 있다.
상기 고전압 펄스 전기장 처리를 수행하는 단계 후에 건조 공정, 분쇄 공정, 건조 후 분쇄 공정 또는 분쇄 후 건조 공정을 거치는 것이 바람직하다.
본 발명은 상기 방법으로 제조되고, 상기 고전압 펄스 전기장 처리 전의 브로콜리에 비하여 설포라판 함량이 30 % 이상, 바람직하게는 50 % 이상, 더욱 바람직하게는 100 % 내지 1000 % 증가된 것을 특징으로 하는 설포라판 함량이 증가된 브로콜리를 제공한다.
고전압 펄스 전기장 처리하지 않은 신선한 브로콜리에 포함된 통상의 설포라판 함량은 일반적으로 브로콜리 건조중량 100 g당 30 mg 내지 70 mg이고 평균 40 mg 정도 이지만, 식용으로 섭취하기 전 가장 보편적인 전처리 공정인 데치기를 통해 브로콜리중의 설포라판 함량이 대부분 소실된다. 그러나 본 발명의 고저압 펄스 전기장 처리를 통해서 브로콜리 원물의 설포라판 함량은 브로콜리 건조중량 100 g당 100 mg 내지 200 mg 으로 처리 전의 브로콜리 원물에 비해 1.5 내지 8 배 정도 설포라판 함량이 현저히 증가한다.
본 발명은 상기 설포라판 함량이 증가된 브로콜리를 재료로 설포라판을 추출하는 것을 특징으로 하는 설포라판 추출물의 제조방법을 제공한다.
상기 설포라판 추출물은 물, 유기용매 또는 이들의 혼합물을 추출 용매로서 이용하여 추출된 것일 수 있다. 이 때 사용되는 유기용매의 종류나 물과 유기용매의 혼합 비율은 특별히 제한되지 않는다.
예를 들어, 상기 유기용매는 저급 알코올, 헥산, 아세톤, 에틸 아세테이트, 클로로포름, 및 디에틸에테르로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 용매일 수 있다. 상기 저급 알코올은 탄소수 1 내지 6의 알코올일 수 있다. 예를 들어, 저급 알코올로는 메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올, 노말-프로판올, 이소-프로판올, 노말-부탄올, 1-펜탄올, 2-부톡시에탄올 또는 에틸렌글리콜 등을 이용할 수 있다. 유기용매는 이 외에도 아세트산, DMFO(dimethyl-formamide), DMSO(dimethyl sulfoxide) 등의 극성 용매, 아세토나이트릴, 에틸 아세테이트, 메틸 아세테이트, 플루오로알칸, 펜탄, 2,2,4-트리메틸펜탄, 데칸, 사이클로헥산, 사이클로펜탄, 디이소부틸렌, 1-펜텐, 1-클로로부탄, 1-클로로펜탄, o-자일렌, 디이소프로필 에테르, 2-클로로프로판, 톨루엔, 1-클로로프로판, 클로로벤젠, 벤젠, 디에틸 에테르, 디에틸 설파이드, 클로로포름, 디클로로메탄, 1,2-디클로로에탄, 어닐린, 디에틸아민, 에테르, 사염화탄소 및 THF(Tetrahydrofuran) 등의 비극성 용매를 사용할 수도 있다.
상기 설포라판 추출물은 물 추출물, 에탄올 추출물, 메탄올 추출물, 또는 물, 에탄올 및 메탄올 중에서 선택되는 어느 2 이상의 용매의 혼합용매에 의한 추출물일 수 있다.
상기 물 추출물의 제조는 본 발명의 방법으로 설포라판 함량이 증가된 브로콜리를 40 ~ 100℃의 물로 2 ~ 48시간 동안 추출하여 제조할 수 있고, 또한 바람직하게는 물 추출에 따른 수용성 성분의 추출 효율을 증대시키기 위하여 셀룰라아제, 비스코자임, 알칼라아제 및 펙신으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 효소를 첨가한 물로 40 ~ 55℃에서 2 ~ 24시간 동안 추출하여 제조할 수 있다.
상기 에탄올 추출물 또는 에탄올 수용액 추출물의 제조는 본 발명의 방법으로 설포라판 함량이 증가된 브로콜리를 에탄올 또는 35 ~ 75 부피%의 에탄올 수용액으로 20 ~ 60℃에서 2 ~ 36 시간, 바람직하게는 40 ~ 50℃에서 2.5 ~ 6 시간 동안 추출하여 제조할 수 있고, 보다 바람직하게는 70 부피%의 에탄올 수용액으로 45℃에서 3시간 동안 추출하여 제조한다.
본 명세서에서 사용되는 용어 '추출물'은 추출물을 추가적으로 분획(fractionation)한 분획물도 포함한다. 즉, 설포라판 추출물은 상술한 추출용매를 이용하여 얻은 것뿐만 아니라, 여기에 정제과정을 추가적으로 적용하여 설포라판을 농축시켜 얻은 것도 포함한다. 또한 상기 추출물이나 분획물을 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외 여과막을 통과시켜 얻은 분획, 다양한 크로마토그래피 (크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 것)에 의한 분리 등, 추가적으로 실시된 다양한 정제 방법을 통해 얻어진 분획도 본 발명의 설포라판 추출물에 포함된다.
본 발명은 상기 설포라판 함량이 증가된 브로콜리를 포함하는 식품 조성물 또는 상기 방법으로 제조된 설포라판 추출물을 포함하는 식품 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 설포라판 함량이 증가된 브로콜리 또는 그로부터 추출된 설포라판 추출물을 건강기능식품 또는 일반 식품의 유효성분 첨가물로 사용하는 경우 본 발명에 따른 상기 브로콜리 또는 설포라판 추출물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품성분과 함께 사용할 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용할 수 있다. 유효 성분의 혼합양은 예방, 건강 또는 치료 등의 각 사용 목적에 따라 적합하게 결정할 수 있다.
일반적으로, 식품 또는 음료의 제조시에 본 본 발명에 따른 상기 브로콜리 또는 설포라판 추출물은 원료에 대하여 15 중량부 이하, 바람직하게는 10 중량부 이하의 양으로 첨가할 수 있다. 그러나, 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 또한 본 발명은 천연물 또는 그로부터의 추출물을 이용하는 점에서 안전성 면에서 문제가 없으므로 상기 범위 이상의 양으로도 사용할 수 있다.
상기 식품의 종류에는 특별히 제한은 없고, 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸콜렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 식품을 모두 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 건강기능식품 중 음료 식품은 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 슈크로스와 같은 디사카라이드 및 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜일 수 있다. 감미제로서는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제나, 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명에 따른 기능성 식품 100 mL당 약 0.01 ~ 0.04 g, 바람직하게는 약 0.02 ~ 0.03 g일 수 있다.
상기 외에 항산화 활서을 가지고 염증 또는 암의 개선이나 예방을 위한 ,식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산음료에 사용되는 탄산화제를 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 식품 조성물은 천연 과일쥬스, 과일쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 혼합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 제한되지 않으나 본 발명의 조성물 100중량부 대비 0.01 ~ 0.1 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
본 발명은 상기 설포라판 함량이 증가된 브로콜리를 포함하는 사료 조성물 또는 상기 방법으로 제조된 설포라판 추출물을 포함하는 사료 조성물을 제공한다. 상기 사료 조성물은 사료 또는 사료 첨가제일 수 있다.
상기 사료 조성물은 구연산, 후말산, 아디픽산, 젖산, 사과산 등의 유기산이나 인산나트륨, 인산칼륨, 산성피로인산염, 폴리인산염(중합인산염) 등의 인산염이나 폴리페놀, 카테킨(catechin), 알파-토코페롤, 로즈마리 추출물(rosemary extract), 비타민 C, 녹차 추출물, 감초 추출물, 키토산, 탄닌산, 피틴산 등의 천연 항산화제 중 어느 하나 또는 하나 이상을 추가로 포함할 수 있다.
상기 사료 조성물의 보조성분으로 아미노산, 무기염류, 비타민, 항생물질, 항균물질, 항산화, 항곰팡이 효소, 살아있는 미생물 제제 등과 같은 각종보조제가 곡물, 예를 들면 분쇄 또는 파쇄된 밀, 귀리, 보리, 옥수수 및 쌀; 식물성 단백질 사료, 예를 들면 평지, 콩 및 해바라기를 주성분으로 하는 것; 동물성 단백질 사료, 예를 들면 혈분, 육분, 골분 및 생선분; 당분 및 유제품, 예를 들면 각종 분유 및 유장 분말로 이루어지는 건조성분, 건조 첨가제를 모두 혼합한 후, 액체 성분과, 가열 후에 액체가 되는 성분, 즉, 지질, 예를 들면 가열에 의해 임의로 액화시킨 동물성 지방 및 식물성 지방 등과 같은 주성분 이외에 영양보충제, 소화 및 흡수향상제, 성장촉진제, 질병예방제 등과 같은 물질과 함께 사용될 수 있다.
상기 사료 조성물은 동물에게 단독으로 식용 담체 중에서 다른 사료 첨가제와 조합되어 투여될 수 있다.
상기 사료 조성물은 탑 드레싱으로서 또는 이들을 동물 사료에 직접 혼합하거나 또는 사료와 별도로, 별도의 경구 제형으로, 주사 또는 경피로 또는 다른 성분과 조합하여 쉽게 투여할 수 있다. 통상적으로, 당업계에 잘 알려진 바와 같이 단독 일일 투여량 또는 분할 일일 투여량을 사용할 수 있다.
상기 사료 조성물은 동물 사료와 별도로 투여할 경우, 당업계에 잘 알려진 바와 같이 조성물의 투여 형태는 이들의 비-독성 제약상 허용 가능한 식용 담체와 조합하여 즉석 방출 또는 서방성 제형으로 제조할 수 있다. 이러한 식용 담체는 고체 또는 액체, 예를 들어 옥수수 전분, 락토오스, 수크로스, 콩 플레이크, 땅콩유, 올리브유, 참깨유 및 프로필렌 글리콜일 수 있다. 고체 담체가 사용될 경우, 화합물의 투여형은 정제, 캡슐제, 산제, 토로키제 또는 함당정제 또는 미분산성 형태의 탑 드레싱일 수 있다. 액체 담체가 사용될 경우, 연젤라틴 캡슐제, 또는 시럽제 또는 액체 현탁액제, 에멀젼제 또는 용액제의 투여 형태일 수 있다. 또한, 투여 형태는 보조제, 예를 들어 보존제, 안정화제, 습윤제 또는 유화제, 용액 촉진제 등을 함유할 수 있다.
상기 사료 조성물은 침지, 분무 또는 혼합하여 상기 동물사료에 첨가하여 이용될 수 있다.
상기 사료 조성물은 포유류, 가금 및 어류를 포함하는 다수의 동물 식이에 적용할 수 있다. 보다 상세하게, 식이는 상업상 중요한 포유류, 예를 들어 돼지, 소, 양, 염소, 실험용 설치 동물(랫트, 마우스, 햄스터 및 게르빌루스쥐), 모피 소유 동물(예, 밍크 및 여우), 및 동물원 동물(예, 원숭이 및 꼬리 없는 원숭이), 뿐만 아니라 가축 (예, 고양이 및 개)에게 사용할 수 있다. 통상적으로 상업상 중요한 가금에는 닭, 터키, 오리, 거위, 꿩 및 메추라기가 포함된다. 송어와 같은 상업적으로 사육되는 어류도 포함될 수 있다.
상기 사료 조성물을 포함한 동물용 사료 배합 방법은, 상기 조성물을 동물 사료에 건조 중량 기준으로 사료 1kg당 약 1g 내지 100g의 양으로 혼합한다. 또한 사료 혼합물은 완전히 혼합한 후, 성분들의 분쇄 정도에 따라 경점성의 조립 또는 과립 물질이 얻어진다. 이것을 매시로서 공급하거나, 또는 추가 가공 및 포장을 위해 원하는 분리된 형상으로 형성한다. 이 때, 저장중에 분리되는 것을 방지하기 위해, 동물 사료에 물을 첨가하고, 이어서 통상의 펠릿화, 팽창화, 또는 압출 공정을 거치는 것이 바람직하다. 과잉의 물은 건조 제거될 수 있다.
본 발명은 상기 설포라판 함량이 증가된 브로콜리를 포함하는 화장료 조성물 또는 상기 방법으로 제조된 설포라판 추출물을 포함하는 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명의 화장료 조성물은 화장수(스킨), 로션, 에센스, 크림, 팩 등의 제제 형태로 제조될 수 있다.
상기 제제에서 본 발명에 따른 설포라판 함량이 증가된 브로콜리 또는 그로부터 추출된 설포라판 추출물을 0.1 중량% 이상, 바람직하게는 0.2 ~ 50 중량%, 더 바람직하게는 0.3 ~ 30 중량%, 가장 바람직하게는 0.5 ~ 10 중량% 사용될 수 있다
상기 화장료 조성물에는 화장품의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 또는 희석제를 더 포함할 수 있다.
상기 담체, 부형제 또는 희석제로는 정제수, 오일, 왁스, 지방산, 지방산 알콜, 지방산 에스테르, 계면활성제, 흡습제(humectant), 증점제(thickening agent), 항산화제, 점도 안정화제(viscosity stabilizer), 킬레이팅제, 완충제, 저급 알콜 등이 포함되지만, 이에 제한되는 것은 아니다. 필요에 따라 미백제, 보습제, 비타민, 자외선 차단제, 향수, 염료, 항균제가 더 포함될 수 있다.
상기 오일로서 수소화 식물성유, 파마자유, 면실유, 올리브유, 야자인유, 호호바유, 아보카도유가 이용될 수 있으며, 왁스로는 밀랍, 경랍, 카르나우바, 칸델릴라, 몬탄, 세레신, 액체 파라핀, 라놀린이 이용될 수 있다. 지방산으로는 스테아르산, 리놀레산, 리놀렌산, 올레산이 이용될 수 있고 지방산 알콜로는 세틸 알콜, 옥틸 도데칸올, 올레일 알콜, 판텐올, 라놀린 알콜, 스테아릴 알콜, 헥사데칸올이 이용될 수 있으며 지방산 에스테르로는 이소프로필 미리스테이트, 이소프로필 팔미테이트, 부틸 스테아레이트가 이용될 수 있다. 계면 활성제의 예에는 소듐 스테아레이트, 소듐 세틸설페이트, 폴리옥시에틸렌 라우릴에테르 포스페이트, 소듐 N-아실 글루타메이트와 같은 음이온 계면활성제; 스테아릴디메틸벤질암모늄 클로라이드 및 스테아릴트리메틸암모늄 클로라이드와 같은 양이온 계면활성제; 알킬아미노에틸글리신 하이드로클로라이드 및 레시틴과 같은 양성 계면활성제; 글리세린 모노스테아레이트, 소르비탄 모노스테아레이트, 수크로오스 지방산 에스테르, 프로필렌 글리콜 모노스테아레이트, 폴리옥시에틸렌 올레일에테르, 폴리에틸렌 글리콜 모노스테아레이트, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노팔미테이트, 폴리옥시에틸렌 코코넛 지방산 모노에탄올아르니드(monoethanol arnide), 폴리옥시프로필렌 글리콜, 폴리옥시에틸렌 캐스터유, 폴리옥시에틸렌 라놀린과 같은 비이온성 계면활성제 등이 포함된다. 흡습제에는 글리세린, 1,3-부틸렌 글리콜, 프로필렌 글리콜이 이용될 수 있으며 저급 알콜로는 에탄올, 이소프로판올이 이용 가능하다. 증점제의 예에는 알긴산 나트륨, 카제인산 나트륨, 젤라틴 한천, 크산탄 고무, 전분, 셀룰로오스 에테르(예, 하이드록시에틸 셀룰로오스, 메틸 셀룰로오스, 카르복시메틸 셀룰로오스, 하이드록시 프로필메틸 셀룰로오스), 폴리비닐피롤리돈, 폴리비닐알콜, 폴리에틸렌 글리콜 및 소듐 카르복시메틸 셀룰로오스 등이 포함된다. 항산화제로는 부틸레이티드 하이드록시톨루엔, 부틸레이티드 하이드록시아니솔, 프로필 갈레이트, 시트르산, 에톡시퀸(ethoxyquin)이 이용 가능하고, 킬레이팅제로는 디소듐 에데테이트, 에탄하이드록시 디포스페이트가 이용 가능하며, 완충제로는 시트르산, 소듐 시트레이트, 붕산, 보랙스(borax), 디소듐 하이드로젠 포스페이트가 이용 가능하다.
본 발명의 고전압 펄스 전기장 처리를 이용한 설포라판 함량이 증가된 브로콜리의 제조방법을 통하여, 브로콜리를 분쇄하지 않고 원물 또는 적당한 크기로 자른 절단물의 형태로 설포라판 함량이 증가된 브로콜리를 섭취할 수 있도록 하고, 또한 상기 설포라판 함량이 증가된 브로콜리를 재료로 설포라판을 추출할 수 있다. 상기 고전압 펄스 전기장 처리장치는 고압압력용기를 구비할 필요가 없고, 처리시간이 수초 또는 수분 미만으로 매우 짧으며, 회분식은 물론 연속식으로 작동하는 것이 가능하여 지금까지 공지된 기술에 비하여 상용화에 유리하다. 또한 상기 설포라판 함량이 증가된 브로콜리 및 그로부터 추출된 설포라판은 식품 조성물, 사료 조성물 또는 화장료 조성물의 항산화, 항염증, 항산화 등의 설포라판의 기능성을 발휘하기 위한 유효성분으로 활용될 수 있다.
도 1a는 고전압 펄스 전기장 처리 직후 찍은 비교예 1(좌측) 및 실시예 1(우측)의 브로콜리의 사진이다.
도 1b는 고전압 펄스 전기장 처리 후 실온 1일 보관 후 찍은 비교예 1(좌측) 및 실시예 1(우측)의 브로콜리의 사진이다.
도 1c는 고전압 펄스 전기장 처리 후 실온 3일 보관 후 찍은 비교예 1(좌측) 및 실시예 1(우측)의 브로콜리의 사진이다.
도 1d는 고전압 펄스 전기장 처리 후 실온 4일 보관 후 찍은 비교예 1(좌측) 및 실시예 1(우측)의 브로콜리의 사진이다.
도 1e는 고전압 펄스 전기장 처리 후 냉장 6일 보관 후 찍은 비교예 1(좌측) 및 실시예 1(우측)의 브로콜리의 사진이다.
본 발명은 상기 과제해결을 위하여, 브로콜리를 액상 매질이 담긴 회분식 또는 연속식 처리 용기에 넣는 단계; 및 상기 액상 매질에 전기장 0.1 내지 200 kV/cm 및 주파수 1 내지 100 Hz에서 0.1 내지 300초 동안 고전압 펄스 전기장 처리를 1 내지 50 회 수행하는 단계;를 포함하는 설포라판 함량이 증가된 브로콜리의 제조방법을 제공한다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명한다. 이들 실시예는 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들에 의해 제한되는 것은 아니다.
브로콜리는 제주도 재배지에서 수확한 신선한 것을, 순무는 강화에서 재배한 신선한 것을 구매하여 시료로 사용하였다. 고전압 펄스 전기장 처리장치는 German Institute of Food Technology사(독일)의 모델명 ELCRACK HVP5를 사용하였다.
실험예 1: 십자화과 채소의 설포라판 함량 분석
십자화과의 무, 순무, 양배추, 적양배추, 방울양배추, 브로콜리 및 컬리플라워 원물에 포함된 설포라판 함량을 다음과 같이 분석하였다.
설포라판 표준품(90%, Sigma)으로 표준용액을 제조하여 UPLC-MS/MS(제조사 Waters) 로 분석하여 표준정량선을 작성하고, 시료 1g (건조중량)을 물 10ml를 넣어 믹서기로 갈고 2시간 침지하여 마이로시나제에 의해 글루코라판닌이 설포라판으로 전환되도록 하였다. 2시간 반응후 메탄올 90ml를 첨가하여 교반, 추출한 후 추출액(100ml)의 1ml를 10배 희석하여 UPLC-MS/MS로 설포라판 함량을 분석하였다. UPLC system은 Acquity UPLC system (Waters corporation, milford, MA), Binary solvent manager, Sample manager로 된 시스템이며, MS system은 Waters Quattro Premier XE Tandem MS (Micromass UK limited), Software 는 Masslynx V4.1을 이용하였다.
표 1
구분 무 순무 양배추 적양배추 브로콜리
함량(mg/100g건조중량) 0.7 1.5 1.9 18.6 37.4
상기 결과를 통해 십자화과 채소 중에서 설포라판의 공급원으로 이용되기 적합한 채소는 적양배추와 브로콜리임을 알 수 있었다.
실험예 2: 브로콜리 및 적양배추에서 설포라판 전구체의 함량 분석
실험예 1에서 설포라판 함량이 높았던 적양배추와 브로콜리에서 설포라판의 전구체가 되는 글루코라파닌의 함량을 확인하기 위하여, 설포라판 및 글루코라파닌의 동시분석법을 다음과 같이 확립하였다.
Glucoraphanin 표준품(90%, PhytoLab)으로 표준용액을 제조하여 UPLC-MS/MS(제조사 Waters) 로 분석하여 표준정량선을 작성하고, 시료 1g (건조중량)을 물 10ml를 넣어 믹서기로 갈고 2시간 침지하여 마이로시나제에 의해 글루코라파닌이 설포라판으로 전환되도록 하였다. 2시간 반응후 메탄올 대신 글루코라파닌과 설포라판의 동시 추출을 위하여 주정 90ml를 첨가하여 교반, 추출한 후 추출액(100ml)의 1ml를 10배 희석하여 UPLC-MS/MS로 글루코라파닌 및 설포라판 함량을 분석하였다. UPLC system은 실험예 1과 동일하고, MS/MS Method는 Sulforaphane (MS 178 m/z -> Daughter 113.9 m/z)을 Positive ion mode로 Scan하였으며, Glucoraphanin은 ((MS 436 m/z -> Daughter 372, 96.9 m/z) Negative ion mode로 Scan 하였다.
표 2
구분 적양배추 브로콜리
글루코라파닌 함량(mg/100g건조중량) 22.2 235.2
설포라판 함량(mg/100g건조중량) 18.6 37.4
상기 결과로부터 적양배추는 설포라판 함량에 있어서는 브로콜리의 절반 정도되지만, 설포라판의 전구체인 글루코라파닌 함량은 1/10 미만임을 알 수 있었다. 또한 브로콜리의 경우는 글루코라파닌을 설포라판으로 전환시킴으로써 설포라판 함량을 현저히 증대시킬 수 있을 것으로 예측되었다.
실시예 1:
신선한 브로콜리를 비가식부위를 제거하고 꽃 부분을 50 g씩 절단하여 고전압 펄스 전기장 처리장치의 물이 담긴 회분식 처리용기에 넣고 전기장 2 kV/cm, 주파수 10 Hz 및 처리시간 10 초의 처리조건에서 1회 브로콜리를 처리하였다.
실시예 2:
실시예 1과 동일하되, 전기장 2 kV/cm, 주파수 20 Hz 및 처리시간 10 초의 처리조건에서 1회 브로콜리를 처리하였다.
비교예 1:
고전압 펄스 전기장 처리한 브로콜리와 비교를 위해 대조군으로 신선한 브로콜리를 비가식부위를 제거하고 50 g씩 절단하여 비교예 1로 하였다.
비교예 2:
신선한 브로콜리를 비가식부위를 제거하고 꽃 부분을 50 g씩 절단하여 100 ℃의 끓는 물에서 1분 동안 데친 브로콜리를 비교예 2로 하였다.
비교예 3:
신선한 브로콜리를 비가식부위를 제거하고 꽃 부분을 50 g씩 절단한 후 믹서기로 2분 동안 분쇄한 분쇄물을 비교예 3으로 하였다.
실험예 3: 설포라판 함량 분석
실시예 1, 2 및 비교예 1 내지 3의 브로콜리에 포함된 설포라판 함량을 분석하기 위하여, 설포라판 표준품(90%, Sigma)으로 표준용액을 제조하여 UPLC-MS/MS(제조사 Waters) 로 분석하여 표준정량선과 시료 중의 설포라판을 분석하여 그 결과를 표 3에 나타내었다. 상기 설포라판 분석은 실험예 1과 동일하게 실시하였다.
표 3
구분 비교예1 비교예2 비교예3 실시예1 실시예2
함량(mg/100g건조중량) 37.4 1.75 65.6 118.6 138.8
상대비율(%) 100.0 4.7 175.4 317.1 371.1
실험예 4:
실시예 1, 2 및 비교예 1, 2의 브로콜리에 포함된 일반세균수를 식품공전의 일반세균수 시험법에 따라 실험하여 그 결과를 표 4에 나타내었다. 시료는 세척에 의해 미생물의 잔존 가능성이 높은 브로콜리의 꽃 부분에서 채취하였다.
표 4
구분 비교예1 비교예2 실시예1 실시예2
CFU/g 2.7x103 0.97x101 2.05x101 1.05x101
끓는 물에 데친 브로콜리(비교예2)는 신선한 브로콜리(비교예 1)의 일반세균을 99% 이상 감소시켰고, 고전압 펄스 전기장 처리한 실시예 1 및 2에서도 비교예 2와 동등한 살균효과를 나타내었다.
실험예 5:
고전압 펄스 전기장 처리 브로콜리의 보존 조건 및 유통기한을 예측하기 위하여 실시예 1 및 비교예 1의 브로콜리의 실온(25 ℃) 및 냉장(5 ℃)에서 보존하면서 색깔 변화를 확인하였고, 그 때의 사진은 도 1a 내지 도 1e에 나타내었다.
신선한 브로콜리(비교예 1)나 고전압 펄스 전기장 처리 브로콜리(실시예 1) 모두 실온에서 3일 동안은 갈변이 나타나지 않았으나, 4일째까지는 갈변이 나타났다. 특히 비교예 1에서는 4일째부터는 브로콜리의 꽃부분이 부스러졌다.
그러나 신선한 브로콜리(비교예 1)나 고전압 펄스 전기장 처리 브로콜리(실시예 1) 모두 냉장 조건에서는 6일째까지도 갈변이 나타나지 않았다.
따라서 고전압 펄스 전기장 처리 브로콜리의 유통기한은 신선한 브로콜리와 적어도 동등하거나 그보다 길 것으로 예측할 수 있었다.
실시예 3:
실시예 1의 브로콜리 50 g을 40 ℃의 열풍으로 열풍건조한 후 분쇄하여 브로콜리 분말을 제조하였다.
실시예 4:
실시예 1의 브로콜리 50 g에 70 중량% 에탄올 수용액 250 ml를 첨가한 후 호모게나이저로 3분 동안 분쇄한 후 20 ℃에서 12 시간 교반하면서 추출한 후, 감압 농축한 후 동결건조하여 설포라판 추출물 분말을 제조하였다.
실시예 5:
실시예 1의 브로콜리 꽃 부분 50 g에 에틸아세테이트 250 ml를 첨가한 후 호모게나이저로 3분 동안 분쇄한 후 20 ℃에서 1 시간 교반하면서 추출하여 에틸아세테이트 층을 얻고, 상기 에틸아세테이트 층을 감압 농축 후 동결건조하여 설포라판 추출물 분말을 제조하였다.
실험예 6: 설포라판 함량 분석
실시예 3 내지 5의 브로콜리 분말 또는 설포라판 추출물 분말에 포함된 설포라판 함량을 실험예 1의 방법으로 분석하여 표 5에 나타내었다.
표 5
구분 실시예1 실시예3 실시예4 실시예5
함량(mg/고형분100g) 1,210 445 1,830 3,580
실험예 7:
각각의 신선한 브로콜리 꽃 부분을 고전압 펄스 전기장 처리장치의 물이 담긴 회분식 처리용기에 넣고 전기장, 주파수, 처리시간 및 처리횟수를 변경시키면서 브로콜리를 처리하였고, 이때의 설포라판 함량과 관능평가를 실시하였다.
관능평가는 숙련된 패널 20명을 대상으로 비교예 1의 신선한 브로콜리를 가장 좋은 9점으로 하고, 그에 대한 상대적인 점수를 9점 평점법으로 나타내었다.
브로콜리의 처리조건 및 설포라판 함량은 표 6에 나타내었다.
표 6
구분 전기장 (kV/cm) 주파수(Hz) 처리시간(초) 처리횟수(회) 설포라판(mg/100g) 관능평가(9점평가)
비교예1 - - - - 37.4 9
1-1 0.1 20 10 1 77.1 9
1-2 1.0 20 10 1 82.4 9
1-3 2.0 20 10 1 138.8 9
1-4 5.0 20 10 1 132.1 8
1-5 10.0 20 10 1 145.1 6
1-6 100.0 20 10 1 107.0 3
2-1 2.0 0.5 10 1 90.5 9
2-2 2.0 5 10 1 119.2 9
2-3 2.0 50 10 1 151.4 6
2-4 2.0 100 10 1 155.0 4
3-1 2.0 5 0.5 1 66.3 9
3-2 2.0 5 5 1 58.2 9
3-3 2.0 5 50 1 121.1 7
3-4 2.0 5 300 1 103.5 4
3-5 2.0 5 600 1 99.8 2
4-1 2.0 5 5 2 49.4 9
4-2 2.0 5 5 10 88.2 8
4-3 2.0 5 5 30 82.1 6
4-4 2.0 5 5 60 56.2 4
실험예 8:
각각의 신선한 브로콜리 꽃 부분을 고전압 펄스 전기장 처리장치에서 전기장 2 kV/cm, 주파수 5 Hz 및 처리시간 5 초의 처리조건에서 1회 처리하되, 액상매질의 종류를 에탄올 50 부피% 함유 수용액, 에탄올 20 중량% 함유 수용액, 0.5 중량% 소금물이 담긴 회분식 처리용기에 넣고 고전압 펄스 전기장 처리하였고, 이때의 설포라판 함량을 분석하여 표 7에 나타내었다.
표 7
구분 제조예3-2 에탄올50% 에탄올20% 0.5% 소금물
설포라판 함량(mg/100g) 58.2 32.2 42.1 65.5.
아래에 본 발명의 설포라판 함량이 증가된 브로콜리, 또는 그로부터 추출한 설포라판 추출물을 함유하는 식품 조성물의 제제예를 예시한다. 아래 제제예의 조성비는 수요계층, 수요국가, 사용용도 등 지역적, 민족적 기호도에 따라서 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.
제제예 1: 정제의 제조
실시예 3의 브로콜리 분말 10 mg
옥수수전분 100 mg
유당 100 mg
스테아린산 마그네슘 2 mg
상기의 성분들을 혼합한 후 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조한다.
제제예 2: 캅셀제의 제조
실험예 4의 설포라판 추출물 분말 10 mg
결정성 셀룰로오스 3 mg
락토오스 14.8 mg
마그네슘 스테아레이트 0.2 mg
통상의 캡슐제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조한다.
제제예 3: 분말 건강기능식품의 제조
실시예 3의 브로콜리 분말 1,000 mg
비타민 혼합물 적량
비타민 A 아세테이트 70 ㎍
비타민 E 1.0 mg
비타민 B1 0.13 mg
비타민 B2 0.15 mg
비타민 B6 0.5 mg
비타민 B12 0.2 ㎍
비타민 C 10 mg
비오틴 10 ㎍
니코틴산아미드 1.7 mg
엽산 50 ㎍
판토텐산 칼슘 0.5 mg
무기질 혼합물 적량
황산제1철 1.75 mg
산화아연 0.82 mg
탄산마그네슘 25.3 mg
제1인산칼륨 15 mg
제2인산칼슘 55 mg
구연산칼륨 90 mg
탄산칼슘 100 mg
염화마그네슘 24.8 mg
상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 건강기능식품에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 건강기능식품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조하고, 통상의 방법에 따라 건강기능식품 조성물 제조에 사용할 수 있다.
제제예 4: 음료의 제조
실시예 4의 설포라판 추출물 분말 1,000 mg
구연산 1,000 mg
올리고당 100 g
매실농축액 2 g
타우린 1 g
정제수를 가하여 전체 900 mL
통상의 건강음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1 시간 동안 85 ℃에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2 L 용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관한 다음 본 발명의 기능성 음료 조성물 제조에 사용한다.
아래에 본 발명의 설포라판 함량이 증가된 브로콜리, 또는 그로부터 추출한 설포라판 추출물을 함유하는 화장료 조성물의 제제예를 예시한다. 아래 제제예의 조성비는 수요계층, 수요국가, 사용용도 등 지역적, 민족적 기호도에 따라서 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.
제제예 5: 비누의 제조
실시예 4의 설포라판 추출물 분말 5 중량%
유지 75 중량%
수산화나트륨 5 중량%
향료 10 중량%
정제수 잔량
통상의 비누 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하여 비누를 제조한다.
제제예 6: 로션의 제조
실시예 4의 설포라판 추출물 분말 3 중량%
L-아스코르빈산-2-인산마그네슘염 1 중량%
수용성 콜라겐 (1% 수용액) 1 중량%
시트르산나트륨 0.1 중량%
시트르산 0.05 중량%
감초 엑기스 0.2 중량%
1,3-부틸렌글리콜 3 중량%
정제수 잔량
통상의 로션의 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하여 로션을 제조한다.
제제예 7: 크림의 제조
실시예 4의 설포라판 추출물 분말 3 중량%
폴리에틸렌글리콜모노스테아레이트 2 중량%
자기유화형 모노스테아르산글리세린 5 중량%
세틸알코올 4 중량%
스쿠알렌 6 중량%
트리2-에틸헥산글리세릴 6 중량%
스핑고당지질 1 중량%
1.3-부틸렌글리콜 7 중량%
정제수 잔량
통상의 크림의 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하여 크림을 제조한다.
제제예 8: 팩의 제조
실시예 3의 브로콜리 분말 2 중량%
폴리비닐알코올 13 중량%
L-아스코르빈산-2-인산마그네슘염 1 중량%
라우로일히드록시프롤린 1 중량%
수용성 콜라겐 (1% 수용액) 2 중량%
1,3-부틸렌글리콜 3 중량%
에탄올 5 중량%
정제수 잔량
통상의 팩 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하여 팩을 제조한다.
본 발명의 고전압 펄스 전기장 처리를 이용한 설포라판 함량이 증가된 브로콜리의 제조방법을 통하여, 브로콜리를 분쇄하지 않고 원물 또는 적당한 크기로 자른 절단물의 형태로 설포라판 함량이 증가된 브로콜리를 섭취할 수 있도록 하고, 또한 상기 설포라판 함량이 증가된 브로콜리를 재료로 설포라판을 추출할 수 있다. 상기 설포라판 함량이 증가된 브로콜리 및 그로부터 추출된 설포라판은 식품 조성물, 사료 조성물 또는 화장료 조성물의 항산화, 항염증, 항산화 등의 설포라판의 기능성을 발휘하기 위한 유효성분으로 활용될 수 있다.

Claims (13)

  1. 브로콜리를 액상 매질이 담긴 회분식 또는 연속식 처리 용기에 넣는 단계; 및 상기 액상 매질에 전기장 0.1 내지 200 kV/cm 및 주파수 1 내지 100 Hz에서 0.1초 내지 300초 동안 고전압 펄스 전기장 처리를 1 내지 100 회 수행하는 단계;를 포함하는 설포라판 함량이 증가된 브로콜리의 제조방법.
  2. 제 1 항에 있어서, 상기 고전압 펄스 전기장 처리는 0.2 내지 20 kV/cm에서 1 내지 50초 동안 수행하는 것을 특징으로 하는 설포라판 함량이 증가된 브로콜리의 제조방법.
  3. 제 1 항에 있어서, 상기 처리 용기에 넣는 단계의 브로콜리는 분쇄 또는 마쇄공정을 거치지 않은 원물 또는 그 절단물인 것을 특징으로 하는 설포라판 함량이 증가된 브로콜리의 제조방법.
  4. 제 1 항에 있어서, 상기 액상 매질은 물, 주정 또는 이들의 혼합액인 것을 특징으로 하는 설포라판 함량이 증가된 브로콜리의 제조방법.
  5. 제 1 항에 있어서, 상기 고전압 펄스 전기장 처리를 수행하는 단계 후에 건조 공정, 분쇄 공정, 건조 후 분쇄 공정 또는 분쇄 후 건조 공정을 거치는 것을 특징으로 하는 설포라판 함량이 증가된 브로콜리의 제조방법.
  6. 청구항 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항의 방법으로 제조되고, 상기 고전압 펄스 전기장 처리 전의 브로콜리에 비하여 설포라판 함량이 30 % 이상 증가된 것을 특징으로 하는 설포라판 함량이 증가된 브로콜리.
  7. 청구항 제6항의 설포라판 함량이 증가된 브로콜리를 포함하는 식품 조성물.
  8. 청구항 제6항의 설포라판 함량이 증가된 브로콜리를 포함하는 사료 조성물.
  9. 청구항 제6항의 설포라판 함량이 증가된 브로콜리를 포함하는 화장료 조성물.
  10. 청구항 제6항의 설포라판 함량이 증가된 브로콜리를 재료로 설포라판을 추출하는 것을 특징으로 하는 설포라판 추출물의 제조방법.
  11. 청구항 제10항의 방법으로 제조된 설포라판 추출물을 포함하는 식품 조성물.
  12. 청구항 제10항의 방법으로 제조된 설포라판 추출물을 포함하는 사료 조성물.
  13. 청구항 제10항의 방법으로 제조된 설포라판 추출물을 포함하는 화장료 조성물.
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