WO2015170516A1 - 有機酸の質量分析方法、分析カラムおよび分析装置 - Google Patents

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Definitions

  • the present invention relates to a mass spectrometric method using a column using a hydrophilic polymer having an anion exchange group as a filler in mass spectrometry of an organic acid by a liquid chromatograph mass spectrometer, an analytical column packed with the filler, and
  • the present invention relates to an analyzer.
  • Organic acids are added to foods as amino acids and saccharides as umami components, and for example, succinic acid and malic acid are used.
  • succinic acid and malic acid are used.
  • organic acids are also used as cleaning agents for electronic materials and the like, and the demand for analyzing the organic acids is increasing.
  • Patent Document 1 Japanese Patent Laid-Open No. 8-201365
  • Patent Document 1 a filler in which a cation exchange group is introduced into a styrene-divinylbenzene copolymer as a base material is used, and a donnan elimination effect between a stationary phase and a mobile phase is used. Can hold and separate the organic acid.
  • alkaline earth metal ions or transition metal ions have been added for the purpose of adjusting the retention.
  • the cation exchange group when ion exclusion chromatography is used in combination with a mass spectrometer, the cation exchange group has low chemical stability and is easily detached from the substrate. In particular, restrictions on the organic solvent concentration are required, which may be disadvantageous for high sensitivity of mass spectrometry.
  • ion chromatography is also known as a liquid chromatograph separation unit for organic acid analysis.
  • Patent Document 2 a column using a styrene-divinylbenzene copolymer, polyvinyl alcohol, polymethacrylate, or the like as a base material and packed with a filler into which an anion exchange group is introduced. Is used.
  • ion chromatography requires the addition of non-volatile substances such as sodium carbonate and sodium hydroxide to the mobile phase, when ion chromatography is used in combination with a mass spectrometer, these non-volatile substances are ionized. Mass spectrometry may be adversely affected by efficiency reduction or clogging due to salt precipitation of the ion source.
  • Patent Document 3 discloses a packing material for ion chromatography in which a quaternary ammonium base is introduced into a base material made of polyvinyl alcohol resin. It is not suggested to be applied as a separation part of the liquid chromatograph mass spectrometer.
  • the present invention has been made in view of such a situation, and it is not necessary to add a non-volatile substance to the mobile phase in the separation part of the mass analysis of the organic acid by the liquid chromatograph mass spectrometer, and the water-soluble organic solvent ratio is free.
  • An object of the present invention is to provide a mass spectrometric method and an analytical column that are high in degree, can hold and separate / elute an organic acid, and as a result can detect the organic acid with high sensitivity.
  • the present inventors used a hydrophilic polymer having an anion exchange group as a filler in a separation part of organic acid mass spectrometry using a liquid chromatograph mass spectrometer. It was found that this can be solved by using this as the stationary phase and using a water-soluble organic solvent-water mixed solution as the mobile phase. Furthermore, the separation mode in liquid chromatography is a mixed mode that combines hydrophilic interaction chromatography and ion exchange chromatography. By holding and separating various organic acids with a mobile phase containing a water-soluble organic solvent, The present inventors have found that an organic acid can be detected with high sensitivity in the analysis section, and have completed the present invention.
  • hydrophilic interaction chromatography is a separation mode that uses the difference in affinity between the packing material and the sample
  • ion exchange chromatography is a separation mode that uses the difference in ion exchange properties between the packing material and the sample.
  • the preferable separation mode in the present application is a mixed mode in which the interaction due to affinity and the interaction due to ion exchange are simultaneously utilized.
  • the present invention relates to the following matters.
  • the anion exchange group of the hydrophilic polymer having an anion exchange group is a quaternary ammonium group, and the content of the quaternary ammonium group is 0.01 to 0.00 with respect to 1 g of the hydrophilic polymer.
  • [5] The method for mass spectrometry of organic acids according to [1] to [4], wherein the water-soluble organic solvent is at least one selected from the group consisting of acetonitrile, methanol, ethanol, isopropanol, acetone, methyl ethyl ketone, and tetrahydrofuran.
  • the separation mode in the liquid chromatography is a mixed mode in which hydrophilic interaction chromatography and ion exchange chromatography are combined, and an organic acid is detected by a mass spectrometer, [1]-[ [5] The method for mass spectrometry of organic acids in [5].
  • a liquid chromatography column for organic acid analysis in which a hydrophilic polymer having an anion exchange group is packed in a liquid chromatography housing made of polyetheretherketone (PEEK) resin.
  • PEEK polyetheretherketone
  • the organic acid mass spectrometry method of the present invention is excellent in holding and separating various organic acids by combining a specific hydrophilic polymer packed column and a mobile phase, and can be detected with high sensitivity in the mass spectrometer. Therefore, it is useful in a wide range of fields such as food, cosmetics, environment, agriculture, medicine, and industrial materials, and is particularly suitable as a method for analyzing umami components such as succinic acid and malic acid in the food field.
  • FIG. 2 is a mass chromatogram obtained by liquid chromatography-mass spectrometry of the organic acid of Example 1.
  • FIG. 2 is a mass chromatogram obtained by liquid chromatography-mass spectrometry of organic acid in Example 2.
  • FIG. It is the mass chromatogram obtained by the liquid chromatography-mass spectrometry of the organic acid of the comparative example.
  • One embodiment of the present invention is a method for mass spectrometry of an organic acid using a liquid chromatograph mass spectrometer, wherein a column having a hydrophilic polymer having an anion exchange group as a filler is used, and a water-soluble organic solvent-water is used as a mobile phase.
  • This is a method for analyzing an organic acid with high sensitivity, using a mixed solution, and preferably separating and eluting the organic acid while sufficiently retaining the organic acid by a mixed mode of hydrophilic interaction chromatography and ion exchange chromatography.
  • an organic acid is an organic compound having acid properties, and includes carboxylic acid, sulfonic acid, and phenols.
  • carboxylic acid is preferable.
  • organic acids that can be analyzed in the present invention include aliphatic carboxylic acids, aromatic carboxylic acids, hydroxycarboxylic acids, haloacetic acids, and the like.
  • Specific examples of the aliphatic carboxylic acid include fumaric acid, maleic acid, malonic acid, succinic acid and the like.
  • Specific examples of the aromatic carboxylic acid include benzoic acid, phthalic acid, isophthalic acid, terephthalic acid, salicylic acid and the like.
  • hydroxycarboxylic acid examples include aliphatic hydroxycarboxylic acids such as lactic acid, glycolic acid, malic acid, and tartaric acid.
  • haloacetic acid examples include monochloroacetic acid, dichloroacetic acid, trichloroacetic acid and the like.
  • the method of the present invention is preferably a mass of an aliphatic carboxylic acid such as lactic acid, glycolic acid, fumaric acid, maleic acid, malonic acid, succinic acid, malic acid and tartaric acid, and a carboxyl group-containing compound such as aliphatic hydroxycarboxylic acid.
  • an aliphatic carboxylic acid such as lactic acid, glycolic acid, fumaric acid, maleic acid, malonic acid, succinic acid, malic acid and tartaric acid
  • a carboxyl group-containing compound such as aliphatic hydroxycarboxylic acid.
  • the present invention is a method for separating and detecting various organic acids by liquid chromatography, and then mass-separating ions generated by an ion source of a mass spectrometer using a mass-to-charge ratio. It can be used as a high-sensitivity analysis method in various fields such as the environment, agriculture, medical care, and industrial materials.
  • the ion source corresponds to the electrospray ionization method, the atmospheric pressure chemical ionization method, and the like
  • the mass separation unit includes a quadrupole type, an ion trap type, and a time-of-flight type.
  • the types of the ion source and the mass separation unit can be used without particular limitation.
  • the electrospray ionization method is suitable for ionization of organic acids, and in order to perform measurement with higher sensitivity, the water-soluble organic solvent ratio (described later) of the mobile phase is increased, and the flow rate is 0.1 to 1 It is preferable to use in the range of 0.0 ml / min.
  • the hydrophilic polymer having an anion exchange group used as a filler in the present invention is based on a hydrophilic polymer such as polyvinyl alcohol or polyhydroxy methacrylate, and preferably based on polyvinyl alcohol.
  • an anion exchange group such as a quaternary ammonium group directly or via a spacer such as epichlorohydrin, 1,4-butanediol diglycidyl ether, ethylene glycol diglycidyl ether, or glycerin diglycidyl ether.
  • 0.01 to 0.1 meq preferably 0.01 to 0.07 meq, more preferably 0.01 to 0.05 meq is introduced per gram of polymer. If the amount of anion exchange groups is less than 0.01 meq, the ion exchange action may be reduced, and if it exceeds 0.1 meq, the ion exchange action becomes too strong and the organic acid may be adsorbed on the column.
  • the hydrophilic polymer having an anion exchange group can be prepared, for example, according to the method described in JP-A-2006-242944 (Patent Document 3).
  • the spacer refers to a chemical bonding site used for adjusting the distance between the base material and an anion exchange group such as a quaternary ammonium group.
  • the spacer is used to give a function of suppressing interference between ions and the substrate and peak diffusion.
  • the spacer is preferably a divalent organic residue having an ether bond at both ends, and examples thereof include those described above.
  • Examples of the quaternary ammonium group include a trimethylammonium group, a triethylammonium group, an N, N-dimethylallylammonium group, and an N, N-dimethylbenzylammonium group.
  • the material, size, and shape are not particularly limited.
  • the shape is preferably a sphere having a volume average particle diameter of 1 to 30 ⁇ m, and more preferably a sphere having a volume of 3 to 10 ⁇ m. Further, it preferably has a strength that can withstand a pressure of 1 to 30 MPa. The volume average particle diameter is measured with a Coulter counter.
  • a water-soluble organic solvent-water mixed solution that is, a mixture of water and an organic solvent can be used.
  • the water-soluble organic solvent in the present application is not particularly limited as long as it is an organic solvent compatible with water, and examples thereof include an organic solvent having 1 to 5 carbon atoms compatible with water.
  • the organic solvent having 1 to 5 carbon atoms means that the solvent molecule has 1 to 5 carbon atoms.
  • the solvent include alcohols such as methanol, ethanol and propanol, ethers such as tetrahydrofuran, nitriles such as acetonitrile, ketones such as acetone, amides such as dimethylformamide, and sulfoxides such as dimethyl sulfoxide.
  • a solvent selected from the group consisting of: These low molecular weight solvents may be used alone or as a mixed solvent of two or more.
  • Preferred water-soluble organic solvents include nitriles such as acetonitrile, alcohols such as methanol, ethanol and isopropyl alcohol, ethers such as tetrahydrofuran, and ketones such as acetone and methyl ethyl ketone.
  • Water and the water-soluble organic solvent can be mixed at an arbitrary ratio.
  • the blending ratio of the water-soluble organic solvent is preferably 50 to 95% by volume, and 55 to 95% by volume of the entire mixed solution in order to improve the holding power by hydrophilic interaction and increase the sensitivity in the mass spectrometer. Is more preferable, and 60 to 90% by volume is most preferable.
  • the ratio of the water-soluble organic solvent is lower than 50% by volume, the hydrophilic interaction may be reduced, and when it is higher than 95% by volume, the organic acid may be adsorbed in the column.
  • a volatile substance such as ammonium formate and ammonium acetate can be added to the mobile phase at an arbitrary ratio. For example, 1 to 100 mmol can be added to 1 L of the mixed solution. It is possible to adjust the holding time by adding these.
  • the column for liquid chromatography analysis of organic acid according to the present invention is packed with a hydrophilic polymer having an anion exchange group.
  • the material of the column housing is preferably made of polyetheretherketone (PEEK) resin in order to sufficiently suppress the adsorption of the organic acid by the metal.
  • the housing size there is no particular limitation on the housing size. However, it is preferable that the inner diameter is 1.0 to 4.6 mm and the length is 100 to 250 mm in order to limit the flow rate of the mass spectrometer and perform analysis with higher separation and higher sensitivity.
  • the analyzer according to the present invention comprises a liquid chromatography column having a mobile phase using a filler containing a hydrophilic polymer having an anion exchange group as described above, a mixed solution of a water-soluble organic solvent and water, and Includes a mass spectrometer.
  • Example 1 As a liquid chromatograph mass spectrometer, LCMS-8030 (manufactured by Shimadzu Corporation) having an electrospray ionization method as an ion source and a quadrupole type as a mass separation unit was used.
  • the column was loaded with a Shodex Rpak JJ-50 2D (inner diameter 2) packed with a polyvinyl alcohol resin (particle size 5 ⁇ m) introduced so that the quaternary ammonium group was 0.03 meq / g (polymer) as an anion exchange group. 0.0 mm, length 150 mm, and the housing material was polyetheretherketone resin), and the column temperature was 30 ° C.
  • a liquid mixture with a volume ratio of 100 mmol / L ammonium formate aqueous solution / acetonitrile of 30/70 was passed at 0.2 ml / min, and water / acetonitrile volume ratio of 50/50 was mixed with lactic acid. Then, 5 ⁇ L of a liquid substance added with 5 ⁇ g / ml of glycolic acid, malonic acid, succinic acid, and malic acid was injected into the above liquid chromatography-mass spectrometer. The obtained mass chromatogram is shown in FIG. All five organic acids were well separated.
  • Example 2 Five organic acids, lactic acid, glycolic acid, malonic acid, succinic acid, and malic acid were analyzed under the same conditions as in Example 1 except that stainless steel was used as the housing material instead of the polyether ether ketone resin. . The obtained mass chromatogram is shown in FIG. All of the five types of organic acids were well separated, but the peak shape was affected by adsorption to stainless steel as compared with Example 1.
  • 1 is a peak of lactic acid
  • 2 is a peak of glycolic acid
  • 3 is a peak of malonic acid
  • 4 is a peak of succinic acid
  • 5 is a peak of malic acid. Since the separation method is different between the example and the comparative example, the elution order is different.

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Abstract

［課題］移動相に不揮発物質を添加することなく、水溶性有機溶媒比率の制限も受けずに、有機酸を、保持かつ分離・溶出させ、高感度に検出することができる液体クロマトグラフ質量分析装置による質量分析方法および分析カラムを提供する。 ［解決手段］液体クロマトグラフ質量分析装置による有機酸の質量分析において、陰イオン交換基を有する親水性ポリマー充填カラムを用いて、移動相に水溶性有機溶媒-水混合溶液を用いる有機酸の質量分析方法。陰イオン交換基を有する親水性ポリマーをポリエーテルエーテルケトン（ＰＥＥＫ）樹脂製の液体クロマトグラフィー用ハウジングに充填した有機酸の液体クロマトグラフィー用カラム。

Description

有機酸の質量分析方法、分析カラムおよび分析装置
　本発明は、液体クロマトグラフ質量分析装置による有機酸の質量分析において、陰イオン交換基を有する親水性ポリマーを充填剤としたカラムを用いた質量分析方法、前記充填剤を充填した分析カラム、および分析装置に関する。
　有機酸は、うまみ成分としてアミノ酸、糖類などとともに食品中に添加されており、例えばコハク酸やリンゴ酸などが用いられている。また、有機酸は近年では電子材料などの洗浄剤としても使用されており、その有機酸を分析する需要は高まっている。
　有機酸の分析装置としては、従来から液体クロマトグラフが用いられてきたが、より高感度で、かつ同定能力の高い質量分析方法の出現が望まれている。
　有機酸の分析のための液体クロマトグラフの分離部には、従来からイオン排除クロマトグラフィーが広く使用されている。たとえば、特開平８－２０１３６５号公報（特許文献１）では、基材であるスチレン-ジビニルベンゼン共重合体に陽イオン交換基を導入した充填剤が用いられ、固定相-移動相間におけるドナン排除効果により有機酸を保持および分離させることができる。このようなイオン排除クロマトグラフィーを用いる方法においては、保持の調整のためアルカリ土類金属イオンまたは遷移金属イオンを添加することも行われてきた。
　しかし、イオン排除クロマトグラフィーを質量分析装置と組み合わせて使用する場合には、陽イオン交換基は化学的安定性が低く、基材から脱離しやすいため、脱離を防止するために移動相には特に有機溶媒濃度に制約が必要とされ、質量分析の高感度化に不利となることがある。また、複数の有機酸成分が含まれる試料での有機酸の分離が困難なこと、添加されるアルカリ土類金属イオンまたは遷移金属イオンの濃度調整が容易でないこと、またアルカリ土類金属イオンまたは遷移金属イオンの添加は質量分析に不適なこと、さらには試料中に含まれる夾雑物が有機酸と分離されず、質量分析装置による検出ではその夾雑物のイオン化抑制効果により感度が低下しやすいという問題がある。
　また、有機酸の分析のための液体クロマトグラフの分離部として、イオンクロマトグラフィーも知られている。例えば特開２００９－１９２２４１号公報（特許文献２）では、スチレン-ジビニルベンゼン共重合体、ポリビニルアルコール、ポリメタクリレートなどを基材として用い、そこに陰イオン交換基を導入した充填剤を充填したカラムが用いられている。しかし、イオンクロマトグラフィーでは移動相に炭酸ナトリウム、水酸化ナトリウム等の不揮発物質を添加しなければならないために、イオンクロマトグラフィーを質量分析装置と組み合わせて使用する場合には、それらの不揮発物質がイオン化効率低下やイオン源の塩析出による詰まりにより質量分析に悪影響を及ぼす場合がある。
　カラムの下流にサプレッサーを配置すれば、不揮発物質は炭酸や水などの揮発性物質に変換されるが、装置として複雑となるほか、高価な消耗部品であるサプレッサーを定期的に交換しなければならない問題があった。また、エレクトロスプレーイオン化法による質量分析の場合、高感度化には一般的に有機溶媒比率の高い移動相が必要とされるため、質量分析する直前で有機溶媒を添加しなければならない煩雑さがあった。
　また、特開２００６－２４２９４４（特許文献３）には、ポリビニルアルコール系樹脂からなる基材に四級アンモニウム塩基を導入したイオンクロマトグラフィー用充填剤が開示されているが、有機酸の分析のための液体クロマトグラフ質量分析装置の分離部として適用することは示唆されていない。
特開平８－２０１３６５号公報 特開２００９－１９２２４１号公報 特開２００６－２４２９４４号公報
　本発明はかかる状況に鑑みてなされたものであり、液体クロマトグラフ質量分析装置による有機酸の質量分析の分離部において、移動相に不揮発物質を添加する必要がなく、水溶性有機溶媒比率の自由度が高く、有機酸を保持かつ分離・溶出させることができ、その結果高感度に有機酸を検出することができる質量分析方法および分析カラムを提供することを目的とする。
　本発明者らは、上記課題を解決すべく鋭意研究を重ねた結果、液体クロマトグラフ質量分析装置による有機酸の質量分析の分離部において、陰イオン交換基を有する親水性ポリマーを充填剤に用いてこれを固定相とし、移動相に水溶性有機溶媒－水混合溶液を用いることで解決できることを見出した。さらには、液体クロマトグラフィーにおける分離モードを、親水性相互作用クロマトグラフィーおよびイオン交換クロマトグラフィーを組み合わせたミックスモードとして、水溶性有機溶媒を含む移動相により各種有機酸を保持および分離させることにより、質量分析部において高感度で有機酸を検出できることを見出し、本発明を完成するに至った。
　ここで、親水性相互作用クロマトグラフィーとは充填剤とサンプルとの親和力の差を利用した分離モードであり、イオン交換クロマトグラフィーとは充填剤とサンプルとのイオン交換性の差を利用した分離モードであり、本願においての好ましい分離モードは、親和力による相互作用とイオン交換性による相互作用を同時に利用したミックスモードである。
　すなわち本発明は次の事項に関する。
[1]液体クロマトグラフ質量分析装置を用いた、液体クロマトグラフィーおよび質量分析による有機酸の質量分析において、陰イオン交換基を有する親水性ポリマーを充填剤としたカラムを用いて、移動相に水溶性有機溶媒-水混合溶液を用いる有機酸の質量分析方法。
[2]前記陰イオン交換基を有する親水性ポリマーの基材がポリビニルアルコールである[1]の有機酸の質量分析方法。
[3]前記陰イオン交換基を有する親水性ポリマーの陰イオン交換基が第４級アンモニウム基であり、第４級アンモニウム基の含有量が前記親水性ポリマー１ｇに対して０．０１～０．１ｍｅｑである、[1]または[2]の有機酸の質量分析方法。
[4]前記水溶性有機溶媒-水混合溶液が水溶性有機溶媒を体積比で５０～９５％含む溶液である、[1]～[3]の有機酸の質量分析方法。
[5]前記水溶性有機溶媒がアセトニトリル、メタノール、エタノール、イソプロパノール、アセトン、メチルエチルケトンおよびテトラヒドロフランからなる群から選ばれた少なくとも1種である、[1]～[4]の有機酸の質量分析方法。
[6]前記液体クロマトグラフィーにおける分離モードが親水性相互作用クロマトグラフィーおよびイオン交換クロマトグラフィーを組み合わせたミックスモードであり、質量分析装置により有機酸を検出することを特徴とする、[1]～[5]の有機酸の質量分析方法。
[7]陰イオン交換基を有する親水性ポリマーを、ポリエーテルエーテルケトン（ＰＥＥＫ）樹脂製の液体クロマトグラフィー用ハウジングに充填した、有機酸分析用の液体クロマトグラフィー用カラム。
[8]陰イオン交換基を有する親水性ポリマーを含む充填剤および水溶性有機溶媒と水との混合溶液を用いた移動相を備えた液体クロマトグラフィー用カラム、並びに質量分析装置を含む分析装置。
　本発明の有機酸の質量分析方法は、特定の親水性ポリマー充填カラムおよび移動相を組み合わせることで、各種有機酸を保持、分離させることに優れており、質量分析部において高感度に検出することができるため、食品、化粧品、環境、農業、医療、工業材料等の幅広い分野に有用であり、特に食品分野においてはコハク酸、リンゴ酸などのうまみ成分の分析法として好適である。
実施例１の有機酸の液体クロマトグラフィー-質量分析法により得られたマスクロマトグラムである。 実施例２の有機酸の液体クロマトグラフィー-質量分析法により得られたマスクロマトグラムである。 比較例の有機酸の液体クロマトグラフィー-質量分析法により得られたマスクロマトグラムである。
　以下、本発明をさらに詳細に説明する。
　本発明の一態様は、液体クロマトグラフ質量分析装置による有機酸の質量分析方法において、陰イオン交換基を有する親水性ポリマーを充填剤としたカラムを用い、かつ移動相に水溶性有機溶媒－水混合溶液を用い、好ましくは親水性相互作用クロマトグラフィーおよびイオン交換クロマトグラフィーのミックスモードにより有機酸を十分に保持させて分離、溶出させる、高感度に有機酸を分析する方法である。
　本願において有機酸とは、酸の性質をもつ有機化合物であり、カルボン酸、スルホン酸、フェノール類を含む。本願発明の対象となる有機酸としては、カルボン酸が好ましい。
　本発明で分析できる有機酸の例示としては、脂肪族カルボン酸、芳香族カルボン酸、ヒドロキシカルボン酸、ハロ酢酸などが含まれる。脂肪族カルボン酸の具体例としては、フマル酸、マレイン酸、マロン酸、コハク酸などが挙げられる。芳香族カルボン酸の具体例としては、安息香酸、フタル酸、イソフタル酸、テレフタル酸、サリチル酸などが挙げられる。またヒドロキシカルボン酸の具体例としては、乳酸、グリコール酸、リンゴ酸、酒石酸などの脂肪族ヒドロキシカルボン酸が挙げられる。ハロ酢酸の具体例としては、モノクロロ酢酸、ジクロロ酢酸、トリクロロ酢酸などが挙げられる。
　本願発明の方法は、好ましくは、乳酸、グリコール酸、フマル酸、マレイン酸、マロン酸、コハク酸、リンゴ酸、酒石酸などの脂肪族カルボン酸および脂肪族ヒドロキシカルボン酸などのカルボキシル基含有化合物の質量分析に用いることができる。本発明は各種有機酸を液体クロマトグラフィーにて分離させた後、質量分析装置のイオン源で生成したイオンを質量分離部で質量電荷比により質量分離させて検出する方法であり、食品、化粧品、環境、農業、医療、工業材料等などの様々な分野において高感度分析法として用いることができる。
　このうち、イオン源にはエレクトロスプレーイオン化法、大気圧化学イオン化法などに対応したものが、質量分離部には四重極型、イオントラップ型、飛行時間型などがある。
　本発明における有機酸分析においてはイオン源、質量分離部の種類は特に制限なく使用することができる。有機酸のイオン化にはエレクトロスプレーイオン化法が適しており、より高感度にて測定を行うためには移動相の水溶性有機溶媒比率（後述）を高くすること、および流量を０．１～１．０ｍｌ／ｍｉｎの範囲で使用することが好ましい。
　本発明で充填剤に用いる陰イオン交換基を有する親水性ポリマーとは、例えばポリビニルアルコール、ポリヒドロキシメタクリレート等の親水性を有するポリマーを基材とし、好ましくは、ポリビニルアルコールを基材とするものであり、この基材に、直接またはエピクロルヒドリン、１，４－ブタンジオールジグリシジルエーテル、エチレングリコールジグリシジルエーテル、グリセリンジグリシジルエーテルなどのスペーサーを介して、第４級アンモニウム基等の陰イオン交換基をポリマー１ｇあたり例えば０．０１～０．１ｍｅｑ、好ましくは０．０１～０．０７ｍｅｑ、さらに好ましくは０．０１～０．０５ｍｅｑ導入したものを挙げることができる。陰イオン交換基量が０．０１ｍｅｑより少ないとイオン交換作用が低下することがあり、０．１ｍｅｑより多いとイオン交換作用が強くなりすぎて有機酸がカラムに吸着される可能性がある。
　この陰イオン交換基を有する親水性ポリマーは、例えば特開２００６－２４２９４４号（特許文献３）に記載の方法にしたがって調製することができる。
　本発明において、スペーサーは、基材と第４級アンモニウム基等の陰イオン交換基との距離を調整するために用いられる化学結合部位をいう。スペーサーは、イオンと基材との干渉及びピーク拡散を抑える機能を付与するために用いられる。基材が水酸基を有する物質の場合、スペーサーとしては両末端にエーテル結合を有する２価の有機残基が好ましく、前記のものが挙げられる。
　第４級アンモニウム基としては、トリメチルアンモニウム基、トリエチルアンモニウム基、Ｎ，Ｎ－ジメチルアリルアンモニウム基、Ｎ，Ｎ－ジメチルベンジルアンモニウム基などが挙げられる。
　本発明の充填剤において、材質、大きさ、形状に特に制限はない。ただし、十分な分離性能および高感度を得るためにその形状は体積平均粒径が１～３０μｍの球状が好ましく、３～１０μｍの球状がさらに好ましい。また、１～３０ＭＰａの圧力に耐えうる強度を有することが好ましい。前記の体積平均粒径は、コールターカウンターで測定される。
　本発明による有機酸の質量分析方法で用いる移動相は、水溶性有機溶媒－水混合溶液、つまり水および有機溶媒を混合したものを用いることができる。
　本願における水溶性有機溶媒とは、水と相溶性を有する有機溶媒であれば特に限定されないが、例えば、水と相溶性を有する炭素数１～５の有機溶媒などが挙げられる。炭素数１～５の有機溶媒とは、溶媒分子中の炭素数が１～５であることを意味する。
 該溶媒として、例えば、メタノール、エタノール、プロパノール等のアルコール系、あるいはテトラヒドロフラン等のエーテル系、あるいはアセトニトリル等のニトリル系、アセトン等のケトン系、ジメチルホルムアミド等のアミド系、ジメチルスルホキシド等のスルホキシド系からなる群から選択される溶媒が挙げられる。これら低分子量溶媒は、１種で用いてもよく、２種以上の混合溶媒として用いてもよい。
　好ましい水溶性有機溶媒としては、アセトニトリル等のニトリル類、メタノール、エタノール、イソプロピルアルコール等のアルコール類、テトラヒドロフラン等のエーテル類、アセトン、メチルエチルケトンなどのケトン類を用いることができる。水と水溶性有機溶媒とは任意の比率で混合することができる。ただし、親水性相互作用による保持力向上、および質量分析装置での高感度化を図るために水溶性有機溶媒の配合比率は、混合溶液全体の５０～９５体積％が好ましく、５５～９５体積％がさらに好ましく、６０～９０体積％が最も好ましい。水溶性有機溶媒の比率が５０体積％より低くなると親水性相互作用が低下する場合があり、９５体積％より高いと有機酸がカラム内で吸着してしまう場合がある。
　また移動相には任意の割合でギ酸アンモニウム、酢酸アンモニウムなどの揮発性を有する物質を添加することができ、例えば、混合溶液１Lに対して、１～１００ｍｍｏｌを添加することができる。
　これらを添加することで保持時間を調整することが可能となる。
　本発明による有機酸の液体クロマトグラフィー分析用カラムは、陰イオン交換基を有する親水性ポリマーが充填されたものである。カラムハウジングの材質は金属による有機酸の吸着を十分抑制するためにポリエーテルエーテルケトン（ＰＥＥＫ）樹脂製が望ましい。
　ハウジングサイズには特に制限はない。ただし、質量分析装置の流量制限およびより高分離、高感度に分析を行うために内径は１．０～４．６ｍｍ、長さは１００～２５０ｍｍとすることが好ましい。
　本発明による分析装置は、以上のような陰イオン交換基を有する親水性ポリマーを含む充填剤および水溶性有機溶媒と水との混合溶液を用いた移動相を備えた液体クロマトグラフィー用カラム、並びに質量分析装置を含む。
　以下、本発明を実施例によりさらに詳細に説明するが、本発明はこれら実施例により何ら制限されるものではない。
　（実施例１）
　液体クロマトグラフ質量分析装置として、イオン源にエレクトロスプレーイオン化法、質量分離部に四重極型を有する、ＬＣＭＳ－８０３０（（株）島津製作所製）を用いた。
　分離モードは、親水性相互作用クロマトグラフィーとイオン交換クロマトグラフィーを組み合わせたミックスモードにより各種有機酸の分析を実施した。検出モードには選択イオンモニタリングを用い、各有機酸のプロトン脱離分子を検出した。
　カラムには、陰イオン交換基として第４級アンモニウム基が０．０３ｍｅｑ／ｇ（ポリマー）となるように導入されたポリビニルアルコール樹脂（粒子径５μｍ）を充填したＳｈｏｄｅｘ ＲＳｐａｋ　ＪＪ－５０ ２Ｄ（内径２．０ｍｍ、長さ１５０ｍｍ、ハウジング素材はポリエーテルエーテルケトン樹脂）を用い、カラム温度３０℃とした。
　移動相として１００ｍｍｏｌ／Ｌギ酸アンモニウム水溶液／アセトニトリルの体積比が３０／７０となる混合液を０．２ｍｌ／ｍｉｎで通液し、水／アセトニトリルの体積比が５０／５０となる混合液に、乳酸、グリコール酸、マロン酸、コハク酸、リンゴ酸をそれぞれ５μｇ／ｍｌを添加した液状物を５μＬ、上記の液体クロマトグラフィー-質量分析計に注入した。得られたマスクロマトグラムを図１に示す。５種類の有機酸はいずれも良好に分離された。
（実施例２）
　ハウジング素材としてポリエーテルエーテルケトン樹脂の代わりにステンレスを用いた以外は、実施例１と同様の条件にて、乳酸、グリコール酸、マロン酸、コハク酸、リンゴ酸の５種類の有機酸を分析した。得られたマスクロマトグラムを図２に示す。５種類の有機酸はいずれも良好に分離されたがピーク形状は実施例１と比べてステンレスへの吸着による影響が認められた。
（比較例）
　実施例で用いた液体クロマトグラフ質量分析装置を用いてイオン排除クロマトグラフィーを分離モードとして各種有機酸の分析を実施した。検出モードには選択イオンモニタリングを用い、各有機酸のプロトン脱離分子を検出した。カラムには陽イオン交換基としてスルホ基を導入したスチレン-ジビニルベンゼン共重合体樹脂（粒子径６μｍ）を充填した有機酸分析用カラムＳｈｏｄｅｘ　ＲＳｐａｋ　ＫＣ－８１１（内径８．０ｍｍ、長さ３００ｍｍ、ハウジング素材はステンレス）（昭和電工（株）製）を用い、カラム温度４０℃とした。
　移動相として水／ギ酸を体積比１００／０．１で混合した水溶液を０．８ｍｌ／ｍｉｎで通液し、乳酸、グリコール酸、マロン酸、コハク酸、リンゴ酸をそれぞれ５μｇ／ｍｌ含む水溶液を５μＬ上記の液体クロマトグラフィー-質量分析計に注入した。質量分析装置にて得られたクロマトグラムを図３に示す。実施例よりもコハク酸、グリコール酸、乳酸の分離が不十分であり、かつシグナル／ノイズ比つまり検出感度が低くなっている結果が認められた。
　図１～３中、１は乳酸のピーク、２はグリコール酸のピーク、３はマロン酸のピーク、４はコハク酸のピーク、５はリンゴ酸のピークをいずれも示す。実施例と比較例では分離の方法が異なるため溶出順番が異なる。
１　乳酸のピーク
２　グリコール酸のピーク
３　マロン酸のピーク
４　コハク酸のピーク
５　リンゴ酸のピーク

Claims (8)

  1. 　液体クロマトグラフ質量分析装置を用いた、液体クロマトグラフィーおよび質量分析による有機酸の質量分析において、陰イオン交換基を有する親水性ポリマーを充填剤としたカラムを用いて、移動相に水溶性有機溶媒-水混合溶液を用いる有機酸の質量分析方法。
  2. 　前記陰イオン交換基を有する親水性ポリマーの基材がポリビニルアルコールである請求項１に記載の有機酸の質量分析方法。
  3. 　前記陰イオン交換基を有する親水性ポリマーの陰イオン交換基が第４級アンモニウム基であり、第４級アンモニウム基の含有量が前記親水性ポリマー１ｇに対して０．０１～０．１ｍｅｑである、請求項１または２に記載の有機酸の質量分析方法。
  4. 　前記水溶性有機溶媒-水混合溶液が水溶性有機溶媒を体積比で５０～９５％含む溶液である、請求項１～３のいずれか1項に記載の有機酸の質量分析方法。
  5. 　前記水溶性有機溶媒がアセトニトリル、メタノール、エタノール、イソプロパノール、アセトン、メチルエチルケトンおよびテトラヒドロフランからなる群から選ばれた少なくとも1種である、請求項１～４のいずれか1項に記載の有機酸の質量分析方法。
  6. 　前記液体クロマトグラフィーにおける分離モードが親水性相互作用クロマトグラフィーおよびイオン交換クロマトグラフィーを組み合わせたミックスモードであり、質量分析装置により有機酸を検出することを特徴とする、請求項１～５のいずれか1項に記載の有機酸の質量分析方法。
  7. 　陰イオン交換基を有する親水性ポリマーを、ポリエーテルエーテルケトン（ＰＥＥＫ）樹脂製の液体クロマトグラフィー用ハウジングに充填した、有機酸分析用の液体クロマトグラフィー用カラム。
  8. 　陰イオン交換基を有する親水性ポリマーを含む充填剤および水溶性有機溶媒と水との混合溶液を用いた移動相を備えた液体クロマトグラフィー用カラム、並びに質量分析装置を含む分析装置。
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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110133124A (zh) * 2019-04-29 2019-08-16 天津中医药大学 疏血通注射液中18种氨基酸的含量测定方法
CN110967432A (zh) * 2019-12-25 2020-04-07 江南大学 一种测定根系分泌物中有机酸含量的方法
KR20210057927A (ko) * 2019-11-13 2021-05-24 주식회사 엘지화학 고분자 내 잔류 유기산의 함량 분석을 위한 방법 및 시스템

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP6706497B2 (ja) * 2015-12-24 2020-06-10 昭和電工株式会社 親水性化合物の分離分析方法
EP3444607A1 (en) 2017-08-17 2019-02-20 BP Exploration Operating Company Limited Quantitative method for determining the organic acid content of crude oil
CN110632243B (zh) * 2019-10-23 2021-10-12 中国日用化学研究院有限公司 一种同时测定醇醚羧酸盐中羟基乙酸、一氯乙酸和二氯乙酸含量的方法
CN111841515B (zh) * 2020-07-21 2023-03-28 镇江海关综合技术中心 作为富水色谱固定相的离子液体桥联杂化氧化硅及其制备方法与应用
CN112326839B (zh) * 2020-11-16 2022-08-02 山东华熙海御生物医药有限公司 一种乳酸残留量的检测方法
CN114778735B (zh) * 2022-04-24 2024-04-02 四川汇宇制药股份有限公司 氯乙酸或其盐与有关物质的分离检测方法
CN114994194B (zh) * 2022-05-09 2024-04-09 广东安纳检测技术有限公司 一种水质中丙二酸的测定方法及装置

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2001040032A (ja) * 1999-05-27 2001-02-13 Showa Denko Kk 耐アルカリ性高強度陰イオン交換体及びその製造方法
JP2004125453A (ja) * 2002-09-30 2004-04-22 Shimadzu Corp 有機酸分析方法
JP2008096258A (ja) * 2006-10-11 2008-04-24 Showa Denko Kk イオンクロマトグラフィーを用いた陰イオンの同時分析方法

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1160260B1 (en) * 2000-05-29 2011-04-13 Showa Denko K.K. Porous polymer particle, anion exchanger, producing method thereof, column for ion chromatography, and method for measuring anions
TW200639190A (en) * 2005-02-04 2006-11-16 Showa Denko Kk Packing material for ion chromatography
US20140179018A1 (en) * 2011-08-12 2014-06-26 Shimadzu Corporation Method for analyzing halogen oxoacids

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2001040032A (ja) * 1999-05-27 2001-02-13 Showa Denko Kk 耐アルカリ性高強度陰イオン交換体及びその製造方法
JP2004125453A (ja) * 2002-09-30 2004-04-22 Shimadzu Corp 有機酸分析方法
JP2008096258A (ja) * 2006-10-11 2008-04-24 Showa Denko Kk イオンクロマトグラフィーを用いた陰イオンの同時分析方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
JUNJI SASUGA ET AL.: "Multi-mode Column Shodex RSpak JJ-50 2D o Mochiita LC/MS ni yoru Haloacetic Acid Oyobi Kaensosan no Kokando Bunseki", DAI 22 KAI SYMPOSIUM ON ENVIRONMENTAL CHEMISTRY PROGRAM AND ABSTRACTS, 2013, pages 1PC - 25, XP008185603 *
See also references of EP3141894A4 *

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110133124A (zh) * 2019-04-29 2019-08-16 天津中医药大学 疏血通注射液中18种氨基酸的含量测定方法
KR20210057927A (ko) * 2019-11-13 2021-05-24 주식회사 엘지화학 고분자 내 잔류 유기산의 함량 분석을 위한 방법 및 시스템
KR102731294B1 (ko) 2019-11-13 2024-11-18 주식회사 엘지화학 고분자 내 잔류 유기산의 함량 분석을 위한 방법 및 시스템
CN110967432A (zh) * 2019-12-25 2020-04-07 江南大学 一种测定根系分泌物中有机酸含量的方法

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