WO2017193185A1

WO2017193185A1 - Composições cosméticas prebióticas e uso das composições cosméticas prebióticas

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Publication number: WO2017193185A1
Application number: PCT/BR2016/050293
Authority: WO
Inventors: Luciana De Miranda Chaves Vasquez Pinto; Débora DOMENES PALMIERI RODRIGUEZ
Original assignee: Natura Cosmeticos SA
Current assignee: Natura Cosmeticos SA
Priority date: 2016-05-12
Filing date: 2016-11-10
Publication date: 2017-11-16
Anticipated expiration: 2018-11-12
Also published as: CL2018003214A1; MX2018013865A; AR108470A1; EP3456312A4; EP3456312A1; US20190274948A1; BR112018073293A2; EP3456312B1

Abstract

A presente invenção trata de composições cosméticas prebióticas compreendendo pelo menos um ingrediente com atividade prebiótica selecionado de açúcares, óleos e extratos para tratamento dos sinais de envelhecimento da pele, favorecendo o equilíbrio da pele, nutrindo os microorganismos benéficos residentes da microbiota da pele, protegendo-a das agressões ambientais, fortalecendo-a, reduzindo a sensibilidade e irritações e melhorando seu sistema de defesa.

Description

COMPOSIÇÕES COSMÉTICAS PREBIÓTICAS E USO DAS COMPOSIÇÕES COSMÉTICAS PREBIÓTICAS CAMPO DA INVENÇÃO

[1 ] A presente invenção trata de composições cosméticas prebióticas compreendendo pelo menos um ingrediente com atividade prebiótica selecionado de açúcares, óleos e extratos para tratamento dos sinais de envelhecimento da pele, favorecendo o equilíbrio da pele, nutrindo os microorganismos benéficos residentes da microbiota da pele, protegendo-a das agressões ambientais, fortalecendo-a, reduzindo a sensibilidade e irritações e melhorando seu sistema de defesa.

ARTE ANTERIOR

[2] Microbiota é o conjunto de microorganismos presente em um determinado ecossistema, como, por exemplo, a pele. A microbiota da pele é formada majoritariamente por bactérias, mas também possui vírus, fungos e protozoários.

[3] Os microorganismos presentes na microbiota da pele são determinados pelas condições ambientais como localização anatómica, umidade, produção de sebo e suor, a concentração de oxigénio, o pH, dentre outros, além de fatores biológicos como oscilações hormonais e a idade do indivíduo.

[4] A microbiota é responsável por várias funções fisiológicas, como a produção de nutrientes ou peptídeos de defesa e a modulação da resposta imunológica.

[5] Os microorganismos podem se fixar na pele através de ligações a estruturas da pele, como carboidratos ou receptores celulares, dentro das células da pele ou organizados em colónias unidas por um biofilme.

[6] O biofilme forma um microambiente com pH, concentração de oxigénio, nutrientes e metabolitos diferente da pele. Ele também facilita a comunicação das bactérias por quorum sensing e protege a microbiota de agentes antimicrobianos endógenos e exógenos, do sistema imunológico do indivíduo.

[7] A pele humana possui aproximadamente 1000 bactérias para cada célula. Estudos de sequenciamento genético mostram que existem bactérias não apenas na superfície da pele, mas também nas glândulas sudoríparas e sebáceas, nos folículos, nas invaginações cutâneas e mesmo nas camadas mais profundas da pele como a derme.

[8] Os géneros mais comuns nas camadas superficiais da pele são Staphylococcus, Propionibacteríum, Micrococcus e Corynebactería.

[9] Essas bactérias se distribuem nas diferentes regiões da pele em função do microbambiente. Staphylococcus e Corynebactería, por exemplo, são os géneros mais abundantes na pele e se mantém ao longo da vida. Propionibacteríum, que são anaeróbicos, estão presentes nas glândulas sebáceas. Corynebactería estão presentes nas axilas e estão relacionadas à produção de mau odor. Malassezia estão presentes no couro cabeludo e estão relacionados com a dermatite seborréica e a caspa.

[10] A pele humana, em geral, oferece para a microbiota um ambiente seco, levemente ácido e com disponibilidade apenas de proteínas e lipídios.

[1 1 ] O equilíbrio da microbiota da pele envolve mecanismos de adesão, interação com o sistema imunológico de defesa do indivíduo, alterações no microambiente, consumo de nutrientes e produção de agentes antimicrobianos.

[12] As camadas superficiais da pele estão em constante processo de descamação que retira parte da microbiota. A capacidade de adesão às células viáveis da pele garante a permanência dos microrganismos. As bactérias se ligam à receptores de membrana nas células, como os da família toll-like que reconhecem padrões associados às bactérias (TLR 1 -10), receptores de manose, ou receptores NOD-/// e. Estes receptores acionam vias imunológicas que discriminam as bactérias patogênicas das benéficas, estimulando as repostas apropriadas. A composição da microbiota ensina o sistema imune a discriminar com maior acurácia as bactérias benéficas, modulando as respostas inflamatórias e reduzindo a sensibilidade da pele a fatores externos como variações de temperatura, umidade e exposição à radiação UV.

[13] Além disso, a microbiota produz ácido lático que, juntamente com os ácidos graxos livres (provenientes do sebo), os aminoácidos ácidos (provenientes do suor) e os ácidos urocânico e pirrolidone carboxílico (do processo de queratinização dos corneocitos) mantêm o pH da pele mais ácido, restringindo os microorganismos presentes na microbiota. Os lipídios são a principal fonte de carbono utilizada pela microbiota da pele.

[14] Variações de idade, sexo e ciclo hormonal interferem na disponibilidade de nutrientes para a microbiota, podendo trazer oscilações na composição dos microorganismos.

[15] O papel de barreira seletiva contra o meio externo, exercido pela pele, é bastante facilitado pelos peptídeos antimicrobianos (AMPs), produzidos tanto pelos queratinócitos quanto pela microbiota da pele. Estão descritas mais de 2000 moléculas, produzidas por microorganismos e catalogadas em bancos de dados públicos e privados, com atividade antimicrobiana. Entre eles estão as α e β-defensinas (hBD), as catelicidinas, as C-type lectinas, as dermicidinas, etc. A maioria dos AMPs é composta de peptídeos pequenos de aproximadamente 2-15kDa. O desequilíbrio (excesso ou falta) de AMPs na pele está relacionado com patologias como a dermatite atópica, rosácea e psoríase. Alguns fatores produzidos pela pele, como a vitamina D e PTH, regulam a síntese de AMPs. AMPs são importantes para a proteção da pele contra patógenos, controlam a população da microbiota e limitam o contato entre queratinócitos e a microbiota. A atividade dos AMPs é geralmente de amplo espectro, atingindo tanto bactérias Gram positivas, Gram negativas e, em alguns casos, fungos, protozoários e vírus.

[16] A microbiota também produz outras substâncias, como ácido hialurônico, produzido por Streptococcus e alguns Lactobacillus, que é um constituinte de matriz extracelular que preenche a derme, dando forma à pele e estimulando a produção de β-defensina 2 (hBD2).

[17] A esfingomielinase é produzida por queratinócitos _T Streptococcus e Lactobacillus, sendo uma enzima que participa da síntese de ceramidas fundamentais para a manutenção da barreira cutânea.

[18] O ácido Lipoteicóico (LTA) é o componente estrutural de bactérias Gram positivas como Staphylococcus, Lactobacillus e Bifidobacterías, que estimula a produção de peptídeos antimicrobianos como β-defensinas (hBD) e catelicidinas.

[19] Os peptidoglicanos são componentes estruturais da parede celular de bactérias Gram positivas, que modulam a resposta imunológica do indivíduo, estimulando a produção de IL-8 por queratinócitos e recrutando fagócitos para locais infectados.

[20] O ácido lático, alfa hidroxiácido, produzido por Lactobacillus e Bifidobacterías, estimula o processo de descamação da pele, enfraquecendo as adesões celulares, estimulando a produção de ceramidas por queratinócitos, fortalecendo a barreira cutânea e compõe o NMF, que retém a umidade da pele.

[21 ] O ácido acético, produzido por Lactobacillus e Bifidobacterías, possui atividade antibacteriana contra S. aureus e P. aeruginosa.

[22] Os principais representantes da microbiota da pele incluem Staphylococcus epidermidis, componente majoritário da pele, que são halotolerantes e capazes de crescer em ambientes com baixa atividade de água. Geralmente é inócuo para a pele, mas pode causar infecções nosocomiais por colonização de corpos estranhos como catéteres e implantes em indivíduos predispostos e imunocomprometidos. Estes são extremamente resistentes à AMPs, não agridem os queratinócitos e produzem AMPs (epidermina, Pep5, epilancina K7 e epicidina 280) que controlam as populações de S. aureus e Streptococcus. [23] Entretanto, a remoção de S. epidermidis da pele, por exemplo, pelo uso excessivo de antibióticos tópicos, deixa o indivíduo imunocomprometido e muito suscetível a infecções por patógenos.

[24] Além disso, eles sintetizam proteases, queratinases, lipases e nucleases que participam do turnover fisiológico da pele. Sintetizam modulinas fenólicas solúveis (PSMs), proteínas com propriedades surfactantes e antibacteriana seletiva para S. aureus e Streptococcus, através a dissolução do biofilme formado por essas bactérias patogênicas.

[25] O Staphylococcus aureus é encontrado em peles saudáveis. Principal patógeno da pele humana, responsável por foliculites, furúnculos, abcessos subcutâneos, meningites, endocardites e septicemias. Condições como a dermatite atópica, vírus (Herpes simples tipo I ou Papilomavirus) e fungos oportunistas (Trichophyton rubrum) predispõem a pele a infecções por S. aureus.

[26] O aumento crescente do número de cepas resistentes à antibióticos como metaciclina e vancomicina, fazem do S. aureus um problema sério em ambientes hospitalares. Ele sintetiza bacteriocinas como staphylococcina 462, que inibe outras cepas de S. aureus.

[27] Co ryne bactéria jeikeium e Corynebacteria striatum são encontrados em peles saudáveis, sendo os microorganismos mais presente depois de S. epidermidis. Encontram-se nas regiões axilares, inguinal e perineal, devido a sua alta tolerância às concentrações de sais. Aderem aos queratinocitos em proporção estimada de 25 bactérias/célula através de receptores de fibronectina. Produzem bacteriocinas como lacticidina Q, responsável pela síntese de dermicidina e catelicidina presentes no suor, propondo uma atividade de defesa da pele.

[28] A Propionibacteria acnes, presente na microbiota saudável, em regiões como o rosto e as costas, é um microorganismo saprófita, anaeróbico encontrado principalmente nas glândulas sebáceas e associado a manifestações como foliculites e acne vulgar. A principal fonte de energia por ele utilizada são os lipídios e ácidos graxos presentes no sebo. A presença de porfirina deixa P. acnes bastante sensível à radiação UV e estimula a produção de IL-8 e IL-12 pelos queratinócitos, formando um microambiente pró- inflamatório.

[29] Estudos apontam P. acnes como envolvida no processo de hipercorneificação do dueto pilosebáceo, exacerbando os processos inflamatórios. Além disso, ele sintetiza ácido acético e ácido propiônico além de lipases e proteases. Também sintetiza diversas bacteriocinas como propionicina PLG-1 , jensenina G, propionicina SM1 , SM2, T1 e acneina, com atividade contra diversas bactérias lácticas, gram negativas, fungos e bolores.

[30] Malasssezia furfur é um fungo fastidioso presente na microbiota saudável, em regiões como o couro cabeludo e as costas, principal responsável por infecções oportunistas como a dermatite seborreica, caspa e tinea versicolor (ou ptiríase). Sua principal fonte de carbono são os ácidos graxos livres. Além disso, ele sintetiza uma enzima capaz de degradar a parede celular de microorganismos, contribuindo para a proteção da pele contra patógenos.

[31 ] O desiquilíbrio da microbiota pode levar a dermatite seborreica, acne vulgar, dermatite atópica, dentre outras doenças.

[32] A microbiota da pele é constantemente removida pelo processo natural de descamação e renovação da pele. Assim, a capacidade de adesão dos MOs às células viáveis da pele, inclusive nas camadas mais profundas como a derme, é uma vantagem competitiva.

[33] A presença da microbiota modula a resposta inflamatória da pele, reduzindo a sensibilidade a fatores como variação de temperatura, umidade e exposição à radiação UV.

[34] A microbiota produz ácido lático, que ajuda a manter o pH da pele mais ácido, peptídeos antimicrobianos (AMPs) que protegem a pele de patógenos e cujo desequilíbrio está relacionado a patologias como dermatites, rosácea e psoríase, auxiliam na regulação da produção de vitamina D e estão envolvidos na produção de proteínas de matriz extracelular como ácido hialuronico e enzimas importantes para a manutenção da barreira cutânea como esfingomielinase.

[35] O Staphyloccocus epidermidis é o microorganismo majoritário da microbiota da pele e se mantém assim, mesmo durante o envelhecimento. S. epidermidis é inócuo para os queratinócitos e produz AMPs (epidermina, Pep5, epilancina K7, modulinas fenólicas solúveis -PSMs- e epicidina 280) que controlam as populações de S. aureus e Streptococcus, protegendo a pele.

[36] S. epidermidis sintetizam proteases, queratinases, lipases e nucleases que contribuem para o turnover fisiológico da pele e possui um papel na manutenção da saúde da pele, protegendo-a de microorganismos nocivos oportunistas e favorecendo mecanismos fisiológicos de renovação da pele.

[37] Há inúmeros ingredientes ativos disponíveis com sugestiva atuação direta ou indireta na microbiota, por administração tópica ou oral, por exemplo, ácido acético, diacetil, ácido lático, ácido hialuronico, dentre outros. E, apesar dos componentes da microbiota e seus efeitos diretos e indiretos na pele serem conhecidos, ainda, persiste a utilização comum de antibacterianos, que afetam tanto as bactérias benéficas quanto as nocivas presentes na pele. Seu uso indiscriminado enfraquece as defesas naturais da pele e a deixa mais vulnerável para bactérias nocivas.

[38] Por esta razão, novos ingredientes prebióticos e probióticos ainda têm sido pesquisados.

[39] Prebióticos são ingredientes que favorecem as bactérias benéficas. Já probióticos são microorganismos que interagem com a microbiota natural da pele e a estimulam a produzir suas próprias defesas. O probiótico também pode atuar como um antibacteriano seletivo, produzindo substâncias que controlam a proliferação de bactérias nocivas.

[40] Inúmeras publicações do estado da técnica indicam que agentes prebioticos seletivamente podem favorecer as bactérias benéficas e, consequentemente, são candidatos a compor composições cosméticas para essa finalidade. Contudo, apesar de triar e sugerir possíveis ingredientes prebioticos, o estado da técnica é limitado no sentido de disponibilizar ingredientes prebioticos efetivos, com eficácia comprovada in vitro e com mecanismo de ação elucidado, particularmente para administração tópica e, por esta razão, ainda carece de investigação.

[41 ] Assim, persiste a necessidade de composições cosméticas, particularmente para aplicação tópica, que apresentem comprovado efeito prebiótico na pele.

BREVE DESCRIÇÃO DAS FIGURAS

[42] A figura 1 apresenta comparativamente os resultados de ensaios com diferentes ingredientes prebioticos candidatos, mostrando o efeito prebiótico de trealose e amido de babaçu.

[43] A figura 2 apresenta comparativamente os resultados de ensaios com diferentes ingredientes prebioticos candidatos, mostrando o efeito prebiótico de óleos de andiroba, castanha e buriti.

[44] A figura 3 apresenta comparativamente os resultados de ensaios com diferentes ingredientes prebioticos candidatos, mostrando o efeito prebiótico de extrato de guaçatonga.

[45] As figuras 4A-D a 10A-D mostram os efeitos de trealose, amido de babaçu (LIMS5345), óleo de andiroba (LIMS16648) e óleo de buriti

(SAP50002446) sobre as sínteses de elastina, GAG, IL-6 , IL-8 e IL-10, sobre a produção de MMP-1 e sobre a taxa de proliferação celular, em cultura de fibroblastos humanos. Os dados representam a média ± desvio padrão de diferentes experimentos independentes. ^**P<0,01 , comparado ao grupo

Controle Basal. (ANOVA, Dunnet).

[46] As figuras 1 1 A e 1 1 B mostram resultados de proteção da pele por S. epidermidis contra S. aureus - efeito preventivo.

[47] As figuras 12A e 12B mostram resultados de proteção da pele por S. epidermidis contra S. aureus - efeito preventivo.

DESCRIÇÃO DA INVENÇÃO

[48] Em um primeiro aspecto, a presente invenção trata de composições cosméticas prebióticas compreendendo pelo menos um ingrediente com atividade prebiótica selecionado de açúcares, óleos e extratos para tratamento dos sinais de envelhecimento da pele, favorecendo o equilíbrio da pele, nutrindo os microorganismos benéficos residentes da microbiota da pele, protegendo-a das agressões ambientais, fortalecendo-a, reduzindo a sensibilidade e irritações e melhorando seu sistema de defesa, com eficácia comprovada in vitro.

[49] De maneira particular, o açúcar de acordo com a presente invenção é selecionado de trealose e/ou amido de babaçu, os óleos são selecionados de andiroba, buriti, castanha e/ou microalgas e o extrato é de guaçatonga.

[50] As composições cosméticas prebióticas de acordo com a presente invenção podem ser disponibilizadas em diferentes formas cosméticas, incluindo sem qualquer limitação, emulsões, géis, pós, bastões, entre outros, incluído veículos cosmeticamente apropriados para a forma cosmética escolhida.

[51 ] As composições cosméticas prebióticas de acordo com a presente invenção são destinadas a aplicação tópica e favorecem a proliferação da S. epidermidis, sem aumentar os microorganismos nocivos.

[52] De maneira surpreendente, constatou-se que o efeito prebiótico propiciado pelos ingredientes ativos presentes nas composições cosméticas prebióticas tópicas de acordo com a presente invenção não só é eficiente em reduzir as bactérias nocivas da pele, favorecendo as bactérias benéficas da pele, equilibrando sua microbiota, mas também propicia equilíbrio da pele, sua nutrição, estimulando o turnover celular, a renovação celular, renovação tecidual, integridade cutânea, a defesa/proteção natural da pele, propiciando efeitos cosméticos vantajosos, como aumento da firmeza e elasticidade da pele, aumento da matriz de estruturação da pele, reforçando a arquitetura da pele, recuperando sua densidade da pele, além de propiciar proteção contra as enzimas que degradam a matriz de estruturação da pele, proteção contra a microinflamação, prevenção de microdanos, proteção contra agressões externas, efeito calmante, e efeitos mais aparentes na firmeza.

[53] Devido a esses e outros efeitos constatados, as composições cosméticas tópicas de acordo com a presente invenção são empregadas como anti-idade {antiaging).

[54] Em outro aspecto, as composições cosméticas prebióticas tópicas de acordo com a presente invenção apresentam efeito anti-idade, atuando de maneira direta na proliferação celular, na proteção da pele e redução da sensibilidade (por atuação na síntese de IL-6, IL-8, IL-10 e PGE2) e na firmeza e elasticidade (por atuação na síntese de colágeno e elastina; glicosaminoglicanos e modulação de metaloproteinase).

[55] O aumento de IL-6 e PGE2 reduz a responsividade de células da imunidade inata à estímulos externos como variações de temperatura, umidade e radiação UV. O aumento de IL-10 modula a responsividade dos linfócitos à estímulos como partículas inorgânicas e outros microorganismos. A redução de IL-8 reduz o limiar de ativação da cascata inflamatória sem prejudicar a proteção da pele. Por sua vez, o aumento de colágeno, elastina e glicosaminoglicanos (GAGs) traz mais firmeza e elasticidade para a derme. E a modulação de metaloproteinase 1 (MMP-1 ) regula a degradação do colágeno e garante a manutenção da fisiologia da pele.

[56] Particularmente, o amido de babaçu nutre a pele, por ser um dímero de glicose, protegendo-a pelo aumento da população de S. epidermidis, que produz AMPs e modula citocinas inflamatórias.

[57] Já a trealose e o óleo de buriti, além dos benefícios acima, também renovam a pele pelo aumento da proliferação dos fibroblastos e aumenta a hidratação da pele pelo aumento da absorção e a retenção de água pela pele, além do aumento da elasticidade da pele pela síntese de elastina e do controle de odor por não estimular a proliferação de Corynebacterias.

[58] As composições cosméticas prebióticas tópicas de acordo com a presente invenção podem ser disponibilizadas em quaisquer formas cosméticas apropriadas para aplicação no rosto ou corpo, conhecidas no homem da técnica, para tratamento ou limpeza, sem impor qualquer limitação, incluindo emulsões, soluções, pós, géis, pastas, sabonetes, dentre outras.

[59] Excipientes cosmeticamente aceitáveis podem ser selecionados de compostos conhecidos no estado da técnica. Sem caráter limitativo, podem compreender emolientes, antioxidantes, umectantes, emulsificantes, tensoativos, modificadores de sensorial ou viscosidade, conservantes, quelantes, estabilizantes, lubrificantes, espessantes, dispersantes, solubilizantes e demais veículos cosmeticamente aceitáveis. Em outro aspecto a presente invenção também contempla o uso das composições cosméticas de acordo com a presente invenção simultaneamente como prebiótico, bacteriostático seletivo e anti-idade da pele, bem como uso dos ingredientes ativos aqui descritos, sozinhos ou em combinação, para preparação de composições cosméticas com efeito simultâneo prebiótico, bacteriostático seletivo e anti-idade da pele.

[60] Os exemplos a seguir, sem impor qualquer limitação, ilustram a presente invenção.

EXEMPLOS

Avaliação dos efeitos

[61 ] Quando a concentração de 10 UFC / ml foi alcançada, os microorganismos foram transferidos para um meio suporte de carbono mínimo, que fornecia condições de replicação microrganismo.

[62] Cada ingrediente ativo das composições de acordo com a presente invenção foi adicionado ao meio de cultura e cultivados. Caso constatada contagem aumentada, o ingrediente seria considerado como tendo uma atividade prebiótica.

[63] Os resultados de cada ensaio foram submetidos a análise estatística. Os ingredientes ativos empregados nas composições cosméticas prebiótica de acordo com a presente invenção foram testados em diferentes microorganismos.

[64] Os microorganismos benéficos avaliados foram: Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus xylosus, Staphylococcus warnerí, Staphylococcus captis e Corynebacteríum xerosis.

[65] Os microorganismos indesejados avaliados foram: Staphylococcus aureus, Corynebacteríum striatum, Corynebacteríum jeikeium, Propioniumbacteria acnes e Cândida albicans.

[66] Observou-se que a inulina, amplamente utilizada como prebiótico na indústria alimentícia, não apresentou seletividade para nenhum dos microorganismos residentes na pele testados como pode ser verificado na figura 1 .

[67] Na mesma figura pode ser verificado que a trealose, ingrediente cosmético utilizado para hidratação, favoreceu seletivamente o crescimento de S. xylosus e de S. epidermidis (0,5%). Essa diferença aponta para diferenças no metabolismo microbiano, onde S. epidermidis seria mais sensível a variações de concentração deste ingrediente ativo. Já o amido de babaçu (Polisensi), utilizado como modificador de sensorial, favoreceu seletivamente S. xylosus, S. warneri e S. captis.

[68] A figura 2 mostra que os óleos de andiroba, castanha e buriti apresentaram uma atividade prebiótica, modulando seletivamente as bactérias benéficas da pele.

[69] O óleo de Andiroba favoreceu o crescimento de S. xylosus em todas as concentrações testadas e de S. epidermidis na concentração de 1 %.

[70] O óleo de buriti favoreceu o crescimento de S. xylosus em todas as concentrações testadas e de S. epidermidis a partir de 0,1 %. A variação observada para S. xylosus está dentro da margem de erro do teste (20%). [71 ] A figura 3 mostra que o extrato de guaçatonga favoreceu o crescimento de S. epidermidis na concentração de 0,01 % e de S. xylosus na concentração de 0,5%. Essa diferença sugere que as variações de metabolismo entre os microorganismos são sensíveis ao aumento de componentes presentes no extrato.

[72] De maneira a demonstrar os efeitos simultâneos aqui descritos, os ingredientes ativos de acordo com a presente foram testados em relação à parâmetros de atividade antissinais avaliados, incluindo proliferação celular, síntese de IL-6, IL-8, IL-10 e PGE2, elastina; GAGs e MMP-1 .

[73] Os resultados são apresentados na tabela 1 a seguir.

Tabela 1 . Resultados nos parâmetros de atividade antissinais avaliados

[74] Os testes realizados no âmbito da presente invenção mostraram que a extrapolação da atividade de prebioticos intestinais para a pele não se mostrou verdadeira, reforçando que cada sistema possui microrganismos extremamente adaptados a ele e com necessidades peculiares. Além disso, constatou-se que a S. epidermidis e S. xylosus se mantém como microorganismos majoritários da pele, mesmo durante o envelhecimento.

[75] A literatura mostra que a proliferação descontrolada de S. epidermidis e S. xylosus provoca quadros infecciosos semelhantes aos causados por S. aureus.

[76] A atividade prebiótica observada nos testes in vitro realizados de acordo com a presente invenção pode ser facilitada in vivo, particularmente para o óleo de buriti, pela atividade de facilitador de permeação do ácido oléico (77% da composição graxa do óleo de buriti), que aumenta a sua disponibilidade para os microorganismos presentes em todas as camadas da pele. [77] As figuras 4A-D a 10A-D mostram os efeitos de trealose sobre as sínteses de elastina, GAG, IL-6, IL-8 e IL-10, sobre a produção de MMP-1 e sobre a taxa de proliferação celular, em cultura de fibroblastos humanos.

[78] A figura 4A mostra que a trealose aumentou a síntese de elastina em cultura de fibroblastos humanos, quando aplicado nas concentrações de 6,25; 3,12 e 1 ,56% (p/v), em 60, 68 e 75%, respectivamente, em comparação com o grupo controle basal. Culturas de fibroblastos humanos foram incubadas por 48 horas com o produto.

[79] A figura 4B mostra que o amido de babaçu aumentou a síntese de Elastina em cultura de fibroblastos humanos quando aplicado nas concentrações de 0,024; 0,012 e 0,006% (p/v), em 68, 75 e 75%, respectivamente, em comparação com o grupo Controle Basal. Culturas de fibroblastos humanos foram incubadas por 48 horas com o produto.

[80] A figura 4C mostra que o óleo de andiroba aumentou a síntese de Elastina em cultura de fibroblastos humanos quando aplicado nas concentrações de 0,039; 0,019 e 0,0098% (p/v), em 61 , 59 e 36%, respectivamente, em comparação com o grupo Controle Basal. Culturas de fibroblastos humanos foram incubadas por 48 horas com o produto.

[81 ] A figura 4D mostra que o óleo de buriti aumentou a síntese de Elastina em cultura de fibroblastos humanos quando aplicado nas concentrações de 0,078; 0,039 e 0,019% (p/v), em 88, 80 e 70%, respectivamente, em comparação com o grupo Controle Basal. Culturas de fibroblastos humanos foram incubadas por 48 horas com o produto.

[82] A figura 5A mostra que trealose reduziu significativamente os níveis de GAG, em 59 e 23%, quando aplicado nas concentrações de 6,25 e 3,12% (p/v), respectivamente, em cultura de fibroblastos humanos por um período de 72 horas.

[83] A figura 5B mostra que o amido de babaçu reduziu significativamente os níveis de GAG, quando aplicado na concentração de 0,024% (p/v), em até 40%, em cultura de fibroblastos humanos por um período de 72 horas.

[84] A figura 5C mostra que o óleo de andiroba mostrou-se capaz de aumentar os níveis de GAG, em 26, 46 e 29%, quando aplicado nas concentrações de 0,039, 0,019 e 0,0098% (p/v) em cultura de fibroblastos humanos por um período de 72 horas, sendo estatisticamente significativo na concentração de 0,019%.

[85] A figura 5D mostra que o óleo de buriti reduziu significativamente os níveis de GAG, quando aplicado na concentração de 0,078% (p/v), em até 42%, em cultura de fibroblastos humanos por um período de 72 horas.

[86] A figura 6A mostra que trealose, quando aplicado em culturas de células, nas concentrações de 6,25 e 3,12% (p/v), promoveu diminuição de 78 e 19%, respectivamente, na síntese de IL-6 em cultura de fibroblastos humanos estimulados com LPS, em relação ao Controle PMA/LPS.

[87] A figura 6B mostra que o amido de babaçu quando aplicado em culturas de células nas concentrações de 0,024; 0,012 E 0,006% (p/v), não promoveu alteração na síntese de IL-6 em cultura de fibroblastos humanos estimulados com PMA/LPS, em relação ao Controle PMA/LPS.

[88] A figura 6C mostra que o óleo de andiroba quando aplicado em culturas de células nas concentrações de 0,039; 0,019 e 0,0098% (p/v), promoveu diminuição de 73, 52 e 37%, respectivamente, na síntese de IL-6 em cultura de fibroblastos humanos estimulados com PMA/LPS, em relação ao Controle PMA/LPS.

[89] A figura 6D mostra que o óleo de buriti quando aplicado em culturas de células nas concentrações de 0,078; 0,039 e 0,019% (p/v), promoveu diminuição de 33, 14 e 10%, respectivamente, na síntese de IL-6 em cultura de fibroblastos humanos estimulados com PMA/LPS, em relação ao Controle PMA/LPS.

[90] A figura 7A mostra que trealose, quando aplicado em culturas de células na concentração de 3,12% (p/v), promoveu diminuição estatisticamente significativa de 16% na síntese de IL-8 em cultura de fibroblastos humanos estimulados com LPS, em relação ao controle LPS.

[91 ] A figura 7B mostra que o amido de babaçu quando aplicado em culturas de células na concentração de 0,024% (p/v), promoveu diminuição estatisticamente significativa de 13% na síntese de IL-8 em cultura de fibroblastos humanos estimulados com LPS, em relação ao Controle LPS.

[92] A figura 7C mostra que o óleo de andiroba quando aplicado em culturas de células nas concentrações de 0,039; 0,019 e 0,0098% (p/v), promoveu diminuição estatisticamente significativa de 25, 17 e 13%, respectivamente, na síntese de IL-8 em cultura de fibroblastos humanos estimulados com LPS, em relação ao Controle LPS.

[93] A figura 7D mostra que o óleo de buriti quando aplicado em culturas de células nas concentrações de 0,039; 0,019 e 0,0098% (p/v), não promoveu alteração estatisticamente significativa na síntese de IL-8 em cultura de fibroblastos humanos estimulados com LPS, em relação ao Controle LPS.

[94] A figura 8 mostra que trealose, quando aplicado em culturas de células, promoveu diminuições de até 31 %, na síntese de IL-10 em cultura de fibroblastos humanos estimulados com PMA/LPS, em relação ao controle PMA/LPS.

[95] A figura 8B mostra que o amido de babaçu quando aplicado em culturas de células, promoveu reduções de até 65% na síntese de IL-10 em cultura de fibroblastos humanos estimulados com PMA/LPS, em relação ao Controle PMA/LPS.

[96] A figura 8C mostra que o óleo de andiroba quando aplicado em culturas de células promoveu diminuições de até 58% na síntese de IL-10 em cultura de fibroblastos humanos estimulados com PMA/LPS, em relação ao Controle PMA/LPS.

[97] A figura 8D mostra que o óleo de buriti quando aplicado em culturas de células, promoveu diminuições de até 63% na síntese de IL-10 em cultura de fibroblastos humanos estimulados com PMA/LPS, em relação ao Controle PMA/LPS.

[98] A figura 9 mostra que trealose, quando aplicado em culturas de células, na concentração de 6,25% (p/v), promoveu diminuição de 20% na síntese de MMP-1 em cultura de fibroblastos humanos estimulados com LPS, em relação ao Controle PMA/LPS.

[99] A figura 9B mostra que o amido de babaçu quando aplicado em culturas de células nas concentrações de 0,024; 0,012 E 0,006% (p/v), não promoveu alteração na síntese de MMP-1 em cultura de fibroblastos humanos estimulados com LPS, em relação ao Controle PMA/LPS.

[100] A figura 9C mostra que o óleo de andiroba quando aplicado em culturas de células na concentração de 0,0098% (p/v), promoveu diminuição de 9% na síntese de MMP-1 em cultura de fibroblastos humanos estimulados com LPS, em relação ao Controle PMA/LPS.

[101 ] A figura 9D mostra que o óleo de buriti quando aplicado em culturas de células na concentração de 0,039% (p/v), promoveu diminuição de 13% na síntese de MMP-1 em cultura de fibroblastos humanos estimulados com LPS, em relação ao Controle PMA/LPS.

[102] A figura 10 mostra que trealose mostrou-se capaz de aumentar a proliferação no período de tempo avaliado nas concentrações de 6,250; 3,125 e 1 ,563% (p/v) em 12, 25 e 33%, respectivamente, em comparação ao grupo controle do mesmo período de tempo.

[103] A figura 10B mostra que o amido de babaçu mostrou-se incapaz de alterar a proliferação no período de tempo avaliado nas concentrações testadas de 0,048, 0,024 e 0,012% (p/v) em comparação ao grupo Controle do mesmo período de tempo.

[104] A figura 10C mostra que o óleo de andiroba mostrou-se capaz de aumentar a proliferação no período de tempo avaliado nas concentrações testadas de 0,039; 0,019 e 0,0098% (p/v) em 21 , 17 e 20%, respectivamente, em comparação ao grupo Controle do mesmo período de tempo.

[105] A figura 10D mostra que o óleo de buriti mostrou-se capaz de aumentar a proliferação no período de tempo avaliado nas concentrações de 0,3125, 0,1563 e 0,0781 % (p/v) em 47, 77 e 103%, respectivamente, em comparação ao grupo Controle do mesmo período de tempo.

[106] Como controle positivo do ensaio, fibroblastos humanos foram cultivados com meio de cultura suplementado com 2% de soro fetal bovino.

[107] O efeito protetor de S. epidermidis contra S. aureus em queratinócitos (HaCaT) em cultura também foi avaliado.

[108] Para tanto, a etapa I consistiu na determinação da concentração de bactérias, por viabilidade celular, a etapa II constitui na diluição dos prebióticos, a etapa III consistiu em um protocolo preventivo (S. epidermidis previne a adesão de S. aureus) e a etapa IV consiste em um protocolo competição (S. epidermidis previne a adesão de S. aureus).

[109] As figuras 1 1 A e 1 1 B mostram resultados de proteção da pele por S. epidermidis contra S. aureus - efeito preventivo.

[1 10] As figuras 12A e 12B mostram resultados de proteção da pele por S. epidermidis contra S. aureus - efeito preventivo.

[1 1 1 ] Esses resultados em conjunto mostram o efeito prebiótico propiciado pelos ingredientes ativos presentes nas composições cosméticas prebióticas tópicas de acordo com a presente invenção não só é eficiente em reduzir as bactérias nocivas da pele, favorecendo as bactérias benéficas da pele, equilibrando sua microbiota, mas também propicia equilíbrio da pele, sua nutrição, estimulando o turnover celular, a renovação celular, renovação tecidual, integridade cutânea, a defesa/proteção natural da pele, propiciando efeitos cosméticos vantajosos, como aumento da firmeza e elasticidade da pele, aumento da matriz de estruturação da pele, reforçando a arquitetura da pele, recuperando sua densidade da pele, além de propiciar proteção contra as enzimas que degradam a matriz de estruturação da pele, proteção contra a microinflamação, prevenção de microdanos, proteção contra agressões externas e efeito calmante.

[1 12] O homem da técnica saberá prontamente avaliar, por meio dos ensinamentos contidos no texto e nos exemplos apresentados, vantagens da invenção e propor variações e alternativas equivalentes de realização, sem fugir ao escopo da invenção, conforme definido nas reivindicações anexas.

Claims

REIVINDICAÇÕES

1 . COMPOSIÇÕES COSMÉTICAS PREBIÓTICAS caracterizadas pelo fato de que compreende pelo menos um ingrediente com atividade prebiótica selecionado de açúcares, óleos e extratos e excipientes cosmeticamente aceitáveis.

2. COMPOSIÇÕES, de acordo com a reivindicação 1 , caracterizadas pelo fato de que o açúcar é selecionado de trealose, amido de babaçu, o óleo é selecionado de andiroba, buriti, castanha, microalgas e o extrato é de guaçatonga.

3. COMPOSIÇÕES, de acordo com uma das reivindicações 1 ou

2, caracterizadas pelo fato de que é para aplicação tópica.

4. COMPOSIÇÕES, de acordo com uma das reivindicações 1 a 3, caracterizadas pelo fato de que é simultaneamente anti-idade.

5. COMPOSIÇÕES, de acordo com uma das reivindicações 1 a 4, caracterizadas pelo fato de que atuam de maneira direta na proliferação celular, na proteção da pele e redução da sensibilidade por atuação na síntese de IL-6, IL-8, IL-10 e PGE2, e na firmeza e elasticidade por atuação na síntese de colágeno e elastina, glicosaminoglicanos e modulação de metaloproteinase.

6. USO DAS COMPOSIÇÕES COSMÉTICAS PREBIÓTICAS, de acordo com uma das reivindicações 1 a 5, caracterizado pelo fato de ser simultaneamente como anti-idade.

7. USO DAS COMPOSIÇÕES COSMÉTICAS PREBIÓTICAS, de acordo com uma das reivindicações 1 a 5, caracterizado pelo fato de ser na proliferação celular, na proteção da pele e redução da sensibilidade por atuação na síntese de IL-6, IL-8, IL-10 e PGE2, e na firmeza e elasticidade por atuação na síntese de colágeno e elastina, glicosaminoglicanos e modulação de metaloproteinase.