WO2020124178A1

WO2020124178A1 - Composição contendo microrganismos promotores de crescimento e redução de estresse hidríco em plantas cultivadas e uso da mesma

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Publication number: WO2020124178A1
Application number: PCT/BR2019/050051
Authority: WO
Inventors: Thales Facanali MARTINS; Eduardo Roberto de Almeida BERNARDO; Bernardo Albuquerque Regina de Matto VIEIRA; Iron Amoreli De Figueiredo RIBEIRO
Original assignee: Agrivalle Brasil Industria e Comercio de Produtos Agricolas Ltda
Current assignee: Agrivalle Brasil Industria e Comercio de Produtos Agricolas Ltda
Priority date: 2018-12-17
Filing date: 2019-02-21
Publication date: 2020-06-25
Anticipated expiration: 2021-06-17
Also published as: US12245595B2; EP3900538A4; BR102018076265A2; US20210368807A1; EP3900538A1

Abstract

Trata-se a presente patente de invenção de composições biológicas de funções múltiplas para a redução de estresse hídrico, promoção de crescimento e inoculantes em plantas cultivas, condicionador de solos, biostimulantes, solubilizador de fósforo e biorremediação de áreas agricultáveis, mais particularmente trata-se de composições contendo misturas de aditivos e excipientes a pelo menos 2 (duas) ou mais espécies de Bacillus ou 2 (duas) ou mais cepas de uma mesma espécie, ou seus mutantes, concomitantemente com aditivos e excipientes, em composições biológicas com propriedades para a redução do estresse hídrico, promoção de crescimento e inoculantes em plantas cultivas, condicionamento biológico de solos, biostimulantes, solubilizador de fósforo e biorremediação de áreas agricultáveis, adicionados no revestimento/incrustação do tratamento de sementes de forma industrial ou não, aplicação em sulco, barra direcionada ou outras vias de aplicação. Pertencente ao setor técnico de biotecnologia, essas composições ampliam a eficiência na condução das plantas cultivadas e lavouras por utilizar mecanismos de ação diferentes e complementares das composições dos microrganismos destacadas acima.

Description

COMPOSIÇÃO CONTENDO MICRORGANISMOS PROMOTORES DE CRESCIMENTO E REDUÇÃO DE ESTRESSE HIDRÍCO EM PLANTAS CULTIVADAS E USO DA MESMA

[001] Trata-se a presente patente de invenção de composições biológicas de funções múltiplas para a redução de estresse hídrico, promoção de crescimento e inoculantes em plantas cultivas, condicionador de solos, biostimulantes, solubilizador de fósforo e biorremediação de áreas agricultáveis, mais particularmente trata-se de composições contendo misturas de aditivos e excipientes a pelo menos 2 (duas) espécies de Bacillus ou 2 (duas) ou mais cepas de uma mesma espécie em combinação entre eles ou parte deles, em adição ou não à óleos essenciais de plantas e/ou extratos de plantas, polímeros/excipientes em formulações para pulverização, pulverização de sulco de plantio, drench, revestimento (industrial ou não), tratamento (industrial ou não) e incrustação (industrial ou não) de sementes das plantas cultivadas. Pertencente ao setor técnico de biotecnologia, essas composições ampliam a eficiência na condução das plantas cultivadas e lavouras por utilizar mecanismos de ação diferentes e complementares das composições dos microrganismos destacadas acima.

ESTADO DA TÉCNICA

[002] No atual cenário agrícola mundial, os ganhos de produção têm sido vinculados a aumentos gradativos de produtividade sem que ocorra um aumento na área agricultável. Esses aumentos de produtividade vêm sendo obtidos por meio de avanços significativos nas técnicas de cultivo, utilização de variedades mais adaptadas a fatores bióticos e abióticos, adequação do requerimento nutricional das plantas e, não obstante, pela mitigação dos danos causados por pragas agrícolas. Esses conceitos estão diretamente relacionados à lei do mínimo, onde a produção será limitada pelo insumo que estiver em concentração menor àquela requerida pela planta ou mesmo a eficiência no controle de pragas e doenças para manutenção da produtividade das culturas. Diversas técnicas podem ser empregadas, com maior ou menor grau de eficácia.

[003] Para a cultura do milho, segunda cultura mais plantada no país, sendo o Brasil o 3^o maior produtor mundial (FAOSTAT, 2017), o fator climático tem grande influência sobre sua produtividade e o regime pluviométrico é responsável por grandes oscilações de produção no Brasil (BERGAMASHI & MATZENAUER, 2014). Dados da CONAB (2015) mostram que durante a 2^a safra do ano agrícola de 2014/2015 houve aumento de 14,1% na produção em relação ao ano anterior, influenciado pelo bom regime de chuvas durante o desenvolvimento da cultura. No entanto, situação contrária foi observada na 2^a safra do ano agrícola de 2015/2016, com queda de 8,4% na produção, apesar do aumento na área plantada, fato ocorrido devido à estiagem durante o período de emergência e desenvolvimento da cultura (CONAB, 2016).

[004] MAGALHÃES et al. (1996) indicam que a necessidade hídrica da cultura do milho para completar seu ciclo é dependente de fatores climáticos, como a temperatura e evapotranspiração, sendo que os períodos de maior exigência hídrica ocorrem durante a emergência, florescimento e enchimento de grãos (FRATTINI, 1975). Portanto, o impacto do estresse hídrico na planta irá variar de acordo com seu estádio fenológico.

[005] Diversos autores avaliaram o efeito da falta de água no rendimento da cultura em diferentes intensidades e épocas de desenvolvimento do milho. Durante o florescimento, o estresse hídrico de dois dias afetou em 20% o rendimento da cultura, enquanto que o estresse durante quatro a oito dias afetou em mais de 50% (MAGALHÃES & DURÃES, 2006). Resultados semelhantes foram obtidos por PANDEY et al. (2000), onde o estresse de sete dias durante a emissão da inflorescência masculina afetou em 50% a produção, enquanto o mesmo estresse ocorrido no período pós polinização acarretou em perdas entre 25 a 32%. Perdas também são observadas quando o estresse ocorre durante o estádio vegetativo, ocasionando redução de até 32% no acúmulo de matéria seca (ÇAKIR, 2004). Os danos ocasionados pelo estresse hídrico ocorridos nos estágios iniciais de desenvolvimento são irreversíveis e tem impacto sobre a produtividade e quanto mais próximo do florescimento, maiores as perdas na produção (BALDO, 2007).

[006] Uma alternativa viável e com resultados significativos é o uso de rizobactérias promotoras de crescimento de plantas (RPCP). Diversos mecanismos associados às RPCPs, que auxiliam as plantas a suportarem os efeitos do estresse hídrico foram descritos, sendo eles: solubilização e fixação de nutrientes, produção de sideróforos, produção de hormônios vegetais, produção de compostos voláteis, alteração na morfologia e arquitetura das raízes, atividade da ACC deaminase, acumulação de osmólitos, ação sobre o sistema antioxidante da planta e produção de exopolissacarídeos (EPS) (ALAMI et al., 2000; ARORA et al., 2001; HUSSAIN et al., 2009; VURUKONDA et al., 2016).

[007] Dentre os mecanismos descritos, a produção de EPS por bactérias tem sido amplamente estudada, porém, visando a aplicação industrial, em especial, nas indústrias alimentícias e farmacêuticas, devido suas características emulsificantes e espessantes (KUMAR et al., 2007). Contudo, dada essas características, a utilização de bactérias produtoras de EPS na agricultura tem despertado interesse, uma vez que podem atuar como importante ferramenta na mitigação dos estresses abióticos. OBJETIVOS DA INVENÇÃO

[008] Assim, o objetivo da presente invenção é aplicar composições efetivas que proporcionem redução de estresse hídrico, promoção de crescimento e inoculantes em plantas cultivas, condicionador de solos, biostimulantes, solubilizador de fósforo e biorremediação de áreas agricultáveis em adição nos polímeros e/ou componentes do tratamento, revestimento ou incrustação de sementes (industrial ou não) das plantas cultivadas, aplicação em sulco, barra direcionada, até mesmo em outras vias de aplicação, não se limitando a Coffea spp ( Coffea arabica, Coffea canefora, Coffea robusta), Glycine max, Zea mays, Gossypium hirsutum, hortaliças (Solanum lycopersicum, Allium cepa, Lactuca sativa, Daucus carota, Capsicum annuum Group), florestais (Eucalyptus spp., Tectona grandis, Hevea brasiliensis, Pinus sp.j, Nicotiana tabacum, ornamentais, frutíferas 0 Citrus spp., Malus spp., Carica papaya, Vitis spp., Cucumis melo, Prunus pérsica, Passiflora edulis ), Brachiaria spp. ( Brachiaria brizantha, Brachiaria decumbens, Brachiaria humidicola, Brachiaria mutica, Brachiaria ruziziensis, Brachiaria arrecta, Brachiaria dictyneura), Panicum spp. (Panicum maximum), Sorghum spp., Pennisetum americanum, crotalárias (Crotalaria juncea, Crotalária spectabilis, Crotalaria ochroleuca, Crotalaria paulina, Crotalaria breviflora), dentre outras. Essas composições envolvem o uso de 2 (dois) ou mais microrganismos ou 2 (duas) ou mais cepas de uma mesma espécie de Bacillus, não se limitando a Bacillus aryabhattai, Bacillus velezensis, Bacillus agri, Bacillus toyonensis, Bacillus aizawai, Bacillus albolactis, Bacillus firmus, Bacillus coagulans, Bacillus endoparasiticus, Bacillus endorhythmos, Bacillus kustaki, Bacillus lacticola, Bacillus lactimorbus, Bacillus lactis, Bacillus laterosporus, Bacillus lentimorbus, Bacillus megaterium, Bacillus medusa, Bacillus metiens, Bacillus natto, Bacillus nigrificans, Bacillus popilliae, Bacillus pumilus, Bacillus siamensis, Bacillus subtilis, Bacilus licheniformis, Bacillus amyloliquefasciens, Bacillus megaterium, Bacillus sphaericus, Bacillus thuringiensis, Bacillus flexus, Bacillus pseudomycoides, Bacillus natto , dentre outros.

DESCRIÇÃO RESUMIDA DA INVENÇÃO

[009] A presente invenção refere-se a composições contendo misturas de pelo menos 2 (duas) ou mais espécies de Bacillus ou 3 (duas) ou mais cepas de uma mesma espécie, ou seus mutantes, concomitantemente com aditivos e excipientes, com exceção da patente em uso US 20150050258 AI , em composições biológicas com propriedades para a redução do estresse hídrico, promoção de crescimento e inoculantes em plantas cultivas, condicionamento biológico de solos, biostimulantes, solubilizador de fósforo e biorremediação de áreas agricultáveis, adicionados no revestimento/incrustação do tratamento de sementes de forma industrial ou não, aplicação em sulco, barra direcionada ou outras vias de aplicação.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

[010] A composição contendo microrganismos promotores de crescimento e redução de estresse hidríco em plantas cultivadas, compreende:

1 ,0 a 20,0% de pelo menos 2 (duas) ou mais espécies de Bacillus ou 2 (duas) ou mais cepas de uma mesma espécie, em misturas e combinação entre eles ou parte deles (em unidades formadoras de colónia, u.f.c.);

1,0 a 20,0% de Aditivos;

1,0 a 97,0% de Excipientes.

[011] Opcionalmente poderão ser adicionados a composição óleos essenciais de plantas e/ou extratos de plantas e/ou vegetais, conforme segue: 5,0 a 10,0% de óleos essenciais;

5,0 a 10,0% de extratos de plantas. [012] Os isolados foram identificados e classificados pela Coleção Brasileira de Microrganismos de Ambiente e Indústria (CBMAI/UNICAMP), onde encontram-se depositados.

[013] Os representantes dos gêneros de Bacillus são do grupo que consistem nas espécies de: Bacillus aryabhattai, Bacillus velezensis, Bacillus agri, Bacillus toyonensis, Bacillus aizawai, Bacillus albolactis, Bacillus firmus, Bacillus coagulans, Bacillus endoparasiticus, Bacillus endorhythmos, Bacillus kustaki, Bacillus lacticola, Bacillus lactimorbus, Bacillus lactis, Bacillus laterosporus, Bacillus lentimorbus, Bacillus megaterium, Bacillus medusa, Bacillus metiens, Bacillus natto, Bacillus nigrificans, Bacillus popilliae, Bacillus pumilus, Bacillus siamensis, Bacillus subtilis, Bacilus licheniformis, Bacillus amyloliquefasciens, Bacillus megaterium, Bacillus sphaericus, Bacillus thuringiensis, Bacillus flexus, Bacillus pseudomycoides, Bacillus natto, dentre outros.

[014] Os aditivos podem ser, mas não se limita a dispersantes selecionados do grupo consistindo de polímeros iônicos solúveis em água, aminoácidos, extratos de algas, compostos de origem natural, polímeros aniônicos solúveis em água, surfactantes selecionados do grupo consistindo de surfactantes aniônicos e surfactantes não iônicos e combinações entre eles.

[015] Os excipientes podem ser, não se limitando a, do grupo que consiste em: sílicas, talco, bentonita, carboidratos, carbonatos, caseína, soro de leite e derivados de leite e combinações entre eles.

[016] Os óleos essenciais de plantas ou extratos de plantas são extraídos e/ou derivados de sementes e/ou plantas, não se limitando a Ricinus communis, Crotalaria juncea, Chenopodium ambrosioides, Azadirachta indica, Verbena ojficinalis, Erythrina mulungu, Quassia amara, Bidens pilosa, Plantago lanceolata, Senecio brasiliensis, Lantana camara, Tagetes patula, Lantana montevidensis, Eucalyptus spp., Lantana montevidensis, Lantana camara, Senecio brasiliensis, Chrysantemum coronarium, Solanum americanum, Solanum paniculatum Hovenia dulcis, Melia azedarach, Butia eriospatha, Schinus terenbithifolius, Cinnamomum camphora, Conyza bonariensis, Senecio brasiliensis, Bidens pilosa, Amaranthus hybridus, Euphorbia heterophylla, Raphanus sativus, Ipomoea purpurea, Brachiaria plantaginea, Ruta graveolens, Aloysia triphylla, Brassica napus, Mucuna pruriens, Ocimum gratissimum, Lippia sidoides, Croton zehntneri, Mentha piperita, Cymbopogon martinii, Cymbopogon schoenanthus, Piper aduncum, Arisaema franchetianum, Zanthoxylum simulans, Ruta chalepensis, Citrus sinensis, Melaleuca quinquenervia, Cymbopogon citratus, Thymus vulgaris, Piper aduncum, Melaleuca alternifolia, Hesperozygis myrtoides, dentre outras.

[017] A composição deve ser empregada como formulação em pó molhável. Entretanto, outras formulações contendo esses microrganismos, tais como, suspensão de encapsulado, concentrado dispersível, concentrado emulsionável, emulsão de água em óleo, emulsão de óleo em água, microemulsão, suspensão concentrada, suspo-emulsão, granulado solúvel, concentrado solúvel, pó solúvel, tablete, granulado dispersível, pó molhável, gel emulsionável, gel solúvel em água, grânulo emulsionável, pó emulsionável, dispersão de óleo ou suspensão concentrada em óleo, formulação mista de concentrado solúvel e suspensão concentrada, formulação mista de concentrado solúvel e suspo-emulsão, formulação mista de concentrado solúvel e emulsão de óleo em água, suspensão concentrada dispersível ou miscível em óleo, solução miscível em óleo, pó dispersível em óleo, granulado encapsulado, pó seco, líquido para pulverização eletrostática/eletrodinâmica, granulado, óleo para pulverização/espalhamento, suspensão a ultrabaixo volume, ultrabaixo volume, microgranulado, pó fino, granulado fino, macrogranulado, encapsulamento, microencapsulamento e nanoencapsulamento também podem ser utilizadas.

[018] O uso da composição poderá ser empregado como pulverização, pulverização de sulco de plantio, drench, no revestimento (industrial ou não), tratamento (industrial ou não) e incrustação (industrial ou não) de sementes das plantas cultivadas, não se limitando a Coffea spp ( Coffea arabica, Coffea canefora, Coffea robusta), Glycine max, Zea mays, Gossypium hirsutum, hortaliças (Solanum lycopersicum, Allium cepa, Lactuca sativa, Daucus carota, Capsicum annuum Group), florestais (Eucalyptus spp., Tectona grandis, Hevea brasiliensis, Pinus sp. , Nicotiana tabacum, ornamentais, frutíferas ( Citrus spp., Malus spp., Carica papaya, Vitis spp., Cucumis melo, Prunus pérsica, Passiflora edulis ), Brachiaria spp. (Brachiaria brizantha, Brachiaria decumbens, Brachiaria humidicola, Brachiaria mutica, Brachiaria ruziziensis, Brachiaria arrecta, Brachiaria dictyneura), Panicum spp. ( Panicum maximum), Sorghum spp., Pennisetum americanum, crotalárias (Crotalaria juncea, Crotalária spectabilis, Crotalaria ochroleuca, Crotalaria paulina, Crotalaria breviflora), dentre outras.

[019] O uso da composição poderá ainda ser empregado com a função de promoção de crescimento, redução de estresse hídrico, bioestimulantes, inoculantes, solubilizador de fósforo e estimulantes de crescimento nas plantas cultivadas, não se limitando a : Coffea spp ( Coffea arabica, Coffea canefora, Coffea robusta), Glycine max, Zea mays, Gossypium hirsutum, hortaliças (Solanum lycopersicum, Allium cepa, Lactuca sativa, Daucus carota, Capsicum annuum Group), florestais (Eucalyptus spp., Tectona grandis, Hevea brasiliensis, Pinus sp.), Nicotiana tabacum, ornamentais, frutíferas (Citrus spp., Malus spp., Carica papaya, Vitis spp., Cucumis melo, Prunus pérsica, Passiflora edulis), Brachiaria spp. (Brachiaria brizantha, Brachiaria decumbens, Brachiaria humidicola, Brachiaria mutica, Brachiaria ruziziensis, Brachiaria arrecta, Brachiaria dictyneura), Panicum spp. (Panicum maximum), Sorghum spp., Pennisetum americanum, crotalárias {Crotalaria juncea, Crotaldria spectabilis, Crotalaria ochroleuca, Crotalaria paulina, Crotalaria breviflora ), dentre outras.

[020] A composição tem seu uso empregado com a função de condicionador de solos para todas as culturas e qualquer área agriculturável e adicionalmente com a função de biorremediação de áreas agricultáveis.

EXEMPLOS DE OBTENÇÃO

[021] A título de exemplo a composição poderá apresentar as seguintes concentrações:

Exemplo 1:

Bacillus velezensis: 1,0 a 20,0%

Bacillus aryabhattai: 1,0 a 20,0%

Aditivos: 1,0 a 20,0%

Excipientes: 97,0 a 40,0%

Exemplo 2:

Bacillus aryabhattai: 1,0 a 20,0%

Bacillus licheniformis : 1,0 a 15,0%

Bacillus amyloliquefaciens : 1,0 a 15,0%

Oleo essencial de Melaleuca alternifolia 5,0 a 20,0%

Aditivos: 1,0 a 20,0%

Excipientes: 91,0 a 10,0%

Exemplo 3:

Bacillus aryabhattai: 1,0 a 20,0%

Bacillus licheniformis : 1,0 a 15,0% Bacillus velezensis: 1,0 a 20,0%

Oleo essencial de Azadirachta indica 5,0 a 20,0%

Extrato de Piper aduncum 5,0 a 15,0%

Aditivos: 1,0 a 10,0%

Excipientes: 86,0 a 10,0%

Exemplo 4:

Bacillus aryabhattai ( cepa 01 ): 1,0 a 20,0%

Bacillus aryabhattai ( cepa 04): 1,0 a 20,0%

Aditivos: 1,0 a 20,0%

Excipientes: 97,0 a 40,0%

Exemplo 5:

Bacillus thuringiensis 1,0 a 20,0%

Bacillus aryabhattai 1,0 a 20,0%

Aditivos: 1,0 a 20,0%

Excipientes: 97,0 a 40,0%

EXEMPLO DE APLICAÇAO

[022] Composições contendo diferentes proporções e combinações entre os microrganismos gênero Bacillus, aminoácidos e seus incipientes foram preparadas para tratamento de semente visando avaliar sua eficiência na redução de estresses abióticos. O exemplo abaixo ilustra, mas não limita o uso dessa composição:

[023] EXEMPLO: Utilização de uma composição biológica no tratamento de sementes de milho ( Zea mays L.) visando mitigação de danos causados por estresse hídrico.

[024] OBJETIVO: Avaliar, em condições de casa de vegetação, o efeito do tratamento de sementes na cultura do milho com formulações contendo rizobactérias e avaliar seus efeitos na redução de estresse hídrico. [025] MATERIAL E MÉTODOS: A seleção de isolados com maior potencial de promover crescimento em plantas de milho, sob condições de estresse hídrico, foi realizada a partir da coleção de microrganismos pertencente à empresa Agrivalle Brasil Ind. e Com. de Produtos Agrícolas Ltda., em casa de vegetação e com delineamento estatístico inteiramente casualizado (DIC).

[026] As sementes utilizadas foram desinfestadas com solução de hipoclorito de sódio 2%, álcool 70%, seguido por lavagem com água destilada, esterilizada e secas em condição ambiente, durante 10 min. O tratamento de sementes correspondeu a uma aplicação de 0,3 mL de uma formulação contendo os Bacillus em 1 Kg de semente previamente pesada. As sementes foram semeadas em vasos contendo 1,5 kg de solo e irrigado até atingir 80% de sua capacidade de campo (C.C.). Cada tratamento foi composto de 5 repetições dispostas ao acaso com duas plantas por vaso. No momento que as plantas apresentaram a primeira folha totalmente desenvolvida, foi induzido o estresse hídrico. Os tratamentos foram conduzidos sob dois regimes de irrigação: estresse hídrico e irrigado. O estresse hídrico foi caracterizado por manter os vasos a 30% C.C. e os tratamento irrigado foi mantido com 80% C.C. O experimento foi realizado até 45 dias após semeadura. Nesse momento, foram realizadas avaliações de comprimento de raiz, massa da matéria fresca e seca da parte aérea e da raiz. Os dados obtidos foram submetidos à análise da variância e suas médias foram comparadas pelo teste de Tukey a 5%. Os dados foram transformados utilizando a função Vx sempre que necessário, e submetidos à análise estatística.

RESULTADOS E DISCUSSÃO

[027] Foram observadas diferenças estatísticas significativa para todas as avaliações [massa fresca de raiz (MFR), massa seca de raiz (MSR), massa fresca de parte aérea (MFPA), massa seca de parte aérea (MSPA) e altura de plantas (AT)], no qual os tratamentos T3, T6 e T8 exibiram valores significativamente superiores ao tratamento T2 (controle não irrigado) para o parâmetro MSR, demonstrando que esses microrganismos possuem maior capacidade de produção radicular em situações de estresse hídrico.

Tabela 2. Avaliações de altura de planta (AT), matéria fresca de parte aérea (MFPA), raiz (MFR) e matéria seca de parte aérea (MSPA) e de raiz (MSR) do milho aos 45 dias após semeadura. (IDENTIFICAR OS ORGANISMOS).

Tratamento Altura (cm) MFPA (g) MFR (g) MSPA (g) MSR (g)

TI (Cl) 59,38 a 23,38 a 21,90 a 1,68 a 1,70 a

T2 (CNI) 35,91 b 6,3 bcde 9,41 bc 0,31 c 0,60 cd

T3 (Bacillus

41,56 b 9,26 b 12,59 b 0,47 bc 0,91 b aryabhattai cepa 1 )

T4 (Bacillus

37,00 b 5,46 cde 9,52 bc 0,36 c 0,69 bcd aryabhattai cepa 2 )

T5 (Bacillus

33,13 bc 4,81 de 7,18 cd 0,48 bc 0,64 cd thuringiensis )

T6 ( Bacillus

40,88 b 7,91 bcd 12,39 b 0,67 b 0,96 b aryabhattai cepa 4 )

T7 (Bacillus

aryabhattai cepa 1.

28,50 c 4,06 e 6,80 d 0,38 c 0,58 d + Bacillus

aryabhattai cepa 4 )

T8 (Bacillus

aryabhattai cepa 1.

41,31 b 8,18 bc 12,40 b 0,73 b 0,94 b + Bacillus

aryabhattai cepa 2 )

T9 (Bacillus

aryabhattai cepa 1.

36,25 b 7,11 bcd 9,97 bc 0,64 b 0,77 bcd + Bacillus

thuringiensis) TIO (Bacillus

aryabhattai cepa 4

37,94 b 7,58 bcd 11,47 b 0,73 b 0,83 bc

+ Bacillus

thuringiensis)

Tl l (Bacillus

aryabhattai cepa 4

35,00 b 5,28 cde 9,74 bc 0,54 bc 0,75 cd

+ Bacillus

aryabhattai cepa 2 )

T12 (Bacillus

aryabhattai cepa 2

33,56 bc 4,89 de 10,65 b 0,45 bc 0,83 bc

+ Bacillus

thuringiensis)

CV(%) 7,22 15,33 10,31 15,48 10,02

Médias seguida da mesma letra na coluna, não diferem entre si à Tukey (5%). MFPA: Massa fresca de parte aérea; MFR: Massa fresca de raiz; MSPA: Massa seca de parte aérea; MSR: Massa seca de raiz; Cl: Controle irrigado; CNI: Controle não irrigado.

[028] Para os outros parâmetros avaliados, AT, MFPA e MFR não foi possível observar diferença significativa entre as médias dos tratamentos e o controle não irrigado. Contudo, vale salientar que os tratamentos T3, T6, T8 e T10, mesmo não apresentando significância em relação ao tratamento controle não irrigado, apresentou, numericamente valores maiores em todos os parâmetros mencionados anteriormente, sugerindo uma tendência desses microrganismos a agregarem vantagens competitivas para a cultura e na mitigação dos danos causados por estresse hídrico na cultura do milho.

[029] Com base nos resultados obtidos pode-se comprovar que o tratamento de sementes com formulações contendo rizobactérias do gênero Bacillus em plantas de milho sob estresse hídrico minimiza os efeitos negativos da falta de água.

CONCLUSÕES

[030] O uso de formulações contendo rizobactérias do gênero Bacillus, adicionados ao tratamento de sementes, mostra-se uma alternativa viável para a redução do efeito negativo causado pelo estresse hídrico em plantas cultivadas. Ainda, além da diversidade de mecanismos de ação desses microrganismos específicos, essa formulação biológica amplia os efeitos benéficos da técnica, podendo ser ampliado para outras culturas e diferentes regiões de cultivo.

[031] A composição para redução do dano causado por estresse hídrico deverá seguir o seguinte fluxo de eventos:

• Matéria prima: as matérias primas que irão compor o produto deverão ser recebidas e manipuladas por pessoas treinadas;

• Mistura: as matérias primas deverão ser pesadas e misturadas seguindo o procedimento operacional padrão (POP) nas proporções indicadas;

• Amostragem: após a mistura, deverão ser retiradas amostras para verificação e certificação das garantias do produto. Deve-se analisar número de unidades formadoras de colónias (u.f.c.)/g de produto;

• Envase: o produto formulado que se apresentar dentro das especificações de garantia deverão ser envasados em frascos plásticos de 1,0; 5,0 e 10,0 kg, previamente rotulados. Os frascos/pouchs são selados e fechados;

• Armazenagem: os frascos/pouchs são acomodados em pallets e armazenados em local seco, arejado e protegido da luz, permanecendo nessa condição até ser despachado.

[032] O presente invento poderá ser aplicado tanto via sulco de plantio, via barra, como tratamento (industrial ou não) e incrustação (industrial ou não) de sementes. O método de aplicação deverá ser analisado caso a caso e dependerá das condições técnicas e necessidade de cada produtor.

VANTAGENS OBTIDAS

[033] O uso das rizobactérias gênero em adição ou não a óleos essenciais e extratos de plantas, aos polímeros e/ou componentes do revestimento/incrustação de sementes das plantas cultivadas, assim obtida, oferece as seguintes vantagens:

• Possui facilidade operacional para o emprego da tecnologia no tratamento de semente de forma industrial ou não;

• E uma alternativa viável para redução dos danos causados por estresses abióticos, principalmente estresse por falta de água no sistema de plantas cultivadas;

• Apresenta vantagens na colonização e reposição de microrganismos para a microbiota do solo;

• Promove crescimento acelerado em plantas cultivadas, agregando assim maior massa fotossintética ativa para produção;

• E capaz de ser empregado nos constituintes do revestimento/incrustação de sementes, não se limitando a Coffea spp ( Coffea arabica, Coffea canefora, Coffea robusta), Glycine max, Zea mays, Gossypium hirsutum, hortaliças (Solanum lycopersicum, Allium cepa, Lactuca sativa, Daucus carota, Capsicum annuum Group), florestais (Eucalyptus spp., Tectona grandis, Hevea brasiliensis, Pinus sp.j, Nicotiana tabacum, ornamentais, frutíferas ( Citrus spp., Malus spp., Carica papaya, Vitis spp., Cucumis melo, Prunus pérsica, Passiflora edulis), Brachiaria spp. (Brachiaria brizantha, Brachiaria decumbens, Brachiaria humidicola, Brachiaria mutica, Brachiaria ruziziensis, Brachiaria arrecta, Brachiaria dictyneura), Panicum spp. (Panicum maximum), Sorghum spp., Pennisetum americanum, crotalárias ( Crotalaria juncea, Crotalária spectabilis, Crotalaria ochroleuca, Crotalaria paulina, Crotalaria breviflora), dentre outras, no tratamento industrial ou não.

• Pode ser aplicado em área total via barra de pulverização ou mesmo em jato direcionado no sulco de plantio nas culturas, não se limitando a Coffea spp ( Coffea arabica, Coffea canefora, Coffea robusta), Glycine max, Zea mays, Gossypium hirsutum, hortaliças (Solanum lycopersicum, Allium cepa, Lactuca sativa, Daucus carota, Capsicum annuum Group), florestais (Eucalyptus spp., Tectona grandis, Hevea brasiliensis, Pinus sp.j, Nicotiana tabacum, ornamentais, frutíferas 0 Citrus spp., Malus spp., Carica papaya, Vitis spp., Cucumis melo, Prunus pérsica, Passiflora edulis ), Brachiaria spp. (Brachiaria brizantha, Brachiaria decumbens, Brachiaria humidicola, Brachiaria mutica, Brachiaria ruziziensis, Brachiaria arrecta, Brachiaria dictyneura), Panicum spp. (Panicum maximum), Sorghum spp., Pennisetum americanum, crotalárias ( Crotalaria juncea, Crotalária spectabilis, Crotalaria ochroleuca, Crotalaria paulina, Crotalaria breviflora ), dentre outras.

[034] A abrangência da presente patente de invenção, não deve ser limitada aos exemplos de aplicação, mas sim, aos termos definidos nas reivindicações e seus equivalentes.

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

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Claims

REIVINDICAÇÕES

1 - COMPOSIÇÃO CONTENDO MICRORGANISMOS PROMOTORES DE CRESCIMENTO E REDUÇÃO DE ESTRESSE HIDRÍCO EM PLANTAS CULTIVADAS, caracterizada por compreender: 1 ,0 a 20,0% de pelo menos 2 (duas) ou mais espécies de Bacillus ou 2 (duas) ou mais cepas de uma mesma espécie, em misturas e combinação entre eles ou parte deles (em unidades formadoras de colónia, u.f.c.);

1,0 a 20,0% de Aditivos;

1,0 a 97,0% de Excipientes.

2 - COMPOSIÇÃO CONTENDO MICRORGANISMOS PROMOTORES DE CRESCIMENTO E REDUÇÃO DE ESTRESSE HIDRÍCO EM PLANTAS CULTIVADAS, de acordo com a reivindicação 1 , caracterizada por opcionalmente ser adicionado a composição reivindicada em 1:

5,0 a 10,0% de óleos essenciais.

3 - COMPOSIÇÃO CONTENDO MICRORGANISMOS PROMOTORES DE CRESCIMENTO E REDUÇÃO DE ESTRESSE HIDRÍCO EM PLANTAS CULTIVADAS, de acordo com a reivindicação 1 , caracterizada por opcionalmente ser adicionado a composição reivindicada em 1:

5,0 a 10,0% de extratos de plantas.

4 - COMPOSIÇÃO CONTENDO MICRORGANISMOS PROMOTORES DE CRESCIMENTO E REDUÇÃO DE ESTRESSE HIDRÍCO EM PLANTAS CULTIVADAS, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada por opcionalmente serem adicionados a composição reivindicada em 1 :

5,0 a 10,0% de óleos essenciais; 5,0 a 10,0% de extratos de plantas.

5 - COMPOSIÇÃO CONTENDO MICRORGANISMOS PROMOTORES DE CRESCIMENTO E REDUÇÃO DE ESTRESSE HIDRÍCO EM PLANTAS CULTIVADAS, de acordo com a reivindicação 1 , caracterizada pelos representantes dos gêneros de Bacillus serem do grupo que consistem nas espécies de: Bacillus aryabhattai, Bacillus velezensis, Bacillus agri, Bacillus toyonensis, Bacillus aizawai, Bacillus albolactis, Bacillus firmus, Bacillus coagulans, Bacillus endoparasiticus, Bacillus endorhythmos, Bacillus kustaki, Bacillus lacticola, Bacillus lactimorbus, Bacillus lactis, Bacillus laterosporus, Bacillus lentimorbus, Bacillus megaterium, Bacillus medusa, Bacillus metiens, Bacillus natto, Bacillus nigrificans, Bacillus popilliae, Bacillus pumilus, Bacillus siamensis, Bacillus subtilis, Bacilus licheniformis, Bacillus amyloliquefasciens, Bacillus megaterium, Bacillus sphaericus, Bacillus thuringiensis, Bacillus flexus, Bacillus pseudomycoides, Bacillus natto, dentre outros.

6 - COMPOSIÇÃO CONTENDO MICRORGANISMOS PROMOTORES DE CRESCIMENTO E REDUÇÃO DE ESTRESSE HIDRÍCO EM PLANTAS CULTIVADAS, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelos aditivos serem do grupo consistindo de polímeros iônicos solúveis em água, aminoácidos, extratos de algas, compostos de origem natural, polímeros aniônicos solúveis em água, surfactantes selecionados do grupo consistindo de surfactantes aniônicos e surfactantes não iônicos e combinações entre eles.

7 - COMPOSIÇÃO CONTENDO MICRORGANISMOS PROMOTORES DE CRESCIMENTO E REDUÇÃO DE ESTRESSE HIDRÍCO EM PLANTAS CULTIVADAS, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelos excipientes serem do grupo que consiste em: sílicas, talco, bentonita, carboidratos, carbonatos, caseína, soro de leite e derivados de leite e combinações entre eles.

8 - COMPOSIÇÃO CONTENDO MICRORGANISMOS PROMOTORES DE CRESCIMENTO E REDUÇÃO DE ESTRESSE HIDRÍCO EM PLANTAS CULTIVADAS, de acordo com as reivindicações 2 e 3, caracterizada pelos óleos essenciais de plantas ou extratos de plantas serem extraídos e/ou derivados de sementes e/ou plantas, do grupo que consiste em: Ricinus communis, Crotalaria juncea, Chenopodium ambrosioides, Azadirachta indica, Verbena officinalis, Erythrina mulungu, Quassia amara, Bidens pilosa, Plantago lanceolata, Senecio brasiliensis, Lantana camara, Tagetes patula, Lantana montevidensis, Eucalyptus spp., Lantana montevidensis, Lantana camara, Senecio brasiliensis, Chrysantemum coronarium, Solanum americanum, Solanum paniculatum Hovenia dulcis, Melia azedarach, Butia eriospatha, Schinus terenbithifolius, Cinnamomum camphora, Conyza bonariensis, Senecio brasiliensis, Bidens pilosa, Amaranthus hybridus, Euphorbia heterophylla, Raphanus sativus, Ipomoea purpurea, Brachiaria plantaginea, Ruta graveolens, Aloysia triphylla, Brassica napus, Mucuna pruriens, Ocimum gratissimum, Lippia sidoides, Croton zehntneri, Mentha piperita, Cymbopogon martinii, Cymbopogon schoenanthus, Piper aduncum, Arisaema franchetianum, Zanthoxylum simulans, Ruta chalepensis, Citrus sinensis, Melaleuca quinquenervia, Cymbopogon citratus, Thymus vulgaris, Piper aduncum, Melaleuca alternifolia, Hesperozygis myrtoides, dentre outras.

9 - COMPOSIÇÃO CONTENDO MICRORGANISMOS PROMOTORES DE CRESCIMENTO E REDUÇÃO DE ESTRESSE HIDRÍCO EM PLANTAS CULTIVADAS, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada por ser empregada como formulação em pó molhável, suspensão de encapsulado, concentrado dispersível, concentrado emulsionável, emulsão de água em óleo, emulsão de óleo em água, microemulsão, suspensão concentrada, suspo-emulsão, granulado solúvel, concentrado solúvel, pó solúvel, tablete, granulado dispersível, pó molhável, gel emulsionável, gel solúvel em água, grânulo emulsionável, pó emulsionável, dispersão de óleo ou suspensão concentrada em óleo, formulação mista de concentrado solúvel e susensão concetrada, formulação mista de concentrado sóluvel e suspo-emulsão, formulação mista de concentrado solúvel e emulsão de óleo em água, suspensão concentrada dispersível ou miscível em óleo, solução miscível em óleo, pó dispersível em óleo, granulado encapsulado, pó seco, líquido para pulverização eletrostática/eletrodinâmica, granulado, óleo para pulverização/espalhamento, suspensão a ultrabaixo volume, ultrabaixo volume, microgranulado, pó fino, granulado fino, macrogranulado, encapsulamento, microencapsulamento e nanoencapsulamento.

10 - USO DA COMPOSIÇÃO CONTENDO

MICRORGANISMOS PROMOTORES DE CRESCIMENTO E REDUÇÃO DE ESTRESSE HIDRÍCO EM PLANTAS CULTIVADAS, caracterizado pelos por ser empregada como pulverização, pulverização de sulco de plantio, drench, no revestimento (industrial ou não), tratamento (industrial ou não) e incrustação (industrial ou não) de sementes das plantas cultivadas, não se limitando a Coffea spp ( Coffea arabica, Coffea canefora, Coffea robusta), Glycine max, Zea mays, Gossypium hirsutum, hortaliças (Solanum lycopersicum, Allium cepa, Lactuca sativa, Daucus carota, Capsicum annuum Group), florestais (Eucalyptus spp., Tectona grandis, Hevea brasiliensis, Pinus sp. , Nicotiana tabacum, ornamentais, frutíferas 0 Citrus spp., Malus spp., Carica papaya, Vitis spp., Cucumis melo, Prunus pérsica, Passiflora edulis), Brachiaria spp. ( Brachiaria brizantha, Brachiaria decumbens, Brachiaria humidicola, Brachiaria mutica, Brachiaria ruziziensis, Brachiaria arrecta, Brachiaria dictyneura), Panicum spp. (Panicum maximum), Sorghum spp., Pennisetum americanum, crotalárias (Crotalaria juncea, Crotaldria spectabilis, Crotalaria ochroleuca, Crotalaria paulina, Crotalaria breviflora ), dentre outras.

11 - USO DA COMPOSIÇÃO, de acordo com a reivindicação 10, caracterizado por ser empregada com a função de promoção de crescimento, redução de estresse hídrico, bioestimulantes, inoculantes, solubilizador de fósforo e estimulantes de crescimento nas plantas cultivadas, não se limitando a : Coffea spp ( Coffea arabica, Coffea canefora, Coffea robusta), Glycine max, Zea mays, Gossypium hirsutum, hortaliças (Solanum lycopersicum, Allium cepa, Lactuca sativa, Daucus carota, Capsicum annuum Group), florestais (Eucalyptus spp., Tectona grandis, Hevea brasiliensis, Pinus sp.j, Nicotiana tabacum, ornamentais, frutíferas ( Citrus spp., Malus spp., Carica papaya, Vitis spp., Cucumis melo, Prunus pérsica, Passiflora edulis), Brachiaria spp. (Brachiaria brizantha, Brachiaria decumbens, Brachiaria humidicola, Brachiaria mutica, Brachiaria ruziziensis, Brachiaria arrecta, Brachiaria dictyneura ), Panicum spp. (Panicum maximum ), Sorghum spp., Pennisetum americanum, crotalárias (Crotalaria juncea, Crotalária spectabilis, Crotalaria ochroleuca, Crotalaria paulina, Crotalaria breviflora), dentre outras.

12 - USO DA COMPOSIÇÃO, de acordo com a reivindicação 10, caracterizado por ser empregada com a função de condicionador de solos para todas as culturas e qualquer área agriculturável.

13 - USO DA COMPOSIÇÃO, de acordo com a reivindicação 10, caracterizado por ser empregada com a função de biorremediação de áreas agricultáveis.