WO2020162407A1 - ハプト藻の培養方法、及びハプト藻の培養装置 - Google Patents

ハプト藻の培養方法、及びハプト藻の培養装置 Download PDF

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WO2020162407A1
WO2020162407A1 PCT/JP2020/003963 JP2020003963W WO2020162407A1 WO 2020162407 A1 WO2020162407 A1 WO 2020162407A1 JP 2020003963 W JP2020003963 W JP 2020003963W WO 2020162407 A1 WO2020162407 A1 WO 2020162407A1
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yellow
culture
illumination
pavlova lutheri
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PCT/JP2020/003963
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松永 茂
伊藤 博康
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Hamamatsu Photonics KK
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    • C12M31/00Means for providing, directing, scattering or concentrating light
    • C12M31/02Means for providing, directing, scattering or concentrating light located outside the reactor
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M21/00Bioreactors or fermenters specially adapted for specific uses
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    • C12M31/00Means for providing, directing, scattering or concentrating light
    • C12M31/10Means for providing, directing, scattering or concentrating light by light emitting elements located inside the reactor, e.g. LED or OLED
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/12Unicellular algae; Culture media therefor

Definitions

  • the present disclosure relates to a method for culturing haptoalgae and a device for culturing haptoalgae.
  • Patent Document 1 describes an algae culture method in which artificial light is applied to algae to promote growth.
  • this algae culturing method at least two or more irradiation cycles consisting of a red light irradiation procedure of irradiating algae with red light and a blue light irradiation procedure of irradiating algae with blue light are performed at least two times within a certain period.
  • the present disclosure aims to provide a culturing method and a culturing device capable of extending the life of haptophyta.
  • the present inventor when irradiating both the yellow light and visible light other than yellow to the haptophyte, the period from the start of culture by light irradiation until the number of individuals decreases, and when only visible light other than yellow is irradiated. It has been found that it will be longer in comparison.
  • the method for culturing haptoalgae according to the present disclosure has a step of irradiating a culture solution containing haptoalgae with both yellow light and visible light other than yellow.
  • the haptoalga grows by receiving yellow light and visible light other than yellow light.
  • this culture method can prolong the life of the haptophyte.
  • the haptophyte may be Pavlova lutheri.
  • the life of Pavlova lutheri can be extended.
  • a culture apparatus for haptoalgae includes a culture tank for storing a culture solution containing haptoalgae, a first light source for irradiating the culture solution in the culture tank with yellow light, and a culture tank A second light source for irradiating the culture solution with visible light other than yellow.
  • the haptoalga culture device the haptoalga is cultivated in the culture solution in the culture tank.
  • the haptophyta grows by receiving both yellow light emitted from the first light source and visible light other than yellow emitted from the second light source.
  • the haptoalga culture device may further include a control unit that controls the first light source and the second light source so that the culture liquid is irradiated with both yellow light and visible light.
  • the haptophyte in the culture solution can receive both the yellow light from the first light source and the visible light other than the yellow light from the second light source, which are emitted under the control of the control unit.
  • the haptophyte may be Pavlova lutheri.
  • the life of Pavlova lutheri can be extended.
  • FIG. 1 is an overall perspective view showing a culture device according to an embodiment.
  • FIG. 2 is a graph showing the absorption spectrum of Pavlova lutheri.
  • FIG. 3 is a graph showing the time variation of the cell density of Pavlova lutheri when cultured with light having different wavelength ranges.
  • FIG. 4 is a graph showing changes over time in cell density of Pavlova lutheri according to Examples and Comparative Examples.
  • Hapto algae The culturing method according to the present embodiment is a method for efficiently growing haptoalga and prolonging the life of the grown haptoalga.
  • Haptoalgae to be cultured are algae that serve as a highly nutritious feed for crustaceans such as shrimp and crabs, and shellfish seedlings such as clams and mussels.
  • Examples of haptophytes include Pavlova lutheri, Isochrysis galbana, Isochrysis sp., and the like.
  • FIG. 1 is an overall perspective view showing a culture device according to an embodiment.
  • the culturing method of the present embodiment is carried out, for example, by the culturing apparatus 1 shown in FIG.
  • the culture device 1 shown in FIG. 1 is a device for culturing a haptoalga 2.
  • the culture device 1 includes a culture tank 10, a first illumination 20, a second illumination 21, an underwater illumination 22, a control unit 30, and a ventilation unit 40.
  • the culture tank 10 is a container that stores the haptophyta 2 and the culture solution 3.
  • the culture solution 3 is water suitable for the growth environment of the haptoalga 2 to be cultured.
  • the culture solution 3 is, for example, water containing more nutrient salts such as nitrogen and phosphorus than seawater.
  • the haptophyta 2 grows by performing photosynthesis in the culture medium 3.
  • the culture tank 10 defines, for example, a box-shaped space whose upper side is open.
  • the culture tank 10 stores the haptophyta 2 and the culture solution 3 inside and forms a water surface 4.
  • the culture tank 10 has a bottom surface 11 at the lower end inside.
  • the first lighting 20 and the second lighting 21 irradiate the haptoalga 2 and the culture solution 3 in the culture tank 10 with light.
  • the first illumination 20 and the second illumination 21 are arranged above the water surface 4, for example.
  • the first lighting 20 and the second lighting 21 irradiate light with the light emitting surface thereof directed toward the bottom surface 11 of the culture tank 10.
  • the first lighting 20 irradiates the culture solution 3 in the culture tank 10 with yellow light.
  • the yellow light is light having a wavelength range of substantially 500 nm or more and 620 nm or less.
  • the wavelength range is a range of wavelengths in which the peak wavelength of light exists.
  • the upper limit of the wavelength range of yellow light may be 600 nm.
  • the lower limit value of the wavelength range of yellow light may be 540 nm.
  • the lower limit value of the wavelength range of yellow light may be 550 nm.
  • the yellow light may be, for example, light whose half-value width of the peak wavelength falls within any of the above wavelength ranges.
  • the first illumination 20 is, for example, a surface light source including a plurality of yellow LEDs (light emitting diodes: Light Emitting Diodes) fixed on a substrate and having a light emitting surface on one side.
  • the second illumination 21 irradiates the culture solution 3 in the culture tank 10 with visible light other than yellow.
  • Visible light other than yellow is visible light whose wavelength range is substantially less than 500 nm or longer than 620 nm.
  • the visible light other than yellow may be visible light in a wavelength range longer than 600 nm.
  • Visible light other than yellow may be visible light in a wavelength range of less than 540 nm.
  • Visible light other than yellow may be visible light in a wavelength range of less than 550 nm.
  • the visible light other than yellow may be, for example, light whose half-value width of the peak wavelength falls within any of the above wavelength ranges.
  • the second illumination 21 is, for example, a surface light source including a plurality of LEDs fixed on a substrate and having a light emitting surface on one surface.
  • the underwater illumination 22 is arranged in the culture tank 10 and irradiates the haptoalga 2 and the culture solution 3 in the culture tank 10 with light.
  • the underwater lighting 22 is arranged, for example, at the upper end of the scaffold 23 extending upward from the bottom surface 11.
  • the underwater illumination 22 is arranged in the culture solution 3 apart from the water surface 4 and the bottom surface 11.
  • the underwater illumination 22 is arranged along a plane parallel to the bottom surface 11.
  • the underwater illumination 22 is arranged with the light emitting surfaces on both sides facing the water surface 4 and the bottom surface 11.
  • Underwater lighting 22 emits yellow light or visible light other than yellow light.
  • the wavelength range of yellow light in the underwater illumination 22 is the same as the wavelength range of yellow light in the first illumination 20.
  • the wavelength range of visible light other than yellow in the underwater illumination 22 is the same as the wavelength range of visible light other than yellow in the second illumination 21.
  • the underwater illumination 22 is, for example, a surface light source that is configured by bonding together substrates of two LED plates configured by a plurality of LEDs fixed on the substrate and has light emitting surfaces on both sides.
  • the underwater illumination 22 is covered with, for example, a translucent resin member. Since the underwater illumination 22 is arranged in the culture solution 3, it is waterproofed.
  • the first illumination 20, the second illumination 21, or the underwater illumination 22 has a power source inside.
  • the power of the first lighting 20, the second lighting 21, or the underwater lighting 22 may be supplied from an external power source by wiring or the like.
  • the control unit 30 controls the first lighting 20, the second lighting 21, and the underwater lighting 22 so that the culture solution 3 is irradiated with both yellow light and visible light other than yellow light.
  • the control unit 30 is, for example, a CPU (Central Processing Unit).
  • the control unit 30 is connected to the first lighting 20, the second lighting 21, and the underwater lighting 22.
  • the control unit 30 controls the timing at which the first illumination 20, the second illumination 21, and the underwater illumination 22 each emit light.
  • the control unit 30 irradiates the culture tank 10 with yellow light from the first illumination 20 (an example of a first light source) and visible light other than yellow from the second illumination 21 (an example of a second light source) at the same time.
  • the control unit 30 causes the underwater illumination 22 (an example of the first light source) to emit yellow light and the second illumination 21 (an example of the second light source) to emit visible light other than yellow to the culture tank 10 at the same time. You may control.
  • the control unit 30 causes the yellow light by the first illumination 20 (an example of the first light source) and the visible light other than yellow by the underwater illumination 22 (an example of the second light source) to be simultaneously irradiated into the culture tank 10. You may control.
  • the control unit 30 causes the yellow light by the combination of the first illumination 20 and the underwater illumination 22 (an example of the first light source) and the visible light other than the yellow light by the second illumination 21 (an example of the second light source) to be cultured simultaneously. It may be controlled to irradiate within 10.
  • the control unit 30 controls the yellow light from the first illumination 20 (an example of the first light source) and the visible light other than yellow by the combination of the second illumination 21 and the underwater illumination 22 (an example of the second light source) at the same time. It may be controlled to irradiate within 10.
  • the control unit 30 may control the wavelength and intensity of the first illumination 20, the second illumination 21, or the underwater illumination 22.
  • the wavelength and intensity controlled by the control unit 30 are set based on the density of the haptoalga 2 in the culture tank 10, the growth rate, the number of culture days, and the like.
  • the control unit 30 controls the first illumination 20, the second illumination 21, or the underwater illumination 22 based on the set wavelength and intensity.
  • the ventilation part 40 vents the gas 41 containing carbon dioxide and oxygen from the bottom surface 11 toward the water surface 4.
  • the gas 41 contains carbon dioxide and oxygen.
  • the haptoalgae 2 performs photosynthesis using carbon dioxide that permeates the culture medium 3 and breathes using oxygen.
  • the ventilation part 40 has an air cylinder 42, a supply pipe 43, and a discharge pipe 44.
  • the air cylinder 42 stores the gas 41 containing carbon dioxide and oxygen.
  • the air cylinder 42 may be an air pump.
  • the supply pipe 43 has one end connected to the air cylinder 42 and the other end connected to the discharge pipe 44.
  • the supply pipe 43 is made of, for example, a silicon tube.
  • the supply pipe 43 acquires a predetermined amount of gas 41 from the air cylinder 42.
  • the supply pipe 43 supplies the acquired gas 41 to the discharge pipe 44.
  • the discharge pipe 44 is arranged on the bottom surface 11.
  • the discharge pipe 44 is an elongated pipe member.
  • the discharge pipe 44 is, for example, a vinyl chloride pipe.
  • the discharge pipe 44 defines a pipe line 45 therein, and has a plurality of small holes 46 at a predetermined interval in the upper portion.
  • the plurality of small holes 46 connect the inside of the culture tank 10 and the conduit 45.
  • the gas 41 supplied from the supply pipe 43 to the discharge pipe 44 passes through the conduit 45 and is discharged from the plurality of small holes 46 into the culture tank 10.
  • the amount of the gas 41 that the supply pipe 43 acquires from the air cylinder 42, the size of the discharge pipe 44, the shape and size of the cross section of the pipe line 45 and the small hole 46, and the arrangement interval of the small holes 46 in the discharge pipe 44 are the haptoalgae. 2 is appropriately set according to the density, the growth rate, the number of culture days, and the like.
  • the control unit 30 may control the ventilation unit 40.
  • the control unit 30 controls, for example, the amount and supply rate of the gas 41 that ventilates the culture solution 3.
  • the gas 41 is aerated in the culture solution 3 by the aeration unit 40, so that a water flow circulating in the culture tank 10 is generated. As a result, the deviation of the amount of received light between individuals is suppressed by the haptophyta 2 moving along the water flow.
  • the haptophyta 2 and the culture solution 3 are stored in the culture tank 10. Under the control of the control unit 30, the ventilation unit 40 vents the culture liquid 3 with the gas 41. A water flow that circulates in the culture tank 10 is generated by the aeration unit 40, and the haptoalga 2 moves in the culture tank 10 along the water flow. Based on the control of the control unit 30, the yellow light from the first illumination 20 or the underwater illumination 22 and the visible light other than the yellow light from the second illumination 21 or the underwater illumination 22 are stored in the culture medium 3 stored in the culture tank 10. The haptophyte 2 is irradiated together. As a result, the haptoalgae 2 receives both yellow light and visible light other than yellow light to perform photosynthesis and proliferate.
  • the side surface and the bottom surface 11 of the culture tank 10 have a structure that shields light from the outside so that light other than the first illumination 20, the second illumination 21, or the underwater illumination 22 does not enter the culture solution 3. You may.
  • the culture device 1 may not include the first lighting 20.
  • the underwater illumination 22 is used as a light source that emits yellow light.
  • the culture device 1 may not include the second illumination 21.
  • the underwater illumination 22 is used as a light source that emits visible light other than yellow.
  • the culture device 1 may not include the first illumination 20 and the second illumination 21. In this case, the underwater illumination 22 emits both yellow light and visible light other than yellow light.
  • the culture device 1 may not include the underwater illumination 22.
  • the first illumination 20 is used as a light source that emits yellow light
  • the second illumination 21 is used as a light source that emits visible light other than yellow light.
  • the first illumination 20 or the second illumination 21 may be arranged so as to emit light from the side surface or the bottom surface 11 of the culture tank 10.
  • the culture device 1 may not include the control unit 30.
  • the worker may perform the control of the light irradiation by the first illumination 20, the second illumination 21, or the underwater illumination 22, or the control of the ventilation amount or the supply speed of the gas 41 in the ventilation portion 40.
  • the culture method of the present disclosure may be applied to other phytoplankton having the characteristics of absorbance similar to those of Haptoalga 2.
  • Another phytoplankton is, for example, a plankton having a low absorbance in the wavelength range of yellow light.
  • yellow light may be irradiated after the haptophyte has grown by irradiation with visible light other than yellow.
  • Pavlova lutheri absorption spectrum The absorption spectrum of Pavlova lutheri was measured by spectrophotometric analysis. An apparatus in which a light source, an opal glass, a sample cell, and a spectroscopic detector were aligned in order was used. An absorption spectrum of Pavlova lutheri was obtained by storing Pavlova lutheri and water in a sample cell, irradiating the sample cell with scattered light, and detecting the light transmitted through the sample cell for each wavelength. The measurement conditions are as follows.
  • Sample Pavlova lutheri and water 1500 ⁇ 10 4 Cells/ml
  • Light source Tungsten lamp light source (wavelength range: 350 nm or more and 3000 nm or less (continuous emission))
  • Optical path length of sample cell 1 cm
  • Spectral detector multi-channel spectrophotometer (PMA) manufactured by Hamamatsu Photonics KK, linear CCD array system Only water was stored in a sample cell for comparison, and an absorption spectrum of water was obtained under the above measurement conditions. The results are shown in Figure 2.
  • PMA multi-channel spectrophotometer
  • Fig. 2 is a graph showing the absorption spectrum of Pavlova lutheri.
  • the horizontal axis represents wavelength (nm) and the vertical axis represents absorbance.
  • FIG. 2 shows half-widths of peak wavelengths of red light, yellow light, green light, blue light, and white light emitted from a light source used in Examples described later.
  • the peak wavelength of red light is 655 nm, and the full width at half maximum is in the range of 645 nm to 670 nm.
  • the peak wavelength of yellow light is 568 nm, and the full width at half maximum is in the range of 510 nm to 620 nm.
  • the peak wavelength of green light is 530 nm, and the full width at half maximum is in the range of 515 nm to 545 nm.
  • the peak wavelength of blue light is 447.5 nm, and the full width at half maximum is in the range of 440 nm to 460 nm.
  • the peak wavelengths of white light are 440 nm and 570 nm, the half-value width of the short wavelength side peak is in the range of 430 nm or more and 460 nm or less, and the half wavelength width of the long wavelength side peak is in the range of 520 nm or more and 650 nm or less.
  • the absorbance of water changed around 0 in the wavelength range of 350 nm to 800 nm. From this, it was confirmed that the influence of water on the absorption spectrum was small.
  • the absorbance of Pavlova lutheri resulted in having a peak around the wavelength range of blue light or red light. That is, it was confirmed that Pavlova lutheri easily absorbs light around the wavelength range of blue light or red light. This result suggests that the light around the wavelength range of blue light or red light can be used for the photosynthesis of Pavlova lutheri more efficiently than the case of using yellow light or green light.
  • the time change of the cell density of Pavlova lutheri was measured for each color of irradiation light.
  • irradiation light red light, yellow light, green light and blue light were used.
  • the peak wavelengths and half widths of red light, yellow light, green light, and blue light are as described above.
  • the culture device 1 was prepared for each color of irradiation light. Light was emitted using only the underwater illumination 22 without using the first illumination 20 and the second illumination 21.
  • the culture conditions are as follows.
  • the cell density of Pavlova lutheri cultured under the above culture conditions was measured every number of culture days.
  • the cell density of Pavlova lutheri was measured by collecting 10 ⁇ L of the culture solution 3 from the culture tank 10 and using a one-cell counter (dispocytometer). This measurement was repeated 4 times, the average was calculated, and it was set as the cell density of Pavlova lutheri in the culture solution 3 on that day. Results are shown in FIG.
  • FIG. 3 is a graph showing the time change of the cell density of Pavlova lutheri when cultured with light having different wavelength ranges.
  • the horizontal axis of FIG. 3 is the number of days of culture (days), and the vertical axis is the cell density of Pavlova lutheri ( ⁇ 10 4 Cells/ml). The day when the culture was started was defined as day 0.
  • Each graph shown in FIG. 3 plots the cell density of Pavlova lutheri for each light when Pavlova lutheri is cultured by receiving any one light of red light, yellow light, green light or blue light, The estimated cell density between each data point is represented by an approximate line.
  • red light is light that Pavlova lutheri easily absorbs.
  • Pavlova lutheri is expected to have increased the number of individuals as a result of absorbing a lot of light and actively photosynthesizing.
  • blue light is light that Pavlova lutheri easily absorbs, it is light that does not easily reach Pavlova lutheri in a large-scale culture tank such as this experiment environment, so it contributes to population growth more than green light. It is speculated that he did not.
  • the yellow light hardly contributes to the growth of Pavlova lutheri despite the irradiation.
  • the yellow light is the light that Pavlova lutheri is not likely to absorb, but has the highest transmittance. Therefore, it is unlikely that the yellow light did not contribute to the growth of Pavlova lutheri because it did not reach Pavlova lutheri.
  • Pavlova lutheri is actively active and undergoes photosynthesis.
  • Pavlova lutheri is in a situation where it is not proliferating while performing photosynthesis.
  • yellow light exerts an extraordinary effect that other lights do not have, that is, it does not contribute to proliferation (suppresses proliferation) while giving the energy required for Pavlova lutheri activity.
  • Pavlova lutheri was cultured with yellow light and visible light other than yellow using the culture device 1, and the time change of cell density was measured.
  • White light was used as an example of visible light other than yellow.
  • the peak wavelengths and half widths of yellow light and white light are as described above.
  • the underwater illumination 22 was used to illuminate yellow light, and the second illumination 21 was used to illuminate white light.
  • the culture conditions are as follows.
  • Pavlova lutheri was cultured using another culture device 1 only with white light, and the time change of cell density was measured. White light was emitted using the second illumination 21.
  • the culture conditions except the yellow light which was not irradiated and the method for measuring the cell density were the same as those in the examples. The results are shown in Fig. 4.
  • FIG. 4 is a graph showing changes over time in cell density of Pavlova lutheri according to Examples and Comparative Examples.
  • the horizontal axis of FIG. 3 is the number of days of culture (days), and the vertical axis is the cell density of Pavlova lutheri ( ⁇ 10 4 Cells/ml). The day when the culture was started was defined as day 0.
  • Each graph shown in FIG. 4 is a plot of the cell density of Pavlova lutheri according to the example and the comparative example, and the estimated cell density between each data point is represented by an approximate line.
  • the cell density of Pavlova lutheri according to the comparative example increased in a short period from the start of the culture, as in the case of visible light other than the yellow color shown in FIG. Decreased with the passage of. Specifically, the increase in cell density slowed down from the 7th day, and the cell density was maintained at 800 to 1000 ( ⁇ 10 4 Cells/ml) from the 7th day to the 19th day. After day 19, cell density decreased. The period in which the number of Pavlova lutheri individuals was 800 ( ⁇ 10 4 Cells/ml) or more was 12 days.
  • the Pavlova lutheri according to the Example has a slightly lower growth rate from the start of culture as compared with the Comparative Example, but stably grows. Specifically, cell density increased by day 22. The increase in cell density slowed down from the 22nd day, and the cell density was maintained at 1100 to 1500 ( ⁇ 10 4 cells/ml) from the 22nd day to the 39th day. After 39 days, the cell density decreased. The period in which the number of Pavlova lutheri individuals was 800 ( ⁇ 10 4 Cells/ml) or more was 28 days.
  • the period from the start of culture by light irradiation to the rapid decrease in the number of individuals was 39 days, which was longer than the period of 19 days in the comparative example.
  • the maximum cell density was maintained for 17 days, which was longer than the comparative example of 12 days.
  • the period of 800 ( ⁇ 10 4 Cells/ml) or more was 28 days, which was longer than the period of 12 days of the comparative example.
  • the culture method according to the example prolongs all the evaluated periods as compared with the method according to the comparative example. Therefore, it was confirmed that the culture method according to the example can prolong the life of haptophytes such as Pavlova lutheri, as compared with the method according to the comparative example.
  • the maximum value of the cell density was 1100 to 1500 ( ⁇ 10 4 Cells/ml), which was increased compared to the comparative example of 800 to 1000 ( ⁇ 10 4 Cells/ml).
  • the culture method according to the example can increase the maximum cell density of Pavlova lutheri as compared with the method according to the comparative example.
  • SYMBOLS 1... Culture apparatus, 2... Haptoalgae, 3... Culture solution, 4... Water surface, 10... Culture tank, 11... Bottom surface, 20... 1st illumination, 21... 2nd illumination, 22... Underwater illumination, 23... Scaffold, 30 ... control part, 40... ventilation part, 41... gas, 42... air cylinder, 43... supply pipe, 44... discharge pipe, 45... pipe line, 46... small hole.

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Abstract

ハプト藻の培養方法は、ハプト藻を含む培養液に対し、黄色光と黄色以外の可視光とを共に照射するステップを有する。

Description

ハプト藻の培養方法、及びハプト藻の培養装置
 本開示は、ハプト藻の培養方法、及びハプト藻の培養装置に関する。
 特許文献1には、藻類に人工光を照射して増殖を促進させる藻類培養方法が記載されている。この藻類培養方法では、赤色光を藻類に照射する赤色光照射手順と、青色光を藻類に照射する青色光照射手順と、からなる照射サイクルを一定期間内に少なくとも2サイクル以上行われる。
特開2015-128448号公報
 特許文献1に記載の藻類培養方法に挙げられている赤色光又は青色光をハプト藻に照射して培養した場合、ハプト藻は増殖するものの、短期間で減少することが確認された。本開示は、ハプト藻の長寿命化を図ることができる培養方法及び培養装置を提供することを目的とする。
 本発明者は、黄色光と黄色以外の可視光とを共にハプト藻に照射した場合、光照射による培養開始から個体数が減少するまでの期間が、黄色以外の可視光のみを照射した場合と比較して長くなることを見出した。
 上記知見に基づき、本開示に係るハプト藻の培養方法は、ハプト藻を含む培養液に対し、黄色光と黄色以外の可視光とを共に照射するステップを有する。このハプト藻の培養方法によれば、ハプト藻は、黄色光と黄色以外の可視光とを受光して増殖する。これにより、黄色以外の可視光のみを照射した場合と比較して、この培養方法は、ハプト藻の長寿命化を図ることができる。
 一実施形態においては、ハプト藻はPavlova lutheriであってもよい。この場合、Pavlova lutheriの長寿命化を図ることができる。
 本開示の他の側面に係るハプト藻の培養装置は、ハプト藻を含む培養液を貯留する培養槽と、培養槽内の培養液に対して黄色光を照射する第1光源と、培養槽内の培養液に対して黄色以外の可視光を照射する第2光源と、を備える。このハプト藻の培養装置によれば、ハプト藻は、培養槽の培養液内で培養される。ハプト藻は、第1光源から照射される黄色光と、第2光源から照射される黄色以外の可視光とを共に受光して増殖する。これにより、黄色以外の可視光のみを照射した場合と比較して、この培養装置は、ハプト藻の長寿命化を図ることができる。
 一実施形態に係るハプト藻の培養装置は、黄色光及び可視光が共に培養液に照射されるように第1光源及び第2光源を制御する制御部をさらに備えてもよい。この場合、培養液内のハプト藻は、制御部の制御に基づき照射される第1光源からの黄色光と第2光源からの黄色以外の可視光とを共に受光することができる。
 一実施形態においては、ハプト藻はPavlova lutheriであってもよい。この場合、Pavlova lutheriの長寿命化を図ることができる。
 本開示によれば、ハプト藻の長寿命化を図ることができる。
図1は、実施形態に係る培養装置を示す全体斜視図である。 図2は、Pavlova lutheriの吸収スペクトルを示すグラフである。 図3は、波長域の異なる光で培養したときのPavlova lutheriの細胞密度の時間変化を示すグラフである。 図4は、実施例及び比較例に係るPavlova lutheriの細胞密度の時間変化を示すグラフである。
 以下、図面を参照して、本開示の実施形態について説明する。なお、以下の説明及び各図面において、同一又は相当要素には同一符号を付し、重複する説明は繰り返さない。図面の寸法比率は、説明のものと必ずしも一致していない。「上」「下」「左」「右」の語は、図示する状態に基づくものであり、便宜的なものである。
(ハプト藻)
 本実施形態に係る培養方法は、ハプト藻を効率的に増殖させ、増殖したハプト藻の長寿命化を図る方法である。培養対象であるハプト藻は、エビやカニなどの甲殻類、アサリやアカガイなどの貝類の種苗に対して栄養価の高い餌料となる藻類である。ハプト藻としては、例えば、Pavlova lutheri、Isochrysis galbana、Isochrysis sp.などが挙げられる。
(ハプト藻の培養装置)
 図1は、実施形態に係る培養装置を示す全体斜視図である。本実施形態の培養方法は、例えば、図1に示す培養装置1によって実施される。図1に示す培養装置1は、ハプト藻2を培養する装置である。培養装置1は、培養槽10と、第1照明20と、第2照明21と、水中照明22と、制御部30と、通気部40とを備える。培養槽10は、ハプト藻2及び培養液3を貯留する容器である。培養液3は、培養対象であるハプト藻2の生育環境に適した水である。培養液3は、例えば、海水より窒素やリンなどの栄養塩を多く含む水である。ハプト藻2は、培養液3中で光合成を行い増殖する。
 培養槽10は、例えば、上方が開放された箱型の空間を内部に画成する。培養槽10は、内部においてハプト藻2及び培養液3を貯留し、水面4を形成する。培養槽10は、内部の下端に底面11を有する。
 第1照明20及び第2照明21は、培養槽10内のハプト藻2及び培養液3に向けて光を照射する。第1照明20及び第2照明21は、例えば、水面4の上方に配置される。第1照明20及び第2照明21は、発光面を培養槽10の底面11に向けて光を照射する。
 第1照明20は、培養槽10内の培養液3に対して黄色光を照射する。黄色光とは、実質的に波長域が500nm以上620nm以下の光である。波長域とは、光のピーク波長が存在する波長の範囲である。黄色光の波長域の上限値は、600nmであってもよい。黄色光の波長域の下限値は、540nmであってもよい。黄色光の波長域の下限値は、550nmであってもよい。ここで、黄色光は、例えば、ピーク波長の半値幅が上記のいずれかの波長域内に入る光としてもよい。第1照明20は、例えば、基板上に固定された複数個の黄色のLED(発光ダイオード:Light Emitting Diode)で構成され、片面に発光面を有する面光源である。
 第2照明21は、培養槽10内の培養液3に対して黄色以外の可視光を照射する。黄色以外の可視光とは、実質的に波長域が500nm未満又は620nmより長い可視光である。黄色以外の可視光は、600nmより長い波長域の可視光であってもよい。黄色以外の可視光は、540nm未満の波長域の可視光であってもよい。黄色以外の可視光は、550nm未満の波長域の可視光であってもよい。ここで、黄色以外の可視光は、例えば、ピーク波長の半値幅が上記のいずれかの波長域内に入る光としてもよい。第2照明21は、例えば、基板上に固定された複数個のLEDで構成され、片面に発光面を有する面光源である。
 水中照明22は、培養槽10内に配置され、培養槽10内のハプト藻2及び培養液3に向けて光を照射する。水中照明22は、例えば、底面11から上方に延在した足場23の上端に配置される。水中照明22は、水面4及び底面11から離間して培養液3中に配置される。水中照明22は、底面11に平行な平面に沿って配置される。水中照明22は、両面の発光面を水面4及び底面11に向けて配置される。
 水中照明22は、黄色光又は黄色以外の可視光を照射する。水中照明22における黄色光の波長域は、第1照明20における黄色光の波長域と同一である。水中照明22における黄色以外の可視光の波長域は、第2照明21における黄色以外の可視光の波長域と同一である。水中照明22は、例えば、基板上に固定された複数個のLEDで構成された2つのLED板の基板同士を貼り合わせて構成され、両面に発光面を有する面光源である。
 水中照明22は、例えば、透光性を有する樹脂部材によって被覆される。水中照明22は、培養液3内に配置されることから、防水処理が施される。第1照明20、第2照明21又は水中照明22は内部に電源を有している。第1照明20、第2照明21又は水中照明22の電力は、配線などによって外部電源から供給されてもよい。
 制御部30は、黄色光及び黄色以外の可視光が共に培養液3に照射されるように、第1照明20、第2照明21及び水中照明22を制御する。制御部30は、例えば、CPU(Central Processing Unit)である。制御部30は、第1照明20、第2照明21及び水中照明22と接続される。制御部30は、第1照明20、第2照明21及び水中照明22がそれぞれ光を照射するタイミングを制御する。
 制御部30は、例えば、第1照明20(第1光源の一例)による黄色光と、第2照明21(第2光源の一例)による黄色以外の可視光とがそれぞれ同時に培養槽10内に照射されるよう制御する。制御部30は、水中照明22(第1光源の一例)による黄色光と、第2照明21(第2光源の一例)による黄色以外の可視光とがそれぞれ同時に培養槽10内に照射されるよう制御してもよい。制御部30は、第1照明20(第1光源の一例)による黄色光と、水中照明22(第2光源の一例)による黄色以外の可視光とがそれぞれ同時に培養槽10内に照射されるよう制御してもよい。
 制御部30は、第1照明20及び水中照明22の組み合わせ(第1光源の一例)による黄色光と、第2照明21(第2光源の一例)による黄色以外の可視光とがそれぞれ同時に培養槽10内に照射されるよう制御してもよい。制御部30は、第1照明20(第1光源の一例)による黄色光と、第2照明21及び水中照明22の組み合わせ(第2光源の一例)による黄色以外の可視光とがそれぞれ同時に培養槽10内に照射されるよう制御してもよい。
 制御部30は、第1照明20、第2照明21又は水中照明22の波長及び強度を制御してもよい。制御部30において制御される波長及び強度は、培養槽10内のハプト藻2の密度、増殖速度又は培養日数などに基づき設定される。制御部30は、設定された波長及び強度に基づき、第1照明20、第2照明21又は水中照明22を制御する。
 通気部40は、二酸化炭素及び酸素を含む気体41を底面11から水面4に向かって通気させる。気体41は、二酸化炭素及び酸素を含む。ハプト藻2は、培養液3内を通気する二酸化炭素を用いて光合成を行い、酸素を用いて呼吸を行う。通気部40は、空気ボンベ42、供給管43、及び放出管44を有する。空気ボンベ42は、二酸化炭素及び酸素を含む気体41を格納する。空気ボンベ42は、空気ポンプであってもよい。供給管43は、一端を空気ボンベ42と接続し、他端を放出管44と接続する。供給管43は、例えばシリコンチューブからなる。供給管43は、空気ボンベ42から所定の量の気体41を取得する。供給管43は、取得した気体41を放出管44に供給する。
 放出管44は、底面11上に配置される。放出管44は、長尺状の管部材である。放出管44は、例えば、塩化ビニル管からなる。放出管44は、内部に管路45を画成し、上部に所定の間隔で複数の小穴46を有する。複数の小穴46は、培養槽10内と管路45とを連通する。放出管44において、供給管43から放出管44に供給された気体41は、管路45を通り、複数の小穴46から培養槽10内へと放出される。
 供給管43が空気ボンベ42から取得する気体41の量、放出管44の大きさ、管路45及び小穴46の断面の形状及び大きさ、並びに放出管44における小穴46の配置間隔は、ハプト藻2の密度、増殖速度又は培養日数などに応じて適宜設定される。制御部30は、通気部40を制御してもよい。制御部30は、例えば、培養液3内を通気する気体41の量及び供給速度を制御する。通気部40により培養液3内に気体41が通気されることで、培養槽10内を循環する水流が生起される。これにより、ハプト藻2が水流に沿って移動することで個体間の受光量の偏りが抑制される。
(ハプト藻の培養方法)
 次に、ハプト藻2の培養方法について説明する。培養槽10内にハプト藻2と培養液3が貯留される。制御部30の制御に基づき、通気部40は、培養液3内に気体41を通気させる。通気部40により培養槽10内を循環する水流が生起され、ハプト藻2は水流に沿って培養槽10内を移動する。制御部30の制御に基づき、第1照明20又は水中照明22による黄色光と、第2照明21又は水中照明22による黄色以外の可視光とが、培養槽10に貯留された培養液3内のハプト藻2に共に照射される。これにより、ハプト藻2は、黄色光及び黄色以外の可視光を共に受光することで、光合成を行い増殖する。
(実施形態のまとめ)
 黄色光のみをハプト藻2に照射して培養してもハプト藻2を増殖させることはできない。黄色以外の可視光をハプト藻2に照射することにより、ハプト藻2を増殖させることができるもののハプト藻2は短期間で減少してしまう。黄色以外の可視光とハプト藻2の増殖に寄与しない黄色光とを組み合わせて培養することにより、ハプト藻2を増殖させることができ、ハプト藻2が短期間で減少する現象が改善される。本実施形態に係るハプト藻2の培養方法及び培養装置1によれば、黄色光と黄色以外の可視光とを共に照射することにより、ハプト藻2の長寿命化を図ることができる。
(変形例)
 以上、種々の例示的実施形態について説明してきたが、上述した例示的実施形態に限定されることなく、様々な省略、置換、及び変更がなされてもよい。例えば、培養槽10の側面及び底面11は、例えば、第1照明20、第2照明21又は水中照明22以外の光が培養液3に入射しないように、外部からの光を遮光する構造を有してもよい。
 また、培養装置1は、第1照明20を備えなくてもよい。この場合、黄色光を照射する光源として、水中照明22を用いる。培養装置1は、第2照明21を備えなくてもよい。この場合、黄色以外の可視光を照射する光源として、水中照明22を用いる。培養装置1は、第1照明20及び第2照明21を備えなくてもよい。この場合、水中照明22は、黄色光及び黄色以外の可視光を共に照射する。培養装置1は、水中照明22を備えなくてもよい。この場合、黄色光を照射する光源として、第1照明20が用いられ、黄色以外の可視光を照射する光源として、第2照明21が用いられる。第1照明20又は第2照明21は、培養槽10の側面又は底面11の方から光を照射するように配置されてもよい。
 培養装置1は、制御部30を備えなくてもよい。この場合、第1照明20、第2照明21若しくは水中照明22による光照射の制御、又は、通気部40における気体41の通気量若しくは供給速度の制御は、作業員により行われてもよい。本開示の培養方法は、ハプト藻2と類似する吸光度の特徴を有する他の植物プランクトンに適用してもよい。他の植物プランクトンは、例えば、黄色光の波長域において吸光度が低いプランクトンである。培養方法は、黄色以外の可視光の照射によりハプト藻が増殖した後において、黄色光を照射するようにしてもよい。
 以下、本開示に係る方法及び装置の効果を検証するために実施した種々の実験について説明する。なお、本開示は、以下の実験に限定されるものではない。以下の実験では、ハプト藻2の一例としてPavlova lutheriを用いた。
(Pavlova lutheriの吸収スペクトル)
 Pavlova lutheriの吸収スペクトルを吸光光度分析によって測定した。光源、オパールグラス、試料セル、及び分光検出器を順に一直線に並べた装置を用いた。Pavlova lutheriと水とを試料セルに格納し、散乱光を試料セルに照射し、試料セルを透過した光を波長ごとに検出することで、Pavlova lutheriの吸収スペクトルを得た。測定条件は以下の通りである。
 試料:Pavlova lutheri及び水 1500×10 Cells/ml
 光源:タングステンランプ光源(波長域:350nm以上3000nm以下(連続発光))
 試料セルの光路長:1cm
 分光検出器:浜松ホトニクス社製マルチチャネル分光測定器(PMA)、リニアCCDアレイ方式
 比較対象として水のみを試料セルに格納し、上記の測定条件にて水の吸収スペクトルを得た。結果を図2に示す。
 図2は、Pavlova lutheriの吸収スペクトルを示すグラフである。図2の横軸は波長(nm)、縦軸は吸光度である。図2は、後述の実施例で用いた光源から照射される赤色光、黄色光、緑色光、青色光、及び白色光のピーク波長の半値幅を示している。赤色光のピーク波長は655nmであり、半値幅は645nm以上670nm以下の範囲である。黄色光のピーク波長は568nmであり、半値幅は510nm以上620nm以下の範囲である。緑色光のピーク波長は530nmであり、半値幅は515nm以上545nm以下の範囲である。青色光のピーク波長は447.5nmであり、半値幅は440nm以上460nm以下の範囲である。白色光のピーク波長は440nm及び570nmであり、短波長側ピークの半値幅は430nm以上460nm以下の範囲であり、長波長側ピークの半値幅は520nm以上650nm以下の範囲である。
 図2に示すように、水の吸光度は、350nm以上800nm以下の波長の範囲において0付近で推移した。これにより、水が吸収スペクトルへ与える影響は小さいことが確認された。Pavlova lutheriの吸光度は、青色光又は赤色光の波長域周辺においてピークを有する結果となった。つまり、Pavlova lutheriは、青色光又は赤色光の波長域周辺の光を吸収しやすいことが確認された。この結果は、青色光又は赤色光の波長域周辺の光を用いた方が、黄色光又は緑色光を用いるよりもPavlova lutheriの光合成を効率良く行えることを示唆している。
(黄色光によるPavlova lutheriの増殖抑制効果の確認)
 Pavlova lutheriの細胞密度の時間変化を照射光の色ごとに測定した。照射光は、赤色光、黄色光、緑色光及び青色光を用いた。赤色光、黄色光、緑色光及び青色光のピーク波長及び半値幅は、前述の通りである。照射光の色ごとに培養装置1を用意した。第1照明20及び第2照明21を用いず、水中照明22のみを用いて光を照射した。培養条件は以下のとおりである。
 培養槽10の大きさ(内寸):幅309mm、奥行439mm、高さ300mm
 培養液3の水深:180mm
 通気部40の気体41の通気量:毎分8L
 照射光の強度:100μmolm-2-1(培養日数0~7日)、330μmol/m-2-1(培養日数8日目以降)
 上記の培養条件で培養されたPavlova lutheriの細胞密度を培養日数ごとに測定した。Pavlova lutheriの細胞密度は、培養槽10内から10μLの培養液3を採取し、ワンセルカウンター(ディスポ形血球計算版)によって測定した。この測定を4回繰り返し、その平均を算出し、その日の培養液3中のPavlova lutheriの細胞密度とした。結果を図3に示す。
 図3は、波長域の異なる光で培養したときのPavlova lutheriの細胞密度の時間変化を示すグラフである。図3の横軸は培養日数(日)、縦軸は、Pavlova lutheriの細胞密度(×10 Cells/ml)である。培養を開始した日を0日目とした。図3に示す各グラフは、Pavlova lutheriが赤色光、黄色光、緑色光又は青色光のいずれか1つの光を受光して培養された場合において、光ごとのPavlova lutheriの細胞密度をプロットし、各データ点間の推定の細胞密度を近似線で表したものである。
 図3に示すように、赤色光、黄色光、緑色光又は青色光のうち、Pavlova lutheriの個体数を最も増加させることができた光は、赤色光であることが確認された。図2に示したように、赤色光はPavlova lutheriが吸収しやすい光である。つまり、赤色光を用いることで、Pavlova lutheriは、多くの光を吸収して活発に光合成した結果、個体数が増加したと予想される。
 しかしながら、Pavlova lutheriが吸収しやすい光である青色光で培養した場合には、個体数は、赤色光ほど増殖せず、むしろ、吸光度がより低い緑色光よりも増殖しなかった。この結果は、吸光度以外にもPavlova lutheriの増殖の要因が存在することを示唆している。考えられる1つの要因は、光透過率である。Pavlova lutheriが存在する培養槽10の光透過率は、黄色光、赤色光、緑色光、青色光の順に高い。青色光は、他の色の光と比べて透過率が極端に小さい。つまり、青色光は、Pavlova lutheriが吸収しやすい光であるものの、本実験環境のように大規模な培養槽においてはPavlova lutheriに届きにくい光であるため、緑色光よりも個体数の増殖に寄与しなかったと推測される。
 そして、図3に示すように、黄色光は、照射したにもかかわらず殆どPavlova lutheriの増殖に寄与しないことが確認された。上述の通り、黄色光は、Pavlova lutheriが吸収しやすい光ではないものの、最も透過率が高い光である。このため、黄色光は、Pavlova lutheriに届いていないためにPavlova lutheriの増殖に寄与しなかったとは考えにくい。顕微鏡で確認したところ、Pavlova lutheriは、活発に活動しており、光合成をしていることが示唆された。そうすると、Pavlova lutheriは光合成を行いつつ増殖していない状況であると言える。つまり、黄色光は、Pavlova lutheriの活動に必要なエネルギーを与えつつ増殖には寄与しない(増殖を抑えている)という、他の光には無い異質な効果を奏することが確認された。
 黄色光のみに増殖抑制効果があることから、Pavlova lutheriを増殖させるためには、黄色以外の可視光(例えば、赤色光、緑色光、青色光又は白色光など)を照射する必要があると言える。ただし、赤色光、緑色光又は青色光によって増殖したPavlova lutheriは、いずれも培養日数の経過とともに減少することが確認された。Pavlova lutheriの個体数は、青色光で増殖させた場合には17日目に0となり、緑色光で増殖させた場合には20日目に0となった。Pavlova lutheriの個体数は、赤色光で増殖させた場合にも23日目に大きく個体数が減少しており、数日以内に0となることが予想された。このように、赤色光、緑色光及び青色光は、Pavlova lutheriを増殖させることができるものの、増殖したPavlova lutheriの個体数を一週間程度しか維持させることができず、その後、個体数は急激に減少することが確認された。
(黄色光及び黄色以外の可視光によるPavlova lutheriの長寿命化効果の確認)
 実施例として、培養装置1を用いて黄色光及び黄色以外の可視光でPavlova lutheriを培養し、細胞密度の時間変化を測定した。黄色以外の可視光の一例として白色光を用いた。黄色光及び白色光のピーク波長及び半値幅は、前述の通りである。水中照明22を用いて黄色光を照射し、第2照明21を用いて白色光を照射した。培養条件は以下のとおりである。
 培養槽10の大きさ:幅309mm、奥行439mm、高さ300mm
 培養液3の水深:180mm
 通気部40の気体41の通気量:毎分8L
 黄色光の強度:80μmolm-2-1(水中照明22からの黄色光を水中照明22の上方60mmにおいて測定)
 白色光の強度:200μmolm-2-1(第2照明21からの白色光を水面上で測定)
 上記の培養条件で培養されたPavlova lutheriの細胞密度を培養日数ごとに前述の方法で測定した。
 比較例として、別の培養装置1を用いて白色光のみでPavlova lutheriを培養し、細胞密度の時間変化を測定した。第2照明21を用いて白色光を照射した。比較例において照射しない黄色光を除く培養条件及び細胞密度の測定方法は、実施例と同一とした。結果を図4に示す。
 図4は、実施例及び比較例に係るPavlova lutheriの細胞密度の時間変化を示すグラフである。図3の横軸は培養日数(日)、縦軸は、Pavlova lutheriの細胞密度(×10 Cells/ml)である。培養を開始した日を0日目とした。図4に示す各グラフは、実施例及び比較例に係るPavlova lutheriの細胞密度をプロットし、各データ点間の推定の細胞密度を近似線で表したものである。
 図4に示すように、比較例に係るPavlova lutheriの細胞密度は、図3に示される黄色以外の他の可視光と同様に、培養開始から短期間で増加するが、7日目から培養日数の経過とともに減少した。具体的には、7日目から細胞密度の増加が鈍化し、細胞密度は7日目から19日目まで800~1000(×10 Cells/ml)を維持した。19日目を経過すると、細胞密度は減少した。Pavlova lutheriの個体数が800(×10 Cells/ml)以上となった期間は、12日間であった。
 これに対して、実施例に係るPavlova lutheriは、比較例と比較して培養開始からの増殖速度はやや小さいが、安定して増殖することが確認された。具体的には、細胞密度は22日目まで増加した。22日目から細胞密度の増加が鈍化し、細胞密度は22日目から39日目まで1100~1500(×10 Cells/ml)を維持した。39日目を経過すると、細胞密度は減少した。Pavlova lutheriの個体数が800(×10 Cells/ml)以上となった期間は、28日間であった。
 このように、実施例では、光照射による培養開始から個体数が急激に減少するまでの期間が39日間であり、比較例の19日間と比較して長くなることが確認された。実施例では、細胞密度の最大値を維持した期間が17日間であり、比較例の12日間と比較して長くなることが確認された。実施例では、800(×10 Cells/ml)以上となった期間が28日間であり、比較例の12日間と比較して長くなることが確認された。このように、実施例に係る培養方法によれば、比較例に係る方法と比較して、評価したすべての期間が長くなることが確認された。よって、実施例に係る培養方法によれば、比較例に係る方法と比較して、Pavlova lutheriなどのハプト藻の長寿命化を図ることができることが確認された。
 さらに実施例では、細胞密度の最大値が1100~1500(×10 Cells/ml)であり、比較例の800~1000(×10 Cells/ml)と比較して増加した。このように、実施例に係る培養方法によれば、比較例に係る方法と比較して、Pavlova lutheriの細胞密度の最大値を増加させることができることが確認された。
1…培養装置、2…ハプト藻、3…培養液、4…水面、10…培養槽、11…底面、20…第1照明、21…第2照明、22…水中照明、23…足場、30…制御部、40…通気部、41…気体、42…空気ボンベ、43…供給管、44…放出管、45…管路、46…小穴。

Claims (5)

  1.  ハプト藻を含む培養液に対し、黄色光と黄色以外の可視光とを共に照射するステップを有する、ハプト藻の培養方法。
  2.  前記ハプト藻はPavlova lutheriである、請求項1に記載のハプト藻の培養方法。
  3.  ハプト藻を含む培養液を貯留する培養槽と、
     前記培養槽内の前記培養液に対して黄色光を照射する第1光源と、
     前記培養槽内の前記培養液に対して黄色以外の可視光を照射する第2光源と、
    を備える、ハプト藻の培養装置。
  4.  前記黄色光及び前記可視光が共に前記培養液に照射されるように前記第1光源及び前記第2光源を制御する制御部をさらに備える、請求項3に記載のハプト藻の培養装置。
  5.  前記ハプト藻はPavlova lutheriである、請求項3又は4に記載のハプト藻の培養装置。
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