WO2021209652A1 - Nueva composición para ser usada en el tratamiento y la prevención de infecciones por covid-19 y otros coronavirus - Google Patents

Nueva composición para ser usada en el tratamiento y la prevención de infecciones por covid-19 y otros coronavirus Download PDF

Info

Publication number
WO2021209652A1
WO2021209652A1 PCT/ES2020/070245 ES2020070245W WO2021209652A1 WO 2021209652 A1 WO2021209652 A1 WO 2021209652A1 ES 2020070245 W ES2020070245 W ES 2020070245W WO 2021209652 A1 WO2021209652 A1 WO 2021209652A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
lactoferrin
covid
treatment
composition
patients
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Ceased
Application number
PCT/ES2020/070245
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
Gabriel SERRANO SANMIGUEL
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
DERMOPARTNERS SL
Original Assignee
DERMOPARTNERS SL
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by DERMOPARTNERS SL filed Critical DERMOPARTNERS SL
Priority to US16/918,260 priority Critical patent/US20230190652A1/en
Priority to PCT/ES2020/070245 priority patent/WO2021209652A1/es
Priority to EP20930839.4A priority patent/EP4137511A4/en
Publication of WO2021209652A1 publication Critical patent/WO2021209652A1/es
Anticipated expiration legal-status Critical
Ceased legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A61K9/127—Synthetic bilayered vehicles, e.g. liposomes or liposomes with cholesterol as the only non-phosphatidyl surfactant
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/365—Lactones
    • A61K31/375—Ascorbic acid, i.e. vitamin C; Salts thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • A61K33/24—Heavy metals; Compounds thereof
    • A61K33/30—Zinc; Compounds thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/40—Transferrins, e.g. lactoferrins, ovotransferrins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0053—Mouth and digestive tract, i.e. intraoral and peroral administration
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/79—Transferrins, e.g. lactoferrins, ovotransferrins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0087—Galenical forms not covered by A61K9/02 - A61K9/7023
    • A61K9/0095—Drinks; Beverages; Syrups; Compositions for reconstitution thereof, e.g. powders or tablets to be dispersed in a glass of water; Veterinary drenches

Definitions

  • New composition to be used in the treatment and prevention of infections by COVID-19 and other coronaviruses New composition to be used in the treatment and prevention of infections by COVID-19 and other coronaviruses.
  • the object of the present invention has application in the field of the medical and pharmaceutical industry since it is a composition that is used to prevent and / or treat viral infections, more specifically by coronavirus, which have recently generated a pandemic that affects many countries due to the lack of vaccines and / or effective treatments against these viruses.
  • compositions that incorporate lactoferrin as an active principle and several patents are known in this regard but the vast majority of them refer to dermatological treatments for diabetes, such as patents EP2323625, EP2692355, EP3603621, EP3210618, US2016206707 and other
  • the objective of the present invention is to provide a pharmaceutical composition that can combat coronavirus infection and / or prevent it.
  • the composition of the present invention was obtained by encapsulating its components in liposomes and was tested in a clinical study.
  • lactoferrin has on the human body as founding president of Laboratorios Sesderma, which has been marketing the Lactyferrin TM Forte drinkable product for more than 14 years. contains liposomal lactoferrin and the possible efficacy of this product against COVID-19 was considered for which a clinical study was carried out.
  • Bovine liposomal lactoferrin (LLF) syrup food supplement (32 mg lactoferrin / 10 ml plus 12 mg vitamin C) was administered orally in 4 to 6 doses per day for 10 days.
  • a zinc solution was administered at the dose of 10 mg / 10 ml two or three times a day.
  • a control group of 12 patients who took only LLF was included. All family members in contact with patients (256 people) were also treated with half this dose. The treatment allowed a complete and rapid recovery in all patients (100%) within the first 4-5 days.
  • the same treatment at lower doses prevented the disease in healthy people directly related to affected patients. Weakness (95%) followed by a dysfunction in the perception of smells and tastes (88%), cough (83%), muscle pain (67%) were the most frequent complaints.
  • the disease begins with fever, headache, dry cough, fatigue, pain, dyspnea, abdominal pain, diarrhea, nausea, and vomiting.
  • the onset of the disease can lead to progressive respiratory failure due to alveolar damage and even death.
  • Laboratory prognostic factors of adverse clinical outcomes include lymphopenia (35-75% of cases), increased CRP values (75-93% of cases), LDH (27-92% of cases), ESR ( up to 85% of cases) and D-dimer (36-43% of cases), as well as low concentrations of serum albumin (50-98% of cases) and hemoglobin (41-50%).
  • the Angiotensin Converting Enzyme 2 (ACE2) receptor is the main receptor for COVID-19 ( Figure 1) and plays a vital role in the entry of the virus into the cell to induce lung infection. These receptors are highly expressed in the nose, mouth, respiratory epithelial tract, alveolar epithelial cells of the lungs, enterocytes of the small intestine, and the brush border of proximal tubular cells of the kidney. ACE2 receptor locations are related to tissue tropism and pathogenesis of viral infection. The disease can cause an infection of the upper respiratory tract (sinuses, nose and throat) but more often an infection of the lower respiratory tract (trachea and lungs). COVID-19 infection spreads in the same way as other coronaviruses, primarily through person-to-person contact. Infections range from mild to severe.
  • COVID 19 is an enveloped RNA virus with a genome approximately 30,000 nucleotides in length and encodes a complex of non-structural replicase and structural proteins including, such as spike (S), envelope (E) and S2, membrane (M) and nucleocapsid (N) proteins.
  • the spike protein is made up of two units: S1, which mediates binding of the virus to receptors on target cells, and S2, which triggers fusion of the virus and the host cell membrane.
  • Angiotensin Converting Enzyme 2 ACE2
  • ACE2 Angiotensin Converting Enzyme 2
  • ACE2 a metallopeptidase is a functional receptor for the virus and is responsible for binding to protein S ( Figure 1) and mediating entry of the virus into target cells.
  • a segment with amino acids 318-510 of the S1 protein is the receptor-binding domain for the ACE2 receptor.
  • ACE2 is highly expressed in the alveolar epithelial cells of the human lung, the enterocytes of the small intestine and the brush border of the proximal tubular cells of the kidney. These ACE2 expression locations are consistent with the tissue tropism and pathogenesis of SARS-Co infection.
  • Some patients with COVID 19 infection develop an intense host immune response against the virus.
  • the innate immune response plays an important role in reducing viral infection. Many genes may be involved in the innate immune response, such as encoding for lactoferrin, S100A9, and lipocalin 2 that are involved in the clearance of SARS-CoV.
  • Lactoferrin gene expression was found to be upregulated and lactoferrin to be very elevated (150-fold) in SARS patients compared to healthy volunteers.
  • CSGF was also up-regulated, but GMCSF was instead down-regulated after healthy volunteers ingested liposomal lactoferrin. Lactoferrin in this infection is believed to work by stimulating NK cell activity and neutrophil aggregation and adhesion.
  • Lactoferrin is a multifunctional glycoprotein present in various body fluids including milk, saliva, tears, semen, vaginal fluids, nasal and bronchial secretions, gastrointestinal fluids, and urinary mucosal secretions and is also present in the neutrophil granules of leukocytes.
  • Lactoferrin has strong antiviral activity against RNA and DNA viruses, including human immunodeficiency virus, sika virus, Chikungunya, hepatitis C, Sindbis virus, cytomegalovirus (herpes simplex virus, human papilloma virus, and rotavirus). These viruses use common molecules such as heparan sulfate proteoglycans (HSPG) on the cell membrane to facilitate invasion into cells. These molecules provide the first docking sites on the cell surface and help the virus to make primary contact with host cells.
  • HSPG heparan sulfate proteoglycans
  • Lactoferrin may be able to prevent internalization of some viruses after binding to HSPG, which is present in most cells. This property of lactoferrin confers protection to the host against viral infections. Lactoferrin has an important protective role in the host's immune defense against the invasion of COVID 19. 75 patients affected by COVID-19 with the typical symptoms of the disease and with a positive result for COVID-19 were selected for inclusion in the study.
  • a control group of 12 patients also received only LLF.
  • the total daily dose of LLF ranged from 256-384 mg / day. All family members in contact with the patients (256 people) were also treated with half of this dose. head, dry cough and nasal congestion also They were treated with LL nasal drops and mouth spray (lactiferrin nasal drops and lactiferrin mouth spray) that were applied 4 times in a day. LL aerosol (SES Nanomist, Sesderma Laboratories, Valencia, Spain) was also administered to all patients with shortness of breath. All participants were evaluated by the medical team through remote systems. The patients were monitored daily (at least 2 times a day) for 10 days and then 30 days later.
  • the symptoms evaluated in each patient were scored on a scale from 0 to 3, with 0 being the absence of, 1 mild symptom, 2 moderate symptoms and 3 severe symptoms. In the case of the taste and smell symptom, these were evaluated on a scale from 0 to 5, where 0 represents the absence of taste / smell (ageusia / anosmia) and five unaffected taste / smell.
  • Table 1 Absence or presence of symptoms in patients included in the study before receiving treatment (day 0).
  • Table 2 The percentages of each of the symptoms observed according to the severity scale are shown below (Table 2). The evaluated parameters have already been mentioned. Table 2 - Degree of affectation of symptoms in the patients included in the study before receiving the treatment (day 0). 48 HOURS: Data collected 48 hours after the first contact with the participants. The patients had already started treatment and improvement was beginning to be seen. (Table 3).
  • Table 3 Absence or presence of symptoms in patients after 48 hours of treatment.
  • Table 6 (% degree of severity of symptoms) shows a progressive improvement in symptoms. Of approximately 72.22% of the patients who showed total absence of taste and smell (ageusla / anosmla) on day 0, the percentage dropped to 38.85 on day 5t.
  • DRY Cough ( Figure 3): At the beginning of the study (day 0), 61.11% of the patients had a dry cough. After 48 and 120 hours of treatment, this percentage was reduced to 50% and 38.89% respectively. The treatment markedly reduced the dry cough.
  • BREATHING DIFFICULTY (Table 3): 100% of patients with shortness of breath completely improved after 48 hours.
  • MUSCLE PAIN ( Figure 4): at the beginning of the study (day 0), 66.67% of the patients had muscle pain. After 48 and 120 hours, this percentage was reduced to 44.44% and 22.22%. The treatment significantly reduced the severe muscle pain associated with COVID-19.
  • TIRED ( Figure 5): 94.44% of the patients were tired on day 0. After 48 and 120 hours of treatment, this percentage decreased to 66.67 and 27.78% respectively.
  • HEAD PAIN ( Figure 6): on day 0, 55.56% of the patients had severe headache. After 48 and 120 hours of treatment, the headache completely disappeared in 100% of the patients. At 120 hours the patients remained without headache.
  • TASTE ( Figure 7): on day 0, 72.22% of the patients had ageusia (total absence of taste), while 11.11% of the patients had no taste impairment. The rest of the patients had hypogeusia (partial decrease in the sense of taste). After 48 and 120 hours of treatment, the percentage of patients with ageusia decreased to 44.44% and continues to decrease to 38.89%, which implies a partial and progressive recovery of taste. At 10 days, all patients fully recovered from smell and taste. Most of the patients complained of not recognizing the taste of food (sweets, seafood, hot chili). SMELL ( Figure 8): on day 0, 72.22% of the patients had anosmia (total absence of smell), while 16.67% of the patients had no olfactory compromise.
  • ACE2 Angiotensin Converting Enzyme 2
  • Topical nose, mouse, and throat care with nasal drops, mouthwash, throat sprays, and even liposome-based toothpastes may help reduce viral load. These alterations can be considered as a transitory olfactory and taste dysfunction and require further follow-up and investigation. Patients receiving chemotherapy can improve taste and smell dysfunction by taking lactoferrin, improving the oral immunity of the cancer patient.
  • lactoferrin liposomal aerosol inhalation device 4 times a day was recommended with great success. Inhalation was well tolerated and any side effects were reported. Inhalations through the LLF nebulizer were also recommended to two of the four hospitalized patients. Lactoferrin is a natural protein present in bronchial secretions and all the content in the liposome is biocompatible and biodegradable. Liposomal aerosol therapy has been used for years with good results and a broad safety profile.
  • Lactoferrin is a hydrophilic chemical substance that, due to its encapsulation in phosphatidylcholine, liposomes behave like amphiphilic ones. Lactoferrin reaches sufficiently high concentrations within the lungs and provides a delayed release of lactoferrin in the target organ, the respiratory tract.
  • the lactoferrin nanoliposome is 100 nm in size, but once it is nebulized through the airways, it is reduced in size to 50 nm because there is a filter in the hole of the device that reduces the size of the nanosome.
  • the liposome alone can interact with the natural surfactant (phospholipids and proteins) of the target tissue (lungs) and phosphatidylcholine can also exert a strong anti-inflammatory effect.
  • COVID-19 lung infections can alter the total lung surfactant and change its composition, thus decreasing the availability of phospholipids that decrease lung function as occurs in chronic obstructive pulmonary disease. Without surfactant, the alveoli tend to collapse during normal tidal breathing, resulting in decreased lung compliance.
  • Lactoferrin is a globular protein belonging to the transferrin family that shows a great affinity for iron ions. Lactoferrin is a defense protein found in human milk, where it is present in relatively high concentrations (1 g / L), especially in the colostral stage (up to 7 g / L). It is also present in other body fluids (tears, semen, vaginal fluid, saliva, bronchial secretions, etc.). It is synthesized by neutrophils in the blood and various types of cells, including some non-native cells. Endogenous lactoferrin levels increase during infection and inflammation.
  • Lactoferrin has antibacterial and antiviral properties, modulates the immune system and protects against intestinal inflammation. Lactoferrin can influence leukocytes by increasing the activity of NK cells, neutrophils and macrophages. It increases the production of cytokines and nitric oxide and limits the growth of pathogens. Promotes the maturation of Immune cells, eg. T and B lymphocytes. May reduce allergy symptoms by blocking histamine release from intestinal mast cells. It can probably be helpful in preventing and treating the effects of obesity and can promote the reduction of visceral fat. It can help improve the condition of the skin in ailments such as acne, skin inflammation, and psoriasis.
  • LLC llposomal lactoferrin
  • Lactoferrin-based bovine llposomal nutritional food supplement Lactyferrin TM Forte drinkable (Sesderma Laboratories, Valencia, Spain) is registered in the European Union (Ireland), as well as by the United States Food and Drug Administration, as a dietary supplement .
  • the European Food Safety Authority recognizes bovine lactoferrin as a dietary supplement with medicinal properties, and is classified as a novel and safe food ("generally recognized as safe”), with no contraindications.
  • Lactyferrin TM contains lactoferrin (32 mg / 10 ml and vitamin C 12 mg / 10 ml). Both substances are hydrophilic and have very limited gastric absorption.
  • the liposome with its closed phospholipid bilayer vesicular system, could encapsulate both hydrophilic (lactoferrin, vitamin C, zinc) and hydrophobic (vitamin
  • the liposomes manufactured to obtain the composition of the present patent are based on phosphatidylcholine (PC), which is a biocompatible and biodegradable chemical. Lactoferrin in its free form is degraded within the stomach by the action of hydrochloric acid and hydrolytic enzymes (proteases, pepsin); therefore, the bioavailability of the free form is very limited.
  • PC phosphatidylcholine
  • lactoferrin and vitamin C are encapsulated in a 100 nm nanoliposome or lipid bubble, made of soy phosphatidylcholine (PC) in Lactyferrin TM.
  • the nanoliposome protects lactoferrin from destruction by digestive secretions and allows the intact protein to travel through the duodenum and into the general circulation, from where its bioavailability is very high.
  • Lactoferrin encapsulated in this way is protected from pepsin and hydrolysis by proteases. It is also important to note that free lactoferrin is rapidly cleared from the circulation, limiting its therapeutic potential. Therefore, it is necessary to encapsulate it in liposomes to improve plasma stability.
  • PC used to make liposomes is a ubiquitous and natural phospholipid molecule, which is the major lipid in cell membranes and blood proteins.
  • PC serves as the main physiological source of choline, an essential nutrient and precursor to the neurotransmitter, acetylcholine.
  • PC is also required to produce surfactants, which are critical for lung function and gastrointestinal health.
  • phosphatidylcholine” and “lecithin” are sometimes used interchangeably; however, lecithin is a mixture of various lipids and phospholipids.
  • PC is necessary for the composition and repair of cell membranes and is vital for normal liver function. Research indicates that PC has a beneficial role in the prevention and treatment of various forms of liver disease and toxicity. PC protects liver cells from viral damage, reduces fibrosis, and prevents cell death from drugs, alcohol, and other chemical toxins.
  • lactoferrin ranges from anticancer, anti-inflammatory, and immunomodulatory properties, to antimicrobial, antifungal, and antiviral activities against many microorganisms. This wide range of activities is possible thanks to mechanisms of action that involve not only the ability of lactoferrin to bind iron, but also the interactions of lactoferrin with the molecular and cellular components of the hosts and pathogens. Lactofemna's antibacterial activity is related to environmental iron deprivation, which is essential for bacterial growth, while its antiviral activity is associated with its role as a competitor for cell membrane receptors commonly used by viruses to enter cells. cells. .
  • lactofemna is an ACE2 blocker, and prevents the binding of virus protein S to the host cell, blocking fusion of the virus with the cell membrane.
  • Liposomal lactofem can also suppress viral replication after entry into the cell, as in the case of HIV.
  • some HIV-1 infected patients show decreased levels of lactophemine in plasma, and in others, the lack of lactophemine (and secretory IgA) found in the oral cavities of people with HIV was strongly correlated with frequent infections in those areas.
  • Nanoliposomes also have beneficial effects related to their size and composition (PC); They are smaller in size (100 nm) than the virus (150 nm), they can compete to reach the target cells, where they settle before the virus.
  • PC size and composition
  • Lactofemna significantly reduces the hyperimmune reaction observed in critically ill patients suffering from an aggressive storm of pro-inflammatory atokines (IL-2 and 6), normalizing or decreasing the parameters IL-6, TNF alpha, ferritin and DD2, and protecting the lungs against acute respiratory distress. Lactofemna has immunomodulatory and anti-inflammatory properties, which are important in the pathophysiology of severe infections.
  • lactofemna has a crucial immunomodulatory role in the maintenance of immunological and physiological homeostasis and in limiting tissue damage by modulating the atokines, chemokines, and cell surface receptors involved in signaling cascades.
  • the restorative and homeostatic roles of lactofemna are notable in the context of the "systemic inflammatory response", which describes the physiological response to serious insults such as sepsis.
  • the concept of "cytokine storm” reflects the hyperinduction of inflammatory responses that result from uncontrolled immune activation, and these clearly respond to oral administration of lactoferrin.
  • Lactoferrin is useful for treating the most severe cases of COVID-19, due to its ability to modulate exaggerated immune and inflammatory responses to viral infections, as we have observed in at least four patients.
  • LLF may play a role in the iron metabolism disturbances seen during inflammation and conditions with increased neutrophil turnover.
  • many released cytokines and / or inflammatory products such as interleukin 1, endotoxin, TNF-alpha, and immune complexes can trigger the release of lactoferrin from neutrophils.
  • Lactoferrin will bind to its membrane receptor on monocytes / macrophages and trapped in this position could prevent the transfer of iron from macrophage to serum transferrin. Iron released from senescent phagocytosed red blood cells could thus be captured by membrane-bound lactoferrin and transferred back to intracellular ferritin.
  • Liposomal lactoferrin has been used to treat various medical conditions for the past 14 years.
  • the neuroprotective effects of liposomal lactoferrin were also tested in a Caenorhabditis elegans model by evaluating both phenotypic and transcriptomic responses.
  • the lactoferrin-based product protected against acute oxidative stress and extended the shelf life of C. alagans in a dose-dependent manner.
  • the paralysis of the transgenic strain of C. alagans, CL4176, caused by the ⁇ 1-42 aggregates was clearly ameliorated by treatment with lactoferrin.
  • lactoferrin-based liposomal product was also able to stimulate the immune system, as well as improve reproductive status and energy metabolism.
  • Zinc has also exhibited a powerful antiviral effect. In chicken virus experiments, zinc inhibited viral infection when incubated with cells after viral fusion, and the level of inhibition correlated with the degree of zinc saturation. Zinc supplements have previously been proposed for administration to COVID-19 patients. Zinc can also influence the metalloproteases involved in the coronavirus fusion process, by decreasing both cell entry and cell-cell fusion.
  • Lactoferrin can be used together or in combination with zinc and both supplements are non-toxic and can also be used as adjunctive treatments, along with conventional antiviral drugs or hydroxychloroquine, as shown for the treatment of hepatitis C virus (HCV), where lactoferrin decreased the HCV RNA titer by contributing to the effectiveness of combined interferon and ribavirin therapy.
  • HCV hepatitis C virus
  • Lactoferrin has great potential for use as an add-on treatment for patients with viral diseases. Based on our experience in the COVID-19 home-isolated clinical study, and careful contact tracing, we concluded that liposomal lactoferrin can prevent and cure infection in a dose-dependent manner. This treatment is also indicated in severely ill patients, as we observed in four critically ill patients. The doses we recommend for the treatment and prevention of COVID-19 are provided in the preferred embodiment example. This mentioned treatment is completely free from side effects. Some institutions are promoting empirical treatment with hydroxychloroquine plus azithromycin. However, clinical studies are not complete and hydroxychloroquine is not without side effects and can induce a wide range of adverse effects.
  • Cardiovascular, dermatological, gastrointestinal, hematological, hepatic, hypersensitivity, metabolic, musculoskeletal, nervous system, ocular, psychiatric, and respiratory side effects have been reported.
  • heart rhythm disturbances have been observed in a patient with systemic lupus erythematosus who developed syncope episodes as a result of significant QT prolongation. This was corrected after discontinuation of the drug.
  • Administration of azithromycin is a paradox.
  • Antibiotics have no effect on the virus and the drug is administered due to its immunomodulatory effect, but unfortunately azithromycin shares with hydroxychloroquine the potential to induce QT segment prolongation by causing abnormal changes in the electrical activity of the heart that can lead to a potentially fatal irregular heartbeat.
  • Antibiotics alter the gut microbiota that has already been destroyed by COVID-19 and the administration of probiotics is recommended. Elderly patients taking antibiotics can develop intestinal dysbiosis with changes in the gut microbiota, making these patients prone to heart failure.
  • LLF lactoferrin increases good micro flora, such as bifidus, and decreases bad bacteria, such as E. coli, streptococcus, clostridium, and others.
  • Lactoferrin acts as an anti-inflammatory agent that promotes "good” atokines such as interleukin (IL) -4 and IL-10 and reduces pro-inflammatory atokines such as tumor necrosis factor alpha, IL-6, and IL-1beta, and the regulation negative nuclear factor-kappa.
  • the best thing about lactoferrin treatment is that it is simple, safe and quite effective in COVID 19 infections, both in young adults, the elderly and in children, women and men, regardless of the underlying pathology.
  • lactoferrin the mediation by lactoferrin of the inflammation induced by COVID-19 infection that leads to the activation of macrophages and dendritic cells.
  • Neutrophils degranulate at the site of injury and release massive amounts of LF.
  • LF in turn, can increase low responses or modulate ultra-aggressive cytokine activity. Both effects serve to control inflammation and assist in tissue repair after trauma.
  • Lactoferrin needs to be encapsulated in a PC liposome to protect it from pepsin hydrolysis and the acidic pH of the stomach that allows the glycoprotein to pass completely through the intestines and be absorbed.
  • Figure 1 Two images are shown showing how the composition prevents the coronavirus from entering the cell and when there is infection.
  • Figure 2 Particle size distribution by the number of particles (%) obtained by DLS studies for A) lactoferrin liposomes, B) sodium ascorbate liposomes, and C) zinc sulfate.
  • Figure 3 Absence or presence of dry cough in patients before treatment (day 0) and after treatment (48 hours and 5 days).
  • Figure 4 Absence or presence of muscle pain in patients before treatment (day 0) and after treatment (48 hours and 5 days).
  • Figure 5 Absence or presence of fatigue in patients before treatment (day 0) and after treatment (48 hours and 5 days).
  • Figure 6 Absence or presence of headache in patients before treatment (day 0) and after treatment (48 hours and 5 days).
  • Figure 7 Absence or presence of taste in patients before treatment (day 0) and after treatment (48 hours and 5 days).
  • Figure 8 Absence or presence of smell in patients before treatment (day 0) and after treatment (48 hours and 5 days).
  • Figure 9 - represents a diagram of lactoferrin mediation of inflammation induced by COVID-19 infection leading to macrophage and dendritic cell activation.
  • a method of carrying out the invention is set out below, on the one hand with regard to the composition object of the present invention and on the other hand to the use thereof.
  • Food grade soy lecithin was purchased from Lipoid (Ludwigshafen, Germany); tween 20 at Comercial Qu ⁇ mica Massó (Barcelona, Spain); 96 ° ethanol at Panreac (Barcelona, Spain); lactoferrin in Ferrer Health (Barcelona, Spain); sodium ascorbate from Fagron Ibérica (Barcelona, Spain); and zinc sulfate heptahydrate from Nutrifoods (Barcelona, Spain).
  • the different liposomal solutions were prepared according to the procedure developed by Sesderma laboratories (Valencia, Spain). (Serrano et al., 2015) Specifically, the phospholipids (phosphatidyl choline) were dissolved in 96 ° ethanol at room temperature, and later tween 20 was added to the ethanolic solution. In parallel, the different active principles were dissolved in double distilled water at the concentration of 5.2, 150 and 14 mg / ml for lactoferrin, sodium ascorbate and zinc sulfate, respectively.
  • the lipid mixture and the aqueous solution containing the corresponding active principle lactoferrin, sodium ascorbate or zinc sulfate
  • the resulting liposomal suspensions were filtered through a surfactant-free cellulose acetate syringe filter with a pore size of 0.2 ⁇ m.
  • the final concentration of the active ingredients in the different liposomal solutions is detailed in the following table:
  • the characterization of the liposome in terms of particle size was evaluated by means of a dynamic light scattering (DLS). All measurements were performed with a Delsa Nano C particle analyzer (Beckman Coulter, Madrid, Spain), and were performed in triplicate on diluted suspensions of the lposomes with filtered deionized water.
  • the polydispersity index (PDI) was used as a measure to define the homogeneity of the size distribution. A sample that presents a PDI value equal to or less than 0.2 is considered a homogeneous population.
  • Composition of food supplements is Composition of food supplements.
  • the concentration of the active ingredients in the different formulations of food supplements is specified in the following table:
  • SA prepared food supplement formulation
  • Particle size studies revealed that all liposome formulations used in this study have a particle diameter in the range of about 100-130 nm, with a PDI below 0.15.
  • the results are shown in Figure 2 and summarized in the following Table: Particle diameter measured by DLS and polydispersity index (PDI) of lactoferrin, sodium ascorbate and zinc sulfate liposomes.
  • Curative doses 64-96 mg (20-30 ml) every 6 hours daily to cure COVID-19 infection (256-384 mg / day). Doses can be increased to 640 to 960 mg / day. Preventive doses: at a dose of 64 mg two or three times a day it prevents infection by COVID-19 (128-192 mg / day).
  • Lactirferrin Pregnancy and Baby Syrup Glucerosome Encapsulation, Alcohol Free
  • Lactoferrin Nasal Drops these nasal drops contain nano lactoferrin to quickly relieve acute sinusitis and the alterations in the smell and taste that many patients have, while contributing to the management of dry cough.
  • lactoferrin TM lactoferrin Nasal Drops

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

Nueva composición para ser usada en el tratamiento y la prevención de infecciones por COVID-19 y otros coronavirus que consiste en un complemento alimenticio que incluye como principio activo esencial lactoferrina encapsulada en liposomas además de otros principios activos secundarios como una sal de zinc y vitamina C, también encapsulados en liposomas, y el uso de esta composición para el tratamiento de personas infectadas con el COVID-19 graves o leves y la prevención del contagio por las no infectadas.

Description

DESCRIPCIÓN
Nueva composición para ser usada en el tratamiento y la prevención de infecciones por COVID-19 y otros coronavirus.
Sector de la técnica
El objeto de la presente Invención tiene aplicación en el ámbito de la industria médica y farmacéutica ya que se trata de una composición que se utiliza para prevenir y/o tratar infecciones víricas, más concretamente por coronavirus, que han generado recientemente una pandemia que afecta a multitud de países debido a la ausencia de vacunas y/o de tratamientos eficaces contra estos virus.
Estado de la técnica
Existen numerosas composiciones farmacéuticas que incorporan lactoferrina como principio activo y se conocen varias patentes en este sentido pero la gran mayoría de ellas se refieren a tratamientos dermatológicos, para la diabetes, como pueden ser las patentes, EP2323625, EP2692355, EP3603621, EP3210618, US2016206707 y otras.
Pero no se conoce ninguna referencia al uso de composiciones farmacéuticas que incorporan lactoferrina encapsulada en liposomas para el tratamiento y prevención de infecciones por COVID-19 u otros coronavirus. Descripción de la invención
Basándose en el estado de la técnica anterior, el objetivo de la presente invención es proporcionar una composición farmacéutica que pueda combatir la infección por coronavirus y/o prevenirla. La composición de la presente invención se obtuvo mediante la encapsulación en liposomas de sus componentes y se testó con un estudio clínico.
El inventor de la presente patente es conocedor de la multitud de efectos que tiene la lactoferrina en el cuerpo humano como presidente fundador de Laboratorios Sesderma que lleva más de 14 años comercializando el producto Lactyferrin™ Forte bebible que contiene lactoferrina liposomada y se consideró la posible eficacia de este producto frente al COVID-19 para lo que se llevó a cabo un estudio clínico.
Se realizó un estudio observacional prospectivo en 75 pacientes con síntomas típicos de COVID-19 que dieron positivo a la prueba rápida IgM / IgG. Los pacientes fueron aislados y tratados en casa usando sistemas remotos, revisados dos veces al día durante 10 días y seguidos hasta 1 mes.
Se administró un suplemento alimenticio de jarabe de lactoferrina liposomal bovina (LLF) (32 mg de lactoferrina / 10 mi más 12 mg de vitamina C) por vía oral en 4 a 6 dosis por día durante 10 días. Además, se administró una solución de zinc a la dosis de 10 mg / 10 mi dos o tres veces al día. Se Incluyó un grupo de control de 12 pacientes que tomaron solo LLF. Todos los miembros de la familia en contacto con pacientes (256 personas) también fueron tratados con la mitad de esta dosis. El tratamiento permitió una recuperación completa y rápida en todos los pacientes (100%) dentro de los primeros 4-5 días. El mismo tratamiento a dosis más bajas previno la enfermedad en personas sanas directamente relacionadas con los pacientes afectados. La debilidad (95%) seguida de una disfunción en la percepción de olores y sabores (88%), tos (83%), dolor muscular (67%) fueron las quejas más frecuentes.
En diciembre de 2019, la enfermedad por coronavirus 2019 (COVID-19) surgió en la ciudad de Wuhan y se extendió rápidamente por toda China y a los cinco continentes en unos pocos meses, creando una pandemia. Desde entonces, ha habido una búsqueda desesperada de un tratamiento seguro y efectivo.
Clínicamente, la enfermedad comienza con fiebre, dolor de cabeza, tos seca, fatiga, mlalgla, disnea, dolor abdominal, diarrea, náuseas y vómitos. El Inicio de la enfermedad puede conducir a Insuficiencia respiratoria progresiva debido a daño alveolar e Incluso a la muerte. Los factores pronósticos de laboratorio de resultados clínicos adversos Incluyen linfopenia (35-75% de los casos), aumento de los valores de PCR (75-93% de los casos), LDH (27-92% de los casos), VSG (hasta el 85% de casos) y dímero D (36-43% de los casos), así como bajas concentraciones de albúmina sérica (50-98% de los casos) y hemoglobina (41-50%). En su lugar, muchas anormalidades de laboratorio fueron predlctivas de resultados adversos, Incluido un aumento en el recuento de glóbulos blancos, aumento en el recuento de neutrófilos, disminución en el recuento de linfocitos, disminución de la albúmina, aumento de LDH, ALT, AST, bilirrubina, creatinina, troponinas cardíacas, dímero D, tiempo de protrombina, procalcitonina y valores de PCR. Los antivirales y la hidroxicloroquina se sugirieron inicialmente contra la neumonía asociada a COVID-19 en ensayos clínicos multicéntricos realizados en China.
El receptor de Enzima Convertidora de Angiotensina 2 (ACE2) es el principal receptor de COVID-19 (Figura 1) y desempeña un papel vital en la entrada del virus en la célula para Inducir la Infección pulmonar. Estos receptores se expresan altamente en la nariz, la boca, el tracto respiratorio epitelial, las células epiteliales alveolares de los pulmones, los enterocitos del intestino delgado y el borde en cepillo de las células tubulares proximales del riñón. Las ubicaciones de los receptores ACE2 están relacionadas con el tropismo tisular y la patogénesis de la infección viral. La enfermedad puede causar una infección del tracto respiratorio superior (senos, nariz y garganta) pero con mayor frecuencia una infección del tracto respiratorio inferior (tráquea y pulmones). La infección por COVID-19 se propaga de la misma manera que otros coronavirus, principalmente a través del contacto de persona a persona. Las infecciones varían de leves a graves.
En el año 2011, Lang et al (2011) declararon que la lactoferrina podría ser potencialmente útil para el tratamiento de la enfermedad del SARS. Sin embargo, hasta ahora, no ha habido informes del uso clínico de lactoferrina en pacientes afectados por la infección por SARS-COv o COVID-19.
El COVID 19 es un virus de ARN envuelto con un genoma de aproximadamente 30000 nucleótidos de longitud y codifica un complejo de replicase no estructural y proteínas estructurales que incluyen, como espiga (S), envoltura (E) y S2, membrana (M) y nucleocápside (N) proteínas. La proteína espiga se compone de dos unidades: S1, que media la unión del virus a los receptores en las células objetivo, y S2, que desencadena la fusión del virus y la membrana de la célula huésped. La Enzima Convertidora de Angiotensina 2 (ACE2), una metalopeptidasa es un receptor funcional del virus y es responsable de unirse a la proteína S (Figura 1) y mediar la entrada del virus en las células objetivo. Un segmento con los aminoácidos 318-510 de la proteína S1 es el dominio de unión al receptor para el receptor ACE2. ACE2 se expresa altamente en las células epiteliales alveolares del pulmón humano, los enterocitos del intestino delgado y el borde en cepillo de las células tubulares proximales del riñón. Estas ubicaciones de expresión de ACE2 son consistentes con el tropismo tisular y la patogénesis de la Infección por SARS-Co.. Algunos pacientes con infección por COVID 19 desarrollan una respuesta inmune intensa del huésped contra el virus. La respuesta inmune innata juega un papel importante en la disminución de la infección viral. Muchos genes pueden estar involucrados en la respuesta inmune innata, como la codificación de lactoferrina, S100A9 y lipocalina 2 que participan en la eliminación del SARS-CoV.
Se observó que la expresión del gen lactoferrina estaba regulada al alza y que la lactoferrina estaba muy elevada (150 veces) en pacientes con SARS en comparación con voluntarios sanos. En nuestra experiencia, el CSGF también estaba regulado al alza, pero en cambio el GMCSF estaba regulado a la baja después de que voluntarios sanos ingirieron lactoferrina liposomal. Se cree que la lactoferrina en esta infección puede funcionar estimulando la actividad de las células NK y la agregación y adhesión de neutrófilos.
La lactoferrina es una glucoproteína multifuncional presente en varios fluidos corporales que incluyen leche, saliva, lágrimas, semen, fluidos vaginales, secreciones nasales y bronquiales, fluidos gastrointestinales y secreciones de la mucosa urinaria y también está presente en los gránulos neutrófilos de los leucocitos. La lactoferrina tiene una fuerte actividad antiviral contra el virus de ARN y ADN, incluido el virus de inmunodeficiencia humana, el virus sika, Chikungunya, hepatitis C, virus Sindbis, citomegalovirus (virus del herpes simple, virus del papiloma humano y rotavirus). Estos virus utilizan moléculas comunes como los proteoglicanos de heparán sulfato (HSPG) en la membrana celular para facilitar la invasión a las células. Estas moléculas proporcionan los primeros sitios de anclaje en la superficie celular y ayudan al virus a hacer contacto primario con las células huésped.
La lactoferrina puede ser capaz de prevenir la internalización de algunos virus después de unirse a HSPG, que está presente en la mayoría de las células. Esta propiedad de la lactoferrina confiere protección al huésped contra las infecciones virales. La lactoferrina tiene un papel protector importante en la defensa inmune del huésped contra la invasión de COVID 19. 75 pacientes afectados por COVID-19 con los síntomas típicos de la enfermedad y con resultado positivo para COVID-19 fueron seleccionados para su Inclusión en el estudio. Los pacientes fueron aislados y tratados en casa usando sistemas remotos, revisados diariamente durante 10 días, y el diagnóstico sanguíneo de hasta 1 mes fue confirmado por la prueba rápida de anticuerpos IgS / IgG SARS-CoV-2 realizada en sangre total (IgM SARS-CoV-2 / Prueba rápida de anticuerpos IgG (Liming Bio, Jiangsu, PR China). LLF (Lactyferrin™ Forte bebible, laboratorios Sesderma, Valencia, España), así como un jarabe de zinc liposomal (LZ) (jarabe de defensa de zinc, laboratorios Sesderma, Valencia, España) se administraron por vía oral en 4 a 6 dosis por día. La solución LZ se administró a la dosis de 10 mg / 10 mi dos o tres veces al día. Un grupo de control de 12 pacientes también recibió solo LLF. La dosis diaria total de LLF varió entre 256- 384 mg / día. Todos los miembros de la familia en contacto con los pacientes (256 personas) también fueron tratados con la mitad de esta dosis. Los pacientes que presentaron dolor de cabeza, tos seca y congestiones nasales también fueron tratados con gotas nasales LL y spray bucal (gotas nasales de lactiferrina y spray bucal de lactiferrina) que se aplicó 4 veces ens un día. También se administró LL en aerosol (SES Nanomist, Sesderma Laboratories, Valencia, España) a todos los pacientes con dificultad para respirar. Todos los participantes fueron evaluados por el equipo médico a través de sistemas remotos. Los pacientes fueron monitoreados diariamente (al menos 2 veces al día) durante 10 días y luego 30 días después. Los síntomas evaluados en cada paciente se puntuaron en una escala de 0 a 3, siendo 0 la ausencia de, 1 síntoma leve, 2 síntomas moderados y 3 síntomas graves. En el caso del síntoma sabor y olor, estos se evaluaron en una escala de 0 a 5, donde 0 representa la ausencia de sabor / olor (ageusia / anosmia) y cinco sabor / olfato no afectados.
Para el grupo con el tratamiento combinado (LLF + LZ), la edad media de los pacientes fue de 42 años y el 45% eran mujeres. También se Incluyen como referencia un grupo especial de cuatro pacientes que se sometieron a ventilación mecánica y fueron tratados en el hospital. Todos fueron liberados después de 10 días. Ninguno murió. Los síntomas más comunes fueron debilidad / cansancio (94,44%), pérdida del olfato (83,33%) y sabor (88,89%), dolor muscular (66,67%) tos seca (61,11%, dolor de cabeza (55,56%), diarrea (44,4%), secreción nasal (33,33%), dificultad para respirar (27,78%), congestión nasal (22,22%) y odinofagia (22,22). los síntomas Incluyen fiebre (38%), calambres (30%), Insomnio (50%), agitación nocturna (30%), náuseas y dolor de estómago intenso, flatulencia, dolor de garganta (28%) y un paciente se quejó de pérdida de cabello fuerte y abrupta (1,3%). No se recogieron datos analíticos (radiografía o tomografía computerizada). Los pacientes tratados en el hospital no se incluyeron a no disponer de un conjunto completo de datos. DÍA 0: Datos recopilados (síntomas) en la primera sesión del sistema remoto con los participantes. Todavía no han comenzado el tratamiento (tabla 1).
Tabla 1 - Ausencia o presencia de sintomatología en pacientes incluidos en el estudio antes de recibir el tratamiento (día 0).
Figure imgf000007_0001
Los porcentajes de cada uno de los síntomas observados de acuerdo con la escala de gravedad se muestran a continuación (Tabla 2). Los parámetros evaluados ya fueron mencionados. Tabla 2 - Grado de afectación de los síntomas en los pacientes Incluidos en el estudio antes de recibir el tratamiento (día 0).
Figure imgf000008_0001
48 HORAS: Datos recopilados 48 horas después del primer contacto con los participantes. Los pacientes ya habían comenzado el tratamiento y se estaba comenzando a observar una mejoría. (Tabla 3).
Tabla 3 - Ausencia o presencia de sintomatología en los pacientes después de 48 horas de tratamiento.
Figure imgf000009_0001
Después de las primeras 48 horas de tomar el tratamiento, el dolor de cabeza desaparece en el 100% de los pacientes. La tos seca disminuye del 61.11% al 50%. Estos pacientes encontraron un alivio significativo de estos síntomas y se relacionaron con la aplicación de gotas nasales y spray. El dolor muscular se redujo del 66,67% al 44,44%. El cansancio / debilidad disminuyó de 94.44% al comienzo del estudio a 66.67% después de 48 horas. En todos los pacientes con disnea moderada a grave, la nebulización de lactoferrina se realizó con un nebulizador Nanomist (SES Nanomist, laboratorios Sesderma, Valencia, España). En el caso del gusto y el olfato, no hubo una mejora significativa en estos síntomas después de 48 horas (tabla 3). La recuperación del olfato y sabor del paciente fue más lenta en comparación con el resto de los síntomas. En la Tabla 4 (escala de severidad de % para los síntomas), se apreció que un 72.22% de los pacientes que mostraron ausencia total de sabor y olfato (ageusia / anosmia) en el día 0) (Tabla 1), presentaron una reducción a las 48 h ( 44,44% y 38,89% para sabor y olor).
Tabla 4 - Grado de afectación de los síntomas en los pacientes después de 48 horas de tratamiento.
Figure imgf000010_0001
Día Cinco. Todos los participantes siguieron mejorando y continuaron el tratamiento programado de 10 días. Al quinto día, la tos seca disminuyó del 61.11% al 38.89%. El dolor muscular se redujo del 66,67% al 22,22%. El cansancio / debilidad disminuye de 94.44% a 27.78%. El dolor de cabeza se mantuvo ausente en el 100% de los pacientes después de 48 horas y al quinto día. La pérdida del gusto y el olfato (Tabla 5) no mostró un efecto significativo, ya que se observó con el resto de los síntomas. La recuperación del olor y del sabor de los pacientes fue más lenta.
Tabla 5 - Ausencia o presencia de sintomatología en los pacientes después de 5 días de tratamiento.
Figure imgf000011_0001
Sin embargo, la Tabla 6 (% de grado de gravedad de los síntomas) muestra una mejora progresiva en los síntomas. De aproximadamente el 72,22% de los pacientes que mostraron ausencia total de sabor y olfato (ageusla / anosmla) en el día 0, el porcentaje se redujo a 38,85 en el día 5t.
Tabla 6 - Grado de afectación de los síntomas en los pacientes después de 5 días de tratamiento. ppr
Figure imgf000012_0001
La evolución de los síntomas principales de los pacientes con COVID-19 en el día 0, 48 hy 120 después de 48 horas (día 5) se describe a continuación.
TOS SECA (Figura 3): Al comienzo del estudio (día 0), el 61.11% de los pacientes tenían tos seca. Después de 48 y 120 horas de tratamiento, este porcentaje se redujo al 50% y al 38.89% respectivamente. El tratamiento redujo notablemente la tos seca.
DIFICULTAD PARA RESPIRAR (Tabla 3): el 100% de los pacientes con dificultad para respirar mejoraron completamente a las 48 horas. DOLOR MUSCULAR (Figura 4): al comienzo del estudio (día 0), el 66,67% de los pacientes tenían dolor muscular. Después de 48 y 120 horas, este porcentaje se redujo a 44.44% y a 22.22%. El tratamiento redujo significativamente el fuerte dolor muscular asociado con COVID-19. CANSANCIO (Figura 5): 94.44% de los pacientes tenían cansancio en el día 0. Después de 48 y 120 horas de tratamiento, este porcentaje se redujo a 66.67 y 27.78% respectivamente.
DOLOR CABEZA (Figura 6): en el día 0, el 55.56% de los pacientes presentaron dolor de cabeza Intenso. Después de 48 y 120 horas de tratamiento, el dolor de cabeza desapareció por completo en el 100% de los pacientes. A las 120 horas los pacientes permanecieron sin dolor de cabeza.
GUSTO (Figura 7): en el día 0, el 72,22% de los pacientes tenían ageusia (ausencia total de sabor), mientras que el 11,11% de los pacientes no tenían afectación del gusto. El resto de los pacientes tenían hipogeusia (disminución parcial del sentido del gusto). Después de 48 y 120 horas de tratamiento, el porcentaje de pacientes con ageusia disminuyó a 44.44% y continúa disminuyendo a 38.89%, lo que Implica una recuperación parcial y progresiva del gusto. A los 10 días, todos los pacientes se recuperaron completamente del olfato y el sabor. La mayoría de los pacientes se quejaron de no reconocer el sabor de los alimentos (dulces, mariscos, chile picante). OLFATO (Figura 8): en el día 0, el 72.22% de los pacientes tenían anosmia (ausencia total de olfato), mientras que el 16.67% de los pacientes no tenían compromiso olfativo. El resto de los pacientes tenían hlposmla (disminución parcial del sentido del olfato). Después de 48 años, el porcentaje de pacientes con anosmia disminuyó a 38.89 y permaneció Igual a las 120 horas. Estas alteraciones mejoraron por completo en el 95% de los casos en el día 10.
Los resultados obtenidos en el grupo control que tomó LLL fueron muy similares. Después de analizar estos resultados, podemos concluir que el tratamiento oral con LLF y LLF + LZ permite una recuperación rápida en todos los pacientes (100%) dentro de los primeros 4-5 días. El mismo tratamiento a dosis más bajas parece prevenir la enfermedad en personas sanas directamente relacionadas con los pacientes afectados. Es Importante notar que la combinación del tratamiento oral con el tratamiento tópico de la nariz y la boca proporcionó un alivio significativo del dolor de cabeza y la tos. Algunos de estos pacientes tenían una congestión sinusal. Los suplementos dietéticos de lactoferrina y zinc mejoraron y respaldaron la respuesta del sistema inmunitario a través de sus propiedades antioxidantes, antibacterianas y antivirales. El síntoma más frecuente en nuestros pacientes fue una sensación muy intensa de cansancio o debilidad (95%) seguida de una alteración en la percepción del olfato y el gusto (88%), tos (83%), dolor muscular (67%), dolor de cabeza (56%) y diarrea (44%). La mayoría de los síntomas mejoraron significativamente durante los primeros cinco días en un porcentaje de mejoría del dolor de cabeza (100%), dolor muscular (78%), sabor (72%), olfato (17%), debilidad (72%) y tos seca (61% ) En el día, todos los pacientes no presentaron síntomas y se observó recuperación completa en todas las personas (100%). La disfunción olfativa y gustativa fue el síntoma más predominante en nuestros casos y ocurrió muy temprano, reflejando la entrada masiva de partículas virales en la mucosa oral y nasofaríngea.
Estas alteraciones se describieron en el síndrome respiratorio agudo severo (SRAS). Los pacientes no pudieron reconocer el sabor de los alimentos, ni siquiera los dulces o picantes, ni oler las fragancias (anosmia) ni los limpiadores domésticos (alcohol, detergentes de cocina o blanqueadores de cloro). El receptor de la Enzima Convertidora de Angiotensina 2 (ACE2), que son los principales receptores para COVID-19, se expresan altamente en la nariz, la boca, particularmente en la base de los sitios de lengua y garganta para los cuales el virus tiene un gran tropismo tisular.
El cuidado tópico de nariz, ratón y garganta con gotas nasales, enjuague bucal, aerosoles para la garganta e incluso pastas dentales a base de liposomas podría ayudar a reducir la carga viral. Estas alteraciones pueden considerarse como una disfunción olfativa y del gusto transitorias y requieren un mayor seguimiento e investigación. Los pacientes que reciben quimioterapia pueden mejorar la disfunción del gusto y el olfato mediante la ingesta de lactoferrina mejorando la inmunidad oral del paciente con cáncer.
Encontramos que el tratamiento de uso de gotas nasales LL fue muy útil para aliviar no solo los síntomas respiratorios sino también la tos, el dolor de cabeza y la disfunción del olfato y el gusto. Un 28% de nuestros pacientes presentaron dificultad para respirar. En estos casos, se recomendó el uso del dispositivo de inhalación de aerosol liposomal lactoferrina 4 veces al día con gran éxito. La inhalación fue bien tolerada y se notificó cualquier efecto secundario. También se recomendaron inhalaciones a través del nebulizador LLF a dos de los cuatro pacientes ingresados en hospitales. La lactoferrina es una proteína natural presente en las secreciones bronquiales y todo el contenido en el liposoma es biocompatible y biodegradable. La terapia liposomal en aerosol se ha empleado durante años con buenos resultados y un amplio perfil de seguridad. Se ha empleado con ribavirina en la infección del virus sintitial respiratorio y en las infecciones por rinovirus. La lactoferrina es una sustancia química hidrófila que, debido a su encapsulación en fosfatidilcolina, los liposomas se comportan como anfifílicos. La lactoferrina alcanza concentraciones suficientemente altas dentro de los pulmones y proporciona una liberación retardada de lactoferrina en el órgano diana, el tracto respiratorio.
El nanoliposoma de lactoferrina tiene un tamaño de 100 nm, pero una vez que se nebuliza a través de las vías respiratorias, tiene un tamaño reducido de 50 nm porque en el orificio del dispositivo hay un filtro que reduce el tamaño del nanósoma. El liposoma por sí solo puede interactuar con el surfactante natural (fosfolípidos y proteínas) del tejido objetivo (pulmones) y la fosfatidilcolina también puede ejercer un fuerte efecto antiinflamatorio.
Las infecciones pulmonares de COVID-19 pueden alterar el surfactante pulmonar total y cambiar su composición, disminuyendo así la disponibilidad de fosfolípidos que disminuyen la función pulmonar como ocurre en la enfermedad pulmonar obstructiva crónica. Sin surfactante, los alvéolos tienden a colapsar durante la respiración normal de las mareas, lo que resulta en una disminución de la distensibilidad pulmonar.
La lactoferrina, es una proteína globular perteneciente a la familia de las transferrinas y que muestra una gran afinidad por los iones de hierro. La lactoferrina es una proteína de defensa que se encuentra en la leche humana, donde está presente en concentraciones relativamente altas (1 g / L), especialmente en la etapa calostral (hasta 7 g / L). También está presente en otros fluidos corporales (lágrimas, semen, fluido vaginal, saliva, secreciones bronquiales, etc.). Es sintetizada por los neutrófilos de la sangre y varios tipos de células, incluidas algunas células atinares. Los niveles de lactoferrina endógena aumentan durante la infección y la inflamación.
La lactoferrina tiene propiedades antibacterianas y antivirales, modula el sistema inmunitario y protege contra la inflamación intestinal. La lactoferrina puede influir en los leucocitos al aumentar la actividad de las células NK, neutrófilos y macrófagos. Aumenta la producción de citocinas y óxido nítrico y limita el crecimiento de patógenos. Promueve la maduración de las células Inmunes, p. Linfocitos T y B. Puede reducir los síntomas de las alergias al bloquear la liberación de histamina de los mastocitos Intestinales. Probablemente puede ser útil en la prevención y el tratamiento de los efectos de la obesidad y puede promover la reducción de la grasa visceral. Puede ayudar a mejorar la condición de la piel en dolencias como el acné, la Inflamación de la piel y la psoriasis.
En el presente estudio se utiliza lactoferrina llposomal (LLF), registrada como suplemento alimenticio, Lactyferrin™, y se encuentra que este producto es seguro y efectivo para el tratamiento y la prevención de COVID-19 ya que los 75 pacientes positivos para la Infección por COVID-19 fueron tratados con éxito. La mayoría de los pacientes respondieron durante los primeros 3 a 4 días de tratamiento con Lactyferrin™, aunque se recomendó el tratamiento durante 10 días.
Los Individuos en contacto con pacientes sintomáticos también fueron tratados con la mitad de la dosis curativa, lo que resultó en la prevención de la enfermedad. La combinación de lactoferrina llposomal y zinc llposomal es muy efectiva y segura para el tratamiento de esta enfermedad potencialmente mortal.
El suplemento alimenticio nutrícional llposomal bovino basado en lactoferrina, Lactyferrin™ Forte bebible (Laboratorios Sesderma, Valencia, España) está registrado en la Unión Europea (Irlanda), así como por la Administración de Drogas y Alimentos de los Estados Unidos, como un suplemento alimenticio. La Autoridad Europea de Seguridad Alimentaria reconoce la lactoferrina bovina como un suplemento dietético con propiedades medicinales, y está clasificada como un alimento novedoso y seguro ("generalmente reconocido como seguro"), sin contraindicaciones.
Las dosis totales para adultos de lactoferrina no encapsulada oscilan entre 1 ,4 y 3,4 g, y este suplemento se usa con frecuencia para fortalecer el sistema inmunitario. La Lactyferrin™ contiene lactoferrina (32 mg / 10 mi y vitamina C 12 mg / 10 mi). Ambas sustancias son hidrofílicas y tienen una absorción gástrica muy limitada. El liposoma, con su sistema vesicular de bicapa de fosfolípidos cerrado, podría encapsular tanto los medicamentos hidrófilos (lactoferrina, vitamina C, zinc) como los hidrófobos (vitamina
A). Los liposomas fabricados para obtener la composición de la presente patente se basan en fosfatidilcolina (PC), que es un químico biocompatible y biodegradable. La lactoferrina en su forma libre se degrada dentro del estómago por la acción del ácido clorhídrico y las enzimas hidrolíticas (proteasas, pepsina); por lo tanto, la biodisponibilidad de la forma libre es muy limitada.
Por lo tanto, lactoferrina y vitamina C se encapsulan en una burbuja de lípidos o nanoliposoma de 100 nm, hecha de fosfatidilcolina de soja (PC) en Lactyferrin™. El nanoliposoma protege a la lactoferrina de la destrucción por secreciones digestivas y permite que la proteína intacta viaje a través del duodeno y llegue a la circulación general, desde donde su biodisponibilidad es muy alta.
La lactoferrina encapsulada de esta manera está protegida de la pepsina y la hidrólisis por proteasas. También es Importante tener en cuenta que la lactoferrina libre se elimina rápidamente de la circulación, lo que limita su potencial terapéutico. Por lo tanto, es necesario encapsularlo en liposomas para mejorar la estabilidad del plasma.
La PC utilizada para fabricar liposomas es una molécula de fosfolípidos ubicua y natural, que es el lípido principal en las membranas celulares y las proteínas sanguíneas. Además, la PC sirve como la principal fuente fisiológica de colina, un nutriente esencial y precursor del neurotransmisor, la acetilcolina. La PC también es necesaria para producir surfactantes, que son críticos para la función pulmonar y la salud gastrointestinal. Los términos "fosfatidilcolina" y "lecitina" a veces se usan indistintamente; sin embargo, la lecitina es una mezcla de varios lípidos y fosfolípidos. La PC es necesaria para la composición y reparación de las membranas celulares y es vital para la función hepática normal. La investigación indica que la PC tiene un papel beneficioso en la prevención y el tratamiento de diversas formas de enfermedad hepática y toxicidad. La PC protege las células del hígado del daño viral, reduce la fíbrosis y previene la muerte celular por drogas, alcohol y otras toxinas químicas.
Los efectos protectores de la lactoferrina varían desde propiedades anticancerígenas, antiinflamatorias e inmunomoduladoras, hasta actividades antimicrobianas, antifúngicas y antivirales contra muchos microorganismos. Esta amplia gama de actividades es posible gracias a mecanismos de acción que involucran, no solo la capacidad de la lactoferrina para unir el hierro, sino también las interacciones de la lactoferrina con los componentes moleculares y celulares de los huéspedes y los patógenos. La actividad antibacteriana de la lactofemna está relacionada con la privación de hierro ambiental, que es esencial para el crecimiento bacteriano, mientras que su actividad antiviral está asociada con su papel como competidor de los receptores de membrana celular comúnmente utilizados por los virus para ingresar a las células. . Específicamente como se ha indicado antes, la lactofemna es un bloqueador de ACE2, y evita la unión de la proteína S del virus a la célula huésped, bloqueando la fusión del virus con la membrana celular. La lactofemna liposomal también puede suprimir la replicación viral después de la entrada en la célula, como en el caso del VIH. Además, algunos pacientes infectados con VIH-1 muestran niveles disminuidos de lactofemna en plasma y en otros, la falta de lactofemna (e IgA secretora) encontrada en las cavidades orales de personas con VIH se correlacionó fuertemente con las infecciones frecuentes en esas áreas.
Los nanoliposomas también tienen efectos beneficiosos relacionados con su tamaño y composición (PC); son de menor tamaño (100 nm) que el virus (150 nm), pueden competir para llegar a las células objetivo, donde se asientan antes que el virus.
También hemos demostrado que dosis específicas de lactofemna liposomal pueden prevenir COVID-19. Dosis más bajas no previenen la infección (datos no publicados).
Además, con el uso de lactofemna, hemos contribuido al tratamiento exitoso de al menos cuatro pacientes hospitalizados intubados, de alto riesgo (niveles altos de ferritina, IL-2, DD2) y con signos vitales prácticamente ausentes. La lactofemna reduce significativamente la reacción hiperinmune observada en pacientes en estado crítico y que sufren una tormenta agresiva de atocinas proinflamatorias (IL-2 y 6), normalizando o disminuyendo los parámetros IL-6, TNF alfa, ferritina y DD2, y protegiendo pulmones contra dificultad respiratoria aguda. La lactofemna tiene propiedades inmunomoduladoras y antiinflamatorias, que son importantes en la fisiopatología de las infecciones graves. Además, la lactofemna tiene un papel inmunomodulador crucial en el mantenimiento de la homeostasis inmunológica y fisiológica y en la limitación del daño tisular al modular las atocinas, las quimiocinas y los receptores de la superficie celular implicados en las cascadas de señalización. Los roles restaurativos y homeostáticos de la lactofemna son notables en el contexto de la "respuesta inflamatoria sistémica", que describe la respuesta fisiológica a los insultos graves como la sepsis. El concepto de "tormenta de citoquinas" refleja la hiperínducción de respuestas inflamatorias que resultan de la activación inmune no controlada, y estas responden claramente a la administración oral de lactoferrina.
La lactoferrina es útil para el tratamiento de los casos más graves de COVID-19, debido a su capacidad para modular las respuestas inmunitarias e inflamatorias exageradas a las infecciones virales, como hemos observado en al menos cuatro pacientes. La LLF podría desempeñar un papel en las alteraciones del metabolismo del hierro observadas durante la inflamación y las condiciones con un aumento de la renovación de neutrófilos. En este caso, muchas citocinas liberadas y / o productos inflamatorios como la interleucina 1, la endotoxina, el TNF-alfa y los complejos inmunes pueden desencadenar la liberación de lactoferrina de los neutrófilos. La lactoferrina se unirá a su receptor de membrana en monocitos / macrófagos y atrapada en esta posición podría impedir la transferencia de hierro del macrófago a la transferrina sérica. El hierro liberado de los glóbulos rojos fagocitados senescentes podría de este modo ser capturado por la lactoferrina unida a la membrana y transferido nuevamente a la ferritina ¡ntracelular.
Se ha estado usando lactoferrina liposomal para tratar diversas afecciones médicas durante los últimos 14 años. También se probaron los efectos neuroprotectores de la lactoferrina liposomal en un modelo de Caenorhabditis elegans mediante la evaluación de respuestas tanto fenotípicas como transcriptómicas. El producto basado en lactoferrina protegió contra el estrés oxidativo agudo y extendió la vida útil de C. alagans de una manera dependiente de la dosis. Además, la parálisis de la cepa transgénica de C. alagans, CL4176, causada por los agregados Αβ1-42, se mejoró claramente mediante el tratamiento con lactoferrina. El análisis del transcriptoma de los nematodos tratados indicó que condujo a la estimulación del sistema inmune, junto con la mejora de los procesos involucrados en la respuesta al estrés oxidativo. El producto basado en lactoferrina también mejoró los procesos involucrados en la homeostasis de las proteínas, la adhesión celular y la neurogénesis en el nematodo. Por ello se concluyó que la lactoferrina brinda protección contra el envejecimiento y la neurodegeneración, modulando los procesos Involucrados en la respuesta al estrés oxidativo, la homeostasis de las proteínas, la función sinóptica y el metabolismo xenobiótico. El producto liposomal basado en lactoferrina también fue capaz de estimular el sistema inmune, así como mejorar el estado reproductivo y el metabolismo energético. Juntos, todos estos hallazgos sugieren que la suplementadón oral con lactoferrina liposomal podría beneficiar al sistema inmune y mejorar la capacidad antioxidante.
Muchos pacientes ingresados en nuestros hospitales locales con COVID-19 son mayores de 70 años y tienen niveles muy bajos de zinc, lo que puede contribuir a la gravedad de la infección. El zinc también es hidrofílico y presenta una absorción deficiente a través del tracto gastrointestinal. Curiosamente, la administración de zinc nano encapsulado podría apoyar la recuperación de pacientes con infección por COVID 19.
El zinc también ha exhibido un potente efecto antiviral. En experimentos con virus de la pollo, el zinc inhibió la infección viral cuando se incubó con células después de la fusión viral, y el nivel de inhibición se correlacionó con el grado de saturación de zinc. Los suplementos de zinc se han propuesto previamente para la administración a pacientes con COVID-19. El zinc también puede influir en las metaloproteasas involucradas en el proceso de fusión del coronavirus, al disminuir tanto la entrada celular como la fusión célula-célula.
La lactoferrina se puede usar junto o en combinación con zinc y ambos suplementos no son tóxicos y también se pueden usar como tratamientos adyuvantes, junto con medicamentos antivirales convencionales o hidroxicloroquina, como se muestra para el tratamiento del virus de la hepatitis C (VHC), donde la lactoferrina disminuyó el título de ARN del VHC al contribuir a la efectividad de la terapia con interferón y ribavirina combinados.
La lactoferrina tiene un gran potencial para su uso como tratamiento complementario para pacientes con enfermedades virales. Según nuestra experiencia en el estudio clínico realizado con pacientes aislados en el hogar de COVID-19, y el cuidadoso rastreo de contactos, concluimos que la lactoferrina liposomal puede prevenir y curar la infección de una manera dependiente de la dosis. Este tratamiento también está indicado en pacientes con enfermedad grave, como observamos en cuatro pacientes que estaban gravemente enfermos. Las dosis que recomendamos para el tratamiento y la prevención de COVID-19 se proporcionan en el n ejemplo de realización preferente. Este tratamiento mencionado está completamente libre de efectos secundarios. Algunas instituciones están promoviendo el tratamiento empírico con hidroxicloroquina más azitromicina. Sin embargo, los estudios clínicos no están completos y la hidroxicloroquina no está exenta de efectos secundarios y puede inducir una amplia gama de efectos adversos. Se han descrito efectos secundarios cardiovasculares, dermatológicos, gastrointestinales, hematológicos, hepáticos, de hipersensibilidad, metabólicos, musculoesqueléticos, del sistema nervioso, oculares, psiquiátricos y respiratorios. En particular, se han observado alteraciones del ritmo cardíaco en un paciente con lupus eritematoso sistémico que desarrolló episodios sincópales como resultado de una prolongación significativa del intervalo QT. Esto se corrigió después de la interrupción de la droga. La administración de azitromicina es una paradoja. Los antibióticos no tienen ningún efecto sobre el virus y el medicamento se administra debido a su efecto inmunomodulador, pero desafortunadamente la azitromicina comparte con la hidroxicloroquina el potencial para inducir la prolongación del segmento QT causando cambios anormales en la actividad eléctrica del corazón que pueden conducir a un ritmo cardíaco irregular potencialmente fatal.
Los antibióticos alteran la microbiota intestinal que ya ha sido destruida por COVID-19 y se recomienda la administración de probióticos. Los pacientes de edad avanzada que toman antibióticos pueden desarrollar disbiosis intestinal con cambios en la microbiota intestinal, lo que hace que estos pacientes sean propensos a la insuficiencia cardíaca.
En el estudio clínico realizado, el 94,44% de los pacientes desarrollaron diarrea que la LLF contrarresta antes del quinto día. La LLF puede ejercer un efecto antiinflamatorio tanto a nivel gastrointestinal que equilibra la microbiota local como reduce el daño intestinal inducido por el virus. La lactoferrina aumenta la buena micro flora, como bifidus, y disminuye la bacteria mala, como E. coli, estreptococo, clostridium y otros.
La lactoferrina actúa como un agente antiinflamatorio que promueve las atocinas "buenas" como la interleucina (IL) -4 e IL-10 y reduce las atocinas proinflamatorias como el factor de necrosis tumoral alfa, IL-6 e IL-1beta, y la regulación negativa de factor nuclear-kappa. Lo mejor del tratamiento con lactoferrina es que es simple, seguro y bastante efectivo en las infecciones por COVID 19, tanto en adultos jóvenes, personas mayores como en niños, mujeres y hombres, independientemente de la patología de base. Asimismo cabe destacar la mediación por parte de la lactoferrina de la inflamación inducida por la infección por COVID-19 que conduce a la activación de macrófagos y células dendríticas. Los neutrófilos se degranulan en el lugar de la injuria y liberan masivas cantidades de LF. La LF a su vez, puede aumentar las bajas respuestas o modular la actividad citoquínica ultra agresiva. Ambos efectos sirven para controlar la inflamación y asistir en la reparación tisular tras el trauma.
La lactoferrina necesita ser encapsulada en un liposoma de PC para protegerla de la hidrólisis de pepsina y del pH ácido del estómago que permite que la glucoproteína pase completamente a través de los intestinos y sea absorbida.
Para complementar la descripción que se está realizando y con objeto de facilitar la comprensión de las características de la invención, se acompaña a la presente memoria descriptiva un juego de dibujos en los que, con carácter ilustrativo y no limitativo, se ha representado lo siguiente:
Figura 1:- Se muestran dos imágenes en las que se muestra como la composición impide la entrada el coronavirus en la célula y cuando hay infección.
Figura 2 - Distribución del tamaño de partícula por el número de partículas (%) obtenido mediante estudios de DLS para A) liposomas de lactoferrina, liposomas de B) ascorbato sódico, y C) de sulfato de zinc.
Figura 3 - Ausencia o presencia de tos seca en los pacientes antes del tratamiento (día 0) y después del tratamiento (48 horas y 5 días).
Figura 4 - Ausencia o presencia de dolor muscular en los pacientes antes del tratamiento (día 0) y después del tratamiento (48 horas y 5 días).
Figura 5 - Ausencia o presencia de cansancio en los pacientes antes del tratamiento (día 0) y después del tratamiento (48 horas y 5 días).
Figura 6 - Ausencia o presencia de dolor de cabeza en los pacientes antes del tratamiento (día 0) y después del tratamiento (48 horas y 5 días). Figura 7 - Ausencia o presencia de gusto en los pacientes antes del tratamiento (día 0) y después del tratamiento (48 horas y 5 días).
Figura 8 - Ausencia o presencia de olfato en los pacientes antes del tratamiento (día 0) y después del tratamiento (48 horas y 5 días).
Figura 9 - representa un diagrama de la mediación por parte de la lactoferrina de la inflamación inducida por la infección por COVID-19 que conduce a la activación de macrófagos y células dendríticas.
Exposición de un modo de realización
A continuación se expone un método de realización de la invención, por un lado lo referente a la composición objeto de la presente invención y por otro lado al uso de la misma.
La lecitina de soja de calidad alimentaria se adquirió en Lipoid (Ludwigshafen, Alemania); el tween 20 en Comercial Química Massó (Barcelona, España); el etanol de 96° en Panreac (Barcelona, España); la lactoferr ¡na en Ferrer Health (Barcelona, España); el ascorbato sódico en Fagron Ibérica (Barcelona, España); y el sulfato de zinc heptahidratado en Nutrifoods (Barcelona, España).
Las diferentes soluciones liposómicas se prepararon según el procedimiento desarrollado por los laboratorios Sesderma (Valencia, España). (Serrano et al., 2015) En concreto, los fosfolípidos (fosfatidil colina) se disolvieron en etanol de 96° a la temperatura ambiente, y posteriormente se añadió tween 20 a la solución etanólica. En paralelo, los diferentes principios activos se disolvieron en agua bidestilada a la concentración de 5,2, 150 y 14 mg/ml para la lactoferrina, el ascorbato sódico y el sulfato de zinc, respectivamente. Posteriormente, se mezclaron la mezcla lipídica y la solución acuosa que contiene el correspondiente principio activo (lactoferrina, ascorbato sódico o sulfato de zinc) y se agitaron vigorosamente durante 5 minutos. Finalmente, las suspensiones liposómicas resultantes se filtraron a través de un filtro de jeringa de acetato de celulosa sin tensioactivo con un tamaño de poro de 0,2 μm. La concentración final de los principios activos en las diferentes soluciones liposómicas se detalla en la siguiente tabla:
Concentraciones de principio activo en las diferentes soluciones liposómicas preparadas.
Figure imgf000024_0001
La caracterización del liposoma en términos de tamaño de partícula fue evaluada mediante una dispersión de luz dinámica (DLS). Todas las mediciones se realizaron con un analizador de partículas Delsa Nano C (Beckman Coulter, Madrid, España), y se realizaron por triplicado en suspensiones diluidas de los llposomas con agua desionizada filtrada. Se usó el índice de polidispersidad (PDI) como una medida para definir la homogeneidad de la distribución de tamaños. Una muestra que presenta un valor del PDI igual o menor de 0,2 se considera una población homogénea.
Con objeto de administrar los principios activos encapsulados a los voluntarios del estudio, las soluciones liposómicas preparadas se Incluyeron en dos formulaciones líquidas de suplementos alimenticios. Las formulaciones de suplementos alimenticios que consistían en una mezcla de componentes con un efecto nutricional o fisiológico se recogen en la Tabla siguiente:
Composición de los suplementos alimenticios.
Figure imgf000024_0002
Figure imgf000025_0001
La concentración de los principios activos en las diferentes formulaciones de suplementos alimenticios se especifica en la tabla siguiente:
Concentraciones de principio activo en la formulación preparada de suplemento alimenticio (SA).
Figure imgf000025_0002
Los estudios del tamaño de partícula revelaron que todas las formulaciones de liposomas usadas en este estudio presentan un diámetro de partícula en el intervalo de aproximadamente 100 - 130 nm, con un PDI por debajo de 0,15. Los resultados se muestran en la Figura 2 y se resumen en la Tabla siguiente: Diámetro de partícula medido por DLS e índice de polidispersidad (PDI) de los liposomas de lactoferrina, de ascorbato sódico y de sulfato de cinc.
Figure imgf000026_0001
Por lo que se refiere al uso de esta composición se debe hacer en las siguientes dosis de lactoferrina liposomada o cantidad de composición siguientes:
Dosis curativas: 64-96 mg (20-30 mi) cada 6 h diarias para curar la infección por COVID-19 (256-384 mg / día). Las dosis se pueden aumentar a 640 a 960 mg / día. Dosis preventivas: a dosis de 64 mg dos o tres veces al día previene la infección por COVID-19 (128-192 mg / día).
Embarazo de lactirferrina y jarabe para bebés (encapsulación de glucerosomas, sin alcohol):
- Mujeres embarazadas y bebés menores de dos años.
- Madres: 20 mg (6,25 mi) tres o cuatro veces al día (72-80 mg / día).
- Bebés: 20 mg (6,25 mi) dos veces al día.
- Jarabe de defensa de zinc: 10-30 mg / día (10-30 mi)
Asimismo en lo referente a la administración por vía nasal de Gotas nasales lactoferrina (Lactyferrin™): estas gotas nasales contienen nano lactoferrina para aliviar rápidamente la sinusitis aguda y las alteraciones en el olor y el sabor que tienen muchos pacientes, al tiempo que contribuyen al manejo de la tos seca. En casos agudos, recomendamos aplicar 2 gotas en cada fosa nasal cada 2-3 horas durante 12 horas. Luego cada 4-6 horas. Las gotas nasales de lactiferrina son un factor muy importante para el alivio de los síntomas respiratorios. Una vez descrita suficientemente la naturaleza de la Invención, así como un ejemplo de realización preferente, se hace constar a los efectos oportunos que los materiales, forma, tamaño y disposición de los elementos descritos podrán ser modificados, siempre y cuando ello no suponga una alteración de las características esenciales de la invención que se reivindican a continuación.

Claims

REIVINDICACIONES
1.- Composición para ser usada en el tratamiento y la prevención de infecciones por COVID-19 y otros coronavirus caracterizada por que el principio activo fundamental es lactoferrina liposomada.
2 - Composición para ser usada en el tratamiento y la prevención de infecciones por COVID-19 y otros coronavirus de acuerdo con la reivindicación 1 caracterizada por que la concentración de lactoferrina liposomada en la composición es entre 2,9 mg/ml y 3,5 mg/ml y preferentemente de 3,2 mg/ml.
3.- Composición para ser usada en el tratamiento y la prevención de infecciones por COVID-19 y otros coronavirus de acuerdo con la reivindicación 1 caracterizada por que el diámetro de la partícula de liposoma de lactoferrina es de 124 ± 6 nm.
4.- Composición para ser usada en el tratamiento y la prevención de infecciones por COVID-19 y otros coronavirus de acuerdo con las reivindicaciones 1 y 3 caracterizada por que el fosfolípido con el que se fabrica el liposoma de lactoferrina es fosfatidilcolina.
5.- Composición para ser usada en el tratamiento y la prevención de infecciones por COVID-19 y otros coronavirus de acuerdo con la reivindicación 1 caracterizada por que además del principio activo fundamental que es la lactoferrina contiene una sal de zinc encapsulada en liposomas en una concentración entre 1,0 mg/ml y 1,2 mg/ml y preferentemente de 1,1 mg/ml.
6.- Composición para ser usada en el tratamiento y la prevención de infecciones por COVID-19 y otros coronavirus de acuerdo con la reivindicación 5 caracterizada por que la sal de zinc preferentemente es sulfato de zinc.
7.- Composición para ser usada en el tratamiento y la prevención de infecciones por COVID-19 y otros coronavirus de acuerdo con las reivindicaciones 1, 5 y 6 caracterizada por que además del principio activo fundamental que es la lactoferrina y otro principio activo secundario como son liposomas de una sal de zinc contiene liposomas de vitamina C en una concentración entre 1,1 mg/ml y 1,3 mg/ml y preferentemente de 1,2 mg/ml.
8.- Uso de la composición de las reivindicaciones anteriores para el tratamiento y prevención de las infecciones por COVID-19 y otros coronavirus en las dosis de lactoferrina liposomada siguientes:
- dosis curativas: 64-96 mg (20-30 mi de composición) cada 6 h diarias para curar la infección por COVID-19 (256-384 mg lactoferrina liposomada/ día).
- dosis preventivas: 64 mg (20 mi de composición).dos o tres veces al día. (128-192 mg lactoferrina liposomada/ día).
9.- Uso de la composición de las reivindicaciones anteriores para el tratamiento y prevención de las infecciones por COVID-19 y otros coronavirus en unas dosis de lactoferrina liposomada que se puede aumentar hasta 960 mg/día.
10.- Uso de la composición de las reivindicaciones anteriores para el tratamiento y prevención de las infecciones por COVID-19 y otros coronavirus en mujeres embarazadas y bebés menores de dos años en las dosis de lactoferrina liposomada siguientes:
- madres: 20 mg (6,25 mi) tres o cuatro veces al día (72-80 mg / día).
- bebés: 20 mg (6,25 mi) dos veces al día.
PCT/ES2020/070245 2020-04-16 2020-04-16 Nueva composición para ser usada en el tratamiento y la prevención de infecciones por covid-19 y otros coronavirus Ceased WO2021209652A1 (es)

Priority Applications (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US16/918,260 US20230190652A1 (en) 2020-04-16 2020-04-16 Composition for the treatment of covid-19 and treatment method
PCT/ES2020/070245 WO2021209652A1 (es) 2020-04-16 2020-04-16 Nueva composición para ser usada en el tratamiento y la prevención de infecciones por covid-19 y otros coronavirus
EP20930839.4A EP4137511A4 (en) 2020-04-16 2020-04-16 NEW COMPOSITION FOR USE IN THE TREATMENT AND PREVENTION OF INFECTIONS CAUSED BY COVID-19 AND OTHER CORONAVIRUSES

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PCT/ES2020/070245 WO2021209652A1 (es) 2020-04-16 2020-04-16 Nueva composición para ser usada en el tratamiento y la prevención de infecciones por covid-19 y otros coronavirus

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2021209652A1 true WO2021209652A1 (es) 2021-10-21

Family

ID=78084053

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/ES2020/070245 Ceased WO2021209652A1 (es) 2020-04-16 2020-04-16 Nueva composición para ser usada en el tratamiento y la prevención de infecciones por covid-19 y otros coronavirus

Country Status (3)

Country Link
US (1) US20230190652A1 (es)
EP (1) EP4137511A4 (es)
WO (1) WO2021209652A1 (es)

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2023230057A1 (en) * 2022-05-23 2023-11-30 Tygrus, LLC Therapeutic useful against antimicrobial resistant agents
IT202200023289A1 (it) * 2022-11-11 2024-05-11 Global Pharmacies Partner S R L In Forma Abbreviata G P P S R L Integratore nutraceutico per la prevenzione ed il trattamento di infezioni delle vie respiratorie
WO2024036227A3 (en) * 2022-08-11 2024-06-06 Helaina Inc. Edible composition comprising recombinant human secretory protein
US12485093B2 (en) 2021-02-01 2025-12-02 Dermopartners, S.L. Composition for use as an antiviral in the form of nasal drops and in nebulisers

Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ES2256070T3 (es) * 1999-11-11 2006-07-16 Am-Pharma B.V. Actividad antimicrobiana de la primera agrupacion cationica de lactoferrina humana.
EP2323625A2 (en) 2008-07-15 2011-05-25 Biagio Biancardi New composition for the treatment of ecchymotic pigmentations
EP2692355A1 (en) 2012-08-01 2014-02-05 Biagio Biancardi Apolactoferrin for the treatment of iron accumulation diseases
US20160206707A1 (en) 2013-09-25 2016-07-21 Giellepi S.P.A. Lactoferrin for the treatment of ibd associated with bacterial invasion
US20160271247A1 (en) * 2010-04-23 2016-09-22 Probiotec Limited Pharmaceutical Compositions
EP3210618A1 (en) 2010-04-23 2017-08-30 Probiotec Limited Composition comprising lactoferrin and immunoglobulin for the treatment of eczema
WO2019046664A1 (en) * 2017-08-30 2019-03-07 Applied Biological Laboratories, Inc. COMPOSITIONS AND METHODS FOR PROTECTING AGENTS FROM PATHOGENS AND IRRITANTS
EP3603621A1 (en) 2018-07-31 2020-02-05 TDC Technology Dedicated to Care S.r.l. Liposomes for the treatment of ocular diseases

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2007022537A2 (en) * 2005-08-19 2007-02-22 Agennix Incorporated Use of lactoferrin as a chemokine and a chemotactic modulator
US12447166B2 (en) * 2016-02-25 2025-10-21 Applied Biological Laboratories, Inc. Compositions and methods for protecting against airborne pathogens and irritants

Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ES2256070T3 (es) * 1999-11-11 2006-07-16 Am-Pharma B.V. Actividad antimicrobiana de la primera agrupacion cationica de lactoferrina humana.
EP2323625A2 (en) 2008-07-15 2011-05-25 Biagio Biancardi New composition for the treatment of ecchymotic pigmentations
US20160271247A1 (en) * 2010-04-23 2016-09-22 Probiotec Limited Pharmaceutical Compositions
EP3210618A1 (en) 2010-04-23 2017-08-30 Probiotec Limited Composition comprising lactoferrin and immunoglobulin for the treatment of eczema
EP2692355A1 (en) 2012-08-01 2014-02-05 Biagio Biancardi Apolactoferrin for the treatment of iron accumulation diseases
US20160206707A1 (en) 2013-09-25 2016-07-21 Giellepi S.P.A. Lactoferrin for the treatment of ibd associated with bacterial invasion
WO2019046664A1 (en) * 2017-08-30 2019-03-07 Applied Biological Laboratories, Inc. COMPOSITIONS AND METHODS FOR PROTECTING AGENTS FROM PATHOGENS AND IRRITANTS
EP3603621A1 (en) 2018-07-31 2020-02-05 TDC Technology Dedicated to Care S.r.l. Liposomes for the treatment of ocular diseases

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
JIANSHE LANG, NING YANG, JIEJIE DENG, KANGTAI LIU, PENG YANG, GUIGEN ZHANG, CHENGYU JIANG, ROBERT GERAGHTY: "Inhibition of SARS Pseudovirus Cell Entry by Lactoferrin Binding to Heparan Sulfate Proteoglycans", PLOS ONE, PUBLIC LIBRARY OF SCIENCE, vol. 6, no. 8, 1 August 2011 (2011-08-01), pages e23710, XP055765756, DOI: 10.1371/journal.pone.0023710 *
REGHUNATHAN RENJI; JAYAPAL MANIKANDAN; HSU LI-YANG; CHNG HIOK-HEE; TAI DESSMON; LEUNG BERNARD P; MELENDEZ ALIRIO J: "Expression profile of immune response genes in patients with Severe Acute Respiratory Syndrome", BMC IMMUNOLOGY, BIOMED CENTRAL, LONDON, GB, vol. 6, no. 1, 18 January 2005 (2005-01-18), GB , pages 2, XP021002445, ISSN: 1471-2172, DOI: 10.1186/1471-2172-6-2 *
See also references of EP4137511A4

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US12485093B2 (en) 2021-02-01 2025-12-02 Dermopartners, S.L. Composition for use as an antiviral in the form of nasal drops and in nebulisers
WO2023230057A1 (en) * 2022-05-23 2023-11-30 Tygrus, LLC Therapeutic useful against antimicrobial resistant agents
WO2024036227A3 (en) * 2022-08-11 2024-06-06 Helaina Inc. Edible composition comprising recombinant human secretory protein
IT202200023289A1 (it) * 2022-11-11 2024-05-11 Global Pharmacies Partner S R L In Forma Abbreviata G P P S R L Integratore nutraceutico per la prevenzione ed il trattamento di infezioni delle vie respiratorie
WO2024100615A1 (en) * 2022-11-11 2024-05-16 Global Pharmacies Partner S.R.L. In Forma Abbreviata G.P.P. S.R.L. Nutraceutical supplement for the prevention and treatment of respiratory tract infections

Also Published As

Publication number Publication date
US20230190652A1 (en) 2023-06-22
EP4137511A1 (en) 2023-02-22
EP4137511A4 (en) 2024-01-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Serrano et al. Liposomal lactoferrin as potential preventative and cure for COVID-19
WO2021209652A1 (es) Nueva composición para ser usada en el tratamiento y la prevención de infecciones por covid-19 y otros coronavirus
US20110020279A1 (en) Rabies cure
US20090191288A1 (en) Composition to Treat Herpes, Pseudomonas, Staph, Hepatitis and Other Infectious Diseases
WO2013058640A2 (es) Método de extracción, comprobación y conteo de extracto dializado de leucocitos de origen bazo de tiburón, para la obtención de factor de transferencia potencializado, específicamente diseñado para su uso como tratamiento contra la enfermedad conocida como asma
KR20110014199A (ko) 비강 비염 치료용 재조합 인간 ｃｃ10 및 이의 조성물
US20170258861A1 (en) Treatment of Herpes, Pseudomonas, Staph, and Hepatitis
US20260007596A1 (en) Compositions for preventing infection
EP2956131A1 (en) Treatment of klebsiella pneumoniae with liposomally formulated glutathione
BR102016020391A2 (pt) Pharmaceutical formulation based on zinc and quercetin for the production of effective antiviral medication for dengue and zika
US12527753B2 (en) Cysteamine for the treatment, mitigation and prevention of coronaviral, e.g., SARS-CoV-2, infections
US20070077258A1 (en) ADMINISTRATION OF GLUTATHIONE (REDUCED) VIA INTRAVENOUS OR ENCAPSULATED IN LIPOSOME FOR THE AMELIORATION OF TNF-alpha EFFECTS AND FLU-LIKE VIRAL SYMPTOMS AND TREATMENT AND PREVENTION OF VIRUS
EP4142772A1 (en) Compositions for the prevention and/or treatment of respiratory tract infections
RU2413503C2 (ru) Перфторуглеродная эмульсия с коллоидным серебром для медико-биологических и косметических целей: состав и средство для применения
US20210228669A1 (en) A composition comprising a mixture of an extract and bentonite
CN117083057A (zh) 用于预防感染的组合物
US11583561B2 (en) Composition for preventing, treating, or alleviating viral infection diseases or respiratory diseases comprising vesicle derived from Lactobacillus paracasei
US12016941B2 (en) Treatment composition for nasal and oral dryness, nosebleeds, and allergy symptoms
US20250082678A1 (en) Bioavailable mixture providing safe, broad-spectrum, antipathogenic, health, fitness, neurological, and homeostatic benefits
US20250161350A1 (en) Methods for using cerium oxide nanoparticles for macrophage-mediated efficacy in respiratory syncytial viral infection
ES2402601T3 (es) Albúmina y/o manitol para el tratamiento de la poliposis nasal
ES2268246T3 (es) Uso de 2,3-dimetoxi-5-metil-6-decaprenil-1,4-benzoquinona en el tratamiento de incontinencia.
WO2023100080A1 (es) Composición farmacéutica líquida antiviral contra sars-cov-2
CN117562921A (zh) 一种钼纳米点在制备用于治疗急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征的药物中的应用
EA044553B1 (ru) Средство для аппликации полости рта и носа и способ его применения в составе комплексной терапии инфекционно-воспалительных заболеваний носовой и ротовой полости

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 20930839

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

ENP Entry into the national phase

Ref document number: 2020930839

Country of ref document: EP

Effective date: 20221116