WO2022019665A1 - 면역 치료제용 펩타이드 - Google Patents

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김효준
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3h Bio Co Ltd
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Definitions

  • the present invention relates to a peptide that is injected into a subject's body to induce a humoral immune response, and is a technology in the field of immunotherapeutic agents.
  • An immunotherapeutic agent is introduced into the body of a subject to induce a humoral immune response to the immunotherapeutic agent itself, and the purpose of the immunotherapeutic agent is to treat a specific disease or disease with the resulting antibody.
  • the "treatment” includes preventing a specific disease or disease.
  • An immunotherapeutic agent is similar to a vaccine in that it induces antibody production through an antigen-antibody reaction in the body of the subject, but the antibody has not only the ability to bind to the immunotherapeutic agent itself, but also a specific target in the body (eg, a specific tissue in the body, It is different in that it can treat specific diseases or diseases because it has binding ability with cells or substances generated in the course of metabolism) and can be continuously administered repeatedly.
  • An object of the present specification is to provide a peptide having a function of inducing a pre-designed antibody in the body of a subject.
  • An object of the present specification is to provide a composition for immunotherapy containing the peptide.
  • An object of the present specification is to provide the use of the peptide and a composition for immunotherapy containing the peptide.
  • the present specification provides a peptide unit having a length of 23mer to 71mer, which is recognized by CD4+ T-cell and capable of inducing a humoral immune response, comprising:
  • Th epitope At least one Th epitope, wherein the Th epitope is 8mer to 32mer in length;
  • the B-cell epitope is a fragment of apolipoprotein B-100 or a mimotope of apolipoprotein B-100, and an antibody targeting apolipoprotein B-100 is induced.
  • the length of the peptide unit is 26mer to 50mer, and the length of the Th epitope is 11mer to 13mer.
  • the peptide unit comprises one B-cell epitope and one Th epitope, and the length of the peptide unit is 26mer to 45mer.
  • the peptide unit comprises one B-cell epitope, and two Th epitopes, respectively referred to as a first Th epitope and a second Th epitope, and the length of the peptide unit is 37mer to 50mer, and
  • the first Th epitope is characterized in that it is linked between the B-cell epitope and the second Th epitope.
  • the peptide unit comprises a first B-cell epitope, two B-cell epitopes referred to as a second B-cell epitope, and a Th epitope, and the length of the peptide unit is 45mer to 50mer and the second B-cell epitope is connected between the first B-cell epitope and the Th epitope.
  • the peptide unit comprises a first B-cell epitope, two B-cell epitopes referred to as a second B-cell epitope, and a Th epitope, and the length of the peptide unit is 45mer to 50mer and the Th epitope is characterized in that it is connected between the first B-cell epitope and the second B-cell epitope.
  • the present specification provides a nucleic acid encoding the peptide unit or one that does not contain a nonstandard amino acid among the peptides.
  • the present specification provides a peptide in which two or more and five or less are linked to the peptide unit.
  • the present specification provides a pharmaceutical composition for the treatment of obesity comprising: the peptide unit or the peptide; and adjuvants.
  • the present specification provides a method for treating obesity, comprising: administering the pharmaceutical composition into a body of a subject.
  • the present specification provides the use of the peptide unit or the peptide for treating obesity.
  • the present specification provides the use of the peptide unit or the peptide for manufacturing an anti-obesity agent.
  • the peptides provided herein When the peptides provided herein are injected into the body of a subject, they specifically bind to a previously designed antigenic site and have the effect of inducing the production of antibodies with specific physiological functions.
  • Example 4 shows the results of the peptide effect confirmation experiment according to Experimental Example 3, and is a graph showing the weight of the test subject for each experimental group measured by age.
  • Lean denotes a normal weight control group
  • Obesity denotes a high-fat diet-induced obesity group
  • Mock denotes a placebo-administered group
  • 3H-OTP denotes Group 2-1.
  • FIG. 5 shows the results of the peptide effect confirmation experiment according to Experimental Example 3, and is a graph showing the measurement of antibody titers appearing in the test subjects for each experimental group.
  • Obesity represents the obesity group induced by a high-fat diet
  • Mock represents the placebo-administered group
  • 3H-OTP represents Group 2-1.
  • FIG. 6 is a graph showing the results of the peptide effect confirmation experiment according to Experimental Example 3, which is a graph showing the lipolytic ability of hormone sensitive lipase in adipocytes of test subjects for each experimental group.
  • Basal represents no norepinephrine treatment
  • Hormone represents norepinephrine treatment.
  • Lean denotes a normal weight control group
  • Obesity denotes a high-fat diet-induced obesity group
  • Mock denotes a placebo-administered group
  • 3H-OTP denotes Group 2-1.
  • Example 7 shows the results of the peptide effect confirmation experiment according to Experimental Example 3, and is a photograph showing the size of the fat cells of the test subjects for each experimental group.
  • Lean represents the normal weight control group
  • Obese represents the obese group induced by a high-fat diet.
  • DAPI staining images, LipidTOX staining images, and Merge images are shown, respectively.
  • FIG. 8 shows the results of the peptide effect confirmation experiment according to Experimental Example 3, and is a photograph showing the size of the fat cells of the test subjects for each experimental group.
  • DAPI staining images for adipocyte nuclei and lipids for each experimental group are shown.
  • Lean is a normal weight control group
  • Obese is an obesity group induced by a high-fat diet
  • Mock is a placebo-administered group
  • 3H-OTP is Group 2-1.
  • TG is triglyceride
  • NEFA non-esterified fatty acid
  • CHOL cholesterol
  • HDL high-density lipoprotein
  • LDL low-density lipoprotein. lipoprotein).
  • FIG. 10 shows the results of the peptide effect confirmation experiment according to Experimental Example 4, and is a graph showing the weight of each test subject for each experimental group measured by age.
  • Lean denotes a normal weight control group
  • Obese denotes an obesity group induced by a high-fat diet
  • Mock denotes a placebo-administered group
  • 3H-OTP 30 ug denotes Group 3-2
  • 3H-OTP 50 ug denotes Group 3-1.
  • a graph for 3H-OTP-2W 50 ug which means Group 2-1, is also shown.
  • FIG. 11 shows the results of the peptide effect confirmation experiment according to Experimental Example 4, and is a graph showing the measurement of the antibody titer of the test target for each experimental group.
  • Lean denotes a normal weight control group
  • Obese denotes an obesity group induced by a high-fat diet
  • Mock denotes a placebo-administered group
  • 3H-OTP 30 ug denotes Group 3-2
  • 3H-OTP 50 ug denotes Group 3-1.
  • FIG. 12 is a graph showing the results of the peptide effect confirmation experiment according to Experimental Example 5, by measuring the weight of the test subject for each experimental group by age.
  • Lean means normal weight control group
  • Obese means obesity group induced by high-fat diet
  • 3H-OTP means Group 4-1.
  • Wild (+/+)-Lean means normal weight control group
  • Wild (+/+) means Group 5-1
  • Hetero (+/-) means Group 5-2
  • Homo (-/-) means Group 5-3 do.
  • 23 to 25 show the results of the peptide effect confirmation experiment according to Experimental Example 7, and are tables describing the antibody titers at 11 weeks of age, 16 weeks of age, and 19 weeks of age of test subjects for each experimental group.
  • Lean is a normal weight control group
  • Obese is a high-fat diet-induced obesity group
  • P1 is Group 6-1
  • P2 is Group 6-2
  • P3 is Group 6-3
  • P4 is Group 6-4
  • P5 is Group 6-5
  • P7 means Group 6-7
  • P8 means Group 6-8
  • P9 means Group 6-9.
  • the value identified by the label in the “No” column for each experimental group in each table means the experimental result of each individual in each experimental group
  • ave is the overall mean
  • sd is the overall standard deviation
  • se is the overall standard error do.
  • the term “about” means approximately approximating some quantity, and is 30, 25, 20 to a reference quantity, level, value, number, frequency, percent, dimension, size, amount, weight or length. , 25, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 or 1% means an amount, level, value, number, frequency, percent, dimension, size, amount, weight or length varying by as much as 1%.
  • peptide refers to a polymer of amino acids.
  • peptide refers to a form in which a small number of amino acids are linked, and is mainly used to distinguish it from a protein. Although there is no clear standard to distinguish a protein from a peptide, unless otherwise defined, in the present specification, a polymer of about 200 amino acids is referred to as a peptide and more than that as a protein.
  • peptide may include all other meanings recognized by those skilled in the art.
  • the term “subject” refers to an organism that is a subject exposed to a specific substance (eg, a peptide, etc.).
  • the subject may refer to an independent organism such as a human or an animal, or may refer to a part of the independent organism such as a part of a tissue or a cell. This meaning may be appropriately interpreted according to the context.
  • the term “object” may include all other meanings recognized by those skilled in the art.
  • the term "immunotherapy” is a concept distinct from a general therapeutic agent or vaccine.
  • the immunotherapeutic agent is injected into the body of a subject and induces a humoral immune response to the immunotherapeutic agent itself is the same as that of a conventional vaccine.
  • the immunotherapeutic agent generally includes an antigen designed to induce an antibody having binding ability with a specific target tissue, cell, or substance in the body.
  • the term “immunotherapeutic agent” is construed to include all antigens that those skilled in the art can appropriately use, such as peptides, proteins, lipids, saccharides, and/or complexes thereof having the above-mentioned functions.
  • the term “immunotherapy” may be more limitedly referred to as “humoral-immunotherapeutics.
  • the term “immunotherapy” has other meanings recognized by those skilled in the art. may include all of them.
  • treatment means to eliminate, alleviate, alleviate, inhibit, ameliorate, or eliminate, or alleviate, a disease, disorder, disorder, and/or symptom of a subject.
  • therapeutic agent refers to various substances (eg, compounds or peptides) that can exhibit the "therapeutic” effect when given in an appropriate way to a subject.
  • treatment or therapeutic agent may include all other meanings recognized by those of ordinary skill in the art.
  • the term “immunogenicity” refers to “the property of acting as an antigen capable of inducing an immune response” in the dictionary. There are various methods for measuring the immunogenicity of a specific antigen, and the method may be appropriately adopted or designed according to the purpose.
  • the antigen when the antigen is administered to the body of a subject, a method of determining whether an antibody of IgG, IgA, and/or IgE type is generated in the body of the subject, 2) depending on the administration cycle, the IgG , IgA, and / or a method of confirming the time when an IgE type antibody is generated, 3) a method of confirming the titer of the induced antibody to the antigen, 4)
  • the mechanism of action of the induced antibody is found, the There may be a method of measuring the effect according to the mechanism of action, but is not limited thereto.
  • immunotherapeuticity increases may be used interchangeably with expressions such as "the effect of inducing an immune response is increased”, “the ability to induce an antibody is improved”, or “the effect as an immunotherapeutic agent is increased”. and includes all expressions that a person skilled in the art can properly interpret according to the context.
  • the term "mer” generally refers to the number of units in a high molecular polymer.
  • the “mer” is generally expressed as a "peptide having a length of N mer” together with a number when expressing the length of a peptide, which means a peptide in which N amino acids are polymerized.
  • the unit indicated by the expression “mer” should be properly interpreted within the context, and includes all other meanings that can be recognized by those skilled in the art.
  • the term "standard amino acid” refers to 20 kinds of amino acids synthesized through transcription and translation processes of genes in the body of an organism.
  • the standard amino acid is alanine (Alanine; Ala, A), arginine (Arginine; Arg, R), asparagine (Asparagine; Asn, N), aspartic acid (Aspartic acid; Asp, D), cysteine (Cysteine; Cys) , C), Glutamic acid (Glu, E), Glutamine (Gln, Q), Glycine (Gly, G), Histidine (Histidine; His, H), Isoleucine (Ile, I), Leucine (Leu, L), lysine (Lys K), methionine (Met, M), phenylalanine (Phenylalanine; Phe, F), proline (Proline; Pro, P), serine (Serine; Ser, S), Threonine (Thr, T), Tryptophan (T
  • Each of the standard amino acids has a corresponding DNA codon, and can be expressed in general one-letter or three-letter notation.
  • the target referred to by the term standard amino acid should be appropriately interpreted according to the context, and includes all other meanings that can be recognized by those skilled in the art.
  • nonstandard amino acid refers to amino acids other than the standard amino acid.
  • the non-standard amino acids include artificial amino acids and unnatural amino acids, and include amino acids in which the standard amino acids are chemically modified through posttranslational modification in an organism.
  • the non-standard amino acids include, for example, D-form alanine, L-cyclohexylalanine, and 6-aminohexanoic acid. Since the non-standard amino acid does not have a corresponding DNA codon and cannot be expressed by a general amino acid one-letter or three-letter notation, it is denoted using other characters, and additionally supplemented and described.
  • the object referred to by the term non-standard amino acid should be appropriately interpreted according to the context, and includes all other meanings that can be recognized by those skilled in the art.
  • amino acid single letter notation or three letter notation is used, and the sequence is described from the N-terminal to the C-terminal direction.
  • RNVP refers to a peptide in which arginine, asparagine, valine, and proline are sequentially linked from the N-terminal to the C-terminal direction.
  • Thr-Leu-Lys refers to a peptide in which threonine, leucine, and lysine are sequentially linked from the N-terminal to the C-terminal direction.
  • amino acids that cannot be represented by the one-letter notation, other characters are used to describe the amino acids, and additionally, the description will be supplemented.
  • N- and -C may be used to clearly indicate the N-terminus or C-terminus, and may be underlined to distinguish the N-terminus and/or C-terminus.
  • the structural formula of a peptide is expressed as N -BTA- C , unless otherwise specified, the first " N -" and the last " -C" are symbols for clarifying the N-terminal and C-terminal directions. , which refers to a peptide in which the sequences indicated by B, T, and A are linked in the N-terminal to C-terminal direction.
  • IgM-induced immune responses are innate immunity and are mainly active in the primary immune response, and occur rapidly in the early stages of infection.
  • IgM is mainly secreted in the form of a pentamer, and theoretically has 10 antigen-binding sites, so that it can bind a large number of antigens at the same time.
  • IgM can bind to a wide variety of antigens and types, but the affinity and binding capacity of the binding are limited by the intrinsic affinity of IgM itself. Therefore, the affinity and binding power of IgM to the antigen is significantly lower than that of an antibody such as IgG made with the help of helper T cells.
  • the humoral immune response by IgM plays an important role in the initial immune response, 1) the production of IgM produced by B cells is lower than that of other types of antibodies such as IgG produced by differentiated B cells, 2) IgM Since the specific binding ability of the antigen to the antigen is lower than that of IgG and 3) the degree of generating a secondary immune response is weak when exposed to the same antigen again, the dependence on the humoral immune response by IgM is that The effect is limited. Therefore, from the viewpoint of designing an antigen that induces an immune response, if the antigen injected into the body of a subject induces only a humoral immune response by IgM, there is a high possibility that the desired effect may not be obtained. Therefore, it is very important to design an antigen to induce a humoral immune response by IgG.
  • the humoral immune response that produces IgG mainly occurs in the germinal center of the spleen or lymph node, and is a complex of B cells, helper T cells, and antigen-presenting cells (APCs). proceeds by action.
  • the general process is as follows. 1) B cells recognize antigens (mainly protein or peptide antigens) that have invaded the body. 2) The antigen-presenting cell endocytoses the antigen (or a fragment thereof) and cuts it into smaller fragments within the cell, and then presents some of the fragments to MHC Class II on the surface of the antigen-presenting cell . 3) Helper T cells recognize the antigen fragment presented in MHC Class II. 4) The helper T cells transmit a differentiation signal to the B cells (antigen-recognized cells).
  • the B cells are activated and some differentiate into plasma cells to produce an IgG antibody having high specific binding ability to the antigen. 6) As a result of the activation of the B cells, some cells are differentiated into memory B cells and, when the same antigen infiltrates again, is stored in the body so that an immune response that produces an IgG antigen can be rapidly generated.
  • Antigen-presenting cell is a generic term for cells that can present on the surface of antigen-presenting cells by inserting protein fragments or peptides into cells, cleaving them into shorter peptide fragments, and placing them on MHC Class II.
  • Major antigen-presenting cells include B cells, macrophages, and dendritic cells.
  • Antigen-presenting cells transport the intracellularly entrapped antigen fragments from the site of infection to the lymph nodes, and present the antigen fragments to helper T cells by MHC Class II, thereby activating the recognized helper T cells to induce an immune response. plays a role
  • MHC Class II is a molecule expressed on the surface of antigen-presenting cells and has a heterodimer structure consisting of ⁇ / ⁇ chains. MHC Class II can bind to and present a peptide of a certain length in its structure. Antigen-presenting cells bind peptide fragments derived from foreign antigens to MHC Class II and present them on the cell surface.
  • the human leukocyte antigen gene complex is involved in the expression of MHC Class II in humans, and among them, HLA-DP, DQ and It is known as a gene complex such as DR.
  • the HLA-DR gene is known to have various alleles according to race, and about 12 types of HLA-DR genes are known as the most commonly found alleles.
  • the length of the peptide presented in MHC Class II is known to be approximately 17mer to 24mer, although there are slight differences in the literature. Therefore, antigen-presenting cells do not present the antigen protein or peptide fragment that has been incorporated into the cell as it is on MHC Class II, but undergo a process of cleavage into smaller fragments of 17mers to 24mers.
  • the antigen fragment (protein or peptide fragment) that the antigen-presenting cell has entrapped into the cell exists in an endosome, and the endosome fuses with the lysosome of the antigen-presenting cell. Thereafter, the antigen fragment is cleaved into shorter peptides by various kinds of degrading enzymes present in the lysosome.
  • Examples of the degrading enzymes include endopeptidase and exopeptidase. Endopeptidases act to cleave the antigen fragment by acting on the peptide bond inside the antigen fragment, and exopeptidases mainly act on the peptide bond at both ends of the antigen fragment to cleave the antigen fragment. .
  • Endopeptidases act to cleave the antigen fragment by acting on the peptide bond inside the antigen fragment
  • exopeptidases mainly act on the peptide bond at both ends of the antigen fragment to cleave the antigen fragment. .
  • MHC Class II present in the inner membrane of the lysosome.
  • the lysosome goes back to the cell surface and fuses with the plasma membrane of the cell, and only then MHC Class II and the peptide fragment bound thereto are exposed on the surface of the antigen-presenting cell.
  • Helper T lymphocytes are also known as CD4+ cells because they express CD4.
  • Helper T cells express a T cell receptor (TCR, T cell receptor) having the ability to bind to MHC Class II on the surface.
  • the T cell receptor generally forms a complex with CD3.
  • antigen eg, a peptide fragment
  • the helper T cell recognizes the antigen fragment presented above. In this recognition process, the T cell receptor-CD3 complex and CD4 are involved.
  • the helper T cells successfully recognize the antigen fragment, they are activated to secrete various cytokines or differentiate themselves. The secreted cytokines are involved in the differentiation of B cells, which will be described later.
  • cytokines such as interleukin-4 (IL-4, Interleukin-4) secreted by helper T cells
  • immunoglobulin class switching of the B cells occurs and the antibody produced by the B cells is The isotype will change (eg from IgM to IgG).
  • some of the B cells are differentiated into memory B cells and stored to generate a rapid immune response when the same antigen is re-infiltrating, and some are differentiated into plasma cells and actively differentiated into plasma cells. Produces IgG antibodies.
  • B cells For a humoral immune response by IgG to occur, 1) a specific conformational structure of the antigen must be recognized by B cells, and 2) some fragment of the antigen must be recognized by helper T cells through MHC Class II.
  • the part of the antigen recognized by B cells and the part of the antigen recognized by helper T cells are different, and although they activate the immune response through different pathways, the part generally recognized by B cells (B- Cell epitope) and the part recognized by helper T cells (Th epitope) are known to cause the immune response only when there is at least a certain connection relationship.
  • B- Cell epitope B- Cell epitope
  • Th epitope helper T cells
  • the B-cell epitope and the Th epitope may be included in one molecule, form conjugates, or have other linkages.
  • the immunotherapeutic agent should be able to induce an immune response stably in the body of the subject due to its characteristics, 2) uniformly induce only the intended antibody in the body of the subject to minimize side effects, 3) In order to commercialize it, it is required that the synthesis is easy and the production cost is reasonable. Therefore, in designing a peptide that can be used as an immunotherapeutic agent, 1) it should exhibit more than a certain level of immunogenicity, 2) the isotype that controls the antigen recognition specificity and physiological function of the antibody, etc. Three conditions must be considered essential: an immune response that uniformly induces
  • immunotherapeutic agents have limitations in that 1) various types of epitopes (antigenic determinants) are induced, and thus the uniformity thereof is deteriorated, and 2) the production cost is high and economical efficiency is lowered.
  • peptides used for immunotherapeutic agents there is no established bar on the design principles of peptides that 1) uniformly induce only the intended immune response and 2) are easy to synthesize and have a low production cost. Accordingly, in the present specification, technical matters to be considered in the design of peptides used for immunotherapeutic agents and a design method thereof are provided.
  • the peptides provided herein include at least one peptide unit.
  • the peptide unit comprises at least one B-cell epitope, at least one Th epitope, and an appropriate number of auxiliary moieties.
  • the peptide may include one peptide unit.
  • the peptide may include two or more peptide units.
  • the peptide unit is a portion designed to 1) exhibit a certain level of immunogenicity or higher, and 2) uniformly induce only the intended antibody in advance. Accordingly, the peptide unit provided herein has properties suitable for use as an immunotherapeutic agent.
  • the peptide unit is designed to have a relatively short length, so that the synthesis is easy and the production cost is low.
  • the peptide is designed using the peptide unit as a component thereof, and specifically designed in a form in which one or more of the peptide unit is linked.
  • the peptide contains only a small number of the peptide units, the total length of the peptide is short, thereby facilitating synthesis.
  • the peptide has a relatively long sequence including a plurality of peptide units, since the peptide unit itself is well designed for easy synthesis, the peptide units are synthesized in parallel and then linked. It is possible to prepare the peptide.
  • the peptide provided in the present specification has the characteristic of being easy to synthesize, which is a characteristic suitable for the peptide to be used as an immunotherapeutic agent in addition to the characteristic of the peptide unit.
  • the peptide When the peptide is injected into the body of a subject, it has a function of uniformly inducing only an antibody capable of specifically binding to a B-cell epitope included in the peptide.
  • B-cell epitope B-CELL EPITOPE
  • the peptides provided herein include one or more B-cell epitopes.
  • B-cell epitope refers to a peptide portion of a unit that is intentionally designed to induce a homogeneous antibody of one type. Accordingly, when the peptide containing the B-cell epitope is injected into the body of a subject, one type of antibody is predominantly induced per one type of the B-cell epitope.
  • the B-cell epitope includes a three-dimensional structure forming portion and an adjacent portion.
  • the three-dimensional structure forming part is a part that forms a peptide higher-order structure, and is a part designed so that B cells can recognize the peptide higher-order structure and produce an antibody capable of specifically binding thereto.
  • the adjacent portion is a portion that directly or indirectly influences the three-dimensional structure forming portion to stably form a higher-order structure.
  • the adjacent portion is 1) a function of the three-dimensional structure-forming part to form a specific structure, 2) when the B-cell epitope is linked with other parts in the peptide unit, the three-dimensional structure-forming part is not affected It may have a linker function, 3) a function of protecting the three-dimensional structure forming part, and the like, but is not limited thereto.
  • the B-cell epitope may have a sequence in which the first three-dimensional structure forming part and the first adjacent part are connected in order from the N-terminus to the C-terminus.
  • the B-cell epitope may have a sequence in which the second adjacent portion, the second conformational structure forming portion, and the third adjacent portion are connected in order from the N-terminus to the C-terminus. In another embodiment, the B-cell epitope may have a sequence in which the third conformational structure forming part and the fourth adjacent part are connected in order from the N-terminus to the C-terminus.
  • the B-cell epitope should be capable of uniformly inducing the production of an antibody capable of specifically binding to the B-cell by recognizing its three-dimensional structure.
  • the three-dimensional structure recognized by B cells can be expressed through an appropriate peptide higher-order structure. Therefore, the B-cell epitope is designed to include a three-dimensional structure forming part that forms a peptide higher-order structure.
  • the three-dimensional structure forming unit may form an intended peptide higher-order structure according to its purpose.
  • the three-dimensional structure forming part may include an ⁇ -helix structure.
  • the three-dimensional structure forming part may include a ⁇ structure.
  • the three-dimensional structure forming part may include an ⁇ -helix and/or a ⁇ structure.
  • the three-dimensional structure forming part may include a peptide tertiary structure.
  • the three-dimensional structure forming part may include a peptide quaternary structure.
  • the B-cell epitope may be designed to additionally include an adjacent portion in addition to the three-dimensional structure forming portion.
  • the adjacent portion may influence the three-dimensional structure forming portion to stably form a higher-order structure.
  • the adjacent part may perform various other functions, and its role may overlap with that of the auxiliary part.
  • the adjacent portion may have a linker function.
  • the adjacent portion may have a protective function for the three-dimensional structure forming portion.
  • the adjacent portion may have more than one function.
  • the B-cell epitope must be 1) large enough to be recognized by B cells, and 2) have one or very few antibodies that specifically bind to the B-cell epitope. Therefore, the length of the B-cell epitope should be limited to an appropriate level. If the length of the B-cell epitope is too short, it is not recognized by the B cells and thus does not have antibody inducing ability. If the length of the B-cell epitope is too long, various types of antibodies may be induced.
  • the length of the B-cell epitope is about 8mer, about 9mer, about 10mer, about 11mer, about 12mer, about 13mer, about 14mer, about 15mer, about 16mer, about 17mer, about 18mer, about 20mer, about 21 mer, about 22 mer, about 23 mer, about 24 mer, about 25 mer, about 26 mer, about 27 mer, about 28 mer, about 29 mer, or about 30 mer.
  • the length of the B-cell epitope may have a value within the two numerical ranges selected in the previous sentence.
  • the B-cell epitope may induce an antibody targeting apolipoprotein B-100.
  • the B-cell epitope may be fragments of apolipoprotein B-100, and/or a mimotope of apolipoprotein B-100.
  • the B-cell epitope is characterized in that it induces an antibody that targets a site selected from the following: Externally exposed site of apolipoprotein B-100 contained in low-density lipoprotein (LDL) ; and an externally exposed site of apolipoprotein B-100 contained in ultra-low-density lipoprotein (VLDL).
  • LDL low-density lipoprotein
  • VLDL ultra-low-density lipoprotein
  • the B-cell epitope is RNVPPIFNDVYWIAF (SEQ ID NO: 6), CRFRGLISLSQVYLS (SEQ ID NO: 7), KTTKQSFDLSVKAQYKKNKH (SEQ ID NO: 8), RNVPPIFNDVY (SEQ ID NO: 9), CRFRGLISLSQ (SEQ ID NO: 10), KTTKQSFDLSV (SEQ ID NO: 10) 11), RNVPPIFNDVYW (SEQ ID NO: 12), CRFRGLISLSQV (SEQ ID NO: 13), KTTKQSFDLSVKAQYKK (SEQ ID NO: 14), RNVPPIFNDVYWI (SEQ ID NO: 15), CRFRGLISLSQVY (SEQ ID NO: 16), KTTKQSFDLSVKAQYKKN (SEQ ID NO: 18), KTTKQSFDLSVKAQYKKN ), GLISLSQVYLS (SEQ ID NO: 19), QSFDLSVKAQYKKNKH (SEQ ID
  • the B-cell epitope may be a peptide comprising an epitope included in a peptide selected from the group consisting of SEQ ID NOs: 6 to 35 and 221 to 222.
  • the B-cell epitope is 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86% of the sequence selected from SEQ ID NO: 6 to SEQ ID NO: 34, SEQ ID NO: 221 to SEQ ID NO: 222 , 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% or 100% identical sequence.
  • the B-cell epitope may be a sequence selected from SEQ ID NO: 6 to SEQ ID NO: 34, SEQ ID NO: 221 to SEQ ID NO: 222 and a sequence selected from the immediately preceding sentence or more.
  • the B-cell epitope may have a sequence that is 90% or more identical to SEQ ID NO: 6.
  • the Th epitope contained in the peptides provided herein is expressed on the surface of the antigen-presenting cell by MHC Class II after the peptide is endocytosed by the antigen-presenting cell, MHC Class II and It refers to a portion designed to bind, present on the surface of the antigen-presenting cell, and function recognized by a helper T cell (Th, Helper-T-Lymphocyte).
  • Th Helper-T-Lymphocyte
  • the Th epitope is designed to have an anchor residue capable of binding MHC Class II in its sequence. Whether or not an anchor residue is included in the sequence is an important factor affecting the function of the Th epitope.
  • the Th epitope consists of Y (Tyrosine), F (Phenylalanine) W (Tryptophan), R (Arginine), L (Leucine), V (Valine), I (Isoleucine), and M (Methionine)
  • One or more amino acids selected from the group may be included as anchor residues.
  • a Th epitope having the ability to bind to MHC Class II of a specific species may be selected according to its purpose.
  • the Th epitope may be a Th epitope having the ability to bind to human MHC Class II.
  • the Th epitope may be a Th epitope having binding ability with MHC Class II of a species belonging to a mammal.
  • the Th epitope may be a Th epitope having the ability to bind to MHC Class II of a mouse.
  • the structure of MHC Class II may vary between races and individuals.
  • the Th epitope is selected from the HLA-DR1 alleles 2w2b, 2w2a, 3, 4w4, 4w14, 5, 7, 52a, 52b, 52c, and 53 by one or more HLA-DR genes. It may be a peptide sequence having high binding ability with the expressed MHC Class II.
  • the Th epitope is HLA-DQ5, HLA-DR, HLA-DR1 to HLA-DR8, HLA-DR11, HLA-DR13, HLA-DR14, HLA-DRw52, HLA-DR2w15, HLA-DPw4, HLA -expressed by one or more genes selected from each subtype of DRB1 (eg, 0301, 01, 03, 04, 07, 08, 09, 11, 12, 13, 15, and 0301), and HLA-DRB5 It may be a peptide sequence having high binding ability with MHC Class II.
  • the Th epitope is Cara C. Wilson et al. (2001, Identification and Antigenicity of Broadly Cross-Reactive and conserveed Human Immunodeficiency Virus Type 1-Derived Helper T-Lymphocyte Epitopes, Journal of Virology, 75 (9) ) 4195-4207) and named HA307-312.
  • the Th epitope is Christopher P Desmond et al. (2008, A systematic review of T-cell epitopes in hepatitis B virus: identification, genotypic variation and relevance to antiviral therapeutics, Antiviral Therapy 13:161-175) It may be one of the HLA Class II restricted epitopes disclosed in Table 2.
  • Th epitope design 4 gene non-specific Th epitope
  • Th epitopes having the ability to bind to various MHC Class II are known, and it is possible to design a Th epitope capable of binding to various MHC Class II by using this.
  • the Th epitope may be a sequence named "pan DR-binding peptide" disclosed in patent application US305,871.
  • Th epitope design 5 Excluding the possibility of acting as a B-cell epitope
  • the Th epitope is designed to be presented by MHC Class II of antigen-presenting cells and recognized by helper T cells. Therefore, in general, since it has a very high binding capacity for MHC Class II, the probability of acting as a B-Cell epitope is very low. In other words, the Th epitope is designed so that an antibody specifically binding to the conformation of the Th epitope itself is not induced.
  • the Th epitope should be designed to have an appropriate length so that it can bind to one MHC Class II unit.
  • one unit of Th epitope that can bind directly to MHC Class II is known to be about 30mer (Abbas, AK, Lichtman, AH and Pillai, S. Cellular and molecular immunology (pp124-126), 7th Ed. ( 2012) Philadelphia PA, Elsevier Saunders et al.).
  • the length of the Th epitope is 7mer, 8mer, 9mer, 10mer, 11mer, 12mer, 13mer, 14mer, 15mer, 16mer, 17mer, 18mer, 19mer, 20mer, 21mer, 22mer, 23mer, 24mer, 25mer, 26mer , 27mer, 28mer, 29mer, 30mer, 31mer, 32mer, or 33mer.
  • the length of the Th epitope may have a value within two numerical ranges selected in the previous sentence.
  • the length of the Th epitope may be 8mer to 32mer.
  • the length of the Th epitope may be 11mer to 13mer.
  • the Th epitope may be a peptide named "pan DR-binding peptide" disclosed in patent application US305,871.
  • the Th epitope may be one of the peptides disclosed in Table VIII A and Table IX of Publication No. 6,413,935 B1.
  • the Th epitope may have a peptide sequence satisfying the following structural formula I:
  • X 1 may be tyrosine (Tyr), phenylalanine (Phe), or L-cyclohexylalanine, but is not limited thereto.
  • X 2 may be a hydrophobic amino acid, leucine (Leu), or isoleucine (Ile), but is not limited thereto.
  • X 3 may be an aromatic or cyclic amino acid, phenylalanine (Phe), tyrosine (Tyr), or histidine (His), but is not limited thereto.
  • X 4 may be aliphatic long chain amino acids, isoleucine (Ile), or valine (Val), but is not limited thereto.
  • X 5 may be a charged amino acid, arginine (Arg), leucine (Leu), aspartic acid (Asp), glutamine (Gln), or glycine (Gly), but is not limited thereto.
  • the Th epitope may have a peptide sequence satisfying the following structural formula II:
  • the X 1 is lysine (Lys), or arginine (Arg),
  • X 2 is tyrosine (Tyr), phenylalanine (Phe), or L-cyclohexylalanine,
  • X 3 is lysine (Lys), tryptophan (Trp), tyrosine (Tyr), arginine (Arg), alanine (Ala), or methionine (Met),
  • X 4 is asparagine (Asn), tryptophan (Trp), tyrosine (Tyr), valine (Val), histidine (His), lysine (Lys), or alanine (Ala).
  • the Th epitope is K (Cha) VAAWTLKAA (SEQ ID NO: 1), PKYVKQNTLKLAT (SEQ ID NO: 2), ILMQYIKANSKFIGI (SEQ ID NO: 3), QSIALSSLMVAQAIP (SEQ ID NO: 5), ILMQYIKANSKFIGIPMGLPQSIAL SEQ ID NO: 162), WPEANQVGAGAFGPGF (SEQ ID NO: 163), MQWNSTALHQALQDP (SEQ ID NO: 164), MQWNSTTFHQTLQDPRVRGLYFPAGG (SEQ ID NO: 165), FFLLTRILTI (SEQ ID NO: 166), FFLLTRILTIPQSLD (SEQ ID NO: 168), QSP SEQ ID NO: FFLLTRILTIPQSLD (SEQ ID NO: 167GGTVCL) No.
  • IIFLFILLLCLIFLLVLLD SEQ ID NO: 170
  • CTTPAQGNSMFPSC SEQ ID NO: 171
  • CTKPTDGN SEQ ID NO: 172
  • WASVRFSW SEQ ID NO: 173
  • LLPIFFCLW SEQ ID NO: 174
  • MDIDPYKEFGATVELLSFLP SEQ ID NO: 175)
  • MDIDPYKEFGATVELLSFLP SEQ ID NO: 175)
  • 176 RDLLDTASALYREALESPEH
  • PHHTALRQAILCWGELMTLA SEQ ID NO: 178
  • GRETVIEYLVSFGVW SEQ ID NO: 179
  • EYLVSFGVWIRTPPA SEQ ID NO: 180
  • VSFGVWIRTPPAYRPPNAPI SEQ ID NO: 182
  • VSFGVWIRTPPAYRPPNAPI SEQ ID NO: 181)
  • KRRLKRRGRSPNAPI SEQ ID NO: 181)
  • a represents D-form alanine
  • Z represents 6-aminohexanoic acid
  • (Cha) represents L-cyclohexylalanine.
  • the Th epitope is SEQ ID NO: 1 to SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 162 to SEQ ID NO: 192, SEQ ID NO: 195 to SEQ ID NO: 196, SEQ ID NO: 223 to SEQ ID NO: 247, a sequence satisfying the [Structural Formula I] , or 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92% with a sequence satisfying the above [Structural Formula II] , 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, or 100% identical sequences.
  • the Th epitope is SEQ ID NO: 1 to SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 162 to SEQ ID NO: 192, SEQ ID NO: 195 to SEQ ID NO: 196, SEQ ID NO: 223 to SEQ ID NO: 247, a sequence satisfying the [Structural Formula I] , or a sequence satisfying the above [Structural Formula II] may have a sequence that matches the number selected in the immediately preceding sentence or more.
  • the Th epitope may have a sequence that is 90% or more identical to the sequence of SEQ ID NO: 1.
  • the peptides disclosed herein may include one or more auxiliary moieties.
  • the auxiliary part collectively refers to an additional part that can directly or indirectly influence the peptide to elicit an intended immune response in the body of the subject.
  • the auxiliary part may have one or more functions, and the composition of the peptide sequence and/or the position of the sequence may be appropriately designed according to the purpose.
  • the auxiliary unit may function as a linker connecting the B-cell epitope and the Th epitope.
  • the B-cell epitope and the Th epitope may be directly linked, or may be linked through an auxiliary part serving as a linker.
  • the auxiliary part may be designed to have a linker function that connects a plurality of units included in the peptide.
  • the sequence of the auxiliary part may be between the sequence of the B-cell epitope and the sequence of the Th epitope.
  • the auxiliary part has a linker function that connects the B-cell epitope and the Th epitope.
  • the sequence of the auxiliary part may be between the sequences of the first peptide unit and the second peptide unit in the peptide.
  • the auxiliary part has a linker function that connects the first peptide unit and the second peptide unit.
  • the peptide unit In the case of the peptide unit provided herein, it is characterized in that it has a relatively short sequence length. Accordingly, when the peptide including the peptide unit is injected into the body of a subject, the Th epitope sequence is degraded before being recognized by helper T cells, and an intended immune response may not occur.
  • the auxiliary moiety may be designed to function to protect the Th epitope in the peptide.
  • the protecting unit may protect the Th epitope from being cleaved by an enzyme in a subject's body.
  • the enzyme in the target body may be peptidase.
  • the peptidase may be an exopeptidase and/or an endopeptidase, but is not limited thereto.
  • the auxiliary part may be connected to the N-terminus and/or the C-terminus of the Th epitope. In this case, the auxiliary part has a function of protecting the Th epitope.
  • the auxiliary moiety may include at least one nonstandard amino acid.
  • the auxiliary part may be designed to have a function of being linked to both ends of the peptide unit to form a cyclic form of the peptide.
  • the peptide may include a first auxiliary portion at the N-terminus and a second auxiliary portion at the C-terminus.
  • the first auxiliary portion and the second auxiliary portion may each include one or more cysteines (S).
  • the peptide may exist in the form of a cyclic form. In this case, the N-terminus and the C-terminus of the peptide may be connected through an auxiliary part.
  • the auxiliary unit may have an additional function in addition to the above function.
  • the auxiliary part may include a hydrophilic amino acid and have a function of increasing the solubility of the peptide.
  • the auxiliary part may be composed of a sequence that is biologically inactive in the body of the subject. In this case, the auxiliary part has no effect on the functions of the B-cell epitope and the Th epitope, and may have a dummy function of extending the length of the peptide.
  • the peptide may be His-tag, but is not limited thereto.
  • the auxiliary unit may have one or more functions.
  • the auxiliary part may have a linker function, a protection function, a cyclic form forming function, a dummy function, and/or a function to increase solubility.
  • the adjuvant may include one or more nonstandard amino acids.
  • the artificial amino acid may be one necessary for the auxiliary moiety to exhibit the linker function, protective function, and/or other function.
  • the auxiliary moiety may include at least one non-standard amino acid.
  • the non-standard amino acid may be one or more non-standard amino acids selected from the group consisting of L-cyclohexylalanine, D-form alanine, and 6-aminohexanoic acid, but is not limited thereto.
  • the auxiliary part may be designed to have an appropriate length according to its function. When the auxiliary part has a plurality of functions, it may be designed to have an appropriate length to exhibit all of the plurality of functions.
  • the length of the auxiliary part is 1mer, 2mer, 3mer, 4mer, 5mer, 6mer, 7mer, 8mer, 9mer, 10mer, 11mer, 12mer, 13mer, 14mer, 15mer, 16mer, 17mer, 18mer, 19mer, 20mer, 21mer, 22mer, 23mer, 24mer, 25mer, 26mer, 27mer, 28mer, 29mer, 30mer, or 31mer or more.
  • the length of the auxiliary part may have a value within two numerical ranges of the immediately preceding sentence.
  • the length of the auxiliary portion may be 1mer to 8mer.
  • the length of the auxiliary portion may be 15mer to 26mer.
  • the adjuvant does not significantly affect the ability of the peptide unit and/or the peptide disclosed herein to induce an antibody that specifically binds to the B-cell epitope in the body of a subject.
  • the auxiliary part is a, Z, aZ, Za, RN, AF, CR, LS, KT, KH, RF, DP, SV, GL, ZRNV (SEQ ID NO: 36), aZRN (SEQ ID NO: 37), IAFZ (SEQ ID NO: 38), AFZa (SEQ ID NO: 39), RNVP (SEQ ID NO: 40), WIAF (SEQ ID NO: 41), ZCRF (SEQ ID NO: 42), aZCR (SEQ ID NO: 43), YLSZ (SEQ ID NO: 44), LSZa (SEQ ID NO: 45), CRFR (SEQ ID NO: 46), VYLS (SEQ ID NO: 47), ZKTT (SEQ ID NO: 48), aZKT (SEQ ID NO: 49), NKHZ (SEQ ID NO: 50), KHZa (SEQ ID NO: 51), GSHHHHHHGSDDDDK ( SEQ ID NO: 52), HHHHHHH (SEQ ID
  • Each unit may include at least one B-cell epitope and at least one Th epitope, and may include an appropriate number of auxiliary moieties.
  • a connection order of the B-cell epitope, the Th epitope, and the auxiliary unit is exemplified for each type.
  • the design of each part included in the peptide unit basically follows the design principle disclosed above.
  • a peptide unit provided herein, which 1) contains one B-cell epitope and one Th epitope, and 2) may include one or more auxiliary moieties, is referred to as “unit-A”.
  • the function of the auxiliary part is not particularly limited as long as it does not impair the functions of the B-cell epitope and the Th epitope, and is appropriately designed as necessary.
  • the unit-A may be one in which the first B-cell epitope and the first Th epitope are sequentially linked in the N-terminal to C-terminal direction.
  • the unit-A may additionally include a first auxiliary part.
  • the sequence of the first auxiliary portion in the unit-A sequence is located at the N-terminal side relative to the sequence of the first B-cell epitope.
  • the first auxiliary part may have a dummy function, a solubility improving function, a linker function, and/or a cyclic form forming function, but is not limited thereto.
  • the unit-A may additionally include a second auxiliary part.
  • the sequence of the second auxiliary moiety in the unit-A sequence is located between the sequence of the first B-cell epitope and the sequence of the first Th epitope.
  • the second auxiliary part may have a dummy function, a solubility improving function, a linker function, and/or a protection function, but is not limited thereto.
  • the unit-A may additionally include a third auxiliary part.
  • the sequence of the third auxiliary portion in the unit-A sequence is located at the C-terminal side relative to the sequence of the first Th epitope.
  • the third auxiliary part may have a dummy function, a solubility improving function, a linker function, a protection function, and/or a cyclic form forming function, but is not limited thereto.
  • the unit-A may be one in which the second Th epitope and the second B-cell epitope are sequentially linked in the N-terminal to C-terminal direction.
  • the unit-A may additionally include a fourth auxiliary part.
  • the sequence of the fourth auxiliary portion in the unit-A sequence is located at the N-terminal side relative to the sequence of the second Th epitope.
  • the fourth auxiliary part may have a dummy function, a solubility improving function, a linker function, and/or a cyclic form forming function, but is not limited thereto.
  • the unit-A may additionally include a fifth auxiliary part.
  • the sequence of the fifth auxiliary moiety in the unit-A sequence is located between the sequence of the second B-cell epitope and the sequence of the second Th epitope.
  • the fifth auxiliary part may have a dummy function, a solubility improving function, and/or a linker function, but is not limited thereto.
  • the unit-A may additionally include a sixth auxiliary part.
  • the sequence of the sixth auxiliary portion in the unit-A sequence is located at the C-terminal side relative to the sequence of the second B-cell epitope.
  • the sixth auxiliary part may have a dummy function, a solubility improving function, a linker function, and/or a cyclic form forming function, but is not limited thereto.
  • the unit-A is a peptide represented by the following [Structural Formula A] or [Structural Formula A'].
  • the B 1 and B 2 are B-cell epitopes and follow the design principle described above.
  • the T 1 and T 2 are Th epitopes, according to the design principle described above.
  • a 1 to A 6 are auxiliary parts and may be omitted.
  • a 1 to A 6 may have a dummy function, a solubility improving function, a linker function, and/or a cyclic form forming function, but is not limited thereto.
  • the length of the unit-A is about 16mer, about 17mer, about 18mer, about 19mer, about 20mer, about 21mer, about 22mer, about 23mer, about 24mer, about 25mer, about 26mer, about 27mer, about 28mer , about 29mer, about 30mer, about 31mer, about 32mer, about 33mer, about 34mer, about 35mer, about 36mer, about 37mer, about 38mer, about 39mer, about 40mer, about 41mer, about 42mer, about 43mer, about 44mer, about 45mer, about 46mer, about 47mer, about 48mer, about 49mer, about 50mer, about 51mer, about 52mer, about 53mer, about 54mer, about 55mer, about 56mer, about 57mer, about 58mer, about 59mer, about 60mer, about 61mer, about 62mer, about 63mer, about 64mer, about 65mer, about 66mer, about 67mer, about 68mer, about 69mer, about 70mer, about 71mer, about 72mer, about 73
  • the length of the unit-A may have a value within the two numerical ranges selected in the previous sentence.
  • the length of the unit-A may be about 16 mer to about 30 mer.
  • the length of the unit-A may be about 23mers to about 60mers.
  • unit-A may have a sequence in which a first B-cell epitope, a first auxiliary, and a first Th epitope are linked in order.
  • the first auxiliary part has a linker function and includes one or more artificial amino acids.
  • unit-A may have a sequence in which the second auxiliary portion, the second B-cell epitope, the third auxiliary portion, and the second Th epitope are sequentially linked.
  • the second auxiliary portion is a His-tag
  • the third auxiliary portion has a linker function and includes one or more artificial amino acids.
  • the unit-A may have a sequence in which the third B-cell epitope, the fourth auxiliary portion, the third Th epitope, and the fifth auxiliary portion are sequentially linked.
  • the fourth auxiliary portion has a linker function and a protecting function
  • the fifth auxiliary portion has a protecting function.
  • the fourth auxiliary portion and the fifth auxiliary portion each include one or more artificial amino acids.
  • unit-A may have a sequence in which the sixth auxiliary portion, the fourth B-cell epitope, the seventh auxiliary portion, the fourth Th epitope, and the eighth auxiliary portion are sequentially linked.
  • the sixth auxiliary portion is a His-tag
  • the seventh auxiliary portion has a linker function and a protective function
  • the eighth auxiliary portion has a protective function.
  • the seventh auxiliary portion and the eighth auxiliary portion comprise one or more artificial amino acids.
  • the unit-A is RNVPPIFNDVYWIAFZaK (Cha) VAAWTLKAAaZ (SEQ ID NO: 56), ZaK (Cha) VAAWTLKAAaZRNVPPIFNDVYWIAF (SEQ ID NO: 57), CRFRGLISLSQVYLSZaK (Cha) VAAWTLKAAaZ CRFRGLISLSQVYLSZaK (Cha) VAAWTLKAAaZCR SEQ ID NO: 58), ZaKAAZ (SEQ ID NO: 58) 59), KTTKQSFDLSVKAQYKKNKHZaK (Cha) VAAWTLKAAaZ (SEQ ID NO: 60), ZaK (Cha) VAAWTLKAAaZKTTKQSFDLSVKAQYKKNKH (SEQ ID NO: 61), RNVPPIFNDVYWIAFK (Cha) VAAWTLVPPRN (SEQ ID NO: 63) VAAWKAVPPRN (SEQ ID NO: 63) VAAWKAVPP
  • a peptide unit As a peptide unit provided herein, 1) it contains two B-cell epitopes and one Th epitope, and 2) the sequence of one B-cell epitope among the two B-cell epitopes is the other B-cell epitope.
  • a peptide unit that is between the sequence of the -cell epitope and the sequence of the Th epitope and may include 3) one or more auxiliary moieties is termed "unit-B".
  • the function of the auxiliary part is not particularly limited as long as it does not impair the functions of the B-cell epitope and the Th epitope, and is appropriately designed as necessary.
  • the unit-B may be one in which a first B-cell epitope, a second B-cell epitope, and a first Th epitope are sequentially linked in an N-terminal to C-terminal direction.
  • the unit-B may additionally include a first auxiliary part.
  • the sequence of the first auxiliary portion in the unit-B sequence is located at the N-terminal side relative to the sequence of the first B-cell epitope.
  • the first auxiliary part may have a dummy function, a solubility improving function, a linker function, and/or a cyclic form forming function, but is not limited thereto.
  • the unit-B may additionally include a second auxiliary part.
  • the sequence of the second auxiliary moiety in the unit-B sequence is located between the sequence of the first B-cell epitope and the sequence of the second B-cell epitope do.
  • the second auxiliary part may have a dummy function, a solubility improving function, a linker function, and/or a protection function, but is not limited thereto.
  • the unit-B may additionally include a third auxiliary part.
  • the sequence of the third auxiliary moiety in the unit-B sequence is located between the sequence of the second B-cell epitope and the sequence of the first Th epitope.
  • the third auxiliary part may have a dummy function, a solubility improving function, a linker function, and/or a protection function, but is not limited thereto.
  • the unit-B may additionally include a fourth auxiliary part.
  • the sequence of the fourth auxiliary portion in the unit-B sequence is located at the C-terminal side relative to the sequence of the first Th epitope in the unit-B sequence .
  • the fourth auxiliary part may have a dummy function, a solubility improving function, a linker function, and/or a cyclic form forming function, but is not limited thereto.
  • the unit-B may be one in which the second Th epitope, the third B-cell epitope, and the fourth B-cell epitope are sequentially linked in the N-terminal to C-terminal direction.
  • the unit-B may additionally include a fifth auxiliary part.
  • the sequence of the fifth auxiliary portion in the unit-B sequence is located at the N-terminal side relative to the sequence of the second Th epitope.
  • the fifth auxiliary part may have a dummy function, a solubility improving function, a linker function, and/or a cyclic form forming function, but is not limited thereto.
  • the unit-B may additionally include a sixth auxiliary part.
  • the sequence of the sixth auxiliary moiety in the unit-B sequence is located between the sequence of the second Th epitope and the sequence of the third B-cell epitope.
  • the sixth auxiliary part may have a dummy function, a solubility improving function, a linker function, and/or a protection function, but is not limited thereto.
  • the unit-B may additionally include a seventh auxiliary part.
  • the sequence of the seventh auxiliary moiety in the unit-B sequence is located between the sequence of the third B-cell epitope and the sequence of the fourth B-cell epitope do.
  • the seventh auxiliary part may have a dummy function, a solubility improving function, a linker function, and/or a protection function, but is not limited thereto.
  • the unit-B may additionally include an eighth auxiliary part.
  • the sequence of the eighth auxiliary portion in the unit-B sequence is at the C-terminal side relative to the sequence of the fourth B-cell epitope in the unit-B sequence Located.
  • the eighth auxiliary part may have a dummy function, a solubility improving function, a linker function, and/or a cyclic form forming function, but is not limited thereto.
  • the unit-B is a peptide represented by the following [Structural Formula B] or [Structural Formula B'].
  • B 1 to B 4 are B-cell epitopes, respectively, according to the design principle described above.
  • the T 1 and T 2 are Th epitopes, according to the design principle described above.
  • a 1 to A 8 are auxiliary parts and may be omitted.
  • a 1 to A 8 may have a dummy function, a solubility improving function, a linker function, and/or a cyclic form forming function, but are not limited thereto.
  • the length of the unit-B is about 24mer, about 25mer, about 26mer, about 27mer, about 28mer, about 29mer, about 30mer, about 31mer, about 32mer, about 33mer, about 34mer, about 35mer, about 36mer , about 37mer, about 38mer, about 39mer, about 40mer, about 41mer, about 42mer, about 43mer, about 44mer, about 45mer, about 46mer, about 47mer, about 48mer, about 49mer, about 50mer, about 51mer, about 52mer, about 53mer, about 54mer, about 55mer, about 56mer, about 57mer, about 58mer, about 59mer, about 60mer, about 61mer, about 62mer, about 63mer, about 64mer, about 65mer, about 66mer, about 67mer, about 68mer, about 69mer, about 70mer, about 71mer, about 72mer, about 73mer, about 74mer, about 75mer, about 76mer, about 77mer, about 78mer, about 79mer, about
  • the length of the unit-B may have a value within two numerical ranges selected in the immediately preceding sentence.
  • the length of the unit-B may be about 24 mers to about 45 mers.
  • the length of the unit-B may be about 40mers to about 80mers.
  • unit-B may have a sequence in which a first auxiliary portion, a first B-cell epitope, a second B-cell epitope, a second auxiliary portion, and a first Th epitope are sequentially linked.
  • the first auxiliary portion is a His-tag
  • the second auxiliary portion has a linker function and includes one or more artificial amino acids.
  • unit-B may have a sequence in which a third B-cell epitope, a fourth B-cell epitope, a third auxiliary, and a second Th epitope are linked in order.
  • the third auxiliary part has a linker function and includes one or more artificial amino acids.
  • unit-B may have a sequence in which the fourth auxiliary portion, the fifth B-cell epitope, the sixth B-cell epitope, the fifth auxiliary portion, the third Th epitope, and the sixth auxiliary portion are linked in order.
  • the fourth auxiliary portion is a His-tag
  • the fifth auxiliary portion has a linker function and a protective function and includes one or more artificial amino acids
  • the sixth auxiliary portion has a protective function and includes one or more artificial amino acids.
  • unit-B may have a sequence in which the seventh B-cell epitope, the eighth B-cell epitope, the seventh auxiliary moiety, the fourth Th epitope, and the eighth adjuvant are linked in order.
  • the seventh auxiliary portion has a linker function and a protective function and includes one or more artificial amino acids
  • the eighth auxiliary portion has a protective function and includes one or more artificial amino acids.
  • unit-B may have a sequence in which the eighth auxiliary region, the ninth B-cell epitope, the ninth auxiliary region, the tenth B-cell epitope, the tenth auxiliary region, and the fifth Th epitope are sequentially linked.
  • the eighth auxiliary portion is a His-tag
  • the ninth auxiliary portion has a linker function
  • the tenth auxiliary portion has a linker function, and includes one or more artificial amino acids.
  • the unit-B may have a sequence in which the 11th B-cell epitope, the 11th adjuvant, the 12th B-cell epitope, the 12th adjuvant, and the 6th Th epitope are sequentially linked.
  • the eleventh auxiliary portion has a linker function
  • the twelfth auxiliary portion has a linker function, and includes one or more artificial amino acids.
  • the unit-B may have a sequence in which a 13th B-cell epitope, a 13th adjuvant, a 14th B-cell epitope, a 14th adjuvant, a 7th Th epitope, and a 15th adjuvant are linked in order.
  • the thirteenth auxiliary portion has a linker function
  • the fourteenth auxiliary portion has a linker function and a protective function, and comprises one or more artificial amino acids
  • the fifteenth auxiliary portion has a protective function and contains one or more artificial amino acids.
  • the unit is -B RNVPPIFNDVYWIAFRNVPPIFNDVYWIAFZaK (Cha) VAAWTLKAAaZ (SEQ ID NO: 83), RNVPPIFNDVYWIAFCRFRGLISLSQVYLSZaK (Cha) VAAWTLKAAaZ (SEQ ID NO: 84), RNVPPIFNDVYWIAFKTTKQSFDLSVKAQYKKNKHZaK (Cha) VAAWTLKAAaZ (SEQ ID NO: 85), CRFRGLISLSQVYLSRNVPPIFNDVYWIAFZaK (Cha) VAAWTLKAAaZ (SEQ ID NO: No.
  • a peptide unit As a peptide unit provided herein, 1) it contains two B-cell epitopes and one Th epitope, and 2) the sequence of the Th epitope is the sequence of one B-cell epitope among the two B-cell epitopes. and the sequence of another B-cell epitope, 3) a peptide unit that may include one or more auxiliary moieties is termed “unit-C”.
  • the function of the auxiliary part is not particularly limited as long as it does not impair the functions of the B-cell epitope and the Th epitope, and is appropriately designed as necessary.
  • the unit-C may be one in which a first B-cell epitope, a first Th epitope, and a second B-cell epitope are sequentially linked in an N-terminal to C-terminal direction.
  • the unit-C may additionally include a first auxiliary part.
  • the sequence of the first auxiliary moiety in the unit-C sequence is located at the N-terminal side relative to the sequence of the first B-cell epitope.
  • the first auxiliary part may have a dummy function, a solubility improving function, a linker function, and/or a cyclic form forming function, but is not limited thereto.
  • the unit-C may additionally include a second auxiliary part.
  • the sequence of the second auxiliary moiety in the monomer-C sequence is located between the sequence of the first B-cell epitope and the sequence of the first Th epitope.
  • the second auxiliary part may have a dummy function, a solubility improving function, a linker function, and/or a protection function, but is not limited thereto.
  • the unit-C may additionally include a third auxiliary part.
  • the sequence of the third auxiliary moiety in the monomer-C sequence is located between the sequence of the first Th epitope and the sequence of the second B-cell epitope.
  • the third auxiliary part may have a dummy function, a solubility improving function, a linker function, and/or a protection function, but is not limited thereto.
  • the unit-C may additionally include a fourth auxiliary part.
  • the sequence of the fourth auxiliary portion in the monomer-C sequence is at the C-terminal side relative to the sequence of the second B-cell epitope in the monomer-C sequence Located.
  • the fourth auxiliary part may have a dummy function, a solubility improving function, a linker function, and/or a cyclic form forming function, but is not limited thereto.
  • the unit-C is a peptide represented by the following [Structural Formula C].
  • B 1 and B 2 are B-cell epitopes, respectively, according to the design principle described above.
  • the T 1 is a Th epitope and follows the design principle described above.
  • a 1 , A 2 , A 3 , and A 4 are auxiliary parts and may be omitted.
  • a 1 , A 2 , A 3 , and A 4 may have a dummy function, a solubility improving function, a linker function, and/or a cyclic form forming function, but are not limited thereto.
  • the length of the unit-C is about 24mer, about 25mer, about 26mer, about 27mer, about 28mer, about 29mer, about 30mer, about 31mer, about 32mer, about 33mer, about 34mer, about 35mer, about 36mer , about 37mer, about 38mer, about 39mer, about 40mer, about 41mer, about 42mer, about 43mer, about 44mer, about 45mer, about 46mer, about 47mer, about 48mer, about 49mer, about 50mer, about 51mer, about 52mer, about 53mer, about 54mer, about 55mer, about 56mer, about 57mer, about 58mer, about 59mer, about 60mer, about 61mer, about 62mer, about 63mer, about 64mer, about 65mer, about 66mer, about 67mer, about 68mer, about 69mer, about 70mer, about 71mer, about 72mer, about 73mer, about 74mer, about 75mer, about 76mer, about 77mer, about 78mer, about 79mer, about
  • the length of the unit-C may have a value within the two numerical ranges selected in the previous sentence.
  • the length of the unit-C may be about 24mers to about 45mers.
  • the length of the unit-C may be from about 40 mer to about 80 mer.
  • unit-C may have a sequence in which a first B-cell epitope, a first auxiliary portion, a first Th epitope, a second auxiliary portion, and a second B-cell epitope are sequentially linked.
  • the first auxiliary part and the second auxiliary part have a linker function and a protective function, respectively.
  • the first auxiliary portion and the second auxiliary portion each include one or more artificial amino acids.
  • unit-C may have a sequence in which the third auxiliary region, the third B-cell epitope, the fourth auxiliary region, the second Th epitope, the fifth auxiliary region, and the fourth B-cell epitope are sequentially linked.
  • the third auxiliary portion is a His-tag
  • the fourth auxiliary portion and the fifth auxiliary portion have a linker function and a protective function, respectively.
  • the fourth auxiliary portion and the fifth auxiliary portion each comprise one or more artificial amino acids.
  • the unit is -C RNVPPIFNDVYWIAFZaK (Cha) VAAWTLKAAaZRNVPPIFNDVYWIAF (SEQ ID NO: 107), RNVPPIFNDVYWIAFZaK (Cha) VAAWTLKAAaZCRFRGLISLSQVYLS (SEQ ID NO: 108), RNVPPIFNDVYWIAFZaK (Cha) VAAWTLKAAaZKTTKQSFDLSVKAQYKKNKH (SEQ ID NO: 109), CRFRGLISLSQVYLSZaK (Cha) VAAWTLKAAaZRNVPPIFNDVYWIAF (SEQ ID NO: No.
  • CRFRGLISLSQVYLSZaK (Cha) VAAWTLKAAaZCRFRGLISLSQVYLS (SEQ ID NO: 111), RNVPPIFNDVYWIAFZaK (Cha) VAAWTLKAAaZKTTKQSFDLSVKAQYKKNKH (SEQ ID NO: 112), KTTKQSFDLSVKAQYKKNKHZaK (Cha) VAAWTLKAAaZRNVPPIFNDVYWIAF (SEQ ID NO: 113), KTTKQSFDLSVKAQYKKNKHZaK (Cha) VAAWTLKAAaZCRFRGLISLSQVYLS (SEQ ID NO: 114), KTTKQSFDLSVKAQYKKNKHZaK ( Cha) VAAWTLKAAaZKTTKQSFDLSVKAQYKKNKH (SEQ ID NO: 115), PIFNDVYWIAFK (Cha) VAAWTLKAACRFRGLISLSQ (SEQ ID NO: 116), P
  • CRNVPPIFNDVYWIAFZaK (Cha) VAAWTLKAAaZRNVPPIFNDVYWIAFC (SEQ ID NO: 122), RNVPPIFNDVYWIAFZaK (Cha) VAAWTLKAACRFRGLISLSQVYLS (SEQ ID NO: 160), RNVPPIFNDVYWIAFXXKXVAAWTLKAAXXCRFRGLISLSQVYLS (SEQ ID NO: 198), KTTKQSFDLSVKAQYKKNKHXXKXVAAWTLKAAXXCRFRGLISLSQVYLS (SEQ ID NO: 201), RNVPPIFNDVYWIAFXPKYVKQNTLKLATXCRFRGLISLSQVYLS (SEQ ID NO: 203), RNVPPIFNDVYWIAFXXKXVAAWTLKAACRFRGLISLSQVYLS ( may be SEQ ID NO: 207), RNVPPIFNDVYWIAFXXKFVAAWTLKAACRFRGLIS
  • a peptide unit As a peptide unit provided herein, 1) it contains one B-cell epitope and two Th epitopes, 2) the sequence of one Th epitope among the two Th epitopes is the sequence of the other Th epitope and the A peptide unit that is located between the sequences of the B-cell epitope and may contain one or more auxiliary moieties 3) is termed “unit-C”.
  • the function of the auxiliary part is not particularly limited as long as it does not impair the functions of the B-cell epitope and the Th epitope, and is appropriately designed as necessary.
  • the unit-D may be one in which the first B-cell epitope, the first Th epitope, and the second Th epitope are sequentially linked in the N-terminal to C-terminal direction.
  • the unit-D may additionally include a first auxiliary part.
  • the sequence of the first auxiliary moiety in the unit-D sequence is located at the N-terminal side relative to the sequence of the first B-cell epitope.
  • the first auxiliary part may have a dummy function, a solubility improving function, a linker function, and/or a cyclic form forming function, but is not limited thereto.
  • the unit-D may additionally include a second auxiliary part.
  • the sequence of the second auxiliary moiety in the unit-D sequence is located between the sequence of the first B-cell epitope and the sequence of the first Th epitope.
  • the second auxiliary part may have a dummy function, a solubility improving function, a linker function, and/or a protection function, but is not limited thereto.
  • the unit-D may additionally include a third auxiliary part.
  • the sequence of the third auxiliary moiety in the unit-D sequence is located between the sequence of the first Th epitope and the sequence of the second Th epitope.
  • the third auxiliary part may have a dummy function, a solubility improving function, a linker function, and/or a protection function, but is not limited thereto.
  • the unit-D may additionally include a fourth auxiliary part.
  • the sequence of the fourth auxiliary moiety in the unit-D sequence is located at the C-terminal side relative to the sequence of the second Th epitope in the unit-D sequence .
  • the fourth auxiliary part may have a dummy function, a solubility improving function, a linker function, and/or a cyclic form forming function, but is not limited thereto.
  • the unit-D may be one in which a third Th epitope, a fourth Th epitope, and a second B-cell epitope are sequentially linked in an N-terminal to C-terminal direction.
  • the unit-D may additionally include a fifth auxiliary part.
  • the sequence of the fifth auxiliary portion in the unit-D sequence is located at the N-terminal side relative to the sequence of the third Th epitope.
  • the fifth auxiliary part may have a dummy function, a solubility improving function, a linker function, and/or a cyclic form forming function, but is not limited thereto.
  • the unit-D may additionally include a sixth auxiliary part.
  • the sequence of the sixth auxiliary moiety in the unit-D sequence is located between the sequence of the third Th epitope and the sequence of the fourth Th epitope.
  • the second auxiliary part may have a dummy function, a solubility improving function, a linker function, and/or a protection function, but is not limited thereto.
  • the unit-D may additionally include a seventh auxiliary part.
  • the sequence of the seventh auxiliary moiety in the unit-D sequence is located between the sequence of the fourth Th epitope and the sequence of the second B-cell epitope.
  • the seventh auxiliary part may have a dummy function, a solubility improving function, a linker function, and/or a protection function, but is not limited thereto.
  • the unit-D may additionally include an eighth auxiliary part.
  • the sequence of the eighth adjuvant in the unit-D sequence is at the C-terminal side relative to the sequence of the second B-cell epitope in the unit-D sequence Located.
  • the eighth auxiliary part may have a dummy function, a solubility improving function, a linker function, and/or a cyclic form forming function, but is not limited thereto.
  • the unit-B is a peptide represented by the following [Structural Formula D] or [Structural Formula D'].
  • B 1 and B 2 are B-cell epitopes, respectively, according to the design principle described above.
  • the T 1 to T 4 are Th epitopes, according to the design principle described above.
  • a 1 to A 8 are auxiliary parts and may be omitted.
  • a 1 to A 8 may have a dummy function, a solubility improving function, a linker function, and/or a cyclic form forming function, but are not limited thereto.
  • the length of the unit-D is about 24mer, about 25mer, about 26mer, about 27mer, about 28mer, about 29mer, about 30mer, about 31mer, about 32mer, about 33mer, about 34mer, about 35mer, about 36mer , about 37mer, about 38mer, about 39mer, about 40mer, about 41mer, about 42mer, about 43mer, about 44mer, about 45mer, about 46mer, about 47mer, about 48mer, about 49mer, about 50mer, about 51mer, about 52mer, about 53mer, about 54mer, about 55mer, about 56mer, about 57mer, about 58mer, about 59mer, about 60mer, about 61mer, about 62mer, about 63mer, about 64mer, about 65mer, about 66mer, about 67mer, about 68mer, about 69mer, about 70mer, about 71mer, about 72mer, about 73mer, about 74mer, about 75mer, about 76mer, about 77mer, about 78mer, about 79mer, about
  • the length of the unit-B may have a value within the two numerical ranges selected in the immediately preceding sentence.
  • the length of the unit-D may be about 24 mers to about 45 mers.
  • the length of the unit-D may be about 40mers to about 80mers.
  • unit-D may have a sequence in which the first auxiliary portion, the first B-cell epitope, the second auxiliary portion, the first Th epitope, the third auxiliary portion, and the second Th epitope are sequentially linked.
  • the first auxiliary portion is a His-tag
  • the second auxiliary portion and the third auxiliary portion each have a linker function.
  • the second auxiliary portion and the third auxiliary portion each include one or more artificial amino acids.
  • unit-D may have a sequence in which a fourth auxiliary moiety, a second B-cell epitope, a fifth adjuvant, a third Th epitope, a sixth adjuvant, a fourth Th epitope, and a seventh adjuvant are linked in order.
  • the fourth auxiliary portion is a His-tag
  • the fifth auxiliary portion and the sixth auxiliary portion each have a linker function
  • the seventh auxiliary portion has a protective function.
  • the fifth auxiliary portion, the sixth auxiliary portion and the seventh auxiliary portion each include one or more artificial amino acids.
  • unit-D comprises a third B-cell epitope, an eighth adjuvant, a fifth Th epitope, a ninth adjuvant, and a sixth Th epitope.
  • the eighth auxiliary portion and the ninth auxiliary portion each have a linker function.
  • the eighth auxiliary portion and the ninth auxiliary portion each include one or more artificial amino acids.
  • unit-D comprises a fourth B-cell epitope, a tenth adjuvant, a seventh Th epitope, an eleventh adjuvant, an eighth Th epitope, and a twelfth adjuvant.
  • the tenth auxiliary part and the eleventh auxiliary part each have a linker function.
  • the twelfth auxiliary part has a protective function.
  • the tenth auxiliary portion, the eleventh auxiliary portion, and the twelfth auxiliary portion each include one or more artificial amino acids.
  • the monomer-D is RNVPPIFNDVYWIAF ZaK (Cha) VAAWTLKAAaZ ILMQYIKANSKFIGI (SEQ ID NO: 123), CRFRGLISLSQVYLS ZaK (Cha) VAAWTLKAAaZ ILMQYIKANSKFIGI (SEQ ID NO: 124), KTTKAWKHKANSK (SEQ ID NO: 124), KTTKAWKHKANSKAN SEQ ID NO: ZaK (Cha) VAAWTLKAAaZ RNVPPIFNDVYWIAF (SEQ ID NO: 126), ILMQYIKANSKFIGI ZaK (Cha) VAAWTLKAAaZ CRFRGLISLSQVYLS (SEQ ID NO: 127), ILMQYIKANSKFIGI ZaK (Cha) SEQ ID NO: 129), PPIFNDVYW K (Cha) VAAWTLKAA K (Cha) VAAWTLKAA (SEQ ID NO: 130), MR
  • a peptide unit As a peptide unit provided herein, 1) it contains two B-cell epitopes and two Th epitopes, and 2) the sequences of each of the two Th epitopes are both B-cell of one of the two B-cell epitopes.
  • a peptide unit that is located between the sequence of a cell epitope and the sequence of another B-cell epitope and may include 3) one or more auxiliary moieties is termed “unit-E”.
  • the function of the auxiliary part is not particularly limited as long as it does not impair the functions of the B-cell epitope and the Th epitope, and is appropriately designed as necessary.
  • the unit-E may be one in which a first B-cell epitope, a first Th epitope, a second Th epitope, and a second B-cell epitope are sequentially linked in an N-terminal to C-terminal direction.
  • the unit-E may additionally include a first auxiliary part.
  • the sequence of the first adjuvant within the unit-E sequence is located at the N-terminal side relative to the sequence of the first B-cell epitope.
  • the first auxiliary part may have a dummy function, a solubility improving function, a linker function, and/or a cyclic form forming function, but is not limited thereto.
  • the unit-E may additionally include a second auxiliary part.
  • the sequence of the second auxiliary moiety in the monomer-E sequence is located between the sequence of the first B-cell epitope and the sequence of the first Th epitope.
  • the second auxiliary part may have a dummy function, a solubility improving function, a linker function, and/or a protection function, but is not limited thereto.
  • the unit-E may additionally include a third auxiliary part.
  • the sequence of the third auxiliary moiety in the monomer-E sequence is located between the sequence of the first Th epitope and the sequence of the second Th epitope.
  • the third auxiliary part may have a dummy function, a solubility improving function, a linker function, and/or a protection function, but is not limited thereto.
  • the unit-E may additionally include a fourth auxiliary part.
  • the sequence of the fourth auxiliary moiety in the unit-E sequence is located between the sequence of the second B-cell epitope and the sequence of the second B-cell epitope do.
  • the fourth auxiliary part may have a dummy function, a solubility improving function, a linker function, and/or a protection function, but is not limited thereto.
  • the unit-E may additionally include a fifth auxiliary part.
  • the sequence of the fifth auxiliary portion in the monomer-E sequence is at the C-terminal side relative to the sequence of the second B-cell epitope in the monomer-E sequence Located.
  • the fifth auxiliary part may have a dummy function, a solubility improving function, a linker function, and/or a cyclic form forming function, but is not limited thereto.
  • the unit-C is a peptide represented by the following [Structural Formula E].
  • B 1 and B 2 are B-cell epitopes, respectively, according to the design principle described above.
  • the T 1 and T 2 are Th epitopes, according to the design principle described above.
  • a 1 , A 2 , A 3 , A 4 , and A 5 are auxiliary parts and may be omitted.
  • a 1 , A 2 , A 3 , A 4 , and A 5 may have a dummy function, a solubility improving function, a linker function, and/or a cyclic form forming function, but are not limited thereto.
  • the length of the unit-C is about 32mer, about 33mer, about 34mer, about 35mer, about 36mer, about 37mer, about 38mer, about 39mer, about 40mer, about 41mer, about 42mer, about 43mer, about 44mer , about 45mer, about 46mer, about 47mer, about 48mer, about 49mer, about 50mer, about 51mer, about 52mer, about 53mer, about 54mer, about 55mer, about 56mer, about 57mer, about 58mer, about 59mer, about 60mer, about 61mer, about 62mer, about 63mer, about 64mer, about 65mer, about 66mer, about 67mer, about 68mer, about 69mer, about 70mer, about 71mer, about 72mer, about 73mer, about 74mer, about 75mer, about 76mer, about 77mer, About 78mer, about 79mer, about 80mer, about 81mer, about 82mer, about 83mer, about 84mer, about 85mer, about 86mer,
  • the length of the unit-C may have a value within the two numerical ranges selected in the previous sentence.
  • the length of the unit-E may be about 32 mer to about 60 mer.
  • the length of the unit-E may be about 50 mer to about 100 mer.
  • the first auxiliary portion, the first B-cell epitope, the second auxiliary portion, the first Th epitope, the third auxiliary portion, the second Th epitope, the fourth auxiliary portion, and the second B-cell epitope are in this order It may have a linked sequence.
  • the first auxiliary part is a His-tag.
  • the second auxiliary portion and the fourth auxiliary portion have a linker function and a protective function, respectively.
  • the third auxiliary part has a linker function.
  • the second auxiliary portion, the third auxiliary portion, and the fourth auxiliary portion comprise one or more artificial amino acids.
  • unit-E has a sequence in which a third B-cell epitope, a fifth auxiliary, a third Th epitope, a sixth auxiliary, a fourth Th epitope, a seventh auxiliary, and a fourth B-cell epitope are linked in order can have
  • the fifth auxiliary portion and the seventh auxiliary portion have a linker function and a protective function, respectively.
  • the sixth auxiliary part has a linker function.
  • the fifth auxiliary portion, the sixth auxiliary portion and the seventh auxiliary portion comprise one or more artificial amino acids.
  • the unit is -E RNVPPIFNDVYWIAFZaK (Cha) VAAWTLKAAaZILMQYIKANSKFIGIRNVPPIFNDVYWIAF (SEQ ID NO: 137), RNVPPIFNDVYWIAFZaK (Cha) VAAWTLKAAaZILMQYIKANSKFIGICRFRGLISLSQVYLS (SEQ ID NO: 138), RNVPPIFNDVYWIAFZaK (Cha) VAAWTLKAAaZILMQYIKANSKFIGIKTTKQSFDLSVKAQYKKNKH (SEQ ID NO: 139), CRFRGLISLSQVYLSZaK (Cha) VAAWTLKAAaZILMQYIKANSKFIGIRNVPPIFNDVYWIAF (SEQ ID NO: No.
  • the peptides provided herein can be designed using one or more of the above-described peptide units.
  • the peptide includes one or more of the peptide units, and may include one or more types of peptide units. For example, 1) design including only one peptide unit, 2) designing a concatamer by linking a plurality of peptide units of one type having the same sequence, or 3) one type having a different sequence
  • a peptide in the form of String-of-Beads can be designed, or 4) a peptide can be designed by mixing the design methods of 1) to 3) above, 5) both ends of the peptide designed by the above method
  • each design method will be described in detail.
  • the peptide may be designed to include only one of the above-described peptide units.
  • the peptide may include one peptide unit selected from the group consisting of unit-A, unit-B, unit-C, unit-D, and unit-E. In this case, the peptide unit has the above-described configuration.
  • the peptide may be designed in the form of a concatamer in which a plurality of one type of the peptide unit having the same sequence are linked.
  • the peptide designed in the form of the chain identical sequence is composed of 1) one type of peptide unit and 2) a plurality of peptide units having the same or equivalent sequence.
  • the two peptide units having an “equivalent sequence” are different in 1) whether an auxiliary part is present at the N-terminus and/or C-terminus of each of the two peptides, and 2) if the auxiliary part is present, the sequence thereof is different.
  • the rest of the sequences refer to the same case.
  • the first peptide has a sequence in which a first auxiliary moiety and a first unit-A are linked in an N-terminal to C-terminal direction
  • the second peptide has a first unit-A and a first auxiliary in an N-to-C-terminal direction.
  • the third peptide has an additionally linked sequence
  • the third peptide has a sequence in which the second auxiliary part, the first monomer-A, and the third auxiliary part are linked in the N-terminal to C-terminal direction
  • the fourth peptide has the first monomer-A sequence
  • the first to fourth peptides are said to have an equivalent sequence.
  • the peptide may include a first peptide unit and a second peptide unit linked in order.
  • the first peptide unit is a peptide unit selected from the group consisting of unit-A, unit-B, unit-C, unit-D, and unit-E
  • the second peptide unit is the same as the first peptide unit or have an equivalent sequence.
  • the peptide may include a third peptide unit, a fourth peptide unit, and a fifth peptide unit linked in order.
  • the third peptide unit is a peptide unit selected from the group consisting of unit-A, unit-B, unit-C, unit-D, and unit-E, and the fourth peptide unit and the fifth peptide unit are each of the above It has the same or equivalent sequence as the third peptide unit.
  • the peptide may include a sixth peptide unit, a seventh peptide unit, an eighth peptide unit, and a ninth peptide unit linked in order.
  • the sixth peptide unit is a peptide unit selected from the group consisting of unit-A, unit-B, unit-C, unit-D, and unit-E, and the seventh peptide unit, the eighth peptide unit, and the first Each of the 9 peptide units has the same or the same sequence as the sixth peptide unit.
  • the peptide may be a peptide represented by the following [Structural Formula 1].
  • each of U 1 to U n is a peptide unit selected from the group consisting of unit-A, unit-B, unit-C, unit-D, and unit-E, and has the above-described configuration of the peptide unit.
  • the U 1 to U n have the same or equivalent sequence.
  • n is an integer of 2 or more.
  • the peptide is MRGSHHHHHHGSDDDDKIVDRNVPPIFNDVYWIAFZaK (Cha) VAAWTLKAAaZRNVPPIFNDVYWIAFZaK (Cha) VAAWTLKAAaZ (SEQ ID NO: 151), RNVPPIFNDVYWIAFCRFRGLISLSQVYLSZaK (Cha) VAAWTLKAAaZRNVPPIFNDVYWIAFCRFRGLISLSQVYLSZaK (Cha) VAAWTLKAAaZ (SEQ ID NO: 152), RNVPPIFNDVYWIAFZaK (Cha) VAAWTLKAAaZCRFRGLISLSQVYLSRNVPPIFNDVYWIAFZaK (Cha) VAAWTLKAAaZCRFRGLISLSQVYLS (SEQ ID NO: 153), it may be RNVPPIFNDVYWIAFZaK (Cha) VAAWTLKAAaZILMQYIKANSKFIGIRN
  • the peptide may be designed in the form of String-of-Beads in which a plurality of the peptide units having different sequences are linked.
  • the peptide designed in the String-of-Beads form is composed of 1) at least one type of peptide unit, and 2) a plurality of peptide units having different sequences.
  • the peptide may include a first peptide unit and a second peptide unit linked in order.
  • each of the first peptide unit and the second peptide unit is a peptide unit selected from the group consisting of unit-A, unit-B, unit-C, unit-D, and unit-E, and the first peptide unit and the The second peptide units have different sequences.
  • the peptide may include a third peptide unit, a fourth peptide unit, and a fifth peptide unit linked in order.
  • each of the third peptide unit, the fourth peptide unit, and the fifth peptide unit is a peptide unit selected from the group consisting of unit-A, unit-B, unit-C, unit-D, and unit-E, and the The third peptide unit, the fourth peptide unit, and the fifth peptide unit have different sequences.
  • the peptide may include a sixth peptide unit, a seventh peptide unit, an eighth peptide unit, and a ninth peptide unit linked in order.
  • the sixth peptide unit, the seventh peptide unit, the eighth peptide unit, and the ninth peptide unit are each selected from the group consisting of Unit-A, Unit-B, Unit-C, Unit-D, and Unit-E. It is a peptide unit, and the sixth peptide unit, the seventh peptide unit, the eighth peptide unit, and the ninth peptide unit have different sequences from each other.
  • the peptide may be a peptide represented by the following [Structural Formula 2].
  • each of U 1 to U n is a peptide unit selected from the group consisting of unit-A, unit-B, unit-C, unit-D, and unit-E, and has the above-described configuration of the peptide unit.
  • the U 1 to U n have different sequences.
  • n is an integer of 2 or more.
  • the peptide may be a peptide of RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZRNVPPIFNDVYWIAFCRFRGLISLSQVYLSZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ (SEQ ID NO: 156).
  • a represents D-form alanine
  • Z represents 6-aminohexanoic acid
  • (Cha) represents L-cyclohexylalanine.
  • the peptide can be designed by appropriately mixing 1) one-unit design, 2) concatemer design, and 3) string-of-beads design described above.
  • the peptide may be designed by first designing the unit peptide according to the design method, and then linking a plurality of unit peptides.
  • the peptide may be one in which a first unit peptide and a second unit peptide are sequentially linked.
  • each of the first peptide and the second peptide has a peptide configuration according to any one of the one unit design, the chain identical sequence design, and the String-of-Beads design, and the sequence of the first unit peptide and the The sequences of the second unit peptides are different from each other.
  • the peptide may be one in which a third unit peptide, a fourth unit peptide, and a fifth unit peptide are sequentially linked.
  • the third unit peptide, the fourth unit peptide, and the fifth unit peptide each have a peptide configuration according to any one of the one unit design, the chain identical sequence design, and the String-of-Beads design, The sequence of the third unit peptide, the sequence of the fourth unit peptide, and the sequence of the fifth unit peptide are different from each other.
  • the peptide may be one in which the sixth unit peptide, the seventh unit peptide, the eighth unit peptide, and the ninth unit peptide are sequentially linked.
  • the 6th unit peptide, the 7th unit peptide, the 8th unit peptide, and the 9th unit peptide are each of the one unit design, the chain identical sequence design, and the String-of-Beads design. and the sequence of the sixth unit peptide, the sequence of the seventh unit peptide, the sequence of the eighth unit peptide, and the sequence of the ninth unit peptide are different from each other.
  • the peptide may be a peptide represented by the following [Structural Formula 3].
  • each of the P 1 to P n is a unit peptide designed by a method selected from the group consisting of a single unit design, a chain identical sequence design, and a String of Beads design, and has the above-described peptide design and configuration.
  • n is an integer of 2 or more.
  • the peptide is RNVPPIFNDVYWIAFZaK (Cha) VAAWTLKAAaZRNVPPIFNDVYWIAFZRNVPPIFNDVYWIAFZaK (Cha) VAAWTLKAAaZILMQYIKANSKFIGIZRNVPPIFNDVYWIAFZaK (Cha) VAAWTLKAAaZ ILMQYIKANSKFIGICRFRGLISLSQVYLS (SEQ ID NO: 157), and RNVPPIFNDVYWIAFZaK (Cha) VAAWTLKAAaZRNVPPIFNDVYWIAFCRFRGLISLSQVYLSZaK (Cha) VAAWTLKAAaZRNVPPIFNDVYWIAFCRFRGLISLSQVYLSZaK (Cha) VAAWTLKAAaZRNVPPIFNDVYWIAFZaK (Cha) VAAWTLKAAaZRNVPPIFNDVYWIAFZaK (Cha) VAAWTLKAAaZRNVPPIFN
  • the peptide may be designed to form a cyclic form.
  • the peptide forms a cyclic form, since stability in the body of the subject is increased, a better effect can be expected when used as an immunotherapeutic agent.
  • the peptide is at the N-terminus and C-terminus It may be designed to further have an auxiliary part having a click form forming function.
  • the peptide for a peptide designed by a design method selected from the group consisting of one unit design, concatemer design, String-of-Beads design, and mixed design, the peptide further comprises an auxiliary part, , can be designed to form a cyclic form through the auxiliary part.
  • the peptide may be designed by other methods, if necessary.
  • the peptide for a peptide designed by a design method selected from the group consisting of one unit design, concatemer design, String-of-Beads design, and mixed design, the peptide comprises one or more auxiliary moieties, one or more B -cell epitope, and/or may further comprise one or more Th epitope.
  • the peptide unit is any one of the sequences disclosed in the paragraphs "Design of Unit-A”, “Design of Unit-B”, “Design of Unit-C”, “Design of Unit-D”, and “Design of Unit-E”. With 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96 %, 97%, 98%, 99%, or 100% identical sequences.
  • the peptide unit is any one of the sequences disclosed in the paragraphs "Design of Unit-A”, “Design of Unit-B”, “Design of Unit-C”, “Design of Unit-D”, and “Design of Unit-E”.
  • the peptide unit is 80%, 81%, 82%, 83%, 84 with any one selected from SEQ ID NO: 56 to SEQ ID NO: 150, SEQ ID NO: 160 to SEQ ID NO: 161, SEQ ID NO: 198 to SEQ ID NO: 220 %, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, or 100% It may have a matching sequence.
  • the peptide unit may have a sequence that matches any one selected from SEQ ID NO: 56 to SEQ ID NO: 150, SEQ ID NO: 160 to SEQ ID NO: 161, SEQ ID NO: 198 to SEQ ID NO: 220 and more than the numerical value selected in the immediately preceding sentence. have.
  • the peptide unit may have a sequence that is 90% or more identical to SEQ ID NO: 56.
  • the peptide is 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, or 100% identical sequences.
  • the peptide may have a sequence that matches any one of the sequences disclosed in the "Peptide Design" paragraph by more than a number selected in the immediately preceding sentence.
  • the peptide comprises any one of SEQ ID NOs: 151 to 158 and 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90 %, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, or 100% identical sequences.
  • the peptide may have a sequence that matches any one of SEQ ID NO: 151 to SEQ ID NO: 158 by more than a number selected in the immediately preceding sentence.
  • the peptide may have a sequence that is 90% or more identical to SEQ ID NO: 151.
  • the peptides provided herein When the peptides provided herein are injected into the body of a subject, 1) induces the production of an antibody that specifically binds to an intentionally designed B-cell epitope, and 2) induces the production of a uniform antibody. suitable as a therapeutic agent. Therefore, the peptide can be used for immunotherapy. In one embodiment, the peptides provided herein can be used as an immunotherapeutic agent for obesity. In one embodiment, the peptide unit provided herein and/or a peptide comprising the same may be used for the treatment of obesity.
  • the peptides provided herein include B-cell epitopes.
  • the B-cell epitope may be a B-cell epitope included in SEQ ID NOs: 41 to 75.
  • the B-cell epitope is known to induce antibodies having binding ability to ApoB-100 (Patent Application No. US10/378,707, PCT/KR2005/000784, and Kim et al, 2016, An apolipoprotein B100 mimotope prevents obesity in mice, Clinical Science 130, 105-116). It is known by the prior literature that when an antibody having binding ability to ApoB-100 is induced by the B-cell epitope in the body of a subject, it has an immunotherapeutic effect on obesity.
  • a pharmaceutical composition comprising the above-described peptide.
  • the peptide can be used as an immunotherapeutic agent and has in common with vaccines in that it induces a humoral immune response when injected into the body.
  • the pharmaceutical composition containing the peptide may include an appropriate composition that those skilled in the art can add for general vaccine administration and/or to increase the immune response inducing effect.
  • the pharmaceutical composition may include, but is not limited to, the formulated peptide, pharmaceutically acceptable carriers, adjuvants and/or adjuvants.
  • the pharmaceutical composition includes water, saline, dextrose, ethanol, glycerol, sodium chloride, dextrose, mannitol, sorbitol, lactose, gelatin, albumin, aluminum hydroxide, Freund's Incomplete Adjuvant and Complete Adjuvant (Pifco Laboratories, Detroit, Mich.), Merck Adjuvant 65 (Merck and Company, Inc., Rahway, NJ.), Alhydrogel (Al(OH)3), Aluminum Hydroxide Gel (Alum) , or aluminum salts such as aluminum phosphate, AS04 series, MF, squalene, MF59, QS21, calcium, iron or zinc salts, insoluble suspensions of acylated tyrosine, acylated fructose, cationically or anionically derived polysaccharides , polyphosphazenes, biodegradable microspheres, and Quil A, toll-like receptor (TLR) agonists, Avanti polar polar
  • the peptides provided herein may be prepared by a known method that can be adopted by those skilled in the art, and the preparation method is not particularly limited.
  • the peptide may be prepared by a recombinant protein production method.
  • the peptide may be chemically synthesized. Specifically, the peptide may be synthesized by a liquid peptide synthesis method, a solid phase peptide synthesis method, or a convergent method of small peptide fragments, but is not limited thereto.
  • nucleic acids encoding nucleic acids
  • Peptide units and peptides disclosed herein may include non-standard amino acids. Since there is no codon corresponding to the non-standard amino acid in nature, the non-standard amino acid cannot be encoded by a general method. Therefore, the non-standard amino acid must be replaced with an appropriate standard amino acid to encode it in the form of a nucleic acid. If the peptide unit and/or the peptide does not contain a non-standard amino acid, the encoding nucleic acid can be designed using a nucleic acid codon corresponding to each standard amino acid.
  • the peptide unit and/or peptide comprising the substitution of the non-standard amino acid with an appropriate standard amino acid, and the peptide unit and/or peptide containing only the standard amino acid are referred to as the encoding target peptide, and the DNA, and/or RNA encoding a peptide to be encoded is referred to as an encoding nucleic acid.
  • the peptide unit and/or peptide does not contain a non-standard amino acid, the peptide unit and/or peptide has the same amino acid sequence as the peptide to be encoded.
  • the "peptide to be encoded" is a conceptual term introduced to easily describe the resulting encoding nucleic acid, and is independent of the method or procedure for preparing the encoding nucleic acid.
  • the peptide units and peptides disclosed herein contain non-standard amino acids, they are replaced with appropriate standard amino acids to design the encoding target peptide.
  • the corresponding peptide to be encoded has the same sequence as the peptide unit and peptide.
  • the encoding target peptide may be one in which the non-standard amino acid is replaced with any standard amino acid.
  • the encoding target peptide may be one in which the non-standard amino acid is replaced with a standard amino acid having the same or equivalent function.
  • the encoding target peptide may have the same sequence as the peptide unit and/or the peptide. In this case, the peptide unit and / or peptide is characterized in that it does not have a non-standard amino acid.
  • the peptide units and peptides disclosed herein comprise one or more Th epitopes.
  • the Th epitope is a sequence named PADRE disclosed in Patent Application No. US305,871, it may include a non-standard amino acid, L-cyclohexylalanine.
  • the L-cyclohexylalanine may have both a function of protecting the PADRE from a peptidic enzyme and an anchor residue function of binding to MHC Class II. Therefore, the encoding target peptide is designed by replacing the L-cyclohexylalanine with an appropriate standard amino acid having the same or equivalent function.
  • the L-cyclohexylalanine may be replaced with any standard amino acid.
  • the L-cyclohexylalanine may be replaced with phenylalanine or tyrosine.
  • the sequence of the encoding target peptide corresponding to the PADRE may be KFVAAWTLKAA (SEQ ID NO: 195), KYVAAWTLKAA (SEQ ID NO: 196), or KXVAAWTLKAA (SEQ ID NO: 197).
  • X means any standard amino acid.
  • sequence of the encryption target peptide RNVPPIFNDVYWIAFXXKXVAAWTLKAAXXCRFRGLISLSQVYLS (SEQ ID NO: 198), RNVPPIFNDVYWIAFXXKXVAAWTLKAAXXGSHHHHHHGSDDDDK (SEQ ID NO: 199), GSHHHHHHGSDDDDKXXKXVAAWTLKAAXXRNVPPIFNDVYWIAF (SEQ ID NO: 200), KTTKQSFDLSVKAQYKKNKHXXKXVAAWTLKAAXXCRFRGLISLSQVYLS (SEQ ID NO: 201), RNVPPIFNDVYWIAFCRFRGLISLSQVYLSXXK (Cha) VAAWTLKAAXX (SEQ ID NO: 202) , RNVPPIFNDVYWIAFXPKYVKQNTLKLATXCRFRGLISLSQVYLS (SEQ ID NO: 203), RNVPPIFNDVYWIAF
  • the encoding nucleic acid disclosed herein refers to a nucleic acid codon encoding the encoding target peptide. Since all sequences of the encoding target peptide are standard amino acids, the encoding nucleic acid is designed based on nucleic acid codons corresponding to each amino acid of the encoding target peptide. In this case, since one or more nucleic acid codons may correspond to one standard amino acid, two or more encoding nucleic acids encoding one encoding target peptide may be designed as a result.
  • the encoding nucleic acid may be a DNA and/or RNA codon encoding the encoding target peptide.
  • the encoding nucleic acid may have a DNA and/or RNA sequence capable of complementary binding to a DNA and/or RNA codon encoding the peptide to be encoded.
  • sequence of the encoding nucleic acid may be codon optimized, which is described in more detail below.
  • the encoding nucleic acid is designed by simply linking the nucleic acid codons corresponding to each amino acid of the encoding target peptide, a plurality of encoding nucleic acids can be designed for one encoding target nucleic acid. Since, on average, 1 to 6 nucleic acid codons are matched per standard amino acid, the number of possible nucleic acid codon combinations increases exponentially as the amino acid sequence length increases. However, not all of these combinations are of equal importance.
  • nucleic acid codons capable of better expressing the encoding target peptide in a cell
  • the combination may vary depending on the higher-order structure of the sequence itself, the type of target cell into which the encoding nucleic acid is to be injected, and the like.
  • Codon optimization refers to finding a combination of nucleic acid codons and specifying the found combination as a sequence of a coding nucleic acid. There is not necessarily only one codon-optimized sequence for one coding target peptide, and there may be two or more codon-optimized sequences.
  • the encoding nucleic acid may have a codon-optimized DNA and/or RNA sequence. In one embodiment, the encoding nucleic acid may have non-codon optimized DNA and/or RNA sequences.
  • Codon optimization of the encoding nucleic acid may be performed in consideration of the higher-order structure of the nucleic acid sequence itself.
  • the encoding nucleic acid may be codon-optimized in consideration of the GC contents of the sequence.
  • the sequence of the encoding nucleic acid has a GC content of less than about 1%, about 1%, about 2%, about 3%, about 4%, about 5%, about 6%, about 7%, about 8%.
  • the sequence of the encoding nucleic acid may have a GC content within a numerical range selected in the immediately preceding sentence.
  • the sequence of the encoding nucleic acid may have a GC content of about 20% to about 50%.
  • the sequence of the encoding nucleic acid may have a GC content less than the value selected in the immediately preceding sentence.
  • the sequence of the encoding nucleic acid may have a GC content of less than about 25%.
  • Codon optimization of the encoding nucleic acid may be performed in consideration of which cell the encoding nucleic acid is to be injected and expressed. In one embodiment, codon optimization of the encoding nucleic acid may be performed in consideration of codon usage of prokaryotic or eukaryotic cells. In one embodiment, codon optimization of the encoding nucleic acid may be performed in consideration of codon usage of animal cells. In one embodiment, codon optimization of the encoding nucleic acid may be performed in consideration of mammalian codon usage. In one embodiment, codon optimization of the encoding nucleic acid may be performed in consideration of human codon usage. In one embodiment, the encoding nucleic acid may be an E. coli codon-optimized one. In one embodiment, the encoding nucleic acid may be mammalian codon-optimized. In one embodiment, the encoding nucleic acid may be human codon-optimized.
  • the encoding nucleic acid is 5'-CGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTCNNNNNNAAGNNNGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCANNNNNNTGCCGTTTCCGTGGACTGATTTCCCTGTCCCAGGTTTATCTGTCC-3 '(SEQ ID NO: 248), 5'-CGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTCNNNNNNAAGTTCGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCANNNNNNTGCCGTTTCCGTGGACTGATTTCCCTGTCCCAGGTTTATCTGTCC-3' (SEQ ID NO: 249), 5'-CGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTCNNNNNNAAGTATGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCANNNNNNTGCCGTTTCCGTGGACTGATTTCCCTGTCCCAGGTTTATCTGTCC-3 '(SEQ ID NO: 250),
  • the encoding nucleic acid may be expressed as an RNA sequence equivalent to a sequence selected from SEQ ID NO: 248 to SEQ ID NO: 278.
  • the encoding nucleic acid may be one in which one or more codons are substituted with a codon encoding the same amino acid in the sequence selected from SEQ ID NO: 248 to SEQ ID NO: 278.
  • the encoding nucleic acid may be one in which the first codon (the first to third nucleic acids at the 5' end) in the sequence of SEQ ID NO: 248 is substituted from CGT to CGC, CGG, CGA, AGA, or AGG.
  • the encoding nucleic acid may be expressed as an RNA sequence equivalent to that in which one or more codons are substituted with a codon encoding the same amino acid in the sequence selected from SEQ ID NO: 248 to SEQ ID NO: 278.
  • a pharmaceutical composition comprising a nucleic acid encoding a peptide unit and/or a peptide
  • the present specification provides a pharmaceutical composition comprising a peptide unit and/or a nucleic acid encoding the peptide (encoding nucleic acid).
  • a nucleic acid encoding nucleic acid
  • the encoding nucleic acid can be formulated by known means, for example, Kim Won-geun (2019, mRNA Vaccines - New Era of Vaccines, BRIC View 2019-R11), Zhang et al. (2019, Advances in mRNA Vaccines for Infectious). Diseases, Frontiers in Immunology, Vol.10, Article 594), Reichmuth et al.
  • the pharmaceutical composition comprising the encoding nucleic acid may further include adjuvants and/or additional ingredients in addition to the formulated encoding nucleic acid.
  • the pharmaceutical composition comprising the encoding nucleic acid comprises: a formulated encoding nucleic acid; optionally, adjuvants; and optionally, additional ingredients.
  • the formulated encoding nucleic acid may be formulated by a person skilled in the art by selecting an appropriate delivery means (vector) for the encoding nucleic acid.
  • the encoding nucleic acid may be formulated using a viral vector and/or a non-viral vector.
  • the formulated encoding nucleic acid may include a viral vector.
  • the formulated encoding nucleic acid may include a non-viral vector.
  • the non-viral vector may include, but is not limited to, lipids, polymers, and inorganic nanoparticles.
  • the formulated encoding nucleic acid may include one or more selected from the following:
  • nucleic acids combined with chemically modified dendrimers and complexed with polyethylene glycol and PEG-lipids (Modified dendrimer nanoparticles); nucleic acid complexed with protamine in PEG-lipid nanoparticles (Protamine liposome); nucleic acids complexed with cationic polymers such as polyethylenimine and PEI; Cationic polymer liposomes complexed with cationic polymers such as PEI and lipid components; nucleic acids complexed with polysaccharide polymers such as chitosan (Polysaccharide particles); Cationic lipid nanoparticles and polymers complexed with nucleic acids; cationic lipids and nucleic acids complexed with cholesterol (Cationic lipid-cholesterol nanoparticles); and cationic lipids and nucleic acids complexed
  • the formulated encoding nucleic acid may include lipid nanoparticles (LNP).
  • LNP lipid nanoparticles
  • the lipid nanoparticles may be ionizable cationic lipids, phospholipids, cholesterol, and/or lipid-anchored polyethylene glycol.
  • the ionizable cationic lipid may be one or more selected from: DLin-DMA; DLin-KC2-DMA; DLin-MC3-DMA; C12-200; cKK-E12; DLin-MC3-DMA derivative L319 (Alnylam and AlCana Technologies); C12-200 and cKK-E12 derivatives (Anderson group); COVID-19 vaccine lipids ALC-0315 and SM-102; TT3 and the biodegradable derivative FTT5 (Dong's group); vitamin derived lipids ssPalmE and VcLNP; A9 (Acuitas); L5 (Moderna); A18 Lipid; ATX Lipid (LUNAR® composition; Arcturus); and LP01 (Intellia Therapeutics).
  • the phospholipid may be one or more selected from the following: 1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine (DOPE); and 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphocholine (DSPC).
  • DOPE 1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine
  • DSPC 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphocholine
  • the formulated encoding nucleic acid may comprise a polymer-based delivery system.
  • the polymer-based delivery system may comprise one or more selected from: polyethylenimine (PEI); polyamidoamine (PAMAM); polypropyleneimine; and the polymer-based dendrimer.
  • the formulated encoding nucleic acid may include a peptide-based delivery system.
  • the peptide-based delivery system may comprise protamine.
  • the formulated encoding nucleic acid may be a protamine-mRNA complex.
  • the formulated encoding nucleic acid may include a cationic lipid constituting liposome, a lipoplex, and/or a cationic emulsion (CNE).
  • the cationic lipid may be DOTMA (1,2-di-O-octadecenyl-3-trimethylammonium propane) and/or DOTAP (1,2-dioleoyl3-trimethylammonium-propane).
  • the pharmaceutical composition comprising the encoding nucleic acid is lipid nanoparticles (LNP), aluminum salts (aluminum salts), 1,2-dioleyl-3-trimethylammonium-propane chloride, MF59 (Novartis) adjuvant, CD70, CD40 ligand (CD40L), TriMix, protamine acting through TLR7 signaling, and/or bacterial monophosphoryl lipid A may be included as adjuvants.
  • LNP lipid nanoparticles
  • aluminum salts aluminum salts
  • 1,2-dioleyl-3-trimethylammonium-propane chloride MF59 (Novartis) adjuvant
  • CD70 CD70
  • TriMix TriMix
  • protamine acting through TLR7 signaling and/or bacterial monophosphoryl lipid A
  • bacterial monophosphoryl lipid A may be included as adjuvants.
  • the pharmaceutical composition comprising the encoding nucleic acid may optionally include various additional ingredients (ingredients).
  • the additional component may be one or more selected from the following:
  • lipids lipids; salts to balance body acidity; sucrose to maintain stability during repeated freezing-thawing; and vaccine stability enhancing substances.
  • the lipid may be SM-102, PEG2000-DMG, DPSC, cholesterol, and/or ALC-0315, but is not limited thereto.
  • the salt may be sodium acetate, potassium chloride, monobasic potassium phosphate, sodium chloride, and/or dibasic sodium phosphate dehydrate, but is not limited thereto.
  • the vaccine stability enhancing substance may be acetic acid, acid stabilizer (tromethamine), and/or ethanol, but is not limited thereto.
  • the peptides provided herein include at least one peptide unit, and the peptide unit may include at least one B-cell epitope, at least one Th epitope, and an appropriate number of auxiliary moieties.
  • the peptide unit is a part designed to uniformly induce only the intended antibody while exhibiting a certain level of immunogenicity in the body of the subject.
  • the peptide unit is designed to have a relatively short length, so it is easy to synthesize and has a low production cost.
  • the peptide has properties suitable for use as an immunotherapeutic agent due to the characteristics of the above-described peptide unit.
  • the design principle of the peptide and the peptide unit is disclosed in detail.
  • each part of the peptide disclosed herein is given for convenience of description. Accordingly, the scope and name of each part may vary depending on the viewpoint.
  • the auxiliary part may be referred to as a protecting part, a dummy part, and/or a linker, but is not limited thereto.
  • the B-cell epitope may be referred to as a Th-epitope-protecting epitope, but is not limited thereto.
  • B represents a B-cell epitope.
  • T represents the Th epitope.
  • A represents an auxiliary part.
  • U represents a peptide unit.
  • the component When each component is connected with “-”, the component means that components adjacent to “-” are directly connected or connected through any other component.
  • the component when B-T is described, it includes both a peptide to which a B-cell epitope and a Th epitope are directly linked, and a peptide to which a B-cell epitope and a Th epitope are linked via any other sequence.
  • each configuration may be numbered, indicating that the two configurations are different.
  • B1-B2-T B1 and B2 represent different B-cell epitopes.
  • Example 1 a peptide unit capable of inducing a humoral immune response
  • a peptide unit capable of inducing a humoral immune response by being recognized by a CD4+ T-cell comprising: at least one Th epitope; and at least one B-cell epitope, wherein the length of the Th epitope is 8mer, 9mer, 10mer, 11mer, 12mer, 13mer, 14mer, 15mer, 16mer, 17mer, 18mer, 19mer, 20mer, 21mer, 22mer, 23mer, 24mer , 25mer, 26mer, 27mer, 28mer, 29mer, or 30mer, and the length of the B-cell epitope is 8mer, 9mer, 10mer, 11mer, 12mer, 13mer, 14mer, 15mer, 16mer, 17mer, 18mer, 19mer, 20mer, 21mer , 22mer, 23mer, 24mer, 25mer, 26mer, 27mer, 28mer, 29mer, 30mer, 31mer, or 32mer, and the length of the peptide unit is 16mer, 17mer, 18mer, 19mer, 20mer, 21mer, 22mer, 23mer
  • Example 2 peptide unit inducing antibody targeting apolipoprotein B-100
  • a peptide unit capable of inducing a humoral immune response by being recognized by a CD4+ T-cell comprising: at least one Th epitope; and at least one B-cell epitope, wherein the length of the Th epitope is 8mer, 9mer, 10mer, 11mer, 12mer, 13mer, 14mer, 15mer, 16mer, 17mer, 18mer, 19mer, 20mer, 21mer, 22mer, 23mer, 24mer , 25mer, 26mer, 27mer, 28mer, 29mer, or 30mer, wherein the B-cell epitope can induce an antibody targeting apolipoprotein B-100, and the length of the peptide unit is 16mer, 17mer, 18mer, 19mer, 20mer, 21mer, 22mer, 23mer, 24mer, 25mer, 26mer, 27mer, 28mer, 29mer, 30mer, 31mer, 32mer, 33mer, 34mer, 35mer, 36mer, 37mer, 38mer, 39mer, 40mer, 41mer, 42mer, 43mer, 44mer, 45
  • Example 3 LDL and / or peptide unit inducing an antibody targeting apolipoprotein B-100 contained in VLDL
  • Example 2 wherein the B-cell epitope induces an antibody targeting a region selected from the following: External exposure of apolipoprotein B-100 contained in low-density lipoprotein (LDL) part; and an externally exposed site of apolipoprotein B-100 contained in ultra-low-density lipoprotein (VLDL).
  • LDL low-density lipoprotein
  • VLDL ultra-low-density lipoprotein
  • the peptide unit according to Example 2 wherein the B-cell epitope is a fragment of apolipoprotein B-100 and/or a mimotope of apolipoprotein B-100.
  • the B-cell epitope is RNVPPIFNDVYWIAF (SEQ ID NO: 6), CRFRGLISLSQVYLS (SEQ ID NO: 7), KTTKQSFDLSVKAQYKKNKH (SEQ ID NO: 8), RFRGLISLSQVYLDP (SEQ ID NO: 221)), and SVCGCPVGHHDV group consisting of SEQ ID NO: 221), and SVCGCPVGHHDV A peptide unit, characterized in that it is a sequence selected from or an epitope included in a sequence selected from SEQ ID NOs: 6 to 8 and 221 to 222.
  • the peptide unit according to any one of Examples 1 to 4, wherein the peptide unit comprises one B-cell epitope and one Th epitope.
  • Example 8 B sequence limited, T length limited, and U length limited
  • the length of the peptide unit is 26mer to 45mer
  • the B-cell epitope is RNVPPIFNDVYWIAF (SEQ ID NO: 6), CRFRGLISLSQVYLS (SEQ ID NO: 7), KTTKQSFDLSVKAQYKKNKH (SEQ ID NO: 8), RFRGLISLSQVYLDP (SEQ ID NO: 8), RFRGLISLSQVYLDP (SEQ ID NO: 221) , and SVCGCPVGHHDVVGL (SEQ ID NO: 222)
  • the length of the Th epitope is a peptide unit, characterized in that 11mer to 13mer.
  • Th epitope is selected from the group consisting of: K(Cha)VAAWTLKAA (SEQ ID NO: 1); PKYVKQNTLKLAT (SEQ ID NO: 2); ILMQYIKANSKFIGI (SEQ ID NO: 3); QSIALSSLMVAQAIP (SEQ ID NO: 4); ILMQYIKANSKFIGIPMGLPQSIALSSLMVAQ (SEQ ID NO: 5); PLGFFPDHQL (SEQ ID NO: 162); WPEANQVGAGAFGPGF (SEQ ID NO:163); MQWNSTALHQALQDP (SEQ ID NO: 164); MQWNSTTFHQTLQDPRVRGLYFPAGG (SEQ ID NO: 165); FFLLTRILTI (SEQ ID NO: 166); FFLLTRILTIPQSLD (SEQ ID NO: 167); TSLNFLGGTTVCLGQ (SEQ ID NO: 168); QSPT
  • peptide unit according to any one of Examples 7 to 8, wherein the peptide unit further comprises an auxiliary moiety, wherein the auxiliary moiety is linked between the B-cell epitope and the Th epitope.
  • Example 11 limited to A, including non-standard amino acids
  • auxiliary moiety comprises one or more non-standard amino acids.
  • auxiliary moiety is selected from a, Z, aZ, Za, GSHHHHHHGSDDDKZa (SEQ ID NO: 193), and aZGSHHHHHHGSDDDK (SEQ ID NO: 194).
  • auxiliary moiety is selected from CR, HHHHHH (SEQ ID NO: 53), and RRRRRR (SEQ ID NO: 159).
  • the peptide unit comprises one B-cell epitope and two Th epitopes, respectively referred to as a first Th epitope and a second Th epitope, wherein the first Th epitope comprises A peptide unit, characterized in that it is linked between the B-cell epitope and the second Th epitope.
  • Example 15 B sequence limited, T length limited, and U length limited
  • the length of the peptide unit is 37mer to 50mer
  • the B-cell epitope is RNVPPIFNDVYWIAF (SEQ ID NO: 6), CRFRGLISLSQVYLS (SEQ ID NO: 7), KTTKQSFDLSVKAQYKKNKH (SEQ ID NO: 8), RFRGLISLSQVYLDP (SEQ ID NO: 8), RFRGLISLSQVYLDP (SEQ ID NO: 221) , and SVCGCPVGHHDVVGL (SEQ ID NO: 222), wherein the length of the first Th epitope and the second Th epitope is 11mer to 13mer, respectively.
  • Th epitope is selected from the group consisting of: K(Cha)VAAWTLKAA (SEQ ID NO: 1); PKYVKQNTLKLAT (SEQ ID NO: 2); ILMQYIKANSKFIGI (SEQ ID NO: 3); QSIALSSLMVAQAIP (SEQ ID NO: 4); ILMQYIKANSKFIGIPMGLPQSIALSSLMVAQ (SEQ ID NO: 5); PLGFFPDHQL (SEQ ID NO: 162); WPEANQVGAGAFGPGF (SEQ ID NO:163); MQWNSTALHQALQDP (SEQ ID NO: 164); MQWNSTTFHQTLQDPRVRGLYFPAGG (SEQ ID NO: 165); FFLLTRILTI (SEQ ID NO: 166); FFLLTRILTIPQSLD (SEQ ID NO: 167); TSLNFLGGTTVCLGQ (SEQ ID NO: 168); QSPT
  • peptide unit according to any one of Examples 14 to 15, wherein the peptide unit further comprises an auxiliary moiety, wherein the auxiliary moiety is linked between the B-cell epitope and the first Th epitope.
  • peptide unit according to any one of Examples 14 to 15, wherein the peptide unit further comprises an auxiliary moiety, wherein the auxiliary moiety is linked between the first Th epitope and the second Th epitope.
  • Example 19 limited to A, including non-standard amino acids
  • auxiliary portion comprises one or more non-standard amino acids.
  • the peptide unit of Example 19 wherein the auxiliary moiety is selected from a, Z, aZ, Za, GSHHHHHHGSDDDKZa (SEQ ID NO: 193), and aZGSHHHHHHGSDDDK (SEQ ID NO: 194).
  • auxiliary moiety is selected from CR, HHHHHH (SEQ ID NO: 53), and RRRRRR (SEQ ID NO: 159).
  • the peptide unit further comprises a first auxiliary portion and a second auxiliary portion, wherein the first auxiliary portion is linked between the B-cell epitope and the Th epitope, and the second
  • the auxiliary moiety is a peptide unit, characterized in that it is linked between the first Th epitope and the second Th epitope.
  • Example 23 limited to A, including non-standard amino acids
  • Example 24 A sequence limitation comprising non-standard amino acids
  • auxiliary moiety comprising one or more non-standard amino acids is independently selected from a, Z, aZ, Za, GSHHHHHHGSDDDKZa (SEQ ID NO: 193), and aZGSHHHHHHGSDDDK (SEQ ID NO: 194).
  • Example 25 A sequence limitation that does not contain non-standard amino acids
  • the peptide unit comprises a first B-cell epitope, two B-cell epitopes referred to as a second B-cell epitope, and one Th epitope, wherein the second A B-cell epitope is a peptide unit, characterized in that linked between the first B-cell epitope and the Th epitope.
  • Example 26 wherein the length of the peptide unit is 45mer to 50mer, and the first B-cell epitope and the second B-cell epitope are RNVPPIFNDVYWIAF (SEQ ID NO: 6), CRFRGLISLSQVYLS (SEQ ID NO: 7), KTTKQSFDLSVKAQYKKNKH (SEQ ID NO: 7) No. 8), RFRGLISLSQVYLDP (SEQ ID NO: 221), and SVCGCPVGHHDVVGL (SEQ ID NO: 222) are each independently selected from, and the length of the Th epitope is 11mer to 13mer.
  • RNVPPIFNDVYWIAF SEQ ID NO: 6
  • CRFRGLISLSQVYLS SEQ ID NO: 7
  • KTTKQSFDLSVKAQYKKNKH SEQ ID NO: 7
  • RFRGLISLSQVYLDP SEQ ID NO: 221
  • SVCGCPVGHHDVVGL SEQ ID NO: 222
  • Th epitope is selected from the group consisting of: K(Cha)VAAWTLKAA (SEQ ID NO: 1); PKYVKQNTLKLAT (SEQ ID NO: 2); ILMQYIKANSKFIGI (SEQ ID NO: 3); QSIALSSLMVAQAIP (SEQ ID NO: 4); ILMQYIKANSKFIGIPMGLPQSIALSSLMVAQ (SEQ ID NO: 5); PLGFFPDHQL (SEQ ID NO: 162); WPEANQVGAGAFGPGF (SEQ ID NO:163); MQWNSTALHQALQDP (SEQ ID NO: 164); MQWNSTTFHQTLQDPRVRGLYFPAGG (SEQ ID NO: 165); FFLLTRILTI (SEQ ID NO: 166); FFLLTRILTIPQSLD (SEQ ID NO: 167); TSLNFLGGTTVCLGQ (SEQ ID NO: 168); QSPT
  • peptide unit according to any one of Examples 26 to 27, wherein the peptide unit further comprises an auxiliary moiety, wherein the auxiliary moiety is linked between the second B-cell epitope and the Th epitope.
  • peptide unit according to any one of Examples 26 to 27, wherein the peptide unit further comprises an auxiliary moiety, wherein the auxiliary moiety is linked between the first B-cell epitope and the second B-cell epitope.
  • Example 31 limited to A, including non-standard amino acids
  • auxiliary portion comprises one or more non-standard amino acids.
  • Example 32 A sequence limitation comprising non-standard amino acids
  • auxiliary moiety is selected from a, Z, aZ, Za, GSHHHHHHGSDDDKZa (SEQ ID NO: 193), and aZGSHHHHHHGSDDDK (SEQ ID NO: 194).
  • Example 33 A sequence limitation that does not contain non-standard amino acids
  • auxiliary moiety is selected from CR, HHHHHH (SEQ ID NO: 53), and RRRRRR (SEQ ID NO: 159).
  • the peptide unit further comprises a first auxiliary portion and a second auxiliary portion, wherein the first auxiliary portion is between the first B-cell epitope and the second B-cell epitope. and the second auxiliary portion is linked between the second B-cell epitope and the Th epitope.
  • Example 35 limited to A, including non-standard amino acids
  • the peptide unit according to embodiment 34 characterized in that the first auxiliary moiety and/or the second adjuvant moiety comprise one or more non-standard amino acids.
  • Example 36 A sequence limitation comprising non-standard amino acids
  • auxiliary moiety comprising one or more non-standard amino acids is independently selected from a, Z, aZ, Za, GSHHHHHHGSDDDKZa (SEQ ID NO: 193), and aZGSHHHHHHGSDDDK (SEQ ID NO: 194).
  • Example 37 A sequence limitation that does not contain non-standard amino acids
  • the peptide unit comprises a first B-cell epitope, two B-cell epitopes referred to as a second B-cell epitope, and a Th epitope, wherein the Th epitope is a peptide unit, characterized in that it is linked between the first B-cell epitope and the second B-cell epitope.
  • Example 39 B sequence limitation, T length limitation, and U length limitation
  • the length of the peptide unit is 45mer to 50mer
  • the first B-cell epitope and the second B-cell epitope are RNVPPIFNDVYWIAF (SEQ ID NO: 6), CRFRGLISLSQVYLS (SEQ ID NO: 7), KTTKQSFDLSVKAQYKKNKH (SEQ ID NO: 7) No. 8), RFRGLISLSQVYLDP (SEQ ID NO: 221), and SVCGCPVGHHDVVGL (SEQ ID NO: 222) are each independently selected from, and the length of the Th epitope is 11mer to 13mer.
  • Th epitope is selected from the group consisting of: K(Cha)VAAWTLKAA (SEQ ID NO: 1); PKYVKQNTLKLAT (SEQ ID NO: 2); ILMQYIKANSKFIGI (SEQ ID NO: 3); QSIALSSLMVAQAIP (SEQ ID NO: 4); ILMQYIKANSKFIGIPMGLPQSIALSSLMVAQ (SEQ ID NO: 5); PLGFFPDHQL (SEQ ID NO: 162); WPEANQVGAGAFGPGF (SEQ ID NO:163); MQWNSTALHQALQDP (SEQ ID NO: 164); MQWNSTTFHQTLQDPRVRGLYFPAGG (SEQ ID NO: 165); FFLLTRILTI (SEQ ID NO: 166); FFLLTRILTIPQSLD (SEQ ID NO: 167); TSLNFLGGTTVCLGQ (SEQ ID NO: 168); QS
  • peptide unit according to any one of Examples 38 to 39, wherein the peptide unit further comprises an auxiliary moiety, wherein the auxiliary moiety is linked between the first B-cell epitope and the Th epitope.
  • Example 42 limited to A, including non-standard amino acids
  • auxiliary portion comprises one or more non-standard amino acids.
  • Example 43 A sequence limitation comprising non-standard amino acids
  • auxiliary moiety is selected from a, Z, aZ, Za, GSHHHHHHGSDDDKZa (SEQ ID NO: 193), and aZGSHHHHHHGSDDDK (SEQ ID NO: 194).
  • Example 44 A sequence limitation that does not contain non-standard amino acids
  • auxiliary moiety is selected from CR, HHHHHH (SEQ ID NO: 53), and RRRRRR (SEQ ID NO: 159).
  • the peptide unit further comprises a first auxiliary portion and a second auxiliary portion, wherein the first auxiliary portion is linked between the first B-cell epitope and the Th epitope, and 2
  • the auxiliary moiety is a peptide unit characterized in that it is linked between the second B-cell epitope and the Th epitope.
  • Example 46 limited to A, including non-standard amino acids
  • the peptide unit according to embodiment 45 characterized in that the first auxiliary moiety and/or the second adjuvant moiety comprise one or more non-standard amino acids.
  • Example 47 A sequence limitation comprising non-standard amino acids
  • auxiliary moiety comprising one or more non-standard amino acids is independently selected from a, Z, aZ, Za, GSHHHHHHGSDDDKZa (SEQ ID NO: 193), and aZGSHHHHHHGSDDDK (SEQ ID NO: 194).
  • Example 48 A sequence limitation that does not contain non-standard amino acids
  • the peptide unit according to Example 45 wherein the first auxiliary moiety and/or the second adjuvant moiety are each independently selected from CR,, HHHHHH (SEQ ID NO: 53), and RRRRRR (SEQ ID NO: 159).
  • the peptide unit comprises two B-cell epitopes, respectively referred to as a first B-cell epitope, a second B-cell epitope, and a first Th epitope and a second Th epitope, respectively. It comprises two Th epitopes referred to, characterized in that in the N-terminal to C-terminal direction, a first B-cell epitope, a first Th epitope, a second Th epitope, and a second B-cell epitope are linked in order peptide monomers.
  • Example 50 B sequence limited, T length limited, and U length limited
  • the length of the peptide unit is 52mer to 90mer
  • the first B-cell epitope and the second B-cell epitope are RNVPPIFNDVYWIAF (SEQ ID NO: 6), CRFRGLISLSQVYLS (SEQ ID NO: 7), KTTKQSFDLSVKAQYKKNKH (SEQ ID NO: 7) No. 8), RFRGLISLSQVYLDP (SEQ ID NO: 221), and SVCGCPVGHHDVVGL (SEQ ID NO: 222) are each independently selected, and the length of the first Th epitope and the second Th epitope is 11mer to 13mer, respectively. .
  • first Th epitope and the second Th epitope are each independently selected from the group consisting of: K (Cha) VAAWTLKAA (SEQ ID NO: 1); PKYVKQNTLKLAT (SEQ ID NO: 2); ILMQYIKANSKFIGI (SEQ ID NO: 3); QSIALSSLMVAQAIP (SEQ ID NO: 4); ILMQYIKANSKFIGIPMGLPQSIALSSLMVAQ (SEQ ID NO: 5); PLGFFPDHQL (SEQ ID NO: 162); WPEANQVGAGAFGPGF (SEQ ID NO:163); MQWNSTALHQALQDP (SEQ ID NO: 164); MQWNSTTFHQTLQDPRVRGLYFPAGG (SEQ ID NO: 165); FFLLTRILTI (SEQ ID NO: 166); FFLLTRILTIPQSLD (SEQ ID NO: 167); TSLNFLGGTTVCLGQ (SEQ ID NO: 168
  • peptide unit according to any one of Examples 49 to 50, wherein the peptide unit further comprises an auxiliary moiety, wherein the auxiliary moiety is linked between the first B-cell epitope and the first Th epitope.
  • peptide unit according to any one of Examples 49 to 50, wherein the peptide unit further comprises an auxiliary moiety, wherein the auxiliary moiety is linked between the first Th epitope and the second Th epitope.
  • peptide unit according to any one of Examples 49 to 50, wherein the peptide unit further comprises an auxiliary moiety, wherein the auxiliary moiety is linked between the second Th epitope and the second B-cell epitope.
  • Example 55 limited to A, including non-standard amino acids
  • auxiliary portion comprises one or more non-standard amino acids.
  • Example 56 A sequence limitation comprising non-standard amino acids
  • auxiliary moiety is selected from a, Z, aZ, Za, GSHHHHHHGSDDDKZa (SEQ ID NO: 193), and aZGSHHHHHHGSDDDK (SEQ ID NO: 194).
  • Example 57 A sequence limitation that does not contain non-standard amino acids
  • auxiliary moiety is selected from CR, HHHHHH (SEQ ID NO: 53), and RRRRRR (SEQ ID NO: 159).
  • the peptide unit further comprises a first auxiliary portion and a second auxiliary portion, wherein the first auxiliary portion is linked between the first B-cell epitope and the first Th epitope and , wherein the second auxiliary moiety is linked between the first Th epitope and the second Th epitope.
  • the peptide unit further comprises a first auxiliary portion and a second auxiliary portion, wherein the first auxiliary portion is linked between the first B-cell epitope and the first Th epitope and , wherein the second auxiliary portion is linked between the second Th epitope and the second B-cell epitope.
  • Example 60 B1-T1A1T2A2B2 and B2-T2A2T1A1B1
  • the peptide unit further comprises a first auxiliary portion and a second auxiliary portion, wherein the first auxiliary portion is linked between the first Th epitope and the second Th epitope, and wherein The second auxiliary portion is a peptide unit characterized in that it is linked between the second Th epitope and the second B-cell epitope.
  • Example 61 limited to A, including non-standard amino acids
  • the peptide unit according to any one of embodiments 58 to 60, characterized in that the first and/or second auxiliary moieties comprise one or more non-standard amino acids.
  • Example 62 A sequence limitation comprising non-standard amino acids
  • auxiliary moieties comprising one or more non-standard amino acids are each independently selected from a, Z, aZ, Za, GSHHHHHHGSDDDKZa (SEQ ID NO: 193), and aZGSHHHHHHGSDDDK (SEQ ID NO: 194).
  • Example 63 A sequence limitation that does not contain non-standard amino acids
  • the peptide unit further comprises a first auxiliary moiety, a second auxiliary moiety, and a third adjuvant moiety, wherein the first adjuvant moiety comprises the first B-cell epitope and the first Th connected between epitopes, wherein the second auxiliary portion is coupled between the first Th epitope and the second Th epitope, and the third auxiliary portion is coupled between the second Th epitope and the second B-cell epitope.
  • a peptide unit comprising
  • Example 65 limited to A, including non-standard amino acids
  • the peptide unit of embodiment 64, wherein the first, second, and/or third auxiliary comprises one or more non-standard amino acids.
  • Example 66 A sequence limitation comprising non-standard amino acids
  • auxiliary moiety comprising one or more non-standard amino acids is independently selected from a, Z, aZ, Za, GSHHHHHHGSDDDKZa (SEQ ID NO: 193), and aZGSHHHHHHGSDDDK (SEQ ID NO: 194).
  • Example 67 A sequence limitation that does not contain non-standard amino acids
  • the peptide unit according to embodiment 64 wherein the first auxiliary moiety, the second auxiliary moiety and/or the third auxiliary moiety are each independently selected from CR,, HHHHHH (SEQ ID NO: 53), and RRRRRR (SEQ ID NO: 159). .
  • a peptide unit comprising: the peptide unit of any one of Examples 1-67; and additional auxiliary parts.
  • Example 69 limited to A, including non-standard amino acids
  • Example 70 A sequence limitation comprising non-standard amino acids
  • auxiliary moiety is selected from a, Z, aZ, Za, GSHHHHHHGSDDDKZa (SEQ ID NO: 193), and aZGSHHHHHHGSDDDK (SEQ ID NO: 194).
  • Example 71 A sequence limitation that does not contain non-standard amino acids
  • peptide unit according to embodiment 68 wherein the additional auxiliary moiety is selected from CR, HHHHHH (SEQ ID NO: 53), and RRRRRR (SEQ ID NO: 159).
  • a peptide unit comprising: the peptide unit of any one of Examples 1-67; a first additional auxiliary; and a second additional auxiliary moiety, wherein the peptide unit is linked between the first additional auxiliary moiety and the second additional auxiliary moiety.
  • Example 73 limited to A, including non-standard amino acids
  • the peptide unit according to embodiment 72 characterized in that the first additional auxiliary moiety and/or the second further auxiliary moiety comprise one or more non-standard amino acids.
  • Example 74 A sequence limitation comprising non-standard amino acids
  • auxiliary moieties comprising one or more non-standard amino acids are each independently selected from a, Z, aZ, Za, GSHHHHHHGSDDDKZa (SEQ ID NO: 193), and aZGSHHHHHHGSDDDK (SEQ ID NO: 194). .
  • Example 75 A sequence limitation that does not contain non-standard amino acids
  • first additional auxiliary moiety and/or the second additional auxiliary moiety are each independently selected from CR, HHHHHH (SEQ ID NO: 53), and RRRRRR (SEQ ID NO: 159).
  • RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ SEQ ID NO: 56
  • ZaK(Cha)VAAWTLKAAaZRNVPPIFNDVYWIAF SEQ ID NO: 57
  • CRFRGLISLSQVYLSZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ SEQ ID NO: 58
  • ZaK(Cha)VAAWTLKAAAaZCRFRGLISLSQVYLS SEQ ID NO: 59
  • KTTKQSFDLSVKAQYKKNKHZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ SEQ ID NO: 60
  • ZaK(Cha)VAAWTLKAAAaZKTTKQSFDLSVKAQYKKNKH SEQ ID NO: 61
  • RNVPPIFNDVYWIAFK(Cha)VAAWTLKAA SEQ ID NO: 61
  • RNVPPIFNDVYWIAF ZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ ILMQYIKANSKFIGI
  • CRFRGLISLSQVYLS ZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ ILMQYIKANSKFIGI
  • KTTKQSFDLSVKAQYKKNKH ZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ ILMQYIKANSKFIGI
  • ILMQYIKANSKFIGI ZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ RNVPPIFNDVYWIAF SEQ ID NO: 126
  • ILMQYIKANSKFIGI ZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ CRFRGLISLSQVYLS (SEQ ID NO: 127); ILMQYIKANSKFIGI
  • RNVPPIFNDVYWIAFRNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ SEQ ID NO: 83
  • RNVPPIFNDVYWIAFKTTKQSFDLSVKAQYKKNKHZaK Cha) VAAWTLKAAaZ (SEQ ID NO: 85)
  • CRFRGLISLSQVYLSRNVPPIFNDVYWIAFZaK Cha) VAAWTLKAAaZ (SEQ ID NO: 86)
  • CRFRGLISLSQVYLSCRFRGLISLSQVYLSZaK Cha) VAAWTLKAAaZ (SEQ ID NO: 87)
  • CRFRGLISLSQVYLSKTTKQSFDLSVKAQYKKNKHZaK Ch
  • RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZRNVPPIFNDVYWIAF SEQ ID NO: 107
  • RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZCRFRGLISLSQVYLS P1: SEQ ID NO: 108
  • RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZKTTKQSFDLSVKAQYKKNKH SEQ ID NO: 109
  • CRFRGLISLSQVYLSZaK(Cha)VAAWTLKAAaZRNVPPIFNDVYWIAF SEQ ID NO: 110
  • CRFRGLISLSQVYLSZaK(Cha)VAAWTLKAAaZCRFRGLISLSQVYLS SEQ ID NO: 111
  • RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZILMQYIKANSKFIGIRNVPPIFNDVYWIAF SEQ ID NO:137
  • RNVPPIFMDVYWIAFZaKVChaN RNVPPIFMDVYWIAFZaKVChaN.
  • RNVPPIFNDVYWIAFZaK (Cha) VAAWTLKAAaZILMQYIKANSKFIGIKTTKQSFDLSVKAQYKKNKH (SEQ ID NO: 139), CRFRGLISLSQVYLSZaK (Cha) VAAWTLKAAaZILMQYIKANSKFIGIRNVPPIFNDVYWIAF (SEQ ID NO: 140), CRFRGLISLSQVYLSZaK (Cha) VAAWTLKAAaZILMQYIKANSKFIGICRFRGLISLSQVYLS (SEQ ID NO: 141), CRFRGLISLSQVYLSZaK (Cha) VAAWTLKAAaZILMQYIKANSKFIGIKTTKQSFDLSVKAQYKKNKH (SEQ ID NO: 142), KTTKQSFDLSVKAQYKKNKHZaK (Cha) VAAWTLKAAaZILMQYIKANSKFIGIRNVPPIFNDVYWIAF
  • the peptide unit is recognized by CD4+ T-cell and can induce a humoral immune response, and is 23mer, 24mer, 25mer, 26mer, 27mer, 28mer, 29mer, 30mer, 31mer, 32mer, 33mer, 34mer, 35mer.
  • a 1 is a first auxiliary moiety or absent, and the first auxiliary moiety has a linker function, a protective function, a cyclic form forming function, a dummy function, and/or a function to increase solubility, and may optionally include a non-standard amino acid, ,
  • a 2 is a second auxiliary moiety or absent, wherein the second auxiliary moiety has a linker function, a protective function, a cyclic form forming function, a dummy function, and/or a function to increase solubility, and may optionally include a non-standard amino acid, ,
  • a 3 is a third auxiliary moiety or absent, wherein the third auxiliary moiety has a linker function, a protective function, a cyclic form forming function, a dummy function, and/or a function to increase solubility, and may optionally include a non-standard amino acid, ,
  • B is a B-cell epitope, a fragment of apolipoprotein B-100 or a mimotope of apolipoprotein B-100, and can induce an antibody targeting apolipoprotein B-100,
  • the T is a Th epitope, characterized in that it can be recognized by CD4+ T-cell, 8mer, 9mer, 10mer, 11mer, 12mer, 13mer, 14mer, 15mer, 16mer, 17mer, 18mer, 19mer, 20mer, 21mer, 22mer, 23mer, 24mer, 25mer, 26mer, 27mer, 28mer, 29mer, 30mer, 31mer, or 32mer.
  • the A 1 , A 2 , and A 3 are each independently a, Z, aZ, Za, RN, AF, CR, LS, KT, KH, RF, DP, SV, GL, ZRNV (SEQ ID NO: 36), aZRN (SEQ ID NO: 37), IAFZ (SEQ ID NO: 38), AFZa (SEQ ID NO: 39), RNVP (SEQ ID NO: 40), WIAF (SEQ ID NO: 41), ZCRF (SEQ ID NO: 42), aZCR (SEQ ID NO: 43), YLSZ (SEQ ID NO: 44), LSZa (SEQ ID NO: 45), CRFR (SEQ ID NO: 46), VYLS (SEQ ID NO: 47), ZKTT (SEQ ID NO: 48), aZKT (SEQ ID NO: 49), NKHZ (SEQ ID NO: 50), KHZa ( SEQ ID NO: 51), GSHHHHHHGSDDDDK (SEQ ID NO:
  • the B is,
  • RNVPPIFNDVYWIAF SEQ ID NO: 6
  • CRFRGLISLSQVYLS SEQ ID NO: 7
  • KTTKQSFDLSVKAQYKKNKH SEQ ID NO: 8
  • RNVPPIFNDVY SEQ ID NO: 9
  • CRFRGLISLSQ SEQ ID NO: 10
  • KTTKQSFDLSVK SEQ ID NO: 12, FRRNLSPPIFNDV
  • FRRNLSPPIFNDV FRRNLSPPIFNDV
  • FRRNLSPPIFNDV SEQ ID NO: 13
  • KTTKQSFDLSVKAQYKK SEQ ID NO: 14
  • RNVPPIFNDVYWI SEQ ID NO: 15
  • CRFRGLISLSQVY SEQ ID NO: 16
  • KTTKQSFDLSVKAQYKKN SEQ ID NO: 17
  • PIFNDVYWIAF SEQ ID NO: 18
  • GLISLSQV SEQ ID NO: 20 PPIFNDVYWIAF
  • SEQ ID NO: 21 GLISLSQ
  • a means D-form alanine
  • Z means 6-aminohexanoic acid
  • T is selected from:
  • VAAWTLKAA (SEQ ID NO: 1), PKYVKQNTLKLAT (SEQ ID NO: 2), ILMQYIKANSKFIGI (SEQ ID NO: 3), QSIALSSLMVAQAIP (SEQ ID NO: 4), ILMQYIKANSKFIGIPMGLPQSIALSSLMVAQ (SEQ ID NO: 5), WGALGFFPDGFL (SEQ ID NO: 5), PGALGFFPDGFL (SEQ ID NO: 5) 163), MQWNSTALHQALQDP (SEQ ID NO: 164), MQWNSTTFHQTLQDPRVRGLYFPAGG (SEQ ID NO: 165), FFLLTRILTI (SEQ ID NO: 166), FFLLTRILTIPQSLD (SEQ ID NO: 167), TSLNFLGGTTVCLGQ (SEQ ID NO: 168), QSLNFLGGTTVCLGQ (SEQ ID NO: 170) ), CTTPAQGNSMFPSC (SEQ ID NO: 169
  • X 1 is tyrosine (Tyr), phenylalanine (Phe), or L-cyclohexylalanine,
  • X 2 is a hydrophobic amino acid, leucine (Leu), or isoleucine (Ile),
  • X 3 is an aromatic or cyclic amino acid, phenylalanine (Phe), tyrosine (Tyr), or histidine (His),
  • X 4 is aliphatic long chain amino acids, isoleucine (Ile), or valine (Val);
  • X 5 is a charged amino acid or arginine (Arg), leucine (Leu), aspartic acid (Asp), glutamine (Gln), or glycine (Gly);
  • X 1 is tyrosine (Tyr), phenylalanine (Phe), or L-cyclohexylalanine,
  • X 2 is lysine (Lys), tryptophan (Trp), tyrosine (Tyr), arginine (Arg), alanine (Ala), or methionine (Met),
  • X 3 is asparagine (Asn), tryptophan (Trp), tyrosine (Tyr), valine (Val), histidine (His), lysine (Lys), or alanine (Ala); and
  • (Cha) means L-cyclohexylalanins
  • X means any standard amino acid.
  • the peptide unit is recognized by CD4+ T-cell and can induce a humoral immune response, and is 23mer, 24mer, 25mer, 26mer, 27mer, 28mer, 29mer, 30mer, 31mer, 32mer, 33mer, 34mer, 35mer.
  • a 1 is a first auxiliary moiety or absent, and the first auxiliary moiety has a linker function, a protective function, a cyclic form forming function, a dummy function, and/or a function to increase solubility, and may optionally include a non-standard amino acid, ,
  • a 2 is a second auxiliary moiety or absent, wherein the second auxiliary moiety has a linker function, a protective function, a cyclic form forming function, a dummy function, and/or a function to increase solubility, and may optionally include a non-standard amino acid, ,
  • a 3 is a third auxiliary moiety or absent, wherein the third auxiliary moiety has a linker function, a protective function, a cyclic form forming function, a dummy function, and/or a function to increase solubility, and may optionally include a non-standard amino acid, ,
  • a 4 is a fourth auxiliary moiety or absent, and the fourth auxiliary moiety has a linker function, a protective function, a cyclic form forming function, a dummy function, and/or a function to increase solubility, and may optionally include a non-standard amino acid, ,
  • B 1 is a B-cell epitope, a fragment of apolipoprotein B-100 or a mimotope of apolipoprotein B-100, and can induce an antibody targeting apolipoprotein B-100,
  • the B 2 is a B-cell epitope, a fragment of apolipoprotein B-100 or a mimotope of apolipoprotein B-100, and can induce an antibody targeting apolipoprotein B-100,
  • the T is a Th epitope, characterized in that it can be recognized by CD4+ T-cell, 8mer, 9mer, 10mer, 11mer, 12mer, 13mer, 14mer, 15mer, 16mer, 17mer, 18mer, 19mer, 20mer, 21mer, 22mer, 23mer, 24mer, 25mer, 26mer, 27mer, 28mer, 29mer, 30mer, 31mer, or 32mer.
  • the A 1 , A 2 , A 3 , and A 4 are each independently a, Z, aZ, Za, RN, AF, CR, LS, KT, KH, RF, DP, SV, GL, ZRNV (SEQ ID NO: 36), aZRN (SEQ ID NO: 37), IAFZ (SEQ ID NO: 38), AFZa (SEQ ID NO: 39), RNVP (SEQ ID NO: 40), WIAF (SEQ ID NO: 41), ZCRF (SEQ ID NO: 42), aZCR (SEQ ID NO: 43) ), YLSZ (SEQ ID NO: 44), LSZa (SEQ ID NO: 45), CRFR (SEQ ID NO: 46), VYLS (SEQ ID NO: 47), ZKTT (SEQ ID NO: 48), aZKT (SEQ ID NO: 49), NKHZ (SEQ ID NO: 50) , KHZa (SEQ ID NO: 51), GSHHHHHHGSDD
  • the B 1 and B 2 are each independently,
  • RNVPPIFNDVYWIAF SEQ ID NO: 6
  • CRFRGLISLSQVYLS SEQ ID NO: 7
  • KTTKQSFDLSVKAQYKKNKH SEQ ID NO: 8
  • RNVPPIFNDVY SEQ ID NO: 9
  • CRFRGLISLSQ SEQ ID NO: 10
  • KTTKQSFDLSVK SEQ ID NO: 12, FRRNLSPPIFNDV
  • FRRNLSPPIFNDV FRRNLSPPIFNDV
  • FRRNLSPPIFNDV SEQ ID NO: 13
  • KTTKQSFDLSVKAQYKK SEQ ID NO: 14
  • RNVPPIFNDVYWI SEQ ID NO: 15
  • CRFRGLISLSQVY SEQ ID NO: 16
  • KTTKQSFDLSVKAQYKKN SEQ ID NO: 17
  • PIFNDVYWIAF SEQ ID NO: 18
  • GLISLSQV SEQ ID NO: 20 PPIFNDVYWIAF
  • SEQ ID NO: 21 GLISLSQ
  • a means D-form alanine
  • Z means 6-aminohexanoic acid
  • T is selected from:
  • VAAWTLKAA (SEQ ID NO: 1), PKYVKQNTLKLAT (SEQ ID NO: 2), ILMQYIKANSKFIGI (SEQ ID NO: 3), QSIALSSLMVAQAIP (SEQ ID NO: 4), ILMQYIKANSKFIGIPMGLPQSIALSSLMVAQ (SEQ ID NO: 5), WGALGFFPDGFL (SEQ ID NO: 5), PGALGFFPDGFL (SEQ ID NO: 5) 163), MQWNSTALHQALQDP (SEQ ID NO: 164), MQWNSTTFHQTLQDPRVRGLYFPAGG (SEQ ID NO: 165), FFLLTRILTI (SEQ ID NO: 166), FFLLTRILTIPQSLD (SEQ ID NO: 167), TSLNFLGGTTVCLGQ (SEQ ID NO: 168), QSLNFLGGTTVCLGQ (SEQ ID NO: 170) ), CTTPAQGNSMFPSC (SEQ ID NO: 169
  • X 1 is tyrosine (Tyr), phenylalanine (Phe), or L-cyclohexylalanine,
  • X 2 is a hydrophobic amino acid, leucine (Leu), or isoleucine (Ile),
  • X 3 is an aromatic or cyclic amino acid, phenylalanine (Phe), tyrosine (Tyr), or histidine (His),
  • X 4 is aliphatic long chain amino acids, isoleucine (Ile), or valine (Val);
  • X 5 is a charged amino acid or arginine (Arg), leucine (Leu), aspartic acid (Asp), glutamine (Gln), or glycine (Gly);
  • X 1 is tyrosine (Tyr), phenylalanine (Phe), or L-cyclohexylalanine,
  • X 2 is lysine (Lys), tryptophan (Trp), tyrosine (Tyr), arginine (Arg), alanine (Ala), or methionine (Met),
  • X 3 is asparagine (Asn), tryptophan (Trp), tyrosine (Tyr), valine (Val), histidine (His), lysine (Lys), or alanine (Ala); and
  • (Cha) means L-cyclohexylalanins
  • X means any standard amino acid.
  • the peptide unit is recognized by CD4+ T-cell and can induce a humoral immune response, and is 23mer, 24mer, 25mer, 26mer, 27mer, 28mer, 29mer, 30mer, 31mer, 32mer, 33mer, 34mer, 35mer.
  • a 1 is a first auxiliary moiety or absent, and the first auxiliary moiety has a linker function, a protective function, a cyclic form forming function, a dummy function, and/or a function to increase solubility, and may optionally include a non-standard amino acid, ,
  • a 2 is a second auxiliary moiety or absent, wherein the second auxiliary moiety has a linker function, a protective function, a cyclic form forming function, a dummy function, and/or a function to increase solubility, and may optionally include a non-standard amino acid, ,
  • a 3 is a third auxiliary moiety or absent, wherein the third auxiliary moiety has a linker function, a protective function, a cyclic form forming function, a dummy function, and/or a function to increase solubility, and may optionally include a non-standard amino acid, ,
  • a 4 is a fourth auxiliary moiety or absent, and the fourth auxiliary moiety has a linker function, a protective function, a cyclic form forming function, a dummy function, and/or a function to increase solubility, and may optionally include a non-standard amino acid, ,
  • B 1 is a B-cell epitope, a fragment of apolipoprotein B-100 or a mimotope of apolipoprotein B-100, and can induce an antibody targeting apolipoprotein B-100,
  • the B 2 is a B-cell epitope, a fragment of apolipoprotein B-100 or a mimotope of apolipoprotein B-100, and can induce an antibody targeting apolipoprotein B-100,
  • the T is a Th epitope, characterized in that it can be recognized by CD4+ T-cell, 8mer, 9mer, 10mer, 11mer, 12mer, 13mer, 14mer, 15mer, 16mer, 17mer, 18mer, 19mer, 20mer, 21mer, 22mer, 23mer, 24mer, 25mer, 26mer, 27mer, 28mer, 29mer, 30mer, 31mer, or 32mer.
  • the A 1 , A 2 , A 3 , and A 4 are each independently a, Z, aZ, Za, RN, AF, CR, LS, KT, KH, RF, DP, SV, GL, ZRNV (SEQ ID NO: 36), aZRN (SEQ ID NO: 37), IAFZ (SEQ ID NO: 38), AFZa (SEQ ID NO: 39), RNVP (SEQ ID NO: 40), WIAF (SEQ ID NO: 41), ZCRF (SEQ ID NO: 42), aZCR (SEQ ID NO: 43) ), YLSZ (SEQ ID NO: 44), LSZa (SEQ ID NO: 45), CRFR (SEQ ID NO: 46), VYLS (SEQ ID NO: 47), ZKTT (SEQ ID NO: 48), aZKT (SEQ ID NO: 49), NKHZ (SEQ ID NO: 50) , KHZa (SEQ ID NO: 51), GSHHHHHHGSDD
  • the B 1 and B 2 are each independently,
  • RNVPPIFNDVYWIAF SEQ ID NO: 6
  • CRFRGLISLSQVYLS SEQ ID NO: 7
  • KTTKQSFDLSVKAQYKKNKH SEQ ID NO: 8
  • RNVPPIFNDVY SEQ ID NO: 9
  • CRFRGLISLSQ SEQ ID NO: 10
  • KTTKQSFDLSVK SEQ ID NO: 12, FRRNLSPPIFNDV
  • FRRNLSPPIFNDV FRRNLSPPIFNDV
  • FRRNLSPPIFNDV SEQ ID NO: 13
  • KTTKQSFDLSVKAQYKK SEQ ID NO: 14
  • RNVPPIFNDVYWI SEQ ID NO: 15
  • CRFRGLISLSQVY SEQ ID NO: 16
  • KTTKQSFDLSVKAQYKKN SEQ ID NO: 17
  • PIFNDVYWIAF SEQ ID NO: 18
  • GLISLSQV SEQ ID NO: 20 PPIFNDVYWIAF
  • SEQ ID NO: 21 GLISLSQ
  • a means D-form alanine
  • Z means 6-aminohexanoic acid
  • T is selected from:
  • VAAWTLKAA (SEQ ID NO: 1), PKYVKQNTLKLAT (SEQ ID NO: 2), ILMQYIKANSKFIGI (SEQ ID NO: 3), QSIALSSLMVAQAIP (SEQ ID NO: 4), ILMQYIKANSKFIGIPMGLPQSIALSSLMVAQ (SEQ ID NO: 5), WGALGFFPDGFL (SEQ ID NO: 5), PGALGFFPDGFL (SEQ ID NO: 5) 163), MQWNSTALHQALQDP (SEQ ID NO: 164), MQWNSTTFHQTLQDPRVRGLYFPAGG (SEQ ID NO: 165), FFLLTRILTI (SEQ ID NO: 166), FFLLTRILTIPQSLD (SEQ ID NO: 167), TSLNFLGGTTVCLGQ (SEQ ID NO: 168), QSLNFLGGTTVCLGQ (SEQ ID NO: 170) ), CTTPAQGNSMFPSC (SEQ ID NO: 169
  • X 1 is tyrosine (Tyr), phenylalanine (Phe), or L-cyclohexylalanine,
  • X 2 is a hydrophobic amino acid, leucine (Leu), or isoleucine (Ile),
  • X 3 is an aromatic or cyclic amino acid, phenylalanine (Phe), tyrosine (Tyr), or histidine (His),
  • X 4 is aliphatic long chain amino acids, isoleucine (Ile), or valine (Val);
  • X 5 is a charged amino acid or arginine (Arg), leucine (Leu), aspartic acid (Asp), glutamine (Gln), or glycine (Gly);
  • X 1 is tyrosine (Tyr), phenylalanine (Phe), or L-cyclohexylalanine,
  • X 2 is lysine (Lys), tryptophan (Trp), tyrosine (Tyr), arginine (Arg), alanine (Ala), or methionine (Met),
  • X 3 is asparagine (Asn), tryptophan (Trp), tyrosine (Tyr), valine (Val), histidine (His), lysine (Lys), or alanine (Ala); and
  • (Cha) means L-cyclohexylalanins
  • X means any standard amino acid.
  • the peptide unit is recognized by CD4+ T-cell and can induce a humoral immune response, and is 23mer, 24mer, 25mer, 26mer, 27mer, 28mer, 29mer, 30mer, 31mer, 32mer, 33mer, 34mer, 35mer.
  • a 1 is a first auxiliary moiety or absent, and the first auxiliary moiety has a linker function, a protective function, a cyclic form forming function, a dummy function, and/or a function to increase solubility, and may optionally include a non-standard amino acid, ,
  • a 2 is a second auxiliary moiety or absent, wherein the second auxiliary moiety has a linker function, a protective function, a cyclic form forming function, a dummy function, and/or a function to increase solubility, and may optionally include a non-standard amino acid, ,
  • a 3 is a third auxiliary moiety or absent, wherein the third auxiliary moiety has a linker function, a protective function, a cyclic form forming function, a dummy function, and/or a function to increase solubility, and may optionally include a non-standard amino acid, ,
  • a 4 is a fourth auxiliary moiety or absent, and the fourth auxiliary moiety has a linker function, a protective function, a cyclic form forming function, a dummy function, and/or a function to increase solubility, and may optionally include a non-standard amino acid, ,
  • B is a B-cell epitope, a fragment of apolipoprotein B-100 or a mimotope of apolipoprotein B-100, and can induce an antibody targeting apolipoprotein B-100,
  • the T 1 is a Th epitope, characterized in that it can be recognized by CD4+ T-cell, 8mer, 9mer, 10mer, 11mer, 12mer, 13mer, 14mer, 15mer, 16mer, 17mer, 18mer, 19mer, 20mer, 21mer , having a length of 22mer, 23mer, 24mer, 25mer, 26mer, 27mer, 28mer, 29mer, 30mer, 31mer, or 32mer,
  • the T 2 is a Th epitope, characterized in that it can be recognized by CD4+ T-cell, 8mer, 9mer, 10mer, 11mer, 12mer, 13mer, 14mer, 15mer, 16mer, 17mer, 18mer, 19mer, 20mer, 21mer , 22mer, 23mer, 24mer, 25mer, 26mer, 27mer, 28mer, 29mer, 30mer, 31mer, or 32mer.
  • the A 1 , A 2 , A 3 , and A 4 are each independently a, Z, aZ, Za, RN, AF, CR, LS, KT, KH, RF, DP, SV, GL, ZRNV (SEQ ID NO: 36), aZRN (SEQ ID NO: 37), IAFZ (SEQ ID NO: 38), AFZa (SEQ ID NO: 39), RNVP (SEQ ID NO: 40), WIAF (SEQ ID NO: 41), ZCRF (SEQ ID NO: 42), aZCR (SEQ ID NO: 43) ), YLSZ (SEQ ID NO: 44), LSZa (SEQ ID NO: 45), CRFR (SEQ ID NO: 46), VYLS (SEQ ID NO: 47), ZKTT (SEQ ID NO: 48), aZKT (SEQ ID NO: 49), NKHZ (SEQ ID NO: 50) , KHZa (SEQ ID NO: 51), GSHHHHHHGSDD
  • the B is,
  • RNVPPIFNDVYWIAF SEQ ID NO: 6
  • CRFRGLISLSQVYLS SEQ ID NO: 7
  • KTTKQSFDLSVKAQYKKNKH SEQ ID NO: 8
  • RNVPPIFNDVY SEQ ID NO: 9
  • CRFRGLISLSQ SEQ ID NO: 10
  • KTTKQSFDLSVK SEQ ID NO: 12, FRRNLSPPIFNDV
  • FRRNLSPPIFNDV FRRNLSPPIFNDV
  • FRRNLSPPIFNDV SEQ ID NO: 13
  • KTTKQSFDLSVKAQYKK SEQ ID NO: 14
  • RNVPPIFNDVYWI SEQ ID NO: 15
  • CRFRGLISLSQVY SEQ ID NO: 16
  • KTTKQSFDLSVKAQYKKN SEQ ID NO: 17
  • PIFNDVYWIAF SEQ ID NO: 18
  • GLISLSQV SEQ ID NO: 20 PPIFNDVYWIAF
  • SEQ ID NO: 21 GLISLSQ
  • a means D-form alanine
  • Z means 6-aminohexanoic acid
  • T 1 and T 2 are each independently selected from:
  • VAAWTLKAA (SEQ ID NO: 1), PKYVKQNTLKLAT (SEQ ID NO: 2), ILMQYIKANSKFIGI (SEQ ID NO: 3), QSIALSSLMVAQAIP (SEQ ID NO: 4), ILMQYIKANSKFIGIPMGLPQSIALSSLMVAQ (SEQ ID NO: 5), WGALGFFPDGFL (SEQ ID NO: 5), PGALGFFPDGFL (SEQ ID NO: 5) 163), MQWNSTALHQALQDP (SEQ ID NO: 164), MQWNSTTFHQTLQDPRVRGLYFPAGG (SEQ ID NO: 165), FFLLTRILTI (SEQ ID NO: 166), FFLLTRILTIPQSLD (SEQ ID NO: 167), TSLNFLGGTTVCLGQ (SEQ ID NO: 168), QSLNFLGGTTVCLGQ (SEQ ID NO: 170) ), CTTPAQGNSMFPSC (SEQ ID NO: 169
  • X 1 is tyrosine (Tyr), phenylalanine (Phe), or L-cyclohexylalanine,
  • X 2 is a hydrophobic amino acid, leucine (Leu), or isoleucine (Ile),
  • X 3 is an aromatic or cyclic amino acid, phenylalanine (Phe), tyrosine (Tyr), or histidine (His),
  • X 4 is aliphatic long chain amino acids, isoleucine (Ile), or valine (Val);
  • X 5 is a charged amino acid or arginine (Arg), leucine (Leu), aspartic acid (Asp), glutamine (Gln), or glycine (Gly);
  • X 1 is tyrosine (Tyr), phenylalanine (Phe), or L-cyclohexylalanine,
  • X 2 is lysine (Lys), tryptophan (Trp), tyrosine (Tyr), arginine (Arg), alanine (Ala), or methionine (Met),
  • X 3 is asparagine (Asn), tryptophan (Trp), tyrosine (Tyr), valine (Val), histidine (His), lysine (Lys), or alanine (Ala); and
  • (Cha) means L-cyclohexylalanins
  • X means any standard amino acid.
  • the peptide unit is recognized by CD4+ T-cell and can induce a humoral immune response, and is 23mer, 24mer, 25mer, 26mer, 27mer, 28mer, 29mer, 30mer, 31mer, 32mer, 33mer, 34mer, 35mer.
  • a 1 is a first auxiliary moiety or absent, and the first auxiliary moiety has a linker function, a protective function, a cyclic form forming function, a dummy function, and/or a function to increase solubility, and may optionally include a non-standard amino acid, ,
  • a 2 is a second auxiliary moiety or absent, wherein the second auxiliary moiety has a linker function, a protective function, a cyclic form forming function, a dummy function, and/or a function to increase solubility, and may optionally include a non-standard amino acid, ,
  • a 3 is a third auxiliary moiety or absent, wherein the third auxiliary moiety has a linker function, a protective function, a cyclic form forming function, a dummy function, and/or a function to increase solubility, and may optionally include a non-standard amino acid, ,
  • a 4 is a fourth auxiliary moiety or absent, and the fourth auxiliary moiety has a linker function, a protective function, a cyclic form forming function, a dummy function, and/or a function to increase solubility, and may optionally include a non-standard amino acid, ,
  • the B 1 is a B-cell epitope, a fragment of apolipoprotein B-100 or a mimotope of apolipoprotein B-100, and can induce an antibody targeting apolipoprotein B-100,
  • the B 2 is a B-cell epitope, a fragment of apolipoprotein B-100 or a mimotope of apolipoprotein B-100, and can induce an antibody targeting apolipoprotein B-100,
  • the T 1 is a Th epitope, characterized in that it can be recognized by CD4+ T-cell, 8mer, 9mer, 10mer, 11mer, 12mer, 13mer, 14mer, 15mer, 16mer, 17mer, 18mer, 19mer, 20mer, 21mer , having a length of 22mer, 23mer, 24mer, 25mer, 26mer, 27mer, 28mer, 29mer, 30mer, 31mer, or 32mer,
  • the T 2 is a Th epitope, characterized in that it can be recognized by CD4+ T-cell, 8mer, 9mer, 10mer, 11mer, 12mer, 13mer, 14mer, 15mer, 16mer, 17mer, 18mer, 19mer, 20mer, 21mer , 22mer, 23mer, 24mer, 25mer, 26mer, 27mer, 28mer, 29mer, 30mer, 31mer, or 32mer.
  • the A 1 , A 2 , A 3 , and A 4 are each independently a, Z, aZ, Za, RN, AF, CR, LS, KT, KH, RF, DP, SV, GL, ZRNV (SEQ ID NO: 36), aZRN (SEQ ID NO: 37), IAFZ (SEQ ID NO: 38), AFZa (SEQ ID NO: 39), RNVP (SEQ ID NO: 40), WIAF (SEQ ID NO: 41), ZCRF (SEQ ID NO: 42), aZCR (SEQ ID NO: 43) ), YLSZ (SEQ ID NO: 44), LSZa (SEQ ID NO: 45), CRFR (SEQ ID NO: 46), VYLS (SEQ ID NO: 47), ZKTT (SEQ ID NO: 48), aZKT (SEQ ID NO: 49), NKHZ (SEQ ID NO: 50) , KHZa (SEQ ID NO: 51), GSHHHHHHGSDD
  • the B 1 and B 2 are each independently,
  • RNVPPIFNDVYWIAF SEQ ID NO: 6
  • CRFRGLISLSQVYLS SEQ ID NO: 7
  • KTTKQSFDLSVKAQYKKNKH SEQ ID NO: 8
  • RNVPPIFNDVY SEQ ID NO: 9
  • CRFRGLISLSQ SEQ ID NO: 10
  • KTTKQSFDLSVK SEQ ID NO: 12, FRRNLSPPIFNDV
  • FRRNLSPPIFNDV FRRNLSPPIFNDV
  • FRRNLSPPIFNDV SEQ ID NO: 13
  • KTTKQSFDLSVKAQYKK SEQ ID NO: 14
  • RNVPPIFNDVYWI SEQ ID NO: 15
  • CRFRGLISLSQVY SEQ ID NO: 16
  • KTTKQSFDLSVKAQYKKN SEQ ID NO: 17
  • PIFNDVYWIAF SEQ ID NO: 18
  • GLISLSQV SEQ ID NO: 20 PPIFNDVYWIAF
  • SEQ ID NO: 21 GLISLSQ
  • a means D-form alanine
  • Z means 6-aminohexanoic acid
  • T 1 and T 2 are each independently selected from:
  • VAAWTLKAA (SEQ ID NO: 1), PKYVKQNTLKLAT (SEQ ID NO: 2), ILMQYIKANSKFIGI (SEQ ID NO: 3), QSIALSSLMVAQAIP (SEQ ID NO: 4), ILMQYIKANSKFIGIPMGLPQSIALSSLMVAQ (SEQ ID NO: 5), WGALGFFPDGFL (SEQ ID NO: 5), PGALGFFPDGFL (SEQ ID NO: 5) 163), MQWNSTALHQALQDP (SEQ ID NO: 164), MQWNSTTFHQTLQDPRVRGLYFPAGG (SEQ ID NO: 165), FFLLTRILTI (SEQ ID NO: 166), FFLLTRILTIPQSLD (SEQ ID NO: 167), TSLNFLGGTTVCLGQ (SEQ ID NO: 168), QSLNFLGGTTVCLGQ (SEQ ID NO: 170) ), CTTPAQGNSMFPSC (SEQ ID NO: 169
  • X 1 is tyrosine (Tyr), phenylalanine (Phe), or L-cyclohexylalanine,
  • X 2 is a hydrophobic amino acid, leucine (Leu), or isoleucine (Ile),
  • X 3 is an aromatic or cyclic amino acid, phenylalanine (Phe), tyrosine (Tyr), or histidine (His),
  • X 4 is aliphatic long chain amino acids, isoleucine (Ile), or valine (Val);
  • X 5 is a charged amino acid or arginine (Arg), leucine (Leu), aspartic acid (Asp), glutamine (Gln), or glycine (Gly);
  • X 1 is tyrosine (Tyr), phenylalanine (Phe), or L-cyclohexylalanine,
  • X 2 is lysine (Lys), tryptophan (Trp), tyrosine (Tyr), arginine (Arg), alanine (Ala), or methionine (Met),
  • X 3 is asparagine (Asn), tryptophan (Trp), tyrosine (Tyr), valine (Val), histidine (His), lysine (Lys), or alanine (Ala); and
  • (Cha) means L-cyclohexylalanins
  • X means any standard amino acid.
  • Example 91 a peptide comprising two or more peptide units
  • Example 92 a peptide comprising 2 to 8 peptide units
  • Example 91 The peptide according to Example 91, wherein the peptide further comprises an auxiliary portion having a cyclic form forming function at the N-terminus and the C-terminus, and the peptide forms a cyclic form through the auxiliary portion.
  • Example 97 encoding nucleic acid of each monomeric structure, non-standard amino acids are not included
  • Example 98 The DNA according to Example 98, which is represented by a sequence selected from:
  • Example 100 monomer encoding RNA sequence limitation
  • RNA according to Example 98 which is represented by a sequence selected from:
  • a vector comprising the nucleic acid of any one of Examples 96 to 100.
  • Example 102 vector limited
  • the vector according to embodiment 101 wherein the vector is selected from the group consisting of plasmids, retroviruses, lentiviruses, adenoviruses, adeno-associated viruses, vacciniaviruses, poxviruses and herpes simplex viruses.
  • nucleic acid according to any one of Examples 96-98, wherein the nucleic acid is codon-optimized for a species selected in mammals.
  • nucleic acid according to any one of Examples 96-98, wherein the nucleic acid is human codon-optimized.
  • nucleic acid according to any one of Examples 96-98, wherein the nucleic acid is codon-optimized for a species selected from among prokaryotes.
  • Example 106 E. coli codon-optimized nucleic acids
  • nucleic acid according to any one of Examples 96 to 98, wherein the nucleic acid is E. coli codon-optimized.
  • Example 107 pharmaceutical composition for immunotherapy
  • a pharmaceutical composition for immunotherapy comprising:
  • Example 108 pharmaceutical composition for the treatment of obesity
  • a pharmaceutical composition for the treatment of obesity comprising:
  • the adjuvant is water, saline, dextrose, ethanol, glycerol, sodium chloride, dextrose, mannitol, sorbitol, lactose, gelatin, albumin, aluminum hydroxide, Freund's incomplete Freund's Incomplete Adjuvant and Complete Adjuvant (Pifco Laboratories, Detroit, Mich.), Merck Adjuvant 65 (Merck and Company, Inc., Rahway, NJ.), Alhydrogel (Al(OH) 3 ) , aluminum hydroxide gel (alum), or aluminum salts such as aluminum phosphate, AS04 series, MF, squalene, MF59, QS21, calcium, iron or zinc salts, insoluble suspensions of acylated tyrosine, acylated fructose, cationic or anionic Induced polysaccharides, polyphosphazenes, biodegradable microspheres, and Quil A, to
  • compositions comprising Encoding Nucleic Acids
  • Example 110 formulated encoding nucleic acids
  • a formulated encoding nucleic acid characterized in that the nucleic acid of any one of Examples 96 to 106 is formulated using a viral vector and/or a non-viral vector.
  • Example 111 viral vector limitation
  • retrovirus lentivirus
  • adenovirus adeno-associated virus
  • vaccinia virus poxvirus
  • herpes simplex virus lentivirus
  • the formulated nucleic acid of embodiment 110 wherein the formulated nucleic acid is selected from:
  • nucleic acids naked nucleic acid; cationic peptide-complex nucleic acid (Protamine); positively charged oil-water cationic nanoemulsion containing nucleic acid; Nucleic acids combined with chemically modified dendrimers and complexed with polyethylene glycol and PEG-lipids (Modified dendrimer nanoparticles); nucleic acid complexed with protamine in PEG-lipid nanoparticles (Protamine liposome); nucleic acids complexed with cationic polymers such as polyethylenimine and PEI; Cationic polymer liposomes complexed with cationic polymers such as PEI and lipid components; nucleic acids complexed with polysaccharide polymers such as chitosan (Polysaccharide particles); Cationic lipid nanoparticles and polymers complexed with nucleic acids; cationic lipids and nucleic acids complexed with cholesterol (Cationic lipid-cholesterol nanoparticles); and cationic
  • Example 113 pharmaceutical composition for immunotherapy comprising formulated nucleic acid
  • a pharmaceutical composition for immunotherapy comprising:
  • Example 114 pharmaceutical composition for the treatment of obesity comprising formulated nucleic acid
  • a pharmaceutical composition for the treatment of obesity comprising:
  • composition according to any one of Examples 113 to 114, wherein the adjuvant is at least one selected from the following:
  • LNP lipid nanoparticles
  • aluminum salts 1,2-dioleyl-3-trimethylammonium-propane chloride
  • MF59 Novartis adjuvant
  • CD70 CD40 ligand
  • CD40L TriMix
  • protamine acting through TLR7 signaling and/or monophosphoryl lipid A from bacteria.
  • composition according to any one of Examples 113 to 114, wherein the pharmaceutical composition comprises one or more additional ingredients selected from:
  • lipids lipids; salts to balance body acidity; sucrose to maintain stability during repeated freezing-thawing; and vaccine stability enhancing substances.
  • the lipid is at least one selected from SM-102, PEG2000-DMG, DPSC, cholesterol, and ALC-0315,
  • the salt is at least one selected from sodium acetate, potassium chloride, monobasic potassium phosphate, sodium chloride, and dibasic sodium phosphate dehydrate,
  • the vaccine stability improving substance is a pharmaceutical composition, characterized in that at least one selected from acetic acid, acid stabilizer (tromethamine), and ethanol.
  • Example 120 immunotherapeutic use (Second medical use)
  • Example 121 obesity treatment use (Second medical use)
  • Immunotherapy methods comprising:
  • Example 123 method for treating obesity
  • a method of treating obesity comprising:
  • Example 124 a sequence similar to a peptide unit
  • peptide unit 80% or more, 81% or more, 82% or more, 83% or more, 84% or more, 85% or more, 86% or more, 87% or more, 88% or more, 89% or more with the peptide unit of any one of Examples 1 to 90 At least 90%, at least 91%, at least 92%, at least 93%, at least 94%, at least 95%, at least 96%, at least 97%, at least 98%, at least 99%, or at least 100% matches. a peptide unit.
  • This peptide was commissioned by a peptide synthesis company (Anigen, Korea, Gwangju City) to obtain a manufactured peptide.
  • the peptide of the present invention can be synthesized using conventionally known techniques such as liquid peptide synthesis, solid phase peptide synthesis, or small peptide fragments convergent, and the synthesis method is not limited.
  • the OTP3 peptide of the present invention can be synthesized using the convergent method of small peptide fragments. In this method, the long-chain peptide is cleaved at a site where it can be easily bound and based on this, several parts are synthesized. After each preparation, they are combined with each other to finally synthesize the desired peptide. Since the above Convergent method has a limitation in that a specific amino acid must be present in the peptide sequence, it can be effectively synthesized by combinatory peptide synthesis by appropriately mixing solution phase synthesis and solid phase peptide synthesis methods.
  • the purity of the peptide prepared in Experimental Example 1.1 was measured by performing HPLC analysis (Shimadzu HPLC LabSolutions) using a C-18 reversed-phase column (SHIMADZU C18 analytical column). As for the analysis conditions, the sample was separated and developed into an aqueous solution of 0.05% Trifluoroactate (TFA) and 0.05% TFA Acetotrile solution at 60° C., and then the purity was confirmed by measuring the peak absorbance at a wavelength of 230 nm.
  • TFA Trifluoroactate
  • the molecular weight of the peptide prepared in Experimental Example 1.1 was analyzed using a mass spectrometer (AXIMA Assurance, MALDI-TOF, Shimadzu).
  • the peptide prepared in Experimental Example 1.1 was quantified by measuring the UV extinction coefficient (Ultrospec 3000 Pro UV/VIS spectrophotometer, Pharmacia). Specifically, it was quantified using the extinction coefficient at 280 nm.
  • a composition for in vivo administration was prepared by mixing the peptide prepared in Experimental Example 1.1, Alhydrogel (Al(OH)3, manufactured by InvivoGe), and PHAD (manufactured by Avanti).
  • Alhydrogel Al(OH)3, manufactured by InvivoGe
  • PHAD manufactured by Avanti
  • the prepared peptide powder was dissolved in 100% DMSO (dimethyl sulfoxide) to obtain a concentration of 100 mg/ml.
  • PHAD was dissolved in 100% DMSO to a concentration of 10 mg/mL, and then diluted with distilled water to 1 mg/mL.
  • Alhydrogel adjuvant (Invivogen, USA) and the PHAD solution were added to the mixture of (2).
  • the concentration of the mixed composition was 50 ⁇ g of the peptide, 10 ⁇ g of the PHAD, and 10% (v/v) of the Alhydrogel adjuvant per 100 ⁇ L of 1 dose.
  • reaction mass of (5) was centrifuged at 1400 rpm for 15 minutes, and the supernatant except for about 1 mL on the pellet was removed. After that, 10 mL of PBS was added and mixed.
  • the peptide concentration was 50 ⁇ g/100 ⁇ L (in this case, 30 ⁇ g/100 ⁇ L in Example 4), the PHAD concentration was 10 ⁇ g/100 ⁇ L, and the Alhydrogel adjuvant was 10% (v/v).
  • mice C57BL/6, Balbc and/or ICR species were used as experimental mice (Purchase: Central Laboratory Animals). Although there are some differences by species, on average, 7-week-old mice were purchased and then acclimatized for 1 week, and then used for experiments from 8 weeks of age. Experimental mice were bred in an environment controlled in a constant temperature and humidity environment within a temperature range of 23 ⁇ 1° C. and a relative humidity of 50 ⁇ 5%, and in a 12-hour light room/12 hour dark room. Drinking water and food were provided ad libitum.
  • mice In the case of a normal diet (place of purchase: Central Laboratory Animals), it was composed of 20% protein, 70% carbohydrate, and 10% fat based on total calories. It consisted of a high-fat diet consisting of % carbohydrates and 60% fat. Experimental mice were divided into groups, and dietary conditions and composition administration conditions were varied, and the experiment was conducted with the number of individuals capable of statistical processing for each experimental group. Detailed conditions are as disclosed in each specific experimental example.
  • compositions were administered for each experimental group. All administration compositions were administered by intramuscular injection, and after disinfection of both thigh muscles with an alcohol swab, 50 ⁇ L each, 100 ⁇ L in total were injected.
  • the target antigen is RNVPPIFNDVYWIAF (SEQ ID NO: 6) or ApoB100.
  • the time to check the antibody titer may vary as needed, and was specifically described for each experimental example.
  • compositions for in vivo administration are injected into a test subject, about 200 ⁇ L of blood is collected from the subject's tail vein one week after the injection.
  • the separated serum was diluted to an appropriate concentration, 100 ⁇ L per well was added, and reacted at 37° C. for one hour. At this time, the serum was diluted to 1/20 to 1/1000 in the experiment after the initial injection, and 1/500 to 1/10000 according to the subject during the experiment after the 2nd to 3rd injection, and serial dilution was performed.
  • a positive control a purified monoclonal antibody against the peptide of SEQ ID NO: 41 is used.
  • HRP horseradish peroxidase conjugated to anti-mouse IgG antibody recognizing mouse antibody
  • OPD solution o-phenylenediamine dihydrochloride solution
  • the antibody titer in serum is converted by measuring the extinction coefficient based on the 1 mg/mL concentration of the monoclonal antibody against the target antibody as a positive control.
  • the experimental method for examining the effect of the composition administered in the body in Experimental Example 1.7 on the blood lipid concentration of the test subject is as follows:
  • HDL-C555 High density lipoprotein (HDL) concentration in blood: HDL-C555 (Shinyak Chemicals Co., Ltd.) was used. i) After mixing 10 ⁇ L of blood sample and 10 ⁇ L of precipitation reagent, it was allowed to react at room temperature for at least 10 minutes. ii) The reaction mass was centrifuged at 300 rpm or higher, and the supernatant was separated. iii) After mixing 4 ⁇ L of the supernatant and 300 ⁇ L of the color reagent, the mixture was reacted at 37°C for 5 minutes. iv) For the above reaction, measure the absorbance at 555 nm and calculate the concentration compared to the reference solution.
  • a method for examining the effect of the composition administered in the body according to Experimental Example 1.7 on the adipocyte resolution and adipocyte size by HSL (Hormon sensitive lipase) of the test subject is as follows:
  • reaction When the reaction is complete, pass through a 300 ⁇ m nylon mesh to filter out adipose tissue debris and adipose tissue, then pass through a 40 ⁇ m nylon mesh again to separate adipocytes and macrophages.
  • adipocytes filtered in 1-2) are washed by adding DMEM with 10% FBS and 1% AA and removing the sublayer with a syringe to obtain adipocytes from which collagenase has been removed.
  • norepinephrine is added to a final 10 -5 M.
  • adipocytes obtained in 1-3) are seeded in a 48 well plate at 1.0 x 10 5 cells/ml per well, treated with 10 ⁇ M of DAPI, reacted for 2 hours, and then observed under a microscope.
  • the composition for in vivo administration was administered to the test subject.
  • the dosing cycle was as follows: 7 weeks, 9 weeks, 12 weeks, 15 weeks and 18 weeks of age.
  • Lean denotes a normal weight control group
  • Obese denotes an obesity group induced by a high-fat diet
  • Mock denotes a placebo-administered group (same below).
  • the composition for in vivo administration was administered to the test subject.
  • the dosing cycle was as follows: 8 weeks, 10 weeks, 12 weeks and 14 weeks old.

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Abstract

본 명세서에서 제공하는 펩타이드는 적어도 하나의 펩타이드 단위체를 포함하며, 상기 펩타이드 단위체는 적어도 하나의 B-cell 에피토프, 적어도 하나의 Th 에피토프를 포함하고, 적절한 수의 보조부를 포함할 수 있다. 상기 펩타이드 단위체는 대상의 체내에서 일정 수준 이상의 면역원성을 나타내면서, 미리 의도된 항체만을 균일하게 유도하도록 설계된 부분이다. 또한, 상기 펩타이드 단위체는 비교적 짧은 길이로 설계되어, 합성이 용이하고 생산 단가가 낮다는 특성을 지닌다. 상기 펩타이드는 전술한 펩타이드 단위체의 특성으로 인해, 면역치료제로 사용되기에 적합한 특성을 지닌다. 본 명세서에서는 상기 펩타이드 및 상기 펩타이드 단위체의 설계 원리에 대하여 자세히 개시하고 있다.

Description

면역 치료제용 펩타이드
본 발명은 대상의 체내에 주입되어 체액성 면역반응을 일으키는 펩타이드에 대한 것으로서, 면역 치료제 분야에 대한 기술이다.
면역치료제는 대상의 체내에 유입되어 상기 면역치료제 자체에 대한 체액성 면역반응을 유도하여, 그 결과 생산된 항체를 가지고 특정 질환이나 질병을 치료하는 것을 목적으로 한다. 이때, 상기 "치료"에는 특정 질환이나 질병을 예방하는 것도 포함된다. 면역치료제는 대상의 체내에서 항원-항체 반응을 통해 항체 생산을 유도한다는 점에서 백신과 유사하지만, 상기 항체가 면역치료제 그 자체에 대한 결합능 뿐 아니라, 체내 특정 대상(예를 들어, 체내 특정 조직, 세포, 또는 물질대사 과정에서 생성되는 물질 등)과도 결합능을 가져 특정 질환이나 질병을 치료할 수 있으며, 지속적으로 반복 투여할 수 있다는 점에서 차이가 있다.
본 명세서에서는 대상의 체내에서 미리 설계된 항체를 유도하는 기능을 가지는 펩타이드를 제공하고자 한다.
본 명세서에서는 상기 펩타이드가 포함된 면역 치료제용 조성물을 제공하고자 한다.
본 명세서에서는 상기 펩타이드를 암호화하는 핵산 서열을 제공하고자 한다.
본 명세서에서는 상기 펩타이드 및 상기 펩타이드가 포함된 면역 치료제용 조성물의 용도를 제공하고자 한다.
본 명세서에서는 다음을 포함하는, 길이가 23mer 내지 71mer이고, CD4+ T-cell에 의해 인식되어 체액성 면역반응을 유도할 수 있는 펩타이드 단위체를 제공한다:
적어도 하나의 Th 에피토프, 상기 Th 에피토프의 길이는 8mer 내지 32mer임; 및
적어도 하나의 B-cell 에피토프,
이때, 상기 B-cell 에피토프는 아포지단백 B-100의 절편(fragment), 또는 아포지단백 B-100의 미모토프(mimotope)로, 아포지단백 B-100(Apolipoprotein B-100)을 표적하는 항체를 유도할 수 있음.
일 실시예로, 상기 펩타이드 단위체의 길이는 26mer 내지 50mer이며, 상기 Th 에피토프의 길이는 11mer 내지 13mer인 것을 특징으로 한다.
일 실시예로, 상기 펩타이드 단위체는 하나의 B-cell 에피토프 및 하나의 Th 에피토프를 포함하며, 상기 펩타이드 단위체의 길이는 26mer 내지 45mer 인 것을 특징으로 한다.
일 실시예로, 상기 펩타이드 단위체는 하나의 B-cell 에피토프, 및 각각 제1 Th 에피토프, 제2 Th 에피토프로 지칭되는 2개의 Th 에피토프를 포함하며, 상기 펩타이드 단위체의 길이는 37mer 내지 50mer이고, 상기 제1 Th 에피토프는 상기 B-cell 에피토프 및 상기 제2 Th 에피토프 사이에 연결된 것을 특징으로 한다.
일 실시예로, 상기 펩타이드 단위체는 제1 B-cell 에피토프, 제2 B-cell 에피토프로 지칭되는 두 개의 B-cell 에피토프, 및 하나의 Th 에피토프를 포함하고, 상기 펩타이드 단위체의 길이는 45mer 내지 50mer이며, 상기 제2 B-cell 에피토프는 상기 제1 B-cell 에피토프 및 상기 Th 에피토프 사이에 연결된 것을 특징으로 한다.
일 실시예로, 상기 펩타이드 단위체는 제1 B-cell 에피토프, 제2 B-cell 에피토프로 지칭되는 두 개의 B-cell 에피토프, 및 하나의 Th 에피토프를 포함하고, 상기 펩타이드 단위체의 길이는 45mer 내지 50mer이며, 상기 Th 에피토프는 상기 제1 B-cell 에피토프 및 상기 제2 B-cell 에피토프 사이에 연결된 것을 특징으로 한다.
본 명세서에서는 상기 펩타이드 단위체, 또는 상기 펩타이드 중 비표준 아미노산(nonstandard amino acid)를 포함하지 않는 것을 암호화하는 핵산을 제공한다.
본 명세서에서는 상기 펩타이드 단위체가 2개 이상 5개 이하로 연결된 펩타이드를 제공한다.
본 명세서에서는 다음을 포함하는 비만치료용 약학적 조성물을 제공한다: 상기 펩타이드 단위체 또는 상기 펩타이드; 및 어쥬번트(adjuvants).
본 명세서에서는 다음을 포함하는 비만 치료 방법을 제공한다: 상기 약학적 조성물을 대상의 체내에 투여하는 것.
본 명세서에서는 상기 펩타이드 단위체, 또는 상기 펩타이드의 비만 치료 용도를 제공한다.
본 명세서에서는 상기 펩타이드 단위체, 또는 상기 펩타이드의 비만 치료제 제조 용도를 제공한다.
본 명세서에서 제공하는 펩타이드는 대상의 체내에 주입되는 경우, 미리 설계된 항원 부위에 특이적으로 결합하며 특정 생리적 기능을 갖춘 항체의 생산을 유도하는 효과가 있다.
도 1 내지 도 3은 실험예 2에 따른 펩타이드 효과 확인 실험 결과를 나타낸 것으로, 각 실험군에 따라 주령 별 체중 변화를 측정해 도시한 그래프이다.
도 4는 실험예 3에 따른 펩타이드 효과 확인 실험 결과를 나타낸 것으로, 각 실험군 별 실험 대상의 주령 별 체중을 측정해 도시한 그래프이다. Lean은 정상 체중 대조군, Obesity는 고지방 식이에 의해 유도된 비만군, Mock은 위약 투여군, 3H-OTP는 Group 2-1을 나타낸다.
도 5는 실험예 3에 따른 펩타이드 효과 확인 실험 결과를 나타낸 것으로, 각 실험군 별 실험 대상에게서 나타나는 항체 역가를 측정해 도시한 그래프이다. Obesity는 고지방 식이에 의해 유도된 비만군, Mock은 위약 투여군, 3H-OTP는 Group 2-1을 나타낸다.
도 6은 실험예 3에 따른 펩타이드 효과 확인 실험 결과를 나타낸 것으로, 각 실험군 별 실험 대상의 지방세포 내 호르몬 민감성 지방분해효소(hormone sensitive lipase)의 지방 분해능을 측정하여 도시한 그래프이다. Basal은 노르에피네프린을 처리하지 않은 경우, Hormone은 노르에피네프린을 처리한 경우를 나타낸다. Lean은 정상 체중 대조군, Obesity는 고지방 식이에 의해 유도된 비만군, Mock은 위약 투여군, 3H-OTP는 Group 2-1을 나타낸다. (a) 105 개의 지방세포 당 글리세롤 분비 농도, (b) 지방 세포 1g 당 글리세롤 분비 농도.
도 7은 실험예 3에 따른 펩타이드 효과 확인 실험 결과를 나타낸 것으로, 각 실험군 별 실험 대상의 지방 세포 크기를 측정하여 나타낸 사진이다. Lean은 정상 체중 대조군, Obese는 고지방 식이에 의해 유도된 비만군을 나타낸다. 각각 DAPI 염색 이미지, LipidTOX 염색 이미지, 및 Merge 이미지를 나타낸다.
도 8은 실험예 3에 따른 펩타이드 효과 확인 실험 결과를 나타낸 것으로, 각 실험군 별 실험 대상의 지방 세포 크기를 측정하여 나타낸 사진이다. 각 실험군 별 지방세포 핵 및 지질에 대한 DAPI 염색 이미지를 나타낸다. Lean은 정상체중 대조군, Obese는 고지방 식이에 의해 유도된 비만군, Mock은 위약 투여군이며, 3H-OTP는 Group 2-1을 나타낸다.
도 9는 실험예 3에 따른 펩타이드 효과 확인 실험 결과를 나타낸 것으로, 각 실험군 별 실험 대상의 혈중 지질 농도를 측정하여 도시한 그래프이다. TG는 트리글리세라이드(triglyceride), NEFA는 비 에스테르화 지방산(non-esterified fatty acid), CHOL은 콜레스테롤(cholesterol), HDL은 고밀도 지질단백질(high-density lipoprotein), LDL은 저밀도 지질단백질(low-density lipoprotein)을 의미한다.
도 10은 실험예 4에 따른 펩타이드 효과 확인 실험 결과를 나타낸 것으로, 각 실험군 별 실험 대상의 주령 별 체중을 측정하여 도시한 그래프이다. Lean은 정상 체중 대조군, Obese는 고지방 식이에 의해 유도된 비만군, Mock은 위약 투여군, 3H-OTP 30ug은 Group 3-2, 3H-OTP 50 ug은 Group 3-1을 나타낸다. 참고적으로, Group 2-1을 의미하는 3H-OTP-2W 50 ug에 대한 그래프도 같이 도시하였다.
도 11은 실험예 4에 따른 펩타이드 효과 확인 실험 결과를 나타낸 것으로, 각 실험군 별 실험 대상의 항체 역가를 측정하여 도시한 그래프이다. Lean은 정상 체중 대조군, Obese는 고지방 식이에 의해 유도된 비만군, Mock은 위약 투여군, 3H-OTP 30ug은 Group 3-2, 3H-OTP 50 ug은 Group 3-1을 나타낸다.
도 12는 실험예 5에 따른 펩타이드 효과 확인 실험 결과를 나타낸 것으로, 각 실험군 별 실험 대상의 주령 별 체중을 측정하여 도시한 그래프이다. Lean은 정상 체중 대조군, Obese는 고지방 식이에 의해 유도된 비만군, 3H-OTP는 Group 4-1을 의미한다.
도 13은 실험예 6에 따른 펩타이드 효과 확인 실험 결과를 나타낸 것으로, 각 실험군 별 실험 대상의 주령 별 체중을 측정한 후, 11주령의 체중에 비해 16주령에서 증가된 체중을 도시한 그래프이다. Wild(+/+)-Lean은 정상 체중 대조군, Wild(+/+)는 Group 5-1, Hetero(+/-)는 Group 5-2, Homo(-/-)는 Group 5-3을 의미한다.
도 14 내지 도 22는 실험예 7에 따른 펩타이드 효과 확인 실험 결과를 나타낸 것으로, 각 실험군 별 실험 대상의 주령 별 체중을 측정하여 도시한 그래프이다. Lean은 정상 체중 대조군, Obese는 고지방 식이에 의해 유도된 비만군, P1은 Group 6-1, P2는 Group 6-2, P3는 Group 6-3, P4는 Group 6-4, P5는 Group 6-5, P6는 Group 6-6, P7는 Group 6-7, P8는 Group 6-8, P9는 Group 6-9를 의미한다.
도 23 내지 도 25는 실험예 7에 따른 펩타이드 효과 확인 실험 결과를 나타낸 것으로, 각 실험군 별 실험 대상의 11주령, 16주령, 19주령일 때의 항체 역가를 기재한 표이다. Lean은 정상 체중 대조군, Obese는 고지방 식이에 의해 유도된 비만군, P1은 Group 6-1, P2는 Group 6-2, P3는 Group 6-3, P4는 Group 6-4, P5는 Group 6-5, P7는 Group 6-7, P8는 Group 6-8, P9는 Group 6-9를 의미한다. 또한, 각 표의 각 실험군 별 "No" 열의 레이블로 구분되는 값은 각 실험군에 속한 개별 개체의 실험 결과를 의미하며, ave는 전체 평균, sd는 전체의 표준편차, se는 전체의 표준 오차를 의미한다.
이하, 첨부된 도면을 참조하여, 발명의 내용을 특정한 구현예와 예시들을 통해 더욱 상세하게 설명한다. 상기 첨부된 도면은 발명의 일부 구현예를 포함하지만, 모든 구현예를 포함하고 있지는 않다는 점에 유의해야 한다. 본 명세서에 의해 개시되는 발명의 내용은 다양한 형태로 구체화될 수 있으며, 여기에 설명되는 특정 구현예로 제한되지 않는다. 이러한 구현예들은 본 명세서에 적용되는 법적 요건을 만족시키기 위해 제공되는 것으로 보아야 한다. 본 명세서에 개시된 발명이 속한 기술분야에 있어 통상의 기술자라면, 본 명세서에 개시된 발명의 내용에 대한 많은 변형 및 다른 구현예들을 떠올릴 수 있을 것이다. 따라서, 본 명세서에서 개시된 발명의 내용은 여기에 기재된 특정 구현예로 제한되지 않으며, 이에 대한 변형 및 다른 구현예들도 청구범위 내에 포함되는 것으로 이해되어야 한다.
일반적인 용어의 정의(DEFINITIONS)
약
본 명세서에서 사용되는 "약"이라는 용어는 어떤 수량에 거의 가까운 정도를 의미하며, 참조 양, 수준, 값, 수, 빈도, 퍼센트, 치수, 크기, 양, 중량 또는 길이에 대해 30, 25, 20, 25, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 또는 1% 정도로 변하는 양, 수준, 값, 수, 빈도, 퍼센트, 치수, 크기, 양, 중량 또는 길이를 의미한다.
펩타이드
본 명세서에서 사용되는 "펩타이드"라는 용어는 아미노산의 중합체를 의미한다. 상기 펩타이드라는 용어는 소수의 아미노산이 연결된 형태를 지칭하며, 단백질(protein)과 구분하기 위하여 주로 사용된다. 단백질과 펩타이드를 구분하는 명확한 기준은 없지만, 달리 정의되지 않는 경우, 본 명세서에서는 약 200개의 아미노산 중합체를 펩타이드, 그 이상은 단백질로 지칭한다. 상기 "펩타이드"라는 용어는 그 외 당업계 통상의 기술자에게 인식되는 의미를 모두 포함할 수 있다.
대상
본 명세서에서 사용되는 "대상"이라는 용어는 특정 물질(예를 들어, 펩타이드 등)에 노출되는 객체가 되는 유기체를 의미한다. 상기 대상은 인간, 동물 등의 독립적인 유기체를 의미할 수도 있고, 조직의 일부, 세포 등 상기 독립적인 유기체의 일부 구성을 의미할 수도 있다. 이러한 의미는 문맥에 따라 적절하게 해석될 수 있다. 또한, 상기 "대상"이라는 용어는 그 외 당업계 통상의 기술자에게 인식되는 의미를 모두 포함할 수 있다.
면역 치료제
본 명세서에서 사용되는 "면역 치료제"라는 용어는 일반적인 치료제, 또는 백신과는 구분되는 개념이다. 상기 면역 치료제는 대상의 체내에 주입되어 상기 면역 치료제 자체에 대한 체액성 면역 반응을 유도한다는 점은 기존의 백신과 같으나, 상기 체액성 면역 반응의 결과 유도된 항체가 상기 면역 치료제 자체 뿐 아니라, 체내 특정 조직, 세포(예를 들어, 세포 표면에 존재하는 수용체), 또는 물질대사 과정에서 생성되는 특정 물질(예를 들어, 펩타이드, 지질, 단백질, 및/또는 당류)과 결합능을 가짐으로써, 특정 질환이나 질병을 치료할 수 있으며, 지속적으로 반복 투여할 수 있다는 점에서 차이가 있다. 따라서, 상기 면역 치료제는 일반적으로 목표하는 체내 특정 조직, 세포, 또는 물질과 결합능을 가지는 항체를 유도하기 위해 설계된 항원을 포함한다. 달리 정의되지 않는 한, 용어 "면역 치료제"는 전술한 기능을 가지는 펩타이드, 단백질, 지질, 당류, 및/또는 그 복합체 등 통상의 기술자가 적절히 사용할 수 있는 항원을 모두 포함하는 것으로 해석된다. 상기 "면역 치료제"라는 용어는 좀 더 한정적으로, "체액성 면역 치료제(humoral-immunotherapeutics)로 일컬어질 수 있다. 또한, 상기 "면역 치료제"라는 용어는 그 외 당업계 통상의 기술자에게 인식되는 의미를 모두 포함할 수 있다.
치료, 또는 치료제
본 명세서에서 사용되는 "치료"라는 용어는 대상이 가진 질환, 질병, 장애, 및/또는 증상을 제거하거나, 완화하거나, 경감하거나, 억제하거나, 개선하거나, 상기 질환, 질병, 장애, 및/또는 증상을 예방하는 결과를 야기하는 직접, 간접적인 행동이나 조치를 통틀어서 의미한다. 본 명세서에서 사용되는 "치료제"라는 용어는 대상에 적절한 방법으로 주어지는 경우, 상기 "치료" 효과를 보일 수 있는 각종 물질(예를 들어, 화합물 또는 펩타이드)을 의미한다. 또한, 상기 "치료" 또는 "치료제"라는 용어는 그 외 당업계 통상의 기술자에게 인식되는 의미를 모두 포함할 수 있다.
면역원성
본 명세서에서 사용되는 "면역원성"이라는 용어는, 사전적으로 "면역 반응을 일으킬 수 있는 항원으로 작용하는 성질"을 의미한다. 특정 항원의 면역원성을 측정하기 위한 다양한 방법들이 있고, 상기 방법은 그 목적에 따라 적절히 채택되거나, 설계될 수 있다. 예를 들어, 1) 상기 항원을 대상의 체내에 투여하는 경우, 대상의 체내에서 IgG, IgA, 및/또는 IgE 타입의 항체가 생성되는지 여부를 확인하는 방법, 2) 투여 주기에 따라, 상기 IgG, IgA, 및/또는 IgE 타입의 항체가 생성되는 시기를 확인하는 방법, 3) 상기 유도된 항체의 상기 항원에 대한 역가를 확인하는 방법, 4) 상기 유도된 항체의 작용기작이 밝혀진 경우, 상기 작용기작에 따른 효과를 측정하는 방법이 있을 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. "면역원성이 증가한다"는 표현은, 예를 들어 "면역 반응 유도 효과가 높아진다", "항체를 유도하는 능력이 향상된다", 또는 "면역치료제로서의 효과가 높아진다"는 표현과 혼용하여 사용될 수 있으며, 통상의 기술자가 맥락에 따라 적절히 해석할 수 있는 표현을 모두 포함한다.
mer
본 명세서에서 사용되는 "mer"라는 용어는 일반적으로 고분자 중합체 내에서 단위체의 개수를 나타낸다. 본 명세서에서 상기 "mer"는 일반적으로 펩타이드의 길이를 표현할 때 숫자와 함께 "길이가 N mer인 펩타이드" 등으로 나타내며, 이는 아미노산이 N개 중합된 펩타이드를 의미한다. 상기 "mer"라는 표현이 지시하는 단위체는 문맥 내에서 적절하게 해석되어야 하며, 그 외 통상의 기술자가 인식할 수 있는 의미를 모두 포함한다.
표준 아미노산(standard amino acid)
본 명세서에서 사용되는 "표준 아미노산(standard amino acid)"이라는 용어는 유기체의 체내에서 유전자의 전사 및 번역 과정을 통해 합성되는 20종의 아미노산을 통틀어 의미한다. 구체적으로, 상기 표준 아미노산은 알라닌(Alanine; Ala, A), 아르기닌(Arginine; Arg, R), 아스파라긴(Asparagine; Asn, N), 아스파르트산(Aspartic acid; Asp, D), 시스테인(Cysteine; Cys, C), 글루탐산(Glutamic acid; Glu, E), 글루타민(Glutamine; Gln, Q), 글리신(Glycine; Gly, G), 히스티딘(Histidine; His, H), 이소류신(Isoleucine; Ile, I), 류신(Leucine; Leu, L), 리신(Lysine; Lys K), 메티오닌(Methionine; Met, M), 페닐알라닌(Phenylalanine; Phe, F), 프롤린(Proline; Pro, P), 세린(Serine; Ser, S), 트레오닌(Threonine; Thr, T), 트립토판(Tryptophan; Trp, W), 티로신(Tyrosine; Tyr, Y), 및 발린(Valine; Val, V)을 포함한다. 상기 표준 아미노산 각각은 모두 대응하는 DNA 코돈이 존재하며, 일반적인 아미노산 일문자 또는 세문자 표기법으로 나타낼 수 있다. 상기 표준 아미노산이라는 용어가 지칭하는 대상은 문맥에 따라 적절하게 해석되어야 하며, 그 외 통상의 기술자가 인식할 수 있는 의미를 모두 포함한다.
비표준 아미노산(nonstandard amino acid)
본 명세서에서 사용되는 "비표준 아미노산(nonstandard amino acid)"이라는 용어는 상기 표준 아미노산 이외의 아미노산을 통틀어 지칭한다. 상기 비표준 아미노산은 인공 아미노산(artificial amino acid) 및 비천연 아미노산(unnatural amino acid)을 포함하며, 상기 표준 아미노산이 유기체 내에서 번역 이후 변형(posttranslational modification)을 거쳐 화학적으로 변형된 아미노산 등을 포함한다. 상기 비표준 아미노산은 예를 들어, D-form alanine, L-cyclohexylalanine, 및 6-aminohexanoic acid 등이 있다. 상기 비표준 아미노산은 이에 대응하는 DNA 코돈이 존재하지 않으며, 일반적인 아미노산 일문자 또는 세문자 표기법으로 나타낼 수 없으므로, 다른 문자를 사용하여 표기하며, 추가적으로 보충하여 설명한다. 상기 비표준 아미노산이라는 용어가 지칭하는 대상은 문맥에 따라 적절하게 해석되어야 하며, 그 외 통상의 기술자가 인식할 수 있는 의미를 모두 포함한다.
펩타이드 서열 기재
달리 서술하지 않는 한, 본 명세서에서 펩타이드의 서열을 기재할 때는 아미노산 일문자 표기법, 또는 세문자 표기법을 사용하여, N-터미널에서 C-터미널 방향으로 기재한다. 예를 들어, RNVP로 표기하는 경우, N-터미널에서 C-터미널 방향으로 아르기닌(arginine), 아스파라긴(asparagine), 발린(valine), 및 프롤린(proline)이 차례로 연결된 펩타이드를 의미한다. 또 다른 예를 들어, Thr-Leu-Lys로 표기하는 경우, N-터미널에서 C-터미널 방향으로 트레오닌(Threonine), 류신(Leucine), 및 리신(Lysine)이 차례로 연결된 펩타이드를 의미한다. 상기 일문자 표기법으로 나타낼 수 없는 아미노산의 경우, 다른 문자를 사용하여 표기하며, 추가적으로 보충하여 설명한다.
펩타이드를 구조식으로 표현할 때, N말단, 또는 C말단을 명확히 표기하기 위해 N- 및 -C를 사용하여 표기할 수 있으며, N말단 및/또는 C말단이라는 구분을 위해 밑줄로 표시할 수 있다. 예를 들어, 펩타이드 구조식을 N-B-T-A-C로 표기하는 경우, 달리 기재되지 않은 한, 맨 앞에 기재된 "N-" 및 맨 뒤에 기재된 "-C"는 N말단 및 C말단 방향을 명확히 하기 위한 기호이며, 이는 N-터미널에서 C-터미널 방향으로 B, T, A로 표시되는 서열이 연결된 펩타이드를 의미한다.
체액성 면역반응 (BACKGROUND - HUMORAL IMMUNITY)
IgM(Immunoglobulin M)에 의한 체액성 면역반응
체액성 면역반응 중 IgM에 의한 면역반응은 선천적 면역능으로 주로 1차 면역반응에서 활성을 나타내며 감염 초기 단계에서 빠른 속도로 일어난다. IgM은 주로 오합체(pentamer) 형태로 분비되어, 이론적으로 10개의 항원 결합 부위를 가짐으로써, 동시에 많은 수의 항원과 결합할 수 있다. IgM은 매우 다양한 종류 및 형태의 항원과 결합할 수 있지만, 그 결합의 친화도 및 결합력은 IgM 자체의 본질적인 친화도로 한정된다. 따라서, IgM의 항원에 대한 친화도 및 결합력은 헬퍼 T세포의 도움으로 만들어지는 IgG와 같은 항체와 비교하여 현저히 낮은 수준이다.
IgM에 의한 체액성 면역반응의 한계
비록 IgM에 의한 체액성 면역반응이 초기 면역 반응에서 중요한 역할을 하지만, 1) B세포가 생산하는 IgM의 생산량이, 분화된 B세포가 생산하는 IgG 등 다른 타입의 항체에 비해 적고, 2) IgM의 항원에 대한 특이적 결합능이 IgG의 특이적 결합능에 비해 떨어지고, 3) 동일한 항원에 재차 노출되었을 때, 2차 면역반응을 일으키는 정도가 약하기 때문에, IgM에 의한 체액성 면역반응에 의존하는 것은 그 효과에 한계가 있다. 따라서, 면역 반응을 유도하는 항원을 설계하는 관점에서 보면, 대상의 체내에 주입한 항원이 IgM에 의한 체액성 면역반응만을 유도하는 경우, 원하는 효과를 얻지 못하게 될 가능성이 크다. 따라서, IgG에 의한 체액성 면역반응을 유도할 수 있도록 항원을 설계하는 것이 매우 중요하다.
IgG(Immunoglobulin G)에 의한 체액성 면역반응 1 - 개괄
IgG를 생산하는 체액성 면역반응은 비장(spleen) 또는 림프절(lymph node)의 배 중심(germinal center)에서 주로 일어나며, B세포, 헬퍼 T 세포, 항원제시세포(APC, antigen-presenting cell)의 복합 작용에 의해 진행된다. 개괄적인 과정은 다음과 같다. 1) B세포가 체내에 침입한 항원(주로 단백질, 또는 펩타이드 항원)을 인식한다. 2) 항원제시세포가 상기 항원(또는 그 조각)을 세포내함입(endocytosis)하여 세포 내에서 더 작은 조각으로 절단한 후, 상기 조각들 중 일부를 상기 항원제시세포 표면의 MHC Class II에 제시한다. 3) 상기 MHC Class II에 제시된 항원 조각을 헬퍼 T 세포가 인식한다. 4) 상기 헬퍼 T 세포가 상기 B세포(항원을 인식한 세포)에 분화 신호를 전달한다. 5) 상기 B세포가 활성화되며 일부는 형질세포(Plasma cell)로 분화하여 상기 항원에 대한 높은 특이적 결합능을 가지는 IgG 항체를 생산한다. 6) 상기 B세포의 활성화 결과, 일부 세포는 기억 B세포(memory B cell)로 분화하여 동일한 항원이 재차 침투한 경우, 신속하게 IgG 항원을 생산하는 면역 반응을 일으킬 수 있도록 체내에 저장된다.
IgG에 의한 체액성 면역반응 2 - 항원제시세포
항원제시세포는 단백질 조각, 또는 펩타이드를 세포내함입한 후, 세포 내에서 더 짧은 펩타이드 조각으로 절단하고, 이를 MHC Class II에 얹어 상기 항원제시세포의 표면에 제시할 수 있는 세포의 총칭이다. 주요 항원제시세포로는 B세포, 대식세포(Macrophage), 수지상 세포(Dendritic cell) 등이 있다. 항원제시세포는 세포내함입한 상기 항원조각을 감염부위로부터 림프절까지 운반하고, MHC Class II에 의해 상기 항원조각을 헬퍼 T 세포에 제시함으로써, 이를 인식한 헬퍼 T 세포를 활성화시켜 면역 반응을 유도하는 역할을 한다.
IgG에 의한 체액성 면역반응 3 - MHC Class II
MHC Class II는 항원제시세포의 표면에서 발현되는 분자로, α/β사슬로 이루어진 헤테로다이머(heterodimer) 구조로 이뤄져 있다. MHC Class II는 그 구조상 일정한 길이의 펩타이드와 결합하고, 이를 제시할 수 있다. 항원제시세포는 MHC Class II에 외부 항원에서 유래된 펩타이드 조각을 결합시켜 세포 표면에 제시한다. 인간의 MHC Class II의 발현에는 HLA 유전자 복합체(human leukocyte antigen gene complex)가 관여하며, 이 중 항원제시세포의 표면에 존제하는 MHC Class II 세포 표면 수용체의 발현에 관여하는 것은 HLA-DP, DQ 및 DR 등의 유전자 복합체로 알려져 있다. 인간의 경우, HLA-DR 유전자는 인종에 따라 다양한 대립 유전자를 갖는 것으로 알려져 있으며, 가장 흔하게 발견되는 대립 유전자로 약 12 종류의 HLA-DR 유전자가 알려져 있다.
IgG에 의한 체액성 면역반응 4 - 항원제시세포에 의한 MHC Class II 제시
MHC Class II에 제시되는 펩타이드의 길이는, 문헌마다 약간씩 차이는 있지만, 대략 17mer 내지 24mer인 것으로 알려져 있다. 따라서, 항원제시세포는 세포내함입한 항원 단백질, 또는 펩타이드 조각을 그대로 MHC Class II에 얹어 제시하는 것이 아니라, 17mer 내지 24mer의 더 작은 조각으로 절단하는 과정을 거친다. 항원제시세포가 세포내함입한 항원 조각(단백질 또는 펩타이드 조각)은 엔도솜(endosome) 내에 존재하며, 상기 엔도솜은 상기 항원제시세포의 리소좀(lysosome)과 융합하게 된다. 그 후, 상기 리소좀 내에 존재하는 여러 종류의 분해 효소들에 의해 상기 항원 조각이 더 짧은 펩타이드로 절단되게 된다. 상기 분해 효소들의 예시로 엔도펩티데이스(endopeptidase)와 엑소펩티데이스(exopeptidase)가 있다. 엔도펩티데이스는 상기 항원 조각 내부의 펩티드 결합에 작용하여 상기 항원 조각을 절단하는 작용을 하고, 엑소펩티데이스는 주로 상기 항원 조각의 양쪽 말단의 펩티드 결합에 작용하여 상기 항원 조각을 절단하는 작용을 한다. 상기 과정을 거쳐 상기 항원 조각이 적당한 크기의 펩타이드로 절단되게 되면, 이 중 일부가 상기 리소좀의 안쪽 막에 존재하는 MHC Class II와 결합하게 된다. 상기 리소좀은 다시 세포 표면으로 가서 세포의 원형질막과 융합하게 되고, 비로소 MHC Class II 및 이와 결합한 상기 펩타이드 조각이 항원제시세포의 표면에 드러나게 된다. 이러한 과정을 통틀어 "항원제시세포가 항원을 제시하는 과정"이라 부르기도 한다.
IgG에 의한 체액성 면역반응 5 - 헬퍼 T 세포
헬퍼 T 세포(helper T lymphocyte)는, CD4를 발현하기 때문에 CD4+ 세포로도 알려져 있다. 헬퍼 T 세포는 표면에 MHC Class II와의 결합능을 가지는 T세포 수용체(TCR, T cell receptor)를 발현한다. 상기 T세포 수용체는 일반적으로 CD3와 복합체를 이루고 있다. 항원제시세포가 림프절까지 운반한 항원(예를 들어, 펩타이드 조각)을 MHC Class II를 통해 제시하는 경우, 헬퍼 T 세포는 상기 제시된 항원 조각을 인식하게 된다. 이러한 인식 과정에서 T세포 수용체-CD3 복합체 및 CD4가 관여한다. 상기 헬퍼 T 세포가 성공적으로 상기 항원 조각을 인식하게 되면, 활성화되어 다양한 사이토카인(cytokine)을 분비하거나, 스스로 분화하게 된다. 상기 분비된 사이토카인은 후술할 B세포의 분화에 관여한다.
IgG에 의한 체액성 면역반응 6 - B세포 분화
헬퍼 T 세포가 분비한 인터류킨-4(IL-4, Interleukin-4) 등의 사이토카인의 영향으로, 상기 B세포의 면역글로불린 종류 변환(immunoglobulin class switching)이 일어나 상기 B세포가 생산하는 항체의 이소타입(isotype)이 변화하게 된다(예를 들어, IgM에서 IgG로). 또한, 상기 B세포가 분화하여 일부는 기억 B 세포(memory B cell)로 분화하여 동일한 항원이 재차 침투하는 경우 신속한 면역 반응을 일으키기 위해 저장되고, 일부는 형질세포(plasma cells)로 분화하여 활발하게 IgG 항체를 생산하게 된다.
IgG에 의한 체액성 면역반응 7 - IgG 생성 조건
IgG에 의한 체액성 면역반응이 일어나려면, 1) B세포에 의해 항원의 특정 입체구조가 인식되어야 하고, 2) 항원의 일부 조각이 MHC Class II를 통해 헬퍼 T 세포에게 인식되어야 한다. 일반적으로 B세포에 의해 인식되는 항원 부분과 헬퍼 T 세포에 의해 인식되는 항원의 부분은 서로 다르고, 서로 다른 경로를 통해 면역 반응을 활성화시키기는 하지만, 일반적으로 B세포에 의해 인식되는 부분(B-cell 에피토프)과 헬퍼 T 세포에 의해 인식되는 부분(Th 에피토프)이 적어도 어떠한 연결 관계를 가지고 있어야만 상기 면역 반응을 일으키는 것으로 알려져 있다. 예를 들어, 상기 B-cell 에피토프와 상기 Th 에피토프는 한 분자 내에 포함되어 있거나, 컨쥬게이트(conjugates)를 이루고 있거나, 기타 다른 연결 관계를 가지고 있을 수 있다.
종래 기술의 한계점 (LIMITATIONS OF PRIOR ART)
면역치료제로 사용될 수 있는 펩타이드 설계에서 고려해야 하는 점
상기한 바, 면역치료제는 그 특성 상 1) 대상의 체내에서 안정적으로 면역반응을 유도할 수 있을 것, 2) 대상의 체내에서 미리 의도된 항체만을 균일하게 유도하여 부작용을 최소화할 것, 3) 이를 상용화하기 위해, 합성이 용이하고 생산 단가가 합리적일 것이 요구된다. 따라서, 면역치료제로 사용될 수 있는 펩타이드를 설계하는 데 있어서, 1) 일정 정도 이상의 면역원성을 나타낼 것, 2) 대상의 체내에서 미리 의도한 항체의 항원 인식 특이성 및 항체의 생리적기능을 조절하는 isotype등을 균일하게 유도하는 면역반응이 일어날 것, 3) 경제성을 고려하여 합성하기 용이할 것, 세 가지 조건을 필수적으로 고려해야 한다.
종래 기술의 한계점
종래 특허출원 US10/378,707호, PCT/KR2005/000784, 및 Kim et al.(2016, An apolipoprotein B100 mimotope prevents obesity in mice, Clinical Science 130, 105-116)에 개시된 바, 인공적으로 제조한 특정 서열의 펩타이드에 특이적인 항체가, LDL 분자 내의 ApoB-100 단백질의 노출 부위에도 결합이 가능하며, 이로 인해 면역 치료제로서 기능할 수 있음이 알려져 있다. 이러한 특성을 이용하여, 상기 특허출원 등에서 상기 펩타이드를 포함하는 면역치료제를 설계하여 개시한 바 있다. 하지만, 종래 기술에서는 1) 상기 펩타이드의 연쇄 동일 서열(Concatemer)을 제조하거나, 2) 상기 연쇄 동일 서열에 단백질 수준으로 길이가 긴 헬퍼 T세포 에피토프를 연결하여 면역치료제를 설계하는 등, 상기 펩타이드의 면역원성을 개선하는 데에만 초점을 맞추었다. 이에 따라, 종래 설계된 면역 치료제는 1) 에피토프(항원 결정기)가 다양하므로, 여러 종류의 항체가 유도되어 그 균일성이 떨어지고, 2) 생산 단가가 높아 경제성이 떨어지는 한계점이 있었다.
상기 펩타이드 설계 방법의 정립이 필요함
면역치료제 용도로 사용하는 펩타이드에 대해, 1) 미리 의도된 면역반응만을 균일하게 유도하면서, 2) 합성이 용이하고 생산 단가가 낮은 펩타이드의 설계 원칙에 대해서는 정립된 바가 전무한 실정이다. 따라서, 본 명세서에서는 면역체료제 용도로 사용하는 펩타이드의 설계에 있어 고려해야 할 기술적 사항들 및 그 설계 방법을 제공하고자 한다.
펩타이드(A PEPTIDE)
펩타이드 개괄
본 명세서에서 제공하는 펩타이드는 적어도 하나의 펩타이드 단위체를 포함한다. 상기 펩타이드 단위체는 적어도 하나의 B-cell 에피토프, 적어도 하나의 Th 에피토프, 및 적절한 수의 보조부를 포함한다. 일 구현예로, 상기 펩타이드는 하나의 펩타이드 단위체를 포함할 수 있다. 또 다른 구현예로, 상기 펩타이드는 두 개 이상의 펩타이드 단위체를 포함할 수 있다.
펩타이드 특징 1 - 펩타이드 단위체를 포함
상기 펩타이드 단위체는 1) 일정 수준 이상의 면역원성을 나타내면서, 2) 미리 의도된 항체만을 균일하게 유도하도록 설계된 부분이다. 따라서, 본 명세서에서 제공하는 상기 펩타이드 단위체는 면역치료제로 사용되기에 적합한 특성을 가진다.
펩타이드 특징 2 - 비교적 짧은 길이의 펩타이드 단위체
상기 펩타이드 단위체는 비교적 짧은 길이로 설계되어, 합성이 용이하고 생산 단가가 낮다. 상기 펩타이드는 상기 펩타이드 단위체를 그 구성요소로 하여 설계되며, 구체적으로는 상기 펩타이드 단위체가 하나 이상 연결된 형태로 설계된다. 상기 펩타이드가 적은 수의 상기 펩타이드 단위체만을 포함하는 경우, 전체 펩타이드 길이가 짧아 합성이 용이하다는 장점을 가진다. 상기 펩타이드가 복수 개의 펩타이드 단위체를 포함하여 비교적 긴 서열을 갖는 경우에도, 상기 펩타이드 단위체 자체는 합성이 용이하도록 잘 설계되어 있기 때문에, 상기 펩타이드 단위체를 각각 병렬적으로 합성한 후, 이를 연결하는 방식으로 상기 펩타이드 제조가 가능하다. 결과적으로, 본 명세서에서 제공하는 상기 펩타이드는 합성이 용이하다는 특징을 가지며, 이는 상기한 펩타이드 단위체의 특징과 더불어 상기 펩타이드가 면역치료제로 사용되기에 적합한 특성이다.
펩타이드 기능
상기 펩타이드는 대상의 체내에 주입되는 경우, 상기 펩타이드에 포함된 B-cell 에피토프에 특이적으로 결합할 수 있는 항체만을 균일하게 유도하는 기능을 가진다.
B-cell 에피토프(B-CELL EPITOPE)
B-cell 에피토프 정의
본 명세서에서 제공하는 펩타이드는 하나 이상의 B-cell 에피토프를 포함한다. 본 명세서에서 B-cell 에피토프라 함은, 한 종류의 균일한 항체를 유도하도록 의도적으로 설계된 한 단위의 펩타이드 부분을 의미한다. 따라서, 상기 B-cell 에피토프를 포함하는 상기 펩타이드를 대상의 체내에 주입하는 경우, 한 종류의 B-cell 에피토프 당 한 종류의 항체가 지배적으로 유도되는 결과를 나타낸다.
B-cell 에피토프 구조
상기 B-cell 에피토프는 입체구조 형성부 및 인접부를 포함한다. 상기 입체구조 형성부는 펩타이드 고차 구조를 형성하는 부분이며, B세포가 상기 펩타이드 고차 구조를 인식하여 이에 특이적으로 결합할 수 있는 항체를 생산할 수 있도록 설계된 부분이다. 상기 인접부는 상기 입체구조 형성부가 안정적으로 고차 구조를 형성하는데 직접, 간접적으로 영향을 주는 부분이다. 구체적으로, 상기 인접부는 1) 상기 입체구조 형성부가 특정한 구조를 형성하도록 하는 기능, 2) 상기 B-cell 에피토프가 펩타이드 단위체 내에서 다른 부분과 연결될 때, 상기 입체구조 형성부에 영향을 주지 않도록 하는 링커 기능, 3) 상기 입체구조 형성부를 보호하는 기능 등을 가질 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 일 구현예로, 상기 B-cell 에피토프는 N말단에서 C말단 순서로, 제1 입체구조 형성부 및 제1 인접부가 순서대로 연결된 서열을 가질 수 있다. 또 다른 구현예로, 상기 B-cell 에피토프는 N말단에서 C말단 순서로, 제2 인접부, 제2 입체구조 형성부, 및 제3 인접부가 순서대로 연결된 서열을 가질 수 있다. 또 다른 구현예로, 상기 B-cell 에피토프는 N말단에서 C말단 순서로, 제3 입체구조 형성부 및 제4 인접부가 순서대로 연결된 서열을 가질 수 있다.
B-cell 에피토프 설계 1 - 입체구조 형성부 설계
상기 B-cell 에피토프는 B세포가 그 입체구조를 인식하여 이에 특이적으로 결합할 수 있는 항체 생산을 균일하게 유도할 수 있어야 한다. B세포가 인식하는 상기 입체구조는 적절한 펩타이드 고차 구조를 통해 표현될 수 있다. 따라서, 상기 B-cell 에피토프는 펩타이드 고차 구조를 형성하는 입체구조 형성부를 포함하도록 설계된다. 상기 입체구조 형성부는 그 목적에 따라 의도된 펩타이드 고차 구조를 형성할 수 있다. 일 구현예로, 상기 입체구조 형성부는 α-helix 구조를 포함할 수 있다. 또 다른 구현예로, 상기 입체구조 형성부는 β구조를 포함할 수 있다. 또 다른 구현예로, 상기 입체구조 형성부는 α-helix 및/또는 β구조를 포함할 수 있다. 일 구현예로, 상기 입체구조 형성부는 펩타이드 3차 구조를 포함할 수 있다. 일 구현예로, 상기 입체구조 형성부는 펩타이드 4차 구조를 포함할 수 있다.
B-cell 에피토프 설계 2 - 인접부 설계
상기 B-cell 에피토프를 설계할 때, 반드시 모든 서열이 펩타이드 고차 구조를 형성해야 하는 것은 아니다. 달리 표현하면, 상기 B-cell 에피토프는 상기 입체구조 형성부 외에, 인접부를 추가적으로 포함하도록 설계될 수 있다. 상기 인접부는 상기 입체구조 형성부가 안정적으로 고차 구조를 형성하는 데 영향을 줄 수 있다. 상기 인접부는 그 외에도 다양한 기능을 할 수 있으며, 보조부와 그 역할이 중복될 수 있다. 일 구현예로, 상기 인접부는 링커 기능을 가질 수 있다. 또 다른 구현예로, 상기 인접부는 상기 입체구조 형성부에 대한 보호 기능을 가질 수 있다. 일 구현예로, 상기 인접부는 하나 이상의 기능을 가질 수 있다.
B-cell 에피토프 길이
상기 B-cell 에피토프는 1) B세포에 인식될 수 있을 정도의 크기이며, 2) 상기 B-cell 에피토프에 특이적으로 결합하는 항체가 1종류이거나, 극히 적은 종류여야 한다. 따라서, 상기 B-cell 에피토프의 길이는 적절한 수준으로 한정되어야 한다. 상기 B-cell 에피토프의 길이가 너무 짧은 경우, B세포에 의해 인식되지 않아 항체 유도능을 가지지 못하며, 상기 B-cell 에피토프의 길이가 너무 긴 경우, 여러 종류의 항체를 유도하게 될 수 있어 그 목적에 어긋나게 된다. 일 구현예로, 상기 B-cell 에피토프의 길이는 약 8mer, 약 9mer, 약 10mer, 약 11mer, 약 12mer, 약 13mer, 약 14mer, 약 15mer, 약 16mer, 약 17mer, 약 18mer, 약 20mer, 약 21mer, 약 22mer, 약 23mer, 약 24mer, 약 25mer, 약 26mer, 약 27mer, 약 28mer, 약 29mer, 또는 약 30mer일 수 있다.
또 다른 구현예로, 상기 B-cell 에피토프의 길이는 바로 이전 문장에서 선택된 두 개의 수치범위 내의 값을 가질 수 있다.
B-cell 에피토프 예시
일 구현예로, 상기 B-cell 에피토프는 아포지단백 B-100(Apolipoprotein B-100)을 표적하는 항체를 유도하는 것일 수 있다. 일 구현예로, 상기 B-cell 에피토프는 아포지단백 B-100의 절편(fragments), 및/또는 아포지단백 B-100의 미모토프(mimotope)일 수 있다. 일 구현예로, 상기 B-cell 에피토프는 다음 중 선택된 부위를 표적하는 항체를 유도하는 것을 특징으로 한다: 저밀도지단백(LDL)에 포함된 아포지단백 B-100(Apolipoprotein B-100)의 외부 노출 부위; 및 초저밀도지단백(VLDL)에 포함된 아포지단백 B-100(Apolipoprotein B-100)의 외부 노출 부위.
B-cell 에피토프 서열 예시
일 구현예로, 상기 B-cell 에피토프는 RNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 6), CRFRGLISLSQVYLS(서열번호 7), KTTKQSFDLSVKAQYKKNKH(서열번호 8), RNVPPIFNDVY(서열번호 9), CRFRGLISLSQ(서열번호 10), KTTKQSFDLSVK(서열번호 11), RNVPPIFNDVYW(서열번호 12), CRFRGLISLSQV(서열번호 13), KTTKQSFDLSVKAQYKK(서열번호 14), RNVPPIFNDVYWI(서열번호 15), CRFRGLISLSQVY(서열번호 16), KTTKQSFDLSVKAQYKKN(서열번호 17), PIFNDVYWIAF(서열번호 18), GLISLSQVYLS(서열번호 19), QSFDLSVKAQYKKNKH(서열번호 20), PPIFNDVYWIAF(서열번호 21), RGLISLSQVYLS(서열번호 22), KQSFDLSVKAQYKKNKH(서열번호 23), VPPIFNDVYWIAF(서열번호 24), FRGLISLSQVYLS(서열번호 25), TKQSFDLSVKAQYKKNKH(서열번호 26), NVPPIFNDVYWIA(서열번호 27), RFRGLISLSQVYL(서열번호 28), TKQSFDLSVKAQYKKN(서열번호 29), VPPIFNDVYWI(서열번호 30), FRGLISLSQVY(서열번호 31), TKQSFDLSVKAQYKKN(서열번호 32), PPIFNDVYW(서열번호 33), RGLISLSQV(서열번호 34), KQSFDLSVKAQYKK(서열번호 35), RFRGLISLSQVYLDP(서열번호 221), 및 SVCGCPVGHHDVVGL(서열번호 222)로 이뤄진 군에서 선택된 서열을 포함하는 펩타이드일 수 있다.
또 다른 구현예로, 상기 B-cell 에피토프는 서열번호 6 내지 35, 221 내지 222로 이뤄진 군에서 선택된 펩타이드에 포함된 에피토프를 포함하는 펩타이드일 수 있다.
B-cell 에피토프 예시 서열과 유사한 서열
본 명세서에서는 상기 B-cell 에피토프 예시 서열과 유사한 서열을 개시한다. 일 구현예로, 상기 B-cell 에피토프는 서열번호 6 내지 서열번호 34, 서열번호 221 내지 서열번호 222에서 선택된 서열과 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100% 일치하는 서열을 가질 수 있다. 일 구현예로, 상기 B-cell 에피토프는 서열번호 6 내지 서열번호 34, 서열번호 221 내지 서열번호 222에서 선택된 서열과 바로 이전 문장에서 선택된 수치 이상 일치하는 서열일 수 있다. 예를 들어, 상기 B-cell 에피토프는 서열번호 6과 90% 이상 일치하는 서열을 가질 수 있다.
Th 에피토프(Th EPITOPE)
Th 에피토프 정의
본 명세서에서 제공하는 펩타이드에 포함된 Th 에피토프는 상기 펩타이드가 항원제시세포에 의해 세포내함입(Endocytosis)된 후, MHC Class II에 의해 상기 항원제시세포의 표면에 제시되는 과정에서, MHC Class II와 결합하여 상기 항원제시세포의 표면에 제시되고, 헬퍼 T 세포(Th, Helper-T-Lymphocyte)에 의해 인식되는 기능을 하도록 설계된 부분을 의미한다. 항원제시세포가 세포내함입한 펩타이드를 가공하여 MHC Class II와 결합시켜 항원 제시하는 과정은 전술하였다. 다시 말해, 상기 Th 에피토프는 상기 펩타이드가 대상의 체내에 주입되는 경우, 상기 헬퍼 T 세포에 의해 인식되는 역할을 하는 부분이며, 따라서 상기 펩타이드에 대한 IgG 타입 항체를 유도하는 데 직접적인 역할을 한다.
Th 에피토프 설계 1 - 앵커 잔기(Anchor residue)
Th 에피토프는 그 서열 내에 MHC Class II와 결합할 수 있는 앵커 잔기를 가지도록 설계한다. 서열 내에 앵커 잔기를 포함하고 있는지 여부는 Th 에피토프의 기능에 영향을 미치는 중요한 요소이다. 일 구현예로, 상기 Th 에피토프는 Y(Tyrosine), F(Phenylalanine) W(Tryptophan), R(Arginine), L(Leucine), V(Valine), I(Isoleucine), 및 M(Methionine) 으로 이뤄진 군에서 선택된 하나 이상의 아미노산을 앵커 잔기로 포함할 수 있다.
Th 에피토프 설계 2 - 종 특이적 Th 에피토프
상기 Th 에피토프는 그 목적에 따라 특정 종의 MHC Class II와 결합능을 가지는 Th 에피토프를 선택할 수 있다. 일 구현예로, 상기 Th 에피토프는 인간의 MHC Class II와 결합능을 가지는 Th 에피토프일 수 있다. 또 다른 구현예로, 상기 Th 에피토프는 포유류에 속하는 종의 MHC Class II와 결합능을 가지는 Th 에피토프일 수 있다. 구체적으로, 상기 Th 에피토프는 마우스의 MHC Class II와 결합능을 가지는 Th 에피토프일 수 있다.
Th 에피토프 설계 3 - 유전자 특이적 Th 에피토프
HLA 유전자 복합체 형질의 다양성으로 인해, MHC Class II의 구조는 인종 별, 개인 별로 다양할 수 있다. 이에 맞추어, 특정 유전 형질의 MHC Class II 분자들인 HLA-DP, HLA-DQ, 및/또는 HLA-DR와 결합능을 가지는 Th 에피토프의 설계가 가능하다. 일 구현예로, 상기 Th 에피토프는 HLA-DR1 대립 유전자(allels)인 2w2b, 2w2a, 3, 4w4, 4w14, 5, 7, 52a, 52b, 52c, 및 53에서 선택된 하나 이상의 HLA-DR 유전자에 의해 발현된 MHC Class II와 결합능이 높은 펩타이드 서열일 수 있다.
일 구현예로, 상기 Th 에피토프는 HLA-DQ5, HLA-DR, HLA-DR1 내지 HLA-DR8, HLA-DR11, HLA-DR13, HLA-DR14, HLA-DRw52, HLA-DR2w15, HLA-DPw4, HLA-DRB1의 각 서브타입(예를 들어, 0301, 01, 03, 04, 07, 08, 09, 11, 12, 13, 15, 및 0301), 및 HLA-DRB5에서 선택된 하나 이상의 유전자에 의해 발현된 MHC Class II와 결합능이 높은 펩타이드 서열일 수 있다.
또 다른 구현예로, 상기 Th 에피토프는 Cara C. Wilson et al.(2001, Identification and Antigenicity of Broadly Cross-Reactive and Conserved Human Immunodeficiency Virus Type 1-Derived Helper T-Lymphocyte Epitopes, Journal of Virology, 75(9) 4195-4207)에 개시된 HA307-312로 이름 붙은 서열일 수 있다.
또 다른 구현예로, 상기 Th 에피토프는 Christopher P Desmond et al.(2008, A systematic review of T-cell epitopes in hepatitis B virus: identification, genotypic variation and relevance to antiviral therapeutics, Antiviral Therapy 13:161-175)의 Table 2에 개시된 HLA Class II restricted epitopes 중 하나일 수 있다.
Th 에피토프 설계 4 - 유전자 비특이적 Th 에피토프
HLA 유전자 복합체의 형질과 관련 없이, 다양한 MHC Class II와 결합능을 가지는 Th 에피토프가 알려져 있으며, 이를 활용하여 유전 형질과 관련 없이 다양한 MHC Class II와 결합할 수 있는 Th 에피토프의 설계가 가능하다. 일 구현예로, 상기 Th 에피토프는 특허출원 US305,871에 개시된 "pan DR-binding peptide"로 이름 붙은 서열일 수 있다.
Th 에피토프 설계 5 - B-cell 에피토프로 작용할 가능성 배제
상기 Th 에피토프는 항원제시세포의 MHC Class II에 의해 제시되어 헬퍼 T 세포에 의해 인식될 수 있도록 설계된다. 따라서, 일반적으로 MHC Class II에 대해 매우 높은 결합능을 가지기 때문에, B-Cell 에피토프로 작용할 확률은 매우 낮다. 다시 말해, 상기 Th 에피토프는, 상기 Th 에피토프 자체의 입체구조와 특이적으로 결합하는 항체가 유도되지 않도록 설계된다.
Th 에피토프 길이 설계
상기 Th 에피토프는 MHC Class II 한 단위와 결합할 수 있도록, 적절한 길이로 설계되어야 한다. 일반적으로 MHC Class II와 직접 결합할 수 있는 한 단위의 Th 에피토프는 약 30mer 내외로 알려져 있다 (Abbas, A.K., Lichtman, A.H. and Pillai, S. Cellular and molecular immunology (pp124-126), 7th Ed. (2012) Philadelphia PA, Elsevier Saunders 등). 또한, 1) 상기 Th 에피토프의 길이가 너무 짧아지는 경우, MHC Class II와의 결합능을 상실하게 될 위험이 있고, 2) 상기 Th 에피토프의 길이가 너무 길어지는 경우, 상기 Th 에피토프가 독립적으로 B-cell 에피토프로 작용할 수 있는 여지가 생기므로, 그 목적에 반하게 된다. 따라서, 적절한 길이의 Th 에피토프를 설계할 필요가 있다.
Th 에피토프 길이 범위
일 구현예로, 상기 Th 에피토프의 길이는 7mer, 8mer, 9mer, 10mer, 11mer, 12mer, 13mer, 14mer, 15mer, 16mer, 17mer, 18mer, 19mer, 20mer, 21mer, 22mer, 23mer, 24mer, 25mer, 26mer, 27mer, 28mer, 29mer, 30mer, 31mer, 32mer, 또는 33mer일 수 있다. 또 다른 구현예로, 상기 Th 에피토프의 길이는 바로 이전 문장에서 선택된 두 개의 수치범위 내의 값을 가질 수 있다. 예를 들어, 상기 Th 에피토프의 길이는 8mer 내지 32mer일 수 있다. 또 다른 예를 들어, 상기 Th 에피토프의 길이는 11mer 내지 13mer일 수 있다.
Th 에피토프 예시 - PADRE 설계
일 구현예로, 상기 Th 에피토프는 특허출원 US305,871에 개시된, "pan DR-binding peptide"로 명명된 펩타이드일 수 있다. 일 구현예로, 상기 Th 에피토프는 공개문헌 US 6,413,935 B1의 Table VIII A, 및 Table IX에 개시된 펩타이드 중 하나일 수 있다. 일 구현예로, 상기 Th 에피토프는 다음 구조식 I을 만족하는 펩타이드 서열을 가질 수 있다:
[구조식 I]
N-Lys-X1-X2-Ala-Ala-X3-Thr-X4-X5-Ala-Ala-C
이때, 상기 X1은 티로신(Tyr), 페닐알라닌(Phe), 또는 L-cyclohexylalanine일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 X2는 소수성 아미노산이거나, 류신(Leu), 또는 이소류신(Ile)일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 X3는 방향족, 또는 고리형 아미노산이거나, 페닐알라닌(Phe), 티로신(Tyr), 또는 히스티딘(His)일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 X4는 지방족 장쇄 아미노산(aliphatic long chain amino acids)이거나, 이소류신(Ile), 또는 발린(Val)일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 X5는 하전된 아미노산이거나, 아르기닌(Arg), 류신(Leu), 아스파르트산(Asp), 글루타민(Gln), 또는 글리신(Gly)일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
일 구현예로, 상기 Th 에피토프는 다음 구조식 II을 만족하는 펩타이드 서열을 가질 수 있다:
[구조식 II]
N-X1-X2-Val-X3-Ala-X4-Thr-Leu-Lys-Ala-Ala-C
이때, 상기 X1은 리신(Lys), 또는 아르기닌(Arg)이고,
상기 X2은 티로신(Tyr), 페닐알라닌(Phe), 또는 L-cyclohexylalanine이고,
상기 X3는 리신(Lys), 트립토판(Trp), 티로신(Tyr), 아르기닌(Arg), 알라닌(Ala), 또는 메티오닌(Met)이고,
상기 X4는 아스파라긴(Asn), 트립토판(Trp), 티로신(Tyr), 발린(Val), 히스티딘(His), 리신(Lys), 또는 알라닌(Ala)이다.
Th 에피토프 서열 예시
일 구현예로, 상기 Th 에피토프는 K(Cha)VAAWTLKAA(서열번호 1), PKYVKQNTLKLAT(서열번호 2), ILMQYIKANSKFIGI(서열번호 3), QSIALSSLMVAQAIP(서열번호 4), ILMQYIKANSKFIGIPMGLPQSIALSSLMVAQ(서열번호 5), PLGFFPDHQL(서열번호 162), WPEANQVGAGAFGPGF(서열번호 163), MQWNSTALHQALQDP(서열번호 164), MQWNSTTFHQTLQDPRVRGLYFPAGG(서열번호 165), FFLLTRILTI(서열번호 166), FFLLTRILTIPQSLD(서열번호 167), TSLNFLGGTTVCLGQ(서열번호 168), QSPTSNHSPTSCPPIC(서열번호 169), IIFLFILLLCLIFLLVLLD(서열번호 170), CTTPAQGNSMFPSC(서열번호 171), CTKPTDGN(서열번호 172), WASVRFSW(서열번호 173), LLPIFFCLW(서열번호 174), MDIDPYKEFGATVELLSFLP(서열번호 175), FLPSDFFPSV(서열번호 176), RDLLDTASALYREALESPEH(서열번호 177), PHHTALRQAILCWGELMTLA(서열번호 178), GRETVIEYLVSFGVW(서열번호 179), EYLVSFGVWIRTPPA(서열번호 180), VSFGVWIRTPPAYRPPNAPI(서열번호 181), TVVRRRGRSP(서열번호 182), VGPLTVNEKRRLKLI(서열번호 183), RHYLHTLWKAGILYK(서열번호 184), ESRLVVDFSQFSRGN(서열번호 185), LQSLTNLLSSNLSWL(서열번호 186), SSNLSWLSLDVSAAF(서열번호 187), LHLYSHPIILGFRKI(서열번호 188), KQCFRKLPVNRPIDW(서열번호 189), LCQVFADATPTGWGL(서열번호 190), AANWILRGTSFVYVP(서열번호 191), EIRLKVFVLGGCRHK(서열번호 192), KFVAAWTLKAA(서열번호 195), KYVAAWTLKAA(서열번호 196), DIEKKIAKMEKASSVFNVVNS(서열번호 223), YSGPLKAEIAQRLEDV(서열번호 224), K(Cha)VKANTLKAA(서열번호 225), K(Cha)VKANTLKAA(서열번호 226), K(Cha)VKAWTLKAA(서열번호 227), K(Cha)VKAWTLKAA(서열번호 228), K(Cha)VWANTLKAA(서열번호 229), K(Cha)VWANTLKAA(서열번호 230), K(Cha)VWAYTLKAA(서열번호 231), K(Cha)VWAVTLKAA(서열번호 232), K(Cha)VYAWTLKAA(서열번호 233), K(Cha)VYAWTLKAA(서열번호 234), R(Cha)VRANTLKAA(서열번호 235), K(Cha)VKAHTLKAA(서열번호 236), K(Cha)VKAHTLKAA(서열번호 237), K(Cha)VAANTLKAA(서열번호 238), K(Cha)VAANTLKAA(서열번호 239), K(Cha)VAAYTLKAA(서열번호 240), K(Cha)VAAYTLKAA(서열번호 241), K(Cha)VAAWTLKAA(서열번호 242), K(Cha)VAAKTLKAA(서열번호 243), K(Cha)VAAHTLKAA(서열번호 244), K(Cha)VAAATLKAA(서열번호 245), K(Cha)VAAWTLKAA(서열번호 246), 및 K(Cha)VMAATLKAA(서열번호 247)로 이뤄진 군에서 선택된 것일 수 있다. 이때, a는 D-form alanine, Z는 6-aminohexanoic acid, (Cha)는 L-cyclohexylalanine를 나타낸다.
Th 에피토프 예시 서열과 유사한 서열
본 명세서에서는 상기 Th 에피토프 예시 서열과 유사한 서열을 개시한다. 일 구현예로, 상기 Th 에피토프는 서열번호 1 내지 서열번호 5, 서열번호 162 내지 서열번호 192, 서열번호 195 내지 서열번호 196, 서열번호 223 내지 서열번호 247, 상기 [구조식 I]을 만족하는 서열, 또는 상기 [구조식 II]를 만족하는 서열과 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 또는 100% 일치하는 서열을 가질 수 있다. 일 구현예로, 상기 Th 에피토프는 서열번호 1 내지 서열번호 5, 서열번호 162 내지 서열번호 192, 서열번호 195 내지 서열번호 196, 서열번호 223 내지 서열번호 247, 상기 [구조식 I]을 만족하는 서열, 또는 상기 [구조식 II]를 만족하는 서열과 바로 이전 문장에서 선택된 수치 이상 일치하는 서열을 가질 수 있다. 예를 들어, 상기 Th 에피토프는 서열번호 1의 서열과 90% 이상 일치하는 서열을 가질 수 있다.
보조부(AUXILIARY PART)
보조부 정의
본 명세서에서 개시되는 펩타이드는 하나 이상의 보조부를 포함할 수 있다. 상기 보조부는 상기 펩타이드가 대상의 체내에서 의도한 대로 면역반응을 일으키는 데 직접, 간접적으로 영향을 줄 수 있는 추가적인 부분을 통칭한다. 상기 보조부는 하나 이상의 기능을 가지고 있을 수 있으며, 그 목적에 따라 펩타이드 서열 구성 및/또는 서열의 위치가 적절하게 설계될 수 있다.
보조부 기능 1 - 링커 기능
상기 보조부는 B-cell 에피토프와 Th 에피토프를 연결하는 링커 기능을 할 수 있다. 상기 B-cell 에피토프와 Th 에피토프는 직접 연결될 수도 있지만, 링커 기능을 하는 보조부를 통해 연결될 수도 있다. 또한, 상기 보조부는 펩타이드 내에 포함된 복수의 단위체를 연결해주는 링커 기능을 가지도록 설계될 수 있다. 일 구현예로, 상기 보조부의 서열은 상기 B-cell 에피토프의 서열 및 상기 Th 에피토프의 서열 사이에 있을 수 있다. 이때, 상기 보조부는 B-cell 에피토프 및 Th 에피토프를 연결하는 링커 기능을 가진다. 일 구현예로, 상기 보조부의 서열은 상기 펩타이드 내 제1 펩타이드 단위체 및 제2 펩타이드 단위체의 서열 사이에 있을 수 있다. 이때, 상기 보조부는 제1 펩타이드 단위체 및 제2 펩타이드 단위체를 연결하는 링커 기능을 가진다.
보조부 기능 2 - 보호 기능
본 명세서에서 제공하는 펩타이드 단위체의 경우, 비교적 짧은 서열 길이를 가지고 있는 것이 특징이다. 이에 따라, 상기 펩타이드 단위체를 포함하는 펩타이드가 대상의 체내에 주입되는 경우, 상기 Th 에피토프 서열이 헬퍼 T 세포에 의해 인식되기 전에 분해되어, 의도한 면역반응이 일어나지 않을 수 있다. 이러한 단점을 보완하기 위해, 상기 보조부가 상기 펩타이드 내에서 Th 에피토프를 보호하는 기능을 하도록 설계될 수 있다. 일 구현예로, 상기 보호부는 상기 Th 에피토프를 대상 체내의 효소에 의해 절단되는 것으로부터 보호할 수 있다. 예를 들어, 상기 대상 체내의 효소는 펩티데이스(peptidase)일 수 있다. 구체적으로, 상기 펩티데이스는 엑소펩티데이스(exopeptidase) 및/또는 엔도펩티데이스(endopeptidase)일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 일 구현예로, 상기 보조부는 Th 에피토프의 N말단 및/또는 C말단에 연결되어있을 수 있다. 이때, 상기 보조부는 상기 Th 에피토프를 보호하는 기능을 가진다. 일 구현예로, 상기 보조부는 적어도 하나의 비표준 아미노산(nonstandard amino acid)을 포함할 수 있다.
보조부 기능 3 - 시클릭 폼(cyclic form) 형성 기능
상기 보조부는 상기 펩타이드 단위체의 양 말단에 연결되어 상기 펩타이드가 시클릭 폼(cyclic form)을 형성하도록 하는 기능을 가지도록 설계될 수 있다. 일 구현예로, 상기 펩타이드는 N말단에 제1 보조부, C말단에 제2 보조부를 포함할 수 있다. 이때 상기 제1 보조부 및 제2 보조부는 각각 하나 이상의 시스테인(S)를 포함할 수 있다. 일 구현예로, 상기 펩타이드는 시클릭 폼(cyclic form)형태로 존재할 수 있다. 이때, 상기 펩타이드의 N말단 및 C말단은 보조부를 통해 연결되어 있을 수 있다.
보조부 기능 3 - 기타 기능
상기 보조부는 상기 기능 외 추가적인 기능을 가질 수 있다. 일 구현예로, 상기 보조부는 친수성 아미노산을 포함하며, 펩타이드의 용해도를 높이는 기능을 가질 수 있다. 일 구현예로, 상기 보조부는 대상의 체내에서 생물학적으로 불활성인 서열로 구성될 수 있다. 이때, 상기 보조부는 상기 B-cell 에피토프 및 Th 에피토프의 기능에는 영향이 없으며, 상기 펩타이드의 길이를 연장시키는 더미(dummy) 기능을 가질 수 있다. 구체적으로, 상기 펩타이드는 His-tag일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
복수 기능 수행 가능
상기 보조부는 하나 이상의 기능을 가질 수 있다. 일 구현예로, 상기 보조부는 링커 기능, 보호 기능, 시클릭 폼 형성 기능, 더미 기능, 및/또는 용해도를 높이는 기능을 가질 수 있다.
비표준 아미노산 포함 가능
상기 보조부는 하나 이상의 비표준 아미노산(nonstandard amino acid)을 포함할 수 있다. 상기 인공 아미노산은 보조부가 상기 링커 기능, 보호 기능, 및/또는 기타 기능을 나타내는데 필요한 것일 수 있다. 일 구현예로, 상기 보조부는 적어도 하나의 비표준 아미노산을 포함하고 있을 수 있다. 구체적으로, 상기 비표준 아미노산은 L-cyclohexylalanine, D-form alanine, 6-aminohexanoic acid로 이뤄진 군에서 선택된 하나 이상의 비표준 아미노산일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
보조부 길이
상기 보조부는 그 기능에 따라 적절한 길이로 설계될 수 있다. 상기 보조부가 복수의 기능을 가지는 경우, 상기 복수의 기능 모두를 발휘하기에 적절한 길이로 설계될 수 있다. 일 구현예로, 상기 보조부의 길이는 1mer, 2mer, 3mer, 4mer, 5mer, 6mer, 7mer, 8mer, 9mer, 10mer, 11mer, 12mer, 13mer, 14mer, 15mer, 16mer, 17mer, 18mer, 19mer, 20mer, 21mer, 22mer, 23mer, 24mer, 25mer, 26mer, 27mer, 28mer, 29mer, 30mer, 또는 31mer 이상일 수 있다. 일 구현예로, 상기 보조부의 길이는 바로 이전 문장의 두 수치범위 내 값을 가질 수 있다. 예를 들어, 상기 보조부의 길이는 1mer 내지 8mer일 수 있다. 또 다른 예를 들어, 상기 보조부의 길이는 15mer 내지 26mer일 수 있다.
보조부 특징 - B-cell 에피토프의 기능에 거의 영향을 미치지 않음
상기 보조부는 본 명세서에서 개시되는 펩타이드 단위체 및/또는 펩타이드가 대상의 체내에서 상기 B-cell 에피토프에 특이적으로 결합하는 항체를 유도하는 기능에 별다른 영향을 미치지 않는다.
보조부 서열 예시
일 구현예로, 상기 보조부는 a, Z, aZ, Za, RN, AF, CR, LS, KT, KH, RF, DP, SV, GL, ZRNV(서열번호 36), aZRN(서열번호 37), IAFZ(서열번호 38), AFZa(서열번호 39), RNVP(서열번호 40), WIAF(서열번호 41), ZCRF(서열번호 42), aZCR(서열번호 43), YLSZ(서열번호 44), LSZa(서열번호 45), CRFR(서열번호 46), VYLS(서열번호 47), ZKTT(서열번호 48), aZKT(서열번호 49), NKHZ(서열번호 50), KHZa(서열번호 51), GSHHHHHHGSDDDDK(서열번호 52), HHHHHH(서열번호 53), MRGSHHHHHHGSDDDDKIVD(서열번호 54), GGGGSGGGGGGSS(서열번호 55), RRRRRR(서열번호 159), GSHHHHHHGSDDDDKaZ(서열번호 193), 및 ZaGSHHHHHHGSDDDDK(서열번호 194)로 이뤄진 군에서 선택된 펩타이드일 수 있다. 이때, a는 D-form alanine, Z는 6-aminohexanoic acid를 나타낸다.
펩타이드 단위체 설계 개괄(DESIGNING PEPTIDE UNIT - OVERALL)
이하 가능한 펩타이드 단위체 설계 방법 및 그 형태에 대해 개시한다. 각 단위체는 적어도 하나의 B-cell 에피토프 및, 적어도 하나의 Th 에피토프를 포함하고, 적절한 수의 보조부를 포함할 수 있다. 상기 B-cell 에피토프, 상기 Th 에피토프, 및 상기 보조부의 연결 순서에 대해서는 각 형태 별로 예시되어 있다. 따로 기술하지 않은 한, 상기 펩타이드 단위체에 포함된 각 부분의 설계는 기본적으로 위에서 개시한 설계 원리를 따른다.
단위체-A 설계(DESIGNING UNIT-A)
단위체-A의 구조 1 - 개괄
본 명세서에서 제공하는 펩타이드 단위체로서, 1) 하나의 B-cell 에피토프 및 하나의 Th 에피토프를 포함하며, 2) 하나 이상의 보조부를 포함할 수 있는 펩타이드 단위체를 "단위체-A"라 명명한다. 상기 보조부의 기능은 상기 B-cell 에피토프 및 상기 Th 에피토프의 기능을 해치지 않는 한, 특별히 제한되지 않으며, 필요에 따라 적절히 설계된다.
일 구현예로, 단위체-A는 N말단에서 C말단 방향으로, 제1 B-cell 에피토프 및 제1 Th 에피토프가 순서대로 연결된 것일 수 있다.
더 나아가, 상기 단위체-A는 제1 보조부를 추가적으로 포함할 수 있다. 상기 단위체-A가 상기 제1 보조부를 포함하는 경우, 상기 단위체-A 서열 내에서 상기 제1 보조부의 서열은 상기 제1 B-cell 에피토프의 서열보다 상대적으로 N말단쪽에 위치한다. 이때, 상기 제1 보조부는 더미 기능, 용해도 향상 기능, 링커 기능, 및/또는 시클릭 폼 형성 기능을 가질 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
더 나아가, 상기 단위체-A는 제2 보조부를 추가적으로 포함할 수 있다. 상기 단위체-A가 상기 제2 보조부를 포함하는 경우, 상기 단위체-A 서열 내에서 상기 제2 보조부의 서열은 상기 제1 B-cell 에피토프의 서열과 상기 제1 Th 에피토프의 서열 사이에 위치한다. 이때, 상기 제2 보조부는 더미 기능, 용해도 향상 기능, 링커 기능, 및/또는 보호 기능을 가질 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
더 나아가, 단위체-A는 제3 보조부를 추가적으로 포함할 수 있다. 상기 단위체-A가 상기 제3 보조부를 포함하는 경우, 상기 단위체-A 서열 내에서 상기 제3 보조부의 서열은 상기 제1 Th 에피토프의 서열보다 상대적으로 C말단쪽에 위치한다. 이때, 상기 제3 보조부는 더미 기능, 용해도 향상 기능, 링커 기능, 보호 기능 및/또는 시클릭 폼 형성 기능을 가질 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
또 다른 구현예로, 단위체-A는 N말단에서 C말단 방향으로, 제2 Th 에피토프 및 제2 B-cell 에피토프가 순서대로 연결된 것일 수 있다.
더 나아가, 상기 단위체-A는 제4 보조부를 추가적으로 포함할 수 있다. 상기 단위체-A가 상기 제4 보조부를 포함하는 경우, 상기 단위체-A 서열 내에서 상기 제4 보조부의 서열은 상기 제2 Th 에피토프의 서열보다 상대적으로 N말단쪽에 위치한다. 이때, 상기 제4 보조부는 더미 기능, 용해도 향상 기능, 링커 기능, 및/또는 시클릭 폼 형성 기능을 가질 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
더 나아가, 상기 단위체-A는 제5 보조부를 추가적으로 포함할 수 있다. 상기 단위체-A가 상기 제5 보조부를 포함하는 경우, 상기 단위체-A 서열 내에서 상기 제5 보조부의 서열은 상기 제2 B-cell 에피토프의 서열과 상기 제2 Th 에피토프의 서열 사이에 위치한다. 이때, 상기 제5 보조부는 더미 기능, 용해도 향상 기능, 및/또는 링커 기능을 가질 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
더 나아가, 상기 단위체-A는 제6 보조부를 추가적으로 포함할 수 있다. 상기 단위체-A가 상기 제6 보조부를 포함하는 경우, 상기 단위체-A 서열 내에서 상기 제6 보조부의 서열은 상기 제2 B-cell 에피토프의 서열보다 상대적으로 C말단쪽에 위치한다. 이때, 상기 제6 보조부는 더미 기능, 용해도 향상 기능, 링커 기능, 및/또는 시클릭 폼 형성 기능을 가질 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
단위체-A의 구조 2 - 구조식
일 구현예로, 상기 단위체-A는 다음 [구조식 A] 또는 [구조식 A']으로 표현되는 펩타이드이다.
[구조식 A]
N-A1-B1-A2-T1-A3-C
[구조식 A']
N-A4-T2-A5-B2-A6-C
상기 B1 및 B2는 B-cell 에피토프로, 전술한 설계 원리를 따른다.
상기 T1 및 T2는 Th 에피토프로, 전술한 설계 원리를 따른다.
상기 A1 내지 A6는 보조부로, 생략될 수 있다.
이때, 상기 A1 내지 A6는 더미 기능, 용해도 향상 기능, 링커 기능, 및/또는 시클릭 폼 형성 기능을 가질 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
단위체-A의 길이
일 구현예로, 상기 단위체-A의 길이는 약 16mer, 약 17mer, 약 18mer, 약 19mer, 약 20mer, 약 21mer, 약 22mer, 약 23mer, 약 24mer, 약 25mer, 약 26mer, 약 27mer, 약 28mer, 약 29mer, 약 30mer, 약 31mer, 약 32mer, 약 33mer, 약 34mer, 약 35mer, 약 36mer, 약 37mer, 약 38mer, 약 39mer, 약 40mer, 약 41mer, 약 42mer, 약 43mer, 약 44mer, 약 45mer, 약 46mer, 약 47mer, 약 48mer, 약 49mer, 약 50mer, 약 51mer, 약 52mer, 약 53mer, 약 54mer, 약 55mer, 약 56mer, 약 57mer, 약 58mer, 약 59mer, 약 60mer, 약 61mer, 약 62mer, 약 63mer, 약 64mer, 약 65mer, 약 66mer, 약 67mer, 약 68mer, 약 69mer, 약 70mer, 약 71mer, 약 72mer, 약 73mer, 약 74mer, 약 75mer, 약 76mer, 약 77mer, 약 78mer, 약 79mer, 약 80mer, 약 81mer, 약 82mer, 약 83mer, 약 84mer, 약 85mer, 약 86mer, 약 87mer, 약 88mer, 약 89mer, 약 90mer, 약 91mer, 약 92mer, 약 93mer, 약 94mer, 약 95mer, 약 96mer, 약 97mer, 약 98mer, 약 99mer, 약 100mer일 수 있다. 일 구현예로, 상기 단위체-A의 길이는 바로 이전 문장에서 선택된 두 개의 수치범위 내의 값을 가질 수 있다. 예를 들어, 상기 단위체-A의 길이는 약 16mer 내지 약 30mer일 수 있다. 또 다른 예를 들어, 상기 단위체-A의 길이는 약 23mer 내지 약 60mer일 수 있다.
단위체-A 예시 - 예시 설계
일 구현예로, 단위체-A는 제1 B-cell 에피토프, 제1 보조부, 및 제1 Th 에피토프가 순서대로 연결된 서열을 가질 수 있다. 이때, 상기 제1 보조부는 링커 기능을 가지고, 하나 이상의 인공 아미노산을 포함한다.
일 구현예로, 단위체-A는 제2 보조부, 제2 B-cell 에피토프, 제3 보조부, 및 제2 Th 에피토프가 순서대로 연결된 서열을 가질 수 있다. 이때, 상기 제2 보조부는 His-tag이고, 상기 제3 보조부는 링커 기능을 가지며, 하나 이상의 인공 아미노산을 포함한다.
일 구현예로, 단위체-A는 제3 B-cell 에피토프, 제4 보조부, 제3 Th 에피토프, 및 제5 보조부가 순서대로 연결된 서열을 가질 수 있다. 이때, 상기 제4 보조부는 링커 기능 및 보호 기능을 가지고, 상기 제5 보조부는 보호 기능을 가진다. 상기 제4 보조부 및 상기 제5 보조부는 각각 하나 이상의 인공 아미노산을 포함한다.
일 구현예로, 단위체-A는 제6 보조부, 제4 B-cell 에피토프, 제7 보조부, 제4 Th 에피토프, 및 제8 보조부가 순서대로 연결된 서열을 가질 수 있다. 이때, 상기 제6 보조부는 His-tag이고, 상기 제7 보조부는 링커 기능 및 보호 기능을 가지고, 상기 제8 보조부는 보호 기능을 가진다. 상기 제7 보조부 및 상기 제8 보조부는 하나 이상의 인공 아미노산을 포함한다.
단위체-A 서열 예시
일 구현예로, 상기 단위체-A는 RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ(서열번호 56), ZaK(Cha)VAAWTLKAAaZRNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 57), CRFRGLISLSQVYLSZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ(서열번호 58), ZaK(Cha)VAAWTLKAAaZCRFRGLISLSQVYLS(서열번호 59), KTTKQSFDLSVKAQYKKNKHZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ(서열번호 60), ZaK(Cha)VAAWTLKAAaZKTTKQSFDLSVKAQYKKNKH(서열번호 61), RNVPPIFNDVYWIAFK(Cha)VAAWTLKAA(서열번호 62), K(Cha)VAAWTLKAARNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 63), RNVPPIFNDVYK(Cha)VAAWTLKAA(서열번호 64), PIFNDVYWIAFK(Cha)VAAWTLKAA(서열번호 65), PPIFNDVYWK(Cha)VAAWTLKAA(서열번호 66), RNVPPIFNDVYWIAFK(Cha)VAAWTLKAAHHHHHH(서열번호 67), RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZGSHHHHHHGSDDDDK(서열번호 68), GSHHHHHHGSDDDDKZaK(Cha)VAAWTLKAAaZRNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 69), RNVPPIFNDVYWIAFGSHHHHHHGSDDDDKZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ(서열번호 70), GSHHHHHHGSDDDDKZaK(Cha)VAAWTLKAAaZCRFRGLISLSQVYLS(서열번호 71), GSHHHHHHGSDDDDKCRFRGLISLSQVYLSZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ(서열번호 72), CRFRGLISLSQVYLSZaK(Cha)VAAWTLKAAaZGSHHHHHHGSDDDDK(서열번호 73), GSHHHHHHGSDDDDKZaK(Cha)VAAWTLKAAaZKTTKQSFDLSVKAQYKKNKH(서열번호 74), GSHHHHHHGSDDDDKKTTKQSFDLSVKAQYKKNKHZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ(서열번호 75), KTTKQSFDLSVKAQYKKNKHZaK(Cha)VAAWTLKAAaZGSHHHHHHGSDDDDK(서열번호 76), MRGSHHHHHHGSDDDDKIVDRNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ(서열번호 77), MRGSHHHHHHGSDDDDKIVDGSHHHHHHGSDDDDKRNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ(서열번호 78), MRGSHHHHHHGSDDDDKIVDRNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZGSHHHHHHGSDDDDK(서열번호 79), RNVPPIFNDVYWIAFILMQYIKANSKFIGI(서열번호 80), RNVPPIFNDVYWIAFILMQYIKANSKFIGIPMGLPQSIALSSLMVAQ(서열번호 81), CRNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZC(서열번호 82), RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAACR(서열번호 161), RNVPPIFNDVYWIAFXXKXVAAWTLKAAXXGSHHHHHHGSDDDDK(서열번호 199), GSHHHHHHGSDDDDKXXKXVAAWTLKAAXXRNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 200), RNVPPIFNDVYWIAFXXKXVAAWTLKAAXX(서열번호 204), RNVPPIFNDVYWIAFKXVAAWTLKAA(서열번호 205), RNVPPIFNDVYWIAFKXVAAWTLKAAHHHHHH(서열번호 206), RNVPPIFNDVYWIAFXXKXVAAWTLKAACR(서열번호 208), RNVPPIFNDVYWIAFXXKFVAAWTLKAAXX(서열번호 210), RNVPPIFNDVYWIAFXXKFVAAWTLKAACR(서열번호 212), RNVPPIFNDVYWIAFCTKPTDGN(서열번호 213), RNVPPIFNDVYWIAFLLPIFFCLW(서열번호 214), RNVPPIFNDVYWIAFFLPSDFFPSV(서열번호 215), RNVPPIFNDVYWIAFILMQYIKANSKFIGIHHHHHH(서열번호 219), 및 RNVPPIFNDVYWIAFMDIDPYKEFGATVELLSFLPHHHHHH(서열번호 220)로 이뤄진 군에서 선택된 펩타이드 단위체일 수 있다. 이때, a는 D-form alanine, Z는 6-aminohexanoic acid, (Cha)는 L-cyclohexylalanine, X는 임의의 표준 아미노산을 나타낸다.
단위체-B 설계(DESIGNING UNIT-B)
단위체-B의 구조 1 - 개괄
본 명세서에서 제공하는 펩타이드 단위체로서, 1) 두 개의 B-cell 에피토프, 및 하나의 Th 에피토프를 포함하고, 2) 상기 두 개의 B-cell 에피토프 중 하나의 B-cell 에피토프의 서열은 다른 하나의 B-cell 에피토프의 서열 및 상기 Th 에피토프의 서열 사이에 있으며, 3) 하나 이상의 보조부를 포함할 수 있는 펩타이드 단위체를 "단위체-B"라 명명한다. 상기 보조부의 기능은 상기 B-cell 에피토프 및 상기 Th 에피토프의 기능을 해치지 않는 한, 특별히 제한되지 않으며, 필요에 따라 적절히 설계된다.
일 구현예로, 단위체-B는 N말단에서 C말단 방향으로, 제1 B-cell 에피토프, 제2 B-cell 에피토프, 및 제1 Th 에피토프가 순서대로 연결된 것일 수 있다.
더 나아가, 상기 단위체-B는 제1 보조부를 추가적으로 포함할 수 있다. 상기 단위체-B가 상기 제1 보조부를 포함하는 경우, 상기 단위체-B 서열 내에서 상기 제1 보조부의 서열은 상기 제1 B-cell 에피토프의 서열보다 상대적으로 N말단쪽에 위치한다. 이때, 상기 제1 보조부는 더미 기능, 용해도 향상 기능, 링커 기능, 및/또는 시클릭 폼 형성 기능을 가질 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
더 나아가, 상기 단위체-B는 제2 보조부를 추가적으로 포함할 수 있다. 상기 단위체-B가 상기 제2 보조부를 포함하는 경우, 상기 단위체-B 서열 내에서 상기 제2 보조부의 서열은 상기 제1 B-cell 에피토프의 서열 및 상기 제2 B-cell 에피토프의 서열 서이에 위치한다. 이때, 상기 제2 보조부는 더미 기능, 용해도 향상 기능, 링커 기능, 및/또는 보호 기능을 가질 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
더 나아가, 상기 단위체-B는 제3 보조부를 추가적으로 포함할 수 있다. 상기 단위체-B가 상기 제3 보조부를 포함하는 경우, 상기 단위체-B 서열 내에서 상기 제3 보조부의 서열은 상기 제2 B-cell 에피토프의 서열 및 상기 제1 Th 에피토프의 서열 사이에 위치한다. 이때, 상기 제3 보조부는 더미 기능, 용해도 향상 기능, 링커 기능, 및/또는 보호 기능을 가질 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
더 나아가, 상기 단위체-B는 제4 보조부를 추가적으로 포함할 수 있다. 상기 단위체-B가 상기 제4 보조부를 포함하는 경우, 상기 단위체-B 서열 내에서 상기 제4 보조부의 서열은 상기 단위체-B 서열 내에서 상기 제1 Th 에피토프의 서열보다 상대적으로 C말단쪽에 위치한다. 이때, 상기 제4 보조부는 더미 기능, 용해도 향상 기능, 링커 기능, 및/또는 시클릭 폼 형성 기능을 가질 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
또 다른 구현예로, 단위체-B는 N말단에서 C말단 방향으로, 제2 Th 에피토프, 제3 B-cell 에피토프, 및 제4 B-cell 에피토프가 순서대로 연결된 것일 수 있다.
더 나아가, 상기 단위체-B는 제5 보조부를 추가적으로 포함할 수 있다. 상기 단위체-B가 상기 제5 보조보를 포함하는 경우, 상기 단위체-B 서열 내에서 상기 제5 보조부의 서열은 상기 제2 Th 에피토프의 서열보다 상대적으로 N말단쪽에 위치한다. 이때, 상기 제5 보조부는 더미 기능, 용해도 향상 기능, 링커 기능, 및/또는 시클릭 폼 형성 기능을 가질 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
더 나아가, 상기 단위체-B는 제6 보조부를 추가적으로 포함할 수 있다. 상기 단위체-B가 상기 제6 보조부를 포함하는 경우, 상기 단위체-B 서열 내에서 상기 제6 보조부의 서열은 상기 제2 Th 에피토프의 서열 및 상기 제3 B-cell 에피토프의 서열 서이에 위치한다. 이때, 상기 제6 보조부는 더미 기능, 용해도 향상 기능, 링커 기능, 및/또는 보호 기능을 가질 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
더 나아가, 상기 단위체-B는 제7 보조부를 추가적으로 포함할 수 있다. 상기 단위체-B가 상기 제7 보조부를 포함하는 경우, 상기 단위체-B 서열 내에서 상기 제7 보조부의 서열은 상기 제3 B-cell 에피토프의 서열 및 상기 제4 B-cell 에피토프의 서열 서이에 위치한다. 이때, 상기 제7 보조부는 더미 기능, 용해도 향상 기능, 링커 기능, 및/또는 보호 기능을 가질 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
더 나아가, 상기 단위체-B는 제8 보조부를 추가적으로 포함할 수 있다. 상기 단위체-B가 상기 제8 보조부를 포함하는 경우, 상기 단위체-B 서열 내에서 상기 제8 보조부의 서열은 상기 단위체-B 서열 내에서 상기 제4 B-cell 에피토프의 서열보다 상대적으로 C말단쪽에 위치한다. 이때, 상기 제8 보조부는 더미 기능, 용해도 향상 기능, 링커 기능, 및/또는 시클릭 폼 형성 기능을 가질 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
단위체-B의 구조 2 - 구조식
일 구현예로, 상기 단위체-B는 다음 [구조식 B] 또는 [구조식 B']으로 표현되는 펩타이드이다.
[구조식 B]
N-A1-B1-A2-B2-A3-T1-A4-C
[구조식 B']
N-A5-T2-A6-B3-A7-B4-A8-C
상기 B1 내지 B4는 B-cell 에피토프로, 각각 전술한 설계 원리를 따른다.
상기 T1 및 T2는 Th 에피토프로, 전술한 설계 원리를 따른다.
상기 A1 내지 A8은 보조부로, 생략될 수 있다.
이때, 상기 A1 내지 A8은 더미 기능, 용해도 향상 기능, 링커 기능, 및/또는 시클릭 폼 형성 기능을 가질 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
단위체-B의 길이
일 구현예로, 상기 단위체-B의 길이는 약 24mer, 약 25mer, 약 26mer, 약 27mer, 약 28mer, 약 29mer, 약 30mer, 약 31mer, 약 32mer, 약 33mer, 약 34mer, 약 35mer, 약 36mer, 약 37mer, 약 38mer, 약 39mer, 약 40mer, 약 41mer, 약 42mer, 약 43mer, 약 44mer, 약 45mer, 약 46mer, 약 47mer, 약 48mer, 약 49mer, 약 50mer, 약 51mer, 약 52mer, 약 53mer, 약 54mer, 약 55mer, 약 56mer, 약 57mer, 약 58mer, 약 59mer, 약 60mer, 약 61mer, 약 62mer, 약 63mer, 약 64mer, 약 65mer, 약 66mer, 약 67mer, 약 68mer, 약 69mer, 약 70mer, 약 71mer, 약 72mer, 약 73mer, 약 74mer, 약 75mer, 약 76mer, 약 77mer, 약 78mer, 약 79mer, 약 80mer, 약 81mer, 약 82mer, 약 83mer, 약 84mer, 약 85mer, 약 86mer, 약 87mer, 약 88mer, 약 89mer, 약 90mer, 약 91mer, 약 92mer, 약 93mer, 약 94mer, 약 95mer, 약 96mer, 약 97mer, 약 98mer, 약 99mer, 약 100mer일 수 있다. 일 구현예로, 상기 단위체-B의 길이는 바로 이전 문장에서 선택된 두 개의 수치범위 내의 값을 가질 수 있다. 예를 들어, 상기 단위체-B의 길이는 약 24mer 내지 약 45mer일 수 있다. 또 다른 예를 들어, 상기 단위체-B의 길이는 약 40mer 내지 약 80mer일 수 있다.
단위체-B 예시 - 예시 설계
일 구현예로, 단위체-B는 제1 보조부, 제1 B-cell 에피토프, 제2 B-cell 에피토프, 제2 보조부, 및 제1 Th 에피토프가 순서대로 연결된 서열을 가질 수 있다. 이때, 상기 제1 보조부는 His-tag이고, 상기 제2 보조부는 링커 기능을 가지며, 하나 이상의 인공 아미노산을 포함한다.
일 구현예로, 단위체-B는 제3 B-cell 에피토프, 제4 B-cell 에피토프, 제3 보조부, 및 제2 Th 에피토프가 순서대로 연결된 서열을 가질 수 있다. 이때, 상기 제3 보조부는 링커 기능을 가지며, 하나 이상의 인공 아미노산을 포함한다.
일 구현예로, 단위체-B는 제4 보조부, 제5 B-cell 에피토프, 제6 B-cell 에피토프, 제5 보조부, 제3 Th 에피토프, 및 제6 보조부가 순서대로 연결된 서열을 가질 수 있다. 이때, 상기 제4 보조부는 His-tag이고, 상기 제5 보조부는 링커 기능 및 보호 기능을 가지고 하나 이상의 인공 아미노산을 포함하며, 상기 제6 보조부는 보호 기능을 가지고, 하나 이상의 인공 아미노산을 포함한다.
일 구현예로, 단위체-B는 제7 B-cell 에피토프, 제8 B-cell 에피토프, 제7 보조부, 제4 Th 에피토프, 및 제8 보조부가 순서대로 연결된 서열을 가질 수 있다. 이때, 상기 제7 보조부는 링커 기능 및 보호 기능을 가지고 하나 이상의 인공 아미노산을 포함하며, 상기 제8 보조부는 보호 기능을 가지고, 하나 이상의 인공 아미노산을 포함한다.
일 구현예로, 단위체-B는 제8 보조부, 제9 B-cell 에피토프, 제9 보조부, 제10 B-cell 에피토프, 제10 보조부, 및 제5 Th 에피토프가 순서대로 연결된 서열을 가질 수 있다. 이때, 상기 제8 보조부는 His-tag이고, 상기 제9 보조부는 링커 기능을 가지며, 상기 제10 보조부는 링커 기능을 가지고, 하나 이상의 인공 아미노산을 포함한다.
일 구현예로, 단위체-B는 제11 B-cell 에피토프, 제11 보조부, 제12 B-cell 에피토프, 제12 보조부, 및 제6 Th 에피토프가 순서대로 연결된 서열을 가질 수 있다. 이때, 상기 제11 보조부는 링커 기능을 가지며, 상기 제12 보조부는 링커 기능을 가지고, 하나 이상의 인공 아미노산을 포함한다.
일 구현예로, 단위체-B는 제13 B-cell 에피토프, 제13 보조부, 제14 B-cell 에피토프, 제14 보조부, 제7 Th 에피토프, 및 제15 보조부가 순서대로 연결된 서열을 가질 수 있다. 이때, 상기 제13 보조부는 링커 기능을 가지며, 상기 제14 보조부는 링커 기능 및 보호 기능을 가지고, 하나 이상의 인공 아미노산을 포함하고, 상기 제15 보조부는 보호 기능을 가지고, 하나 이상의 인공 아미노산을 포함한다.
단위체-B 서열 예시
일 구현예로, 상기 단위체-B는 RNVPPIFNDVYWIAFRNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ(서열번호 83), RNVPPIFNDVYWIAFCRFRGLISLSQVYLSZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ(서열번호 84), RNVPPIFNDVYWIAFKTTKQSFDLSVKAQYKKNKHZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ(서열번호 85), CRFRGLISLSQVYLSRNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ(서열번호 86), CRFRGLISLSQVYLSCRFRGLISLSQVYLSZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ(서열번호 87), CRFRGLISLSQVYLSKTTKQSFDLSVKAQYKKNKHZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ(서열번호 88), KTTKQSFDLSVKAQYKKNKHRNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ(서열번호 89), KTTKQSFDLSVKAQYKKNKHCRFRGLISLSQVYLSZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ(서열번호 90), KTTKQSFDLSVKAQYKKNKHKTTKQSFDLSVKAQYKKNKHZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ(서열번호 91), RNVPPIFNDVYWIAFCRFRGLISLSQVYLSK(Cha)VAAWTLKAA(서열번호 92), PIFNDVYWIAFGLISLSQVYLSK(Cha)VAAWTLKAA(서열번호 93), RNVPPIFNDVYCRFRGLISLSQK(Cha)VAAWTLKAA(서열번호 94), PIFNDVYWIAFCRFRGLISLSQK(Cha)VAAWTLKAA(서열번호 95), PPIFNDVYWRGLISLSQVK(Cha)VAAWTLKAA(서열번호 96), RNVPPIFNDVYWIAFCRFRGLISLSQVYLSK(Cha)VAAWTLKAAHHHHHH(서열번호 97), MRGSHHHHHHGSDDDDKIVDRNVPPIFNDVYWIAFCRFRGLISLSQVYLSZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ(서열번호 98), MRGSHHHHHHGSDDDDKIVDRNVPPIFNDVYWIAFCRFRGLISLSQVYLSZaK(Cha)VAAWTLKAA(서열번호 99), RNVPPIFNDVYWIAFCRFRGLISLSQVYLSZaK(Cha)VAAWTLKAA(서열번호 100), MRGSHHHHHHGSDDDDKIVDRNVPPIFNDVYWIAFGGGGSGGGGGGSSRNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAA(서열번호 101), RNVPPIFNDVYWIAFGGGGSGGGGGGSSRNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAA(서열번호 102), RNVPPIFNDVYWIAFGGGGSGGGGGGSSRNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ(서열번호 103), RNVPPIFNDVYWIAFRNVPPIFNDVYWIAFILMQYIKANSKFIGI(서열번호 104), RNVPPIFNDVYWIAFRNVPPIFNDVYWIAFILMQYIKANSKFIGIPMGLPQSIALSSLMVAQ(서열번호 105), CRNVPPIFNDVYWIAFCRFRGLISLSQVYLSZaK(Cha)VAAWTLKAAaZC(서열번호 106), 및 RNVPPIFNDVYWIAFCRFRGLISLSQVYLSXXK(Cha)VAAWTLKAAXX(서열번호 202)로 이뤄진 군에서 선택된 펩타이드 단위체일 수 있다. 이때, a는 D-form alanine, Z는 6-aminohexanoic acid, (Cha)는 L-cyclohexylalanine, X는 임의의 표준 아미노산을 나타낸다.
단위체-C 설계(DESIGNING UNIT-C)
단위체-C의 구조 1 - 개괄
본 명세서에서 제공하는 펩타이드 단위체로서, 1) 두 개의 B-cell 에피토프 및 하나의 Th 에피토프를 포함하고, 2) 상기 Th 에피토프의 서열은 상기 두 개의 B-cell 에피토프 중 하나의 B-cell 에피토프의 서열 및 다른 하나의 B-cell 에피토프의 서열 사이에 있으며, 3) 하나 이상의 보조부를 포함할 수 있는 펩타이드 단위체를 "단위체-C"라 명명한다. 상기 보조부의 기능은 상기 B-cell 에피토프 및 상기 Th 에피토프의 기능을 해치지 않는 한, 특별히 제한되지 않으며, 필요에 따라 적절히 설계된다.
일 구현예로, 상기 단위체-C는 N말단에서 C말단 방향으로, 제1 B-cell 에피토프, 제1 Th 에피토프, 및 제2 B-cell 에피토프가 순서대로 연결된 것일 수 있다.
더 나아가, 상기 단위체-C는 제1 보조부를 추가적으로 포함할 수 있다. 상기 단위체-C가 상기 제1 보조부를 추가적으로 포함하는 경우, 상기 단위체-C 서열 내에서 상기 제1 보조부의 서열은 상기 제1 B-cell 에피토프의 서열보다 상대적으로 N말단쪽에 위치한다. 이때, 상기 제1 보조부는 더미 기능, 용해도 향상 기능, 링커 기능, 및/또는 시클릭 폼 형성 기능을 가질 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
더 나아가, 상기 단위체-C는 제2 보조부를 추가적으로 포함할 수 있다. 상기 단위체-C가 상기 제2 보조부를 포함하는 경우, 상기 단위체-C 서열 내에서 상기 제2 보조부의 서열은 상기 제1 B-cell 에피토프의 서열 및 상기 제1 Th 에피토프의 서열 서이에 위치한다. 이때, 상기 제2 보조부는 더미 기능, 용해도 향상 기능, 링커 기능, 및/또는 보호 기능을 가질 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
더 나아가, 상기 단위체-C는 제3 보조부를 추가적으로 포함할 수 있다. 상기 단위체-C가 상기 제3 보조부를 포함하는 경우, 상기 단위체-C 서열 내에서 상기 제3 보조부의 서열은 상기 제1 Th 에피토프의 서열 및 상기 제2 B-cell 에피토프의 서열 사이에 위치한다. 이때, 상기 제3 보조부는 더미 기능, 용해도 향상 기능, 링커 기능, 및/또는 보호 기능을 가질 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
더 나아가, 상기 단위체-C는 제4 보조부를 추가적으로 포함할 수 있다. 상기 단위체-C가 상기 제4 보조부를 포함하는 경우, 상기 단위체-C 서열 내에서 상기 제4 보조부의 서열은 상기 단위체-C 서열 내에서 상기 제2 B-cell 에피토프의 서열보다 상대적으로 C말단쪽에 위치한다. 이때, 상기 제4 보조부는 더미 기능, 용해도 향상 기능, 링커 기능, 및/또는 시클릭 폼 형성 기능을 가질 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
단위체-C의 구조 2 - 구조식
일 구현예로, 상기 단위체-C는 다음 [구조식 C]로 표현되는 펩타이드이다.
[구조식 C]
N-A1-B1-A2-T1-A3-B2-A4-C
상기 B1 및 B2는 B-cell 에피토프로, 각각 전술한 설계 원리를 따른다.
상기 T1은 Th 에피토프로, 전술한 설계 원리를 따른다.
상기 A1, A2, A3, 및 A4는 보조부로, 생략될 수 있다.
이때, 상기 A1, A2, A3, 및 A4는 더미 기능, 용해도 향상 기능, 링커 기능, 및/또는 시클릭 폼 형성 기능을 가질 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
단위체-C의 길이
일 구현예로, 상기 단위체-C의 길이는 약 24mer, 약 25mer, 약 26mer, 약 27mer, 약 28mer, 약 29mer, 약 30mer, 약 31mer, 약 32mer, 약 33mer, 약 34mer, 약 35mer, 약 36mer, 약 37mer, 약 38mer, 약 39mer, 약 40mer, 약 41mer, 약 42mer, 약 43mer, 약 44mer, 약 45mer, 약 46mer, 약 47mer, 약 48mer, 약 49mer, 약 50mer, 약 51mer, 약 52mer, 약 53mer, 약 54mer, 약 55mer, 약 56mer, 약 57mer, 약 58mer, 약 59mer, 약 60mer, 약 61mer, 약 62mer, 약 63mer, 약 64mer, 약 65mer, 약 66mer, 약 67mer, 약 68mer, 약 69mer, 약 70mer, 약 71mer, 약 72mer, 약 73mer, 약 74mer, 약 75mer, 약 76mer, 약 77mer, 약 78mer, 약 79mer, 약 80mer, 약 81mer, 약 82mer, 약 83mer, 약 84mer, 약 85mer, 약 86mer, 약 87mer, 약 88mer, 약 89mer, 약 90mer, 약 91mer, 약 92mer, 약 93mer, 약 94mer, 약 95mer, 약 96mer, 약 97mer, 약 98mer, 약 99mer, 약 100mer일 수 있다. 일 구현예로, 상기 단위체-C의 길이는 바로 이전 문장에서 선택된 두 개의 수치범위 내의 값을 가질 수 있다. 예를 들어, 상기 단위체-C의 길이는 약 24mer 내지 약 45mer일 수 있다. 또 다른 예를 들어, 상기 단위체-C의 길이는 약 40mer 내지 약 80mer일 수 있다.
단위체-C 예시 - 예시 설계
일 구현예로, 단위체-C는 제1 B-cell 에피토프, 제1 보조부, 제1 Th 에피토프, 제2 보조부, 및 제2 B-cell 에피토프가 순서대로 연결된 서열을 가질 수 있다. 이때, 상기 제1 보조부 및 제2 보조부는 각각 링커 기능 및 보호 기능을 가진다. 상기 제1 보조부 및 제2 보조부는 각각 하나 이상의 인공 아미노산을 포함한다.
일 구현예로, 단위체-C는 제3 보조부, 제3 B-cell 에피토프, 제4 보조부, 제2 Th 에피토프, 제5 보조부, 및 제 4 B-cell 에피토프가 순서대로 연결된 서열을 가질 수 있다. 이때, 상기 제3 보조부는 His-tag이고, 상기 제4 보조부 및 제5 보조부는 각각 링커 기능 및 보호 기능을 가진다. 상기 제4 보조부 및 제5 보조부는 각각 하나 이상의 인공 아미노산을 포함한다.
단위체-C 서열 예시
일 구현예로, 상기 단위체-C는 RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZRNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 107), RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZCRFRGLISLSQVYLS(서열번호 108), RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZKTTKQSFDLSVKAQYKKNKH(서열번호 109), CRFRGLISLSQVYLSZaK(Cha)VAAWTLKAAaZRNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 110), CRFRGLISLSQVYLSZaK(Cha)VAAWTLKAAaZCRFRGLISLSQVYLS(서열번호 111), RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZKTTKQSFDLSVKAQYKKNKH(서열번호 112), KTTKQSFDLSVKAQYKKNKHZaK(Cha)VAAWTLKAAaZRNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 113), KTTKQSFDLSVKAQYKKNKHZaK(Cha)VAAWTLKAAaZCRFRGLISLSQVYLS(서열번호 114), KTTKQSFDLSVKAQYKKNKHZaK(Cha)VAAWTLKAAaZKTTKQSFDLSVKAQYKKNKH(서열번호 115), PIFNDVYWIAFK(Cha)VAAWTLKAACRFRGLISLSQ(서열번호 116), PPIFNDVYWK(Cha)VAAWTLKAARGLISLSQV(서열번호 117), MRGSHHHHHHGSDDDDKIVD RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZRNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 118), MRGSHHHHHHGSDDDDKIVDRNVPPIFNDVYWIAF GGGGSGGGGGGSS ILMQYIKANSKFIGIPMGLPQSIALSSLMVAQ GGGGSGGGGGGSSCRFRGLISLSQVYLS(서열번호 119), RNVPPIFNDVYWIAFILMQYIKANSKFIGICRFRGLISLSQVYLS(서열번호 120), RNVPPIFNDVYWIAFZPKYVKQNTLKLATZCRFRGLISLSQVYLS(서열번호 121), CRNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZRNVPPIFNDVYWIAFC(서열번호 122), RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAACRFRGLISLSQVYLS(서열번호 160), RNVPPIFNDVYWIAFXXKXVAAWTLKAAXXCRFRGLISLSQVYLS(서열번호 198), KTTKQSFDLSVKAQYKKNKHXXKXVAAWTLKAAXXCRFRGLISLSQVYLS(서열번호 201), RNVPPIFNDVYWIAFXPKYVKQNTLKLATXCRFRGLISLSQVYLS(서열번호 203), RNVPPIFNDVYWIAFXXKXVAAWTLKAACRFRGLISLSQVYLS(서열번호 207), RNVPPIFNDVYWIAFXXKFVAAWTLKAAXXCRFRGLISLSQVYLS(서열번호 209), RNVPPIFNDVYWIAFXXKFVAAWTLKAACRFRGLISLSQVYLS(서열번호 211), KTTKQSFDLSVKAQYKKNKHZaWPEANQVGAGAFGPGFaZCRFRGLISLSQVYLS(서열번호 216), KTTKQSFDLSVKAQYKKNKHZaMDIDPYKEFGATVELLSFLPaZCRFRGLISLSQVYLS(서열번호 217), 및 KTTKQSFDLSVKAQYKKNKHZaILMQYIKANSKFIGIPMGLPQSIALSSLMVAQaZCRFRGLISLSQVYLS(서열번호 218)로 이뤄진 군에서 선택된 펩타이드 단위체일 수 있다. 이때, a는 D-form alanine, Z는 6-aminohexanoic acid, (Cha)는 L-cyclohexylalanine, X는 임의의 표준 아미노산을 나타낸다.
단위체-D 설계(DESIGNING UNIT-D)
단위체-D의 구조 1 - 개괄
본 명세서에서 제공하는 펩타이드 단위체로서, 1) 하나의 B-cell 에피토프 및 두 개의 Th 에피토프를 포함하고, 2) 상기 두 개의 Th 에피토프 중 하나의 Th 에피토프의 서열은 다른 하나의 Th 에피토프의 서열 및 상기 B-cell 에피토프의 서열 사이에 있으며, 3) 하나 이상의 보조부를 포함할 수 있는 펩타이드 단위체를 "단위체-C"라 명명한다. 상기 보조부의 기능은 상기 B-cell 에피토프 및 상기 Th 에피토프의 기능을 해치지 않는 한, 특별히 제한되지 않으며, 필요에 따라 적절히 설계된다.
일 구현예로, 단위체-D는 N말단에서 C말단 방향으로, 제1 B-cell 에피토프, 제1 Th 에피토프, 및 제2 Th 에피토프가 순서대로 연결된 것일 수 있다.
더 나아가, 상기 단위체-D는 제1 보조부를 추가적으로 포함할 수 있다. 상기 단위체-D가 상기 제1 보조부를 포함하는 경우, 상기 단위체-D 서열 내에서 상기 제1 보조부의 서열은 상기 제1 B-cell 에피토프의 서열보다 상대적으로 N말단쪽에 위치한다. 이때, 상기 제1 보조부는 더미 기능, 용해도 향상 기능, 링커 기능, 및/또는 시클릭 폼 형성 기능을 가질 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
더 나아가, 상기 단위체-D는 제2 보조부를 추가적으로 포함할 수 있다. 상기 단위체-D가 상기 제2 보조부를 포함하는 경우, 상기 단위체-D 서열 내에서 상기 제2 보조부의 서열은 상기 제1 B-cell 에피토프의 서열 및 상기 제1 Th 에피토프의 서열 서이에 위치한다. 이때, 상기 제2 보조부는 더미 기능, 용해도 향상 기능, 링커 기능, 및/또는 보호 기능을 가질 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
더 나아가, 상기 단위체-D는 제3 보조부를 추가적으로 포함할 수 있다. 상기 단위체-D가 상기 제3 보조부를 포함하는 경우, 상기 단위체-D 서열 내에서 상기 제3 보조부의 서열은 상기 제1 Th 에피토프의 서열 및 상기 제2 Th 에피토프의 서열 사이에 위치한다. 이때, 상기 제3 보조부는 더미 기능, 용해도 향상 기능, 링커 기능, 및/또는 보호 기능을 가질 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
더 나아가, 상기 단위체-D는 제4 보조부를 추가적으로 포함할 수 있다. 상기 단위체-D가 상기 제4 보조부를 포함하는 경우, 상기 단위체-D 서열 내에서 상기 제4 보조부의 서열은 상기 단위체-D 서열 내에서 상기 제2 Th 에피토프의 서열보다 상대적으로 C말단쪽에 위치한다. 이때, 상기 제4 보조부는 더미 기능, 용해도 향상 기능, 링커 기능, 및/또는 시클릭 폼 형성 기능을 가질 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
또 다른 구현예로, 단위체-D는 N말단에서 C말단 방향으로, 제3 Th 에피토프, 제4 Th 에피토프, 및 제2 B-cell 에피토프가 순서대로 연결된 것일 수 있다.
더 나아가, 상기 단위체-D는 제5 보조부를 추가적으로 포함할 수 있다. 상기 단위체-D가 상기 제5 보조보를 포함하는 경우, 상기 단위체-D 서열 내에서 상기 제5 보조부의 서열은 상기 제3 Th 에피토프의 서열보다 상대적으로 N말단쪽에 위치한다. 이때, 상기 제5 보조부는 더미 기능, 용해도 향상 기능, 링커 기능, 및/또는 시클릭 폼 형성 기능을 가질 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
더 나아가, 상기 단위체-D는 제6 보조부를 추가적으로 포함할 수 있다. 상기 단위체-D가 상기 제6 보조부를 포함하는 경우, 상기 단위체-D 서열 내에서 상기 제6 보조부의 서열은 상기 제3 Th 에피토프의 서열 및 상기 제4 Th 에피토프의 서열 서이에 위치한다. 이때, 상기 제2 보조부는 더미 기능, 용해도 향상 기능, 링커 기능, 및/또는 보호 기능을 가질 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
더 나아가, 상기 단위체-D는 제7 보조부를 추가적으로 포함할 수 있다. 상기 단위체-D가 상기 제7 보조부를 포함하는 경우, 상기 단위체-D 서열 내에서 상기 제7 보조부의 서열은 상기 제4 Th 에피토프의 서열 및 상기 제2 B-cell 에피토프의 서열 서이에 위치한다. 이때, 상기 제7 보조부는 더미 기능, 용해도 향상 기능, 링커 기능, 및/또는 보호 기능을 가질 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
더 나아가, 상기 단위체-D는 제8 보조부를 추가적으로 포함할 수 있다. 상기 단위체-D가 상기 제8 보조부를 포함하는 경우, 상기 단위체-D 서열 내에서 상기 제8 보조부의 서열은 상기 단위체-D 서열 내에서 상기 제2 B-cell 에피토프의 서열보다 상대적으로 C말단쪽에 위치한다. 이때, 상기 제8 보조부는 더미 기능, 용해도 향상 기능, 링커 기능, 및/또는 시클릭 폼 형성 기능을 가질 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
단위체-D의 구조 2 - 구조식
일 구현예로, 상기 단위체-B는 다음 [구조식 D] 또는 [구조식 D']으로 표현되는 펩타이드이다.
[구조식 D]
N-A1-B1-A2-T1-A3-T2-A4-C
[구조식 D']
N-A5-T3-A6-T4-A7-B2-A8-C
상기 B1 및 B2는 B-cell 에피토프로, 각각 전술한 설계 원리를 따른다.
상기 T1 내지 T4는 Th 에피토프로, 전술한 설계 원리를 따른다.
상기 A1 내지 A8은 보조부로, 생략될 수 있다.
이때, 상기 A1 내지 A8은 더미 기능, 용해도 향상 기능, 링커 기능, 및/또는 시클릭 폼 형성 기능을 가질 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
단위체-D의 길이
일 구현예로, 상기 단위체-D의 길이는 약 24mer, 약 25mer, 약 26mer, 약 27mer, 약 28mer, 약 29mer, 약 30mer, 약 31mer, 약 32mer, 약 33mer, 약 34mer, 약 35mer, 약 36mer, 약 37mer, 약 38mer, 약 39mer, 약 40mer, 약 41mer, 약 42mer, 약 43mer, 약 44mer, 약 45mer, 약 46mer, 약 47mer, 약 48mer, 약 49mer, 약 50mer, 약 51mer, 약 52mer, 약 53mer, 약 54mer, 약 55mer, 약 56mer, 약 57mer, 약 58mer, 약 59mer, 약 60mer, 약 61mer, 약 62mer, 약 63mer, 약 64mer, 약 65mer, 약 66mer, 약 67mer, 약 68mer, 약 69mer, 약 70mer, 약 71mer, 약 72mer, 약 73mer, 약 74mer, 약 75mer, 약 76mer, 약 77mer, 약 78mer, 약 79mer, 약 80mer, 약 81mer, 약 82mer, 약 83mer, 약 84mer, 약 85mer, 약 86mer, 약 87mer, 약 88mer, 약 89mer, 약 90mer, 약 91mer, 약 92mer, 약 93mer, 약 94mer, 약 95mer, 약 96mer, 약 97mer, 약 98mer, 약 99mer, 약 100mer일 수 있다. 일 구현예로, 상기 단위체-B의 길이는 바로 이전 문장에서 선택된 두 개의 수치범위 내의 값을 가질 수 있다. 예를 들어, 상기 단위체-D의 길이는 약 24mer 내지 약 45mer일 수 있다. 또 다른 예를 들어, 상기 단위체-D의 길이는 약 40mer 내지 약 80mer일 수 있다.
단위체-D 예시 - 예시 설계
일 구현예로, 단위체-D는 제1 보조부, 제1 B-cell 에피토프, 제2 보조부, 제1 Th 에피토프, 제3 보조부, 및 제2 Th 에피토프가 순서대로 연결된 서열을 가질 수 있다. 이때, 상기 제1 보조부는 His-tag이고, 상기 제2 보조부 및 제3 보조부는 각각 링커 기능을 가진다. 상기 제2 보조부 및 제3 보조부는 각각 하나 이상의 인공 아미노산을 포함한다.
일 구현예로, 단위체-D는 제4 보조부, 제2 B-cell 에피토프, 제5 보조부, 제3 Th 에피토프, 제6 보조부, 제4 Th 에피토프, 및 제7 보조부가 순서대로 연결된 서열을 가질 수 있다. 이때, 상기 제4 보조부는 His-tag이고, 상기 제5 보조부 및 제6 보조부는 각각 링커 기능을 가지고, 상기 제7 보조부는 보호 기능을 가진다. 상기 제5 보조부, 제6 보조부 및 제7 보조부는 각각 하나 이상의 인공 아미노산을 포함한다.
일 구현예로, 단위체-D는 제3 B-cell 에피토프, 제8 보조부, 제5 Th 에피토프, 제9 보조부, 및 제6 Th 에피토프를 포함한다. 이때, 상기 제8 보조부 및 제9 보조부는 각각 링커 기능을 가진다. 상기 제8 보조부 및 제9 보조부는 각각 하나 이상의 인공 아미노산을 포함한다.
일 구현예로, 단위체-D는 제4 B-cell 에피토프, 제10 보조부, 제7 Th 에피토프, 제11 보조부, 제8 Th 에피토프, 및 제12 보조부를 포함한다. 이때, 상기 제10 보조부 및 제11 보조부는 각각 링커 기능을 가진다. 상기 제12 보조부는 보호 기능을 가진다. 상기 제10 보조부, 제11 보조부 및 제12 보조부는 각각 하나 이상의 인공 아미노산을 포함한다.
단위체-D 서열 예시
일 구현예로, 상기 단위체-D는 RNVPPIFNDVYWIAF ZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ ILMQYIKANSKFIGI(서열번호 123), CRFRGLISLSQVYLS ZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ ILMQYIKANSKFIGI(서열번호 124), KTTKQSFDLSVKAQYKKNKH ZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ ILMQYIKANSKFIGI(서열번호 125), ILMQYIKANSKFIGI ZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ RNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 126), ILMQYIKANSKFIGI ZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ CRFRGLISLSQVYLS(서열번호 127), ILMQYIKANSKFIGI ZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ KTTKQSFDLSVKAQYKKNKH(서열번호 128), PIFNDVYWIAF K(Cha)VAAWTLKAA K(Cha)VAAWTLKAA(서열번호 129), PPIFNDVYW K(Cha)VAAWTLKAA K(Cha)VAAWTLKAA(서열번호 130), MRGSHHHHHHGSDDDDKIVDRNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZILMQYIKANSKFIGI(서열번호 131), MRGSHHHHHHGSDDDDKIVDILMQYIKANSKFIGIZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ(서열번호 132), MRGSHHHHHHGSDDDDKIVDRNVPPIFNDVYWIAFGGGGSGGGGGGSSZaK(Cha)VAAWTLKAAaZILMQYIKANSKFIGI(서열번호 133), MRGSHHHHHHGSDDDDKIVDRNVPPIFNDVYWIAFGGGGSGGGGGGSSILMQYIKANSKFIGIPMGLPQSIALSSLMVAQGGGGSGGGGGGSSILMQYIKANSKFIGIPMGLPQSIALSSLMVAQ(서열번호 134), RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZK(Cha)LAAFTIRAAaZ(서열번호 135), 및 CRNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZILMQYIKANSKFIGIC(서열번호 136)로 이뤄진 군에서 선택된 단위체 펩타이드일 수 있다. 이때, a는 D-form alanine, Z는 6-aminohexanoic acid, (Cha)는 L-cyclohexylalanine를 나타낸다.
단위체-E 설계(DESIGNING UNIT-E)
단위체-E의 구조 1 - 개괄
본 명세서에서 제공하는 펩타이드 단위체로서, 1) 두 개의 B-cell 에피토프 및 두 개의 Th 에피토프를 포함하고, 2) 상기 두 개의 Th 에피토프 각각의 서열은 모두 상기 두 개의 B-cell 에피토프 중 하나의 B-cell 에피토프의 서열 및 다른 하나의 B-cell 에피토프의 서열 사이에 있으며, 3) 하나 이상의 보조부를 포함할 수 있는 펩타이드 단위체를 "단위체-E"라 명명한다. 상기 보조부의 기능은 상기 B-cell 에피토프 및 상기 Th 에피토프의 기능을 해치지 않는 한, 특별히 제한되지 않으며, 필요에 따라 적절히 설계된다.
일 구현예로, 상기 단위체-E는 N말단에서 C말단 방향으로, 제1 B-cell 에피토프, 제1 Th 에피토프, 제2 Th 에피토프, 및 제2 B-cell 에피토프가 순서대로 연결된 것일 수 있다.
더 나아가, 상기 단위체-E는 제1 보조부를 추가적으로 포함할 수 있다. 상기 단위체-E가 상기 제1 보조부를 추가적으로 포함하는 경우, 상기 단위체-E 서열 내에서 상기 제1 보조부의 서열은 상기 제1 B-cell 에피토프의 서열보다 상대적으로 N말단쪽에 위치한다. 이때, 상기 제1 보조부는 더미 기능, 용해도 향상 기능, 링커 기능, 및/또는 시클릭 폼 형성 기능을 가질 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
더 나아가, 상기 단위체-E는 제2 보조부를 추가적으로 포함할 수 있다. 상기 단위체-E가 상기 제2 보조부를 포함하는 경우, 상기 단위체-E 서열 내에서 상기 제2 보조부의 서열은 상기 제1 B-cell 에피토프의 서열 및 상기 제1 Th 에피토프의 서열 서이에 위치한다. 이때, 상기 제2 보조부는 더미 기능, 용해도 향상 기능, 링커 기능, 및/또는 보호 기능을 가질 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
더 나아가, 상기 단위체-E는 제3 보조부를 추가적으로 포함할 수 있다. 상기 단위체-E가 상기 제3 보조부를 포함하는 경우, 상기 단위체-E 서열 내에서 상기 제3 보조부의 서열은 상기 제1 Th 에피토프의 서열 및 상기 제2 Th 에피토프의 서열 사이에 위치한다. 이때, 상기 제3 보조부는 더미 기능, 용해도 향상 기능, 링커 기능, 및/또는 보호 기능을 가질 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
더 나아가, 상기 단위체-E는 제4 보조부를 추가적으로 포함할 수 있다. 상기 단위체-E가 상기 제4 보조부를 포함하는 경우, 상기 단위체-E 서열 내에서 상기 제4 보조부의 서열은 상기 제2 B-cell 에피토프의 서열 및 상기 제2 B-cell 에피토프의 서열 사이에 위치한다. 이때, 상기 제4 보조부는 더미 기능, 용해도 향상 기능, 링커 기능, 및/또는 보호 기능을 가질 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
더 나아가, 상기 단위체-E는 제5 보조부를 추가적으로 포함할 수 있다. 상기 단위체-E가 상기 제5 보조부를 포함하는 경우, 상기 단위체-E 서열 내에서 상기 제5 보조부의 서열은 상기 단위체-E 서열 내에서 상기 제2 B-cell 에피토프의 서열보다 상대적으로 C말단쪽에 위치한다. 이때, 상기 제5 보조부는 더미 기능, 용해도 향상 기능, 링커 기능, 및/또는 시클릭 폼 형성 기능을 가질 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
단위체-E의 구조 2 - 구조식
일 구현예로, 상기 단위체-C는 다음 [구조식 E]로 표현되는 펩타이드이다.
[구조식 E]
N-A1-B1-A2-T1-A3-T2-A4-B2-A5-C
상기 B1 및 B2는 B-cell 에피토프로, 각각 전술한 설계 원리를 따른다.
상기 T1 및 T2는 Th 에피토프로, 전술한 설계 원리를 따른다.
상기 A1, A2, A3, A4, 및 A5는 보조부로, 생략될 수 있다.
이때, 상기 A1, A2, A3, A4, 및 A5는 더미 기능, 용해도 향상 기능, 링커 기능, 및/또는 시클릭 폼 형성 기능을 가질 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
단위체-E의 길이
일 구현예로, 상기 단위체-C의 길이는 약 32mer, 약 33mer, 약 34mer, 약 35mer, 약 36mer, 약 37mer, 약 38mer, 약 39mer, 약 40mer, 약 41mer, 약 42mer, 약 43mer, 약 44mer, 약 45mer, 약 46mer, 약 47mer, 약 48mer, 약 49mer, 약 50mer, 약 51mer, 약 52mer, 약 53mer, 약 54mer, 약 55mer, 약 56mer, 약 57mer, 약 58mer, 약 59mer, 약 60mer, 약 61mer, 약 62mer, 약 63mer, 약 64mer, 약 65mer, 약 66mer, 약 67mer, 약 68mer, 약 69mer, 약 70mer, 약 71mer, 약 72mer, 약 73mer, 약 74mer, 약 75mer, 약 76mer, 약 77mer, 약 78mer, 약 79mer, 약 80mer, 약 81mer, 약 82mer, 약 83mer, 약 84mer, 약 85mer, 약 86mer, 약 87mer, 약 88mer, 약 89mer, 약 90mer, 약 91mer, 약 92mer, 약 93mer, 약 94mer, 약 95mer, 약 96mer, 약 97mer, 약 98mer, 약 99mer, 약 100mer일 수 있다. 일 구현예로, 상기 단위체-C의 길이는 바로 이전 문장에서 선택된 두 개의 수치범위 내의 값을 가질 수 있다. 예를 들어, 상기 단위체-E의 길이는 약 32mer 내지 약 60mer일 수 있다. 또 다른 예를 들어, 상기 단위체-E의 길이는 약 50mer 내지 약 100mer일 수 있다.
단위체-E 예시 - 예시 설계
일 구현예로 단위체-E는 제1 보조부, 제1 B-cell 에피토프, 제2 보조부, 제1 Th 에피토프, 제3 보조부, 제2 Th 에피토프, 제4 보조부, 및 제2 B-cell 에피토프가 순서대로 연결된 서열을 가질 수 있다. 이때, 상기 제1 보조부는 His-tag이다. 상기 제2 보조부 및 제4 보조부는 각각 링커 기능 및 보호 기능을 가진다. 상기 제3 보조부는 링커 기능을 가진다. 상기 제2 보조부, 제3 보조부, 및 제4 보조부는 하나 이상의 인공 아미노산을 포함한다.
일 구현예로, 단위체-E는 제3 B-cell 에피토프, 제5 보조부, 제3 Th 에피토프, 제6 보조부, 제4 Th 에피토프, 제7 보조부, 및 제4 B-cell 에피토프가 순서대로 연결된 서열을 가질 수 있다. 이때, 상기 제5 보조부 및 제7 보조부는 각각 링커 기능 및 보호 기능을 가진다. 상기 제6 보조부는 링커 기능을 가진다. 상기 제5 보조부, 제6 보조부 및 제7 보조부는 하나 이상의 인공 아미노산을 포함한다.
단위체-E 서열 예시
일 구현예로, 상기 단위체-E는 RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZILMQYIKANSKFIGIRNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 137), RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZILMQYIKANSKFIGICRFRGLISLSQVYLS(서열번호 138), RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZILMQYIKANSKFIGIKTTKQSFDLSVKAQYKKNKH(서열번호 139), CRFRGLISLSQVYLSZaK(Cha)VAAWTLKAAaZILMQYIKANSKFIGIRNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 140), CRFRGLISLSQVYLSZaK(Cha)VAAWTLKAAaZILMQYIKANSKFIGICRFRGLISLSQVYLS(서열번호 141), CRFRGLISLSQVYLSZaK(Cha)VAAWTLKAAaZILMQYIKANSKFIGIKTTKQSFDLSVKAQYKKNKH(서열번호 142), KTTKQSFDLSVKAQYKKNKHZaK(Cha)VAAWTLKAAaZILMQYIKANSKFIGIRNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 143), KTTKQSFDLSVKAQYKKNKHZaK(Cha)VAAWTLKAAaZILMQYIKANSKFIGICRFRGLISLSQVYLS(서열번호 144), KTTKQSFDLSVKAQYKKNKHZaK(Cha)VAAWTLKAAaZILMQYIKANSKFIGIKTTKQSFDLSVKAQYKKNKH(서열번호 145), MRGSHHHHHHGSDDDDKIVDRNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZILMQYIKANSKFIGIRNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 146), MRGSHHHHHHGSDDDDKIVDRNVPPIFNDVYWIAFGGGGSGGGGGGSSILMQYIKANSKFIGIPMGLPQSIALSSLMVAQILMQYIKANSKFIGIPMGLPQSIALSSLMVAQGGGGSGGGGGGSSCRFRGLISLSQVYLS(서열번호 147), PIFNDVYWIAFK(Cha)VAAWTLKAAK(Cha)VAAWTLKAACRFRGLISLSQ(서열번호 148), PPIFNDVYWK(Cha)VAAWTLKAAK(Cha)VAAWTLKAARGLISLSQV(서열번호 149), 및 CRNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZILMQYIKANSKFIGIRNVPPIFNDVYWIAFC(서열번호 150)로 이뤄진 군에서 선택된 펩타이드 단위체일 수 있다. 이때, a는 D-form alanine, Z는 6-aminohexanoic acid, (Cha)는 L-cyclohexylalanine를 나타낸다.
펩타이드 설계(DESIGNING A PEPTIDE)
펩타이드 설계 - 개괄
본 명세서에서 제공하는 펩타이드는 상기 개시된 펩타이드 단위체를 하나 이상 사용하여 설계할 수 있다. 상기 펩타이드는 상기 펩타이드 단위체를 하나 이상 포함하며, 1 종류 이상의 펩타이드 단위체를 포함할 수 있다. 예를 들어, 1) 상기 펩타이드 단위체를 하나만 포함하여 설계하거나, 2) 동일한 서열을 가지는 1 종류의 상기 펩타이드 단위체를 복수 개 연결하여 연쇄 동일 서열(Concatamer)을 설계하거나, 3) 서열이 상이한 1종류 이상의 상기 펩타이드 단위체를 연결하여 String-of-Beads 형태의 펩타이드를 설계하거나, 4) 상기 1) 내지 3)의 설계 방법을 혼합하여 펩타이드를 설계할 수 있고, 5) 상기 방법으로 설계된 펩타이드의 양쪽 끝을 연결하여 시클릭 폼(Cyclic form)의 펩타이드를 설계할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 이하 각각의 설계 방법에 대해 상세히 설명한다.
한 단위 설계
상기 펩타이드는 전술한 펩타이드 단위체 중 1개만을 포함하여 설계할 수 있다. 일 구현예로, 상기 펩타이드는 단위체-A, 단위체-B, 단위체-C, 단위체-D, 및 단위체-E로 이뤄진 군에서 선택된 하나의 펩타이드 단위체를 포함할 수 있다. 이때, 상기 펩타이드 단위체는 전술한 구성을 가진다.
연쇄 동일 서열(Concatemer) 설계 1 - 개괄
상기 펩타이드는 동일한 서열을 가지는 1 종류의 상기 펩타이드 단위체가 복수 개 연결된 연쇄 동일 서열(Concatamer) 형태로 설계될 수 있다. 상기 연쇄 동일 서열 형태로 설계된 펩타이드는 1) 1 종류의 펩타이드 단위체로, 2) 동일하거나 동등한 서열을 가지는 복수의 펩타이드 단위체로 구성되어 있다.
이때, "동등한 서열"을 가진 두 펩타이드 단위체는, 1) 상기 두 펩타이드 각각의 N말단 및/또는 C말단에 보조부가 존재하는 지 여부, 2) 상기 보조부가 존재하는 경우 그 서열, 두 가지가 상이하더라도, 나머지 서열은 같은 경우를 일컫는다. 예를 들어, 제1 펩타이드가 N말단에서 C말단 방향으로 제1 보조부, 제1 단위체-A가 연결된 서열을 가지고, 제2 펩타이드가 N말단에서 C말단 방향으로 제1 단위체-A, 제1 보조부가 연결된 서열을 가지고, 제3 펩타이드가 N말단에서 C말단 방향으로 제2 보조부, 제1 단위체-A, 제3 보조부가 연결된 서열을 가지고, 제4 펩타이드가 제1 단위체-A 서열을 가질 때, 상기 제1 펩타이드 내지 제4 펩타이드는 동등한 서열을 가졌다고 한다.
일 구현예로, 상기 펩타이드는 제1 펩타이드 단위체 및 제2 펩타이드 단위체가 순서대로 연결된 것을 포함할 수 있다. 이때, 상기 제1 펩타이드 단위체는 단위체-A, 단위체-B, 단위체-C, 단위체-D, 및 단위체-E로 이뤄진 군에서 선택된 펩타이드 단위체이며, 상기 제2 펩타이드 단위체는 상기 제1 펩타이드 단위체와 동일하거나 동등한 서열을 가진다.
일 구현예로, 상기 펩타이드는 제3 펩타이드 단위체, 제4 펩타이드 단위체, 및 제5 펩타이드 단위체가 순서대로 연결된 것을 포함할 수 있다. 이때, 상기 제3 펩타이드 단위체는 단위체-A, 단위체-B, 단위체-C, 단위체-D, 및 단위체-E로 이뤄진 군에서 선택된 펩타이드 단위체이며, 상기 제4 펩타이드 단위체 및 제5 펩타이드 단위체는 각각 상기 제3 펩타이드 단위체와 동일하거나 동등한 서열을 가진다.
일 구현예로, 상기 펩타이드는 제6 펩타이드 단위체, 제7 펩타이드 단위체, 제8 펩타이드 단위체, 및 제9 펩타이드 단위체가 순서대로 연결된 것을 포함할 수 있다. 이때, 상기 제6 펩타이드 단위체는 단위체-A, 단위체-B, 단위체-C, 단위체-D, 및 단위체-E로 이뤄진 군에서 선택된 펩타이드 단위체이며, 상기 제7 펩타이드 단위체, 제8 펩타이드 단위체, 및 제9 펩타이드 단위체는 각각 상기 제6 펩타이드 단위체와 동일하거나 동등한 서열을 가진다.
연쇄 동일 서열(Concatemer) 설계 2 - 구조식
일 구현예로, 상기 펩타이드는 다음 [구조식 1]로 표현되는 펩타이드일 수 있다.
[구조식 1]
N-U1-U2-쪋-Un-C
이때, 상기 U1 내지 Un은 각각 단위체-A, 단위체-B, 단위체-C, 단위체-D, 및 단위체-E로 이뤄진 군에서 선택된 펩타이드 단위체이며, 전술한 펩타이드 단위체의 구성을 가진다.
상기 U1 내지 Un은 동일하거나 동등한 서열을 가진다.
상기 n은 2 이상의 정수이다.
연쇄 동일 서열(Concatemer) 설계 3 - 예시 서열
일 구현예로, 상기 펩타이드는 MRGSHHHHHHGSDDDDKIVDRNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZRNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ(서열번호 151), RNVPPIFNDVYWIAFCRFRGLISLSQVYLSZaK(Cha)VAAWTLKAAaZRNVPPIFNDVYWIAFCRFRGLISLSQVYLSZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ(서열번호 152), RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZCRFRGLISLSQVYLSRNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZCRFRGLISLSQVYLS(서열번호 153), RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZILMQYIKANSKFIGIRNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZILMQYIKANSKFIGI(서열번호 154), 및 RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZILMQYIKANSKFIGIRNVPPIFNDVYWIAFRNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZILMQYIKANSKFIGIRNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 155)로 이뤄진 군에서 선택된 펩타이드일 수 있다. 이때, a는 D-form alanine, Z는 6-aminohexanoic acid, (Cha)는 L-cyclohexylalanine를 나타낸다.
String-of-Beads 설계 1 - 개괄
상기 펩타이드는 서로 다른 서열을 가지는 상기 펩타이드 단위체가 복수 개 연결된 String-of-Beads 형태로 설계될 수 있다. 상기 String-of-Beads 형태로 설계된 펩타이드는 1) 적어도 1종류의 펩타이드 단위체로, 2) 상이한 서열을 가지는 복수의 펩타이드 단위체로 구성되어 있다.
일 구현예로, 상기 펩타이드는 제1 펩타이드 단위체 및 제2 펩타이드 단위체가 순서대로 연결된 것을 포함할 수 있다. 이때, 상기 제1 펩타이드 단위체 및 제2 펩타이드 단위체는 각각 단위체-A, 단위체-B, 단위체-C, 단위체-D, 및 단위체-E로 이뤄진 군에서 선택된 펩타이드 단위체이고, 상기 제1 펩타이드 단위체 및 상기 제2 펩타이드 단위체는 서로 상이한 서열을 가진다.
일 구현예로, 상기 펩타이드는 제3 펩타이드 단위체, 제4 펩타이드 단위체, 및 제5 펩타이드 단위체가 순서대로 연결된 것을 포함할 수 있다. 이때, 상기 제3 펩타이드 단위체, 제4 펩타이드 단위체, 및 제5 펩타이드 단위체는 각각 단위체-A, 단위체-B, 단위체-C, 단위체-D, 및 단위체-E로 이뤄진 군에서 선택된 펩타이드 단위체이고, 상기 제3 펩타이드 단위체, 상기 제4 펩타이드 단위체, 및 제5 펩타이드 단위체는 서로 상이한 서열을 가진다.
일 구현예로, 상기 펩타이드는 제6 펩타이드 단위체, 제7 펩타이드 단위체, 제8 펩타이드 단위체, 및 제9 펩타이드 단위체가 순서대로 연결된 것을 포함할 수 있다. 이때, 상기 제6 펩타이드 단위체, 제7 펩타이드 단위체, 제8 펩타이드 단위체, 및 제9 펩타이드 단위체는 각각 단위체-A, 단위체-B, 단위체-C, 단위체-D, 및 단위체-E로 이뤄진 군에서 선택된 펩타이드 단위체이고, 상기 제6 펩타이드 단위체, 상기 제7 펩타이드 단위체, 제8 펩타이드 단위체, 및 제9 펩타이드 단위체는 서로 상이한 서열을 가진다.
String-of-Beads 설계 2 - 구조식
일 구현예로, 상기 펩타이드는 다음 [구조식 2]로 표현되는 펩타이드일 수 있다.
[구조식 2]
N-U1-U2-쪋-Un-C
이때, 상기 U1 내지 Un은 각각 단위체-A, 단위체-B, 단위체-C, 단위체-D, 및 단위체-E로 이뤄진 군에서 선택된 펩타이드 단위체이며, 전술한 펩타이드 단위체의 구성을 가진다.
상기 U1 내지 Un은 상이한 서열을 가진다.
상기 n은 2 이상의 정수이다.
String-of-Beads 설계 3 - 예시 서열
일 구현예로, 상기 펩타이드는 RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZRNVPPIFNDVYWIAFCRFRGLISLSQVYLSZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ(서열번호 156)의 펩타이드일 수 있다. 이때, a는 D-form alanine, Z는 6-aminohexanoic acid, (Cha)는 L-cyclohexylalanine를 나타낸다.
혼합 설계 1 - 개괄
상기 펩타이드는 전술한 1) 한 단위 설계, 2) 연쇄 동일 서열(Concatemer) 설계, 및 3) String-of-Beads 설계를 적절히 혼합하여 설계할 수 있다. 일 구현예로, 상기한 설계 방법에 따른 단위 펩타이드를 먼저 설계한 후, 복수의 단위 펩타이드를 연결하는 방식으로 펩타이드를 설계할 수 있다.
일 구현예로, 상기 펩타이드는 제1 단위 펩타이드 및 제2 단위 펩타이드가 순서대로 연결된 것일 수 있다. 이때, 상기 제1 펩타이드 및 제2 펩타이드는 각각 상기 한 단위 설계, 상기 연쇄 동일 서열 설계, 및 상기 String-of-Beads 설계 중 어느 하나에 의한 펩타이드 구성을 가지며, 상기 제1 단위 펩타이드의 서열 및 상기 제2 단위 펩타이드의 서열은 서로 상이하다.
일 구현예로, 상기 펩타이드는 제3 단위 펩타이드, 제4 단위 펩타이드, 및 제5 단위 펩타이드가 순서대로 연결된 것일 수 있다. 이때, 상기 제3 단위 펩타이드, 제4 단위 펩타이드, 및 제5 단위 펩타이드는 각각 상기 한 단위 설계, 상기 연쇄 동일 서열 설계, 및 상기 String-of-Beads 설계 중 어느 하나에 의한 펩타이드 구성을 가지며, 상기 제3 단위 펩타이드의 서열, 상기 제4 단위 펩타이드의 서열, 및 상기 제5 단위 펩타이드의 서열은 서로 상이하다.
일 구현예로, 상기 펩타이드는 제6 단위 펩타이드, 제7 단위 펩타이드, 제8 단위 펩타이드, 및 제9 단위 펩타이드가 순서대로 연결된 것일 수 있다. 이때, 상기 제6 단위 펩타이드, 제7 단위 펩타이드, 제8 단위 펩타이드 및 제9 단위 펩타이드는 각각 상기 한 단위 설계, 상기 연쇄 동일 서열 설계, 및 상기 String-of-Beads 설계 중 어느 하나에 의한 펩타이드 구성을 가지며, 상기 제6 단위 펩타이드의 서열, 상기 제7 단위 펩타이드의 서열, 제8 단위 펩타이드의 서열 및 상기 제9 단위 펩타이드의 서열은 서로 상이하다.
혼합 설계 2 - 구조식
일 구현예로, 상기 펩타이드는 다음 [구조식 3]으로 표현되는 펩타이드일 수 있다.
[구조식 3]
N-P1-P2-쪋-Pn-C
이때, 상기 P1 내지 Pn은 각각 한 단위 설계, 연쇄 동일 서열 설계, 및 String of Beads 설계로 이뤄진 군에서 선택된 방법으로 설계된 단위 펩타이드이며, 전술한 펩타이드 설계 및 구성을 가진다.
상기 n은 2 이상의 정수이다.
혼합 설계 3 - 예시 서열
일 구현예로, 상기 펩타이드는 RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZRNVPPIFNDVYWIAFZRNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZILMQYIKANSKFIGIZRNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ ILMQYIKANSKFIGICRFRGLISLSQVYLS(서열번호 157), 및 RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZRNVPPIFNDVYWIAFCRFRGLISLSQVYLSZaK(Cha)VAAWTLKAAaZRNVPPIFNDVYWIAFCRFRGLISLSQVYLSZaK(Cha)VAAWTLKAAaZRNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZRNVPPIFNDVYWIAFZRNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZILMQYIKANSKFIGIZRNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ ILMQYIKANSKFIGICRFRGLISLSQVYLS(서열번호 158)로 이뤄진 군에서 선택된 펩타이드일 수 있다. 이때, a는 D-form alanine, Z는 6-aminohexanoic acid, (Cha)는 L-cyclohexylalanine를 나타낸다.
시클릭 폼(Cyclic form) 설계
상기 펩타이드는 시클릭 폼을 이루도록 설계될 수 있다. 상기 펩타이드가 시클릭 폼을 이루는 경우, 대상의 체내에서 안정성이 높아지기 때문에, 면역치료제로 사용되는 경우 더 좋은 효과를 기대할 수 있다. 일 구현예로, 한 단위 설계, 연쇄 동일 서열(Concatemer) 설계, String-of-Beads 설계, 및 혼합 설계로 이뤄진 군에서 선택된 설계 방법으로 설계된 펩타이드에 대해서, 상기 펩타이드는 N말단 및 C말단에 시클릭 폼 형성 기능을 가지는 보조부를 더 가지도록 설계될 수 있다. 일 구현예로, 한 단위 설계, 연쇄 동일 서열(Concatemer) 설계, String-of-Beads 설계, 및 혼합 설계로 이뤄진 군에서 선택된 설계 방법으로 설계된 펩타이드에 대해서, 상기 펩타이드는 보조부를 추가로 더 포함하고, 상기 보조부를 통해 시클릭 폼을 형성하도록 설계될 수 있다.
기타 설계
상기 펩타이드는 전술한 설계 방법 외에도, 필요에 따라 기타 다른 방법으로 설계될 수 있다. 일 구현예로, 한 단위 설계, 연쇄 동일 서열(Concatemer) 설계, String-of-Beads 설계, 및 혼합 설계로 이뤄진 군에서 선택된 설계 방법으로 설계된 펩타이드에 대해서, 상기 펩타이드는 하나 이상의 보조부, 하나 이상의 B-cell 에피토프, 및/또는 하나 이상의 Th 에피토프를 추가로 더 포함할 수 있다.
개시된 펩타이드 단위체 및/또는 펩타이드와 유사한 서열
본 명세서에서는 상기 "단위체-A 설계", "단위체-B 설계", "단위체-C 설계", "단위체-D 설계", "단위체-E 설계", 및 "펩타이드 설계" 단락에서 개시된 서열과 유사한 서열을 가지는 펩타이드 단위체 및/또는 펩타이드를 개시한다.
일 구현예로, 상기 펩타이드 단위체는 "단위체-A 설계", "단위체-B 설계", "단위체-C 설계", "단위체-D 설계", "단위체-E 설계" 단락에서 개시된 서열 중 어느 하나와 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 또는 100% 일치하는 서열을 가질 수 있다. 일 구현예로, 상기 펩타이드 단위체는 "단위체-A 설계", "단위체-B 설계", "단위체-C 설계", "단위체-D 설계", "단위체-E 설계" 단락에서 개시된 서열 중 어느 하나와 바로 이전 문장에서 선택된 수치 이상 일치하는 서열을 가질 수 있다. 일 구현예로, 상기 펩타이드 단위체는 서열번호 56 내지 서열번호 150, 서열번호 160 내지 서열번호 161, 서열번호 198 내지 서열번호 220에서 선택된 어느 하나와 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 또는 100% 일치하는 서열을 가질 수 있다. 일 구현예로, 상기 펩타이드 단위체는 서열번호 56 내지 서열번호 150, 서열번호 160 내지 서열번호 161, 서열번호 198 내지 서열번호 220에서 선택된 어느 하나와 바로 이전 문장에서 선택된 수치 이상 일치하는 서열을 가질 수 있다. 예를 들어, 상기 펩타이드 단위체는 서열번호 56과 90% 이상 일치하는 서열을 가질 수 있다.
일 구현예로, 상기 펩타이드는 "펩타이드 설계" 단락에서 개시된 서열 중 어느 하나와 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 또는 100% 일치하는 서열을 가질 수 있다. 일 구현예로, 상기 펩타이드는 "펩타이드 설계" 단락에서 개시된 서열 중 어느 하나와 바로 이전 문장에서 선택된 수치 이상 일치하는 서열을 가질 수 있다. 일 구현예로, 상기 펩타이드는 서열번호 151 내지 서열번호 158 중 어느 하나와 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 또는 100% 일치하는 서열을 가질 수 있다. 일 구현예로, 상기 펩타이드는 서열번호 151 내지 서열번호 158 중 어느 하나와 바로 이전 문장에서 선택된 수치 이상 일치하는 서열을 가질 수 있다. 예를 들어, 상기 펩타이드는 서열번호 151과 90% 이상 일치하는 서열을 가질 수 있다.
펩타이드 용도
펩타이드의 용도 - 개괄
본 명세서에서 제공하는 펩타이드는 대상의 체내에 주입되는 경우 1) 의도적으로 설계된 B-cell 에피토프에 특이적으로 결합하는 항체의 생성을 유도하고, 2) 균일한 항체의 생성을 유도한다는 특징이 있어 면역 치료제로서 적합하다. 따라서, 상기 펩타이드는 면역 치료제 용도로 사용될 수 있다. 일 구현예로, 본 명세서에서 제공하는 펩타이드는 비만에 대한 면역 치료제로 사용될 수 있다. 일 구현예로, 본 명세서에서 제공하는 펩타이드 단위체 및/또는 이를 포함하는 펩타이드는 비만 치료 용도로 사용될 수 있다.
펩타이드의 비만 치료용 용도
본 명세서에서 제공하는 펩타이드는 B-cell 에피토프를 포함한다. 일 구현예에서, 상기 B-cell 에피토프는 서열번호 41 내지 75에 포함된 B-cell 에피토프일 수 있다. 이때, 상기 B-cell 에피토프는 ApoB-100에 대한 결합능을 가지는 항체를 유도하는 것으로 알려져 있다(특허출원 US10/378,707호, PCT/KR2005/000784, 및 Kim et al, 2016, An apolipoprotein B100 mimotope prevents obesity in mice, Clinical Science 130, 105-116). 대상의 체내에서 상기 B-cell 에피토프에 의해 ApoB-100에 대한 결합능을 가지는 항체가 유도되는 경우, 비만에 대한 면역 치료 효과가 있음이 상기 선행문헌에 의해 알려져 있다. 따라서, 본 명세서에서는 비만 치료용 용도로 상기 펩타이드를 사용하는 용도 및 그 방법에 대해 개시한다. 상기 비만에 대한 면역 치료 효과에 대해 설명하기 위해, 특허출원 US10/378,707호, PCT/KR2005/000784, 및 Kim et al, 2016, An apolipoprotein B100 mimotope prevents obesity in mice, Clinical Science 130, 105-116에 기재된 내용이 본 명세서에 원용된다. 상기 원용된 부분과 본 명세서 기재가 충돌하는 경우에는, 본 명세서에 기재된 바가 우선하는 것으로 해석한다.
펩타이드를 포함하는 약학적 조성물
본 명세서에서는 전술한 펩타이드를 포함하는 약학적 조성물에 대해 개시한다. 상기 펩타이드는 면역 치료제로 사용될 수 있고, 체내에 주입되는 경우 체액성 면역반응을 유도한다는 점에서 백신과 공통점을 가진다. 따라서, 상기 펩타이드를 포함하는 약학적 조성물에는 당업자가 일반적인 백신의 투여를 위해, 및/또는 면역 반응 유도 효과를 높이기 위해 추가할 수 있는 적절한 구성이 포함될 수 있다. 예를 들어, 상기 약학적 조성물은 제제화된 상기 펩타이드, 약학적으로 허용되는 담체, 보조제 및/또는 어쥬번트(adjuvants)를 포함할 수 있으나 이에 제한되는 것은 아니다. 구체적으로, 상기 약학적 조성물은 물, 염수, 덱스트로즈, 에탄올, 글리세롤, 염화나트륨, 덱스트로즈, 만니톨, 솔비톨, 락토즈, 젤라틴, 알부민, 수산화알루미늄, 프로인트 불완전 보조제(Freund's Incomplete Adjuvant) 및 완전 항원보조제(Complete Adjuvant)(Pifco Laboratories, Detroit, Mich.), 머크 항원보강제 65(Merck and Company, Inc., Rahway, NJ.), Alhydrogel(Al(OH)3), 수산화알루미늄 겔(알룸), 또는 인산알루미늄과 같은 알루미늄 염, AS04 series, MF, squalene, MF59, QS21, 칼슘, 철 또는 아연염, 아실화 티로신의 불용성 현탁액, 아실화 과당, 양이온적으로 또는 음이온적으로 유도된 폴리사카라이드, 폴리포스파젠, 생분해성 미세구, 및 퀼(Quil) A, 톨-라이크 리셉터(TLR) 작용제, PHAD[Avanti polar lipid, Monophosphoryl Lipid A (synthetic)], 모노포스포릴 지질 A(MPL, monophosphoryl Lipid A), 합성 지질 A, 지질 A 모방체 또는 유사체, 알루미늄 염, 사이토카인, 사포닌, Prolactin, growth hormone deoxycholic acid, betaglucan, polyribonucleotides, 무라밀 다이펩타이드(MDP) 유도체, CpG 올리고, 그람-음성 박테리아의 리포폴리사카라이드(LPS), 폴리포스파젠, 에멀젼, 비로솜, 코크리트(cochleate), 폴리(락티드-코-글리콜리드)(PLG) 마이크로입자, 폴록사머 입자, 마이크로입자, 리포솜, 또는 이들의 적절한 조합일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
펩타이드 제조 방법(MANUFACTURING METHOD OF THE PEPTIDE)
본 명세서에서 제공하는 펩타이드는 당업자가 채택할 수 있는 공지의 방법으로 제조될 수 있으며, 그 제조 방법은 특별히 제한되지 않는다. 일 구현예로, 상기 펩타이드는 재조합 단백질 제조 방법에 의해 제조될 수 있다. 또 다른 구현예로, 상기 펩타이드는 화학적으로 합성될 수 있다. 구체적으로, 상기 펩타이드는 액상 펩타이드 합성법, 고상 펩타이드 합성법, 또는 작은 펩타이드 조각들의 결합법(convergent)으로 합성될 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
펩타이드 단위체 및/또는 펩타이드를 암호화하는 핵산
펩타이드 단위체 및/또는 펩타이드를 암호화하는 핵산 개괄
본 명세서에서는 상기 개시한 펩타이드 단위체 및/또는 펩타이드를 암호화하는 핵산(이하, 암호화 핵산)을 개시한다. 본 명세서에서 개시되는 펩타이드 단위체 및 펩타이드는 비표준 아미노산을 포함할 수 있는데, 자연계에서는 상기 비표준 아미노산에 대응하는 코돈이 없기 때문에, 일반적인 방법으로는 해당 비표준 아미노산을 암호화할 수 없다. 따라서, 이러한 비표준 아미노산을 적절한 표준 아미노산으로 대체해야 이를 핵산 형태로 암호화할 수 있다. 상기 펩타이드 단위체 및/또는 펩타이드가 비표준 아미노산을 포함하지 않는다면, 각 표준 아미노산에 대응되는 핵산 코돈을 이용하여 상기 암호화 핵산을 설계할 수 있다.
설명의 편의를 위해, 본 명세서에서는 상기 비표준 아미노산을 적절한 표준 아미노산으로 치환한 것을 포함하는 펩타이드 단위체 및/또는 펩타이드, 및 표준 아미노산만을 포함하는 펩타이드 단위체 및/또는 펩타이드를 암호화 대상 펩타이드라 지칭하고, 상기 암호화 대상 펩타이드를 암호화하는 DNA, 및/또는 RNA를 암호화 핵산으로 지칭한다. 이때, 상기 펩타이드 단위체 및/또는 펩타이드가 비표준 아미노산을 포함하지 않는다면, 상기 펩타이드 단위체 및/또는 펩타이드는 암호화 대상 펩타이드와 동일한 아미노산 서열을 가진다.
본 명세서에서 사용하는 상기 "암호화 대상 펩타이드"는 결과물인 암호화 핵산을 용이하게 설명하기 위해 도입한 개념적인 용어로, 상기 암호화 핵산을 제조하는 방법 또는 절차와는 무관하다.
암호화 대상 펩타이드 설계
본 명세서에서 개시되는 펩타이드 단위체 및 펩타이드가 비표준 아미노산을 포함하는 경우, 이를 적절한 표준 아미노산으로 대체하여 암호화 대상 펩타이드를 설계한다. 본 명세서에서 개시되는 펩타이드 단위체 및 펩타이드가 비표준 아미노산을 포함하지 않는 경우, 이와 대응되는 암호화 대상 펩타이드는 상기 펩타이드 단위체 및 펩타이드 와 동일한 서열을 가진다. 일 구현예로, 상기 암호화 대상 펩타이드는 상기 비표준 아미노산을 임의의 표준 아미노산으로 대체한 것일 수 있다. 일 구현예로, 상기 암호화 대상 펩타이드는 상기 비표준 아미노산을 이와 동일하거나 동등한 기능을 하는 표준 아미노산으로 대체한 것일 수 있다. 일 구현예로, 상기 암호화 대상 펩타이드는 상기 펩타이드 단위체 및/또는 펩타이드와 동일한 서열을 가질 수 있다. 이때, 상기 펩타이드 단위체 및/또는 펩타이드는 비표준 아미노산을 가지지 않는 것을 특징으로 한다.
암호화 대상 펩타이드 설계 예시 - PADRE 서열을 포함하는 경우
본 명세서에서 개시되는 펩타이드 단위체 및 펩타이드는 하나 이상의 Th 에피토프를 포함한다. 이때, 상기 Th 에피토프가 특허출원 US305,871에 개시된 PADRE로 명명된 서열인 경우, 비표준 아미노산인 L-cyclohexylalanine을 포함할 수 있다. 상기 문헌에 따르면, 상기 L-cyclohexylalanine은 상기 PADRE를 펩타이드 분해 효소로부터 보호하는 기능 및 MHC Class II에 결합하는 앵커 잔기(anchor residue)기능을 모두 가질 수 있다. 따라서, 상기 암호화 대상 펩타이드는 상기 L-cyclohexylalanine을 이와 동일하거나, 동등한 기능을 하는 적절한 표준 아미노산으로 대체하여 설계한다. 일 구현예로, 상기 L-cyclohexylalanine은 임의의 표준 아미노산으로 대체될 수 있다. 일 구현예로, 상기 L-cyclohexylalanine은 페닐알라닌(Phenylalanine), 또는 티로신(Tyrosine)으로 대체될 수 있다. 일 구현예로, 상기 PADRE에 대응되는 암호화 대상 펩타이드의 서열은 KFVAAWTLKAA (서열번호 195), KYVAAWTLKAA (서열번호 196), 또는 KXVAAWTLKAA (서열번호 197)일 수 있다. 이때, 상기 X는 임의의 표준 아미노산을 의미한다.
암호화 대상 펩타이드 서열 예시
일 구현예로, 상기 암호화 대상 펩타이드의 서열은 RNVPPIFNDVYWIAFXXKXVAAWTLKAAXXCRFRGLISLSQVYLS(서열번호 198), RNVPPIFNDVYWIAFXXKXVAAWTLKAAXXGSHHHHHHGSDDDDK(서열번호 199), GSHHHHHHGSDDDDKXXKXVAAWTLKAAXXRNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 200), KTTKQSFDLSVKAQYKKNKHXXKXVAAWTLKAAXXCRFRGLISLSQVYLS(서열번호 201), RNVPPIFNDVYWIAFCRFRGLISLSQVYLSXXK(Cha)VAAWTLKAAXX(서열번호 202), RNVPPIFNDVYWIAFXPKYVKQNTLKLATXCRFRGLISLSQVYLS(서열번호 203), RNVPPIFNDVYWIAFXXKXVAAWTLKAAXX(서열번호 204), RNVPPIFNDVYWIAFKXVAAWTLKAA(서열번호 205), RNVPPIFNDVYWIAFKXVAAWTLKAAHHHHHH(서열번호 206), RNVPPIFNDVYWIAFXXKXVAAWTLKAACRFRGLISLSQVYLS(서열번호 207), RNVPPIFNDVYWIAFXXKXVAAWTLKAACR(서열번호 208), RNVPPIFNDVYWIAFXXKFVAAWTLKAAXXCRFRGLISLSQVYLS(서열번호 209), RNVPPIFNDVYWIAFXXKFVAAWTLKAAXX(서열번호 210), RNVPPIFNDVYWIAFXXKFVAAWTLKAACRFRGLISLSQVYLS(서열번호 211), 및 RNVPPIFNDVYWIAFXXKFVAAWTLKAACR(서열번호 212)에서 선택된 것일 수 있다. 이때, 상기 X는 임의의 표준 아미노산을 의미한다.
암호화 핵산 설계 1 - 핵산 코돈 기반
본 명세서에서 개시되는 암호화 핵산은 상기 암호화 대상 펩타이드를 암호화 하는 핵산 코돈을 의미한다. 상기 암호화 대상 펩타이드의 서열은 모두 표준 아미노산이므로, 상기 암호화 핵산은 상기 암호화 대상 펩타이드의 각 아미노산에 대응하는 핵산 코돈을 기반으로 설계된다. 이때, 하나의 표준 아미노산에 하나 이상의 핵산 코돈이 대응될 수 있으므로, 결과적으로 하나의 암호화 대상 펩타이드를 암호화 하는 둘 이상의 암호화 핵산이 설계될 수 있다. 일 구현예로, 상기 암호화 핵산은 상기 암호화 대상 펩타이드를 암호화하는 DNA 및/또는 RNA 코돈일 수 있다. 일 구현예로, 상기 암호화 핵산은 상기 암호화 대상 펩타이드를 암호화하는 DNA 및/또는 RNA 코돈과 상보적으로 결합할 수 있는 DNA 및/또는 RNA 서열을 가질 수 있다.
상기 암호화 핵산의 서열은 코돈 최적화 될 수 있는데, 이는 아래에서 더 자세히 설명한다.
암호화 핵산 설계 2 - 코돈 최적화
상기한 바, 상기 암호화 대상 펩타이드의 각 아미노산에 대응하는 핵산 코돈을 단순히 연결시키는 방법으로 암호화 핵산을 설계한다면, 하나의 암호화 대상 핵산에 대해 복수의 암호화 핵산이 설계될 수 있다. 평균적으로 하나의 표준 아미노산 당 1개 내지 6개의 핵산 코돈이 대응되기 때문에, 아미노산 서열 길이가 길어짐에 따라 가능한 핵산 코돈 조합의 수는 기하급수적으로 증가한다. 하지만, 이 모든 조합이 동등한 중요도를 가지지는 않는다. 일반적으로 세포 내에서 상기 암호화 대상 펩타이드를 더 잘 발현시킬 수 있는 핵산 코돈의 조합이 존재하며, 상기 조합은 상기 서열 자체의 고차구조, 상기 암호화 핵산을 주입하려는 대상 세포의 종류 등에 따라 달라질 수 있다. 이러한 핵산 코돈의 조합을 찾아내고, 찾아낸 조합을 암호화 핵산의 서열로 특정하는 것을 코돈 최적화라 한다. 하나의 암호화 대상 펩타이드에 대해 코돈 최적화된 서열이 반드시 하나만 존재하는 것은 아니며, 둘 이상의 코돈 최적화된 서열이 있을 수 있다.
일 구현예로, 상기 암호화 핵산은 코돈 최적화된 DNA 및/또는 RNA 서열을 가질 수 있다. 일 구현예로, 상기 암호화 핵산은 코돈 최적화되지 않은 DNA 및/또는 RNA 서열을 가질 수 있다.
암호화 핵산의 코돈 최적화 1 - 암호화 핵산의 고차 구조 고려
상기 암호화 핵산의 코돈 최적화는 상기 핵산 서열 자체의 고차 구조를 고려하여 이뤄질 수 있다. 일 구현예로, 상기 암호화 핵산은 그 서열의 GC 함량(GC contents)을 고려하여 코돈 최적화될 수 있다. 일 구현예로, 상기 암호화 핵산의 서열은 GC 함량이 약 1% 미만, 약 1%, 약 2%, 약 3%, 약 4%, 약 5%, 약 6%, 약 7%, 약 8%, 약 9%, 약 10%, 약 11%, 약 12%, 약 13%, 약 14%, 약 15%, 약 16%, 약 17%, 약 18%, 약 19%, 약 20%, 약 21%, 약 22%, 약 23%, 약 24%, 약 25%, 약 26%, 약 27%, 약 28%, 약 29%, 약 30%, 약 31%, 약 32%, 약 33%, 약 34%, 약 35%, 약 36%, 약 37%, 약 38%, 약 39%, 약 40%, 약 41%, 약 42%, 약 43%, 약 44%, 약 45%, 약 46%, 약 47%, 약 48%, 약 49%, 약 50%, 약 51%, 약 52%, 약 53%, 약 54%, 약 55%, 약 56%, 약 57%, 약 58%, 약 59%, 약 60%, 약 61%, 약 62%, 약 63%, 약 64%, 약 65%, 약 66%, 약 67%, 약 68%, 약 69%, 약 70%, 약 71%, 약 72%, 약 73%, 약 74%, 약 75%, 약 76%, 약 77%, 약 78%, 약 79%, 약 80%, 약 81%, 약 82%, 약 83%, 약 84%, 약 85%, 약 86%, 약 87%, 약 88%, 약 89%, 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98%, 약 99%, 또는 약 100%일 수 있다. 일 구현예로, 상기 암호화 핵산의 서열은 바로 이전 문장에서 선택된 수치 범위 내 GC 함량을 가질 수 있다. 예를 들어, 상기 암호화 핵산의 서열은 약 20% 내지 약 50%의 GC 함량을 가질 수 있다. 일 구현예로, 상기 암호화 핵산의 서열은 바로 이전 문장에서 선택된 수치 미만의 GC 함량을 가질 수 있다. 예를 들어, 상기 암호화 핵산의 서열은 약 25% 미만의 GC 함량을 가질 수 있다.
암호화 핵산의 코돈 최적화 2 - 발현 대상 세포 고려
상기 암호화 핵산의 코돈 최적화는 상기 암호화 핵산을 어느 세포에 주입하여 발현시킬 것인지를 고려하여 이뤄질 수 있다. 일 구현예로, 상기 암호화 핵산의 코돈 최적화는 원핵세포 또는 진핵세포의 코돈 사용빈도(codon usage)를 고려하여 이뤄질 수 있다. 일 구현예로, 상기 암호화 핵산의 코돈 최적화는 동물세포의 코돈 사용빈도(codon usage)를 고려하여 이뤄질 수 있다. 일 구현예로, 상기 암호화 핵산의 코돈 최적화는 포유류의 코돈 사용빈도(codon usage)를 고려하여 이뤄질 수 있다. 일 구현예로, 상기 암호화 핵산의 코돈 최적화는 인간의 코돈 사용빈도(codon usage)를 고려하여 이뤄질 수 있다. 일 구현예로, 상기 암호화 핵산은 대장균 코돈 최적화된 것일 수 있다. 일 구현예로, 상기 암호화 핵산은 포유류 코돈 최적화된 것일 수 있다. 일 구현예로, 상기 암호화 핵산은 인간 코돈 최적화된 것일 수 있다.
암호화 핵산 서열 예시
일 구현예로, 상기 암호화 핵산은 5'-CGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTCNNNNNNAAGNNNGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCANNNNNNTGCCGTTTCCGTGGACTGATTTCCCTGTCCCAGGTTTATCTGTCC-3'(서열번호 248), 5'-CGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTCNNNNNNAAGTTCGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCANNNNNNTGCCGTTTCCGTGGACTGATTTCCCTGTCCCAGGTTTATCTGTCC-3'(서열번호 249), 5'-CGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTCNNNNNNAAGTATGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCANNNNNNTGCCGTTTCCGTGGACTGATTTCCCTGTCCCAGGTTTATCTGTCC-3'(서열번호 250), 5'-CGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTCNNNNNNAAGNNNGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCANNNNNNGGATCGCATCACCATCACCATCACGGATCCGATGATGATGACAAG-3'(서열번호 251), 5'-ACGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTCNNNNNNAAGTTCGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCANNNNNNGGATCGCATCACCATCACCATCACGGATCCGATGATGATGACAAG-3'(서열번호 252), 5'-CGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTCNNNNNNAAGTATGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCANNNNNNGGATCGCATCACCATCACCATCACGGATCCGATGATGATGACAAG-3'(서열번호 253), 5'-GGATCGCATCACCATCACCATCACGGATCCGATGATGATGACAAGNNNNNNAAGNNNGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCANNNNNNCGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTC-3'(서열번호 254), 5'-GGATCGCATCACCATCACCATCACGGATCCGATGATGATGACAAGNNNNNNAAGTTCGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCANNNNNNCGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTC-3'(서열번호 255), 5'-GGATCGCATCACCATCACCATCACGGATCCGATGATGATGACAAGNNNNNNAAGTATGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCANNNNNNCGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTC-3'(서열번호 256), 5'-AAAACGACAAAGCAATCATTTGATTTAAGTGTAAAAGCTCAGTATNNNNNNAAGNNNGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCANNNNNNTGCCGTTTCCGTGGACTGATTTCCCTGTCCCAGGTTTATCTGTCC-3'(서열번호 257), 5'-AAAACGACAAAGCAATCATTTGATTTAAGTGTAAAAGCTCAGTATNNNNNNAAGTTCGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCANNNNNNTGCCGTTTCCGTGGACTGATTTCCCTGTCCCAGGTTTATCTGTCC-3'(서열번호 258), 5'-AAAACGACAAAGCAATCATTTGATTTAAGTGTAAAAGCTCAGTATNNNNNNAAGTATGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCANNNNNNTGCCGTTTCCGTGGACTGATTTCCCTGTCCCAGGTTTATCTGTCC-3'(서열번호 259), 5'-CGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTCTGCCGTTTCCGTGGACTGATTTCCCTGTCCCAGGTTTATCTGTCCNNNNNNAAGNNNGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCANNNNNN-3'(서열번호 260), 5'-CGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTCTGCCGTTTCCGTGGACTGATTTCCCTGTCCCAGGTTTATCTGTCCNNNNNNAAGTTCGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCANNNNNN-3'(서열번호 261), 5'-CGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTCTGCCGTTTCCGTGGACTGATTTCCCTGTCCCAGGTTTATCTGTCCNNNNNNAAGTATGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCANNNNNN-3'(서열번호 262), 5'-CGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTCNNNCCTAAGTATGTGAAGCAGAATACACTGAAGCTGGCAACCNNNTGCCGTTTCCGTGGACTGATTTCCCTGTCCCAGGTTTATCTGTCC-3'(서열번호 263), 5'-CGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTCNNNNNNAAGNNNGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCANNNNNN-3'(서열번호 264), 5'-CGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTCNNNNNNAAGTTCGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCANNNNNN-3'(서열번호 265), 5'-CGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTCNNNNNNAAGTATGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCANNNNNN-3'(서열번호 266), 5'-CGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTCAAGNNNGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCA-3'(서열번호 267), 5'-CGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTCAAGTTCGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCA-3'(서열번호 268), 5'-CGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTCAAGTATGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCA-3'(서열번호 269), 5'-CGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTCAAGNNNGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCACATCACCATCACCATCAC-3'(서열번호 270), 5'-CGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTCAAGTTCGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCACATCACCATCACCATCAC-3'(서열번호 271), 5'-CGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTCAAGTATGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCACATCACCATCACCATCAC-3'(서열번호 272), 5'-CGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTCNNNNNNAAGNNNGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCATGCCGTTTCCGTGGACTGATTTCCCTGTCCCAGGTTTATCTGTCC-3'(서열번호 273), 5'-CGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTCNNNNNNAAGTTCGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCATGCCGTTTCCGTGGACTGATTTCCCTGTCCCAGGTTTATCTGTCC-3'(서열번호 274), 5'-CGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTCNNNNNNAAGTATGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCATGCCGTTTCCGTGGACTGATTTCCCTGTCCCAGGTTTATCTGTCC-3'(서열번호 275), 5'-CGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTCNNNNNNAAGNNNGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCATGCCGT-3'(서열번호 276), 5'-CGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTCNNNNNNAAGTTCGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCATGCCGT-3'(서열번호 277), 및 5'-CGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTCNNNNNNAAGTATGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCATGCCGT-3'(서열번호 278)에서 선택된 서열로 표현될 수 있다.
일 구현예로, 상기 암호화 핵산은 상기 서열번호 248 내지 서열번호 278에서 선택된 서열과 동등한 RNA 서열로 표현될 수 있다.
일 구현예로, 상기 암호화 핵산은 상기 서열번호 248 내지 서열번호 278에서 선택된 서열에서, 하나 이상의 코돈이 이와 동일한 아미노산을 암호화하는 코돈으로 치환된 것일 수 있다. 예를 들어, 상기 암호화 핵산은 상기 서열번호 248 서열에서, 첫 번째 코돈(5'말단의 1번째 내지 3번째 핵산)이 CGT에서 CGC, CGG, CGA, AGA, 또는 AGG로 치환된 것일 수 있다.
일 구현예로, 상기 암호화 핵산은 상기 서열번호 248 내지 서열번호 278에서 선택된 서열에서, 하나 이상의 코돈이 이와 동일한 아미노산을 암호화하는 코돈으로 치환된 것과 동등한 RNA 서열로 표현될 수 있다.
펩타이드 단위체 및/또는 펩타이드를 암호화하는 핵산을 포함하는 약학적 조성물
암호화 핵산을 포함하는 약학적 조성물 - 개괄
본 명세서에서는 펩타이드 단위체 및/또는 펩타이드를 암호화하는 핵산(암호화 핵산)을 포함하는 약학적 조성물을 제공한다. 상기 암호화 핵산을 대상에 전달하여 의도한 면역 반응 유도 효과를 내기 위해서는 적절한 수단으로 제형화 될 필요가 있다. 상기 암호화 핵산은 공지된 수단으로 제형화 될 수 있으며, 예를 들어, 김원근(2019, mRNA 백신 - 백신학의 새로운 시대, BRIC View 2019-R11), Zhang et al.(2019, Advances in mRNA Vaccines for Infectious Diseases, Frontiers in Immunology, Vol.10, Article 594), Reichmuth et al.(2016, mRNA vaccine delivery using lipid nanoparticles, Therapeutic Delivery, 7(5), 319-334), Miao et al.(2021, mRNA vaccine for cancer immunotherapy, Molecular Cancer, 20:41), Boen et al.(2021, Identification of T Cell Ligands in a Library of Peptides Covalently Attached to HLA-DR4, The Journal of Immunology, 165:2040-2047), Pardi et al.(2018, mRNA vaccines - a new era in vaccinology, Nature Reviews, Vol.17, 261-279), 및 대한민국 공개특허공보 제10-2017-0054429호에 공지된 수단일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 암호화 핵산을 포함하는 약학적 조성물은, 상기 제형화 된 암호화 핵산 외 추가적으로 어쥬번트(adjuvants) 및/또는 추가 성분(ingredients)을 포함할 수 있다. 일 구현예로, 상기 암호화 핵산을 포함하는 약학적 조성물은 다음을 포함한다: 제형화 된 암호화 핵산; 선택적으로, 어쥬번트(adjuvants); 및 선택적으로, 추가 성분(ingredients).
제형화 된 암호화 핵산
상기 제형화 된 암호화 핵산은 통상의 기술자가 상기 암호화 핵산을 적절한 전달 수단(vector)을 택하여 제형화 한 것일 수 있다. 상기 암호화 핵산은 바이러스 벡터 및/또는 비 바이러스 벡터를 사용하여 제형화 되어 있을 수 있다. 일 구현예로, 상기 제형화 된 암호화 핵산은 바이러스 벡터를 포함할 수 있다. 일 구현예로, 상기 제형화 된 암호화 핵산은 비 바이러스 벡터를 포함할 수 있다. 구체적으로, 상기 비 바이러스 벡터는 지질, 폴리머, 무기 나노 입자를 포함할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
일 구현예로, 상기 제형화 된 암호화 핵산은 다음 중 선택된 하나 이상을 포함할 수 있다:
네이키드 핵산(naked nucleic acid); 양이온성 펩티드-복합 핵산(Protamine); 양전하를 띠는 oil-water 양이온 나노에멀젼(Cationic nanoemulsion); 화학적으로 변형된 덴드리머와 결합되고, 폴리에틸렌 글리콜(polyethylene glycol) 및 PEG-지질과 복합체화 된 핵산(Modified dendrimer nanoparticle); PEG-지질 나노 입자에서 프로타민과 복합된 핵산(Protamine liposome); polyethylenimine, PEI와 같은 양이온성 중합체와 복합된 핵산(Cationic polymer); PEI 및 지질 성분과 같은 양이온성 중합체와 복합된 핵산(Cationic polymer liposome); 키토산 같은 다당류 중합체와 복합된 핵산(Polysaccharide particle); 양이온성 지질 나노 입자 중합체와 복합된 핵산(Cationic lipid nanoparticle); 양이온성 지질 및 콜레스테롤과 복합된 핵산(Cationic lipid-cholesterol nanoparticle); 및 양이온성 지질 및 콜레스테롤 및 PEG-지질과 복합체화 된 핵산(Cationic lipid-cholesterol-PEG nanoparticle).
일 구현예로, 상기 제형화 된 암호화 핵산은 지질 나노 입자(lipid nanoparticles; LNP)를 포함할 수 있다. 상기 구현예에서, 상기 지질 나노 입자는 이온화 가능한 양이온성 지질(cationic lipid), 인지질(phospholipid), 콜레스테롤(cholesterol), 및/또는 지질 고정 폴리에틸렌 글리콜(lipid-anchored polyethylene glycol)일 수 있다. 구체적으로, 상기 이온화 가능한 양이온성 지질은 다음에서 선택된 하나 이상일 수 있다: DLin-DMA; DLin-KC2-DMA; DLin-MC3-DMA; C12-200; cKK-E12; DLin-MC3-DMA 유도체 L319 (Alnylam 및 AlCana Technologies); C12-200 및 cKK-E12 유도체 (Anderson 그룹); COVID-19 백신 지질 ALC-0315 및 SM-102; TT3 및 생분해성 유도체 FTT5 (Dong 's group); 비타민 유래 지질 ssPalmE 및 VcLNP; A9 (Acuitas); L5 (Moderna); A18 Lipid; ATX Lipid (LUNAR® 조성물; Arcturus); 및 LP01 (Intellia Therapeutics). 구체적으로, 상기 인지질은 다음 중 선택된 하나 이상일 수 있다: 1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine (DOPE); 및 1,2-distearoyl-sn-glycero-3- phosphocholine (DSPC).
일 구현예로, 상기 제형화 된 암호화 핵산은 폴리머-기반 전달 시스템(polymer-based delivery system)을 포함할 수 있다. 상기 구현예에서, 상기 폴리머-기반 전달 시스템은 다음 중 선택된 하나 이상을 포함할 수 있다: 폴리에틸렌이민(polyethylenimine; PEI); 폴리아미도아민(polyamidoamine; PAMAM); 폴리프로필렌이민(polypropylenimine); 및 상기 폴리머 기반 덴드리머.
일 구현예로, 상기 제형화 된 암호화 핵산은 펩타이드-기반 전달 시스템(peptide-based delivery system)을 포함할 수 있다. 상기 구현예에서, 상기 펩타이드-기반 전달 시스템은 프로타민(protamine)을 포함할 수 있다. 구체적으로, 상기 제형화 된 암호화 핵산은 프로타민-mRNA 복합체일 수 있다.
일 구현예로, 상기 제형화 된 암호화 핵산은 양이온성 지질 구성 리포솜 (liposome), 리포플렉스 (lipoplex) 및/또는 양이온성 에멀젼 (cationic emulsion, CNE)을 포함할 수 있다. 상기 구현예에서, 상기 양이온성 지질은 DOTMA (1,2-di-O-octadecenyl-3-trimethylammonium propane) 및/또는 DOTAP (1,2-dioleoyl3-trimethylammonium-propane)일 수 있다.
어쥬번트(adjuvants)
일 구현예로, 상기 암호화 핵산을 포함하는 약학적 조성물은 지질 나노 입자(LNP), 알루미늄 염(aluminum salts), 1,2-dioleyl-3-trimethylammonium-propane chloride, MF59 (Novartis) adjuvant, CD70, CD40 ligand (CD40L), TriMix, TLR7 신호 전달을 통해 작용하는 프로타민, 및/또는 박테리아 유래 monophosphoryl lipid A를 어쥬번트(adjuvants)로 포함할 수 있다.
추가 성분(ingredients)
일 구현예로, 상기 암호화 핵산을 포함하는 약학적 조성물은 선택적으로, 다양한 추가성분(ingredients)을 포함할 수 있다. 일 구현예로, 상기 추가 성분은 다음에서 선택된 하나 이상일 수 있다:
지질(lipids); 체내 산성도 균형을 이루기 위한 염(salts); 반복 동결-융해(freezing-thawing)시의 안정성 유지를 위한 수크로스(sucrose); 및 백신 안정성 향상 물질.
구체적으로, 상기 지질은 SM-102, PEG2000-DMG, DPSC, cholesterol, 및/또는 ALC-0315일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 구체적으로, 상기 염은 sodium acetate, potassium chloride, monobasic potassium phosphate, sodium chloride, 및/또는 dibasic sodium phosphate dehydrate일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 구체적으로, 상기 백신 안정성 향상 물질은 acetic acid, acid stabilizer (tromethamine), 및/또는 ethanol일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
펩타이드 - 정리(THE PEPTIDE - SUMMARY)
본 명세서에서 제공하는 펩타이드는 적어도 하나의 펩타이드 단위체를 포함하며, 상기 펩타이드 단위체는 적어도 하나의 B-cell 에피토프, 적어도 하나의 Th 에피토프를 포함하고, 적절한 수의 보조부를 포함할 수 있다. 상기 펩타이드 단위체는 대상의 체내에서 일정 수준 이상의 면역원성을 나타내면서, 미리 의도된 항체만을 균일하게 유도하도록 설계된 부분이다. 또한, 상기 펩타이드 단위체는 비교적 짧은 길이로 설계되어, 합성이 용이하고 생산 단가가 낮다는 특성을 지닌다. 상기 펩타이드는 전술한 펩타이드 단위체의 특성으로 인해, 면역치료제로 사용되기에 적합한 특성을 지닌다. 본 명세서에서는 상기 펩타이드 및 상기 펩타이드 단위체의 설계 원리에 대하여 자세히 개시하고 있다.
본 명세서에 개시하는 상기 펩타이드의 각 부분의 명칭(예를 들어, 보조부)은 설명의 편의를 위해 붙여진 명칭이다. 따라서, 관점에 따라 각 부분의 범위 및 명칭은 달라질 수 있다. 예를 들어, 상기 보조부는 보호부(protecting part), 더미부(dummy part) 및/또는 링커(linker)로 지칭될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 또 다른 예를 들어, 상기 B-cell 에피토프는 Th-에피토프-보호 에피토프로 지칭될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
발명의 가능한 실시예
이하 본 명세서에서 제공하는 발명의 가능한 실시예들을 나열한다. 본 단락에서 제공하는 이하의 실시예들은 단지 발명의 일 예시에 해당될 뿐이다. 따라서, 본 명세서에서 제공하는 발명을 하기 실시예로 제한하여 해석할 수 없다.
각 실시예에 사용된 기호
이하 각 실시예를 구분하기 위한 번호 외, 각 실시예의 간략한 설명을 위해 사용된 기호를 설명한다.
B는 B-cell 에피토프를 나타낸다. T는 Th 에피토프를 나타낸다. A는 보조부(Auxiliary part)를 나타낸다. U는 펩타이드 단위체를 나타낸다.
각 구성이 "-"로 연결된 경우, 해당 구성은 "-" 양 옆의 구성이 직접 연결되거나, 또는 임의의 다른 구성을 통해 연결된 것을 통틀어 의미한다. 예를 들어, B-T라고 기재하는 경우, B-cell 에피토프 및 Th 에피토프가 직접 연결된 펩타이드, 및 B-cell 에피토프 및 Th 에피토프가 임의의 다른 서열을 통해 연결된 펩타이드를 모두 포함한다.
필요한 경우, 각 구성에 번호를 붙여 표기할 수 있으며, 이는 두 구성이 서로 다른 것을 나타낸다. 예를 들어, B1-B2-T라고 표기하는 경우, 상기 B1 및 B2는 서로 다른 B-cell 에피토프를 나타낸다.
상기 기호는 실시예를 대략적으로 설명하기 위한 기호일 뿐, 실시예를 상기 기호를 가지고 제한하여 해석할 수 없다.
펩타이드 단위체 1
실시예 1, 체액성 면역반응을 유도할 수 있는 펩타이드 단위체
다음을 포함하는, CD4+ T-cell에 의해 인식되어 체액성 면역반응을 유도할 수 있는 펩타이드 단위체: 적어도 하나의 Th 에피토프; 및 적어도 하나의 B-cell 에피토프, 이때, 상기 Th 에피토프의 길이는 8mer, 9mer, 10mer, 11mer, 12mer, 13mer, 14mer, 15mer, 16mer, 17mer, 18mer, 19mer, 20mer, 21mer, 22mer, 23mer, 24mer, 25mer, 26mer, 27mer, 28mer, 29mer, 또는 30mer이고, 상기 B-cell 에피토프의 길이는 8mer, 9mer, 10mer, 11mer, 12mer, 13mer, 14mer, 15mer, 16mer, 17mer, 18mer, 19mer, 20mer, 21mer, 22mer, 23mer, 24mer, 25mer, 26mer, 27mer, 28mer, 29mer, 30mer, 31mer, 또는 32mer이며, 상기 펩타이드 단위체의 길이는 16mer, 17mer, 18mer, 19mer, 20mer, 21mer, 22mer, 23mer, 24mer, 25mer, 26mer, 27mer, 28mer, 29mer, 30mer, 31mer, 32mer, 33mer, 34mer, 35mer, 36mer, 37mer, 38mer, 39mer, 40mer, 41mer, 42mer, 43mer, 44mer, 45mer, 46mer, 47mer, 48mer, 49mer, 50mer, 51mer, 52mer, 53mer, 54mer, 55mer, 56mer, 57mer, 58mer, 59mer, 60mer, 61mer, 62mer, 63mer, 64mer, 65mer, 66mer, 67mer, 68mer, 69mer, 70mer, 71mer, 72mer, 73mer, 74mer, 75mer, 76mer, 77mer, 78mer, 79mer, 80mer, 81mer, 82mer, 83mer, 84mer, 85mer, 86mer, 87mer, 88mer, 89mer, 90mer, 91mer, 92mer, 93mer, 94mer, 95mer, 96mer, 97mer, 98mer, 99mer, 또는 100mer인 것을 특징으로 함.
실시예 2, 아포지단백 B-100을 표적하는 항체를 유도하는 펩타이드 단위체
다음을 포함하는, CD4+ T-cell에 의해 인식되어 체액성 면역반응을 유도할 수 있는 펩타이드 단위체: 적어도 하나의 Th 에피토프; 및 적어도 하나의 B-cell 에피토프, 이때, 상기 Th 에피토프의 길이는 8mer, 9mer, 10mer, 11mer, 12mer, 13mer, 14mer, 15mer, 16mer, 17mer, 18mer, 19mer, 20mer, 21mer, 22mer, 23mer, 24mer, 25mer, 26mer, 27mer, 28mer, 29mer, 또는 30mer이고, 상기 B-cell 에피토프는 아포지단백 B-100(Apolipoprotein B-100)을 표적하는 항체를 유도할 수 있으며, 상기 펩타이드 단위체의 길이는 16mer, 17mer, 18mer, 19mer, 20mer, 21mer, 22mer, 23mer, 24mer, 25mer, 26mer, 27mer, 28mer, 29mer, 30mer, 31mer, 32mer, 33mer, 34mer, 35mer, 36mer, 37mer, 38mer, 39mer, 40mer, 41mer, 42mer, 43mer, 44mer, 45mer, 46mer, 47mer, 48mer, 49mer, 50mer, 51mer, 52mer, 53mer, 54mer, 55mer, 56mer, 57mer, 58mer, 59mer, 60mer, 61mer, 62mer, 63mer, 64mer, 65mer, 66mer, 67mer, 68mer, 69mer, 70mer, 71mer, 72mer, 73mer, 74mer, 75mer, 76mer, 77mer, 78mer, 79mer, 80mer, 81mer, 82mer, 83mer, 84mer, 85mer, 86mer, 87mer, 88mer, 89mer, 90mer, 91mer, 92mer, 93mer, 94mer, 95mer, 96mer, 97mer, 98mer, 99mer, 또는 100mer인 것을 특징으로 함.
실시예 3, LDL 및/또는 VLDL에 포함된 아포지단백 B-100을 표적하는 항체를 유도하는 펩타이드 단위체
실시예 2에 있어서, 상기 B-cell 에피토프는 다음 중 선택된 부위를 표적하는 항체를 유도하는 것을 특징으로 함: 저밀도지단백(LDL)에 포함된 아포지단백 B-100(Apolipoprotein B-100)의 외부 노출 부위; 및 초저밀도지단백(VLDL)에 포함된 아포지단백 B-100(Apolipoprotein B-100)의 외부 노출 부위.
실시예 4, B 종류 한정
실시예 2에 있어서, 상기 B-cell 에피토프는 아포지단백 B-100의 절편(fragment), 및/또는 아포지단백 B-100의 미모토프(mimotope)인 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 5, B 서열 한정
실시예 4에 있어서, 상기 B-cell 에피토프는 RNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 6), CRFRGLISLSQVYLS(서열번호 7), KTTKQSFDLSVKAQYKKNKH(서열번호 8), RFRGLISLSQVYLDP(서열번호 221), 및 SVCGCPVGHHDVVGL(서열번호 222)로 이뤄진 군에서 선택되는 서열이거나, 상기 서열번호 6 내지 8, 221 내지 222에서 선택된 서열에 포함된 에피토프인 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 6, 펩타이드 단위체 전장 서열 길이 한정
실시예 1 내지 5 중 어느 하나에 있어서, 상기 펩타이드 단위체의 길이는 23mer 내지 71mer, 또는 26mer 내지 50mer인 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
펩타이드 단위체 2 - 단위체 A
실시예 7, B-T 및 T-B
실시예 1 내지 4 중 어느 하나에 있어서, 상기 펩타이드 단위체는 하나의 B-cell 에피토프 및 하나의 Th 에피토프를 포함하는 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 8, B 서열 한정, T 길이 한정, 및 U 길이 한정
실시예 7에 있어서, 상기 펩타이드 단위체의 길이는 26mer 내지 45mer이며, 상기 B-cell 에피토프는 RNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 6), CRFRGLISLSQVYLS(서열번호 7), KTTKQSFDLSVKAQYKKNKH(서열번호 8), RFRGLISLSQVYLDP(서열번호 221), 및 SVCGCPVGHHDVVGL(서열번호 222)에서 선택되고, 상기 Th 에피토프의 길이는 11mer 내지 13mer인 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 9, T 서열 한정
실시예 7 내지 8 중 어느 하나에 있어서, 상기 Th 에피토프는 다음으로 이뤄진 군에서 선택되는 것을 특징으로 함: K(Cha)VAAWTLKAA(서열번호 1); PKYVKQNTLKLAT(서열번호 2); ILMQYIKANSKFIGI(서열번호 3); QSIALSSLMVAQAIP(서열번호 4); ILMQYIKANSKFIGIPMGLPQSIALSSLMVAQ(서열번호 5); PLGFFPDHQL(서열번호 162); WPEANQVGAGAFGPGF(서열번호 163); MQWNSTALHQALQDP(서열번호 164); MQWNSTTFHQTLQDPRVRGLYFPAGG(서열번호 165); FFLLTRILTI(서열번호 166); FFLLTRILTIPQSLD(서열번호 167); TSLNFLGGTTVCLGQ(서열번호 168); QSPTSNHSPTSCPPIC(서열번호 169); IIFLFILLLCLIFLLVLLD(서열번호 170); CTTPAQGNSMFPSC(서열번호 171); CTKPTDGN(서열번호 172); WASVRFSW(서열번호 173); LLPIFFCLW(서열번호 174); MDIDPYKEFGATVELLSFLP(서열번호 175); FLPSDFFPSV(서열번호 176); RDLLDTASALYREALESPEH(서열번호 177); PHHTALRQAILCWGELMTLA(서열번호 178); GRETVIEYLVSFGVW(서열번호 179); EYLVSFGVWIRTPPA(서열번호 180); VSFGVWIRTPPAYRPPNAPI(서열번호 181); TVVRRRGRSP(서열번호 182); VGPLTVNEKRRLKLI(서열번호 183); RHYLHTLWKAGILYK(서열번호 184); ESRLVVDFSQFSRGN(서열번호 185); LQSLTNLLSSNLSWL(서열번호 186); SSNLSWLSLDVSAAF(서열번호 187); LHLYSHPIILGFRKI(서열번호 188); KQCFRKLPVNRPIDW(서열번호 189); LCQVFADATPTGWGL(서열번호 190); AANWILRGTSFVYVP(서열번호 191); 및 EIRLKVFVLGGCRHK(서열번호 192), 이때, (Cha)는 L-cyclohexylalanins을 의미함.
실시예 10, BAT 및 TAB
실시예 7 내지 8 중 어느 하나에 있어서, 상기 펩타이드 단위체는 보조부를 추가로 포함하며, 상기 보조부는 상기 B-cell 에피토프 및 상기 Th 에피토프 사이에 연결된 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 11, A 한정, 비표준 아미노산 포함
실시예 10에 있어서, 상기 보조부는 하나 이상의 비표준 아미노산을 포함하는 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 12, 비표준 아미노산을 포함하는 A의 서열 한정
실시예 11에 있어서, 상기 보조부는 a, Z, aZ, Za, GSHHHHHHGSDDDKZa (서열번호 193), 및 aZGSHHHHHHGSDDDK (서열번호 194)에서 선택되는 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 13, 비표준 아미노산을 포함하지 않는 A의 서열 한정
실시예 10에 있어서, 상기 보조부는 CR, HHHHHH (서열번호 53), 및 RRRRRR (서열번호 159)에서 선택되는 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
펩타이드 단위체 3 - 단위체 D
실시예 14, B-T1-T2 및 T2-T1-B
실시예 1 내지 4 중 어느 하나에 있어서, 상기 펩타이드 단위체는 하나의 B-cell 에피토프, 및 각각 제1 Th 에피토프, 제2 Th 에피토프로 지칭되는 2개의 Th 에피토프를 포함하며, 상기 제1 Th 에피토프는 상기 B-cell 에피토프 및 상기 제2 Th 에피토프 사이에 연결된 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 15, B 서열 한정, T 길이 한정, 및 U 길이 한정
실시예 14에 있어서, 상기 펩타이드 단위체의 길이는 37mer 내지 50mer이고, 상기 B-cell 에피토프는 RNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 6), CRFRGLISLSQVYLS(서열번호 7), KTTKQSFDLSVKAQYKKNKH(서열번호 8), RFRGLISLSQVYLDP(서열번호 221), 및 SVCGCPVGHHDVVGL(서열번호 222)에서 선택되고, 상기 제1 Th 에피토프 및 상기 제2 Th 에피토프의 길이는 각각 11mer 내지 13mer인 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 16, T 서열 한정
실시예 14 내지 15 중 어느 하나에 있어서, 상기 Th 에피토프는 다음으로 이뤄진 군에서 선택되는 것을 특징으로 함: K(Cha)VAAWTLKAA(서열번호 1); PKYVKQNTLKLAT(서열번호 2); ILMQYIKANSKFIGI(서열번호 3); QSIALSSLMVAQAIP(서열번호 4); ILMQYIKANSKFIGIPMGLPQSIALSSLMVAQ(서열번호 5); PLGFFPDHQL(서열번호 162); WPEANQVGAGAFGPGF(서열번호 163); MQWNSTALHQALQDP(서열번호 164); MQWNSTTFHQTLQDPRVRGLYFPAGG(서열번호 165); FFLLTRILTI(서열번호 166); FFLLTRILTIPQSLD(서열번호 167); TSLNFLGGTTVCLGQ(서열번호 168); QSPTSNHSPTSCPPIC(서열번호 169); IIFLFILLLCLIFLLVLLD(서열번호 170); CTTPAQGNSMFPSC(서열번호 171); CTKPTDGN(서열번호 172); WASVRFSW(서열번호 173); LLPIFFCLW(서열번호 174); MDIDPYKEFGATVELLSFLP(서열번호 175); FLPSDFFPSV(서열번호 176); RDLLDTASALYREALESPEH(서열번호 177); PHHTALRQAILCWGELMTLA(서열번호 178); GRETVIEYLVSFGVW(서열번호 179); EYLVSFGVWIRTPPA(서열번호 180); VSFGVWIRTPPAYRPPNAPI(서열번호 181); TVVRRRGRSP(서열번호 182); VGPLTVNEKRRLKLI(서열번호 183); RHYLHTLWKAGILYK(서열번호 184); ESRLVVDFSQFSRGN(서열번호 185); LQSLTNLLSSNLSWL(서열번호 186); SSNLSWLSLDVSAAF(서열번호 187); LHLYSHPIILGFRKI(서열번호 188); KQCFRKLPVNRPIDW(서열번호 189); LCQVFADATPTGWGL(서열번호 190); AANWILRGTSFVYVP(서열번호 191); 및 EIRLKVFVLGGCRHK(서열번호 192), 이때, a는 D-form alanine, (Cha)는 L-cyclohexylalanins, Z는 6-aminohexanoic acid를 의미함.
실시예 17, BAT1-T2 및 T2-T1AB
실시예 14 내지 15 중 어느 하나에 있어서, 상기 펩타이드 단위체는 보조부를 추가로 포함하며, 상기 보조부는 상기 B-cell 에피토프 및 상기 제1 Th 에피토프 사이에 연결된 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 18, B-T1AT2 및 T2AT1-B
실시예 14 내지 15 중 어느 하나에 있어서, 상기 펩타이드 단위체는 보조부를 추가로 포함하며, 상기 보조부는 상기 제1 Th 에피토프 및 상기 제2 Th 에피토프 사이에 연결된 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 19, A 한정, 비표준 아미노산 포함
실시예 17 내지 18 중 어느 하나에 있어서, 상기 보조부는 하나 이상의 비표준 아미노산을 포함하는 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 20, 비표준 아미노산을 포함하는 A 서열 한정
실시예 19에 있어서, 상기 보조부는 a, Z, aZ, Za, GSHHHHHHGSDDDKZa (서열번호 193), 및 aZGSHHHHHHGSDDDK (서열번호 194)에서 선택되는 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 21, 비표준 아미노산을 포함하지 않는 A 서열 한정
실시예 17 내지 18 중 어느 하나에 있어서, 상기 보조부는 CR, HHHHHH (서열번호 53), 및 RRRRRR (서열번호 159)에서 선택되는 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 22, BAT1AT2 및 T2AT1AB
실시예 14 내지 15 중 어느 하나에 있어서, 상기 펩타이드 단위체는 제1 보조부 및 제2 보조부를 추가로 포함하며, 상기 제1 보조부는 상기 B-cell 에피토프 및 상기 Th 에피토프 사이에 연결되었고, 상기 제2 보조부는 상기 제1 Th 에피토프 및 상기 제2 Th 에피토프 사이에 연결된 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 23, A 한정, 비표준 아미노산 포함
실시예 22에 있어서, 상기 제1 보조부 및/또는 제2 보조부는 하나 이상의 비표준 아미노산을 포함하는 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 24, 비표준 아미노산을 포함하는 A 서열 한정
실시예 23에 있어서, 하나 이상의 비표준 아미노산을 포함하는 보조부는 a, Z, aZ, Za, GSHHHHHHGSDDDKZa (서열번호 193), 및 aZGSHHHHHHGSDDDK (서열번호 194)에서 각각 독립적으로 선택되는 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 25, 비표준 아미노산을 포함하지 않는 A 서열 한정
실시예 22에 있어서, 상기 제1 보조부 및/또는 제2 보조부는 CR,, HHHHHH (서열번호 53), 및 RRRRRR (서열번호 159)에서 각각 독립적으로 선택되는 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
펩타이드 단위체 4 - 단위체 B
실시예 26, B1-B2-T 및 T-B2-B1
실시예 1 내지 4 중 어느 하나에 있어서, 상기 펩타이드 단위체는 제1 B-cell 에피토프, 제2 B-cell 에피토프로 지칭되는 두 개의 B-cell 에피토프, 및 하나의 Th 에피토프를 포함하고, 상기 제2 B-cell 에피토프는 상기 제1 B-cell 에피토프 및 상기 Th 에피토프 사이에 연결된 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 27, B 서열 한정, T 길이 한정, 및 U 길이 한정
실시예 26에 있어서, 상기 펩타이드 단위체의 길이는 45mer 내지 50mer이고, 상기 제1 B-cell 에피토프 및 상기 제2 B-cell 에피토프는 RNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 6), CRFRGLISLSQVYLS(서열번호 7), KTTKQSFDLSVKAQYKKNKH(서열번호 8), RFRGLISLSQVYLDP(서열번호 221), 및 SVCGCPVGHHDVVGL(서열번호 222)에서 각각 독립적으로 선택되고, 상기 Th 에피토프의 길이는 11mer 내지 13mer인 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 28, T 서열 한정
실시예 26 내지 27 중 어느 하나에 있어서, 상기 Th 에피토프는 다음으로 이뤄진 군에서 선택되는 것을 특징으로 함: K(Cha)VAAWTLKAA(서열번호 1); PKYVKQNTLKLAT(서열번호 2); ILMQYIKANSKFIGI(서열번호 3); QSIALSSLMVAQAIP(서열번호 4); ILMQYIKANSKFIGIPMGLPQSIALSSLMVAQ(서열번호 5); PLGFFPDHQL(서열번호 162); WPEANQVGAGAFGPGF(서열번호 163); MQWNSTALHQALQDP(서열번호 164); MQWNSTTFHQTLQDPRVRGLYFPAGG(서열번호 165); FFLLTRILTI(서열번호 166); FFLLTRILTIPQSLD(서열번호 167); TSLNFLGGTTVCLGQ(서열번호 168); QSPTSNHSPTSCPPIC(서열번호 169); IIFLFILLLCLIFLLVLLD(서열번호 170); CTTPAQGNSMFPSC(서열번호 171); CTKPTDGN(서열번호 172); WASVRFSW(서열번호 173); LLPIFFCLW(서열번호 174); MDIDPYKEFGATVELLSFLP(서열번호 175); FLPSDFFPSV(서열번호 176); RDLLDTASALYREALESPEH(서열번호 177); PHHTALRQAILCWGELMTLA(서열번호 178); GRETVIEYLVSFGVW(서열번호 179); EYLVSFGVWIRTPPA(서열번호 180); VSFGVWIRTPPAYRPPNAPI(서열번호 181); TVVRRRGRSP(서열번호 182); VGPLTVNEKRRLKLI(서열번호 183); RHYLHTLWKAGILYK(서열번호 184); ESRLVVDFSQFSRGN(서열번호 185); LQSLTNLLSSNLSWL(서열번호 186); SSNLSWLSLDVSAAF(서열번호 187); LHLYSHPIILGFRKI(서열번호 188); KQCFRKLPVNRPIDW(서열번호 189); LCQVFADATPTGWGL(서열번호 190); AANWILRGTSFVYVP(서열번호 191); 및 EIRLKVFVLGGCRHK(서열번호 192), 이때, a는 D-form alanine, (Cha)는 L-cyclohexylalanins, Z는 6-aminohexanoic acid를 의미함.
실시예 29, B1-B2AT 및 TAB2-B1
실시예 26 내지 27 중 어느 하나에 있어서, 상기 펩타이드 단위체는 보조부를 추가로 포함하고, 상기 보조부는 상기 제2 B-cell 에피토프 및 상기 Th 에피토프 사이에 연결된 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 30, B1AB2-T 및 T-B2AB1
실시예 26 내지 27 중 어느 하나에 있어서, 상기 펩타이드 단위체는 보조부를 추가로 포함하고, 상기 보조부는 상기 제1 B-cell 에피토프 및 상기 제2 B-cell 에피토프 사이에 연결된 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 31, A 한정, 비표준 아미노산 포함
실시예 29 내지 30 중 어느 하나에 있어서, 상기 보조부는 하나 이상의 비표준 아미노산을 포함하는 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 32, 비표준 아미노산을 포함하는 A 서열 한정
실시예 31에 있어서, 상기 보조부는 a, Z, aZ, Za, GSHHHHHHGSDDDKZa (서열번호 193), 및 aZGSHHHHHHGSDDDK (서열번호 194)에서 선택되는 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 33, A, 비표준 아미노산을 포함하지 않는 A 서열 한정
실시예 29 내지 30 중 어느 하나에 있어서, 상기 보조부는 CR, HHHHHH (서열번호 53), 및 RRRRRR (서열번호 159)에서 선택되는 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 34, B1A1B2A2T 및 TA2B2A1B1
실시예 26 내지 27 중 어느 하나에 있어서, 상기 펩타이드 단위체는 제1 보조부 및 제2 보조부를 추가로 포함하고, 상기 제1 보조부는 상기 제1 B-cell 에피토프 및 상기 제2 B-cell 에피토프 사이에 연결되었고, 상기 제2 보조부는 상기 제2 B-cell 에피토프 및 상기 Th 에피토프 사이에 연결된 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 35, A 한정, 비표준 아미노산 포함
실시예 34에 있어서, 상기 제1 보조부 및/또는 제2 보조부는 하나 이상의 비표준 아미노산을 포함하는 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 36, 비표준 아미노산을 포함하는 A 서열 한정
실시예 35에 있어서, 하나 이상의 비표준 아미노산을 포함하는 보조부는 a, Z, aZ, Za, GSHHHHHHGSDDDKZa (서열번호 193), 및 aZGSHHHHHHGSDDDK (서열번호 194)에서 각각 독립적으로 선택되는 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 37, 비표준 아미노산을 포함하지 않는 A 서열 한정
실시예 34에 있어서, 상기 제1 보조부 및/또는 제2 보조부는 CR,, HHHHHH (서열번호 53), 및 RRRRRR (서열번호 159)에서 각각 독립적으로 선택되는 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
펩타이드 단위체 5 - 단위체 C
실시예 38, B1-T-B2
실시예 1 내지 4 중 어느 하나에 있어서, 상기 펩타이드 단위체는 제1 B-cell 에피토프, 제2 B-cell 에피토프로 지칭되는 두 개의 B-cell 에피토프, 및 하나의 Th 에피토프를 포함하고, 상기 Th 에피토프는 상기 제1 B-cell 에피토프 및 상기 제2 B-cell 에피토프 사이에 연결된 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 39, B 서열 한정, T 길이 한정, 및 U 길이 한정
실시예 38에 있어서, 상기 펩타이드 단위체의 길이는 45mer 내지 50mer이고, 상기 제1 B-cell 에피토프 및 상기 제2 B-cell 에피토프는 RNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 6), CRFRGLISLSQVYLS(서열번호 7), KTTKQSFDLSVKAQYKKNKH(서열번호 8), RFRGLISLSQVYLDP(서열번호 221), 및 SVCGCPVGHHDVVGL(서열번호 222)에서 각각 독립적으로 선택되고, 상기 Th 에피토프의 길이는 11mer 내지 13mer인 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 40, T 서열 한정
실시예 38 내지 39 중 어느 하나에 있어서, 상기 Th 에피토프는 다음으로 이뤄진 군에서 선택되는 것을 특징으로 함: K(Cha)VAAWTLKAA(서열번호 1); PKYVKQNTLKLAT(서열번호 2); ILMQYIKANSKFIGI(서열번호 3); QSIALSSLMVAQAIP(서열번호 4); ILMQYIKANSKFIGIPMGLPQSIALSSLMVAQ(서열번호 5); PLGFFPDHQL(서열번호 162); WPEANQVGAGAFGPGF(서열번호 163); MQWNSTALHQALQDP(서열번호 164); MQWNSTTFHQTLQDPRVRGLYFPAGG(서열번호 165); FFLLTRILTI(서열번호 166); FFLLTRILTIPQSLD(서열번호 167); TSLNFLGGTTVCLGQ(서열번호 168); QSPTSNHSPTSCPPIC(서열번호 169); IIFLFILLLCLIFLLVLLD(서열번호 170); CTTPAQGNSMFPSC(서열번호 171); CTKPTDGN(서열번호 172); WASVRFSW(서열번호 173); LLPIFFCLW(서열번호 174); MDIDPYKEFGATVELLSFLP(서열번호 175); FLPSDFFPSV(서열번호 176); RDLLDTASALYREALESPEH(서열번호 177); PHHTALRQAILCWGELMTLA(서열번호 178); GRETVIEYLVSFGVW(서열번호 179); EYLVSFGVWIRTPPA(서열번호 180); VSFGVWIRTPPAYRPPNAPI(서열번호 181); TVVRRRGRSP(서열번호 182); VGPLTVNEKRRLKLI(서열번호 183); RHYLHTLWKAGILYK(서열번호 184); ESRLVVDFSQFSRGN(서열번호 185); LQSLTNLLSSNLSWL(서열번호 186); SSNLSWLSLDVSAAF(서열번호 187); LHLYSHPIILGFRKI(서열번호 188); KQCFRKLPVNRPIDW(서열번호 189); LCQVFADATPTGWGL(서열번호 190); AANWILRGTSFVYVP(서열번호 191); 및 EIRLKVFVLGGCRHK(서열번호 192), 이때, a는 D-form alanine, (Cha)는 L-cyclohexylalanins, Z는 6-aminohexanoic acid를 의미함.
실시예 41, B1AT-B2 및 B2-TAB1
실시예 38 내지 39 중 어느 하나에 있어서, 상기 펩타이드 단위체는 보조부를 추가로 포함하고, 상기 보조부는 상기 제1 B-cell 에피토프 및 상기 Th 에피토프 사이에 연결된 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 42, A 한정, 비표준 아미노산 포함
실시예 41에 있어서, 상기 보조부는 하나 이상의 비표준 아미노산을 포함하는 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 43, 비표준 아미노산을 포함하는 A 서열 한정
실시예 42에 있어서, 상기 보조부는 a, Z, aZ, Za, GSHHHHHHGSDDDKZa (서열번호 193), 및 aZGSHHHHHHGSDDDK (서열번호 194)에서 선택되는 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 44, 비표준 아미노산을 포함하지 않는 A 서열 한정
실시예 41에 있어서, 상기 보조부는 CR, HHHHHH (서열번호 53), 및 RRRRRR (서열번호 159)에서 선택되는 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 45, B1A1TA2B2
실시예 38 내지 39 중 어느 하나에 있어서, 상기 펩타이드 단위체는 제1 보조부 및 제2 보조부를 추가로 포함하고, 상기 제1 보조부는 상기 제1 B-cell 에피토프 및 Th 에피토프 사이에 연결되었고, 상기 제2 보조부는 상기 제2 B-cell 에피토프 및 Th 에피토프 사이에 연결된 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 46, A 한정, 비표준 아미노산 포함
실시예 45에 있어서, 상기 제1 보조부 및/또는 제2 보조부는 하나 이상의 비표준 아미노산을 포함하는 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 47, 비표준 아미노산을 포함하는 A 서열 한정
실시예 46에 있어서, 하나 이상의 비표준 아미노산을 포함하는 보조부는 a, Z, aZ, Za, GSHHHHHHGSDDDKZa (서열번호 193), 및 aZGSHHHHHHGSDDDK (서열번호 194)에서 각각 독립적으로 선택되는 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 48, 비표준 아미노산을 포함하지 않는 A 서열 한정
실시예 45에 있어서, 상기 제1 보조부 및/또는 제2 보조부는 CR,, HHHHHH (서열번호 53), 및 RRRRRR (서열번호 159)에서 각각 독립적으로 선택되는 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
펩타이드 단위체 6 - 단위체 E
실시예 49, B1-T1-T2-B2
실시예 1 내지 4 중 어느 하나에 있어서, 상기 펩타이드 단위체는 제1 B-cell 에피토프, 제2 B-cell 에피토프로 각각 지칭되는 두 개의 B-cell 에피토프 및 제1 Th 에피토프 및 제2 Th 에피토프로 각각 지칭되는 두 개의 Th 에피토프를 포함하고, N말단에서 C말단 방향으로, 제1 B-cell 에피토프, 제1 Th 에피토프, 제2 Th 에피토프, 및 제2 B-cell 에피토프가 순서대로 연결된 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 50, B 서열 한정, T 길이 한정, 및 U 길이 한정
실시예 49에 있어서, 상기 펩타이드 단위체의 길이는 52mer 내지 90mer이고, 상기 제1 B-cell 에피토프 및 상기 제2 B-cell 에피토프는 RNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 6), CRFRGLISLSQVYLS(서열번호 7), KTTKQSFDLSVKAQYKKNKH(서열번호 8), RFRGLISLSQVYLDP(서열번호 221), 및 SVCGCPVGHHDVVGL(서열번호 222)에서 각각 독립적으로 선택되고, 상기 제1 Th 에피토프 및 상기 제2 Th 에피토프의 길이는 각각 11mer 내지 13mer인 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 51, T 서열 한정
실시예 50에 있어서, 상기 제1 Th 에피토프 및 상기 제2 Th 에피토프는 다음으로 이뤄진 군에서 각각 독립적으로 선택되는 것을 특징으로 함: 상기 Th 에피토프는 다음으로 이뤄진 군에서 선택되는 것을 특징으로 함: K(Cha)VAAWTLKAA(서열번호 1); PKYVKQNTLKLAT(서열번호 2); ILMQYIKANSKFIGI(서열번호 3); QSIALSSLMVAQAIP(서열번호 4); ILMQYIKANSKFIGIPMGLPQSIALSSLMVAQ(서열번호 5); PLGFFPDHQL(서열번호 162); WPEANQVGAGAFGPGF(서열번호 163); MQWNSTALHQALQDP(서열번호 164); MQWNSTTFHQTLQDPRVRGLYFPAGG(서열번호 165); FFLLTRILTI(서열번호 166); FFLLTRILTIPQSLD(서열번호 167); TSLNFLGGTTVCLGQ(서열번호 168); QSPTSNHSPTSCPPIC(서열번호 169); IIFLFILLLCLIFLLVLLD(서열번호 170); CTTPAQGNSMFPSC(서열번호 171); CTKPTDGN(서열번호 172); WASVRFSW(서열번호 173); LLPIFFCLW(서열번호 174); MDIDPYKEFGATVELLSFLP(서열번호 175); FLPSDFFPSV(서열번호 176); RDLLDTASALYREALESPEH(서열번호 177); PHHTALRQAILCWGELMTLA(서열번호 178); GRETVIEYLVSFGVW(서열번호 179); EYLVSFGVWIRTPPA(서열번호 180); VSFGVWIRTPPAYRPPNAPI(서열번호 181); TVVRRRGRSP(서열번호 182); VGPLTVNEKRRLKLI(서열번호 183); RHYLHTLWKAGILYK(서열번호 184); ESRLVVDFSQFSRGN(서열번호 185); LQSLTNLLSSNLSWL(서열번호 186); SSNLSWLSLDVSAAF(서열번호 187); LHLYSHPIILGFRKI(서열번호 188); KQCFRKLPVNRPIDW(서열번호 189); LCQVFADATPTGWGL(서열번호 190); AANWILRGTSFVYVP(서열번호 191); 및 EIRLKVFVLGGCRHK(서열번호 192), 이때, a는 D-form alanine, (Cha)는 L-cyclohexylalanins, Z는 6-aminohexanoic acid를 의미함.
실시예 52, B1AT1-T2-B2 및 B2-T2-T1AB1
실시예 49 내지 50 중 어느 하나에 있어서, 상기 펩타이드 단위체는 보조부를 추가로 포함하고, 상기 보조부는 상기 제1 B-cell 에피토프 및 상기 제1 Th 에피토프 사이에 연결된 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 53, B1-T1AT2-B2
실시예 49 내지 50 중 어느 하나에 있어서, 상기 펩타이드 단위체는 보조부를 추가로 포함하고, 상기 보조부는 상기 제1 Th 에피토프 및 상기 제2 Th 에피토프 사이에 연결된 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 54, B1-T1-T2AB2 및 B2AT2-T1-B1
실시예 49 내지 50 중 어느 하나에 있어서, 상기 펩타이드 단위체는 보조부를 추가로 포함하고, 상기 보조부는 상기 제2 Th 에피토프 및 상기 제2 B-cell 에피토프 사이에 연결된 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 55, A 한정, 비표준 아미노산 포함
실시예 52 내지 54 중 어느 하나에 있어서, 상기 보조부는 하나 이상의 비표준 아미노산을 포함하는 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 56, 비표준 아미노산을 포함하는 A 서열 한정
실시예 52 내지 54 중 어느 하나에 있어서, 상기 보조부는 a, Z, aZ, Za, GSHHHHHHGSDDDKZa (서열번호 193), 및 aZGSHHHHHHGSDDDK (서열번호 194)에서 선택되는 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 57, 비표준 아미노산을 포함하지 않는 A 서열 한정
실시예 52 내지 54 중 어느 하나에 있어서, 상기 보조부는 CR, HHHHHH (서열번호 53), 및 RRRRRR (서열번호 159)에서 선택되는 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 58, B1A1T1A2T2-B2 및 B2-T2A2T1A1B1
실시예 49 내지 50 중 어느 하나에 있어서, 상기 펩타이드 단위체는 제1 보조부 및 제2 보조부를 추가로 포함하고, 상기 제1 보조부는 상기 제1 B-cell에피토프 및 상기 제1 Th 에피토프 사이에 연결되고, 상기 제2 보조부는 상기 제1 Th 에피토프 및 상기 제2 Th 에피토프 사이에 연결된 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 59, B1A1T1-T2A2B2
실시예 49 내지 50 중 어느 하나에 있어서, 상기 펩타이드 단위체는 제1 보조부 및 제2 보조부를 추가로 포함하고, 상기 제1 보조부는 상기 제1 B-cell에피토프 및 상기 제1 Th 에피토프 사이에 연결되고, 상기 제2 보조부는 상기 제2 Th 에피토프 및 상기 제2 B-cell 에피토프 사이에 연결된 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 60, B1-T1A1T2A2B2 및 B2-T2A2T1A1B1
실시예 49 내지 50 중 어느 하나에 있어서, 상기 펩타이드 단위체는 제1 보조부 및 제2 보조부를 추가로 포함하고, 상기 제1 보조부는 상기 제1 Th 에피토프 및 상기 제2 Th 에피토프 사이에 연결되고, 상기 제2 보조부는 상기 제2 Th 에피토프 및 상기 제2 B-cell 에피토프 사이에 연결된 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 61, A 한정, 비표준 아미노산 포함
실시예 58 내지 60 중 어느 하나에 있어서, 상기 제1 보조부 및/또는 제2 보조부는 하나 이상의 비표준 아미노산을 포함하는 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 62, 비표준 아미노산을 포함하는 A 서열 한정
실시예 58 내지 60 중 어느 하나에 있어서, 하나 이상의 비표준 아미노산을 포함하는 보조부는 a, Z, aZ, Za, GSHHHHHHGSDDDKZa (서열번호 193), 및 aZGSHHHHHHGSDDDK (서열번호 194)에서 각각 독립적으로 선택되는 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 63, 비표준 아미노산을 포함하지 않는 A 서열 한정
실시예 58 내지 60 중 어느 하나에 있어서, 상기 제1 보조부 및/또는 제2 보조부는 CR,, HHHHHH (서열번호 53), 및 RRRRRR (서열번호 159)에서 각각 독립적으로 선택되는 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 64, B1A1T1A2T2A3B2
실시예 49 내지 50 중 어느 하나에 있어서, 상기 펩타이드 단위체는 제1 보조부, 제2 보조부, 및 제3 보조부를 추가로 포함하고, 상기 제1 보조부는 상기 제1 B-cell 에피토프 및 상기 제1 Th 에피토프 사이에 연결되었고, 상기 제2 보조부는 상기 제1 Th 에피토프 및 상기 제2 Th 에피토프 사이에 연결되었으며, 상기 제3 보조부는 상기 제2 Th 에피토프 및 상기 제2 B-cell 에피토프 사이에 연결된 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 65, A 한정, 비표준 아미노산 포함
실시예 64에 있어서, 상기 제1 보조부, 제2 보조부, 및/또는 제3 보조부는 하나 이상의 비표준 아미노산을 포함하는 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 66, 비표준 아미노산을 포함하는 A 서열 한정
실시예 65에 있어서, 하나 이상의 비표준 아미노산을 포함하는 보조부는 a, Z, aZ, Za, GSHHHHHHGSDDDKZa (서열번호 193), 및 aZGSHHHHHHGSDDDK (서열번호 194)에서 각각 독립적으로 선택되는 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 67, 비표준 아미노산을 포함하지 않는 A 서열 한정
실시예 64에 있어서, 상기 제1 보조부, 제2 보조부 및/또는 제3 보조부는 CR,, HHHHHH (서열번호 53), 및 RRRRRR (서열번호 159)에서 각각 독립적으로 선택되는 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
펩타이드 단위체 7 - 단위체 및 추가 보조부
실시예 68, AU 및 UA
다음을 포함하는 펩타이드 단위체: 실시예 1 내지 실시예 67 중 어느 하나의 펩타이드 단위체; 및 추가 보조부.
실시예 69, A 한정, 비표준 아미노산 포함
실시예 67에 있어서, 상기 추가 보조부는 하나 이상의 비표준 아미노산을 포함하는 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 70, 비표준 아미노산을 포함하는 A 서열 한정
실시예 69에 있어서, 상기 추가 보조부는 a, Z, aZ, Za, GSHHHHHHGSDDDKZa (서열번호 193), 및 aZGSHHHHHHGSDDDK (서열번호 194)에서 선택되는 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 71, 비표준 아미노산을 포함하지 않는 A 서열 한정
실시예 68에 있어서, 상기 추가 보조부는 CR, HHHHHH (서열번호 53), 및 RRRRRR (서열번호 159)에서 선택되는 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 72, AUA
다음을 포함하는 펩타이드 단위체: 실시예 1 내지 실시예 67 중 어느 하나의 펩타이드 단위체; 제1 추가 보조부; 및 제2 추가 보조부, 이때, 상기 펩타이드 단위체는 상기 제1 추가 보조부 및 상기 제2 추가 보조부 사이에 연결된 것을 특징으로 함.
실시예 73, A 한정, 비표준 아미노산 포함
실시예 72에 있어서, 상기 제1 추가 보조부 및/또는 제2 추가 보조부는 하나 이상의 비표준 아미노산을 포함하는 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 74, 비표준 아미노산을 포함하는 A 서열 한정
실시예 73에 있어서, 하나 이상의 비표준 아미노산을 포함하는 추가 보조부는 a, Z, aZ, Za, GSHHHHHHGSDDDKZa (서열번호 193), 및 aZGSHHHHHHGSDDDK (서열번호 194)에서 각각 독립적으로 선택되는 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
실시예 75, 비표준 아미노산을 포함하지 않는 A 서열 한정
실시예 72에 있어서, 상기 제1 추가 보조부 및/또는 제2 추가 보조부는 CR,, HHHHHH (서열번호 53), 및 RRRRRR (서열번호 159)에서 각각 독립적으로 선택되는 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
펩타이드 단위체 8 - 단위체 서열 한정
실시예 76, 단위체-A 서열 한정
실시예 1 내지 8 및 68 내지 75 중 어느 하나에 있어서, 다음으로 이뤄진 군에서 선택되는 펩타이드 단위체: RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ(서열번호 56); ZaK(Cha)VAAWTLKAAaZRNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 57); CRFRGLISLSQVYLSZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ(서열번호 58); ZaK(Cha)VAAWTLKAAaZCRFRGLISLSQVYLS(서열번호 59); KTTKQSFDLSVKAQYKKNKHZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ(서열번호 60); ZaK(Cha)VAAWTLKAAaZKTTKQSFDLSVKAQYKKNKH(서열번호 61); RNVPPIFNDVYWIAFK(Cha)VAAWTLKAA(서열번호 62); K(Cha)VAAWTLKAARNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 63); RNVPPIFNDVYK(Cha)VAAWTLKAA(서열번호 64); PIFNDVYWIAFK(Cha)VAAWTLKAA(서열번호 65); PPIFNDVYWK(Cha)VAAWTLKAA(서열번호 66); RNVPPIFNDVYWIAFK(Cha)VAAWTLKAAHHHHHH(서열번호 67); RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZGSHHHHHHGSDDDDK(서열번호 68); GSHHHHHHGSDDDDKZaK(Cha)VAAWTLKAAaZRNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 69); RNVPPIFNDVYWIAFGSHHHHHHGSDDDDKZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ(서열번호 70); GSHHHHHHGSDDDDKZaK(Cha)VAAWTLKAAaZCRFRGLISLSQVYLS(서열번호 71); GSHHHHHHGSDDDDKCRFRGLISLSQVYLSZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ(서열번호 72); CRFRGLISLSQVYLSZaK(Cha)VAAWTLKAAaZGSHHHHHHGSDDDDK(서열번호 73); GSHHHHHHGSDDDDKZaK(Cha)VAAWTLKAAaZKTTKQSFDLSVKAQYKKNKH(서열번호 74); GSHHHHHHGSDDDDKKTTKQSFDLSVKAQYKKNKHZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ(서열번호 75); KTTKQSFDLSVKAQYKKNKHZaK(Cha)VAAWTLKAAaZGSHHHHHHGSDDDDK(서열번호 76); MRGSHHHHHHGSDDDDKIVDRNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ(서열번호 77); MRGSHHHHHHGSDDDDKIVDGSHHHHHHGSDDDDKRNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ(서열번호 78); MRGSHHHHHHGSDDDDKIVDRNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZGSHHHHHHGSDDDDK(서열번호 79); RNVPPIFNDVYWIAFILMQYIKANSKFIGI(서열번호 80); RNVPPIFNDVYWIAFILMQYIKANSKFIGIPMGLPQSIALSSLMVAQ(서열번호 81); CRNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZC(서열번호 82); RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAACR(서열번호 161); RNVPPIFNDVYWIAFXXKXVAAWTLKAAXXGSHHHHHHGSDDDDK(서열번호 199); GSHHHHHHGSDDDDKXXKXVAAWTLKAAXXRNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 200); RNVPPIFNDVYWIAFXXKXVAAWTLKAAXX(서열번호 204); RNVPPIFNDVYWIAFKXVAAWTLKAA(서열번호 205); RNVPPIFNDVYWIAFKXVAAWTLKAAHHHHHH(서열번호 206); RNVPPIFNDVYWIAFXXKXVAAWTLKAACR(서열번호 208); RNVPPIFNDVYWIAFXXKFVAAWTLKAAXX(서열번호 210); RNVPPIFNDVYWIAFXXKFVAAWTLKAACR(서열번호 212); RNVPPIFNDVYWIAFCTKPTDGN(서열번호 213); RNVPPIFNDVYWIAFLLPIFFCLW(서열번호 214); RNVPPIFNDVYWIAFFLPSDFFPSV(서열번호 215); RNVPPIFNDVYWIAFILMQYIKANSKFIGIHHHHHH(서열번호 219); 및 RNVPPIFNDVYWIAFMDIDPYKEFGATVELLSFLPHHHHHH(서열번호 220), 이때, a는 D-form alanine, Z는 6-aminohexanoic acid, (Cha)는 L-cyclohexylalanine, X는 임의의 표준 아미노산을 나타낸다.
실시예 77, 단위체-D 서열 한정
실시예 1 내지 6, 14 내지 15 및 68 내지 75 중 어느 하나에 있어서, 상기 펩타이드 단위체는 다음으로 이뤄진 군에서 선택되는 펩타이드 단위체: RNVPPIFNDVYWIAF ZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ ILMQYIKANSKFIGI(서열번호 123); CRFRGLISLSQVYLS ZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ ILMQYIKANSKFIGI(서열번호 124); KTTKQSFDLSVKAQYKKNKH ZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ ILMQYIKANSKFIGI(서열번호 125); ILMQYIKANSKFIGI ZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ RNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 126); ILMQYIKANSKFIGI ZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ CRFRGLISLSQVYLS(서열번호 127); ILMQYIKANSKFIGI ZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ KTTKQSFDLSVKAQYKKNKH(서열번호 128); PIFNDVYWIAF K(Cha)VAAWTLKAA K(Cha)VAAWTLKAA(서열번호 129); PPIFNDVYW K(Cha)VAAWTLKAA K(Cha)VAAWTLKAA(서열번호 130); MRGSHHHHHHGSDDDDKIVDRNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZILMQYIKANSKFIGI(서열번호 131); MRGSHHHHHHGSDDDDKIVDILMQYIKANSKFIGIZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ(서열번호 132); MRGSHHHHHHGSDDDDKIVDRNVPPIFNDVYWIAFGGGGSGGGGGGSSZaK(Cha)VAAWTLKAAaZILMQYIKANSKFIGI(서열번호 133); MRGSHHHHHHGSDDDDKIVDRNVPPIFNDVYWIAFGGGGSGGGGGGSSILMQYIKANSKFIGIPMGLPQSIALSSLMVAQGGGGSGGGGGGSSILMQYIKANSKFIGIPMGLPQSIALSSLMVAQ(서열번호 134); RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZK(Cha)LAAFTIRAAaZ(서열번호 135); 및 CRNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZILMQYIKANSKFIGIC(서열번호 136), 이때, a는 D-form alanine, Z는 6-aminohexanoic acid, (Cha)는 L-cyclohexylalanine를 나타낸다.
실시예 78, 단위체-B 서열 한정
실시예 1 내지 6, 26 내지 27 및 68 내지 75 중 어느 하나에 있어서, 상기 펩타이드 단위체는 다음으로 이뤄진 군에서 선택되는 펩타이드 단위체: RNVPPIFNDVYWIAFRNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ (서열번호 83), RNVPPIFNDVYWIAFCRFRGLISLSQVYLSZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ (P5: 서열번호 84), RNVPPIFNDVYWIAFKTTKQSFDLSVKAQYKKNKHZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ (서열번호 85), CRFRGLISLSQVYLSRNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ (서열번호 86), CRFRGLISLSQVYLSCRFRGLISLSQVYLSZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ (서열번호 87), CRFRGLISLSQVYLSKTTKQSFDLSVKAQYKKNKHZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ (서열번호 88), KTTKQSFDLSVKAQYKKNKHRNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ (서열번호 89), KTTKQSFDLSVKAQYKKNKHCRFRGLISLSQVYLSZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ (서열번호 90), KTTKQSFDLSVKAQYKKNKHKTTKQSFDLSVKAQYKKNKHZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ (서열번호 91), RNVPPIFNDVYWIAFCRFRGLISLSQVYLSK(Cha)VAAWTLKAA (서열번호 92), PIFNDVYWIAFGLISLSQVYLSK(Cha)VAAWTLKAA (서열번호 93), RNVPPIFNDVYCRFRGLISLSQK(Cha)VAAWTLKAA (서열번호 94), PIFNDVYWIAFCRFRGLISLSQK(Cha)VAAWTLKAA (서열번호 95), PPIFNDVYWRGLISLSQVK(Cha)VAAWTLKAA (서열번호 96), RNVPPIFNDVYWIAFCRFRGLISLSQVYLSK(Cha)VAAWTLKAAHHHHHH (서열번호 97), MRGSHHHHHHGSDDDDKIVDRNVPPIFNDVYWIAFCRFRGLISLSQVYLSZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ (서열번호 98), MRGSHHHHHHGSDDDDKIVDRNVPPIFNDVYWIAFCRFRGLISLSQVYLSZaK(Cha)VAAWTLKAA (서열번호 99), RNVPPIFNDVYWIAFCRFRGLISLSQVYLSZaK(Cha)VAAWTLKAA (서열번호 100), MRGSHHHHHHGSDDDDKIVD RNVPPIFNDVYWIAF GGGGSGGGGGGSS RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAA (서열번호 101), RNVPPIFNDVYWIAF GGGGSGGGGGGSS RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAA (서열번호 102), RNVPPIFNDVYWIAF GGGGSGGGGGGSS RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ (서열번호 103), RNVPPIFNDVYWIAFRNVPPIFNDVYWIAF ILMQYIKANSKFIGI (서열번호 104), RNVPPIFNDVYWIAFRNVPPIFNDVYWIAF ILMQYIKANSKFIGIPMGLPQSIALSSLMVAQ (서열번호 105), CRNVPPIFNDVYWIAFCRFRGLISLSQVYLSZaK(Cha)VAAWTLKAAaZC (서열번호 106), 및 RNVPPIFNDVYWIAFCRFRGLISLSQVYLSXXK(Cha)VAAWTLKAAXX(서열번호 202), 이때, a는 D-form alanine, (Cha)는 L-cyclohexylalanins, Z는 6-aminohexanoic acid, X는 임의의 표준 아미노산을 의미함.
실시예 79, 단위체-C 서열 한정
실시예 1 내지 6, 38 내지 39 및 68 내지 75 중 어느 하나에 있어서, 상기 펩타이드 단위체는 다음으로 이뤄진 군에서 선택되는 펩타이드 단위체: RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZRNVPPIFNDVYWIAF (서열번호 107); RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZCRFRGLISLSQVYLS (P1: 서열번호 108); RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZKTTKQSFDLSVKAQYKKNKH (서열번호 109); CRFRGLISLSQVYLSZaK(Cha)VAAWTLKAAaZRNVPPIFNDVYWIAF (서열번호 110); CRFRGLISLSQVYLSZaK(Cha)VAAWTLKAAaZCRFRGLISLSQVYLS (서열번호 111); RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZKTTKQSFDLSVKAQYKKNKH (서열번호 112); KTTKQSFDLSVKAQYKKNKHZaK(Cha)VAAWTLKAAaZRNVPPIFNDVYWIAF (서열번호 113); KTTKQSFDLSVKAQYKKNKHZaK(Cha)VAAWTLKAAaZCRFRGLISLSQVYLS (P4: 서열번호 114); KTTKQSFDLSVKAQYKKNKHZaK(Cha)VAAWTLKAAaZKTTKQSFDLSVKAQYKKNKH (서열번호 115); PIFNDVYWIAFK(Cha)VAAWTLKAACRFRGLISLSQ (서열번호 116); PPIFNDVYWK(Cha)VAAWTLKAARGLISLSQV (서열번호 117); MRGSHHHHHHGSDDDDKIVD RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZRNVPPIFNDVYWIAF (서열번호 118); MRGSHHHHHHGSDDDDKIVDRNVPPIFNDVYWIAF GGGGSGGGGGGSS ILMQYIKANSKFIGIPMGLPQSIALSSLMVAQ GGGGSGGGGGGSSCRFRGLISLSQVYLS (서열번호 119); RNVPPIFNDVYWIAFILMQYIKANSKFIGICRFRGLISLSQVYLS (서열번호 120); RNVPPIFNDVYWIAFZPKYVKQNTLKLATZCRFRGLISLSQVYLS (P5: 서열번호 121); CRNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZRNVPPIFNDVYWIAFC (서열번호 122); RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAACRFRGLISLSQVYLS(서열번호 160); RNVPPIFNDVYWIAFXXKXVAAWTLKAAXXCRFRGLISLSQVYLS(서열번호 198); KTTKQSFDLSVKAQYKKNKHXXKXVAAWTLKAAXXCRFRGLISLSQVYLS(서열번호 201); RNVPPIFNDVYWIAFXPKYVKQNTLKLATXCRFRGLISLSQVYLS(서열번호 203); RNVPPIFNDVYWIAFXXKXVAAWTLKAACRFRGLISLSQVYLS(서열번호 207); RNVPPIFNDVYWIAFXXKFVAAWTLKAAXXCRFRGLISLSQVYLS(서열번호 209); RNVPPIFNDVYWIAFXXKFVAAWTLKAACRFRGLISLSQVYLS(서열번호 211); KTTKQSFDLSVKAQYKKNKHZaWPEANQVGAGAFGPGFaZCRFRGLISLSQVYLS(서열번호 216); KTTKQSFDLSVKAQYKKNKHZaMDIDPYKEFGATVELLSFLPaZCRFRGLISLSQVYLS(서열번호 217); 및 KTTKQSFDLSVKAQYKKNKHZaILMQYIKANSKFIGIPMGLPQSIALSSLMVAQaZCRFRGLISLSQVYLS(서열번호 218), 이때, a는 D-form alanine, (Cha)는 L-cyclohexylalanins, Z는 6-aminohexanoic acid, X는 임의의 표준 아미노산을 의미함.
실시예 80, 단위체-E 서열 한정
실시예 1 내지 6, 49 내지 50 및 68 내지 75 중 어느 하나에 있어서, 다음으로 이뤄진 군에서 선택되는 펩타이드 단위체: RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZILMQYIKANSKFIGIRNVPPIFNDVYWIAF (서열번호 137), RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZILMQYIKANSKFIGICRFRGLISLSQVYLS (서열번호 138), RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZILMQYIKANSKFIGIKTTKQSFDLSVKAQYKKNKH (서열번호 139), CRFRGLISLSQVYLSZaK(Cha)VAAWTLKAAaZILMQYIKANSKFIGIRNVPPIFNDVYWIAF (서열번호 140), CRFRGLISLSQVYLSZaK(Cha)VAAWTLKAAaZILMQYIKANSKFIGICRFRGLISLSQVYLS (서열번호 141), CRFRGLISLSQVYLSZaK(Cha)VAAWTLKAAaZILMQYIKANSKFIGIKTTKQSFDLSVKAQYKKNKH (서열번호 142), KTTKQSFDLSVKAQYKKNKHZaK(Cha)VAAWTLKAAaZILMQYIKANSKFIGIRNVPPIFNDVYWIAF (서열번호 143), KTTKQSFDLSVKAQYKKNKHZaK(Cha)VAAWTLKAAaZILMQYIKANSKFIGICRFRGLISLSQVYLS (서열번호 144), KTTKQSFDLSVKAQYKKNKHZaK(Cha)VAAWTLKAAaZILMQYIKANSKFIGIKTTKQSFDLSVKAQYKKNKH (서열번호 145), MRGSHHHHHHGSDDDDKIVDRNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZILMQYIKANSKFIGIRNVPPIFNDVYWIAF (서열번호 146), MRGSHHHHHHGSDDDDKIVDRNVPPIFNDVYWIAFGGGGSGGGGGGSSILMQYIKANSKFIGIPMGLPQSIALSSLMVAQILMQYIKANSKFIGIPMGLPQSIALSSLMVAQGGGGSGGGGGGSSCRFRGLISLSQVYLS (서열번호 147), PIFNDVYWIAFK(Cha)VAAWTLKAAK(Cha)VAAWTLKAACRFRGLISLSQ (서열번호 148), PPIFNDVYWK(Cha)VAAWTLKAAK(Cha)VAAWTLKAARGLISLSQV (서열번호 149), 및 CRNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZILMQYIKANSKFIGIRNVPPIFNDVYWIAFC (서열번호 150), 이때, a는 D-form alanine, (Cha)는 L-cyclohexylalanins, Z는 6-aminohexanoic acid를 의미함.
펩타이드 단위체 9 - 구조식
실시예 81, 단위체-A 구조식 상위개념
실시예 1 내지 2 중 어느 하나에 있어서, 다음 [구조식 A] 또는 [구조식 A']으로 표현되는 펩타이드 단위체:
[구조식 A] A1-B-A2-T-A3
[구조식 A'] A1-T-A2-B-A3
이때, 상기 펩타이드 단위체는 CD4+ T-cell에 의해 인식되어 체액성 면역반응을 유도할 수 있는 것으로, 23mer, 24mer, 25mer, 26mer, 27mer, 28mer, 29mer, 30mer, 31mer, 32mer, 33mer, 34mer, 35mer, 36mer, 37mer, 38mer, 39mer, 40mer, 41mer, 42mer, 43mer, 44mer, 45mer, 46mer, 47mer, 48mer, 49mer, 50mer, 51mer, 52mer, 53mer, 54mer, 55mer, 56mer, 57mer, 58mer, 59mer, 60mer, 61mer, 62mer, 63mer, 64mer, 65mer, 66mer, 67mer, 68mer, 69mer, 70mer, 또는 71mer의 길이를 가지고,
상기 A1은 제1 보조부이거나 부존재하며, 상기 제1 보조부는 링커 기능, 보호 기능, 시클릭 폼 형성 기능, 더미 기능, 및/또는 용해도를 높이는 기능을 가지며, 선택적으로 비표준 아미노산을 포함할 수 있고,
상기 A2은 제2 보조부이거나 부존재하며, 상기 제2 보조부는 링커 기능, 보호 기능, 시클릭 폼 형성 기능, 더미 기능, 및/또는 용해도를 높이는 기능을 가지며, 선택적으로 비표준 아미노산을 포함할 수 있고,
상기 A3은 제3 보조부이거나 부존재하며, 상기 제3 보조부는 링커 기능, 보호 기능, 시클릭 폼 형성 기능, 더미 기능, 및/또는 용해도를 높이는 기능을 가지며, 선택적으로 비표준 아미노산을 포함할 수 있고,
상기 B는 B-cell 에피토프로, 아포지단백 B-100의 절편(fragment) 또는 아포지단백 B-100의 미모토프(mimotope)이고, 아포지단백 B-100을 표적하는 항체를 유도할 수 있으며,
상기 T는 Th 에피토프로, CD4+ T-cell에 의해 인식될 수 있는 것을 특징으로 하고, 8mer, 9mer, 10mer, 11mer, 12mer, 13mer, 14mer, 15mer, 16mer, 17mer, 18mer, 19mer, 20mer, 21mer, 22mer, 23mer, 24mer, 25mer, 26mer, 27mer, 28mer, 29mer, 30mer, 31mer, 또는 32mer의 길이를 가짐.
실시예 82, 단위체-A 서열 조합
실시예 81에 있어서,
상기 A1, A2, 및 A3는 각각 독립적으로, a, Z, aZ, Za, RN, AF, CR, LS, KT, KH, RF, DP, SV, GL, ZRNV(서열번호 36), aZRN(서열번호 37), IAFZ(서열번호 38), AFZa(서열번호 39), RNVP(서열번호 40), WIAF(서열번호 41), ZCRF(서열번호 42), aZCR(서열번호 43), YLSZ(서열번호 44), LSZa(서열번호 45), CRFR(서열번호 46), VYLS(서열번호 47), ZKTT(서열번호 48), aZKT(서열번호 49), NKHZ(서열번호 50), KHZa(서열번호 51), GSHHHHHHGSDDDDK(서열번호 52), HHHHHH(서열번호 53), MRGSHHHHHHGSDDDDKIVD(서열번호 54), GGGGSGGGGGGSS(서열번호 55), RRRRRR(서열번호 159), GSHHHHHHGSDDDDKZa(서열번호 193), 및 aZGSHHHHHHGSDDDDK(서열번호 194)로 이뤄진 군에서 선택되거나, 부존재하고, 이때, a는 D-form alanine, Z는 6-aminohexanoic acid를 의미하고,
상기 B는,
RNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 6), CRFRGLISLSQVYLS(서열번호 7), KTTKQSFDLSVKAQYKKNKH(서열번호 8), RNVPPIFNDVY(서열번호 9), CRFRGLISLSQ(서열번호 10), KTTKQSFDLSVK(서열번호 11), RNVPPIFNDVYW(서열번호 12), CRFRGLISLSQV(서열번호 13), KTTKQSFDLSVKAQYKK(서열번호 14), RNVPPIFNDVYWI(서열번호 15), CRFRGLISLSQVY(서열번호 16), KTTKQSFDLSVKAQYKKN(서열번호 17), PIFNDVYWIAF(서열번호 18), GLISLSQVYLS(서열번호 19), QSFDLSVKAQYKKNKH(서열번호 20), PPIFNDVYWIAF(서열번호 21), RGLISLSQVYLS(서열번호 22), KQSFDLSVKAQYKKNKH(서열번호 23), VPPIFNDVYWIAF(서열번호 24), FRGLISLSQVYLS(서열번호 25), TKQSFDLSVKAQYKKNKH(서열번호 26), NVPPIFNDVYWIA(서열번호 27), RFRGLISLSQVYL(서열번호 28), TKQSFDLSVKAQYKKN(서열번호 29), VPPIFNDVYWI(서열번호 30), FRGLISLSQVY(서열번호 31), TKQSFDLSVKAQYKKN(서열번호 32), PPIFNDVYW(서열번호 33), RGLISLSQV(서열번호 34), KQSFDLSVKAQYKK(서열번호 35), RFRGLISLSQVYLDP(서열번호 221), 및 SVCGCPVGHHDVVGL(서열번호 222)로 이뤄진 군에서 선택된 것,
상기 서열번호 6 내지 서열번호 35, 서열번호 221 내지 서열번호 222 중 어느 하나에 포함된 에피토프, 또는
상기 서열번호 6 내지 서열번호 35, 서열번호 221 내지 서열번호 222 중 어느 하나와 80% 이상, 81% 이상, 82% 이상, 83% 이상, 84% 이상, 85% 이상, 86% 이상, 87% 이상, 88% 이상, 89% 이상, 90% 이상, 91% 이상, 92% 이상, 93% 이상, 94% 이상, 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상, 99% 이상, 또는 100% 이상 일치하는 서열을 가지고,
이때, a는 D-form alanine, Z는 6-aminohexanoic acid를 의미하며,
상기 T는 다음에서 선택됨:
K(Cha)VAAWTLKAA(서열번호 1), PKYVKQNTLKLAT(서열번호 2), ILMQYIKANSKFIGI(서열번호 3), QSIALSSLMVAQAIP(서열번호 4), ILMQYIKANSKFIGIPMGLPQSIALSSLMVAQ(서열번호 5), PLGFFPDHQL(서열번호 162), WPEANQVGAGAFGPGF(서열번호 163), MQWNSTALHQALQDP(서열번호 164), MQWNSTTFHQTLQDPRVRGLYFPAGG(서열번호 165), FFLLTRILTI(서열번호 166), FFLLTRILTIPQSLD(서열번호 167), TSLNFLGGTTVCLGQ(서열번호 168), QSPTSNHSPTSCPPIC(서열번호 169), IIFLFILLLCLIFLLVLLD(서열번호 170), CTTPAQGNSMFPSC(서열번호 171), CTKPTDGN(서열번호 172), WASVRFSW(서열번호 173), LLPIFFCLW(서열번호 174), MDIDPYKEFGATVELLSFLP(서열번호 175), FLPSDFFPSV(서열번호 176), RDLLDTASALYREALESPEH(서열번호 177), PHHTALRQAILCWGELMTLA(서열번호 178), GRETVIEYLVSFGVW(서열번호 179), EYLVSFGVWIRTPPA(서열번호 180), VSFGVWIRTPPAYRPPNAPI(서열번호 181), TVVRRRGRSP(서열번호 182), VGPLTVNEKRRLKLI(서열번호 183), RHYLHTLWKAGILYK(서열번호 184), ESRLVVDFSQFSRGN(서열번호 185), LQSLTNLLSSNLSWL(서열번호 186), SSNLSWLSLDVSAAF(서열번호 187), LHLYSHPIILGFRKI(서열번호 188), KQCFRKLPVNRPIDW(서열번호 189), LCQVFADATPTGWGL(서열번호 190), AANWILRGTSFVYVP(서열번호 191), EIRLKVFVLGGCRHK(서열번호 192), KFVAAWTLKAA(서열번호 195), KYVAAWTLKAA(서열번호 196), DIEKKIAKMEKASSVFNVVNS(서열번호 223), YSGPLKAEIAQRLEDV(서열번호 224), K(Cha)VKANTLKAA(서열번호 225), K(Cha)VKANTLKAA(서열번호 226), K(Cha)VKAWTLKAA(서열번호 227), K(Cha)VKAWTLKAA(서열번호 228), K(Cha)VWANTLKAA(서열번호 229), K(Cha)VWANTLKAA(서열번호 230), K(Cha)VWAYTLKAA(서열번호 231), K(Cha)VWAVTLKAA(서열번호 232), K(Cha)VYAWTLKAA(서열번호 233), K(Cha)VYAWTLKAA(서열번호 234), R(Cha)VRANTLKAA(서열번호 235), K(Cha)VKAHTLKAA(서열번호 236), K(Cha)VKAHTLKAA(서열번호 237), K(Cha)VAANTLKAA(서열번호 238), K(Cha)VAANTLKAA(서열번호 239), K(Cha)VAAYTLKAA(서열번호 240), K(Cha)VAAYTLKAA(서열번호 241), K(Cha)VAAWTLKAA(서열번호 242), K(Cha)VAAKTLKAA(서열번호 243), K(Cha)VAAHTLKAA(서열번호 244), K(Cha)VAAATLKAA(서열번호 245), K(Cha)VAAWTLKAA(서열번호 246), 및 K(Cha)VMAATLKAA(서열번호 247)로 이뤄진 군에서 선택된 것;
다음 [구조식 I] 또는 [구조식 II]로 표현되는 서열,
[구조식 I] N-Lys-X1-X2-Ala-Ala-X3-Thr-X4-X5-Ala-Ala-C
이때, 상기 X1은 티로신(Tyr), 페닐알라닌(Phe), 또는 L-cyclohexylalanine이고,
상기 X2는 소수성 아미노산이거나, 류신(Leu), 또는 이소류신(Ile)이고,
상기 X3는 방향족, 또는 고리형 아미노산이거나, 페닐알라닌(Phe), 티로신(Tyr), 또는 히스티딘(His)이고,
상기 X4는 지방족 장쇄 아미노산(aliphatic long chain amino acids)이거나, 이소류신(Ile), 또는 발린(Val)이고,
상기 X5는 하전된 아미노산이거나, 아르기닌(Arg), 류신(Leu), 아스파르트산(Asp), 글루타민(Gln), 또는 글리신(Gly)임,
[구조식 II] N-Lys-X1-Val-X2-Ala-X3-Thr-Leu-Lys-Ala-Ala-C
이때, 상기 X1은 티로신(Tyr), 페닐알라닌(Phe), 또는 L-cyclohexylalanine이고,
상기 X2는 리신(Lys), 트립토판(Trp), 티로신(Tyr), 아르기닌(Arg), 알라닌(Ala), 또는 메티오닌(Met)이고,
상기 X3는 아스파라긴(Asn), 트립토판(Trp), 티로신(Tyr), 발린(Val), 히스티딘(His), 리신(Lys), 또는 알라닌(Ala)임; 및
상기 서열번호 1 내지 서열번호 5, 서열번호 162 내지 서열번호 192, 서열번호 195 내지 서열번호 196, 서열번호 223 내지 서열번호 247, [구조식 I] 또는 [구조식 II]로 표현되는 서열 중 어느 하나와 80% 이상, 81% 이상, 82% 이상, 83% 이상, 84% 이상, 85% 이상, 86% 이상, 87% 이상, 88% 이상, 89% 이상, 90% 이상, 91% 이상, 92% 이상, 93% 이상, 94% 이상, 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상, 99% 이상, 또는 100% 이상 일치하는 서열,
이때, (Cha)는 L-cyclohexylalanins, X는 임의의 표준 아미노산을 의미함.
실시예 83, 단위체-B 구조식 상위개념
실시예 1 내지 2 중 어느 하나에 있어서, 다음 [구조식 B] 또는 [구조식 B']으로 표현되는 펩타이드 단위체:
[구조식 B] A1-B1-A2-B2-A3-T-A4
[구조식 B'] A1-T-A2-B1-A3-B2-A4
이때, 상기 펩타이드 단위체는 CD4+ T-cell에 의해 인식되어 체액성 면역반응을 유도할 수 있는 것으로, 23mer, 24mer, 25mer, 26mer, 27mer, 28mer, 29mer, 30mer, 31mer, 32mer, 33mer, 34mer, 35mer, 36mer, 37mer, 38mer, 39mer, 40mer, 41mer, 42mer, 43mer, 44mer, 45mer, 46mer, 47mer, 48mer, 49mer, 50mer, 51mer, 52mer, 53mer, 54mer, 55mer, 56mer, 57mer, 58mer, 59mer, 60mer, 61mer, 62mer, 63mer, 64mer, 65mer, 66mer, 67mer, 68mer, 69mer, 70mer, 또는 71mer의 길이를 가지고,
상기 A1은 제1 보조부이거나 부존재하며, 상기 제1 보조부는 링커 기능, 보호 기능, 시클릭 폼 형성 기능, 더미 기능, 및/또는 용해도를 높이는 기능을 가지며, 선택적으로 비표준 아미노산을 포함할 수 있고,
상기 A2은 제2 보조부이거나 부존재하며, 상기 제2 보조부는 링커 기능, 보호 기능, 시클릭 폼 형성 기능, 더미 기능, 및/또는 용해도를 높이는 기능을 가지며, 선택적으로 비표준 아미노산을 포함할 수 있고,
상기 A3은 제3 보조부이거나 부존재하며, 상기 제3 보조부는 링커 기능, 보호 기능, 시클릭 폼 형성 기능, 더미 기능, 및/또는 용해도를 높이는 기능을 가지며, 선택적으로 비표준 아미노산을 포함할 수 있고,
상기 A4은 제4 보조부이거나 부존재하며, 상기 제4 보조부는 링커 기능, 보호 기능, 시클릭 폼 형성 기능, 더미 기능, 및/또는 용해도를 높이는 기능을 가지며, 선택적으로 비표준 아미노산을 포함할 수 있고,
상기 B1는 B-cell 에피토프로, 아포지단백 B-100의 절편(fragment) 또는 아포지단백 B-100의 미모토프(mimotope)이고, 아포지단백 B-100을 표적하는 항체를 유도할 수 있으며,
상기 B2는 B-cell 에피토프로, 아포지단백 B-100의 절편(fragment) 또는 아포지단백 B-100의 미모토프(mimotope)이고, 아포지단백 B-100을 표적하는 항체를 유도할 수 있으며,
상기 T는 Th 에피토프로, CD4+ T-cell에 의해 인식될 수 있는 것을 특징으로 하고, 8mer, 9mer, 10mer, 11mer, 12mer, 13mer, 14mer, 15mer, 16mer, 17mer, 18mer, 19mer, 20mer, 21mer, 22mer, 23mer, 24mer, 25mer, 26mer, 27mer, 28mer, 29mer, 30mer, 31mer, 또는 32mer의 길이를 가짐.
실시예 84, 단위체-B 서열 조합
실시예 83에 있어서,
상기 A1, A2, A3, 및 A4는 각각 독립적으로, a, Z, aZ, Za, RN, AF, CR, LS, KT, KH, RF, DP, SV, GL, ZRNV(서열번호 36), aZRN(서열번호 37), IAFZ(서열번호 38), AFZa(서열번호 39), RNVP(서열번호 40), WIAF(서열번호 41), ZCRF(서열번호 42), aZCR(서열번호 43), YLSZ(서열번호 44), LSZa(서열번호 45), CRFR(서열번호 46), VYLS(서열번호 47), ZKTT(서열번호 48), aZKT(서열번호 49), NKHZ(서열번호 50), KHZa(서열번호 51), GSHHHHHHGSDDDDK(서열번호 52), HHHHHH(서열번호 53), MRGSHHHHHHGSDDDDKIVD(서열번호 54), GGGGSGGGGGGSS(서열번호 55), RRRRRR(서열번호 159), GSHHHHHHGSDDDDKZa(서열번호 193), 및 aZGSHHHHHHGSDDDDK(서열번호 194)로 이뤄진 군에서 선택되거나, 부존재하고, 이때, a는 D-form alanine, Z는 6-aminohexanoic acid를 의미하고,
상기 B1 및 B2는 각각 독립적으로,
RNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 6), CRFRGLISLSQVYLS(서열번호 7), KTTKQSFDLSVKAQYKKNKH(서열번호 8), RNVPPIFNDVY(서열번호 9), CRFRGLISLSQ(서열번호 10), KTTKQSFDLSVK(서열번호 11), RNVPPIFNDVYW(서열번호 12), CRFRGLISLSQV(서열번호 13), KTTKQSFDLSVKAQYKK(서열번호 14), RNVPPIFNDVYWI(서열번호 15), CRFRGLISLSQVY(서열번호 16), KTTKQSFDLSVKAQYKKN(서열번호 17), PIFNDVYWIAF(서열번호 18), GLISLSQVYLS(서열번호 19), QSFDLSVKAQYKKNKH(서열번호 20), PPIFNDVYWIAF(서열번호 21), RGLISLSQVYLS(서열번호 22), KQSFDLSVKAQYKKNKH(서열번호 23), VPPIFNDVYWIAF(서열번호 24), FRGLISLSQVYLS(서열번호 25), TKQSFDLSVKAQYKKNKH(서열번호 26), NVPPIFNDVYWIA(서열번호 27), RFRGLISLSQVYL(서열번호 28), TKQSFDLSVKAQYKKN(서열번호 29), VPPIFNDVYWI(서열번호 30), FRGLISLSQVY(서열번호 31), TKQSFDLSVKAQYKKN(서열번호 32), PPIFNDVYW(서열번호 33), RGLISLSQV(서열번호 34), KQSFDLSVKAQYKK(서열번호 35), RFRGLISLSQVYLDP(서열번호 221), 및 SVCGCPVGHHDVVGL(서열번호 222)로 이뤄진 군에서 선택된 것,
상기 서열번호 6 내지 서열번호 35, 서열번호 221 내지 서열번호 222 중 어느 하나에 포함된 에피토프, 또는
상기 서열번호 6 내지 서열번호 35, 서열번호 221 내지 서열번호 222 중 어느 하나와 80% 이상, 81% 이상, 82% 이상, 83% 이상, 84% 이상, 85% 이상, 86% 이상, 87% 이상, 88% 이상, 89% 이상, 90% 이상, 91% 이상, 92% 이상, 93% 이상, 94% 이상, 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상, 99% 이상, 또는 100% 이상 일치하는 서열을 가지고,
이때, a는 D-form alanine, Z는 6-aminohexanoic acid를 의미하며,
상기 T는 다음에서 선택됨:
K(Cha)VAAWTLKAA(서열번호 1), PKYVKQNTLKLAT(서열번호 2), ILMQYIKANSKFIGI(서열번호 3), QSIALSSLMVAQAIP(서열번호 4), ILMQYIKANSKFIGIPMGLPQSIALSSLMVAQ(서열번호 5), PLGFFPDHQL(서열번호 162), WPEANQVGAGAFGPGF(서열번호 163), MQWNSTALHQALQDP(서열번호 164), MQWNSTTFHQTLQDPRVRGLYFPAGG(서열번호 165), FFLLTRILTI(서열번호 166), FFLLTRILTIPQSLD(서열번호 167), TSLNFLGGTTVCLGQ(서열번호 168), QSPTSNHSPTSCPPIC(서열번호 169), IIFLFILLLCLIFLLVLLD(서열번호 170), CTTPAQGNSMFPSC(서열번호 171), CTKPTDGN(서열번호 172), WASVRFSW(서열번호 173), LLPIFFCLW(서열번호 174), MDIDPYKEFGATVELLSFLP(서열번호 175), FLPSDFFPSV(서열번호 176), RDLLDTASALYREALESPEH(서열번호 177), PHHTALRQAILCWGELMTLA(서열번호 178), GRETVIEYLVSFGVW(서열번호 179), EYLVSFGVWIRTPPA(서열번호 180), VSFGVWIRTPPAYRPPNAPI(서열번호 181), TVVRRRGRSP(서열번호 182), VGPLTVNEKRRLKLI(서열번호 183), RHYLHTLWKAGILYK(서열번호 184), ESRLVVDFSQFSRGN(서열번호 185), LQSLTNLLSSNLSWL(서열번호 186), SSNLSWLSLDVSAAF(서열번호 187), LHLYSHPIILGFRKI(서열번호 188), KQCFRKLPVNRPIDW(서열번호 189), LCQVFADATPTGWGL(서열번호 190), AANWILRGTSFVYVP(서열번호 191), EIRLKVFVLGGCRHK(서열번호 192), KFVAAWTLKAA(서열번호 195), KYVAAWTLKAA(서열번호 196), DIEKKIAKMEKASSVFNVVNS(서열번호 223), YSGPLKAEIAQRLEDV(서열번호 224), K(Cha)VKANTLKAA(서열번호 225), K(Cha)VKANTLKAA(서열번호 226), K(Cha)VKAWTLKAA(서열번호 227), K(Cha)VKAWTLKAA(서열번호 228), K(Cha)VWANTLKAA(서열번호 229), K(Cha)VWANTLKAA(서열번호 230), K(Cha)VWAYTLKAA(서열번호 231), K(Cha)VWAVTLKAA(서열번호 232), K(Cha)VYAWTLKAA(서열번호 233), K(Cha)VYAWTLKAA(서열번호 234), R(Cha)VRANTLKAA(서열번호 235), K(Cha)VKAHTLKAA(서열번호 236), K(Cha)VKAHTLKAA(서열번호 237), K(Cha)VAANTLKAA(서열번호 238), K(Cha)VAANTLKAA(서열번호 239), K(Cha)VAAYTLKAA(서열번호 240), K(Cha)VAAYTLKAA(서열번호 241), K(Cha)VAAWTLKAA(서열번호 242), K(Cha)VAAKTLKAA(서열번호 243), K(Cha)VAAHTLKAA(서열번호 244), K(Cha)VAAATLKAA(서열번호 245), K(Cha)VAAWTLKAA(서열번호 246), 및 K(Cha)VMAATLKAA(서열번호 247)로 이뤄진 군에서 선택된 것;
다음 [구조식 I] 또는 [구조식 II]로 표현되는 서열,
[구조식 I] N-Lys-X1-X2-Ala-Ala-X3-Thr-X4-X5-Ala-Ala-C
이때, 상기 X1은 티로신(Tyr), 페닐알라닌(Phe), 또는 L-cyclohexylalanine이고,
상기 X2는 소수성 아미노산이거나, 류신(Leu), 또는 이소류신(Ile)이고,
상기 X3는 방향족, 또는 고리형 아미노산이거나, 페닐알라닌(Phe), 티로신(Tyr), 또는 히스티딘(His)이고,
상기 X4는 지방족 장쇄 아미노산(aliphatic long chain amino acids)이거나, 이소류신(Ile), 또는 발린(Val)이고,
상기 X5는 하전된 아미노산이거나, 아르기닌(Arg), 류신(Leu), 아스파르트산(Asp), 글루타민(Gln), 또는 글리신(Gly)임,
[구조식 II] N-Lys-X1-Val-X2-Ala-X3-Thr-Leu-Lys-Ala-Ala-C
이때, 상기 X1은 티로신(Tyr), 페닐알라닌(Phe), 또는 L-cyclohexylalanine이고,
상기 X2는 리신(Lys), 트립토판(Trp), 티로신(Tyr), 아르기닌(Arg), 알라닌(Ala), 또는 메티오닌(Met)이고,
상기 X3는 아스파라긴(Asn), 트립토판(Trp), 티로신(Tyr), 발린(Val), 히스티딘(His), 리신(Lys), 또는 알라닌(Ala)임; 및
상기 서열번호 1 내지 서열번호 5, 서열번호 162 내지 서열번호 192, 서열번호 195 내지 서열번호 196, 서열번호 223 내지 서열번호 247, [구조식 I] 또는 [구조식 II]로 표현되는 서열 중 어느 하나와 80% 이상, 81% 이상, 82% 이상, 83% 이상, 84% 이상, 85% 이상, 86% 이상, 87% 이상, 88% 이상, 89% 이상, 90% 이상, 91% 이상, 92% 이상, 93% 이상, 94% 이상, 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상, 99% 이상, 또는 100% 이상 일치하는 서열,
이때, (Cha)는 L-cyclohexylalanins, X는 임의의 표준 아미노산을 의미함.
실시예 85, 단위체-C 구조식 상위개념
실시예 1 내지 2 중 어느 하나에 있어서, 다음 [구조식 C]으로 표현되는 펩타이드 단위체:
[구조식 C] A1-B1-A2-T-A3-B2-A4
이때, 상기 펩타이드 단위체는 CD4+ T-cell에 의해 인식되어 체액성 면역반응을 유도할 수 있는 것으로, 23mer, 24mer, 25mer, 26mer, 27mer, 28mer, 29mer, 30mer, 31mer, 32mer, 33mer, 34mer, 35mer, 36mer, 37mer, 38mer, 39mer, 40mer, 41mer, 42mer, 43mer, 44mer, 45mer, 46mer, 47mer, 48mer, 49mer, 50mer, 51mer, 52mer, 53mer, 54mer, 55mer, 56mer, 57mer, 58mer, 59mer, 60mer, 61mer, 62mer, 63mer, 64mer, 65mer, 66mer, 67mer, 68mer, 69mer, 70mer, 또는 71mer의 길이를 가지고,
상기 A1은 제1 보조부이거나 부존재하며, 상기 제1 보조부는 링커 기능, 보호 기능, 시클릭 폼 형성 기능, 더미 기능, 및/또는 용해도를 높이는 기능을 가지며, 선택적으로 비표준 아미노산을 포함할 수 있고,
상기 A2은 제2 보조부이거나 부존재하며, 상기 제2 보조부는 링커 기능, 보호 기능, 시클릭 폼 형성 기능, 더미 기능, 및/또는 용해도를 높이는 기능을 가지며, 선택적으로 비표준 아미노산을 포함할 수 있고,
상기 A3은 제3 보조부이거나 부존재하며, 상기 제3 보조부는 링커 기능, 보호 기능, 시클릭 폼 형성 기능, 더미 기능, 및/또는 용해도를 높이는 기능을 가지며, 선택적으로 비표준 아미노산을 포함할 수 있고,
상기 A4은 제4 보조부이거나 부존재하며, 상기 제4 보조부는 링커 기능, 보호 기능, 시클릭 폼 형성 기능, 더미 기능, 및/또는 용해도를 높이는 기능을 가지며, 선택적으로 비표준 아미노산을 포함할 수 있고,
상기 B1는 B-cell 에피토프로, 아포지단백 B-100의 절편(fragment) 또는 아포지단백 B-100의 미모토프(mimotope)이고, 아포지단백 B-100을 표적하는 항체를 유도할 수 있으며,
상기 B2는 B-cell 에피토프로, 아포지단백 B-100의 절편(fragment) 또는 아포지단백 B-100의 미모토프(mimotope)이고, 아포지단백 B-100을 표적하는 항체를 유도할 수 있으며,
상기 T는 Th 에피토프로, CD4+ T-cell에 의해 인식될 수 있는 것을 특징으로 하고, 8mer, 9mer, 10mer, 11mer, 12mer, 13mer, 14mer, 15mer, 16mer, 17mer, 18mer, 19mer, 20mer, 21mer, 22mer, 23mer, 24mer, 25mer, 26mer, 27mer, 28mer, 29mer, 30mer, 31mer, 또는 32mer의 길이를 가짐.
실시예 86, 단위체-C 서열 조합
실시예 85에 있어서,
상기 A1, A2, A3, 및 A4는 각각 독립적으로, a, Z, aZ, Za, RN, AF, CR, LS, KT, KH, RF, DP, SV, GL, ZRNV(서열번호 36), aZRN(서열번호 37), IAFZ(서열번호 38), AFZa(서열번호 39), RNVP(서열번호 40), WIAF(서열번호 41), ZCRF(서열번호 42), aZCR(서열번호 43), YLSZ(서열번호 44), LSZa(서열번호 45), CRFR(서열번호 46), VYLS(서열번호 47), ZKTT(서열번호 48), aZKT(서열번호 49), NKHZ(서열번호 50), KHZa(서열번호 51), GSHHHHHHGSDDDDK(서열번호 52), HHHHHH(서열번호 53), MRGSHHHHHHGSDDDDKIVD(서열번호 54), GGGGSGGGGGGSS(서열번호 55), RRRRRR(서열번호 159), GSHHHHHHGSDDDDKZa(서열번호 193), 및 aZGSHHHHHHGSDDDDK(서열번호 194)로 이뤄진 군에서 선택되거나, 부존재하고, 이때, a는 D-form alanine, Z는 6-aminohexanoic acid를 의미하고,
상기 B1 및 B2는 각각 독립적으로,
RNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 6), CRFRGLISLSQVYLS(서열번호 7), KTTKQSFDLSVKAQYKKNKH(서열번호 8), RNVPPIFNDVY(서열번호 9), CRFRGLISLSQ(서열번호 10), KTTKQSFDLSVK(서열번호 11), RNVPPIFNDVYW(서열번호 12), CRFRGLISLSQV(서열번호 13), KTTKQSFDLSVKAQYKK(서열번호 14), RNVPPIFNDVYWI(서열번호 15), CRFRGLISLSQVY(서열번호 16), KTTKQSFDLSVKAQYKKN(서열번호 17), PIFNDVYWIAF(서열번호 18), GLISLSQVYLS(서열번호 19), QSFDLSVKAQYKKNKH(서열번호 20), PPIFNDVYWIAF(서열번호 21), RGLISLSQVYLS(서열번호 22), KQSFDLSVKAQYKKNKH(서열번호 23), VPPIFNDVYWIAF(서열번호 24), FRGLISLSQVYLS(서열번호 25), TKQSFDLSVKAQYKKNKH(서열번호 26), NVPPIFNDVYWIA(서열번호 27), RFRGLISLSQVYL(서열번호 28), TKQSFDLSVKAQYKKN(서열번호 29), VPPIFNDVYWI(서열번호 30), FRGLISLSQVY(서열번호 31), TKQSFDLSVKAQYKKN(서열번호 32), PPIFNDVYW(서열번호 33), RGLISLSQV(서열번호 34), KQSFDLSVKAQYKK(서열번호 35), RFRGLISLSQVYLDP(서열번호 221), 및 SVCGCPVGHHDVVGL(서열번호 222)로 이뤄진 군에서 선택된 것,
상기 서열번호 6 내지 서열번호 35, 서열번호 221 내지 서열번호 222 중 어느 하나에 포함된 에피토프, 또는
상기 서열번호 6 내지 서열번호 35, 서열번호 221 내지 서열번호 222 중 어느 하나와 80% 이상, 81% 이상, 82% 이상, 83% 이상, 84% 이상, 85% 이상, 86% 이상, 87% 이상, 88% 이상, 89% 이상, 90% 이상, 91% 이상, 92% 이상, 93% 이상, 94% 이상, 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상, 99% 이상, 또는 100% 이상 일치하는 서열을 가지고,
이때, a는 D-form alanine, Z는 6-aminohexanoic acid를 의미하며,
상기 T는 다음에서 선택됨:
K(Cha)VAAWTLKAA(서열번호 1), PKYVKQNTLKLAT(서열번호 2), ILMQYIKANSKFIGI(서열번호 3), QSIALSSLMVAQAIP(서열번호 4), ILMQYIKANSKFIGIPMGLPQSIALSSLMVAQ(서열번호 5), PLGFFPDHQL(서열번호 162), WPEANQVGAGAFGPGF(서열번호 163), MQWNSTALHQALQDP(서열번호 164), MQWNSTTFHQTLQDPRVRGLYFPAGG(서열번호 165), FFLLTRILTI(서열번호 166), FFLLTRILTIPQSLD(서열번호 167), TSLNFLGGTTVCLGQ(서열번호 168), QSPTSNHSPTSCPPIC(서열번호 169), IIFLFILLLCLIFLLVLLD(서열번호 170), CTTPAQGNSMFPSC(서열번호 171), CTKPTDGN(서열번호 172), WASVRFSW(서열번호 173), LLPIFFCLW(서열번호 174), MDIDPYKEFGATVELLSFLP(서열번호 175), FLPSDFFPSV(서열번호 176), RDLLDTASALYREALESPEH(서열번호 177), PHHTALRQAILCWGELMTLA(서열번호 178), GRETVIEYLVSFGVW(서열번호 179), EYLVSFGVWIRTPPA(서열번호 180), VSFGVWIRTPPAYRPPNAPI(서열번호 181), TVVRRRGRSP(서열번호 182), VGPLTVNEKRRLKLI(서열번호 183), RHYLHTLWKAGILYK(서열번호 184), ESRLVVDFSQFSRGN(서열번호 185), LQSLTNLLSSNLSWL(서열번호 186), SSNLSWLSLDVSAAF(서열번호 187), LHLYSHPIILGFRKI(서열번호 188), KQCFRKLPVNRPIDW(서열번호 189), LCQVFADATPTGWGL(서열번호 190), AANWILRGTSFVYVP(서열번호 191), EIRLKVFVLGGCRHK(서열번호 192), KFVAAWTLKAA(서열번호 195), KYVAAWTLKAA(서열번호 196), DIEKKIAKMEKASSVFNVVNS(서열번호 223), YSGPLKAEIAQRLEDV(서열번호 224), K(Cha)VKANTLKAA(서열번호 225), K(Cha)VKANTLKAA(서열번호 226), K(Cha)VKAWTLKAA(서열번호 227), K(Cha)VKAWTLKAA(서열번호 228), K(Cha)VWANTLKAA(서열번호 229), K(Cha)VWANTLKAA(서열번호 230), K(Cha)VWAYTLKAA(서열번호 231), K(Cha)VWAVTLKAA(서열번호 232), K(Cha)VYAWTLKAA(서열번호 233), K(Cha)VYAWTLKAA(서열번호 234), R(Cha)VRANTLKAA(서열번호 235), K(Cha)VKAHTLKAA(서열번호 236), K(Cha)VKAHTLKAA(서열번호 237), K(Cha)VAANTLKAA(서열번호 238), K(Cha)VAANTLKAA(서열번호 239), K(Cha)VAAYTLKAA(서열번호 240), K(Cha)VAAYTLKAA(서열번호 241), K(Cha)VAAWTLKAA(서열번호 242), K(Cha)VAAKTLKAA(서열번호 243), K(Cha)VAAHTLKAA(서열번호 244), K(Cha)VAAATLKAA(서열번호 245), K(Cha)VAAWTLKAA(서열번호 246), 및 K(Cha)VMAATLKAA(서열번호 247)로 이뤄진 군에서 선택된 것;
다음 [구조식 I] 또는 [구조식 II]로 표현되는 서열,
[구조식 I] N-Lys-X1-X2-Ala-Ala-X3-Thr-X4-X5-Ala-Ala-C
이때, 상기 X1은 티로신(Tyr), 페닐알라닌(Phe), 또는 L-cyclohexylalanine이고,
상기 X2는 소수성 아미노산이거나, 류신(Leu), 또는 이소류신(Ile)이고,
상기 X3는 방향족, 또는 고리형 아미노산이거나, 페닐알라닌(Phe), 티로신(Tyr), 또는 히스티딘(His)이고,
상기 X4는 지방족 장쇄 아미노산(aliphatic long chain amino acids)이거나, 이소류신(Ile), 또는 발린(Val)이고,
상기 X5는 하전된 아미노산이거나, 아르기닌(Arg), 류신(Leu), 아스파르트산(Asp), 글루타민(Gln), 또는 글리신(Gly)임,
[구조식 II] N-Lys-X1-Val-X2-Ala-X3-Thr-Leu-Lys-Ala-Ala-C
이때, 상기 X1은 티로신(Tyr), 페닐알라닌(Phe), 또는 L-cyclohexylalanine이고,
상기 X2는 리신(Lys), 트립토판(Trp), 티로신(Tyr), 아르기닌(Arg), 알라닌(Ala), 또는 메티오닌(Met)이고,
상기 X3는 아스파라긴(Asn), 트립토판(Trp), 티로신(Tyr), 발린(Val), 히스티딘(His), 리신(Lys), 또는 알라닌(Ala)임; 및
상기 서열번호 1 내지 서열번호 5, 서열번호 162 내지 서열번호 192, 서열번호 195 내지 서열번호 196, 서열번호 223 내지 서열번호 247, [구조식 I] 또는 [구조식 II]로 표현되는 서열 중 어느 하나와 80% 이상, 81% 이상, 82% 이상, 83% 이상, 84% 이상, 85% 이상, 86% 이상, 87% 이상, 88% 이상, 89% 이상, 90% 이상, 91% 이상, 92% 이상, 93% 이상, 94% 이상, 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상, 99% 이상, 또는 100% 이상 일치하는 서열,
이때, (Cha)는 L-cyclohexylalanins, X는 임의의 표준 아미노산을 의미함.
실시예 87, 단위체-D 구조식 상위개념
실시예 1 내지 2 중 어느 하나에 있어서, 다음 [구조식 D] 또는 [구조식 D']으로 표현되는 펩타이드 단위체:
[구조식 D] A1-B-A2-T1-A3-T2-A4
[구조식 D'] A1-T1-A2-T2-A3-B-A4
이때, 상기 펩타이드 단위체는 CD4+ T-cell에 의해 인식되어 체액성 면역반응을 유도할 수 있는 것으로, 23mer, 24mer, 25mer, 26mer, 27mer, 28mer, 29mer, 30mer, 31mer, 32mer, 33mer, 34mer, 35mer, 36mer, 37mer, 38mer, 39mer, 40mer, 41mer, 42mer, 43mer, 44mer, 45mer, 46mer, 47mer, 48mer, 49mer, 50mer, 51mer, 52mer, 53mer, 54mer, 55mer, 56mer, 57mer, 58mer, 59mer, 60mer, 61mer, 62mer, 63mer, 64mer, 65mer, 66mer, 67mer, 68mer, 69mer, 70mer, 또는 71mer의 길이를 가지고,
상기 A1은 제1 보조부이거나 부존재하며, 상기 제1 보조부는 링커 기능, 보호 기능, 시클릭 폼 형성 기능, 더미 기능, 및/또는 용해도를 높이는 기능을 가지며, 선택적으로 비표준 아미노산을 포함할 수 있고,
상기 A2은 제2 보조부이거나 부존재하며, 상기 제2 보조부는 링커 기능, 보호 기능, 시클릭 폼 형성 기능, 더미 기능, 및/또는 용해도를 높이는 기능을 가지며, 선택적으로 비표준 아미노산을 포함할 수 있고,
상기 A3은 제3 보조부이거나 부존재하며, 상기 제3 보조부는 링커 기능, 보호 기능, 시클릭 폼 형성 기능, 더미 기능, 및/또는 용해도를 높이는 기능을 가지며, 선택적으로 비표준 아미노산을 포함할 수 있고,
상기 A4은 제4 보조부이거나 부존재하며, 상기 제4 보조부는 링커 기능, 보호 기능, 시클릭 폼 형성 기능, 더미 기능, 및/또는 용해도를 높이는 기능을 가지며, 선택적으로 비표준 아미노산을 포함할 수 있고,
상기 B는 B-cell 에피토프로, 아포지단백 B-100의 절편(fragment) 또는 아포지단백 B-100의 미모토프(mimotope)이고, 아포지단백 B-100을 표적하는 항체를 유도할 수 있으며,
상기 T1은 Th 에피토프로, CD4+ T-cell에 의해 인식될 수 있는 것을 특징으로 하고, 8mer, 9mer, 10mer, 11mer, 12mer, 13mer, 14mer, 15mer, 16mer, 17mer, 18mer, 19mer, 20mer, 21mer, 22mer, 23mer, 24mer, 25mer, 26mer, 27mer, 28mer, 29mer, 30mer, 31mer, 또는 32mer의 길이를 가지고,
상기 T2는 Th 에피토프로, CD4+ T-cell에 의해 인식될 수 있는 것을 특징으로 하고, 8mer, 9mer, 10mer, 11mer, 12mer, 13mer, 14mer, 15mer, 16mer, 17mer, 18mer, 19mer, 20mer, 21mer, 22mer, 23mer, 24mer, 25mer, 26mer, 27mer, 28mer, 29mer, 30mer, 31mer, 또는 32mer의 길이를 가짐.
실시예 88, 단위체-D 서열 조합
실시예 87에 있어서,
상기 A1, A2, A3, 및 A4는 각각 독립적으로, a, Z, aZ, Za, RN, AF, CR, LS, KT, KH, RF, DP, SV, GL, ZRNV(서열번호 36), aZRN(서열번호 37), IAFZ(서열번호 38), AFZa(서열번호 39), RNVP(서열번호 40), WIAF(서열번호 41), ZCRF(서열번호 42), aZCR(서열번호 43), YLSZ(서열번호 44), LSZa(서열번호 45), CRFR(서열번호 46), VYLS(서열번호 47), ZKTT(서열번호 48), aZKT(서열번호 49), NKHZ(서열번호 50), KHZa(서열번호 51), GSHHHHHHGSDDDDK(서열번호 52), HHHHHH(서열번호 53), MRGSHHHHHHGSDDDDKIVD(서열번호 54), GGGGSGGGGGGSS(서열번호 55), RRRRRR(서열번호 159), GSHHHHHHGSDDDDKZa(서열번호 193), 및 aZGSHHHHHHGSDDDDK(서열번호 194)로 이뤄진 군에서 선택되거나, 부존재하고, 이때, a는 D-form alanine, Z는 6-aminohexanoic acid를 의미하고,
상기 B는,
RNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 6), CRFRGLISLSQVYLS(서열번호 7), KTTKQSFDLSVKAQYKKNKH(서열번호 8), RNVPPIFNDVY(서열번호 9), CRFRGLISLSQ(서열번호 10), KTTKQSFDLSVK(서열번호 11), RNVPPIFNDVYW(서열번호 12), CRFRGLISLSQV(서열번호 13), KTTKQSFDLSVKAQYKK(서열번호 14), RNVPPIFNDVYWI(서열번호 15), CRFRGLISLSQVY(서열번호 16), KTTKQSFDLSVKAQYKKN(서열번호 17), PIFNDVYWIAF(서열번호 18), GLISLSQVYLS(서열번호 19), QSFDLSVKAQYKKNKH(서열번호 20), PPIFNDVYWIAF(서열번호 21), RGLISLSQVYLS(서열번호 22), KQSFDLSVKAQYKKNKH(서열번호 23), VPPIFNDVYWIAF(서열번호 24), FRGLISLSQVYLS(서열번호 25), TKQSFDLSVKAQYKKNKH(서열번호 26), NVPPIFNDVYWIA(서열번호 27), RFRGLISLSQVYL(서열번호 28), TKQSFDLSVKAQYKKN(서열번호 29), VPPIFNDVYWI(서열번호 30), FRGLISLSQVY(서열번호 31), TKQSFDLSVKAQYKKN(서열번호 32), PPIFNDVYW(서열번호 33), RGLISLSQV(서열번호 34), KQSFDLSVKAQYKK(서열번호 35), RFRGLISLSQVYLDP(서열번호 221), 및 SVCGCPVGHHDVVGL(서열번호 222)로 이뤄진 군에서 선택된 것,
상기 서열번호 6 내지 서열번호 35, 서열번호 221 내지 서열번호 222 중 어느 하나에 포함된 에피토프, 또는
상기 서열번호 6 내지 서열번호 35, 서열번호 221 내지 서열번호 222 중 어느 하나와 80% 이상, 81% 이상, 82% 이상, 83% 이상, 84% 이상, 85% 이상, 86% 이상, 87% 이상, 88% 이상, 89% 이상, 90% 이상, 91% 이상, 92% 이상, 93% 이상, 94% 이상, 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상, 99% 이상, 또는 100% 이상 일치하는 서열을 가지고,
이때, a는 D-form alanine, Z는 6-aminohexanoic acid를 의미하며,
상기 T1 및 T2는 각각 독립적으로 다음에서 선택됨:
K(Cha)VAAWTLKAA(서열번호 1), PKYVKQNTLKLAT(서열번호 2), ILMQYIKANSKFIGI(서열번호 3), QSIALSSLMVAQAIP(서열번호 4), ILMQYIKANSKFIGIPMGLPQSIALSSLMVAQ(서열번호 5), PLGFFPDHQL(서열번호 162), WPEANQVGAGAFGPGF(서열번호 163), MQWNSTALHQALQDP(서열번호 164), MQWNSTTFHQTLQDPRVRGLYFPAGG(서열번호 165), FFLLTRILTI(서열번호 166), FFLLTRILTIPQSLD(서열번호 167), TSLNFLGGTTVCLGQ(서열번호 168), QSPTSNHSPTSCPPIC(서열번호 169), IIFLFILLLCLIFLLVLLD(서열번호 170), CTTPAQGNSMFPSC(서열번호 171), CTKPTDGN(서열번호 172), WASVRFSW(서열번호 173), LLPIFFCLW(서열번호 174), MDIDPYKEFGATVELLSFLP(서열번호 175), FLPSDFFPSV(서열번호 176), RDLLDTASALYREALESPEH(서열번호 177), PHHTALRQAILCWGELMTLA(서열번호 178), GRETVIEYLVSFGVW(서열번호 179), EYLVSFGVWIRTPPA(서열번호 180), VSFGVWIRTPPAYRPPNAPI(서열번호 181), TVVRRRGRSP(서열번호 182), VGPLTVNEKRRLKLI(서열번호 183), RHYLHTLWKAGILYK(서열번호 184), ESRLVVDFSQFSRGN(서열번호 185), LQSLTNLLSSNLSWL(서열번호 186), SSNLSWLSLDVSAAF(서열번호 187), LHLYSHPIILGFRKI(서열번호 188), KQCFRKLPVNRPIDW(서열번호 189), LCQVFADATPTGWGL(서열번호 190), AANWILRGTSFVYVP(서열번호 191), EIRLKVFVLGGCRHK(서열번호 192), KFVAAWTLKAA(서열번호 195), KYVAAWTLKAA(서열번호 196), DIEKKIAKMEKASSVFNVVNS(서열번호 223), YSGPLKAEIAQRLEDV(서열번호 224), K(Cha)VKANTLKAA(서열번호 225), K(Cha)VKANTLKAA(서열번호 226), K(Cha)VKAWTLKAA(서열번호 227), K(Cha)VKAWTLKAA(서열번호 228), K(Cha)VWANTLKAA(서열번호 229), K(Cha)VWANTLKAA(서열번호 230), K(Cha)VWAYTLKAA(서열번호 231), K(Cha)VWAVTLKAA(서열번호 232), K(Cha)VYAWTLKAA(서열번호 233), K(Cha)VYAWTLKAA(서열번호 234), R(Cha)VRANTLKAA(서열번호 235), K(Cha)VKAHTLKAA(서열번호 236), K(Cha)VKAHTLKAA(서열번호 237), K(Cha)VAANTLKAA(서열번호 238), K(Cha)VAANTLKAA(서열번호 239), K(Cha)VAAYTLKAA(서열번호 240), K(Cha)VAAYTLKAA(서열번호 241), K(Cha)VAAWTLKAA(서열번호 242), K(Cha)VAAKTLKAA(서열번호 243), K(Cha)VAAHTLKAA(서열번호 244), K(Cha)VAAATLKAA(서열번호 245), K(Cha)VAAWTLKAA(서열번호 246), 및 K(Cha)VMAATLKAA(서열번호 247)로 이뤄진 군에서 선택된 것;
다음 [구조식 I] 또는 [구조식 II]로 표현되는 서열,
[구조식 I] N-Lys-X1-X2-Ala-Ala-X3-Thr-X4-X5-Ala-Ala-C
이때, 상기 X1은 티로신(Tyr), 페닐알라닌(Phe), 또는 L-cyclohexylalanine이고,
상기 X2는 소수성 아미노산이거나, 류신(Leu), 또는 이소류신(Ile)이고,
상기 X3는 방향족, 또는 고리형 아미노산이거나, 페닐알라닌(Phe), 티로신(Tyr), 또는 히스티딘(His)이고,
상기 X4는 지방족 장쇄 아미노산(aliphatic long chain amino acids)이거나, 이소류신(Ile), 또는 발린(Val)이고,
상기 X5는 하전된 아미노산이거나, 아르기닌(Arg), 류신(Leu), 아스파르트산(Asp), 글루타민(Gln), 또는 글리신(Gly)임,
[구조식 II] N-Lys-X1-Val-X2-Ala-X3-Thr-Leu-Lys-Ala-Ala-C
이때, 상기 X1은 티로신(Tyr), 페닐알라닌(Phe), 또는 L-cyclohexylalanine이고,
상기 X2는 리신(Lys), 트립토판(Trp), 티로신(Tyr), 아르기닌(Arg), 알라닌(Ala), 또는 메티오닌(Met)이고,
상기 X3는 아스파라긴(Asn), 트립토판(Trp), 티로신(Tyr), 발린(Val), 히스티딘(His), 리신(Lys), 또는 알라닌(Ala)임; 및
상기 서열번호 1 내지 서열번호 5, 서열번호 162 내지 서열번호 192, 서열번호 195 내지 서열번호 196, 서열번호 223 내지 서열번호 247, [구조식 I] 또는 [구조식 II]로 표현되는 서열 중 어느 하나와 80% 이상, 81% 이상, 82% 이상, 83% 이상, 84% 이상, 85% 이상, 86% 이상, 87% 이상, 88% 이상, 89% 이상, 90% 이상, 91% 이상, 92% 이상, 93% 이상, 94% 이상, 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상, 99% 이상, 또는 100% 이상 일치하는 서열,
이때, (Cha)는 L-cyclohexylalanins, X는 임의의 표준 아미노산을 의미함.
실시예 89, 단위체-E 구조식 상위개념
실시예 1 내지 2 중 어느 하나에 있어서, 다음 [구조식 E]로 표현되는 펩타이드 단위체:
[구조식 E] A1-B1-A2-T1-A3-T2-A4-B2-A5
이때, 상기 펩타이드 단위체는 CD4+ T-cell에 의해 인식되어 체액성 면역반응을 유도할 수 있는 것으로, 23mer, 24mer, 25mer, 26mer, 27mer, 28mer, 29mer, 30mer, 31mer, 32mer, 33mer, 34mer, 35mer, 36mer, 37mer, 38mer, 39mer, 40mer, 41mer, 42mer, 43mer, 44mer, 45mer, 46mer, 47mer, 48mer, 49mer, 50mer, 51mer, 52mer, 53mer, 54mer, 55mer, 56mer, 57mer, 58mer, 59mer, 60mer, 61mer, 62mer, 63mer, 64mer, 65mer, 66mer, 67mer, 68mer, 69mer, 70mer, 또는 71mer의 길이를 가지고,
상기 A1은 제1 보조부이거나 부존재하며, 상기 제1 보조부는 링커 기능, 보호 기능, 시클릭 폼 형성 기능, 더미 기능, 및/또는 용해도를 높이는 기능을 가지며, 선택적으로 비표준 아미노산을 포함할 수 있고,
상기 A2은 제2 보조부이거나 부존재하며, 상기 제2 보조부는 링커 기능, 보호 기능, 시클릭 폼 형성 기능, 더미 기능, 및/또는 용해도를 높이는 기능을 가지며, 선택적으로 비표준 아미노산을 포함할 수 있고,
상기 A3은 제3 보조부이거나 부존재하며, 상기 제3 보조부는 링커 기능, 보호 기능, 시클릭 폼 형성 기능, 더미 기능, 및/또는 용해도를 높이는 기능을 가지며, 선택적으로 비표준 아미노산을 포함할 수 있고,
상기 A4은 제4 보조부이거나 부존재하며, 상기 제4 보조부는 링커 기능, 보호 기능, 시클릭 폼 형성 기능, 더미 기능, 및/또는 용해도를 높이는 기능을 가지며, 선택적으로 비표준 아미노산을 포함할 수 있고,
상기 B1은 B-cell 에피토프로, 아포지단백 B-100의 절편(fragment) 또는 아포지단백 B-100의 미모토프(mimotope)이고, 아포지단백 B-100을 표적하는 항체를 유도할 수 있으며,
상기 B2는 B-cell 에피토프로, 아포지단백 B-100의 절편(fragment) 또는 아포지단백 B-100의 미모토프(mimotope)이고, 아포지단백 B-100을 표적하는 항체를 유도할 수 있으며,
상기 T1은 Th 에피토프로, CD4+ T-cell에 의해 인식될 수 있는 것을 특징으로 하고, 8mer, 9mer, 10mer, 11mer, 12mer, 13mer, 14mer, 15mer, 16mer, 17mer, 18mer, 19mer, 20mer, 21mer, 22mer, 23mer, 24mer, 25mer, 26mer, 27mer, 28mer, 29mer, 30mer, 31mer, 또는 32mer의 길이를 가지고,
상기 T2는 Th 에피토프로, CD4+ T-cell에 의해 인식될 수 있는 것을 특징으로 하고, 8mer, 9mer, 10mer, 11mer, 12mer, 13mer, 14mer, 15mer, 16mer, 17mer, 18mer, 19mer, 20mer, 21mer, 22mer, 23mer, 24mer, 25mer, 26mer, 27mer, 28mer, 29mer, 30mer, 31mer, 또는 32mer의 길이를 가짐.
실시예 90, 단위체-E 서열 조합
실시예 89에 있어서,
상기 A1, A2, A3, 및 A4는 각각 독립적으로, a, Z, aZ, Za, RN, AF, CR, LS, KT, KH, RF, DP, SV, GL, ZRNV(서열번호 36), aZRN(서열번호 37), IAFZ(서열번호 38), AFZa(서열번호 39), RNVP(서열번호 40), WIAF(서열번호 41), ZCRF(서열번호 42), aZCR(서열번호 43), YLSZ(서열번호 44), LSZa(서열번호 45), CRFR(서열번호 46), VYLS(서열번호 47), ZKTT(서열번호 48), aZKT(서열번호 49), NKHZ(서열번호 50), KHZa(서열번호 51), GSHHHHHHGSDDDDK(서열번호 52), HHHHHH(서열번호 53), MRGSHHHHHHGSDDDDKIVD(서열번호 54), GGGGSGGGGGGSS(서열번호 55), RRRRRR(서열번호 159), GSHHHHHHGSDDDDKZa(서열번호 193), 및 aZGSHHHHHHGSDDDDK(서열번호 194)로 이뤄진 군에서 선택되거나, 부존재하고, 이때, a는 D-form alanine, Z는 6-aminohexanoic acid를 의미하고,
상기 B1 및 B2는 각각 독립적으로,
RNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 6), CRFRGLISLSQVYLS(서열번호 7), KTTKQSFDLSVKAQYKKNKH(서열번호 8), RNVPPIFNDVY(서열번호 9), CRFRGLISLSQ(서열번호 10), KTTKQSFDLSVK(서열번호 11), RNVPPIFNDVYW(서열번호 12), CRFRGLISLSQV(서열번호 13), KTTKQSFDLSVKAQYKK(서열번호 14), RNVPPIFNDVYWI(서열번호 15), CRFRGLISLSQVY(서열번호 16), KTTKQSFDLSVKAQYKKN(서열번호 17), PIFNDVYWIAF(서열번호 18), GLISLSQVYLS(서열번호 19), QSFDLSVKAQYKKNKH(서열번호 20), PPIFNDVYWIAF(서열번호 21), RGLISLSQVYLS(서열번호 22), KQSFDLSVKAQYKKNKH(서열번호 23), VPPIFNDVYWIAF(서열번호 24), FRGLISLSQVYLS(서열번호 25), TKQSFDLSVKAQYKKNKH(서열번호 26), NVPPIFNDVYWIA(서열번호 27), RFRGLISLSQVYL(서열번호 28), TKQSFDLSVKAQYKKN(서열번호 29), VPPIFNDVYWI(서열번호 30), FRGLISLSQVY(서열번호 31), TKQSFDLSVKAQYKKN(서열번호 32), PPIFNDVYW(서열번호 33), RGLISLSQV(서열번호 34), KQSFDLSVKAQYKK(서열번호 35), RFRGLISLSQVYLDP(서열번호 221), 및 SVCGCPVGHHDVVGL(서열번호 222)로 이뤄진 군에서 선택된 것,
상기 서열번호 6 내지 서열번호 35, 서열번호 221 내지 서열번호 222 중 어느 하나에 포함된 에피토프, 또는
상기 서열번호 6 내지 서열번호 35, 서열번호 221 내지 서열번호 222 중 어느 하나와 80% 이상, 81% 이상, 82% 이상, 83% 이상, 84% 이상, 85% 이상, 86% 이상, 87% 이상, 88% 이상, 89% 이상, 90% 이상, 91% 이상, 92% 이상, 93% 이상, 94% 이상, 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상, 99% 이상, 또는 100% 이상 일치하는 서열을 가지고,
이때, a는 D-form alanine, Z는 6-aminohexanoic acid를 의미하며,
상기 T1 및 T2는 각각 독립적으로 다음에서 선택됨:
K(Cha)VAAWTLKAA(서열번호 1), PKYVKQNTLKLAT(서열번호 2), ILMQYIKANSKFIGI(서열번호 3), QSIALSSLMVAQAIP(서열번호 4), ILMQYIKANSKFIGIPMGLPQSIALSSLMVAQ(서열번호 5), PLGFFPDHQL(서열번호 162), WPEANQVGAGAFGPGF(서열번호 163), MQWNSTALHQALQDP(서열번호 164), MQWNSTTFHQTLQDPRVRGLYFPAGG(서열번호 165), FFLLTRILTI(서열번호 166), FFLLTRILTIPQSLD(서열번호 167), TSLNFLGGTTVCLGQ(서열번호 168), QSPTSNHSPTSCPPIC(서열번호 169), IIFLFILLLCLIFLLVLLD(서열번호 170), CTTPAQGNSMFPSC(서열번호 171), CTKPTDGN(서열번호 172), WASVRFSW(서열번호 173), LLPIFFCLW(서열번호 174), MDIDPYKEFGATVELLSFLP(서열번호 175), FLPSDFFPSV(서열번호 176), RDLLDTASALYREALESPEH(서열번호 177), PHHTALRQAILCWGELMTLA(서열번호 178), GRETVIEYLVSFGVW(서열번호 179), EYLVSFGVWIRTPPA(서열번호 180), VSFGVWIRTPPAYRPPNAPI(서열번호 181), TVVRRRGRSP(서열번호 182), VGPLTVNEKRRLKLI(서열번호 183), RHYLHTLWKAGILYK(서열번호 184), ESRLVVDFSQFSRGN(서열번호 185), LQSLTNLLSSNLSWL(서열번호 186), SSNLSWLSLDVSAAF(서열번호 187), LHLYSHPIILGFRKI(서열번호 188), KQCFRKLPVNRPIDW(서열번호 189), LCQVFADATPTGWGL(서열번호 190), AANWILRGTSFVYVP(서열번호 191), EIRLKVFVLGGCRHK(서열번호 192), KFVAAWTLKAA(서열번호 195), KYVAAWTLKAA(서열번호 196), DIEKKIAKMEKASSVFNVVNS(서열번호 223), YSGPLKAEIAQRLEDV(서열번호 224), K(Cha)VKANTLKAA(서열번호 225), K(Cha)VKANTLKAA(서열번호 226), K(Cha)VKAWTLKAA(서열번호 227), K(Cha)VKAWTLKAA(서열번호 228), K(Cha)VWANTLKAA(서열번호 229), K(Cha)VWANTLKAA(서열번호 230), K(Cha)VWAYTLKAA(서열번호 231), K(Cha)VWAVTLKAA(서열번호 232), K(Cha)VYAWTLKAA(서열번호 233), K(Cha)VYAWTLKAA(서열번호 234), R(Cha)VRANTLKAA(서열번호 235), K(Cha)VKAHTLKAA(서열번호 236), K(Cha)VKAHTLKAA(서열번호 237), K(Cha)VAANTLKAA(서열번호 238), K(Cha)VAANTLKAA(서열번호 239), K(Cha)VAAYTLKAA(서열번호 240), K(Cha)VAAYTLKAA(서열번호 241), K(Cha)VAAWTLKAA(서열번호 242), K(Cha)VAAKTLKAA(서열번호 243), K(Cha)VAAHTLKAA(서열번호 244), K(Cha)VAAATLKAA(서열번호 245), K(Cha)VAAWTLKAA(서열번호 246), 및 K(Cha)VMAATLKAA(서열번호 247)로 이뤄진 군에서 선택된 것;
다음 [구조식 I] 또는 [구조식 II]로 표현되는 서열,
[구조식 I] N-Lys-X1-X2-Ala-Ala-X3-Thr-X4-X5-Ala-Ala-C
이때, 상기 X1은 티로신(Tyr), 페닐알라닌(Phe), 또는 L-cyclohexylalanine이고,
상기 X2는 소수성 아미노산이거나, 류신(Leu), 또는 이소류신(Ile)이고,
상기 X3는 방향족, 또는 고리형 아미노산이거나, 페닐알라닌(Phe), 티로신(Tyr), 또는 히스티딘(His)이고,
상기 X4는 지방족 장쇄 아미노산(aliphatic long chain amino acids)이거나, 이소류신(Ile), 또는 발린(Val)이고,
상기 X5는 하전된 아미노산이거나, 아르기닌(Arg), 류신(Leu), 아스파르트산(Asp), 글루타민(Gln), 또는 글리신(Gly)임,
[구조식 II] N-Lys-X1-Val-X2-Ala-X3-Thr-Leu-Lys-Ala-Ala-C
이때, 상기 X1은 티로신(Tyr), 페닐알라닌(Phe), 또는 L-cyclohexylalanine이고,
상기 X2는 리신(Lys), 트립토판(Trp), 티로신(Tyr), 아르기닌(Arg), 알라닌(Ala), 또는 메티오닌(Met)이고,
상기 X3는 아스파라긴(Asn), 트립토판(Trp), 티로신(Tyr), 발린(Val), 히스티딘(His), 리신(Lys), 또는 알라닌(Ala)임; 및
상기 서열번호 1 내지 서열번호 5, 서열번호 162 내지 서열번호 192, 서열번호 195 내지 서열번호 196, 서열번호 223 내지 서열번호 247, [구조식 I] 또는 [구조식 II]로 표현되는 서열 중 어느 하나와 80% 이상, 81% 이상, 82% 이상, 83% 이상, 84% 이상, 85% 이상, 86% 이상, 87% 이상, 88% 이상, 89% 이상, 90% 이상, 91% 이상, 92% 이상, 93% 이상, 94% 이상, 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상, 99% 이상, 또는 100% 이상 일치하는 서열,
이때, (Cha)는 L-cyclohexylalanins, X는 임의의 표준 아미노산을 의미함.
펩타이드 단위체를 포함하는 펩타이드
실시예 91, 2개 이상의 펩타이드 단위체를 포함하는 펩타이드
실시예 1 내지 90 중 어느 하나의 펩타이드 단위체가 2개 이상 연결된 펩타이드.
실시예 92, 2개 내지 8개의 펩타이드 단위체를 포함하는 펩타이드
실시예 1 내지 90 중 어느 하나의 펩타이드 단위체가 2개, 3개, 4개, 5개, 6개, 7개, 또는 8개 연결된 펩타이드.
실시예 93, 연쇄동일서열
실시예 91에 있어서, 상기 펩타이드 단위체 각각은 동일하거나 동등한 서열을 가지는 것을 특징으로 하는 펩타이드.
실시예 94, String of Beads
실시예 91에 있어서, 상기 펩타이드 단위체 각각은 상이한 서열을 가지는 것을 특징으로 하는 펩타이드.
실시예 95, 시클릭폼
실시예 91에 있어서, 상기 펩타이드는 N말단 및 C말단에 시클릭 폼 형성 기능을 가지는 보조부를 추가로 포함하고, 상기 펩타이드는 상기 보조부를 통해 시클릭 폼을 형성하는 것을 특징으로 하는 펩타이드.
펩타이드 단위체 및/또는 펩타이드를 암호화하는 핵산
실시예 96, 암호화 핵산, 비표준 아미노산 불포함
실시예 1 내지 실시예 6 중 어느 하나의 펩타이드 단위체, 및/또는 실시예 91 내지 실시예 95 중 어느 하나의 펩타이드를 암호화하는 핵산, 이때, 상기 펩타이드 단위체 및 상기 펩타이드는 비표준 아미노산을 포함하지 않는 것을 특징으로 함.
실시예 97, 각 단위체 구조의 암호화 핵산, 비표준 아미노산 불포함
실시예 7 내지 실시예 10, 실시예 14 내지 실시예 18, 실시예 22, 실시예 26 내지 실시예 30, 실시예 34, 실시예 38 내지 실시예 41, 실시예 45, 실시예 49 내지 실시예 54, 실시예 58 내지 실시예 60, 실시예 64, 실시예 68, 및 실시예 72 중 어느 하나의 펩타이드 단위체를 암호화하는 핵산, 이때, 상기 펩타이드 단위체는 비표준 아미노산을 포함하지 않는 것을 특징으로 함.
실시예 98, 단위체 펩타이드 서열 한정
실시예 96 내지 실시예 97 중 어느 하나에 있어서, 다음에서 선택된 펩타이드 단위체를 암호화하는 핵산: RNVPPIFNDVYWIAFXXKXVAAWTLKAAXXCRFRGLISLSQVYLS(서열번호 198); RNVPPIFNDVYWIAFXXKXVAAWTLKAAXXGSHHHHHHGSDDDDK(서열번호 199); GSHHHHHHGSDDDDKXXKXVAAWTLKAAXXRNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 200); KTTKQSFDLSVKAQYKKNKHXXKXVAAWTLKAAXXCRFRGLISLSQVYLS(서열번호 201); RNVPPIFNDVYWIAFCRFRGLISLSQVYLSXXKXVAAWTLKAAXX(서열번호 202); RNVPPIFNDVYWIAFXPKYVKQNTLKLATXCRFRGLISLSQVYLS(서열번호 203); RNVPPIFNDVYWIAFXXKXVAAWTLKAAXX(서열번호 204); RNVPPIFNDVYWIAFKXVAAWTLKAA(서열번호 205); RNVPPIFNDVYWIAFKXVAAWTLKAAHHHHHH(서열번호 206); RNVPPIFNDVYWIAFXXKXVAAWTLKAACRFRGLISLSQVYLS(서열번호 207); RNVPPIFNDVYWIAFXXKXVAAWTLKAACR(서열번호 208); RNVPPIFNDVYWIAFXXKFVAAWTLKAAXXCRFRGLISLSQVYLS(서열번호 209); RNVPPIFNDVYWIAFXXKFVAAWTLKAAXX(서열번호 210); RNVPPIFNDVYWIAFXXKFVAAWTLKAACRFRGLISLSQVYLS(서열번호 211); 및 RNVPPIFNDVYWIAFXXKFVAAWTLKAACR(서열번호 212), 이때, 상기 X는 임의의 표준 아미노산을 의미한다.
실시예 99, 단위체 암호화 DNA 서열 한정
실시예 98에 있어서, 다음에서 선택된 서열로 표현되는 DNA:
5'-CGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTCNNNNNNAAGNNNGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCANNNNNNTGCCGTTTCCGTGGACTGATTTCCCTGTCCCAGGTTTATCTGTCC-3'(서열번호 248); 5'-CGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTCNNNNNNAAGTTCGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCANNNNNNTGCCGTTTCCGTGGACTGATTTCCCTGTCCCAGGTTTATCTGTCC-3'(서열번호 249); 5'-CGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTCNNNNNNAAGTATGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCANNNNNNTGCCGTTTCCGTGGACTGATTTCCCTGTCCCAGGTTTATCTGTCC-3'(서열번호 250); 5'-CGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTCNNNNNNAAGNNNGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCANNNNNNGGATCGCATCACCATCACCATCACGGATCCGATGATGATGACAAG-3'(서열번호 251); 5'-ACGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTCNNNNNNAAGTTCGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCANNNNNNGGATCGCATCACCATCACCATCACGGATCCGATGATGATGACAAG-3'(서열번호 252); 5'-CGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTCNNNNNNAAGTATGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCANNNNNNGGATCGCATCACCATCACCATCACGGATCCGATGATGATGACAAG-3'(서열번호 253); 5'-GGATCGCATCACCATCACCATCACGGATCCGATGATGATGACAAGNNNNNNAAGNNNGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCANNNNNNCGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTC-3'(서열번호 254); 5'-GGATCGCATCACCATCACCATCACGGATCCGATGATGATGACAAGNNNNNNAAGTTCGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCANNNNNNCGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTC-3'(서열번호 255); 5'-GGATCGCATCACCATCACCATCACGGATCCGATGATGATGACAAGNNNNNNAAGTATGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCANNNNNNCGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTC-3'(서열번호 256); 5'-AAAACGACAAAGCAATCATTTGATTTAAGTGTAAAAGCTCAGTATNNNNNNAAGNNNGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCANNNNNNTGCCGTTTCCGTGGACTGATTTCCCTGTCCCAGGTTTATCTGTCC-3'(서열번호 257); 5'-AAAACGACAAAGCAATCATTTGATTTAAGTGTAAAAGCTCAGTATNNNNNNAAGTTCGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCANNNNNNTGCCGTTTCCGTGGACTGATTTCCCTGTCCCAGGTTTATCTGTCC-3'(서열번호 258); 5'-AAAACGACAAAGCAATCATTTGATTTAAGTGTAAAAGCTCAGTATNNNNNNAAGTATGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCANNNNNNTGCCGTTTCCGTGGACTGATTTCCCTGTCCCAGGTTTATCTGTCC-3'(서열번호 259); 5'-CGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTCTGCCGTTTCCGTGGACTGATTTCCCTGTCCCAGGTTTATCTGTCCNNNNNNAAGNNNGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCANNNNNN-3'(서열번호 260); 5'-CGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTCTGCCGTTTCCGTGGACTGATTTCCCTGTCCCAGGTTTATCTGTCCNNNNNNAAGTTCGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCANNNNNN-3'(서열번호 261); 5'-CGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTCTGCCGTTTCCGTGGACTGATTTCCCTGTCCCAGGTTTATCTGTCCNNNNNNAAGTATGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCANNNNNN-3'(서열번호 262); 5'-CGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTCNNNCCTAAGTATGTGAAGCAGAATACACTGAAGCTGGCAACCNNNTGCCGTTTCCGTGGACTGATTTCCCTGTCCCAGGTTTATCTGTCC-3'(서열번호 263); 5'-CGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTCNNNNNNAAGNNNGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCANNNNNN-3'(서열번호 264); 5'-CGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTCNNNNNNAAGTTCGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCANNNNNN-3'(서열번호 265); 5'-CGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTCNNNNNNAAGTATGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCANNNNNN-3'(서열번호 266); 5'-CGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTCAAGNNNGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCA-3'(서열번호 267); 5'-CGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTCAAGTTCGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCA-3'(서열번호 268); 5'-CGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTCAAGTATGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCA-3'(서열번호 269); 5'-CGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTCAAGNNNGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCACATCACCATCACCATCAC-3'(서열번호 270); 5'-CGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTCAAGTTCGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCACATCACCATCACCATCAC-3'(서열번호 271); 5'-CGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTCAAGTATGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCACATCACCATCACCATCAC-3'(서열번호 272); 5'-CGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTCNNNNNNAAGNNNGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCATGCCGTTTCCGTGGACTGATTTCCCTGTCCCAGGTTTATCTGTCC-3'(서열번호 273); 5'-CGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTCNNNNNNAAGTTCGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCATGCCGTTTCCGTGGACTGATTTCCCTGTCCCAGGTTTATCTGTCC-3'(서열번호 274); 5'-CGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTCNNNNNNAAGTATGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCATGCCGTTTCCGTGGACTGATTTCCCTGTCCCAGGTTTATCTGTCC-3'(서열번호 275); 5'-CGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTCNNNNNNAAGNNNGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCATGCCGT-3'(서열번호 276); 5'-CGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTCNNNNNNAAGTTCGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCATGCCGT-3'(서열번호 277); 및 5'-CGTAATGTTCCTCCTATCTTCAATGATGTTTATTGGATTGCATTCNNNNNNAAGTATGTGGCAGCTTGGACCCTGAAGGCAGCATGCCGT-3'(서열번호 278).
실시예 100, 단위체 암호화 RNA 서열 한정
실시예 98에 있어서, 다음에서 선택된 서열로 표현되는 RNA:
5'-CGUAAUGUUCCUCCUAUCUUCAAUGAUGUUUAUUGGAUUGCAUUCNNNNNNAAGNNNGUGGCAGCUUGGACCCUGAAGGCAGCANNNNNNUGCCGUUUCCGUGGACUGAUUUCCCUGUCCCAGGUUUAUCUGUCC-3'(서열번호 279); 5'-CGUAAUGUUCCUCCUAUCUUCAAUGAUGUUUAUUGGAUUGCAUUCNNNNNNAAGUUCGUGGCAGCUUGGACCCUGAAGGCAGCANNNNNNUGCCGUUUCCGUGGACUGAUUUCCCUGUCCCAGGUUUAUCUGUCC-3'(서열번호 280); 5'-CGUAAUGUUCCUCCUAUCUUCAAUGAUGUUUAUUGGAUUGCAUUCNNNNNNAAGUAUGUGGCAGCUUGGACCCUGAAGGCAGCANNNNNNUGCCGUUUCCGUGGACUGAUUUCCCUGUCCCAGGUUUAUCUGUCC-3'(서열번호 281); 5'-CGUAAUGUUCCUCCUAUCUUCAAUGAUGUUUAUUGGAUUGCAUUCNNNNNNAAGNNNGUGGCAGCUUGGACCCUGAAGGCAGCANNNNNNGGAUCGCAUCACCAUCACCAUCACGGAUCCGAUGAUGAUGACAAG-3'(서열번호 282); 5'-CGUAAUGUUCCUCCUAUCUUCAAUGAUGUUUAUUGGAUUGCAUUCNNNNNNAAGUUCGUGGCAGCUUGGACCCUGAAGGCAGCANNNNNNGGAUCGCAUCACCAUCACCAUCACGGAUCCGAUGAUGAUGACAAG-3'(서열번호 283); 5'-CGUAAUGUUCCUCCUAUCUUCAAUGAUGUUUAUUGGAUUGCAUUCNNNNNNAAGUAUGUGGCAGCUUGGACCCUGAAGGCAGCANNNNNNGGAUCGCAUCACCAUCACCAUCACGGAUCCGAUGAUGAUGACAAG-3'(서열번호 284); 5'-GGAUCGCAUCACCAUCACCAUCACGGAUCCGAUGAUGAUGACAAGNNNNNNAAGNNNGUGGCAGCUUGGACCCUGAAGGCAGCANNNNNNCGUAAUGUUCCUCCUAUCUUCAAUGAUGUUUAUUGGAUUGCAUUC-3'(서열번호 285); 5'-GGAUCGCAUCACCAUCACCAUCACGGAUCCGAUGAUGAUGACAAGNNNNNNAAGUUCGUGGCAGCUUGGACCCUGAAGGCAGCANNNNNNCGUAAUGUUCCUCCUAUCUUCAAUGAUGUUUAUUGGAUUGCAUUC-3'(서열번호 286); 5'-GGAUCGCAUCACCAUCACCAUCACGGAUCCGAUGAUGAUGACAAGNNNNNNAAGUAUGUGGCAGCUUGGACCCUGAAGGCAGCANNNNNNCGUAAUGUUCCUCCUAUCUUCAAUGAUGUUUAUUGGAUUGCAUUC-3'(서열번호 287); 5'-AAAACGACAAAGCAAUCAUUUGAUUUAAGUGUAAAAGCUCAGUAUNNNNNNAAGNNNGUGGCAGCUUGGACCCUGAAGGCAGCANNNNNNUGCCGUUUCCGUGGACUGAUUUCCCUGUCCCAGGUUUAUCUGUCC-3'(서열번호 288); 5'-AAAACGACAAAGCAAUCAUUUGAUUUAAGUGUAAAAGCUCAGUAUNNNNNNAAGUUCGUGGCAGCUUGGACCCUGAAGGCAGCANNNNNNUGCCGUUUCCGUGGACUGAUUUCCCUGUCCCAGGUUUAUCUGUCC-3'(서열번호 289); 5'-AAAACGACAAAGCAAUCAUUUGAUUUAAGUGUAAAAGCUCAGUAUNNNNNNAAGUAUGUGGCAGCUUGGACCCUGAAGGCAGCANNNNNNUGCCGUUUCCGUGGACUGAUUUCCCUGUCCCAGGUUUAUCUGUCC-3'(서열번호 290); 5'-CGUAAUGUUCCUCCUAUCUUCAAUGAUGUUUAUUGGAUUGCAUUCUGCCGUUUCCGUGGACUGAUUUCCCUGUCCCAGGUUUAUCUGUCCNNNNNNAAGNNNGUGGCAGCUUGGACCCUGAAGGCAGCANNNNNN-3'(서열번호 291); 5'-CGUAAUGUUCCUCCUAUCUUCAAUGAUGUUUAUUGGAUUGCAUUCUGCCGUUUCCGUGGACUGAUUUCCCUGUCCCAGGUUUAUCUGUCCNNNNNNAAGUUCGUGGCAGCUUGGACCCUGAAGGCAGCANNNNNN-3'(서열번호 292); 5'-CGUAAUGUUCCUCCUAUCUUCAAUGAUGUUUAUUGGAUUGCAUUCUGCCGUUUCCGUGGACUGAUUUCCCUGUCCCAGGUUUAUCUGUCCNNNNNNAAGUAUGUGGCAGCUUGGACCCUGAAGGCAGCANNNNNN-3'(서열번호 293); 5'-CGUAAUGUUCCUCCUAUCUUCAAUGAUGUUUAUUGGAUUGCAUUCNNNCCUAAGUAUGUGAAGCAGAAUACACUGAAGCUGGCAACCNNNUGCCGUUUCCGUGGACUGAUUUCCCUGUCCCAGGUUUAUCUGUCC-3'(서열번호 294); 5'-CGUAAUGUUCCUCCUAUCUUCAAUGAUGUUUAUUGGAUUGCAUUCNNNNNNAAGNNNGUGGCAGCUUGGACCCUGAAGGCAGCANNNNNN-3'(서열번호 295); 5'-CGUAAUGUUCCUCCUAUCUUCAAUGAUGUUUAUUGGAUUGCAUUCNNNNNNAAGUUCGUGGCAGCUUGGACCCUGAAGGCAGCANNNNNN-3'(서열번호 296); 5'-CGUAAUGUUCCUCCUAUCUUCAAUGAUGUUUAUUGGAUUGCAUUCNNNNNNAAGUAUGUGGCAGCUUGGACCCUGAAGGCAGCANNNNNN-3'(서열번호 297); 5'-CGUAAUGUUCCUCCUAUCUUCAAUGAUGUUUAUUGGAUUGCAUUCAAGNNNGUGGCAGCUUGGACCCUGAAGGCAGCA-3'(서열번호 298); 5'-CGUAAUGUUCCUCCUAUCUUCAAUGAUGUUUAUUGGAUUGCAUUCAAGUUCGUGGCAGCUUGGACCCUGAAGGCAGCA-3'(서열번호 299); 5'-CGUAAUGUUCCUCCUAUCUUCAAUGAUGUUUAUUGGAUUGCAUUCAAGUAUGUGGCAGCUUGGACCCUGAAGGCAGCA-3'(서열번호 300); 5'-CGUAAUGUUCCUCCUAUCUUCAAUGAUGUUUAUUGGAUUGCAUUCAAGNNNGUGGCAGCUUGGACCCUGAAGGCAGCACAUCACCAUCACCAUCAC-3'(서열번호 301); 5'-CGUAAUGUUCCUCCUAUCUUCAAUGAUGUUUAUUGGAUUGCAUUCAAGUUCGUGGCAGCUUGGACCCUGAAGGCAGCACAUCACCAUCACCAUCAC-3'(서열번호 302); 5'-CGUAAUGUUCCUCCUAUCUUCAAUGAUGUUUAUUGGAUUGCAUUCAAGUAUGUGGCAGCUUGGACCCUGAAGGCAGCACAUCACCAUCACCAUCAC-3'(서열번호 303); 5'-CGUAAUGUUCCUCCUAUCUUCAAUGAUGUUUAUUGGAUUGCAUUCNNNNNNAAGNNNGUGGCAGCUUGGACCCUGAAGGCAGCAUGCCGUUUCCGUGGACUGAUUUCCCUGUCCCAGGUUUAUCUGUCC-3'(서열번호 304); 5'-CGUAAUGUUCCUCCUAUCUUCAAUGAUGUUUAUUGGAUUGCAUUCNNNNNNAAGUUCGUGGCAGCUUGGACCCUGAAGGCAGCAUGCCGUUUCCGUGGACUGAUUUCCCUGUCCCAGGUUUAUCUGUCC-3'(서열번호 305); 5'-CGUAAUGUUCCUCCUAUCUUCAAUGAUGUUUAUUGGAUUGCAUUCNNNNNNAAGUAUGUGGCAGCUUGGACCCUGAAGGCAGCAUGCCGUUUCCGUGGACUGAUUUCCCUGUCCCAGGUUUAUCUGUCC-3'(서열번호 306); 5'-CGUAAUGUUCCUCCUAUCUUCAAUGAUGUUUAUUGGAUUGCAUUCNNNNNNAAGNNNGUGGCAGCUUGGACCCUGAAGGCAGCAUGCCGU-3'(서열번호 307); 5'-CGUAAUGUUCCUCCUAUCUUCAAUGAUGUUUAUUGGAUUGCAUUCNNNNNNAAGUUCGUGGCAGCUUGGACCCUGAAGGCAGCAUGCCGU-3'(서열번호 308); 및 5'-CGUAAUGUUCCUCCUAUCUUCAAUGAUGUUUAUUGGAUUGCAUUCNNNNNNAAGUAUGUGGCAGCUUGGACCCUGAAGGCAGCAUGCCGU-3'(서열번호 309).
실시예 101, 벡터
실시예 96 내지 실시예 100 중 어느 하나의 핵산을 포함하는 벡터.
실시예 102, 벡터 한정
실시예 101에 있어서, 상기 벡터는 플라스미드, 레트로바이러스, 렌티바이러스, 아데노바이러스, 아데노-연관 바이러스, 백시니아바이러스, 폭스바이러스 및 단순포진 바이러스로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 벡터.
실시예 103, 포유류 코돈-최적화된 핵산
실시예 96 내지 실시예 98 중 어느 하나에 있어서, 상기 핵산은 포유류에서 선택된 종에 대해 코돈-최적화된 것을 특징으로 하는 핵산.
실시예 104, 인간 코돈-최적화된 핵산
실시예 96 내지 실시예 98 중 어느 하나에 있어서, 상기 핵산은 인간 코돈-최적화된 것을 특징으로 하는 핵산.
실시예 105, 원핵생물 코돈-최적화된 핵산
실시예 96 내지 실시예 98 중 어느 하나에 있어서, 상기 핵산은 원핵생물 중에서 선택된 종에 대해 코돈-최적화된 것을 특징으로 하는 핵산.
실시예 106, 대장균 코돈-최적화된 핵산
실시예 96 내지 98 중 어느 하나에 있어서, 상기 핵산은 대장균 코돈-최적화된 것을 특징으로 하는 핵산.
펩타이드를 포함하는 약학적 조성물
실시예 107, 면역치료용 약학적 조성물
다음을 포함하는 면역 치료용 약학적 조성물:
실시예 1 내지 실시예 90 중 어느 하나의 펩타이드 단위체, 및/또는 실시예 91 내지 실시예 95 중 어느 하나의 펩타이드; 및
어쥬번트(adjuvants).
실시예 108, 비만치료용 약학적 조성물
다음을 포함하는 비만 치료용 약학적 조성물:
실시예 1 내지 실시예 90 중 어느 하나의 펩타이드 단위체, 및/또는 실시예 91 내지 실시예 95 중 어느 하나의 펩타이드; 및
어쥬번트(adjuvants).
실시예 109, 어쥬번트 한정
실시예 107 내지 108 중 어느 하나에 있어서, 상기 어쥬번트는 물, 염수, 덱스트로즈, 에탄올, 글리세롤, 염화나트륨, 덱스트로즈, 만니톨, 솔비톨, 락토즈, 젤라틴, 알부민, 수산화알루미늄, 프로인트 불완전 보조제(Freund's Incomplete Adjuvant) 및 완전 항원보조제(Complete Adjuvant)(Pifco Laboratories, Detroit, Mich.), 머크 항원보강제 65(Merck and Company, Inc., Rahway, NJ.), Alhydrogel(Al(OH)3), 수산화알루미늄 겔(알룸), 또는 인산알루미늄과 같은 알루미늄 염, AS04 series, MF, squalene, MF59, QS21, 칼슘, 철 또는 아연염, 아실화 티로신의 불용성 현탁액, 아실화 과당, 양이온적으로 또는 음이온적으로 유도된 폴리사카라이드, 폴리포스파젠, 생분해성 미세구, 및 퀼(Quil) A, 톨-라이크 리셉터(TLR) 작용제, PHAD[Avanti polar lipid, Monophosphoryl Lipid A (synthetic)], 모노포스포릴 지질 A(MPL, monophosphoryl Lipid A), 합성 지질 A, 지질 A 모방체 또는 유사체, 알루미늄 염, 사이토카인, 사포닌, Prolactin, growth hormone deoxycholic acid, betaglucan, polyribonucleotides, 무라밀 다이펩타이드(MDP) 유도체, CpG 올리고, 그람-음성 박테리아의 리포폴리사카라이드(LPS), 폴리포스파젠, 에멀젼, 비로솜, 코크리트(cochleate), 폴리(락티드-코-글리콜리드)(PLG) 마이크로입자, 폴록사머 입자, 마이크로입자, 리포솜, 또는 이들의 적절한 조합인 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
암호화 핵산을 포함하는 약학적 조성물
실시예 110, 제형화 된 암호화 핵산
실시예 96 내지 실시예 106 중 어느 하나의 핵산을 바이러스 벡터 및/또는 비 바이러스 벡터를 사용해 제형화 한 것을 특징으로 하는 제형화 된 암호화 핵산.
실시예 111, 바이러스 벡터 한정
실시예 110에 있어서, 상기 바이러스 벡터는 다음에서 선택되는 것을 특징으로 하는 제형화 된 암호화 핵산:
레트로바이러스; 렌티바이러스; 아데노바이러스; 아데노-연관 바이러스; 백시니아바이러스; 폭스바이러스; 및 단순포진 바이러스.
실시예 112, 제형화 된 핵산 형태 한정
실시예 110에 있어서, 상기 제형화 된 핵산은 다음 중에서 선택되는 것을 특징으로 하는 제형화 된 핵산:
네이키드 핵산(naked nucleic acid); 양이온성 펩티드-복합 핵산(Protamine); 핵산을 포함하는 양전하를 띠는 oil-water 양이온 나노에멀젼(Cationic nanoemulsion); 화학적으로 변형된 덴드리머와 결합되고, 폴리에틸렌 글리콜(polyethylene glycol) 및 PEG-지질과 복합체화 된 핵산(Modified dendrimer nanoparticle); PEG-지질 나노 입자에서 프로타민과 복합된 핵산(Protamine liposome); polyethylenimine, PEI와 같은 양이온성 중합체와 복합된 핵산(Cationic polymer); PEI 및 지질 성분과 같은 양이온성 중합체와 복합된 핵산(Cationic polymer liposome); 키토산 같은 다당류 중합체와 복합된 핵산(Polysaccharide particle); 양이온성 지질 나노 입자 중합체와 복합된 핵산(Cationic lipid nanoparticle); 양이온성 지질 및 콜레스테롤과 복합된 핵산(Cationic lipid-cholesterol nanoparticle); 및 양이온성 지질 및 콜레스테롤 및 PEG-지질과 복합체화 된 핵산(Cationic lipid-cholesterol-PEG nanoparticle).
실시예 113, 제형화 된 핵산을 포함하는 면역치료용 약학적 조성물
다음을 포함하는 면역치료용 약학적 조성물:
실시예 100 내지 실시예 112 중 어느 하나의 제형화 된 핵산; 및
어쥬번트(adjuvants).
실시예 114, 제형화 된 핵산을 포함하는 비만치료용 약학적 조성물
다음을 포함하는 비만치료용 약학적 조성물:
실시예 100 내지 실시예 112 중 어느 하나의 제형화 된 핵산; 및
어쥬번트(adjuvants).
실시예 115, 어쥬번트 한정
실시예 113 내지 114 중 어느 하나에 있어서, 상기 어쥬번트는 다음에서 선택된 하나 이상인 것을 특징으로 하는 약학적 조성물:
지질 나노 입자(LNP); 알루미늄 염(aluminum salts); 1;2-dioleyl-3-trimethylammonium-propane chloride; MF59 (Novartis) adjuvant; CD70; CD40 ligand (CD40L); TriMix; TLR7 신호 전달을 통해 작용하는 프로타민; 및/또는 박테리아 유래 monophosphoryl lipid A.
실시예 116, 추가 성분 포함
실시예 113 내지 114 중 어느 하나에 있어서, 상기 약학적 조성물은 다음에서 선택된 하나 이상의 추가 성분(ingredients)을 포함하는 것을 특징으로 하는 약학적 조성물:
지질(lipids); 체내 산성도 균형을 이루기 위한 염(salts); 반복 동결-융해(freezing-thawing)시의 안정성 유지를 위한 수크로스(sucrose); 및 백신 안정성 향상 물질.
실시예 117, 추가 성분 한정
실시예 116에 있어서,
상기 지질은 SM-102, PEG2000-DMG, DPSC, cholesterol, 및 ALC-0315에서 선택된 하나 이상이고,
상기 염은 sodium acetate, potassium chloride, monobasic potassium phosphate, sodium chloride, 및 dibasic sodium phosphate dehydrate에서 선택된 하나 이상이고,
상기 백신 안정성 향상 물질은 acetic acid, acid stabilizer (tromethamine), 및 ethanol에서 선택된 하나 이상인 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
펩타이드의 용도
실시예 118, 면역 치료용도 (First medical use)
실시예 1 내지 실시예 90 중 어느 하나의 펩타이드 단위체, 실시예 91 내지 실시예 95 중 어느 하나의 펩타이드, 실시예 96 내지 실시예 106 중 어느 하나의 핵산, 및/또는 실시예 107 내지 실시예 109, 실시예 113 내지 실시예 117 중 어느 하나의 약학적 조성물의 면역 치료 용도.
실시예 119, 비만 치료용도 (First medical use)
실시예 1 내지 실시예 90 중 어느 하나의 펩타이드 단위체, 실시예 91 내지 실시예 95 중 어느 하나의 펩타이드, 실시예 96 내지 실시예 106 중 어느 하나의 핵산, 및/또는 실시예 107 내지 실시예 109, 실시예 113 내지 실시예 117 중 어느 하나의 약학적 조성물의 비만 치료 용도.
실시예 120, 면역 치료제 제조 용도 (Second medical use)
실시예 1 내지 실시예 90 중 어느 하나의 펩타이드 단위체, 실시예 91 내지 실시예 95 중 어느 하나의 펩타이드, 실시예 96 내지 실시예 106 중 어느 하나의 핵산, 및/또는 실시예 107 내지 실시예 109, 실시예 113 내지 실시예 117 중 어느 하나의 약학적 조성물의 면역 치료제 제조 용도.
실시예 121, 비만 치료제 제조 용도 (Second medical use)
실시예 1 내지 실시예 90 중 어느 하나의 펩타이드 단위체, 실시예 91 내지 실시예 95 중 어느 하나의 펩타이드, 실시예 96 내지 실시예 106 중 어느 하나의 핵산, 및/또는 실시예 107 내지 실시예 109, 실시예 113 내지 실시예 117 중 어느 하나의 약학적 조성물의 비만 치료제 제조 용도.
펩타이드를 사용하는 치료방법
실시예 122, 면역 치료 방법
다음을 포함하는 면역 치료 방법:
실시예 1 내지 실시예 90 중 어느 하나의 펩타이드 단위체, 실시예 91 내지 실시예 95 중 어느 하나의 펩타이드, 실시예 96 내지 실시예 106 중 어느 하나의 핵산, 및/또는 실시예 107 내지 실시예 109, 실시예 113 내지 실시예 117 중 어느 하나의 약학적 조성물을 대상의 체내에 투여하는 것.
실시예 123, 비만 치료 방법
다음을 포함하는 비만 치료 방법:
실시예 1 내지 실시예 90 중 어느 하나의 펩타이드 단위체, 실시예 91 내지 실시예 95 중 어느 하나의 펩타이드, 실시예 96 내지 실시예 106 중 어느 하나의 핵산, 및/또는 실시예 107 내지 실시예 109, 실시예 113 내지 실시예 117 중 어느 하나의 약학적 조성물을 대상의 체내에 투여하는 것.
펩타이드 단위체 및/또는 펩타이드와 유사한 서열
실시예 124, 펩타이드 단위체와 유사한 서열
실시예 1 내지 90 중 어느 하나의 펩타이드 단위체와 80% 이상, 81% 이상, 82% 이상, 83% 이상, 84% 이상, 85% 이상, 86% 이상, 87% 이상, 88% 이상, 89% 이상, 90% 이상, 91% 이상, 92% 이상, 93% 이상, 94% 이상, 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상, 99% 이상, 또는 100% 이상 일치하는 서열을 가지는 펩타이드 단위체.
실시예 125, 펩타이드와 유사한 서열
실시예 91 내지 95 중 어느 하나의 펩타이드와 80% 이상, 81% 이상, 82% 이상, 83% 이상, 84% 이상, 85% 이상, 86% 이상, 87% 이상, 88% 이상, 89% 이상, 90% 이상, 91% 이상, 92% 이상, 93% 이상, 94% 이상, 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상, 99% 이상, 또는 100% 이상 일치하는 서열을 가지는 펩타이드.
이하, 실험예 및 실시예를 통해 본 명세서가 제공하는 발명에 대해 더욱 상세히 설명한다. 이들 실시예는 오로지 본 명세서에 의해 개시되는 내용을 예시하기 위한 것으로, 본 명세서에 의해 개시되는 내용의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.
실험예 1 실험 방법
실험예 1.1 펩타이드 제조
본 펩타이드를 펩타이드 합성 회사 (애니젠, 한국, 광주시)에 의뢰하여 제조된 펩타이드를 얻었다. 본 발명의 펩타이드는 액상 펩타이드 합성법, 고상 펩타이드 합성법, 또는 작은 펩타이드 조각들의 결합법(convergent) 등과 같은 종래 알려진 기술들을 사용하여 합성할 수 있으며, 그 합성 방법은 제한되지 않는다. 예컨대, 본 발명의 OTP3 펩타이드는 작은 펩타이드 조각의 결합법(Convergent)을 이용하여 합성할 수 있는데, 이 방법은 긴 사슬의 펩타이드를 결합이 용이할 수 있는 부위를 가상으로 절단하고 이를 토대로 여러 부분을 각각 제조한 후 이를 서로 결합하여 최종적으로는 원하는 펩타이드를 합성하는 것이다. 상기의 Convergent 방법은 펩타이드 서열 내 특정 아미노산이 존재해야 하는 제약이 있으므로 solution phase synthesis 와 solid phase peptide synthesis 방법을 적절히 혼합한 combinatory peptide synthesis에 의해 효과적으로 합성할 수도 있다.
실험예 1.2 제조된 펩타이드 확인 1 - 순도 분석
실험예 1.1에서 제조된 펩타이드의 순도는 C-18 역상 컬럼(SHIMADZU C18 analytical column)을 이용한 HPLC 분석(Shimadzu HPLC LabSolutions)을 수행하여 측정하였다. 분석 조건은 60℃에서 시료를 0.05% Trifluoroactate (TFA)의 수용액 및 0.05% TFA Acetoitrile 용액으로 분리 전개한 후 230nm의 파장에 대한 피크 흡광도로 측정하여 순도를 확인하였다.
실험예 1.3 제조된 펩타이드 확인 2 - 분자량 분석
실험예 1.1에서 제조된 펩타이드의 분자량을 질량분석기(AXIMA Assurance, MALDI-TOF, Shimadzu)로 분석했다.
실험예 1.4 제조된 펩타이드 확인 3 - 정량 분석
실험예 1.1에서 제조된 펩타이드를 UV 흡광계수를 측정(Ultrospec 3000 Pro UV/VIS spectrophotometer, Pharmacia)하여 정량 했다. 구체적으로, 280nm 에서의 흡광계수를 이용하여 정량 했다.
실험예 1.5 체내 투여용 조성물 제조
체내 투여용 조성물을 실험예 1.1에서 제조된 펩타이드, Alhydrogel(Al(OH)3, InvivoGe사 제품), PHAD(Avanti사 제품)를 혼합하여 제조하였다. 구체적인 과정은 다음과 같다.
(1) 제조된 펩타이드 분말을 100% DMSO(dimethyl sulfoxide)에 녹여 100 mg/ml의 농도를 만들었다.
(2) (1)의 펩타이드-DMSO 용액에 PBS를 첨가하여, 펩타이드 농도가 50 mg/mL가 되도록 혼합했다.
(3) PHAD는 농도가 10mg/mL가 되도록 100% DMSO에 녹인 후, 증류수(Distilled water)로 1 mg/mL가 되도록 희석했다.
(4) (2)의 혼합물에 Alhydrogel adjuvant(Invivogen, USA) 및 상기 PHAD 용액을 첨가했다. 혼합 조성물의 농도는 1 dose 용량인 100 μL 당 상기 펩타이드는 50 μg, 상기 PHAD는 10 μg, 상기 Alhydrogel adjuvant는 10%(v/v)였다.
(5) (4)의 혼합물을 잘 섞은 후, 저온실(4℃)에서 회전기(rotator)로 저어주며 하룻밤(overnight) 반응시켰다.
(6) DSMO 세척을 위해, (5)의 반응물을 1400rpm에서 15분간 원심분리하고, pellet 위 1 mL 정도를 제외한 상층액을 제거했다. 그 후 PBS 10 mL를 첨가하여 섞었다.
(7) (6)의 세척 과정을 3회 반복했다.
(8) 마지막 세척 과정 후, PBS를 첨가하여 조성물의 최종 농도를 맞췄다. 이때, 상기 펩타이드 농도는 50 μg/100 μL(이때, 실시예 4의 경우 30 μg/100 μL), 상기 PHAD 농도는 10 μg/100 μL, 상기 Alhydrogel adjuvant는 10%(v/v)였다.
(9) Aluminum gel에 흡착된 펩타이드의 정량을 실험예 2.3에 기재된 방법에 따라 측정하였으며, 그 결과 95% 이상의 흡착률을 확인하고 실험에 사용했다.
실험예 1.6 실험 대상 준비
실험예 1.5에서 제조된 체내 투여용 조성물의 효과를 실험하기 위해, 실험 마우스로 C57BL/6, Balbc 및/또는 ICR 종들을 사용했다(구매처: 중앙실험동물). 종들 별로 다소 차이는 있지만, 평균적으로 7주령 마우스를 구매 후, 1주 간 순화기간을 거친 후, 8주령부터 실험에 사용하였다. 실험 마우스는 온도 23±1℃ 상대습도 50±5% 범위 내의 항온 항습 환경, 12시간 명실/12시간 암실로 조절되는 환경에서 사육했다. 식수와 식이는 자유 급식으로 공급했다. 정상 식이(구매처: 중앙실험동물)의 경우, 총 열량 기준 20% 단백질, 70% 탄수화물, 10% 지방으로 조성되어 있었으며, 비만 유도 식이(구매처: Research diets)의 경우 총 열량 기준 20% 단백질, 20% 탄수화물, 60% 지방으로 조성된 고지방 식이로 구성되었다. 실험 마우스를 각 군으로 나누어 식이 조건 및 조성물 투여 조건을 달리했으며, 각 실험군 별 통계처리 가능한 정도의 개체수를 가지고 실험했다. 자세한 조건은 구체적인 각 실험예에 개시된 바와 같다.
실험예 1.7 실험 대상에 펩타이드를 포함하는 조성물 투여
실험예 1.6에서 준비된 실험 대상에 대해, 실험군 별로 조성물을 달리하여 투여했다. 모든 투여 조성물은 근육주사법으로, 마우스 양쪽 허벅지 근육에 알코올 솜으로 소독한 후, 각 50 μL씩, 총 100 μL 주사하였다.
실험예 1.8 체내 투여용 조성물의 효과 확인 1 - 체중 측정
실험예 1.7에 의해 투여된 체내 투여 조성물의 실험 대상에 대한 체중 감량 효과를 확인하기 위해 각 실험군 별로 체중 및 장기 무게를 측정하였다. 마우스의 실험군 별로 마우스 입고 시부터 실험 종료 시까지 주당 3번 측정 후 평균을 계산하여 주령별 평균 무게 값을 구하였다. 실험 완료 후 각각의 마우스를 마취시킨 후 해부를 통해 장기를 분리하여 무게를 측정한 후 실험 그룹 별로 평균을 구하였다.
실험예 1.9 체내 투여용 조성물의 효과 확인 2 - 항체 역가 확인
실험예 1.7에 의해 투여된 체내 투여 조성물이 B-cell 에피토프에 대한 항체를 유도했는지 확인하기 위해, 대상 항원을 사용하여 항체 역가를 확인하는 방법은 다음과 같다. 이때, 상기 대상 항원은 RNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 6) 또는 ApoB100이다. 항체 역가를 확인하는 시기는 필요에 따라 달라질 수 있으며, 각 실험예 별로 구체적으로 기재하였다.
1. 항원 코팅 반응 과정
1-1) 실험 대상에 체내 투여용 조성물을 주사할 때마다, 주사 일주일 후, 대상의 꼬리 정맥에서 약 200 μL의 혈액을 채혈한다.
1-2) 채혈한 혈액을 4℃에서 한 시간 방치한 후, 14,000rpm에서 10분간 원심분리를 수행하여 상등액인 혈청을 분리한다.
1-3) 대상 항원을 coating buffer(0.05M, Bicarbonate, pH9.6)에 50 μg/100 μL농도가 되도록 희석하여 96-well plate에 well 당 50 μg 첨가하고, 4℃에서 하룻밤(overnight) 반응시켜 상기 펩타이드가 well 벽에 코팅되도록 한다.
1-4) 상기 대상 항원이 코팅된 plate를 well 당 300 μL의 PBS-T(Phosphate Buffered Saline, 0.05% with Tween-20)을 사용해 3회 세척한다.
2. blocking 반응 과정
2-1) 상기 plate에 0.5% casein blocking 용액을 well 당 300 μL 첨가하고, 4℃에서 하룻밤(overnight) 반응시킨다.
2-2) 상기 plate를 well 당 300 μL의 PBS-T을 사용해 3회 세척한다.
3. 1차 항체 반응 과정
3-1) 1차 항체 반응으로, 분리한 혈청을 적정 농도로 희석, well 당 100 μL 첨가하고, 37℃에서 한시간 반응시켰다. 이때, 상기 혈청은 초기 주사 이후 실험 시 1/20 내지 1/1000, 2 내지 3회차 주사 이후 실험 시 개체에 따라 1/500 내지 1/10000로 희석하여 serial dilution을 수행했다. 양성 대조군으로는 상기 서열번호 41의 펩타이드에 대해 단일클론항체를 정제하여 사용한다.
3-2) 3-1의 반응 후, 상기 plate에 대해 well 당 300 μL의 PBS-T을 사용해 3회 세척한다.
4. 2차 항체 반응 과정
4-1) 2차 항체 반응으로, 마우스 항체를 인식하는 anti-mouse IgG 항체에 HRP(horseradish peroxidase)가 결합된 것을 well 당 100 μL 첨가하고, 37℃에서 한시간 반응시킨다.
4-2) 4-1)의 반응 후, 상기 plate에 대해 well 당 300 μL의 PBS-T을 사용해 3회 세척한다.
5. 발색 및 흡광도 확인 과정
5-1) OPD 용액(o-phenylenediamine dihydrochloride solution)을 well 당 100 μL 첨가하여 37℃에서 10분간 반응시킨 후, O.D 450nm에서 흡광도를 측정(Synergy HT microplate reader, BioTek)한다.
5-2) 혈청 내 항체 역가는 양성 대조군인 상기 대상 항체에 대한 단일클론항체의 1 mg/mL 농도를 기준으로 흡광계수를 측정하여 환산한다.
실험예 1.10 체내 투여용 조성물의 효과 확인 3 - 혈중 지질 농도 확인
실험예 1.7에서 투여된 체내 투여 조성물이 실험 대상의 혈중 지질 농도에 미치는 영향을 알아보기 위한 실험 방법은 다음과 같다:
(1) 매 조성물 투여 일주일 후, 대상의 꼬리 정맥에서 약 200 μL의 혈액을 채혈한다.
(2) 혈중 트리글리세라이드(TG, Triglyceride) 농도 측정: Triglyzyme-V(신약화학약품주식회사)를 사용하였다. i) 혈액 샘플 4 μL 및 발색시약 300 μL를 섞은 후, 37℃에서 5분간 반응시켰다. ii) 생성된 적색 Quinone에 대해, 505nm에서 흡광도를 측정하고, 기준액과 비교하여 농도를 계산한다.
(3) 혈중 총 콜레스테롤 농도 측정: Cholestezyme-V(신약화학약품주식회사)를 사용하였다. i) 혈액 샘플 4 μL 및 발색시약 300 μL를 섞은 후, 37℃에서 5분간 반응시켰다. ii) 생성된 적색 Quinone에 대해, 505nm에서 흡광도를 측정하고, 기준액과 비교하여 농도를 계산한다.
(4) 혈중 HDL(high density lipoprotein) 농도 측정: HDL-C555(신약화학약품주식회사)를 사용하였다. i) 혈액 샘플 10 μL 및 침전시약 10 μL를 섞은 후, 상온에서 10분 이상 반응시켰다. ii) 반응물을 300rpm 이상에서 원심분리하고, 상층액을 분리했다. iii) 상층액 4 μL와 발색시약 300 μL를 섞은 후, 37℃에서 5분간 반응시켰다. iv) 상기 반응물에 대해, 555nm에서 흡광도를 측정하고, 기준액과 비교하여 농도를 계산한다.
(5) 혈중 LDL(low density lipoprotein) 농도 측정: i) Direct LDL Cholesterol detection kit(Randox)를 사용하여 반응을 진행했다. ii) 2단계의 반응 후, 생성된 Quinone에 대해, 600nm에서 흡광도를 측정하고, 기준액과 비교하여 농도를 계산한다.
실험예 1.11 체내 투여용 조성물의 효과 확인 4 - 지방 분해능 확인 및 지방 세포 크기 비교
실험예 1.7에 의해 투여된 체내 투여 조성물이 실험 대상의 HSL(Hormon sensitive lipase)에 의한 지방 세포 분해능 및 지방 세포 크기에 미치는 영향을 알아보기 위한 방법은 다음과 같다:
1. 지방세포 분리
1-1) Epididymal fat pad를 가위로 잘게 썰어준 후 2% FBS, 2 mM glucose, 1mg/ml collagenase가 첨가된 KRB buffer를 1 g당 4 ml를 넣고 흔들어주며 37℃에서 1시간동안 반응시킨다.
1-2) 반응이 완료되면 300 μm nylon mesh를 통과시켜 지방조직 찌꺼기 및 지방조직을 걸러준 후, 40 μm nylon mesh에 다시 통과시켜 지방세포와 대식세포를 분리한다.
1-3) 1-2)에서 걸러진 지방세포를 10% FBS, 1% AA가 첨가된 DMEM을 첨가하여 하층액을 주사기로 제거하는 방식으로 세척해 collagenase가 제거된 지방세포를 수득한다.
2. 지방 분해능 비교
2-1) 1-3)에서 얻은 지방세포를 48 well plate에 well 당 1.0 x 105개를 시딩(seeding)하고, 배양을 위해 DMEM (10% FBS, 1% AA)을 총 1 ml을 넣어 37℃, CO2 조건 하 2 시간동안 배양한다.
2-2) HSL 활성을 유도할 well에 대해, 노르에피네프린(norepinephrine)을 최종 10-5 M이 되도록 넣어준다.
2-3) 반응이 끝나면 각 well의 상층액 100 μL 와 free glycerol reagent 100μL를 반응시켜 540 nm에 대한 흡광도를 측정한다.
3. 지방 세포 크기 관찰
3-1) 1-3)에서 얻은 지방세포를 48 well plate에 well당 1.0 x 105 cells/ml로 시딩(seeding)하고, DAPI를 10 μM 처리하여 2 시간 반응시킨 후 현미경으로 관찰한다.
3-2) DAPI 염색된 세포가 지방세포임을 확인하기 위해 Lipid와 핵을 같이 염색하여 관찰하였다. 이때 DAPI를 10 uM, HCS LipidTOX를 1:1000으로 처리하여 24시간 반응시킨 후 현미경으로 관찰한다.
실험예 2 펩타이드 효과 확인 1
실험예 2.1 펩타이드 준비 및 실험
실험예 1.1에 따라 [표 1]에 따른 펩타이드를 제조한 후, 실험예 1.2 내지 실험예 1.4에 따라 제조된 펩타이드를 확인했다. 실험예 1.5에 따라 [표 1]에 따른 펩타이드를 포함하는 체내 투여용 조성물을 제조했다.
[표 1] 실험예 2에 사용된 펩타이드 및 이를 포함하는 체내 투여용 조성물
Figure PCTKR2021009453-appb-I000001
실험예 1.6에 따라 [표 2]에 나타낸 실험 대상을 준비했다.
[표 2] 실험예 2에 사용된 실험 대상
Figure PCTKR2021009453-appb-I000002
실험예 1.7에 따라 상기 실험 대상에 상기 체내 투여용 조성물을 투여했다. 이때, 투여 주기는 다음과 같았다: 7주, 9주, 12주, 15주 및 18주령.
실험예 2.2 실험 결과 확인
실험예 2.1의 실험 결과를 확인하기 위해, 실험예 1.8에 따라 [표 2]에 개시된 각 실험군 별로 실험 대상의 체중을 측정했다.
상기 실험 결과를 도 1 내지 도 3에 도시했다.
실험예 3 펩타이드 효과 확인 2
실험예 3.1 펩타이드 준비 및 실험
실험예 1.1에 따라 [표 3]에 따른 펩타이드를 제조한 후, 실험예 1.2 내지 실험예 1.4에 따라 제조된 펩타이드를 확인했다. 실험예 1.5에 따라 [표 3]에 따른 펩타이드를 포함하는 체내 투여용 조성물을 제조했다.
[표 3] 실험예 3에 사용된 펩타이드 및 이를 포함하는 체내 투여용 조성물
Figure PCTKR2021009453-appb-I000003
실험예 1.6에 따라 [표 4]에 나타낸 실험 대상을 준비했다.
[표 4] 실험예 3에 사용된 실험 대상
Figure PCTKR2021009453-appb-I000004
이때, Lean은 정상 체중 대조군, Obese는 고지방 식이에 의해 유도된 비만군, Mock은 위약 투여군을 나타낸다 (이하 동일).
실험예 1.7에 따라 상기 실험 대상에 상기 체내 투여용 조성물을 투여했다. 이때, 투여 주기는 다음과 같았다: 8주, 10주, 12주 및 14주령.
실험예 3.2 실험 결과 확인
실험예 3.1의 실험 결과를 확인하기 위해, [표 4]에 개시된 각 실험군 별로 실험 대상에 대해 다음과 같은 실험을 수행했다.
(1) 실험예 1.8에 따라 각 실험군 별 실험 대상의 체중을 측정했다.
(2) 실험예 1.9에 따라 각 실험군 별 실험 대상에게서 나타나는 항체 역가를 확인했다.
(3) 실험예 1.10에 따라 각 실험군 별 실험 대상의 혈중 지질 농도를 측정했다.
(4) 실험예 1.11에 따라 각 실험군 별 실험 대상의 지방 분해능을 확인했고, 지방 세포 크기를 관찰했다.
상기 실험 결과를 도 4 내지 도 9에 도시했다.
실험예 4 펩타이드 효과 확인 3
실험예 4.1 펩타이드 준비 및 실험
실험예 1.1에 따라 [표 5]에 따른 펩타이드를 제조한 후, 실험예 1.2 내지 실험예 1.4에 따라 제조된 펩타이드를 확인했다. 실험예 1.5에 따라 [표 5]에 따른 펩타이드를 포함하는 체내 투여용 조성물을 제조했다.
[표 5] 실험예 4에 사용된 펩타이드 및 이를 포함하는 체내 투여용 조성물
Figure PCTKR2021009453-appb-I000005
이때, Example.4의 경우 펩타이드 최종 농도는 30 μg/100 μL였다.
실험예 1.6에 따라 [표 6]에 나타낸 실험 대상을 준비했다.
[표 6] 실험예 4에 사용된 실험 대상
Figure PCTKR2021009453-appb-I000006
실험예 1.7에 따라 상기 실험 대상에 상기 체내 투여용 조성물을 투여했다. 이때, 투여 주기는 다음과 같았다: 8주, 11주, 14주, 17주, 및 20주령.
실험예 4.2 실험 결과 확인
실험예 4.1의 실험 결과를 확인하기 위해, [표 6]에 개시된 각 실험군 별로 실험 대상에 대해 다음과 같은 실험을 수행했다.
(1) 실험예 1.8에 따라 각 실험군 별 실험 대상의 체중을 측정했다.
(2) 실험예 1.9에 따라 각 실험군 별 실험 대상에게서 나타나는 항체 역가를 확인했다.
상기 실험 결과를 도 10 내지 도 11에 도시했다.
실험예 5 펩타이드 효과 확인 4
실험예 5.1 펩타이드 준비 및 실험
실험예 1.1에 따라 [표 7]에 따른 펩타이드를 제조한 후, 실험예 1.2 내지 실험예 1.4에 따라 제조된 펩타이드를 확인했다. 실험예 1.5에 따라 [표 7]에 따른 펩타이드를 포함하는 체내 투여용 조성물을 제조했다.
[표 7] 실험예 5에 사용된 펩타이드 및 이를 포함하는 체내 투여용 조성물
Figure PCTKR2021009453-appb-I000007
실험예 1.6에 따라 [표 8]에 나타낸 실험 대상을 준비했다.
[표 8] 실험예 5에 사용된 실험 대상
Figure PCTKR2021009453-appb-I000008
실험예 1.7에 따라 상기 실험 대상에 상기 체내 투여용 조성물을 투여했다. 이때, 투여 주기는 다음과 같았다: 11주, 13주, 15주, 및 17주령.
실험예 5.2 실험 결과 확인
실험예 5.1의 실험 결과를 확인하기 위해, 실험예 1.8에 따라 [표 8]에 개시된 각 실험군 별로 실험 대상의 체중을 측정했다.
상기 실험 결과를 도 12에 도시했다.
실험예 6 펩타이드 효과 확인 5
실험예 6.1 펩타이드 준비 및 실험
실험예 1.1에 따라 [표 9]에 따른 펩타이드를 제조한 후, 실험예 1.2 내지 실험예 1.4에 따라 제조된 펩타이드를 확인했다. 실험예 1.5에 따라 [표 9]에 따른 펩타이드를 포함하는 체내 투여용 조성물을 제조했다.
[표 9] 실험예 6에 사용된 펩타이드 및 이를 포함하는 체내 투여용 조성물
Figure PCTKR2021009453-appb-I000009
실험예 1.6에 따라 [표 10]에 나타낸 실험 대상을 준비했다.
[표 10] 실험예 6에 사용된 실험 대상
Figure PCTKR2021009453-appb-I000010
* C57BL/6J-Rag2em1hwl/Korl 마우스는 C57BL/6J 마우스에서 항체 생성 능력에 관여하는 유전자인 Rag2 유전자를 녹아웃(Knock-out)시킨 마우스이다.
** Wild(+/+)는 유전자가 변이되지 않은 야생형 마우스, Hetero(+/-)는 이형접합자(heterozygote) 마우스, Homo(-/-)는 동형접합자(homozygote) 마우스를 의미한다.
*** Homo(-/-) 마우스의 경우 체내 항체 생성 능력이 없다.
실험예 1.7에 따라 상기 실험 대상에 상기 체내 투여용 조성물을 투여했다. 이때, 투여 주기는 다음과 같았다: 8주, 10주, 12주, 및 14주령.
실험예 6.2 실험 결과 확인
실험예 6.1의 실험 결과를 확인하기 위해, 실험예 1.8에 따라 [표 10]에 개시된 각 실험군 별로 실험 대상의 체중을 측정했다.
상기 실험 결과를 도 13에 도시했다.
실험예 7 펩타이드 효과 확인 6
실험예 7.1 펩타이드 준비 및 실험
실험예 1.1에 따라 [표 11]에 따른 펩타이드를 제조한 후, 실험예 1.2 내지 실험예 1.4에 따라 제조된 펩타이드를 확인했다. 실험예 1.5에 따라 [표 11]에 따른 펩타이드를 포함하는 체내 투여용 조성물을 제조했다.
[표 11] 실험예 7에 사용된 펩타이드 및 이를 포함하는 체내 투여용 조성물
Figure PCTKR2021009453-appb-I000011
실험예 1.6에 따라 [표 12]에 나타낸 실험 대상을 준비했다.
[표 12] 실험예 7에 사용된 실험 대상
Figure PCTKR2021009453-appb-I000012
실험예 1.7에 따라 상기 실험 대상에 상기 체내 투여용 조성물을 투여했다. 이때, 투여 주기는 다음과 같았다: 8주, 10주, 12주, 및 14주령.
실험예 7.2 실험 결과 확인
실험예 7.1의 실험 결과를 확인하기 위해, [표 12]에 개시된 각 실험군 별로 실험 대상에 대해 다음과 같은 실험을 수행했다.
(1) 실험예 1.8에 따라 각 실험군 별 실험 대상의 체중을 측정했다.
(2) 실험예 1.9에 따라 11주, 16주, 및 19주차에 각 실험군 별 실험 대상에게서 나타나는 항체 역가를 확인했다. 이때, 대상 항원은 RNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 6)를 사용하여 측정했다.
상기 실험 결과를 도 14 내지 도 25에 도시했다.
실험 결과, 실험군 6-1 (P1) 내지 실험군 6-9 (P9) 모두 고지방식이를 한 대조군(Obese)에 비해 뚜렷한 체중 감소 효과를 나타내었다.
각 실험군에 따른 항체 역가 실험 결과는 다음과 같이 해석된다:
대조군인 Lean 및 Obese에는 항원을 투여하지 않았기 때문에, 항체 역가가 나타나지 않았다.
실험 설계를 고려하여, 실험군에서는 사용한 펩타이드 내에 포함된 서열번호 6에 대한 항체 역가를 중심으로 확인하였다. 비록 사용한 펩타이드 내에 포함된 서열번호 6 이외의 다른 서열에 대한 항체 역가를 별도로 확인하지는 않았지만, 이들에 의한 체액성 면역반응으로 인한 체중 감소 효과는 함께 확인하였다.
이하 구체적인 결과를 설명한다.
실험군 6-1 (P1)의 경우, 개체에 따라 항체 역가가 크게 나타난 개체가 있었고, 항체 역가가 나타나지 않은 개체도 존재했다. 이는, 상기 실험군 6-1 (P1)의 일부 개체에 대해서는 실시예 6에 포함된 RNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 6)에 대한 체액성 면역반응이 유도되어 체중 감소 효과 및 항체 역가가 모두 나타나고, 일부 개체에 대해서는 실시예 6에 포함된 CRFRGLISLSQVYLS(서열번호 7)에 대한 체액성 면역반응이 유도되어 체중 감소 효과는 나타나지만, Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) (면역효소흡착분석법)에 사용한 항원은 RNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 6)으로만 이뤄져 있고 다른 항원 즉, 서열번호7의 항원이 존재하지 않았기 때문에, 항체가 존재하여도 상기 실험에 따른 항체 역가는 나타나지 않은 것으로 해석할 수 있다.
실험군 6-2 (P2)의 경우, 실시예 7에 포함된 RNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 6)에 대한 항체 역가가 나타나고, 체중 감소 효과가 나타나므로, 실시예 7의 펩타이드에 포함된 B-cell 에피토프가 이에 대한 체액성 면역반응을 잘 유도했음을 볼 수 있다.
실험군 6-3 (P3)의 경우, 실시예 8에 포함된 RNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 6)에 대한 항체 역가가 나타나고, 체중 감소 효과가 나타나므로, 실시예 8의 펩타이드에 포함된 B-cell 에피토프가 이에 대한 체액성 면역반응을 잘 유도했음을 볼 수 있다.
실험군 6-4 (P4)의 경우, 실시예 9에 포함된 KTTKQSFDLSVKAQYKKNKH(서열번호 8) 및/또는 CRFRGLISLSQVYLS(서열번호 7)에 대한 체액성 면역반응이 유도되어, RNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 6)에 대한 항체 역가는 나타나지 않지만, 체중 감소 효과는 나타나는 것으로 해석할 수 있다.
실험군 6-5 (P5)의 경우, 개체에 따라 항체 역가가 크게 나타난 개체가 있었고, 항체 역가가 나타나지 않은 개체도 존재했다. 이는, 상기 실험군 6-5 (P5)의 일부 개체에 대해서는 실시예 10에 포함된 RNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 6)에 대한 체액성 면역반응이 유도되어 체중 감소 효과 및 항체 역가가 모두 나타나고, 일부 개체에 대해서는 실시예 10에 포함된 CRFRGLISLSQVYLS(서열번호 7)에 대한 체액성 면역반응이 유도되어 체중 감소 효과는 나타나지만, 상기 실험에 따른 항체 역가는 나타나지 않은 것으로 해석할 수 있다.
실험군 6-7 (P7)의 경우, 개체 별로 다소 차이는 있지만 RNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 6)에 대한 항체가 나타나고, 체중 감소 효과가 나타나므로, 실시예 11의 펩타이드에 포함된 B-cell 에피토프가 이에 대한 체액성 면역반응을 잘 유도했음을 볼 수 있다.
실험군 6-8 (P8)의 경우, 실시예 12에 포함된 RNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 6)에 대한 항체 역가가 나타나고, 체중 감소 효과가 나타나므로, 실시예 12의 펩타이드에 포함된 B-cell 에피토프가 이에 대한 체액성 면역반응을 잘 유도했음을 볼 수 있다.
실험군 6-9 (P9)의 경우, 개체 별로 다소 차이는 있지만 RNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 6)에 대한 항체가 나타나고, 체중 감소 효과가 나타나므로, 실시예 13의 펩타이드에 포함된 B-cell 에피토프가 이에 대한 체액성 면역반응을 잘 유도했음을 볼 수 있다.
실험예 8 펩타이드 효과 확인 7
실험예 8.1 펩타이드 준비 및 실험
실험예 1.1에 따라 [표 13]에 따른 펩타이드를 제조한 후, 실험예 1.2 내지 실험예 1.4에 따라 제조된 펩타이드를 확인한다. 실험예 1.5에 따라 [표 13]에 따른 펩타이드를 포함하는 체내 투여용 조성물을 제조한다.
[표 13] 실험예 8에 사용할 펩타이드 및 이를 포함하는 체내 투여용 조성물
Figure PCTKR2021009453-appb-I000013
실험예 1.6에 따라 [표 14]에 나타낸 실험 대상을 준비한다.
[표 14] 실험예 8에 사용할 실험 대상
Figure PCTKR2021009453-appb-I000014
실험예 1.7에 따라 상기 실험 대상에 상기 체내 투여용 조성물을 투여한다. 이때, 실험 설계에 따라 투여 주기, 투여 시기 및 투여 횟수는 적절히 변형될 수 있다. 예를 들어, 8주령의 실험 대상에 대해 2주 간격으로 4회 투여할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 실험 방법은 필요에 따라 적절히 변형될 수 있다.
실험예 8.2 실험 결과 확인
실험예 8.1의 실험 결과를 확인하기 위해, [표 14]에 개시된 각 실험군 별로 실험 대상에 대해 다음과 같은 실험을 수행한다.
(1) 실험예 1.8에 따라 각 실험군 별 실험 대상의 체중을 측정한다.
(2) 실험예 1.9에 따라 각 실험군 별 실험 대상에게서 나타나는 항체 역가를 확인한다.
(3) 실험예 1.10에 따라 각 실험군 별 실험 대상의 혈중 지질 농도를 측정한다.
(4) 실험예 1.11에 따라 각 실험군 별 실험 대상의 지방 분해능을 확인하고, 지방 세포 크기를 관찰한다.
실험예 9 펩타이드 효과 확인 8
실험예 9.1 펩타이드 준비 및 실험
실험예 1.1에 따라, 다음으로 이뤄진 군에서 선택된 하나 이상의 서열로 표현되는 펩타이드를 제조한다: 서열번호 56 내지 158, 서열번호 160 내지 161, 및 서열번호 198 내지 220.
실험예 1.2 내지 실험예 1.4에 따라 상기 제조된 펩타이드를 확인한다. 실험예 1.5에 따라 상기 제조된 펩타이드를 포함하는 체내 투여용 조성물을 제조한다.
이때, 상기한 서열 군에서 일부 서열만 선택하여 펩타이드를 제조할 수 있으며, 필요에 따라 여러 조합을 가지고 반복 실험할 수 있다.
실험예 1.6에 따라 상기 제조된 펩타이드에 대한 실험 대상을 준비한다. 이때, 사용될 대조군 및 실험군 예시는 [표 15]에 나타낸 바와 같으며, 각각의 실험군은 실험예 1.6 및 [표 15]의 조건을 참조하여 결정한다.
[표 15] 실험예 9에 사용할 실험 대상
Figure PCTKR2021009453-appb-I000015
이때, 상기 실험군(Experimental group)은 상기 제조한 펩타이드의 수 만큼 준비한다.
실험예 1.7에 따라 상기 실험 대상에 상기 체내 투여용 조성물을 투여한다. 이때, 실험 설계에 따라 투여 주기, 투여 시기 및 투여 횟수는 적절히 변형될 수 있다. 예를 들어, 8주령의 실험 대상에 대해 2주 간격으로 4회 투여할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 실험 방법은 필요에 따라 적절히 변형될 수 있다.
실험예 9.2 실험 결과 확인
실험예 9.1의 실험 결과를 확인하기 위해, 각 실험군 별로 실험 대상에 대해 다음과 같은 실험을 수행한다.
(1) 실험예 1.8에 따라 각 실험군 별 실험 대상의 체중을 측정한다.
(2) 실험예 1.9에 따라 각 실험군 별 실험 대상에게서 나타나는 항체 역가를 확인한다.
(3) 실험예 1.10에 따라 각 실험군 별 실험 대상의 혈중 지질 농도를 측정한다.
(4) 실험예 1.11에 따라 각 실험군 별 실험 대상의 지방 분해능을 확인하고, 지방 세포 크기를 관찰한다.
실험예 10 펩타이드 효과 확인 9
실험예 10.1 펩타이드 준비 및 실험
실험예 1.1에 따라, "발명의 가능한 실시예" 단락의 실시예 81 내지 실시예 90에 따른 펩타이드를 제조한 후, 실험예 1.2 내지 실험예 1.4에 따라 제조된 펩타이드를 확인한다. 실험예 1.5에 따라, 상기 제조한 펩타이드를 포함하는 체내 투여용 조성물을 제조한다.
이때, "발명의 가능한 실시예" 단락의 실시예 81 내지 실시예 90에 따른 펩타이드중 일부만을 선택하여 제조할 수 있으며, 필요에 따라 여러 조합을 가지고 반복 실험할 수 있다.
실험예 1.6에 따라 상기 제조한 펩타이드에 대한 실험 대상을 준비한다. 이때, 사용될 대조군 및 실험군은 실험예 1.6 및 [표 15]의 조건을 참조하여 결정한다.
실험예 1.7에 따라 상기 실험 대상에 상기 체내 투여용 조성물을 투여한다. 이때, 실험 설계에 따라 투여 주기, 투여 시기 및 투여 횟수는 적절히 변형될 수 있다. 예를 들어, 8주령의 실험 대상에 대해 2주 간격으로 4회 투여할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 실험 방법은 필요에 따라 적절히 변형될 수 있다.
실험예 10.2 실험 결과 확인
실험예 10.1의 실험 결과를 확인하기 위해, 상기 실험예 10.1에서 사용한 각 실험군 별로 실험 대상에 대해 다음과 같은 실험을 수행한다.
(1) 실험예 1.8에 따라 각 실험군 별 실험 대상의 체중을 측정한다.
(2) 실험예 1.9에 따라 각 실험군 별 실험 대상에게서 나타나는 항체 역가를 확인한다.
(3) 실험예 1.10에 따라 각 실험군 별 실험 대상의 혈중 지질 농도를 측정한다.
(4) 실험예 1.11에 따라 각 실험군 별 실험 대상의 지방 분해능을 확인하고, 지방 세포 크기를 관찰한다.
본 명세서에서 제공하는 펩타이드 단위체, 펩타이드, 및/또는 이를 암호화하는 핵산은 면역치료제, 특히 비만치료제를 제조하는 데 이용될 수 있으며, 상기 면역치료제는 대상의 체내에 투여되어 의도한 체액성 면역반응을 일으킴으로써 치료 효과를 낼 수 있다.

Claims (26)

  1. 23mer 내지 71mer 길이의 펩타이드 단위체로, 다음 [구조식 1]로 표현되는, CD4+ T세포에 의해 인식되어 아포지단백 B-100(Apolipoprotein B-100)을 표적하는 항체를 유도할 수 있는 펩타이드 단위체:
    [구조식 1]
    N-B-A1-T-A2-C
    이때, 상기 B는 아포지단백 B-100에 대한 B-cell 에피토프로, RNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 6), CRFRGLISLSQVYLS(서열번호 7), KTTKQSFDLSVKAQYKKNKH(서열번호 8)에서 선택된 서열, 또는 상기 선택된 서열과 90% 이상 일치하는 서열을 가지고,
    상기 A1은 제1 보조부이거나 부존재하며, 상기 제1 보조부는 Za, 또는 Z이고,
    상기 T는 Helper-T-cell 에피토프(Th 에피토프)로, K(Cha)VAAWTLKAA(서열번호 1), PKYVKQNTLKLAT(서열번호 2), ILMQYIKANSKFIGI(서열번호 3), QSIALSSLMVAQAIP(서열번호 4), ILMQYIKANSKFIGIPMGLPQSIALSSLMVAQ(서열번호 5), PLGFFPDHQL(서열번호 162), WPEANQVGAGAFGPGF(서열번호 163), MQWNSTALHQALQDP(서열번호 164), MQWNSTTFHQTLQDPRVRGLYFPAGG(서열번호 165), FFLLTRILTI(서열번호 166), FFLLTRILTIPQSLD(서열번호 167), TSLNFLGGTTVCLGQ(서열번호 168), QSPTSNHSPTSCPPIC(서열번호 169), IIFLFILLLCLIFLLVLLD(서열번호 170), CTTPAQGNSMFPSC(서열번호 171), CTKPTDGN(서열번호 172), WASVRFSW(서열번호 173), LLPIFFCLW(서열번호 174), MDIDPYKEFGATVELLSFLP(서열번호 175), FLPSDFFPSV(서열번호 176), RDLLDTASALYREALESPEH(서열번호 177), PHHTALRQAILCWGELMTLA(서열번호 178), GRETVIEYLVSFGVW(서열번호 179), EYLVSFGVWIRTPPA(서열번호 180), VSFGVWIRTPPAYRPPNAPI(서열번호 181), TVVRRRGRSP(서열번호 182), VGPLTVNEKRRLKLI(서열번호 183), RHYLHTLWKAGILYK(서열번호 184), ESRLVVDFSQFSRGN(서열번호 185), LQSLTNLLSSNLSWL(서열번호 186), SSNLSWLSLDVSAAF(서열번호 187), LHLYSHPIILGFRKI(서열번호 188), KQCFRKLPVNRPIDW(서열번호 189), LCQVFADATPTGWGL(서열번호 190), AANWILRGTSFVYVP(서열번호 191), 및 EIRLKVFVLGGCRHK(서열번호 192)에서 선택된 서열, 또는 상기 선택된 서열과 90% 이상 일치하는 서열을 가지고,
    상기 A2는 제2 보조부이거나 부존재하며, 상기 제2 보조부는 aZ, CR, HHHHHH(서열번호 53), 또는 aZGSHHHHHHGSDDDDK(서열번호 194)이고,
    상기 a는 D-form alanine, 상기 (Cha)는 L-cyclohexylalanine, 상기 Z는 6-aminohexanoic acid를 의미함.
  2. 제1항에 있어서, 상기 A1은 Za, 상기 A2는 aZGSHHHHHHGSDDDDK(서열번호 194)이며, 상기 B-cell 에피토프는 KTTKQSFDLSVKAQYKKNKH(서열번호 8)인 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
  3. 제2항에 있어서, 상기 펩타이드 단위체의 서열은 RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZGSHHHHHHGSDDDDK(서열번호 68)인 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
  4. 제1항에 있어서, 상기 A1은 Za, 상기 A2는 aZ이며, 상기 B-cell 에피토프는 RNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 6)인 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
  5. 제4항에 있어서, 상기 펩타이드 단위체의 서열은 RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ(서열번호 56)인 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
  6. 제1항에 있어서, 상기 A1은 부존재, 상기 A2는 HHHHHH(서열번호 53)이며, 상기 B-cell 에피토프는 RNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 6)인 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
  7. 제6항에 있어서, 상기 펩타이드 단위체의 서열은 RNVPPIFNDVYWIAFK(Cha)VAAWTLKAAHHHHHH(서열번호 67)인 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
  8. 제1항에 있어서, 상기 A1은 Za, 상기 A2는 CR이며, 상기 B-cell 에피토프는 RNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 6)인 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
  9. 제8항에 있어서, 상기 펩타이드 단위체의 서열은 RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAACR(서열번호 161)인 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
  10. 23mer 내지 71mer 길이의 펩타이드 단위체로, 다음 [구조식 2]로 표현되는, CD4+ T세포에 의해 인식되어 아포지단백 B-100(Apolipoprotein B-100)을 표적하는 항체를 유도할 수 있는 펩타이드 단위체:
    [구조식 2]
    N-B1-A1-T-A2-B2-C
    이때, 상기 B1 및 B2는 아포지단백 B-100에 대한 B-cell 에피토프로, RNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 6), CRFRGLISLSQVYLS(서열번호 7), KTTKQSFDLSVKAQYKKNKH(서열번호 8)에서 각각 독립적으로 선택되고,
    상기 A1은 제1 보조부로, Za, 또는 Z이며,
    상기 T는 Helper-T-cell 에피토프(Th 에피토프)로, K(Cha)VAAWTLKAA(서열번호 1), PKYVKQNTLKLAT(서열번호 2), ILMQYIKANSKFIGI(서열번호 3), QSIALSSLMVAQAIP(서열번호 4), ILMQYIKANSKFIGIPMGLPQSIALSSLMVAQ(서열번호 5), PLGFFPDHQL(서열번호 162), WPEANQVGAGAFGPGF(서열번호 163), MQWNSTALHQALQDP(서열번호 164), MQWNSTTFHQTLQDPRVRGLYFPAGG(서열번호 165), FFLLTRILTI(서열번호 166), FFLLTRILTIPQSLD(서열번호 167), TSLNFLGGTTVCLGQ(서열번호 168), QSPTSNHSPTSCPPIC(서열번호 169), IIFLFILLLCLIFLLVLLD(서열번호 170), CTTPAQGNSMFPSC(서열번호 171), CTKPTDGN(서열번호 172), WASVRFSW(서열번호 173), LLPIFFCLW(서열번호 174), MDIDPYKEFGATVELLSFLP(서열번호 175), FLPSDFFPSV(서열번호 176), RDLLDTASALYREALESPEH(서열번호 177), PHHTALRQAILCWGELMTLA(서열번호 178), GRETVIEYLVSFGVW(서열번호 179), EYLVSFGVWIRTPPA(서열번호 180), VSFGVWIRTPPAYRPPNAPI(서열번호 181), TVVRRRGRSP(서열번호 182), VGPLTVNEKRRLKLI(서열번호 183), RHYLHTLWKAGILYK(서열번호 184), ESRLVVDFSQFSRGN(서열번호 185), LQSLTNLLSSNLSWL(서열번호 186), SSNLSWLSLDVSAAF(서열번호 187), LHLYSHPIILGFRKI(서열번호 188), KQCFRKLPVNRPIDW(서열번호 189), LCQVFADATPTGWGL(서열번호 190), AANWILRGTSFVYVP(서열번호 191), 및 EIRLKVFVLGGCRHK(서열번호 192)에서 선택되고,
    상기 A2는 제2 보조부로, aZ, 또는 Z이고,
    상기 a는 D-form alanine, 상기 (Cha)는 L-cyclohexylalanine, 상기 Z는 6-aminohexanoic acid를 의미함.
  11. 제10항에 있어서, 상기 A1은 Za, 상기 A2는 aZ이고, 상기 B1은 RNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 6), 또는 KTTKQSFDLSVKAQYKKNKH(서열번호 8)이며, 상기 B2는 CRFRGLISLSQVYLS(서열번호 7)인 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
  12. 제11항에 있어서, 상기 펩타이드 단위체의 서열은 RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZCRFRGLISLSQVYLS(서열번호 108) 또는 KTTKQSFDLSVKAQYKKNKHZaK(Cha)VAAWTLKAAaZCRFRGLISLSQVYLS(서열번호 114)인 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
  13. 제10항에 있어서, 상기 A1은 Z, 상기 A2는 Z이고, 상기 B1은 RNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 6)이며, 상기 B2는 CRFRGLISLSQVYLS(서열번호 7)인 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
  14. 제13항에 있어서, 상기 펩타이드 단위체의 서열은 RNVPPIFNDVYWIAFZPKYVKQNTLKLATZCRFRGLISLSQVYLS(서열번호 121)인 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
  15. 23mer 내지 71mer 길이의 펩타이드 단위체로, 다음 [구조식 3]로 표현되는, CD4+ T세포에 의해 인식되어 아포지단백 B-100(Apolipoprotein B-100)을 표적하는 항체를 유도할 수 있는 펩타이드 단위체:
    [구조식 3]
    N-B1-B2-A1-T-A2-C
    이때, 상기 B1 및 B2는 아포지단백 B-100에 대한 B-cell 에피토프로, RNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 6), CRFRGLISLSQVYLS(서열번호 7), KTTKQSFDLSVKAQYKKNKH(서열번호 8)에서 각각 독립적으로 선택되고,
    상기 A1은 제1 보조부로, Za이고,
    상기 T는 Helper-T-cell 에피토프(Th 에피토프)로, K(Cha)VAAWTLKAA(서열번호 1), PKYVKQNTLKLAT(서열번호 2), ILMQYIKANSKFIGI(서열번호 3), QSIALSSLMVAQAIP(서열번호 4), ILMQYIKANSKFIGIPMGLPQSIALSSLMVAQ(서열번호 5), PLGFFPDHQL(서열번호 162), WPEANQVGAGAFGPGF(서열번호 163), MQWNSTALHQALQDP(서열번호 164), MQWNSTTFHQTLQDPRVRGLYFPAGG(서열번호 165), FFLLTRILTI(서열번호 166), FFLLTRILTIPQSLD(서열번호 167), TSLNFLGGTTVCLGQ(서열번호 168), QSPTSNHSPTSCPPIC(서열번호 169), IIFLFILLLCLIFLLVLLD(서열번호 170), CTTPAQGNSMFPSC(서열번호 171), CTKPTDGN(서열번호 172), WASVRFSW(서열번호 173), LLPIFFCLW(서열번호 174), MDIDPYKEFGATVELLSFLP(서열번호 175), FLPSDFFPSV(서열번호 176), RDLLDTASALYREALESPEH(서열번호 177), PHHTALRQAILCWGELMTLA(서열번호 178), GRETVIEYLVSFGVW(서열번호 179), EYLVSFGVWIRTPPA(서열번호 180), VSFGVWIRTPPAYRPPNAPI(서열번호 181), TVVRRRGRSP(서열번호 182), VGPLTVNEKRRLKLI(서열번호 183), RHYLHTLWKAGILYK(서열번호 184), ESRLVVDFSQFSRGN(서열번호 185), LQSLTNLLSSNLSWL(서열번호 186), SSNLSWLSLDVSAAF(서열번호 187), LHLYSHPIILGFRKI(서열번호 188), KQCFRKLPVNRPIDW(서열번호 189), LCQVFADATPTGWGL(서열번호 190), AANWILRGTSFVYVP(서열번호 191), 및 EIRLKVFVLGGCRHK(서열번호 192)에서 선택되고,
    상기 A2는 제2 보조부로, aZ이고,
    상기 a는 D-form alanine, 상기 (Cha)는 L-cyclohexylalanine, 상기 Z는 6-aminohexanoic acid를 의미함.
  16. 제15항에 있어서, 상기 B1은 RNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 6)이고, 상기 B2는 CRFRGLISLSQVYLS(서열번호 7)인 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
  17. 제16항에 있어서, 상기 펩타이드 단위체는 RNVPPIFNDVYWIAFCRFRGLISLSQVYLSZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ(서열번호 84)인 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
  18. 23mer 내지 71mer 길이의 펩타이드 단위체로, 다음 [구조식 4]로 표현되는, CD4+ T세포에 의해 인식되어 아포지단백 B-100(Apolipoprotein B-100)을 표적하는 항체를 유도할 수 있는 펩타이드 단위체:
    [구조식 4]
    N-A1-T-A2-B-C
    이때, 상기 B는 아포지단백 B-100에 대한 B-cell 에피토프로, RNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 6), CRFRGLISLSQVYLS(서열번호 7), KTTKQSFDLSVKAQYKKNKH(서열번호 8)에서 선택되고,
    상기 A1은 제1 보조부로, GSHHHHHHGSDDDDKZa(서열번호 193)이고,
    상기 T는 Helper-T-cell 에피토프(Th 에피토프)로, K(Cha)VAAWTLKAA(서열번호 1), PKYVKQNTLKLAT(서열번호 2), ILMQYIKANSKFIGI(서열번호 3), QSIALSSLMVAQAIP(서열번호 4), ILMQYIKANSKFIGIPMGLPQSIALSSLMVAQ(서열번호 5), PLGFFPDHQL(서열번호 162), WPEANQVGAGAFGPGF(서열번호 163), MQWNSTALHQALQDP(서열번호 164), MQWNSTTFHQTLQDPRVRGLYFPAGG(서열번호 165), FFLLTRILTI(서열번호 166), FFLLTRILTIPQSLD(서열번호 167), TSLNFLGGTTVCLGQ(서열번호 168), QSPTSNHSPTSCPPIC(서열번호 169), IIFLFILLLCLIFLLVLLD(서열번호 170), CTTPAQGNSMFPSC(서열번호 171), CTKPTDGN(서열번호 172), WASVRFSW(서열번호 173), LLPIFFCLW(서열번호 174), MDIDPYKEFGATVELLSFLP(서열번호 175), FLPSDFFPSV(서열번호 176), RDLLDTASALYREALESPEH(서열번호 177), PHHTALRQAILCWGELMTLA(서열번호 178), GRETVIEYLVSFGVW(서열번호 179), EYLVSFGVWIRTPPA(서열번호 180), VSFGVWIRTPPAYRPPNAPI(서열번호 181), TVVRRRGRSP(서열번호 182), VGPLTVNEKRRLKLI(서열번호 183), RHYLHTLWKAGILYK(서열번호 184), ESRLVVDFSQFSRGN(서열번호 185), LQSLTNLLSSNLSWL(서열번호 186), SSNLSWLSLDVSAAF(서열번호 187), LHLYSHPIILGFRKI(서열번호 188), KQCFRKLPVNRPIDW(서열번호 189), LCQVFADATPTGWGL(서열번호 190), AANWILRGTSFVYVP(서열번호 191), 및 EIRLKVFVLGGCRHK(서열번호 192)에서 선택되고,
    상기 A2는 제2 보조부로, aZ이고,
    상기 a는 D-form alanine, 상기 (Cha)는 L-cyclohexylalanine, 상기 Z는 6-aminohexanoic acid를 의미함.
  19. 제18항에 있어서, 상기 B는 RNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 6)인 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
  20. 제19항에 있어서, 상기 펩타이드 단위체의 서열은 GSHHHHHHGSDDDDKZaK(Cha)VAAWTLKAAaZRNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 69)인 것을 특징으로 하는 펩타이드 단위체.
  21. CD4+ T세포에 의해 인식되어 아포지단백 B-100(Apolipoprotein B-100)을 표적하는 항체를 유도할 수 있는, 다음에서 독립적으로 선택된 2개 이상 5개 이하의 펩타이드 단위체가 연결된 펩타이드: 제1항의 펩타이드 단위체; 제10항의 펩타이드 단위체; 제15항의 펩타이드 단위체; 및 제18항의 펩타이드 단위체.
  22. 제21항에 있어서, 상기 펩타이드는 다음에서 독립적으로 선택된 2개 이상 5개 이하의 펩타이드 단위체가 연결된 것을 특징으로 함: RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ(서열번호 56); RNVPPIFNDVYWIAFK(Cha)VAAWTLKAA(서열번호 62); RNVPPIFNDVYWIAFK(Cha)VAAWTLKAAHHHHHH(서열번호 67); RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZGSHHHHHHGSDDDDK(서열번호 68); GSHHHHHHGSDDDDKZaK(Cha)VAAWTLKAAaZRNVPPIFNDVYWIAF(서열번호 69); RNVPPIFNDVYWIAFCRFRGLISLSQVYLSZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ(서열번호 84); RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZCRFRGLISLSQVYLS(서열번호 108); KTTKQSFDLSVKAQYKKNKHZaK(Cha)VAAWTLKAAaZCRFRGLISLSQVYLS(서열번호 114); RNVPPIFNDVYWIAFZPKYVKQNTLKLATZCRFRGLISLSQVYLS(서열번호 121); RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAACRFRGLISLSQVYLS(서열번호 160); 및 RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAACR(서열번호 161), 이때, a는 D-form alanine, (Cha)는 L-cyclohexylalanine, Z는 6-aminohexanoic acid를 의미함.
  23. 다음을 포함하는 비만치료용 약학적 조성물:
    제1항, 제10항, 제15항, 및 제18항 중 어느 하나의 펩타이드 단위체, 또는 제21항의 펩타이드; 및
    어쥬번트(adjuvants).
  24. 제23항에 있어서, 상기 어쥬번트는 물, 염수, 덱스트로즈, 에탄올, 글리세롤, 염화나트륨, 덱스트로즈, 만니톨, 솔비톨, 락토즈, 젤라틴, 알부민, 수산화알루미늄, 프로인트 불완전 보조제(Freund's Incomplete Adjuvant) 및 완전 항원보조제(Complete Adjuvant)(Pifco Laboratories, Detroit, Mich.), 머크 항원보강제 65(Merck and Company, Inc., Rahway, NJ.), Alhydrogel(Al(OH)3), 수산화알루미늄 겔(알룸), 또는 인산알루미늄과 같은 알루미늄 염, AS04 series, MF, squalene, MF59, QS21, 칼슘, 철 또는 아연염, 아실화 티로신의 불용성 현탁액, 아실화 과당, 양이온적으로 또는 음이온적으로 유도된 폴리사카라이드, 폴리포스파젠, 생분해성 미세구, 및 퀼(Quil) A, 톨-라이크 리셉터(TLR) 작용제, PHAD[Avanti polar lipid, Monophosphoryl Lipid A (synthetic)], 모노포스포릴 지질 A(MPL, monophosphoryl Lipid A), 합성 지질 A, 지질 A 모방체 또는 유사체, 알루미늄 염, 사이토카인, 사포닌, Prolactin, growth hormone deoxycholic acid, betaglucan, polyribonucleotides, 무라밀 다이펩타이드(MDP) 유도체, CpG 올리고, 그람-음성 박테리아의 리포폴리사카라이드(LPS), 폴리포스파젠, 에멀젼, 비로솜, 코크리트(cochleate), 폴리(락티드-코-글리콜리드)(PLG) 마이크로입자, 폴록사머 입자, 마이크로입자, 리포솜, 또는 이들의 적절한 조합인 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
  25. 제23항에 있어서, 상기 약학적 조성물은 다음에서 선택된 서열의 펩타이드 단위체를 포함하는 것을 특징으로 하는 약학적 조성물: RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ (서열번호 56); RNVPPIFNDVYWIAFK(Cha)VAAWTLKAA (서열번호 62); RNVPPIFNDVYWIAFK(Cha)VAAWTLKAAHHHHHH (서열번호 67); RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZGSHHHHHHGSDDDDK (서열번호 68); GSHHHHHHGSDDDDKZaK(Cha)VAAWTLKAAaZRNVPPIFNDVYWIAF (서열번호 69); RNVPPIFNDVYWIAFCRFRGLISLSQVYLSZaK(Cha)VAAWTLKAAaZ (서열번호 84); RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAAaZCRFRGLISLSQVYLS (서열번호 108); KTTKQSFDLSVKAQYKKNKHZaK(Cha)VAAWTLKAAaZCRFRGLISLSQVYLS (서열번호 114); RNVPPIFNDVYWIAFZPKYVKQNTLKLATZCRFRGLISLSQVYLS (서열번호 121); RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAACRFRGLISLSQVYLS (서열번호 160); 및 RNVPPIFNDVYWIAFZaK(Cha)VAAWTLKAACR (서열번호 161), 이때, a는 D-form alanine, (Cha)는 L-cyclohexylalanine, Z는 6-aminohexanoic acid를 의미함.
  26. 다음을 포함하는 비만 치료 방법: 제23항의 약학적 조성물을 대상의 체내에 투여하는 것.
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