WO2022045823A1 - 생분해성 고분자 분산체, 이를 포함하는 조성물 및 피부 개선용 시스템 - Google Patents

생분해성 고분자 분산체, 이를 포함하는 조성물 및 피부 개선용 시스템 Download PDF

Info

Publication number
WO2022045823A1
WO2022045823A1 PCT/KR2021/011507 KR2021011507W WO2022045823A1 WO 2022045823 A1 WO2022045823 A1 WO 2022045823A1 KR 2021011507 W KR2021011507 W KR 2021011507W WO 2022045823 A1 WO2022045823 A1 WO 2022045823A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
biodegradable polymer
lactic acid
polymer dispersion
hyaluronic acid
based polymer
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Ceased
Application number
PCT/KR2021/011507
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
김근풍
서석배
이건필
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Vaim Co ltd
Original Assignee
Vaim Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from KR1020210112934A external-priority patent/KR102905790B1/ko
Application filed by Vaim Co ltd filed Critical Vaim Co ltd
Priority to EP21862119.1A priority Critical patent/EP4122442A4/en
Priority to CN202180026768.4A priority patent/CN115427012B/zh
Priority to BR112022020991A priority patent/BR112022020991A2/pt
Priority to US17/996,781 priority patent/US20230149288A1/en
Publication of WO2022045823A1 publication Critical patent/WO2022045823A1/ko
Anticipated expiration legal-status Critical
Ceased legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/72—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic macromolecular compounds
    • A61K8/84—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic macromolecular compounds obtained by reactions otherwise than those involving only carbon-carbon unsaturated bonds
    • A61K8/86—Polyethers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/02—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by special physical form
    • A61K8/0241—Containing particulates characterized by their shape and/or structure
    • A61K8/025—Explicitly spheroidal or spherical shape
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/72—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic macromolecular compounds
    • A61K8/73—Polysaccharides
    • A61K8/735—Mucopolysaccharides, e.g. hyaluronic acid; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/72—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic macromolecular compounds
    • A61K8/84—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic macromolecular compounds obtained by reactions otherwise than those involving only carbon-carbon unsaturated bonds
    • A61K8/85—Polyesters
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/72—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic macromolecular compounds
    • A61K8/90—Block copolymers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/40—Chemical, physico-chemical or functional or structural properties of particular ingredients
    • A61K2800/41—Particular ingredients further characterized by their size
    • A61K2800/412—Microsized, i.e. having sizes between 0.1 and 100 microns
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/40—Chemical, physico-chemical or functional or structural properties of particular ingredients
    • A61K2800/41—Particular ingredients further characterized by their size
    • A61K2800/413—Nanosized, i.e. having sizes below 100 nm
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/40—Chemical, physico-chemical or functional or structural properties of particular ingredients
    • A61K2800/59—Mixtures
    • A61K2800/594—Mixtures of polymers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/40—Chemical, physico-chemical or functional or structural properties of particular ingredients
    • A61K2800/60—Particulates further characterized by their structure or composition
    • A61K2800/65—Characterized by the composition of the particulate/core
    • A61K2800/654—The particulate/core comprising macromolecular material
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/80—Process related aspects concerning the preparation of the cosmetic composition or the storage or application thereof
    • A61K2800/87—Application Devices; Containers; Packaging
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/74—Synthetic polymeric materials
    • A61K31/765—Polymers containing oxygen

Definitions

  • the present invention relates to a biodegradable polymer dispersion, a composition comprising the same, and a system for improving skin.
  • the skin consists of epidermis, dermis and subcutaneous tissue.
  • the dermis is a layer between the epidermis and subcutaneous tissue, and contains blood vessels, collagen, elastin fibers, pores, pilaris, sebaceous glands, sweat glands, various sensory nerves, fibroblasts, and macrophages, which are absent in the epidermis, and occupies the largest portion of the skin. do.
  • the active ingredient active ingredient
  • nanoparticles such as liposomes, cationic polymers, quantum dots, magnetic particles or gold nanoparticles have been studied, and these delivery systems are designed to promote absorption into cells.
  • liposomes they have the advantage of being easily designed to have targeting performance as a physical self-assembly, but the colloidal stability of the delivery system is poor, and mainly depends on the delivery of active ingredients by diffusion in the skin barrier layer.
  • a cationic polymer, quantum dots, gold nanoparticles, etc. are used, some cytotoxicity exists, effective delivery of an active material is not easy, and the delivery system does not have biodegradability.
  • Patent Document 1 Korean Patent Publication No. 10-2019-0095088 (2019.08.19.)
  • An object of the present invention is to provide a lactic acid-based polymer and a composition comprising the same, specifically, a block copolymer (PEG-PLA) containing lactic acid and polyethylene glycol positioned on the surface of lactic acid-based polymer particles and a hyaluronic acid mixture. It is intended to provide a biodegradable polymer dispersion having physiological activity by penetrating into the skin by itself. In addition, it is to provide a composition comprising a biodegradable polymer dispersion capable of effective delivery of the active ingredient to the deep skin by including the active ingredient inside the lactic acid-based polymer particles.
  • PEG-PLA block copolymer
  • Another object of the present invention is to provide a skin improvement system including the biodegradable polymer dispersion and a plasma device so as to enhance skin absorption of active ingredients.
  • the present invention for achieving the above object is characterized in that it is a biodegradable polymer dispersion comprising a lactic acid-based polymer, a block copolymer containing a lactic acid-based polymer and polyethylene glycol, and a hyaluronic acid mixture.
  • the biodegradable polymer dispersion may be spherical particles having an average particle size of 0.01 to 30 ⁇ m.
  • the lactic acid-based polymer may have a weight average molecular weight of 10,000 to 1,000,000 g/mol.
  • the block copolymer containing the lactic acid-based polymer and polyethylene glycol may have a weight average molecular weight of 2,000 to 60,000 g/mol.
  • the weight ratio of the lactic acid-based polymer to the block copolymer containing the lactic acid-based polymer and polyethylene glycol may be 1:1 to 20:1.
  • the hyaluronic acid mixture may include hyaluronic acid, ammonium-substituted hyaluronic acid, and a hyaluronic acid oligomer having a weight average molecular weight of less than 8,000 g/mol.
  • hyaluronic acid 50 to 90% by weight of high molecular weight hyaluronic acid, 1 to 10% by weight of ammonium substituted hyaluronic acid, and 10 to 35% by weight of hyaluronic acid oligomer based on the total weight of the hyaluronic acid mixture.
  • the weight ratio of the hyaluronic acid mixture to the lactic acid-based polymer may be 1:3 to 1:20.
  • the block copolymer (PEG-PLA) containing the lactic acid-based polymer and polyethylene glycol may be positioned on the surface of the particles including the lactic acid-based polymer.
  • Another aspect of the present invention is a cosmetic composition comprising the biodegradable polymer dispersion.
  • Another aspect of the present invention is characterized in that it is a composition for external application for skin including the biodegradable polymer dispersion.
  • Another aspect of the present invention is characterized in that the pharmaceutical composition comprising the biodegradable polymer dispersion.
  • the biodegradable polymer dispersion may include an active ingredient inside the particles including the lactic acid-based polymer.
  • Another aspect of the present invention is characterized in that it is a skin improvement system comprising the biodegradable polymer dispersion and a plasma device.
  • the biodegradable polymer dispersion according to the present invention is a dispersion of lactic acid-based polymer in the form of particles in which a block copolymer (PEG-PLA) containing a lactic acid-based polymer and polyethylene glycol is positioned on the surface in an aqueous phase containing a hyaluronic acid mixture.
  • PEG-PLA block copolymer
  • a lactic acid-based polymer and polyethylene glycol is positioned on the surface in an aqueous phase containing a hyaluronic acid mixture.
  • the biodegradable polymer dispersion according to the present invention can effectively deliver the active ingredient through the skin or other barriers.
  • the active ingredient may include both hydrophilic and hydrophobic active ingredients, and thus has the advantage of implementing excellent physiological activity and therapeutic or improvement effects.
  • by further including the active ingredient in the lactic acid-based polymer particles of the biodegradable polymer dispersion it is possible to control the sustained release of the active ingredient.
  • the biodegradable polymer dispersion according to the present invention has an excellent skin improvement effect by further improving the physiological activity effect and skin penetration by the plasma device.
  • Example 1 is a schematic diagram showing a biodegradable polymer dispersion according to Example 1 of the present invention.
  • FIG. 19 is a graph showing the cytotoxicity of the biodegradable polymer dispersions according to Examples 1 and 4 of the present invention in human dermal fibroblasts.
  • FIG. 20 is a graph evaluating the procollagen synthesis ability before and after plasma treatment in human dermal fibroblasts of the biodegradable polymer dispersions according to Examples 1 and 4 of the present invention.
  • 21 is a graph evaluating the MMP-1 inhibitory ability of the biodegradable polymer dispersions according to Examples 1 and 4 of the present invention before and after plasma treatment in human dermal fibroblasts.
  • FIG. 22 is a graph evaluating the elastase inhibition rate before and after plasma treatment in human dermal fibroblasts of the biodegradable polymer dispersions according to Examples 1 and 4 of the present invention.
  • 23A is an image showing the collagen expression level before and after plasma treatment in human dermal fibroblasts of the biodegradable polymer dispersion according to Examples 1 and 4 of the present invention.
  • 23B is an image showing the elastin expression level before and after plasma treatment in human dermal fibroblasts of the biodegradable polymer dispersion according to Examples 1 and 4 of the present invention.
  • 'lactic acid-based polymer particles' used in the present invention has the same meaning as 'particulates containing lactic acid-based polymer'.
  • 'PEG-PLA block copolymer' used in the present invention is used as a more specific meaning of 'block copolymer containing lactic acid polymer and polyethylene glycol'.
  • composition' used in the present invention is used in the sense of including 'cosmetic composition', 'composition for external application for skin' or 'pharmaceutical composition'.
  • 'dispersion' used in the present invention means 'a dispersion formed in an aqueous phase,' and is used to include a 'biodegradable polymer dispersion'.
  • the present invention for achieving the above object provides a biodegradable polymer dispersion, a composition comprising the same, and a system for improving skin.
  • the present inventors have deepened research on a delivery system that has excellent physiological activity, has excellent penetration into the skin barrier, enables effective skin improvement or treatment, and has no toxicity in vivo. Accordingly, through a biodegradable polymer dispersion containing a lactic acid-based polymer, a lactic acid-based polymer and a block copolymer (PEG-PLA block copolymer) containing polyethylene glycol, and a hyaluronic acid mixture, the above effects can be realized was confirmed and the present invention was completed.
  • PEG-PLA block copolymer PEG-PLA block copolymer
  • biodegradable polymer dispersion according to the present invention will be described in detail.
  • the biodegradable polymer dispersion according to an aspect of the present invention may include a lactic acid-based polymer, a block copolymer containing a lactic acid-based polymer and polyethylene glycol, and a mixture of hyaluronic acid.
  • the lactic acid-based polymer means a polymer including lactic acid as a structural unit, and the lactic acid may be L-lactic acid, D-lactic acid, or a combination thereof.
  • the lactic acid unit may include 50 mol% or more with respect to 100 mol% of all monomer components constituting the lactic acid-based polymer, specifically 60 mol% or more, and more specifically 70 mol% or more may be, but is not limited thereto.
  • the lactic acid-based polymer may include poly(lactic acid), PLA), poly(lactic-co-glycolic acid), PLGA, or the like, preferably polylactic acid. (Poly(lactic acid), PLA).
  • the lactic acid-based polymer may have a weight average molecular weight of 10,000 to 1,000,000 g/mol, specifically 13,000 to 500,000 g/mol, and more specifically, 15,000 to 250,000 g/mol.
  • the block copolymer containing the lactic acid polymer and polyethylene glycol may mean a polymer including a lactic acid polymer and a polyethylene glycol unit, and specifically, a double block copolymer of a lactic acid polymer and polyethylene glycol (PEG-PLA). block copolymer).
  • the lactic acid-based polymer may have hydrophobic properties
  • polyethylene glycol may have hydrophilic properties, and may have amphiphilic properties.
  • the lactic acid polymer may be a polymer of a monomer selected from the group consisting of L-lactic acid, D-lactic acid and L,D-lactic acid, and a weight average molecular weight of 1,000 to It may be 40,000 g/mol, specifically 1,500 to 30,000 g/mol.
  • the block copolymer may have a weight average molecular weight of 2,000 to 60,000 g/mol, and polyethylene glycol in the block copolymer may have a weight average molecular weight of 1,000 to 20,000 g/mol, specifically 3,000 to 15,000 g It may be /mol, but is not limited thereto.
  • the weight ratio of the lactic acid-based polymer block to the polyethylene glycol block may be 95: 5 to 50: 50, specifically 90: 10 to 70: 30, and more specifically 90: 10 to 80: 20.
  • the block copolymer containing the lactic acid polymer, the lactic acid polymer, and polyethylene glycol may be included in a weight ratio of 1:1 to 20:1.
  • the particle size controllability and dispersion stability of the lactic acid-based polymer particles of the present invention can be improved, and the compatibility with the hyaluronic acid mixture to be described later is improved. may be desirable.
  • the weight ratio of the lactic acid-based polymer and the block copolymer the size and shape of the dispersion formed in the aqueous phase can be adjusted.
  • the dispersion when the weight ratio of the lactic acid-based polymer to the block copolymer is 1:1 to 6:1, the dispersion may be prepared as fine particles having a size of 0.01 to 4 ⁇ m, and the lactic acid-based polymer is inside the fine particles. may have a spherical shape filled with high density.
  • oval particles having a spherical shape or a shape elongated in one direction may be prepared in the dispersion, and the weight ratio is 9:1 To 15: 1, the dispersion may have a spherical or oval shape in which pores are formed inside.
  • the dispersion formed in the aqueous phase by including the lactic acid-based polymer and the block copolymer containing the lactic acid-based polymer and polyethylene glycol may be spherical or elliptical particles, and the particles may have an average particle size of 0.01 to 30 ⁇ m, and , specifically, may be 0.1 to 20 ⁇ m.
  • the average particle size may be atomized depending on the manufacturing process, but there is a problem in that the polydispersity is high and the reproducibility of the dispersion is poor.
  • the biodegradable polymer dispersion according to the present invention contains a lactic acid-based polymer and a block copolymer containing polyethylene glycol, so it has very high reproducibility depending on the manufacturing method and can be atomized without applying high energy, It has the advantage of high dispersion.
  • the hyaluronic acid mixture may mean a hyaluronic acid mixture of three types of hyaluronic acid, ammonium-substituted hyaluronic acid, and hyaluronic acid oligomer.
  • the hyaluronic acid may be a high molecular weight hyaluronic acid having a weight average molecular weight of 1,000,000 g/mol to 3,000,000 g/mol, specifically 1,200,000 g/mol to 2,200,000 g/mol, and the hyaluronic acid mixture It may be included in an amount of 55 to 90% by weight based on the total weight, specifically, it may be included in an amount of 65 to 85% by weight, but is not limited thereto.
  • the ammonium-substituted hyaluronic acid may mean that some or all of the hydrogen atoms of the hydroxyl group of the hyaluronic acid are substituted with a group having a quaternary ammonium cation group, and a weight average molecular weight of 300,000 g/mol to 1,000,000 g/mol, specifically It may be 500,000 g/mol, 800,000 g/mol, 1 to 10% by weight based on the total weight of the hyaluronic acid mixture, and specifically 3 to 8% by weight, but limited thereto it is not
  • the hyaluronic acid oligomer may mean a hydrolyzed state of hyaluronic acid, may have a weight average molecular weight of less than 8,000 g/mol, and specifically refer to a low molecular weight hyaluronic acid of less than 5,000 g/mol and the lower limit is not limited, but may be 800 g/mol or more.
  • the hyaluronic acid oligomer may be included in an amount of 10 to 35% by weight based on the total weight of the hyaluronic acid mixture, specifically, it may be included in an amount of 13 to 30% by weight, but is not limited thereto.
  • the weight ratio of the hyaluronic acid mixture to the lactic acid polymer may be 1: 3 to 1: 20, specifically 1: 4 to 1: 16, but is not limited thereto.
  • the dispersion stability of the lactic acid-based polymer particles of the biodegradable polymer dispersion to be described later can be further improved.
  • the interaction with the skin barrier layer can be remarkably improved.
  • conventional lactic acid-based polymers have high crystallinity and low interaction with the lipid layer constituting the skin barrier layer, and thus have remarkably low adsorption or permeation properties to the skin barrier layer.
  • the hyaluronic acid mixture is mixed with the lactic acid-based polymer particles to hydrate the surface of the lactic acid-based polymer particles, and the interaction of the lactic acid-based polymer particles with the skin barrier layer is remarkably improved, so that it can be strongly adsorbed or permeated to the skin barrier layer. Accordingly, when the biodegradable polymer dispersion is applied to the skin, it is preferable because it can further improve physiological activities such as improvement of skin cell elasticity, inhibition of aging, and promotion of skin cell growth.
  • lactic acid-based polymer particles are dispersed on a continuous phase containing a hyaluronic acid mixture, and lactic acid-based polymer particles are disposed on the surface of the lactic acid-based polymer particles.
  • a block copolymer containing a polymer and polyethylene glycol may be located. More specifically, in the block copolymer, the hydrophobic lactic acid-based polymer portion is positioned to face the lactic acid-based polymer particles, and hydrophilic polyethylene glycol is positioned to face the continuous phase.
  • the lactic acid-based polymer portion which is the hydrophobic portion of the block copolymer, may be more densely located on the surface of the particle, and the hydrophilic portion Excellent dispersion stability can be realized by phosphorus polyethylene glycol, which can accommodate a large amount of lactic acid-based polymer particles as a dispersed phase in the continuous phase, which may be more preferable.
  • the biodegradable polymer dispersion may include an active ingredient to be described later in each phase independently, which may be more preferable.
  • the method for producing a biodegradable polymer dispersion comprises the steps of: preparing a polymer solution by dissolving a polylactic acid-based polymer and a block copolymer in a solvent; preparing an aqueous solution in which a hyaluronic acid mixture and water are mixed; preparing a dispersion by mixing an aqueous solution with the polymer solution; It may include; removing the solvent from the dispersion.
  • the step of preparing the polymer solution may be prepared by dissolving the above-described polylactic acid-based polymer and block copolymer in a solvent, and the solvent is not limited as long as the solvent is an organic solvent miscible with water, but specifically acetone ( Acetone), ethanol (Ethanol), acetic acid (Acetic acid), N,N- dimethylformamide (N,N-Dimethylformamide) and N,N- dimethylacetamide (N,N-Dimethylacetamie) any selected from the group consisting of It may be one or a mixture of two or more, preferably acetone (Acetone) may be used.
  • acetone Acetone
  • Euthanol acetic acid
  • N,N- dimethylformamide N,N-Dimethylformamide
  • N,N-Dimethylacetamie any selected from the group consisting of It may be one or a mixture of two or more, preferably acetone (Acetone) may be used.
  • the solvent may be included in an amount of 70 wt% to 95 wt%, but is not limited thereto.
  • the step of preparing the aqueous solution may be to use the three types of hyaluronic acid described above, and the water may be included in an amount of 95% to 99.9% by weight based on the total aqueous solution, but is not limited thereto.
  • the preparing of the dispersion may be prepared by mixing an aqueous solution with the polymer solution, and the polymer solution and the aqueous solution may be prepared by mixing in a volume ratio of 1:1 to 1:3.
  • the dispersion may be one in which the aqueous solution forms a continuous phase, and the solvent is extracted into the continuous phase so that the phase-separated polymer forms a dispersed phase.
  • the dispersed phase may be a block copolymer containing a lactic acid-based polymer and polyethylene glycol positioned on the surface of the dispersed lactic acid-based polymer particles.
  • the step of removing the solvent is not limited, but may specifically use evaporation, and the evaporation condition may be performed at 20 to 130 ° C. for 1 hour to 48 hours, but is not limited thereto, and the use of Depending on the type of solvent, evaporation conditions may be adjusted. In addition, the evaporation may be performed under reduced pressure.
  • the lactic acid-based polymer particles are dispersed on the continuous phase containing the hyaluronic acid mixture, and the lactic acid-based polymer particles are formed on the surface of the lactic acid-based polymer and polyethylene It may be in the form in which the block copolymer containing glycol is located.
  • the biodegradable polymer dispersion according to an aspect of the present invention has excellent bioactive properties by itself, biocompatibility and high loading properties that can contain a large amount of active ingredients, so that it can be applied to various fields, Specifically, a cosmetic composition or a composition for external application for skin or a pharmaceutical composition including the biodegradable polymer dispersion may be mentioned.
  • the application mode of the active ingredient includes a first embodiment comprising a hydrophilic active ingredient in a hyaluronic acid mixture, which is a hydrophilic continuous phase, a second embodiment comprising a hydrophobic active ingredient in a hydrophobic lactic acid-based polymer, hydrophilicity It may include a third aspect including the active ingredient in each of the hyaluronic acid mixture and the hydrophobic lactic acid-based polymer, which is a continuous phase of
  • the active ingredient can be used without limitation as long as it is a known active ingredient having physiological activity in the skin or other tissues, and additional fragrances, vitamins, stabilizers, It may further include a conventional additive that is not harmful to the human body, such as an oxidizing agent, but is not limited thereto.
  • biodegradable polymer dispersion of the present invention or the composition comprising the biodegradable polymer dispersion of the present invention can be applied in formulations such as known internal and external preparations, preferably external preparations such as creams, ointments, lotions, and gels. may be applied as
  • the biodegradable polymer dispersion or the composition comprising the biodegradable polymer dispersion can be applied directly to the skin, and when plasma-treated to the applied site, the penetration of the biodegradable polymer dispersion into the skin increases, As absorption into the skin is promoted, it is possible to accelerate the physiologically active properties, so that effective skin improvement is possible within a short time, and it can help treatment by skin regeneration, which can be applied to skin improvement.
  • an additional active ingredient is included in the biodegradable polymer dispersion, diffusion of the active ingredient into the deep skin is promoted by plasma treatment, thereby further maximizing the skin improvement or therapeutic effect.
  • biodegradable polymer dispersion according to an aspect of the present invention having the above characteristics or a composition including the same is provided with a plasma treatment device and can be used as a desirable skin improvement system.
  • a polymer solution was prepared in which 1.25 g of polylactic acid (EVONIK, RESOMER® R 202 S) and 1.25 g of a PEG-PLA block copolymer (EBONIK, RESOMER 100 DL mPEG5000) were mixed in 25 mL of acetone.
  • hyaluronic acid molecular weight 1,200,000 g/mol
  • hydroxypropyltriammonium hyaluronic acid molecular weight 500,000 g/mol
  • sodium hyaluronate hydrolyzed with hyaluronic acid oligomer molecular weight 5,000 g/mol
  • a biodegradable polymer dispersion was prepared by slowly mixing 25 mL of the prepared polymer solution into 50 mL of an aqueous solution under stirring, and evaporating the mixed solution under reduced pressure in acetone at room temperature.
  • a biodegradable polymer dispersion was prepared in the same manner as in Example 1, except that 1.67 g of polylactic acid and 0.83 g of PEG-PLA block copolymer were used in Example 1.
  • a biodegradable polymer dispersion was prepared in the same manner as in Example 1, except that 1.87 g of polylactic acid and 0.63 g of PEG-PLA block copolymer were used in Example 1.
  • a biodegradable polymer dispersion was prepared in the same manner as in Example 1, except that 2.08 g of polylactic acid and 0.5 g of PEG-PLA block copolymer were used in Example 1.
  • a biodegradable polymer dispersion was prepared in the same manner as in Example 1, except that 2.08 g of polylactic acid and 0.42 g of PEG-PLA block copolymer were used in Example 1.
  • a biodegradable polymer dispersion was prepared in the same manner as in Example 1, except that 2.08 g of polylactic acid and 0.42 g of PEG-PLA block copolymer were used in Example 1.
  • a biodegradable polymer dispersion was prepared in the same manner as in Example 1, except that 2.14 g of polylactic acid and 0.36 g of PEG-PLA block copolymer were used in Example 1.
  • a biodegradable polymer dispersion was prepared in the same manner as in Example 1, except that in Example 1, 2.22 g of polylactic acid and 0.28 g of a PEG-PLA block copolymer were used.
  • a biodegradable polymer dispersion was prepared in the same manner as in Example 1, except that in Example 1, a solution obtained by mixing 3.0 g of polylactic acid and 0.3 g of PEG-PLA block copolymer in 33 mL of acetone was used. .
  • a biodegradable polymer dispersion was prepared in the same manner as in Example 1, except that in Example 1, a solution of 4.5 g of polylactic acid and 0.3 g of PEG-PLA block copolymer was used in 48 mL of acetone. .
  • a biodegradable polymer dispersion was prepared in the same manner as in Example 1, except that in Example 1, a solution of 6.0 g of polylactic acid and 0.3 g of PEG-PLA block copolymer was used in 63 mL of acetone. .
  • Example 1 except that 1.5 g of polylactate-co-glyclate (EVONIK, RESOMER RG 752 S) was used instead of polylactic acid in Example 1 and 0.5 g of PEG-PLA copolymer was used. In the same manner as described above, a biodegradable polymer dispersion was prepared.
  • polylactate-co-glyclate EVONIK, RESOMER RG 752 S
  • a biodegradable polymer dispersion was prepared in the same manner as in Example 1, except that 50 mL of water (H 2 O) was used instead of the aqueous solution in Example 1.
  • a biodegradable polymer dispersion was prepared in the same manner as in Example 1, except that 50 mL of water (H 2 O) was used instead of the aqueous solution in Example 2.
  • a biodegradable polymer dispersion was prepared in the same manner as in Example 1, except that 50 mL of water (H 2 O) was used instead of the aqueous solution in Example 4.
  • a biodegradable polymer dispersion was prepared in the same manner as in Example 1, except that 50 mL of water (H 2 O) was used instead of the aqueous solution in Example 7.
  • a biodegradable polymer dispersion was prepared in the same manner as in Example 1, except that polylactic acid was not used in Example 1.
  • a biodegradable polymer dispersion was prepared in the same manner as in Example 1, except that the PEG-PLA block copolymer was not used in Example 1.
  • the average particle size of the dispersed particles in the biodegradable polymer dispersion prepared in Examples 1 to 11 and Comparative Examples 1 to 6 was measured and shown in Table 1 below.
  • Comparative Example 5 when polylactic acid (PLA) was not used, it was confirmed that the particles of the resulting biodegradable polymer dispersion were largely agglomerated, and Comparative Example in which the PEG-PLA block copolymer was not used In the case of 6, it was confirmed that polylactic acid (PLA) was largely agglomerated, resulting in the formation of precipitates rather than fine particles.
  • HDF-N Human dermal fibroblasts (GIBCO) containing Medium 106 (Gibco-BRL, Gaithersburg, MD) medium and low-serum growth adjuvant (LSGS; Gibco-BRL, Gaithersburg, MD) containing 1% In a medium supplemented with penicillin/streptomycin, it was cultured at 37° C. 5% CO 2 condition.
  • GEBCO Human dermal fibroblasts
  • LSGS low-serum growth adjuvant
  • Human dermal fibroblasts (HDF-N) were dispensed in a 96-well plate, and cultured for 24 hours at 37° C. 5% CO 2 condition. Thereafter, the supplement was replaced with a removed medium and cultured for 24 hours.
  • the test substance was diluted and replaced with the medium, and cultured for 24 hours. Then, it was treated with a 5 mg/ml MTT solution and further cultured for 4 hours in an incubator at 37°C. After incubation, the supernatant was removed, and DMSO was added to the formazan formed by MTT reduction to lyse the cells, and then the absorbance was measured at 540 nm using an ELISA microplate reader (SoftMax Pro5, Molecular Devices, USA). All data are expressed as mean standard deviation. For statistical analysis of each data, a two-sided test of Student's t-test was performed, and it was judged to be significant when p ⁇ 0.05 compared to the control group.
  • Human dermal fibroblasts (HDF-N) were dispensed in a 6-well plate, and cultured for 24 hours at 37 °C 5% CO 2 condition. After replacing the supplement with the removed medium, maintaining the starvation state of the cells for 24 hours, after treating the biodegradable polymer dispersion according to Examples 1 and 4, plasma was irradiated for 3 seconds. After culturing for 24 hours, the culture medium was collected and the amount of procollagen was measured using a procollagen Type I C-Peptide (PIP) ELISA kit (MK101, Takara Bio Inc.). All data are expressed as mean standard deviation. For statistical analysis of each data, a two-sided test of Student's t-test was performed, and it was judged to be significant when p ⁇ 0.05 compared to the control group.
  • PIP procollagen Type I C-Peptide
  • Human dermal fibroblasts (HDF-N) were dispensed in a 6-well plate, and cultured for 24 hours at 37 °C 5% CO 2 condition. Thereafter, the supplement was replaced with the removed medium, and after maintaining the starvation state of the cells for 24 hours, the medium was removed, washed with DPBS, and then 200 ⁇ l of DPBS was added and UVB 30 mJ was irradiated. After UVB irradiation, the biodegradable polymer dispersion according to Examples 1 and 4 was treated, and plasma was irradiated for 3 seconds.
  • HDF-N Human dermal fibroblasts
  • Human dermal fibroblasts (HDF-N) were dispensed in a 6-well plate, and cultured for 24 hours at 37 °C 5% CO 2 condition. After replacing the supplement with the removed medium, maintaining the starvation state of the cells for 24 hours, the biodegradable polymer dispersion according to Examples 1 and 4 was treated, and plasma was irradiated for 3 seconds. The cultured cells were washed with DPBS, dissolved in 0.1% triton X-100 0.2M Tris solution (pH 8.0), and then frozen and thawed in liquid nitrogen three times to homogenize the cells.
  • HDF-N Human dermal fibroblasts
  • the biodegradable polymer dispersion and plasma alone treatment group according to Examples 1 and 4 of the present invention significantly decreased the activity of elastase compared to the control group.
  • the activity of elastase was further decreased, and it was confirmed that the decomposition inhibitory effect of elastin was significantly exhibited.
  • the biodegradable polymer dispersion and the plasma alone treatment group according to Examples 1 and 4 of the present invention increased the collagen expression level compared to the control group.
  • the collagen expression level was further increased when plasma was applied to the biodegradable polymer dispersions according to Examples 1 and 4.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Cosmetics (AREA)

Abstract

본 발명은 락트산계 중합체, 락트산계 중합체 및 폴리에틸렌글리콜을 함유하는 블록 공중합체(PEG-PLA) 및 히알루론산 혼합물을 포함하고, 그 자체로도 우수한 생리활성을 가지며, 상기 락트산계 중합체의 분산 안정성이 우수하며, 유효성분의 효과적인 담지가 가능한 생분해성 고분자 분산체에 관한 것이다. 또한, 상기 생분해성 고분자 분산체를 포함하는 조성물 및 피부 개선 시스템을 제공하는 것에 관한 것이다.

Description

생분해성 고분자 분산체, 이를 포함하는 조성물 및 피부 개선용 시스템
본 발명은 생분해성 고분자 분산체, 이를 포함하는 조성물 및 피부 개선용 시스템에 관한 것이다.
피부는 표피, 진피 및 피하조직으로 이루어진다. 진피는 표피와 피하조직 사이의 층으로서, 표피에는 없는 혈관, 콜라겐, 엘라스틴 섬유, 모공, 입모근, 피지선, 한선, 여러 가지 감각신경, 섬유아세포 및 대식세포 등이 존재하며 피부 중 가장 많은 부위를 차지한다. 유효성분(활성 성분)의 경피흡수를 통해 피부상태를 개선하기 위해서는 표피에 존재하는 피부 장벽층을 투과하여야 한다. 그러나 대부분의 유효성분들이 장벽층을 투과하지 못하고 피부의 심층 조직으로 전달되지 못하기 때문에 유효성분의 경피흡수를 증진시키기 위해 화학적 흡수 촉진제의 사용, 장벽층 내에 물리적으로 미세기공을 형성하는 방법 또는 이온영동을 통해 전달시키는 방법들이 고려되어 왔다.
한편 피부흡수가 어려운 유효 성분의 침투 및 투과를 증진시키기 위해 제제학적인 접근이 폭넓게 연구되어 왔으며, 특히 콜로이드나 나노 입자와 같은 약물전달시스템의 개발 또는 제형적 접근방법이 집중적으로 연구되었다.
약물전달시스템에 기반한 유효 성분 전달 시스템으로는, 리포좀(liposome), 양이온성 고분자, 양자점, 자성입자 또는 금 나노입자 등의 나노입자들이 연구되었고, 이러한 전달 시스템은 세포 내로의 흡수를 촉진시키도록 설계되었다. 리포좀의 경우, 물리적 자기조립체로서 타겟팅 성능을 가지도록 설계가 용이한 장점을 가지지만, 전달 시스템의 콜로이드 안정성이 떨어지며, 주로 피부 장벽층에서의 확산에 의한 유효성분의 전달에 의존한다. 또한, 양이온성 고분자, 양자점, 금 나노입자 등을 이용하는 경우, 세포 독성이 일부 존재하고, 유효물질의 효과적인 전달이 용이하지 않으며, 전달 시스템이 생분해성을 가지지 않는 단점이 존재한다.
이러한 문제를 해결하기 위하여, 최근 생분해성(biodegradable) 고분자를 이용한 담체 안에 유효 성분을 봉입함으로써, 유효 성분을 전달하거나 방출을 제어하는 시스템이 연구되고 있다. 그러나, 주로 분자량이 작은 유효성분을 봉입하는 데 적합하며, 고분자량의 유효성분을 봉입하는 경우, 유효 성분의 방출 제어가 어렵고, 초기 과다방출과 같은 문제점을 가지고 있다. 더욱이, 피하 및 근육 내 주사를 위한 용도로 활용되고 있어, 피부 외용제로서의 적용에는 부적합한 실정이다.
따라서 피부 외용제로서도 적합하며, 세포 내에서의　생리활성의 극대화 및 유효성분의 효율적인 전달이 가능한 유효성분 전달 시스템이 요구되고 있다.
[선행기술문헌]
(특허문헌 1) 한국 공개특허공보 제10-2019-0095088호(2019.08.19.)
본 발명의 목적은 락트산계 중합체 및 이를 포함하는 조성물을 제공하는 것으로, 구체적으로 락트산계 중합체 입자의 표면에 위치하는 락트산계 및 폴리에틸렌글리콜을 함유하는 블록 공중합체(PEG-PLA) 및 히알루론산 혼합물을 포함하고, 그 자체로 피부에 침투하여 생리활성을 가지는 생분해성 고분자 분산체를 제공하는 것이다. 또한, 상기 락트산계 중합체 입자의 내부에 유효 성분을 포함하여, 피부의 심층으로의 유효 성분의 효과적인 전달이 가능한 생분해성 고분자 분산체를 포함하는 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 유효성분의 피부흡수를 증진시킬 수 있도록, 상기 생분해성 고분자 분산체 및 플라즈마 장치를 포함하는 피부 개선용 시스템을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위한 본 발명은 락트산계 중합체, 락트산계 중합체 및 폴리에틸렌글리콜을 함유하는 블록 공중합체 및 히알루론산 혼합물을 포함하는 생분해성 고분자 분산체인 것을 특징으로 한다.
본 발명의 일 양태로서 상기 생분해성 고분자 분산체는 평균입도가 0.01 내지 30 ㎛인 구형의 입자인 것일 수 있다.
본 발명의 일 양태로서 상기 락트산계 중합체는 중량평균분자량이 10,000 내지 1,000,000 g/mol 인 것일 수 있다.
본 발명의 일 양태로서 상기 락트산계 중합체 및 폴리에틸렌글리콜을 함유하는 블록 공중합체는 중량평균분자량이 2,000 내지 60,000 g/mol인 것일 수 있다.
본 발명의 일 양태로서 상기 락트산계 중합체와 락트산계 중합체 및 폴리에틸렌글리콜을 함유하는 블록 공중합체의 중량비는 1 : 1 내지 20 : 1인 것일 수 있다.
본 발명의 일 양태로서 상기 히알루론산 혼합물은 히알루론산, 암모늄 치환 히알루론산 및 중량평균분자량 8,000 g/mol 미만의 히알루론산 올리고머를 포함하는 것일 수 있다.
본 발명의 일 양태로서 상기 히알루론산 혼합물의 전체 중량에 대하여 고분자량 히알루론산은 50 내지 90 중량%, 암모늄 치환 히알루론산은 1 내지 10 중량%, 히알루론산 올리고머은 10 내지 35 중량%로 포함하는 것일 수 있다.
본 발명의 일 양태로서 상기 히알루론산 혼합물과 락트산계 중합체의 중량비는 1 : 3 내지 1 : 20인 것일 수 있다.
본 발명의 일 양태로서 상기 락트산계 중합체 및 폴리에틸렌글리콜을 함유하는 블록 공중합체(PEG-PLA)는 상기 락트산계 중합체를 포함하는 입자의 표면에 위치하는 것일 수 있다.
본 발명의 다른 일 양태는 상기 생분해성 고분자 분산체를 포함하는 화장료 조성물인 것을 특징으로 한다.
본 발명의 다른 일 양태는 상기 생분해성 고분자 분산체를 포함하는 피부 외용제 조성물인 것을 특징으로 한다.
본 발명의 다른 일 양태는 상기 생분해성 고분자 분산체를 포함하는 약학 조성물인 것을 특징으로 한다.
본 발명의 일 양태로서 상기 생분해성 고분자 분산체는 상기 락트산계 중합체를 포함하는 입자의 내부에 유효성분을 포함하는 것일 수 있다.
본 발명의 또 다른 일 양태는 상기 생분해성 고분자 분산체 및 플라즈마 장치를 포함하는 피부 개선용 시스템인 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따른 생분해성 고분자 분산체는 히알루론산 혼합물을 포함하는 수상에 락트산계 중합체 및 폴리에틸렌글리콜을 함유하는 블록 공중합체(PEG-PLA)가 표면에 위치하는 입자 형태의 락트산계 중합체가 분산된 형태로 포함됨으로써, 우수한 분산 안정성을 가지며, 락트산계 중합체의 입자 크기의 제어가 가능하며, 그 자체로 피부에 침투하여 생리활성을 가지는 장점을 가진다.
또한, 본 발명에 따른 생분해성 고분자 분산체는 유효 성분을 포함하여, 피부 또는 기타 장벽을 통해 유효 성분을 효과적으로 전달할 수 있다. 구체적으로, 상기 유효 성분은 친수성과 소수성의 유효 성분을 모두 포함할 수 있어, 우수한 생리활성 및 치료 또는 개선의 효과를 구현할 수 있는 장점을 가진다. 더욱이, 상기 생분해성 고분자 분산체의 락트산계 중합체 입자의 내부에 유효 성분을 더 포함함으로써, 유효 성분의 지속적 방출을 제어할 수 있다.
본 발명에 따른 생분해성 고분자 분산체는 플라즈마 장치에 의하여 생리활성 효과 및 피부 침투력이 더욱 향상되어 우수한 피부 개선 효과를 가진다.
도 1은 본 발명의 실시예 1에 따른 생분해성 고분자 분산체를 나타낸 모식도이다.
도 2 내지 도 18은 본 발명의 실시예들 및 비교예들에 따른 생분해성 고분자 분산체의 공초점 현미경(Confocal microscopy), 주사 전자 현미경(Scanning Electrone Microscope, SEM) 사진을 나타낸 것이다.
도 19는 본 발명의 실시예 1 및 실시예 4에 따른 생분해성 고분자 분산체의 인간 진피 섬유아세포에서의 세포 독성을 확인한 결과 그래프이다.
도 20은 본 발명의 실시예 1 및 실시예 4에 따른 생분해성 고분자 분산체의 인간 진피 섬유아세포에서의 플라즈마 처리 전후 프로콜라겐 합성능을 평가한 그래프이다.
도 21은 본 발명의 실시예 1 및 실시예 4에 따른 생분해성 고분자 분산체의 인간 진피 섬유아세포에서의 플라즈마 처리 전후 MMP-1 억제능을 평가한 그래프이다.
도 22은 본 발명의 실시예 1 및 실시예 4에 따른 생분해성 고분자 분산체의 인간 진피 섬유아세포에서의 플라즈마 처리 전후 엘라스타제 저해율을 평가한 그래프이다.
도 23a는 본 발명의 실시예 1 및 실시예 4에 따른 생분해성 고분자 분산체의 인간 진피 섬유아세포에서의 플라즈마 처리 전후 콜라겐 발현량을 나타낸 이미지이다.
도 23b는 본 발명의 실시예 1 및 실시예 4에 따른 생분해성 고분자 분산체의 인간 진피 섬유아세포에서의 플라즈마 처리 전후 엘라스틴 발현량을 나타낸 이미지이다.
이하 첨부된 도면들을 포함한 구체예 또는 실시예를 통해 본 발명을 더욱 상세히 설명한다. 다만 하기 구체예 또는 실시예는 본 발명을 상세히 설명하기 위한 하나의 참조일 뿐 본 발명이 이에 한정되는 것은 아니며, 여러 형태로 구현될 수 있다.
또한 달리 정의되지 않는 한, 모든 기술적 용어 및 과학적 용어는 본 발명이 속하는 당업자 중 하나에 의해 일반적으로 이해되는 의미와 동일한 의미를 갖는다. 본 발명에서 설명에 사용되는 용어는 단지 특정 구체예를 효과적으로 기술하기 위함이고 본 발명을 제한하는 것으로 의도되지 않는다.
또한 명세서 및 첨부된 청구범위에서 사용되는 단수 형태는 문맥에서 특별한 지시가 없는 한 복수 형태도 포함하는 것으로 의도할 수 있다.
또한 어떤 부분이 어떤 구성요소를 "포함"한다고 할 때, 이는 특별히 반대되는 기재가 없는 한 다른 구성요소를 제외하는 것이 아니라 다른 구성요소를 더 포함할 수 있는 것을 의미한다.
본 발명에서 사용되는 용어 '락트산계 중합체 입자'는 '락트산계 중합체를 포함하는 입자' 와 동일한 의미로 사용된 것이다.
본 발명에서 사용되는 용어 'PEG-PLA 블록 공중합체'는 '락트산계 중합체 및 폴리에틸렌글리콜을 함유하는 블록 공중합체'의 보다 구체화된 의미로 사용된 것이다.
본 발명에서 사용되는 용어 '조성물'은 '화장료 조성물', '피부 외용제 조성물' 또는 '약학 조성물'을 포함하는 의미로 사용된 것이다.
본 발명에서 사용되는 용어 '분산체'는 '수상에서 형성된 분산체'를 의미하는 것이고, '생분해성 고분자 분산체'를 포함하는 의미로 사용된 것이다.
상기 목적을 달성하기 위한 본 발명은 생분해성 고분자 분산체, 이를 포함하는 조성물 및 피부 개선용 시스템을 제공한다.
본 발명자는 우수한 생리활성을 가지고, 피부 장벽 내부로의 침투가 우수하여, 효과적인 피부 개선 또는 치료가 가능하고, 생체 내에서의 독성이 없는 전달 시스템에 관한 연구를 심화하였다. 이에 따라, 락트산계 중합체, 락트산계 중합체 및 폴리에틸렌글리콜을 함유하는 블록 공중합체(PEG-PLA 블록 공중합체) 및 히알루론산 혼합물을 포함하는 생분해성 고분자 분산체를 통해, 상기와 같은 효과를 구현할 수 있음을 확인하고 본 발명을 완성하였다.
이하, 본 발명에 따른 생분해성 고분자 분산체에 대해 상세히 설명한다.
본 발명의 일 양태에 따른 생분해성 고분자 분산체는, 락트산계 중합체, 락트산계 중합체 및 폴리에틸렌글리콜을 함유하는 블록 공중합체 및 히알루론산 혼합물을 포함하는 것일 수 있다.
상기 락트산계 중합체는 락트산을 구조단위에 포함하는 중합체를 의미하는 것이며, 상기 락트산은 L-락트산, D-락트산 또는 이들의 조합일 수 있다. 상기 락트산 단위는 락트산계 고분자를 구성하는 모든 단량체 성분 100 mol%에 대하여 50 mol% 이상으로 포함하는 것일 수 있고, 구체적으로는 60 mol% 이상일 수 있고, 더욱 구체적으로는 70 mol% 이상으로 포함하는 것일 수 있고, 이에 제한되는 것은 아니다. 상기 락트산계 중합체는 폴리락트산(Poly(lactic acid), PLA), 폴리락트산-글리콜산 공중합체(Poly(lactic-co-glycolic acid), PLGA) 등을 포함하는 것일 수 있고, 바람직하게는 폴리락트산(Poly(lactic acid), PLA)인 것일 수 있다.
상기 락트산계 중합체는 중량평균분자량이 10,000 내지 1,000,000 g/mol인 것일 수 있고, 구체적으로 13,000 내지 500,000 g/mol인 것일 수 있으며, 더욱 구체적으로는 15,000 내지 250,000 g/mol인 것일 수 있다.
상기 락트산계 중합체 및 폴리에틸렌글리콜을 함유하는 블록 공중합체는, 락트산계 중합체와 폴리에틸렌글리콜 단위를 포함하는 중합체를 의미하는 것일 수 있고, 구체적으로 락트산계 중합체와 폴리에틸렌글리콜의 이중 블록 공중합체(PEG-PLA 블록공중합체)인 것일 수 있다. 이때, 상기 락트산계 중합체는 소수성(hydrophobic)을 갖고, 폴리에틸렌글리콜은 친수성(hydrophilic)을 가져, 양친성 특성을 가지는 것일 수 있다.
상기 락트산계 중합체 및 폴리에틸렌글리콜을 함유하는 블록 공중합체에서 상기 락트산계 중합체는 L-락트산, D-락트산 및 L,D-락트산으로 이루어진 군에서 선택된 단량체의 중합체일 수 있고, 중량평균분자량이 1,000 내지 40,000 g/mol인 것일 수 있으며, 구체적으로는 1,500 내지 30,000 g/mol일 수 있다. 상기 블록 공중합체는 중량평균분자량이 2,000 내지 60,000 g/mol일 수 있고, 상기 블록 공중합체에서의 폴리에틸렌글리콜은 중량평균분자량이 1,000 내지 20,000 g/mol인 것일 수 있고, 구체적으로는 3,000 내지 15,000 g/mol인 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 상기 블록 공중합체에서 락트산계 중합체 블록과 폴리에틸렌글리콜 블록의 중량비는 95 : 5 내지 50 : 50, 구체적으로 90 : 10 내지 70 : 30, 더욱 구체적으로 90 : 10 내지 80 : 20일 수 있다.
상기 락트산계 중합체와 락트산계 중합체 및 폴리에틸렌글리콜을 함유하는 블록 공중합체는 중량비로 1 : 1 내지 20 : 1인 것으로 포함되는 것일 수 있다. 상기 중량범위의 락트산계 중합체와, 블록 공중합체를 함께 포함함에 따라 본 발명의 락트산계 중합체 입자의 입도 제어성 및 분산 안정성이 향상될 수 있고, 후술하는 히알루론산 혼합물과의 혼화성이 향상되어 더욱 바람직할 수 있다. 또한, 상기 락트산계 중합체과 블록공중합체의 중량비를 조절함에 따라, 수상에서 형성하는 분산체의 크기 및 형상을 조절할 수 있다.
보다 구체적으로 상기 락트산계 중합체와 블록 공중합체의 중량비가 1 : 1 내지 6 : 1인 경우, 상기 분산체의 크기가 0.01 내지 4 ㎛의 미립자로 제조될 수 있고, 상기 미립자의 내부에는 락트산계 중합체가 고밀도로 충진된 구형의 형상을 가지는 것일 수 있다.
상기 락트산계 중합체와 블록 공중합체의 중량비가 6 : 1 내지 9 : 1인 경우, 상기 분산체의 형태가 구형 또는 한 방향으로 신장된 형태의 타원형 입자가 제조될 수 있으며, 상기 중량비가 9 : 1 내지 15 : 1인 경우, 분산체의 내부에 기공이 형성된 구형 또는 타원형의 형상을 가질 수 있다.
상기 락트산계 중합체와 락트산계 중합체 및 폴리에틸렌글리콜을 함유하는 블록 공중합체가 포함되어 수상에서 형성하는 분산체는 구형 또는 타원형의 입자인 것일 수 있고, 상기 입자는 평균입도가 0.01 내지 30 ㎛일 수 있고, 구체적으로는 0.1 내지 20 ㎛인 것일 수 있다.
락트산계 중합체 단독으로 사용된 분산체의 경우 평균입도는 제조공정에 따라 미립화가 가능할 수 있으나 다분산도가 높고 분산체의 재연성이 떨어지는 문제가 있다. 그에 반해 본 발명에 따른 생분해성 고분자 분산체는 락트산계 중합체 및 폴리에틸렌글리콜을 함유하는 블록 공중합체가 포함됨에 따라, 제조방법에 따라 매우 높은 재연성을 가지며 높은 에너지를 가하지 않더라도 미립화가 가능하며, 입자의 분산도가 높은 장점을 가진다.
상기 히알루론산 혼합물은 히알루론산, 암모늄 치환 히알루론산 및 히알루론산 올리고머의 3 종류의 히알루론산 혼합물을 의미하는 것일 수 있다.
상기 히알루론산 혼합물에서, 상기 히알루론산은 중량평균 분자량 1,000,000 g/mol 내지 3,000,000 g/mol, 구체적으로는 1,200,000 g/mol 내지 2,200,000 g/mol의 고분자량의 히알루론산인 것일 수 있고, 상기 히알루론산 혼합물 전체 중량에 대하여 55 내지 90 중량%로 포함되는 것일 수 있고, 구체적으로 65 내지 85 중량%로 포함되는 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 암모늄 치환 히알루론산은 히알루론산의 수산기의 수소 원자 중 일부 또는 전부가 4급 암모늄 양이온기를 갖는 기로 치환된 것을 의미하는 것일 수 있고, 중량평균 분자량이 300,000 g/mol 내지 1,000,000 g/mol, 구체적으로 500,000 g/mol 800,000 g/mol인 것일 수 있고, 상기 히알루론산 혼합물 전체 중량에 대하여 1 내지 10 중량%로 포함되는 것일 수 있고, 구체적으로 3 내지 8 중량%로 포함되는 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 히알루론산 올리고머는 히알루론산의 가수분해된 상태를 의미하는 것일 수 있고, 중량평균 분자량이 8,000 g/mol 미만인 것일 수 있고, 구체적으로는 5,000 g/mol 미만의 저분자량의 히알루론산을 의미하는 것일 수 있고, 하한은 제한되지는 않으나, 800 g/mol 이상인 것일 수 있다. 상기 히알루론산 올리고머는 히알루론산 혼합물 전체 중량에 대하여 10 내지 35 중량%로 포함되는 것일 수 있고, 구체적으로 13 내지 30 중량%로 포함되는 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 히알루론산 혼합물과 락트산계 중합체의 중량비는 1 : 3 내지 1 : 20인 것일 수 있고, 구체적으로 1 : 4 내지 1 : 16인 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상술한 바와 같은 서로 다른 3종의 히알루론산의 혼합물을 사용함에 따라 후술하는 생분해성 고분자 분산체의 락트산계 중합체 입자의 분산 안정성을 더욱 향상시킬 수 있다. 특히 히알루론산 혼합물이 락트산계 중합체 입자와 결합됨에 따라 피부 장벽층과의 상호작용이 현저하게 향상될 수 있다. 통상적인 락트산계 중합체는 결정성이 높고 피부 장벽층을 구성하는 지질층과 낮은 상호작용을 가져 피부 장벽층에 흡착 또는 투과 특성이 현저하게 낮은 것으로 알려져있다. 그러나 히알루론산 혼합물이 락트산계 중합체 입자와 혼합되어, 락트산계 중합체 입자의 표면을 수화시켜 락트산계 중합체 입자가 피부 장벽층과 상호작용이 현저하게 향상되어 피부 장벽층에 강하게 흡착되거나 투과될 수 있다. 이에 따라 생분해성 고분자 분산체를 피부에 적용시, 피부 세포의 탄력 개선, 노화 억제 및 피부 세포의 생장 촉진 등의 생리활성을 더욱 향상시킬 수 있어 바람직하다.
본 발명의 바람직한 일 양태에 따른 생분해성 고분자 분산체는, 도 1에서와 같이, 히알루론산 혼합물을 포함하는 연속상 상에 락트산계 중합체 입자가 분산되어 있고, 상기 락트산계 중합체 입자의 표면에 락트산계 중합체 및 폴리에틸렌글리콜을 함유하는 블록 공중합체가 위치하는 것일 수 있다. 보다 구체적으로 상기 블록 공중합체는 소수성의 락트산계 중합체 부분이 상기 락트산계 중합체 입자를 향하는 형태로 위치하고, 친수성인 폴리에틸렌글리콜이 연속상을 향하는 형태로 위치한다. 이때, 연속상을 형성하는 3종류의 서로 다른 히알루론산을 혼합한 히알루론산 혼합물에 의하여, 상기 블록 공중합체의 소수성 부분인 락트산계 중합체 부분이 입자의 표면에 더욱 조밀하게 위치할 수 있으며, 친수성 부분인 폴리에틸렌글리콜에 의하여 우수한 분산 안정성을 구현할 수 있어, 연속상 내에 분산상인 다량의 락트산계 중합체 입자를 수용할 수 있어 더욱 바람직할 수 있다. 이에 따라 상기 생분해성 고분자 분산체에 후술하는 유효 성분을 각각의 상에 독립적으로 포함할 수 있어 더욱 바람직할 수 있다.
이하, 본 발명에 따른 생분해성 고분자 분산체의 제조방법에 대해 상세히 설명한다.
본 발명에 따른 생분해성 고분자 분산체의 제조방법은, 폴리락트산계 중합체와 블록공중합체를 용매에 용해시켜 고분자 용액을 제조하는 단계; 히알루론산 혼합물과 물을 혼합한 수용액을 제조하는 단계; 상기 고분자 용액에 수용액을 혼합하여 분산액을 제조하는 단계; 상기 분산액에서 용매를 제거하는 단계;를 포함하는 것일 수 있다.
상기 고분자 용액을 제조하는 단계는 상술한 폴리락트산계 중합체와 블록 공중합체를 용매에 용해시켜 제조하는 것일 수 있고, 상기 용매는 물에 대해 혼화성을 가지는 유기용매이면 제한되지 않으나, 구체적으로 아세톤(Acetone), 에탄올(Ethanol), 아세트산(Acetic acid), N,N-디메틸포름아마이드(N,N-Dimethylformamide) 및 N,N-디메틸아세트아마이드(N,N-Dimethylacetamie)로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 또는 둘 이상의 혼합물일 수 있고, 바람직하게는 아세톤(Acetone)을 사용하는 것일 수 있다.
상기 고분자 용액 전체 중량에 대하여, 상기 용매는 70 중량% 내지 95 중량%로 포함되는 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 수용액을 제조하는 단계는 상술한 3종의 히알루론산을 사용하는 것일 수 있고, 상기 물은 전체 수용액에 대하여 95 중량% 내지 99.9 중량%로 포함되는 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 분산액을 제조하는 단계는 상기 고분자 용액에 수용액을 혼합하여 제조하는 것일 수 있고, 상기 고분자 용액과 수용액은 부피비로 1 : 1 내지 1 : 3로 혼합하여 제조되는 것일 수 있다. 이때, 상기 분산액은 수용액이 연속상을 형성하고, 상기 연속상 상으로 용매가 추출되어 상분리된 고분자가 분산상을 형성하는 것일 수 있다. 구체적으로 상기 분산상은 분산된 락트산계 중합체 입자의 표면에 락트산계 중합체 및 폴리에틸렌글리콜을 함유하는 블록 공중합체가 위치한 것일 수 있다.
상기 용매를 제거하는 단계는, 제한되지 않으나, 구체적으로 증발을 이용하는 것일 수 있고, 상기 증발 조건은 20 내지 130 ℃에서 1 시간 내지 48 시간 동안 수행되는 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니며, 사용하는 용매의 종류에 따라, 증발 조건을 조절할 수 있다. 또한 상기 증발은 감압 하에서 수행되는 것일 수도 있다.
상술한 단계를 거쳐 제조된 본 발명의 생분해성 고분자 분산체는 상기 히알루론산 혼합물을 포함하는 연속상 상에, 상기 락트산계 중합체 입자가 분산되고, 상기 락트산계 중합체 입자는 표면에 락트산계 중합체 및 폴리에틸렌글리콜을 함유하는 블록 공중합체가 위치하는 형태인 것일 수 있다.
본 발명의 일 양태에 따른 생분해성 고분자 분산체는 그 자체로의 우수한 생리활성 특성과, 생체적합성 및 다량의 유효 성분을 포함할 수 있는 높은 담지 특성을 가져, 다양한 분야로의 적용이 가능하고, 구체적으로 상기 생분해성 고분자 분산체를 포함하는 화장료 조성물 또는 피부 외용제 조성물 또는 약학 조성물 등을 들 수 있다. 보다 구체적으로, 상기 유효 성분의 적용 양태는, 친수성의 연속상인 히알루론산 혼합물에 친수성의 유효 성분을 포함하는 제1 양태, 소수성의 락트산계 중합체 내부에 소수성의 유효 성분을 포함하는 제2 양태, 친수성의 연속상인 히알루론산 혼합물과 소수성의 락트산계 중합체 내부 각각에 유효 성분을 포함하는 제3 양태를 포함하는 것일 수 있다.
상기 유효 성분은 피부 또는 기타 조직에서 생리활성이 있는 공지되어 있는 활성 성분이면 제한 없이 사용할 수 있고, 본 발명의 생분해성 고분자 분산체의 물성을 저해하지 않는 범위 내에서 추가의 향료, 비타민, 안정제, 황산화제 등과 같은 인체에 유해하지 않은 통상적인 첨가제를 더 포함할 수도 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상술한 본 발명의 생분해성 고분자 분산체 또는 상기 생분해성 고분자 분산체를 포함하는 조성물은 공지된 내용제와 외용제 등의 제형으로 적용이 가능하며, 바람직하게는 크림, 연고, 로션, 겔 등의 외용제로 적용하는 것일 수 있다.
상기 생분해성 고분자 분산체 또는 상기 생분해성 고분자 분산체를 포함하는 조성물은 피부에 직접적으로 도포될 수 있고, 도포된 부위로 플라즈마 처리하는 경우, 상기 생분해성 고분자 분산체의 피부 내로 침투가 증가하고, 피부 내로의 흡수가 촉진됨에 따라, 생리활성 특성을 가속화시킬 수 있어, 단시간 내 효과적인 피부 개선이 가능하고, 피부 재생에 의한 치료에 도움을 줄 수 있어, 피부 개선에 적용 가능한 것이다. 또한, 상기 생분해성 고분자 분산체에 추가의 유효 성분을 포함하는 경우, 플라즈마 처리에 의하여, 피부 심층으로의 유효 성분의 확산을 촉진시켜, 피부 개선 또는 치료 효과를 더욱 극대화할 수 있어 바람직하다.
상기와 같은 특성을 가지는 본 발명의 일 양태에 따른 생분해성 고분자 분산체 또는 이를 포함하는 조성물은 플라즈마 처리 장치와 함께 구비되어 바람직한 피부 개선 시스템으로 사용될 수 있다.
이하 실시예 및 비교예를 바탕으로 본 발명을 더욱 상세히 설명한다. 다만 하기 실시예 및 비교예는 본 발명을 더욱 상세히 설명하기 위한 하나의 예시일 뿐, 본 발명이 하기 실시예 및 비교예에 의해 제한되는 것은 아니다.
[실험방법]
1. 고분자 분산체의 생성 확인
제조된 생분해성 고분자 분산체를 공초점 레이저 주사 현미경(Confocal laser scanning microscopy, CLSM)으로 생분해성 고분자 분산체의 형성을 분석하였다.　
2. 고분자 분산체의 물성 측정
제조된 생분해성 고분자 분산체를 동결건조하여, 주사전자현미경(Scanning Electron Microscope, SEM) 사진을 측정하였고, 또한, 제조된 생분해성 고분자를 나노제타 전위측정기(Malvern InstrumentsZetasizer사의 Nano ZSP)를 이용하여, 입도 및 입도분포를 측정하였다.
[실시예 1]
아세톤 25 mL에 폴리락트산(EVONIK사, RESOMER® R 202 S) 1.25 g과 PEG-PLA 블록공중합체(EBONIK사, RESOMER 100 DL mPEG5000) 1.25 g이 혼합된 고분자 용액을 제조하였다.
증류수 1,000 mL에 히알루론산(분자량 1,200,000 g/mol) 6 g, 암모늄 치환 히알루론산으로 하이드록시프로필트리암모늄 히알루론산(분자량 500,000 g/mol) 0.4 g, 히알루론산 올리고머로 가수분해된 히알루론산나트륨(분자량 5,000 g/mol) 1.6 g을 혼합하여 수용액을 제조하였다.
이후, 수용액 50mL에 상기 제조된 고분자 용액 25mL를 교반 하에 서서히 혼합하고, 혼합이 완료된 용액을 상온에서 아세톤을 감압 증발함으로써 생분해성 고분자 분산체를 제조하였다.
[실시예 2]
상기 실시예 1에서 폴리락트산을 1.67 g, PEG-PLA 블록공중합체 0.83 g을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1과 동일하게 수행하여, 생분해성 고분자 분산체를 제조하였다.
[실시예 3]
상기 실시예 1에서 폴리락트산을 1.87 g, PEG-PLA 블록공중합체 0.63 g을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1과 동일하게 수행하여, 생분해성 고분자 분산체를 제조하였다.
[실시예 4]
상기 실시예 1에서 폴리락트산을 2.08 g, PEG-PLA 블록공중합체 0.5 g을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1과 동일하게 수행하여, 생분해성 고분자 분산체를 제조하였다.
[실시예 5]
상기 실시예 1에서 폴리락트산을 2.08 g, PEG-PLA 블록공중합체 0.42 g을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1과 동일하게 수행하여, 생분해성 고분자 분산체를 제조하였다.
[실시예 5]
상기 실시예 1에서 폴리락트산을 2.08 g, PEG-PLA 블록공중합체 0.42 g을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1과 동일하게 수행하여, 생분해성 고분자 분산체를 제조하였다.
[실시예 6]
상기 실시예 1에서 폴리락트산을 2.14 g, PEG-PLA 블록공중합체 0.36 g을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1과 동일하게 수행하여, 생분해성 고분자 분산체를 제조하였다.
[실시예 7]
상기 실시예 1에서 폴리락트산을 2.22 g, PEG-PLA 블록공중합체 0.28 g을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1과 동일하게 수행하여, 생분해성 고분자 분산체를 제조하였다.
[실시예 8]
상기 실시예 1에서 아세톤 33 mL에 폴리락트산을 3.0 g, PEG-PLA 블록공중합체 0.3 g을 혼합한 용액을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1과 동일하게 수행하여, 생분해성 고분자 분산체를 제조하였다.
[실시예 9]
상기 실시예 1에서 아세톤 48 mL에 폴리락트산을 4.5 g, PEG-PLA 블록공중합체 0.3 g을 혼합한 용액을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1과 동일하게 수행하여, 생분해성 고분자 분산체를 제조하였다.
[실시예 10]
상기 실시예 1에서 아세톤 63 mL에 폴리락트산을 6.0 g, PEG-PLA 블록공중합체 0.3 g을 혼합한 용액을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1과 동일하게 수행하여, 생분해성 고분자 분산체를 제조하였다.
[실시예 11]
상기 실시예 1에서 폴리락트산 대신 폴리락테이트-co-글라이클레이트(EVONIK사, RESOMER RG 752 S) 1.5 g를 사용하고, PEG-PLA 공중합체를 0.5 g 사용하는 것을 제외하고는, 실시예 1과 동일하게 수행하여, 생분해성 고분자 분산체를 제조하였다.
[비교예 1]
상기 실시예 1에서 수용액 대신 물(H2O) 50mL를 사용하는 것을 제외하고는 실시예 1과 동일하게 수행하여, 생분해성 고분자 분산체를 제조하였다.
[비교예 2]
상기 실시예 2에서 수용액 대신 물(H2O) 50mL를 사용하는 것을 제외하고는 실시예 1과 동일하게 수행하여, 생분해성 고분자 분산체를 제조하였다.
[비교예 3]
상기 실시예 4에서 수용액 대신 물(H2O) 50mL를 사용하는 것을 제외하고는 실시예 1과 동일하게 수행하여, 생분해성 고분자 분산체를 제조하였다.
[비교예 4]
상기 실시예 7에서 수용액 대신 물(H2O) 50mL를 사용하는 것을 제외하고는 실시예 1과 동일하게 수행하여, 생분해성 고분자 분산체를 제조하였다.
[비교예 5]
상기 실시예 1에서 폴리락트산을 사용하지 않는 것을 제외하고는 실시예 1과 동일하게 수행하여, 생분해성 고분자 분산체를 제조하였다.
[비교예 6]
상기 실시예 1에서 PEG-PLA 블록공중합체를 사용하지 않는 것을 제외하고는 실시예 1과 동일하게 수행하여, 생분해성 고분자 분산체를 제조하였다.
상기 실시예들 및 비교예들에 대하여 하기와 같이 특성을 평가하였다.
[실험예 1] 생분해성 고분자 분산체의 생성 및 입도 평가
상기 실시예 1 내지 11 및 비교예 1 내지 6에서 제조한 생분해성 고분자 분산체 내의 분산된 입자의 평균 입도를 측정하여 하기 표 1에 나타내었다.
Figure PCTKR2021011507-appb-img-000001
상기 실시예 1 내지 11 및 비교예 1 내지 6에서 제조한 생분해성 고분자 분산체 공초점 현미경 사진 및 주사전자현미경(SEM) 사진을 도 2 내지 18에 각각 나타내었다.
상기 표 1 및 도 2 내지 12에서와 같이, 실시예 1 내지 11의 경우, 생분해성 분산체가 구형 또는 타원형의 형태를 가지는 입자가 형성된 것을 확인할 수 있었고, 또한, 평균 입도가 10 ㎛ 미만의 크기를 가지는 것을 확인할 수 있었다.
이에 반해, 상기 표 1 및 도 13 내지 18에서와 같이, 비교예 1 내지 4의 경우, 3종의 히알루론산이 혼합된 수용액 대신 물을 사용하는 경우, 생성된 생분해성 고분자 분산체의 입자가 불균일하고, 평균 입도가 15 ㎛ 이상의 크기를 가지는 것을 확인할 수 있었다. 또한, 비교예 5의 경우, 폴리락트산(PLA)를 사용하지 않는 경우, 생성되는 생분해성 고분자 분산체의 입자가 크게 뭉치는 현상을 확인할 수 있었고, PEG-PLA 블록공중합체를 이용하지 않은 비교예 6의 경우, 폴리락트산(PLA)가 크게 뭉쳐서, 미세입자가 아닌 침전물이 생성되는 것을 확인할 수 있었다.
[실험예 2] 생분해성 고분자 분산체의 생리활성 특징 평가
상기 실시예 1 및 실시예 4에 따라 제조된 생분해성 고분자 분산체에 대하여 플라즈마 조사 전후의 생리활성 변화를 측정하였다. 플라즈마는 헬륨 플라즈마 조사기기를 사용하였으며, 하기 조건에 따라 실시하였다.
인간 진피 섬유아세포(human dermal fibroblast: HDF-N)(GIBCO)를 Medium 106(Gibco-BRL, Gaithersburg, MD) 배지와 저혈청 성장 보조제(LSGS; Gibco-BRL, Gaithersburg, MD)를 함유하고 1 % 페니실린/스트렙토마이신을 첨가한 배지에서 37 ℃ 5 % CO2 조건으로 배양하였다.
Figure PCTKR2021011507-appb-img-000002
2-1. 세포 독성 평가
인간 진피 섬유아세포 (HDF-N)를 96-웰플레이트에 분주하고, 37 ℃ 5 % CO2 조건에서 24시간 배양하였다. 이후 보충제가 제거된 배지로 교체하여 24시간 배양하였고, 양성 대조군의 경우 배지로 시험물질을 희석하여 교체하여, 24시간 배양하였다. 이후 5 mg/ml 농도의 MTT 용액을 처리하여 37℃배양기에서 4시간 동안 추가 배양하였다. 배양 후 상등액을 제거하고 MTT 환원에 의해 형성된 formazan에 DMSO를 첨가하여 세포를 용해시킨 다음, ELISA microplate reader (SoftMax Pro5, Molecular Devices, USA)를 이용하여 540 nm에서 흡광도를 측정하였다. 모든 데이터는 평균 표준편차로 표시하였다. 각 데이터의 통계 분석은 Student's t-test의 양측검정을 시행하였으며, 대조군과 대비하여 p < 0.05인 경우 유의성이 있다고 판단하였다.
실험 결과 도 19에서 도시하고 있는 바와 같이, 본 발명의 구체적 실시예 1 및 4에 따른 생분해성 고분자 분산체를 농도별로 희석하여 세포 생존율을 측정한 결과, 50% 농도까지 세포 독성이 없는 것으로 분석되어, 인간 진피 섬유아세포에서 안정성을 확인할 수 있었다.
2-2. 프로콜라겐 합성능 평가
인간 진피 섬유아세포(HDF-N)를 6-웰플레이트에 분주하고, 37 ℃5 % CO2 조건에서 24시간 배양하였다. 이후 보충제가 제거된 배지로 교체하여, 24시간 세포의 기아상태를 유지한 후, 실시예 1 및 4에 따른 생분해성 고분자 분산체를 처리한 후, 플라즈마를 3초 동안 조사하였다. 24시간 배양한 후, 배양된 세포의 배지를 수거하여 프로콜라겐 Type I C-Peptide (PIP) ELISA 키트 (MK101, Takara Bio Inc.)를 사용하여 프로콜라겐 양을 측정하였다. 모든 데이터는 평균 표준편차로 표시하였다. 각 데이터의 통계 분석은 Student's t-test의 양측검정을 시행하였으며, 대조군과 대비하여 p < 0.05인 경우 유의성이 있다고 판단하였다.
실험 결과 도 20에서 도시된 바와 같이, 대조군에 비하여, 실시예 1, 실시예 4 및 플라즈마만을 처리한 그룹에서 유의적인 효과를 확인하였다. 특히 실시예 1 및 실시예 4에 따른 생분해성 고분자 분산체에 플라즈마를 처리한 그룹에서 프로콜라겐 합성능의 우수한 것으로 나타났다. 상기 우수한 프로콜라겐 합성능을 통해 본 발명에 따른 생분해성 고분자 분산체 및 플라즈마 처리 시 세포 내에서의 콜라겐 생합성이 증가하여 피부 재생 및 노화 방지 효과를 제공할 수 있음을 확인하였다.
2-3. MMP-1 억제능 평가
인간 진피 섬유아세포(HDF-N)를 6-웰플레이트에 분주하고, 37 ℃5 % CO2 조건에서 24시간 배양하였다. 이후 보충제가 제거된 배지로 교체하여, 24시간 세포의 기아상태를 유지한 후, 배지를 제거하고 DPBS로 세척한 다음 DPBS 200 ㎕를 첨가하여 UVB 30 mJ를 조사하였다. UVB를 조사한 후, 실시예 1 및 4에 따른 생분해성 고분자 분산체를 처리하고, 플라즈마를 3초 동안 조사하였다. 24시간 배양한 후, 배양된 세포의 배지를 수거하여 Human MMP-1 ELISA 키트 (ELH-MMP-1, RayBio Inc.)를 사용하여 MMP-1의 양을 측정하였다. 모든 데이터는 평균 표준편차로 표시하였다. 각 데이터의 통계 분석은 Student's t-test의 양측검정을 시행하였으며, 대조군과 대비하여 p < 0.05인 경우 유의성이 있다고 판단하였다.
실험 결과 도 21에 도시된 바와 같이, 본 발명의 실시예 1, 실시예 4 에 따른 생분해성 고분자 분산체 및 플라즈마 단독 처리군은 대조군과 대비하여 MMP-1이 유의적으로 증가함을 확인하였다. 다만, MMP-1의 발현 억제 효능에 있어서는 실시예 1 및 실시예 4에 플라즈마를 처리한 경우 유의적 차이는 나타나지 않았다.
2-4. 엘라스타제 저해율 평가
인간 진피 섬유아세포(HDF-N)를 6-웰플레이트에 분주하고, 37 ℃5 % CO2 조건에서 24시간 배양하였다. 이후 보충제가 제거된 배지로 교체하여, 24시간 세포의 기아상태를 유지한 후, 실시예 1 및 4에 따른 생분해성 고분자 분산체를 처리하고, 플라즈마를 3초 동안 조사하였다. 배양된 세포를 DPBS로 세척하고, 0.1% triton X-100 · 0.2M Tris 액 (pH 8.0) 용액을 넣어 녹인 후, 이를 액체 질소에서 얼렸다 녹였다를 3회 반복하여 세포를 균질화(homogenization) 하였다. 이를 4 ℃에서 3000 rpm으로 20분간 원심분리한 후, 상층액을 취하여 섬유아세포 엘라스타제를 포함하는 효소액을 수득하였다. 상기 효소액을 단백질 정량하여 96-웰플레이트에 98 ㎕의 부피를 맞춰 동량을 취한 뒤, 엘라스타제의 기질인 STANA (N-succinyl-tri-alanyl-p-nitroanilide, 50 mM)액을 2 ㎕씩 각 웰 당 넣고, 37℃에서 배양하였다. 90분 경과 후, 405 nm에서 ELISA Reader로 엘라스타제 양을 측정하였다. 모든 데이터는 평균 표준편차로 표시하였다. 각 데이터의 통계 분석은 Student's t-test의 양측검정을 시행하였으며, 대조군과 대비하여 p < 0.05인 경우 유의성이 있다고 판단하였다.
실험 결과 도 22에 나타난 바와 같이, 본 발명의 실시예 1, 실시예 4 에 따른 생분해성 고분자 분산체 및 플라즈마 단독 처리군은 대조군과 대비하여 엘라스타제의 활성이 유의적으로 감소함을 확인하였다. 특히 실시예 1 및 실시예 4에 따른 생분해성 고분자 분산체에 플라즈마를 처리한 경우 엘라스타제의 활성이 보다 더 감소하여 엘라스틴의 분해 저해 효과가 유의미하게 나타난 것을 확인할 수 있었다.
2-5. 인공피부의 조직학적 평가
FBS(Invitrogen-GIBCO-BRL, Grand Island, NY)를 첨가한 배지를 12-웰플레이트에 1 ㎖씩 분주하고, 인간의 피부세포를 이용하여 진피 및 표피를 재현한 인공피부(Neoderm-ED, 테고사이언스)를 조심스럽게 옮겨 37 ℃5% CO2 배양 조건에서 24시간 배양하였다. 그 후, 상기 실시예 1 및 4에서 제조한 생분해성 고분자 분산체를 인공피부에 처리하고, 플라즈마를 3초 동안 조사하였다. 24시간 배양 후, 인공피부를 10% NBF(neutral buffered formalin) 용액에 고정한 다음 파라핀에 포매하여 굳히고, 5 ㎛ 절편을 제작하였다. 그리고 MT 염색(Masson Trichrome staining), VVG 염색(Verhoeff-van Gieson staining)을 한 후, 조직 슬라이드 스캐너(Pannoramic MID II, 3D histech Ltd., HU)로 인공피부의 조직을 관찰하였다.
MT 염색 결과, 도 23a에 도시된 바와 같이, 본 발명의 실시예 1, 실시예 4 에 따른 생분해성 고분자 분산체 및 플라즈마 단독 처리군은 대조군과 대비하여 콜라겐 발현량이 증가하는 것을 확인할 수 있었다. 특히 실시예 1 및 실시예 4에 따른 생분해성 고분자 분산체에 플라즈마를 처리한 경우 콜라겐 발현량이 더욱 증가한 것을 확인할 수 있었다.
VVG 염색 결과, 도 23b에 도시된 바와 같이, 본 발명의 실시예 1, 실시예 4 에 따른 생분해성 고분자 분산체 및 플라즈마 단독 처리군은 대조군과 대비하여 엘라스틴 발현량이 증가하는 것을 확인할 수 있었다. 특히 실시예 1 및 실시예 4에 따른 생분해성 고분자 분산체에 플라즈마를 처리한 경우 엘라스틴 발현량이 더욱 증가한 것을 확인할 수 있었다.
이상과 같이 본 발명에서는 특정된 사항들과 한정된 실시예 및 도면에 의해 설명되었으나 이는 본 발명의 보다 전반적인 이해를 돕기 위해서 제공된 것일 뿐, 본 발명은 상기의 실시예에 한정되는 것은 아니며, 본 발명이 속하는 분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 이러한 기재로부터 다양한 수정 및 변형이 가능하다.
따라서, 본 발명의 사상은 설명된 실시예에 국한되어 정해져서는 아니되며, 후술하는 청구범위뿐 아니라 이 청구범위와 균등하거나 등가적 변형이 있는 모든 것들은 본 발명 사상의 범주에 속한다고 할 것이다.

Claims (14)

  1. 락트산계 중합체, 락트산계 중합체 및 폴리에틸렌글리콜을 함유하는 블록 공중합체 및 히알루론산 혼합물을 포함하는 생분해성 고분자 분산체.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 생분해성 고분자 분산체는 평균입도가 0.01 내지 30 ㎛인 구형의 입자인 생분해성 고분자 분산체.
  3. 제1항에 있어서,
    상기 락트산계 중합체는 중량평균분자량이 10,000 내지 1,000,000 g/mol 인 생분해성 고분자 분산제.
  4. 제1항에 있어서,
    상기 락트산계 중합체 및 폴리에틸렌글리콜을 함유하는 블록 공중합체는 중량평균분자량이 2,000 내지 60,000 g/mol인 생분해성 고분자 분산제.
  5. 제1항에 있어서,
    상기 락트산계 중합체와 락트산계 중합체 및 폴리에틸렌글리콜을 함유하는 블록 공중합체의 중량비는 1 : 1 내지 20 : 1인 생분해성 고분자 분산제.
  6. 제1항에 있어서,
    상기 히알루론산 혼합물은 히알루론산, 암모늄 치환 히알루론산 및 중량평균분자량 8,000 g/mol 미만의 히알루론산 올리고머를 포함하는 것인 생분해성 고분자 분산제.
  7. 제6항에 있어서,
    상기 히알루론산 혼합물의 전체 중량에 대하여 고분자량 히알루론산은 50 내지 90 중량%, 암모늄 치환 히알루론산은 1 내지 10 중량%, 히알루론산 올리고머은 10 내지 35 중량%로 포함하는 것인 생분해성 고분자 분산체.
  8. 제1항에 있어서,
    상기 히알루론산 혼합물과 락트산계 중합체의 중량비는 1 : 3 내지 1 : 20인 생분해성 고분자 분산체.
  9. 제2항에 있어서,
    상기 락트산계 중합체 및 폴리에틸렌글리콜을 함유하는 블록 공중합체(PEG-PLA)는 상기 락트산계 중합체를 포함하는 입자의 표면에 위치하는 것인 생분해성 고분자 분산체.
  10. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항의 생분해성 고분자 분산체를 포함하는 화장료 조성물.
  11. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항의 생분해성 고분자 분산체를 포함하는 피부 외용제 조성물.
  12. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항의 생분해성 고분자 분산체를 포함하는 약학 조성물.
  13. 제12항에 있어서,
    상기 생분해성 고분자 분산체는 상기 락트산계 중합체를 포함하는 입자의 내부에 유효성분을 포함하는 것인 약학 조성물.
  14. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항의 생분해성 고분자 분산체 및 플라즈마 장치를 포함하는 피부 개선용 시스템.
PCT/KR2021/011507 2020-08-31 2021-08-27 생분해성 고분자 분산체, 이를 포함하는 조성물 및 피부 개선용 시스템 Ceased WO2022045823A1 (ko)

Priority Applications (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP21862119.1A EP4122442A4 (en) 2020-08-31 2021-08-27 BIODEGRADABLE POLYMER DISPERSION, COMPOSITION THEREOF AND SKIN IMPROVEMENT SYSTEM
CN202180026768.4A CN115427012B (zh) 2020-08-31 2021-08-27 生物降解性高分子分散体、包含其的组合物和皮肤改善用系统
BR112022020991A BR112022020991A2 (pt) 2020-08-31 2021-08-27 Dispersão de polímero biodegradável, composição compreendendo a mesma e sistema de melhoria da pele
US17/996,781 US20230149288A1 (en) 2020-08-31 2021-08-27 Biodegradable polymer dispersion, composition comprising same, and skin improvement system

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR10-2020-0110235 2020-08-31
KR20200110235 2020-08-31
KR10-2021-0112934 2021-08-26
KR1020210112934A KR102905790B1 (ko) 2020-08-31 2021-08-26 생분해성 고분자 분산체, 이를 포함하는 조성물 및 피부 개선용 시스템

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2022045823A1 true WO2022045823A1 (ko) 2022-03-03

Family

ID=80355507

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/KR2021/011507 Ceased WO2022045823A1 (ko) 2020-08-31 2021-08-27 생분해성 고분자 분산체, 이를 포함하는 조성물 및 피부 개선용 시스템

Country Status (5)

Country Link
US (1) US20230149288A1 (ko)
EP (1) EP4122442A4 (ko)
CN (1) CN115427012B (ko)
BR (1) BR112022020991A2 (ko)
WO (1) WO2022045823A1 (ko)

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20020045569A (ko) * 2000-12-07 2002-06-19 김윤 수난용성 약물의 서방성 제형 조성물
WO2014039012A1 (en) * 2012-09-06 2014-03-13 Nanyang Technological University Hyaluronic acid-based drug delivery systems
US20150044270A1 (en) * 2010-02-25 2015-02-12 The Johns Hopkins University Sustained delivery of therapeutic agents to an eye compartment
KR20160053230A (ko) * 2014-10-31 2016-05-13 (주)프로스테믹스 피부 미용기 및 이의 용도
KR20180003443A (ko) * 2016-06-30 2018-01-09 (주)아모레퍼시픽 분자량이 상이한 히알루론산들을 함유하는 화장료 조성물
KR20190095088A (ko) 2018-10-19 2019-08-14 주식회사 레모넥스 생리활성물질 전달체

Family Cites Families (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100360827B1 (ko) * 1999-08-14 2002-11-18 주식회사 삼양사 난용성 약물을 가용화하기 위한 고분자 조성물 및 그의 제조방법
KR100416242B1 (ko) * 1999-12-22 2004-01-31 주식회사 삼양사 약물전달체용 생분해성 블록 공중합체의 액체 조성물 및이의 제조방법
US20040185101A1 (en) * 2001-03-27 2004-09-23 Macromed, Incorporated. Biodegradable triblock copolymers as solubilizing agents for drugs and method of use thereof
CN1283692C (zh) * 2002-07-12 2006-11-08 天津大学 聚乙二醇－b－聚乳酸两亲性二嵌段共聚物的制备方法
CN101283966A (zh) * 2008-06-05 2008-10-15 复旦大学 一种生物降解性水凝胶控释制剂及其制备方法和应用
KR101014652B1 (ko) * 2008-08-01 2011-02-16 (주)더페이스샵 세정용 화장료 조성물
CN101766584B (zh) * 2008-12-30 2013-03-06 华东理工大学 聚乙二醇/水溶性壳聚糖协同修饰的长循环可降解聚合物纳米微囊及其制备方法
CN101812227B (zh) * 2010-02-08 2012-01-25 中国科学院长春应用化学研究所 一种基于非线性聚乙二醇-聚乳酸嵌段共聚物的胶束及制备方法
KR101306765B1 (ko) * 2011-02-28 2013-09-10 부산대학교병원 히아루론산과 폴리락타이드글리코라이드공중합으로 이루어지는 블록공중합체 및 이를 이용한 치료용 약물을 담지한 고분자 담지체
CN102304193A (zh) * 2011-09-29 2012-01-04 胡如桂 一种寡聚透明质酸的制备方法及其用途
WO2015018461A1 (fr) * 2013-08-09 2015-02-12 Genbiotech Compositions therapeutiques comprenant d'acide hyaluronique
CN104056275B (zh) * 2014-05-30 2017-09-19 中国药科大学 多功能主动靶向透明质酸‑聚乳酸载体合成及其抗肿瘤药物胶束制备方法
SG11201802073YA (en) * 2015-09-15 2018-04-27 Samyang Biopharmaceuticals Pharmaceutical composition containing anionic drug, and preparation method therefor
CN108245483A (zh) * 2016-12-28 2018-07-06 中国人民解放军第二军医大学 一种包载难溶性抗肿瘤药物的聚合物纳米胶束体系
KR101915381B1 (ko) * 2017-02-10 2018-11-05 광운대학교 산학협력단 피부 밀착형 플라즈마 피부치료 장치
AU2018265415A1 (en) * 2017-05-10 2019-10-31 Graybug Vision, Inc. Extended release microparticles and suspensions thereof for medical therapy
KR102378824B1 (ko) * 2018-07-13 2022-03-25 주식회사 삼양홀딩스 피부 콜라겐 생성 촉진용 생분해성 고분자 실 필러 및 이의 제조방법
WO2020102758A1 (en) * 2018-11-15 2020-05-22 Graybug Vision, Inc. Improved aggregated microparticles
CN110051587A (zh) * 2019-05-04 2019-07-26 广州市爱百伊生物技术有限公司 一种含多种玻尿酸的抗衰老组合物的制备方法和应用
CN111150883A (zh) * 2020-01-14 2020-05-15 北京四环制药有限公司 可生物降解的注射填充物及其制备方法和其应用

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20020045569A (ko) * 2000-12-07 2002-06-19 김윤 수난용성 약물의 서방성 제형 조성물
US20150044270A1 (en) * 2010-02-25 2015-02-12 The Johns Hopkins University Sustained delivery of therapeutic agents to an eye compartment
WO2014039012A1 (en) * 2012-09-06 2014-03-13 Nanyang Technological University Hyaluronic acid-based drug delivery systems
KR20160053230A (ko) * 2014-10-31 2016-05-13 (주)프로스테믹스 피부 미용기 및 이의 용도
KR20180003443A (ko) * 2016-06-30 2018-01-09 (주)아모레퍼시픽 분자량이 상이한 히알루론산들을 함유하는 화장료 조성물
KR20190095088A (ko) 2018-10-19 2019-08-14 주식회사 레모넥스 생리활성물질 전달체

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
See also references of EP4122442A4

Also Published As

Publication number Publication date
US20230149288A1 (en) 2023-05-18
EP4122442A1 (en) 2023-01-25
EP4122442A4 (en) 2024-05-22
BR112022020991A2 (pt) 2023-03-07
CN115427012B (zh) 2024-07-02
CN115427012A (zh) 2022-12-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Ayumi et al. Polymeric nanoparticles for topical delivery of alpha and beta arbutin: preparation and characterization
WO2020116892A2 (ko) 생리활성물질 봉입을 위한 나노지질전달체 및 이의 제조방법
HU220373B (hu) Vérellátást javító, tartós mágnességű részeket tartalmazó készítmény
JP4627727B2 (ja) 多価金属無機塩被覆レチノイン酸ナノ粒子含有組成物
WO2010016686A2 (ko) 국소 투여용 나노에멀젼
WO2016013755A1 (ko) 레티놀 또는 레티놀 유도체를 함유하는 마이크로니들
CN110691607A (zh) 神经营养素用于治疗听力损失的用途
WO2010079978A2 (ko) Abh 항원을 이용한 염증질환 개선용 조성물
JP2018510883A (ja) タンパク質またはペプチド伝達用の溶解性マイクロニドル
Li et al. Biodegradable PLLA/PLGA microspheres/collagen composites for continuous soft tissue augmentation
KR20220029449A (ko) 생분해성 고분자 분산체, 이를 포함하는 조성물 및 피부 개선용 시스템
WO2022045823A1 (ko) 생분해성 고분자 분산체, 이를 포함하는 조성물 및 피부 개선용 시스템
WO2024043713A1 (ko) 자연살해세포 유래 엑소좀 및 생체적합성 고분자를 유효성분으로 포함하는 조성물 및 이의 용도
KR20240140325A (ko) 바쿠치올이 봉입된 NLC(Nanostructured Lipid Carriers)를 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물
WO2009134091A2 (ko) 난용성 약물을 함유하는 균일한 크기의 고분자 나노입자 제조방법
JP2013010704A (ja) イオントフォレシス用ナノ粒子及びその製造方法
WO2016163752A1 (ko) 난용성 약물 전달용 용해성 마이크로니들
WO2024111942A1 (ko) 생분해성 고분자 분산체 및 이의 제조방법
KR102156674B1 (ko) 피부투과성 고형지질나노입자 및 상기 고형지질나노입자를 포함하는 약물전달용 조성물
Uk Son et al. Distinctive nanogels as high-efficiency transdermal carriers for skin wound healing
Pawar et al. Novel approach in transdermal drug delivery system: Transferosome
WO2026095730A1 (ko) 양친매성 생체적합성 고분자를 포함하는 혈관확장성 또는 염증성 피부 질환의 개선 또는 치료용 조성물
WO2024096553A1 (ko) 피부 개선용 복합체
WO2023287261A1 (ko) 담즙산 또는 담즙산 염의 분자 회합체를 포함하는 화장료 조성물
Ajmal et al. Electrospun Nanofiber: Application in Tissue Regeneration.(2023)

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 21862119

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

REG Reference to national code

Ref country code: BR

Ref legal event code: B01A

Ref document number: 112022020991

Country of ref document: BR

ENP Entry into the national phase

Ref document number: 2021862119

Country of ref document: EP

Effective date: 20221017

ENP Entry into the national phase

Ref document number: 112022020991

Country of ref document: BR

Kind code of ref document: A2

Effective date: 20221017

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE