WO2023096005A1 - 2'-fl을 함유하는 근위축 또는 근감소증 개선, 예방 또는 치료용 조성물 - Google Patents

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sarcopenia
muscular atrophy
muscle
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treatment
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김경호
신철수
윤종원
전선민
송영하
유종길
김지은
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Advanced Protein Technologies Corp
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    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; PREPARATION OR TREATMENT THEREOF
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/125—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives containing carbohydrate syrups; containing sugars; containing sugar alcohols; containing starch hydrolysates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/702—Oligosaccharides, i.e. having three to five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system

Definitions

  • the present invention relates to a composition for improving, preventing or treating muscular atrophy or sarcopenia containing 2'-FL (2'-fucosyllactose).
  • Muscles account for more than 50% of body weight on average, and together with bones and ligaments, support and move the body. Therefore, muscle damage in charge of movement causes discomfort in movement in the short term, and in the long term, not only decreases the quality of life, but also increases medical and social expenses.
  • muscular atrophy or sarcopenia refers to a state in which muscle mass and strength decrease, resulting in decreased physical function and vulnerability to stimulation. Muscular atrophy or sarcopenia is a primary cause of aging due to lack of mechanical stimulation such as lack of physical activity, aging of astrocytes, a type of stem cell, decreased activity of neuromuscular junctions, decreased mitochondrial function, and nutritional deficiency including insufficient protein intake.
  • muscle atrophy or sarcopenia muscle diseases
  • muscle diseases e.g., muscle damage, muscle (motor) nerve damage, degenerative central nervous system disease, spinal disease, genetic disease, etc.
  • various chronic diseases e.g., cancer cachexia, AIDS, chronic heart failure, chronic obstructive pulmonary disease (COPD), sepsis, etc.
  • COPD chronic obstructive pulmonary disease
  • sepsis etc.
  • drugs corticoid-type steroids, statins-type hyperlipidemia drugs, penicillin-type antibiotic penicillamine) Etc.
  • endocrine hormones growth hormone, thyroid hormone, adrenal hormone, vitamin D, etc.
  • sex hormones testosterone, estrogen, etc.
  • proinflammatory cytokine imbalance etc. It can be classified as atrophy or sarcopenia.
  • Muscular atrophy or sarcopenia in an aging society has an important meaning that should not be predicted or judged simply by a decrease in muscle mass.
  • the causes of muscular atrophy or sarcopenia are diverse, but when muscular atrophy occurs, the cross-sectional area of muscle fibers, protein content, and strength decrease, and fatigue and insulin resistance increase, increasing the incidence and mortality of other diseases. Therefore, clinical diagnosis through various measurements is very important. It is important.
  • muscle mass peaks in the 20s and 30s, and then gradually decreases, 8% per 10 years from 40 to 70 years old, and nearly 10% per 10 years after 70 years of age. stand out Therefore, the prevalence of sarcopenia is more than 10% in people over 65 years old, and increases by up to more than 50% after the age of 80.
  • diagnostic criteria for geriatric sarcopenia vary by country, the common criteria are physical activity abilities such as muscle mass, grip strength, and walking speed. This muscle loss is caused not only by aging itself, but also by hormonal imbalance, increased active oxygen, nutritional deficiency, inflammation, or various degenerative diseases, as well as decreased metabolic capacity and decreased physical activity.
  • Sarcopenia is a health problem in itself, and at the same time it is a risk factor that can cause other diseases or health problems.
  • contractile protein synthesis decreases and proteolysis increases, which further restricts physical activity due to reduced grip strength, walking speed, and sense of standing balance, leading to osteoporosis, falls, and fracture injuries.
  • Increased risk may result in a situation in which physical activity is not possible, decreased immune function, increased risk of infection such as pneumonia, decreased cognitive ability, diabetes, hypertension, obesity, cardiovascular disease, chronic lung disease due to reduced lung capacity, etc. As this progresses, the mortality rate increases.
  • sarcopenia is a risk factor for depression and dementia.
  • Muscular atrophy or sarcopenia is largely related to aging, but teenagers and young adults are also not free from sarcopenia due to modern people's convenient living environment, sedentary lifestyle, lack of exercise, and nutritional imbalance. Recently, a variety of supplements such as protein and related ingredients necessary for muscle growth are sold along with exercise to help muscle growth and muscle strength improvement. As it is excreted, it puts a constant burden on the kidneys, so it can adversely affect the health of people with weak or impaired kidney function and the elderly with poor metabolic ability.
  • Zolgensma a gene therapy for spinal muscular atrophy (SMA)
  • SMA spinal muscular atrophy
  • the health functional food market is also growing rapidly. According to various market reports, the future sarcopenia treatment market is expected to grow larger than the osteoporosis treatment market, which is worth about 20 trillion won annually in the United States alone.
  • An object of the present invention is to provide novel preventive and therapeutic methods for the treatment of muscular atrophy or sarcopenia.
  • the present invention provides a pharmaceutical composition for preventing or treating muscular atrophy, containing 2'-FL as an active ingredient.
  • the muscular atrophy may be, for example, any one selected from primary muscular atrophy and secondary muscular atrophy.
  • the primary muscular atrophy for example, may be induced by any one selected from a lack of mechanical stimulation, aging of astrocytes, decreased activity of the neuromuscular junction, mitochondrial function decline, and nutritional deficiency.
  • the secondary muscular atrophy is, for example, due to any one factor selected from denervation caused by a stroke, chronic disease, excessive drug use, changes in endocrine system hormones and sex hormones, and an imbalance of proinflammatory cytokines. may be induced by
  • the present invention provides a pharmaceutical composition for preventing or treating sarcopenia containing 2'-FL as an active ingredient.
  • the sarcopenia may be, for example, any one sarcopenia selected from primary sarcopenia and secondary sarcopenia.
  • the primary sarcopenia may be induced, for example, due to any one selected from a lack of mechanical stimulation, aging of astrocytes, decreased activity of the neuromuscular junction, mitochondrial function decline, and nutritional deficiency.
  • the secondary sarcopenia is, for example, due to any one factor selected from denervation caused by a stroke, chronic disease, excessive drug use, changes in endocrine system hormones and sex hormones, and an imbalance of proinflammatory cytokines. may be induced by
  • the present invention provides a food composition for improving muscular atrophy containing 2'-FL as an active ingredient.
  • the present invention provides a food composition for improving sarcopenia containing 2'-FL as an active ingredient.
  • it provides a food composition for muscle strengthening containing 2'-FL as an active ingredient.
  • composition for improving, preventing, or treating muscular atrophy or sarcopenia of the present invention increases the expression of genes related to mitochondrial function and mitochondrial biosynthesis, and reduces the expression of atrogin-1 and MuRF1 genes, which are markers of muscular atrophy, to strengthen and strengthen muscles. It has a preventive effect on atrophy or sarcopenia.
  • 1 is a result of measuring cell viability according to 2'-FL treatment.
  • Figure 2 is a result confirming the muscle differentiation control efficacy according to the 2'-FL treatment.
  • Figure 3 is the result of confirming the mitochondrial function enhancement effect according to the 2'-FL treatment.
  • Figure 4 is the result of confirming the mRNA expression change of PGC-1 ⁇ and NRF2, a subgene, according to 2'-FL treatment.
  • Figure 5 is a result of confirming the protective effect on muscular atrophy induced by dexamethasone treatment according to 2'-FL treatment.
  • Figure 6 is a result confirming the mitochondrial function inhibition protective efficacy induced by dexamethasone treatment according to 2'-FL treatment.
  • Figure 8 is the result of confirming the effect of protecting the body from damage by dexamethasone treatment according to 2'-FL treatment in an animal model (A: weight measurement result of animal model according to treatment group, B: liver function test according to treatment group (GOT , GPT) results).
  • Figure 9 is a result confirming the effect of improving muscular atrophy induced by dexamethasone treatment according to 2'-FL treatment in an animal model (A: histological morphology observation result of muscle tissue, B: by muscle tissue (splenomegaly, gastrocnemius and intestinal tract) extensor) weighing results).
  • Figure 11 is a result confirming the change in atrogin-1 protein expression reduced by dexamethasone treatment according to 2'-FL treatment in an animal model.
  • 2'-FL increases the differentiation of C2C12 myoblasts into myotubes, increases mtDNA expression and mitochondrial density, and PGC-1 ⁇ , a gene related to mitochondrial biosynthesis, and It has been confirmed that mitochondrial function is enhanced by increasing the expression of NRF2 mRNA.
  • the protective effect against the decrease in the number of muscle cells and the decrease in mitochondrial function according to the treatment of dexamethasone, a synthetic component of the glucocorticoid series among the steroid hormones of 2'-FL, and the muscle atrophy markers atrogin-1 and MuRF1
  • the present invention provides a pharmaceutical composition for preventing or treating muscular atrophy or sarcopenia containing 2'-FL as an active ingredient.
  • the muscular atrophy or sarcopenia is preferably any one selected from primary (so-called 'primary') muscular atrophy or sarcopenia and secondary (so-called 'secondary') muscular atrophy or sarcopenia. It is good to be.
  • the primary (so-called 'primary') muscular atrophy or sarcopenia for example, lack of mechanical stimulation (including lack of physical activity, etc.), aging of astrocytes, a type of stem cell, decreased activity of the neuromuscular junction, It may be induced by any one selected from mitochondrial function decline and nutritional deficiency (including insufficient protein intake), but is not necessarily limited thereto.
  • the secondary (so-called 'secondary') muscular atrophy or sarcopenia is, for example, denervation caused by a stroke (muscle damage, muscle (motor) nerve damage, degenerative central nervous system disease, spinal disease, muscle disease such as genetic disease) Including), chronic diseases (including cancer cachexia, AIDS, chronic heart failure, chronic obstructive pulmonary disease (COPD), sepsis, etc.), excessive drug use (corticoid-type steroids, statins-type hyperlipidemia treatment or antibiotic penicillin-type rheumatism Any one selected from changes in endocrine system hormones and sex hormones (including growth hormone, thyroid hormone, adrenal hormone, vitamin D, testosterone, estrogen, etc.) and imbalance of proinflammatory cytokines It may be induced by the factor of, but is not necessarily limited thereto.
  • Sarcopenia has been defined as the starting point of frailty, that is, a state in which the risk of disability or death increases when exposed to physical and mental stress due to a decrease in the metabolic capacity of the body organs due to aging, and improvement of sarcopenia can reduce frailty due to aging. This could be said to be the key to prevention.
  • Nutrients or nutritional factors that directly affect muscle mass and strength include protein, vitamin D, various antioxidants, and omega-3 fatty acids. Lack of protein directly causes muscle loss through reduced muscle synthesis, and vitamin D It is known that omega-3 fatty acids and antioxidants can prevent or improve sarcopenia through immune and anti-inflammatory actions.
  • Decreased physical activity reduces muscle action and lowers the load applied to the muscles, which decreases muscle contraction-related protein synthesis and increases muscle protein breakdown, resulting in decreased grip strength, walking speed, and sense of standing balance, making physical activity more difficult.
  • sarcopenia The mechanism of occurrence of sarcopenia is aging of astrocytes, a type of stem cell that produces muscle, degenerative central nervous system disease, motor neuron loss and functional weakness, decreased activity of neuromuscular junctions, and changes in endocrine hormones (growth hormone, thyroid gland). hormones, adrenal hormones, etc.), increased inflammatory cytokines, decreased mitochondrial function, decreased food intake (protein and related nutrient intake), decreased activity, tooth loss, excessive drinking, and insufficient sleep time.
  • Muscular atrophy or sarcopenia is also induced by chronic diseases (cancer cachexia, AIDS, chronic heart failure, chronic obstructive pulmonary disease (COPD), sepsis, etc.). It is a multifactorial disease accompanied by weight loss due to cancer. In clinical practice, cancer cachexia reduces the effectiveness of chemotherapy and increases mortality, so it is managed together with chemotherapy. Cachexia is accompanied by general weakness and muscle fatigue through muscle atrophy, and decreases to the lung muscles, leading to an increase in mortality due to respiratory failure. It is caused by increased degradation.
  • cancer cachexia reduces the effectiveness of chemotherapy and increases mortality, so it is managed together with chemotherapy.
  • Cachexia is accompanied by general weakness and muscle fatigue through muscle atrophy, and decreases to the lung muscles, leading to an increase in mortality due to respiratory failure. It is caused by increased degradation.
  • AIDS causes muscle atrophy with excessive protein degradation due to abnormal cytokine production, nutritional abnormalities, and endocrine hormone abnormalities. Unlike other diseases, AIDS patients consume 10 to 35% more resting energy than the general population, and AIDS infection affects pituitary hormones to increase the secretion of cortisol, a stress hormone, to promote muscle protein breakdown and inhibit protein synthesis, resulting in muscle atrophy. This is triggered
  • Chronic heart failure significantly reduces exercise capacity and activity capacity in daily life due to increased fatigue and shortness of breath.
  • muscular atrophy progresses as ubiquitin proteasome, autophagy, and myocyte death are increased through increased inflammatory cytokines, decreased protein synthesis, resistance to growth hormone, and hyperactivity of the renin-angiotensin-aldosterone system.
  • COPD chronic obstructive pulmonary disease
  • Muscle atrophy or sarcopenia can also be induced by steroid abuse, statin-based hyperlipidemic drugs, or antibiotic penicillin-based rheumatic drugs.
  • statin-based hyperlipidemic drugs Long-term use of steroids in muscle inflammatory diseases such as dermatomyositis helps relieve inflammation, but eventually causes muscle atrophy.
  • statins When hyperlipidemia patients without a history of muscle disease take statins, they cause muscle atrophy with subacute myalgia, fatigue, muscle weakness, muscle pigmenturia, and elevation of creatine kinase (CK).
  • Statin drugs lower the level of ubiquinone (CoQ10), which plays a major role in cellular respiration and antioxidant function of mitochondria, increase muscle protein degradation through the ubiquitin proteasome pathway (UPP), and apoptosis of mitochondria and apoptosis. , decrease in mitochondrial calcium control function, increase in active oxygen, etc., causing muscle loss.
  • UPP ubiquitin proteasome pathway
  • penicillamine of the penicillin family is mainly used for rheumatoid arthritis, and it is known that this drug causes inflammatory muscular dystrophy.
  • myasthenia gravis causes drooping eyelids, double vision, and general weakness because nerve impulses are not properly transmitted to the muscles. there is.
  • SMA Spinal muscular atrophy
  • ALS Amyotrophic lateral sclerosis
  • 'motor neuron disease' or aka 'Lou Gehrig's disease' because motor neurons in the spinal cord are selectively destroyed.
  • This disease is a chronic degenerative disease that leads to death within a few years due to muscle weakness and muscle atrophy of the limbs, quadriplegia, speech impairment, and respiratory function deterioration.
  • SBMA Spinal bulbar muscular atrophy
  • Kennedy disease is a genetic disorder in which loss of motor neurons, or nerve cells in the spinal cord and brainstem, affects the part of the nervous system that controls voluntary muscle movement. It is a disease. As it is an X chromosome genetic disorder, it primarily affects males and represents a hormonal dysfunction associated with loss of testosterone function. It also mainly affects the muscles of the face, swallowing muscles, arms and legs, especially those closest to the center of the body.
  • Duchenne Muscular Dystrophy is the most common form of muscular dystrophy in children. Symptoms usually first appear between the ages of 2 and 6. Early symptoms include frequent falls, difficulty getting up, walking with a wide stagger, and enlarged calf muscles. Duchenne muscular dystrophy is an X chromosome-related recessive disorder that mainly appears in boys, and the muscles of the buttocks, upper arms, and thighs are damaged first. In some cases, it may be accompanied by mild mental retardation. Although Duchenne muscular dystrophy progresses slowly. By the age of 12, your child may need a wheelchair. Breathing will be difficult in the later stages so he can be given antibiotics and treatment for breathing. In the final stages, the child may have severe breathing and heart problems, which most often occur in their teens or early 20s. Patients with Duchenne muscular dystrophy may receive gene therapy.
  • Becker Muscular Dystrophy The onset and symptoms of Becker Muscular Dystrophy (BMD) are similar to those of Duchenne Muscular Dystrophy, but with a later onset and slower progression. Although the above two muscular dystrophy are caused by damage to the same gene, the damage itself is different. Becker muscular dystrophy can also be treated with gene therapy. Becker's muscular dystrophy is an X chromosome-linked recessive disorder that occurs mostly in men. The muscles of the upper arm, thigh, and buttocks are damaged first, and the onset period is between the ages of 2 and 16, and walking is possible until the age of 30.
  • Stroke Cerebral ischemia causes edema of surrounding brain tissues and ischemia of brain cells due to cerebral circulation disorder, which induces local or global sudden neurological deficits, resulting in movement disorders, sensory disorders, cognitive disorders, and language disorders.
  • hemiplegia causes muscle atrophy due to reduced activity or movement, reduced blood supply, reduced nutrient intake, reduced stimulation by hormones, and reduced nerve stimulation.
  • Facioscapulohumeral Muscular Dystrophy is an autosomal dominant type of muscular dystrophy that affects both boys and girls and first appears in the teens or early adulthood. Early symptoms include forward tilting of the shoulders, difficulty raising the arms above the head and closing the eyes, and gradually muscle weakness spreads to the abdominal muscles, feet, upper limbs, and buttocks. Symptoms vary in severity and progression is slow. About half of people with this disorder may be able to walk continuously.
  • prevention refers to any action that inhibits or delays the onset of muscular atrophy or sarcopenia by administration of the pharmaceutical composition according to the present invention.
  • treatment refers to all activities that improve or beneficially change symptoms caused by muscular atrophy or sarcopenia by administration of the pharmaceutical composition according to the present invention.
  • composition of the present invention may contain one or more active ingredients exhibiting the same or similar functions in addition to 2'-FL.
  • the pharmaceutical composition of the present invention may further include a pharmaceutically acceptable carrier in addition to 2'-FL.
  • the type of carrier that can be used in the present invention is not particularly limited, and any carrier commonly used in the art may be used.
  • Non-limiting examples of the carrier include lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, saline, sterile water, Ringer's solution, buffered saline, albumin injection solution, xylitol, erythritol, maltitol, maltodextrin, glycerol, ethanol, and the like. can These may be used alone or in combination of two or more.
  • the pharmaceutical composition of the present invention may be used by adding other pharmaceutically acceptable additives such as antioxidants, excipients, diluents, buffers or bacteriostats, surfactants, binders, fillers, bulking agents, wetting agents, disintegrants , a dispersant or a lubricant may be additionally added and used.
  • other pharmaceutically acceptable additives such as antioxidants, excipients, diluents, buffers or bacteriostats, surfactants, binders, fillers, bulking agents, wetting agents, disintegrants , a dispersant or a lubricant may be additionally added and used.
  • 2'-FL may be included in an amount of 0.00001 wt% to 99.99 wt% based on the total weight of the pharmaceutical composition, preferably 0.1 wt% to 90 wt%, more preferably It may be included in 0.1% by weight to 70% by weight, more preferably 0.1% by weight to 50% by weight, but is not limited thereto and may be variously changed depending on the condition of the subject to be administered, the type of specific disease, the degree of progression, etc. If necessary, it may be included in the entire content of the pharmaceutical composition.
  • the pharmaceutically effective amount and effective dosage of the pharmaceutical composition of the present invention may vary depending on the formulation method, administration method, administration time and/or route of administration of the pharmaceutical composition, and Type and degree of reaction, type of subject to be administered, age, weight, general health condition, symptom or severity of disease, sex, diet, excretion, drugs used simultaneously or at different times in the subject, or components of other compositions, etc. It can vary according to various factors including, and similar factors well known in the medical field, and those skilled in the art can easily determine and prescribe an effective dosage for the desired treatment.
  • the daily dosage of the pharmaceutical composition of the present invention is about 0.01 to 1,000 mg/kg, preferably 0.1 to 100 mg/kg, and may be administered once or several times a day.
  • Administration of the pharmaceutical composition of the present invention may be administered once a day, or may be divided and administered several times.
  • the pharmaceutical composition of the present invention may be administered as an individual therapeutic agent or in combination with other therapeutic agents, and may be administered sequentially or simultaneously with conventional therapeutic agents. Considering all of the above factors, it can be administered in an amount that can obtain the maximum effect with the minimum amount without side effects, which can be easily determined by those skilled in the art.
  • the pharmaceutical composition of the present invention may be additionally used in combination with various methods such as hormone therapy and drug therapy to prevent or treat muscular atrophy or sarcopenia.
  • the term "administration” means introducing the pharmaceutical composition of the present invention to a patient by any suitable method, and the route and method of administration of the pharmaceutical composition of the present invention may be independent, respectively, and the purpose Any administration route and administration method may be followed without particular limitation, as long as the pharmaceutical composition can reach the corresponding site.
  • the pharmaceutical composition may be administered by oral administration or parenteral administration, and may be formulated into various dosage forms suitable for oral administration or parenteral administration.
  • Non-limiting examples of preparations for oral administration using the pharmaceutical composition of the present invention include oily suspensions, troches, lozenges, tablets, aqueous suspensions, prepared powders, granules, emulsions, hard capsules, and soft capsules, syrups or elixirs; and the like.
  • a binder such as sorbitol, mannitol, starch, amylopectin, cellulose lactose, saccharose or gelatin; lubricating oils such as magnesium stearate, calcium stearate, sodium stearyl fumarate or polyethylene glycol wax; excipients such as dicalcium phosphate and the like; A disintegrant such as corn starch or sweet potato starch may be used, and aromatics, syrups, sweeteners, and the like may also be used.
  • a liquid carrier such as fatty oil may be additionally used in addition to the above-mentioned materials.
  • intramuscular administration As a method for parenteral administration of the pharmaceutical composition of the present invention, intramuscular administration, transdermal administration, intravenous administration, intraperitoneal administration, or subcutaneous administration may be used, and a method of applying, spraying, or inhaling the composition to a diseased area It can also be used, but is not limited thereto.
  • Non-limiting examples of parenteral preparations using the pharmaceutical composition of the present invention include injection solutions, suppositories, ointments, powders for application, oils, powders for respiratory inhalation, aerosols for sprays, creams, and the like.
  • aqueous solutions In order to formulate the pharmaceutical composition of the present invention for parenteral administration, sterilized aqueous solutions, non-aqueous solvents, suspensions, emulsions, freeze-dried preparations, external preparations, etc. may be used. Vegetable oils, propylene glycol, polyethylene glycol, injectable esters such as ethyl oleate, and the like can be used.
  • the pharmaceutical composition of the present invention is formulated as an injection solution
  • the pharmaceutical composition of the present invention is mixed in water together with a stabilizer or buffer to prepare a solution or suspension, which is used for unit administration in an ampoule or vial. can be formulated.
  • a propellant or the like may be mixed with additives so that the water-dispersed concentrate or wet powder is dispersed.
  • composition of the present invention When the pharmaceutical composition of the present invention is formulated into ointments, oils, creams, powders for application, skin external preparations, etc., animal oils, vegetable oils, waxes, paraffins, polyethylene glycols, silicones, bentonites, silicas, talc, starch, tras It can be formulated using Kant, cellulose derivatives, zinc oxide and the like as carriers.
  • the present invention provides a food composition for improving muscle atrophy or sarcopenia or strengthening muscle containing 2'-FL as an active ingredient.
  • the content of 2'-FL is not particularly limited, and may be variously changed depending on the condition of the subject to be administered, the type of specific disease, and the degree of progression. If necessary, it may also be included in the total content of food.
  • the food composition of the present invention is, for example, noodles, gums, dairy products, ice creams, meats, grains, caffeinated beverages, general beverages, chocolates, breads, snacks, confectionery products, candies, pizzas, jellies, alcoholic beverages, alcohol, and vitamin complexes. And it may be any one selected from other health supplements, but is not necessarily limited thereto.
  • the food composition of the present invention when used in the form of a food additive, it may be added as it is or used together with other foods or food ingredients, and may be appropriately used according to conventional methods.
  • the "food composition” of the present invention includes a health functional food
  • the health functional food refers to a food manufactured and processed using raw materials or ingredients having useful functionalities for the human body, and is referred to as "functional”. It refers to intake for the purpose of obtaining useful effects for health purposes such as regulating nutrients for the structure and function of the human body or physiological functions.
  • the food composition of the present invention may include additional ingredients that are commonly used and can improve odor, taste, and visual properties.
  • it may include biotin, folate, panthotenic acid, vitamins A, C, D, E, B1, B2, B6, B12, niacin, and the like.
  • minerals such as chromium (Cr), magnesium (Mg), manganese (Mn), copper (Cu), zinc (Zn), iron (Fe), and calcium (Ca) may be included.
  • amino acids such as cysteine, valine, lysine, and tryptophan may be included.
  • preservatives potassium sorbate, sodium benzoate, salicylic acid, sodium dihydroacetate, etc.
  • coloring agents tar colorant, etc.
  • coloring agents sodium nitrite, sodium nitrite, etc.
  • bleaching agents sodium sulfite
  • disinfectants bleaching powder and high bleaching powder, sodium hypochlorite, etc.
  • swelling agent alum, D-potassium hydrogen tartrate, etc.
  • strengthening agent emulsifier, thickener (thickener), coating agent, antioxidant (butylhydroxyanisole (BHA), butylhydroxytoluene (BHT), etc.
  • additives such as seasonings (MSG, etc.), sweeteners (dulcin, cyclemate, saccharin, sodium, etc.), flavorings (vanillin, lactones, etc.), gum base, antifoaming agent, solvent, improver, etc.
  • the additive may be selected according to the type of food and used in an appropriate amount
  • C2C12 a mouse myoblast cell line, was cultured at 37°C and 5% CO2 in a medium containing 90% DMEM, 10% FBS, and 10 unit/ml penicillin-streptomycin.
  • the C2C12 cell line was dispensed in a 96-well plate at a concentration of 5 ⁇ 10 4 /well, cultured for 24 hours, and 2'-FL was added to each concentration (100, 200, 400 ⁇ M ) for 24 hours. Thereafter, after removing the medium, 2 ml of MTT solution diluted with the growth medium at a concentration of 0.5 mg/ml was dispensed and cultured in a CO 2 incubator. After 2 hours, the MTT reagent was removed, formazin was dissolved using DMSO (dimethyl sulfoxide), and absorbance was measured at 540 nm.
  • DMSO dimethyl sulfoxide
  • mouse muscle cell lines (myoblast) into myotubes
  • Immunocytochemical staining was performed to confirm the myocyte differentiation effect according to 2'-FL treatment. Specifically, C2C12 was treated with 2'-FL at different concentrations (100, 200 ⁇ M) for 24 hours, and then 4% paraformaldehyde solution was added and fixed for 10 minutes. The fixed cells were washed with PBS containing 0.1% Triton X-100 and reacted in a 5% BSA solution for 1 hour. After washing again with 1x PBS three times, it was reacted overnight at room temperature with MHC antibody (Cell signaling).
  • the cells were washed three times with PBS, reacted with Alexa Fluor 488 goat anti-rabbit IgG for 1 hour at room temperature, stained the nucleus with horchest solution, and observed under a fluorescence microscope. At this time, A-769662 (1 ⁇ M), an AMPK agonist, was used as a positive control.
  • Mitochondria have mitochondrial DNA (mtDNA) that is separate from its own nuclear DNA, and unlike nuclear DNA in cells, mtDNA does not have a repair mechanism to repair damage and does not contain histone proteins that protect DNA. relatively easy to damage. Such damage to mtDNA leads to a decrease in mitochondrial function, resulting in a decrease in ATP synthesis, which is an energy form required for cell activity, and a decrease in the ability to regulate homeostasis in vivo, which causes the onset of various diseases. Accordingly, mtDNA expression and mitochondrial density were measured according to 2'-FL treatment.
  • C2C12 was treated with 2'-FL at different concentrations (100, 200 ⁇ M) for 24 hours, washed with PBS, and cultured for 30 minutes after adding a medium containing 200 nM MitoTracker Green probe. Thereafter, the wavelength at which the portion bound to the MitoTracker Green probe absorbs a wavelength of 490 nm and emits a wavelength of 516 nm was quantified using SpectraMax to measure the density of mitochondria. At this time, A-769662 (1 ⁇ M), an AMPK agonist, was used as a positive control.
  • the main function of mitochondria is to generate ATP, a form of intracellular energy, and is an organelle that performs various functions in cells such as metabolism, signal transduction, apoptosis, and differentiation.
  • This metabolic adaptation response in skeletal muscle is achieved by the regulation of various genes, and the most important role at this time is known as PGC-1 ⁇ (peroxisome proliferator-activated receptor- ⁇ coactivator-1 ⁇ ) transcriptional cofactor.
  • PGC-1 ⁇ peroxisome proliferator-activated receptor- ⁇ coactivator-1 ⁇
  • RNA extracted from C2C12 cells was subjected to cDNA synthesis using the ReverTra Ace qPCR RT Kit (TOYOBO).
  • TOYOBO ReverTra Ace qPCR RT Kit
  • the RNA was heated at 65 ° C. for 5 minutes in advance, and immediately stored on ice. Thereafter, a total of 8 ⁇ l of reagent was prepared with 2 ⁇ l of 4 ⁇ DN Master Mix including gDNA remover, 0.5 ⁇ g of mRNA, and nuclease-free water, and amplification was performed at 37° C. for 5 minutes.
  • RT mater mix 5 ⁇ RT mater mix was added to the reagent after the reaction, and cDNA was synthesized by amplification at 37°C for 15 minutes, 50°C for 5 minutes, and 98°C for 5 minutes. Afterwards, the synthesized cDNA was subjected to qPCR using Thunderbird TMSYBR qPCR Mix reagent (TOYOBO). The expression level of the gene was analyzed by the iQ5 Cycler System (Bio-Rad). At this time, A-769662 (1 ⁇ M), an AMPK agonist, was used as a positive control.
  • FIG. 4 is the result of confirming the mRNA expression change of PGC-1 ⁇ and NRF2, a subgene, according to 2'-FL treatment.
  • Dexamethasone a synthetic glucocorticoid
  • Dexamethasone a synthetic glucocorticoid
  • the differentiated C2C12 was treated with 2'-FL, and 1 hour later, dexamethasone at a concentration of 400 ⁇ M was simultaneously treated for 24 hours, and the protective efficacy of 2'-FL against muscular atrophy was evaluated in a cell model.
  • C2C12 was treated with 2'FL and dexamethasone in the above manner, then the cells were removed with trypsin, and the number of cells was counted using trypan blue staining did
  • the length and diameter of myotubes were measured after treatment with dexamethasone.
  • FIG. 5 is a result of confirming the protective effect on muscular atrophy induced by dexamethasone treatment according to 2'-FL treatment.
  • 5 2FLL means the 100 ⁇ M 2'-FL treatment group
  • 2FLH means the 200 ⁇ M 2'-FL treatment group.
  • FIG. 6 is a result confirming the mitochondrial function inhibition protective efficacy induced by dexamethasone treatment according to 2'-FL treatment.
  • 6FLL means the 100 ⁇ M 2'-FL treatment group
  • 2FLH means the 200 ⁇ M 2'-FL treatment group.
  • Muscular atrophy is associated with two muscle-specific E3 ubiquitin ligases, MAFbx (muscle atrophy F-box)/atrogin-1 and MuRF1 (Muscle RING Finger-1), through which dexamethasone It is reported to reduce muscle mass by decomposing proteins and reducing myogenin and myoD (myogenic differentiation antigen), which are muscle-specific factors involved in muscle differentiation. Thus, an experiment was conducted to confirm whether 2'-FL increases the expression of a muscle atrophy-related gene decreased by dexamethasone treatment. The experimental method is the same as 'Experiment No. 4 of Example 1' except for the change of the antibody, so description thereof is omitted.
  • 2'-FL was orally administered to 7-week-old male C57BL/6 mice at concentrations of 200 and 400 mg/kg for 7 days, followed by a drug that induces muscular atrophy.
  • Dexamethasone known as 10 mg/kg, was injected intraperitoneally and 2'-FL was additionally orally administered for 2 weeks.
  • the mouse experimental group is a Nor group in which saline was intraperitoneally injected and distilled water was orally administered, a Veh group in which dexamethasone was intraperitoneally injected and distilled water was orally administered, and dexamethasone was intraperitoneally injected and 2'-FL was 200 and 400, respectively.
  • the experiment was conducted with the 2FLL group and the 2FLH group orally administered at a concentration of mg/kg.
  • FIG. 8 is the result of confirming the effect of protecting the body from damage caused by dexamethasone treatment according to 2'-FL treatment in an animal model (A: weight measurement result of animal model according to treatment group, B: liver function test according to treatment group (GOT , GPT) results).
  • the 2'-FL high concentration treatment group (2FLH) recovered the morphological characteristics of muscle atrophy, such as reduction in the size of muscle bundles and imbalance in nuclear location, which can be observed in the dexamethasone-treated group (Veh).
  • 2FLH 2'-FL high concentration treatment group
  • Halt TM protein was lysed in lysis buffer (10 mM Tris-HCl, pH 7.5, 1% NP-40, 0.1% sodium deoxycholate, 0.1% SDS, 150 mM NaCl, 1 mM EDTA) to confirm protein expression using mouse muscle tissue. After protein extraction was performed by adding a protease inhibitor, immunoblotting was performed.
  • lysis buffer 10 mM Tris-HCl, pH 7.5, 1% NP-40, 0.1% sodium deoxycholate, 0.1% SDS, 150 mM NaCl, 1 mM EDTA
  • Anti- ⁇ -tubulin (1:1000) and anti-atrogin-1 (1:1000) were used as primary antibodies. Immunoblotting result images were analyzed using ChemiDoc TM touch imaging system (Bio-Rad) and Image Lab 5.2 software (Bio-Rad).
  • FIG. 11 is a result confirming the change in atrogin-1 protein expression reduced by dexamethasone treatment according to 2'-FL treatment in an animal model.

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Abstract

본 발명은 2'-FL(2'-fucosyllactose)을 함유하는 근위축 또는 근감소증 개선, 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것으로, 본 발명의 근위축 또는 근감소증 개선, 예방 또는 치료용 조성물은 근육세포 미토콘드리아 기능 증대 및 미토콘드리아 생합성과 관련된 유전자의 발현을 증가시키며, 근위축 마커인 atrogin-1 및 MuRF1 유전자의 발현을 감소시켜 근육 강화 및 근위축 또는 근감소증의 예방 효과를 가진다.

Description

2'-FL을 함유하는 근위축 또는 근감소증 개선, 예방 또는 치료용 조성물
본 발명은 2'-FL(2'-fucosyllactose)을 함유하는 근위축 또는 근감소증 개선, 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.
근육은 평균적으로 체중의 50% 이상을 차지하는데, 뼈, 인대와 함께 몸을 지지하고 움직이게 하는 역할을 한다. 따라서 움직임을 담당하는 근육 손상은 단기적으로는 움직임의 불편함을 초래하고, 장기적으로는 삶의 질을 떨어뜨릴 뿐만 아니라 의료비 및 사회적 비용 지출이 상승하게 된다. 일반적으로 근위축 또는 근감소증은 근육량과 근력이 감소하여 신체기능이 떨어지고 자극에 취약해지는 상태를 의미한다. 근위축 또는 근감소증은 신체활동 부족 등의 기계적 자극이 부족하거나, 줄기세포의 일종인 성상세포의 노화, 신경근 접합부의 활성도 감소, 미토콘드리아 기능 감퇴, 단백질 섭취량 부족을 포함한 영양 결핍 등 노화로 인한 일차성(소위 '원발성')) 근위축 또는 근감소증, 그리고 근육질환들(예, 근손상, 근육(운동)신경 손상, 퇴행성 중추신경질환, 척추질환, 유전적 질병 등)을 포함하여 뇌졸중에 의한 탈신경, 다양한 만성질환(예, 암 악액질, AIDS, 만성심부전증, 만성폐색성폐질환(COPD), 패혈증 등), 과도한 약물 사용(코르티코이드계열 스테로이드제제, 스타틴 계열의 고지혈증 치료제, 항생제 페니실린 계열의 페니실라민 등), 내분비계호르몬(성장호르몬, 갑상선호르몬, 부신호르몬, 비타민 D 등)과 성호르몬(테스토스테론, 에스트로겐 등) 변화, 염증유발 사이토카인(proinflammatory cytokine) 불균형 등에 의한 이차성(소위 '속발성') 근위축 또는 근감소증으로 구분할 수 있다.
고령화 사회에서 근위축 또는 근감소증은 단순히 근육량 감소만으로 예측, 판단해서는 안되는 중요한 의미를 가진다. 근위축 또는 근감소증의 발병원인은 다양하나 근위축증이 생기면 근섬유 단면적, 단백질량과 근력이 감소하고, 피로도와 인슐린저항성이 증가하여 다른 질병의 발병률과 사망률을 증가시키기 때문에 다양한 측정을 통한 임상진단이 매우 중요하다.
일반적으로 근육량은 20∼30대에 최대이며, 이후 점차 감소하여 40세 이후부터 70세까지는 10년에 8%씩, 70세 이후에는 10년에 10% 가까이 감소되고, 특히 상지보다 하지 근육량 감소가 두드러진다. 따라서 65세 이상에서는 근감소증 유병률이 10% 이상이며, 80세 이후에는 최대 50% 이상 증가하는데, 국가별 노인성 근감소증 진단기준은 다르지만 공통적인 기준은 근육량, 악력, 보행속도 등 신체활동 능력이다. 이러한 근감소는 노화 자체로 인한 대사능력 저하와 신체활동 감소뿐만 아니라 호르몬 불균형, 활성산소 증가, 영양 결핍, 염증 또는 각종 퇴행성 질환 등이 원인으로 작용한다. 근감소증은 자체적으로 건강문제이면서, 동시에 다른 질병이나 건강상의 문제를 야기할 수 있는 위험요인이다. 신체활동 저하로 인해 근육작용과 근육에 가해지는 부하가 모두 저하되면 수축성 단백질 합성 감소와 단백분해가 증가되면서 악력과 보행속도, 기립균형감 저하 등으로 신체활동이 더욱 제한되고, 골다공증, 낙상, 골절상의 위험이 증가하여 결과적으로 신체활동이 불가한 상황이 초래될 수 있으며, 면역기능 감소, 폐렴 등 감염 위험 증가, 인지능력 저하, 당뇨병, 고혈압, 비만, 심혈관계질환, 폐활량 감소에 의한 만성폐질환 등이 진행되면서 사망률이 증가한다. 최근에는 근감소증이 우울증과 치매의 위험요인이라는 연구결과도 발표되고 있다.
특히 의료와 영양상태 및 환경개선으로 인해 기대수명이 늘어나면서 전세계적으로 고령인구는 크게 증가하고 있어 고령화에 따른 근위축 또는 근감소증은 지속적으로 증가하는 추세이다. 또한 뒤센형과 베커형 근위축증 등 유전성 근위축증 환자도 인구 100,000명 당 4명 정도를 차지하며, 루게릭병이나 케네디병 등 기타 근위축증 환자를 포함하면 근위축 또는 근감소증 환자는 상당히 많을 것으로 추측되고 있다.
이렇게 전세계적으로 근위축 또는 근감소증 인구가 증가함에 따라 2016년 11월 미국질병통제예방센터는 세계 최초로 근감소증에 대해 질병코드(M62.84)를 부여하여 질병으로 분류하였고, 세계보건기구에서는 국제질병통계분류 제10차 개정판에 근감소증이 공식 등록되었으며, 2018년 일본에서도 근감소증에 질병코드를 부여하였다. 한국에서는 2021년 한국 질병통계분류 개정판에 근감소증 질병코드를 부여받고, 한국표준질병사인분류 8차 개정안에 근감소증 진단코드가 포함될 예정이다
근위축 또는 근감소증은 노화와 크게 관련되어 있지만, 현대인들의 편리한 생활환경과 좌식 생활습관, 운동부족, 영양불균형 등으로 청소년 및 청장년층 또한 근감소증에 자유롭지 못하다. 최근에는 근육성장과 근력개선에 도움이 되는 운동과 함께 근육생성에 필요한 단백질과 관련 성분 등의 보충제가 다양하게 판매되고 있으나, 필요이상의 과다한 단백질 보충 섭취는 단백질 대사과정에서 생기는 질소산화물이 신장을 통해 배출되면서 신장에 지속적인 부담을 주기 때문에 신장기능이 약하거나 기능이 떨어진 사람, 그리고 대사능력이 떨어지는 노인의 경우 오히려 건강에 악영향을 끼칠 수 있다.
근위축증 치료제는 척수성 근위축증(SMA) 유전자 치료제 '졸겐스마'가 세계 유일하며, 유전자 대체 치료제로서 1회 투여만으로 SMA 치료가 가능한 것으로 알려져 있으나 그 외 다른 종류의 근위축증 치료제는 개발 중이거나 없는 실정이다. 근감소증 치료제 또한 아직 개발된 제품이 없으나, 전세계적인 근위축 또는 근감소증 인구 증가추세로 볼 때 향후 근감소증 치료제 시장 규모는 약 110억 달러 (한화 약 12조 5,500억원) 이상으로 전망하고 있고, 관련 건강기능식품 시장도 빠르게 성장하고 있다. 각종 시장보고서에 따르면 향후 근감소증 치료제 시장이 미국에서만 연 약 20조원 규모인 골다공증 치료제 시장보다 커질 것으로 내다보고 있다.
따라서, 부작용을 최소화하면서도 근본적으로 근육단백질 합성을 촉진하고 분해를 억제하는 기전을 가진, 근위축 또는 근감소증 예방, 개선 또는 치료가능한 효과적인 신규 소재 개발이 필요한 실정이다.
본 발명은 근위축 또는 근감소증 치료를 위한 신규한 예방법 및 치료법을 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명은 2'-FL을 유효성분으로 함유하는 근위축 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
본 발명의 근위축 예방 또는 치료용 약학 조성물에 있어서, 상기 근위축은, 일 예로 일차성 근위축 및 이차성 근위축 중 선택되는 어느 하나의 근위축일 수 있다. 이때, 상기 일차성 근위축은, 일 예로 기계적 자극의 부족, 성상세포의 노화, 신경근 접합부의 활성도 감소, 미토콘드리아 기능 감퇴 및 영양 결핍 중 선택되는 어느 하나를 원인으로 하여 유도되는 것일 수 있다. 또한, 상기 이차성 근위축은, 일 예로 뇌졸중에 의한 탈신경, 만성질환, 과도한 약물사용, 내분비계호르몬 및 성호르몬의 변화 및 염증유발 사이토카인(proinflammatory cytokine)의 불균형 중 선택되는 어느 하나의 요인에 의해 유도되는 것일 수 있다.
본 발명은 2'-FL을 유효성분으로 함유하는 근감소증 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
본 발명의 근감소증 예방 또는 치료용 약학 조성물에 있어서, 상기 근감소증은, 일 예로 일차성 근감소증 및 이차성 근감소증 중 선택되는 어느 하나의 근감소증일 수 있다. 이때, 상기 일차성 근감소증은, 일 예로 기계적 자극의 부족, 성상세포의 노화, 신경근 접합부의 활성도 감소, 미토콘드리아 기능 감퇴 및 영양 결핍 중 선택되는 어느 하나를 원인으로 하여 유도되는 것일 수 있다. 또한, 상기 이차성 근감소증은, 일 예로 뇌졸중에 의한 탈신경, 만성질환, 과도한 약물사용, 내분비계호르몬 및 성호르몬의 변화 및 염증유발 사이토카인(proinflammatory cytokine)의 불균형 중 선택되는 어느 하나의 요인에 의해 유도되는 것일 수 있다.
본 발명은 2'-FL을 유효성분으로 함유하는 근위축 개선용 식품 조성물을 제공한다. 또한, 본 발명은 2'-FL을 유효성분으로 함유하는 근감소증 개선용 식품 조성물을 제공한다. 또한, 2'-FL을 유효성분으로 함유하는 근육강화용 식품 조성물을 제공한다.
본 발명의 근위축 또는 근감소증 개선, 예방 또는 치료용 조성물은 미토콘드리아 기능 증대 및 미토콘드리아 생합성과 관련된 유전자의 발현을 증가시키며, 근위축 마커인 atrogin-1 및 MuRF1 유전자의 발현을 감소시켜 근육 강화 및 근위축 또는 근감소증의 예방 효과를 가진다.
도 1은 2'-FL 처리에 따른 세포 생존율을 측정한 결과이다.
도 2는 2'-FL 처리에 따른 근육 분화 조절 효능을 확인한 결과이다.
도 3은 2'-FL 처리에 따른 미토콘드리아 기능 강화 효능을 확인한 결과이다.
도 4는 2'-FL 처리에 따른 PGC-1α와 하위 유전자인 NRF2의 mRNA 발현 변화를 확인한 결과이다.
도 5는 2'-FL 처리에 따른 덱사메타손 처리에 의해 유도된 근위축 보호 효능을 확인한 결과이다.
도 6은 2'-FL 처리에 따른 덱사메타손 처리에 의해 유도된 미토콘드리아 기능 저해 보호 효능을 확인한 결과이다.
도 7은 2'-FL 처리에 따른 atrogin-1 및 MuRF1 유전자의 발현 변화를 확인한 결과이다.
도 8은 동물 모델에서 2'-FL 처리에 따른 덱사메타손 처리에 의한 체내 손상 보호 효능을 확인한 결과이다 (A: 처리군에 따른 동물 모델의 무게 측정 결과, B: 처리군에 따른 간 기능 검사(GOT, GPT) 결과).
도 9는 동물 모델에서 2'-FL 처리에 따른 덱사메타손 처리에 의해 유도된 근위축 개선 효능을 확인한 결과이다 (A: 근육 조직의 조직학적 형태 관찰 결과, B: 근육 조직별(비장근, 비복근 및 장지신근) 무게 측정 결과).
도 10은 동물 모델에서 2'-FL 처리에 따른 덱사메타손 처리에 의해 감소된 악력 개선 효능을 확인한 결과이다.
도 11은 동물 모델에서 2'-FL 처리에 따른 덱사메타손 처리에 의해 감소된 atrogin-1 단백질 발현 변화를 확인한 결과이다.
본 발명의 일 실시예에서는 2'-FL이 C2C12 근원세포(myoblast)의 근관세포(myotube)로의 분화를 증가시키고, mtDNA 발현 및 미토콘드리아의 밀도를 증가시키며, 미토콘드리아 생합성과 관련된 유전자인 PGC-1α 및 NRF2 mRNA의 발현을 증가시켜 미토콘드리아 기능을 증대시킴을 확인한 바 있다.
또한, 본 발명의 일 실시예에서는 2'-FL의 스테로이드 호르몬 중 당질코르티코이드 계열의 합성 성분인 덱사메타손 처리에 따른 근육세포 수 감소와 미토콘드리아 기능 감소에 대한 보호 효능 및 근위축 마커인 atrogin-1과 MuRF1의 유전자 발현 감소 효능을 확인함으로써, 2'-FL의 근육강화 효능 및 근위축 또는 근감소증 개선, 예방 또는 치료 효과를 확인할 수 있었다.
이에, 본 발명은 2'-FL을 유효성분으로 함유하는 근위축 또는 근감소증 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
본 발명의 약학 조성물에 있어, 상기 근위축 또는 근감소증은, 바람직하게는 일차성(소위 '원발성') 근위축 또는 근감소증 및 이차성(소위 '속발성') 근위축 또는 근감소증 중 선택되는 어느 하나인 것이 좋다.
이때, 상기 일차성(소위 '원발성') 근위축 또는 근감소증은, 일 예로 기계적 자극의 부족(신체활동의 부족 등을 포함), 줄기세포의 일종인 성상세포의 노화, 신경근 접합부의 활성도 감소, 미토콘드리아 기능 감퇴 및 영양 결핍(단백질 섭취량 부족을 포함) 중 선택되는 어느 하나를 원인으로 유도되는 것일 수 있으나, 반드시 이에 한정되지 않는다.
또한, 상기 이차성(소위 '속발성') 근위축 또는 근감소증은, 일 예로 뇌졸중에 의한 탈신경(근손상, 근육(운동)신경 손상, 퇴행성 중추신경질환, 척추질환, 유전적 질병 등의 근육질환을 포함), 만성질환(암 악액질, AIDS, 만성심부전증, 만성폐색성폐질환(COPD), 패혈증 등을 포함), 과도한 약물사용(코르티코이드계열 스테로이드제제, 스타틴 계열의 고지혈증 치료제 또는 항생제인 페니실린 계열의 류마티스 치료제 등을 포함), 내분비계호르몬 및 성호르몬(성장호르몬, 갑상선호르몬, 부신호르몬, 비타민 D, 테스토스테론, 에스트로겐 등을 포함)의 변화 및 염증유발 사이토카인(proinflammatory cytokines)의 불균형 중 선택되는 어느 하나의 요인에 의해 유도되는 것일 수 있으나, 반드시 이에 한정되지 않는다.
노화와 근감소증 관련 연구가 활발하게 진행되면서 노화된 근육의 근육량과 근육세포수 감소, 근세포 변성에 관여하는 유전자 및 관련 단백질 등의 기능이 밝혀지고 있다. 근감소증은 노쇠, 즉 노화에 의해 신체장기의 대사능력이 감소하여 육체적, 정신적 스트레스에 노출되었을 때 장애가 발생하거나 사망위험이 증가한 상태의 시작점이라고 정의된 바 있고, 근감소증 개선이 노화에 따른 노쇠를 예방하는 열쇠라고 할 수 있다.
근육량과 근력에 직접적인 영향을 미치는 영양소 또는 영양인자는 단백질, 비타민 D, 여러 항산화 성분들과 오메가-3 지방산 등이 있는데, 단백질 부족은 근육합성 감소를 통해 직접적으로 근감소의 원인이 되고, 비타민 D와 오메가-3 지방산, 항산화 성분들은 면역과 항염작용을 통해 근감소증을 예방하거나 개선할 수 있다고 알려져 있다.
신체활동 감소는 근육작용을 감소시키고, 근육에 가해지는 부하가 저하되어 근수축관련 단백질 합성 감소와 근육단백질 분해가 증가됨으로써 악력, 보행속도, 기립균형감 저하를 일으켜 신체활동이 더욱 힘들어진다.
한편, 본 발명의 약학 조성물에 의해 예방 또는 치료 가능한 질병의 종류를 하기에 더욱 상세히 설명하였다.
근감소증의 발생기전은, 근육을 생성하는 줄기세포의 일종인 성상세포가 노화되거나, 퇴행성 중추신경질환, 운동신경 손실 및 기능약화, 신경근 접합부의 활성도 감소, 내분비계호르몬의 변화(성장호르몬, 갑상선호르몬, 부신호르몬 등), 염증성 사이토카인 증가, 미토콘드리아 기능 감퇴, 식사량(단백질 및 관련 영양소 섭취량) 감소, 활동량 감소, 치아 부실, 과음, 수면시간 부족 등이 있다.
만성질환(암 악액질, AIDS, 만성심부전증, 만성폐색성폐질환(COPD), 패혈증 등)에 의해서도 근위축 또는 근감소증이 유발되는데, 암 악액질(cancer cachexia)은 암이 진행되는 동안 대사장애와 식욕 상실로 인한 체중감소가 동반되는 다인성 질병으로, 임상에서 암 악액질은 항암치료의 효과를 감소시키고 사망률을 높이는 원인이므로 항암치료와 함께 관리한다. 악액질은 근위축을 통한 전신 쇠약, 근육피로를 동반하고, 폐근육까지 감소되어 호흡 부전으로 사망률이 증가하는데, 악액질에서 근위축은 암에 의한 식욕부진이 단백질 합성을 억제하고 염증성 사이토카인에 의해 단백질 분해가 증가됨으로써 유발된다.
AIDS는 비정상적인 사이토카인 생성, 영양 이상, 내분비계호르몬 이상 등으로 인해 과도한 단백질 분해와 함께 근위축증을 유발한다. 다른 질환들과는 달리 AIDS 환자는 휴식기 에너지소비량이 일반인에 비해 10∼35% 정도 높고, AIDS 감염은 뇌하수체 호르몬에 영향을 주어 스트레스 호르몬인 코르티졸 분비를 증가시켜 근육단백질 분해 촉진 및 단백질 합성을 억제시킴으로써 근위축이 유발된다.
만성심부전증은 호흡곤란과 피로도 증가로 인해 운동능력과 일상생활에서의 활동능력이 현저히 저하된다. 만성심부전증 환자에서 염증성 사이토카인 증가, 단백질 합성 감소, 성장호르몬 저항성, 레닌-안지오텐신-알도스테론 시스템의 과활성을 통해 유비퀴틴 프로테아좀, 자가포식, 근세포 사멸이 증가되면서 근위축이 진행된다.
만성폐쇄성폐질환(COPD, chronic obstructive pulmonary disease)은 기도와 폐에 심각한 손상으로 과도한 염증이 유발되어 발생하는 진행성 폐질환으로, 폐조직 파괴에 의한 폐기종, 만성기관지염, 기침, 숨가쁨 증상이 나타난다. COPD 환자의 40% 정도는 근육량과 근기능이 감소된 근위축증을 나타내며, 점진적인 근육 소모가 일어나 결과적으로 운동능력 상실 및 사망률이 증가한다.
스테로이드 남용이나 스타틴(statin) 계열의 고지혈증 치료제, 항생제인 페니실린 계열의 류마티스 치료제 등에 의해서도 근위축 또는 근감소증이 유발될 수 있다. 피부근염 등의 근육염증 질환에서 스테로이드를 장기적으로 사용할 때 염증완화에는 도움이 되지만 결과적으로 근위축을 일으키는 원인이 된다. 근육질환 경력이 없는 고지혈증 환자가 스타틴 복용시 아급성으로 근육통, 피로감, 근쇠약, 근색소뇨, 크레아틴 키나아제(creatine kinase, CK) 상승을 보이면서 근위축을 유발한다. 스타틴 약물이 미토콘드리아의 세포호흡과 항산화 기능에 주요 역할을 하는 유비퀴논(CoQ10) 수준을 저하시키고, 유비퀴틴 프로테아좀 경로(ubiquitin proteasome pathway, UPP)를 통해 근육단백질 분해를 증가시키며, 미토콘드리아 및 세포사멸, 미토콘드리아 칼슘조절 기능 감소, 활성산소 증가 등에 영향을 주면서 근감소를 유발하게 된다. 약물 중 페니실린 계열의 페니실라민은 주로 류마티스관절염에 이용되는데, 이 약물이 염증성 근위축증을 유발하는 것으로 알려져 있다.
자가면역질환으로서 중증 근무력증은 신경의 자극이 근육으로 제대로 전달되지 못해 눈꺼풀 처짐, 복시, 전신위약감 등을 일으키는데, 처음에는 단순한 피로나 노화에 의한 증상으로 여기기 쉽지만 증상이 심할 경우 호흡근 마비가 올 수도 있다.
근육을 지배하는 신경의 손상에 의한 척수성 근위축증(spinal muscular atrophy, SMA)은 퇴행성 신경질환의 한 예로, 진핵생물에서 SMN(survival motor neuron) 단백질을 암호화하는 SMN1 유전자 돌연변이에 의해 발생하는 상염색체 열성 유전질환이다. 척수성근위축증은 척수의 전각세포나 뇌간핵의 변성 또는 소실로 인해 대칭적인 근육의 약화나 소실이 나타나는 임상적, 유전학적으로 다양한 질환군을 의미한다.
근위축성 측상경화증(Amyotrophic lateral sclerosis, ALS)은 원인이 정확히 밝혀지지 않은 희귀 퇴행성 신경질환으로, 척수의 운동신경원이 선택적으로 파괴되기 때문에 '운동신경원질환' 또는 일명 '루게릭병'으로 불린다. 이 질환은 사지의 근력약화와 근위축, 사지 마비, 언어장애, 호흡기능 저하 등으로 인해 수년 내에 사망하는 만성 퇴행성 질환이다.
구척수마비 근위축증(spinal bulbar muscular atrophy, SBMA)은 케네디병이라고도 하는데, 운동 신경세포의 손실, 즉 척수와 뇌간에서의 신경 세포의 손실이 자발적인 근육 움직임을 조절하는 신경계의 부분에 영향을 미치는 유전적 질환이다. X 염색체 유전질환이므로 주로 남성에게 영향을 미치며, 테스토스테론 기능 상실과 관련된 호르몬 기능장애를 나타낸다. 또한, 주로 얼굴과 삼키는 근육, 팔과 다리 근육, 특히 신체의 중심에 가장 가까운 근육에 영향을 미친다.
듀센 근위축증(Duchenne Muscular Dystrophy, DMD)은 아동에게 발생하는 근위축증 중 가장 흔한 형태이다. 보통 2세에서 6세 사이에 처음 증상이 나타난다. 자주 넘어지고 일어나기가 힘들고 넓게 뒤뚱거리며 걸으며, 종아리 근육이 커지는 것이 초기 증상이다. 듀센 근위축증은 X 염색체 관련 열성 장애로 남아에게서 주로 나타나며, 엉덩이, 팔의 윗쪽, 허벅지 등의 근육이 먼저 손상된다. 경한 정신지체를 동반하게 되는 경우도 있다. 듀센 근위축증은 느리게 진행되지만. 12세가 되면 아이는 휠체어가 필요할 수도 있다. 숨쉬는 것은 나중 단계에 어려움을 겪게 되는데 항생제와 호흡을 위한 치료를 받을 수 있다. 마지막 단계에서 아이는 심한 호흡, 심장 문제를 겪을 수 있는데, 대다수 십대나 20대 초반에 발생한다. 듀센 근위축증 환자는 유전자치료를 받을 수도 있다.
베커 근위축증(Becker Muscular Dystrophy, BMD)의 시작과 증상은 듀센 근위축증과 비슷하지만 그 보다 늦게 발병하고 그 진행이 더욱 느리다. 상기한 두 근위축증은 같은 유전자의 손상으로 인한 것이지만 그 손상 자체는 서로 다르다. 베커 근위축증도 유전자 치료를 받을 수 있다. 베커 근위축증은 대부분 남자에게서 나타나는 X 염색체 관련 열성 장애이다. 팔윗부분, 허벅지, 엉덩이 부분의 근육이 먼저 손상되며 발생시기는 2~16세이고, 30대까지는 보행이 가능한 특징이 있다.
뇌졸중(뇌허혈)은 뇌의 순환장애로 인해 주위 뇌조직의 부종과 뇌세포 허혈이 발생하여 국소적 혹은 전반적인 돌발적 신경학적 결손을 유도하여 운동장애, 감각장애, 인지장애 및 언어장애 등을 초래하는데, 뇌졸중 발생 후 편마비로 인해 활동이나 운동 저하, 혈액 공급량 감소, 영양섭취 감소, 호르몬에 의한 자극 감소, 신경자극 감소 등으로 인해 근위축이 초래된다.
안면견갑상완형 근위축증(Facioscapulohumeral Muscular Dystrophy, FSH)은 상염색체 우성 타입의 근위축증으로, 남아와 여아 모두에게 영향을 주며, 십대나 성인기 초기에 처음 나타난다. 초기 증상은 어깨가 앞으로 기울어지고 머리위로 팔을 드는 것과 눈을 감는 것이 어려우며, 점차 복부근육, 발, 상지, 엉덩이 부분 등으로 근육약화가 퍼진다. 증상의 심한 정도는 다양하며, 진행은 느리다. 이 장애가 있는 사람의 대략 반정도는 지속적으로 보행하는 것이 가능할 수 있다.
한편, 본 발명에서 사용되는 용어, "예방"이란 본 발명에 따른 약학적 조성물의 투여에 의해 근위축 또는 근감소증을 억제하거나 발병을 지연시키는 모든 행위를 의미한다.
본 발명에서 사용되는 용어, "치료"란 본 발명에 따른 약학적 조성물의 투여에 의해 근위축 또는 근감소증에 의한 증세가 호전되거나 이롭게 변경되는 모든 행위를 의미한다.
본 발명의 조성물은 2'-FL에 추가로 동일 또는 유사한 기능을 나타내는 유효성분을 1종 이상 함유할 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 2'-FL 이외에 약학적으로 허용 가능한 담체를 추가로 포함할 수 있다.
본 발명에서 사용될 수 있는 담체의 종류는 특별히 제한되지 아니하며 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용되는 담체라면 어느 것이든 사용할 수 있다. 상기 담체의 비제한적인 예로는, 락토오스, 덱스트로오스, 수크로오스, 솔비톨, 만니톨, 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 알부민 주사 용액, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 말토덱스트린, 글리세롤, 에탄올 등을 들 수 있다. 이들은 단독으로 사용되거나 2종 이상을 혼합하여 사용될 수 있다.
또한, 본 발명의 약학적 조성물은 필요한 경우, 항산화제, 부형제, 희석제, 완충액 또는 정균제 등 기타 약학적으로 허용 가능한 첨가제들을 첨가하여 사용할 수 있으며, 계면활성제, 결합제, 충진제, 증량제, 습윤제, 붕해제, 분산제 또는 윤활제 등을 부가적으로 첨가하여 사용할 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물에 있어서, 2'-FL은 약학적 조성물의 전체의 중량을 기준으로 0.00001중량％ 내지 99.99중량％로 포함될 수 있으며, 바람직하게는 0.1중량% 내지 90중량%, 보다 바람직하게는 0.1중량% 내지 70중량%, 더욱 바람직하게는 0.1중량% 내지 50중량%로 포함될 수 있으나, 이에 한정되지 않으며 투여 대상의 상태, 구체적인 병증의 종류, 진행 정도 등에 따라 다양하게 변경될 수 있다. 필요한 경우, 약학적 조성물의 전체 함량으로도 포함될 수 있다.
즉, 본 발명의 약학적 조성물의 약학적 유효량, 유효 투여량은 약학적 조성물의 제제화 방법, 투여 방식, 투여 시간 및/또는 투여 경로 등에 의해 다양해질 수 있으며, 약학적 조성물의 투여로 달성하고자 하는 반응의 종류와 정도, 투여 대상이 되는 개체의 종류, 연령, 체중, 일반적인 건강 상태, 질병의 증세나 정도, 성별, 식이, 배설, 해당 개체에 동시 또는 이시에 함께 사용되는 약물 기타 조성물의 성분 등을 비롯한 여러 인자 및 의약 분야에서 잘 알려진 유사 인자에 따라 다양해질 수 있으며, 당해 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 목적하는 치료에 효과적인 투여량을 용이하게 결정하고 처방할 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 약학적 조성물의 일일 투여량은 약 0.01 내지 1,000 mg/kg이고, 바람직하게는 0.1 내지 100 mg/kg이며, 하루 일회 내지 수회에 나누어 투여할 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물의 투여는 하루에 1회 투여될 수 있고, 수 회에 나누어 투여될 수도 있다. 본 발명의 약학적 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고 종래의 치료제와는 순차적 또는 동시에 투여될 수 있다. 상기 요소를 모두 고려하여 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양으로 투여할 수 있으며, 이는 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 근위축 또는 근감소증을 예방 또는 치료하기 위하여 추가적으로 호르몬 치료, 약물치료 등의 다양한 방법들과 병용하여 사용될 수 있다.
본 발명에서 사용된 용어, "투여"는 어떠한 적절한 방법으로 환자에게 본 발명의 약학적 조성물을 도입하는 것을 의미하며, 본 발명의 약학적 조성물의 투여 경로 및 투여 방식은 각각 독립적일 수 있으며, 목적하는 해당 부위에 상기 약학적 조성물이 도달할 수 있는 한, 특별한 제한 없이 임의의 투여 경로 및 투여 방식에 따를 수 있다.
상기 약학적 조성물은 경구 투여 또는 비경구 투여 방식으로 투여할 수 있으며, 경구 투여 또는 비경구 투여를 위한 적합하고 다양한 제형으로 제제화되어 사용될 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물을 이용한 경구 투여용 제제의 비제한적인 예로는, 유성 현탁액, 트로키제(troches), 로젠지(lozenge), 정제, 수용성 현탁액, 조제 분말, 과립, 에멀젼, 하드 캡슐, 소프트 캡슐, 시럽 또는 엘릭시르제 등을 들 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물을 경구 투여용으로 제제화하기 위하여, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아밀로펙틴, 셀룰로오스 락토오스, 사카로오스 또는 젤라틴 등과 같은 결합제; 스테아르산 마그네슘, 스테아르산 칼슘, 스테아릴 푸마르산 나트륨 또는 폴리에틸렌 글리콜 왁스 등과 같은 윤활유; 디칼슘 포스페이트 등과 같은 부형제; 옥수수 전분 또는 고구마 전분 등과 같은 붕해제 등을 사용할 수 있으며, 방향제, 시럽제, 감미제 등도 사용할 수 있다. 나아가 캡슐제의 경우에는 상기 언급한 물질 외에도 지방유와 같은 액체 담체 등을 추가로 사용할 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물의 비경구 투여 방법으로는, 근육 내 투여, 경피 투여, 정맥 내 투여, 복강 내 투여 또는 피하 투여 등을 이용할 수 있으며, 상기 조성물을 질환 부위에 도포하거나 분무, 흡입하는 방법 또한 이용할 수 있으나 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 약학적 조성물을 이용한 비경구용 제제의 비제한적인 예로는, 주사액, 좌제, 연고, 도포용 파우더, 오일, 호흡기 흡입용 분말, 스프레이용 에어로졸제, 크림 등을 들 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물을 비경구 투여용으로 제제화하기 위하여, 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결 건조 제제, 외용제 등을 사용할 수 있으며, 상기 비수성용제, 현탁제로는 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물을 주사액으로 제제화하는 경우, 본 발명의 약학적 조성물을 안정제 또는 완충제와 함께 물에서 혼합하여 용액 또는 현탁액으로 제조하고 이를 앰플(ampoule) 또는 바이알(vial)의 단위 투여용으로 제제화할 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물을 에어로졸제로 제제화하는 경우, 수분산된 농축물 또는 습윤 분말이 분산되도록 추진제 등이 첨가제와 함께 배합할 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물을 연고, 오일, 크림, 도포용 파우더, 피부 외용제 등으로 제제화하는 경우에는, 동물성 유, 식물성 유, 왁스, 파라핀, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 산화 아연 등을 담체로 사용하여 제제화할 수 있다.
한편, 본 발명은 2'-FL을 유효성분으로 함유하는 근위축 개선 또는 근감소증 개선 또는 근육강화용 식품 조성물을 제공한다.
본 발명의 식품 조성물에 있어, 2'-FL의 함량은 특별히 제한되지 않으며, 투여 대상의 상태, 구체적인 병증의 종류, 진행 정도 등에 따라 다양하게 변경될 수 있다. 필요한 경우, 식품의 전체 함량으로도 포함될 수 있다.
본 발명의 식품 조성물은 일 예로, 면류, 껌류, 유제품류, 아이스크림류, 육류, 곡류, 카페인 음료, 일반음료, 초콜릿, 빵류, 스낵류, 과자류, 사탕, 피자, 젤리, 알코올성 음료, 술, 비타민 복합제 및 그 밖의 건강보조식품류 중 선택되는 어느 하나일 수 있으나, 반드시 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 식품 조성물이 식품 첨가물의 형태로 사용될 경우, 이를 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다.
또한, 본 발명의 "식품 조성물"은 건강기능식품을 포함하는데, 상기 건강기능식품이라 함은 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 제조 및 가공한 식품을 의미하며, "기능성"이라 함은 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건 용도에 유용한 효과를 얻을 목적으로 섭취하는 것을 의미한다.
본 발명의 식품 조성물은 통상 사용되어 냄새, 맛, 시각 등을 향상시킬 수 있는 추가 성분을 포함할 수 있다. 예들 들어, 비오틴(biotin), 엽산(folate), 판토텐산(panthotenic acid), 비타민 A, C, D, E, B1, B2, B6, B12, 니아신(niacin) 등을 포함할 수 있다. 또한, 크롬(Cr), 마그네슘(Mg), 망간(Mn), 구리(Cu), 아연(Zn), 철(Fe), 칼슘(Ca) 등의 미네랄을 포함할 수 있다. 또한, 시스테인, 발린, 라이신, 트립토판 등의 아미노산을 포함할 수 있다. 또한, 방부제(소르빈산칼륨, 벤조산나트륨, 살리실산, 디히드로초산나트륨 등), 착색제(타르색소 등), 발색제(아질산나트륨, 아초산나트륨 등), 표백제(아황산나트륨), 살균제(표백분과 고도 표백분, 차아염소산나트륨 등), 팽창제(명반, D-주석산수소칼륨 등), 강화제, 유화제, 증점제(호료), 피막제, 산화방지제(부틸히드록시아니졸(BHA), 부틸히드록시톨루엔(BHT) 등), 조미료(MSG 등), 감미료(둘신, 사이클레메이트, 사카린, 나트륨 등), 향료(바닐린, 락톤류 등), 검기초제, 거품억제제, 용제, 개량제 등의 식품첨가물(food additives)을 첨가할 수 있다. 상기 첨가물은 식품의 종류에 따라 선별되고 적절한 양으로 사용될 수 있다.
이하, 본 발명의 내용에 대해서 하기 실시예를 통해 더욱 상세히 설명하고자 한다. 다만, 본 발명의 권리범위가 하기 실시예만 한정되는 것은 아니고 그와 등가의 기술적 사상의 변형까지를 포함한다.
[실시예 1: C2C12 세포주를 이용한 2'-FL의 근육강화 효능 평가]
1. C2C12 배양 및 MTT 분석
마우스 근육 (myoblast) 세포주인 C2C12는 90% DMEM, 10% FBS 및 10 unit/㎖ 페니실린-스트렙토마이신이 포함된 배지를 사용하여 37℃, 5% CO₂ 조건에서 배양하였다.
2'-FL의 세포 독성을 확인하기 위하여, C2C12 세포주를 96웰 플레이트에 5×104/well 농도로 분주하고, 24시간 동안 배양한 뒤 2'-FL을 농도별(100, 200, 400 μM)로 24시간 동안 처리하였다. 이후, 배지를 제거한 뒤 성장배지와 희석된 0.5 ㎎/㎖ 농도의 MTT 용액을 2 ㎖씩 분주하고 CO2 인큐베이터에서 배양시켰다. 2시간 경과 후 MTT 시약을 제거하고 DMSO (dimethyl sulfoxide)를 이용하여 포르마진(formazin)을 녹인 다음 540㎚에서 흡광도를 측정하였다.
실험 결과, 2'-FL 모든 농도(100, 200, 400 μM) 처리군에서 대조군 대비 세포 생존율에는 차이가 없는 것을 확인하였다(도 1). 도 1은 2'-FL 처리에 따른 세포 생존율을 측정한 결과이다.
2. 면역세포화학염색을 이용한 MHC 발현 분석
마우스 근육세포주(myoblast)를 근관세포(myotube)로 분화시키기 위하여 6웰 플레이트에 4×105/well 농도로 분주하고, 24시간 동안 배양하여 100% 융합한 상태로 배양한 다음, 2% 말혈청이 첨가된 DMEM 배지로 2일마다 교환하여 6일간 분화시켰다.
2'-FL 처리에 따른 근육세포 분화 효과를 확인하기 위하여 면역세포화학염색을 실시하였다. 구체적으로, C2C12에 2'-FL를 농도별(100, 200 μM)로 24시간 동안 처리한 뒤 4% 파라포름알데하이드(paraformaldehyde) 용액을 넣어 10분 동안 고정시켰다. 고정된 세포에 0.1% Triton X-100이 포함된 PBS로 세척한 뒤 5% BSA 용액에서 1시간 동안 반응시켰다. 이를 다시 1× PBS로 3회 세척한 후, MHC 항체(Cell signaling)와 함께 상온에서 하룻밤 동안 반응시켰다.
반응이 끝난 세포는 PBS로 3회 세척한 후 Alexa Fluor 488 goat anti-rabbit IgG와 함께 1시간 동안 실온에서 반응시키고 홀체스트(horchest) 용액으로 핵을 염색시킨 뒤 형광현미경으로 관찰하였다. 이때, 양성대조군으로 AMPK 작용자인 A-769662 (1 μM)을 사용하였다.
실험 결과, 2'-FL를 처리한 군에서 대조군 대비 MHC 발현 및 근관세포의 길이와 굵기가 모두 증가하는 것을 확인하였다(도 2). 도 2는 2'-FL 처리에 따른 근육 분화 조절 효능을 확인한 결과이다.
따라서 2'-FL은 C2C12 세포주에서 근육 분화를 증가시키는 것으로 확인되었다.
3. 미토콘드리아 기능 강화 효능 평가
미토콘드리아는 자체적인 핵 DNA와 분리되는 미토콘드리아 DNA (mtDNA)를 가지며, mtDNA는 세포의 핵 DNA와는 달리 손상을 복구하는 수선과정 (repair mechanism)이 없으며, DNA를 보호하는 역할을 하는 히스톤 단백질이 없기 때문에 상대적으로 손상되기 쉽다. 이러한 mtDNA의 손상은 미토콘드리아의 기능 저하로 연결되어 세포 활동에 필요한 에너지 형태인 ATP 합성이 감소하게 되고, 생체 내 항상성 조절 능력이 감소되어 다양한 질환 발병의 원인이 된다. 이에 따라 2'-FL 처리에 따른 mtDNA 발현과 미토콘드리아 밀도(density)를 측정하였다.
이를 위하여, 분화가 완료된 C2C12에 2'-FL를 처리한 후 미토콘드리아 밀도의 변화를 미토트래커(Mitotracker)로 확인하였다. C2C12에 2'-FL를 농도별(100, 200 μM)로 24시간 동안 처리한 후 PBS로 세척하고, 미토트래커 그린 탐침을 200 nM 포함하는 배지를 첨가하여 30분간 배양하였다. 이후, 미토트래커 그린 탐침와 결합한 부분은 490 ㎚의 파장을 흡수하고 516 ㎚의 파장을 방출하는 파장을 SpectraMax로 정량하여 미토콘드리아의 밀도를 측정하였다. 이때, 양성대조군으로 AMPK 작용자인 A-769662 (1 μM)을 사용하였다.
실험 결과, 대조군(control) 대비 2'-FL 처리군에서 농도의존적으로 유의적인 mtDNA 발현 증가를 확인하였고, 미토트래커를 이용한 미토콘드리아 밀도 측정에서도 대조군 대비 2'-FL 처리군에서 농도의존적으로 미토콘드리아 밀도가 증가하는 것을 확인할 수 있었다(도 3). 도 3은 2'-FL 처리에 따른 미토콘드리아 기능 강화 효능을 확인한 결과이다. 이러한 결과는 2'-FL이 미토콘드리아 기능을 조절함을 의미한다.
4. 미토콘드리아 생합성 관련 유전자 발현 변화 확인
미토콘드리아의 주요 기능은 세포내 에너지 형태인 ATP를 생성하는 것으로, 신진대사, 신호전달, 세포자살, 분화 등 세포내 다양한 기능을 수행하는 소기관이다. 이러한 골격근 내 대사적응 반응은 다양한 유전자의 조절에 의해 이루어지게 되는데, 이때 가장 핵심적인 역할을 하는 것이 PGC-1α(peroxisome proliferator-activated receptor-γ coactivator-1α) 전사 보조인자로 알려졌다. 이에 따라 2'-FL 처리에 따른 PGC-1α와 하위 유전자인 NRF2의 mRNA 발현 변화를 확인하고자 하였다.
이를 위하여, C2C12 세포에서 추출한 RNA를 ReverTra Ace qPCR RT Kit (TOYOBO)를 이용하여 cDNA합성을 진행하였다. 반응의 효율을 높이기 위해 미리 RNA를 65℃에서 5분간 히팅한 후, 바로 얼음에 보관하였다. 이후, gDNA remover를 포함하는 2 ㎕의 4× DN Master Mix와 0.5 ㎍의 mRNA, 뉴클레이즈-프리 워터로 총 8 ㎕의 시약을 만들어 37℃에서 5분 동안 증폭하였다.
반응을 끝낸 시약에 5× RT mater mix를 넣고 37℃에 15분, 50℃에 5분, 98℃에 5분 동안 증폭시켜 cDNA를 합성하였다. 이후 얻어진 합성된 cDNA는 Thunderbird TMSYBR qPCR Mix reagent (TOYOBO)을 이용하여 qPCR을 실시하였다. 유전자의 발현량은 iQ5 Cycler System (Bio-Rad)으로 분석하였다. 이때, 양성대조군으로 AMPK 작용자인 A-769662 (1 μM)을 사용하였다.
실험 결과, 대조군 대비 2'-FL 고농도 처리군에서 PGC-1α와 NRF2 mRNA 발현이 유의적으로 증가하는 것을 확인하였다(도 4). 도 4는 2'-FL 처리에 따른 PGC-1α와 하위 유전자인 NRF2의 mRNA 발현 변화를 확인한 결과이다.
상기 결과를 종합해볼 때, 2'-FL은 C2C12 근원세포(myoblast)에서 근관세포(myotube)로의 분화를 증가시키고, mtDNA 발현 및 미토콘드리아 밀도를 증가시켜 미토콘드리아 기능을 증대시키는 것으로 확인된다. 또한, 미토콘드리아 생합성과 관련된 유전자인 PGC-1α 및 NRF2 mRNA의 발현을 증가시키는 것으로 확인된다.
이러한 결과는 2'-FL의 처리가 근육강화에 효능이 있을 것으로 판단되는바, 이러한 효과로 근위축 보호 효능이 있는지를 하기 실시예 2에서 확인해보고자 하였다.
[실시예 2: C2C12 세포주를 이용한 2'-FL의 근위축 보호 효능 평가]
합성 글루코르티코이드인 덱사메타손은 생체 내 또는 배양세포에서 근육에서의 단백질 합성 속도를 감소시키고 단백질 분해 속도를 증가시키는 것으로 알려져 있다. 이에 따라 분화가 완료된 C2C12에 2'-FL를 처리하고 1시간 뒤, 400 μM 농도로 덱사메타손을 동시에 24시간 처리하여 2'-FL의 근위축 보호 효능을 세포 모델에서 평가하였다.
1. 덱사메타손 처리에 따른 성장억제 보호능 및 분화억제 보호능 평가
덱사메타손 처리에 따른 성장억제 보호능을 평가하기 위하여, 상기한 방법으로 C2C12에 2'FL 및 덱사메타손을 처리한 뒤 트립신으로 세포를 떼어내고, 트리판 블루(trypan blue) 염색을 이용하여 세포수를 카운팅하였다.
한편, 덱사메타손 처리에 따른 분화억제 보호능을 평가하기 위하여, 덱사메타손을 처리한 뒤 근관세포(myotube)의 길이와 지름을 측정하였다.
실험 결과, 덱사메타손을 처리하지 않은 실험군(Nor) 대비 덱사메타손을 처리한 군(Veh)에서 유의적인 세포수 감소를 확인하였으나, 2'-FL 고농도 처리군 (200 μM)에서는 덱사메타손을 처리한 군(Veh) 대비 유의적인 세포수 증가를 확인하였다.
또한, 덱사메타손을 처리하지 않은 실험군(Nor)에 비해 덱사메타손을 처리한 군(Veh)에서 근관세포(myotube)의 길이와 지름이 유의적으로 줄어드는 것이 확인되었으나, 2'-FL 고농도 처리군 (200 μM)에서 덱사메타손을 처리한 군(Veh) 대비 유의적인 근관세포의 길이와 지름 증가를 확인하였다(도 5). 도 5는 2'-FL 처리에 따른 덱사메타손 처리에 의해 유도된 근위축 보호 효능을 확인한 결과이다. 도 5에서 2FLL은 100 μM의 2'-FL 처리군을 의미하며, 2FLH는 200 μM의 2'-FL 처리군을 의미한다.
2. 덱사메타손 처리에 따른 미토콘드리아 기능 저해 보호 효능 평가
덱사메타손을 처리한 뒤 mtDNA 발현과 미토콘드리아 밀도를 측정하였다. 실험 결과, 덱사메타손을 처리하지 않은 실험군(Nor) 대비 덱사메타손을 처리한 군(Veh)에서 유의적인 mtDNA 발현과 미토콘드리아 밀도가 감소된 것을 확인되었으나, 2'-FL 처리군에서 덱사메타손을 처리한 군(Veh) 대비 유의적인 미토콘드리아 기능 증가를 확인하였다(도 6). 도 6은 2'-FL 처리에 따른 덱사메타손 처리에 의해 유도된 미토콘드리아 기능 저해 보호 효능을 확인한 결과이다. 도 6에서 2FLL은 100 μM의 2'-FL 처리군을 의미하며, 2FLH는 200 μM의 2'-FL 처리군을 의미한다.
3. 근위축 관련 유전자 발현 변화
근위축은 2개의 근육 특이적 E3 유비퀴틴 라이게이즈(E3 ubiquitin ligase)인 MAFbx (muscle atrophy F-box)/atrogin-1 및 MuRF1 (Muscle RING Finger-1)과 관련이 있는데, 덱사메타손은 이들을 통해 근육 단백질을 분해하고, 근육분화에 관여하는 근육 특이적 인자들인 미오게닌(myogenin) 및 MyoD (myogenic differentiation antigen)를 감소시킴으로써 근육량을 감소시키는 것으로 보고되고 있다. 이에, 덱사메타손 처리에 의해 감소한 근위축 관련 유전자 발현을 2'-FL이 증대시키는지를 확인하기 위하여 실험을 진행하였다. 실험방법은 항체의 변경을 제외하고는 '실시예 1의 4번 실험'과 동일한 바 이에 대한 기재는 생략한다.
실험 결과, 덱사메타손을 처리하지 않은 실험군(Nor) 대비 덱사메타손을 처리한 군(Veh)에서 유의적인 atrogin-1 및 MuRF1 유전자 발현의 증가를 확인하였고, 2'-FL 처리시 덱사메타손을 처리한 군(Veh) 대비 atrogin-1 및 MuRF1 유전자의 발현을 유의적으로 감소시키는 것을 확인하였다(도 7). 도 7은 2'-FL 처리에 따른 atrogin-1 및 MuRF1 유전자의 발현 변화를 확인한 결과이다. 도 7에서 2FLL은 100 μM의 2'-FL 처리군을 의미하며, 2FLH는 200 μM의 2'-FL 처리군을 의미한다.
이상의 결과를 종합해보면 2'-FL은 덱사메타손 처리에 따른 세포수 감소, 미토콘드리아 기능 감소에 대한 보호효과가 있는 것으로 확인되었으며, 근위축 마커인 atrogin-1 및 MuRF1 유전자의 발현을 감소시켜 근위축 예방에 도움이될 것으로 판단된다. 이러한 결과가 동물모델에서도 동일하게 나타나는지를 하기 실시예 3에서 확인해보고자 하였다.
[실시예 3: 동물 모델을 이용한 2'-FL의 근위축 보호 효능 평가]
1. 동물실험 디자인
2'-FL의 근위축 보호 효과를 동물모델에서 확인하기 위하여 7주령 수컷 C57BL/6 마우스에 7일간 2'-FL를 200, 400 ㎎/㎏ 농도로 경구투여한 뒤, 근위축을 유도하는 약물로 알려진 덱사메타손을 10 ㎎/㎏ 농도로 복강주사와 동시에 2'-FL를 2주간 추가로 경구투여하였다.
이때, 마우스 실험군은 식염수(saline)를 복강주사하고 증류수를 경구투여한 Nor군, 덱사메타손을 복강주사하고 증류수를 경구투여한 Veh군, 덱타메타손을 복강주사하고 2'-FL을 각각 200, 400 ㎎/㎏ 농도로 경구투여한 2FLL군 및 2FLH군으로 실험을 진행하였다.
실험 결과, 동물 실험이 진행되는 3주 동안 마우스 무게를 측정하였을 때 2'-FL 고농도 처리군(2FLH)에서 마우스 무게가 덱사메타손을 처리한 군(Veh) 대비 증가한 것으로 확인되었다. 또한, 혈장 간기능 검사(GOT, GPT)에서도 덱사메타손을 처리한 군(Veh) 대비 2'-FL 처리군에서 GOT, GPT 활성도가 낮아진 것을 확인하였다(도 8). 도 8은 동물 모델에서 2'-FL 처리에 따른 덱사메타손 처리에 의한 체내 손상 보호 효능을 확인한 결과이다(A: 처리군에 따른 동물 모델의 무게 측정 결과, B: 처리군에 따른 간기능 검사(GOT, GPT) 결과).
이러한 결과는 2'-FL의 경구투여가 덱사메타손 복강투여에 따른 체내 손상의 보호를 야기하는 것으로 판단된다.
2. 마우스 근육 조직의 조직학적 형태 관찰
마우스 근육 조직을 H&E 방법으로 염색한 뒤 조직학적 형태를 관찰하였다.
실험 결과, 덱사메타손을 처리한 군(Veh)에서 관찰할 수 있는 근위축 형태학적 특징인 근육 다발의 크기 감소, 핵 위치의 불균형 등이 2'-FL 고농도 처리군 (2FLH)에서 회복되는 현상을 관찰할 수 있었다.
또한, 근육 조직별(비장근, 비복근 및 장지신근) 무게 측정에서도 덱사메타손을 처리한 군(Veh) 대비 2'-FL 고농도 처리군(2FLH)에서 유의적으로 근육 조직별 무게가 증가한 것을 확인하였다(도 9). 도 9는 동물 모델에서 2'-FL 처리에 따른 덱사메타손 처리에 의해 유도된 근위축 개선 효능을 확인한 결과이다 (A: 근육 조직의 조직학적 형태 관찰 결과, B: 근육 조직별(비장근, 비복근 및 장지신근) 무게 측정 결과).
3. 악력 테스트 수행
모든 실험동물은 실험 종료 전날 grip strength meter(정도비앤피)를 이용하여 악력 테스트를 시행하였다.
실험결과, 덱사메타손을 처리한 군(Veh) 대비 2'-FL 처리군에서 유의적으로 악력이 증가한 것을 확인하였다(도 10). 도 10은 동물 모델에서 2'-FL 처리에 따른 덱사메타손 처리에 의해 감소된 악력 개선 효능을 확인한 결과이다.
4. 근손실 관련 단백질 발현 확인
마우스 근육 조직을 이용한 단백질 발현을 확인하기 위하여 용해 완충액 (10 mM Tris-HCl, pH 7.5, 1% NP-40, 0.1% sodium deoxycholate, 0.1% SDS, 150 mM NaCl, 1 mM EDTA)에 HaltTM 단백질분해효소(protease) 억제제를 첨가하여 단백질을 추출한 뒤 이뮤노블롯팅을 실시하였다.
1차 항체로 anti-α-tubulin (1:1000), anti-atrogin-1 (1:1000)을 사용하였다. 이뮤노블롯팅의 결과 이미지는 ChemiDocTM touch imaging system (Bio-Rad)와 Image Lab 5.2 software (Bio-Rad)를 이용하여 분석하였다.
실험 결과, 덱사메타손을 처리한 군(Veh) 대비 2'-FL 고농도 처리군에서 유의적으로 근위축 마커인 atrogin-1 단백질 발현이 감소한 것을 확인하였다(도 11). 도 11은 동물 모델에서 2'-FL 처리에 따른 덱사메타손 처리에 의해 감소된 atrogin-1 단백질 발현 변화를 확인한 결과이다.

Claims (11)

  1. 2'-FL을 유효성분으로 함유하는 근위축 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 근위축은,
    일차성 근위축 및 이차성 근위축 중 선택되는 어느 하나의 근위축인 것을 특징으로 하는 근위축 예방 또는 치료용 약학 조성물
  3. 제2항에 있어서,
    상기 일차성 근위축은,
    기계적 자극의 부족, 성상세포의 노화, 신경근 접합부의 활성도 감소, 미토콘드리아 기능 감퇴 및 영양 결핍 중 선택되는 어느 하나를 원인으로 하여 유도되는 것을 특징으로 하는 근위축 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  4. 제2항에 있어서,
    상기 이차성 근위축은,
    뇌졸중에 의한 탈신경, 만성질환, 과도한 약물사용, 내분비계호르몬 및 성호르몬의 변화 및 염증유발 사이토카인(proinflammatory cytokine)의 불균형 중 선택되는 어느 하나의 요인에 의해 유도되는 것을 특징으로 하는 근위축 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  5. 2'-FL을 유효성분으로 함유하는 근감소증 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  6. 제5항에 있어서,
    상기 근감소증은,
    일차성 근감소증 및 이차성 근감소증 중 선택되는 어느 하나의 근감소증인 것을 특징으로 하는 근감소증 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  7. 제6항에 있어서,
    상기 일차성 근감소증은,
    기계적 자극의 부족, 성상세포의 노화, 신경근 접합부의 활성도 감소, 미토콘드리아 기능 감퇴 및 영양 결핍 중 선택되는 어느 하나를 원인으로 하여 유도되는 것을 특징으로 하는 근감소증 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  8. 제6항에 있어서,
    상기 이차성 근감소증은,
    뇌졸중에 의한 탈신경, 만성질환, 과도한 약물사용, 내분비계호르몬 및 성호르몬의 변화 및 염증유발 사이토카인(proinflammatory cytokine)의 불균형 중 선택되는 어느 하나의 요인에 의해 유도되는 것을 특징으로 하는 근감소증 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  9. 2'-FL을 유효성분으로 함유하는 근위축 개선용 식품 조성물.
  10. 2'-FL을 유효성분으로 함유하는 근감소증 개선용 식품 조성물.
  11. 2'-FL을 유효성분으로 함유하는 근육강화용 식품 조성물.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20180102431A (ko) * 2017-03-07 2018-09-17 코스맥스 주식회사 푸코실락토오스를 포함하는 피부 노화 개선용 화장료 조성물
KR20190045079A (ko) * 2017-10-23 2019-05-02 (주)에이피테크놀로지 2'-푸코실락토오스 또는 3-푸코실락토오스를 함유한 안약 또는 안구 건조 방지용 조성물
KR20190130720A (ko) * 2018-05-15 2019-11-25 (주)에이피테크놀로지 2'-푸코실락토오스를 포함하는 뇌졸중 예방용 조성물
KR20210013007A (ko) * 2018-02-19 2021-02-03 듀폰 뉴트리션 바이오사이언시즈 에이피에스 푸코실락토스 용액을 분무 건조하는 방법 및 관련 제품 조성물
KR20210116783A (ko) * 2020-03-16 2021-09-28 아주대학교산학협력단 푸코실락토즈를 포함하는 미백용 조성물

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20210189048A1 (en) 2018-08-23 2021-06-24 Toray Industries, Inc. Resin film, laminated body, and production method for laminated body
EP3952882A4 (en) * 2019-04-09 2023-01-18 Intrinsic Medicine, Inc. IMMUNO-MODULATORY OLIGOSACCHARIDES FOR PAIN TREATMENT
EP3976051A1 (en) * 2019-05-29 2022-04-06 FrieslandCampina Nederland B.V. Compositions comprising 2 -fucosyllactose and gos
WO2021071289A2 (ko) 2019-10-08 2021-04-15 주식회사 진켐 줄기세포능을 증대시키기 위한 조성물 및 이의 용도

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20180102431A (ko) * 2017-03-07 2018-09-17 코스맥스 주식회사 푸코실락토오스를 포함하는 피부 노화 개선용 화장료 조성물
KR20190045079A (ko) * 2017-10-23 2019-05-02 (주)에이피테크놀로지 2'-푸코실락토오스 또는 3-푸코실락토오스를 함유한 안약 또는 안구 건조 방지용 조성물
KR20210013007A (ko) * 2018-02-19 2021-02-03 듀폰 뉴트리션 바이오사이언시즈 에이피에스 푸코실락토스 용액을 분무 건조하는 방법 및 관련 제품 조성물
KR20190130720A (ko) * 2018-05-15 2019-11-25 (주)에이피테크놀로지 2'-푸코실락토오스를 포함하는 뇌졸중 예방용 조성물
KR20210116783A (ko) * 2020-03-16 2021-09-28 아주대학교산학협력단 푸코실락토즈를 포함하는 미백용 조성물

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* Cited by examiner, † Cited by third party
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