WO2024112231A1 - Композиция быстродействующего инсулина (варианты) - Google Patents

Композиция быстродействующего инсулина (варианты) Download PDF

Info

Publication number
WO2024112231A1
WO2024112231A1 PCT/RU2023/050272 RU2023050272W WO2024112231A1 WO 2024112231 A1 WO2024112231 A1 WO 2024112231A1 RU 2023050272 W RU2023050272 W RU 2023050272W WO 2024112231 A1 WO2024112231 A1 WO 2024112231A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
insulin
composition
compositions
lysine
composition according
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Ceased
Application number
PCT/RU2023/050272
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
Виктория Олеговна ШИТИКОВА
Нина Валерьевна ЮДАЕВА
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Obshchestvo S Ogranichennoy Otvetstvennostyu "geropharm"
Original Assignee
Obshchestvo S Ogranichennoy Otvetstvennostyu "geropharm"
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from RU2022130796A external-priority patent/RU2022130796A/ru
Application filed by Obshchestvo S Ogranichennoy Otvetstvennostyu "geropharm" filed Critical Obshchestvo S Ogranichennoy Otvetstvennostyu "geropharm"
Priority to CN202380092609.3A priority Critical patent/CN120712073A/zh
Priority to CR20250256A priority patent/CR20250256A/es
Priority to EP23895130.5A priority patent/EP4623902A1/en
Publication of WO2024112231A1 publication Critical patent/WO2024112231A1/ru
Priority to MX2025006079A priority patent/MX2025006079A/es
Priority to DO2025000123A priority patent/DOP2025000123A/es
Anticipated expiration legal-status Critical
Priority to CONC2025/0008517A priority patent/CO2025008517A2/es
Ceased legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/22—Hormones
    • A61K38/28—Insulins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
    • A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
    • A61K47/183—Amino acids, e.g. glycine, EDTA or aspartame
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/08—Solutions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics

Definitions

  • the invention relates to the field of pharmaceuticals and medicine, namely to compositions of fast-acting insulin preparations. More specifically, the present invention relates to compositions containing rapid-acting insulin and an amino acid as a stabilizer, which may be selected from lysine and/or a salt thereof or a combination of lysine and/or a salt thereof with arginine and/or a salt thereof.
  • the compositions according to the invention exhibit better chemical and physical stability compared to analogues.
  • Insulin is a peptide hormone that regulates blood glucose levels in mammals by initiating a signaling cascade that accelerates glucose uptake and glycogen production upon binding to the insulin receptor.
  • T1DM type 1 diabetes
  • T2DM type 2 diabetes
  • the delay in insulin action is largely related to the time it takes for hexamers to dissociate into monomers and dimers capable of absorption [2,3].
  • the first class of rapid-acting insulins eg, insulin lispro and aspart
  • insulin aspart were developed based on amino acid mutations in the human insulin sequence, which resulted in weakened self-association of insulin oligomers.
  • replacing the amino acid proline at position B28 with aspartic acid in insulin aspart reduces the tendency of molecules to form hexamers, which is observed in a solution of soluble human insulin.
  • insulin aspart is absorbed much more quickly from subcutaneous fat compared to soluble human insulin and is widely used for postprandial control of blood glucose levels in patients with diabetes mellitus [4].
  • the molecular structure of insulin lispro is identical to the structure of human insulin with the exception of positions 28 and 29 of the B chain of the molecule, where lysine and proline are located in the reverse order (human insulin: B28ProB29Lys, lispro: B28LysB29Pro).
  • the reverse arrangement of lysine and proline allows the lispro molecule to dissociate twice as fast.
  • Insulin compositions are manufactured, stored and used in vials, which require their stability during shelf life. Stable insulin compositions are particularly desirable for use in delivery devices where they are exposed to elevated temperatures near body temperature and/or mechanical stress, such as, for example, pen injections and continuous infusion systems (using pumps).
  • fast-acting insulin analogues which are in monomeric or dimeric form, have reduced physicochemical stability compared to hexamers [5], in particular they form high-molecular impurities, and an increased tendency to aggregation (fibrillation), which manifests itself in the form of cloudiness and sediment.
  • High molecular weight impurities dimers, trimers, polymers
  • aggregates not only reduce the administered dose of insulin, but can also provoke irritation or immune reactions in the patient.
  • insoluble aggregates can clog and damage needles, cannulas, and pump tubing in continuous infusion systems. To ensure the quality of insulin compositions, it is necessary to increase their chemical and physical stability.
  • the pharmacokinetic characteristics of rapid-acting insulin aspart Fiasp® may better reproduce the rapid endogenous secretion of prandial insulin and, thus, improve postprandial glycemic control. compared to insulin aspart [6].
  • Nicotinamide has the ability to accelerate the absorption of insulin (WO 91/09617), including insulin aspart (WO/9610417), but has a negative effect on chemical stability - it increases the content of impurities (RU2533217).
  • the chemical stability of the composition of the medicinal product (LP) “Fiasp®” is increased due to the introduction of arginine into the composition, which is reflected in a decrease in the content of dimers and polymers, deamidated insulin during storage (RU2533217).
  • the composition of the drug "FIASP®” is another one of the closest analogues of the present invention.
  • Patent RU2533217 shows (example 2) that the addition of arginine to compositions containing insulin aspart with nicotinamide reduces the amount of degradation products formed, especially high molecular weight protein and deamidated forms, but at the same time the physical stability, measured as the lag time in the analysis with thioflavin, decreases T, with increasing arginine concentration, physical stability decreases even more.
  • n 37
  • compositions of fast-acting insulins such as insulin aspart, insulin lispro or insulin glulisine, which are characterized by worse stability compared to hexameric forms of insulin, as well as for compositions containing nicotinamide, which can accelerate the absorption of insulin, but at the same time at the same time negatively affecting the chemical stability of insulin.
  • the inventors of the present invention have surprisingly discovered that rapid-acting insulin compositions containing as a stabilizer the amino acid that is lysine and/or a salt thereof, or a combination of lysine and/or a salt thereof with arginine and/or a salt thereof, have improved chemical and physical stability compared to with insulin compositions without added amino acids, as well as with insulin compositions containing the amino acid arginine as a stabilizer.
  • the present invention relates to compositions with improved chemical and physical stability containing rapid-acting insulin and an amino acid that is lysine or a salt thereof, or a combination of lysine or a salt thereof with arginine or a salt thereof.
  • the present invention relates to compositions for lowering blood glucose levels in a subject, containing rapid-acting insulin and an amino acid that is lysine or a salt thereof, or a combination of lysine or a salt thereof with arginine or a salt thereof.
  • the insulin is insulin aspart, insulin lispro and insulin glulisine.
  • Insulin glulisine compositions additionally, but not necessarily, contain methionine.
  • concentration of rapid-acting insulin in the compositions of the invention is from about 0.2 mM to 2.0 mM (about 33 U/ml to about 333 U/ml), preferably from about 0.3 mM to 1.2 mM ( from about 50 U/ml to about 200 U/ml), even more preferably 0.6 mm (100 U/ml).
  • the compositions have a pH of from 6.5 to 8.5. In yet another embodiment of the present invention, the compositions have a pH of from 6.6 to 7.4. In one embodiment, the pH is 7, 7.3, 7.4 or 7.5.
  • compositions of the invention containing insulin aspart further, but not necessarily, contain a nicotinic acid compound selected from nicotinamide (niacinamide), nicotinic acid (niacin) and/or a salt thereof and/or any combination thereof, with the preferred nicotinic acid compound being nicotinamide.
  • concentration of nicotinamide or other nicotinic acid compound in compositions of the invention containing insulin aspart is from about 1 mM to about 200 mM.
  • the concentration of lysine and/or its salt or the total concentration of lysine and/or its salt in combination with arginine and/or its salt is from about 1 mM to about 100 mM.
  • the molar ratio of amino acids is from 4000:1 to 1:4000, respectively, said range including each integer ratio, for example 100:1, 99:1, 98: 1, etc.
  • the molar ratio of lysine to arginine is 1:1, 4:5, 5:4, 6:4; 5:2 or 2:5.
  • compositions of the invention may additionally contain protease inhibitor(s), metal ions, buffer systems, pH adjusters, preservative(s), isotonic agent(s), chelating agent(s), stabilizers and surfactants.
  • compositions of the invention are aqueous compositions, i.e. compositions containing water and are solutions or suspensions.
  • compositions of the present invention can be used for the treatment or prevention of hyperglycemia, type 2 diabetes mellitus, impaired glucose tolerance, type 1 diabetes mellitus.
  • compositions of the invention are administered parenterally.
  • Parenteral administration can be performed by subcutaneous, intramuscular, intraperitoneal or intravenous injection using a syringe, possibly a pen syringe.
  • parenteral administration can be accomplished using an infusion pump.
  • the present invention also relates to injectable insulin preparations containing the compositions of the present invention.
  • human insulin refers to a human hormone, the structure and properties of which are well known.
  • Insulin is a 51 amino acid polypeptide that is divided into 2 amino acid chains: chain A, consisting of 21 amino acids, and chain B, consisting of 30 amino acids.
  • C,epi are connected to each other using 2 disulfide bridges. Insulin preparations have been used to treat diabetes mellitus for many years, and recently not only insulins of natural origin have been used, but also derivatives and analogues of insulin.
  • insulin analogue as used herein is meant a polypeptide derived from the primary structure of naturally occurring insulin, such as human insulin, by mutation. One or more mutations are obtained by deletion and/or substitution of at least one amino acid residue occurring in natural insulin and/or by addition of at least one amino acid residue. Mutations in the insulin molecule are identified by the chain (A or B), position, and three-letter code for the amino acid that replaces the native amino acid.
  • rapid-acting insulin refers to insulin analogues and/or insulin derivatives that begin to act within 5-15 minutes and have a duration of action of 3-4 hours.
  • rapid-acting insulins include, but are not limited to, insulin aspart, insulin lispro, and insulin glulisine.
  • monomeric human insulin analogue “monomeric insulin analogue” are well known in the art and generally refer to rapid-acting human insulin analogues. These include, for example, insulin lispro (Humalog®), insulin aspart (NovoRapid®) and insulin glulisine (Apidra®).
  • the content of rapid-acting insulin in the compositions of the invention may range from about 0.2 mM to about 2.0 mM (from about 33 to about 333 international units (IU)/ml), preferably in the range from about 0.3 mmol to about 1.2 mmol (about 50 to about 200 IU/ml), especially preferably at a concentration of 0.6 mmol (100 U/ml), in injection preparations.
  • the insulin compound content may be higher.
  • the unit "IU" corresponds to 6 nmol.
  • rapidly-acting insulin composition means a product containing a monomeric insulin analog and an amino acid selected from lysine and/or a salt thereof or a combination of lysine and/or a salt thereof with arginine and/or a salt thereof.
  • the monomeric insulin analogue in the composition is insulin aspart, insulin lispro and insulin glulisine.
  • the insulin aspart composition of the present invention may, but not necessarily, contain a nicotinic acid compound selected from nicotinamide (niacinamide), nicotinic acid (niacin) and/or a salt thereof and/or any combination thereof.
  • the rapid-acting insulin composition may, but does not necessarily, also contain other excipients such as preservatives, chelating agents, isotonic agents, excipients, stabilizers, antioxidants, polymers and surfactants, metal ions, oil carriers and proteins (for example, human serum albumin, gelatin or proteins), pH regulators, wherein the rapid-acting insulin composition can be used to treat, prevent or reduce the severity of a disease or disorder by administering said insulin preparation to a human.
  • the rapid-acting insulin composition of the present invention can be called a “pharmaceutical composition.”
  • protein preparation can be used interchangeably within the framework of the present invention and mean any drug containing as an active substance a molecule consisting of polypeptide chains consisting of amino acid residues linearly linked by a peptide bond, independently or in combination with other compounds.
  • Insulin composition or insulin for example, are special cases and are covered by these terms.
  • lysine and arginine refer to amino acids and include the D- and L-enantiomers, as well as mixtures thereof.
  • the term also includes any pharmacologically acceptable salts of lysine and arginine. Lysine and arginine readily form salts, such as hydrochlorides.
  • nicotinic acid compound includes nicotinamide (niacinamide), nicotinic acid (niacin) and/or salts thereof and/or any combination thereof.
  • the buffer may be selected from the group consisting of sodium acetate, sodium carbonate, citrate, sodium dihydrogen phosphate, sodium hydrogen phosphate, sodium phosphate, as well as tris(hydroxymethyl)aminomethane, bicine, tricine, malic acid, succinate, maleic acid, fumaric acid, tartaric acid, aspartic acid or mixtures thereof, but not limited to them.
  • Each of these specific buffers, or each of their combinations, is an alternative embodiment of the invention.
  • the rapid-acting insulin composition of the present invention may contain other ingredients commonly used in insulin preparations, for example, zinc complexing agents.
  • Isotonic agents such as glycerin, mannitol, sodium chloride, dextrose, etc. may also be present in the compositions of the present invention.
  • An isotonic agent is a physiologically acceptable compound that imparts a suitable tonicity to the composition to prevent diffusion of water across cell membranes in contact with the pharmaceutical composition.
  • composition of the present invention may contain a pharmaceutically acceptable preservative.
  • the preservative present in the composition of the present invention may be phenol, m-cresol, methylparaben, etc.
  • composition of the present invention may also contain a chelating agent.
  • chelating agents in pharmaceutical preparations is well known to those skilled in the art.
  • composition of the present invention may also contain a stabilizer.
  • stabilizer refers to chemicals added to pharmaceutical preparations containing a polypeptide to stabilize it, i.e. to increase the shelf life and/or time of use of such drugs.
  • surfactant refers to any molecules or ions that consist of a water-soluble (hydrophilic) portion, a head, and a fat-soluble (lipophilic) segment. Surfactants are concentrated predominantly at the interface, with the hydrophilic part oriented towards the water (hydrophilic phase), and the lipophilic part towards the oil or hydrophobic phase (i.e. glass, air, oil, etc.). Surfactants reduce the surface tension of a liquid. They are also known as amphipathic compounds.
  • detergent is generally synonymous with the term “surfactant”.
  • surfactants in pharmaceutical preparations is well known to those skilled in the art. These include, for example, polysorbate 20, polysorbate 80, poloxamer 188, etc., these substances as excipients are described in the current pharmacopoeias (USP, EP).
  • the term “stability” refers to the chemical and physical stability of monomeric insulin analog compositions.
  • chemical stability of a protein composition (protein preparation) and/or protein as used herein refers to changes in the covalent structure of the protein resulting in the formation of chemical breakdown products with potentially less biological activity and/or potentially enhanced immunogenic properties compared to with the native protein structure.
  • chemical degradation products can be formed depending on the type and nature of the native protein and the external factors to which the protein is exposed. An increase in the amount of chemical breakdown products is often observed during storage and use of a protein preparation.
  • the amount of each individual degradation product is often determined by separating the degradation products based on molecular size and/or charge using various chromatography techniques (e.g., size exclusion liquid chromatography (SEC-HPLC) and/or reverse-phase high-performance liquid chromatography (RP-HPLC) ). Since high molecular weight protein products are potentially immunogenic and are biologically inactive, then the levels of high molecular weight proteins should be low.
  • SEC-HPLC size exclusion liquid chromatography
  • RP-HPLC reverse-phase high-performance liquid chromatography
  • Physical instability of the protein composition (protein preparation) and/or protein can be caused by the aggregation of protein molecules to form higher order polymers or even precipitates.
  • Physical denaturation of insulin is known as fibrillation.
  • fibrillation In the fibrillar state, elongated peptide chains are arranged parallel or antiparallel and are hydrogen bonded to each other, forming the so-called P-structure or P-pleated sheets.
  • Fibrils typically represent the lowest energy state of the protein; regeneration of the protein from this state to the native state of a properly folded protein is only possible in a highly alkaline environment.
  • Insulin fibrils take the form of gels or precipitates. Factors that contribute to an increase in the rate of fibril formation include exposure to thermomechanical stress and/or interaction with interfaces and hydrophobic surfaces. It is believed that fibril formation occurs due to insulin monomerization. Monomeric insulin analogues, which readily dissociate from the hexameric unit to the monomeric form, are more prone to fibril formation compared to
  • Turbidity occurs as a result of aggregation or precipitation of proteins or complexes in compositions.
  • the physical stability of aqueous protein preparations can also be assessed using a spectroscopic agent or a protein conformational state probe.
  • the probe is preferably a small molecule that preferentially binds to non-native protein conformers.
  • a small molecule spectroscopic protein structure probe is thioflavin T.
  • Thioflavin T is a fluorescent dye that is widely used for the detection of amyloid fibrils. In the presence of fibrils and possibly also other protein configurations, thioflavin T generates a new excitation maximum at approximately 445 nm and enhances emission at approximately 485 nm when bound to the fibrillar form of the protein. Unbound thioflavin T is essentially non-fluorescent at these wavelengths.
  • a “stable composition” is a composition in which the degree of protein aggregation and the content of impurities is within normal limits and does not exceed it over time.
  • aqueous preparation refers to a preparation containing water.
  • Aqueous suspensions may contain the active compounds in admixture with excipients suitable for the preparation of aqueous suspensions.
  • compositions of the present invention are prepared in the form of aqueous solutions.
  • Table 1 shows the qualitative and quantitative composition of some prepared compositions.
  • Compositions according to the invention include, but are not limited to, compositions 4-17, shown in Table 1.
  • the composition of composition 1 corresponds to the composition of one of the closest analogues according to the invention, the composition of the drug "Fiasp®".
  • the composition of composition 2 reproduces the composition of composition 1, except that it does not contain L-arginine hydrochloride.
  • the composition of composition 3 corresponds to the composition of composition 1, except that it does not contain nicotinamide.
  • Composition 4 reproduces the composition of composition 3, but with the addition of L-lysine hydrochloride instead of L-arginine hydrochloride.
  • Composition 5 reproduces the composition of composition 3 with the addition of a combination of L-lysine and L-arginine.
  • the method for preparing the compositions includes: a) preparing a solution of insulin aspart by dissolving it in water or buffer; b) preparing a solution of zinc salt by dissolving it in water or buffer; c) preparing a solution of preservatives (phenolic compounds) by dissolving them in water or buffer; d) preparing a solution of an isotonic agent by dissolving it in water or buffer; e) preparing a solution of nicotinamide and/or another nicotinic acid compound (if present in the composition) by dissolving in water or buffer; f) preparing a solution of lysine and/or arginine by dissolving amino acids and/or their salts in water or buffer; g) mixing solution a) and solutions b), c), d), e) if available, and f) in accordance with the composition of the compositions given in Table 1; h) bringing the pH of the mixture g) to a value of 6.6-7.4, followed
  • compositions 1-17 obtained according to example 1, after thermostatting the cartridges aseptically filled with them at a temperature of 40 ° C for 1 and 2 weeks.
  • Determination of insulin aspart-related impurities was carried out by HPLC with UV detection on a column filled with octadecyl silica gel, with a particle size of 5 ⁇ m and a pore size of 300 A with a mobile phase flow rate of 1.0 ml/min and a wavelength of 214 nm.
  • Elution was carried out in a gradient mode with a mobile phase consisting of the following components: mobile phase A (PF A): acetonitrile: buffer solution with pH 3.4 (1.4% solution (w/V) anhydrous sodium sulfate, 0.13% solution (V/V) concentrated orthophosphoric acid, 2 M sodium hydroxide to pH 3.4 ⁇ 0.05) 10:90 (V/V); mobile phase B (PF B): acetonitrile: water 50:50 (V/V).
  • the amount of B28IsoAsp, deamidated (B3iso, A21Asp, B3Asp) and other related impurities was determined by internal normalization by the absorption area of the corresponding peaks, measured as a percentage of the sum of the peak areas eluted after nicotinamide and preservatives.
  • HMP high molecular weight protein
  • the composition of the LP “Fiasp” was reproduced. The analysis was carried out immediately after preparation of the compositions.
  • Triplicate aliquots of 100 ⁇ l samples are placed in a black 96-well plate; purified water is used as a control sample. 10 ⁇ l of thioflavin working solution was added to all wells. When filling the plate, avoid the outer wells (see Fig. 1).
  • the tablet is sealed with a transparent film and placed in a CLARIOstar multimodular tablet reader (B MG, Germany). The fluorescent signal is detected every 20 minutes for 12 hours at a wavelength of 445/485 nm. Between readings, the plate is stirred at 700 rpm. Mixing and detection are carried out at a temperature of 37 °C.
  • T1/2max is determined - the time during which half of the analyzed sample aggregates.
  • the delay time is visually determined from the ThT fluorescence curve as the time point at which ThT fluorescence differs from the background level.
  • Table 2 shows the results of determining the chemical and physical stability of compositions 1, 3-17 containing insulin aspart.
  • Nicotinamide used in a composition without added amino acids has a negative effect on chemical stability during storage.
  • Arginine in composition 1 which reproduces the drug "FIASP"
  • FIASP drug
  • nicotinamide which is reflected in a decrease in the content of VMB, deamidated insulins after 2 weeks of storage at 40°C in comparison with the content of impurities in composition 2
  • composition 6 When replacing arginine in composition 1 with an equimolar amount of lysine (composition 6), the content of impurities significantly decreases; increasing the concentration of lysine to 100 mM helps to further reduce the amount of impurities. Lysine concentration more than 100 mM undesirable due to the deterioration of the physical stability of the compositions. The smallest amount of impurities was noted when using a combination of lysine and arginine (composition 10).
  • compositions 11-17 Similar results were obtained for compositions using Tris buffer (compositions 11-17), with better chemical stability of compositions prepared using Tris buffer compared to similar compositions prepared using phosphate buffer.
  • compositions that do not contain nicotinamide compositions 3-5
  • compositions 3-5 a significant advantage of stabilization with lysine or a combination of lysine with arginine compared to stabilization with arginine was also shown.
  • the pharmaceutical compositions of the present invention are prepared in the form of aqueous solutions.
  • Table 3 shows the qualitative and quantitative composition of some prepared compositions.
  • the compositions according to the invention include, but are not limited to, compositions 2-7, shown in table 3.
  • the composition of composition 1 corresponds to the composition of the original drug "Apidra®", solution for subcutaneous administration, 100 units. /ml.
  • compositions 2-7 the composition of the original drug is reproduced with the addition of L-lysine hydrochloride or a combination of L-lysine hydrochloride and L-arginine hydrochloride.
  • the method for preparing the compositions includes: a) preparing a solution of insulin glulisine by dissolving it in water or buffer; b) preparing a preservative solution by dissolving it in water or buffer; c) preparing a solution of an isotonic agent by dissolving it in water or buffer; d) preparing a solution of a surfactant by dissolving it in water or buffer; e) preparing a solution of lysine and/or a combination of lysine and arginine by dissolving amino acids and/or their salts in water or buffer; f) mixing solution a) and solutions b), c), d), e) in accordance with the composition of the compositions given in Table 3; g) bringing the pH of the mixture e) to 7.3, followed by sterilizing filtration. h) aseptic filling of cartridges with prepared compositions.
  • compositions of the invention may be prepared by any other method.
  • Example 4 Analysis of physical and chemical stability of compositions according to the invention containing insulin glulisine
  • compositions 1-7 obtained according to example 3, after thermostatting cartridges aseptically filled with them at a temperature of 40 ° C for 1 and 2 weeks.
  • Determination of insulin-glulisine-related impurities was carried out by HPLC with UV detection on a column filled with octadecyl silica gel, with a particle size of 5 ⁇ m and a pore size of 100 A with a mobile phase flow rate of 1.0 ml/min and a wavelength of 214 nm.
  • Elution was carried out in a gradient mode with a mobile phase consisting of the following components: mobile phase A (PF A): acetonitrile: buffer solution with pH 2.3 (0.1 M sodium sulfate solution, orthophosphoric acid qs to pH 2.3) 10:90 (V:V); mobile phase B (PF B): acetonitrile: buffer solution with pH 2.3 (0.1 M sodium sulfate solution, orthophosphoric acid qs to pH 2.3) 50:50 (V:V).
  • mobile phase A PF A
  • acetonitrile buffer solution with pH 2.3 (0.1 M sodium sulfate solution, orthophosphoric acid qs to pH 2.3) 10:90 (V:V)
  • mobile phase B PF B
  • acetonitrile buffer solution with pH 2.3 (0.1 M sodium sulfate solution, orthophosphoric acid qs to pH 2.3) 50:50 (V:V).
  • the amount of impurity A21-desamidoinsulin glulisine and other related impurities was determined by internal normalization by the absorption area of the corresponding peaks, measured as a percentage of the sum of the peak areas eluted after metacresol.
  • the amount of VMB in compositions containing insulin glulisine was determined using a method similar to the determination of VMB in compositions containing insulin aspart (see Example 2).
  • the content of VMB was determined by the method of internal normalization based on the sum of absorption areas of all peaks with retention times shorter than that of the peak of the insulin glulisine monomer. Peaks with retention times longer than that of the insulin monomer glulisine (metacresol peak) were not taken into account in the calculation.
  • compositions containing insulin glulisine were assessed similarly to the assessment of the physical stability of compositions containing insulin aspart (see Example 2).
  • Table 4 shows the results of determining the stability of compositions containing insulin glulisine.
  • compositions 1 - 7 containing insulin glulisine Based on the study of the chemical and physical stability of compositions 1 - 7 containing insulin glulisine, it was unexpectedly found that when adding lysine and/or its salt and/or a combination of lysine and/or its salt with arginine and/or its salt, the amount of impurities after 2 weeks of storage at 40°C in the compositions according to the invention is significantly and reliably less than in the prototype, while the physical stability is also improved compared to the prototype.
  • lysine concentration to 100 mM helps reduce the amount of impurities. Lysine concentrations greater than 100 mM are undesirable due to the deterioration of the physical stability of the compositions. The least amount of impurities was noted when using a combination of lysine and arginine.
  • the pharmaceutical compositions of the present invention are prepared in the form of aqueous solutions.
  • Table 5 shows the qualitative and quantitative composition of some prepared compositions.
  • the compositions according to the invention include, but are not limited to, compositions 2-8, shown in table 5.
  • the composition of composition 1 corresponds to the composition of the original drug "Humalog", solution for intravenous and subcutaneous administration, 100 units. /ml.
  • compositions 2-7 the composition of the original drug is reproduced with the addition of L-lysine hydrochloride or a combination of L-lysine hydrochloride and L-arginine hydrochloride.
  • the method for preparing the compositions includes: a) preparing an insulin solution by dissolving it in water or buffer; b) preparing a zinc solution by dissolving zinc oxide in a solution of dilute hydrochloric acid; c) preparing a preservative solution by dissolving it in water or buffer; d) preparing a solution of an isotonic agent by dissolving it in water or buffer; e) preparing a solution of lysine and/or arginine by dissolving amino acids and/or their salts in water or buffer; f) mixing solution a) and solutions b), c), d), e) in accordance with the composition of the compositions given in Table 1; g) bringing the pH of the mixture e) to a value of 7-8, followed by sterilizing filtration. h) aseptic filling of cartridges with prepared compositions.
  • compositions of the invention may be prepared by any other method.
  • compositions 1-8 compositions containing insulin lispro
  • compositions containing insulin lispro obtained according to example 5, after thermostatting cartridges aseptically filled with them at a temperature of 40 ° C for 1 and 2 weeks.
  • Elution was carried out in a gradient mode with a mobile phase flow rate of 0.9 ml/min and a detection wavelength of 214 nm.
  • the amount of impurity A21 desamidoinsulin lispro and other related impurities was determined by internal normalization by the absorption area of the corresponding peaks, measured as a percentage of the sum of the peak areas eluted after metacresol.
  • the amount of VMB in compositions containing insulin lispro was determined using a method similar to the determination of VMB in compositions containing insulin aspart or insulin glulisine (see Example 2).
  • the VMB content was determined by the internal normalization method based on the sum of absorption areas of all peaks with retention times shorter than that of the insulin lispro monomer peak. Peaks with retention times greater than that of the insulin lispro monomer peak (metacresol peak) were not taken into account in the calculation.
  • compositions containing insulin lispro were assessed similarly to the assessment of the physical stability of compositions containing insulin aspart (see Example 2).
  • Table 6 shows the results of determining the chemical and physical stability of compositions containing insulin lispro.
  • compositions 1 - 8 containing insulin lispro Based on the study of the chemical and physical stability of compositions 1 - 8 containing insulin lispro, it was unexpectedly found that when adding lysine and/or its salt and/or a combination of lysine and/or its salt with arginine and/or its salt, the amount of impurities after 2 weeks of storage at 40°C in compositions according to the invention was significantly and reliably less than in the prototype, while the physical stability also improves compared to the prototype.
  • lysine concentration to 100 mM helps reduce the amount of impurities. Lysine concentrations greater than 100 mM are undesirable due to the deterioration of the physical stability of the compositions. The least amount of impurities was noted when using a combination of lysine and arginine.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

Изобретение относится к области фармацевтики и медицины, а именно к композициям быстродействующих инсулиновых препаратов. Более конкретно, настоящее изобретение относится к композициям, содержащим быстродействующий инсулин и аминокислоту в качестве стабилизатора, которая может быть выбрана из лизина и/или его соли или комбинации лизина и/или его соли с аргинином и/или его солью. Композиции по изобретению проявляют лучшую в сравнении с аналогом химическую и физическую стабильность.

Description

КОМПОЗИЦИЯ БЫСТРОДЕЙСТВУЮЩЕГО ИНСУЛИНА (ВАРИАНТЫ)
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Область техники, к которой относится изобретение
Изобретение относится к области фармацевтики и медицины, а именно к композициям быстродействующих инсулиновых препаратов. Более конкретно, настоящее изобретение относится к композициям, содержащим быстродействующий инсулин и аминокислоту в качестве стабилизатора, которая может быть выбрана из лизина и/или его соли или комбинации лизина и/или его соли с аргинином и/или его солью. Композиции по изобретению проявляют лучшую в сравнении с аналогами химическую и физическую стабильность.
Уровень техники
Инсулин представляет собой пептидный гормон, который регулирует уровень глюкозы в крови у млекопитающих, инициируя сигнальный каскад, который ускоряет поглощение глюкозы и выработку гликогена при связывании с рецептором инсулина. При нарушении выработки инсулина в крови повышается концентрация глюкозы (хроническая гипергликемия), что и является основным диагностическим признаком диабета 1-го типа (СД1). Однако при нарушениях передачи сигнала от инсулиновых рецепторов, даже если гормон вырабатывается в достаточных количествах, развивается диабет 2-го типа (СД2), обусловленный снижением чувствительности тканей к действию инсулина (инсулинорезистентность). Эффективность инсулина в лечении сахарного диабета, обусловленная способностью этого гормона снижать уровень глюкозы в крови, была доказана в течение десятилетий его применения в медицинской практике. Тем не менее, в настоящее время сохраняется актуальность в поиске новых подходов к терапии сахарного диабета в связи с увеличением количества случаев заболевания и необходимостью учета индивидуальных особенностей и предпочтений пациентов [1].
Разработка быстродействующих и сверхбыстродействующих аналогов инсулина, таких как, инсулин аспарт (НовоРапид®), инсулин глулизин (Апидра®) и инсулин лизпро (Хумалог®), имеющих более быстрое начало действия и меньшую продолжительность, действия стала значительным шагом вперед в лечении диабета 1-го и 2-го типа. Составы лекарственных препаратов НовоРапид®, Апидра®, Хумалог® являются наиболее близкими аналогами композиций по изобретению. В нейтральном растворе при фармацевтической концентрации инсулин и его аналоги находятся в форме стабилизированных цинксодержащих гексамеров, которые состоят из трех идентичных димерных единиц. Задержка действия инсулина в значительной степени связана со временем, которое требуется гексамерам для диссоциации на мономеры и димеры, способные к абсорбции [2,3]. Первый класс быстродействующих инсулинов (например, инсулин лизпро и аспарт) был разработан на основе аминокислотных мутаций в последовательности человеческого инсулина, что привело к ослаблению самоассоциации олигомеров инсулина. Так, например, замещение аминокислоты пролин в положении В28 на аспарагиновую кислоту в инсулине аспарт снижает тенденцию молекул к образованию гексамеров, которая наблюдается в растворе растворимого человеческого инсулина. В связи с этим инсулин аспарт гораздо быстрее всасывается из подкожно-жировой клетчатки по сравнению с растворимым человеческим инсулином и широко применяется для постпрандиального контроля уровня глюкозы в крови у пациентов с сахарным диабетом [4]. Молекулярная структура инсулина лизпро идентична структуре человеческого инсулина за исключением позиций 28 и 29 В-цепи молекулы, где лизин и пролин расположены в обратном порядке (инсулин человека: B28ProB29Lys, лизпро: B28LysB29Pro). Обратное расположение лизина и пролина позволяет молекуле лизпро диссоциировать в два раза быстрее. В структуре инсулина глулизин (3BLys29BGlu) аминокислотный остаток аспарагин в 3-м положении В-цепи молекулы инсулина человека заменен на лизин, а лизин в 29-м положении В-цепи заменен на глутамин, что способствует стабильности данного препарата в растворе в виде мономеров и димеров [1].
Химическая и физическая стабильность препаратов инсулина является необходимым условием обеспечения терапевтического эффекта препаратов или отсутствия у них побочных реакций, при этом стабильность должна быть обеспечена как при хранении в течение срока годности препаратов, так и при их использовании. Композиции инсулина производят, хранят и используют во флаконах, что требует их стабильности на протяжении срока хранения. Стабильные композиции инсулина особенно необходимы для использования в устройствах доставки, в которых они подвергаются воздействию повышенных температур, близких к температуре тела, и/или механических нагрузок, таких как, например, шприц-ручки для инъекций и системы непрерывной инфузии (с использованием помп).
Известно, что быстродействующие аналоги инсулина, которые находятся в мономерной или димерной форме, обладают пониженной по сравнению с гексамерами физико-химической стабильностью [5], в частности образуют высокомолекулярные примеси, и повышенной склонностью к агрегации (фибрилляции), что проявляется в виде помутнений и осадка. Высокомолекулярные примеси (димеры, тримеры, полимеры) и агрегаты не только снижают введенную дозу инсулина, но и могут провоцировать раздражения или иммунные реакции у пациента. Кроме того, нерастворимые агрегаты могут закупоривать и повреждать иглы, канюли и шланги насосов в системах непрерывной инфузии. Для обеспечения качества инсулиновых композиций необходимо повышать их химическую и физическую стабильность.
На рынке существуют лекарственные препараты инсулина аспарт (например, «НовоРапид®» (Ново Нордиск А/С), «РинФаст®» (ООО «ГЕРОФАРМ»). Было показано, что можно улучшить общий гликемический контроль за счет введения в состав препарата вспомогательного вещества никотинамид, способного ускорять абсорбцию инсулина аспарт, в сравнении с препаратами инсулина аспарт без никотинамида. В частности, было показано, что препарат «Фиасп®» (содержит никотинамид) по сравнению с препаратом «НовоРапид®» (не содержит никотинамид) обеспечил улучшенный общий гликемический контроль и лучший гликемический контроль после приёма пищи без увеличения общего риска развития тяжёлых или подтверждённых гипогликемий у пациентов с СД1 и СД2. Фармакокинетические характеристики быстродействующего инсулина аспарт «Фиасп®» могут лучше воспроизводить быструю эндогенную секрецию прандиального инсулина и, таким образом, улучшать постпрандиальный контроль гликемии по сравнению с инсулином аспарт [6].
Никотинамид обладает способностью ускорять абсорбцию инсулина (WO 91/09617), в том числе инсулина аспарт (WO/9610417), однако оказывает негативное влияние на химическую стабильность - увеличивает содержание примесей (RU2533217). Химическая стабильность состава лекарственного препарата (ЛП) «Фиасп®» повышается за счет введения аргинина в состав, что отражается в уменьшении содержания димеров и полимеров, дезамидированных инсулинов при хранении (RU2533217). Состав ЛП «ФИАСП®» является еще одним из наиболее близких аналогов настоящего изобретения.
В патенте RU2533217 показано (пример 2), что добавление аргинина в состав композиций, содержащих инсулина аспарт с никотинамидом, уменьшает количество образующихся продуктов распада, особенно высокомолекулярного белка и дезамидированных форм, но при этом понижается физическая стабильность, измеряемая как время задержки в анализе с тиофлавином Т, при увеличении концентрации аргинина физическая стабильность снижается еще больше. В отчете о небольшом (п = 37) 6-недельном исследовании склонности инфузионных систем к засорению и неисправности, не было отмечено случаев закупоривания инфузионных систем ни препаратом ФИАСП (25 субъектов), ни инсулином аспарт (12 субъектов). Однако необъяснимая гипергликемия и преждевременная смена инфузионного набора чаще встречались при применении ФИАСПа по сравнению с применением инсулина аспарт [7].
Таким образом, в настоящее время сохраняется потребность в композициях быстродействующих инсулинов, обладающих повышенной химической стабильностью и в то же время приемлемой физической стабильностью. Особенно актуальна обозначенная выше техническая проблема для композиций быстродействующих инсулинов, таких как например, инсулин аспарт, инсулин лизпро или инсулин глулизин, отличающихся худшей стабильностью по сравнению с гексамерными формами инсулина, а также для композиций, содержащих никотинамид, способный ускорять абсорбцию инсулина, но в то же время негативно влияющий на химическую стабильность инсулина.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Авторами настоящего изобретения неожиданно было обнаружено, что композиции быстродействующего инсулина, содержащие в качестве стабилизатора аминокислоту, представляющую собой лизин и/или его соль или комбинацию лизина и/или его соли с аргинином и/или его солью, обладают улучшенной химической и физической стабильностью по сравнению с композициями инсулина без добавления аминокислот, а также с композициями инсулина, содержащими в качестве стабилизатора аминокислоту аргинин.
Таким образом, настоящее изобретение относится к композициям с улучшенной химической и физической стабильностью, содержащим быстродействующий инсулин и аминокислоту, которая представляет собой лизин или его соль, или комбинацию лизина или его соли с аргинином или его солью.
Настоящее изобретение относится к композициям для снижения уровня глюкозы в крови у субъекта, содержащим быстродействующий инсулин и аминокислоту, которая представляет собой лизин или его соль, или комбинацию лизина или его соли с аргинином или его солью.
В предпочтительных вариантах осуществления изобретения инсулин представляет собой инсулин аспарт, инсулин лизпро и инсулин глулизин.
Композиции инсулина глулизина дополнительно, но не обязательно, содержат метионин. Концентрация быстродействующего инсулина в композициях по изобретению - от примерно 0,2 мМ до 2,0 мМ (от примерно 33 Ед. /мл до примерно 333 Ед. /мл), предпочтительно - от примерно 0,3 мМ до 1,2 мМ (от примерно 50 Ед. /мл до примерно 200 Ед. /мл), еще более предпочтительно - 0,6 мМ (100 Ед. /мл).
В одном из вариантов настоящего изобретения композиции имеют pH от 6,5 до 8,5. Еще в одном из вариантов настоящего изобретения композиции имеют pH от 6,6 до 7,4. В одном из вариантов pH равен 7, 7,3, 7,4 или 7,5.
Композиции по изобретению, содержащие инсулин аспарт, дополнительно, но не обязательно, содержат соединение никотиновой кислоты, выбранное из никотинамида (ниацинамида), никотиновой кислоты (ниацина) и/или их соли и/или любой их комбинации, предпочтительное соединение никотиновой кислоты - никотинамид. Концентрация никотинамида или другого соединения никотиновой кислоты в композициях по изобретению, содержащих инсулин аспарт - от примерно 1 мМ и до примерно 200 мМ.
Концентрация лизина и/или его соли или суммарная концентрация лизина и/или его соли в комбинации с аргинином и/или его солью - от примерно 1мМ до примерно 100 мМ.
В композициях, содержащих комбинацию лизина и/или его соли и аргинина и/или его соли молярное соотношение аминокислот составляет от 4000 : 1 до 1 : 4000 соответственно, указанный диапазон включает каждое целочисленное соотношение, например 100 : 1, 99 : 1, 98 : 1 и т.д. В одном из предпочтительных вариантов молярное соотношение лизина к аргинину составляет 1 : 1, 4 : 5, 5 : 4, 6 : 4; 5 : 2 или 2 : 5.
В композициях по изобретению дополнительно могут содержаться ингибитор(ы) протеазы, ионы металлов, буферные системы, регуляторы pH, консервант(ы), изотонический агент(ы), хелатирующий агент(ы), стабилизаторы и поверхностноактивные вещества.
В одном из вариантов композиции по изобретению являются водными композициями, т.е. композициями, содержащими воду и являются растворами или суспензиями.
Композиции по настоящему изобретению могут быть использованы для лечения или профилактики гипергликемии, сахарного диабета 2 типа, нарушения толерантности к глюкозе, сахарного диабета 1 типа.
В одном из предпочтительных вариантов композиции по изобретению применяются парентерально. Парентеральное введение может быть выполнено путем подкожной, внутримышечной, внутрибрюшинной или внутривенной инъекции при помощи шприца, возможно шприца-ручки. Альтернативно парентеральное введение может быть выполнено с помощью инфузионного насоса.
Таким образом, настоящее изобретение также относится к инъецируемым инсулиновым препаратам, содержащим композиции по настоящему изобретению.
ТЕРМИНЫ И ОПРЕДЕЛЕНИЯ
Термин «человеческий инсулин», используемый в настоящем документе, обозначает человеческий гормон, структура и свойства которого хорошо известны. Инсулин представляет собой полипептид из 51 аминокислоты, который разделен на 2 аминокислотные цепи: цепь А, состоящую из 21 аминокислоты, и цепь В, состоящую из 30 аминокислот. Ц,епи соединяются между собой с помощью 2 дисульфидных мостиков. Препараты инсулина используются для лечения сахарного диабета в течение многих лет, при этом в последнее время используют не только инсулины природного происхождения, но также производные и аналоги инсулина.
Под «аналогом инсулина», упоминаемым в настоящем документе, понимается полипептид, полученный из первичной структуры природного инсулина, например, человеческого инсулина, в результате мутации. Одну или более мутацию получают путем удаления и/или замены по меньшей мере одного аминокислотного остатка, происходящей в природном инсулине, и/или путем добавления по меньшей мере одного аминокислотного остатка. Мутации в инсулиновой молекуле обозначаются указанием цепи (А или В), положения и трехбуквенного кода для аминокислоты, заменяющей нативную аминокислоту.
Термин «быстродействующий инсулин» или «краткодействующий инсулин» относится к аналогам инсулина и/или производным инсулина, которые начинают действовать в пределах 5-15 минут и имеют продолжительность действия 3-4 часа. Примеры быстродействующих инсулинов включают в себя, но не ограничиваются, следующими: инсулин аспарт, инсулин лизпро и инсулин глулизин.
Термины «мономерный аналог человеческого инсулина», «мономерный аналог инсулина» хорошо известны в данной области и обычно относятся к быстродействующим аналогам человеческого инсулина. К ним относятся, например, инсулин лизпро (Хумалог®), инсулин аспарт (НовоРапид®) и инсулин глулизин (Апидра®).
Содержание быстродействующего инсулина в композициях по изобретению может находиться в диапазоне от примерно 0,2 мМ до примерно 2,0 мМ (от примерно 33 до примерно 333 международных единиц (МЕ)/мл), предпочтительно в диапазоне от примерно 0,3 мМ до примерно 1,2 мМ (от примерно 50 до примерно 200 МЕ/мл), особенно предпочтительно в концентрации 0,6 мМ (100 Ед. /мл), в препаратах для инъекций. Тем не менее, для других целей парентерального введения содержание инсулинового соединения может быть выше.
В данном контексте единица «МЕ» соответствует 6 нмоль.
Термин «композиция быстродействующего инсулина», используемый в настоящем документе, означает продукт, содержащий мономерный аналог инсулина и аминокислоту, выбранную из лизина и/или его соли или комбинации лизина и/или его соли с аргинином и/или его солью. Предпочтительно мономерный аналог инсулина в композиции представляет собой инсулин аспарт, инсулин лизпро и инсулин глулизин. Композиция инсулина аспарта по настоящему изобретению может содержать, но не обязательно, соединение никотиновой кислоты, выбранное из никотинамида (ниацинамида), никотиновой кислоты (ниацина) и/или их соли и/или любой их комбинации. Композиция быстродействующего инсулина может содержать, но не обязательно, также и другие эксципиенты, такие как консерванты, хелатирующие агенты, изотонические агенты, наполнители, стабилизаторы, антиоксиданты, полимеры и поверхностно-активные вещества, ионы металлов, масляные носители и белки (например, человеческий сывороточный альбумин, желатин или белки), регуляторы pH, при этом композиция быстродействующего инсулина может быть использована для лечения, профилактики или снижения тяжести заболевания или нарушения путем введения указанного инсулинового препарата человеку. Таким образом, композиция быстродействующего инсулина по настоящему изобретению может быть названа «фармацевтической композиций».
Термины «белковый препарат», «белковая композиция» и «белок» могут использоваться в рамках настоящего изобретения взаимозаменяемо и означают любое лекарственное средство, содержащее в качестве действующего вещества молекулу, состоящую из полипептидных цепей, состоящих из остатков аминокислот, линейно связанных пептидной связью, самостоятельно или в комбинации с другими соединениями. Инсулиновая композиция или инсулин, например, являются частными случаями и охватываются указанными терминами.
Термины «лизин» и «аргинин» относятся к аминокислотам и включают D- и L- энантиомеры, а также их смеси. Термин также включает любые фармакологически приемлемые соли лизина и аргинина. Лизин и аргинин легко образуют соли, например, гидрохлориды. Термин «соединение никотиновой кислоты» включает никотинамид (ниацинамид), никотиновую кислоту (ниацин) и/или их соли и/или любую их комбинацию.
Буфер может быть выбран из группы, состоящей из ацетата натрия, карбоната натрия, цитрата, дигидрофосфата натрия, гидрофосфата натрия, фосфата натрия, а также трис(гидроксиметил)аминометана, бицина, трицина, яблочной кислоты, сукцината, малеиновой кислоты, фумаровой кислоты, винной кислоты, аспарагиновой кислоты или их смесей, но не ограниченной ими. Каждый из этих конкретных буферов или каждая из их комбинаций является альтернативным вариантом изобретения.
Композиция быстродействующего инсулина по настоящему изобретению может содержать и другие ингредиенты, обычно используемые в инсулиновых препаратах, например, цинковые комплексообразующие агенты.
Изотонические агенты, такие как глицерин, манит, хлорид натрия, декстроза и др. также могут присутствовать в композициях по настоящему изобретению. Изотонический агент представляет собой физиологически приемлемое соединение, которое придает композиции подходящую тоничность с целью предотвращения диффузии воды через клеточные мембраны, находящиеся в контакте с фармацевтической композицией.
Композиция по настоящему изобретению может содержать фармацевтически приемлемый консервант. Консервант, присутствующий в композиции по настоящему изобретению, может быть фенолом, м-крезолом, метилпарабеном и др.
Композиция по настояшему изобретению также может содержать хелатирующий агент. Применение хелатирующих агентов в фармацевтических препаратах хорошо известно специалистам в данной области.
Композиция по настоящему изобретению также может содержать стабилизатор. Термин «стабилизатор», используемый в настоящем документе, относится к химическим веществам, добавляемым к фармацевтическим препаратам, содержащим полипептид для его стабилизации, т.е. для увеличения срока хранения и/или времени использования таких препаратов.
Термин «поверхностно-активное вещество» (ПАВ), используемый в настоящем документе, относится к любым молекулам или ионам, которые состоят из растворимой в воде (гидрофильной) части, головы, и жирорастворимого (липофильного) сегмента. ПАВ концентрируются преимущественно на поверхности раздела фаз, гидрофильной частью ориентируясь по направлению к воде (гидрофильной фазе), а липофильной частью по направлению к маслу или гидрофобной фазе (т.е. стеклу, воздуху, маслу и т.д.). ПАВ снижают поверхностное натяжение жидкости. Они также известны как амфипатические соединения. Термин «детергент», как правило, является синонимом термина «поверхностно-активное вещество». Использование ПАВ в фармацевтических препаратах хорошо известно специалистам в данной области. К ним относятся, например, полисорбат 20, полисорбат 80, полоксамер 188 и др., эти вещества в качестве вспомогательных веществ описаны в действующих фармакопеях (USP, ЕР).
Используемый здесь термин «стабильность» относится к химической и физической стабильности композиций мономерных аналогов инсулина.
Термин «химическая стабильность» белковой композиции (белкового препарата) и/или белка, используемый в настоящем описании изобретения, относится к изменениям в ковалентной структуре белка, приводящим к образованию продуктов химического распада с потенциально меньшей биологической активностью и/или потенциально усиленными иммуногенными свойствами по сравнению с нативной структурой белка. Различные продукты химического распада могут быть сформированы в зависимости от вида и характера нативного белка и внешних факторов, воздействию которых подвергается белок. Увеличение количества продуктов химического распада часто наблюдается при хранении и использовании белкового препарата. Большинство белков склонны к дезамидированию, другие пути распада предполагают формирование высокомолекулярных продуктов, при котором две или более белковые молекулы ковалентно связаны друг с другом через переамидирование и/или дисульфидные взаимодействия, приводящие к образованию ковалентно связанных димерных, олигомерных и полимерных продуктов распада [8]. В качестве еще одного варианта химического распада можно упомянуть окисление (например, остатков метионина). Химическую стабильность белкового препарата и/или белка можно оценить, измеряя количество продуктов химического распада в различные временные точки после воздействия различных условий окружающей среды (образование продуктов распада часто может быть ускорено, например, путем повышения температуры). Количество каждого отдельного продукта распада часто определяют путем разделения продуктов распада в зависимости от размера молекул и/или заряда с использованием различных методик хроматографии (например, эксклюзионной жидкостной хроматографии (SEC-HPLC) и/или обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии (RP-HPLC)). Так как высокомолекулярные белковые продукты потенциально иммуногенны и биологически неактивны, то уровни высокомолекулярных белков должны быть низкими.
Физическая нестабильность белковой композиции (белкового препарата) и/или белка может быть вызвана агрегацией белковых молекул с образованием полимеров более высокого порядка или даже осадков. Физическая денатурация инсулина известна как фибрилляция. В фибриллярном состоянии вытянутые пептидные цепи располагаются параллельно или антипараллельно и связаны водородной связью друг с другом, образуя так называемую P-структуру или Р-складчатые листы. Фибриллы обычно представляют собой состояние белка с самой низкой энергией, регенерация белка из этого состояния в нативное состояние правильно свернутого белка возможна только в сильнощелочной среде. Фибриллы инсулина имеют вид гелей или преципитатов. Факторами, которые способствуют повышению скорости образования фибрилл, являются воздействие термомеханического стресса и/или взаимодействие с границами раздела фаз и гидрофобными поверхностями. Считается, что образование фибрилл происходит за счет мономеризации инсулина. Мономерные аналоги инсулина, легко диссоциирующие от гексамерной единицы к мономерной форме, более склонны к образованию фибрилл по сравнению с человеческим инсулином.
Физическую стабильность можно оценить способами, хорошо известными в данной области, например, измерением мутности (оптической плотности). Мутность возникает в результате агрегации или осаждения белков или комплексов в композициях.
Физическую стабильность водных белковых препаратов также можно оценить с помощью спектроскопического агента или зонда конформационного состояния белка. Зонд предпочтительно представляет собой небольшую молекулу, которая преимущественно связывается с ненативными конформерами белка. Одним из примеров низкомолекулярного спектроскопического зонда белковой структуры является тиофлавин Т. Тиофлавин Т является флуоресцентным красителем, который широко используется для обнаружения амилоидных фибрилл. В присутствии фибрилл и, возможно, также других белковых конфигураций, тиофлавин Т порождает новый максимум возбуждения на примерно 445 нм и усиливает излучение на примерно 485 нм при связывании с фибриллярной формой белка. Несвязанный тиофлавин Т является по существу нефлуоресцентным при этих длинах волн.
«Стабильная композиция» представляет собой композицию, в которой степень агрегации белков и содержание примесей находится в пределах нормы и не превышает ее со временем. Термин «водный препарат» относится к препарату, содержащему воду. Термины «водный раствор» и «водная суспензия» относятся соответственно к раствору или суспензии, содержащим воду. Водные суспензии могут содержать активные соединения в смеси с эксципиентами, подходящими для изготовления водных суспензий.
ПРИМЕРЫ
Пример 1. Приготовление композиций по изобретению, содержащих инсулин аспарт
В одном из вариантов фармацевтические композиции по настоящему изобретению получают в виде водных растворов. В таблице 1 приведен качественный и количественный состав некоторых приготовленных композиций. Композиции по изобретению включают в себя, но без ограничения, композиции 4-17, приведенные в таблице 1. Состав композиции 1 соответствует составу одного из ближайших аналогов по изобретению, составу ЛП «Фиасп®». В составе композиции 2 воспроизведен состав композиции 1 за исключением того, что в ней отсутствует L- аргинина гидрохлорид. Состав композиции 3 соответствует составу композиции 1, за исключением того, что в ней отсутствует никотинамид. В составе композиции 4 воспроизведен состав композиции 3, но с добавлением L- лизина гидрохлорида вместо L-аргинина гидрохлорида. В составе композиции 5 воспроизведен состав композиции 3 с добавлением комбинации L-лизина и L-аргинина.
Способ получения композиций включает: а) приготовление раствора инсулина аспарт путем его растворения в воде или буфере; б) приготовление раствора соли цинка путем ее растворения в воде или буфере; в) приготовление раствора консервантов (фенольных соединений) путем их растворения в воде или буфере; г) приготовление раствора изотонического агента путем его растворения в воде или буфере; д) приготовление раствора никотинамида и/или другого соединения никотиновой кислоты (при его наличии в композиции) путем растворения в воде или буфере; е) приготовление раствора лизина и/или аргинина путем растворения аминокислот и/или их солей в воде или буфере; ж) смешивание раствора а) и растворов б), в), г), д) при наличии, и е) в соответствии с составом композиций, приведенных в таблице 1 ; з) доведение pH смеси ж) до значения 6, 6-7, 4 с последующей стерилизующей фильтрацией. и) асептическое заполнение приготовленными композициями картриджей. Композиции по изобретению могут быть получены любым другим способом.
Таблица 1. Качественный и количественный состав композиций по изобретению, содержащих инсулин аспарт
Figure imgf000013_0001
Figure imgf000014_0001
Пример 2. Анализ физической и химической стабильности композиций по изобретению, содержащих инсулин аспарт
Определение химической стабильности проводили для композиций 1-17, полученных по примеру 1, после термостатирования асептично заполненных ими картрижей при температуре 40° С в течение 1 и 2 недель.
Определение родственных инсулину аспарту примесей проводили методом ВЭЖХ с УФ- детектированием на колонке, заполненной октадецилсиликагелем, с размером частиц 5 мкм и размером пор 300 А со скоростью потока подвижной фазы 1,0 мл/мин и при длине волны 214 нм.
Элюирование проводили в градиентном режиме подвижной фазой, состоящей из следующих компонентов: подвижная фаза А (ПФ А): ацетонитрил : буферный раствор с pH 3,4 (1,4 % раствор (w/V) натрия сульфата безводного, 0,13 % раствор (V/V) ортофосфорной кислоты концентрированной, 2 М гидроксид натрия до pH 3,4 ± 0,05) 10:90 (V/V); подвижная фаза Б (ПФ Б): ацетонитрил : вода 50:50 (V /V).
Количество примеси B28IsoAsp, дезамидированных (B3iso, A21Asp, B3Asp) и других родственных примесей определяли методом внутренней нормализации по площади абсорбции соответствующих пиков, измеренной в процентах от суммы площадей пиков, элюированных после никотинамида и консервантов.
Количество высокомолекулярного белка (ВМБ) определяли методом эксклюзионной жидкостной хроматографии на колонке, заполненной силикагелем гидрофильным для хроматографии с размером частиц 10 мкм и диаметром пор 125 А. В качестве элюента использовали смесь ацетонитрил : уксусная кислота ледяная: 0,1 % раствор аргинина (20:15:65) (V/V/V). Элюирование проводили в изократическом режиме со скоростью потока 0,5 мл/мин при длине волны детектирования 276 нм. Содержание ВМБ определяли методом внутренней нормализации по сумме площадей абсорбции всех пиков с временами удерживания меньшими, чем у пика мономера инсулина аспарт. Пики с временами удерживания больше, чем у пика мономера инсулина аспарт (никотинамид и консерванты), в расчете не учитывались.
Для оценки физической стабильности белковых композиций проводили анализ на склонность к образованию фибрилл с помощью Тиофлавина-Т (ThT). Выбранный метод описан в литературе, например, в патенте RU2533217. Склонность к образованию фибрилл определяли для композиций 1, 3 - 17, приведенных в примере 1, а также для готовой формы оригинального ЛП «Фиасп». В составе композиции 1 был воспроизведен состав ЛП «Фиасп». Анализ проводили сразу после приготовления композиций.
Приготовление растворов
Стоковый раствор тиофлавина
Берут точную навеску сухого реактива Тиофлавин Т, растворяют в метаноле до концентрации тиофлавина 1 мг/мл (что соответствует 3,14 мМ). Раствор тщательно перемешивают на вортексе, хранят защищая от света при температуре + 2 - 8 °C до 6 месяцев.
Рабочий раствор тиофлавина
Готовят рабочий раствор с концентрацией тиофлавина 200 мкМ в воде очищенной. Объем стокового раствора к воде очищенной рассчитывают в пропорции 1:14,7. Используют свежеприготовленным.
Аликвоты образцов по 100 мкл в трипликатах помещают в черный 96-луночный планшет, в качестве контрольной пробы используют воду очищенную. Во все лунки вносили по 10 мкл рабочего раствора тиофлавина. При заполнении планшета избегают крайних лунок (см. фиг.1). Планшет запечатывают прозрачной пленкой, помещают в планшетный мультимодульный ридер CLARIOstar (В MG, Германия). Детектируют флуоресцентный сигнал каждые 20 минут в течение 12 часов при длине волны 445/485 нм. Между считываниями планшет перемешивают при 700 об/мин. Перемешивание и детекцию проводят при температуре 37 °C.
По результатам измерений строят графики зависимости сигнала в относительных единицах флуоресценции от времени в часах для каждого образца. Для анализа используют 4-х параметрическую зависимость.
По графику определяют Т1/2шах - время, за которое агрегирует половина анализируемого образца. При получении графика в виде прямой на уровне нулевого значения, образец признается не склонным к агрегации, в остальных случаях степень склонности к агрегации оценивается по Т 1/2шах.
Наряду с Т 1/2 шах по кривой флуоресценции ThT визуально определяют время задержки как временную точку, в которой флуоресценция ThT отличается от фонового уровня.
В таблице 2 приведены результаты определения химической и физической стабильности композиций 1, 3-17, содержащих инсулин аспарт.
Таблица 2. Данные по физической и химической стабильности композиций 1,
3-17, содержащих инсулин аспарт, полученных по примеру 1.
Figure imgf000016_0001
Figure imgf000017_0001
* Оригинальный ЛП «Фиасп»; **N/A - «по analysis», не анализировали.
На основании изучения химической и физической стабильности композиций инсулина аспарта, приготовленных с использованием как фосфатного буфера, так и трис-буфера, неожиданно было обнаружено, что при добавлении лизина и/или его соли и/или комбинации лизина и/или его соли с аргинином и/или его солью количество примесей после 2 недель хранения при 40°С в композициях по изобретению существенно и достоверно меньше, чем в прототипе, при этом по сравнению с прототипом улучшается также и физическая стабильность.
Никотинамид, используемый в составе композиции без добавления аминокислот, (композиция 2), оказывает негативное влияние на химическую стабильность при хранении. Аргинин в составе композиции 1, воспроизводящей ЛП «ФИАСП», препятствует химической деградации, одной из причин которой является добавление никотинамида, что отражается в уменьшении содержания ВМБ, дезамидированных инсулинов после 2 недель хранения при 40°С в сравнении с содержанием примесей в композиции 2, не содержащей аргинин. При замене аргинина в композиции 1 эквимолярным количеством лизина (композиция 6) содержание примесей достоверно уменьшается, повышение концентрации лизина до 100 мМ способствует еще большему снижению количества примесей. Концентрация лизина более 100 мМ нежелательна в связи с ухудшением физической стабильности композиций. Наименьшее количество примесей отмечено при использовании комбинации лизина и аргинина (композиция 10).
Аналогичные результаты получены для композиций с использованием трис- буфера (композиции 11-17), при этом отмечена лучшая химическая стабильность композиций, приготовленных с использованием трис-буфера по сравнению с аналогичными композициями, приготовленными с использованием фосфатного буфера.
Для композиций, не содержащих никотинамид (композиции 3-5) также показано достоверное преимущество стабилизации лизином или комбинацией лизина с аргинином по сравнению со стабилизацией аргинином.
Пример 3. Приготовление композиций по изобретению, содержащих инсулин глулизин
В одном из вариантов фармацевтические композиции по настоящему изобретению получают в виде водных растворов. В таблице 3 приведен качественный и количественный состав некоторых приготовленных композиций. Композиции по изобретению включают в себя, но без ограничения, композиции 2-7, приведенные в таблице 3. Состав композиции 1 соответствует составу оригинального ЛП «Апидра®», раствор для подкожного введения, 100 Ед. /мл. В составах композиций 2- 7 воспроизведен состав оригинального ЛП с добавлением L-лизина гидрохлорида или комбинации L-лизина гидрохлорида и L-аргинина гидрохлорида.
Способ получения композиций включает: а) приготовление раствора инсулина глулизина путем его растворения в воде или буфере; б) приготовление раствора консерванта путем его растворения в воде или буфере; в) приготовление раствора изотонического агента путем его растворения в воде или буфере; г) приготовление раствора поверхностно-активного вещества путем его растворения в воде или буфере; д) приготовление раствора лизина и/или комбинации лизина с аргинином путем растворения аминокислот и/или их солей в воде или буфере; е) смешивание раствора а) и растворов б), в), г), д) в соответствии с составом композиций, приведенных в таблице 3 ; ж) доведение pH смеси е) до значения 7,3 с последующей стерилизующей фильтрацией. з) асептическое заполнение приготовленными композициями картриджей.
Композиции по изобретению могут быть получены любым другим способом.
Таблица 3. Качественный и количественный состав композиций по изобретению, содержащих инсулин глулизин
Figure imgf000019_0001
Пример 4. Анализ физической и химической стабильности композиций по изобретению, содержащих инсулин глулизин
Определение химической стабильности проводили для композиций 1—7, полученных по примеру 3, после термостатирования асептично заполненных ими картрижей при температуре 40° С в течение 1 и 2 недель.
Определение родственных инсулину глулизин примесей проводили методом ВЭЖХ с УФ- детектированием на колонке, заполненной октадецилсиликагелем, с размером частиц 5 мкм и размером пор 100 А со скоростью потока подвижной фазы 1,0 мл/мин и при длине волны 214 нм.
Элюирование проводили в градиентном режиме подвижной фазой, состоящей из следующих компонентов: подвижная фаза А (ПФ А): ацетонитрил : буферный раствор с pH 2,3 (0,1 М раствор сульфата натрия, ортофосфорная кислота q.s. до pH 2,3) 10:90 (V:V); подвижная фаза Б (ПФ Б): ацетонитрил : буферный раствор с pH 2,3 (0,1 М раствор сульфата натрия, ортофосфорная кислота q.s. до pH 2,3) 50:50 (V:V).
Количество примеси А21 -дезамидоинсулин глулизин и других родственных примесей определяли методом внутренней нормализации по площади абсорбции соответствующих пиков, измеренной в процентах от суммы площадей пиков, элюированных после метакрезола.
Количество ВМБ в композициях, содержащих инсулин глулизин определяли по методике, аналогичной определению ВМБ в композициях, содержащих инсулин аспарт (см. Пример 2). Содержание ВМБ определяли методом внутренней нормализации по сумме площадей абсорбции всех пиков с временами удерживания меньшими, чем у пика мономера инсулина глулизин. Пики с временами удерживания большими, чем у пика мономера инсулина глулизин (пик метакрезола) в расчете не учитывались.
Физическую стабильность композиций, содержащих инсулин глулизин, оценивали аналогично оценке физической стабильности композиций, содержащих инсулин аспарт (см. Пример 2).
В таблице 4 приведены результаты определения стабильности композиций, содержащих инсулин глулизин.
Таблица 4. Данные по химической стабильности композиций 1-7, содержащих инсулин глулизин, полученных по примеру 3.
Figure imgf000020_0001
Figure imgf000021_0001
* Оригинальный ЛП «Апидра®»
На основании изучения химической и физической стабильности композиций 1 — 7, содержащих инсулин глулизин, неожиданно было обнаружено, что что при добавлении лизина и/или его соли и/или комбинации лизина и/или его соли с аргинином и/или его солью количество примесей после 2 недель хранения при 40°С в композициях по изобретению существенно и достоверно меньше, чем в прототипе, при этом по сравнению с прототипом улучшается также и физическая стабильность.
Повышение концентрации лизина до 100 мМ способствует снижению количества примесей. Концентрация лизина более 100 мМ нежелательна в связи с ухудшением физической стабильности композиций. Наименьшее количество примесей отмечено при использовании комбинации лизина и аргинина.
Пример 5. Приготовление композиций по изобретению, содержащих инсулин лизпро
В одном из вариантов фармацевтические композиции по настоящему изобретению получают в виде водных растворов. В таблице 5 приведен качественный и количественный состав некоторых приготовленных композиций. Композиции по изобретению включают в себя, но без ограничения, композиции 2-8, приведенные в таблице 5. Состав композиции 1 соответствует составу оригинального ЛП «Хумалог», раствор для внутривенного и подкожного введения, 100 Ед. /мл. В составах композиций 2-7 воспроизведен состав оригинального ЛП с добавлением L-лизина гидрохлорида или комбинации L-лизина гидрохлорида и L-аргинина гидрохлорида.
Способ получения композиций включает: а) приготовление раствора инсулина путем его растворения в воде или буфере; б) приготовление раствора цинка путем растворения оксида цинка в растворе разбавленной соляной кислоты; в) приготовление раствора консерванта путем его растворения в воде или буфере; г) приготовление раствора изотонического агента путем его растворения в воде или буфере; д) приготовление раствора лизина и/или аргинина путем растворения аминокислот и/или их солей в воде или буфере; е) смешивание раствора а) и растворов б), в), г), д) в соответствии с составом композиций, приведенных в таблице 1 ; ж) доведение pH смеси е) до значения 7-8 с последующей стерилизующей фильтрацией. з) асептическое заполнение приготовленными композициями картриджей.
Композиции по изобретению могут быть получены любым другим способом.
Таблица 5. Качественный и количественный состав композиций по изобретению, содержащих инсулин лизпро
Figure imgf000022_0001
Пример 6. Анализ физической и химической стабильности композиций по изобретению, содержащих инсулин лизпро
Определение химической стабильности проводили для композиций 1-8 (композиции, содержащие инсулин лизпро), полученных по примеру 5, после термостатирования асептично заполненных ими картрижей при температуре 40° С в течение 1 и 2 недель.
Определение примеси А21 -дезамидоинсулин лизпро и других родственных инсулину лизпро примесей проводили методом ВЭЖХ с УФ-детектированием на колонке, заполненной октадецилсиликагелем с размером частиц 3,5 мкм. В качестве элюента использовали подвижную фазу, состоящую из следующих компонентов: подвижная фаза А (ПФ А): буферный раствор перхлората натрия pH 2,2; подвижная фаза В (ПФ В): ацетонитрил для хроматографии.
Элюирование проводили в градиентном режиме со скоростью потока подвижной фазы 0,9 мл/мин и при длине волны детектирования 214 нм.
Количество примеси А21 дезамидоинсулин лизпро и других родственных примесей определяли методом внутренней нормализации по площади абсорбции соответствующих пиков, измеренной в процентах от суммы площадей пиков, элюированных после метакрезола.
Количество ВМБ в композициях, содержащих инсулин лизпро определяли по методике, аналогичной определению ВМБ в композициях, содержащих инсулин аспарт или инсулин глулизин (см. Пример 2). Содержание ВМБ определяли методом внутренней нормализации по сумме площадей абсорбции всех пиков с временами удерживания меньшими, чем у пика мономера инсулина лизпро. Пики с временами удерживания большими, чем у пика мономера инсулина лизпро (пик метакрезола) в расчете не учитывались.
Физическую стабильность композиций, содержащих инсулин лизпро оценивали аналогично оценке физической стабильности композиций, содержащих инсулин аспарт (см. Пример 2).
В таблице 6 приведены результаты определения химической и физической стабильности композиций, содержащих инсулин лизпро.
На основании изучения химической и физической стабильности композиций 1 - 8, содержащих инсулин лизпро, неожиданно было обнаружено, что при добавлении лизина и/или его соли и/или комбинации лизина и/или его соли с аргинином и/или его солью количество примесей после 2 недель хранения при 40° С в композициях по изобретению было существенно и достоверно меньше, чем в прототипе, при этом по сравнению с прототипом улучшается также и физическая стабильность.
Повышение концентрации лизина до 100 мМ способствует снижению количества примесей. Концентрация лизина более 100 мМ нежелательна в связи с ухудшением физической стабильности композиций. Наименьшее количество примесей отмечено при использовании комбинации лизина и аргинина.
Таблица 6. Данные по физической и химической стабильности композиций 1 - 8, содержащих инсулин лизпро, полученных по примеру 5.
Figure imgf000024_0001
* Оригинальный ЛП «Хумалог» Список литературы:
1. Селиванова О. М., Гришин С. Ю., Глякина А. В. и др. Анализ аналогов инсулина и стратегия их дальнейшей разработки. Успехи биологической химии. 2018, 58: 313— 346. . Brange J., Owens D. R., Kang S., Volund A. Monomeric Insulins and Their Experimental and Clinical Implications. Diabetes Care. 1990, 13(9), 923-
954. doi:10.2337/diacare.13.9.923
3. Schlein M. Insulin Formulation Characterization - the Thio flavin T Assays. AAPS Journal. 2017, 19(2): 397 - 408. . Инструкция по применению лекарственного препарата для медицинского применения «Фиасп». URL: http://grls.rosminzdrav.ru (дата обращения 30.08.22).
5. Brange J. Stability of Insulin. Kluwer Academic Publisher. 1994, 18-23.
6. Paquot N., Scheen A. J. Faster aspart insulin (FIASP®). Revue Medicale de Liege. 2018; 73 (4): 211-215. . Muchmore D. B. Pump Users Clamor for Faster Insulin: Is Fast-Acting Insulin Aspart Ready for Them? Journal of Diabetes Science and Technology. 2018; 12(1): 152— 154. doi:10.1177/1932296817750166
8. Ahem T. J., Manning M. C. Stability of Protein Pharmaceuticals. Plenum Press. New York. 1992.

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. Композиция для снижения уровня глюкозы в крови у субъекта, содержащая быстродействующий инсулин и аминокислоту, которая представляет собой лизин или его соль, или комбинацию лизина или его соли с аргинином или его солью.
2. Композиция по п.1, в которой быстродействующий инсулин выбран из группы, включающей инсулин аспарт (B28Asp), инсулин лизпро (B28LysB29Pro), инсулин глулизин (3BLys29BGlu).
3. Композиция по и. 2, в которой быстродействующий инсулин представляет собой инсулин аспарт (B28Asp).
4. Композиция по п.1, в которой аминокислота представляет собой лизин или его соль.
5. Композиция по и. 1, в которой аминокислота представляет собой комбинацию лизина или его соли с аргинином или его солью.
6. Композиция по и. 3, в которой аминокислота представляет собой лизин или его соль.
7. Композиция по п.З, в которой аминокислота представляет собой комбинацию лизина с аргинином.
8. Композиция по и. 2, в которой быстродействующий инсулин представляет собой глулизин (3BLys29BGlu).
9. Композиция по и. 8, которая дополнительно содержит метионин.
10. Композиция по и. 1, в которой инсулин присутствует в количестве от примерно 0,2 мМ (33 Ед. /мл) до примерно 2мМ (333 Ед. /мл).
11. Композиция по п.1, в которой инсулин присутствует в количестве от примерно 0,3 мМ (50 Ед. /мл) до примерно 1,2 мМ (200 Ед. /мл).
12. Композиция по и.10 или и.11, отличающаяся тем, что инсулин представляет собой инсулин аспарт и композиция дополнительно содержит соединение никотиновой кислоты.
13. Композиция по и.12, отличающаяся тем, что в качестве соединения никотиновой кислоты содержит никотинамид.
14. Композиция по и.13, содержащая от примерно 1 мМ и до примерно 200 мМ никотинамида.
15. Композиция по и. 10 или и.11, содержащая от примерно 1мМ до примерно 100 мМ лизина или его соли.
25
16. Композиция по и.10 или п.11, содержащая от примерно 1мМ до примерно 100 мМ комбинации лизина или его соли с аргинином или его солью.
17. Композиция по п.1, дополнительно содержащая ион металла, консервант(ы), изотонический агент(ы) и стабилизатор(ы), буфер(ы) и регуляторы кислотности.
18. Композиция по п.1 для применения в лечении или профилактике гипергликемии, сахарного диабета 2 типа, нарушения толерантности к глюкозе, сахарного диабета 1 типа.
19. Инъецируемый инсулиновый препарат для снижения уровня глюкозы в крови у субъекта, содержащий композицию по любому из пи. 1-17.
PCT/RU2023/050272 2022-11-26 2023-11-24 Композиция быстродействующего инсулина (варианты) Ceased WO2024112231A1 (ru)

Priority Applications (6)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202380092609.3A CN120712073A (zh) 2022-11-26 2023-11-24 速效胰岛素（变体）组合物
CR20250256A CR20250256A (es) 2022-11-26 2023-11-24 Composición de insulina de acción rápida (variantes)
EP23895130.5A EP4623902A1 (en) 2022-11-26 2023-11-24 Composition of fast-acting insulin (variants)
MX2025006079A MX2025006079A (es) 2022-11-26 2025-05-23 Composicion de insulina de accion rapida (variantes)
DO2025000123A DOP2025000123A (es) 2022-11-26 2025-05-26 Composición de insulina de acción rápida (variantes)
CONC2025/0008517A CO2025008517A2 (es) 2022-11-26 2025-06-25 Composición de insulina de acción rápida (variantes)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2022130796 2022-11-26
RU2022130796A RU2022130796A (ru) 2022-11-26 Композиция быстродействующего инсулина (варианты)

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2024112231A1 true WO2024112231A1 (ru) 2024-05-30

Family

ID=91196432

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/RU2023/050272 Ceased WO2024112231A1 (ru) 2022-11-26 2023-11-24 Композиция быстродействующего инсулина (варианты)

Country Status (9)

Country Link
EP (1) EP4623902A1 (ru)
CN (1) CN120712073A (ru)
AR (1) AR131148A1 (ru)
CL (1) CL2025001546A1 (ru)
CO (1) CO2025008517A2 (ru)
CR (1) CR20250256A (ru)
DO (1) DOP2025000123A (ru)
MX (1) MX2025006079A (ru)
WO (1) WO2024112231A1 (ru)

Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1991009617A1 (en) 1989-12-21 1991-07-11 Novo Nordisk A/S Insulin preparations containing nicotinic acid or nicotinamide
WO1996010417A1 (en) 1994-10-04 1996-04-11 Novo Nordisk A/S PREPARATIONS CONTAINING AspB28 HUMAN INSULIN AND NICOTINAMIDE
US20090304665A1 (en) * 2008-04-28 2009-12-10 Frost Gregory I Super fast-acting insulin compositions
EP2612677A1 (en) * 2009-06-26 2013-07-10 Novo Nordisk A/S Preparation comprising insulin, nicotinamide and an amino acid
WO2014096985A2 (en) * 2012-12-19 2014-06-26 Wockhardt Limited A stable aqueous composition comprising human insulin or an analogue or derivative thereof
WO2014102623A1 (en) * 2012-12-26 2014-07-03 Wockhardt Limited Pharmaceutical composition
US20150119323A1 (en) * 2013-10-25 2015-04-30 Sanofi Stable Formulation of Insulin Glulisine

Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1991009617A1 (en) 1989-12-21 1991-07-11 Novo Nordisk A/S Insulin preparations containing nicotinic acid or nicotinamide
WO1996010417A1 (en) 1994-10-04 1996-04-11 Novo Nordisk A/S PREPARATIONS CONTAINING AspB28 HUMAN INSULIN AND NICOTINAMIDE
US20090304665A1 (en) * 2008-04-28 2009-12-10 Frost Gregory I Super fast-acting insulin compositions
EP2612677A1 (en) * 2009-06-26 2013-07-10 Novo Nordisk A/S Preparation comprising insulin, nicotinamide and an amino acid
RU2533217C2 (ru) 2009-06-26 2014-11-20 Ново Нордиск А/С Препарат, содержащий инсулин, никотинамид и аминокислоту
WO2014096985A2 (en) * 2012-12-19 2014-06-26 Wockhardt Limited A stable aqueous composition comprising human insulin or an analogue or derivative thereof
WO2014102623A1 (en) * 2012-12-26 2014-07-03 Wockhardt Limited Pharmaceutical composition
US20150119323A1 (en) * 2013-10-25 2015-04-30 Sanofi Stable Formulation of Insulin Glulisine

Non-Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
AHEM T. J.MANNING M. C.: "Stability of Protein Pharmaceuticals", 1992, PLENUM PRESS
BRANGE J., STABILITY OF INSULIN. KLUWER ACADEMIC PUBLISHER, 1994, pages 18 - 23
BRANGE J.OWENS D. R.KANG S.VOLUND A.: "Monomeric Insulins and Their Experimental and Clinical Implications.", DIABETES CARE., vol. 13, no. 9, 1990, pages 923 - 954
MUCHMORE D. B.: "Pump Users Clamor for Faster Insulin: Is Fast-Acting Insulin Aspart Ready for Them?", JOURNAL OF DIABETES SCIENCE AND TECHNOLOGY., vol. 12, no. 1, 2018, pages 152 - 154
O. M. SELIVANOVAS. YU. GRISHINA. V. GLYAKINA ET AL.: "Analysis of insulin analogues and strategy for their further development.", ADVANCES IN BIOLOGICAL CHEMISTRY., vol. 58, 2018, pages 313 - 346
PAQUOT N.SCHEEN A. J.: "Faster aspart insulin (FIASP®", REVUE MEDICALE DE LIEGE., vol. 73, no. 4, 2018, pages 211 - 215
SCHLEIN M: "Insulin Formulation Characterization - the Thioflavin T Assays. ", JOURNAL, vol. 19, no. 2, 2017, pages 397 - 408, XP036185436, DOI: 10.1208/s12248-016-0028-6
See also references of EP4623902A1

Also Published As

Publication number Publication date
EP4623902A8 (en) 2026-02-11
DOP2025000123A (es) 2025-11-30
MX2025006079A (es) 2025-09-02
CN120712073A (zh) 2025-09-26
CO2025008517A2 (es) 2025-07-17
AR131148A1 (es) 2025-02-19
CL2025001546A1 (es) 2025-09-26
EP4623902A1 (en) 2025-10-01
CR20250256A (es) 2025-10-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN104667264B (zh) 包含胰岛素、烟酰胺和氨基酸的制剂
DK2403520T3 (en) Insulin formulations for fast uptake
JP6525987B2 (ja) インスリングルリジンの安定製剤
TR201809460T4 (tr) Bir GLP- 1-agonisti, bir insülin ve metiyonin içeren farmasötik bileşim.
CN105126082B (zh) 一种多肽药物制剂及其制备方法
CN105188736A (zh) 胰岛素给药方案
MX2014012096A (es) Formulaciones de insulina.
KR20260008798A (ko) 글루카곤-유사 펩타이드 2 (glp-2) 유사체의 제형
KR102837765B1 (ko) 아밀린 유사체의 액체 제제
CN103328006A (zh) 包含胰岛素、烟酰胺和氨基酸的制剂
WO2016196976A1 (en) Glucagon delivery apparatuses and related methods
KR20240176455A (ko) 시클로덱스트린을 포함하는 약학적 제형
EP4628092A1 (en) Insulin aspart composition (embodiments)
EP4623902A1 (en) Composition of fast-acting insulin (variants)
AU2013368990B2 (en) Pharmaceutical composition
RU2832344C2 (ru) Водная композиция инсулина аспарта и инъецируемый инсулиновый препарат
US20220354782A1 (en) Subcutaneously injectable insulin and glucagon formulations and methods of administration
RU2838627C2 (ru) Жидкие композиции аналогов амилина
WO2011156476A2 (en) Insulin with a basal release profile
AU2013203134B2 (en) Preparation comprising insulin, nicotinamide and an amino acid
WO2006096079A2 (en) Pharmaceutical composition comprising a biosynthetic analog of human insulin, and its use in the treatment of diabetes mellitus.
HK1166266A (en) Aqueous preparations comprising methionine

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 23895130

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 202590940

Country of ref document: EA

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: MX/A/2025/006079

Country of ref document: MX

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: P2025-01591

Country of ref document: AE

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 2501003428

Country of ref document: TH

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 0025000111

Country of ref document: IQ

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: DZ2025000833

Country of ref document: DZ

Ref document number: DZP2025000833

Country of ref document: DZ

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 202517060746

Country of ref document: IN

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 2023895130

Country of ref document: EP

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

ENP Entry into the national phase

Ref document number: 2023895130

Country of ref document: EP

Effective date: 20250626

WWP Wipo information: published in national office

Ref document number: MX/A/2025/006079

Country of ref document: MX

WWP Wipo information: published in national office

Ref document number: 202517060746

Country of ref document: IN

WWP Wipo information: published in national office

Ref document number: 2023895130

Country of ref document: EP

REG Reference to national code

Ref country code: BR

Ref legal event code: B01A

Ref document number: 112025010532

Country of ref document: BR

REG Reference to national code

Ref country code: BR

Ref legal event code: B01E

Ref document number: 112025010532

Country of ref document: BR

Free format text: APRESENTE NOVAS FOLHAS DOS DESENHOS AO ART. 39.I DA PORTARIA/INPI/NO 14/2024, UMA VEZ QUE O CONTEUDO ENVIADO NA PETICAO NO 870250044940 DE 30/05/2025 ENCONTRA-SE FORA DA NORMA NO QUE SE REFERE A PRESENCA DE TEXTO NOS DESENHOS. A EXIGENCIA DEVE SER RESPONDIDA EM ATE 60 (SESSENTA) DIAS DE SUA PUBLICACAO E DEVE SER REALIZADA POR MEIO DA PETICAO GRU CODIGO DE SERVICO 207