AR132902A1 - Métodos y composiciones para la tolerancia a glifosato en plantas - Google Patents

Métodos y composiciones para la tolerancia a glifosato en plantas

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AR132902A1
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Shirley X Guo
Sergey Ivashuta
Clayton T Larue
Kevin B Reed
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Monsanto Technology Llc
Univ Texas
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Abstract

La presente divulgación se refiere a métodos y composiciones novedosos para conferir tolerancia al glifosato a las plantas. La presente divulgación también proporciona plantas, semillas, tejidos, células y partes de plantas tolerantes al glifosato que comprenden EPSP sintasas modificadas y moléculas de ADN recombinante que codifican EPSP sintasas modificadas, así como métodos para producir las mismas y su uso. Reivindicación 1: Una molécula de ADN recombinante que codifica una 5-enol-piruvil-shikimato-3-fosfato sintasa (EPSPS) tolerante a glifosato, donde la EPSPS comprende por lo menos una primera combinación de sustituciones de aminoácidos seleccionada del grupo que consiste en: T102I-P106S-P126S-K296R, T102I-P106S-P126S, T102I-P106S-K296R, T102I-P106S-P126S-M217L-K296R, T102I-P106S-V66L-M104L, T102I-P106S-T108S, T102I-P106S-F150V-H318Y, T102I-P106S-P126L, T102I-P106S-G116V, T102I-P106S-I177V, y P106S-A109V-I163K, donde la posición de la sustitución de aminoácido es relativa a la posición de la secuencia de aminoácidos proporcionada como SEQ ID Nº 6. Reivindicación 5: Una EPSPS tolerante a glifosato que comprende por lo menos una primera combinación de sustituciones de aminoácidos seleccionada del grupo que consiste en: T102I-P106S-P126S-K296R, T102I-P106S-P126S, T102I-P106S-K296R, T102I-P106S-P126S-M217L-K296R, T102I-P106S-V66L-M104L, T102I-P106S-T108S, T102I-P106S-F150V-H318Y, T102I-P106S-P126L, T102I-P106S-G116V, T102I-P106S-I177V, y P106S-A109V-I163K, donde la posición de la sustitución de aminoácido es relativa a la posición de la secuencia de aminoácidos proporcionada como SEQ ID Nº 6. Reivindicación 11: Una planta de maíz transgénico que comprende una molécula de ADN recombinante que codifica una 5-enol-piruvil-shikimato-3-fosfato sintasa (EPSPS) tolerante a glifosato, donde la EPSPS comprende por lo menos una primera combinación de sustituciones de aminoácidos seleccionada del grupo que consiste en: T102I-P106S-P126S-K296R, T102I-P106S-P126S, T102I-P106S-K296R, T102I-P106S-P126S-M217L-K296R, T102I-P106S-V66L-M104L, T102I-P106S-T108S, T102I-P106S-F150V-H318Y, T102I-P106S-P126L, T102I-P106S-G116V, T102I-P106S-I177V, y P106S-A109V-I163K, donde la posición de la sustitución de aminoácido es relativa a la posición de la secuencia de aminoácidos proporcionada como SEQ ID Nº 6, y donde dicha EPSPS confiere tolerancia a glifosato a dicha planta de maíz transgénico. Reivindicación 13: Una semilla, célula o parte de planta de la planta de la reivindicación 11, donde la semilla, célula o parte de planta comprende dicha molécula de ADN recombinante. Reivindicación 14: Un método para conferir tolerancia a glifosato a una planta, que comprende expresar en la planta la EPSPS tolerante a glifosato de la reivindicación 5. Reivindicación 16: Un método para producir una EPSPS tolerante a glifosato que comprende introducir en una molécula de ácido nucleico que codifica una EPSPS de planta por lo menos una primera combinación de sustituciones de aminoácidos seleccionada del grupo que consiste en: T102I-P106S-P126S-K296R, T102I-P106S-P126S, T102I-P106S-K296R, T102I-P106S-P126S-M217L-K296R, T102I-P106S-V66L-M104L, T102I-P106S-T108S, T102I-P106S-F150V-H318Y, T102I-P106S-P126L, T102I-P106S-G116V, T102I-P106S-I177V, y P106S-A109V-I163K, donde la posición de la sustitución de aminoácido es relativa a la posición de la secuencia de aminoácidos proporcionada como SEQ ID Nº 6. Reivindicación 21: Un método para controlar malezas en un área de cultivo de plantas, que comprende poner en contacto un área de cultivo de plantas que comprende la planta o semilla de la reivindicación 8 con glifosato, donde la planta o semilla es tolerante al glifosato, y donde las malezas son controladas en el área de cultivo de las plantas. Reivindicación 22: Una célula de levadura que comprende un noqueo por eliminación de la función aro1 nativa, y que comprende además una molécula de ADN recombinante que comprende un promotor heterólogo unido operativamente a una secuencia codificante de aro1 que comprende una mutación D731A, donde dicha célula de levadura no es capaz de crecer en medios sin aminoácidos aromáticos. Reivindicación 26: Un método para identificar una EPSPS tolerante al glifosato que tiene un crecimiento mejorado, una tolerancia al glifosato mejorada o una eficiencia enzimática mejorada en comparación con la EPSPS de tipo salvaje, que comprende los pasos de: a) obtener una célula de levadura de acuerdo con la reivindicación 22; y b) identificar la célula de levadura como capaz de crecer en presencia de glifosato y, por lo tanto, que comprende una EPSPS tolerante al glifosato que tiene un crecimiento mejorado, una tolerancia mejorada al glifosato o una eficiencia enzimática mejorada en comparación con la EPSPS de tipo salvaje. Reivindicación 29: Un método para identificar una planta, semilla, célula o parte de planta que comprende tolerancia al glifosato, donde el método comprende aplicar glifosato a la planta, semilla, célula o parte de planta que comprende la molécula de ADN recombinante de la reivindicación 1.
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