BE572218A

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Publication number: BE572218A
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Description

La présente invention concerne un nouveau composé glucosidique thé- rapeutiquement important, préparé à partir de Glycyrrhiza glabra L., ainsi que son procédé de préparation. Plus particulièrement, l'invention concerne un digly- coside de flavone préparé à l'état pur et qui est propre à exercer un effet thé- rapeutique lorsqu'il est administré tant aux humains qu'aux animaux. Des compo- sitions adéquates-pour l'administration convenable de cet agent thérapeutique aux humains et aux animaux sont également décrites.

Ce glucoside est appelé liquiritoside ou encore liquiritoside-flavano- ne.

La Glycyrrhiza glabra L. ou plante de réglisse commune, a été large- ment utilisée en médecine et en alimentation depuis longtemps. Malgré son antiqui- té et sa grande diffusion, la composition phytochimique de cette substance n'a guère reçu davantage qu'une attention superficielle au cours des années. L'analy- se chimique et pharmaceutique approximative d'extraits aqueux de la racine entiè- re séchée et réduite en poudre indique qu'elle contient de l'albumine des mucines, des sels d'acide glycyrrhizique sous forme de dérivés de potassium,de calcium et de magnésium, des substances telles que de l'hydrate de carbone, de l'eau et une proportion importante de substances conglémérées vaguement englobées sous la désignation de "substances extraites" et de "substances insolubles à l'eau".

Or, il a été établi que l'acide glycyrrhizique est un glucoside sus- ceptible d'être dégradé en une molécule d'acide glycyrrhétinique (C30H4604) et deux molécules d'acide glyouronique. Il existe certaines divergences en ce qui concerne la composition chimique de l'acide glycyrrhizique, celui-ci n'ayant ja- mais été ni réalisé par synthèse, ni complètement identifié quant à sa structu- re. De plus, le degré ou proportion auquel il se manifeste dans la plante a été décrit comme couvrant une gamme étendue et variable. L'acide glycyrrhizique a été désigné comme le composant actif de la glycyrrhiza glabra L., et il a été démontré qu'il est capable de produire un effet comparable à celui des hormones corticales adrénales.

Il est évident que la désignation du composant actif d'une plante ne peut être fonction que du but ou de l'effet recherché à l'usage. Ainsi, l'al- bumine, la mucine et les substances hydrocarbonées peuvent être considérées comme étant des composants actifs si l'on considère les propriétés émollientes de la racine.

Il a été démontré que la réglisse (Glycyrrhiza glabra L.) exerce une action modulatrice sur l'activité intestinale. Cette découverte a été confirmée par un certain nombre de chercheurs qui ont pu établir par la suite que cette ac- tivité était dûe à une fraction non identifiée de la glycyrrhiza glabra.L., fraction qui n'était pas apparentée à l'acide glycyrrhizique.

En 1934, Shinoda et ses collaborateurs annonçaient un glucoside de flavanone isolé à partir de Glycyrrhiza glabra L. Ce composé était obtenu sous forme d'aiguilles incolores dont le point de fusion était de 212 C et qui don- naient une masse fondue aglycone à 207 C. Le composé en question révèle une for- mule empirique telle que C21H2209 et il fut démontré qu'il était identique à celui obtenu antérieurement par d'autres chercheurs. Il était supposé par ailleurs que l'hydrolyse par voie de dégradation se développait suivant le processus ci-après.
EMI1.1

Aussi bien le glucoside que l'agluoone ne fournirent aucune colora- tion sous l'influence du chlorure ferrique dans une solution d'alcool, mais en revanche ils révélaient une teinte violet-rouge si l'on utilisait du magnésium dans de l'acide chlorhydrique (réaction à la cyanidine). La courbe d'absorption du composé indiquait un spectre du type flavanone et la caractérisation de struc- ture révélait que ce composé était le 7-oxy-4'-glucosidoxy-flavanone, ce qui était d'ailleurs confirmé par la synthèse.

Grace au procédé décrit plus loin, on a pu isoler un rhamno-glucosido- flavanone différent du glucoside obtenu antérieurement. Ce composé diffère du glucoside Shinoda isolé autrefois en ce qu'il s'agit d'un diglucoside au lieu d'un mono-glucoside. En outre, en procédant par voie de dégradation ce nouveau composé donne de la rhamnose en plus du glucose, à titre de fragments glucosidi- ques. Le diglucoside-flavanone ou liquiritoside flavanone préparé suivant les méthodes actuelles est une poudre microcristalline jaune dont le point de fusion se situe entre 132 et 134 C . sa formule étant C27H32C13 Cette substance est insoluble dans l'éther de pétrole, le benzène et le chloroforme; en revanche elle est légèrement soluble dans l'éther et soluble dans l'éthanol, le méthanol et l'eau.

Elle manifeste les réactions caractéristiques des flavanones produisant une couleur jaune intense dans un milieu alcalin, laquelle disparaît à l'acidi- fication, et une couleur violette en présence de magnésium dans de l'acide chlo- rhydrique (réaction à la cyanidine). Le liquiritoside-flavanone réduit le nitra- te d'argent ammoniaqué et le réactif phosphomolybdique. On obtient une couleur verdâtre-jaune par le traitement avec du chlorure ferrique en solution d'alcool.

Le spectre ultra-violet du diglucoside est représenté sur la figure
I des dessins annexés En solution d'alcool il montre une courbe caractéristi- que avec des minima à 2 500, 3 000 et 3 400 A, et des maxima à 2 700 et 3 600 A.

Dans un milieu alcalin, le spectre d'absorption présente deux minima à 2 800 et
3 600 A et trois maxima à 2 400, 3 500 et 4 100
Le diglucoside-flavanone sera dénommé ci-après "diglycoliquiritoside".

Une représentantion schématique du procédé préféré de préparation du diglucoside-flavanone, en partant de la racine entière, séchée et broyée, fait l'objet de la figure 2.

L'étude physiologique et pharmacologique du diglucoside obtenu par ce procédé permet d'établir qu'il possède des propriétés nouvelles et avantageuses.

Sa toxicité est faible et il agit comme dépresseur des fibres musculaires lisses.

Il diminue-la tonicité et la contraction de l'intestin isolé de lapin, lorsqu' @ il est utilisé en concentrations aussi faibles qùe 1/5 000. Il est capable de bloquer la stimulation cholinergique de l'acétylcholine ainsi que l'action du chlorure de baryum et de l'histamine sur le muscle intestinal, lorsqu'il est uti- lisé en concentrations de 1/2 500 Cet effet antispasmodique est désirable dans le traitement de malàdies caractérisées par un spasme des muscles lisses.

Les exemples ci-après montrent en détail le processus de préparation du diglucoside et ses propriétés.

EXEMPLE I
1) Un kg de racines entières et séchées de Glycyrrhiza glabra L., est pulvérisé jusqu'à une grosseur de particules correspondant à un tamis de soi- xante mesh, puis dégraissé par extraction en utilisant trois parties d'un litre chacune d'éther de pétrole (gamme d'ébullition : 39 à 79 C)o La pouce est ensui- te extraite trois fois en utilisant chaque fois un litre de chloroforme pour éliminer les résines, la racine broyée étant finalement retirée de l'extracteur et séchée.

2) La poudre séchée est extraite jusqu'à épuisement en utilisant de l'éthanol à 95% jusqu'au moment ou une nouvelle aliquote du produit de perco- lation ne donne plus une réaction positive de la cyanidine (une couleur violette en présence de tournures de magnésium et d'acide chlorhydrique) avec hydrogène naissant.

3) L'extrait d'alcool est concentré sous pression réduite (inférieure à 20 mm de Eg), en prenant soin que la température ne s'élève pas au-dessus de 50 C environ et que le contact avec l'air soit réduit au minimum. Un volume de concentré permettant d'opérer convenablement doit représenter de 1/16ème à 1/3 du volume initial. Les limites exactes de concentration dépendent du volume ini- tial et de la quantième de matière présente sous forme de substance extractive.

Dans des conditions particulières, il peut être jugé avantageux de réduire le volume au-dessous de ces limites
4) L'extrait alcoolique concentré est ajouté lentement à de l'acétate éthyle en remuant constamment. L'acétate éthyle doit être maintenu en excès sans interruption, et il est souhaitable d'utiliser le rapport de cinq volumes d'acé- tate éthyle pour chaque volume d'extrait alcoolique. Cette proportion s'est ré- vélée comme préférable bien que des cas particuliers puissent exiger des propor- tions différentes en fonction des quantités de substance extractive présentes dans le concentré d'alcool. La gamme préférée des rapports entre l'extrait alco- olique et l'acétate éthyle s'étend entre 1/2 et 1/25 Le taux particulier à choi- sir apparaitra rapidement à'tout spécialiste de la question.

Lorsque l'extrait alcoolique a été complètement mélangé avec l'acé- tate éthyle, il se forme un précipité que l'on sépare de la liqueur-mère. En effet, il s'agit là d'une phase de purification; autrement dit, on fait précipi- ter les résines résiduelles d'acide glycyrrhizique et analogues. Le temps néces- saire pour la formation du précipité sera proportionnel au rapport entre l'acl- cool et l'acétate éthyle, et il peut varier entre la précipitation immédiate et le séjour correspondant à une nuit. La température est également un facteur dont il faut tenir compte et le principe général d'une température décroissante occas- sionnant une précipitation plus rapide est valable dans ce cas, bien que la réac- tion considérée puisse être normalement effectuée à la température ambiante.

5) La liqueur-mère filtrée est ensuite concentrée sous pression ré- duite (moins de 20 m/m de Hg) jusqu'au point de cristallisation , puis on la lais- se reposer pour qu'elle se cristallise. La substance précipitée est filtrée et dissoute dans un volume minimum d'alcool éthylique suffisant pour déterminer la solution.

6) A la liqueur-mère obtenue au cours de la phase (5) ci-dessus on ajoute 3 volumes d'éther de pétrole (point d'ébullition de 39 à 79 C) et le mé- lange obtenu est mis de côté pour qu'il se cristallise. Le rapport entre la liqueur- mère et l'éther de pétrole se situe de préférence entre 1/2 et 1/10 selon la quantité de matière en solutiono La substance cristalline est filtrée et dissou- te dans un volume minimum d'alcool, juste suffisant pour déterminer la solutiono
7) Les solutions alcooliques obtenues par suite des phases (5) et (6) sont combinées et mélangées avec de l'acétate éthyle dans le rapport de 1/5 Ce rapport entre la solution alcoolique et l'acétate éthyle peut être modifié dans une gamme comprise de préférence entre 1/2 et 1/10. Il se forme un précipité cristallin que l'on filtre et sèche sous vide.

La substance cristalline jaune ainsi obtenue fond à 132-134 C, et elle est soluble dans l'éthanol, le méthanol et l'eau, tout en étant insoluble dans l'éther de pétrole ,le benzène et le chloroforme. Son analyse pour déceler la teneur en carbone et en hydrogène donne :

C27H320134H20 (pourcentages théoriques ou calculés : C=50, 94 H=6,28, les chiffres constatés étant : C=50,72% et H-6,25%) A l'analyse par hydrolyse on obtient un aglycone ayant pour formule empirique : C15H1204, ainsi que deux fragments de sucre glucose et rhamnose. Les fragments de sucre peuvent être identifiés par leurs osazones ca- ractéristiques, ainsi que par chromatographie au papier.

La fission hydrolytique du diglucoside peut être supposée comme suit:
EMI4.1
C27H32013 2 C15H1204 + Glucose + Rhamnose H +
Le glucoside fournit les réactions colorées caractéristiques des fla- vanones avec de l'hydrogène naissant, ainsi qu'une couleur verdâtre jaune avec une solution alcoolique de chlorure ferrique.

EXEMPLE II
1 Un kg de racines propres, fraîches et entières de Glycyrrhiza gla- bra L., est mélangé à 10 volumes d'éthanol à 95% dans un ballon d'ébullition pour- vu d'un condenseur à reflux. On laisse le mélange bouillir au reflux pendant 15 à 20 minutes, puis on sépare la racine de l'alcool par décantation. La racine est ensuite séchée à l'air et pulvérisée jusqu'à la dimension de particules cor- respondant à un tamis de soixante mesh.

2) La racine réduite en poudre est ensuite extraite jusqu'à épuisement en utilisant de l'alcool à 95% jusqu'à ce qu'une portion aliquote du produit de percolation n'indique pas une réaction de cyanidine positive (couleur violette avec hydrogène naissant).

3) Les extraits alcooliques provenant des phases 1 et 2 sont mélangés et concentrés jusqu'à siccité sous pression réduite (moins de 20 mm de Hg).

4) Le résidu sec est dissous dans un faible volume d'eau distillée, juste suffisant pour déterminer la solution. Afin de maintenir le volume d'eau distillée aussi faible que possible et nécessaire , la température de l'eau peut être élevée, même jusqu'à ébullition .La solution est refroidie àla température ambiante et dégraissée par extraction en utilisant deux fractions d'éther de pétrole représentant chacune de 15 à 25 ccc.

5) La couche aqueuse est séparée et mise de côté pour la faire cris- talliser. Après plusieurs jours, un précipité fin, de couleur jaune-brun, fait son apparition et on le recueille par centrifugation et séchage sous vide.

6) Le liquide surnageant peut êtes concentré sous pression réduite afin de fournir une nouvelle quantité de précipité que l'on sépare et sèche.

Cependant, cette phase n'est pas toujours nécessaire car si l'on prend suffisam- ment de précautions pour lamise en oeuvre de laphase 4, on obtiendra déjà la plus grande partie de la substance précipitée disponible.

7) La purification du précipité provenant des phases 5 et 6 est réa- lisée en dissolvant la matière sèche dans 3 à 5 volumes d'acétate éthyle et en laissant cristalliser. La substance cristalline est séparée par centrifugation et séchée sous vide.

Le rendement que ces différentesphases permettent d'obtenir en par- tant de la racine entière fraîche, n 'est pas aussi important que celui résul- tant du processus plus critique de l'Exemple I et il peut être éventuellement indispensable de répéter la phase 7, afin d'obtenir le glucoside flavanone pur.

Toutefois, la substance obtenue après cristallisation, est identique en ce qui concerne les propriétés chimiques, physiques et pharmacologiques, au produit résultant du processus décrit dans l'Exemple I.

EXEMPLE III
1) On réduit en poudre un kg de racines sèches de Glycyrrhiza glabra L., la dimension des particules de cette poudre correspondant-à un tamis de 20 à 50 mesh. La matière broyée est placée dans un appareil de Soxhlet et soumise à extraction pendant 30 minutes avec de l'éther de pétrole (point d'ébullition compris entre 50 et 80 C).

2) L'éther de pétrole est séparé et la poudre extraite avec du chloro- forme pendant 30 minutes.

3) Le chloroforme est séparé et la racine pulvérisée est ensuite extraite jusqu'à épuisement à l'aide d'acétate éthyle, puis l'extrait est séparé.

4) Le résidu est extrait en utilisant cette fois un mélange d'acétate éthyle et d'éthanol dans le rapport de 20/1 pendant 2 heures,l'extrait étant fina- lement séparé.

5) Les extraits obtenus par suite des phases 3 et 4 sont mélangés et concentrés à un cinquième du volume initial, un précipité cristallin jaune étant obtenu au repos. La susbstance précipitée est filtrée et séchée. Elle est iden- tique à celle obtenue par suite du processus décrit dans l'Exemple I.

EXEMPLE IV
En remplacement de l'éther de pétrole utilisé dans la phase 1 des Exemples 1 et III, on peut utiliser de l'éther di-éthyle ou du benzène en volumes correspondants et dans les mêmes conditions.

EXEMPLE V
En remplacement du chloroforme utilisé dans la phase 1 de l'Exemple I et dans la .phase 2 de l'Exemple III, on peut utiliser du tétrachlorure de car- bone en volumes identiques et dans les mêmes conditions.

EXEMPLE VI
En remplacement de l'éthanol utilisé dans la phase 3 de l'Exemple I, et dans les phases 1 et 2 de l'Exemple II, on peut utiliser des alcools infé- rieurs, par exemple du méthanol, du propanol, de l'isopropanol, du butanol et de l'isobutanol. Ces mêmes alcools peuvent être adoptés en remplacement d'une partie de l'éthanol dans la phase 3 de l'Exemple 1 et dans les phases 1 et 2 de l'Exemple II.

EXEMPLE VII
La purification du diglucoside-flavanone obtenu suivant la phase 7 de l'Exemple 1,'les s p h a s e s 5 et 6'de l'Exemple II et la phase 5 de l'Exemple III peut s'effectuer selon une variante basée sur l'absorption chromatographique utilisant de la cellulose ou du silicate de ma- gnésium comme absorbant, suivie d'élution à l'éther de pétrole, au chloforme et à l'éther di-éthyle pour séparer le diglucoside-flavanone de ses impuretés. Le gludoside-flavanone est élué avec de l'acétate éthyle ce qui, après concentration sous pression réduite, aboutit à la formation d'un dépôt de diglucoside pur.

Dans les exemples ci-après plusieurs formes thérapeutiques ont été décrites.

Lorsqu'on désire utiliser le di-glucoside-flavanone comme moyen de correction d'un spasme musculaire, ou encore à des fins thérapeutiques pour les humains et pour les animaux, on peut le préparer sous des formes dosées différen- tes telles que solutions aqueuses, alcooliques et hydro-alcooliques, pilules, com- primés, capsules et suppositoires. La matière active peut être dispersée dans des bases d'onguents tant hydrophiles que lipohiles pour administrations ou appli- cations locales. Lorsque la substance doit être administrée par voie orale, rec- tale ou parentérale, elle est rapidement absorbée par le réseau sanguin en raison de sa solubilité dans les fluides physiologiques. Elle est comparativement non- toxique et des doses aussi fortes qu'un gramme par kg, administrées sous forme sous-cutanée à des souris, n'ont produit aucune manifestation toxique.

Etant donné cette faible toxicité par rapport à son degré élevé d'activité, la gamme des dosages est extrêmement souple et s'adapte aisément aux besoins du patient.

EXEMPLE VIII
Dix grammes de diglucoside-flavanone sont dissous dans un litre d'eau distillée contenant 0,9% de chlorure de sodium. La solution est filtrée et on y ajoute 0,2% de phénol, en tant que stabilisant, après quoi on fait passer le tout à travers un filtre bactériologique de Selas. La solution stérile est répar- tie en ampoules de verre d'un centimètre cube que l'on scelle à la flamme.

Cette nréparation peut être utilisée pour des injections sous-cutanées, intra-musculaires ou intra-veineuses afin d'obtenir l'effet recherché sur les hu- mains et les animaux.

EXEMPLE IX
Un gramme de diglucoside-flavanone est dissous dans un litre de sirop de sucre simple. La solution peut être protégée contre la décomposition par les bactéries et les moisissures en ajoutant une quantité variant entre 0,1% à 0,3% de benzoate méthyl-p-hydroxy et d'une autre quantité variant entre 0,1% à 0,3% de benzoate propyl-p-hydroxy.

On peut éventuellement ajouter des aromes et colorants destinés à donner un goût et un aspect agréables selon les besoins particuliers. Ce sirop peut être utilisé en thérapeutique par dosages appropriés afin de fournir la quan- tité désirée de diglucoside.

EXEMPLE X
On dissout un gramme de diglucoside-flavanonne dans 300 centimètres cubes d'eau distillée et on y ajoute une quantité suffisante d'éthanol pour élever le volume à 500 centimètres ubes. On peut ajouter des aromes et des colorants appprorpiés pour améliorer l'aspect de la solution hydro-alcooliqueo Celle-ci est adminisitée par voie orale en dosage convenable afin de fournir à l'organisme la quantité désirée de matière active.

On peut éventuellement remplacer l'eau en totalité ou en partie par un simple sirop de sucre, le rapport entre la phase aqueuse et la phase alcoolique pouvant varier dans les limites comprises entre 1/2 et 1/20.

EXEMPLE XI
Un gramme de diglucoside-flavanone est mélangé à 500 grammes de lacto- se et l'on remplit des capsules de gélatine dure avec le produit obtenu, afin que chaque capsule contienne l'équivalent de 2 milligrammes de substance active.

Les capsules sont administrées par voie orale afin d'assurer les effets thérapeu- tiques désirés.

EXEMPLE XII:
Dix grammes de diglucoside-flavanone sont mélangés avec une quantité suffisante de lactone pour obtenir un kilogramme de mélange. A ce mélange on ajou- te 50 grammes d'amidon de céréale en poudre et 2,5 grammes de stéarate de magnésium.

Le mélange est transformé en granulés à l'aide d'un agent liant approprié, par exemple du sirop de glucose ou de la gomme d'acacia, ou encore-un agent apparte- nant au groupe communément utilisé dans ce but (par exemple gélatine, sucrose, alcool et eau). La quantité de liant utilisée dépendra de la dureté que l'on dési- re dohner aux comprimés. En général, la quantité utilisée variera entre 3 et 10 parties du lot travaillé.

.Le mélange granulé est séché et comprimé en pastilles ayant la forme et le poids voulus. Une méthode classique consiste à comprimer les pastilles afin que chacune d'elles représente 1,0 milligramme- de diglucoside-flavanone.

Les pastilles ou comprimés ainsi obtenus peuvent être éventuellement enduits de l'un quelconque des agents d'enrobage connus, mais cela n'est pas indispensable pour obtenir l'effet thérapeutique désiré.

EXEMPLE XIII
Dans un plat en porcelaine on fait fondre lentement 495 grammes de beurre de cacao, et l'on y ajoute 5 grammes de diglucoside-flavanone. Le mélan- ge est constamment remué pendant qu'on le laisse "prendre". La masse est moulée en suppositoires selon les formes connues, chacun d'eux pesant 2 grammes et con- tenant 20 milligrammes de diglucoside-flavanone.

La nature du support ou de la base de suppositoire qui est prévu pour la diglucoside-flavanone n'est pas critique ; peut lui substituer d' autres bases de suppositoires par exemple de la gélatine glycérinée.

EXEMPLE XIV
Lorsqu'on désire utiliser du diglucoside-flavanone pour des applica- tions extérieures sur la peau, on peut l'incorporer à un véhicule tel qu'un on- guent approprié, soit par simple lévigation, soit par mélange avec une base fondue que l'on laisse ensuite durcir . Des effets thérapeutiques analogues sont observés avec des supports différents de substances pharmaceutiques, tels que bases d'onguents hydrophiles ou véhicules lipohiles du genre Base d'Absorption.

La gamme des rapports entre l'ingrédient . actif et la base est compri- se entre 1/10 parties et 1/100 parties, selon la maladie particulière à traiter, l'âge de l'individu en traitement et l'étendue de l'affection à soigner.

La description ci-dessus a été donnée à titre d'exemple seulement et il reste entendu que de nombreuses modifications peuvent être apportées aux formulations indiquées sans sortir du cadre de l'invention.

REVENDICATIONS.

1.- Diglycoliquiritoside et liquiritoside flavanone.

**ATTENTION** fin du champ DESC peut contenir debut de CLMS **.

Claims

2.- Le diglucoside flavanone ayant pour formule C27H32013 qui se cristallise pour donner des cristaux de couleur jaune et de goût amer, fondant à 132 -134 C, insolubles dans l'éther de pétrole, le benzène et le chloroforme, lé- gèrement solubles dans l'éther et solubles dans l'éthanol, le méthanol et l'eau, ayant un spectre d'absorption d'ultra-violet dans un milieu alcoolique qui donne des minima de 2 500, 3 000 et 3 400 A et des maxima de 2 700 et 3 600 1 et, dans un milieu alcalin, des minima de 2 800 et 3 600 1 et des maxima de 2 400, 3 500 et 4 100 A. <Desc/Clms Page number 8>

3 Le procédé de préparation de diglycoliquiritoside qui consiste à préparer une liqueur-mère à partir de l'extrait alcoolique dégraissé de racines de réglisse et à déterminer, à partir de cette liqueur-mère, la cristallisation du diglycoliquiritoside.

4- Le procédé de préparation de diglycoliquiritoside à partir de la racine de Glycyrrhiza glabra L, lequel comprend les phases qui consistent à dé- graisser, extraire les résines, à soumettre la substance à une extration à 1 aide d'alcools inférieurs et à produire la cristallisation à partir de la liqueur- mère de diglycoliquiritoside ainsi obtenue.

5.- Le procédé de préparation de diglycoliquiritoside à partir de la racine de Glycyrrhiza glabra L Lequel consiste essentiellement à dégraisser la racine à l'aide d'un solvant gras, à éliminer les résines à l'aide d'un sol- vant, à effectuer l'extraction à l'aide d'un alcool choisi dans la classe ROH ou R désigne un groupe alcoyle ou iso-alcoyle ne comportant pas plus de cinq atomes de carbone, et à précipiter le diglycoliquiritoside à partir de la liqueur-mère ainsi obtenue par ]usage d'un agent de précipitation.

6 Le procédé suivant la revendication 5, dans lequel le solvant gras est' constitué par de l'éther de pétrole.

7.- Le procédé suivant la revendication 5, dans lequel le solvant gras est constitué par du benzène.

8.- Le procédé suivant la revendication 5, dans lequel le solvant gras est constitué par de l'éther di-éthyle.

9.- Le procédé suivant la revendication 5, dans lequel le solvant pour éliminer les résines est constitué par du chloroforme.

10.- Le procédé suivant la revendication 5, dans lequel le solvant pour éliminer les résines est constitué par du tétrachlorure de carbone.

Il.- Le procédé suivant la revendication 5, dans lequel l'agent de précipitation est constitué par de l'acétate éthyle.

120- Le procédé de préparation de diglycoliquiritoside à partir de la racine de Glycyrrhiza glabra L. lequel consiste à dégraisser la racine à 1 aide d'éther de pétrole, à en extraire, les résinesà l'aide de chloroforme, à effectuer l'extraction du résidu à l'aide d'un alcool choisi dans le groupe des ROH ou R désigne un groupe alcoyle ou iso-alcoyle ne comportant pas plus de cinq atomes de carbone, à concentrer l'extrait et à ajouter au concentré de 1 acétate éthyle afin de déterminer la précipitation du diglycoliquiritoside à par- tir de ce concentré.

13- Le procédé de préparation de diglycoliquiritoside à partir de la racine de Glycyrrhiza glabra Lo lequel consiste à dégraisser la racine à 1' aide d'éther de pétrole, à extraire les résines qu'elles contiennent en utilisant du chloroforme à cet effet, à extraire le résidu à l'aide d'alcool éthyle, à concentrer l'extrait et à ajouter au concentré de l'acétate éthyle afin de déter- miner la précipitation du diglycoliquiritoside à partir de ce concentrée 140- Le procédé de préparation de diglycoliquiritoside à partir de racine de réglisse, lequel consiste à extraire à l'aide d'un alcool inférieur, à concentrer l'extrait jusqu'à siccité, à réaliser une solution aqueuse de l'ex- trait sec, à extraire le contenu gras de cet extrait à l'aide d'un solvant gras, à séparer la couche aqueuse de la couche contenant la matière grasse, puis,

après que la précipitation s'est produite à partir de ladite couche aqueuse, séparer le diglycoliquiritoside de celle-ci.

15. - Le procédé de .préparation de diglycoliquiritoside à partir de la racine de Glycyrrhiza glabra L. lequel consiste à extraire à l'aide d'un al- cool choisi parmi ceux de la classe des ROH ou R désigne un groupe alooyle ou iso-alcoyle ne comportant pas plus de cinq atomes de carbone à concentrer l'ex- <Desc/Clms Page number 9> trait jusqu'à siccité, à réaliser une solution aqueuse au minimum à l'aide dudit extrait sec, à dégraisser ladite solution à l'aide d'un solvant gras et à séparer de la partie contenant la substance grasse une partie aqueuse dans laquelle se manifeste la précipitation d'un précipité de couleur jaune-brun, à recueillir et sécher ledit précipité, et dissoudre ce précipité dans l'acétate éthyle à partir duquel le diglycoliquiritoside se précipite sous forme de cristaux jaunes.

16.- Le procédé de préparation de diglycoliquiritoside à partir de la racine de réglisse, lequel comprend la phase de dégraissage de la racine, d'ex- traction des résines à partir de cette racine, d'extraction du résidu à l'aide d' acétate éthyle et de séparation du premier extrait obtenu, suivie de l'extraction du résidu après ledit premier extrait en utilisant un mélange d'acétate éthyle et d'éthanol dans le rapport de 20/1 et de la séparation dudit deuxième extrait, les- - dits premier et'deuxième extraits étant mélangés et concentrés pour en tirer, par précipitation ,le diglycoliquiritoside.

17.- L'extraction du diglycoliquiritoside à partir de diverses varié- tés autres que le Glycyrrhiza glabra L., le diglycoliquiritoside se retrouvant dans les autres variétés de Glycyrrhiza.

18.- L'usage thérapeutique d'une préparation de diglycoliquiritoside dans un solvant ou sous une forme quelconque.