BE628258A - - Google Patents

Description

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  "   PROCEDE   DE PREPARATION DE LA TETRACYCLINE PAR 
EXTRACTION DES   BOUILLONS   DE   CULTURS   ".- 

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Cette invention est relative à un   procédé   de préparation de tétracycline à partir de bouillons de culture* 
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 On Mit que la tétracycline ne peut 8tre précipitée que partiellement des bouillons de culture, après séparation du mycé- lium, étant donné que par simple alcI11iRA Uon du bouillon,une quantité considérable de l'antibiotique demeure l'état dissous dans les eettx de précipitation.

   Pour pallier à cet inconvénient, on effectue l' a1 oalisl\t:ton en présence de sels d'ammonium quater- naires (tels que ceux connus sous la marque de fabrication "Arquadf par exemple) et d'ions   métalliques, ce qui     entraine   la formation de sels   complexe    de tétracycline insolubles à   l'eau, qui     peuvent   
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 être extraits par des solvants  tes procédés d'extraction de la 1'0   technique   antérieure se basent sur   ce     principe.

   Cependant, ce      procèdes     présentent   encore des   inconvénients   et en   particulier   
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 on retrouve  les sel  d'ammonium quatf)rnaire(Arquadt<)h l'état de   traces   plus ou moins   importantes, dans   le produit final. 



   Selon la présente   invention, on   effectue l'extraction de 
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 la tétracycline du bouillon de culture nsns utiliser de fft'!l1 tIJ d'   ammonium     quaternaire   ou de   solvant ,par   acidification directe des bouillons de   eu'! furet   
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 En !,artieuli"'!"..I!Ilon l'invention,la tetracyclino peut ttr4m récupérée quasi intégralement du bouillon de culture en   opèrent   de la   manière   suivante   @     oncidifie   le bouillon de 
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 culture jusque un plt de 1,8 à z9 par de l'acide sulfurique de façon A solubiliser l'antiMotique et à assurer son passage en phase lîqttide#ori6joitte le bouillon de farine fossile et 

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 l'on filtre.

   On traite le bouillon   filtré   par de l'acide oxa- 
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 lique de façon A précipiter la plus grande partie du calcium présent et l'on filtre l'oxalate précipite* On ajoute de laaw aavn,aquar au filtrat jusque obtenir un pl de 6, et l'on ajoute ensuite 3,5 à 4 kg de carbonate de sodium par m3 de bouillon et, de l'ammoniaque 'Jusqu'à Un pH de 6,8 à 9#5. La tétracycline précipite quasi totalement nous forme d'un sel complexe de caleïum-atnmoniwn-magné3im et le précipité. a une pureté variait! entre 60 et 70   %.   Le produit complexe précipité est recueilli par filtration et lavé sur un filtre par de l'eau déminéralisée. 



  Le tourteau de filtration est repris par une solution à 5   %   d'acide oxalique, de façon à obtenir une solution contenant   40.000   à 50.000 y/cc environ de complexe de   tétracyline.   On remue le tout jusqu'à précipitation complète du calcium; on filtre l'oxalate de calcium précipité et l'on fait précipiter la base du filtrat clair par addition directe d'une solution d'hydroxyde de sodium. 



   La base séparée par filtration est successivement 
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 abchée et transformée en lea sel* désirés. 



   Il est également possible d'acidifier directement le bouillon de culture par de l'acide oxalique en une quantité telle qu'elle n'élimine pas complètement le calcium présent, puis d'aci- difier le bouillon par de l'acide sulfurique jusqu'à un   pH   de 
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 1,6 - 1,9 et de procéder ensuite comme décrit ci-dessus. 
EXEMPLE 1 On acidifie   10   1. de bouillon de fermentation, titrant 
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 5200 y/cop par de l'acide sulfurique, jusqu'à un pH de 1,B , en agitant continuellement. On ajoute ensuite   300 g*  de farine   fossile,   on agite encore pendant une   demi-heure,  on filtre et on traite le filtrat clair par 90   g.'   d'acide oxalique. On agite pendant 2 heures et on filtre ensuite   l'oxalate   de calcium pré- 
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 cipité.

   On amène le filtrat limpide à pH 6 par addition d'aatwniaque, puis on ajoute 35 %, de carbonate de sodium et on élève 

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 ensuite le pH à la valeur de 9,2. Après 15 minutes environ, on filtre la base précipitée sous forme d'un complexe. Les eau%*   mères   épuisées ont un titre de 140 y/cc. La base brute   préci-     pitée   est reprise par deux parties environ de son poids de solu- tion d'acide oxalique à 5% (pH de la solution 1,9),on agite pen- dant 2 heures environ, on ajoute du charbon décolorant et on filtre l'oxalate de calcium précipite. On ajoute lentement au filtrat clair, titrant 43.000 y/cc, une   solution   d'hydrate de sodium à 10 % jusqu'à obtenir un   pH   de 3. 



     On   amorce la précipitation par addition de tétracycline-   baae     et,   l'on agite pendant trois heures au moins, de façon à assurer la précipitation de 70% du produit, on élève ensuite le pH à 4,5 et on filtre la base précipitée .Les eaux-mères épuisées ont un titre en tétracycline de 3200 y/cc. La base recueillie et   sèchée   a une pureté de 99 % et une puissance de 
1020 y/mg. 



   EXEMPLE 2 
5 litres de bouillon de culture, ayant un titre de 
5340 y/cc, sont traités directement par   47     Se*     d'acide   oxalique, en agitant continuellement, et le   pH   est amené à 1,85 par de l'acide sulfurique 1:1.   L'ensemble   est agité pendant une demi- heure et filtré, le mycélium étant soumis à un lavage poussé. On aHoute ajoute au filtrat clair l'ammonique jusqu'à un pH de 6, puis 00 
10 gr de carbonate de aodium et on   l'amène 1   pH 9,2 par de l'am-   moniaque.   Après une demi-heure, on filtre le produit complexe précipité qui, recueilli et séché, pèse 35,2 gr et a un titre en   tétracyline   de 72   %.   



   Les eaux-mères   épuisées   titrent 210 y/cc. L'on suspend   20   gr de produit brut dans 300   ce.   de solution d'acide oxalique à 5 % (pH 1,8). Après chauffage à 30-35 C, l'on remue pendant deux heures pour assurer la précipitation de tout le calcium sous forme d'oxalate.   L'on   ajoute 2 ge de charbon et l'on filtre. 

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   Le filtrat clair, titrant   42.900   y/cc, est amené pH 2,9 par addition lente   d'hydroxyde   de sodium, et agité pen- dant 2 heures de façon   à   assurer la précipitation quasi totale de la base  et est ensuite amené à pH 4,5, Après une demi-heure, on filtre la base, qui,   recueillie   et   aèchée,   pèse 13,2 gr et a une puissance de 990 y/mg. 



   REVENDICATIONS. 



   1.- Procédé de préparation de tétracycline par extrac- tion de bouillons de culture, caractérisé en ce que   l'on   effectue cette extraction sans utiliser des solvants et des cols   d'ammo-     nium   quaternaires, par acidification directe des bouillons de culture.

Claims (1)

1. 2.- Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'acidification est effectuée par de l'acide sulfurique, le calcium étant éliminé sous forme d'oxalate.

   3.- Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'acidification est effectuée par de l'acide oxalique et, ensuite, par de l'acide sulfurique.