BG102948A

BG102948A - Пиразинони като инхибитори на тромбин

Info

Publication number: BG102948A
Application number: BG102948A
Authority: BG
Inventors: Philip SANDERSON; Terry Lyle; Bruce Dorsey; Richard Varsolona
Original assignee: Merck & Co. Inc.
Priority date: 1996-04-23
Filing date: 1998-11-23
Publication date: 1999-11-30
Also published as: EP0900207B1; IL126404A0; EP0900207A1; BR9708859A; ATE209191T1; KR20000010650A; AU2679997A; EE9800353A; HRP970211A2; NO984928D0; AU714985B2; JP2000508334A; WO1997040024A1; PE13399A1; JP3140790B2; DE69709727D1; NO984928L; PL329441A1; TR199802133T2; NZ331993A

Abstract

Изобретението се отнася до съединения, които са полезни като инхибитори на тромбин и свързани тромботични оклузии със структурни формули.

Description

Област на техниката

Изобретението се отнася до пиразинони като инхибитори на тромбин.

Предшестващо състояние на техниката

Тромбинът е серинова протеаза в кръвната плазма под формата на предшественик протромбин. Тромбинът играе

централна роля в механизма на съсирване на кръвта, чрез превръщане на разтвора на плазмения протеин фибриноген в неразтворим фибрин.

Edwards et al., J.Amer.Chem. Soc.,(1992) vol 114, pp. 1854-63, описват пептидил а-кетобензоксазоли, които са обратими инхибитори на сериновите протеази човешка левкоцитна еластаза и свинска панкреасна еластаза.

В European Publication 363 284 са описани аналози на пептидазни субстрати, в които азотният атом на амидната група която може да се изреже в пептидния субстрат е заменена с водород или заместена карбонилна част.

В Australian Publication 862456677 също се описват пептидазни инхибитори, които имат активирана електрофилна кетонна част като флуорометиленкетон или а-кето карбоксилни производни.

R. J. Brown et al., J. Med. Chem., vol. 37, pages 12591261 (1994) описват орално активни, непептидни инхибитори на човешка левкоцитна еластаза, които съдържат трифлуорометилкетонова и пиридинонова части.

Н. Mack et al., J. Enzyme Inhibition, vol. 9, pages 73-86 (1995) описват устойчиви амидино-фенилаланин тромбинови инхибитори, които съдържат пиридинонова част като централна

структура на ядрото.

Техническа същност на изобретението

Изобретението се отнася до състав за инхибиране загубата на тромбоцити, инхибиране образуването на тромбоцитни агрегати, инхибиране образуването на фибрин, инхибиране образуването на тромби, и инхибиране образуването на емболи у бозайници, който съдържа съединение съгласно изобретението във фармацевтично приемлив носител. Тези състави могат в даден случай да включват антикоагуланти, антитромбоцитни средства и тромболитични средства. Съставите могат да бъдат прибавяни към кръв, кръвни продукти или органи на бозайници с оглед да се осъществи желаното инхибиране.

Изобретението включва също състав за предпазване от или лечение на нестабилна ангина, резистентна ангина, инфаркт на миокарда, преходни исхемични атаки, фибрилация на предсърдията, тромбозен удар, емболичен удар, дълбоковенна тромбоза, разпръсната вътрешносъдова коагулация, очно изграждане на фибрин, и реоклузия или рестеноза на реканализирани съдове у бозайници, който съдържа съединение

• · · ν·3 ·съгласно изобретението във фармацевтично приемлив носител. Тези състави могат в даден случай да включват антикоагуланти, антитромбоцитни средства и тромболитични средства.

Изобретението се отнася също до метод за намаляване на тромбогенността на повърхност у бозайник чрез прикрепване към повърхността, било ковалентно или нековалентно, на съединение съгласно изобретението.

Съединенията съгласно настоящото изобретение са полезни като инхибитори на тромбин и имат терапевтично значение например за предотвратяване на коронарни артериални заболявания и имат следната структурна формула

в която W означава водород,

R¹;

R^CO;

R^JCO;

R^CHilnNHCO; или (R^CHiCb^nNHCO, където η е 0-4; R¹ означава R²;

R²(CH2)mC(R¹²)2, където m е 0-3 и всички R¹² могат да бъдат еднакви или различни;

(R²)(OR²)CH(CH₂)_P, където р е 1-4;

R²C(R¹²)2(CH2)m, където m е 0-3 и всички R¹² могат да бъдат еднакви или различни, където (R¹²)2 могат да образуват също пръстен с С означен като С3.7 циклоалкил;

R²CH2C(R¹²)2(CH₂)_q, където q е 0-2 и всички R¹² могат да бъдат еднакви или различни, където (R¹²)₂могат да образуват също пръстен с С означен като С₃.₇циклоалкил;

(R²)2CH(CH2)r, където г е 0-4 и всички R²могат да бъдат еднакви или различни и където (R²)2 могат да образуват също пръстен с СН, означен като С₃.₇ циклоалкил, С₇.12 бициклоалкил, Сю-ΐδ трициклоалкил или 5- до 7-атомен моно- или бицикличен хетероциклен пръстен, който може да бъде наситен или ненаситен и съдържа от един до три хетероатома избрани от групата Ν, О и S;

R²O(CH2)P, където р е 1-4; или R²(COOR³)(CH2)_r> където г е 1-4;

R² и R¹⁴ означават независимо един от друг фенил, незаместен или заместен с един или повече С_Ь4 алкил, Ci_₄ алкокси, халоген, хидрокси, СООН, CONH₂ или SO₂NH₂;

нафтил;

бифенил;

5- до 7-атомен моно- или 9- до 10-атомен бицикличен хетероцикрен пръстен или нехетероциклен пръстен, който може да бъде наситен или ненаситен, където хетероцикленият пръстен съдържа от един до четири хетероатома избрани от групата Ν, О и S и където хетероцикленият или нехетероцикленият пръстен е незаместен или заместен с халоген или хидрокси;

С1_₇ алкил, незаместен или заместен с един или повече хидрокси, СООН, амино, арил, С₃.₇ циклоалкил, CF₃,

N(CH₃)₂, -Ci_₃ алкиларил, хетероарил или хетероциклоалкил;

·· ····

CF₃;

C3.7 циклоалкил, незаместен или заместен с арил;

С7.12 бициклоалкил; или

C₁₀-i6 трициклоалкил;

R³ означава водород;

С1.4 алкил;

С₃.₇ циклоалкил; или трифлуорометил

X означава водород или халоген;

А е избран от следните радикали;

където Y¹ и Y² независимо означават водород, Ci.₄ алкил,

С1_₄ алкокси, С3.7 циклоалкил, халоген или трифлуорометил;

R⁴ означава водород;

С1_₄ алкил;

С1_₄ алкокси;

халоген;

-OCH₂CF₃;

-OCH2CN;

·· ····

-COOH;

-OH;

-COOR⁶, където R⁶ е C1.4 алкил; -CONR⁷R⁸, където R⁷ и R⁸ независимо означават водород или С[.₄ алкил;

-(СН₂)₁.₄ОН;

-CH₂NHC(O)CH₃; -CH₂NHC(O)CF₃; -CH₂NHSO₂CH₃; -SO₂NH₂;

-(CH₂)₁.₄SO₂NR⁷R⁸; -(CH₂)₁.₄SO₂R⁶;

5- до 7-атомен моно- или 9- до 10-атомен бицикличен хетероциклен пръстен, който може да бъде наситен или ненаситен и който съдържа от един до четири хетероатома избрани от групата N, О и S;

-ZCH₂CO₂H; -ZCH₂CO₂CH₃; -ZCH₂R¹⁴;

-ZCH₂CO₂(CH₂)₁.₃CH₃;

-Z(CHR⁹)1.3C(O)NR¹⁰R¹¹, където R⁹ e водород или Ci-4 алкил, R¹⁰ и R¹¹ независимо означават водород, С3_7 циклоалкил, арил, хетероарил, хетероциклоалкил, -(CH₂)i_₂NCH₂CH₃, С_Ь4 алкил, незаместен или заместен с един или повече хидрокси, СООН, амино, арил, хетероарил или хетероциклоалкил или R¹⁰ и R¹¹ са свързани като образуват четири до седематомен циклоалкилов пръстен, незаместен или заместен с хидрокси, амино или арил, където Z е О, S или СН₂;

«МЙШйММ

······ · ··· ·· ·· · ·· · ····· • · · · · · ·· • ·· · ······ · • •е · · · ··

9 9 9~ 999 9 99 9 9 9 9

R? означава водород;

халоген;

С1_4 алкил;

С1.₄ алкокси;

CF₃;

CN; или

CO₂NH₂ и

R¹² означава водород;

фенил, незаместен или заместен с един или повече С_Ь4 алкил, С_Ь4 алкокси, халоген, хидрокси, СООН, CONH₂;

нафтил;

бифенил;

5- до 7-атомен моно- или 9- до 10-атомен бицикличен хетероциклен пръстен, който може да бъде наситен или ненаситен и който съдържа от един до четири хетероатома избрани от N, О и S;

С1.₄ алкил, незаместен или заместен с един или повече хидрокси, СООН, амино, арил, хетероарил или хетероциклоалкил;

CF₃;

С₃_7 циклоалкил;

С7.12 бициклоалкил; или

Сю-16 трициклоалкил;

и техни фармацевтично приемливи соли.

Един клас съединения и техни фармацевтично приемливи соли са, когато R³ е С_ь4 алкил.

• ft ft··· • · · • · • · • · · •••8 ·:

ft ·· ·· • · · • · ·· • · ·· · • ♦ • · · · ·

Един подклас съединения техни фармацевтично приемливи соли са, когато А е избран от следните радикали:

където Y¹ и Y² независимо един от друг означават водород или

Ci.4 алкил;

R⁴ означава водород;

халоген;

-OCH₂CN;

-OH;

-ZCH₂CO₂H; или

-Z(CHR⁹)i.₃C(O)NR^1(>Rⁿ, където R⁹ е водород или С1.₄ алкил и R¹⁰ и R¹¹ независимо са водород, С₃.₇ циклоалкил, -(CH₂)i_₂NCH₂CH₃ или Ci.₄ алкил, където Z е О, S или СН₂;

R⁵ означава водород;

халоген; или

CF₃.

Група от този подклас съединения и техни фармацевтично приемливи соли са, когато W е Н или R¹.

Подгрупа от тази група съединения и техни фармацевтично приемливи соли са, когато ·· ····

• 9 9 999

99 9 9 99

9 9· 99

9 9 999 9· • · 9 99

999 ,99 9999

R¹ означава R²;

R²(CH2)mC(R¹²)2, където m е 0-3 и всички R¹² са еднакви или различни;

R²C(R¹²)2(CH2)m, където m е 0-3 и всички R¹² са еднакви или различни и (R¹²)2 могат да образуват пръстен с С означен като С₃.₇ циклоалкил;

(R²)2CH(CH2)r, където г е 0-4 и всички R²могат да бъдат еднакви или различни и (R²)2 могат също да образуват пръстен с СН означен като С₃.₇ циклоалкил, С₇_1₂бициклоалкил, Сю-16 трициклоалкил или 5- до 7-атомен моно- или бицикличен хетероциклен пръстен, който може да бъде наситен или ненаситен и който съдържа от един до три хетероатома избрани от групата N, О и S; или

R²O(CH₂)_P, където р е 1-4;

R² и R¹⁴ независимо един от друг означават фенил, незаместен или заместен с един или повече Ci_₄ алкил, С_Ь4 алкокси, халоген, хидрокси или SO₂NH₂;

5- до 7-атомен моно- или 9- до 10-атомен

бицикличен хетероциклен пръстен или нехетероциклен пръстен, съдържащ от един до четири хетероатома избрани от N, О или S и където хетероцикления или нехетероцикления пръстен е незаместен или заместен с халоген или хидрокси;

С1.7 алкил, незаместен или заместен с един или повече хидрокси, СООН, С₃.₇ циклоалкил, CF₃, N(CH₃)₂, -Ci.₃ алкиларил, хетероарил или хетероциклоалкил;

CF₃; или

С₃_₇ циклоалкил, незаместен или заместен с арил; и

R¹² означава мним •in· · · ··· r»»«L<jl·- ··· ··· ·· ·· водород;

Ci.4 алкил, незаместен или заместен с един или повече хидрокси, СООН, амино, арил, хетероарил или хетероциклоалкил.

От тази подгрупа са съединения и техни фармацевтично приемливи соли, където А е

i)

където R⁵ означава водород, флуоро, хлоро и R¹⁰ и R¹¹ независимо са избрани от водород, С₂Н₅,

С₃Н₅, (CH₂)₂N(CH₃)₂, С₃ циклоалкил,

ϋ)

'3

Hi)

Mi

където R⁴ e OH, хлоро, H, -OCH2CN, флуоро, -ОСН2СООН и R⁵ е хлоро или CF3, vi)

R³ е СН₃ или СН₂СН₃;

X е Н или хлоро; и

W означава

PhCH₂CH₂;

(СН₃)₃С-;

НООССН₂;

CF₃CH₂;

(CH₃)₂N(CH₂)₂;

PhCH₂O(CH₂)₂;

PhCH(CH₃);

PhCH₂CH(COOH);

CH₃(CH₂)₅;

PhCH₂;

H;

CH₃(CH₂)₄;

CH₃CH₂CH(CH₃)CH₂;

(Ph)₂CHCH₂;

PhCH₂CH(CH₃);

PhCH₂C(CH₃)₂;

PhCH(CH₃)CH₂;

(CH₃)₂CH;

PhCH(OH)CH₂;

PhC(CH₃)CH₂;

(Ph)₂CHCH₂;

• · · · « ·

π ^N^^(CH2)₂

(СНЖ

η ^1Ч::=^^/ХСН₂СН(СНз)

СН(СН₃)СН₂ т^^^СНССН^СНг

./--------------V

сн₃

Примери на съединения от тази подгрупа са изредени и в следващите таблици 1-4 и включват (отбележете, че метиловота група обичайно е означена като проста връзка към пръстена):

Ph

Ο ·· ·

Конкретен пример е съединението 3-(2фенетиламино)-6-метил-1 -(2-амино-6-метил-5метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон и негови фармацевтично приемливи соли. Конкретна сол на съединението е 3-(2-фенетиламино)-6-метил-1-(2-амино-6-метил-5метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон дихидрохлорид. Тази сол може да се получи в две кристални полиморфни форми означени по-долу като тип А и тип В (виж пример V).

Съединенията съгласно настоящото изобретение могат да имат хирални центрове и съществуват като рацемати,

рацемични смеси и отделни диастереомери или енантиомери с всички изомерни форми, които се включват в настоящото изобретение. Съединенията съгласно настоящото изобретение могат да имат също полиморфни кристални форми и всички те се включват в настоящото изобретение.

Когато някоя променлива се среща повече от един път в някоя част или във формула (I), нейната дефиниция във всеки един случай е независима от нейната дефиниция при всеки друг случай. Също така комбинациите от заместители и/или променливи са допустими само ако такива комбинации водят до стабилно съединение.

Някои абревиатури от описанието са както следва:

Означение

Защитна група

ВОС (Вос)

CBZ (Cbz)

TBS (TBDMS) трет-бутилоксикарбонил бензилоксикарбонил (карбобензокси) трет-бутилдиметилсилил

Активна група

НВТ (НОВТ или HOBt)

1-хидроксибензотриазолхидрат

Означение

ВОР реагент

ВОР-С1

Свързващ реагент бензотриазол-1-илокситрис(диметиламино)фосфониев хексафлуорофосфат бис(2-оксо-3-оксазолидинил)фосфинов хлорид

EDC

1-етил-3-(3-диметиламинопропил) карбодиимид хидрохлорид

• · •irf· · · ···

-··Ψο··· ··* ··· ·* **

Други
(ВОС)₂О (ВОС₂О)	ди-трет-бутилдикарбонат
n-Bu₄N⁺F’	тетрабутиламониев флуорид
nBuLi (n-Buli)	норм-бутиллитий
DMF	диметилформамид
Et₃N (TEA)	триетиламин
EtOAc	етилацетат
TFA	трифлуорооцетна киселина
DMAP	диметиламинопиридин
DME	диметоксиетан
NMM	N-метил морфолин
DPPA	дифенилфосфорилазид
THF	тетрахидрофуран
DIPEA	диизопропилетиламин Аминокиселина
lie	изолевцин
Phe	фенилаланин
Pro	пролин
Ala	аланин
Vai	валии

Както е използван тук, освен където е посочено, алкил се отнася до наситени алифатни въглеводородни групи с права или разклонена верига, с конкретен брой въглеродни атоми (Ме е метил, Et е етил, Рг е пропил, Ви е бутил); алкокси” означава алкилова група с права или разклонена верига с означен брой въглеродни атоми, свързана с кислороден мост; халоген както е използван тук означава флуоро, хлоро, бромо и йодо; и отрицателно натоварен йон е използван за означаване на малка, единична отрицателно натоварена частица

·· · · · · • · · ·· • · · · · · · • · · · • ··· ·· ·· като хлорид, бромид, хидрокси, ацетат, трифлуороацетат, перхлорат, нитрат, бензоат, малеат, сулфат, тартрат, хемитартрат, бензенсулфонат и подобни.

Означението С₃.₇ циклоалкил включва циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклохексил и циклохептил и подобни.

Означението C₇_i₂ бициклоалкил включва

бицикло[2.2.1]хептил (норборнил), бицикло[2.2.2]октил, 1,1,3триметилбицикло[2.2.1]хептил (борнил) и подобни.

Използваният тук арил, освен където е посочен, означава стабилна 6- до 10-атомна моно- или бициклична пръстенна система като фенил или нафтил. Ариловият пръстен може да бъде незаместен или заместен с един или повече Ci_₄нисш алкил; хидрокси; алкокси; халоген; амино. Означението хетероарил се отнася до 5- до 7-атомен ненаситен пръстен съдържащ 1 до 2 хетероатома избрани от Ο, N и S.

Означението хетероцикъл или хетероциклен пръстен, както е използвано тук, освен ако не е посочен, означава стабилен 5- до 7-атомен моно- или бицикличен, или стабилна 7- до 10-атомна бициклична хетероциклена пръстенна система, всеки от пръстените на която може да бъде наситен или ненаситен, и които се състоят от въглеродни атоми и от един до четири хетероатома избрани от Ν, О и S и където азотните или серни хетероатоми могат в даден случай да бъдат оксидирани, а азотният атом може в даден случай да бъде кватернизиран, и включва всяка бициклична група, в която всеки от горедефинираните хетероциклени пръстени е кондензиран с бензенов пръстен. По-специално, полезни са пръстени съдържащи един кислород или сяра, един до четири • ft ft··· ·· · ·· ·· ···· ft · · · · · ft · • · · · ······ · • ftft ft ft ···

..........

азотни атоми, или един кислород или сяра, заедно с един или два азотни атома. Хетероцикленият пръстен може да бъде свързан при който и да е от хетероатомите или въглероден атом, което води до създаване на стабилна структура. Примери за такива хетероциклени групи са пиперидинил, пиперазинил, 2оксопиперазинил, 2-оксопиперидинил, 2-оксопиролодинил, 2оксоазепинил, азепинил, пиролил, 4-пиперидонил, пиролидинил, пиразолил, пиразолидинил, имидазолил, имидазолинил, имидазолидинил, пиридил, пиразинил, пиримидинил, пиридазинил, оксазолил, оксазолидинил, изоксазолил, изоксазолидинил, морфолинил, тиазолил, тиазолидинил, изотиазолил, хинуклидинил, изотиазолидинил, индолил, хинолинил, изохинолинил, бензимидазолил, тиадиазолил, бензопиранил, бензотиазолил, бензоксазолил, фурил, тетрахидрофурил, тетрахидропиранил, тетразол, тиенил, бензотиенил, тиаморфолинил, тиаморфолинил сулфоксид, тиаморфолинил сулфон и оксадиазолил. Морфолино е също като морфолинил.

Фармацевтично приемливи соли на съединенията с формула (I) (под формата на водоразтворими или маслоразтворими или диспергируеми продукти) включват обичайните нетоксични соли като тези получени с неорганични киселини, напр. солна, бромоводородна, сярна, сулфаминова, фосфорна, азотна и подобни, или кватернерни амониеви соли, които се образуват, напр. с неорганични или органични киселини или основи. Примери за присъединителни с киселини соли са ацетат, адипат, алгинат, аспартат, бензоат, бензенсулфонат, бисулфат, бутират, цитрат, камфорат, камфорсулфонат, циклопентанпропионат, диглюконат, ······ · · ·· · · • « · ·· ······ • · · · · · ·· • · · · · · ··· · · • · · ·· · ·

Τ··^1β· - ··· ··· ···· додецилсулфат, етансулфонат, фумарат, глюкохептаноат, глицерофосфат, хемисулфат, хептаноат, хексаноат, хидрохлорид, хидробромид, хидройодид, 2-хидроксиетансулфонат, лактат, малеат,метансулфонат, 2-нафталенсулфонат, никотинат, нитрат, оксалат, памоат, пектинат, персулфат, 3-фенилпропионат, пикрат, пивалат, пропионат, сукцинат, сулфат, тартрат, тиоцианат, тозилат и ундеканоат. Основните соли включват амониеви соли, алкалнометални соли като натриеви или калиеви соли, алкалоземнометални соли като калциеви и магнезиеви соли, соли с органични основи като дициклохексиламиносоли, 1Ч-метил-О-глюкамин и соли с аминокиселини като аргинин, лизин и т.н.. Също, основните азотсъдържащи групи могат да бъдат кватернизирани с такива средства като нисши алкилхалогениди, като метил, етил, пропил и бутил хлориди, бромиди и йодиди; диалкилсулфати като диметил, диетил, дибутил и диамилсулфати, дълговерижни халогениди като децил, лаурил, миристил и стеарил хлориди, бромиди и йодиди; аралкилхалогениди като бензил и фенетил бромиди и други.

Инхибитори на тромбин - терапевтично използване метод на използване

Антикоагулантната терапия е показана за лечение и предотвратяване на различни тромботични състояния, поспециално на коронарните артерии и мозъчносъдовата болест. Специалистите с опит в тази област знаят обстоятелствата изискващи антикоагулантна терапия. Терминът пациент както е използван тук е приет да означава бозайници като примати, включително хора, овце, коне, едър рогат добитък, свине, кучета, котки, плъхове и мишки.

Инхибирането на тромбина е полезно не само в

антикоагулантната терапия на индивиди имащи тромботично състояние, но са полезни и когато се изисква инхибиране на съсирването на кръвта с цел да се предотврати съсирване по време на съхранение на цялостна кръв и да се предотврати съсирване на други биологични образци за изследване или за съхранение. Така, инхибитори на тромбина могат да се прибавят към или да се смесват с всяка среда съдържаща или подозирана, че съдържа тромбин и при която е желателно да се инхибира съсирването, например когато кръв от бозайник се постави в допир с материал избран от групата състояща се от присадки на кръвоносни съдове, стентове, ортопедични протези, сърдечни протези и екстракорпорални системи за кръвообращение.

Съединенията съгласно изобретението са полезни за

лечение или предпазване от венозен тромбоемболизъм (напр. обструкция или оклузия на вена от отделил се тромб; обструкция или оклузия на белодробна артерия от отделен тромб), кардиогенен тромбоемболизъм (напр. обдструкция или оклузия на сърцето от отделен тромб), артериална тромбоза (напр. образуване на тромб вътре в артерията, който може да причини инфаркт на тъкан снабдявана от артерията), атеросклероза (напр. атеросклероза характеризираща се чрез неправилно разпределени липидни отлагания) у бозайници, и за намаляване на склонността на устройства, които влизат в контакт с кръвта да съсирват кръвта.

Примерите на венозен тромбоемболизъм, които могат да бъдат лекувани или предотвратени чрез съединения съгласно изобретението включват обструкция на вена, обструкция на белодробна артерия (белодробен емболизъм), дълбоковенна

·· ···· · · ·· ·· «· · ·· ·· · · ·· • · · · ·· <· • · · · · · ··· ·· • -.1 · · · · ··

-•••23··- ..........

тромбоза, тромбоза свързана с рак и химиотерапия на рака, тромбоза наследена с тромбофилни болести като протеин-С недостатъчност, протеин-Б-недостатъчност, антитромбин III недостатъчност и фактор V Leiden и тромбоза резултат от придобити тромбофилни неразположения като сисистемен лупус еритематозус (възпалително заболяване на свързващата тъкан). Също с оглед венозния тромбоемболизъм, съединения съгласно изобретението са полезни за поддържане на пациенти с постоянен катетер.

Примерите за кардиогенен тромбоемболизъм, който може да бъде лекуван или предотвратен със съединения съгласно изобретението включват тромбоемболичен удар (отделени тромби причиняват неврологични увреждания свързани с увредено мозъчно кръвоснабдяване), кардиогенен тромбоемболизъм свързан със фибрилация на предсърдията (бързо, неправилно подръпвания на мускулните влакна на горните сърдечни камери), кардиогенен тромбоемболизъм свързан с протезни сърдечни клапи, като механични сърдечни клапи и кардиогенен тромбоемболизъм свързан с болест на сърцето.

Примерите на артериална тромбоза включват нестабилна ангина (тежка свиваща болка в гърдите с коронарен произход), инфаркт на миокарда (смърт на клетките на сърдечния мускул дължаща се на недостатъчно кръвоснабдяване), исхемична болест на сърцето (локална анемия дължаща се на обструкция (както при стесняване на артериите) на снабдяването с кръв), реоклузия през време или след перкутанна транслуминална коронарна ангиопластия, рестеноза след перкутанна транслуминална коронарна ангиопластия, ·· ·9·· • · ··

• · * · · • · • ·· ··

оклузия на байпасови присадки на коронарната артерия, и оклузивна мозъчносъдова болест. Също с оглед артериалната тромбоза, съединенията съгласно изобретението са полезни за поддържане на пациенти с артериовенозни канюли.

Примерите за атеросклероза включват атеросклерозата.

Примерите за устройства които влизат в допир с кръвта включват съдови трансплантати, стентове, ортопедични протези, сърдечни протези и системи за екстракорпорално кръвообращение.

Тромбиновите инхибитори съгласно изобретението

могат да се прилагат в такива орални форми като таблети, капсули (всяка от които включва форми със забавено или разпределено във времето освобождаване), пилули, прахове, гранули, елексири, тинктури, суспензии, сиропи и емулсии. По подобен начин те могат да се прилагат във венозни (болуси или инфузионни разтвори), перитонеални, подкожни или мускулни форми, добре известни на обикновените специалисти във фармацията. Ефективно но нетоксично количество от желаното съединение може да се използва като антиагрегационно средство. За лечение на изграждане на фибрин в окото съединенията могат да се прилагат вътреочно или топично както и орално или парентерално.

Тромбиновите инхибитори могат да се прилагат под формата на депо-инжекции или имплантни препарати, които могат да се приготвят по такъв начин, че да позволяват забавено освобождаване на активната съставка. Активната съставка може да се пресова до пелети или малки цилиндри и да се имплантира подкожно или мускулно като депо-инжекция или имплантат.

• · • · • · ·

Имплантатите могат да използват инертни материали като биоразграждащи се полимери или синтетични силикони, например Silastic, силиконов каучук или други полимери произвеждани от Dow-Corning Corporation.

Тромбиновите инхибитори могат да бъдат прилагани също под формата на системи доставящи липосоми, като малки

еднослойни мехурчета и многослойни мехурчета. Липосомите могат да се образуват от различни фосфолипиди, като холестерол, стеариламин или фосфатидилхолини.

Тромбиновите инхибитори могат да бъдат прилагани чрез използване на моноклонални антитела като индивидуални носители към които е свързана молекулата на съединението. Тромбиновите инхибитори могат също да бъдат свързвани с разтворими полимери като целеви носители на лекарството. Такива полимери могат да включват поливинилпиролидон, пиран-съполимер, полихидрокси-пропил-метакриламид-фенол, полихидроксиетил-аспартамид-фенол или полиетиленоксид полилизин заместен с палмитоилни остатъци.

Освен това, тромбиновите инхибитори могат да се свързват с клас от биоразграждащи се полимери полезни за постигане на контролирано освобождаване на лекарството, например, полимлечна киселина, полигликолова киселина, съполимери на полимлечната и полигликоловата киселина, полиепсилон капролактон, полихидроксимаслена киселина, полиортоестери, полиацетали, полидихидропирани, полицианоакрилати и напречно омрежени или амфипатни блок съполимери или хидрогели.

Режимът на дозиране при използване на тромбиновите инхибитори се избира в съгласие с множество фактори • ·

включително типа, вида, възрастта, теглото, пола и медицинското състояние на пациента; тежестта на състоянието което ще се лекува; пътя на приложение; бъбречната и чернодробната функция на пациента; и специфичното съединение или негова сол, които ще се използват. Обикновеният хуманен или ветеринарен лекар могат лесно да определят и предпишат ефективното количество лекарство, което се изисква да се предотврати, противодейства или спре напредването на състоянието.

Оралните дозировки на тромбиновите инхибитори, когато се използват за посочените действия, са в порядъка между около 0,01 mg на kg телесно тегло на ден (mg/kg/ден) до около 30 mg/kg/ден, за предпочитане 0,025-7,5 mg/kg/ден, повече за предпочитане 0,1 -2,5 mg/kg/ден и особено за предпочитане 0,1 - 0,5 mg/kg/ден (освен ако не е указано друго, количествата на активната съставка са на основата на свободна основа). Например, 80 kg пациент ще получи между 0,8 mg/kg/ден и 2,4 g/ден, за предпочитане 2-600 mg/ден, повече за предпочитане 8-200 mg/ден и особено за предпочитане 8-40 mg/kg/ден. Подходящо приготвено лекарство за прилагане веднъж дневно по такъв начин ще съдържа между 0,8 mg и 2,4 g, за предпочитане между 2 mg и 600 mg, повече за предпочитане между 8 mg и 200 mg и особено за предпочитане 8 mg и 40 mg, например 8 mg, 10 mg, 20 mg и 40 mg. Благоприятно, тромбиновите инхибитори могат да се прилагат в разделни дози на два, три или четири пъти дневно. За приложение два пъти на ден, подходящо приготвеният медикамент ще съдържа между 0,4 mg и 4 g, за предпочитане между 1 mg и 300 mg, повече за ·· ····

* I * · · · · ·

«..27· - .:. ·:.....

предпочитане между 4 mg и 100 mg и особеноза предпочитане 4 mg и 20 mg, например 4 mg, 5 mg, 10 mg и 20 mg.

Венозно, пациентът трябва да получи активната съставка в количества достатъчни да осигурят между 0,025-7,5 mg/kg/ден, за предпочитане 0,1-2,5 mg/kg/ден и повече за предпочитане 0,1-0,5 mg/kg/ден.

Такива количества могат да бъдат прилагани по много подходящи начини, например големи обеми от ниски концентрации на активната съставка през време на удължен период от време или няколко пъти на ден ниски обеми с високи концентрации на активната съставка през време на кратък период от време, напр. веднъж дневно. Типично, обичайна венозна готова форма може да се приготви да съдържа концентрация на активната съставка между около 0,01-1,0 mg/ml напр. 0,1 mg/ml, 0,3 mg/ml и 0,6 mg/ml и да се прилага в количества за деня между 0,01 ml/kg тегло на пациента и 10,0 ml/kg тегло на пациента напр. 0,1 ml/kg, 0,2 ml/kg, 0,5 ml/kg. В един пример, 80 kg пациент, който получава 8 ml два пъти на ден готова венозна форма с концентрация на активната съставка 0,5 mg/ml, получава 8 mg активна съставка на ден. Като буфери могат да се използват глюкуронова киселина, L-млечна киселина, оцетна киселина, лимонена киселина или всяка фармацевтично приемлива киселина/конюгат база с подходящ буфериращ капацитет при обхват на pH приемлив за венозно приложение. Разтворимостта на лекарството трябва да се вземе предвид при този избор. Изборът на подходящ буфер и pH на формата, в зависимост от разтворимостта на лекарството, което ще се прилага лесно се прави от лице имащо обичайния опит в областта.

Съединенията могат също да се прилагат в назални форми чрез топична употреба на подходящи назални носители или чрез трансдермални пътища, като се използват форми на трансдермални кожни пластири добре известни на обикновените специалисти от областта. За да бъде приложено във формата на трансдермална система за освобождаване, прилагането на дозата разбира се ще бъде по-скоро непрекъснато отколкото прекъснато през време на режима на дозиране.

Тромбиновите инхибитори обикновено се прилагат като активни съставки в смес с подходящи фармацевтични разредители, ексципиенти или носители (колективно наричани тук носещи материали) подходящо избрани по отношение на замислената форма на приложение, тоест орални таблети, капсули, еликсири, сиропи и подобни и съвместими с обичайните фармацевтични практики.

Например, за орално приложение под формата на таблета или капсула, активната лекарствена съставка може да се комбинира с орален, нетоксичен, фармацевтично приемлив, инертен носител като лактоза, нишесте, захароза, глюкоза, метилцелулоза, магнезиев стеарат, дикалциев фосфат, калциев сулфат, манитол, сорбитол, и подобни; за орално приложение в течна форма, съставките на оралното лекарство могат да се комбинират със всеки орален, не-токисичен, фармацевтично приемлив инертен носител като етанол, глицерол, вода и подобни. Нещо повече, когато е желателно или необходимо, подходящи свързващи средства, смазващи средства, разпадащи средства и оцветители също могат да се включват в сместа. Подходящите свързващи средства включват нишесте, желатина, природни захари като глюкоза или бета-лактоза, царевични

подсладители, природни и синтетични гуми като акациева, трагаканта или натриев алгинат, карбоксиметилцелулоза, полиетилен гликол, восъци и подобни. Смазващите средства използвани в тези дозирани форми включват натриев олеат, натриев стеарат, магнезиев стеарат, натриев бензоат, натриев ацетат, натриев хлорид и подобни. Разпадащите средства включват без ограничение, нишесте метилцелулоза, агар, бентонит, ксантанова гума и подобни.

Типични таблетни ядра подходящи за прилагане на тромбинови инхибитори се състоят от, но без ограничение само до тях, следните количества стандартни съставки:

Предложени количества на състави за ексципиенти в непокрити таблетни ядра

	Ексципиент	Общо количество %	Предпочитано количество %	Особено предпочитано количество %
	Манитол	10-90	25-75	30-60
	Микрокристална	10-90	25-75	30-60
целулоза
	Магнезиев стеарат	0,1-5,0	0,1-2,5	0,5-1,5

Манитолът, микрокристалната целулоза и магнезиевият стеарат могат да бъдат заместени с алтернативни фармацевтично приемливи помощни вещества.

Тромбиновите инхибитори могат също да бъдат прилагани едновременно с подходящи антитромбоцитни средства, включително, но без ограничение само до тях, фибриноген рецепторни антагонисти (напр. да се лекува или • · · · ······· • · · · · · · · • ·· ······ ·· ··

- предотврати нестабилна ангина или да се предотврати реоклузия след ангиопластия и рестеноза), антикоагуланти, като аспирин, тромболитични средства като плазминоген активатори или стрептокиназа, за да се постигнат синергистични ефекти в лечението на различни съдови патологии или понижаващи

липидите средства включително антихиперхолестеремични средства (напр. HMG СоА редуктазни инхибитори като ловастатин, HMG СоА синтазни инхибитори и пр.) за лечение или предотвратяване на атеросклерозата. Например, пациенти страдащи от заболяване на коронарните артерии и пациенти подложени на ангиопластични процедури могат да се подобрят от едновременно прилагене на фибриноген рецепторни антагонисти и тромбинови инхибитори. Тромбиновите инхибитори също увеличават ефективността на тромболитична реперфузия с посредничеството на тъканен плазминогенен активатор. Тромбиновите инхибитори могат да се прилагат първи след образуване на тромб и след това да се приложи активатор на тъканния плазминоген или друг плазминогенен активатор.

Типичните дози на тромбиновите инхибитори съгласно изобретението в комбинация с други подходящи антитромбоцитни средства, антикоагулантни средства или тромболитични средства могат да бъдат същите както дозите на тромбиновите инхибитори прилагани без едновременно прилагане на допълнителни антитромбоцитни средства, антикоагулантни средства или тромболитични средства или могат да бъдат по същество по-малки от тези дози на тромбинови инхибитори приложени без едновременно приемане на допълнителни антитромбоцитни средства, антикоагулантни йалаай

• · · · · · • · · · • · • · · • · ·

-•••31”- · средства или тромболитични средства, в зависимост от терапевтичните нужди на пациента.

Примери за изпълнение на изобретението

Следващите методи за синтез могат да се използват за получаване на съединенията съгласно изобретението.

Следващите примери илюстрират изобретението и не ограничават обхвата и замисъла на изобретението.

Метод I (описан в пример 1)

Изходен алиламин се кондензира с ацеталдехид и цианид в етап А като се получава аминонитрил. Той взаимодейства в етап В с оксалилхлорид съгласно метод на Hoornaert [J. Heterocyclic Chem., 20, 919, (1983)] като се получава пиразинон. Олефинът се разцепва окислително с рутениев тетраоксид и полученият алдехид се превръща в киселината с оксидиращо средство като хромена киселина в етап С. След това 3-хлорогрупата се замества с амониев еквивалент, в случая р-метоксибензиламин в етап D. Полученият хлор се отстранява чрез редукция с ранейникел в етап Е и в етап F рметоксибензиловата група се отстранява чрез третиране със силна киселина като TFA. Накрая, в етап G киселината се свързва с подходящ амин, в случая етил-2-аминометил-4хлорофеноксиацетамид като се получава крайният продукт (метод за получаване на този амин е дадено по-долу).

Метод I (описан в пример 1) ·· ···· • · • · • « • · · -зг ·

сносно

KCN.HCI

EtOH.HjO ^NH* етап A (СОС1)₂

СдНдС^ етап В

4- MeOPhCH₂NH₂Et₃N диоксан етап D

Амидното свързване, напр. етап G, за да се получат съединенията съгласно изобретението, може да се извърши по карбодиимидния метод с реагенти като дициклохексилкарбодиимид, или 1-етил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид. Други методи за образуване на амидна или пептидна връзка включват, но не се ограничават до тях, синтетични начини през киселинен хлорид, азид, смесен анхидрид или активиран естер. Обичайно, амидното свързване се извършва в разтвор, но може да се използва и синтез в твърда фаза по класически метод на Merrifield. Прибавянето или отстраняването на една или повече защитни групи е също обичайна практика.

Модификации на метода осигуряват различни W, R³, X и А групи в обхвата на широката претенция по-долу, при използване на подходящ реагент или подходящ заместен изходен продукт в дадения етап на синтеза. Например, изходният алдехид в етап А може да има като странична верига етил, изопропил, циклопропил, трифлуорометил и подобни, за да се получат различните значения за R³. По подобен начин W групи могат да се получат при използване на подходящ амин в етап D. Различни X групи могат да се получат при отпадане на етап Е и при използване на реагент като оксалилбромид в етап В. Подходящ избор на амин в етап G осигурява получаване на различни значения на А. Очевидни варианти и модификации на метода за получаване на техни подобни и очевидни варианти, са несъмнени за специалиста в тази област.

Метод за получаване на етил-2-аминометил-4 хлорофеноксиацетамид

nh₂oh.hci

Na₂CO₃,EtOH/H₂O етап A

HC<

Cl

H₂,Rh/C

ЕЮН.НгвОд етап В

Модификации на този метод осигуряват различни R⁴ и R⁵ групи в обхвата на широката претенция по-долу при използване на подходящ реагент и подходящ заместен изходен продукт в дадения етап на синтеза. Например, подходящ избор на амин в етап F осигурява получаването на различни заместители R¹⁰ и R¹¹. Очевидни варианти и модификации на

метода за получаване на техни подобни и очевидни варианти, са несъмнени за специалиста в тази област.

Етап А: 4-хлоросалицалдехидоксим

Разтвор на хидроксиламин хидрохлорид (16,7 g, 0,24 mol) и натриев карбонат (12,7 g, 0,12 mol) във вода (120 ml) се прибавя към разбъркван разтвор на 4-хлоросалицалдехид (25,0 g, 0,16 mol) в етанол (160 ml) и полученият разтвор се нагрява под обратен хладник. След 1 h реакционната смес се охлажда, прибавя се вода (320 ml) и получената кристална утайка се изолира чрез филтриране. Второ количество се събира по подобен начин и обединените количества твърдо вещество се суши като се получава съединението съгласно заглавието.

^lH NMR (400 Mz, CDCI3) d 6,92 (d, J=8,8Hz, 1H), 7,15 (d, J=2,6Hz, 1H), 7,23 (dd, J=2,6 и 8,8Hz, 1H), 7,26 (s, 1H), 8,16 (s, 1H), 9,71 (s, 1H).

Етап В: 2-хидрокси-5-хлоробензиламин

Смес от 4-хлоросалицалдехидоксим (10 g, 58,3 mmol) и 5% Rh/C (2,0 g) в етанол (100 ml) съдържащ концентрирана сярна киселина (10 ml) се разклаща в апарат на Parr под Н₂ (60 psi) в продължение на 24 h. Прибавя се вода (100 ml) и сместа се филтрира през целит. Филтратът се концентрира докато продуктът започне да кристализира из разтвора. Твърдият продукт се събира чрез филтриране и филтратът отново се концентрира, прибавя се вода като се получава второ количество, което се обединява с първото като се получава, след сушене съединението съгласно заглавието, сулфатната сол.

^lH NMR (400 Mz, CD3OD) d 4,07 (s, 2Н), 6,88 (d,

J=8,6Hz, 1H), 7,25 (dd, J=2,6 и 8,6Hz, 1H), 7,31 (d, J=2,6Hz, 1H).

Етап C: М-трет-бутоксикарбонил-2-хидрокси-5·· ····

хлоробензиламин

Смес от 2-хидрокси-5-хлоробензиламин (1,22 g, 4,77 mmol като бисулфатна сол), (ВОС)₂О (1,56 g, 7,16 mmol) и Nметилморфолин (1,05 ml, 9,54 mmol) в DMF (10 ml) се разбърква в продължение на 5 h при стайна температура. Реакционната смес се разпределя между вода и етилацетат и органичният слой се промива с 5%-ен разтвор на KHSO₄ (2 пъти), разтвор на натриев хидрогенкарбонат, суши се (Na₂SO₄) и се изпарява под вакуум до твърдо вещество. Суровият продукт се прекристализира из етилацетат/хексан (1:5, 12 ml) като се получава съединението съгласно заглавието.

^lH NMR (400 Mz, CDC1₃) d 1,44 (s, 9Н, t-Bu), 4,17 (d, J=6,8Hz, 2H, CH₂), 5,22 (br t, 1H, NH), 6,87 (d, J=8,6Hz, 1H, H3), 7,03 (d, J=2,6Hz, 1H, H-6), 7,15 (dd, >2,6 и 8,6Hz, 1H, H-4).

Етап D: етил-2-трет-бутоксикарбониламинометил-4хлорофеноксиацетат

Смес от 1\[-трет-бутоксикарбонил-2-хидрокси-5хлоробензиламин (730 mg, 2,83 mmol), Cs₂CO₃ (923 mg, 2,83 mmol) и етилбромоацетат (0,314 ml, 2,83 mmol) в DMF (5 ml) ce разбърква в продължение на 2 h. Суровата реакционна смес се разпределя между етилацетат и вода и органичният слой се промива с разтвор на натриев хлорид, суши се (Na₂SO₄) и се изпарява под вакуум до масло, което се използва в следващия етап.

Етап Е: 2-трет-бутоксикарбониламинометил-4хлорофеноксиоцетна киселина

Продуктът от етап D се суспендира в 1:1:1 метанол/ТНЕ/вода (9 ml) и се прибавя литиев хидроксидхидрат (126 mg, 3,0 mmol). След 16 h леснолетливите компоненти се

отстраняват под вакуум и разтворът се разрежда с вода и се промива с етилацетат, добавя се достатъчно разтвор на натриев хлорид, за да се диспергира емулсията. Водният слой се подкислява с 5%-ен разтвор на KHSO₄ и се екстрахира с метиленхлорид, който след това се суши (Na₂SO₄) и изпарява под вакуум като се получава съединението съгласно заглавието като твърдо вещество.

*Н NMR (400 Mz, CDCb) d 1,44 (s, 9Н, t-Bu), 4,35 (br s, 2H, NCH₂), 4,62 (s, 2H, OCH₂), 5,04 (br s, 1H, NH), 6,74 (d, J=7,9Hz, 1H, H-3), 7,20 (d, J=2,6Hz, 1H, H-6), 7,24 (d, неясен, 1H, H-4).

Етап F: етил-2-трет-бутоксикарбониламинометил-4хлорофеноксиацетамид

EDC хидрохлорид (249 mg, 1,3 mmol) се прибавя към разбърквана смес от 2-трет-бутоксикарбониламинометил-4хлорофеноксиоцетна киселина (316 mg, 1,0 mmol), НОВТ (176 mg, 1,3 mmol), етиламинхидрохлорид (106 mg, 1,3 mmol) и Nметилморфолин (0,396 ml, 3,6 mmol) в DMF (4 ml) и сместа се разбърква в продължение на 16 h. Реакционната смес се разпределя между етилацетат и 5%-ен разтвор на KHSO₄ и органичният слой се промива с 5%-ен разтвор на KHSO₄, вода, NaHCO₃ разтвор и разтвор на натриев хлорид, суши се (Na₂SO₄) и су изпарява под вакуум като се получава твърдо вещество (333 mg), което се използва в следващия етап.

Етап G: етил-2-аминометил-4-хлорофеноксиацетамид

Етил-2-трет-бутоксикарбониламинометил-4хлорофеноксиацетамид от етап F се разтваря в 2:1 метиленхлорид /TFA (3 ml) и след 15 min разтворителят се изпарява под вакуум. Остатъкът се разтваря във вода и

ШйШ ······ · · ·· · · • » · ·· ·· ···· • · · · · · ·· • · · · · · ··· · · ··· · · ···

-••3*8 *·- ..........

разтворът се промива с метиленхлорид (два пъти). Водният слой след това се алкализира с наситен разтвор на натриев карбонат и към разтвора се прибавя NaCl. Сместа се екстрахира с етилацетат и органичният слой се суши (Na₂SO₄) и изпарява под вакуум като се получава съединението съгласно заглавието като кристално твърдо вещество.

^rH NMR (300 MHz, CDCI3) d 1,12 (t, J=7,3Hz, ЗН, Me), 1,54 (s, 9H, t-Bu), 3,31 (q, J=7,3 Hz, 2H, CH₂Me), 3,90 (s, 2H, NCH₂), 4,58 (s, 2H, OCH₂), 6,80 (d, J=8,3Hz, 1H, H-3), 7,19-7,23 (m, 2H, H-4, H-6), 8,01 (br s, 1H, CONH).

Метод 2 (описан в пример III)

Алтернативен метод за получаване на съединения от настоящото изобретение е описан в пример II.

Киселината получена съгласно метод I, етап С, се свързва с подходящ амин, в този случай 2-трет-бутоксикарбониламино-5-аминометил-6-метилпиридин (метод за получаване на този амин е посочен по-долу) в етап А. След това

3-хлорогрупата се замества с подходящ амин, в случая фенетиламин в етап В и ВОС групата се отстранява в етап С като се получава крайният продукт.

Метод 2 (описан в пример II)

CI

О

EDC.HOBT

NMM.DMF етап А

Модификации на метода осигуряват различни W, R³, X и А групи в обхвата на широката претенция по-долу при използване на подходящ реагент или подходящо заместен изходен продукт в дадения етап на синтеза. Очевидни варианти и модификации на метода за получаване на подобни и очевидни варианти са несъмнени за специалиста от тази област.

Метод за получаване на 2-грет-бутоксикарбониламино-5-аминометил-6-метилпиридин

Получаване на 2-амино-5-циано-6-метилпиридин

Смес от 6-амино-3-бромо-2-метилпиридин (20,0 g,

0,107 mol) (Maybridge) и меден (I) цианид (11,0 g, 0,123 mol) в DMF (25 ml) се нагрява под обратен хладник в продължение на 4 h. DMF се изпарява под вакуум и остатъкът се разпределя между етилацетат и 10%-ен разтвор на натриев цианид. Органичният слой се промива с 10%-ен разтвор на натриев цианид и разтвор на натриев хлорид, суши се (Na₂SO₄) и се изпарява под вакуум до кафяво твърдо вещество. Последното се разтваря в минимално количество етилацетат и продуктът се утаява с прибавяне на хексан. Сместа се филтрира като се получава съединението съгласно заглавието като кафяв прах.

^lH NMR (CDC1₃) d 2,56 (s, ЗН), 4,97 (br s, 2H), 6,33 (d, J=8,6Hz, 1H), 7,54 (d, J=8,6Hz, 1H).

Получаване на 2-трет-бутоксикарбониламино-5-циано-

6-метилпиридин

Смес от 2-амино-5-циано-6-метилпиридин (10,0 g, ® 75,1 mmol), (ВОС)₂О (16,39 g, 75,1 mmol), триетиламин (11,5 ml,

82,6 mmol) и DMAP (0,92 g, 7,5 mmol) в метиленхлорид (200 ml) се разбърква 3 h. Прибавя се още триетиламин (4,22 ml) и (ВОС)₂О (1,64 g) и след 16 h реакционната смес се разрежда с етилацетат и се промива с 1М АсОН (3 пъти), суши се (Na₂SO₄) и се изпарява под вакуум като се получава тъмно кофяво твърдо вещество. Суровият продукт се пречиства чрез колонна хроматография (10% етилацетат/хексан) като се получава съединението съгласно заглавието като бяло твърдо вещество.

··· ·· ···· • · • · • · · • л, · ·· ·· ·· • · · · • · ·· • ··· · · • ·· ·· ^lH NMR (CDC1₃) d 1,52 (s, 9H), 2,62 (s, 3H), 7,46 (br s, 1H), 7,80 (d, J=8,8Hz, 1H), 7,88 (d, J=8,8Hz, 1H).

Получаване на 2-трет-бутоксикарбониламино-5аминометил-6- метил пиридин

Смес от 2-трет-бутоксикарбониламино-5-циано-6метилпиридин (14,68 g, 62,9 mmol) и 10% Pd/C (1,5 g) в ледена оцетна киселина (150 ml) се разклаща на апарат на Parr при 60 psi в продължение на 88 h.

Реакционната смес се филтрира през целит и се изпарява под вакуум. Остатъкът се разтваря във вода и разтворът се промива с метиленхлорид (2 пъти), след това се алкализира с натриев карбонат и се екстрахира с етилацетат (2 пъти). Обединените етилацетатни слоеве се сушат (Na₂SO₄) и изпаряват под вакуум до твърдо вещество. Суровият продукт се прекристализира (етилацетат/хексан) като се получава

съединението съгласно заглавието.

^lH NMR (CDC1₃) d 1,50 (s, 9Н), 2,43 (s, ЗН), 3,81 (s, 2Н), 7,23 (br s, 1H), 7,57 (d, J=8,3Hz, 1H), 7,70 (d, J=8,3Hz, 1H).

Модификации на метода осигуряват различни Y¹ и Y²групи в обхвата на широката претенция по-долу при използване на подходящ реагент или подходящо заместен изходен продукт в дадения етап на синтеза. Очевидни варианти и модификации на метода за получаване на подобни и очевидни варианти са несъмнени за специалиста от тази област.

Метод 3 (описан в пример V)

Естер на глицин, в случая бензилов естер, се кондензира с ацеталдехид и цианид в етап А като се получава аминонитрил. Той реагира в етап В с оксалилхлорид като се

• · · • · · · • · ·· ·· получава пиразинон. След това 3-хлорогрупата се замества с подходящ амин, в случая фенилетиламин, етап С. Естерът се хидролизира в етап D и останалият хлор се отстранява в етап Е чрез хидролиза. Киселината след това се кондензира в етап F с подходящ амин, в случая 2-амино-5-аминометил-6 метилпиридин (метод за получаване на този амин е показан по долу) като се получава крайният продукт.

H^Pd/C КОН

1. EDC.HOBT NMM.DMF

2. HCI,ΒΟΗ

N Η

Ο

Получаване на 2-амино-5-аминометил-6-метилпиридин

дихидрохлорид

Смес от 2-амино-5-циано-6-метилпиридин (4,0 g, 30,0 mmol) и 10% Pd/C (3,08 g) в етанол (80 ml), метанол (30 ml), концентрирана НС1 (6 ml) и вода (10 ml) се разклаща на апарат на Parr при 60 psi в продължение на 25 h. Реакционната смес се филтрира през целит, промива се с 1:1 етанол/метанол и се изпарява под вакуум до твърдо вещество, което се превръща в прах с 5:1 етилацетат/етанол като се получава съединението съгласно заглавието (5,95 g, 94%).

^lH NMR (CD₃OD) d 2,58 (s, ЗН), 4,12 (s, 2Н), 6,92 (d, J=9,2Hz, 1Н), 7,93 (d, J=9,2Hz, 1H).

Очевидни варианти и модификации на метода за получаване на подобни и очевидни варианти са несъмнени за специалиста от тази област.

Метод 4

Продуктът от етап Е, метод 3 се кондензира с подходящо защитен амин, например 2-трет-бутоксикарбониламино-5-аминометил-6-метилпиридин, след което защитната група се отстранява и се получава крайният продукт. Очевидни варианти и модификации на метода за получаване на подобни и очевидни варианти са несъмнени за специалиста от тази област.

Метод 5 (описан в пример LXXXII)

Изходният алиламин се кондензира с ацеталдехид и цианид в етап А като се получава аминонитрил. Той взаимодейства в етап В с оксалилхлорид съгласно метода на Hoornaert [J. Heterocyclic Chem., 20, 919, (1983)] като се получава пиразинон. Олефинът се разцепва окислително с рутениев тетраоксид и полученият алдехид се превръща в

киселина с оксидиращо средство като хромена киселина в етап С. След това 3-хлорогрупата се замества с подходящ амин, в случая фенилетиламин, в етап D, а другият хлор след това се отстранява чрез редукция с ранейникел в етап Е. Киселината се свързва в етап F с подходящ амин, в случая З-аминометил-6ВОС-амино-2-метилпиридин и ВОС-групата се отстранява като се използва силна киселина като НС1 газ в етап G и се получава крайният продукт.

(COCI) 2

C₆H₄CI₂

CH₃CHO

KCN.HCI

EtOH.Hp етап A етап B

Cl

PhCHQCH2NH₂

Et₃N, диоксан

1. RuCl3,NalO₄

CCU.CH3CN.H2O

2. CrO₃,H2SO₄,ацетон етап C етап D

O

RaNi.NaOH етап E

EDC.HOBT NMM.DMF етап F

Амидното свързване, етап F, за получаване на съединения съгласно изобретението, може да се извършши по • ·

карбодиимидния метод с реагенти като дициклохексил-

карбодиимид, или 1-етил-3-(3-диметиламинопропил) карбодиимид. Други методи за образуване на амидна или пептидна връзка включват, но не се ограничават само до тях синтетични начини през киселинен хлорид, азид, смесен анхидрид или активиран естер. Обичайно амидното свързване се провежда във фаза на разтвор, но твърдофазна синтеза по класическата Merrifield техника също може да се използва. Прибавянето или отстраняването на една или повече защитни групи е също обичайна практика.

Модификации на метода осигуряват различни W, R³, X и А групи в обхвата на широката претенция по-долу при използване на подходящ реагент или подходящо заместен изходен продукт в дадения етап на синтеза. Например изходният алдехид в етап А може да има като странична верига етил, изопропил, циклопропил, трифлуорометил и подобни, за да се получат различни стойности на R³. Подобно, различни W групи могат да се получат като се използва подходящ амин в етап D. Различни X групи могат да се получат при изпускане на етап Е и при използване на реагент като оксалилбромид в етап В. Подходящ избор на амин в етап F може да осигури получаване на различни значения на А. Така, както е описано в пример VI, продуктът от етап Е се свързва с производно на 2хидроксибензиламин, в случая етил-(2-аминометил-4хлорофенокси)ацетамид като се получава крайният продукт. Очевидни варианти и модификации на метода за получаване на подобни и очевидни варианти са несъмнени за специалиста от тази област.

• · • ·

-»••47··Примери за изпълнение на изобретението

Следващите примери илюстрират изобретението както е разглеждано от изобретателите, без да се ограничава неговия обхват и замисъл.

ПРИМЕР I

Получаване на 3-амино-6-метил-1-[етил-(2-метилкарбоксамидометил-4-хлорофенокси)ацетамидо]-2-пиразинон

Етап А: а-(алиламино)пропионитрил хидрохлорид Концентрирана НС1 (20 ml, 0,24 mol) се прибавя към разбъркван разтвор на алиламин (36 ml, 0,48 mol) във вода (100 ml) и етанол (60 ml) при 0°С. След това се прибавят калиев цианид (15 g, 0,23 mol) и ацеталдехид (11,2 ml, 0,20 mol) и сместа се нагрява под обратен хладник. След 15 h летливите компоненти се отстраняват под вакуум и полученият разтвор се насища с NaCl и се екстрахира с метиленхлорид (3 пъти). Обединените екстракти се сушат (Na₂SO₄) и се изпарява под вакуум като се получава масло, което се разтваря в IM НС1 (200 ml). Разтворът се изпарява под вакуум, дестилира се ацеотропно с толуен/метанол като се получава твърд продукт, който се нагрява под обратен хладник в етилацетат (200 ml), охлажда се, филтрира и суши като се получава съединението съгласно заглавието като НС1 сол.

• · · · ······· • · · · · ··· ί··4&· - ..........

*Η NMR (400 MHz, CD₃OD) d 1,72 (d, J=7,0Hz, 3H, CH₃, 3,78-3,90 (m, 2H, CH₂), 4,63 (q, J=7,0Hz, a-CH), 5,56-5,66 (m, 2H, CHCH₂), 5,91-6,02 (m, 1H, CHCH₂).

Етап В: 1-алил-3,5-дихлоро-6-метилпиразинон

Разбърквана смес от оксалилхлорид (30,5 ml, 0,35 mol) и а-(алиламино)пропионитрил хидрохлорид (10,26 g, 70 mmol) в о-дихлоробензен (100 ml) се нагрява до 100°С в продължение на 15 h. Разтворителят се изпарява под вакуум и оставащото черно масло се пречиства чрез флаш хроматография върху силикагел (елуиране с 30% етилацетат/хексан) като се получава съединението съгласно заглавието като жълтокафяво кристално твърдо вещество.

^ХН NMR (400Mz, CDC1₃) d 2,48 (s, ЗН, СН₃), 4,75 (m, 2Н, NCH₂), 5,18 (m, 1Н, CHCH_AH_B), 5,33 (m, 1H, СНСН_АНв), 5,85-5,92 (m, 1H, CHCH_AH_B).

Етап C: 3,5-дихлоро-6-метил-1-карбоксиметилпиразинон

Рутениев трихлоридхидрат (114 mg, 0,547 mmol) се прибавя към разбърквана смес от 1-алил-3,5-дихлоро-6метилпиразинон (5,45 g, 24,88 mmol) и натриев перйодат (21,82 g, 0,102 mol) във вода (75 ml), ацетонитрил (50 ml) и въглероден тетрахлорид (50 ml). След 3 h реакционната смес се екстрахира с метиленхлорид (4 пъти) и обединените екстракти се сушат (Na₂SO₄) и изпаряват под вакуум до сироп. Спектърът ^lH NMR (CDC1₃) на този продукт показва 1:1 смес от киселината и алдехида. Суровата смес се разтваря в ацетон (50 ml) и се прибавя реагент на Jones (2,7 М) докато реакционната смес стане оранжева. Реакционната смес след това се екстрахира в етилацетат, който след това се промива с разтвор на натриев ·· ···· • ·

хлорид, суши се (Na₂SO₄) и се изпарява под вакуум като се получава съединението съгласно заглавието като жълтокафяво твърдо вещество.

*Н NMR (400 Mz, DMSO) d 2,41 (s, ЗН, Me), 4,86 (s, 2H, CH₂).

Етап D: 3-(4-метоксибензиламино)-5-хлоро-6-метил-1карбоксиметилпиразинон

Към разбъркван разтвор от 3,5-дихлоро-6-метил-1карбоксиметилпиразинон (0,50 g, 2,11 mmol) в диоксан (6 ml) се прибавя 4-метоксибензиламин (0,83 ml, 6,33 mmol) и получената смес се нагрява до 60°С. След 16 h реакционната смес се разпределя между хлороформ и 10%-ен разтвор на лимонена киселина и органичният слой се суши (Na₂SO₄) и изпарява под вакуум. Суровият продукт се пречиства чрез флаш хроматография (елуира се с 2% толуен/метанол/хлороформ/2% оцетна киселина) като след ацеотропно сушене с толуен/метанол се получава съединението съгласно заглавието като бяло твърдо вещество.

^!Н NMR (300 Mz, CD₃OD) d 2,27 (s, ЗН, ССН₃), 3,76 (s, ЗН, ОСН₃), 4,46 (s, 2Н, СН₂), 4,87 (s, 2Н, СН₂), 6,85 (d, J=8,8Hz, 1Н, арилни Η), 7,27 (d, J=8,8Hz, 1H, арилни H).

Етап Е: 3-(4-метоксибензиламино)-6-метил-1карбоксиметилпиразинон

Ранейникелова сплав (2 g) се прибавя към разбъркван разтвор на 3-(4-метоксибензиламино)-5-хлоро-6-метил-1карбоксиметилпиразинон (448 mg, 1,33 mmol) в 1:1 метанол/1М NaOH (50 ml). След 2 h реакционната смес се филтрира през целит, промива се с 1:1 метанол/вода и филтратът се изпарява под вакуум до бяло твърдо вещество. Неарганичните соли се

отстраняват чрез препаративна HPLC (Cl8 вода/ацетонитрил/ 0,1% TFA градиент) като се получава TFA солта на съединението съгласно заглавието като пяна.

^!Н NMR (300 Mz, CDCI₃) d 2,15 (s, ЗН, ССН₃), 3,81 (s, ЗН, ОСНз), 4,63 (s, 4Н, 2хСН₂), 6,57 (s, 1Н, пиразинон Н), 6,91 (d, J=8,7Hz, 1Н, арил Η), 7,30 (d, J=8,7Hz, 1H, арил H).

Етап F: З-амино-б-метил-1-карбоксиметилпиразинон Разбъркван разтвор на 3-(4-метоксибензиламино)-6метил-1-карбоксиметилпиразинон (387 mg, 0,927 mmol) в TFA (8 ml) се нагрява под обратен хладник в продължение на 6 h. Реакционната смес се изпарява под вакуум ацеотропно с метиленхлорид и етилацетат. Прибавя се метанол към суровия продукт и полученото твърдо вещество се филтрира и суши като се получава TFA солта на съединението съгласно заглавието.

*Н NMR (400 MHz, CD3OD) d 2,21 (s, ЗН, CH₃), 4,81 (s, 2Н, СН₂), 6,56 (s, 1Н, пиразинон Н).

Етап G: 3-амино-6-метил-1-[етил-(2-метилкарбоксамидометил-4-хлорофенокси)ацетамидо]-2-пиразинон

EDC хидрохлорид (67 mg, 0,35 mmol) се прибавя към смес от 3-амино-6-метил-1-карбоксиметилпиразинон (80 mg, 0,27 mmol), НОВТ (47 mg, 0,35 mmol), етил-(2-аминометил-4хлорофенокси)ацетамидо (85 mg, 0,35 mmol) и Nметилморфолин (0,11 ml, 0,97 mmol) в DMF (1 ml) и сместа се разбърква в продължение на 16 h. Към реакционната смес се прибавя вода и утаеното твърдо вещество се събира чрез филтриране и се суши под вакуум. Суровият продукт се суспендира в етилацетат, нагрява се под обратен хладник, охлажда се и се филтрира като след сушене се получава

съединението съгласно заглавието като бяло кристално твърдо вещество, т.т. >200°С.

^lH NMR (300 Mz, DMSO) d 0,97 (t, J=7,2Hz, ЗН, CH₂CH₃), 2,02 (s, ЗН, СН₃), 3,09 (q, J=6,8Hz, 2Н, СН₂СН₃), 4,37 (d, J=5,6Hz, 2Н, CONHCH₂), 4,47 (s, 2H, CH₂CO), 4,63 (s, 2Н, СН₂СО), 6,30 (br s, 2Н, NH₂), 6,51 (s, IH, пиразинон H-5), 6,94 (d, J=9,3Hz, IH, фенокси H-6), 7,28 (m, 2H, остатък), 7,98 (br t, IH, NH), 8,67 (br t, IH, NH); MS (FAB) 408 (M+l)⁺.

ПРИМЕР II

Получаване на 3-амино-6-метил-1-(2-амино-6-метил-5метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон

NH₂

Съединението съгласно заглавието се получава като НС1 сол от 3-амино-6-метил-1-карбоксиметилпиразинон и 2амино-5-аминометил-6-метилпиридин дихидрохлорид като се използва процедурата от пример I, етап G, т.т. >200°С; MS (FAB) 303 (M+l)⁺.

ПРИМЕР III

Получаване на 3-(2-фенетиламино)-5-хлоро-6-метил-1(2-амино-6-метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон

Етап А: 3,5-дихлоро-6-метил-1-(2-третбутоксикарбониламино-6-метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон

EDC хидрохлорид (249 mg, 1,3 mmol) се прибавя към разбърквана смес от 3,5-дихлоро-6-метил-1-карбоксиметилпиразинон (237 mg, 1,0 mmol), НОВТ (176 mg, 1,3 mmol), 5аминометил-2-трет-бутоксикарбониламино-6-метилпиридин (237 mg, 1,0 mmol) и N-метилморфолин (0,25 ml, 2,3 mmol) в DMF (4 ml) и сместа се разбърква в продължение на 2 h. Реакционната смес се разрежда с етилацетат и се промива с 10%-ен разтвор на лимонена киселина, вода, разтвор на натриев хидрогенкарбонат и разтвор на натриев хлорид, суши се (Na₂SO₄) и се изпарява под вакуум като се получава съединението съгласно заглавието като пяна.

^!Н NMR (400 Mz, CDC1₃) d 1,51 (s, 9Н, t-Bu), 2,39 (s, ЗН, CH₃), 2,59 (s, ЗН, СН₃), 4,37 (d, J=5,5Hz, NHCH₂), 4,71 (s, 2H, CH₂CO), 6,76 (br t, 1H, NHCH₂), 7,14 (s, 1H, NHBOC), 7,44 (d, J=8,3Hz, пиридин H-3), 7,66 (d, J=8,3Hz, пиридин H-3).

Етап В: 3-(2-фенетиламино)-5-хлоро-6-метил-1-(2трет-бутоксикарбониламино-б-метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон

Фенетиламин (0,10 ml, 0,80 mmol) се прибавя към разбъркван разтвор на 3,5-дихлоро-6-метил-1-(2-трет·· • · • ·· ·· ···· • · • ·

бутоксикарбониламино-6-метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон (182 mg, 0,40 mmol) в диоксан (0,8 ml) и полученият разтвор се затопля до 60°С. След 16 h реакционната смес се разпределя между вода и хлороформ. Органичният слой се суши (Na₂SO₄) и изпарява под вакуум. Суровият продукт се пречиства чрез флаш хроматография върху силициев диоксид (градиент етилацетат/хексан, 40-75% етилацетат) като се получава съединението съгласно заглавието.

Н NMR (300 Mz, CDC1₃) d 1,51 (s, 9H, t-Bu), 2,36 (s,

ЗН, СНз), 2,41 (s, ЗН, СНз), 2,92 (t, J=7,lHz, PhCH₂), 3,66 (q,

J=7,lHz, PhCH₂CH₂), 4,35 (d, J=5,4Hz, 2H, CONHCH₂), 4,63 (s,

2H, CH₂CO), 6,05 (br t, 1H, NH), 6,54 (br t, 1H, NH), 7,14 (s, 1H, NHBOC), 7,21-7,31 (m, 5H, Ph), 7,43 (d, J=8,3Hz, 1H, пиридин H3), 7,69 (d, J=8,3Hz, 1H, пиридин H-4).

Етап C: 3-(2-фенетиламино)-5-хлоро-6-метил-1-(2амино-6-метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон

HC1 газ се пуска да барботира през разтвор на 3-(2фенетиламино)-5-хлоро-6-метил-1-(2-трет-бутоксикарбониламидометилпиридинил)пиразинон (83 mg, 0,153 mmol) в етилацетат (10 ml) при 0°С в продължение на 10 min. Реакционната смес се затопля до стайна температура и след 1 h разтворът се дегазира с аргон като се получава бяла утайка, която се събира чрез филтриране и след сушене се получава съединението съгласно заглавието като НС1 сол.

^ХН NMR (400 Mz, CD3OD) d 2,26 (s, ЗН, СН₃), 2,50 (s,

ЗН, СНз), 2,91 (t, J=7,0Hz, PhCH₂), 3,60 (t, J=7,0Hz, PhCH₂CH₂),

4,29 (s, 2H, CONHCH₂), 4,74 (s, 2H, CH₂CO), 6,82 (d, J=9,0Hz,

1H, пиридин H-3), 7,18-7,29 (m, 5H, Ph), 7,83 (d, J=9,0Hz, 1H, пиридин H-4); MS (FAB) 441 (M+l)⁺.

·· ····

ПРИМЕР IV

Получаване на 3-бензиламино-5-хлоро-6-метил-1-(2амино-6-метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон

Съединението съгласно заглавието се получава като TFA сол от 3,5-дихлоро-6-метил-1-(2-трет-бутоксикарбониламино-6-метил-5-метиленкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон и бензиламин като се използва процедурата от пример III, етапи В и С. MS (FAB) 428 (M+l)⁺.

ПРИМЕР V

Получаване на 3-(2-фенилетиламино)-6-метил-1-(2амино-6-метил-5-метил карбоксамидометилпиридинил)пиразинон

Етап А: бензил-М-(1-цианоетил)глицин хидрохлорид

TMSCN (18,8 ml, 141 mmol) се прибавя внимателно (реакцията е екзотермична) към разбъркван разтвор на бензилглицин като свободна основа (23,3 g, 141 mmol - от НС1 сол чрез разпределяне между ЕЮАс и разтвор на натриев хлорид алкализиран с наситен разтвор на Na₂CO₃) и ацеталдехид (7,88 ml, 141 mmol) в метиленхлорид (50 ml). След 4 h летливите компоненти се отстраняват под вакуум и остатъкът се разбърква с ЕЮАс и се промива с разтвор на натриев хлорид, суши се (Na₂SO₄) и се изпарява под вакуум до масло. Маслото се разтворя повторно в ЕЮАс и се прибавя 9,9М НС1 в EtOH (15,25 ml, 151 mmol) като се получава кристална утайка, която се изолира чрез филтриране, промива се с ЕЮАс и Et₂O като се получава съединението съгласно заглавието.

NMR (CD₃OD) d 1,70 (d, J=7,0Hz, 3H, CH₃), 4,16 (d, J=16,8Hz, 1H, СНдНв), 4,21 (d, J=16,8Hz, 1H, СН_АНв), 4,64 (q, J=7,0Hz, a-CH), 5,31 (s, 2H, CH₂O), 7,35-7,44 (m, 5H, Ph).

Етап В: 1-бензилоксикарбонилметил-3,5-дихлоро-6-

метилпиразинон

Разбърквана смес от оксалилхлорид (40,4 ml, 463 mmol) и бензил-М-(1-цианоетил)глицин хидрохлорид (29,51 g, 116 mmol) в 1,2-дихлоробензен (110 ml) се нагрява до 100°С в продължение на 15 h. Летливите компоненти се изпаряват под вакуум и остатъкът се пречиства чрез флаш хроматография върху алуминиев оксид (елуиране с хексан и след това 30% етилацетат/хексан) като се получава твърдо вещество, което се нагрява под обратен хладник в 2:5 ЕЮАс/хексан (140 ml), охлажда се и се събира чрез филтриране като се получава съединението съгласно заглавието като бледозелено кристално твърдо вещество.

^JH NMR (CDC1₃): d 2,35 (s, ЗН, CH₃), 4,88 (s, 2H,

CH₂), 5,24 (s, 2Н, СН₂), 7,38 (m, 5Н, Ph).

ft· ft···

• ft ·· • ft · · ♦ · ·· ··· · · • · ·

Етап C: 3-(2-фенилетиламино)-5-хлоро-6-метил-1(бензилоксикарбонилметил)пиразинон

Фенетиламин (15,07 ml, 120 mmol) се прибавя към разбърквана смес от 1-бензилоксикарбонилметил-3,5-дихлоро-6метилпиразинон (13,09 g, 40 mmol) в EtOAc (80 ml) и получената смес се нагрява до техпературата под обратен хладник под аргон. След 2 h реакционната смес се охлажда, разрежда се с хлороформ (500 ml) и се промива с 5%-ен разтвор на лимонена киселина и разтвор на натриев хлорид, суши се (Na₂SO₄) и се изпарява под вакуум като се получава съединението съгласно заглавието като кристално твърдо вещество.

*Н NMR (CDC1₃): d 2,21 (s, ЗН, СН₃), 2,93 (t, J=7,lHz, 2Н, PhCH₂), 3,67 (q, J=6,7Hz, 2H, CH₂NH), 4,79 (s, 2H, CH₂), 5,21 (s, 2H, CH₂), 6,10 (br t, 1H, NH), 7,20-7,39 (m, 10H, 2Ph).

Етап D: 3-(2-фенилетиламино)-5-хлоро-6-метил-1карбоксиметилпиразинон

LiOH.H₂O (3,36 g, 80 mmol) се прибавя към разбърквана суспензия от продукта от етап С в 3:3:1 ТНР/МеОН/Н₂О (280 ml) при 0°С и сместа се затопля до стайна температура. След 16 h летливите компоненти се изпаряват под вакуум и разтворът се разрежда с вода (500 ml) и се промива с EtOAc. Водният слой се насища с NaCI и се подкислява с 20%-ен разтвор на KHSO₄ (20 ml) като се получава, утайка, която се екстрахира в 1:1 етилацетат/THF (400 ml). Органичният слой се суши (Na₂SO₄) и изпарява под вакуум като се получава твърд продукт, който се нагрява до температурата под обратен хладник в 1:1 етилацетат/хексан, охлажда се и се събира чрез

филтриране като се получава съединението съгласно заглавието като кристално твърдо вещество.

^lH NMR (DMSO-d₆): d 2,21 (s, ЗН, Me), 2,86 (t, J=7,4Hz, 2H, PhCH₂), 3,47 (dt, J=5,9 и 7,4Hz, 2H, CH₂NH), 4,72 (s, 2H, CH₂CO₂), 7,18-7,31 (m, 5H, Ph), 7,46 (t, J=5,9Hz, 1H, NH), 13,30 (br s, 1H, COOH).

Етап Е: 3-(2-фенетиламино)-6-метил-1карбоксиметилпиразинон

3-(2-фенетиламино)-5-хлоро-6-метил-1карбоксиметилпиразинон (11,66 g, 36,2 mmol) се прибавя към разбъркван разтвор на калиев хидроксид (86% тегл., 6,10 g, 93,5 mmol) във вода (400 ml). След дегазиране на получения разтвор с аргон, се прибав 10% Pd/C (3,48 g) и сместа се разбърква под водород от бутилка. След 16 h сместа се дегазира с азот, прибавя се още 10% Pd/C (3,0 g) и сместа се разбърква под водород от бутилка за още 7 h, филтрира се през целит, филтърната утайка се промива с вода (200 ml). Филтратът се подкислява с разтвор на KHSO₄ (7,8 g, 57,3 mmol) и вода (35 ml) и получената утайка се събира чрез филтриране, промива се с вода (200 ml) и се суши в продължение на 16 h под вакуум като се получава съединението съгласно заглавието като кристално твърдо вещество.

^!Н NMR (DMSO-d₆): d 2,07 (d, J=0,7Hz, ЗН, Me), 2,84 (t, J-7,4Hz, 2H, PhCH₂), 3,47 (dt, J=5,9 и 7,4Hz, 2H, CH₂NH),

4,66 (s, 2H, CH₂CO₂), 6,67 (s, 1H, пиразинон H-5), 6,88 (br t, J=5,9Hz, 1H, NH), 7,17-7,32 (m, 5H, Ph).

Етап F: 3-(2-фенетиламино)-6-метил-1-(2-амино-6метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон ·· ···· • · • ·· • · л в 4 · · · · ^w

-••$8··- ..........

EDC.HCI (0,962 g, 5,02 mmol) се прибавя към

разбърквана смес от 3-(2-фенетиламино)-6-метил-1карбоксиметилпиразинон (1,20 g, 4,18 mmol), 2-амино-5аминометил-6-метилпиридин дихидрохлорид (0,874 g, 4,16 mmol), НОВТ.Н2О (0,678 g, 5,02 mmol) и N-метилморфолин (2,30 ml, 20,9 mmol) в сух DMF (10 ml). След 6 h летливите компоненти се изпаряват под вакуум и остатъкът се разпределя между етилацетат и 1М разтвор на НС1. Водният слой се наглася на pH 10 с наситен разтвор на натриев карбонат и утайката се събира чрез филтриране, промива се с вода и етанол като се получава съединението съгласно заглавието като свободна основа.

Продуктът свободна основа се използва като изходен

за получаване на 3-(2-фенетиламино)-6-метил-1-(2-амино-6метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон дихидрохлорид (етап G1), 3-(2-фенетиламино)-6-метил-1-(2амино-6-метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон дихидрохлорид тип А монохидрат (етап G2, също означен като полиморфна кристална форма тип А монохидрат) или 3-(2фенетиламино)-6-метил-1-(2-амино-6-метил-5метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон дихидрохлорид тип В монохидрат (етап G3, също означен като полиморфна кристална форма тип В монохидрат).

Най-общо, получаването на 3-(2-фенетиламино)-6 метил-1-(2-амино-6-метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон дихидрохлорид тип А монохидрат се състои в етап а) разтаряне на 3-(2-фенетиламино)-6-метил-1-(2амино-6-метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон в разтворител оцетна киселина и добавяне на водна НС1; Ь) мшаШя

отделяне на получената твърда фаза и с) и отстраняване от нея на разтворителя. В един аспект на метода, количеството на прибавената водна НС1 в етап а) е такова, че крайното

съдържание на вода в оцетната киселина е между 1 и 5% тегл..

Най-общо, получаването на 3-(2-фенетиламино)-6метил-1 -(2-а мино-6-метил-5-метил карбоксамидо метилпиридинил)пиразинон дихидрохлорид тип В монохидрат се състои в етап а) разтваряне на 3-(2-фенетиламино)-6-метил-1-(2амино-6-метил-5-метил карбоксамидо метил пиридинил)пиразинон в разтворител солна киселина; Ь) отделяне на получената твърда фаза и с) отстраняване от нея на

разтворителя.

Етап G1: 3-(2-фенетиламино)-6-метил-1-(2-амино-6метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон дихидрохлорид

3-(2-фенетиламино)-6-метил-1-(2-амино-6-метил-5метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон като свободна основа се суспендира в етанол (20 ml) и се прибавя етанол наситен с хлороводород (9,9М, 8,36 mmol), при разбъркване при 0°С. Бис-HCl солта кристализира бързо из сместа и след 30 min се събира чрез филтриране, промива се с етанол и се суши в продължение на 16 h при 0,5 mm Hg като се получава съединението съгласно заглавието.

^!Н NMR (DMSO-d₆): d 2,10 (s, ЗН, СН₃), 2,45 (s, ЗН, СН₃), 2,91 (t, J=7,6Hz, PhCH₂), 3,63 (br q, CH₂NH), 4,71 (d, J=5,5Hz, 2H, CONHCH₂), 4,62 (s, 2H, CH₂CO), 6,68 (s, 1H, пиразинон H-5), 6,81 (d, J=9,0Hz, 1H, пиридин H-3), 7,21-7,31 (m, 5H, Ph), 7,76 (неясен d, 1H, пиридин H-4), 7,77 (br s, 2H, NH₂), 8,81 (brt, J=5,5Hz, 1H, CONH).

Етап G2: 3-(2-фенетиламино)-6-метил-1-(2-амино-6метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон дихидрохлорид тип А монохидрат

3-(2-фенетиламино)-6-метил-1-(2-амино-6-метил-5метиленкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон като свободна основа (680 g) се разтваря в 6,0 1 оцетна киселина и сместа се разбърква при нагряване до 60°С до получаване на разтвор.

Сместа се филтрира и филтърът се промива с 7,6 1 оцетна

киселина и към охладения разтвор при 28°С се прибавя водна НС1 (734 ml 5N НС1 и 147 ml вода). Към сместа се прибавят зародиши и се нагрява до 73°С като се получава фин слой зародиши, след това се охлажда до 20°С за няколко часа, филтрира се и филтърната утайка се промива с оцетна киселина и след това с 190 чист етанол и се суши при 60°С във вакуум сушилня при продухване с азот като се получава съединението съгласно заглавието.

Тип А съединението се охарактеризира с диференциална сканираща калориметрична (DSC) крива, при скорост на нагряване от 5°C/min в отворена чаша под поток от азот барботиращ през вода при 5°С, показваща ендотерма с екстраполирана начална температура от около 102°С, пикова температура от около 112°С и свързана топлина при около 115 J/gm и следваща ендотерма с екстраполирана начална температура при около 171°С, пикова температура при около 194°С и свързана топлина при 83 j/gm. Нискотемпературната ендотерма се дължи на загуба на вода при хидратирането, а високотемпературната ендотерма се дължи на стапяне при разлагане на оставащата безводна фаза. Пробата от х-гау

Ιϋϋΐϋ

Bi • · · · • · · · • · · · • · · · · · • · · • · · · · · ι.:ί· прахова дифракция се характеризира с d-интервал 13,06, 12,16,

7,40, 5,71, 4,92, 4,48, 4,40, 3,63, 3,07,2,98, 2,86 и 2,62 А.

Етап G3: 3-(2-фенетиламино)-6-метил-1-(2-амино-6метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон дихидрохлорид тип В монохидрат

Съд от 100 1 се зарежда с 8,12 литра 2N солна киселина (НС1), след това се добавя 1,62 литра DI вода при стайна температура. Към съда се прибавя 3-(2-фенетиламино)-6метил-1-(2-амино-6-метил-5-метиленкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон като свободна основа (3,30 kg) и съдържанието се нагрява до 82°С. След разбъркване в продължение на 15 min се прибавя Solka flok (24 g) и полученият разтвор се филтрира посредством остатъчен вакуум през последователни тръбовидни филтри (20 и 5 микрона). Първоначалният съд се промива с 3,25 литра DI вода (стайна температура), които се обединяват с първоначалния филтрат и се нагрява повторно до 72°С. Разтворът се охлажда до 53°С,

прибавят се зародиши и охлаждането продължава до 25°С за период от 3 h. На капки към суспензията се прибавя концентрирана солна киселина (1,30 литра) за период от 30 min.

Суспензията се охлажда до 20°С и твърдият продукт се изолира чрез вакуумфилтриране. Филтърната утайка се промива с 6,48 литра IN НС1. Филтърната утайка след това се промива с етанол (190 чист; 3x6,48 литра). Влажната филтърна утайка се суши под вакуум при стайна температура като се получава съединението съгласно заглавието.

Тип В съединенията се охарктаризират с диференциална сканираща калориметрична (DSC) крива, при скорост на нагряване от 5°C/min в отворена чаша под поток от • · · · • · · ·· · · ···· • · · · · · · · • ·· · ··»···· ··· · · ···

-•••62··- ..........

азот барботиращ през вода при 5°С, показваща ендотерма с екстраполирана начална температура от около 120°С, пикова температура от около 132°С и свързана топлина при около 123 J/gm и следваща ендотерма с екстраполирана начална температура при около 160°С, пикова температура при около 191°С и свързана топлина при 78 J/gm. Нискотемпературната ендотерма се дължи на загуба на вода при хидратирането, а високотемпературната ендотерма се дължи на стапяне при разлагане на оставащата безводна фаза. Пробата от х-гау прахова дифракция се характеризира с d-интервал 12,98, 11,91, 7,24, 5,98, 4,90, 4,46, 4,23, 3,99, 3,75, 3,61, 3,41, 2,94, 2,85 и 2,61 А.

ПРИМЕР VI

3-(2-фенетиламино)-6-метил-1-[етил-(2метилкарбоксамидометил-4-хлорофенокси)ацетамидо]-2- пиразинон

EDC хидрохлорид (56 mg, 0,29 mmol) се прибавя към разбърквана смес от 3-(2-фенетиламино)-6-метил-1карбоксиметилпиразинон (91 mg, 0,23 mmol), НОВТ (40 mg, 0,29 mmol), етил-(2-аминометил-4-хлорофенокси)ацетамид хидрохлорид (82 mg, 0,29 mmol) и N-метилморфолин (0,13 ml, 1,17 mmol) в DMF (1 ml) и сместа се разбърква в продължение • · · · на 16 h. Реакционната смес се разпределя между етилацетат и вода, прибавя се достатъчно разтвор на натриев хлорид, за да се диспергира емулсията. Мътният органичен слой се събира и твърдото вещество се разтваря чрез прибавяне на хлороформ и метанол и разтворът се суши и изпарява до твърд продукт. Суровият продукт се суспендира в етилацетат и се филтрира, промива се с вода, след това с етилацетат като след сушене се получава съединението съгласно заглавието като бяло кристално твърдо вещество, т.т. >200°С.

Н NMR (400 Mz, DMSO) d 0,97 (t, J=7,2Hz, ЗН,

CH₂CH₃), 2,03 (s, ЗН, СН₃), 2,83 (t, J=7,4Hz, 2Н, PhCH₂), 3,09 (q,

J=6,7Hz, 2H, CH₂CH₃), 3,47 (q, J=6,9Hz, 2H, РИСЩСНД 4,37 (d,

J=5,7Hz, 2H, CONHCHz), 4,64 (s, 2H, CH₂CO), 6,63 (s, 1H, пиразинон H-5), 6,77 (br t, 1H, NH), 6,94 (d, J=8,4Hz, 1H, фенокси H-6), 7,16-7,30 (m, 7H, остатъчен), 7,98 (br t, 1H, NH),

8,67 (br t, 1H, NH). MS (FAB) 512 (M+l)⁺.

ПРИМЕР VII

Получаване на [Я]-3-(1-фенил-2-пропиламино)-6метил-1-(2-амино-6-метил-5-метилкарбоксамидо метил

Ph

N

Н

О • · · ·

• · · · · · • · · • · ··

Съединението съгласно заглавието се получава като НС1 сол от 1-бензилоксикарбонилметил-3,5-дихлоро-6метилпиразинон и [К]-1-фенил-2-пропиламин като се използва процедурата от пример V, етапи C-F. MS (FAB) 421 (M+l)⁺.

ПРИМЕР VIII

Получаване на [8]-3-(1-фенил-2-пропиламино)-6метил-1-(2-амино-6-метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон

Съединението съгласно заглавието се получава като НС1 сол от 1-бензилоксикарбонилметил-3,5-дихлоро-6метилпиразинон и [8]-1-фенил-2-пропиламин като се използва процедурата от пример V, етапи C-F; MS (FAB) 421 (M+l)⁺.

Получаване на 3-(1-фенил-2-метил-2-пропиламино)-6метил-1-(2-амино-6-метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон

Н

• · · · · ·

Съединението съгласно заглавието се получава като НС1 сол от 1-бензилоксикарбонилметил-3,5-дихлоро-6метилпиразинон и 1-фенил-2-метил-2-пропиламин като се използва процедурата от пример V, етапи C-F; MS (FAB) 435 (M+l)⁺.

ПРИМЕР X

Получаване на 3-(2-метил-2-пропиламино)-6-метил-1(2-амино-6-метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон

Съединението съгласно заглавието се получава като НС1 сол от 1-бензилоксикарбонилметил-3,5-дихлоро-6метилпиразинон и 2-метил-2-пропиламин като се използва процедурата от пример V, етапи C-F; MS (FAB) 358 (M+l)⁺.

ПРИМЕР XI

Получаване на 3-(2-фенетиламино)-6-метил-1-(2амино-4,6-диметил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон

Съединението съгласно заглавието се получава като НС1 сол от 3-(2-фенетиламино)-6-метил-1-метилкарбоксамидопиразинон и 2-амино-5-аминометил-4,6-диметилпиридин дихидрохлорид като се използва процедурата от пример V, етап F, т.т. >200°С; MS (FAB) 421 (M+l)⁺.

ПРИМЕР XII

Получаване на [К,8]-3-(2-фенил-1-пропиламино)-6метил-1-(2-амино-6-метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон

Съединението съгласно заглавието се получава като

НС1 сол от 1-бензилоксикарбонилметил-3,5-дихлоро-6метилпиразинон и рацемичен 2-фенил-1-пропиламин като се използва процедурата от пример V, етапи С-F, т.т. >200°С; MS (FAB) 421 (M+l)⁺.

ПРИМЕР XIII

Получаване на 3-(2-пропиламино)-6-метил-1-(2-амино-

6-метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон

Съединението съгласно заглавието се получава като НС1 сол от 1-бензилоксикарбонилметил-3,5-дихлоро-6метилпиразинон и 2-пропиламин като се използва процедурата от пример V, етапи С-F, т.т. > 200°С; MS (FAB) 345 (M+l)⁺.

ПРИМЕР XIV

Получаване на 3-(2-феноксиетиламино)-6-метил-1-(2амино-6-метил-5-метил карбоксамидометилпиридинил)пиразинон

Съединението съгласно заглавието се получава като НС1 сол от 1-бензилоксикарбонилметил-3,5-дихлоро-6метилпиразинон и 2-феноксиетиламин като се използва процедурата от пример V, етапи С-F, т.т. > 200°С; MS (FAB) 423 (M+l)⁺.

ПРИМЕР XV ййЖ >· ···· • ·

Получаване на 3-[2-(4-хидроксифенил)етиламино]-6метил-1-(2-амино-6-метил-5-метил карбоксами до метилпиридинил)пиразинон

Съединението съгласно заглавието се получава като НС1 сол от 1-бензилоксикарбонилметил-3,5-дихлоро-6метилпиразинон и 2-(4-хидроксифенил)етиламин като се използва процедурата от пример V, етапи С-F, т.т 195-199°С; MS (FAB) 423 (M+l)⁺.

ПРИМЕР XVI

Получаване на 3-циклопропиламино-6-метил-1-(2амино-6-метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон

TFA сол от 1-бензилоксикарбонилметил-3,5-дихлоро-6·· ···· • · метилпиразинон и циклопропиламин като се използва процедурата от пример V, етапи C-F, MS (FAB) 343 (M+l)⁺.

ПРИМЕР XVII

Получаване на 3-циклопропилметиламино-6-метил-1(2-амино-6-метил-5-метил карбоксамидо метилпиридинил )пиразинон

Съединението съгласно заглавието се получава като НС1 сол от 1-бензилоксикарбонилметил-3,5-дихлоро-6метилпиразинон и циклопропилметиламин като се използва процедурата от пример V, етапи С-F, т.т. >200°С; MS (FAB) 357 (M+l)⁺.

ПРИМЕР XVIII

Получаване на [8]-3-(2-хидрокси-2-фенетиламино)-6ф метил- 1-(2-амино-6-метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон

·· ····

Съединението съгласно заглавието се получава като НС1 сол от 1-бензилоксикарбонилметил-3,5-дихлоро-6метилпиразинон и [SJ-2-хидроксифенетиламин като се използва процедурата от пример V, етапи С-F, т.т. >200°С; MS (FAB) 423 (M+l)⁺.

ПРИМЕР XIX

Получаване на [К]-3-(2-хидрокси-2-фенетиламино)-6метил-1-(2-амино-6-метил-5-метил карбоксамидометилпиридинил)пиразинон

НС1 сол от 1-бензилоксикарбонилметил-3,5-дихлоро-6метилпиразинон и [RJ-2-хидроксифенетиламин като се използва процедурата от пример V, етапи C-F, MS (FAB) 423 (M+l)⁺.

ПРИМЕР XX

Получаване на 3-(2-циклопропилетиламино)-6-метил-

1-(2-амино-6-метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон

Mtn

Етап А: 4-фталимидо-1-бутен

Смес от 4-бромо-1-бутен (1,01 ml, 10,0 mmol) и калиев фталимид (1,85 g, 10,0 mmol) в DMF (10 ml) се разбърква при 100°С в продължение на 3 h. Получената смес се охлажда и се разпределя между етилацетат и вода. Органичният слой се промива с вода и разтвор на натриев хлорид, суши се (Na₂SO₄) и се изпарява под вакуум до кристално твърдо вещество.

Суровият продукт се пречиства чрез флаш хроматография върху силициев диоксид (елуиране с 20% етилацетат/хексан) като се получава съединението съгласно заглавието като кристално твърдо вещество.

^!Н NMR (300 Mz, CDC1₃) d 2,45 (q, J=7,0Hz, 2H), 3,78 (t, J=7,0Hz, 2H), 5,04 (m, 2H), 5,76 (m, 1H), 7,71 (m, 2H), 7,84 (m, 2H).

Етап В: 2-фталимидоетилциклопропан

4-фталимидо-1-бутен се свързва с циклопропан като се използва процедура на Suda (Synthesis, 1981, 714) като се получава съединението съгласно заглавието като кристално твърдо вещество.

^]Н NMR (400 Mz, CDCb) d 0,05 (m, 2Н), 0,42 (m, 2Н), 0,69 (m, ΙΗ), 1,58 (q, J=7,lHz, 2H), 3,77 (t, J=7,lHz, 2H), 7,71 (m, 2H), 7,84 (m, 2H).

Етап C: 2-циклопропилетиламин

Смес от 2-фталимидоетилциклопропан (1,40 g, 6,50 mmol) и хидразинхидрат (0,32 ml, 6,50 mmol) в етанол (10 ml) се разбърква под обратен хладник в продължение на 1 h. Сместа се охлажда и към плътната утайка се прибавя конц. НС1 (0,54 ml,

6,50 mmol). Сместа се изпарява под вакуум и остатъкът се ·· ···· · · ·· ·· • · · ···· ···· • · · · · · ·· • · · · ······· • · · · · · · ♦ • ·*4^·· ··· ··· ·· ·· суспендира в 1Μ разтвор на HCl (10 ml) и се затопля до 50°С в продължение на 5 min, охлажда се и се филтрира. Филтратът се промива с метиленхлорид и смес това се изпарява под вакуум, изпарява се ацеотропно с толуен/етанол като се получава НС1 сол на съединението съгласно заглавието като кристално твърдо

вещество.

*Н NMR (400 Mz, CD₃OD) d 0,15 (m, 2Н), 0,54 (m, 2Н), 0,74 (m, 1Н), 1,55 (q, J=7,3Hz, 2H), 3,01 (t, J=7,3Hz, 2H).

Етап D: 3-(2-циклопропилетиламин)-5-хлоро-6-метил-

1-(бензилоксикарбонилметил)пиразинон

Смес от 2-циклопропилетиламин хидрохлорид (73 mg, 0,60 mmol), 1-бензилоксикарбонилметил-3,5-дихлоро-6метилпиразинон (164 mg, 0,50 mmol) и натриев хидрогенкарбонат (101 mg, 1,20 mmol) в толуен (1 ml) и вода (0,5 ml) се разбърква при 80°С в продължение на 3 h. Реакционната смес след това се охлажда и се разпределя между метиленхлорид и 10%-ен разтвор на лимонена киселина.

Органичният слой се суши (Na₂SO₄) и изпарява под вакуум като

се получава съединението съгласно заглавието като кристално твърдо вещество.

Ή NMR (400 MHz, CDCI3): d 0,10 (m, 2H), 0,47 (m, 2H), 0,74 (m, 1H), 1,53 (q, J=7,0Hz, 2H), 2,21 (s, 3H, CH₃), 3,49 (q, J=6,6Hz, 2H), 4,80 (s, 2H), 5,22 (s, 2H), 6,18 (br t, 1H), 7,33-

7,40 (m, 5H).

Етап Е: 3-(2-циклопропилетиламино)-6-метил-1-(2амино-6-метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон

Съединението съгласно заглавието се получава от 3-(2циклопропилетиламино)-5-хлоро-6-метил-1(бензилоксикарбонилметил)пиразинон като се използва ·· ····

процедурата от пример V, етапи D-F, т.т. >200°С; MS (FAB) 371 (M+l)⁺.

ПРИМЕР XXI

Получаване на 3-(2-фенилетиламино)-6-етил-1-(2амино-6-метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон

Съединението съгласно заглавието се получава като НС1 сол от пропионалдехид като се използва процедурата от пример V, MS (FAB) 421 (M+l)⁺.

ПРИМЕР XXII

Получаване на 3-(2-фенилетиламино)-6-метил-1-(2амино-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон

Съединението съгласно заглавието се получава като НС1 сол от 3-(2-фенилетиламино)-6-метил-1-карбоксиметил-пиразинон и 2-амино-5-аминометилпиридин като се използва процедурата от пример V, етап F, т.т. >220°С; MS (FAB) 393 (M+l)⁺.

··

ПРИМЕР XXIII

Получаване на 3-(5-инданилметиламино)-6-метил-1-(2амино-6-метил-5-метил карбоксамидометилпиридинил)пиразинон

Съединението съгласно заглавието се получава като TFA сол от 1-бензилоксикарбонилметил-3,5-дихлоро-6метилпиразинон и 5-инданилметиламин като се използва процедурата от пример V, етапи C-F; MS (FAB) 434 (M+l)⁺.

ПРИМЕР XXIV

Получаване на 3-(2-фенилетиламино)-6-метил-1-[етил(2-метилкарбоксамидометилфенокси)ацетамидо]пиразинон

Съединението съгласно заглавието се получава от 3-(2фенетиламино)-6-метил-1-карбоксиметилпиразинон и етил-2 аминометилфеноксиацетамид като се използва процедурата от пример VI; MS (FAB) 478 (M+l)⁺.

ПРИМЕР XXV

Получаване на 3-(4-метоксибензиламино)-6-метил-1[етил-(2-метилкарбоксамидометил-4-хлорофенокси)ацетамидо]пиразинон

Съединението съгласно заглавието се получава от 1бензилоксикаронилметил-3,5-дихлоро-6-метилпиразинон и 4метксибензиламин като се използва процедурата от пример V, етапи С-Е и след това процедурата от пример VI, т.т. >200°С; MS (FAB) 528 (M+l)⁺.

ПРИМЕР XXVI

Получаване на 3-(2-фенетиламино)-6-метил-1(метилкарбоксамидометил-2-хидрокси-5-хлорофенил)пиразинон

Съединението съгласно заглавието се получава от 3-(2фенилетиламино)-6-метил-1-карбоксиметилпиразинон и 2аминометил-4-хлорофенол като се използва процедурата от пример VI; MS (FAB) 427 (M+l)⁺.

ПРИМЕР XXVII

Получаване на 3-(2-фенетиламино)-6-метил-1-[етил-(2метилкарбоксамидометил-4-хлорофенокси)ацетил]пиразинон

Съединението съгласно заглавието се получава от 3-(2 фенилетиламино)-6-метил-1-карбоксиметилпиразинон и етил-2аминометилметил-4-хлорофеноксиацетат като се използва процедурата от пример VI; MS (FAB) 513 (M+l)⁺.

ПРИМЕР XXVIII

Получаване на 3-(2-метил-2-пропиламино)-6-метил-1[етил-(2-метилкарбоксамидометил-4-хлорофенокси)ацетамидо]фф ···· φ φ · • · • φ φ • · · ·«·« ··

- 77 пиразинон

Съединението съгласно заглавието се получава като TFA сол от 3-(2-метил-2-пропиламино)-6-метил-1карбоксиметилпиразинон като се използва процедурата от пример VI, тт.т. 64-70°С; MS (FAB) 464 (M+l)⁺.

ПРИМЕР XXIX

Получаване на рац-транс-3-(2-фенилциклохексиламино)-6-метил-1-(2-амино-6-метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон

Съединението съгласно заглавието се получава като НС1 от 1-бензилоксикарбонилметил-3,5-дихлоро-6-метилпиразинон и рац-транс-2-фенилциклохексиламин като се използва процедурата от пример V, етап С-Е, след това процедурата от метод 4; MS (FAB) 461 (M+l)⁺.

ПРИМЕР XXX

Получаване на рац-цис-3-(2-фенилциклохексиламино)

·· ···· 9 · ·· ·· • · е ·· ·· ♦ · · · • · · · · · ·· • · · · · φ 999 9 9

9 9 9 9 9 9 9

9999 99 999 999 99 99

6-метил-1-(2-амино-6-метил-5-метилкарбоксамидометил пиридинил)пиразинон

Съединението съгласно заглавието се получава като НС1 от 1-бензилоксикарбонилметил-3,5-дихлоро-6-метилпиразинон и рац-цис-2-фенилциклохексиламин като се използва процедурата от пример V, етап С-Е, след това процедурата от метод 4; MS (FAB) 461 (M+l)⁺.

ПРИМЕР XXXI

Получаване на 3-(2-фенетиламино)-6-метил-1-(2-амино-

4-метилкарбоксамидометилпиридин)пиразинон

Съединението съгласно заглавието се получава като НС1 от 3-(2-фенетиламино)-6-метил-1-метилкарбоксипиразинон и 2амино-4-аминометилпиридин като се използва процедурата от пример V, етап F; MS (FAB) 393 (M+l)⁺.

ПРИМЕР XXXII

Получаване на 3-(2-фенетиламино)-6-метил-1-(2-амино3-метил-4-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон

Етап А: 2-трет-бутоксикарбониламино-З-метилпилидинN-оксид

Към разтвор при 0°С от 1,0 g (4,8 mmol) 2-третбутоксикарбониламино-3-метилпиридин в 25 ml СН₂С1₂ се прибавя 25 ml 5%-ен NaHCO₃. Към енергично разбъркваната смес за период от 20 min се прибавят пет порции от 1,73 g (5 mmol) 3хлоропероксибензоена киселина. Студената баня се оставя една нощ и към реакционната смес се прибавя 10% Na₂SO₃. След разбъркване 5 min водният слой се екстрахира с СН₂С1₂, суши се над Na₂SO₄, обработва се с активен въглен и разтворителят се отстранява като се получава масло, което се хроматографира върху 50 g фин SiO₂ като се използва 96:4 СНС1₃-СН₃ОН като се получава съединението съгласно заглавието като белезникаво твърдо вещество.

^!Н NMR (CDC1₃) δ 8,23 (s, 1Н), 8,12 (d, 1H, 6,6Hz), 7,15 (d, 1H, 6,8Hz), 6,98 (t, 1H, 6,3Hz), 2,36 (s, 3H), 1,52 (s, 9H).

Етап В: 2-трет-бутоксикарбониламино-3-метил-1метоксипиридиниев метилсулфат

Към разбъркван разтвор от 620 mg (0,29 mmol) 2-третбутоксикарбониламино-З-метилпиридин-М-оксид в 8 ml СН₂С1₂под Аг се прибавя 262 μΐ (0,3 mmol) диметилсулфат. В слаб поток от Аг се оставя за една нощ СН₂С1₂ да се изпари като се получава

съединението съгласно заглавието като леко жълтокафяво твърдо вещество.

*Н NMR (DMSO-d₆) δ 10,8 (s, ΙΗ), 9,32 (d, 1H, 6,6Hz),

8,50 (d, 1H, 7,8Hz), 7,98 (t, 1H, 7,1 Hz), 4,28 (s, 3H), 3,37 (s, 3H),

2,41 (s, 3H), 1,49 (s, 9H).

Етап C: 2-трет-бутоксикарбониламино-4-циано-3метилпиридин

Продуктът от предишния етап се нагрява с 651 mg (10 mmol) калиев цианид в 4,5 ml вода при 50°С една нощ. Реакционната смес се разрежда с вода и 10% Na₂CO₃, екстрахира се с 3 х СНС1₃, обединените органични слоеве се промиват с разтвор на натриев хлорид, сушат се над Na₂SO₄ и разтворителят се отстранява като се получава тъмно масло, което се разтваря в СНС1₃ и се нанася на колона от 20 g фин SiO₂. Колоната се елуира с 1:4 - 1:3 EtOAc-хексан като се получава съединението съгласно заглавието като безцветно твърдо вещество.

’Н NMR (CDC1₃) д 7,64 (d, 1Н, 7,7Hz), 7,44 (d, ΙΗ, 7,7Hz), 6,80 (s, 1H), 2,38 (s, 3H), 1,52 (s, 9H).

Етап D: 4-аминометил-2-трет-бутилоксикарбониламино3-метилпиридин

Разтвор от 175 mg (0,75 mmol) 2-третбутоксикарбониламино-4-циано-З-метилпиридин и 88 μΐ (1,5 mmol) оцетна киселина в 10 ml МеОН се хидрогенира върху 75 mg 10% Pd/C при 55 psi една нощ в апарат на Parr. Катализаторът се отстранява чрез филтриране, концентрира се при намалено налягане и остатъкът се разпределя между СНС1₃ и 10% Na₂CO₃. Водният слой се екстрахира с СНС1₃ и органичните слоеве се сушат върху Na₂SO₄ и се концентрират като се получава 150 mg от съединението съгласно заглавието като безцветно масло.

NMR (CDCI₃) δ 7,48 (d, 1H, 7,7Hz), 7,02 (d, 1H, 7,7IIz), 6,69 (s, 1H), 3,88 (s, 2H), 2,28 (s, 3H), 1,51 (s, 9H).

Етап Е: 3-(2-фенетиламино)-6-метил-1-(2-амино-3метил-4-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон

Съединението съгласно заглавието се получава като TFA от 3-(2-фенетиламино)-6-метил-1-карбоксиметилпиразинон и

4-аминометил-2-трет-бутоксикарбониламино-3-метилпиридин като се използва процедурата от метод 4; MS (FAB) 407 (M+l)⁺.

ПРИМЕР XXXIII

Получаване на 3-[2-(2-пиридил)етиламино]-6-метил-1(2-амино-6-метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил) пиразинон

Съединението съгласно заглавието се получава като НС1 от 3,5-дихлоро-6-метил-1-карбоксиметилпиразинон и 2-(2пиридилетил)амин като се използва процедурата от пример I, етап D, след това процедурата от пример V, етап Е и F, т.т. 209,5212°С; MS (FAB) 408 (M+l)⁺.

ПРИМЕР XXXIV

Получаване на 3-(1-пентиламино)-5-хлоро-6-метил-1-(2амино-6-метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон

HffWWiiWi

Съединението съгласно заглавието се получава от 3,5дихлоро-6-метил-1-карбоксиметилпиразинон и пентиламин като се използва процедурата от пример I, етап D, след това процедурата от пример V, етап F. MS (FAB) 407 (M+l)⁺.

ПРИМЕР XXXV

Получаване на 3-[2-(4-морфолино)етиламино]-6-метил

1-(2-амино-6-метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)- пиразинон

Съединението съгласно заглавието се получава като НС1 сол от 3,5-дихлоро-6-метил-1-карбоксиметилпиразинон и 2-(4морфолиноетил)амин като се използва процедурата от пример I, етап D, след това процедурата от пример V етап Е, и процедурата от метод 4.

Анализ за С₂оН₂₉М₇Оз.3.7НС1 . 3,05Н₂О

Изчислено: С 39,69 Н 6,46 N 16,20

Намерено: С 39,69 Н 6,46 N 15,95.

ПРИМЕР XXXVI

Получаване на 3-[2-(8)-метил-1-бутиламино]-6-метил-1 (2-амино-6-метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон

Съединението съгласно заглавието се получава от 3,5дихлоро-6-метил-1-карбоксиметилпиразинон и 2(8)-метил-1бутиламин като се използва процедурата на пример I, етап D и след това процедурата на пример V, етап Е и F, т.т. 188,5-193,5°С.

ПРИМЕР XXXVII

Получаване на 3-(1-пентиламино)-6-метил-1-(2-амино6-метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон

Съединението съгласно заглавието се получава от 3,5дихлоро-6-метил-1-карбоксиметилпиразинон и 1-пентиламин като се използва процедурата на пример I, етап D и след това процедурата на пример V, етап Е и F, т.т. 115-118°С.

ПРИМЕР XXXVIII

Получаване на 3-(2,2-дифенетиламино)-6-метил-1-(2амино-6-метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон

Съединението съгласно заглавието се получава като НС1 сол от 3,5-дихлоро-6-метил-1-карбоксиметилпиразинон и 2,2дифенетиламин като се използва процедурата на пример I, етап D и след това процедурата на пример V, етап Е и процедурата от метод 4.

Анализ за C₂₈H₃oN₆02 2,0НС1 . 0,50Н₂0

Изчислено: С 59,56 Н 5,89 N 14,89

Намерено: С 59,53 Н 5,72 N 14,59.

ПРИМЕР XXXIX

Получаване на 3-циклохексиламино-6-метил-1-(2амино-6-метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон

Съединението съгласно заглавието се получава като НС1 сол от 3,5-дихлоро-6-метил-1-карбоксиметилпиразинон и циклохексиламин като се използва процедурата на пример I, етап

D и след това процедурата на пример V, етап Е и процедурата от метод 4, т.т. 221-227°С.

ПРИМЕР XL

Получаване на 3-(2-инданиламино)-6-метил-1-(2-амино6-метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон

Съединението съгласно заглавието се получава като НС1 сол от 3,5-дихлоро-6-метил-1-карбоксиметилпиразинон и 2аминоиндан като се използва процедурата на пример I, етап D и след това процедурата на пример V, етап Е и процедурата от метод

4.

Анализ за C₂3H₂6N₆O2 . 2,0НС1 . 1,0Н₂О .0,35ЕЮАс Изчислено: С 54,25 Н 6,12 N 15,56

Намерено: С 54,20 Н 5,85 N 15,54.

ПРИМЕР XLI

Получаване на 3-[2(К.)-хидрокси-1(8)-инданиламино]-6метил-1-(2-амино-6-метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон

ОН ·· ···· • · • · ·

Съединението съгласно заглавието се получава от 3,586 дихлоро-6-метил-1-карбоксиметилпиразинон и 2(R)-xhhpokch-1(S)аминоиндан като се използва процедурата на пример I, етап D и след това процедурата на пример V, етап Е и процедурата от метод 4, т.т. 280-283°С.

ПРИМЕР XLII

Получаване на 3-(2-(3,4-метилендиоксифенетиламино)]

6-метил-1-(2-амино-6-метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон

НС1 от 3,5-дихлоро-6-метил-1-карбоксиметилпиразинон и 2-(3,4метилендиоксифенил)етиламин като се използва процедурата на пример I, етап D и след това процедурата на пример V, етап Е и процедурата от метод 4.

Анализ за C₂₃H₂₆N₆O4 . 3,0НС1 . 0,30ЕЮАс

Изчислено: С 49,57 Н 5,40 N 14,33

Намерено: С 49,94 Н 5,25 N 14,48.

ПРИМЕР XLIII

Получаване на 3-[2-(4-флуорофенетиламино)]-6-метил

1-(2-амино-6-метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил) пиразинон

TFA сол от 3.5-дихлоро-6-метил-1-карбоксиметилпиразинон и 2(4-флуорофенил)етиламин като се използва процедурата на пример I, етап D и след това процедурата на пример V, етап Е и процедурата от метод 4, MS (FAB) 425 (M+l)⁺.

ПРИМЕР XLIV

Получаване на 3-[2-(4-пиридил)етиламино]-6-метил-1(2-амино-6-метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон

Съединението съгласно заглавието се получава като НС1 сол от 3,5-дихлоро-6-метил-1-карбоксиметилпиразинон и 2-(4пиридил)етиламин като се използва процедурата на пример I, етап D и след това процедурата на пример V, етап Е и процедурата от метод 4, т.т. 220-226°С; MS (FAB) 408 (M+l)⁺.

ПРИМЕР XLV • · · • ··

- 88 Получаване на рац-3-(1-инданиламино)-6-метил-1-(2амино-6-метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон

Съединението съгласно заглавието се получава като НС1 сол от 3,5-дихлоро-6-метил-1-карбоксиметилпиразинон и рац-1аминоиндан като се използва процедурата на пример I, етап D и след това процедурата на пример V, етап Е и процедурата от метод

4.

Анализ за С₂зН₂бНбО2 .2,0НС1 . 1,0Н₂О

Изчислено: С 54,22 Н 5,94 N 16,50

Намерено: С 54,12 Н 5,65 N 16,45.

ПРИМЕР XLVI

Получаване на рац-3-[2-(2-тетрахидропиранил)етиламино]-6-метил-1-(2-амино-6-метил-5-метилкарбоксамидо метилпиридинил)пиразинон

Етап А: рац-2-цианометилпиран

Смес от рац-2-бромометилпиран (3,0 g, 16 mmol) и ·· ···· ·· ··

натриев цианид (1,6 g, 33 mmol) в DMF (50 ml) се нагрява при 100°С една нощ. Разтворителят след това се отстранява под вакуум и остатъкът се разпределя между метиленхлорид и вода. Органичната фаза се суши над натриев сулфат. След отстраняване на разтворителя и хроматография на остатъка (4:1 хексан/ етилацетат) се получава съединението съгласно заглавието.

^!Н NMR (CDC1₃) d 1,35-1,91 (m, 6Н), 2,50 (d, J=6,0Hz, 2H), 3,59 (m, 2H), 4,01 (m, 1H).

Етап В: рац-2-аминоетилпиран

Смес от рац-2-цианометилпиран (4,2 g) и 10% Pd/C (4,0 g) в 1:1 етанолюцетна киселина (150 ml) се хидрогенира при 55 psi една нощ. Реакционната смес се филтрира през целит и разтворителят се отстранява под вакуум. Остатъкът се разпределя между хлороформ и 10%-ен разтвор на натриев карбонат. Органичната фаза се суши над натриев сулфат. След отстраняване на разтворителя се получава съединението съгласно заглавието.

^!Н NMR (CDC1₃) d 1,32-1,84 (m, 6Н), 3,06 (m, 2Н), 3,44 (m, 2Н), 3,98 (m, 1Н).

Етап С: рац-3-[2-(2-тетрахидропиранил)етиламино]-6метил-1-(2-амино-6-метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)> пиразинон

TFA сол от 1-бензилоксикарбонилметил-3,5-дихлоро-6метилпиразинон и 2-(2-тетрахидропиранил)етиламин като се използва процедурата на пример V, етап С-Е и процедурата от метод 4. MS (FAB) 415 (M+l)⁺.

ПРИМЕР XLVII

Получаване на 3-[2-(3-пиридил)етиламино]-6-метил-1• · · · · · (2-амино-6-метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил) пиразинон

Съединението съгласно заглавието се получава като НС1 сол от 3,5-дихлоро-6-метил-1-карбоксиметилпиразинон и 2-(3пиридил)етиламин като се използва процедурата на пример I, етап D и след това процедурата на пример V, етап Е и процедурата от метод 4, т.т. >250°С; MS (FAB) 408 (M+l)⁺.

ПРИМЕР XLVIII

Получаване на 3-[2-(4-имидазолил)етиламино]-6-метил-

Съединението съгласно заглавието се получава като НС1 сол от 1-бензилоксикарбонилметил-3,5-дихлоро-6-метилпиразинон и хистамин като се използва процедурата от пример V, етап С-Е и процедурата от метод 4. MS (FAB) 397 (M+l)⁺.

·· ···· • · ·· ·· ·♦ ·· · · · · • · · · ·· • · · ··· · · • · · · · ··· ··· ·· «·

ПРИМЕР IL

Получаване на 3-[2-(3-индолил)етиламино]-6-метил-1(2-амино-6-метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон

Съединението съгласно заглавието се получава от 1бензилоксикарбонилметил-3,5-дихлоро-6-метилпиразинон и триптамин като се използва процедурата от пример V, етап С-Е и процедурата от метод 4, т.т. 195-197°С. MS (FAB) 446 (M+l)⁺.

ПРИМЕР L

Получаване на 3-{2-[3-(6-флуоро)индолил]етиламино}

nh₂

TFA сол от 1-бензилоксикарбонилметил-3,5-дихлоро-6метилпиразинон и 6-флуоротриптамин като се използва процедурата от пример V, етап С-Е и процедурата от метод 4. MS (FAB) 464 (M+l)⁺.

ПРИМЕР LI

Получаване на 3-(2-циклопентилетиламино)-6-метил-1(2-амино-6-метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон

Съединението съгласно заглавието се получава като НС1 сол от 1-бензилоксикарбонилметил-3,5-дихлоро-6-метилпиразинон и 2-циклопентилетиламин като се използва процедурата от пример V, етап С-Е и процедурата от метод 4. MS (FAB) 399 (M+l)\ © ПРИМЕР LII

Получаване на 3-[2-(4-метилфенил)етиламино]-6-метил-

• ·

Съединението съгласно заглавието се получава от 1бензилоксикарбонилметил-3,5-дихлоро-6-метилпиразинон и 2-(4метилфенил)етиламин като се използва процедурата от пример V, етап С-F, т.т. 254,5-260°С. MS (FAB) 421 (M+l)⁺.

ПРИМЕР LIII

Получаване на 3-[2-(2-тиенил)етиламино]-6-метил-1-(2амино-6-метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон

Съединението съгласно заглавието се получава от 3,5дихлоро-1-карбоксиметилпиразинон и 2-(2-тиенил)етиламин като се използва процедурата от пример I етап D, процедурата от пример V, етап Е и процедурата от метод 4, т.т. 245,5-249,5°С. MS (FAB) 413 (M+l)⁺.

ПРИМЕР LIV

Получаване на рац-3-[1-(3-пиридил)-2-пропиламино]-6метил-1-(2-амино-6-метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон

i-awMiWjj-'Wii

Съединението съгласно заглавието се получава от 1бензилоксикарбонилметил-3,5-дихлоро-6-метилпиразинон и 1-(3пиридил)-2-пропиламин (който се получава като се следва процедурата на Burger et al., J. Org. Chem. 1957,22,143) като се използва процедурата от пример V, етап С-Е и процедурата от метод 4. MS (FAB) 422 (M+l)⁺.

Анализ за C22H₂7N₇O₂ . 4,1НС1 . 1,0ЕЮАс

Изчислено: С 47,38 Н 5,98 N 14,88

Намерено: С 47,37 Н 6,11 N 14,88.

ПРИМЕР LV

Получаване на 3-[2-(3-пиридил)-1-пропиламино]-6метил-1-(2-амино-6-метил-5-метилкарбоксамидопиридинил)пиразинон

Етап А: 2-(3-пиридил)-1-нитропропан

Към разтвор на безводен СеС1₃ (8,63 g, 35,0 mmol) в 200 ml безводен THF, охладен до 0°С, на капки се прибавя MeMgBr (1,0М в етер, 11,7 ml, 35,0 mmol).След разбъркване в продължение на 1,5 h разтворът се охлажда до -40°С и на капки, за период от 15 min се прибавя разтвор на 3-(2-нитроетенил)пиридин (достъпен от TCI-USA) (1,50 g, 10,0 mmol) в 5 ml THF. След 5 min реакцията се спира с ледена АсОН (1 ml) и се концентрира под вакуум.

Остатъкът се разтваря в метиленхлорид (200 ml) и се примава с NaOH (1x50 ml, IN) и вода (1x50 ml), суши се над Na₂SO₄, филтрира и концентрира под вакуум, остатъкът се пречиства чрез флаш колонна хроматография (30 х 150 mm колона от SiO₂, EtOAc/CH₂Cl₂ (1:3)) като се получава съединението съгласно заглавието като масло.

‘Н NMR (400 MHz, CDC1₃) d 1,40 (d, J=6,9Hz, ЗН), 3,623,71 (m, 1H), 4,53-4,62 (m, 2H), 7,26-,7,36 (m, 1H), 7,54-7,59 (m, 1H), 8,48-8,53 (m, 2H).

Етап В: 2-(3-пиридил)-1-пропиламин

Към разтвор на 2-(3-пиридил)-1-нитропропан (0,91 g, 5,48 mmol) в 20 ml етанол и 0,1 ml 12N НС1 се прибавя 10% Pd/C (1,00 g) под аргон. Разтворът се евакуира и продухва с водород няколко пъти, поставя се в атмосфера от водород и се разбърква енергично. След 14 h сместа се евакуира и се продухва с аргон няколко пъти, филтрира се през целит и се промива с 200 ml етанол. Летливите компоненти се отстраняват под вакуум като се получава остатък, който се разпределя между метиленхлорид (100 ml) и NaOH (50 ml, 10%) и водният слой се екстрахира с метиленхлорид (2 х 100 ml). Обединените органични слоеве се сушат над MgSO₄, филтрират, концентрират под вакуум и остатъкът се пречиства чрез флаш колонна хроматография (20 х 150 mm колона от SiO₂, СН₂С1₂/СН₂С1₂ наситен с NH₃/MeOH 60:39:1) като се получава съединението съгласно заглавието като масло.

^JH NMR (400 MHz, CDC1₃) d 1,28 (d, J=6,8Hz, 3H), 2,742,85 (m, 1H), 2,87-2,92 (m, 2H), 7,23-7,26 (m, 1H), 7,51-7,54 (m,

1H), 8,47-8,49 (m, 2H).

Етап C: рац-3-[2-(3-пиридил)-1-пропиламино]-6-метил• · • · • · · • ·

Съединението съгласно заглавието се получава от 1бензилоксикарбонилметил-3,5-дихлоро-6-метилпиразинон и 2-(3пиридил)-1-пропиламин като се използва процедурата на пример V, етап C-F.

Анализ за C₂₂H₂7N₇O₂ . 0,1 Н₂О

Изчислено: С 62,42 Н 6,48 N 23,10

Намерено: С 62,08 Н 6,28 N 23,55.

ПРИМЕР LVI

Получаване на 3-[2-метил-2-(2-пиридил)-1пропиламино]-6-метил-1-(2-амино-6-метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон

nh₂

Етап А: 2-метил-2-(2-пиридил)пропионитрил

Към разтвор на 2-пиридилацетонитрил (1,00 g, 8,44 mmol) в безводен DMF (20 ml) охладен до 0°С, на части се прибавя NaH (0,743 g, 18,58 mmol), 60% тегл. дисперсия в минерално масло). След 10 min през спринцовка за период от 15 min се прибавя йодометан (1,31 ml, 21,11 mmol). След 1 h реакционната смес се разрежда в етилацетат (200 ml) и се промива с вода (5 х 20 ml) и разтвор на натриев хлорид (1 х 20 ml) и се суши над MgSO₄). Разтворът се филтрира, летливите компоненти »· ···· • · • · ·· ·· · · ·

- 97 се отстраняват под вакуум и полученото масло се пречиства чрез флаш колонна хроматография (30 х 150 mm колона от SiO₂, EtOAc/Hex градиентно елуиране 1:4 до 1:3) като се получава съединението съгласно заглавието като безцветно масло.

^!Н NMR ( 400 MHz, CDC1₃) d 1,77 (s, 6Н), 7,22-7,27 (m, 1Н), 7,59 (dd, J=7,8 и 0,9Hz, 1H), 7,71-7,75 (m, 1H), 8,59-8,61 (m, 1H).

Етап В: 2-метил-2-(2-пиридил)-1-пропиламин

Към разтвор на 2-метил-2-(2-пиридил)пропионитрил (1,018 g, 6,97 mmol) в 25 ml безводен диетилов етер под аргон, на части се прибавя LiAlH₄ (0,538 g, 14,17 mmol). След 1 h реакцията се спира с добавяне на вода (1 ml), NaOH (1,0 ml, IN), вода (8 ml), след това диетилов етер (20 ml) и се разбърква в продължение на 10 h. Разтворът се филтрира през слой целит и се промива с диетилов етер:МеОН (1:1) (200 ml). Филтратът се концентрира под вакуум и остатъкът се пречиства чрез флаш колонна хроматография (30 х 150 mm колона от SiO₂, СН₂С1₂/ СН₂С1₂наситен с NH₃/MeOH градиентно елуиране 60:39:1 до 60:38:2 до 60:37:3) като се получава съединението съгласно заглавието като смола.

²Н NMR (400 MHz, CDCI3) d 1,21 (br s, 2H), 1,38 (s, 6H), 2,98 (s, 2H), 7,05-7,14 (m, 1H), 7,34-7,38 (m, 1H), 7,60-7,64 (m, 1H), 8,59-8,61 (m, 1H).

Етап C: 3-(2-метил-2-(2-пиридил)-1-пропиламино)-6метил-1-(2-амино-6-метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон

Съединението съгласно заглавието се получава като НС1 сол от 1-бензилоксикарбонилметил-3,5-дихлоро-6-метилпиразинон и 2-метил-2-(2-пиридил)-1-пропиламин като се използва ·· ··· · процедурата от пример V, етапи С-Е и след това процедурата от метод 4. MS (FAB) 436 (M+l)⁺.

Анализ за C23H29N7O2 . 3,0 НС1 . 0,3 EtOAc

Изчислено: С 50,87 Н 6,07 N 17,16

Намерено: С 50,52 Н 5,76 N 16,88.

ПРИМЕР LVII

Получаване на рац-3-{ 1-[5-(2-метиламинопиридил)]-2пропиламино}-6-метил-1-(2-амино-6-метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон

н •N.

Етап А: метил-б-(трет-бутоксикарбониламино) никотинат

Към разтвор на 6-аминоникотинова киселина (2,00 g,

14,48 mmol) разтворена в хлороформ/МеОН (90 ml : 30 ml) се прибавя (триметилсилил)диазометан (2,ОМ в хексан, 25 ml). След 15 min се прибавя оцетна киселина (0,1 ml) и разтворът се концентрира под вакуум до остатък. Обработва се с ЕЮАс/Нех (2:1) като се получава метил-6-аминоникотинат като бледожълто твърдо вещество след филтриране. Продуктът се използва директно в следващия етап. Към разтвор на метил-6аминоникотинат (1,86 g, 12,22 mmol) разтворен в метиленхлорид (90 ml) се прибавя ди-трет-бутилкарбонат (2,69 g, 12,34 mmol), 4диметиламинопиридин (0,15 g, 1,22 mmol) и триетиламин (2,00 ml,

14,66 mmol). След 14 h реакционната смес се разрежда с ЕЮАс (400 ml) и се промива с лимонена киселина (1 х 50 ml, 10%), вода (1 х 50 ml) и разтвор на натриев хлорид (1 х 50 ml) и се суши над MgSO₄, филтрира и концентрира под вакуум. Остатъкът се пречиства чрез флаш колонна хроматография (40 х 150 mm колона от SiO₂, EtOAc/Hex градиентно елуиране 1:6, 1:5, 1:3) като се получава съединението съгласно заглавието като бяло твърдо

вещество.

NMR (400 MHz. CDC1₃) d 1.56 (s, 9H), 3,91 (s, 3H), 8,06 (d, J=8,2Hz, 1H), 8,24-8,27 (m, 1H), 8,57 (br s, 1H), 8,93 (dd, J=0.7 и 2,4Hz, 1H).

Етап В: 2-(трет-бутоксикарбониламино)-5пиридинкарбоксалдехид

Към разтвор на метил-б-(трет-бутоксикарбониламино)никотинат (2,20 g, 8,72 mmol) в безводен THF (50 ml), охладен до -30°С на капки се прибавя DIBAL-H (1,0М в хексан, 34,8 ml, 34,8 mmol). След 1 h се прибавя 40 ml наситен разтвор на сол на Rochelle и се разбърква енергично в продължение на 10 h. Летливите компоненти се отстраняват под вакуум и водният слой се екстрахира с метиленхлорид (3 х 50 ml). Органичният слой се промива с вода (1 х 50 ml) и разтвор на натриев хлорид (1 х 50 ml), суши се над MgSO₄, филтрира и концентрира под вакуум. Остатъкът се използва директно в следващия етап. Към разтвор на оксалилхлорид (4,12 g, 32,46 mmol) в метиленхлорид (30 ml), охладен до -78°С на капки се прибавя DMSO (2,54 g, 32,46 mmol) разтворен в метиленхлорид (9 ml). След 20 min се прибавя суровият алкохол (1,82 g, 8,11 mmol) разтворен в 35 ml метиленхлорид и след това триетиламин (4,92 g, 48,66 mmol). Ледената баня се отстранява и реакционната смес се разбърква 1 h • · · · · · * · · ··· ·

100 при стайна температура, след което се прибавя вода (30 ml). Слоевете се разделят и водният слой се екстрахира с метиленхлорид (2 х 50 ml). Органичният слой се промива с вода (1 х 50 ml) и разтвор на натриев хлорид (1 х 50 ml), суши се над MaSO4, филтрира и концентрира под вакуум. Остатъкът се пречиства чрез флаш колонна хроматография (30 х 150 mm колона от SiO₂, ЕЮАс/метиленхлорид (1:11) като се получава съединението съгласно заглавието като безцветно твърдо вещество.

Н NMR (400 MHz, CDC1₃) d 1,55 (s, 9Н), 7,79 (br s, 1H),

8,13-8,14 (m, 2H), 8,71 (dd, J=l, 1 и 1,8Hz, 1H), 9,96 (s, 1H).

Етап C: 2-(трет-бутоксикарбониламино)-5-[ 1-(2нитропропенил)] пиридин

Към разтвор на 2-(трет-бутоксикарбониламино)-5пиридинкарбоксалдехид (1,20 g, 5,40 mmol) се разтваря в Nметилморфолин (40 ml) и се прибавя нитроетан (2,20 g, 27,0 mmol), калиев флуорид (0,144 g, 2,49 mmol) и 18-краун-6 (0,036 g). След 1 h се прибавя оцетен анхидрид (2,20 g, 21,6 mmol) и каталитично количество 4-диметиламинопиридин (0,05 g). Реакцията се спира след 12 h като реакционната смес се излива в 200 ml лед. Водният слой се екстрахира с метиленхлорид (3 х 75 ml) и обединените органични слоеве се промиват с вода (2 х 50 ml) и разтвор на натриев хлорид (1 х 50 ml), сушат се над MgSO₄, филтрират и концентрират под вакуум. Остатъкът се обработва с метиленхлорид и отделеният твърд продукт се събира чрез филтриране като се получава съединенето съгласно заглавието като бледо жълто твърдо вещество.

101

^!H NMR (400 MHz, CDCI3) d 1,54 (s, 9H), 2,47 (d, >0,9 Hz, 3H), 7,41 (br s, 1H), 7,76 (dd, >2,3 и 8,8Hz, 1H), 8,04 (s, 1H), 8,05 (d, >8,8Hz, 1H), 8,33 (d, >2,4Hz, 1H).

Етап D: рац-1-[5-(2-метиламинопиридил)]-2пропиламин

Към разтвор на 2-(трет-бутоксикарбониламино)-5-[1-(2нитропропенил)]пиридин (0,20 g, 0,716 mmol) разтворен в THF (8 ml), охладен до 0°С се прибавя боран-THF комплекс (4,30 ml, 1,0М в THF, 4,30 mmol). Ледената баня се отстранява и се прибавя NaBH₄ (0,0135 g, 0,358 mmol) и реакционната смес се затопля до 65°С. След 24 h реакционната смес се излива в лед (50 ml), подкислява се до pH 2 с 3N НС1 и се затопля до 65°C в продължение на 2 h. Стойността на pH се коригира на 8 с воден NaOH (IN) и разтворителят се отстранява под вакуум. Водният слой се екстрахира с метиленхлорид (3 х 75 ml) и обединените органични слоеве се промиват с вода (2 х 50 ml) и разтвор на натриев хлорид (1 х 50 ml), сушат се над MgSO₄, филтрират и концентрират под вакуум. Остатъкът се пречиства чрез флаш колонна хроматография (15 х 150 mm колона от SiO₂, СН₂С1₂/ СН₂С1₂наситен с NH₃/MeOH 60:37:3) като се получава съединението съгласно заглавието като масло.

Н NMR (400 MHz, CDCI3) d 1.09 (d, >6,2Hz, ЗН), 2,37-

2,42 (m, 1H), 2,54 (dd, >5,5 и 13,7Hz, 1H), 2,90 (d, >4,9Hz, 3H),

3,03-3,09 (m, 1H), 4,62 (br s, 1H), 6,34-6,37 (m, 1H), 7,26-7,33 (m,

Съединението съгласно заглавието се получава като НС1

1H), 7,89-7,92 (m, 1H).

Етап Е: рац-3-{ 1-[5-(2-метиламинопиридил)]-2пропиламино}-6-метил-1-(2-амино-6-метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон

ΜΗ шам ннм··

- 102 -

сол от 1-бензилоксикарбонилметил-3,5-дихлоро-6-метилпиразинон и рац-1-[5-(2-метиламинопиридил)]-2-пропиламин като се използва процедурата от пример V, етапи C-F. MS (FAB) 451 (M+l)⁺.

Анализ за C₂₃H₃₀N₈O₂ -2,45 НС1 . 1,25 СН₂С1₂Изчислено : С 45,08 Н 5,45 N 17,35

Намерено: С 45,03 Н 5,48 N 17,37.

ПРИМЕР LVIII

Получаване на 3-(2-метил-2-фенил-1-пропиламино)-6метил-1-(2-амино-6-метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон

Съединението съгласно заглавието се получава от 1бензилоксикарбонилметил-3,5-дихлоро-6-метилпиразинон и 2метил-2-фенил-1-пропиламин като се използва процедурата от пример V, етапи С-F, т.т. 179-181°С. MS (FAB) 435 (M+l)⁺.

ПРИМЕР LIX

Получаване на 3-[2-метил-2-(3,4-метилендиоксифенил)-

1-пропиламино]-6-метил-1-(2-амино-6-метил-5метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон •· ····

« · ·· ·♦ ·· ·· ♦ · · · • · · · ·· • · · ···· · • · · · · ··· ··· ·· ··

Съединението съгласно заглавието се получава като НС1 сол от 1-бензилоксикарбонилметил-3,5-дихлоро-6-метилпиразинон и 2-метил-2-(3,4-метилендиоксифенил)-1-пропиламин (който се получава от 3,4-метилендиоксифенилацетонитрил като се използва процедурата от пример LVI, етап А и В) като се използва процедурата От пример V етапи C-F. MS (FAB) 479 (M+l)⁺.

Анализ за C₂₅H₃₀N₆O₄.2,10 НС1 . 0,7 Н₂О

Изчислено: С 52,88 Н 5,95 N 14,80

Намерено: С 52,88 Н 5,96 N 14,51.

ПРИМЕР LX

Получаване на рац-3-[1-(3,4-метилендиоксифенил)-2пропиламино]-6-метил-1-(2-амино-6-метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон

Етап А: рац-1-(3,4-метилендиоксифенил)-2-пропиламин

Към разтвор на 1-(3,4-метилендиоксифенил)-2нитропропен (0,938 g, 4,53 mmol) разтворен в абсолютен етанол

9 99 ·· ·· 99 9 9 9 9 • 9 9 9 99

9 9 9 99 9 9

9 9 9 9

999 999 99 99

BMW ·· ···· • · · • · • · <

• · ·

(40 ml), метанол (8 ml) и HCI (4N, 4 ml) под атмосфера от аргон се прибавя Pd/C (10%, 0,902 g). Сместа се поставя под атмосфера от водород (бутилка, 1 atm) и се разбърква в продължение на 14 h. Реакционната смес се филтрира през целит, промива се с етанол (200 ml) и се концентрира под вакуум като се получава съединението съгласно заглавието като бледо кафяво твърдо вещество.

^lH NMR (400 MHz, CDC1₃) d 1,35 (d, J=6,6 Hz, ЗН), 2,76 (dd, J=8,6 и 13,5Hz, 1H), 3,09 (dd, J=5,9 и 13,5Hz, 1H), 3,41-3,49 (m, 1H), 5,49 (s, 2H), 6,27-6,77 (m, 3H).

Етап В: рац-3-[1-(3,4-метилендиоксифенил)-2пропиламино]-6-метил-1-(2-амино-6-метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон

Съединението съгласно заглавието се получава като НС1 сол от 1-бензилоксикарбонилметил-3,5-дихлоро-6-метилпиразинон и 1-(3,4-метилендиоксифенил)-2-пропиламин като се използва процедурата от пример V етапи С-Е и процедурата от метод 4. MS (FAB) 465 (M+l)⁺.

Анализ за C₂4H₂8N₆O4 . 2,40 НС1 . 0,65 EtOAc ♦ Изчислено: С 52,43 Н 5,89 N 13,73

Намерено: С 52,39 Н 5,57 N 13,82.

ПРИМЕР LXI

Получаване на 3-[2-(4-сулфонамидофенил)етиламино]6-метил-1 -(2-амино-6-метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон

I

nh₂

Съединението съгласно заглавието се получава като НС1 сол от 1-бензилоксикарбонилметил-3,5-дихлоро-6-метилпиразинон и 4-(2-аминоетил)бензенсулфонамид като се използва процедурата от пример V етапи С-Е и процедурата от метод 4, т.т. 214-221 °C. MS (FAB) 486 (M+l)⁺.

ПРИМЕР LXII

Получаване на 3-(2-(3,4-дифлуорофенил)етиламино]-6метил-1 -(2-амино-6-метил-5 -метилкарбоксамидометилпиридинил)-

Съединението съгласно заглавието се получава като НС1 сол от 1-бензилоксикарбонилметил-3,5-дихлоро-6-метилпиразинон и 2-(3,4-дифлуорофенил)етиламин като се използва процедурата от пример V етапи С-Е и процедурата от метод 4, т.т. >235°С. MS (FAB) 443 (M+l)⁺.

ПРИМЕР LXIII

Получаване на 3-(3,4-метилендиоксибензиламино)-6• · • ·

метил- 1-(2-амино-6-метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон

Съединението съгласно заглавието се получава като НС1 сол от 1-бензилоксикарбонилметил-3,5-дихлоро-6-метилпиразинон и 3,4-метилендиоксибензиламин като се използва процедурата от пример V етапи С-Е и процедурата от метод 4, т.т. >255°С. MS (FAB) 437 (M+l)⁺.

ПРИМЕР LXIV

Получаване на 3-(1-фенил-1-циклобутанметиламино)-6метил-1-(2-амино-6-метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон

Съединението съгласно заглавието се получава като НС1 сол от 1-бензилоксикарбонилметил-3,5-дихлоро-6-метилпиразинон и 1-фенил-1-циклобутанметиламин (който се получава от 1-фенилφ φ φ φ φ φ φ <

107 • ·

1-циклобутанкарбонитрил като се използва процедурата от пример LVI, етап В) като се използва процедурата от пример V етапи С-Е и процедурата от метод 4, т.т. 252-259°С. MS (FAB) 447 (M+l)⁺.

ПРИМЕР LXV

Получаване на 3-(1-фенил-1-циклопропанметиламино)6-метил-1-(2-амино-6-метил-5-метилкарбоксамидометилпиримидинил)пиразинон

Съединението съгласно заглавието се получава от 1бензилоксикарбонилметил-3,5-дихлоро-6-метилпиразинон и 1фенил-1-циклопропанметиламин (който се получава от 1-фенил-1циклопропанкарбонитрил като се използва процедурата от пример LVI, етап В) като се използва процедурата от пример V етапи С-Е и процедурата от метод 4. MS (FAB) 433 (M+l)⁺.

ПРИМЕР LXVI

Получаване на 3-(2-(2,5-дифлуорофенил)етиламино]-6метил-1-(2-амино-6-метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон

Съединението съгласно заглавието се получава като TFA сол от 1-бензилоксикарбонилметил-3,5-дихлоро-6метилпиразинон и 2-(2,5-дифлуорофенил)етиламин като се използва процедурата от пример V етапи C-F. MS (FAB) 443 (M+l)⁺.

ПРИМЕР LXVII

3-[2-(2-пиридил)етиламино]-5-хлоро-6-метил-1-[етил(2-метилкарбоксамидометил-4-хлорофенокси)ацетамидо]-2пиразинон

Съединението съгласно заглавието се получава от 3,5дихлоро-6-метил-1-[етил-(2-метилкарбоксамидометил-4хлорофенокси)ацетамидо]пиразинон [който се получава като се използва процедурата от пример III, етап А, от 3,5-дихлоро-6метил-1-карбоксиметилпиразинон и етил-2-аминометил-4• ·

хлорофенокси)ацетамид)] и 2-(2-пиридил)етиламин като се използва процедурата от пример III, етап В, т.т. 207-209°С.

ПРИМЕР LXVIII

3-[2-(2-пиридил)етиламино]-6-метил-1-[етил-(2метилкарбоксамидометил-4-хлорофенокси)ацетамидо]-2пиразинон

Съединението съгласно заглавието се получава от 3-[2(2-пиридил)етиламино]-6-метил-1-карбоксиметилпиразинон и етил-2-аминометил-4-хлорофенокси)ацетамид като се използва процедурата от пример V, етап F, т.т. 195-197°С.

ПРИМЕР LXIX

3-[2-(4-морфолино)етиламино]-6-метил-1[циклопропил-(2-метилкарбоксамидометил-4-хлорофенокси)ацетамидо]-2-пиразинон

CI • · · · · · • · · · · · · · ···· ·· ··· ♦ ·· ·· ··

- 110 Съединението съгласно заглавието се получава от 3-[2(4-морфолино)етиламино]-6-метил-1-карбоксиметилпиразинон и циклопропил-2-аминометил-4-хлорофенокси)ацетамид като се използва процедурата от пример V, етап F.

Анализ за C₂₅H₃₃N₆O₅C1 . 0,45 Н₂О

Изчислено: С 55,49 Н 6,31 N 15,53

Намерено: С 55,14 Н 6,16 N 16,13.

ПРИМЕР LXX

3-[2-(2-пиридил)етиламино]-6-метил-1-[циклопропил(2-метилкарбоксамидометил-4-хлорофенокси)ацетамидо]-2пиразинон

CI

Съединението съгласно заглавието се получава от 3-[2-

(2-пиридил)етиламино]-6-метил-1-карбоксиметилпиразинон и циклопропил-2-аминометил-4-хлорофенокси)ацетамид като се използва процедурата от пример V, етап F, т.т. 196-199°С. MS (FAB) 525 (M+l)⁺.

ПРИМЕР LXXI

3-[2(8)-метил-1-бутиламино]-6-метил-1-[циклопропил(2-метилкарбоксамидометил-4-хлорофенокси)ацетамидо]-2пиразинон

Съединението съгласно заглавието се получава от 3[2(8)-метил-1-бутиламино]-6-метил-1-карбоксиметилпиразинон и циклопропил-2-аминометил-4-хлорофенокси)ацетамид като се използва процедурата от пример V, етап F, т.т. 195-198°С. MS (FAB) 490 (M+l)⁺.

ПРИМЕР LXXII

3-(1-пентиламино)-6-метил-1-[етил-(2метилкарбоксамидометил-4-хлорофенокси)ацетамидо]-2пиразинон

Съединението съгласно заглавието се получава от 3-(1пентиламино)-6-метил-1-карбоксиметилпиразинон и етил-2аминометил-4-хлорофенокси)ацетамид като се използва процедурата от пример V, етап F, т.т. 125-127°С.

ПРИМЕР LXXIII

3-(2,2-дифениламино)-6-метил-1-[циклопропил-(2-

·· ··· ·

метилкарбоксамидометил-4-хлорофенокси)ацетамидо]-2пиразинон

Съединението съгласно заглавието се получава от 3(2,2-дифениламино)-6-метил-1-карбоксиметилпиразинон и циклопропил-2-аминометил-4-хлорофенокси)ацетамид като се използва процедурата от пример V, етап F, т.т. 153-159°С. MS (FAB) 600 (M+l)⁺.

ПРИМЕР LXXIV

3-(циклохексиламино)-6-метил-1-[циклопропил-(2метилкарбоксамидометил-4-хлорофенокси)ацетамидо]-2-

Съединението съгласно заглавието се получава от 3(циклохексиламино)-б-метил-1 -карбоксиметилпиразинон и циклопропил-2-аминометил-4-хлорофенокси)ацетамид като се ”П4

(2-пиридил)етиламино]-6-метил-1-карбоксиметилпиразинон и 3хлоробензиламин като се използва процедурата от пример V, етап F, т.т. 201-207°С. MS (FAB) 412 (M+l)⁺.

ПРИМЕР LXXVII

3-[2-(2-пиридил)етиламино]-6-метил-1-(3-хлоро-6(цианометокси)бензилацетамидо)-2-пиразинон

Съединението съгласно заглавието се получава от 3-[2(2-пиридил)етиламино]-6-метил-1-карбоксиметилпиразинон и 3хлоро-6-(цианометокси)бензиламин като се използва процедурата от пример V, етап F, т.т. 207-211°С.

ПРИМЕР LXXVIII

3-[2-(2-пиридил)етиламино]-6-метил-1-(2-флуоро-5(трифлуорометил)бензилацетамидо)-2-пиразинон

Съединението съгласно заглавието се получава от 3-[2• · · · · · ·· · · · ··· • · · · ·· • · · ····· • · · ·· ··· · · · ·· ··

- 113използва процедурата от пример V, етап F, т.т. 114-121°С. MS (FAB) 502 (M+l)⁺.

ПРИМЕР LXXV

3-[2-(2-пиридил)етиламино]-6-метил-1-(2,5дихлоробензилацетамидо)-2-пиразинон

Съединението съгласно заглавието се получава от 3-[2(2-пиридил)етиламино]-6-метил-1-карбоксиметилпиразинон и 2,5дихлоробензиламин като се използва процедурата от пример V, етап F, т.т. 188-191°С. MS (FAB) 446 (M+l)⁺.

ПРИМЕР LXXVI

3-[2-(2-пиридил)етиламино]-6-метил-1-(3хлоробензилацетамидо)-2-пиразинон

Съединението съгласно заглавието се получава от 3-[2115 (2-пиридил)етиламино]-6-метил-1-карбоксиметилпиразинон и 2флуоро-5-трифлуоробензиламин като се използва процедурата от пример V, етап F. т.т. 181-184°С.

ПРИМЕР LXXIX

3-[2-(4-пиридил)етиламино]-6-метил-1 -[циклопропил(2-метилкарбоксамидометил-4-хлорофенокси)ацетамидо]-2пиразинон

Съединението съгласно заглавието се получава от 3-[2(4-пиридил)етиламино]-6-метил-1-карбоксиметилпиразинон и циклопропил-2-аминометил-4-хлорофенокси)ацетамид като се използва процедурата от пример V, етап F, т.т. 190-192,5°С. MS (FAB) 525 (M+l)⁺.

ПРИМЕР LXXX

3-[2-(3,4-метилендиоксифенил)етиламино]-6-метил-1[циклопропил-(2-метилкарбоксамидометил-4-хлорофенокси)ацетамидо]-2-пиразинон

116 -

Η

Съединението съгласно заглавието се получава от 3-[2 (3,4-метилендиоксифенил)етиламино]-6-метил-1карбоксиметилпиразинон и циклопропил-2-аминометил-4хлорофенокси)ацетамид като се използва процедурата от пример V, етап F, т.т. 202-204°С. MS (FAB) 568 (M+l)⁺.

ПРИМЕР LXXXI

3-(2-фенетиламино)-6-метил-1-[3-хлоро-6(карбоксиметокси)бензилацетамидо]-2-пиразинон

CI

Съединението съгласно заглавието се получава от 3-(2фенетиламино)-6-метил-1-карбоксиметилпиразинон и етил-2аминометил-4-хлорофеноксиацетат като се използва процедурата от пример V, етап F, с последваща хидролиза като се използва процедурата от пример V, етап D. MS (FAB) 485 (M+l)⁺.

ПРИМЕР LXXXII

Получаване на 3-(2-фенилетиламино)-6-метил-1-(2амино-6-метил-5-метиленкарбоксамидометилпиридинил)-2·· · · · · ··

- 117 пиридинон

Етап А: а-(алиламино)пропионитрил хидрохлорид Концентрирана НС1 (20 ml, 0,24 mol) се прибавя към разбъркван разтвор на алиламин (36 ml, 0,48 mol) във вода (100 ml) и етанол (60 ml) при 0°С. След това се прибавят калиев цианид (15 g, 0,23 mol) и ацеталдехид (11,2 ml, 0,20 mol) и сместа се нагрява до температурата под обратен хладник. След 15 min летливите компоненти се отстраняват под вакуум и полученият разтвор се насища с NaCI и се екстрахира с метиленхлорид (3 пъти). Обединените екстракти се сушат (Na₂SO₄) и изпаряват под вакуум като се получава масло, което се разтваря в IM НС1 (200 ml). Разтворът се изпарява под вакуум, ацеотропно се изпарява с 1:1 толуен/метанол като се получава твърдо вещество, което се нагрява по температурата под обратен хладник в етилацетат (200 ml), охлажда се, филтрира се и се суши като се получава съединението съгласно заглавието като НС1 сол.

*Н NMR (400 MHz, CDjOD) d 1,72 (d, J=7,0Hz, 3H, CH₃), 3,78-3,90 (m, 2H, CH₂), 4,63 (q, J=7,0Hz, a-CH), 5,56-5,66 (m, 2H, CHCH₂), 5,91-6,02 (m, 1H, CHCH₂).

Етап В: 1-алил-3,5-дихлоро-6-метилпиразинон

Разбърквана смес от оксалилхлорид (30,5 ml, 0,35 mol) и а-(алиламино)пропионитрил хидрохлорид (10,26 g, 70 mmol) и одихлоробензен (100 ml) се нагряват до 100°С в продължение на 15 ·« ···· ···· ·· ·

118 • · ·· • ·<···

9· • 9999 min. Разтворителят се изпарява под вакуум и полученото тъмно масло се пречиства чрез флаш колонна хроматография върху силициев диоксид (елуиране с 30% етилацетат/хексан) като се получава съединението съгласно заглавието.

^!Н NMR (400 Mz, CDC1₃) d 2,48 (s, ЗН, СН₃), 4,75 (m,

2Н, NCH₂), 5,18 (m, 1Н, СНСНдНв), 5,33 (m, 1H, СНСНдНв), 5,855,92 (m, 1H, СНСНдНв).

Етап C: 3,5-дихлоро-6-метил-1-метиленкарбоксипиразинон

Рутениев трихлорид хидрат (114 mg, 0,547 mmol) се

прибавя към разбърквана смес от 1-алил-3,5-дихлоро-6метилпиразинон (5,45 g, 24,88 mmol) и натриев перйодат (21,82 g, 0,102 mol) във вода (75 ml), ацетонитрил (50 ml) и въглероден тетрахлорид (50 ml). След 3 h обединените екстракти се сушат (Na₂SO₄) и изпаряват под вакуум до сироп. Анализ с ^JH NMR (CDC13) на проба показва, че е смес от 1:1 киселина и алдехид. Суровата смес се разтваря в ацетон (50 ml) и се прибавя реактив на Jones (2,7 М) докато реакционната смес стане оранжева. Реакционната смес се екстрахира с етилацетат, който след това се промива с разтвор на натриев хлорид, суши се (Na₂SO₄) и се изпарява под вакуум като се получава съединението съгласно заглавието като жълтокафяво твърдо вещество.

Н NMR (400 Mz, DMSO) d 2,41 (s, ЗН, Me), 4,86 (s, 2H,

CH₂).

Етап D: 3-(2-фенетиламино)-5-хлоро-6-метил-1метиленкарбоксипиразинон

Фенетиламин (0,80 ml, 6,33 mmol) се прибавя към разбъркван разтвор на 3,5-дихлоро-6-метил-1-метиленкарбоксипиразинон (0,50 g, 2,11 mmol) в диоксан (6 ml) и • ·

полученият разтвор се нагрява до 60°С. След 16 h реакционната

смес се разпределя между метиленхлорид и 10%-ен разтвор на лимонена киселина. Органичният слой се суши (Na₂SO₄) и изпарява под вакуум като се получава жълтокафяво твърдо вещество, което се пречиства чрез флаш колонна хроматография (елуиране с градиент метанол/хлороформ/2% оцетна киселина, 25% метанол) като се получава след ацеотропно сушене с толуен съединението съгласно заглавието като бяло твърдо вещество.

^!Н NMR (300 Mz, DMSO) d 2,19 (s, ЗН, Me), 2,84 (t, J=7,0Hz, 2H, PhCH₂), 3,45 (q, J=7,0Hz, 2H, CH₂NH), 4,70 (s, 2H, CH₂CO₂), 7,18-7,31 (m, 5H, Ph), 7,46 (br t, 1H, NH).

Етап Е: 3-(2-фенилетиламино)-6-метил-1метиленкарбоксипиразинон

Ранейникелова сплав (1 g) се прибавя към разбъркван разтвор на 3-(2-фенетиламино)-5-хлоро-6-метил-1метиленкарбоксипиразинон (158 mg, 0,49 mmol) в 1:1 метанол/1М NaOH (24 ml). След 2 h реакционната смес се филтрира през целит, промива се с 1:1 метанол:вода и филтратът се изпарява под вакуум до бяло твърдо вещество. Суровият продукт, който е онечистен с неорганични соли се пречиства чрез препаративна HPLC (С18, вода/ацетонитрил/0,1% TFA градиент) като се получава съединението съгласно заглавието като пяна.

^lH NMT (400 Mz, DMSO) d 2,11 (s, ЗН, Me), 2,87 (t, J=7,6Hz, 2H, PhCH₂), 3,53 (br s, 2H, CH₂NH), 4,68 (s, 2H, CH₂CO₂),

6,68 (s, 1H, пиразинон H-5), 7,20-7,31 (m, 5H, Ph), 8,16 (br, s, 1H, NH).

Етап F: 3-(2-фенетиламино)-6-метил-1-(2-третбутоксикарбониламино-б-метил-5-метиленкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон • ·

EDC хидрохлорид (56 mg, 0,29 mmol) се прибавя към разбърквана смес от 3-(2-фенилетиламино)-6-метил-1метиленкарбоксипиразинон (91 mg, 0,23 mmol), НОВТ (40 mg, 0,29 mmol), 5-аминометил-2-трет-бутоксикарбониламино-6метилпиридин (70 mg, 0,29 mmol) и N-метилморфолин (0,13 ml, 1,17 mmol) в DMF (1 ml) и сместа се разбърква 16 h. Реакционната

смес се разрежда с етилацетат и се промива с вода, суши се (Na₂SO₄) и изпарява под вакуум. Суровият продукт се пречиства чрез флаш колонна хроматография върху силициев диоксид (етилацетат/хексан градиент, 80-100% етилацетат), като се получава съединенето съгласно заглавието.

*Н NMR (300 Mz, CDC1₃) d 1,51 (s, 9Н, t-Bu), 2,26 (s, ЗН, СН₃), 2,36 (s, ЗН, СНз), 2,93 (t, J-7,0Hz, PhCH₂), 3,65 (q, J=7,0Hz, PhCH₂CH₂), 4,36 (d, J=5,6Hz, 2H, CONHCbb), 4,61 (s, 2H, CH₂CO), 5,91 (br t, 1H, NH), 6,65 (br, t, 1H, NH), 6,77 (s, 1H, пиразинон H5), 7,12 (s, 1H, NHBOC), 7,21-7,32 (m, 5H, Ph), 7,42 (d, J=8,5Hz, 1H, пиридин H-3), 7,68 (d, J=8,5Hz, 1H, пиридин H-4).

Етап G: 3-(2-фенетиламино)-6-метил-1-(2-амино-6метил-5-метиленкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон

HC1 газ се пуска да барботира през суспензия от 3-(2фенетиламино)-6-метил-1-(2-трет-бутоксикарбониламино-6-метил-

5-метиленкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон (85 mg, 0,17 mmol) в етилацетат (10 ml) при 0°С докато се получи разтвор, който се насища с НС1. След 2 h при стайна температура сместа се дегазира с азот и се филтрира като се получава съединението съгласно заглавието като бисНС! сол бяло кристално твърдо вещество, т.т. > 200°С.

Ή NMR (300 Mz, CD3OD) d 2,18 (s, ЗН, CH₃), 2,52 (s,

ЗН, СНз), 3,00 (t, J=7,4Hz, PhCH₂), 3,68 (t, J=7,4Hz, PhCH₂CH₂), • · · · « · « · • · • · · ·· ·· ··· ·· · · ···· • · · · ······· • · · · · · · ·

4,33 (d, J=5,4Hz, 2H, CONHCH2), 4,76 (s, 2H, CH₂CO), 6,55 (s, 1H, пиразинон H-5), 6,84 (d, J=9,3Hz, 1H, пиридин H-3), 7,23-7,31 (m, 5H, Ph), 7,86 (d, J=9,3Hz, 1H, пиридин H-4). MS (FAB) 407 (M+l)⁺.

In vitro опит за определяне на инхибнрането на протеиназа

Проведени са опити с човешки α-тромбин и човешки трипсин по методите по същество описани в Thrombosis Research, Issue № 70, page 173 (1993) от S. D. Lewis et al.

Опитите са извършени при 25°С в 0,05 М Tris буфер pH 7,4, 0,15 М NaCl, 0,1% PEG. Трипсиновият опит съдържа също 1 тМ СаС1₂. В опитите, където се определя степента на хидролиза на р-нитроанилид (рпа) се използва апарат за отчитане Thermomax 96-well plate reader за измерване (при 405 nm) на зависещото от времето появяване на р-нитроанилин. sar-PR-pna се използва за анализ на човешки α-тромбин (К_т=125 μΜ) и говежди трипсин (К._га= 125 μΜ). Субстратната концентрация на р-нитроанилида се определя от измерването на абсорбцията при 342 nm като се използва екстинкционен коефициент 8270 ст^М’¹.

В някои изследвания с мощни инхибитори (Kj <10 пМ), където степента на инхибиране на тромбина е висока, се използва анализ с по-висока чувствителност. В този анализ скоростта на катализираната от тромбина хидролиза на флуорогенния субстрат Z-GPR-afc (K_m=27 μΜ) се определя от увеличението на флуоресценцията при 500 nm (възбуждане при 400 nm) свързано с продуцирането на 7-амино-4-трифлуорометилкумарин. Концентрациите на съхраняваните разтвори от Z-GPR-afc се определят от измерването на абсорбцията при 380 nm на 7-амино-

4-трифлуорометилкумарина продуциран при пълна хидролиза от • · · ·

122

тромбина на аликвотна част от съхранявания разтвор.

Анализите на активността се извършват чрез разреждане на съхраняван разтвор на субстрат най-малко десеткратно до крайна концентрация <0,1 К_т в разтвор съдържащ ензим или ензим еквилибриран с инхибитор. Времената изискващи се за достигане на равновесие между ензима и инхибитора се определят в контролни опити. Началните скорости на образуване на продукта в отсъствието (V_o) или присъствието на инхибитор (Vj) се измерват. Тъй като се предполага конкуретно инхибиране и предвид това, че единицата е пренебрежима в сравнение с K_m/[S], [1]/е, и [1]/е (където [S], [I] и е респективно означават общата концентрация на субстрата, инхибитора и ензима), равновесната константа (Κι) за дисоциацията на инхибитора на ензима може да бъде получена от зависимостта V₀/Vj от [I] показана в равенството

1.

Активностите показани при този опит сочат, че

съединенията съгласно изобретението са терапевтично полезни за лечение на различни състояния у пациенти страдащи от нестабилна ангина, рефрактерна ангина, инфаркт на миокарда, преходни исхемични пристъпи, предсърдна фибрилация, тромботичен удар, емболичен удар, дълбока венна тромбоза, разпръснато вътресъдово съсирване, и реоклузия или рестеноза на реканализирани съдове. Инхибиращата активност на съединенията съгласно изобретението спрямо човешки тромбин, представена чрез Kj е по-малка от 24 пМ. Това са селективни съединения, както е потвърдено с тяхната инхибиторна активност спрямо човешки трипсин (представена с Ki), която е най-малко 1000 пМ.

Следващите таблици илюстрират други съединения в

обхвата на настоящото изобретение. Инхибиторната активност е означена с показваща Kj по-голяма или равна на пМ или показваща Kj по-малка от пМ.

Таблица 1

X	Y	Ki
н	NHC₂H₅	**
н	NHC₃H₅
н	NH(CH₂)₂N(CH₃)₂
F	NHC2H5
F	nhc₃h₅
F	NH(CH₂)₂N(CH₃)2	-

Таблица 2

R	к»
С₃Н₅ С₃Н₅СН₂трет-С₄Н₉НО₂ССН₂ CF₃CH₂(ch₃)₂N(CH₂)₂	♦

Таблица 3

R	Ki
PhCH₂C(CH₃)₂PhCHCH₃PhCH₂CHCO₂H норм-С₆Н1₃	*

·· ····

128

·· • · · • ·· ··· · · • · · ·· ··

ο iOS

ο

МИМИШННШЙШ·

Μ

?й)11йд|№лмяиийа^йм1№ iarihnwrUi

1ййШМй

о вШМФШММММ ·· ···· • · · ft • ft • ftft ft ft ft • · ft ft ft · · • ft ·· • · ft · • · ·· • ···· ft • · ft

132 -

133 -

ο

Μ*ΜΜΜΜίΜ·ί·ι

ММ*

о

**

Ο ★*

ο

nh₂

★*

Cl

Пример LXXXIII

In vivo изследвания за определяне тромботични оклузии

Изследване на 3-(2-фенилетиламино)-6-метил-1-(2амино-6-метил-5-метиленкарбоксамидометилпиридинил)-2пиридинон, като се използват следващите анализи на железен хлорид у плъхове, по същество както са описани от Kurtz et al., в Thrombosis Research, № 60, page 269 (1990), се използват за определяне на in vivo активността на тромбиновите инхибитори съгласно изобретението.

Мъжки плъхове Sprague-Dawley (телесно тегло 200-350 g) се анестезират с диал-уретанов разтвор (0,1 ml/100 g телесно тегло i.p.) и латералната опашна вена се канюлира с игла 23 калибър свързана с РЕ50 тръба дълга 12 инча. Тръбата се свързва с 3-пътна клапа посредством тръбен адаптор. Прилага се физиологичен разтвор (контрола) или изпитваното съединение, съответно, през катетера на опашната вена. Прави се трахеостомия ·· ···· • · · • · • · · • ft ·

c PE50 тръба c дължина 0,75 инча. Дясната каротидна артерия се открива и върху съда се поставя 1,3 mm диаметър Doppler flow проба.Телесната температура се поддържа на 37°С като се

използва лампа за нагряване.

Шест плъха се разпределят произволно на непрекъснато вливане на физиологичен разтвор или изследваното съединение прилагани през опашната вена. Изследваното съединение се прилага със скорост 10 μg/kg/min. Лечебните вливания започват 60 min преди да се постави 3 mm квадратно късче филтърна хартия Watman № 1 наситено с 35% FeCl₃ върху откритата каротидна артерия дистално на течащата проба. Лечебните вливания продължават допълнително 90 min след прилагането на FeCl₃(продължителност на цялото вливане 150 min) ако не настъпи троботична оклузия на съда. Времето до оклузията се дефинира като време от прилагането на FeCl₃ до тромботична оклузия на съда. В края на изследването (90 min след прилагане на FeCl₃ у животните, които нямат оклузия, или на 30-тата min след тромбозната оклузия) се вземат 3 ml кръвни проби чрез сърдечна пункция в 0,3 ml 3,8 % натриев цитрат.

Резултатите от изследването показват, че изпитваното съединение е напълно ефикасно. Никой от третираните плъхове не показва доказателства за тромботична оклузия.

Пример LXXXIV

Приготвяне на таблети

Приготвят се таблети съдържащи 25,0, 50,0 и 100,0 mg респективно, от следните активни съединения както е посочено по-долу ( Състави А - I):

3-(2-Фенилетиламино)-6-метил-1-(2-амино-6-метил-5метиленкарбоксамидометилпиридинил)-2-пиридинон (Актив I) ······ 9 999 99

9 9 9 9 9 9 9 9 99

9 9 9 9 99

99 9 9999999

9 9 · ···· •··· ·· 999 99 9 99 99

- 1463-(2-Фенетиламино)-6-метил-1-[етил-(2метиленкарбоксамидометил-4-хлорофенокси)ацетамидо]-2пиразинон (Актив II), и

3-Дмино-6-метил-1-[етил-(2-метиленкарбоксамидометил-4-хлорофенокси)ацетамидо]-2-пиразинон (Актив III).

Таблица за дозираните форми съдържащи от 25-100 mg от активното съединение

Количество mg

Съед.	А	В	е	D	Е	F	G	Н	I
Актив I	25	50	100	-	-	-	-		-
Актив II	-	-	-	25	50	100	-	-	-
Актив III	-	-	-	-	-	-	25	50	100
Микрокристална целулоза	37,25	100	200	37,25	100	200	37,25	100	200
Модифицирано царевично нишесте	37,25	4,25	8,5	37,25	4,25	8,5	37,25	4,25	8,5
Магнезиев стеарат	0,5	0,75	1,5	0,5	0,75	1,5	0,5	0,75	1,5

Всяко от активните съединения, целулоза и част от царевичното нишесте се смесват и гранулират до паста с 10% царевично нишесте. Получените гранули се пресява, суши се и се смесва с остатъка от царевичното нишесте и магнезиевия стеарат. Получените гранули след това се пресова на таблети съдържащи 25,0, 50,0 и 100,0 mg респективно от активната съставка в една таблета.

·· *··· • · · ·· ·· · · · · • · · · · · ·· • ·· · ······· ··· · · ··· ···· ·· ··· ··· ·· ··

- 147 Пример LXXXV

Приготвяне на таблети

По-долу са показани примерни състави с 3-(2фенетиламино)-6-метил-1-(2-амино-6-метил-5метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон дихидрохлорид Тип А монохидрат (Актив IV):

Съединение	0,25 mg	2 mg	10 mg	50 mg
Актив IV	0,500%	1,000%	5,000%	14,29%
Манитол	49,50%	49,25%	47,25%	42,61%
Микрокриста лна целулоза	49,50%	49,25%	47,25%	42,61%
Магнезиев стеарат	0,500%	0,500%	0,500%	0,500%

2, 10 и 50 mg таблети се покриват с филм с водна дисперсия на хидроксипропилцелулоза, хидроксипропилметилцелулоза и титанов диоксид, като се получава спестяване на номинално тегло 2,4 %.

Приготвяне на таблети чрез директно таблетиране Актив IV, манитол и микрокристална целулоза се пресяват през сита със специфичен размер на отворите (най-общо от 250 до 750 цт) и се обединяват в подходящ смесител. След това сместа се разбърква (обикновено 15 до 30 min) докато лекарството се разпредели равномерно в получената суха прахова смес. Магнезиев стеарат се пресява и се прибавя към смесителя, след което се получава смес преди таблетиране след допълнително разбъркване (обичайно 2 до 10 min). Тази смес преди таблетиране след това се таблетира с прилагане на сила обичайно в порядъка от 0,5 до 2,5 метрични тона, достатъчна да се получат таблети с подходяща физическа здравина с приемливи времена на разпадане ·· ··*· (спецификите варират с размерите и силата на готовата таблета). В случаите на 2, 10 и 50 mg активна съставка таблетите се обезпрашават и се покриват с филм с водна дисперсия от водоразтворими полимери и пигменти.

Приготвяне на таблети чрез сухо гранулиране

Алтернативно, суха прахова смес се прави компактна при умерена сила и се смила отново, за да се получат гранули със специфичен размер на частиците. След това гранулите се смесват с магнезиев стеарат и се таблетират както е заявено по-горе.

Пример LXXXVI

Готова форма за венозно приложение

Приготвят се готови форми за венозно приложение с 3(2-фенетиламино)-6-метил-1-(2-амино-6-метил-5метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон дихидрохлорид Тип А монохидрат (Актив IV) съгласно общите методи за готови форми за венозно приложение.

Изчислено съотношение

Съединение

Актив IV	0,12-0,61 mg
D-глюкуронова киселина*	0,5-5 mg
Manitol NF	50-53 mg
IN натриев хидроксид	q.s.pH 3,9-41
Вода за инжекции	q.s.1,0 ml

·· ···· • · · • · • · · • · ·

Примерни състави А-С са както следва:

Съединение	A	B	C
Актив IV	0,61 mg*	0,30 **	0,15 ***
D-глюкуронова киселина	1,94 mg	1,94 mg	1,94 mg
Manitol NF	51,2 mg	51,2 mg	51,2 mg
IN NaOH	q.s.pH 4,0	q.s.pH 4,0	q.s.pH 4,0
Вода за	q.s. 1,0 ml	q.s. 1.0 ml	q.s. 1,0 ml

инжекции * 0,50 mg свободна основа ** 0,25 mg свободна основа *** 0,12 mg свободна основа

Глюкуроновата киселина може да бъде заменена с различни други буферни киселини като L-млечна киселина, оцетна киселина, лимонена киселина или всяка фармацевтично приемлива киселина/конюгат база за венозно приложение.

·· ····

• · ··· · • ·9

9 99

9999 99 9999

- 150 ·· ·· • 9 99

999

999 99

99

9999

Claims

1. Съединение с обща формула в която W означава водород,

R¹;

R^CO;

R^O;

R^CH^NHCO; или (R¹)₂CH(CH₂)_nNHCO, където η е 0-4;

R¹ означава R²;

R²(CH2)mC(R¹²)2, където m е 0-3 и всички R¹²могат да бъдат еднакви или различни;

(R²)(OR²)CH(CH2)P, където р е 1-4; R²C(R¹²)2(CH₂)_m, където ш е 0-3 и всички R¹²могат да бъдат еднакви или различни, където (R¹²)₂ могат да образуват също пръстен с С означен като С₃.₇ циклоалкил;

R²CH2C(R¹²)2(CH2)q, където q е 0-2 и всички R¹² могат да бъдат еднакви или различни, където (R¹²)2 могат да образуват също пръстен с С означен като С₃.₇ циклоалкил;

(R²)₂CH(CH₂)_r, където г е 0-4 и всички R² могат да бъдат еднакви или различни и където (R²)₂ могат да образуват също пръстен с СН, означен като С₃.₇ циклоалкил, C₇_i₂ бициклоалкил, С₁₀.1б трициклоалкил или 5- до 7-атомен моно- или бицикличен хетероциклен пръстен, който може да бъде наситен • · • · · · ·

151 • · · • · · · • · · · • · • · · · или ненаситен и съдържа от един до три хетероатома избрани от групата N, О и S;

R² и R¹⁴ означават независимо един от друг фенил, незаместен или заместен с един или повече С_Ь4 алкил, С_Ь4 алкокси, халоген, хидрокси, СООН, CONH₂или SO₂NH₂;

нафтил; бифенил;

5- до 7-атомен моно- или 9- до 10-атомен бицикличен хетероцикрен пръстен или нехетероциклен пръстен, който може да бъде наситен или ненаситен, където хетероцикленият пръстен съдържа от един до четири хетероатома избрани от групата N, О и S и където хетероцикленият или нехетероцикленият пръстен е незаместен или заместен с халоген или хидрокси;

С1_7 алкил, незаместен или заместен с един или повече хидрокси, СООН, амино, арил, С₃.₇ циклоалкил, CF₃, N(CH₃)₂, -Сь₃ алкиларил, хетероарил или хетероциклоалкил;

CF₃;

С₃_₇ циклоалкил, незаместен или заместен с арил;

С7-12 бициклоалкил; или

Сю-16 трициклоалкил;

R³ означава водород;

С1.₄ алкил;

С₃_7 циклоалкил; или

152 трифлуорометил

X означава водород или халоген;

А е избран от следните радикали;

1 7 където Y и Y означават независимо един от друг водород,

Сь4 алкил, С_Ь4 алкокси, С₃_₇ циклоалкил, халоген или трифлуорометил;

R⁴ означава водород

С1_4 алкил;

Ci-4 алкокси;

халоген;

-OCH₂CF₃;

-OCH₂CN;

-COOH;

-OH;

-COOR⁶, където R⁶ e Cj.₄ алкил; -CONR⁷R⁸, където R⁷ и R⁸ независимо означават водород или Сь₄ алкил;

-(СН₂)_Ь4ОН;

-CH₂NHC(O)CH₃;

-CH₂NHC(O)CF₃;

ммм им

-CH₂NHSO₂CH₃;

-SO₂NH₂;

-(CH₂)₁.₄SO₂NR⁷R^s; -(CH₂)₁.₄SO₂R^s;

-ZCH₂CO₂H; -ZCH₂CO₂CH₃; -ZCH₂R¹⁴;

-гСНгССМСВДьзСНз;

-Z(CHR⁹)i_3C(O)NR¹⁰R¹¹, където R⁹ е водород или С}_4 алкил, R¹⁰ и R¹¹ независимо означават водород, С3.₇циклоалкил, арил, хетероарил, хетероциклоалкил, -(CH₂)i-₂NCH₂CH₃, С1.4 алкил, незаместен или заместен с един или повече хидрокси, СООН, амино, арил, хетероарил или хетероциклоалкил или R¹⁰ и R¹¹ са свързани като образуват четири ®до седематомен циклоалкилов пръстен, незаместен или заместен с хидрокси, амино или арил, където Z е О, S или СН₂;

R⁵ означава водород; халоген; Cj.4 алкил; С1.4 алкокси; CF₃;

CN; или

CO₂NH₂ и • 4 • · · · ·

154 • · · · • · · · ♦ · ·· • · · · · · • · ·

R¹² означава водород;

фенил, незаместен или заместен с един или повече С1.4 алкил, С1.4 алкокси, халоген, хидрокси, COOH, CONH₂;

нафтил;

бифенил;

Ci-4 алкил, незаместен или заместен с един или повече хидрокси, СООН, амино, арил, хетероарил или хетероциклоалкил;

CF₃;

С3.7 циклоалкил;

С₇_12 бициклоалкил; или

Сю-16 трициклоалкил;

и техни фармацевтично приемливи соли.

2. Съединение съгласно претенция 1, и негови фармацевтично приемливи соли, характеризиращо се с това, че R³е С).4 алкил.

3. Съединение съгласно претенция 2, и негови фармацевтично приемливи соли, характеризиращо се с това, че А е избран от следните радикали:

Y- • · • · · · • ·

155

1 2 където Y и Y независимо един от друг означават водород или

Сь4 алкил;

R⁴ означава водород;

халотен;

-OCH₂CN;

-ОН;

-ZCH₂CO₂H или

-Z(CHR⁹)₁.₃C(O)NR¹⁰R¹¹, където R⁹ е водород или С1_4 алкил и R¹⁰ и R¹¹ са независимо водород, С₃.₇ циклоалкил,

-(CH₂)i.₂NCH₂CH₃ илиС₃_4 алкил, където Z е О, S или СН₂;

R⁵ означава водород;

халоген; или

CF₃.

4. Съединение съгласно претенция 3, и негови фармацевтично приемливи соли, характеризиращо се с това, че W означава водород или R¹.

5. Съединение съгласно претенция 4, и негови фармацевтично приемливи соли, характеризиращо се с това, че

R¹ означава R²;

R²(CH2)mC(R¹²)2, където m е 0-3 и всички R¹²са еднакви или различни;

R²C(R¹²)2(CH2)m, където m е 0-3 и всички R¹²са еднакви или различни и (R¹²)2 могат да образуват пръстен с С означен като С₃.₇ циклоалкил;

(R²)2CH(CH2)r, където r е 0-4 и всички R²могат да бъдат еднакви или различни и (R²)2 могат също да образуват пръстен с СН означен като С3.7 циклоалкил, С₇. ₁₂бициклоалкил, Сю-и трициклоалкил или 5- до 7-атомен монокли бицикличен хетероциклен пръстен, който може да бъде наситен или ненаситен и който съдържа от един до три хетероатома избрани от групата N, О и S; или

R²O(CH₂)_P, където ре 1-4;

R² и R¹⁴ означават независимо един от друг фенил, незаместен или заместен с един или повече С1.4 алкил, Ci_₄ алкокси, халоген, хидрокси или SO₂NH₂;

5- до 7-атомен моно- или 9- до 10-атомен бицикличен хетероциклен пръстен или нехетероциклен пръстен, съдържащ от един до четири хетероатома избрани от N, О или S и където хетероцикления или нехетероцикления пръстен е незаместен или заместен с халоген или хидрокси;

Cj.₇ алкил, незаместен или заместен с един или повече хидрокси, СООН, С₃.₇ циклоалкил, CF₃, N(CH₃)₂, -Ci.₃ алкиларил, хетероарил или хетероциклоалкил;

CF₃; или

С₃.₇ циклоалкил, незаместен или заместен с арил;и

R¹² означава водород;

С1.4 алкил, незаместен или заместен с един или повече хидрокси, СООН, амино, арил, хетероарил или хетероциклоалкил.

6. Съединение съгласно претенция 5 или негова фармацевтично приемлива сол, характеризиращо се с това, че вШ й

А означава

i) където R⁵ означава водород, флуоро, хлоро и

R¹⁰ и R¹¹ независимо са избрани от водород, С₂Н₅, С₃Н₅, (CH₂)₂N(CH₃)₂, Сз циклоалкил,

И)

Hi) iv)

V) където R⁴ е OH, хлоро, Н, -OCH2CN, флуоро, -OCH2COOH и R⁵ е хлоро или CF3, vi)

R³ е СН₃ или СН₂СН₃;

X е Н или хлоро; и

W означава

PhCH₂CH₂;

(СНз)₃С-;

НООССН₂;

CF₃CH₂; (CH₃)₂N(CH₂)₂;

PhCH₂O(CH₂)₂;

PhCH(CH₃); PhCH₂CH(COOH); CH₃(CH₂)₅; PhCH₂;

H;

СН₃(СН₂)₄;

СН₃СН₂СН(СН₃)СН₂; (Ph)₂CHCH₂;

PhCH₂CH(CH₃)

PhCH₂C(CH₃)₂;

PhCH(CH₃)CH₂;

(CH₃)₂CH;

PhCH(OH)CH₂;

PhC(CH₃)CH₂;

(Ph)₂CHCH₂;

[>—CH₂ |>—CH₂CH₂

СН2СН(СН₃)

СН(СН₃)СН₂ ^'^СНССН^СНз // \\

CH₃NH—2—CH₂C(CH₃)

Ν=/

С(СН₃)₂СН₂

СН₂СН(СН₃)

F

ОМе

СН₃

7. Съединение съгласно претенция 6, и негови фармацевтично приемливи соли, избрано от групата:

NHCjHg

МдЙМ

Ph

NHC2H₅

H(CH₂)2N(CH3)₂

Cl ·· · · · · • · · • · • · · • · · ··· · ··

- 163 ·· • · ·· • · ·· · · · · • · · · · · • ······· • · · · · ··· ··· ·· ··

Η ο

- 164 -

Ο ···· 9« • ·

99 9999

Ο

167 ο

·· ····

128 ·· • · · • ·· ··· · · • · · ·· ·· ο

ο

....., ,..... . ·· ··. .. .··· • • · •χ ι i * ·· .· ·. . • • • · ··:: : • · · • • · · .:. ·· ·* • · · · · · - 169 -

nh₂ о

МИМИШННШЙЙ·

Μ nh₂ ο

* · · · • · · · • ·

Η ο

Μι—ι nh₂ j

ο • · · · • · ο

• · • ·

- 175 • · ·· • · · · · · • · · ·· ·· nh₂ ο

·· ···· • · ···· ·· ·· ·· • · ·· ♦ ♦·· • ··· ·· • · · ·· ··

- 176 -

Ο

- 178 - ·· ···· • · · · · ·

- 179 -

Cl • · »· ·· ·· ·· · ·· · • · · · ·· • · · · · · · · • · · · · ··· ♦ ·· ·· · ·

- 180 - :l

- 181 - ·· 4··· • · · ·· ·· · · · · • · · · · · ·· • ·· · ······· ··· · · ··· ···· ·· ··· ··· ·· ··

- 147 Пример LXXXV

Приготвяне на таблети

Приготвяне на таблети чрез директно таблетиране Актив IV, манитол и микрокристална целулоза се пресяват през сита със специфичен размер на отворите (най-общо от 250 до 750 цт) и се обединяват в подходящ смесител. След това сместа се разбърква (обикновено 15 до 30 min) докато лекарството се разпредели равномерно в получената суха прахова смес. Магнезиев стеарат се пресява и се прибавя към смесителя, след което се получава смес преди таблетиране след допълнително разбъркване (обичайно 2 до 10 min). Тази смес преди таблетиране след това се таблетира с прилагане на сила обичайно в порядъка от 0,5 до 2,5 метрични тона, достатъчна да се получат таблети с подходяща физическа здравина с приемливи времена на разпадане

ΜΗΜΜΜΜιΜ··

Cl nh₂ ·· ··*· (спецификите варират с размерите и силата на готовата таблета). В случаите на 2, 10 и 50 mg активна съставка таблетите се обезпрашават и се покриват с филм с водна дисперсия от водоразтворими полимери и пигменти.

Пример LXXXVI

Готова форма за венозно приложение

Изчислено съотношение

Съединение

8. Съединение съгласно претенция 7 и негови фармацевтично приемливи соли, избрано от групата

Ν' Н о

·· ···· • · · • · • · · • · ·

Примерни състави А-С са както следва:

Съединение A B C Актив IV 0,61 mg* 0,30 ** 0,15 *♦* D-глюкуронова киселина 1,94 mg 1,94 mg 1,94 mg Manitol NF 51,2 mg 51,2 mg 51,2 mg IN NaOH q.s.pH 4,0 q.s.pH 4,0 q.s.pH 4,0 Вода за q.s. 1,0 ml q.s. 1.0 ml q.s. 1,0 ml

• · • · · · · ·

- 185 • · • · • · · · · • · · • · · · ο

·· »··· • · ··· · • ·9 • · ·· • · ·· ···· ·· ··· ·

- 150 ·· ·· • · 99

9 999

9 999 99

9 99

9 9999

ПАТЕНТНИ ПРЕТЕНЦИИ

R¹;

R^CO;

R^O;

R^CH^NHCO; или (R¹)₂CH(CH2)_nNHCO, където η е 0-4;

R¹ означава R²;

R²(CH₂)_mC(R¹²)2, където m е 0-3 и всички R¹²могат да бъдат еднакви или различни;

(R²)(OR²)CH(CH2)P, където р е 1-4; R²C(R¹²)2(CH2)_m, където m е 0-3 и всички R¹²могат да бъдат еднакви или различни, където (R¹²)₂ могат да образуват също пръстен с С означен като С₃.₇ циклоалкил;

(R²)₂CH(CH2)_r, където г е 0-4 и всички R² могат да бъдат еднакви или различни и където (R²)₂ могат да образуват също пръстен с СН, означен като С₃.₇ циклоалкил, C₇_i₂ бициклоалкил, С₁₀.1б трициклоалкил или 5- до 7-атомен моно- или бицикличен хетероциклен пръстен, който може да бъде наситен • ·

186

9. Съединение съгласно претенция 8 и негова фармацевтично приемлива сол, характеризиращо се с това, че е 3(2-фенетиламино)-6-метил-1-(2-амино-6-метил-5метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон.

10. Сол съгласно претенция 9, характеризираща се с това, че е 3-(2-фенетиламино)-6-метил-1-(2-амино-6-метил-5метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон дихидрохлорид.

11. Сол съгласно претенция 10 представляваща полиморфна кристална форма тип А монохидрат.

12. Сол съгласно претенция 11, характеризираща се с диференциална сканираща калориметрична крива при нагряване със скорост 5°C/min в отворена чаша в поток от азот барботиран през вода при 5 °C, показваща ендотерма с екстраполирана начална температура от около 102°С, пикова температура от около 112С и свързана топлина от около 115 J/gm и следваща ендотерма с екстраполирана начална температура от около 171 °C, пикова • · • · · · ·

151 • · · • · · · • · · · • · • · · · или ненаситен и съдържа от един до три хетероатома избрани от групата Ν, О и S;

R² и R¹⁴ означават независимо един от друг фенил, незаместен или заместен с един или повече С_Ь4 алкил, С_Ь4 алкокси, халоген, хидрокси, COOH, CONH₂или SO₂NH₂;

нафтил; бифенил;

С1_7 алкил, незаместен или заместен с един или повече хидрокси, СООН, амино, арил, С₃.₇ циклоалкил, CF₃, N(CH₃)₂, -Сьз алкиларил, хетероарил или хетероциклоалкил;

CF₃;

С3.7 циклоалкил, незаместен или заместен с арил;

С7-12 бициклоалкил; или

Сю-16 трициклоалкил;

R³ означава водород;

Ci.₄ алкил;

С3.7 циклоалкил; или

- 187 температура от около 194°С и свързана топлина от около 83 J/gm; x-ray прахова дифракция на образец, характеризиращ се със спектрално d-интервал от 13,06, 12,16, 7,40, 5,71, 4,92, 4,48, 4,40, 3,63, 3,07, 2,98, 2,86 и 2,62 А.

13. Сол съгласно претенция 10 представляваща полиморфна кристална форма тип В монохидрат.

14. Сол съгласно претенция 13, характеризираща се с диференциална сканираща калориметрична крива при нагряване със скорост 5°C/min в отворена чаша в поток от азот барботиран през вода при 5 °C, показваща ендотерма с екстраполирана начална температура от около 120°С, пикова температура от около 132С и свързана топлина от около 123 J/gm и следваща ендотерма с екстраполирана начална температура от около 160°С, пикова температура от около 191°С и свързана топлина от около 78 J/gm; x-ray прахова дифракция на образец, характеризиращ се със спектрално d-интервал от 12,98, 11,91, 7,24, 5,98, 4,90, 4,46, 4,23, 3,99, 3,75, 3,61, 3,41, 2,94, 2,85 и 2,61 А.

15. Състав за инхибиране образуването на тромби в кръвта, характеризиращ се с това, че съдържа съединение съгласно претенция 1 и фармацевтично приемлив носител.

16. Метод за инхибиране образуването на тромбин в кръвта, характеризиращ се с това, че към кръвта се добавя състав съгласно претенция 15.

17. Метод за инхибиране образуването на тромбоцитни агрегати в кръвта, характеризиращо се с това, че към кръвта се добавя състав съгласно претенция 15.

18. Метод за инхибиране образуването на тромби в кръвта, характеризиращ се с това, че към кръвта се добавя състав съгласно претенция 15.

• ·· • ·· ·· ·· • ·· • ··

188

19. Метод за инхибиране образуването на тромби в кръвта, характеризиращ се с това, че към кръвта се добавя съединение съгласно претенция 1 и фибриногенен рецепторен антагонист.

20. Използване на съединение съгласно претенция 1 или негова фармацевтично приемлива сол за производсво на лекарствено средство за инхибиране на тромбин, инхибиране образуването на тромби, лечение на образуването на тромби или предотвратяване образуването на тромби у бозайнки.

21. Метод за лечение или предотвратяване на венозен тромбоемболизъм и пулмонарен емболизъм у бозайник, характеризиращ се с това, че към бозайника се прилага състав съгласно претенция 15.

22. Метод за лечение или предотвратяване на дълбоковенна тромбоза у бозайник, характеризиращ се с това, че към бозайника се прилага състав съгласно претенция 15.

23. Метод за лечение или предотвратяване на кардиогенен тромбоемболизъм у бозайник, характеризиращ се с това, че към бозайника се прилага състав съгласно претенция 15.

24. Метод за лечение или предотвратяване на тромбоемболичен удар у човек и други бозайници, характеризиращ се с това, че към бозайника се прилага състав съгласно претенция

15.

25. Метод за лечение или предотвратяване на тромбоза свързана с рак и ракова химиотерапия у бозайник, характеризиращ се с това, че към бозайника се прилага състав съгласно претенция

15.

• · ·· · · · ·· · · · · ·· · · ···· • ·· · ······ · ··· · · · · · ···· ·· ··· ··· ·· ··

- 189 -

26. Метод за лечение или предотвратяване на нестабилна ангина у бозайник, характеризиращ се с това, че към бозайника се прилага състав съгласно претенция 15.

27. Метод за лечение или предотвратяване на инфаркт на миокарда у бозайник, характеризиращ се с това, че към бозайника се прилага състав съгласно претенция 15.

28. Метод за лечение или предотвратяване на кардиогенен тромбоемболизъм свързан с артериална фибрилация у бозайник, характеризиращ се с това, че към бозайника се прилага състав съгласно претенция 15.

29. Метод за лечение или предотвратяване на кардиогенен тромбоемболизъм свързан с протезни сърдечни клапи у бозайник, характеризиращ се с това, че към бозайника се прилага състав съгласно претенция 15.

30. Метод за лечение или предотвратяване на кардиогенен тромбоемболизъм свързан със сърдечно заболяване у бозайник, характеризиращ се с това, че към бозайника се прилага състав съгласно претенция 15.

31. Метод за лечение или предотвратяване на атеросклероза у бозайник, характеризиращ се с това, че към бозайника се прилага състав съгласно претенция 15.

32. Метод за лечение или предотвратяване на тромбози у бозайник с онаследени тромбофилни заболявания като протеин С недостатъчност, протеин S недостатъчност, антитромбин III и фактор V Leiden, характеризиращ се с това, че към бозайника се прилага състав съгласно претенция 15.

33. Метод за лечение или предотвратяване на тромбози у бозайник с придобити тромбофилни неразположения, ·· ·*··

- 190 характеризиращ се с това, че към бозайника се прилага състав съгласно претенция 15.

34. Метод за лечение или предотвратяване на исхемично сърдечно заболяване у бозайник, характеризиращ се с това, че към бозайника се прилага състав съгласно претенция 15.

35. Метод за понижаване склонността на устройства в контакт с кръвта да я съсирват, характеризиращ се с това, че усктойството се покрива със състав съгласно претенция 15.

36. Метод за лечение или предотвратяване на реоклузия у бозайник по време на или след перкутанна транслуминална коронарна ангиопластия, характеризиращ се с това, че към бозайника се прилага състав съгласно претенция 15.

37. Метод за лечение или предотвратяване на рестенози у бозайник след перкутанна транслуминална коронарна ангиопластия, характеризиращ се с това, че към бозайника се прилага състав съгласно претенция 15.

38. Метод за лечение или предотвратяване на оклузия на трансплантиран байпас на сърдечна артерия у бозайник, характеризиращ се с това, че към бозайника се прилага състав съгласно претенция 15.

39. Метод за лечение или предотвратяване на оклузивно заболяване на мозъчни съдове у бозайник, характеризиращ се с това, че към бозайника се прилага състав съгласно претенция 15.

40. Метод за поддържане на пациент с вмъкнати артериалновенозни канюли у бозайник, характеризиращ се с това, че към бозайника се прилага състав съгласно претенция 15.

41. Метод за поддържане на пациент с постоянен катетър, характеризиращ се с това, че към бозайника се прилага състав съгласно претенция 15.

•9 ···· • · · ···· ···· • * · · · · ·· • · · · · · ··· · » • · · · · · · · ···· ·· ··· ··· ·· ··

- 191 -

42. Метод за получаване на 3-(2-фенетиламино)-6метил-1-(2-амино-6-метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон дихидрохлорид тип А монохидрат, характеризиращ се с това, че

a) 3-(2-фенетиламино)-6-метил-1 -(2-амино-6-метил-5метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон се разтваря в разтворител оцетна киселина и се добавя водна НС1,

b) отделяне се получената твърда фаза и

c) сезотстранява разтворителят от нея.

43. Метод съгласно претенция 42, характеризиращ се с това, че количеството на водната НС1 е такова, че крайното съдържание на вода в оцетната киселина да бъде между 1 и 5 % тегл..

44. Метод за получаване на 3-(2-фенетиламино)-6метил-1-(2-амино-6-метил-5-метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон дихидрохлорид тип В монохидрат, характеризиращ се с това, че

a) 3-(2-фенетиламино)-6-метил-1-(2-амино-6-метил-5метилкарбоксамидометилпиридинил)пиразинон се разтваря в разтворител солна киселина,

b) отделяне се получената твърда фаза и

c) се отстраняваразтворителят от нея.