BG107302A

BG107302A - Антитуморни аналози на ет - 743

Info

Publication number: BG107302A
Application number: BG107302A
Authority: BG
Inventors: Ignacio Manzanares; Maria MARTIN; Alberto Rodriguez; Simon Munt; Carmen Cuevas; Marta Perez
Original assignee: Pharma Mar, S.A.
Priority date: 2000-05-15
Filing date: 2002-11-20
Publication date: 2003-07-31
Also published as: JP2003533532A; JP5008812B2; SK287833B6; CA2405002C; US8012975B2; US20080051407A1; HU230699B1; PL358258A1; PL215769B1; IL152126A; US7247629B2; US20040019056A1; CA2405002A1; HK1053653A1; US20060019960A1; HUP0302327A2; ATE282624T1; US7410969B2; IL152126A0; SK16012002A3

Abstract

Антитуморните съединения имат 5-членна кондензирана пръстенна ектеинасцидинова структура с формула.При тях липсва 1,4-мостова група, доказана в ектеинасцидините. Тези съединения имат на С-1 позиция заместител, избран от по избор защитена или получена аминометиленова група или по избор защитена или получена хидроксиметиленова група.

Description

Област на техниката

Настоящото изобретение се отнася до антитуморни съединения, поспециално, до антитуморни аналози на ектеинасцидин 743, ЕТ-743.

Предшестващо състояние на техниката

European Patent 309,477 се отнася до ектеинасцидини 729, 743, 745, 759А, 759В и 770. Установено е, че ектеинасцидиновите съединения притежават антибакгериални и други полезни свойства. Ектеинасцидин 743 в момента е подложен на клинични изпитания като антитуморно средство.

Ектеинасцидин 743 притежава сложна трис(тетрахидроизохинолинфенол) структура със следната формула (I):

В ектеинасцидин 743 1,4-мостьт има структура с формула (IV):

Другите известни ектеинасцидини включват съединения с различни мостово свързани циклични пръстенни системи, както при ектеинасцидини 722 и 736, където мостът има структура с формула (V):

ектеинасцидини 583 и 597, където мостът има структура с формула (VI):

* 9

и екгеинасцидини 594 и 596, където мостът има структура с формула (VII):

Пълната структура на тези и съответните съединения е дадена в J. Ат. Chem. Soc. (1996) 118, 9017-9023. Съобщението е дадено за сравнение.

Напоследък ектеинасцидините се получават чрез изолиране от морското безгръбначно Ecteinascidia turbinata. Добивът е нисък и се търсят алтернативни препаративни методи.

В U. S. Patent No. 5,721,362, виж също и WO 9812198, е описан синтетичен метод за получаване на ектеинасцидинови съединения. Описаният метод е дълъг и сложен. За илюстрация са дадени 38 примера, описващи един или повече етапи на синтетичната последователност за получаване на екгеинасцидин 743.

Претенция 25 на U. S. Patent No. 5,721,362 се отнася до междинно фенолово съединение с дадена формула (11), което ще наричаме Междинно съединение 11 или lnt-11. То притежава следната бис(тетрахидроизохинолинфенолова) структура (II):

в която MOM е мвтоксимвтилов заместител и TBDPS е тертбугилдифенилсилилов заместител.

От Междинно съединение 11 е възможно да се синтезира друго интересно антитуморно средство, фталасцидин, виж Proc. Natl. Acad. Sci. USA 96, 3496-3501, 1999. фталасцидинът представлява бис(тетрахидроизохинолинфенолово)производно с формула (III):

По-общо, фталасцидинът и съответните съединения са описани в WO

0018233. Претенция 1 се отнася до съединения с формула:

• β · · ♦ · · * 4 · » « · « « Й ···· ·· ··· ··· ·« ···· в която всяка от заместителните групи, дефинирани с Ri, R₂, Яз, R₄, Rs, Rs, R7, Rs и Rg, независимо една от друга се подбират от групата, състояща се от водород, OH, OR’, SH, SR’, SOR’, SO₂R’, NO₂, NH₂, NHR’, N(R’)₂, NHC(O)R’, CN, халоген, =0, C(=O)H, C(=O)R’, CO₂H, CO₂R’, СЦ-С^алкил, С₂-С₁₂алкенил, C2-Ci₂алкинил, заместен или незаместен арил, заместен или незаместен аралкил и заместен или незаместен хетероароматен пръстен;

в която всяка от групите R’ независимо е подбрана от група, съдържаща водород, хидроксилна група, нитрогрупа, аминогрупа, тиогрупа, цианогрупа, халоген, =0, С(=О)Н, С(=О)СН₃, СО₂Н, СО₂СН₃, С_гС₁₂алкил, Сг-С₁₂алкенил, СгС₁₂ алкинил, арил, аралкил или хетероароматен пръстен;

в която всяко пунктирано кръгче представлява една, две или три възможни двойни връзки;

в която R₇ и Rg могат да бъдат свързани в карбоциклична или хетероциклична пръстенна система;

и, в която Xi и Х₂ независимо един от друг са дефинирани както по-горе за R_rRg като включват и други пзволени определения.

Известни са и други природно съществуващи съединения, в които липсва мостова циклична пръстенна система. Те включват бис(тетрахидроизохинолинхиноновите) антитуморни-антимикробни антибиотици сафрацини и сафрамицини и морските природни продукти рениерамицини и ксестомицин, изолирани от култивирани микроби или гъби. Всички те притежават обикновена димерна тетрахидроизохинолин-въглеродна рамка. Тези съединения могат да бъдат класифицирани в четири типа, от I до IV, по отношение на окислението на ароматните ядра.

Тип I, димерни изохинолинхинони, представлява система с формула (VIII), която е най-обща за този клас съединения, виж следващата Таблица I.

Таблица I

Структура на тип I сафрамицинови антибиотици (saframycin)

Съединение	RMa	p,14b
saframycin А	H	H
saframycin В	H	H
saframycin С	H	OCH₃
saframycin G	H	OH
saframycin Η	H	H
saframycin S	H	H
saframycin Y₃	H	H
saframycin Ydj	H	H
saframycin Adj	H	H
saframycin Yd₂	H	H
saframycin Y₂b	H	Q*
saframycin Y₂b-d	H	Q^b
saframycin AH₂	H	H
saframycin AH₂Ac	H	H
saframycin AHi	H	H
saframycin АЩАс	H	H
saframycin AR₃	H	H

Заместители

R²¹	R^25a	R^25b	R25C
CN	0	0	CH₃
H	0	0	СНз
H	0	0	СНз
CN	0	0	СНз
CN	OH	CH2COCH3	СНз
OH	0	0	СНз
CN	NH₂	H	СНз
CN	nh₂	H	С₂Н₅
CN	0	0	С₂Н₅
CN	nh₂	H	Н
CN	nh₂	H	СНз
CN	nh₂	H	С₂н₅
CN	H^e	OH^e	СНз
CN	Η	OAc	СНз
CN	OH^fl	H^fl	СНз
CN	OAc	H	СНз
H	H	OH	СНз

^а означенията са взаимно заменяеми ^ь когато групата Q има формула (IX):

Тип I ароматни пръстени се виждат при сафрамицини ABhC;GhH;hS изолиран от Streptomyces lavendulae като компоненти в минимално количество. Цианопроизводно на сафрамицин А наречено цианохинонамин, е известно от Japanese Kokai JP-A2 59/225189 и 60/084288. Сафрамицини Y₃, Yd^ Adi и Yd₂ се получават от Streptomyces lavendulae при директна биосинтеза, при подходящо използване на културна среда. Сафрамицините У₂ь и Y₂b-d димери, получени чрез свързване на азот върху С-25 на едно звено с С-14 на друго, също се получават в подходяща културна среда на Streptomyces lavendulae. Сафрамицините ARi (=ДН₂), микробен редукционен продукт на сафрамицин А при С-25, получен от Rhodococcus amtdophilus, също се получава посредством нестереоселективна химична редукция на сафрамицин А с натриев борхидрид като 1:1 смес на епимери, последвана от хроматографско разделяне (другият изомер AHi е по-слабо полярен). Другият редукционен продукт сафрамицин AR3, 21-дециано-25-дихидросафрамицин А (=25-дихидросафрамицин В) се получава при същата микробна конверсия. При друг тип микробна конверсия на сафрамицин А при използване на вида Nocardia се получава сафрамицин В и при следващо редуциране с вида Mycobacterium се получава сафрамицин ·· • · · ·

АН¹Ас. 25-О-ацетатите на сафрамицин АН₂ и AHi също са получени по химичен начин за биологични изследвания.

Тип I съединенията с формула (X) също са изолирани от морски гъби, виж

Таблица II.

Таблица II

Структури на тип I съединения от морски гъби

Заместители

	-RUa	R^Ub	.......R^2l~	R
renieramycin А	OH	H	H	-С(СНз)=СН-СНз
renieramycin В	OC₂H₅	H	H	-С(СНз)=СН-СНз
renieramycin С	OH	0	0	-С(СН₃)=СН-СН₃
renieramycin D	OC2H5	0	0	-С(СНз)=СН-СН₃
renieramycin Е	H	H	OH	-С(СН₃)=СН-СНз
renieramycin F	OCH3	H	OH	-С(СН₃)=СН-СНз
xestomycin	OCH3	H	H	-СНз

Рениерамицините А-D са изолирани от антимикробен екстракт на гъба от вида Reniera, събирана в Мексико, заедно с биогенетично свързания мономерен изохинолин рениерон и съответни съединения. Структурата на рениерамицин А първоначално е означена със стереохимия при С-3, С-11 и С13. Обаче, при внимателно разглеждане на данните от ’Н NMR за новите свързани съединения рениерамицините Е и F, изолирани от същата гъба, ···· ·· ··«··· ··· · · · »· • · · · · · · e _r» • · · · е t» ···· ·4 ··· . ·« _φβ ·«·· събирана в Palau, е установено, че пръстенното свързване на рениерамицините е идентично като това на сафрамицините. Този резултат води до извода, че преди установената стереохимия на рениерамицините от А до D трябва да бъде същата като тази на сафрамицините.

Ксестомицинът е намерен в гъба от вида Xestospongia, събирана от водите на Шриланка.

Тип II съединенията с формула (XI) с редуциран хидрохинонов пръстен включват сафрамицини D и F, изолирани от Streptomyces lavendulae и сафрамицини Мх-1 и Мх-2, изолирани от Myxococcus xanthus. Виж Таблица III.

Таблица III

Тип II съединения

ОСН₃

Съединение

	R^14a	R^14b	R²¹	R₂₅a	R^25b	r_25C
saframycin D	0	0	Н	0	0	СНз
saframycin F	0	0	CN	0	0	СНз
saframycin Мх-1	Η	ОСНз	ОН	н	СНз	nh₂
saframycin Мх-2	Η	ОСНз	н	н	СНз	nh₂

Тип III скелет е установен в антибиотиците сафрацини А и В, изолирани от култивирани Pseudomonas fluorescens. Тези антибиотици с формула (XII) се състоят от тетрахидроизохинолин-хиноново подзвено и тетрахидроизохинолин фенолно подзвено

θΛ^/СНз йн₂ където R²¹ е водород в сафрацин А и хидроксилна група в сафрацин В.

Сафрамицин R, единственото съединение, класифицирано като тип IV скелет, също се изолира от Streptomyces lavendulae. Това съединение с формула (XIII), състоящо се от хидрохинонов пръстен със странична верига от гликолов естер при един от фенолните кислородни атоми, е прекурсор на сафрамицин А, поради умерената си токсичност.

Всички тези известни съединения включват кондензирана система от пет пръстена от (А) до (Е), както е показано в следната структура с формула (XIV):

• · · • ·· • ·· • · ·· • · · · • · · • · • · • * • · · · · ·

Пръстените А и Е са фенолни в ектеинасцидините и някои други съединения, докато в други съединения, особено сафрамицините, пръстените А и Е са хинолинови. В известните съединения пръстените В и D са тетрахидро, докато пръстен С е перхидро.

Техническа същност на изобретението

Настоящото изобретение се отнася до нови съединения, притежаващи кондензирана система от пет пръстена от (А) до (Е). По-специално, то се отнася до нови съединения, които могат да бъдат получени от междинни съединения, описани в WO 9812198, или по нов метод, който е обект на настоящото изобретение. В този смисъл ние се отнасяме до наш WO 0069862, публикуван на 23 ноември 2000, който се отнася до полусинтетични методи и нови съединения. Настоящата заявка претендира за приоритет, в който попада този РСТ, а ние включваме този текст за сравнение за да се разшири обхватът на настоящото изобретение.

В WO 0069862 са описани различни методи за получаване на ектеинасцидинови съединения, включая ектеинасцидин 743, както и ектеинасцидинови аналози, включително фталисцидин. Настоящото изобретение се отнася в частност до приложение на междинните съединения, съгласно WO 0069862 за получаване на други аналози на ектеинасцидините.

• · • ·· · ·· >.т·· ·· ··· · 2···· ····· Z ··· ··· _β*····

..........··

Предпочитани аспекти

Установено е, че съединенията, съгласно настоящото изобретение, притежават изключителна активност при лечение на рак, като левкемии, рак на белия дроб, рак на дебелото черво, рак на бъбрека и меланома.

Следователно, настоящото изобретение се отнася до метод за лечение на бозайници, особено на човек, страдащи от рак, характеризиращ се с това, че включва администриране върху страдащия индивид на терапевтично ефективно количество съединение, съгласно настоящото изобретение, или на фармацевтичен състав на негова база.

Настоящото изобретение се отнася и до фармацевтични състави, които съдържат като активен ингредиент съединение или съединения, съгласно настоящото изобретение, както и до методи за тяхното получаване.

Примерите за фармацевтични състави включват твърди състави (таблетки, хапчета, капсули, гранули и т.н.) или течни състави (разтвори, суспензии или емулсии) с подходящ състав за орално, локално или парентерално администриране, а те могат да съдържат чистото съединение или то да е в комбинация с носител или други фармакологично активни съединения. Тези състави трябва да бъдат стерилни при парентералното администриране.

Администрирането на съединенията или съставите, съгласно настоящото изобретение, може да се осъществи по кой да е подходящ метод, като интравенозна инфузия, орално приемане, интраперитонеално и интравенозно администриране. Предпочита се времето за инфузия да бъде до 24 часа, повече се предпочита, между 2 и 12 часа, а най-много се предпочита, от 2 до 6 часа. Особено желани са кратките времена за инфузия, които позволяват лечението да се провежда без да се пренощува в болница. Обаче, зисква се • · инфузия от 12 до 24 часа или по-дълготрайна. Инфузията може да се провежда на подходящи интервали от 2 до 4 седмици. Фармацевтичните състави, съдържащи съединенията, съгласно настоящото изобретение, могат да бъдат доставени чрез липозомно или наносферно капсулиране, в състави със задържано освобождаване или посредством други стандартни начини.

Правилната доза на съединенията варира в зависимост от отделния състав, начина на прилагане и отделния situs, приемника и тумора, който ще се лекува. Други фактори, които се взимат под внимание, са възраст, телесно тегло, пол, хранителен режим, време за администриране, скорост на отделяне, състояние на приемника, лекарствена комбинация, реакции на чувствителност и тежест на заболяването. Администрирането може да се провежда непрекъснато или периодично в рамките на поносимата доза.

Съединенията и съставите, съгласно настоящото изобретение, могат да се използват с други лекарства за провеждане на комбинирана терапия. Другите лекарства могат да бъдат част от същия състав или да се администрират като отделен състав едновременно или по друго време. Идентичността на другото лекарство не е ограничена, като подходящи могат да бъдат:

а) лекарства с антимитотично действие, особено тези, които са насочени към цитоскелетни елементи, включващи микротубулни модулатори, като таксанови лекарства (като таксол, паклитаксел, таксотер, доцетаксел), подофилотоксини или vinca алкалоиди (винкристин, винбластин);

б) антиметаболитни лекарства като 5-флуорурацил, цитарабин, гемцитабин, пуринови аналози като пентостатин, метотрексат);

в) алкилиращи средства като азотни мустарди (като циклофосфамид или ифосфамид);

• · • · ·· · ·· л!·· ·· ··· · ·* ·· · · ···· · .·· · ··· * · · ·· ·

...... ··· ·· .

г) лекарства, насочени към DNA, като антрациклиновите лекарства адриамицин, доксорубицин, фарморубицин или епирубицин;

д) лекарства, насочени към топоизомеразите, като етопозид;

е) хормони и хормонни агонисти и антагонисти, като естрогени, антиестрогени (тамоксифен и свързани съединения) и андрогени, флугамид, леупрорелин, госерелин, ципротрон или окгреотид;

ж) лекарства, насочени към сигналната трансдукция в туморните клетки, включващи производни н антитела, като херцептин;

з) алкилиращи лекарства като платинови лекарства (цис-платина, карбонплатина, оксалиплатина, параплатина) или нитрозокарбамиди;

и) лекарства, силно действащи на метастазите на туморите, като инхибитори на металопротеиназата;

й) средства за генна терапия и антисензорни средства;

к) терапевтици за антитела;

л) други биоактивни съдинения с морски произход, особено дидемнините като аплидин;

м) стероидни аналози, в частност, дексаметазон;

н) противовъзпалителни лекарства, в частност, дексаметазон; и

о) антиеметични лекарства, в частност, дексаметазон;

п) протектори на скелетните мускули, като L-карнитин или прекурсор на аминокиселини.

Настоящото изобретение се отнася и до приложение на съединенията, съгласно настоящото изобретение, в метод за лечение и до приложение на съединенията, съгласно настоящото изобретение, при получаването на състави за лечение на рак.

• · · · · · _е • · · · · ·

В един аспект на настоящото изобретение, ние не претендираме за съединенията 2, 3, 5, 8-ОН-2 и от 14 до 21, описани в приоритета на една или повече GB патентни заявки за наш РСТ, публикуван като 0069862. В свързан аспект, настоящото изобретение се отнася до съединения, които се различават едно от друго по присъстващите на С-1, С-5, С-7, С-8 или С-18 заместители в съединенията, съгласно тези GB патентни заявки.

Съединенията, съгласно настоящото изобретение, включват съединения, които нямат хидроксилна група на С-18 позиция. Още повече, съединенията, съгласно настоящото изобретение, включват съединения, които нямат дикарбоксимидометилов заместител, като фталимидометил, на С-1 позиция. В частност, настоящото изобретение се отнася до активни съединения, в които заместителят Xj не е показан на стр. 19 на WO 0018233.

В един аспект, аналозите, съгласно настоящото изобретение, обикновено имат формула (XVIIa):

или формула (XVlIb):

• ·· ··® ··· · . · · ·· ···· z · ·· ·· . ····· ••·· ·· ··· .2. · · · ··· ·· ···· в която

R¹ е възможно защитена или получена аминометиленова група, възможно защитена или получена хидроксиметиленова група;

R⁴ е водород;

R⁵ е водород или хидроксилна група;

R⁷ е -ОСНз, и R⁸ е хидроксилна група или R⁷ и R⁸ заедно образуват групата

-О-СН2-О-;

и двата R^14a и R^14b са водород или единият е водород, а другият е хидроксилна група, -ОСН₃ или -ОСН₂СН₃ или и двата R^14a и R^14b заедно формират кетогрупа; и R¹⁵ е водород или хидроксилна група;

R²¹ е водород, хидроксилна група или циано;

и техни производни, включващи ацилови производни, по-специално, в които R⁵ е ацетилокси или друга ацилоксигрупа, съдържаща до 4 въглеродни атома.

В настоящото изобретение, ключов клас продукти включват фталасцидин със следната обща формула (XX):

в която

R¹ е амидометиленова група; R⁵ е малка окси-странична верига; и R²¹ е е цианогрупа или хидроксилна група. За фталасцидин, R¹ е фталимидометиленова група; R⁵ е ацетоксигрупа; и R²¹ е цианогрупа. Други групи за R¹ включват моно- и ди-N-заместени амидометилени, както и други циклични амидометилени, а други групи за R⁵ включват и С_гС₄ацилови групи, както и С_гС₄алкилови групи.

• ·

В настоящото изобретение, ключов клас междинни съединения и аналози включват Междинно съединение 11 със следната обща формула (XXI):

в която

Prot¹ и Prot² са хидроксизащитени групи, за предпочитане, различни. За самото Междинно съединение 11, групата Prot¹ е метоксиметилова група, a Prot² е tбугилдифенилсилилова група.

В светлината на предишните обяснения, може да се види, че настоящото изобретение се отнася до нови аналози и нови междинни съединения. В зависимост от пръстен А, съединенията включват такива с формула (ХХНа):

или с формула (ХХНЬ):

В КОЯТО

R¹ е -CH₂NH₂ или -СН₂ОН, или защитена или получена разновидност на такава група, и R⁴ е водород;

R⁵ е хидроксилна група или защитена или получена разновидност на тази група;

и двата R^14a и R^14b са водород или единият е водород, а другият е хидроксилна група, или защитена или получена разновидност на тази група, -ОСН₃ или -ОСН₂СН₃, или и двата R^14a и R^14b заедно формират кетогрупа;

R¹² е водород, -СН₃ или -ОСН₂СН₃;

R¹⁵ е водород, хидроксилна група или защитена или получена разновидност на тази група; и

R¹⁸ е хидроксилна група или защитена или получена разновидност на тази група.

При една разновидност на настоящото изобретение, групата R¹ не е tertбутилдифенилсилилов заместител и/или групата R¹⁸ не е метоксиметилоксигрупа.

Предпочита се, R¹ да е -CH₂NH₂ или -СН₂ОН, или защитена или получена разновидност на такава група, и R⁴ да е водород.

Предпочита се, и двата R^14a и R^14b да са водород.

Предпочита се, R¹² да е -СН₃.

Един предпочитан клас междинни съединения включва съединението, което идентифицираме като съединение 25 с формула:

• · • ·

Следователно, предпочитаният клас има обща формула, в която групата

МОМ е заменена с друга защитаваща група, и/или алиловата група е заменена с друга защитаваща група.

Други предпочитани междинни съединения включват съединенията, които определяме като съединения 17, 43 и 45.

43 45

От съединение 45 могат да бъдат получени други N-ацилови производни, които са важна част от настоящото изобретение. Предпочитаните ацилови групи включват тези, които са споменати по-горе. Съответните 21-хидроксилни съединения също са полезни и са сред активните съединения, намерени от нас.

От данните за активността и други параметри може да се види, че активните съединения, съгласно настоящото изобретение, включват предпочитан клас съединения с обща формула (XXIII):

о

В КОЯТО

R¹, е както е дефиниран по-горе за формула (XVI lb) и, за предпочитане, е получена аминометиленова група със среден размер;

R⁵ е, както е дефиниран по-горе за формула (XVIIb) и, за предпочитане, е получена хидроксилна група с малък размер;

R¹² е, както е дефиниран по-горе и, за предпочитане, е -СН₃; и

R²¹ е хидроксилна или циано група.

Подходящо е, R¹ да е хидрофобна група, в която в която липсват свободна амино, хидрокси или друга хидрофилна функционалност. Обикновено R¹ е група -CH₂-NH₂-CO-R^a, където R^a е, както е дефинирана по-горе, но, за предпочитане, да има линейна верига с дължина по-малка от 20 атома, повече се предпочита, по-малко от 15 или 10 атома, в която 1,4-фенил се счита за дължина на веригата с 4 атома, и по подобен начин се счита за формиране на други циклични групи (например, 1,2-циклохексил е дължина на веригата с два), а линейната верига с дължина по-малка от 10, 15 или 20 атома може сама да бъде заместена. По-специално, данните показват, че се постига баланс между нямащите такава група -C0-R³, и имащите голяма група.

В един аспект, предпочита се, в R¹ да няма циклични групи, особено ароматни групи. В свързан аспект, настоящото изобретение не се отнася до получаване на съединения, които са описани в Proc. Natl. Acad. Sci. USA 96, 3496-3501, 1999, даден за сравнение. Нашите предпочитани групи за R¹включват съответните заместители CH₂-R₂-, показани в Таблица 1 на настоящото изобретение, по-специално, групите А В, С и D за R₂.

Предпочита се, R⁵ да бъде ацетилова група.

В особено предпочитаните съединения, групата R¹ е ацилирана при аминогрупата и, например, N-ацилови производни могат да бъдат получени от

групите -CH₂-NH₂ и -CH₂-NHaa. Ациловите производни могат да бъдат техни Nацилови или N-тиоацилови производни. Ациловите групи могат да бъдат с формула -C0-R³, където R^a е, както е дефиниран по-горе и трябва да отговаря на определени изисквания. Подходящите ацилови групи включват аланил, аргинил, аспартил, аспарагил, цистил, глутамил, глутаминил, глицил, хистидил, хидроксипропил, изолеуцил, леуцил, лизил, метионил, фенилаланил, пролил, серил, треонил, тиронил, триптофил, тирозил, валил, както и други ацилови групи на аминокиселини, които могат да бъдат L- или D-. Тези ацилови групи на аминокиселини за предпочитане се получават върху аминогрупата за да се придаде хидрофобност.

В един аспект, групата R¹ се получава от хидроксиметиленова група. Свойствата са както на аминометиленовата група.

Настоящото изобретение се отнася до съединения, при които заместителите около пръстена са, както са дефинирани в WO 0018233, даден за сравнение. Следователно, заместителите, съгласно настоящото изобретение, могат да бъдат подбрани между водород, OH, OR’, SH, SR’, SOR’, SO₂R’, NO₂, NH₂, NHR’, N(R’)₂, NHC(O)R’, CN, халоген, =0, С_гС₆алкил, заместен или незаместен арил, заместен или незаместен аралкил и заместен или незаместен хетероароматен пръстен;

в която всяка от групите R’ независимо е подбрана от група, съдържаща водород, хидроксилна група, нитрогрупа, аминогрупа, тиогрупа, цианогрупа, халоген, =0, С(=О)Н, С(=О)СН₃, СО₂Н, СО₂СН₃, С_гС₆алкил, фенил, бензил и хетероароматен пръстен;

Подходящите халогенни заместители в съединенията, съгласно настоящото изобретение, включват флуор, хлор, бром и йод.

Предпочита се, алкиловите групи да имат от 1 до около 12 въглеродни атома, повече се предпочита, от 1 до около 8 въглеродни атома, още повече се предпочита, от 1 до около 6 въглеродни атома и най-много се предпочита 1, 2, 3 или 4 въглеродни атома. Особено предпочитани алкилови групи в съединенията, съгласно настоящото изобретение, са метил, етил и пропил, включително изопропил. Използваният в настоящото изобретение термин “алкил”, ако не е споменато друго, се отнася, както до циклични, така и до нециклични групи, въпреки че цикличните групи включват поне три члена с въглероден пръстен.

Предпочита се, алкениловите и алкиниловите групи в съединенията, съгласно настоящото изобретение, да имат една или повече ненаситени връзки и от 2 до около 12 въглеродни атома, повече се предпочита, от 2 до около 8 въглеродни атома, още повече се предпочита, от 2 до около 6 въглеродни атома и най-много се предпочита 1, 2, 3 или 4 въглеродни атома. Използваните в настоящото изобретение термини “алкенил” и “алкинил”, се отнасят, както до циклични, така и до нециклични групи, въпреки че по-предпочитани са нецикличните групи с права или с разклонена верига.

Предпочитаните алкоксигрупи в съединенията, съгласно настоящото изобретение, включват групи, имащи една или повече кислородни връзки и от 1 до около 12 въглеродни атома, повече се предпочита, от 1 до около 8 въглеродни атома, още повече се предпочита, от 1 до около 6 въглеродни атома и най-много се предпочита 1, 2, 3 или 4 въглеродни атома.

Предпочитаните алкилтиогрупи в съединенията, съгласно настоящото изобретение, имат една или повече тиоетерни връзки и от 1 до около 12 въглеродни атома, повече се предпочита, от 1 до около 8 въглеродни атома, и • * ’ :: : ·: ·: .·..··.

• · · · A * * · « ··· ; !···· ...... ··. ...

още повече се предпочита, от 1 до около 6 въглеродни атома. Особено се предпочита алкилтиогрупите да имат 1, 2, 3 или 4 въглеродни атома.

Предпочитаните алкилсулфинилови групи в съединенията, съгласно настоящото изобретение, включват групи, имащи една или повече сулфоксидни (SO) групи и от 1 до около 12 въглеродни атома, повече се предпочита, от 1 до около 8 въглеродни атома, и още повече се предпочита, от 1 до около 6 въглеродни атома. Особено се предпочита, алкилсулфиниловите групи да имат 1, 2, 3 или 4 въглеродни атома.

Предпочитаните алкилсулфонилови групи в съединенията, съгласно настоящото изобретение, включват групи, имащи една или повече сулфоксидни (SO₂) групи и от 1 до около 12 въглеродни атома, повече се предпочита, от 1 до около 8 въглеродни атома, и още повече се предпочита, от 1 до около 6 въглеродни атома. Особено се предпочита, алкилсулфониловите групи да имат 1, 2, 3 или 4 въглеродни атома.

Предпочитаните аминоалкилови групи включват групи, имащи една или повече първични, вторични и/или третични аминогрупи от 1 до около 12 въглеродни атома, повече се предпочита, от 1 до около 8 въглеродни атома, още повече се предпочита, от 1 до около 6 въглеродни атома и най-много се предпочита 1, 2, 3 или 4 въглеродни атома. Вторичните и третични аминогрупи обикновено повече се предпочитат от първичните аминни части.

Подходящите хетероароматни групи в съединенията, съгласно настоящото изобретение, съдържат един, два или три хетероатома, подбрани между азотни, кислородни или серни атоми и включват, например, кумаринил, включващ 8-кумаринил, хинолинил, включващ 8-хинолинил, пиридил, пиразинил, пиримидил, фурил, пиролил, тиенил, тиазолил, оксазолил, имидазолил, индолил, бензофуранил и бензотиазолил. Подходящите • · · I · · · · · ··♦· »· ··· .ί* · · .

* · ·· ·· ··»« хетероалициклични групи в съединенията, съгласно настоящото изобретение, съдържат един, два или три хетероатома, подбрани между азотни, кислородни или серни атоми и включват, например, тетрахидрофуранил, тетрахидропиранил, пиперидинил, морфолино и пиролидинил.

Подходящите карбоциклични арилови групи в съединенията, съгласно настоящото изобретение, включват съединения с един или повече пръстени, включващи многопръстенни съединения, които съдържат отделни и/или кондензирани арилови групи. Типичните карбоциклични арилови групи съдържат от 1 до 3 единични или кондензирани пръстени и от 6 до около 18 въглеродни пръстенни атоми. Особено предпочитаните карбоциклични арилови групи включващ фенил, включващ заместен фенил като 2-заместен фенил, 3заместен фенил, 2,3-заместен фенил, 2,5-заместен фенил, 2,3,5-заместен фенил и 2,4,5-заместен фенил, като един или повече фенилови заместителя са електрон-съдържащи групи, като халоген, циано, нитро, алканоил, сулфинил, сулфонил и други; нафтил, включващ 1-нафтил и 2-нафтил; бифенил; фенантрил; и антрацил.

Всичко, което се отнася до заместените групи в съединенията, съгласно настоящото изобретение, се отнасят до специфичната част, която може да бъде заместена на една или повече налични позиции с една или повече подходящи групи, например, халоген, като флуор, хлор, бром и йод; циано; хидроксил; нитро; азидо; алканоил, като Ci.₆ алканоил като ацил и други; карбоксамидо; алкилови групи, включващи такива, които имат от 1 до около 12 въглеродни атома или от 1 до около 6 въглеродни атома, като повече се предпочита, от 1 до 3 въглеродни атома; алкенилови и алкинилови групи, включващи такива, които имат една или повече ненаситени връзки и от 2 до около 12 въглеродни атома или от 2 до около 6 въглеродни атома; алкоксигрупи, включващи такива, които ·· ·» • · · · • ·· • » ·

имат една или повече кислородни връзки и от 1 до около 12 въглеродни атома или от 1 до около 6 въглеродни атома; арилокси като фенокси; алкилтиогрупи, включващи части, които имат една или повече тиоетерни връзки и от 1 до около 12 въглеродни атома или от 1 до около 6 въглеродни атома; алкилсулфинилови групи, включващи части, които имат една или повече сулфинилови връзки и от 1 до около 12 въглеродни атома или от 1 до около 6 въглеродни атома; алкилсулфонилови групи, включващи части, които имат една или повече сулфонилови връзки и от 1 до около 12 въглеродни атома или от 1 до около 6 въглеродни атома; аминоалкилови групи като групи, притежаващи един или повече азотни атома и от 1 до около 12 въглеродни атома или от 1 до около 6 въглеродни атома; карбоциклични арилови групи, притежаващи 6 или повече въглеродни атоми, особено фенил (например, R е заместена или незаместена бифенилова част); и аралкил като бензил.

Без да е изчерпателно, предпочитаните съединения с формула:

R?

Rg

Rs

имат едно или повече от следните определения:

Ri е -OR, където R е водород, ацил, особено ацетил, алкил-СО- (алкилът е с до около 20 въглеродни атома, за предпочитане, от 1 до около 12 въглеродни атома и по-специално, нечетен брой въглеродни атома, като 3, 5, 7 и 9), циклоалкил-алкил-СО- и по-специално, алкилови групировки с крайна циклихексилова група и с до 6 допълнителни въглеродни атома в страничната верига, или защитаваща група, особено, метоксиметил и R, е по-специално, хидроксилна група.

R₂ е метокси.

R₃ е метил.

е водород.

Rs е метил или водород, особено метил.

Rs е циано или хидрокси.

Xi е -NHR’, -NH-aa-R’ -OR’, където аа е възможно защитена ацилова група на аминокиселина, по-специално, аланин, фенилаланин, цистеин, пролин, валин, аргинин, триптофан или друга аминокиселина. Други възможности за Х₁включват -N(R’)₂, -N(R’)-aa-R’ и -N-(aa-R’)2. В случай на група -aa-R’, R’ обикновено е при аминогрупата на аминокиселината и може да има два такива заместителя. Предпочита се R’ да бъде водород, алкил-СО- (алкилът е с до около 25 въглеродни атома, като до 17, 19 или 21 въглеродни атома и поспециално, нечетен брой въглеродни атома, съответстващи на мастна карбонова киселина с четен брой въглеродни атоми или друг брой въглеродни атоми като от 1 до 6), по-специално, СН₃-(СН₂)_П-СО-, където η е, например, 1, 2, 4, 12 или 16; алкенил, особено алил; халоалкил-СО-, особено CF₃-CO-; циклоалкил-алкил-СО- и по-специално, алкилови групировки с крайна циклихексилова група и с до 6 допълнителни въглеродни атома в страничната верига, особено циклохексил-(СН₂)_п-СО-, където η е, например, 1 или 2; халоалкил-О-СО-, особено трихлоретоксикарбонил; арилалкил-СО- или арилалкенил-СО-, особено фенил-метил/етил/винил-СО-, където арилът може да бъде заместен, както в трифлуорметилсинамоил; възможно заместен хетероарил-CO-, където заместителите и хетероцикличната група са, както вече са дискутирани, както в 2-2-хлорникотиноил; алкенил-СО-, особено, кротонил;

• · ··· · · · · · ··«· ·· ··· ··· ·· ···· възможно заместен аминоалкил-СО-, в частност ацил на аминокиселина, особено аланин, фенилаланин, цистеин, пролин, валин, аргинин, триптофан или друга аминокиселина, или тяхно производно, както в Вос-фенилаланин, пролин, валин, аргинин или триптофан, или, както във фенетилаланин, трифлуоретилацетилаланин, трифлуордиацетилаланин и техни изомери, или диацетил- или дипропионил-трифлуорацетил, или както в Cbz-Val- или група, получена от цистеин с обща формула

Prot^SH-S-CH₂-C(=NOProt°^H)-CO- или Prot^SH-S-CH=C(-OProt°^H)-CO-, където Prot^SHи Prot^OH са защитаващи групи за тиол и за хидрокси, особено когато Prot^SH е Fm и Prot^OH е метокси за първата формула или МОМ за втората формула; или други възможности като защитаваща група, както в алкоксикарбонил, като Вос, или PhNR’CS. Различните групи могат да бъдат заместени, както е показано на други места в настоящото изобретение.

R₇ и Re са -О-СНг-О- или R₇ е =0 и R_a е ОМе, по-специално, R₇ и Raca -О-СН₂-О-. R_g е метил.

Хг е -OR”, където R” е, за предпочитане, водород; алкил-СО-, особено ацетил; алкенил, особено алил; алкенил-О-СО-, особено алил-О-СО-, халоалкил-СО-, особено трифлуорметилкарбонил или хлорметилкарбонил или 2хлоретилкарбонил или перфлуорпропилкарбонил.

Особено интересни са съединенията, в които:

Ri е -OR, където R е водород или ацетил, алкил-СО-, особено η-пропил-СО-, и най-вече, в които Ri е хидроксилна група.

R₂ е метокси.

R₃ е метил.

R4 е водород.

Rs е метил.

• ·

R₆ е циано или хидрокси.

Xi е -NHR’, където R’ е, за предпочитане, алкенил, особено алил, алкил-СО(алкилът е с от 1 до 6 въглеродни атома, особено СН₃-(СН₂)п'СО-, където η е, например, от 1 до 6 и по-специално, от 1 до 4); циклоалкил-алкил-СО- и поспециално, циклохексил-(СН₂)_п-СО-, където η е 1 или 2; арилалкил-СО- или арилалкенил-СО-, особено фенетилкарбонил, фенилвинилкарбонил или бензилкарбонил, алкенил-СО-, особено СН₃-СН=СН-СО-; ацил на аминокиселина, особено Cbz-Val-; възможно заместен хетероарил-СО-, особено 2-хлорпирид и нил карбонил;

или X, е -NH-aa-R’, където аа е аланин, фенилаланин, валин или триптофан. R’ е аминозаместител и е арилалкил-СО-, особено фенетилкарбонил или бензилкарбонил; алкил-СО- (алкилът е с от 1 до 6 въглеродни атома, особено СНз-(СН₂)_п-СО-, където η е, например, от 1 до 6 и по-специално, 1, 2 или 4); алкенил-СО-, особено СН₃-СН==СН-СО-; или защитаваща група, особено алкилокси-СО, както в Вос;

или Xi е -OR’, където R’ е, за предпочитане, алкил-СО- (алкилът е с от 1 до 6 въглеродни атома, особено СН₃-(СН₂)_П-СО-, където η е, например, от 1 до 6 и поспециално, 2); арилалкил-СО- или арилалкенил-СО- особено фенетилкарбонил, фенилвинилкарбонил или трифлуорметилсинамоил.

R₇ и R₈ca -О-СН₂-О-.

Rg е метил.

Х₂ е -OR”, където R” е водород; ацетил, алилоксикарбонил, хлорметилкарбонил или перфлуорпропилкарбонил; и R” е по-специално водород; ацетил или алилоксикарбонил.

Особено предпочитан аспект на настоящото изобретение са нови подобни на ектеинасцидин съединения с показаните по-долу структури I, II и III, които се получават от съединения 17, 25, 43 и 45, получени от цианосафрацин В.

Съединение 25 съответства на синтетичното междинно съединение 3, описано в

US Patent No 6,124,292.

Me

OMe

(I) (II) (III)

Където R’, X₂, Ri и Re независимо един от друг са подбрани от показаните подолу групи:

R’	. x₂	R1	R6
H	OH	OH	CN
CH₂CH=CH₂	OAc	OAc	OH
COCH₂CH₃	OCH₂CH=CH₂	OMOM
COCH₂CH₂CH₃	OCOOCH₂CH=CH₂	OCOCH₂C₆H11
CO(CH₂)₄CH₃	OCOCF₃	OCOCH₂CH₂C₆Hh
CO(CH₂)1₂CH₃	OCOCH₂C1	OCOCH₂CH₂CH₃
CO(CH₂)₁₆CH₃	OCOCH₂CH₂C1	OCO(CH₂)₄CH₃
COCH₂C₆Hh	OCOCF₂CF₂CF₃	OCO(CH₂)_gCH₃
COCH₂CH₂C₆H11		OCO(CH₂)₁₆CH₃

СООСН₂СС1₃

COCH₂Ph

COCH₂CH₂Ph

СОСН=СНСН₃

COCH=CHPh

COCH=CHArCF₃

COCH(CH₃)NHCOCH₂CH₂Ph

CO-(S)-CH(CH₃)NHCOCF₃

CO-(R)-CH(CH₃)NHCOCF₃

CO-(S)-CH(NHCbz)CH(CH₃)2

Boc

CSNHPh

H

NHBoc

NH

I N NH₂

Във формули (XVIIa) или (XVIIb), R¹ обикновено е аминометилен, амидометилен или R¹ заедно c R⁴ образуват група (IV) или (V). Подходящите амидометиленови групи включват тези с формула -CH2-NH-CO-CHCH3-NH2, получени от аланин, и подобни групи, получени от други аминокиселини, а именно, както D така и L, глицин, валин, леуцин, изолеуцин, фенилаланин, тирозин, триптофан, метонин, цистеин, аспартат, аспарагин, глутамова киселина, глутамин, лизин, аргинин, пролин, серин, треонин, хистидин и хидроксипролин. Обща формула на групата R¹ е и -СНг-NH-aa, където аа показва ацилова група на аминокиселина.

Групата R¹ може да бъде ацилирана при аминогрупата като, например, от групите -CH2NH2 и -СНг-NH-aa могат да бъдат получени N-ацилови производни. Ациловите производни могат да бъдат техни N-ацилови или N-тиоацилови производни, както и циклични амиди. Например, ациловите групи могат да бъдат алканоил, халоалканоил, арилалканоил, алкеноил, хетероциклилацил, ароил, арилароил, халоароил, нитроароил или други ацилови групи. Ациловите ··· · · · !

• · · · · ···· · ··· · · е·· ···· ·· ··· ··· ·· ···· групи могат да бъдат с формула -C0-R³, кьдето R^a може да представлява различни групи, като алкил, алкокси, алкилен, арилалкил, арилалкилен, ацил на аминокиселина или хетероциклил, всички възможно заместени с хало, циано, нитро, карбоксиалкил, алкокси, арил, арилокси, хетероциклил, хетероциклилокси, алкил, амино или заместен амино. Други ацилиращи агенти са изотиоцианати като арилизоцианати, особено фенилизоцианат. Алкил, алкокси или алкиленовите групи на R^a е подходящо да притежават от 1 до 6 или 12 въглеродни атома и могат да бъдат линейни, разклонени или циклични. Ариловите групи обикновено са фенил, бифенил или нафтил. Хетероцикличните групи могат да бъдат ароматни или частично или напълно ненаситени и е подходящо да притежават от 4 до 8 пръстенни атома, за предпочитане, 5 или 6 пръстенни атома, с един или повече хетероатоми, подбрани между азот, сяра и кислород.

Без да е изчерпателно, обикновено групите R^a включват алкил, халоалкил, алкоксиалкил, халоалкоксиалкил, арилалкилен, халоалкиларилалкилен, ацил, халоацил, арилалкил, алкенил и аминокиселина. Например R^a-CO- може да бъде ацетил, трифлуорацетил, 2,2,2-трихлоретоксикарбонил, изовалерилкарбонил, транс-3-(трифлуорметил)синамоилкарбонил, хептафлуорбутирилкарбонил, деканоилкарбонил, транс-синамоилкарбонил, бугирилкарбонил, 3-хлорпропионилкарбонил, синамоилкарбонил, 4-метилсинамоилкарбонил, хидросинамоилкарбонил или транс-хексеноилкарбонил, или аланил, аргинил, аспартил, аспарагил, цистил, глутамил, глутаминил, глицил, хистидил, хидроксипропил, изолеуцил, леуцил, лизил, метионил, фенилаланил, пропил, серил, треонил, тиронил, триптофил, тирозил, валил, както и други по-необичайни ацилови групи на аминокиселини, както и ··· · · ·· · . · · · · ···· · ··· · · ··· ···· ·· ··· ··· ·· ···· фталимидо или други циклични амиди. Други примери могат да се намерят в списъка на защитаващите групи.

Съединенията, в които R^a-CO- се получава от аминокиселина и включва аминогрупа, могат сами да образуват ацилови производни. Подходящите Nацили включват дипептиди, които могат да формират N-ацилови производни.

Важен аспект на настоящото изобретение се отнася до предпочитани

в която

R¹ е -CH2-N(R^a)2 или -CH₂-OR^a, R^a е водород; алкил-СО-; халоалкил-СО-; циклоалкилалкил-СО-; халоалкил-О-СО-; арилалкил-СО-; арилалкенил-СО-; хетероарил-СО-; алкенил-СО-; алкенил; ацил на аминокиселина; или защитаваща група;

R⁵ е -OR”, където R” е водород; алкил-СО-; циклоалкил-СО-; халоалкил-СО-; или защитаваща група;

R¹⁸ е -OR, където R е водород; алкил-СО-; циклоалкилалкил-СО-; или защитаваща група;

R²¹ е циано или хидроксилна група.

Обикновено такова съединение има формула:

• · · · · · · * ···· ♦· ··· ··· ·· ···· в която R¹, R⁵, R¹⁸ и R²¹ са, както са дефинирани по-горе.

В тези предпочитани съединения, съгласно настоящото изобретение, R¹може да бъде -CH₂-NHR^a.

R^a може да бъде -aa-R^b, където аа е ацил на аминокиселина и R^b е, както е дефиниран за R^a. Ацилът на аминокиселина е възможно да бъде заместен с една или повече R^a групи.

В други предпочитани съединения, R¹ е -CH2-NH-aa-R^b, където аа е аминокиселина и R^b е водород; защитаваща група; арилалкенил-СО-; халоалкил-СО-; алкил-СО-; арилалкил-СО-; или ацил на аминокиселина. Тези съединения включват такива, в които R¹ е -CH2-NH-aa-R^b, където аа е аланин, а R^b е водород, Вос, PhNHCS-, CF3CO-, PhNAcCS-, трифлуорсинамоил, синамоил, C3F7CO-, бутирил, 3-хлорпроприоноил, хидросинамоил, хексаноил, фенилацетил, Cbz-Val или ацетил; -CH2-aa-R^b, където аа е валин, a R^b е Cbz или Roc; -CH2-aa-R^b, където аа е фенилаланин, a R^b е Вос; -CH2-aa-R^b, където аа е пролин, a R^b е Вос; -CH2-aa-R^b, където аа е аргинин, a R^b е Вос; -CH₂-aa-R^b, където аа е триптофан, a R^b е Вос.

R¹ може да бъде -CH2-NR^a-aa-R^b, където аа е аминокиселина, R^a е алкилСО- и R^b е халоалкил-СО-. Тези съединения включват такива, в които R¹ е -СН2NR^a-aa-R^b, където аа е ацетилаланин, R^a е ацетил или бутирил, a R^b е CF₃CO-.

R¹ може да бъде -CH2-NHR^a, където R^a е водород, защитаваща група; алкил-СО-, алкенил-СО-, арилалкенил-СО-, арилалкил-СО-, хетероарил-СО-, циклоалкилалкил-СО-, или алкенил. Тези съединения включват такива, в които R¹ е -CH2-NHR^a, където R^a е водород, Тгос, ацетил, изовалероил, деканоил, синамоил, хидросинамоил, фенилацетил, пропионил, миристоил, стеароил, хексаноил, кротонил, хлорникотиноил, циклохексилацетил, циклохексилпропионил или алил.

R¹ може да бъде -CH2-OR^a, където R^a е водород, защитен цистеин, производно на цистеина с формула Prot^SH-S-CH2-C(NHProt^NH)-CO-, където Prot^SHи Prot^NH са защитаващи групи за тиол и за амино; защитаваща група; алкил-СО, арилалкил-СО-, арилалкенил-СО-; производно на цистеина с формула Prot^SHS-CH2-C(=NOProt°^H)-CO-, където Prot³¹⁴ и Prot^OH са защитаващи групи за тиол и за хидрокси; или производно на цистеина с формула Prot^3H-S-CH=C(-OProt^OH)СО-, където Prot^SH и Prot^OH са защитаващи групи за тиол и за хидрокси. Тези съединения включват такива, в които R¹ е -CH2-0R³, където R^a е водород; S-FmO-TBDMS-цистеин; производно на цистеина с формула Prot^3H-S-CH2C(NHProt^NH)-CO-, където Prot^SH е Fm и Prot^OH е Troc; TBDMS; бутирил; трифлуорметилсинамоил; синамоил; хидросинамоил; производно на цистеина с формула Prot^SH-S-CH2-C(=NOProt°^H)-CO-, където Prot^SH е Fm и Prot^OH е метокси; или производно на цистеина с формула Prot^SH-S-CH=C(-OProt°^H)-CO-, където Prot^SH е Fm и Prot^0H е МОМ.

В тези предпочитани съединения, подходящо е R⁵ да е -OR”, където R” е водород; алкил-СО-, където алкилът притежава нечетен брой въглеродни атоми, ω-циклохексилалкил-СО-; или защитаваща група.

В тези предпочитани съединения, подходящо е R¹⁸ да е -OR, където R е водород; алкил-СО-, или защитаваща група.

В един вариант, който се отнася до междинни съединения, пръстенът А се модифицира за да се въведе субструкгурата, показана в дискутираните подолу формули (XX) или (XXI).

В друг вариант, който се отнася до междинни съединения, групата R¹може да бъде -CH₂O-CO-CFu-CH₂-S-Prof, получена от съединение с формула (XIX), в която Prof и Fu са, както са дефинирани по-горе. В този случай, R⁷ и R⁸ • · • · · · · ·· · • · · « · ···· · ··· · · · · · ···· ·· ··· ··· ·· ···· формират оксиметиленоксигрупа. Групата R¹⁸ обикновено е защитена. Обикновено R²¹ е циано.

Предпочита се, R^Wa и R^14b да са водород. Предпочита се, R¹⁵ да е водород. Подходящо е, О-ациловите производни да бъдат алифатни О-ацилови производни, особено ацилови производни с от 1 до 4 въглеродни атома, и 0ацетилова група, особено на 5-та позиция.

Подходящите защитаващи групи за феноли и хидроксилни групи включват етери и естери, като алкил, алкоксиалкил, арилоксиалкил, алкоксиалкоксиалкил, алкилсилилалкоксиалкил, алкилтиоалкил, арилтиоалкил, азидоалкил, цианоалкил, хлоралкил, хетероцикъл, арилацил, халоарилацил, циклоалкилалкил, алкенил, циклоалкил, алкиларилалкил, алкоксиарилалкил, нитроарилалкил, халоарилалкил, алкиламинокарбониларилалкил, алкилсулфиниларилалкил, алкилсилил и други етери и арилацил, арилалкилкарбонат, алифатен карбонат, алкилсулфиниларилалкилкарбонат, алкилкарбонат, арилхалоалкилкарбонат, арилалкенилкарбонат, арилкарбамат, алкилфосфинил, алкилфосфинотиоил, арилфосфинотиоил, арилалкилсулфонат и други естери. Тези групи е възможно да бъдат заместени със споменатите по-горе групи в R¹.

Подходящите защитаващи групи за амини включват карбамати, амиди и други защитаващи групи като алкил, арилалкил, сулфо- или халоарилалкил, халоалкил, алкилсилилалкил, арилалкил, циклоалкилалкил, алкиларилалкил, хетероциклилалкил, нитроарилалкил, ациламиноалкил, нитроарилдитиоарилалкил, дициклоалкилкарбоксамидоалкил, циклоалкил, алкенил, арилалкенил, нитроарилалкенил, хетероциклилалкенил, хетероциклил, хидроксихетероциклил, алкилдитио, алкокси- или хало- или алкилсулфиниларилалкил, хетероциклилацил и други карбамати и алканоил, халоалканоил, арилалканоил, алкеноил, хетероциклилацил, ароил, арилароил, халоароил, нитроароил и други амиди, както и алкил, алкенил, алкилсилилалкоксиалкил, алкоксиалкил, цианоалкил, хетероциклил, алкоксиарилалкил, циклоалкил, нитроалкил, арилалкил, алкокси- или хидроксиарилалкил и много други групи. Тези групи е възможно да бъдат заместени със споменатите по-горе групи в R¹.

Примерите за такива защитаващи групи са дадени в списъка по-долу.

Защита за хидроксилна група

Етери метил метоксиметил бензилоксиметил метоксиетоксиметил 2-(триметилсилил)етоксиметил метилтиометил фенилтиометил азидометил цианометил

2,2-дихлор-1,1 -дифлуоретил 2-хлоретил 2-брометил тетрахидропиранил 1-етоксиетил фенацил

4-бромфенацил циклопропилметил алил пропаргил изопропил циклохексил t-бутил бензил

2.6- диметилбензил 4-метоксибензил о-нитробензил

2.6- дихлорбензл

Съкращение

МОМ

ВОМ

МЕМ

SEM

МТМ

РТМ

ТНР ЕЕ

МРМ или РМВ • · * ·

9 · · · » • · · ···· · ·

3,4-дихлорбензил

4-(диметиламино)карбонилбензил

4-метилсулфинилбензил Msib

9-антрилметил

4-пиколил хептафлуор-р-толил етрафлуор-4-пиридил триметилсилил TMS t-бутилдиметилсилил TBDMS t-бутилдифенилсилил ТВ DPS триизопропилсилил TIPS

Естери арилформиат арилацетат ариллевулинат арилпивалоат арилбензоат арил-9-флуор карбокси л ат арилметилкарбонат 1 -адамантилкарбонат t-бутилкарбонат 4-метилсулфинилбензилкарбонат

2,4-диметилпент-З-илкарбонат арил-2,2,2-трихлоретилкарбонат арилвинилкарбонат арилбензилкарбонат арилкарбамат диметилфосфинил диметилфосфинотиоил дифенилфосфинотиоил арилметансулфонат арилтолуенсулфонат арил-2-формилбензенсулфонат

ArOPv

ВОС-Оаг Msx-Oar

Doc-Oar

Dmp-Oar М pt-Oar Dpt-Oar

Защита за аминогрупа

Карбамати

Съкращение метил етил

9-флуоренилметил

9-(2-сулфо)флуоренилметил

9-(2,7-дибром)флуоренил метил

17-тетрабензо[а,с,д,1]флуоренилметил

2-хлор-З-инденилметил бенз[йинден-3-илметил

2,7-ди4-бутил [9-( 10,10-диоксо-10,10,10,10- тетрахидротиоксантил)]метил

2.2.2- трихлоретил

2-триметилсилилетил

2-фенилетил

-(1 -адамантил)-1 -метилети л

2-хлоретил

1,1 -диметил-2-хлоретил

1,1 -диметил-2-брометил

1,1 -диметил-2,2-диброметил

1,1 -диметил-2,2,2-трихлоретил

-метил-1 -(4-бифенил)етил

-(3,5-ди4-бутилфенил)-1,1 -метилетил

2-(2’ и 4’-пиридил)етил

2.2- бис(4’-нитрофенил)етил п-(2-пивалоиламино)-1,1-диметилетил 2-[(2-нитрофенил)дитио]-1-фенилетил 2-(п,п-дициклохексилкарбоксамидо)етил t-бутил

1- адамантил

2- адамантил винил алил

1-изопропилалил синамил

4-нитросинамил

3- (3’-пиридил)проп-2-енил

8-хинолил п-хидроксипиперидинил алкилдитио бензил ·· · · * · ·· се • ·· · ·· ·· е е·· е·· е е ··е • · · · е ·· е • е е е · · ·· · · · · ее · · · ·

Fmoc

Tbfmoc

Bimoc

DBD-Tmoc Troc

Teoc hZ

Adpoc

DB-t-BOC TCBOC

Bpoc t-Burmeoc Pyoc

Bnpeoc

NpSSPeoc

BOC

1- Adoc

2- Adoc

Voc

Aloe или Alloc Ipaoc

Coc Noc

Paloc

Cbz или Z р-метоксибензил р-нитробензил р-бромбензил р-хлорбензил 2,4-дихлорбензил 4-метилсулфинилбензил 9-антрилметил дифенилметил фенотиазинил-(10)-карбонил п’-р-толуенсулфониламинокарбонил n’-фениламинотиокарбонил

Амиди формамид ацетамид хлорацетамид трифлуорацетамид фенилацетамид 3-фенилпропанамид пент-4-енамид пиколинамид

3- пиридилкарбоксамид бензамид р-фенилбензамид п-фталимид п-тетрахлорфталимид

4- нитро-п-фталимид п-дитиасукцинимид п-2,3-дифенилмалеимид п-2,5-диметилпирол п-2,5-бис(диизопропилсилоксил)пирол п-1,1,4,4-тетраметилдисилиазациклопентан 1,1,3,3-тетраметил-1,3-дисилаизоиндолин

Специални -NH защитени групи п-метиламин n-t-бутиламин п-алиламин п-[2-триметилсилил)етокси]метиламин ···· · ···· · ··· · · · · · ···· ·· ··· ··· ·· ····

Moz

PNZ

Msz

TFA

TCP

Dts

BIPSOP STABASE BSB

SEM • · ·· · · · · ·« ···· ·· · · ···· n-3-ацетоксипропиламин n-цианометиламин п-(1-изопропил-4-нитро-2-окси-3-пиролин-3-ил)амин п-2,4-диметоксибензиламин Dmb

2-азанорборнени п-2,4-динитрофениламин п-бензиламин Вп п-4-метоксибензиламин МРМ п-2,4-диметоксибензиламинDMPM п-2-хидроксибензиламинНЬп п-(дифенилметил)аминоDPM п-бис(4-метоксифенил)метиламин п-5-дибензосубериламинDBS п-трифенил метиламин Тг п-[(4-метоксифенил)дифенил метил ]амино ММТг п-9-фенилфлурениламин Pf п-фероценилметиламин Fem п-2-пиколиламин-п’-оксид п-1,1 -диметилтиометиленамин п-бенилиденамин п-р-метоксибензилиденамин п-дифенилметиленамин п-(5,5-диметил-3-оксо-1-циклохексенил)амин п-нитроамин п-нитрозамин дифенилфосфинамид Dpp диметилтиофосфинамид Mpt дифенилтиофосфинамид Ppt дибензилфосфорамидат

2- нитробензенсулфенамид Nps п-1-(2,2,2-трифлуор-1,1-дифенил)етилсулфенамид TDE

3- нитро-2-пиридинсулфенамид Npys р-толуенсулфонамид Ts бензенсулфонамид

Примерите за предпочитаните методи, съгласно настоящото изобретение, най-напред трябва да се отнасят до изходните съединения 45, 43 и

25. Трябва да се разбира, че отделните заместители, особено в позиции С-5 и

С-18, могат да се променят, съгласно настоящото изобретение.

Предпочитаните методи за получаване на съединенията с формули I, II и

III са описани по-долу в следващите реакционни схеми с типични примерни заместителни групи.

Схема 1

I (Re = CN)

(Re = OH)

Както е илюстрирано на Схема 1, първият етап за получаване на предпочитаните съединения (I) (в които R₁=OH, Хг=ОАс и Re=CN или ОН), съгласно настоящото изобретение, от съединение 45 е конверсията с висок добив на аминогрупата в амидна група.

След ацилиране на аминогрупата, вторият етап е трансформиране на цианогрупата в хидроксилна група при взаимодействие със сребърен нитрат в AcCN/вода.

Получаването на други съединения с обща формула I, съгласно настоящото изобретение, от съединение 17 е показано по-долу (Схема 4).

Схема 2

II (R₆ = CN)

II (Rs = OH) ···· ·· ··· ··· ·· ····

Както е илюстрирано на Схема 2, от съединение 43 може да се получи друга група производни с формула II (в която R^OH, Хг=ОАс и Re=CN или ОН) по следната последователност. Ацилиране на аминогрупата до получаване на съответен амид и трансформиране на цианогрупата в хидроксилна група при взаимодействие със сребърен нитрат в AcCN/вода.

Получаването на други съединения с обща формула II, съгласно настоящото изобретение, от съединение 17 е показано по-долу (Схема 4).

Схема 3

AgNO,

III

Предпочитан метод за получаване на съединения с формула III е трансформиране на съединението 25 в съответните естерни производни чрез ацилиране на хидроксилната група, премахване на защитата на фенолната група, последвано от ацетилиране и премахване на защитата на МОМ групата до получаване на съответния естер, последвано от трансформиране на цианогрупата в хидроксилна група при взаимодействие със сребърен нитрат в AcCN/вода до получаване на съединението с формула III (в която Ri=OH, Хг=ОАс и Re=CN или ОН).

• a • a

От съединение 17 могат да бъдат получени други съединения с общи формули I и II, съгласно настоящото изобретение, през междинното аминно съединение 120, както е опсано на Схема 4.

Схема 4

Следващите допълнителни съединения, съгласно настоящото изобретение (включващи, например, 140 и 141), се получават от цианосафрацин В (2), както е описано подробно в примерите (Схема 5).

На специалистите в областта е ясно, че описаните в настоящото изобретение реакционни схеми могат да бъдат изменени и/или комбинирани по различен начин като получените, съгласно тях, съединения трябва да се считат за част от настоящото изобретение. В частност, изходното съединение и/или реактиви и взаимодействия могат да се изменят за да се получат други комбинации на заместителни групи във формули I, II и III.

Схема 5

В свързан аспект, настоящото изобретение се отнася до приложение на известно съединение, сафрацин В, известно като хинонамин, в полусинтетична синтеза.

По-общо, настоящото изобретение се отнася до полусинтетичен метод за получаване на междинни съединения, производни и свързани структури на ектеинасцидин или други тетрахидроизохинолинфенолови съединения, като се изхожда от природни бис(тетрахидроизохинолин)алкалоиди. Подходящите предпочитани изходни вещества за полусинтетичния метод включват класове сафрамицин и сафрацинови антибиотици, получени от различни културни среди, а също и класове реинерамицин и ксестомицинови съединения, получени от морски гъби.

Общата формула (XV) за изходните съединения е следната:

в която:

R¹ е амидометиленова група като -СНг-МН-СО-СП²⁵^²⁵^²⁵⁰, където R^25a и R^25bформират кетогрупа или единият е хидроксилна група, аминогрупа или -ОСОСНз, а другият е -СН2СОСН3, водород, хидроксилна група или -ОСОСН3, при условие, че, когато R²⁵³ е хидроксилна група или аминогрупа, R^2Sb не е хидроксилна група, и R^25c е водород, метил или етил, или R¹ е ацилоксиметиленова група като -CH2OCOR, където R е -С(СН₃)=СН-СН₃ или -СН₃;

R⁵ и R⁸ независимо един от друг са подбрани между водород, хидроксилна група или -ОСОСН₂ОН, или и двата R⁵ и R⁸ са кето, а пръстенът А е рбензохинонов пръстен;

и двата R^14a и R^14b са водород или единият е водород, а другият е хидроксилна група, -ОСН₃ или -ОСН₂СН₃ или и двата R^14a и R^14b заедно формират кетогрупа;

R¹⁵ и R¹⁸ независимо един от друг са подбрани между водород или хидроксилна група, или и двата R⁵ и R⁸ са кето, а пръстенът А е р-бензохинонов пръстен; и R²¹ е хидроксилна група или циано.

По-обща формула за този клас съединения е дадена по-долу:

X в която всяка от заместителните групи, дефинирани с R·», R₂, R3, R4, Rs. Re. R7. Ra.

Rg, Rio е независимо подбрана от групата, състояща се от водород, хидроксилна група, ОСН₃, циано, =0, метил;

в която X е амидна или естерна функционалност, съдържана в споменатите природни продукти;

в която всяко пунктирано кръгче представлява една, две или три възможни двойни връзки.

Следователно, настоящото изобретение се отнася до полусинтетични методи за получаване на междинни съединения, включващи междинно съединение 11 и, оттук, до получаване на ектеинасцидинови съединения, както и на фталасцидин и други съединения. Полусинтетичните методи, съгласно настоящото изобретение, включват редица етапи на трансформиране за да се стигне до желания продукт. Всеки етап сам по себе си е метод, съгласно настоящото изобретение. Настоящото изобретение не се ограничава от дадените за пример методи, а алтернативните методи могат да се осъществяват, например, чрез промяна на реда на етапите на трансформиране, ако е подходящо.

В частност, настоящото изобретение включва 21-циано изходно вещество с обща формула (XVI):

в която R¹, R⁵, R⁸, R^14a, R^14b, R¹⁵ и R¹⁸ са, както са дефинирани по-горе.

·· * · · · · ·· · • · · 4 ·· ··♦··· • · i · · ·>· ···· · ···»· ··· · » · ·· ···· ·· ··· ··· ·· ····

И други съединения с формула (XVI) с различни заместители на 21-ва позиция също могат да представляват възможни изходни вещества. Най-общо, всяко производно, способно да бъде получено чрез нуклеофилно заместване на 21-хидроксилна група на съединенията с формула (XV), в която R²¹ е хидроксилна група, може да бъде използвано. Примерите за подходящи 21заместители включват, но без да е ограничение: меркаптогрупа;

алкилтиогрупа (алкиловата група притежава от 1 до 6 въглеродни атома); арилтиогрупа (ариловата група притежава от 6 до 10 въглеродни атома и е незаместена или заместена с от 1 до 5 заместителя, подбрани от, например, алкилова група, притежаваща от 1 до 6 въглеродни атома, алкоксигрупа, притежаваща от 1 до 6 въглеродни атома, халогенни атоми, меркаптогрупи и нитрогрупи);

аминогрупа;

моно- или диалкиламиногрупа (всяка алкилова група притежава от 1 до 6 въглеродни атома);

моно- или диариламиногрупа (всяка арилова група е, както е дефинирана погоре във връзка с арилтиогрупите);

α-карбонилалкилова група с формула -C(R^a)(R^b)-C(=O)R^c, в която R^a и R^b са подбрани между водородни атоми, алкилови групи, притежаващи от 1 до 20 въглеродни атома, арилови групи (дефинирани по-горе във връзка с арилтиогрупите) и аралкилови групи (в които алкилова група, притежаваща от 1 до 4 въглеродни атома е заместена с арилова група, както е дефинирана погоре във връзка с арилтиогрупите) при условие, че единият от R^a и R^b е водороден атом;

R^c е подбран между водороден атом, алкилова група, притежаваща от 1 до 20 въглеродни атома, арилова група (дефинирана по-горе във връзка с арилтиогрупите), аралкилова група (в която алкилова група, притежаваща от 1 до 4 въглеродни атома е заместена с арилова група, както е дефинирана погоре във връзка с арилтиогрупите), алкоксигрупа, притежаваща от 1 до 6 въглеродни атома, аминогрупа или моно- или диалкиламиногрупа, както е дефинирана по-горе.

Следователно, в по-общ аспект, настоящото изобретение се отнася до методи, при които в първия етап се формира 21-производно при използване на нуклеофилен реагент. Такива съединения наричаме 21-Nuc съединения.

Наличие на 21-цианогрупа се изисква за някои от крайните продукти, особено ектеинасцидин 770 и фталасцидин, докато за други крайни продукти тя действа като защитаваща група, която лесно се превръща в друг заместител, като 21-хидроксилната група на ектеинасцидин 743 или на 21хидроксифталасцидин. Приемането на 21-цианосъединението като изходно съединение ефективно стабилизира молекулата през време на етапите на синтеза, докато е възможно да бъде отстранено. Това и други предимства предлагат и други 21-Nuc съединения.

В един предпочитан аспект, настоящото изобретение се отнася до приложение на 21-цианосъединение с обща формула (XVI) при получаването на бис- и трис-(тетрахидроизохинолинфенолови) съединения. Съединенията, които могат да бъдат получени включват междинни съединения, като междинно съединение 11 и ектеинасцидини и фталасцидин, както и нови и известни съединения с подобна структура.

Предпочитаните изходни съединения включват тези съединения с формула (XV) или (XVI), в която и двата R^14a и R^14b са водород. Предпочитаните изходни съединения включват и съединения с формула (XV) или (XVI), в която R¹⁵ е водород. Още повече, предпочитаните изходни съединения включват съединения с формула (XV) или (XVI), в която пръстен Е е фенолов пръстен.

Предпочитаните изходни съединения включват и съединения с формула (XV) или (XVI), в която поне един от, за предпочитане, поне два или три от R⁵, R⁸, R¹⁵и R¹⁸ не са водород.

Примерите за подходящи изходни съединения, съгласно настоящото изобретение, включват сафрамицин А, сафрамицин В, сафрамицин С, сафрамицин G, сафрамицин Н, сафрамицин S, сафрамицин У₃, сафрамицин Yd^ сафрамицин Adi, сафрамицин Yd2, сафрамицин АН₂, сафрамицин АН_гАс, сафрамицин АНь сафрамицин АЬ^Ас, сафрамицин AR₃, рениерамицин А, рениерамицин В, рениерамицин С, рениерамицин D, рениерамицин Е, рениерамицин F, ксестомицин, сафрамицин D, сафрамицин F, сафрамицин Мх

1, сафрамицин Мх-2, сафрацин А, сафрацин В и сафрамицин R. Предпочитаните изходни съединения имат цианогрупа в позиция 2, за групата R²¹.

В особено предпочитан аспект, настоящото изобретение се отнася до полусинтетичен метод, при който етапите на трансформация се прилагат за сафрацин В:

SAFRACIN В

Сафрацин В притежава пръстенна система, близка 1 И rid ектеинасцидините. Това съединение притежава същата пентациклична структура и същата схема на заместване в десния ароматен пръстен, пръстен Е. Следователно, сафрацин В проявява близко сходство с някои от синтетичните междинни съединения в общата синтеза на ЕТ-743, в частност, с междинно съединение 11. Това междинно съединение може да бъде трансформирано в Et-743 при използване на добре установен метод. Синтетичното превръщане на сафрацин В в междинно съединение 11 представлява полусинтетичен метод за получаване на ЕТ-743.

Следователно, ние предлагаме междинно съединение 11, получено от това съединение сафрацин В и съединения, получени от междинно съединение 11, в частност, ектеинасцидинови съединения. Ние предлагаме също и фталасцидин, получен от сафрацин В. Настоящото изобретение се отнася и до приложение на сафрацин В при получаване на междинно съединение 11, фталасцидин, ектеинасцидинови съединения и други междинни съединения, съгласно настоящото изобретение. Настоящото изобретение се отнася и до съединения, получени от другите изходни съединения и до приложение на тези съединения при получаването на съединенията.

По-предпочитаните изходни съединения, съгласно настоящото изобретение, имат 21-цианогрупа. Най-предпочитаното съединение, съгласно настоящото изобретение, е съединението с Формула 2. Това съединение се получава директно от сафрацин В и се счита за ключово междинно съединение в полусинтетичния метод.

Съединение 2

В свързан аспект, цианосафрацин В се получава при ферментация на сафрацин В, от щама Pseudomonas fluorescens, в културна среда при използване на цианиден йон. Предпочитаният щам на Pseudomonas fluorescens е щам А2-2, FERM ВР-14, който се прилага при метода, съгласно ЕР-А-055 299. Подходящ източник на цианиден йон е калиевият цианид. Най-общо, културната среда се филтрува и се прибавя излишък от цианиден йон. След подходя период на разбъркване, например, 1 час, pH се установява алкално, например, pH 9.5, и при органична екстракция се получава суров екстракт, който след това може да бъде пречистен до получаване на цианосафрацин В.

Сафрацин В включва аланилова странична верига. В един аспект на настоящото изобретение, установихме, че защитата на свободната аминогрупа с Вос група може да има голямо предимство.

Най-общо, превръщането на 21-циано изходното съединение в ектеинасцидинов аналог, съгласно настоящото изобретение, може да бъде осъществено съгласно РСТ патентна заявка, attorney reference wpp83894, която претендира за приоритет от РСТ, публикуван като WO 0069862/23.ноември 2000, който се отнася до полусинтетични методи и нови съединения. Ние въвеждаме текста на РСТ патентната заявка, attorney reference wpp83894, за сравнение.

··· · · ··· ···· ·· ··· ··· ·· ····

Обикновено полусинтетичният метод на аналог, съгласно настоящото изобретение, включва:

а) конверсия, ако е необходима, на хиноновата система за пръстен Е до фенолна система;

б) конверсия, ако е необходима, на хиноновата система за пръстен А до фенолна система;

в) конверсия на фенолната система за пръстен А в метилендиоксифенолов пръстен; и

г) дериватизация, ако е необходима, като ацилиране.

Етап (а), конверсия, ако е необходима, на хиноновата система за пръстен Е до фенолна система, може да бъде проведен като конвенционален редукционен метод. Подходяща реакционноспособна система е водород с паладиево-въглероден катализатор, въпреки че могат да бъдат използвани и други редукционни системи.

Етап (б), конверсия, ако е необходима, на хиноновата система за пръстен А до фенолна система, е аналогичен на етоп (а) и не са необходими повече подробности.

Етап (в), конверсия на фенолната система за пръстен А в метилендиоксифенолов пръстен, може да бъде осъществен по различни начини, по възможност, заедно с етап (б). Например, хиноновият пръстен А може да се деметилира в метоксизаместител в 7-ма позиция и да се редуцира до дихидрохинон и да се обработи с подходящ електрофилен реактив, като дибромметан, хлорбромметан или подобен бивалентен реактив, при което директно се получава метилендиоксипръстенна система, или с бивалентен реактив, като тиокарбонилдиимидазол, при което се получава заместена метилендиоксипръстенна система, която може да бъде превърната в желания пръстен.

Дериватизацията, съгласно етап (г) може да включва ацилиране, например с групата R^a-CO-, както и превръщане на 12NCH3 групата в 12-NH или 12-NCH₂CH₃. Това превръщане може да се осъществи преди или след другите етапи, при използване на известни методи.

Например, цианосафрацин В може да се трансформира по по-кратък и по-праволинеен метод за получаване на нови аналози. Цианосафрацин В може да се трансформира в междинно съединение 25;

и от това производно е възможно да се въведат и други аналози, съгласно настоящото изобретение.

При един метод, съгласно настоящото изобретение, цианосафрацин В се превръща в междинно съединение lnt-25 след поредица от реакции, която включва (1) отстраняване на метоксигрупа от пръстен А, (2) редуциране на пръстен А и формиране на метилендиоксигрупа в един реакционен съд, (3) хидролиза на амидната функционалност върху въглерод 1, (4) превръщане на получената аминогрупа в хидроксилна група.

Превръщането на 2-циановото съединение в междинно съединение lnt-25 обикновено включва следните етапи (виж Схема II):

• · · · · « i* ···· · · · » ♦* • · · β · *♦ ···· ·· ··· ··· ······ формиране на защитено съединение с формула 14 при взаимодействие на 2 с терт-бутоксикарбонилов анхидрид;

превръщане на 14 в дизащитено съединение с формула 15 при взаимодействие с бромметилметилов етер и диизопропилетиламин в ацетонитрил;

селективно елиминиране на метоксигрупата на хиноновата система в 15 до получаване на съединението с формула 16 при взаимодействие с метанолов разтвор на натриев хидроксид;

превръщане на 16 в метилендиоксисъединение с формула 18 при използване на следната предпочитана последователност: (1) хиноновата група на съединение 16 се редуцира с 10% паладий върху въглен в атмосфера на водород; (2) хидроксихиноновото междинно съединение се превръща в метилендиоксисъединението с формула 17 при взаимодействие с бромхлорметан и цезиев карбонат в атмосфера на водород; (3) 17 се превръща в съединението с формула 18 чрез премахване на защитата на свободната хидроксилна група като OCH₂R група. Тази реакция се провежда с BrCH₂R и цезиев карбонат, където R може да бъде арил, СН=СН_?, OR’ и т.н.;

елиминиране на терт-бугоксикарбонил- и метилоксиметил-защитаващите групи на 18 до получаване на съединението с формула 19 при взаимодействие с разтвор на хлороводород в диоксан. Таз реакция може да бъде осъществена и при смесване на 18 с разтвор на трифлуороцетна киселина в дихлорметан;

получаване на тиокарбамидното съединение с формула 20 при взаимодействие на 19 с фенилизотиоцианат;

превръщане на съединението с формула 20 в аминно съединение с формула 21 при взаимодействие с разтвор на хлороводород в диоксан;

превръщане на съединението с формула 21 в N-Troc производно 22 при взаимодействие с трихлоретилхлорформиат и пиридин;

получаване на хидрокси-защитено съединение с формула 23 при взаимодействие на 22 с бромметилметилов етер и диизопропилетиламин;

превръщане на съединението с формула 23 в N-Н производно 24 при взаимодействие с оцетна киселина и цинк;

превръщане на съединението с формула 24 в хидроксилното съединение 25 при взаимодействие с натриев нитрит в оцетна киселина. Или пък, може да се използва азотен тетроксид в смес на оцетна киселина и ацетонитрил, последвано от третиране с натриев хидроксид. Също така, може да се използва натриев нитрит в смес на оцетен анхидрид и оцетна киселина, последвано от третиране с натриев хидроксид.

Схема II

lnt-14 lnl-2U lnt-21

Превръщането на междинно съединение 25 в други аналози, съгласно настоящото изобретение, след това лесно се осъществява, както е показано на Схема III, която обикновено включва следните етапи:

трансформиране на съединението с формула 24 в производното 30 чрез защитаване на първичната хидроксилна функционалност с (S)-N-2,2,2трихлоретоксикарбонил-5-(9Н-флуорен-9-илметил)цистеин 29;

превръщане на защитеното съединение с формула 30 във фенолното производно 31 чрез разцепване на алиловата група с трибутилкалаен хидрид и дихлорпаладиев-бис(трифенилфосфин);

трансформиране на фенолното съединение с формула 31 в съединение с формула 32 чрез окисление с бензенселенов анхидрид при ниска температура;

lnt-25

Int-29 lnt-30 lnt-31 ·· · · · ♦ ·· • · · ·· • · 9 · ·· • · · ·· ·· · ··· ·« ····

Методът за трансформиране на междинното съединение 25, описан погоре, може удобно да се модифицира за получаване на други производни.

По-подробно, конверсията на изходното 21-цианосъединение в съответен продукт, съгласно настоящото изобретение, като това с формула (XX), обикновено включва следните етапи:

б) образуване на -R⁵ група на 5-та позиция в пръстен А;

в) образуване на R¹ група на 1-ва позиция в пръстен В; и

г) конверсия, ако е необходима, на хиноновата система за пръстен А до фенолна система;

в) конверсия на фенолната система за пръстен А в метилендиоксифенолов пръстен.

Тези етапи са много подобни на дадените по-горе. Етап (в) обикновено включва образуване на аминометиленова група на 1-ва позиция и нейното ацилиране.

фталасцидин може да бъде получен при използване на междинните съединения, описани в превръщането на цианосафрацин В в междинно съединение 25. Например, междинни съединения 21 и 17 са подходящи изходни съединения за получаване на фталасцидин и други аналози, съгласно настоящото изобретение.

Както е показано на Схема V, методът за синтетично получаване на фталасцидин от междинно съединение 21 включва следните последователни етапи:

трансформиране на 21 в съединение с формула 27 чрез взаимодействие с фталов анхидрид в дихлорметан и карбонилимидазол.

·· « · 9	• е	• • е •	• • · •	е	♦ · • · • •
• •	• •	• •	• е
•	•	е	•	•	•	•	•
999 9		··	• •е	<··		··	• ••е

Превръщане на 27 във фталасцидин чрез взаимодействие с трибутилкалаен хидрид и дихлорпаладиев-бис(трифенилфосфин) или базична среда, последвано от взаимодействие с ацетилхлорид.

Схема V

Както е показано на Схема VI, методът за синтетично получаване на фталасцидин от междинно съединение 17 включва следните последователни етапи:

ацетилиране на хидроксилната група на съединение с формула 17 с ацетилхлорид и пиридин до получаване на ацетилирано междинно съединение с формула 42;

отстраняване на терт-бутоксикарбониловата и метилоксиметиловата защитаващи групи на 42 за да се получи съединение с формула 43 при взаимодействие с разтвор на хлороводород в диоксан. Тази реакция се осъществява и при смесване на 42 с разтвор на трифлуороцетна киселина в дихлорметан;

получаване на тиокарбамидно съединение с формула 44 при взаимодействие на 43 с фенилизотиоцианат;

превръщане на съединение с формула 44 в аминно съединение с формула 45 при взаимодействие с разтвор на хлороводород в диоксан;

трансформиране на 45 във фталасцидин при взаимодействие с фталов анхидрид в дихлорметан и карбонилдиимидазол.

По същия начин могат да се получат и други аналози, например, от 43 или 45.

Схема VI

Конверсията на 21-цианосъединението в междинно съединение 11 или съответно междинно съединение с формула (XXI), обикновено включва следните етапи:

б) образуване на -OProt¹ група на 18-та позиция в пръстен Е;

в) образуване на -CH₂-OProF група на 1-ва позиция в пръстен В; и

Етап (б), образуване на -OProt¹ група на 18-та позиция в пръстен Е, е обикновена реакция на защитаване на фенолна група и няма смисъл ст допълнителен коментар. Избрани са подходящи условия в зависимост от природата на защитаващата група. Другите етапи са подобни на другите реакции.

Етап (в), образуване на -СНг-OProl² група на 1-ва позиция в пръстен В, обикновено се провежда при образуване на аминометиленова група на първа позиция и след това аминната функционалност се превръща в хидроксилна функционалност, която се защитава. Следователно, когато изходното съединение притежава група R¹, която е -CH2-NH-CO-CR^25aR^25bR^25c, тогава Nациловата група се отстранява. Когато изходното съединение притежава група R¹, която е -CH2-O-CO-R, тогава не се прави промяна на ектеинасцидина. в който заместителят R¹ е същият. При другите продукти трябва да се отстрани Оациловата група. За такова деацилиране се използват различни методи. При един от тях, деацилирането и конверсията в хидроксилна функционалност се извършват едноетапно. След това хидроксилната група може да бъде ацилирана или по друг начин променена до получаване на подходяща R¹ група.

··· · · ··· ···· ·· ··· ··· ·· ····

B US Patent No 5,721,362 са описани синтетични методи за получаване на ЕТ-743 посредством дълга многоетапна синтеза. Едно от междинните съединения на тази синтеза е междинно съединение 11. Възможно е да се достигне до междинно съединение 11 при използване на цианосафрацин В като изходно съединение по много по-кратък метод за получаване на такова междинно съединение при подобряване на метода за получаване на ЕТ-743.

Цианосафрацин В може да се превърне в междинно съединение 25 по описаните по-горе методи. От междинно съединение 25 може да се получи междинно съединение 11 при използване на следните етапи, виж Схема VII:

получаване на защитено хидроксилно съединение с формула 26 при взаимодействие на 25 с терт-бутилдифенилсилилхлорид в присъствие на база;

крайно отцепване на алиловата група с трибутилкалаен хидрид и дихлорпаладиев-бис(трифенилфосфин) от 26, което води до получаване на междинно съединение 11.

BujSnH

lnt-11

··· · · ··· ···· ·· ··· ··· ·· ····

Един аспект на синтетичния метод, съгласно настоящото изобретение, за трансформиране на сафрацин В в междинно съединение 11, е модификация и разширяване на Схема VIII и включване на допълнителни етапи на:

стереоспецифично превръщане на съединението сафрацин В в съединение с формула 2 чрез селективно заменяне на хидроксилна група с цианогрупа при взаимодействие с калиев цианид в кисела среда;

получаване на тиокарбамидно съединение с формула 3 при взаимодействие на съединение с формула 2 с фенилизотиоцианат;

превръщане на тиокарбамидното съединение с формула 3 в ацетамид с формула 5 при хидролиза в кисела среда, последвано от прибавяне на оцетен анхидрид. Междинното аминно съединение с формула 4 може да бъде изолирано чрез спиране на хидролизата в кисела среда с натриев бикарбонат, но това междинно съединение е много нестабилно и бързо се превръща в 5членен цикличен имин, наречен съединение 6;

получаване на защитено съединение с формула 7 при взаимодействие с бромметилметилов етер и диизопропилетиламин в дихлорметан;

селективно деметилиране на метоксигрупата на хиноновата система на съединението с формула 7 в съединение с формула 8 при взаимодействие с метанолов разтвор на натриев хидроксид;

превръщане на съединението с формула 8 в метилендиокси съединение с формула 9 при следната последователност от етапи: (1) хиноновата група на съединение 8 се редуцира с 10% паладий върху въглен в атмосфера на водород; (2) хидроксихиноновото междинно съединение се превръща в метилендиоксисъединение с формула 9 при взаимодействие с бромхлорметан и цезиев карбонат в атмосфера на водород; (3) съединение с формула 9 се превръща в съединение с формула 10 чрез защитаване на свободната

хидроксилна група като OCH₂R група при реакция с BrCH₂R и цезиев карбонат, където R може да бъде арил, СН=СН₂, OR’ и т.н.;

превръщане на ацетамидната група на съединение с формула 10 в съответната хидроксилна група на съединение с формула 11 при взаимодействие с азотен тетраоксид в смес на оцетна киселина и ацетоацетат, последвано от третиране с натриев хидроксид; или пък може да бъде използван натриев нитрит в смес на оцетен анхидрид и оцетна киселина, последвано от третиране с натриев хидроксид; или пък ацетамидната група на съединение с формула 10 може да бъде превърната в първична аминогрупа при взаимодействие с хидразин или с Boc₂O.DMAP, последван от хидразин; този първичен амин може да бъде превърнат в съответната хидроксилна група (съединение с формула 11) при окислителна конверсия на първичния амин в съответния алдехид с 4-формил-1-метил пиридиниев бензенсулфонат или друг пиридиниев йон, последвано от третиране с DBU или с друга база с последващо хидролизирано, последвано от редукция на алдехида до съответна хидроксилна група с литиево алуминиев хидрид или друг редуциращ агент; получаване на защитеното съединение с формула 26 при взаимодействие с t-бутилдифенилсилилхлорид и диметиламинопиридин в дихлорметан:

превръщане на силираното съединение с формула 26 в междинно съединение с формула 11 чрез премахване на защитата на OCH₂R защитаващата група при взаимодействие в редукционни условия или киселинни условия.

Обикновено методът се провежда с паладий върху въглен в атмосфера на водород или водна трифлуороцетна киселина, или трибутилкалаен хидрид и дихлорбис(трифенилфосфин паладий).

При друга предпочитана модификация, циано съединението с формула 2 може да бъде превърнато в междинно съединение 11 при разширяване на Схема II, включвайки следните етапи:

получаване на защитеното хидроксилно съединение с формула 26 при взаимодействие на 25 с терт-бутилдифенилсилилхлорид в присъствие на база;

Следователно, възможно е превръщането на цианосафрацин В в редица междинни съединения и производни с антитуморна терапевтична активност. Тези междинни съединения могат да бъдат получени от вече описани съединения, или при използване на алтернативни методи.

Междинните съединения, описани в настоящото изобретение, включват съединение 47 и редица амидни производни, получени при използване на съединения 45 или 43.

На Схема VIII е описано получаването на съединение 47 при използване на следната последователност:

• · ♦ · · ··· ···· ·· ··· ··· ·· ···· получаване на защитено съединение с формула 7 при взаимодействие с бромметилметилов етер и диизопропилетиламин в дихлорметан;

превръщане на съединението с формула 8 в метилендиокси съединение с формула 10 при следната предпочитана последователност от етапи: (1) хиноновата група на съединение 8 се редуцира с 10% паладий върху въглен в атмосфера на водород; (2) хидроксихиноновото междинно съединение се превръща в метилендиоксисъединение с формула 9 при взаимодействие с бромхлорметан и цезиев карбонат в атмосфера на водород; (3) съединение с формула 9 се превръща в съединение с формула 10 чрез защитаване на свободната хидроксилна група като алилоксигрупа при реакция с алилбромид и цезиев карбонат;

Схема VIII

U HCI 6.SMOIOXANE 2)Ас₃О

ОМе

• ·

превръщане на съединението с формула 9 в ацетилно производно 46 при взаимодействие с ацетилхлорид в пиридин;

превръщане на съединението с формула 46 в незащитено съединение 47 при взаимодействие със солна киселина в диоксан.

Други полезни амидни междинни производни се получават от вече описаното междинно съединение 45 при използване на следната схема:

Схема IX

Вторият етап е възможен. Този метод е важна част от настоящото изобретение, особено, когато групата R е група R^a, както е дефинирана по-горе. Още повече, Схема VIII може да бъде разширена за да се осигури получаването на съединения с формула (XXIII) при изключване на изходни съединения с различна група на позиция 5, или на група, директно закачена за ··· · · · · · ···· ·· ··· ··· ·· ···· продукта, или на група, която може да бъде отстранена или по друг начин модифицирана за да се получи желана група.

От съединение 45 може да бъде получена група аналози при следната последователност:

ацилиране на аминогрупата на съединение с формула 45 с редица ацилови производни до получаване на съответните амиди, където предпочитани ацилови групи са ацетил, синамоилхлорид, р-трифлуорсинамоилхлорид, изовалерилхлоридфенилизотиоцианат или аминокиселини, или други примери, дадени по-горе за групите R^aCO-;

превръщане на цианогрупата в хидроксилна група при взаимодействие със сребърен нитрат в смес AcN/вода.

Други полезни амидни междинни производни се получават от вече описаното междинно съединение 43 при използване на следната схема:

Схема X

··· · · ··· ···· ·· ··· ··· ·· ····

От съединение 43 може да бъде получена друга група производни при използване на следната последователност:

(а) ацилиране на аминогрупата на съединение с формула 43 с редица ацилови производни до получаване на съответните амиди, където предпочитани ацилови групи са ацетил, синамоилхлорид, р-трифлуорсинамоилхлорид, изовалерилхлоридфенилизотиоцианат или аминокиселини, или други примери, дадени по-горе за групите R^aCO-;

(б) превръщане на цианогрупата в хидроксилна група при взаимодействие със сребърен нитрат в смес AcN/вода.

Важен метод, съгласно настоящото изобретение, е следният:

където

R^s в крайния продукт е, както е дефинирана за съединение (XXII) и може да се различава по изходно съединение и може да се превръща като част от метода;

R¹⁸ е хидроксилна група в крайния продукт, но може да бъде защитена хидроксилна група в изходното съединение и да се превръща като част от метода;

R¹² в крайния продукт може да бъде еднаква с групата в изходното съединение или да се превръща като част от метода;

R²¹ в крайния продукт е, както е дефинирана по-горе и, ако хидроксилна група може да се получи от цианогрупа като част от метода;

··· · · · · * ···· ·· ··· ··· ·· ····

R^a е, както е дефинирана по-горе и може след това да бъде ацилирана до получаване на краен продукт с ацилирана R^a група, както е дискутирана.

Предпочита се, R⁵ да бъде оксиацетил или друга малка оксиацилова група в изходното съединение и да не се променя в хода на метода. Предпочита се, R¹⁸ да бъде хидроксилна група в изходното съединение и да не се променя в хода на метода. Предпочита се, R¹² да бъде -NCH₃- в изходното съединение и да не се променя в хода на метода. R²¹ в крайния продукт е, както е дефинирана по-горе и, ако хидроксилна група може да се получи от цианогрупа като част от метода. Предпочита се, R^b в крайния продукт да бъде, както е дефинирана по-горе при описание на съединението с формула (XXIII).

Друг важен метод, съгласно настоящото изобретение, включва реакцията:

··· · · ··· ··«· · · ··· с · · · · · < · ·

Друг важен метод, съгласно настоящото изобретение, включва реакцията, при която групата R¹ е аминометиленова и се превръща в хидроксиметиленова група.

Друг важен метод, съгласно настоящото изобретение, включва реакцията за получаване на 21-цианосъединение с формула (XVI), която включва взаимодействие на съединение с формула (XV):

в която R¹, R⁵, R⁸, R^14a, R^14b, R¹⁵ и R¹⁸ са, както са дефинирани по-горе и R²¹ е хидроксилна група, с източник на цианиден йон, до получаване на желаното 21цианосъединение.

В допълнение, настоящото изобретение се отнася и до методи, при които се използват и други нуклеофил-съдържащи съединения за получаване на съединения с формула (XVI), в които 21-та позиция е защитена с друга нуклеофилна група, 21-Nuc група. Например, 21-Nuc съединение с формула (XVI) с алкиламинозаместител на 21 позиция може да бъде получено при взаимодействие на съединение с формула (XV), в която R²¹ е хидроксилна група с подходящ алкиламин. 21-Nuc съединение с формула (XVI) с алкилтиозаместител на 21 позиция може също да бъде получено при взаимодействие на съединение с формула (XV), в която R²¹ е хидроксилна група с подходящ алкантиол. Или пък, 21-Nuc съединение с формула (XVI) с акарбонилалкилов заместител може да бъде получено при взаимодействие на съединение с формула (XV), в която R²¹ е хидроксилна група с подходящо • · · · · · ♦ ♦ ···· t· ··* ··· ·· ···· карбонилно съединение, обикновено в присъствие на база. Има и други методи за получаване на други 21-Nuc съединения.

Друго важно взаимодействие, съгласно настоящото изобретение, включва третиране на 21-цианов продукт, съгласно настоящото изобретение, до получаване на 21-хидроксилно съединение. Тези съединения притежават интересни in vivo свойства.

За да се избегнат грешки, стереохимията, описана в настоящото изобретение, се базира на нашето разбиране за правилна стереохимия на природните продукти. До степен, в която може да бъде открита грешка в означената стереохимия, следва да се направи подходяща корекция в дадените в настоящото изобретение формули. Още повече, тъй като синтезите могат да бъдат модифицирани, настоящото изобретение се отнася до стереоизомери.

ЦИТОТОКСИЧНА АКТИВНОСТ

Compound	IC₅₀ (μΜ)
Ρ-388	Α-549	ΗΤ-29	MEL-28	CV-1	DU-145
ом· II 11 «Г О\| CN ΝΗ ₂	0.009	0.018	0.018	0.018	0.023
ΟΜ· ΗΟ-Χ.Μ· «.ο-νγΧ ⁰ Ж 14	0.15	>0.15	0.15	>0.15

·· ·· • · · » • ·· • · ·· • ·· ···· ·· • · ♦ ·· ·· ·· ·· · a • · ·· · • · · ♦·· • ' a · »·.

··· · ·· ·· ····

1 OMe й/уу>/ “ r °^4- -V \_s	1.44	1.44	1.44	1.44



0 L CN 0 / Γ >°4 “V 16	>1.5	>1.5	>1.5	>1.5
°4^°γΛγ·^Μ·
^u' Υ^τ^χ**⁴γ^χ^-Γ-Μ·
V· IJ.^_ , -V π	1.4	1.4	1.4	1.4
% 1 ?“*

o X Εν o i τ >-°4Λ^,ΝΗ \ ~ 18	0.01	0.01	0.01	0.01
4, ?“· ^Ηα*γΛ^^Μ·		-
^Μ<''Υ^’^Ζ4Τ*^2Γ^Μ·
0 X CN ΝΗ «V 19	0.08	0.16	0.01	0.16
\ ^MVy^u·

^Οχ-° ’'«Λ <k^NHCSNHPh \ 20	0.01	0.01	0.01	0.01
\ο ΗΟ± Μ.
^Μ* ΥίΎ*;γ ^Μι	0.019	0.019	0.019	0.019
^Οχ-ό ^4 21
% ?“· λ ^ΗΥΓ
Mt. ^zk >ΓΤ \| J N-\|’Me
^0<-° s> ₀Л₀.сн,со, 22	0.014	0.014	0.014	0.014	0.014	0.014
%. ?“·

^-° ’'«Λ* ₀Л₀.СН,СС1, 23	0.13	0.13	0.13	0.13	0.13	0.13

“Yj/'Yjz“· Χ·Ο X CN η Λ ΝΗ1 24	0.18	1.8	1.8	1.8	1.8	1.8
% ?“* ^Μ0Μ° ЕЙ ** ^Μ1 ^O,^^o> 25	0.2	0.2	0.2	0.2		0.2
MjN J. ^0Μβ °Τ ^7/\| ^н0^ч-^м· Ac0\ S jrlf ^ΜΎι vi^r“· '-Ο CN 35	0.008	0.008	0.008	0.008
0 1 ^0Μ· °®τ 'ή w’sAsyx“· JL J Ί ί\ τ ^Νj‘^u· '-ο CN 36	0.01	0.01	0.01	0.01
ΟΜ« ом Τ J ме. >C * V-O J CN K W 28	0.001	0.001	0.001	0.001	0.001	0.001 .
I OMe ΟΑς Γ J Mt. yL л Vyy Η·Μ· '—Ο X CN 0. / r Λ°-ν ⁰ \ 42	0.13	0.13	0.13	0.13		0.13
0Μ< KO^JL^M· ΟΑβ J7T мч Yyy *Η’^Μ· ^θ4-⁰ ''νΛ V 43	0.008	0.016	0.008	0.008		0.016
ΟΜι KO^JL^Mt OAe Jf ίΊΓ ^Nd’^M· V-о X £ν ΝΜ ^ik-NHCSNHPh °\ 44	0.001	0.001	0.001	0.001		0.001
ΟΜ· ho^JL'M· cac jr j ^Ύη⁴! ^Ντ*» \—Ο X CN At· nm, 45	0.01	0.01	0.01	0.01		0.01
,

ом· HO^Js-M· Ol CN NH PhWSCHN^^ 1 ⁰ 3	0.015	0.015	0.015	0.015	0.018
OM· hqJ^m Ίίΐί⁴! Ώ’¹*
N-' CN 6	2.171	2.171	2.171	2.171	2.171
OM< HO ± M. L^I Μ·ο*γγ >r ⁰ M^NoA 5	0.005	0.005	0.005	0.005
1 OMe O^O^X-M· M·^ Jk x*»s Z¥
ΜΛ'^/^γ^γ^Ν4^ζ^ ⁰ *W^N 7	0.22	0.22	0.22	0.22	0.22
1 OM· °^°>Α<^Μ' ⁰ <A 8	>9	>18.1	>18.1	>18.1	>18.1
1 OM· МчЛ^ он Γ J ^Μ<ν^γ^ζ*⁴γ^ζ^Α’^Μ· Ulj» <A 9	>1.77	>1.77	>1.77	>1.77		>1.77
ч. 1 ?“· o^CyL·»· M«. A. s^Pr..
θ'“⁰ 4> <A 10	>1.65	>1.65	>1.65	>1.65		>1.65

OAc Me^-L XJ	1 OMe °4^^Ο4_Τ^4^Μ· Nj-Me L·* ο**' 46	0.016	0.016	0.016	0.016		0.016
	но. X -Me
OAc	rj

/*<^1	. -N. Jr
0 T '-O	U CN	0.001
	<A 47	0.001	0.001	0.001		0.001
	^Ύν“*
M·^ -X

0 \— 0		0.0008
	NH , 48	0.001	0.0008	0.0008		0.001
	HO^Jk^Me
Me^JL
T 1 o /			-
\-0		0.007
	^T'¹· 49	0.007	0.007	0.007		0.007
	HO^-L Me
OAC	XJ
“Й	Ύ^Ν-J-Me
0/^ \-o		0.0001
	NM	0.0001	0.0001	0.0001		0.0001
	OMe
OAc	Xj
“o	''YyTmi
. \-0	Bn NH	0.0001	0.0001	0.0001	0.0001		0.0001
	O^Y^Me
	NH I 51
	OMe HO^^jL Me
OAc	TJ
^Μ<γΚ_/'	N-~Me
°vo 1	Bn
oA*“^e	0.001
	NH _oAsS=-X\|0^CFj	0.001	0.001	0.001		0.001
	2
	OMe
	ноЦ-Μι
Me^
Ώ	X^‘
Vo	4 CN NH	0.0001	0.0001	0.0001	0.0001		0.0001

	Me 0 53

OMe ч. ^HOss^>r^Me Me Us/xAr ГТ T N-Me JXV Vo V CN NH oVy'3 Me 0 54	0.001	0.001	0.001	0.001	0.001
OMe он T J\| o'VY'Y Vo V CN NH ₀ΤγΝΗγΟ₽₃ Me 0 53	0.01	0.01	0.01	0.01	0.01
OMe HoU^Mt °η ΊΓ J Vo v cn NH “V· 56	0.18	0.9	0.18	0.8	0.9
OMe HO^Jx^Me OH T J ^Me Vo L. CN NH ^-HMCSNHPh 57	0.14	0.14	0.14	0.14	0.14
OMe XO^Js-Me OAc jT Jj V isk^NHCSNPh \ * 58	. · 0.001	0.001	0.001	0.001	0.001
OMe HO^Js^Me OAc A J oW> ^-° * =N ΛΆ° Me 0 «6 60	0.001	0.001	0.0001	0.001	0.0005
OMe HO^Js^zMe OAc I J Ме^к/ч^С^Г Vo \ CN NH <Асл 61	0.001	0.001	0.001	0.001	0.001
оме HO^Js^Me OAc T J Ме^^А^-ч-^^** ΥΎ T^N7^Me Ш/ Vo \ CN NH _u M. ° 62	0.001	0.001		0.0005	0.001

OMe OAc Г 1 ιΓ I N-rMe *~0 X CN NH ^63	0.0001	0.0001	0.0001	0.0001	0.0001
ho^Jv Me OAc T Я MeUU</CY Γ rt ΊΓ ^N1^M· _ojxv ^-0 \ CN NH _u ₀VY~^a Me 0 64	0.001	0.001		0.001	0.001
OMe \| ^ноч^А^Ме OAc jT J ЛОУ~ ^-0 \ CN NH <^ 65	0.0001	0.0001	0.0001	0.0001	0.0001
OMe HO^J^Me OAc T jf r IT ΊΓ ^N4Me Z.j-Az' V-0 K. OH NH ^₆₆	0.0001	0.0001	0.0001	0.0001	0.0001
OMe ^ΗΟν«Λ^^Μβ OAc T J . Mi^X/vXY 1 πί ^ΝςΜ« сМД^ \*o \ 0H NH O^^CT, Me 0 67	0.0001	0.0001	0.0001	0.0001	0.0001
OMe MO^J^Me OAc Tf jf *** “Γ^w· °\-° 1_ΝΗδΗ 68	0.0008	0.001	0.0008	0.0008	0.001
OMe HO^^AyeMe °Ac JL jf Me^Js^z4^<V^ K rt 1 ^м4ме ₀W/ v-o \| oh NH θί^γΜβ NH \| «Λ·^ 69	0.001	0.001	0.001	0.001	0.001
OMe HO^Js^Me OAc T j <w? '-o \ OH NH ^70	0.0001	0.0001	0.0001	0.0001	0.0001

• ·


OMe OAc Ϊ J Г T T EfMe «Mr*/ ^-0 X OH NH <X^ 71	0.0008	0.0008	0.0001	0.0008		0.0001
OMe но^Х^Ме OAc T j Г Й I ^N7^Me Ч-ο X CN NH 72	0.0001	0.0001	0.0001	0.0001		0.0001
OMe HO^A-Me OAe T j “e^xkx^xAr A\V V- 0 1 CN даО 73	0.0001	0.0001	0.0001	0.0001		0.0001
OMe HCkX,“' OAe T J YY T N—Me АМА Ч-ο X CN NH _ода 74	0.0001	0.0001	0.0001	0.0001		0.0001
OMe HO^X, Me oac T J МеХ^куСТ Γ T ΊΓ ^NT^M« «W/ '-o \ CN NH A o^(CMj),₂ 75	0.1	0.1	0.1	0.1		0.1
OMe HO^X^-Me OAc ΊΓ J Me^X^zs^z^*r ГТ T N-jMe A\V 0 CN NH A o (chj,, 7^	0.1	0.1	0.1	0.1		0.1
OMe но^Х^ме ^OAc Jl IT ^М\Х/Ч/^Т Г rt T N—Me »w> 0 X CN NH 77	0.0001	0.0001	0.0001	0.0001	0.0001	0.0001
оме HO^X^Me OAc T J .MrV V-о X CN NH ₀A^x 78	0.0001	0.0008 >. ··	0.0001	0.0001		0.0008


OMe OAC T J ^•0 \ CN NH \| □SA NHCOZ 79	0.001	0.001	-0.001	0.001		0.001
OMe HO^J^-Me OAC T J r ti T N-Me oAV'Z '-ο OH NH ^80	0.0001	0.0001	0.0001	0.0001		0.0001
OMe НО^^кч-Ме OAc Jl· J Меч^к^ч^Х⁴^ Г II T ^N1“· OK ЛО 81	0.0007	0.0007	0.0007	0.0007		0.0007
OMe мхА, ме OAc T J Me Γ ГТ^ ^NT7^Me Ak-V 0 \ OH NH 82	0.0001	0.0001	0.0001	0.0001		0.0001
OMe HCkk^Me OAc X J Γ ί 1 ^NT^Me AAV ^-0 \ CN NH S3	0.0001	0.0001	0.0001	0.0001	0.0001	0.0001
OMe ^ΗΟχΑ/^Μί OAc Γ J AV> *-0 X OH NH _o<k^x 84	0.0001	0.0008	0.0001	0.0001		0.0008
оме ^H0>tfXy^Me OAc T 1 YYt ^Mi AAV ⁰ ' ^CN Хл ΛτΑ Me ⁰ 8 5	0.0006	0.001	0.0006	0.001		0.0006

• ·

OMe OAc 7 J дХХ>“^еVo * CN NH NH	0.001	0.001	0.001	0.001	0.001	0.001
OMe OAe Ϊ J Mt. A YY T N-jMe Vo I CN NH _HoYYV Me 0 ^87	0.0001	0.0001	0.0001	0.0001		0.0001
OMe HO^Js^Me OAc Ϊ J “YrvY“» _ολ_γΛγΜ^> Vo CN NH o^Y^N1i^ _oo Me ⁰ 88	0.0007	0.0007	0.0007	0.0007		0.0007
OMe ΗΟ^Α,Μι OAc Ϊ J ^ΜΎ^ίΗτ^/'Υ?^β _ок£кА Vo CN NH _H°ΥΥΥ_Λ Me 0 89	0.001	0.007	0.001	0.001		0.007
оме HO^Jv^Me OAc T J VO \ CN NH „ NHCbZ <£ϊΥ₉ο	0.01	0.01	0.01	0.01		0.01
OMe ΗΟ^Χ,Μβ OAc JTJl Vo I OH NH _M ο^^Νϊ---' Me 0 91	0.001	’ 0.001	0.001	0.001		0.001
OMe HO^Js^Me °^Ac XJ ^-° 1 би Me 0 9 2	0.0001	0.0001	0.0001	0.0001		0.0001

·· »· · . ... ···· ·· »····« ··· · ··♦ · ··· · · 9 ·· ··»· ·· ··· 999····

........OMe OAc I J l· ll 1 ⁿ7«« «MrV Vo \ OH NH 0^'“* NH —<.93	0.001	0.001	0.001	0.001	0.001	0.001
ИО^хк.Ме OAc T J Ui. A XCC^^ut Vo \ OH NH _H «ViTi Me 0 <^94	0.0007	0.0007	0.0007	0.0007		0.0007
OAc T H r fTT N-Me _ow'/ Vo \ oh NH _MοΥ^νΎ^ _ncMe ⁰ 95	0.0001	0.0001	0.0001	0.0001		0.0001
OMe ^Н°кДуЛе OAc T jj Me. X х-V XT Γ\|Τ J* oW/ '—O \ OH ?^и и o=Vⁿy^ Me 0 96	0.001	0.007	0.001	0.001		0.007
% ?^Me 1 MOMO^xk.Me Me.A.x'.xcv ΓΥΎΧμι οΑγ-Υ Vo \ CN 0 97	>1	>1	>1	>1		>1
*4) OMe мома^АуМе rfT ^N7Mt οΎΥ/ '—Ο \ CN	>1	>1	>1	>1		>1
4) ?^Me 1 МОМСХ^К-Ме Me^xkxs-АЛ rfr L>^MeοΎγΆ '-Ο χ CN A) 99	0.7	0.7	0.7	0.7	0.7	0.7

MOMCL^L-Me ° ςΥ ГТ> Ϊ>^Μ· oW/ '-Ο X CN “^0 JOO	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1
OMe momo^Js^mc OK T J Me. Js. ΓίΙ “l* oWs^ V-о \ CN O 101	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1
OMe MOMO^Js^Me OH T 1 Мс^Х/ч/Гу r й i ^ΝτΜβ As-V' ^-0 ( CN 0 102	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1
оме momo,J>. Me OK Ϊ J ГТ I ^NTMe '—O * CN J03	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1
OMe момо^ж“· ^0H JJ J ПТ £>“« Λ-γγ V· o ( CN 104	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1
OMe MOMO^Js^Me OAc JT j r ί T H^Me A\V '-O \ CN 105	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1
OMe MOMCkX^Me OAc J I ΓιΤΤ ^Ni^M« W ν-О \ CN O ₀<^^ХЧ^СР₃106	0.6	0.6	0.6	0.6	0.6

• · • · • · · · • · · • · · · · ·

owe MOMO^Js^Me OAc Γ Ϊ r IT ΊΓ ^N“Me .Wx ^-0 ( CN ^5 107	0.1	Ό.1	0.1	0.1	0.1
OMe MOMO^Jx-Me OAC JT J ΜίκζΧχκ/^τ Γ If 1 N—Me WX 0 \ CN °^O 108	0.01	0.07	0.07	0.07	0.07
OMe ^H0N^X^Me OAc ΊΓ ]f Γ π i N'T Me W '-o \ CN <A^ Ю9	0.0001	0.0008	0.0008	0.0008	0.0008
OMe HO^Jx^Me OAC T \|T ΜΕχΑν'Χ/⁴'⁷Г II 1 N-;Me _oA_jA_r ¹NV> \-0 \ CN “Ήτ·ιι_β	0.001	0.001	0.001	0.001	0.001
OMe no^Js-Me OAc T J ^ΜβχΓ^ίί^^χχΤ^ζΝ7Μβ _oAy!L.Nji> 0 \ CN	0.0001	0.0001	0.0001	0.0001	0.0001
OMe HO^Jss-zMe OAC j Г ^-0 ( CN °^Όιη	0.0007	0.0007	0.0007	0.0007	0.0007
OMe ηο^Χ,μ· OAc Ύ J “Άγ-γιΑ· ЛМХ V-0 \ OH 113	0.0001	0.0001	0.0001	0.0001	0.0001

• · • · · ·

OMe . OAc Т Г ΜβχΑΛζ*4^ζ<ν^ l· Η I N—Me MV \-0 \ OH ”·^ΧΓ“·_η4	0.0001	0.0001	0.0001	0.0001	0.0001
оме ΠΟχΥ,Μβ OAc T IT Me xA/xV<t ГИ I ^NTMe AVv^ ^-0 \ OH 115	0.0001	0.0001	0.0001	0.0001	0.0001
OMe HO^^k^Me OAc T j Me χΧ ^-x Г 1Γ ΠΓ N—Me MV Mjll6	0.0001	0.0007	0.0007	0.0007	0.0007
^k0 ?· J MOMO^k^Me ^0>4° ΙΪ Me. JL ^-x K ff T N-тме AKV V-0 I CN NH Ax>NH80C 1 117	0.06	0.06	0.06	0.06	0.06
OMe J nOxJV^Me 0^0 JL T Me. 1 Γ li ^νΊ^μ· J-yys' ^-o έκ ΝΗ V 118	0.001	0.001	0.001	0.001	0.001
\ j HOVs^Me 0*% Yjf MV V-0 CN NH -Ax^NHCSNHPh r 119	0.001	0.001	0.001	0.001	0.001
k_o OMe j HOxJ^-Me 0^0 1 T Γ il ΊΓ N-jMe MV V 120	0.06	0.06	0.06	0.06	0.06

• · • «

X <А_О '—ο	ΟΜ« 4-ζ^Νχχ·^ к> C^oV α^α 121	0.006	0.006	0.006	0.006	0.006

X	ΟΜ«

			-.
JU
\—ο	ki**
	> 122	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1
X	Out
ο·Χ₀	f II
“*yS
		··
x_o	к CN NH
	и	0.0001	0.0001	0.0001	0.0001	0.0001
	V 124
ΟΗ	ΗΟ^Χ,Μ.
“’Δ	'^''p'N-J-Mt
0 7 \-ο	k CN NH
	Λ
	Ό 125	0.001	0.001	0.001	0.001	0.001
X	CUt
O’Lq
Mt^JL
Τ
Κ-ο					•
	°ΰ	0.0001	0.0001	0.0001	0.0001	0.0001
	U 126
X	OMt
o=L_o	ΗΟ^Α,Μι
^Μ*χ-Α^_	'''уЧ-Т-м»
&Τ 0	U=^N
	Ϋ.	0.0001	o.oooi	0.0001	0.0001	0.0001
	U 127

X 0=+о ΌΤ Uo	ом· 4χΝχχ*^ k OK NH %_u.	0.0001	0.0001	0.0001	0.0001	0.0001
X °“4	OM* MOMO^X^Me xy '^z’^^zZn-J-m*
✓к о г ^--0	4.n,>* k OH NH
	°v,	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1
	129
	WOMO^JL. ^M«	··
ϋΗ ^м‘тЧ °\_j	XJ 4χ^Ν·4Χ^ k CN NH
	A
	kJ 130	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1
Г 0*4	MC'NC'jky M«
	'’Ч^мТш
°νο*	k “CN NM
	o<
	kJ 131	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5
^ui 0^0 ^Μ·νχ4	OM* MOMO^X-M·
T д or V-0	4χ^Νχζ^ k CN NH

	k? 132	0.1	0.1	o.i	0.1	0.1
λ	OM· MOMO^Js^Mf
M»_K xk .
o 1r 0	4χ^Νχχ*^
	4 133	0.05	0.05	0.05	0.05	0.05

Θ7

'% \-ο	ом· ’^Z*^Sy^Z^Nj-M« % 134	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5
0 /,Λο ^Μ,Υν	ΗΟ^Χ,Μί
I 2L	CN NM

	Ό 135	0.01	0.01	0.01	0.01		0.01
^U1 0^0	hcl^L^m·
^m,tS	'^Ζ ⁴γ'Ν4-Μ<
‘LT'	°X	0.001	0.001	0.001	0.001		0.001
	ιΟ 136
V^c -o	0M« HO^Jl^M·

O'^'t \-o	V *CN NM
	U 137	0.01	0.01	0.01	0.01		0.01
-¾. 0^0	OM· ΗΟ,Χ,Μ·
“·γΑ	^ζ^*⁴γ^ΖΎ,Ν·4-Μ·
0*7^ \_o
		0.006	0.006	0.006	0.006		0.006
	138
^ux Сг*О ^м,юЛ.	OM· ΑεΟ^^γΜ·
VT 0	>V*^NvX^ Ύ	0.01	0.01	0.01	0.01		0.01
	U 139

8β

ОМе If f 1 ^Me0^X\|j^^x 0 1 CN H f WS ‘ 140	0.08	0..08	0.08	0.08		0.08
HO^JL· Me Mt-JL Η ί * lJ”^M* MeO η^ν^Nx^ 0 1 CN и ? ΎX_q • 141	0.01	0.01	0.01	0.01	0.01	0.01
MO^Js^Me OAc TT *** 'T^Zj^x^S4f^,z^N^<« V-о X CN NM _o«A^NM8oc ^•Ph 174		0.0013	0.0013
HO^A^ Me OAc T T Me. -L jC-ZC ' j^·*· ^-0 A CN NM Q=k^NHBOC 175		0.007	0.007
HO^Jw^Me OAC T T μ·. A>^z<t 1 Ί N-J-Me ^-0 X 5n 7^M Boe οΑβ 176		0.014	0.014
ΗΟ^,Α^-Μβ OAC ΊΤ T Μκ Αχκ,/^γ И ^NJ“^M< ^-0 X CN NH KN о«Е_г^хх^_мЛ_НН1 NMBOC ^M 177		>1	>1
OMe ΜΟ.Α,Μι OAc T T ^U**· 011 ^ΝχΖ^ ^-0 A Bn NH 0«ANH6oc XP H 178		0.00012	0.00012

но-Х^м· OAc jT J 1 1*^ ii ^wj~^Mt °^7> _OX^NMBoc rO N M 179		0.012	0.012
HO^X^Me OAc T J Vo K. CN NH °^Jn 180	·-	0.00015	0.00015
нстоХ^ме Oac Y J ^w* Vo L OH NH Pd 181		0.00015	0.00015
OAc £ J Ύ 182		0.0015	0.0015
’ S ом» ^'ΧΧ,μ. OAC JL J γ^ζ^γ^ζ*γ^χ^Ν7“^Μ· Vo A CN 183		0.013	0.013
0M« ΗΟ,Χ,Μί OAC Tjj ^M* γ^ζ^γ^χ*γ^ζ^Η’^Μ· ^0<-° Mⁿ 184		0.0015	0.0015

OAC T ^Οχ-° ЧЛ 185		0.12	0.12	i
0 П ОМ* **— ОЛС Ίζ j ^M 'γ^ζ^ϊ^ζ*⁴γ^ζ’^< “J“ ^Μ· У-0 ν CN νη ⁰⁼ν~ _Ph 186	.·	0.0014	0.0014
JL ^ом* OAc JT J[ *** ^χ\|ι^Υ^,ζ’⁴γ^ζ/^^Ν jr ^Μ · 0 X CN ΝΗ ⁰⁼ν^_ρ„ 187		0.013	0.013
ο Η ΟΜ« OAC Τ J Mt JL -Ζ4. -ζ4^Γ 0 X С» ΝΗ °А^М^_₽П 188		0.012	0.012
ο Л ^0Μ· ^ΧΧ·'-^^4ΖΌ_χ^4_γΖΜ» °AC Τ'J( ^ΜβΥιΥ^<'^Ν/^Μ* V-0 X CN NM 189		0.06	0.06
OMt AcO^Js^M· OAc T J *** ^° ч>_нοΎν cf, «? T 190		0.013	0.013

0 ___ JI ?*· OAc '“Ο X ΪΝ NH °^SS^K _VzCF₁ i. Ϊ 191		0.13	0.13
АеО>А^м· OAc T J Ύ(^ζχι^Νί^Μ ^-o K. CN NAc о”Х»м!,сь мт I 192		0.12	0.12
qac T j ЛПГГ 193		0.11	0.11
Ϊ OM· ^χΖ4χ·^ζ ^4,,'χ4₁Χ_ν.Μ· OAC T jf 'Υ3⁴Τ^Ζ<ΝΧ¥ ⁰⁼Ч*« CF, ΙΪ 194		0.012	0.012
ίΑχ- OAc J j oAJ ct, IT 195		0.012	0.012
-X- OAe X.T ^M*VS^/V^i^llh ^-0 X ch №t ХЙ CF, M· Q 196	.-	0.1	0.1
OM· HoX^M· OAc T_ J] ^-0 X Zn		0.0018	0.0018

197			--i-w—I • · e · • · · · · <	• ·· ·< • · e « • е e • · · · · ·	• · · · • —1— -® • · · · • · · • · · е · ·
λ	ОМ· HO^J^	M«
с	ΊΓ»


V-C	О=Х^р„	198	0.0015	' 0.0015
	ОМе момо^ ^Ме
О	1
м..
Έ Т	Y N-J-Me
.АХ
о	X-*CN	7^ч
	0 °γ*^	A?	>1	>1
	OMe	O
		199
\	OMe MO MO Me
Ме^ хк .
Υί

ο	V CN
	O C=U_S^ OMOM	o	0.056	0.056
		o
		202

ЦИТОТОКСИЧНА АКТИВНОСТ (М)

ТВЪРДИ ТУМОРИ	ЛИНИЯ	ом· ОАс 77 j ^0<-° ~·/χΧλ 0 66	ом· nO^JL- Mi ο· 77 JT М·. JL sy xxx> \-o k oh НИ M· 0 67	OMt oac J7 Г V-0 \ Oh •^г'О 70	ом» OAC ^TjT “·ΥΫΥ% «ΟΠΓτ A-0 \ On NH 80
Далак	5637	6.02Е-10	3.42E-10	1.91E-10	2.04E-11
Гърда	МХ-1	1.65Е-06	NA	2.38E-09	NA
Колон	НТ-29	7.84Е-10	1.97E-08	2.12E-09	8.44E-12
Стомах	Hs746t	7.90Е-12	2.18E-09	7.10E-11	2.21E-09
Черен дроб	SK-HEP-1	1.79Е-12	6.01E-11	3.15E-09	9.91E-11
NSCL	А549	3.25Е-09	7.68E-06	NA	NA
Яйчник	SK-OV-3	4.39Е-11	E02E-07	8.74E-09	NA
Панкреас	PANC-1	•7.22Е-11	4.17E-09	1.29E-10	1.19E-10

фаринкс

Простата

Бъбрек

SCL

Ретинобластома

Меланома фибросаркома Хондросаркома

FADU	5.41Е-11	1.58Е-09	• · · ···· ·· ·	5.^85-(^9 ; • · · · · ·
РСЗ	6.65Е-09	2.15Е-09	4.70Е-09	1.52Е-10
DU-145	5.73Е-10	1.83Е-07	2.22Е-09	ΝΑ
LNCAP	5.45Е-10	2.17Е-10	3.94Е-11
786-0	6.58Е-12	1.59Е-09	1.72Е-09	1.03Е-10
NCI-H187	7.14Е-14	9.57Е-10	7.78Е-14
Y-79	7.14Е-14	7.36Е-10	8.85Е-11
Ме1-28	2.60Е-10	3.17Е-09	2.18Е-09	1.23Е-10
SW-694	9.9IE-10	NA	1.39Е-06	ΝΑ
CHSA	3.24Е-10	6.77Е-09	1.39Е-09	2.30Е-10
OSA-FH	1.94Е-09	1.39Е-09	1.09Е-09	1.1 IE-10

Остеосаркома j ТВЪРДИ ТУМОРИ	ЛИНИЯ	ом» °** .L JT Ta Mt ο 92	0Μ> ΟΑβ Υ J C>T J Τ Vo * όκ •ΫΤΌ 94	ΟΜ· oac jT j ^-0 \ Q»« Л& 81
Далак	5637	1.65Ε-10	7.85Ε-10	3.18-09
Гърда	МХ-1	ΝΑ	2.85Ε-06	NA
Колон	НТ-29	7.43Ε-10	1.2Ε-10	NA
Стомах	Hs746t	9.35Ε-10	6.25Ε-09	1.37E-07
Черен дроб	SK-HEP-1	1.40Ε-09	9.03Ε-10	9.50E-09
NSCL	А549	ΝΑ	ΝΑ	NA
Яйчник	SK-0V-3	ΝΑ	ΝΑ
Панкреас	PANC-1	8.93Ε-10	2.58Ε-9	1.O3E-O8
фаринкс	• FADU	8.41Ε-10	3.77Ε-08	I.14E-09
Простата	РСЗ	8.13Ε-10		9.34E-09
Простата	DU-145	ΝΑ	ΝΑ	NA
Простата	LNCAP		ΝΑ
Бъбрек	786-0	7.88Ε-10	2.90Ε-09	1.00E-08
SCL	NCI-H187		2.07Ε-12
Ретинобластома	Y-79		1.31Ε-11	7.78E-09

Меланома	Ме1-28	1.О8Е-О9	1.13Е-09	4.48Е-09
фибросаркома	SW-694	NA
Хондросаркома	CHSA	1.08Е-09	2.25Е-09	1.09Е-08
Остеосаркома	OSA-FH	8.84Е-10	1.35-08	9.50Е-09

ЛЕВКЕМИИ И ЛИМФОМИ	ЛИНИЯ	ом» o*< . 77 f '—o T oh 0 66	ОМ» q*< J7 JT V-o \ СИ NH ^«ΗγΟ, Mt o 67	OMe ο* 17 T uh;* X— 0 0K Z-Q 70	©М» HCs-Asz¹* ^CV0 t Jh NN 80
ALL Promyelocytic leukemia	HL60				9.38E-09
ALL Acute lymphoblastic	Molt3	6.13E-10	2.8E-09	5.66E-10	1.55E-14
CML Chronic myelogenous	K562				2.33E-07
Leukemia Hairy B-cell	Mo-B
Lymphoma Tcell	H9				1.99E-11
Lymphoma Cutaneus T cell	Hut 78	5.50E-11	2.57E-10	4.62E-9	6.21E-11
Lymphoma undifferentiated	MC116	2.15E-10	2.65E-10	3.8E-09	NA
Lymphoma Burkitts B celll	RAMOS				7.77E-13
Lymphoma	U-937	1.77E-10	5.27E-11	3.28E-11	3.06E-11
Histiocytic

ЛЕВКЕМИИ И ЛИМФОМИ	ЛИНИЯ	OMt OAc 1Γ T if o 92	ом· oac IT A/rY \~o X 0H MH _и 94	cm· OAC JL f M·^ JL ZS. 81
ALL Promyelocytic leukemia	HL60	5.92E-09	1.23E-10	3.97E-10
ALL Acute lymphoblastic	Molt3	7.53E-12	8.85E-10	2.54E-09
CML Chronic myelogenous	K562	1.09E-08	4.45E-08
Leukemia Hairy B-cell	Mo-B
Lymphoma T- cell	H9	4.48E-09	1.14E-08
Lymphoma Cutaneus T cell	Hut 78	9.9E-10	1.06E-08	7.46E-09
Lymphoma undifferentiated	MC116	NA	1.41E-09	1.13E-08
Lymphoma Burkitts B celll	RAMOS	5.26-11	8.85E-10	7.15E-09
Lymphoma Histiocytic	U-937	5.15E-10

ТВЪРДИ

ТУМОРИ

Далак

Гърда

Колон

Стомах

Черен дроб

NSCL

Яйчник

Панкреас фаринкс

Простата

Бъбрек

SCL

Меланома фибросаркома

Хондросаркома

Остеосаркома

	ЛИНИЯ	ОМе Ме ОАс ТГ J ^Ме '—Ο ( OH NH 71	_____________t___· t t, •Μ» ηο^λ·μ·; · OAC · * j · · ΑΧί/ '-O X OH NH 93
	5637	2.81E-09	2.84E-10
	МХ-1	2.50E-06	NA
	НТ-29	NA	8.97E-09
	Hs746t	2.97E-08	9.19E-09
	SK-HEP-1	5.07E-09	1.08E-09
	А549	NA	9.41E-09
	SK-OV-3	2.21E-07	NA
	PANC-1	2.90E-09	1.00E-09
	FADU	7.94E-09	1.39E-08
	РСЗ	1.46-08	9.32E-10
	DU-145	NA	NA
	LNCAP	5.39E-09
	786-0	6.55E-09	1.72E-09
	NCI-H187	3.98E-11
	Y-79	3.14E-09
	Ме1-28	3.05E-08	1.15E-09
SW-694	NA	NA
CHSA	1.73E-08	2.10E-09
OSA-FH	8.56E-08	1.30E-09

• ·

ТВЪРДИ ТУМОРИ

Далак

Гърда

ЛИНИЯ	OMe MO^Js^Me OAc jT J Me yYT N—Me \-0 X OH NH 82	* OMe HO^X^Me OAc T Γ ^Μ*Ύ^!ί^^^ϊ^Χ^ΤΜβ AW 0 χ OH NH _M Me O 95
5637	9.91E-10	1.17E-09
MX-1	NA	1.92E-09

Колон

Стомах

Черен дроб NSCL

Яйчник

Панкреас фаринкс Простата Простата Простата

Бъбрек

SCL

Ретинобластома Меланома фибросаркома Хондросаркома Остеосаркома

НТ-29	ΝΑ	ΝΑ
Hs746t	1.36Е-09	8.15Ε-09
SK-HEP-1	1.17Е-09	6.21Ε-09
А549	ΝΑ	ΝΑ
SK-OV-3	2.90Е-08	ΝΑ
PANC-1	1.37Е-09	8.61 Ε-09
- FADU	3.05Е-08	4.38Ε-08
РСЗ
DU-145	ΝΑ	ΝΑ
LNCAP	2.38Ε-08	1.77Ε-08
786-0	2.27Ε-09	1.54Ε-08
NCI-H187	2.41Ε-11	9.89Ε-11
Y-79	3.08Ε-10	7.45Ε-10
Mel-28	2.85Ε-09	1.42Ε-08
SW-694
CHSA	1.63Ε-09	2.91Ε-08
OSA-FH	4.37Ε-09	1.15Ε-08

ЛЕВКЕМИИ И ЛИМФОМИ	ЛИНИЯ	Cm· T °V0 x on NN 71	OM· ^o<u _T q'rT^H'5 VO \ oh NH ₀Хчг^ЧХ*Ч 93
ALL Promyelocytic leukemia	HL60		1.5OE-O8
ALL Acute lymphoblastic	Molt3	1.62E-09	3.87E-O9
CML Chronic	K562		6.89E-08

myelogenous
Lymphoma T-cell	H9		1.08E-08
Lymphoma Cutaneus T cell	Hut 78	7.33E-09	1.97E-09
Lymphoma undifferentiated	MC116	1.62E-08	3.81E-09
Lymphoma Burkitts B celll	RAMOS		1.1E-09
Lymphoma Histiocytic	U-937	1.92E-09	1.08E-09

--- ЛЕВКЕМИИ И ЛИМФОМИ	ПИНИЯ	(M °** 17 J X-0 ( Oh HH 0*^ 82	Out 0«< Τ' j y. ГТТ 7* _oLL V-0 \ OH НИ O'S*’·№ 0 95
ALL Promyelocytic leukemia	HL60	4.93E-10	7.36E-09
ALL Acute lymphoblastic	Molt3	9.86E-10	9.86E-10
CML Chronic myelogenous	K562	1.87E-08	1.18E-08
Lymphoma T-cell	• H9	1.20E-08	2.43-08
Lymphoma Cutaneus T cell	Hut 78
Lymphoma undifferentiated	MC116	1.04E-09	1.49E-09
Lymphoma Burkitts B celll	RAMOS		5.01E-09

* ·

Lymphoma Histiocytic

U-937

- · · * *

f—---------_r ТВЪРДИ ТУМОРИ	ЛИНИЯ	оме ом ЛуАуЧ/ \-о \ ом 0 114	ОМе ом IT J Г й I ⁿ*7 ме '-O \ OH 116
Далак	5637	1.14Е-08	1.71E-08
Гърда	МХ-1	2.81Е-08	7.25E-13
Колон	НТ-29	4.08Е-07	2.96E-07
Стомах	Hs746t	3.57Е-08	1.24E-09
Черен дроб	SK-HEP-1	1.63-08	1.94E-09
NSCL	А549	2.81 Е-06	1.56-05
Яйчник	SK-OV-3	7.03Е-06	7.78E-08
Панкреас	PANC-1	1.03Е-08	9.47E-09
фаринкс	FADU	4.59Е-07	2.46E-08
Простата	РСЗ	7.88Е-08
Простата	DU-145	7.03Е-08	1.56E-06
Простата	LNCAP	5.98Е-07	6.83E-08
Бъбрек	786-0	1.46Е-08	5.26E-12
SCL	NCI-H187	8.02Е-10	7.78E-14
Ретинобластома	Y-79	8.85Е-10	7.78E-14
Меланома	Ме1-28	1.76Е-08	5.89E-08
фибросаркома	SW-694	• 3.38Е-О6	6.69E-06
Хондросаркома	CHSA	2.53Е-08	4.49E-08
Остеосаркома	OSA-FH	6.34Е-08	5.26E-07

ТВЪРДИ ТУМОРИ

Далак

Гърда

Колон

Стомах Черен дроб NSCL

Яйчник

Панкреас Фаринкс Простата Простата Простата Бъбрек SCL Ретинобластома Меланома фибросаркома Хондросаркома Остеосаркома

4С0

J	1ИНИЯ	оме °дс JL I '-θ * OH 115	.. ЗД OAc . Γ j · o \ он 0 113
	5637	7.88Ε-10	3.02E-08
	МХ-1	ΝΑ	4.75E-08
	НТ-29	8.99Ε-09	1.34E-08
	Hs746t	2.95Ε-08	7.05E-07
	SK-HEP-1	1.29Ε-09	6.12E-08
	А549	8.22Ε-06	8.49E-09
	SK-OV-3		3.55E-08
	PANC-1	5.68Ε-10	1.28E-08
	FADU	5.40Ε-11	2.47E-08
	РСЗ	7.7ΙΕ-10	6.18E-10
	DU-145	ΝΑ	1.17E-08
	LNCAP		3.29E-07
	786-0	9.23Ε-10	1.13E-08
	NCI-H187		2.33E-1O
	Y-79	1.03Ε-08	2.64E-09
Ме1-28	2.23Ε-08	1.25E-08
SW-694	8.53Ε-06	ΝΑ
CHSA	1.55Ε-05	2.95E-08
OSA-FH	1.29Ε-09	5.01E-08

ЛЕВКЕМИИ

И

ЛИМФОМИ

ЛИНИЯ

101

ALL Promyelocytic leukemia	HL60		1.34E-08
ALL Acute lymphoblastic	Molt 3	1.44E-08	2.48E-09
CML Chronic myelogenous	K562	1.56E-07	6.13E-08
Lymphoma T-cell	H9	1.56E-07	1.91E-08
Lymphoma Cutaneus T cell	Hut 78	6.47E-08	7.31E-09
Lymphoma undifferentiated	MC116	1.69E-08	6.38E-09
Lymphoma Burkitts B celll	RAMOS	8.86E-09	7.15E-10
Lymphoma Histiocytic	U-937	7.6E-08

102

ALL Acute lymphoblastic	Molt 3	8.69E-11	4.63E-08
CML Chronic myelogenous	K562		2.11E-08
Lymphoma T-cell	H9	2.17E-08	6.76E-08
Lymphoma Cutaneus T cell	Hut 78	4.81E-08	2.06E-08
Lymphoma undifferentiated	МС116	5.27E-11	1.51E-08
Lymphoma Burkitts B celll	RAMOS	1.86E-09	9.09E-09
Lymphoma Histiocytic	U-937		1.03E-08

Примери за изпълнение на изобретението

Настоящото изобретение е илюстрирано с помощта на следващите примери.

103

ПРИМЕР 1

Към разтвор на lnt-2 (21.53 g, 39.17 ml) в етанол (200 ml) се прибавя tertбугоксикарбониланхидрид (7.7 д, 35.25 ml) и сместа се разбърква в продължение на 7 часа при 23°С. След това реакционната смес се концентрира под вакуум и остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, хексан:етилацетат 6:4) до получаване на lnt-14 (20.6 g, 81%) като жълто твърдо вещество. Rf: 0.52 (етилацетат:хлороформ 5:2). ¹Н NMR (300 MHz, CDCI₃): δ 6.49 (s,1H), 6.32 (bs,1 Η), 5.26 (bs,1H), 4.60 (bs,1H), 4.14 (d,J=2.4 Hz,1H), 4.05 (d,J=2.4 Hz,1H), 3.94 (s,3H), 3.81 (d,J=4.8 Hz,1H), 3.7 (s,3H),

3.34 (brd,J-7.2 Hz,1H), 3.18-3.00 (m,5H), 2.44 (d,J=18.3 Hz,1H), 2.29 (s,3H), 2.24 (s,3H), 1.82 (s,3H), 1.80-1.65 (m,1H), 1.48 (s,9H), 0.86 (d,J-5.7 Hz,3H). ¹³C NMR (75 MHz, CDCI3): δ 185.5, 180.8, 172.7, 155.9, 154.5, 147.3, 143.3, 141.5, 135.3, 130.4, 129.2,

127.5, 120.2, 117.4, 116.9, 80.2, 60.7, 60.3, 58.5, 55.9, 55.8, 54.9, 54.4, 50.0, 41.6, 40.3, 28.0, 25.3, 24.0, 18.1, 15.6, 8.5. ESI-MS m/z: Изчислено за C34H43N5O8: 649.7. Намерено (M+H)⁺: 650.3.

104

ПРИМЕР 2

Към разтвор на lnt-14 (20.6 g, 31.75 ml) в CH₃CN (159 ml) при разбъркване и при 0°С се прибавят диизопропилетиламин (82.96 ml, 476.2 ml), метоксиметиленбромид (25.9 ml, 317.5 ml) идиметиламинопиридин (155 mg, 1.27 ml). Сместа се разбърква в продължение на 24 часа при 23°С. След това реакционната смес се закалява при 0°С с водна 0.1N солна киселина (750 ml) (рН=5) и се екстрахира с метиленхлорид (2 х 400 ml). Органичната фаза се суши с натриев сулфат и се концентрира под вакуум. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, градиент от хексан:етилацетат 4:1 до хексан:етилацетат 3:2) до получаване на lnt-15 (17.6 д, 83%) като жълто твърдо вещество. Rf: 0.38 (хексан:етилацетат 3:7). *Н NMR (300 MHz, CDCI3): δ 6.73 (s,1H), 5.35 (bs,1 Η), 5.13 (s,2H), 4.50 (bs,1H), 4.25 (d,J=2.7 Hz,1H), 4.03 (d,J=2.7 Hz,1H), 3.97 (s,3H), 3.84 (bs,1H), 3.82-3.65 (m,1H), 3.69 (s,3H), 3.56 (s,3H), 3.39-3.37 (m,1H), 3.20-3.00 (m,5H), 2.46 (d,J=18 Hz,1H), 2.33 (s,3H), 2.23 (s,3H), 1.85 (s,3H), 1.73-1.63 (m,1H), 1.29 (s,9H), 0.93 (d,J=5.1 Hz,3H). ¹³C NMR (75 MHz, CDCI3): δ 185.4, 180.9, 172.4, 155.9, 154.5, 149.0, 148.4, 141.6, 135.1, 131.0, 129.9, 127.6, 124.4, 123.7, 117.3, 99.1, 79.3, 60.7, 59.7, 58.4, 57.5, 56.2, 55.9, 55.0,

105 • ·

54.2, 50.0, 41.5, 39.9, 28.0, 25.2, 24.0, 18.1,

15.6, 8.5. ESI-MS m/z: Изчислено за

C36H47N5O9: 693.8. Намерено (М+Н)⁺: 694.3.

ПРИМЕР 3

Към колба, съдържаща lnt-15 (8 g, 1.5 ml) в метанол (1.6 I) при 0°С се прибавя воден разтвор на 1М натриев хидроксид (3.2 I). Реакционната смес се разбърква в продължение на 2 часа при тази температура и след това се закалява с 6М солна киселина до рН=5. Сместа се екстрахира с етилацетат (3 х 1 I) и смесените органични слоеве се сушат над натриев сулфат и се концентрират под вакуум. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, градиент от хлороформ до хлороформ :етилацетат 2:1) до получаване на lnt-16 (5.3 mg, 68%). Rf: 0.48 (СНзСЬквода 7:3, RP-C18). ¹Н NMR (300 MHz, CDCI3): δ 6.73 (s,1H), 5.43 (bs,1H),

5.16 (s,2H), 4.54 (bs,1H), 4.26 (d,J=1.8 Hz,1H), 4.04 (d,J=2.7 Hz,1H), 3.84 (bs,1H), 3.80-3.64 (m,1H), 3.58 (s,3H), 3.41-3.39 (m,1H), 3.22-3.06 (m,5H), 2.49 (d,J=18.6 Ηζ,ΙΗ), 2.35 (s,3H), 2.30-2.25 (m,1H), 2.24 (s,3H), 1.87 (s,3H), 1.45-1.33 (m,1H), 1.19 (s,9H), 1.00 (brd,J=6.6 Hz,3H). ¹³C NMR (75 MHz, CDCI3): δ 184.9, 180.9, 172.6, 154.7,

151.3, 149.1, 148.6, 144.7, 132.9, 131.3, 129.8, 124.5, 123.7, 117.3, 116.8, 99.1, 79.4, 59.8,

106 ·· ·· · · · * · · ···· ·· ·· · · ·· ··· · · ··· ···· · · · · · · ··· · ···· ···· ·· ··· ··· ·· ····

58.6, 57.7, 56.2, 55.6, 54.9, 54.5, 50.1, 41.6, 40.1, 28.0, 25.3, 24.4, 18.1, 15.7, 8.0. ESI-MS m/z: Изчислено за C35H45N5O9: 679.7. Намерено (Μ+H)⁺: 680.3.

ПРИМЕР 4

ОМе

Към дегазиран разтвор на съединение lnt-16 (1.8 g, 2.64 ml) в диметилформамид (221 ml) се прибавя 10% паладий върху въглерод (360 mg) и се разбърква в атмосфера на водород (при атмосферно налягане) в продължение на 45 минути. След това реакционната смес се филтрува през селит под аргон в колба, съдържаща безводен цезиев карбонат (2.58 д, 7.92 ml). След това се прибавя бромхлорметан (3.40 ml, 52.8 ml), епруветката се заварява и се разбърква при 100°С в продължение на 2 часа. Реакционната смес се охлажда, филтрува се през слой от селит и се промива с метиленхлорид. Органичният слой се концентрира и се суши с натриев сулфат до получаване на lnt-17 като кафяво масло, което се използва в следващия етап без допълнително пречистване. Rf: 0.36 (хексан:етилацетат 1:5, силициев двуокис). ¹Н NMR (300 MHz, CDCI₃): δ 6.68 (s,1H), 6.05 (bs,1H), 5.90 (s,1H), 5.79 (s,1H), 5.40 (bs,1H), 5.31-5.24 (m,2H), 4.67 (d,J=8.1 Hz,1H), 4.19 (d,J=2.7 Hz,1H), 4.07

107 (bs,1 Η), 4.01 (bs,1H), 3.70 (s,3H), 3.67 (s,3H), 3.64-2.96 (m,5H), 2.65 (d,J=18.3 Hz,1H),

2.33 (s,3H), 2.21 (s,3H), 2.04 (s,3H), 2.01-1.95 (m,1H), 1.28 (s,9H), 0.87 (d,J=6.3 Hz,3H). ¹³C NMR (75 MHz, CDCI₃): δ 172.1, 162.6, 154.9, 149.1, 145.7, 135.9, 130.8,

130.7, 125.1, 123.1, 117.8, 100.8, 99.8, 76.6, 59.8, 59.2, 57.7, 57.0, 56.7, 55.8, 55.2, 49.5,

41.6, 40.1, 36.5, 31.9, 31.9, 31.6, 29.7, 28.2, 26.3, 25.0, 22.6, 18.2, 15.8, 14.1, 8.8. ESI-MS m/z: Изчислено за СзбНЛОд: 693.34. Намерено (М+Н)⁺: 694.3.

ПРИМЕР 5

AllylBr, CS2CO3

DMF.Ih, 23 °C

Към колба, съдържаща разтвор на lnt-17 (1.83 g, 2.65 ml) в диметилформамид (13 ml) при 0°С се прибавят цезиев карбонат (2.6 д, 7.97 ml) и алилбромид (1.15 ml, 13.28 ml). Получената реакционна смес се разбърква в продължение на 1 час при 23°С. Реакционната смес се филтрува през слой от селит и се промива с метиленхлорид. Органичният слой се суши над натриев сулфат и се концентрира. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, хлороформ :етилацетат 1:4) до получаване на lnt-18 (1.08 mg, 56%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.36 (хлороформ:етилацетат 1:3). ¹Н NMR (300 MHz, CDCI3): δ 6.70 (s,1H), 6.27-6.02

108 (m,1H), 5.94 (s,1H), 5.83 (s,1H), 5.37 (dd,^=1.01 Hz,^-=16.8 Hz,1H), 5.40 (bs,1H),

5.25 (dd,Ji-1.0 Hz, 10.5 Hz,1H), 5.10 (s,2H), 4.91 (bs,1H), 4.25-4.22 (m,1H), 4.21 (d,J=2.4 Hz,1H), 4.14-4.10 (m,1H), 4.08 (d,J-2.4 Hz,1H), 4.00 (bs,1H), 3.70 (s,3H), 3.59 (s,3H), 3.56-3.35 (m,2H), 3.26-3.20 (m,2H), 3.05-2.96 (dd,J,=8.1 Hz,^=18 Hz,1H), 2.63 (d,J=18 Hz,1H), 2.30 (s,3H), 2.21 (s,3H), 2.09 (s,3H), 1.91-1.80 (m,1H), 1.24 (s,9H), 0.94 (d,J=6.6 Hz,3H). ¹³C NMR (75 MHz, CDCI₃): δ 172.0, 154.8, 148.8, 148.6, 148.4, 144.4,

138.8, 133.7, 130.9, 130.3, 125.1, 124.0, 120.9, 117.8, 117.4, 112.8, 112.6, 101.1, 99.2,

73.9, 59.7, 59.3, 57.7, 56.9, 56.8, 56.2, 55.2, 40.1, 34.6, 31.5, 28.1, 26.4, 25.1, 22.6, 18.5,

15.7, 14.0, 9.2. ESI-MS m/z: Изчислено за C^HsiNsOg: 733.4. Намерено (M+H)⁺:

734.4.

ПРИМЕР 6

4.3М HCI/dioxane

1.2h, 23°C

Към разтвор на lnt-18 (0.1 g, 0.137 ml) в диоксан (2 ml) се прибавя 4.2М солна киселина/диоксан (1.46 ml) и реакционната смес се разбърква в продължение на 1.2 часа при 23°С. След това реакционната смес се закалява при 0°С с наситен воден натриев бикарбонат (60 ml) и се екстрахира с етилацетат (2 х 70 ml). Органичният слой се суши с натриев сулфат и се

109 концентрира под вакуум до получаване на lnt-19 (267 mg, 95%) като бяло твърдо вещество, което се използва в следващите реакции без допълнително пречистване. Rf: 0.36 (етилацетагметанол 10:1, силициев двуокис). ¹Н NMR (300 MHz, CDCI3): δ 6.49 (s,1H), 6.12-6.00 (m,1H), 5.94 (s,1H), 5.86 (s,1H), 5.34 (dd,J=1.0 Hz,J=17.4 Hz,1H), 5.25 (dd,J=1.0 Hz,J=10.2 Hz,1H), 4.18-3.76 (m,5H), 3.74 (s,3H),

3.71-3.59 (m,1H), 3.36-3.20 (m,4H), 3.01-2.90 (m,1H), 2.60 (d,J=18.0 Hz,1H), 2.29 (s,3H), 2.24 (s,3H), 2.11 (s,3H), 1.97-1.86 (m,1H), 0.93 (d,J=8.7 Hz,3H). ¹³C NMR (75 MHz, CDCI3): δ 175.5, 148.4, 146.7, 144.4, 142.4, 138.9, 133.7, 131.3, 128.3, 120.8, 117.9,

117.4, 113.8, 112.4, 101.1, 74.2, 60.5, 59.1, 56.5, 56.1, 56.3, 56.0, 55.0, 50.5, 41.6, 39.5,

29.5, 26.4, 24.9, 21.1, 15.5, 9.33. ESI-MS m/z: Изчислено за C32H39N5O6: 589. Намерено (M+H)⁺: 590.

ПРИМЕР 7

Ме

Към разтвор на lnt-19 (250 mg, 0.42 ml) в метиленхлорид (1.5 ml) се прибавя фенилизотиоцианат (0.3 ml, 2.51 ml) и реакционната смес се разбърква в продължение на 1 час при 23°С. След това реакционната смес се концентрира под вакуум и остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, градиент от хексан до 5:1

110 ··· t · · · · ···· ·· ··· ··· ·· ···· хексан :етилацетат) до получаване на lnt-20 (270 mg, 87%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.56 (хлороформ:етилацетат 1:4). *Н NMR (300 MHz, CDCI₃): δ 8.00 (bs,1H), 7.45-6.97 (m,4H), 6.10 (s,1H), 6.08-6.00 (m,1H), 5.92 (s,1H), 5.89 (s,1H), 5.82 (s,1H), 5.40 (dd,J=1.5 Hz,J=17.1 Hz,1H), 5.38 (bs,1H), 5.23 (dd,J=1.5 Hz,J=10.5 Hz,1H), 4.42-4.36 (m,1H), 4.19-4.03 (m,5H), 3.71 (s,3H), 3.68-3.17 (m,4H), 2.90 (dd,J=7.8 Hz,J»=18.3 Hz,1H), 2.57 (d,J=18.3 Hz,1H), 2.25 (s,3H), 2.12 (s,3H), 2.10 (s,3H), 1.90 (dd,J»12.3 Hz,J= 16.5 Hz,1H), 0.81 (d,J=6.9 Hz,3H). ¹³C NMR (75 MHz, CDCb): δ 178.4,171.6, 148.6, 146.8, 144.3, 142.7, 138.7, 136.2, 133.6, 130.7, 129.8, 126.6,

124.2, 124.1, 120.9, 120.5, 117.7, 117.4, 116.7, 112.6, 112.5, 101.0, 74.0, 60.6, 59.0, 57.0,

56.2, 56.1, 55.0, 53.3, 41.4, 39.7, 26.3, 24.8, 18.3, 15.5, 9.2. ESI-MS m/z: Изчислено за CagHuNeOeS: 724.8. Намерено (M+H)⁺; 725.3.

ПРИМЕР 8

Me

Към разтвор на lnt-20 (270 mg, 0.37 ml) в диоксан (1 ml) се прибавя 4N солна киселина/диоксан (3.5 ml) и реакционната смес се разбърква в продължение на 30 минути при 23°С. След това се прибавят етилацетат (20 ml) и вода (20 ml) и органичният слой се декантира. Водната фаза се базифицира с

111 наситен воден разтвор на натриев бикарбонат (60 ml) (рН=8) при 0°С и се екстрахира с метиленхлорид (2 х 50 ml). Смесените органични екстракти се сушат с натриев сулфат и се концентрират под вакуум. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, етилацетат: метанол 5:1) до получаване на съединението lnt-21 (158 mg, 82%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.3 (етилацетат:метанол 1:1). ¹Н NMR (300 MHz, CDCb): δ 6.45 (s,1H), 6.125-6.03 (m,1H), 5.91 (s,1H), 5.85 (s,1H), 5.82 (s,1H), 5.38 (dd,Ji-1.2 Hz,J₂=17.1 Hz,1H), 5.24 (dd,Ji=1.2 Hz,J₂=10.5 Hz,1H), 4.23-4.09 (m,4H),

3.98 (d,J=2.1 Hz,1H), 3.90 (bs,1H), 3.72 (s,3H), 3.36-3.02 (m,5H), 2.72-2.71 (m,2H),

2.48 (d,J=18.0 Hz,1H), 2.33 (s,3H), 2.22 (s,3H), 2.11 (s,3H), 1.85 (dd,Ji-11.7 Hz,Лг=15.6 Hz,1H). ¹³C NMR (75 MHz, CDCI₃): δ 148.4, 146.7, 144.4, 142.8, 138.8,

133.8, 130.5, 128.8, 121.5, 120.8, 118.0, 117.5, 116.9, 113.6, 112.2, 101.1, 74.3, 60.7, 59.9,

58.8, 56.6, 56.5, 55.3, 44.2, 41.8, 29.7, 26.5, 25.7, 15.7, 9.4. ESI-MS m/z: Изчислено за CaHw^Os: 518.3. Намерено (M+H)⁺: 519.2.

ПРИМЕР 9

Me

NH₂

CN NHTroc

Към разтвор на lnt-21 (0.64 g, 1.22 ml) в метиленхлорид (6.13 ml) при -10°C се прибавят пиридин (1.104 ml, 1.28 ml) и 2,2,2-трихлоретилхлорформиатат (0.177

112 • · · · · · · · ···· ·· ··· ··· ·· ···· ml, 1.28 ml). Реакционната смес се разбърква при тази температура в продължение на 1 час и след това реакционната смес се закалява чрез прибавяне на 0.1 N солна киселина (10 ml) и се екстрахира с метиленхлорид (2 х 10 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат и се концентрира под вакуум. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, хексан:етилацетат 1:2) до получаване на lnt-22 (0.84 g, 98%) като бяло пеноподобно твърдо вещество. Rf: 0.57 (етилацетат: метанол 5:1). ¹Н NMR (300 MHz, CDCI₃): δ 6.50 (s,1H), 6.10-6.00 (m,1H), 6.94 (d,J=1.5 Hz,1H), 5.87 (d,J=1.5 Hz,1H), 5.73 (bs,1H), 5.37 (dq,4=1.5 Hz,J₂=17.1 Hz,1H), 5.26 (dq,4=1.8 Hz,4=10.2 Hz,1H), 4.60 (d,J=12 Hz,1H), 4.22-4.10 (m,4H),

4.19 (d,J=12 Ηζ,ΙΗ), 4.02 (m,2H), 3.75 (s,3H), 3.37-3.18 (m,5H), 3.04 (dd,4=8.1 Hz,4= 18 Hz,1H), 2.63 (d,J=18 Hz,1H), 3.31 (s,3H), 2.26 (s,3H), 2.11 (s,3H), 1.85 (dd,J=12.3 Hz,J= 15.9 Hz,1H). ¹³C NMR (75 MHz, CDCfe): δ 154.3, 148.5, 146.7, 144.5,

142.8, 139.0, 133.8, 130.7, 128.7, 121.3, 120.8, 117.8, 117.7, 116.8, 112.7, 101.2, 77.2,

74.3, 60.7, 59.9, 57.0, 56.4, 55.3, 43.3, 41.7, 31.6, 26.4, 25.3, 22.6, 15.9, 14.1, 9.4. ESI-MS m/z: Изчислено за C32H35CI3N4O7:694.17. Намерено (M+H)⁺: 695.2.

ПРИМЕР 10

NHTroc

113 ·»·· · » ··· • · · · ·· ·····« • · · » «· » · ···· · ···· · ··· · ·· t * ···· ·· ♦«· ··· * · ····

Към разтвор на lnt-22 (0.32 g, 0.46 ml) в CH₃CN (2.33 ml) при 0°C се прибавят диизопропилетиламин (1.62 mi, 9.34 ml), бромметилметилов етер (0.57 ml, 7.0 ml) и диметиламинопиридин (6 mg, 0.046 ml). Сместа се нагрява в продължение на 10 часа при 30°С. След това реакционната смес се разрежда с дихлорметан (30 ml) и се излива във воден разтвор на солна киселина при pH 5 (10 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат и разтворителят се отделя при понижено налягане до получаване на остатък, който се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, хексан:етилацетат 2:1) до получаване на lnt-23 (0.304 g, 88%) като бяло пеноподобно твърдо вещество. Rf: 0.62 (хексан:етилацетат 1:3). ¹Н NMR (300 MHz, CDCI₃): δ 6.73 (s,1H), 6.10 (m,1H), 5.94 (d,J=1.5 Hz,1H), 5.88 (d,J=1.5 Hz,1H),

5.39 (dq,Ji=1.5 Hz,J₂=17.1 Hz,1H), 5.26 (dq, ^=1.8 Hz,J₂=10.2 Hz,1H), 5.12 (s,1H),

4.61 (d,J=12 Hz,1H), 4.55 (t,J=6.6 Hz,1H), 4.25 (d,J=12 Hz,1H), 4.22-4.11 (m,4H), 4.03 (m,2H), 3.72 (s,3H), 3.58 (s,3H), 3.38-3.21 (m,5H), 3.05 (dd,^-8.1 Hz,J₂-18 Hz,1H),

2.65 (d,J=18 Hz,1H), 2.32 (s,3H), 2.23 (s,3H), 2.12 (s,3H), 1.79 (dd,Ji-12.3 Hz,J₂=15.9 Hz,1H). ¹³C NMR (75 MHz, CDCb): δ 154.3, 148.6, 148.4, 144.5, 139.0, 133.6, 130.1, 125.07, 124.7, 124.0, 121.1, 117.7, 112.6, 101.2, 99.2, 77.2, 74.4, 74.1, 59.8, 57.7, 57.0,

56.8, 56.68, 55.3, 43.2, 41.5, 26.4, 25.2, 15.9, 9.3. ESI-MS m/z: Изчислено за ОиИззС^Ов: 738.20. Намерено (М+Н)⁺: 739.0.

ПРИМЕР 11

Към суспензия на lnt-23 (0.304 g, 0.41 ml) в 90% водна оцетна киселина (4 ml) се прибавя прахообразен цинк (0.2 д, 6.17 ml) и реакционната смес се разбърква в продължение на 7 часа при 23°С. След това реакционната смес се филтрува през слой от селит, който се промива с метиленхлорид. Органичният слой се промива с наситен воден разтвор на натриев бикарбонат (pH 9) (15 ml) и се суши над натриев сулфат. Разтворителят се отделя при понижено налягане до получаване на lnt-24 (0.191 g, 83%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.3 (етилацетат:метанол 5:1). ¹Н NMR (300 MHz, CDCI₃): δ 6.68 (s, 1 Η), 6.09 (m,1H), 5.90 (d,J=1.5 Hz,1H), 5.83 (d,J=1.5 Hz,1H), 5.39 (dq,Ji=1.5 Hz,J₂=17.1 Hz,1H), 5.25 (dq,Ji-1.5 Hz,^=10.2 Hz,1H), 5.10 (s,2H), 4.22-4.09 (m,3H), 3.98 (d,J=2.4 Hz,1H),

3.89 (m,1H), 3.69 (s,3H), 3.57 (s,3H), 3.37-3.17 (m,3H), 3.07 (dd,Ji=8.1 Hz,J₂=18 Hz,1H), 2.71 (m,2H), 2.48 (d,J=18 Hz,1H), 2.33 (s,3H), 2.19 (s,3H), 2.17 (s,3H), 1.80 (00,^ = 12.3 Hz,^=15.9 Hz,1H). ¹³C NMR (75 MHz, CDCI3): δ 148.5, 148.2, 144.3,

138.7, 133.7, 130.7, 129.9, 125.0, 123.9, 121.3, 117.9, 117.5, 113.6, 112.0, 101.0, 99.2, 74.0, 59.8, 59.7, 58.8, 57.6, 57.0, 56.2, 55.2, 44.2, 41.5, 31.5, 26.4, 25.6, 22.5, 16.7, 14.0,

9.2. ESI-MS m/z: Изчислено за Сз^зд^Од: 562.66. Намерено (М+Н)⁺: 563.1.

ПРИМЕР 12

115 • ·

Към разтвор на lnt-24 (20 mg, 0.035 ml) във вода (0.7 ml) и тетрахидрофуран (0.7 ml) при 0°С се прибавят натриев нитрит (12 mg, 0.17 ml) и 90% водна оцетна киселина (0.06 ml) и сместа се разбърква в продължение на 3 часа при 0°С. След разреждане с дихлорметан (5 ml), органичният слой се промива с вода (1 ml), суши се над натриев сулфат и се концентрира под вакуум, разтворителят се отделя при понижено налягане до получаване на остатък, Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, хексан*.етилацетат 2:1) до получаване на lnt-25 (9.8 mg, 50%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.34 (хексан:етилацетат 1:1). ¹Н NMR (300 MHz, CDCI3): δ 6.71 (s,1H), 6.11 (m,1H), 5.92 (d,J=1.5 Ηζ,ΙΗ), 5.87 (d,J=1.5 Ηζ,ΙΗ), 5.42 (dq,Jt-1.5 Hz,J₂-17.1 Hz,1H), 5.28 (dq,Ji-1.5 Hz,J₂-10.2 Hz,1H), 5.12 (s,1H), 4.26-4.09 (m,3H), 4.05 (d,J=2.4 Hz,1H), 3.97 (t,J=3.0 Hz,1H), 3.70 (s,3H), 3.67-

3.32 (m,4H), 3.58 (s,3H), 3.24 (dd,Ji=2.7 Hz,J₂=15.9 Hz,1H), 3.12 (dd,Jt=8.1 Hz,^=18.0 Hz,1H), 2.51 (d,J-18 Hz,1H), 2.36 (s,3H), 2.21 (s,3H), 2.12 (s,3H), 1.83 (dd,Ji-12.3 Hz,J₂=15.9 Hz,1H). ¹³C NMR (75 MHz, CDCI3): δ 148.7, 148.4, 138.9,

133.7, 131.1, 129.4, 125.1, 123.9, 120.7, 117.6, 117.5, 113.6, 112.3, 101.1, 99.2, 74.0, 63.2,

59.8, 59.7, 57.9, 57.7, 57.0, 56.5, 55.2, 41.6, 29.6, 26.1, 25.6, 22.6, 15.7, 9.2. ESI-MS m/z: Изчислено за C31H37N3O7:563.64. Намерено (M+H)⁺: 564.1.

ПРИМЕР 13

НО'

116

···· ·· ··· ··· ·· ····

Изходният материал (2 g, 5.90 ml) се прибавя към суспензия на натриев хцдрид (354 mg, 8.86 ml) в тетрахидрофуран при 23°С, след което суспензията се третира с алилхлорформиат (1.135 ml, 8.25 ml) при 23°С, след което се нагрява при кипене на обратен хладник в продължение на 3 часа. Суспензията се охлажда, филтрува се и твърдото вещество се промива с етилацетат (100 ml) и филтратът се концентрира. Суровото масло се смила с хексан (100 ml) и се държи при 4°С в продължение на една нощ. След това разтворителят се декантира и получената светложълта каша се третира с метиленхлорид (20 ml) и се утаява с хексан (100 ml). След 10 минути разтворителят отново се декантира. Операцията се повтаря до получаване на бяло твърдо вещество. Твърдото бяло вещество се отфилтрува и се суши до получаване на съединението lnt-29 (1.80 g, 65%) като бяло твърдо вещество. ¹Н NMR (300 MHz, CDCI3): δ 7.74 (d,J=7.5 Hz,2H), 7.62 (d,J=6.9 Hz,2H), 7.33 (t,J=7.5 Hz,2H), 7.30 (t,J-6.3 Hz,2H), 5.71 (d,J-7.8 Hz,1H), 4.73 (d,J=7.8 Hz,2H), 4.59 (m,1H), 4.11 (t,J=6.0 Hz,1H), 3.17 (dd,Ji«6.0 ΗζΛ-2.7 Hz,2H), 3.20 (dd,J,-5.4 Нг,Дг-2.1 Hz,2H). ¹³C NMR (75 MHz, CDCI3): δ 173.6, 152.7, 144.0, 139.7, 137.8, 126.0, 125.6, 123.4, 118.3,

73.4, 52.4, 45.5, 35.8, 33.7. ESI-MS m/z: Изчислено за C20HWCI3NO4S: 474.8. Намерено (M+Na)⁺: 497.8.

ПРИМЕР 14

Me

117 • · · · ·· ······ ··· · ··· · • · · · · ···· · ··· · ···· • · · · · · ··· ··· ·· ····

Получава се азеотропна смес на съединението lnt-25 (585 mg, 1.03 ml) съединението lnt-29 (1.47 mg, 3.11 ml) c безводен толуен (3 x 10 ml). Към разтвор на lnt-25 и lnt-29 в безводен метиленхлорид (40 ml) се прибавят DM АР (633 mg, 5.18 ml) и EDC.HCI (994 mg, 5.18 ml) при 23°С. Реакционната смес се разбърква при 23°С в продължение на 3 часа. Реакционната смес се разпределя в наситен воден разтвор на натриев бикарбонат (50 ml) и слоевете се разделят. Водният слой се промива с метиленхлорид (50 ml). Смесените органични слоеве се сушат над натриев сулфат, филтруват се и се концентрират. Суровият продукт се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, хексан:етилацетат 3:1) до получаване на lnt-30 (1.00 g, 95%) като бледо кремавожълто твърдо вещество. ¹Н NMR (300 MHz, CDCb): δ 7.72 (m,2H), 7.52 (m,2H), 7.38 (m,2H), 7.28 (m,2H), 6.65 (s,1H), 6.03 (m,1H), 5.92 (d,J=1.5 Hz,1H), 5.79 (d,J=1.5 Hz,2H), 5.39 (m,1H), 5.29 (dq,Ji = 10.3 Hz, ^=1.5 Hz,1H), 5.10 (s,2H), 4.73 (d,J=11.9 Ηζ,ΙΗ), 4.66 (d,J=11.9 Hz,1H), 4.53 (m,1H), 4.36-3.96 (m,9H), 3.89 (t,J=6.4 Hz,1H), 3.71 (s,3H), 3.55 (s,3H), 3.33 (m,1H), 3.20 (m,2H), 2.94 (m,3H), 2.59 (m,1H), 2.29 (s,3H), 2.23 (S,3H), 2.02 (s,3H), 1.83 (dd,^ = 16.0 Hz,J₂=11.9 Hz,1H). ¹³C NMR (75 MHz, CDCb): δ 169.7, 154.0, 148.8, 148.4, 145.7, 144.5, 140.9, 139.0, 133.7, 130.9, 130.6, 127.6, 127.0, 124.8, 124.6, 124.1, 120.8, 119.9, 118.2, 117.7, 117.3, 112.7, 112.1, 101.3, 99.2, 74.7, 73.9, 64.4, 59.8, 57.7, 57.0, 56.8, 55.4, 53.3, 46.7, 41.4, 36.5, 34.7, 31.5, 26.4, 24.9, 22.6, 15.7, 14.0, 9.1. ESI-MS m/z: Изчислено за CsiHssCb^OioS: 1020.4. Намерено (M+H)⁺: 1021.2.

ПРИМЕР 15

118 • · · · · ··· ···· ·· ··· ··· ·· ····

31

Към разтвор на lnt-30 (845 mg, 0.82 ml) на капки при 23°С се прибавят оцетна киселина (500 mg, 8.28 ml) и (PPhs^PdCfe (29 mg, 0.04 ml) в безводен метиленхлорид (20 ml) и Bu₃SnH (650 mg, 2.23 ml). Реакционната смес се разбърква в продължение на 15 минути при тази температура. Суровият продукт се закалява с вода (50 ml) и се екстрахира с метиленхлорид (3 х 50 ml). Органичните слоеве се сушат над натриев сулфат, филтруват се и се концентрират. Суровият продукт се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, етилацетат:хексан в градиент от 1:5 до 1:3) до получаване на съединението lnt-31 (730 mg, 90%) като бледо кремавожълто твърдо вещество. ¹Н NMR (300 MHz, CDCI3): δ 7.72 (m,2H), 7.56 (m,2H), 7.37 (m,2H), 7.30 (m,2H), 6.65 (s,1H), 5.89 (s,1H), 5.77 (s,1H), 5.74 (s,1H), 5.36 (d,J=5.9 Hz,1H), 5.32 (d,J=5.9 Hz,1H), 5.20 (d,J=9.0,1H), 4.57 (d,J=12.0 Hz,1H), 4.73 (m,1H), 4.48 (d,J=11.9 Hz,1H), 4.08 (m,4H), 3.89 (m,1H), 3.86 (t,J=6.2 Hz,1H), 3.70 (s,3H), 3.69 (s,3H), 3.38 (m,1H), 3.25 (m,1H), 3.02-2.89 (m,4H), 2.67 (s,1H), 2.61 (s,1H),

2.51 (dd,J!=14.3 Hz,42=4.5 Hz,1H), 2.29 (s,3H), 2.23 (s,3H), 1.95 (s,3H), 1.83 (m,1H). ¹³CNMR (75 MHz, CDCI3): δ 168.2, 152.5, 148.1, 146.2, 144.4, 144.3, 143.3, 139.6, 134.6,

129.7, 129.6, 126.2, 125.6, 123.4, 123.3, 121.6, 118.5, 116.3, 110.7, 110.2, 105.1, 99.4,

119 • · · · · ··· • · · · ·· ··· ··· ·· ····

98.5, 75.2, 73.3, 61.7, 58.4, 57.9, 56.3, 56.1, 55.1, 54.7, 53.9, 51.9, 45.2, 40.1, 35.6, 33.3,

24.8, 23.3, 14.5, 7.3. ESI-MS m/z: Изчислено за C48H49CI3N4O10S: 980.3. Намерено (М+Н)⁺:981.2.

ПРИМЕР 16

Към разтвор на lnt-31 (310 mg, 0.32 ml) в безводен метиленхлорид (15 ml) при -10°С през канюла се прибавя разтвор на бензенселенов анхидрид 70% (165 mg, 0.32 ml) в безводен метиленхлорид (7 ml) като температурата се поддържа -10°С. Реакционната смес се разбърква при -10°С в продължение на 5 минути. При тази температура се прибавя наситен разтвор на натриев бикарбонат (30 ml). Водният слой се промива с още метиленхлорид (40 ml). Органичните слоеве се сушат над натриев сулфат, филтруват се и се концентрира). Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, етилацетат:хексан в градиент от 1:5 до 1:1) до получаване на lnt-32 (287 mg, 91%, HPLC: 91.3%) като бледо кремавожьлто твърдо вещество като смес на два изомера (65:35), която се използва в

120 следващия етап. ¹Н NMR (300 MHz, CDCI₃): δ (Смес на изомери) 7.76 (т,4Н), 7.65 (т,4Н), 7.39 (т,4Н), 7.29 (т,4Н), 6.62 (s,1H), 6.55 (s,1H), 5.79-5.63 (т,6Н), 5.09 (s, 1Н), 5.02 (d,J=6.0 Hz,1H), 4.99 (d,J=6.0 Hz,1H), 4.80-4.63 (m,6H), 4.60 (m,1H), 4.50 (т,1Н), 4.38 (dd,Ji-12.8 Hz,J₂=7.5 Hz,1H), 4.27 (dd,J!=12.8 Hz,J₂=7.5 Hz,1H), 4.16-

3.90 (m,10H), 3.84 (s,3H), 3.62 (s,3H), 3.50 (s,3H), 3.49 (m,1H), 3.33-2.83 (m,14H), 2.45-

2.18 (m,2H), 2.21 (s,6H), 2.17 (s,6H), 1.77 (s,6H), 1.67 (m,2H). ¹³C NMR (75 MHz,

CDCb): δ (Смес на изомери) 168.6, 168.4, 158.6, 154.8, 152.8, 152.5, 147.3, 147.2,

146.8, 144.1, 144.0, 140.8, 139.7, 137.1, 129.8, 129.3, 128.4, 128.7, 126.5, 125.5, 123.7,

123.6, 123.5, 123.4, 122.2, 121.3, 118.3, 115.8, 115.5, 110.2, 106.9, 103.5, 103.2, 100.1,

99.6, 97.9, 97.7, 93.8, 73.4, 70.9, 69.2, 64.9, 62.5, 59.3, 58.9, 58.4, 56.7, 56.3, 56.2, 55.4,

55.2, 55.1, 54.9, 54.7, 54.3, 54.1, 53.8, 52.8, 45.5, 40.5, 40.0, 39.8, 35.8, 35.5, 33.9, 33.7,

30.1, 28.8, 24.2, 24.1, 21.2, 14.5, 14.4, 12.7, 6.0, 5.7. ESI-MS m/z: Изчислено за C48H49CI3N4O11S: 996.3. Намерено (М+Н)⁺: 997.2.

ПРИМЕР 17

121 • · · « · · > · • · · · · ···« · ·*· * · ···· ·· ··· *:· ·· ····

Реакционната колба се обгаря два пъти, пуска се вакуум/продухва се с аргон няколко пъти и се поддържа атмосфера на аргон за реакцията. Към разтвор на диметилсулфоксид (39.1 ml, 0.55 ml, 5 еквивалента) в безводен метиленхлорид (4.5 ml) при -78°С на капки се прибавя трифлик анхидрид (37.3 ml, 0.22 ml, 2 еквивалента). Реакционната смес се разбърква при -78°С в продължение на 20 минути, след което при -78°С, през канюла се прибавя разтвор на lnt-32 (110 mg, 0.11 ml, HPLC: 91.3%) в безводен метиленхлорид (1 ml за основното прибавяне и 0.5 ml за промиването). През време на прибавянето температурата в двете колби се поддържа -78°С и цветът се променя от жълт в кафяв. Реакционната смес се разбърква при -40°С в продължение на 35 минути. През този период от време цветът на разтвора се променя от жълт в тъмнозелен. След това на капки се прибавя 'PrzNRt (153 ml, 0.88 ml, 8 еквивалента) като температурата на реакционната смес се поддържа 0°С в продължение на 45 минути и през това време цветът на разтвора става кафяв. След това на капки се прибавят t-бутанол (41.6 mg, 0.44 ml, 4 еквивалента) и 2-1-бутил-1,1,3,3-тетраметилгуанидин (132.8 ml, 0.77 ml, 7 еквивалента) и реакционната смес се разбърква при 23°С в продължение на 40 минути. През това време на капки се прибавя оцетен анхидрид (104.3 ml, 1.10 ml, 10 еквивалента) и реакционната смес се държи при 23°С в продължение на още 1 час. След това реакционната смес се разрежда с метиленхлорид (20 ml) и се промива с воден наситен разтвор на амониев хлорид (50 ml), натриев бикарбонат (50 ml) и натриев хлорид (50 ml). Смесените органични слоеве се сушат над натриев сулфат, филтруват се и се концентрират. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (елуент: етилацетат/хексан в градиент от 1:3 до 1:2) до получаване на съединението lnt-33 (54 mg, 58%) като бледожълто твърдо вещество. ’Н NMR (300 MHz, CDCIg): δ

122

6.85 (s,1H), 6.09 (s,1H), 5.99 (s,1H), 5.20 (d,J=5.8 Hz,1H), 5.14 (d,J=5.3 Hz,1H), 5.03

4.82 (d,J=12.2 Hz,1H), 4.63 (d,J=12.0 Hz,1H), 4.52 (m,1H), 4.35-4.17 (m,4H),

3.76 (s,3H), 3.56 (s,3H), 3.45 (m,2H), 2.91 (m,2H), 2.32 (s,3H), 2.28 (s,3H), 2.21 (s,3H),

2.12 (m,2H), 2.03 (s,3H). ¹³C NMR (75 MHz, CDCI₃): δ 168.5, 167.2, 152.7, 148.1, 147.1,

144.5, 139.6, 139.1, 130.5, 129.0, 123.7, 123.5, 123.3, 118.8, 116.5, 112.1, 100.6, 97.8,

73.3, 60.5, 59.4, 59.2, 58.3, 57.6, 57.4, 56.1, 53.5, 53.1, 40.6, 40.0, 31.0, 22.2, 18.9, 14.4,

8.1. ESI-MS m/z: Изчислено за СдаНдаСЬ^Опв: 842.1. Намерено (М+Н)⁺: 843.1.

ПРИМЕР 18

TMSCI, Nal

CH₂CI₂. CH₃CN

Към разтвор на lnt-33 (12 mg, 0.014 ml) в сух метиленхлорид (1.2 ml) и ацетонитрил за високоефективна течна хроматография (1.2 ml) при 23°С се прибавят натриев йодид (21 mg, 0.14 ml) и пресно дестилиран (над калциев хидрид при атмосферно налягане) триметилсилилхлорид (15.4 mg, 0.14 ml). След 15 минути разтворът се разрежда с дихлорметан (10 mi) и се промива с пресно приготвен воден наситен разтвор на Na₂S₂O₄ (3 х 10 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и се концентрира. Получава се съединението lnt-34 (13 mg, количествено) като бледожълто твърдо вещество, което се използва в следващия етап без допълнително пречистване. Ή NMR

123 • · • · ···· · · · · ·· ··· · · · ·· ···· tt ··· ··· ······ (300 MHz, CDCI₃): δ 6.85 (s,1H), 6.09 (s,1H), 5.99 (s,1H), 5.27 (d,J=5.8 Hz,1H), 5.14 (d,J=5.3 Hz,1H), 5.03 (d,J=11.9 Hz,1H), 4.82 (d,J=12.2 Hz,1H), 4.63 (d,J=13.0 Hz,1H), 4.52 (m,1H), 4.34 (m,1H), 4.27 (bs,1H), 4.18 (m,2H), 3.76 (s,3H), 3.56 (s,3H),

3.44 (m,1H), 3.42 (m,1H), 2.91 (m,2H), 2.32 (s,3H), 2.28 (s,3H), 2.21 (s,3H), 2.03 (s,3H). ESI-MS m/z: Изчислено за Cs^N^S: 798.1. Намерено (M+H)⁺: 799.1.

ПРИМЕР 19

35

Към разтвор на lnt-34 (13 mg, 0.016 ml) в смес на оцетна киселина/вода (90:10, 1 ml) при 23°С се прибавя цинк на прах (5.3 mg, 0.081 ml). Реакционната смес се нагрява при 70°С в продължение на 6 часа. След това време разтворът се охлажда до 23°С , разрежда се с дихлорметан (20 ml) и се промива с воден наситен разтвор на натриев бикарбонат (15 ml) и воден разтвор на триетиламин (15 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и се концентрира. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане Silica-NH₂ (елуент: етилацетат/хексан в градиент от 0:100 до 50:50) до получаване на съединението lnt-35 (6.8 mg, 77%) като бледожълто твърдо вещество. ¹Н NMR (300 MHz, CDCI3): δ 6.51 (s,1H), 6.03 (dd,Ji«1.3 Hz,J₂»26.5 Hz,1H), 5.75 (bs,1H), 5.02 (d,J=11.6 Hz,1H), 4.52 (m,1H), 4.25

124 ··· · · ··· ···· · · е · ·· ··· · · · ·· ··«· ·· ··· ··· ·· ···· (m,2H), 4.18 (d,J=11.6 Hz,1H), 4.12 (dd,Ji=1.9 Hz,J₂=11.5 Hz,1H), 3.77 (s,3H), 3.40 (m,2H), 3.26 (t,J=6.4 Hz,1H), 2.88 (m,2H), 2.30-2.10 (m,2H), 2.30 (s,3H), 2.28 (s,3H),

2.18 (s,3H), 2.02 (s,3H). ¹³C NMR (75 MHz, CDCI₃): δ 174.1, 168.4, 147.8, 145.4, 142.9,

140.8, 140.1, 131.7, 130.2, 129.1, 128.3, 120.4, 118.3, 117.9, 113.8, 111.7, 101.7, 61.2,

59.8, 59.2, 58.9, 54.4, 53.8, 54.4, 41.1, 41.5, 34.1, 23.6, 20.3, 15.5, 9.4. ESI-MS m/z: Изчислено за Ο^Η^Ν^δ: 622.7. Намерено (М+Н)⁺: 623.2.

ПРИМЕР 20

СНО

Разтвор на №метилпиридин-4-карбоксалдехидйодид (378 mg, 1.5 mmol) в безводен диметилформамид (5.8 ml) се третира с безводен толуен (2x10 ml) за да се елиминира водата посредством азеотропно отделяне на толуена. Разтвор на lnt-35 (134 mg, 0.21 mmol), предварително третиран с безводен толуен (2 х 10 ml), в безводен дихлорметан (дестилиран над калциев хидрид, 7.2 ml) през канюла при 23°С се прибавя към горния оранжев разтвор. Реакционната смес се разбърква при 23°С в продължение на 4 часа. След това време при 23°С на капки се прибавя DBU (32.2 I, 0.21 mmol) и се разбърква при 23°С в продължение на 15 минути. Към реакционната смес се прибавя пресно приготвен воден наситен разтвор на оксалова киселина (5.8 ml) и се разбърква

125 ·· · ♦ ♦ »···· • ·· · ·· ·· · ··· ··· · · ··· • · · · · · · · ·· • · · · ···· • · · · ·· ··· ··· ·· ···· при 23°С в продължение на 30 минути. След това реакционната смес се охлажда до 0°С и на порции се прибавя натриев бикарбонат (15 ml), последвано от прибавяне на воден наситен разтвор на натриев бикарбонат. Сместа се екстрахира с етиленов окис. Към водния слой се прибавя калиев карбонат и се екстрахира с етиленов окис. Смесените органични слоеве се сушат над магнезиев сулфат и разтворителят се отделя при понижено налягане. Суровият продукт се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (етилацетат/хексан в градиент от 1:3 до 1:1) до получаване на съединението lnt-36 (77 mg, 57%) като бледожьлто твърдо вещество. ’Н NMR (300 MHz, CDCfe): δ 6.48 (s,1H), 6.11 (d,J=1.3 Hz,1H), 6.02 (d,J=1.3 Ηζ,ΙΗ), 5.70 (bs,1H), 5.09 (d,J=11.3 Hz.lH), 4.66 (bs,1H), 4.39 (m,1H), 4.27 (d,J=5.6 Ηζ,ΙΗ), 4.21 (d,J=10.5 Ηζ,ΙΗ), 4.16 (d,J=2.6 Hz,1H), 3.76 (s,3H), 3.54 (d,J=5.1 Ηζ,ΙΗ), 3.42 (d,J=8.5 Hz,1H), 2.88-2.54 (m,3H), 2.32 (s,3H), 2.24 (s,3H), 2.14 (s,3H), 2.04 (S,3H). ^,3C NMR (75 MHz, CDCI3): δ 186.7, 168.5, 160.5,

147.1, 146.4, 142.9, 141.6, 140.7, 130.4, 129.8, 121.7 (2C), 120.0, 117.8, 117.1, 113.5,

102.2, 61.7, 61.4, 60.3, 59.8, 58.9, 54.6, 41.6, 36.9, 29.7, 24.1, 20.3, 15.8, 14.1, 9.6. ESI-MS m/z: Изчислено за C31H31N3O9S: 621.7. Намерено (M+H)⁺: 622.2.

ПРИМЕР 21

ml) и

2-[3-хидрокси-4-

Към разтвор на 36 (49 mg, 0.08 метоксифенил]етиламин (46.2 mg, 0.27 ml) в етанол (2.5 ml) при 23°С се прибавя силикагел (105 mg). Реакционната смес се разбърква при 23°С в

126 продължение на 14 часа. Разрежда се с хексан и се излива в хроматографска колона (етилацетат/хексан от 1/3 до 1/1) до получаване на Et-770 (55 mg, 90%) като бледожълто твърдо вещество.

'H-NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6.60 (s, IH), 6.47 (s, IH), 6.45 (s, IH), 6.05 (s, IH), 5.98 (s, IH), 5.02 (d, 7=11.4 Hz, IH), 4.57 (bs, IH), 4.32 (bs, IH), 4.28 (d,7= 5.3 Hz, IH), 4.18 (d, 7= 2.5 Hz, IH), 4.12 (dd,7= 2.1 Hz,7= 11.5 Hz, IH), 3.78 (s, 3H), 3.62 (s, 3H), 3.50 (d,7= 5.0 Hz, IH), 3.42 (m, IH), 3.10 (ddd,7= 4.0 Hz, 7= 10.0 Hz, 7= 11.0 Hz, 1H),2.94 (m, 2H),

2.79 (m, IH), 2.61 (m, IH), 2.47 (m, IH), 2.35 (m, IH), 2.32 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.09 (m, 1H), 2.04 (s, 3H).

ESI-MS m/z: Изчислено за C40H42N4O10S: 770.7. Намерено (M+H)⁺: 771.2.

ПРИМЕР 22

прибавя фталов анхидрид (6.44 mg, 0.042 ml) и реакционната смес се разбърква в продължение на 2 часа при 23°С. След това се прибавя карбонилдиимидазол (1 mg, 0.006 ml) и реакционната смес се разбърква в продължение на 7 часа при 23°С. След това се прибавя карбонилдиимидазол (5.86 mg, 0.035 ml) и реакционната смес се разбърква в продължение на още 17 часа при 23°С. Разтворът се разрежда с метиленхлорид (15 ml) и се промива с 0.1N солна киселина (15 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под

127 • ·

налягане (силикагел, хексан.етилацетат 2:1) до получаване на 27 (26.4 mg,

96%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.58 (етилацетат).

’Н NMR (300 MHz, CDCI₃): 7.73-7.64 (m, 4Н), 6.40 (s, Ш), 6.12-6.01 (m, 1Н), 5.63 (s, 1H), 5.58 (d, J= 1.5 Hz, 1H), 5.37 (dd, J,= 1.8 Hz, J₂= 17.4 Hz), 5.23 (dd, J,= 1.8 Hz,

10.5 Hz, 1H), 5.12 (d, J= 1.5 Hz, 1H), 4.22-4.15 (m, 3H), 4.08 (d, J= 1.8 Hz, 1H), 3.68 (s, 3H), 3.59-3.55 (m 2H), 3.35 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 3.27-3.16 (m, 2H), 3.05 (dd, J/= 8.1 Hz, 4=

18.3 Hz, 1H), 2.64 (d, J= 18.0Hz, 1H), 2.30 (s, 3H), 2.24 (s, 3H), 2.09 (s, ЗН), 1.80 (dd, J_t=

11.4 Hz, 15 Hz, 1H);

^I3CNMR(75 MHz, CDCI3): δ 167.7, 148.9, 146.4, 144.2,142.6,139.5, 134.0, 133.5, 132.0, 131.0,128.3, 123.0,121.3,120.9,118.1,117.5,116.8,113.6,112.4, 100.8, 74.5, 60.6, 60.5,

57.7, 56.6,55.6, 55.5,42.3,41.7,26.6, 25.5,15.9, 9.46.

ESI-MS m/z: Изчислено за C37H35N4O7:648.79. Намерено (M+H)⁺: 649.3.

ПРИМЕР 23

Към разтвор на 27 (26 mg, 0.041 ml) в метиленхлорид (11 ml) при 23°С се прибавят оцетна киселина (11 ml), (PPIhfePdCfe (2.36 mg) и Bu₃SnH (28 ml, 0.10 ml). След разбъркване при тази температура в продължение на 2 часа, реакционната смес се излива в хроматографска колона под налягане (силикагел, градиент хексан към хексан.етилацетат 2:1) до получаване на 28 (24.7 mg, 99%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.33 (хексан:етилацетат 2:1).

’Н NMR (300 MHz, CDCI3): δ 7.75-7.70 (m, 2Н), 7.69-7.65 (m, 2Н), 6.39 (s. 1 Η), 5.82 (bs 1Η), 5.50 (d, J= 1.5 Hz, 1H), 5.0 (d, J= 1.5 Hz, 1H), 4.45 (bs, 1H), 4.23-4.19 (m, 2H). 4.104.09 (m, 1H), 3.73 (s, 3H), 3.60-3.48 (m, 2H), 3.36-3.33 (m, 1H), 3.26-3.20 (m, 1H). 3.143.08 (m, 1H), 3.98 (d, J= 14.4 Hz, 1H), 2.61 (d, J= 18.3 Hz, 1H), 2.30 (s, 3H). 2.23 (s, 3H), 2.06 (s, 3H), 1.85 (dd,/= 12 Hz, J₂= 15.3 Hz);

128

¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 167.8. 146.4, 145.1, 143.9, 142.7,137.1, 133.5, 131.9, 130.8,

128.4,122.9, 120.8,118.0, 116.8, 114.0, 113.4, 106.4, 100.4, 60.6, 60.5, 57.8. 56.6. 55.5,

55.2,42.6,41.5,25.6,25.5,15.8, 8.9.

ESI-MS m/z: Изчислено за C34H32N4O7: 608.6. Намерено (М+Н)⁺: 609.2.

ПРИМЕР 24

Към разтвор на 28 (357 mg, 0.058 ml) в метиленхлорид (3 mi) при 0°С се прибавят ацетилхлорид (41.58 ml, 0.58 ml), и пиридин (47.3 ml, 0.58 ml). Реакционната смес се разбърква в продължение на 1 час и след това разтворът се разрежда с метиленхлорид (15 ml) и се промива с 0.1N солна киселина (15 ml). Органичниягслой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (RP-18, CH₃CN:B0fla 60:40) до получаване на фталасцидин (354 mg, 94%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.57 (СНзСЬГвода 7:3, RP-18).

’Н NMR (300 MHz, CDCI3): δ 7.72-7.68 (m, 2Н), 7.67-7.63 (m. 2Н), 6.38 (s, IH), 5.69 (d, J= 1.2 Hz, IH), 5.64 (d, J= 1 ·2Ηζ, IH), 5.30 (bs, IH), 4.25-4.21 (m, 2H), 4.02 (d, J= 2.1 Hz, IH), 3.64-3.62 (m, 5H), 3.33 (d, J= 8.4 Hz, IH), 3.21-3.16 (m, IH), 3.02 (dd, J/= 8.1 Hz, Jf 18 Hz, IH), 2.76 (dd, J/= 1.8 Hz, 7?= 15.6 Hz, IH), 2.63 (d, J= 17.7 Hz, IH), 2.29 (s, 3H),

2.28 (s,3H), 2.21 (s, 3H), 2.0 (s, 3H), 1.73 (dd, J/= 12.0 Hz, J/= 15.3 Hz, IH))

129 ···· ·· ··· *·· _>( ···· ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃)): δ 168.5,167.6,146.2, 144.2, 142.5, 141.0, 140.5, 133.4,

131.8,130.7, 128.2, 120.9, 120.8, 117.9,116.4,113.6,101.1,60.4, 60.0,57.0,56.3,55.6,

55.4,41.6,41.5,26.5,25.2,20.2,15.7,9.4.

ESI-MS m/z: Изчислено за С^Им^Ов: 650. Намерено (М+Н)⁺: 651.2.

ПРИМЕР 25

42

Към разтвор на 17 (300 mg, 0.432 ml) в метиленхлорид (2 ml) при 0°С се прибавят ацетилхлорид (30.7 ml, 0.432 mi), и пиридин (34.9 ml, 0.432 ml). Реакционната смес се разбърква в продължение на 2 часа при тази температура и след това разтворът се разрежда с метиленхлорид (15 ml) и се промива с 0.1N солна киселина (15 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане до получаване на 42 (318 mg, 100%) като бяло твърдо вещество, което се използва в следващите реакции без допълнително пречистване. Rf: 0.5 (етилацетат.метанол 5:1).

'Н NMR (300 MHz, CDCI3). δ 6.66 (s, IH), 5.93 (d, J= 1.2 Hz, IH), 5.83 (d. J= 1.2 Hz, IH), 5.42 (t, J= 6.6 Hz, IH), 5.07 (d, J= 5.7 Hz, IH), 4.98 (d,J= 5.7 Hz, IH),4.16 (d, J= 1.8 Hz, 1H),4.11 (d,J=2.7Hz, lH),3.98(bs, IH), 3.73-3.61 (m, 2H), 3.64 (s, 3H), 3.52-3.48 (m, IH), 3.50 (s, 3H), 3.33 (d, J= 9.6 Hz, IH), 3.17-3.14 (m, IH), 2.97-2.87 (m, IH), 2.752.70 (d, J= 16.8 Hz, IH), 2.26 (s, 6H), 2.16 (s, 3H), 1.96 (s, 3H), 1.70 (dd, Jj= 11.7 Hz, Λ= 15.6 Hz, IH), 1.33 (s, 9H), 0.59 (d, J= 6.0 Hz, 3H).

130 ··· · · · · · ¹³CNMR(75 MHz, CDCI3)): δ-172.0,168.3,1623J48.2,144.4,*140.4,'1*40*2**130.9,

130.5, 125.3, 123.4, 120.8,117.6, 112.7,111.7,101.4, 99.1, 79.2,59.5,58.8,57.5,57.4,

56.4, 55.5, 55.0,41.3, 39.0, 28.2, 26.4,24.6,19.9,18.4, 15.4, 9.1.

ESI-MS m/z: Изчислено за C38H49N5O10: 735.82. Намерено (M+H)⁺: 736.3.

ПРИМЕР 26

TFA, СН₂С1₂

3.5h, 23 °C

OMe

NH₂

Ме

Към разтвор на 42 (318 mg, 0.432 ml) в метиленхлорид (2.16 ml) се прибавя трифлуороцетна киселина (1.33 ml, 17.30 ml) и реакционната смес се разбърква в продължение на 3.5 часа при 23°С. Реакционната смес се закалява при 0°С с наситен воден разтвор на натриев бикарбонат (60 ml) и се екстрахира с метиленхлорид (2 х 70 ml). Смесените органични слоеве се сушат над натриев сулфат и се концентрират под вакуум. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силикагел, етилацетат.метанол 20:1) до получаване на 43 (154 mg, 60%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.22 (етилацетат:метанол 5:1).

*Н NMR (300 MHz, CDCJ3). δ 6.47 (s, 1Н), 6.22 (bs, 1H), 5.95 (d, /= 1.2 Hz, 1H), 5.88 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 4.08-4.06 (m, 2H), 4.01 (bs, 1H), 3.69 (s, 3H), 3.49 (d,/= 3.6 Hz, 1H), 3.33 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 3.26-3.22 (m, 1H), 2.95 (dd, J_t= 8.1 Hz, J₂= 18 Hz, 1H), 2.80-2.76 (m, 2H), 2.58 (d,/=18Hz, 1H), 2.29 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 1.96 (s, 3H), 1.77 (dd, //= 12.3 Hz,/2= 15.6 Hz, 1H), 0.90 (d,/=6.9 Hz, 3H).

¹³CNMR(75 MHz, CDCI3)): δ 174.8,169.0,146.8, 144.4,142.8, 140.5, 140.2, 131.1,

128.8,120.8,120.5, 117.1, 112.9,111.6,101.5,60.3, 59.0,56.5,56.3,55.6, 55.1,50.2,41.6,

39.5,26.8,26.3,24.9,20.2,15.4,9.2.

131

ESI-MS m/z: Изчислено за ОиНзтМдОу: 591.65. Намерено (М+Н)⁺: 592.3.

ПРИМЕР 27

Ме

Към разтвор на 43 (154 mg, 0.26 ml) в метиленхлорид (1.3 ml) се прибавя фенилизотиоцианат (186 ml, 1.56 ml) и реакционната смес се разбърква в продължение на 2 часа при 23°С. Реакционната смес се концентрира под вакуум и остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силикагел, градиент хексан към хексан:етилацетат 1:1) до получаване на 44 (120 mg, 63%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.41 (етилацетат:метанол 5:1).

'Н NMR (300 MHz, CDC1₃). δ 8.17 (s, 1Н), 7.49-7.44 (m, ЗН), 7.31-7.24 (m, ЗН), 7.05 (d, J= 6.9 Hz, 1H), 5.98 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 5.87 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 5.52 (bs, 1H), 4.54 (t, J=

6.6 Hz, 1H), 4.15 (d, J= 2.1 Hz, 1H), 4.03 (d, J= 2.7 Hz, 2H), 3.80 (bs, 1H), 3.66 (s, 3H),

3.40 (bs, Ш), 3.32 (d, J= 7.8 Hz, 1H), 3.16 (d,J= 11.7 Hz, 1H), 2.82-2.61 (m, 3H), 2.29 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.01 (s, 3H), 1.99 (s, 3H), 1.80 (dd, J₇= 12.0 Hz, J₂= 15.9 Hz, 1H), 0.62 (d, J= 6.0 Hz, 3H). -

ESI-MS m/z: Изчислено за C38H42N6O7S: 726.3. Намерено (M+H)⁺: 727.3.

^,3С NMR (75 MHz, CDCI3) δ 178.5, 171.9,168.7, 146.7,144.5,142.6,140.6, 140.3,136.3,

131.0,129.9, 128.9, 126.7, 124.4, 120.9,120.6, 117.7,116.6, 112.7, 111.9, 101.4, 60.4,58.7,

57.5, 56.1,55.7,55.1, 53.3,41.4, 38.8,26.3,24.4, 20.2, 18.1, 15.3, 9.2.

132 * · • ·

Към разтвор на 44 (120 mg, 0.165 ml) в диоксан (0.9 ml) се прибавя 5.3N солна киселина/диоксан (1.8 ml) и реакционната смес се разбърква в продължение на 2.5 часа при 23°С. След това към тази реакционна смес се прибавят метиленхлорид (10 ml) и вода (5 ml) и органичният слой се декантира. Водната фаза се базифицира при 0°С с наситен воден разтвор на натриев бикарбонат (20 ml) (pH 8) и се екстрахира с метиленхлорид (2x15 ml). Смесените органични екстракти се сушат с натриев сулфат и се концентрират под вакуум до получаване на 45 (75 mg, 87%) като бяло твърдо вещество, което се използва в следващите реакции без допълнително пречистване. Rf: 0.23 (етилацетат:метанол 5:1).

'Н NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6.43 (s, IH), 5.94 (d. J= 1.2 Hz, IH), 5.87 (d. J= 1.2Hz. IH),

4.10 (d, J= 2.1 Hz, IH), 3.98 (d, J= 2.4 Hz, IH). 3.91 (bs. 1H). 3.69 (s, 3H), 3.34-3.25 (m, 2H), 3.05 (dd, Jr 1.8 Hz,8.1 Hz, IH), 2.80-2.73 (m, 3H), 2.46 (d, J= 18 Hz, IH), 2.30 (s, 3H), 2.28 (s,3H), 2.20 (s, 3H), 1.98 (s, 3H), 1.79 (dd, J/= 12.6 Hz, J₂= 16.2 Hz, IH);

¹³C NMR (75 MHz, CDCI3)): δ 168.7,146.7,144.4. 142.9, 140.4, 130.4, 128.9,121.1,

120.8, 117.8, 116.8, 113.6,111.5, 101.4, 67.6,60.5, 59.8,58.4,56.6,55.8,55.3,43.6,41.8,

31.3,25.6,20.2, 15.6,9.2.

ESI-MS m/z: Изчислено за C28H32N4O6: 520.58. Намерено (M+H)⁺: 521.3.

ПРИМЕР 29

133

Към разтвор на 45 (10 mg, 0.02 ml) в метиленхлорид (0.4 ml) се прибавя фталов анхидрид (2.84 mg, 0.02 ml) и реакционната смес се разбърква в продължение на 2 часа при 23°С. След това към тази реакционна смес се прибавя карбонилдиимидазол (0.5 mg, 0.003 ml) и реакционната смес се разбърква в продължение на 7 часа при 23°С. След това се прибавя карбонилдиимидазол (2.61 mg, 0.016 ml) и реакционната смес се разбърква в продължение на още 17 часа при 23°С. Разтворът се разрежда с метиленхлорид (10 ml) и се промива с 0.1 N солна киселина (5 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (RP-18, СНзСИ-Вода 60:40) до получаване на фталасцидин (11.7 mg, 93%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.37 (СН₃СЬ1:вода 7:3, RP-18).

*Н NMR (300 MHz, CDCI3): δ 7.72-7.68 (m, 2 h), 7.67-7.63 (m, 2 h), 6.38 (s, 1H), 5.69 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 5.64 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 5.30 (bs, 1H), 4.25-4.21 (m, 2 h), 4.02 (d, 7=2.1 Hz, 1H), 3.64-3.62 (m, 5H), 3.33 (d, 7= 8.4 Hz, 1H), 3.21-3.16 (m, 1H), 3.02 (dd, 7/= 8.1 Hz, 7/= 18 Hz, 1H), 2.76 (dd, 7/= 1.8 Hz, 7,= 15.6 Hz, 1H), 2.63 (d,7= 17.7 Hz, 1H), 2.29 (s, 3H),

2.28 (s,3H), 2.21 (s, 3H), 2.0 (s, 3H), 1.73 (dd, 7/= 12.0 Hz, J₂= 15.3 Hz, 1H));

¹³CNMR(75 MHz, CDCI3)): δ 168.5,167.6,146.2, 144.2, 142.5, 141.0, 140.5, 133.4,

131.8, 130.7, 128.2,120.9, 120.8, 117.9,116.4, 113.6, 101.1,60.4,60.0, 57.0, 56.3, 55.6,

55.4,41.6,41.5,26.5,25.2,20.2,15.7,9.4.

134

ESI-MS m/z: Изчислено за Ο^ΗμΝ^: 650. Намерено (Μ+Η)⁺: 651.2.

Към разтвор на 25 (18 mg, 0.032 ml) в диметилформамид (0.05 ml) при 0°С се прибавят катализатор DMAP (0.5 mg, 0.004 ml), имидазол (5 mg, 0.08 ml) и терт-бутилдифенилсилилхлорид (12.5 ml, 0.048 ml) и реакционната смес се разбърква в продължение на 6 часа при 23°С. След това към тази реакционна смес при 0°С се прибавя вода (10 ml) и водната фаза се екстрахира с хексан:етилацетат 1:10 (2 х 10 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, хексан:етилацетат 3:1) до получаване на 26 (27 mg, 88%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.29 (хексан:етилацетатЗ:1).

^lH NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 7.61-7.58 (m, 2 h), 7.42-7.28 (m, 8H), 6.71 (s, 1H), 6.19-6.02 (m, 1H), 5.78 (d, J= 1.2Hz, 1H),5.64(d,J= 1.2Hz, 1H),5.4O(dd,J/= 1.2Hz.A= 17.1 Hz, 1H), 5.27 (dd, J1= 1.2 Hz, J₂= 10.2 Hz, 1H), 5.13 (s, 2 h), 4.45 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 4.24 (d, J= 2.1 Hz, 1H), 4.17-4.06 (m, 3H), 3.75 (s, 3H), 3.64 (dd, J/= 2.4 Hz, J₂= 9.9 Hz, 1H), 3.59 (s, 3H), 3.42-3.21 (m,4H), 3.10 (dd, J/= 8.1 Ηζ,Λ= 17.7 Hz, 1H), 2.70 (d, J= 17.7 Hz, 1H),

2.33 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 2.08-1.89 (m, 1H), 0.87 (s, 9H);

^,3C NMR (75 MHz, CDCh): δ 148.5, 148.3,148.1, 144.0,139.0, 135.6, 135.4, 133.8, 133.1,

132.6, 130.5, 130.3, 129.6, 129.4, 127.5,127.4,125.1, 124.3, 121.6,118.5,117.5,112.9,

111.7,100.8,99.2, 74.0,67.7, 61.5,59.6, 59.0,57.7, 57.1,55.4,41.6,29.6,26.6,25.5, 18.8.

ESI-MS m/z: Изчислено за C47H55N3O7S1:801.3. Намерено (M+H)⁺: 802.3.

135 • · ·

• ·

Към разтвор на 26 (7 mg, 0.0087 ml) в метиленхлорид (0.11 ml) при 23°С се прибавят оцетна киселина (2.5 ml, 0.044 ml), (PPh₃)₂PdCI₂ (0.5 mg, 6.96 x IO⁴ml) и Bu₃SnH (3.5 ml, 0.013 ml). След разбъркване при тази температура в продължение на 1 час. Разтворът се разрежда със смес на хексан:етилацетат 5:1 (0.5 ml) и се излива в хроматографска колона под налягане (силикагел, градиент хексан към хексан:етилацетат от 5:1 до 1:1) до получаване на ЕТ-11 (5 mg, 75%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.36 (хексан:етилацетат 1:5, силициев двуокис).

*Н NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7.56 (m, 2 h), 7.41-7.25 (m, 8H), 6.67 (s, 1H), 5.72 (d, J=

1.0 Hz, 1H), 5.58 (d, J= 1.0 Hz, 1H), 5.51 (s, 1H), 5.38 (d, J= 5.75 Hz, 1H), 5.16 (d,J= 5.7 Hz, 1H), 4.57 (d, J= 2.9 Hz, 1H), 4.21 (m, 1H), 4.09 (m, 1H), 3.72 (s, 3H), 3.71 (s, 3H), 3.68 (dd, 2.1 Hz, J₂- 10.4 Hz, 1H), 3.38-3.26 (m, 3H), 3.11 (dd, 2.5 Hz, 15.7 Hz, 1H), 3.01 (dd, J- 8.9 Hz, J₂- 17.9 Hz, 1H), 2.70 (d, J= 17.9 Hz, 1H), 2.31 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 2.06 (s, 3H), 1.89 (dd, 12.1 Hz, 15.7 Hz, 1H), 0.9 (s, 9H).);

^l3CNMR(75 MHz, CDCh): δ 149.0,147.4, 145.3,144.3,136.3, 135.7,135.4,133.2,130.9,

130.5,129.6, 129.5, 127.5,125.0, 118.6,112.5, 112.1,105.7, 100.5, 99.8,68.5,61.5,59.7, ESI-MS m/z: Изчислено за C^HsiNsCbSi: 761. Намерено (M+H)⁺: 762.

ПРИМЕР 32

‘ 2

PhHNSCHN

136 • · · · • · · · · • · · • · ·

Разтвор на 2 (3.0 g, 5.46 ml) и фенилизотиоцианат*(3.92 ml, 3276* ml) в метиленхлорид (27 ml) се разбърква в продължение на 1.5 часа при 23°С.

След това реакционната смес се разпределя между метиленхлорид (10 ml) и вода (5 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и се концентрира. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, градиент от хексан до 2:3 хексан.етилацетат) до получаване на 3 (3.29 mg, 88%) като жълто твърдо вещество. Rf: 0.27 (ацетонитрил :вода 3:2, RP-C18).

‘HNMR(300 MHz, CDC1₃): δ 7.77 (bs, 1Н), 7.42-7.11 (m, 5Н), 6.65 (d, 1Н), 6.29 (s, Ш),·

5.6-5.5 (m, Ш), 4.19-4.14 (m, 2 h), 4.08 (d, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.87-3.65 (m, 6H), 3.77 (s, 3H), 3.37-2.98 (m, 8H), 2.50 (d, 1H), 2.31 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 1.96 (d, 1H), 1.87 (s, 3H),

1.81-1.75 (m, 1H), 0.96 (d, 3H);

¹³C NMR (75 MHz,

CDC1₃):6 185.7, 180.9,178.9, 172.0,155.7, 147.1, 143.2, 142.4, 136.0, 135.1, 130.5,129.9,

129.3,128.5, 126.9,124.4,120.2,117.4, 116.3, 77.1,60.9, 58.6, 56.2, 55.8, 55.0, 54.6, 53.5,

41.7, 40.3,25.1,24.5, 18.4, 15.8, 8.7

ESI-MS m/z: Изчислено за C36H40N6O6S: 684.8. Намерено (М+Н)⁺: 685.2.

ПРИМЕР 33

Разтвор на 3 (0.143 g, 0.208 ml) в 6.5М солна киселина/диоксан (150 ml) се разбърква в продължение на 6 часа при 23°С. След това към реакционната смес се прибавя толуен (3 ml) и органичният слой се декантира. Остатъкът се разпределя между наситен воден разтвор на

137 натриев бикарбонат (3 ml) и метиленхлорид (3x3 ml). Органичния? слУй се суши и концентрира до получаване на съединението от заглавието като смес на 4 и 6 (4:6 90:10), която бавно се циклизара до 6 при престояване. Rf: 0.4 (етмлацетатметанол 15:1, силициев двуокис).

’Н NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6.45 (s, IH), 4.16 (m, IH), 4.02 (d, IH), 3.96 (s. 3H), 3.79 (m,2 h), 3.75 (s, 3H), 3.35 (m, IH), 3.20-3.00 (m, 3H), 2.87 (d, IH), 2.75 (d. IH). 2.43 (d, IH), 2.34 (s, 3H), 2.30 (s, 3H), 1.93 (s, 3H), 1.72-1.5 (m, 3H);

ESI-MS m/z: Изчислено за C26H30N4O5:478.5. Намерено (M+H)⁺: 479.2.

ПРИМЕР 34

Разтвор на 3 (0.143 g, 0.208 ml) в 6.5М солна киселина/диоксан (150 ml) се разбърква в продължение на 1 час при 23°С. При изпаряване на разтворителя се получава остатък, който се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (етилацетат/метанол/триетиламин 100:25:0.1) до получаване на 6 (80 mg, 83%) като жълто твърдо вещество. Rf: 0.27 (ацетонитрил :вода 3:2, RP-C18).

’Н NMR (500 MHz, CDCI3): δ 6.46 (s, IH), 5.9 (bs, IH) 4.67 (dd, 7=18.3 Hz. 7= 7.8 Hz, IH), 4.24 (d, IH), 4A6(s, 3H), 3.93 (d,7=2.7 Hz, IH), 3.8 (τη, 2 h). 3.77 (s. 3H). 3.45 (m. 2

h), 3.08 (dd, 7=17.9 Hz, 7=3.6 Hz, IH), 2.78 (m, IH), 2.55 (d, IH), 2.3 (m, IH). 2.3 (s. 3H).

2. 28(s, 3H), 1.90 (s, 3H);

ⁿC NMR (75 MHz,CDCl₃):6 186.2, 162.1,154.9, 146.9,145.3, 143.0, 130.1,129.4, 128,1. 125.0, 121.4, 116.4,116.2, 66.6, 60.7, 60.7, 60.1, 59.6, 58.8, 55.6, 54.9, 41.9,25.3,24.7,

15.7,8.9.

138 *♦ ·· • · · • · ·

ESI-MS m/z: Изчислено за C26H28N4O4:460.5. Намерено (М+Н)⁺: 461.1.

ПРИМЕР 35

Към разтвор на 3 (2.38 д, 3.47 ml) в диоксан (5 ml) се прибавя 5.3М солна киселина в диоксан (34 ml) и реакционната смес се разбърква в продължение на 45 минути при 23°С. След това към тази реакционна смес се прибавя оцетен анхидрид (51 ml, 539.5 ml) и реакционната смес се разбърква в продължение на 4 часа. След това реакционната смес се охлажда до 0°С и се разпределя между наситен воден разтвор на натриев карбонат (300 ml) и етилацетат (300 ml) при тази температура. Органичната фаза се суши над натриев сулфат, филтрува се и се концентрира. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, градиент от метиленхлорид до метиленхлорид.етилацетат 1:2) до получаване на 5 (1.75 д, 97%) като жълто твърдо вещество. Rf: 0.53 (СН₃С1М:вода 3:2, RP18).

*Н NMR (300 MHz, CDCI3): δ 6.51 (s, IH), 5.98 (bs, IH), 4.84 (dd, IH), 4.17 (d, IH), 4.00 (d, IH), 3.99 (s, 3H), 3.85 (bs, IH), 3.81 (m, IH), 3.74 (s, 3H), 3.70 (d, IH), 3.23 (m, IH),

3.11 (dd, IH), 3.09 (m, 1H), 2.93 (m, 2 h), 2.44 (d, IH), 3.67 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 1.70 (s, 3H), 1.60-1.50 (m, 2 h), 1.29 (s, 3H);

^,3C NMR (75 MHz, CDCI3): δ 185.9,180.8,169.9,160.2, 156.2, 147.0,143.1. 140.4. 136.1.

130.6, 129.6, 127.9, 120.4, 117.2, 61.0, 60.7, 58.6, 56.1,55.7, 55.1, 54.3.41.8, 41.1.25.7.

23.9, 22.2, 15.7, 8.7.

139 • · · · в ·

ESI-MS m/z: Изчислено за С^На^Ов: 650. Намерено (М+Н)⁴:*651.2*.

• · • · ····

ПРИМЕР 36

Към разтвор на 5 (1.75 д, 3.36 ml) в метиленхлорид (17 ml) при 0°С се прибавят диизопропилетиламин (11.71 ml, 67.23 ml), DM АР (20 mg, 0.17 ml) и бромметилметмлов етер (4.11 ml, 50.42 ml). След разбъркване в продължение на 6 часа при 23°С, реакционната смес се разпределя между наситен воден разтвор на натриев бикарбонат (25 ml) и метиленхлорид (50 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (RP-18, СН₃СМ:вода 1:1) до получаване на 7 (1.32 д, 70%) като жълто твърдо вещество. Rf: 0.34 (CH₃CN:BOfla 2:3, RP-C18).

Ή NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6.74 (s, IH), 5.14 (s, 2 h), 4.82 (m, IH), 4.22 (d, IH), 4.00 (s, 3H), 4.0 (m, IH), 3.83 (m, 2 h), 3.7 (s, 3H), 3.58 (s, 3H), 3.4 (m, IH), 3.2-2.95 (m, 6H), 2.43 (d, IH), 2.37 (s, 3H), 2.22 (s, 3H), 1.89 (s, 3H), 1.5-1.4 (m, 2 h), 1.31 (s, 3H); ¹³CNMR(75 MHz, CDCh): δ 185.9, 180.7,169.6, 156.2, 148.9,148.5, 140.3, 136.2,131.3,

130.1, 127.7, 124.6, 123.7,117.3,99.5, 99.2, 60.9, 59.7,58.8, 57.7, 56.4, 55.7, 55.0, 54.2, 51.0, 41.6,41.0, 40.5, 25.5,23.9,22.3,19.3, 15.6,14.6, 8.6.

ESI-MS m/z: Изчислено за 564.6. Намерено (М+Н)⁺: 565.3.

ПРИМЕР 37

140

Към разтвор на 7 (0.37 д, 0.65 ml) в метанол (74 ml) при 0°С се прибавя 1М разтвор на натриев хидроксид (130 ml). Реакционната смес се разбърква в продължение на 15 минути, след което се закалява при 0°С с 6М солна киселина до pH 5. Реакционната смес се екстрахира с етилацетат (3 х 50 ml) и смесените органични слоеве се сушат над натриев сулфат и се концентрират под вакуум. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (RP-18, СН₃СМ:вода 1:1) до получаване на 8 (232 mg, 65%) като жълто масло. Rf: 0.5 (АСГЕвода 3:2, RP-C18).

’HNMR(300 MHz, CDC1₃): δ 6.75 (s, 1Н), 5.15 (s, 2 h), 4.86 (m, 1H), 4.26 (d, 1H),), 4.01 (d, 1H), 3.88-3.81 (m, 2 h), 3.70 (s, 3H), 3.58 (s, 3H), 3.39 (m, 1H), 3.27-3.21 (m, 1H), 3.183.08 (m, 2 h), 3.03-2.97 (m, 1H) 2.47 (d, 1H), 2.37 (s, 3H), 2.22 (s, ЗН), 1.90 (s, 3H), 1.57-

1.46(m, 2 h), 1.33 (s, 3H);

¹³C NMR (75 MHz, CDCI3): δ 185.3, 180.6, 175.9, 170.1,151.5,148.9, 148.6, 143.3, 133.7,

131.5, 129.9, 124.7, 123.5, 117.1,117.0, 99.2, 59.8, 58.7, 57.8, 56.3, 55.3, 54.9, 54.3, 41.5,

40.7,29.6,25.5,24.4,22.2,20.7,15.7, 8.0.

ESI-MS m/z: Изчислено за C29H34N4O7: 550.6. Намерено (M+H)⁺: 551.2.

ПРИМЕР 38

А_о

141

Към дегазиран разтвор на съединение 8 (240 mg’,’ 3.36 ml) диметилформамид (30 ml) се прибавя 10% паладий върху въглен (48 mg) и реакционната смес се разбърква под водород (атмосферно налягане) в продължение на 1 час. Реакционната смес се филтрува през слой от селит под аргон в епруветка на Schlenk като безцветен разтвор, съдържащ безводен цезиев карбонат (240 mg, 0.739 mi). След това се прибавя бромхлорметан (0.566 ml, 8.71 ml). Епруветката се заварява и се разбърква при 90°С в продължение на 3 часа. Реакционната смес се охлажда и филтрува през селит и се промива с метиленхлорид. Органичният слой се концентрира и суши над натриев сулфат до получаване на 9 като кафяво масло, което се използва в следващия етап без допълнително пречистване. Rf: 0.36 (силициев двуокис, хексан :етилацетат 1:5).

'HNMR(300 MHz, CDCI3): δ 6.71 (s, ЗН), 5.89 (d, 1Н), 5.81 (d, lH),5.63(bs. 1H), 5.33 (d, 1H), 5.17 (d, 1H), 4.97 (m, 1H), 4.20 (d, 1H), 4.09 (m, 1H), 3.99 (m, 1H), 3.68 (m, Ш), . 3.65 (s, 6H), 3.59-3.47 (m, 4H), 3.37-3.27 (m, 2 h), 3.14- 2.97 (m, 2 h), 2.62 (d, 1H), 2.32 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.08 (s, 3H), 1.72 (m, 1H), 1.36 (s, 3H);

^,3C NMR (75 MHz, CDCI3): δ 169.8, 149.1,147.4,145.5, 136.2,130.9, 130.8. 125.0,122.9,

117.7,112.6, 111.8, 106.4,100.8, 99.8, 59.8, 58.9, 57.7,56.6, 56.4, 55.5, 55.2,41.6,40.1, 29.6,25.9,25.0,22.6, 15.6,8.8.

ESI-MS m/z: Изчислено за СзоНзб81М₄0₇:564.6. Намерено (Μ+Н)⁺: 565.3.

ПРИМЕР 39

142 ·· ·· · · ·· ·.

• ·· · ·· ·· · ·· · ··· · · ·· · ··· · ·*···’

Към колба, съдържаща 9 (245 mg, 0.435 m*l)* в*диметилформамид |4*fal) при 0°С се прибавят цезиев карбонат (425 mg, 1.30 ml) и алилбромид (376 ml, 4.35 ml) и реакционната смес се разбърква при 23°С в продължение на 1 час. Реакционната смес се филтрува през слой от селит и се разпределя между метиленхлорид (25 ml) и вода (10 ml). Органичната фаза се суши над натриев сулфат и се концентрира при понижено налягане до получаване на остатък, който се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, хлороформгетилацетат 1:2) до получаване на 10 като жълто масло (113 mg, 43%). Rf: 0.36 (хексан :етилацетат 1:5).

'Н NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6.74 (s, IH), 6.3-6.0 (m, IH), 5.94 (d, IH), 5.87 (d, IH),

5.43-5.36 (m, 2 h), 5.22 (s, 2 h), 5.00 (m, IH), 4.22 (m, IH), 4.17-4.01 (m. IH), 3.98 (m, 2 h), 3.71-3.67 (m, IH), 3.69 (s, 3H), 3.62-3.51 (m, 3H), 3.58 (s, 3H), 3.39-3.37 (m, IH), 3.31-

3.26 (m, 3H), 3.09 (dd, IH), 2.56 (d, IH), 2.36 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.11 (s, 3H). 2.24-2.10 (m, IH), 1.82-1.73 (m, IH), 1.24 (bs, 3H) ¹³CNMR(75 MHz, CDCI3): δ 169.4,148.8,148.3, 139.1, 133.7, 130.9,130.3, 125.2, 120.2,

117.7,113.1, 112.6, 101.3, 99.3, 74.1, 59.7, 59.3, 57.8, 57.0, 56.1, 56.1, 55.2,41.6, 41.0,

40.9,29.7,26.3,22.5,15.6,9.3

ESI-MS m/z: Изчислено за C33H40N4O7:604.7. Намерено (M+H)⁺: 605.3.

46

Към разтвор на 9 (22 mg, 0.039 ml) в метиленхлорид (0.2 ml) при 0°С се прибавят ацетилхлорид (2.79 ml, 0.039 ml) и пиридин (3.2 ml, 0.039 ml). Реакционната смес се разбърква в продължение на 1 час, след което

143 разтворът се разрежда с метиленхлорид (Ю mi) и се промива с 0.ΪΝ солна киселина (5 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане до получаване на 46 (22 mg, 93%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.4 (хексан:етилацетат 1:5).

’Н NMR (300 MHz, CDCI3). δ 6.74 (s, 1 Η), 5.97 (d,7=0.9 Hz, IH), 5.91 (d,7=0.9 Hz, IH), 5.12 (d,7= 5.7 Hz, 2 h), 5.04 (d,7= 5.7 Hz, IH) 4.90 (t,7= 6 Hz. IH), 4.17 (d,7= 2.7 Hz, IH), 4.05 (d, 7= 2.7 Hz, 1H), 4.01 (bs, IH), 3.71 (s, 3H), 3.57 (s, 3H), 3.50-3.44 (m, 2 h), 3.38-3.36 (m, IH), 3.30-3.26 (m, IH), 3.00 (dd,7/= 7.8 Hz,7?= 18.0 Hz. IH). 2.79 (d,7=

12.9 Hz, IH), 2.60 (d,7=18.0 Hz, IH), 2.35 (s, 3H), 2.32 (s, 3H). 2.21 (s, 3H), 2.00 (s, 3H),

1.68 (dd, 7/=11.7 Hz, 7τ= 15.6 Hz, 1H).

ESI-MS m/z: Изчислено за C32H38N4O8:606.67. Намерено (M+H)⁺: 607.3.

Към разтвор на 46 (8 mg, 0.013 ml) в диоксан (0.1 ml) се прибавя 5.3N солна киселина/диоксан (0.5 ml) и реакционната смес се разбърква при

23°С в продължение на 1 час, след което разтворът се разрежда с метиленхлорид (5 ml) и се промива с 0.1N солна киселина (3 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане до получаване на 47 (5 mg, 70%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.4 (хексан .етилацетат 1:5).

’HNMR (300 MHz, CDCh). δ 6.51 (s, IH), 5.97 (d,7= 1.2 Hz, IH), 5.91 (d.7= 1.2 Hz, IH), 4.97 (bs, IH), 4.11 (bs, IH), 4.04-4.02 (m, 2 h), 3.75 (s, 3H),), 3.65 (d, 7= 2.1 Hz, 2 h), 3.56-3.30 (m,2 h), 3.04 (dd,7/= 7.5 Hz, Jr 18 Hz, IH), 2.80 (d,7= 14.4 Hz. IH), 2.59 (d, 7= 18.3 Hz, IH), 2.33 (s, 3H), 2.24 (s, 3H), 2.00 (s, 3H), 1.76 (dd, 7/= 12.0 Hz, 7_?= 15.9 Hz. IH), 1.33 (s, 3H), 1.25 (s, 3H).

144

ESI-MS m/г: Изчислено за C30H34N4O7:562.61. Намерено (М+Н)⁺: 563.3.

ПРИМЕР 42

Isovaleryl chloride, ру,

CH₂CI₂.0°C. 1h

OMe

Към разтвор на 45 (10 mg, 0.0192 ml) в метиленхлорид (0.3 ml) при 0°С се прибавят изовалерилхлорид (2.34 ml, 0.0192 ml) и пиридин (1.55 ml, 0.0192 ml). Реакционната смес се разбърква в продължение на 1 час, след което разтворът се разрежда с метиленхлорид (5 ml) и се промива с 0.1N солна киселина (3 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, хексан:етилацетат 1:2) до получаване на 48 (11 mg, 95%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.12 (хексан:етилацетат 1:2).

‘Н NMR (300 MHz, CDCI3): δ 6.50 (s, 1Н), 5.98 (d, J= LSHz, 1H), 5.91 (d, J= 1.5 Hz, 1H),

5.75 (s, 1H), 5.02 (t, 7= 5.4 Hz, 1H), 4.10 (d, J= 1.5 Hz, 1H), 4.06 (d, J= 2.7 Hz, 1H), 4.02 (d, J= 2.7 Hz, 1H), 3.77 (s, 3H), 3.76-3.71 (m, 1H), 3.86-3.28 (m, 3H), 3.04 (dd, 7/= 8.1 Hz, J₂= 18.3Hz, 1H), 2.78 (d,7=15.9 Hz, 1H), 2.55 (d,7=18 Hz, 1H), 2.32 (s, 6H), 2.26 (s, 3H),

1.98 (s. 3H), 1.84-1.68 (m, 2 h), 1.36 (d, J= 7.2 Hz, 2 h), 0.69 (d, J= 6.6 Hz, 3H). 0.62 (d. 7=6.6 Hz, 3H).

ESI-MS m/z: Изчислено за C33H40N4O7:604.69. Намерено (M+H)⁺: 605.3.

ПРИМЕР 43

145

Към разтвор на 45 (10 mg, 0.0192 ml) в метиленхлорид (0.3 ml) при 0°С се прибавят изовалерилхлорид (3.98 ml, 0.0192 ml) и пиридин (1.55 ml, 0.0192 ml). Реакционната смес се разбърква в продължение на 1 час, след което разтворът се разрежда с метиленхлорид (5 ml) и се промива с 0.1N солна киселина (3 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, хексан :етилацетат 1:2) до получаване на 49 (12.4 mg, 96%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.7 (етилацетатметанол 10:1).

’HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6.50 (s, IH), 5.98 (d,7= 1.5Hz, IH), 5.91 (d,7= 1.5 Hz, IH), 5.73 (s, IH), 5.08 (t, 7= 5.4 Hz, IH), 4.10 (d, J= 1.5 Hz, IH), 4.05 (m., IH), 4.01 (m, IH), 3.76 (s, 3H), 3.65-3.61 (m, IH), 3.40-3.27 (m, 3H), 3.03 (dd,7_;= 8.1 Hz, J₂= 18.6 Hz, IH), 2.78 (d, 7=13.2 Hz, IH), 2.57 (d, 7=18.3 Hz, IH), 2.32 (s, 3H), 2.31 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 1.99 (s, 3H), 1.79 (dd,7/= 12.0 Hz, 7/= 16.5 Hz, IH), 1.73-1.42 (m, 4H), 1.33-1.18 (m, 10H), 1.03 (m, 2 h), 0.87 (t,7= 6.6 Hz, 3H).

ESI-MS m/z: Изчислено за C38H50N4O7.674.83. Намерено (M+H)⁺: 675.5.

ПРИМЕР 44

146 ··· · · ···

Към разтвор на 45 (14.5 mg, 0.0278 ml) в метиленхлорид’(Ь*3 т!)*прй’0°С се прибавят транс-3-трифлуорметилсинамоилхлорид (4.76 ml, 0.0278 ml) и пиридин (2.25 ml, 0.0278 ml). Реакционната смес се разбърква в продължение на 1 час, след което разтворът се разрежда с метиленхлорид (5 ml) и се промива с 0.1N солна киселина (3 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, хексан:етилацетат 1:1) до получаване на 50 (18.7 mg, 94%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.64 (етилацетат:метанол 15:1).

*Н NMR (300 MHz, CH3OD). δ 7.74-7.55 (m, 4Н), 7.23 (d, 7= 16.0 Hz, lH),6.34(s, 1H),

6.12 (d, 7= 16.0 Hz, 1H), 6.07 (d, 7= 0.9 Hz, 1H), 5.96 (d, 7= 0.9 Hz, 1H), 4.39 (d, 7= 2.4 Hz, 1H), 4.07-4.05 (m, 1 H), 3.81 (bs, 1H), 3.46-3.51 (m, 3H), 3.42 (s, 3H), 3.09 (br d, 7= 12.0 Hz, 1H), 2.94-2.85 (m, 2 h); 2.74 (d, 7=18.3 Hz, 1H), 2.38 (s, 3H), 2.23 (s, 3H), 2.02 (s, 3H), 1.80 (s, 3H), 1.84-1.75 (m, 1H).

¹³CNMR(75 MHz, CDCI3)): δ 168.7,165.3, 146.5, 144.7, 142.6, 140.6,138.0, 135.9, 131.0,130.9, 129.1, 128.6,125.8, 125.7,124.5, 124.4,122.7, 121.2, 117.8,116.5,113.0, 112.0,101.7, 60.4, 59.1, 56.5,56.4, 55.6,55.3,41.8,40.3,26.6,25.1,20.3,15.4,9.3.

ESI-MS m/z: Изчислено за C38H37F3N4O7: 718.72. Намерено (M+H)⁺: 719.3.

ПРИМЕР 45

51

Към разтвор на 43 (33 mg, 0.0557 ml) в метиленхлорид (0.4 ml) при 0°С се прибавят изовалерилхлорид (6.79 ml, 0.0557 ml) и пиридин (4.5 ml, 0.0557

147 • ··· ·· ··· ··· · · ···· ml). Реакционната смес се разбърква в продължение на 1 час, след което разтворът се разрежда с метиленхлорид (5 ml) и се промива с 0.1N солна киселина (3 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, хексан:етилацетат 1:2) до получаване на 51 (11 mg, 95%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.12 (хексан:етмлацетат 1:2).

Ή NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6.46 (s,lΗ), 6.10 (bs, 1Η), 5.99 (d, J= 0.9Hz, IH), 5.90 (d, /= 0.9 Hz, 1H), 5.30 (t,/= 6.0 Hz, 1H), 4.10-4.05 (m, 3H),3.81 (bs, 1H), 3.74 (s, 3H), 3.54 (bs,lH), 3.38-3.36 (m, 1H), 3.29-3.21 (m, 1H), 3.00 (dd,//= 8.0 Hz,/3= 18-0 Hz, 1H), 2.25 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.00 (s, 3H), 1.95-1.90 (m, 3H), 0.87 (d,/=6.6 Hz, 6H), 0.76 (d, /=6.0 Hz, 3H).

ESI-MS m/z: Изчислено за C36H45N5O8:675.77. Намерено (M+H)⁺: 676.3.

ПРИМЕР 46

CF₃

Към разтвор на 43 (33 mg, 0.0557 ml) в метиленхлорид (0.4 ml) при 0°С се прибавят транс-3-трифлуорметилсинамоилхлорид (9.52 ml, 0.0557 ml) и пиридин (4.5 ml, 0.0557 ml). Реакционната смес се разбърква в продължение на 1 час, след което разтворът се разрежда с метиленхлорид (5 ml) и се промива с 0.1N солна киселина (3 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под

148

··· · · ··· налягане (силициев двуокис, хексан:етилацетат*1:5) до поЛу4й6ане’йа*52^,(40 mg, 92%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.21 (хексан :етилацетат 1:2).

'Н NMR (300 MHz, CD₃OD). δ 7.74-7.47 (m, 4Н), 6.49 (s, IH), 6.40 (d, 7= 15.6 Hz, Ш), 6.00 (d, 7= 1.5 Hz, IH), 5.90 (d,7= 1.5 Hz, IH), 5.47 (t,7= 6 Hz, IH), 4.12-4.09 (m, 3H),

3.93 (bs, IH), 3.71 (s, 3H), 3.59-3.58 (m, Ш), 3.38 (d, 7=7.8 Hz, IH), 3.29 (d,7=12.0 Hz, IH), 3.00 (dd,7/= 8.1 Hz,7₃= 18.3 Hz, IH), 2.79-2.78 (m, IH), 2.65 (d, 7=18.3 Hz, IH)

2.29 (s, 6H), 2.28 (s, 3H), 2.22 (s, 3H), 1.84-1.80 (m, IH), 0.85-0.84 (m, 3H).

^,3CNMR(75 MHz, CDCl₃)b 171.9, 168.8, 164.4, 146.9,144.6,143.0,140.5, 140.5, 139.3,

135.7, 131.1, 131.0,129.4,129.1,126.0, 124.1, 124.0, 122.4, 121.1, 120.7, 120.6, 117.7,

116.9, 112.8, 112.0,101.6,60.6, 59.3, 57.1, 56.3, 55.9, 55.2,49.0,41.7,49.9, 26.5,25.1,

20.2,18.4,15.7,9.3.

ESI-MS m/z: Изчислено за C41H42F3N5O8:789.8. Намерено (M+H)⁺: 790.3.

ПРИМЕР 47

OMe

Ме

Към разтвор на 43 (10 mg, 0.0169 ml) в метиленхлорид (0.2 ml) при 23°С се прибавя трифлуороцетен анхидрид (2.38 μΙ, 0.0169 ml). Реакционната смес се разбърква в продължение на 5 часа, след което разтворът се разрежда с метиленхлорид (5 ml) и се промива с 0.1N солна киселина (3 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, хексан:етилацетат

149 ·· · · · · «<. ·« • · · · · · · β · · ·· • · · · · · ·· ···· · ···· · • · · · · ·· · ···· ·· ··· ··· ·· ····

3:2) до получаване на 53 (10.7 mg, 93%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.57 (еталацетагметанол 15:1).

^!Н NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 6.45 (s, 1Н), 6.00 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 5.90 (d,/= 1.2 Hz,

1H), 5.87 (bs, 1H), 5.32(bs, 1H), 4.12(d, /=2.1 Hz, 1H), 4.08 (d,/= 1.8 Hz. 1H). 3.78-3.56 (m, 3H), 3.72 (s, 3H), 3.40 (d, /= 8.1 Hz, 1H), 3.25 (d, /= 9.3 Hz, 1H), 3.00 (dd, //= 8.4 Hz, /2= 18.0 Hz, 1H), 2.77 (dd, //= 2.1 Hz, /₂= 15.9 Hz, 1H), 2.68 (d, /= 18.6 Hz, 1H), 2.30 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 2.22 (s, 3H), 2.00 (s, ЗН), 1.75 (dd, //= 11.4 Hz, /2= 15.9 Hz, 1H), 0.69 (d,/= 6.3 Hz, 3H).

^,3CNMR(75 MHz, CDC1₃)5 170.1,168.6,156.0,147.0,144.6,143.0, 140.6,140.4, 131.0,

129.4, 120.9,120.7, 117.6, 116.8, 112.4, 112.1, 101.6, 60.5, 59.0, 57.1,56.3,55.6, 55.2,

48.7,41.6,39.4,26.5,24.9,20.2,17.8,15.4,9.2.

ESI-MS m/z: Изчислено за ΟμΗ^Ν^β:687.63. Намерено (M+H)⁺: 688.66.

ПРИМЕР 48

Ме

Към разтвор на 19 (11 mg, 0.0169 ml) в метиленхлорид (0.2 ml) при 23°С се прибавя трифлуороцетен анхидрид (2.38 ml, 0.0169 ml). Реакционната смес се разбърква в продължение на 5 часа, след което разтворът се разрежда с метиленхлорид (5 ml) и се промива с 0.1N солна киселина (3 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, хексан:етилацетат

150 • · · ···««« ______

3:2) до получаване на 54 (10.7 mg, 93%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.6 (етилацетат.метанол 15:1).

^lH NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7.33 (d,/=6.3 Hz, Ш), 6.45 (s, 1H), 6.04 (m, 1H), 5.95 (d, /= 1.5 Hz, 1H), 5.84 (d, /= 1.5 Hz, 1H), 5.32 (m, 2 h), 5.21 (m, 1H), 4.11 (m, 4H), 3.73 (s, 3H), 3.64 (m, 2 h), 3.51 (m, 1H), 3.37 (d, J= 7.8 Hz, 1H), 3.22 (m, 2 h), 3.03 (dd, 1H, //= 8.1 Hz, J₂= 18.3 Hz, 1H), 2.60 (d,/= 18.3 Hz, 1H), 2.29 (s, 3H), 2.24 (s, 3H), 2.08 (s, 3H), 1.86 (dd, //= 12 Hz, /₂= 16.2 Hz, 1H), 0.82 (d, /= 7.2 Hz, 3H).

^,3CNMR(75 MHz, CDCI3) δ 170.0,156.0,148.4,147.1,144.3, 143.0,138.7,133.8,130.5,

129.4,120.6,120.4, 117.6,117.5, 117.0,113.5,112.5,112.4,101.1,74.1,66.8, 60.4, 59.3,

56.9, 56.6,56.3,55.4, 48.7,41.6, 40.1,26.2,25.0, 17.6,15.4, 9.1.

ESI-MS m/z: Изчислено за C35H39F3N5O7: 685.69. Намерено (М+Н)⁺: 686.3.

ПРИМЕР 49

Към разтвор на 54 (100 mg, 0.415 ml) в метиленхлорид (4 ml) при 23°С се прибавят оцетна киселина (40 ml), (PPh₃)₂PdCl2 (8.4 mg, 0.012 ml) и BifeSnH (157 ml, 0.56 ml). След разбъркване при тази температура в продължение на 2 часа, реакционната смес се излива в хроматографска колона под налягане (силициев двуокис, градиент хексан до хексан:етилацетат от 2:1) до получаване на 55 (90 mg, 96%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.6 (хексан :етилацетат 1:2).

151 ’HNMR (300

5.82 (d, J= 1.2 Hz. 1H), 5.37 (t, J= 6.0 Hz, 1H), 4.15 (d, J= 2.1 Hz. 1H), 4.04 (d. J= 1.8 Hz.

1H), 3.70 (s, 3H), 3.66-3.53 (m, 2 h), 3.37-3.31 (m, 2 h), 3.19-3.15 (d, J= 11.7 Hz, 1H), 3.083.00 (m, 2 h), 2.56 (d, 7=18.3 Hz, 1H), 2.30 (s, 3H), 2.24 (s, 3H), 2.04 (s, 3H), 1.91 (dd, Jr

12.0 Hz, J₂= 15.6 Hz, 1H), 0.84 (d, 7= 6.9 Hz, 3H).

^I3CNMR(75 MHz, CDC1₃) δ 170.1, 156.3, 147.3, 144.9, 144.4, 143.3, 136.7, 130.7,129.3,

41.6,40.9,25.7,25.3, 18.0,15.6, 8.7.

ESI-MS m/z: Изчислено за C32H35F3N5O7:645.63. Намерено (M+H)⁺: 646.2.

ПРИМЕР 50

Към разтвор на 17 (200 mg, 0.288 ml) в метиленхлорид (1.44 ml) се прибавя трифлуороцетна киселина (888 ml, 11.53 ml) и реакционната смес се разбърква в продължение на 4 часа при 23°С. Реакционната смес се закалява при 0°С с наситен воден разтвор на натриев бикарбонат (60 ml) и се екстрахира с етилацетат (2 х 70 ml). Смесените органични слоеве се сушат над натриев сулфат и се концентрират под вакуум до получаване на 56 (147 mg, 93%) като бяло твърдо вещество, което се използва в следващите реакции без допълнително пречистване. Rf: 0.19 (етилацетат:метанол 15:1).

152 ·· ♦· · · · ·· • · · · ·· ·· ···· *H NMR (300 MHz, CD3OD). δ 6.48 (s, 1H), 5.^/-0.9 jfc, 0.9 Hz,

1H), 4.35 (d,/= 2.4 Hz, 1H),4.15 (d, J= 1.8 Hz, 1H), 3.99-3.98 (m, 1H), 3.70 (s, 3H), 3.52-

2.96 (m, 7H), 2.68 (d, J= 18.3 Hz, 1H), 2.24 (s, 3H), 2.23 (s, 3H), 2.06 (s. 3H), 1.85 (dd, J_t=

11.7 Hz,/2= 15.6 Hz, 1H), 0.91 (d,/= 6.6 Hz, 3H).

^,3C NMR (75 MHz, CD3OD): δ 173.2. 149.1, 145.6, 144.9, 138.0, 132.2. 130.6, 121.4,

119.6.117.4.114.3.109.2.102.5, 82.3, 60.4,58.4,58.3,57.8, 56.6, 50.1,42.3,41.6,27.8,

26.2.19.5.15.5, 9.8.

ESI-MS m/z: Изчислено за C29H₃₅N£)₆: 549.62. Намерено (M+H)⁺: 550.3.

ПРИМЕР 51

Me

Към разтвор на 56 (10 mg, 0.018 ml) в метиленхлорид (0.4 ml) се прибавя фенилизотиоцианат (13 ml, 0.109 ml) и реакционната смес се разбърква в продължение на 1.5 часа при 23°С. Сместа се концентрира под вакуум и остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, градиент от хексан до 1:1 хексан :етилацетат) до получаване на 57 (8 mg, 65%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.57 (етилацетатметанол 10:1).

*Н NMR (300 MHz, CDCI3): δ 7.88 (bs, 1Н), 7.41-7.36 (m, 2 h), 7.27-7.22 (m, 1H), 7.027.00 (d, /= 7.8 Hz, 2 h), 6.71 (d, /= 7.2 Hz, 1H), 6.31 (s, 1H), 6.17 (bs, 1H), 5.93 (d, /=1.2 Hz, 1H), 5.83 (d,/= 1.2 Hz, lH),5.55(bs, 1H), 5.20-5.17 (m, 1H), 4.16 (d,/= 1.8 Hz, 1H), 4.05 (bs, 1H), 4.02 (d, /= 2.4 Hz, 1H), 3.79 (s, 3H), 3.75-3.71 (m, 1H), 3.35 (d, /= 7.8 Hz, 1H), 3.28-3.19 (m, 2 h), 3.12-2.97 (m, 2 h), 2.50 (d, /=18.3 Hz, 1H), 2.32 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.15-2.09 (dd, /,= 11.4 Hz, /2= 15.9 Hz, 1H), 1.95 (s, 3H), 0.88 (d, /=6.9 Hz, 3H).

^I3C NMR (75 MHz, CDClj): δ 178.5, 171.7, 147.2,Ί*45Ό, 144.3,143.3, 137.0,‘135.7, 130.6,

130.4,129.6, 127.5,124.3,120.6,117.7, 117.2, 115.3,112.1, 108.3,100.9, 60.9, 59.5, 56.7, 56.5,56.2,55.2,54.1,41.7,41.1,26.3,25.4,18.5,15.8,9.0.

ESI-MS m/z: Изчислено за 684.81. Намерено (М+Н)⁺: 685.3.

ПРИМЕР 52

58

Към разтвор на 57 (45 mg, 0.065 ml) в метиленхлорид (0.5 ml) при 0°С се прибавят ацетилхлорид (4.67 ml, 0.065 ml) и пиридин (5.3 ml, 0.065 ml). Реакционната смес се разбърква в продължение на 3 часа, след което разтворът се разрежда с метиленхлорид (10 ml) и се промива с 0.1N солна киселина (5 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (RP-18, СНзСИ:вода 40:60) до получаване на 58 (14 mg, 28%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.34 (СН₃СЬ1:вода 7:15).

’Н NMR (300 MHz, CDCI3). δ 11.90 (d, 7= 6.6 Hz, IH), 7.45-7.40 (m, ЗН). 7.18-7.15 (m,

h), 6.58 (s, IH), 6.00 (d,7= 1.2 Hz, IH), 5.89 (d,7= 1.2 Hz, IH), 5.70 (s. IH). 5.37 (t,7=

4.8 Hz, IH), 4.48 (m, IH), 4.23 (bs, IH), 4.07 (bs, 2 h), 3.85-3.75 (m, IH), 3.70 (s, 3H),

3.46-3.41 (m, 2 h), 3.24-3.20 (m, IH), 3.00-2.95 (m, IH), 2.87-2.75 (m, IH), 2.31 (s, 3H),

2.28 (s, 3H), 2.24 (s, 3H), 2.00 (s, ЗН), 1.85 (dd, 7_;= 11.4 Hz, J₂= 15.6 Hz, IH), 1.66 (s, 3H),

0.82 (d, 7= 6.0 Hz, 3H).

^,3C NMR (75 MHz, CDCh)): δ 182.6,174.3, 171.0,146.6,144.6,142.7,142.3,140.7,

154 ··· · · ··· ···· ·· ··· ··· ·· ····

140.2.131.3, 129.8,129.3,128.9, 128.8, 121.5, 120.4,117.3, 116.6,112.8,112.0,111.3,

101.5, 60.5, 59.0, 57.6, 56.2, 55.9, 55.3, 55.1,41.6, 39.4, 27.8,26.5, 24.8, 20.2, 17.1, 15.5,

9.3.

ESI-MS m/z: Изчислено за C^H-uNsObS: 768.88. Намерено (M+H)⁺: 769.2.

ПРИМЕР 53

Към разтвор на 57 (130 mg, 0.189 ml) в диоксан (1 ml) се прибавя 5.3N солна киселина/диоксан (1.87 ml) и реакционната смес се разбърква при

23°С в продължение на 4 часа. След това към реакционната смес се прибавят метиленхлорид (15 ml) и вода (10 ml) и органичният слой се декантира. Водната фаза се базифицира при 0°С с наситен воден разтвор на натриев бикарбонат (60 ml) (pH 8) и след това се екстрахира с етилацетат (2 х 50 ml). Смесените органични екстракти се сушат над натриев сулфат и се концентрират под вакуум до получаване на 59 (63 mg, 70%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.15 (етилацетатметанол 15:1).

^!НNMR (300 MHz, CDC1₃). δ 6.67 (s, IH), 5.99 (d, 7= 0.9 Hz, IH), 5.91 (d. 7= 1.2 Hz, IH), 5.10 (bs, IH), 4.32 (d, 7= 7.2 Hz, IH), 4.25 (dd, 7/= 3.6 Hz, 7₂= 9.3 Hz, IH), 3.7 (s, 3H), 3.71-3.64 (m, 2 h), 3.50 (dd, 7/= 2.4 Hz,7₂= 15.9 Hz, IH), 3.42-3.37 (m, 2 h), 3.16 (dd, 7/=3.6 Hz, 7₂= 12.9 Hz, IH), 2.57 (dd, 7/= 9.3 Hz, 7₂= 12.9 Hz, IH), 2.27 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 1.91 (dd, 7/= 12.0 Hz,7₂= 15.9 Hz, IH).

ESI-MS m/z: Изчислено за C26H30N4O5:478.5. Намерено (M+H)⁺: 479.3.

155

• ·

Към разтвор на 43 (20 mg, 0.0338 mmol) в метиленхлорид (0.3 ml) при 0°С се прибавят синамоилхлорид (5.63 mg, 0.0338 mmol) и пиридин (2.73 ml, 0.0338 mmol). Реакционната смес се разбърква в продължение на 1 час, след което разтворът се разрежда с метиленхлорид (10 ml) и се промива с 0.1N солна киселина (5 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, етилацетагметанол 20:1) до получаване на 60 (22 mg, 90%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.56 (етилацетагметанол 5:1).

‘HNMR (300 MHz, CDC1₃). 7.51 (s, IH), 7.50-7.47 (m, 2H), 7.36-7.35 (m, 2H), 6.43 (s, IH), 6.36 (brd, J= 15.9 Hz, 2H), 6.01 (d, /= 1.5 Hz, IH), 5.90 (brd, /= 1.5 Hz, 2H), 5.42 (t, J= 6.0 Hz IH), 4.12-4.07 (m, 3H), 3.96-3.95 (m, IH), 3.73 (bs, 3H), 3.58 (bs, 2H), 3.39 (d, J= 8.7 Hz, IH), 3.25 (d, /=11.7 Hz, IH), 3.0 (dd, //= 7.5 Hz, J₂= 17.7 Hz, IH), 2.78 (d, /=

15.9 Hz, IH), 2.67 (d, /=16.5 Hz, 1H),2.29 (s, 6H),2.23 (s, 3H), 1.99 (s, 3H), 1.82 (dd,/₇=

11.4 Hz,/₂= 15.6 Hz, IH), 0.83 (d,/= 6.0 Hz, 3H).

¹³C NMR (75 MHz, CDCI3)): δ. 172.0, 165.0, 146.9,144.6, 143.1, 141.0,140.5, 134.8, 131.0, 129.7, 129.1,128.8,127.8; 125.5,123.8, 123.0,121.1, 120.5, 117.7,116.9, 112.8, 112.0, 101.9, 60.6,59.2, 57.1, 56.4, 55.9, 55.3, 48.8,41.7,40.0, 26.5, 25.1,20.3,18.5,15.7,

9.3.

ESI-MS m/z: Изчислено за C^H^NsOg: 721.8. Намерено (M+H)⁺: 722.3.

156

ПРИМЕР 55

Към разтвор на 45 (19 mg, 0.0364 mmol) в метиленхлорид (0.3 ml) при 0°С се прибавят хептафлуорбутирилхлорид (5.44 ml, 0.0364 mmol) и пиридин (2.95 ml, 0.0364 mmol). Реакционната смес се разбърква в продължение на 1 час, след което разтворът се разрежда с метиленхлорид (10 ml) и се промива с 0.1N солна киселина (5 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, етилацетатметанол 20:1) до получаване на 61 (11.7 mg, 45%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.76 (етилацетат.метанол 5:1).

*Н NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 6.46 (s, 1Н), 6.12 (bs, 1H), 5.98 (d, J= 1.2 Hz. 1H). 5.93 (d, 7=1.2 Hz, 1H), 5.72 (bs, 1H), 4.13-4.11 (m. 2H), 4.0 (d, 7=2.4 Hz, 1H), 3.98-3.96 (m, 1H),

3.73 (s, 3H), 3.39 (d,7= 7.5 Hz, 1H), 3.39-3.28 (m, 2H), 3.09 (dd,7/= 8.1 Hz, 7/= 18.0 Hz, 1H), 2.80 (d, 7= 16.2 Hz, 1H), 2.46 (d,7= 18.3 Hz, 1H), 2.32 (s, 6H), 2.21 (s, 3H), 1.99 (s, 3H), 1.80 (dd, 7/= 12.0 Hz, 7/= 16.2 Hz, 1H).

ESI-MS m/z: Изчислено за C32H31F7N4O7:716.6. Намерено (M+H)⁺: 717.2.

ПРИМЕР 56

nh₂

Me

Към разтвор на 43 (24 mg, 0.04 mmol) в метиленхлорид (0.3 ml) при 0°С се прибавят бутирилхлорид (4.15 ml, 0.04 mmol) и пиридин (3.28 ml, 0.04 mmol). Реакционната смес се разбърква в продължение на 1 час, след което разтворът се разрежда с метиленхлорид (10 ml) и се промива с 0.1N солна киселина (5 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, етилацетагметанол 20:1) до получаване на 62 (24 mg, 90%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.35 (етилацетат:метанол 5:1).

^]HNMR (300 MHz, CDC1₃) δ 6.47 (s, IH), 6.10 (d,7= 6.5 Hz, IH), 6.0 (d, J= 1.5 Hz, IH),

5.91 (d, J= 1.5 Hz, IH), 5.86 (bs, IH), 5.31 (d,7= 6.9 Hz, IH), 4.11-4.06 (m. 3H), 3.85-3.81 (m, IH), 3.75 (s, 3H), 3.59-3.53 (m, 2H), 3.38 (d,7= 7.5 Hz, IH), 3.27-3.22 (m, IH), 3.0 (dd, 7/= 7.8 Hz, 7/= 17.4 Hz, 1H),2.79 (d,7= 15.3 Hz, IH), 2.63 (d,7= 17.7 Hz, IH), 2.31 (s, 3H), 2.0 (s, 3H), 1.80 (dd,7_;= 12.0 Hz, 7/= 15.9 Hz, IH), 1.58 (q,7= 7.2 Hz, 2H), 0.89 (t,7=

7.2 Hz, 3H), 0.76 (d, 7= 6.6 Hz, 3H).

ESI-MS m/z: Изчислено за C35H43N5O8·. 661.64. Намерено (M+H)⁺: 662.3.

ПРИМЕР 57

Към разтвор на 43 (19 mg, 0.0364 mmol) в метиленхлорид (0.3 ml) при 0°С се прибавят синамоилхлорид (6.06 mg, 0.0364 mmol) и пиридин (2.95 ml, 0.0364 mmol). Реакционната смес се разбърква в продължение на 1 час, след което разтворът се разрежда с метиленхлорид (10 ml) и се промива с 0.1N солна киселина (5 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, етилацетатметанол 20:1) до получаване на 63 (20.1 mg, 85%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.65 (етилацетат:метанол 5:1).

'Н NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7.39-7.29 (m, 5Н), 6.42, (s, 1Н), 6.01 (d, 7= 1.5 Hz, 1H),

5.92 (d, 7= 1.5 Hz, 1H), 5.73 (bs, 1H), 5.24 (t, 7= 6.8 Hz, 1H), 4.12-4.08 (m, 3H), 3.66-3.64 (m, 2H), 3.58 (bs, 3H), 3.36 (d, 7= 8.7 Hz, 1H), 3.29 (d, 7= 12.0 Hz, 1H), 2.98 (dd, 7/= 8.1 Hz, 7/= 18 Hz, lH),2.33(s, 6H), 2.29 (s, 3H), 2.01 (s, 3H), 1.84 (dd,7/= 12.0 Hz,J₂= 15.9 Hz, 1H). ).

ESI-MS m/z: Изчислено за C37H38N4O7:650.72. Намерено (M+H)⁺: 651.2.

ПРИМЕР 58

3-chloropropionyl chloride

Py.CH₂CI₂,1h, 0°С

159

Към разтвор на 43 (20 mg, 0.0338 mmol) в метиленхлорид (0.3 ml) при

0°С се прибавят 3-хлорпропионилхлорид (3.22 ml, 0.0338 mmol) и пиридин (2.73 ml, 0.0338 mmol). Реакционната смес се разбърква в продължение на 1 час, след което разтворът се разрежда с метиленхлорид (10 ml) и се промива с 0.1N солна киселина (5 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, етилацетат:метанол 20:1) до получаване на 64 (20.5 mg, 89%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.32 (еталацетат:хексан 5:1).

'HNMR (300 MHz, CDCI₃) 6.48 (s, ЗН), 6.28 (m, 1Н), 5.99 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 5.91 (d, J=

1.2 Hz, 1H), 5.86 (bs, 1H), 5.31 (m, Ш), 4.08-4.07 (m, 3H), 3.75 (s, 3H), 3.72-3.53 (m, 5H), 3.39 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 3.24 (d, J= 12.0 Hz, 1H), 3.00 (dd, J/= 8.1 Hz, J₂= 18.0 Hz, 1H),

2.79 (d, 13.5 Hz, 1H), 2.50 (t, J= 6.3 Hz, 2H), 2.32 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 2.0 (s, 3H), 1.79 (dd, Ji= 12.3 Hz, J₂= 14.8 Hz, 1H), 0.81 (d, J= 6.3 Hz, 3H).

Към разтвор на 43 (19 mg, 0.0364 mmol) в метиленхлорид (0.3 ml) при 0°C се прибавят бутирилхлорид (3.78 ml, 0.0364 mmol) и пиридин (2.95 ml, 0.0364 mmol). Реакционната смес се разбърква в продължение на 1 час, след което разтворът се разрежда с метиленхлорид (10 ml) и се промива с 0.1N солна киселина (5 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът

160 се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, етилацетатметанол 20:1) до получаване на 64 (19 mg, 87%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.60 (етилацетатметанол 5:1).

’Н NMR (300 MHz, CDCI3) 6.50 (s, IH), 5.98 (d, J= 1.5 Hz, IH), 5.91 (d. 7= 1.5 Hz, IH),

5.75 (s,lH), 5.01 (t, 7=6.4 Hz, IH), 4.10 -4.09 (m, IH), 4.06 (d, 7= 2.1 Hz, IH). 4.03-4.02 (m, IH), 3.76 (s, 3H), 3.67-3.60 (m, IH), 3.42-3.35 (m, 2H), 3.29 (d,7= 12.0 Hz. IH), 3.02 (dd,7/= 7.8 Hz, 7,= 17.7 Hz, IH), 2.79 (d,7= 14.1 Hz, IH), 2.56 (d,7= 18.3 Hz. IH). 2.32 (s, 3H), 2.31 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 1.78 (dd,7/= 12.0 Hz,7,= 15.9 Hz, IH), 1.63 (s. 3H),

1.53-1.46 (m, 2H), 1.28-1.16 (m, 2H), 0.68 (t,7= 7.2 Hz, 3H).

ESI-MS m/z: Изчислено за C32H38N4O7: 590.67. Намерено (M+H)⁺: 591.2.

ПРИМЕР 60

се прибавя сребърен нитрат (225 mg, 1.32 mmol) и реакционната смес се разбърква при 23°С в продължение на 17 часа. При 0°С се прибавят разсол (10 ml) и наситен воден разтвор на натриев бикарбонат (10 ml) и сместа се разбърква в продължение на 15 минути, филтрува се през слой от селит и се промива с метиленхлорид (20 ml). Разтворът се декантира и органичният слой се суши и концентрира под вакуум. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, етилацетатметанол 5:1) до получаване на 66 (16 mg, 51%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.26 (етилацетатметанол 5:1).

161 'Η NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 7.66-7.42 (m, 4H), 7.20 (bs. 1H), 6.44 (s. 1H). 5.97 (b.7= 1.2 Hz, 1H), 5.90 (d, J= 1.2 HZ, 1H), 5.76 (bs, 1H), 5.28 (bs, 1H), 4.54 (bs, 1H), 4.43 (bs. 1H). 4.00 (bs, 1H), 3.68-3.57 (m, 4H), 3.47 (d,7=3.3 Hz, 1H),3.4O (d,7=11.7 Hz. 1H). 3.17 (d.

7= 6.9 Hz, 1H), 2.92 (dd,7/= 8.1 Hz,7^= 17.7 Hz, 1H), 2.74 (d,7= 17.1 Hz. 1H). 2.48 (d, 7=

18.6 Hz, 1H), 2.32 (s, 6H), 2.28 (s, 3H), 1.99 (s, 3H), 1.76 (dd,7/= 12.0 Hz. J2= 16.2 Hz, 1H).

ESI-MS m/z: Изчислено за C37H38F3N3O8: 709. Намерено (M⁺-17): 692.3.

ПРИМЕР 61

Ме 0

Към разтвор на 53 (57 mg, 0.0828 mmol) в СН₃СЬ1/вода (1.5 ml/0.5 ml) се прибавя сребърен нитрат (650 mg, 3.81 mmol) и реакционната смес се разбърква при 23°С в продължение на 24 часа. След това при 0°С се прибавят разсол (10 ml) и наситен воден разтвор на натриев бикарбонат (10 ml) и сместа се разбърква в продължение на 15 минути, филтрува се през слой от селит и се промива с метиленхлорид (20 ml). Разтворът се декантира и органичният слой се суши и концентрира под вакуум. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, етилацетат:метанол 5:1) до получаване на 67 (28 mg, 50%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.28 (етилацетат:метанол 10:1).

162 ’H NMR (300 MHz, CDC1₃) d ..................

6.47 (s, 1H), 5.97 (s, 1H), 5.88 (s, 1H), 5.35 (bs, 1H), 4.51 (bs, 1H), 4.41 (bs, 1H), 4.12-4.05 (m, 1H), 4.00 (d, J= 2.7 Hz, 1H), 3.77 (s, 3H), 3.64 (bs, 1H), 3.46 (d, 7= 3.3 Hz, 1H), 3.34 (d, J= 11.4 Hz, 1H), 3.18 (d, J= 7.5 Hz, 1H), 2.95 (dd, 7/= 8.4 Hz, 7/= 18.3 Hz, 1H), 2.70 (d. J= 15.6 Hz, 1H), 2.48 (d, 7= 17.7 Hz, 1H), 2.28 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 2.26 (s. 3H). 1.98 (s, 3H), 1.68 (dd, 7/= 12 Hz, J₂= 15.6 Hz, 1H), 0.86 (d, 7= 6.3 Hz, 3H).

ESI-MS m/z: Изчислено за C32H37F3N4O9:678.66. Намерено (M⁺-17): 661.2.

ПРИМЕР 62

ОМе

Към разтвор на 48 (32 mg, 0.0529 mmol) в СН₃С14/вода (1.5 ml/0.5 ml) се прибавя сребърен нитрат (270 mg, 1.58 mmol) и реакционната смес се разбърква при 23°С в продължение на 24 часа. След това при 0°С се прибавят разсол (10 ml) и наситен воден разтвор на натриев бикарбонат (10 ml) и сместа се разбърква в продължение на 15 минути, филтрува се през слой от селит и се промива с метиленхлорид (20 ml). Разтворът се декантира и органичният слой се суши и концентрира под вакуум. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, етилацетатметанол 5:1) до получаване на 68 (18 mg, 56%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.40 (етилацетат:метанол 5.1).

163

*H NMR (300 MHz, CDC1₃) d 6.50 (s, 1H), 5.95 (d,7= 1.2 Hz, 1H), 5.88 (d,7= 1.2 Hz, 1H),

5.23 (d, 7= 6.9 Hz, 1H), 4.45 (d, 7= 3.3 Hz, 1H), 4.38 (s, 1H), 4.01 (d, 7= 2.4 Hz, 1H), 3.78 (m, 1H), 3.77 (s, 3H), 3.41-3.37 (m, 1H), 3.17-3.15 (m, 1H), 2.96 (dd,7_;= 7.8 Hz, 7,= 18.0 Hz, 1H), 2.70 (d, 7= 15.3 Hz, 1H), 2.40 (d, 7= 18.0 Hz, 1H), 2.30 (s, 6H), 2.27 (s, 3H), 1.76-

1.65 (m, 1H), 1.35-1.25 (m, 2H), 0.89-0.82 (m, 1H), 0.69 (d,7= 6.6 Hz, 3H), 0.58 (d,7= 6.6 Hz, 3H)

Към разтвор на 51 (27 mg, 0.04 mmol) в СН₃СИ/вода (1.5 ml/0.5 ml) се прибавя сребърен нитрат (204 mg, 1.19 mmol) и реакционната смес се разбърква при 23°С в продължение на 24 часа. След това при 0°С се прибавят разсол (10 ml) и наситен воден разтвор на натриев бикарбонат (10 ml) и сместа се разбърква в продължение на 15 минути, филтрува се през слой от селит и се промива с метиленхлорид (20 ml). Разтворът се декантира и органичният слой се суши и концентрира под вакуум. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, етилацетат:метанол 5:1) до получаване на 69 (10 mg, 38%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.38 (етилацетат:метанол 5:1).

'HNMR (300 MHz, CDCh) d 6.48 s, 1H), 6.16 (bs, 1H), 5.98 (d,7= 1.5 Hz, 1H), 5.89 (d,7=

1.5 Hz, 1H), 5.33 (t,7= 6.0 Hz, 1H), 4.50 (m, 1H), 4.40 (m, 1H), 4.11-4.09 (m, 1H), 4.00 (d, 7= 2.6Hz, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.41-3.32 (m, 3H), 3.18 (d, 7= 8.4 Hz, 1H), 2.94 (dd, 7/= 8.4 Hz, J₂= 18.3 Hz, 1H), 2.70 (d, 7= 14.4 Hz, 1H), 4.45 (d, 7= 18.3 Hz, 1H), 2.31 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 2.04 (s, 3H), 2.00-1.86 (m, 3H), 1.73 (m, 1H), 0.87 (d,7= 6.3 Hz, 6H).

164 • · • · • · · · · ·· · • · · · · ···· · ··· · · · · * ···· ·· ··· ··· ·· ····

Към разтвор на 63 (15 mg, 0.023 mmol) в CHsCN/вода (1.5 ml/0.5 ml) се прибавя сребърен нитрат (118 mg, 0.691 mmol) и реакционната смес се разбърква при 23°С в продължение на 24 часа. След това при 0°С се прибавят разсол (10 ml) и наситен воден разтвор на натриев бикарбонат (10 ml) и сместа се разбърква в продължение на 15 минути, филтрува се през слой от селит и се промива с метиленхлорид (20 ml). Разтворът се декантира и органичният слой се суши и концентрира под вакуум. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, етилацетатметанол 5:1) до получаване на 70 (20.1 mg, 85%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.43 (етилацетатметанол 5:1).

’HNMR(300 MHz, CDC1₃) d 7.38-7.28 (m, 5H), 6.48 (s, 1H), 5.98 (d,/=1.5 Hz, 1H), 5.91 (d,/=1.5 Hz, 1H), 5.75 (bs, 1H), 5.38 (brd, 1H), 5.30 (bs, 1H),4.53 (m, 1H),4.42 (m, 1H), 4.02 (d, /=2.7 Hz, 1H), 3.78-3.65 (m, 5H), 3.46-3.40 (m, 2H), 3.17 (d, /=7.8 Hz, 1Ή), 2.94 (dd,//=7.8 Hz,/2=17.7 Hz, 1H), 2.73 (d,/=16.8 Hz, 1H), 2.45 (d,/=18.0 Hz, 1H), 2.31 (s, 6H), 2.28 (s,3H), 1.97 (s, 3H), 1.77 (dd,//=12.0 Hz,/₂=15.3 Hz, 1H).

ПРИМЕР 65

165

1ЧП j” ⁷¹

Към разтвор на 65 (25 mg, 0.042 mmol) в СНзСИ/вода (1.5 ml/0.5 ml) се прибавя сребърен нитрат (215.56 mg, 1.269 mmol) и реакционната смес се разбърква при 23°С в продължение на 24 часа. След това при 0°С се прибавят разсол (10 ml) и наситен воден разтвор на натриев бикарбонат (10 ml) и сместа се разбърква в продължение на 15 минути, филтрува се през слой от селит и се промива с метиленхлорид (20 ml). Разтворът се декантира и органичният слой се суши и концентрира под вакуум. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, етилацетагметанол 5:2) до получаване на 71 (16 mg, 65%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.05 (етилацетагметанол 5:2).

’Н NMR (300 MHz, CDC1₃) d 6.50 (s, IH), 5.95 (d, 7=1.5 Hz, IH), 5.78 (s, IH), 5.19 (bs, IH), 4.45 (d, 7=3.3 Hz, IH), 4.37 (bs, IH), 4.11 (brd,7=4.8 Hz, IH), 4.01 (d,7=2.1 Hz, IH),

3.76 (s, IH), 3.71-3.69 (m, IH), 3.49-3.35 (m, 1H),3.24 (d,7=13.5 Hz, IH), 3.15 (d, 7=9.3 Hz, IH), 2.95 (dd,7/=8.1 Hz,7,=17.7 Hz, IH), 2.70 (d,7=15.6 Hz, IH), 2.40 (d,7=18.0 Hz, IH), 2.31 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 2.26 (s, 3H), 1.96 (s. 3H), 1.75-1.66 (m, IH), 1.52-1.17 (m, 2H), 0.66 (t, 7=7.2 Hz, 3H).

166

ПРИМЕР 66

Към разтвор на 45 (35 mg, 0.0672 mmol) в метиленхлорид (0.3 ml) при

0°С се прибавят хидросинамоилхлорид (11.58 μΙ, 0.0672 mmol) и пиридин (5.43 μΙ, 0.0672 mmol). Реакционната смес се разбърква в продължение на 1.5 часа, след което разтворът се разрежда с метиленхлорид (10 ml) и се промива с 0.1N солна киселина (5 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, градиент от хексан :етилацетат 2:1 до етилацетат) до получаване на 72 (30 mg, 68%) като бяло твърдо вещество. Rf.

0.51 (етилацетат:метанол 10:1).

'Н NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 7.23-7.12 (m, ЗН), 7.05-7.00 (m, 2Н). 5.97 (d. J= 1.2 Hz.

1H), 5.91 (d,7= 1.2 Hz, 1H), 5.73 (s, 1H), 5.04 (brt, 1H), 4.08 (d,7= 2.4 Hz. 1H). 4.02 (bs.

1H), 4.00 (d, 7= 2.4 Hz, 1H), 3.58 (dd, 7/= 4.5 Hz, 7₂= 13.8 Hz, 1H), 3.47 (bs. 3H). 3.33 (d. 7= 7.5 Hz, 1H), 3.29 (dt, 7/= 2.7 Hz, 7₂= 11.7 Hz, 1H), 3.00 (dd, 7/= 7.8 Hz. 7₂= 18.3 Hz.

1H), 2,79 (d, 7= 14.1 Hz, 1H), 2.58-2.50 (m, 3H), 2.32 (s, 3H), 2.29 (s. 3H), 2.03 (s, 3H),

2.01 (s, 3H), 1.94-1.76 (m, 4H).

ESI-MS m/z: Изчислено за C37H40N4O7: 652.7. Намерено (M+Na)⁺: 675.3.

ПРИМЕР 67

167

Към разтвор на 45 (45 mg, 0.0576 mmol) в метиленхлорид (0.3 ml) при 0^QC се прибавят фенилацетилхлорид (7.61 μΙ, 0.0576 mmol) и пиридин (4.6 μΙ, 0.0576 mmol). Реакционната смес се разбърква в продължение на 1 час, след което разтворът се разрежда с метиленхлорид (10 ml) и се промива с 0.1N солна киселина (5 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, градиент от хексан :етилацетат 3:1 до хексан:етилацетат 1:1) до получаване на 73 (25.8 mg, 70%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.5 (хексан: етмлацетат:метанол 5:10:2).

'HNMR(300 MHz, CDC1₃) δ 7.18-7.17 (m, ЗН), 6.85 (bs, 2H), 6.54 (s, Ш), 5.89 (d, J= 1.5Hz, IH), 5.83 (d, J= 1.5 Hz, IH), 5.76 (s, IH), 5.08 (bs, Ш), 4.12 (d, J= 2.1 Hz, IH), 4.09 (d, J= 2.1 Hz, IH), 3.98 (bs, IH), 3.73 (s, 3H), 3.51-3.46 (m, 2H), 3.35 (d, J= 8.4 Hz, IH), 3.25 (dt, Jr 2.7 Hz, Jr= 12.0 Hz, 1H), 3.03 (d, J= 8.7 Hz, IH), 3.02-2.94 (m, 2H), 2.75 (d, J= 16.8 Hz, IH), 2.63 (d, J= 18.0 Hz, IH), 2.35 (s, 3H), 2.30 (s, 3H), 2.22 (s. 3H9, 1.98 (s, 3H), 1.80 (dd, J/= 12.0 Hz, J₂= 16.2 Hz, IH).

ESI-MS m/z: Изчислено за C36H38N4O7:638.7. Намерено (М + 1)⁺: 639.2.

168 ·»·· · · ·9 9 · · < ·· ······ «»· « ♦ ♦ ·· ·«·· · · * · ·* · 9 fr ® · ·*

9999 99 ··· ··· ·· ·«··

Към разтвор на 45 (30 mg, 0.0576 mmol) в метиленхлорид (0.3 ml) при 0°С се прибавят пропионилхлорид (5 μΙ, 0.0576 mmol) и пиридин (4.6 μΙ, 0.0576 mmol). Реакционната смес се разбърква в продължение на 1 час, след което разтворът се разрежда с метиленхлорид (10 ml) и се промива с 0.1N солна киселина (5 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, градиент от хексан :етилацетат 5:1 до хексан :етилацетат 1:1 до етилацетат) до получаване на 74 (23 mg, 70%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.59 (хексан: етилацетат:метанол 5:10:2).

^!HNMR (300 MHz, CDC1₃) δ 6.50 (s,lH), 5.97 (d,7= 1.2 Hz, 1H), 5.91 (d, 7= 1.2 Hz, 1H),

5.76 (s, 1H), 5.00 (t, 1H), 4.09 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 4.04 (bs, 2H), 3.74 (s, 3H), 3.62 (dd, Jj=

6.6 Hz, 7/= 13.2 Hz, 1H), 3.43 (bs, 1H), 3.37 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 3.29 (d, J= 12.0 Hz, 1H), 3.02 (dd, Jr 8.1 Hz,7/= 18.3 Hz, 1H), 2.80 (d,7= 14.4 Hz, 1H), 2.55 (d,7= 18.0 Hz, 1H), 2.31 (s, 3H), 2.24 (s, 3H), 2.00 (s, 3H), 1.78 (dd,7/= 12.0Hz,7r= 15.6 Hz, 1H), 1.64-1.50 (m, 2H), 0.70 (t, 7= 7.8 Hz, 3H).

ESI-MS m/z: Изчислено за ^ΗβεΙ^Ο?: 576.6. Намерено (М + 1)⁺: 577.2.

ПРИМЕР 69

Към разтвор на 45 (15 mg, 0.0288 mmol) в метиленхлорид (0.25 ml) при

0°С се прибавят миристоилхлорид (7.83 μΙ, 0.0288 mmol) и пиридин (2.3 μΙ,

169

·· • · •	• « • ·	• • · •	4 ·· •	• • · • ·	·· • 4 •
• ····	• · ··	• ··♦	• ♦ ··	• · ··	• ····

0.0288 mmol). Реакционната смес се разбърква в продължение на 1 час, след което разтворът се разрежда с метиленхлорид (10 ml) и се промива с 0.1N солна киселина (5 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, градиент от хексан.етилацетат 6:1 до хексан:етилацетат 1:1) до получаване на 75 (15 mg, 71%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.65 (хексан: етилацетаг.метанол 10:10:1).

’HNMR(300 MHz, CDC1₃) δ 6.49 (s, Ш), 5.97 (d, J= 1.2 Hz, IH), 5.91 (d,7= 1.2 Hz, IH),

5.72 (s, 1H),4.99 (t, 1H),4.O9 (d, J= 1.5 Hz, 1H),4.O5 (d, J= 1.5 Hz, IH), 4.02 (bs, IH),

3.76 (s,3H), 3.61-3.59 (m,lH), 3.39 (bs, 1H),3.35 (d, 7= 7.8 Hz, 1H),3.29 (d,7= 12.3 Hz, IH), 3.04 (dd,7/= 8.1 Hz,7₂= 18.3 Hz, 1H),2.78 (d,7= 15.6 Hz, 1H),2.55 (d,7= 18.3 Hz, IH), 2.32 (s, 6H), 2.25 (s, 3H), 1.99 (s, 3H), 1.78 (dd, Jj= 12.3 Hz, J₂= 15.0 Hz, IH), 1.25-

1.24 (m, 12H), 0.87 (d, 7= 6.0 Hz, 3H).

ESI-MS m/z: Изчислено за C42H58N4O7:730.9. Намерено (M+1)⁺: 731.4.

ПРИМЕР 70
				OMe
	ОМе			ΗΟ^ζΧ,Μβ
	XT		OAc	XJ
ОАс		Me^zk.
Me^^k^z	N —- Μα	stearoyl chloride, py	_ XI
XX		CH₂CI₂, 0°C, 1h	U	\ CN
0 Т 0	\ CN nh₂			NH cXcH₂)₁₆I
	45			76

0°С се прибавят стеароилхлорид (9.7 μΙ, 0.0288 mmol) и пиридин (2.3 μΙ, 0.0288 mmol). Реакционната смес се разбърква в продължение на 1 час, след което разтворът се разрежда с метиленхлорид (10 ml) и се промива с 0.1N солна • · · • · · • · • · · · • · · • · · · · киселина (5 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се

170 и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, градиент от хексан:етилацетат 3:1 до хексан:етилацетат 1:1) до получаване на 76 (16 mg, 70%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.46 (хексан:етилацетат: метанол 10:10:1).

’НNMRNMR (300 MHz, CDCI₃) δ 6.49 (s, IH), 5.98 (d, J= 1.5 Hz, IH), 5.91 (d, J= 1.5 Hz, IH), 5.73 (s, IH), 4.99 (t, J= 5.7 Hz, IH), 4.09 (d, J= 1.8 Hz, IH), 4.05 (d, J= 2.4 Hz, IH), 4.01 (bs, IH), 3.76 (s, 3H), 3.61-3.59 (m, IH), 3.38 (bs, IH), 3.36 (d, J= 7.2 Hz, IH),

3.28 (d, J= 12.0 Hz, IH), 3.03 (dd, J/= 7.8 Hz, J₂= 18.3 Hz, IH), 2.78 (d, J= 15.9 Hz, IH),

2.57 (d, J= 18.3 Hz, IH), 2.32 (s, 3H), 2.31 (s, 3H), 2.24 (s, 3H), 1.99 (s, 3H), 1.77 (dd, J/=

11.7 Hz, J₂= 15.6 Hz, IH), 1.25-1.24 (m, 16H), 0.87 (d, J= 6.3 Hz, 3H).

ESI-MS m/z: Изчислено за С^Нк^От: 786.4. Намерено (М+22)⁺: 809.5.

ПРИМЕР 71

Към разтвор на 45 (31 mg, 0.0595 mmol) в метиленхлорид (0.3 ml) при 0°С се прибавят хексаноилхлорид (8.32 μΙ, 0.0595 mmol) и пиридин (4.8 μΙ, 0.0595 mmol). Реакционната смес се разбърква в продължение на 1.5 часа, след което разтворът се разрежда с метиленхлорид (10 ml) и се промива с 0.1N солна киселина (5 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев

171 • · • · · . . ; **** ·· ··· ,,, ,, двуокис, градиент отхексан.етилацетат 3:2 до етилацетат) до получаване на (26 mg, 70%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.65 (етилацетат:метанол

10:1).

’HNMR(300 MHz, CDC1₃) δ 6.50 (s, 1Н), 5.98 (d,7= 1.5 Hz, 1H), 5.91 (d,7= 1.5 Hz, 1H),

5.74 (s, 1H), 5.00 (t, 7= 5.4 Hz, 1H), 4.09 (d,7= 2.7 Hz, 1H), 4.05 (d, 7= 2.4 Hz, 1H), 4.01 (bs, 1H), 3.76 (s, 3H), 3.61-3.58 (m, 1H), 3.02 (dd,7/= 8.1 Hz, 7,= 18.3 Hz, 1H), 2.78 (d,7=

14.4 Hz, 1H), 2.56 (d, 7= 18.3 Hz, 1H), 2.31 (s, 6H), 2.25 (s, 3H), 2.00 (s, 3H), 1.78 (dd,7/= 12.0 Hz, 7/= 15.9 Hz, 1H), 1.53-1.40 (m, 2H), 1.29-1.12 (m, 4H), 1.07-0.97 (m, 2H), 0.81 (t, 7= 7.5 Hz, 3H).

ESI-MS m/z: Изчислено за C34H42N4O7: 618.7. Намерено (M + 1)⁺: 619.3.

78

Към разтвор на 45 (20 mg, 0.0384 mmol) в метиленхлорид (0.3 ml) при 0°С се прибавят транс-кротонилхлорид (3.68 μΙ, 0.0384 mmol) и пиридин (3.1 μΙ, 0.0384 mmol). Реакционната смес се разбърква в продължение на 1 час, след което разтворът се разрежда с метиленхлорид (10 ml) и се промива с 0.1N солна киселина (5 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, градиент от хексан:етилацетат 4:1 до етилацетат) до получаване на 78 (16 mg, 71%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.55 (етилацетат:метанол 5:1).

172 ’Η NMR (300 MHz, CDCI3) δ 6.50-6.40 (m, IH). 6.46 (s, IH), 5.97 (d, J= 1.5 Hz, Ш), 5.91 (d,7= 1.5 Hz, IH), 5.77 (s, IH), 5.08 (bst, IH), 4.10 (d,7= 1.5 Hz, IH). 4.05 (m, 2H), 3.78 (s, 3H), 3.67 (bs, IH), 3.42-3.29 (m, 3H), 3.04 (dd,7/= 8.1 Hz,7,= 18.3 Hz, IH), 2.78 (d,7=

15.3 Hz, IH), 2.53 (d, 7= 18.3 Hz, IH), 2.32 (s, 3H), 2.26 (s, 3H), 1.98 (s, 3H), 1.79 (dd,7/= 12.0 Hz, J₂= 15.6 Hz, IH), 1.70 (dd, 7/= 1.2 Hz, 7,= 6.6 Hz, 3H).

ESI-MS m/z: Изчислено за C32H36N4O7: 588.6. Намерено (M+1)⁺: 589.3.

ПРИМЕР 73

Към разтвор на 45 (50 mg, 0.096 mmol) в метиленхлорид (0.5 ml) при

0°С се прибавят Cbz-L-Val-OH (24.12 mg, 0.096 mmol) и карбонилдиимидазол (18.7 mg, 0.115 mmol). Реакционната смес се разбърква в продължение на 16 часа при стайна температура, след което разтворът се разрежда с метиленхлорид (15 ml) и се промива с 0.1N солна киселина (10 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, хексан:етилацетат 4:1) до получаване на 79 (25 mg, 34%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.7 (етилацетатметанол 5:1).

'Н NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7.33-7.28 (m, 5Н), 6.45 (s, IH), 5.96 (s, IH), 5.90 (bs, IH),

5.82 (s, IH), 5.53 (bs, IH), 5.09 (bs, IH), 5.05 (d,7= 3.3 Hz, 2H), 4.16 (bs, IH), 4.09 (d,7=

2.4 Hz, IH), 4.02 (bs, IH), 3.75 (s, 3H), 3.74 (m, IH), 3.37-3.35 (m, 2H), 3.26-3.21 (m, 3H), 3.00 (dd,7/= 8.1 Hz, Jr 18.3 Hz, IH), 2.77 (d,7= 15.6 Hz, IH), 2.55 (d,7= 18.0 Hz, IH),

2.30 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 1.98 (s, 3H), 1.70-1.66 (m, IH), 0.65 (d,7= 6.6 Hz, 3H).

173

ESI-MS m/z: Изчислено за C^H^N^: 753.8. Намерено (M + 1)⁺: 754.2.

ПРИМЕР 74

Към разтвор на 72 (18 mg, 0.0275 mmol) в СН₃СМ/вода (1.5 ml/0.5 ml) се прибавя сребърен нитрат (140.5 mg, 0.827 mmol) и реакционната смес се разбърква при 23°С в продължение на 24 часа. При 0°С се прибавят разсол (10 ml) и наситен воден разтвор на натриев бикарбонат (10 ml) и сместа се разбърква в продължение на 15 минути, филтрува се през слой от селит и се промива с метиленхлорид (20 ml). Разтворът се екстрахира и органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и се концентрира под вакуум. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, етилацетат:метанол 10:1) до получаване на 80 (13 mg, 74%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.37 (етилацетат:метанол 5:1).

‘HNMR (300 MHz, CDC1₃) δ 7.23-7.11 (m, ЗН), 7.06-7.01 (m, 2Н), 6.43 (s, 1Н), 5.95 (d,7=

1.2 Hz, 1H), 5.88 (d, 7=1.2 Hz, 1H), 5.71 (bs, lH),5.19(bs, 1H),4.45 (d,7= 3.0 Hz, 1H), 4.37 (bs, 1H), 4.02-3.96 (m, 1H), 3.75-3.68 (m, 2H), 3.48 (s, 3H), 3.41-3.36 (m, 2H), 3.28-

3.24 (m, 1H), 3.15 (d,7=7.5 Hz, 1H), 3.01-2.88 (m, 2H), 2.70 (d,7= 15.9 Hz, 1H), 2.57-2.51 (m, 2H), 2.31 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 2.00 (s, 6H), 1.77-1.68 (m, 1H).

174

ESI-MS m/z: Изчислено за C36H41N3O8:643.3. Намерено (М-17)⁺: 626.2.

ПРИМЕР 75

Към разтвор на 73 (23 mg, 0.036 mmol) в СНзСИ/вода (1.5 ml/1 ml) се прибавя сребърен нитрат (183 mg, 1.08 mmol) и реакционната смес се разбърква при 23°С в продължение на 24 часа. При 0°С се прибавят разсол (10 ml) и наситен воден разтвор на натриев бикарбонат (10 ml) и сместа се разбърква в продължение на 15 минути, филтрува се през слой от селит и се промива с метиленхлорид (20 ml). Разтворът се екстрахира и органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и се концентрира под вакуум. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, градиент от етилацетат.метанол 5:1 до метанол) до получаване на 81 (9.3 mg, 41%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.3 (етилацетат.метанол 5:1).

'HNMR (300 MHz, CDCI3) δ 7.17-7.13 (m, ЗН), 6.85 (m, 2Н), 6.54 (s, 1Н), 5.90 (d, J= 1.5 Hz, 1H), 5.84 (d, J= 1.5 Hz, 1H), 5.22 (m, 1H), 4.43 (bs, 1H), 4.39 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 4.00 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.64-3.29 (m, 2H), 3.16 (d, J= 8.7 Hz, 1H). 2.98-2.88 (m, 3H), 2.67 (d, J= 14.8 Hz, 1H), 2.45 (d, J= 18.3 Hz, 1H), 2.33 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 2.22 (s, 3H), 1.97 (s, 3H), 1.68 (dd, J₇= 12.8 Hz, Jy= 14.7 Hz, 1H).

ESI-MS m/z: Изчислено за C35H39N3O8:629.7. Намерено (M⁺-OH): 612.3.

175 • ·

ПРИМЕР 76

	ОМе		OMe
	НО^-k -Ме		Me
OAc	Т Т	OAc I
		Me.
	'У N~rMe	AgN°3	if Υ
0 1 \-о	\ CN	CH₃CN/H_ZO %_Q	\ OH
	NH	rt. 24 h	NH
С

Към разтвор на 74 (20 mg, 0.0346 mmol) в СНзСИ/вода (1.5 ml/1 ml) се прибавя сребърен нитрат (176.6 mg, 1.04 mmol) и реакционната смес се разбърква при 23°С в продължение на 24 часа. При 0°С се прибавят разсол (10 ml) и наситен воден разтвор на натриев бикарбонат (10 ml) и сместа се разбърква в продължение на 15 минути, филтрува се през слой от селит и се промива с метиленхлорид (20 ml). Разтворът се екстрахира и органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и се концентрира под вакуум. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, етилацетат:метанол 1:1) до получаване на 82 (12.9 mg, 66%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.3 (етилацетагметанол 5:1).

*HNMR (300 MHz, CDC1₃) δ 6.50 (s, 1Н), 5.95 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 5.89 (d, J= 1.2 Hz, 1H),

5.19 (d, 1H), 4.46 (d,/= 3.0 Hz, 1H), 4.38 (d,/= 1.8 Hz, 1H), 4.00 (d, J= 2.1 Hz, 1H), 3.74 (s, 3H), 3.70-3.66 (m, 1H), 3.38 (dt,//= 2.7 Hz, J,= 13.2 Hz, 1H), 3.25 (d, J= 13.8 Hz, 1H),

3.16 (d, /= 7.5 Hz, 1H), 2.96 (dd, //= 7.2 Hz, /₂= 17.7 Hz, 1H), 2.71 (d, J= 15.6 Hz, 1H),

2.40 (d, J= 18.0 Hz, 1H), 2.30 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 2.24 (s, 3H), 1.97 (s, 3H), 1.71 (dd,//=

11.7 Hz,//= 15.3 Hz, 1H), 1.60-1.48 (m, 2H), 0.67 (t,/=7.5 Hz, 3H).

ESI-MS m/z: Изчислено за СзоНзт1ЧзО_в: 567.6. Намерено (М-17)⁺: 550.2.

176

ПРИМЕР 77

AgNO₃

CH₃CN/H₂O rt. 24 h

·

Към разтвор на 77 (14 mg, 0.0226 mmol) в СН₃СМ/вода (1.5 ml/1 ml) се прибавя сребърен нитрат (115.3 mg, 0.68 mmol) и реакционната смес се разбърква при 23°С в продължение на 24 часа. При 0°С се прибавят разсол (10 ml) и наситен воден разтвор на натриев бикарбонат (10 ml) и сместа се разбърква в продължение на 15 минути, филтрува се през слой от селит и се промива с метиленхлорид (20 ml). Разтворът се екстрахира и органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и се концентрира под вакуум. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, етилацетагметанол 5:1) до получаване на 83 (9 mg, 65%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.25 (етилацетагметанол 5:1).

*Н NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 6.50 (s, 1Н), 5.96 (d, J= 1.5 Hz, 1H), 5.89 (d,/= 1.5 Hz, 1H),

5.73 (bs, 1H), 4.44 (d,/= 3.6 Hz, 1H), 4.37 (s, 1H), 4.01 (d,/= 2.4 Hz, 1H), 3.77 (s, 3H), 3.73-3.64 (m, 1H), 3.39 (dt,//= 3.0 Hz, J .= 9.3 Hz, 1H), 3.22 (d,/= 14.5 Hz, 1H), 3.16 (d, /= 7.5 Hz, 1H), 2.95 (dd,//= 8.1 Hz,//= 17.4 Hz, 1H),2.7O (d,/= 14.5 Hz, 1H), 2.41 (d,/=

18.3 Hz, 1H), 2.30 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 1.96 (s, 3H), 1.71 (dd,//= 12.0 Hz,/2=

15.6 Hz, 1H), 1.48-1.46 (m, 2H); 1.24-1.10 (m, 4H), 1.00-0.95 (m, 2H), 0.80 (t,/= 7.2 Hz, 3H).

ESI-MS m/z: Изчислено за C33H43N3O8:609.7. Намерено (M-17)⁺ . 592.3.

ПРИМЕР 78 νπ

84

Към разтвор на 78 (15 mg, 0.025 mmol) в СНзСИ/вода (1.5 ml/1 ml) се прибавя сребърен нитрат (130 mg, 0.764 mmol) и реакционната смес се разбърква при 23°С в продължение на 24 часа. При 0°С се прибавят разсол (10 ml) и наситен воден разтвор на натриев бикарбонат (10 ml) и сместа се разбърква в продължение на 15 минути, филтрува се през слой от селит и се промива с метиленхлорид (20 ml). Разтворът се екстрахира и органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и се концентрира под вакуум. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, градиент от етилацетат до етилацетат-метанол 1.Ί) до получаване на 84 (10 mg, 71%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.19 (етилацетат:метанол 5:1).

‘НNMR(300 MHz, CDC1₃) 5 6.49 (s, IH), 6.47-6.37 (m, IH), 5.94 (d, J= 1.5 Hz, IH), 5.88 (d, J= 1.5 Hz, IH), 5.77 (bs, IH), 5.26 (d, J= 5.7 Hz, IH), 4.93 (d, 7= 14.7 Hz, 1H), 4.48 (d, 7= 11.1 Hz, IH), 4.38 (d, 7= 2.7 Hz, 1H),4.O2 ((d, 7= 2.1 Hz, IH), 3.79 (s, 3H). 3.76-3.72 (m, IH), 3.42 (dt, 7/= 2.7 Hz, 7₂= 12.0 Hz, IH), 3.28 (d, 7= 13.2 Hz, IH), 3.15 (d, 7= 6.6 Hz, IH), 2.96 (dd,7/= 8.7 Hz,7₂= 18.0 Hz, IH), 2.70 (d,7= 15.0 Hz, IH), 2.38 (d, 7= 18.0 Hz, IH), 2.30 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 1.95 (s, 3H), 1.72 (dd, 7/= 12.3 Hz, 7?= 17.4 Hz, IH), 1.98 (dd, 7/= 1.5 Hz, J₂= 6.9 Hz, 3H).

ESI-MS m/z: Изчислено за C31H37N3O8:579.6. Намерено (M-17)⁺: 562.3.

178

Към разтвор на 43 (25 mg, 0.422 mmol) в метиленхлорид (0.3 ml) при 0°С се прибавят хидросинамоилхлорид (6.27 μΙ, 0.422 mmol) и пиридин (3.41 μΙ, 0.422 mmol). Реакционната смес се разбърква в продължение на 1 час, след което разтворът се разрежда с метиленхлорид (10 ml) и се промива с 0.1N солна киселина (5 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, градиент от хексан:етилацетат4:1 до етилацетат) до получаване на 85 (30 mg, 68%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.54 (етилацетагметанол 10:1).

'HNMR (300 MHz, CDClj) δ 7.28-7.14 (m, 5Η), 6.45 (s, 1Н), 6.07 (brd, 1H), 5.99 (d, J=

1.2 Hz, 1H), 5.90 (d, J= 1.2 Hz, IH), 5.88 (s, 1H), 5.31 (brt, 1H), 4.09-4.06 (m, 3H), 3.80-

3.75 (m, 1H), 3.73 (s, 3H), 3.57-3.51 (m, 2H), 3.38 (d, J= 7.5 Hz, 1H), 3.24 (m, 1H), 3.00 (dd, 7/= 8.4 Hz, 7/= 18.0 Hz, 1H), 2.89-2.85 (m, 2H), 2.79 (d, 7= 16.5 Hz, 1H), 2.61 (d,7= 18.0 Hz, 1H), 2.31 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 2.22 (s, 3H), 2.00 (s, 3H), 1.79 (dd, 7/= 12.3 Hz, 7₂=

16.2 Hz, 1H), 0.72 (d, 7= 6.6 Hz, 3H).

ESI-MS m/z: Изчислено за C40H45N5O8:723.8. Намерено (M+23)⁺: 746.3.

179

Към разтвор на 43 (20 mg, 0.0338 mmol) в метиленхлорид (0.25 ml) при 0°С се прибавят хексаноилхлорид (4.72 μΙ, 0.0338 mmol) и пиридин (2.73 μΙ, 0.0338 mmol). Реакционната смес се разбърква в продължение на 1 час, след което разтворът се разрежда с метиленхлорид (10 ml) и се промива с 0.1N солна киселина (5 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, градиент от хексан:етилацетат 1:1 до етилацетат) до получаване на 86 (10 mg, 43%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.74 (етилацетагметанол 10:1).

’HNMR (300 MHz, CDCh) δ 6.47 (s, IH), 6.12(brd, IH), 6.00(d,7= 1.2 Hz, 1H),5.91 (d, 7= 1.2 Hz, IH), 5.30 (m, IH), 4.09-3.99 (m, 3H), 3.84-3.82 (m, IH), 3.75 (s, 3H), 3.57-3.55 (m, 2H), 3.39 (d, 7= 6.9 Hz, IH), 3.24 (d, 7= 12.0 Hz, IH), 3.04 (dd, 7/= 9.0 Hz, Jy= 18.3 Hz, IH), 2.77 (d, 7= 115.3Hz, IH), 2.63 (d,7= 18.0 Hz, IH), 2.32 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 2.00 (s, 3H), 1.80 (dd, 7/= 11.7 Hz, 7,= 15.6 Hz, IH), 1.55-1.50 (m, 2H), 1.30-1.22 (m, 6H), 0.87 (t, 7= 6.9 Hz, 3H), 0.75 (d, 7= 6.6 Hz, 3H).

ESI-MS m/z: Изчислено за C37H47N5O8.· 689.8. Намерено (M+1)⁺: 6Θ0.3.

180

ПРИМЕР 81

Към разтвор на 43 (33 mg, 0.0557 mmol) в метиленхлорид (0.4 ml) при 0°С се прибавят фенилацетилхлорид (7.36 μΙ, 0.0557 mmol) и пиридин (4.5 μΙ, 0.0557 mmol). Реакционната смес се разбърква в продължение на 1 час, след което разтворът се разрежда с метиленхлорид (10 ml) и се промива с 0.1N солна киселина (5 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, градиент хексан :етилацетат 2:1) до получаване на 87 (13 mg, 32%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.63 (хексан:етилацетат:метанол 5:10:2).

’Н NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7.37-7.20 (m, 5Н), 6.26 (s, 1Н), 6.14 (d, J= 6.6 Hz, 1H), 5.98 (d,/=1.2 Hz, 1H),5.83 (s, IH), 5.27 (t,/=6.2 Hz, 1H), 4.11 (d,/= 2.1 Hz, 1H), 4.07 (d,/= 3.0 Hz, 1H), 4.04 (s, IH), 3.86-3.81 (m, 1H), 3.70 (s, 3H), 3.54-3.53 (m, 2H), 3.44 (bs, 2H), 3.36 (d, /= 8.1 Hz, 1H), 3.22 (dt, //= 2.7 Hz, /2= 12.0 Hz, 1H), 2.93 (dd, //= 7.2 Hz, /?=

18.3 Hz, 1H), 2.77 (d,/= 14.4 Hz, 1H), 2.59 (d,/= 18.0 Hz, 1H),2.31 (s,3H),2.26 (s, 3H),

2.17 (s, 3H), 2.01 (s, 3H), 1.78 (dd,//= 10.8 Hz,/₂= 15.6 Hz, IH), 0.65 (d,/= 6.3 Hz, 1H).

ESI-MS m/z: Изчислено за C39H43N5O8: 709.8. Намерено (M+1/: 710.3.

181

ПРИМЕР 82

Към разтвор на 43 (30 mg, 0.05 mmol) в метиленхлорид (0.3 ml) при 0°С се прибавят пропионилхлорид (4.40 μΙ, 0.05 mmol) и пиридин (4.04 μΙ, 0.05 mmol). Реакционната смес се разбърква в продължение на 1 час, след което разтворът се разрежда с метиленхлорид (10 ml) и се промива с 0.1N солна киселина (5 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, градиент от хексан :етилацетат 1:1 до етилацетат) до получаване на 88 (18 mg, 56%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.49 (хексан :етилацетат:метанол 1:10:2).

’HNMR (300 MHz, CDC1₃) δ 6.46 (s, IH), 6.16 (brd, 1H),5.99 (d,7=1.2 Hz, 1H),5.95 (s, IH), 5.90 (d, 7= 1.2 Hz, IH), 5.34 brt, IH), 4.12-4.06 (m, 3H), 3.84 (bs, IH), 3.74 (s, 3H), 3.63 (dd, 7/= 6.3 Hz, 7/= 12.9 Hz, IH), 3.50-3.48 (m, IH), 3.39 (d, J= 8.1 Hz, IH), 3.23 (d, 7= 11.7 Hz, IH), 3.00 (dd,7_z= 8.4 Hz,7r= 18.3 Hz, IH), 2.78 (d,7= 15.6 Hz, IH), 2.63 (d, 7= 18.3 Hz, IH), 2.31 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 1.87-1.80 (m, IH), 1.06 (t,7= 7.5Hz, 3H), 0.74 (d, 7= 6.9 Hz, 3H).

ESI-MS m/z: Изчислено за C34H41N5O8: 647.7. Намерено (M+1)⁺: 648.2.

182 • ·

Към разтвор на 43 (20 mg, 0.0338 mmol) в метиленхлорид (0.3 ml) при 0°С се прибавят пропионилхлорид (3.238 μΙ, 0.0338 mmol) и пиридин (2.73 μΙ, 0.0338 mmol). Реакционната смес се разбърква в продължение на 1 час, след което разтворът се разрежда с метиленхлорид (10 ml) и се промива с 0.1N солна киселина (5 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, градиент от хексан:етилацетат 3:1 до етилацетат) до получаване на 89 (11.5 mg, 52%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.57 (етилацетат.метанол 10:1).

'HNMR(300 MHz, CDCI3) δ 6.82-6.70 (m, Ш), 6.46 (s, 1H). 6.1 V(d, 1H),6.OO (d,J= 1.5 Hz, Ш), 5.89 (d, J= 1.5 Hz, IH), 5.85 (s, 1H), 5.77 (dd, 7/= 1.5 Hz, 7,= 15.3 Hz, 1H), 5.37 (bst, 1H), 4.13-4.06 (m, 3H), 3.19 (m, 1H), 3.73 (s, 3H), 3.55 (m, 2H), 3.38 (d, J= 1.5 Hz, 1H), 3.23 (d, 7= 11.4 Hz, 1H), 3.00 (dd, 7/= 8.4 Hz, 7,= 18.3 Hz, 1H), 2.78 (d, 7= 15.0 Hz, 1H), 2.65 (d. 7= 18.0 Hz, IH), 2.31 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 2.22 (s, 3H), 2.00 (s, 3H), 1.85-1.82 (m, 4H), 0.77 (d, 7= 6.3 Hz, 3H).

ESI-MS m/z: Изчислено за C35H41N5O8: 659.7. Намерено (M+1)⁺: 660.3.

183 е · · • · · · • · · • · ·

Към разтвор на 43 (15 mg, 0.0253 mmol) в метиленхлорид (0.3 ml) при

0°С се прибавят Cbz-L-Val-OH (6.39 mg, 0.0253 mmol) и карбонилдиимидазол (4.86 mg, 0.03 mmol). Реакционната смес се разбърква в продължение на 16 часа при стайна температура, след което разтворът се разрежда с метиленхлорид (15 ml) и се промива с 0.1N солна киселина (10 ml).

Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, градиент от хексан :етилацетат 1:1 до етилацетат) до получаване на 90 (6.7 mg, 32%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.79 (етилацетатметанол 5:1).

'Н NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 7.35 (bs, 5Н), 6.46 (s, IH), 6.28 (d, J= 6.0 Hz, IH), 5.98 (d, J= 1.2 Hz, IH), 5.89 (d, J= 1.2 Hz, IH), 5.77 (s, IH), 5.44 (bs, IH), 5.30 (bs, IH), 5.08 (s, 2H), 4.09-4.06 (m, 3H), 3.94-3.89 (m, IH), 3.70-3.66 (m, 5H), 3.38 (d, J= 11.7 Hz, IH), 3.01 (dd, Jr 7.8 Hz, Jr 18.3 Hz, IH), 2.79 (d, J= 14.1 Hz, IH), 2.63 (d, J= 18.0 Hz, IH),

2.30 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 1.99 (s, 3H9,1.97-1.81 (m, 2H), 0.83 (d, J= 6.6 Hz, 3H), 0.80 (d, J= 6.6 Hz, 3H), 0.75 (d, J= 6.9 Hz, 3H).

ESI-MS m/z: Изчислено за C44H52N6O10: 647.7. Намерено (M+1)⁺: 825.4.

184 ···· ♦ · ♦ · 9 • · · · · ·· · ··· ♦ « ··· ···· ·· ··· ··· ·· ····

91

Към разтвор на 62 (20 mg, 0.030 mmol) в CH₃CN/BOfla (1.5 ml/0.5 ml) се прибавя сребърен нитрат (154 mg, 0.90 mmol) и реакционната смес се разбърква при 23°С в продължение на 24 часа. При 0°С се прибавят разсол (10 ml) и наситен воден разтвор на натриев бикарбонат (10 ml) и сместа се разбърква в продължение на 15 минути, филтрува се през слой от селит и се промива с метиленхлорид (15 ml). Разтворът се екстрахира и органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и се концентрира под вакуум. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, градиент от етилацетат до етилацетат:метанол 3:1) до получаване на 91 (13 mg, 66%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.18 (етилацетат:метанол 10:1).

’HNMR (300 MHz, CDC1₃) δ 6.49 (s, 1Н), 6.16 (d, 1H), 5.98 (d, J= 1.5 Hz, 1H), 5.89 (d, J=

1.5 Hz, 1H), 5.32 (bs, 1H), 4.41 (bs, 1H), 4.00 (bs, 1H), 3.79 (s, 3H), 3.70-3.65 (m, 2H),

3.37-3.32 (m, 2H), 3.19-3.17 (m, 1H), 2.94 (dd, J,= 9.0 Hz, J₂= 15.0 Hz, 1H), 2.74 (d, J=

15.9 Hz, 1H), 2.46 (d, J= 17.1 Hz, 1H), 2.31 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 2.04-2.01 (m,

2H), 1.98 (s, 3H), 1.64-1.62 (m, 1H), 1.54-1.52 (m, 2H), 0.89-0.84 (m, 6H).

ESI-MS m/z: Изчислено за C^HuhUOg'. 652.7. Намерено (M-17)⁺: 635.3.

185

ПРИМЕР 86

Към разтвор на 85 (10 mg, 0.0138 mmol) в СНзСИ/вода (1.5 ml/0.5 ml) се прибавя сребърен нитрат (70.4 mg, 0.414 mmol) и реакционната смес се разбърква при 23°С в продължение на 24 часа. При 0°С се прибавят разсол (10 ml) и наситен воден разтвор на натриев бикарбонат (10 ml) и сместа се разбърква в продължение на 15 минути, филтрува се през слой от селит и се промива с метиленхлорид (15 ml). Разтворът се екстрахира и органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и се концентрира под вакуум. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, градиент от етилацетат до етилацетагметанол 4:1) до получаване на 92 (7 mg, 71%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.20 (етилацетагметанол 5:1).

’HNMR (300 MHz, CDC1₃) δ 7.25-7.13 (m, 5Н), 6.47 (s, IH), 6.13 (brd, IH), 5.97 (d,/=

1.2 Hz, IH), 5.88(d,/=1.2 Hz, 1H),5.34 (brt, lH),4.50(bs, 1H),4.4O (bs, 1H),4.OO (bs, IH), 3.76 (s, 3H), 3.70-3.65 (m, 3H), 3.34 (d, /= 11.7 Hz, IH), 3.17 (d, /= 5.1 Hz, IH), 2.98-

2.83 (m, 3H), 2.72 (d,/= 14.4 Hz, IH), 2.44 (d,/= 19.2 Hz, IH), 2.30 (s, 3H), 2.27 (s, 6H),

1.97 (s, 3H), 1.72 (m, IH), 0.82 (d, /= 6.6 Hz, 3H).

ESI-MS m/z: Изчислено за C39H46N4O9: 714.8. Намерено (M-17)⁺: 697.3.

186 ··· · · ··· ···· ·· ··· ··· ·· ·*··

Към разтвор на 86 (6 mg, 0.0087 mmol) в СНзСИ/вода (1.5 ml/0.5 ml) се прибавя сребърен нитрат (44 mg, 0.26 mmol) и реакционната смес се разбърква при 23°С в продължение на 24 часа. При 0°С се прибавят разсол (10 ml) и наситен воден разтвор на натриев бикарбонат (10 ml) и сместа се разбърква в продължение на 15 минути, филтрува се през слой от селит и се промива с метиленхлорид (15 ml). Разтворът се екстрахира и органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и се концентрира под вакуум. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, градиент от етилацетат до етилацетат:метанол 5:1) до получаване на 93 (5 mg, 85%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.018 (етилацетат:метанол 5:1).

'Н NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 6.48 (s, 1 Η), 6.17 (d, 1Η), 5.98 (d, 7= 1.5 Hz, 1H). 5.89 (d, 7=

1.5 Hz, 1H), 5.33 (bs, 1H), 4.51 (d, 1H), 4.40 (d, 1H),4.OO (d, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.76-3.65 (m, 2H), 3.36-3.32 (m, 2H), 3.18 (d,7= 6.9 Hz, 1H), 2.98-2.89 (m, 1H), 2.71 (d,7= 15.0 Hz,

1H), 2.45 (d,7= 17.7 Hz; 1H), 2.31 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 2.26 (s, 3H), 1.98 (s, 3H), 1.68-1.50 (m, 3H), 1.29-1.19 (m, 6H), 0.88-0.84 (m, 6H).

ESI-MS m/z: Изчислено за C36H48N4O9: 680.7. Намерено (M-17)⁺: 663.3.

187

ПРИМЕР 88

94

Към разтвор на 87 (12 mg, 0.0169 mmol) в СНзСИ/вода (1.5 ml/0.5 ml) се прибавя сребърен нитрат (186 mg, 0.507 mmol) и реакционната смес се разбърква при 23°С в продължение на 24 часа. При 0°С се прибавят разсол (10 ml) и наситен воден разтвор на натриев бикарбонат (10 ml) и сместа се разбърква в продължение на 15 минути, филтрува се през слой отселит и се промива с метиленхлорид (15 ml). Разтворът се екстрахира и органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и се концентрира под вакуум. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, градиент от етилацетат до етилацетат:метанол 5:1) до получаване на 94 (8.8 mg, 74%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.28 (етилацетат:метанол 5:1).

’Н NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 7.34-7.18 (m, 5Н), 6.37 (s, 1Н), 6.20 (d, 1H), 5.96 (d, J= 1.5 Hz, 1H), 5.88 (d, J= 1.5 Hz, 1H), 5.30 (t, 1H), 4.50 (bs, 1H), 4.39 (d, J= 1.8 Hz, 1H), 3.99 (d, /=2.1 Hz, 1H), 3.73 (s, 3H), 3.69-3.60 (m, 3H), 3.37-3.30 (m, 3H), 3.17 (d,/= 18.1 Hz, 1H),

2.89 (dd,//= 7.5 Hz,/₂= 18.3 Hz, Ш), 2.31 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 1.99 (s, 3H),

1.71 (dd,//= 11.7 Hz,/2= 15.0 Hz, 1H), 0.77 (d,/= 6.6 Hz, 1H).

ESI-MS m/z: Изчислено за C₃₈H44N₄O₉: 700.7. Намерено (M-17)⁺: 683.2.

188

Към разтвор на 88 (14 mg, 0.0216 mmol) в СНзСИ/вода (1.5 ml/0.5 ml) се прибавя сребърен нитрат (110 mg, 0.648 mmol) и реакционната смес се разбърква при 23°С в продължение на 24 часа. При 0°С се прибавят разсол (10 ml) и наситен воден разтвор на натриев бикарбонат (10 ml) и сместа се разбърква в продължение на 15 минути, филтрува се през слой от селит и се промива с метиленхлорид (15 ml). Разтворът се екстрахира и органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и се концентрира под вакуум. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, градиент от етилацетат до етилацетат:метанол 5:1) до получаване на 95 (9.7 mg, 70%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.16 (етилацетат:метанол 5:1).

'HNMR (300 MHz, CDC1₃) δ 6.48 (s, 1Η), 6.10 (d, 1H), 5.97 (d,7= 1.2 Hz. 1H), 5.89 (d,7=

1.2 Hz, 1H), 5.36 (bs, 1H), 4.51 (bs, 1H), 4.40 (d, 7= 2.1 Hz, 1H), 4.00 (d, 7= 2.1 Hz, 1H),

3.78 (s, 3H), 3.76-3.62 (m, 3H), 3.33 (d, 7= 11.7Hz, 1H), 3.18 (d, 7= 8.4 Hz, 1H). 2.94 (dd,

7/= 8.4 Hz, 7t= 16.5 Hz, 1H), 2.72 (d, 7= 15.0 Hz, Ш), 2.45 (d, 7= 18.3 Hz, 1H), 2.31 (s,

3H), 2.27 (s, 3H), 2.22 (s, 3H), 1.97 (s, 3H), 1.86 (m, 2H), 1.73 (dd, 7/= 12.0 Hz,7r= 15.0

Hz, 1H), 1.05 (t, 7= 7.8 Hz, 3H), 0.83 (d, 7= 6.9 Hz, 3H).

ESI-MS m/z: Изчислено за C33H42N4O9:638.7. Намерено (M-17)⁺: 621.2.

189

ПРИМЕР 90

AgNO₃

CH₃CN/H₂O rt, 24 h

Към разтвор на 89 (10 mg, 0.015 mmol) в СН₃СМ/вода (1.5 ml/0.5 ml) се прибавя сребърен нитрат (77.2 mg, 0.454 mmol) и реакционната смес се разбърква при 23°С в продължение на 24 часа. При 0°С се прибавят разсол (10 ml) и наситен воден разтвор на натриев бикарбонат (10 ml) и сместа се разбърква в продължение на 15 минути, филтрува се през слой отселит и се промива с метиленхлорид (15 ml). Разтворът се екстрахира и органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и се концентрира под вакуум. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, градиент от етилацетат до етилацетат:метанол 1:1) до получаване на 96 (9 mg, 92%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.016 (етилацетат:метанол 5:1).

‘HNMR (300 MHz, CDCh) δ 6.76-6.69 (m, 1H), 6.47 (s, 1H), 6.18 (brd, 1H), 5.97 (d, J=

1.5 Hz, 1H), 5.88 (d, 7= 1.5 Hz, 1H), 5.71 (dd,7/= 1.5 Hz,7₂= 16.2 Hz, 3H), 5.32 (bs, 1H),

4.50 (m, 1H), 4.41 (m, 1H), 3.99 (m, 1H), 3.78 (m, 4H), 3.64-3.58 (m, 2H), 3.34 (d,7= 11.1 Hz, 1H), 3.17 (d, 7= 8.6 Hz, 1H), 2.95 (dd, 7/= 7.5 Hz, J₂= 17.4 Hz, 1H), 2.70 (d, 7= 16.2 Hz, 1H), 2.48 (d, 7= 17.7 Hz, 1H), 2.31 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 2.17 (s, 6H), 1.97 (s, 3H), 1.82-

1.74 (m, 4H), 0.88 (t, 7= 5.2 Hz, 3H).

ESI-MS m/z: Изчислено за С^Щг^Од: 650.7. Намерено (М-17)⁺: 633.3.

190

ПРИМЕР 91
	OMe MOMO.Jx>Me		X	OMe MOMO^Jx^Me j T
0
Me. X.		butyryl chloride, py	Y^Y^N-jMe
	N-7 Me	I I	u/
JO		CH₂CI₂,0°C,-2 h	0 T
^υ\-ο	\ CN	V-0	CN 0
	OH			O^k^
	25			97

Към разтвор на 25 (100 mg, 0.177 mmol) в метиленхлорид (0.5 ml) при 0°С се прибавят бутирилхлорид (24 μΙ, 0.23 mmol) и пиридин (17 μΙ, 0.212 mmol). Реакционната смес се разбърква в продължение на 2 часа при стайна температура, след което разтворът се разрежда с метиленхлорид (30 ml) и се промива с 0.1N солна киселина (20 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, хексан:етмлацетат 3:1) до получаване на 97 (99 mg, 88%) като безцветно масло. Rf: 0.64 (хексан :етилацетат 1:1).

'HNMR(300 MHz, CDC1₃) 5 6.66 (s, IH), 6.16-6.05 (m, IH), 5.93 (d,7= 1.2 Hz, IH), 5.87 (d,7= 1.2 Hz, IH), 5.40 (dd,7/= 1.2 Hz, 7,= 17.1 Hz, IH), 5.26 (dd,7/= 1.2 Hz,7,= 10.2 Hz, Ш), 5.13-5.08 (m, 2H), 4.44 (dd, 7/= 3.6 Hz,7,= 11.1 Hz, IH), 4.21-4.07 (m, 5H), 3.74 (m, IH), 3.72 (s, IH), 3.57 (s, 3H), 3.35 (d, .7= 10.5 Hz, IH), 3.26-3.21 (m, 2H), 3.98 (dd,7/=

8.7 Hz, 7,= 18.0 Hz, IH), 2.54 (d,7= 18.0 Hz), 2.30 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.13 (s, 3H), 1.92-

1.65 (m, 3H), 1.42-1.34 (m, 2H), 0.80 (t, 7= 7.5 Hz, 3H).

ESI-MS m/z: Изчислено за C35H43N3O9: 633.7. Намерено (M+1)⁺: 634.3.

191

ПРИМЕР 92

Към разтвор на 25 (100 mg, 0.177 mmol) в метиленхлорид (0.4 ml) при 0°С се прибавят транс-3-(трифлуорметил)синамоилхлорид (35 μΙ, 0.23 mmol) и пиридин (17 μΙ, 0.212 mmol). Реакционната смес се разбърква в продължение на 1 час при стайна температура, след което разтворът се разрежда с метиленхлорид (30 ml) и се промива с 0.1N солна киселина (20 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, градиент от хексан:етилацетат 6:1 до хексан:етилацетат 1:1) до получаване на 98 (122 mg, 90%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.478 (хексан:етилацетат 1:1).

’Н NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 7.64-7.48 (m, 4H), 7.37 (d, J= 15.6 Hz, 1H), 6.62 (s, 1H), 6.16-6.07 (m, 1H), 6.12 (d, J= 15.6 Hz, 1H), 5.94 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 5.89 (d,J= 1.2 Hz, 1H), 5.41 (dd, Jr 1.8 Hz, J₂= 17.1 Hz, 1H), 5.28 (dd, Jr 1.8 Hz, J₂= 12.0 Hz, 1H), 5.04 (q, J= 6.0 Hz, 1H), 4.60 (dd, Jr 3.3 Hz, J₂= 11.1 Hz, 1H), 4.22-4.15 (m, 5H), 3.90 (dd, J/= 4.2 Hz, Л= ИЛ Hz, 1H), 3.55 (s, 3H), 3.38 (s, 3H), 3.35-3.34 (m, 1H), 3.27-3.25 (m, 1H), 3.22 (bs, 1H), 2.98 (dd, Jr 7.8 Hz, J₂= 18-0 Hz, 1H), 2.61 (d, J= 17.7 Hz, 1H), 2.29 (s, 3H), 2.16 (s, 3H), 2.00 (s, 3H), 1.80 (dd, Jr H-7 Hz,//= 15.6 Hz, 1H).

ESI-MS m/z: Изчислено за С^ЩгРзИзОв: 761.7. Намерено (М+1)⁺: 762.3.

192 « ·

ПРИМЕР 93

Към разтвор на 25 (68 mg, 0.12 mmol) в метиленхлорид (0.4 ml) при 0°С се прибавят хидросинамоилхлорид (20 μΙ, 1.12 mmol) и пиридин (10 μΙ, 1.01 mmol). Реакционната смес се разбърква в продължение на 2 часа при стайна температура, след което разтворът се разрежда с метиленхлорид (30 ml) и се промива с 0.1N солна киселина (20 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, градиент от хексан:етилацетат 5:1 до хексан:етилацетат 2:1) до получаване на 99 (41 mg, 49%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.47 (хексан:етилацетат 1:1).

’Н NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 7.29-7.18 (m, ЗН), 7.04-7.02 (m, 2Н), 6.66 (s, IH), 6.16-6.07 (m, IH), 5.93 (d, J= 1.2 Hz, IH), 5.87 (d, /= 1.2 Hz, IH), 5.40 (dd. //= 1.7 Hz, J₂= 17.4 Hz, IH), 5.26 (dd, Jr 1.7 Hz, /2= Ю.2 Hz, IH), 5.09 (dd, Jr 6.0 Hz, Jr 8.7 Hz, 2H), 4.43 (dd, Jr 3.3 Hz, Jr 11.1 Hz, IH), 4.20-4.14 (m, 3H), 4.06 (t, J= 3.7 Hz, IH), 4.02 (d, /= 2.4 Hz, IH), 3.72 (dd,//=4.5 Hz,//= 11.1 Hz, IH), 3.56 (s, 3H), 3.55 (s, 3H), 3.32 (brd,/= 8.7 Hz, IH), 3.26 (dd,//= 1.9 Hz,/2= 8.1 Hz, IH), 3.23-3.20 (m, IH), 3.01 (brd,/=8.1 Hz, IH), 3.23-3.20 (m, IH), 3.26 (dd,//= 1.9 Hz,/₂= 8.1 Hz, IH), 2.95 (d,/= 1.8 Hz, IH), 2.71-2.64 (m, 3H), 2.53 (d,/= 17.7 Hz, IH), 2.26 (s, 3H), 2.14 (s, 6H), 1.83 (dd,//= 12.3 Hz,/2= 15.9 Hz, IH).

ESI-MS m/z: Изчислено за C40H45F3N3O8: 695.3. Намерено (Μ+1/: 696.3.

193 • ·

ПРИМЕР 94

• · · • · · · · ·

cinnamoyl choride. py

CH₂CI₂, 0°C, 2 h

Към разтвор на 25 (100 mg, 0.177 mmol) в метиленхлорид (0.4 ml) при 0°C се прибавят синамоилхлорид (35 mg, 0.21 mmol) и пиридин (17 μΙ, 0.21 mmol). Реакционната смес се разбърква в продължение на 2 часа при стайна температура, след което разтворът се разрежда с метиленхлорид (30 ml) и се промива с 0.1N солна киселина (20 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, хексан:етилацетат 6:1) до получаване на 100 (94 mg, 76%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.49 (хексан:етилацетат 1:1).

’Н NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7.42-7.33 (m, 6Н), 6.62 (s, IH), 6.16-6.05 (m, IH), 6.10 (d, J= 15.9Hz, IH), 5.94 (d,7= 1.2 Hz, IH), 5.88 (d,7= 1.2 Hz, IH), 5.43 (dd,7/= 3.0 Hz, 7,=

17.1 Hz, IH), 5.27 (dd, 7/= 3.0 Hz, 7,= 12.0 Hz, IH), 5.04 (q, 7= 6.0 Hz, IH). 4.55 (dd, 7/=

3.9 Hz,7/= 11.1 Hz, IH), 4.22-4.15 (m, 5H), 3.87 (dd,7/=4.5 Hz,7,= 11.1 Hz, IH), 3.55 (s, 3H), 3.39 (s, 3H), 3.36-3.33 (m, IH), 3.26-3.22 (m, 2H), 2.98 (dd,7/= 8.1 Hz,7,= 17.7 Hz, IH), 2.63 (d, 7= 17.7 Hz, IH), 2.29 (s, 3H), 2.03 (s, 3H), 1.82 (dd, 7/= 11.7 Hz, 7,= 15.3Hz, IH).

ESI-MS m/z: Изчислено за C40H43N3O8:693.3. Намерено (M+23)⁺: 694.3.

194

Към разтвор на 97 (40 mg, 0.063 mmol) в метиленхлорид (0.7 ml) при 23°С се прибавят оцетна киселина (17.8 μΙ), Pd(PPh₃)2CI₂ (3.64 mg, 0.052 mmol) и BitjSnH (67.9 μΙ, 0.252 mmol). Реакционната смес се разбърква в продължение на 2 часа при тази температура, след което разтворът се излива в хроматографска колона под налягане (силициев двуокис, градиент от хексан :етилацетат 5:1 до хексан:етилацетатЗ:1) до получаване на 101 (30 mg, 80%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.4 (хексан:етилацетат 1:1).

’Н NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 6.65 (s, IH), 5.90 (d, J= 1.5 Hz, IH), 5.82 (d, J= 1.5 Hz, IH), 5.54 (s, IH), 5.33 (d,7= 6.0 Hz, IH), 5.13 (d, J= 6.0 Hz, IH), 4.54 (dd, Jj= 3.6 Hz, Jr

11.4 Hz, IH), 4.18 (d, 7=2.1 Hz, 1H),4.13 (d,7=2.4 Hz, 1H),4.O7 (1,7=3.3 Hz, 1H),3.75 (dd,7/=3.9 Hz,7/= 11.1 Hz, 1H),3.7O (s,3H),3.35 (d,7=8.4 Hz, 1H),3.24(dd,7/= 2.7Hz, J₂= 8.7 Hz, IH), 3.10 (dd,7/= 2.4 Hz,7,= 15.0 Hz, IH), 3.01 (d,7= 8.1 Hz, IH), 2.95 (d,7=

7.8 Hz, IH), 2.58 (d,7= 18.3 Hz, IH), 2.29 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.89-1.66 (m, 3H), 1.36-1.25 (m, 2H),.0.77 (t,7= 7.5 Hz, 3H).

ESI-MS m/z: Изчислено за C32H39N3O8:593.6. Намерено (M+1)⁺: 594.8.

ПРИМЕР 96

195

Към разтвор на 98 (37 mg, 0.0485 mmol) в метиленхлорид (0.7 ml) при

23°С се прибавят оцетна киселина (20 μΙ), Pd(PPh₃)₂CI₂ (4 mg, 0.0057 mmol) и Bu₃SnH (53 μΙ, 0.194 mmol). Реакционната смес се разбърква в продължение на 5 часа при тази температура, след което разтворът се излива в хроматографска колона под налягане (силициев двуокис, градиент от хексан:етилацетат 6:1 до хексан:етилацетат 2:1) до получаване на 102 (25 mg, 71%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.38 (хексан:етилацетат 1:1).

'Н NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 7.63-7.60 (Μ, 2Η), 7.50-7.49 (Μ, 2Η), 7.24 (d,7= 15.9 Hz, IH), 6.59 (s, IH), 5.98 (d,7= 15.9 Hz, IH), 5.92 (d,7= 1.5 Hz, IH), 5.84 (d,7= 1.5 Hz, IH),

5.66 (s, IH), 5.20 (d, 7= 6.0 Hz, IH), 4.87 (d, 7= 6.0 Hz, IH), 4.71 (dd, 7/= 2.7 Hz, 7,= 10.8 Hz, IH), 4.16-4.15 (m, 3H), 3.93 (dd,7/= 3.3 Hz, 7,= 11.1 Hz. IH), 3.66 (s, 3H), 3.36 (brd, 7= 10.2 Hz, Ш), 3.26 (brd,7= 11.7 Hz, IH), 3.10 (brd.7= 15.0 Hz, IH), 2.96 (dd,7/= 7.8 Hz, 7,= 17.7 Hz, IH), 2.62 (d,7= 17.7 Hz, IH), 2.27 (s, 3H), 2.14 (s, 3H), 1.97 (s, 3H), 1.79 (dd, 7/= 12.0 Hz, 7/= 15.8 Hz, IH).

ESI-MS m/z: Изчислено за СзвНзвРзИзОв: 721.7. Намерено (М+1)⁺: 722.2.

196 • · · · · · •· ·· ··· · • · · ·· • · · ·· · • · ·· · • · · ··· ·· ····

Към разтвор на 99 (41 mg, 0.059 mmol) в метиленхлорид (1 ml) при 23°С се прибавят оцетна киселина (25 μΙ), Pd(PPh₃)₂CI₂ (5 mg, 0.0071 mmol) и Bu₃SnH (63 μΙ, 0.235 mmol). Реакционната смес се разбърква в продължение на 4.5 часа при тази температура, след което разтворът се излива в хроматографска колона под налягане (силициев двуокис, градиент от хексан :етилацетат 6:1 до хексан:етилацетат 1:1) до получаване на 103 (34.2 mg, 89%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.49 (хексан:етилацетат 1:1).

'Н NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7.24-7.15 (m, ЗН), 7.03-7.01 (m, 2Н), 6.65 (s, IH). 5.89 (bs, IH), 5.82 (bs, IH), 5.49 (s, IH), 5.31 (d, J= 6.0 Hz, IH), 5.12 (d, J= 6.0 Hz. IH), 4.53 (dd, Jf= 3.3 Hz, J₂= 11.1 Hz, IH), 4.18 (d, 7= 2.7 Hz, IH), 4.07 (m, 2H), 3.75 (dd, 7/= 3.9 Hz, 7/= 11.1 Hz, IH), 3.69 (s, 3H), 3.62 (s, 3H), 3.32 (d,7= 7.8 Hz, IH), 3.25 (d,7= 10.8 Hz, IH), 3.12 (d,7= 14.7Hz, IH), 3.00 (d,7= 7.8 Hz, IH), 2.94 (d,7= 8.1 Hz, IH), 2.66-2.60 (m, 3H), 2.57 (d, 7= 18.0 Hz, IH), 2.28 (s. 3H), 2.14 (s, 3H), 2.10 (bs, 3H), 1.83-1.74 (m, 1H).

ESI-MS m/z: Изчислено за ΟβτΗ^Ν^»: 655.7. Намерено (М + 1)⁺: 656.3.

Към разтвор на 100 (40 mg, 0.0576 mmol) в метиленхлорид (1 ml) при 23°С се прибавят оцетна киселина (25 μΙ), Рй(РР1т₃)гС1г (4.8 mg, 0.007 mmol) и Bu₃SnH (62 μΙ, 0.23 mmol). Реакционната смес се разбърква в продължение на 5 часа при тази температура, след което разтворът се излива в хроматографска колона под налягане (силициев двуокис, градиент от

197 хексан:етмлацетат4:1 до хексан.етилацетат 1:1) до получаване на 104 (30 mg,

82%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.41 (хексан:етилацетат 1:1).

*Н NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7.36 (s, 5Н), 7.30 (d, 7= 16.2 Hz, 1H), 6.59 (s. 1H), 5.99 (d, J= 16.2 Hz, 1H), 5.91 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 5.84 (d, 7= 1.2 Hz, 1H), 5.60 (s. 1H). 5.20 (d,7=

5.6 Hz, 1H), 4.94 (d, 7= 5.6 Hz, 1H), 4.63 (dd,7/= 3.3 Hz, 7,= 11.4 Hz, 1H), 4.18-4.15 (m, 3H), 3.91 (dd, 7/= 3.9 Hz, 7₂= 11.1 Hz, 1H), 3.66 (s, 3H), 3.49 (s, 3H). 3.35 (brd, 7= 15.0 Hz, 1H), 3.26 (brd, 7= 11.4 Hz, 1H), 3.10 (brd, 7= 15.0 Hz, 1H), 2.96 (dd, 7/= 8.4 Hz, 7.,= 18.0 Hz, 1H), 2.63 (d,7= 18.0 Hz, 1H), 2.27 (s, 3H), 2.13 (s, 3H), 2.00 (s, 3H), 1.80 (dd,7/= 12.0Hz, 7/= 14.4 Hz, 1H).

ESI-MS m/z: Изчислено за Сз₇Нз9МзО₈:653.7. Намерено (М+23)⁺: 676.2.

Към разтвор на 101 (24 mg, 0.041 mmol) в метиленхлорид (0.4 ml) при 0°С се прибавят ацетилхлорид (3 μΙ, 0.041 mmol) и пиридин (3.3 μΙ, 0.041 mmol). Реакционната смес се разбърква в продължение на 2 часа, след което разтворът се разрежда с метиленхлорид (15 ml) и се промива с 0.1N солна киселина (5 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, градиент от хексан:етилацетат 5:1 до хексан:етилацетат 1:1) до получаване на 105 (23 mg, 88%) като бяло твърдо вещество. Rf. 0.40 (хексан:етил ацетат 1:1).

198 • · ’ΗNMR (300 MHz, CDC1₃) δ 6.66 (s, IH), 5.97 (d, /= 1.2 Hz, IH), 5.91 (d. J= 1.2 Hz. IH).

4.58 (d, /= 3.0 Hz, IH), 4.54 (d, J= 3.0 Hz, IH), 4.07 (t, J= 3.3 Hz, IH), 3.77 (dd, //= 3.9 Hz, J₂= 11.4 Hz, Ш), 3.73 (s, 3H), 3.57 (s, 3H), 3.35 (d, J= 10.2 Hz, IH), 3.22 (di. //= 2.7 Hz, J₂= 11.7 Hz, IH), 2.98 (dd, //= 8.1 Hz,/,= 18.0 Hz, IH), 2.80 (d,/= 13.5 Hz. IH), 2.58 (d,/=18.0 Hz, IH), 2.33(s, 3H), 2.30 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.02 (s, 3H), 1.89-1.76 (m. 2H).

1.72-1.66 (m, IH), 1.37-1.25 (m, 2H), 0.78 (t,/= 7.5 Hz, 3H).

ESI-MS m/z: Изчислено за C34H41N3O9.635.7. Намерено (Μ+1)⁺: 636.8.

ПРИМЕР 100

Към разтвор на 102 (16 mg, 0.022 mmol) в метиленхлорид (0.2 ml) при 0°С се прибавят ацетилхлорид (1.9 μΙ, 0.0266 mmol) и пиридин (2.15 μΙ, 0.0266 mmol). Реакционната смес се разбърква в продължение на 1.5 часа, след което разтворът се разрежда с метиленхлорид (10 ml) и се промива с 0.1N солна киселина (7 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, градиент от хексангетилацетат 4:1 до етилацетат) до получаване на 106 (12 mg, 71%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.60 (хексан:етилацетат 1:1).

»Н NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7.83 (bs, IH), 7.65-7.58 (m, 2H), 7.49-7.44 (m, IH), 7.14 (d. /= 16.2 Hz, IH), 6.62 (s, IH), 6.06 (d,/= 16.2 Hz, 1H), 6.00 (d,/= 1.2 Hz, IH). 5.95 (d,/=

1.2 Hz, IH), 5.02 (d,/= 5.7 Hz, IH), 4.96 (bs, 1H),4.92 (d,/= 5.7 Hz. IH). 4.15-4.11 (m.

199

ЗН), 3.88 (dd, 7/= 3.3 Hz, 7₂= 11.1 Hz, 1H), 3.08 (bs, 3H), 2.93 (dd, 7/- 8.1 Hz. 7₂- 18.3 Hz. 1H),2.8O (d,7= 13.2 Hz, 1H),2.64 (d, 7= 18.0 Hz, 1H),2.31 (s, 3H), 2.27 (s. 3H). 2.08 (s, 3H), 1.91 (s, 3H), 1.69 (dd,7/= 11.7 Hz, 7/= 15.9 Hz, 1H).).

ESI-MS m/z: Изчислено за C40H40F3N3O9: 763.7. Намерено (M+1)⁺: 764.2.

Към разтвор на 103 (34 mg, 0.052 mmol) в метиленхлорид (0.2 ml) при 0°С се прибавят ацетилхлорид (4.4 μΙ, 0.062 mmol) и пиридин (5 μΙ, 0.062 mmol). Реакционната смес се разбърква в продължение на 1.5 часа, след което разтворът се разрежда с метиленхлорид (10 ml) и се промива с 0.1N солна киселина (7 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, градиентотхексан:етилацетат4:1 до етилацетат) до получаване на 107 (25.5 mg, 70%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.48 (хексан:етилацетат 1:1).

'Н NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7.25-7.14 (m, ЗН), 7.06-7.04 (m, 2Н), 6.66 (s, Ш), 5.96 (d, 7= 1.2 Hz, 1H), 5.91 (d, 7= 1.2 Hz, 1H), 5.11 (d, 7= 5.4 Hz, 1H), 4.14 (d, 7= 3.3 Hz, 1H), 4.07 (d, 7= 3.6 Hz, 1H), 4.04 (d,7=2.7Hz, 1H),3.78 (dd, 7/= 3.3 Hz, 7/= 10.8 Hz, 1H),3.55 (s, 3H), 3.51 (s, 3H), 3.33 (brd, 7= 8.1 Hz, 1H), 3.23 (dt, 7/= 2.7 Hz, 7/= 11.7 Hz, 1H), 2.97 (dd, 7/= 8.1 Hz, 7/= 18.0 Hz, 1H), 2.81 (d, J= 14.1 Hz, 1H), 2.63-2.52 (m, 3H), 2.33 (s, 3H),

2.29 (s, 3H), 2.26-202 (m, 2H), 2.09 (s, 3H), 2.04 (s, 3H), 1.74 (dd, 7/= 12.0 Hz, 7/= 15.6 Hz, 1H).

200

ESI-MS m/z: Изчислено за C39H43N3O9: 697.7. Намерено (М + 1)⁺: 698.3.

Към разтвор на 104 (29 mg, 0.0443 mmol) в метиленхлорид (0.3 ml) при 0°С се прибавят ацетилхлорид (3.77 μΙ, 0.053 mmol) и пиридин (4.3 μΙ, 0.053 mmol). Реакционната смес се разбърква в продължение на 2 часа, след което разтворът се разрежда с метиленхлорид (15 ml) и се промива с 0.1N солна киселина (10 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, градиент от хексан:етилацетат4:1 до етилацетат) до получаване на 108 (21.6 mg, 70%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.58 (хексан:етилацетат 1:1).

’НNMR (300 MHz, CDCI3) δ 7.47-7.44 (m, 2Н), 7.35-7.34 (m, ЗН), 7.29 (d, /= 15.9 Hz,

1H), 6.62 (s, 1H), 5.99 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 5.93 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 5.05 (d,/= 5.7 Hz, 1H),

4.94 (d,/=5.7Hz, 1H),4.81 (d,/= 11.5 Hz, 1H), 4.16-4.11 (m, 3H), 3.34 (brd, J= 5.4 Hz,

1H), 3.24 (bs, 3H), 3.22-3.20 (m, 2H), 2.94 (dd,//= 8.1 Hz, J2= 18.0 Hz, 1H), 2.80 (d,/=

14.1 Hz, 1H), 2.64 (d,/= 18.0 Hz, 1H), 2.32 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 2.09 (s, 3H), 1.94 (s, 3H),

1.71 (dd,//= 11.7 Hz,//= 15.6 Hz, 1H).

ESI-MS m/z: Изчислено за C39H41N3O9: 695.7. Намерено (Μ+1)*: 696.2.

201

Към разтвор на 105 (16 mg, 0.025 mmol) в метиленхлорид (0.2 ml) при 0°С се прибавя трифлуороцетна киселина (77 μΙ, 1 mmol) и реакционната смес се разбърква в продължение на 3.5 часа при 23°С. Реакционната смес се закалява при 0°С с наситен воден разтвор на натриев бикарбонат (15 ml) и се екстрахира с етилацетат (2 х 10 ml). Смесените органични слоеве се сушат над натриев сулфат, филтруват се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, хексан:етилацетат 1:1) до получаване на 109 (12 mg, 81%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.32 (хексан :етилацетат 1:1).

*HNMR(300MHz, CDC1₃)0 6.43 (s, 1Н),5.97 (d,7= 1.5 Hz, 1H), 5.91 (d,7= 1.5 Hz, 1H),

5.69 (s, 1H), 4.51 (dd, 7/=3.3 Hz, 7,= 11.1 Hz, 1H), 4.10-4.05 (m, 3H), 3.78-3.77 (m, 1H),

3.75 (s, 3H), 3.33 (d, 7= 8.1 Hz, 1H), 3.22 (dt, 7/= 2.7 Hz, 7,= 12.0 Hz, 1H), 2.96 (dd, 7/=

8.4 Hz, J₂= 17.7 Hz, 1H), 2.80 (d, 7= 15.6 Hz, 1H), 2.55 (d, 7= 18.0 Hz, 1H). 2.33 (s, 3H),

2.24 (s, 3H), 2.01 (s, 3H), 1.87-1.66 (m, 3H), 1.37-1.27 (m, 2H), 0.77 (t, 7= 7.5 Hz, 3H).

ESI-MS m/z: Изчислено за C32H31N3O8: 591.6. Намерено (M+1)⁺: 592.8.

202

Към разтвор на 106 (90 mg, 0.1178 mmol) в метиленхлорид (0.3 ml) при 0°С се прибавя трифлуороцетна киселина (750 μΙ, 4.71 mmol) и реакционната смес се разбърква в продължение на 7 часа при 23°С. Реакционната смес се закалява при 0°С с наситен воден разтвор на натриев бикарбонат (20 ml) и се екстрахира с етилацетат (2 х 15 ml). Смесените органични слоеве се сушат над натриев сулфат, филтруват се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, хексан :етилацетат 1:1) до получаване на 110 (71 mg, 84%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.6 (хексан :етилацетат 1:1).

’Н NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 7.76 (bs, 1Н), 7.62-7.57 (m, 2H), 7.48-7.45 (m, 1H). 7.12 (d, J= 16.2 Hz, 1H), 6.37 (s, 1H), 6.00 (d,7= 16.2 Hz, 1H), 5.98 (d,7= 1.2 Hz, 1H), 5.92 (d,7=

1.2 Hz, 1H), 5.60 (bs, Ш), 4.88 (d,7= 10.2 Hz, 1H), 4.14 (bs, 1H), 4.10 (d,7= 2.4 Hz, 1H), 4.03 (d, 7= 2.4 Hz, 1H), 3.89 (dd, 7_;= 2.7 Hz, 7_?= 11.4 Hz, 1H), 3.32 (d, 7= 8.4 Hz. 1H), 3.26-3.21 (m, 4H), 2.91 (dd,7/= 8.1 Hz, 7/= 18.0 Hz, 1H), 2.82 (d,7= 13.8 Hz. 1H). 2.58 (d, 7= 18.0 Hz, 1H), 2.33 (s, 3H), 2.24 (s, 3H), 2.05 (s, 3H), 1.89 (s, 3H), 1.84 (dd. 7_y= 12.0 Hz, 7/= 15.6 Hz, 1H).

ESI-MS m/z: Изчислено за C38H36F3N3O8:719.7. Намерено (M+1)⁺: 720.3.

ПРИМЕР 105

203

Към разтвор на 107 (20 mg, 0.286 mmol) в метиленхлорид (0.2 ml) при 0°С се прибавя трифлуороцетна киселина (88 μΙ, 1.144 mmol) и реакционната смес се разбърква в продължение на 4 часа при 23°С. Реакционната смес се закалява при 0°С с наситен воден разтвор на натриев бикарбонат (15 ml) и се екстрахира с етилацетат (2 х 10 ml). Смесените органични слоеве се сушат над натриев сулфат, филтруват се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, хексан:етилацетат 1:1) до получаване на 111 (18 mg, 96%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.39 (хексан :етилацетат 1:1).

’Н NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7.23-7.16 (m, ЗН), 7.06-7.04 (m, 2Н), 6.43 (s, 1Н). 5.96 (d. J= 1.5 Hz, 1H), 5.90 (d, /= 1.5 Hz, 1H), 6.66 (s, 1H), 4.52 (dd, Jj= 3.3 Hz./,= 11.1 Hz, 1H). 4.07 (s, 1H), 4.05 (d, J= 3.3 Hz, 1H), 4.03 (d, /= 2.4 Hz, 1H), 3.76 (dd, J,= 3.6 Hz. J₂= 11.1 Hz, 1H), 3.56 (s, 3H), 3.31 (d, J= 7.5 Hz, 1H), 3.23 (d, J= 12.0 Hz, 1H), 2.95 (dd. J,= 8.1 Hz,/,= 18.0 Hz, 1H), 2.80 (d,/= 15.3 Hz, 1H), 2.63-2.58 (m,2H), 2.53 (d,/= 18.0 Hz, 1H),

2.33 (s, 3H), 2.61 (s, 3H), 2.21-2.09 (m, 2H), 2.13 (s, 3H), 2.02 (s. 3H). 1.85 (dd. //= 11.7 Hz./₂= 115.3Hz, 1H).

ESI-MS m/z: Изчислено за C37H39N3O8:653.7. Намерено (M+1)⁺: 654.3.

{ TFA jCH₂CI₂,6 h ! 0°C 23°C

Към разтвор на 108 (14 mg, 0.02 mmol) в метиленхлорид (0.4 ml) при 0°C се прибавя трифлуороцетна киселина (61.5 μΙ, 1 mmol) и реакционната смес се разбърква в продължение на 6 часа при 23°С. Реакционната смес се

204 закалява при 0°С с наситен воден разтвор на натриев бикарбонат (15 ml) и се екстрахира с етилацетат (2 х 10 ml). Смесените органични слоеве се сушат над натриев сулфат, филтруват се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, хексан.етилацетат 2:1) до получаване на 112 (12 mg, 92%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.36 (хексан .етилацетат 1:1).

’Н NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7.46-7.45 (m, 2H), 7.35-7.20 (m, 4H), 6.38 (s, Ш), 6.05 (d, J= 15.9 Hz, 1H), 5.98 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 5.93 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 5.57 (s, 1H), 4.71 (d, J=

9.3 Hz, 1H), 4.17-4.13 (m, 2H), 4.08 (d, J= 1.9 Hz, IH), 3.89 (dd./_;= 3.6 Ηζ.Λ= 11.4 Hz. 1H), 3.33 (m, 5H), 3.26-3.22 (m, 1H), 2.93 (dd, Jr 9.0 Hz, Jr 17.4 Hz. 1H), 2.34 (s. 3H).

2.25 (s, 3H), 2.05 (s, 3H), 1.97 (s, 3H), 1.81 (dd, Jr 12.0 Hz,//= 15.6 Hz. 1H).

ESI-MS m/z: Изчислено за Сз₇Нз₇М₃О₈: 651. Намерено (Μ +1)⁺: 652.2.

ПРИМЕР 107

AgNO₃

CH₃CN/H₂O rt. 24 h

113

Към разтвор на 109 (10 mg, 0.017 mmol) в СН₃СМ/вода (1.5 ml/0.5 ml) се прибавя сребърен нитрат (86 mg, 0.5 mmol) и реакционната смес се разбърква при 23°С в продължение на 24 часа. При 0°С се прибавят разсол (10 ml) и наситен воден разтвор на натриев бикарбонат (10 ml) и сместа се разбърква в продължение на 15 минути, филтрува се през слой от селит и се промива с метиленхлорид (15 ml). Разтворът се екстрахира и органичният

205 • · · » » · Λ слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и се концентрира под вакуум. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, градиент от етилацетат до етилацетагметанол 3:1) до получаване на 113 (7 mg, 71%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.41 (етилацетат:метанол 5:1).

’HNMR (300 MHz, CDC1₃) δ 6.45 (s, Ш), 5.95 (d, 7= 1.5 Hz, IH), 5.88 (d,7= 1.5 Hz, IH),

5.65 (bs, IH), 4.50-4.48 (m, 2H), 4.44 (d, 7= 2.1 Hz, IH), 3.96 (d, 7= 3.0 Hz, IH), 3.76 (s, 3H), 3.74-3.70 (m, IH), 3.30 (d, 7= 12.3 Hz, IH), 3.13 (d, 7= 7.5 Hz, IH), 2.86 (dd, 7_;= 5.7 Hz, J₂= 18.3 Hz, IH), 2.73 (d, 7= 14.7 Hz, IH), 2.48 (d, 7= 17.7 Hz, IH), 2.33 (s, 3H), 2.24 (s, 3H), 2.17 (s, 3H), 2.00 (s, 3H), 1.86-1.55 (m, 3H), 1.42-1.23 (m, 2H), 0.75 (t,7= 7.5 Hz, 3H).

ESI-MS m/z: Изчислено за C31H38N2O9: 582.6. Намерено (M-17)⁺: 565.3.

ПРИМЕР 108

Към разтвор на 110 (42.8 mg, 0.059 mmol) в СНзСМ/вода (1.5 ml/0.5 ml) се прибавя сребърен нитрат (303 mg, 1.78 mmol) и реакционната смес се разбърква при 23°С в продължение на 24 часа. При 0°С се прибавят разсол (10 ml) и наситен воден разтвор на натриев бикарбонат (10 ml) и сместа се разбърква в продължение на 15 минути, филтрува се през слой от селит и се промива с метиленхлорид (20 ml). Разтворът се екстрахира и органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и се концентрира под вакуум. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане

206 • · · · ·< · · • · · · ·· ······ • · · · ··· · ··· · ···· ···· ·· ··· ··· ·· ···· (силициев двуокис, градиент от етилацетат до етилацетатгметанол 5:1) до получаване на 114 (30 mg, 71%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.30 (етилацетат:метанол 5:1).

’HNMR (300 MHz, CDC1₃) δ 7.75 (bs, IH), 7.61-7.56 (m, 2H), 7.45-7.42 (m, IH), 7.12 (d, J= 16.2 Hz, IH), 6.38 (s, IH), 6.02 (d, J= 16.2 Hz, IH), 5.97 (d,7= 1.5 Hz, IH), 5.90 (d,7=

1.5 Hz, IH), 5.50 (bs, IH), 4.87 (bs, IH), 4.56 (m, IH), 4.45 (bs, IH), 3.92 (d,7= 2.4 Hz, IH), 3.31 (dt,7_;= 3.6 Hz, 72= 12.9 Hz, IH), 3.21 (bs, 3H), 3.13 (d,7= 7.8 Hz, IH), 2.82 (dd, 7/= 8.1 Hz, 7₂= 18.0 Hz, IH), 2.75 (d, 7= 14.7 Hz, IH), 2.49 (d,7= 18.0 Hz, IH), 2.33 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.05 (s, 3H), 1.89 (s, 3H), 1.78 (dd,7/= 12.0 Hz, 7₂= 15.6 Hz, IH).

ESI-MS m/z: Изчислено за СзуНзуЕзИгОд: 710.6. Намерено (М-17)⁺: 693.2.

Към разтвор на 111 (12 mg, 0.018 mmol) в СНзСИ/вода (1.5 ml/0.5 ml) се прибавя сребърен нитрат (93.5 mg, 0.55 mmol) и реакционната смес се разбърква при 23°С в продължение на 24 часа. При 0°С се прибавят разсол (10 ml) и наситен воден разтвор на натриев бикарбонат (10 ml) и сместа се разбърква в продължение на 15 минути, филтрува се през слой от селит и се промива с метиленхлорид (15 ml). Разтворът се екстрахира и органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и се концентрира под вакуум. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, градиент от етилацетат до етилацетагметанол 1:1) до

207

получаване на 115 (10 mg, 86%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.43 (етилацетатметанол 5:1).

'НNMR (300 MHz, CDCI3) δ 7.23-7.14 (m. ЗН), 7.05-7.03 (m, 2Н), 6.45 (s, IH). 5.93 (d, 7= 1.2 Hz, IH), 5.88 (d, 7= 1.2 Hz_; 1H). 5.63 (brd, IH), 4.55-4.49 (m, 2H), 4.43 (d, 7= 2.7 Hz, IH), 3.96 (d, 7= 3.1 Hz, 1Ή), 3.80-3.73 (m, IH), 3.56 (bs, 3H), 3.32 (dt, 7/= 3.3 Hz, 7,=

12.6 Hz, 1H),3.13 (d,7= 6.0 Hz, IH), 2.86 (dd,7/= 7.5 Hz,7,= 18.3 Hz, IH), 2.74 (d,7=

14.7 Hz, IH), 2.61-2.56 (m, 2H), 2.47 (d,7= 18.0 Hz, IH), 2.33 (s, 3H), 2.23 (s, 3H), 2.13 (s, 3H), 2.01 (s, 3H), 1.99-1.94 (m, 2H), 1.78 (dd,7/= 11.7 Hz, 7/= 15.0 Hz, IH).

ESI-MS m/z: Изчислено за Ο^Η^Ν-Α: 644.7. Намерено (М-17)⁺: 627.2.

Към разтвор на 112 (12 mg, 0.018 mmol) в СН₃С1Ч/вода (1.5 ml/0.5 ml) се прибавя сребърен нитрат (93 mg, 0.55 mmol) и реакционната смес се разбърква при 23°С в продължение на 24 часа. При 0°С се прибавят разсол (10 ml) и наситен воден разтвор на натриев бикарбонат (10 ml) и сместа се разбърква в продължение на 15 минути, филтрува се през слой от селит и се промива с метиленхлорид (15 mi). Разтворът се екстрахира и органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и се концентрира под вакуум. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, градиент от етилацетат до етилацетатметанол 1:1) до

208 получаване на 116 (8 mg, 70%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.41 (етилацетатметанол 5:1).

’Н NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 7.44-7.43 (m, 2H), 7.34-7.27 (m, 4H), 6.39 (s, 1 Η), 6.03 (d, J= 15.9 Hz, IH), 5.96 (d, J= 1.5 Hz, IH), 5.90 (d, J= 1.5 Hz, IH), 5.55 (m, IH), 4.47 (m,

IH), 4.50 (m, IH), 3.94 (d, J= 3.6 Hz, IH), 3.85 (dd, J/= 3.3 Hz, J₂= 11.1 Hz. IH), 3.66 (bs, , 3H), 3.34-3.31 (m, 2H), 3.13 (d, J= 5.1 Hz, IH), 2.93-2.73 (m, 2H), 2.53 (d. J= 18.0 Hz,

IH), 2.33 (s, 3H), 2.22 (s, 3H), 2.03 (s, 3H), 1.94-1.82 (m, IH).

ESI-MS m/z: Изчислено за СзбИзвИгОд: 642.7. Намерено (М-17)⁺: 625.2.

Към разтвор на 17 (6.28 mg, 9.06 mmol) в метиленхлорид (45.3 ml) при 0°С се прибавят алилхлорформиат (3.85 ml, 36.24 mmol) и пиридин (2.93 ml, 36.24 mmol). Реакционната смес се разбърква в продължение на 16 часа при 23°С, след което разтворът се разрежда с метиленхлорид (150 ml) и се промива с 0.1N солна киселина (2 х 100 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане до получаване на 117 (5.96 mg, 84%), който се използва в следващите етапи без допълнително пречистване. Rf: 0.56 (метиленхлорид: етилацетат 1:1).

209

• ·

5.44 (dd, JI = 1.2 Hz, J2 = 17.1 Hz, 1H), 5.35 (dd, JI = 1.2 Hz, J2 = 10.5 Hz, 1H), 5.34 (m,

IH), 5.10 (d, J= 5.7 Hz, IH), 5.05 (d, J = 5.7 Hz, IH), 4.68 (d, J = 5.7 Hz, ΪΗ), 4.65 (dt, JI = 1.2 Hz, J2 = 6 Hz, IH), 4.18 (brd, J = 9 Hz, 2H), 4.04 (bs, IH), 3.70 (s, 3H), 3.67-3.60 (m, IH), 3.55 (s, 3H), 3.43-3.41 (m, 2H), 3.29-3.25 (m, 2H), 3.00 (dd, JI = 8.7 Hz, J2 =

18.3 Hz, IH), 2.90 (dd, JI = 2.4 Hz,72 = 16.2 Hz, IH), 2.75 (d,7= 18.3 Hz, IH), 2.35 (s, 3H), 2.22 (s, 3H), 2.06 (s, 3H), 1.83 (dd,77 = 11.4 Hz, 72 = 15.9 Hz, IH), 1.39 (s, 9H). 0.73 (d, 7 = 6.9 Hz, 3H).

^I3CNMR(75 MHz, CDC1₃) δ 172.1, 152.8,148.6,148.3, 144.6,140.7,140.6,131.5,131.2,

131.1, 130.4, 125.3, 125.0, 123.3,120.9, 119.1, 118.8, 117.6, 112.9, 112.0, 101.6, 99.2,71.8, 69.0, 68.4,59.7, 59.2, 57.6, 57.3, 56.7, 55.8, 55.2,41.4, 39.9,28.2,26.0,25.0,18.6, 15.6, 9.0.

ESI-MS m/z: Изчислено за C40H51N5O11: 777.8. Намерено (M+1)⁺: 778.3.

Към разтвор на 117 (3.96 д, 5.09 mmol) в метанол (37.4 ml) при 0°С се прибавя триметилхлорсилан (6.5 ml, 50.9 mmol). Реакционната смес се разбърква в продължение на 4 часа при 23°С, след което разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се разрежда с етилацетат (70 ml) и се промива с наситен воден разтвор на натриев бикарбонат (2 х 45 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане до получаване на 118 (2.77 д, 86%), който

210 се използва в следващите етапи без допълнително пречистване. Rf: 0.61 (хексан: етилацетат 1:1).

*Н NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 6.50 (s, IH), 6.45 (m, IH), 6.10-6.03 (m, IH), 6.00 (s, IH),

5.93 (s, IH), 5.47 (dd, JI = 1.2 Hz,72 = 17.1 Hz, IH), 5.38 (dd,77 = 1.2 Hz, 72 = 10.5 Hz, Ш), 4.81-4.64 (m, 2H), 4.10-4.03 (m, 3H), 3.75 (s, 3H), 3.70-3.44 (m, 2H), 3.35 (d,7 = 8.1 Hz, IH), 3.28 (dt, 77 = 2.7 Hz, 72 = 9 Hz, IH), 2.98 (dd, 77 = 7.8 Hz, 72 = 18 Hz, IH),

2.90 (dd, 77 = 2.7 Hz, 72 = 16.2 Hz, IH), 2.78 (dd, JI = 6.9 Hz, 72 = 14.1 Hz, 1H), 2.63 (d, 7= 18.3 Hz, IH), 2.30 (s, 3H),-2.25 (s, 3H), 2.04 (s, 3H), 1.88 (dd,77 = 13.2 Hz, 72 = 15.6 Hz, IH), 0.95 (d, 7 = 6.9 Hz, 3H).

^,3C NMR (75 MHz, CDCI3) δ 175.8, 152.9, 146.6, 144.6,142.5, 140.8, 140.6, 131.5, 131.3, 128.5,121.1,120.8,118.9,117.8,.117.0,113.2,111.9,101.7,68.9,60.6, 59.1, 56.6,56.4,

55.7, 55.2, 50.5, 41.7, 39.4,26.1, 25.0, 21.0, 15.6, 9.2.

ESI-MS m/z: Изчислено за C33H39N5O8:633.6. Намерено (M+1)⁺: 634.2.

ПРИМЕР 113

118

119

Към разтвор на 118 (3.52 д, 5.56 mmol) в метиленхлорид (28 ml) при 23°С се прибавя фенилизотиоцианат (3.99 ml, 33.36 mmol). Реакционната смес се разбърква в продължение на 3 часа, след което разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством

211 ··· · · ··· ···· ·· ··· ··· ·· ···· колонна хроматография под налягане до получаване на 119 (3.5 д, 82%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.52 (метиленхлорид: етилацетат 1:5).

'Н NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 7.69 (bs, 1Н), 7.49-7.46 (m, 2H), 7.34-7.2] (mi 2H), 6.96 (d, 7= 6.9 Hz, 1H), 6.06-5.97 (m, 1H), 6.03 (s, 1H), 5.96 (bs, 1H), 5.91 (s, 1H), 5.66 (s, 1H),

5.47 (dd, JI = 1.5 Hz, 72 = 17.1 Hz, 1H), 5.37 (dd, 77 = 1.5 Hz, 72 = 10.5 Hz, 1H), 5.36 (s, 1H), 4.75-4.70 (m,2H), 4.54-4-49 (m, 1H), 4.14 (d,7 = 2.4 Hz, 1H), 4.07-4.06 (m, 2H),

3.70 (s, 3H), 3.44 (m, 1H), 3.35 (d, 7 = 8.1 Hz, 1H), 3.21 (dt, 77 = 2.7 Hz. 72 = 6.6 Hz, 1H),

2.94-2.82 (m, 2H), 2.63 (d, 7= 1.8 Hz, 1H), 2.24 (s,3H),2.06 (s,3H),2.06 (s, 3H), 1.90 (dd, Л = 11.7 Hz, 72 = 15.9 Hz, 1H), 0.71 (d, 7 = 6.9 Hz, 3H).

¹³C NMR (75 MHz, CDCI3) δ 178.6, 171.9,152.8,146.7, 144.5, 142.6, 140.8,140.5, 136.3,

131.3, 131.0, 129.9, 129.8, 128.9, 1-26.7, 125.2,124.3, 121.1, 120.6, 1 ] 8.9, 117.7, 116.5,

112.8, 112.1,101.6, 68.9, 60.5, 58.9, 57.3, 56.1, 55.9, 55.1, 53.3,41.5, 39.2,25.9, 24.6, 20.9,

15.4, 9.1.

ESI-MS m/z: Изчислено за C40H44N3O8S: 768.8. Намерено (Μ+1)⁺: 769.3.

ПРИМЕР 114

119

Към разтвор на 119 (3.38 g, 4.4 mmol) в метанол (22 ml) при 0°С се прибавя три мети лхлорсилан (2.3 ml, 22 mmol). Реакционната смес се разбърква в продължение на 1.5 часа при 23°С, след което разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се разрежда с етилацетат (100 ml) и се промива с 0.1N солна киселина (2 х 75 ml). Водната фаза се базифицира

212 ··· · · · · · ···· ·· ··· ··· ·· ···· с наситен воден разтвор на натриев бикарбонат и се екстрахира с метиленхлорид (2 х 100 ml). Смесените органични слоеве се сушат над натриев сулфат, филтруват се и разтворителят се отделя при понижено налягане до получаване на 120 (2.47 д, 100%) като бяло твърдо вещество, което се използва в следващите етапи без допълнително пречистване. Rf: 0.26 (етилацетат:метанол 5:1).

'Н NMR (300 MHz, CDCI3) δ 6.45 (s, 1Н), 6.05-5.98 (m, 1H), 5.97 (d, J = 1.2 Hz, 1H),

5.90 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 5.44 (dd, JI = 1.2 Hz, 72 = 17.1 Hz, 1H), 5.35 (dd,77 = 1.2 Hz, = 10.2 Hz, 1H), 4.75-4.71 (m, 2H), 4.12-4.10 (m, 1H), 3.99 (d, 7 = 2.4 Hz, 1H), 3.92 (bs, 1H), 3.73 (s, 3H), 3.36-3.26 (m, 2H), 3.06 (dd, 77 = 8.4 Hz, 72 = 18 Hz, 1H), 2.89 (dd,77 =

2.7 Hz, J2 = 15.9 Hz, 1H), 2.75-2.73 (m, 2H), 2.48 (d, 7 = 18 Hz, 1H), 2.32 (s, 3H), 2.23 (s, 3H), 2.05 (s, 3H), 1.85 (dd, 77 = 11.7 Hz, 72 = 15.6 Hz, 1H).

¹³CNMR (75 MHz, CDCI3) δ 153.0,146.6,144.5,142.8,140.7, 131.5, 130.5, 128.9, 121.3,

120.9,119.1, 117.9,116.7,113.8. 111.6, 101.5, 69.0, 60.6, 59.8, 58.7, 56.5, 56.0, 55.3,44.2,

41.8,31.6,26.1,25.7,15.7,9.2.

ESI-MS m/z: Изчислено за C30H34N4O7:562.6. Намерено (M+1)⁺: 563.2.

ПРИМЕР 115

Към разтвор на 120 (2.57 д, 4.4 mmol) в метиленхлорид (44 ml) при -20°С се прибавят TrocCI (0.91 ml, 6.6 mmol) и пиридин (0.53 ml, 6.6 mmol). Реакционната смес се разбърква в продължение на 30 минути при 0°С, след

213 което разтворът се разрежда с метиленхлорид (50 ml) и се промива с 0.1N солна киселина (2 х 25 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане до получаване на 121 (3.24 д, 100%), който се използва в следващите етапи без допълнително пречистване. Rf: 0.62 (етилацетатметанол 5:1).

’Н NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 6.50 (s, 1Н), 6.07-6.01 (m, 1H), 5.99 (d,7 = 1.2 Hz, 1H),

5.93 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 5.68 (s,.lH), 5.46 (dd,J7 = 1.2 Hz, J2 = 17.1 Hz, lH),5.37(dd, Л = 1.2 Hz, J2 = 10.5 Hz, 1H), 4.74 (t, J = 5.7 Hz, 2H), 4.63-4.62 (m, 1H), 4.54 (d, J = 12 Hz, 1H), 4.30 (d, 7 = 12 Hz, 1H), 4.14-4.11 (m, 2H), 4.02-4.01 (m, 2H), 3.75 (s, 3H), 3.36-

3.26 (m, 3H), 3.04 (dd, JI = 8.1 Hz, J2 = 17.7 Hz, 1H), 2.91 (dd, JI = 2.4 Hz, J2 = 15.6 Hz, 1H), 2.60 (d, J= 17.7Hz, 1Н), 2.31 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 2.04 (s, 3H), 1.84 (dd, JI = 12 Hz, 72= 15.9 Hz, 1H).

ESI-MS m/z: Изчислено за СззНз/ЗЦ^Од: 738.0. Намерено (М+1)⁺: 737.2.

Към разтвор на 121 (0.45 д, 0.60 mmol) в CH3CN (4 ml) при 0°С се прибавят диизопропилеталамин (2.17 ml, 12.46 mmol), бромметилметилов етер (0.76 ml, 9.34 mmol) и диметиламинопиридин (8 mg, 0.062 mmol). Реакционната смес се разбърква в продължение на 5 часа при 40°С, след което разтворът се разрежда с метиленхлорид (50 ml) и се промива с 0.1N солна киселина (2 х 25 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат,

214 ··*· * · * ♦· • · · · ·« ·« · ·· · ··· · · ·· · • · · · · ···· · • · · ·· ··· ···· ·· ··· *·· ·· ···· филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане до получаване на 122 (0.453 д, 95%), който се използва в следващите етапи без допълнително пречистване. Rf: 0.31 (RP-18, CH₃CN-BOfla 8:2).

’НNMR(300 MHz, CDC1₃) δ 6.70 (s, IH), 6.05-5.99 (m, IH), 5.97 (s, IH), 5.92 (s, IH), 5.43 (dd, JI = 1.2 Hz, J2 = 17.1 Hz, IH), 5.34 (dd, JI = 1.2 Hz, J2 = 10.5 Hz, IH), 5.105.04 (m, 2H), 4.72-4.68 (m, 2H), 4.60 (t, J = 5.7 Hz, IH), 4.49 (d, J = 12.3 Hz, IH), 4.38 (d, / = 12.3 Hz, IH), 4.18 (d,/= 2.7 Hz, IH), 4.03-4.00 (m,2H),3.71 (s,3H),3.54 (s, 3H), 3.38-3.22 (m, 4H), 3.04 (dd,/7 =, 7.8 Hz,/2 = 18.3 Hz, 1H),2.91 (dd, Л = 2.4 Hz,/2 =

15.9 Hz, IH), 2.61 (d,/= 18 Hz, IH), 2.31 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.03 (s, 3H), 1.76 (dd,/7 = 11.7 Hz,/2 = 15.6 Hz, IH).

ESI-MS m/z: Изчислено за C33H39CI3N4O10:782.0. Намерено (M+1)⁺: 783.2.

АсОН aq., Zn °C, 6 h

123

Към суспензия на 122 (0.45 g, 0.579 mmol) в 90% водна оцетна киселина (6 ml) се прибавя цинк на прах (0.283 д, 4.34 mmol) и реакционната смес се разбърква в продължение на 6 часа при 23°С. След това реакционната смес се филтрува през слой от селит, който се промива с метиленхлорид (25 ml). Органичният слой се промива с наситен воден разтвор на натриев бикарбонат (pH 9) (2 х 15 ml), суши се над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане до получаване на 123 (0.351

215 » · · · · · ·♦ ΐ • « · · · · · · · · е· • · · · « *«« • · · · · · · с ·· • 9 9 « · 9» ···« ·· ··· »·· ······ g, 100%), който се използва в следващите етапи без допълнително пречистване. Rf: 0.38 (силициев двуокис, етилацетат.метанол 5:1).

*Н NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 6.68 (s, 1Н), 6.06-5.99 (m, 1H), 5.97 (d, J = 1.5 Hz, 1H),

5.91 (d,/ = 1.25 Hz, 1H), 5.44 (dd, J] = 1.5 Hz, J2 = 17.4 Hz, 1H), 5.36 (dd, JI = 1.5 Hz, J2 = 10.2 Hz, 1H), 5.08 (q, J = 5.7 Hz, 2H), 5.74-4.70 (m, 2H), 4.02 (d, J = 3 Hz, 1H), 4.00 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 3.91 (m, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.56 (s, 3H), 3.37-3.35 (m, 1H), 3.29 (t,/ =

2.7 Hz, 1H), 3.08 (dd, JI = 7.5 Hz, /2 = 18 Hz, 1H), 2.90 (dd, JI = 2.7 Hz, /2 = 15.9 Hz, 1H), 2.74 (dd, JI = 2.4 Hz, /2 = 5.1 Hz, 2H), 2.48 (d, J = 18 Hz, 1H), 2.35 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.05 (s, 3H), 1.80 (dd, /7 = 12 Hz, /2 = 15.9 Hz, 2H).

ESI-MS m/z. Изчислено за СзгНзв^Оз: 606.6. Намерено (М+1)⁺: 607.3.

ПРИМЕР 118

Към разтвор на 120 (100 mg, 0.177 mmol) в метиленхлорид (0.7 ml) при 0°С се прибавят синамоилхлорид (29.5 mg, 0.177 mmol) и пиридин (14.37 μΙ, 0.177 mmol). Реакционната смес се разбърква в продължение на 1.5 часа, след което разтворът се разрежда с метиленхлорид (15 ml) и се промива с 0.1N солна киселина (10 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, градиент от хексан:етилацетат 2:1 до хексан:етилацетат 1:3) до получаване на 124 (86 mg, 70%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.77 (етилацетагметанол 5:1).

216 • · 0 ♦· · · · · ·< ·· ··· · . · · · · ···· - ·· · ·· _ ····»

............

’Η NMR (300 MHz, CDCh) δ 7.39-7.26 (m, 5H), 7.25 (d, J = 15.6 Hz. 1H), 6.44 (s, 1H),

6.01 (d, J = 1.2 Hz, l.H), 5.94 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 5.68 (s, 1H), 5.65 (d, J = 15.6 Hz, 1H),

5.44 (dd, JI = 1.2 Hz, J2 = 17.1 Hz, 1H), 5.35 (dd, JI = 1.2 Hz, J2 = 10.5 Hz, 1H), 5.18 (t, J = 6 Hz, 1H), 4.73-4.69 (m, 2H), 4.11-4.09 (m, 3H), 3.66-3.58 (m, 2H), 3.65 (s, 3H), 3.38-

3.31 (m, 3H), 3.02 (dd, JI = 8.4 Hz, J2 = 18.3 Hz, 1H), 2.92 (dd, JI = 2.7 Hz, J2 = 15.6 Hz,

1H), 2.59 (d, J = 18.3 Hz, 1H), 2.31 (s, 3H), 2.05 (s, 3H), 2.02 (s, 3H), 1.89 (dd, JI = 12.3

Hz, J2 = 16.2 Hz, 1H).

¹³CNMR(75 MHz,CDCl₃)5 165.5,152.7, 146.6,144.4,142.6, 140.7,140.5, 140.1,134.7,

131.2, 130.6,129.3,128.7,128.4, 127.6,120.8, 120.5, 120.3, 118.9, 117.6,116.5, 113.2,

111.8,101.6,68.8, 60.4, 59.0, 56.2, 56.1, 55.7, 55.0,41.5,40.6, 25.9,25.1,15.5, 9.0.

ESI-MS m/z: Изчислено за CdWIA: Θ92.7. Намерено (M+1)⁺: 693.2.

ПРИМЕР 119

Към разтвор на 124 (495 mg, 0.713 mmol) в метиленхлорид (28 ml) при 0°С се прибавят оцетна киселина (163 μΙ), Р0(РР1гз)2С1г (50 mg, 0.0713 mmol) и Bu₃SnH (384 μΙ, 1.42 mmol). Реакционната смес се разбърква в продължение на 2 часа при 23°С, след което разтворът се излива в хроматографска колона под налягане (силициев двуокис, градиент от хексан:етилацетат 1:1 до етилацетат) до получаване на 125 (435 mg, 100%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.22 (хексан:етилацетат 1:2).

217 • · • · •·· · ···· ’ΗNMR (300 MHz, CDCI3) δ 7.36-7.33 (m, 5H), 7.28 (d, J = 15,*9 Hz, IH),’ б’Л’£ (s, IH),

5.90 (s, IH), 5.83 (s, IH), 5.55 (d, J= 15.6 Hz, IH), 5.24 (t, J= 12.9 Hz, IH), 4.17 (d, J

1.8 Hz, IH), 4.10-4.07 (m, 2H), 3.72 (s, 3H), 3.46-3.32 (m, 3H), 3.14-3.00 (m, 2H), 2.54 (d, J= 18 Hz, IH), 2.32 (s, 3H), 2.05 (s, 6H), 1.89 (dd,Λ = 12 Hz,72 = 15.3 Hz, IH). ¹³CNMR(75 MHz, CDCI3) δ 165.7,146.9, 145.1, 144.2,143.0, 140.8, 136.5, 134.5, 130.6,

129.4, 128.9,127.9, 127.7, 120.8,119.8, 117.8,114.1, 112.9, 107.1, 100.8, 60.5, 59.2, 56.4, 56.0, 55.1,41.4, 30.7, 25.5, 25.3,15.5, 8.9.

ESI-MS m/z: Изчислено за C35H36N4O6:608.6. Намерено (M+1)⁺: 609.2.

ПРИМЕР 120

Към разтвор на 125 (86 mg, 0.124 mmol) в СНзСИ/вода (1.5 ml/0.5 ml) се прибавя сребърен нитрат (632 mg, 3.72 mmol) и реакционната смес се разбърква при 23°С в продължение на 24 часа. При 0°С се прибавят разсол (10 ml) и наситен воден разтвор на натриев бикарбонат (10 ml) и сместа се разбърква в продължение на 15 минути, филтрува се през слой от селит и се промива с метиленхлорид (20 ml). Разтворът се екстрахира и органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и се концентрира под вакуум. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, градиент от етилацетат до етилацетатметанол 2:1) до получаване на 126 (70 mg, 83%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.07 (етилацетатметанол 5:1).

218 • ·

'Η NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 7.40-7.28 (m, 5H), 7.25 (d, J = 15.6 Hz, 1H), 6.48 (s, 1H), 6.00-5.94 (m, 1H), 5.96 (s, 1H), 5.92 (s, 1H), 5.89 (s, 1H), 5.53 (d, J = 15.6 Hz, 1H), 5.425.36 (m, 2H), 5.31 (dd, Λ = 1.2 Hz, J2 = 10.8 Hz, 1H), 4.71-4.65 (m, 2H), 4.51 (d, J = 3 Hz, 1H), 4.42 (bs, 1H), 4.07 (bs, 1H), 3.79 (dd, J, = 6.9 Hz, J2 = 12.9 Hz, 1H), 3.68 (s, 3H), 3.62-3.59 (m, 1H), 3.41-3.37 (m, 1H), 3.16 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 2.95 (dd, J, = 7.5 Hz, J2 =

17.4 Hz, 1H), 2.88-2.83 (m, 1H), 2.43 (d, J = 18 Hz, 1H), 2.28 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 2.00 (s, 3H), 1.81 (dd, J; = 11.7 Hz,/2 = 15.3 Hz, 1H).

¹³C NMR (75 MHz, CDCI3) δ 165.5,152.9,146.7, 144.5,144.4,142.7,141.0,140.0,134.6,

131.4,130.7, 129.2, 128.8,128.5,127.8,127.7, 124.6,121.2, 120.9,118.9, 116.5,114.9,

114.7,111.3, 101.6, 93.3, 92.3, 83.2, 68.9, 60.6, 57.8, 56.8, 56.6, 56.3, 52.5,52.2, 41.6, 26.1,

24.6,15.6,9.1. ’

ESI-MS m/z: Изчислено за C38H41N3O9:683.7. Намерено (M-17)⁺: 666.3.

ПРИМЕР 121

Към разтвор на 120 (1.61 д, 2.85 mmol) в метиленхлорид (4 ml) при 0°С се прибавят хидросинамоилхлорид (423 μΙ, 2.85 mmol) и пиридин (230 μΙ, 2.85 mmol). Реакционната смес се разбърква в продължение на 1.5 часа, след което разтворът се разрежда с метиленхлорид (50 ml) и се промива с 0.1N солна киселина (30 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев

219 двуокис, градиент от хексан.етилацетат 2.1 до етилацетат) до получаване на

127 (1.64 д, 83%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.63 (етилацетат:метанол

5:1).

'Н NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 7.26-7-14 (m, ЗН), 7.04-7.01 (m, 2H), 6.44 (s, 1H), 6.07-5.99 (m, 1H), 5.97 (d, J= 1.5 Hz, 1H),·5.91 (d, 1.5 Hz, 1H), 5.75 (bs, 1H), 5.45 (dd,J/ =

1.5 Hz, J2 = 17.4 Hz, 1H), 5.36 (dd, J_} = 1.5 Hz, J2 = 10.2 Hz, 1H), 5.03 (t, J = 5.7 Hz, 1H), 5.74-5.66 (m, 2H), 4.09 (d, 2.4 Hz, 1H), 4.01 (bs, 1H), 3.97 (d, J = 2.7 Hz, 1H),

3.62 (dd, Ji = 8.4 Hz, J2 = 13.5 Hz, 1H), 3.42 (s, 3H), 3.37-3.28 (m, 3H), 3.04-2.87 (m, 3H), 2.67-2.46 (m, 4H), 2.29 (s, 3H), 2.05 (s, 3H), 2.03 (s, 3H), 1.83-1.79 (m, 1H).

¹³CNMR (75 MHz, CDC1₃) δ 171.8, 152.8, 146.7,144.5, 144.4, 142.7, 140.9,140.8,140.6,

131.4, 130.7, 128.9, 128.4, 128.2, 128.1, 126.0,120.8,120.4,118.9, 117.6, 116.6, 113.0,

111.9, 101.6, 68.9,60.3, 59.0, 56.3, 56.2, 55.6, 55.1,41.6,40.3,37.7, 31.0,25.9, 25.2,15.5,

9.1.

ESI-MS m/z: Изчислено за C39H42N4O8: 694.3. Намерено (M+1)⁺: 695.3.

ПРИМЕР 122

Към разтвор на 127 (50 mg, 0.072 mmol) в СНзСИ/вода (1.5 ml/1 ml) се прибавя сребърен нитрат (444 mg, 2.16 mmol) и реакционната смес се разбърква при 23°С в продължение на 24 часа. При 0°С се прибавят разсол (10 ml) и наситен воден разтвор на натриев бикарбонат (10 ml) и сместа се разбърква в продължение на 15 минути, филтрува се през слой от селит и се

220 промива с метиленхлорид (15 ml). Разтворът се екстрахира и органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и се концентрира под вакуум. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, градиент от етилацетат до етилацетат:метанол 3:1) до получаване на 128 (30 mg, 61%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.65 (етилацетат:метанол 5:1).

’HNMR (300 MHz, CDC1₃) δ 7.22-7.11 (ш, ЗН), 7.06-7.03 (m, 2Н), 6.43 (s, IH), 6.08-5.98 (m, IH), 5.96 (d, 7= 1.5 Hz, IH), 5.90 (d, J =1.5 Hz, IH), 5.66 (bs, IH), 5.44 (dd, Λ = 1.5 Hz, J2 = 17.4 Hz, IH), 5.36 (dd,7_z = 1.5 Hz,72 = 10.5 Hz, IH), 4.78-4.65 (m, 2H), 4.44 (d, 7 = 3 Hz, IH), 4.36 (bs, IH), 3.99 (td,77 = 2.1 Hz,72 = 9.9 Hz, IH), 3.78-3.67 (m, IH),

3.56 (dt, JI = 1.5 Hz, J2 = 11.1 Hz, IH), 3.43 (s, 3H), 3.30-3.12 (m, 2H), 3.02-2.89 (m, IH), 2.83 (dd, 77 = 2.7 Hz, J2 = 15.9 Hz, IH), 2.62-2.51 (m, 2H), 2.36 (d, 7 = 18.6 Hz, IH), 2.27 (s, 3H), 2.02 (s, 3H), 2.00 (s, 3H), 1.86-1.66 (m, 3H).

¹³C NMR (75 MHz, CDCI3) δ 171.6, 146.7,141.2,141.1,131.5, 130.5,128.9,128.3, 128.2,

128.2,125.9,124.7, 121.1,121.0,118.8,111.3, 101.6,94.0, 83.2,68.8, 60.3,57.9, 56.6,

56.3, 52.3, 52.0, 41.7, 41.6,41.1, 37.9, 31.1, 31.0,26.1,24.6,15.5, 9.2..

ESI-MS m/z: Изчислено за C38H43N3O9:685.7. Намерено (M-17)⁺: 668.3.

Към разтвор на 127 (1.64 д, 2.36 mmol) в CH₃CN (12 ml) при 0°С се прибавят диизопропилетиламин (8.22 ml, 47.2 mmol), бромметилметилов етер

221 • · ··· ·· ···· (2.89 ml, 35.4 mmol) и диметиламинопиридин (29 mg, 0.236 mmol). Реакционната смес се нагрява в продължение на 5 часа при 40°С, след което разтворът се разрежда с метиленхлорид (80 ml) и се промива с 0.1N солна киселина (3 х 25 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане до получаване на 129 (1.46 д, 84%), който се използва в следващите етапи без допълнително пречистване. Rf: 0.24 (RP-18, СН₃СМ-вода 8:2).

ESI-MS m/z: Изчислено за C₄iH46N₄O₉: 738.8. Намерено (М+23)⁺: 761.2.

ПРИМЕР 124

Към разтвор на 129 (1.46 д, 1.97 mmol) в метиленхлорид (40 ml) при 0°С се прибавят оцетна киселина (450 μΙ), Pd(PPh₃)2CI₂ (138 mg, 0.197 mmol) и Bu₃SnH (1.06 ml, 3.95 mmol). Реакционната смес се разбърква в продължение на 5 часа при 23°С, след което разтворът се излива в хроматографска колона под налягане (силициев двуокис, градиент от хексан:етилацетат 1:1 до етилацетат) до получаване на 130 (1.1 д, 85%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.22 (хексан:етилацетат 1:2).

’HNMR(300 MHz, CDCh) δ 7.21-7.12 (m, ЗН), 6.98-6.95 (m, 2Н), 5.86 (s. IH), 5.84 (s, IH), 5.79(bs, lH),5.26(d, 7= 6 Hz, 1H),5.11 (d, 7= 6 Hz, 1H),5.O5 (t, 7 =5.7 Hz, IH),

4.19 (d, 7 = 2.4 Hz, IH), 4.03 (d, 7 = 2.4 Hz, IH), 3.99 (bs, IH), 3.65 (s, 3H), 3.56 (s, 3H),

3.53-3.42 (m, 2H), 3.34 (d, 7 =8.7 Hz, IH), 3.27 (brd, 7= 11.7 Hz, IH), 3.11 (d, 7= 15 Hz, IH), 2.99 (dd,77 = 8.4 Hz,72 = 18.3 Hz, IH), 2.64-2.52 (m, 3H), 2.29 (s, 3H), 2.08 (s, 3H), 2.06 (s, 3H), 1.84 (t, 7= 7.8 Hz, 2H), 1.71 (dd, 72 = 12.9 Hz, 72 = 13.5 Hz, IH).

222 • · · · • · · · · • ·· • · ·· • ·· • · · · · · _e • · • · · • · • · • · ¹³CNMR(75 MHz, CDC1₃)6 171.7, 149.0, 147.6,140.6,132.1,131.9,130.9,130.5,128.5,

128.4, 128.3, 128.0, 126.0,124.9, 124.6, 123.1, 117.6, 100.8, 99.6, 59.6, 58.9, 57.6, 56.6,

56.5,55.6, 55.1, 41.5, 37.8,31.5, 31.1,25.9,25.1, 22.6,15.5, 8.8.

ESI-MS m/z: Изчислено за C37H42N4O7: 654.7. Намерено (M⁺+Na): 655.1.

ПРИМЕР 125

Към разтвор на 130 (130 mg, 0.198 mmol) в метиленхлорид (1 ml) при 0°С се прибавят трифлуорацетил анхидрид (41.9 μΙ, 0.297 mmol) и пиридин (24 μΙ, 0.297 mmol). Реакционната смес се разбърква в продължение на 2.5 часа, след което разтворът се разрежда с метиленхлорид (10 ml) и се промива с 0.1N солна киселина (7 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, градиент от хексан.етилацетат 4:1 до хексан.етилацетат 1:4) до получаване на 131 (93 mg, 62%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.30 (хексан:етилацетат 1:2).

'HNMR (300 MHz, CDC1₃) δ 7.25-7.16 (m, ЗН), 7.04-7.02 (m, 2H), 6.78 (s, IH), 6.02 (d, J = 1.2 Hz, IH), 5.95 (d, J = 1.2 Hz, IH), 5.11 (d, J = 6.6 Hz, IH), 4.98 (d, J = 6.6 Hz, IH),

4.95 (t, J = 6.3 Hz, IH), 4.61 (bs, IH), 4.30 (s, IH), 4.08 (s, IH), 3.96 (d, J = 7.2 Hz, IH),

3.66-3.54 (m, IH), 3.50 (s, 3H), 3.39 (s, 3H), 3.19 (dd, JI = 7.8 Hz, J2 = 18.3 Hz, IH), 2.88 (d, J = 18.6 Hz, IH), 2.79 (dd, JI =2.7 Hz, J2 = 15.9 Hz, IH), 2.66-2.62 (m, IH), 2.57 (s, 3H), 2.06 (s, 6H), 1.94-1.87 (m, IH), 1.77-1.68 (m, 2H).

223

ESI-MS m/z: Изчислено за Ο^Η^Ν^: 750.7. Намерено (M+Na)⁺: 751.2.

ПРИМЕР 126

Към разтвор на 130 (130 mg, 0.198 mmol) в метиленхлорид (2 ml) при 0°С се прибавят хлорацетилхлорид (23.65 μΙ, 0.297 mmol) и пиридин (24 μΙ, 0.297 mmol). Реакционната смес се разбърква в продължение на 1.5 часа, след което разтворът се разрежда с метиленхлорид (10 ml) и се промива с 0.1N солна киселина (7 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, градиент от хексан :етилацетат 2:1 до хексан :етилацетат 1:1) до получаване на 132 (130 mg, 90%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.31 (хексан :етилацетат 1:2).

'Н NMR (300 MHz, CDC1₃) 5 7.24-7.15 (m, ЗН), 7.07-7.05 (m, 2Н), 6.69 (s, IH). 6.00 (d, J = 1.5 Hz, IH), 5.94 (d, J = 1.5 Hz, IH), 5.11 (d, J = 5.7 Hz, IH), 5.04 (d. J = 5.7 Hz, IH), 4.93 (m, IH), 4.36 (s, 2H), 4.16 (d, J = 2.7 Hz, IH), 4.01 (m, 2H), 3.64 (dd, JI = 6.9 Hz, J2 = 12.3 Hz, IH), 3.54 (s, 3H), 3.40 (s, 3H), 3.38-3.35 (m, 2H), 2.29 (dt, JI = 3 Hz, J2 = 12 Hz, IH), 3.03 (dd, 77 =7.8 Hz, 72 = 18 Hz, IH), 2.77 (dd, 77 = 2.4 Hz, 72 = 16.2 Hz, IH), 2.58-2.52 (m, 3H), 2.32 (s, 3H), 2.02 (s, 3H), 1.92-1.85 (m, IH), 1.76-1.65 (m, 2H).

¹³C NMR (75 MHz, CDCI3) δ 171.6,164.9,148.3,144.6,140.9, 140.8, 139.8, 132.1, 131.9, 131.1,130.0, 128.2, 126.0,125.0, 124.6,123.5,120.1,117.5, 113.0, J 11.5, 101.7, 99.1, 64.9,

59.7, 58.9, 57.7, 56.6, 56.4, 55.2, 55.1,41.5, 40.2,39.9, 37.7, 30.9, 26.3, 25.1, 15.4, 9.1.

224

ESI-MS m/z: Изчислено за C3SH43CIN4O8: 730.2. Намерено (М + 1)⁺: 731.1.

ПРИМЕР 127

Към разтвор на 130 (130 mg, 0.198 mmol) в метиленхлорид (2 ml) при 0°С се прибавят хлорпропионилхлорид (28.35 μΙ, 0.297 mmol) и пиридин (24 μΙ, 0.297 mmol). Реакционната смес се разбърква в продължение на 1.5 часа, след което разтворът се разрежда с метиленхлорид (10 ml) и се промива с 0.1N солна киселина (7 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, хексан:етилацетат 1:1) до получаване на 133 (94 mg, 64%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.43 (хексан:еталацетат 1:2).

*НNMR (300 MHz, CDCI3) 5 7.23-7.12 (m, ЗН), 7.06-7.04 (m, 2Н), 6.69 (s, IH), 5.97 (s, IH), 5.92 (s, IH), 5.08 (d, J= 6 Hz, IH), 5.00 (d, J= 6 Hz, IH), 4.97 (m, IH), 4.16 (bs, IH), 4.00 (m, IH), 3.88 (t, J =6.9 Hz, 2H), 3.75 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 3.59 (dd, JI = 6.3 Hz, J2 = 12.3 Hz, IH), 3.53 (s, 3H), 3.37 (s, 3H), 3.03-3.26 (m, IH), 3.17-2.97 (m, 3H), 2.83-

2.73 (m, 2H), 2.58-2.52 (m, 3H), 2.31 (s, 3H), 2.03 (s, 6H), 1.93-1.86 (m, IH), 1.79-1.64 (m, 2H).

¹³CNMR(75 MHz, CDCI3) δ 171.9,167.8,148.3,144.7,140.8,132.1, 132.0, 131.1,130.2,

128.2, 126.1, 125.2, 124.6, 123.7, 122.2,120.2, 117.6,114.7, 112.9,111.8, 101.7, 99.3,74.9, 65.0, 59.6, 59.0, 57.7, 56.7, 56.4, 55.4,55.1,41.5,38.5,37.8, 37.2,31.0, 26.4, 25.2, 15.5,

9.3.

225 • ·

ESI-MS m/z: Изчислено за C40H45CIN4O8. 744.2. Намерено (М + 1)⁺: 745.0.

ПРИМЕР 128

Към разтвор на 130 (160 mg, 0.244 mmol) в метиленхлорид (2 ml) при 0°С се прибавят хептафлуорбутирилхлорид (54.5 μΙ, 0.366 mmol) и пиридин (40 μΙ, 0.49 mmol). Реакционната смес се разбърква в продължение на 2 часа, след което разтворът се разрежда с метиленхлорид (15 ml) и се промива с 0.1 N солна киселина (10 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, градиент от хексан:етилацетат 2:1 до хексан.етилацетат 1:4) до получаване на 134 (120 mg, 63%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.40 (хексан:етилацетат 1:2).

’НNMR (300 MHz, CDCI3) δ 7.25-7.16 (m, ЗН), 7.04-7.02 (m, 2Н), 6.77 (s, IH), 6.02 (d,

J = 1.5 Hz, 1H), 5.96 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 5.11 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 4.95 (d, J = 6.6 Hz, IH), 4.94 (m, IH), 4.58 (m, IH), 4.25 (bs, IH), 4.06 (bs, IH), 3.88 (d, J = 6.9 Hz, IH), 3.64 (dd, JI = 7.5 Hz, 72 = 12.9 Hz, Ш), 3.55-3.53 (m, IH), 3.49 (s, 3H), 3.38 (s, 3H), 3.17 (dd, JI =8.1 Hz, 72 = 18.9 Hz, IH), 2.85 (d, J = 18.3 Hz, 1H), 2.77 (dd, 77 = 2.7 Hz, 72 = 16.2 Hz, IH), 2.60-2.57 (m, 3H), 2.56 (s, 3H), 2.06 (s, 3H), 2.03 (s, 3H), 1.96-1.88 (m, IH), 1.79-

1.69 (m, 2H).

226

ESI-MS m/z: Изчислено за C₄₁H₄iF₇N₄O₈: 850.7. Намерено (M+1)⁺: 851.3.

ПРИМЕР 129

Към разтвор на 131 (93 mg, 0.123 mmol) в метиленхлорид (1 ml) при 0°С се прибавя трифлуороцетна киселина (381 μΙ, 4.95 mmol) и реакционната смес се разбърква в продължение на 6 часа при 23°С. Реакцията се спира при 0°С с наситен воден разтвор на натриев бикарбонат (15 ml) и се екстрахира с етилацетат (2x10 ml). Смесените органични слоеве се сушат над натриев сулфат, филтруват се и разтворителят се отделя при понижено налягане до получаване на 135 (65 mg, 75%) като бяло твърдо вещество, което се използва в следващите етапи без допълнително пречистване. Rf: 0.26 (хексан: етилацетат 1:1).

’Н NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 7.24 - 7.15 (m, ЗН), 7.04 - 7.01 (m, 2Н), 6.45 (s, 1Н), 6.03 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 5.97 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 5.62 (s, 1H), 4.97 (m, 1H), 4.09 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 4.03 (bs, 1H), 3.99 (d, 7 = 2.4 Hz, 1H),3.73 (dd, Jl=7.5 Hz, 72 = 12 Hz, 1H), 3.38 (s, 3H), 3.34 - 3.28 (m, 3H), 3.05 (dd, Jl= 8.4 Hz, 72 = 18.3 Hz, 1H), 2.75 (dd, Jl= 3.3 Hz, 72 = 16.5 Hz, 1H), 2.60 - 2.47 (m, 3H), 2.30 (s, 3H), 2.05 (s, 3H), 2.02 (s, 3H), 1.91 -1.65 (m, 3H).

ESI-MS m/z: Изчислено за Сз₇Н₃₇Р₃М₄О₇:706.2. Намерено (M+1)⁺. 707.2.

227

ПРИМЕР 130

Към разтвор на 132 (130 mg, 0.177 mmol) в метиленхлорид (1 ml) при 0°С се прибавя трифлуороцетна киселина (545 μΙ, 7.08 mmol) и реакционната смес се разбърква в продължение на 3.5 часа при 23°С. Реакцията се спира при 0°С с наситен воден разтвор на натриев бикарбонат (15 ml) и се екстрахира с етилацетат (2 х 10 ml). Смесените органични слоеве се сушат над натриев сулфат, филтруват се и разтворителят се отделя при понижено налягане до получаване на 136 (118 mg, 97%) като бяло твърдо вещество, което се използва в следващите етапи без допълнително пречистване. Rf: 0.27 (хексан: етилацетат 1:1).

'Н NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 7.23 - 7.13 (m, ЗН), 7.06 - 7.03 (m, 2Н), 6.45 (s. IH), 5.98 (d, J= 1.2 Hz, IH), 5.91 (d, 7= 1.2 Hz, IH), 5.04 (t, 7 = 4.5 Hz, IH), 4.37 (bs, 2H), 4.13 (d, 7 = 2.1 Hz, IH), 4.03 (bs, 2H), 3.68 - 3.61 (dd, Jl= 7.2 Hz,72 = 12.3 Hz IH), 3.40 (s 3H), 3.37 - 3.28 (m, 3H), 3.02 (dd, Jl= 8.4 Hz, 72 = 18.6 Hz IH), 2.75 (dd, Jl= 2.7 Hz, J2= 15.9 Hz IH), 2.58 - 2.50 (m, 3H), 2.32 (s, 3H), 2.01 (s, 6H), 1.94 - 1.67 (m, 3H).

¹³C NMR (75 MHz, CDCI3) δ 171.8, 165.0, 146.8, 144.6,142.9, 141.0, 140.9, 139.8, 132.0,

130.3,129.4, 128.5, 128.3,126.0, 120.8,120.1, 117.4, 116.1,113.0,111.5, 101.7, 60.5,58.7,

56.3, 56.2, 55.2, 55.0,41.5,40.4, 39.5, 37.7, 31.0,29.6, 26.4,25.3,15.5, 9.2.

ESI-MS m/z: Изчислено за C37H39CIN4O7: 686.2. Намерено (Μ +1)*: 687.2.

228 • ·

Към разтвор на 133 (94 mg, 0.126 mmol) в метиленхлорид (1 ml) при 0°С се прибавя трифлуороцетна киселина (385 μΙ, 5.0 mmol) и реакционната смес се разбърква в продължение на 2.5 часа при 23°С. Реакцията се спира при 0°С с наситен воден разтвор на натриев бикарбонат (15 ml) и се екстрахира с етилацетат (2x10 ml). Смесените органични слоеве се сушат над натриев сулфат, филтруват се и разтворителят се отделя при понижено налягане до получаване на 137 (118 mg, 97%) като бяло твърдо вещество, което се използва в следващите етапи без допълнително пречистване. Rf: 0.24 (хексан: етилацетат 1:1).

’Н NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 7.25-7.14 (m, ЗН), 7.05-7.03 (m, 2Н), 6.44 (s. 1Н), 5.98 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 5.92 (d, J =1.5 Hz, 1H), 5.82 (s, 1H), 5.20 (t, J = 4.8 Hz. 1H), 4.07 (d, J = 2.1 Hz, lH),5.82(s, 1H), 5.20(1, J =4.8 Hz, lH),4.07(d, /=2.1 Hz, 1H), 4.01 (bs, 1H), 3.98 (d, / = 2.4 Hz, 1H), 3.93-3.84 (m, 2H), 3.63 (ddd, JI = 1.5 Hz, J2 = 6.9 Hz, J3 = 12 Hz, 1H), 3.44 (bs, 3H), 3.37-3.26 (m, 3H), 3.11-3.06 (m, 2H), 3.01 (dd./7 = 8.4 Hz,/2 = 18.3 Hz, 1H), 2.80 (brd, /= 13.8 Hz, 1H), 2.58-2.47 (m, 3H), 2.29 (s, 3H), 2.03 (s, 3H), 2.01 (s,3H), 1.93-1.68 (m,3H).

ⁿCNMR(75 MHz, CDCI3) δ 171.7, 168.0,146.7,144.6,142.8,142.1,141.0, 140.8, 140.1,

130.7, 129.0, 128.2,126.0,122.2,120.9,116.7,114.7,113.1, 111.7, 102.3, 101.7,72.0, 60.4,

59.1, 56.4, 56.3, 55.7, 55.2, 41.7, 40.3, 38.8, 37.8, 37.1, 31.0,26.4, 25.2, 15.5, 9.4.

230

AcCI, py

------►

CH2CI2.4 h

0°C — 23°C

Към разтвор на 136 (45 mg, 0.065 mmol) в метиленхлорид (0.3 ml) при

0°С се прибавят ацетилхлорид (4.65 μΙ, 0.065 mmol) и пиридин (5.2 μΙ, 0.065 mmol). Реакционната смес се разбърква в продължение на 4 часа, след което разтворът се разрежда с метиленхлорид (15 ml) и се промива с 0.1N солна киселина (7 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, градиент от хексан :етилацетат 5:1 до етилацетат) до получаване на 139 (27 mg, 57%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.36 (хексан :етилацетат 1:2).

’HNMR (300 MHz, CDC1₃) δ 7.26 - 7.14 (m, ЗН), 7.07 - 7.04 (m, 2H), 6.84 (s, 1H), 6.00 (d, /=1.2 Hz, 1H), 5.94 (d,/= 1.2 Hz, 1H),4.94 (t,/= 5.1 Hz, 1H), 4.39 - 4.38 (m, 2H), 4.02 (bs, 2H), 3.67 (d, /= 3 Hz, 1H), 3.60-3.54 (m, 1H), 3.47-3.35 (m, 3H), 3.42 (s, 3H), 3.26 (dt, // = 4.8 Hz, /2 = 8.7 Hz 1H), 3.02 (dd, // = 8.1 Hz, /, = 18.3 Hz, 1H), 2.64 - 2.38 (m, 3H), 2.35 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 2.06 (s, 3H), 2.03 (s, 3H), 1.95 - 1.69 (m, 3H).

ESI-MS m/z: Изчислено за C39H41CIN4O8: 729.2. Намерено (M+23)⁺: 752.3.

ПРИМЕР 134

231

Към разтвор на 2 (15 mg, 0.0273 mmol) в метиленхлорид (0.2 ml) при 0°С се прибавят ацетилхлорид (1.94 μΙ, 0.0273 mmol) и пиридин (2.20 μΙ, 0.0273 mmol). Реакционната смес се разбърква в продължение на 20 минути, след което разтворът се разрежда с метиленхлорид (15 ml) и се промива с 0.1N солна киселина (5 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, градиент от етилацетат до етилацетат:метанол 5:1) до получаване на 140 (9 mg, 56%) като светложълто твърдо вещество. Rf: 0.56 (етилацетат: метанол 5:1).

‘Н NMR (300 MHz, CDCh) δ 6.52 (s, 1H), 6.40 (s, 1H), 5.73 (d, J= 7.5 Hz, Ш), 4.95 (d, J=

6.9 Hz, 1H), 4.20 (d,7= 1.5 Hz, 1H), 4.00 (s, 3H), 3.86 (d,7= 4.5 Hz, 1H), 3.79 (s, 3H),

3.78-3.77 (m, 1H), 3.40-3.35 (m, 2H), 3.24 (dt,, 7/= 3.6 Hz, 7/= 11.4 Hz, 1H), 3.17 (d,7=

7.8 Hz, 1H), 3.11 (d, 7= 7.5 Hz, 1H), 3.04 (dd, 7/= 3.6 Hz, 7/= 18.6 Hz, 1H), 2.92 (dt, ,7/=

3.3 Hz, 7/= 14.1 Hz, 1H), 2.43 (d, 7= 18.0 Hz, 1H), 2.37 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 1.89 (s, 3H),

1.79 (s, 3H), 1.75 (dd, 7/= 2.7 Hz, J₂= 6.9 Hz, 1H), 0.99 (d, 7= 7.5 Hz, 3H).

ESI-MS m/z: Изчислено за C31H37N5O7: 591.6. Намерено (M+1)⁺: 592.3.

ПРИМЕР 135

232

Към разтвор на 2 (15 mg, 0.0273 mmol) в метиленхлорид (0.2 ml) при 23°С се прибавя трифлуорацетил анхидрид (3.85 μΙ, 0.0273 mmol). Реакционната смес се разбърква в продължение на 30 минути, след което разтворът се разрежда с метиленхлорид (15 ml) и се промива с 0.1 N солна киселина (5 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, градиент от етилацетат до етилацетатметанол 4:1) до получаване на 141 (12.1 mg, 69%) като светложълто твърдо вещество. Rf: 0.73 (етилацетатметанол 5:1).

’HNMR(300 MHz, CDC1₃)6 6.9O (d, 7=6.6 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 5.11 (d, 7= 6.6 Hz, 1H),

4.47 (bs, 1H), 4.23 (bs, 1H), 3.97 (s, 3H), 3.93 (bs, 1H), 3.85-3.81 (m, 1H), 3.77 (s, 3H),

3.40-3-36 (m, 2H), 3.23 (dd,7/= 7.2 Hz,T₂= 18.6 Hz, 1H), 3.13-3.08 (m, 3H), 1.86 (s, 3H),

1.74 (dd, Jr 10.8 Hz,7₂= 16.8 Hz, 1H), 1.07 (d,7= 6.9 Hz, 3H).

ESI-MS m/z: Изчислено за C31H34F3N5O7: 645.6. Намерено (M+1)⁺: 646.3.

ПРИМЕР 136

233 ···· · · · · · • · · · · * ·· · · · · • · · · · · е> · • · · · · ····· ··· · · ··· ···· ·· ··· ··· ·· ····

Към разтвор на 45 (30 mg, 0.058 mmol) в метиленхлорид (0.87 ml) при стайна температура се прибавят DIPEA (15 ml, 0.086 mmol), EDC.HCI (27.6 mg, 0.145 mmol), N-Вос-фенилаланин (22.9 mg, 0.086 mmol) и DMAP (0.7 mg, 0.006 mmol) и реакционната смес се разбърква в продължение на 4 часа. След това разтворът се разрежда с метиленхлорид (10 ml) и успешно се промива с 0.1N солна киселина (5 ml) и 10% разтвор на натриев бикарбонат (5 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, хексан:етилацетат 1:2) до получаване на 174 (17 mg, 38%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.35 (хексан:етилацетат 1:2).

’HNMR (300 MHz, CDCI3) 7.24-7.15 (m, ЗН), 7.05-7.02 (m, 2Н), 6.43 (s, 1Н), 5.88 (s, 1H), 5.78 (s, 1H), 5.64 (s, 1H), 5.63 (bs, 1H), 4.80 (bs, 1H), 3.98 (s, 1H), 3.85 (bs, 2H), 3.75 (bs, 1H), 3.58 (bs, 1H), 3.53 (bs, 3H), 3.38 (m, 1H), 3.17-3.10 (m, 3H) 2.90 (dd, 7/ = 8.7 Hz, J₂ = 17.7 Hz, 1H), 2.73 (d, 7 = 14.4 Hz, 1H), 2.57 (m, 1H), 2.43-2.37 (m, 1H), 2.25 (s, 3H),

2.24 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.94 (s, 3H), 1.76 (dd, 7/ = 12.3 Hz, 7? = 15.6 Hz, 1H), 1.19 (bs, 9H). ¹³C NMR (75 MHz, CDCI3) 171.2,168.8,146.6,144.6,142.8, 140.6, 137.0,130.7,

129.5, 129.0, 128.4,126.8, 121.1, 121.0, 117.8, 116.7, 113.3, 111.8, 101.5, 60.5,59.7, 57.0,

56.4, 55.3,41.9,41.6, 38.7,31.6,29.7,28.2,26.5, 25.2,22.6,20.3,15.7, 14.1,9.3.

234

ESI-MS m/z: Изчислено за C42H49N5O9: 767.87. Намерено (Μ +1)⁺: 768.3.

ПРИМЕР 137

175

Към разтвор на 45 (30 mg, 0.058 mmol) в метиленхлорид (0.87 ml) при стайна температура се прибавят DIPEA (15 ml, 0.086 mmol), EDC.HCI (27.6 mg, 0.145 mmol), N-Вос-валин (18.8 mg, 0.086 mmol) и DMAP (0.7 mg, 0.006 mmol) и реакционната смес се разбърква в продължение на 4 часа. След това разтворът се разрежда с метиленхлорид (10 ml) и успешно се промива с 0.1N солна киселина (5 ml) и 10% разтвор на натриев бикарбонат (5 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, хексан:етилацетат 1:2) до получаване на 175 (18 mg, 43%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.25 (хексан :етил ацетат 1:1).

’НNMR (300 MHz, CDCI3) δ 6.42 (s, IH), 5.97 (s, IH), 5.82 (s, IH), 5.73 (bs, IH), 5.50 (bs, IH), 4.82 (bs, IH), 4.15 (bs, IH), 4.03 (bs, IH), 3.96 (bs, IH), 3.72 (s, 3H), 3.61 (m, IH), 3.41-3.15 (m, 3H), 2.96 (dd, J, = 8.4 Hz, J₂ = 18.3 Hz, IH), 2.72 (d, J= 16.5 Hz, IH), 2.53 (d, 7= 18 Hz, IH), 2.25 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 1.93 (s, 3H), 1.81 (dd, Jj = 14.1 Hz, J₂ =

14.7 Hz, IH), 1.34 (s, 9H), 0.83-0.76 (m, 2H), 0.61 (d, 7 = 6.3 Hz, 3H), 0.54 (d, 7= 6.3 Hz, 3H).

¹³C NMR (75 MHz, CDCI3) δ 171.6,168.7, 155.4, 146.8,144.5,142.9, 140.7,130.7, 128.8, 121.0, 120.6,117.7, 116.8,113.3,111.9,101.4,60.6,60.0, 59.3,57.2,56.3, 55.2, 41.7,29.7,

29.3,28.2,26.2, 25.2,22.6,20.3,18.9,17.7,15.7,14.1, 9.3.

235

ESI-MS m/z: Изчислено за C38H49N5O9: 719.82. Намерено (М+1)⁺: 720.3.

ПРИМЕР 138

Към разтвор на 45 (38 mg, 0.073 mmol) в метиленхлорид (1.09 ml) при 23°С се прибавят DIPEA (19.0 ml, 0.109 mmol), EDC.HCI (34.9 mg, 0.182 mmol), N-Вос-пролин (23.5 mg, 0.109 mmol) и DMAP (0.8 mg, 0.007 mmol) и реакционната смес се разбърква в продължение на 4.5 часа. След това разтворът се разрежда с метиленхлорид (10 mi) и успешно се промива с 0.1N солна киселина (5 ml) и 10% разтвор на натриев бикарбонат (5 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, хексан:етилацетат 1:1) до получаване на 176 (33 mg, 63%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.14 (хексан :етил ацетат 1:2).

’НNMR (300 MHz, CDCI3) δ 6.49 (s, IH), 6.02 (bs. IH), 5.90 (s, IH), 5.74 (s, IH), 4.19 (bs, IH), 4.09 (bs, IH), 3.98 (bs, IH), 3.76 (s, 3H), 3.38 (d, J= 6 Hz, 2H), 3.22 (d, J = 11.7 Hz, IH), 3.15-2.99 (m, 2H), 2.80 (d, J= 15.3 Hz, IH), 2.63-2.58 (m, IH), 2.32 (s. 3H), 2.26 (s, 6H), 1.99 (s, 3H), 1.78-1.62 (m, IH), 1.50-0.83 (m, 7H), 1.21 (s, 9H).

236 • ·9 9 • ·· • *· • · 99 •99 • 999 9 • ·9 9 • · · · ·· * с «· • · · ·9 * · *« * · 9 99 9999

ESI-MS m/z: Изчислено за C38H47N5O9: 717.81. Намерено (М + 1)⁺: 718.3.

ПРИМЕР 139

Към разтвор на 45 (50 mg, 0.144 mmol) в метиленхлорид (0.96 ml) при 23°С се прибавят DIPEA (41.8 ml, 0.240 mmol), EDC.HCI (46.0 mg, 0.240 mmol), N-Вос-аргининхидрохлорид хидрат (47.2 mg, 0.144 mmol) и DMAP (1.1 mg, 0.01 mmol) и реакционната смес се разбърква в продължение на 4 часа. След това разтворителят се отделя под вакуум и остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, хексан.етилацетат 1:2) до получаване на 177 (58 mg, 78%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.40 (метанол :етилацетат 1:5).

’Н NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7.53 (bs, 1Н), 6.95 (bs, ЗН), 6.54 (bs, 1Н), 6.48 (s, 1H), 6.07 (s, 1H), 6.00 (bs, 1H), 5.88 (s, 1H), 5.11 (bs, 1H), 4.23 (s, 1H), 4.08 (s, 1H), 4.02 (s, 1H),

3.76 (s, 3H), 3.70 (bs, 1H), 3.48 (bs, 1H), 3.37 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 3.18 (d, J= 10.2 Hz, 1H), 3.00-2.94 (m, 3H), 2.82-2.70 (m, 2H), 2.34 (s, 3H), 2.25 (s, 6H), 1.99 (s, 3H), 1.73 (brt, J=

14.1 Hz, 1H), 1.40 (s, 9H), 1.25 (bs, 3H), 0.95-0.85 (m, 2H).

ESI-MS m/z: Изчислено за 776.88. Намерено (Μ +1)⁺: 777.3.

ПРИМЕР 140

237

Към разтвор на 45 (50 mg, 0.096 mmol) в метиленхлорид (1.44 ml) при 23°С се прибавят DIPEA (25.8 ml, 0.144 mmol), EDC.HCI (46.0 mg, 0.240 mmol), N-Вос-триптофан (43.8 mg, 0.144 mmol) и DMAP (1.2 mg, 0.009 mmol) и реакционната смес се разбърква в продължение на 4 часа. След това разтворът се разрежда с метиленхлорид (10 ml) и успешно се промива с 0.1N солна киселина (5 ml) и 10% разтвор на натриев бикарбонат (5 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, хексан:етилацетат 1:2) до получаване на 178 (57 mg, 74%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.12 (хексан:етилацетат 1:1).

’Н NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 8.50 (bs, 1Н), 7.73-7.71 (m, 1H), 7.13-7.12 (m, 3H), 6.51 (s, 1H), 5.72 (s, 1H), 5.36 (bs, 1H), 5.28 (bs, 1H), 4.95 (bs, 1H), 4.41 (bs, 1H), 4.05 (s, 1H),

3.70 (s, 3H), 3.50 (bs, 2H), 3.30-3.17 (m, 4H), 2.89-2.82 (m, 3H), 2.40 (s, 3H), 2.29 (s, 3H),

2.19 (s, 3H), 2.03 (s, 3H), 1.49 (s, 9H), 1.26-1.25 (m, 2H).

ESI-MS m/z: Изчислено за C^HsoNeOg: 806.90. Намерено (M+1)⁺. 807.3.

ПРИМЕР 141

238

Към разтвор на 178 (43 mg, 0.053 mmol) в СНзСИ/вода (3 ml/2 ml) се прибавя сребърен нитрат (271 mg, 1.60 mmol) и реакционната смес се разбърква при 23°С в продължение на 17 часа. При 0°С се прибавят наситен воден разтвор на натриев хлорид (10 ml) и наситен воден разтвор на натриев бикарбонат (10 ml) и сместа се разбърква в продължение на 15 минути, филтрува се през слой от селит и се промива с метиленхлорид (20 ml). Разтворът се декантира и органичният слой се суши и се концентрира под вакуум. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, етилацетагметанол 5:1) до получаване на 179 (24 mg, 56%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.38 (етилацетагметанол 5:1).

’НNMR (300 MHz, CDC1₃) δ 8.40 (s, IH), 7.66 (bs, 1 Η), 7.25-7.21 (m, 1 Η), 7.16-7.09 (m, 2Η), 6.45 (s, IH), 5.75 (bs, IH), 5.55 (bs, IH), 5.45 (s, IH), 5.25 (bs, IH), 4.36 (bs, IH), 4.16 (bs, IH), 4.05 (bs, IH), 3.95 (s, IH), 3.69 (s, 3H), 3.35-3.02 (m, 6H), 2.83-2.73 (m, 3H),

2.35 (s, 3H), 2.24 (s, 3H), 2.19 (s, 3H), 1.99 (s, 3H), 1.77 (dd, J_; = 12 Hz, Λ = 15.3 Hz IH).

ESI-MS m/z: Изчислено за C43H51N5OK): 797.89. Намерено (M-17)⁺: 780.

239

ПРИМЕР 142

OMe

NH₂

-------►

Py, CH₂CI₂

OMe

Към разтвор на 45 (50 mg, 0.0960 mmol) в метиленхлорид (0.7 ml) при 0°C се прибавят 2-хлорникотиноилхлорид (17.7 mg, 0.101 mmol) и пиридин (8.1 ml, 0.101 mmol). Реакционната смес се разбърква в продължение на 1.5 часа, след което разтворът се разрежда с метиленхлорид (5 ml) и се промива с 0.1N солна киселина (3 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, хексан:етилацетат 1:1) до получаване на 180 (45 mg, 71%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.18 (хексан:етилацетат 1:2).

*Н NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 8.32-8.29 (m, IH), 7.38-7.34 (m, Ш), 7.14-7.09 (m, IH),

6.14 (s, IH), 5.97 (d, 7=1.2 Hz, IH), 5.92-5.91 (m, 2H), 5.75 (d,7=2.1 Hz, IH), 4.18 (d,7 = 2.1 Hz, IH), 4.15 (s, IH), 4.07 (s, IH), 3.91-3.73 (m, 2H), 3.68 (s, 3H), 3.36 (d,7= 7.5 Hz, IH), 3.31 (dt, 7/ = 2.4 Hz, J₂ = 11.7 Hz, IH), 2.92 (dd, 7/ = 8.1 Hz, 7, = 18 Hz, IH), 2.80 (d, 7= 16.2 Hz, IH), 2.58 (d,7= 18 Hz, IH), 2.31 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 1.99 (s, 3H), 1.91 (s, 3H) 1.97-1.83 (m, IH).

^,3C NMR (75 MHz, CDCh) δ 168.6, 164.8,150.3, 147.2,146.5,144.6, 142.5,140.6, 139.0,

130.9,130.5, 128.8, 122.3,120.8, 120.3,117.6,116.3, 112.7, 112.1,101.6, 60.6, 58.8, 56.5,

56.3, 55.6, 55.1,41.6, 39.8,31.5, 26.2,24.9,20.3,15.5, 9.3.

ESI-MS m/z: Изчислено за C34H34C1N5O7: 659.2. Намерено (M+1)⁺: 660.1.

240 • ·

Към разтвор на 180 (39 mg, 0.059 mmol) в СН₃СМ/вода (3 ml/2 ml) се прибавя сребърен нитрат (301 mg, 1.77 mmol) и реакционната смес се разбърква при 23°С в продължение на 17 часа. При 0°С се прибавят наситен воден разтвор на натриев хлорид (10 ml) и наситен воден разтвор на натриев бикарбонат (10 ml) и сместа се разбърква в продължение на 15 минути, филтрува се през слой от селит и се промива с метиленхлорид (20 ml). Разтворът се декантира и органичният слой се суши и се концентрира под вакуум. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, етилацетагметанол 5:1) до получаване на 181 (28 mg, 73%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.24 (етилацетагметанол 5:1).

^!Н NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 8.33-8.31 (m, 1 Η), 7.40-7.35 (m, 1 Η), 7.16-7.09 (m, 2Η),

6.20 (s, IH), 5.98 (d, J= 1.2 Hz, IH), 5.96 (s, IH), 5.92 (d, J= 1.2 Hz, IH). 5.63 (bs, IH),

4.60 (bs, IH), 4.47 (bs, IH), 4.02-3.95 (m, 2H), 3.69 (s, 3H), 3.65-3.56 (m, IH), 3.48 (s, 3H),

3.43-3.38 (m, IH), 3.17 (brd, J= 7.2 Hz, IH), 2.88 (dd, J_; = 8.7 Hz, J₂ = 18.3 Hz, IH), 2.74 (d, J= 15.3 Hz, IH), 2.40 (d, J= 18.3 Hz, IH), 2.32 (s, 3H), 2.26 (s, 3H), 2.00 ,(s, ЗН), 1.99 (s, 3H), 1.77 (dd, J] = 12 Hz, J₂ = 15 Hz, IH).

^I3C NMR (75 MHz, CDCI3) δ 168.1,165.0,150.0,147.2,146.5, 144.4, 142.5, 140.9, 138.7,

131.5, 130.2,128.9, 122.3,121.1, 120.7,116.1, 114.4, 111.4, 101.5, 82.6, 60.6, 57.8, 56.2,

52.1, 41.6, 31.5,26.4,24.5,22.6, 20.3,15.6,14.1, 9.3.

241

ESI-MS m/z: Изчислено за C₄3H₅₁N₅0₁o: 797.89. Намерено (M-17)⁺: 780.

Към разтвор на 45 (30 mg, 0.058 mmol) в метиленхлорид (0.87 ml) при 0°С се прибавят DIPEA(15.0 ml, 0.086 mmol), EDC.HCI (27.6 mg, 0.145 mmol), циклохексилоцетна киселина (12.2 mg, 0.086 mmol) и DMAP (0.7 mg, 0.006 mmol) и реакционната смес се разбърква в продължение на 5 часа. След това разтворът се разрежда с метиленхлорид (10 ml) и успешно се промива с 0.1N солна киселина (5 ml) и 10% разтвор на натриев бикарбонат (5 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, хексан.етилацетат 1:2) до получаване на 182 (10 mg, 27%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.11 (хексан.етилацетат 1:1).

’Н NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 6.50 (s, IH), 5.98 (d, 7= 1.2 Hz, IH), 5.91 (d, 7= 1.2 Hz, IH), 5.75 (s, IH), 5.02-4.91 (m, IH), 4.11 (bs, IH), 4.04 (d,7= 2.1 Hz, IH), 4.01 (bs, IH), 3.78 (s, 3H), 3.72-3.69 (m, IH), 3.38-3.29 (m, 3H), 3.05 (dd,7/ = 7.8 Hz, 7,= 18.0 Hz, IH),

2.77 (d, 7= 15.6 Hz, IH), 2.54 (d,7= 18.6 Hz, IH), 2.33 (s, 3H), 2.32 (s, 3H), 2.27 (s, 3H),

1.98 (s, 3H), 1.79 (dd, 7/ = 11.7 Hz, 7, = 15.6 Hz, 1 Η), 1.59-0.61 (m, 13H).

ESI-MS m/z: Изчислено за C36H44N4O7: 644.76. Намерено (Μ +1)⁺: 645.3.

242

ПРИМЕР 145

Към разтвор на 45 (30 mg, 0.058 mmol) в метиленхлорид (0.87 ml) при 0°С се прибавят DIPEA (15.0 ml, 0.086 mmol), EDC.HCI (27.6 mg, 0.145 mmol), циклохексилоцетна киселина (12.2 mg, 0.086 mmol) и DMAP (0.7 mg, 0.006 mmol) и реакционната смес се разбърква в продължение на 5 часа. След това разтворът се разрежда с метиленхлорид (10 ml) и успешно се промива с 0.1N солна киселина (5 ml) и 10% разтвор на натриев бикарбонат (5 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, хексан:етилацетат 1:2) до получаване на 183 (17 mg, 38%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.13 (хексан:етмлацетат 1:1).

’HNMR (300 MHz, CDCI₃) δ 6.87 (s, IH), 5.99 (d, J= 1.2 Hz, IH), 5.92 (d, J= 1.2 Hz, IH), 4.95 (t, J= 5.7 Hz, IH), 4.08 (bs, IH), 4.00 (bs, IH), 3.71 (s, 3H), 3.64 (d,J = 1.8 Hz, 2H), 3.38 (d, J= 6.6 Hz, IH), 3.33-3.32 (m, IH), 3.27 (d, J= 11.7 Hz, IH), 3.06 (dd, J/ = 7.8 Hz, J2 = 18.0 Hz, IH), 2.65-2.59 (m, IH), 2.50-2.47 (m, IH), 2.35 (s, 3H), 2.27 (s, 6H), 1.99 (s, 3H), 1.78-1.74 (m, IH) 1.60-0.62 (m, 26H).

ESI-MS m/z: Изчислено за C44H56N4O8: 768.94. Намерено (Μ + 1/: 769.3.

243 • ·

ПРИМЕР 146

Към разтвор на 45 (30 mg, 0.058 mmol) в метиленхлорид (0.87 ml) при 0°С се прибавят DIPEA (15.0 ml, 0.086 mmol), EDC.HCI (27.6 mg, 0.145 mmol), циклохексилпропионова киселина (13.5 mg, 0.086 mmol) и DMAP (0.7 mg, 0.006 mmol) и реакционната смес се разбърква в продължение на 6 часа. След това разтворът се разрежда с метиленхлорид (10 ml) и успешно се промива с 0.1 N солна киселина (5 ml) и 10% разтвор на натриев бикарбонат (5 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, хексан:етилацетат 1:2) до получаване на 184 (15 mg, 39%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.15 (хексан:етилацетат 1:1).

‘Н NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 6.50 (s, IH), 5.98 (s, IH). 5.91 (s, IH), 5.74 (s. IH), 5.01 (t, J= 5.1 Hz, IH), 4.09 (bs, IH), 4.06 (s, IH), 4.02 (bs, IH), 3.76 (s, 3H). 3.64-3.58 (m, IH), 3.42-3.41 (m, IH), 3.36 (d, J = 7.5 Hz, IH), 3.28 (d, 7 = 12.3 Hz, IH), 3.05 (dd, J, = 8.6 Hz, J₂ = 18 Hz, IH), 2.79 (d, J = 14.7 Hz, IH), 2.57 (d,7 = 18 Hz, IH), 2.32 (s. 3H), 2.30 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 1.99 (s, 3H), 1.77 (dd, 7/ = 12.0 Hz, J₂ = 15.9 Hz, 1 Η), 1.62-0.71 (m, 15H).

ESI-MS m/z: Изчислено за C37H46N4O7:658.78. Намерено (M + 1)⁺: 659.3.

ПРИМЕР 147

244 • · • ·

• · · • · · ·

Към разтвор на 45 (30 mg, 0.058 mmol) в метиленхлорид (0.87 ml) при 0°С се прибавят DIPEA (15.0 ml, 0.086 mmol), EDC.HCI (27.6 mg, 0.145 mmol), циклохексилпропионова киселина (13.5 mg, 0.086 mmol) и DMAP (0.7 mg, 0.006 mmol) и реакционната смес се разбърква в продължение на 6 часа. След това разтворът се разрежда с метиленхлорид (10 ml) и успешно се промива с 0.1N солна киселина (5 ml) и 10% разтвор на натриев бикарбонат (5 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, хексан:етилацетат 1:2) до получаване на 185 (21 mg, 46%) като бяло твърдо вещество. Rf. 0.17 (хексан етилацетат 1:1).

'Н NMR (300 MHz, CDCI3) δ 6.86 (s, 1Н), 5.99 (s, 1Н), 5.92 (s, 1Н), 4.97 (t, 7 = 5.4 Hz, 1H), 4.10 (d, 7= 2.4 Hz, 1H),4.O1 (bs, 1H), 3.70 (s, 3H), 3.64 (d,7=2.4 Hz, 1H), 3.51 (bs, 1H), 3.37 (d,7= 8.1 Hz, 1H), 3.23 (d, 7= 11.1 Hz, 1H),3.O2 (dd,7/ = 7.8 Hz, J₂ = 18 Hz, 1H), 2.69-2.59 (m, 4H), 2.35 (s, 3H), 2.26 (s, 6H), 2.00 (s, 3H), 1.76-0.72 (m, 30H).

¹³C NMR (75 MHz, CDCI3) δ 173.1,171.5,168.2,147.9,144.7,142.5,140.7,140.3,130.9,

130.6, 127.7,123.3,120.0, 117.5,113.1,111.9,101.6, 60.5, 59.0, 57.3, 56.7, 55.2, 55.0,

41.6, 39.9, 37.2, 33.5, 33.0, 32.9,32.9, 32.8, 32.5, 32.4, 31.9, 31.7,29.7, 29.3, 26.6, 26.5,

26.2, 24.9,20.3, 15.8,14.1,9.4.

ESI-MS m/z: Изчислено за C37H46N4O7: 658.78. Намерено (M + 1)⁺: 659.3.

245 • · ··· β » ··* •··· ·· ··· ··· ·· ··

Към разтвор на 72 (111 mg, 0.162 mmol) в метиленхлорид (0.81 ml) при 0°С се прибавят DIPEA (56.3 ml, 0.324 mmol), бутирилхлорид (33.6 ml, 0.324 mmol) и DM АР (1.96 mg, 0.016 mmol) и реакционната смес се разбърква в продължение на 5 часа при тази температура. След това разтворът се разрежда с метиленхлорид (10 ml) и успешно се промива с 0.1N солна киселина (5 ml) и 10% разтвор на натриев бикарбонат (5 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (RP-18, СНзСИгвода 1:1) до получаване на 186 (65.4 mg, 54%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.21 (хексан:етилацетат 1:2).

'Н NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 7.24-7.15 (m, ЗН), 7.12-7.04 (m, 2Н), 6.84 (s, 1Н), 5.98 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 5.92 (d, 7= 1.2 Hz, 1H), 4.97 (t, 7 = 5.7 Hz, 1H), 4.03 (m, 3H), 3.63 (d, 7 =

2.7 Hz, 1H), 3.50 (m, 2H), 3.44 (s, 3H), 3.37 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 3.24 (dt, 7/ = 2.7 Hz, J₂ =

11.7 Hz, 1H), 3.02 (dd, 7/ = 8.1 Hz,7?= 18.3 Hz, 1H), 2.65-2.54 (m, 7H), 2.35 (s, 3H),2.25 (s, 3H), 2.07 (s, 3H), 2.02 (s, 3H), 1.87-1.75 (m, 3H), 1.08 (t, 7= 7.5 Hz, 3H).

^l3CNMR(75 MHz, CDC1₃)6 171.7,170.8,168.2, 147.8,144.7,142.5, 140.8, 140.6,140.3,

131.1, 130.5, 128.3,.128.2,127.6, 126.0, 123.2, 117.5,112.9, 111.8, 101.6, 60.2,59.0, 57.3,

56.6, 55.1, 54.9, 41.5, 39.9, 37.8, 36.0, 31.0,26.5, 24.8,22.6, 20.2,18.5, 15.6, 13.7, 9.3.

ESI-MS m/z: Изчислено за C^H^Os: 722.83. Намерено (M+1)⁺: 723.2.

246 • ·

CH₂CI₂

187

Към разтвор на 72 (80 mg, 0.122 mmol) в метиленхлорид (0.61 ml) при 0°С се прибавят DIPEA (64.0 ml, 0.367 mmol), хексаноилхлорид (49.5 ml, 0.367 mmol) и DMAP (1.50 mg, 0.012 mmol) и реакционната смес се разбърква в продължение на 5 часа при тази температура. След това разтворът се разрежда с метиленхлорид (10 ml) и успешно се промива с 0.1N солна киселина (5 ml) и 10% разтвор на натриев бикарбонат (5 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (RP-18, СН₃СМ:вода 6.4) до получаване на 187 (86.1 mg, 94%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.25 (хексан:етмлацетат 1:2).

'Н NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 7.20-7.06 (m, ЗН), 6.99-6.97 (m, 2Н), 6.77 (s, 1Н), 5.91 (s, IH), 5.85 (s, 1H), 4.90 (m, Ш), 3.96 (d, J = 3 Hz, 2H), 3.57-3.55 (m, 1H), 3.43 (bs, 2H),

3.36 (bs, 3H), 3.29 (brd, J= 10.5 Hz, 1H), 3.18 (d, J= 11.7 Hz, 1H), 2.97 (dd, J/ = 4.8 Hz, J₂= 12 Hz, 1H), 2.58-2.46 (m, 6H), 2.28 (s, 3H), 2.18 (s, 3H), 2.00 (s, 3H), 1.95 (s, 3H), 1.86-

1.66 (m, 7H), 1.41-1.38 (m, 2H), 0.86-0.81 (m, 3H).

^I3C NMR (75 MHz, CDCI3) δ 171.7, 171.0,168.2,147.8,144.7, 142.5,140.8, 140.6, 140.3,

131.1, 130.5, 128.3, 128.2, 127.6, 126.0, 117.5, 112.9, 111.8, 101.6, 60.2,59.0,57.3,56.6,

55.1, 55.0,41.5, 39.9, 37.8, 34.1, 31.3, 31.1, 29.6, 24.8,24.7, 22.3, 20.2, 15.6,13.8.

ESI-MS m/z: Изчислено за C43H50N4O8: 750.88. Намерено (M + 1)⁺: 751.3.

247 • · • ·

Към разтвор на 85 (80 mg, 0.110 mmol) в метиленхлорид (0.55 ml) при

0°С се прибавят DIPEA (57.7 ml, 0.331 mmol), бутирилхлорид (34.4 ml, 0.331 mmol) и DMAP (1.30 mg, 0.011 mmol) и реакционната смес се разбърква в продължение на 5 часа при 23°С. След това разтворът се разрежда с метиленхлорид (10 ml) и успешно се промива с 0.1 N солна киселина (5 ml) и 10% разтвор на натриев бикарбонат (5 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (RP-18, СН₃СМ:вода 1:1) до получаване на 188 (70.1 mg, 80%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.54 (метанол:етилацетат 1:5).

^]HNMR(300 MHz, CDC1₃) δ 7.28-7.14 (m, 5H), 6.80 (s, IH), 6.07 (d,/= 6.6 Hz, IH), 6.00 (d, / = 1.5 Hz, IH), 5.90 (d, /= 1.5 Hz, IH), 5.35 (t, /= 5.4 Hz, IH), 4.12 (d, /= 2.4 Hz, IH), 4.05 (bs, IH), 3.89 (brt,/= 6.9 Hz, IH), 3.66 (s, 3H), 3.64-3.63 (m, IH), 3.59-3.45 (m, 2H), 3.40 (brd,/= 7.8 Hz, IH), 3.20 (dt,// = 2.7 Hz, J₂ = 12 Hz, IH), 3.00 (dd,// = 8.1 Hz,/2= 18 Hz, IH), 2.87 (t,/= 8.1 Hz, 2H), 2.71 (d,/= 18.6 Hz, IH), 2.66-2.61 (m, IH),

2.58 (t, /= 7.2 Hz, 2H), 2.41-2.35 (m, 2H), 2.33 (s, 3H), 2.23 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.00 (s, 3H), 1.90-1.77 (m, 3H), 1.08 (t,/= 7.2 Hz, 3H), 0.69 (d, J= 6.9 Hz, 3H).

¹³CNMR (75 MHz, CDCI3) δ 172.0,171.3,170.8,168.5, 147.7,144.7, 142.5, 140.6,140.5,

140.3, 131.0,130.7, 128.4,128.2, 127.7,126.1,123.1,120.3,117.5,112.7,111.8,101.6,

60.3, 59.1, 57.3, 57.2,55.4, 54.9, 48.2,41.5, 39.5, 38.0, 36.0, 31.4,26.8, 26.6, 24.6,20.1,

18.5,18.1,15.7,13.7,9.2.

248

ESI-MS m/z: Изчислено за C^H^NsOg: 793.9. Намерено (M+1)⁺: 794.3.

ПРИМЕР 151

Към разтвор на 85 (80 mg, 0.110 mmol) в метиленхлорид (0.55 ml) при 0°С се прибавят DIPEA (57.7 ml, 0.331 mmol), хексаноилхлорид (46.3 ml, 0.331 mmol) и DMAP (1.30 mg, 0.011 mmol) и реакционната смес се разбърква в продължение на 5 часа при 23°С. След това разтворът се разрежда с метиленхлорид (10 ml) и успешно се промива с 0.1N солна киселина (5 ml) и 10% разтвор на натриев бикарбонат (5 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (RP-18, СН₃СМ:вода 1:1) до получаване на 189 (80 mg, 88%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.23 (хексан:етилацетат 1:3).

'Н NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 7.21-7.08 (m, 5Н), 6.74 (s, 1Н), 6.00 (d, 7 = 6.9 Hz, 1H),

5.94 (d, J= 1.5 Hz, 1H), 5.84 (d, 7 = 1.5 Hz, 1H), 5.24 (t, 7= 5.4 Hz, 1H), 4.06 (bs, 1H), 4.00 (bs, 1H), 3.83 (t,7= 6 Hz, 1H), 3.59 (s, 3H), 3.57 (m, 1H), 3.53-3.40 (m, 2H), 3.33 (d, 7 = 7.8Hz, 1H), 3.14 (d,7= 11.7Hz, 1H),2.94(dd,7/ = 8.4Hz,7₂= 18Hz, 1H),2.81 (t,7=

7.5 Hz, 2H), 2.65 (d,7= 18 Hz, 1H), 2.60-2.54 (m, 1H), 2.52 (t,7= 7.2 Hz, 2H), 2.35-2.29 (m, 2H), 2.27 (s, 3H), 2.17 (s, 3H), 2.15 (s, 3H), 1.95 (s, 3H), 1.76-1.60 (m, 3H), 1.35-1.29 (m, 2H), 1.84 (m, 2H), 0.85-0.78 (m, 3H), 0.62 (t, 7= 6.6 Hz, 3H).

^,3CNMR(75 MHz, CDCI3) δ 172.0, 171.3,171.1,168.4,147.8,144.8,142.6,140.7,140.5,

131.2, 130.6, 128.4, 128.3, 127.7, 126.2, 123.1, 120.3, 117.5, 112.6, 112.0, 101.7, 60.4, 59.1,

57.4, 57.2, 55.4, 54.9,48.3, 41.5, 39.6, 38.1, 34.1, 33.6, 31.5, 31.3,26.7,24.7,22.3,20.2,

18.2,15.7,13.9, 9.3.

249

ESI-MS m/z: Изчислено за C^HssNsOg: 821.96. Намерено (M + 1)⁺: 822.3.

AcCI

---------►

DIPEA, CH₂CI₂

S3

Me Ο

190

Към разтвор на 53 (100 mg, 0.145 mmol) в метиленхлорид (0.72 ml) при 0°С се прибавят DIPEA (50.6 ml, 0.291 mmol) и ацетилхлорид (20.7 ml, 0.291 mmol) и реакционната смес се разбърква в продължение на 4 часа при 23°С.

След това разтворът се разрежда с метиленхлорид (10 ml) и успешно се промива с 0.1N солна киселина (5 ml) и 10% разтвор на натриев бикарбонат (5 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, хексан.етилацетат 1:2) до получаване на 190 (27 mg, 25%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.24 (хексан:етилацетат 1:1).

’Н NMR (300MHz, CDC1₃) δ 6.82 (s, 1Н), 6.02 (d, J= 0.9 Hz, 1H), 5.92 (d, J= 0.9 Hz, lH),5.30(bs, 1H), 4.14 (d,/= 2.7 Hz, 1H), 4.10 (s, 1H), 3.90-3.73 (m, 2H), 3.68 (s, 3H),

3.67 (bs, 1H), 3.49 (bs, 1H), 3.42 (brd, /= 8.1 Hz, 1H), 3.24-3.20 (m, 1H), 3.01 (dd, // = 8.4 Hz,/3= 18.3 Hz, 1H), 2.78 (d,/= 18 Hz, 1H), 2.64 (brd,/= 15.6Hz, 1H), 2.36 (s, 3H),

2.34 (s, 3H), 2.24 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.02 (s, 3H), 1.77 (dd, // = 11.7 Hz, J₂ = 15.6 Hz, 1H), 0.65 (d,/= 6.6 Hz, 3H).

250

¹³CNMR(75

131.0,127.7,123.2,120.3,117.5,112.3,112.2,101.7, 60.4,59.0, 57.4, 57.2,55.2, 54.9,

ESI-MS m/z: Изчислено за C35H38F3N5O9: 729.70. Намерено (Μ+1)⁺: 730.3.

ПРИМЕР 153

Ο

DIPEA, DMAP

Me Ο

Към разтвор на 53 (150 mg, 0.218 mmol) в метиленхлорид (1.09 ml) при 0°С се прибавят DIPEA (151.9 ml, 0.87 mmol), бутирилхлорид (90.6 ml, 0.87 mmol) и DMAP (2.70 mg, 0.02 mmol) и реакционната смес се разбърква в продължение на 4 часа при 23°С. След това разтворът се разрежда с метиленхлорид (10 ml) и успешно се промива с 0.1 N солна киселина (5 ml) и 10% разтвор на натриев бикарбонат (5 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (RP-18, СНзС1Ч:вода 4:1) до получаване на 191 (20.2 mg, 12%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.3 (хексан:етилацетат 1:1).

’HNMR (300 MHz, CDCI3) δ 6.81 (s, 1Н), 6.03 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 5.92 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 5.16 (t, J= 5.4 Hz, 1H), 4.13 (d, J= 2.1 Hz, 1H), 4.10 (bs, 1H), 3.87-3.82 (m, 1H), 3.80-3.74 (m, 1), 3.68 (s, 3H),3.64 (d,/=3 Hz, 1H), 3.52-3.47 (m, 1H), 3.42 (brd,/=7.2 Hz, 1H), 3.24-3.20 (m, 1H), 3.02 (dd,/y = 8.1 Hz, Λ = 18.3 Hz, 1H), 2.77 (d, /= 17.7 Hz, 1H), 2.64 (brd, /= 16.2 Hz, 1H), 2.58 (t, /= 7.2 Hz, 2H), 2.33 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 2.22 (s, 3H), 2.02 (s' 3H), 1.87-1.73 (m, 3H), 1.08 (t,/= 7.2 Hz, 3H), 0.68 (d,/= 6.6 Hz, 3H).

251 ^I3CNMR(75 MHz, CDC1₃) δ 172.8,172.1, 170.4,’ 157.8* 150.0’’146.9, 144.8,”] 42.6, 142.5,

133.3,132.8,129.6, 125.3,122.3, 119.5,118.4,115.7, 114.3, 114.2, 103.8, 62.4, 61.0, 59.4,

59.2, 57.2,57.0, 50.6,43.6, 41.2,38.1,31.7,28.7,26.6,22.2, 20.6,19.7, 17.5, 15.7, 11.2.

ESI-MS m/z: Изчислено за Qnl^FaNsOg: 757.75. Намерено: 758.5 (M+1)⁺, 780.5 (M+23)⁺.

ПРИМЕР 154

Към разтвор на 53 (150 mg, 0.218 mmol) в метиленхлорид (1.09 ml) при 0°С се прибавят DIPEA (151.9 ml, 0.87 mmol), ацетилхлорид (62.0 ml, 0.87 mmol) и DMAP (2.70 mg, 0.02 mmol) и реакционната смес се разбърква в продължение на 5 часа при 23°С. След това разтворът се разрежда с метиленхлорид (10 ml) и успешно се промива с 0.1N солна киселина (5 ml) и 10% разтвор на натриев бикарбонат (5 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (RP-18, СНзСЬГвода 1:1) до получаване на 192 (111 mg, 62%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.25 (хексан:етилацетат 1:1).

^lH NMR (300 MHz, CDCI3) δ 6.80 (s, 1Н), 5.87 (s, 1H), 5.81 (s, 1H), 4.70 (dd, 7/ = 2.4 Hz, J₂ = 9.9 Hz, 1H), 4.20 (d, 7= 6.3 Hz, 1H), 4.09 (s, 1H), 3.74 (s, 3H), 3.60 (s, 1H), 3.28 (d, 7 = 7.5 Hz, 1H), 3.17 (d, 7= 12 Hz, 1H), 3.07 (dd, 7/ = 7.2 Hz,7₂= 18.3 Hz, 1H), 2.93 (d,7=

13.2 Hz, 1H), 2.66 (d,7= 15.3 Hz, 1H), 2.53 (d,7= 17.7 Hz, 1H), 2.47-2.20 (m, 1H), 2.37 (s, 1H), 2.33 (s, 3H), 2.26 (s, 3H), 2.24 (s, 3H), 2.08 (s, 3H), 2.00 (s, 3H), 1.96 (s, 3H), 1.72 (t, 7= 14.4 Hz, 1H), 1.53 (d, 7= 6.9 Hz, 3H).

252 ¹³C NMR (75 MHz, CDCb) δ 174.1,. 168.6, 168.4, 167.5,147.7,144.8, 142.2, 140.4, 131.1

130.5, 126.9, 123.3,120.4, 117.5, 112.4, 111.8, 101.1, 60.7, 60.6, 57.6, 57.2,56.6, 55.3,

52.7, 48.3,41.5,31.6,29.7, 26.4,25.5, 23.0,22.6,20.7,20.5,20.2, 17.8, 15.9, 14.1, 9.5.

ESI-MS m/z: Изчислено за Csg^FsNgOn: 813.7. Намерено (M+1)⁺: 814.3.

Към разтвор на 53 (150 mg, 0.218 mmol) в метиленхлорид (1.09 ml) при 0°С се прибавят DIPEA (151.9 ml, 0.87 mmol), бутирилхлорид (90.6 ml, 0.87 mmol) и DMAP (2.70 mg, 0.02 mmol) и реакционната смес се разбърква в продължение на 4 часа при 23°С. След това разтворът се разрежда с метиленхлорид (10 ml) и успешно се промива с 0.1N солна киселина (5 ml) и 10% разтвор на натриев бикарбонат (5 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (RP-18, СНзСЬЕвода 4:1) до получаване на 193 (58 mg, 30%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.38 (хексан:етилацетат 1:1).

'HNMR (300 MHz, CDCI3) δ 6.85 (s, IH), 5.99 (d,J= 1.2 Hz, IH), 5.90 (d,J= 1.2 Hz, IH), 5.47-5.42 (m, 2H), 4.09-4.08 (m, 2H), 3.69 (s, 3H), 3.66 (m, IH), 3.41 (d, J= 7.5 Hz, IH), 3.28-3.18 (m, 2H), 3.07 (dd,J/ = 8.1 Ηζ,Λ= 18 Hz, 1H),2.66 (d, J= 18.6 Hz, IH), 2.61-2.39 (m, 3H), 2.34 (s, 3H), 2.26 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.01 (s, 3H), 1.95-1.79 (m, 6H),

1.72-1.59 (m, 6H) 1.09 (t, J= 7.5 Hz, 3H), 0.99-0.94 (m, 6H), 0.85 (d, J= 6.9 Hz, 3H).

^,3C NMR (75 MHz, CDCI3) δ 171.2,170.7,169.1, 168.4,148.1, 145.0,142.7,140.9,140.6,

253 е · · · · · • · · · · ··· · · · ·· ····

131.2,130.5,128.4, 123.4,119.9, .117.6,113.0,112.1, 101.9,60.7,59.5, 57.6, 56.5,55.7,

55.2, 41.8,41.4, 36.3, 35.8, 29.9,27.0,25.3,20.5, 20.0,18.8,18.3,15.8,14.0,13.8,13.4, Г2.7, 9.6.

ESI-MS m/z: Изчислено за C45H54F3N4O11:897.93. Намерено (М+1)⁺: 898.3.

ПРИМЕР 156

Към разтвор на 53 (150 mg, 0.218 mmol) в метиленхлорид (1.09 ml) при 0°С се прибавят DIPEA (151.9 ml, 0.87 mmol), хексаноилхлорид (121.9 ml, 0.87 mmol) и DMAP (2.70 mg, 0.02 mmol) и реакционната смес се разбърква в продължение на 4 часа при 23°С. След това разтворът се разрежда с метиленхлорид (10 ml) и успешно се промива с 0.1N солна киселина (5 ml) и 10% разтвор на натриев бикарбонат (5 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (RP-18, СНзСЬквода 4:1) до получаване на 194 (37.5 mg, 22%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.32 (хексан:етилацетат 1:1).

254

Ή NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 6.80 (s, IH), 6.02 (d, J= 1.2 Hz, IH), 5.92 (d, 7 = 1.2 Hz,

IH), 5.22 (t, 7= 5.7 Hz, 1H),4.13 (d,7=2.4 Hz, IH), 4.09 (s, IH), 3.88-3.81 (m, JH),3.8O-

3.71 (m, IH), 3.67 (s, 3H), 3.64 (d,7= 3 Hz, IH), 3.52-3.43 (m, IH), 3.41 (brd,7= 6.6 Hz,

IH), 3.23-3.19 (m, IH), 3.00 (dd, 7/ = 8.7 Hz, J₂ = 18.6 Hz, IH), 2.77 (d, 7= 18Hz, IH),

2.67-2.56 (m, 3H), 2.33 (s, 3H), 2.24. (s, 3H), 2.22 (s, 3H), 2.01 (s, 3H), 1.82-1.74 (m, 4H),

1.43-1.38 (m, 3H), 0.97-0.88 (m, 3H), 0.67 (d,7= 6.9Hz, 3H).

¹³CNMR(75 MHz, CDC1₃)6 171.2,170.3,168.6,148.2,145.1,143.0,140.8,140.7, 131.7,

131.1, 127.8, 123.5, 120.6, 117.7, 112.5,102.0, 60.7,59.2,57.6,57.4, 55.4, 55.2,48.9,41.8,

34.4, 31.8, 31.6,29.9,26.9,25.0, 24.8,22.9, 22.5,20.4,17.9,15.8,14.3, 14.1,9.5.

ESI-MS m/z: Изчислено за C39H46F3N5O9: 785.81. Намерено: 756 (M+1)⁺, 805.5 (М+23)⁺.

ПРИМЕР 157

Към разтвор на 53 (150 mg, 0.218 mmol) в метиленхлорид (1.09 ml) при 0°С се прибавят DIPEA (75.9 ml, 0.436 mmol) и деканоилхлорид (92.7 ml, 0.436 mmol) и реакционната смес се разбърква в продължение на 4 часа при 23°С. След това разтворът се разрежда с метиленхлорид (10 ml) и успешно се промива с 0.1N солна киселина (5 ml) и 10% разтвор на натриев бикарбонат (5 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (RP-18, СН₃СМ:вода 1:1)

255 ···· ·· ······ ··· · ··· · ···· · ···· · ··· · ···· ···· ·· ··· ··· ·· ···« до получаване на 195 (75 mg, 41%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.32 (хексан :етилацетат 1:1).

’Н NMR (300 Hz, CDCI3) δ 6.82 (s, IH), 6.03 (d, J~ 1.5 Hz, IH), 5.93 (d, J= 1.5 Hz, IH),

5.26 (bs, IH), 4.15 (s, IH), 4.11 (s, IH), 3.89-3.75 (m, 2H), 3.68 (s, 3H), 3.65 (bs, IH), 3.52-

3.44 (m, IH), 3.43 (d, J= 8.1 Hz, IH), 3.22 (brd, J= 11.4 Hz, IH), 3.03 (dd, Λ = 7.8 Hz, J2 = 17.4 Hz, IH), 2.78 (d, J= 17.7 Hz, IH), 2.69-2.56 (m, 3H), 2.34 (s, 3H), 2.26 (s, 3H), 2.23 (s, 3H), 2.03 (s, 3H), 1.83-1.74 (m, 3H), 1.83-1.74 (m, 12H), 0.90-8.88 (m, 3H), 0.68 (d, J=

Hz, 3H).

¹³CNMR(75 Hz, CDCI3) δ 171.0,170.1,168.4, 148.0, 144.8,142.8,140.5,131.5, 130.8,

127.5,123.3,120.3,117.5, 112.3,112.2,101.7,60.4, 59.0, 57.4,57.2, 55.1, 55.0,48.6,41.5,

39.1, 34.2, 31.8,29.4,29.2, 26.7, 25.0, 24.6, 22.6,20.2,17.6,15.5,14.0, 9.2.

ESI-MS m/z: Изчислено за C43H54F3N5O9:841.91. Намерено (M+1)⁺: 842.3.

ПРИМЕР 158

196

Към разтвор на 53 (150 mg, 0.218 mmol) в метиленхлорид (1.09 ml) при 0°С се прибавят DIPEA (75.9 ml, 0.436 mmol) и стеароилхлорид (147.3 ml, 0.436 mmol) и реакционната смес се разбърква в продължение на 4 часа при 23°С. След това разтворът се разрежда с метиленхлорид (10 ml) и успешно се промива с 0.1N солна киселина (5 ml) и 10% разтвор на натриев бикарбонат (5 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства

256

посредством колонна хроматография под налягане (RP-18, СН₃СМ:вода 1:1) до получаване на 196 (86 mg, 41%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.42 (хексан:етилацетат 1:1).

‘НNMR (300 MHz, CDC1₃) δ 6.81 (s, IH), 6.03 (s, IH), 5.92 (s, 1H),5.21 (bs, IH), 4.14 (s, IH), 4.10 (s, IH), 3.88-3.74 (m, 2H), 3.67 (s, 3H), 3.64 (d,7= 3 Hz, IH), 3.49 (brd,7 = 14.7 Hz, IH), 3.42 (d, 7= 8.1 Hz, IH), 3.22 (brd, 7= 11.4 Hz, 1H), 3.02 (dd, 7_; = 8.7 Hz, 7, = 18.6 Hz, IH), 2.78 (d,7= 18Hz, IH), 2.68-2.56 (m, 3H), 2.33 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 2.02 (s, 3H), 1.82-1.73 (m, 3H), 1.42-1.19 (m, 28H), 0.87 (t,7= 7.2 Hz, 3H), 0.67 (d,7= 6.6 Hz, 3H).

¹³C NMR (75 MHz, CDCI3) δ 171.0, 170.2,168.5, 147.9, 144.8, 142.8, 140.4,131.4,130.9, 127.5,123.3,120.4,117.5,112.4,.112.1,101.7, 60.4, 58.9, 57.4, 57.2,55.2, 55.0,48.6,41.5, 39.0,34.2, 31.9, 29.7,29.6, 29.4, 29.3,29.2,26.7, 25.1, 24.6,22.7, 20.2, 17.6,15.5, 14.1,

ESI-MS m/z: Изчислено за C₅iH₇oF₃N50₉: 953.5. Намерено (M+1)⁺: 954.4.

197

Към разтвор на 45 (10 mg, 0.019 mmol) в метиленхлорид (0.095 ml) при 23°С се прибавят триетиламин (2.94 ml, 0.021 mmol) и алилбромид (2.0 ml, 0.023 mmol). Реакционната смес се разбърква в продължение на 6 часа, след което разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, метанол :етилацетат 1:5) до получаване на 197 (3.8 mg, 35%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.19 (етилацетатметанол 5:1).

257 'H NMR (300 MHz, CDCI3) δ 6.43 (s, Ш), 5.95 (s, IH), 5.89 (s, IH), 5.62-5.59 (m, IH),

4.94-4.84 (m„ 2H), 4.19 (s, IH), 4.08 (s, IH), 3.98 (t, 7 = 4.5 Hz, IH), 3.76 (s, 3H), 3.32-

3.26 (m, 2H), 3.07 (dd, 7_; = 7.5 Hz, J₂ = 17.4 Hz, IH), 2.89 (d, 7= 6 Hz, 2H), 2.80 (d, 7=

3.9 Hz, IH), 2.76 (d, 7= 3.3 Hz, 1H), 2.57-2.52 (m, 2H), 2.33 (s, 6H), 2.24 (s, ЗН), 1.99 (s, 3H), 1.88-1.79 (dd,7/ = 12.9 Hz, J₂ = 15.9 Hz, IH).

ESI-MS m/z: Изчислено за Сз^зб^Ое: 560.64. Намерено (Μ +1)⁺: 561.3.

ПРИМЕР 160

Към разтвор на 146 (50 mg, 0.096 mmol) в метиленхлорид (0.96 ml) при 23°С се прибавят пиридин (11.7 ml, 0.144 mmol) и синамоилхлорид (24.0 mg, 0.144 mmol) и реакционната смес се разбърква в продължение на 18 часа при тази температура. След това разтворът се разрежда с метиленхлорид (10 ml) и успешно се промива с 0.1 N солна киселина (5 ml) и 10% разтвор на натриев бикарбонат (5 ml). Органичният слой се суши над натриев сулфат, филтрува се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, хексан :етилацетат 1:2) до получаване на 198 (54 mg, 86%) като бяло твърдо вещество. Rf: 0.45 (хексан:етилацетат 1:1).

258 ··· · · ··· 'Η NMR (300 MHz, CDCh) δ 7.41-7.37 (m, 6H),*6.38 (s, IH), 6.19-6.03 (m,’lH), 6.08 (d, J = 15.9 Hz, IH), 5.93 (d, J= 1.5 Hz, IH), 5.88 (d, 7= 1.5 Hz, IH), 5.62 (s, IH), 5.38 (dd, J, =

1.5 Hz, J₂ =17.1 Hz, IH), 5.26 (dd, 7 = 1.5 Hz,7₂ = 10.5 Hz, IH), 4.47 (dd,7/= 3.6 Hz, J₂= 10.8 Hz, IH),4.23-4.11 (m,5H),3.89(dd,7/ = 4.8 Hz,7₂= 11.1 Hz, IH),3.51 (s,3H),

3.34 (brd, 7= 8.4 Hz, IH), 3.27-3.21 (m, 2H), 2.97 (dd, 7/ = 7.8 Hz, 7₂ = 17.7 Hz, IH), 2.28 (s, 3H), 2.15 (s, 3H), 2.04 (s, 3H), 1.91 (dd,7/ = 12 Hz, J₂ = 15.6 Hz, IH).

¹³CNMR(75 MHz, CDCh) δ 166,5,148.8,146.7,144.7,144.5,142.7,139.5,134.4, 134.1,

131.1,130.6,129.1, 128.7, 128.2, 121.9,121.2, 118.5,117.8,116.8,112.9,112.7, 101.5,

74.7, 65.2, 60.7, 60.6, 57.4,56.8, 56.6, 55.7,41.9, 31.8, 26.7,25.5, 22.9, 15.9, 14.4, 9.7.

ESI-MS m/z: Изчислено за СзаНзаИзОу: 649.7. Намерено (М + 1)⁺: 650.3.

ПРИМЕР 161

Към разтвор на 161 (78.5 mg, 0.146 mmol) и производно на цистеина (81.1 mg, 0.247 mmol) в безводен метиленхлорид (7.3 ml) при 23°С се прибавят DMAP (50 mg, 0.41 mmol) и EDC.HCI (78.1 mg, 0.41 mmol). Реакционната смес се разбърква при 23°С в атмосфера на аргон в продължение на 1.5 часа. Сместа се разрежда с метиленхлорид (20 ml) и се екстрахира с наситен воден разтвор на натриев бикарбонат (25 ml). Водната фаза се екстрахира с допълнително количество метиленхлорид (20 ml) и смесените органични екстракти се сушат над натриев сулфат, филтруват се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (вътрешен диаметър на

259 • · ·· · ··· ·· • ·· · ·· · · · ··· • · · · · * *· ···· · · · * ·· ··· · «··· ···· ·· ··· · · · ·· ···· колоната 2 cm, височина на силициевия двуокис 10 cm) със смес на етилацетат/хексан като елуент в градиент от 1:4 до 3:1. Съединението 199 (113 mg, 88%) се получава като бледожьлто твърдо вещество. Rf: 0.36 (хексан :етилацетат 1:1).

’Н NMR (300 MHz, CDC1₃) S: 7.76 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 7.63 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 7.40 (t, J =

7.6 Hz, 2H), 7.29 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 6.54 (s, 1H), 5.80 (s, 1H), 5.74 (s, 1H), 5.10 (d, J = 5.7 Hz, 1H), 5.08 (d, J = 5.7 Hz, 1H), 4.50 (dd, J = 4.9 Hz, J = 11.8 Hz, 1H), 4.20-4.05 (m, 4H), 4.02 (s, 3H), 3.81 (s, 3H), 3.61 (d, J = 13.8 Hz, 1H), 3.55 (d, J = 13.8 Hz, 1H), 3.50 (s, 3H),

3.21 (m, 1H), 3.06 (m, 1H), 3.00 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 2.90 (dd, J = 8.9 Hz, J = 17.4 Hz, 1H),

2.79 (s, 1H), 2.56 (m, 1H), 2.50 (dd, J = 4.8 Hz, J = 14.9 Hz, 1H), 2.21 (s, 3H), 2.18 (s, 3H),

1.80 (s,3H), 1.75 (m,2H).

ESI-MS m/z: Изчислено за C46H48N4O10S: 848.3. Намерено: 849.3 (M+1)⁺, 871.3 (М+23)⁺. HPLC. Условия: Колона: Симетричен С18, Подвижна фаза: СНзСИ/вода в градиент от 50 до 100% за 25 минути. 0 = 1 ml/min, t = 40°С.

Време на задържане: 16.04 минути. HPLC чистота в областта: 89.29%.

ПРИМЕР 162

Към разтвор на 161 (80 mg, 0.148 mmol) и производно на цистеина (76 mg, 0.223 mmol) в безводен метиленхлорид (6.8 ml) при 23°С се прибавят DMAP (45 mg, 0.37 mmol) и EDC.HCI (71 mg, 0.37 mmol). Реакционната смес се разбърква при 23°С в атмосфера на аргон в продължение на 2.5 часа.

260 • · • ·

Сместа се разрежда с метиленхлорид (20 ml) и се екстрахира с наситен воден разтвор на натриев бикарбонат (25 ml). Водната фаза се екстрахира с допълнително количество метиленхлорид (20 ml) и смесените органични екстракти се сушат над натриев сулфат, филтруват се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (вътрешен диаметър на колоната 2 cm, височина на силициевия двуокис 10 cm) със смес на етилацетат/хексан като елуент в градиент от 1:4 до 3:1. Съединението 200 (83 mg, 65%) се получава като бледожълто твърдо вещество. Rf: 0.5 (хексан:етилацетат 1:1).

’Н NMR (300 MHz, CDCI₃) δ: 7.71 (m, ЗН), 7.49 (d, J = 7.3 Hz, IH), 7.36 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 7.32- 7.23 (m, 2H), 6.65 (s, Ш), 5.80 (s, IH), 5.79 (s, IH), 5.13 (d, J = 6.1 Hz, IH),

5.11 (d, J = 6.1 Hz, IH), 5.05 (d, J = 6.1 Hz, IH), 5.01 (d, J = 6.3 Hz, IH), 4.76 (dd, J =

3.9 Hz, J = 11.9 Hz, IH), 4.15- 4.03 (m, 4H), 3.96 (t, J = 4.0 Hz, IH), 3.87 (s, 3H), 3.55 (s, 3H), 3.51 (s, 3H), 3.34-3.29 (m, 2H), 3.24 (dd, J = 5.5 Hz, J = 13.5 Hz, IH), 3.03 (m, IH),

2.97 (t, J = 7.5 Hz, IH), 2.44-2.35 (m, 3H), 2.29 (s, 3H), 2.14 (s, 3H), 1.98 (dd, J = 8.06, J = 15.1 Hz, 2H), 1.75 (s,3H).

ⁱ³C NMR (75 MHz, CDCI3) δ 196.98, 161.13, 158.21, 149.01, 148.78, 145.05, 144.91, 141.01, 140.69, 140.07, 137.53, 132.76, 131.15, 129.41, 127.70, 127.67, 127.21, 126.83, 125.28, 125.05, 124.94, 122.51, 119.84, 119.73, 116.61, 110.26, 104, 57, 101.40, 99.23, 96.70, 70.25, 63.15, 60.40, 58.89, 57.52, 56.98, 56.72, 56.15, 55.06, 47.22, 41.37, 38.26. 35.22, 29.57, 25.34, 15.62, 7.26.

ESI-MS m/z: Изчислено за C47H49N30nS: 863.97. Намерено: 865.0 (M+1)⁺, 887.1 (M+23)⁺. HPLC: Условия: Колона: Симетричен С18, Подвижна фаза: СНзСИ/вода в градиент от 50 до 100% за 25 минути. 0 = 1 ml/min, t = 40°С. Време на задържане: 15.36 минути. HPLC чистота в областта: 91.56%.

ПРИМЕР 163

261

• · • · · • · • ·

I · · · · ·

161

Към разтвор на 161 (418 mg, 0.77 mmol) и производно на цистеина (321 mg, 0.77 mmol) в безводен метиленхлорид (35 ml) при 23°С се прибавят DMAP (235 mg, 1.92 mmol) и EDC.HCI (369 mg, 1.92 mmol). Реакционната смес се разбърква при 23°С в атмосфера на аргон в продължение на 2 часа. Сместа се разрежда с метиленхлорид (20 ml) и разтвор на натриев бикарбонат (25 mi).

допълнително количество метиленхлорид се екстрахира с наситен воден

Водната фаза се екстрахира с (20 ml) и смесените органични екстракти се сушат над натриев сулфат, филтруват се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (вътрешен диаметър на колоната 3 cm, височина на силициевия двуокис 11 cm) със смес на етилацетат/хексан като елуент в градиент от 1:3 до 3:1. Съединението 201 (372 mg, 52%) се получава като бледожьлто твърдо вещество. Rf: 0.41 (хексан:етилацетат 1:1).

’Н NMR (300 MHz, CDCI3): δ 7.76-7.64 (m,4H), 7.41-7.30 (m,4H), 6.54 (s,1H за основния изомер), 6.51 (s,1H за изомера в минимално количество), 5.69 (s,1H за изомера в минимално количество), 5.67 (s,1H за основния изомер), 5.60 (s, 1Н за изомера в минимално количество), 5.57 (s,1H за основния изомер), 5.08 (s,1H), 4.26 (t,J=5.1 Hz,1H за изомера в минимално количество), 4.23 (t,J=4.9 Hz,1H за основния изомер), 4.07-4.03 (т,ЗН), 3.98-3.88 (т,ЗН), 3.84 (s,3H), 3.71 (dt,Ji=5.6 Hz,J₂=10.0 Ηζ,ΙΗ), 3.49 (s,3H за основния изомер), 3.49 (s,3H за изомера в минимално количество), 3.40 (dt,Jj=5.6 Hz,J₂=9.5 Ηζ,ΙΗ),

262 • · · · · ·· · ···· · · ·· · · ·· • · · · · ··· • · · · · ···· · • · · · ···· • · · · · · ··· · · · <· ····

3.18 (m,3H), 3.11 2.91-2.82 (m,1H), 2.48-2.28 (m,2H), 2.24 (s,3H), 2.16 (s,3H за основния изомер), 2.14 (s,3H за изомера в минимално количество), 2.03 (s,3H), 1.91 (dt,Ji=8.8 Hz,J₂=14.4 Hz,1H), 1.76 (s,3H за основния изомер), 1.76 (s,3H за изомера в минимално количество), 0.85 (s,9H за изомера в минимално количество), 0.85 (s,9H за основния изомер), 0.04 и 0.01 (s,6H за двата изомера).

ESI-MS m/z: Изчислено за C₅₁H6iN₃OioSSi: 935.4. Намерено: 936.4 (М+1)⁺, 958.3 (М+23)⁺.

ПРИМЕР 164

Към разтвор на 25 (2 mg, 0.0035 mmol) и производно на цистеина в излишък в безводен метиленхлорид (0.2 ml) при 23°С се прибавят DMAP в излишък и EDC.HCI в излишък. Реакционната смес се разбърква при 23°С в атмосфера на аргон в продължение на 14 часа. Сместа се разрежда с метиленхлорид (10 ml) и се промива с наситен воден разтвор на натриев бикарбонат (10 ml). Водната фаза се екстрахира с допълнително количество метиленхлорид (10 ml) и смесените органични екстракти се сушат над натриев сулфат, филтруват се и разтворителят се отделя при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, хексан:етилацетат 4:1) до получаване на 202 като бледожълто твърдо вещество.

···· · · ·· • ·· · ·· · · · · ·· • · · · · · ·· ··· · ···· ’н NMR (300 MHz, CDC1₃) (poor resolution) δ 7.78.7,62 (m, 4H), 7 77-726 (m*4H), 6.73 (s, IH), 6.10 (m, IH), 5.92 (d, J = 1.3 Hz, IH), 5.88 (d, J = 1.3 Hz, IH), 5.40-5.22 (m, 2H),

5.11 (s, 3H), 5.02 (d, J = 13.8 Hz, IH). 4.29-4.02 (m, 6H), 3.97 (m, IH), 3.72 (d, J = 12.5 Hz, 2H), 3.70 (s, 3H), 3.58 (s, 3H), 3.51 (d, J = 12.3 Hz, 2H), 3.50 (s, 3H). 3.49-3.20 (m. 4H), 2.54-2.28 (m, 4H), 2.40 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.16 (s, 3H).

264

МЕТОДИ ЗА ФЕРМЕНТАЦИЯ

ПРИМЕРА

Посадъчна среда YMP3, съдържаща 1% глюкоза; 0.25% говежди екстракт; 0.5% бактопептон; 0.25% натриев хлорид и 0.8% калциев карбонат се инокулира с 0.1% замразена вегетативна маса от микроорганизма, щам А2-2 на Pseudomonas fluorescens и се инкубира в ротационен шейкър (250 оборота в минута) при 27°С. След инкубиране в продължение на 30 часа, посадъчната култура се поставя в съд за ферментация при разбъркване с хранителна среда, съставена от 2% декстроза; 4% манитол; 2% суха мая (Vitaievor® Biolux, Belgium); 1% амониев сулфат; 0.04% дикалиев хидрофосфат; 0.8% калиев хлорид; 0.001% железен трихлорид; 0.1% L-Tyr; 0.1% калциев карбонат; 0.05% полипропиленгликол-2000; 0.2% силикон антипенител (ASSAF-100, RHODIA UK). Стерилизирането се провежда при 122°С в продължение на 30 минути. Обемът за инокулиране е 2% (об./об.). Температурата е 27°С (от нулевия до шестнадесетия час) и 24°С от шестнадесетия час до края на процеса (41 часа). Кислородното налягане е до 25%. pH се установява 6.0 с разредена сярна киселина 28 часа до завършване на процеса. Свръхналягането е 0.5 бара. От шестнадесетия час до края на процеса (протича в продължение на 2 дни) се прибавя 1% манитол или сорбитол и 2% за тридневен процес на ферментация.

След 41 или 64 часа, ферментационният бульон трябва да се екстрахира за възстановяване на сафрацин В или да се третира с калиев цианид за възстановяване на сафрацин В-циано.

ПРИМЕР Б

265 •« · · · ·· · · ···· · · · · · · · · ··· · ··· · ···· · · · · · · • · · · 99 · · ···· ·· ··· *·· ·· ····

Получаване на сафрацин В-циано от суровия екстракт

При избистрянето или филтрацията на ферментационния бульон при pH 6 се отделят твърдите вещества. Бистрият бульон се установява на pH 6 с разреден натриев хидроксид и се екстрахира два пъти с 2:1 (об./об.) етилацетат, метиленхлорид или бутилацетат. Екстракцията се провежда в съд при разбъркване в продължение на 20 минути, като температурата на сместа се поддържа от 8 до 10°С. Посредством центрофугиране се разделят две фази. Органичната фаза се суши с безводен натриев сулфат или се замразява и след това се филтрува за да се отдели ледът. Тази органична фаза (етилацетатен слой) се изпарява до получаване на суров маслен екстракт.

ПРИМЕР В

Получаване на сафрацин В-циано от избистрения бульон

При избистрянето или филтрацията на ферментационния бульон при pH 6 се отделят твърдите вещества. Бистрият бульон се установява на pH 3.9 с концентрирана оцетна киселина. Към избистрения бульон се прибавят 0.5 грама на литър калиев цианид и се инкубира при 20°С в продължение на 1 час при разбъркване. След това температурата се понижава до 15°С и pH се установява 9.5 с разреден натриев хидроксид и се екстрахира с 2:1.5 (об./об.) етилацетат. Екстракцията се провежда в съд при разбъркване в продължение на 20 минути, като температурата на сместа се поддържа от 8 до 10°С. Посредством центрофугиране се разделят две фази. Органичната фаза се суши с безводен натриев сулфат. Тази органична фаза (етилацетатен слой) се изпарява до получаване на суров маслен екстракт.

266

Този екстракт се пречиства посредством колонна хроматография под налягане (силициев двуокис, градиент от 20:1 до 10 до 5:1 етилацетаг.метанол) до количествено получаване на съединението 2 като светложълто твърдо вещество.

Rf: 0.55 (етилацетат:метанол 15:1); tR = 19.9 min [HPLC, Delta Pack C4, 5μΐτι,

300A, 150 x 3 mm, λ = 215 nm, поток = 0.7 ml/min, температура = 50°C, градиент: СНзСИ-воден NaOAc (10 mM) 85% - 70% (20 минути)];

'H NMR (300 Mhz, CDC1₃): δ 6.54 (dd, J_t = 4.4Hz, J₂= 8.4 Hz, 1H),6.44 (s, 1H), 4.12 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 4.04 (d,/= 2.4 Hz, 1H),4.OO (s, 3H), 3.87 (bs, 1H), 3.65 (ddd,// = 1.5 Hz,/?

= 8.7 Hz, /? = 9.9 Hz, 1H), 3.35 (br. D,/= 8.4 Hz, 1H), 3.15-2.96 (m, 4H), 2.92 (q, /= 7.2 Hz, 1H), 2.47 (d,/= 18.3 Hz, 1H), 2.29 (s, 3H), 2.18 (s, 3H) 1.83 (s, 3H), 1.64 (ddd, // = 2.7 Hz, Λ = 11.1 Hz, /3 = 14.1 Hz, 1H), 0.79 (d, /= 7.2 Hz, 3H);

¹³C NMR (75 Mhz, CDCI3): δ 186.0 (q), 175.9 (q), 156.2 (q), 146.8 (q), 142.8 (q), 140.7 (q),

136.6 (q), 130.5 (q), 128.8 (q), 127.0 (q), 120.5 (s), 117.4 (q), 116.5 (q), 60.8 (t), 60.4 (s),

58.7 (t), 56.2 (s), 55.7 (s), 54.8 (s), 54.8 (s), 54.4 (s), 50.0 (s), 41.6 (t), 39.8 (d), 25.2 (d), 24.4 (d), 21.2 (t), 15.5 (t), 8.4 (t).

ESI-MS m/z: Изчислено за C29H35N5O6: 549.6. Намерено (M+Na)⁺: 572.3.

ПРИМЕР Γ

Среда (50 литра), съдържаща 2% декстроза; 4% манитол; 2% суха мая; 1% амониев сулфат; 0.04% дикалиев хидрофосфат; 0.8% калиев хлорид; 0.001% железен трихлорид 6-хидрат; 0.1% L-тирозин, 0.8% калциев карбонат; 0.05% полипропиленгликол-2000; 0.2% антмпенител ASSAF-100 се излива във ферментатор със 75 литра общ капацитет и, след стерилизация, се инокулира с посадъчна култура (2%) от А2-2 щам (FERM ВР-14) и култивацията се аерира при разбъркване при от 27°С до 24°С в продължение на 64 часа (аерираре на 75 литра за минута и разбъркване от 350 до 500

267 ·· · · • · · • · • · · ··· · «4 ____ _ _ _ _ 9 , _ ____ оборота за минута). pH се контролира посредством автоматично подаване *· ··· · на разредена сярна киселина от 27-ия час до края на процеса. От 16-тия час до края на процеса се прибавят 2% манитол. Така получената културна среда (45 литра), след отделяне на клетки чрез центрофугиране, се установява на pH 9.5 с разреден натриев хидроксид и двукратно се екстрахира с 25 литра етилацетат. Сместа се поставя в съд при разбъркване при 8°С в продължение на 20 минути. Посредством центрофугиране се разделят две фази. Органичната фаза се замразява при -20°С и се филтрува за отделяне на леда, ледът се изпарява и се изпарява до получаване на 40 g тьмен маслен суров екстракт. След въвеждане на цианидна група и пречистване се получават 3.0 g сафрацин В-циано.

ПРИМЕР Д

Среда (50 литра), съдържаща 2% декстроза; 4% манитол; 2% суха мая; 1% амониев сулфат; 0.02% дикалиев хидрофосфат; 0.2% калиев хлорид; 0.001% железен трихлорид 6-хидрат; 0.1% L-тирозин; 0.8% калциев карбонат; 0.05% полипропиленгликол-2000; 0.2% антипенител ASSAF-100 се излива във ферментатор със 75 литра общ капацитет и, след стерилизация, се инокулира с посадъчна култура (2%) от А2-2 щам (FERM ВР-14) и култивацията се аерира при разбъркване при от 27°С до 24°С в продължение на 41 часа (аерираре на 75 литра за минута и разбъркване от 350 до 500 оборота за минута). pH се контролира посредством автоматично подаване на разредена сярна киселина от 28-ия час до края на процеса. От 16-тия час до края на процеса се прибавят 1% манитол. Така получената културна среда (45 литра), след отделяне на клетки чрез центрофугиране, се установява на pH 3.9 с 200 ml концентрирана оцетна киселина. Прибавят се 25 грама калиев цианид 97% и след 1 час разбъркване при 20оС, pH се

268 установява 9.5 с 1500 ml разтвор 10% ·· · · • · · · • ·· • ·· • ·· ··· · ·· ♦ * • · · ·· ···· ♦

натриев хидроксид. След това се екстрахира с 35 литра етилацетат. Сместа се поставя в съд при разбъркване при 8°С в продължение на 20 минути. Посредством центрофугиране се разделят две фази. Органичната фаза се суши с безводен натриев сулфат и се изпарява до получаване на 60 g тъмен маслен суров екстракт. След хроматографиране се получават 4.9 g сафрацин В-циано.

269

ЛИТЕРАТУРА

European Patent 309,477.

US Patent 5,721,362.

Sakai, R., Jares-Erijman, EA, Manzanares, I., Elipe, M.V.S., and Rinehart, K.L, J. Am. Chem. Soc. (1996) 118, 9017-9023.

Martinez, E.J., Owa, T., Schreiber, S.L. and Corey, E.J., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1999, 96, 3496-3501.

Japanese Kokai JP-A2 59/225189.

Japanese Kokai JP-A2 60/084288.

Arai, T., Kubo, A., In The Alkaloids, Chemistry and Pharmacology; Brossi, A. Ed.; Academic: New York, 1983, Vol. 21, pp. 56-110.

Remers, W.A.: In The Chemistry of Antitumor Antibiotics; Vol. 2; Wiley; New York, 1988, pp. 93-118.

Gulavita N.K., Schreuer, P.J., Desilva, E.D., Abst. Indo-United States Symp. On Bioactive Compounds from Marine Organisms, Goa, India, Feb. 23-27, 1989, p. 28.

Arai, T., Takahashi, K., Kubo, A., J. Antibiot., 1977,30, 1015-1018.

Arai, T., Takahashi, K., Nakahara, S., Kubo, A., Experientia, 1980, 36, 10251028.

Mikami, Y., Takahashi, K., Yazawa, K., Hour-Young, C., Arai, T., Saito, N., Kubo, A., J. Antibiot., 1988, 41, 734-740.

Arai, T., Takahashi, K., Ishiguro, K., Yazawa, K., J. Antibiot., 1980, 33, 951960.

Yazawa, K., Takahashi, K., Mikami, Y., Arai, T., Saito, N., Kubo, A, J. Antibiot., 1986, 39, 1639-1650.

Arai, T., Yazawa, K., Takahashi, K., Maeda, A., Mikami, Y., Antimicrob. Agent Chemother. 1985, 28, 5-11.

270 ·· ·· · ··« ·· • ·· · ·· ······ ··· · ··· · • · · · · ···· · ··· · ···· • ··· · · ··· ··· ·· ···· Takahashi, K., Yazawa, K., Kishi, K., Mikami, Y., Arai, T., Kubo, A., J.

Antibiot., 1982, 35, 196-201.

Yazawa, K., Asaoka, T., Takahashi, K., Mikami, Y., Arai, T., J. Antibiot.,

1982, 35, 915-917.

Frincke, J.M., Faulkner, D.J., J. Am. Chem. Soc., 1982, 104, 265-269.

He, H.-Y., Faulkner, D.J., J. Org. Chem., 1989, 54, 5822-5824.

Kubo, A., Saito, N., Kitahara, Y., Takahashi, K., Tazawa, K., Arai, T., Chem.

Pharm. Bull., 1987,35, 440-442.

Trowitzsch-Kienast, W., Irschik, H., Reichenback, H., Wray, V., Hoefle, G.

Liebigs Ann. Chem., 1988, 475-481.

Ikeda, Y., Idemoto, H., Hirayama, F., Yamamoto, K., Iwao, K., Asano, T.,

Munakata, T., J. Antibiot., 1983, 36, 1279-1283.

Asaoka, T., Yazawa, K., Mikami, Y., Arai, T., Takahashi, K., J. Antibiot.,

1982, 35, 1708-1710.

Lown, J.W., Hanstock, C.C., Joshua, A.V., Arai, T., Takahashi, K., J.

Antibiot., 1983, 36, 1184-1194.

Munakata et al., US Patent 4,400,752, 1984.

Y. Ikeda et al., The Journal of Antibiotics. Vol. XXXVI, №10, 1284, 1983.

R. Cooper, S. Unger, The Journal of Antibiotics. Vol. XXXVIII, №1, 1985.

Corey et al„ US Patent 5,721,362, 1998.

Corey et al., J. Am. Chem. Soc, vol. 118, pp. 9202-92034, 1996.

Proc. Natl. Acad. Sci. USA, vol. 96, pp. 3496-3501, 1999.

Claims

ПАТЕНТНИ ПРЕТЕНЦИИ

1. Съединение с петчленна кондензирана пръстенна ектеинасцидинова структура с формула (XIV):

характеризиращо се с това, че в съединението липсва 1,4-мостова група и в позиция С-1 има заместител, подбран от възможно защитена или получена аминометиленова група или възможно защитена или получена хидроксиметиленова група.
2. Съединение, съгласно претенция 1, характеризиращо се с това, че пръстенната структура има формула (а), (Ь) или (с):

(Ъ)

272 • · · · · ··· •··· ·· ··· ··· ·· ····
3. Съединение, съгласно претенция 1 или 2, характеризиращо се с това, че С-1 заместителят е хидрофобна група със средна големина.
4. Съединение, съгласно претенция 1, 2 или 3, характеризиращо се с това, че заместителят на С-1 е възможно защитена или получена аминометиленова група.
5. Съединение, съгласно претенция 4, характеризиращо се с това, че С-1 заместителят е монозаместена аминометиленова група.
6. Съединение, съгласно претенция 5, характеризиращо се с това, че С-1 заместителят има формула -CH₂-NHCO-R^a или -CH₂-NHCS-R^a, където R^a е алкил, халоалкил, алкоксиалкил, халоалкоксиалкил, арилалкилен, халоалкиларилалкилен, ацил, халоацил, арилалкил, алкенил и аминокиселина.
7. Съединение, съгласно претенция 4, характеризиращо се с това, че С-1 заместителят е възможно защитена или получена хидроксиметиленова група.
8. Съединение, съгласно претенция 7, характеризиращо се с това, че С-1 заместителят има формула -CH₂-OCO-R^a, където R^a е алкил, халоалкил, алкоксиалкил, халоалкоксиалкил, арилалкилен, халоалкиларилалкилен, ацил, халоацил, арилалкил, алкенил и аминокиселина.
9. Съединение, съгласно претенция 1 с формула:

характеризиращо се с това, че

273 • · · · · ··· ···· ·· ··· ··· ·· ···· R¹ e -CH2-N(R^a)2 или -CH₂-OR^a, където R^a е водород, алкил-СО-, халоалкил-СО-, циклоалкилалкил-СО-, халоалкил-О-СО-, арилалкил-СО-, арилалкенил-СО-, хетероарил-СО-, алкенил-СО-, алкенил, ацил на аминокиселина или защитаваща група;

R⁵ е -OR”, където R” е водород, алкил-СО-, циклоалкил-СО-, халоалкил-СО- или защитаваща група;

R¹⁸ е -OR, където R е водород, алкил-СО-, циклоалкилалкил-СО- или защитаваща група;

R²¹ е -CN или хидроксилна група.
10. Съединение, съгласно претенция 9 с формула:

характеризиращо се с това, че R¹, R⁵, R¹⁸ и R²¹ са, както са дефинирани по-горе.
11. Съединение, съгласно претенция 9 или 10, характеризиращо се с това, че R¹ е -CH₂-NHR^a.
12. Съединение, съгласно една от претенции от 9 до 10, характеризиращо се с това, че R^a е -aa-R^b, където аа е ацил на аминокиселина и R^b е, както е дефиниран за R^a.
13. Съединение, съгласно претенция 12, характеризиращо се с това, че ацилът на аминокиселината след това се замества с една или повече R^a групи.
14. Съединение, съгласно една от претенции от 9 до 13, характеризиращо се с това, че R¹ е -CH₂-NH-aa-R^b, където аа е аминокиселина и R^b е водород,

274 ··· · · · · · ···· ·· ··· ··· ·· ···· защитаваща група, арилалкенил-СО-, халоалкил-СО-, алкил-СО-, арилалкил-СОили ацил на аминокиселина.
15. Съединение, съгласно претенция 14, характеризиращо се с това, че R¹е -CH2-NH-aa-R^b, където аа е аланин и R^b е водород, Вос, PhNHCS-, CF3CO-, PhNAcCS-, трифлуорсинамоил, синамоил, C3F7CO-, бутирил, 3-хлорпроприоноил, хидросинамоил, хексаноил, фенилацетил, Cbz-Val или ацетил; -CH₂-aa-R^b, където аа е валин и R^b е Cbz или Вос; -CH2-aa-R^b, където аа е пролин и R^b е Вос; -CH2-aa-R^b, където аа е аргинин и R^b е Вос; или -CH₂-aa-R^b, където аа е триптофан и R^b е Вос.
16. Съединение, съгласно една от претенции от 9 до 13, характеризиращо се с това, че R¹ е -CH₂-NR^a-aa-R^b, където аа е аминокиселина и R^a е алкил-СО- и R^b е халоалкил-СО-.
17. Съединение, съгласно претенция 16, характеризиращо се с това, че R¹е -CH₂-NR^a-aa-R^b, където аа е ацетилаланин и R^a е ацетил или бутирил и R^b е CF3-CO-.
18. Съединение, съгласно една от претенции от 9 до 13, характеризиращо се с това, че R¹ е -CH₂-NHR^a, където R^a е водород, защитаваща група, алкил-СОалкенил-СО-, арилалкенил-СО-, арилалкил-CO-, хетероарил-СО-, циклоалкилалкил-СО- или алкенил.
19. Съединение, съгласно претенция 18, характеризиращо се с това, че R¹е -CH₂-NHR^a, където R^a е водород, Тгос, ацетил, изовалероил, деканоил, синамоил, хидросинамоил, фенилацетил, пропионил, миристоил, стеароил, хексаноил, кротонил, хлорникотиноил, циклохексилацетил, циклохексилпропионил или алил.
20. Съединение, съгласно една от претенции от 9 до 13, характеризиращо се с това, че R¹ е -CH₂-OR^a, където R^a е водород, защитен цистеин, производно

275 на цистеина с формула Prot^SH-S-CH2-C(NHProt^NH)-CO-, където Prot^SH и Prot^NH са защитаващи групи за тиол и за амино; защитаваща група; алкил-СОарилалкил-СО-, арилалкенил-СО-; производно на цистеина с формула Prot^SH-SCH2-C(=NOProt°^H)-CO-, където Prot^SH и Prot^OH са защитаващи групи за тиол и за хидрокси; или производно на цистеина с формула Prot^SH-S-CH=C(-OProt°^H)-CO-, където Prot^SH и Prot^OH са защитаващи групи за тиол и за хидрокси.
21. Съединение, съгласно претенция 20, характеризиращо се с това, че R¹е -CH2-OR^a, където R^a е водород, S-Fm-O-TBDMS-цистеин; производно на цистеина с формула Prot^SH-S-CH2-C(NHProt^NH)-CO-, където Prot^SH е Fm и Prot^OH е Troc; TBDMS; бутирил; трифлуорметилсинамоил; синамоил; хидросинамоил; производно на цистеина с формула Prot^SH-S-CH₂-C(=NOProt°^H)-CO-, където Prot^SH е Fm и Prot^OH е метокси; или производно на цистеина с формула Prot^SH-SCH=C(-OProt°^H)-CO-, където Prot^SH е Fm и Prot^OH е MOM.
22. Съединение, съгласно една от претенции от 9 до 21, характеризиращо се с това, че R⁵ е -OR”, където R” е водород; алкил-СО-, където алкилът притежава нечетен брой въглеродни атоми, ω-циклохексилалкил-СО-; или защитаваща група.
23. Съединение, съгласно една от претенции от 9 до 22, характеризиращо се с това, че R¹⁸ е -OR, където R е водород; алкил-СО-, или защитаваща група.
24. Съединение, съгласно една от претенции от 9 до 22, характеризиращо се с това, че R²¹ е цианогрупа.
25. Съединение, съгласно една от претенции от 9 до 22, характеризиращо се с това, че R²¹ е хидроксилна група.
26. Съединение, съгласно претенция 1 с формула (XVIIa):

276 или формула (XVIIb):

• · характеризиращо се с това, че

R¹ е възможно защитена или получена аминометиленова група или възможно защитена или получена хидроксиметиленова група;

R⁴ е водород;

R⁵ е водород или хидроксилна група;

R⁷ е -ОСНз, и R⁸ е хидроксилна група или R⁷ и R⁸ заедно образуват групата -О-СН2-О-;

и двата R^14a и R^14b са водород или единият е водород, а другият е хидроксилна група, -ОСНз или -ОСН₂СН₃ или и двата R^14a и R^14b заедно формират кетогрупа; и R^1S е водород или хидроксилна група;

R²¹ е водород, хидроксилна група или циано;

и техни производни.

2-П · · · · · · е · · • · · · ·· · · · · · · ··· · · ·· · ···· · · · · · · ··· · · ··· ···· ·· ··· ··· ·· ·«··
27. Съединение, съгласно претенция 26, характеризиращо се с това, че R⁵ е ацетилокси или друга ацилоксигрупа с до 4 въглеродни атома.
28. Съединение, съгласно претенция 1 с обща формула (XX):

характеризиращо се с това, че R¹ е монозаместена амидометиленова група; R⁵е малка окси-странична верига; и R²¹ е цианогрупа или хидроксилна група.
29. Съединение, съгласно претенция 1, с обща формула (XXI):

характеризиращо се с това, че Prot¹ и Prot² са хидроксизащитени групи, за предпочитане, различни.
30. Съединение, съгласно претенция 1, с формула (ХХПа):

278 или с формула (ХХПЬ):

характеризиращо се с това, че

R¹ е -CH₂NH₂ или -СН₂ОН, или защитена или получена разновидност на такава група, и R⁴ е водород;

R⁵ е хидроксилна група или защитена или получена разновидност на таен* група;

и двата R^14a и R^14b са водород или единият е водород, а другият е хидроксилна група, или защитена или получена разновидност на тази група, -ОСН₃ или -ОСН₂СНз, или и двата R^14a и R^14b заедно формират кетогрупа;

R¹² е -NCH₃-;

R¹⁵ е хидроксилна група или защитена или получена разновидност на тазм група; и

R¹⁸ е хидроксилна група или защитена или получена разновидност на таеш група.
31. Съединение, съгласно претенция 30, характеризиращо се с това, поне един от R¹, R⁵, R^14a, R^14b, R¹⁵ или R¹⁸ да е защитена или получена група.
32. Съединение, съгласно претенция 30, характеризиращо се с това, че и двата R^14a и R^14b са водород.
33. Съединение, съгласно претенция 1, с обща формула (XXIII):

• · · · * · · · · ·· · · · · · · ·· · ··· · · ·· ·

279 характеризиращо се с това, че

R¹ е получена аминометиленова група със средна големина;

R⁵ е получена хидроксилна група с малка големина;

R¹² е -NCH₃-; и

R²¹ е цианогрупа или хидроксилна група.
34. Съединение, съгласно претенция 33, характеризиращо се с това, че R¹е хидрофобна група и липсва свободна хидрофилна функционалност.
35. Съединение, съгласно претенция 33 или 34, характеризиращо се с това, че R¹ е групата -CH₂-NH₂-CO-R^a, където R^a има линейна верига с по-малко от 20 атома.
36. Съединение, съгласно претенция 33, 34 или 35, характеризиращо се с това, че R⁵ е ацетилна група.
37. Съединение, съгласно една от претенции от 33 до 36, характеризиращо се с това, че групата R¹ е ацилирана при аминогрупата и е Nацилно производно, получено от групата -CH₂-NH₂ или -СНг-NH-aa.
38. Съединение, съгласно претенция 37, характеризиращо се с това, че ацилната група има формула -C0-R³, където R^a е алкил, халоалкил, алкоксиалкил, халоалкоксиалкил, арилалкилен, халоалкиларилалкилен, ацил, халоацил, арилалкил, алкенил или аминокиселина.

280 ···· · » ·· · ? · · * · · ·« · ·· ·

4·· · · ··· • · · · · · · · ·· » · · 9 * · ·· ···· ·· ··· *·· ······
39. Съединение, съгласно претенция 33 или 34, характеризиращо се с това, че групата R¹ е получена хидроксиметиленова група.
40. Фармацевтичен състав, характеризиращ се с това, че съдържа съединение, съгласно коя да е от предишните претенции, заедно с фармацевтично приемлив носител.
41. Приложение на съединение, съгласно коя да е от претенции от 1 до

39, при получаване на фармацевтичен състав, характеризиращо се с това, че е за лечение на тумори.
42. Метод за лечение на тумор, характеризиращ се с това, че включва администриране на ефективно количество съединение, съгласно коя да е от претенции от 1 до 39.