BG65635B1 - Хранителна среда за микроразмножаване на лавандула (lavandula vera v.) в условия in vitro - Google Patents

Хранителна среда за микроразмножаване на лавандула (lavandula vera v.) в условия in vitro Download PDF

Info

Publication number
BG65635B1
BG65635B1 BG107956A BG10795603A BG65635B1 BG 65635 B1 BG65635 B1 BG 65635B1 BG 107956 A BG107956 A BG 107956A BG 10795603 A BG10795603 A BG 10795603A BG 65635 B1 BG65635 B1 BG 65635B1
Authority
BG
Bulgaria
Prior art keywords
acid
lavender
ιμμ
agar
micropropagation
Prior art date
Application number
BG107956A
Other languages
English (en)
Other versions
BG107956A (bg
Inventor
Йорданка СЛАВОВА
Ели ЗАЙОВА
Симеон КРЪСТЕВ
Original Assignee
Земеделски Институт
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Земеделски Институт filed Critical Земеделски Институт
Priority to BG107956A priority Critical patent/BG65635B1/bg
Publication of BG107956A publication Critical patent/BG107956A/bg
Publication of BG65635B1 publication Critical patent/BG65635B1/bg

Links

Classifications

    • Y02P60/216

Landscapes

  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

Хранителната среда представлява подходяща комбинация от определени количества от макро- и микросоли, хидролизат на казеина, захароза, витамини, агар-агар, БАП (6- бензиламинопурин), АНОК (алфа-нафтилоцетна киселина), ГК (гиберилинова киселина) и AgNО3 (сребърен нитрат), която създава условия за масово пъпкуване на експлантите. От един експлант, взет от връхчета и стъблени коленца, за 20-25 дни могат да се получат от 15 до 30 нови фрагмента. Средата позволява от едно оформено in vitro растение да се получат от осем до десет хиляди нови след четири субкултивирания.

Description

Област на техниката
Изобретението се отнася до хранителна среда за in vitro микроразмножаване на предварително въведени при тези условия растения от лавандула.
Предшестващо състояние на техниката
При лавандулата е възможно семенно и вегетативно размножаване. Поради факта, че семенното потомство на хибридните сортове дава силно разпадане, вегетативното размножаване е прието като единствен метод. В практиката масово се използва методът на вкоренени резници, като вкореняването е около 75-80 % (Янкулов, 2000). Методът е непроизводителен и доста скъп. Цената на един вкоренен резник по цени през 2002 г. е около 0,10 лв.
Известна е хранителна среда за микроразмножаване на захарно цвекло (Славова, Рафаилова, 1991), която предизвиква микроразмножаване и на лавандула в условия in vitro. Недостатък на тази среда е, че наред с пъпкуването предизвиква встькляване (ненормално, уродливо развитие) на вегетативните части на растенията, което ги прави негодни за по-нататъшно култивиране.
Техническа същност на изобретението
Изобретението се отнася до хранителна среда за микроразмножаване на експланти от въведена in vitro лавандула.
Хранителната среда включва следните компоненти в съответните количествени съотношения:
Макросоли по Lepoivre: mM mg/I
NH4NO3 От 3,7 До 6,2 Οτ 300 До 500
KNO3 16,8 18,8 1700 1900
MgSC>4 7Н2О 1,5 1,7 350 400
КН2РО4 1,5 2,6 200 350
Ca(NO3)2.4H2O 4,2 5,1 1000 1200
Na2EDTA 0,09 0,1 36,5 38,5
Fe2SO4.7H2O 0,08 0,1 23,0 28,5
Микросоли:
ZnSO4.7H2O 0,056 0,063 16,0 18,0
H3BO3 0,19 0,21 12,0 13,0
MnSO4.4H2O 0,009 0,018 1,5 3,0
C11SO4.5H2O Ο,ΙόμΜ 0,24μΜ 0,04 0,06
KJ 0,90μΜ 1,20μΜ 0,15 0,20
Na2MoO42H2O 1,80μΜ 2,4μΜ 0,45 0,60
CoCI2 ,6H2O 0,16μΜ 0,24μΜ 0,04 0,06
Хидролизат на казеина 400 600
Захароза 58,4 116,8 20000 40000
Витамини:
Фолиева киселина Ι,ΙμΜ 3,3μΜ 0,5 1,5
Рибофлавин 1,3 μΜ 3,9μΜ 0,5 1,5
Н /биотин/ 6,1μΜ 10,2μΜ 1,5 2,5
Холин-хлорид 10,7μΜ 17,9μΜ 1,5 2,5
Са-пантотенат 3,1 μΜ 5,2μΜ 1,5 2,5
Be /пиридоксин/ 7,2μΜ 12,ΙμΜ 1,5 2,5
В] /тиамин/ 4,4μΜ 7,4μΜ 1,5 2,5
РР /никотинова киселина/ 24,5μΜ 32,7μΜ 3,0 4,0
В12 0,007μΜ 0,029μΜ 0,01 0,04
С /аскорбинова киселина/ 0,1 ΙμΜ 0,17μΜ 20,0 30,0
Агар-агар 7000 9000
БАП /6-бензиламинопурин/ 0,44μΜ 1,33μΜ ο,ι о,з
АНОК /а-нафтилоцетна киселина/ 2,7μΜ 8,0μΜ 0,5 1,5
ГК /гиберилинова киселина/ 0,26μΜ 1,04μΜ ο,ι 0,4
AgNO3 2,94μΜ 8,83μΜ 0,5 1,5
65635 Bl
Хранителна среда за микроразмножаване на растения от лавандула в условия in vitro, съгласно изобретението създава условия за масово пъпкуване на растенията. От един експлант, взет от връхчета или стъблени коленца, могат да се оформят от 15 до 30 нови фрагмента за период от 20-25 дни. Този резултат е повлиян и от липсата на встъкляване (уродливо развитие на растенията, дължащо се на силно оводняване на междуклетъчните пространства на тъканите и засилена склонност към калусогенезис). Появата на това явление води до отпадане на растенията. Преодоляването му в конкретния случай се дължи на подходящо подбрания състав на макро- и микросолите (Lepoivre), повишеното ниво на захарозата (20000-40000 mg/Ι) и ниските нива от растежните регулатори БАП (0.1-0.3 mg/Ι) и АНОК (0.5-1.5 mg/Ι) в хранителната среда.
Използваните концентрации от растежните регу латори (БАП и АНОК) не предизвикват калусо генезис на тъканите, явяващ се основна пред поставка за появата на нежеланото встъкляване.
Примери за изпълнение на изобретението
Изобретението се илюстрира със следните примери.
Пример 1. В 1 1 хранителна среда се съдържат следните компоненти:
Макросоли по Lepoivre:
mM mg/1
NH4NO3 3,7 300
KNO3 16,8 1700
MgSO47H2O 1,5 350
КН2РО4 1,5 200
Ca(NO3)2.4H2O 4,2 1000
Na2EDTA 0,09 36,5
Fe2SO4.7H2O 0,08 23,0
Микросоли:
ZnSO4.7H2O 0,056 16,0
H3BO3 0,19 12,0
MnSO4.4H2O 0,009 1,5
CuSO4 .5H2O Ο,ΙόμΜ 0,04
KJ 0,90μΜ 0,15
Na2MoO42H2O 1,80μΜ 0,45
CoCI2 .6H2O Ο,ΙόμΜ 0,04
Хидролизат на казеина 400
Захароза 58,4 20000
Витамини:
Фолиева киселина Ι,ΙμΜ 0,5
Рибофлавин 1,3 μΜ 0,5
Н/биотин/ 6,1μΜ 1,5
Холин-хлорид 10,7μΜ 1,5
Са-пантотенат 3,1 μΜ 1,5
Вб /пиридоксин/ 7,2μΜ 1,5
В] /тиамин/ 4,4μΜ 1,5
РР /никотинова киселина/ 24,5μΜ 3,0
В]2 0,007μΜ 0,01
С /аскорбинова киселина/ 0,1 ΙμΜ 20,0
Агар-агар 7000
БАП /6-бензиламинопурин/ 0,44μΜ 0,1
АНОК /а-нафтилоцетна киселина/ 2,7μΜ 0,5
ГК /гиберилинова киселина/ 0,26μΜ ο,ι
AgNO3 2,94μΜ 0,5
65635 Bl
Пример 2. В 1 1 хранителна среда се съдържат следните компоненти:
Макросоли по Lepoivre: mM mg/1
NH4NO3 6,2 500
KNO3 18,8 1900
MgSO47H2O 1,7 400
КН2РО4 2,6 350
Ca(NO3)2.4H2O 5,1 1200
Na2EDTA 0,1 38,5
Fe2SO4.7H2O 0,1 28,5
Микросоли:
ZnSO4.7H2O 0,063 18,0
H3BO3 0,21 13,0
MnSO4.4H2O 0,018 3,0
C11SO4.5H2O 0,24μΜ 0,06
KJ 1,20μΜ 0,20
Na2MoO42H2O 2,4μΜ 0,60
CoCI2 .6H2O 0,24μΜ 0,06
Хидролизат на казеина 600
Захароза 116,8 40000
Витамини:
Фолиева киселина 3,3μΜ 1,5
Рибофлавин 3,9μΜ 1,5
Н /биотин/ 10,2μΜ 2,5
Холин-хлорид 17,9μΜ 2,5
Са-пантотенат 5,2μΜ 2,5
Вб /пиридоксин/ 12,1μΜ 2,5
Bi /тиамин/ 7,4μΜ 2,5
РР /никотинова киселина/ 32,7μΜ 4,0
В]2 0,029μΜ 0,04
С /аскорбинова киселина/ 0,17μΜ 30,0
Агар-агар 9000
БАП /6-бензиламинопурин/ 1,33μΜ 0,3
АНОК /а-нафтилоцетна
киселина/ 8,0μΜ 1,5
ГК /гиберилинова киселина/ 1,04μΜ 0,4
AgNO3 8,83μΜ 1,5
65635 Bl
Пример 3. В 1 1 хранителна среда се съдържат следните компоненти:
Макросоли по Lepoivre:
mM mg/1
NH4NO3 6,2 500
KNO3 18,8 1900
MgSO47H2O 1,7 400
КН2РО4 2,6 350
Ca(NO3)2.4H2O 5,1 1200
Na2EDTA 0,1 38,5
Fe2SO4.7H2O 0,1 28,5
Микросоли:
ZnSO4.7H2O 0,063 18,0
H3BO3· 0,21 13,0
MnSO4.4H2O 0,018 3,0
CuSO4.5H2O 0,24μΜ 0,06
KJ 1,20μΜ 0,20
Na2MoO42H2O 2,4μΜ 0,60
CoCI2 .6H2O 0,24μΜ 0,06
Хидролизат на казеина 600
Захароза 116,8 40000
Витамини:
Фолиева киселина 3,3 μΜ 1,5
Рибофлавин 3,9μΜ 1,5
Н /биотин/ 10,2μΜ 2,5
Холин-хлорид 17,9μΜ 2,5
Са-пантотенат 5,2μΜ 2,5
Вб /пиридоксин/ 12,1 μΜ 2,5
В| /тиамин/ 7,4μΜ 2,5
РР /никотинова киселина/ 32,7μΜ 4,0
В)2 0,029μΜ 0,04
С /аскорбинова киселина/ 0,17μΜ 30,0
Агар-агар 9000
БАП /6-бензиламинопурин/ 1,33μΜ 0,3
АНОК /а-нафтилоцетна киселина/ 8,0μΜ 1,5
ГК /гиберилинова киселина/ 1,04μΜ 0,4
AgNO3 8,83μΜ 1,5
На предлаганите хранителни среди, експлантите от лавандула (връхчета и стъблени коленца) нарастват и масово пъпкуват. За 20-25 дни, от един заложен експлант, могат да се получат от 15 до 30 нови фрагмента. Хранителната среда се приготвя по следния начин: от предварително подготвени концентрирани разтвори от макро- и микросоли, витамини и стимулатори 45 се вземат необходимите количества, смесват се последователно, както са изписани в рецептата. Хидролизатьт на казеина и захарозата се изтеглят и прибавят към хранителната среда в момента на приготвянето й. Агар-агарът се залива с 5θ бидестилирана вода (1/3 от необходимия обем
65635 Bl на средата) и се автоклавира при 1 at за 30 min. След това се смесва с останалите компоненти от хранителната среда, долива се до 11, размесва се и се разлива в културните съдове. Следва отново автоклавиране при 0.75-1.00 at налягане за 5 25 min. Експлантите от лавандула се пасират на предоставените хранителни среди и се поставят при контролирани условия (температура 25 ± 1 °C и режим на осветление от 16 h в денонощието).
Приложение /използване/ на изобретението
Хранителната среда за микроразмножаване може да бъде използвана за масово и непрекъснато in vitro размножаване на лавандула. От един заложен експлант могат да се получат от 15 до 30 нови фрагмента за 20-25 дни, а от едно оформено in vitro растение - от 8 до 10 хиляди нови след четири субкултивирания.

Claims (1)

  1. Патентни претенции
    1. Хранителна среда за микроразмножаване на лавандула (Lavandula vera L.) в условия in vitro, която съдържа макросоли, микросоли, 1 θ хидролизат на казеина, захароза, витамини, агарагар, характеризираща се с това, че допълнително съдържа 6-бензиламинопурин, алфа-нафтилоцетна киселина, гиберилинова киселина и AgNO3 и компонентите са в следните количест15 вени съотношения:
    mM
    Макросоли по Lepoivre:
    mg/1
    NH4NO3 От 3,7 До 6,2 Οτ 300 До 500 KNO3 16,8 18,8 1700 1900 MgSO47H2O 1,5 1,7 350 400 КН2РО4 1,5 2,6 200 350 Ca(NO3)2.4H2O 4,2 5,1 1000 1200 Na2EDTA 0,09 0,1 36,5 38,5 Fe2SO4.7H2O 0,08 0,1 23,0 28,5 Микросоли: ZnSO4.7H2O 0,056 0,063 16,0 18,0 H3BO3 0,19 0,21 12,0 13,0 MnSO4 4H2O 0,009 0,018 1,5 3,0 CuSO4.5H2O Ο,ΙόμΜ 0,24μΜ 0,04 0,06 KJ 0,90μΜ 1,20μΜ 0,15 0,20 Na2MoO42H2O 1,8μΜ 2,4μΜ 0,45 0,60 CoCI2 ,6H2O Ο,ΙόμΜ 0,24μΜ 0,04 0,06 Хидролизат на казеина 400 600 Захароза 58,4 116,8 20000 40000 Витамини: Фолиева киселина Ι,ΙμΜ 3,3μΜ 0,5 1,5 Рибофлавин 1,3 μΜ 3,9μΜ 0,5 1,5 Н/биотин/ 6,ΙμΜ 10,2μΜ 1,5 2,5 Холин-хлорид 10,7μΜ 17,9μΜ 1,5 2,5 Са-пантотенат 3,1 μΜ 5,2μΜ 1,5 2,5 Вб /пиридоксин/ 7,2μΜ 12,ΙμΜ 1,5 2,5 Βι /тиамин/ 4,4μΜ 7,4μΜ 1,5 2,5 РР /никотинова киселина/ 24,5μΜ 32,7μΜ 3,0 4,0 В12 0,007μΜ 0,029μΜ 0,01 0,04 С /аскорбинова киселина/ 0,1 ΙμΜ 0,17μΜ 20,0 30,0 Агар-агар 7000 9000 ^6-бензиламинопурин/ 0,44μΜ 1,33μΜ ο,ι 0,3 ’ ':· ^Ах-нафтилоцетна киселина/ 2,70μΜ 8,00μΜ 0,5 1,5 , лберилинова киселина/ 0,26μΜ 1,04μΜ ο,ι 0,4 AgNO3 2,94μΜ 8,83μΜ 0,5 1,5
    65635 Bl
BG107956A 2003-07-01 2003-07-01 Хранителна среда за микроразмножаване на лавандула (lavandula vera v.) в условия in vitro BG65635B1 (bg)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
BG107956A BG65635B1 (bg) 2003-07-01 2003-07-01 Хранителна среда за микроразмножаване на лавандула (lavandula vera v.) в условия in vitro

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
BG107956A BG65635B1 (bg) 2003-07-01 2003-07-01 Хранителна среда за микроразмножаване на лавандула (lavandula vera v.) в условия in vitro

Publications (2)

Publication Number Publication Date
BG107956A BG107956A (bg) 2005-02-28
BG65635B1 true BG65635B1 (bg) 2009-04-30

Family

ID=34230263

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
BG107956A BG65635B1 (bg) 2003-07-01 2003-07-01 Хранителна среда за микроразмножаване на лавандула (lavandula vera v.) в условия in vitro

Country Status (1)

Country Link
BG (1) BG65635B1 (bg)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MD57Z (ro) * 2009-03-03 2010-03-31 Институт Генетики, Физиологии И Защиты Растений Академии Наук Молдовы Procedeu de micropropagare a Stevia rebaudiana Bertoni in vitro

Also Published As

Publication number Publication date
BG107956A (bg) 2005-02-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Eeuwens Mineral requirements for growth and callus initiation of tissue explants excised from mature coconut palms (Cocos nucifera) and cultured in vitro
Boxus The production of strawberry plants by in vitro micro-propagation
KR101587707B1 (ko) 난 유묘의 생산방법
CN103651121A (zh) 一种白及分化、壮苗培养基
Ibrahim et al. Nutrient factors affecting in vitro cultivation of Stevia rebaudiana
Ebrahim et al. Influence of medium solidification and pH value on in vitro propagation of Maranta leuconeura cv. Kerchoviana
Chávez-Ortiz et al. In vitro propagation of Agave guiengola Gentry using semisolid medium and temporary immersion bioreactors
Hosoki et al. In Vitro Propagation of Narcissus1
Seabrook et al. The in vitro propagation of Amaryllis (Hippeastrum spp. hybrids)
JPS6137030A (ja) 器官形成によるヒマワリの再生方法
Pacholczak et al. Effect of IBA and biopreparations on rooting performance of Cotinus coggygria Scop.
Norstog The growth of barley embryos on coconut milk media
Borbolla-Pérez et al. Effect of zeatin and casein hydrolysate on in vitro asymbiotic germination of immature seeds of Vanilla planifolia Jacks ex Andrews (Orchidaceae)
BG65635B1 (bg) Хранителна среда за микроразмножаване на лавандула (lavandula vera v.) в условия in vitro
KR101934775B1 (ko) 캘러스배양을 통한 모링가 유식물체의 대량 증식방법
EP2332405B1 (en) Media comprising gellan gum and methods for promoting maturation of conifer somatic embryos
CN1915002B (zh) 诱导落叶松属植物胚性愈伤组织的方法及其专用培养基
Meyer Jr et al. In vitro propagation of horseradish with leaf pieces
Taha et al. Studies on silver nitrate impact on jojoba in vitro culture
CN112154919B (zh) 一种诱导七叶一枝花愈伤组织直接成苗的培养基及方法
RU2045891C1 (ru) Питательная среда для микроклонального размножения косточковых культур
Amin et al. Somatic Embryogenesis and Plant Regeneration from Juice Vesicles of Mexican Lime (Citrus aurantifolia L.).
CA1270647A (en) Process for regenerating soybeans
KR102200935B1 (ko) 절간 배양 방법을 이용한 대추나무 '복조' 품종의 기내 식물체 형성 방법
EP1360893B1 (en) Methods for producing high yields of zygotic-like cotyledonary pine embryos utilizing media that include a disaccharide and glucose