BG98804A - Стабилизирана фармацевтична форма,съдържаща растежен хормон и аспарагин - Google Patents

Abstract

Формата съдържа хормон на растежа и аспарагин илибуфериращо вещество. Тя има много висока стабилност срещу деамидиране, окисление и разкъсване на пептидните връзки и може да се съхранява и транспортира в лиофилизирано състояние или под формата на разтворен или повторно разтворен препарат при температурата на околната среда.

Description

А-265/94-ГП СТАШйЗйРШ ФАРайДВШЧИА ФОРМУЛИРОВКАСЩЖШ РАСТВМВЙ Ж><;Ш Л АСЙАРАГЙН Област на изобретението Изобретението се отнася &amp;о стабилизирана фармацевтична Формулировка съдържащо растежен хормон, до метод за получаването натакава формулировка и до използването на аспарагин за стабили-зиране на формулировка на растежен хормон. Предшествувано състояние на техниката Растежните хормони от хора и от обикновените домашни жи-вотни са протеини с приблизително Х9Х аминокиселини, синтезира-ли се и отделящи се от предната част на хипофизната жлеза. Чо-вешкият растежен хормон се състои от Χ3Ι аминокиселини. Растежният хормон е ключов хормон участвуващ в регулиране-то не само на соматичния растеж, но сшо така и в регулиране наметаболизма на протеините, на въглехидратите и на липидите. - 2 - Главнатв роля ва растежния хоромон е да предизвиква растеж. Фргаавите системи, които се повлияват от растежния хорьюнса скелета и свързаните с вето тъкани и мускули и вътрешните ор-гани като черен дроб, черва и бъбреци· докато разработването на рекомбянантаа технология и клони-рането ва растежния хормонен ген сега дава възможност за увели-чаване на производството примерно на човешки растежен хормон(дСп) и ва ме.-аСп в индустриален мащаб, то човешкият растеженхормон можеше да се получи само чрез екстрахирана на хапофизнижлези от човешки трупове· лрадно ограничените доставки от расте-жен хормон намаляват и зло л заснето му за продължително приложе-ние за предизвикване на растеж при деца и младежи а пуберитетнавъзраст за лечение при спирането на растежа (джуджета), както имежду другото при лечението на малък ръст (дължащ се на недостигна растежен хордон, при нормален малък ръст и при 1ърнеров син-дром), при недостиг на растежен хормон ара възрастни, при безплод-ност, при лечението на изгаряния, за зарастване из рани, придастрофия, при зарастване на кости, при остеопороза, при дифуз-но стомашно кървене и при псевдоартроза. Неда повече, предложено е използването на растежен хормонза увеличаване скоростта на растеж при домашни животни и за на-маляване количеството на мазнини при животни подлежащи на кланоза консумация от хора· Фармацевтичните препарати от растежен хормон проявяват тен-денция да са нестабилни. Получават се продукти от разлагането ка-то деамидарани или сулфоксидирани продукти и димерни или поли-мерни Форми, особено в разтвори на растежен хормон· доминиращите реакции на разлагане на човешкия растежен хор- - 3 - мой са: 1) деамидиране чрез директна хвдрежюо или чрез циклич-но суксянимадво междинно съединение за да се образуват различниКОДИЧес?ва ОТ Ь-ввр-ЬОИ, Ь-Хао-еер-рОН, б-авр-ЬЗН и 9- Хво-ввр-ьан (виж 1-3), 2) окасляваае на метиоаинозате остатъци в позиции 14 и 125 (виж 4 - 9) и 3) разцепване на пеп-тадните връзки. Деамидараввто протича най-вече при 4ап > позиция 149.ьон се окислява най-лесно в позицга 14 и 125 и то най-вече а разтвор (4 - е). Окисляването на ьон в разтвор при което се образуватсулфоксиди обикновено се дължи на разтворения в арепаративнатаформа кислород. Разтворимостта на кислорода в дестилирана водае около 200 ийп (9). Уъй като концентрацията на човешки растеженхормон в препарат съдържащ 4 международни едаициДш е 1.3 мг/мл, отговаряща на 60 н^ човешки растежен хорман, то кислорода,при нормални условия па съхранения, ще нрисаствува в около 3000пъти излишък по отношение на стехиометричното количество необхо-димо за окисляване на човешкия растежен хормон, пе е възможно десе р .среши проблема чрез обезгазяване с буфери преди затварянетои опаковането на препаратите. Понастоящем не се счита, че тези продукти на разлагане при-тежават токсични яли пременени свойства на биологическа активностиди изменени свойства за свързване на рецептора, но има индика-ции че е намалена стабилността на строежа на сулфоксидите в срав-нение с природния човешки растежен хормон. За да се разработи стабилна, разтворима препаратизна формасъдържаща човешки растежен хормон, важно е де се знае скоросттана образуване на сулфоксиди, както и средствата за контролиранена окислението. Киветаката на разлагането зависи от температурата» от рНи от различните добавки или спомагателни вещества във формули-ровката на човешкия растежен хормон· Поради нестабилността не растежния хоршн» понастоящем тойо се лиофализира и се съхранява в лио.илизарааа форма при 4 С дореконституирането му преда употреба с оглед до се сведат до ми-нимум процесите на разлагане· лиофилизирането фармацевтични препарати съдържащи човешкирастежен хормон» понастоящем се рековституират от пациента исоед това се съхраняват като разтвор при употребата им з продъл-жение на период от 14 дай при 4° 0» при което настъпва известноразлагане· нещо повече» процесът на реконституираке на лиофилязираниярастежен хормон създава известни затруднения иа пациента· Понастоящем се предпочита растежният хормон да се рекон-ституира колкото е възможно по-късно непосредствено преда упо-треба» като транспортирането и съхранението на препарата се из-вършва в лиофилизирано състояние· Подходящо е» при пренасянетона препаратите от производителя до аптеките» те да се държат приконтролирана ниска температура като например 4° С» която позво-лява съхраняването на препаратите за период до две годани· При това» широко използваната система чрез пюменл указанияпациента сам да прилага лекарството» както и разширената областна прилоиевае на тези средства» изисква наличието на препарат»който да е стабилен в продължение на достатъчно дълъг период отвреме включително и през периода на приеманото му и то при усло-вия» при които не е достъпно достатъчно5· охлаждане· Предпочита се» препаратът да е стабилен включително и прикрайния потребител в ямофализирана форма в продължение на около - 5 - един месец и допълнително още един месец в реконституирано със-тояние зв предвидения период за приложение. Поради това, необходими са яо-стабилни препаратнвта формаот растежния хормон· които да са стабилни в мобилизирано със-тояние при относително висока температура за даден период и до-пълнително още за периода на приложение при сравнително високатемпература в разтвор. Такова стабилизиране е много важно ксга-то растежният хормон от клинична обстановка започне да се прила-га в домашна обстановка на пациентите, където не всякога може дасе осигуржоптималните условия на съхранение, съгласно указания-та по-горе. Нещо повече, различните начини на приложение на растежнияхормон до използваното на жарващо устройство, изискват стабиленпрепарат под формата на разтвор в който се съдържа растежнияхормон,с което да се улесни манипулирането което трябва да сеизаърш ’ от пациента, йоже да се произведе стабилен разтворен пре-парат съдържащ растежен хормон, който да е готов за употреба поддамата на патрони,. подходящи за вкарващото устойстзо използва-но от пациента, с което той да избегне рокоиституирането на пре-парата. От тук, той няма да притежава лиофилиаиран препарат, под-ходящо свързващо вещество за реконструирането му, както и необ-ходимата сръчност и стерилна екипировка за стерилно реконструи-ране на препарата. С оглед на сигурността, желателно е да се избегне реконсти-туирането на диофалазирания препарат непосредствено преди изпол-зването му. Освен това, предимство представлява избягването на етапана лиофилазиране при производството на препарати на база расте-жен хормон. Лиофилизирането изисква време и е скъпоструващ про- цес и често той се оказзо тесно място в производството благода-рение но ограничения капацитет за апарата суаяц чрез замразява· ае. Така» необходимо е да ос намали скоростта на разлагане соглед препаратите,съдърдаци разтворен човешки растежен хормон,даса стабилни при съхранение и лагеруване през периода в койтосе прилагвт до един месец. Предишните опита за стабилизиране на човешкия растежен хор-мон не са успали напълно по отношение предпазване от образува-нето на дипер. Проблемите свързани с образуването не димер санапример отбелязаните от звекег, б. »♦, в вШесЬвоХо^у оапАррНей Βίοβϋβηΐοΐχητ 9, 478 (1987). .международната патентна публикация б ννο 89/09614 и Австра-лийски патент 3υ??ΐ/Β9 описват стабилна фармацевтична Сюрцузга-ровка съдържаща човешки растежен хормон, глицин и манитоя. Тозипрепарат показва подобрена стабилност при нормални условия наработа и съхранени© в яиофшшзирйно състояние както и през пе-риода в който се използва след реконститупрапе. публикуваният европейски патенти ЗиЗ 746 описва стабили-зирането на животински растежен хормон с различни стабилизаториза да се намали образуването на неразтворими вещества и да сезапази . разтворимата активност във водна среда. Такива стаби-лизатори са някой полиоди, аминокиселини, полимери на аминоки-селини притежаващи заредена странична група при физиологичнори и холинови соли. Долиолите са подбрани между група състоящасе от не-родуцирощи захари, захарни алкохоли, захарни киселини,пентаеритрол, лактоза, водно-разтворими дсистрани и Рнкоя;амлвокиселиняте са подбрани между глицин, саркозин, лизан агитяхна соли» серии, аргинин или тяхна соли, бетаин, ΙΙ,Η-диметил- • · ·· * * ► · * »-= глицин, аспартова киселина или нейни соди, глутамкнове кисели-на или нейни соди; нолкмер на аминокиселина притежаваща зареденастранична група при физиологично рН може да бъде подбран неадуполилизин, аолиаеп&amp;ртоъа киселина, пегиглуташнова киселина,полиаргишш, аоаихистадк, пояиорнитик и тяхаи сола; а холино-аи производни като холишелорид, холан д/осадроген цитрат, хелиябитартарат, холан бикарбонат, трпхолад цитрат, холан асхорбат,холан борат, холан глженат, хелин фосфат, да(хслнн) сулфат адихшшн пукат· кратко описание на изобретението Сега, изненадате беше намерено, че формулировка на човеш-ки растежен хормон, съдържаща зсяарагяа като добавка жхи буфера-радо вещество полазва много висока отобилноот срещу даамидяраве,окисление и разкъсване на пелтидняте връзка. Стабилността напродукта позвеяяза съхранението а транспортирането му в лиофи-ляаиразо състояние или под формата на разтворен яли повторно раз-творен препарат. Така, препаратът съгласно изобретението аоже да бъде подформата на лиофидязиран прах който по-късно да бъда рекоаститу-иран като се използват обичайни свързващи вещества като дестили-рана вода за инжекции или йод формата на разтвор съдържащ расте-жен хормон. Тези свързваад вещества поле да съдържат обичайниконсервиращи вещества като п-крезол и бензин алкохол. Дредочитадо изпълнение на изобретението е не^ щермата нафармацевтичен препарат на човешки растежен хормон съдържащ ао-парагин под формата на буфернрав воден разтвор на растежния хор-дан будериран е аспарагинов буфер. Този препарат е готов за упо-треба и шие ща се съхранява и транспортира като воден разтвор без пра това значително да ве разгражда.*’ С оглед не стабилността, рН не разтвора се предпочита да енагласено на стойност в интервал от :: до В. Предпочитат се пре-парати с рй от 5 до ί и най-добро е то да бъде от 6 до ?.5. За да се получи стабилизиращ ефект, аспарагинът се прибавяв количество до 100 Жшцентрацията на аспарагина е за пред-почитане в интервал от 2 до 20 м&amp;, най-добре от 2 до 10 мй. Фармацевтичният състав съгласно изобретението може също та-ка да бъде под формата на лиофилизираа препарат. Фармацевтичният препарат съгласно изобретението пад® съдат$да да съдържа сели и заждада е оглед да се улесни неговотообработване, например лвефилизирането му. Обикновено се използваманитол като набухвещо средство при яиофилизацията. Друг аспект на изобретението се отнася до използването наееварвгин за получаване аа стабилизиран препарат па базата нарастежен хорист. н настоящият контекст “растежен хормон може да. бъда рас-тежен хормон от всякакъв източник като птича, говежди, конски,човешки, овчи, свински, от сьомга, пъстърва изгл растежен хормонна риба тон. Предпочита се говежда, човешка или свинска растеженхормон, като най-предпочитая е човешкия растежен хоргав. Растеж-ният хорист, използван съгласно изобретението може да бъде пре-роден растежен хормон изолиран от природен източник, напримерчрез екстрахирано на хипофизни жлези по обичайния начин, илида бъде растежен хормон получен чрез рекомбинантна техника, на-пример КЗКТО е описано ОТ ίβηεβη β.ηά Сег1§9П> ЗХо^есР. й,па В108Л2·, Зб, 1-11 (1930). ’?Ростежнйят хормон” може да бъда също така и в съкратенаформа при което един или повече ампнокиселинии остатъка са бя- • · · · • · · · ли делегирани; зиезоочас на това едва т повече змякокиселв-ши оотатш 9 природната молекула са бял зажадза е друг ага- остатък» ара условие чего антагенаост или намаляване ва активността; «ги нарово про-изводно» шртр притежаващо М* или С-тершшалйо удължениекато м«в-мв» т-аш-^ичивниш т А1а-аха-шн.Предпочитаният растежен хормон е човешкият. В настоящият контекст "висока стабилност" се получава ко-рете препарата е ао-стабиаса от обичайната формулировка съдър-жаща фосфзтеа буфер. Терминът "соли"» кзаолззен в изстоявдетонзчи жнълнатат съставки не ся до обичайните соли като тазик;пе метали т амониеви соля на органичнинека квселша» винена жаяна ига дава &amp;»*««<»,натриев цптрет, натриев тертарат той натриев ацвт или ва ми-нерални кхзеяипж като хлороводорода» киселина»ев хлорид· "Захвридае" легат да бъдат монозахариди» двешрялвзахарни алкохоли конте ее използват обичайно при фармацевтич-

ната разтворител при получаването на препаратите от изо-бретението иоже да се използва вода» алкохоли като етилов» н-пропйлоь или взодроаилв» бутюов алкехол или снеси от тях. Раз-творителят да съдържа консервант като мрезол от бевзи-лов алкохол* аа изобретението * · · · • · · · · · « - Ю ~ ашас алюстркрез изоОретеааехо. Те агйгкяте им иа/н^Чуип^шнАУП »·ιβ» 1ВЧРЯИИЧРВРЖ ярпбж да се считах шо9 Штс се определя ех

а чреа

10 штввряаа 88 Х3«2ДО 0.9 % (прибавя 0.Х XX 20 мг «заежи рведоива хо^дож в 10 шрезхвор. Тези разтвор ое получава прав рев*аеааралга в 10 ал дойттвдовва водсбвнввяов алвохоя и дои теза рвзхеор сеДО сшрадолеаохо рН. ц еха шидояу са овяра хабг дата ао-довуг при 25* С а се след 14 в спад 30 доя чрез Х1Ив»*дроиатсгрвфия» Рвзулха’ Таблица О

чрез ХВ-ШХ К8Т0 в разхвор при 25° С

II Формулировка (*) Образуване на дедамидо съе-динение при 25° С 14да(») 30 да

8 ш! ди-Ма-фосфатрй 6*5 8 мй дж-На-фосфатрй 7.5 8 мМ ди-Иа-фосфатрй 6,5 0*3 % м-крезол 10 мм аспарагинрй 6.5 10 МЙ Шрй 6.5 10 мй глутамжнрй 6.5 7.8 15.2 9Л 21.7 6.5 14.8 10.8 20.3 13.2 нд 8.3 НД +: Съдържа 0.9 % бензилов алкохол с изключение на формулировка В 3. Съдържанието на дезамидо-човешки растежен хормон в изходнияпродукт е 2.1 %. От таблицата се вижда, не деамидирането на човешкия растеженхормон се намалява с около 25 % при прибавяне на аспарагин всравнение с фосфатния буфер при рй 6.5. Прибавянето на Аспарагин или гяутамин увеличава скоросттана деамидиране в сравнение с фосфата при рй 6.5. От горните резултати се вжжда, че скоростта на де-амвдира- - 12 - • · · · · · · Ю рН I нб’ № в гладка кенцвктреция я&amp; ЮО вй» за предпочитане около 5 мМ, Сксрос^га на де-еилдирлае ише да се йошж е всзече ои 50 % чрез мшшаме на рН и при веществена пе фосфатния с Използването не ΐί-нрезоа или бензлдоз лдкйход като кояоер-зак? ас йзглеад да ноа&amp;иоб скоростта на де-ошаддране· Об плзу валето на одазв^ се продукти (хидрожзе ва швяа*нит© връаки) се навляза чрез аеаорвпша прм рП €»5 в срежеше С с фосфвтв· №ЕРШРА 1« ί· Ο. I· %в$а ае£ 1. А· Нешсав· Ремвйя! РотШвве&amp;£ аМ х-арШва» 2ШЬ1ХХ4у а*и* ОКаОШяеРв* «и Рш*ея~ *е*а1 ЗаХааае аа£ 2«а1шоХо<у 42 (йиррХ.) 0988). 53 * 525· 2. и.С. ШшоАа$* Ж. &amp;Ш, Н· Т* жжШагйй* ЗОД&amp;Шу οί?ЖУИХа ^аа./аасеа^1аа1ь· Р1шх^е е«ш4Хов1 ЯаовагаЬ 6 01)* 0989) 903 * 918. 3· ОоЬлаоа, 0. И· ШхХгеМеиа* о« л. НвлооеА* Μ· V· ЗреХХааа* Л. σ. Звве <ш&amp; Ο. ». Ааяаг£* а. аШ. ОЬваи. 2б4, 1462 - 71. 4. Л. С. ТаЬ е* вХ.» 3. МоХ. СЬва.. 785 - 794 (1987). 5. 0. «· Ввеквг ·> аХ·» Мо£во&amp;. АррХ· ЬХооЪвл.» 10, 328-337 (1338). 6. й. А. В»чвИ«&amp; в! е!·* Агск. МооЬаю. ЗХорЬув·, 178. 350 - 355 0977). 7. Я. 8. ЯХ&amp;&amp;1&amp; ·* аХ·* АлаХ. ВХоеЬл&amp;и* 167* 199 - 209(1987)· 8. СюПвгГвге а4 аХ., Ав*а РаадХвЪ?. заалв (ВаррХ)* 370* 93 * Ш (1990). • · · · • ·

I 9« Ι1· σ. Кец£зпп, РЬаяа. Вее·* 7 (3), 289 · 292 (1990),

Claims (2)

1. - I • · X· Ф-аужиотцкин поешшах оаозвжвя хаопан и ао» п-лцтчдц* 2. ^аршщсптячеп препарат «аезаоао аретенцзя I» под форме-на на ффодфаа пода разтвор на растежш хорноа, езддот ао* аарараа» *арвдоз2жеа препарат отмия аротт 1 ига 2> арииШго рВ о изгивооно за отсмаоег а шпшрзая
2. 2 · Ь· 4· .арницезтяцан препарат саезаоао аоига от ареддодшгеедрешщяц пря шйто коздоорашгахз за асварагжа е до 1и0 зм. 5· Фарззцззжоз препарат ежяасмо всяка от предадат©прзтешан, а но&amp;ш се оадорваз сшо соля и захада 6* Фарзздозтеа препарат овдезо всяка от прштот I до 6» а коХто реетегащя хормон е чоаешад реотеяез яоржа* ?. йзпсзажше на аспарагин за арйгстоавязаае на стабпя»-зараа аршшрат ст рзетезов ашршт*