BRPI0610635A2 - uso de anticorpos cd25 em imunoterapia - Google Patents

Abstract

Patente de Invenção: USO DE ANTICORPOS CD25 EM IMUNOTERAPIA. A presente invenção refere-se a um método para o tratamento de doença proliferativa ou doença inflamatória, compreendendo a adminis- tração ao paciente de uma quantidade efetiva de uma molécula de ligação CD25.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "USO DE ANTICORPOS CD25 EM IMUNOTERAPIA".

A presente invenção está direcionada ao uso de um anticorpoquimerico CD25, especificamente o basiliximab, em imunoterapia e maisespecificamente na prevenção e no tratamento de uma doença proliferativa,tal como o câncer, ou uma doença infecciosa, tal como uma infecção micro-biana, na qual a inibição de células T reguladoras é benéfica.

Em vista do número significativo de pacientes que sofrem dedoença proliferativa ou de doença infecciosa, especificamente no caso decâncer, existe uma necessidade com relação a um tratamento efetivo contraessas doenças.

É conhecido que depois da ativação as células T expressam acadeia do receptor alfa IL-2 (CD25) que é importante com relação à prolife-ração das células T ativadas e da liberação eventual do antígeno. Essas cé-lulas T proliferativas ativadas pelo antígeno são chamadas aqui, neste pedi-do de patente de células T executoras.

Em um estado saudável, uma pequena percentagem da popula-ção total de células T expressa o CD25 de forma constitutiva (sem ser ativa-da). Essas células têm mostrado suprimir a expansão das células executorase são chamadas de células T reguladoras. As células T reguladoras são im-portantes com relação ao estado saudável com a finalidade de manter ascélulas executoras impedidas de reagir contra aos próprios antígenos oureagir em excesso com relação a antígenos externos e danificando o orga-nismo. Em uma resposta de proteção de imunização normal, as células Texecutoras se multiplicam depois do contato com o antígeno externo e supe-ram a inibição através das células T reguladoras resultando dessa forma emproteção contra infecção ou câncer. No caso de doenças proliferativas, ascélulas de câncer e muitos agentes infecciosos são capazes de escapar daresposta saudável de imunização através do aumento da quantidade de cé-lulas T reguladoras e limitando, por esse motivo a geração das células T e-xecutoras contra os mesmos.

Em casos tais como transplantes, nos quais a supressão da i-munização é exigida, os anticorpos monoclônicos anti CD25 tem demonstra-do prover uma vantagem através da redução do número de células T executoras.

Foi descoberto agora que o tratamento anti CD25 também é útilpara a imunoterapia, isto é, com relação à inibição, bloqueio ou inativaçãodas células T reguladoras, como por exemplo, a geração e/ou a multiplica-ção dessas células, especificamente contra doenças ou distúrbios nos quaisa inibição de células T reguladoras é benéfica, por exemplo, devido a que ascélulas T reguladoras bloqueiam a função efetiva das células T executoras,tal como em determinadas doenças proliferativas, como por exemplo, deter-minados cânceres ou doenças infecciosas, por exemplo, as infecções micro-bianas.

Por "anticorpo CD25" é significado um anticorpo capaz de seligar ao antígeno CD25 tanto de forma isolada como em associação comoutras moléculas para formar receptores IL-2 de alta afinidade que estãopresentes nas células T reguladoras. Por exemplo, o anticorpo CVD25 podeser um anticorpo monoclônico.

Uma vez que o antígeno CD25 também está presente ma mem-brana de superfície das células T executoras, o anticorpo CD25 tem umaatividade supressora potencial sobre o sistema de imunização. Por esse mo-tivo o uso do anticorpo CD25 de acordo com a invenção deve ser essenci-almente seletivo, isto é, a reunião de células C executoras deve ser mantidaintacta enquanto a categoria de células T reguladoras deve ser inibida.

Por "anticorpo quimérico CD25" é significado anticorpo que in-clui regiões que codificam especificidade de antígeno a partir de um camun-dongo com seqüências humanas, especificamente um a região variável nãohumana fundida a uma região constante humana. Um anticorpo quiméricoCD25 de preferência de acordo com a invenção compreende somente se-qüências não humanas na região variável não humana, como por exemplo,somente seqüências de camundongo na região variável não humana.

Por conseqüência em um primeiro aspecto, a presente invençãoproporciona o uso de um anticorpo quimérico CD25 em imunoterapia, comopor exemplo, na imunoterapia do câncer, por exemplo, para a prevenção ouo tratamento de doenças proliferativas ou infecciosas nas quais a inibiçãodas células T reguladoras é benéfica.

A presente invenção também proporciona o uso de um anticorpoquimérico CD25 para a inibição, bloqueio ou inativação das células T regula-doras, como por exemplo, a geração e/ou a multiplicação dessas células. Demodo específico, é provido o uso de um anticorpo quimérico CD25 especifi-camente em doenças nas quais as células reguladoras T bloqueiam umafunção efetiva das células T executoras.

A expressão "doença proliferativa" inclui doenças proliferativasmalignas e não malignas, nas quais as células reguladoras T estão envolvi-das, como por exemplo, aterosclerose, carcinomas e tumores, doenças in-fecciosas, trombose, restenose, esclerodermite e fibrose.

O termo "câncer" na forma usada aqui, neste pedido de patente,inclui porém não está limitado ao câncer da mama; melanoma, câncer epi-dermóide; câncer do cólon, e em geral do trato Gl, especificamente o câncergástrico, câncer do esôfago, câncer colo-retal; câncer do pâncreas, carcino-ma da célula renal; câncer do pulmão, especificamente câncer da célula pe-quena do pulmão, e câncer do pulmão que não da célula pequena; câncerda célula renal; câncer da cabeça e do pescoço; câncer geniturinário; comopor exemplo, câncer cervical, câncer do ovário, câncer dos testículos, prós-tata ou bexiga urinaria; doença de Hodgkin ou sarcoma de Karposi.

O termo "rumor" engloba os tumores líquidos e os tumores sólidos.

Por "tumores sólidos" são entendidos outros tumores e/ou me-tástases (onde quer que localizada)que não o câncer linfático, pó exemplo,tumores do cérebro e outros tumores do sistema nervoso central (como porexemplo, tumores das meninges, cérebro, medula espinhal, nervos crania-nos e outras partes do sistema nervoso central, como por exemplo, glioblas-tomas ou blastomas da medula); câncer da cabeça e/ou do pescoço; tumo-res da mama; tumores do sistema circulatório (como por exemplo, coração,mediastium e pleura, e outros órgãos intra torácicos, tumores vasculares etumores associados ao tecido vascular); tumores do sistema de excreção(como por exemplo, do rim, pélvis renal, ureter, bexiga urinaria, outros ór-gãos urinários não especificados); tumores do trato gastrintestinal (por e-xemplo, esôfago, estômago, intestino delgado, cólon, colo-retal, junção retosigmóide, teto, anus e canal anal), tumores que envolvem o fígado e os du-tos intra-hepáticos da bile, tumores da vesícula biliar outras partes e partesnão especificadas do trato biliar, pâncreas; cavidade oral (lábios, língua,gengiva, assoalho da boca, palato e outras partes da boca, glândula parótidae outras partes das glândulas salivares, amídalas, orofaringe, nasofaringe,sinus piriforme, hipafaringe, e outros locais nos lábios, cavidade oral ou fa-ringe); tumores do sistema reprodutivo (como por exemplo, vulva, vagina,Cervix uteri, Corpus uteri, útero, ovário e outros locais associados com osórgãos genitais femininos, placenta, pênis, próstata, testículos, e outros lo-cais associados com os órgão genitais masculinos; tumores do trato respira-tório (como por exemplo, câncer da cavidade nasal e do ouvido médio, sinusacessórios, laringe, traquéia, bronquios e pulmão, como por exemplo, câncerda célula pequena do pulmão ou de célula não pequena do pulmão); tumo-res do sistema esquelético (como por exemplo, tumores de osso e de carti-lagem articular ou de membros, cartilagem articular de ossos e em outroslocais); tumores da pele (como por exemplo, melanoma maligno da pele,câncer de pele que não o melanoma, carcinoma de células basal da pele,carcinoma de célula escamosa da pele, mesotelioma, sarcoma de Kaposi); etumores que envolvem outros tecidos incluindo nervos periféricos e sistemanervoso autônomo, tecidos conectivos e moles, retro-peritônio e peritônio,olho e anexos, tireóide, glândula adrenal e outras glândulas endócrinas eestruturas relacionadas, neoplasma maligno secundário e não especificadodos nodos da linfa, neoplasma maligno secundário dos sistemas respiratórioe digestivo e neoplasma maligno secundário de outros locais.

Onde, aqui neste pedido de patente e subseqüentemente, umtumor, uma doença de tumor ou um câncer for mencionado, também a me-tástase no órgão ou tecido original e/ou em qualquer outra localização sãoimplicadas de forma alternativa ou em adição, qualquer que seja a localiza-ção do tumor e/ou da metástase.

A expressão "doença infecciosa" na forma usada aqui, nestepedido de patente se refere porém não está limitada a, infecção microbiana,tal como a presença de bactérias. Essas infecções incluem, por exemplo,infecções do sistema nervoso central, infecções do ouvido médio, tais comootite media aguda, infecções dos sinus do crânio, infecção dos olhos, infec-ções da cavidade oral, tais como infecções dos dentes, gengivas e mucosa,infecções do trato respiratório superior, infecções do trato respiratório inferi-or, infecções genito - urinárias, infecções gastrintestinais, infecções gineco-lógicas, septicemia, infecções dos ossos e das articulações, infecções dapele e da estrutura da pele, endocardite bacteriana, queimaduras, profilaxiaantibacteriana da cirurgia, profilaxia antibacteriana em pacientes com imu-nossupressão, tais como pacientes recebendo quimioterapia contra o cân-cer, ou pacientes de transplantes de órgãos e doenças crônicas ocasionadasatravés de organismos infecciosos, como por exemplo, a aterosclerose.

Elas podem ser causadas por uma variedade de organismosbacterianos ou procarióticos. Os exemplos incluem, porém não estão limita-dos a, bactérias aeróbicas e anaeróbicas Gram positivas e Gram negativas,incluindo Staphylococci, por exemplo, S. aureus e S. epidermidis; Entero-cocei, por exemplo, E. faecalis and E. faecium; Streptococci, por exemplo, S.pneumoniáe; Haemophilus, por exemplo, H. influenza; Moraxella, por exem-plo, M. catarrhalis; Bacteroides, por exemplo,, Bacteroides fragilis, Clostridi-um, por exemplo,, Clostridium difficile, Niesseria, por exemplo,, N. meningiti-dis e N. gonorrhoae, Legionella, and Escherichia, por exemplo, E. coli. Ou-tros exemplos incluem Mycobacteria, por exemplo, M. tuberculosis; micró-bios intercelulares, por exemplo, Chlamydia e Rickettsiae; e Mycoplasma,por exemplo, M. pneumoniáe; e Pseudomonas, por exemplo, P. aeruginosa;Helicobacter pylori; Helicobacter hepaticus e parasitas, por exemplo, Plas-modium falciparum , Pneumonocystis carnii, Leishmania major, Schistosomamasoni, Cândida albicans, vírus de Herpres Simplex, vírus da imunodefici-ência humana, vírus da Hepatite C, e citolegalovirus.

Em um aspecto da invenção, o anticorpo quimérico CD25 com-preende, pelo menos um sítio de ligação com o antígeno compreendendopelo menos um domínio que compreende em seqüência, as regiões hiperva-riáveis CDR1, CDR2 e CDR3; a referida CDR1 tendo a seqüência de aminoácido Arg-Tyr-Trp-Met-His, a referida CDR2 tendo a seqüência de aminoácido Ala-lle-Tyr-Pro-Gly-Asn-Ser-Asp-Thr-Ser-Tyr-Asn-GIn-Lys-Phe-Glu-Gly, e a referida CDR3 tendo a seqüência de amino ácido Asp-Tyr-Gly-Tyr-Tyr-Phe-Asp-Phe; ou equivalentes diretos das mesmas em imunoterapia,como por exemplo, para o tratamento de doença proliferativa ou doença in-fecciosa.

De preferência o anticorpo quimérico CD25 é usado compreen-dendo, pelo menos um sítio de ligação com o antígeno, composto por:

a) um primeiro domínio compreendendo em seqüência as regi-ões hipervariáveis CDR1, CDR2 e CDR3; a referida CDR1 tendo a seqüên-cia de amino ácido Arg-Tyr-Trp-Met-His, a referida CDR2 tendo a seqüênciade amino ácido Ala-lle-Tyr-Pro-Gly-Asn-Ser-Asp-Thr-Ser-Tyr-Asn-GIn-Lys-Phe-Glu-Gly, e a referida CDR3 tendo a seqüência de amino ácido Asp-Tyr-Gly-Tyr-Tyr-Phe-Asp-Phe; e

b) um segundo domínio compreendendo em seqüência as regi-ões hipervariáveis CDR1', CDR2' e CDR3', a referida CDR1' tendo a se-qüência de amino ácido Ser-Ala-Ser-Ser-Ser-lle-Ser-Tyr-Met-Gln, a referidaCDR2' tendo a seqüência de amino ácido Asp-Thr-Ser-Lys-Leu-Ala-Ser, e areferida CDR3' tendo a seqüência de amino ácido His-GIn-Arg-Ser-Ser-Tyr-Thr;

ou equivalentes diretos das mesmas.

A não ser que indicado de outra forma, qualquer cadeia de poli-peptídio é descrita aqui, neste pedido de patente como tendo uma seqüênciade amino ácido se iniciando na extremidade do terminal N e finalizando naextremidade do terminal C.

Quando o sítio de ligação do antígeno compreende ambos osprimeiro e segundo domínios, estes podem estar localizados na molécula domesmo polipeptídio ou, de preferência, cada domínio pode estar em umacadeia diferente, o primeiro domínio fazendo parte de uma cadeia pesada deimunoglobulina ou de um fragmento da mesma e o segundo domínio fazen-do parte de uma cadeia leve de imunoglobulina ou de um fragmento damesma.

Por conseqüência, a invenção também proporciona o uso de umanticorpo quimérico CD25 que compreende pelo menos um sítio de ligaçãodo antígeno que compreende tanto um primeiro domínio tendo uma seqüên-cia de amino ácido idêntica ou substancialmente idêntica àquela mostradana Seq. Id. N- 1 na EP 449.769 B1, se iniciando com um amino ácido na po-sição 117 ou um primeiro domínio como descrito acima e um segundo domí-nio tendo uma seqüência de amino ácido idêntica ou substancialmente idên-tica àquela mostrada na Seq. Id. N- 2 na EP 449.769 B1, se iniciando comum amino ácido na posição 1 e finalizando com o amino ácido na posição104, o conteúdo da EP 449.769 B1, ficando incorporado aqui, neste pedidode patente por referência.

Um anticorpo quimérico CD25 de mais preferência para ser u-sado de acordo com a invenção é selecionado a partir de um anticorpo qui-mérico anti-CD25 que compreende pelo menos:

a) uma cadeia pesada de imunoglobulina ou um fragmento damesma que é composta por (i) um domínio variável compreendendo em se-qüência as regiões hipervariáveis CDR1, CDR2 e CDR3 e (ii) a parte cons-tante ou um fragmento da mesma de uma cadeia pesada humana; a referidaa referida CDR1 tendo a seqüência de amino ácido Arg-Tyr-Trp-Met-His, areferida CDR2 tendo a seqüência de amino ácido Ala-lle-Tyr-Pro-Gly-Asn-Ser-Asp-Thr-Ser-Tyr-Asn-Gln-Lys-Phe-Glu-Gly, e a referida CDR3 tendo aseqüência de amino ácido Asp-Tyr-Gly-Tyr-Tyr-Phe-Asp-Phe; e

b) uma cadeia leve de imunoglobulina ou um fragmento da mes-ma que compreende (i) um domínio variável compreendendo em seqüênciaas regiões hipervariáveis CDR1', CDR2' e CDR3', e (ii) a parte constante ouum fragmento da mesma de uma cadeia humana leve; a referida CDR1' ten-do a seqüência de amino ácido Ser-Ala-Ser-Ser-Ser-lle-Ser-Tyr-Met-Gln, areferida CDR2' tendo a seqüência de amino ácido Asp-Thr-Ser-Lys-Leu-Ala-Ser, e a referida CDR3' tendo a seqüência de amino ácido His-GIn-Arg-Ser-Ser-Tyr-Thr; e equivalentes diretos das mesmas.

Alternativamente, um anticorpo quimérico CD25 para ser usadode acordo com a invenção pode ser selecionado a partir de uma molécula deligação de cadeia única que compreende um sítio de ligação do antígenocompreendendo:

a) um primeiro domínio compreendendo em seqüência as regi-ões hiper variáveis CDRT, CDR2 e CDR3, as referidas regiões hipervariáveistendo as seqüências de amino ácido como mostradas na Seq. Id. N9 1 na EP 449.769B1, o conteúdo da qual fica incorporado aqui, neste pedido de paten-te por referência,

b) um segundo domínio compreendendo em seqüência as regi-ões hipervariáveis CDR1', CDR2' e CDR3', as referidas regiões hipervariá-veis tendo as seqüências de amino ácido como mostradas na Seq. Id. N9 2na EP 449.769B1, o conteúdo da qual fica incorporado aqui, neste pedido depatente por referência, e

c) um ligante de peptídio que está ligado tanto à extremidade doterminal N do primeiro domínio como a extremidade do terminal C do segun-do domínio, ou á extremidade do terminal C do primeiro domínio e a extre-midade do terminal N do segundo domínio; e equivalentes diretos dos mesmos.

Como é bem-conhecido, pequenas mudanças em uma seqüên-cia de amino ácido tais como cancelamento, adição ou substituição de um,mais ou vários amino ácidos podem levar a uma forma "alílica" da proteínaoriginal que tenha propriedades idênticas ou substancialmente idênticas,como por exemplo propriedades de ligação ao antígeno. Dessa forma, atra-vés da expressão "equivalentes diretos da mesma" é significado ambas,qualquer molécula de ligação CD25 de domínio único (molécula X)

(i) na qual as regiões hipervariáveis CDR1, CDR2 e CDR3, to-madas como um todo sejam pelo menos 80% homólogas, de preferênciapelo menos 90% homólogas de mais preferência pelo menos 95% homólo-gas com relação às regiões hipervariáveis como mostradas na Seq. Id. N9 1na EP 449.769B1,ou nas Figuras 3 e 4 da EP 451.216 B1, o conteúdo dasquais fica incorporado aqui, neste pedido de patente por referência,e

(ii) que seja capaz de inibir a ligação da interleucina 2 (IL-2) aoseu receptor substancialmente no mesmo grau como o de uma molécula dereferência que tenha regiões de estrutura idênticas aquelas da molécula X,porém tendo as regiões hipervariáveis CDR1, CDR2 e CDR3, idênticas à-quelas mostradas na Seq. Id. N9 1 na EP 449.769B1 ,ou nas Figuras 3 e 4 daEP 451.216 B1, o conteúdo das quais fica incorporado aqui, neste pedido depatente por referência;

ou qualquer molécula de ligação CD25 que tenha pelo menosdois domínios por sítio de ligação (molécula X')

(i) na qual as regiões hipervariáveis CDR1, CDR2, CDR3, C-DR1', CDR2' e CDR3' tomadas como um todo sejam pelo menos 80% ho-mólogas, de preferência pelo menos 90% homólogas de mais preferênciapelo menos 95% homólogas com relação às regiões hipervariáveis comomostradas nas Seq. Id. N9 1 e 2 na EP 449.769 B1, o conteúdo da qual ficaincorporado aqui, neste pedido de patente por referência, e

(ii) que seja capaz de inibir a ligação da IL-2 ao seu receptorsubstancialmente no mesmo grau como o de uma molécula de referênciaque tenha regiões de estrutura idênticas aquelas da molécula X', porém ten-do as regiões hipervariáveis CDR1, CDR2 e CDR3, idênticas àquelas mos-tradas na Seq. Id. N9 1 na EP 449.769B1, CDR1, CDR2, CDR3, CDR1',CDR2' e CDR3' idênticas àquelas mostradas nas Seq. Id. N9 1 e 2 na EP449.769 B1, o conteúdo da qual fica incorporado aqui, neste pedido de pa-tente por referência.

Este último critério pode ser testado de forma conveniente emdiversos ensaios como descritos na EP Seq. Id. N9 1 e 2 na EP 449.769 B1,o conteúdo da qual fica incorporado aqui, neste pedido de patente por refe-rência.

Em uma modalidade da invenção, a molécula de ligação CD25 éum anticorpo quimérico CD25, que compreende, pelo menos:

a) uma cadeia pesada que compreenda um domínio variáveltendo uma seqüência de amino ácido idêntica ou substancialmente idênticaàquela mostrada na Seq. Id. N-1 na EP 449.769B1, o conteúdo da qual ficaincorporado aqui, neste pedido de patente por referência, se iniciando com oamino ácido na posição 1 e finalizando com o amino ácido na posição 117 ea parte constante de uma cadeia humana pesada; e

b) uma cadeia leve que compreende um domínio variável tendouma seqüência de amino ácido idêntica ou substancialmente idêntica àquelamostrada na Seq. Id. NQ 2 na EP 449.769B1, se iniciando com o ácido glu-tâmico na posição 1 e finalizando com o ácido glutâmico na posição 104 e aparte constante de uma cadeia humana leve, o conteúdo da EP 449.769B1sendo incorporado aqui, neste pedido de patente por referência.

A parte constante de uma cadeia humana pesada pode ser dotipo y1, 7y2, y3, y4, yi, oc1, a2, ô ou e, de preferência do tipo y, de mais prefe-rência do tipo yl, enquanto que a parte constante de uma cadeia humanaleve pode ser do tipo kou X (que inclui os sub tipos rk~\,12e X3) porém é depreferência do tipo k. A seqüência de amino ácido dessas partes constantessão dadas em Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest,US Department of Health and Human Services, Public Health Service, NIH.

O anticorpo CD25 de maior preferência de acordo com a inven-ção é o anticorpo quimérico basiliximab que está comercialmente disponívelcomo SIMULECT® da Novartis AG.

As moléculas de ligação CD25 adequadas pára serem usadascom a presente invenção podem ser produzidas através de técnicas descri-tas por exemplo na EP 449.769 B1, o conteúdo da qual fica incorporado a-qui, neste pedido de patente por referência.

Quando o sítio de ligação do antígeno compreende ambos oprimeiro e segundo domínios, esses domínios podem estar localizados namesma molécula de polipeptídio, ou, de preferência, cada um dos domíniospode estar em uma cadeia diferente, o primeiro domínio sendo parte de umacadeia pesada de imunoglobulina ou de um fragmento da mesma e o se-gundo domínio sendo parte de uma cadeia leve de imunoglobulina ou de umfragmento da mesma.Por conseqüência, a invenção também proporciona o uso emimunoterapia de uma molécula de ligação CD25 que compreenda pelo me-nos um sítio de ligação do antígeno compreendendo tanto um primeiro do-mínio que tenha uma seqüência de amíno ácido idêntica ou substancialmen-te idêntica àquela mostrada na Seq. Id. N5 1 na EP 449.769 B1, se iniciandocom o amino ácido na posição 1 e finalizando com o amino ácido na posição117 ou um primeiro domínio como descrito acima e um segundo domíniotendo uma seqüência de amino ácido idêntica ou substancialmente idênticaàquela mostrada na Seq. Id. N9 2 na EP 449.769 B1, se iniciando com umamino ácido na posição 1 e finalizando com o amino ácido na posição 104, oconteúdo da EP 449.769 B1, ficando incorporado aqui, neste pedido de pa-tente por referência.

As moléculas de ligação CD25 adequadas para serem usadascom a presente invenção podem ser produzidas através das técnicas descri-tas por exemplo, na EP 449.769 B1, o conteúdo da qual ficando incorporadoaqui, neste pedido de patente por referência.

A invenção também proporciona:

(i) Um método de imunoterapia compreendendo a administraçãode uma quantidade terapeuticamente efetiva de um anticorpo quiméricoCD25 como descrito acima aqui, neste pedido de patente, a um paciente queesteja necessitando de tal tratamento.

(ii) Um método para a prevenção e tratamento de uma doençaproliferativa ou infecciosa, como por exemplo câncer ou doença maligna, noqual a inibição das células T reguladoras é benéfica em um paciente queesteja necessitando de tal tratamento, que compreende a administração aopaciente de uma quantidade terapeuticamente efetiva de um anticorpo qui-mérico CD25, como descrito acima, como por exemplo o basiliximab.

(iii) Um método para o tratamento de um tumor sólido invasivoou sintomas associados com o crescimento desse tumor ou para a preven-ção do espalhamento metastático de tumores, como por exemplo, de tumo-res sólidos, ou para a prevenção do crescimento ou do desenvolvimento demicro metástases em um paciente que esteja necessitando do mes-mo,compreendendo a administração ao paciente de uma quantidade tera-peuticamente efetiva de um anticorpo quimérico CD25, como descrito acima,como por exemplo o basiliximab.

(iv) Um método para o tratamento, prevenção e/ou a redução dagravidade de uma infecção ou de uma doença proliferativa, como por exem-plo câncer ou doença maligna, no qual a inibição das células T reguladoras ébenéfica em um paciente, que compreende a administração ao paciente deuma quantidade terapeuticamente efetiva de um anticorpo quimérico CD25,como descrito acima, como por exemplo, o basiliximab.

(v) Um método para o aumento da atividade de um agente qui-mioterápico ou para superar a resistência a um agente quimioterápico emum sujeito que esteja necessitando do mesmo, que compreende a adminis-tração ao paciente de uma quantidade terapeuticamente efetiva de um anti-corpo quimérico CD25, como descrito acima, como por exemplo, o basilixi-mab, tanto ao mesmo tempo como em seqüência com o referido agentequimioterápico.

(vi) O uso de um anticorpo quimérico CD25 como descrito aci-ma, como por exemplo, o basiliximab, em imunoterapia, especificamentepara a inibição, bloqueio ou a inativação de células T reguladoras, por e-xemplo para prevenir ou para tratar uma doença proliferativa ou infecciosano qual a inibição das células T reguladoras é benéfica.

(vii) O uso de um anticorpo quimérico CD25 como descrito aci-ma, como por exemplo, o basiliximab, para a preparação de um medicamen-to para a prevenção ou o tratamento de uma doença proliferativa ou infec-ciosa na qual a inibição das células T reguladoras é benéfica, por exemplo,as doenças ou os distúrbios mencionados acima aqui, neste pedido de pa-tente.

(viii) Uma composição farmacêutica para uso em um métodocomo o descrito em de (i) até (v) que compreende um anticorpo quiméricoCD25 como descrito acima, por exemplo, o basiliximab, e um veículo ou di-luente do mesmo farmaceuticamente aceitável.

(ix) Um anticorpo quimérico CD25 como descrito acima, por e-xemplo, o basiliximab, para ser usado na fabricação de um medicamentopara uso em um método como descrito de (i) até (v).

Para o uso de acordo com a invenção, a dosagem apropriadado anticorpo quimérico CD25, por exemplo, o basiliximab, irá, por certo vari-ar dependendo de, por exemplo, o anticorpo quimérico CD25 específico aser empregado, do paciente, do modo de administração e da gravidade dacondição que está sendo tratada e dos efeitos desejados. Resultados satis-fatórios são em geral indicados para serem obtidos com dosagens a partir decerca de 0,1 até cerca de 1000 mg, de preferência a partir de 1 até 100 mg,de mais preferência de 20 a 50 mg. Por exemplo, as dosagens podem ser de0,3 mg/kg de peso corporal, 1 mg/kg de peso corporal, 3 mg/kg de peso cor-poral, 5 mg/kg de peso corporal ou 10 mg/kg de peso corporal, ou dentro dafaixa de 1 a 10 mg/kg. A administração pode ser em uma dose única ou emvarias doses durante um período de tempo tão longo quanto indicado emrelação ao tempo em que a doença for clinicamente evidente ou de formaprofilática para suprimir outras recaídas clinicas, por exemplo, uma dose apartir de cerca de 5 até cerca de 100 mg pode ser administrada uma vez pormês, até que seja conseguido o controle ou a melhora da doença. Um regi-me de dosagem de preferência compreende a administração de 20 a 50 mgdo anticorpo quimérico CD25, por exemplo, o basiliximab, a cada duas se-manas ou uma vez por mês. Um regime de tratamento a título de exemplovincula a administração uma vez por semana, uma vez a cada duas sema-nas, uma vez a cada três semanas, uma vez a cada quatro semanas, umavez por mês, uma vez a cada três meses ou uma vez a cada de três até seismeses. O anticorpo quimérico CD25, é administrado convenientemente porvia parenteral, por exemplo por via intravenosa, por exemplo na veia anticu-bita ou outra veia periférica. Um regime de dosagem alternativo a titulo deexemplo é a administração intravenosa de, por exemplo, 40 mg a cada mês,por exemplo, a cada 28 dias, até que seja conseguido o controle ou o alívioda doença. Os regimes de dosagem com relação ao anticorpo quiméricoCD25 da invenção podem incluir a cada quatro semanas durante seis dosa-gens, em seguida a cada três meses; cada três semanas; 3 mg/kg de pesocorporal uma vez seguida por 1 mg/kg de peso corporal a cada três semanas.

O anticorpo quimerico CD25, por exemplo, o basiliximab, é ad-ministrado usualmente em múltiplas ocasiões, os intervalos entre as dosa-gens únicas podem ser, por exemplo, semanais, mensais, a cada três mesesou anuais, os intervalos também podem ser irregulares como indicado pelamedição dos níveis no sangue do anticorpo com relação ao antígeno alvo nopaciente. Em alguns métodos, a dosagem é ajustada para alcançar umaconcentração de anticorpos no plasma de cerca de 1 a 1000 fig/ml e em al-guns métodos cerca de 25 a 300 ng/ml.

As infusões intravenosas podem ser preparadas como se se-gue: os anticorpos liofilizados são misturados juntos e dispersos dentro de100 ml de solução salina estéril tamponada contendo 4,5% em peso de al-bumina humana. Essa dispersão salina podem ser administrada aos pacien-tes tanto como uma injeção intravenosa de bolus ou como uma infusão in-travenosa durante um período de 15 minutos.

Investigações até agora indicam que a administração do anti-corpo quimerico CD25 está isenta de efeitos colaterais inaceitáveis nos ní-veis de dosagem empregados. Especificamente o de preferência, basilixi-mab , é seguro, aprovado pela Federal Drug Administration (FDA) dos Esta-dos Unidos e estão comercialmente disponíveis.

As composições farmacêuticas da invenção podem ser fabrica-das de uma maneira convencional como descrita, por exemplo, na EP449.769 B1, o conteúdo da qual fica incorporado aqui, neste pedido de pa-tente, por referência.

O anticorpo quimerico CD25 da invenção pode ser administradocomo o unido ingrediente ativo ou em conjunto com outros fármacos em re-gimes de imunoterapia ou outros agentes antiproliferativos ou quimioterápi-cos ou agentes antiinfecciosos. Por exemplo, o anticorpo quimerico CD25pode estar em combinação com composições farmacêuticas efetivas emdiversas doenças como descrito acima, por exemplo com um inibidor mTOR,como por exemplo a rapamicina ou derivado da rapamicina, inibidor de aro-matase, anti estrogênio, antiandrogênio, agonista da gonadorelina, inibidorda topoisomerase I ou topoisomerase II, agente ativo do microtúbulo, agentede alquilação, antimetabólito antineoplásico ou composto simples, compostoobjetivando/reduzindo a atividade de quinase de uma proteína ou de um lipí-dio ou a atividade de uma fosfatase de proteína ou de lipídio , composto antiangiogênico, composto que induza os processos de diferenciação de célu-las, receptor da bradiquinina 1 ou um antagonista da angiotensina II, inibidorda ciclooxigenase, bisfosfonato, inibidor da deacetilase histona, inibidor daheparanase (impede a degradação do sulfato de heparano), como por e-xemplo, PI-88, modificador de resposta biológica, de preferência uma linfoci-na ou interferons, por exemplo, interferon y, inibidor da ubiquitinação, ou ini-bidor que bloqueia trajetos antiapopóticos, inibidor de isoformas oncogênicasde Rãs, como por exemplo H-Ras, K-Ras ou N-Ras, ou inibidor da farnesil-transferase, por exemplo, L-744.832 ou DK8G557, inibidor da telomerase,por exemplo, a telomestatina, inibidor de protease, inibidor da matriz da me-taloproteinase, inibidor da aminopeptidase da metionina, por exemplo, abengamida ou um derivado da mesma, ou inibidor da proteosoma, por e-xemplo, o PS-341.

A expressão "inibidor da aromatase" na forma usada aqui, nestepedido de patente, se refere a um composto que inibe a produção de estro-gênio, isto é, a conversão dos substratos androstenediona e testosterona emestrona e estradiol, respectivamente. A expressão inclui, porém não estálimitada a esteróides, especialmente atamestano, exemestano e formestanoe, especificamente a não esteróides, especialmente a aminoglutetimida, ro-gletimida, piridoglutetimida, trilostano, testolactona, cetoconazola, vorozol,fadrozol, anastrozol e letrozol. O exemestano pode ser administrado, porexemplo, na forma em que é comercializado, por exemplo sob a marca co-mercial de AROMASIN®. O formestano pode ser administrado, por exemplo,na forma em que é comercializado, por exemplo sob a marca comercial deLENTARON®. O fadrozol pode ser administrado, por exemplo, na forma emque ela é comercializado, por exemplo sob a marca comercial de AFEMA®.O anastrozol pode ser administrado, por exemplo, na forma em que ele écomercializado, por exemplo sob a marca comercial de AEIMIDEX®. O letro-zol pode ser administrado, por exemplo, na forma em que ele é comerciali-zada, por exemplo, sob a marca comercial de FEMARA® ou FEMAR®. A a-minoglutetimida pode ser administrada, por exemplo, na forma em que ela écomercializado, por exemplo sob a marca comercial de ORIMETEN®. Umacombinação da invenção compreendendo um agente quimioterápico que éum inibidor da aromatase é especificamente útil para o tratamento de tumo-res positivos ao receptor de hormônio, por exemplo, tumores de mama.

O termo "antiestrogênio" na forma usada aqui, neste pedido depatente se refere a um composto que antagoniza o efeito dos estrogênios nonível do receptor de estrogênio. O termo inclui, porém não está limitado atamoxifeno, fulvestrant, raloxifeno e cloridrato de raloxifeno. O tamoxifenopode ser administrado, por exemplo, na forma em que ela é comercializado,por exemplo sob a marca comercial de NOLVADEX®. O cloridrato de raloxi-feno pode ser administrado, por exemplo, na forma em que ele é comerciali-zado, por exemplo sob a marca comercial de EVISTA®. O fulvestrant podeser formulado, por exemplo, como descrito na U. S. 4.659.516 ou pode seradministrado na forma em que ele é comercializado, por exemplo, sob amarca comercial de FASLODEX®. Uma combinação da invenção compreen-dendo um agente quimioterápico que é um antiestrogênio é especificamenteútil para o tratamento de tumores positivos ao receptor de estrogênio, porexemplo, tumores de mama.

A expressão "antiandrogênio" na forma usada aqui, neste pedi-do de patente se refere a qualquer substância que seja capaz de inibir osefeitos biológicos dos hormônios androgênicos e inclui porém não está limi-tada a bicalutamida (CASODEX®), que pode ser formulada, por exemplo,como descrito na U.S. 4.636.505.

A expressão "agonista da gonadorelina" na forma usada aqui,neste pedido de patente, inclui, porém não está limitada ao abarelix, gosere-lina e acetato de goserelina. A goserelina está descrita na U. S. 4.100.274 epode ser administrada, por exemplo, na forma em que ela é comercializada,por exemplo, sob a marca comercial de ZOLADEX®. O abarelix pode serformulado, por exemplo, como descrito na U. S. 5.843.901.

A expressão "inibidor da topoisomerase I" na forma usada aqui,neste pedido de patente, inclui, porém não está limitada ao topotecan, irino-tecan, 9-nitrocamptotecina e o conjugado macromolecular da camptotecinaPNU-166148 (composto A1 na WO99/17804). O Irinotecan pode ser admi-nistrado, por exemplo, na forma em que ele é comercializado, por exemplo,sob a marca comercial de CAMPTOSAR®. O topotecan pode ser administra-do, por exemplo, na forma em que ele é comercializado, por exemplo, sob amarca comercial de HYCAMITIN®.

A expressão "inibidor da topoisomerase II" na forma usada aqui,neste pedido de patente, inclui porém não está limitada as antraciclinas taiscomo a doxorubicina (incluindo a formulação lipossômica, por exemplo,CARLYX®, daunorubicina, epirubicina, idarubicina e nemorubicina, as antra-quinonas mitoxantrona e losoxantrona, e as podofilotoxinas etoposida e teni-posida. A etoposida pode ser administrada, por exemplo, na forma em que écomercializada, por exemplo, sob a marca comercial ETOPOFOS®. A teni-posida pode ser administrada, por exemplo, na forma em que é comerciali-zada, por exemplo, sob a marca comercial VM 26-BRISTOL®. A doxorubici-na pode ser administrada, por exemplo, na forma em que é comercializada,por exemplo, sob a marca comercial ADRIBLASTIN®. A epirubicina pode seradministrada, por exemplo, na forma em que é comercializada, por exemplo,sob a marca comercial FARMORUBICINA®. A idarubicina pode ser adminis-trada, por exemplo, na forma em que é comercializada, por exemplo, sob amarca comercial ZAVEDOS®. A mitroxantona pode ser administrada, porexemplo, na forma em que é comercializada, por exemplo, sob a marca co-mercial NOVANTRON®

A expressão "agente ativo de microtúbulo" se refere a agente deestabilização de microtúbulo e de desestabilização de microtúbulo, incluindoporém não limitados aos taxanos, por exemplo, paclitaxel e docetaxel, alca-lóides vinca, por exemplo, vinblastina, especialmente sulfato de vinblastina,vincristina especialmente sulfato de vincristina, e vinorelbina, discodermoli-das e epotilonas e derivados das mesmas, por exemplo, epotilona B ou umderivado da mesma. O paclitaxel pode ser administrado, por exemplo, naforma em que ele é comercializado, por exemplo, TAXOL®. O docetaxel po-de ser administrado, por exemplo, na forma em que ele é comercializado,por exemplo, sob a marca comercial TAXOTERE®. O sulfato de vinblastinapode ser administrado, por exemplo, na forma em que ele é comercializado,por exemplo, sob a marca comercial VINBLASTIN R.P. ®. O sulfato de vin-cristina pode ser administrado, por exemplo, na forma em que ele é comer-cializado, por exemplo, sob a marca comercial FARMISTIN®. A discodermo-lida pode ser obtida, por exemplo, como descrita na U. S. 5.010.099.

A expressão "agente de alquilação" na forma usada aqui, nestepedido de patente, inclui porém não está limitada a ciclofosfamida, ifosfami-da, melfalano e nitrosouréia (BCNU ou Gliadel®). A ciclofosfamida pode seradministrada, por exemplo, na forma em que ela é comercializada, por e-xemplo, sob a marca comercial CYCLOSTIN®. A ifosfamida pode ser admi-nistrada, por exemplo, na forma em que ela é comercializada, por exemplo,sob a marca comercial HOLOXAN®.

A expressão "antimetabólito antineloplásico" inclui, porém nãoestá limitada a 5-fluoruracil, capecitabina, gemcitabina, metotrexato, hidro-cloroquina, sulfasalazina e edatrexato. A capecitabina pode ser administra-da, por exemplo, na forma em que ela é comercializada, por exemplo, sob amarca comercial XELODA®. A gemcitabina pode ser administrada, por e-xemplo, na forma em que ela é comercializada, por exemplo, sob a marcacomercial GEMZAR®.

A expressão "composto de platina", na forma usada aqui, nestepedido de patente inclui, porém não está limitada a carboplatina, cisplatina eoxaliplatina. A carboplatina pode ser administrada, por exemplo, na formaem que ela é comercializada, por exemplo, sob a marca comercial CAEBO-PLAT®, A oxaliplatina pode ser administrada, por exemplo, na forma em queela é comercializada, por exemplo, sob a marca comercial ELOXATIN®.

A frase "objetivando/reduzindo a atividade de quinase de umaproteína ou de um lipídio ou de outros compostos antiangiogênicos" na for-ma usada aqui, neste pedido de patente inclui, porém não está limitada aosinibidores da proteína tirosina quinase e/ou serina e/ou treonina ou inibidoresde quinase de lipídio, como por exemplo compostos alvejando, reduzindo ouinibindo a atividade da família do fator de crescimento epidérmico dos recep-tores das tirosina quinases(EGFR, ErbB2, ErbB3, ErbB4 como homo- ouheterodímeros), a família do fator de crescimento endotelial vascular do re-ceptor da tirosina quinase (VEGFR), os receptores do fator de crescimentoderivado de plaquetas (PDGFR), os receptores do fator de crescimento defibroblastos (FGFR), o receptor 1 do fator de crescimento do tipo da insulina(IGF-1R), a família do receptor Trk da tirosina quinase, a família do receptorAxl da tirosina quinase, o receptor Ret da tirosina quinase, o receptorKit/SCFR da tirosina quinase, os membros da família c-Abl e os produtos defusão de genes dos mesmos (por exemplo, BCR-Abl), membros da proteínaquinase C (PKC) e da família Raf de quinases de serina/treonina, membrosda família de quinase MEK, SRC, JAK, FAK, PDK ou Pl(3), ou da famíliarelacionada com a quinase Pl(3)-quinase, e/ou membros da família da ciclinadependente da quinase (CDK) e compostos anti angiogênicos que tenhamoutro mecanismo para a sua atividade, como por exemplo, não relacionadoscom a inibição as quinase de proteína ou lipídio.

Os compostos que objetivam, reduzem ou inibem a atividade deVEGFR são especialmente compostos, proteínas ou anticorpos que inibem oreceptor de tirosina quinase VEGF, inibem um receptor VEGF ou se ligam aoVEGF, e são especificamente aqueles compostos, proteínas ou anticorposmonoclônicos descritos de modo genérico e especificamente na WO98/35958, como por exemplo, 1-(4-cloroanilino)-4-(4-piridilmetil)ftalazina ouum sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, por exemplo, o sucinato, ounas WO 00/09495, WO 00/27820, WO 00/59509, WO 98/11223, WO00/27819 e EP 0 769 947; aqueles como os descritos por M. Prewett et alem Câncer Research 59 (1999) 5209 a 5218, por F. Yuan et al em Proc. Na-tl. Acad. Sei. USA, vol. 93, pp. 14765 a 14770, Dec. 1996, por Z. Zhu et alem Câncer Res. 58, 1998, 3209 a 3214, e por J. Mordenti et al em Toxicolo-gic Pathology, Vol. 27, no. 1, pp 14 a 21, 1999; na WO 00/37502 e na WO94/10202; Angiostatin®, descrito por M. S. 0'Reilly et al, Cell 79, 1994, 315 a328; Endostatin®, descrita por M. S. 0'Reilly et al, Cell 88, 1997, 277 a 285;amidas do ácido antralínico; ZD4190; ZD6474; SU5416; SU6668; ou anticor-pos anti-VEGF ou anticorpos anti-receptor VEGF,por exemplo, RhuMab.

Por anticorpo são significados anticorpos monoclonais intactos,anticorpos policlonais, anticorpos multiespecíficos formados a partir de pelomenos dois anticorpos intactos, e fragmentos de anticorpos contanto queeles exibam a atividade biológica desejada.

Os compostos que objetivam, reduzem ou inibem a atividade dafamília do receptor do fator de crescimento epidérmico são de forma especialcompostos, proteínas ou anticorpos que inibem os membros da família EGFdo receptor de tirosina quinase, como por exemplo, o receptor EGF, ErbB2,ErbB3 e ErbB4 ou se ligam aos ligantes EGF ou relacionados com EGF, esão, de modo específico aqueles compostos, proteínas ou anticorpos descri-tos de modo genérico e especificamente nas WO 97/02266, por exemplo, ocomposto do ex. 39, ou nas EP 0 564 409, WO 99/03854, EP 0520722, EP 0566 226, EP 0 787 722, EP 0 837 063, U.S. 5.747.498, WO 98/10767, WO97/30034, WO 97/49688, WO 97/38983 e, especialmente na, WO 96/30347(por exemplo, o composto conhecido como CP 358774), WO 96/33980 (porexemplo, o composto ZD 1839) e WO 95/03283 (por exemplo, o compostoZM105180); por exemplo, trastuzumab (Herpetin®), cetuximab, Iressa, OSI-774, CI-1033, EKB-569, GW-2016, E1.1, E2.4, E2.5, E6.2, E6.4, E2.11, E6.3ou E7.6.3.

Os compostos que objetivam, reduzem ou inibem a atividade doPDGFR são especialmente aqueles compostos que inibem o receptorPDGF, por exemplo, um derivado de N-fenil-2-pirimidina-amina, por exem-plo, o imatinib.

Os compostos que objetivam, reduzem ou inibem a atividadedos membros da família c-Abl e os produtos da fusão de genes dos mes-mos, como por exemplo um derivado de N-fenil-2-pirimidina-amina, por e-xemplo, o imatinib; PD180970; AG957; ou NSC 680410.

Os compostos que objetivam, reduzem ou inibem a atividade daproteína quinase C, Raf, MEK, SRC, JAK, FAK e membros da família PDK,ou quinase Pl(3) ou da família relacionada com a quinase Pl(3) e/ou mem-bros da família de quinase dependente de ciclina (CDK), são especialmenteaqueles descritos na EP 0 296 110, por exemplo, midostaurina; os exemplosde outros compostos incluem, por exemplo, UCN-01, safingol, BAY 43-9006,Bryostatin 1, Perifosina; llmofosina; RO 318220 e RO 320432; GO 6976; Isis3521; ou LY333531/LY379196.

Outros compostos anti angiogênicos são, por exemplo, a talido-mida (THALOMID) e TNP-470.

Os compostos que objetivam, reduzem ou inibem a atividade deuma fosfatase de proteína ou de lipídio são, por exemplo, os inibidores defosfatase 1, fosfatase 2A, PTEN ou CDC25, como por exemplo, o ácido oca-daico ou um derivado do mesmo.

Os compostos que induzem os processos de diferenciação decélulas são, por exemplo, o ácido retinóico, o a-, y- ou ô- tocoferol ou o a-,y- ou ô- tocotrienol.

A expressão inibidor da ciclooxigenase na forma usada aqui,neste pedido de patente inclui, porém não está limitada a, por exemplo, ce-lecoxib (Celebrex®), rofecoxib (Vioxx®), etoricoxib, valdecoxib ou um ácido a5-alquil-2-arilaminofenil acético, por exemplo, o ácido 5-metil-2-(2'-cloro-6'-fluoranilino)fenil acético.

A expressão "inibidor da deacetilase de histona" na forma usadaaqui, neste pedido de patente inclui porém não está limitada a, MS-27-275,SAHA, piroxamida, FG-901228 ou ácido valpróico.

O termo "bisfosfonatos" na forma usada aqui, neste pedido depatente inclui porém não está limitado aos ácidos etridônico, clodrônico, tilu-drônico, pamidrônico, alendrônico, ibandrônico, risedrônico e zoledrônico. O"ácido etridônico" pode ser administrado, por exemplo, na forma em que eleé comercializado, por exemplo, sob a marca comercial DIDRONEL®. O "áci-do clodrônico" pode ser administrado, por exemplo, na forma em que ele écomercializado, por exemplo, sob a marca comercial BONEFOS®. O "ácidotiludrônico" pode ser administrado, por exemplo, na forma em que ele é co-mercializado, por exemplo, sob a marca comercial SKELID®. O "ácido paimi-drônico" pode ser administrado, por exemplo, na forma em que ele é comer-cializado, por exemplo, sob a marca comercial AREDIA®. O "ácido alendrô-nico" pode ser administrado, por exemplo, na forma em que ele é comercia-lizado, por exemplo, sob a marca comercial FOSAMAX®. O "ácido ibandrôni-co" pode ser administrado, por exemplo, na forma em que ele é comerciali-zado, por exemplo, sob a marca comercial BONDRANAT®. O "ácido risedrô-nicó" pode ser administrado, por exemplo, na forma em que ele é comercia-lizado, por exemplo, sob a marca comercial ACTONEL®. O "ácido zoledrôni-co" pode ser administrado, por exemplo, na forma em que ele é comerciali-zado, por exemplo, sob a marca comercial ZOMETA®.

A frase "inibidor da metaloproteinase de matriz" na forma usadaaqui, neste pedido de patente inclui porém não está limitada a inibidores mi-méticos de peptídio e não miméticos de peptídio do colágeno, derivados datetraciclina, como por exemplo, o inibidor mimético de peptídio hidroxamatobatimastat e o seu análogo biodisponivel oral marimastat, prinomastat, BMS-279251, BAY 12-9566, TAA211 ou AAJ996.

Alem das terapias destinadas a redução do crescimento dascélulas de câncer, o anticorpo quimérico CD25 pode ser usado em combina-ção com terapias destinadas a fortalecer o sistema de imunização do pacien-te. Essas terapias incluem, porém não estão limitadas a IL-12, IL-15, IL-21,células dendríticas ativadas, diversas formas de vacinação (incluindo vaci-nação por DNA), IFN-oc e outros tratamentos destinados a aumentar a fun-ção das células T executoras contra p agente do tumor ou da infecção.

O anticorpo quimérico CD25, por exemplo, o basiliximab, tam-bém pode ser aplicado em combinação com uma intervenção cirúrgica, hi-pertermia total do corpo suave prolongada e/pó terapia de irradiação.

O anticorpo quimérico CD25, por exemplo, o basiliximab, tam-bém pode ser administrado em conjunto com outros fármacos efetivos nasdoenças infecciosas, tais como antibióticos, agentes antibacterianos oucompostos antiviróticos, tais como (3-lactamos por exemplo, penicilinas; cefa-losporinas; carbapenemos; cetolidas; quinolonas por exemplo, fluorquinolo-nas; macrolidas por exemplo, claritromicina, azithromicina ou vancomicina;rifamicinas; monobactamos; isoniazida; licosamidas; mupirocina; sulfonami-das; fenicois; fosfomicina; glicopeptídios; tetraciclinas; estreptograminas;cloramfenicol; e oxazolidinona, famciclovir ou penciclovir.

Por conseqüência, a presente invenção também proporciona:(x) Um método de imunoterapia em um paciente que compreen-de a administração, por exemplo ao mesmo tempo ou em seqüência, ao re-ferido paciente uma quantidade terapeuticamente efetiva de a) um anticorpoquimérico CD25 como descrito acima, por exemplo, o basiliximab, e b) umaoutra substância de fármaco efetiva em imunoterapia, como por exemplo,efetiva na inibição ou na inativação de células T reguladoras, por exemplouma molécula de ligação com antígeno a pelo menos um outro antígeno quenão o CD25 que esteja presente nas células T reguladoras, ou em aumentara função das células T executoras para o paciente que esteja necessitandode um tal tratamento.

(xi) Um método para a prevenção e o tratamento de uma doen-ça proliferativa ou de uma doença infecciosa em um paciente, que compre-ende a administração, por exemplo, concomitantemente ou em seqüência aoreferido paciente de uma quantidade terapeuticamente efetiva de a) um anti-corpo quimérico CD25 como descrito acima, por exemplo, o basiliximab, e b)uma outra substância de fármaco sendo efetiva para a prevenção ou para otratamento de doença proliferativa ou de doença infecciosa, por exemplo, naprevenção ou no tratamento de aterosclerose, carcinomas, trombose, reste-nose, esclerodermite, fibrose ou um câncer, doença maligna, como por e-xemplo um tumor sólido, por exemplo, como descrito acima.

(xii) Um método para a prevenção e o tratamento de uma doen-ça proliferativa ou de uma doença infecciosa em um paciente, que compre-ende a administração, por exemplo, concomitantemente ou em seqüência aoreferido paciente de uma quantidade terapeuticamente efetiva de a) um anti-corpo quimérico CD25 como descrito acima, por exemplo, o basiliximab, e b)uma composição que compreenda um agente antiproliferativo, um agentequimioterápico, ou um agente antiinfeccioso, por exemplo, um agente eficazpara a prevenção ou tratamento de doença proliferativa ou doença infeccio-sa, por exemplo, na prevenção ou no tratamento de aterosclerose, carcino-mas, trombose, restenose, esclerodermite, fibrose ou um câncer, doençamaligna, como por exemplo, um tumor sólido, por exemplo, como descritoacima.

(xiii) Uma combinação de, por exemplo, um kit ou embalagemfarmacêutica, compreendendo a) um anticorpo quimérico CD25 como descri-to acima, por exemplo, o basiliximab, e b) uma outra substância de um fár-maco efetiva em imunoterapia, por exemplo, efetiva na inibição ou na inati-vação de células T reguladoras, por exemplo uma molécula de ligação doantígeno a pelo menos um outro antígeno que não o CD25 que esteja pre-sente nas células T reguladoras, ou em aumentar a função das células Texecutoras para o paciente que esteja necessitando de um tal tratamento.

(xiv) Uma combinação de, por exemplo, um kit ou embalagemfarmacêutica, compreendendo a) um anticorpo quimérico CD25 como descri-to acima, por exemplo, o basiliximab, e b) uma outra substância de um fár-maco efetiva em imunoterapia, por exemplo, efetiva para o tratamento ou aprevenção de uma doença proliferativa, tal como o câncer ou doença de tu-mor, por exemplo, um tumor sólido, ou para o tratamento ou a prevenção deuma doença infecciosa, tal como uma infecção microbiana.

(xv) O uso de uma combinação como descrita nos parágrafos

(xiii) ou (xiv) abaixo para a imunoterapia ou para ser usada em qualquer umdos métodos como descritos nos parágrafos de (i) até (v) abaixo, por exem-plo, para o retardamento da progressão ou para o tratamento de uma doen-ça proliferativa, especialmente uma doença de tumor; ou uma doença infec-ciosa, ou para o aumento da atividade de um agente quimioterápico ou paraa superação da resistência a um agente quimioterápico.

(xvi) Uma composição farmacêutica composta por uma combi-nação como a descrita nos parágrafos (xiii) ou (xiv) abaixo.

(xvii) Um método como o descrito nos parágrafos de (i) até (v)ou de (x) até (xii) abaixo, no qual o anticorpo quimérico CD25, de preferênciao basiliximab, é administrado de forma intermitente.

Se o anticorpo quimérico CD25 for co-administrado com umaoutra substância de um fármaco ambos podem ser embalados de modo se-parado, no interior da mesma embalagem, com instruções misturar ou para aadministração concomitante. Os exemplos de kits incluem por exemplo, umaseringa de tubos múltiplos ou um pacote duplo contendo formas de unidadede dosagem separadas.

A utilidade do anticorpo quimérico CD25 para o tratamento de,por exemplo, tumores sólidos, como especificado mais acima aqui, nestepedido de patente, pode ser demonstrada em métodos de teste animal bemcomo em clinica, por exemplo, de acordo com os métodos descritos aqui,neste pedido de patente.

A. In Vivo: Atividade em tumores pancreáticos CA20948 de rato.

São estabelecidos tumores em ratos Lewis machos através dainjeção subcutânea de uma suspensão de células de tumor CA20948 deri-vadas a partir de ratos doadores dentro do flanço esquerdo. O tratamento éiniciado no dia 4 em seguida à inoculação. O anticorpo quimérico CD25 a sertestado é administrado p. o. uma vez por dia (o um uma vez a cada 2 a 4dias), a partir do dia 4 até o dia 9 a 15 após a inoculação. A atividade antitumor é expressa como T/C% (aumento médio nos volumes de tumor dosanimais tratados dividido pelo aumento médio nos volumes de tumor dosanimais de controle, multiplicado por 100) e a percentagem de redução (vo-lume do tumor menos volume inicial do tumor dividido pelo volume inicial dotumor e multiplicado por 199).

B. Teste Clínico.

A utilidade do anticorpo quimérico CD25 da invenção na imuno-terapia, por exemplo, na imunoterapia do câncer, pode ser mostrada atravésda utilização de Basiliximab para estudar os efeitos sobre a progressão docâncer ou a regressão da infecção. Os parâmetros que se seguem podemser avaliados e depois de várias semanas ou meses de tratamento, por e-xemplo, depois de 2 ou 3 meses: CD25 + células T reguladoras na circula-ção, ou no órgão objetivado, resposta de imunização contra o câncer ou oagente infeccioso, outros parâmetros se relacionando aos efeitos de malig-nidades ou de agentes infecciosos tais como tamanho, freqüência, cargavirótica, etc.

Por exemplo o uso do anticorpo CD25 na imunoterapia do cân-cer pode ser avaliado com o exemplo clinico que se segue que descreve ouso do basiliximab na manutenção da remissão de um câncer colo retal.60 pacientes de câncer colo-retal são recrutados para o teste.

Os critérios de escolha incluem a idade de pelo menos 18 anos, carcinomacolo-retal em metástase histologicamente confirmado, com doença mensu-rável de forma bidimensional. Os pacientes são escolhidos de forma aleató-ria para receber ou tratamento padrão para o câncer ou o tratamento padrãopara o câncer mais de 1 a 10 mg/kg de basiliximab a cada duas semanas.

A prova primaria de eficácia é baseada nas taxas objetivas deresposta, e no tempo até a resposta, duração da resposta, o tempo até afalha do tratamento e a sobrevivência também são avaliados, è exigido queos tumores possam ser medidos em pelo menos um local da doença, e acaracterização da resposta com base nos critérios do Southwestern Onco-logy Group (SWOG). Depois da avaliação a partir da linha de base, o estadodo tumor pode ser avaliado a cada 6 semanas durante as primeiras 24 se-manas do estudo e em seguida a cada 12 semanas durante o restante daterapia. Todas as respostas completas e parciais podem exigir a confirma-ção de pelo menos quatro semanas depois de que elas foram registradas.

O basiliximab pode ser administrado concomitante com a quimi-oterapia.

Claims (10)

1. Combinação farmacêutica compreendendo a) um anticorpoquimérico CD25 e b) pelo menos um agente antiproliferativo, agente quimio-terápico ou um agente antiinfeccioso.

2. Combinação de acordo com a reivindicação 1 na qual o anti-corpo quimérico CD25 compreende, pelo menos um sítio de ligação comantígeno que compreende, pelo menos um domínio que compreenda emseqüência as regiões hipervariáveis CDR1, CDR2 e CDR3, a referida CDR1tendo a seqüência de amino ácido Arg-Tyr-Trp-Met-His, a referida CDR2tendo a seqüência de amino ácido Ala-lle-Tyr-Pro-Gly-Asn-Ser-Asp-Thr-Ser-Tyr-Asn-Gln-Lys-Phe-Glu-Gly, e a referida CDR3 tendo a seqüência de ami-no ácido Asp-Tyr-Gly-Tyr-Tyr-Phe-Asp-Phe; ou equivalentes diretos dasmesmas.

3. Combinação de acordo com a reivindicação 2 na qual o anti-corpo quimérico CD25 é o basiliximab.

4. Combinação de acordo com qualquer uma das reivindicaçõesprecedentes nas quais o componente b) é um agente quimioterápico, sele-cionado a partir dos compostos:i. um inibidor da aromatase,ii. um antiestrogênio, um antiandrogênio (especialmente no casodo câncer de próstata)ou um agonista da gonadorelina,iii. um inibidor da topoisomerase I ou um inibidor da topoisome-rase II,iv. um agente ativo de microtúbulo, um agente de alquilação, umantimetabólito antineoplásico, ou um composto de platina,v. um composto objetivando/reduzindo uma atividade de quina-se de uma proteína ou lipidio ou uma atividade de fosfatase de uma proteínaou lipidio, um outro composto antiangiogênico ou um composto que induzaprocessos de diferenciação de células,vi. um receptor da bradiquinina 1 ou um antagonista da angio-tensina II,vii. um inibidor da ciclooxigenase, um bisfosfonato, um inibidorda deacetilase de histona, um inibidor da heparanase (impede a degradaçãodo sulfato de heparano), como por exemplo, PI-88, um modificador de res-posta biológica, de preferência uma linfocina ou interferons, como por exem-plo o interferon y, um inibidor de ubiquitinação, ou um inibidor que bloqueietrajetos antiapopóticos,viii. um inibidor de isoformas oncogênicas Rãs, como por exemploH-Ras, K-Ras ou N-Ras, ou um inibidor da farnesil transferase,como por exemplo L-744,832 ou DK8G557,ix. um inibidor da telomerase, por exemplo, a telomestatina,x. um inibidor da protease, um inibidor da metaloproteinase dematriz, um inibidor da aminopeptidase da metionina, por exemplo, bengami-da ou um derivado da mesma, ou um inibidor da proteosoma, por exemplo, PS-341, exi. um inibidor de mTOR.

5. Combinação de acordo com qualquer uma das reivindicaçõesprecedentes para uso em imunoterapia, especificamente a imunoterapia docâncer.

6. Combinação de acordo com qualquer uma das reivindicaçõesde 1 a 4 para uso na preparação de um medicamento ou um kit para o tra-tamento ou a prevenção de uma doença proliferativa, tal como o câncer, ouuma doença infecciosa, tal como uma infecção microbiana, em que a inibi-ção das células T reguladoras é benéfica.

7. Uso de basiliximab em imunoterapia, especificamente na i-munoterapia do câncer, por exemplo, para inibir, bloquear ou inativar célulasT reguladoras.

8. Uso de basiliximab para a prevenção ou o tratamento de ate-rosclerose, carcinomas e tumores, doenças infecciosas, trombose, resteno-se, esclerodermite, fibrose ou para o tratamento da invasão de tumor sólidoou de sintomas associados com esse crescimento de tumor.

9. Método de imunoterapia, por exemplo, para o tratamento dedoença proliferativa ou de doença infecciosa, em um paciente compreen-dendo a administração ao paciente de uma quantidade efetiva de basilixi-mab, opcionalmente em combinação com pelo menos um agente antiprolife-rativo.

10. Método de acordo com a reivindicação 9 no qual o basilixi-mab é para a prevenção ou o tratamento de aterosclerose, carcinomas etumores, doenças infecciosas, trombose, restenose, esclerodermite, fibroseou para o tratamento da invasão de tumor sólido ou de sintomas associadoscom esse crescimento de tumor.