BRPI0610983A2 - peptìdeos e miméticos de peptìdeos para tratar patologias caracterizadas por uma resposta inflamatória - Google Patents

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BRPI0610983A2
BRPI0610983A2 BRPI0610983-7A BRPI0610983A BRPI0610983A2 BR PI0610983 A2 BRPI0610983 A2 BR PI0610983A2 BR PI0610983 A BRPI0610983 A BR PI0610983A BR PI0610983 A2 BRPI0610983 A2 BR PI0610983A2
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phe
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Alan M Fogelman
Mohamad Navab
Gattadahalli M Anantharamalah
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Universirty Of California
Univ Alabama Res Found
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Abstract

Essa invenção fornece novos agentes ativos (por exemplo, peptídeos, pequenas moléculas orgânicas, pares de aminoácidos etc.) peptídeos que melhoram um ou mais sintomas de aterosclerose e/ou outras patologias caracterizadas por uma resposta inflamatória. Em certas modalidades, os peptideos assemelham-se a uma hélice anfifática G* de apolipoproteina J. Os agentes são altamente estáveis e facilmente administrados por via oral.

Description

PEPTÍDEOS E MIMÉTICOS DE PEPTÍDEOS PARA TRATAR PATOLOGIASCARACTERIZADAS POR UMA RESPOSTA INFLAMATÓRIA
Este pedido reivindica prioridade e o benefício deUSSN 60/697.495, depositado em 7 de julho de 2005, e deUSSN 60/676.431, depositado em 29 de abril de 2005, ambosaqui incorporados por referência em sua totalidade paratodos os fins.
Declaração Quanto Aos Direitos das Invenções Feitas sobPesquisas e Desenvolvimento Financiados por Verbas Federais
Este trabalho foi custeado, em parte, pela Concessãon° i HL30568 do ",National Heart Blood Lung Institute of theNational Institutes of Health". 0 Governo dos EstadosUnidos pode ter certos direitos sobre esta invenção.
CAMPO DA INVENÇÃO
Esta invenção está relacionada ^ ao campo daaterosclerose e outras condições caracterizadas porinflamação e/ou pela formação de várias espécies oxidadas.Em particular, esta invenção pertence a identificação declasses de agentes ativos que possam ser administrados porvia oral e que melhorem um ou mais sintomas de condiçõescaracterizadas por uma resposta inflamatória e/ou pelaformação de várias espécies oxidadas.
FUNDAMENTOS DA INVENÇÃO
A introdução das estatinas (por exemplo, Mevacor®,Lipitor® etc.) reduziu a mortalidade decorrente de ataquecardíaco e acidente vascular encefálico em cerca de umterço. No entanto, o ataque cardíaco e o acidente vascularencefálico permanecem sendo a causa principal de morte eincapacidade, particularmente nos Estados Unidos e nospaíses da Europa Ocidental. 0 ataque cardíaco e o acidentevascular encefálico são o resultado de uma condiçãoinflamatória crônica denominada aterosclerose.
Vários fatores etiológicos estão implicados nodesenvolvimento da doença cardiovascular, incluindopredisposição hereditária para a doença, sexo,fatores relacionados ao estilo de vida, tais como otabagismo e a dieta, idade, hipertensão e hiperlipidemia,incluindo hipercolesterolemia. Vários desses fatores,particularmente hiperlipidemia e hipercolesterolemia (altasconcentrações sangüíneas de colesterol), representam umfator de risco significativo associado à aterosclerose.
0 colesterol está presente no sangue como colesterollivre e esterificado dentro de partículas de lipoproteína,comumente conhecidas como quilomícrons, lipoproteínas dedensidade muito baixa (VLDLs), lipoproteínas de baixadensidade (LDLs) e lipoproteínas de alta densidade (HDLs).
A concentração de colesterol total no sangue é influenciadapor (1) absorção de colesterol pelo trato digestivo, (2)síntese de colesterol a partir dos constituintesdietéticos, tais como carboidratos, proteínas, gorduras eetanol, e (3) remoção de colesterol do sangue por tecidos,especialmente pelo fígado, e subseqüente conversão docolesterol em ácidos biliares, hormônios esteróides ecolesterol biliar.
A manutenção das concentrações sangüíneas decolesterol é influenciada por fatores tanto genéticosquanto ambientais. Fatores genéticos incluem a concentraçãode enzimas limitantes da taxa na biossíntese de colesterol,concentração de receptores para lipoproteínas de baixadensidade no fígado, a concentração de enzimas limitantesda taxa para a conversão de ácidos biliares de colesteróis,taxas de síntese e secreção de lipoproteínas e o sexo dapessoa. Fatores ambientais que influenciam a homeostasia daconcentração sangüínea de colesterol em seres humanosincluem composição dietética, incidência de tabagismo,atividade física e o uso de diversos agentes farmacêuticos.
Variáveis dietéticas incluem a quantidade e tipo de gordura(ácidos graxos saturados e poliinsaturados), a quantidadede colesterol, quantidade e tipo de fibra e, talvez, asquantidades de vitaminas, como vitamina C e D, e mineraiscomo, por exemplo, cálcio.
A oxidação da lipoproteína de baixa densidade (LDL)tem sido fortemente implicada na patogênese daaterosclerose. Verificou-se que a lipoproteína de altadensidade (HDL) é capaz de proteger contra a oxidação doLDL, mas, em alguns casos, constatou-se que acelera aoxidação do LDL. Fatores iniciadores importantes naaterosclerose incluem a produção de fosfolipídeos oxidadosderivados de LDL.
0 HDL normal tem a capacidade de evitar a formaçãodesses fosfolipídeos oxidados e de também inativar essesfosfolipídeos oxidados após eles terem sido formados. Noentanto, sob algumas circunstâncias, o HDL pode serconvertido de uma molécula antiinflamatória em uma moléculapró-inflamatória que realmente promove a formação dessesfosfolipídeos oxidados.
Foi sugerido que HDL e LDL funcionam como parte dosistema imunológico inato (Navab e cols. (2001)Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol., 21: 481-488). A geraçãode HDL antiinf lamatório foi obtida com a utilização depeptídeos helicoidais anfipáticos da Classe A que mimetizama principal proteína do HDL, a apolipoproteína A-I (apoA-I)(veja, por exemplo, WO 02/15923).
SUMÁRIO DA INVENÇÃO
Esta invenção fornece composições e métodos inéditospara melhorar um ou mais sintomas de uma condição vasculare/ou de uma condição caracterizada por uma respostainflamatória e/ou uma condição caracterizada pela formaçãode espécies reativas oxidadas em um mamífero. Os métodosenvolvem a administração a um mamífero (por exemplo, um serhumano que necessite destes) de um ou mais dos agentesativos (por exemplo, peptídeos helicoidais anfipáticos daClasse A, certos tripeptídeos, tetrapeptídeos,pentapeptídeos e pares de aminoácido, alguns peptídeos Apo-J(G*) e algumas pequenas moléculas orgânicas).
Em certas modalidades, esta invenção fornece umpeptídeo que melhora um sintoma de aterosclerose, em que oreferido peptídeo compreende uma seqüência de aminoácidosou uma seqüência de retro-aminoácidos de um peptídeolistado nos peptídeos listados em qualquer uma das Tabelas2-18 (por exemplo, Tabela 4, Tabela 5 ou Tabela 6 etc.). Emcertas modalidades, o(s) peptídeo(s) ainda compreende(m) umgrupo de proteção ligado ao terminal amino ou carboxil. Emcertas modalidades, os peptídeos compreendem um primeirogrupo de proteção ligado ao terminal amino e um segundogrupo de proteção ligado ao terminal carboxil. Em certasmodalidades, os grupos de proteção podem ser selecionadosindependentemente do grupo que consiste em acetil, amida egrupos alquil de 3 a 20 carbonos, Fmoc, Tboc, grupo 9-fluorenoacetil, grupo 1-fluorenocarboxílico, grupo 9-fluorenocarboxílico, grupo 9-fluorenona-1-carboxílico,benziloxicarbonil, Xantil (Xan), Tritil (Trt), 4-metiltritil (Mtt), 4-metoxitritil (Mmt), 4-metóxi-2,3,6-trimetil-benzenossulfonil (Mtr), Mesitileno-2-sulfonil(Mts), 4,4-dimetoxibenzidril (Mbh)iTosil (Tos), 2,2,5,7,8-pentametil croman-6-sulfonil (Pmc), 4-metilbenzil (MeBzl),4-metoxibenzil (MeOBzl), Benziloxi (BzlO), Benzil (Bzl),Benzoil (Bz), 3-nitro-2-piridinassulfenil (Npys), l-(4,4-dimentil-2,6-diaxociclohexilideno)etil (Dde), 2,6-diclorobenzil (2,6-DiCl-Bzl), 2-clorobenziloxicarbonil (2-Cl-Z), 2-bromobenziloxicarbonil (2-Br-Z), Benziloximetil(Bom), t -butoxicarbonil (Boc), ciclohexiloxi (cHxO), t-butoximetil (Bum), t-butóxi (tBuO), t-Butil (tBu), Acetil(Ac) e Trifluoraeetil (TFA).
Em certas modalidades, o peptideo compreende um grupode proteção acoplado ao terminal amino e o grupo deproteção do terminal amino é um grupo de proteçãoselecionado do grupo que consiste em acetil, propeonil e umalquil de 3 a 20 carbonos. Em certas modalidades, opeptideo compreende um grupo de proteção ligado ao terminalcarboxil e o grupo de proteção do terminal carboxil é umaamida. Em certas modalidades, o peptideo compreende: umprimeiro grupo de proteção ligado ao terminal amino, em queo grupo de proteção é um grupo de proteção selecionado dogrupo que consiste em acetil, propeonil e um alquil de 3 a20 carbonos; e um segundo grupo de proteção ligado aoterminal carboxil, e o grupo de proteção do terminalcarboxil é uma amida.
Em várias modalidades, um ou mais aminoácidos quecompreendem o peptideo são aminoácidos "D" . Em váriasmodalidades, todos os aminoácidos que compreendem opeptídeo são aminoácidos "D". O(s) peptídeo(s) pode,opcionalmente, ser misturado/combinado com um excipientefarmacologicamente aceitável. Em certas modalidades, oexcipiente é um excipiente adequado para administração orala um mamífero.
Em certas modalidades, esta invenção fornece métodosde tratamento de uma condição vascular e/ou de uma condiçãocaracterizada por uma resposta inflamatória e/ou umacondição caracterizada pela formação de espécies reativasoxidadas em um mamífero. Os métodos tipicamente envolvem aadministração a um mamífero em necessidade de um ou maisdos agentes ativos descritos nas Tabelas 2-18 (por exemplo,Tabela 4, Tabela 5, ou Tabela 6, etc.) e/ou uma pequenamolécula orgânica, como aqui descrito, em uma quantidadesuficiente para atenuar um ou mais sintomas da condição. Emcertas modalidades, o agente ativo é um polipeptídeo quecompreende uma seqüência de aminoácidos de 4F (ID. DE SEQ.N°: 5). Em certas modalidades, a administração é por umavia selecionada do grupo que consiste em administraçãooral, administração nasal, administração retal, injeçãointraperitoneal e injeção intravascular, injeçãosubcutânea, administração transcutânea e injeçãointramuscular. Em certas modalidades, o agente ativo éadministrado em conjunto com um fármaco selecionado dogrupo que consiste em inibidores de CETP, FTY720, Certican,inibidores de DPP4, bloqueadores do canal de cálcio,derivado ou mimético ou agonista de ApoAl, agonistas dePPAR, esteróides, Gleevec, bloqueadores da absorção decolesterol (Zetia), Vytorin, qualquer bloqueador da via derenina-angiotensina, antagonista do receptor deangiotensina II (Diovan etc.), inibidores da ACE,inibidores de renina, antagonista de MR e inibidor daaldosterona sintase, betabloqueadores, antagonistas alfa-adrenérgicos, agonista de LXR, agonista de FXR, agonista doreceptor Scavenger BI, agonista de ABCAl, agonista doreceptor de adiponectina ou indutores de adiponectina,inibidor da Estearoil-CoA Desaturase I (SCDl), inibidoresda síntese de colesterol (não estatinas), inibidor dadiacilglicerol aciltransferase I (DGATl), inibidor deAcetil CoA Carboxilase 2, inibidor de PAI-1, inibidor deLP-PLA2, GLP-I, ativador de glicoquinase, agonista de CB-1,inibidor/degradador de AGE, inibidores de PKC, anti-trombóticos/coagulantes, Aspirina, bloqueadores do receptorde ADP, por exemplo, Clopidigrel, inibidor do Fator Xa,inibidor de GPIIb/IIIa, inibidor do Fator Vila, Warfarin,heparina de baixo peso molecular, inibidor do fatortecidual, fármacos antiinflamatórios, Probucol e derivado,por exemplo, AGI-1067 etc., antagonista de CCR2,antagonista de CX3CR1, antagonista de EL-I, nitratos edoadores de NO e inibidores da fosfodiesterase.
Também é fornecido o uso de um peptídeo que compreendeuma seqüência de aminoácidos ou uma seqüência de retro-aminoácidos de um peptídeo listado na Tabela 4, Tabela 5 ouTabela 6 no tratamento de uma condição selecionada do grupoque consiste em: formação de placa aterosclerótica,formação de lesão aterosclerótica, infarto do miocárdio,acidente vascular encefálico, insuficiência cardíacacongestiva, função arteriolar, doença arteriolar, doençaarteriolar associada ao envelhecimento, doença arteriolarassociada à doença de Alzheimer, doença arteriolarassociada à doença renal crônica, doença arteriolarassociada à hipertensão, doença arteriolar associada àdemência multienfartos, doença arteriolar associada àhemorragia subaracnóide, doença vascular periférica, doençapulmonar obstrutiva crônica (DPOC), enfisema, asma, fibrosepulmonar idiopática, fibrose pulmonar, síndrome dosofrimento respiratório do adulto, osteoporose, doença dePaget, calcificação coronária, artrite reumatóide,poliarterite nodosa, polimialgia reumática, lúpuseritematoso, esclerose múltipla, granulomatose de Wegener,vasculite do sistema nervoso central (CNSV), síndrome deSjõgren, esclerodermia, polimiosite, resposta inflamatóriada AIDS, infecção bacteriana, infecção fúngica, infecçãoviral, infecção parasitária, influenza, gripe aviária,pneumonia viral, síndrome de choque endotóxico, sépsis,síndrome séptica, trauma/ferida, transplante de órgãos,aterosclerose em transplantes, rejeição de transplantes,úlcera corneana, ferida crônica/não cicatrizante, coliteulcerativa, lesão de re-perfusão (prevenção e/outratamento), lesão isquêmica de re-perfusão (prevenção e/outratamento), lesões da medula vertebral (atenuação dosefeitos), cânceres, mieloma/mieloma múltiplo, câncerovariano, câncer de mama, câncer de cólon, câncer ósseo,osteoartrite, doença inflamatória do intestino, rinitealérgica, caquexia, diabetes, doença de Alzheimer, prótesesimplantadas, formação de biopelícula, doença de Crohn,dermatite, aguda e crônica, eczema, psoríase, dermatite decontato, esclerodermia, diabetes do tipo I, diabetes dotipo II, diabetes de surgimento juvenil, prevenção dosurgimento de diabetes, nefropatia diabética, neuropatiadiabética, retinopatia diabética, disfunção erétil,degeneração macular, esclerose múltipla, nefropatia,neuropatia, doença de Parkinson, doença vascular periféricae meningite.
Ainda em outra modalidade, esta invenção fornece o usode um peptídeo que compreende uma seqüência de aminoácidosou uma seqüência de retro-aminoácidos de um peptídeolistado na Tabela 4, Tabela 5 ou Tabela 6 para a manufaturade um medicamento para o tratamento de uma condiçãoselecionada do grupo que consiste em: formação de placaaterosclerótica, formação de lesão aterosclerótica, infartodo miocárdio, acidente vascular encefálico, insuficiênciacardíaca congestiva, função arteriolar, doença arteriolar,doença arteriolar associada ao envelhecimento, doençaarteriolar associada à doença de Alzheimer, doençaarteriolar associada à doença renal crônica, doençaarteriolar associada à hipertensão, doença arteriolarassociada â demência multienfartos, doença arteriolarassociada à hemorragia subaracnóide, doença vascularperiférica, doença pulmonar obstrutiva crônica (DPOC),enfisema, asma, fibrose pulmonar idiopática, fibrosepulmonar, síndrome do sofrimento respiratório do adulto,osteoporose, doença de Paget, calcificação coronária,artrite reumatóide, poliarterite nodosa, polimialgiareumática, lúpus eritematoso, esclerose múltipla,granulomatose de Wegener, vasculite do sistema nervosocentral (CNSV), síndrome de Sjògren, esclerodermia,polimiosite, resposta inflamatória da AIDS, infecçãobacteriana, infecção fúngica, infecção viral, infecçãoparasitária, influenza, gripe aviária, pneumonia viral,síndrome de choque endotóxico, sépsis, síndrome séptica,trauma/ferida, transplante de órgãos, aterosclerose emtransplantes, rejeição de transplantes, úlcera corneana,ferida crônica/não cicatrizante, colite ulcerativa, lesãode re-perfusão (prevenção e/ou tratamento), lesão isquêmicade re-perfusão (prevenção e/ou tratamento), lesões damedula vertebral (atenuação dos efeitos), cânceres,mieloma/mieloma múltiplo, câncer ovariano, câncer de mama,câncer de cólon, câncer ósseo, osteoartrite, doençainflamatória do intestino, rinite alérgica, caquexia,diabetes, doença de Alzheimer, próteses implantadas,formação de biopelícula, doença de Crohn, dermatite, agudae crônica, eczema, psoríase, dermatite de contato,esclerodermia, diabetes do tipo I, diabetes do tipo II,diabetes de surgimento juvenil, prevenção do surgimento dediabetes, nefropatia diabética, neuropatia diabética,retinopatia diabética, disfunção erétil, degeneraçãomacular, esclerose múltipla, nefropatia, neuropatia, doençade Parkinson, doença vascular periférica e meningite.
Em certas modalidades, esta invenção fornece um stent(stent) para a liberação de fármacos a um vaso em um corpo.O stent tipicamente compreende uma estrutura do stent queinclui diversos reservatórios nela formados, e um peptídeoque compreende uma seqüência de aminoácidos ou umaseqüência de retro-aminoácidos de um peptídeo listado nasTabelas 2-18 (por exemplo, Tabela 4, Tabela 5 ou Tabela 6etc.) e/ou o inverso desta. Em certas modalidades, o stentcompreende um peptídeo que compreende uma seqüência deaminoácidos de 4F (ID. DE SEQ. N° : 5) ou o inverso desta.Em certas modalidades, o agente ativo está contido dentrode um polímero. Em certas modalidades, a estrutura do stentcompreende um de uma base metálica ou uma base polimérica.
Em certas modalidades, a base da estrutura do stentcompreende um material selecionado do grupo que consiste emaço inoxidável, nitinol, tântalo, liga de MP35N, platina,titânio, uma liga biocompatível adequada, um polímerobiocompatível adequado, e uma combinação destes. 0(s)reservatório(s) que compreende a referido stent pode, emalgumas modalidades, compreender microporos (por exemplo,com um diâmetro de cerca de 20 mícrons ou menos). Em certasmodalidades, os microporos possuem um diâmetro na faixa decerca de 20 mícrons a cerca de 50 mícrons. Em váriasmodalidades, os microporos possuem uma profundidade nafaixa de cerca de 10 a cerca de 50 mícrons. Os microporos,em certas modalidades, se estendem através da estrutura dostent, com uma abertura em uma superfície interior do stente uma abertura em uma superfície exterior do stent. Emvárias modalidades, o stent pode ainda compreender umacamada de cobertura disposta na superfície interior daestrutura do stent, a camada de cobertura cobrindo pelomenos uma porção dos orifícios e fornecendo uma barreiracaracterística para controlar a taxa de eluição de umfármaco no polímero de fármaco a partir da superfícieinterior da estrutura do stent. Em várias modalidades, osreservatórios compreendem canais ao longo de uma superfícieexterior da estrutura do stent. Em várias modalidades, opolímero compreende uma primeira camada de um primeiropolímero de fármaco que possui uma primeira característicafarmacêutica, e a camada de polímero compreende um segundopolímero de fármaco que possui uma segunda característicafarmacêutica. Em certas modalidades, o stent aindacompreende uma camada de barreira posicionada entre opolímero que compreende o agente ativo. Em váriasmodalidades, um cateter pode ser ligado à estrutura dostent. Em certas modalidades, o cateter pode incluir umbalão usado para expandir o stent. Em certas modalidades, ocateter inclui uma bainha que se retrai para permitir aexpansão do stent.
Também é fornecido um método de manufatura de um stentde fármaco-polímero. 0 método tipicamente envolve ofornecimento de uma estrutura do stent; o corte de diversosreservatórios na estrutura do stent; a aplicação de umacomposição que compreende um ou mais peptídeos quecompreendem uma seqüência de aminoácidos ou uma seqüênciade retro-aminoácidos de um peptídeo listado em qualquer umadas Tabelas 2-18 a pelo menos um reservatório; e secagem dacomposição. O método pode ainda envolver a aplicação de umacamada de polímero à composição seca; e a secagem da camadade polímero.
Esta invenção também fornece um método de tratamentode uma condição vascular. 0 método envolve o posicionamentode um stent como descrita acima, dentro de um vaso docorpo; a expansão do stent; e a eluição de pelo menos umagente ativo (por exemplo, um agente ativo de qualquer umadas Tabelas 2-18) de pelo menos uma superfície do stent.
Em certas modalidades, esta invenção excluiexpressamente um ou mais dos peptídeos descritos nasPatentes U.S. Nos: 6.037.323, 4.643.988, 6.933.279,6.930.085, 6.664.230, 3.767.040, 6.037. 323; Publicações dePatente U.S. 2005/0164950; 2004/0266671; 2004/0254120;2004/0057871; 2003/0229015; 2003/0191057; 2003/0171277;2003/0045460; 2003/0040505; Publicações PCT WO 2002/15923;WO 1999/16408; WO 1997/36927; e/ou em Garber e cols.(1992)Arteriosclerosis and Thrombosis, 12: 886-894, que são aquiincorporados por referência.
O termo "tratar", quando usado com referência atratamento, por exemplo, de uma patologia ou doença,refere-se à atenuação e/ou eliminação de um ou maissintomas daquela patologia ou doença, e/ou uma redução navelocidade de surgimento ou da gravidade de um ou maissintomas daquela patologia ou doença, e/ou a prevençãodaquela patologia ou doença.
Os termos "isolado", "purificado" ou "biologicamentepuro", quando se referem a um polipeptídeo isolado,referem-se ao material que é substancial ou essencialmentelivre de componentes que normalmente o acompanham, comoencontrado em seu estado nativo. Com relação a ácidosnucléicos e/ou polipeptídeos, o termo pode se referir aosácidos nucléicos ou polipeptídeos que não são maisflanqueados pelas seqüências que tipicamente os flanqueiamna natureza. Polipeptídeos sintetizados quimicamente são"isolados" porque não são encontrados em um estado nativo(por exemplo, no sangue, soro etc.). Em certas modalidades,o termo "isolado" indica que o polipeptídeo não éencontrado na natureza.
Os termos "polipeptídeo", "peptídeo" e "proteína" sãoaqui usados de forma intercambiável para se referirem a umpolímero de resíduos de aminoácidos. Os termos se aplicamaos polímeros de aminoácidos nos quais um ou mais resíduosde aminoácidos são um análogo químico artificial de umaminoácido de ocorrência natural correspondente, além depolímeros de aminoácidos de ocorrência natural.
0 termo "um peptídeo helicoidal anfipático" refere-sea um peptídeo que compreende pelo menos uma héliceanfipática (domínio helicoidal anfipático). Algunspeptídeos helicoidais anfipáticos desta invenção podemcompreender duas ou mais (por exemplo, 3, 4, 5 etc.)hélices anfipáticas.
O termo "hélice anfipática da Classe A" refere-se auma estrutura protéica que forma uma hélice α que produzuma segregação de uma face polar e não polar com osresíduos carregados positivamente residindo na interfacepolar-não polar e os resíduos carregados negativamenteresidindo no centro da face polar (veja, por exemplo,Segrest e cols. (1990) Proteins: Structure, Function, andGenetics 8: 103-117).
A "apolipoproteína J" (apoJ) é conhecida por diversosnomes, incluindo clusterina, TRPM2, GP80 e SP 4 0 (veja, porexemplo, Fritz (1995) Pp 112 Em: Clusterin: Role inVertebrate Development, Function, and Adaptation (HarmonyJAK Ed.), R.G. Landes, Georgetown, TX,). Ela foi descritainicialmente como uma glicoproteína heterodimérica e umcomponente das proteínas secretadas de células de Sertolicultivadas de rato (veja, por exemplo, Kissinger e cols.(1982) Biol. Reprod.; 27: 233-240). 0 produto traduzido éuma proteína precursora de cadeia única que é submetida àclivagem intracelular em uma subunidade α ligada pordissulfeto de 34 kDa e uma subunidade β de 4 7 kDa (veja,por exemplo, Collard e Griswold (1987) Biochew., 26: 3.297-3.303). Ela foi associada à lesão celular, transportelipidico, apoptose, e pode estar envolvida na depuração derestos celulares causados por lesão ou morte celular.
Demonstrou-se que a clusterina se liga a diversas moléculascom alta afinidade, incluindo lipideos, peptideos eproteínas e à sonda hidrofóbica l-anilino-8-naftalenossulfonato (Bailey e cols. (2001) Biochem., 40:11.828-11.840).
A hélice anfipática da classe G é encontrada emproteínas globulares, daí o nome classe G. A característicadessa classe de hélice anfipática é que ela possui umadistribuição aleatória de resíduos carregados positivamentee carregados negativamente na face polar com uma face nãopolar estreita. Por causa da face não polar estreita, essaclasse não se associa facilmente com fosfolipídeos (veja,por exemplo, Segrest e cols. (1990) Proteins: Structure,Function, and Genetics. 8: 103-117; Erratum (1991)Proteins: Structure, Function and Genetics, 9: 79). Váriasapolipoproteínas permutáveis possuem característicassimilares, mas não idênticas, à hélice anfipática G.Similar à hélice anfipática da classe G, essa outra classepossui uma distribuição aleatória de resíduos carregadospositivamente e negativamente na face polar. No entanto, emcontraste com a hélice anfipática da classe G, que tem umaface não polar estreita, essa classe tem uma face não polarampla que permite que essa classe se ligue facilmente aosfosfolipídeos, e a classe é denominada G* para diferenciá-la da hélice anfipática da classe G (veja, por exemplo,Segrest e cols. (1992) J. Lipid Res., 33: 141-166;Anantharamaiah e cols. (1993) Pp. 109-142 Em: TheAmphipathic Helix, Epand, R.M. Ed CRC Press, Boca Raton,Flórida). Foram descritos programas de computador paraidentificar e classificar os domínios helicoidaisanfipáticos por Jones e cols. (1992) J. Lipid Res. 33: 287-296) , e esses incluem, sem limitação, o programa de rodahelicoidal (WHEEL ou WHEEL/SNORKEL), programa de redehelicoidal (HELNET, HELNET/SNORKEL, HELNET/Angle), programapara a adição de rodas helicoidais (COMBO ouCOMBO/SNORKEL), programa para a adição de redes helicoidais(COMNET, COMNET/SNORKEL, COMBO/SELECT, COMBO/NET), programade roda de consenso (CONSENSUS, CONSENSUS/SNORKEL), esemelhantes.
O termo "atenuação", quando usado com relação à"atenuação de um ou mais sintomas de aterosclerose",refere-se a uma redução, prevenção ou eliminação de um oumais sintomas característicos de aterosclerose e/oupatologias associadas. Uma redução como essa inclui, semlimitação, uma redução ou eliminação de fosfolipídeosoxidados, uma redução na formação e ruptura de placaaterosclerótica, uma redução nas intercorrências clínicas,tais como ataque cardíaco, angina ou acidente vascularencefálico, uma diminuição da hipertensão, uma diminuiçãoda biossíntese de proteínas inflamatórias, redução docolesterol plasmãtico, e semelhantes.
O termo "aminoácidos enantioméricos" refere-se aosaminoácidos que podem existir em pelo menos duas formas quesão imagens especulares não superponíveis entre elas. Amaioria dos aminoácidos (exceto glicina) é enantiomérica eexiste na denominada forma L (L-aminoácido) ou forma D (D-aminoácido). A maioria dos aminoácidos de ocorrêncianatural é formada por "L" aminoácidos. Os termos uD-aminoácido" e "L-aminoácido" são usados pra se referirem àconfiguração absoluta do aminoácido, e não uma direção derotação em particular da luz plano-polarizada. 0 uso nestaespecificação é consistente com o uso padrão por aqueleshabilitados na técnica. Os aminoácidos são aqui designadoscom o uso de códigos-padrão de 1 letra ou de três letras,por exemplo, como designado em "Standard ST.25" no"Handbook On Industrial Property Information andDocumentation".
0 termo "grupo de proteção" refere-se a um grupoquímico que, quando anexado a um grupo funcional em umaminoácido (por exemplo, uma cadeia lateral, um grupo aminoalfa, um grupo carboxil alfa etc.), bloqueia ou mascara aspropriedades daquele grupo funcional. Grupos de proteção doterminal amino preferidos incluem, sem limitação, gruposacetil ou amino. Outros grupos de proteção do terminalamino incluem, sem limitação, cadeias alquil como em ácidosgraxos, propeonil, formil e outros. Grupos de proteção doterminal carboxil preferidos incluem, sem limitação, osgrupos que formam amidas ou ésteres.
A frase "protege um fosfolipídeo da oxidação por umagente oxidante" refere-se à capacidade de um composto dereduzir a taxa de oxidação de um fosfolipídeo (ou aquantidade de fosfolipídeo oxidado produzida) quando aquelefosfolipídeo é colocado em contato com um agente oxidante(por exemplo, peróxido de hidrogênio, 13-(S)-HPODE,15-(S) -HPETE, HPODE, HPETE, HODE, HETE etc.).
0 termo "lipoproteína de baixa densidade" ou "LDL" édefinido de acordo com o uso comum daqueles habilitados natécnica. Geralmente, LDL refere-se ao complexo lipídeo-proteína que, quando isolado por ultracentrifugação, éencontrado da faixa de densidade d = 1,019 a d = 1,063.
O termo "lipoproteína de alta densidade" ou "HDL" édefinido de acordo com o uso comum daqueles habilitados natécnica. Geralmente, "HDL" refere-se a um complexo lipídeo-proteína que, quando isolado por ultracentrifugação, éencontrado na faixa de densidade de d = 1,063 a d = 1,21.
O termo "HDL do Grupo I" refere-se a uma lipoproteínade alta densidade, ou componentes desta, (por exemplo,apoA-I, paraoxonase, fator de ativação plaquetáriaacetilhidrolase etc.) que reduz lipídeos oxidados (porexemplo, em lipoproteinas de baixa densidade) ou queprotege lipídeos oxidados da oxidação por agentesoxidantes.
0 termo "HDL do Grupo II" refere-se a um HDL queoferece atividade reduzida ou nenhuma atividade na proteçãode lipídeos da oxidação ou no reparo (por exemplo, redução)de lipídeos oxidados.
0 termo "componente de HDL" refere-se a um componente(por exemplo, moléculas) que compreende uma lipoproteína dealta densidade (HDL). Ensaios para HDL que protegemlipídeos da oxidação ou que reparam (por exemplo, reduzemos lipídeos oxidados) também incluem ensaios paracomponentes de HDL (por exemplo, apoA-I, paraoxonase, fatorde ativação plaquetária acetilhidrolase etc.) que exibemtal atividade.
O termo "peptídeo apoA-I humano" refere-se a umpeptídeo apoA-I humano de comprimento total ou a umfragmento ou domínio deste que compreende uma héliceanfipática da Classe A.
Uma "reação monocítica", como aqui usada, refere-se àatividade de monócito característica da "respostainflamatória" associada à formação da placaaterosclerótica. A reação monocítica é caracterizada pelaadesão de monócitos às células da parede vascular (porexemplo, células do endotélio vascular) , e/ou quimiotaxiano espaço subendotelial e/ou diferenciação de monócitos emmacrófagos.
O termo "ausência de alteração", quando se refere àquantidade de fosfolipídeo oxidado, refere-se à ausência deuma alteração detectável, mais preferivelmente à ausênciade uma alteração estatisticamente significativa (porexemplo, pelo menos no nível de confiança de 85%,preferivelmente pelo menos 90%, mais preferivelmente pelomenos 95% e, principalmente, pelo menos 98% ou 99%) . Aausência de uma alteração detectável também pode se referiraos ensaios nos quais o nível de fosfolipídeo oxidado sealtera, mas não tanto quanto na ausência da(s) proteína(s)aqui descrita ou com referência a outros controlespositivos ou negativos.
As seguintes abreviações podem ser aqui usadas: PAPC:L-a-l-palmitoil-2-araquidonoil-sn-glicero-3-fosfocolina;
POVPC: 1-palmitoil-2 -(5-oxovaleril)-sn-glicero-3-fosfocolina; PGPC: l-palmitoil-2-glutaril-sn-glicero-3-fosfocolina; PEIPC: l-palmitoil-2-(5,6-epoxiisoprostanoE2)-sn-glicero-3-fosfocolina; ChC18:2: colesterillinoleato; ChC18:2-OOH: colesteril linoleato hidroperóxido;DMPC: 1,2-ditetradecanoil-rac-glicerol-3-fosfocolina; PON:paraoxonase; HPF: campo padronizado de grande aumento;PAPC: L-a-1-palmitoil-2-araquidonoil-sn-glicero-3 -fosfocolina; BL/6: C57BL/6J; C3H:C3H/HeJ.
O termo "substituição conservadora" é usado comreferência às proteínas ou aos peptídeos para refletirsubstituições de aminoácidos que não alteramsubstancialmente a atividade (especificidade (por exemplo,para lipoproteínas)) ou afinidade de ligação (por exemplo,para lipídeos ou lipoproteínas) da molécula. Tipicamente,substituições conservadoras de aminoácidos envolvem asubstituição de um aminoácido por outro aminoácido compropriedades químicas similares (por exemplo, carga ouhidrofobicidade). Cada um dos seis grupos seguintes contémaminoácidos que são substituições conservadoras típicas unspara os outros: 1) Alanina (A), Serina (S), Treonina (T);2) Ácido aspártico (D) , Ácido glutâmico (E); 3) Asparagina(N)7 Glutamina (Q); 4) Arginina (R), Lisina (K); 5)Isoleucina (I) , Leucina (L) , Metionina (M), Valina (V) ; e6) Fenilalanina (F), Tirosina (Y), Triptofano (W).
Os termos "idênticos" ou percentual de "identidade",no contexto de duas ou mais seqüências de ácidos nucléicosou de polipeptídeos, referem-se a duas ou mais seqüênciasou subseqüências que são iguais ou possuem uma percentagemespecificada de resíduos de aminoácidos ou de nucleotídeosque são iguais, quando comparadas e alinhadas para umacorrespondência máxima, como medido com o uso de um dosseguintes algoritmos de comparação de seqüências ou porinspeção visual. Com relação aos peptídeos desta invenção,a identidade de seqüências é determinada ao longo docomprimento total do peptídeo.Para a comparação de seqüências, tipicamente umaseqüência atua como uma seqüência de referência, para aqual são comparadas seqüências de teste. Quando se utilizaum algoritmo de comparação de seqüências, seqüências deteste e de referência são inseridas em um computador, sãoatribuídas coordenadas de subseqüências, se necessário, esão atribuídos os parâmetros do programa de algoritmo deseqüências. 0 algoritmo de comparação de seqüências entãocalcula o percentual de identidade de seqüências para a(s)seqüência(s) de teste em relação à seqüência de referência,com base nos parâmetros atribuídos ao programa.
O alinhamento ótimo de seqüências para a comparaçãopode ser realizado, por exemplo, pelo algoritmo dehomologia local de Smith & Waterman, Adv. Appl. Math. 2:482 (1981), pelo algoritmo de alinhamento de homologia deNeedleman & Wunsch, J. Mol. Biol. 48: 443 (1970), pelométodo de pesquisa de similaridade de Pearson & Lipman(1988) Proc. Natl. Acad. Sei. USA 85: 2.444, porimplementações computadorizadas desses algoritmos (GAP,BESTFIT, FASTA e TFASTA na suíte de programas "WisconsinGenetics", Genetics Computer Group, 575 Science Dr.,Madison, WI) , ou por inspeção visual (veja, de forma geral,Ausubel e cols., supra).
Um exemplo de um algoritmo útil é PILEUP. PILEUP criaum alinhamento múltiplo de seqüências a partir de um grupode seqüências relacionadas usando alinhamentos pareadosprogressivos, para mostrar o relacionamento e o percentualde identidade de seqüências. Ele também organiza uma árvoreou dendograma que mostra os relacionamentos agrupadosusados para criar o alinhamento. PILEUP utiliza umasimplificação do método de alinhamento progressivo de Feng& Doolittle (1987) J. Mol. Evol. 35: 351-360. 0 métodousado é similar ao método descrito por Higgins & Sharp(1989) CABIOS 5: 151-153. 0 programa pode alinhar até 300seqüências, cada uma delas com um comprimento máximo de5.000 nucleotldeos ou aminoácidos. 0 procedimento dealinhamento múltiplo começa com o alinhamento pareado dasduas seqüências mais similares, produzindo um agrupamentode duas seqüências alinhadas. Esse agrupamento é entãoalinhado com a seqüência ou com o agrupamento de seqüênciasalinhadas seguinte mais relacionado. Dois agrupamentos deseqüências são alinhados por uma extensão simples doalinhamento pareado de duas seqüências individuais. 0alinhamento final é obtido por uma série de alinhamentospareados progressivos. 0 programa é executado atribuindo-seseqüências específicas e suas coordenadas de aminoácidos ounucleotldeos para regiões de comparação de seqüências, eatribuindo-se os parâmetros do programa. Por exemplo, umaseqüência de referência pode ser comparada com outrasseqüências de teste para determinar o percentual derelacionamento de identidade de seqüências com o uso dosseguintes parâmetros: peso da lacuna-padrão (grap) (3,00),peso do comprimento-padrão da lacuna (0,10) e lacunasfinais ponderadas.
Outro exemplo de algoritmo adequado para adeterminação do percentual de identidade de seqüências e desimilaridade de seqüências é o algoritmo BLAST, que édescrito em Altschul e cols. (1990) J. Mol. Biol. 215: 403-410. O programa de computador para a realização de análisesBLAST é disponível publicamente através do "National Centerfor Biotechnology Information" em(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/). Esse algoritmo envolveinicialmente a identificação de pares de seqüências de altapontuação (HSPs) pela identificação de palavras curtas decomprimento W na seqüência pesquisada, que combina ousatisfaz um limiar de pontuação de valor positivo T quandoalinhada com uma palavra do mesmo comprimento em umaseqüência da base de dados. T é considerado como sendo olimiar de pontuação de palavra vizinho (Altschul e cols.,supra). Essas combinações iniciais de palavra vizinha atuamcomo sementes para o início de pesquisas para encontrarHSPs mais longas que as contenham. As combinações depalavras são então estendidas em ambas as direções ao longode cada seqüência pelo máximo que a pontuação cumulativa dealinhamento puder ser aumentada. As pontuações cumulativassão calculadas usando, para seqüências nucleotídicas, osparâmetros M (pontuação de recompensa para um par deresíduos combinados; sempre > 0) e N (pontuação depenalidade para resíduos que não combinam; sempre < 0).
Para seqüências de aminoácidos, é utilizada uma matriz depontuação para calcular a pontuação cumulativa. A extensãodas combinações de palavras em cada direção é interrompidaquando: a pontuação cumulativa de alinhamento cai além daquantidade X do seu valor máximo obtido; a pontuaçãocumulativa cai a zero ou menos, em função do acúmulo de umou mais alinhamentos de resíduos com pontuação negativa; ouaté o final de uma das seqüências ser alcançado. Osparâmetros W, T, e X do algoritmo BLAST determinam asensibilidade e a velocidade do alinhamento. 0 programaBLA.STN (para seqüências nucleotídicas) usa como padrão umcomprimento de palavra (W) de 11, uma expectativa (E) de10, M= 5, N= -4, e uma comparação de ambas as fitas. Paraseqüências de aminoácidos, o programa BLASTP utiliza comopadrão um comprimento de palavra (W) de 3, uma expectativa(E) de 10, e a matriz de pontuação BLOSUM62 (veja Henikoff& Henikoff (1989) Proc. Natl. Acad. Sei. USA 89: 10.915).
Além de calcular o percentual de identidade deseqüências, o algoritmo BLAST também efetua uma análiseestatística da similaridade entre duas seqüências (veja,por exemplo, Karlin & Altschul (1993) Proc. Natl. Acad.Sei. USA, 90: 5.873-5.787). Uma medida da similaridadefornecida pelo algoritmo BLAST é a menor probabilidade desoma (P(N)) que fornece uma indicação da probabilidade pelaqual uma combinação entre duas seqüências de nucleotídicasou de aminoácidos ocorreria ao acaso. Por exemplo, um ácidonucléico é considerado similar a uma seqüência dereferência se a menor probabilidade de soma em umacomparação do ácido nucléico de teste para o ácido nucléicode referência é menor do que cerca de 0,1, maispreferivelmente menor do que cerca de 0,01 e,principalmente, menor do que cerca de 0,001.
A frase "em conjunto com", quando usada em relação aouso de um ou mais fármacos em conjunto com um ou maisagentes ativos aqui descritos, indica que o(s) fármaco(s) eo(s) agente(s) ativo(s) são administrados de forma que hajapelo menos alguma superposição cronológica em sua atividadefisiológica sobre o organismo. Dessa forma, o(s) fármaco(s)e o(s) agente(s) ativo(s) podem ser administradossimultânea e/ou seqüencialmente. Na administraçãoseqüencial, pode até mesmo haver algum retardo substancial(por exemplo, minutos ou até mesmo horas ou dias), antes daadministração da segunda porção, desde que o primeirofármaco/agente administrado tenha exercido alguma alteraçãofisiológica sobre o organismo quando o segundo agenteadministrado for administrado ou se tornar ativo noorganismo.
As frases "adjacentes uns aos outros em um diagrama deroda helicoidal de um peptídeo", "contíguos em um diagramade roda helicoidal de um peptídeo", quando se referem aosresíduos em um peptídeo helicoidal, indicam que, narepresentação da roda helicoidal, os resíduos aparecemadjacentes ou contíguos, embora possam não estar adjacentesou contíguos no peptídeo linear. Dessa forma, por exemplo,os resíduos "A, Ε, K, W, Ke F" são contíguos nos diagramasda roda helicoidal mostrados na Figura 15, embora essesresíduos não sejam contíguos no peptídeo linear.
BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS
A Figura 1 mostra a comparação do efeito de D4F(Navab, e cols. (2002) Circulation, 105: 290-292) epeptídeo apo-J 336 feita a partir de D-aminoácidos (D-J336*) sobre a prevenção de atividade quimiotática demonócitos induzida por LDL in vitro em um experimento deco-incubação. Os dados são a média ± DP (desvio padrão) donúmero de monócitos migrados em nove campos de grandeaumento em culturas quádruplas. (D-7336 = Ac-LLEQLNEQFNWVSRLANLTQGE - NH2, ID. DE SEQ. N°: 1).
A Figura 2 ilustra a prevenção da atividadequimiotática de monócitos induzida por LDL por pré-tratamento das células da parede arterial com D-J336,comparado com D-4F. Os dados são a média ± DP do número demonócitos migrados em nove campos de grande aumento emculturas quádruplas.
A Figura 3 ilustra o efeito de miméticos do peptídeoapoJ sobre a capacidade protetora do HDL em camundongosnull para o receptor de LDL. Os valores são a média ± DP donúmero de 30 monócitos migrados em 9 campos de grandeaumento de cada um dos poços do ensaio quádruplo.
A Figura 4 ilustra a proteção contra atividadequimiotática de monócitos induzida por LDL por HDL decamundongos null para apoE que receberam peptídeos orais.
Os valores são a média ± DP do número de monócitos migradosem 9 campos de grande aumento de cada um dos poços doensaio quádruplo. Os asteriscos indicam diferençasignificante (p<0,05) comparada com Sem Peptideo mHDL.
A Figura 5 ilustra o efeito de mimético de peptídeoapoA-1 e peptídeo apoJ oral sobre suscetibilidade de LDL àoxidação. Os valores são a média ± DP do número demonócitos migrados em 9 campos de grande aumento de cada umdos poços do ensaio quádruplo. Os asteriscos indicamdiferença significante (p<0,05) comparada com Sem PeptídeoLDL.
A Figura 6 ilustra o efeito de mimético de peptídeoapoA-1 e peptídeo apoJ oral sobre a capacidade protetora deHDL. Os valores são a média ± DP do número de monócitosmigrados em 9 campos de grande aumento de cada um dos poçosdo ensaio quádruplo. Os asteriscos indicam diferençasignificante (p<0,05) comparada com Sem Peptídeo mHDL.
A Figura 7 ilustra o efeito de mimético de peptídeoapoA-1 e peptídeo apoJ oral sobre a atividade deparaoxonase plasmática. Os valores são a média ± DP deleituras de alíquotas quádruplas de plasma. Os asteriscosindicam diferenças significantes (p<0,05) comparadas complasma de controle Sem Peptídeo.
A Figura 8 mostra o efeito de peptídeos G* orais sobrea capacidade protetora do HDL em camundongos ApoE -/-. Osvalores são a média ± DP de leituras de alíquotasquádruplas de plasma. Os asteriscos indicam diferençassignificantes (p<0,05) comparadas com plasma de controleSem peptídeo.
A Figura 9 mostra o efeito de peptídeo G* oral, 146-156, sobre a capacidade protetora de HDL em camundongosApoE-/-.
As Figuras IOA a IOC ilustram diagramas da rodahelicoidal de alguns peptídeos desta invenção. Figura 10A:V2W3A5F10'17 -D-4F; Figura IOB : W3-D-4F; Figura 10C: V2W3F10-D-4F.
Figura 11. Um LDL humano padrão (LDL) foi adicionado aco-culturas de parede arterial humana sem (Sem adição) oucom HDL humano (+ HDL de Controle) ou com HDL de camundongode camundongos null para apoE que receberam Ração de um diapara o outro (+HDL na Ração) , ou que receberam D-4F naração de um dia para o outro (+ HDL D4F) , ou que receberamG5-D-4F na ração de um dia para o outro (+ HDL G5) , ou quereceberam G5,10-D-4F na ração de um dia para o outro (+HDL5-10), ou que receberam G5,11-D-4F na ração de um dia parao outro (+HDL 5-11), e a atividade quimiotática demonócitos resultante foi determinada como descritopreviamente (Navab e cols. (2002) Circulation, 105: 290-292).
A Figura 12 mostra que peptídeos desta invenção sãoeficazes na atenuação de sintomas de diabetes (por exemplo,glicemia). Ratos Zucker obesos com 26 semanas de idadetiveram o sangue coletado e depois foram tratados cominjeções intraperitoneais diárias de D-4F (5,0 mg/kg/dia).
Após 10 dias, os ratos foram submetidos novamente a umacoleta de sangue e foi determinada a glicose plasmática eos hidroperóxidos lipidicos (LOOH). *p=0,027; ** p=0,0017.
Figura 13. Ratos Zucker obesos com 16 semanas de idadeforam injetados com D-4F (5 mg/kg/dia) por 1 semana, quandoentão foram submetidos a uma lesão por balão na artériacarótida comum. Duas semanas mais tarde, os ratos foramsacrificados, e foi determinada a proporção média daintima.
A Figura 14 demonstra que o produto do esquema desintese da fase em solução é muito biologicamente ativo naprodução de HDL e pré-beta HDL que inibem a quimiotaxia demonócitos induzida por LDL em camundongos null para apoE.Camundongos null para ApoE foram alimentados com 5microgramas do D-4F sintetizado como descrito acima(Frgmnt) ou os camundongos receberam a mesma quantidade deração de camundongo sem D-4F (Ração) . Doze horas após aalimentação ter começado, os camundongos foram sangrados eseu plasma foi fracionado em FPLC. LDL (100 microgramas deLDL-colesterol) foi adicionado às co-culturas de células daparede arterial humana isoladamente (LDL) ou com um HDLhumano de controle (HDL de Controle) ou com HDL (50microgramas de HDL-colesterol) ou pós-HDL (pHDL; pré-betaHDL) de camundongos que receberam (Frgmnt) ou não receberam(Ração) o D-4F, e foi determinada a atividade quimiotáticade monócitos produzida.A Figura 15 ilustra uma representação da rodahelicoidal de 4F e 4F reverso (retro) . 4F reverso é umaimagem especular de 4F com as posições relativas dosaminoácidos entre eles e em relação às faces hidrofílicas ehidrofóbicas que são idênticas.
A Figura 16 mostra uma comparação do índiceinflamatório de HDL de D-4F versus D-4F reverso.
DESCRIÇÃO DETALHADA
I. Métodos de tratamento.
Os agentes ativos (por exemplo, peptídeos, pequenasmoléculas orgânicas, pares de aminoácido etc.) aquidescritos são eficazes para a atenuação de um ou maissintomas e/ou para a redução da velocidade de surgimentoe/ou da gravidade de uma ou mais indicações aqui descritas.
Em particular, os agentes ativos (por exemplo, peptídeos,pequenas moléculas orgânicas, pares de aminoácido etc.)aqui descritos são eficazes para a atenuação de um ou maissintomas de aterosclerose. Sem se prender a uma teoriaespecífica, acredita-se que os peptídeos se ligam às"moléculas de semeadura" necessárias para a formação defosfolipídeos oxidados pró-inflamatórios, tais como Ox-PAPC, POVPC, PGPC e PEIPC.
Além disso, uma vez que muitas condições inflamatóriase/ou outras patologias são mediadas pelo menos em parte porlipídeos oxidados, acreditamos que os peptídeos destainvenção são eficazes na melhora das condições que sãocaracterizadas pela formação de lipídeos oxidadosbiologicamente ativos. Além disso, há várias outrascondições para as quais os agentes ativos aqui descritosparecem ser eficazes.Serão descritas abaixo diversas patologias para asquais os agentes ativos aqui descritos parecem ser umpaliativo e/ou um preventivo.
A) Aterosclerose e patologias associadas.
Descobrimos que o HDL normal inibe três etapas naformação de LDL levemente oxidado. Em particular,demonstramos que o tratamento do LDL humano in vitro com umpeptideo apoA-I ou um mimético de peptideo apoA-I (37pA)removia moléculas de semeadura do LDL que incluíam HPODE eHPETE. Essas moléculas de semeadura eram necessárias paraque co-culturas de células da parede arterial humana fossemcapazes de oxidar LDL e para que o LDL induzisse as célulasda parede arterial a produzir atividade quimiotática demonócitos. Também demonstramos que, após injeção de apoA-Iem camundongos ou infusão em seres humanos, o LDL isoladodos camundongos ou de voluntários humanos apósinjeção/infusão de apoA-I era resistente à oxidação porcélulas da parede arterial humana e não induzia atividadequimiotática de monócitos em co-culturas de células daparede arterial.
A função protetora de vários agentes ativos destainvenção é ilustrada nos pedidos parentes (09/645.454,depositado em 24 de agosto de 2000, 09/896.841, depositadoem 29 de junho de 2001 e WO 02/15923 (PCT/US01/26497) ,depositado em 29 de junho de 2001, veja, por exemplo,Figuras 1-5 em WO 02/15923) . A Figura 1, painéis A, B, CeD em WO 02/15923, mostra a associação de 14C-D-5F comcomponentes sangüíneos em um camundongo null para ApoE.Também é demonstrado que HDL de camundongos que foramalimentados com uma dieta aterogênica e injetados com PBSnão inibiram a oxidação de LDL humano e não inibiram aatividade quimiotática de monócitos induzida por LDL em co-culturas da parede arterial humana. Em contraste, HDL decamundongos alimentados em uma dieta aterogênica einjetados diariamente com os peptídeos aqui descritos eratão eficaz na inibição da oxidação do LDL humano e naprevenção da atividade quimiotática de monócitos induzidapor LDL nas co-culturas quanto foi o HDL humano normal(Figuras 2A e 2B em WO 02/15923) . Além disso, o LDLretirado de camundongos alimentados com a dieta aterogênicae injetados diariamente com PBS era oxidado mais facilmentee induzia mais facilmente atividade quimiotática demonócitos do que o LDL retirado de camundongos alimentadoscom a mesma dieta, mas injetados com 20 pg diariamente depeptídeo 5F. 0 peptideo D não pareceu ser imunogênico(Figura 4 em WO 02/15923).
As respostas in vitro de células da parede arterialhumana ao HDL e LDL de camundongos alimentados com a dietaaterogênica e injetados com um peptídeo de acordo com estainvenção são consistentes com a ação protetora exibida portais peptídeos in vivo. Apesar dos níveis similares decolesterol total, LDL-colesterol, colesterol IDL + VLDL eHDL-colesterol inferior como um percentual do colesteroltotal, os animais alimentados com a dieta aterogênica einjetados com o peptídeo tiveram pontuações de lesãosignificativamente menores (Figura 5 em WO 02/15923). Dessaforma, os peptídeos desta invenção evitaram a progressão delesões ateroscleróticas em camundongos alimentados em umadieta aterogênica.
Dessa forma, em uma modalidade, esta invenção fornecemétodos para atenuação e/ou prevenção de um ou maissintomas de aterosclerose por administração de um ou maisdos agentes ativos aqui descritos.
Observa-se também que a proteína C-reativa, ummarcador para inflamação, está elevada na insuficiênciacardíaca congestiva. Além disso, na insuficiência cardíacacongestiva, há um acúmulo de espécies reativas ao oxigênioe anormalidades vasomotoras. Por causa de seus efeitos naprevenção/redução da formação de várias espécies oxidadase/ou por causa de seu efeito na melhora da reatividadevascular e/ou da função arteriolar (veja abaixo), osagentes ativos aqui descritos serão eficazes no tratamentode insuficiência cardíaca congestiva.
B) Indicações arteriolares/vasculares.
Vasos menores até mesmo do que as menores artérias (ouseja, arteríolas) se espessam, se tornam disfuncionais ecausam danos aos órgãos finais a tecidos tão distintosquanto o cérebro e o rim. Acredita-se que os agentes ativosaqui descritos podem funcionar para melhorar a estrutura efunção arteriolar e/ou tornar mais lenta a velocidade e/oua gravidade da disfunção arteriolar. Sem se prender a umateoria específica, acredita-se que a disfunção arteriolarseja um fator causai em vários distúrbios cerebrais erenais. Dessa forma, o uso dos agentes aqui descritosfornece um método para melhorar a estrutura e a função dearteríolas e preservar a função de órgãos finais, tais comoo cérebro e os rins.
Dessa forma, por exemplo, espera-se que aadministração de um ou mais dos agentes ativos aquidescritos reduza um ou mais sintomas ou torne mais lento osurgimento ou a gravidade de doença arteriolar associada aoenvelhecimento e/ou doença de Alzheimer e/ou doença deParkinson e/ou com demência multienfartos e/ou hemorragiasubaracnóide, e semelhantes. Do mesmo modo, espera-se que aadministração de um ou mais agentes aqui descritos alivieum ou mais sintomas e/ou torne mais lento o surgimento e/oua gravidade de doença renal crônica e/ou hipertensão.
Do mesmo modo, os agentes aqui descritos parecemmelhorar a reatividade vascular. Por causa da melhora dareatividade vascular e/ou da função arteriolar, os agentesaqui descritos são adequados para o tratamento de doençavascular periférica, disfunção erétil, e semelhantes.
C) Indicações pulmonares.
Os agentes aqui descritos também são adequados para otratamento de diversas indicações pulmonares. Essasincluem, sem limitação, doença pulmonar obstrutiva crônica(DPOC), enfisema, doença pulmonar, asma, fibrose pulmonaridiopática, e semelhantes.
D) Atenuação de um sintoma ou condição associada àcalcificação coronária e à osteoporose.
A calcificação vascular e a osteoporose freqüentementecoexistem nos mesmos indivíduos (Ouchi e cols. (1993) Ann.NY Acad. Sci., 676: 297-307; Boukhris e Becker (1972) JAMA,219: 1.307-1.311; Banks e cols. (1994) Eur. J. Clin.Invest., 24: 813-817; Laroche e cols. (1994) Clin.Rheumatol., 13: 611-614; Broulik e Kapitola (1993) Endocr.Regul., 27: 57-60; Frye e cols. (1992) Bone Mine., 19: 185-194; Barengolts e cols. (1998) Calcif. Tissue Int., 62:209-213; Burnett e Vasikaran (2002) Ann. Clin. Biochem.,39: 203-210. Parhami e cols. (1997) Arterioscl. Thromb.Va.sc. Biol., 17: 680-687, demonstraram que o LDL levementeoxidado (MM-LDL) e os lipídeos biologicamente ativos em MM-LDL (ou seja, l-palmitoil-2-araquidonoil-sn-glicero-3-fosforilcolina oxidada) (Ox-PAPC)), além do isoprostano, 8-isoprostaglandina E2, mas não o fosfolipideo não oxidado(PAPC) ou isoprostano 8-isoprostaglandina F2a, induziamatividade de fosfatase alcalina e diferenciaçãoosteoblástica de células vasculares em calcificação (CVCs)in vitro, mas inibiam a diferenciação de células ósseasMC3T3-El.
0 ósteon se parece com a parede arterial, pelo fato deque o ósteon é centrado em um lúmen revestido por célulasendoteliais circundado por um espaço subendotelial quecontém matriz e células semelhantes a fibroblastos, osquais, por sua vez, são circundados por pré-osteoblastos eosteoblastos que ocupam uma posição análoga às células demúsculo liso na parede arterial (Id.). Os osteoblastos doosso trabecular também têm uma interface com os espaçossubendoteliais da medula óssea (Id.). Parhami e cols.postularam que as lipoproteinas poderiam atravessar oendotélio de artérias ósseas e se depositar no espaçosubendotelial, onde seriam submetidas à oxidação comoocorre nas artérias coronárias (Id.). Com base em seusdados in vitro, eles previram que a oxidação do LDL noespaço subendotelial de artérias ósseas e na medula óssealevaria à diferenciação osteoblástica reduzida emineralização que contribuiriam para a osteoporose (Id.).Sua hipótese ainda previa que os níveis de LDL estariampositivamente correlacionados com a osteoporose da mesmaforma que estão com a calcificação coronária (Pohle e cols.(2001) Circulation, 104: 1.927-1.932), mas os níveis de HDLestariam negativamente correlacionados com a osteoporose(Parhami e cols. (1997) Arterioscl. Thromb. Vasc. Biol.,17: 680-687).
In vitro, a diferenciação osteoblástica da linhagemcelular do estroma de medula M2-10B4 era inibida por MM-LDL, mas não por LDL nativo (Parhami e cols. (1999) J. BoneMiner. Res., 14: 2.067-2.078). Quando células estromais damedula de camundongos C57BL/6 (BL6) suscetíveis àaterosclerose alimentados com uma dieta de ração baixa emgorduras eram cultivadas, havia uma forte diferenciaçãoosteogênica (Id.). Em contraste, quando as célulasestromais da medula retiradas dos camundongos após umadieta aterogênica rica em gordura eram cultivadas, eles nãopassavam por diferenciação osteogênica (Jd.). Essaobservação é particularmente importante, uma vez que elafornece uma possível explicação para o potencialosteogênico diminuído de células estromais da medula nodesenvolvimento de osteoporose (Nuttall e Gimble (2000)Bone, 27: 177-184). In vivo, a diminuição do potencialosteogênico é acompanhada por um aumento da adipogênese noosso osteoporótico (Id.).
Verificou-se que a adição de D-4F à água de beber decamundongos null para apoE por 6 semanas aumentavadramaticamente a densidade mineral do osso trabecular, eacredita-se que os outros agentes ativos desta invençãoagirão da mesma forma.
Nossos dados indicam que a osteoporose pode serconsiderada como uma "aterosclerose do osso". Ela pareceser o resultado da ação de lipídeos oxidados. O HDL destróiesses lipídeos oxidados e promove a diferenciaçãoosteoblástica. Nossos dados indicam que a administraçãodo(s) agente(s) ativo (s) desta invenção a um mamífero (porexemplo, na água de beber de camundongos null para apoE)aumenta dramaticamente o osso trabecular em questão desemanas.
Isso indica que os agentes ativos aqui descritos sãoúteis para a atenuação de um ou mais sintomas deosteoporose (por exemplo, para a inibição dedescalcificação) ou para a indução de recalcificação doosso osteoporótico. Os agentes ativos também são úteis comoprofiláticos para evitar o surgimento de sintomas deosteoporose em um mamífero (por exemplo, um paciente sobrisco para osteoporose).
Acreditamos que mecanismos similares sejam uma causade calcificação coronária, por exemplo, estenose aórticacalcifiçada. Dessa forma, em certas modalidades, estainvenção contempla o uso dos agentes ativos aqui descritospara inibir ou evitar um sintoma de uma doença como, porexemplo, calcificação coronária, estenose aórticacalcifiçada, osteoporose, e semelhantes.
E) Indicações inflamatórias e autoimunes.
Condições inflamatórias e/ou autoimunes crônicastambém são caracterizadas pela formação de diversasespécies reativas ao oxigênio e são passíveis de tratamentocom o uso de um ou mais dos agentes ativos aqui descritos.Dessa forma, sem se prender a uma teoria específica, tambémacreditamos que os agentes ativos aqui descritos são úteis,profilática ou terapeuticamente, para atenuar o surgimentoe/ou um ou mais sintomas de várias outras condições queincluem, sem limitação, artrite reumatóide, lúpuseritematoso, poliarterite nodosa, polimialgia reumática,esclerodermia, esclerose múltipla, e semelhantes.
Em certas modalidades, os agentes ativos são úteis naatenuação de um ou mais sintomas causados ou associados auma resposta inflamatória nessas condições.
Além disso, em certas modalidades, os agentes ativossão úteis na atenuação de um ou mais sintomas causados ouassociados a uma resposta inflamatória associada à AIDS.
F) Infecções/trauma/transplantes.
Observamos que uma conseqüência da infecção porinfluenza e de outras infecções é a diminuição na atividadede paraoxonase e da acetilhidrolase de ativação plaquetáriano HDL. Sem se prender a uma teoria específica, acreditamosque, em conseqüência da perda dessas atividades enzimáticasdo HDL e também como resultado da associação de proteínaspró-oxidantes com o HDL durante a resposta da fase aguda,HDL não seja mais capaz de evitar a oxidação do LDL e nãoseja mais capaz de evitar a produção de atividadequimiotática de monócitos induzida por LDL por célulasendoteliais.
Observamos que, em um indivíduo injetado com dosagensmuito baixas de certos agentes desta invenção (por exemplo,20 microgramas para camundongos) diariamente após infecçãocom o vírus da influenza A, os níveis de paraoxonase nãocaiam e os fosfolipídeos oxidados biologicamente ativos nãosejam gerados além dos níveis de fundo. Isso indica que 4F,D4F (e/ou outros agentes desta invenção) podem seradministrados (por exemplo, oralmente ou por injeção) aospacientes (incluindo, por exemplo, com doença arterialcoronariana conhecida durante infecção por influenza ououtros eventos que possam gerar uma resposta inflamatóriada fase aguda, por exemplo, em conseqüência de infecçãoviral, infecção bacteriana, trauma, transplante, váriascondições autoimunes etc.) e, dessa forma, podemos evitar,por esse tratamento de curto prazo, a incidência aumentadade ataque cardíaco e acidente vascular encefálico associadaàs patologias que geram estados inflamatórios como esses.
Além disso, restaurando-se e/ou mantendo-se os níveisde paraoxonase e/ou a atividade de monócitos, os agentesdesta invenção são úteis no tratamento de infecção (porexemplo, infecção viral, infecção bacteriana, infecçãofúngica) e/ou das patologias inflamatórias associadas àinfecção (por exemplo, meningite) e/ou trauma.
Em certas modalidades, em função da atividadeantiinflamatória e da atividade antiinfecciosa combinadas,os agentes aqui descritos também são úteis no tratamento deuma ferida ou de outro trauma, reduzindo os efeitosadversos associados aos transplantes de órgãos ou tecidos,e/ou rejeição de transplantes de órgãos ou tecidos e/oupróteses implantadas e/ou aterosclerose em transplantese/ou formação de biopelícula. Além disso, acreditamos queL-4F, D-4F e/ou outros agentes aqui descritos também sãoúteis na atenuação dos efeitos de lesões da medulavertebral.
G) Diabetes e condições associadas.
Observou-se também que vários agentes ativos aquidescritos exibem eficácia na redução e/ou prevenção de umou mais sintomas associados ao diabetes. Dessa forma, emvárias modalidades, esta invenção fornece métodos detratamento (terapêutica e/ou profilaticamente) do diabetese/ou de patologias associadas (por exemplo, diabetes dotipo I, diabetes do tipo II, diabetes de surgimentojuvenil, nefropatia diabética, nefropatia, neuropatiadiabética, retinopatia diabética, e semelhantes).
H) Câncer.
NFkB é um fator de transcrição que é normalmenteativado em resposta às citocinas pró-inflamatõrias e queregula a expressão de mais de 200 genes. Muitas linhagenscelulares tumorais exibem ativação constitutiva dasinalização de NFkB. Vários estudos de modelos decamundongo de tumores intestinais e mamários concluíram quea ativação da via NFkB intensifica o desenvolvimentotumoral e pode agir primariamente nos estados tardios datumorigênese (veja, por exemplo, (2004) Cell 118: 285;(2004) J. Clin. Invest., 114: 569). A inibição dasinalização de NFkB suprimiu o desenvolvimento tumoral. Semse prender a uma teoria específica, acredita-se que osmecanismos para essa supressão incluam um aumento daapoptose da célula tumoral, a expressão reduzida de fatoresde crescimento da célula tumoral fornecidos por célulasestromais circundantes e/ou a abolição de um programa dediferenciação da célula tumoral que é crítico para ainvasão/metástase tumoral.
Sem se prender a uma teoria específica, acredita-seque a administração de um ou mais agentes ativos aquidescritos inibirá a expressão e/ou secreção e/ou aatividade de NFkB. Dessa forma, em certas modalidades, estainvenção fornece métodos de tratamento de uma patologiacaracterizada por NFkB elevado pela administração de um oumais agentes ativos aqui descritos. Dessa forma, em váriasmodalidades, esta invenção contempla a inibição da ativaçãode NFkB associada ao câncer pela administração de um oumais agentes ativos aqui descritos, opcionalmente emcombinação com substâncias anticancerígenas apropriadas.
I) Àtividade bioquímica.
Demonstrou-se que os agentes ativos aqui descritosexibem diversas atividades biológicas específicas. Dessaforma, por exemplo, eles aumentam a heme oxigenase 1, elesaumentam a superóxido dismutase extracelular, eles reduzemou evitam a associação de mieloperoxidase com apoA-I, elesreduzem ou evitam a nitrosilação de tirosina em apoA-I,eles tornam HDL antiinflamatório ou mais antiinflamatório eeles aumentam a formação cíclica de pré-β HDL, elespromovem o transporte reverso de colesterol, em particular,transporte reverso de colesterol por macrófagos, e elestornam sinérgica a atividade de estatinas. Os agentesativos aqui descritos podem, desse modo, ser administradosa um mamífero para a promoção dessas atividades, porexemplo, para tratar uma condição/patologia cuja gravidadee/ou probabilidade de surgimento é reduzida por uma ou maisdessas atividades.
J) Àtenuação de vim sintoma de aterosclerose associadaa uma resposta inflamatória aguda.
Os agentes ativos desta invenção também são úteis emdiversos contextos. Por exemplo, observamos quecomplicações cardiovasculares (por exemplo, aterosclerose,acidente vascular encefálico etc.) que freqüentementeacompanham ou aparecem após o surgimento de uma respostainflamatória da fase aguda, por exemplo, aquela associada auma doença inflamatória recorrente, uma infecção viral (porexemplo, influenza), uma infecção bacteriana, uma infecçãofúngica, um transplante de órgão, uma ferida ou outrotrauma, e assim por diante.
Dessa forma, em certas modalidades, esta invençãocontempla a administração de um ou mais dos agentes ativosaqui descritos a um indivíduo em risco, ou que apresentauma resposta inflamatória aguda e/ou em risco ou queapresenta um sintoma de aterosclerose e/ou uma patologiaassociada (por exemplo, acidente vascular encefálico).
Dessa forma, por exemplo, uma pessoa que apresenta ouem risco para doença coronária pode profilaticamentereceber a administração de um ou mais agentes ativos destainvenção durante estação da gripe. Uma pessoa (ou animal)submetida a uma condição inflamatória recorrente, porexemplo, artrite reumatóide, várias doenças autoimunesetc., pode ser tratada com um ou mais agentes aquidescritos para reduzir ou evitar o desenvolvimento deaterosclerose ou acidente vascular encefálico. Uma pessoa(ou animal) vítima de trauma, por exemplo, lesão aguda,transplante de tecido etc. pode ser tratada com umpolipeptídeo desta invenção para reduzir o desenvolvimentode aterosclerose ou acidente vascular encefálico.
Em certos casos, tais métodos irão conferir umdiagnóstico da ocorrência ou do risco de uma respostainflamatória aguda. A resposta inflamatória agudatipicamente envolve alterações no metabolismo e regulaçãogênica no fígado. É um processo homeostático dinâmico queenvolve todos os sistemas principais do corpo, além dosistema imunológico, cardiovascular e sistema nervosocentral. Normalmente, a resposta da fase aguda dura apenaspoucos dias; no entanto, em casos de inflamação crônica ourecorrente, uma continuação aberrante de alguns aspectos daresposta da fase aguda pode contribuir para o dano tecidualsubjacente que acompanha a doença, e também pode levar acomplicações adicionais, por exemplo, doençascardiovasculares ou doenças por deposição de proteína como,por exemplo, amiloidose.
Um aspecto importante da resposta da fase aguda é operfil biossintético radicalmente alterado do fígado. Sobcircunstâncias normais, o fígado sintetiza uma gamacaracterística de proteínas plasmáticas em concentraçõesestáveis. Muitas dessas proteínas possuem funçõesimportantes, e níveis plasmáticos mais elevados dessesreagentes da fase aguda (APRs) ou de proteínas da faseaguda (APPs) são necessários durante a resposta da faseaguda após um estímulo inflamatório. Embora a maioria dosAPRs seja sintetizada por hepatócitos, alguns sãoproduzidos por outros tipos de células, incluindomonócitos, células endoteliais, fibroblastos e adipócitos.
A maior parte dos APRs é induzida entre 50% e várias vezesem relação aos níveis normais. Em contraste, os APRsprincipais podem aumentar até 1.000 vezes em relação aosníveis normais. Esse grupo inclui a proteína amilóidesérica A (SAA) e proteína C-reativa (CRP) em seres humanosou seu homólogo em camundongos, componente sérico amilóideP (SAP). Os chamados APRs negativos possuem concentraçõesplasmáticas diminuídas durante a resposta da fase agudapara permitir um aumento da capacidade do fígado parasintetizar os APRs induzidos.Portanto, em certas modalidades, a resposta da faseaguda, ou o risco para ela, é avaliada medindo-se uma oumais APPs. A medida de tais marcadores é bem conhecida poraqueles habilitados na técnica, e existem empresascomerciais que fornecem tal medida (por exemplo, AGP medidapor Cardiotech Services, Louisville, KY).
K) Outras indicações.
Em várias modalidades, contempla-se que os agentesativos aqui descritos são úteis no tratamento (por exemplo,atenuação e/ou prevenção) de úlceras corneanas,descolamento endotelial, doença de Crohn, dermatite aguda ecrônica (incluindo, sem limitação, eczema e/ou psoríase),degeneração macular, neuropatia, esclerodermia e coliteulcerativa.
Um resumo das indicações/condições para as quais osagentes ativos demonstraram ser eficazes, e/ou acredita-seque sejam eficazes, é mostrado na Tabela 1.
Tabela 1. Resumo de condições nas quais os agentes ativos(por exemplo, D-4F) demonstraram ser, ou acredita-se quesejam, eficazes.
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Tornar sinérgica a ação de estatinas
Observa-se que as condições listadas na Tabela 1 têm aintenção de serem ilustrativas, e não limitantes.
L) Administração.
Tipicamente, o(s) agente(s) ativo(s) será administradoa um mamífero (por exemplo, um ser humano) que delenecessita. Tal mamífero irá tipicamente incluir um mamífero(por exemplo, um ser humano) que possui ou que está sobrisco para uma ou mais das patologias aqui descritas.
O(s) agente(s) ativo(s) pode ser administrado, comoaqui descrito, de acordo com qualquer um dentre inúmerosmétodos-padrão que incluem, sem limitação, injeção,supositório, spray nasal, implante de liberação prolongada,emplastro transdérmico, e semelhantes. Em uma modalidadeparticularmente preferida, o(s) peptídeo(s) é administradooralmente (por exemplo, como um xarope, cápsula oucomprimido).
Os métodos envolvem a administração de um único agenteativo desta invenção ou a administração de dois ou maisagentes ativos diferentes. Os agentes ativos podem serfornecidos como monômeros (por exemplo, em formulaçõesseparadas ou combinadas), ou em formas diméricas,oligoméricas ou poliméricas. Em certas modalidades, asformas multiméricas podem compreender monômeros associados(por exemplo, ligados iônica ou hidrofobicamente), enquantooutras formas multiméricas compreendem monômeros ligadoscovalentemente (ligados diretamente ou através de umvinculador).
Embora a invenção seja descrita com relação ao uso emseres humanos, ela também é adequada para animais, porexemplo, para uso veterinário. Dessa forma, certosorganismos preferidos incluem, sem limitação, sereshumanos, primatas não humanos, caninos, eqüinos, felinos,suínos, ungulados, lagomorfos, e semelhantes.
Os métodos desta invenção são se limitam aos sereshumanos ou animais não humanos que exibem um ou maissintomas das patologias aqui descritas, mas também sãoúteis em um contexto profilático. Dessa forma, os agentesativos desta invenção podem ser administrados a organismospara evitar o surgimento/desenvolvimento de um ou maissintomas das patologias aqui descritas (por exemplo,aterosclerose, acidente vascular encefálico etc.).Indivíduos particularmente preferidos nesse contexto sãoindivíduos que exibem um ou mais fatores de risco para apatologia. Dessa forma, por exemplo, no caso de fatores derisco para aterosclerose, incluem história familiar,hipertensão, obesidade, alto consumo de álcool, tabagismo,colesterol sangüíneo elevado, triglicerídeos sangüíneoselevados, LDL, VLDL, IDL sangüíneos elevados ou HDLsangüíneo baixo, diabetes ou uma história familiar dediabetes, lipídeos sangüíneos elevados, ataque cardíaco,angina ou acidente vascular encefálico etc.
II. Agentes ativos.
Uma ampla gama de agentes ativos é adequada para otratamento de uma ou mais das indicações discutidas acima.Esses agentes incluem, sem limitação, peptídeos helicoidaisanfipáticos da Classe A, miméticos de peptídeo helicoidalanfipático da Classe A de apoA-I que possuem resíduosaromáticos ou alifáticos na face não polar, pequenospeptídeos que incluem pentapeptídeos, tetrapeptídeos,tripeptídeos, dipeptídeos e pares de aminoácidos, Apo-J(peptídeos G*) e miméticos de peptídeos, por exemplo, comodescritos abaixo.
A) Peptídeos helicoidais anfipáticos da Classe A.
Em certas modalidades, os agentes ativos para uso nométodo desta invenção incluem peptídeos helicoidaisanfipáticos da Classe A, por exemplo, como descrito naPatente U.S. N0 6.664.230, e Publicações PCT WO 02/15923 eWO 2004/034977. Foi descoberto que os peptídeos quecompreendem uma hélice anfipática da Classe A ("peptídeosda Classe A"), além de serem capazes de atenuar um ou maissintomas da aterosclerose, também são úteis no tratamentode uma ou mais das outras indicações aqui descritas.
Peptídeos da Classe A são caracterizados por formaçãode uma α-hélice que produz a segregação de resíduos polarese não polares formando, dessa forma, uma face polar e umaface não polar com os resíduos carregados positivamente queresidem na interface polar-não polar e os resíduoscarregados negativamente que residem no centro da facepolar (veja, por exemplo, Anantharamaiah (1986) Meth.Enzymol., 128: 626-668). Observa-se que o quarto éxon deapoA-I, quando dobrado em 3.667 resíduos/giros, produz umaestrutura helicoidal anfipática da Classe A.
Um peptídeo da Classe A, designado 18A (veja, porexemplo, Anantharamaiah (1986) Meth. Enzymol., 128: 626-668) foi modificado como aqui descrito para produzirpeptídeos oralmente administráveis e altamente eficazes nainibição ou prevenção de um ou mais sintomas deaterosclerose e/ou de outras indicações aqui descritas. Semse prender a uma teoria específica, acredita-se que ospeptídeos desta invenção possam atuar in vivo recolhendomolécula(s) de semeadura que atenuam a oxidação de LDL.
Determinamos que o aumento do número de resíduos Phena face hidrofóbica de 18A iria teoricamente aumentar aafinidade lipídica, como determinado pelos métodoscomputacionais descritos por Palgunachari e cols. (1996)Arteriosclerosis, Thrombosis, & Vascular Biol. 16: 328-338.Teoricamente, uma substituição sistemática de resíduos naface não polar de 18A com Phe geraria seis peptídeos.Peptídeos com 2 3 e 4 Phe adicionais teriam valoresteóricos de afinidade lipídica (λ) de 13, 14 e 15 unidades,respectivamente. No entanto, os valores λ saltavam quatrounidades se as Phe adicionais fossem aumentadas de 4 para 5(para 19 unidades λ). 0 aumento de 6 ou 7 Phe produziria umaumento menos dramático (para 20 e 21 unidades λ,respectivamente).
Foram feitos vários desses peptídeos da Classe A,incluindo os peptídeos designados 4F, D4F, 5F e D5F, esemelhantes. Vários peptídeos da Classe A inibiram odesenvolvimento de lesão em camundongos suscetíveis àaterosclerose. Além disso, os peptídeos mostram grausvariáveis, mas significativos, de eficácia na atenuação deum ou mais sintomas das várias patologias aqui descritas.Diversos desses peptideos são ilustrados na Tabela 2.
Tabela 2. Peptídeos helicoidais anfipáticos da Classe Ailustrativos para uso nesta invenção.
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1 Os vinculadores estão sublinhados.
NMA é N-Metil Antranilil.
Em certas modalidades preferidas, os peptídeos incluemvariações de 4F ((ID. DE SEQ. N°: 5 na Tabela 2), tambémconhecidos como L-4F, em que todos os resíduos sãoaminoácidos na forma L) ou D-4F, em que um ou mais resíduossão aminoácidos na forma D) . Em qualquer um dos peptídeosaqui descritos, o C-terminal e/ou N-terminal e/ou resíduosinternos podem ser bloqueados com um ou mais grupos debloqueio, como aqui descritos.
Embora vários peptídeos da Tabela 2 sejam ilustradoscom um grupo acetil ou um grupo N-metilantranililprotegendo o terminal amino e um grupo amida protegendo oterminal carboxil, qualquer um desses grupos de proteçãopode ser eliminado e/ou substituído com outro grupo deproteção, como aqui descrito. Em modalidadesparticularmente preferidas, os peptídeos compreendem um oumais aminoácidos na forma D, como aqui descritos. Em certasmodalidades, cada aminoácido (por exemplo, cada aminoácidoenantiomérico) dos peptídeos da Tabela 2 é um aminoácido naforma D.
Observa-se também que a Tabela 2 não é totalmenteinclusiva. Utilizando-se os ensinamentos aqui apresentados,outros peptídeos helicoidais anfipáticos da Classe Aadequados podem ser rotineiramente produzidos (por exemplo,por substituições conservadoras ou semiconservadoras (porexemplo, D substituído por Ε) , extensões, eliminações, esemelhantes). Dessa forma, por exemplo, uma modalidadeutiliza truncamentos de um ou mais dos peptídeos aquimostrados (por exemplo, peptídeos identificados pelo ID. DESEQ. Nos: 2-20 e 39 na Tabela 2) . Dessa forma, por exemplo,o ID. DE SEQ. N°: 21 ilustra um peptídeo que compreende 14aminoácidos do C-terminal de 18A que compreende um ou maisD-aminoácidos, enquanto os IDS. DE SEQ. Nos: 22-38 ilustramoutros truncamentos.
Peptídeos mais longos também são adequados. Essespeptídeos mais longos podem forma inteiramente uma héliceanfipática da Classe A, ou a hélice anfipática da Classe A(hélices) pode formar um ou mais domínios do peptídeo. Alémdisso, esta invenção contempla versões multiméricas dospeptídeos (por exemplo, concatâmeros). Dessa forma, porexemplo, os peptídeos aqui ilustrados podem ser acopladosjuntos (diretamente ou através de um vinculador (porexemplo, um vinculador de carbono ou um ou maisaminoácidos) com um ou mais aminoácidos intervenientes).Peptídeos poliméricos ilustrativos incluem 18A-Pro-18A e ospeptídeos dos IDS. DE SEQ. Nos: 78-85, em certasmodalidades compreendendo um ou mais D-aminoácidos, maispreferivelmente com cada aminoácido um D-aminoácido comoaqui descrito e/ou que possui um ou ambos os terminaisprotegidos.
Também será observado que, além das seqüênciaspeptídicas expressamente aqui ilustradas, esta invençãotambém contempla formas retro e retro-inversas de cada umdesses peptídeos. Nas formas retro, a direção da seqüênciaé revertida. Nas formas inversas, a quiralidade dosaminoácidos constituintes é revertida (ou seja, aminoácidosna forma L se tornam aminoácidos na forma D, e aminoácidosna forma D se tornam aminoácidos na forma L) . Na formaretro-inversa, tanto a ordem quanto a quiralidade dosaminoácidos são revertidas. Dessa forma, por exemplo, umaforma retro do peptídeo 4F (DWFKAFYDKVAEKFKEAF, ID. DE SEQ.N°: 5), em que o terminal amino está no aspartato (D) e oterminal carboxil está na fenilalanina (F) , tem a mesmaseqüência, mas o terminal amino está na fenilalanina e oterminal carboxi está no aspartato (ou seja,FAEKFKEAVKDYFAKFWD, ID. DE SEQ. N°: 104). Quando o peptídeo4F compreender só L-aminoácidos, a forma retro-inversa teráa seqüência mostrada acima (ID. DE SEQ. N°: 104) ecompreenderá todos os aminoácidos na forma D. Comoilustrado nos diagramas da roda helicoidal da Figura 15, 4Fe retro-inverso (Rev-4F) são imagens especulares entre elascom segregação idêntica das faces polares e não polares,com os resíduos carregados positivamente residindo nainterface polar-não polar, e os resíduos carregadosnegativamente residindo no centro da face polar. Essasimagens especulares do mesmo polímero de aminoácidos sãoidênticas em termos da segregação das faces polares e nãopolares, com os resíduos carregados positivamente residindona interface polar-não polar, e os resíduos carregadosnegativamente residindo no centro da face polar. Dessaforma, 4F e Rev-4F são enantiômeros entre si. Para umadiscussão sobre peptIdeos retro e retro-inversos veja, porexemplo, Chorev e Goodman, (1995) TibTech, 13: 439-445.
Quando for feita referência a uma seqüência e aorientação não for expressamente indicada, a seqüênciapoderá ser visualizada como representando uma seqüência deaminoácidos na orientação do amino para o carboxil, a formaretro (ou seja, uma seqüência de aminoácidos na orientaçãocarboxil para amino), a forma retro em que L-aminoácidossão substituídos com D-aminoácidos, ou D-aminoácidos sãosubstituídos com L-aminoácidos, e a forma retro-inversa emque tanto a ordem quanto a quiralidade do aminoácido sãorevertidas.
C) Miméticos de peptídeo helicoidal anfipático daClasse A de apoA-I que possuem resíduos aromáticos oualifáticos na face não polar.
Em certas modalidades, esta invenção também fornecepeptídeos modificados de hélice anfipática da Classe A.Alguns peptídeos preferidos incorporam um ou mais resíduosaromáticos no centro da face não polar, por exemplo, 3Fc7t,(como presente em 4F) , ou com um ou mais resíduosalifáticos no centro da face não polar; por exemplo, 3FI7t,veja, por exemplo, a Tabela 3. Sem se prender a uma teoriaespecífica, acreditamos que os resíduos aromáticos centraisna face não polar do peptídeo 3FC7t, em função da presençade elétrons TC no centro da face não polar, permitem que asmoléculas de água penetrem próximo das cadeias lipídicasalquil hidrofóbicas do complexo peptídeo-lipídeo, o que,por sua vez, permitiria a entrada de espécies reativas aooxigênio (por exemplo, hidroperóxidos lipídicos)protegendo-os da superfície da célula. Do mesmo modo,também acreditamos que os peptídeos com resíduos alifáticosno centro da face não polar, por exemplo, 3 F171, atuarãosimilarmente, mas não tão eficazmente quanto 3 Fcit.
Peptídeos preferidos convertem HDL pró-inflamatório emHDL antiinflamatório ou tornarão o HDL antiinflamatóriomais antiinflamatório e/ou diminuem a atividadequimiotática de monócitos induzida por LDL gerada porcélulas da parede arterial igual ou acima de D4F ou deoutros peptídeos mostrados na Tabela 2.
Tabela 3. Exemplos de alguns peptídeos preferidos.
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C) Outros peptídeos helicoidais anfipáticos da Classe
A e alguns peptídeos helicoidais anfipáticos da Classe Y.
Em certas modalidades, esta invenção também contemplapeptídeos helicoidais anfipáticos da Classe 1 que têm umacomposição de aminoácidos idêntica a um ou mais dospeptídeos helicoidais anfipáticos da Classe 1 descritosacima. Dessa forma, por exemplo, em certas modalidades,esta invenção contempla peptídeos que possuem umacomposição de aminoácidos idêntica a 4F. Dessa forma, emcertas modalidades, esta invenção inclui agentes ativos quecompreendem um peptídeo que consiste em 18 aminoácidos, emque os 18 aminoácidos consistem em 3 alaninas (A) , 2aspartatos (D) , 2 glutamatos (E) , 4 fenilalaninas (F) , 4lisinas (K) , 1 valina (V) , 1 triptofano (W) , e 1 tirosina(Y) ; e em que o peptídeo forma uma hélice anfipática daClasse A; e protege um fosfolipídeo contra oxidação por umagente oxidante. Em várias modalidades, os peptídeoscompreendem pelo menos um resíduo de aminoácido "D"; e emcertas modalidades, os peptídeos compreendem todos osresíduos de aminoácidos na forma "D". Vários dessespeptídeos são ilustrados na Tabela 4. Formas reversas(retro-), inversas, retro-inversa e circularmentepermutadas desses peptídeos também são contempladas.
Tabela 4. Peptídeos helicoidais anfipáticos da Classe Ailustrativos com comprimento de 18 aminoácidos com aseguinte composição de aminoácidos: 3 alaninas (A), 2aspartatos (D) , 2 glutamatos (E) , 4 fenilalaninas (F) , 4lisinas (K), 1 valina (V), 1 triptofano (W) , e 1 tirosina (Y).
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Com base nos diagramas da roda helicoidal mostrados naFigura 15, é possível identificar facilmente peptxdeosbiologicamente ativos e úteis. Dessa forma, por exemplo, ospeptídeos seguintes foram identificados com precisão comoativos: 3Fl; 3F2; 4F as formas reversas (retro) destes e asformas retro-inversas destes. Dessa forma, em certasmodalidades, esta invenção contempla agentes ativos quecompreendem um peptídeo que tem comprimento de 18aminoácidos e forma uma hélice anfipática da Classe A, emque o peptídeo tem a composição de aminoácidos: 2aspartatos, 2 glutamatos, 4 lisinas, 1 triptofano, 1tirosina, no máximo 1 leucina, no máximo 1 valina, nomínimo 1 e no máximo 3 alaninas, e com 3 a 6 aminoácidos dogrupo: fenilalanina, alfa-naftalanina, beta-naftalanina,histidina, e contém 9 ou 10 aminoácidos na face polar emuma representação da roda helicoidal da hélice anfipáticada Classe A que inclui 4 aminoácidos com carga positiva empH neutro com dois dos resíduos carregados positivamenteresidindo na interface entre as faces polares e nãopolares, e com dois dos quatro resíduos carregadospositivamente na face polar que são contíguos, e na facenão polar dois dos resíduos de aminoácidos do grupo:fenilalanina, alfa-naftalanina, beta-naftalanina,histidina, também são contíguos e, caso haja 4 ou maisaminoácidos desse grupo na face não polar, também há pelomenos 2 resíduos desse grupo que não são contíguos.
Em certas modalidades, esta invenção também contemplaalguns peptídeos helicoidais anfipáticos da classe Y, alémde peptídeos helicoidais anfipáticos da Classe A. peptídeoshelicoidais anfipáticos da Classe Y são conhecidos poraqueles habilitados na técnica (veja, por exemplo, Segreste cols. (1992) J. Lipid Res. 33: 141-166; Oram e Heinecke(2005) Physiol Rev. 85: 1.343-1.372, e semelhantes). Emvárias modalidades, esses peptídeos incluem, sem limitação,um peptídeo de 18 aminoácidos que forma uma héliceanfipática da Classe A ou uma hélice anfipática da classe Ydescrita pela fórmula III (ID. DE SEQ. N°: 402):
DXXKYXXDKXYDKXKDYX III
em que os Ds são independentemente Asp ou Glu; os Kssão independentemente Lys ou Argi- o Xs sãoindependentemente Leu, norLeu, Vai, Ile, Trp, Phe, Tyr, β—Nal ou α—Nal, e todos os resíduos X estão na face nãopolar (por exemplo, quando visualizados em um diagrama daroda helicoidal) , exceto um que pode estar na face polarentre dois resíduos K; os Ys são independentemente Ala,His, Ser, Gln, Asn, ou Thr na face não polar (por exemplo,quando visualizados em um diagrama da roda helicoidal) , eos Ys são independentemente uma Ala na face polar, uma His,uma Ser, uma Gln, uma Asn ou uma Thr na face polar (porexemplo, quando visualizados em um diagrama da rodahelicoidal), em que no máximo dois K devem ser contíguos(por exemplo, quando visualizados em um diagrama da rodahelicoidal) ; e em que no máximo 3 Ds são contíguos (porexemplo, quando visualizados em um diagrama da rodahelicoidal), e o quarto D deve estar separado dos outros Dspor um Y. Peptídeos ilustrativos desse tipo que incluempeptídeos com histidina e/ou alfa- e/ou beta-naftalaninasão mostrados na Tabela 5. Formas reversas (retro-),inversas, retro-inversas e circularmente permutadas dessespeptídeos também são contempladas.
Tabela 5. Ilustra vários análogos de peptxdeo de Classe Ae/ou classe Y com His incorporada na seqüência.<table>table see original document page 74</column></row><table>[[A-17>H, D-8>E]4F Ae-DWFKAFYEKVAEKFKEHF-NH2 430
[[A-17>H,E-12>D]4F Ae-DWFKAFYDKVADKFKEHF-NH2 431
[[A-17>H, E16>D]4F Ac-DWFKAFYDKVAEKFKDHF-NH2 432
[A-17>F, F-18>H] 4F Ac-DWFKAFYDKVAEKFKEFH-NH2 433
[A-17>F, F-18>H,D-E Ac-EWFKAFYEKVADKFKDFH-NH2 434trocado] 4F
[A-17>F, F-18>H,D-1>E] -4F Ae-EWFKAFYDKVAEKFKEFH-NH2 435
[A-17>F, F-18>H] 4F Ac-DWFKAFYDKVAEKFKEFH-NH2 436
[A-17>F, F-18>H,D-8>E] -4F Ac-DWFKAFYEKVAEKFKEFH-NH2 437
[A-17>F, F-18>H,E-12>D] 4F Ac-DWFKAFYDKVAEKFKEFH-NH2 438
[A-17>F, F-18>H],E-16>D]-4F Ae-DWFKAFYDKVAEKFKDra-NH2 439
Rev-4F Ae-FAEKFKEAVKDYFAKFWD-NH2 44 0
lA-2>H]Rev4F Ae-FHEKFKEAVKDYFAKFWD-NH2 441
Rev-[A-2>H, D>E]-4F Ae-FHEKFKEAVKEYFAKFWE-NH2 442
Rev-[A-2>H, E>D]4F Ae-FHDKFKDAVKDYFAKFWD-NH2 443
[A-2>H, D-E trocado]Rev-4F Ac-FHDKFKDAVKEYFAKFWE-NH2 444
[A-2>H, E-3>D]Rev-4F Ac-FHDKFKEAVKDYFAKFWD-NH2 445
[A-2>H, E-7>D]Rev-4F Ac-FHEKFKDAVKDYFAKFWD-NH2 446
[A-2>H, D-11>E]Rev-4F Ac-FHEKFKEAVKEYFAKFWD-NH2 447
[A-2>H, D-18>E]Rev-4F Ae-FHEKFKEAVKDYFAKFWE-NH2 448
[F-1>H, A-2>F]Rev-4F Ae-HFEKFKEAVKDYFAKFWD-NH2 449
[F-1>H, A-2>F,D-E Ae-HFDKFKDAVKEYFAKFWE-NH2 450trocado]Rev4F
[F-1>H,A-2>F,D>E]Rev-4F Ac-HFEKFKEAVKEYFAKFWE-NH2 451
[F-1>H, A-2>F,E-3>D]Rev-4F Ac-HFDKFKEAVKDYFAKFWD-NH2 452
[F-1>H,A-2>F,E-7>D]Rev-4F Ac-HFEKFKDAVKDYFAKFWD-NH2 453
[F-1>H,A-2>F,D-11>E] Rev-4F Ae-HFEKFKEAVKEYFAKFWD-NH2 454
[F-1>H,A-2>F,D-18>E] Rev-4F Ae-HFEKFKEAVKDYFAKFWE-NH2 455
[A-2>F, F-5>H] Rev D-4F Ae-FFEKHKEAVKDYFAKFWD-NH2 456
[A-2>F,F-5>H,D-E Ae-FFDKHKDAVKEYFAKFWE-NH2 457trocado]Rev D-4F[A-2>F,F-5>H,D>E]RevD-4F[A-2>F,F-5>H,E>D]RevD-4 F[A-2>F,F-5>H,E-3>D]Rev D-4F[A-2>F,F-5>H,D-11>E]RevD-4F[A-2>F,F-5>H,D-18>E]Rev D-4F
[A-2>V, V-9>H] Rev D-4F[A-2>V, V-9>H,D-E trocado]Rev D-4F
[A-2>V, V-9>H,D>E] Rev D-4F[A-2>V, V-9>H,E>D] Rev D-4F[A-2>V,V-9>H,E-3>D]Rev D-4F[A-2>V,V-9>H,E-7>D]Rev D-4F[A-2>V,V-9>H,D-11>E]Rev D-4F
[A-2>V,V-9>H,D-18>E]Ver D-4F
[A- 8 >H] Rev-4F[A-8>H,D-E trocado]Rev-4F[A-8>H,D>E]Rev-4F[A-8>H,E>D]Rev-4F[A-8>H,E-3>D]Rev-4F[A-8>H, E-7>D]Rev-4F[A-8>H, D-11>E]Rev-4F[A-8>H, D-18>E]Rev-4F[A-8>F,F-13 >H]Rev-4F[A-8>F,F-13 >H,D-Etrocado]Rev- 4F[A-8>F,F-13>H,E-3>D]Rev-4F
Ac-FFEKHKEAVKEYFAKFWE-NH2 458
Ac-FFDKHKDAVKDYFAKFWD-NH2 4 59
Ac-FFDKHKEAVKDYFAKFWD-NH2 4 60
Ac-FFEKHKEAVKEYFAKFWD-NH2 4 61
Ac-FFEKHKEAVKDYFAKFWE-NH2 4 62
AC-FVEKFKEAHKDYFAKFWD-NH2 4 63
Ac-FVDKFKDAHKEYFAKFWE-NH2 4 64
Ac-FVEKFKEAHKEYFAKFWE-NH2 4 65
Ac-FVDKFKDAHKDYFAKFWD-NH2 4 66
Ac-FVDKFKEAHKDYFAKFWD-NH2 4 67
Ae-FVEKFKDAHKDYFAKFWD-NH2 4 68
Ac-FVEKFKEAHKEYFAKFWD-NH2 4 69
Ae-FVEKFKEAHKDYFAKFWE-NH2 470
Ae-FAEKFKEHVKDYFAKFWD-NH2 471
Ae-FADKFKDHVKEYFAKFWE-NH2 472
Ae-FAEKFKEHVKEYFAKFWE-NH2 4 73
Ae-FADKFKDHVKDYFAKFWD-NH2 4 74
Ac-FADKFKEHVKDYFAKFWD-NH2 4 75
Ac-FAEKFKDHVKDYFAKFWD-NH2 476
Ae-FAEKFKEHVKEYFAKFWD-NH2 4 77
Ae-FAEKFKEHVKDYFAKFWE-NH2 4 78
Ae-FAEKFKEFVKDYHAKFWD-NH2 4 79
Ae-FADKFKDFVKEYHAKFWE-NH2 480
AC-FADKFKEFVKDYHAKFWD-NH2 481<table>table see original document page 77</column></row><table>
Exemplos de análogos Classe A 4F e Rev 4F com beta-Nph. Do mesmo modo, análogos alfa-Nph podem ser projetados.Similarmente aos análogos acima, His pode ser incorporadaaos análogos Nph. Análogos D>E, análogos E>D e análogos detroca D-E são possibilidades adicionais similarmente aosanálogos descritos acima.
<table>table see original document page 77</column></row><table>
Como descrito acima para 4Nph, um mínimo de 7 análogosadicionais para cada um dos análogos fornecidos abaixo.<table>table see original document page 78</column></row><table>
Para os análogos descritos abaixo, são possíveisanálogos adicionais pela incorporação de His ou alfa-Nph e
<table>table see original document page 78</column></row><table><table>table see original document page 79</column></row><table>
Para cada um dos análogos abaixo, são possíveisanálogos H e Nph adicionais com o uso dos exemplosdescritos acima. Cada análogo pode gerar 7 análogos com asalterações descritas nos exemplos apresentados acima.
<table>table see original document page 79</column></row><table><table>table see original document page 80</column></row><table><table>table see original document page 81</column></row><table><table>table see original document page 82</column></row><table>
Observa-se também que qualquer um dos peptídeos aquidescritos pode compreender aminoácidos não naturais além ouem vez dos aminoácidos naturais correspondentes aquiidentificados. Tais modificações incluem, sem limitação,acetilação, amidação, formilação, metilação, sulfação, esemelhantes. Aminoácidos não naturais ilustrativos incluem,sem limitação, ornitina, norleucina, norvalina, N-metilvalina, 6-N-metillisina, N-metilisoleucina, N-metilglicina, sarcosina, inosina, alo-isoleucina,isodesmolisina, 4-hidroxiprolina, 3-hidroxiprolina, alo-hidroxilisina, hidroxilisina, N-etilasparagina, N-etilglicina, ácido 2,3-diaminopropiônico, ácido 2,2'-diaminopropiônico, desmosina, ácido 2,4-diaminobutirico, 2-aminopimélico ácido, ácido 3-aminoisobutírico, ácido2-aminoisobutírico, ácido 2-aminoheptanóico, ácido 6-aminocapróico, ácido 4-aminobutírico, ácido 2-aminobutírico, beta-alanina, ácido 3-aminoadípico, ácido 2-aminoadipico, e semelhantes. Em certas modalidades,qualquer um ou mais dos aminoácidos "naturais" dospeptídeos aqui descritos podem ser substituídos com oaminoácido não natural correspondente (por exemplo, comodescrito acima).
Em certas modalidades, esta invenção contemplaparticularmente o uso de lisinas modificadas. Taismodificações incluem, sem limitação, modificação de biotinade lisinas épsilon e/ou metilação das lisinas épsilon. Umpeptídeo ilustrativo que compreende lisinas épsilonmetiladas inclui, sem limitação: Ac-D-W-F-K(eCH3) 2-A-F-Y-D-K(eCH3) 2-V-A-E-K(eCHs) 2-F-K(eCH3) 2-E-A-F-NH (CH3) 2 (ID. DESEQ. N°: 63 5) e Ac-DWFK (eCH3) 2AFYDK(eCH3) 2VAEK(eCH3) 2FK(eCH3)2EAF-NH (CH3) (ID. DE SEQ. N°: 636). Outros aminoácidosmodificados incluem, sem limitação, análogos de ornitina eanálogos de homoaminoalanina (em vez de Lys por (CH2)4-NH2pode ser Haa por -(CH2)2-NH2 e Om por -(CH2)3-NH2) esemelhantes. Observa-se que essas modificações sãoilustrativas e não têm a intenção de ser limitantes.
Análogos de 4F ilustrativos que possuem aminoácidosmodificados são mostrados na Tabela 6.Tabela 6. Análogos de 4F ilustrativos que compreendemaminoácidos modificados.
<table>table see original document page 84</column></row><table><table>table see original document page 85</column></row><table><table>table see original document page 86</column></row><table>
Os peptídeos e modificações mostrados acima visam aser ilustrativos não limitantes.
D) Peptídeos menores.
Também foi uma descoberta surpreendente que certospequenos peptídeos que consistem em um mínimo de trêsaminoácidos preferencialmente (mas não necessariamente) comum ou mais dos aminoácidos sendo o D-estereoisômero doaminoácido, e possuindo domínios hidrofóbicos para permitirinterações lipídeo-proteína, e domínios hidrofílicos parapermitir um grau de hidrossolubilidade, também possuempropriedades antiinflamatórias significativas e são úteisno tratamento de uma ou mais das patologias aqui descritas.Os "pequenos peptídeos" tipicamente possuem um comprimentoque varia de 2 aminoácidos a cerca de 15 aminoácidos, maispreferivelmente de cerca de 3 aminoácidos a cerca de 10 ou11 aminoácidos e, principalmente, de cerca de 4 a cerca de8 ou 10 aminoácidos. Em várias modalidades, os peptídeossão tipicamente caracterizados por terem aminoácidosterminais hidrofóbicos ou aminoácidos terminais que setornam hidrofóbicos por adesão de um ou mais grupos de"proteção" hidrofóbicos. Vários "pequenos peptídeos" sãodescritos nos pedidos provisórios USSN 10/649.378,depositado em 26 de agosto de 2003, e USSN 10/913.800,depositado em 6 de agosto de 2004, e no Pedido PCTPCT/US2004/026288.
Em certas modalidades, os peptídeos podem sercaracterizados pela Fórmula I, abaixo:
<formula>formula see original document page 87</formula>
em que, η é 0 ou 1, X1 é um aminoácido hidrofóbicoe/ou abriga um grupo de proteção hidrofóbico, X4 é umaminoácido hidrofóbico e/ou abriga um grupo de proteçãohidrofóbico; e quando η é 0, X2 é um aminoácido ácido oubásico; quando η é 1: X2 e X3 são independentemente umaminoácido ácido, um aminoácido básico, um aminoácidoalifático ou um aminoácido aromático, de tal forma que,quando X2 é um aminoácido ácido, X3 é um aminoácido básico,um aminoácido alifático ou um aminoácido aromático; quandoX2 é um aminoácido básico, X3 é um aminoácido ácido, umaminoácido alifático ou um aminoácido aromático; e quandoX2 é um aminoácido alifático ou aromático, X3 é umaminoácido ácido ou um aminoácido básico.
Peptídeos mais longos (por exemplo, até 10, 11 ou 15aminoácidos) também são contemplados dentro do escopo destainvenção. Tipicamente, quando os peptídeos mais curtos (porexemplo, peptídeos de acordo com a fórmula I) foremcaracterizados por um aminoácido ácido, básico, alifáticoou aromático, os peptídeos mais longos serão caracterizadospor domínios ácidos, básicos, alifáticos ou aromáticos quecompreendem dois ou mais aminoácidos daquele tipo.
1) Propriedades funcionais de pequenos peptídeosativos.
Foi um achado surpreendente desta invenção quediversas propriedades físicas prevêem a capacidade depequenos peptídeos (por exemplo, menos de 10 aminoácidos,preferivelmente menos de 8 aminoácidos, maispref erivelmente de cerca de 3 a cerca de 5 ou 6aminoácidos) desta invenção para tornar o HDL maisantiinflamatório e para atenuar a aterosclerose e/ou outraspatologias caracterizadas por uma resposta inflamatória emum mamífero. As propriedades físicas incluem altasolubilidade em acetato de etila (por exemplo, acima decerca de 4 mg/ml) e solubilidade em tampão aquoso em pH7,0. Mediante o contato dos fosfolipídeos, por exemplo,1,2-Dimiristoil-sn-glicero-3-fosfocolina (DMPC), em umambiente aquoso, os pequenos peptídeos particularmenteeficazes induzem ou participam da formação de partículascom um diâmetro de aproximadamente 7,5 nm (± 0,1 nm) , e/ouinduzem ou participam da formação de bicamadas empilhadascom uma dimensão da bicamada da ordem de 3,4 a 4,1 nm, comespaçamento entre as bicamadas na pilha de aproximadamente2 nm, e/ou também induzem ou participam da formação deestruturas vesiculares de aproximadamente 38 nm. Em certasmodalidades preferidas, os pequenos peptídeos possuem umpeso molecular de menos do que cerca de 900 Da.
Dessa forma, em certas modalidades, esta invençãocontempla pequenos peptídeos que atenuam um ou maissintomas de uma indicação/patologia aqui descrita, porexemplo, uma condição inflamatória, em que o(s)peptídeo(s): têm comprimento que varia de cerca de 3 acerca de 8 aminoácidos, preferivelmente de cerca de 3 acerca de 6 ou 7 aminoácidos e, mais preferivelmente, decerca de 3 a cerca de 5 aminoácidos; são solúveis emacetato de etila em uma concentração acima de cerca de 4mg/ml; são solúveis em tampão aquoso em pH 7,0; quandocolocados em contato com um fosfolipídeo em um ambienteaquoso, formam partículas com um diâmetro deaproximadamente 7,5 nm e/ou formam bicamadas empilhadas comuma dimensão da bicamada da ordem de 3,4 a 4,1 nm, comespaçamento entre as bicamadas na pilha de aproximadamente2 nm; possuem um peso molecular menor do que cerca de 900dáltons; convertem HDL pró-inflamatório em HDLantiinflamatório ou tornam o HDL antiinflamatório maisantiinflamatório; e não possuem uma seqüência deaminoácidos Lys-Arg-Asp-Ser (ID. DE SEQ. N°: 801),especialmente em que Lys-Arg-Asp e Ser são todos L-aminoácidos. Em certas modalidades, esses pequenospeptídeos protegem um fosfolipídeo contra oxidação por umagente oxidante.
Embora esses pequenos peptídeos não precisem ser tãolimitados, em certas modalidades, esses pequenos peptídeospodem incluir os pequenos peptídeos descritos abaixo.
2) Tripeptídeos.
Foi descoberto que podem ser sintetizados certostripeptídeos (peptídeos de 3 aminoácidos) que exibem aspropriedades desejáveis aqui descritas (por exemplo, acapacidade para converter HDL pró-inflamatório em HDLantiinflamatório, a capacidade para diminuir a atividadequimiotática de monócitos induzida por LDL gerada porcélulas da parede arterial, a capacidade para aumentar pré-beta HDL etc.). Em certas modalidades, os peptídeos sãocaracterizados pela fórmula I, em que N é zero, mostradaabaixo como Fórmula II:
<formula>formula see original document page 90</formula>
em que os aminoácidos finais (X1 e X4) sãohidrofóbicos, tanto por causa de uma cadeia lateralhidrofóbica, quanto pelo fato de a cadeia lateral ou de oterminal C e/ou N serem bloqueados com um ou mais grupos deproteção hidrofóbicos (por exemplo, o N-terminal ébloqueado com Boc-, Fmoc-, nicotinil- etc., e o C-terminalbloqueado com (tBu)-OtBu etc.). Em certas modalidades, oaminoácido X2 é tanto ácido (por exemplo, ácido aspártico,ácido glutâmico etc.) quanto básico (por exemplo,histidina, arginina, lisina etc.). 0 peptídeo pode ser sóde L-aminoácidos ou pode incluir um ou mais ou só D-aminoácidos.
Certos tripeptídeos desta invenção incluem, semlimitação, os peptídeos mostrados na Tabela 7.
Tabela 7. Exemplos de certos tripeptídeos preferidos queabrigam grupos de bloqueio hidrofóbicos e aminoácidoscentrais ácidos, básicos ou histidina.
<table>table see original document page 90</column></row><table><table>table see original document page 91</column></row><table><table>table see original document page 92</column></row><table><table>table see original document page 93</column></row><table><table>table see original document page 94</column></row><table><table>table see original document page 95</column></row><table>
Embora os peptídeos da Tabela 7 sejam ilustrados comgrupos de proteção específicos, observa-se que esses grupospodem ser substituídos por outros grupos de proteção comoaqui descritos e/ou um ou mais dos grupos de proteçãomostrados podem ser eliminados.
3) Pequenos peptídeos com aminoácidos centrais ácidose básicos.
Em certas modalidades, os peptídeos desta invençãovariam de 4 aminoácidos a cerca de 10 aminoácidos. Osaminoácidos terminais são tipicamente hidrofóbicos, tantopor causa de uma cadeia lateral hidrofóbica, quanto porqueos aminoácidos terminais abrigam um ou mais grupos deproteção hidrofóbicos. Os aminoácidos finais (X1 e X4) sãohidrofóbicos tanto por causa de uma cadeia lateralhidrofóbica, quanto pelo fato de a cadeia lateral ou de oterminal C e/ou N serem bloqueados com um ou mais grupo (s)de proteção hidrofóbico(s) (por exemplo, o N-terminal ébloqueado com Boc-, Fmoc-, Nicotinil- etc., e o C-terminalbloqueado com (tBu)-OtBu etc.). Tipicamente, a porçãocentral do peptídeo compreende um aminoácido básico e umaminoácido ácido (por exemplo, em um 4 mer) ou um domíniobásico e/ou um domínio ácido em uma molécula mais longa.
Esses quatro-mers podem ser representados pela FórmulaI, em que X1 e X4 são hidrofóbicos e/ou abrigam um grupo(s)de proteção hidrofóbico(s), como aqui descrito, e X2 éácido enquanto X3 é básico ou X2 é básico enquanto X3 éácido. 0 peptídeo pode ser só de L-aminoácidos ou incluirum ou mais ou só D-aminoácidos.
Certas modalidades preferidas desta invenção incluem,sem limitação, os peptídeos mostrados na Tabela 8.
Tabela 8. Exemplos ilustrativos de pequenos peptídeos comaminoácidos centrais ácidos e básicos.
<table>table see original document page 96</column></row><table><table>table see original document page 97</column></row><table><table>table see original document page 98</column></row><table><table>table see original document page 99</column></row><table><table>table see original document page 100</column></row><table><table>table see original document page 101</column></row><table>
Embora os peptídeos da Tabela 8 sejam ilustrados comgrupos de proteção específicos, observa-se que esses grupospodem ser substituídos por outros grupos de proteção comoaqui descritos e/ou um ou mais dos grupos de proteçãomostrados podem ser eliminados.
4) Pequenos peptídeos que possuem um aminoácido ácidoou básico no centro, junto com um aminoácido alifáticocentral.
Em certas modalidades, os peptídeos desta invençãovariam de 4 aminoácidos a cerca de 10 aminoácidos. Osaminoácidos terminais são tipicamente hidrofóbicos, tantopor causa de uma cadeia lateral hidrofóbica, quanto porqueos aminoácidos terminais abrigam um ou mais grupos deproteção hidrofóbicos. Os aminoácidos finais (X1 e X4) sãohidrofóbicos tanto por causa de uma cadeia lateralhidrofóbica, quanto pelo fato de a cadeia lateral ou de oterminal C e/ou N serem bloqueados com um ou mais grupo (s)de proteção hidrofóbico(s) (por exemplo, o N-terminal ébloqueado com Boc-, Fmoc-, Nicotinil- etc., e o C-terminalbloqueado com (fcBu)-OtBu etc.). Tipicamente, a porçãocentral do peptídeo compreende um aminoácido básico ouácido e um aminoácido alifático (por exemplo, em um 4 mer)ou um domínio básico ou um domínio ácido e um domínioalifático em uma molécula mais longa.
Esses quatro-mers podem ser representados pela FórmulaI, em que X1 e X4 são hidrofóbicos e/ou abrigam um grupo(s)de proteção hidrofóbico(s), como aqui descrito, e X2 éácido ou básico enquanto X3 é alifático ou X2 é alifáticoenquanto X3 é ácido ou básico. 0 peptídeo pode ser só de L-aminoácidos ou incluir um ou mais ou só de D-aminoácidos.
Alguns peptídeos preferidos desta invenção incluem,sem limitação, os peptídeos mostrados na Tabela 9.
Tabela 9. Exemplos de alguns peptídeos preferidos quepossuem um aminoácido ácido ou básico no centro, junto comum aminoácido alifático central.
<table>table see original document page 102</column></row><table><table>table see original document page 103</column></row><table>
Embora os peptídeos da Tabela 9 sejam ilustrados comgrupos de proteção específicos, observa-se que esses grupospodem ser substituídos por outros grupos de proteção comoaqui descritos e/ou um ou mais dos grupos de proteçãomostrados podem ser eliminados.5) Pequenos peptídeos que possuem um antinoácido ácidoou básico no centro, junto com um aminoácido aromáticocentral.
Em certas modalidades, os "pequenos" peptídeos destainvenção variam de 4 aminoácidos a cerca de 10 aminoácidos.Os aminoácidos terminais são tipicamente hidrofóbicos,tanto por causa de uma cadeia lateral hidrofóbica, quantoporque os aminoácidos terminais abrigam um ou mais gruposde proteção hidrofóbicos. Os aminoácidos finais (X1 e X4)são hidrofóbicos tanto por causa de uma cadeia lateralhidrofóbica, quanto pelo fato de a cadeia lateral ou de oterminal C e/ou N serem bloqueado com um ou mais grupo (s)de proteção hidrofóbico(s) (por exemplo, o N-terminal ébloqueado com Boc-, Fmoc-, Nicotinil- etc., e o C-terminalbloqueado com (tBu)-OtBu etc.). Tipicamente, a porçãocentral do peptídeo compreende um aminoácido básico ouácido e um aminoácido aromático (por exemplo, em um 4 mer)ou um domínio básico ou um domínio ácido e um domínioaromático em uma molécula mais longa.
Esses quatro-mers podem ser representados pela FórmulaI, em que X1 e X4 são hidrofóbicos e/ou abrigam um grupo(s)de proteção hidrofóbico(s), como aqui descrito, e X2 éácido ou básico enquanto X3 é aromático ou X2 é aromáticoenquanto X3 é ácido ou básico. 0 peptídeo pode ser só de L-aminoácidos ou incluir um ou mais ou só de D-aminoácidos.Cinco-mers podem ser representados por uma pequenamodificação da Fórmula I, em que X5 é inserido comomostrado na Tabela 10 e em que X5 é tipicamente umaminoácido aromático.
Alguns peptídeos preferidos desta invenção incluem,sem limitação, os peptídeos mostrados na Tabela 10.
Tabela 10. Exemplos de alguns peptídeos preferidos quepossuem Tim aminoácido ácido ou básico no centro, junto comum aminoácido aromãtico central.
<table>table see original document page 105</column></row><table><table>table see original document page 106</column></row><table>
Embora os peptídeos da Tabela 10 sejam ilustrados comgrupos de proteção específicos, observa-se que esses grupospodem ser substituídos por outros grupos de proteção comoaqui descritos e/ou um ou mais dos grupos de proteçãomostrados podem ser eliminados.
6) Pequenos peptídeos que possuem aminoácidosaromáticos ou aminoácidos aromáticos separados porhistidina(s) no centro.
Em certas modalidades, os peptídeos desta invenção sãocaracterizados por elétrons que são expostos no centro damolécula que permitem a hidratação da partícula e quepermitem que as partículas do peptídeo capturem lipídeosoxidados pró-inflamatórios, como hidroperóxidos de ácidograxo e fosfolipídeos que contêm um produto de oxidação deácido araquidônico na posição sn-2.
Em certas modalidades, esses peptídeos consistem em ummínimo de 4 aminoácidos e um máximo de cerca de 10aminoácidos, preferencialmente (mas não necessariamente)com um ou mais dos aminoácidos sendo o D-estereoisômero doaminoácido, com os aminoácidos finais sendo hidrofóbicostanto por causa de uma cadeia lateral hidrofóbica quantoporque o(s) aminoácido(s) terminal abriga um ou maisgrupo(s) de bloqueio hidrofóbico (por exemplo, um N-terminal bloqueado com Boc-, Fmoc-, Nicotinil-, esemelhantes, e um C-terminal bloqueado com (tBu)-OtBugrupos e semelhantes). Em vez de ter um aminoácido ácido oubásico no centro, esses peptídeos geralmente possuem umaminoácido aromático no centro ou possuem aminoácidosaromáticos separados por histidina no centro do peptídeo.Alguns peptídeos preferidos desta invenção incluem,sem limitação, os peptídeos mostrados na Tabela 11.Tabela 11. Exemplos de peptídeos que possuem aminoácidosaromáticos no centro ou aminoácidos aromáticos ou domíniosaromáticos separados por uma ou mais histidinas.
<table>table see original document page 107</column></row><table>
Embora os peptídeos da Tabela 11 sejam ilustrados comgrupos de proteção específicos, observa-se que esses grupospodem ser substituídos por outros grupos de proteção comoaqui descritos e/ou um ou mais dos grupos de proteçãomostrados podem ser eliminados.
7) Resumo de tripeptídeos e tetrapeptídeos.
Para uma maior compreensão, vários tripeptídeos etetrapeptídeos desta invenção são resumidos de forma geralabaixo na Tabela 12.
Tabela 12. Estrutura geral de alguns peptídeos destainvenção.
<table>table see original document page 108</column></row><table><table>table see original document page 109</column></row><table>
Quando forem desejados peptídeos mais longos, X2 e X3podem representar domínios (por exemplo, regiões de dois oumais aminoácidos do tipo especificado) em vez deaminoácidos individuais. A Tabela 12 visa a ser ilustrativae não limitante. Com o uso dos ensinamentos aquiapresentados, outros peptídeos adequados podem serfacilmente identificados.
8) Aminoácidos e dipeptídeos pareados.
Em certas modalidades, esta invenção está ligada àdescoberta de que certos pares de aminoácidos,administrados em conjunto uns com os outros ou ligados paraformar um dipeptídeo, possuem uma ou mais das propriedadesaqui descritas. Dessa forma, sem se prender a uma teoriaespecífica, acredita-se que, quando os pares de aminoácidossão administrados em conjunto uns com os outros, como aquidescrito, eles são capazes de participar ou induzir aformação de micelas in vivo.
Da mesma forma que os pequenos peptídeos aquidescritos, acredita-se que os pares de peptídeos seassociarão in vivo, e que exibem propriedades físicas queincluem solubilidade elevada em acetato de etila (porexemplo, acima de cerca de 4 mg/ml), solubilidade em tampãoaquoso em pH 7,0. Mediante o contato de fosfolipídeos, porexemplo, 1,2-Dimiristoil-sr2-glicero-3-fosfocolina (DMPC) ,em um ambiente aquoso, acredita-se que os pares deaminoácidos induzem ou participam na formação de partículascom um diâmetro de aproximadamente 7,5 nm (± 0,1 nm), e/ouinduzem ou participam na formação de bicamadas empilhadascom uma dimensão da bicamada da ordem de 3,4 a 4,1 nm, comespaçamento entre as bicamadas na pilha de aproximadamente2 nm, e/ou também induzem ou participam da formação deestruturas vesiculares de aproximadamente 38 nm.
Além disso, acredita-se ainda que os pares deaminoácidos possam exibir uma ou mais das seguintespropriedades fisiologicamente relevantes:
1. Eles convertem HDL pró-inf lamatório em HDLantiinflamatório ou tornam o HDL antiinflamatório maisantiinflamatório;
2. Eles diminuem a atividade quimiotática de monócitosinduzida por LDL gerada por células da parede arterial;3. Eles estimulam a formação e ciclagem de pré-β HDL;
4. Eles elevam o HDL-colesterol; e/ou
5. Eles aumentam atividade de HDL paraoxonase.
Os pares de aminoácidos podem ser administrados comoaminoácidos separados (administrados seqüencial ousimultaneamente, por exemplo, em uma formulação combinada)ou podem ser covalentemente acoplados diretamente ouatravés de um vinculador (por exemplo, um vinculador dePEG, um vinculador de carbono, um vinculador ramificado, umvinculador de cadeia linear, um vinculador heterocíclico,um vinculador formado por lipídeo derivatizado etc.). Emcertas modalidades, os pares de aminoácidos são ligadoscovalentemente através de uma ligação peptídica para formarum dipeptídeo. Em várias modalidades, embora os dipeptídeoscompreendam tipicamente dois aminoácidos, cada um abrigandoum grupo de proteção anexado, esta invenção tambémcontempla dipeptideos nos quais apenas um dos aminoácidosabriga um ou mais grupos de proteção.
Os pares de aminoácidos tipicamente compreendemaminoácidos em que cada aminoácido está anexado a pelomenos um grupo de proteção (por exemplo, um grupo deproteção hidrofóbico como aqui descrito) . Os aminoácidospodem estar na forma D ou L. Em certas modalidades, quandoos aminoácidos que compreendem os pares não estiveremanexados uns aos outros, cada aminoácido abrigará doisgrupos de proteção (por exemplo, moléculas 1 e 2 na Tabela 13).
Tabela 13. Pares de aminoácido ilustrativos desta invenção.
Par de aminoácidos /dipeptídeo
1. Boc-Arg-OtBu*<table>table see original document page 112</column></row><table>
* Esse seria tipicamente administrado em conjunto com umsegundo aminoácido.
** Em certas modalidades, esses dipeptídeos seriamadministrados em conjunto uns com os outros.
*** Em certas modalidades, esse peptideo seria administradoisoladamente ou em combinação com um dos outros peptídeosaqui descritos.
Pares de aminoácidos adequados podem ser facilmenteidentificados pela geração de um par de aminoácidosprotegidos e/ou um dipeptídeo, e depois rastreando-se o parde aminoácidos/dipeptídeo quanto a uma ou mais daspropriedades físicas e/ou fisiológicas aqui descritas. Emcertas modalidades, esta invenção exclui pares deaminoácidos e/ou dipeptídeos que compreendem ácidoaspártico e fenilalanina. Em certas modalidades, estainvenção exclui pares de aminoácidos e/ou dipeptídeos nosquais um aminoácido é (-)-N-[(trans-4-isopropilciclohexano)carbonil]-D-fenilalanina (nateglinida).
Em certas modalidades, os aminoácidos que compreendemo par são independentemente selecionados do grupo queconsiste em um aminoácido ácido (por exemplo, ácidoaspártico, ácido glutâmico etc.), um aminoácido básico (porexemplo, lisina, arginina, histidina etc.) e um aminoácidonão polar (por exemplo, alanina, valina, leucina,isoleucina, prolina, fenilalanina, triptofano, metioninaetc.). Em certas modalidades, quando o primeiro aminoácidoé ácido ou básico, o segundo aminoácido é não polar, equando o segundo aminoácido é ácido ou básico, o primeiroaminoácido é não polar. Em certas modalidades, quando oprimeiro aminoácido é ácido, o segundo aminoácido é básico,e vice-versa (veja, por exemplo, Tabela 14).
Podem ser obtidas combinações similares pelaadministração de pares de dipeptídeos. Dessa forma, porexemplo, em certas modalidades, as moléculas 3 e 4 naTabela 13 seriam administradas em conjunto umas com asoutras.
Tabela 14. Certos pares de aminoácidos/dipeptídeosgeneralizados.
<table>table see original document page 113</column></row><table>
Observa-se que esses pares de aminoácidos/dipeptídeosvisam a ser ilustrativos e não limitantes. Com o uso dosensinamentos aqui apresentados, outros pares deaminoácidos/dipeptídeos adequados podem ser facilmentedeterminados.
E) Apo-j (peptídeos G*).
Em certas modalidades desta invenção, foi descobertoque peptídeos que mimetizam os domínios helicoidaisanfipáticos de apoJ são capazes de atenuar um ou maissintomas de aterosclerose e/ou de outras patologias aquidescritas. A apolipoproteína J possui uma face não polarampla denominada proteína globular-Iikel ou domínioshelicoidais anfipáticos G*. A hélice anfipática da classe Gé encontrada em proteínas globulares, daí o nome classe G.
Essa classe de hélice anfipática é caracterizada por umadistribuição aleatória de resíduos carregados positivamentee carregados negativamente na face polar, com uma face nãopolar estreita. Em função da face não polar estreita, essaclasse não se associa facilmente aos fosfolipídeos. Ahélice anfipática G* possui características similares, masnão idênticas, à hélice anfipática G. Do mesmo modo que ospeptídeos de hélice anfipática da classe G, os peptídeos daclasse G* possuem uma distribuição aleatória de resíduoscarregados positivamente e negativamente na face polar. Noentanto, em contraste com a hélice anfipática da classe G,que tem uma face não polar estreita, essa classe tem umaface não polar ampla que permite que essa classe se liguefacilmente ao fosfolipídeo, e a classe é denominada G* paradiferenciá-la da hélice anfipática da classe G.
Diversos peptídeos anfipáticos G* adequados sãodescritos nos pedidos provisórios USSN 10/120.508,depositado em 5 de abril de 2002, USSN 10/520.207,depositado em Io de abril de 2003, e Pedido PCTPCT/US 03/09988, depositado em Io de abril de 2003. Alémdisso, vários peptídeos adequados desta invenção que estãorelacionados aos domínios helicoidais anfipáticos G* deapoJ são ilustrados na Tabela 15.
Tabela 15. Algvins peptídeos para uso nesta invençãorelacionados aos domínios helicoidais anfipáticos G* de apoJ.<table>table see original document page 115</column></row><table>
Os peptídeos desta invenção, no entanto, não selimitam às variantes G* de apoJ. De forma geral, osdomínios G* de praticamente qualquer outra proteína,preferivelmente proteínas apo, também são adequados. Aadequação particular de tais proteínas pode facilmente serdeterminada com o uso de ensaios quanto à atividadeprotetora (por exemplo, proteção de LDL da oxidação, esemelhantes), por exemplo, como aqui ilustrado nosExemplos. Algumas proteínas particularmente preferidasincluem domínios helicoidais anfipáticos G* ou variantesdestes (por exemplo, substituições conservadoras, esemelhantes) de proteínas que incluem, sem limitação,apoAI, apoAIV, apoE, apo CII, apo CIII, e semelhantes.
Alguns peptídeos preferidos relacionados aos domínioshelicoidais anfipáticos G* relacionados a outrasapoproteínas diferentes de apoJ são ilustrados na Tabela 16.
Tabela 16. Alguns peptídeos para uso nesta invençãorelacionados aos domínios helicoidais anfipáticos G*relacionados a outras apoproteínas diferentes de apoJ.
<table>table see original document page 116</column></row><table><table>table see original document page 117</column></row><table>
Peptídeos G* ilustrativos adicionais são mostrados na Tabela 17.
Tabela 17. Peptídeos G* ilustrativos adicionais.
<table>table see original document page 117</column></row><table><table>table see original document page 118</column></row><table>Ac-Lys-Trp-Ile-Tyr-His-Leu-Thr-Glu-Gly-Ser-Thr- Asp-Tyr-Arg-Thr-Glu-Gly-NH2 1. 067Ac-Lys-Trp-Ile-Tyr-His-Leu-Thr-Glu-Gly-Ser-Thr- Asp-Ile-Arg-Thr-Glu-Gly-NH2 1.068Ac-Lys-Trp-Ile-Tyr-His-Leu-Thr-Glu-Gly-Ser-Thr- Asp-Val-Arg-Thr-Glu-Gly-NH2 1. 069Ac-Lys-Trp-Ile-Tyr-His-Leu-Thr-Glu-Gly-Ser-Thr- Asp-Leu-Lys-Thr-Glu-Gly-NH2 1. 070Ac-Lys-Trp-Ile-Tyr-His-Leu-Thr-Glu-Gly-Ser-Thr- Asp-Leu-Arg-Ser-Glu-Gly-NH2 1. 071Ac-Lys-Trp-Ile-Tyr-His-Leu-Thr-Glu-Gly-Ser-Thr- Asp-Leu-Arg-Thr-Asp-Gly-NH2 1. 072Ac-Lys-Trp-Ile-Tyr-His-Leu-Thr-Glu-Gly-Ser-Thr- Asp-Ile-Lys-Thr-Glu-Gly-NH2 1. 073Ac-Lys-Trp-Ile-Tyr-His-Leu-Thr-Glu-Gly-Ser-Thr- Asp-Ile-Arg-Ser-Glu-Gly-NH2 1. 074Ac-Lys-Trp-Ile-Tyr-His-Leu-Thr-Glu-Gly-Ser-Thr- Asp-Ile-Lys- Ser-Glu-Gly-NH2 1.075Ac-Lys-Trp-Ile-Tyr-His-Leu-Thr-Glu-Gly-Ser-Thr- Asp-Ile-Lys-Ser-Asp-Gly-NH2 1. 076Ac-Arg-Trp-Ile-Tyr-His-Leu-Thr-Glu-Gly-Ser-Thr- Asp-Leu-Arg-Thr-Glu-Gly-NH2 1. 077Ac-Arg-Tyr-Ile-Trp-His-Leu-Thr-Glu-Gly-Ser-Thr- Asp-Ile-Arg-Thr-Glu-Gly-NH2 1. 078Ac-Arg-Trp-Ile-Tyr-His-Leu-Thr-Glu-Gly-Ser-Thr- Asp-IIe-Arg-Thr-Asp-Gly-NH2 1. 079Ac-Arg-Trp-Ile-Phe-His-Leu-Thr-Glu-Gly-Ser-Thr- Asp-Ile-Arg-Thr-Glu-Gly-NH2 1. 080Ac-Arg-Trp-Ile-Tyr-His-Leu-Thr-Glu-Gly-Ser-Thr- Asp-Leu-Lys-Thr-Glu-Gly-NH2 1.081Ac-Arg-Trp-Ile-Tyr-His-Leu-Thr-Asp-Gly-Ser-Thr- Asp-Ile-Arg-Thr-Glu-Gly-NH2 1.082Ac-Arg-Trp-Ile-Tyr-His-Leu-Thr-Asp-Gly-Ser-Thr- Asp-Leu-Arg-Thr-Glu-Gly-NH2 1. 083Ac-Arg-Trp-Ile-Tyr-Phe-Leu-Thr-Glu-Gly-Ser-Thr- Asp-Ile-Arg-Thr-Glu-Gly-NH2 1.084Ac-Arg-Trp-Ile-Tyr-Phe-Leu-Thr-Glu-Gly-Ser-Thr- Asp-Leu-Arg-Thr-Glu-Gly-NH2 1.085Ac-Lys-Trp-Phe-Tyr-His-Leu-Thr-Glu-Gly-Ser-Thr- Asp-Phe-Arg-Thr-Glu-Gly-NH2 1. 086Ac-Arg-Trp-Phe-Tyr-His-Leu-Thr-Glu-Gly-Ser-Thr- Asp-Leu-Arg-Thr-Glu-Gly-NH2 1. 087Ac-Lys-Trp-Ile-Phe-His-Leu-Thr-Glu-Gly-Ser-Thr- Asp-I1e-Arg-Thr-Asp-Gly-NH2 1. 088Ac-Arg-Trp-Ile-Tyr-His-Leu-Thr-Glu-Gly-Ser-Thr- Asp-Ile-Arg-Thr-Asp-Gly-NH2 1. 089Ac-Arg-Trp-Ile-Tyr-His-Leu-Thr-Glu-Gly-Ser-Thr- Asp-Leu-Arg-Thr-Asp-Gly-NH2 1. 090Ac-Lys-Trp-Ile-Tyr-His-Leu-Thr-Glu-Gly-Ser-Thr- Asp-Ile-Lys-Thr-Glu-Gly-NH2 1. 091Ac-Lys-Trp-Ile-Tyr-His-Leu-Thr-Glu-Gly-Ser-Thr- Asp-Ile-Lys-Thr-Asp-Gly-NH2 1.092Ac-Lys-Trp-Ile-Tyr-His-Leu-Thr-Glu-Gly-Ser-Thr- Asp-Phe-Lys-Thr-Glu-Gly-NH2 1. 093Ac-Lys-Trp-Ile-Tyr-His-Leu-Thr-Glu-Gly-Ser-Thr- Asp-Tyr-Lys-Thr-Glu-Gly-NH2 1.094Ac-Lys-Trp-Ile-Tyr-His-Leu-Thr-Glu-Gly-Ser-Thr- Asp-Ile-Arg-Thr-Glu-Gly-NH2 1. 095Ac-Lys-Trp-Phe-Tyr-His-Phe-Thr-Glu-Gly-Ser-Thr- Asp-Leu-Arg-Thr-Glu-Gly-NH2 1. 096Ac-Arg-Trp-Phe-Tyr-His-Phe-Thr-Glu-Gly-Ser-Thr- Asp-Leu-Arg-Thr-Glu-Gly-NH2 1. 097Ac-Lys-Trp-Phe-Tyr-His-Phe-Thr-Glu-Gly-Ser-Thr- Asp-Phe-Arg-Thr-Glu-Gly-NH2 1. 098Ac-Lys-Trp-Phe-Tyr-His-Phe-Thr-Asp-Gly-Ser-Thr- Asp-Ile-Arg-Thr-Glu-Gly-NH2 1. 099Ac-Arg-Trp-Phe-Tyr-His-Phe-Thr-Glu-Gly-Ser-Thr- Asp-Leu-Arg-Thr-Glu-Gly-NH2 1.100Ac-Arg-Trp-Phe-Tyr-His-Phe-Thr-Glu-Gly-Ser-Thr- Asp-Phe-Arg-Thr-Glu-Gly-NH2 1.101Ac-Arg-Trp-Phe-Tyr-His-Phe-Thr-Glu-Gly-Ser-Thr- Asp-Phe-Arg-Thr-Asp-Gly-NH2 1. 102Ac-Glu-Lys-Cys-Val-Glu-Glu-Phe-Lys-Ser-Leu-Thr- Ser-Cys-Leu-Asp-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 1.103Ac-Asp-Lys-Cys-Val-Glu-Glu-Phe-Lys-Ser-Leu-Thr- Ser-Cys-Leu-Asp-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 1.104Ac-Glu-Lys-Cys-Val-Asp-Glu-Phe-Lys-Ser-Leu-Thr- Ser-Cys-Leu-Asp-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 1.105Ac-Glu-Lys-Cys-Val-Glu-Asp-Phe-Lys-Ser-Leu-Thr- Ser-Cys-Leu-Asp-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 1.106Ac-Glu-Arg-Cys-Val-Glu-Glu-Phe-Lys-Ser-Leu-Thr- Ser-Cys-Leu-Asp-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 1.107Ac-Asp-Lys-Cys-Val-Asp-Asp-Phe-Lys-Ser-Leu-Thr- Ser-Cys-Leu-Asp-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 1.108Ac-Asp-Arg-Cys-Val-Glu-Glu-Phe-Lys-Ser-Leu-Thr- Ser-Cys-Leu-Asp-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 1.109Ac-Glu-Arg-Cys-Val-Asp-Asp-Phe-Lys-Ser-Leu-Thr- Ser-Cys-Leu-Asp-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 1.110Ac-Glu-Lys-Cys-Val-Glu-Glu-Phe-Lys-Ser-Phe-Thr- Ser-Cys-Leu-Asp-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 1.111<table>table see original document page 122</column></row><table>Ac-Glu-Lys-Cys-Val-Glu-Glu-Phe-Lys-Ser-Phe-Thr- Ser-Cys-Leu-Asp-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 1.127Ac-Glu-Lys-Cys-Val-Glu-Glu-Phe-Lys-Ser-Phe-Thr- Ser-Cys-Phe-Asp-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 1.128Ac-Glu-Lys-Cys-Val-Glu-Glu-Phe-Lys-Ser-Phe-Thr- Ser-Cys-Phe-Glu-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 1.129Ac-Glu-Lys-Cys-Val-Glu-Glu-Phe-Lys-Ser-Phe-Thr- Ser-Cys-Leu-Glu-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 1.130Ae-Glu-Lys-Cys-Val-Glu-Glu-Phe-Lys-Ser-Phe-Thr- Ser-Cys-Ile-Asp-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 1.131Ac-Glu-Lys-Cys-Val-Glu-Glu-Leu-Lys-Ser-Phe-Thr- Ser-Cys-Phe-Asp-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 1.132Ac-Asp-Lys-Cys-Val-Glu-Glu-Phe-Lys-Ser-Phe-Thr- Ser-Cys-Phe-Asp-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 1.133Ae-Asp-Lys-Cys-Val-Glu-Glu-Phe-Lys-Ser-Phe-Thr- Ser-Cys-Phe-Glu-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 1.134Ac-Glu-Arg-Cys-Val-Glu-Glu-Phe-Lys-Ser-Phe-Thr- Ser-Cys-Phe-Asp-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 1.135Ac-Glu-Lys-Cys-Phe-Glu-Glu-Phe-Lys-Ser-Phe-Thr- Ser-Cys-Phe-Asp-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 1.136Ac-Glu-Lys-Cys-Phe-Glu-Glu-Phe-Lys-Ser-Phe-Thr- Ser-Cys-Phe-Glu-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 1.137Ac-Glu-Lys-Cys-Val-Glu-Glu-Phe-Lys-Ser-Phe-Ser- Ser-Cys-Phe-Glu-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 1.138Ac-Glu-Lys-Cys-Val-Glu-Glu-Phe-Lys-Ser-Phe-Gln- Ser-Cys-Phe-Asp-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 1.139Ac-Glu-Lys-Cys-Phe-Glu-Glu-Phe-Lys-Ser-Phe-Gln- Ser-Cys-Phe-Asp-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 1.140Ae-Glu-Lys-Cys-Val-Glu-Glu-Phe-Lys-Gln-Phe-Thr- Ser-Cys-Phe-Asp-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 1.141<table>table see original document page 124</column></row><table>Ac - Glu-Lys-Ala-Val-Glu-Glu-Phe-Lys-Ser-Phe-Thr- Ser-Ala-Leu-Asp-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 1.157Ac-Asp-Lys-Ala-Val-Glu-Glu-Phe-Lys-Ser-Phe-Thr- Ser-Ala-Leu-Asp-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 1.158Ac-Asp-Arg-Ala-Phe-Glu-Glu-Phe-Lys-Ser-Phe-Thr- Ser-Cys-Leu-Asp-Ser-Lys-Phe-Phe-NH2 1.159Ac-Asp-Arg-Ala-Phe-Glu-Glu-Phe-Lys-Ser-Phe-Thr- Ser-Ala-Leu-Asp-Ser-Lys-Phe-Phe-NH2 1.160Ae-Asp-Lys-Cys-Phe-Glu-Glu-Phe-Lys-Ser-Phe-Thr- Ser-Cys-Phe-Glu-Ser-Lys-Phe-Phe-NH2 1.161Ae-Glu-Lys-Cys-Tyr-Glu-Glu-Phe-Lys-Ser-Phe-Thr- Ser-Cys-Leu-Asp-Ser-Lys-Phe-Phe-NH2 1.162Ac-Asp-Lys-Cys-Trp-Glu-Glu-Phe-Lys-Ser-Phe-Thr- Ser-Cys-Leu-Asp-Ser-Lys-Phe-Phe-NH2 1.163Ac-Glu-Lys-Cys-Phe-Glu-Glu-Phe-Lys-Ser-Tyr-Thr- Ser-Cys-Leu-Asp-Ser-Lys-Phe-Phe-NH2 1.164Ac-Glu-Lys-Cys-Phe-Glu-Glu-Phe-Lys-Ser-Trp-Thr- Ser-Cys-Leu-Asp-Ser-Lys-Phe-Phe-NH2 1.165Ac-Glu-Lys-Cys-Val-Glu-Glu-Phe-Lys-Ser-Trp-Thr- Ser-Cys-Leu-Asp-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 1.166Ac-Asp-Lys-Cys-Phe-Glu-Glu-Phe-Lys-Ser-Trp-Thr- Ser-Cys-Leu-Asp-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 1. 167
Outros peptídeos adequados incluem, mas não limitandoa, os peptídeos da Tabela 18.
Tabela 18. Peptídeos ilustrativos que possuem uma fasehidrofóbica aprimorada.
<table>table see original document page 125</column></row><table><table>table see original document page 126</column></row><table>
Os peptídeos aqui descritos (V2W3A5F10,17-D-4F;V2W3F10-D-4F; W3-D-4F) podem ser mais potentes do que o D-4F original.
Ainda outros peptídeos adequados incluem, semlimitação: P1-Dimetiltirosina-D-Arg-Phe-Lys-P2 (ID. DE SEQ.N°: 1.171) e Pl-Dimetiltirosina-Arg-Glu-Leu-P2, em que Pl eP2 são grupos de proteção como aqui descritos. Em certasmodalidades, esses peptídeos incluem, sem limitação,BocDimetiltirosina-D-Arg-Phe-Lys(OtBu) eBocDimetiltirosina-Arg-Glu-Leu(OtBu).
Em certas modalidades, os peptídeos desta invençãoincluem peptídeos que compreendem ou que consistem em umaseqüência de aminoácidos LAEYHAK (ID. DE SEQ. N°: 1.172)que compreende pelo menos um D-aminoácido e/ou pelo menosum ou dois grupos de proteção terminais. Em certasmodalidades, esta invenção inclui um peptídeo que melhoraum ou mais sintomas de uma condição inflamatória, em que opeptídeo: tem comprimento que varia de cerca de 3 a cercade 10 aminoácidos; compreende uma seqüência de aminoácidos,em que a seqüência compreende aminoácidos ácidos ou básicosque se alternam com aminoácidos aromáticos ou hidrofóbicos;compreende aminoácidos hidrofóbicos terminais ouaminoácidos terminais que abrigam um grupo de proteçãohidrofóbico; não é a seqüência LAEYHAK (ID. DE SEQ. N°:1.173) que compreende somente L-aminoácidos; em que opeptídeo converte HDL pró-inflamatório em HDLantiinflamatório e/ou torna o HDL antiinflamatório maisantiinflamatório.
Observa-se também que os peptídeos listados nasTabelas aqui apresentadas não são totalmente inclusivos.Com o uso dos ensinamentos aqui apresentados, outrospeptídeos adequados podem ser rotineiramente produzidos(por exemplo, por substituições conservadoras ousemiconservadoras (por exemplo, D substituído por Ε),extensões, eliminações, e semelhantes). Dessa forma, porexemplo, uma modalidade utiliza truncamentos de qualquer umou mais dos peptídeos identificados pelos IDS. DE SEQ. Nos:1.011-1.039.
Peptídeos mais longos também são adequados. Taispeptídeos mais longos podem formar inteiramente uma héliceanfipática da classe G ou G*, ou a hélice anfipática G(hélices) pode formar um ou mais domínios do peptídeo. Alémdisso, esta invenção contempla versões multiméricas dospeptídeos. Dessa forma, por exemplo, os peptídeosilustrados nas Tabelas aqui apresentadas podem seracoplados juntos (diretamente ou através de um vinculador(por exemplo, um vinculador de carbono ou um ou maisaminoácidos) com um ou mais aminoácidos intervenientes).Vinculadores adequados incluem, sem limitação, Prolina (-Pro-), Gly4Ser3 (ID. DE SEQ. N°: 1.174), e semelhantes.Dessa forma, um peptídeo multimérico ilustrativo de acordocom esta invenção é (D-J336)-P-(D-J336) (ou seja, Ac-L-L-E-Q-L-N-E-Q-F-N-W-V-S-R-L-A-N-L-T-Q-G-E-P-L-L-E-Q-L-N-E-Q-F-N-W-V-S- R-L-A-N-L-T-Q-G-E-NH2, ID. DE SEQ. Ν°: 1.175).
Esta invenção também contempla o uso de peptídeos"híbridos" que compreendem um ou mais domínios helicoidaisanfipáticos G ou G* e uma ou mais hélices anfipáticas daClasse A. Peptídeos helicoidais anfipáticos da Classe Aadequados são descritos no pedido PCT WO 02/15923. Dessaforma, como forma de ilustração, um desses peptídeos"híbridos" é (D-J336)-Pro-(4F) (ou seja, Ac-L-L-E-Q-L-N-E-Q-F-N-W-V-S-R-L-A-N-L-T-Q-G-E-P-D-W-F-K-A-F-Y-D-K-V-A-E-K-F-K-E-A-F-NH2, ID. DE SEQ. N°: 1176), e semelhantes.
Com o uso dos ensinamentos aqui apresentados, aqueleshabilitados na técnica podem rotineiramente modificar ospeptídeos helicoidais anfipáticos ilustrados para aprodução de outras variantes apoJ adequadas e/ou peptídeoshelicoidais anfipáticos G e/ou A desta invenção. Porexemplo, podem ser feitas substituições conservadoras ousemiconservadoras rotineiras (por exemplo, D por E) dosaminoácidos existentes. 0 efeito de várias substituiçõessobre a afinidade lipídica do peptídeo resultante pode serprevisto com o uso do método computacional descrito por
Palgunachari e cols. (1996) Arteriosclerosis, Thrombosis, &Vascular Biology 16: 328-338. Os peptídeos podem seralongados ou encurtados, desde que a(s) estrutura(s) daclasse da hélice seja preservada. Além disso, podem serfeitas substituições para tornar o peptídeo resultante maissimilar ao(s) peptídeo(s) produzido(s) endogenamente pelaespécie em questão.
Embora, em modalidades preferidas, os peptídeos destainvenção utilizem aminoácidos de ocorrência natural ouformas D de aminoácidos de ocorrência natural, também sãocontempladas substituições com aminoácidos de ocorrêncianão natural (por exemplo, metionina sulfóxido, metioninametilsulfônio, norleucina, ácido épsilon-aminocapróico,ácido 4-aminobutanóico, ácido tetra-hidroisoquinolina-3-carboxilico, ácido 8-aminocaprílico, ácido 4-aminobutírico,Lys(N(épsilon)-Trifluoracetil), ácido a-aminoisobutírico,e semelhantes).
Novos peptídeos podem ser projetados e/ou avaliadoscom o uso de métodos computacionais. Programas decomputador para a identificação e classificação de domínioshelicoidais antipáticos são bem conhecidos por aqueleshabilitados na técnica, e muitos foram descritos por Jonese cols. (1992) J. Lipid Res. 33: 287-296). Tais programasincluem, sem limitação, o programa de roda helicoidal(WHEEL ou WHEEL/SNORKEL), programa de rede helicoidal(HELNET, HELNET/SNORKEL, HELNET/Angle) , programa para aadição de rodas helicoidais (COMBO ou COMBO/SNORKEL),programa para a adição de redes helicoidais (COMNET,COMNET/SNORKEL, COMBO/SELECT, COMBO/NET), programa de rodade consenso (CONSENSUS, CONSENSUS/SNORKEL), e semelhantes.
F) Grupos de bloqueio e resíduos D.
Embora os vários peptídeos e/ou pares de aminoácidoaqui descritos possam ser mostrados sem grupos de proteção,em certas modalidades (por exemplo, particularmente paraadministração oral), eles podem abrigar um, dois , três,quatro ou mais grupos de proteção. Os grupos de proteçãopodem ser ligados ao terminal C e/ou N do(s) peptídeo(s)e/ou a um ou mais resíduos internos que compreendem o(s)peptídeo(s) (por exemplo, um ou mais grupos R nosaminoácidos constituintes podem ser bloqueados). Dessaforma, por exemplo, em certas modalidades, qualquer um dospeptídeos aqui descritos pode abrigar, por exemplo, umgrupo acetil que protege o terminal amino e/ou um grupoamida que protege o terminal carboxil. Um exemplo de um"peptídeo com proteção dupla" é Ac-L-L-E-Q-L-N-E-Q-F-N-W-V-S-R-L-A-N-L-T-Q-G-E-NH2 (ID. DE SEQ. N°: 1.011 com gruposde bloqueio), um ou ambos esses grupos de proteção podemser eliminados e/ou substituídos com outro grupo deproteção, como aqui descrito.
Sem se prender a uma teoria específica, foi umadescoberta desta invenção que o bloqueio, particularmentedos terminais amino e/ou carboxil dos peptídeos destainvenção em questão, aprimora acentuadamente a liberaçãooral e aumenta significativamente a meia-vida sérica.
Um grande número de grupos de proteção é adequado paraessa finalidade. Tais grupos incluem, sem limitação, gruposacetil, amida e alquil, com grupos acetil e alquilsendo particularmente preferidos para proteção do N-terminal e grupos amida sendo preferidos para proteção doterminal carboxil. Em certas modalidades particularmentepreferidas, os grupos de proteção incluem, sem limitação,cadeias alquil, como em ácidos graxos, propeonil, formil, eoutras. Grupos de proteção carboxil particularmentepreferidos incluem amidas, ésteres e grupos de proteção queformam éter. Em uma modalidade preferida, é usado um grupoacetil para proteger o terminal amino, e um grupo amida éusado para proteger o terminal carboxil. Esses grupos debloqueio intensificam as tendências de formação de hélicedos peptídeos. Certos grupos de bloqueio particularmentepreferidos incluem grupos alquil de vários comprimentos,por exemplo, grupos que possuem a fórmula: CH3-(CH2)n-CO-,em que η varia de cerca de 1 a cerca de 20, preferivelmentede cerca de 1 a cerca de 16 ou 18, mais preferivelmente decerca de 3 a cerca de 13 e, principalmente, de cerca de 3 acerca de 10.
Em certas modalidades particularmente preferidas, osgrupos de proteção incluem, sem limitação, cadeias alquil,como em ácidos graxos, propeonil, formil, e outras. Gruposde proteção carboxil particularmente preferidos incluemamidas, ésteres e grupos de proteção que formam éter. Emuma modalidade preferida, um grupo acetil é usado paraproteger o terminal amino e um grupo amida é usado paraproteger o terminal carboxil. Esses grupos de bloqueiointensificam as tendências de formação de hélice dospeptídeos. Certos grupos de bloqueio particularmentepreferidos incluem grupos alquil de vários comprimentos,por exemplo, grupos que possuem a fórmula: CH3-(CH2)n-CO-,em que η varia de cerca de 3 a cerca de 20, preferivelmentede cerca de 3 a cerca de 16, mais preferivelmente de cercade 3 a cerca de 13 e, principalmente, de cerca de 3 a cercade 10.
Outros grupos de proteção incluem, sem limitação,Fmoc, t-butoxicarbonil (t-BOC), grupo 9-fluorenoacetil,grupo 1-fluorenocarboxilico, grupo 9-fluorenocarboxilico,grupo 9-fluorenona-1-carboxíIico, benziloxicarbonil, Xantil(Xan), Tritil (Trt), 4-metiltritil (Mtt), 4-metoxitritil(Mmt), 4-metóxi-2,3,6- trimetil-benzenossulfonil (Mtr),Mesitileno-2-sulfonil (Mts), 4,4-dimetoxibenzidril(Mbh),Tosil (Tos), 2,2,5,7,8-pentametil croman-6-sulfonil(Pmc), 4-metilbenzil (MeBzl), 4-metoxibenzil (MeOBzl),Benziloxi (BzlO), Benzil (Bzl), Benzoil (Bz), 3-nitro-2-piridinassulfenil (Npys), 1-(4,4-dimentil-2,6-diaxociclohexilideno)etil (Dde), 2,6-diclorobenzil (2,6-DiCl-Bzl), 2- clorobenziloxicarbonil (2-C1-Z), 2-bromobenziloxicarbonil (2-Br-Ζ), Benziloximetil (Bom),ciclohexiloxi (cHxO), t-butoximetil (Bum), t-butóxi (tBuO),t-Butil (tBu), Acetil (Ac) e Trifluoracetil (TFA).
Grupos de proteção/bloqueio são bem conhecidos poraqueles habilitados na técnica, bom como o são os métodosde acoplamento de tais grupos ao(s) resíduo(s)apropriado(s) que compreendem os peptídeos desta invenção(veja, por exemplo, Greene e cols., (1991) Protective„'Grupos in Organic Synthesis, 2a ed. , John Wiley & Sons,Inc. Somerset, N.J.). Em uma modalidade preferida, porexemplo, a acetilação é obtida durante a síntese quando opeptídeo está sobre uma resina com o uso de anidridoacético. A proteção de amida pode ser obtida pela seleçãode uma resina adequada para a síntese. Durante a síntesedos peptídeos aqui descritos nos exemplos, foi usada umaresina amida rink. Após o término da síntese, os grupos deproteção semipermanentes em aminoácidos ácidosbifuncionais, tais como Asp e Glu, e aminoácido básico Lys,hidroxil de Tyr são todos removidos simultaneamente. Ospeptídeos liberados de uma resina como essa com autilização de tratamento ácido surgem com o n-terminalprotegido como acetil e o carboxil protegido como NH2, ecom a remoção simultânea de todos os outros grupos deproteção.
Em certas modalidades particularmente preferidas, ospeptídeos compreendem um ou mais aminoácidos da forma D(dextro ao invés de levo) como aqui descritos. Em certasmodalidades, pelo menos dois aminoácidos enantioméricos,mais preferivelmente pelo menos 4 aminoácidosenantioméricos e, principalmente, pelo menos 8 ou 10aminoácidos enantioméricos, são aminoácidos na forma "D".
Em certas modalidades, alguns, ou até mesmo todos osaminoácidos (por exemplo, todos os aminoácidosenantioméricos) dos peptídeos aqui descritos são umaminoácido na forma D.
Em certas modalidades, pelo menos 50% dos aminoácidosenantioméricos estão na forma "D", mais preferivelmente,pelo menos 80% dos aminoácidos enantioméricos estão naforma "D" e, principalmente, pelo menos 90% ou até mesmotodos os aminoácidos enantioméricos são aminoácidos naforma "D" .
G) Miméticos de peptídeos.
Além dos peptídeos aqui descritos, também sãocontemplados peptidomiméticos. Análogos de peptídeos sãocomumente usados na indústria farmacêutica como fármacosnão peptídicos com propriedades análogas àquelas dopeptídeo-modelo. Esses tipos de compostos não peptídicossão denominados "miméticos de peptídeos" ou"peptidomiméticos" (Fauchere (1986) Adv. Drug Res. 15: 29;Veber e Freidinger (1985) TINS p.3 92; e Evans e cols.(1987) J. Med. Chem. 30: 1.229) e são normalmentedesenvolvidos com o auxílio de modelagem molecularcomputadorizada. Miméticos de peptídeos que sãoestruturalmente similares aos peptídeos terapeuticamenteúteis podem ser usados para a produção de um efeitoterapêutico ou profilático equivalente.Geralmente, peptidomiméticos são estruturalmentesimilares a um polipeptídeo-paradigma (por exemplo, ID. DESEQ. N°: 5, mostrado na Tabela 1), mas têm uma ou maisligações peptídicas opcionalmente substituídas por umaligação selecionada do grupo que consiste em: -CH2NH-,CH2S-, -CH2-CH2-, -CH=CH- (eis e trans) , -COCH2-,CH(OH)CH2-, -CH2SO- etc. por métodos conhecidos na técnicae descritos com mais detalhes nas seguintes referências:Spatola (1983) p. 267 em Chemistry and Biochemistry ofAmino acids, Peptides, and Proteins, B. Weinstein, eds. ,Mareei Dekker, Nova York,; Spatola (1983) Vega Data 1(3)Peptide Backbone Modifications. (revisão geral); Morley(1980) Trends Pharm. Sei. pp. 463-468 (revisão geral);Hudson e cols. (1979) Int. J. Pept. Prot. Res. 14: 177-185(-CH2NH-, CH2CH2-); Spatola e cols. (1986) Life Sci 38:1.243-1.249 (-CH2-S); Hann1 (1982) J. Chem. Soe. PerkinTrans. I 307-314 (-CH-CH-, eis e trans); Almquist e cols.(1980) J. Med. Chem. 23: 1.392-1.398 (-COCH2-); Jennings-White e cols. (1982) Tetrahedron Lett. 23: 2.533 (-COCH2-);Szelke e cols., European Appin. EP 45665 (1982) CA:97:39405 (1982) (-CH(OH)CH2-); Holladay e cols. (1983)Tetrahedron Lett. 24 :v 4.401-4.404 (-C(OH)CH2-); e Hruby(1982) LifeSci., 31: 189-199 (-CH2-S-)).
Uma ligação não peptídica particularmente preferida é-CH2NH-. Tais miméticos de peptídeos podem ter vantagenssignificativas em relação às modalidades de polipeptídeos,incluindo, por exemplo: produção mais econômica, maiorestabilidade química, propriedades farmacológicasaprimoradas (meia-vida, absorção, potência, eficácia etc.),antigenicidade reduzida, e outras.Além disso, permutações em círculo dos peptídeos aquidescritos ou em peptídeos restritos (que incluem peptídeosciclizados) que compreendem uma seqüência de consenso ouuma variação da seqüência de consenso substancialmenteidêntica podem ser geradas por métodos conhecidos natécnica (Rizo e Gierasch (1992) Ann. Rev. Biochem. 61:387) ; por exemplo, pela adição de resíduos internos decisteína capazes de formar pontes dissulfetointramoleculares que ciclizam o peptídeo.
H) Pequenas moléculas orgânicas.
Em certas modalidades, os agentes ativos destainvenção incluem pequenas moléculas orgânicas, por exemplo,como descrito no pedido provisório USSN 60/600.925,depositado em 11 de agosto de 2004. Em várias modalidades,as pequenas moléculas orgânicas são similares e, em certoscasos, miméticos dos tetra- e pentapeptídeos descritos nopedido provisório USSN 10/649,378, depositado em 26 deagosto de 2003, e em USSN 60/494.449, depositado em 11 deagosto.
As pequenas moléculas orgânicas desta invençãotipicamente possuem pesos moleculares menores do que cercade 900 Dáltons. Tipicamente, as moléculas são altamentesolúveis em acetato de etila (por exemplo, em concentraçõesiguais ou maiores do que 4 mg/ml), e também são solúveis emtampão aquoso em pH 7,0.
O contato de fosfolipídeos, por exemplo, ,1,2-dimiristoil-sn-glicero-3-fosfocolina (DMPC), com aspequenas moléculas orgânicas desta invenção em um ambienteaquoso, resulta tipicamente na formação de partículas comum diâmetro de aproximadamente 7,5 nm (± 0,1 nm) . Alémdisso, freqüentemente são formadas bicamadas empilhadas comuma dimensão da bicamada da ordem de 3,4 a 4,1 nm, comespaçamento entre as bicamadas na pilha de aproximadamente2 nm. Estruturas vesiculares de aproximadamente 38 nmtambém são formadas freqüentemente. Além disso, quando asmoléculas desta invenção são administradas a um mamífero,elas tornam o HDL mais antiinflamatório e atenuam um oumais sintomas de aterosclerose e/ou de outras condiçõescaracterizadas por uma resposta inflamatória.
Dessa forma, em certas modalidades, a pequena moléculaorgânica é uma que melhora um ou mais sintomas de umapatologia caracterizada por uma resposta inflamatória em ummamífero (por exemplo, aterosclerose), em que a pequenamolécula é solúvel em acetato de etila em uma concentraçãoacima de 4 mg/ml, é solúvel em tampão aquoso em pH 7,0 e,quando colocada em contato com um fosfolipídeo em umambiente aquoso, forma partículas com um diâmetro deaproximadamente 7,5 nm e forma bicamadas empilhadas com umadimensão da bicamada da ordem de 3,4 a 4,1 nm, comespaçamento entre as bicamadas na pilha de aproximadamente2 nm, e tem um peso molecular abaixo de 900 dáltons.
Em certas modalidades, a molécula tem a fórmula:
<formula>formula see original document page 136</formula>
selecionados
em que P1, P2, P3 e P4 são selecionadosindependentemente de grupos de proteção hidrofóbicos; R1 eR2 são selecionados independentemente de grupos R deaminoácidos; η, i, χ, y e ζ são independentemente zero ou1, de tal forma quem quando η e χ são ambos zero, R1 é umgrupo hidrofóbico, e quando y e i são ambos zero, R4 é umgrupo hidrofóbico; R2 e R3 são grupos ácidos ou básicos empH 7,0, de tal forma que, quando R2 é ácido, R3 é básico, equando R2 é básico, R3 é ácido; e R5, quando presente, éselecionado do grupo que consiste em um grupo aromático, umgrupo alifático, um grupo carregado positivamente ou umgrupo carregado negativamente. Em certas modalidades, R2 ouR3 é -(CH2)j-COOH, em que j =1, 2, 3 ou 4 e/ou -(CH2)j-NH2,em que j = 1, 2, 3, 4 ou 5, ou - (CH2) -j-NH-C (=NH) -NH2, em queη = 1, 2, 3 ou 4. Em certas modalidades, R2, R3 e R5, quandopresentes, são grupos R de aminoácidos. Dessa forma, porexemplo, em várias modalidades, R2 e R3 sãoindependentemente um grupo R de ácido aspártico, um grupo Rde ácido glutâmico, um grupo R de lisina, um grupo R dehistidina ou um grupo R de arginina (por exemplo, comoilustrado na Tabela 1).
Em certas modalidades, R1 é selecionado do grupo queconsiste em um grupo R Lys, um grupo R Trp, um grupo R Phe,um grupo R Leu, um grupo R Orn, ou um grupo R norLeu. Emcertas modalidades, R4 é selecionado do grupo que consisteem um grupo R Ser, um grupo R Thr, um grupo R Ile, um grupoR Leu, um grupo R norLeu, um grupo R Phe ou um grupo R Tyr.
Em várias modalidades, χ é 1 e R5 é um grupo aromático(por exemplo, um R grupo Trp).
Em várias modalidades, pelo menos um de n, x, y e i é1, e P1, P2, P3 e P4, quando presentes, sãoindependentemente selecionados do grupo que consiste empolietileno glicol (PEG), um acetil, uma amida, um alquilde 3 a 20 carbonos, fmoc, grupo 9-fluorenoacetil, grupo 1-fluorenocarboxílico, 9-fluorenocarboxílico, grupo 9-fluorenona-1-carboxíIico, benziloxicarbonil, xantil (Xan),Tritil (Trt), 4-metiltritil (Mtt), 4-metoxitritil (Mmt), 4-metóxi-2,3,6-trimetil-benzenossulfonil (Mt), Mesitileno-2-sulfonil (Mts),-4,4-dimetoxibenzidril (Mbh),Tosil (Tos),2, 2,5, 7,8-pentametil croman-6-sulfonil (Pmc), 4-metilbenzil(MeBzl), 4-metoxibenzil (MeOBzl), benziloxi (BzlO), benzil(Bzl), Benzoil (Bz), 3-nitro-2-piridinassulfenil (Npys),144,4- dimetil-2,6-dioxociclohexilideno)etil (Dde), 2,6-diclorobenzil (2,6-DiCl-Bzl), 2-clorobenziloxicarbonil (2-Cl-Z), 2-bromobenziloxicarbonil (2-Br-Z), benziloximetil(Bom), t-butoxicarbonil (Boc), ciclohexiloxi (cHxO),t-butoximetil (Bum), t-butóxi (tBuO), t-Butil (tBu), um grupopropil, um grupo Butil, um grupo pentil, um grupo hexil eTrifluoracetil (TFA). Em certas modalidades, P1, quandopresente, e/ou P2, quando presente, são independentementeselecionados do grupo que consiste em Boc-, Fmoc- eNicotinil-, e/ou P3i quando presente, e/ou P4, quandopresente, são independentemente selecionados do grupo queconsiste em tBu e OtBu.
Embora diversos dos grupos de proteção (P1, P2, P3, P4)sejam ilustrados acima, essa lista visa a ser ilustrativa enão limitante. À luz dos ensinamentos aqui apresentados,vários outros grupos de proteção/bloqueio também serãoconhecidos por aqueles habilitados na técnica. Tais gruposde bloqueio podem ser selecionados para minimizar adigestão (por exemplo, para liberação farmacêutica oral)e/ou para aumentar a captação/biodisponibilidade (porexemplo, através de superfícies mucosas na liberação nasal,terapia por inalação, administração retal) e/ou paraaumentar a meia-vida sérica/plasmática. Em certasmodalidades, os grupos de proteção podem ser fornecidoscomo um excipiente ou como um componente de um excipiente.
Em certas modalidades, ζ é zero e a molécula tem afórmula:
<formula>formula see original document page 139</formula>
em que P1, P2, P3, P4, R1, R2, R3, R4, n, x, y e i sãocomo descritos acima.
Em certas modalidades, ζ é zero e a molécula tem afórmula:
<formula>formula see original document page 139</formula>
em que R1, R2, R3 e R4 são como descritos acima.
Em uma modalidade, a molécula tem a fórmula:
<formula>formula see original document page 139</formula>Em certas modalidades, esta invenção contemplapequenas moléculas que possuem uma ou mais das propriedadesfísicas e/ou funcionais aqui descritas, e que possuem afórmula:
<formula>formula see original document page 140</formula>
em que P , P , P , e P são selecionados
independentemente de grupos de proteção hidrofóbicos comodescritos acima, n, x, e y são independentemente zero ou 1;j, k e 1 são independentemente zero, 1, 2, 3, 4 ou 5; e R2e R3 são grupos ácidos ou básicos em pH 7,0, de tal formaque, quando R2 é ácido, R3 é básico, e quando R2 é básico,R3 é ácido. Em certas modalidades preferidas, a pequenamolécula é solúvel em água; e a pequena molécula tem umpeso molecular menor do que cerca de 900 Dáltons. Em certasmodalidades, n, x, y, j e 1 são 1; e k é 4.
Em certas modalidades, P1 e/ou P2 são grupos deproteção aromáticos. Em certas modalidades, R2 e R3 sãogrupos R de aminoácidos, por exemplo, como descrito acima.Em várias modalidades, pelo menos um de η, χ e y, é 1, eP1, P2, P3 e P4, quando presentes, são independentementegrupos de proteção, por exemplo, como descrito acima. Emcertas modalidades, os grupos de proteção, quandopresentes, são independentemente selecionados do grupo queconsiste em polietileno glicol (PEG), um acetil, amida,grupos alquil com 3 a 20 carbonos, Fmoc, grupo 9-fluorenoacetil, grupo 1-fluorenocarboxílico, 9-fluorenocarboxílico, 9-fluorenona-1- carboxílico grupo,benziloxicarbonil, Xantil (Xan), Tritil (Trt), 4-metiltritil (Mtt), 4- metoxitritil (Mmt)f 4-metóxi-2,3,6 -trimetil-benzenossulfonil (Mtr), Mesitileno-2- sulfonil(Mts),4,4-dimetoxibenzidril (Mbh)iTosil (Tos), 2,2,5,7,8-penta.
III. Ensaios funcionais de agentes ativos.
Certos agentes ativos para uso nos métodos destainvenção são aqui descritos por várias fórmulas (porexemplo, Fórmula I, acima) e/ou por seqüências específicas.Em certas modalidades, agentes ativos desta invençãopreferidos são caracterizados por uma ou mais das seguintespropriedades funcionais:
1. Eles convertem HDL pró-inf lamatório em HDLantiinflamatório ou tornam o HDL antiinflamatório maisantiinflamatório;
2. Eles diminuem a atividade quimiotática de monócitosinduzida por LDL gerada por células da parede arterial;
3. Eles estimulam a formação e ciclagem de pré-β HDL;
4. Eles elevam o HDL-colesterol; e/ou
5. Eles aumentam atividade de HDL paraoxonase.
Os agentes específicos aqui revelados, e/ou agentesque correspondem às várias fórmulas aqui descritas, podemfacilmente ser testados quanto a uma ou mais dessasatividades, se desejado.
Métodos de rastreamento de cada uma dessaspropriedades funcionais são bem conhecidos por aqueleshabilitados na técnica. Em particular, observa-se que osensaios para a atividade quimiotática de monócitos, HDL-colesterol e atividade de HDL paraoxonase são ilustrados emPCT/USOl/26497 (WO 2002/15923).
IV. Preparação de peptídeo.
Os peptídeos usados nesta invenção podem sersintetizados quimicamente com a utilização de técnicas-padrão de síntese química de peptídeos ou, particularmentequando o peptídeo não compreende resíduos de aminoácidos"D", podem ser expressos de forma recombinante. Em certasmodalidades, até mesmo os peptídeos que compreendemresíduos de aminoácidos "D" são expressos de formarecombinante. Quando os polipeptídeos forem expressos deforma recombinante, um organismo hospedeiro (por exemplo,bactérias, plantas, células fúngicas etc.) será cultivadoem um ambiente onde é fornecido um ou mais dos aminoácidosao organismo, exclusivamente em uma forma D. Peptídeosexpressos de forma recombinante em um sistema como esseentão incorporam aqueles D-aminoácidos.
Em modalidades preferidas, os peptídeos sãosintetizados quimicamente por uma das inúmeras técnicas desíntese peptídica de fase líquida ou sólida conhecidas poraqueles habilitados na técnica. A síntese de fase sólida,na qual o aminoácido C-terminal da seqüência é anexado a umsuporte insolúvel, seguido por adição seqüencial dosaminoácidos restantes na seqüência, é um método preferidopara a síntese química dos polipeptídeos desta invenção.
Técnicas para a síntese de fase sólida são bem conhecidaspor aqueles habilitados na técnica, e são descritas, porexemplo, por Barmy e Merrifield (1963) Solid-Phase PeptideSynthesis; pp. 3-284 em The Peptídeos: Analysis, Synthesis,Biology. Vol. 2: Special Methods in Peptide Synthesis, PartA.; Merrifield e cols. (1963) J. Am. Chem. Soc., 85: 2.149-2.156, e Stewart e cols. (1984) Solid Phase PeptideSynthesis, 2a ed. Pierce Chem. Co., Rockford, 111.
Em certas modalidades, os peptídeos são sintetizadospelo procedimento de síntese peptídica de fase sólida com ouso de uma resina de benzidrilamina (Beckman Bioproducts,0,59 mmol de NH2/g de resina) como o suporte sólido. Oaminoácido COOH terminal (por exemplo, t-Butilcarbonil-Phe)é anexado ao suporte sólido através de um grupo 4-(oximetil)fenacetil. Essa é uma ligação mais estável do quea ligação convencional de éster benzílico, embora opeptídeo acabado ainda possa ser clivado por hidrogenação.
A hidrogenação de transferência com o uso de ácido fórmicocomo doador de hidrogênio é utilizada para essa finalidade.
Protocolos detalhados usados para síntese peptídica eanálise de peptídeos sintetizados são descritos em umsuplemento que acompanha Anantharamaiah e cols. (1985) J.Biol. Chem., 260(16): 10.248-10.255.
Observa-se que, na síntese química de peptídeos,particularmente de peptídeos que compreendem D-aminoácidos,a síntese normalmente produz diversos peptídeos truncadosalém do produto de comprimento total desejado. 0 processode purificação (por exemplo, HPLC) tipicamente resulta naperda de uma quantidade significativa do produto decomprimento total.
Foi uma descoberta desta invenção que, na síntese deum peptídeo D (por exemplo, D-4) , a fim de evitar a perdana purificação da forma mais longa, pode-se dialisar e usara mistura e, dessa forma, eliminar a última purificação porHPLC. Uma mistura como essa perde cerca de 50% da potênciado produto altamente purificado (por exemplo, por peso doproduto protéico), mas a mistura contém cerca de 6 vezesmais peptídeo e, assim, maior atividade total.
V. Formulações farmacêuticas e dispositivos.
A) Formulações farmacêuticas.
A fim de efetuar os métodos da invenção, um ou maisagentes ativos desta invenção são administrados, porexemplo, a um indivíduo diagnosticado como tendo um ou maissintomas de aterosclerose, ou como estando em risco deaterosclerose e/ou das várias outras patologias aquidescritas. 0(s) agente(s) ativo(s) pode ser administrado naforma "nativa" ou, se desejado, na forma de sais, ésteres,amidas, pró-fármacos, derivados, e semelhantes, desde que osal, éster, amida, pró-fármaco ou derivado sejafarmacologicamente adequado, ou seja, eficaz no presentemétodo. Sais, ésteres, amidas, pró-fármacos e outrosderivados dos agentes ativos podem ser preparados com o usode procedimentos-padrão conhecidos por aqueles habilitadosna técnica de química sintética orgânica e descritos, porexemplo, por March (1992) Advanced Organic Chemistry;Reactions, Mechanisms and Structure, 4a Ed. N.Y. Wiley-Interscience.
Por exemplo, sais de adição ácida são preparados apartir da base livre com o uso de metodologia convencional,que tipicamente envolve reação com um ácido adequado.
Geralmente, a forma de base do fármaco é dissolvida em umsolvente orgânico polar como, por exemplo, metanol ouetanol, e o ácido é a ele adicionado. 0 sal resultante seprecipita ou pode ser retirado da solução por adição de umsolvente menos polar. Ácidos adequados para a preparação desais de adição ácida incluem tanto ácidos orgânicos, porexemplo, ácido acético, ácido propiônico, ácido glicólico,ácido pirúvico, ácido oxálico, ácido málico, ácidomalônico, ácido succínico, ácido maléico, ácido fumárico,ácido tartárico, ácido cítrico, ácido benzóico, ácidocinâmico, ácido mandélico, ácido metanossulfônico, ácidoetanossulfônico, ácido p-toluenossulfônico, ácidosalicílico, e semelhantes, além de ácidos inorgânicos, porexemplo, ácido clorídrico, ácido hidrobrômico, ácidosulfúrico, ácido nítrico, ácido fosfórico, e semelhantes.
Um sal de adição ácida pode ser reconvertido na base livrepor tratamento com uma base adequada. Sais de adição ácidados agentes ativos aqui apresentados particularmentepreferidos são sais de haleto, tais como os que podem serpreparados com o uso de ácidos clorídrico ou hidrobrômico.
Inversamente, os sais básicos dos agentes ativos destainvenção são preparados de forma similar, com o uso de umabase farmaceuticamente aceitável como, por exemplo,hidróxido de sódio, hidróxido de potássio, hidróxido deamônio, hidróxido de cálcio, trimetilamina, ou semelhantes.
Sais básicos particularmente preferidos incluem sais demetal alcalino, por exemplo, o sal de sódio, e sais decobre.
A preparação de ésteres envolve tipicamente afuncionalização de grupos hidroxil e/ou carboxil que podemestar presentes dentro da estrutura molecular do fármaco.
Os ésteres são tipicamente derivados acil-substituídos degrupos alcoólicos livres, ou seja, porções que sãoderivadas de ácidos carboxilicos da fórmula RCOOH em que Ré alquil, e preferivelmente é alquil inferior. Ésterespodem ser reconvertidos nos ácidos livres, se desejado, como uso de procedimentos convencionais de hidrogenólise ouhidrólise.
Amidas e pró-fármacos também podem ser preparados coma utilização de técnicas conhecidas por aqueles habilitadosna técnica ou descritas na literatura pertinente. Porexemplo, amidas podem ser preparadas a partir de ésteres,com o uso de reagentes de amina adequados, ou podem serpreparadas a partir de um anidrido ou um cloreto ácido porreação com amônia ou uma alquilamina inferior. Pró-fármacossão preparados tipicamente por adesão covalente de umaporção que resulta em um composto que é terapeuticamenteinativo até ser modificado pelo sistema metabólico de umindivíduo.
Os agentes ativos aqui identificados são úteis paraadministração parenteral, tópical, oral, nasal (ou dealguma forma inalada), retal ou local, por exemplo, poraerossol ou transdérmica, para tratamento profilático e/outerapêutico de uma ou mais das patologias/indicações aquidescritas (por exemplo, aterosclerose e/ou sintomas desta).
As composições farmacêuticas podem ser administradas emvárias formas de dosagem unitária, dependendo do método deadministração. Formas adequadas de dosagem unitáriaincluem, sem limitação, pós, comprimidos, pílulas,cápsulas, drágeas, supositórios, emplastros, sprays nasais,injetáveis, formulações implantáveis de liberaçãosustentada, complexos lipídicos etc.
Os agentes ativos desta invenção são tipicamentecombinados com um veículo farmaceuticamente aceitável(excipiente) para formar uma composição farmacológica.
Veículos farmaceuticamente aceitáveis podem conter um oumais compostos fisiologicamente aceitáveis que atuam, porexemplo, para estabilizar a composição ou para aumentar oudiminuir a absorção do(s) agente(s) ativo(s). Compostosfisiologicamente aceitáveis podem incluir, por exemplo,carboidratos, tais como glicose, sacarose ou dextranas,antioxidantes, tais como ácido ascórbico ou glutationa,agentes quelantes, proteínas de baixo peso molecular,intensificadores da proteção e da captação, tais comolipídeos, composições que reduzem a depuração ou hidrólisedos agentes ativos, ou excipientes ou outrosestabilizadores e/ou tampões.
Outros compostos fisiologicamente aceitáveis incluemagentes umidificantes, agentes emulsificantes, agentesdispersantes ou conservantes que são particularmente úteispara a prevenção do crescimento ou da ação demicroorganismos. Vários conservantes são bem conhecidos eincluem, por exemplo, fenol e ácido ascórbico. Aqueleshabilitados na técnica observarão que a escolha de veículosfarmaceuticamente aceitáveis, incluindo um compostofisiologicamente aceitável, depende, por exemplo, da via deadministração do(s) agente(s) ativo(s) e dascaracterísticas físico-químicas específicas do(s) agente(s)ativo(s).
Os excipientes são preferivelmente estéreis egeralmente livres de materiais indesejáveis. Essascomposições podem ser esterilizadas por técnicas deesterilização convencionais bem conhecidas.
Em aplicações terapêuticas, as composições destainvenção são administradas a um paciente que sofre de um oumais sintomas de uma ou mais patologias aqui descritas, ouem risco para uma ou mais das patologias aqui descritas, emuma quantidade suficiente para evitar e/ou curar e/ou pelomenos parcialmente evitar ou interromper a doença e/ou suascomplicações. Uma quantidade adequada para se obter esseresultado é definida como uma "dose terapeuticamenteeficaz". Quantidades eficazes para esse uso dependerão dagravidade da doença e do estado geral da saúde do paciente.Podem ser realizadas administrações únicas ou múltiplas dascomposições, dependendo da dosagem e da freqüência, comonecessário e tolerado pelo paciente. Em qualquer caso, acomposição deve fornecer uma quantidade suficiente dosagentes ativos das formulações desta invenção para tratareficazmente (atenuar um ou mais sintomas) o paciente.
A concentração de agente(s) ativo(s) pode variaramplamente, e será selecionada primariamente com base nosvolumes de líquidos, viscosidades, peso corporal e outrosdados, de acordo com o modo de administração específicoselecionado e das necessidades do paciente. Asconcentrações, no entanto, serão selecionadas tipicamentepara fornecerem dosagens que variam de cerca de 0,1 ou 1mg/kg/dia a cerca de 50 mg/kg/dia e, algumas vezes, maiselevadas. Dosagens típicas variam de cerca de 3 mg/kg/dia acerca de 3,5 mg/kg/dia, preferivelmente de cerca de 3,5mg/kg/dia a cerca de 7,2 mg/kg/dia, mais preferivelmente decerca de 7,2 mg/kg/dia a cerca de 11,0 mg/kg/dia e,principalmente, de cerca de 11,0 mg/kg/dia a cerca de 15,0mg/kg/dia. Em certas modalidades preferidas, as dosagensvariam de cerca de 10 mg/kg/dia a cerca de 50 mg/kg/dia. Emcertas modalidades, as dosagens variam de cerca de 20 mg acerca de 50 mg administrados oralmente duas vezes ao dia.Será observado que tais dosagens podem ser variadas paraotimizar um regime terapêutico em um indivíduo ou grupo deindivíduos em particular.
Em certas modalidades preferidas, os agentes ativosdesta invenção são administrados oralmente (por exemplo,por meio de um comprimido) ou como um injetável de acordocom métodos-padrão bem conhecidos por aqueles habilitadosna técnica. Em outras modalidades preferidas, os peptídeostambém podem ser liberados através da pele com a utilizaçãode sistemas convencionais de liberação transdérmica defármacos, ou seja, "emplastros" transdérmicos, em que osagentes ativos estão tipicamente contidos dentro de umaestrutura laminada que serve como um dispositivo deliberação de fármacos a ser afixado à pele. Em umaestrutura como essa, a composição de fármaco estátipicamente contida em uma camada, ou "reservatório",subjacente a uma camada de revestimento superior. Seráobservado que, nesse contexto, o termo "reservatório"refere-se a uma quantidade de "ingrediente(s) ativo(s)" queao final estará disponível para liberação à superfície dapele. Dessa forma, por exemplo, o "reservatório" podeincluir o(s) ingrediente(s) ativo(s) em um adesivo em umacamada de revestimento do emplastro, ou em qualquer uma dediversas formulações de matrizes diferentes conhecidas poraqueles habilitados na técnica. 0 emplastro pode conter umúnico reservatório, ou ele pode conter múltiplosreservatórios.
Em uma modalidade, o reservatório compreende umamatriz polimérica de um material adesivo de contatofarmaceuticamente aceitável que serve para afixar o sistemaà pele durante a liberação do fármaco. Exemplos adequadosde materiais adesivos de contato com a pele incluem, semlimitação, polietilenos, polissiloxanos, poliisobutilenos,poliacrilatos, poliuretanos, e semelhantes.
Alternativamente, o reservatório que contém o fármaco e oadesivo de contato com a pele estão presentes como camadasseparadas e distintas, com o adesivo subjacente aoreservatório, que, nesse caso, pode ser tanto uma matrizpolimérica como descrita acima, quanto pode ser umreservatório de líquido ou hidrogel, ou pode assumirqualquer outra forma. A camada de revestimento nesseslaminados, que serve como a superfície superior dodispositivo, preferivelmente funciona como um elementoestrutural primário do "emplastro" e dá ao dispositivomuita de sua flexibilidade. 0 material selecionado para acamada de revestimento é, de preferência, substancialmenteimpermeável ao(s) agente(s) ativo(s) e a quaisquer outrosmateriais que estejam presentes.
Outras formulações preferidas para a liberação tópicade fármacos incluem, sem limitação, pomadas e cremes.Pomadas são preparações semi-sólidas que são tipicamentebaseadas em vaselina ou outros derivados de petróleo.Cremes contendo o agente ativo selecionado são tipicamenteemulsões viscosas líquidas ou semi-sólidas, freqüentementeóleo em água ou água em óleo. As bases dos cremes sãotipicamente laváveis com água, e contêm uma fase oleosa, umemulsificante e uma fase aquosa. A fase oleosa, algumasvezes denominada fase "interna", é geralmente composta porvaselina e um álcool graxo como, por exemplo, álcoolcetílico ou estearílico; a fase aquosa normalmente, emboranão necessariamente, excede a fase oleosa em volume, egeralmente contém um umectante. 0 emulsificante em umaformulação de creme é geralmente um não iônico, aniônico,catiônico ou anfotérico. A base específica da pomada oucreme a ser usado, como será observado por aqueleshabilitados na técnica, é aquela que permitirá uma ótimaliberação do fármaco. Como com outros transportadores ouveículos, uma base de pomada deve ser inerte, estável, nãoirritante e não sensibilizante.
Diferentemente de outras formulações peptídicastípicas, os peptídeos desta invenção, que compreendemaminoácidos na forma D, podem ser administrados, até mesmooralmente, sem proteção contra proteólise pelo ácidoestomacal etc. No entanto, em certas modalidades, aliberação do peptídeo pode ser intensificada pelo uso deexcipientes protetores. Tipicamente, isso é obtidoformando-se um complexo do polipeptídeo com uma composiçãopara torná-lo resistente à hidrólise ácida e enzimática, ouembalando-se o polipeptídeo em um veículo adequadamenteresistente como, por exemplo, um lipossomo. Meios deproteção de polipeptídeos para liberação oral são bemconhecidos na técnica (veja, por exemplo, Patente U.S.5.391.377, que descreve composições lipídicas paraliberação oral de agentes terapêuticos).
A meia-vida sérica elevada pode ser mantida através douso de sistemas de liberação sustentada de proteína "deempacotamento". Tais sistemas de liberação sustentada sãobem conhecidos por aqueles habilitados na técnica. Em umamodalidade preferida, o sistema de liberação biodegradávelde microesferas ProLease para proteínas e peptídeos (Tracy(1998) Biotechnol. Prog., 14: 108; Johnson e cols. (1996)Nature Med. 2: 795; Herbert e cols. (1998), Pharmaceut.Res. 15, 357) a pó seco composto de microesferaspoliméricas biodegradáveis que contêm o agente ativo em umamatriz polimérica que pode ser composta como uma formulaçãoseca com ou sem outros agentes.
O processo de fabricação das microesferas ProLease foiespecificamente projetado para se obter uma alta eficiênciade encapsulação, ao mesmo tempo em que mantém a integridadedo agente ativo. 0 processo consiste em: (i) preparação departículas liofilizadas do fármaco a partir do volume agranel Iiofilizando-se a solução do fármaco com excipientesestabilizantes, (ii) preparação de uma suspensão fármaco-polímero, seguida por sonificação ou homogeneização parareduzir o tamanho de partícula do fármaco, (iii) produçãode microesferas congeladas de fármaco-polímero poratomização em nitrogênio líquido, (iv) extração do solventedo polímero com etanol, e (v) filtração e secagem a vácuopara produzir o produto de pó seco final. 0 pó resultantecontém a forma sólida dos agentes ativos, que é homogênea erigidamente dispersa dentro das partículas porosas depolímero. 0 polímero mais comumente usado nesse processo,poli(lactida-coglicolida) (PLG), é tanto biocompatívelquanto biodegradável.
Encapsulação pode ser obtida em temperaturas baixas(por exemplo, -40°C). Durante a encapsulação, a proteína émantida no estado sólido na ausência de água, minimizando,dessa forma, a mobilidade conformacional da proteínainduzida pela água, evitando reações degradação da proteínaque incluem água como um reagente, e evitando interfacesorgânicas-aquosas, onde as proteínas podem ser submetidas àdesnaturação. Um processo preferido usa solventes nos quaisa maioria das proteínas é insolúvel, gerando, desse modo,altas eficiências de encapsulação (por exemplo, acima de 95%).
Em outra modalidade, um ou mais componentes da soluçãopodem ser fornecidos como um "concentrado", por exemplo, emum recipiente de estocagem (por exemplo, em um volume pré-medido) pronto para diluição, ou em uma cápsula solúvelpronta para adição a um volume de água.
As formulações e os métodos de administraçãoapresentados anteriormente visam a ser ilustrativos e nãolimitantes. Será observado que, com o uso dos ensinamentosaqui apresentados, outras formulações e modos deadministração adequados podem ser facilmente previstos.
B) Formulações baseadas em lipídeos.
Em certas modalidades, os agentes ativos destainvenção são administrados em conjunto com um ou maislipídeos. Os lipídeos podem ser formulados como umexcipiente para proteger e/ou intensificar otransporte/captação dos agentes ativos, ou podem seradministrados separadamente.
Sem se prender a uma teoria específica, foi descobertopor esta invenção que a administração (por exemplo,administração oral) de certos fosfolipídeos pode aumentarsignificativamente as proporções HDL/LDL. Além disso,acredita-se que certos fosfolipídeos de comprimento médiosão transportados por um processo diferente daqueleenvolvido no transporte lipídico geral. Dessa forma, a co-administração de certos fosfolipídeos de comprimento médiocom os agentes ativos desta invenção confere diversasvantagens: eles protegem os agentes ativos da digestão ouhidrólise, aumentam a captação e aumentam as proporçõesHDL/LDL.
Os lipídeos podem ser formados em lipossomos queencapsulam os agentes ativos desta invenção e/ou podemformar complexos/misturas com os agentes ativos e/ou podemser ligados covalentemente aos agentes ativos. Métodos defabricação de lipossomos e encapsulação de reagentes sãobem conhecidos por aqueles habilitados na técnica (veja,por exemplo, Martin e Papahadjopoulos (1982) J. Biol.Chem., 257: 286-288; Papahadjopoulos e cols. (1991) Proc.Natl. Acad. Sei. USA, 88: 11.460-11.464; Huang e cols.(1992) Câncer Res., 52: 6.774-6.781; Lasic e cols. (1992)FEBS Lett., 312: 255-258., e semelhantes).
Fosfolipídeos preferidos para uso nesses métodospossuem ácidos graxos que variam de cerca de 4 carbonos acerca de 24 carbonos nas posições sn-1 e sn-2. Em certasmodalidades preferidas, os ácidos graxos são saturados. Emoutras modalidades preferidas, os ácidos graxos podem serinsaturados. Vários ácidos graxos preferidos são ilustradosna Tabela 19.
Tabela 19. Ácidos graxos preferidos na posição sn-1 e/ousn-2 dos fosfolipídeos preferidos para administração deagentes ativos aqui descritos.
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Os ácidos graxos nessas posições podem ser os mesmosou diferentes. Fosfolipídeos particularmente preferidospossuem fosforilcolina na posição sn-3.
C) Liberação/dispositivos especializados.
1. Stents de eluição de fármacos.
A re-estenose, o re-fechamento de um vaso periféricoou coronário previamente estenosado e subseqüentementedilatado, ocorre em uma taxa significativa (por exemplo,20-50% para esses procedimentos) e depende de inúmerasvariáveis clínicas e morfológicas. A re-estenose podecomeçar logo após um procedimento de angioplastia, masnormalmente cessa ao final de aproximadamente seis (6)meses.
Foi desenvolvida uma tecnologia recente parasolucionar o problema de re-estenose em stentsintravasculares. Stents são tipicamente dispositivos quesão implantados permanentemente (expandidos) em vasoscoronários e periféricos. 0 objetivo dessas stents éfornecer uma "armação" ou suporte de longo prazo para vasosdoentes (estenosados) . Com a teoria sendo, se o vasoestiver sendo apoiado pelo lado de dentro, ele não irá sefechar ou re-estenosar.
Os designs conhecidos de stents incluem, semlimitação, stents em espiral de fio monofilamento (veja,por exemplo, Patente U.S. 4.969.458); gaiolas de metalsoldado (veja, por exemplo, Patentes U.S. 4.733.665 e4.776,337), cilindros metálicos de paredes finas com fendasaxiais formadas em torno da circunferência (veja, porexemplo, Patentes U.S. 4.733.665, 4.739.762, 4.776.337, esemelhantes). Materiais de construção conhecidos para usoem stents incluem, sem limitação, polímeros, tecidosorgânicos e metais biocompatíveis, tais como açoinoxidável, ouro, prata, tântalo, titânio, e ligas commemória de formato como, por exemplo, Nitinol.
Para prevenir ainda mais a re-estenose, as stentspodem ser cobertas e/ou impregnadas com uma ou maissubstâncias farmacêuticas, por exemplo, em formulações deliberação controlada para inibir a proliferação celularassociada à re-estenose. Mais comumente, essas stents wdeeluição de fármacos" são projetadas para liberar váriosfármacos para o câncer (citotoxinas).
No entanto, por causa de sua atividade na atenuação derespostas inflamatórias, redução e/ou eliminação delipídeos oxidados e/ou de outras espécies oxidadas,inibição da atividade quimiotática de macrófagos esemelhantes, os agentes ativos aqui descritos são bemadequados para evitar a re-estenose. Dessa forma, em certasmodalidades, esta invenção contemplo stents que possuem umou mais dos agentes ativos aqui descritos revestidos nasuperfície e/ou retidos dentro das cavidades oumicrocavidades da superfície do stent.
Em certas modalidades, os agentes ativos estãocontidos dentro de matrizes biocompatíveis (por exemplo,polímeros biocompatíveis, tais como uretano, silicone, esemelhantes). Materiais biocompatíveis adequados sãodescritos, por exemplo, nas Publicações de Patente U.S.20050084515, 200500791991, 20050070996, e semelhantes. Emvárias modalidades, os polímeros incluem, sem limitação,copolímero de silicone-uretano, um poliuretano, um fenóxi,etileno vinil acetato, policaprolactona, poli(lactida-coglicolida), polilactida, polissulfona, elastina, fibrina,colágeno, sulfato de condroitina, um polímerobiocompatível, um polímero bioestável, um polímerobiodegradável.
Dessa forma, em certas modalidades, esta invençãofornece um stent para a liberação de fármacos a um vaso emum corpo. 0 stent tipicamente compreende uma estrutura dostent que inclui diversos reservatórios nela formados. Osreservatórios tipicamente incluem um agente ativo e/ou umpolímero contendo agente ativo posicionado no reservatórioe/ou revestido na superfície do stent. Em váriasmodalidades, o stent é uma base metálica ou uma basepolimérica. Certos materiais de stent preferidos incluem,sem limitação, aço inoxidável, nitinol, tântalo, liga deMP35N, platina, titânio, uma liga biocompatível adequada,um polímero biocompatível adequado e/ou uma combinaçãodestes.
Em várias modalidades, nas quais o stent compreendeporos (por exemplo, reservatórios) , os poros podem incluirmicroporos (por exemplo, com um diâmetro que varia de cercade 10 a cerca de 50 μπι, preferivelmente cerca de 20 μπι oumenos). Em várias modalidades, os microporos possuem umaprofundidade na faixa de cerca de 10 μπι a cerca de 50 μπι.
Em várias modalidades, os microporos se estendem através daestrutura do stent com uma abertura na superfície interiordo stent e uma abertura em uma superfície exterior dostent. Em certas modalidades, o stent, opcionalmente, podecompreender uma camada de cobertura disposta na superfícieinterior da estrutura do stent, a camada de coberturacobrindo pelo menos uma porção dos orifícios e que forneceuma barreira característica para controlar a taxa deeluição do(s) agente(s) ativo(s) no polímero a partir dasuperfície interior da estrutura do stent. Em váriasmodalidades, os reservatórios compreendem canais ao longode uma superfície exterior da estrutura do stent. 0 stentpode opcionalmente ter múltiplas camadas de polímero, emque diferentes camadas de polímero carregam diferente(s)agente(s) ativo(s) e/ou outros fármacos.
Em certas modalidades, o stent compreende: uma camadade adesão posicionada entre a estrutura do stent e opolímero. Camadas de adesão adequadas incluem, semlimitação, um poliuretano, um fenóxi, poli(lactida-co-glicolida)-, polilactida, polissulfona, policaprolactona,um promotor de adesão e/ou uma combinação destes.
Além de stents, os agentes ativos podem ser revestidosou contidos dentro de essencialmente qualquer dispositivomédico implantável configurado para implantação em umalocalização extravascular e/ou intravascular.
Também são fornecidos métodos de fabricação de umstent de fármaco-polímero. Os métodos envolvem ofornecimento de uma estrutura do stent; o corte de diversosreservatórios na estrutura do stent, por exemplo, com o usode um laser de alta potência; a aplicação de um ou mais dosagentes ativos e/ou de um polímero de fármaco a pelo menosum reservatório; a secagem do polímero de fármaco; aaplicação de uma camada de polímero ao polímero de fármacoseco; e secagem da camada de polímero. Os agentes ativose/ou os polímeros podem ser aplicado por qualquer métodoconveniente, incluindo, sem limitação, vaporização,imersão, pintura, escovação e distribuição.
Também são fornecidos métodos de tratamento de umacondição vascular e/ou de uma condição caracterizada poruma resposta inflamatória e/ou uma condição caracterizadapela formação de espécies oxidadas reativas. Os métodostipicamente envolvem o posicionamento de um stent ou deoutro dispositivo implantável como descrito acima, dentrodo corpo (por exemplo, dentro de um vaso do corpo) e aeluição de pelo menos um agente ativo por pelo menos umasuperfície do implante.
2. Enxertos e transplantes impregnados.
Os enxertos vasculares podem ser classificados comobiológicos ou sintéticos. Há dois tipos comumente usados deenxertos biológicos. Um autoenxerto é aquele retirado deoutro local do paciente. Na cirurgia vascular periférica, aveia safena longa é, de longe, o mais comumente usado dessetipo de enxertos. Essa pode ser usada in si tu com asválvulas cirurgicamente destruídas com um valvulótomointraluminal de corte.
Alternativamente, a veia pode ser removida einvertida, mas isso tipicamente produz uma discrepânciaentre o local anastomótico da artéria e da veia. Nacirurgia torácica, o uso da artéria mamária interna paracirurgia de bypass da artéria coronária é outro exemplo deum autoenxerto. Um aloenxerto é aquele retirado de outroanimal da mesma espécie. A veia umbilical apoiadaexternamente é raramente usada, mas é um exemplo de umenxerto desse tipo.
Enxertos sintéticos são feitos com maior freqüência deDacron ou politetrafluretileno (PTFE). Enxertos de Dacronsão usados freqüentemente em cirurgia aórtica e aorto-ilíaca. Abaixo do ligamento inguinal, os resultados detodos os enxertos sintéticos são inferiores àqueles obtidoscom o uso de enxertos de veias. Uma veia adequada nemsempre está disponível e, nessa situação, PTFE étipicamente usado. Ele pode ser usado em conjunto com umaveia como um enxerto composto. A hiperplasia da neoíntimana anastomose distai pode ser reduzida pela incorporação deum segmento de veia tanto como um Millar Cuff quanto comoum Taylor Patch para melhorar a patência de longo prazo dosenxertos.
As complicações mais comuns associadas ao uso deenxertos vasculares incluem a oclusão do enxerto, infecçãodo enxerto, aneurismas verdadeiros e falsos no local daanastomose, embolização distai e erosão nas estruturasadjacentes - por exemplo, fístulas aorto-entéricas. Muitasdessas condições estão associadas a uma respostainflamatória, migração de macrófagos para o local e/ou aformação de espécies reativas ao oxigênio (por exemplo,lipideos oxidados). Para reduzir essas complicações, oenxerto (sintético ou biológico) pode ser embebido, ou dealgum outro modo revestido, com um ou mais dos agentesativos aqui descritos.
Além disso, contempla-se que outros tecidos oumateriais implantáveis podem similarmente ser impregnadosou revestidos com um ou mais agentes ativos desta invenção.
Dessa forma, por exemplo, em certas modalidades, estainvenção contempla o uso de suturas impregnadas paraminimizar a inflamação e/ou infecção e/ou rejeição detecidos.
3. Matrizes subcutâneas.
Em certas modalidades, um ou mais agentes ativos aquidescritos são administrados isoladamente ou em combinaçãocom outras substâncias terapêuticas, como aqui descrito, emmatrizes implantáveis (por exemplo, subcutâneas).
Um problema importante com a administração padrão defármacos é que a liberação típica de fármacos resulta em umrápido aumento da medicação no momento da administração,seguido por uma perda rápida do fármaco pelo corpo. Amaioria dos efeitos colaterais de um fármaco ocorre durantea fase de aumento súbito de sua liberação na correntesangüínea. Em segundo lugar, o tempo de permanência dofármaco na corrente sangüínea em níveis terapêuticos émuito curto, e a maior parte dele é usado e depuradodurante o curto aumento súbito.
Fármacos (por exemplo, os agentes ativos aquidescritos) embebidos em vários materiais de matriz paraliberação sustentada fornecem uma solução parcial paraesses problemas. Fármacos embebidos, por exemplo, emglóbulos de polímero ou em wafers de polímero, têm váriasvantagens. Primeiro, a maioria dos sistemas permite umaliberação lenta do fármaco, criando, dessa forma, umaadministração contínua do corpo com pequenos níveis defármaco. Isso tipicamente evita os efeitos colateraisassociados aos altos níveis iniciais de fármacos normaisinjetados ou na forma de pílulas. Em segundo lugar, uma vezque esses polímeros podem ser feitos de forma a seremliberados ao longo de horas a meses, a amplitudeterapêutica do fármaco é acentuadamente aumentada.Freqüentemente, misturando-se diferentes proporções dosmesmos componentes poliméricos, podem ser feitos polímerosde diferentes taxas de degradação, permitindo umaflexibilidade marcante, dependendo do agente que estiversendo usado. Uma taxa de liberação de fármaco longa ébenéfica para as pessoas que podem ter dificuldades parausar uma dosagem regular, por exemplo, os idosos, mastambém facilita o uso, o que pode ser benéfico para todasas pessoas. A maioria dos polímeros pode ser feita de formaa ser degradada e depurada pelo corpo ao longo do tempo e,desse modo, não irá permanecer no corpo após o intervaloterapêutico.
Outra vantagem da liberação de fármacos baseada empolímeros é que os polímeros freqüentemente podemestabilizar ou solubilizar proteínas, peptídeos, e outrasmoléculas grandes que, de outro modo, seriam impraticáveiscomo medicações. Finalmente, muitas misturas defármaco/polímero podem ser colocadas diretamente na áreadoente, o que permite um direcionamento específico damedicação para onde ela é necessária, sem perda de fármacoaté o efeito da "primeira passagem". Isso é certamenteeficaz para o tratamento do cérebro, que é freqüentementeprivado de medicações que não conseguem penetrar nabarreira hematencefálica.
Diversos de sistemas de matriz implantável (liberaçãosustentada) são conhecidos por aqueles habilitados natécnica, e podem facilmente ser adaptados para uso com umou mais dos agentes ativos aqui descritos. Sistemas deliberação sustentada adequados incluem, sem limitação, Re-Gel®, SQ2Gel® e Oligosphere® por MacroMed7 ProLease® eMedisorb® por Alkermes, Paclimer® e Gliadel® Wafer porGuilford Pharmaceuticals, o implante Duros por Alza,bioSpheres acústicas por Point Biomedical, a cápsulaIntelsite por Scintipharma, Inc., e semelhantes.
4. Outros "sistemas de liberação especializada".
Outros "sistemas de liberação especializada" incluem,sem limitação, mistura oral baseada em lipídeos que permitea absorção de fármacos através da mucosa oral, desenvolvidapor Generex Biotechnology, o sistema transmucoso oral(OTS™) por Anesta Corp., o pó seco inalável e a tecnologiade PulmoSpheres por Inhale Therapeutics, o Sistema deLiberação Pulmonar de Fármacos AERx® por Aradigm, omecanismo AIR por Alkermes, e semelhantes.
Outra abordagem para liberação desenvolvida porAlkermes é um sistema dirigido ao uso pediátrico e poridosos, duas populações para as quais o uso de pílulas éfreqüentemente difícil, e é conhecido como vvDrug SippingTechnology" (DST). A medicação é colocada em um dispositivocom o aspecto de um canudo de bebida que tem filtros emambas as extremidades que impedem a saída do medicamento. 0paciente tem simplesmente que beber um líquido transparente(água, suco, refrigerante) através do canudo. 0 fármaco sedissolve no líquido à medida que é sugado através docanudo, e é ingerido pelo paciente. O filtro aparece notopo do canudo quando a medicação é ingerida. Esse métodotem a vantagem de ser de fácil utilização, o líquidofreqüentemente mascara o gosto da medicação, e o fármaco épré-dissolvido para uma absorção mais eficiente.
Observa-se que esses usos e sistemas de liberaçãovisam a ser ilustrativos e não limitantes. Utilizando-se osensinamentos aqui apresentados, outros usos e sistemas deliberação serão conhecidos por aqueles habilitados natécnica.
VI. Agentes farmacologicamente ativos adicionais.
Agentes ativos combinados
Em várias modalidades, o uso de combinações de dois oumais agentes ativos aqui descritos é contemplado notratamento das várias patologias/indicações aqui descritas.O uso de combinações de agentes ativos pode alterar aatividade farmacológica, biodisponibilidade, e semelhantes.
Como forma de ilustração, observa-se que D-4F seassocia rapidamente com pré-beta HDL e HDL, e depois érapidamente depurado da circulação (é essencialmenteindetectável 6 horas após uma dose oral), enquanto D-[113-122]apoJ se associa lentamente com pré-beta HDL e, em menorextensão, com HDL, mas permanece associado a essas fraçõesde HDL por pelo menos 36 horas. FREL se associa ao HDL eapenas ao HDL, mas permanece detectável no HDL por um tempobem maior do que D-4F (ou seja, é detectável no HDL 4 8horas após uma única dose oral em camundongos) . Dessaforma, em certas modalidades, esta invenção contemplacombinações, por exemplo, desses três peptídeos parareduzir a quantidade, para reduzir os custos de produçãoe/ou para otimizar o regime de dosagem, o perfilterapêutico, e semelhantes. Em certas modalidades, ascombinações dos agentes ativos aqui descritas podem sersimplesmente co-administradas e/ou adicionadas em conjunto,para formar uma única formulação farmacêutica. Em certasmodalidades, os vários agentes ativos podem formarcomplexos em conjunto (por exemplo, por meio de uma ligaçãode hidrogênio) para formar complexos de agente ativo quesão mais eficazes do que os agentes parentes.
Uso com materiais farmacologicamente ativosadicionais.
Materiais farmacologicamente ativos adicionais (ouseja, fármacos) podem ser liberados em conjunto com um oumais dos agentes ativos aqui descritos. Em certasmodalidades, tais agentes incluem, sem limitação, agentesque reduzem o risco de eventos ateroscleróticos e/oucomplicações destes. Tais agentes incluem, sem limitação,betabloqueadores, combinações betabloqueadores e diuréticotiazida, estatinas, aspirina, inibidores da Ace, inibidoresdo receptor da Ace (ARBs), e semelhantes.
Foi descoberto que a adição de um agente ativo emdosagem baixa (por exemplo, de D-4F) (1 μg/ml) à água debeber de camundongos null para apoE por 24 horas nãomelhorou significativamente a função do HDL (veja, porexemplo, pedido relacionado USSN 10/423.830, depositado em25 de abril de 2003, que é aqui incorporado porreferência). Além disso, a adição de 0,05 mg/ml deatorvastatina ou pravastatina isoladamente à água de beberdos camundongos null para apoE por 24 horas não melhorou afunção do HDL. No entanto, quando 1 μg/ml de D-4F foiadicionado à água de beber, junto com 0,05 mg/ml deatorvastatina ou pravastatina, houve uma melhorasignificativa na função do HDL. Na verdade, o HDL pró-inflamatório null para apoE se tornou tão antiinflamatórioquanto 350 μg/ml de HDL humano normal (h, HDL veja, porexemplo, pedido relacionado USSN 10/423.830).
Dessa forma, doses de D-4F isoladamente, ou estatinasisoladamente, os quais não possuem efeitos sobre a funçãodo HDL, quando administrados em conjunto, atuaram de formasinérgica. Quando D-4F e a estatina foram administrados emconjunto aos camundongos null para apoE, seu HDL pró-inflamatório a 50 μg/ml de HDL-colesterol se tornou tãoeficaz quanto o HDL humano normal a 350 μg/ml de HDL-colesterol na prevenção da resposta inflamatória induzidapela ação de PAPC oxidante de HPODE em co-culturas decélulas da parede arterial humana.
Dessa forma, em certas modalidades, esta invençãofornece métodos para a intensificação da atividade deestatinas. Os métodos geralmente envolvem a administraçãode um ou mais dos agentes ativos aqui descritos, emconjunto com uma ou mais estatinas. Os agentes ativos obtêmação sinérgica entre a estatina e o(s) agente(s) paraatenuar um ou mais sintomas de aterosclerose. Nessecontexto, as estatinas podem ser administradas em dosagenssignificativamente mais baixas e, dessa forma, são evitadosvários efeitos colaterais danosos (por exemplo, perdamuscular) associados ao uso de altas doses de estatina e/ouas propriedades antiinflamatórias das estatinas em certasdoses são significativamente aumentadas.
Estatinas adequadas incluem, sem limitação,pravastatina (Pravachol/Bristol-Myers Squibb), simvastatina(Zocor/Merck), lovastatina (Mevacor/Merck), e semelhantes.
Em várias modalidades, os agentes ativos aquidescritos são administrados em conjunto com um ou maisbetabloqueadores. Betabloqueadores adequados incluem, semlimitação, betabloqueadores cárdio-seletivos (bloqueadoresseletivos para beta 1), por exemplo, acebutolol(Sectral™) , atenolol (Tenormin™) , betaxolol (Kerlone™) ,bisoprolol (Zebeta™) , metoprolol (Lopressor™) , esemelhantes. Bloqueadores não seletivos adequados(bloqueiam beta 1 e beta 2 igualmente) incluem, semlimitação, carteolol (Cartrol™) , nadolol (Corgard™) ,penbutolol (Levatol™) , pindolol (Visken™) , propranolol(Inderal™) , timolol (Blockadren™) , labetalol (Normodyne™,Trandate™) , e semelhantes.Combinações adequadas de betabloqueador e diuréticotiazida incluem, sem limitação, Lopressor HCT, ZIAC,Tenoretic, Corzide, Timolide, Inderal LA 40/25, Inderide,Normozida, e semelhantes.
Inibidores da Ace adequados incluem, sem limitação,captopril (por exemplo, Capoten™ por Squibb), benazepril(por exemplo, Lotensin™ por Novartis), enalapril (porexemplo, Vasotec™ por Merck), fosinopril (por exemplo,Monopril™ por Bristol-Myers), lisinopril (por exemplo,Prinivil™ por Merck ou Zestril™ por Astra-Zeneca) ,quinapril (por exemplo, Accupril™ por Parke-Davis),ramipril (por exemplo, Altace™ por Hoechst Marion Roussel,King Pharmaceuticals), imidapril, erbumina de perindopril(por exemplo, Aceon™ por Rhone-Polenc Rorer), trandolapril(por exemplo, Mavik™ por Knoll Pharmaceutical), esemelhantes. ARBS (bloqueadores do receptor de Ace)adequados incluem, sem limitação, losartan (por exemplo,Cozaar™ por Merck), irbesartan (por exemplo, Avapro™ porSanofi), candesartan (por exemplo, Atacand™ por AstraMerck), valsartan (por exemplo, Diovan™ por Novartis), esemelhantes.
Em várias modalidades, um ou mais agentes aquidescritos são administrados com um ou mais dos fármacosidentificados abaixo.
Dessa forma, em certas modalidades, um ou mais agentesativos são administrados em conjunto com inibidores daproteína de transferência de colesteril éster (CETP) (porexemplo, torcetrapib, JTT-705. CP-529414) e/ou inibidoresda acil-CoA:colesterol O-aciltransferase (ACAT) (porexemplo, Avasimibe (CI-1011), CP 113818, F-1394, esemelhantes), e/ou imunomoduladores (por exemplo, FTY720(agonista do receptor de esfingosina-l-fosfato) , Thalomid(talidomida), Imuran (azatioprina), Copaxone (acetato deglatiramer), Certican® (everolimus), Neoral®(ciclosporina), e semelhantes, e/ou inibidores dadipeptidil-peptidase-4 (DPP4) (por exemplo, 2-
Pirrolidinacarbonitrila, 1- [ [ [2- [ (5-ciano-2-piridinil)amino]etil]amino]acetil], veja também aPublicação de Patente U.S. 2005-0070530), e/ou bloqueadoresdo canal de cálcio (por exemplo, Adalat, Adalat CC, Calan,Calan SR, Cardene, Cardizem, Cardizem CD, Cardizem SR,Dilacor-XR, DynaCirc, Isoptin, Isoptin SR, Nimotop,Norvasc, Plendil, Procardia, Procardia XL, Vascor,Verelan), e/ou agonistas do receptor ativado por ativadorde peroxissoma (PPAR) , por exemplo, para receptores α, γ eδ (por exemplo, Azelaoil PAF, ácido 2-Bromohexadecanóico,Ciglitizone, Clofibrato, 15-Desoxi-δ12'14~prostaglandina J2,Fenofibrato, Fmoc-Leu-OH, GW 1929, GW7647, ácido 8(S)-Hidroxi-(5Z,9E,11Z,14Z)-eicosatetraenóico (8(S)-HETE),Leucotrieno B4, LY-171,883 (Tomelukast), Prostaglandina A2,Prostaglandina J2, ácido Tetradeciltioacético (TTA),Troglitazona (CS-045), WY-14643 (ácido piriníxico), esemelhantes.
Em certas modalidades, um ou mais dos agentes ativossão administrados em conjunto com fibratos (por exemplo,clofibrato (atromid), gemfibrozil (Iopid), fenofibrato(tricor) etc.), sequestrantes de ácido biliar (por exemplo,colestiramina, colestipol etc.), bloqueadores da absorçãode colesterol (por exemplo, ezetimiba (Zetia) etc.),Vytorin (combinação ezetimiba/simvastatina), e/ouesteróides, warfarin, e/ou aspirina, e/ouinibidores/antagonistas de Bcr-Abl (por exemplo, Gleevec(ImatinibMesylate), AMN107, STI571 (CGP57148B), ON 012380,PLX225, e semelhantes), e/ou bloqueadores da via renins-angiotensina (por exemplo, Losartan (Cozaar®), Valsartan(Diovan®), Irbesartan (Avapro®), Candesartan (Atacand®) , esemelhantes), e/ou antagonistas do receptor de angiotensinaII (por exemplo, losartan (Cozaar), valsartan (Diovan),irbesartan (Avapro), candesartan (Atacand) e telmisartan(Micardis) etc.), e/ou inibidores da PKC (por exemplo,Calfostina C, cloreto de Queleritrina, Queleritrina,cloreto, cobre bis-3,5-diisopropilsalicilato, Ebselen,Receptor EGF (humano) (651-658) (N-Miristoilado), Go 6976,H-7. dicloridrato, Hexadecil-2-0-metil-rac-glicerol,Hexadecil-fosfocolina (C16:0) ; Miltefosina, Hipericina,Melitina (natural), Melitina (sintético), ML-7. cloridrato,ML-9. cloridrato, Palmitoil-DL-carnitina. cloridrato,Proteína Quinase C (19-31), Proteína Quinase C (19-36),Quercetina. diidrato, Quercetina. diidrato, O-eritro-Esfingosina (isolada), D-eritro-Esfingosina (sintética),Esfingosina, Ν,Ν-dimetil, D-eritro-Esfingosina, Diidro-, D-erythro-Esfingosina, N,N-Dimetil-, D-eritro-Esfingosinacloreto, Ν,N,N-Trimetil-, Estaurosporina,Bisindolilmaleimida I, G-6203, e semelhantes).
Em certas modalidades, um ou mais dos agentes ativossão administrados em conjunto com ApoAI, derivados de e/ouagonistas de ApoA-I (por exemplo, ApoAI milano, veja, porexemplo, Publicações de Patente U.S. 20050004082,20040224011, 20040198662, 20040181034, 20040122091,20040082548, 20040029807, 20030149094, 20030125559,20030109442, 20030065195, 20030008827 e 20020071862, ePatentes U.S. 6.831.105, 6.790.953, 6.773.719, 6.713.507,6.703.422, 6.699.910, 6.680.203, 6.673.780, 6.646.170,6.617.134, 6.559.284, 6.506.879, 6.506.799, 6.459.003,6.423.830, 6.410.802, 6.376.464, 6.367.479, 6.329.341,6.287.590, 6.090.921, 5.990.081, e semelhantes), inibidoresda renina (por exemplo, SPP630 e SPP635, SPP100, Aliskiren,e semelhantes), e/ou antagonista de MR (por exemplo,espironolactona, aldosterona glucuronida, e semelhantes),e/ou inibidores da aldosterona sintase e/ou antagonistasalfa-adrenérgicos (por exemplo, Aldomet® (Metildopa),Cardura® (Doxazosin), Catapres®; Catapres-TTS®; DuraclonTM(Clonidina), Dibenzilina® (Fenoxibenzamina), Hylorel®(Guanadrel), Hytrin® (Terazosin) , Minipress® (Prazosin),Tenex® (Guanfacina), Guanabenz, Fentolamina, Reserpina, esemelhantes), e/ou agonistas do receptor do fator X (LXR)(por exemplo, T0901317, GW3965, ATI-829, dímero acetil-podocárpico (APD), e semelhantes) , e/ou agonistas doreceptor farnesoid X (FXR) (por exemplo, GW4064, ácido 6-alfa-etilquenodesoxicólico (6-ECDCA), T0901317, esemelhantes), e/ou inibidores do ativador-1 deplasminogênio (PAI-I) (veja, por exemplo, inibidores dePAI-I baseados em oxima, veja também a Patente U.S.5,639.726, e semelhantes), e/ou heparina de baixo pesomolecular e/ou inibidores/degradadores de AGE (por exemplo,Benfotiamina, aminoguanidina, piridoxamina, Tenilsetam,Pimagedina, e semelhantes) e/ou bloqueadores do receptor deADP (por exemplo, Clopidigrel, AZD614 0, e semelhantes),e/ou agonistas de ABCAl, e/ou agonistas do receptorscavenger BI, e/ou agonista do receptor adiponético ouindutores da adiponectina, e/ou inibidores da estearoil-CoADesaturase (SCDl), e/ou inibidores da síntese de colesterol(não estatinas), e/ou inibidores da diacilglicerolaciltransferase I (DGATl), e/ou inibidores da Acetil CoACarboxilase 2, e/ou inibidores de LP-PLA2, e/ou GLP-1, e/ouativador de glicoquinase, e/ou agonistas de CB-1, e/ouanti-trombóticos/coagulantes, e/ou inibidores do Fator Xa,e/ou inibidores de GPIIb/IIIc, e/ou inibidores do FatorVila, e/ou inibidores do fator tecidual, e/ou fármacosantiinflamatórios, e/ou Probucol e derivados (por exemplo,AGI-10 6 7 etc.), e/ou antagonistas de CCR2, e/ouantagonistas de CX3CR1, e/ou antagonistas de IL-1, e/ounitratos e doadores de NO, e/ou inibidores dafosfodiesterase, e semelhantes.
IX. Kits para o tratamento de uma ou mais indicações.
Em outra modalidade, esta invenção fornece kits para aatenuação de um ou mais sintomas de aterosclerose ou para otratamento profilático de um indivíduo (humano ou animal)em risco para aterosclerose e/ou o tratamento ou profilaxiade uma ou mais das condições aqui descritas. Os kitspreferivelmente compreendem um recipiente que contém um oumais dos agentes ativos aqui descritos. Os agentes ativospodem ser fornecidos em uma formulação de dosagem unitária(por exemplo, supositório, comprimido, cápsula, emplastroetc.) e/ou podem ser opcionalmente combinados com um oumais excipientes farmaceuticamente aceitáveis.
0 kit pode, opcionalmente, ainda compreender um oumais dos outros agentes usados no tratamento dacondição/patologia de interesse. Tais agentes incluem, semlimitação, betabloqueadores, vasodiladores, aspirina,estatinas, inibidores da Ace ou inibidores do receptor deAce (ARBs), e semelhantes, por exemplo, como descritoacima.
Além disso, os kits opcionalmente incluem materiais derotulagem e/ou instruções que fornecem diretrizes (ou seja,protocolos) para a prática dos métodos ou do uso das"substâncias terapêuticas" ou "substâncias profiláticas"desta invenção. Materiais de orientação preferidosdescrevem o uso de um ou mais agentes ativos desta invençãopara atenuar um ou mais sintomas de aterosclerose (ououtras patologias aqui descritas) e/ou para evitar osurgimento ou o aumento de um ou mais desses sintomas em umindivíduo em risco para aterosclerose (ou outras patologiasaqui descritas). Os materiais de orientação também podem,opcionalmente, ensinar dosagens/regimes terapêuticospreferidos, contra-indicações e semelhantes.
Embora materiais de orientação tipicamente compreendammateriais escritos ou impressos, eles não se limitam aessas apresentações. Qualquer meio capaz de estocar essasinstruções e de divulgá-las ao usuário final é contempladopor esta invenção. Tais meios incluem, sem limitação, meiosde estocagem eletrônica (por exemplo, discos magnéticos,fitas, cartuchos, chips), meios ópticos (por exemplo, CD-ROM) , e semelhantes. Tais meios podem incluir endereços desites da internet que fornecem esses materiais deorientação.
EXEMPLOS
Os exemplos seguintes são oferecidos para ilustrar,mas não limitar, a invenção reivindicada.
Exemplo 1Uso de peptídeos relacionados à ApoJ para mediar ossintomas de aterosclerose
Prevenção da atividade quimiotática de monôcitos induzidapor LDL
A Figura 1 ilustra uma comparação do efeito de D-4F(Anantharamaiah e cols. (2002) Circulation, 105: 290-292)com o efeito de um peptídeo apoJ feito de D-aminoácidos (D-J33 6, Ac-L-L-E-Q-L-N-E-Q-F-N-W-V-S-R-L-A-N-L-T-Q-G-E-NH2,ID. DE SEQ. N°: 1.177) sobre a prevenção da atividadequimiotática de monôcitos induzida por LDL in vitro em umaco-incubação. Células endoteliais aórticas humanas foramincubadas somente com meio (sem adição) , com LDL humano decontrole (2 00 pg de proteína/ml) ou LDL humano de controle+ HDL humano de controle (350 μg de proteína HDL/ml) . D-J336 ou D-4F foi adicionado aos outros poços em uma faixade concentração indicada, mais LDL humano de controle (200pg de proteína/ml). Após incubação de um dia para o outro,os sobrenadantes foram testados quanto à atividadequimiotática de monôcitos. Como mostrado na Figura 1, aconcentração in vitro do peptídeo apoJ variante que evita aatividade quimiotática de monôcitos induzida por LDL porcélulas da parede arterial humana é 10 a 25 vezes menor doque a concentração necessária para o peptídeo D-4F.
Prevenção da atividade quimiotática de monôcitos induzidapor LDL por pré-tratamento de células da parede arterialcom D-J336
A Figura 2 ilustra uma comparação do efeito de D-4Fcom o efeito de D-J336 sobre a prevenção de atividadequimiotática de monôcitos induzida por LDL em uma pré-incubação. Células endoteliais aórticas humanas foram pré-incubadas com D-J336 ou D-4F a 4, 2, e 1 pg/ml para DJ336ou 100, 50, 25 e 12,5 μg/ml para D-4F por 6 horas. Asculturas foram então lavadas e foram incubadas somente commeio (sem adição), ou com LDL humano de controle (200 pg deproteína/ml), ou com LDL humano de controle + HDL humano decontrole (350 μ9 de proteína HDL/ml) como controles doensaio. Os poços que foram pré-tratados com peptídeosreceberam o LDL humano de controle a 200 pg de proteína/ml.
Após incubação de um dia para o outro, os sobrenadantesforam testados quanto à atividade quimiotática demonócitos.
Como ilustrado na Figura 2, o peptídeo ApoJ variantefoi 10-25 vezes mais potente na prevenção da oxidação doLDL por células da parede arterial in vitro.
0 efeito de miméticos do peptídeo apoJ sobre a capacidadeprotetora do HDL em camundongos null para o receptor deLDL.
D-4F designado como F, ou o peptídeo apoJ feito de D-aminoácidos (D-J336, designado como J) , foi adicionado àágua de beber de camundongos null para o receptor de LDL (4por grupo) a 0,25 ou 0,5 mg por ml de água de beber. Após24 ou 4 8 horas, foi coletado sangue dos camundongos e seuHDL foi isolado e testado quanto à sua capacidade paraproteger contra atividade quimiotática de monócitosinduzida por LDL. Os controles do ensaio incluíram poços decultura que não receberam lipoproteínas (sem adição), ousomente LDL humano de controle (designado como LDL, 200 pgde colesterol/ml) , ou LDL de controle + HDL humano decontrole (designado como + HDL, 350 μg de HDL-colesterol) .
Para testar o HDL de camundongo, o LDL de controle foiadicionado junto com HDL de camundongo (+F HDL ou +J HDL) aculturas de células da parede arterial. 0 HDL de camundongofoi adicionado a 100 μg de colesterol/ml, respectivamente.
Após tratamento com D-4F ou D-J336, o HDL de camundongo a100 μg/ml era tão ativo quanto 350 μg/ml de HDL humano decontrole para evitar que o LDL de controle induzisse ascélulas da parede arterial para produzir atividadequimiotática de monócitos. A razão para a discrepânciaentre as doses relativas necessárias para o peptideo D-J336em relação ao D-4F in vitro e in vivo pode estarrelacionada à solubilidade dos peptídeos na água, eacreditamos que, quando forem medidos para a obtenção desolubilidade igual, os peptídeos D-J serão bem mais ativosin vivo do que são in vitro.
Proteção contra a atividade quimiotática de monócitosinduzida por LDL por HDL de camundongos null para apoE quereceberam peptídeos orais.
A Figura 4 ilustra o efeito de mimético do peptideoapoA-1 e do peptideo apoJ oral sobre a capacidade protetorado HDL. Camundongos null para ApoE (4 por grupo) receberama administração de D-4F (designado como F) a 50, 30, 20,10, 5 μg por ml de água de beber ou peptideo apoJ(designado como J) a 50, 30 ou 20 μg por ml de água debeber. Após 24 horas, foi coletado sangue, o plasma foifracionado por FPLC, e as frações contendo LDL (designadocomo mLDL para LDL murídeo) e as frações contendo HDL(designado como mHDL) foram separadamente reunidas em poole a capacidade protetora do HDL contra oxidação do LDL,como determinada pela atividade quimiotática de monócitosinduzida por LDL, foi determinada. Para os controles doensaio, os poços de cultura não receberam lipoproteínas(sem adições), somente mLDL (a 200 de colesterol/ml), oumLDL + HDL humano normal padronizado (designado como Cont.h HDL, a 350 de HDL-colesterol/ml).
Para testar o HDL murídeo, mLDL, junto com HDL murídeo(+F mHDL ou +J mHDL), foi adicionado às culturas de célulasda parede arterial. 0 HDL dos camundongos que não receberamnenhum peptídeo em sua água de beber é designado como sempeptídeo mHDL. 0 HDL murídeo foi usado a 100 μg decolesterol/ml. Após receber D-4F ou D-J336, o HDL murídeo a100 μg/ml era tão ativo quanto 350 μg/ml de HDL humanonormal. Como mostrado na Figura 4, quando adicionado à águade beber, o peptídeo D-J era tão potente quanto D-4F naintensificação da capacidade protetora do HDL emcamundongos null para apoE.
Capacidade do LDL obtido de camundongos null para apoE quereceberam peptídeos orais para induzir a atividadequimiotática de monócitos.
A Figura 5 ilustra o efeito de mimético de peptídeoapoA-1 e peptídeo apoJ oral sobre suscetibilidade de LDL àoxidação. Camundongos null para ApoE (4 por grupo)receberam a administração, em sua água de beber, do D-4F(designado como F) a 50, 30, 20, 10, 5 pg por ml de água debeber, ou do peptídeo apoJ (D-J336 feito de D-aminoácidos edesignado como J) a 50, 30 ou 20 μg por ml de água debeber. Após 24 horas, foi coletado sangue dos camundongosmostrados na Figura 4, o plasma foi fracionado por FPLC, eas frações contendo LDL (designado como mLDL para LDLmurídeo) foram reunidos em pool, e foi determinada asuscetibilidade de LDL à oxidação, como determinada pelaindução da atividade quimiotática de monócitos. Para oscontroles do ensaio, os poços de cultura não receberamlipoproteínas (sem adições) , somente mLDL (a 200 pg decolesterol/ml) ou mLDL + HDL humano normal padronizado(designado como Cont. h HDL, 350 pg de HDL-colesterol).
LDL murídeo, mLDL, de camundongos que receberam o D-4F(F mLDL), ou aqueles que receberam o peptídeo apoJ (JmLDL), foram adicionados às culturas de células da paredearterial. 0 LDL de camundongos que não receberam nenhumpeptídeo em sua água de beber é designado como Sem peptídeo LDL.
Como mostrado na Figura 5, quando adicionado à água debeber, D-J336 foi ligeiramente mais potente do que D-4Fpara tornar o LDL de camundongos null para apoE resistenteà oxidação por células da parede arterial humana, comodeterminado pela indução da atividade quimiotática demonócitos.
Proteção contra a oxidação de fosfolipídeos e indução daatividade quimiotática de monócitos por HDL obtido decamundongos null para apoE que receberam peptídeos orais.
A Figura 6 ilustra o efeito de mimético de peptídeoapoA-1 e do peptídeo apoJ oral sobre a capacidade protetorado HDL. Camundongos null ApoE (4 por grupo) receberam aadministração de D-4F (designado como F) a 50, 30, 20, 10,5 μ9 por ml de água de beber, ou do peptídeo apoJ (D-J336feito por D-aminoácidos e designado como J) a 50, 30 ou 20μg por ml de água de beber. Após 24 horas, o sangue foicoletado, o plasma foi fracionado por FPLC, e as fraçõescontendo HDL (designado como mHDL) foram reunidas em pool,e foi determinada a capacidade protetora do HDL contraoxidação de PAPC, como determinado pela indução daatividade quimiotática de monócitos. Para os controles doensaio, os poços de cultura não receberam lipoproteínas(sem adições) , o fosfolipídeo PAPC a 20 μg /ml + HPODE, a1,0 μ9/πι1, ou PAPC+HPODE mais HDL humano normal padronizado(a 350 μ9 de HDL-colesterol/ml e designado como + Cont. hIML).
Para o teste do HDL murídeo, PAPC+HPODE, juntos comHDL murídeo (+F mHDL ou +J mHDL) foram adicionados àsculturas de células da parede arterial. 0 HDL decamundongos que não receberam nenhum peptídeo em sua águade beber é designado como "sem peptídeo mHDL" . 0 HDLmurídeo foi usado a 100 μg de colesterol/ml.
Os dados mostrados na Figura 6 indicam que, quandoadicionado à água de beber, D-J336 foi mais potente do queD-4 F em fazer com que HDL iniba a oxidação de umfosfolipídeo PAPC pelo HPODE oxidante em uma co-cultura daparede arterial humana, como medido pela geração deatividade quimiotática de monócitos.
Efeito do mimético de peptídeo apoA-1 oral e peptídeo apoJsobre a atividade de paraoxonase plasmática em camundongos.
A Figura 7 mostra o efeito do mimético de peptídeoapoA-1 oral e do peptídeo apoJ sobre a atividade deparaoxonase plasmática em camundongos. Camundongos nullpara ApoE (4 por grupo) receberam a administração de D-4F,designado como F, a 50, 10, 5 ou 0 μg por ml de água debeber, ou de peptídeo apoJ (D-J336 feito de D-aminoácidos edesignado como J) a 50, 10 ou 5 μg por ml de água de beber.Após 24 horas, o sangue foi coletado e o plasma foi testadoquanto à atividade de PONl. Esses dados demonstram que,quando adicionado à água de beber, D-J336 foi pelo menostão potente quanto D-4F no aumento da atividade deparaoxonase de camundongos null para apoE.
Exemplo 2
Peptídeos G* orais alimentam a capacidade protetora doHDL em camundongos deficientes em ApoE.
Fêmeas de camundongos deficientes em apoE com 4 mesesde idade (n=4 por grupo) foram tratadas com peptídeos G*que possuem as seguintes seqüências de aminoácidos:Peptideo 113-122= Ac-L VGRQLEEF L-NH2 (ID. DE SEQ.N0. 9), Peptideo 336-357 = Ac-L LEQLNEQFNWVSRLANLTQG E-NH2 (ID. DE SEQ. N°. 17) e Peptideo 377-390 =Ac-P SGVTE V VVKLFD S-NH2 (ID. DE SEQ. N°. 19) .
Cada camundongo recebeu 200 μg do peptídeo por sondaestomacal. Quatro horas mais tarde, o sangue foi coletado,o plasma separado, as lipoproteinas fracionadas e o HDL (a25 μg por ml) foi testado quanto à capacidade protetoracontra a oxidação de LDL (a 100 μg por 30 ml) em culturasde células da parede arterial humana. Os dados sãomostrados na Figura 8. 0 peptídeo gerou capacidadeprotetora de HDL significativa nos camundongos.
Em outro experimento, fêmeas de camundongosdeficientes em apoE com 4 meses de idade (n=4 por grupo)foram tratadas com o peptídeo G* de 11 aminoácidos 146-156com a seqüência: Ac-Q QTHMLDVMQ D-NH2. (ID. DE SEQ.N°: 11). Os camundongos receberam o peptídeo em sua água debeber nas concentrações indicadas (veja a Figura 9) . Após18 horas, o sangue foi coletado, o plasma separado, aslipoproteinas fracionadas, e HDL (a 50 μg de colesterol porml) foi testado quanto à capacidade protetora contra aoxidação de PAPC (a 25 pg por ml) + HPODE (a 1,0 pg por ml)em culturas de células da parede arterial humana. Oscontroles do ensaio foram Sem adições, PAPC+HPODE ePAPC+HPODE mais HDL de Controle (designado como +HDL). Osdados são a média ± DP do número de monócitos migrados emnove campos de grande aumento em culturas em triplicata. Osasteriscos indicam significância no nível de p<0,05 vs. ocontrole de água (0 pg/ml).
Exemplo 3
Química de fase em solução para a síntese peptídica
Em certas modalidades, uma química de síntese de faseem solução fornece um meio mais econômico de síntese depeptídeos desta invenção.
Antes desta invenção, a síntese era realizadatipicamente com o uso de química de síntese de fase todasólida. A síntese de fase sólida de peptídeos de menos de 9aminoácidos é bem mais econômica do que a síntese de fasesólida de peptídeos de mais de 9 aminoácidos. A síntese depeptídeos de mais de 9 aminoácidos resulta em uma perdasignificativa de material, em função da dissociação físicado alongamento da cadeia de aminoácidos pela resina. Asíntese de fase sólida de peptídeos que contêm menos de 9aminoácidos é bem mais econômica, pois há uma perdarelativamente pequena no alongamento da cadeia pela resina.
Em certas modalidades, a síntese de fase em soluçãofunciona pela conversão da síntese do peptídeo miméticoapoA-I de 18 aminoácidos, 4F (e outros peptídeosrelacionados) de uma síntese de fase toda sólida em umasíntese de fase toda em solução ou em uma combinação dasíntese de fase sólida de três cadeias, cada um contendo,por exemplo, 6 aminoácidos, seguida pela montagem das trêscadeias em solução. Isso fornece uma síntese global bemmais econômica. Esse procedimento é facilmente modificadoquando os peptídeos não têm comprimento de 18 aminoácidos.Dessa forma, por exemplo, um 15 mer pode ser sintetizadopor síntese de fase sólida de três 5 mers, seguida pormontagem das três cadeias em solução. Um 14 mer pode sersintetizado pela síntese de fase sólida de dois 5 mers e um4 mer, seguida pela montagem dessas cadeias em solução, eassim por diante.
A) Resvimo do protocolo de síntese.
Um esquema para a síntese do peptídeo D4F (Ac-D-W-F-K-A-F-Y-D-K-V-A-E-K-F-K-E-A-F-NH2, (ID. DE SEQ. N°: 5)) éilustrada na Tabela 20 (o esquema e os rendimentos parasíntese são mostrados na Tabela 20) .<table>table see original document page 183</column></row><table><table>table see original document page 184</column></row><table><table>table see original document page 185</column></row><table>Β) Detalhes do protocolo de síntese.
1. Procedimento de condensação de fragmento parasintetizar D-4F
Fragmentos sintetizados por condensação de fragmentoem fase sólida são:
Fragmento 1: Ac-D(OBut)-W-F-K (sBoc)-A-F-COOH (ID. DESEQ. N0: 1.185);
Fragmento 2: Fmoc-Y(OBut)-D(OBut)-K(SBoc)-V-A-E(OBut)-COOH (ID. DE SEQ. N°: 1.186); e
Fragmento 3: Fmoc-K(sBoc) F-K(sBoc)-E (OBut)-A-F-resinaamida rink (ID. DE SEQ. N°: 1.187).
0 Fragmento 1 foi deixado na resina para obter a amidado peptídeo final após tratamento com TFA.
Para sintetizar o fragmento 1: Fmoc-Phe (1,2equivalente) foi adicionada à resina clorotritil (NovaBiochem, 1,3 mMol/g substituição, 5 mMol ou 6,5 g foramusados) na presença de seis equivalentes de DIEA emDMF:diclorometano (1:1)) e agitados por 4 horas.
0 excesso de funcionalidade na resina foi coberto commetanol na presença de diclorometano e DIEA.
Após a remoção de Fmoc-Fmoc, derivados de aminoácido(2 equivalentes) foram adicionados com o uso de reagentesHOBt/HBTU, como descrito acima. A resina FmocD(OBut)-W-F-K(sBoc)-A-F Clorotritil final foi tratada com agente dedesbloqueio de Fmoc e acetilada com 6 equivalentes deanidrido acético na presença de diisoproliletil amina.
A Ac-D (OBut) -W-F-K(sBoc) -A-F-resina resultante foitratada com uma mistura de ácido triflouretanol-acético-diclorometano (2:2:6, 10 ml/g de resina) por 4 horas emtemperatura ambiente. Após remoção da resina por filtração,ο solvente foi removido por destilação aziotrópica com n-hexano sob vácuo. 0 resíduo (1,8 g) foi determinado poranálise espectral de massa como sendo Ac-D(OBut)-W-F-K(SBoc)-A-F-COOH (ID. DE SEQ. N°: 1.188).
O Fragmento 2, Fmoc-Y(OBut)-D(OBut)-K(EBoc)-V-A-E(OBut)-COOH (ID. DE SEQ. N°: 1.189), foi obtido com autilização do procedimento descrito para o Fragmento 1. 0rendimento final foi de 2,2 g.
Fragmento 3. 0,9 g (0,5 mmol) de resina amida rink(Nova Biochem) foi usado para obter o fragmento. A resinaamida rink foi tratada com pipetidina 20% em diclorometanopor 5 minutos uma vez e por 15 minutos na segunda vez(reagentes de desbloqueio de Fmoc). 1,2 equivalente deFmoc-Phe foi condensado usando os agentes de condensaçãoHOBt/HBTU (2 equivalentes na presença de poucas gotas dediisopropiletil amina) (condensação do aminoácido).
0 desbloqueio e a condensação do resto dos aminoácidosforam continuados para obter a Fmoc-K (sBoc) F-K(sBoc) -E(OBut)-A-F- resina amida rink (ID. DE SEQ. N° : 1.190).Fmoc foi clivado, e a resina do peptídeo K(eBoc) F-I ( (sBoc) -E (OBut)-A-F-resina amida rink (ID. DE SEQ. N° : 1.190) foiusada para a condensação do fragmento, como descritoabaixo.
Fragmento 2 em DMF foi adicionado ao Fragmento 3 (1,2equivalente) usando o procedimento HOBt-HBTU na presença deDIEA de um dia para o outro. Após lavagem, a resina com DMFe Fmoc-Fragmento 1 de desbloqueio (1,2 equivalente) foiadicionada à resina do dodecapeptídeo usando o procedimentoHOBt-HBTU de um dia para o outro.
A resina do peptídeo final (3,3 g) foi tratada com umamistura de TFA-Fenol-triisopropi1silano-tioanisol-água (80:5:5:5) por 1,5 hora (10 ml do reagente/gda resina). A resina foi retirada por filtração e asolução foi diluída com 10 volumes de éter. 0peptídeo precipitado foi isolado por centrifugaçãoe lavado duas vezes com éter. Um g do peptídeobruto foi submetido à purificação por HPLC paraobter 100 mg do peptídeo.
2. Caracterização do peptídeo.
0 peptídeo foi identificado por análiseespectral de massa e métodos analíticos de HPLC.
Como mostrado na Figura 14, o produto doesquema de síntese da fase em solução é muito ativobiologicamente na produção de HDL e pré-beta HDLque inibem a quimiotaxia de monócitos induzida porLDL em camundongos null para apoE. Camundongos nullpara ApoE foram alimentados com 5 microgramas do D-4F sintetizado como descrito acima (Frgmnt), ou oscamundongos receberam a mesma quantidade de raçãode camundongo sem D-4F (Ração).
Doze horas após a alimentação ter se iniciado,os camundongos tiveram o sangue coletado e seuplasma foi fracionado em FPLC. 0 LDL (100microgramas de LDL- colesterol) foi adicionado àsco-culturas de células da parede arterial humanaisoladamente (LDL) ou com um HDL humano de controle(HDL de Controle) ou com HDL (50 microgramas deHDL-colesterol) ou pós-HDL (pHDL; pré-beta HDL) decamundongos que recebeu (Frgmnt) ou não recebeu(Ração) o D-4F, e a atividade quimiotática demonócitos produzida foi determinada.
Exemplo 4
Comparação da atividade de D-4F e (retro-)D-4Freverso.
Como mostrado na Figura 16, as atividadesbiológicas de D-4F e RD- 4F reverso não sãosignificativamente diferentes. Fêmeas decamundongos null para apoE receberam aadministração por sonda estomacal de 0, 3, 6, 12 ou25 microgramas de D-4F ou D-4F Reverso em 100microlitros de água. O sangue foi obtido 7 horasmais tarde, e o plasma foi fracionado por FPLC.
Um LDL humano de controle padronizado foiadicionado às células da parede arterial humana, emuma concentração de 100 microgramas de LDL-colesterol/ml (LDL) . A atividade quimiotática demonócitos resultante foi normalizada até 1,0. Omesmo LDL na mesma concentração foi adicionado àscélulas da parede arterial humana, junto com HDL a50 microgramas de HDL-colesterol/ml de um serhumano normal (hHDL) ou dos camundongos null paraapoE que receberam a dose de D-4F ou de D-4FReverso mostrada no eixo X. A atividadequimiotática de monócitos resultante foinormalizada até aquela do LDL adicionado sem HDL. 0valor resultante é o índice de HDL Inflamatório. Osresultados mostrados são a Média ± DP para os dadosde três experimentos separados.
Entende-se que os exemplos e as modalidadesaqui descritos são somente para fins ilustrativos,e que várias modificações ou alterações à luzdestes serão sugeridas por pessoas habilitadas natécnica, e devem ser incluídas dentro do espírito ealcance desse pedido e do escopo das reivindicaçõesem anexo. Todas as publicações, patentes e pedidosde patentes aqui citados são aqui incorporados porreferência em sua totalidade para todos os fins.

Claims (16)

1. Uso de um peptídeo "D" ou "L" caracterizado pelofato de que compreende a seqüência de aminoácidos ouseqüência de retro aminoácidos de um peptídeo listado nastabelas 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 15, 16 ou 18 paraaliviar um ou mais sintomas em um mamífero em uma condiçãoselecionada do grupo consistido de restenose, enfisema,doença de Paget, granulomatose de Wegener, vasculite dosistema nervoso central (CNSV), síndrome de Sjõgren, úlceracorneal, colite ulcerativa, lesão de reperfusão, lesão dereperfusão isquêmica, câncer, osteoartrite, doençainflamatória , de intestino, rinite alérgica, caquexia,doença de Crohns, dermatite, asma, disfunção erétil edegeneração macular.
2. Uso de um peptídeo "D" ou "L" caracterizado pelofato de que compreende a seqüência de aminoácidos ouseqüência de retro aminoácidos de um peptídeo listado nastabelas 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 15, "16 ou 18 namanufatura de um medicamento para aliviar um ou maissintomas em um mamífero em uma condição selecionada dogrupo consistido de restenose, enfisema, doença de Paget,granulomatose de Wegener, vasculite do sistema nervosocentral (CNSV), síndrome de Sjõgren, úlcera corneal, coliteulcerativa, lesão de reperfusão, lesão de reperfusãoisquêmica, câncer, osteoartrite, doença inflamatória deintestino, rinite alérgica, caquexia, doença de Crohns,dermatite, asma, disfunção erétil e degeneração macular.
3. Uso, de acordo com a reivindicação 1 ou 2,caracterizado pelo fato de que a dita condição é umadermatite selecionada do grupo consistido de eczema,psoríase, e dermatite de contato.
4. Uso, de acordo com a reivindicação 1 ou 2,caracterizado pelo fato de que a dita condição é um câncerselecionado do grupo consistido de mieloma/mielomamúltiplo, câncer de ovário, câncer de mama, câncer de cólone câncer nos ossos.
5. Uso de um peptídeo "D" ou "L" caracterizado pelofato de que compreende a seqüência de aminoácidos ouseqüência de retro aminoácidos de um peptídeo listado nastabelas 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 ou 18 para aliviarum ou mais sintomas em um mamífero em uma condiçãoselecionada do grupo consistido de doença de Parkinson edoença vascular periférica.
6. Uso de um peptídeo "D" ou "L" caracterizado pelofato de que compreende a seqüência de aminoácidos ouseqüência de retro aminoácidos de um peptídeo listado nastabelas 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 ou 18 na manufaturade um medicamento para aliviar um ou mais sintomas em ummamífero em uma condição selecionada do grupo consistido dedoença de Parkinson e doença vascular periférica.
7. Uso, de acordo com qualquer uma dasreivindicações 1, 2, 3, 4, 5 ou 6, caracterizado pelo fatode que dito peptídeo compreende a seqüência de aminoácidosDWFKAFYDKVAEKFKEAF (SEQ ID N°:5) OU FAEKFKEAVKDYFAKFWD (SEQID N0:104).
8. Uso, de acordo com qualquer uma dasreivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6 ou 7, caracterizado pelofato de que dito peptídeo compreende ainda um grupoprotetor unido aos grupos amino ou carboxila terminais.
9. Uso, de acordo com qualquer uma dasreivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6 ou 7, caracterizado pelofato de que dito peptídeo compreende ainda um primeirogrupo protetor unido ao grupo amino terminal e um segundogrupo protetor unido ao grupo carboxila terminal.
10. Uso, de acordo com a reivindicação 9,caracterizado pelo fato de que o primeiro grupo protetor eo segundo grupo protetor são independentemente selecionadosdo grupo consistido de acetil, amido, grupos alquila com 3a 20 carbonos, Fmoc, Tboc, grupo 9-fluorenoacetil, grupo 1-fluorenocarboxilico, grupo 9-fluorenocarboxilico, grupo 9-fluoreno-l-carboxilico, benziloxicarbonil, Xantil (Xan),Tritil (Trt), 4-metiltritil(Mtt), 4-metoxitritil (Mmt), 4-metoxi-2,3,6-trimetil-benzenosulfonil (Mtr), Mesitileno-2-sulfonil (Mts), 4,4-dimetoxibenzidril (Mbh), Tosil (Tos), 2,2,5,7,8-pentametil croman-6-sulfonil (Pmc), 4-metilbenzil(MeBzl), 4-metoxibenzil (MeOBzl), Benziloxi (BzlO), Benzil(Bzl), Benzoil (Bz), 3-nitro-2-piridinosulfenil (Npys), 1-(4-4-dimetil-2,6-diaxociclohexilideno)etil (Dde) , 2,6-diclorobenzil (2,6-DiCl-Bzl), 2-clorobenziloxicarbonil (2-Cl-Z), 2-bromobenziloxicarbonil (2-Br-Z), Benziloximetil(Bom), t-butoxicarbonil(Boc), ciclohexiloxi (cHxO), t-butoximetil (Bum), t-butoxi(tBuO), t-Butil (tBu), Acetil(Ac), e Trifluoroacetil (TFA).
11. Uso, de acordo com a reivindicação 9,caracterizado pelo fato de que dito primeiro grupo protetoré selecionado do grupo consistido de acetil, propionil, eum grupo alquil com 3 a 20 carbonos.
12. Uso, de acordo com a reivindicação 9 ou 11,caracterizado pelo fato de que dito segundo grupo protetoré uma amida.
13. Uso, de acordo com qualquer uma dasreivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9,, 10, 11 ou 12,caracterizado pelo fato de que o peptídeo é misturado a umexcipiente farmaceuticamente aceitável.
14. Uso, de acordo com a reivindicação 13,caracterizado pelo fato de que dito peptídeo é misturado aum excipiente farmaceuticamente aceitável adequado paraadministração oral para um mamífero.
15. Composição caracterizada pelo fato de quecompreende um peptídeo "D" ou "L" que compreende aseqüência de aminoácidos ou seqüência de retro aminoácidosde um peptídeo listado nas tabelas 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 15, 16 ou 18 e um agente selecionado do grupoconsistido de um inibidor CETP, FTY720, Certican,inibidores DPP4, um agonista LXR, um agonista FXR, umagonista ABCAl, agonista CB-1, e um inibidor PKC.
16. Composição, de acordo com a reivindicação 15,caracterizada pelo fato de que dito peptídeo compreende aseqüência de aminoácidos DWFKAFYDKVAEKFKEAF (SEQ ID N°:5)OU FAEKFKEAVKDYFAKFWD (SEQ ID N0104).
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Families Citing this family (28)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7199102B2 (en) 2000-08-24 2007-04-03 The Regents Of The University Of California Orally administered peptides synergize statin activity
US7723303B2 (en) * 2000-08-24 2010-05-25 The Regents Of The University Of California Peptides and peptide mimetics to treat pathologies characterized by an inflammatory response
WO2012047930A2 (en) 2010-10-04 2012-04-12 The Regents Of The University Of California Compositions and methods for treatment of gynecologic cancers
KR20070089996A (ko) 2004-12-06 2007-09-04 더 리전트 오브 더 유니버시티 오브 캘리포니아 세동맥의 구조 및 기능의 개선 방법
AU2007284801A1 (en) 2006-08-08 2008-02-21 The Regents Of The University Of Californina Salicylanilides enhance oral delivery of therapeutic peptides
EP2977452A3 (en) * 2007-05-11 2016-05-25 Thomas Jefferson University Methods of treatment and prevention of neurodegenerative diseases and disorders
AU2014200542B2 (en) * 2007-05-11 2016-08-25 Rowan University Methods of treatment and prevention of neurodegenerative diseases and disorders
EP2195331B1 (en) * 2007-08-28 2013-11-20 Uab Research Foundation Synthetic apolipoprotein e mimicking polypeptides and methods of use
US7985728B1 (en) 2007-09-20 2011-07-26 Abbott Cardiovascular Systems Inc. Sustained release of Apo A-I mimetic peptides and methods of treatment
US9173890B2 (en) 2007-09-20 2015-11-03 Abbott Cardiovascular Systems Inc. Sustained release of Apo A-I mimetic peptides and methods of treatment
US7985727B1 (en) * 2007-09-20 2011-07-26 Abbott Cardiovascular Systems Inc. Apo A-I mimetic peptides and methods of treatment
WO2009093246A2 (en) * 2008-01-22 2009-07-30 Compugen Ltd. Novel clusterin derived peptide
WO2010020822A1 (en) * 2008-08-19 2010-02-25 University Of Patras Therapy for apolipoprotein-induced hypertriglyceridemia
WO2010049103A1 (en) * 2008-10-31 2010-05-06 Eth Zurich Soluble truncated apom proteins and medical uses thereof
US20120270771A1 (en) * 2009-09-30 2012-10-25 Snu R&Db Foundation Apolipoprotein a-1 mimic peptides, and therapeutic agent for treating hyperlipidemia and diseases related to hyperlipidemia comprising same
US9241976B2 (en) 2011-08-29 2016-01-26 The Regents Of The University Of California Use of HDL-related molecules to treat and prevent proinflammatory conditions
US9539300B2 (en) 2012-03-31 2017-01-10 The Regents Of The University Of California Modulating disease through genetic engineering of plants
KR102017026B1 (ko) * 2013-01-10 2019-09-02 (주) 수파드엘릭사 염증 또는 알러지의 예방 또는 치료용 약학 조성물 및 염증 또는 알러지 개선용 화장료 조성물
WO2016018665A1 (en) 2014-07-31 2016-02-04 Uab Research Foundation Apoe mimetic peptides and higher potency to clear plasma cholesterol
CN115919996A (zh) * 2015-05-01 2023-04-07 雅利斯塔制药公司 用于治疗眼科疾病的脂联素拟肽
AU2016260190A1 (en) * 2015-05-12 2017-11-23 The Regents Of The University Of California Peptide treatment for inflammation and fibrosis
DK3395354T3 (da) 2015-12-18 2024-06-03 Talengen Int Ltd Plasminogen til anvendelse i behandling af diabetisk nefropati
WO2018063796A1 (en) 2016-09-28 2018-04-05 The Regents Of The University Of California Ezetimibe-associated apoa-1 mimetic peptides showing enhanced synergism
US10426817B2 (en) 2017-01-24 2019-10-01 Macregen, Inc. Treatment of age-related macular degeneration and other eye diseases with apolipoprotein mimetics
CA3075471C (en) * 2017-09-15 2024-02-20 Kine Sciences Co., Ltd. Use of peptides as therapeutic agent for autoimmune diseases and bone diseases
GB2576705A (en) * 2018-08-17 2020-03-04 E Miller Norman Improvements in or relating to organic material
SG11202111311WA (en) 2019-06-14 2021-12-30 Zealand Pharma As Pharmaceutical parenteral composition of dual glp1/2 agonist
CN111796098B (zh) * 2020-05-29 2021-06-01 中国科学院武汉病毒研究所 诊断新冠肺炎由重症转危重症的血浆蛋白标志物、检测试剂或检测工具

Family Cites Families (98)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US651842A (en) * 1899-08-18 1900-06-19 James Thomas Ford Friction-clutch.
US3767040A (en) 1971-03-01 1973-10-23 Minnesota Mining & Mfg Pressure-sensitive polyurethane adhesives
US4155913A (en) * 1973-02-08 1979-05-22 Hoffmann-La Roche Inc. Thienotriazolodiazepine derivatives
NO812612L (no) 1980-08-06 1982-02-08 Ferring Pharma Ltd Enzym-inhibitorer.
HU185263B (en) * 1981-06-12 1984-12-28 Richter Gedeon Vegyeszet Process for producing peptides effective on the immuncontroll analogous with the tp5
CH661438A5 (it) * 1984-04-09 1987-07-31 Seuref Ag Composizioni farmaceutiche ad azione antianossica e metabolica cerebrale.
US4643988A (en) 1984-05-15 1987-02-17 Research Corporation Amphipathic peptides
US4733665C2 (en) 1985-11-07 2002-01-29 Expandable Grafts Partnership Expandable intraluminal graft and method and apparatus for implanting an expandable intraluminal graft
US4969458A (en) 1987-07-06 1990-11-13 Medtronic, Inc. Intracoronary stent and method of simultaneous angioplasty and stent implant
NZ229004A (en) * 1988-05-19 1993-09-27 Immunobiology Res Inst Inc Tetrapeptides having t cell helper acitivity
US5480869A (en) * 1990-01-09 1996-01-02 The Regents Of The University Of California Anti-inflammatory peptide analogs and treatment to inhibit vascular leakage in injured tissues
AU662885B2 (en) * 1990-06-07 1995-09-21 Scripps Research Institute, The APO AI polypeptides, antibodies, and immunoassays
GB9022788D0 (en) 1990-10-19 1990-12-05 Cortecs Ltd Pharmaceutical formulations
SE9103701D0 (sv) 1991-12-13 1991-12-13 Kabi Pharmacia Ab Apolipoprotein
JPH07507554A (ja) * 1992-06-12 1995-08-24 エヌ・ブイ・イノゲネテイクス・エス・エイ 新規ペプチドおよびタンパク質，それらの調製方法，ならびにコレステロール受容体としてのそれらの使用
US5344822A (en) * 1992-08-12 1994-09-06 The Rogosin Institute Methods useful in endotoxin prophylaxis and therapy
AU672028B2 (en) * 1992-08-14 1996-09-19 Shino-Test Corporation Peptides containing respective amino acid sequences selected from among those of lipoprotein(a) and apolipoprotein(a), antibodies respectively recognizing these amino acid sequences, and method of assaying with these antibodies
JP3401005B2 (ja) * 1992-12-11 2003-04-28 ユニバーシティ オブ フロリダ 有害生物の防除のための材料および方法
US5721138A (en) * 1992-12-15 1998-02-24 Sandford University Apolipoprotein(A) promoter and regulatory sequence constructs and methods of use
US6773719B2 (en) 1994-03-04 2004-08-10 Esperion Luv Development, Inc. Liposomal compositions, and methods of using liposomal compositions to treat dislipidemias
US5746223A (en) 1996-10-11 1998-05-05 Williams; Kevin Jon Method of forcing the reverse transport of cholesterol from a body part to the liver while avoiding harmful disruptions of hepatic cholesterol homeostasis
US5635599A (en) * 1994-04-08 1997-06-03 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Fusion proteins comprising circularly permuted ligands
US5595973A (en) * 1994-09-12 1997-01-21 Biomeasure Incorporated Protection of hemopoietic cells during chemotherapy or radiotherapy
US5639726A (en) 1994-09-30 1997-06-17 The Regents Of The University Of Michigan Peptide mediated enhancement of thrombolysis methods and compositions
SE9500778D0 (sv) 1995-03-03 1995-03-03 Pharmacia Ab Process for producing a protein
US6717031B2 (en) * 1995-06-07 2004-04-06 Kate Dora Games Method for selecting a transgenic mouse model of alzheimer's disease
US5912014A (en) * 1996-03-15 1999-06-15 Unigene Laboratories, Inc. Oral salmon calcitonin pharmaceutical products
CN1109047C (zh) * 1996-03-29 2003-05-21 D·博菲利 作为胆固醇和其它脂类摄取抑制剂的两亲分子
SE9603068D0 (sv) 1996-08-23 1996-08-23 Pharmacia & Upjohn Ab Process for purifying a protein
SE9603303D0 (sv) 1996-09-11 1996-09-11 Pharmacia & Upjohn Ab Process for purifying a protein
US6555651B2 (en) * 1997-10-09 2003-04-29 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Ligand binding site of rage and uses thereof
ES2239801T3 (es) * 1997-04-02 2005-10-01 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Uso de un agente para disminuir el riesgo de enfermedad cardiovascular.
US6696545B1 (en) * 1997-04-11 2004-02-24 Sangstat Medical Corporation Cytomodulating lipophilic peptides for modulating immune system activity and inhibiting inflammation
US6273913B1 (en) * 1997-04-18 2001-08-14 Cordis Corporation Modified stent useful for delivery of drugs along stent strut
DE69805697T3 (de) * 1997-04-24 2006-11-30 Chemoxal S.A. Desinfizierende und fungizide Zusammensetzung auf der Basis von Peressigsäure und einem Aminoxid
US6635623B1 (en) * 1997-06-13 2003-10-21 Baylor College Of Medicine Lipoproteins as nucleic acid vectors
US6383808B1 (en) * 2000-09-11 2002-05-07 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense inhibition of clusterin expression
US6037323A (en) 1997-09-29 2000-03-14 Jean-Louis Dasseux Apolipoprotein A-I agonists and their use to treat dyslipidemic disorders
US6046166A (en) * 1997-09-29 2000-04-04 Jean-Louis Dasseux Apolipoprotein A-I agonists and their use to treat dyslipidemic disorders
US6004925A (en) * 1997-09-29 1999-12-21 J. L. Dasseux Apolipoprotein A-I agonists and their use to treat dyslipidemic disorders
US6287590B1 (en) * 1997-10-02 2001-09-11 Esperion Therapeutics, Inc. Peptide/lipid complex formation by co-lyophilization
US6191151B1 (en) * 1997-11-12 2001-02-20 Howard M. Zik Therapy for herpes neurological viral conditions utilizing 1,4-dihydropyridine calcium channel blockers
US20030077641A1 (en) * 1998-03-11 2003-04-24 Laskowitz Daniel T. Methods of suppressing microglial activation and systemic inflammatory responses
US6303619B1 (en) * 1998-03-12 2001-10-16 University Of Virginia Meta-substituted acidic 8-phenylxanthine antagonists of A3 human adenosine receptors
US6846636B1 (en) * 1998-05-15 2005-01-25 American National Red Cross Methods and compositions for HDL holoparticle uptake receptor
US6019739A (en) * 1998-06-18 2000-02-01 Baxter International Inc. Minimally invasive valve annulus sizer
US6228989B1 (en) * 1998-11-13 2001-05-08 The Regents Of The University Of California Peptide substrates phosphorylated by P21-activated protein kinase
WO2000034469A1 (en) * 1998-12-11 2000-06-15 The Research Foundation Of State University Of New York At Albany Compositions and methods for altering cell migration
US7544772B2 (en) * 2001-06-26 2009-06-09 Biomarck Pharmaceuticals, Ltd. Methods for regulating inflammatory mediators and peptides useful therein
US6410802B1 (en) 1999-04-01 2002-06-25 Esperion Therapeutics, Inc. Methods for synthesizing ether compounds and intermediates therefor
US6887470B1 (en) * 1999-09-10 2005-05-03 Conjuchem, Inc. Protection of endogenous therapeutic peptides from peptidase activity through conjugation to blood components
US6849714B1 (en) * 1999-05-17 2005-02-01 Conjuchem, Inc. Protection of endogenous therapeutic peptides from peptidase activity through conjugation to blood components
GB9911689D0 (en) * 1999-05-19 1999-07-21 Medical Res Council Refolding method
US6727063B1 (en) * 1999-09-10 2004-04-27 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Single nucleotide polymorphisms in genes
EP1226231A4 (en) * 1999-11-02 2003-07-09 Human Genome Sciences Inc 19 HUMANE SECRETIED PROTEINS
JP2001299364A (ja) * 1999-12-27 2001-10-30 Takeda Chem Ind Ltd 新規タンパク質およびそのｄｎａ
US20030040505A1 (en) 2000-03-31 2003-02-27 The Regents Of The University Of California Synthetic phospholipids to ameliorate atherosclerosis and other inflammatory conditions
US6596544B1 (en) 2000-03-31 2003-07-22 The Regents Of The University Of California Functional assay of high-density lipoprotein
US6444681B1 (en) * 2000-06-09 2002-09-03 The Ohio State University Research Foundation Methods and compositions for treating Raynaud's Phenomenon and scleroderma
US6680203B2 (en) 2000-07-10 2004-01-20 Esperion Therapeutics, Inc. Fourier transform mass spectrometry of complex biological samples
AU7705601A (en) * 2000-07-25 2002-02-05 Merck & Co Inc N-substituted indoles useful in the treatment of diabetes
US6664230B1 (en) * 2000-08-24 2003-12-16 The Regents Of The University Of California Orally administered peptides to ameliorate atherosclerosis
US7166578B2 (en) * 2000-08-24 2007-01-23 The Regents Of The University Of California Orally administered peptides synergize statin activity
US7723303B2 (en) * 2000-08-24 2010-05-25 The Regents Of The University Of California Peptides and peptide mimetics to treat pathologies characterized by an inflammatory response
US7148197B2 (en) 2000-08-24 2006-12-12 The Regents Of The University Of California Orally administered small peptides synergize statin activity
US7199102B2 (en) * 2000-08-24 2007-04-03 The Regents Of The University Of California Orally administered peptides synergize statin activity
US7144862B2 (en) * 2000-08-24 2006-12-05 The Regents Of The University Of California Orally administered peptides to ameliorate atherosclerosis
CN101426763A (zh) 2000-10-11 2009-05-06 埃斯佩里安医疗公司 用于胆固醇治疗和相关应用的硫化物和二硫化物化合物和组合物
CN1894195A (zh) 2000-10-11 2007-01-10 埃斯佩里安医疗公司 用于控制胆固醇以及相关用途的醚化合物以及组合物
CA2425311C (en) 2000-10-11 2011-06-14 Esperion Therapeutics, Inc. Ketone compounds and compositions for cholesterol management and related uses
JP2004531459A (ja) 2000-10-11 2004-10-14 エスペリオン セラピューティクス，インコーポレイテッド コレステロールマネージメント用スルホキシドおよびビススルホキシド化合物ならびに組成物および関連する使用
US20040122091A1 (en) 2000-10-11 2004-06-24 Esperion Therapeutics, Inc. Sulfoxide and bis-sulfoxide compounds and compositions for cholesterol management and related uses
US6982348B2 (en) * 2001-01-26 2006-01-03 Takeda Pharmaceutical Company Limited Aminoethanol derivatives
JP2002226457A (ja) * 2001-02-02 2002-08-14 Ajinomoto Co Inc 新規シスチン誘導体及び炎症因子活性化抑制剤
US6815426B2 (en) * 2001-02-16 2004-11-09 E. I. Du Pont De Nemours And Company Angiogenesis-inhibitory tripeptides, compositions and their methods of use
US7217785B2 (en) * 2001-05-09 2007-05-15 The Regents Of The University Of California Cysteine-containing peptides having antioxidant properties
PL372925A1 (en) 2001-09-28 2005-08-08 Esperion Therapeutics Inc. Prevention and treatment of restenosis by local administration of drug
US20030125260A1 (en) * 2001-10-31 2003-07-03 Fortuna Haviv Tetra-and pentapeptides having antiangiogenic activity
US7308303B2 (en) * 2001-11-01 2007-12-11 Advanced Bionics Corporation Thrombolysis and chronic anticoagulation therapy
US20050154046A1 (en) * 2004-01-12 2005-07-14 Longgui Wang Methods of treating an inflammatory-related disease
US7582670B2 (en) * 2001-12-13 2009-09-01 Natrogen Therapeutics, Inc. Methods of treating an inflammatory-related disease
AU2003202737A1 (en) * 2002-02-28 2003-09-09 Koninklijke Philips Electronics N.V. Method for controlling the mode of an electronic application
US6930085B2 (en) 2002-04-05 2005-08-16 The Regents Of The University Of California G-type peptides to ameliorate atherosclerosis
WO2004009776A2 (en) * 2002-07-19 2004-01-29 Abbott Biotechnology Ltd. TREATMENT OF TNFα RELATED DISORDERS
JP2004067583A (ja) * 2002-08-06 2004-03-04 Sumitomo Pharmaceut Co Ltd 新規ペプチド誘導体
AU2003291206A1 (en) * 2002-12-04 2004-06-23 Agennix Incorporated Lactoferrin in the reduction of circulating cholesterol, vascular inflammation, atherosclerosis and cardiovascular disease
EP1594437A2 (en) * 2003-02-04 2005-11-16 University of Connecticut Health Center Immunogenic cd91 ligand-antigenic molecule complexes and fusion proteins
US8088404B2 (en) 2003-03-20 2012-01-03 Medtronic Vasular, Inc. Biocompatible controlled release coatings for medical devices and related methods
US20050070996A1 (en) 2003-04-08 2005-03-31 Dinh Thomas Q. Drug-eluting stent for controlled drug delivery
US7291590B2 (en) * 2003-06-12 2007-11-06 Queen's University At Kingston Compositions and methods for treating atherosclerosis
KR20060041309A (ko) 2003-08-13 2006-05-11 다케다 야쿠힌 고교 가부시키가이샤 ４-피리미돈 유도체 및 펩티딜 펩티다제 저해제로서의 그의용도
ES2381551T3 (es) * 2003-12-05 2012-05-29 The Cleveland Clinic Foundation Marcadores de riesgo para enfermedad cardiovascular
KR101185609B1 (ko) * 2004-07-16 2012-09-24 트러스티즈 오브 터프츠 칼리지 아포리포단백질 ａ１ 미메틱 및 이의 용도
AU2005287004B2 (en) * 2004-09-16 2011-03-17 The Regents Of The University Of California G-type peptides and other agents to ameliorate atherosclerosis and other pathologies
KR20070089996A (ko) * 2004-12-06 2007-09-04 더 리전트 오브 더 유니버시티 오브 캘리포니아 세동맥의 구조 및 기능의 개선 방법
US20080293639A1 (en) * 2005-04-29 2008-11-27 The Regents Of The University Of California Peptides and peptide mimetics to treat pathologies characterized by an inflammatory response
WO2006128056A2 (en) * 2005-05-26 2006-11-30 Metabasis Therapeutics, Inc. Novel phosphinic acid-containing thyromimetics
US8101565B2 (en) * 2007-09-20 2012-01-24 Abbott Cardiovascular Systems Inc. Sustained release of Apo A-I mimetic peptides and methods of treatment

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