BRPI0612298A2 - aditivo de alimento para seres humanos e animais, e/ou água potável promotor de desempenho e sáude probiótica e uso do mesmo - Google Patents

Abstract

ADITIVO DE ALIMENTO PARA SERES HUMANOS E ANIMAIS, E/OU áGUA POTáVEL PROMOTOR DE DESEMPENHO E SAúDE PROBIóTICA E USO DO MESMO. A presente invenção refere-se a um aditivo de água potável e/ou gêneros alimentícios de animal ou ser humano promotor de aptidão ou saúde probiótica compreendendo uma mistura de microorganismos, selecionados a partir do grupo Enterococcus faecium, DSM 16211, Lactobacilius reuteri, DSM 16350, Lactobacilius salivarius ssp. salivarius, DSM 16351, Pediococcus acidilactici, DSM 16210, Bifidobacterium animalís e DSM 16284. A invenção também se refere ao uso de um aditivo de água potável e/ou gêneros alimentícios de animal ou ser humano, em particular para prevenção do efeito nocivo de vários germes indesejáveis no sistema digestivo de animais e/ou pássaros domésticos.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "ADITIVO DEALIMENTO PARA SERES HUMANOS E ANIMAIS, E/OU ÁGUA POTÁVELPROMOTOR DE DESEMPENHO E SAÚDE PROBIÓTICA E USO DOMESMO".

A presente invenção refere-se a um aditivo de alimento, alimen-tação e/ou água potável promotor de desempenho e saúde probiótica quecontém uma mistura de microorganismos, e o uso de um tal aditivo de ali-mento, alimentação e/ou água potável promotor de desempenho e saúdeprobiótica.

Misturas contendo aditivos de alimento, alimentação e/ou águapotável de microorganismos são empregados a uma extensão crescentetanto em aplicações em ser humano quanto em animais para prevenir, atéonde possível, infecções através de germes patogênicos tal como, por e-xemplo, Salmonella ou E. coli, Campylobacter, Clostridia etc. O uso de taismisturas de microorganismos é com base no que é chamado exclusão com-petitiva (CE) por qual é tentado suprimir ou eliminar bactérias "ruins", isto é,bactérias nocivas ou prejudiciais à saúde, por assim chamadas bactérias"boas" . Desse modo, o crescimento de bactérias boas inibe aquele de bac-térias ruins, por exemplo, levando a vantagem do ambiente do trato digestivoem termos de crescimento de proliferar mais rapidamente. Concretamente,uma mistura especial de bactérias, que podem da mesma forma ser isoladasdo trato digestivo é empregada na tentativa de administrar quando amplo umespectro de bactérias intestinais quando possível para alcançar um campoamplo de aplicação. Entretanto, o uso de um espectro tão amplo quantopossível, de bactérias intestinais que não são especificadas mostrou envol-ver problemas, desde que, por um lado, possíveis problemas de misturasindefinidas tal como, por exemplo, a transferência de resistências à antibióti-co ou doenças possam severamente ser evitados e, por outro lado, a admi-nistração de misturas indefinidas está limitada por legislações e regulamen-tos internacionais ou regionais para prevenir resultados inesperados ou in-desejados da administração de tais misturas. O uso de misturas definidas e,várias cepas tem, portanto, que ser recorrido para evitar efeitos inesperadose obedecer as legislações.

Tendo em mente as providências legais e buscando obter resul-tados tão concretos quanto possíveis, uma pluralidade de publicações foirecentemente conhecida, entre as quais US-A 5 372 810, por exemplo, des-creve uma formulação e método para prevenir e tratar diarréia em animaisde fazenda empregando-se células bacterianas esterilizadas, seus homoge-nados ou componentes de parede celular, que foram aerobicamente cresci-dos. As bactérias empregadas nesse caso pertencem aos gêneros de Brevi-bacterium ou Corynebacterium.

Publicação US 2004-0115308 descreve produtos consumíveisque contêm ingredientes frescos, probióticos, os referidos probióticos sendocompreendidos dos grupos de leveduras, Aspergilla, Lactobacilli, Bifidobae-teria, Streptococci, Enterococci e misturas destes. As bactérias empregadasnão são secadas ou concentradas de qualquer maneira sejam qual for, massão empregadas quando obtidas, desse modo causando problemas em ter-mos de estabilidade, aplicabilidade e similares.

A partir de EP 1 037 964, um probiótico definido ou formulaçãode bactérias anaeróbias para controlar ou inibir salmonelas em porcos foiconhecida, as referidas bactérias compreendendo Enterococcus faeeaiis,Streptoeoeeus bovis, Clostridium eiostridiforme, Ciostridium symbiosum,Ciostridium ramosum, Baeteroides fragiiis, Baeteroides distasonis, Baeteroi-des vuigatus, Baeteroides thetaiotamicron e Bacteroides eaeeae, em quepelo menos sete grupos diferentes de germes têm que estar contidos noproduto.

Finalmente, WO 03/054168 descreve um método para prepararuma formulação de germes intestinais que são capazes de eliminar germespatogênicos. Nesse método, uma amostra microbiana é obtida dos intestinosde uma espécie animal particular e exposta às condições aeróbicas, subse-qüentemente congelada, e redescongelada. Os grupos microbianos indivi-duais são seletivamente cultivados e testados quanto suas atividades contramicróbios patogênicos em testes de inibição e finalmente fermentos e em-pregados.

Os métodos descritos na literatura, entretanto, envolvem pro-blemas em que apenas uma atividade contra um germe patogênico especialserá obtida empregando-se quaisquer bactérias específicas individuais oucombinações destas. Uma atividade contra os vários germes patogênicoscontidos no trato digestivo não é realizável. Finalmente, os métodos descri-tos na literatura principalmente da mesma forma sofrem disso, o espectroadministrado de bactérias não é amplo o bastante para alcançar tão comple-ta uma inibição de germes patogênicos quanto possível. Outros produtosconhecidos usam bactérias que não são obtidas dos intestinos, desse modofornecendo atividades não completamente específicas.

A presente invenção visa fornecer um aditivo de alimento, ali-mentação e/ou água potável promotor de desempenho e saúde probióticacompreendendo uma mistura de microorganismos, que exibe sua atividadesubstancialmente no sistema digestivo inteiro de mamíferos e/ou animais defazenda, desse modo prevenindo ou pelo menos reduzindo os efeitos noci-vos de um grande número de germes indesejados tais como, por exemplo,Salmonella, E. coli, Clostridia etc.

Para resolver estes objetivos, um aditivo de alimento, alimenta-ção e/ou água potável promotor de desempenho e saúde probiótica conten-do uma mistura de microorganismos é empregado de acordo com a presenteinvenção, que compreende pelo menos dois microorganismos selecionadosdo grupo que consiste em Enterococcus faeeium, DSM 16211, Lactobacillusreuteri, DSM 16350, e Lactobacillus salivarius ssp. salivarius, DSM 16351,Pediocoeeus acidilaetiei, DSM 16210, e Bifidobaeterium animalis, DSM16284. Empregando-se microorganismos do grupo que consiste em Entero-eoceus faeeium, DSM 16211, Laetobaeillus reuteri, DSM 16350, e Lactobacil-lus salivarius ssp. salivarius, DSM 16351, Pediocoeeus acidilaetiei, DSM16210, e Bifidobacterium animalis, DSM 16284, é possível, devido aos refe-ridos microorganismos que originam-se das regiões mais diversas do tratodigestivo tal como, por exemplo, o apêndice, jejuno, íleo ou papo, para subs-tancialmente proteger o trato digestivo inteiro e, em particular, a região gas-trointestinal para impedir bem-sucedidamente germes patogênicos de traba-lhar no trato digestivo inteiro.

Com a exceção de DSM 16284, Bifidobacterium animalis que ésuposto constituir uma espécie nova, os microorganismos depositados sãocepas novas de espécies já conhecidas, desde que elas geralmente mos-trem mais de 99% de correspondência com as cepas conhecidas.

As seqüências individuais das cepas depositadas são como segue:

Pediococcus acidilactici, DSM 16210,CCTGGCTCAGGATGAACGCTGGCGGCGTGCCTAATACATGCAAGTCGAACGAACTTCCGT

TAATTGATTATGACGTGCTTGCACTGAATGAGATTTTAACACGAAGTGAGTGGCGGACGG

GTGAGTAACACGTGGGTAACCTGCCCAGAAGCAGGGGATAACACCTGGAAACAGATG CTA

ATACCGTATAACAGAGAAAACCGCCTGGTTTTCTTTTAAAAGATGGCTCTGCTATCACTT

CTGGATGGACCCGCGGCGCATTAGCTAGTTGGTGAGGTAACGGCTCACCAAGGCGATGAT

GCGTAGCCGACCTGAGAGGGTAATCGGCCACATTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCT

ACGGGAGGCAGCAGTAGGGAATCTTCCACAATGGACGCAAGTCTGATGGTGCACGCCGCG

TGAGTGAAGAAGGGTTTCGGCTCGTAAAGCTCTGTTGTTAAAGAAGAACGTGGGTGAGAG

TAACTGTTCACCCAGTGACGGTATTTAACCAGAAAGCCACGGCTAACTACGTGCCAGCAG

CCGCGGTAATACGTAGGTGGCAAGCGTTATCCGGATTTATTGGGCGTAAAGCGAGCGCAG

GCGGTCTTTTAAGTCTAATGTGAAAGCCTTCGGCTCAACCGAAGAAGTGCATTG GAAACT

GGGAGACTTGAGTGCAGAAGAGGATAGTGGAACTCCATGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGA

TATATGGAAGAACACCAGTGGCGAAGGCGGCTGTCTGGTCTGTAACTGACGCTGAGGCTC

GAAAGCATGGGTAGCGAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCATGCCGTAAACGATGATT

ACTAAGTGTTGGAGGGTTTCCGCCCTTCAGTGCTGCAGCTAACGCATTAAGTAATCCGCC

TGGGGAGTACGACCGCAAGGTTGAAACTCAAAAGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGT

GGAGCATGTGGTTTAATTCGAAGCTACGCGAAGAACCTTACCAGGTCTTGACATCTTCTG

CCAACCT AAGAGATTAGGCGTTCCCTTCGGGGACAGAATGACAGGTGGTGCATGGTTGTCGTCAGCTCGTGTCG

Iniciador de seqüenciamento: 341 dianteiro, 530 reversoContig de 2 seqüências parciais: 341f530rComprimento de seqüência: 1094 bases no totalCorrespondência com cepa conhecida 99,6%Lactobacillus reuteri, DSM 16350,

GGATGAACGCCGGCGGTGTGCCTAATACATGCAAGTCGTACGCACTGGCCCAACTGATTG

ATGGTGCTTGCACCTGATTGACGATGGATCACCAGTGAGTGGCGGACGGGTGAGTAACAC

GTAGGTAACCTGCCCCGGAGCGGGGGATAACATTTGGAAACAGATGCTAATACCGCATAA

C AAC AAA AGCC ACATG G CTTTTGTTTG AAAG ATG G CTTTG G CTATC ACTCTG G GATG GAC

CTGCGGTGCATTAGCTAGTTGGTAAGGTAACGGCTTACCAAGGCGATGATGCATAGCCGA

GTTGAGAGACTGATCGGCCACAATGGAACTGAGACACGGTCCATACTCCTACGGGAGGCA

GCAGTAGGGAATCTTCCACAATGGGCGCAAGCCTGATGGAGCACACCGCGTGAGTGAAGA

AGGGTTTCGGCTCGTAAAGCTCTGTTGTTGGAGAAGAACGTGCGTGAGAGTAACTGTTCA

YGCAGTGACGGTATCCAACCAGAAAGTCACGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAAT

ACGTAGGTGGCAAGCGTTATCCGGATTTATTGGGCGTAAAGCGAGCGCAGGCGGTTGCTT

AGGTCTGATGTGAAAGCCTTCGGCTTAACCGAAGAAGTGCATCGGAAACCGGGCGACTTG

AGTGCAGAAGAGGACAGTGGAACTCCATGTGTAGCGGTGGAATGCGTAG ATAT ATG GAAG

AACACCAGTGGCGAAGGCGGCTGTCTGGTCTGCAACTGACGCTGAGGCTCGAAAGCATGG

GTAGCGAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCATGCCGTAAACGATGAGTGCTAGGGTGT

TGGAGGGTTTCCGCCCTTCAGTGCCGGAGCTAACGCATTAAGCACTCCGCCTGGGGAGTA

CGACCGCAAGGTTGAAACTCAAAGGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGTGGAAGCATG

TGGTTTAATTCGAAGCTACGCGAAGAACCTTACCAGGTCTTGACATCTTGCGCTAACCTT

AGAGATAAGGCGTTCCCTTCGGGGACGCAATGACAGGTGGTGCATGGTCGTCGTCAGCTCGTG

Iniciador de seqüenciamento: 341 dianteiro, 530 reversoContig de 2 seqüências parciais: 341f530r

Comprimento de seqüência: 1083 bases no totalCorrespondência com cepa conhecida 99,7%Lactobacillus salivarius ssp. salivaríus, DSM 16351,ACGCTGGCGGCGTGCCTAATACATGCAAGTCGAACGAAACTTTCTTACACCGAATGCTTG

CATTCACTCGTAAGAAGTTGAGTGGCGGACGGGTGAGTAACACGTGGGTAACCTGCCTAAAAGAAGGGGATAACACTTGGAAACAGGTGCTAATACCGTATATCTNTAAGGATCGCATGA

TCCTNAGATGAAAGATGGTTCTGCTATCGCTTNTAGATGGACCCGCGGCGTATTANCTAG

TTGGTGGGGTAACGGCNTACCAAGGNGATGATACGTAGCCGAACTGAGAGGNTGATCGGC

CACATTGGGACTGAGACACGGCCCAAACTCCTACGGGAGGCAGCAGTAGGGAATCTTCCA

CAATGGACGCAAGTCTGATGGTGCCCGCCGCGAGAGTGAAGAAGGTCTTCGGATCGTAAA

ACTCTGTTGTTAGAGAAGAACACGAGTGAGAGTAACTGTTCATTCGATGACGGTATCTAA

CCAGCAAGTCACGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGTGGCAAGCGTT

GTCCGGATTTATTGGGCGTAAAGGGAACGCAGGCGGTCTTTTAAGTCTGATGTGAAAGCC

TTCGGCTTAACCGGAGTAGTGCATTGGAAACTGGAAGAQTTGAGTGCAGAAGAGGAGAGT

GGAACTCCATGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGATATATGGAAGAACACCAGTGGCGAAAGC

GGCTCTCTGGTCTGTAACTGACGCTGAGGTTCGAAAGCGTGGGTAGCAAACAGGATTAGA

TACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGATGAATGCTAGGTGTTGGAGGGTTTCCGCCCTTC

AGTGCCGCAGCTAACGCAATAAGCATTCCGCCTGGGGAGTACGACCGCAAGGTTGAAACT

CAAAGGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGTGGAGCATGTGGTTTAATTCGAAGCAACG

CGAAGAACCTTACCAGGTCTTGACATCCTTTGACCACCTAAAAAATTAGGTTTCCCTTCG

GGGACAAAGTGACAGGTGGTGCATGGCTGTCGTCAGCTCGTGTCGTIniciador de seqüenciamento: 341 dianteiro, 530 reversoContig de 2 seqüências parciais: 341f530rComprimento de seqüência: 1066 bases no totalCorrespondência com cepa conhecida 99,5%Enterococcus faecium, DSM 16211,

CCTGGCTCAGGACGAACGCTGGCGGCGTGCCTAATACATGCAAGTCGAACGCTTCTTTTTCCACCGGAGCTTGCTCCACCGGAAAAAGAGGAGTGGCGAACGGGTGAGTAACACGTGGGTAACCTGCCCATCAGAAGGGGATAACACTTG

GAAACAGGTGCTAATACCGTATAACAATCAAAACCGCATGGTTTTGATTTGAAAGGCGCTTTCGGGTGTCGCTGATGGATGGACCCGCGGTGCATTAGCTAGTTGGTGAGGTAACGGCTCACCAAGGCCACGATGCATAGCCGACCTGAG

AGGGTGATCGGCCACATTGGGACTGAGACACGGCCCAAACTCCTACGGGAGGCAGCAGTAGGGAATCTTCGGCAATGGACGAAAGTCTGACCGAGCAACGCCGCGTGAGTGAAGAAGGTTTTCGGATCGTAAAACTCTGTTGTTAGAGAA

GAACAAGGATGAGAGTAACTGTTCATCCCTTGACGGTATCTAACCAGAAAGCCACGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGTGGCAAGCGTTGTCCGGATTTATTGGGCGTAAAGCGAGCGCAGGCGGTTTCTTAAGTCTGATGTGAAAGCCCCCGGCTCAACCGGGGAGGGTCATTGGAAACTGGGAGACTTGAGTGCAGAAGAGGAGAGTGGAATTCCATGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGATATATGGAGGAACACCAGTGGCGAAGGCGGCTCTCTGGTCTGTAACTGACGCTGAGGCTCGAAAGCGTGGGGAGCAAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGATGAGTGCTAAGTGTTGGAGGGTTTCCGCCCTTCAGTGCTGCAGCTAACGCATTAAGCACTCCGCCTGGGGAGTACGACCGCAAGGTTGAAACTCAAAGGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGTGGAGCATGTGGTTTAATTCGAAGCAACGCGAAGAACCTTACCAGGTCTTGACATCCTTTGACCACTCTAGAGATAGAGCTTCCCCTTC

Iniciador de seqüenciamento: 341 dianteiro, 530 reversoContig de 2 seqüências parciais: 341f530rComprimento de seqüência: 1033 bases no totalCorrespondência com cepa conhecida 99,9%Bifidobacterium animalis, DSM 16284,

TTGCCATGGGCGCAAGCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGCGGGATGGAGGCCTTCGGGTTG

TAAACCGCTTTTGTTCAAGGGCAAGGCACGGTTTCGGGCCGTGTTGAGTGGATTGTTCGA

ATAAGCACCGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGGTGCGAGCGTTATC

CGGATTTATTGGGCGTAAAGGGCTCGTAGGCGGTTCGTCGCGTCCGGTGTGAAAGTCCAT

CGCCTAACGGTGGATCTGCGCCGGGTACGGGCGGGCTGGAGTGCGNTAAGGGAGACTGGA

ATTCCCGGTGTAACGNTGGAATGTGTANATATCGGGAAGAACACCAATGGNNAANGNAGG

TCTCTGGGCCGTTACTGACGCTGACGATNNAAAGACGTGAACCAGCGANCNCNATAANAT

ACCCTGACTACGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGGTGGATG CTG G ATGT

GGGGCCCTTTCCACGGGTCCTGTGTCGGAGCCAACGCGTTAAGCATCCCGCCTGGGGAGT

ACGGCCGCAAGGCTAAAACTCAAAGAAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGCGGAGCATG

CGGATTAATTCGATGCAACGCGAAGAACCTTACCTGGGCTTGACATGTGCCGGATCGCCG

TGGAAACACGGTTTCCCTTCGGGGCCGGTTCACAGGTGGTGCATGGTCGTCGTCAGCTCG

TGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTCGCCGCATGTTGCCAGC

GGGTGATGCCGGGAACTCATGTGGGACCGCCGGGGTCAACTCGGAGGAAGGTGGGGATGA

CGTCAGATCATCATGCCCCTTACGTCCAGGGCTTCACGCATGCTACAATGGCCGGTACAACGCGATGCGACACGGTGACGTGGGGCGGATCGCTGAAAACCGGTCTCAGTTCGGATCGCA

GTCTGCAACTCGACTGCGTGAAGGCGGAGTCGCTAGTAATCGCGGATCAGCAACGCCGCG

GTGAATGCGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCCCGTCAAGTCATGAAAGTGGGTAGCACC

GGAAGCCGGTGGCCCGACCCTCGTGGGGCGGACCGTCTAATGGTGAGACTCGTGATTGG

Iniciadorde seqüenciamento: 341 dianteiro, 1492 reversoContig de 2 seqüências parciais: 341f1492rComprimento de seqüência: 1139 bases no totalCorrespondência com cepa conhecida 98,9% - espécies novas

De acordo com um outro desenvolvimento da invenção, o aditivode alimento, alimentação e/ou água potável compreende pelo menos trêsmicroorganismos, desse modo permitindo a realização de uma coberturamais completa do trato digestivo inteiro e, além disso, a detecção de um efei-to sinérgico dos três microorganismos empregados contra germes patogênicos.

Uma mistura que compreende Enterococcus faecium, DSM16211, Lactobacillus reuteri, DSM 16350, e Lactobacillus salivarius ssp. sali-varius, DSM 16351, mostrou ser uma mistura particularmente preferida paraaditivos de alimento, alimentação e/ou água potável. Uma tal mistura não sóprovou ser benéfico para a inibição de germes patogênicos, em particular,bactérias E. eoli, mas, por causa de seu potencial redutor de pH forte e taxasde produção ácida altas, por exemplo, de ácido láctico, da mesma forma res-tringe fortemente os arredores de germes patogênicos, desse modo, alémdisso, da mesma forma fortemente inibindo a determinação de outros pató-genos diferentes.

Além disso, um aditivo de alimento, alimentação e/ou água po-tável que compreende Enteroeoceus faecium, DSM 16211, Pedioeoceus aei-dilactiei, DSM 16210, e Bifidobaeterium animalis, DSM 16284, é particular-mente preferido. Um tal aditivo de alimento, alimentação e/ou água potável,em particular, exibe uma inibição uniformemente aumentada de quase todosos germes patogênicos geralmente presentes e, em particular, E. coli, Sal-monella choleraesuis, Campylobacter jejuni, Clostridium perfringens, que éaumentado relativo aos únicos efeitos dos microorganismos contidos na mis-tura por uma tal extensão para fornecer um efeito sinérgico dos três microor-ganismos contra uma pluralidade de germes patogênicos. Além disso, estamistura também tem um potencial redutor de pH, particularmente por causade quantidades relativamente altas de formação de ácido láctico e ácido acé-tico, que terão novamente um efeito fortemente adverso sobre as condiçõesde vida para germes patogênicos.

Devido ao fato que, quando em correspondência com um de-senvolvimento adicional preferido da presente invenção, substâncias nutriti-vas e/ou substâncias prebióticas adicionalmente utilizáveis como portadorese selecionadas de fruto-oligossacarídeos, inulinas, isomalto-oligossacarídeos, lactitol, lactossacarose, lactulose, pirodextrinas, oligossa-carídeos de soja, transgalactooligossacarídeos, xilo-oligossacarídeos, vita-minas, em particular, vitamina E, estão contidas no aditivo de alimento, ali-mentação e/ou água potável, as condições de vida para os microorganismosno trato digestivo serão notadamente melhoradas, e será, em particular, sal-vaguardado que os microorganismos empregados serão capazes rapida-mente e confiantemente de propagarem no trato digestivo, no entanto en-quanto, ao mesmo tempo, impedindo ou prevenindo a propagação de ger-mes patogênicos por exclusão competitiva. As substâncias nutritivas e/ouácidos prebióticas fornecem vantagens de crescimento para os microorga-nismos empregados relativo aos germes patogênicos.

Desde então, quando em correspondência com um outro de-senvolvimento adicional preferido da presente invenção, um veículo adicio-nal selecionado dentre zeólitos, carbonato de cálcio, carbonato de magnésio,trealose, quitosana, goma-laca, albumina, amido, leite em pó desnatado,soro de leite doce em pó, maltodextrins, lactose, inulina, dextroses, óleosvegetais, ou um solvente selecionado a partir de água ou solução salina fi-siológica, está contido, é possível obter uma distribuição uniforme dos mi-croorganismos no trato digestivo, por um lado, e obter outra ajuda da exclu-são competitiva, por outro lado.

Desde então, quando em correspondência com um desenvolvi-mento adicional preferido da invenção, um material de revestimento selecio-nado dentre maltodextrinas, farinha de semente de guar, goma arábica, algi-natos, goma modificada e derivados de amido, dextrinas, derivados de celu-lose como éster celulose e éter, proteínas como gelatina, albumina, caseína,glúten, goma acácia, tragacanto, lipídios como ceras, parafina, ácido esteári-co, mono e diglicerídeos está contido, é possível proteger os microorganis-mos junto com materiais de veículo opcionalmente contidos para garantirque os microorganismos desenvolverão apenas suas atividades no local deseu propósito de uso, isto é, no trato digestivo. Além disso, empregando-setais materiais de revestimento, é, por exemplo, possível aplicar o aditivo dealimento, alimentação e/ou água potável diretamente em animais a ser trata-do com isso, tais como pintinhos de um dia de idade, em suas caixas detransporte por assim chamada aplicação de pélete ou gel para fornecer umaprofilaxia e tratamento terapêutico de animais jovens contra infecções pormicróbios patogênicos. Tais aplicações são de importância particular na pro-criação de animal moderna, visto que, por causa do contato direto deficientede animais jovens com suas mães, a base apropriada para uma flora intesti-nal intacta não será mais transmitida.

Para alcançar uma atividade ainda mais completa do aditivo dealimento, alimentação e/ou água potável contra germes patogênicos, o aditi-vo é preferivelmente também desenvolvido ao efeito que compreende adi-cionalmente pelo menos um microorganismo selecionado a partir do grupode Bifidobacterium sp., Lactobacillus salivarius, Lactobacillus sp., Lactobacii-Ius fermentum e Enteroeoeeus faeealis. Misturando-se ao aditivo de alimen-to, alimentação e/ou água potável um outro microorganismo conhecido por sipróprio, e atividade contra um ou vários germe(s) patogênico(s) a ser espe-rada nos animais respectivos serão seletivamente realçados para garantiroutra redução do risco de infecção.

De acordo com um desenvolvimento adicional preferido, temmostrado ser particularmente benéfico usar o aditivo de alimento, alimenta-ção e/ou água potável em forma suspensa, pulverulenta ou encapsuladacom um diâmetro máximo de 2000 μηι para permitir uma liberação seletiva,exata da atividade dos microorganismos como uma função do local desejadode uso tal como, por exemplo, o papo, o estômago, o intestino delgado esimilares. Além disso, é, claro, da mesma forma possível usar formas mistu-radas de aditivos de alimento, alimentação e/ou água potável suspensos eencapsulados para poder garantir uma atividade no sistema digestivo inteiro.

De acordo com um desenvolvimento adicional preferido da in-venção, um aditivo de alimento é fornecido, em particular para pássaros e/ouporcos de fazenda para aumentar o desempenho dos referidos animais defazenda, cujo aditivo de alimentação é compreendido de 1 χ 107 a 1 χ 1014,em particular 1 χ 1010 a 1 χ 1012, CFU/kg de Enterococcus faecium em aditi-vo de alimentação, DSM 16211, e 1 χ 106 a 1 χ 1014, em particular 1 χ 1010a1 χ 1012, CFU/kg de Lactobacillus reuteri em aditivo de alimentação, DSM16350. Uma tal seleção das quantidades de microorganismos empregados,em particular, garante a produção de um aditivo de alimento que exibe ativi-dade excelente contra a maioria dos germes de E. coli.

De acordo com um desenvolvimento adicional preferido da in-venção, é fornecido um aditivo de alimento, em particular, para pássarose/ou porcos de fazenda para aumentar o desempenho dos referidos animaisde fazenda cujo aditivo de alimentação é compreendido de 1 χ 107 a 1 χ1014, em particular, 1 χ 1010 a 1 χ 1012, CFU/kg de Enterococcus faecium emaditivo de alimentação, DSM 16211, 1 χ 107 a 1 χ 1014, em particular, 1 χ1010 a 1 χ 1012, CFU/kg de Pedioeoceus acidilactici em aditivo de alimenta-ção, DSM 16210, e 1 χ 107 a 1 χ 1014, em particular, 1 χ 1010 a 1 χ 1012,CFU/kg de Bifidobaeterium animalis em aditivo de alimentação, DSM 16284.

Um tal aditivo de alimentação, em particular, garante fortemente, ou unifor-memente fortemente, inibir a ação de Salmonella eholeraesuis e Clostridiumperfringens bem como a ação de bactérias E. coli e, além disso, fortementediminuir o pH no trato digestivo dos animais desse modo alimentados porcausa da produção alta de ácidos, isto é, ácido acético e ácido láctico, pelosmicroorganismos empregados, desse modo fortemente impedindo outrosgermes patogênicos de crescerem.

Para aumentar a atividade do aditivo de alimentação, é preferi-velmente também desenvolvido ao efeito que é compreendido de 1 χ 107 a 1χ 1014, em particular, 1 χ 1010 a 1 χ 1012, CFU/kg de Enterococcus faeciumem aditivo de alimentação, DSM 16211, 1 χ 106 a 1 χ 1014, em particular, 1 χ1010 a 1 χ 1012, CFU/kg de Laetobacillus reuteri em aditivo de alimentação,DSM 16350, e 1 χ 106 a 1 χ 1014, em particular 1 χ 1010 a 1 χ 1012, CFU/kgde Laetobacillus salivarius ssp. salivarius em aditivo de alimentação, DSM16351. Uma tal seleção das quantidades de microorganismos empregados,em particular, garante a produção de um aditivo de alimento que exibe ativi-dade excelente contra germes de E. eoli e, além disso, por causa do altopotencial redutor de pH, fornecendo forte inibição do crescimento de quasetodos os outros germes patogênicos.

O aditivo de alimentação pretendido, em particular, para pássa-ros e/ou porcos de fazenda para aumentar o desempenho dos referidos a-nimais de fazenda, de acordo com um desenvolvimento adicional preferidoda presente invenção é compreendido de 1 χ 107 a 1 χ 1014, em particular 1χ 1010 a 1 χ 1012, CFU/kg de Enteroeoceus faecium em aditivo de alimenta-ção, DSM 16211, 1 χ 106 a 1 χ 1014, em particular 1 χ 1010 a 1 χ 1012,CFU/kg de Laetobacillus reuteri em aditivo de alimentação, DSM 16350, 1 χ106 a 1 χ 1014, em particular 1 χ 1010 a 1 χ 1012, CFU/kg de Lactobacillus sa-livarius ssp. salivarius em aditivo de alimentação, DSM 16351, 1 χ 107 a 1 χ1014, em particular 1 χ 1010 a 1 χ 1012, CFU/kg de Pediococcus acidiiacticiem aditivo de alimentação, DSM 16210, 1 χ 107 a 1 χ 1014, em particular 1 χ1010 a 1 χ 1012, CFU/kg de Bifidobaeterium animalis em aditivo de alimenta-ção, DSM 16284, e 1 χ 106 a 1 χ 1014, em particular, 1 χ 1010 a 1 χ 1012CFU/kg, Bifidobaeterium sp. 2 em aditivo de alimentação. Uma tal mistura deaditivo de alimentação, em particular, mostra uma atividade notadamenteaumentada contra os germes patogênicos Campylobacter jejuni bem comoSalmonella choleraesuis. Além disso, da mesma forma, as atividades contrabactérias E. colisão fortemente realçadas e, principalmente, em grande par-te excedem as atividades das cepas individuais. Além disso, a reação meta-bólica de um tal aditivo de alimentação provou que um efeito sinérgico dasbactérias deve estar presente. Desse modo, a mistura presente de cinco mi-croorganismos, inter alia, pode converter xilitol, que não pode ser feito porum microorganismo da mistura sozinho. A razão para isto é que, por exem-plo, várias enzimas são requeridas para a degradação de xilitol, e é apenaspela combinação de acordo com a invenção de cinco microorganismos queas enzimas necessárias são tornadas disponíveis juntamente para permitir aconversão de um hidrato de carbono que é desse modo complicado de de-gradar.

De acordo com um desenvolvimento adicional preferido, o aditi-vo de alimentação adicionalmente compreende 1% a 95%, em particular20% a 98%, de veículo ou substância natural. Por um veículo ou substâncianatural que está adicionalmente contido, uma outra eliminação de germespatogênicos do ambiente gastrointestinal é possível suportando-se ou pro-movendo-se o crescimento seletivo dos microorganismos usados.

Desde então, quando em correspondência com um desenvolvi-mento adicional preferido, a suspensão bacteriana aquosa é aplicada na a-limentação ou seus péletes em uma quantidade de 0,01 g/kg a 10 g/kg dealimentação, em particular, 0,025 g/kg a 2,5 g/kg de alimentação, é garantidoque, por um lado, o aditivo de alimentação será facilmente apreendido pelosanimais e, por outro lado, germes patogênicos já presentes na superfície daalimentação antes da absorção de alimentação serão combatidos ou elimi-nados ou degradados pelo aditivo de alimentação. A fim de obter uma ativi-dade particularmente boa do aditivo de alimentação, o aditivo de alimenta-ção é preferivelmente misturado na alimentação em uma quantidade de 20g/t a 20 kg/t, em particular, 100 g/t a 2,5 kg/t, desse modo fornecendo umaquantidade suficiente de microorganismos, por um lado, e garantindo a de-gradação segura ou eliminação de germes patogênicos do ambiente gastro-intestinal, por outro lado.

De acordo com um desenvolvimento adicional preferido da in-venção, os microorganismos, ou mistura de microorganismos, são emprega-dos como aditivo de água potável, em que, de acordo com um desenvolvi-mento adicional preferido, o aditivo de água potável compreende 1 χ 107 a 1χ 1014, em particular 1 χ 1010 a 1 χ 1013, CFU/kg de Enterococcus faeciumem aditivo de água potável, DSM 16211, e 1 χ 106 a 1 χ 10145 em particular,1 χ 1010 a 1 χ 1013 de CFU/kg de Lactobacillus reuteri em aditivo de águapotável, DSM 16350. Um tal aditivo de água potável é, em particular, benéfi-co para a inibição de germes patogênicos e, em particular, para a inibição deE eoli. Além disso, uma tal mistura é capaz de fortemente reduzir o pH notrato gastrointestinal por causa da formação de ácido láctico, ácido acético eácido propiônico, desse modo criando condições de vida desfavoráveis paragermes patogênicos, e, por outro lado, os ácidos formados também agirãobactericidamente em suas formas não dissociadas, como é geralmente co-nhecido, para fornecer uma ação completamente boa contra uma pluralidadede germes patogênicos.

De acordo com um desenvolvimento adicional preferido, um adi-tivo de água potável é empregado, o qual é compreendido de 1 χ 107 a 1 χ1014, em particular, 1 χ 1010 a 1 χ 1013, CFU/kg de Enteroeoceus faecium emaditivo de água potável, DSM 16211, 1 χ 106 a 1 χ 1014, em particular, 1 χ1010 a 1 χ 1013, CFU/kg de Lactobacillus reuteri em aditivo de água potável,DSM 16350, e 1 χ 106 a 1 χ 1014, em particular, 1 χ 1010 a 1 χ 1013, CFU/kgde Laetobaeillus salivarius ssp. salivarius em aditivo de água potável, DSM16351. Um tal aditivo de água potável mostrou ser de benefício particularpara a inibição de E. eoli bem como Salmoriella eholeraesuis e, além disso,também mostra um efeito sinérgico a respeito do perfil metabólico. Esta mis-tura é, desse modo, por exemplo, capaz de degradar D-tagatose que nãopode ser feito por qualquer cepa individual separada contida nisso. Um efeitosinergistico destas três cepas a respeito do perfil metabólico é, desse modo,detectável.

De acordo com um desenvolvimento adicional preferido, a in-venção é também desenvolvida ao efeito que o aditivo de água potável écompreendido de 1 χ 107 a 1 χ 1014, em particular, 1 χ 1010 a 1 χ 1013,CFU/kg de Enteroeoceus faecium em aditivo de água potável, DSM 16211, 1χ 107 a 1 χ 1014, em particular, 1 χ 1010 a 1 χ 10131 CFU/kg de Pediococcusacidilactici em aditivo de água potável, DSM 16210, e 1 χ 107 a 1 χ 1014, emparticular 1 χ 1010 a 1 χ 1013, CFU/kg de Bifidobacterium animalis em aditivode água potável, DSM 16284. Uma tal mistura de microorganismos mostrouser de benefício particular para a inibição de germes patogênicos do grupode Salmonella eholeraesuis, Campylobaeter jejuni e Clostridium perfringense, devido às origens diferentes dos microorganismos do trato gastrointesti-nal, é, além disso, também capaz de desenvolver sua atividade no trato gas-trointestinal para garantir uma eliminação quase completa de germes noci-vos, patogênicos do sistema gastrointestinal inteiro.

De acordo com um desenvolvimento adicional preferido, um adi-tivo de água potável é empregado, o qual é compreendido de 1 χ 107 a 1 χ1014, em particular 1 χ 1010 a 1 χ 1013, CFU/kg de Enteroeoecus faecium emaditivo de água potável, DSM 16211, 1 χ 106 a 1 χ 1014, em particular, 1 χ1010 a 1 χ 1013, CFU/kg de Lactobaeillus reuteri em aditivo em água potável,DSM 16350, 1 χ 106 a 1 χ 1014, em particular, 1 χ 1010 a 1 χ 1013, CFU/kg deLactobaeillus salivarius ssp. salivarius em aditivo de água potável, DSM16351, 1 χ 107 a 1 χ 1014, em particular 1 χ 1010 a 1 χ 1013, CFU/kg de Pedi-oeoceus acidilactici em aditivo de água potável, DSM 16210, 1 χ 107 a 1 χ1014, em particular, 1 χ 1010 a 1 χ 1013, CFU/kg de Bifidobacterium animalisem aditivo de água potável, DSM 16284, e 1 χ 106 a 1 χ 1014, em particular,1 χ 1010 a 1 χ 1013 CFU/kg de Bifidobacterium sp. aditivo de água potável.Por um tal aditivo de água potável, é possível inibir quase todos germes pa-togênicos de ocorrência freqüente e, em particular, E. coli, Salmonella, Clos-tridia e Campylobacter a um grau largamente excedendo aquele da açãocumulativa dos microorganismos individuais, de forma que um efeito sinérgi-co volumoso contra germes patogênicos será alcançado. Além disso, é pos-sível por um tal microorganismo fortemente e extremamente rapidamentereduzir o pH nos tratos digestivos de animais para também realçar sua açãoe, em particular, a inibição do crescimento de germes patogênicos.

Para promover, em particular, o crescimento dos microorganis-mos desejados no trato gastrointestinal e também realçar o efeito de elimi-nação, o aditivo de água potável de acordo com um desenvolvimento adicio-nal preferido adicionalmente compreende 1% a 95%, em particular, 20% a92%, de veículo ou nutriente.

De acordo com um outro objeto, a presente invenção apontapara seletivamente reforçar os sistemas imunes de mamíferos e/ou pássarosde fazenda pelo uso seletivo de microorganismos, ou uma mistura de micro-organismos, e desse modo eliminar tão completamente quanto possível ger-mes patogênicos do trato digestivo.

Para resolver estes objetos, a invenção considera o uso de umamistura de pelo menos dois microorganismos selecionados a partir do grupoque consiste em Enterococcus faeeium, DSM 16211, Lactobaeillus reuteri,DSM 16350, e Lactobaeillus salivarius ssp. salivarius, DSM 16351, Pedio-eoceus acidilactiei, DSM 16210, e Bifidobaeterium animalis, DSM 16284,como um aditivo de alimento, alimentação e/ou água potável promotor dedesempenho e saúde probiótica. Um tal uso permite quase completamenteeliminar germes patogênicos dos tratos digestivos de mamíferos e animaisde fazenda pela assim chamada exclusão competitiva, desde que uma redu-ção extremamente rápida e forte do pH no trato digestivo é, em particular,possível por uma mistura seletiva dos referidos microorganismos, o uso deacordo com a invenção que permite a inibição seletiva do desenvolvimentode germes patogênicos. Aparte disso, nenhum dos microorganismos exibiuuma resistência ao antibiótico até mesmo em uma administração prolonga-da, simultânea de pelo menos um antibiótico durante tal uso.

De acordo com um desenvolvimento adicional preferido, umamistura de Enteroeoceus faeeium, DSM 16211, Lactobaeillus reuteri, DSM16350, e Lacbacillus salivarius ssp. salivarius, DSM 16351, é empregada deacordo com a presente invenção. Um tal uso, em particular, garante a inibi-ção da ação de germes patogênicos, isto é, E. eoli, e, pela redução extre-mamente rápida do pH no trato digestivo, para deteriorar as condições devida para germes patogênicos como tal a um tal grau que até mesmo o cres-cimento de quaisquer outros germes nocivos será fortemente prejudicado ouinibido para reduzir notadamente a suscetibilidade às doenças de mamíferose/ou pássaros de fazenda fornecidos com isto.

De acordo com um desenvolvimento adicional da invenção, umamistura de Enterococcus faeeium, DSM 16211, Pediocoeeus acidilactici,DSM 16210, e Bifidobacterium animaiis, DSM 16284, é preferivelmente em-pregada, que, em particular, torna possível a inibição de SaImoneiIa eholera-esuis, Campylobaeter jejuni e Chlostridium perfringens, respectivamente, e,além disso, fortemente deteriora as condições de vida para outros germespatogênicos, de forma que, principalmente, um efeito probiótico da misturaempregada que em grande parte excede o efeito cumulativo quando empre-gando os microorganismos individuais possa ser demonstrado.

De acordo com um desenvolvimento adicional preferido da in-venção, uma mistura compreendida de Enteroeoceus faeeium, DSM 16211,Lactobacillus reuteri, DSM 16350, é empregada junto com outras cepas des-tes grupos de LactobaciHi, Streptoeoeei e/ou Bifidobaeteria, o uso adicionalde cepas destes grupos de Laetobacilli, Streptoeoeei e/ou Bifidobaeteriapermitindo o uso seletivo ou inibição seletiva de microorganismos especiaisem regiões seletivas do trato gastrointestinal para particularmente inibir aocorrência de uma doença específica causada por germes patogênicos.

De acordo com um desenvolvimento adicional preferido da in-venção, a mistura de microorganismos é empregada para fortalecer a defesaimune. Um tal uso, em particular, é permitido pela escolha seletiva dos mi-croorganismos empregados e suas origens das regiões mais diversas dotrato digestivo salvaguardando que os microorganismos empregados desen-volverão suas atividades no comprimento inteiro do sistema digestivo e, con-seqüentemente, na realidade, notadamente fortalecerá a defesa imune domamífero ou pássaro de fazenda desse modo tratado contra germes pato-gênicos específicos no trato digestivo inteiro.

De acordo com um desenvolvimento adicional preferido, a mis-tura de microorganismos é empregada junto com pelo menos um formadorde pélete e/ou agente gelatinizante ou material de revestimento selecionadodentre maltodextrinas, farinha de semente de guar, goma arábica, alginatos,goma modificada e derivados de amido, dextrinas, derivados de celulose,proteínas, goma acácia, tragacanto, lipídios. Empregando-se a mistura demicroorganismos junto com um formador de pélete e/ou gel, seu uso comoum assim chamado pélete de aplicação de gel torna-se possível para permi-tir, em particular, animais extremamente jovens que não podem mais serfornecidos com as substâncias de imunorrealce apropriadas pelas suasmães ser seguramente e confiantemente fornecidos com os microorganis-mos necessários exigidos para fortalecer sua defesa imune. Ao usar uma talaplicação de pélete ou gel, a mistura de microorganismos é protegida comagentes gelatinizantes ou encapsulada, e esta mistura é diretamente pulveri-zada ou aplicada nos animais jovens a ser fornecidos a partir disto, ou, porexemplo, introduzidos em caixas de transporte no caso de pintinhos jovens,para salvaguardar o fornecimento dos animais jovens com os microorganis-mos que são de importância essencial para eles. Um uso similar, preferidoserá realizado visto que a mistura de microorganismos, junto com um veículolíquido, como uma suspensão em sprayé diretamente aplicada nos animaisjovens a ser tratados com isto. Pulverizando-se animais jovens com a mistu-ra de microorganismos, uma porção desta mistura em spray será apreendidano trato digestivo pelo próprio cuidado da camada ou contato com outrosanimais jovens, por meio da qual o fornecimento com os microorganismosque são essenciais para fortalecer sua defesa imune será salvaguardadonovamente.

No seguinte, a invenção será explicada em mais detalhe pormeio de modalidades exemplares. A esse respeito, o Exemplo 1 ilustra ainibição de germes patogênicos por germes de teste isolados em um modelode ensaio em placa de ágar; Exemplo 2 ilustra um teste de alimentação noqual pintinhos de um dia de idade são alimentados com um aditivo de ali-mentação e água potável que contém cinco, três ou nenhum microorganis-mo; Exemplo 3 é um estudo em campo em que pintinhos de um dia de idadesão alimentados com um aditivo de água potável que contém cinco microor-ganismos; Exemplo 4 ilustra um teste de alimentação no qual pintinhos deum dia de idade receberam um aditivo de água potável que contém cincomicroorganismos em tempos definidos; Exemplo 5 demonstra desafio deSalmonela em pintinhos de um dia de idade que foram administrados commicroorganismos através de água potável ou através de forragem em tem-pos definidos, com uma mistura de três ou cinco microorganismos que têmsido empregados; e Exemplo 6 mostra um teste de alimentação em porqui-nhos desmamados.

Exemplo 1

Inibição de germes patogênicos pelos germes teste de CE iso-lados (germes de teste de exclusão competitivos) de acordo com a invençãoem um modelo de ensaio em placa de ágar.

O ensaio foi realizado em placas de ágar MRS. As cepas foramaplicadas nas placas de ágar por inoculação, as cepas tendo sido levadasdiretamente de frasconetes de resfriamento. A incubação das placas ocorreudurante 48 horas sob condições anaeróbias. Depois do cultivo das cepaspatogênicas nos meios apropriados, as placas foram derramadas cuidado-samente com cerca de 9 ml de meio semi-sólido contendo a cepa patogêni-ca respectiva. Para E. coli e Salmonella chloeraesuis, meio semi-sólido VL1para Campylobacter jejuni, Meio de Infusão em Cérebro Coração semi-sólido, e para Clostridium perfringens, Meio Clostridial Reforçado semi-sólido, foram empregados.

As placas foram subseqüentemente incubadas sob as condi-ções de incubação respectivas das cepas patogênicas. A avaliação das pla-cas foi realizada medindo-se os diâmetros dos germes testes e zonas deinibição e calculando-se a partir disso as relações de zona de inibição paragerme de teste. Com base nas relações de zona de inibição /germe teste,uma avaliação da ação inibidora dos germes testes pode ser feita. Tabela 1abaixo indica os resultados para as cepas empregadas separadamente e emmistura.Tabela 1

<table>table see original document page 23</column></row><table><table>table see original document page 24</column></row><table>

A partir de uma comparação dos microorganismos depositados(escritos em letras em negrito) com cepas relacionadas (escrito em letrascursivas), é claramente evidente que os microorganismos depositados (es-crito em letras em negrito) são capazes de inibir germes patogênicos emgraus consideravelmente mais altos que as cepas já conhecidas (cursiva-mente escrita).Exemplo 2

Teste de alimentação em pintinhos de um dia de idade que fo-ram administrados com uma mistura de todos os cinco microorganismos de-positados ou uma mistura de três microorganismos depositados, as misturastendo sido administradas por meio de água potável no período de partida e,adicionalmente, pela alimentação durante o período de teste inteiro.Parâmetros de teste:

600 pintinhos de um dia de idade (raça: Ross 308) foram dividi-dos em três grupos:

Grupo 1: controle sem aditivos

Grupo 2: cinco microorganismos; 1 - 21 dias em água potável; 1 - 42 dias poralimentação

Grupo 3: DSM 16210, DSM 16211, DSM 16284; dia 1 - 21 dias em água po-tável; 1 - 42 dias por alimentação

Água e alimentação ficaram disponíveis ad Iibitum para absor-ção pelos animais.

Parâmetros de desempenho registrado:

Peso do fígado, ganhos de peso diário, absorção de alimenta-ção, relação de conversão de alimentação (= FCR), mortalidade, Fator deEficiência de Produção Europeu (EPEF).

<table>table see original document page 25</column></row><table><table>table see original document page 26</column></row><table>

EPEF (Fator de Eficiência de Produção Europeu)

O uso dos produtos permitiu melhorias significantes nos pesos do fí-gado dos animais nos grupos testes. A absorção de alimentação pode seraumentada ligeiramente no grupo de produto que contém todos os cinco mi-croorganismos, nenhuma diferença, porém, foi observada a respeito da rela-ção de conversão de alimentação. A mortalidade foi alta em geral, desdeque o teste foi realizado no meio do verão e os animais foram confrontadoscom temperaturas ambientes muito altas. Apesar deste fator de cepa adicio-nal, um aumento marcado no desempenho dos grupos de produto, porém,pode ser observado.

Exemplo 3

Em um teste em campo, uma mistura de todos os cinco micro-organismos foi testada em pintinhos de um dia de idade debaixo de condi-ções práticas e administrou em água potável durante o período inteiro.

Parâmetros de teste:

Aproximadamente 53.000 pintinhos de um dia de idade foramdivididos igualmente entre dois pavimentos.

Pavimento de chão: controle sem aditivos

12 pavimento: todos os cinco microorganismos em água potável

Água e alimentação estavam disponíveis ad Iibitum aos animais.

Parâmetros de desempenho registrado:

Peso do fígado, mortalidadeComo está evidente a partir da Tabela 3 abaixo, os desempe-nhos dos animais podem ser aumentados notadamente, acima todos damesma forma em comparação aos ciclos de produção precedentes listadosna Tabela 4, com os problemas de E. coli previamente ocorrendo sendo re-solvidos.

Tabela 3: Resumo de dados de desempenho

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Tabela 4: Desempenhos das últimas seis produções da fazenda

<table>table see original document page 27</column></row><table>

*... com todos os cinco microorganismos

Exemplo 4

Em um teste de alimentação, pintinhos de um dia de idade fo-ram administrados com uma mistura de todos os cinco microorganismos pormeio de água potável em tempos definidos.

Parâmetros de teste:

400 pintinhos de um dia de idade, raça: Ross 308, foram dividi-dos entre dois grupos de acordo com o princípio de contingência:Grupo 1: controle; sem aditivos

Grupo 2: cinco microorganismos em água potável nos dias 1, 2, 3, 7, 8, 9 e14,15,16

Água e alimentação estavam disponíveis ad Iibitum para absorção pelos a-nimais.

Parâmetros de desempenho registrados:

Ganhos de peso do fígado, absorção de alimento, relação deconversão de alimentação (= FCR), mortalidade, EPEF (Fator de Eficiênciade Produção Europeu).

Os resultados são resumidos na Tabela 5.

Tabela 5: Resumo de dados de c esempenho

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a, b diferenças de sign. (P < 0,05)

* EPEF (Fator de Eficiência de Produção Europeu)

Devido à adição dos microorganismos, os pesos do fígado dosanimais podem ser aumentados significativamente. Em termos de absorçãode alimentação e relação de conversão de alimentação, os dois grupos eramcomparáveis entre si. O número de massa de produtividade (= EPEF) foiclaramente mais alto no grupo de produto que no grupo de controle.

Exemplo 5

Desafio de salmonela em pintinhos de um dia de idade

Um produto compreendido de todos os cinco microorganismos,e um produto compreendido de três microorganismos, foi administrado naalimentação durante o período de teste inteiro e por meio de água potável nafase de partida.

Parâmetros de teste:

304 pintinhos de um dia de idade, raça: Ross 308, foram dividi-dos entre quatro grupos:

Grupo 1: controle negativo; sem aditivos e sem desafio de Salmonela

Grupo 2: controle positivo; sem aditivos; com desafio de Salmonela

Grupo 3: com desafio de Salmonela + produto de cinco microorganismos:dias 1 -21 em água potável; dias 1 - 42 por meio de alimentação

Grupo 4: com desafio de Salmonela + produto de três microorganismos(DSM 16211, DSM 16210, DSM 16284): dias 1-21 em água potável; dias 1-42 por meio de alimentação

Água e alimentação estavam disponíveis ad Iibitum para absor-ção pelos animais.

No dia 5, todos os animais de grupos 2, 3 e 4 foram inoculadosoralmente com uma dose de 6 χ 105 cfu de Salmonella enteritidis. O controlenegativo foi levado junto para o controle dos dados de desempenho normal.Parâmetros de desempenho registrados:

Ganho em peso do fígado, absorção de alimento, relação deconversão de alimentação (= FCR), morbidez (medida pelo número de diar-réias), mortalidade, EPEF (Fator de Eficiência de Produção Europeu).

Os resultados são resumidos na Tabela 6.

<table>table see original document page 29</column></row><table>

* EPEF (Fator de Eficiência de Produção Europeu)

Com respeito ao ganho de peso total, perdas de desempenhonotáveis ocorreram devido à infecção com Salmonella enteritidis quandocomparadas ao grupo de controle, que pode ser melhorado pela adição dosprodutos de acordo com a invenção. Foi mostrado que melhorias marcadaspodem ser alcançadas pela adição de ambos, o produto compreendendotrês microorganismos e aquele compreendendo cinco microorganismos. Damesma forma, a absorção de alimentação tinha sido adversamente afetadapela infecção, contudo a relação de conversão de alimentação pode ser me-lhorada notadamente pela adição dos produtos de acordo com a invenção.Até mesmo a morbidez, medida pelo número de diarréias observadas, podeser reduzida notadamente pela adição dos produtos quando comparada aogrupo não tratado.

Exemplo 6

Teste de alimentação em pintinhos de um dia de idade - desafio de Salmonela

Três grupos cada qual consistindo em 36 pintinhos de um dia deidade foram submetidos a um teste de alimentação empregando desafio deSalmonela. A um primeiro grupo, nenhum dos produtos foi administrado, umsegundo grupo foi administrado com uma mistura de todas as cinco cepasdepositadas, e um terceiro grupo recebeu um produto probiótico comercial-mente disponível que compreende os seguintes microorganismos: Lactoba-cillus sp., Lactobacillus sp., Bifidobaeterium spe Enterococcus faeeium.

Método teste:

Os pintinhos de um dia de idade foram mantidos em gaiolas emum ambiente isolado. Os produtos probióticos foram administrados em 1, 2 e3 dias de vida por meio de água potável, que foi fornecida ad Iibitum aos pin-tinhos. No terceiro dia de vida, todos os pintinhos foram administrados oral-mente com 1,0 ml de uma suspensão de Salmoriella enteritidis. A concentra-ção da solução de salmonela foi 1,0 χ 106 CFU/ml. Todos os pintinhos rece-beram adicionalmente alimentação e água ad libitum. A concentração desalmonelas nos excrementos dos animais foi medida.

Avaliação:

<table>table see original document page 30</column></row><table>

Os resultados demonstram que apenas a combinação dos cincomicroorganismos depositados pôde reduzir significativamente o crescimentode salmonelas a uma tal extensão que o número de germes de salmonelacaiu abaixo do limite de detecção.

Exemplo 7

Teste de alimentação em porquinho desmamados, empregandouma mistura que compreende cinco microorganismos e uma mistura quecompreende três microorganismos, respectivamente.

Em um teste de alimentação, os microorganismos de acordocom a presente invenção foram testados quanto aos seus efeitos sobre osdesempenhos de porquinhos desmamados. Os produtos foram administra-dos pela alimentação durante o período de teste inteiro de 47 dias.

Parâmetros de teste:

101 porquinhos desmamados, raça: ÒHYB, foram divididos en-tre três grupos:

Grupo 1: controle sem aditivos

Grupo 2: cinco microorganismos (C5); dias 1.47 por meio de alimentação;

Grupo 3: três microorganismos (C3) compreendendo DSM 16211, DSM16350, DSM 16351; dias 1 - 47 por meio de alimentação

Água e alimentação estavam ad Iibitum disponíveis para absor-ção pelos animais.

Parâmetros de desempenho registrados:

Peso do fígado, ganhos de peso diários, absorção de alimento,relação de conversão de alimentação (= FCR), mortalidade

Os resultados são resumidos na Tabela 7.

TABLEA 7: RESUMO DE DADOS DE DESEMPENHO

<table>table see original document page 31</column></row><table><table>table see original document page 32</column></row><table>

O uso dos produtos permitiu melhorias significantes nos pesosdo fígado dos animais nos grupos de teste, isto é, por 3% e 1,7%, respecti-vamente, depois que os primeiros 13 dias, e por 4% e 2,6%, respectivamen-te, até o fim do teste. Um aumento marcado pela adição dos produtos tam-bém pode ser obtido em termos de ganhos de peso diários.

Na Tabela 8 abaixo, os dados de alimentação são resumidos.

<table>table see original document page 32</column></row><table>

As absorções de alimentação podem ser aumentadas ligeira-mente nos grupos de produto, em termos de relações de conversão de ali-mentação uma melhoria ficou acima de todas noticiadas no primeiro períodode teste. No curso adicional, nenhuma diferença nas relações de conversãode alimentação, porém, pode ser determinada.

Lista que persiste na Regra 13bis, para 4, dos RegulamentosSob o Tratado de Cooperação de Patente.

Todos os microorganismos mencionados no pedido presenteforam depositados na German Collection of Microorganisms e Cell CulturesGmbH - DSMZ, Mascheroder Weg 1b 38124 Braunschweig, Germany (DE).

<table>table see original document page 33</column></row><table>

Exemplo 8

Troca positiva da flora intestinal em galinhas de grelha

Quatro grupos de galinhas de grelha foram submetidos a umteste de alimentação, 2 grupos tendo sido administrados com uma misturade produto compreendida de cinco microorganismos depositados, um grupoque tem sido um controle negativo sem qualquer aditivo, grupo que tem sidoum controle positivo com a adição de um promotor de desempenho de anti-biótico, isto é, avialmicina, um grupo que tem recebido a mistura de cincomicroorganismos por meio de água potável, e um grupo que tem sido admi-nistrado com uma mistura de microorganismos por meio da alimentação.

No curso do exame, mostrou que não houve nenhuma diferençaestatisticamente significante entre os grupos individuais em termos da con-tagem total de germes aeróbios, coliformes, a contagem total de germes a-naeróbios e bacteróides. Os grupos que tinham recebido a mistura de cincomicroorganismos mostraram números de germe significativamente mais altoa respeito de Bifidobacterium sp, Lactobacillus spp e Gram+cocci (por e-xemplo Enterococcus, Pediococcus) quando comparados aos controles posi-tivo e negativo (NK, PK).

Um fluxograma desta comparação é ilustrado na Figura.

O fluxograma da Figura, na parte moldada preta, mostra que osgrupos que têm recebido a mistura de cinco microorganismos por meio deágua potável ou alimentação, respectivamente, exibe números considera-velmente mais altos de germes "bons". No diagrama da Figura, o grupo decontrole negativo é representado como uma barra preta, o grupo de controlepositivo é representado como uma barra sombreada, o grupo que foi admi-nistrado com os cinco microorganismos por meio da alimentação é indicadopor uma barra pontilhada, e o grupo que foi administrado com a mistura decinco microorganismos por meio de água potável é ilustrado como uma barracinza clara.

Exemplo 9

Teste de alimentação em galinhas de grelha

4.500 galinhas de grelha (Ross 308) de sexos misturados foramdivididas entre dois grupos, cada dois grupos sendo subdivididos em trêssubgrupos adicionais para facilitar a observação. Ambos grupos receberamuma comida para animais padrão, e o grupo de teste recebeu uma misturados cinco microorganismos depositados em uma dose de 1*109 CFU/kg dealimentação. O grupo de controle foi administrado com um produto probióticocomercialmente disponível na mesma dose. A administração das substân-cias foi realizada por meio da comida para animais.

Depois de 38 dias, foi constatado que os parâmetros de desem-penho do grupo de teste foram melhorados notadamente ambos em termosde peso do fígado e ganhos de peso de diário e relações de conversão dealimentação. Além disso, a mortalidade caiu significativamente em relaçãoao grupo comparativo. Os resultados são indicados na Tabela 9 abaixo.

Tabela 9

<table>table see original document page 34</column></row><table>Exemplo 10

Em um teste de laboratório, as resistências ao antibiótico doscinco microorganismos depositados foram investigadas e, onde disponíveis,comparadas com os antibiogramas de bifidobactérias relacionadas. Foi ape-nas com a cepa Bifidobakterium animalis que nenhuma cepa comparativapode ser encontrada na literatura ou dados seguros podem ser obtidos paracepas comparativas por causa de condições de cultivo difíceis. Os resulta-dos dos testes de resistência a respeito de antibióticos comuns, junto comcepas comparativas onde disponíveis, são indicados nas Tabelas abaixo.

<table>table see original document page 35</column></row><table><table>table see original document page 36</column></row><table><table>table see original document page 37</column></row><table><table>table see original document page 38</column></row><table>

S ... sensível, R ... resistente

A partir destes resultados de testes comparativos que nenhumdestes microorganismos depositados tornam-se resistantes a quaisquer an-tibióticos conhecidos, todos eles permaneceram sensíveis e suscetíveis.Anexo ao pedido PCT

Requerente: Erber Aktiengesellschaft e outros.

Lista que persiste na Regra 13bis, para 4, dos Regulamentos Sob o Tratadode Cooperação de Patente.

Todos os microorganismos mencionados no presente pedidoforam depositados na German Collection of Microorganisms e Cell CulturesGmbH - DSMZ, Maseheroder Weg 1b, 38124 Braunschweig1 Alemanha (DE).

<table>table see original document page 38</column></row><table>LISTAGEM DE SEQÜÊNCIA

<110> Erber Aktiengesellschaft

<120> ADITIVO DE ALIMENTO PARA SERES HUMANOS E ANIMAIS, ALIMENTAÇÃOE/OU ÁGUA POTÁVEL PROMOTOR DE DESEMPENHO E SAÚDE PROBIÓTICA E USO DO MESMO

<130> P03453

<140> PCT/AT2006/000243

<141> 2006-06-14

<150> A 999/2005

<151> 2005-06-14

<160> 5

<170> Patentln versão 3.3

<210> 1

<211> 1094

<212> DNA

<213> Pediococcus acidilactici<220>

<221> 16S-rDNA

<222> (1)..(1094)

<300>

<308> DSM 16210

<309> 2004-02-06

<313> (1)..(1094)

<400> 1

cctggctcag gatgaacgct ggcggcgtgc ctaatacatg caagtcgaac gaacttccgt 60taattgatta tgacgtgctt gcactgaatg agattttaac acgaagtgag tggcggacgg 120gtgagtaaca cgtgggtaac ctgcccagaa gcaggggata acacctggaa acagatgcta 180ataccgtata acagagaaaa ccgcctggtt ttcttttaaa agatggctct gctatcactt 240ctggatggac ccgcggcgca ttagctagtt ggtgaggtaa cggctcacca aggcgatgat 300gcgtagccga cctgagaggg taatcggcca cattgggact gagacacggc ccagactcct 360acgggaggca gcagtaggga atcttccaca atggacgcaa gtctgatggt gcacgccgcg 420tgagtgaaga agggtttcgg ctcgtaaagc tctgttgtta aagaagaacg tgggtgagag 480taactgttca cccagtgacg gtatttaacc agaaagccac ggctaactac gtgccagcag 540ccgcggtaat acgtaggtgg caagcgttat ccggatttat tgggcgtaaa gcgagcgcag 600gcggtctttt aagtctaatg tgaaagcctt cggctcaacc gaagaagtgc attggaaact 660gggagacttg agtgcagaag aggatagtgg aactccatgt gtagcggtga aatgcgtaga 720tatatggaag aacaccagtg gcgaaggcgg ctgtctggtc tgtaactgac gctgaggctc 780gaaagcatgg gtagcgaaca ggattagata ccctggtagt ccatgccgta aacgatgatt 840actaagtgtt ggagggtttc cgcccttcag tgctgcagct aacgcattaa gtaatccgcc 900tggggagtac gaccgcaagg ttgaaactca aaagaattga cgggggcccg cacaagcggt 960ggagcatgtg gtttaattcg aagctacgcg aagaacctta ccaggtcttg acatcttctg 1020ccaacctaag agattaggcg ttcccttcgg ggacagaatg acaggtggtg catggttgtc 1080gtcagctcgt gtcg 1094

<210> 2

<211> 1083

<212> DNA

<213> LactobaciTlus reuteri<220>

<221> 16S-TDNA

<222> CD (1083)

<300>

<308> DSM 16350

<309> 2004-04-15

<313> Cl) (1083)

<400> 2

ggatgaacgc cggcggtgtg cctaatacat gcaagtcgta cgcactggcc caactgattg 60atggtgcttg cacctgattg acgatggatc accagtgagt ggcggacggg tgagtaacac 120gtaggtaacc tgccccggag cgggggataa catttggaaa cagatgctaa taccgcataa 180caacaaaagc cacatggctt ttgtttgaaa gatggctttg gctatcactc tgggatggac 240ctgcggtgca ttagctagtt ggtaaggtaa cggcttacca aggcgatgat gcatagccga 300gttgagagac tgatcggcca caatggaact gagacacggt ccatactcct acgggaggca 360gcagtaggga atcttccaca atgggcgcaa gcctgatgga gcacaccgcg tgagtgaaga 420agggtttcgg ctcgtaaagc tctgttgttg gagaagaacg tgcgtgagag taactgttca 480ygcagtgacg gtatccaacc agaaagtcac ggctaactac gtgccagcag ccgcggtaat 540acgtaggtgg caagcgttat ccggatttat tgggcgtaaa gcgagcgcag gcggttgctt 600aggtctgatg tgaaagcctt cggcttaacc gaagaagtgc atcggaaacc gggcgacttg 660agtgcagaag aggacagtgg aactccatgt gtagcggtgg aatgcgtaga tatatggaag 720aacaccagtg gcgaaggcgg ctgtctggtc tgcaactgac gctgaggctc gaaagcatgg 780gtagcgaaca ggattagata ccctggtagt ccatgccgta aacgatgagt gctagggtgt 840tggagggttt ccgcccttca gtgccggagc taacgcatta agcactccgc ctggggagta 900cgaccgcaag gttgaaactc aaaggaattg acgggggccc gcacaagcgg tggaagcatg 960tggtttaatt cgaagctacg cgaagaacct taccaggtct tgacatcttg cgctaacctt 1020agagataagg cgttcccttc ggggacgcaa tgacaggtgg tgcatggtcg tcgtcagctc 1080

gtg 1083

<210> 3

<211> 1066

<212> DNA

<213> Lactobacillus salivarius ssp. salivarius

<220><221> 16S-rDNA<222> (1)..(1066)

<220>

<221> misc_feature

<222> (166)..(166)

<223> néa, c, g.touu

<220>

<221> misc_feature

<222> (185)..(185)

<223> néa, c, g.touu

<220>

<221> misc_feature

<222> (213)..(213)

<223> néa, c, g.touu

<220>

<221> misc_feature

<222> (236)..(236)<223>

nea, c, g.touu

<220>

<221> misc_feature

<222> (257)..(257)

<223> néa, c, g.touu

<220>

<221> misc_feature

<222> (266)..(266)

<223> néa, c, g.touu

<220>

<221> misc_feature

<222> (292)..(292)

<223> néa, c, g.touu

<300>

<308> DSM 16351

<309> 2004-04-15

<313> (1)..(1066)

<400> 3

acgctggcgg cgtgcctaat acatgcaagt cgaacgaaac tttcttacac cgaatgcttg 60

cattcactcg taagaagttg agtggcggac gggtgagtaa cacgtgggta acctgcctaa 120

aagaagggga taacacttgg aaacaggtgc taataccgta tatctntaag gatcgcatga 180

tcctnagatg aaagatggtt ctgctatcgc ttntagatgg acccgcggcg tattanctag 240

ttggtggggt aacggcntac caaggngatg atacgtagcc gaactgagag gntgatcggc 300

cacattggga ctgagacacg gcccaaactc ctacgggagg cagcagtagg gaatcttcca 360

caatggacgc aagtctgatg gtgcccgccg cgagagtgaa gaaggtcttc ggatcgtaaa 420

actctgttgt tagagaagaa cacgagtgag agtaactgtt cattcgatga cggtatctaa 480

ccagcaagtc acggctaact acgtgccagc agccgcggta atacgtaggt ggcaagcgtt 540

gtccggattt attgggcgta aagggaacgc aggcggtctt ttaagtctga tgtgaaagcc 600

ttcggcttaa ccggagtagt gcattggaaa ctggaagact tgagtgcaga agaggagagt 660

ggaactccat gtgtagcggt gaaatgcgta gatatatgga agaacaccag tggcgaaagc 720ggctctctgg tctgtaactg acgctgaggt tcgaaagcgt gggtagcaaa caggattaga 780taccctggta gtccacgccg taaacgatga atgctaggtg ttggagggtt tccgcccttc 840agtgccgcag ctaacgcaat aagcattccg cctggggagt acgaccgcaa ggttgaaact 900caaaggaatt gacgggggcc cgcacaagcg gtggagcatg tggtttaatt cgaagcaacg 960cgaagaacct taccaggtct tgacatcctt tgaccaccta aaaaattagg tttcccttcg 1020gggacaaagt gacaggtggt gcatggctgt cgtcagctcg tgtcgt 1066

<210> 4

<211> 1033

<212> DNA

<213> Enterococcus faecium<220>

<221> 16S-rDNA

<222> (1)..(1033)

<300>

<308> DSM 16211

<309> 2004-02-06

<313> Cl)..(1033)

<400> 4

cctggctcag gacgaacgct ggcggcgtgc ctaatacatg caagtcgaac gcttcttttt 60ccaccggagc ttgctccacc ggaaaaagag gagtggcgaa cgggtgagta acacgtgggt 120aacctgccca tcagaagggg ataacacttg gaaacaggtg ctaataccgt ataacaatca 180aaaccgcatg gttttgattt gaaaggcgct ttcgggtgtc gctgatggat ggacccgcgg 240tgcattagct agttggtgag gtaacggctc accaaggcca cgatgcatag ccgacctgag 300agggtgatcg gccacattgg gactgagaca cggcccaaac tcctacggga ggcagcagta 360gggaatcttc ggcaatggac gaaagtctga ccgagcaacg ccgcgtgagt gaagaaggtt 420ttcggatcgt aaaactctgt tgttagagaa gaacaaggat gagagtaact gttcatccct 480tgacggtatc taaccagaaa gccacggcta actacgtgcc agcagccgcg gtaatacgta 540ggtggcaagc gttgtccgga tttattgggc gtaaagcgag cgcaggcggt ttcttaagtc 600tgatgtgaaa gcccccggct caaccgggga gggtcattgg aaactgggag acttgagtgc 660agaagaggag agtggaattc catgtgtagc ggtgaaatgc gtagatatat ggaggaacac 720cagtggcgaa ggcggctctc tggtctgtaa ctgacgctga ggctcgaaag cgtggggagc 780aaacaggatt agataccctg gtagtccacg ccgtaaacga tgagtgctaa gtgttggagg 840gtttccgccc ttcagtgctg cagctaacgc attaagcact ccgcctgggg agtacgaccg 900caaggttgaa actcaaagga attgacgggg gcccgcacaa gcggtggagc atgtggttta 960attcgaagca acgcgaagaa ccttaccagg tcttgacatc ctttgaccac tctagagata 1020gagcttcccc ttc 1033

<210> 5<211> 1139<212>

<213>

DNA

Bifidocacterii

<220>

<221> 165-rDNA

<222> (1)..(1139)

<220>

<221> misc_feature

<222> (286)..(286)

<223> néa, c, g.touu

<220>

<221> misc_feature

<222> (316)..(316)<223> néa, c, g.touu

<220>

<221> misc_feature

<222> (328)..(328)

<223> néa, c, g.touu

<220>

<221> misc_feature

<222> (351)..(352)

<223> néa, c, g.touu<220>

<221> misc_feature

<222> (355)..(355)

<223> néa, ο, g.touu

<220>

<221> misc_feature

<222> (357)..(357)<223>

η e a, c, g, tou u

<220>

<221> misc_feature

<222> (389)..(390)

néa, c, g.touu

<220>

<221> misc_feature

<222> (409)..(409)

<223> néa, c, g.touu<220>

<221> misc_feature

<222> (411)..(411)

<223>

η é a, c, g, tou u

<220>

<221> misc_feature

<222> (413)..(413)

<223> néa, c, g.touu

<220>

<221> misc_feature

<222> (418)..(418)<223>

η e a, c, g, t ou u

<300>

<308> DSM16284

<309> 2004-03-10

<313> (1)..(1139)<400> 5 ttgccatggg cgcaagcctg atgcagcgac gccgcgtgcg ggatggaggc cttcgggttg 60taaaccgctt ttgttcaagg gcaaggcacg gtttcgggcc gtgttgagtg gattgttcga 120ataagcaccg gctaactacg tgccagcagc cgcggtaata cgtagggtgc gagcgttatc 180cggatttatt gggcgtaaag ggctcgtagg cggttcgtcg cgtccggtgt gaaagtccat 240cgcctaacgg tggatctgcg ccgggtacgg gcgggctgga gtgcgntaag ggagactgga 300attcccggtg taacgntgga atgtgtanat atcgggaaga acaccaatgg nnaangnagg 360tctctgggcc gttactgacg ctgacgatnn aaagacgtga accagcganc ncnataanat 420accctgacta cggattagat accctggtag tccacgccgt aaacggtgga tgctggatgt 480ggggcccttt ccacgggtcc tgtgtcggag ccaacgcgtt aagcatcccg cctggggagt 540acggccgcaa ggctaaaact caaagaaatt gacgggggcc cgcacaagcg gcggagcatg 600cggattaatt cgatgcaacg cgaagaacct tacctgggct tgacatgtgc cggatcgccg 660tggaaacacg gtttcccttc ggggccggtt cacaggtggt gcatggtcgt cgtcagctcg 720tgtcgtgaga tgttgggtta agtcccgcaa cgagcgcaac cctcgccgca tgttgccagc 780gggtgatgcc gggaactcat gtgggaccgc cggggtcaac tcggaggaag gtggggatga 840cgtcagatca tcatgcccct tacgtccagg gcttcacgca tgctacaatg gccggtacaa 900cgcgatgcga cacggtgacg tggggcggat cgctgaaaac cggtctcagt tcggatcgca 960gtctgcaact cgactgcgtg aaggcggagt cgctagtaat cgcggatcag caacgccgcg 1020gtgaatgcgt tcccgggcct tgtacacacc gcccgtcaag tcatgaaagt gggtagcacc 1080ggaagccggt ggcccgaccc tcgtggggcg gaccgtctaa tggtgagact cgtgattgg 1139

Claims (28)

1. Aditivo de alimento, alimentação e/ou água potável pro-motor de desempenho e saúde probiótica contendo uma mistura de microor-ganismos, caracterizado pelo fato de que compreende pelo menos dois mi-croorganismos selecionados a partir do grupo que consiste em Enterococcusfaeeium, DSM 16211, Lactobacillus reuteri, DSM 16350, e Laetobaeillus sali-varius ssp. salivarius, DSM 16351, Pedioeoceus acidilaetiei, DSM 16210, eBifidobacterium animalis, DSM 16284.

2. Aditivo de alimento, alimentação e/ou água potável deacordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que compreendepelo menos três microorganismos.

3. Aditivo de alimento, alimentação e/ou água potável deacordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que compre-ende Enteroeoceus faeeium, DSM 16211, Laetobaeillus reuteri, DSM 16350,e Laetobaeillus salivarius ssp. salivarius, DSM 16351.

4. Aditivo de alimento, alimentação e/ou água potável deacordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que compre-ende Enterococcus faeeium, DSM 16211, Pediococcus acidilactici, DSM 16210, e Bifidobacterium animalis, DSM 16284.

5. Aditivo de alimento, alimentação e/ou água potável deacordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado pelo fatode que compreende substâncias nutritivas e/ou substâncias nutritivas adicio-nalmente utilizáveis como veículos e selecionadas de fruto-oligossacarídeos,inulinas, isomalto-oligossacarídeos , lactitol, Iactossacarose , lactulose, piro-dextrinas, oligossacarídeos de soja, transgalactooligossacarídeos, xilo-oligossacarídeos, vitaminas, em particular, vitamina E.

6. Aditivo de alimento, alimentação e/ou água potável deacordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizado pelo fatode que compreende um outro portador selecionado de zeólitos, carbonato decálcio, carbonato de magnésio, trealose, quitosana, goma-laca, albumina,goma, leite em pó desnatado, soro de leite doce em pó, maltodextrina, Iacto-se, inulina, dextroses, óleos vegetais, ou um solvente selecionadodentre água ou solução salina fisiológica.

7. Aditivo de alimento, alimentação e/ou água potável deacordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado pelo fatode que adicionalmente compreende um material de revestimento seleciona-do de maltodextrinas, farinha de semente de guar, goma arábica, alginatos,amido modificado e derivados de amido, dextrinas, derivados de celulosecomo éter e éster de celulose, proteínas como gelatina, albumina, caseína,glúten, goma acácia, tragacanto, lipídios como ceras, parafina, ácido esteári-co, mono e diglicerídeos.

8. Aditivo de alimento, alimentação e/ou água potável deacordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, caracterizado pelo fatode que compreende adicionalmente pelo menos um microorganismo sele-cionado a partir do grupo de Bifidobacterium sp., Lactobacillus salivarius,Lactobacillus sp., Lactobacillus fermentum e Enteroeoeeus faeealis.

9. Aditivo de alimento, alimentação e/ou água potável de acordocom qualquer uma das reivindicações 1 a 8, caracterizado pelo fato de queos microorganismos estão contidos em forma suspensa, pulverulenta ou en-capsulada com um diâmetro máximo de 2000 μιτι.

10. Aditivo de alimento, em particular, para pássaros e/ou por-cos de fazenda para aumentar o desempenho dos referidos animais de fa-zenda, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, caracterizadopelo fato de que o referido aditivo de alimento é compreendido de 1 χ 107 a 1χ 1014, em particular 1 χ 1010 a 1 χ 1012, CFU/kg de Enteroeoeeus faeciumem aditivo de alimentação, DSM 16211, e 1 χ 106 a 1 χ 1014, em particular 1χ 1010 a 1 χ 1012, CFU/kg de Lactobacillus reuteriem aditivo de alimentação,DSM 16350.

11. Aditivo de alimentação, em particular para pássaros e/ouporcos de fazenda para aumentar o desempenho dos referidos animais defazenda, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, caracteriza-do pelo fato de que o referido aditivo de alimentação é compreendido de 1 χ-107 a 1 χ 1014, em particular 1 χ 1010 a 1 χ 1012, CFU/kg de Enteroeoeeus-faecium em aditivo de alimentação, DSM 16211, 1 χ 107 a 1 χ 1014, em parti-cular, 1 χ 1010 a 1 χ 1012, CFU/kg de Pediococcus acidilactici em aditivo dealimentação, DSM 16210, e 1 χ 107 a 1 χ 1014, em particular 1 χ 1010 a 1 χ- 1012, CFU/kg de Bifidobacterium animaiis em aditivo de alimentação, DSM 16284.

12. Aditivo de alimentação, em particular, para pássarose/ou porcos de fazenda para aumentar o desempenho dos referidos animaisde fazenda, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, caracte-rizado pelo fato de que o referido aditivo de alimento é compreendido de 1 χ- 107 a 1 χ 1014, em particular 1 χ 1010 a 1 χ 1012, CFU/kg de Enterococcusfaeeium em aditivo de alimentação, DSM 16211, 1 χ 106 a 1 χ 1014, em parti-cular 1 χ 1010 a 1 χ 10121 CFU/kg de Lactobacillus reuteri em aditivo de ali-mentação, DSM 16350, e 1 χ 106 a 1 χ 1014, em particular, 1 χ 1010 a 1 χ- 1012, CFU/kg de Laetobaeillus salivarius ssp. salivarius em aditivo de alimen-tação, DSM 16351.

13. Aditivo de alimento, em particular, para pássaros e/ouporcos de fazenda para aumentar o desempenho dos referidos animais defazenda, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, caracteriza-do pelo fato de que o referido aditivo de alimento é compreendido de 1 χ 107a 1 χ 1014, em particular 1 χ 1010 a 1 χ 1012, CFU/kg de Enteroeoceus faeci-um em aditivo de alimentação, DSM 16211, 1 χ 106 a 1 χ 1014, em particular- 1 χ 1010 a 1 χ 1012, CFU/kg de Laetobaeillus reuteri em aditivo de alimenta-ção, DSM 16350, 1 χ 106 a 1 χ 1014, em particular, 1 χ 1010 a 1 χ 1012,CFU/kg de Laetobaeillus salivarius ssp. salivarius em aditivo de alimentação,DSM 16351, 1 χ 107 a 1 χ 1014, em particular 1 χ 1010 a 1 χ 1012, CFU/kg dePediococcus acidilactici em aditivo de alimentação, DSM 16210, 1 χ 107 a 1χ 1014, em particular 1 χ 1010 a 1 χ 1012, CFU/kg de Bifidobacterium animaiisem aditivo de alimentação, DSM 16284, e 1 χ 106 a 1 χ 1014, em particular 1χ 1010 a 1 χ 1012 CFU/kg, de Bifidobacterium sp. 2 em aditivo de alimentação.

14. Aditivo de alimentação, de acordo com a reivindicação 11, 12 ou 13, caracterizado pelo fato de que o aditivo de alimentação adicio-nalmente compreende 1% a 95%, em particular 20% a 98%, do veículo ousubstância natural.

15. Aditivo de alimentação, de acordo com a reivindicação-11, 12 ou 13, caracterizado pelo fato de que o aditivo de alimentação é apli-cado no alimento como uma suspensão aquosa em uma quantidade de 0,01g/kg a 10 g/kg de alimentação, em particular, 0,025 g/kg a 2,5 g/kg de ali-mentação.

16. Aditivo de alimentação, de acordo com qualquer umadas reivindicações 10 a 15, caracterizado pelo fato de que o aditivo de ali-mentação é misturado na alimentação em uma quantidade de de 20 g/t a 20kg/t, em particular, 100 g/t a 2,5 kg/t.

17. Aditivo de água potável, em particular, para pássarose/ou porcos de fazenda para aumentar o desempenho dos referidos animaisde fazenda, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, caracte-rizado pelo fato de que o aditivo de água potável compreende 1 χ 107 a 1 χ-1014, em particular 1 χ 1010 a 1 χ 1013, CFU/kg de Enterococcus faecium emaditivo de água potável, DSM 16211, e 1 χ 106 a 1 χ 1014, em particular, 1 χ-1010 a 1 χ 1013, CFU/kg de Lactobacillus reuteríem aditivo de água potável,DSM 16350.

18. Aditivo de água potável, em particular para pássarose/ou porcos de fazenda para aumentar o desempenho dos referidos animaisde fazenda, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, caracte-rizado pelo fato de que o aditivo de água potável é compreendido de 1 χ 107a 1 χ 1014, em particular 1 χ 1010 a 1 χ 1013, CFU/kg de Enterococcus faeci-um em aditivo de água potável, DSM 16211, 1 χ 106 a 1 χ 1014, em particular-1 χ 1010 a 1 χ 1013, CFU/kg de Lactobacillus reuteri em aditivo em água po-tável, DSM 16350, e 1 χ 10® a 1 χ 1014, em particular, 1 χ 1010 a 1 χ 1013,CFU/kg de LactobaciHus salivarius ssp. salivarius em aditivo de água potá-vel, DSM 16351.

19. Aditivo de água potável, em particular, para pássarose/ou porcos de fazenda para aumentar o desempenho dos referidos animaisde fazenda, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, caracte-rizado pelo fato de que o aditivo de água potável é compreendido de 1 χ 107a 1 χ ΊΟ14, em particular 1 χ 1010 a 1 χ 1013, CFU/kg de Enterococcus faeci-um e m aditivo de água potável, DSM 16211, 1 χ 107 a 1 χ 1014, em particular- 1 χ 1010 a 1 χ 1013, CFU/kg de Pediococcus aeidilactici em aditivo de águapotável, DSM 16210, e 1 χ 107 a 1 χ 1014, em particular 1 χ 1010 a 1 χ 1013,CFU/kg de Bifidobaeterium animaiis em aditivo de água potável, DSM 16284.

20. Aditivo de água potável, em particular, para pássarose/ou porcos de fazenda para aumentar o desempenho dos referidos animaisde fazenda, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, caracte-rizado pelo fato de que o aditivo de água potável é compreendido de 1 χ 107a 1 χ 1014, em particular 1 χ 1010 a 1 χ 1013, CFU/kg de Enteroeoeeus faeci-umem aditivo de água potável, DSM 16211, 1 χ 106 a 1 χ 1014, em particular- 1 χ 1010 a 1 χ 1013, CFU/kg de Lactobaeillus reuteri em aditivo em água po-tável, DSM 16350, 1 χ 106 a 1 χ TO14, em particular 1 χ 1010 a 1 χ 1013,CFU/kg de Lactobaeillus salivarius ssp. salivarius em aditivo de água potá-vel, DSM 16351, 1 χ 107a 1 χ 1014, em particular 1 χ 1010a 1 χ 1013, CFU/kgde Pedioeoecus aeidilactici em aditivo de água potável, DSM 16210, 1 χ 107a 1 χ 1014, em particular 1 χ 1010 a 1 χ 1013, CFU/kg de Bifidobacterium ani-maiis em aditivo de água potável, DSM 16284, e 1 χ 106 a 1 χ 1014, em parti-cular 1 χ 1010 a 1 χ 1013 CFU/kg de Bifidobacterium sp. 2 em aditivo de águapotável.

21. Aditivo de água potável, de acordo com qualquer umadas reivindicações 17 a 20, caracterizado pelo fato de que o aditivo de águapotável adicionalmente compreende 1% a 95%, em particular 20% a 92%,de veículo ou nutriente.

22. Uso de uma mistura de pelo menos dois microorganis-mos selecionados a partir do grupo consistindo em Enteroeoeeus faecium,DSM 16210, Lactobaeillus reuteri, DSM 16350, e Lactobaeillus salivariusssp. salivarius, DSM 16351, Pediococcus aeidilactici, DSM 16210, e Bifido-bacterium animaiis, DSM 16284, como um aditivo de alimento, alimentaçãoe/ou água potável promotor de desempenho e saúde probiótica.

23. Uso, de acordo com a reivindicação 22, caracterizadopelo fato de que Enteroeoeeus faecium, DSM 16211, Lactobaeillus reuteri,DSM 16350, e Lactobacillus salivarius ssp. salivarius, DSM 16351, são em-pregados.

24. Uso, de acordo com a reivindicação 22, caracterizadopelo fato de que, Enterococcus faeeium, DSM 16211, Pedioeoceus acidilaeti-ei, DSM 16210, e Bifidobaeterium animalis, DSM 16284, são empregados.

25. Uso, de acordo com a reivindicação 22, caracterizadopelo fato de que Enteroeoeeus faeeium, DSM 16211, Lactobacillus reuteri,DSM 16350, são empregados junto com outras cepas destes grupos de Lac-tobaeilli, Streptoeoeei e/ou Bifidobaeteria.

26. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 22a 25, caracterizado pelo fato de que a mistura de microorganismos é empre-gada para aumentar a defesa imune.

27. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 22a 26, caracterizado pelo fato de que a mistura de microorganismos é empre-gada junto com pelo menos um agente gelatinizante selecionado dentre mal-todextrinas, farinha de semente de guar, goma arábica, alginatos, goma mo-dificada e derivados de amido, dextrinas, derivados de celulose, proteínas,goma acácia, tragacanto, lipídios.

28. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 22a 27, caracterizado pelo fato de que a mistura de microorganismos, juntocom um veículo líquido, é empregada como uma suspensão em spray.