BRPI0612505A2 - processo para obter lipìdio a partir de células - Google Patents

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Hendrik Louis Bijl
Daniel Verkoeijen
Heinz Niggli
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Abstract

PROCESSO PARA OBTER LIPIDIO A PARTIR DE CELULAS. A presente invenção se refere a um processo para obter lipídio a partir de uma composição compreendendo células e água, o processo compreendendo contatar a composição com um dessecante, e recuperar o lipídio a partir das células. A invenção também se refere a um lipídio que pode ser obtido por intermédio desse processo. O processo de acordo com a presente invenção permite que lipídio de alta qualidade seja obtido com um elevado rendimento, e não requer uma etapa de aquecimento.

Description

PROCESSO PARA OBTER LIPÍDIO A PARTIR DE CÉLULAS
A presente invenção se refere a um processo paraobter lipxdio a partir de uma composição compreendendocélulas e água. A invenção também se refere ao lipídio quepode ser obtido através desse processo.
Os lipídios podem ser produzidos pormicroorganismos, por exemplo, em um processo defermentação. Eles também podem estar presentes em célulasde plantas. Os lipídios têm muitos usos, e podem, porexemplo, ser incluídos em gêneros alimentícios, rações,suplementos nutricionais e produtos farmacêuticos.
A obtenção de lipídio a partir das célulasfreqüentemente envolve obter o lipídio a partir de umacomposição compreendendo as células e água. A composição,por exemplo, pode ser um caldo de fermentação ou um produtoparcialmente desidratado obtido mediante separação de parteda água a partir de um caldo de fermentação, por exemplo,mediante técnicas de separação mecânica. Vários processossão conhecidos para permitir a recuperação de lipídio apartir de uma composição compreendendo células e água. Porexemplo, é conhecido secar a composição mediante secagem depulverização, e recuperar o lipídio a partir do produtoseco mediante extração com um solvente orgânico. Contudo, aqualidade do lipídio pode ser prejudicada sob as condiçõesque prevalecem durante a secagem de pulverização. Alémdisso, a morfologia do produto seco pode tornar a extraçãosubseqüente menos eficiente.
W0-A-97036996 descreve um processo para obterlipídio a partir de células microbianas, que envolve agranulação das células em grânulos, preferivelmentemediante extrusão. Os grânulos são secos, e o lipídio éobtido a partir dos grânulos secos, por exemplo, medianteextração com um solvente orgânico. A extração é eficiente,o lipídio resultante tem uma alta qualidade, e é elevado orendimento, isto é, a quantidade de lipídio recuperada porquantidade de lipídio presente nas células.
Apesar das vantagens do processo da WO-A-97036996, ainda existe a vontade de aperfeiçoamentoadicional. Especificamente, o processo envolverelativamente muitas etapas, tal como a granulação e asecagem dos grânulos. Além disso, a etapa de secagem requerenergia. Portanto, existe o desejo de um processo exigindoum número menor de etapas, em que a energia pode sereconomizada, e que permite que o lipídio seja extraído de;uma maneira eficiente.
Esse objetivo é alcançado de acordo com ainvenção mediante provisão de um processo para obterlipídio a partir de uma composição compreendendo células e-água, o processo compreendendo:
(a) contatar a composição com um dessecante; e
(b) recuperar o lipídio a partir das células.
O processo de acordo com a invenção permite quelipídio de alta qualidade seja obtido com um elevadorendimento. De acordo com a invenção, a secagem das célulasmediante aquecimento antes da recuperação do lipídio apartir das células não é necessária. Isso é de vantagemespecífica para lipídio sensível ao calor, por exemplo,lipídio compreendendo um ácido graxo poliinsaturado (PUFA).O processo de acordo com a invenção tem ainda a vantagem deque a formação de partículas finas ou pó - que, porexemplo, são formadas pelos processos da técnica anteriorque envolvem a secagem de pulverização ou moagem - éevitada ou minimizada. Além disso, descobriu-se quequando o lipidio é recuperado pela extração com um solvente- quantidades relativamente pequenas de solvente sãosuficientes para que se obtenha um rendimento relativamenteelevado. A invenção também permite a recuperação do lipidiomediante extração na presença do dessecante, isto é, sem anecessidade de separar o dessecante a partir das células.
Portanto, a extração pode ser realizada na presença de águaadsorvida para o dessecante ou absorvida pelo dessecante.Isso é surpreendente em que a técnica anterior defende aremoção de água para se obter elevados rendimentos (vide,por exemplo, W0-A-97036996).
O processo de acordo com a invenção compreendecontatar a composição compreendendo células e água com umdessecante. Como resultado, a água é removida da composiçãopelo dessecante. A captação da água pode ser medianteadsorção e/ou absorção. 0 dessecante não é limitado a umdessecante especifico, e uma ampla variedade de agentescapazes de captar água a partir da composição medianteadsorção e/ou absorção pode ser usada como dessecante. Taisagentes também são referidos na técnica como adsorventese/ou absorventes.
Exemplos de dessecantes que podem ser usados noprocesso são, por exemplo, silica (por exemplo, gel desilica), carvão ativado, alumina ativada, uma peneiramolecular (por exemplo, uma peneira molecular de carvão ouum zeólito), ou um polímero reticulado (por exemplo, umpoliacrilato). Silica é preferida. Preferivelmente, odessecante está na fórmula em partícula.
Preferivelmente, o dessecante tem uma elevadacapacidade de absorção. A capacidade de absorção se refereà quantidade de água que pode ser absorvida por quantidadede dessecante. Uma capacidade de absorção relativamentealta tem a vantagem de que rendimentos de extração ótimospodem ser obtidos utilizando-se quantidades relativamentepequenas de dessecante. 0 dessecante pode ter umacapacidade de absorção de pelo menos 50 g de água por 100 gde dessecante, preferivelmente pelo menos 100 g de água por100 g de dessecante. Não há limite superior específico paraa capacidade de absorção. Na prática, a capacidade deabsorção para a água está abaixo de 2 0.000 g de água por100 g de dessecante, por exemplo, abaixo de 10.000 g deágua por 100 g de dessecante. Como aqui usado, o peso dodessecante se refere ao peso livre de umidade dodessecante. A capacidade de absorção pode ser determinadapor técnicas conhecidas daqueles versados na arte. Ummétodo adequado é mediante absorção DBP, por exemplo, deacordo com DIN 53601.
Preferivelmente, o dessecante tem uma área desuperfície específica elevada. Uma área de superfícieespecífica relativamente elevada tem a vantagem de querendimentos de extração ótimos podem ser obtidos utilizandoquantidades relativamente pequenas de dessecante. 0dessecante, por exemplo, pode ter uma área de superfícieespecífica de pelo menos 25 m2/g, preferivelmente de pelomenos 50 m2/g, pref erivelmente de pelo menos 100 m2/g. Nãohá limite superior específico para a área de superfícieespecífica do dessecante. Na prática, a área de superfícieespecífica está abaixo de 2.000 m2/g, por exemplo, abaixode 1.000 m2/g. A área de superfície específica pode serdeterminada por técnicas conhecidas daqueles versados naarte, por exemplo, de acordo com ISO 5704/1, Anexo D.
Em uma modalidade preferida, o dessecante époroso. Isso tem a vantagem de que a área de superfíciedisponível para adsorção é relativamente elevada.
No processo de acordo com a invenção, acomposição a ser contatada com o dessecante podecompreender água em qualquer quantidade adequada. O teor deágua da composição a ser contatada com o dessecante pode,por exemplo, ser de pelo menos 5% em peso, por exemplo,pelo menos 10% em peso, por exemplo, de pelo menos 20% empeso, por exemplo, de pelo menos 3 0% em peso. Não há limitesuperior específico para o teor de água da composição a sercontatada com o dessecante. 0 teor de água da composição aser contatada com o dessecante pode, por exemplo, estarabaixo de 98% em peso, preferivelmente abaixo de 95% empeso, preferivelmente abaixo de 90% em peso,preferivelmente abaixo de 80% em peso, preferivelmenteabaixo de 70% em peso. Um teor de água inferior tem avantagem de que menos dessecante pode ser usado para seobter um rendimento ótimo.
Como usado aqui, o teor de água das células édado por Ww/ (wcens+ww) *100% onde
ww = peso da água na composição
Wceiis = peso da matéria seca das células nacomposição
Aqueles versados na técnica entenderão que o pesoda matéria seca das células (wceiis ) se refere ao peso dascélulas sem umidade, porém incluindo o peso do lipídio.Será considerado que o peso da água compreendida nacomposição (ww) inclui o peso total de água na composição,incluindo água intracelular, intercelular e extracelular.
Os valores de ww e wceiis, e conseqüentemente o teor de águada composição podem ser determinados pelos métodosconhecidos daqueles versados na técnica, por exemplo,mediante evaporação da água em uma temperatura de 105°C, edeterminando o peso da água evaporada e as célulasrestantes. Uma balança de matéria seca de infravermelhopode, por exemplo, ser usada.
Em uma modalidade preferida, a invenção provêquantidades preferidas de dessecante a serem contatadas coma composição. Descobriu-se que o rendimento de extraçãoaumenta com a quantidade crescente de dessecante que écontatado com a composição até que se obtenha um rendimentoótimo. Com base nesse ensinamento provido pela invenção,aqueles versados na técnica podem - mediante variação daquantidade de dessecante - determinar a quantidade ótima dodessecante em qualquer situação.
Descobriu-se especificamente que as quantidadespreferidas de dessecante dependem do teor de água dacomposição e das propriedades do dessecante. Em umamodalidade preferida, wdes/ (wceiis(a)+w„(a)) > (l/x) * (1Wcells (a)/ (0.8* (Weells<a)+Ww<a>) ) ) , em que
Wdes = peso de dessecante a ser contatado com acomposição em (a)
Wceiis(a) = peso da matéria seca das células na composiçãoa ser contatada com o dessecante em (a)
ww(a) = peso da água na composição a ser contatada como dessecante em (a)
x = capacidade de absorção do dessecante.
Em outra modalidade preferida,
Wdes/ (Wceiis (a)+Ww (a) ) > (l/x) * (1 - WceIls (a) / (0.9* (WceIis (a)+Ww (a) ) ) )
Em uma modalidade preferida, o processo de acordocom a invenção compreende contatar a composição com umaquantidade de dessecante de tal modo que o rendimento é depelo menos 70%, preferivelmente de pelo menos 80%, maispreferivelmente de pelo menos 85%, mais preferivelmente depelo menos 90%. Como usado aqui, o rendimento se refere àquantidade de lipidio recuperado a partir das células porquantidade de lipidio presente nas células.
A composição a ser contatada com o dessecante.pode ser qualquer composição adequada compreendendo célulase água a partir das quais o lipidio pode ser obtido. Acomposição, por exemplo, pode ser um caldo de fermentação,ou um produto parcialmente desidratado obtido medianteseparação de água, por exemplo, mediante separaçãomecânica, a partir de um caldo de fermentação. Acomposição, por exemplo, pode ser uma torta úmida, umaborra, pasta, concentrado e/ou creme. Embora a granulaçãonão seja necessária de acordo com a invenção, o processo deacordo com a invenção também oferece vantagens quando ascélulas estão na forma de um produto granulado, porexemplo, um produto extrusado.
Contatar a composição com o dessecante pode serrealizado de qualquer maneira adequada, preferivelmente,mediante mistura da composição com o dessecante para obteruma mistura compreendendo as células e o dessecante. 0lipidio pode ser recuperado da mistura, por exemplo,mediante extração com um solvente.
De acordo com o mencionado acima, em umamodalidade preferida, a invenção provê um processo paraobter lipídio a partir de uma composição compreendendocélulas e água, o processo compreendendo (a) misturar acomposição com um dessecante para prover uma misturacompreendendo as células e o dessecante; e (b) recuperar olipídio a partir da mistura.
Em outro aspecto, a invenção também provê umamistura compreendendo (i) células compreendendo um lipídioe (ii) dessecante. Será considerado que os aspectospreferidos e/o modalidades do processo de acordo com ainvenção se aplicam à mistura de acordo com a invenção.
Em uma modalidade preferida, a mistura compreendeainda água, em que wdes, mix/ (WceIls, mix + Ww, mix )>(l/x)*(1 -Wceiis. mix/ (o . 8* (Wceiisf mix + wW/ mix) ) ) , preferivelmente wdes,mix/ (Wcells, mix + Ww, mix) > ( l/x) * ( 1 - WceIls, mix/ ( 0 . 9 * (WceHs, mix +ww, mix) ) ) , em que
Wdes, mix = peso do dessecante na mistura
Weeiis, mix = peso de matéria seca das células na mistura
ww, mix = peso da água na mistura
x = capacidade de absorção do dessecante.
A misturação pode ser realizada em qualquermisturador adequado, por exemplo, em um misturador deelevado cisalhamento, por exemplo, um Misturador deparafuso, um Misturador de discos, um Misturador dePalhetas, uma Máquina Misturadora de Tombamento com barrasintensificadoras ou um Misturador Diosna.
O lipídio pode ser recuperado a partir dascélulas resultantes do contato em (a) de qualquer maneiraadequada. O lipídio, por exemplo, pode ser recuperado apartir das células, por exemplo, através da extração com umsolvente, após ou durante contatar a composição com odessecante.
Em uma modalidade preferida, o lipídio érecuperado das células mediante extração com um solvente.Uma ampla variedade de solventes pode ser usada. 0solvente, por exemplo, pode ser um éster de alquila Ci-I0(por exemplo, acetato de etila ou butila), tolueno, umálcool Ci-3 (por exemplo, metanol, propanol) , alcanos C3-6(por exemplo, hexano), ou um fluido supercrítico (porexemplo, CO2 líquido ou propano supercrítico). Misturas dossolventes também são possíveis. Em uma modalidadepreferida, o solvente é um solvente orgânico. 0 processo deacordo com a invenção é especialmente vantajoso, se osolvente for um solvente atolar. Mais preferivelmente, osolvente é hexano ou CO2 supercrítico.
As células ou mistura compreendendo as célulaspodem ser contatadas com o solvente de qualquer modoadequado, por exemplo, mediante extração por percolação, aextração é em contracorrente, ou extração em um misturador.A extração em um misturador é preferida. Em uma modalidadepreferida, entre 2 a 40 partes em peso de solvente sãousadas por parte em peso das células.
Em uma modalidade da invenção, pelo menos partedo dessecante (por exemplo, pelo menos 50%) é separado damistura antes de contatar as células com o solvente. Em umamodalidade preferida, a mistura compreendendo as células oupelo menos parte do dessecante é contatado com o solvente.
Conseqüentemente, recuperar o lipídio mediante extração comum solvente pode ser realizada na presença de (pelo menosparte de) dessecante. Isso tem a vantagem de que a etapa deseparação para separar o dessecante das células não énecessária. Surpreendentemente, o processo de acordo com ainvenção ainda resulta em uma extração eficiente, mesmo napresença de água. Em uma modalidade,
Ww (b) / Wcells (b) >0 . 5*Ww(a) , /wcells(a)
em que
ww(b) = peso de água na mistura a partir da qual olipidio é recuperado em (b)
Wceiis(b) = peso de matéria seca das células na mistura apartir da qual o lipidio é recuperado em (b)
ww(a) = peso da água na composição a ser contatada como dessecante em (a)
Wceiis(a) = peso da matéria seca das células na composiçãoa ser contatada com o dessecante em (a)
Em outra modalidade, ww(b>/wceiis(b) >0 . 7*ww(a)/wCeiis(a)
Em outra modalidade, ww(b)/wceiis(b) >0 . 8*ww(a)/wceiis(a)
Em outra modalidade, ww(b)/wceiiS(b) >0 . 9*ww(a)/wceiis(a)
O processo de acordo com a invenção pode serusado para se obter uma ampla variedade de lipidios apartir de uma ampla variedade de células. 0 lipidio, porexemplo, pode compreender um ou mais dos seguintescompostos: lipstatina, estatina, TAPS, pimaricina,nistatina, antibiótico solúvel em gordura (por exemplo,laidlomicina), antioxidante solúvel em gordura (porexemplo, co-enzima Q10), colesterol, fitosterol,desmosterol, tocotrienol, tocoferol, carotenóide, ouxantofilas, por exemplo, beta-caroteno, luteina, licopeno,astaxantina, zeaxantina, ou cantaxantina, ácidos graxos,tais como ácidos linoléicos conjugados ou ácidos graxospoliinsaturados (PUFAs). Em uma modalidade preferida, olipídio compreende pelo menos um dos compostos mencionadosacima em uma concentração de 5% em peso, maispreferivelmente de pelo menos 10% em peso (com relação aopeso do lipídio).
O lipídio pode ser obtido compreendendo, porexemplo, triglicerídeo, fosfolipídio, ácido graxo livre,éster de ácido graxo (por exemplo, éster de metila ouetila) e/ou combinações dos mesmos. Em uma modalidadepreferida, o lipídio tem um teor de triglicerídeo de pelomenos 50%, mais pref erivelmente de pelo menos 70%,otimamente de pelo menos 90%.
Em uma modalidade particularmente preferida dainvenção, o lipídio compreende um ácido graxopoliinsaturado (PUFA), por exemplo, um PUFA tendo pelomenos 18 átomos de carbono, por exemplo, um PUFA C18, C20ou C22. Em uma modalidade preferida, o PUFA é um PUFAômega-3 (Q3) ou um PUFA ômega-6 (Q6) . Pref erivelmente, oPUFA tem pelo menos 3 ligações duplas. PUFAs preferidossão:
ácido docosahexaenóico (DHA, 22:6 Q3);
ácido y-linoléico (GLA, 18:3 £16) ;
ácido a-linoléico (ALA, 18:3 Q3) ;
ácido dihomo-y-linoléico (DGLA, 20:3 Q.6) ;
ácido araquidônico (ARA, 20:4 Q.6); e
ácido eicosapentaenóico (EPA, 20:5 Q3).
Em uma modalidade preferida, o lipídio compreendepelo menos um PUFA (por exemplo, ARA ou DHA) em umaconcentração de pelo menos 5% em peso, por exemplo, pelomenos 10% em peso, por exemplo, pelo menos 20% em peso (comrelação ao peso do lipídio).
O PUFA pode estar na forma de um (mono-, di outri) glicerídeo, fosfolipídio, ácido graxo livre, éster deácido graxo (por exemplo, éster de metila ou etila) e/ousuas combinações. Preferivelmente, um lipídio é obtido emque pelo menos 50% de todos os PUFAs estão na forma detriglicerídeo.
O lipídio pode ser um óleo ou gordura, porexemplo, um óleo compreendendo um PUFA. Modalidadespreferidas para o lipídio se aplicam ao óleo ou gorduramutatis mutandis.
As células podem ser quaisquer célulascompreendendo um lipídio. Tipicamente, as células têmproduzido o lipídio. As células podem ser células integraisou células com ruptura. As células podem ser de qualquerorigem adequada. As células, por exemplo, podem ser célulasde plantas, por exemplo, células de sementes ou células deum microorganismo (células microbianas). Exemplos decélulas microbianas são células de levedura, célulasbacterianas, células fúngicas, células algais. Fungos sãopreferidos, preferivelmente da ordem Mucorales, porexemplo, Mortierella, Phicomyces, Blakeslea., Aspergillus,Thraustochytrium, Pythium ou Entomophthora. A fontepreferida de ácido araquidônico (ARA) é de Mortierellaalpina, Blakeslea trispora, Aspergillus terreus ou Pythiuminsidiosum. Algas podem ser dinoflagellate e/ou incluirPorphyridium, Nitszchia, ou Crypthecodinium (por exemplo,Crypthecodinium cohnii) . Leveduras incluem aquelas dogênero Piehia ou Saccharomyees, tal como Piehia eiferii. Asbactérias podem ser do gênero Propionihacterium. Exemplosde células de plantas compreendendo um lipídio são ascélulas a partir de sementes de soja, semente de colza,canola, girassol, coco, semente de linho e palma. Em umamodalidade da invenção, as células são células de plantascompreendendo lipídio cujo lipídio compreende ARA.
Em uma modalidade da invenção, as células sãoproduzidas por intermédio de fermentação. Processosadequados para fermentação são conhecidos daqueles versadosna técnica, e são, por exemplo, revelados em W0-A-9737032.Preferivelmente, as células produzidas por fermentação sãoaquecidas ou pasteurizadas.
Em uma modalidade preferida, o processo de acordocom a invenção compreende uma ou mais das seguintes etapasantes de contatar a composição com o dessecante: (i)aquecer ou pasteurizar as células; (ii) separar a água apartir das células mediante separação mecânica; (iii) lavaras células; e (iv) comprimir as células.
O aquecimento ou a pasteurização podem serrealizados em uma temperatura a partir de 65°C a 120°C.Isso pode inativar ou desnaturar as enzimas tais comolipases e/ou lipoxigenases.
Separar a água das células mediante separaçãomecânica pode ser feio vantajosamente para se obter osvalores preferidos para o conteúdo de água e/ou conteúdo dematéria seca conforme revelado acima. A separação mecânica,por exemplo, pode envolver a filtração, centrifugação,compressão, sedimentação, ou o uso de um hidrociclone.
O lipídio pode ser adicionalmente tratado dequalquer modo adequado. Se o lipídio for recuperadomediante extração com um solvente, o lipídio pode serobtido a partir do solvente por intermédio de evaporação dosolvente.
O lipídio obtido ou obtenível pelo processo deacordo com a invenção pode ser submetido a tratamentosadicionais, por exemplo, tratamento ácido (também referidocomo desengomação) , tratamento alcalino (também referidocomo neutralização) , branqueamento, desodorização,esfriamento (também referido como invernagem).
O lipídio obtido ou obtenível pelo processo deacordo com a invenção tem muitos usos. Ele pode, porexemplo, ser usado para a preparação de um produtoalimentício, por exemplo, um produto alimentício humano(por exemplo, papinha para crianças), ou um produto deração animal. Ele também pode ser usado para a preparaçãode um produto farmacêutico ou de um produto cosmético.Conseqüentemente, a invenção também provê um produtoalimentício (por exemplo, alimento fortificado ou umsuplemento nutricional), por exemplo, um produtoalimentício humano (por exemplo, papinha para crianças), ouum produto de ração animal, um produto farmacêutico, umproduto cosmético, compreendendo o lipídio obtido ou quepode ser obtido pelo processo de acordo com a invenção.
A invenção será agora elucidada com referênciaaos exemplos a seguir sem, contudo, ser limitado a eles.
Exemplos
Experimento comparativo A
Um caldo de fermentação contendo ARA foi obtidomediante fermentação de Mortierella alpina sob as condiçõesconforme revelado em WO-A-9736996, página 45, e foisubseqüentemente pasteurizado a 65°C por 1 hora. 0 caldofoi filtrado utilizando um filtro de correia, lavado comágua para remover componentes residuais do meio, ecomprimido. 0 teor de água da torta de filtro comprimidafoi de 60,7% em peso. 0 teor de matéria seca (células,incluindo óleo nas células) foi de 39,3% em peso. A tortade filtro comprimida foi extrusada como descrito na WO-A-9736996, seguido de secagem em um teor de matéria seca de94% em peso utilizando um secador de leito fluido.
A extração foi realizada como a seguir. Em umprimeiro estágio de extração, 100 gramas do produto seco,obtidos conforme descrito acima, foram adicionados a 3 00 mlde n-hexano do tipo laboratório, e agitados magneticamenteem temperatura ambiente (20°C), por 1 hora. Após o primeiroestágio de extração a fase líquida (compreendendo óleodissolvido em hexano) foi decantada a partir dos sólidos(compreendendo células). Em um segundo estágio de extraçãoos sólidos restantes foram adicionados a 250 ml de n-hexanoe agitados por 3 0 minutos. Após o segundo estágio deextração a fase líquida (compreendendo óleo dissolvido emhexano) foi separada dos sólidos mediante filtração avácuo. As fases líquidas a partir do primeiro e segundoestágio de extração foram combinadas, após o que o hexanofoi evaporado utilizando-se um Rotavapor® obtido através daBüchi, Suíça. Operado a 68°C, e uma pressão entre 100 e 400mbara por 30 minutos.
Para o propósito desse pedido de patente, orendimento (de óleo contendo-ARA) do experimentocomparativo A é definido como 100%. Os rendimentos obtidosnos experimentos a seguir são fornecidos vis-à-vis osegmento de um experimento comparativo A.Experimento de referência B
O experimento comparativo A foi repetido, com adiferença de que nenhuma extrusão ou secagem foi realizada.
A mistura foi extraída utilizando-se o mesmo procedimentoconforme descrito no experimento comparativo A. 0rendimento foi de 29,68%.
Exemplo 1
O experimento de referência B foi repetido, com adiferença de que 82 partes em peso da torta de filtrocomprimida foram trituradas, e misturadas com 18 partes empeso de sílica (SIPERNAT® 22 obtida através da Degussa AG,Alemanha) em um misturador de elevado cisalhamento Hobart..A extração foi realizada da mesma maneira. 0 rendimento foide 84,68%, que é um aumento de 55% em comparação com oexperimento de referência em que nenhum dessecante foiusado.
Exemplo 2
O exemplo 1 foi repetido com a diferença de que aquantidade de sílica foi aumentada de 18 partes em pesopara 25 partes em peso. Isso resultou em um aumentoadicional do rendimento (com 4,8%) para um valor de 89,48%.
Exemplo 3
O exemplo 2 foi repetido com a diferença de que aquantidade de sílica foi aumentada ainda mais de 25 partesem peso para 35 partes em peso. Isso resultou em um aumentoadicional do rendimento com 7,53% para um valor de 97,01%.
Uma visão geral dos exemplos 1, 2 e 3 eexperimentos A e B é fornecida na Tabela 1. Essa tabelamostra que o uso de um dessecante resulta em um aumento dorendimento de extração, e que o rendimento de extraçãoaumenta com quantidade crescente de dessecante usado. Issopermite que ótimos rendimentos de extração sejam obtidosmediante variação da quantidade de silica usada. Osexperimentos mostram que virtualmente o mesmo rendimentopode ser obtido através do uso de um dessecante de acordocom a invenção, e que a extrusão e a secagem são obviadas.
Tabela 1. Rendimento obtido pelo processo de acordo com ainvenção versus rendimento dos experimentos A, B
<table>table see original document page 18</column></row><table>
O lipídio obtido pelo processo de acordo com a invenção eaquele obtido pelo processo envolvendo extrusão e secagemtem virtualmente a mesma composição, vide Tabela 2.
Exemplo 4
Uma torta de filtro comprimida (Mortierellaalpina) tendo um teor de matéria seca de 45,6% foipreparada conforme descrito nos exemplos anteriores. 50 gdessa torta foram misturados com 5 g de super absorvedor depoliacrilato (Luquasorb® FP 800, obtido através da BASF,Alemanha). A mistura obtida foi extraída com 250 ml dehexano sob agitação. A quantidade de óleo contendo-ARAextraída foi determinada após 7 horas de extração (após aevaporação do hexano), e descobriu-se que era de 7,8 g.
Exemplo 5<table>table see original document page 19</column></row><table>
O exemplo 4 foi repetido com a diferença de que10 g de dessecante de sílica (SIPERNAT®22, obtido atravésda Degussa AGf Alemanha) foram usados em vez de 5 g depoliacrilato. Após 7 horas de extração, a quantidade doóleo contendo-ARA extraída foi de 7,8 g.
Realizando a extração dos exemplos 4 e 5 eutilizando extrudatos secos como revelado na WO-A-9736996(na ausência de dessecante) resultou em entre 7,65 e 8,1 gde óleo extraído.
É visto claramente que mediante uso de umdessecante de acordo com a invenção o mesmo rendimento podeser obtido sem a necessidade de granulação/extrusão e/ousecagem mediante evaporação.
Tabela 2. Composição de lipídio (óleo) obtido peloprocesso de acordo com a invenção versusexperimentos A, B<table>table see original document page 20</column></row><table>

Claims (37)

1. Processo para obtenção de lipídio a partir deuma composição compreendendo células e água, o processocaracterizado por compreender:(a) contatar a composição com um dessecante; e(b) recuperar o lipídio a partir das células.
2. Processo, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de que o dessecante tem umacapacidade de absorção de pelo menos 50 g de água por 100 gde dessecante.
3. Processo, de acordo com qualquer uma dasreivindicações 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que odessecante é poroso.
4. Processo, de acordo com qualquer uma dasreivindicações 1, 2 ou 3, caracterizado pelo fato de que odessecante tem uma área de superfície específica de pelomenos 25 m2/g.
5. Processo, de acordo com qualquer uma dasreivindicações 1, 2, 3 ou 4, caracterizado pelo fato de queo dessecante é selecionado a partir de sílica, carvãoativado, alumina ativada, uma peneira molecular (porexemplo, uma peneira molecular de carvão ou um zeólito), ouum polímero reticulado (por exemplo, um poliacrilato).
6. Processo, de acordo com qualquer uma dasreivindicações 1, 2, 3, 4 ou 5, caracterizado pelo fato deque o dessecante é sílica.
7. Processo, de acordo com qualquer uma dasreivindicações 1, 2, 3, 4, 5 ou 6, caracterizado pelo fatode queWdes/ (Wcells (a)+Ww (a) )> (l/x) * (1 - WceIls (a) /( 0 . 8 *( WceIl3 (a) +Ww (a) ))) ,em quewdes = peso do dessecante a ser contatado com acomposição em (a)Wceiis(a) = peso da matéria seca das células na composiçãoa ser contatada com o dessecante em (a)wW(a) = peso da água na composição a ser contatada como dessecante em (a)x = capacidade de absorção do dessecante.
8. Processo, de acordo com qualquer uma dasreivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6 ou 7, caracterizado pelofato de que o processo compreende a obtenção das célulasmediante fermentação.
9. Processo, de acordo com qualquer uma das:reivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 ou 8, caracterizado pelofato de que a composição a ser contatada com o dessecanteem (a) é um caldo de fermentação ou em que a composição aser contatada com o dessecante em (a) é obtida medianteseparação de água a partir de um caldo de fermentação, porexemplo, por intermédio de separação mecânica.
10. Processo, de acordo com qualquer uma dasreivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 ou 9, caracterizadopelo fato de que a composição a ser contatada com odessecante em (a) tem um teor de água de entre 5 e 95% empeso.
11. Processo, de acordo com qualquer uma dasreivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 ou 10,caracterizado pelo fato de que (a) compreende misturar acomposição com o dessecante para proporcionar uma misturacompreendendo células e dessecante; e em que (b) compreenderecuperar o lipídio a partir da mistura, opcionalmente napresença de pelo menos parte do dessecante.
12. Processo, de acordo com a reivindicação 11,caracterizado pelo fato de que o processo compreende pelomenos um dos seguintes:(i) separar pelo menos parte do dessecante a partir damistura; e/ou(ii) Ww(b)/wCeiiS(b) >0 . 5*ww(a)/Wceiis(a), em queww(b) = peso da água na mistura a partir da qual olipídio é recuperado em (b)Wceiis <b) = peso da matéria seca das células na mistura apartir da qual o lipídio é recuperado em (b)ww(a) = peso da água na composição a ser contatada como dessecante em (a)Wceiis (a) = peso da matéria seca das células na composiçãoa ser contatada com o dessecante em (a)
13. Processo, de acordo com qualquer uma dasreivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 ou 12,caracterizado pelo fato de que (b) compreende recuperar olipídio mediante extração com um solvente.
14. Processo, de acordo com qualquer uma dasreivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 ou 13,caracterizado pelo fato de que o solvente é um solventeapoiar, por exemplo, um alcano C3-6, preferivelmente hexano.
15. Processo, de acordo com qualquer uma dasreivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13 ou 14, caracterizado pelo fato de que o solvente é um supercrítico, por exemplo, CO2 líquido ou propano super crítico.
16. Processo, de acordo com qualquer uma dasreivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 ou 15, caracterizado pelo fato de que o processo nãocompreende, após (a) e antes de (b):uma etapa de secagem que envolve aquecimento dascélulas; e/ougranulação das células para obtenção departículas granulares.
17. Processo, de acordo com qualquer uma dasreivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 ou 16, caracterizado pelo fato de que as células sãocélulas microbianas, por exemplo, células de levedura,células bacterianas, células fúngicas, ou células algais.
18. Processo, de acordo com qualquer uma dasreivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16 ou 17, caracterizado pelo fato de que as célulassão do gênero Mortierella ou de Pythium ou Entomophthora.
19. Processo, de acordo com qualquer uma dasreivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 ou 18, caracterizado pelo fato de que ascélulas são do gênero Crypthecodinium ou da ordemThraustochytriales, por exemplo, do gênero Thraustochytriumou Schizochytrium.
20. Processo, de acordo com qualquer uma dasreivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18 ou 19, caracterizado pelo fato de que ascélulas são células de plantas, por exemplo, células desementes ou nozes.
21. Processo, de acordo com qualquer uma dasreivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13,- 14, 15, 16, 17, 18, 19 ou 20, caracterizado pelo fato deque o lipídio compreende um ácido graxo poliinsaturado(PUFA) , por exemplo, um Q-3 PUFA ou um Q-6 PUFA.
22. Processo, de acordo com qualquer uma dasreivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13,- 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 ou 21, caracterizado pelo fatode que o PUFA é um PUFA tendo pelo menos 18 átomos decarbono.
23. Processo, de acordo com qualquer uma dasreivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13,- 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21 ou 22, caracterizado pelofato de que o PUFA é ácido araquidônico (ARA).
24. Processo, de acordo com qualquer uma dasreivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13,- 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22 ou 23, caracterizadopelo fato de que o PUFA é ácido docosahexaenóico (DHA).
25. Processo, de acordo com qualquer uma dasreivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13,- 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23 ou 24, caracterizadopelo fato de que o lipídio compreende pelo menos 5% em pesodo PUFA.
26. Processo, de acordo com qualquer uma dasreivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13,- 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24 OU 25,caracterizado pelo fato de que o lipídio compreende um oumais dos seguintes compostos: lipstatina, estatina, TAPS,pimaricina, nistatina, antibiótico solúvel em gordura (porexemplo, laidlomicina) , antioxidante solúvel em gordura(por exemplo, co-enzima QlO), colesterol, fitosterol,desmosterol, tocotrienol, tocoferol, carotenóide, ouxantofilas, por exemplo, beta-caroteno, lutexna, licopeno,astaxantina, zeaxantina, ou cantaxantina.
27. Mistura, caracterizada por compreender (i)células compreendendo um lipxdio e (ii) um dessecante.
28. Mistura, de acordo com a reivindicação 27,caracterizada pelo fato de que o lipídio é um lipidioconforme de qualquer uma das reivindicações 21, 22, 23, 24, 25 ou 26.
29. Mistura, de acordo com qualquer uma dasreivindicações 27 ou 28, caracterizada pelo fato de que odessecante é um dessecante de qualquer uma dasreivindicações 2, 3, 4, 5 ou 6.
30. Mistura, de acordo com qualquer uma dasreivindicações 27, 28 ou 29, caracterizada pelo fato de queas células são células de qualquer uma das reivindicações 17, 18, 19 ou 20.
31. Mistura, de acordo com qualquer uma dasreivindicações 27, 28, 29 ou 30, caracterizada porcompreender ainda água, em queWdes, mix/ (Wcells, mix + Ww, mix) > (l/x) * ( 1 - WceIls, mix/ ( 0 . 8 *( WceIl3,mix + Ww, mix) ) ) i preferivelmente Wdes, mix/ (wcens, mix + ww,mix ) > (l/X) * (1 - WceXls, mix/ (0. 9* (wcens, mix + ww, mix) ) ) / em quewdes, mix = peso do dessecante na misturawcens, mix = peso da matéria seca das células na misturaww, mix = peso da água na misturax = capacidade de absorção do dessecante.
32. Processo para obtenção de um lipidio, oprocesso caracterizado por compreender contatar uma misturade acordo com qualquer reivindicação precedente com umsolvente orgânico.
33. Lipidio caracterizado por poder ser obtidopelo processo de acordo com qualquer reivindicaçãoprecedente.
34. Produto alimentício caracterizado porcompreender o lipídio da reivindicação 33, por exemplo, umproduto alimentício humano ou uma ração de animais.
35. Produto alimentício, de acordo com areivindicação 34, caracterizado pelo fato de que o produtoalimentício é uma papinha para crianças.
36. Produto farmacêutico caracterizado porcompreender o lipídio da reivindicação 33.
37. Produto cosmético caracterizado porcompreender o lipídio da reivindicação 33.
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