BRPI0614270A2 - derivados xantina como seletivos agonistas de ha74a - Google Patents

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Abstract

DERIVADOS XANTINA COMO SELETIVOS AGONISTAS DE HA74A. A presente invenção está relacionada a compostos de fórmula (1) os quais são derivados de xantina, processos para a fabricação dos referidos derivados, formulações farmacêuticas contendo esses compostos e a utilização dos compostos em terapia, por exemplo, no tratamento de doenças onde a sub-ativação do receptor HM74A contribui para a doença ou onde a ativação do receptor será benéfica.

Description

"DERIVADOS XANTINA COMO SELETIVOS AGONISTAS DEHA74A"
A presente invenção diz respeito aos compostos quesão derivados xantina, os processos para a fabricação dosreferidos derivados, formulações farmacêuticas contendoestes compostos e da utilização dos compostos em terapia,por Exemplo, no tratamento de doenças onde sub-ativação doreceptor HM74A contribui para a doença ou onde ativação doreceptor será benéfico.
Dislipidemia é um termo geral usado para descreverpessoas com aberrantes perfis lipoproteina. Clinicamente, asprincipais classes de compostos utilizados para o tratamentode pacientes com dislipidemia, e, portanto, em risco dedoenças cardiovasculares são as estatinas, fibratos, resinasligantes bile-ácido e ácido nicotinico. Ácido nicotinico(Niacina, uma vitamina B) tem sido usado clinicamente hámais de 40 anos em pacientes com diversas formas dedislipidemia. 0 principal modo de ação do ácido nicotinico éatravés da inibição da triglicérides lipase hormônio-sensível (HSL), o que resulta em uma redução dos níveisplasmáticos de ácidos graxos não esterifiçados (NEFA), que,por sua vez, altera metabolismo hepático de gordura parareduzir a produção de LDL e VLDL (lipoproteina de baixa e demuito baixa densidade). Níveis reduzidos de VLDL sãoconsiderados rebaixar a atividade da proteína detransferência colesterol éster (CETP) para resultar emaumentados níveis de HDL (lipoproteina de alta densidade)que pode ser a causa dos benefícios cardiovascularesobservados. Desse modo, o ácido nicotinico produz umaalteração muito desejável nos perfis de lipoproteína;reduzindo níveis de VLDL e LDL embora aumentando HDL. 0ácido nicotinico tem demonstrado também possuir benefíciosmodificadores da doença, reduzindo a progressão e aumentandoa regressão de lesões ateroscleróticas e reduzindo o númerode eventos cardiovasculares em diversos ensaios.
A observada inibição do HSL através do tratamentocom ácido nicotinico é mediado por meio de uma redução nomonofosfato de adenosina cíclico celular (cAMP) induzidopela inibição G-proteína-mediada da adenilil ciclase.Recentemente, receptores HM74 e HM74a acoplados a G-proteínaforam identificados como receptores para ácido nicotinico(Pedido de PCT W002/84928; Wise e outros J. Biol Chem.,2003, 278 (11), 9869-9874). A seqüência DNA do HM74A humanopode ser encontrada no Genbank; número de acesso AY148884,dois trabalhos adicionais sustentam essa descoberta (Tunarue outros Nature Medicine, 2003, 9(3), 352-255 e Soga eoutros Biochem Biophys Res Commun., 2003, 303 (1) 364-369),todavia a nomenclatura difere ligeiramente. No trabalho deTunaru o que eles denominam HM7 4 humano nós denominamosHM74A e no trabalho de Soga o HM74b é idêntico ao HM74A. Ascélulas transfectadas para expressar HM74A e/ou HM74 ganhama capacidade para eliciar respostas G-proteína mediadas Giem seguida à exposição ao ácido nicotinico. Em ratosfaltantes do homólogo de HM74A (m-PUMA-G) o ácido nicotinicofalha em reduzir os níveis plasmáticos de NEFA.Certos derivados xantina foram sintetizados erevelados na arte existente. Por exemplo, Exemplo, EP0389282revela derivados xantina como potenciais mediadores dedistúrbios cerebrovasculares. Uma faixa de derivados xantinafoi identificada como antagonistas de receptor adenosina porJacobson e outros em J. Med. Chem., 1993, 36, 2639-2644,
É apresentado agora um grupo de m grupo dederivados xantina os quais são agonistas seletivos doreceptor HM74A de ácido nicotinico e são desse modo depotencial beneficio no tratamento, profilaxia e supressão dedoenças onde a sub-ativação desse receptor ou contribui paraa doença ou onde a ativação do receptor será benéfica.
SUMÁRIO DA INVENÇÃO
A presente invenção proporciona derivados xantinae o uso desses derivados em terapia, por exemplo, notratamento de doenças onde a sub-ativação do receptor HM74contribui para a doença ou onde a ativação do receptor serábenéfica. Por exemplo, no tratamento de doenças dometabolismo lipidico incluindo dislipidemia ouhiperlipoproteinemia tal como dislipidemia diabética edislipidemia mista, deficiência cardíaca, hipercolesteremia,doença cardiovascular incluindo aterosclerose, arterioscle-rose, e hipertrigliceridemia. Como tal, os compostos podemtambém encontrar usos como terapêuticas para doença arterialcoronariana, trombose, angina, deficiência renal crônica,doença vascular periférica e derrame, bem como as indicaçõescardiovasculares associada com o diabetes melitus tipo II,diabetes tipo I, insulino-resistência, hiperlipidemia,anorexia nervosa, obesidade. Os compostos podem ser tambémde uso no tratamento de doenças ou condições inflamatórias,como apresentado mais adiante.
Intermediários, formulações, métodos e processosdescritos aqui formam modalidades adicionais da invenção.
DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO
De acordo com um aspecto dessa invenção, é providopelo menos uma entidade química selecionada . a partir decompostos de fórmula (I)
<formula>formula see original document page 5</formula>
e seus derivados farmaceuticamente aceitáveis, onde
R1 representa-(alquileno)m-X-(aIquiIeno) n_Y;onde m e η representam o número de átomos decarbono na cadeia alquileno;
onde X representa um grupo selecionado a partir deheteroarila e heterociclina;
onde Y representa um grupo selecionado a partir dearila, heteroarila e 0-arila;
os quais podem estar opcionalmente substituídoscom um ou mais grupos independentemente selecionados apartir de alquila Ci-6, alquenila C2-6, alquinila C2_6, halo-gênio, -(CH2)qN[5R7, - (CH2) q- (O) p- (CH2) q-N ( [5) C (0) OR8, -(CH2)q-N ( [5) C (O)R8, -(CH2)q-(O)p-(CH2)q-C(O) N [5R6, - (CH2) q-N ( [5) C (0) N [5R6,-(CH2)q-C(0)N( (CH2)raOH) [5, - (CH2) q-N ( [5)-S (0) 2R8, -CH2-S (0) 2N [5R6,-haloalquila Cx_6, -OCF3, -OCH(F)2, -OCH2F, -C(0)0[5, -0[5,-R8CN, CN, -SO2R9, - (CH2) nheteroarila, - (CH2) nheterociclila,- (CH2) nCicloalquila, - (CH2) ncicloalquenila, e-(CH2) narila;
R2 representa alquila Ci_6 que pode estaropcionalmente substituída com um ou mais grupos independen-temente selecionados de cicloalquila, haloalquila Ci_6,halogênio, -CN e-OR4;
R3 representa halogênio;
R4 representa um grupo selecionado de hidrogênio,alquila C1-6, alquenila C2-6, alquinila C2-6, - (CH2) ncicloal-quila, - (CH2) ncicloalquenila, - (CH2) nheterociclila, - (CH2) narila,e- (CH2) nheteroarila;
R5 e R6 são independentemente selecionados dehidrogênio e alquila C1-4;
R7 representa um grupo selecionado de alquila C1-6,alquenila C2-6, alquinila C2-6, - (CH2) tcicloalquila, - (CH2) nci-cloalquenila, - (CH2) theterociclila, - (CH2) tarila, e- (CH2) the-teroarila;
R8 representa alquila C1-4;
R9 representa um grupo selecionado de alquila Ci_6,alquenila C2-6, alquinila C2_6, - (CH2) ncicloalquila, -(CH2) nci-cloalquenila, - (CH2) nheterociclila, - (CH2) narila, -(CH2) nhete-roarila, e CN;
m representa um inteiro selecionado de 3 e 4;
η representa um inteiro selecionado de 0 e 1 ;
ρ representa um inteiro selecionado de 0 e 1 ;
q representa um inteiro selecionado de 0, Ie 2; e
t representa um inteiro selecionado de 1 e 2,0(s) composto(s) são acreditados serem de uso notratamento de doenças onde a sub-ativação do receptor HM74contribui para a doença ou onde a ativação do receptor serábenéfica. Por exemplo, no tratamento de doenças do metabo-lismo lipidico incluindo dislipidemia ou hiperlipopro-teinemia tal como dislipidemia diabética e dislipidemiamista, deficiência cardíaca, hipercolesteremia, doençacardiovascular incluindo aterosclerose, arteriosclerose, ehipertrigliceridemia. Como tal, os compostos podem tambémencontrar usos como terapêuticas para doença arterialcoronariana, trombose, angina, deficiência renal crônica,doença vascular periférica e derrame, bem como as indicaçõescardiovasculares associada com o diabetes melitus tipo II,diabetes tipo I, insulino-resistência, hiperlipidemia,anorexia nervosa, obesidade. Como tal, os compostos dapresente invenção podem encontrar usos como agonistasparciais do HM74A. Os compostos podem ser também de uso notratamento de doenças ou condições inflamatórias, comoapresentado mais adiante.
Em uma modalidade da presente invenção, X repre-senta a heteroarila. Em uma outra modalidade X representa aheteroarila que compreende um heteroátomo nitrogênio, porexemplo, triazolila, furazanila, oxadiazolila, tetrazolila,imidazolila ou pirazolila. Numa modalidade adicional Xrepresenta um grupo selecionado de oxadiazolila e tetra-zolila.
Em uma outra modalidade, Y representa um grupoopcionalmente substituído selecionado de arila, por exemplo,fenila ou naftila, heteroarila, por exemplo, piridinila,tiazolila, tienila, benzofuranila ou indolila, e O-arila,por exemplo, O-fenila. Numa modalidade adicional, Yrepresenta um grupo opcionalmente substituído selecionado dearila e heteroarila. Em uma modalidade Y é selecionado dearila.
Em uma modalidade da presente invenção, Y podeestar opcionalmente substituído com um ou mais de: alquilaC1-6, alquenila C2-61 alquinila C2-6, halogênio, -NH2, -(CH2)q-(O)p-(CH2)q-N(R5)C(O)OR8, -(CH2)q-N(R5)C(O)R8, -(CH2)q-(O)p-(CH2)q-C(O)NR5R6, -(CH2)q-N(R5)C(O)N(R5)R6, -(CH2)q-C(O)N((CH2)mOH)R5, -(CH2)q-N(R5)-S(O)2R8, -CH2-S(O)2N(R5)R6,-haloalquila Ci_6, -OCF3, -OCH(F)2, -OCH2F, -C(O)OR5, -OR5,-R8CN, CN-SO2R9, - (CH2) nheteroarila, - (CH2) nheterociclila,- (CH2) ncicloalquila, - (CH2) ncicloalquenila, - (CH2) narila;
Numa modalidade adicional, Y está substituído comum ou mais grupos selecionados de OR5 por exemplo, OH ouOCH3, halogênio, por exemplo, F ou Cl, arila, por exemplo,fenila, haloalquila C1-6 por exemplo, CF3 ou CH2CF3 , OCF3,R8CN, CN,
(CH2)q-N(R5)-S(O)2R8 , por exemplo, NHSO2CH3 e SO2R9,por exemplo, SO2CH3.
Em ainda uma modalidade adicional Y está substi-tuído com um ou mais grupos selecionados de OR5, halogênio,haloalquila Ci_6, e -(CH2)q-N(R5)C(O)R8.
Em uma outra modalidade, Y está substituído com umou mais grupos selecionados de halogênio, e haloalquila Ci_6·Em ainda uma outra modalidade, Y não está adicio-nalmente substituído.
Em uma modalidade da presente invenção, XeY cadaum representa independentemente uma heteroarila quecompreende um heteroátomo nitrogênio. Numa modalidade adi-cional X representa oxadiazolila e Y representa piridinila.
Em uma outra modalidade X representa tetrazolila e Yrepresenta fenila. Em ainda uma outra modalidade da presenteinvenção X representa oxadiazolila e Y representa fenila.
Em uma modalidade da invenção, m é 4 e η é 0. Numamodalidade adicional, m é 3 e η é 1.
Em uma modalidade da presente invenção, R2 éselecionado de alquila C3_6, por exemplo, butila ou pentila,por exemplo, n-butila ou n-pentila.
Numa modalidade adicional da presente invenção, R3é selecionado de cloro e bromo. Em uma outra modalidade, R3representa cloro.
Em uma modalidade da presente invenção R7 repre-senta um grupo selecionado de alquila Ci-6, alquenila C2-6 ralquinila C2-6/ - (CH2) tcicloalquila, - (CH2) ncicloalquenila,-(CH2Jt heterociclila, - (CH2) tarila, e-(CH2), heteroarila;
Em uma modalidade da presente invenção X repre-senta oxadiazolila, Y representa fenila, R2 é butila, R3representa cloro emé 4 ené 0.
Com respeito aos estereoisômeros, os compostos defórmula (I) podem ter um ou mais átomo de carbono assimé-trico e podem ocorrer como racematos, mistura racêmicas ecomo enantiômeros ou diastereômeros individuais. Todas astais formas isoméricas estão inclusas na presente invençãoincluindo misturas delas provenientes.
Onde um composto de fórmula (I) contém um grupoalquenila ou alquenileno, isomerismo eis (E) e trans(Z) podemtambém ocorre. A presente invenção inclui os estereoisômerosindividuais do composto da invenção e, onde apropriado, suasformas tautoméricas individuais, juntamente com suasmisturas.
A separação de diastereômeros ou isômeros eis etrans pode ser conseguida através de técnicas convencionais,por exemplo, através de cristalização fracionada, e acromatografia ou HPLC de uma mistura estereoisomérica doagente pode ser também preparada a partir de umcorrespondente intermediário oticamente puro ou porresolução, tal como por HPLC do correspondente racematousando um adequado suporte quiral ou através dacristalização fracionada dos sais diastereoisoméricosformados pela reação do correspondente racemato com um ácidoou base oticamente aceitável, como apropriado.
Além disso, parte das formas cristalinas doscompostos de fórmula (I) podem existir como polimorfos, osquais estão inclusos na presente invenção. Uma forma podeter uma vantagem sobre uma outra forma, por exemplo, umaforma pode ter melhorada estabilidade sobre uma outra forma.
É para ser entendido que a presente invenção incluiqualquer combinação de modalidades particulares e cobretodas as combinações dos substituintes particulares descri-tos acima.Ao longo da presente especificação e das reivin-dicações anexas, as palavras "compreende" e "inclui" evariações tais como "compreender", "compreendendo" "inclui"e "incluindo" são para serem interpretadas de modo exclu-sivo. Isto é, essas palavras são pretendidas a portar apossível inclusão de outros elementos ou inteiros nãoespecificamente mencionados, onde o contexto permitir.
Como usado aqui, o termo "alquila" (quando usadocomo um grupo ou como parte de um grupo) se refere a umacadeia hidrocarboneto linear ou ramificada a menos que deoutro modo especificada, contendo o número significa umacadeia hidrocarboneto linear ou ramificada contendo pelomenos 3 e no máximo 6 átomos de carbono. Exemplos de alquilacomo usado aqui incluem, mas não estão limitados a metila(Me), etila (Et), n-propila e i-propila.
0 termo "alquileno" como usado aqui tanto cadeialinear ou ramificada, saturada ou insaturada, ou gruposligantes a hidrocarbonetos cíclicos saturados. Exemplos degrupos alquileno incluem metileno (-CH2-) , etileno (-CH2CH2-) ,eteno (-CH=CH-), ou ciclopropileno e semelhantes. Porexemplo, como usado aqui, -(alquileno)m-, onde m é 3 erepresenta -(CH2) 3-, -C(CH3)2-, -CH2CH=CH-, ou -ciclopro-pileno- e semelhantes. Por exemplo como usado aqui, -(alk)m-onde m é 4 representa -(CH2)4-, -CH2C(CH3)2-, -CH2CH=CHCH2-,ou-CH2-ciclopropileno- e semelhantes. Por exemplo, comousado aqui - (alquileno) n onde η = 1 significa -CH2-. Comousado aqui-(alquileno)n onde η = 0 significa que não existeligante alquileno nessa posição.O termo "alquenila" como usado aqui se refere auma cadeia hidrocarboneto linear ou ramificada contendo oespecificado número de átomos de carbono que contém uma oumais duplas ligações.
O termo "alquinila" como usado aqui se refere auma cadeia hidrocarboneto linear ou ramificada contendo oespecificado número de átomos de carbono que contém uma oumais triplas ligações.
O termo "cicloalquila" como usado aqui se refere aum anel monociclico saturado de 3 a 8 átomos de carbono.Exemplos de tais grupos incluem ciclopropila, ciclobutila,ciclopentila, cicloexila, cicloeptila e ciclooctila.
O termo "cicloalquenila" como usado aqui se referea um anel hidrocarboneto monociclico não aromático insatu-rado de 3 a 8 átomos de carbono contendo uma ou mais duplasligações. Exemplos de tais grupos incluem ciclopropenila,ciclobutenila, ciclopentenila, cicloexenila, cicloeptenila,ciclooctenila e semelhantes.
O termo "arila" como usado aqui se refere a umanel hidrocarboneto C6-i2 monociclico, biciclico outriciclico em que pelo menos um anel é aromático. Exemplosde tais grupos incluem fenila, naftila ou tetraidronafta-lenila e semelhantes.
O termo "heteroarila" como usado aqui se refere aum anel aromático monociclico de 5-6 membros ou um anelaromático biciclico fundido de 8-10 membros, contendo de 1 a4, cada um independentemente selecionado de oxigênio, nitro-gênio e enxofre. Pode existir um ou mais substituintes oxoopcionais nos átomos de carbono do anel. Exemplos de taisanéis aromáticos monociclicos incluem tienila, furila,furazanila, pirrolila, triazolila, tetrazolila, imidazolila,oxazolila, tiazolila, oxadiazolila, isotiazolila, isoxazo-lila, tiadiazolila, piranila, pirazolila, pirimidila,piridazinila, pirazinila, piridila, triazinila, tetrazinilae semelhantes. Exemplos de tais anéis aromáticos fundidosincluem quinolinila, isoquinolinila, quinazolinila, quino-xalinila, pteridinila, cinnolinila, phtalazinila, naftiridi-nila, indolila, isoindolila, azaindolila, indolizinila,indazolila, purinila, pirrolopiridinila, furopiridinila,benzofuranila, isobenzofuranila, benzotienila, benzoimidazo-lila, benzoxazolila, benzoisoxazolila, benzotiazolila,benzoisotiazolila, benzoxadiazolila, benzotiadiazolila esemelhantes.
0 termo "heterociclila" como usado aqui se referea um anel monociclico de 4-7 membros ou um anel biciclicofundido de 8-12 que pode estar saturado ou ρ cm saturadocontendo de 1 a 4 heteroátomos cada um independentementeselecionado de oxigênio, nitrogênio ou enxofre. Pode existirum ou mais substituintes oxo opcionais nos átomos de carbonodo anel. Exemplos de tais anéis monociclicos incluempirrolidinila, azetidinila, pirazolidinila, oxazolidinila,piperidinila, piperazinila, morfolinila, tiomorfolinila,tiazolidinila, hydantoinila, valerolactamila, oxiranila,oxetanila, dioxolanila, dioxanila, oxatiolanila, oxatianila,ditianila, diidrofuranila, tetraidrofuranila, diidropira-nila, tetraidropiranila, tetraidropiridinila, tetraidropiri-midinila, tetraidrotiofenila, tetraidrotiopiranila, diazepa-nila, azepanila e semelhantes. Exemplos de tais anéis bicí-clicos incluem indolinila, isoindolinila, benzopiranila,quinuclidinila, 2 , 3,4,5-tetraidro-lfl-3-benzazepina, tetrai-droisoquinolinila e semelhantes.
Os termos "halogênio" ou "halo" como usados aquise referem a, por exemplo, um átomo de flúor, cloro, bromoou iodo.
0 termo "haloalquila Ci_6" como usado aqui se referea um grupo alquila Ci-6 como definido aqui em que pelo menosum átomo de hidrogênio é substituído com halogênio. Exemplosde tais grupos incluem fluoretila, trifluormetila, trifluo-retila e semelhantes.
Como usado aqui, onde um grupo é referido comosendo "substituído" com um outro grupo ou possuindo "um oumais substituintes" a menos que uma posição particular parauma tal substituição seja especificada é para ser entendidoque uma substituição pode estar presente em qualquer posiçãono grupo.
0 termo "derivado farmaceuticamente aceitável" comousado aqui se refere a qualquer derivado farmaceuticamenteaceitável de um composto da presente invenção, por exemplo,sais, solvatos ou ésteres, os quais quando da administraçãoa um mamífero, tal como um humano, é capaz de proporcionar(diretamente ou indiretamente) um tal composto ou um seumetabolito ativo. Tais derivados são evidentes por aquelesusualmente versados na técnica, sem experimentação indevida,e com referência às orientações de Burger's MedicinalChemistry E Drug Discovery, 5a Edição, Vol. 1: PrincipiesAnd Practice, que é aqui incorporado por referência.
Como usado aqui, o termo "farmaceuticamenteaceitável" usado em relação a um ingrediente (ingredienteativo, diluente, excipiente ou velocidade) que pode estarincluso numa formulação farmacêutica para administração a umpaciente, se refere àquele ingrediente que é aceitável nosentido de ser compatível com quaisquer outros ingredientespresentes na formulação farmacêutica e que não sejaprejudicial ao seu receptor.
Como usado aqui, o termo "solvato" se refere a umcomplexo de estequiometria variável formado por um soluto(nessa invenção, um composto de fórmula (I) ou um seuderivado farmaceuticamente aceitável) e um solvente. Taissolventes para os propósitos da presente invenção não podeminterferir com a atividade biológica do soluto. 0 solventeusado pode ser um solvente farmaceuticamente aceitável.Exemplos de adequados solventes farmaceuticamente aceitáveisincluem, água, etanol, e ácido acético. Um exemplo de umsolvente que pode ser usado é a água, caso no qual o solvatopode ser referido como um hidrato do soluto em questão.
Será notado que, para uso farmacêutico, o "sal" ou"solvato" referido acima será um sal ou solvato farmaceuti-camente aceitável. Entretanto, outros sais ou solvatos podemencontrar uso, por exemplo, na preparação de um composto defórmula (I) ou na preparação de um sal farmaceuticamenteaceitável ou seu solvato.Sais farmaceuticamente aceitáveis incluem aquelesdescritos por Berge, Bighley e Monkhouse, J. Pharm. Sci.,1977, 66, 1-19. Adequados sais farmaceuticamente aceitáveisincluem sais de metais alcalinos formados a partir da adiçãode bases de metal alcalino tal como hidróxidos de metaisalcalinos. Exemplos de adequados sais de metais alcalinosincluem sais de sódio e de potássio. Outros sais farmaceu-ticamente aceitáveis adequados incluem sais de metaisalcalino-terrosos tais como sais de cálcio e sais demagnésio; ou sais com bases inorgânicas tal como etano-lamina, trietanolamina, etileno diamina, trietilamina,colina e meglumina; ou sais com aminoácidos tais comoarginina, lisina e histidina.
Esteres podem ser ativos por si só e/ou seremhidrolisáveis in vivo sob condições no organismo humano.Adequados grupos ésteres farmaceuticamente aceitáveis hidro-lisáveis in vivo incluem aqueles que se quebram facilmenteno organismo humano para deixar o ácido gerador ou seu sal.Um éster pode ser formado num grupo ácido carboxilico(-C(O)OH), através de métodos bem conhecidos na arteenvolvendo reação com o correspondente álcool. Por exemplo,os ésteres podem ser ésteres de alquila Ci-6, por exemplo,ésteres metilicos, ésteres etilicos, e semelhantes.
Como usado aqui, o termo "compostos da invenção"significa os compostos de acordo com a fórmula I e os seusderivados farmaceuticamente aceitáveis. 0 termo "um compostoda invenção" significa qualquer um dos compostos da invençãocomo definido acima.Como usado aqui, o termo "pelo menos uma entidadequímica" significa pelo menos uma substância químicaescolhida a partir do grupo de compostos que consiste decompostos de fórmula I e seus derivados farmaceuticamenteaceitáveis.
Em um aspecto da invenção é provida a substancial-mente cristalina 3-butil-8-cloro-l-{4-[5-(2-piridinil)-1,2, 4-oxadiazol-3-il]butil}-3,7-diidro-lfl-purin-2,6-diona, forma1. Em um outro aspecto da invenção é provida a substancial-mente cristalina 3-butil-8-cloro-l-{4-[5-(2-piridinil)-1, 2 , 4-oxadiazol-3-il] butil}-3, 7-diidro-lfí-purin-2, β-diona, forma 2.
A análise térmica nas amostras das substancial-mente cristalinas 3-butil-8-cloro-l-{4-[5-(2-piridinil)-l,2,4-oxadiazol-3-il]butil}-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona,formas 1 e 2, foi realizada. Desse modo, é provida asubstancialmente cristalina 3-butil-8-cloro-l-{4-[5-(2-piridinil)-1,2,4-oxadiazol-3-il]butil}-3,7-diidro-lE-purin-2,6-diona (forma 1 ou forma 2) possuindo um início de pontode derretimento medido por DSC (± 0,5°C) de: 160°C ou maiore 147°C ou maior, respectivamente.
Amostras de substancialmente cristalinas 3-butil-8-cloro-l-{4-[5-(2-piridinil)-1,2,4-oxadiazol-3-il]butil}-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona, forma 1, e 3-butil-8-cloro-l-{4-[5-(2-piridinil)-1,2,4-oxadiazol-3-il]butil}-3,7-diidro-1H-purin-2,6-diona, forma 2, preparadas como descrito daquiem diante, produziram os Padrões de difração de raios-X dopó das Figuras 1-2. O Padrão de difração de raios-X é únicopara a forma cristalina. As formas cristalinas substancial-mente puras apresentam padrão de difração com um únicoconjunto de picos de difração os quais podem ser expressosem ângulos 2 teta (°).
Os ângulos de difração 2 teta são consideradospara as posicoes dos diversos picos de difração de raios-X.Ligeiras variações nos ângulos 2 teta observados são espe-radas com base no difratômetro especifico empregado e natécnica de preparação da amostra para análise.
As formas substancialmente cristalinas de 3-butil-8-cloro-l-{4-[5-(2-piridinil)-1,2,4-oxadiazol-3-il]butil}-3,7-diidro-lfl-purin-2,6-diona podem ser identificadas pelapresença de um característico pico do ângulo 2 teta, ou pormúltiplos ângulos 2 teta os quais são razoavelmentecaracterísticos das formas cristalinas particulares. Paraidentificar a substancialmente cristalina 3-butil-8-cloro-l-{4-[5-(2-piridinil)-1,2,4-oxadiazol-3-il]butil}-3,7-diidro-lH-purin-2,β-diona (forma 1), esses picos ocorrem, nasseguintes posições, expressas em ângulos 2 teta (±0,1 graus):5,4, 6,7, 9,7, 11,1, 12,9, 14,0, 15,6, 16,3, 16,7, 23,1graus. Para identificar a substancialmente cristalina 3-butil-8-cloro-l-{4-[5-(2-piridinil)-1,2,4-oxadiazol-3-il]bu-til }-3, 7-diidro-lfí-purin-2, 6-diona (forma 2), esses picosocrrem nas seguintes posições, expressas em ângulos 2 teta(±0,1 graus): 5,2, 6,6, 10,4, 11,2, 13,4, 15,6, 18,1, 19,5,20,9 graus. Em uma modalidade pelo menos um dos mencionadosângulos 2 teta são empregados para identificar a substanci-almente cristalina 3-butil-8-cloro-l-{4-[5-(2-piridinil)-1,2,4-oxadiazol-3-il]butil}-3,7-diidro-lJí-purin-2 , 6-diona,forma 1 e substancialmente cristalina 3-butil-8-cloro-l-{4-[5-(2-piridinil)-1,2,4-oxadiazol-3-il]butil}-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona, forma 2. Em outras modalidades, pelo menos2, 3, 4 ou 5 (onde aplicável) dos mencionados ângulos 2 tetasão empregados para identificar a substancialmente crista-lina 3-buti1-8-cloro-1-{4-[5-(2-piridinil)-1,2,4-oxadiazol-3-il]butil}-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona, forma 1, substan-cialmente cristalina 3-butil-8-cloro-l-{4-[5-(2-piridinil)-1,2,4-oxadiazol-3-il]butil}-3,7-diidro-lfí-purin-2 , 6-diona,forma 2.
Alguma margem de erro está presente em cada umadas atribuições dos ângulos 2 teta. A margem de erro dosmencionados ângulos 2 ,teta é de aproximadamente ±0,1 grauspara cada uma das atribuições de picos mencionadas.
Uma vez que alguma margem de erro é possível naatribuição dos ângulos 2 teta, o método preferido de com-parar padrões de difração de raios-X do pó a fim deidentificar uma forma cristalina particular é o de sobreporo padrão de difração de raios-X do pó da forma desconhecidasobre o padrão de difração de raios-X do pó de uma formaconhecida. Por exemplo, aqueles usualmente versados natécnica podem sobrepor o padrão de difração de raios-X do póde uma forma não identificada de 3-butil-8-cloro-l-{4-[5-(2-piridinil)-1,2,4-oxadiazol-3-il]butil}-3,7-diidro-lfl-purin-2,6-diona, obtido usando os métodos descritos aqui, verFigura 3, por exemplo, e determinar facilmente se o padrãode difração de raios-X da forma não identificada é subs-tancialmente o mesmo como a do padrão de difração de raios-Xdo pó da substancialmente cristalina 3-butil-8-cloro-l-{4-[5-(2-piridinil)-1,2,4-oxadiazol-3-il]butil}-3,7-diidro-ltf-purin-2, 6-diona, forma 1 ou 2. Se o padrão de difração deraios-X do pó é substancialmente o mesmo como aquelemostrado em qualquer das Figuras 1-2, a forma anteriormentemostrada pode ser identificada de modo fácil e preciso.
Como usado aqui, o termo "forma substancialmentecristalina" significa que ela é substancialmente livre da 3-butil-8-cloro-l-{4-[5-(2-piridinil)-1,2,4-oxadiazol-3-il]bu-til}-3,7-diidro-li?-purin-2, 6-diona em forma amorfa. Por"substancialmente livre" é significado conter menos que 50%da forma amorfa, em um aspecto menos que 20% da forma amorfa,em um outro aspecto menos que 10% da forma amorfa, em umoutro aspecto menos que 5% da forma amorfa, em um outroaspecto menos que 2% da forma amorfa, em um outro aspectomenos que 1% da forma amorfa.
A presente invenção proporciona um método para apreparação da forma substancialmente cristalina da 3-butil-8-cloro-l-{4-[5-(2-piridinil)-1,2,4-oxadiazol-3-il]butil}-3,7-diidro-l#-purin-2,6-diona, como descrito aqui.
Os compostos de fórmula (I) são de potencialbeneficio terapêutico no tratamento e melhora dos sintomasde muitas doenças do metabolismo lipidico que incluemdislipidemia e hiperlipoproteinemia tal como dislipidemiadiabética e dislipidemia mista, deficiência cardíaca,hipercolesteremia, doença cardiovascular incluindo ateros-clerose, arteriosclerose, e hipertrigliceridemia, diabetesmelitus do tipo II, diabetes do tipo I, insulino-resis-tência, hiperlipidemia, anorexia nervosa, obesidade. Comotal, os compostos podem também encontrar uso comoterapênticos para doença arterial coronariana, trombose,angina, deficiência renal crônica, doença vascularperiférica e derrame.
Foi reportado que os receptores HM74 e HM74A estãoenvolvidos na inflamação (W002084298). A inflamação repre-senta um grupo de respostas vascular, celular e neurológicasao trauma. A inflamação pode ser caracterizada como omovimento de células inflamatórias tais como monócitos,neutrófilos e granulócitos para o interior dos tecidos. Issoestá usualmente associado com a reduzida função barreiraendotelial e edema no interior dos tecidos. A inflamação comrespeito à doença é tipicamente referida como inflamaçãocrônica. Tal inflamação crônica pode se manifestar pro-priamente através de sintomas da doença. 0 objetivo daterapia antiinflamatória é, portanto, reduzir essa infla-mação crônica e permitir o progresso do processo fisiológicode cura e de reparo do tecido.
Exemplos de doenças ou condições inflamatóriaspara as quais os compostos da presente invenção podemdemonstrar utilidade incluem aquelas das juntas, porexemplo, artrite (por exemplo, artrite reumatóide, osteoar-trite, deficiência da prótese de junta), ou do tratogastrintestinal (por exemplo, colite ulcerativa, doença deCrohn, e outras doenças inflamatórias dos intestinos egastrintestinais, gastrite e inflamação resultante de infec-ção, a enteropatia provocada por drogas antiiflamatórias nãoesteroidais), do pulmão (por exemplo, sindrome da agoniarespiratória adulta, ou doença pulmonar obstrutiva crônica),do coração (por exemplo, miocardite), do tecido nervoso (porexemplo, esclerose múltipla) , do pâncreas, (por exemplo,inflamação associada com diabetes melitus e suas compli-cações, dos rins (por exemplo, glomerulonefrite) , da pele(por exemplo, dermatite, psoriase, eczema, urticária, danospor queimaduras), dos olhos (por exemplo, glaucoma) bem comode órgãos transplantados (por exemplo, rejeição) e doençasmulti-orgânica (por exemplo, eritematose de lúpus sistêmico,sepse) e seqüelas inflamatórias de infecções virais oubacterianas e condições inflamatórias associadas com ateros-clerose e seguintes de insultos hipóxicos ou isquêmicos (comou sem reperfusão), por exemplo, no cérebro ou em doençaisquêmica cardíaca.
Em uma modalidade, os compostos dessa invenção sãoúteis no tratamento e prevenção de inflamação, diabetes edoenças ou condições cardiovasculares que incluem ateros-clerose, arteriosclerose, hipertrigliceridemia, e dislipi-demia mista.
0 ácido nicotínico tem um significativo perfil deefeito colateral, possivelmente porque ele é dosado emníveis altos (quantidades diária em gramas). 0 efeitocolateral mais comum é um intenso rubor cutâneo. Em certasmodalidades da presente invenção os compostos podem apre-sentar reduzidos efeitos colaterais comparados ao ácidonicotínico. 0 HM74A foi identificado como um receptor dealta afinidade para o ácido nicotínico enquanto que o HM74 éum receptor de afinidade mais baixa. Os compostos dapresente invenção apresentam maior afinidade para HM74A quepara HM74 e, portanto, podem encontrar uso como seletivosagonistar ou agonistas parciais de HM74A.
0 potencial para compostos de fórmula (I) paraativar HM74A pode ser demonstrado, por exemplo, utilizandoos seguintes ensaios de célula integral in vitro.
Testes in vitro
Para transfecções transientes, as células HEK293T(células HEK293 que expressam de modo estável o antigeno-TSV40 amplo) foram mantidas em DMEM contendo 10% de sorofetal bovino e 2 mM glutamina. As células foram semeadas emdiscos de cultura de 90 mm e crescidas até 60-80% deconfluência (18 — 2 4 h) antes da transfecção. O HM74A humano(GenBank™ número de acesso AY148884) foi subclonado numvetor de expressão de mamífero (pcDNA3; Invitrogen) etransfectado usando reagente Lipofectamine™. Para a trans-fecção, 9 μg do DNA foi misturado com 30 μΐϋ de Lipofectaminaem 0,6 mL de Opti-MEM (Life Technologies Inc.) e foiincubado na temperatura ambiente por 30 minutos antes daadição de 1,6 mL de Opti-MEM. As células foram expostas àmistura Lipofectamine/DNA por 5h e 6 mL de 20% (v/v) sorofetal bovino em DMEM foi em seguida acrescentado. As célulasforam colhidas após 48 h de transfecção. O tratamento datoxina da coqueluche foi realizado mediante suplementação nomeio a 50 ngmL"1 por 16h. Todos os estudos de transfecçãotransiente envolveram a co-transfecção do receptor junta-mente com a proteína Gi/0 g, G0ia.Para a geração de linhagens estáveis de células ométodo acima foi usado para transfectar células CHO-Klsemeadas em seis pratos com cavidades crescidas até 30% deconfluência. Essas células foram mantidas em meio DMEM-HamF-12 (disponível da Invitrogen) contendo 10% de soro fetalbovino e 2 mM glutamina. 48 h pós-transf ecção o meio foisuplementado com 400 μg/ mL de Geneticin (G418, Gibco) paraa seleção das células resistentes a antibiótico. Linhagensclonais de células CHO-Kl expressando HM74A de modo estávelforam confirmadas através de medições de ligação [35S]-GTPyS,em seguida da adição de ácido nicotínico.
Preparação da membrana P2 - Frações de particuladoP2 contendo membrana plasmática foram preparadas a partir depastas de células congeladas a -80°C após colheita. Todos osprocedimentos foram realizados a 4°C. Os aglomerados decélulas foram re-suspensos em 1 mL de 10 mM Tris-HCl e 0,1mM EDTA, pH 7,5 (tampão A) e por homogeneização por 20s comUltra Turrax seguido por passagem (5 vezes) através de umaagulha calibre 25. Os lisatos de células foram centrifugadosa 1000 g numa microcentrifuga para aglomerar o núcleo e ascélulas não quebradas e frações de particulado P2 foramrecuperadas por microcentrifugação a 16000 g por 30 minutos.Frações particulado P2 foram re-suspensas em tampão A earmazenadas a -80°C, até que fossem necessárias.
Ligação [35S] -GTPyS - Os ensaios foram realizadosna temperatura ambiente em formato 384 cavidades bom basenos métodos descritos anteriormente, (Wieland, T. e Jakobs,K.H. (1994) Métodos Enzymol. 237, 3-13) . Em resumo, asdiluições de compostos padrões ou de teste foram preparadase acrescentadas a uma placa de 384 cavidades e num volume de10 μΐ. Membranas (HM74A ou HM74) foram diluídas no tampão deensaio (20 mM HEPES, 100 mM NaCl, 10 mM MgCl2, pH 7,4)suplementado com saponina (60 μς/πΛ), microesferasLeadseeker WGA (Amersham; 250 μg/cavidade) e 10 μπι GDP, talque o volume de 20 μΐ, acrescentado a cada uma cavidadecontivesse 5 μς de membranas. [35S]-GTPyS (1170 Ci/ mmol,Amersham) foi diluído (1:1500) em tampão de ensaio e 20 μΐϋacrescentado a cada cavidade. Em seguida da adição doradioligante, as placas foram seladas, giradas em pulsos eincubadas por 4 horas na temperatura ambiente. Ao final doperíodo de incubação as placas foram lidas numa máquinaLeadseeker (VIEWLUX PLUS; Perkin-Elmer) para determinar osníveis de ligações específicas.
Esses ensaios foram refinados mediante redução dovolume final do ensaio para 10 μL. Para esse ensaio de 10 μLfoi usado um protocolo revisado. Isto envolveu o uso deapenas 100 nL do composto padrão ou de teste por cavidade deuma placa de 384 cavidades e 1,5 μg de membrana e 100 μg demicroesferas Leadseeker WGA. Para o protocolo de baixovolume, as membranas, microesferas e [35S]-GTPyS forammisturados juntos e em seguida 10 μL dessa mistura foramdispensados a cada cavidade. A incubação e a leitura daplaca foram idênticas para os ensaios a 10 μΐ e 50 μί.
Todos os compostos exemplificados foram testadosem um ou ambos os ensaios ligantes [35S]-GTPyS descritosacima (isto é, os ensaios de 10 μL e 50 μL) .O dado foi analisado através do ajuste de curvacomo realizado usando uma equação logística de quatroparâmetros utilizando o pacote de software XC50 (máximo de 2pontos desconsiderados para qualquer uma curva).
Testes in vivo
Os compostos da invenção podem ser testados emratos Spague-Dawley machos (200-250 g) que foram mantidos emjejum pelo menos 12 horas antes do estudo. Os compostos sãodosados de modo intravenoso ou al ou 3 mg/kg (5 mL/g) oupor meio de alimentação forçada oral em doses variando de 1-30 mg/kg (10 mL/kg) . Amostras de sangue (0,3 mL sangria daveia caudal) podem ser tomadas pré-dose e em três momentospós-dose (tempos variando de 15 minutos a 6 horas pós-dose)Cada amostra de sangue é transferida para um tubo deheparina (Becton Dickinson Microtainer, PST LH) e centri-fugado (10.OOOg por 5 minutos) para produzir uma amostra deplasma. As amostras de plasma são ensaiadas quanto aosníveis de ácidos graxos não esterifiçados (NEFA) usando umkit comercialmente disponível (Randox). Os níveis NAFA deinibição plasmática, relativamente aos níveis da pré-dose,são usados como um substituto para a atividade do agonistaHM7 4A.
A fim de determinar se os compostos da invençãoapresentam respostas de ruborização associadas com o ácidonicotínico eles podem ser dosados a cobaias conscientes.Cobaias Dunkin Hartley machos (300-600 g; n=10-20 por grupo)são mantidas em jejum por pelo menos 12 horas, mas não acimade 24 horas antes do experimento. Amostras de sangue pré-estudo (0,5 mL) são tomadas de cada animal por meio depunção cardíaca sob anestesia de recuperação (Isoflurane3,5% com adicional O2 (lL/min)). Medições da temperatura daorelha são bomadas mediante colocar a orelha esquerda decada animal sobre uma sonda de temperatura por infra-vermelho. As medições são tomadas a intervalos de 1 minuto apartir de 5 minutos da pré-dose até 30 minutos pós-dose. Asmedições de temperatura são tomadas a intervalos de 15minutos até 2 horas pós-dose. Os animais recebem oscompostos de teste através de alimentação oral forçada (5mL/g) . Amostras de sangue (0,5 mL) são tomadas por punçãocardíaca sob anestesia terminal. As amostras de sangue sãotomadas a partir dos animais individuais para proporcionardados a 0,5, 1, 2, 3, e 4 horas pós-dose. Todas as amostrasde sangue são colocadas num cilindro de sangue por 5 minutose em seguida armazenadas em gelo até o final do estudo.emseguida da centrifugação 12000 g por 5 minutos) o plasma étransferido para tubos novos e armazenado a -20°C até seremanalisados quanto a concentrações de NEFA.
Alguns compostos de acordo com a fórmula (I) foramsintetizados (ver exemplos sintéticos adiante) e testadosnos ensaios ligantes de [35SJ-GTPyS discutidos acima.
Alguns compostos de acordo com a fórmula (I)incluindo: 8-cloro-3-(3,3-dimetilbutil)-1-[2-(etiloxi)etil]-3, 7-diidro-lH-purin-2, 6-diona; possuem utilidade como inter-mediários na produção de outros compostos de acordo com afórmula (I).Os compostos exemplificados (Exemplos 1-512)possuem uma pEC50 de 4,3 ( + /-0,3 unidade 10 g) ou maior euma eficácia de 30% ou maior (em relação ao ácidonicotinico) nos ensaios ligantes [35S]-GTPyS descritos acima,nos quais eles foram testados.
Purificação Geral e métodos analíticos
LC/MS: Método
HPLC analítico foi conduzido numa colunaSupelcosil™ ABZ + PLUS (Supelco) (3 pm, 3,3 cm χ 4,6 mm ID)eluindo com 0,1% HCO2H e 0,01 M acetato de amônio em água(solvente A), e 95% MeCN e 5% água (contendo 0,5% HCO2H)(solvente Β), utilizando o gradiente de eluição seguinte 0-0,7 min 0%B, 0,7-4,2min 0-^100%B, 4,2-4,6 minutos 100%B, 4,6-4,8 min 100-.Ό %B numa taxa de fluxo de 3 mL/ min. Adisposição do diodo de detecção UV foi realizada na faixa de215 a 330 nm. Os espectros de massa (MS) foram registradosnum espectrômetro de massa Waters ZQ mass utilizando modosde ionização eletrospray positiva [(ES+ve para produzir íonsmoleculares MH+ e M(NH4)+] ou de ionização eletrospraynegativa [(ES-ve para produzir íon molecular (M-H)"]. Apenaso íon gerador de maior quantidade de isótopos foi cotado.
Os espectros 1H RMN foram registrados usandoespectrômetro Bruker DPX 400MHz usando tetrametil-silano comoo padrão.
Cromatografia Biotage™ se refere à purificaçãorealizada usando ou sistemas de purificação Flash 40i ouFlash 150i, comercializados pela Biotage AB, utilizandocartuchos pré-empacotados com KPSil (sílica).Sistema Companion™ se refere ao sistema de purifi-cação Teledyne Isco Combiflash Companion™. Este é um sistemade purificação controlado por gradiente com detecção inte-gral, variável do comprimento de onda UV com a capacidadepara deflagrar a coleta da fração de modo automatizadoatravés do limiar do UV.
Autoprep direcionado a massa (MDAP) se refere ummétodos onde o material foi purificado por meio decromatografia liquida de alta performance utilizando ou umacoluna Supelcosil™ ABZ+ 5 um (10 cm χ 20 mm i.d.) ou umacoluna Supelcosil™ ABZ+ 10 μπι (15 cm χ 30 mm i.d.) com umadequado gradiente de solvente A: 0,1% HCO2H em água esolvente B: 95% MeCN, 5% água (contendo 0,5% HCO2H). 0inj etor/coletor Waters 2767 fli deflagrado por meio de umespectrômetro de massa MicroMass ZQ na detecção da massa deinteresse (utilizando software MassLynx Micromass).
HPLC preparativa (Autoprep HPLC ou Autoprep) serefere um métodos onde o material foi purificado por meio decromatografia liquida de alta performance numa colunaSupelcosil™ ABZ+ 5 um (10 cm χ 21,2 mm i.d.) com um adequadogradiente de 0,1% HCO2H em água e MeCN (com 0,5% HCO2H). 0coletor de frações Gilson 233 foi deflagrado por meio dadetecção de UV.
SPE ( extração de fase sólida) se refere ao uso decartuchos de polietileno os quais são pré-empacotados comabsorvente para purificação. 0 absorvente contido nessescartuchos será especificado. Exemplos usados são detalhadosadiante.C18 SPE se refere ao uso de cartuchos pré-empacotados com absorvente silica funcionalizada 40 μπι C18(comercializado por Varian Inc.)· O composto foi carregado,tipicamente em DMSO/MeOH 50:50, por sobre um cartuchopreviamente condicionado com MeCN e equilibrado com 5% MeCNem água. O produto foi eluido com um gradiente adequado de0,1% HCO2H em água e MeCN (0,5% HCO2H).
SPE aminopropila ou coluna se refere ao uso decartuchos pré-empacotados com silica aminopropil funcionali-zada 40 μιη-120 μπι (comercializado por Varian Inc.). 0produto bruto é tipicamente carregado em misturas DCM/MeOHpor sobre um cartucho previamente condicionado com MeOH. Oscomponentes neutros foram eluidos com MeOH e/ou DCM (3 ou 4volumes de coluna) e os componentes de caráter ácido eluidosum eluente contendo uma proporção de AcOH (2-20%).
Cartuchos 0asis™/0asis™ SPE's se refere a cartuchosSPE empacotados com um absorvente polimérico fabricado porthe Waters Corporation. Estes são .tipicamente condicionadoscom volumes de 3 colunas de MeOH e equilibrados com águaantes da amostra ser carregada. Os sais e os inorgânicos sãoeluidos com água e o produto é tipicamente eluido com MeOHou MeCN.
GreenHouse™ se refere a uma plataforma sintetiza-dora de 24 reações paralelas disponível da RDT Ltd. Ingla-terra.
Como indicado acima, compostos de fórmula (I) podemencontrar uso na medicina humana ou veterinária, por exemplo,como ativadores do HM74A, no gerenciamento da dislipidemia ehiperlipoproteinemia.
Desse modo, é provida como uma outra modalidade dapresente invenção pelo menos um composto de fórmula (I) ouum seu derivado farmaceuticamente aceitável, para uso emmedicina humana ou veterinária, por exemplo, no tratamentode distúrbios de metabolismo lipidico que incluem disli-pidemia e hiperlipoproteinemia tal como dislipidemia diabé-tica e dislipidemia mista, deficiência cardíaca, hipercoles-teremia, doença cardiovascular incluindo aterosclerose,arteriosclerose, e hipertrigliceridemia, diabetes melitus dotipo II, diabetes do tipo I, insulino-resistência, hiperli-pidemia, anorexia nervosa e obesidade. Como tal, os compos-tos são também providos para uso no tratamento de doençaarterial coronariana, trombose, angina, deficiência renalcrônica, doença vascular periférica e derrame.
É provida como uma modalidade adicional dapresente invenção pelo menos um composto de fórmula (I) ouum seu derivado farmaceuticamente aceitável, for use nafabricação de um medicamento para o tratamento de distúrbiosde metabolismo lipidico que incluem dislipidemia e hiperli-poproteinemia tal como dislipidemia diabética e dislipidemiamista, deficiência cardíaca, hipercolesteremia, doençacardiovascular incluindo aterosclerose, arteriosclerose, ehipertrigliceridemia, diabetes melitus do tipo II, diabetesdo tipo I, insulino-resistência, hiperlipidemia, anorexianervosa, obesidade. Como tal, os compostos são também provi-dos para uso no tratamento de doença arterial coronariana,trombose, angina, deficiência renal crônica, doença vascularperiférica e derrame.
Será notado aqui que referências ao tratamento seestendem a profilaxia, prevenção da recorrência e supressãode sintomas bem como ao tratamento de condições estabele-cidas.
Em uma modalidade da invenção, é provida pelo menosum composto de fórmula (I) ou um seu derivado farmaceuti-camente aceitável for use no tratamento de distúrbios demetabolismo lipidico que incluem dislipidemia e hiperlipo-proteinemia. Por exemplo, é provido o uso de pelo menos umcomposto de fórmula (I) ou um seu derivado farmaceuticamenteaceitável no tratamento de dislipidemia diabética, dislipi-demia mista, deficiência cardíaca, hipercolesteremia,diabetes melitus do tipo II, diabetes do tipo I, insulino-resistência, hiperlipidemia, anorexia nervosa, obesidade,doença arterial coronariana, trombose, angina, deficiênciarenal crônica, derrame e doença cardiovascular incluindoaterosclerose, arteriosclerose, e hipertrigliceridemia.
É para ser entendido que essa modalidade dapresente invenção inclui qualquer combinação de modalidadesparticulares e cobre todas as combinações de substituintesparticulares descritos aqui acima para os compostos defórmula (I).
Adicionalmente, a presente invenção proporciona ouso de pelo menos um composto de fórmula (I) ou um seuderivado farmaceuticamente aceitável, na fabricação de ummedicamento para o tratamento de doenças ou condiçõesinflamatorias das juntas, por exemplo, artrite (por exemplo,artrite reumatóide, osteoartrite, deficiência da prótese dejunta), ou do trato gastrintestinal (por exemplo, coliteulcerativa, doença de Crohn, e outras doenças inflamatoriasdos intestinos e gastrintestinais, gastrite e inflamaçãoresultante de infecção, a enteropatia provocada por drogasantiiflamatorias não esteroidais), do pulmão (por exemplo,sindrome da agonia respiratória adulta, ou doença pulmonarobstrutiva crônica), do coração (por exemplo, miocardite) ,do tecido nervoso (por exemplo, esclerose múltipla), dopâncreas, (por exemplo, inflamação associada com diabetesmelitus e suas complicações, dos rins (por exemplo, glome-rul onefrite), da pele (por exemplo, dermatite, psoriase,eczema, urticária, danos por queimaduras), dos olhos (porexemplo, glaucoma) bem como de órgãos transplantados (porexemplo, rejeição) e doenças multi-orgânica (por exemplo,eritematose de lúpus sistêmico, sepse) e seqüelas inflama-tórias de infecções virais ou bacterianas e condiçõesinflamatorias associadas com aterosclerose e seguintes deinsultos hipóxicos ou isquêmicos (com ou sem reperfusão),por exemplo, no cérebro ou em doença isquêmica cardíaca.
Em modalidades alternativas ou adicionais é providoum método para o tratamento de um indivíduo humano ou animalcom uma condição onde a sub-ativação do receptor HM74contribui para a condição ou onde a ativação do receptorserá benéfica, cujo método compreende administrar ao referidoindivíduo humano ou animal uma quantidade eficaz de pelomenos um composto de fórmula (I) ou um seu derivado farma-ceuticamente aceitável.
Novamente, é para ser entendido que essa modalidadeda presente invenção inclui qualquer combinação de modali-dades particulares e cobre todas as combinações de substi-tuintes particulares descritos aqui acima para os compostosde fórmula (I).
Em uma modalidade, a presente invenção proporcionaum método para o tratamento de distúrbios de metabolismolipidico que incluem dislipidemia e hiperlipoproteinemia talcomo dislipidemia diabética e dislipidemia mista, deficiên-cia cardíaca, hipercolesteremia, doença cardiovascularincluindo aterosclerose, arteriosclerose, e hipertriglice-ridemia, diabetes melitus do tipo II, diabetes do tipo I,insulino-resistência, hiperlipidemia, anorexia nervosa eobesidade, cujo método compreende administrar ao referidoindivíduo humano ou animal uma quantidade eficaz de pelomenos um composto de fórmula (I) ou um seu derivado farma-ceuticamente aceitável. Como tal, esses compostos podemtambém encontrar uso nos métodos para o tratamento de doençaarterial coronariana, trombose, angina, deficiência renalcrônica, doença vascular periférica e derrame, métodos essesque compreendem administrar ao referido indivíduo humano ouanimal uma quantidade eficaz de pelo menos um composto defórmula (I) ou um seu derivado farmaceuticamente aceitável.
A quantidade de um composto de fórmula (I) ou umseu derivado farmaceuticamente aceitável que é requeridapara conseguir o desejado efeito biológico será, natural-mente, dependente de um número de fatores, por exemplo, omodo de administração e a exata condição clinica do receptor.No geral, a dose total diária estará na faixa de 0,1 mg-1g/kg, tipicamente de 0,1-100 mg/kg. Uma dose intravenosapode, por exemplo, estar na faixa de 0,01 mg a 0,lg/kg,tipicamente de 0,01 mg a lOmg/kg, que pode ser convenien-temente administrada como uma infusão de 0,1 pg a 1 mg, porminuto. Fluidos de infusão adequados para esse propósitopodem conter, por exemplo, de 0,01 yg a 0,1 mg, pormililitro. Doses unitárias podem conter, por exemplo, de0,01 μg a Ig de um composto da invenção. Desse modo ampolaspara injeção podem conter, por exemplo, de 0,01 pg a 0,1 g eformulações de dose unitária administráveis de modo oral,tal como comprimidos ou cápsulas, podem conter, por exemplo,de 0,1
mg a lg, por exemplo, de 5 mg a 50 mg.
Um composto de fórmula (I) ou um seu derivadofarmaceuticamente aceitável pode ser empregado como ocomposto individualmente no tratamento de uma doença ondesub-ativação do receptor HM74 contribui para a doença ouonde a ativação do receptor será benéfica, um exemplo dissoé onde um composto da presente invenção está apresentado comum veiculo aceitável na forma de uma formulação farmacêu-tica. O veiculo precisa, naturalmente, ser aceitável nosentido de ser compatível com os outros ingredientes daformulação e precisa não ser prejudicial ao receptor. Oveículo pode ser um sólido ou líquido, ou ambos, e pode serformulado com o composto da invenção como uma formulação emdose unitária, por exemplo, um comprimido, o qual podeconter de 0,05% a 95% em peso do composto da invenção.
As formulações incluem aquelas adequadas paraadministração oral, retal, tópica, bucal (por exemplo, sub-lingual) e parenteral (por exemplo, subcutânea, intramus-cular, intradérmica ou intravenosa).
É também provido de acordo com a invenção umprocesso para a preparação de uma tal composição farmacêu-tica o qual compreende a mistura dos ingredientes.
Formulações adequadas para administração oral podemser apresentadas em unidades discretas, tal como cápsulas,sachets, pastilhas ou tabletes, cada um contendo uma quan-tidade predeterminada de um composto de fórmula (I) ou umseu derivado farmaceuticamente aceitável; como um pó ougrânulos; como uma solução ou suspensão num liquido aquosoou não aquoso; ou como uma emulsão óleo-em-água ou água-em-óleo. No geral, as formulações são preparadas mediante mis-turar uniformemente e intimamente o composto de fórmula (I)ou um seu derivado farmaceuticamente aceitável, com umveiculo liquido ou sólido finamente dividido, ou ambos, e emseguida, se necessário, moldar o produto. Por exemplo, umcomprimido pode ser preparado mediante comprimir ou moldarum pó ou grânulos do composto de fórmula (I) ou um seuderivado farmaceuticamente aceitável opcionalmente com um oumais ingredientes acessórios. Os comprimidos prensados podemser preparados mediante compressão, numa máquina adequada,do composto na forma de fluxo livre, tal como um pó ougrânulos opcionalmente misturado com um aglutinante, lubri-ficante, diluente inerte e/ou agente ativo de superfície/dispersante. Os comprimidos moldados podem ser feitosatravés de moldagem, numa máquina adequada, o composto em póumedecido com um diluente líquido inerte.
Comprimidos e cápsulas para administração oralpodem conter excipientes convencionais tal como agentesaglutinantes, por exemplo, xarope, acácia, gelatina, sorbi-tol, tragacanto, mucilagem de amido, celulose microcris-talina, açúcar, amido de milho, fosfato de cálcio ousorbitol; lubrificantes, por exemplo, estearato de magnésio,ácido esteárico, talco, polietileno glicol ou sílica;desintegrantes, por exemplo, amido de batata, croscarmelosesódica ou amido glicolato de sódio; ou agentes umectantestal como lauril sulfato de sódio. Os comprimidos podem serrevestidos de acordo com métodos bem conhecidos por aquelesusualmente versados na técnica. As preparações líquidaspodem estar na forma de, por exemplo, suspensões, soluções,emulsões, xaropes ou elixires aquosos e não aquosos, oupodem ser apresentados como um produto seco para consti-tuição com água ou outro veículo adequado antes do uso. Taispreparações líquidas podem conter aditivos convencionaistais como agentes de suspensão, por exemplo, xaropesorbitol, metilcelulose, xarope glicose/açúcar, gelatina,hidroximetil celulose, hidroxipropilmetil celulose, carboxi-metil celulose, gel de estearato de alumínio ou gordurascomestíveis hidrogenadas; agentes emulsificantes, porexemplo, lecitina, monooleato de sorbitan ou acácia;veículos não aquosos (que podem incluir óleos comestíveis),por exemplo, óleo de amêndoas, óleo de coco fracionado,ésteres graxos, propileno glicol ou álcool etílico; ouconservantes, por exemplo, metil ou propil p-hidroxiben-zoatos ou ácido sórbico. As preparações pode também contersais tampões, agentes aromatizantes e/ou adoçantes (porexemplo, manitol) como apropriado.
Formulações adequadas para administração bucal(sub-lingual) incluem pastilhas que compreendem um compostoda invenção numa base aromatizada, usualmente sacarose eacácia ou tragacanto, e pastilhas compreendendo o compostoda invenção numa base inerte tal como gelatina e glicerinaou sacarose e acácia.
As formulações da presente invenção adequadas paraadministração parenteral compreendem adequadamente prepara-ções aquosas estéreis de um composto de fórmula (I) ou umseu derivado farmaceuticamente aceitável, a formulação podeser isotônica com o sangue do receptor pretendido. Essaspreparações podem ser administradas de modo intravenoso,embora a administração possa ser também efetuada por meio deinjeção subcutânea, intramuscular, intradérmica. Tais prepa-rações podem ser convenientemente preparadas mediantemistura do composto de fórmula (I) ou um seu derivadofarmaceuticamente aceitável com água e tornando a soluçãoresultante estéril e isotônica com o sangue. Composiçõesinjetáveis de acordo com a invenção irão geralmente conterde 0,1 a 5% p/p do composto de fórmula (I) ou um seuderivado farmaceuticamente aceitável.Desse modo, formulações da presente invençãoadequadas para administração parenteral compreendendo umcomposto de fórmula (I) ou um seu derivado farmaceuticamenteaceitável podem ser formuladas para administração parenteralatravés da injeção de bólus ou infusão continua e podemestar apresentadas na forma de dose unitária, por exemplo,como ampolas, pequenos frascos, infusões de pequenos volumesou seringas pré-carregadas, ou recipientes multi-dose com umconservante acrescentado. As composições podem assumirformas tais como soluções, suspensões, ou emulsões emveículos aquosos ou não aquosos, e podem conter agentes deformulação tais como antioxidantes, tampões, agentesantimicrobianos e/ou agentes de ajuste da toxicidade.
Exemplos de formulações adequadas para administração oralincluem formulações compreendendo um composto de fórmula (I)ou um seu derivado farmaceuticamente aceitável, em 10% DMSOe 90% carbonato ácido de sódio em salino estéril. Exemplosde formulações adequadas para administração intravenosaincluem formulações compreendendo um composto de fórmula (I)ou um seu derivado farmaceuticamente aceitável, em 5% ou 10%DMSO e 95% ou 90% carbonato ácido de sódio em água estéril.
De modo alternativo, o agente terapeuticamente eficaz podeestar na foram de pó para reconstituição com um veículoadequado, por exemplo, água estéril livre de pirogênio,antes do uso. A apresentação em sólido seco pode ser prepa-rada mediante carregamento de um pó assepticamente estérilem recipientes estéreis individuais ou mediante carregamentode uma solução assepticamente estéril dentro de cadarecipiente e secagem por congelamento.
Formulações adequadas para administração retalpodem ser apresentadas como dose unitária em supositórios.
Estes podem ser preparados mediante mistura de um compostode fórmula (I) ou um seu derivado farmaceuticamenteaceitável com um ou mais veículos sólidos convencionais, porexemplo, manteiga de cacau ou glicerídeos e em seguidamoldando a mistura resultante.
Formulações adequadas para aplicação tópica à pelepodem assumir a forma de uma pomada, creme, loção, pasta,gel, borrifo, aerossol, ou óleo. Veículos que podem serusados incluem vaselina, lanolina, polietileno glicóis,álcoois, e combinações de dois ou mais desses. O composto defórmula (I) ou um seu derivado farmaceuticamente aceitávelestá geralmente presente numa concentração de 0,1 a 15% p/pda composição, por exemplo, de 0,5 a 2%.
Por administração tópica como usado aqui, estáinclusa a administração por insuflação e inalação. Exemplosdos diversos tipos de preparações para administração tópicaincluem pomadas, cremes, loções, pós, pessários, borrifos,aerossóis, cápsulas ou cartuchos para uso como um inalanteou insuflador ou gotas (por exemplo, gotas oculares ounasais).
Pomadas e cremes podem, por exemplo, ser formu-lados com uma adequada base aquosa ou oleosa com a adição deadequados agentes espessantes e/ou de formação de gel e/ousolventes. Tais bases podem, desse modo, por exemplo,incluir água e/ou um óleo tal como parafina liquida ou umóleo vegetal tal como de amendoim ou óleo de mamona ou umsolvente tal como polietileno glicol.
Agentes espessantes que podem ser usados incluemparafina mole, estearato de alumínio, álcool cetoestearí-lico, polietileno glicóis, cera microcristalina e cera deabelhas.
Loções podem ser formuladas com uma base aquosa ouoleosa e irão também conter um ou mais agentes emulsifican-tes, agentes estabilizantes, agentes dispersantes, agentesde suspensão ou agentes espessantes.
Pós para aplicação externa podem ser formados coma ajuda de quaisquer bases pó adequadas, por exemplo, talco,lactose ou amido. Gotas podem ser formuladas com uma baseaquosa ou não aquosa também compreendendo um ou mais agentesdispersantes, solubilizantes ou agentes de suspensão.
As composições de uso por borrifo podem ser formu-ladas, por exemplo, como suspensões ou soluções aquosas oucomo aerossóis entregues a partir de embalagens pressuri-zadas, com o uso de um adequado propelente, por exemplo,diclorodifluormetano, triclorofluormetano, diclorotetra-fluoretano, 1,1,1,2,3,3,3-heptafluorpropano, 1,1,1,2-tetra-fluoretano, dióxido de carbono ou outro gás adequado.
Cápsulas e cartuchos para uso em um inalador ouinsuflador, de, por exemplo, gelatina, podem ser formuladascontendo uma mistura de pó de um composto da invenção e umaadequada base pó tal como lactose ou amido.As composições farmacêuticas de acordo com ainvenção podem ser também usadas em combinação com outrosagentes terapêuticos, por exemplo, em combinação com outrasclasses de drogas dislipidêmicas (por exemplo, estatinas,fibratos resinas ligantes bile-ácido ou ácido nicotinico).
Os compostos da presente invenção podem ser usadosem combinação com um ou mais outros agentes terapeuticamenteativos, por exemplo, em combinação com outras classes dedrogas dislipidêmicas, por exemplo, inibidores da 3-hidróxi-3-metilglutrila-coenzima A redutase (estatinas) ou fibratosou resinas ligantes bile-ácido ou ácido nicotinico. Ainvenção desse modo proporciona, numa modalidade adicional,o uso de uma tal combinação no tratamento de doenças onde asub-ativação do receptor HM74 contribui para a doença ouonde a ativação do receptor será benéfica e o uso de pelomenos um composto de fórmula (I) ou um seu derivadofarmaceuticamente aceitável na fabricação de um medicamentopara a terapia de combinação de distúrbios de metabolismolipidico que incluem dislipidemia e hiperlipoproteinemia talcomo dislipidemia diabética e dislipidemia mista, deficiên-cia cardíaca, hipercolesteremia, doença cardiovascularincluindo aterosclerose, arteriosclerose, e hipertriglice-ridemia, diabetes melitus do tipo II, diabetes do tipo I,insulino-resistência, hiperlipidemia, anorexia nervosa eobesidade.
Quando os compostos da presente invenção sãousados em combinação com outros agentes terapeuticamenteativos, os compostos podem ser administrados ou juntos ouseparadamente, seqüencialmente ou simultaneamente por meiode qualquer rota conveniente.
As combinações referidas acima podem ser conveni-entemente apresentadas para uso na forma de uma formulaçãofarmacêutica e desse modo formulações farmacêuticas compre-endendo uma com como definida acima otimamente junto com umveiculo ou excipiente farmaceuticamente aceitável compreen-dem uma modalidade adicional da invenção. Os componentesindividuais de tais combinações podem ser administrados oujuntos ou separadamente, seqüencialmente ou simultaneamenteem formulações farmacêuticas separadas ou combinadas.
Quando combinado na mesma formulação será notadoque os dois componentes precisam ser estáveis e compatíveisentre si e os outros componentes da formulação e podem serformulados para administração. Quando formulados separada-mente eles podem ser providos em qualquer formulaçãoconveniente, de modo conveniente em um modo tal comoconhecido para tais compostos na arte.
Quando em combinação com um segundo agente tera-pêutico ativo contra a mesma doença, a dose de cadacomponente pode diferir daquela quando o composto é usadosozinho. Doses apropriadas serão facilmente percebidas poraqueles usualmente versados na técnica.
A invenção desse modo proporciona, numa modalidadeadicional, uma combinação que compreende pelo menos umcomposto de fórmula (I) ou um seu derivado farmaceuticamenteaceitável juntamente com um outro agente terapeuticamenteativo.A combinação referida acima pode estar convenien-temente apresentada para uso na forma de uma formulaçãofarmacêutica e desse modo formulações farmacêuticas compre-endendo uma combinação como definida acima juntamente com umseu veiculo farmaceuticamente aceitável representam umamodalidade adicional da invenção.
Os compostos da presente invenção e seus derivadosfarmaceuticamente aceitáveis podem ser preparados através demetodologia descrita adiante, constituindo uma modalidadeadicional dessa invenção.
Em uma modalidade a presente invenção proporcionaum método para a preparação de composto(s) de fórmula (I) apartir de um apropriado material de partida, por exemplo,composto(s) de fórmula (II):
<formula>formula see original document page 44</formula>
onde PG = grupo protetor, o método caracterizadopelo fato de que compreende:
(i) alquilação em Nl de uma xantina protegida em N7 ;
(ii) alquilação em N3 de uma xantina protegida em N7 ;
(iii) halogenação em C8;
(iv) desproteção de N7;em qualquer ordem com a condição de que a despro-teção seja realizada após a alquilação.
Processo 1:
Um processo de acordo com a invenção para prepararcomposto(s) de fórmula (I) em que
R1 incorpora uma heterociclila, heteroarila ouarila e Rl representa Cl.
<formula>formula see original document page 45</formula>
1 ácido N1N -dimetilbarbitúrico
i) Alquilação de guanina com brometo de alila
ii) Diazotação com nitrito de sódio seguido porhidrólise para formar a xantina
iii) Cloração
iv) Alquilação em N3 (Exemplos de bases adequadasincluem Na2CO3, Cs2CO3, K2CO3)
v) Alquilação em Nl (Exemplos de bases adequadasincluem Na2CO3, Cs2CO3, K2CO3)
vi) Remoção paládio-catalisada do grupo alilaem que L representa um grupo abandonador, porexemplo, halogênio.
Processo 2:
Um processo de acordo com a invenção para prepararintermediários em que Rl incorpora uma amida, carbamato ouuréia, os quais podem ser úteis para a produção de composto(s) de fórmula (I) .
<formula>formula see original document page 46</formula>
em que L representa um grupo abandonador, porexemplo, halogênio, d representa (m-1) (isto é, d juntamentecom o precedente metileno = m) , R representa-(alquileno)n-Ye Q pode estar presente ou não, e se presente representa ou 0 ou N[5,
Processo 3:
Um processo para preparar intermediários em que Rlincorpora um carbamato ou éster ^reverso', que pode ser útilpara a produção de composto(s) de fórmula (I).<formula>formula see original document page 47</formula>
em que L representa um grupo abandonador, porexemplo, halogênio, d representa (m-1), e R representa-(alk)n-Y.
Processo 4:
Um processo de acordo com a invenção para prepararintermediários em que Rl incorpora um éster ou amida, quepodem ser úteis para a produção de composto(s) de fórmula (1) ·<formula>formula see original document page 48</formula>
em que L representa um grupo abandonador, porexemplo, halogênio, d representa (m-1), e R representa -NR5R7 ou -OR5.
Processo 5:
Um processo de acordo com a invenção para prepararcomposto(s) de fórmula (I) em que
X incorpora a pirazol, imidazol ou tetrazol.
<formula>formula see original document page 48</formula>Em que L representa um grupo abandonador, porexemplo, halogênio, d representa (m-1), e R representa-(alk)n-Y.
Processo 6:
Um processo de acordo com a invenção para prepararcomposto(s) de fórmula (!) em que
<formula>formula see original document page 49</formula>
em que L representa um grupo abandonador, porexemplo, halogênio, d representa (m-1), R representa umgrupo alquila e R' representa-(alk)n-Y.
Processo 7:
Um processo de acordo com a invenção para prepararcomposto(s) de fórmula (!) em que X incorpora um oxadiazol<formula>formula see original document page 50</formula>
em que L representa um grupo abandonador, porexemplo, halogênio, d representa (m-1), R representa umgrupo alquila e R' representa-(alk)n-Y.
Processo 8:
Um processo de acordo com a invenção para prepararintermediários em que R3 is CN, que podem ser úteis para apreparação do composto(s) de fórmula (I).
Isto compreende etapas (i) e (ii) do processo 1seguido por:
<formula>formula see original document page 50</formula>
iii) Alquilação em N3iv) Alquilação em Nl
v) Formação de aldeído em C8 pela litiação comLiHMDS e rápido resfriamento com DMF
vi) Conversão do aldeido para a nitrila
vii) remoção paládio-catalisada do grupo alilaonde L representa um grupo abandonador.
Processo 9:
Um processo de acordo com a invenção para prepararcomposto(s) de fórmula (I) em que
R3 é Cl ou Br compreende as etapas (i) a (iv) doprocesso 8 seguido por:
<formula>formula see original document page 51</formula>
i) Halogenação em C8 usando NCS ou NBS
ii) Remoção paládio-catalisada do grupo alila
Processo 10:
Um processo de acordo com a invenção para prepararcomposto(s) de fórmula (!) em que
R é Cl compreende:<formula>formula see original document page 52</formula>
i) Alquilação em N3
ii) Alquilação em Nl
iii) Debenzilação
iii) Cloração em C8
em que L representa um grupo abandonadorProcesso 11:
Um processo de acordo com a invenção para prepararcomposto (s) de fórmula (I) em que R1 difere de R2 e R3 é Clcompreende as etapas (i) a (v) do processo 1 (onde R2 prove-niente do processo .1 é especificamente SEM ou MEM) seguidopor:
vi) Clivagem do grupo protetor MEM ou SEM
vii) Alquilação de N3 seguido por remoção paládio-catalisada do grupo alila
em que L representa um grupo abandonadorProcesso 12:
Um processo de acordo com a invenção para prepararcomposto (s) de fórmula (I) em que R3 é Cl, Br ou I com-preende as etapas (i) a (iv) do processo 8 seguido por:
<formula>formula see original document page 53</formula>
v) remoção paládio-catalisada do grupo alila
vi) Halogenação em C8 usando NCS, NBS ou NIS
Processo 13:
Um processo de acordo com a invenção para prepararcomposto(s) de fórmula (I) compreende:
<formula>formula see original document page 53</formula>
i) Formação de pirimidinodiona
ii) Alquilação em Nl
iii) Nitrosaçãoiv) Redução usando Na2S2O4 ou um agente redutorsimilar
v) Formação de xanntina
vi) Halogenação em C8 usando NCS
em que L representa um grupo abandonador
Processo 14:
Um processo de acordo com a invenção para prepararcomposto(s) de fórmula (1):
<formula>formula see original document page 53</formula>
em que L representa um grupo abandonador.
Como uma etapa adicional aos processos geraisdescritos acima, e em particular para uso na preparação dosExemplos abaixo, existem diversos modos de purificar oscompostos resultantes, um ou mais dos quais pode ser de usona presente invenção, por exemplo, o uso de MDAP, medianterecristalização a partir de um ou mais solventes adequadostal como acetato de etila, etanol absoluto, acetonitrila oumetanol, ou pelo uso de coluna de purificação tal comoCartuchos Silica Redisep™ e subseqüente eluição com umsolvente adequado tal como diclorometano contendo acetato deetila.
Onde desejado ou necessário, como um estágio finalem qualquer dos processos sintéticos acima, um compostoresultante de fórmula (I) pode ser convertido num derivadofarmaceuticamente aceitável, por exemplo, um compostoresultante de fórmula (I) pode ser convertido numa forma salou vice versa ou convertendo uma forma sal numa outra formasal farmaceuticamente aceitável. Esses processos serão bemconhecidos por aqueles usualmente versados na técnica.
ABREVIAÇÕES
AcOH Ácido acéticoatm Atmosferabr Amplo (RMN)CDI Carbonilimidazold Dubleto (RMN)DBAD Di-t-butilaazodicarboxilatoDCM DiclorometanoDIPEA DiisopropiletilaminaDMSO sulfóxido de dimetilaDMF N,N-DimetilformamidaEtOAc Acetato de etilaEtOH Etanolh Hora(s)IPA álcool isopropilicom Multipleto (RMN)MDAP Autoprep massa-direcionadaMeCN AcetonitrilaMeOH Metanol min Minuto(s) NCS N-Clorosuccinimida NBS N-bromosuccinimida NIS N-iodosuccinimida q Quarteto (RMN) rt temperatura ambiente RT Retention time S Singleto (RMN) SPE Cartucho de Extração fase sólida t tripleto (RMN) TFA Ácido trifluoracético THF Tetraidrofurano DMEM Meio Eagle modificado de Dulbecco HEPES nossulfônico ácido 4-(2-Hidroxietil)piperazin-l-eta- LiHMDS Hexametildisililamida de litio Δ Calor SEM 2-(trimetilsilil)etoximetila MEM 2-metoxietoximetila Boc t-butoxicarbonila THP Tetraidropirano BREVE DESCRIÇÃO DAS FIGURAS
Figura 1: dados de XRPD da substancialmentecristalina 3-butil-8-cloro-l-{4-[5-(2-piridinil)-1,2,4-oxa-diazol-3-il]butil}-3,7-diidro-ltf-purin-2,β-diona, forma I1Figura 2: dados de XRPD da substancialmente cris-talina 3-butil-8-cloro-l-{4-[5-(2-piridinil)-1,2,4-oxadia-zol-3-il]butil}-3,7-diidro-l#-purin-2,6-diona, forma 2,
Figura 3: Sobreposição de dados de XRPD da subs-tancialmente cristalina 3-butil-8-cloro-l-{A-[5-(2-piridinil)-1,2, 4-oxadiazol-3-il] butil} - 3, 7-diidro-lJí-puhne-2 , 6-diona,forma 1 e Forma 2,
Os exemplos não limitantes apresentados a seguirilustram a presente invenção:
Exemplos Sintéticos
Deverá ser notado que a consignação da estereo-química -(Z) apresentada nos compostos exemplificados abaixonão foi confirmada pelos dados experimentais. Aqueles usual-mente versados na técnica irão também reconhecer que podehaver interconversão entre os isômeros E & Z. (Dondoni,Alessandro; Lunazzi, Lodovico; Giorgianni, Patrizia;Macciantelli, Dante. Carbon-nitrogen rotational barrier as astereochemical probe de benzamidoximes. Journal de OrganicChemistry (1975), 40(20), 2979-80)
Exemplo 1:
8-cloro-1-(3-{1-[(2-cloro-6-fluorfenil)metil]-lH-pirazol-4-il}propil)-3-pentil-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona
a) 8-cloro-l-(3-{1-[(2-cloro-6-fluorfenil)metil]-lH-pirazol-4-il}propil)-3-pentil-diona8-cloro-3-pentil-7-(2-propen-1-il)-1-[3-(IH-pira-zol-4-il)propil]-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona (61 mg, 0,15mmol) em DMF anidro (2 mL) foi agitado com carbonato desódio (64 mg, 0,6 mmol) e brometo de 2-cloro-6-fluorbenzila(134 mg, 0,6 mmol) e aquecido a 45°C por 18h sob nitrogênio.Após resfriamento até a temperatura ambiente a mistura foidesgaseifiçada por evacuação e readmissão de nitrogênio, eagitada com tetraquis(trifenilfosfino)paládio(0) (35 mg,0, 303 mmol) e morfolina (0,13 mL) por 5,5h. A mistura foiparticionada entre EtOAc e 2M HCl, a fase orgânica foiseparada e evaporada e o resíduo purificado por meio de SPEaminopropila (5 g, lavagem com THF-MeOH (1:1) em seguidaMeOH puro e finalmente eluindo com DCM-MeOH (1:1) contendo5% AcOH) para produzir o composto título (57mg) como umsólido.
LC/MS: m/z 507 [MH]+, RT 3,64 min.
b) 8-cloro-3-pentil-7-(2-propen-l-il)-1-[3-(1H-pirazol-4-il) propil] -3, 7-diidro-lJÍ-purin-2 , 6-diona
<formula>formula see original document page 58</formula>
3-pentil-8-cloro-7-(2-propen-l-il)-3, 7-diidro-lH-purin-2, 6-diona (5g, 16,86 mmol) e 3- (l/í-pirazol-4-il)propan-l-ol (2,12g, 16,8 mmol) foram agitados em THFanidro (150 mL) a 3°C. Azodicarboxilato de dibenzila (10,05g, 33,7 mmol) foi acrescentado seguido por adição gota agota de trifenilfosfina (8,83 g, 33,7 mmol) em THF anidro(70 mL) . A mistura foi deixada aquecer até. a temperaturaambient e agitada por 18h. Água (1 mL) foi acrescentada eos solventes evaporados. O resíduo foi retomado em Et2O (200mL) a partir do que um sólido branco, principalmente óxidode trifenilfosfina, cristalizou e foi removido por filtra-ção. O filtrado foi concentrado e em seguida subprodutoscristalizados a partir de éter-cicloexano. O filtradorestante foi concentrado (19,2g) e purificado em um sistemaBiotage™ (400 g) eluindo com EtOAc-cicloexano (2:1) paraproduzir o composto título como um sólido branco (2,89 g).
LC/MS: m/z 405 [MH]+, RT 3,19 min.
Os compostos seguintes (Tabela 1) foram preparadosutilizando um método análogo àquele para o exemplo 1, a apartir dos correspondentes haletos de benzila.
TABELA 1
<table>table see original document page 59</column></row><table><table>table see original document page 60</column></row><table>
aapós purificação adicional por MDAP
Detalhes de RMN para exemplos selecionados a partirda tabela 1
Exemplo 2:
8-cloro-3-pentil-l-(3-{l-[(2 ,4,6-trifluorfenil)metil]-1H-pirazol-4-il}propil)-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona
1H NMR (DMSO-dg) δ: 0,85 (t, 3H, J = I Hz), 1,20-1,40 (m, 4H), 1,60-1,70 (m, 2H), 1,70-1,82 (m, 2H), 2,39 (t,2H, J = 8 Hz), 3, 83-3, 94 (m, 4H) , 5,24 (s, 2H) , 7,18-7,30(m, 3H) , 7, 57 (s, 1H) .
Exemplo 6:
8-cloro-l-(3-{1-[(2,4-difluorfenil)metil]-lff-pirazol-4-il}propil) -3-pentil-3, 7-diidro-ltf-purin-2, 6-diona8-cloro-3-pentil-7-(2-propen-l-il)-1-[3-(líf-pira-zol-4-il) propil]-3, 7-diidro-lií-purin-2, 6-diona (81 mg, 0,2mmol) e carbonato de sódio (85 mg, 0,8 mmol) foram agitadosem DMF anidro (2 mL) com brometo de 2,4-difluorbenzila (166mg, 0,8 mmol) a 45°C por 18h. A mistura foi desgaseifiçada eagitada com tetraquis(trifenilfosfino)paládio(0) (46 mg,0,04 mmol) e morfolina (176 mg, 2 mmol) na temperaturaambiente por 6h. A reação foi trabalhada e purificada pormeio de SPE aminopropila (5 g, lavagem com THF-MeOH (1:1) emseguida MeOH puro, eluindo com DCM-MeOH (1:1) com AcOH 5%acrescentado) para produzir o composto titulo (37,7mg) comoum sólido.
LC/MS: m/z 491 [MH]+, RT 3,42 min.
Os compostos seguintes (Tabela 1) foram preparadosutilizando um método análogo àquele para o exemplo 6, a apartir dos correspondentes haletos de benzila.
Tabela 2
<table>table see original document page 61</column></row><table><table>table see original document page 62</column></row><table>
Detalhes de RMN para exemplos selecionados apartir da tabela 2
Exemplo 6:
1H NMR (d6 DMSO) 0,85 (3H, t, J = 7Hz), 1,21-1,34(4H, m) , 1, 58-1, 68 (2H, m) , 1,71-1,80 (2H, m), 2,41 (2H, t,J = 8Hz), 3, 84-3, 93 (4H, m) , 5,26 (2H1 s), 7, 02-7, 09 (1H,m), 7,15-7,29 (2H, m), 7,31 (1H, s), 7,61 (1H, s).
Exemplo 7:
8-cloro-3-pentil-l-{3-[1-(fenilmetil)-i H-pirazol-4-il]propil}-3,7-diidro-lff-purin-2, 6-diona;
1H NMR (DMSO-d6) δ: 0,87 (t, 3H, J = 7 Hz), 1,20-1,36 (m, 4H), 1,60-1,70 (m, 2H), 1,72-1,85 (m, 2H), 2,42 (t,2H, J = 8 Hz), 3, 83-3, 95 (m, 4H) , 5,24 (s, 2H) , 7,13-7,38(m, 6H) , 7, 61 (s, 1H) .
Exemplo 11:
8-cloro-l-(3-{1-[(2-clorofenil)metill-lfí-pirazol-4-il)propil)-3-pentil-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona<formula>formula see original document page 63</formula>
Preparado por meio do método para 8-cloro-l-(3-{1-[(2,4-difluorfenil)metil]-lH-pirazol-4-il}propil)-3-pentil-3,7-diidro-ltf-purin-2,6-diona, do Exemplo 6 mas a partir debrometo de 2-clorobenzila (164 mg, 0,8 mmol). Todavia, a fimde completar a etapa de desproteção mais tetraquis(trifenilfosfino.) paládio (0) (40mg) e morfolina (0,15 mL)foram acrescentados e a agitação continuada por mais 5,5horas. A purificação por meio de SPE aminopropila como acimaproporcionou o composto titulo como um sólido (42mg).
LC/MS: m/z 489 [MH]+, RT 3,67 min.
a) 3-butil-8-cloro-l-{3-[1-(fenilmetil)-lH-imi-dazol-4-il]propil}-3,7-diidro-l#-purin-2,6-diona
Exemplo 12:
3-butil-8-cloro-l-(3-[1-(fenilmetil)-lH-imidazol-4-il]propil}-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona
<formula>formula see original document page 63</formula>
Uma solução de 3-butil-8-cloro-l-[4-(ltf-imidazol-4-il) butila] -7- (2-propen-l-il) -3, 7-diidro-lJÍ-purin-2 , 6-diona(300 mg, 0,77 mmol) em THF anidro (5 mL) foi tratada combrometo de benzila (144 mg, 0,84 mmol) e DIPEA (147 μΐ,, 0,84mmol) . A mistura foi deixada agitar na temperatura ambientesob nitrogênio por 4 dias. A mistura foi particionada entreEtOAc e 2M HCl (aq) . A camada orgânica foi separada, lavadacom solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secada(MgSO4) e concentrada. 0 produto bruto foi purificado pormeio de uma coluna SPE silica utilizando um gradiente 0,5-5%MeOH/DCM. As frações do produto foram combinadas econcentradas sob alto vácuo. 0 produto foi dissolvido em THF(5 mL) e em seguida Pd(PPh3)4 (88 mg, 0, 077 mmol) emorfolina (670 μL, 7,67 mmol) foram acrescentados e amistura deixada a agitar na temperatura ambiente sobnitrogênio por 3h. 88 mg de Pd(PPh3)4 (0, 077 mmol) foiacrescentado e a mistura foi deixada agitar na temperaturaambiente sob nitrogênio por 16 h. A mistura foi particionadaentre EtOAc e H2O. A camada orgânica foi separada e a camadaaquosa foi extraída com EtOAc (x2) . As camadas orgânicasforam combinadas, lavadas com solução aquosa saturada decloreto de sódio, secadas (MgSO4) e concentrada. 0 produtobruto foi purificado por meio de MDAP para produzir ocomposto título como um sólido branco (9 mg, 2%).
LC/MS: m/z 441 [MH]+, RT 2,50 min.
1H NMR (DMS0-d6) δ: 0,89 (t, 3H, J = 7,5 Hz), 1,28(m, 2H), 1,60 (m, 2H), 1,79 (m, 2H), 2,48 (sobreposição de tcom DMSO, 2H, J = 7,5 Hz), 3,89 (m, 4H), 5,17 (s, 2H), 7,08(s, 1H), 7,31 , (m, 6H), 8,03 (s, 1H).
b) 3-butil-8-cloro-1- [3- (1 JÍ-imidazol-4-il) propil]-7-(2-propen-l-il)-3,7-diidro-l tf-purin-2,6-diona<formula>formula see original document page 65</formula>
Uma solução de 3-butil-8-cloro-7-(2-propen-l-il) -3,7-diidro-lH-purin-2, 6-diona (2,8g, 9,9 mmol) em THF anidro(60 mL) foi tratada com 3-(lH-imidazol-4-il)-1-propanol (1,5g, 12 mmol) em THF anidro (10 mL) e PPh3 (3,4 g, 13 mmol).DBAD (2,9 g, 13 mmol) foi acrescentado em uma porção e amistura foi deixada agitar na temperatura ambiente, sobnitrogênio por 18h. A mistura foi particionada entre EtOAc eH2O. A camada aquosa foi extraída e lavada com EtOAc. Ascamadas orgânicas foram combinadas, lavadas com soluçãoaquosa saturada de cloreto de sódio, secadas (MgSO4) econcentrada. 0 produto bruto foi purificado por meio de umcartucho SPE de sílica usando um gradiente MeOH/EtOAc (0,5%-7% MeOH). As frações do produto foram combinadas econcentradas para produzir o composto título como um sólidobranco (2,16 g, 55%).
LC/MS: m/z 391 [MH]+, RT 2,40 min.
c) 3-butil-8-cloro-7-(2-propen-l-il)-3,7-diidro-1H-purin-2,6-dionaA uma solução de 3-butil-7-(2-propen-l-il)-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona (3,34g, 13,4 mmol) em DMF anidro(19 mL) foi acrescentado NCS (l,97g, 14,8 mmol) e deixada aagitar na temperatura ambiente sob nitrogênio por 22h. Amistura foi concentrada em vácuo para produzir um sólidoamarelo que foi filtrado e lavado com MeOH para proporcionaruma primeira coleta. 0 filtrado foi concentrado até umsólido e lavado com MeOH para proporcionar uma segundacoleta e repetido mais duas ocasioes para proporcionar ocomposto titulo. Na lavagem final o filtrado foi adicional-mente purificado por cartucho SPE (Si, 20 g) eluindo comEtOAc:cicloexano (1:1). Os sólidos combinados foram secadossob vácuo para produzir o composto titulo (2,42g, 64%).
LC/MS: m/z 283 [MH]+.
Exemplo 13:
3-butil-8-cloro-l-(3-{1-[(2,3-difluorfenil)metil]-1H-imidazol-4-il)propil)-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona
<formula>formula see original document page 66</formula>
Uma solução de 3-butil-8-cloro-l-[ 4-(1 Jí-imidazol-4-il)butil]-7-(2-propen-l-il)-3,7-diidro-lH-purin-2, 6-diona(150 mg, 0,38 mmol) em DMF anidro (3 mL) foi tratada com 1-(bromometil)-2,4-difluorbenzeno (54 yL, 0,42 mmol) e DIPEA(73 yL, 0,42 mmol). A mistura foi deixada agitar natemperatura ambiente sob nitrogênio por 3 dias. A misturafoi particionada entre EtOAc e 2M HCl (aq) . A camadaorgânica foi separada, lavada com solução aquosa saturada decloreto de sódio, secada (MgSO4) e concentrada. 0 produtobruto foi purificado numa coluna SPE de silica utilizandoDCM para carregar o material por sobre a coluna e remover asimpurezas por lavagem e em seguida um gradiente 0-5%MeOH/DCM para eluir o composto. As frações do produto foramcombinadas e concentradas e os resíduos dissolvidos em DMFanidro (3 mL) . A solução foi desgaseifiçada e em seguidaPd(PPh3)4 (39 mg, 0,034 mmol) e morfolina (200 pL, 2,3 mmol)foram acrescentados e a mistura deixada a agitar natemperatura ambiente sob nitrogênio por 3h. 0 produto brutofoi purificado por meio de uma SPE aminopropila usando MeOHMeOH para carregar o composto sobre a coluna e remover asimpurezas por lavagem em seguida um gradiente de 0-5%AcOH/MeOH para eluir o produto. As frações do produto foramcombinadas e concentradas em alto vácuo para deixar ocomposto título como um sólido branco (14 mg, 7%).
LC/MS: m/z 477 [MH]+, RT 2,54 min.
Exemplo 14:
3-Butila-8-cloro-l-[3-(l-{[2-(trifluormetil)fenil]metil}-IH-imidazol-4-il) propil] -3, 7-diidro-lfí-purin-2 , 6-diona
<formula>formula see original document page 63</formula>Uma solução de 3-butil-8-cloro-l-[4-(lH-imidazol-4-il)butila]-7-(2-propen-l-il)-3,7-diidro-l#-purin-2,6-diona(150 mg, 0,38 mmol) em DMF anidro (3 mL) foi tratada com 1-(clorometil) -2-(trifluormetil) benzeno (61 μΐ,, 0,42 mmol) eDIPEA (73 μί, 0,42 mmol). A mistura foi deixada agitar natemperatura ambiente sob nitrogênio por 3 dias. A misturafoi particionada entre EtOAc e 2M HCl (aq) . A camadaorgânica foi separada, lavada com solução aquosa saturada decloreto de sódio, secada (MgSO4) e concentrada. 0 produtobruto foi purificado numa coluna SPE de silica usando DCMpara carregar o material por sobre a coluna e remover asimpurezas por lavagem e em seguida um gradiente 0-5%MeOH/DCM para eluir o composto. As frações do produto foramcombinadas e concentradas e os resíduos dissolvidos em DMFanidro (3 mL) . A solução foi desgaseifiçada e em seguidaPd(PPh3)4 (35 mg, 0, 030 mmol) e morfolina (174 \iL, 2,0 mmol)foram acrescentados e a mistura deixada a agitar natemperatura ambiente sob nitrogênio por 3h. 0 produto brutofoi purificado por meio de uma SPE aminopropila usando MeOHMeOH para carregar o composto sobre a coluna e remover asimpurezas por lavagem em seguida um gradiente de 0-5%AcOH/MeOH para eluir o produto. As frações do produto foramcombinadas e concentradas em alto vácuo para deixar ocomposto título como um sólido branco (50 mg, 26%).
LC/MS: m/z 509 [MH]+, RT 2,64 min.
Exemplo 15:
3-butil-8-cloro-l-[3- (l-{[3- (trifluormetil)fenil]metil}-1H-imidazol-4-il) propil] -3, 7-diidro-l ff-purin-2 , 6-diona<formula>formula see original document page 69</formula>
Uma solução de 3-butil-8-cloro-l-[4-(lH-imidazol-4-il)butila]-7-(2-propen-l-il)-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona(150 mg, 0,38 mmol) em DMF anidro (3 mL) foi tratada com 1-(clorometil)-3-(trifluormetil)benzeno (65 pL, 0,42 mmol) eDIPEA (73 μΐ,, 0,42 mmol). A mistura foi deixada agitar natemperatura ambiente sob nitrogênio por 3 dias. A misturafoi particionada entre EtOAc e 2M HCl (aq) . A camadaorgânica foi separada, lavada com solução aquosa saturada decloreto de sódio, secada (MgSO4) e concentrada. 0 produtobruto foi purificado numa coluna SPE de silica utilizandoDCM para carregar o material por sobre a coluna e remover asimpurezas por lavagem e em seguida um gradiente 0-5%MeOH/DCM para eluir o composto. As frações do produto foramcombinadas e concentradas e os resíduos dissolvidos em DMFanidro (3 mL) . A solução foi desgaseifiçada e em seguidaPd(PPh3J4 (30 mg, 0, 027 mmol) e morfolina (156 \iLr 1,8 mmol)foram acrescentados e a mistura deixada a agitar natemperatura ambiente sob nitrogênio por 3h. 0 produto brutofoi purificado por meio de uma SPE aminopropila usando MeOHMeOH para carregar o composto sobre a coluna e remover asimpurezas por lavagem e em seguida um gradiente de 0-5%AcOH/MeOH apra eluir o produto. As frações do produto foramcombinadas e concentradas em alto vácuo para deixar ocomposto titulo como um sólido branco (18 mg, 9%).
LC/MS: m/z 509 [MH]+, RT 2,78 min.
Exemplo 16:
3-buti1-8-cloro-1-(3-[3-(fenilmetil)-lff-1,2,4-triazol-l-il]propil)-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona
a) 3-buti1-8-cloro-1-{3-[3-(fenilmetil)-IH-1, 2 , 4-triazol-l-il] propil} - 3, 7-diidro-l Jí-purin-2 , 6-diona
<formula>formula see original document page 70</formula>
Uma solução de 3-butil-8-cloro-l-{3-[3-(fenil-metil) -lfí-1, 2, 4-triazol-l-il] propil}-7- (2-propen-l-il) -3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona (669 mg, 1,39 mmol) em THF (7 mL)foi desgaseifiçada por aplicação de vácuo e em seguidanitrogênio foi introduzido. Pd(PPh3)4 (160 mg, 0,14 mmol)foi acrescentado e a mistura desgaseifiçada mais uma vez.Morfolina (1,2 mL, 13,9 mmol) foi acrescentado e a misturafoi agitada sob nitrogênio por 18h, em seguida particionadaentre 2M HCl (aq) e EtOAc. A camada orgânica foi separada ea camada aquosa extraída novamente com EtOAc. Os extratoscombinados foram lavados com solução aquosa saturada decloreto de sódio, secados (MgSO4) e concentrados, produzindoum resíduo amarelo. MeOH foi acrescentado e em seguidapassado numa SPE aminopropila com o produto eluindo com 2-3%AcOH/MeOH. As frações do produto foram combinadas econcentradas produzindo um sólido amarelo pálido (380mg).Aproximadamente um quarto do material foi purificado pormeio de autoprep HPLC e o restante foi cristalizado a partirde MeOHtDMSO (1:1) produzindo o composto titulo como umsólido branco (125 mg, 31%).
LC/MS: m/z 442 [MH]+, RT 3,0 min.
1H NMR (DMS0-d6) δ: 0,89 (t, 3H, J = 7Hz), 1,30 (m,2H) , 1,62 (m, 2H), 2,07 (m, 2H), 3,90 (m, 6H), 4,13 (t, 2H,J= 7Hz), 7,24 (m, 5H), 8,36 (1H, s), 14,5 (br s, 1H).
b) 3-butil-8-cloro-l-{3-[3-(fenilmetil)-1H-1, 2, 4-triazol-l-il]propil}-7-(2-propen-l-il)-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona
<formula>formula see original document page 71</formula>
Uma solução de 3-(fenilmetil)-1H-1,2,4-triazol(2,lg, 13,2 mmol) em MeOH (40 mL) foi tratada com 0,5M NaOMeem MeOH (29 mL) seguido por 1,3-dibromopropano (1,7 mL).
Após agitação por 5h a 50°C a mistura foi particionada entre2M HCl (aq) e EtOAc. A camada orgânica foi separada, lavadacom solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secada(MgSO4) e concentrada, produzindo um resíduo oleoso. A estefoi acrescentado butil-8-cloro-7-(2-propen-l-il)-3,7-diidro-lH-purin-2, 6-diona (917 mg, 3,2 mmol) e Cs2CO3 (l,2g, 3,6mmol). DMF (15 mL) foi acrescentado e a mistura foi agitadaa 500C por 20 h e em seguida particionada entre 2M HCl (aq)e EtOAc. A camada orgânica foi separada, lavada com soluçãoaquosa saturada de cloreto de sódio, secada (MgSO4) econcentrada. 0 óleo resultante (l,52g) foi passado numacoluna silica SPE (50 g) eluindo com misturas EtOAc/cicloexano. Dois produtos isomericos do triazol foramobtidos como uma mistura 2:1, em favor do composto titulo,como uma pasta amarela (697 mg, 67% com base na relação deisômeros presentes) .
LC/MS: m/z 482 [MH]+, RT 3,3 min.
Exemplo 17:
8-cloro-3-pentil-l-{3-[5-(fenilmetil)-2H-tetrazol-2-il] propil} - 3, 7-diidro-1H-purin-2 , 6-diona
<formula>formula see original document page 72</formula>
Uma solução de 5-benzil-lH-tetrazol (1,0 g, 6,24mmol) em MeOH (5 mL) foi tratada com l-cloro-3-iodopropano(1,0 mL, 9,3 6 mmol) e uma solução de 0,5M NaOMe em MeOH (4,7mL, 9,36 mmol). A reação foi aquecida ao refluxo por 18h emseguida particionada entre 2M HCl (aq) e EtOAc. A camadaorgânica foi separada e a camada aquosa extraída mais umavez com EtOAc. Os extratos combinados foram lavados comsolução aquosa saturada de cloreto de sódio, secados (MgSO4)e concentrados, produzindo um sólido amarelo. (796 mg). 700mg desse material foi reagido com 8-cloro-3-pentil-7-(2-propen-l-il)-3,7-diidro-ltf-purin-2,6-diona (732 mg, 2,47mmol) e Cs2CO3 (967 mg, 3,0 mmol) em DMF (20 mL) a 75°C por24h. A reação foi deixada esfriar até a temperatura ambientee a mistura foi desgaseifiçada por aplicação de vácuo e emseguida nitrogênio foi introduzido. Pd(PPh3)4 (428 mg, 0,37mmol) foi acrescentado e a mistura desgaseifiçada mais umavez. Morfolina (2,1 mL, 24,7 mmol) foi acrescentado e amistura foi agitada sob nitrogênio por 3h, em seguidaparticionada entre 2M HCl (aq) e EtOAc. A camada orgânicafoi separada e a camada aquosa extraída mais uma vez. Osextratos combinados foram concentrados, produzindo umresíduo amarelo. MeOH foi acrescentado e em seguida passadanuma SPE aminopropila, o produto eluindo com 2-3% AcOH/MeOH.
As frações do produto foram combinadas e concentradas emseguida purificadas por MDAP para produzir o composto títulocomo um sólido branco (35 mg, 3%).
LC/MS: m/z 457 [MH]+, RT 3,5 min.
1H NMR; (DMS0-d6) δ: 0,85 (t, 3H, J = 7Hz), 1,21-1, 34 (m, 4H) , 1,62 (m, 2H) , 2,22 (m, 2H) , 3,88 (t, 2H, J =7Hz) , 3,97 (t, 2H, J = 7Hz), 4,17 (s, 2H), 4,67 (t, 2H, J =7Hz), 7,20-7,32 (m, 5H), 14,5 (br s, 1H).
Exemplo 18:
3-butil-8-cloro-l-{3-[5-(fenilmetil)-2H-tetrazol-2-il]propil}-3,7-diidro-lfí-purin-2,6-dionaUma solução de 5-benzil-lH-tetrazol (l,8g, 11,2irnnol) em MeOH (30 mL) foi tratada com 1,3-dibromopropano(5,7 mL, 56,2 mmol) e 0,5M NaOMe em MeOH (31,5 mL) emseguida agitada a 40°C sob nitrogênio por 60 h. A misturafoi particionada entre 2M HCl (aq) e EtOAc. A camadaorgânica foi separada, lavada com solução aquosa saturada decloreto de sódio, secada (MgSO4) e concentrada. Purificaçãoparcial por SPE (20 g silica, misturas cicloexano/EtOAc) epelo sistema Companion™ (silica SPE, misturas cicloexano/EtOAc) produziram um óleo (1,98 g, 62% de uma mistura deisômeros, 2:1 em favor de 2-(3-bromopropil)-5-(fenilmetil)-2H-tetrazol) que foi tomado em bruto na próxima etapa. Amistura de 3-butil-8-cloro-7-(2-propen-l-il) -3, 7-diidro-lJí-purin-2,6-diona (1,74 g, 6,1 mmol), 2-(3-bromopropil)-5-(fenilmetil)-2H-tetrazol bruto (1,9 g, 6,8 mmol), Cs2CO3(2,2g, 6,8 mmol) e DMF (60 mL) foi agitado a 4°C sobnitrogênio por 24h. A mistura foi desgaseifiçada poraplicação de vácuo e em seguida nitrogênio foi introduzido.Pd(PPh3)4 (705 mg, 0,61 mmol) foi acrescentado e a misturadesgaseif içada mais uma vez. Morfolina (5,4 mL, 61,4 mmol)foi acrescentado e a mistura foi agitada sob nitrogênio por4h, e em seguida particionada entre 2M HCl (aq) e EtOAc. Acamada orgânica foi separada, lavada com solução aquosasaturada de cloreto de sódio, secada (MgSO4) e concentrada,produzindo um resíduo amarelo. MeOH foi acrescentado e emseguida passada numa coluna aminopropila com o produtoeluindo com 2% AcOH/MeOH. O produto foi adicionalmentepurificado pelo sistema Companion™ utilizando misturasEtOAc/cicloexano. O sólido resultante foi agitado com Et2Ofervente e filtrado após resfriamento até a temperaturaambiente. 0 composto título foi coletado como um sólidobranco (1,01 g, 37%) e secada a 50°C sob vácuo.
LC/MS: m/z 443 [MH]+, RT 3,3 min.
1H NMR (DMS0-d6) δ: 0,89 (t, 3H, J = 7Hz), 1,29 (m,2H) , 1,61 (m, 2H), 2,22 (m, 2H), 3,89 (t, 2H, J = 7Hz), 3,97(t, 2H, J = 7Hz), 4,17 (s, 2H), 4,67 (t, 2H, J = 7Hz), 7,20-7,32 (m, 5H), 14,5 (br s, 1H).
Exemplo 19:
8-cloro-1-(3-{5-[(4-fluorfenil)metil]-2H-tetrazol-2-il}propil)-3-(4,4,4-trifluorbutila)-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona
a) 8-cloro-1-(3-{5-[(4-flúorfenil)metil]-2H-te-trazol-2-il}propil)-3-(4,4,4-trifluorbutila)-3, 7-diidro-lfí-purin-2,6-diona
<formula>formula see original document page 75</formula>
5-[(4-Fluorfenil)metil]-lH-tetrazol (75 mg, 0,4mmol) foi tratada com carbonato de potássio (100 mg, 0,7mmol) e DMF (3 mL). A mistura foi tratada com uma solução demetano-sulfonato de 3-[8-cloro-2,6-dioxo-7-(2-propen-l-il)-3-(4,4,4-trifluorbutila)-2,3,6, 7-tetraidro-lH-purin-l-il]pro-pila (100 mg, 0,2 mmol) em DMF (0,5 mL) . A mistura foiagitada e aquecido a 60°C 3 horas em seguida resfriada eevaporada. 0 resíduo foi particionado entre clorofórmio (4mL) e água (2cm3). Icm3 de solução aquosa saturada debicarbonato de sódio (3 mL) foi acrescentado a cada um. Amistura foi separada e a fase orgânica evaporada. 0 resíduofoi dissolvido em THF anidro (3 mL) e a mistura desgasei-ficada pela aplicação cuidasosa sucessiva de vácuo e pressãode nitrogênio à mistura. A mistura foi tratada comtetraquis(trifenilfosfino)paládio(0) (10 mg, 0,008 mmol) emorfolina (0,2 mL, 2,3 mmol) e em seguida agitado numaatmosfera de nitrogênio por 2h. A mistura foi evaporada eparticionada entre clorofórmio (4 mL) e solução aquosasaturada de cloreto de amônio (3 mL). A mistura foiseparada, e a fase aquosa re-extraída com clorofórmio. Afase orgânica foi evaporada e o resíduo dissolvido em MeOH(3 mL). A solução foi acrescentado ao topo de uma SPEaminopropila 2 g e lavada com MeOH (15 mL) . O produtodesejado foi eluído do cartucho com uma solução 3% v/v deAcOH em MeOH (20 mL). Frações contendo o produto foramcombinadas e evaporadass e o resíduo submetido á purificaçãoatravés de cromatografia em coluna flash (gradiente deeluição de 10:1 cicloexano/EtOAc to EtOAc). Frações contendoproduto foram combinadas e evaporadass para produzir oproduto como um óleo incolor. A trituração em quantidademínima de éter dietílico induziu o produto a solidificar eeste foi completamente secado para produzir o compostotítulo como um sólido branco (18,7 mg, 18%).
LC/MS: m/z 515 [MH]+, RT 3,31 min.1H NMR (CDCl3) δ: 2,06 (m, 2H) , 2,21 (m, 2H) , 2,45(m, 2H), 4,17 (m, 4H), 4,24 (t, 2H, J = 7,0Hz), 4,70 (t, 2H,J = 7,2Hz), 6,96 (m, 2H), 7,25 (m, 2H).
b) Metano-sulfonato de 3-[ 8-cloro-2,6-dioxo-7-(2-propen-l-il)-3-(4,4,4-trifluorbutil)-2,3,6,7-tetraidro-ltf-purin-l-il]propila
<formula>formula see original document page 77</formula>
Uma solução de 8-cloro-l-(3-hidroxipropil)-7-(2-propen-l-il) - 3- (4, 4, 4-trif luorbutil) -3,7-diidro-lJí-purin-2, 6-diona (0,82g, 2,1 mmol) em DCM (20 mL) foi tratada comtrietilamina (0,42 mL, 3,1 mmol) e anidrido metano-sulfônico (0,40 g, 2,3 mmol) . Após Ih a mistura foi tratadasolução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (20 mL) . Amistura foi separada e a fase orgânica secada (MgSO4),filtrada e evaporada para produzir o composto título (0,91g) , o qual foi usado sem purificação adicional.
LC/MS: m/z 473 [MH]+, RT 3,17 min.
c) 8-cloro-l-(3-hidroxipropil)-7-(2-propen-l-il)-3-(4,4,4-trifluorbutil)-3,7-diidro-ltf-purin-2,6-diona<formula>formula see original document page 78</formula>
Uma solução de 8-cloro-7-(2-propen-l-il)-3-(4 , 4 , 4-trifluorbutila)-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona (l,0g, 3,0mmol) em DMF (15 mL) foi tratada com carbonato de césio(1,16 g, 3,6 mmol) e 3-bromo-l-propanol (0,3 mL, 3,3 mmol).
A mistura foi aquecida a 60°C por 4h e em seguida resfriadae evaporada. O resíduo foi particionado entre EtOAc (50 mL)e água (50 mL). A fase orgânica foi secada (MgSO4), filtradae evaporada. 0 produto foi purificado por meio decromatografia em coluna flash usando um gradiente de eluiçãode cicloexano to EtOAc. Frações contendo produto foramcombinadas e evaporadas para produzir o composto título comoum óleo incolor (0,82g, 75%).
LC/MS: m/z 395 [MH]+, RT 2,90 min.
d) 8-cloro-7-(2-propen-l-il)-3-(4,4,4-trifluor-butila) -33;7-diidro-líí-purin-2, 6-diona
<formula>formula see original document page 78</formula>Uma solução de 8-cloro-7-(2-propen-l-il)-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona (2,0 g, 8,8 mmol) em DMF (20 mL)foi tratada com carbonato de sódio (l,15g, 10,8 mmol) e 4-bromo-1,1,1-trifluorbutano (1,86 g, 9,7 mmol). A mistura foiagitada a 50°C por 18h em seguida resfriada e evaporada. 0resíduo foi particionado entre EtOAc (100 mL) e soluçãoaquosa saturada de bicarbonato de sódio (50 mL) . A faseorgânica foi secada (MgSO4), filtrada e evaporada. 0 resíduofoi triturado numa mistura de éter dietílico e cicloexano eem seguida o produto removido por filtração e secado paraproduzir o composto título como um sólido branco (1,18 g, 40%).
LC/MS: m/z 337 [MH]+, RT 2,83 min.
e) 5-[(4-Fluorfenil)metil]-lH-tetrazol
<formula>formula see original document page 79</formula>
A mistura de cloreto de trietilamônio (4,14g, 30mmol) e sodium azide (1,95 g, 30 mmol) foi tratada com umasolução de (4-fluorfenil)acetonitrila (1,35 g, 10 mmol) emtolueno (14 mL) e a mistura foi agitada e aquecida a IOO0Cpor 5h. A mistura resfriada foi tratada com água (10 mL) e amistura separada. A fase aquosa foi agitada e tratada gota agota com ácido clorídrico concentrado até o produtoprecipitar da solução. 0 produto precipitado foi removidopor filtração, lavado com água e secado para produzir ocomposto título como um sólido branco (l,27g, 72%).LC/MS: m/z 179 [MH]+, RT 2,24 min.
Os compostos na Tabela 3 foram preparados utili-zando um método análogo àquele para o exemplo 19: 8-cloro-l-(3-{5-[(4-fluorfenil)metil]-2H-tetrazol-2-il}propil)-3-(4,4,4-trifluorbutila)-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona, com o apro-priado metano-sulfonato e tetrazol. MDAP foi empregado parapurificar ainda mais aqueles compostos insuficientementepuros em seguida da cromatografia de fase normal.
Intermediários metano-sulfonatos e seus precurso-res álcoois foram preparados de acordo com os procedimentosseguintes:
Metano-sulfonato de 3-[8-cloro-2,6-dioxo-7-(2-pro-pen-l-il) -3-propil-2 ,3,6, 7-tetraidro-lfl-purin-l-il ] propila
<formula>formula see original document page 80</formula>
Uma solução de 8-cloro-l-(3-hidroxipropil)-7-(2-propen-l-il)-3-propil-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona (1,99 g,6,1 mmol) em DCM (50 mL) foi tratada com trietilamina (1,2mL, 8,6 mmol) e anidrido metano-sulfônico (l,2g, 6,9 mmol).
Após l,5h a mistura foi tratada com água (50 mL). A misturafoi separada e a fase aquosa extraída com DCM (25 mL) , asfases orgânicas combinadas foram secadas (MgSO4) , filtradase evaporadas para produzir o composto título como um óleoamarelo pálido (2,38g), que foi usado sem purificaçãoadicional.LC/MS: m/z 405 [MH]+, RT 2,93 min.Metano-sulfonato de 3-[3-butil-8-cloro-2,6-dioxo-7-(2-propen-l-il)-2,3,6,7-tetraidro-lfí-purin-l-il]propila
<formula>formula see original document page 81</formula>
Preparado de acordo com o método usado parametano-sulfonato de 3-[8-cloro-2,6-dioxo-7-(2-propen-l-il)-3-propil-2,3,6,7-tetraidro-lfl-purin-l-il]propila para produ-zir o composto titulo como um óleo amarelo pálido (2,44g).
LC/MS: m/z 419 [MH]+, RT 3,14 min.
8-cloro-l-(3-hidroxipropil)-7- (2-propen-l-il)-3-propil-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona
<formula>formula see original document page 81</formula>
Uma solução de 8-cloro-7-(2-propen-l-il)-3-propil-3,7-diidro-l#-purin-2,6-diona (3,0 g, 11,1 mmol) em DMF (20mL) foi tratada com carbonato de césio (3,7 g, 11,4 mmol) e3-bromo-l-propanol (1,6 g, 11,5 mmol). A mistura foiaquecida a 60°C por 4h e em seguida resfriada e evaporada. Oresíduo foi particionado entre EtOAc (60 mL) e soluçãoaquosa saturada de bicarbonato de sódio (50 mL) . E a faseaquosa foi extraída com EtOAc (60 mL) , as fases orgânicascombinadas foram secadas (MgSO4), filtradas e evaporadas. 0produto foi purificado usando o sistema Companion™ e umgradiente de eluição de cicloexano para EtOAc. Fraçõescontendo o produto foram combinadas e evaporadass paraproduzir o composto titulo como um óleo incolor (2,6 g).
LC/MS: m/z 327 [MH]+, RT 2,62 min.
3-butil-8-cloro-l-(3-hidroxipropil)-7-(2-propen-l-il)-3, 7-diidro-lH-purin-2,6-diona
<formula>formula see original document page 82</formula>
Preparado de acordo com o método usado para 8-cloro-1-(3-hidroxipropil)-7- (2-propen-l-il)-3-propil-3,7-di-idro-li7-purin-2, 6-diona para produzir o composto titulo comoum óleo incolor (2,3g).
LC/MS: m/z 341 [MH]+, RT 2,85 min.
Tabela 3
<table>table see original document page 82</column></row><table><table>table see original document page 83</column></row><table><table>table see original document page 84</column></row><table><table>table see original document page 85</column></row><table><table>table see original document page 86</column></row><table><table>table see original document page 87</column></row><table><table>table see original document page 88</column></row><table><table>table see original document page 89</column></row><table>
Detalhes de RMN para os exemplos selecionadso da
Tabela 3:
Exemplo 20:
8-cloro-l-(3-{5-[(4-fluorfenil)metil]-2H-tetrazol-2-il}propil)-3-propil-3,7-diidro-lfí-purin-2,6-diona
1H NMR (CDCl3) δ: 0,99 (t, 3H, J = 7,5 Hz), 1,802H) , 2,46 (m, 2H), 4,06 (m, 2H), 4,18 (S, 2H) , 4,25 (t,J = 7Hz), 4,70 (t, 2H, J = 7,5Hz), 6,96 (m, 2H), 7,262H), 13,15 (br s, 1H).
Exemplo 23:
8-cloro-3-(4,4,4-trifluorbutila)-1-(3-{5-[(2,4,6-trifluorfenil)metil]-2H-tetrazol-2-il}propil)-3,7-diidro-lff-purin-2,6-diona:
1H NMR (CDCl3) δ: 2,07 (m, 2H) , 2,21 (m, 2H) , 2,44(m, 2H) , 4,18 (t, 2H, J = 7,1Hz), 4,20 (s, 2H) , 4,24, (t,2H, J = 6,8Hz), 4,68 (t, 2H, J = 7,3Hz), 6,67 (t, 2H, J =8,IHz), 13,04 (br s, 1H).
Exemplo 24:
1H NMR (CDCl3): 2,03-2,10 (m, 2H) , 2,16-2,28 (m,2H) , 2, 43-2, 50 (m, 2H) , 4,16-4,19 (m, 2H) , 4,17 (s, 2H) ,4,24 (t, 2H, J=7,IHz) , 4,71(t, 2H, J=7,lHz), 7,00-7,13 (m,3H), 13,06 (bs, 1H).Exemplo 27:
1H NMR (CDCl3): 0,99 (t, 3H, J=7,5Hz), 1,76-1,86(m, 2H), 2,40-2,47 (m, 2H), 4,05-4,09 (m, 2H), 4,23-4,26 (m,2H) , 4,54 (s, 2H) , 4, 65-4, 69 (m, 2H) , 7,14-7,18 (m, 1H) ,7, 31-7, 33, (m, 2H) , 13,18 (bs, 1H) .
Exemplo 28:
1H NMR (CDCl3): 0,97 (t, 3H, J=7,5Hz), 1,36-1,46(m, 2H), 1,71-1,79 (m, 2H), 2,42-2,49 (m, 2H), 4,08-4,11 (m,2H) , 4,25 (s, 2H) , 4, 24-4, 27 (m, 2H) , 4,68-4,71 (m, 2H) ,7,02-7,09 (m, 2H), 7,20-7,26, (m, 2H), 13,14 (bs, 1H).
Exemplo 29:
1H NMR (CDCl3): 0,97 (t, 3H, J=7,5Hz), 1,36-1,45(m, 2H), 1,71-1,79 (m, 2H), 2,42-2,49 (m, 2H), 4,09 (t, 2H,J=7,5Hz), 4,26 (t, 2H, J=7,5Hz), 4,34 (s, 2H) , 4,70 (t, 2H,J=7,3Hz), 7,18-7,21 (m, 2H) , 7,25-7,27, (m, 1H), 7, 35-7, 37,(m, 1H) , 13, 34 (bs, 1H).
Exemplo 30:
3-buti1-8-cloro-1-(3-{5-[(3-fluorfenil)metil]-2H-tetrazol-2-il} propil) - 3, 7-diidro-l Jf-purin-2 , 6-diona
1H NMR (CDCl3) δ: 0,97 (t, 3H, J = 7Hz), 1,40 (m,2H) , 1,75 (m, 2H) , 2,46 (m, 2H) , 4,10 (t, 2H, J = 7,5Hz),4,21 (s, 2H) , 4,26 (t, 2H , J = 6,5Hz), 4,70 (t, 2H, J =7, 5Hz) , 6,90 (m, 1H) , 6,99 (m, 1H) , 7,07 (m, 1H) , 7,25 (m,1H) , 13,25 (br s, 1H) .
Exemplo 31:
1H NMR (CDCl3): 0,99 (t, 3H, J=7,5Hz), 1,38-1,48(m, 2H), 1,73-1,81 (m, 2H), 2,44-2,51 (m, 2H), 4,12 (t, 2H,J=7,5Hz), 4,20 (s, 2H), 4,27 (t, 2H, J=7,5Hz), 4,70 (t, 2H,J=7,3Hz), 6,95-7,00 (m, 2Η) , 7,26-7,30, (m, 2Η), 13,35 (bs, 1Η).
Exemplo 32:
3-butil-8-cloro-l-(3-{5-[(4-fluorfenil)metil]-2H-tetrazol-2-il}propil)-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona
1H NMR (CDCl3) δ: 0,99 (t, 3H, J = 7Hz), 1,43 (m,2H) , 1,77 (m, 2H) , 2,48 (m, 2H) , 4,12 (t, 2H, J = 7,5Hz),4,20 (s, 2H) , 4,27 (t, 2H, J = 7Hz), 4,72 (t, 2H, J =7,5Hz), 6,98 (m, 2H), 7,27 (m, 2H), 13,35 (br s, 1H).
Exemplo 33:
3-butil-8-cloro-l-(3—{5—[(4-clorofenil)metil]-2H-tetrazol-2-il}propil)-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona
1H NMR (CDCl3) δ: 1,02 (t, 3H, J = 7,5Hz), 1,45 (m,2H) , 1,79 (m, 2H) , 2,50 (m, 2H) , 4,14 (t, 2H, J = 7,5Hz),4, 22 (s, 2H) , 4,29 (t, 2H , J = 7Hz), -4,75 (t, 2H, J =7,5Hz), 7,27 (s, 4H), 13,35 (br s, 1H).
Exemplo 48:
8-cloro-l-(3-{5-[(2,4-difluorfenil)metil]-2H-tetrazol-2-il}propil)-3-propil-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona
1H NMR (CDCl3) δ: 0,99 (t, 3H, J = 7,5 Hz), 1,80(m, 2H), 2,45 (m, 2H), 4,06 (m, 2H), 4,20 (SI 2H) , 4,25 (t,2H, J = 7Hz) , 4,70 (t, 2H, J = 7,5Hz), 6,80 (m, 2H) , 7,23(m, 1H).
Exemplo 51:
8-cloro-3-propil-l-(3-{5-[(2,4,6-trifluorfenil)metil]-2H-tetrazol-2-il}propil)-3,7-diidro-l#-purin-2, 6-diona
1H NMR (CDCl3) δ: 0,99 (t, 3H, J = 7,3 Hz), 1,80(m, 2H), 1,98 (m, 2H), 2,01 (m, 2H), 4,20 (s, 2H) , 4,25 (t,2Η, J = 6,5Hz), 4,67 (t, 2H, J = 7,3Hz), 6,68 (t, 2H, J =8,IHz).
Exemplo 52:
1H NMR (CDCl3): 0,99 (t, 3H, J=7,3Hz), 1,76-1,85(m, 2H), 2, 39-2, 46 (m, 2H) , 4, 05-4, 08 (m, 2H), 4,24 (t, 2H,J=I, IHz) , 4,39 (s, 2H) , 4,64 (t, 2H, J=7,lHz), 7,29- 7,32(m, 1H), 7,38-7,44, (m, 1H), 7,49-7,51 , (m, 1H), 13,17 (bs, 1H).
Exemplo 59:
1H NMR (CDCl3): 0,99 (t, 3H, J=7,6Hz), 1,36-1,45(m, 2H), 1,71-1,79 (m, 2H), 2,42-2,49 (m, 2H), 4,09 (t, 2H,J=7,5Hz), 4,17 (s, 2H), 4,24 (t, 2H, J=7,5Hz), 4,71 (t, 2H,J=7,3Hz), 7,00-7,14 (m, 3H), 13,07 (bs, 1H).
Exemplo: 61:
1H NMR (CDCl3): 0,96 (t, 3H, J=7,2Hz), 1,32-1,47(m, 2H), 1,68-1,80 (m, 2H), 2,40-2,51 (m, 2H), 4,06-4,12 (m,2H) , 4,22 (s, 2H) , 4, 22-4,27 (m, 2H) , 4, 67-4, 73 (m, 2H) ,6,84-7,04 (m, 3H), 13,05 (bs, 1H).
Exemplo 64:
3-butil-8-cloro-l-(3-{5-[(2,4,6-trifluorfenil)metil]-2H-tetrazol-2-il}propil)-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona
1H NMR (CDCl3) δ: 0,97 (t, 3H, J = 7,3Hz), 1,41 (m,2H) , 1,75 (m, 2H) , 2,44 (m, 2H) , 4,10 (t, 2H, J = 7,5Hz),4,20 (s, 2H) , 4,25 (t, 2H , J = 6,5Hz), 4,67 (t, 2H, J =7, 4Hz), 6,67 (t, 2H, J = 8,0Hz), 13,25 (br s, 1H).
Exemplo 68:
8-cloro-3-pentil-l-{3-[3-(fenilmetil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]propil}-3,7-diidro-lH-purin-2,6-dionaa) 8-cloro-3-pentil-l-{3-[3-(fenilmetil)-1,2,4-oxadiazol-5-il] propil }-3, 7-diidro-lfí-purin-2, 6-diona
Uma solução de 3-[3-(fenilmetil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]-1-propanol (88 mg, 0,4 mmol) em THF (4 mL) foi tratadacom 8-cloro-3-pentil-7-(2-propen-l-il)-3,7-diidro-lfl-purin-2,6-diona (100 mg, 0,34 mmol) e PPh3 (115 mg, 0,44 mmol) sobnitrogênio. DBAD (101 mg, 0,44 mmol) foi acrescentado numporção e a reação deixada a reagir por 5h. A mistura foidesgaseifiçada por aplicação de vácuo e em seguidanitrogênio foi introduzido. Pd(PPh3)4 (39 mg, 0,034 mmol)foi acrescentado e a mistura desgaseifiçada mais uma vez.
Morfolina (294 μΐ, 3,4 mmol) foi acrescentado e a misturafoi agitada sob nitrogênio por 3h. A mistura foi particio-nada entre 2M HCl (aq) e EtOAc. A camada orgânica foiseparada, lavada com solução aquosa saturada de cloreto desódio, secada (MgSO4) e concentrada. 0 composto titulo foiobtido como um sólido branco após purificação por MDAP (64mg, 42%).
LC/MS: m/z 457 [MH]+, RT 3,4 min.
1H NMR (DMS0-d6) δ: 0,85 (t, 3H, J = 7Hz), 1,22-1,34 (m, 4H) , 1,62 (m, 2H) , 2,02 (m, 2H) , 2,91 (t, 2H, J =7Hz), 3,88 (t, 2H, J = 7Hz), 3,95-4,00 (m, 4H), 7,22-7,33(m, 5H), 14,5 (br s, 1H).
b) 3-[3-(Fenilmetil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]-1-pro-panol
<formula>formula see original document page 94</formula>
A mistura de γ-butirolactona (223 μί, 2,9 mmol),benzamidina oxima (480 mg, 3,2 mmol), 21% solução de NaOEtem EtOH (1,3 mL) e EtOH (3 mL) foi aquecida em microondas a140°C por 10 min. A mistura foi particionada entre 2M HCl(aq) e EtOAc. A camada orgânica foi separada, lavada comsolução aquosa saturada de cloreto de sódio, secada (MgSO4)e concentrada. 0 produto titulo foi purificado sobre silicausando o sistema Companion™ para produzir um óleo amarelopálido (143 mg, 23%).
LC/MS: m/z 219 [MH]+, RT 2,4 min.
Exemplo 69:
8-cloro-1-(3-{3-[(4-clorofenil)metil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}propil)-3-pentil-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona
a) 8-cloro-1-(3-{3-[(4-clorofenil)metil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}propil)-3-pentil-3,7-diidro-lH-purin-2 , 6-diona
<formula>formula see original document page 94</formula>Uma solução de 8-cloro-l-(3-{3-[ (4-clorofenil)metil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}propil)-3-pentil-7-(2-propen-l-il) -3,7-diidro-li7-purin-2, 6-diona (0,18g, 0,34 mmol) em DMF(5 mL) foi desgaseifiçada por evacuação seqüencial do frascoe admissao de nitrogênio (x3) e morfolina (0,5 mL, 5,8mmol), e Pd(PPh3)4 (80 mg, 0,068 mmol) foi acrescentado. Asolução foi agitada por 72h em seguida concentrada e osresíduos carregados numa SPE aminopropila (10 g) com MeOH. Aeluição com MeOH seguido por 5% AcOH/MeOH proporcionou ocomposto título como um sólido amarelo pálido, que foilavado com éter para produzir um sólido branco (0,053g, 32%).
LC/MS: m/z 491 [MH]+, RT 3,69min
b) 8-cloro-l- ( 3-{3-[(4-clorofenil)metil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}propil)-3-pentil-7-(2-propen-l-il)-3,7-diidro-lfí-purin-2, 6-diona
<formula>formula see original document page 95</formula>
i) Uma mistura de γ-butirolactona (8 mL, 104mmol), 4-clorobenzamidina oxima (3,0 g, 16,25 mmol), 30%solução 30% de NaOMe em MeOH (5 mL) e MeOH (80 mL) foimantida em refluxo por 30 horas, resfriada e concentrada. Osresíduos foram purificados por cromatografia em coluna flashsobre sílica eluindo com DCM/EtOH/O,88 aq amônia (200:8:1)para proporcionar um óleo amarelo (13g) . Esse material foidissolvido em DCM (150 mL) e lavado com hidróxido de sódio2M (100 mL) e os orgânicos separados, secados e concentradospara produzir 3-{3-[(4-clorofenil)metil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}-1-propanol como um óleo viscoso (3,95 g, 96%) que foiusado na etapa seguinte.
ii) A uma solução de 8-cloro-3-pentil-7-(2-propen-1-il)-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona (0,10g, 0,34 mmol), 3-{3-[(4-clorofenil)metil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}-l-propanol(0,086 g, 0,34 mmol) e trifenilfosfina (0,186 g, 0,69 mmol)em THF (5 mL) foi acrescentado dibenzilazodi-carboxilato(0, 204 g, 0,68 mmol) e a solução agitada por 18h. A soluçãofoi em seguida concentrada e os resíduos submetidos àcromatografia sobre sílica (20 g, SPE) eluindo com DCMinicialmente e em seguida com misturas DCM/Et20 para produziro composto título contaminado com subprodutos dibenzilazodi-carboxilato (0,18 g). 0 material foi usado em bruto na etapade desproteção.
LC/MS: m/z 531 [MH]+, RT 3,83 min.
Exemplo 70:
8-cloro-l-{3-[3-(fenilmetil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]propil)-3-propil-3,7-diidro-lfí-purin-2,6-diona
a) 8-cloro-l-{3-[3-(fenilmetil)-1,2,4-oxadiazol-5-il ] propil} -3-propil-3, 7-diidro-líf-purin-2 , 6-diona<formula>formula see original document page 97</formula>
Uma solução de 8-cloro-7-(2-propen-l-il)-3-propil-3,7-diidro-l Jí-purin-2, 6-diona (200 mg, 0,74 mmol) em THF (4mL) foi tratada com 3-[3-(fenilmetil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]-1-propanol (195 mg, 0,89 mmol) e PPh3 (254 mg, 0,96 mmol).
DBAD (223 mg, 0,96 mmol) foi acrescentado em uma porção e amistura foi deixada agitar na temperatura ambiente sobnitrogênio por 18h. A mistura foi particionada entre EtOAc e2M HCl (aq). A camada orgânica foi separada, lavada comsolução aquosa saturada de cloreto de sódio, secada (MgSO4)e concentrada. 0 produto bruto foi purificado por meio deuma coluna SPE silica usando um gradiente de 0-70%cicloexano/EtOAc. As frações do produto foram combinadas,concentradas e em seguida purificada por meio de uma colunaSPE silica usando um gradiente de 0-60% cicloexano/EtOAc. Asfrações do produto foram combinadas e concentradas e emseguida dissolvidas em THF anidro (4 mL) . A solução foidesgaseifiçada em alto vácuo e em seguida Pd(PPh3)4 (86 mg,0, 074 mmol) e morfolina (644 yL, 7,4 mmol) foramacrescentados e a mistura deixada a agitar na temperaturaambiente sob nitrogênio por 1 dia. A mistura foi particio-nada entre EtOAc e HCl (aq). A camada orgânica foi separada,lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio,secada (MgSO4) e concentrada em alto vácuo. O produto brutofoi purificado por meio de uma SPE aminopropila usando MeOHMeOH para carregar o composto sobre a coluna e remover asimpurezas por lavagem em seguida um gradiente de 2-4%AcOH/MeOH para eluir o produto. As frações do produto foramcombinadas e concentradas em alto vácuo para deixar ocomposto titulo como um sólido branco (74 mg, 23%).LC/MS: m/z 429 [MH]+, RT 3,14 min.
1H NMR; (DMS0-d6) Ô: 0,87 (t, 3H, J = 7,5 Hz), 1,65(m, 2H), 2,02 (m, 2H), 2,91 (t, 2H, J = 7,5Hz), 3,86 (t, 2H,J = 7Hz) , 3,97 (s, sobreposição de t, 4H) , 7,27 (m, 5H)14,46 (s, 1H).
Uma mistura de 8-cloro-7-(2-propen-l-il)-3,7-diidro-lfl-purin-2,6-diona (1,5 g, 6,6 mmol), 1-iodopropano(1,2 g, 6,9 mmol) e carbonato de sódio (0,9 g, 8,5 mmol) emDMF (40 mL) foi aquecida a 50°C por 18h. A mistura reacionalfoi concentrada em vácuo e o residuo tratado com água (60mL) e extraída com EtOAc (3x 80 mL) . Os extratos orgânicoscombinados f oram secados (MgS0,j) filtrados e evaporados. 0resíduo foi triturado com éter/cicloexano, o sólido foiremovido por filtração e secado para produzir o compostotítulo (0,82 g, 46%).
LC/MS: m/z 269 [MH]+.
Exemplo 71:
8-cloro-3-pentil-l-{3-[3-(3-tienilmetil)-1, 2,4-oxadiazol-5-il]propil}-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona
a) 8-cloro-3-pentil-l-{3-[3-(3-tienilmetil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]propil}-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona<formula>formula see original document page 99</formula>
Uma mistura de 4-(8-cloro-2,6-dioxo-3-pentil-2 , 3, 6, 7-tetraidro-lH-purin-l-il)butanoato de etila (70 mg,0,19 mmol), N-hidróxi-2-(3-tienil)etanimidamida (36 mg, 0,23mmol) , solução 21% de NaOEt em EtOH (78 μΐ,, 0,21 mmol) eEtOH (1,5 mL) foi aquecida em microondas a 140°C por 10 min.
Após resfriamento a reação foi particionada entre 2M HCl(aq) e EtOAc. A camada orgânica foi separada e a camadaaquosa extraída novamente com EtOAc. Os extratos combinadosforam concentrados, e purificados por MDAP. 0 composto títulofoi secado por congelamento a partir de dioxano-1,4 paraproduzir um sólido branco (27 mg, 31%) .
LC/MS: m/z 463 [MH]+, RT 3,4 min.
b) 4-(8-cloro-2,6-dioxo-3-pentil-2,3,6,7-tetrai-dro-lH-purin-l-il)butanoato de etila
<formula>formula see original document page 99</formula>
Uma solução de 8-cloro-3-pentil-7-(2-propen-l-il) -3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona (3,0 g, 10,1 mmol) em DMFanidro (35 mL) foi tratada com Cs2CO3 (3,6g, 11,1 mmol) e 4-bromobutirato de etila (1,6 mL, 11,1 mmol). A mistura foiagitada na temperatura ambiente por 18h em seguidadesgaseifiçada sob vácuo suave, em seguida nitrogênio foiintroduzido. Isto foi repetido duas vezes. Pd(PPh3)4 (l,17g,1,0 mmol) foi acrescentado e a mistura desgaseifiçada maisuma vez. Morfolina (8,8 mL, 101 mmol) foi acrescentado edeixada a agitar por 3 h na temperatura ambiente. A misturafoi particionada entre 2M HCl (aq) e EtOAc. A camadaorgânica foi separada, lavada com solução aquosa saturada decloreto de sódio, secada (MgSO4) e concentrada, produzindoum sólido amarelo (5,16g). 0 resíduo foi retomado em MeOH edividida em duas porções iguais, e em seguida cada umapassada numa SPE aminopropila (20 g) , eluindo com MeOHseguido por 5% AcOH/MeOH. As frações do produto foramcombinadas e concentradas produzindo o composto título comoum sólido quase branco (3,01 g, 80%).
LC/MS: m/z 371 [MH]+, RT 3,2 min.
Exemplo 72:
3-buti1-8-cloro-1-{3-[3-(2,3-difluorbenzil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]propil}-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona
a) 3-butil-8-cloro-l-{3-[3-(2,3-difluorbenzil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]propil}-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona
<formula>formula see original document page 99</formula>
2,3-Difluorfenilacetonitrila (23 mg, 0,15 mmol)foi dissolvida em EtOH (1 mL). Cloridrato de hidroxilamina(14 mg, 0,20 mmol) foi acrescentado, seguido por água (0,5mL) e carbonatoao refluxo de um dia para o outro e emseguida resfriadae particionada entre EtOAc e solução aquosasaturada de cloreto de sódio. A fase orgânica foi evaporadae a amidoxima bruta desse modo obtida foi dissolvida em EtOH(1 mL). 4-(3-butil-8-cloro-2, 6-dioxo-2, 3, 6, 7-tetraidro-líf-purin-l-il)butanoato de etila (43 mg, 0,12 mmol) e etóxidode sódio etanólico 21% em peso (0, 067 mL, 0,18 mmol) foiacrescentado e a mistura aquecida em reator microondas a140°C por por 10 min. A mistura foi particionada entre EtOAce 2M HCl, a fase orgânica evaporada e o produto purificadoatravés de MDAP para proporcionar o composto titulo como umsólido (13 mg).
LC/MS: m/z 479 [MH]+, RT 3,52 min.
1H NMR (MeOH-d4) δ: 0,96 (t, 3H, J = 7Hz), 1,34-1,45 (m, 2H) , 1, 65-1, 75 (m, 2H) , 2,13- 2,22 (m, 2H) , 2,97(t, 2H, J = 7Hz), 4,00 (t, 2H, J = 7Hz), 4,05 (s, 2H) , 4,12(t, 2H, J = 7Hz), 7,03-7,25 (m, 3H).
b) 4-(3-butil-8-cloro-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetraidro-lfl-purin-l-il)butanoato de etila
<formula>formula see original document page 101</formula>
A 3-butil-8-cloro-7-(2-propen-l-il)-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona (6,0 g, 21,24 mmol) em DMF anidro (100 mL)foi acrescentado Cs2CO3 (7,62 g, 23,36 mmol) seguido por 4-bromobutirato de etila (4,556 g, 23,36 mmol). A mistura foiaquecida a 55°C por 18h e deixada a esfriar e em seguidadeixada a esfriar e em seguida desgaseifiçada medianterepetidamente evacuar e readmitir nitrogênio. Morfolina (14,9g, 171 mmo1) foi acrescentado seguido por tetraquis(trife-nilfosfino)paládio(0) (4,0 g, 3,46 mmol) e a mistura foiagitada por 4h. EtOAc (300 mL) e 2M HCl (150 mL) e água (100mL) foram acrescentados e a fase orgânica separada, lavadacom solução aquosa saturada de cloreto de sódio (3 χ 100 mL)e filtrada. 0 filtrado foi secado (Na2SO4) e evaporado. 0produto bruto (10 g) foi purificado por meio de SPEaminopropila (3 χ 20 g), carregamento em THF/MeOH (1:1),lavagem com THF/MeOH (1:1) e MeOH puro e eluindo o produtocom DCM/MeOH (1:1) contendo AcOH 5% adicionado para produziro composto titulo (5,08 g).
LC/MS: m/z 357 [MH]+, RT 3,06 min.
1H NMR (d<4> MeOH) 0,96 (3H, t, J = 7Hz), 1,33-1,42 (2H, m) , 1, 64-1, 74 (2H, m), 2,12- 2,21 (2H, m) , 2,95(2H, t, J = 8Hz), 3,99 (2H, t, J = 7Hz), 4,03 (2H, s), 4,11(2H, t, J = 7Hz), 7,03-7,21 (3H, m).
EXEMPLO 73
3-butil-8-cloro-1-(3-[3-(2-clorobenzil)-1,2,4-oxadiazol-5-il ] propil} - 3, 7-diidro-lff-purin-2 , 6-diona
<formula>formula see original document page 102</formula>
4-(3-butil-8-cloro-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetraidro-lff-purin-l-il)butanoato de etila (53 mg, 0,15 mmol) e (IZ)-2-(2-clorofenil)-N-hidroxietanimidamida (30 mg, 0,18 mmol;Entada 1, Tabela 7) foram aquecidos em EtOH (0,75 mL) cometóxido de sódio etanólico 21% (0,083 mL, 0,22 mmol) a140°C por 10 min. A mistura foi em seguida particionadaentre EtOAc e 2M HCl e a fase orgânica evaporada. 0 produtofoi purificado por meio de MDAP para produzir o compostotitulo como um sólido (34,8mg).
LC/MS: m/z 477 [MH]+, RT 3,59 min.
1H NMR (d6 DMSO) 0,89 (3H, t, J = 8Hz), 1,24-1,34(2H, m), 1, 56-1, 65 (2H1 m) , 1, 98- 2, 07 (2H, m), 2,92 (2H, t,J = 7Hz), 3,89 (2H1 1, J = 7Hz), 3,98 (2H, t, J = 7Hz), 4,09(2H, s), 7,28-7,48 (4H, m).
Exemplo 74:
3-buti1-8-cloro-1-{3-[3- ( 4-fluorbenzil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]propil}-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona
<formula>formula see original document page 103</formula
Partindo de (IZ)-2-(4-fluorfenil)-N-hidroxietani-midamida (28 mg, 0,18 mmol; Entrada 2, Tabela 7) foi obtidode modo similar o composto titulo como um sólido (IOfOmg).LC/MS: m/z 461 [MH]+, RT 3,49 min.
Exemplo 75:
3-butil-8-cloro-l-{3-[3-(2,3-diclorobenzil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]propil}-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona
<formula>formula see original document page 103</formula4-(3-butil-8-cloro-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetraidro-lH-purin-l-il) butanoato de etila (53 mg, 0,15 mmol) e (IZ)-2-(2 , 3-diclorofenil)-iV-hidroxietanimidamida (36 mg, 0,165mmol; Entrada 3, Tabela 7) e etóxido de sódio etanólico 21%(0,083 mL, 0,22 mmol) foram aquecidos juntos em EtOH (0,75mL) no reator microondas a 140°C por 10 min. A mistura foiem seguida particionada entre EtOAc e 2M HCl, a faseorgânica separada, evaporada e o produto purificado por MDAPpara produzir o composto titulo como um sólido (42,1 mg).
LC/MS: m/z 511 , 513, 515 (isótopos) [MH]+, RT3,66 min.
Os compostos seguintes (Tabela 4) foram preparadosutilizando um método análogo àquele para o exemplo 75,usando a apropriada amidoxima, (com a exceção de que, para oExemplo 87 (Tabela 4) durante os trabalhos o pH foi ajustadopara 5 antes da extração com EtOAc; e no caso do Exemplo 88(Tabela 4) o produto bruto foi agitado por 18h com EtOH (1mL) e 2M NaOH (0,5 mL) e o Exemplo 89 (Tabela 4) foi agitadopor 18h com EtOH (0,75 mL) e 2M NaOH (0,5 mL) antes derepetir os trabalhos e a purificação por MDAP).
Tabela 4
<table>table see original document page 104</column></row><table><table>table see original document page 105</column></row><table><table>table see original document page 106</column></row><table><table>table see original document page 107</column></row><table>
Detalhes RMN para exemplos selecionados da Tabela 4:
Exemplo 76:
3-butil-8-cloro-l-{3-[3-(3-fluorbenzil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]propil}-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona
1H NMR (DMSO-de) δ: 0,90 (t, 3H, J = 7Hz), 1,25-1,36 (m, 2H), 1,56-1,67 (m, 2H), 2,0-2,1 (m, 2H), 2,94 (t,2H, J = 7Hz), 3,90 (t, 2H, J = 7 Hz), 3,98 (t, 2H, J = 7Hz),4,02 (s, 2H), 7,05-7,15 (m, 3H), 7,32-7,40 (m, 1H).Exemplo 77:
3-butil-8-cloro-l-{3-[3- (3,4-difluorbenzil)-1,2,4-oxadiazol-5-il] propil} - 3, 7-diidro-lff-purin-2, 6-diona
1H NMR (DMS0-d6) δ: 0,89 (t, 3H, J = 7,5Hz), 1,25-1,34 (m, 2H), 1,56-1,65 (m, 2H), 1,99-2,07 (m, 2H), 2,92 (t,2H, J = 7Hz), 3,89 (t, 2H, J = 7 Hz), 3,98 (t, 2H, J = 7Hz),4,02 (s, 2H), 7,10-7,15 (m, 1H), 7, 32-7, 39 (m, 2H), 14,45(br s, 1H).
Exemplo 79:
1-{3-[3-(1,3-benzodioxol-5-ilmetil)-1,2,4-oxadiazol-5-il ] propil} -3-butil-8-cloro-3, 7-diidro-lff-purin-2, 6-diona
1H NMR (DMSO-de) δ: 0,90 (t> 3H, J = 7Hz), 1,25-1,36 (m, 2H), 1,58-1,68 (m, 2H), 1,98-2,09 (m, 2H), 2,92 (t,2H, J = 7Hz), 3,88-3,95 (m, 4H), 3,99 (t, 2H, J = 7Hz), 5,98(s, 2H), 6,70-6,86 (m, 3H).
Exemplo 87:
3-butil-8-cloro-l-{3-[3-(lH-indol-3-ilmetil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]propil}-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona
1H NMR (DMSO-de) δ: 0,89 (t, 3H, J = 7Hz), 1,23-1,36 (m, 2H), 1,56-1,67 (m, 2H), 1,96-2,08 (m, 2H), 2,90 (t,2H, J = 7Hz), 3,90 (t, 2H, J = 7 Hz), 3,99 (t, 2H, J = 7Hz),4,04 (s, 2H), 6,92-7,50 (m, 5H), 10,95 (s, 1H).
Exemplo 88:
3-butil-8-cloro-l-(3-{3-[(3-hidroxifenil)metil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}propil)-3,7-diidro-lH-purin-2, 6-diona
1H NMR (DMSO-d6) δ: 0,90 (t, 3H, J = 7Hz), 1,25-1,38 (m, 2H), 1, 57-1, 68 (m, 2H) , 1, 96-2,07 (m, 2H) , 2,92 (t,2Η, J = 7Hz), 3,86 (s, 2H), 3,89 (t, 2H, J = 7Hz), 3,99 (t,2H, J = 7Hz), 6, 58-6, 68 (m, 3H) , 7,08 (m, 1H), 9,40 (s, 1H) .
Exemplo 89:
N-[3-({5-[3-(3-butil-8-cloro-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetraidro-lH-purin-l-il)propil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}metil)fenil]metanosulfonamida
1H NMR (DMSO-d6) δ: 0,89 (t, 3H, J = 7,5Hz), 1,24-1,34 (m, 2H) , 1, 56-1, 65 (m, 2H) , 1, 97-2,06 (m, 2H) , 2,91 (t,2H, J = 7,5 H ζ) , 2,97 (s, 3H), 3,90 (t, 2H, J = 7,5Hz), 3,96(s, 2H), 3,97 (t, 2H, J = 7Hz), 6,96-6,99 (m, 1H), 7,06-7,13(m, 2H), 7,26 (t, 1H, J = 8Hz), 9,75 (s, 1H) , 14,45 (br s, 1H).
Exemplo 90:
3-butil-8-cloro-1- (3-{3- [ (3,4-diclorofenil)metil]-1,2,4-oxadiazol-5-il} propil) -3, 7-diidro-l Jí-purin-2, 6-diona
<formula>formula see original document page 109</formula>
4-(3-butil-8-cloro-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetraidro-l Jf-purin-l-il)butanoato de etila (71 mg, 0,2 mmol), (IZ) —2 —(3,4-diclorofenil)-W-hidroxietanimidamida (48 mg, 0,22 mmol)e etóxido de sódio etanólico 21% em peso (0,111 mL, 0,3mmol) foram aquecidos juntos em EtOH (1 mL) no microondasreactor a 140°C por 10 min. A mistura foi em seguidaparticionada entre EtOAc e 2M HCl, a fase orgânica separadae evaporada, e o produto bruto foi purificado por meio deMDAP para produzir o composto titulo como um sólido(4 8,8mg).
LC/MS: m/z 511, 513 [MH]+, RT 3,65 min.
Os compostos seguintes (Tabela 5) foram preparadosutilizando um método análogo àquele para o exemplo 90,usando a apropriada amidoxima (com a exceção de que para oexemplo, 91, 0,185 mL, (0,5 mmol) de etóxido de sódio 21%foi acrescentado a fim de permitir as amidoximas sendo saiscloridrato).
Tabela 5
<table>table see original document page 110</column></row><table><table>table see original document page 111</column></row><table>Detalhes de RMN para exemplos selecionados daTabela 5
Exemplo 91:
1H NMR (d6 DMSO) 0,88 (3H, t, J = 7Hz) , 1,24-1,33(2H, m) , 1, 56-1, 65 (2H, m) , 1, 98-2, 06 (2H, m) , 2,92 (2H, t,J = 7Hz), 3,89 (2H, t, J = 7Hz), 3,97 (2H, t, J 7Hz), 4,14(2H, s), 7,52-7,70 (4H, m).
Exemplo 94:
3-butil-8-cloro-l-(3-{3-[(4-clorofenil)metil]-1, 2,4-oxadiazol-5-il}propil)-3,7-diidro-lfl-purin-2,6-diona
1H NMR (DMSOd6) δ: 0,89 (t, 3H, J = 7Hz), 1,23-1,37 (m, 2H), 1,55-1,67 (m, 2H), 1,97-2,09 (m, 2H), 2,90 (t,2H, J = 7Hz), 3,88 (t, 2H, J = 7Hz), 3,97 (t, 2H, J = 7Hz),4,00 (s, 2H), 7,27-7,40 (m, 4H).
Exemplo 96:
S-butil-S-cloro-l-(3-{3-[(4-hidroxifenil)metil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}propil) - 3, 7-diidro-lij-purin-2, 6-diona
1H NMR (DMS0-d6) δ: 0,90 (t, 3H, J = 7Hz), 1,23-1,37 (m, 2H), 1, 57-1, 68 (m, 2H) , 1, 96-2, 08 (m, 2H), 2,90 (t,2H, J = 7Hz) , 3,82 (s, 2H), 3,90 (t, 2H, J = 7Hz), 3,98 (t,2H, J = 7Hz), 6,68 (d, 2H, J = 9Hz), 7,04 (d, 2H, J = 9Hz),9,32 (s, 1H).
Exemplo 97:
3-butil-8-cloro-l-[3-(3-{[3-(trifluormetil)-lfí-pirazol-1-il]metil}-1,2,4-oxadiazol-5-il)propil]-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona
1H NMR (DMSO-dô) δ: 0,90 (t, 3H, J = 7Hz), 1,23-1,36 (m, 2H), 1,57-1,69 (m, 2H), 1,95-2,08 (m, 2H), 2,95 (t,2Η, J = 7Hz), 3,91 (t, 2Η, J = 7Ηζ), 3,97 (t, 2Η, J = 7Ηζ),5,62 (s, 2Η), 6,79 (s, 1Η), 8,10 (s, 1Η) .
Exemplo 99:
3-butil-8-cloro-1-[3-(3 —{[3-(etiloxi)-4-hidroxifenil]metil}-1,2,4-oxadiazol-5-il)propil]-3,7-diidro-lfí-purin-2,6-diona
<formula>formula see original document page 113</formula>
Etil 4-(3-butil-8-cloro-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetrai-dro-líf-purin-l-il) butanoato (53 mg, 0,15 mmol) e (IZ)-2-[3-(etiloxi)-4-hidroxifenil]-W-hidroxietanimidamida (35 mg,0,165 mmol; entrada 11, Tabela 7) foram misturados em EtOH(0,75 mL) . Etóxido de sódio etanólico (21% em peso, 0,083mL, 0,22 mmol) foi acrescentado e a mistura foi aquecida emmicroondas a 140°C por 10 min. Mais 0, 055 mL (0,15 mmol) desolução NaOEt foi em seguida acrescentado e a misturaaquecida por um período adicional de 10 minutos a 140°C. Amistura foi particionada entre EtOAc e 2M HCl e a faseorgânica evaporada e purificada por MDAP para produzir ocomposto título como um sólido (29,6mg).
LC/MS: m/z 503 [MH]+, RT 3,15 min.
Os compostos seguintes (Tabela 6) foram preparadosutilizando um método análogo àquele para o exemplo 99,usando a apropriada amidoxima (com a exceção de que porexemplo, 100 (Tabela 6) , o produto bruto após retomada foiagitado com EtOH (1 mL) e 2M NaOH (0,5 mL) de um dia para ooutro a fim de hidrolisar o éster de partida residual, antesde repetir a retomada em HCl e purificação por MDAP).
Tabela 6
<table>table see original document page 114</column></row><table>
Detalhes de RMN para os Exemplos selecionados daTabela 6
Exemplo 101:
N-[3-({5-[3-(3-butil-8-cloro-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetraidro-lfí-purin-l-il)propil]-1,2,4-oxadiazol-3-l}metil)fenil]acetamida
1H NMR (DMSO-de) δ: 0,90 (t, 3H, J = 7Hz), 1,25-1,38 (m, 2H), 1, 57-1, 68 (m, 2H) , 1, 95-2, 07 (m, 5H) , 2,92 (t,2H, J = 7Hz), 3,91 (t, 2H, J = 7Hz), 3,94 (s, 2H), 3,98 (m,2H), 6,88-7,50 (m, 4H), 9,90 (s, 1H).Exemplo 102:
3-butil-8-cloro-l-(3-{ - [ (2-cloro-4-fluorfenil)metil]-1, 2,oxadiazol-5-il }propil)-3,7-diidro-lff-purin-l-2, 6-diona
<formula>formula see original document page 115</formula>
Etil 4-(3-butil-8-cloro-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetrai-dro-lH-purin-l-il)butanoato (100 mg, 0,28 mmol) e (IZ)-2-(2-cloro-4-fluorfenil)-W-hidroxietanimidamida (62,4 mg, 0,308mmol) e 21% em peso etóxido de sódio etanólico (0,157 mL,0,42 mmol) foram aquecidos juntos em um reator de microondasem EtOH (1,5 mL) a 140°C por 10 min. Δ mistura foi retomadapor particionamento entre EtOAc e 2M HCl. A fase orgânicafoi evaporada e purificada por MDAP para produzir o compostotitulo como um sólido (73 mg).
LC/MS: m/z 495 [MH]+, RT 3,55 min.
Exemplo 103:
8-cloro-3-eti1-1-(3-[3-(fenilmetil]-1,2,4-oxadiazol-5-il]propil)-3,7-diidro-l#-purin-2,6-diona
a) 8-cloro-3-etil-l-{3-[3-(fenilmetil)-1,2,4-oxa-diazol-5-il]propil}-3,7-diidro-lH-purin-2,6-dionaUma solução de 8-cloro-3-etil-7-(2-propen-l-il)-3,7-diidro-lH-purin-2, 6-diona (150 mg, 0,59 mmol) em THFanidro (4 mL) foi tratada com 3-[3- ( fenilmetil)-1,2, 4-oxadiazol-5-il]-1-propanol (154 mg, 0,71 mmol) e trifenil-fosfina (200 mg, 0,76 mmol). DBAD (162 mg, 0,71 mmol) foiacrescentado em uma porção e a mistura foi deixada agitar natemperatura ambiente, sob nitrogênio por 18h. A mistura foidesgaseifiçada em alto vácuo e em seguida Pd(PPh3)4 (68 mg,0,059 mmol) e morfolina (515 μί, 5,9 mmol) foram acrescen-tados. A mistura foi deixada agitar na temperatura ambiente,sob nitrogênio, por 3h. A mistura foi particionada entreEtOAc e 2M HCl (aq). A camada orgânica foi separada, lavadacom solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secada(MgSO4) e concentrada em alto vácuo. 0 material bruto foipurificado por meio de uma SPE aminopropila usando MeOH MeOHpara carregar o composto sobre a coluna e remover asimpurezas por lavagem, em seguida com 2% AcOH/MeOH paraeluir o composto. As frações ativas em UV foram combinadas econcentradas em alto vácuo. 0 produto foi adicionalmentepurificado por MDAP. As frações do produto foram combinadase concentradas para produzir o composto titulo como umsólido branco (61 mg, 25%).
LC/MS: m/z 415 [MH]+, RT 3,01 min.
1H NMR; (DMSO-de) δ: 1,19 (t, 3H, J = 7Hz), 2,93(m, 2H), 2,91 (t, 2H, J = 7,5Hz), 3,96 (m, 6H), 7,27 (m, 5H)14,46 (s, 1H).
b) 8-cloro-3-etil-7-(2-propen-l-il)-3,7-diidro-lH-purin-2, 6-diona<formula>formula see original document page 117</formula>
Uma solução de 8-cloro-7-(2-propen-l-il)-3,7-diidro-lfí-purin-2, 6-diona (10 g, 0, 044 mol) em DMF anidro(100 mL) foi tratada com iodoetano (5,4 mL, 0, 068 mol) eNa2CO3 (4,9 g, 0,046 mol). A mistura reacional foi deixadaagitar na temperatura ambiente sob nitrogênio por 2 dias.Iodoetano (0,35 mL, 0,0044 mol) foi acrescentado e amistura foi deixada agitar na temperatura ambiente por 1dia. A mistura foi particionada entre EtOAc e 2M HCl. Acamada orgânica foi separada, lavada seqüencialmente comsolução saturada de sulfito de sódio e solução aquosasaturada de cloreto de sódio, secada (MgSO4) e concentrada.0 sólido bruto foi lavado com Et2O para produzir o compostotitulo como um sólido branco (8,37g, 75%).
LC/MS: m/z 255 [MH]+, RT 2,35 min.
Exemplo 104:
8-cloro-1-(3 —{3 —[(3-clorofenil)metil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}propil)-3-pentil-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona5-(8-cloro-2,6-dioxo-3-pentil-2,3,6,7-tetraidro-lH-purin-l-il)pentanoato de etila (70 mg, 0,19 mmol) foidissolvido em EtOH. A solução foi tratada com uma solução deNaOEt 21% em EtOH (78 μΙ,, 0,21 mmol) e (IZ)-2-(3-cloro-fenil) -/V-hidroxietanimidamida (38 mg, 0,21 mmol). A reaçãofoi aquecida em microondas a 140°C por 10 min. A mistura foiparticionada entre EtOH e 2M HCl (aq). A camada orgânica foiremovida por decantação e concentrada. 0 produto bruto foipurificado em MDAP. As frações do produto foram combinadas econcentradas para produzir o composto titulo como um sólidobranco (46 mg, 49%).
LC/MS: m/z 491 [MH]+, RT 3,64 min.
1H NMR (DMS0-d6) δ: 0,85 (t, 3H, J = 7Hz), 1,27 (m,4H) , 1,62 (m, 2H) , 2,02 (m, 2H) , 2,92 (t, 2H, J = 7,5Hz),.3,88 (t, 2H, J=7 Hz), 3,97 (t, 2H, J = 6,5Hz), 4,02 (s, 2H),7,23 (d, 1H, J = 7Hz), 7,34 (m, 3H).
Exemplo 105:
8-cloro-1-(3-{3-[(3,4-diclorofenil)metil]-l,2,4-oxadiazol-5-il}propil)-3-pentil-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona
<formula>formula see original document page 118</formula>
5-(8-cloro-2,6-dioxo-3-pentil-2,3,6, 7-tetraidro-líí-purin-l-il)pentanoato de etila (70 mg, 0,19 mmol) foidissolvido em EtOH. A solução foi tratada com uma solução deNaOEt 21% em EtOH (78 \iL, 0,21 mmol) e (IZ) -2- (3,4-diclorofenil)-N-hidroxietanimidamida (46 mg, 0,21 mmol). Areação foi aquecida em microondas a 140°C por 10 min. Amistura foi particionada entre EtOH e 2M HCl (aq). A camadaorgânica foi removida por decantação e concentrada. 0produto bruto foi purificado por meio de MDAP. As frações doproduto foram combinadas e concentradas para produzir ocomposto titulo como um sólido branco (66 mg, 66%).
LC/MS: m/z 527 [MH]+, RT 3,80 min.
Exemplo 106:
8-cloro-l-(3 —{3 —[(2,6-diclorofenil)metil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}propil)-3-pentil-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona
<formula>formula see original document page 119</formula>
5-(8-cloro-2,6-dioxo-3-pentil-2,3,6,7-tetraidro-lJí-purin-l-il)pentanoato de etila (70 mg, 0,19 mmol) foidissolvido em EtOH. A solução foi tratada com uma solução deNaOEt 21% em EtOH (78 yL, 0,21 mmol) e (1Ζ)-2-(2,6-diclorofenil)-W-hidroxietanimidamida (46 mg, 0,21 mmol). Areação foi aquecida em microondas a 140°C por 10 min. Amistura foi particionada entre EtOH e 2M HCl (aq) . A camadaorgânica foi removida por decantação e concentrada pordescarga de nitrogênio. 0 produto bruto foi purificado pormeio de MDAP. As frações do produto foram combinadas econcentradas para produzir o composto titulo como um sólidobranco (80 mg, 80%).
LC/MS: m/z 526 [MH]+, RT 3,6 min.
Exemplo 107:
8-cloro-l-(3-{3-[(2-cloro-4-fluorfenil)metil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}propil)-3-pentil-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona
<formula>formula see original document page 120</formula>
5-(8-cloro-2,6-dioxo-3-pentil-2,3,6,7-tetraidro-lH-purin-l-il)pentanoato de etila (70 mg, 0,19 mmol) foidissolvido em EtOH. A solução foi tratada com uma solução deNaOEt 21% em EtOH (78 pL, 0,21 mmol) e (IZ) -2-(2-cloro-4-fluorfenil)-N-hidroxietanimidamida (42 mg, 0,21 mmol). Areação foi aquecida em microondas a 140°C por 10 min. Amistura foi particionada entre EtOH e 2M HCl (aq). A camadaorgânica foi removida por decantação e concentrada. 0produto bruto foi purificado por meio de MDAP. As frações doproduto foram combinadas e concentradas para produzir ocomposto titulo como um sólido branco (65 mg, 67%).LC/MS: m/z 509 [MH]+, RT 3,63 min.
Exemplo 108:
3-butil-8-cloro-l-{3-[3-(feniImetil)-1,2, 4-oxadiazol-5-il]propil}-3,7-diidro-lff-purin-2,6-diona<formula>formula see original document page 121</formula>
Uma solução de 3-butil-8-cloro-7-(2-propen-l-il)-3, 7-diidro-lH-purin-2,6-diona (205 mg, 0,73 mmol) em THFanidro (4 mL) foi tratada com 3-[ 3-(fenilmetil)-1, 2 , 4-oxadiazol-5-il]-1-propanol (190 mg, 0,87 mmol) e PPh3 (247mg, 0,94 mmol). DBAD (217 mg, 0,94 mmol) foi acrescentado emuma porção e a mistura foi agitada na temperatura ambientesob nitrogênio por 18h. A mistura foi desgaseifiçada em altovácuo e em seguida Pd(PPh3)4 (84 mg, 0,073 mmol) e morfolina(636 μΐι, 7,3 mmol) foram acrescentados. A mistura foiagitada na temperatura ambiente sob nitrogênio por 3h. Amistura foi particionada entre EtOAc e 2M HCl (aq) e acamada orgânica separada, lavada com solução aquosa saturadade cloreto de sódio, secada (MgSO4) e concentrada. Omaterial bruto foi purificado por meio de uma coluna deaminopropila usando MeOH para carregar o composto sobre acoluna e remover as impurezas por lavagem, em seguida comgradiente de 2-4% AcOH/MeOH para remover o composto dacoluna. A purificação adicional foi efetuada por MDAP paraproduzir o composto titulo como um sólido branco (75 mg, 23%).
LC/MS: m/z 443 [MH]+, RT 3,37 min.
1H NMR; (DMS0-CJ6) δ: 0,89 (t, 3H, J = 7,5 Hz),1,29 (m, 2H) , 1,61 (m, 2H) , 2,02 (m, 2H) , 2,91 (t, 2H, J =7,5Hz), 3,89 (t, 2Η, J = 7Hz), 3,97 (m, 4Η) , 7,27 (m, 5Η)14,46 (s, IH).
Exemplo 109:
8-cloro-1-(3—{3—[(4-hidroxifenil)metill-1,2,4-oxadiazol-5-ilIpropil)-3-pentil-3,7-diidro-lH-purin-2, 6-diona
<formula>formula see original document page 122</formula>
5-(8-cloro-2,6-dioxo-3-pentil-2,3,6,7-tetraidro-lH-purin-l-il)pentanoato de etila (29 mg, 0,078 mmol) e (IZ)-IV-hidroxi-2-( 4-hidroxifenil) etanimidamida (14 mg, 0,084mmol) foram aquecidos em EtOH (1 mL) com etóxido de sódioetanólico 21% (0,043 mL, 0,117 mmol) sob irradiação demicroondas a 140°C por 10 min. A mistura foi particionadaentre EtOAc e 2M HCl e a fase orgânica evaporada. Essematerial foi agitado com EtOH (1 mL) e 2M NaOH (0,5 mL) por18h, antes de ser retomado novamente por partição entreEtOAc e 2M HCl. A purificação por MDAP produziu o compostotitulo (6,5mg).
LC/MS: m/z 473 [MH]+, RT 3,34 min.
1H NMR (MeOH-d4) δ: 0,92 (t, 3H, J = 7Hz), 1,25-1,45 (m, 4H) , 1, 68-1, 78 (m, 2H) , 2,11- 2,21 (m, 2H) , 2,93(t, 2H, J = 7Hz), 3,82 (s, 2H), 3,98 (t, 2H, J = 7Hz), 4,10(t, 2H, J = 7Hz), 6,70 (d, 2H, J = 10Hz), 7,02 (d, 2H, J = IOHz).Exemplo 110:
3-butil-8-cloro-1- (3-{3-[(feniloxi)metill-1,2,4-oxadiazol-5-il}propil)-3,7-diidro-lfí-purin-2,6-diona
<formula>formula see original document page 123</formula>
A 4-(3-butil-8-cloro-2,6-dioxo-2F3, 6, 7-tetraidro-lfl-purin-l-il)butanoato de etila (26 mg, 0,073 mmol) ecloridrato de (IZ)-W-hidróxi-2-(feniloxi)etanimidamida (16mg, 0, 079 mmol) em EtOH (1 mL) foi acrescentado solução 21%em peso de etóxido de sódio etanólico (0, 068 mL, 0,183mmol) e A mistura foi aquecida sob irradiação por microondasa 140°C por 10 min. A mistura foi particionada entre EtOAc e2M HCl, a fase orgânica secada (Na2SO4) evaporada epurificada por MDAP para produzir o composto titulo como umagoma que foi solidificada por trituração com éter (5,9 mg).
LC/MS: m/z 459 [MH]+, RT 3,39 min.
1H NMR (DMSO-de) δ: 0,90 (t, 3H, J = 8Hz), 1,22-1,36 (m, 2H), 1,57-1,68 (m, 2H), 2,02-2,14 (m, 2H), 3,00 (t,2H, J = 8Hz), 3,90 (t, 2H, J = 7Hz), 4,00 (t, 2H, J = 7Hz),5,18 (SI 2H), 6,95-7,35 (m, 5H).
Exemplo 111:
3-butil-8-cloro-l-(3-{3-[(3,5-diclorofenil)metil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}propil)-3,7-diidro-l#-purin-2,6-diona<formula>formula see original document page 124</formula>
A 4-(3-butil-8-cloro-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetraidro-ΙΗ-purin-l-il)butanoato de etila (185 mg, 0,52 mmol) e (IZ)-2-(3,5-diclorofenil)-N-hidroxietanimidamida (126 mg, 0,58mmol; Entrada 23, Tabela 7) em EtOH anidro (2 mL) foiacrescentado solução etanólica de etóxido de sódio 21% (0,29mL, 0,78 mmol) e A mistura foi aquecida por microondas a140°C por 10 min. A reação foi retomada por partição entreEtOAc e 2M HCl e evaporação da fase orgânica. A purificaçãopor MDAP produziu o composto titulo como um sólido (135mg).
LC/MS: m/z 511 [MH]+, RT 3,71 min.
Exemplo 112:
3-butil-8-cloro-l-(3-{3-[(2,4,6-trifluorfenil)metil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}propil)-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona
<formula>formula see original document page 124</formula>
Preparada de modo similar partido de (IZ)-N-hidroxi-2-(2,4,6-trifluorfenil)etanimidamida (119 mg, 0,58mmol; Entrada 24, Tabela 7) num rendimento de 135 mg.
LC/MS: m/z 497 [MH]+, RT 3,39 min.
1H NMR (DMSO-d6) δ: 0,90 (t, 3H, J = 7Hz), 1,24-1,36 (m, 2H), 1,55-1,66 (m, 2H), 1,96-2,06 (m, 2H), 2,91 (t,2H, J = 8Hz), 3,91 (t, 2H, J = 8 Hz), 3, 94-4, 02 (m, 4H),7,18-7,28 (m, 2H).Amidoximes:
Estas são disponíveis através dos métodos deta-lhados adiante e exemplificadas por análogos na Tabela 7.
Tabela 7 (Intermediários)
<table>table see original document page 125</column></row><table><table>table see original document page 126</column></row><table><table>table see original document page 127</column></row><table>
Deverá ser notado que como usado aqui representauma dupla ligação de geometria indefinida.
Método A
A correspondente nitrila (0,5 mitiol) foi agitada emEtOH (1,5 mL) com solução aquosa hidroxilamina 50% (0,08mL, 1,3 mmol) e aquecidas a 65°C por 4,5h. Após resfriamentoa mistura reacional bruta foi carregada num cartucho SCX SPE(2g) e lavada com MeOH, e em seguida o produto amidoxima foieluido com amônia 2M em MeOH.
Método B
Similar ao Método A exceto que o produto seseparou por cristalização da mistura e foi separado porfiltração em lugar de ser por SCX.
Método C
Similar ao Método A exceto que o produto foipurificado num cartucho SCS 5g.
Método D
Similar ao Método C exceto que o período deaquecimento foi de 18 h.Método E
Similar ao Método C exceto que a escala foi de0,753 mmol de nitrila.
Método F
Similar ao Método A exceto que a escala foi de 1,5mmol de nitrila e a purificação foi num cartucho SCX 10 g.
Método G
Similar ao Método A exceto que o tempo deaquecimento foi de 2,75 h e a escala foi de 0,25 mmol denitrila.
Exemplo 113:
3-butil-8-cloro-l-(3-{5-[(3-clorofenil)metil]-1, 2 , 4-oxadiazol-3-il}propil) - 3, 7-diidro-lff-purin-2 , 6-diona
a) 3-buti1-8-cloro-1-(3-{5-[(3-clorofenil)metil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}propil)-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona
Ácido (3-Clorofenil)acético (0,1 mmol), cloridratode N-[3-(dimetilamino)propil]-N'-etilcarbodiimida (21 mg,0,11 mmol) e IH-1,2,3-benzotriazol-l-ol (15 mg, 0,11 mmol)foram agitados em l-metil-2-pirrolidinona (1 mL). A este foiacrescentado (IZ)-4-(3-butil-8-cloro-2,6-dioxo-2 , 3, 6, 7-tetraidro-lH-purin-l-il)-N-hidroxibutanimidamida (34 mg, O.immol) e a mistura agitada na temperatura ambiente por 17h eem seguida a 80°C por 24h. A mistura reacional foipurificada, sem modificação adicional, por HPLC preparativa(auto prep) para produzir o composto titulo (13 mg, 27%).
LC/MS: m/z 477, 479 [MH]+, RT 3,5 min. 1H NMR(CDCl3) δ: 0,96 (t, 3H, J = 7Hz) , 1, 32-1, 47 (m, 2H) , 1,68-1,80 (m, 2H), 2,12- 2,24 (m, 2H), 2,83 (t, 2H, J = 7,5Hz),4,05-4,24 (m, 6H), 7,16-7,30 (m, 4H).
b) (IZ)-4-(3-butil-8-cloro-2,6-dioxo-2,3,6,7-te-traidro-lH-purin-l-il)-N-hidroxibutanimidamida
<formula>formula see original document page 129</formula>
4-(3-butil-8-cloro-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetraidro-lH-purin-l-il)butanonitrila (1 g, 0,0032 mol) foi agitado emEtOH (3,5 mL) e água (1,8 mL) . Cloridrato de hidroxilamina(344 mg, 0,0049 mol) e carbonato de potássio (652 mg, 0,0049mol) foram acrescentados ea mistura reacional bruta foievaporada. 0 produto bruto foi dissolvido em água,neutralised to pH7 com HCl, e carregado num cartucho Oásis™(2g). Este foi eluido com água para remover os sais e emseguida com MeOH, para produzir o composto titulo (957 mg, 86%).
LC/MS: m/z 343, 345 [MH]+, RT 2,04 min.c) 4-(3-butil-8-cloro-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetraidro-lfí-purin-l-il) butanonitrila<formula>formula see original document page 130</formula>
4-[3-butil-8-cloro-2,6-dioxo-7-(2-propen-l-il)-2,3,6,7-tetraidro-lH-purin-l-il]butanonitrila (2,lg, 6 mmol)foi agitada numa mistura de nitrogênio degaseifiçada DCM (20mL) e AcOH (2 mL) . Tetraquis(trifenilfosfino)paládio (675mg, 0,6 mmol) e fenil silano (7,4 mL, 60 mmol) foramacrescentados e a mistura agitada na temperatura ambientepor 2d. Esta foi em seguida evaporada e o resíduo trituradocom uma mistura de dietilethercicloexano (1:1) para produziro composto título (1,47 g, 60%) como um sólido branco.
LC/MS: m/z 310 [MH]+, RT 2,66 min.
d) 4-[3-butil-8-cloro-2,6-dioxo-7-(2-propen-l-il)-2,3,6,7-tetraidro-lH-purin-l-il]butanonitrila
<formula>formula see original document page 130</formula>
3-butil-8-cloro-7-(2-propen-l-il)-3,7-diidro-1H-purin-2,6-diona (2,0 g, 0, 0072 mol) em MeCN anidro (20 mL)foi acrescentado Cs2CO3 (4,68 g, 0,0144 mol) seguido porbromobutironitrila (1,38 g, 0,0094 mol). A mistura foiaquecida a 80°C por 18h e em seguida deixada a esfriar. Amistura reacional foi evaporada e o produto bruto particio-nado entre EtOAc e HCl (2N) . A fase orgânica foi separada elavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio,secada (MgSO4) e evaporada para produzir o produto bruto.Este foi purificado por meio de silica SPE (50 g) , eluindocom cicloexano:acetato de etila (2:1 a 1:1) para produzir ocomposto titulo como um óleo claro (2,lg, 85%).
LC/MS: m/z 350 [MH]+, RT 3,10 min.
Os compostos seguintes (Tabela 8) foram preparadosutilizando um método análogo àquele para o exemplo 113, apartir dos correspondentes ácidos e (IZ)-4-(3-butil-8-cloro-2, 6-dioxo-2, 3, 6, 7-tetraidro-lJí-purin-l-il) -N-hidroxibutanimi-damida.
<formula>formula see original document page 131</formula>
Onde * é usado aqui nos Exemplos ele indica oponto de anexação do grupo R ao núcleo xantina.
Tabela 8
<table>table see original document page 131</column></row><table><table>table see original document page 132</column></row><table>
Detalhes de RMN para os Exemplos selecionados da
Tabela 8
Exemplo 115:
1H NMR (CDCl3) 0,96 (3H, t, J = 7,5Hz), 1,32-1,47(2H1 m) , 1,65-1,81 (2H, m) , 2,12-2,25 (2H, m) , 2,84 (2H, t,J = 7,5 Hz), 4,02 (2H, t, 7,5Hz), 4,22 (2H, t, 7Hz), 4,24(2H, s), 7,40-7,62 (4H, m).
Exemplo 121:
8-cloro-3-pentil-l-(3-[5-(fenilmetil)-1,2,4-oxadiazol-3-il]propil}-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona
a) 8-cloro-3-pentil-l-{3-[5-(fenilmetil)-1,2,4-oxadiazol-3-il]propil}-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona<formula>formula see original document page 133</formula>
A uma solução agitada de 8-cloro-3-pentil-7-(2-propen-l-il)-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona (0,20, 0,67 mmol)em THF (5 mL) foi acrescentado 3-[5-(fenilmetil)-1,2 , 4 -oxadiazol-3-il]-1-propanol (0,162 g, 0,74 mmol), DBAD (0,186g, 0,81 mmol) e trifenilfosfina (0,212 g, 0,81 mmol) e asolução agitada por 18h. À solução foi acrescentadoPd(PPh3)4 (75 mg, 0, 067 mmol) e morfolina (600 ]iL, 6,7 mmol)foram acrescentados e agitados na temperatura ambiente sobnitrogênio por mais 3h. 75 mg de Pd(PPh3)4 foi acrescentadoe a mistura deixada a agitar por mais 3h. A mistura foiparticionada entre EtOAc e 2M HCl (aq) . A camada orgânicafoi separada, lavada com solução aquosa saturada de cloretode sódio, secada (MgSO4) e concentrada. 0 material bruto foipurificado por meio de uma SPE aminopropila usando MeOH MeOHpara carregar o composto sobre a coluna e remover asimpurezas por lavagem, em seguida com 2-4% AcOH/MeOH paraeluir o composto. As frações do produto foram combinadas econcentradas e em seguidum adicional de purificado por MDAP.As frações do produto foram combinadas e concentradas paraproduzir o composto titulo como um sólido branco (51 mg, 20%).
LC/MS: m/z 457 [MH]+, RT 3,54 min.b) 3-[5-(Fenilmetil)-1,2,4-oxadiazol-3-il]-1-pro-panol
<formula>formula see original document page 134</formula>
A mistura de (1E)-4,4-bis(etiloxi)-N-hidroxibuta-nimidamida (3,2g, 16,8 mmol), fenilacetato de etila (2,3 mL,14,4 mmol) e etóxido de sódio (solução 21% em EtOH, 6,4 mL)foi aquecida em um microondas a 140°C por 10 min. O materialfoi combinado com aquele proveniente da segunda reação(usando 1,2 g de (IE)-4,4-bis(etilóxi)-N-hidroxibuta-nimidamida e conduzido como acima) e particionado entre 1 MHCl solução e EtOAc. A camada orgânica foi separada, lavadacom solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secada econcentrada para proporcionar 5-[3,3-bis(etilóxi)propil]-5-(fenilmetil)-1,2,4-oxadiazol que foi usado sem purificaçãono estágio seguinte.
3-[3,3-bis(etilóxi)propil]-5-(fenilmetil)-1,2,4-oxadiazol bruto (5,63 g, 19,4 mmol) em EtOH (75 mL) foiagitado com ácido p-tolueno-sulfônico (0,738 g, 3,9 mmol)por 21h e a mistura particionada entre EtOAc e água. Osorgânicos foram separados e lavados com água solução aquosasaturada de cloreto de sódio, secados e concentrados paraproduzir um óleo vermelho. Esse material continha quanti-dades significativas de acetal, portanto o óleo foi dissol-vido em THF (15 mL) e tratado com 2M HCl solução por 2h emseguida particionada entre EtOAc e água. Os orgânicos foramseparados lavada com solução aquosa saturada de cloreto desódio, secada e concentrada para produzir 3-[5-(fenilmetil)-1,2, 4-oxadiazol-3-il]propanal as a red/brown oil (3,77g)which foi used crude no estágio seguinte.
Uma solução de 3-[5-(fenilmetil)-1,2,4-oxadiazol-3-il]propanal bruto (3,76 g, 17,4 mmol) em MeOH (60 mL) foiresfriada a O0C e boroidreto de sódio (0, 724 g, 19,1 mmol)acrescentado em porções durante 30 min. 0 banho de resfria-mento foi removido e a solução agitada por mais 1 h e emseguida particionada entre 1 M HCl e EtOAc. A camada orgânicafoi separada e o aquoso extraído com EtOAc. Os extratoscombinados foram lavados com solução aquosa saturada decloreto de sódio, secada e concentrada até um líquido laranja.Este foi purificado numa SPE sílica 50 g, eluindo comcicloexano/EtOAc (gradiente de eluição de 20% a 80%) paraproporcionar o composto título como um óleo amarelo (2,24g).
LC/MS: m/z 210 [MH]+.
c) (IE)-4,4-bis(etilóxi)-N-hidroxibutanimidamida
<formula>formula see original document page 135</formula>
Uma mistura de dietilacetal 3-cianopropionaldeído(6,12 g, 39 mmol), cloridrato de hidroxilamina (4,06 g, 58,4mmol), carbonato de potássio (10,76 g, 77,9 mmol) em água(20 mL) e EtOH (40 mL) foi mantida em refluxo por 24h. Amistura foi deixada esfriar e em seguida particionada entreágua e EtOAc. A camada orgânica foi separada e o aquosoextraído com EtOAc. As frações orgânicas combinadas foramlavadas com solução aquosa saturada de cloreto de sódio,secada e concentradas para proporcionar o composto titulocomo um óleo incolor contaminado com -20% da nitrila departida (6,03 g, 81%).
LC/MS: m/z 191 [MH]+.
Exemplo 122:
8-cloro-l-{3-[5-(fenilmetil)-1,2, 4-oxadiazol-3-illpropil)-3-propil-3,7-diidro-lfí-purin-2,6-diona
<formula>formula see original document page 136</formula>
Uma solução de 8-cloro-7-(2-propen-l-il)-3-propil-3,7-diidro-lií-purin-2, 6-diona (200 mg, 0,74 mmol) em THF (4mL) foi tratada com 3-[5-(fenilmetil)-1,2,4-oxadiazol-3-il]-1-propanol (195 mg, 0,89 mmol) e PPh3 (254 mg, 0,96 mmol).DBAD (223 mg, 0,96 mmol) foi acrescentado em uma porção e amistura foi deixada agitar na temperatura ambiente sobnitrogênio por 18h. A mistura foi particionada entre EtOAc e2M HCl (aq). A camada orgânica foi separada, lavada comsolução aquosa saturada de cloreto de sódio, secada (MgSO4)e concentrada em alto vácuo. O produto bruto foi purificadonuma coluna SPE de sílica usando um gradiente de 0-70%cicloexano/EtOAc. As frações do produto foram combinadas,concentradas em alto vácuo e purificadas numa coluna SPE desílica usando um gradiente de 0-60% cicloexano/EtOAc. Asfrações do produto foram combinadas e concentradas e emseguida dissolvidas em THF anidro (4 mL) . A solução foidesgaseifiçada em alto vácuo e em seguida Pd(PPh3)4 (61 mg,0,053 mmol) e morfolina (460 pL, 5,3 mmol) foram acrescen-tados e a mistura deixada a agitar na temperatura ambientesob nitrogênio por 1 dia. A mistura foi particionada entreEtOAc e 2M HCl (aq). A camada orgânica foi separada, lavadacom solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secada(MgSO4) e concentrada em alto vácuo. 0 produto bruto foipurificado por meio de uma SPE aminopropila usando MeOH MeOHpara carregar o composto sobre a coluna e remover asimpurezas por lavagem e em seguida um gradiente de 2-4%AcOH/MeOH para eluir o produto. As frações do produto foramcombinadas e concentradas para deixar o composto titulo comoum sólido branco (36 mg, 11%).
LC/MS: m/z 429 [MH]+, RT 3,14 min.
1H NMR (DMS0-d6) δ: 0,86 (t, 3H, J = 7,5Hz), 1,65(m, 2H), 1,93 (m, 2H), 2,70 (t, 2H, J = 7,5Hz), 3,86 (t, 2H,J = 7Hz), 3,96 (t, 2H, J = 7Hz), 4,28 (s, 2H), 7,32 (m, 5H).
Exemplo 123:
3-butil-8-cloro-l-{3-[5-(fenilmetil)-1,2,4-oxadiazol-3-il]propil}-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona
<formula>formula see original document page 137</formula>Uma solução de 3-[5-(fenilmetil)-1,2,4-oxadiazol-3-il] -1-propanol (594 mg, 2,7 mmol) em THF (25 mL) foitratada com 3-butil-8-cloro-7-(2-propen-l-il)-3,7-diidro-lfl-purin-2, 6-diona (700 mg, 2,48 mmol) e PPh3 (779 mg, 2,97mmol) sob nitrogênio. DBAD (684 mg, 2,97 mmol) foiacrescentado em uma porção e a reação deixada para reagirpor 60 h. A mistura foi particionada entre 2M HCl (aq) eEtOAc. A camada orgânica foi separada, lavada com soluçãoaquosa saturada de cloreto de sódio, secada (MgSO4) econcentrada. MeOH foi acrescentado ao resíduo e em seguidapassada numa coluna aminopropila com o produto eluindo com2-4% AcOH/MeOH. Frações do produto foram combinadas econcentradas. 0 resíduo esbranquiçado foi recristalizado apartir de EtOAc:cicloexano (1:1), produzindo o compostotítulo como um sólido branco (696 mg, 63%).
LC/MS: m/z 443 [MH]+, RT 3,4 min.
1H NMR (DMS0-d6) δ: 0,89 (t, 3H, J = 7Hz), 1,29 (m,2H) , 1,61 (m, 2H) , 1,93 (m, 2H) , 2,70 (t, 2H, J = 7,5Hz),3,90 (t, 2H, J = 7Hz), 3,96 (t, 2H, J = 7Hz), 4,28 (2H, s),7,31 (m, 5H), 14,4 (br s, 1H).
Exemplo 124:
3-butil-8-cloro-l-(3-{5-[(3-cloro-4-hidroxifenil)metil]-1,2,4-oxadiazol-3-iljpropil)-3,7-diidro-lfí-purin-2, 6-diona
<formula>formula see original document page 138</formula>Uma solução de ácido 3-cloro-4-hidroxifenilacético(24 mg, 0,13 ramol) em DMSO (1 mL) foi tratada com CDI (21mg, 0,13 mmol) e eixado a reagir por 30 min. (IZ)-4-(3-butil-8-cloro-2 , 6-dioxo-2, 3, 6, 7-tetraidro-lfl-purin-l-il) -N-hidroxibutanimidamida (50 mg, 0,15 mmol) foi acrescentado ea mistura aquecida no microondas a 120°C por 15 min. Asolução foi diretamente purificada MDAP para obter ocomposto titulo como um sólido branco (12 mg, 17%).
LC/MS: m/z 493 [MH]+, RT 3,2 min.
Exemplo 125:
3-butil-8-cloro-l-[3-(5-{[3-cloro-2-(metilóxi)fenil]metil}-1,2,4-oxadiazol-3-il)propil]-3,7-diidro-lfí-purin-2,6-diona
<formula>formula see original document page 48</formula>
A mistura de ácido [3-cloro-2-(metilóxi)fenil ]acético (32 mg, 0,16 mmol) em DMF (1,5 mL) foi tratada comCDI (26 mg, 0,16 mmol) e deixada para reagir por 45 min.(IZ)-4-(3-Butil-8-cloro-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetraidro-lH-purin-1-il)-N-hidroxibutanimidamida (60 mg, 0,18 mmol) foiacrescen-tado e a mistura aquecida no microondas a 140°C por15 min. Após resfriamento, a reação foi particionada entre2M HCl (aq) e EtOAc. A camada orgânica foi separada e emseguida concentrada e purificada por MDAP. 0 composto títulofoi obtido como um sólido branco (25 mg, 28%).
LC/MS: m/z 507 [MH]+, RT 3,5 min.
Exemplo 126:
5 3-butil-8-cloro-l-(3-{5-[(3-flúor-4-hidroxifenil)metil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}propil)-3,7-diidro-lff-purin-2,6-diona
<formula>formula see original document page 140</formula>
A mistura de ácido (3-flúor-4-hidroxifenil)acético(27 mg, 0,16 mmol) em DMF (1,5 mL) foi tratada com CDI (26mg, 0,16 mmol) e deixada para reagir por 45 minutos, (IZ)-4-(3-butil-8-cloro-2 , 6-dioxo-2, 3, 6, 7-tetraidro-lií-purin-l-il) -N-hidroxibutanimidamida (60 mg, 0,18 mmol) foi acrescentadoe a mistura aquecida no microondas a 140°C por 15 min. Apósresfriamento, a reação foi particionada entre 2M HCl (aq) eEtOAc. A camada orgânica foi separada e em seguida concen-trada purificada por MDAP. 0 composto título foi obtido comoum sólido branco (10 mg, 12%).
LC/MS: m/z 477 [MH]+, RT 3,2 min.
Exemplo 127:
8-cloro-3-pentil-l-[4-(5-fenil-1,2,4-oxadiazol-3-il)butil]-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona
a) Preparação de 8-cloro-3-pentil-l-[4-(5-fenil-1,2, 4-oxadiazol-3-il) butila] - 3, 7-diidro-l//-purin-2, 6-diona<formula>formula see original document page 141</formula>
Ácido benzóico (18 mg, 0,15 mmol) foi tratada comuma solução de hidrato de IH-I,2,3-benzotriazol-l-ol (25 mg,0,19 mmol) em DMSO (0,3 mL) . A este foi acrescentada asolução/suspensão de cloridrato de N-[3-(dimetilamino)propil]-N'-etilcarbodiimida (29 mg, 0,15 mmol) em DMSO (0,3mL) seguido por uma solução de 5-( 8-cloro-2,6-dioxo-3-pentila-2, 3, 6, 7-tetraidro-lJí-purin-l-il) -N-hidroxipentanimi-damida (55 mg, 0,15 mmol) em DMSO (0,3 mL) . A mistura foiaquecida a 40°C por lh, e em seguida a 80°C por 5h e emseguida resfriada. A mistura foi submetida à purificação porMDAP. Frações contendo produto foram sopradas até a securaatravés de uma corrente de nitrogênio para produzir ocomposto titulo como um sólido branco (17,2 mg, 25%).LC/MS: m/z 457 [MH]+, RT 3,67 min.
1H NMR (CDCl3) δ: 0,90 (t, 3H, J = 6,8Hz), 1,35 (m,4H) , 1,76 (m, 2H) , 1,89 (m, 4H) , 2,88 (t, 2H, J = 7,2Hz),4,08 (t, 2H, J = 7,5Hz), 4,17 (t, 2H, J = 6,7Hz), 7,50 (m2H), 7,57 (m, 1H), 8,08, (d, 2H, J = 7,3Hz).
b) 5- (8-cloro-2,6-dioxo-3-pentil-2,3,6,7-tetrai-dro-lH-purin-l-il)-N-hidroxipentanimidamida<formula>formula see original document page 142</formula>
Uma solução de 5-(8-cloro-2,6-dioxo-3-pentil-2, 3, 6, 7-tetraidro-lH-purin-l-il)pentanonitrila (3,0 g, 8,9mmol) em EtOH (30 mL) foi tratada com água (15 mL) ,carbonato de potássio (1,48 g, 10,7 mmol) e cloridrato dehidroxilamina (0,74 g, 10,7 mmol)e em seguida aquecida a70°C de um dia para o outro. Uma quantidade adicional decarbonato de potássio (1,5 g, 10,9 mmol) e cloridrato dehidroxilamina (1,0 g, 14,5 mmol) foram cuidadosamente acres-centados a uma mistura que foi em seguida aquecida a 90°Cpor 24h. A mistura foi resfriada e concentrada em vácuo pararemover a maior parte do EtOH. A mistura residual foitratada com água (30 mL) e acidificada a pH 7 mediantecuidadosa adição de ácido clorídrico aquoso 2M. 0 sólidoprecipitado foi removido por filtração, lavado com água, emseguida com éter dietílico e completamente secado paraproduzir o composto título como um sólido branco (2,80 g, 85%).
LC/MS: m/z 371 [MH]+, RT 2,27 min.
c) 5-(8-cloro-2,6-dioxo-3-pentil-2,3, 6,7-tetrai-dro-lH-purin-l-il)pentanenitrila<formula>formula see original document page 143</formula>
Uma solução de 8-cloro-3-pentil-7-(2-propen-l-il)-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona (4,0 g, 13,5 mmol) em DMF (100mL) foi tratada com carbonato de césio (4,83g, 14,8 mmol) e5-bromopentanonitrila (1,73 mL, 14,8 mmol). A mistura foiaquecida a 50°C numa atmosfera de nitrogênio por 19h e emseguida resfriada. A mistura foi e em seguida degaseifiçadaatravés da repetida aplicação sucessiva de um vácuo e emseguida pressão de nitrogênio. A mistura foi em seguidatratada com tetraquis(trifenilfosfino)paládio(0) (l,lg, 0,94mmol) e morfolina (11,8 mL, 136 mmol). A mistura foi agitadanuma atmosfera de nitrogênio por 3h e em seguida particio-nada entre EtOAc e ácido clorídrico aquoso 2M. A camadaorgânica foi separada, lavada com solução aquosa pararevelar um resíduo amarelo, oleoso. Este foi dissolvido emMeOH, dividido igualmente em quatro porções e cada porçãoaplicada a uma SPE aminopropila 20 g que foi em seguidalavada abundantemente com MeOH. 0 produto desejado foieluído do cartucho com a 5% v/v solução de AcOH em MeOH. 0produto-contendo fractions foram combinadas e concentradaspara produzir o composto título as a pale yellow solid(4,03g, 88%).
LC/MS: m/z 338 [MH]+, RT 3,05 min.Os compostos seguintes foram preparados utilizandoum método análogo àquele para o exemplo 127 (8-cloro-3-pentil-1-[4-(5-fenil-1,2,4-oxadiazol-3-il)butil]-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona) a partir dos acs correspondentes:
Tabela 9
<table>table see original document page 144</column></row><table>
Em adição ao Exemplo 128, 8-cloro-3-pentil-l-{4-[5-(2-piridinil)-1,2,4-oxadiazol-3-il]butil}-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona possui os seguintes dados espectrais: 1H NMR(CDCl3) δ: 0,89 (t, 3H, J = 6,9Hz), 1,75 (m, 4H) , 1,89 (m,6H), 2,92 (t, 2H, J = 7,1Hz), 4,07 (t, 2H, J = 7,4Hz), 4,16(t, 2H, J = 6, 9Hz) , 7,52 (m, 1H) , 7,92 (m, 1H) , 8,18 (m,1H), 8,83 (m, 1H), 13,40 (br s, 1H).Exemplo 132:
8-cloro-1-{4-[5-(4-hidroxifenil)-1,2,4-oxadiazol-3-il]butil}-3-propil-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona
<formula>formula see original document page 145</formula>
Ácido 4-hidroxibenzóico (18 mg, 0,13 mmol) e CDI(24 mg, 0,15 mmol) foram agitados em DMSO anidro (0,9 mL) natemperatura ambiente por Ih. (IZ)-5-(8-cloro-2,6-dioxo-3-propil-2,3,6,7-tetraidro-lH-purin-l-il)-N-hidroxipentanimida-mida (50 mg, 0,15 mmol; preparado num modo similar a (IZ)-5-(8-cloro-2,6-dioxo-3-pentil-2,3,6,7-tetraidro-lH-purin-l-il)-N-hidroxipentanimidamida como descrito no Exemplo 128(b))foi acrescentado e a mistura foi agitada a 90°C por 2h. Amistura reacional foi purificada por meio de MDAP. A fraçãode produto foi combinada e concentrada sob alto vácuo paraproduzir o composto titulo como um sólido branco (7 mg, 11%).
LC/MS: m/z 443 [MH]+RT 3,2 8 min.
Exemplo 133:
3-butil-8-cloro-l-(4-[5-(2,6-difluorfenil)-1,2,4-oxadiazol-11%).3-il]butil}-3,7-diidro-lfí-purin-2,6-diona
<formula>formula see original document page 145</formula>Ácido 2,6 difluorbenzóico (40 mg, 0,25 mmol) e CDI(45 mg, 0,28 mmol) foram agitados em DMSO anidro (0,9 mL) natemperatura ambiente por lh. (IZ)-5-(3-butil-8-cloro-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetraidro-lH-purin-l-il)-N-hidroxipentanimida-mida (100 mg, 0,28 mmol) foi acrescentado e a mistura foiagitada a 90°C por 16h. A mistura reacional foi purificadapor meio de MDAP. A fração de produto foi combinada econcentrada para produzir o composto titulo como um sólidobranco (18 mg, 15%).
LC/MS: m/z 479 [MH]+, RT 3,40 min.
Exemplo 134:
3-butil-8-cloro-l-14-[5-(2-fluorfenil)-1,2,4-oxadiazol-3-il]butil}-3, 7-diidro-lfí-purin-2, 6-diona
<formula>formula see original document page 146</formula>
Ácido 2-fluorbenzóico (36 mg, 0,25 mmol) e CDI (45mg, 0,28 mmol) foram agitados em DMSO anidro (0,9 mL) natemperatura ambiente por lh. (IZ)-5-(3-butil-8-cloro-2 , 6-dioxo-2,3,6,7-tetraidro-lH-purin-l-il)-N-hidroxipentanimida-mida (100 mg, 0,28 mmol) foi acrescentado e a mistura foiagitada a 90°C por 16h. A mistura foi purificado por meio deMDAP. A fração de produto foi combinada e concentrada paraproduzir o composto titulo como um sólido branco (33 mg, 29%).LC/MS: m/z 461 [MH]+, RT 3,44 min.
Exemplo 135:
3-Buti1-8-cloro-1-{4-[5- (4-cloro-2-piridinil)-1,2,4-oxadiazol-3-il]butil}-3,7-diidro-l#-purin-2,6-diona
<formula>formula see original document page 147</formula>
Ácido 4-cloro-2-piridinocarboxílico (40 mg, 0,25mmol) e CDI (45 mg, 0,28 mmol) foram agitados em DMSO anidro(0,9 mL) na temperatura ambiente por lh. (IZ)-5-(3-butil-8-cloro-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetraidro-lH-purin-l-il)-N-hidroxi-pentanimidamida (100 mg, 0,28 mmol) foi acrescentado e amistura foi agitada a 90°C por 16h. A mistura reacional foipurificada por meio de MDAP. A fração de produto foicombinada e concentrada para produzir o composto titulo comoum sólido branco (13 mg, 11 %).
J=6Hz) , 8,24 (d, 1H, J=2Hz), 7,88 (dd, 1H, J=6Hz & 2Hz),3,91 (m, 4H), 2,85 (t, 2H, J=7,5Hz), 1,56-1,76 (m, 6H), 1,28(m, 2H), 0,87 (t, 3H, J=7,5Hz) ppm.
LC/MS: m/z 478 [MH]+, RT 3,31 min.
1H NMR (DMSO-de) δΗ 14,4 (br. s, 1H) , 8,79 (d, 1H,
Exemplo 136:
3-buti1-8-cloro-1-{4-[5-(3-metil-2-piridinil)-1,2,4-oxadiazol-3-il]butil}-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona<formula>formula see original document page 148</formula>
Ácido 3-Metil-2-piridinocarboxíIico (35 mg, 0,25mmol) e CDI (45 mg, 0,28 mmol) foram agitados em DMSO anidro(0,9 mL) na temperatura ambiente por lh. (IZ)-5-(3-butil-8-cloro-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetraidro-lH-purin-l-il)-N-hidroxi-pentanimidamida (100 mg, 0,28 mmol) foi acrescentado e amistura foi agitada a 90°C por 16h. A mistura reacional foipurificada por meio de MDAP. A fração de produto foicombinada e concentrada para produzir o composto titulo comoum sólido branco 14 mg, 12%).
LC/MS: m/z 458 [MH]+, RT 3,13 min.
Exemplo 137:
3-buti1-8-cloro-1-{4-[5-(2-piridinil)-1,2,4-oxadiazol-3-il ] butil} - 3, 7-diidro-lif-purin-2, 6-diona
Método A
<formula>formula see original document page 148</formula>
Ácido 2-piridinocarboxíIico (31 mg, 0,25 mmol) e(45 mg, 0,28 mmol) foram agitados em DMSO anidro (0,5na temperatura ambiente por Ih. Uma solução de (IZ)-5-(3-butil-8-cloro-2 , 6-dioxo-2, 3, 6, 7-tetraidro-ltf-purin-l-il) -N-hidroxipentanimidamida (100 mg, 0,28 mmol) em DMSO (0,4mL) foi acrescentado e a mistura foi agitada a 90°C por 16h.
A mistura reacional foi purificada diretamente por MDAP. Asfrações do produto foram combinadas e concentradas paraproduzir o composto titulo como um sólido branco (14 mg, 12%).
LC/MS: m/z 444 [MH]+, RT 3,01 min.
1H NMR (DMS0-d6) δ: 0,87 (t, 3H, J = I Hz), 1,27(m, 2H), 1,65 (m, 6H), 2,84 (t, 2H, J=I Hz), 3,91 (m, 4H),7,70 (dd 1H, J = 5 & 7Hz), 8,07 (m, 1H), 8,19 (d, 1H, J =8Hz), 8,81 (d, 1H, J = 5Hz), 14,5 (br. s, 1H).
Método B
<formula>formula see original document page 148</formula>
Ácido 2-PiridinocarboxiIico (675 mg, 5,3 mmol) eCDI (909 mg, 5,6 mmol) foram agitados em DMF anidro (30 mL)na temperatura ambiente sob nitrogênio por 90 minutos. (IZ)-5-(3-butil-8-cloro-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetraidro-lH-purin-l-il)-N-hidroxipentanimidamida (2,0 g, 5,6 mmol) e DMF (10 mL)foram acrescentados e a mistura foi agitada a 100°C por 20h.
A mistura reacional foi resfriada até a temperatura ambienteem seguida particionada entre solução satutada de NH4Cl(aq)e EtOAc. A camada orgânica foi separada, e a solução aquosaextraída com EtOAc. Os extratos combinados foram lavados comsolução aquosa saturada de cloreto de sódio, secada MgSO4 econcentrada produzindo um liquido laranja. Este foipurificado usando o sistema Companion™ produzindo doissólidos brancos idênticos (649 mg; 240 mg).
LC/MS: m/z 444 [MH]+, RT 3,04 min.
Método C
<formula>formula see original document page 150</formula>
Um frasco de 12L de fundo redondo foi equipado comum agitador mecânico de topo, uma sonda de temperatura, comum controlador de temperatura J-KEM, um condensador e umadaptador para entrada de nitrogênio. 0 frasco foi carregadocom ácido picolinico (0,180 kg, 1,46 mol), MIBK (4,0 L) ,1,1'-carbonildiimidazol (0,23 kg, 1,42 mol,) e mais MIBK(0,66 L). A mistura foi agitada e aquecida a 50°C duranteaproximadamente lh, e a temperatura subiu para 56°C. Ossólidos dissolveram durante o aquecimento a 50°C e dióxidode carbono. Após lha 50°C, (IZ)-5-(3-butil-8-cloro-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetraidro-lH-purin-l-il)-N-hidroxipentanimida-mida (0, 467 kg, 1,31 mol) foi acrescentado à reação. Amistura foi e em seguida aquecida a 90°C durante 1 h.
Análise por HPLC de a reação após aquecimento a 90°C por 5,5horas indicou que a reação estava completa. 0 aquecimentofoi desligado, e solução de ácido clorídrico 1,0 N (2,33 L)foi acrescentado. A temperatura caiu para 61°C. Após agitaçãode um dia para o outro, o produto precipitou e foi filtrado.
A torta de filtro foi lavada com água (1 χ 2,23 L, Ix 2,43L) e heptanos (1,40 L). A torta úmida foi secada em um fornode vácuo a 50°C por 22 horas para produzir 396 g de produto(68%) Análise por HPLC 97,7% (AUC) tR = 18,6 min.
Os Métodos A, B e C de Exemplo 137 produz a subs-tancialmente cristalina 3-butil-8-cloro-l-{4-[5-(2-piridinil)-1,2, 4-oxadiazol-3-il] butil}-3, 7-diidro-lfí-purin-2, 6-diona,forma 2,
Método D
Formação de 3-butil-8-cloro-l-{4-[5-(2-piridinil)-1,2, 4-oxadiazol-3-il]butil}-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona,Forma 1
0 vaso reacional foi carregado com 3-butil-8-cloro-1-{4-[5-(2-piridinil)-1,2,4-oxadiazol-3-il]butil}-3,7-diidro-líí-purin-2, 6-diona (1 ρ) , acetona (20 vol) e água(0,6 vol). A mistura foi agitada e aquecida a 50-60°C eagitada por um mínimo de 1 h. Uma solução foi formada a qualé clarificada nessa temperatura por filtração através de umfiltro de um mícron para dentro de um segundo vasoreacional. A solução foi resfriada durante aproximadamente 3horas a 33-380C e semeada nessa temperatura com 3-butil-8-cloro-1-{4-[5-(2-piridinil)-1,2,4-oxadiazol-3-il]butil}-3, 7-diidro-lfl-purin-2,6-diona (Forma 1, 0,01 ρ). A suspensãorala foi agitada nessa temperatura por um mínimo de 1 h e emseguida resfriada a 20-25°C e mantida nessa temperatura porum mínimo de 12 horas. A suspensão desse modo formada foiresfriada a 13-17°C e mantida nessa temperatura por ummínimo de 1 h. A suspensão foi e em seguida amostrada*, e osólido coletado por filtração no laboratório. 0 sólido foisecado e analisado por xrpd/DSC para verificar a forma. Se aforma é como requerida (Forma 1) a batelada é filtrada,lavada (2x3 vol de acetona) e secada em um forno de vácuo a50°C. A batelada é descarregada uma vez que a análiseapresente que os níveis de solvente (acetona, água) sãoaceitáveis.
Rendimento esperado (75-80% p/p).
Se a forma da amostra tomada em * é mostrada seroutra que a Forma 1 pura,. então** batelada é reaquecida a35-45°C e agitada nessa temperatura por um mínimo de 1 h. Asuspensão rala is e em seguida resfriada a 20-25°C e mantidanessa temperatura por um mínimo de 12 horas. A suspensãodesse modo formada é em seguida resfriada a 13-17°C emantida nessa temperatura por um mínimo de 1 h. A suspensãoé em seguida amostrada, e o sólido coletado por filtração nolaboratório. O sólido é secado e analisado por xrpd/DSC paraverificar a forma. Se a forma é como requerido (Forma 1) abatelada é filtrada, lavada e secada como descritoanteriormente. Se a forma não é a Forma 1 pura, então ociclo a partir de ** é repetido até que seja obtidoresultado satisfatório.
Difração de Raios-X do pó (XRPD)
Os dados de difração de raios-X do pó (XRPD) sãomostrados nas Figuras 1-3. Os dados foram obtidos numdifratômetro de pó PANalytical X'Pert Pro, modelo PW3040/60,número de série DY1850 utilizando um detector X'Celerator.As condições da obtenção foram: radiação: Cu, Ka, gerador detensão: 40 kV, gerador de corrente: 45 mA, ângulo departida: 2,0° 2Θ, ângulo terminal: 40,0° 2Θ, tamanho depasso: 0,0167 °2 Θ, tempo por passo: 31,75 segundos. Asamostras foram preparadas através da montagem de poucasmiligramas da amostra em placas de bolacha de Si (basezero), resultando numa camada fina do pó.
Exemplo 138:
3-buti1-8-cloro-1-{4-[5- ( 4-hidroxifenil)-1,2,4-oxadiazol-3-il ] butil} - 3, 7-diidro-lff-purin-2, 6-diona
<formula>formula see original document page 153</formula>
Ácido 4-Hidroxibenzóico (35 mg, 0,25 mmol) e CDI(45 mg, 0,28 mmol) foram agitados em DMSO anidro (0,9 mL) natemperatura ambiente por lh. (IZ)-5-(3-butil-8-cloro-2, 6-dioxo-2 ,3,6,7-tetraidro-lfí-purin-l-il) -N-hidroxipentanimida-mida (100 mg, 0,28 mmol) foi acrescentado e a mistura foiagitada a 90°C por 16h. A mistura foi purificada por meio deMDAP para produzir o composto titulo como um sólido branco(5 mg, 4%).
LC/MS: m/z 459 [MH]+, RT 3,24 min.
Exemplo 139:
8-cloro-l-[4-(5-fenil-1,2,4-oxadiazol-3-il)butil]-3-propil-3,7-diidro-lfí-purin-2,6-diona<formula>formula see original document page 154</formula>
Ácido benzóico (9 mg, 0, 074 mmol) e CDI (13 mg,0,081 mmol) foram agitados em DMSO anidro (0,9 mL) natemperatura ambiente por lh. (IZ)-5-(8-cloro-2 , 6-dioxo-3-propil-2,3,6,7-tetraidro-lH-purin-l-il)-N-hidroxipentanimi-damida (28 mg, 0,081 mmol) foi acrescentado e a mistura foiagitada a 80°C por 4h. A mistura foi purificada por meio deMDAP para produzir o composto titulo como um sólido branco(0,6 mg, 2%).
LC/MS: m/z 429 [MH]+, RT 3,21 min.
1H NMR (MeOH-d4) δ: 0,93 (t, 3H, J = 7,5Hz), 1,74(m, 4H), 1,84 (m, 2H), 2,84 (t, 2H, J = 7Hz), 3,97 (t, 2H, J= 7,5Hz), 4,08 (t, 2H, J = 7Hz), 7,57 (dd, 2H, J = 7 &7, 5Hz) , 7,65 (dd, 1H, J = 7 & 7,5Hz), 8,08 (d, 2H, J =7,5Hz).
Exemplo 140:
3-butil-8-cloro-l-{4-[5-(2-cloro-6-fluorfenil)-1,2,4-oxadiazol-3-il]butil}-3,7-diidro-lH-purin-2, 6-diona
<formula>formula see original document page 154</formula>Acido 2-cloro-6-fluorbenzóico (44 mg, 0,25 mmol) eCDI (45 mg, 0,28 mmol) foram agitados em DMSO anidro (0,9mL) na temperatura ambiente por lh. (IZ)-5-(3-butil-8-cloro-2, 6-dioxo-2,3,6,7-tetraidro-lH-purin-l-il)-N-hidroxipentani-midamida (100 mg, 0,28 mmol) foi acrescentado e a misturafoi agitada a 90°C por 16h. A mistura foi purificado pormeio de MDAP. A fração de produto foi combinada econcentrada para produzir o composto titulo como um sólidobranco (6,4 mg, 5%).
LC/MS: m/z 495 [MH]+, RT 3,58 min.
Exemplo 141:
3-butil-8-cloro-l-(4-[5-(5-hidróxi-2-piridinil)-1, 2,4-oxadiazol-3-il]butil}-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona
<formula>formula see original document page 155</formula>
Ácido 5-hidróxi-2-piridinocarboxíIico (24 mg, 0,17mmol) e CDI (31 mg, 0,19 mmol) foram agitados em DMSO anidro(0,9 mL) na temperatura ambiente por lh. (IZ)-5-(3-butil-8-cloro-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetraidro-lff-purin-l-il)-N-hidroxi-pentanimidamida (68 mg, 0,19 mmol) foi acrescentado e amistura foi agitada a 90°C por 16h. A mistura foi purificadopor meio de MDAP e a fração de produtos concentrada paraproduzir o composto titulo como um sólido branco (19 mg, 24%).
LC/MS: m/z 459 [MH]+, RT 3,03 min.Exemplo 142:
8-cloro-3-pentil-l-(4-[5-(3-tienil)-1,2,4-oxadiazol-3-il]butil}-3,7-diidro-l ff-purin-2,6-diona
<formula>formula see original document page 156</formula>
Uma solução de (IZ)-5- (8-cloro-2,6-dioxo-3-pentil-2,3,6,7-tetraidro-lfí-purin-l-il)-N-hidroxipentanimidamida(50 mg, 0,13 mmol) em EtOH (1 mL) foi tratada com umasolução de NaOEt 21% em EtOH (55 \iL, 0,21 mmol) e 3-tiofenecarboxilato de etila (18 μί, 0,13 mmol). A misturafoi aquecida em microondas a 150°C por 10 min. Apósresfriamento, a reação foi particionada entre 2M HCl (aq) eEtOAc. A camada orgânica foi separada e o aquoso extraídonovamente com EtOAc. Os extratos combinados foramconcentrados e purificada por MDAP. 0 composto título foiobtido como um sólido esbranquiçado (20 mg, 32%).
LC/MS: m/z 463 [MH]+, RT 3,6 min.
Exemplo 143:
8-cloro-3-pentil-l-{4-[5-(2-tienil)-1,2,4-oxadiazol-3-il]butil}-3,7-diidro-lff-purin-2,6-diona
<formula>formula see original document page 156</formula>Ácido 2-tiofenocarboxilico (14 mg, 0,11 mmol) foidissolvido em NMP (0,9 mL) e tratado com CDI (18 mg, 0,11mmol). Após 1 Hr (IZ)-5-(8-cloro-2,6-dioxo-3-pentil-2,3,β,7-tetraidro-lH-purin-l-il)-N-hidroxipentanimidamida (50 mg,0,13 mmol) foi acrescentado e a mistura aquecida nomicroondas a 150°C por 15 min. A solução foi diretamentepurificada por MDAP para obter o composto titulo o qual foie em seguida secado por congelamento a partir de dioxano-1,4para produzir o composto titulo como um sólido branco (19mg, 31%).
LC/MS: m/z 463 [MH]+, RT 3,5 min.
Exemplo 144:
8-cloro-3-pentil-l-(4-[5-(1,3-tiazol-2-il)-1,2,4-oxadiazol-3-il]butil}-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona
<formula>formula see original document page 157</formula>
Uma solução de (IZ)-5-( 8-cloro-2,6-dioxo-3-pentil-2,3,6,7-tetraidro-lH-purin-l-il)-N-hidroxipentanimidamida(50 mg, 0,13 mmol) em EtOH (1,5 mL) foi tratada com umasolução de NaOEt 21% em EtOH (50 μί, 0,13 mmol) e 1,3-tiazole-2-carboxilato de etila (18 mg, 0,11 mmol). A misturafoi aquecida em microondas a 170°C por 10 min. Apósresfriamento, a reação foi particionada entre 2M HCl (aq) eEtOAc. A camada orgânica foi separada e em seguida concen-trada e purificada por MDAP. 0 composto titulo foi obtidocomo um sólido branco (13 mg, 21%).
LC/MS: m/z 464 [MH]+, RT 3,3 min.
1H NMR (DMSO-d6) δ: 0,83 (t, 3H, J = 7Hz), 1,21-1,32 (m, 4H), 1,60-1,77 (m, 6H), 2,84 (t, 2H, J = 7Hz), 3,91(m, 4H) , 8,23 (d, 1H, J = 3Hz), 8,27 (d, 1H, J = 3Hz), 14,4(br s, 1H).
Exemplo 145:
3-butil-8-cloro-l-{4-[3- (2-piridinil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]butil}-3,7-diidro-l tf-purin-2,6-diona
a) Preparação de 3-butil-8-cloro-l-{4-[3-(2-piridinil) -1, 2, 4-oxadiazol-5-il]butil}-3, 7-diidro-líí-purin-2,6-diona
<formula>formula see original document page 158</formula>
A uma mistura de 5- (3-butil-8-cloro-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetraidro-lH-purin-l-il)pentanoato de etila (120 mg,0,32 mmol) e de N-hidróxi-2-piridinocarboximidamida (50 mg,0,36 mmol) em EtOH (2 mL) foi acrescentado a 21% (p/v)solução de etóxido de sódio em EtOH (0, 225 mL, 0,62 mmol) eem seguida aquecida num frasco selado em um forno microondasa 140°C por 10 min. A mistura resfriada foi evaporada até asecura e o resíduo particionado entre clorofórmio (5 mL) esolução aquosa saturada de cloreto de amônio (5 mL). A faseorgânica foi evaporada até secura e o produto brutosubmetido à purificação por MDAP. Frações contendo o produtoforam combinadas e evaporadass até a secura. 0 produto foitriturado até um sólido numa pequena quantidade de éterdietilico e em seguida secada para revelar o composto titulocomo um sólido branco (44 mg, 31%).
LC/MS: m/z 444 [MH]+, RT 3,03 min.
IH NMR (CDCl3) δ: 0,96 (t, 3H, J = 7,3Hz), 1,40(m, 2H), 1 ,74 (m, 2H), 1,88 (m, 2H), 1,99 (m, 2H), 3,07 (t,2H, J = 7, 5Hz) , 4,09 (t, 2H, J = 7,5Hz), 4,17 (t, 2H, J =7, OHz) , 7,43 (m, 1H) , 7,64 (m, 1H) , 8,10 (m, 1H) , 8,79 (m, 1H).
b) Preparação de N-hidróxi-2-piridinocarboximi-damida
<formula>formula see original document page 157</formula>
A uma mistura de 2-piridinocarbonitrila (3g, 29mmol) e carbonato de potássio (4,lg, 30 mmol)em EtOH (30 mL)foi acrescentado água (15 mL) e, cuidadosamente, cloridratode hidroxilamina (2,9 g, 42 mmol) e em seguida aquecida arefluxo por 6h, resfriada e evaporada até a secura. 0resíduo foi tratado com água (100 mL) e o produto sólidosuspenso removido por filtração, lavado com água e secadopara produzir o composto título como um sólido branco(2,28g, 57%).
1H NMR (DMSO-d6) δ: 5,85 (br s, 2H), 7,40 (m, 1H) ,7,79 (m, 1H), 7,86 (m, 1H), 8,55 (m, 1H) , 9,92 (s, 1H)Exemplo 146:
3-butil-8-cloro-1-[4-(3-fenil-1,2,4-oxadiazol-5-il)butil]-3, 7-diidro-lH-purin-2,6-diona
Método A
a) 3-butil-8-cloro-1-[4-(3-fenil-1,2,4-oxadiazol-5-il)butil]-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona
<formula>formula see original document page 160</formula>
5-(3-butil-8-cloro-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetraidro-lH-purin-l-il)pentanoato de etila (74 mg, 0,2 mmol) e benzami-doxima (30 mg, 0,22 mmol) foram suspensos em EtOH anidro (1mL) e etóxido de sódio etanólico (21% em p, 0,111 mL, 0,3mmol) foi acrescentado. A mistura foi aquecida suavementeaté que os sólidos dissolvessem e em seguida aquecida noreator de microondas a 140°C por 10 min. A mistura foi emseguida particionada entre EtOAc e 2M HCl e a fase orgânicasecada (Na2SO4) e evaporada. MDAP produziu o composto titulopuro (40,7mg).
LC/MS: m/z 443 [MH]+, RT 3,67 min.
1H NMR (DMS0-d6) Ô: 0,89 (t, 3H, J = 7Hz), 1,22-1,34 (m, 2H), 1, 57-1, 75 (m, 4H) , 1, 75-1, 86 (m, 2H), 3,05 (t,2H, J = 7 Hz), 3,88-3,98 (m, 4H), 7,52-7,63 (m, 3H), 7,95-8,0 (m, 2H).b) 5-(3-butil-8-cloro-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetraidro-lH-purin-l-il)pentanoato de etila
<formula>formula see original document page 161</formula>
A 3-butil-8-cloro-7-(2-propen-l-il)-3,7-diidro-lA7-purin-2, 6-diona (1,5 g, 5,31 mmol) em DMF anidro (25 mL)foi acrescentado Cs2CO3 (1,905 g, 5,84 mmol), seguido por 5-bromovalerato de etila (l,46g, 6,99 mmol). A mistura foiaquecida a 55°C por 18h e em seguida deixada esfriar. Elafoi desgaseifiçada mediante repetidamente evacuar ereadmitir nitrogênio, e em seguida morfolina (3,70 mL, 42,5mmol) e tetraquis(trifenilfosfino)paládio(0) (1,0 g, 0,865mmol) foram acrescentados e a mistura agitada por 5h. EtOAc(75 mL), 2M HCl (40 mL) e água (20 mL) foram acrescentados ea fase orgânica foi separada, lavada com solução aquosasaturada de cloreto de sódio (3 χ 25 mL) , filtrada pararemover algum sólido amarelo insolúvel, secada (Na2SO4) eevaporada. O resíduo (2,5g) foi purificado por meio de SPEaminopropila (20 g), carregando em THF-MeOH (1:1), lavagemcom MeOH e eluindo o produto com DCM-MeOH (1:1) contendoAcOH 5% adicionado para produzir o composto título (l,53g).
LC/MS:, m/z 371 MH+, RT 3,18min
Método B
a) 3-butil-8-cloro-l-[4-(3-fenil-l,2,4-oxadiazol-5-il)butil]-3,7-diidro-ltf-purin-2,6-diona<formula>formula see original document page 162</formula>
CDI (0,98 g, 6,1 mmol) foi acrescentado a umasolução de ácido 5-(3-butil-8-cloro-2,6-dioxo-2, 3,6,7-tetraidro-lH-purin-l-il)pentanóico (1,89 g, 5,5 mmol) em DMF(15 mL) e agitado sob nitrogênio por l,5h. Benzamidoxima(0,91 g, 6,1 mmol) foi acrescentado e a mistura agitada aIlO0C de um dia para o outro. A mistura reacional foiparticionada entre EtOAc e 2M HCl. A camada orgânica foiseparada, lavada com solução aquosa saturada de cloreto desódio, secada (MgSO4) e evaporada. 0 produto bruto foicristalizado a partir de metanol e em seguida mais puri-ficado usando o sistema Companion™ e um gradiente de eluiçãode cicloexano para EtOAc. Frações contendo o produto foramcombinadas e evaporadass para produzir o composto titulocomo um sólido branco (850 mg).
LC/MS: m/z 443 [MH]+, RT 3,52 min.
1H NMR (MeOH-d4) δ: 0,94 (t, 3H, J = 7,5 Hz), 1,31-1,41 (m, 2H) , 1, 65-1, 73 (m, 2H) , 4,06 (t, 2H, J = 7 Hz),7,46-7,55 (m, 3H), 7,98-8,02 (m, 2H).
b) Ácido oxo-2,3,6,7-tetraidro-lH-purin-l-il)pen-tanóico<formula>formula see original document page 163</formula>
Uma mistura de 5-(3-butil-8-cloro-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetraidro-lfl-purin-l-il)pentanoato de etila (2,8g, 7,55mmol), LiOH (542 mg, 22,7 mmol), água (2,5 mL) e metanol (50mL) foi agitada na temperatura ambiente por por 60 h. Amistura foi particionada entre água e EtOAc e o pH da faseaquosa ajustado para pH 4-5. A camada orgânica foi separada,lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio,secada (MgSO4) e evaporada para produzir o composto titulocomo um sólido branco (2,18g).
LC/MS: m/z 343 [MH]+, RT 2,69 min.
Exemplo 147:
8-cloro-3-pentil-l-r4-(3-fenil-l,2,4-oxadiazol-5-il)butilal-3, 7-diidro-lfí-purin-2 , 6-diona
<formula>formula see original document page 163</formula>
Um mistura de 5-(8-cloro-2,6-dioxo-3-pentil-2,3,6,7-tetraidro-lH-purin-l-il)pentanoato de metila (50 mg,0,13 mmol), benzamidina oxima (20 mg, 0,15 mmol) e umasolução de NaOEt 21% em EtOH (76 μΐ,, 0,20 mmol) em EtOH (1,5mL) foi aquecida em microondas a 140°C por 10 min. Apósresfriamento a reação foi particionada entre 2M HCl (aq) eEtOAc. A camada orgânica foi separada, secada (MgSO4) econcentrada. A purificação por MDAP produziu o compostotitulo como um sólido branco (25 mg, 41%).
LC/MS: m/z 457 [MH]+, RT 3,7 min.
1H NMR (DMSO-de) δ: 0,82 (t, 3H, J = 7 Hz), 1,25(m, 4H), 1,66 (m, 4H), 1,79 (m, 2H), 3,04 (t, 2H, J = 7Hz),3,92 (4H,m), 7,57 (m, 3H), 7,97 (m, 2H), 14,5 (br s, 1H).
Exemplo 148:
3-buti1-8-cloro-1-{4-[3-(3-hidroxifenil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]butil}-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona
<formula>formula see original document page 164</formula>
Uma mistura de 5-(3-butil-8-cloro-2,6-dioxo-2,36,7-tetraidro-lH-purin-l-il)pentanoato de etila (50 mg, 0,13mmol), N,3-diidroxibenzenocarboximidamida (25 mg, 0,16mmol), 21% solução de NaOEt em EtOH (55 pL, 0,15 mmol) eEtOH (1,5 mL) foi aquecida em microondas a 180°C por 10 min.
Uma outra aliquoda de solução 21% de NaOEt em EtOH (55 μΐ,,0,21 mmol) foi acrescentada e a mistura aquecida nomicroondas a 175°C por 30 min. Após resfriamento a reaçãofoi particionada entre 2M HCl (aq) e EtOAc. A camadaorgânica foi separada, concentrada e purificada por MDAP. Ocomposto titulo foi obtido como um sólido esbranquiçado (20mg, 32%).
LC/MS: m/z 459 [MH]+, RT 3,3 min.Exemplo 149:
8-cloro-1-(4-[3-(4-hidroxifenil)-1,2,4-oxadiazol-5-il ] butil }-3-pentil-3, 7-diidro-lH-purin-2, 6-diona
<formula>formula see original document page 165</formula>
Uma solução de ácido 5-( 8-cloro-2,6-dioxo-3-pentil-2,3,6,7-tetraidro-lfl-purin-l-il)pentanóico (50 mg,0,14 mmol) em DMF (2 mL) foi tratada com CDI (23 mg, 0,14mmol) e agitado na temperatura ambiente por 30 min. N,4-diidroxibenzenocarboximidamida (26 mg, 0,17 mmol) foiacrescentado e a mistura aquecida no microondas a 120°C por15 min. Após resfriamento a reação foi particionada entre 2MHCl (aq) e EtOAc. A camada orgânica foi separada, concen-trada e purificada por MDAP. 0 composto titulo foi obtidocomo um sólido esbranquiçado (17 mg, 2 6%).
LC/MS: m/z 473 [MH]+, RT 3,5 min.
Exemplo 150:
3-butil-8-cloro-l-[4-(5-fenil-2H-tetrazol-2-il)butilal-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona
<formula>formula see original document page 165</formula>Uma mistura de metano-sulfonato de 4-[3-butil-8-cloro-2,6-dioxo-7-(2-propen-l-il)-2,3,6,7-tetraidro-lH-purin-1-il]butila (50 mg, 0,12 mmol), Cs2CO3 (45 mg, 0,14 mmol) eDMF (3 mL) foi tratada com 5-fenil-lH-tetrazol (20 mg, 0,14mmol) e agitada por 60 h a 50°C. Após resfriamento, amistura foi desgaseifiçada por aplicação de vácuo e emseguida nitrogênio foi introduzido. Pd(PPh3)4 (20 mg, 0,017mmol) foi acrescentado e a mistura desgaseifiçada mais umavez. Morfolina (150 pL, 1,7 mmol) foi acrescentado e amistura foi agitada sob nitrogênio por 18h, em seguidaparticionada entre 2M HCl (aq) e EtOAc. A camada orgânicafoi separada e a camada aquosa extraída novamente com EtOAc.
Os extratos combinados foram concentrados, produzindo umresíduo amarelo. MeOH foi acrescentado e em seguida passadonuma coluna NH2-propila com o produto eluindo com 2%AcOH/MeOH. Purificação adicional por MDAP produziu ocomposto título como um sólido esbranquiçado (15 mg, 29%).
LC/MS: m/z 443 [MH]+, RT 3,4 min.
1H NMR (DMS0-d6) δ: 0,86 (t, 3H, J = 7Hz), 1,26 (m,2H) , 1,59 (m, 4H) , 1,97 (m, 2H), 3,90 (m, 4H), 4,76 (t, 2H,J = 7Hz), 7,54 (m, 3H), 8,02 (m, 2H), 14,4 (br s, 1H).
Exemplo 151:
3-butil-8-cloro-l-[4-(5-oxo-4-fenil-4,5-diidro-lH-tetrazol-1-il)butil]-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona<formula>formula see original document page 167</formula>
ma mistura de metano-sulfonato de 4-[3-butil-8-cloro-2,6-dioxo-7-(2-propen-l-il)-2,3,6,7-tetraidro-lH-purin-1-il]butila (50 mg, 0,12 mmol), Cs2CO3 (45 mg, 0,14 mmol) eDMF (3 mL) foi tratada com 1-fenil-1,2-diidro-5H-tetrazol-5-ona (23 mg, 0,14 mmol) e agitado por 60 h a 50°C. Apósresfriamento, a mistura foi desgaseifiçada por aplicação devácuo e em seguida nitrogênio foi introduzido. Pd(PPh3J4 (20mg, 0,017 mmol) foi acrescentado e a mistura desgaseifiçadamais uma vez. Morfolina (150 pL, 1,7 mmol) foi acrescentadoe a mistura foi agitada sob nitrogênio por 18h, em seguidaparticionada entre 2M HCl (aq) e EtOAc. A camada orgânicafoi separada e a camada aquosa extraída novamente com EtOAc.
Os extratos combinados foram concentrados, produzindo umresíduo amarelo. MeOH foi acrescentado e em seguida passadanuma coluna aminopropila com o produto eluindo com 2%AcOH/MeOH. A purificação adicional por MDAP produziu ocomposto título como um sólido esbranquiçado (27 mg, 51%) .NB. ca. 10% de material O-alquilado presente.
LC/MS: m/z 459 [MH]+, RT 3,1 min.
1H NMR (DMSO-d6) δ: 0,88 (t, 3H, J = 7Hz), 1,28 (m,2H) , 1,62 (m, 4H), 1,79 (m, 2H), 3,91 (m, 4H) , 4,03 (m, 2H),7,44 (m, 1H), 7,57 (m, 2H), 7,85 (m, 2H), 14,5 (br s, 1H).Exemplo 152:
3-butil-8-cloro-l-(4-[3-(4-hidroxifenil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]butil}-3,7-diidro-lg-purin-2,6-diona
<formula>formula see original document page 168</formula>
Uma solução agitada de ácido 5-(3-butil-8-cloro-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetraidro-lfl-purin-l-il)pentanóico (100mg, 0,29 mirtol) em DMF (4 mL) foi tratada com CDI (52 mg,0,32 mmol). Após 1 Hr N,4-diidroxibenzenocarboximidamida foiacrescentado e a mistura aquecida a IOO0C por 6h. Oncooling, a mistura reacional foi particionado entre 2M HCl(aq) e EtOAc. A camada orgânica foi separada, lavada comsolução aquosa saturada de cloreto de sódio, secada (MgSO4)e concentrada. A purificação por MDAP produziu o compostotitulo como um sólido cinza claro (72mg).
LC/MS: m/z 459 [MH]+, RT 3,27 min.
Os compostos seguintes (Tabela 10) foram preparadosutilizando um método análogo àquele para o exemplo 146,usando a apropriada amidoxima.Tabela 10
<table>table see original document page 169</column></row><table>
Exemplo Comparativo A:
3-buti1-8-cloro-1-{3- (1-fenilciclopentil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]propil}-3,7-diidro-l#-purin-2,6-diona
<formula>formula see original document page 169</formula>
4-(3-butil-8-cloro-2,6-dioxo-2)3, 6, 7-tetraidro-lH-purin-l-il)butanoato de etila (53 mg, 0,15 mmol), N-hidróxi-i-fenilciclopentanocarboximidamida (34 mg, 0,165 mmol) emetóxido de sódio (20 mg, 0,37 mmol) em MeOH anidro (0,75mL) foram aquecidos a 140°C no reator microondas por 10 min.
A mistura foi em seguida particionada entre acetato de etilae 2M HCl, a fase orgânica evaporada e o produto purificadopor MDAP para produzir o composto titulo como um sólido(29, 1 mg).
LC/MS: m/z 497 [MH]+, RT 3,76 min.
Exemplo 156:
1-[3-(3-biciclo[4.2.0]octa-1,3,5-trien-7-il-l,2,4-oxadiazol-5-il)propil]-3-butil-8-cloro-3,7-diidro-l#-purin-2,6-diona
<formula>formula see original document page 48</formula>
Esse composto foi preparado usando um método aná-logo àquele para o Exemplo Comparativo A, usando a apro-priada amidoxima.
Rendimento ( mg): 28,8
LC/MS: m/z 455 [MH]+ , RT 3,43 min.
Exemplo 157:
3-buti1-8-cloro-1-[3- (3-{ [4 - (metilóxi)fenil]metil}-1,2,4-oxadiazol-5-il)propil]3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona
<formula>formula see original document page 48</formula>Preparado usando um método análogo àquele usadopara o exemplo 93, exceto que uma etapa adicional de puri-ficação final usando HPLC foi empregada. Rendimento 6,0 mg.
LC/MS: m/z 473 [MH]+, RT 3,27 min.
Os compostos seguintes (Tabela 11) foram prepa-rados utilizando um método análogo àquele para o exemplo 75,usando a apropriada amidoxima [com a exceção de que porexemplo, 162 o produto bruto foi agitado em EtOH (0,75 mL)com 2M NaOH (0,5 mL) de um dia para o outro antes da usualretomada EtOAc/HCl e MDAP; Exemplo 164 foi isolado como umaimpureza a partir da preparação do Exemplo 165 e foiseparado dele por HPLC; para os exemplos 166, e 167 o pHdurante a retomada aquosa foi ajustado para aproximadamente5 antes da extração; adicionalmente o Exemplo 167 foiadicionalmente purificado por SPE silica (2g, DCM-MeOH 40:1e em seguida 20:1) após MDAP].
Tabela 11
<table>table see original document page 171</column></row><table><table>table see original document page 172</column></row><table><table>table see original document page 173</column></row><table>
Os compostos seguintes (Tabela 12) foram prepa-rados utilizando um método análogo àquele para o exemplo 90,usando a apropriada amidoxima [com a exceção de que Exemplo170 foi conduzido em meia escala do Exemplo 90 e durante aretomada a fase aquosa foi neutralizada antes da extração;
Exemplo 171 foi conduzido numa meia escala do Exemplo 90 e oproduto bruto agitado com 2M NaOH (0,5 mL) em EtOH (1 mL)por 5h antes da retomada e MDAP; por exemplo, 175 0,185mL(0,5 mmol) de 21% NaOEt foi usado].
Tabela 12
<table>table see original document page 174</column></row><table><table>table see original document page 175</column></row><table>Exemplo 180:
3-butil-8-cloro-l- (3 - { 3 - [ (2-oxo-2 , 3-diidro-l ff-benzimidazol-5-il)metil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}propil)-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona
<formula>formula see original document page 176</formula>
Sintetizado por meio de um método análogo àqueledo Exemplo 99 com a exceção de que um adicional de 2equivalentes de etóxido de sódio 21% (0,11 mL) foi usado, otempo extra de aquecimento foi 20 min, e o produto foiisolado por filtração seguido por trituração com MeOHquente. Rendimento 14,5mg.
LC/MS: m/z 499 [MH]+, RT 2,78 min.
Os compostos seguintes (Tabela 13) foram preparadospor meio de um método análogo àquele do Exemplo 1 [com aexceção de que Exemplos 181-186 foram todos sintetizadosnuma escala começando de 50 mg de 8-cloro-3-pentil-7-(2-propen-l-il)-1-[3-(-1 Jí-pirazol-4-il)propil]-3,7-diidro-lH-purin-2, 6-diona; Exemplos 184, 186, 188, 189 e 190 foramadicionalmente purificados por MDAP em seguida da SPEaminopropila; Exemplo 185 foi adicionalmente purificado porrecristalização a partir de MeOH em seguida da SPEaminopropila; por exemplo, 191, 128 mg (1,2 mmol) de carbo-nato de sódio foi usado; durante a retomada e a fase aquosafoi ajustada para pH6 antes da extração; e o produto foipurificado por meio de MDAP e em seguida por mais HPLC; porexemplo, os sólidos de 184 que precipitaram durante aretomada foram combinados com extratos de EtOAc antes deSPE].
Tabela 13
<table>table see original document page 177</column></row><table><table>table see original document page 178</column></row><table><table>table see original document page 179</column></row><table>
Exemplo 192:
8-cloro-1-(3-{1-[(4-clorofenil)metil]-lH-pirazol-4-il}propil)-3-pentil-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona
<formula>formula see original document page 179</formula>
8-cloro-3-pentil-7-(2-propen-l-il)-1-[3-(lH-pirazol-4-il)propil]-3,7-diidro-l#-purin-2,6-diona (50 mg, 0,123mmol) em DMF anidro (1,5 mL) foi agitado com carbonato desódio (75 mg, 0,708 mmol) e 4-clorobrometo de benzila (150mg, 0,73 mmol) a 40°C por 18h. A mistura foi particionadaentre EtOAc e água, a fase orgânica lavada com soluçãoaquosa saturada de cloreto de sódio, secada e evaporada. Oproduto foi purificado por meio de cromatograf ia de fasenormal sobre silica (Companion System, gradiente EtOAc-cicloexano) produzindo um óleo (44 mg) . Este foi agitado emDMF anidro desgaseifiçado (1 mL) com tetraquis(trifenilfos-fino)paládio(0) (19 mg) e morfolina (0,072 mL) sobnitrogênio por 6h. A mistura foi particionada entre EtOAc e2M HCl e a fase orgânica evaporada e purificada através doprocedimento usual de SPE aminopropila. Rendimento 21,0 mg.
LC/MS: m/z 489 [MH+] , RT 3,59 min.
Os compostos seguintes (Tabela 14) foram preparadospor meio de um método análogo àquele do Exemplo 6 [com aexceção de que para o exemplo, 193 uma segunda porção dePd(PPh3)4 foi acrescentada após 5h, agitação foi continuadade um dia para o outro, e purificação final foi conseguidapor HPLC; para o exemplo, 195 requereu purificação adicionalpor MDAP; Exemplo 200 requereu purificação adicional porrecristalização a partir de MeOH; Exemplo 201 requereupurificação adicional por trituração com MeOH].
Tabela 14
<table>table see original document page 180</column></row><table><table>table see original document page 181</column></row><table><table>table see original document page 182</column></row><table>
Exemplo 202:
8-cloro-l-(3-{1-[(5-cloro-2-tienil)metil]-lH-pirazol-4-il}propil)-3-pentil-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona
<formula>formula see original document page 182</formula>
8-cloro-3-pentil-7-(2-propen-l-il)-1-[3-(1H-pirazol-4-il)propil]-3,7-diidro-l#-purin-2,6-diona (61 mg,0,15 mmol) em THF anidro (1 mL) a -78°C, sob nitrogênio, foiacrescentado t-butóxido de potássio (1 M em THF, 0,15 mL) ,seguido por 2-cloro-5-(clorometil)tiofeno (25 mg, 0,15mmol). A agitação foi continuada a -78°C por 15min, e emseguida na temperatura ambiente por Ih e finalmente a 60°Cpor 18h. A solução foi desgaseifiçada e morfolina (0,13 mL)e tetraquis(trifenilfosfino)paládio(0) (35 mg) acrescentadae a agitação continuada por 6h. Quantidades adicionais (0,2mL morfolina, 50 mg Pd(PPh3)4) foram acrescentados eagitação continuou de um dia para o outro. Retomada porpartição entre EtOAc e 2M HCl, a fase orgânica evaporada epurificada pelo procedimento padrão de SPE aminopropilaseguido por MDAP produzindo o composto titulo como um sólidobranco (5,1 mg).
LC/MS: m/z 495 [MH]+, RT 3,68 min.
Exemplo 203:
3-butil-8-cloro-l-{3-[5-(fenilmetil)-1,3,4-oxadiazol-2-il]propil}-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona
<formula>formula see original document page 183</formula>
A 3-butil-8-cloro-7-(2-propen-l-il)-3,7-diidro-lH-purin-2, 6-diona (99 mg, 0,35 mmol) em DMF anidro (2 mL) foiacrescentado carbonato de césio (137 mg, 0,42 mmol) seguidopor a solução em DMF anidro (1 mL) de 2-(3-cloropropil)-5-(fenilmetil)-1,3,4-oxadiazol (99 mg, 0,42 mmol). A misturafoi agitada sob nitrogênio e aquecido a 55°C por 2,5h e emseguida agitado na temperatura ambiente de um dia para ooutro. A mistura foi desgaseifiçada mediante repetidamenteevacuar e admitir nitrogênio e em seguida tetraquis(trifenilfosfino)paládio(0) (81 mg, 0,07 mmol) e morfolina(0,305 mL, 3,5 mmol) foram acrescentados e agitação foicontinuada por 5h EtOAc e 2M HCl foram acrescentados e amistura agitada por 20 min e em seguida filtrada. A faseorgânica foi separada e evaporada, e o produto foi purifi-cado por meio de SPE aminopropila (5 g) lavagem com THF-MeOH(1:1) em seguida com MeOH e eluindo o produto de caráterácido com DCM-MeOH (1:1) contendo AcOH 5% adicionado. 0produto desse modo obtido foi purificado ainda mais por MDAPpara produzir o composto titulo (92mg).
LC/MS: m/z 443 [MH]+, RT 3,18 min.Os compostos seguintes (Tabela 15) foram prepa-rados por meio de um método análogo àquele do Exemplo 203,com a exceção de que Exemplo 211 foi adicionalmente puri-ficado por HPLC.
Tabela 18
<table>table see original document page 184</column></row><table><table>table see original document page 185</column></row><table><table>table see original document page 56</column></row><table>
Sintese de intermediários 1,3,4-oxadiazol decloropropila a partir da Tabela 15
2-[(2-cloro-4-fluorfenil)metil]-5-(3-cloropropil)-1,3,4-oxadiazol
2-(3-cloropropil)-5-[(2,4-difluorfenil)metil]-1,3,4-oxadiazol
2-(3-cloropropil)-5-(fenilmetil)-1,3,4-oxadiazolDiacil hidrazinas (500 mg, sintese abaixo) foramagitados em tolueno anidro (4 mL) e oxicloreto de fósforo (4mL) foi acrescentado. A misturas foram aquecidas a 90°C por2h e em seguida deixadas esfriar e os solventes evaporados.
Os residuos foram dissolvidos em tolueno anidro, evaporadose em seguida particionados entre EtOAc e NaHC03 aquoso. Asfases orgânicas foram lavadas com solução aquosa saturada decloreto de sódio, secadas sobre Na2SO4 e evaporadas paraproduzir os oxidiazóis requeridos como óleos incolores.Estes não foram purificados adicionalmente mas reagidosdiretamente com as xantinas como acima.
<table>table see original document page 187</column></row><table>Preparação de 4-cloro-N'-(fenilacetil)butanoidrazida
<formula>formula see original document page 188</formula>
A cloreto de 4-clorobutirila (1,12 mL, 10 mmol) emDCM anidro (10 mL) foi acrescentado, gota a gota, durante 40min, uma mistura de hidrazida fenilacética (1,5 g, 10 mmol)e DIPEA (1,77 mL, 10,2 mmol) em DCM anidro (40 mL) natemperatura ambiente. Um denso precipitado branco se formou.Após um adicional de 20 minutos, 2M HCl (30 mL) foiacrescentado e o composto titulo (sólido branco) foiremovido por filtração, lavado com água e secado (2,24 g) .
LC/MS: m/z 255 [MH]+, RT 2,20 min.
Preparação de 4-cloro-N'-[(2-cloro-4-fluorfenil)acetil]butanoidrazida
<formula>formula see original document page 188</formula>
(i) Uma solução de cloreto de 2-cloro-4-fIuor-fenilacetila (10 mmol) em DCM anidro (15 mL) foi acres-centado durante 20 minutos a uma mistura de carbazato de t-butila (1,32 g, 10 mmol) e DIPEA (1,77 mL, 10,2 mmol) em DCManidro (20 mL) . Após agitação por um adicional de 2h, Amistura foi lavada com 1 M HCl em seguida com NaHCO3 aquoso.
Um sólido branco se precipitou nesse momento, o qual foiremovido por filtração, lavado com água e DCM e em seguidasecado para produzir 2-[ (2-cloro-4-fluorfenil)acetila]hidrazinacarboxilato de 1,1-dimetiletila (1,94 g).(ii) Este composto (1,92 g, 6,34 mmol) foisuspenso em dioxano (2 mL) e 4M HCl em dioxano (5 mL) foiacrescentado. Um denso precipitado branco se formou. Após Iha mistura foi particionada entre EtOAc e NaHCC>3 aquososaturado e a fase orgânica lavada com solução aquosasaturada de cloreto de sódio, secada (Na2SO4) e evaporadaproduzindo 2-(2-cloro-4-fluorfenil)acetoidrazida como umsólido branco (1, 07 g) .
(iii) Um mistura de 2-(2-cloro-4-fluorfenil)acetoidrazida (909 mg, 4,5 mmol) e DIPEA (0,817 mL, 4,7mmol) em DCM anidro (65 mL) foi acrescentado durante 20minutos a cloreto de 4-clorobutirila (0,505 mL, 4,5 mmol)- emDCM anidro (5 mL). Após l,5h, 2M HCl foi acrescentado e a 4-cloro-N-[(2-cloro-4-fluorfenil)acetila]butanoidrazidaprecipitada foi removida por filtração, lavada com água esecada (1,24g).
LC/MS: m/z 307 [MH]+, RT 2,61 min.
Preparação de 2-(3-cloropropil)-5-[(2,4-difluorfenil)metil]-1,3,4-oxadiazol
<formula>formula see original document page 189</formula>
(i) Uma solucao de cloreto de 2,4-diflourfenilacetila (10 mmol) em DCM anidro (15 mL) foi acrescentadodurante 10 min. A uma mistura de carbazato de t-butila (1,32g, 10 mmol) e DIPEA (1,77 mL, 10,2 mmol) em DCM anidro (20mL). Após agitação por l,5h A mistura foi lavada com 1 M HClem seguida com NaHCO3 aquoso. A fase orgânica foi evaporadapara produzir 2-[(2,4-difluorfenil)acetila]hidrazinacarbo-xilato de 1,1-dimetiletila como um sólido branco.
(ii) 2-[(2,4-difluorfenil)acetila]hidrazinacarbo-xilato de 1,1-dimetiletila (10 mmol) em dioxano (5 mL) foiagitado com 4M HCl em dioxano (8 mL) por l,5h. A mistura foiparticionada entre EtOAc e NaHCO3 aquoso saturado e a faseorgânica lavada com solução aquosa saturada de cloreto desódio, secada (Na2SO4) e evaporada. A reação foi incompletae desse modo o residuo foi agitado novamente com 4M HCl emdioxano (10 mL) por 2,5h. A retomada como anteriormenteproduziu 2-(2,4-difluorfenil)acetoidrazida como um sólido(570 mg).
(iii) Uma mistura de 2-(2,4-difluorfenil)acetoi-drazida (570 mg, 3,06 mmol) e DIPEA (0,553 mL, 3,2 mmol) emDCM anidro (30 mL) foi acrescentado a cloreto de 4-clorobutirila (0, 343 mL, 3,06 mmol) em DCM anidro (5 mL)durante 15 min. Um imediato precipitado branco se formou.Após agitação por lh, 2M HCl (20 mL) foi acrescentado e o 2-(3-cloropropil)-5-[(2,4-difluorfenil)metil]-1,3,4-oxadiazolsólido foi removido por filtração, lavado com água e secado(7 2 6mg).
LC/MS: m/z 291 [MH]+, RT 2,45 min.
Exemplo 212:
3-butil-8-cloro-l-[4-(3-fenil-5-isoxazolil)butil]-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona
a) 3-butil-8-cloro-l-[4-(3-fenil-5-isoxazolil)butil]-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona<formula>formula see original document page 191</formula>
3-butil-8-cloro-7-(2-propen-l-il)-3,7-diidro-IH-purin-2,6-diona (100 mg, 0, 354 mmol) e 4-(3-fenil-5-isoxa-zolil)-1-butanol (77 mg, 0,355 mmol) foram dissolvidos emTHF anidro (4 mL) sob nitrogênio. Uma solução deazodicarboxilato de dibenzila (94%, 224 mg, 0,708 mmol) emTHF anidro (2 mL) foi acrescentada. A mistura foi resfriadaa 0°C e uma solução de trifenilfosfina (185 mg, 0,708 mmol)em THF anidro (1 mL) foi acrescentada. A mistura foi agitadapor 20 min a 0°C e em seguida na temperatura ambiente de umdia para o outro. A mistura foi desgaseifiçada e em seguidaagitada com morfolina (0,308 mL) e tetraquis(trifenilfosfi-no) paládio (0) (82mg) por 4,5h. Um adicional de 60 mg detetraquis(trifenilfosfino)paládio(0) foi acrescentado eagitação continuou de um dia para o outro. A reação foiretomada por partição entre EtOAc e 2M HCl, a fase orgânicaevaporada e purificada por SPE aminopropila (5g) lavagem comTHF-MeOH (1:1), MeOH e eluindo com DCM-MeOH (1:1) contendo5% AcOH. Purificação adicional por MDAP produziu o compostotitulo (56mg).
LC/MS: m/z 442 [MH]+, RT 3,59 min.
b) 4-(3-Fenil-5-isoxazolil)-1-butanol
<formula>formula see original document page 191</formula>A cloreto de N-hidroxibenzenocarboximidoila (622mg, 4 mmol) em DCM anidro (6 mL) foi acrescentado 5-hexin-l-ol (431 mg, 4,4 mmol). A mistura foi resfriada a O0C sobnitrogênio como trietilamina (0,612 mL, 4,4 mmol) foiacrescentado gota a gota durante 10 min. Agitado for umadicional de 20 min a 0°C e em seguida na temperaturaambiente de um dia para o outro. A mistura foi lavada comágua e a fase orgânica evaporada. 0 produto foi purificadopor meio de silica SPE (20 g) eluindo com EtOAc-cicloexano(1:2, e em seguida 3:1) para produzir um sólido cerosobranco (443mg).
LC/MS: m/z 218 [MH]+, RT 2,74 min.
Exemplo 213:
3-buti1-8-cloro-1-{3-[3-(fenilmetil)-5-isoxazolil]propil}-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona
a) 3-butil-8-cloro-l-{3-[3-(fenilmetil)-5-isoxazolil]propil}-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona
Preparado de modo análogo a 3-butil-8-cloro-l-[4-(3-fenil-5-isoxazolil)butila]-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona(Exemplo 213) usando metade das quantidades molares,começando de 3-butil-8-cloro-7-(2-propen-l-il)-3,7-diidro-lH-purin-2, 6-diona (50 mg, 0,177 mmol) e 3-[3-( fenilmetil)-5-isoxazolil]-1-propanol (38,4 mg, 0,177 mmol). Rendimento2 4,2 mg,LC/MS: m/z 442 [MH]+, RT 3,43 min.
b) 3-[3-(Fenilmetil)-5-isoxazolil]-1-propanol
<formula>formula see original document page 193</formula>
Sintetizado como com 4-(3-fenil-5-isoxazolil)-1-butanol, usando cloreto de N-hidróxi-2-feniletanimidoila(253 mg, 1,5 ramol) e 4-pentil-l-ol (139 mg, 1,65 mmol).
Rendimento 61 mg de óleo amarelo pálido.
LC/MS: m/z 218 [MH]+, RT 2,62 min.
Exemplo Comparativo B:
Sal sódico de 8-cloro-l-[3-(2-furanil)propil]-3-pentil-3, 7-diidro-lH-purin-2,6-diona
<formula>formula see original document page 193</formula>
Um tubo GreenHouse™ equipado com um agitador foicarregado com uma alíquota de 0,25 mL de uma solução 0,54 Mde 8-cloro-3-pentil-7-(2-propen-l-il)-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona (0,13 mmol) em THF. À mistura foi acrescentado 3-(2-furanil)-1-propanol (21 mg, 0,16 mmol, l,2eq) em THF(0,25 mL) , seguido por uma alíquota de 0,25 mL de umasolução 0,71 M de (E)-1,2-diazenodicarboxilato de bis (1,1-dimetiletila) (0,18 mmol) em THF e em seguida uma alíquotade 0,25 mL de uma solução 0,71 M de trifenilfosfina (0,18mmol) em THF. A solução foi agitada em a GreenHouse™ sobnitrogênio por 16h. À mistura foi acrescentado uma aliquotaadicional de 0,25mL de uma solução 1,4 M solução de (E)-1,2-diazenodicarboxilato de bis(1,1-dimetiletila) (0,36 mmol) emTHF e em seguida uma aliquota adicional de 0,25 mL de umasolução 1,4M de trifenilfosfina (0,36 mmol) em THF. Amistura foi agitada por 16h sob uma corrente de nitrogênio.
Tetraquis(trifenilfosfino)paládio(0) (16 mg, 0,014mmol) e morfolina (0,12 mL, 1,35 mmol) foram acrescentados àmistura a qual foi agitada por 16h sob uma corrente denitrogênio. A mistura reacional foi concentrada sobnitrogênio e o material bruto dissolvido em solução aquosade NaOH (0,5 mL, 2M) . A solução resultante foi purificadausando SPE aminopropila (eluindo com AcOH em DCM e MeOH) .Purificação adicional usando C18 SPE (eluindo com a água,amônia e MeCN mistura) produziu o composto titulo como umagoma clara (22 mg, 45%).
LC/MS: m/z 365 [MH]+, RT 3,48 min.
1H NMR (DMS0-d6) ô: 0,85 (t, 3H, J = 7Hz), 1,35-1,19 (m, 4H) , 1,62 (m, 2H) , 1,79 (m, 2H) , 2,59 (t, 2H, J =8Hz), 3,93 - 3,80 (m, 4H), 6,14 (d, 1H, J = 3Hz), 6,32 (dd,1H, J = 3 e 2Hz), 7,48 (d, 1H, J = 2Hz).
Os compostos seguintes (Tabela 16) foram prepa-rados através de um método análogo àquele para o ExemploComparativo B.Tabela 16
<table>table see original document page 195</column></row><table>
Os compostos seguintes (Tabela 17) foram prepa-rados utilizando um método análogo àquele para o exemplo113, a partir dos correspondente ácidos e (IZ)-A-(3-butil-8-cloro-2, 6-dioxo-2, 3, 6, 7-tetraidro-líí-purin-l-il) -N-hidroxi-butanimidamida.
Tabela 17
<formula>formula see original document page 195</formula><table>table see original document page 196</column></row><table>
Exemplo 221:
8-cloro-3-propil-l-{4-[3-(2-piridinil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]butil}-3f 7-diidro-l N-purin-2,6-diona
a) 8-cloro-3-propil-l-{4-[3-(2-piridinil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]butil}-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona
<formula>formula see original document page 196</formula>
Uma solução de 8-cloro-7-(2-propen-l-il)-1-{4-[3-(2-piridinil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]butil}-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona (40 mg, 0,09 mmol) em DMF (3 mL) foi tratada comcarbonato de potássio (15 mg, 0,11 mmol) e 1-iodopropano (19mg, 0,11 mmol) . A mistura foi aquecida a 40°C por 3h e emseguida a 70°C for um adicional de 3h. A mistura foiresfriada e degaseifiçada pela sucessiva aplicação de vácuoe gás nitrogênio. A mistura foi em seguida tratada com umasolução de tetraquis(trifenilfosfino)paládio(0) (10 mg,0, 009 mmol) e morfolina (0,1 mL, 1,2 mmol) e em seguidaagitada de um dia para o outro. A mistura foi evaporada eparticionada entre clorofórmio (2 mL) e água (2 mL) . A faseaquosa foi extraida com mais clorofórmio (2 mL) e osorgânicos combinados evaporados e o residuo dissolvido emmetanol (2 mL) . A solução foi aplicada a SPE aminopropila 1g e eluida com metanol e em seguida com 5% ácido acético emmetanol. Frações contendo produto foram misturadas eevaporadas e o produto purificado ainda mais por MDAP paraproduzir 8-cloro-3-propil-l-{4-[3-(2-piridinil)-1,2,4-oxadi-azol-5-il]butil}-3,7-diidro-lff-purin-2,6-diona (l,4mg) comoum sólido branco.
LC/MS: m/z 430 [MH]+, RT 2,84 min.
b) 8-cloro-7- (2-propen-l-il)-1-{4-[3-(2-piridinil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]butil}-3,7-diidro-l#-purin-2,6-diona
<formula>formula see original document page 197</formula>
Uma suspensão de N-hidróxi-2-piridinocarboximi-damida (1,15 g, 8,4 mmol) em THF anidro (20 mL) foi tratadacom metóxido de sódio (0,38 g, 7,0 mmol) e a mistura agitadapor 5 min. A mistura foi tratada com 5-[8-cloro-2,6-dioxo-7-(2-propen-l-il)-2,3,6,7-tetraidro-lH-purin-l-il]pentanoatode etila (2 g, 5,6 mmol) e a mistura agitada por cerca de 5minutos até que todo o material tivesse dissolvido. Amistura foi e em seguida vedado e aquecida em um microondasa 120°C por 15 minutos e em seguida resfriado e particionadoentre acetato de etila (100 mL) e solução aquosa saturada debicarbonato de sódio (50 mL). A fase aquosa foi extraida commais acetato de etila (50 mL) e os orgânicos combinadossecados (MgSO4), filtrados e evaporados. 0 produto foipurificado por meio de cromatografia em coluna flash usandoum gradiente de eluição de 1:9 acetato de etila/cicloexanopara acetato de etila para produzir 8-cloro-7-(2-propen-l-il) —1-{4—[3—(2-piridinil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]butil}-3,7-diidro-lJí-purin-2, 6-diona (l,49g) como um sólido branco.
[(2,4-difluorfenil)metil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}propil)-7- (2-propen-l-il)-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona usando 4-[8-cloro-2,6-dioxo-7-(2-propen-l-il)-2,3,6,7-tetraidro-lH-purin-l-il]butanoato de etila.
LC/MS: m/z 463 [MH]+, RT 3,09 min.
c) 5-[8-cloro-2,6-dioxo-7-(2-propen-l-il)-2,3,6,7-tetraidro-lH-purin-l-il]pentanoato de etila
LC/MS: m/z 428 [MH]+, RT 2,70 min.
Preparado de modo similar foi 8-cloro-l-(3-{3-Uma solução de 8-cloro-7-(2-propen-l-il)-3-({[2-(trimetilsilil) etil] oxi}metil) -3, 7-diidro-ltf-purin-2, 6-diona(10 g, 28 mmol) em DMF (10 mL) foi tratada com carbonato depotássio (4,8 g, 35 mmol) e etil 5-bromopentanoato (6,5 g,31 mmol) e em seguida aquecida a 70°C por 3h, resfriada eevaporada. O residuo foi particionado entre acetato de etila(100 mL) e água (50 mL). A fase orgânica foi secada (MgSO4),filtrada e evaporada e o intermediário bruto dissolvido emdiclorometano (90 mL), tratado com ácido trifluoracético (17mL) e a mistura agitada na temperatura ambiente de um diapara o outro. Tolueno (50 mL) foi acrescentado e a misturaevaporada até a secura. 0 produto foi purificado por meio decromatografia em coluna flash usando um gradiente de eluiçãode cicloexano para acetato de etila para produzir 8,65 g de-5-[8-cloro-2,6-dioxo-7- (2-propen-l-il)-2,3,6,7-tetraidro-lH-purin-l-il]pentanoato de etila como um sólido branco.
dioxo-7-(2-propen-l-il)-2,3,6,7-tetraidro-l#-purin-l-il]bu-tanoato de etila.
LC/MS: m/z 355 [MH]+, RT 2,75 min.Preparado de modo similar foi 4-[8-cloro-2,6-
LC/MS: m/z 341 [MH]+, RT 2,61 min.
d) 8-cloro-7-(2-propen-l-il)-3-({[2-(trimetilsi-
lil) etil] oxi Jmetil) -3, 7-diidro-lJí-purin-2, 6-dionaA uma solução de 8-cloro-7-(2-propen-l-il)-3,7-diidro-lfí-purin-2, 6-diona (5 g, 22,1 mmol) em DMF (80 mL)foi acrescentado cloreto de 2-2-(trimetilsilil)etoximetila(4,3 mL, 24,2 mmol) e carbonato de sódio ( 2,6 g, 24,2mmol). Após agitação na temperatura ambiente de um dia parao outro mais cloreto de 2-2-(trimetilsilil)etoximetila (4,3mL, 24,2 mmol) e carbonato de sódio (1,3 g, 12,1 mmol) foramacrescentados e agitação continuou por 2h. A misturareacional foi em seguida particionada entre 5% LiCl aq eacetato de etila. O extrato orgânico foi separado, lavadocom solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secado(MgSO4) e concentrado. A purificação por cromatografia emBiotage™ usando um cartucho de silica eluindo 1:4-1:2acetato de etila/cicloexano produziu o composto titulo(3,14g, 40%).
m/z 374 [MNH4+]
Os compostos seguintes (Tabela 18) foram prepara-dos por meio de um método análogo àquele do Exemplo 221,from 8-cloro-7- (2-propen-l-il)-1-{4-[3-(2-piridinil)-1, 2 , 4-oxadiazol-5-il] butil}-3, 7-diidro-lií-purin-2, 6-diona e oapropriado agente de alquilação.
Tabela 18
<formula>formula see original document page 200</formula><table>table see original document page 201</column></row><table>
Os compostos seguintes (Tabela 19) foram preparadospor meio de um método análogo àquele do Exemplo 221, apartir de 8-cloro-l-(3-{3-[(2,4-difluorfenil)metil]-1, 2, 4-oxadiazol-5-il }propil) - 7- (2-propen-l-il) - 3, 7-diidro-lH-purin-2,6-diona e o apropriado agente de alquilação.
Tabela 19
<formula>formula see original document page 202</formula>
<table>table see original document page 202</column></row><table><table>table see original document page 203</column></row><table><table>table see original document page 204</column></row><table>
Exemplo 24 6:
8-cloro-l-{4-[2-oxo-3-(fenilmetil]-1-pirrolidin]butil}-3-pentil-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona
a) 8-cloro-l-{4-[2-oxo-3-(fenilmetil)-1-pirroli-dinila]butil}-3-pentil-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona
<formula>formula see original document page 204</formula>
Uma solução de 8-cloro-l-{4-[2-oxo-3-(fenilmetil)-1-pirrolidinilá]butil}-3-pentil-7-(2-propen-l-il)-3,7-diidro-lH-purin-2, 6-diona (0,35 g, 0,67 mmol), Pd(PPh3)4 (0, 082 g,0,07 mmol) e morfolina (0,6 mL, 6,7 mmol) em THF (10 mL) foidesgaseifiçada (evacuação seqüencial seguida por adição denitrogênio x 3) e em seguida agitada por 4h. A solução foi eem seguida carregada num SPE aminopropila (5g) e eluidaprimeiro com MeOH e em seguida 5% AcOH/MeOH para propor-cionar o composto titulo contendo uma pequena quantidade deimpureza. A purificação adicional sobre silica (10 g SPE,gradiente de eluição éter/acetato de etila 1:0 a 0:1)proporcionou o composto titulo como um óleo claro (0,10 g, 31 %).
LC/MS: m/z 486 [MH]+
b) 8-cloro-1-{4-[2-oxo-3-(fenilmetil)-1-pirroli-dinila] butil} -3-pentil-7- (2-propen-l-il) -3, 7-diidro-l Jí-purin-2,6-diona
<formula>formula see original document page 205</formula>
Preparado como com 8-cloro-l-(2-hidróxi-6-fenilexil) -3-pentil-7- (2-propen-l-il) -3, 7-diidro-l JÍ-purin-2,6-diona usando 1-(4-bromobutila)-3-(fenilmetil)-2-pirroli-dinona como o agente de alquilação, carbonato de potássiocomo base e aquecimento a 50°C por 18h. Rendimento 86%.
LC/MS: m/z 526 [MH]+
c) 1-(4-bromobutil)-3-(fenilmetil)-2-pirrolidinona<formula>formula see original document page 206</formula>
A uma solução de 3-(fenilmetil)-2-pirrolidinona(0,23 g, 1,3 mmol) e 1,4-dibromobutano (0,57 g, 4,2 mmol) emDMF (5 mL) foi acrescentado t-butóxido de sódio (0,151 g,1,6 mmol) e a solução agitada por 18h. A solução foiconcentrada e os residuos submetidos à cromatografia sobresilica (20 g SPE, eluindo first com cicloexano em seguidacom DCM) para proporcionar o composto titulo como um óleoincolor contendo traços de DMF (0,25 g, 61%).
LC/MS: m/z 311 [MH]+
Exemplo 247:
8-cloro-l-{4-[2-oxo-l-(fenilmetil)-3-pirrolidin]butil}-3-pentil-3, 7-diidro-lH-purin-2 , 6-diona
a) 8-cloro-l-{4-[2-oxo-l-(fenilmetil)-3-pirroli-dinila]butil}-3-pentil-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona
<formula>formula see original document page 206</formula>
A uma solução de 8-cloro-3-pentil-7-(2-propen-l-il)-3,7-diidro-l#-purin-2,6-diona (0,086 g, 0,29 mmol) e 3-(4-bromobutila)-1-(fenilmetil)-2-pirrolidinona (0,17g, 0,55mmol, 1:1 mistura com 2-(fenilmetil)-2-azaspiro[4,4]nonan-1-one) em THF (5 mL) foi acrescentado carbonato de potássio(0,08g, 0,58 mmol) e a mistura aquecida e agitada a 50°C por18h. A solução foi deixada esfriar e em seguida degasei-ficada (evacuação seqüencial seguido por adição de nitrogêniox 3) e Pd(PPh3)4 (0,09 g, 0,077 mmol) seguido por morfolina(0,2 mL, 2,2 mmol) acrescentada e a solução agitada natemperatura ambiente por 18h. A solução foi separada entreacetato de etila e HCl diluido e os orgânicos lavados comsolução aquosa saturada de cloreto de sódio, secados econcentrados. A purificação dos residuos uma SPE aminopro-pila (5 g) eluindo primeiro com MeOH e em seguida 5%AcOH/MeOH produziu o composto titulo como um óleo amareloque cristalizou em repouso sob éter (0,031 g, 22%).
LC/MS: m/z 486 [MH]+
b) 3-(4-Bromobutila)-1-(fenilmetil)-2-pirrolidi-nona
<formula>formula see original document page 207</formula>
A uma solução de 1-(fenilmetil)-2-pirrolidinona(0,47 g, 2,7 mmol) em THF (10 mL) a -78°C foi acrescentadohexametildisililazina de litio (2,8 mL, 2,7 mmol, 1 Msolução) durante 5 min. Após 15 minutos, 1,4-dibromobutano(0,32 mL, 2,7 mmol) foi acrescentado e a solução deixada aatingir a temperatura ambiente durante 2h e em seguidaagitada for um adicional de 18h. A solução foi separadaentre acetato de etila e água e os orgânicos separados,secados e concentrados. A cromatografia sobre silica (20 gSPE) eluindo com cicloexano e em seguida DCM e finalmenteéter proporcionou um óleo claro o qual era uma mistura 1:1mistura do composto titulo e 2-(fenilmetil)-2-azaspiro[4,4]nonan-l-ona (0,17 g) . Este foi usado na etapa seguintesem purificação adicional.
LC/MS: m/z 310, 312 [MH]+
Exemplo Comparativo C:
8-cloro-l-(5-{5-[(3,4-diclorofenil)metil]-2N-tetrazol-2-il}pentil)-3-pentil-3,7-diidro-lfl-purin-2,6-diona
<formula>formula see original document page 208</formula>
A uma solução de 8-cloro-3-pentil-7-(2-propen-l-il)-3, 7-diidro-l#-purin-2, 6-diona (0,18 g, 0,61 mmol) em THF(5 mL) foi acrescentado 5-{5-[(3,4-diclorofenil)metil]-2H-tetrazol-2-il}-1-pentanol (0,191 g, 0,61 mmol; preparado demodo similar ao Exemplo 35), trifenilfosfina (0,36 g, 1,3mmol) e finalmente dibenzilazodicarboxilato (0,40 g, 1,3mmol). A solução foi agitada por 18h após o que Pd(PPh3)4(0,16 g, 0,137 mmol) seguido por morfolina (0,75 mL, 8,3mmol) foi acrescentado e a solução agitada na temperaturaambiente por 6h. A solução foi carregada num SPE araino-propila (5 g) e eluida com MeOH e em seguida 5% AcOH/MeOHpara produzir o composto titulo contendo quantidades menoresde impurezas. A cromatografia adicional (silica SPE, 20 g)eluindo com éter produziu o composto titulo como um sólidobranco (0,061 g, 18%).
LC/MS: m/z 553 [MH]+
Exemplo 248:
8-cloro-l-{3-[5-(4-clorofenil)-lH-pirazol-3-il]propil}-3-pentil-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona
<formula>formula see original document page 209</formula>
Preparado como com 8-cloro-l-(5-{5-[(3,4-dicloro-fenil)metil]-2H-tetrazol-2-il}pentil)-3-pentil-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona (Exemplo Comparativo C) usando 3—[5— (4 —clorofenil)-lH-pirazol-3-il]-1-propanol. O material doproduto final foi lavado com éter para produzir o compostotitulo como um sólido cremoso (30%).
LC/MS: m/z 475 [MH]+
Exemplo 24 9:
3-butil-8-cloro-l-{4-[5-(1-metil-l H-1,2,3-triazol-4-il)-1,2,4-oxadiazol-3-il]butil}-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona
<formula>formula see original document page 209</formula>
Uma solução do ácido 1-metil-lH-l,2,3-triazol-4-carboxilico (18 mg, 0,14 mmol) em DMF (0,5 mL) foi tratadacom CDI (23 mg, 0,14 mmol) na temperatura ambiente por Ih.Uma solução de (IZ)-5- (3-butil-8-cloro-2,6-dioxo-2, 3, 6, 7-tetraidro-lH-purin-l-il)-N-hidroxipentanimidamida (50 mg,0,14 mmol) em DMSO (0,4 mL) foi acrescentado à mistura e emseguida aquecida a 100°C por 18h. A mistura reacional foipurificada por meio de MDAP para produzir o composto titulocomo um sólido branco (18mg).
LC/MS: m/z 448 [MH]+, RT 2,86 min.
Os compostos seguintes (tabela 20) foram prepa-rados utilizando um método análogo àquele para o exemplo249, usando o apropriado ácido carboxilico.
Tabela 20
<table>table see original document page 210</column></row><table><table>table see original document page 211</column></row><table><table>table see original document page 212</column></row><table><table>table see original document page 213</column></row><table><table>table see original document page 214</column></row><table><table>table see original document page 215</column></row><table>
Exemplo 291:
8-cloro-l{4-[3-(2,4-difluorfenil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]butil}-3-etil-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona
a) 8-cloro-l-{4-[3-(2,4-difluorfenil)-1,2,4-oxa-diazol-5-il]butil}-3-etil-3,7-diidro-l#-purin-2,6-dionaUma solução de ácido 5-(8-cloro-3-etil-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetraidro-lH-purin-l-il)pentanóico (0,05 g, 0,16mmol) em DMSO (1 mL) foi tratada com CDI (0, 029 g, 0,18ramol) e a mistura agitada na temperatura ambiente por lh. Emseguida, a mistura foi tratada com 2,4-difluorbenzamidoxima(0,03 g, 0,18 mmol) e em seguida aquecida a 120°C por 30min. 0 produto foi- purificado a partir da mistura brutausando MDAP. Frações contendo produto foram evaporadasusando uma corrente de nitrogênio e a goma incolor resul-tante triturada em éter e secada para produzir o compostotitulo como um sólido branco (50 mg, 70%).
LC/MS: m/z 451 [MH]+, RT 2,23 min.
b) ácido 5-(8-cloro-3-etil-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetraidro-lH-purin-l-il)pentanóico
<formula>formula see original document page 216</formula>
Uma solução de 5-(8-cloro-3-etil-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetraidro-lH-purin-l-il)pentanoato de etila (2,3 g, 6,7mmol) em metanol (75 mL) foi tratada com água (3 mL) ehidróxido de litio (0,481 g, 20,1 mmol) e a mistura agitadaa 40°C por 17h. A mistura foi evaporada até a secura e oresiduo tratado com 50 mL de acetato de etila e 50mL deágua. As 2 fases foram separadas e a fsac ajustada para pH 5usando ácido cloridrico aquoso 2M. 0 produto precipitado foiremovido por filtração e secado para produzir ácido 5-(8-cloro-3-etil-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetraidro-lH-purin-l-il)pen-tanóico como um sólido branco (l,99g, 95%).
LC/MS: m/z 315 [MH]+, RT 2,34 min.
c) 5-(8-cloro-3-etil-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetraidro-lfl-purin-1-il)pentanoato de etila
<formula>formula see original document page 217</formula>
Uma solução de 8-cloro-7-(2-propen-l-il)-3-etil-3,7-diidro-lH-purin-2, 6-diona (3 g, 11,8 mmol) em DMF (40mL) foi tratada com carbonato de potássio (1,9 g, 14,1 mmol)e 5-bromopentanoato de etila (2,24 mL, 14,1 mmol) e amistura aquecida numa atmosfera de nitrogênio a 70°C por 5he em seguida resfriada. A mistura foi desgaseifiçada pelaaplicação repetida de vácuo seguido por recarga com gásnitrogênio e em seguida tratado com tetraquis(trife-nilfosfino)paládio(0) (l,36g, 1,1 mmol) e morfolina (10,3mL, 118 mmol) . A mistura foi agitada numa atmosfera denitrogênio por 4h e em seguida evaporada até a secura. Oresiduo foi particionado entre 100 mL de acetato de etila e100mL de água. E a fase aquosa foi re-extraida com 100 mL deacetato de etila e os orgânicos combinados secados sobresulfato de magnésio, filtrados e evaporados. O residuo foitriturado em éter dietilico, filtrado e secado para produziro composto 5-( 8-cloro-3-etil-2, 6-dioxo-2, 3, 6, 7-tetraidro-lJí-purin-l-il)pentanoato de etila como um sólido branco (2,3 g,57%) .LC/MS: m/z 343 [MH]+, RT 2,73 min.
Os compostos seguintes (Tabela 21) foram preparadospor meio de um método análogo àquele do Exemplo 2 91.
Tabela 21
<table>table see original document page 218</column></row><table><table>table see original document page 219</column></row><table><table>table see original document page 220</column></row><table>Os compostos seguintes (Tabela 22) foram preparadosutilizando um método análogo àquele para o exemplo 127,usando o ácido apropriado.
Tabela 22
<table>table see original document page 221</column></row><table><table>table see original document page 222</column></row><table>Os compostos seguintes (Tabela 23) foram preparadosutilizando um método análogo àquele para o exemplo 19,usando os apropriados tetrazol e metano-sulfonato de 3-[3-alquil-8-cloro-2,6-dioxo-7-(2-propen-l-il)-2,3,6,7-tetraidro-lH-purin-l-il]propila. MDAP foi empregado para purificarainda mais aqueles compostos insuficientemente purosseguindo cromatografia de fase normal.
Tabela 23
<table>table see original document page 223</column></row><table><table>table see original document page 224</column></row><table><table>table see original document page 225</column></row><table><table>table see original document page 226</column></row><table><table>table see original document page 227</column></row><table><table>table see original document page 228</column></row><table><table>table see original document page 229</column></row><table><table>table see original document page 230</column></row><table><table>table see original document page 231</column></row><table><table>table see original document page 232</column></row><table><table>table see original document page 233</column></row><table><table>table see original document page 234</column></row><table><table>table see original document page 235</column></row><table><table>table see original document page 236</column></row><table><table>table see original document page 237</column></row><table><table>table see original document page 238</column></row><table>
Exemplo 408:
3-butil-8-cloro-l-{3-[4 - (fenilmetil)-1-piperazinil]propil}-3,7-diidro-lff-purin-2, 6-diona
<formula>formula see original document page 238</formula>
Uma solução de metano-sulfonato de 3-[3-butil-8-cloro-2, 6-dioxo-7- (2-propen-l-il) -2,3,6, 7-tetraidro-líí-purin-1-il]propila (0,08 g, 0,19 mmol) em DMF (5 mL) foi tratadacom carbonato de potássio (0,08g, 0,6 mmol) e 1-benzilpi-perazina (0,04 g, 0,23 mmol) e em seguida aquecida a 70°Cpor 2h. A mistura foi resfriada, evaporada até a secura eparticionado entre 10 mL de DCM e 10 mL de água. A faseorgânica foi evaporada até a secura e o resíduo dissolvidoem THF anidro (5 mL). A solução foi cuidadosamente degasei-ficada pela repetida aplicação de vácuo à mistura reacionale subseqüente recarga com nitrogênio gasoso e em seguidatratado com tetraquis(trifenilfosfino)paládio(0) (0,010 g,0,009 mmol) e morfolina (0, 200 mL, 2,3 mmol) e a misturaagitada por 2h numa atmosfera de nitrogênio. A mistura foievaporada e o resíduo retomado em 5mL de metanol eacrescentado a um cartucho SPE aminopropila 2g o qual foi emseguida lavado com metanol e o produto eluído usando umasolução 3% de ácido acético em metanol. Frações contendoproduto foram misturadas e evaporadas até a secura. 0produto foi e em seguida purificado por cromatografia emcoluna flash usando um gradiente de eluição de DCM /2% Ácidoacético para DCM/20% MeOH /2% Ácido acético e o produtofinal secado por congelamento a partir de dioxano-1,4 paraproduzir o composto título como um sólido branco (0,021 g, 24%).
LC/MS: m/z 459 [MH]+, RT 2,37 min.
Os compostos seguintes (Tabela 24) foram preparadospor meio da apropriada metodologia geral descrita acima.
Tabela 24
<table>table see original document page 239</column></row><table><table>table see original document page 240</column></row><table><table>table see original document page 241</column></row><table><table>table see original document page 242</column></row><table><table>table see original document page 243</column></row><table><table>table see original document page 244</column></row><table><table>table see original document page 245</column></row><table>
Exemplo 4 63:
3-butil-8-cloro-l-{4-[5- (2-flúor-4-hidroxifenil) -1,2,4-oxadiazol-3-il] butil} - 3, 7-diidro-lff-purin-2, 6-dionaa) 3-butil-8-cloro-l-{4-[5-(2-flúor-4-hidroxife-nil)-1,2,4-oxadiazol-3-il]butil}-3,7-diidro-lfl-purin-2, 6-diona
<formula>formula see original document page 246</formula>
CDI (45 mg, 0,28 mmol) em DMSO anidro (0,5 mL) foiacrescentado a ácido 2-flúor-4-hidroxibenzóico (40 mg, 0,25mmol) e agitado na temperatura ambiente por 2h. 5-(3-butil-8-cloro-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetraidro-lH-purin-l-il)-N-hidroxi-pentanimidamida (100 mg, 0,28 mmol) em DMSO (0,4 mL) foiacrescentado e a mistura resultante aquecida a 90°C por 18h.
A purificação por MDAP produziu o composto titulocomo um sólido (38 mg, 28%).
LC/MS: m/z 477 [MH]+, RT 3,39 min.
1H NMR (DMS0-d6) δ: 0,87 (t, 3H, J = 7Hz), 1,27 (m,2H) , 1, 56-1, 78 (m, 6H) , 2,77 (t, 2H, J = 7Hz), 3,90 (m, 4H),6, 80 (m, 2H) , 7,91 (t, 1H, J = 9Hz), 11,01 (s, 1H) , 14,45(br s, 1H).
b) 5-(3-butil-8-cloro-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetraidro-ΙΗ-purin-l-il)-N-hidroxipentanimidamida
<formula>formula see original document page 246</formula>
5-(3-butil-8-cloro-2,6-dioxo-2, 3, 6, 7-tetraidro-l#-purin-l-il)pentanonitrila (8,5g, 26 mmol) foi dissolvido emEtOH (100 mL) . Hidroxilamina (50% em água; 2,6ml, 39 mmol)foi acrescentado e a mistura aquecida a 80°C por 48h sobnitrogênio. A mistura reacional foi concentrada em vácuo, osólido resultante lavado com metanol e secado para produziro composto titulo como um sólido (5,9g, 47%).
LC/MS: m/z 357 [MH]+, RT 2,17 min.
c) 5-(3-butil-8-cloro-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetraidro-1 H-purin-l-il) pentanenitrila
<formula>formula see original document page 247</formula>
5-Bromopentanonitrila (4,54 mL, 39 mmol) ecarbonato de césio (12,7 g) foram acrescentados a umasolução de 3-butil-8-cloro-7-(2-propen-l-il)-3,7-diidro-lH-purin-2, 6-diona (10 g, 35 mmol) em DMF (100 mL) e a misturaagitada sob nitrogênio a 40°C de um dia para o outro edeixada esfriar.
A mistura foi e em seguida degaseifiçada atravésda repetida aplicação sucessiva de um vácuo e em seguidapressão de nitrogênio. A mistura foi em seguida tratada comtetraquis(trifenilfosfino)paládio(0) (2,86 g, 2,5 mmol) emorfolina (30,8 mL, 350 mmol). A mistura foi agitada numaatmosfera de nitrogênio por 3h e em seguida particionadaentre EtOAc e ácido clorídrico aquoso 2M. A camada aquosafoi separada e extraída com EtOAc (x2). The combined organicphases were concentrada em vácuo para produzir um sólido quefoi lavado com éter, filtrado e secado. O filtrado foiconcentrado e purificada onuma coluna de aminopropilaeluindo com MeOH seguido por 3% AcOH/MeOH. As fraçõescontendo produto foram combinadas e concentradas paraproduzir um sólido, que foi combinado com o produtofiltrado. 0 composto titulo foi obtido como um sólido (10,5g, 93%).
LC/MS: m/z 324 [MH]+, RT 2,75 min.
Os compostos seguintes (Tabela 25) foram preparadosutilizando um método análogo àquele para o exemplo 463,usando o ácido carboxilico apropriado.
Tabela 25
<table>table see original document page 248</column></row><table><table>table see original document page 249</column></row><table><table>table see original document page 250</column></row><table><table>table see original document page 251</column></row><table><table>table see original document page 252</column></row><table>
Os materiais de partida podem ser adquiridoscomercialmente e/ou produzidos de acordo com processos queestão disponíveis na literatura.Todas as publicações, incluindo mas não limitadasa patentes e pedidos de patentes, mencionados nessaespecificação são aqui incorporados por referência como secada uma das publicações estivessem especificamente eindividualmente indicadas a estarem incorporadas aqui porreferência como se totalmente apresentada.

Claims (22)

1. Composto, CARACTERIZADO pelo fato de queapresenta a fórmula (I):<formula>formula see original document page 254</formula>e seus sais e solvatos farmaceuticamenteaceitáveis, ondeR1 representa -(alquileno)m-X-(alquileno) n-Y;onde m e η representam o número de átomos decarbono na cadeia de alquileno;onde X representa um grupo selecionado a partir deheteroarila e heterociclina;onde Y representa um grupo selecionado a partir dearila, heteroarila e O-arila;os quais podem estar opcionalmente substituídoscom um ou mais grupos independentemente selecionados apartir de alquila Ci-6, alquenila C2-6, alquinila C2_6,halogênio, -NH2, -(CH2)q-(O)p-(CH2)q-N(R5)C(O)OR8, -(CH2)q-N(R5)C(O)R8, -(CH2)q-(O)p-(CH2)q-C(O)NR5R6, -(CH2)q-N(R5)C(O)NR5R6, -(CH2)q-C(O)N((CH2)mOH)R5, -(CH2)q-N(Rs)-S(O)2R8, -CH2-S(O)2N(R5)R6, -haloalquila Ci_6, -OCF3, -OCH(F)2,-OCH2F, -C(O)OR5, -OR5, -R8CN, CN -SO2R9, - (CH2) nheteroarila,- (CH2) nheterociclila, - (CH2) ncicloalquila,(CH2) ncicloalquenila, e - (CH2) narila;R2 representa alquila C3_6;R3 representa halogênio;R5 e R6 são independentemente selecionados dehidrogênio e alquila C1-4;R7 representa um grupo selecionado de alquila Ci_6,alquenila C2-Sr alquinila C2_6, - (CH2) tcicloalquila,(CH2) nCicloalquenila, - (CH2) theterociclila, - (CH2) tarila, e -(CH2) theteroarila;R8 representa alquila Ci-4;R9 representa um grupo selecionado de alquila Ci-6,alquenila C2_6, alquinila C2_6, - (CH2) ncicloalquila,(CH2) nCicloalquenila, - (CH2) nheterociclila, - (CH2) narila,(CH2) nheteroarila, e CN;m representa um inteiro selecionado de 3 e 4;η representa um inteiro selecionado de 0 e 1 ;ρ representa um inteiro selecionado de 0 e 1 ;q representa um inteiro selecionado de 0, Ie 2; et representa um inteiro selecionado de 1 e 2.
2. Composto de fórmula I, de acordo com areivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que X representaum grupo selecionado de heteroarila.
3. Composto de fórmula I, de acordo com areivindicação 1 ou 2, CARACTERIZADO pelo fato de que Xrepresenta um grupo selecionado de heteroarila compreendendoum heteroátomo nitrogênio.
4. Composto de fórmula I, de acordo com areivindicação 3, CARACTERIZADO pelo fato de que X representaoxadiazolila ou tetrazol.
5. Composto de fórmula I, de acordo com qualqueruma das reivindicações anteriores, CARACTERIZADO pelo fatode que Y representa um grupo selecionado a partir de arila eheteroarila.
6. Composto de fórmula I, de acordo com qualqueruma das reivindicações anteriores, CARACTERIZADO pelo fatode que Y é opcionalmente substituído por um ou mais dehalogênio e haloalquila Ci-6·
7. Composto de fórmula I, de acordo com qualqueruma das reivindicações anteriores, CARACTERIZADO pelo fatode que R3 representa cloro.
8. Composto de fórmula I, de acordo com qualqueruma das reivindicações anteriores, CARACTERIZADO pelo fatode que Y representa fenila emé3enél.
9. Composto de fórmula I, de acordo com areivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que X representatetrazolila, R2 representa butila e R3 representa cloro.
10. Composto de fórmula I, de acordo com areivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que X representaoxadiazolila, Y representa piridinila, R2 representa butila,R3 representa cloro emé 4 ené 0.
11. Composto de fórmula I, de acordo com areivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de ser 3-butil-8-cloro-1-(3-{5-[(4-fluorofenil)metil]-2H-tetrazol-2-il}propil)-3,7-diihidro-lH-purin-2,6-diona<formula>formula see original document page 257</formula>
12. Composto de fórmula I, de acordo com areivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que é 3-butil-8-cloro-1-(3-{5-[(4-fluorofenil)metil]-2H-tetrazol-2-il}propil)-3,7-diidro-lH-purin-2,6-diona<formula>formula see original document page 257</formula>ou seu sal farmaceuticamente aceitável.
13. Composto de fórmula I, de acordo com qualqueruma das reivindicações anteriores, CARACTERIZADO pelo fatode que é para uso em medicina humana e veterinária.
14. Composto de fórmula I, de acordo com qualqueruma das reivindicações 1 a 12, CARACTERIZADA pelo fato deque é para uso no tratamento de dislipidemia diabética,dislipidemia mista e hiperlipoproteinemia e/ou de doenças oucondições inflamatórias.
15. Composto de fórmula I, de acordo com qualqueruma das reivindicações 1 a 12, CARACTERIZADO pelo fato deque é para uso no tratamento de dislipidemia diabética,dislipidemia mista, insuficiência cardíaca,hipercolesteremia, doença cardiovascular, aterosclerose,arteriosclerose, hipertrigliceridemia, diabetes melitus tipoII, diabetes tipo I, insulino-resistência, hiperlipidemia,anorexia nervosa, obesidade, doença das artérias coronárias,trombose, angina, insuficiência renal crônica, doençavascular periférica ou derrame.
16. Composto de fórmula I, de acordo com qualqueruma das reivindicações 1 a 12, CARACTERIZADO pelo fato deque é para uso na fabricação de um medicamento paratratamento de dislipidemia diabética, dislipidemia mista,insuficiência cardíaca, hipercolesteremia, doençacardiovascular, aterosclerose, arteriosclerose,hipertrigliceridemia, diabetes melitus tipo II, diabetestipo I, insulino-resistência, hiperlipidemia, anorexianervosa, obesidade, doença das artérias coronárias,trombose, angina, insuficiência renal crônica ou derrame.
17. Método para o tratamento de um indivíduohumano ou animal que possui uma condição onde a sub-ativaçãodo receptor HM74A contribui para a condição ou onde aativação do receptor será benéfica, método esseCARACTERIZADO pelo fato de que compreende administrar aoreferido indivíduo humano ou animal uma quantidade eficaz deum composto de fórmula I, como definido em qualquer uma dasreivindicações 1 a 12.
18. Método, de acordo com a reivindicação 17,CARACTERIZADO pelo fato de que o indivíduo humano ou animalpossui dislipidemia diabética, dislipidemia mista ehiperproteinemia ou uma doença ou condição inflamatória.
19. Formulação farmacêutica, CARACTERIZADA pelofato de que compreende um composto fórmula I, como definidoem qualquer uma das reivindicações 1 a 12 e pelo menos umdiluente, excipiente ou veiculo farmaceuticamente aceitável.
20. Combinação para administração em conjunto ouseparadamente, seqüencialmente ou simultaneamente emformulações farmacêuticas separadas ou combinadas, areferida combinação CARACTERIZADA pelo fato de quecompreende um composto de fórmula I, como definido emqualquer uma das reivindicações 1 a 12 juntamente com pelomenos um agente terapeuticamente ativo.
21. Formulação farmacêutica, CARACTERIZADA pelofato de que compreende:(i) um composto de fórmula I como definido emqualquer uma das reivindicações 1 a 12;(ii) um ou mais agentes terapeuticamentes eficazesselecionados de estatinas, fibratos, resinas ligantes deácido biliar e ácido nicotínico; e(iii) um ou mais diluentes, excipientes ouveículos farmaceuticamente aceitáveis.
22. Método para a preparação de um composto defórmula I como definido em qualquer uma das reivindicações 1a 12 a partir de um apropriado material de partida, porexemplo, composto(s) de fórmula (II):<formula>formula see original document page 260</formula>onde PG = grupo protetor, o método CARACTERIZADOpelo fato de que compreende:(i) alquilação em Nl de uma xantina protegida em N7 ;(ii) alquilação em N3 de uma xantina protegida em N7 ;(iii) halogenação em C8;(iv) desproteção de N7;em qualquer ordem com a condição de que adesproteção seja realizada após a alquilação.
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