BRPI0619463A2 - ligando, uso do mesmo, mÉtodos para tratar cÂncer e para administrar um tratamento anti-vegf e tratamento anti-egfr a um indivÍduo, composiÇço, dispositivo de dispensaÇço de droga, Ácido nucleico isolado ou recombinante, vetor, cÉlula hospedeira, mÉtodo para produzir um ligando, polipeptÍdeo de domÍnio variÁvel simples de imunoglobulina, e, antagonista de egfr - Google Patents

ligando, uso do mesmo, mÉtodos para tratar cÂncer e para administrar um tratamento anti-vegf e tratamento anti-egfr a um indivÍduo, composiÇço, dispositivo de dispensaÇço de droga, Ácido nucleico isolado ou recombinante, vetor, cÉlula hospedeira, mÉtodo para produzir um ligando, polipeptÍdeo de domÍnio variÁvel simples de imunoglobulina, e, antagonista de egfr Download PDF

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Roland Beckmann
Haiqun Liu
Wildt Rudolf M T De
Laurent S Jespers
Michael Steward
Armin Sepp
Malgorzata Pupecka
Olga Ignatovich
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Abstract

LIGANDO, USO DO MESMO, MÉTODOS PARA TRATAR CÂNCER E PARA ADMINISTRAR UM TRATAMENTO ANTI-VEGF E TRATAMENTO ANTI-EGFR A UM INDIVÍDUO, COPOSIÇçO, DISPOSITIVO DE DISPENSAÇçO DE DROGA, ÁCIDO NUCLEICP ISOLADO OU RECOMBINANTE, VETOR, CÉLULA HOSPEDEIRA, MÉTODO PARA PRODUZIR UM LIGANDO, POLIPEPTÍDEO DE DOMÍNIO VARIÁVEL SIMPLES DE IMUNOGLOBULINA, E, ANTAGONISTA DE EGFR São divulgados ligando que tem especificidade de ligação para o fator de criscimento endotelial vascular (VEGF), para o receptor do fator de crescimento epidérmico (EGFR) ou para VEGF e EGFR. Também são divulgados métodos de usar estes ligantes. Em particular, o uso destes ligandos para a terapia de câncer é descrito.

Description

"LIGANDO, USO DO MESMO, MÉTODOS PARA TRATAR CÂNCER E PARA ADMINISTRAR UM TRATAMENTO ANTI-VEGF E TRATAMENTO ANTI-EGFR A UM INDIVÍDUO, COMPOSIÇÃO, DISPOSITIVO DE DISPENSAÇÃO DE DROGA, ÁCIDO NUCLEICO ISOLADO OU RECOMBINANTE, VETOR, CÉLULA HOSPEDEIRA, MÉTODO PARA PRODUZIR UM LIGANDO, POLIPEPTÍDEO DE DOMÍNIO VARIÁVEL SIMPLES DE IMUNOGLOBULINA, E, ANTAGONISTA DE EGFR" PEDIDO RELACIONADO Este pedido reivindica o benefício do Pedido Condicional U.
S. N0 60/742.992, depositado em 6 de dezembro de 2005 e o benefício do Pedido Condicional U. S. N0 60/758.355, depositado em 11 de janeiro de 2006. As explicações inteiras dos pedidos acima são incorporados neste por referência.
FUNDAMENTOS DA INVENÇÃO
O câncer é uma causa principal de mortalidade e morbidez. Os métodos para tratar o câncer incluem intervenção cirúrgica para remover tumores e quimioterapia. Estes métodos podem, de maneira bem sucedida, curar alguns pacientes. Entretanto, mesmo pacientes que parecem ter sido curadas freqüentemente sofrem de recorrência do câncer que ainda necessita de terapia. Os agentes quimioterapêuticos, no geral, são agentes não seletivos que são tóxicos para a células, tais como, células proliferadoras. Conseqüentemente, tais agentes podem matar eficazmente as células cancerígenas mas também matar as células saudáveis produzindo diversos efeitos colaterais nocivos.
Certas células cancerígenas expressam ou super-expressam certos componentes celulares, tais como proteínas de superfície celular, ou expressam componentes celulares diferentes em comparação com as células normais. Um método para indicar as deficiências de métodos cirúrgicos e quimioterapêuticos da terapia e o diagnóstico contra o câncer envolve alvejar as células cancerígenas, por exemplo, usando-se anticorpos ou fragmentos de anticorpos que ligam-se às proteínas que são expressados ou super- expressados em células cancerosas. Diversas tais proteínas alvo foram identificadas. Entre tais proteínas está o fator do receptor de desenvolvimento epidérmico (EGFR).
EGFR é um membro da família de ErbBl e transduz os sinais que levam à proliferação e a sobrevivência celular e a elaboração dos fatores de desenvolvimento e angiogênicos na ligação do fator de desenvolvimento epidérmico (EGF) e ou o fator de desenvolvimento transformante alfa (TGF alfa). Conseqüentemente, o EGFR foi demonstrado estar envolvido no desenvolvimento tumoral, metástase e angiogênese. Ainda, muitos cânceres expressam EGFR, tais como câncer de bexiga, câncer ovariano, câncer colorretal, câncer de mama, câncer de pulmão (por exemplo, carcinoma de pulmão de célula não pequena), câncer gástrico, câncer pancreático, câncer de próstata, câncer de cabeça e pescoço, câncer renal câncer de vesícula biliar. ERBITUX (cetuximab; Inclone Systems Inc) é um anticorpo de camundongo/humano quimérico que liga-se ao EGFR humano que foi aprovado para tratar certos cânceres que expressam EGFR em combinação com irinotecan.
Um processo patofísiológico importante que facilita a formação de tumor, metástase e a recorrência é a angiogênese de tumor. Este processo é mediado pela elaboração de fatores angiogênicos pelo tumor, tal como o fator de desenvolvimento endotelial vascular (VEGF), que induz a formação de vasos sangüíneos que libera nutrientes ao tumor. Conseqüentemente, um outro método para tratar certos cânceres é inibir a angiogênese de tumor mediada pelo VEGF, desse modo matando-se o tumor de fome. AVASTIN (bevacizumab; Genetech, Inc.) é um anticorpo humanizado que liga-se ao VEGF humano que foi aprovado para o tratamento de câncer colorretal. Um anticorpo referido como o anticorpo 2C3 (Acessão ATCC N0 PTA 1595) é relatado ligar o VEGF e inibir a ligação de VEGF ao fator do receptor de desenvolvimento epidérmico 2.
Alvejando-se EGFR ou VEGF com os terapêuticos comercialmente disponíveis não é eficaz em todos os pacientes ou em todos os cânceres (por exemplo, cânceres que expressam EGFR). Desta maneira, existe uma necessidade quanto um agente melhorados para o tratamento de câncer e outras condições patológicas. SUMÁRIO DA INVENÇÃO
A invenção diz respeito aos ligandos que tem especificidade de ligação para VEGF (por exemplo, VEGF humano), os ligandos tendo especificidade de ligação para EGFR (por exemplo, EGFR humano) e aos ligandos tendo especificidade de ligação para VEGF e EGFR (por exemplo, VEGF humano e EGFR humano). Por exemplo, o ligando pode compreender um domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF, um domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação EGFR ou compreende um domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF e um domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação EGFR.
Em um aspecto, a invenção diz respeito a um ligando que tem especificidade de ligação para VEGF e para EGFR. Tais ligandos compreendem pelo menos uma porção de proteína que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF e pelo menos uma porção de proteína que tem um local de ligação com especificidade de ligação para EGFR. A porção de proteína que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF e a porção de proteína que tem um local de ligação com especificidade de ligação para EGFR podem ser, cada um qualquer porção de ligação adequada. As porções de proteína podem ser uma porção de peptídeo, porção de polipeptídeo ou porção de proteína. Por exemplo, as porções de proteína podem ser fornecidos por um fragmento de anticorpo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF ou EGFR, tais como um domínio variável simples de imunoglobulina que tem especificidade de ligação para VEGF ou EGFR.
O ligando pode compreender uma porção de proteína que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF que competem com a ligação ao VEGF com AVASTIN (bevacizumab; Genentech, Inc.) e/ou anticorpo 2C3 (Acessão ATCC N0 PTA 1595). O ligando pode compreender uma porção de proteína que tem um local de ligação com especificidade de ligação para EGFR que competem com a ligação ao EGFR com ERBITUX (cetuximab; Imclone Systems, Inc.) e/ou VECTIBIX (panitumumab; Amgen, Inc.). Em algumas formas de realização, o ligando compreende uma porção de proteína que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF que competem com a ligação ao VEGF com bevacizumab e/ou anticorpo 2C3 (Acessão ATCC N0 PTA 1595) e ainda compreende uma porção de proteína que tem um local de ligação com especificidade de ligação para EGFR que competem com a ligação ao EGFR com cetuximab.
Em algumas formas de realização,,o ligando compreende uma porção de proteína que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF (por exemplo, um domínio variável simples de imunoglobulina) que competem com a ligação ao VEGF com um anticorpo de domínio anti- VEGF (dAb) selecionado do grupo que consiste de TAR15-1 (SEQ ID N°: 100), TARl5-3 (SEQ ID N°: 101), TAR15-4 (SEQ ID N°: 102), TAR15-9 (SEQ ID N°: 103), TAR15-10 (SEQ ID N°: 104), TAR15-11 (SEQ ID N°: 105), TARl 5-12 (SEQ IDN°: 106), TAR15-13 (SEQ ID N°: 107), TAR15-14 (SEQ ID N°: 108), TAR15-15 (SEQ ID N°: 109), TAR15-16 (SEQ ID N°: 110), TAR15-17 (SEQ IDN0: 111), TAR15-18 (SEQ ID N°: 112), TAR15-19 (SEQ ID N°: 113), TAR15-20 (SEQ ID N°: 114), TAR 15-22 (SEQ ID N°: 115), TARl5-5 (SEQ ID N0: 116), TAR15-6 (SEQ ID N°: 117), TAR15-7 (SEQ ID N°: 118), TAR15-8 (SEQ ID N°: 119), TAR15-23 (SEQ ID N°: 120), TAR15-24 (SEQ ID N0: 121), TAR15-25 (SEQ ID N°: 122), TAR15-26 (SEQ ID N°: 123), TAR15-27 (SEQ ID N°: 124), TAR15-29 (SEQ ID N°: 125), TARl5-30 (SEQ ID N°: 126), TAR15-6-500 (SEQ ID N°: 127), TARl5-6-501 (SEQ ID N°: 128), TAR15-6-502 (SEQ ID N°: 129), TAR15- 6-503 (SEQ ID N°: 130), TAR15-6-504 (SEQ ID N°: 131), TAR15-6-505 (SEQ ID N0: 132), TAR15-6-506 (SEQ ID N°: 133), TAR15-6-507 (SEQ ID N°: 134), TARl5-6-508 (SEQ ID N0: 135), TAR15-6-509 (SEQ ID N°: 136), TARl5-6-510 (SEQ ID N°: 137), TAR15-8-500 (SEQ ID N°: 138), TAR15- 8-501 (SEQ ID N°: 139), TAR15-8-502 (SEQ ID N°: 140), TAR15-8-503 (SEQ ID N°: 141), TAR15-8-505 (SEQ ID N°: 142), TAR15-8-506 (SEQ ID N°: 143), TARl5-8-507 (SEQ ID N°: 144), TAR15-8-508 (SEQ ID N°: 145), TARl5-8-509 (SEQ ID N°: 146), TAR15-8-510 (SEQ ID N°: 147), TAR15- 8-511 (SEQ ID N0: 148), TAR15-26-500 (SEQ ID N°: 149), TAR15-26-501 (SEQ ID N°: 150), TAR15-26-502 (SEQ ID N0: 151), TAR15-26-503 (SEQ ID N°: 152), TAR15-26-504 (SEQ ID N°: 153), TAR15-26-505 (SEQ ID N°:
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TARl5-26-550 (SEQ ID N°: 539) e TAR15-26-551 (SEQ ID N°: 540).
Em algumas formas de realização, o ligando compreende uma porção de proteína que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF (por exemplo, um domínio variável simples de imunoglobulina) que competem com a ligação ao VEGF com TAR15-26-555 (SEQ ID N°: 704).
Adicionalmente ou em outras formas de realização, o ligando pode compreender uma porção de proteína que tem um local de ligação com especificidade de ligação para EGFR (por exemplo, um domínio variável simples de imunoglobulina) que competem com a ligação ao EGFR com um anticorpo de domínio anti-EGFR (dAb) selecionado do grupo que consiste de DOMl6-17 (SEQ ID N0: 325), DOM16-18 (SEQ ID N°: 326), DOM16-19 (SEQ ID N°: 327), DOM16-20 (SEQ ID N°: 328), DOM16-21 (SEQ ID N°: 329), DOM 16-22 (SEQ ID N°: 330), DOM16-23 (SEQ ID N°: 331), DOM16- 24 (SEQ ID N°: 332), DOMI6-25 (SEQ ID N°: 333), DOM16-26 (SEQ ID N0: 334), DOMl6-27 (SEQ ID N°: 335), DOM16-28 (SEQ ID N°: 336), DOM 16-29 (SEQ ID N°: 337), DOM16-30 (SEQ ID N°: 338), DOM16-31 (SEQ ID N0: 339), DOM16-32 (SEQ ID N°: 340), DOM16-33 (SEQ ID N°: 341), DOMl6-35 (SEQ ID N°: 342), DOM16-37 (SEQ ID N°: 343), DOM16- 38 (SEQ ID N°: 344), DOM16-39 (SEQ ID N°: 345), DOM16-40 (SEQ ID N°: 346), DOM 16-41 (SEQ ID N°: 347), DOM16-42 (SEQ ID N°: 348), DOM 16-43 (SEQ ID N°: 349), DOM16-44 (SEQ ID N°: 350), DOM16-45 (SEQ ID N°: 351), DOM16-46 (SEQ ID N°: 352), DOM16-47 (SEQ ID N°: 353), DOMl6-48 (SEQ ID N0: 354), DOM16-49 (SEQ ID N°: 355), D0M16- 50 (SEQ ID N0: 356), DOM16-59 (SEQ ID N°: 357), DOMI6-6O (SEQ ID N°: 358), DOM 16-61 (SEQ ID N°: 359), DOM16-62 (SEQ ID N°: 360), DOM 16-63 (SEQ ID N°: 361), DOM16-64 (SEQ ID N°: 362), DOM16-65 (SEQ ID N0: 363), DOM16-66 (SEQ ID N°: 364), DOM16-67 (SEQ ID N°: 365), DOM 16-68 (SEQ ID N0: 366), DOM16-69 (SEQ ID N°: 367), D0M16- 70 (SEQ ID N0: 368), DOM16-71 (SEQ ID N0: 369), DOM16-72 (SEQ ID N°: 370), DOM 16-73 (SEQ ID N°: 371), DOM16-74 (SEQ ID N°: 372), DOMl6-75 (SEQ ID N°: 373), DOM16-76 (SEQ ID N°: 374), DOM16-77 (SEQ ID N0: 375), DOM16-78 (SEQ ID N°: 376), DOM16-79 (SEQ ID N0: 377), DOMl6-80 (SEQ ID N0: 378), DOM16-81 (SEQ ID N°: 379), D0M16- 82 (SEQ ID N°: 380), DOM16-83 (SEQ ID N0: 381), DOM16-84 (SEQ ID N°: 382), DOM 16-85 (SEQ ID N0: 383), DOM16-87 (SEQ ID N0: 384), DOMl6-88 (SEQ ID N°: 385), DOM16-89 (SEQ ID N°: 386), DOM16-90 (SEQ ID N0: 387), DOM16-91 (SEQ ID N°: 388), DOM16-92 (SEQ ID N°: 389), DOM 16-94 (SEQ ID N0: 390), DOM16-95 (SEQ ID N°: 391), D0M16- 96 (SEQ ID N°: 392), DOM16-97 (SEQ ID N0: 393), DOM16-98 (SEQ ID N0: 394), DOMl6-99 (SEQ ID N°: 395), DOMI6-IOO (SEQ ID N°: 396), DOMI6-IOI (SEQ ID N°: 397), DOM16-102 (SEQ ID N0: 398), D0M16- 103 (SEQ ID N°: 399), DOM16-104 (SEQ ID N°: 400), DOM16-105 (SEQ ID N°: 401), DOMI6-IO6 (SEQ ID N0: 402), DOM16-107 (SEQ ID N°: 403), DOMl6-108 (SEQ ID N°: 404), DOM16-109 (SEQ ID N°: 405), DOMl6-110 (SEQ ID N°: 406), D0M16-111 (SEQ ID N0: 407), DOM16- 112 (SEQ ID N0: 408), DOM16-113 (SEQ ID N°: 409), DOM16-114 (SEQ ID N°: 410), DOM16-115 (SEQ ID N°: 411), DOM16-116 (SEQ ID N°: 412), DOMl6-117 (SEQ ID N°: 413), DOM16-118 (SEQ ID N°: 414), DOM16-119 (SEQ ID N0: 415), DOM16-39-6 (SEQ ID N°: 416), D0M16- 39-8 (SEQ ID N°: 417), DOM16-39-34 (SEQ ID N°: 418), DOM16-39-48 (SEQ ID N°: 419), DOM16-39-87 (SEQ ID N°: 420), DOM16-39-90 (SEQ ID N°: 421), DOM16-39-96 (SEQ ID N°: 422), DOM16-39-KX) (SEQ ID N°: 423), DOM16-39-101 (SEQ ID N0: 424), DOM16-39-102 (SEQ ID N°: 425), DOM 16-39-103 (SEQ ID N0: 426), DOM16-39-104 (SEQ ID N°: 427), DOM16-39-105 (SEQ ID N°: 428), DOM16-39-106 (SEQ ID N°: 429), DOM 16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM16-39-108 (SEQ ID N°: 431), DOMl6-39-109 (SEQ ID N°: 432), DOM16-39-HO (SEQ ID N°: 433), DOM16-39-111 (SEQ ID N°: 434), DOM16-39-112 (SEQ ID N°: 435), DOM16-39-113 (SEQ ID N°: 436), DOM16-39-114 (SEQ ID N°: 437), DOM16-39-115 (SEQ ID N0: 438), DOM16-39-116 (SEQ ID N°: 439), DOM16-39-117 (SEQ ID N°: 440), DOM16-39-200 (SEQ ID N°: 441), DOM16-39-201 (SEQ ID N0: 442), DOM16-39-202 (SEQ ID N°: 443), DOM16-39-203 (SEQ ID N0: 444), DOM16-39-204 (SEQ ID N°: 445), DOMl6-39-205 (SEQ ID N°: 446), DOM16-39-206 (SEQ ID N°: 447), DOMl6-39-207 (SEQ ID N°: 448), DOM16-39-209 (SEQ ID N0: 449), DOM 16-52 (SEQ ID N°: 450), NB 1 (SEQ ID N°: 451), NB 2 (SEQ ID N°: 452), NB 3 (SEQ ID N0: 453), NB 4 (SEQ ID N°: 454), NB 5 (SEQ ID N°: 455), NB 6 (SEQ ID N°: 456), NB 7 (SEQ ID N°: 457), NB 8 (SEQ ID N°: 458), NB 9 (SEQ ID N°: 459), NB 10 (SEQ ID N°: 460), NB 11 (SEQ ID N°: 461), NB 12 (SEQ ID N0: 462), NB 13 (SEQ ID N°: 463), NB 14 (SEQ ID N0: 464), NB 15 (SEQ ID N0: 465), NB 16 (SEQ ID N°: 466), NB 17 (SEQ ID N°: 467), NB 18 (SEQ ID N°: 468), NB 19 (SEQ ID N°: 469), NB 20 (SEQ ID N°: 470), NB 21 (SEQ ID N°: 471) e NB 22 (SEQ ID N°: 472).
Em formas de realização particulares, o ligando tem especificidade de ligação para VEGF e para EGFR e que compreende uma porção de proteína que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF que competem com a ligação ao VEGF com um anticorpo de domínio anti-VEGF (dAb) selecionado do grupo que consiste de TARl 5-6 (SEQ ID N°: 117), TAR15-8 (SEQ ID N0: 119) e TAR15-26 (SEQ ID N°: 123) e que ainda compreende uma porção de proteína que tem um local de ligação com especificidade de ligação para EGFR que competem com a ligação ao EGFR com um anticorpo de domínio anti-EGFR (dAb) selecionado do grupo que consiste de DOM16-39 (SEQ ID N°: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N°: 420), DOM16-39-100 (SEQ ID N°: 423), DOM 16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM16-39-109 (SEQ ID N°: 432), , 10 DOM16-39-115 (SEQ ID N°: 438) e DOM16-39-200 (SEQ ID N°: 441).
Em formas de realização particulares, o ligando tem especificidade de ligação para VEGF e para EGFR e que compreende uma porção de proteína que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF que competem com a ligação ao VEGF com um anticorpo de domínio anti-VEGF (dAb) selecionado do grupo que consiste de TARl 5-6 (SEQ ID N°: 117), TAR15-8 (SEQ ID N°: 119) e TAR15-26 (SEQ ID N°: 123) e que ainda compreende uma porção de proteína que tem um local de ligação com especificidade de ligação para EGFR que competem com a ligação ao EGFR com um anticorpo de domínio anti-EGFR (dAb) selecionado do grupo que consiste de DOM16-39-521 (SEQ ID N°: 577), DOM16-39-541 (SEQ ID N°: 585), DOM16-39-542 (SEQ ID N°: 586), DOM16-39-551 (SEQ ID N°: 591), DOM16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOMl6-39-604 (SEQ ID N°: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID N°: 621) e DOM 16-39-619 (SEQ ID N°: 622). Em formas de realização mais particulares, o ligando tem
especificidade de ligação para VEGF e para EGFR e compreende pelo menos um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF e pelo menos um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR, em que domínio
variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF compete com a ligação ao VEGF com um anticorpo de domínio anti- VEGF (dAb) selecionado do grupo que consiste de TARl 5-1 (SEQ ID N°: 100), TARl5-3 (SEQ ID N°: 101), TAR15-4 (SEQ ID N°: 102), TAR15-9 (SEQ ID N°: 103), TAR15-10 (SEQ ID N°: 104), TARl5-11 (SEQ ID N°: 105), TARl5-12 (SEQ IDN0: 106), TARl5-13 (SEQ IDN°: 107), TAR15-14 (SEQ ID N°: 108), TAR15-15 (SEQ ID N°: 109), TAR15-16 (SEQ ID N°: 110), TARl5-17 (SEQ IDN0: 111), TARl5-18 (SEQ IDN°: 112), TAR15-19 (SEQ ID N°: 113), TAR15-20 (SEQ ID N°: 114), TAR 15-22 (SEQ ID N°: * 10 115), TARl5-5 (SEQ ID N0: 116), TAR15-6 (SEQ ID N°: 117), TAR15-7 (SEQ ID N0: 118), TAR15-8 (SEQ ID N°: 119), TAR15-23 (SEQ ID N°: 120), TARl 5-24 (SEQ IDN°: 121), TAR15-25 (SEQ IDN°: 122), TAR15-26 (SEQ ID N0: 123), TAR15-27 (SEQ ID N°: 124), TAR15-29 (SEQ ID N°: 125), TARl5-30 (SEQ ID N°: 126), TAR15-6-500 (SEQ ID N°: 127), TARl5-6-501 (SEQ ID N°: 128), TAR15-6-502 (SEQ ID N°: 129), TAR15- 6-503 (SEQ ID N°: 130), TAR15-6-504 (SEQ ID N°: 131), TAR15-6-505 (SEQ ID N°: 132), TAR15-6-506 (SEQ ID N°: 133), TAR15-6-507 (SEQ ID N°: 134), TARl5-6-508 (SEQ ID N°: 135), TAR15-6-509 (SEQ ID N°: 136), TARl5-6-510 (SEQ ID N0: 137), TAR15-8-500 (SEQ ID N°: 138), TAR15- 8-501 (SEQ ID N°: 139), TAR15-8-502 (SEQ ID N°: 140), TAR15-8-503 (SEQ ID N°: 141), TAR15-8-505 (SEQ ID N°: 142), TAR15-8-506 (SEQ ID N°: 143), TARl5-8-507 (SEQ ID N°: 144), TAR15-8-508 (SEQ ID N°: 145), TARl5-8-509 (SEQ ID N°: 146), TAR15-8-510 (SEQ ID N0: 147), TAR15- 8-511 (SEQ ID N°: 148), TAR15-26-500 (SEQ ID N°: 149), TAR15-26-501 (SEQ ID N°: 150), TAR15-26-502 (SEQ ID N0: 151), TAR15-26-503 (SEQ ID N°: 152), TAR15-26-504 (SEQ ID N0: 153), TAR15-26-505 (SEQ ID N°: 154), TARl 5-26-506 (SEQ ID N°: 155), TARl 5-26-507 (SEQ ID N°: 156), TARl5-26-508 (SEQ ID N0: 157), TAR15-26-509 (SEQ ID N°: 158), TARl5-26-510 (SEQ ID N0: 159), TAR15-26-511 (SEQ ID N0: 160), ΪΜΟ TAR15-26-512 (SEQ ID N°: 161), TAR15-26-513 (SEQ ID N°: 162), TAR15-26-514 (SEQ ID N0: 163), TARl 5-26-515 (SEQ ID N°: 164), TARl 5-26-516 (SEQ ID N°: 165), TAR15-26-517 (SEQ ID N°: 166), TARl 5-26-518 (SEQ ID N°: 167), TAR15-26-519 (SEQ ID N°: 168), TAR15-26-520 (SEQ ID N0: 169), TAR15-26-521 (SEQ ID N°: 170), TAR15-26-522 (SEQ ID N°: 171), TARl5-26-523 (SEQ ID N°: 172), TARl 5-26-524 (SEQ ID N°: 173), TARl 5-26-525 (SEQ ID N°: 174), TARl 5-26-526 (SEQ ID N0: 175), TAR15-26-527 (SEQ ID N°: 176), TARl 5-26-528 (SEQ ID N0: 177), TARl 5-26-529 (SEQ ID N°: 178), TARl 5-26-530 (SEQ ID N0: 179), TARl5-26-531 (SEQ ID N°: 180), TAR15-26-532 (SEQ ID N°: 181), TARl 5-26-533 (SEQ ID N°: 182), TARl 5-26-534 (SEQ ID N0: 183), TAR15-26-535 (SEQ ID N°: 184), TAR15-26-536 (SEQ ID N0: 185), TARl5-26-537 (SEQ ID N°: 186), TARl 5-26-538 (SEQ ID N°: 187), TAR15-26-539 (SEQ ID N°: 188), TARl 5-26-540 (SEQ ID N0: 189), TARl 5-26-541 (SEQ ID N°: 190), TARl 5-26-542 (SEQ ID N0: 191), TARl 5-26-543 (SEQ ID N°: 192), TARl 5-26-544 (SEQ ID N0: 193), TARl 5-26-545 (SEQ ID N°: 194), TARl 5-26-546 (SEQ ID N°: 195), TARl 5-26-547 (SEQ ID N°: 196), TARl 5-26-548 (SEQ ID N0: 197) e TARl 5-26-549 (SEQ ID N°: 198),
TAR15-26-550 (SEQ ID Ν°: 539) e TAR15-26-551 (SEQ ID N°: 540).
Por exemplo, o domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF pode compreender uma seqüência de aminoácido que tem pelo menos cerca de 85 % de identidade de seqüência de aminoácido com a seqüência de aminoácido de um dAb selecionado do grupo que consiste de TAR15-1 (SEQ ID N°: 100), TAR15-3 (SEQ ID N°: 101), TARl5-4 (SEQ ID N°: 102), TAR15-9 (SEQ ID N0: 103), TAR15-10 (SEQ ID N°: 104), TAR15-11 (SEQ ID N°: 105), TAR15-12 (SEQ ID N°: 106), TARl5-13 (SEQ ID N°: 107), TARl5-14 (SEQ ID N°: 108), TAR15-15 (SEQ ID N°: 109), TAR15-16 (SEQ ID N°: 110), TAR15-17 (SEQ ID N0: ϋ8\
111),TAR15-18(SEQIDN°: 112), TAR15-19 (SEQID N°: 113), TAR15-20 (SEQ ID N°: 114), TAR 15-22 (SEQ ID N°: 115), TARl 5-5 (SEQ ID N°: 116), TARl5-6 (SEQ ID N°: 117), TAR15-7 (SEQ ID N°: 1 18), TAR15-8 (SEQ ID N°: 119), TAR15-23 (SEQ ID N°: 120), TAR15-24 (SEQ ID N°: 121), TAR15-25 (SEQ ID N0: 122), TARl5-26 (SEQ ID N°: 123), TAR15-27 (SEQ ID N°: 124), TAR15-29 (SEQ ID N°: 125), TAR15-30 (SEQ ID N°: 126), TARl5-6-500 (SEQ ID N°: 127), TAR15-6-501 (SEQ ID N°: 128), TAR15-6-502 (SEQ ID N°: 129), TAR15-6-503 (SEQ ID N°: 130), TAR15- 6-504 (SEQ ID N°: 131), TARl5.-6-505 (SEQ ID N°: 132), TAR15-6-506 , 10 (SEQ ID N°: 133), TAR15-6-507 (SEQ ID N°: 134), TAR15-6-508 (SEQ ID N0: 135), TARl5-6-509 (SEQ ID N°: 136), TAR15-6-510 (SEQ ID N°: 137), TAR15-8-500 (SEQ ID N°: 138), TAR15-8-501 (SEQ ID N°: 139), TAR15- 8-502 (SEQ ID N°: 140), TAR15-8-503 (SEQ ID N°: 141), TAR15-8-505 (SEQ ID N°: 142), TAR15-8-506 (SEQ ID N°: 143), TAR15-8-507 (SEQ ID N°: 144), TAR15-8-508 (SEQ ID N°: 145), TAR15-8-509 (SEQ ID N°: 146), TARl5-8-510 (SEQ ID N0: 147), TAR15-8-511 (SEQ ID N°: 148), TAR15- 26-500 (SEQ ID N°: 149), TAR15-26-501 (SEQ ID N°: 150), TAR15-26-502 (SEQ ID N0: 151), TAR15-26-503 (SEQ ID N0: 152), TAR15-26-504 (SEQ ID N°: 153), TAR15-26-505 (SEQ ID N°: 154), TAR15-26-506 (SEQ IDN°: 155), TAR15-26-507 (SEQ ID N°: 156), TAR15-26-508 (SEQ ID N°: 157), TARl5-26-509 (SEQ ID N0: 158), TAR15-26-510 (SEQ ID N°: 159), TARl5-26-511 (SEQ ID N0: 160), TAR15-26-512 (SEQ ID N°: 161), TAR15-26-513 (SEQ ID N°: 162), TAR15-26-514 (SEQ ID N°: 163), TARl5-26-515 (SEQ ID N0: 164), TAR15-26-516 (SEQ ID N°: 165), TARl5-26-517 (SEQ ID N0: 166), TAR15-26-518 (SEQ ID N°: 167), TARl5-26-519 (SEQ ID N0: 168), TAR15-26-520 (SEQ ID N°: 169), TAR15-26-521 (SEQ ID N0: 170), TAR15-26-522 (SEQ ID N°: 171), TARl5-26-523 (SEQ ID N°: 172), TARl5-26-524 (SEQ ID N°: 173), TARl5-26-525 (SEQ ID N0: 174), TAR15-26-526 (SEQ ID N°: 175), TARl 5-26-527 (SEQ ID N°: 176), TARl 5-26-528 (SEQ ID N°: 177), TARl 5-26-529 (SEQ ID N°: 178), TARl5-26-530 (SEQ ID N°: 179), TARl 5-26-531 (SEQ ID N°: 180), TARl 5-26-532 (SEQ ID N°: 181), TARl 5-26-533 (SEQ ID N°: 182), TARl 5-26-534 (SEQ ID N°: 183), TAR15-26-535 (SEQ ID N°: 184), TARl5-26-536 (SEQ ID N°: 185), TARl 5-26-537 (SEQ ID N°: 186), TAR15-26-538 (SEQ ID N°: 187), TARl 5-26-539 (SEQ ID N°: 188), TARl 5-26-540 (SEQ ID N°: 189), TARl 5-26-541 (SEQ ID N°: 190), TARl 5-26-542 (SEQ ID N°: 191), TARl 5-26-543 (SEQ ID N°: 192), TARl 5-26-544 (SEQ ID N°: 193), TARl 5-26-545 (SEQ ID N°: 194), TARl 5-26-546 (SEQ ID N°: 195), TARl 5-26-547 (SEQ ID N0: 196), TARl 5-26-548 (SEQ ID N°: 197) e
TARl5-26-549 (SEQ ID N°: 198), TARl5-26-550 (SEQ ID N°: 539) e TARl5-26-551 (SEQ ID N°: 540).
Em outras formas de realização particulares, o ligando tem especificidade de ligação para VEGF e para EGFR e compreende pelo menos um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF e pelo menos um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR, em que domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR compete com a ligação ao EGFR com um anticorpo de domínio anti-EGFR (dAb) selecionado do grupo que consiste de DOM16-17 (SEQ ID N°: 325), DOMl6-18 (SEQ ID N0: 326), DOM16-19 (SEQ ID N°: 327), DOM16-20 (SEQ ID N0: 328), DOM16-21 (SEQ ID N0: 329), DOM16-22 (SEQ ID N°: 330), DOM 16-23 (SEQ ID N°: 331), DOM16-24 (SEQ ID N°: 332), DOM16- 25 (SEQ ID N°: 333), DOMl6-26 (SEQ ID N0: 334), DOMl6-27 (SEQ ID N°: 335), DOMl6-28 (SEQ ID N°: 336), DOMl6-29 (SEQ ID N°: 337), DOMl6-30 (SEQ ID N°: 338), DOM16-31 (SEQ ID N°: 339), DOM16-32 (SEQ ID N0: 340), DOM16-33 (SEQ ID N°: 341), DOM16-35 (SEQ ID N°: 342), DOM 16-37 (SEQ ID N0: 343), DOM16-38 (SEQ ID N°: 344), DOM16- 39 (SEQ ID N°: 345), DOM16-40 (SEQ ID N0: 346), DOM16-41 (SEQ ID N°: 347), DOM 16-42 (SEQ ID N°: 348), DOM16-43 (SEQ ID N°: 349), DOMl6-44 (SEQ ID N°: 350), DOM16-45 (SEQ ID N°: 351), DOM16-46 (SEQ ID N°: 352), DOMl6-47 (SEQ ID N°: 353), DOMl6-48 (SEQ ID N°: 354), DOM 16-49 (SEQ IDN°: 355), DOM16-50 (SEQ IDN0: 356), DOM16- 59 (SEQ ID N°: 357), DOMI6-6O (SEQ ID N0: 358), DOM16-61 (SEQ ID N°: 359), DOMl6-62 (SEQ ID N°: 360), DOM16-63 (SEQ ID N°: 361), DOMl6-64 (SEQ ID N°: 362), DOM16-65 (SEQ ID N0: 363), DOM16-66 (SEQ ID N°: 364), DOM16-67 (SEQ ID N°: 365), DOM16-68 (SEQ ID N°: « 10 366), DOM 16-69 (SEQ ID N°: 367), DOM16-70 (SEQ ID N°: 368), DOM16- 71 (SEQ ID N°: 369), DOM16-72 (SEQ ID N0: 370), DOM16-73 (SEQ ID N°: 371), DOM 16-74 (SEQ ID N°: 372), DOM16-75 (SEQ ID N°: 373), DOM 16-76 (SEQ ID N°: 374), DOM16-77 (SEQ ID N°: 375), DOM16-78 (SEQ ID N°: 376), DOM16-79 (SEQ ID N°: 377), DOMI6-8O (SEQ ID N°: 378), DOMl6-81 (SEQ ID N0: 379), DOM16-82 (SEQ ID N°: 380), DOM16- 83 (SEQ ID N°: 381), DOM16-84 (SEQ ID N0: 382), DOM16-85 (SEQ ID N°: 383), DOM16-87 (SEQ ID N°: 384), DOM16-88 (SEQ ID N0: 385), DOM 16-89 (SEQ ID N°: 386), DOM16-90 (SEQ ID N°: 387), DOM16-91 (SEQ ID N°: 388), DOM16-92 (SEQ ID N°: 389), DOM16-94 (SEQ ID N°: 390), DOM 16-95 (SEQ ID N0: 391), DOMl6-96 (SEQ ID N0: 392), DOM16- 97 (SEQ ID N°: 393), DOM16-98 (SEQ ID N°: 394), DOM16-99 (SEQ ID N°: 395), DOM 16-100 (SEQ ID N°: 396), DOMIÓ-lOl (SEQ ID N0: 397), DOM 16-102 (SEQ ID N0: 398), DOM16-103 (SEQ ID N°: 399), DOM16- 104 (SEQ ID N°: 400), DOM16-105 (SEQ ID N°: 401), DOMI6-IO6 (SEQ ID N°: 402), DOM16-107 (SEQ ID N°: 403), DOMI6-IO8 (SEQ ID N°: 404), DOMl6-109 (SEQ ID N°: 405), DOM16-HO (SEQ ID N°: 406), D0M16-111 (SEQ ID N0: 407), DOM16-112 (SEQ ID N°: 408), DOM16- 113 (SEQ ID N°: 409), DOM16-114 (SEQ ID N°: 410), DOM16-115 (SEQ ID N°: 411), DOM16-1I6 (SEQ ID N°: 412), DOM16-117 (SEQ ID N°: 413), DOMl6-118 (SEQ ID N0: 414), DOM16-119 (SEQ ID N°: 415), DOMl6-39-6 (SEQ ID N0: 416), DOM16-39-8 (SEQ ID N°: 417), DOM16- 39-34 (SEQ ID N0: 418), DOM16-39-48 (SEQ ID N°: 419), DOM16-39-87 (SEQ ID N°: 420), DOM16-39-90 (SEQ ID N0: 421), DOM16-39-96 (SEQ ID N°: 422), DOM16-39-100 (SEQ ID N°: 423), DOM16-39-KH (SEQ ID N°: 424), DOM16-39-102 (SEQ ID N°: 425), DOM16-39-103 (SEQ ID N°: 426), DOM16-39-104 (SEQ ID N°: 427), DOM16-39-105 (SEQ ID N°: 428), DOM16-39-106 (SEQ ID N°: 429), DOM16-39-107 (SEQ ID N0: 430), DOM 16-39-108 (SEQ ID N°: 431), DOM16-39-109 (SEQ ID N°: 432), . 10 DOM16-39-110 (SEQ ID.N0: 433), DOM16-39-111 (SEQ ID N0: 434), DOM16-39-112 (SEQ ID N°: 435), DOM16-39-113 (SEQ ID N°: 436), DOM16-39-114 (SEQ ID N°: 437), DOM16-39-115 (SEQ ID N°: 438), DOM16-39-116 (SEQ ID N°: 439), DOM16-39-117 (SEQ ID N°: 440), DOM 16-39-200 (SEQ ID N°: 441), DOM16-39-201 (SEQ ID N°: 442), DOMl6-39-202 (SEQ ID N°: 443), DOM16-39-203 (SEQ ID N°: 444), DOM16-39-204 (SEQ ID N°: 445), DOM16-39-205 (SEQ ID N°: 446), DOMl6-39-206 (SEQ ID N0: 447), DOM16-39-207 (SEQ ID N°: 448), DOM16-39-209 (SEQ ID N0: 449), DOM16-52 (SEQ ID N°: 450), NB 1 (SEQ ID N°: 451), NB 2 (SEQ ID N°: 452), NB 3 (SEQ ID N°: 453), NB 4 (SEQ ID N0: 454), NB 5 (SEQ ID N°: 455), NB 6 (SEQ ID N°: 456), NB 7 (SEQ ID N0: 457), NB 8 (SEQ ID N°: 458), NB 9 (SEQ ID N°: 459), NB 10 (SEQ ID N0: 460), NB 11 (SEQ ID N°: 461), NB 12 (SEQ ID N°: 462), NB 13 (SEQ ID N°: 463), NB 14 (SEQ ID N°: 464), NB 15 (SEQ ID N°: 465), NB 16 (SEQ ID N°: 466), NB 17 (SEQ ID N0: 467), NB 18 (SEQ ID N0: 468), NB 19 (SEQ ID N°: 469), NB 20 (SEQ ID N°: 470), NB 21 (SEQ ID N°: 471) e NB 22 (SEQ ID N°: 472).
Em outras formas de realização particulares, o ligando tem especificidade de ligação para VEGF e para EGFR e compreende pelo menos um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de 68* 16
ligação para VEGF e pelo menos um domínio de imunoglobulina variável simples com especificidade de ligação para EGFR, em que domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR compete com a ligação ao EGFR com um anticorpo de domínio anti-EGFR (dAb) selecionado do grupo que consiste de DOM16-39-210 (SEQ ID N°: 541), DOM 16-39-211 (SEQ ID N°: 542), DOM16-39-212 (SEQ ID N°: 543), DOM16-39-213 (SEQ ID N°: 544), DOM16-39-214 (SEQ ID N°: 545), DOM16-39-215 (SEQ ID N°: 546), DOM16-39-216 (SEQ ID N°: 547), DOM16-39-217 (SEQ ID N°: 548), DOM16-39-218 (SEQ ID N°: 549), DOM16-39-219 (SEQ ID N°: 550), DOM16-39-220 (SEQ ID N°: 551), DOM16-39-221 (SEQ ID N°: 552), DOMl6-39-222 (SEQ ID N°: 553), DOM16-39-223 (SEQ ID N0: 554), DOM16-39-224 (SEQ ID N°: 555), DOMl6-39-225 (SEQ ID N0: 556), DOM16-39-226 (SEQ ID N°: 557), DOMl6-39-227 (SEQ ID N°: 558), DOM16-39-228 (SEQ ID N°: 559), DOMl6-39-229 (SEQ ID N°: 560), DOM16-39-230 (SEQ ID N0: 561), DOM16-39-231 (SEQ ID N0: 562), DOM16-39-232 (SEQ ID N°: 563), DOM16-39-233 (SEQ ID N°: 564), DOM16-39-234 (SEQ ID N0: 565), DOMl6-39-235 (SEQ ID N°: 566), DOM16-39-500 (SEQ ID N°: 725), DOM16-39-502(SEQ ID N0: 726), DOM16-39-503 (SEQ ID N°: 567), DOMl6-39-504 (SEQ ID N0: 568), DOM16-39-505 (SEQ ID N°: 569), DOM16-39-506 (SEQ ID N0: 570), DOM16-39-507 (SEQ ID N°: 571), DOM16-39-508 (SEQ ID N°: 572), DOM16-39-509 (SEQ ID N0: 573), DOM16-39-510 (SEQ ID N°: 574), DOM16-39-511 (SEQ ID N°: 575), DOM16-39-512 (SEQ ID N°: 576), DOM16-39-521 (SEQ ID N°: 577), DOMl6-39-522 (SEQ ID N°: 578), DOM16-39-523 (SEQ ID N°: 579), DOM16-39-524 (SEQ ID N0: 580), DOM16-39-527 (SEQ ID N°: 581), DOMl6-39-525 (SEQ ID N°: 582), DOM16-39-526 (SEQ ID N0: 583), DOM16-39-540 (SEQ ID N°: 584), DOM16-39-541 (SEQ ID N0: 585), DOMl6-39-542 (SEQ ID N°: 586), DOM16-39-543 (SEQ ID N°: 587),
DOM 16-3 9-544 (SEQ ID N°: 588), DOMl6-39-545 (SEQ ID N°: 589), DOM16-39-550 (SEQ ID N°: 590), DOMl6-39-551 (SEQ ID N°: 591), DOMl 6-39-552 (SEQ ID N°: 592), DOMl6-39-553 (SEQ ID N°: 593), DOM16-39-554 (SEQ ID N°: 594), DOM16-39-555 (SEQ ID N°: 595), DOM16-39-561 (SEQ ID N°: 596), DOMl6-39-562 (SEQ ID N°: 597), DOM16-39-563 (SEQ ID N°: 598), DOMl6-39-564 (SEQ ID N°: 599), DOM 16-3 9-5 71 (SEQ ID N°: 600), DOMl 6-39-572 (SEQ ID N°: 601), DOM16-39-573 (SEQ ID N0: 602), DOM16-39-574 (SEQ ID N°: 603), DOMl 6-39-580 (SEQ ID N°: 604), DOM 16-39-591 (SEQ ID N°: 605), DOM16-39-592 (SEQ ID N°: 606), DOMl6-39-593 (SEQ ID N°: 607), DOM16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOMl6-39-602 (SEQ ID N°: 609), DOM 16-39-603 (SEQ ID N0: 610), DOMl 6-39-604 (SEQ ID N°: 611), DOMl 6-39-605 (SEQ ID N°: 612), DOMl6-39-607 (SEQ ID N0: 613), DOM16-39-611 (SEQ ID N°: 614), DOMl6-39-612 (SEQ ID N°: 615), DOM16-39-613 (SEQ ID N0: 616), DOM 16-39-614 (SEQ ID N°: 617), DOMl 6-39-615 (SEQ ID N°: 618), DOM 16-3 9-616 (SEQ ID N0: 619), DOM16-39-617 (SEQ ID N0: 620), DOMl6-39-618 (SEQ ID N°: 621) e DOM 16-3 9-619 (SEQ ID N 622).
Por exemplo, o domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR pode compreender uma seqüência de aminoácido que tem pelo menos cerca de 85 % de identidade de seqüência de aminoácido com a seqüência de aminoácido de um dAb selecionado do grupo que consiste de DOM16-17 (SEQ ID N°: 325), DOM16-18 (SEQ ID N0: 326), DOMl6-19 (SEQ ID N0: 327), DOM16-20 (SEQ ID N°: 328), DOM 16-21 (SEQ ID N°: 329), DOM16-22 (SEQ ID N°: 330), DOM16-23 (SEQ ID N°: 331), DOM16-24 (SEQ ID N°: 332), DOM16-25 (SEQ ID N°: 333), DOMl6-26 (SEQ ID N0: 334), DOM16-27 (SEQ ID N°: 335), D0M16- 28 (SEQ ID N0: 336), DOM16-29 (SEQ ID N0: 337), DOM16-30 (SEQ ID N°: 338), DOM 16-31 (SEQ ID N0: 339), DOM16-32 (SEQ ID N°: 340), DOM 16-33 (SEQ ID N°: 341), DOM16-35 (SEQ ID N°: 342), DOM16-37 (SEQ ID N°: 343), DOM16-38 (SEQ ID N0: 344), DOM16-39 (SEQ ID N°: 345), DOM 16-40 (SEQ ID N0: 346), DOM16-41 (SEQ ID N°: 347), DOM16- 42 (SEQ ID N°: 348), DOMl6-43 (SEQ ID N°: 349), DOMl6-44 (SEQ ID N°: 350), DOM16-45 (SEQ ID N°: 351), DOM16-46 (SEQ ID N°: 352), DOM 16-47 (SEQ ID N°: 353), DOM16-48 (SEQ ID N°: 354), DOM16-49 (SEQ ID N°: 355), DOM16-50 (SEQ ID N°: 356), DOM16-59 (SEQ ID N°: 357), DOMl6-60 (SEQ ID N0: 358), DOM16-61 (SEQ ID N°: 359), DOM16- 62 (SEQ ID N°: 360), DOM16-63 (SEQ ID N°: 361), DOM16-64 (SEQ ID N0: 362), DOM16-65 (SEQ ID N°: 363), DOM16-66 (SEQ ID N°: 364), DOMl6-67 (SEQ ID N°: 365), DOM16-68 (SEQ ID N°: 366), DOM16-69 (SEQ ID N°: 367), DOM16-70 (SEQ ID N0: 368), DOM16-71 (SEQ ID N°: 369), DOM 16-72 (SEQ ID N0: 370), DOM16-73 (SEQ ID N°: 371), D0M16- 74 (SEQ ID N°: 372), DOMl6-75 (SEQ ID N°: 373), DOMl6-76 (SEQ ID N0: 374), DOM16-77 (SEQ ID N°: 375), DOM16-78 (SEQ ID N°: 376), DOMl6-79 (SEQ ID N°: 377), DOMI6-8O (SEQ ID N°: 378), DOM16-81 (SEQ ID N°: 379), DOM16-82 (SEQ ID N0: 380), DOM16-83 (SEQ ID N°: 381), DOM16-84 (SEQ ID N°: 382), DOM16-85 (SEQ ID N0: 383), DOMl6-5 87 (SEQ ID N°: 384), DOM16-88 (SEQ ID N°: 385), DOM16-89 (SEQ ID N°: 386), DOM16-90 (SEQ ID N°: 387), DOM16-91 (SEQ ID N°: 388), DOM 16-92 (SEQ ID N0: 389), DOM16-94 (SEQ ID N°: 390), D0M16- 95 (SEQ ID N°: 391), DOM16-96 (SEQ ID N0: 392), DOM16-97 (SEQ ID N°: 393), DOM 16-98 (SEQ ID N°: 394), DOM16-99 (SEQ ID N°: 395), DOM 16-100 (SEQ ID N0: 396), DCMI6-101 (SEQ ID N°: 397), DOM16- 102 (SEQ ID N°: 398), DOM16-103 (SEQ ID N0: 399), DOM16-104 (SEQ ID N0: 400), DOM16.-105 (SEQ ID N°: 401), DOMI6-IO6 (SEQ ID N°: 402), DOM 16-107 (SEQ ID N°: 403), DOMI6-IO8 (SEQ ID N°: 404), DOM 16-109 (SEQ ID N°: 405), DOM16-HO (SEQ ID N°: 406), DOM16- 111 (SEQ ID N°: 407), DOM16-112 (SEQ ID N0: 408), DOM16-113 (SEQ
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r ID N°: 409), DOM16-114 (SEQ ID N°: 410), DOM16-115 (SEQ ID N0: 411), DOMl6-116 (SEQ ID N°: 412), DOM16-117 (SEQ ID N°: 413), DOM16-118 (SEQ ID N°: 414), DOM16-119 (SEQ ID N°: 415), DOM16-39- 6 (SEQ ID N°: 416), DOM16-39-8 (SEQ ID N°: 417), DOM16-39-34 (SEQ ID N°: 418), DOM16-39-48 (SEQ ID N°: 419), DOM16-39-87 (SEQ ID N°: 420), DOM 16-39-90 (SEQ ID N°: 421), DOM16-39-96 (SEQ ID N°: 422), DOM16-39-100 (SEQ ID N0: 423), DOM16-39-101 (SEQ ID N°: 424), DOM 16-39-102 (SEQ ID N°: 425), DOM16-39-1Ü3 (SEQ ID N°: 426), DOM 16-39-104 (SEQ ID N°: 427), DOM16-39-105 (SEQ ID N°: 428), ι 10 DOM16-39-106 (SEQ ID N°: 429), DOM16-39-107 (SEQ ID N0: 430), DOM16-39-108 (SEQ ID N°: 431), DOM16-39-109 (SEQ ID N°: 432), DOM16-39-HO (SEQ ID N°: 433), DOMl6-39-111 (SEQ ID N0: 434), DOM16-39-112 (SEQ ID N°: 435), DOM16-39-113 (SEQ ID N0: 436), DOM16-39-114 (SEQ ID N°: 437), DOM16-39-115 (SEQ ID N°: 438), DOM16-39-116 (SEQ ID N0: 439), DOM16-39-117 (SEQ ID N°: 440), DOM 16-39-200 (SEQ ID N°: 441), DOM16-39-201 (SEQ ID N°: 442), DOM 16-39-202 (SEQ ID N°: 443), DOM16-39-203 (SEQ ID N°: 444), DOM 16-39-204 (SEQ ID N°: 445), DOM16-39-205 (SEQ ID N°: 446), DOM16-39-206 (SEQ ID N°: 447), DOM16-39-207 (SEQ ID N°: 448), DOM 16-39-209 (SEQ ID N°: 449), DOM16-52 (SEQ ID N°: 450), NB 1 (SEQ ID N°: 451), NB 2 (SEQ ID N°: 452), NB 3 (SEQ ID N°: 453), NB 4 (SEQ ID N°: 454), NB 5 (SEQ ID N°: 455), NB 6 (SEQ ID N°: 456), NB 7 (SEQ ID N0: 457), NB 8 (SEQ ID N°: 458), NB 9 (SEQ ID N0: 459), NB 10 (SEQ ID N°: 460), NB 11 (SEQ ID N°: 461), NB 12 (SEQ ID N0: 462), NB 13 (SEQ ID N°: 463), NB 14 (SEQ ID N°: 464), NB 15 (SEQ ID N0: 465), NB 16 (SEQ ID N°: 466), NB 17 (SEQ ID N°: 467), NB 18 (SEQ ID N°: 468), NB 19 (SEQ ID N°: 469), NB 20 (SEQ ID N°: 470), NB 21 (SEQ ID N°: 471) e NB 22 (SEQ ID N°: 472).
Por exemplo, o domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação ao EGFR pode compreender uma seqüência de aminoácido que tem pelo menos cerca de 85 % de identidade de seqüência de aminoácido com a seqüência de aminoácido de um dAb selecionado do grupo que consiste de DOM16-39-210 (SEQ ID N°: 541), DOM16-39-211 (SEQ ID N°: 542), DOM16-39-212 (SEQ ID N°: 543), DOM16-39-213 (SEQ ID N°: 544), DOM 16-39-214 (SEQ ID N°: 545), DOM16-39-215 (SEQ ID N°: 546), DOM 16-39-216 (SEQ ID N°: 547), DOM16-39-217 (SEQ ID N°: 548), DOM 16-39-218 (SEQ ID N°: 549), DOM16-39-219 (SEQ ID N°: 550), DOM16-39-220 (SEQ ID N°: 551), DOM16-39-221 (SEQ ID N0: 552), DOMl6-39-222 (SEQ ID N°: 553), DOM16-39-223 (SEQ ID N°: 554), DOMl6-39-224 (SEQ ID N°: 555), DOM16-39-225 (SEQ ID N°: 556), DOMl6-39-226 (SEQ ID N°: 557), DOM16-39-227 (SEQ ID N°: 558), DOM 16-39-228 (SEQ ID N°: 559), DOM16-39-229 (SEQ ID N°: 560), DOM16-39-230 (SEQ ID N°: 561), DOM16-39-231 (SEQ ID N°: 562), DOMl6-39-232 (SEQ ID N°: 563), DOM16-39-233 (SEQ ID N°: 564), DOMl6-39-234 (SEQ ID N°: 565), DOM16-39-235 (SEQ ID N0: 566), DOM16-39-500 (SEQ ID N0: 725), DOM16-39-502(SEQ ID N°: 726), DOMl6-39-503 (SEQ ID N0: 567), DOM16-39-504 (SEQ ID N°: 568), DOMl6-39-505 (SEQ ID N0: 569), DOMl6-39-506 (SEQ ID N°: 570), DOMl6-39-507 (SEQ ID N°: 571), DOM16-39-508 (SEQ ID N°: 572), DOM16-39-509 (SEQ ID N0: 573), DOM16-39-510 (SEQ ID N°: 574), DOM16-39-511 (SEQ ID N°: 575), DOM16-39-512 (SEQ ID N°: 576), DOM16-39-521 (SEQ ID N°: 577), DOM16-39-522 (SEQ ID N0: 578), DOMl6-39-523 (SEQ ID N0: 579), DOM16-39-524 (SEQ ID N°: 580), DOM16-39-527 (SEQ ID N°: 581), DOM16-39-525 (SEQ ID N°: 582), DOM16-39-526 (SEQ ID N°: 583), DOM16-39-540 (SEQ ID N°: 584), DOM16-39-541 (SEQ ID N0: 585), DOM16-39-542 (SEQ ID N°: 586), DOMl6-39-543 (SEQ ID N0: 587), DOM16-39-544 (SEQ ID N°: 588), DOM 16-39-545 (SEQ ID N°: 589), DQM16-39-550 (SEQ ID N°: 590), DOM16-39-551 (SEQ ID N°: 591), DOM16-39-552 (SEQ ID N°: 592), DOMl6-39-553 (SEQ ID N°: 593), DOM16-39-554 (SEQ ID N°: 594), DOM16-39-555 (SEQ ID N°: 595), DOM16-39-561 (SEQ ID N0: 596), DOMl6-39-562 (SEQ ID N°: 597), DOMl6-39-563 (SEQ ID N°: 598), DOMl6-39-564 (SEQ ID N°: 599), DOM16-39-571 (SEQ ID N°: 600), DOM16-39-572 (SEQ ID N°: 601), DOM16-39-573 (SEQ ID N°: 602), DOM16-39-574 (SEQ ID N°: 603), DOM16-39-580 (SEQ ID N°: 604), DOM16-39-591 (SEQ ID N°: 605), DOM16-39-592 (SEQ ID N°: 606), DOMl6-39-593 (SEQ ID N°: 607), DOM16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOMl6-39-602 (SEQ ID N°: 609), DOM16-39-603 (SEQ ID N°: 610), DOMl6-39-604 (SEQ ID N°: 611), DOM16-39-605 (SEQ ID N0: 612), DOMl6-39-607 (SEQ ID N°: 613), DOM16-39-611 (SEQ ID , N°: 614), DOM16-39-612 (SEQ ID N°: 615), DOM16-39-613 (SEQ ID N°: 616), DOM16-39-614 (SEQ ID N°: 617), DOM16-39-615 (SEQ ID N°: 618), DOM 16-39-616 (SEQ ID N°: 619), DOM16-39-617 (SEQ ID N°: 620), DOM16-39-618 (SEQ ID N°: 621) e DOM16-39-619 (SEQ ID N°: 622).
Em algumas formas de realização, o ligando tem especificidade de ligação para VEGF e para EGFR e compreende pelo menos um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF e pelo menos um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR, em que domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF compete com a ligação ao VEGF com um anticorpo de domínio anti- VEGF (dAb) selecionado do grupo que consiste de TAR15-1 (SEQ ID N°: 100), TARl5-3 (SEQ ID N°: 101), TAR15-4 (SEQ ID N°: 102), TAR15-9 (SEQ ID N0: 103), TAR15-10 (SEQ ID N°: 104), TAR15-11 (SEQ ID N°: 105), TARl5-12 (SEQ ID N°: 106), TAR15-13 (SEQ ID N0: 107), TAR15-14 (SEQ ID N0: 108), TAR15-15 (SEQ ID N°: 109), TAR15-16 (SEQ ID N°: 110), TAR15-17 (SEQ ID N°: 111), TARl5-18 (SEQ IDN°: 112), TAR15-19 (SEQ ID N0: 113), TAR15-20 (SEQ ID N°: 114), TAR 15-22 (SEQ ID N°: 115), TARl5-5 (SEQ ID N0: 116), TAR15-6 (SEQ ID N°: 117), TAR15-7 (SEQ ID N°: 118), TAR15-8 (SEQ ID N°: 119), TAR15-23 (SEQ ID N°: 120), TAR15-24 (SEQ IDN0: 121), TAR15-25 (SEQ IDN°: 122), TAR15-26 (SEQ ID N°: 123), TAR15-27 (SEQ ID N°: 124), TAR15-29 (SEQ ID N°: 125), TARl5-30 (SEQ ID N°: 126), TAR15-6-500 (SEQ ID N°: 127), TARl5-6-501 (SEQ ID N0: 128), TAR15-6-502 (SEQ ID N°: 129), TAR15- 6-503 (SEQ ID N°: 130), TAR15-6-504 (SEQ ID N°: 131), TAR15-6-505 (SEQ ID N0: 132), TAR15-6-506 (SEQ ID N°: 133), TAR15-6-507 (SEQ ID N°: 134), TARl5-6-508 (SEQ ID N°: 135), TAR15-6-509 (SEQ ID N°: 136), TARl5-6-510 (SEQ ID N°: 137), TAR15-8-500 (SEQ ID N0: 138), TAR15- 8-501 (SEQ ID N°: 139), TAR15-8-502 (SEQ ID N°: 140), TAR15-8-503 (SEQ ID N°: 141), TAR15-8-505 (SEQ ID N°: 142), TAR15-8-506 (SEQ ID N0: 143), TAR15-8-507 (SEQ ID N°: 144), TARl 5-8-508 (SEQ ID N°: 145), TARl5-8-509 (SEQ ID N°: 146), TAR15-8-510 (SEQ ID N°: 147), TAR15- 8-511 (SEQ ID N0: 148), TAR15-26-500 (SEQ ID N°: 149), TAR15-26-501 (SEQ ID N0: 150), TAR15-26-502 (SEQ ID N0: 151), TAR15-26-503 (SEQ ID N°: 152), TAR15-26-504 (SEQ ID N°: 153), TAR15-26-505 (SEQ ID N°: 154), TAR15-26-506 (SEQ ID N0: 155), TAR15-26-507 (SEQ ID N°: 156), TARl5-26-508 (SEQ ID N0: 157), TAR15-26-509 (SEQ ID N0: 158), TARl5-26-510 (SEQ ID N°: 159), TAR15-26-511 (SEQ ID N°: 160), TARl 5-26-512 (SEQ ID N0: 161), TARl 5-26-513 (SEQ ID N0: 162), TARl5-26-514 (SEQ ID N0: 163), TAR15-26-515 (SEQ ID N°: 164), TARl5-26-516 (SEQ ID N°: 165), TAR15-26-517 (SEQ ID N°: 166), TARl5-26-518 (SEQ ID N0: 167), TAR15-26-519 (SEQ ID N°: 168), TARl5-26-520 (SEQ ID N0: 169), TAR15-26-521 (SEQ ID N°: 170), TARl5-26-522 (SEQ ID N0: 171), TAR15-26-523 (SEQ ID N°: 172), TARl5-26-524 (SEQ ID N0: 173), TAR15-26-525 (SEQ ID N°: 174), TARl 5-26-526 (SEQ ID N0: 175), TARl 5-26-527 (SEQ ID N0: 176), TAR15-26-528 (SEQ ID N°: 177), TAR15-26-529 (SEQ ID N°: 178), TARl5-26-530 (SEQ ID N179), TARl5-26-531 (SEQ ID N°: 180), TARl5-26-532 (SEQ ID N°: 181), TAR15-26-533 (SEQ ID N0: 182), TARl5-26-534 (SEQ ID N°: 183), TARl5-26-535 (SEQ ID N°: 184), TARl5-26-536 (SEQ ID N°: 185), TAR15-26-537 (SEQ ID N°: 186), TARl5-26-538 (SEQ ID N°: 187), TARl5-26-539 (SEQ ID N°: 188), TARl 5-26-540 (SEQ ID N°: 189), TARl 5-26-541 (SEQ ID N°: 190), TARl5-26-542 (SEQ ID N°: 191), TAR15-26-543 (SEQ ID N°: 192), TARl5-26-544 (SEQ ID N°: 193), TAR15-26-545 (SEQ ID N0: 194), TARl5-26-546 (SEQ ID N°: 195), TAR15-26-547 (SEQ ID N°: 196), TARl5-26-548 (SEQ ID N°: 197) e TAR15-26-549 (SEQ ID N°: 198), TARl5-26-550 (SEQ ID N°: 539) e TARl5-26-551 (SEQ ID N°: 540) e em que domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR compete com a ligação ao EGFR com um anticorpo de domínio anti-EGFR (dAb) selecionado do grupo que consiste de DOM 16-17 (SEQ ID N0: 325), DOM16-18 (SEQ ID N°: 326), DOM16-19 (SEQ ID N°: 327), DOMl6-20 (SEQ ID N0: 328), DOM16-21 (SEQ ID N°: 329), DOM16- 22 (SEQ ID N°: 330), DOM16-23 (SEQ ID N0: 331), DOM16-24 (SEQ ID N°: 332), DOM 16-25 (SEQ ID N°: 333), DOM16-26 (SEQ ID N°: 334), DOM 16-27 (SEQ ID N°: 335), DOM16-28 (SEQ ID N°: 336), DOM16-29 (SEQ ID N0: 337), DOM16-30 (SEQ ID N°: 338), DOM16-31 (SEQ ID N°: 339), DOM 16-32 (SEQ ID N0: 340), DOM16-33 (SEQ ID N°: 341), DOM16- (SEQ ID N°: 342), DOM16-37 (SEQ ID N0: 343), DOM16-38 (SEQ ID N°: 344), DOMl6-39 (SEQ ID N°: 345), DOM16-40 (SEQ ID N0: 346), DOM 16-41 (SEQ ID N°: 347), DOM16-42 (SEQ ID N°: 348), DOM16-43 (SEQ ID N0: 349), DOM16-44 (SEQ ID N°: 350), DOM16-45 (SEQ ID N°: 351), DOMl6-46 (SEQ ID N°: 352), DOM16-47 (SEQ ID N°: 353), DOM16- 48 (SEQ ID N°: 354), DOM16-49 (SEQ ID N0: 355), DOM16-50 (SEQ ID N°: 356), DOMl6-59 (SEQ ID N°: 357), DOMI6-6O (SEQ ID N°: 358), 24
DOM 16-61 (SEQ ID N0: 359), DOM16-62 (SEQ ID N°: 360), DOM16-63 (SEQ ID N°: 361), DOM16-64 (SEQ ID N°: 362), DOM16-65 (SEQ ID N°: 363), DOM 16-66 (SEQ ID N0: 364), DOM16-67 (SEQ ID N°: 365), D0M16- 68 (SEQ ID N°: 366), D0M16-69 (SEQ ID N°: 367), DOM16-7Ü (SEQ ID N°: 368), DOM16-71 (SEQ ID N°: 369), DOM16-72 (SEQ ID N0: 370), DOM 16-73 (SEQ ID N0: 371), DOM16-74 (SEQ ID N°: 372), DOM16-75 (SEQ ID N°: 373), DOM16-76 (SEQ ID N°: 374), DOM16-77 (SEQ ID N0: 375), DOM 16-78 (SEQ ID N0: 376), DOM16-79 (SEQ ID N°: 377), DOM16- 80 (SEQ ID N0: 378), DOM16-81 (SEQ ID N°: 379), DOM16-82 (SEQ ID N0: 380), DOM16-83 (SEQ ID N°: 381), DOM16-84 (SEQ ID N°: 382), DOMl6-85 (SEQ ID N°: 383), DOM16-87 (SEQ ID N°: 384), DOM16-88 (SEQ ID N°: 385), DOM16-89 (SEQ ID N°: 386), DOM16-90 (SEQ ID N°: 387), DOM 16-91 (SEQ ID N0: 388), DOM16-92 (SEQ ID N°: 389), D0M16- 94 (SEQ ID N°: 390), D0M16-95 (SEQ ID N°: 391), DOM16-96 (SEQ ID N°: 392), DOM16-97 (SEQ ID N°: 393), DOM16-98 (SEQ ID N°: 394), DOM 16-99 (SEQ ID N°: 395), DOMI6-IOO (SEQ ID N°: 396), DOMI6-IOI (SEQ ID N°: 397), DOM16-102 (SEQ ID N°: 398), DOM16-103 (SEQ ID N0: 399), DOM 16-104 (SEQ ID N°: 400), DOM16-105 (SEQ ID N°: 401), DOM 16-106 (SEQ ID N0: 402), DOM16-107 (SEQ ID N°: 403), DOM16- 108 (SEQ ID N°: 404), DOM16-109 (SEQ ID N°: 405), DOM16-HO (SEQ ID N°: 406), D0M16-111 (SEQ ID N°: 407), DOM16-112 (SEQ ID N°: 408), DOM16-113 (SEQ ID N°: 409), DOM16-114 (SEQ ID N°: 410), DOM16-115 (SEQ ID N0: 411), DOM16-116 (SEQ ID N0: 412), D0M16- 117 (SEQ ID N0: 413), DOM16-118 (SEQ ID N°: 414), DOM16-119 (SEQ ID N°: 415), DOM16-39-6 (SEQ ID N°: 416), DOM16-39-8 (SEQ ID N°: 417), DOM16-39-34 (SEQ ID N°: 418), DOM16-39-48 (SEQ ID N°: 419), DOM16-39-87 (SEQ ID N0: 420), DOM16-39-90 (SEQ ID N°: 421), DOMl6-39-96 (SEQ ID N0: 422), DOM16-39-100 (SEQ ID N°: 423), DOM16-39-101 (SEQ ID N°: 424), DQM16-39-102 (SEQ ID N°: 425), DOM 16-3 9-103 (SEQ ID N°: 426), DOM16-39-104 (SEQ ID N°: 427), DOM16-39-105 (SEQ ID N°: 428), DOM16-39-106 (SEQ ID N°: 429), DOM16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM16-39-108 (SEQ ID N°: 431), DOM 16-3 9-109 (SEQ ID N°: 432), DOM16-39-110 (SEQ ID N°: 433), DOM16-39-111 (SEQ ID N°: 434), DOM16-39-112 (SEQ ID N°: 435), DOM16-39-113 (SEQ ID N0: 436), DOM16-39-114 (SEQ ID N°: 437), DOM16-39-115 (SEQ ID N0: 438), DOM16-39-116 (SEQ ID N0: 439), DOM16-39-117 (SEQ ID N0: 440), DOM 16-3 9-200 (SEQ ID N°: 441), DOM16-39-201 (SEQ ID N0: 442), DOM 16-3 9-202 (SEQ ID N°: 443), DOM16-39-203 (SEQ ID N0: 444), DOM 16-3 9-204 (SEQ ID N°: 445), DOM16-39-205 (SEQ ID N0: 446), DOM 16-3 9-206 (SEQ ID N°: 447), DOM16-39-2Q7 (SEQ ID N0: 448), DOM 16-3 9-209 (SEQ ID N°: 449),
DOMl6-52 (SEQ ID N°: 450), NB 1 (SEQ ID N0: 451), NB 2 (SEQ ID N°: 452), NB 3 (SEQ ID N°: 453), NB 4 (SEQ ID N°: 454), NB 5 (SEQ ID N°: 455), NB 6 (SEQ ID N°: 456), NB 7 (SEQ ID N°: 457), NB 8 (SEQ ID N0: 458), NB 9 (SEQ ID N°: 459), NB 10 (SEQ ID N°: 460), NB 11 (SEQ ID N°: 461), NB 12 (SEQ ID N°: 462), NB 13 (SEQ ID N°: 463), NB 14 (SEQ ID N0: 464), NB 15 (SEQ ID N0: 465), NB 16 (SEQ ID N°: 466), NB 17 (SEQ ID N°: 467), NB 18 (SEQ ID N0: 468), NB 19 (SEQ ID N°: 469), NB 20 (SEQ ID N°: 470), NB 21 (SEQ ID N°: 471) e NB 22 (SEQ ID N°: 472).
Nas formas de realização adicionais, o ligando tem especificidade de ligação para VEGF e para EGFR e compreende pelo menos um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF e pelo menos um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR, em que domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF compete com a ligação ao VEGF com um anticorpo de domínio anti- VEGF (dAb) selecionado do grupo que consiste de TARl5-1 (SEQ ID N°: 100), TAR15-3 (SEQ ID N°: 101), TAR15-4 (SEQ ID N°: 102), TAR15-9 &Φ (SEQ ID N°: 103), TAR15-10 (SEQ ID N°: 104), TAR15-11 (SEQ ID N°: 105),TAR15-12(SEQIDN°: 106), TARl5-13 (SEQ ID N°: 107), TAR15-14 (SEQ ID N°: 108), TAR15-15 (SEQ ID N°: 109), TAR15-16 (SEQ ID N°: 110), TARl5-17 (SEQ ID N°: 111), TARl5-18 (SEQ ID N°: 112), TARl5-19 (SEQ ID N°: 113), TAR15-20 (SEQ ID N°: 114), TAR 15-22 (SEQ ID N°: 115), TAR15-5 (SEQ ID N°: 116), TAR15-6 (SEQ ID N°: 117), TAR15-7 (SEQ ID N°: 118), TAR15-8 (SEQ ID N°: 119), TAR15-23 (SEQ ID N°: 120), TAR15-24 (SEQ IDN°: 121), TAR15-25 (SEQ IDN°: 122), TAR15-26 (SEQ ID N°: 123), TAR15-27 (SEQ ID N°: 124), TAR15-29 (SEQ ID N°: - 10 125), TAR15-30 (SEQ ID N°: 126), TAR15-6-500 (SEQ ID N°: 127), TARl5-6-501 (SEQ ID N0: 128), TAR15-6-502 (SEQ ID N0: 129), TAR15- 6-503 (SEQ ID N0: 130), TAR15-6-504 (SEQ ID N°: 131), TAR15-6-505 (SEQ ID N°: 132), TAR15-6-506 (SEQ ID N°: 133), TAR15-6-507 (SEQ ID N0: 134), TAR15-6-508 (SEQ ID N°: 135), TAR15-6-509 (SEQ ID N°: 136), TARl5-6-510 (SEQ ID N0: 137), TAR15-8-500 (SEQ ID N°: 138), TAR15- 8-501 (SEQ ID N°: 139), TAR15-8-502 (SEQ ID N0: 140), TAR15-8-503 (SEQ ID N°: 141), TAR15-8-505 (SEQ ID N0: 142), TAR15-8-506 (SEQ ID N0: 143), TARl5-8-507 (SEQ ID N°: 144), TAR15-8-508 (SEQ ID N°: 145), TAR15-8-509 (SEQ ID N0: 146), TAR15-8-510 (SEQ ID N°: 147), TAR15- 8-511 (SEQ ID N°: 148), TAR15-26-500 (SEQ ID N°: 149), TAR15-26-501 (SEQ ID N0: 150), TAR15-26-502 (SEQ ID N°: 151), TAR15-26-503 (SEQ ID N°: 152), TAR15-26-504 (SEQ ID N°: 153), TAR15-26-505 (SEQ ID N°:
154), TAR15-26-506 (SEQ ID N°: 155), TAR15-26-507 (SEQ ID N0: 156), TARl 5-26-508 (SEQ ID N0: 157), TARl 5-26-509 (SEQ ID N°: 158), TARl 5-26-510 (SEQ ID N0: 159), TARl 5-26-511 (SEQ ID N°: 160), TARl 5-26-512 (SEQ ID N°: 161), TARl 5-26-513 (SEQ ID N°: 162), TARl 5-26-514 (SEQ ID N0: 163), TARl 5-26-515 (SEQ ID N°: 164), TARl 5-26-516 (SEQ ID N0: 165), TARl 5-26-517 (SEQ ID N°: 166), TAR15-26-518 (SEQ ID N°: 167), TARl 5-26-519 (SEQ ID N°: 168), TARl 5-26-520 (SEQ ID N°: 169), TARl 5-26-521 (SEQ ID N°: 170), TARl 5-26-522 (SEQ ID N°: 171), TARl 5-26-523 (SEQ ID N°: 172), TARl 5-26-524 (SEQ ID N0: 173), TARl 5-26-525 (SEQ ID N°: 174), TARl 5-26-526 (SEQ ID N0: 175), TARl 5-26-527 (SEQ ID N°: 176), TARl 5-26-528 (SEQ ID N0: 177), TARl 5-26-529 (SEQ ID N°: 178), TARl 5-26-530 (SEQ ID N0: 179), TARl 5-26-531 (SEQ ID N°: 180), TARl 5-26-532 (SEQ ID N°: 181), TARl 5-26-533 (SEQ ID N°: 182), TARl 5-26-534 (SEQ ID N°: 183), TARl 5-26-535 (SEQ ID N°: 184), TARl 5-26-536 (SEQ ID N°: 185), TARl 5-26-537 (SEQ ID N°: 186), TARl 5-26-538 (SEQ ID N°: 187), TARl 5-26-539 (SEQ ID N°: 188), TARl 5-26-540 (SEQ ID N0: 189), TAR15-26-541 (SEQ ID N°: 190), TARl 5-26-542 (SEQ ID N0: 191), TARl 5-26-543 (SEQ ID N°: 192), TARl 5-26-544 (SEQ ID N0: 193), TARl 5-26-545 (SEQ ID N°: 194), TARl 5-26-546 (SEQ ID N°: 195), TARl 5-26-547 (SEQ ID N°: 196), TARl 5-26-548 (SEQ ID N0: 197), TARl 5-26-549 (SEQ ID N°: 198), TARl5-26-550 (SEQ IDN 539) e TAR15-26-551 (SEQ ID N°: 540) e em
que domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR compete com a ligação ao EGFR com um anticorpo de domínio anti-EGFR (dAb) selecionado do grupo que consiste de DOM 16-3 9- 210 (SEQ ID N°: 541), DOM16-39-211 (SEQ ID N°: 542), DOM16-39-212 (SEQ ID N°: 543), DOM16-39-213 (SEQ ID N°: 544), DOM16-39-214 (SEQ ID N°: 545), DOM16-39-215 (SEQ ID N0: 546), DOM16-39-216 (SEQ ID N°: 547), DOM 16-39-217 (SEQ ID N°: 548), DOM16-39-218 (SEQ ID N°: 549), DOM16-39-219 (SEQ ID N°: 550), DOM16-39-220 (SEQ ID N°: 551), DOM 16-39-221 (SEQ ID N°: 552), DOM16-39-222 (SEQ ID N0: 553), DOMl6-39-223 (SEQ ID N0: 554), DOM16-39-224 (SEQ ID N°: 555), DOMl6-39-225 (SEQ ID N0: 556), DOMl6-39-226 (SEQ ID N°: 557), DOM 16-39-227 (SEQ ID N°: 558), DOM16-39-228 (SEQ ID N°: 559), DOM16-39-229 (SEQ ID N°: 560), DOM16-39-230 (SEQ ID N°: 561), 69$
10
15
20
25
DOM16-39-231 (SEQ ID N°: 562) DOM16-39-232 (SEQ ID N°: 563), DOM16-39-233 (SEQ ID N°: 564) DOM16-39-234 (SEQ ID N°: 565), DOM16-39-235 (SEQ ID N°: 566) DOM16-39-500 (SEQ ID N°: 725), DOMI6-39-502(SEQ ID N0: 726), DOMl 6-39-503 (SEQ ID N°: 567), DOM16-39-504 (SEQ ID N°: 568) DOM16-39-505 (SEQ ID N°: 569), DOM16-39-506 (SEQ ID N°: 570) DOM16-39-507 (SEQ ID N°: 571), DOM16-39-508 (SEQ ID N°: 572) DOM16-39-509 (SEQ ID N°: 573), DOM 16-3 9-510 (SEQ ID N°: 574) DOM16-39-511 (SEQ ID N°: 575), DOM16-39-512 (SEQ ID N°: 576) DOM16-39-521 (SEQ ID N°: 577), DOMl 6-39-522 (SEQ ID N°: 578) DOM16-39-523 (SEQ ID N°: 579), DOMl 6-39-524 (SEQ ID N°: 580) DOM16-39-527 (SEQ ID N°: 581), DOMl 6-39-525 (SEQ ID N°: 582) DOM16-39-526 (SEQ ID N°: 583), DOM 16-3 9-540 (SEQ ID N°: 584) DOM16-39-541 (SEQ ID N°: 585), DOM 16-3 9-542 (SEQ ID N°: 586) DOMl 6-39-543 (SEQ ID N°: 587), DOM 16-3 9-544 (SEQ ID N°: 588) DOMl 6-39-545 (SEQ ID N°: 589), DOM16-39-550 (SEQ ID N°: 590) DOMl 6-39-551 (SEQ ID N°: 591), DOM16-39-552 (SEQ ID N°: 592) DOMl 6-39-553 (SEQ ID N°: 593), DOM16-39-554 (SEQ ID N°: 594) DOM16-39-555 (SEQ ID N°: 595), DOM16-39-561 (SEQ ID N°: 596) DOMl 6-39-562 (SEQ ID N°: 597), DOM16-39-563 (SEQ ID N°: 598) DOMl 6-39-564 (SEQ ID N°: 599), DOM16-39-571 (SEQ ID N°: 600) DOMl 6-39-572 (SEQ ID N°: 601), DOM16-39-573 (SEQ ID N°: 602) DOMl 6-39-574 (SEQ ID N°: 603), DOM16-39-580 (SEQ ID N0: 604) DOM16-39-591 (SEQ ID N°: 605), DOM16-39-592 (SEQ ID N°: 606) DOMl 6-39-593 (SEQ ID N°: 607), DOM 16-3 9-601 (SEQ ID N°: 608) DOMl 6-39-602 (SEQ ID N°: 609), DOM16-39-603 (SEQ ID N°: 610) DOMl 6-39-604 (SEQ ID N°: 611), DOM16-39-605 (SEQ ID N0: 612) DOMl 6-39-607 (SEQ ID N°: 613), DOM16-39-611 (SEQ ID N°: 614) DOM16-39-612 (SEQ ID N°: 615), DOM16-39-613 (SEQ ID N°: 616) DOM16-39-614 (SEQ ID N°: 617), m DOM16-39-615 (SEQ ID N°: 618), DOM16-39-616 (SEQ ID N°: 619), DOM16-39-617 (SEQ ID N°: 620), DOM16-39-618 (SEQ ID N°: 621) e DOMl 6-39-619 (SEQ ID N0: 622).
Por exemplo, o ligando pode compreender um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF que compreende uma seqüência de aminoácido que tem pelo menos cerca de 85 % de identidade de seqüência de aminoácido com a seqüência de aminoácido de um dAb selecionado do grupo que consiste de TAR15-1 (SEQ ID N°: 100), TAR15-3 (SEQ ID N0: 101), TAR15-4 (SEQ ID N°: 102), ■ 10 TAR15-9 (SEQ ID N0: 103), TAR15-10 (SEQ ID N°: 104), TARl5-11 (SEQ ID N°: 105), TAR15-12 (SEQ ID N°: 106), TAR15-13 (SEQ ID N°: 107), TARl5-14 (SEQ ID N°: 108), TAR15-15 (SEQ ID N0: 109), TAR15-16 (SEQ ID N°: 110), TAR15-17 (SEQ ID N°: 111), TAR15-18 (SEQ ID N°: 112), TARl5-19 (SEQ IDN0: 113), TAR15-20 (SEQ IDN0: 114), TAR IS- IS 22 (SEQ ID N°: 115), TAR15-5 (SEQ ID N°: 116), TAR15-6 (SEQ ID N°: 117), TARl5-7 (SEQ ID N°: 118), TAR15-8 (SEQ ID N°: 119), TAR15-23 (SEQ ID N°: 120), TAR15-24 (SEQ ID N°: 121), TAR15-25 (SEQ ID N°: 122), TAR15-26 (SEQ ID N°: 123), TAR15-27 (SEQ ID N°: 124), TAR15-29 (SEQIDN0: 125), TAR15-30 (SEQ ID N0: 126), TAR15-6-500 (SEQ IDN°: 127), TARl5-6-501 (SEQ ID N°: 128), TAR15-6-502 (SEQ ID N°: 129), TAR15-6-503 (SEQ ID N°: 130), TAR15-6-504 (SEQ ID N°: 131), TAR15- 6-505 (SEQ ID N°: 132), TAR15-6-506 (SEQ ID N°: 133), TAR15-6-507 (SEQ ID N0: 134), TAR15-6-508 (SEQ ID N°: 135), TAR15-6-509 (SEQ ID N0: 136), TARl5-6-510 (SEQ ID N°: 137), TAR15-8-500 (SEQ ID N°: 138), TAR15-8-501 (SEQ ID N°: 139), TAR15-8-502 (SEQ ID N°: 140), TAR15- 8-503 (SEQ ID N°: 141), TAR15-8-505 (SEQ ID N°: 142), TAR15-8-506 (SEQ ID N0: 143), TARl5-8-507 (SEQ ID N°: 144), TARl5-8-508 (SEQ ID N°: 145), TARl5-8-509 (SEQ ID N°: 146), TAR15-8-510 (SEQ ID N°: 147), TAR15-8-511 (SEQ IDN°: 148), TAR15-26-500 (SEQ IDN°: 149), TARl5- 30
26-501 (SEQ ID N°: 150), TAR15-26-502 (SEQ ID N0: 151), TAR15-26-503 (SEQ ID N°: 152), TAR15-26-504 (SEQ ID N°: 153), TAR15-26-505 (SEQ ID N°: 154), TAR15-26-506 (SEQ ID N0: 155), TAR15-26-507 (SEQ ID N°: 156), TAR15-26-508 (SEQ ID N°: 157), TAR15-26-509 (SEQ ID N°: 158) TARl5-26-510 (SEQ ID N°: 159), TAR15-26-511 (SEQ ID N°: 160) TAR15-26-512 (SEQ ID N°: 161), TAR15-26-513 (SEQ ID N°: 162) TARl5-26-514 (SEQ ID N°: 163), TAR15-26-515 (SEQ ID N°: 164) TARl5-26-516 (SEQ ID N°: 165), TAR15-26-517 (SEQ ID N0: 166) TARl5-26-518 (SEQ ID N0: 167), TAR15-26-519 (SEQ ID N°: 168) TARl5-26-520 (SEQ ID N0: 169), TAR15-26-521 (SEQ ID N°: 170) TARl5-26-522 (SEQ ID N0: 171), TAR15-26-523 (SEQ ID N°: 172) TARl5-26-524 (SEQ ID N0: 173), TAR15-26-525 (SEQ ID N°: 174) TAR15-26-526 (SEQ ID N°: 175), TAR15-26-527 (SEQ ID N°: 176) TARl5-26-528 (SEQ ID N°: 177), TAR15-26-529 (SEQ ID N°: 178) TAR15-26-530 (SEQ ID N°: 179), TAR15-26-531 (SEQ ID N°: 180) TARl5-26-532 (SEQ ID N0: 181), TAR15-26-533 (SEQ ID N°: 182) TAR15-26-534 (SEQ ID N°: 183), TAR15-26-535 (SEQ ID N°: 184) TAR15-26-536 (SEQ ID N°: 185), TAR15-26-537 (SEQ ID N°: 186) TAR15-26-538 (SEQ ID N°: 187), TAR15-26-539 (SEQ ID N°: 188) TAR15-26-540 (SEQ ID N°: 189), TAR15-26-541 (SEQ ID N°: 190) TAR15-26-542 (SEQ ID N°: 191), TAR15-26-543 (SEQ ID N°: 192) TAR15-26-544 (SEQ ID N°: 193), TAR15-26-545 (SEQ ID N°: 194) TARl5-26-546 (SEQ ID N0: 195), TAR15-26-547 (SEQ ID N°: 196) TARl5-26-548 (SEQ ID N°: 197) e TAR15-26-549 (SEQ ID N°: 198) TARl5-26-550 (SEQ ID N°: 539) e TAR15-26-551 (SEQ ID N0: 540) e ainda compreende um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR que compreende uma seqüência de aminoácido que tem pelo menos cerca de 85 % de identidade de seqüência de aminoácido com a seqüência de aminoácido de um dAb selecionado do grupo que consiste de DOM16-17 (SEQ ID N0: 325), DOM16-18 (SEQ ID N°: 326), DOMl6-19 (SEQ ID N°: 327), DOM16-20 (SEQ ID N°: 328), DOM16- 21 (SEQ ID N°: 329), DOM16-22 (SEQ ID N0: 330), DOM16-23 (SEQ ID N0: 331), DOM 16-24 (SEQ ID N0: 332), DOM16-25 (SEQ ID N°: 333), DOMl6-26 (SEQ ID N°: 334), DOM16-27 (SEQ ID N°: 335), DOM16-28 (SEQ ID N0: 336), DOM16-29 (SEQ ID N°: 337), DOM16-30 (SEQ ID N°: 338), DOMl6-31 (SEQ ID N0: 339), DOM16-32 (SEQ ID N°: 340), DOM16- 33 (SEQ ID N0: 341), DOM16-35 (SEQ ID N0: 342), DOM16-37 (SEQ ID N°: 343), DOM 16-38 (SEQ ID N°: 344), DOM16-39 (SEQ ID N°: 345), - 10 DOM 16-40 (SEQ ID N°: 346), DOM16-41 (SEQ ID N°: 347), DOM16-42 (SEQ ID N°: 348), DOM16-43 (SEQ ID N°: 349), DOM16-44 (SEQ ID N°: 350), DOMl6-45 (SEQ IDN0: 351), DOM16-46 (SEQ ID N°: 352), DOM16- 47 (SEQ ID N0: 353), DOM16-48 (SEQ ID N0: 354), DOM16-49 (SEQ ID N°: 355), DOMl6-50 (SEQ ID N°: 356), DOM16-59 (SEQ ID N°: 357), DOM 16-60 (SEQ ID N°: 358), DOM16-61 (SEQ ID N°: 359), DOM16-62 (SEQ ID N°: 360), DOM16-63 (SEQ ID N°: 361), DOM16-64 (SEQ ID N°: 362), DOM 16-65 (SEQ ID N0: 363), DOM16-66 (SEQ ID N°: 364), DOM16- 67 (SEQ ID N0: 365), DOM16-68 (SEQ ID N°: 366), DOM16-69 (SEQ ID N°: 367), DOM 16-70 (SEQ ID N0: 368), DOM16-71 (SEQ ID N°: 369), DOMl6-72 (SEQ ID N°: 370), DOM16-73 (SEQ ID N°: 371), DOM16-74 (SEQ ID N°: 372), DOM16-75 (SEQ ID N°: 373), DOM16-76 (SEQ ID N°: 374), DOMl6-77 (SEQ ID N0: 375), DOM16-78 (SEQ ID N°: 376), D0M16- 79 (SEQ ID N°: 377), DOMI6-8O (SEQ ID N0: 378), DOM16-81 (SEQ ID N°: 379), DOM 16-82 (SEQ ID N°: 380), DOM16-83 (SEQ ID N°: 381), DOM 16-84 (SEQ ID N°: 382), DOM16-85 (SEQ ID N°: 383), DOM16-87 (SEQ ID N°: 384), DOM16-88 (SEQ ID N°: 385), DOM16-89 (SEQ ID N°: 386), DOM 16-90 (SEQ ID N0: 387), DOM16-91 (SEQ ID N°: 388), D0M16- 92 (SEQ ID N0: 389), DOM16-94 (SEQ ID N°: 390), DOM16-95 (SEQ ID N°: 391), DOM 16-96 (SEQ ID N°: 392), DOM16-97 (SEQ ID N0: 393), <ÒQ\
DOM 16-98 (SEQ ID N0: 394), DOM16-99 (SEQ ID N°: 395), DOMIó-lOO (SEQ ID N°: 396), DOMló-lOl (SEQ ID N°: 397), DOM16-102 (SEQ ID N°: 398), DOM 16-103 (SEQ ID N°: 399), DOM16-104 (SEQ ID N0: 400), DOM 16-105 (SEQ ID N°: 401), DOMI6-IO6 (SEQ ID N°: 402), DOM16- 107 (SEQ ID N°: 403), DOMI6-IO8 (SEQ ID N°: 404), DOM16-109 (SEQ ID N°: 405), ΌΟΜ16-ΠΟ (SEQ ID N°: 406), DOMl6-111 (SEQ ID N°: 407), DOMl6-112 (SEQ ID N°: 408), DOMl6-113 (SEQ ID N°: 409), DOM16-114 (SEQ ID N°: 410), DOM16-115 (SEQ ID N°: 411), DOM16- 116 (SEQ ID N°: 412), DOMl6-117 (SEQ ID N°: 413), DOM16-118 (SEQ - 10 ID N°: 414), DOM16-119 (SEQ ID N°: 415), DOM16-39-6 (SEQ ID N°:
416), DOMl6-39-8 (SEQ ID N°: 417), DOM16-39-34 (SEQ ID N0: 418), DOM16-39-48 I ^SEQ ID N0: 419), DOMl6-39-87 (SEQ ID N°: 420), DOM16-39-90 (SEQ ID N°: 421), DOMl 6-39-96 (SEQ ID N0: 422), DOM16-39-100 (SEQ ID N°: 423), DOM16-39-101 (SEQ ID N°: 424), DOM 16-3 9-102 (SEQ ID N°: 425), DOM16-39-103 (SEQ ID N°: 426), DOM16-39-104 (SEQ ID N0: 427), DOM 16-3 9-105 (SEQ ID N°: 428), DOM16-39-106 (SEQ ID N°: 429), DOM 16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM16-39-108 (SEQ ID N°: 431), DOM16-39-109 (SEQ ID N°: 432), DOM16-39-110 (SEQ ID N°: 433), DOM16-39-111 (SEQ ID N°: 434), DOM16-39-112 (SEQ ID N0: 435), DOM16-39-113 (SEQ ID N°: 436), DOM16-39-114 (SEQ ID N°: 437), DOM16-39-115 (SEQ ID N°: 438), DOM16-39-116 (SEQ ID N°: 439), DOM16-39-117 (SEQ ID N°: 440), DOMl 6-39-200 (SEQ ID N°: 441), DOM16-39-201 (SEQ ID N0: 442), DOM16-39-202 (SEQ ID N°: 443), DOM16-39-203 (SEQ ID N°: 444), DOM16-39-204 (SEQ ID N°: 445), DOMl 6-39-205 (SEQ ID N°: 446), DOM16-39-206 (SEQ ID N0: 447), DOMl 6-39-207 (SEQ ID N°: 448),
DOM 16-39-209 (SEQ ID N0: 449), DOM16-52 (SEQ ID N0: 450), NB 1 (SEQ ID N0: 451), NB 2 (SEQ ID N°: 452), NB 3 (SEQ ID N°: 453), NB 4 (SEQ ID N°: 454), NB 5 (SEQ ID N°: 455), NB 6 (SEQ ID N°: 456), NB 7 ti
(SEQ ID N0: 457), NB 8 (SEQ ID N°: 458), NB 9 (SEQ ID N°: 459), NB 10 (SEQ ID N0: 460), NB 11 (SEQ ID N°: 461), NB 12 (SEQ ID N°: 462), NB 13 (SEQ ID N°: 463), NB 14 (SEQ ID N0: 464), NB 15 (SEQ ID N°: 465), NB 16 (SEQ ID N°: 466), NB 17 (SEQ ID N0: 467), NB 18 (SEQ ID N0: 468), NB 19 (SEQ ID N0: 469), NB 20 (SEQ ID N°: 470), NB 21 (SEQ ID N°: 471) e NB 22 (SEQ ID N0: 472).
Por exemplo, o ligando pode compreender um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF que compreende uma seqüência de aminoácido que tem pelo menos cerca de 85 % de identidade de seqüência de aminoácido com a seqüência de aminoácido de um dAb selecionado do grupo que consiste de TARl 5-1 (SEQ ID N°: 100), TAR15-3 (SEQ ID N°: 101), TAR15-4 (SEQ ID N°: 102), TARl5-9 (SEQ ID N0: 103), T,ARl5-10 (SEQ ID N0: 104), TAR15-11 (SEQ ID N°: 105), TARl 5-12 (SEQ ID N°: 106), TARl 5-13 (SEQ ID N°: 107), TARl 5-14 (SEQ ID N°: 108), TAR15-15 (SEQ ID N°: 109), TAR15-16 (SEQ ID N0: 110), TAR15-17 (SEQ ID N°: 111), TAR15-18 (SEQ ID N°: 112), TARl5-19 (SEQ ID N0: 113), TAR15-20 (SEQ ID N°: 114), TAR 15- 22 (SEQ ID N°: 115), TAR15-5 (SEQ ID N°: 116), TAR15-6 (SEQ ID N°: 117), TAR15-7 (SEQ ID N°: 118), TAR15-8 (SEQ ID N°: 119), TAR15-23 (SEQ ID N0: 120), TAR15-24 (SEQ ID N°: 121), TAR15-25 (SEQ ID N°: 122), TARl5-26 (SEQ ID N°: 123), TAR15-27 (SEQ ID N0: 124), TAR15-29 (SEQ ID N°: 125), TAR15-30 (SEQ ID N°: 126), TAR15-6-500 (SEQ ID N°: 127), TAR15-6-501 (SEQ ID N°: 128), TAR15-6-502 (SEQ ID N°: 129), TARl5-6-503 (SEQ ID N0: 130), TAR15-6-504 (SEQ ID N°: 131), TAR15- 6-505 (SEQ ID N°: 132), TAR15-6-506 (SEQ ID N°: 133), TAR15-6-507 (SEQ ID N°: 134), TAR15-6-508 (SEQ ID N°: 135), TAR15-6-509 (SEQ ID N0: 136), TARl5-6-510 (SEQ ID N°: 137), TAR15-8-500 (SEQ ID N°: 138), TAR15-8-501 (SEQ ID N°: 139), TAR15-8-502 (SEQ ID N°: 140), TAR15- 8-503 (SEQ ID N°: 141), TAR15-8-505 (SEQ ID N°: 142), TAR15-8-506 ÔC&
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(SEQ ID N°: 143), TARl5-8-507 (SEQ ID N°: 144), TARl5-8-508 (SEQ ID N°: 145), TARl5-8-509 (SEQ ID N°: 146), TAR15-8-510 (SEQ ID N°: 147), TARl5-8-511 (SEQ ID N°: 148), TAR15-26-500 (SEQ ID N0: 149), TAR15- 26-501 (SEQ IDN°: 150), TAR15-26-502 (SEQ ID N°: 151), TAR15-26-503 (SEQ ID N0: 152), TAR15-26-504 (SEQ ID N°: 153), TAR15-26-505 (SEQ ID N°: 154), TAR15-26-506 (SEQ ID N°: 155), TAR15-26-507 (SEQ ID N°:
156), TAR15-26-508 (SEQ ID N°: 57), TARl5-26-509 (SEQ ID N°: 158), TAR15-26-510 (SEQ ID N0: 159 , TARl 5-26-511 (SEQ ID N0: 160), TARl 5-26-512 (SEQ ID N0: 161 , TARl 5-26-513 (SEQ ID N°: 162), TARl 5-26-514 (SEQ ID N°: 163 , TARl 5-26-515 (SEQ ID N°: 164), TAR15-26-516 (SEQ ID N°: 165 , TARl 5-26-517 (SEQ ID N°: 166), TARl 5-26-518 (SEQ ID N°: 167 , TARl 5-26-519 (SEQ ID N°: 168), TARl 5-26-520 (SEQ ID N°: 169 , TARl 5-26-521 (SEQ ID N°: 170), TAR15-26-522 (SEQ ID N°: 171 , TARl 5-26-523 (SEQ ID N°: 172), TAR15-26-524 (SEQ ID N°: 173 , TARl 5-26-525 (SEQ ID N°: 174), TARl 5-26-526 (SEQ ID N°: 175 , TARl 5-26-527 (SEQ ID N°: 176), TAR15-26-528 (SEQ ID N°: 177 , TARl 5-26-529 (SEQ ID N°: 178), TAR15-26-530 (SEQ ID N°: 179 , TARl 5-26-531 (SEQ ID N°: 180), TAR15-26-532 (SEQ ID N°: 181 , TARl 5-26-533 (SEQ ID N°: 182), TARl 5-26-534 (SEQ ID N°: 183 , TARl5-26-535 (SEQ ID N°: 184), TAR15-26-536 (SEQ ID N°: 185 , TARl5-26-537 (SEQ ID N°: 186), TAR15-26-538 (SEQ ID N°: 187 , TARl5-26-539 (SEQ ID N°: 188), TARl 5-26-540 (SEQ ID N°: 189 , TAR15-26-541 (SEQ ID N°: 190), TARl 5-26-542 (SEQ ID N0: 191 , TAR15-26-543 (SEQ ID N°: 192), TARl 5-26-544 (SEQ ID N0: 193 , TAR15-26-545 (SEQ ID N°: 194), TARl 5-26-546 (SEQ ID N0: 195 , TAR15-26-547 (SEQ ID N°: 196), TARl 5-26-548 (SEQ ID N0: 197 , TAR15-26-549 (SEQ ID N°: 198), TAR15-26-550 (SEQ ID N0: 539) e TARl5-26-551 (SEQ ID N°: 540); e
ainda compreende um domínio variável simples de imunoglobulina com 10
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especificidade de ligação para EGFR que compreende uma seqüência de aminoácido que tem pelo menos cerca de 85 % de identidade de seqüência de aminoácido com a seqüência de aminoácido de um dAb selecionado do grupo que consiste de DOM16-39-210 (SEQ IDN°: 541), DOM16-39-211 (SEQ ID N°: 542), DOM 16-39-212 (SEQ ID N°: 543), DOM16-39-213 (SEQ ID N°: 544), DOMl6-39-214 (SEQ ID N°: 545), DOM16-39-215 (SEQ ID N0: 546)
DOM16-39-216 (SEQ ID N°: 547) DOM16-39-217 (SEQ ID N°: 548) DOM16-39-218 (SEQ ID N0: 549) DOM16-39-219 (SEQ ID N°: 550) DOM16-39-220 (SEQ ID N°: 551) DOM16-39-221 (SEQ ID N°: 552) DOM16-39-222 (SEQ ID N°: 553) DOMl6-39-223 (SEQ ID N°: 554) DOM16-39-224 (SEQ ID N°: 555) DOMl6-39-225 (SEQ ID N°: 556) DOMl 6-39-226 (SEQ ID N°: 557) DOMl6-39-227 (SEQ ID N°: 558) DOMl 6-39-228 (SEQ ID N°: 559) DOMl6-39-229 (SEQ ID N°: 560) DOM16-39-230 (SEQ ID N°: 561) DOMl 6-39-231 (SEQ ID N°: 562) DOMl 6-39-232 (SEQ ID N°: 563) DOMl6-39-233 (SEQ ID N°: 564) DOM16-39-234 (SEQ ID N°: 565) DOMl6-39-235 (SEQ ID N°: 566) DOMl 6-39-500 (SEQ ID N°: 725), DOM16-39-502(SEQ ID N°: 726) DOMl 6-39-503 (SEQ ID N°: 567) DOMl6-39-504 (SEQ ID N°: 568) DOMl 6-39-505 (SEQ ID N°: 569) DOM16-39-506 (SEQ ID N°: 570) DOM16-39-507 (SEQ ID N°: 571) DOM16-39-508 (SEQ ID N°: 572) DOM16-39-509 (SEQ ID N°: 573) DOM16-39-510 (SEQ ID N°: 574) DOM16-39-511 (SEQ ID N0: 575) DOM16-39-512 (SEQ ID N°: 576) DOM16-39-521 (SEQ ID N0: 577) DOM16-39-522 (SEQ ID N°: 578) DOM16-39-523 (SEQ ID N°: 579) DOM16-39-524 (SEQ ID N°: 580) DOMl 6-39-527 (SEQ ID N°: 581) DOMl6-39-525 (SEQ ID N°: 582) DOMl 6-39-526 (SEQ ID N°: 583) DOMl6-39-540 (SEQ ID N°: 584) DOM16-39-541 (SEQ ID N0: 585) DOMl6-39-542 (SEQ ID N°: 586) DOMl 6-39-543 (SEQ ID N°: 587) DOMl6-39-544 (SEQ ID N°: 588) DOMl 6-39-545 (SEQ ID N°: 589) DOMl6-39-550 (SEQ ID N°: 590) «r
DOM16-39-551 (SEQ ID N°: 591), DOMl 6-39-552 (SEQ ID N°: 592), DOMl 6-39-553 (SEQ ID N0: 593), DOM 16-3 9-5 54 (SEQ ID N0: 594), DOMl 6-39-555 (SEQ ID N0: 595), DOM16-39-561 (SEQ ID N°: 596), DOMl 6-39-562 (SEQ ID N0: 597), DOM16-39-563 (SEQ ID N°: 598), DOM16-39-564 (SEQ ID N0: 599), DOM16-39-571 (SEQ ID N°: 600), DOMl 6-39-572 (SEQ ID N°: 601), DOMl 6-39-573 (SEQ ID N0: 602), DOMl 6-39-574 (SEQ ID N°: 603), DOM16-39-580 (SEQ ID N°: 604), DOM16-39-591 (SEQ ID N0: 605), DOM16-39-592 (SEQ ID N°: 606), DOM16-39-593 (SEQ ID N0: 607), DOM16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOM16-39-602 (SEQ ID N0: 609), DOM16-39-603 (SEQ ID N°: 610), DOMl 6-39-604 (SEQ ID N°: 611), DOMl 6-39-605 (SEQ ID N°: 612), DOMl 6-39-607 (SEQ ID N°: 613), DOM16-39-611 (SEQ ID N0: 614), DOMl 6-39-612 (SEQ ID N°: 615), DOM16-39-613 (SEQ ID N°: 616), DOM16-39-614 (SEQ ID N°: 617), DOM16-39-615 (SEQ ID N°: 618), DOM16-39-616 (SEQ ID N°: 619), DOM16-39-617 (SEQ ID N°: 620), DOM 16-39-618 (SEQ ID N°: 621) e DOM16-39-619 (SEQ ID N°: 622).
Em algumas formas de realização, o ligando tem especificidade de ligação para VEGF e para EGFR e compreende pelo menos um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF e pelo menos um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFRi em que um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF compete com a ligação ao VEGF com um anticorpo de domínio anti-VEGF (dAb) selecionado do grupo que consiste de TARl 5-1 (SEQ ID N0: 100), TARl5-3 (SEQIDN0: 101), TAR15-4 (SEQ ID N°: 102), TARl5- 9 (SEQ ID N°: 103), TAR15-10 (SEQ ID N°: 104), TARl5-11 (SEQ ID N°: 105), TARl5-12 (SEQ ID N0: 106), TAR15-13 (SEQ ID N0: 107), TAR15-14 (SEQ ID N°: 108), TAR15-15 (SEQ ID N°: 109), TAR15-16 (SEQ ID N°: 110), TARl5-17 (SEQ ID N°: 111), TARl5-18 (SEQ ID N°: 112), TARl5-19 etfc
(SEQ ID N°: 113), TAR15-20 (SEQ ID N°: 114), TAR 15-22 (SEQ ID N°: 115), TAR15-5 (SEQ ID N0: 116), TAR15-6 (SEQ ID N°: 117), TAR15-7 (SEQ ID N°: 118), TAR15-8 (SEQ ID N°: 119), TAR15-23 (SEQ ID N°: 120), TARl5-24 (SEQ ID N°: 121), TAR15-25 (SEQ ID N°: 122), TAR15-26 (SEQ ID N°: 123), TAR15-27 (SEQ ID N°: 124), TAR15-29 (SEQ ID N°: 125), TARl5-30 (SEQ ID N°: 126), TAR15-6-500 (SEQ ID N°: 127), TARl5-6-501 (SEQ ID N0: 128), TAR15-6-502 (SEQ ID N°: 129), TAR15- 6-503 (SEQ ID N°: 130), TAR15-6-504 (SEQ ID N°: 131), TAR15-6-505 (SEQ ID N°: 132), TAR15-6-506 (SEQ ID N°: 133), TAR15-6-507 (SEQ ID - 10 N°: 134), TAR15-6-508 (SEQ ID N°: 135), TAR15-6-509 (SEQ ID N°: 136), TARl5-6-510 (SEQ ID N0: 137), TAR15-8-500 (SEQ ID N°: 138), TAR15- 8-501 (SEQ ID N°: 139), TAR15-8-502 (SEQ ID N°: 140), TAR15-8-503 (SEQ ID N°: 141), TAR15-8-505 (SEQ ID N°: 142), TAR15-8-506 (SEQ ID N0: 143), TARl5-8-507 (SEQ ID N°: 144), TAR15-8-508 (SEQ ID N°: 145), TARl5-8-509 (SEQ ID N0: 146), TAR15-8-510 (SEQ ID N°: 147), TAR15- 8-511 (SEQ ID N0: 148), TAR15-26-500 (SEQ ID N0: 149), TAR15-26-501 (SEQ ID N°: 150), TAR15-26-502 (SEQ ID N0: 151), TAR15-26-503 (SEQ ID N°: 152), TAR15-26-504 (SEQ ID N°: 153), TAR15-26-505 (SEQ ID N°: 154), TARl5-26-506 (SEQ ID N°: 155), TAR15-26-507 (SEQ ID N°: 156),
TARl 5-26-508 (SEQ ID N0: 157), TARl 5-26-509 (SEQ ID 158), TARl 5-26-510 (SEQ ID N°: 159), TAR15-26-511 (SEQ ID N°: 160), TARl 5-26-512 (SEQ ID N0: 161), TARl 5-26-513 (SEQ ID N0: 162), TARl 5-26-514 (SEQ ID N0: 163), TARl 5-26-515 (SEQ ID N°: 164), TAR15-26-516 (SEQ ID N0: 165), TARl 5-26-517 (SEQ ID N°: 166), TARl 5-26-518 (SEQ ID N°: 167), TAR15-26-519 (SEQ ID N°: 168), TARl 5-26-520 (SEQ ID N0: 169), TAR15-26-521 (SEQ ID N°: 170), TARl 5-26-522 (SEQ ID N0: 171), TARl 5-26-523 (SEQ ID N°: 172), TAR15-26-524 (SEQ ID N°: 173), TARl 5-26-525 (SEQ ID N0: 174), TARl 5-26-526 (SEQ ID N°: 175), TARl 5-26-527 (SEQ ID N°: 176), f
TARl 5-26-528 (SEQ ID N0: 177), TARl 5-26-529 (SEQ ID N°: 178), TARl 5-26-530 (SEQ ID N°: 179), TARl 5-26-531 (SEQ ID N°: 180), TAR15-26-532 (SEQ ID N0: IBlX TARl 5-26-533 (SEQ ID N°: 182), TAR15-26-534 (SEQ ID N0: 183), TARl 5-26-535 (SEQ ID N°: 184), TARl 5-26-536 (SEQ ID N°: 185), TARl 5-26-537 (SEQ ID N°: 186), TARl 5-26-538 (SEQ ID N°: 187), TARl 5-26-539 (SEQ ID N0: 188), TARl 5-26-540 (SEQ ID N°: 189), TARl 5-26-541 (SEQ ID N°: 190), TARl 5-26-542 (SEQ ID N0: 191), TARl 5-26-543 (SEQ ID N°: 192), TARl 5-26-544 (SEQ ID N0: 193), TARl 5-26-545 (SEQ ID N°: 194), TARl 5-26-546 (SEQ ID N°: 195), TARl 5-26-547 (SEQ ID N°: 196), TARl 5-26-548 (SEQ ID N0: 197) e TARl 5-26-549 (SEQ ID N°: 198),
TARl5-26-550 (SEQ ID Ν°: 539) e TARl5-26-551 (SEQ ID N°: 540) e um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR compete com a ligação ao EGFR com cetuximab. Por exemplo, o domínio variável simples de imunoglobulina
com especificidade de ligação para VEGF pode compreender uma seqüência de aminoácido que tem pelo menos cerca de 85 % de identidade de seqüência de aminoácido com a seqüência de aminoácido de um dAb selecionado do grupo que consiste de TAR15-1 (SEQ ID N°: 100), TAR15-3 (SEQ ID N°: 101), TARl5-4 (SEQ ID N°: 102), TAR15-9 (SEQ ID N°: 103), TAR15-10 (SEQ ID N°: 104), TAR15-11 (SEQ ID N°: 105), TAR15-12 (SEQ ID N°: 106), TARl5-13 (SEQ ID N°: 107), TAR15-14 (SEQ ID N°: 108), TAR15-15 (SEQ ID N°: 109), TARl 5-16 (SEQ ID N°: 110), TARl 5-17 (SEQ ID N°: 111), TAR15-18 (SEQIDN0: 112), TAR15-19 (SEQ ID N0: 113), TAR15-20 (SEQ ID N°: 114), TAR 15-22 (SEQ ID N°: 115), TAR15-5 (SEQ ID N°: 116), TARl5-6 (SEQ ID N°: 117), TAR15-7 (SEQ ID N°: 118), TAR15-8 (SEQ ID N°: 119), TAR15-23 (SEQ ID N°: 120), TAR15-24 (SEQ ID N°: 121), TARl5-25 (SEQ IDN°: 122), TAR15-26 (SEQ IDN°: 123), TAR15-27 (SEQ ID N°: 124), TARl 5-29 (SEQ ID N°: 125), TARl 5-30 (SEQ ID N°: 126), TARl5-6-500 (SEQ ID N°: 127), TAR15-6-501 (SEQ ID N0: 128), TARl5-6-502 (SEQ ID N0: 129), TAR15-6-503 (SEQ ID N°: 130), TAR15- 6-504 (SEQ ID N°: 131), TAR15-6-505 (SEQ ID N°: 132), TAR15-6-506 (SEQ ID N°: 133), TAR15-6-507 (SEQ ID N°: 134), TAR15-6-508 (SEQ ID N°: 135), TAR15-6-509 (SEQ ID N°: 136), TAR15-6-510 (SEQ ID N0: 137), TAR15-8-500 (SEQ ID N°: 138), TAR15-8-501 (SEQ ID N°: 139), TAR15- 8-502 (SEQ ID N0: 140), TAR15-8-503 (SEQ ID N°: 141), TAR15-8-505 (SEQ ID N0: 142), TAR15-8-506 (SEQ ID N°: 143), TAR15-8-507 (SEQ ID N°: 144), TAR15-8-508 (SEQ ID N°: 145), TAR15-8-509 (SEQ ID N°: 146), TARl5-8-510 (SEQ IDN°: 147), TARl5-8-511 (SEQ IDN°: 148), TAR15- 26-500 (SEQ ID N°: 149), TAR15-26-501 (SEQ ID N°: 150), TAR15-26-502 (SEQ ID N0: 151), TAR15-26-503 (SEQ ID N0: 152), TAR15-26-504 (SEQ ID N°: 153), TAR15-26-505 (SEQ ID N°: 154), TAR15-26-506 (SEQ ID N°: 155), TAR15-26-507 (SEQ ID N°: 156), TAR15-26-508 (SEQ ID N°: 157),
TARl5-26-509 (SEQ ID N°: 158), TARl 5-26-510 (SEQ ID N°: 159) TARl5-26-511 (SEQ ID N°: 160), TARl 5-26-512 (SEQ ID N°: 161) TARl5-26-513 (SEQ ID N°: 162), TARl 5-26-514 (SEQ ID N°: 163) TARl5-26-515 (SEQ ID N°: 164), TARl 5-26-516 (SEQ ID N°: 165) TARl5-26-517 (SEQ ID N°: 166), TARl 5-26-518 (SEQ ID N°: 167) TARl5-26-519 (SEQ ID N0: 168), TARl 5-26-520 (SEQ ID N°: 169) TARl 5-26-521 (SEQ ID N°: 170), TARl 5-26-522 (SEQ ID N°: 171) TARl 5- 26-523 (SEQ ID N0: 172), TARl 5-26-524 (SEQ ID N°: 173) TARl 5-26-525 (SEQ ID N0: 174), TARl 5-26-526 (SEQ ID N0: 175) TARl5-26-527 (SEQ ID N°: 176), TARl 5-26-528 (SEQ ID N°: 177) TARl5-26-529 (SEQ ID N°: 178), TARl 5-26-530 (SEQ ID N°: 179) TARl5-26-531 (SEQ ID N0: 180), TARl 5-26-532 (SEQ ID N°: 181) TARl5-26-533 (SEQ ID N°: 182), TARl 5-26-534 (SEQ ID N°: 183) TARl5-26-535 (SEQ ID N°: 184), TARl 5-26-536 (SEQ ID N°: 185) TARl5-26-537 (SEQ ID N0: 186), TAR15-26-538 (SEQ ID N°: 187) TAR15-26-539 (SEQ ID N°: 188), TAR15-26-540 (SEQ ID N0: 189), TARl5-26-541 (SEQ ID N0: 190), TAR15-26-542 (SEQ ID N°: 191), TARl5-26-543 (SEQ ID N°: 192), TAR15-26-544 (SEQ ID N°: 193), TARl 5-26-545 (SEQ ID N0: 194), TARl 5-26-546 (SEQ ID N0: 195), TAR15-26-547 (SEQ ID N0: 196), TAR15-26-548 (SEQ ID N°: 197) e TARl5-26-549 (SEQ ID N0: 198), TAR15-26-550 (SEQ ID N°: 539) e TAR15-26-551 (SEQIDN0: 540).
Em outras formas de realização, o ligando tem especificidade de ligação para VEGF e para EGFR e compreende pelo menos um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF e pelo menos um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR, em que um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF compete com a ligação ao VEGF com bevacizumab e/ou anticorpo 2C3 (Acessão ATCC N0 PTA 1595) e um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR compete com a ligação ao EGFR com um anticorpo de domínio anti-EGFR (dAb) selecionado do grupo que consiste de DOMl6-17 (SEQ ID N°: 325), DOM16-18 (SEQ ID N°: 326), DOM16-19 (SEQ ID N°: 327), DOM16-20 (SEQ ID N°: 328), DOM16-21 (SEQ ID N°: 329), DOMl6-22 (SEQ IDN0: 330), DOM16-23 (SEQ IDN°: 331), DOM16- 24 (SEQ ID N°: 332), DOM16-25 (SEQ ID N°: 333), DOM16-26 (SEQ ID N°: 334), DOMl6-27 (SEQ ID N0: 335), DOM16-28 (SEQ ID N°: 336), DOM 16-29 (SEQ ID N°: 337), DOM16-30 (SEQ ID N°: 338), DOM16-31 (SEQ ID N°: 339), DOM16-32 (SEQ ID N°: 340), DOM16-33 (SEQ ID N°: 341), DOMl6-35 (SEQ ID N0: 342), DOMl6-37 (SEQ ID N°: 343), DOMl6- 38 (SEQ ID N0: 344), DOM16-39 (SEQ ID N°: 345), DOM16-40 (SEQ ID N°: 346), DOMl6-41 (SEQ ID N°: 347), DOM16-42 (SEQ ID N°: 348), DOM 16-43 (SEQ ID N0: 349), DOM16-44 (SEQ ID N°: 350), DOM16-45 (SEQ ID N0: 351), DOM16-46 (SEQ ID N0: 352), DOM16-47 (SEQ ID N°: <q\0 g/
353), DOMl6-48 (SEQ ID N°: 354), DOM16-49 (SEQID N0: 355), DOM16- 50 (SEQ ID N0: 356), DOM16-59 (SEQ ID N°: 357), DOM16-ÓO (SEQ ID N0: 358), DOM 16-61 (SEQ ID N°: 359), DOM16-62 (SEQ ID N°: 360), DOM 16-63 (SEQ ID N°: 361), DOM16-64 (SEQ ID N0: 362), DOM16-65 (SEQ ID N°: 363), DOM16-66 (SEQ ID N°: 364), DOM16-67 (SEQ ID N°: 365), DOMl6-68 (SEQ ID N0: 366), DOM16-69 (SEQ ID N°: 367), DOM16- 70 (SEQ ID N°: 368), DOM16-71 (SEQ ID N0: 369), DOM16-72 (SEQ ID N0: 370), DOM 16-73 (SEQ ID N°: 371), DOM16-74 (SEQ ID N°: 372), DOM 16-75 (SEQ ID N°: 373), DOM16-76 (SEQ ID N0: 374), DOM16-77 (SEQ ID N°: 375), DOM16-78 (SEQ ID N°: 376), DOM16-79 (SEQ ID N°: 377), DOMl6-80 (SEQ ID N0: 378), DOM16-81 (SEQ ID N°: 379), D0M16- 82 (SEQ ID N°: 380), DOM16-83 (SEQ ID N°: 381), DOM16-84 (SEQ ID N°: 382), DOMl6-85 (SEQ ID N°: 383), DOM16-87 (SEQ ID N°: 384), DOMl6-88 (SEQ ID N°: 385), DOM16-89 (SEQ ID N°: 386), DOM16-90 (SEQ ID N°: 387), DOM16-91 (SEQ ID N°: 388), DOM16-92 (SEQ ID N°: 389), DOM 16-94 (SEQ IDN0: 390), DOM16-95 (SEQ ID N°: 391), DOM16- 96 (SEQ ID N°: 392), DOM16-97 (SEQ ID N0: 393), DOM16-98 (SEQ ID N°: 394), DOM 16-99 (SEQ ID N°: 395), DOMI6-IOO (SEQ ID N°: 396), DOMI6-IOI (SEQ ID N°: 397), DOM16-102 (SEQ ID N°: 398), DOM16- 103 (SEQ ID N°: 399), DOM16-104 (SEQ ID N°: 400), DOM16-105 (SEQ ID N°: 401), DOMI6-IO6 (SEQ ID N°: 402), DOM16-107 (SEQ ID N°: 403), DOM 16-108 (SEQ ID N°: 404), DOM16-109 (SEQ ID N°: 405), DOM16-HO (SEQ ID N0: 406), DOM16-111 (SEQ ID N°: 407), DOM16- 112 (SEQ ID N°: 408), DOM16-113 (SEQ ID N°: 409), DOMl6-114 (SEQ ID N0: 410), DOM16-115 (SEQ ID N°: 411), DOM16-116 (SEQ ID N°: 412), DOM16-117 (SEQ ID N0: 413), DOM16-118 (SEQ ID N0: 414), DOM16-119 (SEQ ID N°: 415), DOM16-39-6 (SEQ ID N°: 416), DOM16- 39-8 (SEQ ID N0: 417), DOM16-39-34 (SEQ ID N°: 418), DOM16-39-48 (SEQ ID N0: 419), DOM16-39-87 (SEQ ID N0: 420), DOM16-39-9Q (SEQ t
ID Ν°: 421), DOM16-39-96 (SEQID N0: 422), DOM16-39-100 (SEQ ID N°: 423), DOM 16-39-101 (SEQ ID N°: 424), DOM16-39-102 (SEQ ID N°: 425), DOM 16-39-103 (SEQ ID N0: 426), DOM16-39-104 (SEQ ID N0: 427), DOM16-39-105 (SEQ ID N°: 428), DOM16-39-106 (SEQ ID N°: 429), DOM16-39-107 (SEQ ID N0: 430), DOM16-39-108 (SEQ ID N0: 431), DOM16-39-109 (SEQ ID N°: 432), DOM16-39-HO (SEQ ID N°: 433), DOM16-39-111 (SEQ ID N0: 434), DOM16-39-112 (SEQ ID N°: 435), DOM16-39-113 (SEQ ID N0: 436), DOM16-39-114 (SEQ ID N0: 437), DOM16-39-115 (SEQ ID N°: 438), DOM16-39-116 (SEQ ID N°: 439), - 10 DOM16-39-117 (SEQ ID N0: 440), DOM16-39-200 (SEQ ID N°: 441), DOM16-39-201 (SEQ ID N0: 442), DOM16-39-202 (SEQ ID N°: 443), DOM16-39-203 (SEQ ID N0: 444), DOM16-39-204 (SEQ ID N°: 445), DOMl6-39-205 (SEQ ID N0: 446), DOM16-39-206 (SEQ ID N°: 447), DOMl6-39-207 (SEQ ID N0: 448), DOM16-39-209 (SEQ ID N°: 449), DOM 16-52 (SEQ ID N°: 450), NB 1 (SEQ ID N°: 451), NB 2 (SEQ ID N°: 452), NB 3 (SEQ ID N°: 453), NB 4 (SEQ ID N°: 454), NB 5 (SEQ ID N°: 455), NB 6 (SEQ ID N0: 456), NB 7 (SEQ ID N°: 457), NB 8 (SEQ ID N°: 458), NB 9 (SEQ ID N°: 459), NB 10 (SEQ ID N°: 460), NB 11 (SEQ ID N°: 461), NB 12 (SEQ ID N°: 462), NB 13 (SEQ ID N0: 463), NB 14 (SEQ ID N0: 464), NB 15 (SEQ ID N0: 465), NB 16 (SEQ ID N°: 466), NB 17 (SEQ ID N°: 467), NB 18 (SEQ ID N0: 468), NB 19 (SEQ ID N°: 469), NB 20 (SEQ ID N°: 470), NB 21 (SEQ ID N°: 471) e NB 22 (SEQ ID N°: 472).
Em outras formas de realização, o ligando tem especificidade de ligação para VEGF e para EGFR e compreende pelo menos um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF e pelo menos um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR, em que um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF compete com a ligação ao VEGF com bevacizumab e/ou anticorpo 2C3 (Acessão ATCC N0
PTA 1595) e um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR compete com a ligação ao EGFR com um anticorpo de domínio anti-EGFR (dAb) selecionado do grupo que consiste
de DOM16-39-210 (SEQ ID Nt 541), DOM16-39-211 (SEQ ID N°: 542), DOM16-39-212 (SEQ ID N°: 543), DOM16-39-213 (SEQ ID N°: 544), DOM16-39-214 (SEQ ID N°: 545), DOM16-39-215 (SEQ ID N°: 546), DOM16-39-216 (SEQ ID N°: 547), DOMl 6-39-217 (SEQ ID N°: 548), DOM16-39-218 (SEQ ID N0: 549), DOM16-39-219 (SEQ ID N°: 550), DOM16-39-220 (SEQ ID N°: 551), DOM16-39-221 (SEQ ID N°: 552), DOM16-39-222 (SEQ ID N0: 553), DOM 16-39-223 (SEQ ID N°: 554), DOM16-39-224 (SEQ ID N°: 555), DOM16-39-225 (SEQ ID N°: 556), DOM16-39-226 (SEQ ID N°: 557), DOM16-39-227 (SEQ ID N°: 558), DOM16-39-228 (SEQ ID N°: 559), DOM16-39-229 (SEQ ID N°: 560), DOMl 6-39-230 (SEQ ID N°: 561), DOMl 6-39-231 (SEQ ID N0: 562), DOM16-39-232 (SEQ ID N°: 563), DOM16-39-233 (SEQ ID N°: 564), DOM16-39-234 (SEQ ID N°: 565), DOM16-39-235 (SEQ ID N°: 566), DOM16-39-500 (SEQ ID N°: 725), DOM16-39-502(SEQ ID N°: 726), DOM16-39-503 (SEQ ID N°: 567), DOM16-39-504 (SEQ ID N°: 568), DOM16-39-505 (SEQ ID N°: 569), DOM16-39-506 (SEQ ID N0: 570), DOM16-39-507 (SEQ ID N°: 571), DOM16-39-508 (SEQ ID N°: 572), DOMl 6-39-509 (SEQ ID N0: 573), DOM16-39-510 (SEQ ID N°: 574), DOM16-39-511 (SEQ ID N0: 575), DOM16-39-512 (SEQ ID N°: 576), DOM16-39-521 (SEQ ID N°: 577), DOMl6-39-522 (SEQ ID N°: 578), DOMl 6-39-523 (SEQ ID N°: 579), DOM16-39-524 (SEQ ID N°: 580), DOM16-39-527 (SEQ ID N°: 581), DOM16-39-525 (SEQ ID N°: 582), DOM16-39-526 (SEQ ID N0: 583), DOM16-39-540 (SEQ ID N°: 584), DOM 16-39-541 (SEQ ID N0: 585), DOM16-39-542 (SEQ ID N°: 586), DOMl 6-39-543 (SEQ ID N0: 587), DOMl6-39-544 (SEQ ID N°: 588), DOM16-39-545 (SEQ ID N°: 589), DOM16-39-550 (SEQ ID N°: 590), t
DOM16-39-551 (SEQ ID N0: 591), DOM16-39-552 (SEQ ID N°: 592) DOM16-39-553 (SEQ ID N0: 593), DOM16-39-554 (SEQ ID N°: 594) DOM16-39-555 (SEQ ID N°: 595), DOM16-39-561 (SEQ ID N°: 596) DOMl 6-39-562 (SEQ ID N°: 597), DOMl6-39-563 (SEQ ID N°: 598) DOMl 6-39-564 (SEQ ID N°: 599), DOM16-39-571 (SEQ ID N°: 600) DOM16-39-572 (SEQ ID N°: 601), DOMl6-39-573 (SEQ ID N°: 602) DOM16-39-574 (SEQ ID N°: 603), DOMl6-39-580 (SEQ ID N°: 604) DOM16-39-591 (SEQ ID N°: 605), DOMl6-39-592 (SEQ ID N°: 606) DOM16-39-593 (SEQ ID N0: 607), DOM16-39-601 (SEQ ID N°: 608) DOM 16-39-602 (SEQ ID N0: 609), DOM 16-3 9-603 (SEQ ID N°: 610) DOM 16-3 9-604 (SEQ ID N0: 611), DOM16-39-605 (SEQ ID N°: 612) DOM 16-3 9-607 (SEQ ID N0: 613), DOM16-39-611 (SEQ ID N°: 614) DOM 16-3 9-612 (SEQ ID N0: 615), DOM 16-3 9-613 (SEQ ID N0: 616) DOM 16-3 9-614 (SEQ ID N0: 617), DOM16-39-615 (SEQ ID N°: 618) DOM16-39-616 (SEQ ID N0: 619), DOM16-39-617 (SEQ ID N°: 620) DOM16-39-618 (SEQ ID N°: 621) e DOM16-39-619 (SEQ ID N°: 622)
Por exemplo, o domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR pode compreender uma seqüência de aminoácido que tem pelo menos cerca de 85 % de identidade de seqüência de aminoácido com a seqüência de aminoácido de um dAb selecionado do grupo que consiste de DOM16-17 (SEQ ID N0: 325), DOM16-18 (SEQ ID N0: 326), DOMl6-19 (SEQ ID N0: 327), DOM16-20 (SEQ ID N°: 328), DOM 16-21 (SEQ ID N°: 329), DOM16-22 (SEQ ID N°: 330), DOM16-23 (SEQ ID N°: 331), DOM16-24 (SEQ ID N°: 332), DOM16-25 (SEQ ID N°: 333), DOMl6-26 (SEQ IDN0: 334), DOM16-27 (SEQ IDN°: 335), DOM16- 28 (SEQ ID N°: 336), DOM16-29 (SEQ ID N0: 337), DOM16-30 (SEQ ID N0: 338), DOM 16-31 (SEQ ID N°: 339), DOM16-32 (SEQ ID N0: 340), DOMl6-33 (SEQ ID N°: 341), DOM16-35 (SEQ ID N°: 342), DOM16-37 (SEQ ID N°: 343), DOM16-38 (SEQ ID N°: 344), DOM16-39 (SEQ ID N0:
345), DOMl6-40 (SEQ ID N°: 346), DOM16-41 (SEQID N°: 347), DOM16- 42 (SEQ ID N°: 348), DOM16-43 (SEQ ID N0: 349), DOM16-44 (SEQ ID N0: 350), DOM16-45 (SEQ ID N°: 351), DOMl6-46 (SEQ ID N°: 352), DOM 16-47 (SEQ ID N°: 353), DOM16-48 (SEQ ID N°: 354), DOM16-49 (SEQ ID N0: 355), DOM16-50 (SEQ ID N°: 356), DOM16-59 (SEQ ID N°: 357), DOMl6-60 (SEQ ID N°: 358), DOM16-61 (SEQ ID N°: 359), DOM16- 62 (SEQ ID N0: 360), DOM16-63 (SEQ ID N°: 361), DOM16-64 (SEQ ID N0: 362), DOM 16-65 (SEQ ID N0: 363), DOM16-66 (SEQ ID N°: 364), DOMl6-67 (SEQ ID N°: 365), DOM16-68 (SEQ ID N°: 366), DOM16-69 (SEQ ID N°: 367), DOM16-70 (SEQ ID N°: 368), DOM16-71 (SEQ ID N°: 369), DOMl6-72 (SEQ ID N0: 370), DOM16-73 (SEQ ID N°: 371), DOM16- 74 (SEQ ID N°: 372), DOM16-75 (SEQ ID N°: 373), DOM16-76 (SEQ ID N0: 374), DOMl6-77 (SEQ ID N°: 375), DOM16-78 (SEQ ID N°: 376), DOM 16-79 (SEQ ID N0: 377), DOMI6-8O (SEQ ID N°: 378), DOM16-81 (SEQ ID N°: 379), DOM16-82 (SEQ ID N°: 380), DOM16-83 (SEQ ID N°: 381), DOM 16-84 (SEQ ID N°: 382), DOM16-85 (SEQ ID N°: 383), DOMl6-87 (SEQ ID N°: 384), DOM16-88 (SEQ ID N°: 385), DOM16-89 (SEQ ID N°: 386), DOM16-90 (SEQ ID N°: 387), DOM16-91 (SEQ ID N°: 388), DOMl6-92 (SEQ ID N0: 389), DOM16-94 (SEQ ID N°: 390), D0M16- 95 (SEQ ID N°: 391), DOM16-96 (SEQ ID N°: 392), DOM16-97 (SEQ ID N0: 393), DOMl6-98 (SEQ ID N°: 394), DOM16-99 (SEQ ID N°: 395), DOM 16-100 (SEQ ID N°: 396), DOMI6-IOI (SEQ ID N°: 397), DOM16- 102 (SEQ ID N°: 398), DOM16-103 (SEQ ID N0: 399), DOM16-104 (SEQ ID N0: 400), DOM16-105 (SEQ ID N°: 401), DOMI6-IO6 (SEQ ID N°: 402), DOM 16-107 (SEQ ID N°: 403), DOMI6-IO8 (SEQ ID N°: 404), DOM 16-109 (SEQ ID N°: 405), DOM16-HO (SEQ ID N°: 406), D0M16- 111 (SEQ ID N°: 407), DOM16-112 (SEQ ID N0: 408), DOM16-113 (SEQ ID N°: 409), DOM16-114 (SEQ ID N°: 410), DOM16-115 (SEQ ID N°: 411), DOM16-116 (SEQ ID N0: 412), DOM16-117 (SEQ ID N°: 413), <r
DOMl6-118 (SEQ IDN0: 414), DOM16-119 (SEQ IDN°: 415), DOM16-39- 6 (SEQ ID N°: 416), DOM16-39-8 (SEQ ID N0: 417), DOM16-39-34 (SEQ ID N°: 418), DOM16-39-48 (SEQ ID N°: 419), DOM16-39-87 (SEQ ID N°: 420), DOM16-39-90 (SEQ ID N0: 421), DOM16-39-96 (SEQ ID N°: 422), DOM16-39-100 (SEQ ID N°: 423), DOM16-39-101 (SEQ ID N°: 424), DOM16-39-102 (SEQ ID N0: 425), DOM16-39-103 (SEQ ID N°: 426), DOM16-39-104 (SEQ ID N0: 427), DOM16-39-105 (SEQ ID N°: 428), DOM16-39-106 (SEQ ID N0: 429), DOM16-39-1Ü7 (SEQ ID N0: 430), DOM16-39-108 (SEQ ID N0: 431), DOM16-39-109 (SEQ ID N°: 432), ■ 10 DOM16-39-HO (SEQ ID N0: 433), DOM16-39-111 (SEQ ID N0: 434), DOM16-39-112 (SEQ ID N°: 435), DOM16-39-113 (SEQ ID N°: 436), DOM16-39-114 (SEQ ID N0: 437), DOM16-39-115 (SEQ ID N°: 438), DOM16-39-116 (SEQ ID N0: 439), DOM16-39-117 (SEQ ID N°: 440), DOM16-39-200 (SEQ ID N0: 441), DOM16-39-201 (SEQ ID N°: 442), DOM16-39-202 (SEQ ID N°: 443), DOM16-39-203 (SEQ ID N°: 444), DOM16-39-204 (SEQ ID N°: 445), DOM16-39-205 (SEQ ID N°: 446), DOM16-39-206 (SEQ ID N0: 447), DOM16-39-207 (SEQ ID N°: 448), DOMl6-39-209 (SEQ ID N0: 449), DOM16-52 (SEQ ID N0: 450), NB 1 (SEQ ID N°: 451), NB 2 (SEQ ID N°: 452), NB 3 (SEQ ID N°: 453), NB 4 (SEQ ID N°: 454), NB 5 (SEQ ID N°: 455), NB 6 (SEQ ID N°: 456), NB 7 (SEQ ID N°: 457), NB 8 (SEQ ID N°: 458), NB 9 (SEQ ID N°: 459), NB 10 (SEQ ID N°: 460), NB 11 (SEQ ID N0: 461), NB 12 (SEQ ID N0: 462), NB 13 (SEQ ID N°: 463), NB 14 (SEQ ID N0: 464), NB 15 (SEQ ID N°: 465), NB 16 (SEQ ID N°: 466), NB 17 (SEQ ID N0: 467), NB 18 (SEQ ID N°: 468), NB 19 (SEQ ID N°: 469), NB 20 (SEQ ID N°: 470), NB 21 (SEQ ID N°: 471) e NB 22 (SEQ ID N0: 472).
Por exemplo, o domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR pode compreender uma seqüência de aminoácido que tem pelo menos cerca de 85 % de identidade de seqüência GIG 47
de aminoácido com a seqüência de aminoácido de um dAb selecionado do grupo que consiste de DOM16-39-210 (SEQ ID N°: 541), DOM16-39-211 (SEQ ID N0: 542), DOM16-39-212 (SEQ ID N°: 543), DOM16-39-213 (SEQ ID N°: 544), DOM16-39-214 (SEQ ID N°: 545), DOM16-39-215 (SEQ ID N°: 546), DOM16-39-216 (SEQ ID N°: 547), DOM16-39-217 (SEQ ID N°: 548), DOMl6-39-218 (SEQ ID N°: 549), DOM16-39-219 (SEQ ID N°: 550), DOM16-39-220 (SEQ ID N°: 551), DOM16-39-221 (SEQ ID N°: 552), DOM16-39-222 (SEQ ID N°: 553), DOM16-39-223 (SEQ ID N°: 554), DOM16-39-224 (SEQ ID N°: 555), DOM16-39-225 (SEQ ID N°: 556), DOM 16-39-226 (SEQ ID N°: 557),''DOMl6-39-227 (SEQ ID N°: 558), DOM16-39-228 (SEQ ID N°: 559), DOM16-39-229 (SEQ ID N°: 560), DOM16-39-230 (SEQ ID N°: 561), DOM16-39-231 (SEQ ID N°: 562), DOM16-39-232 (SEQ ID N°: 563), DOM16-39-233 (SEQ ID N°: 564), DOM16-39-234 (SEQ ID N°: 565), DOM16-39-235 (SEQ ID N°: 566), DOM16-39-500 (SEQ ID N°: 725), DOM16-39-502(SEQ ID N0: 726), DOM16-39-503 (SEQ ID N°: 567), DOM16-39-504 (SEQ ID N°: 568), DOM16-39-505 (SEQ ID N°: 569), DOM16-39-506 (SEQ ID N°: 570), DOM16-39-507 (SEQ ID N0: 571), DOM16-39-508 (SEQ ID N°: 572), DOM16-39-509 (SEQ ID N°: 573), DOM16-39-510 (SEQ ID N°: 574), DOM16-39-511 (SEQ ID N°: 575), DOM16-39-512 (SEQ ID N0: 576), DOM16-39-521 (SEQ ID N°: 577), DOM16-39-522 (SEQ ID N°: 578), DOM16-39-523 (SEQ ID N°: 579), DOM16-39-524 (SEQ ID N°: 580), DOM16-39-527 (SEQ ID N°: 581), DOM16-39-525 (SEQ ID N°: 582), DOM 16-39-526 (SEQ ID N0: 583), DOM16-39-540 (SEQ ID N°: 584), DOM16-39-541 (SEQ ID N°: 585), DOM16-39-542 (SEQ ID N°: 586), DOM16-39-543 (SEQ ID N°: 587), DOM16-39-544 (SEQ ID N0: 588), DOM16-39-545 (SEQ ID N°: 589), DOM16-39-550 (SEQ ID N°: 590), DOM16-39-551 (SEQ ID N°: 591), DOM16-39-552 (SEQ ID N0: 592), DOM16-39-553 (SEQ ID N°: 593), DOM16-39-554 (SEQ ID N°: 594),
DOM 16-3 9-5 5 5 (SEQ ID N°: 595), DOM16-39-561 (SEQ ID N°: 596), DOMl 6-39-562 (SEQ ID N°: 597), DOMl6-39-563 (SEQ ID N°: 598), DOM16-39-564 (SEQ ID N°: 599), DOMl 6-39-571 (SEQ ID N°: 600), DOMl6-39-572 (SEQ ID N°: 601), DOMl6-39-573 (SEQ ID N°: 602), DOM16-39-574 (SEQ ID N°: 603), DOM16-39-580 (SEQ ID N°: 604), DOM16-39-591 (SEQ ID N°: 605), DOM16-39-592 (SEQ ID N°: 606), DOM 16-3 9-593 (SEQ ID N°: 607), DOM16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOM16-39-602 (SEQ ID N°: 609), DOMl6-39-603 (SEQ ID N°: 610), DOMl6-39-604 (SEQ ID N°: 611), DOM16-39-605 (SEQ ID N°: 612), DOM16-39-607 (SEQ ID N°: 613), DOM16-39-611 (SEQ ID N°: 614), DOM16-39-612 (SEQ ID N°: 615), DOM16-39-613 (SEQ ID N°: 616), DOM16-39-614 (SEQ ID N°: 617), DOM16-39-615 (SEQ ID N°: 618), DOM16-39-616 (SEQ ID N°: 619), DOM16-39-617 (SEQ ID N°: 620),
DOM 16-39-618 (SEQ ID N°: 621) e DOM16-39-619 (SEQ ID N°: 622). Em outras formas de realização, o ligando que tem
especificidade de ligação para VEGF e para EGFR compreende um primeiro domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF e um segundo domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFRj em que o dito primeiro domínio variável simples de imunoglobulina compete com a ligação ao VEGF com bevacizumab e/ou anticorpo 2C3 (Acessão ATCC N0 PTA 1595) e o dito segundo domínio variável simples de imunoglobulina compete com a ligação ao EGFR com cetuximab.
Em formas de realização particulares, o ligando tem especificidade de ligação para VEGF e para EGFR e compreende pelo menos um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF e pelo menos um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR, em que o ligando compreende um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF que compreende uma seqüência de aminoácido que tem pelo menos 90 % de identidade de seqüência de aminoácido com a seqüência de aminoácido de um dAb anti-VEGF selecionado do grupo que consiste de TARl 5-6 (SEQ ID N°: 117), TARl 5-8 (SEQ ID N°: 119) e TARl5-26 (SEQ ID N0: 123) e que ainda compreende um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR que compreende uma seqüência de aminoácido que tem pelo menos 90 % de identidade de seqüência de aminoácido com um seqüência de aminoácido selecionado do grupo que consiste de DOM 16-3 9 (SEQ ID N°: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N°: 420), DOM16-39-100 (SEQ ID N°: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM16-39-109 (SEQ ID N°: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N°: 438) ou DOM16-39-200 (SEQ ID N0: 441).
Em formas de realização particulares, o ligando tem especificidade de ligação para VEGF e para EGFR e compreende pelo menos um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF e pelo menos um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR, em que o ligando compreende um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF que compreende uma seqüência de aminoácido que tem pelo menos 90 % de identidade de seqüência de aminoácido com a seqüência de aminoácido de um dAb anti-VEGF selecionado do grupo que consiste de TAR15-6 (SEQ ID N°: 117), TAR15-8 (SEQ ID N0: 119) e TAR15-26 (SEQ ID N0: 123) e que ainda compreende um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR que compreende uma seqüência de aminoácido que tem pelo menos 90 % de identidade de seqüência de aminoácido com um seqüência de aminoácido selecionado do grupo que consiste de DOMl6-39- 521 (SEQ ID N°: 577), DOM16-39-541 (SEQ ID N0: 585), DOM16-39-542 (SEQ ID N°: 586), DOM16-39-551 (SEQ ID N°: 591), DÜM16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOM16-39-604 (SEQ ID N°: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID N0: 621) e DOM16-39-619 (SEQ ID N°: 622).
O ligando que tem especificidade de ligação para VEGF e para EGFR inibe a ligação do fator de desenvolvimento epidérmico (EGF) e/ou fator de desenvolvimento transformante alfa (TGFalfa) ao EGFR, inibe a atividade de EGFR e/ou inibe a atividade de EGFR sem inibir substancialmente a ligação do fator de desenvolvimento epidérmico (EGF) e/ou fator de desenvolvimento transformante alfa (TGFalfa) ao EGFR. Além disso ou alternativamente, o ligando que tem especificidade de ligação para VEGF e para EGFR inibe a ligação de VEGF ao receptor do fator de desenvolvimento endotelial vascular 1 (VEGFRl) e/ou receptor do fator de desenvolvimento endotelial vascular 2 (VEGFR2), inibe a atividade de VEGF e/ou inibe a atividade de atividade de VEGF sem inibir substancialmente a ligação de VEGF ao VEGFRl e/ou VEGFR2.
O ligando que tem especificidade de ligação para VEGF e para EGFR pode conter uma porção de ligação de proteína (por exemplo, domínio variável simples de imunoglobulina) com especificidade de ligação para VEGF que liga o VEGF com uma afinidade (KD) que está entre cerca de 100 nM e cerca de 1 pM, como determinado pela ressonância de plasmon de superfície.
O ligando que tem especificidade de ligação para VEGF e para EGFR pode conter uma porção de ligação de proteína (por exemplo, domínio variável simples de imunoglobulina) com especificidade de ligação para EGFR que liga o EGFR com uma afinidade (KD) que está entre cerca de 100 nM e cerca de 1 pM ou cerca de 10 nM a cerca de 100 pM, como determinado por ressonância de plasmon de superfície.
O ligando que tem especificidade de ligação para VEGF e para EGFR pode ligar o VEGF com uma afinidade (KD) que está entre cerca de 1OO nM e cerca de 1 pM, como determinado pela ressonância de plasmon de superfície.
O ligando que tem especificidade de ligação para VEGF e para EGFR pode ligar o EGFR com uma afinidade (KD) que está entre cerca de 100 nM e cerca de 1 pM ou cerca de 10 nM a cerca de 100 pM, como determinado pela ressonância de plasmon de superfície.
O ligando que tem especificidade de ligação para VEGF e para EGFR pode compreender um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF que é um VHh e/ou um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação ao EGFR que é um VHh-
O ligando que tem especificidade de ligação para VEGF e para EGFR pode compreender um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF e um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR, em que o domínio simples de imunoglobulina são selecionados do grupo que consiste de um Vh humano e um Vl humano.
Em algumas formas de realização, o ligando que tem especificidade de ligação para VEGF e para EGFR podem ser um formatos semelhante ao IgG que compreende dois domínios variáveis simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF e dois domínios variáveis simples de imunoglobulinas com especificidade de ligação para EGFR.
Em algumas formas de realização, o ligando que tem especificidade de ligação para VEGF e para EGFR pode compreender uma região de Fc de anticorpo.
A invenção também diz respeito a um ligando que tem especificidade de ligação para VEGF, que compreende pelo menos um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação GüJ t
para VEGF, em que domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF compete com a ligação ao VEGF com um anticorpo de domínio anti-VEGF (dAb) selecionado do grupo que consiste de TARl5-1 (SEQ IDN°: 100), TAR15-3 (SEQ ID N°: 101), TAR15-4 (SEQ ID N°: 102), TAR15-9 (SEQ ID N°: 103), TAR15-10 (SEQ ID N°: 104), TARl5-11 (SEQ ID N°: 105), TAR15-12 (SEQ ID N°: 106), TAR15-13 (SEQ ID N°: 107), TAR15-14 (SEQ ID N°: 108), TAR15-15 (SEQ ID N°: 109), TARl5-16 (SEQ ID N0: 110), TAR15-17 (SEQ ID N°: 111), TAR15-18 (SEQ ID N°: 112), TAR15-19 (SEQ ID N°: 113), TAR15-20 (SEQ ID N°: 114), TAR 15-22 (SEQ ID N0: 115), TAR15-5 (SEQ ID N°: 116), TAR15-6 (SEQ IDN°: 117), TAR15-7 (SEQ IDN°: 118), TARl5-8 (SEQ IDN°: 119), TARl5-23 (SEQ ID N0: 120), TAR15-24 (SEQ ID N°: 121), TAR15-25 (SEQ ID N0: 122), TAR15-26 (SEQ ID N°: 123), TAR15-27 (SEQ ID N°: 124), TARl5-29 (SEQ ID N0: 125), TAR15-30 (SEQ ID N°: 126), TARA- IS 6-20 500 (SEQ ID N0: 127), TAR15-6-501 (SEQ ID N0: 128), TAR15-6-502 (SEQ ID N°: 129), TAR15-6-503 (SEQ ID N°: 130), TAR15-6-504 (SEQ ID N°: 131), TARl5-6-505 (SEQ ID N°: 132), TAR15-6-506 (SEQ ID N°: 133), TARl5-6-507 (SEQ ID N°: 134), TAR15-6-508 (SEQ ID N°: 135), TAR15- 6-509 (SEQ ID N°: 136), TAR15-6-510 (SEQ ID N°: 137), TAR15-8-500 (SEQ ID N°: 138), TAR15-8-501 (SEQ ID N°: 139), TAR15-8-502 (SEQ ID N°: 140), TARl5-8-503 (SEQ ID N°: 141), TAR15-8-505 (SEQ ID N°: 142), TAR15-8-506 (SEQ ID N°: 143), TAR15-8-507 (SEQ ID N°: 144), TAR15- 8-508 (SEQ ID N°: 145), TAR15-8-509 (SEQ ID N°: 146), TAR15-8-510 (SEQ ID N0: 147), TARl5-8-511 (SEQ ID N°: 148), TAR15-26-500 (SEQ ID N°: 149), TAR15-26-501 (SEQ ID N°: 150), TAR15-26-502 (SEQ ID N°: 151), TARl5-26-503 (SEQ ID N°: 152), TAR15-26-504 (SEQ ID N°: 153), TARl5-26-505 (SEQ ID N°: 154), TAR15-26-506 (SEQ ID N°: 155), TARl5-26-507 (SEQ ID N°: 156), TAR15-26-508 (SEQ ID N°: 157), TARl5-26-509 (SEQ ID N°: 158), TAR15-26-510 (SEQ ID N°: 159), fb&Qu <k
TARl 5-26-511 (SEQ ID N°: 160), TARl 5-26-512 (SEQ ID N°: 161), TARl 5-26-513 (SEQ ID N0: 162), TARl 5-26-514 (SEQ ID N°: 163), TARl 5-26-515 (SEQ ID N°: 164), TARl 5-26-516 (SEQ ID N°: 165), TARl 5-26-517 (SEQ ID N°: 166), TAR15-26-518 (SEQ ID N°: 167), TARl 5-26-519 (SEQ ID N°: 168), TARl 5-26-520 (SEQ ID N°: 169), TARl 5-26-521 (SEQ ID N0: 170), TARl 5-26-522 (SEQ ID N°: 171), TARl 5-26-523 (SEQ ID N°: 172), TARl 5-26-524 (SEQ ID N°: 173), TAR15-26-525 (SEQ ID N°: 174), TARl 5-26-526 (SEQ ID N°: 175), TARl 5-26-527 (SEQ ID N°: 176), TAR15-26-528 (SEQ ID N0: 177), TARl 5-26-529 (SEQ ID N°: 178), TARl5-26-530 (SEQ ID N°: 179), TARl 5-26-531 (SEQ ID N°: 180), TARl5-26-532 (SEQ ID N°: 181), TARl 5-26-533 (SEQ ID N0: 182), TARl 5-26-534 (SEQ ID N°: 183), TAR15-26-535 (SEQ ID N°: 184), TAR15-26-536 (SEQ ID N°: 185), TARl 5-26-537 (SEQ ID N0: 186), TARl5-26-538 (SEQ ID N°: 187), TARl 5-26-539 (SEQ ID N0: 188), TARl 5-26-540 (SEQ ID N°: 189), TARl 5-26-541 (SEQ ID N0: 190), TARl 5-26-542 (SEQ ID N°: 191), TARl 5-26-543 (SEQ ID N°: 192), TARl 5-26-544 (SEQ ID N°: 193), TARl 5-26-545 (SEQ ID N°: 194), TARl5-26-546 (SEQ ID N°: 195), TARl 5-26-547 (SEQ ID N0: 196), TARl5-26-548 (SEQ ID N°: 197) e
TARl5-26-549 (SEQ ID N0: 198), TAR15-26-550 (SEQ ID N°: 539) e TAR15-26-551 (SEQ ID N°: 540).
Por exemplo, um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF pode compreender uma seqüência de aminoácido que tem pelo menos cerca de 85 % de identidade de seqüência de aminoácido com a seqüência de aminoácido de um dAb selecionado do grupo que consiste de TARl 5-1 (SEQ ID N°: 100), TARl 5-3 (SEQ ID N°: 101), TARl5-4 (SEQ ID N°: 102), TAR15-9 (SEQ ID N°: 103), TAR15-10 (SEQ ID N°: 104), TAR15-11 (SEQ ID N0: 105), TAR15-12 (SEQ ID N°: 106), TARl5-13 (SEQ IDN°: 107), TAR15-14 (SEQ ID N°: 108), TAR15-15 (SEQ ID N0: 109), TAR15-16 (SEQ ID N°: 110), TAR15-17 (SEQ ID N°: 111), TAR15-18 (SEQ IDN0: 112), TARl5-19 (SEQ IDN°: 113), TAR15-20 (SEQ ID N°: 114), TAR 15-22 (SEQ ID N°: 115), TAR15-5 (SEQ ID N°: 116), TARl5-6 (SEQ ID N°: 117), TAR15-7 (SEQ ID N°: 118), TAR15-8 (SEQ ID N°: 119), TAR15-23 (SEQ ID N°: 120), TAR15-24 (SEQ ID N°: 121), TARl5-25 (SEQIDN0: 122), TAR15-26 (SEQ ID N°: 123), TAR15-27 (SEQ ID N°: 124), TAR15-29 (SEQ ID N°: 125), TAR15-30 (SEQ ID N°: 126), TARl5-6-500 (SEQ ID N°: 127), TAR15-6-501 (SEQ ID N°: 128), TARl5-6-502 (SEQ ID N°: 129), TAR15-6-503 (SEQ ID N°: 130), TARD- IO 6-504 (SEQ ID N°: 131), TAR15-6-505 (SEQ ID N°: 132), TAR15-6-506 (SEQ ID N°: 133), TAR15-6-507 (SEQ ID N0: 134), TAR15-6-508 (SEQ ID N0: 135), TARl5-6-509 (SEQ ID N°: 136), TAR15-6-510 (SEQ ID N°: 137), TAR15-8-500 (SEQ ID N°: 138), TAR15-8-501 (SEQ ID N°: 139), TAR15- 8-502 (SEQ ID N0: 140), TAR15-8-503 (SEQ ID N°: 141), TAR15-8-505 (SEQ ID N°: 142), TARl5-8-506 (SEQ ID N0: 143), TARl5-8-507 (SEQ ID N°: 144), TARl5-8-508 (SEQ ID N°: 145), TAR15-8-509 (SEQ ID N°: 146), TARl5-8-510 (SEQ ID N°: 147), TAR15-8-511 (SEQ ID N°: 148), TAR15- 26-500 (SEQ ID N°: 149), TAR15-26-501 (SEQ ID N0: 150), TAR15-26-502 (SEQ ID N°: 151), TAR15-26-503 (SEQ ID N°: 152), TAR15-26-504 (SEQ ID N°: 153), TAR15-26-505 (SEQ ID N°: 154), TAR15-26-506 (SEQ ID N°: 155), TARl5-26-507 (SEQ ID N0: 156), TARl5-26-508 (SEQ ID N°: 157),
TARl5-26-509 (SEQ ID 15 N1 D: 158), TARl5-26-510 (SEQ ID N°: 159), TAR15-26-511 (SEQ ID N0: 160), TARl 5-26-512 (SEQ ID N°: 161), TARl 5-26-513 (SEQ ID N°: 162), TARl 5-26-514 (SEQ ID N°: 163), TARl 5-26-515 (SEQ ID N°: 164), TARl 5-26-516 (SEQ ID N°: 165), TAR15-26-517 (SEQ ID N°: 166), TARl 5-26-518 (SEQ ID N°: 167), TARl 5-26-519 (SEQ ID N0: 168), TARl 5-26-520 (SEQ ID N0: 169), TAR15-26-521 (SEQ ID N°: 170), TARl 5-26-522 (SEQ ID N°: 171), TAR15-26-523 (SEQ ID N°: 172), TARl 5-26-524 (SEQ ID N°: 173), GM
TARl 5-26-525 (SEQ ID N°: 174), TARl 5-26-526 (SEQ ID N°: 175), TARl 5-26-527 (SEQ ID N0: 176), TARl 5-26-528 (SEQ ID N°: 177), TARl 5-26-529 (SEQ ID N0: 178), TARl 5-26-530 (SEQ ID N°: 179), TARl 5-26-531 (SEQ ID N°: 180), TARl 5-26-532 (SEQ ID N°: 181), TARl 5-26-533 (SEQ ID N°: 182), TARl 5-26-534 (SEQ ID N°: 183), TAR15-26-535 (SEQ ID N0: 184), TARl 5-26-536 (SEQ ID N°: 185), TARl 5-26-537 (SEQ ID N0: 186), TARl 5-26-538 (SEQ ID N°: 187), TARl 5-26-539 (SEQ ID N0: 188), TARl 5-26-540 (SEQ ID N°: 189), TARl 5-26-541 (SEQ ID N°: 190), TARl 5-26-542 (SEQ ID N°: 191), TAR15-26-543 (SEQ ID N°: 192), TARl 5-26-544 (SEQ ID N°: 193), TARl 5-26-545 (SEQ ID N°: 194), TARl 5-26-546 (SEQ ID N°: 195), TARl 5-26-547 (SEQ ID N0: 196), TARl 5-26-548 (SEQ ID N°: 197) e
TARl5-26-549 (SEQ ID N°: 198), TAR15-26-550 (SEQ ID N°: 539) e TARl5-26-551 (SEQIDN0: 540). O ligando que tem especificidade de ligação para VEGF pode
inibir a ligação de VEGF ao receptor do fator de desenvolvimento endotelial vascular 1 (VEGFRI) e/ou receptor do fator de desenvolvimento endotelial vascular 2 (VEGFR2), inibem atividade de VEGF e/ou inibem a atividade de atividade de VEGF sem inibir substancialmente a ligação de VEGF ao VEGFRl e/ou VEGFR2.
O ligando que tem especificidade de ligação para VEGF pode conter um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF que liga o VEGF com uma afinidade (KD) que está entre cerca de 100 nM e cerca de 1 pM, como determinado pela ressonância de plasmon de superfície.
O ligando que tem especificidade de ligação para VEGF pode ligar o VEGF com uma afinidade (KD) que está entre cerca de 100 nM e cerca de 1 pM, como determinado pela ressonância de plasmon de superfície.
O ligando que tem especificidade de ligação para VEGF pode 6&S 56
compreender um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF que é um VHh-
O ligando que tem especificidade de ligação para VEGF pode compreender um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF que é selecionado do grupo que consiste de um Vh humano e um Vl humano.
Em algumas formas de realização, o ligando que tem especificidade de ligação para VEGF é um formatos semelhante ao IgG que compreende pelo menos dois domínios variáveis simples de imunoglobulinas com especificidade de ligação para VEGF.
Em algumas formas de realização, o ligando que tem especificidade de ligação para VEGF compreende uma região de Fc de anticorpo.
A invenção também diz respeito a um ligando que tem especificidade de ligação para EGFR que compreende pelo menos um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFRs em que o domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR compete com a ligação ao EGFR com um anticorpo de domínio anti-EGFR (dAb) selecionado do grupo que consiste de DOM16-17 (SEQ ID N0: 325), DOM16-18 (SEQID N°: 326), DOM16-19 (SEQ ID N°: 327), DOM16-20 (SEQ ID N°: 328), DOM16-21 (SEQ ID N0: 329), DOMl6-22 (SEQ ID N°: 330), DOM16-23 (SEQ ID N°: 331), DOM16- 24 (SEQ ID N°: 332), DOMl6-25 (SEQ ID N0: 333), DOMl6-26 (SEQ ID N°: 334), DOMl6-27 (SEQ ID N°: 335), DOM16-28 (SEQ ID N°: 336), DOMl6-29 (SEQ ID N°: 337), DOM16-30 (SEQ ID N°: 338), DOM16-31 (SEQ ID N°: 339), DOM16-32 (SEQ ID N°: 340), DOM16-33 (SEQ ID N°: 341), DOM 16-35 (SEQ ID N°: 342), DOM16-37 (SEQ ID N°: 343), DOM16- 38 (SEQ ID N°: 344), DOM16-39 (SEQ ID N0: 345), DOM16-40 (SEQ ID N°: 346), DOMl6-41 (SEQ ID N°: 347), DOM16-42 (SEQ ID N0: 348),
A
DOMl6-43 (SEQ ID N°: 349), DOM16-44 (SEQ ID N0: 350), DOM16-45 (SEQ ID N°: 351), DOM16-46 (SEQ ID N°: 352), DOM16-47 (SEQ ID N°: 353), DOM 16-48 (SEQ ID N0: 354), DOM16-49 (SEQ ID N°: 355), DOM16- 50 (SEQ ID N°: 356), DOM16-59 (SEQ ID N0: 357), DOMI6-6O (SEQ ID N0: 358), DOM16-61 (SEQ ID N°: 359), DOM16-62 (SEQ ID N°: 360), DOM 16-63 (SEQ ID N°: 361), DOM16-64 (SEQ ID N°: 362), DOM16-65 (SEQ ID N°: 363), DOM16-66 (SEQ ID N°: 364), DOM16-67 (SEQ ID N°: 365), DOM 16-68 (SEQ ID N0: 366), DOM16-69 (SEQ ID N°: 367), DOM16- 70 (SEQ ID N°: 368), DOM16-71 (SEQ ID N0: 369), DOM16-72 (SEQ ID N0: 370), DOM16-73 (SEQ ID N°: 371), DOM16-74 (SEQ ID N°: 372), DOM 16-75 (SEQ ID N°: 373), DOM16-76 (SEQ ID N0: 374), DOM16-77 (SEQ ID N°: 375), DOM16-78 (SEQ ID N°: 376), DOM16-79 (SEQ ID N°: 377), DOMl6-80 (SEQ ID N0: 378), DOM16-81 (SEQ ID N0: 379), DOM16- 82 (SEQ ID N°: 380), DOM16-83 (SEQ ID N°: 381), DOM16-84 (SEQ ID N0: 382), DOM16-85 (SEQ ID N°: 383), DOM16-87 (SEQ ID N°: 384), DOM16-88 (SEQ ID N°: 385), DOM16-89 (SEQ ID N0: 386), DOM16-90 (SEQ ID N°: 387), DOM16-91 (SEQ ID N°: 388), DOM16-92 (SEQ ID N°: 389), DOM 16-94 (SEQ ID N°: 390), DOM16-95 (SEQ ID N°: 391), DOM16- 96 (SEQ ID N°: 392), DOM16-97 (SEQ ID N0: 393), DOM16-98 (SEQ ID N0: 394), DOM16-99 (SEQ ID N°: 395), DOMI6-IOO (SEQ ID N°: 396), DOMIô-lOl (SEQ ID N°: 397), DOM16-102 (SEQ ID N°: 398), DOM16- 103 (SEQ ID N°: 399), DOM16-104 (SEQ ID N°: 400), DOM16-105 (SEQ ID N°: 401), DOMI6-IO6 (SEQ ID N°: 402), DOM16-107 (SEQ ID N°: 403), DOMl6-108 (SEQ ID N°: 404), DOM16-109 (SEQ ID N°: 405), DOM16-HO (SEQ ID N°: 406), D0M16-111 (SEQ ID N°: 407), DOM16- 112 (SEQ ID N°: 408), DOM16-113 (SEQ ID N°: 409), DOM16-114 (SEQ ID N°: 410), DOM16-115 (SEQ ID N°: 411), DOM16-116 (SEQ ID N°: 412), DOMl6-117 (SEQ ID N°: 413), DOM16-118 (SEQ ID N°: 414), DOM16-119 (SEQ ID N°: 415), DOM16-39-6 (SEQ ID N°: 416), DOM16-
39-8 (SEQ ID N°: 417), DOM16-39-34 (SEQ ID N°: 418), DOM16-39-48 (SEQ ID N°: 419), DOM16-39-87 (SEQ ID N0: 420), DOM16-39-90 (SEQ ID N0: 421), DOM16-39-96 (SEQ ID N°: 422), DOM16-39-100 (SEQ ID N0: 423), DOMló-39-lOl (SEQ ID N°: 424), DOM16-39-1Q2 (SEQ ID N°: 425),
DOM 16-3 9-103 (SEQ ID N°: 426), DOM16-39-104 (SEQ ID N°: 427), DOM 16-3 9-105 (SEQ ID N0: 428), DOM16-39-106 (SEQ ID N°: 429), DOM16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM 16-39-108 (SEQ ID N°: 431), DOM16-39-109 (SEQ ID N°: 432), DOM16-39-110 (SEQ ID N°: 433), DOM16-39-111 (SEQ ID N°: 434), DOM16-39-112 (SEQ ID N°: 435), DOM16-39-113 (SEQ ID N°: 436), DOM16-39-114 (SEQ ID N°: 437), DOM16-39-115 (SEQ ID N°: 438), DOM16-39-116 (SEQ ID N°: 439), DOM16-39-117 (SEQ ID N°: 440), DOM16-39-200 (SEQ ID N°: 441), DOM 16-3 9-201 (SEQ ID N°: 442), DOMl6-39-202 (SEQ ID N°: 443), DOM16-39-203 (SEQ ID N0: 444), DOMl6-39-204 (SEQ ID N°: 445), DOM16-39-205 (SEQ ID N°: 446), DOM16-39-206 (SEQ ID N°: 447), DOM16-39-207 (SEQ ID N°: 448), DOMl6-39-209 (SEQ ID N°: 449),
DOMl6-52 (SEQ ID N°: 450), NB 1 (SEQ ID N°: 451), NB 2 (SEQ ID N°: 452), NB 3 (SEQ ID N0: 453), NB 4 (SEQ ID N°: 454), NB 5 (SEQ ID N°: 455), NB 6 (SEQ ID N°: 456), NB 7 (SEQ ID N°: 457), NB 8 (SEQ ID N°:
458), NB 9 (SEQ ID N°: 459), NB 10 (SEQ ID N°: 460), NB 11 (SEQ ID N°: 461), NB 12 (SEQ ID N0: 462), NB 13 (SEQ ID N°: 463), NB 14 (SEQ ID N°: 464), NB 15 (SEQ ID N0: 465), NB 16 (SEQ ID N°: 466), NB 17 (SEQ ID N°: 467), NB 18 (SEQ ID N°: 468), NB 19 (SEQ ID N°: 469), NB 20 (SEQ ID N°: 470), NB 21 (SEQ ID N°: 471) e NB 22 (SEQ ID N°: 472).
A invenção também diz respeito a um ligando que tem
especificidade de ligação para EGFR que compreende pelo menos um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR, em que o domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR compete com a ligação ao EGFR com r
um anticorpo de domínio anti-EGFR (dAb) selecionado do grupo que consiste de DOM16-39-210 (SEQ ID N°: 541), DOM 16-39-211 (SEQ ID N°: 542),
DOM16-39-212 (SEQ ID N°: 543), DOM16-39-213 (SEQ ID N°: 544), DOM 16-3 9-214 (SEQ ID N0: 545), DOM16-39-215 (SEQ ID N°: 546), DOM 16-3 9-216 (SEQ ID N°: 547), DOM16-39-217 (SEQ ID N°: 548), DOM16-39-218 (SEQ ID N°: 549), DOM 16-39-219 (SEQ ID N°: 550), DOM16-39-220 (SEQ ID N°: 551), DOMl6-39-221 (SEQ ID N°: 552), DOMl 6-39-222 (SEQ ID N°: 553), DOMl6-39-223 (SEQ ID N°: 554), DOMl 6-39-224 (SEQ ID N°: 555), DOM16-39-225 (SEQ ID N°: 556), DOMl 6-39-226 (SEQ ID N°: 557), DOMl6-39-227 (SEQ ID N°: 558), DOM16-39-228 (SEQ ID N°: 559), DOMl6-39-229 (SEQ ID N°: 560), DOMl 6-39-230 (SEQ ID N0: 561), DOMl6-39-231 (SEQ ID N°: 562), DOMl 6-39-232 (SEQ ID N°: 563), DOMl6-39-233 (SEQ ID N°: 564), DOM16-39-234 (SEQ ID N0: 565), DOMl6-39-235 (SEQ ID N°: 566), DOMl 6-39-500 (SEQ ID N°: 725), DOM16-39-502(SEQ ID N°: 726), DOMl 6-39-503 (SEQ ID N°: 567), DOM16-39-504 (SEQ ID N°: 568), DOMl 6-39-505 (SEQ ID N°: 569), DOMl6-39-506 (SEQ ID N°: 570), DOM16-39-507 (SEQ ID N°: 571), DOMl6-39-508 (SEQ ID N°: 572), DOMl 6-39-509 (SEQ ID N0: 573), DOM16-39-510 (SEQ ID N°: 574), DOM16-39-511 (SEQ ID N°: 575), DOM16-39-512 (SEQ ID N°: 576), DOM 16-3 9-521 (SEQ ID N°: 577), DOMl6-39-522 (SEQ ID N°: 578), DOM16-39-523 (SEQ ID N°: 579), DOMl6-39-524 (SEQ ID N0: 580), DOMl 6-39-527 (SEQ ID N°: 581), DOM16-39-525 (SEQ ID N°: 582), DOMl 6-39-526 (SEQ ID N°: 583), DOM16-39-540 (SEQ ID N°: 584), DOM 16-3 9-541 (SEQ ID N°: 585), DOMl6-39-542 (SEQ ID N°: 586), DOM16-39-543 (SEQ ID N°: 587), DOMl6-39-544 (SEQ ID N°: 588), DOMl 6-39-545 (SEQ ID N°: 589), DOM16-39-550 (SEQ ID N°: 590), DOMl 6-39-551 (SEQ ID N°: 591), DOMl6-39-552 (SEQ ID N0: 592), DOM16-39-553 (SEQ ID N°: 593), DOMl6-39-554 (SEQ ID N°: 594), DOMl 6-39-555 (SEQ ID N°: 595), DOM16-39-561 (SEQ ID N°: 596), DOM16-39-562 (SEQ ID N0: 597), DOM16-39-563 (SEQ ID N°: 598), DOMl 6-39-564 (SEQ ID N°: 599), DOM16-39-571 (SEQ ID N°: 600), DOM16-39-572 (SEQ ID N0: 601), DOMl 6-39-573 (SEQ ID N°: 602), DOM16-39-574 (SEQ ID N°: 603), DOMl 6-39-580 (SEQ ID N°: 604), DOM16-39-591 (SEQ ID N0: 605), DOM16-39-592 (SEQ ID N°: 606), DOM16-39-593 (SEQ ID N°: 607), DOMl 6-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOMl 6-39-602 (SEQ ID N°: 609), DOM16-39-603 (SEQ ID N°: 610), DOMl 6-39-604 (SEQ ID N°: 611), DOMl 6-39-605 (SEQ ID N°: 612), DOM16-39-607 (SEQ ID N°: 613), DOM16-39-611 (SEQ ID N°: 614), DOM16-39-612 (SEQ ID N°: 615), DOM 16-3 9-613 (SEQ ID N°: 616), DOM16-39-614 (SEQ ID N0: 617), DOM16-39-615 (SEQ ID N°: 618), DOM16-39-616 (SEQ ID N°: 619), DOM16-39-617 (SEQ ID N°: 620), DOM16-39-618 (SEQ ID N 621) e DOM16-39-619 (SEQ ID N°: 622).
Por exemplo, o domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR pode compreender uma seqüência de aminoácido que tem pelo menos cerca de 85 % de identidade de seqüência de aminoácido com a seqüência de aminoácido de um dAb selecionado do grupo que consiste de DOM16-17 (SEQ ID N°: 325), DOM16-18 (SEQ ID N°: 326), DOMl6-19 (SEQ ID N0: 327), DOM16-20 (SEQ ID N°: 328), DOM 16-21 (SEQ ID N°: 329), DOM16-22 (SEQ ID N0: 330), DOM16-23 (SEQ ID N°: 331), DOM16-24 (SEQ ID N°: 332), DOM16-25 (SEQ ID N°: 333), DOM 16-26 (SEQ ID N0: 334), DOM16-27 (SEQ ID N°: 335), DOM16- 28 (SEQ ID N°: 336), DOM16-29 (SEQ ID N0: 337), DOM16-30 (SEQ ID N°: 338), DOM 16-31 (SEQ ID N°: 339), DOM16-32 (SEQ ID N°: 340), DOMl6-33 (SEQ ID N0: 341), DOM16-35 (SEQ ID N°: 342), DOM16-37 (SEQ ID N°: 343), DOM16-38 (SEQ ID N°: 344), DOM16-39 (SEQ ID N°: 345), DOM 16-40 (SEQ ID N°: 346), DOM16-41 (SEQ ID N°: 347), DOM16- 42 (SEQ ID N0: 348), DOM16-43 (SEQ ID N°: 349), DOM16-44 (SEQ ID <o'ÍP φ
N°: 350), DOM 16-45 (SEQ ID N°: 351), DOM16-46 (SEQ ID N0: 352), DOM 16-47 (SEQ ID N°: 353), DOM16-48 (SEQ ID N°: 354), DOM16-49 (SEQ ID N0: 355), DOM16-50 (SEQ ID N°: 356), DOM16-59 (SEQ ID N°: 357), DOM 16-60 (SEQ ID N0: 358), DOM16-61 (SEQ ID N°: 359), DOM16- 62 (SEQ ID N°: 360), DOM16-63 (SEQ ID N°: 361), DOM16-64 (SEQ ID N0: 362), DOMl6-65 (SEQ ID N°: 363), DOM16-66 (SEQ ID N°: 364), DOMl6-67 (SEQ ID N°: 365), DOM16-68 (SEQ ID N°: 366), DOM16-69 (SEQ ID N°: 367), DOM16-70 (SEQ ID N°: 368), DOM16-71 (SEQ ID N°: 369), DOM 16-72 (SEQ ID N0: 370), DOM16-73 (SEQ ID N°: 371), DOM16- - 10 74 (SEQ ID N°: 372), DOM16-75 (SEQ ID N°: 373), DOM16-76 (SEQ ID N°: 374), DOM 16-77 (SEQ ID N°: 375), DOM16-78 (SEQ ID N°: 376), DOM 16-79 (SEQ ID N°: 377), DOMI6-8O (SEQ ID N°: 378), DOM16-81 (SEQ ID N0: 379), DOM16-82 (SEQ ID N°: 380), DOM16-83 (SEQ ID N°: 381), DOMl6-84 (SEQ ID N0: 382), DOM16-85 (SEQ ID N0: 383), D0M16- 87 (SEQ ID N°: 384), D0M16-88 (SEQ ID N0: 385), DOM16-89 (SEQ ID N0: 386), DOM 16-90 (SEQ ID N°: 387), DOM16-91 (SEQ ID N0: 388), DOM 16-92 (SEQ ID N°: 389), DOM16-94 (SEQ ID N0: 390), DOM16-95 (SEQ ID N°: 391), DOM16-96 (SEQ ID N°: 392), DOM16-97 (SEQ ID N°: 393), DOM 16-98 (SEQ ID N0: 394), DOM16-99 (SEQ ID N°: 395), D0M16- 100 (SEQ ID N°: 396), DOMIÔ-lOl (SEQ ID N0: 397), DOM16-102 (SEQ ID N°: 398), DOM16-103 (SEQ ID N°: 399), DOM16-104 (SEQ ID N°: 400), DOMl6-105 (SEQ ID N°: 401), DOMI6-IO6 (SEQ ID N°: 402), DOM 16-107 (SEQ ID N°: 403), DOMI6-IO8 (SEQ ID N°: 404), D0M16- 109 (SEQ ID N0: 405), D0M16-1K) (SEQ ID N0: 406), DOM16-111 (SEQ ID N°: 407), DOM16-112 (SEQ ID N°: 408), DOMl6-113 (SEQ ID N°: 409), DOMl6-114 (SEQ ID N°: 410), DOM16-115 (SEQ ID N°: 411), DOM16-116 (SEQ ID N°: 412), DOM16-117 (SEQ ID N°: 413), D0M16- 118 (SEQ ID N°: 414), D0M16-119 (SEQ ID N°: 415), DOM16-39-6 (SEQ ID N°: 416), DOM16-39-8 (SEQ ID N°: 417), DOM16-39-34 (SEQ ID N°: t
418), DOM 16-39-48 (SEQ ID N0: 419), DOM16-39-87 (SEQ ID N°: 420),
DOM16-39-90 (SEQ ID N°: 421), DOM16-39-96 (SEQ ID N°: 422), DOM16-39-100 (SEQ ID N°: 423), DOM16-39-101 (SEQ ID N°: 424), DOM16-39-102 (SEQ ID N°: 425), DOM16-39-103 (SEQ ID N°: 426), DOMl 6-39-104 (SEQ ID N°: 427), DOM16-39-105 (SEQ ID N°: 428), DOM16-39-106 (SEQ ID N0: 429), DOM16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM16-39-108 (SEQ ID N°: 431), DOM16-39-109 (SEQ ID N°: 432), DOM16-39-HO (SEQ ID N0: 433), DOM16-39-111 (SEQ ID N°: 434), DOM16-39-112 (SEQ ID N°: 435), DOM16-39-113 (SEQ ID N0: 436), DOM16-39-114 (SEQ ID N0: 437), DOM16-39-115 (SEQ ID N°: 438), DOM16-39-116 (SEQ ID N°: 439), DOM16-39-117 (SEQ ID N°: 440), DOM 16-3 9-200 (SEQ ID N°: 441), DOM 16-3 9-201 (SEQ ID N°: 442), DOM16-39-202 (SEQ ID N°: 443), DOM16-39-203 (SEQ ID N°: 444), DOM16-39-204 (SEQ ID N°: 445), DOM16-39-205 (SEQ ID N°: 446), DOMl 6-39-206 (SEQ ID N°: 447), DOMl 6-39-207 (SEQ ID N°: 448), DOM16-39-209 (SEQ ID N0: ■ 449), DOMl6-52 (SEQ ID N°: 450), NB 1
(SEQ ID N0: 451), NB 2 (SEQ ID N0: 452), NB 3 (SEQ ID N°: 453), NB 4 (SEQ ID N°: 454), NB 5 (SEQ ID N°: 455), NB 6 (SEQ ID N°: 456), NB 7 (SEQ ID N°: 457), NB 8 (SEQ ID N°: 458), NB 9 (SEQ ID N°: 459), NB 10 ' 20 (SEQ ID N°: 460), NB 11 (SEQ ID N°: 461), NB 12 (SEQ ID N0: 462), NB 13 (SEQ ID N°: 463), NB 14 (SEQ ID N°: 464), NB 15 (SEQ ID N°: 465), NB 16 (SEQ ID N°: 466), NB 17 (SEQ ID N0: 467), NB 18 (SEQ ID N°: 468), NB 19 (SEQ ID N°: 469), NB 20 (SEQ ID N°: 470), NB 21 (SEQ ID N0: 471) e NB 22 (SEQ ID N0: 472).
Por exemplo, o domínio variável simples de imunoglobulina
com especificidade de ligação para EGFR pode compreender uma seqüência de aminoácido que tem pelo menos cerca de 85 % de identidade de seqüência de aminoácido com a seqüência de aminoácido de um dAb selecionado do grupo que consiste de DOM16-39-210 (SEQ ID N0: 541), DOM16-39-211 (SEQ ID N°: 542), DOM16-39-212 (SEQID N°: 543), DOM16-39-213 (SEQ ID N°: 544), DOM16-39-2I4 (SEQ ID N0: 545), DOM16-39-215 (SEQ ID N0: 546), DOM16-39-216 (SEQ ID N°: 547), DOM16-39-217 (SEQ ID N°: 548), DOM 16-39-218 (SEQ ID N°: 549), DOM16-39-219 (SEQ ID N°: 550), DOM16-39-220 (SEQ ID N0: 551), DOM16-39-221 (SEQ ID N°: 552), DOM16-39-222 (SEQ ID N°: 553), DOM16-39-223 (SEQ ID N°: 554), DOM16-39-224 (SEQ ID N0: 555), DOM16-39-225 (SEQ ID N°: 556), DOMl6-39-226 (SEQ ID N0: 557), DOMl6-39-227 (SEQ ID N°: 558), DOM16-39-228 (SEQ ID N°: 559), DOM16-39-229 (SEQ ID N°: 560), DOM 16-39-23O (SEQ ID N0: 561), DOM16-39-231 (SEQ ID N°: 562), DOMl6-39-232 (SEQ ID N°: 563), DOM16-39-233 (SEQ ID N°: 564), DOM 16-39-234 (SEQ ID N0: 565), DOM16-39-235 (SEQ ID N°: 566), DOMl6-39-500 (SEQ ID N°: 725), DOM16-39-502(SEQ ID N°: 726), DOM16-39-503 (SEQ ID N0: 567), DOM16-39-504 (SEQ ID N°: 568), DOMl6-39-505 (SEQ ID N°: 569), DOM16-39-506 (SEQ ID N°: 570), DOM16-39-507 (SEQ ID N°: 571), DOM16-39-508 (SEQ ID N°: 572), DOM16-39-509 (SEQ ID N0: 573), DOM16-39-510 (SEQ ID N°: 574), DOM16-39-511 (SEQ ID N°: 575), DOM16-39-512 (SEQ ID N°: 576), DOM16-39-521 (SEQ ID N0: 577), DOM16-39-522 (SEQ ID N°: 578), DOM16-39-523 (SEQ ID N0: 579), DOM16-39-524 (SEQ ID N°: 580), DOM16-39-527 (SEQ ID N0: 581), DOM16-39-525 (SEQ ID N°: 582), DOMl6-39-526 (SEQ ID N0: 583), DOMl6-39-540 (SEQ ID N0: 584), DOM16-39-541 (SEQ ID N°: 585), DOM16-39-542 (SEQ ID N°: 586), DOM16-39-543 (SEQ ID N0: 587), DOM16-39-544 (SEQ ID N°: 588), DOM16-39-545 (SEQ ID N0: 589), DOM16-39-550 (SEQ ID N°: 590), DOM16-39-551 (SEQ ID N0: 591), DOM16-39-552 (SEQ ID N°: 592), DOMl6-39-553 (SEQ ID N0: 593), DOM16-39-554 (SEQ ID N°: 594), DOM16-39-555 (SEQ ID N0: 595), DOM16-39-561 (SEQ ID N°: 596), DOMl6-39-562 (SEQ ID N0: 597), DOMl6-39-563 (SEQ ID N°: 598), 635
4
DOM16-39-564 (SEQ ID N°: 599), DOMl6-39-571 (SEQ ID N°: 600), DOMl 6-39-572 (SEQ ID N°: 601), DOMl6-39-573 (SEQ ID N°: 602), DOMl 6-39-574 (SEQ ID N°: 603), DOMl6-39-580 (SEQ ID N°: 604), DOM16-39-591 (SEQ ID N°: 605), DOMl6-39-592 (SEQ ID N°: 606), DOMl 6-39-593 (SEQ ID N°: 607), DÓM16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOMl 6-39-602 (SEQ ID N°: 609), DOMl6-39-603 (SEQ ID N°: 610), DOMl 6-39-604 (SEQ ID N°: 611), DOMl6-39-605 (SEQ ID N°: 612), DOM16-39-607 (SEQ ID N°: 613), DOM16-39-611 (SEQ ID N°: 614), DOM16-39-612 (SEQ ID N0: 615), DOM16-39-613 (SEQ ID N°: 616), DOM 16-3 9-614 (SEQ ID N°: 617), DOMl 6-39-615 (SEQ ID N°: 618), DOM 16-3 9-616 (SEQ ID N°: 619), DOMl 6-39-617 (SEQ ID N°: 620),
DOMl6-39-618 (SEQ ID N°: 621) e DOM16-39-619 (SEQID N°: 622).
O ligando que tem especificidade de ligação para EGFR pode inibir a ligação do fator de desenvolvimento epidérmico (EGF) e/ou fator de desenvolvimento transformante alfa (TGFalfa) ao EGFR, inibe a atividade de EGFR e/ou inibe a atividade de atividade de EGFR sem inibir substancialmente a ligação do fator de desenvolvimento epidérmico (EGF) e/ou fator de desenvolvimento transformante alfa (TGFalfa) ao EGFR.
O ligando que tem especificidade de ligação para EGFR pode conter um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR que liga o EGFR com uma afinidade (I(D) que está entre cerca de 100 nM e cerca de 1 pM ou cerca de 10 nM a cerca de 100 pM, como determinado pela ressonância de plasmon de superfície.
O ligando que tem especificidade de ligação para VEGF e para EGFR pode ligar o EGFR com uma afinidade (I(D) que está entre cerca de 100 nM e cerca de 1 pM ou cerca de 10 nM a cerca de 100 pM, como determinado pela ressonância de plasmon de superfície.
O ligando que tem especificidade de ligação para EGFR pode compreender um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR que é um VHh·
0 ligando que tem especificidade de ligação para EGFR pode compreender um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR que é selecionado do grupo que consiste de um Vh humano e um Vl humano.
Em algumas formas de realização, o ligando que tem especificidade de ligação para EGFR é um formatos semelhante ao IgG que compreende pelo menos dois domínios variáveis simples de imunoglobulinas com especificidade de ligação para EGFR.
Em algumas formas de realização, o ligando que tem especificidade de ligação para EGFR 5 compreende uma região de Fc de anticorpo.
Em algumas formas de realização, o ligando compreende um polipeptídeo de domínio variável de imunoglobulina simples que antagoniza (inibe) a ligação de EGFR humano a um receptor, em que o dito polipeptídeo de domínio variável de imunoglobulina simples compreende uma seqüência de CDR3 que é a mesma seqüência de CDR3 de um dAb anti-EGFR divulgado neste.
Em outras formas de realização, o ligando compreende um polipeptídeo de domínio variável de imunoglobulina simples que liga o EGFR, em que o polipeptídeo tem uma seqüência de aminoácido que é idêntica à seqüência de aminoácido de um dAb anti-EGFR divulgado neste ou difere da seqüência de aminoácido de um dAb anti-EGFR divulgado neste e não mais do que 25 posições de aminoácido e têm uma seqüência de CDRl que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDRl do dAb anti-EGFR.
Em outras formas de realização, o ligando compreende polipeptídeo de domínio variável de imunoglobulina simples que liga-se ao EGFR, em que o polipeptídeo tem uma seqüência de aminoácido que é idêntica à seqüência de aminoácido de dAb anti-EGFR divulgado neste ou difere da seqüência de aminoácido de dAb anti-EGFR divulgado neste e não mais do que 25 posições de aminoácido e têm uma seqüência de CDR2 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR2 do dAb anti-EGFR.
Em outras formas de realização, o ligando compreende um polipeptídeo de domínio variável simples de imunoglobulina que liga o EGFR, em que o polipeptídeo tem uma seqüência de aminoácido que é idêntica à seqüência de aminoácido de dAb anti-EGFR divulgado neste ou difere da seqüência de aminoácido de dAb anti-EGFR divulgado neste e não mais do que 25 posições de aminoácido e têm uma seqüência de CDR3 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR3 do dAb anti-EGFR.
Em outras formas de realização, o ligando compreende um polipeptídeo de domínio variável simples de imunoglobulina que liga o EGFR, em que o polipeptídeo tem uma seqüência de aminoácido que é idêntica à seqüência de aminoácido de um dAb anti-EGFR divulgado neste ou difere da seqüência de aminoácido de um dAb anti-EGFR divulgado neste e não mais do que 25 posições de aminoácido e têm uma seqüência de CDRl que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDRl do dAb anti-EGFR e tem uma seqüência de CDR2 tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR2 do dAb anti-EGFR.
Em outras formas de realização, o ligando compreende um polipeptídeo de domínio variável simples de imunoglobulina que liga o EGFR, em que o polipeptídeo tem uma seqüência de aminoácido que é idêntica à seqüência de aminoácido de um dAb anti-EGFR divulgado neste ou difere da seqüência de aminoácido de um dAb anti-EGFR divulgado neste e não mais do que 25 posições de aminoácido e têm uma seqüência de CDR2 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR2 do dAb anti-EGFR e tem uma seqüência de CDR3 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR3 do dAb anti-EGFR.
Em outras formas de realização, o ligando compreende um polipeptídeo de domínio variável simples de imunoglobulina que liga o EGFR, em que o polipeptídeo tem uma seqüência de aminoácido que é idêntica à seqüência de aminoácido de um dAb anti-EGFR divulgado neste ou difere da seqüência de aminoácido de um dAb anti-EGFR divulgado neste e não mais do que 25 posições de aminoácido e têm uma seqüência de CDRl que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDRl do dAb anti-EGFR e têm uma seqüência de CDR3 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR3 do dAb anti-EGFR.
Em outras formas de realização, o ligando compreende um polipeptídeo de domínio variável simples de imunoglobulina que liga o EGFR, em que o polipeptídeo tem uma seqüência de aminoácido que é idêntica à seqüência de aminoácido de um dAb anti-EGFR divulgado neste ou difere da seqüência de aminoácido de um dAb anti-EGFR divulgado neste e não mais do que 25 posições de aminoácido e têm uma seqüência de CDRl que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDRl do dAb anti-EGFR e têm uma seqüência de CDR2 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR2 do dAb anti-EGFR e têm uma seqüência de CDR3 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR3 do dAb anti-EGFR.
Em uma outra forma de realização, a invenção é um antagonista de EFGR que tem a seqüência de CDRl que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDRl de um dAb anti-EGFR divulgado neste.
Em uma outra forma de realização, a invenção é um antagonista de EFGR que tem a seqüência de CDR2 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR2 de um dAb anti-EGFR divulgado neste.
Em uma outra forma de realização, a invenção é um antagonista de EFGR tendo uma seqüência de CDR3 5 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR3 de um dAb anti-EGFR divulgado neste.
Em uma outra forma de realização, a invenção é um antagonista de EFGR que tem a seqüência de CDRl que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDRl de um dAb anti-EGFR divulgado neste e a seqüência de CDR2 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR2 do dAb anti-EGFR.
Em uma outra forma de realização, a invenção é um antagonista de EFGR que tem a seqüência de CDR2 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR2 de um dAb anti-EGFR divulgado neste e a seqüência de CDR3 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR3 do dAb anti-EGFR.
Em uma outra forma de realização, a invenção é um antagonista de EFGR que tem uma seqüência de CDRl que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDRl de um dAb anti-EGFR divulgado neste e a seqüência de CDR3 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR3 do dAb anti-EGFR.
Em uma outra forma de realização, a invenção é um antagonista de EFGR que tem uma seqüência de CDRl que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDRl de um dAb anti-EGFR divulgado neste e a seqüência de CDR2 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR2 do dAb anti-EGFR e a seqüência de CDR3 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR3 do dAb anti-EGFR.
Em algumas formas de realização, o ligando compreende um polipeptídeo de domínio variável de imunoglobulina simples que antagoniza (inibe) a ligação de VEGF humano a um receptor, em que o dito polipeptídeo de domínio variável de imunoglobulina simples compreende uma seqüência de CDR3 que é a mesma seqüência de CDR3 de um dAb anti-VEGF divulgado neste.
Em outras formas de realização, o ligando compreende um polipeptídeo de domínio variável de imunoglobulina que liga o VEGF, em que o polipeptídeo tem uma seqüência de aminoácido que é idêntica à seqüência de aminoácido de um dAb anti-VEGF divulgado neste ou difere da seqüência de aminoácido de um dAb anti-VEGF divulgado neste e não mais do que 25 posições de aminoácido e têm uma seqüência de CDRl que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDRl do dAb anti-VEGF.
Em outras formas de realização, o ligando compreende polipeptídeo de domínio variável de imunoglobulina simples que liga-se ao VEGF, em que o polipeptídeo tem uma seqüência de aminoácido que é idêntica à seqüência de aminoácido de dAb anti-VEGF divulgado neste ou difere da seqüência de aminoácido de dAb anti-VEGF divulgado neste e não mais do que 25 posições de aminoácido e têm uma seqüência de CDR2 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR2 do dAb anti-VEGF.
Em outras formas de realização, o ligando compreende uma polipeptídeo de domínio variável simples e imunoglobulina que liga o VEGF, em que o polipeptídeo tem uma seqüência de aminoácido que é idêntica à seqüência de aminoácido de dAb anti-VEGF divulgado neste ou difere da seqüência de aminoácido de dAb anti-VEGF divulgado neste e não mais do que 25 posições de aminoácido e têm uma seqüência de CDR3 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR3 do dAb anti- VEGF.
Em outras formas de realização, o ligando compreende um polipeptídeo de domínio variável simples de imunoglobulina que liga o VEGF, em que o polipeptídeo tem uma seqüência de aminoácido que é idêntica à seqüência de aminoácido de um dAb anti-VEGF divulgado neste ou difere da seqüência de aminoácido de um dAb anti-VEGF divulgado neste e não mais do que 25 posições de aminoácido e têm uma seqüência de CDRl que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDRl do dAb anti-VEGF e tem uma seqüência de CDR2 tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR2 do dAb anti-VEGF.
Em outras formas de realização, o ligando compreende um polipeptídeo de domínio variável simples de imunoglobulina que liga o VEGF, em que o polipeptídeo tem uma seqüência de aminoácido que é idêntica à seqüência de aminoácido de um dAb anti-VEGF divulgado neste ou difere da seqüência de aminoácido de um dAb anti-VEGF divulgado neste e não mais do que 25 posições de aminoácido e têm uma seqüência de CDR2 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR2 do dAb anti-VEGF e tem uma seqüência de CDR3 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR3 do dAb anti-VEGF dAb.
Em outras formas de realização, o ligando compreende um polipeptídeo de domínio variável simples de imunoglobulina que liga o VEGF, em que o polipeptídeo tem uma seqüência de aminoácido que é idêntica à seqüência de aminoácido de um dAb anti-VEGF divulgado neste ou difere da seqüência de aminoácido de um dAb anti-VEGF divulgado neste e não mais do que 25 posições de aminoácido e têm uma seqüência de CDRl que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDRl do dAb anti-VEGF e tem uma seqüência de CDR3 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR3 do dAb anti-VEGF.
Em outras formas de realização, o ligando compreende um polipeptídeo de domínio variável simples de imunoglobulina que liga o VEGF, em que o polipeptídeo tem uma seqüência de aminoácido que é idêntica à seqüência de aminoácido de um dAb anti-VEGF divulgado neste ou difere da seqüência de aminoácido de um dAb anti-VEGF divulgado neste e não mais do que 25 posições de aminoácido e têm uma seqüência de CDRl que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDRl do dAb anti-VEGF e têm uma seqüência de CDR2 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR2 do dAb anti-VEGF e têm uma seqüência de CDR3 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR3 do dAb anti-VEGF.
Em uma outra forma de realização, a invenção é um * 10 antagonista de VEGF que tem a seqüência de CDRl que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDRl de um dAb anti-VEGF divulgado neste.
Em uma outra forma de realização, a invenção é um antagonista de VEGF que tem uma seqüência de CDR2 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR2 de um dAb anti-VEGF divulgado neste.
Em uma outra forma de realização, a invenção é um antagonista de VEGF que tem a seqüência de CDR3 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR3 de um dAb anti-VEGF divulgado neste.
Em uma outra forma de realização, a invenção é um antagonista de VEGF tendo uma seqüência de CDRl que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDRl de um dAb anti-VEGF divulgado neste e a seqüência de CDR2 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR2 do dAb anti- VEGF.
Em uma outra forma de realização, a invenção é um antagonista de VEGF tendo uma seqüência de CDR2 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR2 de um dAb anti-VEGF divulgado neste e a seqüência de CDR3 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR3 do dAb anti-VEGF.
Em uma outra forma de realização, a invenção é um antagonista de VEGF que tem a seqüência de CDRl que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDRl de um dAb anti-VEGF divulgado neste e a seqüência de CDR3 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR3 do dAb anti-VEGF.
Em uma outra forma de realização, a invenção é um antagonista de VEGF que tem a seqüência de CDRl que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDRl de um dAb anti-VEGF divulgado neste e a seqüência de CDR2 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR2 do dAb anti-VEGF e a seqüência de CDR3 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR3 do dAb anti-VEGF.
Nas formas de realização adicionais, qualquer um dos ligandos descritos neste ainda compreendem uma toxina, tal como uma citotoxina, gerador de radical livre, antimetabólito, proteína, polipeptídeo, peptídeo, agente fotoativo, composto anti-sentido, quimioterapêutico, radionuclídeo ou intracorpo. Em formas de realização particulares, a toxina é uma toxina ativa de superfície (por exemplo, um gerador de radical livre, um radionuclídeo).
Em outras formas de realização, o ligando ainda compreende uma porção extensora de vida média, tal como uma porção de polialquileno glicol, albumina de soro ou um fragmento deste, receptor de transferrina ou uma porção de ligação de transferrina deste ou uma porção que compreende um local de ligação para um polipeptídeo que intensifica a vida média in vivo. Em algumas formas de realização, a porção extensora de vida média é uma porção que compreende um local de ligação para a polipeptídeo que intensifica a vida média in vivo selecionado do grupo que consiste de um anticorpo, um domínio de SpA, um domínio de classe A do receptou De LDL, um domínio de EGF e um avímero.
Em outras formas de realização, a porção extensora de vida média é um anticorpo ou fragmento de anticorpo (por exemplo, um domínio variável simples de imunoglobulina) que compreende um local de ligação para albumina de soro ou receptou De Fc neonatal.
Em formas de realização particulares, a porção extensora de vida média é um domínio variável simples de imunoglobulina que compreende um local de ligação para albumina de soro que competem com a ligação ao albumina de soro humano com um dAb selecionado do grupo que * 10 consiste de DOM7m-16 (SEQ ID N0: 473), DOM7m-12 (SEQ ID N°: 474), DOM7m-26 (SEQ ID N°: 475), DOM7r-l (SEQ ID N°: 476), DOM7r-3 (SEQ ID N°: 477), DOM7r-4 (SEQ ID N°: 478), DOM7r-5 (SEQ ID N°: 479), DOM7r-7 (SEQ ID N0: 480), DOM7r-8 (SEQ ID N°: 481), DOM7h-2 (SEQ ID N°: 482), DOM7h-3 (SEQ ID N°: 483), DOM7h-4 (SEQ ID N0: 484), DOM7h-6 (SEQ ID N0: 485), DOM7h-l (SEQ ID N0: 486), DOM7h-7 (SEQ ID N0: 487), DOM7h-22 (SEQ ID N°: 489), DOM7h-23 (SEQ ID N°: 490), DOM7h-24 (SEQ ID N0: 491), DOM7h-25 (SEQ ID N°: 492), DOM7h- 26 (SEQ ID N°: 493), DOM7h-21 (SEQ ID N°: 494), DOM7h-27 (SEQ ID N°: 495), DOM7h-8 (SEQ ID N°: 496), DOM7r-13 (SEQ ID N°: 497), DOM7r-14 (SEQ ID N°: 498), DOM7r-15 (SEQ ID N°: 499), DOM7r-16 (SEQ ID N°: 500), DOM7r-17 (SEQ ID N°: 501), DOM7r-18 (SEQ ID N°: 502), DOM7r-19 (SEQ ID N0: 503), DC)M7r-20 (SEQ ID N°: 504), DOM7r- 21 (SEQ ID N°: 505), DOM7r-22 (SEQ ID N°: 506), DOM7r-23 (SEQ ID N0: 507), DOM7r-24 (SEQ ID N°: 508), DOM7r-25 (SEQ ID N°: 509), DOM7r-26 (SEQ ID N°: 510), DOM7r-27 (SEQ ID N°: 511), DOM7r-28 (SEQ ID N°: 512), DOM7r-29 (SEQ ID N°: 513), DOM7r-30 (SEQ ID N°: 514), DOM7r-31 (SEQ ID N0: 515), DOM7r-32 (SEQ ID N°: 516) e DOM7r- 33 (SEQ ID N°: 517).
Por exemplo, o domínio variável simples de imunoglobulina A
que compreende um local de ligação para albumina de soro pode compreender uma seqüência de aminoácido que tem pelo menos 85 % de identidade de seqüência de aminoácido com a seqüência de aminoácido de um dAb selecionado do grupo que consiste de DOM7m-16 (SEQ ID N°: 473), DOM7m-12 (SEQ ID N°: 474), DOM7m-26 (SEQ ID N°: 475), DOM7r-l (SEQ ID N°: 476), DOM7r-3 (SEQ ID N°: 477), DOM7r-4 (SEQ ID N°: 478), DOM7r-5 (SEQ ID N°: 479), DOM7r-7 (SEQ ID N°: 480), DOM7r-8 (SEQ ID N°: 481), DOM7h-2 (SEQ ID N°: 482), DOM7h-3 (SEQ ID N°: 483), DOM7h-4 (SEQ ID N°: 484), DOM7h-6 (SEQ ID N°: 485), DOM7h-l (SEQ ID N°: 486), DOM7h-7 (SEQ ID N°: 487), DOM7h-22 (SEQ ID N°: 489), DOM7h-23 (SEQ ID N0: 490), DOM7h-24 (SEQ ID N°: 491), DOM7h- (SEQ ID N°: 492), DOM7h-26 (SEQ ID N°: 493), DOM7h-21 (SEQ ID N°: 494), DOM7h-27 (SEQ ID N°: 495), DOM7h-8 (SEQ ID N°: 496), DOM7r-13 (SEQ ID N°: 497), DOM7r-14 (SEQ ID N°: 498), DOM7r-15 (SEQ ID N0: 499), DOM7r-16 (SEQ ID N°: 500), DOM7r-17 (SEQ ID N°: 501), DOM7r-18 (SEQ ID N0: 502), DOM7r-19 (SEQ ID N°: 503), DOM7r- (SEQ ID N°: 504), DOM7r-21 (SEQ ID N°: 505), DOM7r-22 (SEQ ID N°: 506), DOM7r-23 (SEQ ID N°: 507), DOM7r-24 (SEQ ID N°: 508), DOM7r-25 (SEQ ID N°: 509), DOM7r-26 (SEQ ID N°: 510), DOM7r-27 (SEQ ID N°: 511), DOM7r-28 (SEQ ID N°: 512), DOM7r-29 (SEQ ID N°: 513), DOM7r-30 (SEQ ID N0: 514), DOM7r-31 (SEQ ID N°: 515), DOM7r- 32 (SEQ ID N°: 516) e DOM7r-33 (SEQ ID N°: 517).
A invenção também diz respeito a um ácido nucleico isolado ou recombinante que codifica um ligando descrito neste e a um vetor (por exemplo, vetor recombinante) que compreende o ácido nucleico recombinante. A invenção também diz respeito a uma célula hospedeira (por exemplo, célula hospedeira recombinante, célula hospedeira isolada) que compreende um ácido recombinante isolado ou vetor da invenção. A invenção também diz respeito a um método para produzir um ligando, que compreende manter uma célula hospedeira da invenção sob as condições adequadas para a expressão do dito ácido nucleico ou vetor, por meio do qual um ligando é produzido. Em algumas formas de realização, o método ainda compreende isolar o ligando.
A invenção também diz respeito a um ligando da invenção para o uso na terapia ou diagnóstico e ao uso de um ligando da invenção para a fabricação de um medicamento para o tratamento, prevenção ou supressão de uma doença descrita neste (por exemplo, câncer).
A invenção também diz respeito a uma composição farmacêutica para o tratamento, prevenção ou supressão de uma doença descrita neste (por exemplo, câncer) que compreende como um ingrediente ativo um ligando da invenção.
Em algumas formas de realização, a invenção diz respeito a um ligando para o uso no tratamento de câncer ou células cancerígenas que super-expressam EGFR e/ou VEGF.
Em outras formas de realização, a invenção diz respeito ao uso de um ligando para a fabricação de um medicamento para matar as células (por exemplo, matar seletivamente as células cancerígenas sobre as células normais).
Em outras formas de realização, a invenção diz respeito ao uso de um ligando para a fabricação de um medicamento para o tratamento de células cancerígenas que super-expressam EGFR e/ou VEGF.
A invenção também diz respeito a métodos terapêuticos que compreendem a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um ligando da invenção a um paciente em necessidade deste. Em uma forma de realização, a invenção diz respeito a um método para o tratamento de câncer que compreende administrar a um paciente em necessidade deste, uma quantidade terapeuticamente eficaz de ligando da invenção. Em algumas formas de realização, o método ainda compreende administrar ao paciente um agente quimioterapêutico (por exemplo, em uma dose baixa).
Em outras formas de realização, o método para o tratamento de câncer compreende administrar a um paciente em necessidade deste, uma quantidade terapeuticamente eficaz de ligando da invenção e uma composição anti-neopástica, em que a dita composição anti-neoplástica compreende pelo menos um agente quimioterapêutico. O agente quimioterapêutico pode ser selecionado do grupo que consiste de agentes alquilantes, antimetabólitos, análogos de ácido fólico, análogos de pirimidina, análogos de purina e inibidores relacionados, vinca alcalóides, epipodofilotoxinas, antibióticos, L- Asparaginase, inibidor de topoisomerase, interferons, complexos coordenadores de platina, uréia substituída por antracenodiona, derivados de metil hidrazina, supressor adrenocortical, adrenocorticoesteróides, progestinas, estrogênios, antiestrogênio, androgênios, antiandrogênio e análogo de hormônio de liberação de gonadotropina. Em algumas formas de realização, o agente quimioterapêutico é selecionado do grupo que consiste de cisplatina, dicarbazina, dactinomicina, mecloretamina, estreptozocina, ciclofosfamida, capecitabina, carmustina, lomustina, doxorubicina, daunorubicina, procarbazina, mitomicina, citarabina, etoposida, metotrexato, 5-fluorouracila, vinbiastina, vincristina, bleomicina, paclitaxel, docetaxel, doxetaxe, aldesleucina, asparaginase, busulfan, carboplatina, cladribina, dacarbazina, floxuridina, fludarabina, hidroxiuréia, ifosfamida, interferon alfa, irinotecan, leuprolida, leucovorina, megestrol, melfalan, mercaptopurina, oxaliplatina, plicamicina, mitotano, pegaspargase, pentostatina, pipobroman, plicamicina, estreptozocina, tamoxifeno, teniposida, testolactona, tioguanina, tiotepa, uracil mostarda, vinorelbina, clorambucila, taxol, um antagonista de receptor de fator de desenvolvimento adicional e uma combinação de acordo com qualquer um dos precedentes.
Em algumas formas de realização, o método é um método de tratar um câncer selecionado do grupo que consiste de câncer de bexiga, câncer ovariano, câncer colorretal (carcinoma colorretal), câncer de mama, câncer de pulmão (carcinoma de pulmão de célula não pequena), câncer gástrico, câncer pancreático, câncer de próstata, câncer de cabeça e pescoço, câncer renal, câncer de vesícula biliar.
A invenção também diz respeito a um método de administrar a um tratamento anti-VEGF e tratamento anti-EGFR do paciente, o método compreendendo a administração simultânea de um tratamento anti-VEGF e um tratamento anti-EGFR pela administração ao dito paciente de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um ligando que tem especificidade de ligação para VEGF e EGFR.
A invenção também diz respeito a uma composição (por exemplo, composição farmacêutica) que compreende um ligando da invenção e um carregador fisiológica ou farmaceuticamente aceitável. Em algumas formas de realização, a composição compreende um veículo para a administração intravenosa, intramuscular, intraperitoneal, intraarterial, intratecal, administração subcutânea intraarticular, pulmonar, intranasal, vaginal ou retal.
A invenção também diz respeito a um dispositivo de liberação de medicamento que compreende a composição (por exemplo, composição farmacêutica) da invenção ou um ligando da invenção. Em uma forma de realização, o dispositivo de liberação de medicamento é para a administração simultânea a um paciente tratamento anti-VEGF e tratamento anti-EGFR e o dispositivo compreendendo um ligando que tem especificidade de ligação para VEGF e EGFR. Em algumas formas de realização, o dispositivo de medicamento compreende uma pluralidade de doses terapeuticamente eficazes de ligando.
Em outras formas de realização, o dispositivo de liberação de medicamento é selecionado do grupo que consiste de um dispositivo de liberação parenteral, dispositivo de liberação intravenoso, dispositivo de liberação intramuscular, dispositivo de liberação intraperitoneal, dispositivo de liberação transdérmico, dispositivo de liberação pulmonar, disposição de liberação intraarterial, dispositivo de liberação intratecal, dispositivo de liberação intraarticular, dispositivo de liberação subcutânea, dispositivo de liberação intranasal, dispositivo de liberação vaginal, dispositivo de liberação retal, uma seringa, a dispositivo de liberação transdérmico, uma cápsula, um tablete e um nebulizador, um inalador, um atomizador, um aerossolizador, um vaporizador, um inalador de pó seco, um inalador de dose medida, um pulverizador de dose medida, um vaporizador de dose medida, um atomizador de dose medida, um cateter.
A invenção também diz respeito a um ligando que tem especificidade de ligação para fator de desenvolvimento endotelial vascular (VEGF) e fator do receptor de desenvolvimento epidérmico (EGFR), que compreende pelo menos uma porção de proteína que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF, pelo menos uma porção de proteína que tem um local de ligação com especificidade de ligação para EGFRe uma região Fc de um anticorpo. Tais ligandos podem consistir de um polipeptídeo simples. Em outras formas de realização, dois ligandos que contém Regiões Fc são ligados juntos, por exemplo através de uma ligação de bissulfeto (por exemplo, na região de junção), para formar um dímero.
Em algumas formas de realização, o ligando que tem especificidade de ligação para VEGF pode compreender uma porção de proteína que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF e uma região Fc de um anticorpo. Em algumas formas de realização, a porção de proteína tendo especificidade de ligação para VEGF é fundido a uma região Fc de um anticorpo.
Em outras formas de realização, o ligando que tem especificidade de ligação para EGFR pode compreender uma porção de proteína que tem um local de ligação com especificidade de ligação para EGFR e uma região Fc de um anticorpo. Em algumas formas de realização, a porção de proteína tendo especificidade de ligação para EGFR é fundido a uma região Fc de um anticorpo. Por exemplo, o ligando pode compreender duas porções de proteína que têm locais de ligação com especificidade de ligação para EGFR e uma região Fc de um anticorpo.
Adicionalmente ou em outras formas de realização, o ligando que tem especificidade de ligação para VEGF e EGFR, compreende um domínio variável simples com especificidade de ligação para VEGF, um domínio variável simples com especificidade de ligação para EGFR e, opcionalmente, um ligador. Em tais formas de realização, o domínio variável simples com especificidade de ligação para EGFR pode ser ligado por intermédio de um ligador ao domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF. Os ligadores adequados incluem SEQ ID N°: 706, SEQ ID N0: 707, SEQ ID N°: 708, SEQ ID N°: 709, SEQ ID N°: 710, SEQ ID N°: 711, SEQ ID N°: 712, SEQ ID N°: 713, SEQ ID N°: 714, SEQ ID N°: 723 e SEQ ID N°: 724. O ligando também pode compreender uma região Fc de um anticorpo se desejado. Quando o ligando ainda compreende uma região Fc de um anticorpo, um ligador pode ligar um domínio de imunoglobulina variável à região de Fe. Em outras formas de realização, dois ligandos que contém Regiões Fc são ligados juntos, por exemplo através de uma ligação de bissulfeto (por exemplo, na região de junção), para formar um dímero.
Adicionalmente ou em outras formas de realização, o ligando que tem especificidade de ligação para VEGF e EGFR, compreende um domínio variável simples com especificidade de ligação para VEGF diretamente fundido a um domínio variável simples com especificidade de ligação para EGFR.
Nas formas de realização onde o ligando compreende um domínio variável simples com especificidade de ligação para VEGF e um domínio variável simples com especificidade de ligação para EGFR, e opcionalmente um ou mais ligadores, o domínio variável simples pode ser, independentemente um domínio variável de cadeia leve ou um domínio variável de cadeia pesada. Por exemplo, o ligando pode compreender a) um domínio variável simples com especificidade de ligação para VEGF que é uma região variável de cadeia pesada e o domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR que é uma região variável de cadeia leve; b) um domínio variável simples com especificidade de ligação para VEGF que é um domínio variável de cadeia leve e um domínio variável simples com especificidade de ligação para EGFR que é um domínio variável de cadeia pesada; c) um domínio variável simples com especificidade de ligação para VEGF que é um domínio variável de cadeia pesada e um domínio variável simples com especificidade de ligação para EGFR que é um domínio variável de cadeia pesada ou d) um domínio variável simples com especificidade de ligação para VEGF que é um domínio variável de cadeia leve e um domínio variável simples com especificidade de ligação para EGFR que é um domínio variável de cadeia leve. Em formas de realização particulares, a região variável de cadeia pesada é Vh ou VHh- Em outras formas de realização, o Vh é um Vh humano. Em outras formas de realização, um nível de região variável de cadeia leve é um Vk-
Em um outro aspecto da invenção, um ligando que tem especificidade de ligação por VEGF e EGFR compreende pelo menos um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF e pelo menos um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR, em que o domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR é ligado por intermédio de uma ligação de bissulfeto ao domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF.
Alternativamente, um ligando que tem especificidade de ligação para VEGF e EGFR pode compreender pelo menos um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF e pelo menos um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFRs em que o domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR está diretamente fundido ao domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF (isto é, um polipeptídeo simples que compreende dois dAbs).
Em outras formas de realização particulares, o ligando é uma fusão de um dAb a um dAb anti-albumina de soro (um DOM7 dAb). Por exemplo, o ligando pode ter a estrutura, do terminal amino para o terminal carbóxi, DOM15-10-DOM16-39- dAb anti-albumina de soro, DOM16-39- DOMl 5-10- dAb anti-albumina de soro, DOM15-26-501-DOM16-39- dAb anti-albumina de soro ou DOM16-39-DC>M15-26-501-dAb anti-albumina de soro. Nas formas de realização adicionais, o ligando que tem um local de ligação com especificidade de ligação para EGFR pode competir para a ligação ao EGFR com cetuximab e/ou panitumumab e é fundido a um dAb anti-albumina de soro. Adicionalmente ou em outras formas de realização, o ligando pode compreender dois ou mais dAbs (por exemplo, dAbs anti- EGFR) fundido a um dAb anti-albumina de soro. BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS
FIG. IA-IE ilustram vinte e sete seqüências de nucleotídeos que codificam anticorpos de domínio humano (Homo sapiens) (dAbs) que especialmente ligam ao VEGF humano. As seqüências de nucleotídeos apresentadas são SEQID N0: 1-27, 535 e 536.
FIG. 2A-2C é um alinhamento de doze seqüências de nucleotídeos que codificam dAbs humano que ligam ao VEGF humano. As seqüências de nucleotídeos apresentadas são SEQ ID N°: 18 e SEQ ID N0: 28-38. Φ
FIG. 3A-3D é um alinhamento de doze seqüências de nucleotídeos que codificam dAbs humano que ligam ao VEGF humano. As seqüências de nucleotídeos apresentadas são SEQ 15 ID N°: 20 e SEQ ID N°: 39-49.
FIG. 4A-4J é um alinhamento de cinqüenta e três seqüências
de nucleotídeos que codificam dAbs humano que ligam ao VEGF humano. As seqüências de nucleotídeos apresentadas são SEQ ID N°: 24, 50-99, 537 e 538.
FIG. 5A-5C ilustra a seqüência de aminoácidos de dAbs codificado por diversas seqüências de ácido nucleico mostrada na FIG. IA- 1E. A seqüência de aminoácidos apresentadas são SEQ ID N°: 100-126.
FIG. 6 é um alinhamento de uma seqüência de aminoácidos de dAbs codificado pela seqüência de ácido nucleico mostrada na FIG. 2A-2C. A seqüência de aminoácidos apresentadas são SEQ ID N°: 117 e SEQ ID N°: 127-137.
FIG. 7A-7B é um alinhamento de uma seqüência de aminoácidos de dAbs codificado pela seqüência de ácido nucleico mostrada na FIG. 3A-2D. O símbolo - foi inserido em uma seqüência de TARl 5-8-500 para facilitar o alinhamento. A seqüência de aminoácidos apresentadas são SEQ ID N°: 119 e SEQID N0: 138-148.
FIG. 8A-8D é um alinhamento de uma seqüência de aminoácidos de dAbs codificado pela seqüência de ácido nucleico mostrada na FIG. 4A-4J. A seqüência de aminoácidos apresentadas são SEQ ID N°: 123,149-198, 539e540. FIG. 9A-90 ilustra diversas seqüências de nucleotídeos que
codificam anticorpos de domínio humano (Homo sapiens) (dAbs) que especialmente ligam ao EGFR humano. As seqüências de nucleotídeos apresentadas são SEQID N°: 199-324.
FIG. 10A-101 ilustra a seqüência de aminoácidos de dAbs 66£L
codificado pela seqüência de ácido nucleico mostrada na FIG. 9A-90. A seqüência de aminoácidos apresentadas são SEQ ID N°: 325-450.
FIG. 1IA-IIB ilustra a seqüência de aminoácidos de diversos VhhS de camelídeo que ligam ao EGFR que são divulgados em WO 2005/044858. MB 1 (SEQ ID N°: 451), NB 2 (SEQ ID N°: 452), NB 3 (SEQ ID N°: 453), NB 4 (SEQ ID N0: 454), NB 5 (SEQ ID N°: 455), NB 6 (SEQ ID N0: 456), NB 7 (SEQ ID N0: 45 7), NB 8 (SEQ ID N°: 458), NB 9 (SEQ ID N°: 459), NB 10 (SEQ ID N°: 460), NB 11 (SEQ ID N°: 461), NB 12 (SEQ ID N0: 462), NB 13 (SEQ ID N°: 463), NB 14 (SEQ ID N°: 464), NB 15 (SEQ ID N°: 465), NB 16 (SEQ ID N°: 466), NB 17 (SEQ IDN°: 467), NB 18 (SEQ ID N°: 468), NB 19 (SEQ ID N°: 469), NB (SEQ ID 15 N0: 470), NB 21 (SEQ ID N°: 471), NB 22 (SEQ ID N°: 472).
FIG. 12A é um alinhamento de uma seqüência de aminoácidos de três Vks que ligam à albumina do soro de camundongo (MSA). As seqüências de aminoácidos alinhadas são a partir de MSAl 6 designado ao Vks , que também é referido como DOM7m-16 (SEQ ID N°: 473), MSA 12, que também é referido como DOM7m-12 (SEQ ID N°: 474), e MSA 26, que também é referido como DOM7m-26 (SEQ ID N0: 475).
FIG. 12B é um alinhamento de uma seqüência de aminoácidos de seis Vks que ligam à albumina de soro de rato (RSA). As seqüências de aminoácidos alinhadas são a partir de DOM7r-l designado ao Vks (SEQ ID N0: 476), DOM7r-3 (SEQ ID N°: 477), DOM7r-4 (SEQ ID N°: 478), DOM7r-5 (SEQ ID N°: 479), DOM7r-7 (SEQ ID N°: 480), e DOM7r-8 (SEQ ID N°: 481).
FIG. 12C é um alinhamento de uma seqüência de aminoácidos
de seis Vks que ligam ao albumina de soro humano (HSA). As seqüências de aminoácidos alinhadas são a partir de DOM7h-2 designado por Vks (SEQ ID N0: 482), DOM7h-3 (SEQ ID N°: 483), DOM7h-4 (SEQ ID N°: 484), DOM7h-6 (SEQ ID N°: 485), DOM7h-l (SEQ ID N°: 486), e DOM7h-7 (SEQID N°: 487).
FIG. 12D é um alinhamento de uma seqüência de aminoácidos de sete VHs que ligam ao albumina de soro humano e uma seqüência de consenso (SEQ ID N0: 488). As seqüências alinhadas são a partir de DOM7h- 22 designado ao VHs (SEQ ID N°: 489), DOM7h-23 (SEQ ID N°: 490), DOM7h-24 (SEQ ID N°: 491), DOM7h-25 (SEQ ID N°: 492), DOM7h-26 (SEQ ID N°: 493), DOM7h-21 (SEQ ID N°: 494) e DOM7h-27 (SEQ ID N°: 495).
FIG. 12E é um alinhamento de uma seqüência de aminoácidos de três Vks que ligam ao albumina de soro humano e albumina de soro de rato. As seqüências de aminoácidos alinhadas são a partir de DOM7h-8 designado ao Vks (SEQ ID N°: 496), DOM7r-13 (SEQ ID N°: 497) e DOM7r-14 (SEQ ID N0: 498).
FIG. 13 é uma ilustração de uma seqüência de aminoácidos de Vks que ligam à albumina de soro de rato (RSA). As seqüências ilustradas são a partir de DOM7r-15 designado ao Vks (SEQ ID N°: 499), DOM7r-16 (SEQ ID N°: 500), DOM7r-17 (SEQ ID N°: 501), DOM7r-18 (SEQ ID N0: 502), DOM7r-19 (SEQ IDN0: 503).
FIG. 14A-14B é uma ilustração de uma seqüência de aminoácidos de VHs que ligam à albumina de soro de rato (RSA). As seqüências ilustradas são a partir de DOM7r-20 designado ao VHs (SEQ ID N°: 504), DOM7r-21 (SEQ ID N°: 505), DOM7r-22 (SEQ ID N°: 506), DOM7r-23 (SEQ ID N0: 507), DOM7r-24 (SEQ ID N°: 508), DOM7r-25 (SEQ ID N°: 509), DOM7r-26 (SEQ ID N°: 510), DOM7r-27 (SEQ ID N°: 511), DOM7r-28 (SEQ ID N0: 512), DOM7r-29 (SEQ ID N0: 513), DOM7r- (SEQ ID N°: 514), DOM7r-31 (SEQ ID N0: 515), DOM7r-32 (SEQ ID N°: 516), e DOM7r-33 (SEQ ID N°: 517).
FIG. 15 ilustra a seqüência de aminoácidos de diversos VHhS de Camelídeo que ligam à albumina do soro de camundongo que são divulgados em WO 2004/041862. A seqüência A (SEQ ID N°: 518), Seqüência B (SEQ ID N°: 519), Seqüência C (SEQ ID N°: 520), Seqüência D (SEQ ID N°: 521), Seqüência E (SEQ ID N°: 522), Seqüência F (SEQ ID N°: 523), Seqüência G (SEQ ID N°: 524), Seqüência H (SEQ ID N°: 525), Seqüência I (SEQ ID N°: 526), Seqüência J (SEQ ID N°: 527), Seqüência K (SEQ ID N0: 528), Seqüência L (SEQ ID N°: 529), Seqüência M (SEQ ID N0: 530), Seqüência N (SEQ ID N0: 531), Seqüência O (SEQ ID N0: 532), Seqüência P (SEQ ID N0: 533), Seqüência Q (SEQ ID N°: 534).
FIG. 16 é uma mapa de um vetor usado para preparar formatos semelhante ao IgG.
FIG. 17A-17F ilustra a seqüência de aminoácidos de dAbs humano que ligam ao EGFR humano. A seqüência de aminoácidos apresentadas são SEQ ID N0: 541-622, 725 e 726. As seqüências são
contínuas sem nenhuma fenda, os símbolos — e--foram inseridos para
mostrar o local de CDRs. CDRl é flanqueado por CDR2 é flanqueado por
e CDR3 é flanqueado por-
FIG. 18A-18L ilustra seqüências de nucleotídeos que codificam o dAbs mostrado na FIG. 17A-17F. As seqüências de nucleotídeos apresentadas são SEQ ID N°: 623-703, 727 e 728.
FIG. 19 ilustra a seqüência de aminoácido (SEQ ID N°: 704) de um dAb humano que liga o VEGF, e uma seqüência de nucleotídeo (SEQ ID N°: 705) que codifica o dAb. As seqüências são contínuas sem nenhuma
fenda, os símbolos — e---foram inseridas para mostrar o local de CDRs.
CDRl é flanqueado por CDR2 é flanqueado por —, e CDR3 é flanqueado por —.
DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO
Dentro desta especificação da forma de realização foi descrita de uma maneira que capacita uma especificação clara e resumida a ser escrita, mas é pretendido e será apreciado que as formas de realização pode ser variadamente combinada ou separada sem divergir da invenção.
Como usado neste, o termo "ligando" refere-se a um composto que compreende pelo menos um peptídeo, polipeptídeo ou porção de proteína que tem um local de ligação com especificidade de ligação para um composto alvo endógeno desejado. Os ligandos de acordo com a invenção preferivelmente compreende domínios variáveis de imunoglobulina que tem especificidade de ligação diferente, e não contém pares de domínios variáveis que tem a mesma especificidade. Preferivelmente cada domínio que tem um local de ligação que tem especificidade de ligação para um alvo de superfície celular é um domínio variável simples de imunoglobulina (por exemplo, domínio variável de cadeia pesada simples de imunoglobulina (por exemplo, VH, VHh) domínio variável de cadeia leve simples de imunoglobulina (por exemplo, Vl)) que tem especificidade de ligação para um alvo de superfície celular desejado (por exemplo, uma proteína de membrana, tal como uma proteína de receptor). Cada domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação que tem especificidade de ligação para um alvo de superfície celular também pode compreender uma ou mais regiões de determinam complementaridade (CDRs) de um anticorpo ou fragmento de anticorpo (por exemplo, um domínio variável simples de imunoglobulina) que tem especificidade de ligação para um alvo de superfície celular desejado em um formato adequado, tal que o domínio de ligação tem especificidade de ligação para o alvo de superfície celular. Por exemplo, o CDRs pode ser enxertado em uma estrutura ou esqueleto de uma proteína adequada, tal como um aficorpo, uma estrutura de SpA, um domínio de classe A do receptou De LDL, ou um domínio de EGF. Além disso, o ligando pode ser bivalente (heterobivalente) ou multivalente (heteromultivalente) como descrito neste. O primeiro e segundo domínio precisam de domínios que dividam a mesma especificidade. Deste modo, os "ligandos" incluem polipeptídeos que compreendem dois dAbs em que cada dAb liga-se a um alvo de superfície celular diferente. Os ligandos também incluem polipeptídeos que compreendem pelo menos dois dAbs que ligam ao alvo de superfícies celulares diferentes (ou o CDRs de um dAbs) em um formato adequado, tal como um formato de anticorpo (por exemplo, formatos semelhante ao IgG, scFv, Fab, Fab', F(abf)2) ou uma estrutura ou esqueleto de proteína adequada, tal como um aficorpo, uma estrutura de SpA, um domínio de classe A do receptou De LDL, um domínio de EGF, os ligandos avímeros ou multiespecíficos como descrito neste. O domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação que tem especificidade de ligação para um alvo de superfície celular (isto é, primeiro ou segundo alvo de superfície celular) também pode ser um domínio de proteína que compreende um local de ligação para um alvo desejado, por exemplo, um domínio de proteína é selecionado a partir de um aficorpo, um domínio SpA, um domínio de classe A do receptou De LDLs um avímero (ver, por exemplo, Publicação de Pedido de Patente U.S. N°. 2005/0053973, 2005/0089932, 2005/0164301). Se desejado, um "ligando" ainda pode compreender uma ou mais porções adicionais, que pode ser cada uma independentemente um peptídeo, polipeptídeo ou porção de proteína ou uma porção não peptídica (por exemplo, um polialquileno glicol, um lipídio, um carboidrato). Por exemplo, o ainda pode compreender uma porção extensora de vida média como descrito neste (por exemplo, uma porção de polialquileno glicol, uma porção que compreende albumina, um fragmento de albumina ou variante de albumina, uma porção que compreende transferrina, um fragmento de transferrina ou variante de transferrina, uma porção que liga-se a albumina, uma porção que liga-se ao receptor Fc neonatal).
Como usado neste, a frase "alvo" refere-se a uma molécula biológica (por exemplo, peptídeo, polipeptídeo, proteína, lipídio, carboidrato) ao qual um domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação pode ligar- se. O alvo pode ser, por exemplo, um alvo intracelular (por exemplo, um alvo de proteína intracelular) ou um alvo de superfície celular (por exemplo, uma proteína de membrana, uma proteína de receptor). Preferivelmente, o alvo é VEGF ou EGFR.
A frase "domínio variável simples de imunoglobulina" refere- se a uma região variável de anticorpo (VH, Vrh, Vl) que especificamente liga- se a um alvo, antígeno ou Epítopo independente de outros domínios V; entretanto, como o termo é usado neste, um domínio variável simples de imunoglobulina pode estar presente em um formato (por exemplo, heteromultímero) com outras regiões variáveis ou domínios variáveis onde as outras regiões ou domínios não são requeridos pela ligação de antígeno pelo domínio variável de imunoglobulina simples (isto é, onde o domínio variável simples de imunoglobulina liga-se ao antígeno independentemente dos domínios variáveis adicionais). Cada "domínio variável simples de imunoglobulina" não abrange apenas um polipeptídeo de domínio variável simples de anticorpo isolado, mas também polipeptídeos maiores que compreendem um ou mais monômeros de uma seqüência de polipeptídeo de domínio variável simples de anticorpo. Um "anticorpo de domínio" ou "dAb" é o mesmo em um polipeptídeo "domínio variável simples de imunoglobulina" como o termo é usado neste. Um polipeptídeo de domínio variável simples de imunoglobulina, como usado neste refere-se a um polipeptídeo de domínio variável simples de imunoglobulina de mamífero, preferivelmente humano, mas também incluem roedor (por exemplo, como divulgado em WO 00/29004, os conteúdos são incorporados neste por referência em sua totalidade) ou VHh dAbs de camelídeo. Como usado neste, os dAbs de camelídeo são polipeptídeos de domínio variável simples de imunoglobulina que são derivados a partir de espécies que incluem camelo, lhama, alpaca, dromedário, e guanaco, e compreendem anticorpos de cadeia pesados naturalmente destituído de cadeia leve (Vhh)- O dAbs similar, pode ser obtido por anticorpos de cadeia simples a partir de outras espécies, tal como tubarão lixa. Os ligandos preferidos compreendem pelo menos dois polipeptídeo de domínios variáveis simples de imunoglobulina diferentes ou pelo menos dois dAbs diferentes.
Um domínio variável simples de imunoglobulina "humano" (por exemplo, dAb, VH, VL, VK, νλ) pode ser derivado a partir de um anticorpo de origem humana ou a partir de uma biblioteca preparada usando genes de região variável de anticorpo humano. Por exemplo, como descrito neste, domínios variáveis simples de imunoglobulina humanos tem uma ou mais regiões de estrutura que são codificados por um segmento de gene de anticorpo de linha de germe humano, ou que tem até 5 diferenças de aminoácidos relativos a uma seqüência de aminoácido codificado por um segmento de gene de áriticorpo de linha de germe humano. Preferivelmente, uma seqüência de aminoácidos de FWl, FW2, FW3 e FW4 são, cada um, codificado por um segmento de gene de anticorpo de linha de germe humano, ou coletivamente, contém até 10 diferenças de aminoácidos relativo à seqüência de aminoácidos que correspondem a regiões de estrutura codificadas pelo segmento de gene de anticorpo de linha de germe humano.
Como usado neste "fator de desenvolvimento endotelial vascular" (VEGF) refere-se a uma ocorrência natural ou proteínas de VEGF- A de mamífero endógenas e por proteínas tendo uma seqüência de aminoácido que é a mesma como de uma ocorrência natural ou proteína de VEGF-A de mamífero correspondente endógena (por exemplo, proteínas recombinantes, proteínas sintéticas (isto é, produzida usando os métodos de química orgânica sintética)). Conseqüentemente, como descrito neste, o termo inclui proteína de VEGF-A madura, variantes polimórficos ou alélicos e outras isoformas de um VEGF-A (por exemplo, produzida pela união alternativa ou outros processos celulares), e formas modificadas ou não modificadas do precedente (por exemplo, lipidado, glicosilado). A união alternativa de RNA que codifica VEGF-A humano (Homo sapiens) produziu diversas isoformas de VEGF humano A que difere-se no número de aminoácidos na seqüência de proteína. Por exemplo, as isoformas referidas como VEGF-121, VEGF-165, VEGF-189 e VEGF-206 são produzidos em humanos. (Ver, por exemplo, Ferrara, N., Endocrine Reviews, 25(4): 581-61 1 (2004).) Estas isoformas e outras isoformas de ocorrência natural são expressamente abrangidos pelo termo "VEGF". A ocorrência natural ou VEGF-A endógeno inclui proteínas de tipo selvagem tal como VEGF-A maduro, variantes polimórficos ou alélicos e outras isoformas que ocorrem naturalmente em mamíferos (por exemplo, humanos, primatas não humanos). Tais proteínas podem ser recuperadas e isoladas a partir de uma fonte que naturalmente produz VEGF-A, por exemplo. Estas proteínas e proteínas tem a mesma seqüência de aminoácido como uma ocorrência natural ou VEGF correspondente endógeno, são referidas pelo nome do mamífero correspondente. Por exemplo, quando o mamífero correspondente é um humano, a proteína é designada como uma VEGF humano. Um ligando (por exemplo, domínio variável simples de
imunoglobulina) que inibe a ligação de VEGF a VEGFRl ou VEGFR2 inibe a ligação no Ensaio de ligação VEGFRl ou ensaio VEGFR2 descrito neste por pelo menos cerca de 40 %, pelo menos cerca de 50 %, pelo menos cerca de 60 %, pelo menos cerca de 70 %, pelo menos cerca de 80 %, pelo menos cerca de 85 %, pelo menos cerca de 90 %, ou pelo menos cerca de 95 % quando o ligando é submetido a ensaio em uma concentração de cerca de 1 nM, cerca de 10 nM, cerca de 50 nM, cerca de 100 nM, cerca de 1 μΜ, cerca de 10 μΜ ou cerca de 100 M. Um ligando que inibe a ligação de VEGF a VEGFRl ou VEGFR2, também pode ou alternativamente, inibir a ligação no ensaio de ligação VEGFRl ou ensaio VEGFR2 com um IC50 de cerca de 1 μΜ ou menos, cerca de 500 nM ou menos, cerca de 100 nM ou menos, cerca de 75 nM ou menos, cerca de 50 nM ou menos, cerca de 10 nM ou menos ou cerca de 1 nM ou menos.
Um ligando (por exemplo, domínio variável simples de imunoglobulina) que inibe a atividade de VEGF inibindo a viabilidade no bioensaio VEGF descrito neste por pelo menos cerca de 20 %, pelo menos cerca de 30 %, pelo menos cerca de 40 %, pelo menos cerca de 50 %, pelo menos cerca de 60 %, pelo menos cerca de 70 %, pelo menos cerca de 80 %, pelo menos cerca de 85 %, pelo menos cerca de 90 %, ou por pelo menos cerca de 95 %.
Um ligando (por exemplo, domínio variável simples de imunoglobulina) que não inibe substancialmente a ligação de VEGF a VEGFRl ou VEGFR2 não inibe significantemente a ligação no ensaio de A 10 ligação VEGFRl ou ensaio VEGFR2 descrito neste. Por exemplo, um tal ligando inibiu a ligação de VEGF no ensaio de ligação VEGFRl ou Ensaio VEGFR2 descrito neste com um IC50 de cerca de 1 mM ou maior, ou inibe a ligação por não mais do que cerca de 20 %, não mais do que cerca de 15%, não mais do que cerca de 10 % ou não mais do que cerca de 5 %. Como usado neste "fator do receptor de desenvolvimento
epidérmico" (EGFR, ErbBls HER1) refere-se a uma ocorrência natural ou proteínas de EGFR de mamífero endógeno e por proteínas tendo uma seqüência de aminoácido que é a mesma como de uma ocorrência natural ou proteína EGFR de mamífero correspondente endógena (por exemplo, proteínas recombinantes, proteínas sintéticas (isto é, produzida usando os métodos de química orgânica sintética)). Conseqüentemente, como descrito neste, o termo inclui proteína EGFR madura, variantes polimórficos ou alélicos, e outras isoformas de um EGFR (por exemplo, produzido pela união alternativa ou outros processos celulares), e formas modificadas ou não modificadas do precedente (por exemplo, lipidado, glicosilado). A ocorrência natural ou EGFR endógeno inclui proteínas de tipo selvagem tal como EGFR maduro, variantes polimórficos ou alélicos e outras isoformas que ocorrem naturalmente em mamíferos (por exemplo, humanos, primatas não humanos). Tais proteínas podem ser recuperadas ou isoladas a partir de uma fonte que naturalmente produz EGFR, por exemplo. Estas proteínas e proteínas tem a mesma seqüência de aminoácido como uma ocorrência natural ou EGFR de correspondente endógeno, são referidas pelo nome do mamífero correspondente. Por exemplo, quando o mamífero correspondente é um humano, a proteína é designada como uma EGFR humano.
Um ligando (por exemplo, domínio variável simples de imunoglobulina) que inibe a ligação de EGF e/ou TGF alfa ao EGFR inibe a ligação no ensaio de ligação de EGFR ou ensaio de quinase de EGFR descrito neste com um IC50 de cerca de ΙμΜ ou menos, cerca de 500 nM ou menos, cerca de 100 nM ou menos, cerca de 75 nM ou menos, cerca de 50 nM ou menos, cerca de 10 nM ou menos ou cerca de 1 nM ou menos.
Um ligando (por exemplo, domínio variável simples de imunoglobulina) que inibe a atividade de EGFR inibe a atividade de quinase de EGFR no ensaio de quinase de EGFR descrito neste com um IC50 de cerca de 1 μΜ ou menos, cerca de 500 nM ou menos, cerca de 100 nM ou menos, cerca de 75 nM ou menos, cerca de 50 nM ou menos, cerca de 10 nM ou menos ou cerca de 1 nM ou menos.
Um ligando (por exemplo, domínio variável simples de imunoglobulina) que não inibe substancialmente a ligação de EGF ou TGF alfa ao EGFR não inibe significantemente a ligação de EGF e/ou TGF alfa ao EGFR no ensaio de ligação do receptor ou ensaio de quinase descrito neste. Por exemplo, um tal ligando inibe a ligação de EGF ou TGF alfa ao EGFR no ensaio de ligação do receptor ou ensaio de quinase descrito neste com um IC50 de cerca de 1 mM ou maior.
"Afinidade" e "avidez" são termos da técnica que descrevem a força de uma interação de ligação. Com respeito aos ligandos da invenção, avidez refere-se a força total de ligação entre os alvos (por exemplo, primeiro alvo de superfície celular e segundo alvo de superfície celular) na célula e no ligando, avidez é mais do que a soma de afinidades individuais para os alvos &
individuais.
Como usado neste, "porção de toxina" refere-se a uma porção que compreende uma toxina. Uma toxina é um agente que tem efeitos nocivos ou altera a fisiologia celular (por exemplo, causas de necrose celular, apoptose ou inibe divisão celular).
Como usado neste, o termo "dose" refere-se à quantidade do
«I
ligando administrado a um paciente, todos de uma vez (dose única), ou em duas ou mais administrações em um intervalo de tempo definido. Por exemplo, a dose pode referir-se a quantidade do ligando (por exemplo, o ligando que compreende um domínio variável simples de imunoglobulina que liga o VEGF e um domínio variável simples de imunoglobulina que liga o EGFR) administrado a um paciente durante o curso de um dia (24 horas) (dose diária), dois dias, uma semana, duas semanas, três semanas ou um ou mais meses (por exemplo, por uma administração simples ou por duas ou mais administrações), o intervalo entre as doses pode ser de qualquer quantidade desejada de tempo.
Como usado neste "complementar" refere-se quando dois domínios de imunoglobulina pertencem a famílias de estruturas que formam pares cognados ou grupos ou são derivados de tais famílias e retém esta
* 20 característica. Por exemplo, um domínio Vh e um domínio Vl de um anticorpo são complementares; dois domínios Vh não são complementares, e
V
dois domínios Vl não são complementares. Domínios complementares podem ser observados em outros membros da superfamília de imunoglobulina, tal como os domínios Va e νβ (ou γ e δ) do receptor celular T. Os domínios que são artificiais, tais como domínios baseados na estrutura de proteína que não é ligada aos Epítopos a não ser projetados de modo que, não são complementares. Da mesma maneira, dois domínios com base em (por exemplo) um domínio de imunoglobulina e um domínio de fibronectina não são complementares. Como usado neste, "imunoglobulina" refere-se a uma família de polipeptídeos que retém a característica de dobra de imunoglobulina de moléculas de anticorpo, que contém duas chapas β e, usualmente, uma ligação bissulfeto conservado. Os membros da superfamília de imunoglobulina são envolvidos em muitos aspectos de interações celulares e não celulares in vivo, incluindo papéis difundidos no sistema imune (por exemplo, anticorpos, moléculas de receptor celular T e outros), envolvimento na adesão celular (por exemplo as moléculas de ICAM) e sinalização intracelular (por exemplo, moléculas de receptor, tal como o receptor PDGF). A presente invenção é aplicável a toda superfamília de moléculas de imunoglobulina que possuem domínios de ligação. Preferivelmente, a presente invenção diz respeito a anticorpos.
Como usado neste "domínio" refere-se a uma estrutura de proteína dobrada que retém a estrutura terciária independentemente do restante da proteína. No geral, os domínios são responsáveis propriedades funcionais discretas de proteínas, em muitos casos podem ser adicionados, removidos ou transferidos para outras proteínas sem a perda da função do remanescente da proteína e/ou do domínio. Para o domínio variável de anticorpo simples é entendido um domínio de polipeptídeo dobrado que compreende características de seqüências de domínios variáveis de anticorpos. Portanto incluem domínios variáveis de anticorpos completos e domínios variáveis modificados, por exemplo em que um ou mais arcos foram substituídos pelas seqüências que não são característica de domínios variáveis de anticorpos, ou domínios variáveis de anticorpos que foram truncados ou compreendem extensões de terminal N- ou C-, bem como fragmentos dobrados de domínios variáveis que retém pelo menos em parte da atividade de ligação e especificidade de domínio de comprimento total. Deste modo, cada ligando compreende pelo menos dois domínios diferentes.
Repertório" uma coleção de diversos variantes, por exemplo variantes de polipeptídeo que diferem em sua seqüência primária. Uma biblioteca usada na presente invenção abrangerá um repertório de polipeptídeos que compreende pelo menos 1000 membros.
" Biblioteca " o termo biblioteca refere-se a uma mistura de polipeptídeos heterogêneos ou ácidos nucleicos. A biblioteca é composta de membros, cada um que teve uma seqüência de polipeptídeo simples ou ácido nucleico. Para esta extensão, a biblioteca é sinônimo de repertório. As diferenças de seqüências entre membros de biblioteca são responsáveis pela diversidade presente na biblioteca. A biblioteca pode tomar a forma de uma Λ 10 mistura simples de polipeptídeos ou ácidos nucleicos, ou pode ser na forma de organismos ou células, por exemplo bactéria, vírus, animal ou células vegetais e outros, transformados com uma biblioteca de ácidos nucleicos. Preferivelmente, cada organismo ou célula individuais contém apenas um ou um número limitado de membros de biblioteca. Vantajosamente, os ácidos nucleicos são incorporados nos vetores de expressão, a fim de permitir a expressão dos polipeptídeos codificadas pelos ácidos nucleicos. Em um aspecto preferido, portanto, a biblioteca pode tomar a forma de uma população de organismos hospedeiro, cada organismo contendo um ou mais cópias de um vetou De expressão contendo um membro simples da biblioteca
* 20 na forma de ácido nucleico que pode ser expressado para produzir este
membro de polipeptídeo correspondente. Deste modo, a população de
*
organismos hospedeiro tem o potencial de codificar um grande repertório de variantes de polipeptídeo geneticamente distintos.
Como usado neste um anticorpo refere-se a IgG, IgM, IgA, IgD ou IgE ou um fragmento (tal como um Fab , F(ab')2, Fv, Fv ligado ao bissulfeto, scFv, anticorpo multiespecífico de conformação fechada, scFv ligado ao bissulfeto, diacorpo) se o derivado de qualquer espécie naturalmente produzir um anticorpo, ou criar pela tecnologia de DNA recombinante; se o isolado do soro, células B, hibridomas, transfectomas, levedura ou bactéria. ©65
Sf
Como descrito neste um "antígeno* é uma molécula que é ligada por um domínio de ligação de acordo com a presente invenção. Tipicamente, os antígenos são ligados por ligandos de anticorpos e são capazes de elevar uma resposta de anticorpo in vivo. Pode ser um polipeptídeo, proteína, ácido nucleico ou outra molécula. No geral, os ligandos específicos duplos de acordo com a invenção são selecionados por especificidade alvo contra dois alvos particulares (por exemplo, antígenos). No caso de anticorpos convencionais e fragmentos destes, o local de ligação de anticorpo definido pelos arcos variáveis (LI, L2, L3 e Hl, H2, H3) é capaz de ligar-se ao antígeno.
Um "epítopo" é uma unidade de estrutura convencionalmente ligado por um par de VIWL de imunoglobulina. Os epítopos definem o local de ligação mínimo para um anticorpo, e deste modo representam o alvo de especificidade de um anticorpo. No caso de um anticorpo de domínio simples, um epítopo representa a unidade de estrutura ligada por um domínio variável em isolamento.
"Estrutura universal" refere-se a uma seqüência de estrutura de anticorpo simples que correspondem à regiões de um anticorpo conservadas na seqüência como definido por Kabat ("Sequences of Protein of Immunological Interest", US Department of Health and Human Services) ou correspondem ao repertório de imunoglobulina de linha de germe humano ou estrutura como definido por Chothia e Lesk, (1987) J. Mol. Biol. 196:910- 917. A invenção fornece o uso de uma estrutura simples, ou uma série de tais estruturas, que foram observadas permitir a derivação de, virtualmente, qualquer especificidade de ligação através da variação nas regiões hipervariáveis apenas.
A frase, "vida média," refere-se ao período retirado da concentração do soro do ligando para reduzir por 50 %, in vivo, por exemplo devido a degradação do ligando e/ou liberação ou aprisionamento do ligando específico duplo por mecanismos naturais. Os ligandos da invenção são estabilizados in vivo e sua vida média aumentada pela ligação de moléculas que resistem a degradação e/ou liberação ou aprisionamento. Tipicamentes tais moléculas são uma ocorrência natural de proteínas que por si mesma tem xima vida média longa in vivo. A vida média de um ligando é aumentada se esta atividade funcional persiste, in vivo, por um período mais longo do que um ligando similar que não é específico para o aumento da vida média da molécula. Deste modo um ligando específico para HSA e duas moléculas alvos são comparados com o mesmo ligando em que a especificidade de HSA não está presente, que não liga-se a HSA mas liga-se a outra molécula. Por exemplo, pode ligar-se ao terceiro alvo na célula. Tipicamente, a vida média é aumentada por 10 %, 20 %, 30 %, 40 %, 50 % ou mais. Aumento na faixa de 2x, 3x, 4x, 5x, IOx, 20x, 30x, 40x, 50x ou mais da vida média são possíveis. Alternativamente, ou além disso, aumento na faixa de até 3 Ox, 40x, 5 Ox, 60x, 70x, 80x, 90x, IOOx, 150x da vida média são possíveis.
Como referido neste, o termo compete" significa que a ligação de um primeiro alvo por este domínio de ligação alvo cognado é inibido quando um segundo alvo é ligado por este domínio de ligação alvo cognado. Por exemplo, a ligação pode ser inibida estericamente, por exemplo pelo bloqueio físico de um domínio de ligação ou pela alteração da estrutura ou ambiente de um domínio de ligação tal que esta afinidade ou avidez por um alvo é reduzida. Uma porção de proteína compete com a ligação a um alvo (por exemplo, EGFR, VEGF, albumina de soro) com um outro agente, quando uma porção de proteína inibe a ligação de outro agente ao alvo em um ensaio de ligação competitivo (por exemplo, um ELISA competitivo ou outro ensaio de ligação adequado). Por exemplo, a porção de proteína pode inibir a ligação de um outro agente que liga-se ao alvo (por exemplo, EGFR, VEGF, albumina de soro) em um ensaio de ligação competitivo por pelo menos cerca de 25 %, pelo menos cerca de 30 %, pelo menos cerca de 40 %, pelo menos cerca de 50 %, pelo menos cerca de 60 %, pelo menos cerca de 70 %, pelo menos cerca de 80 %, pelo menos cerca de 90 %, ou pelo menos cerca de 95
Como usado neste, o termos "estringência baixa", "estringência média", "estringência alta" ou "condições de estringência muito alta" descreve condições para hidridização de ácido nucleico e lavagem. Orientação para realizar reações de hidridização pode ser observadas em Current Protocols em Molecular Biology, John Wiley & Sons, N.Y. (1989), 6.3.1-6.3.6, que é incorporado neste por referência em sua totalidade. Métodos aquosos e não aquosos são descritos na referência e podem ser usados. As condições de hibridização específicas são referidas neste como seguintes: (1) condições de hibridização de estringência baixa em 6X cloreto de sódio/citrato de sódio (SSC) a cerca de 45C, seguido por duas lavagens em 0,2X de SSC, 0,1 % de SDS pelo menos a 50C (a temperatura das lavagens pode ser aumentada a 55C para condições de estringência baixa); (2) condições de hibridização de estringência média em 6X de SSC a cerca de 45C, seguida por uma ou mais lavagens em 0,2X de SSC, 0,1 % de SDS a 60C; (3) condições de hibridização de estringência alta em 6X de SSC a cerca de 45C, seguida por uma ou mais lavagens em 0,2X de SSC, 0,1 % de SDS a 65C; e preferivelmente (4) condições de hibridização de estringência muito alta são 0,5M de fosfato de sódio, 7 % de SDS a 65C, seguida por uma ou mais lavagens a 0,2X de SSC, 1 % de SDS a 65C. Condições de estringência muito alta (4) são as condições preferidas e uma deve ser usada a não ser de uma outra maneira especificada. As seqüências similares ou homólogas (por exemplo, pelo
menos cerca de 70 % de identidade de seqüência) às seqüências divulgadas neste também são parte da invenção. Em algumas formas de realização, a identidade de seqüência no nível de aminoácido pode ser de cerca de 80 %, 85 %, 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % ou maior. No nível de ácido nucleico, a identidade de seqüência pode ser de cerca de 70 %, 75 %, 80 %, 85 %, 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % ou maior. Alternativamente, a identidade substancial existe quando os segmentos de ácido nucleico hibridizaram sob condições de hibridização seletiva (por exemplo, condições de hibridização de estringência muito alta), ao complemento do filamento. Os ácidos nucleicos podem estar presentes em células totais, em uma célula lisada, ou em uma forma purificada ou substancialmente pura.
Cálculos de "homologia" ou de "identidade de seqüência " ou de "similaridade" entre duas seqüências (os termos são usados intercambeabilidade neste) são realizadas como seguintes. As seqüências são alinhadas por propósitos de comparação ótimos (por exemplo, fendas podem ser introduzidas em uma ou tanto em uma primeira e quanto em uma segunda seqüência de aminoácido ou ácido nucleico por seqüências de alinhamento e não homólogas ótimas podem ser desconsiderada pelo propósito da comparação). Em uma forma de realização preferida, o comprimento de uma seqüência de referência alinhada pelo propósito da comparação é de pelo menos 30 %, preferivelmente pelo menos 40 %, mais preferivelmente pelo menos 50 %, ainda mais preferivelmente pelo menos 60 %, e ainda mais preferivelmente pelo menos 70 %, 80 %, 90 %, ou 100 % do comprimento da seqüência de referência.
Os resíduos de aminoácido e nucleotídeos correspondem a posições de aminoácido ou posições de nucleotídeos que são então comparados. Quando uma posição na primeira seqüência é ocupada pelo mesmo resíduo de aminoácido ou nucleotídeo como a posição correspondente na segunda seqüência, e então as moléculas são idênticas a que posição (como usado nesta " homologia" de aminoácido ou ácido nucleico que é equivalente a "identidade" de aminoácido ou ácido nucleico). A identidade percentual entre as duas seqüências é uma função de várias posições idênticas dividida pelas seqüências, levando em conta o número de fendas e o comprimento de cada fenda, que necessita ser introduzida por alinhamento ótimo de duas seqüências.
Alinhamentos de seqüência de aminoácido e nucleotídeo e homologia, similaridade ou identidade, como descrito neste são preferivelmente preparados e determinados usando as seqüências de algoritmo de BLAST 2, usando-se parâmetros Default (Tatusova, T. A. et al., FEMS Microbiol Lett, 174:187-188 (1999)). Alternativamente, o algoritmo BLAST (versão 2,0) é utilizado por alinhamento de seqüência, com ajuste de parâmetros aos valores de default. O BLAST (Ferramenta de Pesquisa de Alinhamento Local Básico) é o algoritmo de busca heurística utilizado pelos programas blastp, blastn, blastx, tblastn, e tblastx; estes programas refere-se a importância de sua descoberta usando os métodos estatísticos de Karlin e Altschulj 1990, Proc. Natl. Acad. Sei. USA 87(6):2264-8.
A não ser definido de outra maneira, todas as técnicas e termos científicos usado neste tem o mesmo significado como comumente entendido por uma pessoa habilitada na técnica (por exemplo, na cultura celular, genética molecular, química de ácido nucleico, técnicas de hibridização e bioquímica). Técnicas padrão são usadas por genética molecular e métodos de bioquímica (ver no geral, Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2o ed. (1989) Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y. e Ausubel et al., Short Protocols in Molecular Biology (1999) 4o Ed, John Wiley & Sons, Inc. que são incorporados neste por referência) e Métodos químicos.
A invenção diz respeito aos ligandos que tem especificidade de ligação para VEGF (por exemplo, VEGF humano), os ligandos tendo especificidade de ligação para EGFR (por exemplo, EGFR humano) e aos ligandos tendo especificidade de ligação para VEGF e EGFR (por exemplo, VEGF humano e EGFR humano). Por exemplo, o ligando pode compreender um domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF, um domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para EGFR ou compreende um domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF e um domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para EGFR.
Os ligandos da invenção fornecem diversas vantagens. Por exemplo, como descrito neste, o ligando pode ser adaptado para ter uma vida média de soro in vivo desejado. Deste modo, o ligandos podem ser usados para controlar, reduzir ou eliminar toxicidade geral de agente terapêuticos, tal como citotoxina usada para tratar o câncer. Ainda, os dAbs são muito menores do que os anticorpos convencionais, e podem ser administrados por atingir melhor penetração no tecido do que os anticorpos convencionais. Deste modo, os dAbs e os ligandos que compreende um dAb fornece vantagens nos anticorpos convencionais quando administrados para tratar o câncer, por exemplo alvej ando-se os tumores sólidos. Além disso, muitos cânceres super-expressam EGFR, e os ligandos tendo especificidade de ligação para EGFR e VEGF podem ser administrados pela atividade inibitória de VEGF alvo aos tumores ou ambiente de células cancerígenas. Estes métodos fornecem duas atividades benéficas diretamente no local de um tumor ou câncer, isto é, atividade anti-câncer direta pela ligação ao EGFR e ligação de inibição dos ligandos (por exemplo, EGF, TGF alfa) ao receptor, e inibição de angiogênese que ajudam na formação e desenvolvimento de tumor. Conseqüentemente, os ligandos tendo especificidade de ligação para VEGF e EGFR podem ser administrados em um paciente com câncer (por exemplo, Câncer que expressa EGFR) fornecendo terapia superior usando um agente terapêutico simples.
Ainda, os sinais traduzidos através de EGFR podem levar a produção de fatores angiogênicos, tal como VEGF. As células cancerígenas
(por exemplo, em um tumor) que expressam ou super-expressam EGFR podem produzir um nível alto de VEGF que atua localmente induzindo a formação de vasculatura do tumor. Conseqüentemente, os ligandos da invenção que tem especificidade de ligação paia VEGF e EGFR podem ser administrados a um paciente para alvejar a liberação da atividade inibidora de VEGF do ligando às células que super-expressam EGFR. Conseqüentemente, terapia anti-angiogênica pode ser liberado especificamente aos locais onde o VEGF está sendo produzido (por exemplo, às células que super-expressam EGFR).
1° Em algumas formas de realização, o ligando tem
especificidade de ligação para VEGF e que compreende um (pelo menos um) domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF. Em outras formas de realização, o ligando tem especificidade de ligação para EGFR e que compreende um (pelo menos um) domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR. Em certas formas de realização, o ligando tem especificidade de ligação para VEGF e EGFR e que compreende um (pelo menos um) domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF e um (pelo menos um) domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR.
O ligando da invenção pode ser formatado como descrito neste. Por exemplo, o ligando da invenção pode ser formatado para adaptar a vida média do soro in vivo. Se desejado, o ligando ainda pode compreender uma toxina ou um porção de toxina como descrito neste. Em algumas formas de realização, o ligando compreende uma toxina ativa de superfície, tal como um gerador de radical livre (por exemplo, toxina contendo selênio) ou um radionuclídeo. Em outras formas de realização, uma toxina ou a porção de toxina é um domínio de polipeptídeo (por exemplo, um dAb) que tem um local de ligação com especificidade de ligação para um alvo intracelular. Em
formas de realização particulares, o ligando é um formato semelhante ao IgG que tem especificidade de ligação para VEGF e EGFR (por exemplo, VEGF humano e EGFR humano). Formatos de Ligando O ligando da invenção pode ser formatado como um ligando
monoespecífico, específico duplo ou multiespecífico como descrito neste. Ver, também o WO 03/002609, cujas explicações totais são incorporadas neste por referência, com respeito à formatação do ligando. Tais ligandos específicos duplos compreendem domínios variáveis simples de imunoglobulina que tem especificidades de ligação diferentes. Tais ligandos específicos duplos podem compreender combinações de cadeia pesada e leve. Por exemplo, o ligando específico duplo pode compreender um domínio V e um VL, que pode ser ligado junto na forma de um scFv (por exemplo, usando um ligador adequado tal como Gly4Ser) ou formatado em um anticorpo biespecífico ou fragmento de ligação de antígeno deste (por exemplo, F(ab')2). O ligando específico duplo não compreende pares VH/VL complementar que forma um local de ligação de antígeno de anticorpo de cadeia dupla convencional que liga o antígeno ou epítopo co-operativamente. Em vez disso, os ligandos de formato duplo compreendem um par complementar de VH/VL; em que os domínios V tem especificidades de ligação diferentes.
Além disso, os ligandos específicos duplos podem compreender um ou mais domínios Ch ou Cl se desejado. Uma região de junção também pode ser incluída se desejado. Tais combinações de domínios podem, por exemplo, imitar os anticorpos naturais, tais como IgG ou IgM ou estruturas destes, tais como moléculas de Fv, scFv, Fab ou F(ab')2. Outras estruturas, tais como um desígnio simples de uma molécula de IgG que compreende domínios VH, VL, Ch e Cu are são consideradas. Preferivelmente, o ligando específico duplo da invenção compreende apenas dois domínios variáveis embora diversos tais ligandos possam ser incorporados juntos na mesma proteína, por exemplo dois tais ligandos podem ser incorporados em um IgG ou uma imunoglobulina multimérica, tal como IgM. Alternativamente, em uma outra forma de realização uma pluralidade de ligandos específicos duplos são combinados para formar um multímero. Por exemplo, dois ligandos específicos diferentes são combinados para criar uma molécula tetra-específica. Será apreciado por uma pessoa habilitada na técnica que as regiões variáveis leves e pesadas de um ligando específico duplo produzido de acordo com o método da presente invenção podendo ser na mesma cadeia de polipeptídeo, ou alternativamente, em cadeias de polipeptídeo diferentes. No caso que as regiões variáveis são em cadeias de polipeptídeo diferentes, então as suas podem ser ligadas por intermédio de um ligador, no geral um ligador flexível (tal como uma cadeia de polipeptídeo), um grupo de ligação química, ou qualquer outro método conhecido na técnica.
Em algumas formas de realização, o ligador pode ser um "ligador natural" que contém aminoácidos de terminal carbóxi de um domínio variável de anticorpo e aminoácidos terminal amino de um domínio constante de anticorpo. Por exemplo, um ligador natural pode conter os aminoácidos de terminal carbóxi de Vk e aminoácidos terminal amino de Ck (por exemplo KVEIKRTVAAPS (SEQ ID N°: 706)). Em outras formas de realização, o ligador pode conter menos resíduos de Lys e Arg do que o ligador natural (por exemplo, LVTVSSAST (SEQ ID N°: 707) ou (LVTVSSGGGGSGGGS (SEQ ID N°: 708)). Se desejado, o ligador pode ser mutado por substituir alguns ou todos dos resíduos carregados positivamente (por exemplo, em um ligador natural), tal como Lys e/ou Arg com resíduos que não são positivamente carregados em pH fisiológico. Por exemplo, resíduos Lys e/ou Arg podem ser substituídos com Asn, Leu, Gln ou Ser. Este tipo de ligador fornece a vantagem da redução da sensibilidade de protease (por exemplo, serina protease, cisteína protease, metaloprotease de matriz, pepsina, tripsina, elastase, quimiotripsina, carboxipeptidase, catepsina (por exemplo, catepsina G), proteinase 3). Exemplos de tais ligadores incluem, GQGTNVEINRTVAAPS (SEQ ID N°: 710), GQGTNVEINQTVAAPS (SEQ ID N°: 711), GQGTNVEIQRTVAAPS (SEQ ID N°: 712), ou GQGTLVTVSSTVAAPS (SEQ ID N°: 713).
Função de proteases (por exemplo, uma serina protease, cisteína protease, metaloprotease de matriz, pepsina, tripsina, elastase, quimiotripsina, carboxipeptidase, catepsina (por exemplo, catepsina G), proteinase 3) no movimento normal e metabolismo de proteínas. Entretanto, em certos estados fisiológicos, tais como estados inflamatórios (por exemplo, COPD) e câncer, a quantidade de proteases presente no tecido, órgão ou animal (por exemplo, no pulmão, em ou adjacente em um tumor) pode aumentar. Este aumento em proteases pode resultar em aceleração da degradação e inativação de proteínas endógenas e de peptídeos terapêuticos ou diagnósticos, polipeptídeos e proteínas que são administrados. Em fato, alguns agentes que tem potencial para uso in vivo (por exemplo, uso no tratamento, diagnóstico ou prevenção de doenças) tem apenas eficácia limitada porque são rapidamente degradados e inativados pelas proteases.
A invenção diz respeito ao ligando que compreende ao ligador que é resistente a degradação de protease. Os ligandos resistentes a protease da invenção fornecem diversas vantagens. Por exemplo, um ligando resistente a protease pode ser administrado em um paciente e permanece ativo in vivo. Mais longo do que os agentes sensíveis a protease. Conseqüentemente, o ligando resistente a protease permanecerá funcional por um período de tempo que é suficiente para produzir efeitos biológicos.
Um ligando ou ligador que é resistente a protease a degradação não é substancialmente degradada pela protease quando incubada com a protease sob as condições adequadas para atividade de protease por pelo menos cerca de 2 horas, pelo menos cerca de 3 horas, pelo menos cerca de 4 horas, pelo menos cerca de 5 horas, pelo menos cerca de 6 horas, pelo menos cerca de 7 horas, pelo menos cerca de 8 horas, pelo menos cerca de 9 horas, pelo menos cerca de 10 horas, pelo menos cerca de 11 horas,pelo menos cerca de 12 horas, pelo menos cerca de 24 horas, pelo menos cerca de 36 horas, ou pelo menos cerca de 48 horas. Um ligando ou ligador não é substancialmente degradado quando não mais do que cerca de 25 %, não mais do que cerca de %, não mais do que cerca de 15 %, não mais do que cerca de 14 %, não mais do que cerca de 13 %, não mais do que cerca de 12 %, não mais do que cerca de 11 %, não mais do que cerca de 10 %, não mais do que cerca de 9 %, não mais do que cerca de 8 %, não mais do que cerca de 7 % não mais do que cerca de 6 %, não mais do que cerca de 5 %, não mais do que cerca de 4 %, não mais do que cerca de 3 %, não mais do que cerca de 2 %, não mais do que cerca de 1 %, ou nenhum substancialmente do ligando ou ligador é degradado pela protease após a incubação com a protease por pelo menos cerca de 2 horas. A degradação de proteína pode ser avaliada usando qualquer método adequado, por exemplo, por SDS-PAGE.
A resistência de protease pode ser avaliada usando qualquer método adequado. Por exemplo, uma protease pode ser adicionada a uma solução de ligando ou ligador em um tampão adequado (por exemplo, PB S) para produzir uma solução de ligando ou ligador/protease, tal como uma solução de pelo menos cerca de 0,01 % (p/p) de protease, cerca de 0,01 % a cerca de 5 % (p/p) de protease, cerca de 0,05 % a cerca de 5 % (p/p) de protease, cerca de 0,1 % a cerca de 5 % (p/p) de protease, cerca de 0,5 % a cerca de 5 % (p/p) de protease, cerca de 1 % a cerca de 5 % (p/p) de protease, pelo menos cerca de 0,01 % (p/p) de protease, pelo menos cerca de 0,02 % (p/p) de protease, pelo menos cerca de 0,03 % (p/p) de protease, pelo menos cerca de 0,04 % (p/p) de protease, pelo menos cerca de 0,05 % (p/p) de protease, pelo menos cerca de 0,06 % (p/p) de protease, pelo menos cerca de 0,07 % (p/p) de protease, pelo menos cerca de 0,08 % (p/p) de protease, pelo menos cerca de 0,09 % (p/p) de protease, pelo menos cerca de 0,1 % (p/p) de protease, pelo menos cerca de 0,2 % (p/p) de protease, pelo menos cerca de 0,3 % (p/p) de protease, pelo menos cerca de 0,4 % (p/p) de protease, pelo menos cerca de 0,5 % (p/p) de protease, pelo menos cerca de 0,6 % (p/p) de protease, pelo menos cerca de 0,7 % (p/p) de protease, pelo menos cerca de 0,8 % (p/p) de protease, pelo menos cerca de 0,9 % (p/p) de protease, pelo menos cerca de 1 % (p/p) de protease, pelo menos cerca de 2 % (p/p) de protease, pelo menos cerca de 3 % (p/p) de protease, pelo menos cerca de 4 % (p/p) de protease, ou cerca de 5 % (p/p) de protease. A mistura de ligando ou ligador/protease pode ser incubada em uma temperatura adequada para atividade de protease (por exemplo, a 37° C) e amostras podem ser retiradas em intervalos de tempo (por exemplo, a 1 hora, 2 horas, 3 horas, etc.) e a reação de protease interrompida. As amostras podem então ser analisadas por uma degradação de proteína usando qualquer método adequado, tal como análise de SDS-PAGE. Os resultados podem ser usados para estabelecer um curso de tempo de degradação.
Os ligandos podem ser formatados como anticorpos bi ou multiespecífxcos ou fragmentos de anticorpos ou em estruturas de anticorpos bi ou não multiespecífícos. Os formatos adequados incluem, qualquer estrutura de polipeptídeo adequada em que um domínio variável de anticorpo ou um ou mais dos CDRs destes podem ser incorporados de modo a conferir a especificidade de ligação para antígeno na estrutura. Uma variedade de formatos de anticorpos adequados são conhecidos na técnica, tal como, formatos biespecíficos semelhante ao IgGs (por exemplo, anticorpos quiméricos, anticorpos humanizados, anticorpos humanos, anticorpos de cadeia simples, heterodímeros de cadeias pesadas de anticorpos e/ou cadeias leves, fragmentos de ligação de antígeno de acordo com qualquer um dos precedentes (por exemplo, um fragmento Fv (por exemplo, Fv de cadeia simples (scFv), um Fv ligado a bissulfeto), um fragmento de Fab, um fragmento de Fab', um fragmento de F(ab')2), um domínio variável simples (por exemplo, VH, VL, VHH), um dAb), e versões modificadas de acordo com qualquer um dos precedentes (por exemplo, modificado pela ligação covalente de polialquileno glicol (por exemplo, polietileno glicol, polipropileno glicol, polibutileno glicol) ou outro polímero adequado). Ver, PCT/GB03/002804, depositado 30 de Junho de 2003, que designou os Estados Unidos, (WO 2004/081026) com respeito ao Domínio variável simples PEGuilado e dAbs, métodos adequados para mesma preparação, aumentando a vida média in vivo dos domínios variáveis simples PEGuilados e monômeros e multímeros dAb, PEGs adequados, tamanhos hidrodinâmicos preferidos de PEGs, e tamanhos hidrodinâmicos preferidos de domínio variável simples PEGuilado e monômeros e multímeros dAb. A explicação total do PCT/GB03/002804 (WO 2004/081026), inclui as porções referidas acima, e são incorporadas neste por referência.
O ligando pode ser formatado usando um ligador adequado tal como (Gly4Ser)n, onde η = de 1 a 8, por exemplo, 2, 3, 4, 5, 6 ou 7. Se desejado, os ligandos, incluindo monômeros, dímeros e trímeros dAb, podem ser ligados a uma região de Fc de anticorpo, que compreende um ou tanto domínios CH2 e quanto CH3, e opcionalmente uma região de junção. Por exemplo, os vetores que codificam os ligandos ligados como uma seqüência de nucleotídeo simples a uma região Fc pode ser usado para preparar tais polipeptídeos. Em algumas formas de realização, o ligando compreende um, dois ou mais dAbs das especificidades de ligação mesmas ou diferentes, e Ch2, Ch3, Ch2-Ch3, junção-CH2, junção-CH3, junção-CH2-CH3, uma porção de junção-CH2, uma porção de junção-CH3, ou uma porção de junção-CH2- CH3. Em tais formas de realização, CH2, CH3, CH2-CH3, junção-CH2, junção- Ch3, junção-CH2-CH3, a porção de junção-CH2, a porção de junção-CH3, e a porção de jimção-CH2-CH3 pode ser a partir de qualquer anticorpo desejado, tal como um IgG humano, tal como um IgGl humano ou um IgG4 humano. Em algumas formas de realização, o ligando da invenção compreende um dAb anti-EGFR ou um dAb anti-VEGF que é fundido (por exemplo, diretamente ou através um ligador) a uma região Fc de um anticorpo. Em algumas formas de realização, o ligando é uma fusão de Fc que compreende um dAb anti-VEGF que é bissulfeto ligado a um dAb anti- EGFR. Em particular exemplos, o ligando compreende dois ou mais dAbs (por exemplo, dois dAbs que ligam EGFR, dois dAbs que ligam ao VEGF, um dAb que liga o EGFR e um dAb que liga o VEGF) e uma região Fe, e o ligando tem a estrutura, a partir de terminal amino ao terminal carbóxi, Vh- Vh-Fc, Vl-Vl-Fc, Vh-Vl-Fc5 Vl-Vh-Fc. Por exemplo, o ligando pode ter a estrutura VH-VK-junção-CH2-CH3, VK-VH-junção-CH2-CH3, VKVK-junção- CH2-CH3, ou VH-VH-junção-CH2-CH3. Se desejado, o VH mostrado em qualquer fórmula precedente pode ser um Vhh. Dois ligandos que contém regiões Fc podem ser ligados juntos para formar um dímero, por exemplo, através de uma ligação de bissulfeto (por exemplo, na região de junção).
No geral a orientação do domínio de polipeptídeos que tem um local de ligação com especificidade de ligação para o alvo (por exemplo, dAbs), e se o ligando compreende um ligador, é um assunto de escolha de projeto. Entretanto, algumas orientações, com ou sem ligadores, pode fornecer características de ligação preferidas em comparação a outras orientações. Todas as orientações (por exemplo, dAbl -dAb2-Fc; dAb2 - dAbl-Fc) são abrangidas pela invenção, e os ligandos que contém uma orientação que fornece características de ligação desejadas podem ser facilmente identificadas pela avaliação de rotina.
Os ligandos e monômeros dAb também podem ser combinados e/ou formatados em estruturas de multi-ligando de não anticorpo para formar complexos multivalentes, que ligam as moléculas alvo com o mesmo antígeno, deste modo fornecem avidez superior. Por exemplo receptores bacterianos naturais tal como SpA podem ser usados como estruturas para o enxerto de CDRs para gerar ligandos que ligam especialmente a um ou mais epítopos. Detalhes destes procedimentos são descritos em US 5.831.012. Outras estruturas adequadas incluem aquelas com base em fibronectina e aficorpos. Detalhes dos procedimentos adequados são descritos em WO 98/58965. Outras estruturas adequadas incluem lipocalina e CTLA4, como descrito em van den Beuken et al., J. Mol. Biol. 310:591-601 (2001), e estruturas tais como aquelas descritas em WO 00/69907 (Medicai Research Council), que são baseadas por exemplo na estrutura de anel de GroEL bacteriano ou outros peptídeos de chaperona. Estruturas de proteínas podem ser combinadas; por exemplo, CDRs pode ser enxertado em uma estrutura CTLA4 e usado junto com imunoglobulina Vh ou domínios Vl para formar um ligando. Da mesma maneira, fibronectina, lipocalina e outras estruturas podem ser combinadas a uma variedade de métodos adequados para preparação de qualquer formato desejado são conhecidos na técnica. Por exemplo, cadeias de anticorpos e formatos (por exemplo, formatos biespecíficos semelhante ao IgGs, anticorpos quiméricos, anticorpos humanizados, anticorpos humanos, anticorpos de cadeia simples, homodímeros e heterodímeros de cadeias pesadas de anticorpos e/ou cadeias leves) podem ser preparados pela expressão de construção de expressão adequada e/ou cultura de células adequadas (por exemplo, hibridomas, hetero- hibridomas, célula hospedeira recombinantes contendo construções recombinantes que codificam o formato). Ainda, os formatos tais como fragmentos de ligação de antígeno de anticorpos ou cadeias de anticorpos (por exemplo, fragmentos de ligação biespecífico, tal como um fragmento Fv (por exemplo, Fv de cadeia simples (scFv), um Fv ligado a bissulfeto), um fragmento de Fab, um fragmento Fab1, um fragmento F(ab')2), pode ser preparado pela expressão de construção de expressão adequado ou pela digestão enzimática de anticorpos, por exemplo usando papaína ou pepsina.
O ligando pode ser formatado como um ligando multiespecífíco, por exemplo como descrito em WO 03/002609, como explicações inteiras de que são incorporados neste por referência. Tal ligando multiespecífíco possui mais do que um epítopo de especificidade de ligação. No geral, o ligando multi-específico compreende dois ou mais epítopo de domínios de ligação, tal como dAbs ou domínio de proteína de não anticorpo que compreende um local de ligação para um epítopo, por exemplo, um aficorpo, um domínio SpA, um domínio de classe A do receptou De LDL, um domínio de EGF, um avímero. Os ligandos multiespecíficos podem ser formatados ainda como descrito neste.
Em algumas formas de realização, o ligando é um formato semelhante ao IgG. Tais formatos tem a estrutura de quatro cadeia convencional de uma molécula IgG (2 cadeias pesadas e duas cadeias leves), em que um ou mais das regiões variáveis (VH e ou VL) foram substituídos com um dAb ou domínio variável simples de uma especificidade desejada. Preferivelmente, cada uma das regiões variáveis (2 regiões Vh e 2 regiões VL) são substituída com um dAb ou domínio variável simples. O dAb(s) ou domínio variável simples que são incluídos em um formato semelhante ao IgG podendo ter a mesma especificidade ou especificidades diferentes. Em algumas formas de realização, o formatos semelhante ao IgG é tetravalente e pode ter uma, duas , três ou quatro especificidades. Por exemplo, os formatos semelhante ao IgG podem ser monoespecíficos e compreendem 4 dAbs que tem a mesma especificidade; biespecífico e compreende 3 dAbs que tem a mesma especificidade e um outro dAb que tem uma especificidade diferente; biespecífico e compreende dois dAbs que tem a mesma especificidade e dois dAbs que tem um comum mas especificidade diferente; triespecífico e compreende primeiro e segundo dAbs que tem a mesma especificidade, um terceiro dAb com uma especificidade diferente e um quarto dAb com uma especificidade diferente a partir do primeiro, segundo e terceiro dAbs; ou tetraespecífico e compreende quatro dAbs que cada um tem a especificidade diferente. Fragmentos de ligação de antígeno de formato semelhante ao IgGs (por exemplo, Fab, F(ab')2, Fab', Fv, scFv) pode ser preparado. Além disso, uma região constante particular de porção Fc (por exemplo, de um IgG, tal como IgGl), variante ou porção deste pode ser selecionado a fim de adaptar a função atuadora. Por exemplo, se o complemento da ativação e/ou função de citotoxicidade celular dependente de anticorpo (ADCC) é desejado, o ligando pode ser um formato semelhante ao IgGl. Se desejado, o formato semelhante ao IgG pode compreender uma região constante mutada (região constante de cadeia pesada de IgG variante) para minimizar a ligação de receptores Fc e/ou capacidade de fixar o complemento, (ver por exemplo Winter et al, GB 2.209.757 B; Morrison et al., WO 89/07142; Morgan et al., WO 94/29351, 22 de Dezembro de 1994).
Em algumas formas de realização, os formatos semelhantes ao IgGs podem compreender um dAb anti-EGFR (por exemplo, DOMl6-39-542, DOM 16-3 9-618 ou DOM 16-3 9-619), um dAb anti-VEGF (por exemplo, DOM15-26-5Ü1), ou um dAb anti-EGFR e um dAb anti-VEGF.
Os ligandos da invenção podem ser formatados como uma proteína de fusão que contém um primeiro domínio variável simples de imunoglobulina que é fundido diretamente a um segundo domínio variável simples de imunoglobulina. Se desejado um tal formato ainda pode compreender a porção extensora de vida média. Por exemplo, o ligando pode compreender um primeiro domínio variável simples de imunoglobulina que é fundido diretamente a um segundo domínio variável simples de imunoglobulina que é fundido diretamente a um domínio variável simples de imunoglobulina que liga-se a albumina de soro. Por exemplo, o ligando pode ser uma linha de fusão de dois ou mais porções de proteínas que tem um local de ligação com especificidade de ligação por EGFR que competem com a ligação ao EGFR com um anticorpo de domínio anti-EGFR (por exemplo, qualquer do DOM 16 dAbs divulgado neste) e fundido a um dAb anti- albumina de soro (por exemplo, qualquer do DOM7 dAbs divulgado neste). Em algumas formas de realização, as porções de proteína que tem um local de ligação com especificidade de ligação para EGFR (por exemplo, dAb anti- EGFRs) tem especificidades epitópicas diferentes. Em outro exemplo, o ligando é uma proteína de linha de fusão que compreende uma porção de proteína que tem um local de ligação com especificidade de ligação para EGFR (por exemplo, dAb anti-EGFR), uma porção de proteína que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF, e um dAb anti- albumina de soro.
Em formas de realização particulares, uma tal linha de fusão compreende DOM16-39-618 dAb e/ou DOM16-39-619 e um dAb anti- albumina de soro (por exemplo, DOM16-39-618-DOM7h-14, DOM7h-14- DOM16-39-618, DOMl 6-39-619-DOM7h-14, DOM7h-14-DOM16-39-619). Em outras formas de realização, na linha de fusão compreende uma porção de proteína (por exemplo, dAb) que tem pelo menos cerca de 80 %, 85 %, 87 %, 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % identidade de seqüência de aminoácido com uma seqüência de aminoácido de DOM 16- 39-618, uma porção de proteína que tem pelo menos cerca de 80 %, 85 %, 87 %, 90 %, 91 %, 92 %, 93 % 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % de identidade de seqüência de aminoácido com a seqüência de aminoácido de DOM16-39-619, e/ou uma porção de proteína (por exemplo, dAb) que tem pelo menos cerca de 80 %, 85 %, 87 %, 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % identidade de seqüência de aminoácido com a seqüência de aminoácido de um dAb anti-albumina de soro divulgado neste, tal como DOM7h-14.
Em outras formas de realização particulares, o ligando compreende um dAb anti-VEGF, um dAb anti-EGFR, e um dAb anti- albumina de soro (por exemplo, DOM15-10-DOM16-39-dAb anti-albumina de soro, DOM16-39-DOM15-10- dAb anti-albumina de soro, DOM15-26- 501-DOM16-39- dAb anti-albumina de soro, DOM16-39-DOM15-26-501- dAb anti-albumina de soro). Em outras formas de realização, a linha de fusão compreende uma porção de proteína (por exemplo, dAb) que tem pelo menos cerca de 80 %, 85 %, 87 %, 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % identidade de seqüência de aminoácido com a seqüência de aminoácido de um dAb anti-VEGF divulgado neste, tal como DOM 15-10 ou DOM15-25-501, e/ou uma porção de proteína que tem pelo menos cerca de 80 Vo9 85 %, 87 %, 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % identidade de seqüência de aminoácido com a seqüência de aminoácido de um dAb anti-EGFR divulgado neste, tal como DOMl 6-39, e/ou uma porção de proteína (por exemplo, dAb) que tem pelo menos cerca de 80 %, 85 %, 87 %, 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % identidade de seqüência de aminoácido com a seqüência de aminoácido de um dAb anti-albumina de soro divulgado neste, tal como DOM7h-14.
No geral a orientação do domínio de polipeptídeos que tem um local de ligação com especificidade de ligação para a alvo, e se o ligando compreende um Iigador5 é um assunto de escolha de projeto. Entretanto, algumas orientações, com ou sem ligadores, podem fornecer maiores características de ligação do que outras orientações. Todas as orientações (por exemplo, dAbl-ligador-dAb2; dAb2-ligador-dAbl) são abrangidas pela invenção são ligandos que contém uma orientação que fornece características de ligação desejadas podendo ser facilmente identificadas pela avaliação. Formatos de vida média estendida
Os ligandos e monômeros dAb divulgados neste podem ser formatados para estender sua vida média no soro in vivo. Aumentando a vida média in vivo é útil em aplicações in vivo de imunoglobulinas, especialmente anticorpos e mais especialmente fragmentos de anticorpos de tamanho pequeno tal como dAbs. Tais fragmentos (Fvs, Fvs ligado ao bissulfeto, Fabs, scFvs, dAbs) são rapidamente clareados a partir do corpo, que pode limitar aplicações clínicas.
Um ligando pode ser formatado como um grande fragmento de ligação de antígeno de um anticorpo ou como um anticorpo (por exemplo, formatado como um Fab, Fab', F(ab)2, F(ab*)2, IgG, scFv) que tem tamanho hidrodinâmico grande. Os ligandos também podem ser formulados para ter um tamanho hidrodinâmico grande, por exemplo, pela ligação de um grupo polialquilenoglicol (por exemplo grupo polietilenoglicol (PEG), polipropileno glicol, polibutileno glicol), albumina de soro, transferrina, receptor de transferrina ou pelo menos a porção de ligação transferrina deste, uma região de Fc de anticorpo, ou pela conjugação a um domínio de anticorpo. Em algumas formas de realização, o ligando (por exemplo, monômero dAb) é PEGuilado. Preferivelmente o ligando PEGuilado (por exemplo, monômero dAb) liga o VEGF e/ou EGFR com substancialmente a mesma afinidade ou avidez como o mesmo ligando que não é PEGuilado. Por exemplo, o ligando pode ser um ligando PEGuilado que compreende um dAb que liga o VEGF ou EGFR com uma afinidade ou avidez que difere-se a partir de avidez do ligando na forma não PEGuilada por não mais do que um fator de cerca de 1000, preferivelmente não mais do que um fator de cerca de 100, mais preferivelmente não mais do que um fator de cerca de IO5 ou com afinidade ou avidez substancialmente não mudada relativa à forma não peguilada. Ver, PCT/GB03/002804, depositado 30 de Junho 2003, que designou os Estados Unidos, (WO 2004/081026) com respeito ao domínio variável simples PEGuilado e dAbs, os métodos adequados para mesma preparação, aumentando a vida média in vivo do domínio variável simples PEGuilado e monômeros e multímeros dAb, PEGs adequados, tamanhos hidrodinâmicos preferidos de PEGs, e tamanhos hidrodinâmicos preferidos de domínio variável simples PEGuilado e monômeros e multímeros dAb. A explicação total do PCT/GB03/002804 (WO 2004/081026), inclui as porções referidas acima, e são incorporados neste por referência.
O tamanho hidrodinâmico dos ligandos (por exemplo, monômeros e multímeros dAb) da invenção pode ser determinado usando métodos que são bem conhecidos na técnica. Por exemplo, cromatografia de filtração em gel pode ser usado para determinar o tamanho hidrodinâmico de um ligando. Matrizes de filtração em gel adequados por determinação dos tamanhos hidrodinâmicos dos ligandos, tal como matrizes de agarose reticuladas, são bem conhecidas e facilmente disponíveis.
O tamanho de um formato de ligando (por exemplo, o tamanho de uma porção PEG ligada a um monômero dAb), pode ser variado dependendo da aplicação desejada. Por exemplo, onde o ligando é entendido deixar a circulação e entrar nos tecidos periféricos, é desejável manter o tamanho hidrodinâmico do ligando baixo para facilitar a extravasação de uma corrente sangüínea. Alternativamente, onde é desejado tem o ligando remanescente na circulação sistêmica por um período mais longo de tempo do tamanho do ligando pode ser aumentado, por exemplo pela formação como uma proteína semelhante ao Ig ou pela adição de uma porção de 30 a 60 kDa PEG (por exemplo, linear ou ramificado PEG 30 a 40 kDa PEG, tal como adição de duas porções de 20kDa PEG.) O tamanho do formato do ligando pode ser adaptado atingir uma vida média de soro in vivo desejado, por exemplo para controlar a exposição de uma toxina e/ou para reduzir efeitos colaterais de agentes tóxicos.
O tamanho hidrodinâmico de ligando (por exemplo, monômero dAb) e vida média do soro também pode ser aumentado pela conjugação ou ligação do ligando a um domínio de ligação (por exemplo, anticorpo ou fragmento de anticorpo) que liga-se a um antígeno ou Epítopo que aumenta a vida média in vivo, como descrito neste. Por exemplo, o ligando (por exemplo, monômero dAb) pode ser conjugado ou ligado a uma albumina anti-soro ou anticorpo de receptor Fc anti-neonatal ou fragmento de anticorpo, por exemplo, um anti-SA ou dAb de receptor Fc anti-neonatal, Fabj Fab' ou scFv ou a um aficorpo anti-SA ou aficorpo de receptor de Fc anti- neonatal.
Exemplo de albumina adequada, fragmentos de albumina ou variante de albumina para o uso de um ligando de acordo com a invenção são descritos em WO 2005/077042A2, que é incorporado neste por referência em sua totalidade. Em particular, a seguinte albumina, fragmentos de albumina ou variante de albumina podem ser usados na presente invenção:
• SEQ ID N0: 1 como divulgado em WO 2005/077042A2, (esta seqüência sendo explicitamente incorporada na presente divulgação por referência);
• Fragmento ou variante de albumina que compreende ou que consiste de aminoácidos 1-387 da SEQ ID N°: 1 em WO 2005/077042A2;
• Albumina, ou fragmento ou variante destes, que compreende uma seqüência de aminoácido selecionado do grupo que consiste de: (a) aminoácidos 54 a 61 da SEQ ID N0: 1 em WO 2005/077042A2; (b) aminoácidos 76 a 89 da SEQ ID N°: 1 em WO 2005/077042A2; (c) aminoácidos 92 a 100 da SEQ ID N0: 1 em WO 2005/077042A2; (d) aminoácidos 170 a 176 da SEQ ID N°: 1 em WO 2005/077042A2; (e) aminoácidos 247 a 252 da SEQ ID N°: 1 em WO 2005/077042A2; (f) aminoácidos 266 a 277 da SEQ ID N0: 1 em WO 2005/077042A2; (g) aminoácidos 280 a 288 da SEQ ID N°: 1 em WO 2005/077042A2; (h) aminoácidos 362 a 368 da SEQ ID N°: 1 em WO 2005/077042A2; (i) aminoácidos 439 a 447 da SEQ ID N0: 1 em WO 2005/077042A2 (j) aminoácidos 462 a 475 da SEQ ID N0: 1 em WO 2005/077042A2; (k) aminoácidos 478 a 486 da SEQ ID N0: 1 em WO 2005/077042A2; e (1) aminoácidos 560 a 566 da SEQ ID N°: 1 em WO 2005/077042A2.
Exemplos adicionais de albumina adequada, fragmentos e análogos para o uso em um ligando de acordo com a invenção são descritos em WO 03/076567A2, que é incorporado neste por referência em sua totalidade. Em particular, a seguinte albumina, fragmentos ou variantes podem ser usados na presente invenção:
• Albumina de soro humano como descrito em WO 03/076567A2, por exemplo, na figura 3 (esta informação de seqüência sendo explicitamente incorporado na presente divulgação por referência);
• Albumina de soro humano (HA) que consiste de uma cadeia de polipeptídeo não glicosado simples de 585 aminoácidos com um peso molecular de fórmula de 66.500 (Ver, Meloun, et ai, FEBS Letters 58:136 (1975); Behrens, et al.,Fed. Proc. 34:591 (1975); Lawn, et ai., Nucleic Acids Research 9:6102-6114 (1981); Minghetti, et ai, J. Biol. Chem. 261:6747 (1986));
• Uma variante ou análogo ou fragmento polimórfico de albumina como descrito em Weitkamp, et ai, Ann. Hum. Genet. 37:219 (1973);
• Um fragmento de albumina ou variante como descrito em EP 322094, por exemplo, HA(l-373., HA(l-388), HA(l-389), HA(l-369), e HA(1-419) e fragmentos entre 1-369 e 1-419;
• Um fragmento de albumina ou variante como descrito em EP 399666, por exemplo, HA(1-177) e HA( 1-200) e fragmentos entre HA(I-X), onde X é qualquer número de 178 a 199.
Onde uma (uma ou mais) porção extensora de vida média (por exemplo, albumina, transferrina e fragmentos e análogos destes) é usada nos ligandos da invenção, pode ser conjugado ao ligando usando qualquer método adequado, tal como, por difusão direta à porção de ligação alvo (por exemplo, dAb ou fragmento de anticorpo), por exemplo usando uma construção de nucleotídeo simples que codificam uma proteína de fusão, em que a proteína de fusão é codificado como uma cadeia de polipeptídeo simples com uma porção extensora de vida média localizado no terminal N ou C às porções de ligação alvo de superfície celular. Alternativamente, a conjugação pode ser atingida usando um ligador de peptídeo entre porções, por exemplo, um ligador de peptídeo como descrito em WO 03/076567A2 ou WO 2004/003019 (estas divulgações de ligador sendo incorporados por referência na presente divulgação para fornecer exemplos para o uso na presente invenção). Tipicamente, um polipeptídeo que intensifica de soro de vida média in vivo é um polipeptídeo que ocorre naturalmente in vivo e que resiste a degradação ou remoção por mecanismos endógenos que remove material indesejado a partir de organismo (por exemplo, humano). Por exemplo, um polipeptídeo que intensifica o soro de vida média in vivo pode ser selecionado a partir de proteínas de matriz extracelular, proteínas encontradas no sangue, proteínas encontradas na barreira sangue cérebro ou No tecido neural, proteínas localizadas no rim, fígado, pulmão, coração, pele ou osso, proteínas de tensão, proteínas específicas de doenças, ou proteínas envolvidas no transporte de Fc.
Os polipeptídeos adequados que intensificam o soro de vida média in vivo incluem, por exemplo, proteínas de fusão do agente ligando- neurofarmacêutico específico de receptor transferrina (ver Patente U.S. N0 5.977.307, a explicação de que são incorporados neste por referência), receptor celular endotelial capilar cerebral, transferrina, receptor de transferrina (por exemplo, receptor de transferrina solúvel), insulina, receptor de fator 1 de desenvolvimento semelhante à insulina (IGF1), receptor de fator 2 de desenvolvimento semelhante à insulina (IGF 2), receptor de insulina, fator X de coagulação do sangue, αΐ-antitripsina e HNF Ια. Os polipeptídeos adequados que intensificam o soro de vida média também incluem alfa-1 glicoproteína (orosomucóide; AAG), alfa-1 antiquimiotripsina (ACT), alfa-1 microglobulina (proteína HC; AIM), antitrombina III (AT III), apolipoproteína A-I (Apo A-1), apolipoproteína B (Apo B), ceruloplasmina (Cp), complemento de componente C3 (C3), complemento de componente C4 (C4), inibidor de esterase Cl (Cl INH), proteína C reativa (CRP), ferritina (FER), hemopexina (HPX)5 lipoproteína (Lp(a))5 proteína de ligação de manose (MBP), mioglobina (Myo)5 prealbumina (transtiretina; PAL), proteína de ligação de retinol (RBP)5 e fator reumatóide (RF).
Proteínas adequadas de matriz extracelular incluem, por exemplo, colágenos, lamininas, integrinas e fibronectina. Os colágenos são a maior proteína de matriz extracelular. A cerca de 15 tipos de moléculas de colágeno são correntemente conhecidos, observados nas partes diferentes do corpo, por exemplo tipo I de colágeno (considera 90 % do colágeno do corpo) observados no osso, pele, tendão, ligamentos, córnea, órgãos internos ou tipo II do colágeno observado na cartilagem, disco vertebral, notochord e humor vítreo ocular.
Proteínas adequadas a partir do sangue incluem, por exemplo, proteínas de plasma (por exemplo, fibrina, a-2 macroglobulina, albumina de soro, fibrinogênio (por exemplo, fibrinogênio A, fibrinogênio B), proteína amilóide de soro A, haptoglobina, profilina, ubiquitina, uteroglobulina e (3-2- microglobulina), enzimas e inibidores de enzima (por exemplo, plasminogênio, lisozima,cistatina C, alfa-l-antitripsina e inibidor de tripsina pancreático), proteínas do sistema imune, tal como proteínas de imunoglobulina (por exemplo, IgA5 IgD5 IgE5 IgG5 IgM5 cadeias leves de imunoglobulina (capa/lambda))5 proteínas de transporte (por exemplo, proteína de ligação de retinol, a-1 microglobulina)5 defensinas (por exemplo, beta-defensina I5 neutrofil defensina 1, neutrofil defensina 2 e neutrofil defensina 3) e outros.
As proteínas adequadas encontradas na barreira sangue cérebro ou no tecido neural incluem, por exemplo, receptor de melanocortina, mielina, transportador de ascorbato e outros.
Os polipeptídeos adequados que intensificam soro de vida média in vivo também incluem proteínas localizadas no rim (por exemplo, policistina, tipo IV de colágeno, Kl transportador de ânion orgânico, antígeno de Heymann), proteínas localizadas no fígado (por exemplo, desidrogenase de álcool, G250), proteínas localizadas no pulmão (por exemplo, componente secretário, que ligam-se a IgA), proteínas localizadas no coração (por exemplo, HSP 27, que é associado com cardiomiopatia dilatada), proteínas localizadas na pele (por exemplo, queratina), proteínas específicas do osso tal como proteínas morfogênicos (BMPs), que são uma subsérie da superfamília do fator do desenvolvimento β transformante de proteínas que demonstram atividade osteogênica (por exemplo, BMP-2, BMP-4, BMP-5, BMP-6, BMP- 7, BMP-8), proteínas específicas de tumor (por exemplo, antígeno de trofoblasto, receptor herceptina, receptor de estrogênio, catepsinas (por exemplo, catepsina B, que pode ser observada no fígado e baço)).
As proteínas adequadas específicas de doenças incluem, por exemplo, antígenos expressados apenas em células T ativadas, incluindo LAG-3 (gene de ativação de linfócito), ligando osteoprotegerina (OPGL; ver Nature 402, 304-309 (1999)), 0X40 (um membro da família do receptor TNF, expressado nas células T ativadas e especialmente super-reguladas em tipo I de vírus de leucemia de célula T humana (HTLV-I)-produzindo células; ver Immunol. 165 (l):263-70 (2000)). Proteínas adequadas específicas de doenças também incluem, por exemplo, metaloprotease (associado com artrites/cânceres) incluindo CG6512 Drosophila, paraplegina humana, FtsH humano, AFG3L2 humano, ftsH murino; e fatores de desenvolvimento angiogênico, incluindo fator de desenvolvimento de fibroblasto ácido (FGF- 1), fator de desenvolvimento fibroblasto básico (FGF-2), fator de desenvolvimento endotelial vascular/fator de permeabilidade vascular (VEGF/VPF), fator-α de desenvolvimento transformante (TGF a), fator alfa de necrose de tumor (TNF-α), angiogenina, interleucina-3 (IL-3), interleucina-8 (IL-8), fator de desenvolvimento endotelial derivado de plaqueta (PD-ECGF)i fator de desenvolvimento de placenta (PIGF), fator-BB de desenvolvimento derivado de plaqueta midcina (PDGF), e fractalquina.
Os polipeptídeos adequados que intensificam o soro de vida média in vivo também incluem proteínas de tensão tal como proteínas de choque do calor (HSPs). HSPs são normalmente observados intracelularmente. Quando estes são observados extracelularmente, isto é indicador que uma célula morreu e derramou seu conteúdo. Esta morte da célula não programada (necrose) ocorre quando a um resultado de trauma, doença ou dano, HSPs extracelular disparam uma resposta a partir do sistema imune, a ligação ao HSP extracelular pode resultar na localização das composições da invenção a um local da doença.
As proteínas adequadas envolvidas no transporte de Fc incluem, por exemplo, receptor de Brambell (também conhecido como FcRB). Este receptor Fc tem duas funções, ambas que são potencialmente úteis para liberação. As funções são (1) transporte de IgG da mãe para a criança através da placenta, (2) proteção de IgG a partir de uma degradação, deste modo, prolongando a vida média deste soro. É através do receptor que recicla IgG a partir de endossomas. (Ver, Holliger et al, Nat Biotechnol 15(7):632-6 (1997).)
Métodos para análises farmacocinéticas e determinação de ligando de vida média serão familiar aqueles habilitados na técnica. Detalhes podem ser observados em Kenneth, A et al: Chemical Stability of Pharmaceuticals: A Handbook for Pharmacists e em Peters et al, Pharmacokinetc analysis: A Practical Approach (1996). A referência também é feita por "Pharmacokinetics", M Gibaldi & D Perron, publicada por Mareei Dekker, 2°Rev. ex edition (1982), que descreve parâmetros farmacocinéticos tal como vida média de t alfa e t beta e área sob a curva (AUC). Ligandos que contém uma porção de toxina ou toxina
A invenção também diz respeito aos ligandos que compreendem uma porção de toxina ou toxina. As porções de toxinas adequadas compreendem uma toxina (por exemplo, toxina ativa de superfície, citotoxina). A porção de toxina ou toxina pode ser ligada ou conjugada ao ligando usando qualquer método adequado. Por exemplo, a porção de toxina ou toxina pode ser covalentemente ligada ao ligando diretamente ou através um ligador adequado. Os ligadores adequados podem incluir ligadores clivável ou não clivável, por exemplo, ligadores cliváveis por pH que compreendem um local de clivagem para uma enzima celular (por exemplo, esterase celular, protease celular tal como catepsina B). Tais ligadores cliváveis podem ser usados para preparar um ligando que podem liberar a porção de toxina ou toxina após o ligando seja incorporado.
Uma variedade de métodos para ligação ou conjugação da porção de toxina ou toxina a um ligando podem ser usados. O método particular selecionado dependerá da porção de toxina ou toxina e ligando a ser ligado ou conjugado. Se desejado, os ligadores que contém grupos funcionais terminais podem ser usados para ligar o ligando e porção de toxina ou toxina.
No geral, a conjugação é realizada pela reação da porção de toxina ou toxina que contém um grupo funcional reativo (ou é modificado por conter um grupo funcional reativo) com um ligador ou diretamente com um ligando. As ligações covalentes formadas pela reação na porção de toxina ou toxina que contém (ou é modificado por conter) uma porção química ou grupo funcional que pode, sob condições apropriadas, reagem com um segundo grupo químico deste modo formando uma ligação covalente. Se desejado, um grupo químico reativo adequado pode ser adicionado ao ligando ou a um ligador usando qualquer método adequado. (Ver, por exemplo, Hennanson, G. T., Bioconjugate Techniques, Academic Press: San Diego, CA (1996)) Muitas combinações de grupos químicos reativos adequados são conhecidos na técnica, por exemplo um grupo amina pode reagir com um grupo eletrofilico tal como tosilato, mesilato, halo (cloro, bromo, flúor, iodo), éster N- hidroxisuccinimidila (NHS), e outros. Os tióis podem reagir com maleimida, iodoacetila, acrilolila, bissulfetos de piridila, tiol do ácido 5-tiol-2- nitrobenzóico (TNB-tiol), e outros. Um grupo funcional aldeído pode ser ligado as moléculas contendo amina ou hidrazida, e um grupo azida pode reagir com um grupo fosforoso trivalente para formar ligações de fosforamidato ou fosforimida. Os métodos adequados introduzem grupos de ativação em moléculas que são conhecidas na técnica (ver por exemplo, Hermanson, G. T., Bioconjugate Techniques, Academic Press: San Diego, CA (1996)).
Porções de toxinas adequadas e toxinas incluem, por exemplo, um maitansinóide (por exemplo, maitansinol, por exemplo, DM1, DM4), um taxano, uma caliqueamicina, uma duocarmicina, ou derivados destes. O maitansinóide pode ser, por exemplo, maitansinol ou um análogo de maitansinol. Exemplos de análogos de maitansinol incluem aqueles tendo um anel aromático modificado (por exemplo, C-19-decloro, C-20-demetóxi, C- 20-acilóxi) e aquele tendo modificações em outras posições (por exemplo, C- 9-CH, C-14-alcoximetil, C-14-hidroximetil ou aceloximetil, C-15- hidróxi/acilóxi, C-15-metóxi, C-18-N-demetil, 4,5-deóxi). O maitansinol e análogos de maitansinol são descritos, por exemplo, em Patente U.S N0 5.208.020 e 6.333.410, os conteúdos são incorporados neste por referência. O maitansinol pode ser ligado como anticorpos e fragmentos de anticorpos usando, por exemplo, um 3 -(2-piridilditio) proprionato de N-succinimidila (também conhecido como 4-(2-piridilditio)pentanoato de N-succinimidila ou SPP), 4-succinimidil-oxicarbonil-a-(2-piridilditio)-tolueno (SMPT), N- succinimidil-3-(2-piridilditio)butirato (SDPB), 2 iminotiolano, ou anidrido de S-acetilsuccínico. O taxano pode ser, por exemplo, um taxol, taxotero, ou taxano novo (ver, por exemplo, WO 01/38318). O caliqueamicina pode ser, por exemplo, uma caliqueamicina do complexo de bromo (por exemplo, um complexo de bromo alfa, beta ou gama), uma caliqueamicina do complexo de iodo (por exemplo, um complexo de iodo alfa, beta ou gama), ou análogos e m imitadores destes. As caliqueamicinas do complexo de bromo incluem Il-BR5 I2-BR, 13-BR, I4-BR, Jl-BRj J2-BR e Kl-BR. As caliqueamicinas do complexo de iodo incluem Il-I3 I2-I, I3-I, Jl-Is J2-I, Ll-I e Kl-BR. Caliqueamicina e mutantes, análogos e imitadores destes são descritos, por exemplo, em Patente U.S. N0 4.970.198; 5.264.586; 5.550.246; 5.712.374, e 5.714.586, os conteúdos são incorporados neste por referência. Análogos de duocarmicina (por exemplo, KW-2189, DC88, DC89 CBI-TMI, e derivados destes) são descritos, por exemplo, em Patente U.S. N°. 5.070.092, Patente U.S. N0. 5.187.186, Patente U.S. N0. 5.641.780, Patente U.S. N°. 5.641.780, ■ 10 Patente U.S. N0. 4.923.990, e Patente U.S. N0. 5.101.038, os conteúdos são incorporados neste por referência.
Exemplos de outras toxinas incluem, mas não são limitados a antimetabólitos (por exemplo, metotrexato, 6-mercaptopurina, 6-tioguanina, citarabina, 5-fluorouracil de decarbazina), agentes alquilantes (por exemplo, mecloretamina, tioepa de clorambucila, CC-1065 (ver Patente U.S. N°. 5.475.092, 5.585.499, 5.846.545), melfalan, carmustina (BSNU) e lomustina (CCNU)5 ciclofosfamida, busulfan, dibromomanitol, estreptozotocina, mitomicina C5 e cis-diclorodiamino platina (II) (DDP) cisplatina), antraciclinas (por exemplo, daunorubicina (antigamente daunomicina) e doxorubicina), antibióticos (por exemplo, dactinomicina (antigamente actinomicina), bleomicina, mitramicina, mitomicina, puromicin antramicina (AMC)), duocarmicina e análogos ou derivados destes, e agentes anti- mitóticos (por exemplo, vincristina, vinblastina, taxol, auristatinas (por exemplo, auristatina E) e maitansinóides, e análogos ou homólogos destes. A toxina também pode ser uma toxina ativa de superfície, tal
como uma toxina que é um gerador de radical livre (por exemplo toxina contendo porções de selênio), ou radionuclídeo contendo porção. Radionuclídeo adequado contendo porções, incluem por exemplo, porções que contém iodo radioativo (13f ou 125I), ítrio (90Y), lutésio (177Lu), actínio (225Ac)i praseodímeo, astatina (211At), rênio (186Re), bismuto (212Bi ou 213Bi), índio (111In), tecnésio (99mTc), fósforo (32P), ródio (188Rh), sulfórico (35S), carbono (14C), trítio (3H), cromo (51Cr), cloro (36Cl), cobalto (57Co ou 58Co), ferro (59Fe), selênio (75Se), ou gálio (67Ga).
A toxina pode ser uma proteína, polipeptídeo ou peptídeo, a partir de fontes bacterianas, por exemplo, toxina da difteria, exotoxina pseudomonas (PE) e proteínas vegetais, por exemplo, a cadeia A de ricina (RTA), gelonina de proteínas que inativam ribosoma (RIPs), proteína antiviral de erva dos cancros, saporina, e dodecandron são abrangidos por uso como toxinas.
Compostos anti-sentido de ácidos nucleicos projetados ligam, inabilitam, promovem a degradação ou evitam a produção do mRNA responsável por gerar uma proteína alvo particular podendo também ser usada como uma toxina. Compostos anti-sentido incluem RNA ou DNA anti- sentido, filamentados simples ou duplos, oligonucleotídeos, ou seus análogos, que podem hibridizar especialmente às espécies mRNA individuais e evitam a transcrição e/ou processamento de RNA das espécies de mRNA e/ou tradução do polipeptídeo codificado e deste modo efetuar a redução em uma quantidade do polipeptídeo codificado respectivo. Ching, et aL, Proc. Natl. Acad. Sei. U.S.A. 86: 10006-10010 (1989); Broder, et al, Ann. Int. Med. 113: 604-618 (1990); Loreau, et al., FEBS Letters 274: 53-56 (1990); Terapêuticos anti-sentido úteis incluem por exemplo: Veglin TM (VasGene) e OGX-Oll (Oncogenix).
As toxinas também podem ser agentes fotoativos. Agentes fotoativos adequados incluem materiais com base em porfirina tal como porfímero sódico, as porfirinas verdes, clorin E6, hematoporfirina derivada por si só, ftalocianinas, etiopurpurinas, texafirina, e outros.
A toxina pode ser um anticorpo ou fragmento de anticorpo que liga-se a um alvo intracelular (por exemplo, um intracorpo), tal como um dAb que liga-se a um alvo intracelular. Tais anticorpos ou fragmentos de anticorpos (dAbs) pode ser diretamente definido por compartimentos subcelular ou alvos. Por exemplo, os anticorpos ou fragmentos de anticorpos (dAbs) podem ligar-se um alvo intracelular selecionado de erbB2, EGFR, BCR-ABL, p21 Rass Caspase3, Caspase7, Bcl-2, p53, Ciclina E, ATF- 1/CREB, HPVl6 E7, HPl, tipo IV de colagenase, catepsina L bem como outros descritos em Kontermann, R.E., Methods, 34:163-170 (2004), incorporado neste por referência em sua totalidade. Domínios de polipeptídeo que ligam ao VEGF
A invenção fornece domínio de polipeptídeos (por exemplo, domínios variáveis simples de imunoglobulina, monômeros de dAb) que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF. Em formas de realização preferidas, o domínio de polipeptídeo (por exemplo, dAb) liga-se ao VEGF com uma afinidade (KD; KD=Koff (kd)/Kon,(ka)) de 300 nM a 1 pM (isto é, 3 χ IO"7 a 5 χ 10"12M), preferivelmente 50 nM a 1 pM, mais preferivelmente 5 nM a 1 pM e mais preferivelmente 1 nM a 1 pM, por exemplo e Kd de 1 χ IO"7 M ou menos, preferivelmente 1 χ IO"8 M ou menos, mais preferivelmente 1 χ IO"9 M ou menos, vantajosamente 1 χ IO-10M ou menos e mais preferivelmente 1 χ IO"11 M ou menos; e/ou uma taxa constante de Koff 5 χ IO"1 s"1 a 1 χ 10"7preferivelmente 1 χ IO"2 s"1 a 1 χ IO"6 s"1, mais preferivelmente 5 χ IO"3 s"1 a 1 χ IO"5 s"1, por exemplo 5 χ IO"1 s"1 ou menos, preferivelmente IxlO"2 s"1 ou menos, vantajosamente IxlO-3S-1 ou menos, mais preferivelmente 1 χ IO"4 s-1 ou menos, ainda mais preferivelmente 1 χ 10° s ou menos, e mais preferivelmente 1 χ IO 6 s-1 ou menos como determinado pela ressonância de plasmon de superfície.
Em algumas formas de realização, o domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF compete com a ligação ao VEGF com um dAb selecionado do grupo que consiste de TARl5-1 (SEQ ID N0: 100), TAR15-3 (SEQ ID N°: 101), TARl 5-4 (SEQ ID N°: 102), TARl 5-9 (SEQ ID N°: 103), TARl 5-10 (SEQ ID N°: 104), TAR15-11 (SEQ ID N°: 105), TAR15-12 (SEQ ID N0: 106), TARl5-13 (SEQ ID N°: 107), TAR15-14 (SEQ ID N°: 108), TAR15-15 (SEQ ID N0: 109), TAR15-16 (SEQ ID N°: 110), TAR15-17 (SEQ ID N°: 111), TAR15-18 (SEQ IDN0: 112), TAR15-19 (SEQ ID N°: 113), TAR15-20 (SEQ ID N°: 114), TAR 15-22 (SEQ ID N°: 115), TAR15-5 (SEQ ID N°: 116), TARl5-6 (SEQ ID N°: 117), TAR15-7 (SEQ ID N0: 118), TAR15-8 (SEQ ID N0: 119), TAR15-23 (SEQ ID N°: 120), TAR15-24 (SEQ ID N°: 121), TARl5-25 (SEQ ID N0: 122), TAR15-26 (SEQ ID N°: 123), TAR15-27 " 10 (SEQ ID N°: 124), TAR15-29 (SEQ ID N0: 125), TAR15-30 (SEQ ID N°: 126), TARl5-6-500 (SEQ ID N°: 127), TAR15-6-501 (SEQ ID N°: 128), TAR15-6-502 (SEQ ID N°: 129), TAR15-6-503 (SEQ ID N°: 130), TAR15- 6-504 (SEQ ID N0: 131), TAR15-6-505 (SEQ ID N°: 132), TAR15-6-506 (SEQ ID N0: 133), TAR15-6-507 (SEQ ID N°: 134), TAR15-6-508 (SEQ ID N°: 135), TAR15-6-509 (SEQ ID N°: 136), TAR15-6-510 (SEQ ID N°: 137), TARl5-8-500 (SEQ ID N0: 138), TAR15-8-501 (SEQ ID N°: 139), TAR15- 8-502 (SEQ ID N°: 140), TAR15-8-503 (SEQ ID N°: 141), TAR15-8-505 (SEQ ID N0: 142), TAR15-8-506 (SEQ ID N°: 143), TAR15-8-507 (SEQ ID N°: 144), TAR15-8-508 (SEQ ID N0: 145), TAR15-8-509 (SEQ ID N°: 146), TARl 5-8-510 (SEQ ID N°: 147), TARl 5-8-511 (SEQ ID N°: 148), TARl 5- 26-500 (SEQ IDN°: 149), TAR15-26-501 (SEQ IDN°: 150), TARl5-26-502 (SEQ ID 5 N°: 151), TAR15-26-503 (SEQ ID N°: 152), TAR15-26-504 (SEQ ID N0: 153), TAR15-26-505 (SEQ ID N°: 154), TAR15-26-506 (SEQ ID N0: 155), TAR15-26-507 (SEQ ID N°: 156), TAR15-26-508 (SEQ ID N°: 157), TARl5-26-509 (SEQ ID N°: 158), TAR15-26-510 (SEQ ID N°: 159), TARl5-26-511 (SEQ ID N°: 160), TAR15-26-512 (SEQ ID N°: 161), TARl5-26-513 (SEQ ID N°: 162), TAR15-26-514 (SEQ ID N°: 163), TARl5-26-515 (SEQ ID N0: 164), TAR15-26-516 (SEQ ID N°: 165), TARl 5-26-517 (SEQ ID N°: 166), TARl 5-26-518 (SEQ ID N°: 167), - TARl 5-26-519 (SEQ ID N°: 168), TARl 5-26-520 (SEQ ID N0: 169), TARl 5-26-521 (SEQ ID N°: 170), TARl 5-26-522 (SEQ ID N°: 171), TARl 5-26-523 (SEQ ID N°: 172), TARl 5-26-524 (SEQ ID N0: 173), TARl 5-26-525 (SEQ ID N0: 174), TARl 5-26-526 (SEQ ID N°: 175), TARl5-26-527 (SEQ ID N0: 176), TARl 5-26-528 (SEQ ID N°: 177), TARl 5-26-529 (SEQ ID N°: 178), TARl 5-26-530 (SEQ ID N°: 179), TARl 5-26-531 (SEQ ID N°: 180), TARl 5-26-532 (SEQ ID N°: 181), TARl5-26-533 (SEQ ID N°: 182), TARl 5-26-534 (SEQ ID N°: 183), TARl5-26-535 (SEQ ID N°: 184), TARl 5-26-536 (SEQ ID N°: 185), TARl5-26-537 (SEQ ID N°: 186), TARl 5-26-538 (SEQ ID N°: 187), TARl 5-26-539 (SEQ ID N0: 188), TARl 5-26-540 (SEQ ID N0: 189), TARl 5-26-541 (SEQ ID N°: 190), TARl 5-26-542 (SEQ ID N°: 191), TARl 5-26-543 (SEQ ID N°: 192), TARl 5-26-544 (SEQ ID N°: 193), TARl 5-26-545 (SEQ ID N°: 194), TARl 5-26-546 (SEQ ID N°: 195), TARl5-26-547 (SEQ ID N0: 196), TARl 5-26-548 (SEQ ID N°: 197),
TARl5-26-549 (SEQ ID N°: 198), TAR15-26-550 (SEQ ID N°: 539) e TARl5-26-551 (SEQ IDN0: 540).
Em algumas formas de realização, o domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF compete com a ligação ao VEGF com TARl5-26-555 (SEQ ID N°: 704).
Em algumas formas de realização, o domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF compreende uma seqüência de aminoácido que tem pelo menos cerca de 80 %, pelo menos cerca de 85 %, pelo menos cerca de 90 %, pelo menos cerca de 91 %, pelo menos cerca de 92 %, pelo menos cerca de 93 %, pelo menos cerca de 94 %, pelo menos cerca de 95 %, pelo menos cerca de 96 %, pelo menos cerca de 97 %, pelo menos cerca de 98 %, ou pelo menos cerca de 99 % de identidade de seqüência de aminoácido com a seqüência de aminoácido de um dAb selecionado do grupo que consiste de TARl5-1 (SEQ ID N°: 100), TAR15-3 (SEQ ID N0: 101), TAR15-4 (SEQ ID N°: 102), TAR15-9 (SEQ ID N°: 103), TAR15-10 (SEQ ID N°: 104), TAR15-11 (SEQ ID N0: 105), TARl5-12 (SEQ ID N0: 106), TAR15-13 (SEQ ID N°: 107), TAR15-14 (SEQ ID N°: 108), TAR15-15 (SEQ ID N°: 109), TAR15-16 (SEQ ID N°: 110), TARl5-17 (SEQ IDN0: 111), TAR15-18 (SEQ ID N°: 112), TAR15-19 (SEQ ID N°: 113), TAR15-20 (SEQ ID N°: 114), TAR 15-22 (SEQ ID N°: 115), TAR15-5 (SEQ ID N0: 116), TAR15-6 (SEQ ID N°: 117), TAR15-7 (SEQ ID N°: 118), TAR15-8 (SEQ ID N°: 119), TAR15-23 (SEQ ID N°: 120), TAR15-24 (SEQ ID N°: 121), TAR15-25 (SEQ ID N°: 122), TAR15-26 (SEQ ID N°: 123), TAR15-27 (SEQ ID N°: 124), TAR15-29 (SEQ ID N°: 125), TARl5-30 (SEQ ID N°: 126), TAR15-6-500 (SEQ ID N°: 127), TARl5-6-501 (SEQ ID N0: 128), TAR15-6-502 (SEQ ID N°: 129), TAR15- 6-503 (SEQ ID N°: 130), TAR15-6-504 (SEQ ID N°: 131), TAR15-6-505 (SEQ ID N°: 132), TAR15-6-506 (SEQ ID N°: 133), TAR15-6-507 (SEQ ID N°: 134), TARl5-6-508 (SEQ ID N°: 135), TAR15-6-509 (SEQ ID N°: 136), TARl5-6-510 (SEQ ID N°: 137), TAR15-8-500 (SEQ ID N°: 138), TAR15- 8-501 (SEQ ID N°: 139), TAR15-8-502 (SEQ ID N°: 140), TAR15-8-503 (SEQ ID N°: 141), TAR15-8-505 (SEQ ID N°: 142), TAR15-8-506 (SEQ ID N0: 143), TAR15-8-507 (SEQ ID N°: 144), TAR15-8-508 (SEQ ID N0: 145), TARl5-8-509 (SEQ ID N0: 146), TAR15-8-510 (SEQ ID N°: 147), TAR15- 8-511 (SEQ ID N0: 148), TAR15-26-500 (SEQ ID N0: 149), TAR15-26-501 (SEQ ID N0: 150), TAR15-26-502 (SEQ ID N0: 151), TAR15-26-503 (SEQ ID N°: 152), TAR15-26-504 (SEQ ID N°: 153), TAR15-26-505 (SEQ ID N°: 154), TAR15-26-506 (SEQ ID N°: 155), TAR15-26-507 (SEQ ID N°: 156), TARl5-26-508 (SEQ ID N0: 157), TAR15-26-509 (SEQ ID N°: 158), TAR15-26-510 (SEQ ID N0: 159), TAR15-26-511 (SEQ ID N°: 160), TARl5-26-512 (SEQ ID N0: 161), TAR15-26-513 (SEQ ID N°: 162), TARl5-26-514 (SEQ ID N0: 163), TAR15-26-515 (SEQ ID N°: 164), TAR15-26-516 (SEQ ID N0: 165), TAR15-26-517 (SEQ ID N°: 166), TAR15-26-518 (SEQ ID N°: 167), TARl 5-26-519 (SEQ ID N0: 168), TARl 5-26-520 (SEQ ID N0: 169), TARl 5-26-521 (SEQ ID N°: 170), TARl 5-26-522 (SEQ ID N°: 171), TARl 5-26-523 (SEQ ID N0: 172), TARl 5-26-524 (SEQ ID N°: 173), TARl 5-26-525 (SEQ ID N°: 174), TARl 5-26-526 (SEQ ID N0: 175), TARl 5-26-527 (SEQ ID N°: 176), TARl 5-26-528 (SEQ ID N0: 177), TARl 5-26-529 (SEQ ID N0: 178), TAR15-26-530 (SEQ ID N°: 179), TAR15-26-531 (SEQ ID N°: 180), TARl 5-26-532 (SEQ ID N0: 181), TAR15-26-533 (SEQ ID N°: 182), TARl 5-26-534 (SEQ ID N0: 183), TARl 5-26-53 5 (SEQ ID N0: 184), TAR15-26-536 (SEQ ID N°: 185), TAR15-26-537 (SEQ ID N°: 186), TARl 5-26-538 (SEQ ID N0: 187), TAR15-26-539 (SEQ ID N0: 188), TARl 5-26-540 (SEQ ID N0: 189), TAR15-26-541 (SEQ ID N0: 190), TARl 5-26-542 (SEQ ID N°: 191), TARl 5-26-543 (SEQ ID N°: 192), TARl 5-26-544 (SEQ ID N0: 193), TARl 5-26-545 (SEQ ID N0: 194), TAR15-26-546 (SEQ ID N0: 195), TAR15-26-547 (SEQ ID N°: 196), TARl 5-26-548 (SEQ ID N0: 197), TARl 5-26-549 (SEQ ID N0: 198),
TARl5-26-550 (SEQID N°: 539) e TAR15-26-551 (SEQID N°: 540).
Em algumas formas de realização, o domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF compreende uma seqüência de aminoácido que tem pelo menos cerca de 80 %, pelo menos cerca de 85 %, pelo menos cerca de 90 %, pelo menos cerca de 91 %, pelo menos cerca de 92 %, pelo menos cerca de 93 %, pelo menos cerca de 94 %, pelo menos cerca de 95 %, pelo menos cerca de 96 %> pelo menos cerca de 97 %, pelo menos cerca de 98 %, ou pelo menos cerca de 99 % de identidade de seqüência de aminoácido com a seqüência de aminoácido de TARl5-26-555 (SEQ ID N0: 704).
Em formas de realização preferidas, o domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF compreende uma seqüência de aminoácido que tem pelo menos cerca de 90 %, pelo menos cerca de 91 %, pelo menos cerca de 92 %, pelo menos cerca de 93 %, pelo menos cerca de 94 %, pelo menos cerca de 95 %, pelo menos cerca de 96 %, pelo menos cerca de 97 %, pelo menos cerca de 98 %, ou pelo menos cerca de 99 % de identidade de seqüência de aminoácido com a seqüência de aminoácido de um dAb selecionado do grupo que consiste de TAR15-6 (SEQ ID N°: 117), TAR15-8 (SEQ ID N°: 119) e TAR15-26 (SEQ ID N°: 123). Por exemplo, o domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF pode compreender TARl 5- 6 (SEQ ID N°: 117), TARl 5-8 (SEQ ID N0: 119), ou TARl 5-26 (SEQ ID N°: 123).
Em algumas formas de realização, o domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF compete com qualquer dAbs divulgado neste pela ligação a VEGF.
Preferivelmente o domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF é um domínio variável simples de imunoglobulina. O domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF pode compreender qualquer domínio variável de imunoglobulina adequada, e preferivelmente compreende um domínio variável humano ou um domínio variável que compreende regiões de estrutura humana. Em certas formas de realização, o domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF compreende uma estrutura universal, como descrito neste.
A estrutura universal pode ser uma estrutura Vl (νλ, ou Vk) , tal como uma estrutura que compreende a seqüência de aminoácido de estrutura codificada pelo linha de germe humano DPK1, DPK2, DPK3, DPK4, DPK5, DPK6, DPK7, DPK8, DPK9, DPK10, DPKl2, DPKl3, DPKl 5, DPK16, DPKl 8, DPK19, DPK20, DPK21, DPK22, DPK23, DPK24, DPK25, DPK26 ou DPK 28 segmento de gene de imunoglobulina. Se desejado, a estrutura Vl ainda pode compreender a seqüência de aminoácido de estrutura codificada pela linha de germe humano Jk 1, JK2, JK3, JK4, ou JK5 segmento de gene de imunoglobulina.
Em outras formas de realização a estrutura universal pode ser uma estrutura VH, tal como uma estrutura que compreende a seqüência de aminoácido de estrutura codificada pela linha de germe humano DP4, DP7, DP8, DP9, DP10, DP31, DP33, DP38, DP45, DP46, DP47, DP49, DP50, DP51, DP53, DP54, DP65, DP66, DP67, DP68 ou DP69 segmento de gene de imunoglobulina. Se desejado, a estrutura Vh ainda pode compreender a seqüência de aminoácido de estrutura codificada pela linha de germe humano Jh 1, Jh2, Jh3, Jh4, J^b, JH5 e JH6 segmento de gene de imunoglobulina.
Em certas formas de realização, o domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF compreende uma ou mais regiões de estrutura que compreende uma seqüência de aminoácido que é a mesma como a seqüência de aminoácido de uma região de estrutura correspondente codificada por um segmento de gene de anticorpo de linha de germe humano, ou uma seqüência de aminoácidos de uma ou mais das ditas regiões de estrutura coletivamente compreende até 5 diferenças de aminoácidos relativos à seqüência de aminoácido da dita região de estrutura correspondente codificada por um segmento de gene de anticorpo de linha de germe humano.
Em outras formas de realização, a seqüência de aminoácidos de FWl, FW2, FW3 e FW4 do domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF são os mesmos como uma seqüência de aminoácidos de regiões de estrutura correspondentes codificadas por um segmento de gene de anticorpo de linha de germe humano, ou as seqüências de aminoácido de FWl, FW2, FW3 e FW4 coletivamente contém até 10 diferenças de aminoácidos relativos a uma seqüência de aminoácidos de regiões de estrutura correspondentes codificadas pelo dito segmento de gene de anticorpo de linha de germe humano. Em outras formas de realização, o domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF compreende regiões FWls FW2 e FW3, e a seqüência de aminoácido das ditas regiões FWl, FW2 e FW3 são as mesmos como uma seqüência de aminoácidos de regiões de estrutura correspondentes codificadas pelo segmento de gene de anticorpo de linha de germe humanos.
Em formas de realização particulares, o domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF compreende a estrutura DPK9 VL) ou uma estrutura Vh selecionada do grupo que consiste de DP47, DP45 e DP38. O domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF pode compreender um local de ligação para um ligando genérico, tal como proteína A, proteína L e proteína G.
Em certas formas de realização, o domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF é substancialmente resistente a agregação. Por exemplo, em algumas formas de realização, menos do que cerca de 10 %, menos do que cerca de 9 %, menos do que cerca de 8 %, menos do que cerca de 7 %, menos do que cerca de 6 %, menos do que cerca de 5 %, menos do que cerca de 4 %, menos do que cerca de 3 %, menos do que cerca de 2 % ou menos do que cerca de 1 % do domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF agrega quando um 1-5 mg/ml, 5-10 mg/ml, 10-20 mg/ml, 20-50 mg/ml, 50-100 mg/ml, 100-200 mg/ml ou 200 -500 mg/ml solução de ligando ou dAb em um solvente que é rotineiramente usado por formulação de medicamento tal como solução salina, solução salina tamponada, solução salina de tampão de citrato, água, uma emulsão, e qualquer destes solventes com um excipiente aceitável tal como aquele aprovado pelo FDA, é mantido a cerca de 22° C, 22-25° C, 25-30° C, 30-37° C, 37-40° C, 40-50° C, 50-60° C, 60-70° C, 70-80° C, 15-20° C, 10-15° C, 5-10° C, 2-5° C, 0-2° C, -10° C a 0° C, -20° C a -10° C9 -40° C a -20° C, -60° C a -40° C, ou -80° C a -60° C, por um período de tempo de cerca de, por exemplo, 10 minutos, 1 hora, 8 horas, 24 horas, 2 dias, 3 dias, 4 dias, 1 semana, 2 semanas, 3 semanas, 1 mês, 2 meses, 3 meses, 4 meses, 6 meses, 1 ano, ou 2 anos.
A agregação pode ser avaliada usando qualquer método adequado, tal como, por microscopia, estimando a turbidez de uma solução pela inspeção ou espectroscopia visual ou qualquer outro método adequado. Preferivelmente, a agregação é estimada pela dispersão de luz dinâmica. Os domínios de polipeptídeos que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF que são resistentes a agregação fornecem diversas vantagens. Por exemplo, tal domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF pode ser fornecido rapidamente em rendimento alto como proteínas solúveis pela expressão usando um sistema de produção biológico adequado, tal como E. coli, e pode ser formulado e/ou armazenado em concentrações maiores do que os polipeptídeos convencionais, e com menos agregação e perda da atividade.
Além disso, o domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF que são resistentes a agregação podem ser produzidos mais economicamente do que outros polipeptídeos de ligação de antígeno ou epítopo (por exemplo, os anticorpos convencionais). Por exemplo, no geral, a preparação polipeptídeos de ligação de antígeno ou epítopo pretendida pelas aplicações in vivo incluem processos (por exemplo, filtração em gel) que remove os polipeptídeos agregados. A falha para remover tais agregados podem resultar na preparação que não é adequada para aplicações in vivo porque, por exemplo, agregados de um polipeptídeo de ligação de antígeno que é pretendido atuar como um antagonista pode funcionar como um agonista pela indução da reticulação ou aglomeração do antígeno alvo. A proteína agregada também pode reduzir a eficácia do polipeptídeo terapêutico por indução de uma resposta imune no paciente que está sendo administrado.
Em contraste, o domínio de polipeptídeo resistente a agregação que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF da invenção pode ser preparado por aplicações in vivo sem necessidade de incluir etapas de processos que removem os agregados, e podem ser usados em aplicações in vivo sem as desvantagens mencionadas acima causados por agregados de polipeptídeo.
Em algumas formas de realização, o domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF desdobrar-se reversivelmente quando aquecido a uma temperatura (Ts) e esfriado a uma temperatura (Tc), em que Ts é maior do que a temperatura de fusão (Tm) do domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação por VEGF, e Tc é menor do que a temperatura de fusão do domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF. Por exemplo, um domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF pode desdobrar-se reversivelmente quando aquecido a 80° C e esfriado a cerca de temperatura ambiente. Um polipeptídeo que desdobra-se reversivelmente perde a função quando desdobrado mas recupera a função no redobramento. Tais polipeptídeos são distintos a partir de polipeptídeos que agregam quando dobrados ou que redobram inadequadamente (polipeptídeos mal-dobrados), isto é, não recuperam a função.
O desdobramento e redobramento de polipeptídeo pode ser avaliado, por exemplo, pela detecção direta ou indireta de estrutura de polipeptídeo usando qualquer método adequado. Por exemplo, estrutura de polipeptídeo pode ser detectado pelo dicroísmo circular (CD) (por exemplo, UV CD afastado, UV CD próximo), fluorescência (por exemplo, fluorescência de cadeias secundárias de triptofano), susceptível a proteólise, ressonância magnética nuclear (NMR), ou por detecção ou medição da função de polipeptídeo que é dependente da dobra apropriada (por exemplo, ligação ao ligando alvo, ligação ao ligando genérico). Em um exemplo, o desdobramento de polipeptídeo é avaliado usando um ensaio funcional em que a perda da função de ligação (por exemplo, ligação ao ligando genérico e/ou alvo, ligação ao substrato) indica que o polipeptídeo é desdobrado.
A extensão de desdobramento e redobramento de um domínio
a
de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF pode ser determinado usando um desdobramento ou curva de desnaturação. Uma curva de desdobramento pode ser produzida pela temperatura de plotagem como a concentração ordenada e a relativa de polipeptídeo dobrado como a abscissa. A concentração relativa do domínio de polipeptídeo dobrado que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF pode ser determinado direto ou indiretamente usando qualquer método adequado (por exemplo, CD, fluorescência, ensaio de ligação). Por exemplo, um domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para solução VEGF pode ser preparado e elipicidade da solução determinada por CD. O valor de elipicidade obtido representa uma concentração relativa do ligando do brado (por exemplo, monômero dAb) de 100 %. O domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF na solução é então desdobrada aumentando-se incrementalmente a temperatura da solução e elipicidade é determinado em incrementos adequados (por exemplo, após cada aumento de um grau na temperatura). O domínio polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF em solução é então redobrada pela redução incrementalmente da temperatura da solução e elipicidade é determinada em incrementos adequados. Os dados podem ser plotados para produzir uma curva de desdobramento e uma curva de redobramento. As curvas de desdobramento e redobramento tem uma forma sigmoidal característica que inclui uma porção em que o domínio de
polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para moléculas VEGF sejam dobrados, uma transição de desdobramento/ redobramento em que o domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para moléculas VEGF são desdobradas por vários graus, e uma porção em que domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF sejam desdobradas. O eixo y intercepta a curva de redobramento é a quantidade relativa de domínio de polipeptídeo redobrado que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF recuperado. Uma recuperação de pelo menos cerca de 50 ' 10 %, ou pelo menos cerca de 60 %, ou pelo menos cerca de 70 %, ou pelo menos cerca de 75 %, ou pelo menos cerca de 80 %, ou pelo menos cerca de 85 %, ou pelo menos cerca de 90 %, ou pelo menos cerca de 95 % indica que o ligando ou monômero dAb desdobra-se reversivelmente.
Em uma forma de realização preferida, a reversibilidade de desdobramento de um domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF é determinado pela preparação de um domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para solução VEGF e plotagem de curvas de desdobramento e redobramento por calor. O domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para solução VEGF pode ser preparada em qualquer solvente adequado, tal como um tampão aquoso que tem um pH adequado para permitir que o domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF dissolva (por exemplo, pH que é de cerca de 3 unidades acima ou abaixo do ponto isoelétrico (pi)). O domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para solução VEGF é concentrado o suficiente para permitir desdobramento/dobramento a ser detectado. Por exemplo, o ligando ou solução de monômero dAb pode ser de cerca de 0,1 μΜ a cerca de 100 μΜ, ou preferivelmente cerca de 1 μΜ a cerca de 10 μΜ. Se a temperatura de fusão (Tm) de um domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF é conhecida, a solução pode ser aquecida a cerca de dez graus abaixo do Tm (Tm-IO) e dobramento avaliado por elipicidade ou fluorescência (por exemplo, varredura de UV CD distante de 200 nm a 250 nra, comprimento de onda fixo CD a 235 nm ou 225 nm; espectros de emissão fluorescente de triptofano de 300 a 450 nm com excitação a 298 nm) para fornecer 100 % do ligando dobrado relativo ou monômero dAb. A solução é então aquecida a pelo menos dez graus acima do Tm (Tm+10) em incrementos pré- determinados (por exemplo, aumento de cerca de 0,1 a cerca de 1 grau), e elipicidade ou fluorescência é determinada a cada um incremento. Então o domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF é redobrada pela esfriamento de pelo menos Tm-10 em incrementos pré-determinados e elipicidade ou fluorescência determinada a cada incremento. Se a temperatura de fusão de um domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF não é conhecido, a solução pode ser desdobrada pelo aquecimento incrementai de cerca de 25° C a cerca de 100° C e então redobrado pelo esfriamento incrementai de pelo menos cerca de 25° C, e elipicidade ou fluorescência em cada incremento de aquecimento ou esfriamento é determinado. Os dados obtidos pode ser plotados para produzir uma curva de desdobramento e uma curva de redobramento, em que o eixo y intercepta a curva de redobramento é a quantidade relativa de proteína recuperada redobrada. Em algumas formas de realização, o domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF não compreende um domínio variável de imunoglobulina de camelídeo, ou uma ou mais de estruturas de aminoácidos que são únicas aos domínios variáveis de imunoglobulina codificado por segmentos de gene de anticorpo de linha de germe de camelídeo. %
Pre feri velmente, o domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF é secretada em uma quantidade de pelo menos cerca de 0,5 mg/L quando expressada em E. coli ou em espécies Pichia (por exemplo, P. pastoris). Em outras formas de realização preferidas, um domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF é secretado em uma quantidade de pelo menos cerca de 0,75 mg/L, pelo menos cerca de 1 mg/L, pelo menos cerca de 4 mg/L, pelo menos cerca de 5 mg/L, pelo menos cerca de 10 mg/L, pelo menos cerca de 15 mg/L, pelo menos cerca de 20 mg/L, pelo menos cerca de 25 mg/L, pelo menos cerca de 30 mg/L, pelo menos cerca de 35 mg/L, pelo menos cerca de 40 mg/L, pelo menos cerca de 45 mg/L, ou pelo menos cerca de 50 mg/L, ou pelo menos cerca de 100 mg/L, ou pelo menos cerca de 200 mg/L, ou pelo menos cerca de 300 mg/L, ou pelo menos cerca de 400 mg/L, ou pelo menos cerca de 500 mg/L, ou pelo menos cerca de 600 mg/L, ou pelo menos cerca de 700 mg/L, ou pelo menos cerca de 800 mg/L, pelo menos cerca de 900 mg/L, ou pelo menos cerca de lg/L quando expressada em E. coli ou em espécies Pichia (por exemplo, P. pastoris). Em outras formas de realização preferidas, um domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF é secretada em uma quantidade de pelo menos cerca de 1 mg/L a pelo menos cerca de 1 g/L, pelo menos cerca de 1 mg/L a pelo menos cerca de 750 mg/L, pelo menos cerca de 100 mg/L a pelo menos cerca de 1 g/L, pelo menos cerca de 200 mg/L a pelo menos cerca de 1 g/L, pelo menos cerca de 300 mg/L a pelo menos cerca de 1 g/L, pelo menos cerca de 400 mg/L a pelo menos cerca de 1 g/L, pelo menos cerca de 500 mg/L a pelo menos cerca de 1 g/L, pelo menos cerca de 600 mg/L a pelo menos cerca de 1 g/L, pelo menos cerca de 700 mg/L a pelo menos cerca de 1 g/L, a pelo menos cerca de 800 mg/L a pelo menos cerca de 1 g/L, ou pelo menos cerca de 900 mg/L a pelo menos cerca de 1 g/L quando expressada em E. coli ou em espécies Pichia (por exemplo, P. pastoris). Embora, um domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF descrito neste pode ser secretado quando expressado em E. coli ou em espécies Pichia (por exemplo, P. pastoris), estes podem ser produzidos usando qualquer método adequado, tal como métodos químicos sintéticos ou métodos de produção biológicos que não é utilizado em espécies E. coli ou Pichia. Domínios de polipeptídeo que ligam ao EGFR
A invenção fornece domínio de polipeptídeos (por exemplo, dAb) que tem um local de ligação com especificidade de ligação para EGFR. Em formas de realização preferidas, o domínio de polipeptídeo (por exemplo, dAb) liga-se ao EGFR com uma afinidade (KD; KD=Koff(kd)/Kon(ka)) de 300 nMalpM (isto é, 3 χ IO"7 a 5 χ IO-12M), preferivelmente 100 nM a 1 pM, ou
0 nM a 10 pM, mais preferivelmente 10 nM a 100 pM e mais preferivelmente cerca de 1 nM, por exemplo e Kd de 1 χ IO"7 M ou menos, preferivelmente 1 χ IO"8 M ou menos, mais preferivelmente cerca de IxlO"9 M ou menos, 1 χ IO"10 M ou menos ou 1 χ IO"11 M ou menos; e/ou uma taxa constante Koff de 5 χ IO"1 s"1 a 1 χ IO"7 s "''preferivelmente 1 χ IO"2 s-1 a 1 χ 10"
6 s mais preferivelmente 5 χ IO"3 s"1 a 1 χ IO"5 s"1, por exemplo 5 χ IO"1 s"1 ou menos, preferivelmente 1 χ IO"2 s"1 ou menos, vantajosamente 1 χ IO"3 s"1 ou menos, mais preferivelmente 1 χ IO"4 s ou menos, ainda mais preferivelmente 1 χ IO"5 s"1 ou menos, e mais preferivelmente 1 χ IO"6 s"1 ou menos como determinado pela ressonância de plasmon de superfície.
Em algumas formas de realização, o domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para EGFR compete com a ligação ao EGFR com a dAb selecionado do grupo que consiste de DOM16-17 (SEQ ID N°: 325), DOM16-18 (SEQ ID N°: 326), DOM16-19 (SEQ ID N°: 327), DOM16-20 (SEQ ID N°: 328), DOM16-21 (SEQ ID N0: 329), DOM16-22 (SEQ ID N°: 330), DOM16-23 (SEQ ID N°: 331), DOMl6-24 (SEQ IDN°: 332), DOMl6-25 (SEQ ID N°: 333), DOM16- 26 (SEQ ID N0: 334), DOM16-27 (SEQ ID N°: 335), DOM16-28 (SEQ ID N°: 336), DOMl6-29 (SEQ ID N°: 337), DOMl6-30 (SEQ ID N°: 338), DOMl6-31 (SEQ ID N°: 339), DOM16-32 (SEQ ID N0: 340), DOM16-33 (SEQ ID N°: 341), DOM16-35 (SEQ ID N°: 342), DOM16-37 (SEQ ID N°: 343), DOM 16-38 (SEQ ID N0: 344), DOM16-39 (SEQ ID N°: 345), DOM16- 40 (SEQ ID N°: 346), DOM16-41 (SEQ ID N0: 347), DOM16-42 (SEQ ID N°: 348), DOM 16-43 (SEQ ID N°: 349), DOM16-44 (SEQ ID N°: 350), DOM 16-45 (SEQ ID N°: 351), DOM16-46 (SEQ ID N°: 352), DOM16-47 (SEQ ID N°: 353), DOM16-48 (SEQ ID N°: 354), DOM16-49 (SEQ ID N°: 355), DOMl6-50 (SEQ ID N0: 356), DOM16-59 (SEQ ID N°: 357), DOM16- 60 (SEQ ID N°: 358), DOM16-61 (SEQ ID N°: 359), DOM16-62 (SEQ ID N°: 360), DOMl6-63 (SEQ ID N°: 361), DOM16-64 (SEQ ID N°: 362), DOM 16-65 (SEQ ID N°: 363), DOMl6-66 (SEQ ID N0: 364), DOM16-67 (SEQ ID N°: 365), DOM16-68 (SEQ ID N°: 366), DOM16-69 (SEQ ID N°: 367), DOMl6-70 (SEQ IDN0: 368), DOM16-71 (SEQ ID N°: 369), DOM16- 72 (SEQ ID N°: 370), DOM16-73 (SEQ ID N°: 371), DOM16-74 (SEQ ID N°: 372), DOM 16-75 (SEQ ID N0: 373), DOM16-76 (SEQ ID N°: 374), DOM 16-77 (SEQ ID N°: 375), DOM16-78 (SEQ ID N°: 376), DOM16-79 (SEQ ID N0: 377), DOMI6-8O (SEQ ID N°: 378), DOM16-81 (SEQ ID N°: 379), DOMl6-82 (SEQ ID N0: 380), DOM16-83 (SEQ ID N°: 381), D0M16- 84 (SEQ ID N°: 382), DOM16-85 (SEQ ID N0: 383), DOM16-87 (SEQ ID N0: 384), DOM16-88 (SEQ ID N°: 385), DOM16-89 (SEQ ID N°: 386), DOM 16-90 (SEQ ID N°: 387), DOM16-91 (SEQ ID N0: 388), DOM16-92 (SEQ ID N°: 389), DOM16-94 (SEQ ID N°: 390), DOM16-95 (SEQ ID N°: 391), DOMl6-96 (SEQ ID N0: 392), DOM16-97 (SEQ ID N°: 393), D0M16- 98 (SEQ ID N°: 394), DOM16-99 (SEQ ID N0: 395), DOMI6-IOO (SEQ ID N°: 396), DOMl6-1 Ol (SEQ ID N°: 397), DOM16-102 (SEQ ID N°: 398), DOM 16-103 (SEQ ID N°: 399), DOM16-104 (SEQ ID N°: 400), D0M16- 105 (SEQ ID N0: 401), DOMI6-IO6 (SEQ ID N°: 402), DOM16-1Q7 (SEQ ID Ν°: 403), DOM16-108 (SEQ ID Ν°: 404), DOM16-109 (SEQ ID N°: 405), DOMl6-110 (SEQ ID N°: 406), DOMI6-111 (SEQ ID N°: 407), DOMl6-112 (SEQ ID N°: 408), DOM16-113 (SEQ ID N°: 409), DOM16- 114 (SEQ ID N0: 410), DOMl6-115 (SEQ IDN°: 411), DOMl6-116 (SEQ ID N°: 412), DOM16-117 (SEQ ID N°: 413), DOM16-118 (SEQ ID N°: 414), DOMl6-119 (SEQ ID N°: 415), DOM16-39-6 (SEQ ID N°: 416), DOMl6-39-8 (SEQ ID N°: 417), DOM16-39-34 (SEQ ID N°: 418), DOM16- 39-48 (SEQ ID N°: 419), DOM16-39-87 (SEQ ID N°: 420), DOM16-39-90 (SEQ ID N°: 421), DOM16-39-96 (SEQ ID N0: 422), DOM16-39-100 (SEQ - 10 ID N°: 423), DOM16-39-101 (SEQ ID N0: 424), DOM16-39-102 (SEQ ID N°: 425), DOM16-39-103 (SEQ ID N0: 426), DOM16-39-104 (SEQ ID N°: 427), DOM16-39-105 (SEQ ID N°: 428), DOM16-39-106 (SEQ ID N°: 429), DOM 16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM16-39-108 (SEQ ID N°: 431), DOM16-39-109 (SEQ ID N°: 432), DOM16-39-HO (SEQ ID N°: 433), DOM16-39-111 (SEQ ID N°: 434), DOM16-39-112 (SEQ ID N°: 435), DOM16-39-113 (SEQ ID N°: 436), DOM16-39-114 (SEQ ID N°: 437), DOM16-39-115 (SEQ ID N°: 438), DOM16-39-116 (SEQ ID N°: 439), DOM16-39-117 (SEQ ID N°: 440), DOM16-39-200 (SEQ ID N°: 441), DOM16-39-201 (SEQ ID N°: 442), DOM16-39-202 (SEQ ID N°: 443), DOM 16-39-203 (SEQ ID N°: 444), DOM16-39-204 (SEQ ID N°: 445), DOMl6-39-205 (SEQ ID N°: 446), DOM16-39-206 (SEQ ID N°: 447), DOMl6-39-207 (SEQ ID N0: 448), DOMl6-39-209 (SEQ ID N°: 449), DOM 16-52 (SEQ ID N°: 450), NB 1 (SEQ ID N°: 451), NB 2 (SEQ ID N°: 452), NB 3 (SEQ ID N°: 453), NB 4 (SEQ ID N°: 454), NB 5 (SEQ ID N°: 455), NB 6 (SEQ ID N0: 456), NB 7 (SEQ ID N°: 457), NB 8 (SEQ ID N°: 458), NB 9 (SEQ ID N°: 459), NB 10 (SEQ ID N°: 460), NB 11 (SEQ ID N°: 461), NB 12 (SEQ ID N°: 462), NB 13 (SEQ ID N°: 463), NB 14 (SEQ ID N0: 464), NB 15 (SEQ ID N0: 465), NB 16 (SEQ ID N°: 466), NB 17 (SEQ ID N°: 467), NB 18 (SEQ ID N0: 468), NB 19 (SEQ ID N°: 469), NB 20 144
(SEQID N°: 470), NB 21 (SEQ ID N°: 471) e NB 22 (SEQ ID N°: 472).
Em algumas formas de realização, o domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para EGFR compete com a ligação ao EGFR com a dAb selecionado do grupo que consiste de DOM16-39-210 (SEQ ID N°: 541), DOM16-39-211 (SEQ ID N°: 542), DOM16-39-212 (SEQ ID N°: 543), DOM16-39-213 (SEQ ID N°: 544), DOM16-39-214 (SEQ ID N0: 545), DOM16-39-215 (SEQ ID N°: 546), DOM 16-39-216 (SEQ ID N°: 547), DOM16-39-217 (SEQ ID N°: 548), DOM 16-39-218 (SEQ ID N°: 549), DOM16-39-219 (SEQ ID N°: 550), DOM16-39-220 (SEQ ID N°: 551), DOM16-39-221 (SEQ ID N°: 552), DOMl6-39-222 (SEQ ID N°: 553), DOM16-39-223 (SEQ ID N°: 554), DOMl6-39-224 (SEQ ID N0: 555), DOM16-39-225 (SEQ ID N°: 556), DOMl6-39-226 (SEQ ID N°: 557), DOM16-39-227 (SEQ ID N0: 558), DOM16-39-228 (SEQ ID N°: 559), DOM16-39-229 (SEQ ID N°: 560), DOMl6-39-230 (SEQ ID N°: 561), DOM16-39-231 (SEQ ID N°: 562), DOMl6-39-232 (SEQ ID N0: 563), DOM16-39-233 (SEQ ID N°: 564), DOM16-39-234 (SEQ ID N°: 565), DOM16-39-235 (SEQ ID N°: 566), DOM16-39-500 (SEQ ID N°: 725), DOM16-39-502(SEQ ID N°: 726), DOMl6-39-503 (SEQ ID N°: 567), DOM16-39-504 (SEQ ID N°: 568), DOMl6-39-505 (SEQ ID N0: 569), DOM16-39-506 (SEQ ID N°: 570), DOM16-39-507 (SEQ ID N°: 571), DOM16-39-508 (SEQ ID N0: 572), DOM16-39-509 (SEQ ID N°: 573), DOM16-39-510 (SEQ ID N°: 574), DOMl6-39-511 (SEQ ID N0: 575), DOM16-39-512 (SEQ ID N°: 576), DOM 16-39-521 (SEQ ID N°: 577), DOM16-39-522 (SEQ ID N0: 578), DOM16-39-523 (SEQ ID N0: 579), DOM16-39-524 (SEQ ID N°: 580), DOM16-39-527 (SEQ ID N0: 581), DOM16-39-525 (SEQ ID N°: 582), DOMl6-39-526 (SEQ ID N0: 583), DOM16-39-540 (SEQ ID N°: 584), DOM16-39-541 (SEQ ID N°: 585), DOM16-39-542 (SEQ ID N°: 586), DOM16-39-543 (SEQ ID N0: 587), DOM16-39-544 (SEQ ID N°: 588), DOMl6-39-545 (SEQ ID N0: 589), DOMl6-39-550 (SEQ ID N°: 590), DOMl6-39-551 (SEQ ID N°: 591), DOM16-39-552 (SEQ ID N°: 592), DOM16-39-553 (SEQ ID N°: 593), DOM16-39-554 (SEQ ID N°: 594), DOM16-39-555 (SEQ ID N°: 595), DOM16-39-561 (SEQ ID N°: 596), DOM16-39-562 (SEQ ID N0: 597), DOM16-39-563 (SEQ ID N°: 598), DOM16-39-564 (SEQ ID N0: 599), DOM16-39-571 (SEQ ID N°: 600), DOMl6-39-572 (SEQ ID N0: 601), DOM16-39-573 (SEQ ID N°: 602), DOM16-39-574 (SEQ ID N°: 603), DOM16-39-580 (SEQ ID N°: 604), DOM16-39-591 (SEQ ID N°: 605), DOM16-39-592 (SEQ ID N°: 606), DOM16-39-593 (SEQ ID N°: 607), DOM16-39-601 (SEQ ID N0: 608), DOM 16-39-602 (SEQ ID N°: 609), DOM16-39-603 (SEQ ID N°: 610), DOMl6-39-604 (SEQ ID N0: 611), DOM16-39-605 (SEQ ID N°: 612), DOM16-39-607 (SEQ ID N°: 613), DOM16-39-611 (SEQ ID N°: 614), DOM16-39-612 (SEQ ID N°: 615), DOM16-39-613 (SEQ ID N°: 616), DOM16-39-614 (SEQ ID N0: 617), DOM16-39-615 (SEQ ID N°: 618), DOM16-39-616 (SEQ ID N0: 619), DOM16-39-617 (SEQ ID N°: 620), DOM16-39-618 (SEQ ID N°: 621) e DOM16-39-619 (SEQ ID N°: 622).
Em algumas formas de realização, o domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para EGFR compreende uma seqüência de aminoácido que tem pelo menos cerca de 80 %, pelo menos cerca de 85 %, pelo menos cerca de 90 %, pelo menos cerca
η
j,. de 91 %, pelo menos cerca de 92 %, pelo menos cerca de 93 %, pelo menos
,j cerca de 94 %, pelo menos cerca de 95 %, pelo menos cerca de 96 %, pelo
menos cerca de 97 %, pelo menos cerca de 98 %, ou pelo menos cerca de 99 % de identidade de seqüência de aminoácido com a seqüência de aminoácido de um dAb selecionado do grupo que consiste de DOM 16-17 (SEQ ID N°: 325), DOMl6-18 (SEQ ID N0: 326), DOM16-19 (SEQ ID N°: 327), DOM16- (SEQ ID N0: 328), DOM16-21 (SEQ ID N0: 329), DOM16-22 (SEQ ID N0: 330), DOM 16-23 (SEQ ID N0: 331), DOM16-24 (SEQ ID N°: 332), Φ6 DOM 16-25 (SEQ ID N°: 333), DOM16-26 (SEQ ID N°: 334), DOM16-27 (SEQ ID N°: 335), DOM16-28 (SEQ ID N°: 336), DOM16-29 (SEQ ID N°: 337), DOM 16-3O (SEQ ID N0: 338), DOM16-31 (SEQ ID N0: 339), DOM16- 32 (SEQ ID N°: 340), DOM16-33 (SEQ ID N0: 341), DOM16-35 (SEQ ID N°: 342), DOM16-37 (SEQ ID N°: 343), DOM16-38 (SEQ ID N°: 344), DOMl6-39 (SEQ ID N°: 345), DOM16-40 (SEQ ID N°: 346), DOM16-41 (SEQ ID N°: 347), DOM16-42 (SEQ ID N°: 348), DOM16-43 (SEQ ID N°: 349), DOMl6-44 (SEQ ID N0: 350), DOMl6-45 (SEQ ID N°: 351), D0M16- 46 (SEQ ID N°: 352), D0M16-47 (SEQ ID N°: 353), DOM16-48 (SEQ ID ' 10 N°: 354), DOM16-49 (SEQ ID N°: 355), DOM16-50 (SEQ ID N°: 356), DOMl6-59 (SEQ ID N°: 357), DOMI6-6O (SEQ ID N°: 358), DOM16-61 (SEQ ID N°: 359), DOM16-62 (SEQ ID N°: 360), DOM16-63 (SEQ ID N°: 361), DOM 16-64 (SEQ IDN0: 362), DOM16-65 (SEQ ID N°: 363), D0M16- 66 (SEQ ID N°: 364), DOM16-67 (SEQ ID N0: 365), DOM16-68 (SEQ ID N°: 366), DOM16-69 (SEQ ID N°: 367), DOM16-70 (SEQ ID N°: 368), DOM 16-71 (SEQ ID N°: 369), DOM16-72 (SEQ ID N°: 370), DOM16-73 (SEQ ID N°: 371), DOM16-74 (SEQ ID N°: 372), DOM16-75 (SEQ ID N°: 373), DOM 16-76 (SEQ ID N0: 374), DOM16-77 (SEQ ID N°: 375), D0M16- 78 (SEQ ID N°: 376), DOM16-79 (SEQ ID N°: 377), DOMI6-8O (SEQ ID T 20 N0: 378), DOM16-81 (SEQ ID N°: 379), DOM16-82 (SEQ ID N0: 380), DOM 16-83 (SEQ ID N°: 381), DOM16-84 (SEQ ID N°: 382), DOM16-85 (SEQ ID N0: 383), DOM16-87 (SEQ ID N°: 384), DOM16-88 (SEQ ID N°: ? 385), DOMl6-89 (SEQ IDN0: 386), DOM16-90 (SEQ ID N°: 387), D0M16-
91 (SEQ ID N°: 388), DOM16-92 (SEQ ID N0: 389), DOM16-94 (SEQ ID N°: 390), DOM16-95 (SEQ ID N0: 391), DOM16-96 (SEQ ID N°: 392), DOM 16-97 (SEQ ID N°: 393), DOM16-98 (SEQ ID N°: 394), DOM16-99 (SEQ ID N°: 395), DOMI6-IOO (SEQ ID N°: 396), DOMI6-IOI (SEQ ID N°: 397), DOM 16-102 (SEQ ID N0: 398), DOM16-103 (SEQ ID N°: 399), DOM 16-104 (SEQ ID N0: 400), DOM16-105 (SEQ ID N°: 401), DOM16- WG 106 (SEQ ID N°: 402), DOM16-107 (SEQ ID N°: 403), DOMI6-IO8 (SEQ ID N°: 404), DOM16-109 (SEQ ID N°: 405), DOMl6-110 (SEQ ID N°: 406), DOMl6-111 (SEQ ID N°: 407), DOM16-112 (SEQ ID N°: 408), DOM16-113 (SEQ ID N0: 409), DOM16-114 (SEQ ID N0: 410), DOM16- 115 (SEQ ID N°: 411), DOM16-116 (SEQ ID N°: 412), DOM16-117 (SEQ ID N°: 413), DOM16-118 (SEQ ID N°: 414), DOMl6-119 (SEQ ID N°: 415), DOMl6-39-6 (SEQ ID N°: 416), DOM16-39-8 (SEQ ID N°: 417), DOM16-39-34 (SEQ ID N°: 418), DOM16-39-48 (SEQ ID N°: 419), DOM16-39-87 (SEQ ID N°: 420), DOM16-39-90 (SEQ ID N°: 421),
DOM16-39-96 (SEQ ID N0: 422), DOM16-39-100 (SEQ ID N°: 423), DOM16-39-101 (SEQ ID N°: 424), DOM16-39-102 (SEQ ID N°: 425), DOM16-39-103 (SEQ ID N°: 426), DOM16-39-104 (SEQ ID N0: 427), DOM16-39-105 (SEQ ID N°: 428), DOM 16-3 9-106 (SEQ ID N°: 429), DOM16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM 16-3 9-108 (SEQ ID N0: 431), DOM16-39-109 (SEQ ID N°: 432), DOM16-39-110 (SEQ ID N°: 433), DOM16-39-111 (SEQ ID N°: 434), DOM16-39-112 (SEQ ID N°: 435), DOM16-39-113 (SEQ ID N°: 436), DOM16-39-114 (SEQ ID N°: 437), DOM16-39-115 (SEQ ID N°: 438), DOM16-39-116 (SEQ ID N°: 439), DOM16-39-117 (SEQ ID N°: 440), DOMl 6-39-200 (SEQ ID N°: 441), DOMl 6-39-201 (SEQ ID N°: 442), DOMl 6-39-202 (SEQ ID N°: 443), DOM 16-3 9-203 (SEQ ID N°: 444), DOMl 6-39-204 (SEQ ID N°: 445), DOM 16-3 9-205 (SEQ ID N0: 446), DOMl 6-39-206 (SEQ ID N°: 447), DOM 16-3 9-207 (SEQ ID N°: 448), DOMl 6-39-209 (SEQ ID N°: 449),
DOMl6-52 (SEQ ID N°: 450), NB 1 (SEQ ID N°: 451), NB 2 (SEQ ID N°: 452), NB 3 (SEQ ID N0: 453), NB 4 (SEQ ID N°: 454), NB 5 (SEQ ID N°: 455), NB 6 (SEQ ID N0: 456), NB 7 (SEQ ID N°: 457), NB 8 (SEQ ID N°: 458), NB 9 (SEQ ID N°: 459), NB 10 (SEQ ID N°: 460), NB 11 (SEQ ID N°: 461), NB 12 (SEQ ID N°: 462), NB 13 (SEQ ID N°: 463), NB 14 (SEQ ID N°: 464), NB 15 (SEQ ID N°: 465), NB 16 (SEQ ID N°: 466), NB 17 (SEQ ID N°: 467), NB 18 (SEQ ID N°: 468), NB 19 (SEQ ID N°: 469), NB 20 (SEQ ID N°: 470), NB 21 (SEQ ID N°: 471) e NB 22 (SEQ ID N0: 472).
Em algumas formas de realização, o domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para EGFR compreende uma seqüência de aminoácido que tem pelo menos cerca de 80 %, pelo menos cerca de 85 %, pelo menos cerca de 90 %, pelo menos cerca de 91 %, pelo menos cerca de 92 %, pelo menos cerca de 93 %, pelo menos cerca de 94 %, pelo menos cerca de 95 %, pelo menos cerca de 96 %, pelo menos cerca de 97 %, pelo menos cerca de 98 %, ou pelo menos cerca de 99 ' 10 % de identidade de seqüência de aminoácido com a seqüência de aminoácido de um dAb selecionado do grupo que consiste de DOM 16-3 9-210 (SEQ ID N°: 541), DOM16-39-211 (SEQ ID N°: 542), DOM16-39-212 (SEQ ID N°: 543), DOM 16-39-213 (SEQ ID N°: 544), DOM16-39-214 (SEQ ID N°: 545),
DOM16-39-215 (SEQ ID N°: 546), DOM16-39-216 (SEQ ID N°: 547), DOM16-39-217 (SEQ ID N°: 548), DOM16-39-218 (SEQ ID N°: 549), DOM 16-39-219 (SEQ ID N0: 550), DOMl6-39-220 (SEQ ID N°: 551), DOM 16-39-221 (SEQ ID N0: 552), DOMl6-39-222 (SEQ ID N°: 553), DOMl6-39-223 (SEQ ID N°: 554), DOMl6-39-224 (SEQ ID N°: 555), DOMl6-39-225 (SEQ ID N°: 556), DOM16-39-226 (SEQ ID N°: 557), DOM16-39-227 (SEQ ID N°: 558), DOM 16-39-228 (SEQ ID N°: 559), DOM16-39-229 (SEQ ID N°: 560), DOMl6-39-230 (SEQ ID N°: 561), DOM16-39-231 (SEQ ID N0: 562), DOMl6-39-232 (SEQ ID N°: 563), DOM16-39-233 (SEQ ID N°: 564), DOMl6-39-234 (SEQ ID N°: 565), DOMl6-39-235 (SEQ ID N°: 566), DOMl6-39-500 (SEQ ID N°: 725), DOMl6-39-502(SEQ ID N0: 726), DOM16-39-503 (SEQ ID N°: 567), DOMl6-39-504 (SEQ ID N°: 568), DOMl6-39-505 (SEQ ID N°: 569), DOMl 6-39-506 (SEQ ID N°: 570), DOMl6-39-507 (SEQ ID N°: 571), DOM16-39-508 (SEQ ID N0: 572), DOMl6-39-509 (SEQ ID N°: 573), DOM16-39-51Q (SEQ ID N°: 574), DOMl6-39-511 (SEQ ID N°: 575), DOMl6-39-512 (SEQ ID N°: 576), DOM16-39-521 (SEQ ID N°: 577), DOM16-39-522 (SEQ ID N0: 578), DOM16-39-523 (SEQ ID N°: 579), DOMl6-39-524 (SEQ ID N°: 580), DOM16-39-527 (SEQ ID N0: 581), DOM16-39-525 (SEQ ID N0: 582), DOM16-39-526 (SEQ ID N°: 583), DOM16-39-540 (SEQ ID N°: 584), DOM16-39-541 (SEQ ID N°: 585), DOMl6-39-542 (SEQ ID N°: 586), DOM16-39-543 (SEQ ID N°: 587), DOM16-39-544 (SEQ ID N°: 588), DOM16-39-545 (SEQ ID N°: 589), DOMl6-39-550 (SEQ ID N°: 590), DOM16-39-551 (SEQ ID N°: 591), DOM16-39-552 (SEQ ID N°: 592), DOM16-39-553 (SEQ ID N°: 593), DOMl6-39-554 (SEQ ID N°: 594), DOM16-39-555 (SEQ ID N°: 595), DOM16-39-561 (SEQ ID N°: 596), DOM16-39-562 (SEQ ID N°: 597), DOM16-39-563 (SEQ ID N0: 598), DOM16-39-564 (SEQ ID N°: 599), DOM16-39-571 (SEQ ID N°: 600), DOM16-39-572 (SEQ ID N°: 601), DOMl6-39-573 (SEQ ID N0: 602), DOM16-39-574 (SEQ ID N°: 603), DOM16-39-580 (SEQ ID N°: 604), DOM16-39-591 (SEQ ID N°: 605), DOMl6-39-592 (SEQ ID N°: 606), DOM16-39-593 (SEQ ID N°: 607), DOM16-39-601 (SEQ ID N0: 608), DOM16-39-602 (SEQ ID N°: 609), DOM16-39-603 (SEQ ID N°: 610), DOM16-39-604 (SEQ ID N0: 611), DOM16-39-605 (SEQ ID N°: 612), DOM16-39-607 (SEQ ID N°: 613), DOMl6-39-611 (SEQ ID N°: 614), DOM16-39-612 (SEQ ID N°: 615), DOM16-39-613 (SEQ ID N0: 616), DOM16-39-614 (SEQ ID N°: 617), DOM16-39-615 (SEQ ID N°: 618), DOM16-39-616 (SEQ ID N°: 619), DOM16-39-617 (SEQ ID N°: 620), DOM16-39-618 (SEQ ID N0: 621) e DOM16-39-619 (SEQ ID N°: 622).
Em formas de realização preferidas, o domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para EGFR compreende uma seqüência de aminoácido que tem pelo menos cerca de 90 %, pelo menos cerca de 91 %, pelo menos cerca de 92 %, pelo menos cerca de 93 %, pelo menos cerca de 94 %, pelo menos cerca de 95 %, pelo menos cerca de 96 %, pelo menos cerca de 97 %, pelo menos cerca de 98 %, ou pelo menos cerca de 99 % de identidade de seqüência de aminoácido com a seqüência de aminoácido de DOM16-39 (SEQ ID N°: 345). Por exemplo, o domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para EGFR pode compreender a seqüência de aminoácido de DOM16-39-87 (SEQ ID N0: 420), DOM16-39-100 (SEQ ID N°: 423), DOM 16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM16-39-109 (SEQ ID N°: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N°: 438) ou DCM16-39-200 (SEQ ID N°: 441).
Em outras formas de realização preferidas, o domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para EGFR compreende uma seqüência de aminoácido que tem pelo menos cerca de 90 %, pelo menos cerca de 91 %, pelo menos cerca de 92 %, pelo menos cerca de 93 %, pelo menos cerca de 94 %, pelo menos cerca de 95 %, pelo menos cerca de 96 %, pelo menos cerca de 97 %, pelo menos cerca de 98 %, ou pelo menos cerca de 99 % de identidade de seqüência de aminoácido com a seqüência de aminoácido de DOM16-39-521 (SEQ ID N°: 577), DOM16- 39-541 (SEQ ID N°: 585), DOM16-39-542 (SEQ ID N°: 586), DOM16-39- 551 (SEQ ID N°: 591), DÜM16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOM16-39-604 (SEQ ID N0: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID N0: 621) e DOM16-39-619 (SEQ ID N°: 622).
Em algumas formas de realização, o domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para EGFR compete com qualquer dAbs divulgado neste por ligação ao EGFR.
Preferivelmente, o domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para EGFR é um domínio variável simples de imunoglobulina. O domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para EGFR pode compreender qualquer domínio variável de imunoglobulina adequada, e preferivelmente compreende a domínio variável humano ou um domínio variável que compreende regiões de estrutura humana. Em certas formas de realização, o domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para EGFR compreende um estrutura universal, como descrito neste.
Em certas formas de realização, o domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação por agregação resistente ao EGFR, desdobra-se reversivelmente, compreende uma região de estrutura e/ou é secretado como descrito acima pelo domínio de polipeptídeo que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF. Monômeros dAb que ligam à albumina de soro - 10 Os ligandos da invenção ainda podem compreender um
monômero dAb que ligam-se à albumina de soro (SA) com um Kd de InM a 500 μ M (isto é, χ IO"9 a 5 χ IO"4), preferivelmente 100 nM a 10 μ M. Preferivelmente, por um ligando que compreende um anti-SA dAb, a ligação (por exemplo Kd e/ou Koff como medido por ressonância de plasmon de superfície, por exemplo, usando BiaCore) do ligando a este alvo(s) é a partir de 1 a 100000 vezes (preferivelmente 100 a 100000, mais preferivelmente 1000 a 100000, ou 10000 a 100000 vezes) mais forte do que por SA. Preferivelmente, a albumina de soro é albumina de soro humano (HSA). Em uma forma de realização, o primeiro dAb (ou um monômero dAb) liga-se SA (por exemplo, HSA) com um Kd de aproximadamente 50, preferivelmente 70, e mais preferivelmente 100, 150 ou 200 nM.
Em certas formas de realização, o monômero dAb que liga-se a agregação resistentes a SA, desdobra-se reversivelmente e/ou compreende um região de estrutura como descrito acima por monômeros dAb que liga-se ao CD3 8.
Em formas de realização particulares, o fragmento de ligação de antígeno de um anticorpo que liga-se a albumina de soro é um dAb que liga-se a albumina de soro humano. Em certas formas de realização, o dAb liga-se a albumina de soro humano e compete com a ligação a albumina com um dAb selecionado do grupo que consiste de DOM7m-16 (SEQID N°: 473), DOM7m-12 (SEQ ID N°: 474), DOM7m-26 (SEQ ID N°: 475), DOM7r-l (SEQ ID N°: 476), DOM7r-3 (SEQ ID N°: 477), DOM7r-4 (SEQ ID N°: 478), DOM7r-5 (SEQ ID N0: 479), DOM7r-7 (SEQ ID N°: 480), DOM7r-8 (SEQ ID N0: 481), DOM7h-2 (SEQ ID N°: 482), DOM7h-3 (SEQ ID N°: 483), DOM7h-4 (SEQ ID N0: 484), DOM7h-6 (SEQ ID N°: 485), DOM7h-l (SEQ ID N°: 486), DOM7h-7 (SEQ ID N°: 487), DOM7h-22 (SEQ ID N°: 489), DOM7h-23 (SEQ ID N0: 490), DOM7h-24 (SEQ ID N°: 491), DOM7h- (SEQ ID N°: 492), DOM7h-26 (SEQ ID N0: 493), DOM7h-21 (SEQ ID • 10 N°: 494), DOM7h-27 (SEQ ID N0: 495), DOM7h-8 (SEQ ID N°: 496), DOM7r-13 (SEQ ID N°: 497), DOM7r-14 (SEQ ID N°: 498), DOM7r-15 (SEQ ID N°: 499), DOM7r-16 (SEQ ID N°: 500), DOM7r-17 (SEQ ID N°: 501), DOM7r-18 (SEQ ID N0: 502), DOM7r-19 (SEQ ID N°: 503), DOM7r- (SEQ ID N°: 504), DOM7r-21 (SEQ ID N0: 505), DOM7r-22 (SEQ ID N°: 506), DOM7r-23 (SEQ ID N0: 507), DOM7r-24 (SEQ ID N°: 508), DOM7r-25 (SEQ ID N0: 509), DOM7r-26 (SEQ ID N°: 510), DOM7r-27 (SEQ ID N°: 511), DOM7r-28 (SEQ ID N°: 512), DOM7r-29 (SEQ ID N°: 513), DOM7r-30 (SEQ ID N°: 514), DOM7r-31 (SEQ ID N°: 515), DOM7r- 32 (SEQ ID N°: 516) e DOM7r-33 (SEQ ID N°: 517). Em certas formas de realização, o dAb liga-se a albumina de
soro humano e que compreende uma seqüência de aminoácido que tem pelo menos cerca de 80 %, ou pelo menos cerca de 85 %, ou pelo menos cerca de 90 %, ou pelo menos cerca de 95 %, ou pelo menos cerca de 96 %, ou pelo menos cerca de 97 %, ou a pelo menos cerca de 98 %, ou pelo menos cerca de 99 % de identidade de seqüência de aminoácido com a seqüência de aminoácido de um dAb selecionado do grupo que consiste de DOM7m-16 (SEQ ID N°: 473), DOM7m-12 (SEQ ID N°: 474), DOM7m-26 (SEQ ID N°: 475), DOM7r-1 (SEQ ID N°: 476), DOM7r-3 (SEQ ID N0: 477), DOM7r-4 (SEQ ID N°: 478), DOM7r-5 (SEQ ID N°: 479), DOM7r-7 (SEQ ID N0: t
480), DOM7r-8 (SEQ ID N0: 481), DOM7h-2 (SEQ ID N°: 482), DOM7h-3 (SEQ ID N°: 483), DOM7h-4 (SEQ ID N°: 484), DOM7h-6 (SEQ ID N°: 485), DOM7h-l (SEQ ID N°: 486), DOM7h-7 (SEQ ID N°: 487), DOM7h-22 (SEQ ID N°: 489), DOM7h-23 (SEQ ID N°: 490), DOM7h-24 (SEQ ID N°: 491), DOM7h-25 (SEQ ID N0: 492), DOM7h-26 (SEQ ID N0: 493), DOM7h- 21 (SEQ ID N°: 494), DOM7h-27 (SEQ ID N°: 495), DOM7h-8 (SEQ ID N°: 496), DOM7r-13 (SEQ ID N0: 497), DOM7r-14 (SEQ ID N0: 498), DOM7r- (SEQ ID N°: 499), DOM7r-16 (SEQ ID N°: 500), DOM7r-17 (SEQ ID N°: 501), DOM7r-18 (SEQ ID N°: 502), DOM7r-19 (SEQ ID N0: 503), • 10 DOM7r-20 (SEQ ID N°: 504), DOM7r-21 (SEQ ID N°: 505), DOM7r-22 (SEQ ID N°: 506), DOM7r-23 (SEQ ID N°: 507), DOM7r-24 (SEQ ID N°: 508), DOM7r-25 (SEQ ID N0: 509), DOM7r-26 (SEQ ID N°: 510), DOM7r- 27 (SEQ ID N°: 511), DOM7r-28 (SEQ ID N0: 512), DOM7r-29 (SEQ ID N°: 513), DC)M7r-30 (SEQ ID N°: 514), DOM7r-31 (SEQ ID N°: 515), DOM7r-32 (SEQ ID N°: 516) e DOM7r-33 (SEQ ID N0: 517).
Por exemplo, o dAb que liga-se a albumina de soro humano pode compreender uma seqüência de aminoácido que tem pelo menos cerca de 90 %, ou pelo menos cerca de 95 %, ou pelo menos cerca de 96 %, ou pelo menos cerca de 97 %, ou pelo menos cerca de 98 %, ou pelo menos cerca de 99 % de identidade de seqüência de aminoácido com DOM7h-2 (SEQ ID N°: 482), DOM7h-3 (SEQ ID N0: 483) DOM7h-4 (SEQ ID N°: 484), DOM7h-6 (SEQ ID N°: 485), DOM7h-l (SEQ ID N°: 486), DOM7h-7 (SEQ ID N°: 487), DOM7h-8 (SEQ ID N0: 496), DOM7r-13 (SEQ ID N°: 497), DOM7r- 14 (SEQ ID N°: 498), DOM7h-22 (SEQ ID N0: 489), DOM7h-23 (SEQ ID N°: 490), DOM7h-24 (SEQ ID N°: 491), DOM7h-25 (SEQ ID N°: 492), DOM7h-26 (SEQ ID N°: 493), DOM7h-21 (SEQ ID N0: 494) e DOM7h-27 (SEQ ID N0: 495).
A identidade de seqüência de aminoácido é preferivelmente determinada usando um algoritmo de alinhamento de seqüência adequada e parâmetros de default, tal como BLAST P (Karlin e Altschulj Proc. Natl. Acad. Sei. USA 87(6):2264-2268 (1990)).
Em formas de realização mais particulares, o dAb é um Vk dAb que liga-se a albumina de soro humano e tem uma seqüência de aminoácido selecionado do grupo que consiste de DOM7h-2 (SEQ ID N°: 482), DOM7h-3 (SEQ ID N0: 483), DOM7h-4 (SEQ ID N0: 484) DOM7h-6 (SEQ ID N°: 485), DOM7h-l (SEQ ID N°: 486), DOM7h-7 (SEQ ID N°: 487), DOM7h-8 (SEQ ID N°: 496), DOM7r-13 (SEQ ID N0: 497), e DOM7r- 14 (SEQ ID N°: 498), ou um Vh dAb que tem uma seqüência de aminoácido • 10 selecionado do grupo que consiste de: DOM7h-22 (SEQ ID N°: 489), DOM7h-23 (SEQ ID N°: 490), DOM7h- (SEQ ID N°: 491), DOM7h-25 (SEQ ID N0: 492), DOM7h-26 (SEQ ID N°: 493), DOM7h-21 (SEQ ID N°: 494), DOM7h-27 (SEQ ID N°: 495). Em outras formas de realização, o fragmento de ligação de antígeno de um anticorpo que liga-se a albumina de soro é um dAb que liga-se a albumina de soro humano e compreende o CDRs de acordo com qualquer um dos precedentes seqüência de aminoácidos.
Vhh de camelídeo adequado que liga-se a albumina de soro incluem aqueles divulgados em WO 2004/041862 (Ablynx N.V.) e neste, tal como uma Seqüência A (SEQ ID N0: 518), Seqüência B (SEQ ID N°: 519), , 20 Seqüência C (SEQ ID N°: 520), Seqüência D (SEQ ID N°: 521), Seqüência E (SEQ ID N°: 522), Seqüência F (SEQ ID N0: 523), Seqüência G (SEQ ID N°: 524), Seqüência H (SEQ ID N0: 525), Seqüência I (SEQ ID N°: 526), Seqüência J (SEQ ID N0: 527), Seqüência K (SEQ ID N°: 528), Seqüência L (SEQ ID N°: 529), Seqüência M (SEQ ID N°: 530), Seqüência N (SEQ ID N°: 531), Seqüência O (SEQ ID N0: 532), Seqüência P (SEQ ID N°: 533), Seqüência Q (SEQ ID N0: 534). Em certas formas de realização, o VHh de camelídeo liga-se a albumina de soro humano e que compreende uma seqüência de aminoácido que tem pelo menos cerca de 80 %, ou pelo menos cerca de 85 %, ou pelo menos cerca de 90 %t ou pelo menos cerca de 95 %, ou pelo menos cerca de 96 %, ou pelo menos cerca de 97 %, ou pelo menos cerca de 98 %, ou pelo menos cerca de 99 % de identidade de seqüência de aminoácido com qualquer uma da SEQ ID N0S:518-534.
A identidade de seqüência de aminoácido é preferivelmente determinada usando um algoritmo de alinhamento de seqüência adequada e parâmetros de default, tal como BLAST P (Karlin e Altschul, Prot. Natl. Acad. Sei. USA 87(6):2264-2268 (1990)).
Em algumas formas de realização, o ligando compreende um dAb anti-albumina de soro que compete com qualquer dAb anti-albumina de soro divulgado neste por ligação a albumina de soro (por exemplo, albumina de soro humano).
Moléculas de ácido nucleico, vetores e células hospedeiras
A invenção também fornece moléculas de ácido nucleico isolado e/ou recombinante que codificam ligandos (por exemplo, ligandos específicos duplos e ligandos multiespecíficos) como descrito neste.
F
Ácidos nucleicos referidos neste como "isolado" são ácidos nucleicos que foram separados fora dos ácidos nucleicos do DNA genômico ou RNA celular e sua fonte de origem (por exemplo, como existem em células ou na mistura de ácidos nucleicos tal como uma biblioteca), e incluem ácidos nucleicos obtidos por métodos descritos neste ou outros métodos adequados, incluindo essencialmente ácidos nucleicos puros, ácidos nucleicos produzido pela síntese química, por combinações de métodos biológicos e químicos, e ácidos nucleicos recombinantes que são isolados (ver por exemplo, Daugherty, B.L. et aL, Nucleic Acids Res., 19(9): 2471-2476 (1991); Lewis, A.P. e J.S. Crowe, Gene, 101: 297-302 (1991)).
Os ácidos nucleicos referidos neste como "recombinantes" são ácidos nucleicos que foram produzidos pelo metodologia de DNA recombinante, incluindo aqueles ácidos nucleicos que são gerados por procedimentos que contam com o método de recombinação artificial, tal como a reação de cadeia de polimerase (PCR) e/ou clonagem em um vetor usando enzimas de restrição.
Em certas formas de realização, o ácido nucleico isolado e/ou recombinante compreende uma seqüência de nucleotídeo que codifica um ligando, como descrito neste, em que o dito ligando compreende uma seqüência de aminoácido que tem pelo menos cerca de 80 %, pelo menos cerca de 85 %, pelo menos cerca de 90 %, pelo menos cerca de 91 %, pelo menos cerca de 92 %, pelo menos cerca de 93 %, pelo menos cerca de 94 %, pelo menos cerca de 95 %, pelo menos cerca de 96 %, pelo menos cerca de 97 ' 10 %, pelo menos cerca de 98 %, ou pelo menos cerca de 99 % de identidade de seqüência de aminoácido com a seqüência de aminoácido de um dAb que liga o VEGF divulgado neste, ou um dAb que liga o EGFR divulgado neste.
Por exemplo, em algumas formas de realização, o ácido nucleico isolado e/ou recombinante compreende uma seqüência de nucleotídeo que codifica um ligando que tem especificidade de ligação para VEGF, como descrito neste, em que o dito ligando compreende uma seqüência de aminoácido que tem pelo menos cerca de 80 %, pelo menos cerca de 85 %, pelo menos cerca de 90 %, pelo menos cerca de 91 %, pelo menos cerca de 92 %, pelo menos cerca de 93 %, pelo menos cerca de 94 %, pelo menos cerca de 95 %, pelo menos cerca de 96 %, pelo menos cerca de 97 %, pelo menos cerca de 98 %, ou pelo menos cerca de 99 % de identidade de seqüência de aminoácido com a seqüência de aminoácido de um dAb selecionado. A partir do grupo que consiste de TAR15-1 (SEQ ID N°: 100), TARl5-3 (SEQIDN0: 101), TARl5-4 (SEQ ID N0: 102), TARl5-9 (SEQ ID N°: 103), TAR15-10 (SEQ ID N0: 104), TARl5-11 (SEQ ID N°: 105), TARl5-12 (SEQ ID N°: 106), TAR15-13 (SEQ ID N0: 107), TAR15-14 (SEQ ID N°: 108), TAR15-15 (SEQ ID N°: 109), TAR15-16 (SEQ ID N°: 110), TARl5-17 (SEQ ID N°: 111), TARl5-18 (SEQ ID N0: 112), TARl5-19 (SEQ ID N°: 113), TAR15-20 (SEQ ID N°: 114), TAR 15-22 (SEQ ID N°:
115), TARl5-5 (SEQ ID N0: 116), TAR15-6 (SEQ ID N°: 117), TAR15-7 (SEQ ID N°: 118), TAR15-8 (SEQ ID N°: 119), TAR15-23 (SEQ ID N0: 120), TAR15-24 (SEQ ID N0: 121), TAR15-25 (SEQ ID N0: 122), TAR15-26 (SEQ ID N°: 123), TAR15-27 (SEQ ID N°: 124), TAR15-29 (SEQ ID N°: 125), TARl5-30 (SEQ ID N°: 126), TAR15-6-500 (SEQ ID N°: 127), TARl5-6-501 (SEQ ID N°: 128), TAR15-6-502 (SEQ ID N0: 129), TAR15- 6-503 (SEQ ID N°: 130), TAR15-6-504 (SEQ ID N°: 131), TAR15-6-505 (SEQ ID N°: 132), TAR15-6-506 (SEQ ID N°: 133), TAR15-6-507 (SEQ ID N0: 134), TARl5-6-508 (SEQ ID N°: 135), TAR15-6-509 (SEQ ID N°: 136), TARl5-6-510 (SEQ ID N0: 137), TAR15-8-500 (SEQ ID N°: 138), TAR15- 8-501 (SEQ ID N°: 139), TAR15-8-502 (SEQ ID N°: 140), TAR15-8-503 (SEQ ID N°: 141), TAR15-8-505 (SEQ ID N°: 142), TAR15-8-506 (SEQ ID N0: 143), TARl5-8-507 (SEQ ID N°: 144), TAR15-8-508 (SEQ ID N°: 145), TAR15-8-509 (SEQ ID N°: 146), TAR15-8-510 (SEQ ID N0: 147), TAR15- 8-511 (SEQ ID N0: 148), TAR15-26-500 (SEQ ID N0: 149), TAR15-26-501 (SEQ ID N0: 150), TAR15-26-502 (SEQ ID N0: 151), TAR15-26-503 (SEQ ID N°: 152), TAR15-26-504 (SEQ ID N°: 153), TAR15-26-505 (SEQ ID N°: 154), TARl5-26-506 (SEQ ID N°: 155), TAR15-26-507 (SEQ ID N°: 156), TARl5-26-508 (SEQ ID N0: 157), TAR15-26-509 (SEQ ID N°: 158), TAR15-26-510 (SEQ ID N0: 159), TAR15-26-511 (SEQ ID N°: 160), TARl5-26-512 (SEQ ID N0: 161), TAR15-26-513 (SEQ ID N°: 162), TARl5-26-514 (SEQ ID N0: 163), TARl5-26-515 (SEQ ID N°: 164), TAR15-26-516 (SEQ ID N0: 165), TAR15-26-517 (SEQ ID N°: 166), TARl5-26-518 (SEQ ID N0: 167), TAR15-26-519 (SEQ ID N°: 168), TARl5-26-520 (SEQ ID N0: 169), TAR15-26-521 (SEQ ID N°: 170), TARl5-26-522 (SEQ ID N0: 171), TAR15-26-523 (SEQ ID N°: 172), TARl5-26-524 (SEQ ID N0: 173), TAR15-26-525 (SEQ ID N°: 174), TARl5-26-526 (SEQ ID N0: 175), TAR15-26-527 (SEQ ID N°: 176), TARl5-26-528 (SEQ ID N0: 177), TAR15-26-529 (SEQ ID N°: 178), TARl 5-26-530 (SEQ ID N°: 179), TARl 5-26-531 (SEQ ID N°: 180), TARl 5-26-532 (SEQ ID N°: 181), TARl 5-26-533 (SEQ ID N°: 182), TARl 5-26-534 (SEQ ID N°: 183), TARl 5-26-535 (SEQ ID N°: 184), TARl 5-26-536 (SEQ ID N°: 185), TARl 5-26-537 (SEQ ID N°: 186), TARl 5-26-538 (SEQ ID N°: 187), TARl 5-26-539 (SEQ ID N°: 188), TARl 5-26-540 (SEQ ID N°: 189), TARl 5-26-541 (SEQ ID N°: 190), TARl 5-26-542 (SEQ ID N°: 191), TARl 5-26-543 (SEQ ID N0: 192), TARl 5-26-544 (SEQ ID N°: 193), TARl 5-26-545 (SEQ ID N°: 194), TARl 5-26-546 (SEQ ID N°: 195), TARl 5-26-547 (SEQ ID N°: 196), TARl 5-26-548 (SEQ ID N°: 197), TARl 5-26-549 (SEQ ID N°: 198), TARl 5-26-550 (SEQ ID N( 539) e TAR15-26-551 (SEQ ID N Γ: 540).
Por exemplo, em algumas formas de realização, o ácido nucleico isolado e/ou recombinante compreende uma seqüência de nucleotídeo que codifica um ligando que tem especificidade de ligação para VEGFA5 como descrito neste, em que o dito ligando compreende uma seqüência de aminoácido que tem pelo menos cerca de 80 %, pelo menos cerca de 85 %, pelo menos cerca de 90 %, pelo menos cerca de 91 %, pelo menos cerca de 92 %, pelo menos cerca de 93 %, pelo menos cerca de 94 %, pelo menos cerca de 95 %, pelo menos cerca de 96 %, pelo menos cerca de 97 %, pelo menos cerca de 98 %, ou pelo menos cerca de 99 % de identidade de seqüência de aminoácido com a seqüência de aminoácido de SEQ ID N°: 705 (TAR15-26-555).
Em outras formas de realização, o ácido nucleico isolado e/ou recombinante compreende uma seqüência de nucleotídeo que codifica um ligando que tem especificidade de ligação por EGFR, como descrito neste, em que o dito ligando compreende uma seqüência de aminoácido que tem pelo menos cerca de 80 %, pelo menos cerca de 85 %, pelo menos cerca de 90 %, pelo menos cerca de 91 %, pelo menos cerca de 92 %, pelo menos cerca de 93 %, pelo menos cerca de 94 %, pelo menos cerca de 95 %, pelo menos cerca de 96 %, pelo menos cerca de 97 %, pelo menos cerca de 98 %, ou pelo menos cerca de 99 % de identidade de seqüência de aminoácido com a seqüência de aminoácido de um dAb selecionado a partir do grupo que consiste de DOM16-17 (SEQ ID N°: 325), DOM16-18 (SEQ ID N°: 326), DOMl6-19 (SEQ ID N°: 327), DOM16-20 (SEQ ID N°: 328), DOM16-21 (SEQ ID N°: 329), DOM16-22 (SEQ ID N°: 330), DOM16-23 (SEQ ID N0: 331), DOM 16-24 (SEQ ID N0: 332), DOM16-25 (SEQ ID N°: 333), DOM16- 26 (SEQ ID N°: 334), DOM16-27 (SEQ ID N°: 335), DOM16-28 (SEQ ID N°: 336), DOM 16-29 (SEQ ID N°: 337), DOM16-30 (SEQ ID N°: 338), DOMl6-31 (SEQ ID N°: 339), DOM16-32 (SEQ ID N°: 340), DOM16-33 (SEQ ID N°: 341), DOM16-35 (SEQ ID N°: 342), DOM16-37 (SEQ ID N°: 343), DOM 16-38 (SEQ ID N0: 344), DOM16-39 (SEQ ID N°: 345), DOM16- 40 (SEQ ID N°: 346), DOM16-41 (SEQ ID N°: 347), DOM16-42 (SEQ ID N°: 348), DOM 16-43 (SEQ ID N°: 349), DOM16-44 (SEQ ID N°: 350), DOMl6-45 (SEQ ID N°: 351), DOM16-46 (SEQ ID N°: 352), DOM16-47 (SEQ ID N°: 353), DOM16-48 (SEQ ID N°: 354), DOM16-49 (SEQ ID N°: 355), DOMl6-50 (SEQ ID N0: 356), DOM16-59 (SEQ ID N°: 357), DOM16- 60 (SEQ ID N°: 358), DOM16-61 (SEQ ID N°: 359), DOM16-62 (SEQ ID N°: 360), DOM 16-63 (SEQ ID N°: 361), DOM16-64 (SEQ ID N°: 362), DOMl6-65 (SEQ ID N°: 363), DOM16-66 (SEQ ID N°: 364), DOM16-67 (SEQ ID N°: 365), DOM16-68 (SEQ ID N°: 366), DOM16-69 (SEQ ID N°: 367), DOM 16-70 (SEQ ID N0: 368), DOM16-71 (SEQ ID N°: 369), DOM16- 72 (SEQ ID N°: 370), DOM16-73 (SEQ ID N0: 371), DOM16-74 (SEQ ID N°: 372), DOM 16-75 (SEQ ID N°: 373), DOM16-76 (SEQ ID N°: 374), DOM 16-77 (SEQ ID N°: 375), DOM16-78 (SEQ ID N0: 376), DOM16-79 (SEQ ID N°: 377), DOMI6-8O (SEQ ID N°: 378), DOM16-81 (SEQ ID N°: 379), DOM 16-82 (SEQ ID N0: 380), DOM16-83 (SEQ ID N°: 381), DOM16- 84 (SEQ ID N°: 382), DOM16-85 (SEQ ID N°: 383), DOM16-87 (SEQ ID N°: 384), DOM 16-88 (SEQ ID N°: 385), DOM16-89 (SEQ ID N°: 386),
DOM 16-90 (SEQ ID N0: 387), DOM16-91 (SEQ ID N0: 388), DOM16-92 (SEQ ID N°: 389), DOM16-94 (SEQ ID N°: 390), DOM16-95 (SEQ ID N°: 391), DOMl6-96 (SEQ ID N0: 392), DOM16-97 (SEQ ID N°: 393), DOM16- 98 (SEQ ID N0: 394), DOM16-99 (SEQ ID N0: 395), DOM16-ÍOO (SEQ ID N°: 396), DOMI6-IOI (SEQ ID N0: 397), DOM16-102 (SEQ ID N°: 398), DOMl6-103 (SEQ ID N0: 399), DOM16-104 (SEQ ID N°: 400), DOM16- 105 (SEQ ID N°: 401), DOMI6-IO6 (SEQ ID N°: 402), DOM16-107 (SEQ ID N°: 403), DOMI6-IO8 (SEQ ID N°: 404), DOM16-109 (SEQ ID N°: 405), DOMl6-110 (SEQ ID N°: 406), D0M16-111 (SEQ ID N°: 407), - 10 DOMl6-112 (SEQ ID N°: 408), DOM16-113 (SEQ ID N°: 409), DOM16- 114 (SEQ ID N°: 410), DOM16-115 (SEQ ID N°: 411), DOM16-116 (SEQ ID N°: 412), DOM16-117 (SEQ ID N°: 413), DOM16-118 (SEQ ID N°: 414), DOMl6-119 (SEQ ID N°: 415), DOM16-39-6 (SEQ ID N0: 416), DOMl6-39-8 (SEQ ID N°: 417), DOM16-39-34 (SEQ ID N°: 418), D0M16- 39-48 (SEQ ID N0: 419), DOM16-39-87 (SEQ ID N°: 420), DOM16-39-90 (SEQ ID N°: 421), DOM16-39-96 (SEQ ID N0: 422), DOM16-39-100 (SEQ ID N°: 423), DOM16-39-101 (SEQ ID N0: 424), DOM16-39-102 (SEQ ID N°: 425), DOM 16-39-103 (SEQ ID N0: 426), DOM16-39-104 (SEQ ID N°: 427), DOM16-39-105 (SEQ ID N°: 428), DOM16-39-106 (SEQ ID N°: 429), , 20 DOMl6-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM16-39-108 (SEQ ID N0: 431), DOM16-39-109 (SEQ ID N0: 432), DOM16-39-HO (SEQ ID N°: 433), DOM16-39-111 (SEQ ID N°: 434), DOM16-39-112 (SEQ ID N0: 435), DOM16-39-113 (SEQ ID N°: 436), DOM16-39-114 (SEQ ID N°: 437), DOM16-39-115 (SEQ ID N0: 438), DOM16-39-116 (SEQ ID N°: 439), DOM16-39-117 (SEQ ID N°: 440), DOM16-39-200 (SEQ ID N°: 441), DOM16-39-201 (SEQ ID N°: 442), DOM16-39-202 (SEQ ID N0: 443), DOM16-39-203 (SEQ ID N°: 444), DOM16-39-204 (SEQ ID N°: 445), DOM 16-39-205 (SEQ ID N°: 446), DOM16-39-206 (SEQ ID N°: 447), DOM 16-39-207 (SEQ ID N°: 448), DQM16-39-209 (SEQ ID N0: 449), DOMl6-52 (SEQ ID N°: 450), NB 1 (SEQ ID N°: 451), NB 2 (SEQ ID N0: 452), NB 3 (SEQ ID N°: 453), NB 4 (SEQ ID N°: 454), NB 5 (SEQ ID N°: 455), NB 6 (SEQ ID N0: 456), NB 7 (SEQ ID N°: 457), NB 8 (SEQ ID N°: 458), NB 9 (SEQ ID N°: 459), NB 10 (SEQ ID N°: 460), NB 11 (SEQ ID N°: 461), NB 12 (SEQ ID N°: 462), NB 13 (SEQ ID N°: 463), NB 14 (SEQ ID N°: 464), NB 15 (SEQ ID N0: 465), NB 16 (SEQ ID N°: 466), NB 17 (SEQ ID N°: 467), NB 18 (SEQ ID N°: 468), NB 19 (SEQ ID N°: 469), NB 20 (SEQ ID N°: 470), NB 21 (SEQ ID N°: 471) e NB 22 (SEQ ID N0: 472).
Em outras formas de realização, o ácido nucleico isolado e/ou recombinante compreende uma seqüência de nucleotídeo que codifica um ligando que tem especificidade de ligação para EGFR, como descrito neste, em que o dito ligando compreende uma seqüência de aminoácido que tem pelo menos cerca de 80 %, pelo menos cerca de 85 %, pelo menos cerca de 90 %, pelo menos cerca de 91 %, pelo menos cerca de 92 %, pelo menos cerca de 93 %, pelo menos cerca de 94 %, pelo menos cerca de 95 %, pelo menos cerca de 96 %, pelo menos cerca de 97 %, pelo menos cerca de 98 %, ou pelo menos cerca de 99 % de identidade de seqüência de aminoácido com um seqüência de aminoácido selecionado do grupo que consiste de SEQ ID N°:623-703, 727 e 728.
Em outras formas de realização, o ácido nucleico isolado e/ou recombinante codifica um ligando que tem especificidade de ligação para VEGF, como descrito neste, compreende uma seqüência de nucleotídeo que tem pelo menos cerca de 80 %, pelo menos cerca de 85 %, pelo menos cerca de 90 %, pelo menos cerca de 91 %, pelo menos cerca de 92 %, pelo menos cerca de 93 %, pelo menos cerca de 94 %, pelo menos cerca de 95 %, pelo menos cerca de 96 %, pelo menos cerca de 97 %, pelo menos cerca de 98 %, ou pelo menos cerca de 99 % de identidade de seqüência de nucleotídeo com uma seqüência de nucleotídeo codificando um dAb anti-VEGF selecionado do grupo que consiste de TAR15-1 (SEQ ID N0: 1), TAR15-3 (SEQ ID N°: 2), TARl5-4 (SEQ ID N°: 3), TAR15-9 (SEQ ID N°: 4), TAR15-10 (SEQ ID N°: 5), TARl5-11 (SEQ ID N°: 6), TAR15-12 (SEQ ID N°: 7), TAR15-13 (SEQ ID N°: 8), TAR15-14 (SEQ ID N°: 9), TAR15-15 (SEQ ID N°: 10), TARl5-16 (SEQ ID N°: 11), TAR15-17 (SEQ ID N°: 12), TAR15-18 (SEQ - 5 ID N°: 13), TAR15-19 (SEQ ID N°: 14), TAR15-20 (SEQ ID N°: 15), TAR 15-22 (SEQ ID N°: 16), TAR15-5 (SEQ ID N0: 17), TAR15-6 (SEQ ID N0: 18), TARl5-7 (SEQ ID N°: 19), TAR15-8 (SEQ ID N0: 20), TAR15-23 (SEQ ID N°: 21), TARl5-24 (SEQ ID N°: 22), TAR15-25 (SEQ ID N°: 23), TARl5-26 (SEQ ID N°: 24), TARl5-27 (SEQ ID N°: 25), TARl5-29 (SEQ ■ 10 ID N°: 26), TAR15-30 (SEQ ID N°: 27), TAR15-6-500 (SEQ ID N°: 28), TARl5-6-501 (SEQ ID.N°: 29), TAR15-6-502 (SEQ ID N°: 30), TAR15-6- 503 (SEQ ID N°: 31), TAR15-6-504 (SEQ ID N0: 32), TAR15-6-505 (SEQ ID N°: 33), TAR15-6-506 (SEQ ID N°: 34), TAR15-6-507 (SEQ ID N0: 35), TARl5-6-508 (SEQ ID N°: 36), TAR15-6-509 (SEQ ID N°: 37), TAR15-6- 510 (SEQ ID N0: 38), TAR15-8-500 (SEQ ID N0: 39), TAR15-8-501 (SEQ ID N°: 40), TARl5-8-502 (SEQ ID N°: 41), TAR15-8-503 (SEQ ID N°: 42), TARl5-8-505 (SEQ ID N0: 43), TAR15-8-506 (SEQ ID N°: 44), TAR15-8- 507 (SEQ ID N°: 45), TAR15-8-508 (SEQ ID N0: 46), TAR15-8-509 (SEQ ID N°: 47), R15-8-510 (SEQ ID N°: 48), TARl5-8-511 (SEQ ID N°: 49), , 20 TARl5-26-500 (SEQ ID N°: 50), TAR15-26-501 (SEQ ID N0: 51), TAR15- 26-502 (SEQ ID N°: 52), TAR15-26-503 (SEQ ID N°: 53), TAR15-26-504 (SEQ ID N°: 54), TAR15-26-505 (SEQ ID N°: 55), TAR15-26-506 (SEQ ID N°: 56), TARl5-26-507 (SEQ ID N°: 57), TAR15-26-508 (SEQ ID N0: 58), TARl 5-26-509 (SEQ ID N°: 59), TARl 5-26-510 (SEQ ID N0: 60), TARl 5- 26-511 (SEQ ID N°: 61), TAR15-26-512 (SEQ ID N°: 62), TAR15-26-513 (SEQ ID N°: 63), TAR15-26-514 (SEQ ID N°: 64), TAR15-26-515 (SEQ ID N°: 65), TARl5-26-516 (SEQ ID N°: 66), TAR15-26-517 (SEQ ID N°: 67), TARl5-26-518 (SEQ ID N°: 68), TAR15-26-519 (SEQ ID N0: 69), TAR15- 26-520 (SEQ ID N0: 70), TAR15-26-521 (SEQ ID N0: 71), TAR15-26-522 (SEQ ID N°: 72), TAR15-26-523 (SEQ ID N°: 73), TAR15-26-524 (SEQ ID N°: 74), TARl5-26-525 (SEQ ID N°: 75), TAR15-26-526 (SEQ ID N°: 76), TAR15-26-527 (SEQ ID N°: 77), TAR15-26-528 (SEQ ID N°: 78), TAR15- 26-529 (SEQ ID N°: 79), TAR15-26-530 (SEQ ID N°: 80), TAR15-26-531 (SEQ ID N°: 81), TAR15-26-532(SEQ ID N°: 82), TAHl5-26-533 (SEQ ID N°: 83), TAR15-26-534 (SEQ ID N°: 84), TAR15-26-535 (SEQ ID N°: 85), TAR15-26-536 (SEQ ID N°: 86), TAR15-26-537 (SEQ ID N0: 87), TAR15- 26-538 (SEQ ID N°: 88), TARl5-26-539 (SEQ ID N°: 89), TARl5-26-540 (SEQ ID N°: 90), TAR15-26-541 (SEQ ID N0: 91), TAR15-26-542 (SEQ ID ' 10 N°: 92), TARl5-26-543 (SEQ ID N°: 93), TAR15-26-544 (SEQ ID N°: 94), TARl5-26-545 (SEQ ID N°: 95), TAR15-26-546 (SEQ ID N°: 96), TAR15- 26-547 (SEQ ID N°: 97), TAR15-26-548 (SEQ ID N°: 98), TAR15-26-549 (SEQ ID N°: 99), TAR15-21 (SEQ ID N°: 535), TAR15-2 (SEQ ID N°: 536), TARl5-26-550 (SEQ ID N0: 537) e TAR15-26-551 (SEQ ID N°: 538). Preferivelmente, a identidade de seqüência de nucleotídeo é determinada no comprimento total da seqüência de nucleotídeo que codifica o dAb anti- VEGF selecionado.
Em outras formas de realização, o ácido nucleico isolado e/ou recombinante codifica um ligando que tem especificidade de ligação para VEGF, como descrito neste, compreende uma seqüência de nucleotídeo que tem pelo menos cerca de 80 %, pelo menos cerca de 85 %, pelo menos cerca de 90 %, pelo menos cerca de 91 %, pelo menos cerca de 92 %, pelo menos cerca de 93 %, pelo menos cerca de 94 %, pelo menos cerca de 95 %, pelo menos cerca de 96 %, pelo menos cerca de 97 %, pelo menos cerca de 98 %, ou pelo menos cerca de 99 % de identidade de seqüência de nucleotídeo com uma seqüência de nucleotídeo que codifica TAR15-26-555 (SEQ ID N0: 705).
Em outras formas de realização, o ácido nucleico isolado e/ou recombinante que codifica um ligando que tem especificidade de ligação para EGFR, como descrito neste, compreende uma seqüência de nucleotídeo que
tem pelo menos cerca de 80 %, pelo menos cerca de 85 %, pelo menos cerca de 90 %, pelo menos cerca de 91 %, pelo menos cerca de 92 %, pelo menos cerca de 93 %, pelo menos cerca de 94 %, pelo menos cerca de 95 %, pelo menos cerca de 96 %, pelo menos cerca de 97 %, pelo menos cerca de 98 %, ou pelo menos cerca de 99 % de identidade de seqüência de nucleotídeo com uma seqüência de nucleotídeo que codifica um dAb anti-VEGF selecionado do grupo que consiste de DOM16-17 (SEQ ID N°: 199), DOM16-18 (SEQ ID N°: 200), DOMl6-19 (SEQ ID N°: 201), DOM16-20 (SEQ ID N°: 202), DOM 16-21 (SEQ ID N°: 203), DOM16-22 (SEQ ID N0: 204), DOM16-23 ' 10 (SEQ ID N°: 205), DOM16-24 (SEQ ID N°: 206), DOM16-25 (SEQ ID N°: 207), DOMl6-26 (SEQ ID N0: 208), DOM16-27 (SEQ ID N°: 209), DOM16- 28 (SEQ ID N°: 210), DOM16-29 (SEQ ID N0: 211), DOM16-30 (SEQ ID N°: 212), DOMl6-31 (SEQ ID N°: 213), DOM16-32 (SEQ ID N°: 214), DOMl6-33 (SEQ ID N°: 215), DOM16-35 (SEQ ID N°: 216), DOM16-37 (SEQ ID N0: 217), DOM16-38 (SEQ ID N0: 218), DOM16-39 (SEQ ID N°: 219), DOMl6-40 (SEQ ID N0: 220), DOM16-41 (SEQ ID N0: 221), DOM16- 42 (SEQ ID N°: 222), DOM16-43 (SEQ ID N0: 223), DOM16-44 (SEQ ID N0: 224), DOMl6-45 (SEQ ID N0: 225), DOM16-46 (SEQ ID N°: 226), DOMl6-47 (SEQ ID N°: 227), DOM16-48 (SEQ ID N°: 228), DOM16-49 . 20 (SEQ ID N0: 229), DOM16-50 (SEQ ID N0: 230), DOM16-59 (SEQ ID N°: 231), DOMl6-60 (SEQ ID N0: 232), DOM16-61 (SEQ ID N°: 233), DOM16- 62 (SEQ ID N°: 234), DOM16-63 (SEQ ID N0: 235), DOM16-64 (SEQ ID N°: 236), DOMl6-65 (SEQ ID N°: 237), DOM16-66 (SEQ ID N°: 238), DOMl6-67 (SEQ ID N°: 239), DOMl6-68 (SEQ ID N°: 240), DOMl6-69 (SEQ ID N0: 241), DOM16-70 (SEQ ID N°: 242), DOM16-71 (SEQ ID N°: 243), DOM 16-72 (SEQ ID N0: 244), DOMl6-73 (SEQ ID N°: 245), DOMl6- 74 (SEQ ID N°: 246), DOM16-75 (SEQ ID N0: 247), DOM16-76 (SEQ ID N0: 248), DOMl6-77 (SEQ ID N°: 249), DOM16-78 (SEQ ID N°: 250), DOMl6-79 (SEQ ID N°: 251), DOMI6-8O (SEQ ID N°: 252), DOM16-81 (SEQ ID N°: 253), DOM16-82 (SEQ ID N°: 254), DOM16-83 (SEQ ID N°: 255), DOM 16-84 (SEQ ID N°: 256), DOM16-85 (SEQ ID N0: 257), DOM16- 87 (SEQ ID N0: 258), DOM16-88 (SEQ ID N°: 259), DOM16-89 (SEQ ID N0: 260), DOMl6-90 (SEQ ID N°: 261), DOM16-91 (SEQ ID N0: 262), DOMl6-92 (SEQ ID N0: 263), DOM16-94 (SEQ ID N°: 264), DOM16-95 (SEQ ID N°: 265), DOM16-96 (SEQ ID N°: 266), DOM16-97 (SEQ ID N°: 267), DOM 16-98 (SEQ ID N0: 268), DOM16-99 (SEQ ID N°: 269), DOM16- 100 (SEQ ID N°: 270), DOMI6-IOI (SEQ ID N°: 271), DOM16-102 (SEQ ID N°: 272), DOM16-103 (SEQ ID N°: 273), DOM16-104 (SEQ ID N°: • 10 274), DOM 16-105 (SEQ ID N°: 275), DOMI6-IO6 (SEQ ID N°: 276), DOM 16-107 (SEQ ID N0: 277), DOMI6-IO8 (SEQ ID N°: 278), DOMl6- 109 (SEQ ID N°: 279), DOM16-HO (SEQ ID N°: 280), D0M16-111 (SEQ ID N°: 281), DOM16-112 (SEQ ID N°: 282), DOM16-113 (SEQ ID N°: 283), DOMl6-114 (SEQ ID N°: 284), DOM16-115 (SEQ ID N0: 285), DOMl6-116 (SEQ ID N°: 286), DOM16-117 (SEQ ID N°: 287), D0M16- 118 (SEQ ID N°: 288), D0M16-119 (SEQ ID N°: 289), DOM16-39-6 (SEQ ID N°: 290), DOM16-39-8 (SEQ ID N°: 291), DOM16-39-34 (SEQ ID N°: 292), DOMl6-39-48 (SEQ ID N°: 293), DOMl6-39-87 (SEQ ID N°: 294), DOM16-39-90 (SEQ ID N0: 295), DOM16-39-96 (SEQ ID N°: 296), . 20 DOM16-39-100 (SEQ ID N0: 297), DOM16-39-101 (SEQ ID N°: 298), DOM16-39-102 (SEQ ID N°: 299), DOM16-39-103 (SEQ ID N°: 300), DOM16-39-104 (SEQ ID N0: 301), DOM16-39-105 (SEQ ID N°: 302), DOM16-39-106 (SEQ ID N°: 303), DOM16-39-107 (SEQ ID N°: 304), DOM16-39-108 (SEQ ID N°: 305), DOM16-39-109 (SEQ ID N0: 306), DOM16-39-110 (SEQ ID N0: 307), DOM16-39-111 (SEQ ID N°: 308), DOM16-39-112 (SEQ ID N°: 309), DOM16-39-113 (SEQ ID N°: 310), DOM16-39-114 (SEQ ID N°: 311), DOM16-39-115 (SEQ ID N°: 312), DOM16-39-116 (SEQ ID N°: 313), DOM16-39-117 (SEQ ID N°: 314), DOMl6-39-200 (SEQ ID N0: 315), DOM16-39-201 (SEQ ID N°: 316), DOMl6-39-202 (SEQ ID N°: 317), DOM16-39-203 (SEQ ID N°: 318), DOMl6-39-204 (SEQ ID N°: 319), DOM16-39-205 (SEQ ID N°: 320), DOM16-39-206 (SEQ ID N°: 321), DOM16-39-207 (SEQ ID N°: 322), DOM 16-39-209 (SEQ ID N°: 323) e DOM16-52 (SEQ ID N°: 324). Preferivelmente, a identidade de seqüência de nucleotídeo é determinada no comprimento total da seqüência de nucleotídeo que codifica o dAb anti-EGFR selecionado.
Em outras formas de realização, o ácido nucleico isolado e/ou recombinante codifica um ligando que tem especificidade de ligação para EGFR, como descrito neste, compreende uma seqüência de nucleotídeo que tem pelo menos cerca de 80 %, pelo menos cerca de 85 %, pelo menos cerca de 90 %, pelo menos cerca de 91 %, pelo menos cerca de 92 %, pelo menos cerca de 93 %, pelo menos cerca de 94 %, pelo menos cerca de 95 %, pelo menos cerca de 96 %, pelo menos cerca de 97 %, pelo menos cerca de 98 %, ou pelo menos cerca de 99 % de identidade de seqüência de nucleotídeo com uma seqüência de nucleotídeo codificando um dAb anti-EGFR selecionado do grupo que consiste de SEQ ID N°:623-703, 727 e 728.
A invenção também fornece um vetor que compreende uma molécula de ácido nucleico recombinante da invenção. Em certas formas de realização, o vetor é um vetor de expressão que compreende um ou mais elementos de controle de expressão ou seqüências que são operavelmente ligadas ao ácido nucleico recombinante da invenção. A invenção também fornece a célula hospedeira recombinante que compreende uma molécula de ácido nucleico recombinante ou vetor da invenção. Os vetores adequados (por exemplo, plasmídios, fagomidas), elementos de controle de expressão, células hospedeiras e métodos para produzir célula hospedeira recombinante da invenção são bem conhecidas na técnica, e exemplos ainda são descritos neste.
Os vetores de expressão adequados podem conter um número de componentes, por exemplo, uma origem de replicação, um gene marcador selecionável, um ou mais elementos de controle de expressão, tal como um elemento de controle de transcrição (por exemplo, promotor, intensificador, terminador) e/ou um ou mais sinais de tradução, uma seqüência de sinal ou seqüência líder, e outros, elementos de controle de expressão e uma seqüência de sinal, se presente, podem ser fornecidas pelo vetor ou outra fonte. Por exemplo, as seqüências de controle de transcrição e/ou tradução de um ácido nucleico clonado que codifica uma cadeia de anticorpo pode ser usado para expressão direta.
Um promotor pode ser fornecido pela expressão em uma célula hospedeira desejada. Os promotores podem ser constitutivos ou indutíveis. Por exemplo, um promotor pode ser operavelmente ligado a um ácido nucleico que codifica um anticorpo, cadeia de anticorpo ou porção destes, tal que a transcrição direta de ácido nucleico. Uma variedade de promotores adequados por hospedeiros procarióticos (por exemplo, promotores lac, tac, T3, T7 por E. coli) e eucarióticos (por exemplo, promotor precoce ou tardio do vírus símio 40, promotor de repetição de terminal longo do vírus do sarcoma de Rous, promotor de citomegalovírus, promotor tardio de adenovírus) são disponíveis.
Além disso, vetores de expressão tipicamente compreendem um marcador selecionável para seleção de células hospedeiras que carregam o vetor, e no caso de um vetor de expressão replicável, uma origem ou replicação. Os genes que codificam produtos que conferem resistência a antibiótico ou medicamento são marcadores selecionáveis comuns e podem ser usados em células procarióticas (por exemplo, gene de lactamase (resistência a ampicilina), gene Tet para resistência a tetraciclina) e eucarióticas (por exemplo, neomicina (G418 ou geneticina), gpt (ácido micofenólico), ampicilina, ou genes de resistência a higromicina). Genes marcadores de redutase de diidrofolato permitem seleção com metotrexato em uma variedade de hospedeiros. Genes que codificam o produto do gene de marcadores auxotróficos do hospedeiro (por exemplo, LEU2, URA3, HIS3) são freqüentemente usados como marcadores selecionáveis em levedura. O uso de vetores virais ou fagos (por exemplo, baculovírus), e vetores que são capazes de integrar no genoma da célula hospedeira, tal como vetores retrovirais, também são abrangidos. Os vetores de expressão adequados pata expressão em células de mamíferos e células procarióticas (E. coli), células de inseto (Células Drosophila Schnieder S2, Sf9) e levedura (P. thethanolica, P. pastoris, S. cerevisiae) são bem conhecidas na técnica.
As células hospedeiras adequadas podem ser procarióticas, incluindo células bacterianas tal como E. coli, B. subtilis e/ou outra bactéria adequada; células eucarióticas, tal como células fóngicas ou de levedura (por exemplo, Pichia pastoris, Aspergillus sp., Saccharomyces cerevisiae, Schizosaccharomyces pornbe, Neurospora crassa), ou outras células eucarióticas inferiores, e células eucariotas superiores tal como aquelas a partir de insetos (por exemplo, células Drosophila Schnieder S2, células de inseto Sf9 (WO 94/26087 (OConnor)), mamíferos (por exemplo, células COS, tais como COS-I (Acessão ATCC N0 CRL-1650) e COS-7 (Acessão ATCC N0 CRL-1651), CHO (por exemplo, Acessão ATCC N0 CRL-9096, CHO DG44 (Urlaub, G. e Chasin, LA., Proc. Natl. Acac. Sei. USA, 77(7):4216-4220 (1980))), 293 (Acessão ATCC N0 CRL-1573), HeLa (Acessão ATCC N0 CCL-2), CVl (Acessão ATCC N0 CCL-70), WOP (Dailey, L, et al., J. Virol., 54:739-749 (1985), 3T3, 293T (Pear, W. S, et al., Proc. Natl. Acad. Sei. U.S.A., 90:8392-8396 (1993)) células NSO, SP2/0, células HuT 78 e outras, ou vegetais (por exemplo, tabaco). (Ver, por exemplo, Ausubel, F.M. et al., eds. Current Protocols in Molecular Biology, Greene Publishing Associates e John Wiley & Sons Inc. (1993)) Em algumas formas de realização, a célula hospedeira em uma célula hospedeira isolada não é parte de um organismo multicelular (por exemplo, vegetal ou animal). Em formas de realização preferidas, a célula hospedeira não é uma célula hospedeira humana.
A invenção também fornece um método para produzir um ligando (por exemplo, ligando específico duplo, ligando multiespecífico) da invenção, que compreende mantendo a célula hospedeira recombinante que compreende um ácido recombinante isolado da invenção sob as condições adequadas para expressão do ácido nucleico recombinante, por qual o ácido nucleico recombinante é expressado e um ligando é produzido. Em algumas formas de realização, o método ainda compreende isolar o ligando. Preparação de ligandos com base em imunoglobulina
Os ligandos (por exemplo, ligandos específicos duplos, ligando multiespecíficos) de acordo com a invenção podem ser preparados de acordo com as prévias técnicas estabelecidas, usadas no campo de engenharia de anticorpo, para a preparação de scFv, anticorpos de "fago" e outras moléculas de anticorpo projetadas. As técnicas para a preparação de anticorpos são por exemplo descritas nas seguintes revisões e nas referências citadas neste: Winter & Milstein, (1991) Nature 349:293-299; Pluckthun (1992) Immunological Reviews 13 0:151-188; Wright et al., (1992) Crit. Rev. Immunol. 12:125-168; Holliger, P. & Winter, G. (1993) Curr. Opin. Biotechnol. 4, 446-449; Carter, et al. (1995) J. Hematother. 4, 463-470; Chester, I.A. & Hawkins, R.E. (1995) Trends Biotechnol. 13, 294-300; Hoogenboom, H.R. (1997) Nat. Biotechnol. 15, 125-126; Fearon, D. (1997) Nat. Biotechnol. 15, 618-619; Pluckthun, A. & Pack, Ρ. (1997) Immunotechnology 3, 83-105; Carter, P. & Merchant, A.M. (1997) Curr. Opin. Biotechnol. 8, 449-454; Holliger, P. & Winter, G. (1997) Câncer Immunol. Imrnunother. 45,128-130.
As técnicas adequadas utilizadas para seleção de domínios variáveis de anticorpos com uma especificidade desejada utiliza bibliotecas e procedimentos de seleção que são conhecidos na técnica. As bibliotecas naturais (Marks et ai. (1991) J. Mol. BioL, 222: 581; Vaughan et al. (1996) Nature Biotech., 14: 309) que usam genes V redispostos coletados a partir de células B humanas e são bem conhecidos aqueles habilitados na técnica. As bibliotecas sintéticas (Hoogenboom & Winter (1992) J. MoL Biol., 227: 381; Barbas et al. (1992) Proc. Natl. Acad. Sei. USA, 89: 4457; Nissim et al. (1994) EMBO J., 13: 692; Griffiths et al. (1994) EMBO J., 13: 3245; De Kruif et al. (1995) J. Mol. Biol., 248: 97) são preparadas pela clonagem de genes V de imunoglobulina, usualmente usando PCR. Os erros no processo de PCR pode levar a um alto grau de randomisação. As bibliotecas Vh e/ou Vl podem ser selecionadas contra antígenos alvos ou epítopos separadamente, no caso da ligação de domínio simples ser diretamente selecionada, ou juntos. Sistemas de vetor da biblioteca
Uma variedade de sistemas de seleção são conhecidos na técnica que são adequadas para o uso na presente invenção. Exemplos de tais sistemas são descritos abaixo.
Sistemas de expressão de lambda de bacteriofago podem ser avaliados diretamente como placas de bacteriofago ou como colônias de lisogênios, ambos previamente descritos (Huse et al. (1989) Science, 246: 1275; Caton e Koprowski (1990) Proc. Natl. Acad. Sei. U.S.A., 87; Mullinax et al. (1990) Proc. Natl. Acad. Sei. U.S.A., 87: 8095; Persson et al. (1991) Proc. Natl. Acad. Sei. U.S.A., 88: 2432) e são de uso na invenção. Enquanto tais sistemas de expressão podem ser usados para avaliar até IO6 membros diferentes de uma biblioteca, estes não estão realmente adaptados para avaliação de números maiores (maior do que IO6 membros). De uso particular na construção de bibliotecas são sistemas de apresentação de seleção, que intensificam um ácido nucleico a ser ligado ao polipeptídeo que este expressa. Como usado neste, um sistema de apresentação de seleção é um sistema que permite a seleção, por meios de apresentação adequados, de membros individuais da biblioteca pela ligação genérica e/ou alvo. Os protocolos de seleção para isolar os membros desejados de bibliotecas grandes são conhecidos na técnica, como típico por técnicas de apresentação de fago. Tais sistemas, em que seqüências de peptídeo diversas são apresentadas na superfície do bacteriofago filamentoso (Scott e Smith
(1990) Science, 249: 386), mostraram-se úteis para criação de bibliotecas de fragmentos de anticorpos (e as seqüências de nucleotídeos que os codificam) para a seleção in vitro e amplificação de fragmentos de anticorpos específicos que ligam ao antígeno alvo (McCafferty et al., WO 92/01047). As seqüências de nucleotídeos que codificam as regiões variáveis são ligadas aos fragmentos do gene que codificam sinais condutor que os conduz ao espaço periplásmico de E. coli e como um resultado os fragmentos de anticorpos resultantes são apresentados na superfície do bacteriofago, tipicamente como fusões às proteínas de revestimento bacteriofago (por exemplo, pIII ou pVIII). Alternativamente, os fragmentos de anticorpos são apresentados externamente em capsídios de fago lambda (fagocorpos). Uma vantagem dos sistemas de apresentação baseados em fago são que, porque estes são sistemas biológicos, de membros de biblioteca selecionados podendo ser amplificados simplesmente pelo desenvolvimento do fago contendo o membro de biblioteca selecionado em células bacterianas. Além disso, visto que a seqüência de nucleotídeo que codifica o membro de biblioteca de polipeptídeo é contido em um fago ou vetor fagomida, seqüenciamento, expressão e manipulação genética subseqüente é relativamente direta.
Os métodos para a construção de bibliotecas de apresentação de anticorpo bacteriofago e bibliotecas de expressão de fago lambda são bem conhecidos na técnica (McCafferty et al. (1990) Nature, 348: 552; Kang et al.
(1991) Proc. Natl. Acad. Sei. U.S.A., 88: 4363; Clackson et al. (1991) Nature, 352: 624; Lowman et al. (1991) Bioquímica, 30: 10832; Burton et al. (1991) Proc. Natl. Acad. Sci U.S.A., 88: 10134; Hoogenboom et al. (1991) Nucleic Acids Res., 19: 4133; Chang et al. (1991) J. Immunol., 147: 3610; Breitling et ai. (1991) Gene, 104: 147; Marks et ai. (1991) supra; Barbas et al. (1992) supra; Hawkins e Winter (1992) J. Immunol., 22: 867; Marks et al., 1992, J. Biol. Chem., 267: 16007; Lerner et al. (1992) Science, 258: 1313, incorporado neste por referência).
Um método vantajoso particularmente tem sido o uso de bibliotecas de fago scFv (Huston et al., 1988, Proc. Natl. Acad. Sci U.S.A., 85: 5879-5883; Chaudhary et al. (1990) Proc. Natl. Acad. Sci U.S.A., 87: 1066-1070; McCafferty et al. (1990) supra; Clackson et al. (1991) Nature, 352: 624; Marks et al. (1991) J. MoL Biol., 222: 581; Chiswell et al. (1992) Trends Biotechnol., 10: 80; Marks et al. (1992) J. Biol. Chem., 267). Várias formas de realização de bibliotecas scFv apresentadas nas proteínas de revestimento bacteriofago foram descritas. Refinamentos de métodos de apresentação de fago são também conhecidos, por exemplo como descrito em W096/06213 e W092/01047 (Medicai Research Council et al.) e W097/08320 (Morphosys), que são incorporados neste por referência.
Outros sistemas para bibliotecas de geração de polipeptídeos envolve o uso de mecanismo enzimático isento de célula para a síntese in vitro dos membros da biblioteca. Em um método, as moléculas de RNA são selecionadas por ciclo alternado de seleção contra um alvo e amplificação PCR (Tuerk and Gold (1990) Science, 249: 505; Ellington and Szostak (1990) Nature, 346: 818). Uma técnica similar pode ser usada para identificar as seqüências de DNA que ligam-se ao fator de transcrição humano pre- determinado (Thiesen e Bach (1990) Nucleic Acids Res., 18: 3203; Beaudry e Joyce (1992) Science, 257: 635; W092/05258 e W092/14843). Em uma maneira similar, a tradução in vitro pode ser usada para a síntese de polipeptídeos como um método para gerar grandes bibliotecas. Estes métodos que no geral compreendem complexos de polissoma estabilizados, são descritos ainda em W088/08453, W090/05785, W090/07003, W091/02076, W091/05058 e W092/02536. Sistemas de apresentação alternativo que não são baseados em fago, tal como aqueles divulgados em W095/22625 e W095/11922 (Affymax) uso de polissomas por polipeptídeos de apresentação para seleção.
Ainda, uma categoria adicional de técnicas envolve a seleção de repertórios em compartimentos artificiais, que permite a ligação de um gene com este produto do gene. Por exemplo, um sistema de seleção em que ácidos nucleicos que codificam produtos de gene desejados podem ser selecionados em microcápsulas formados por emulsões em água em óleo é descrita em W099/02671, W000/40712 e Tawfik & Griffiths (1998) Nature Biotechnol 16(7), 652-6. Os elementos genéticos que codificam um produto do gene tendo uma atividade desejada são compartimentalizadas em microcápsulas e então descritas e/ou traduzidas para produzir seus produtos de gene respectivos (RNA ou proteína) dentro das microcápsulas. Os elementos genéticos que produzem produto do gene tendo atividade desejada são subseqüentemente sortidos. Este método seleciona os produtos do gene de interesse pela detecção da atividade desejada por uma variedade de meios. Construção de biblioteca
As bibliotecas pretendidas para seleção, podem ser construídas usando técnicas conhecidas na técnica, por exemplo como apresentado acima, ou podem ser adquiridas a partir de fontes comerciais, as bibliotecas que são úteis na presente invenção são descritas, por exemplo, em W099/20749. Uma vez que um sistema de vetor seja escolhido e uma ou mais seqüências de ácido nucleico que codificam polipeptídeos de interesse são clonados no vetor de biblioteca, um pode gerar diversidade dentro das moléculas clonadas por mutagênese de comprometimento antes da expressão; Alternativamente, as proteínas codificadas podem ser expressadas e selecionadas, como descrito acima, antes da mutagênese e ciclos adicionais de seleção serem realizados. A mutagênese de seqüências de ácido nucleico que codificam estruturalmente os polipeptídeos otimizados é realizada por métodos moleculares padrão. De uso particular é a reação de cadeia de polimerase, ou PCR, (Mullis e Faloona (1987) Methods Enzymol., 155: 335, neste incorporado por referência). O PCR, que usa ciclos múltiplos de replicação de DNA catalisado por um polimerase de DNA dependente de DNA termoestável para amplificar a seqüência alvo de interesse, é bem conhecida na técnica. A construção de várias bibliotecas de anticorpo foram debatidas em Winter et ai. (1994) Ann. Rev. Immunology 12, 433-55, e referências citadas neste.
O PCR é realizado usando DNA padrão (pelo menos lfg; mais utilmente, 1 -1OOO ng) e pelo menos 25 pmol de iniciadores de oliglonucleotídeos; este pode ser vantajoso para uso em uma quantidade grande de iniciador quando o grupo iniciador é fortemente heterogêneo, como cada seqüência é representada por apenas uma fração pequena das moléculas do grupo, e quantidades tornando-se limitantes no ciclo de amplificação posterior. Uma mistura de reação típica inclui: 2μ1 de DNA, 25 pmol de iniciador de oliglonucleotídeo, 2,5 μΐ de IOX tampão PCR 1 (Perkin-Elmer, Foster City, CA), 0,4 μΐ de 1,25 μΜ dNTP, 0,15 μΐ (ou 2,5 unidades) de polimerase de DNA de Taq (Perkin Elmer, Foster City, CA) e água deionizada a um volume total de 25 μΐ. Óleo mineral é sobreposto e o PCR é realizado usando um alternador térmico programável. O comprimento e temperatura de cada etapa um ciclo PCR, bem como diversos ciclos, é ajustado de acordo aos requerimentos de estringência no efeito. A temperatura e o ritmo de recozimento são determinados tanto pela eficiência quanto por um iniciador que é esperado recozer em um padrão e no grau de divergência que está a ser tolerado; obviamente, quando as moléculas de ácido nucleico são simultaneamente amplificadas e mutagenizadas, a divergência é requerida, pelo menos no primeiro ciclo da síntese. A capacidade de otimizar a estrigências das condições de recozimento do iniciador é bem dentro do entendimento de um moderado habilitado na técnica. Uma temperatura de recozimento entre 30° C e 72° C é usada. A desnaturação inicial das moléculas padrão normalmente ocorrem entre 92° C e 99° C por 4 minutos,
seguido por 20-40 ciclos que consistem de desnaturação (94-99° C por 15
segundos a 1 minuto), recozimento (temperatura determinada como debatido
acima; 1-2 minutos), e extensão (72° C por 1-5 minutos, dependendo do
comprimento do produto amplificado), a extensão final é no geral por 4
minutos a 72° C, e pode ser seguido por uma etapa indefinida (0-24 hora) a 4o C.
Combinação de domínios variáveis simples
Os domínios úteis na invenção, uma vez selecionados, podem ser combinados por uma variedade de métodos conhecidos na técnica, incluindo métodos covalentes e não covalentes. métodos preferidos incluem o uso de ligadores de polipeptídeo, como descrito, por exemplo, em conexão com moléculas scFv (Bird et ai., (1988) Science 242:423-426). A argumentação dos ligadores adequados são fornecidas em Bird et al. Science 242, 423-426; Hudson et al , Journal Immunol Methods 231 (1999) 177-189; Hudson et al, Proc Nat Acad Sci USA 85, 5879-5883. Os ligadores são preferivelmente flexíveis, permitindo que dois domínios simples interajam. Um exemplo de ligador é um ligador (Gly4 Ser)n, onde η = 1 a 8, por exemplo, 2, 3, 4, 5 ou 7. Os ligadores usados em diacorpos, que são menos flexíveis, também podem ser utilizados (Holliger et al., (1993) Proc Nat Acad Sci USA 90:6444-6448). Em uma forma de realização, o ligador utilizado não é uma região de junção de imunoglobulina.
Os domínios variáveis podem ser combinados usando outros métodos do que ligadores. Por exemplo, o uso de pontes de bissulfeto fornecidas através de ocorrência natural ou resíduos de cisteína projetados, podem ser explorados para estabilizar dímeros de Vh-Vh,Vl-Vl ou Vh-Vl (Reiter et al., (1994) Protein Eng. 7:697-704) ou pela remodelação da interface entre os domínios variáveis para melhorar a "adaptação" e deste modo a estabilidade de interação (Ridgeway et al., (1996) Protein Eng. 7:617- 621; Zhu et ai, (1997) Protein Science 6:781-788). Outras técnicas para unir ou estabilizar os domínios variáveis de imunoglobulinas, e em particular domínios Vh de anticorpo, podem ser utilizados como apropriado. Caracterização dos Iigandos
Uma ligação de um ligando específico duplo á célula ou uma ligação de cada domínio de ligação para cada alvo específico pode ser testados por métodos que serão familiares aqueles habilitados na técnica e incluem ELISA. Em uma forma de realização preferida da invenção a ligação é testada usando ELISA de fago monoclonal. ELISA de fago pode ser realizada de acordo com qualquer procedimento adequado: um protocolo exemplar é apresentado abaixo.
Populações de fago produzido em cada ciclo de seleção pode ser avaliado pela ligação por ELISA ao antígeno selecionado ou epítopo, para identificar anticorpos de fago "policlonal". O fago a partir das colônias bacterianas infectadas simples destas populações podem então ser avaliadas por ELISA para identificar anticorpos de fago "monoclonal". Também é desejado avaliar fragmentos solúveis de anticorpos por ligação ao antígeno ou epítopo, e isto também pode ser realizado por ELISA usando reagentes, por exemplo, contra um rótulo de terminal C ou N (ver por exemplo Winter et al. (1994) Ann. Rev. Immunology 12, 433-55 e referências citadas neste.
A diversidade dos anticorpos monoclonal de fago selecionados também pode ser avaliada por eletroforese em gel de produtos PCR (Marks et al. 1991, supra; Nissim et al. 1994 supra), sondagem (Tomlinson et al., 1992) J. MoL Biol. 227, 776) ou pelo seqüenciamento do DNA de vetor. Estrutura dos ligandos
No caso que cada domínio variável é selecionado de repertórios de gene V, selecionados por exemplo usando tecnologia de apresentação de fago como neste descrito, então estes domínios variáveis compreendem uma região universal de estrutura, tal que estes podem ser reconhecido por um ligando específico duplo genérico específico como neste definido. O uso das estruturas universais, ligandos genéricos e outros é descrito em W099/20749.
Onde repertórios de gene V são usados a variação na seqüência de polipeptídeo é preferivelmente localizado dentro do arcos estruturais de domínios variáveis. As seqüências de polipeptídeo de domínio variável pode ser alterada pela mistura do DNA ou por mutação a fim de intensificar a interação de cada domínio variável com este par complementar. A mistura de DNA é conhecida na técnica e ensinada, por exemplo, por Stemmer, 1994, Nature 370: 389-391 e Patente U.S. N°. 6.297.053, ambas que são incorporadas neste por referência. Outros métodos de mutagênese são bem conhecidos aqueles habilitados na técnica.
No geral, moléculas de ácido nucleico e construções de vetor requeridos para seleção, preparação e formatação dos ligandos específicos duplos podem ser construídos e manipulados como apresentado nos manuais de laboratório padrão, tal como Sambrook et al. (1989) Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harborv USA.
A manipulação de ácidos nucleicos úteis na presente invenção é tipicamente realizada em vetores recombinantes. Como usado neste, o vetor refere-se a um elemento discreto que é usado para introduzir DNA heterólogos nas células para a expressão e/ou replicação deste. Os métodos pelos quais a seleção ou construção e, subseqüentemente, usam tais vetores que são bem conhecidos por uma pessoa comum habilitada na técnica. Os vetores numerosos são publicamente disponíveis, incluindo plasmídeos bacterianos, bacteriofago, cromossomos artificiais e vetores epissomais. Tais vetores podem ser usados por clonagem simples e mutagênese; Alternativamente um vetor de expressão do gene é utilizado. Um vetor de uso de acordo com a invenção pode ser selecionado por acomodar uma seqüência codificadora de polipeptídeo de um tamanho desejado, tipicamente a partir de 0,25 quilobase (kb) a 40 kb ou mais em comprimento. Uma célula hospedeira adequada é transformada com um vetor após manipulações de clonagem in vitro. Cada vetor contendo vários componentes funcionais, que no geral incluem um local de clonagem (ou "poliligador"), uma origem de replicação e pelo menos um gene marcador selecionável. Se o dado vetor é um vetor de expressão, este adicionalmente possui um ou mais dos seguintes: elemento intensificador, promotor, terminação de transcrição e seqüências de sinais, cada um posicionado na vicinidade do local de clonagem, tal que estes são operativamente ligado ao gene que codifica um ligando específico duplo de acordo com a invenção.
Tanto vetor de clonagem quanto de expressão no geral contém seqüências de ácido nucleico que intensificam o vetor para replicar e um ou mais células hospedeiras selecionadas. Tipicamente em vetores de clonagem, esta seqüência é uma que permite o vetor replicar independentemente do DNA cromossômico hospedeiro e incluem origens de replicação ou seqüências de replicação autônomas. Tais seqüências são bem conhecidas por uma variedade de bactéria, levedura e vírus. A origem de replicação a partir do plasmídeo pBR322 é mais adequado por bactéria gram-negativa, a origem do plasmídeo de 2 mícrons é adequado por levedura, e várias origens virais (por exemplo SV 40, adenovírus) são úteis por vetores de clonagem em células de mamíferos. No geral, a origem da replicação não é necessária por vetores de expressão de mamíferos a não ser estes são usados em células de mamíferos capaz de replicar altos níveis de DNA, tal como células COS.
Vantajosamente, um vetor de clonagem ou expressão pode conter um gene de seleção também referidos como um marcador selecionável. Este gene codifica uma proteína necessária pela sobrevivência ou desenvolvimento de células hospedeiras transformadas desenvolvidas em um meio de cultura seletivo. As células hospedeiras não transformadas com o vetor contendo o gene de seleção portanto não sobreviverá no meio de cultura. Genes de seleção típicos codificam proteínas que conferem resistência a antibióticos e outras toxinas, por exemplo ampicilina, neomicina, metotrexato ou tetraciclina, complementam as deficiências auxotróficas, ou fornecem nutrientes críticos não disponíveis no meio de desenvolvimento.
Visto que a replicação dos vetores que codificam o ligando específico duplo de acordo com a presente invenção é mais convenientemente realizado em E. coli, um marcador selecionável de E. coli, por exemplo, gene de lactamase β que conferem resistência ao antibiótico ampicilina, é o uso. Estes podem ser obtidos de plasmídios de E. coli, tal como pBR322 ou um plasmídeo pUC tal como pUC18 ou pUC19.
Os vetores de expressão usualmente contém um promotor que é reconhecido pelo organismo hospedeiro e é operavelmente ligado à seqüência codificadora de interesse. Um tal promotor pode ser induzido ou constitutivo. O termo "operavelmente ligado" refere-se a uma justaposição em que os componentes descritos são em uma afinidade os permitindo funcionar em sua maneira pretendida. Uma seqüência de controle "operavelmente ligado" a uma seqüência codificadora é ligada em uma tal maneira que a expressão da seqüência codificadora é atingida sob condições compatíveis com as seqüências de controle.
Os promotores adequados para uso com hospedeiros procarióticos incluem, por exemplo, os sistemas de promotor lactamase β e lactose, fosfatase alcalina, o sistema de promotor triptofano (trp) e promotores híbridos tal como o promotor tac. Os promotores para o uso nos sistemas bacterianos também conterão no geral uma seqüência Shine-Delgarno operavelmente ligada à seqüência codificada.
Os vetores preferidos são vetores de expressão que permitem a expressão de uma seqüência de nucleotídeo correspondente a um membro de biblioteca de polipeptídeo. Deste modo, a seleção com o primeiro e/ou segundo antígeno ou epítopo pode ser realizada por propagação separada e expressão de um clone simples que expressa o membro de biblioteca de polipeptídeo ou pelo uso de qualquer sistema de apresentação de seleção. Como descrito acima, o sistema de apresentação de seleção preferido é apresentação de bacteriofago. Deste modo, vetores de fago ou fagomidas podem ser usados, (por exemplo, pITl ou pIT2. Seqüências condutoras úteis na invenção incluem pelB, stll, ompA, phoA, bla e pelA. Um exemplo são vetores de fagomida que tem uma origem de E. coli de replicação. (por replicação de filamento duplo) e também uma origem de fago de replicação (para produção de DNA de filamento simples). A manipulação e expressão de tais vetores é bem conhecida na técnica (Hoogenboom e Winter (1992) supra; Nissim et al. (1994) supra). Resumidamente, o vetor contém um gene de lactamase β a conferir seletivamente no fagomida e um promotor lac, a montante de um cassete de expressão que consiste (terminal N a C) de uma seqüência condutora pelB (que conduz o polipeptídeo expressado ao espaço periplásmico), um local de clonagem múltipla (para clonagem da versão de nucleotídeo do membro da biblioteca), opcionalmente, um ou mais peptídeo tag (por detecção), opcionalmente, um ou mais códons de interrupção TAG e a proteína de fago pIII. Deste modo, usando várias cepas supressoras e não supressoras de E. coli e com a adição de glicose, iso-propil tio-(3-D- galactosídeo (IPTG) ou um fago auxiliar, tal como VCS Ml3, o vetor é capaz de replicar com um plasmídio com nenhuma expressão, produzindo grandes quantidades do membro de biblioteca de polipeptídeo apenas ou produzindo fago, alguns que contenham pelo menos uma cópia da fusão pIII de polipeptídeo na sua superfície.
A construção de vetores que codificam os ligandos específicos duplos de acordo com a invenção utilizam técnicas de ligação convencionais. Vetores isolados ou fragmentos de DNA são clivados, adaptados, e religados na forma desejada para gerar o vetor requerido. Se desejado, a análise confirma que as seqüências corretas estão presentes no vetor construído pode ser realizada em uma maneira conhecida. Os métodos adequados para vetores de expressão de construção, preparação transcrita in vitro, introduzindo o DNA em células hospedeiras, e realizando análise para expressão e função avaliada que são conhecidas aqueles habilitados na técnica. A presença de uma seqüência de gene em uma amostra é detectada, ou esta amplificação e/ou expressão quantificada por métodos convencionais, tal como análise de Southern ou Northern, Western blotting, dot blotting de DNA5 RNA ou proteína, hibridização in situ, imunocitoquímica ou análises de seqüência de ácido nucleico ou moléculas de proteína. Aqueles habilitados na técnica considerarão facilmente como estes métodos podem ser modificados, se desejado.
Cadeias principais
As cadeias principais podem ser baseadas em moléculas de imunoglobulina ou podem não ser imunoglobulina na origem como apresentado acima. Cada domínio do ligando específico duplo pode ser uma cadeia principal diferente. Cadeias principais de imunoglobulina preferidas como neste definido incluem qualquer um ou mais daqueles selecionados dos seguintes: uma molécula de imunoglobulina que compreende pelo menos (i) o domínio CL (subclasse capa ou lambda) de um anticorpo; ou (ii) o domínio CHl de uma cadeia pesada de anticorpo; uma molécula de imunoglobulina que compreende os domínios CHl e CH2 de uma cadeia pesada de anticorpo; uma molécula de imunoglobulina que compreende os domínios CHI, CH2 e CH3 de uma cadeia pesada de anticorpo; ou qualquer dos subgrupos (ii) em conjunção com o domínio CL (subclasse capa ou lambda) de um anticorpo. Um domínio de Uma região de junção também pode ser incluído. Tais combinações de domínios podem, por exemplo, anticorpos naturais imitadores, tal como IgG ou IgM, ou fragmentos destes, tal como moléculas Fv, scFv, Fab ou F(ab')2. Aqueles habilitados na técnica serão advertido que esta lista não é pretendida a ser exaustiva. Estruturas de proteínas
Cada domínio de ligação compreende uma estrutura de proteína e um ou mais CDRs que são envolvidos na interação específica do domínio com um ou mais epítopos. Vantajosamente, um domínio de ligação de epítopo de acordo com a presente invenção compreende três CDRs. Estruturas de proteínas adequadas incluem qualquer daqueles selecionados do grupo que consiste dos seguintes: aqueles com base em domínios de imunoglobulina, aqueles com base em fibronectina, aqueles com base em aficorpos, aqueles com base em CTLA4, aqueles com base em chaperonas tal como GroEL, aqueles com base em lipocalina e aqueles com base nos receptores Fc bacterianos SpA e SpD. Aqueles habilitados na técnica estimarão que esta lista não é pretendida a ser exaustiva. Estruturas para o uso nos ligandos de construção Seleção de conformação da cadeia principal
Todos os membros da superfamília de imunoglobulina dividem uma dobra similar pela sua cadeia de polipeptídeo. Por exemplo, embora os anticorpos são altamente diversos em termos de sua seqüência primária, comparação de seqüências e estruturas cristalográficas tem revelado que, contrário à expectativa, cinco de seis arcos de ligação de antígenos de anticorpos (Hl, H2, LI, L2, L3) adotando um número limitado de conformações de cadeia principal, ou estruturas canônicas (Chothia e Lesk (1987) J. MoL Biol., 196:901; Chothia et ai. (1989) Nature, 342: 877). A análise de comprimentos de arco e resíduos chave tem portanto capacidade de predição das conformações de cadeia principal de Hl, H2, LI, L2 e L3 observados na maioria de anticorpos humanos (Chothia et al. (1992) J. Mol. Biol., 227: 799; Tomlinson et al. (1995) EMBO J, 14: 4628; Williams et al. (1996) J. MoL Biol., 264: 220). Embora a região H3 é muito mais diversa em termos de seqüência, comprimento e estrutura (devido ao uso de segmentos D), também formam um número limitado de conformações de cadeia
principal por comprimentos de arcos curtos que dependem do comprimento e da presença de resíduos particulares, ou tipos de resíduo, em posições chave no arco e na estrutura do anticorpo (Martin et al. (1996) J. Mol. Biol., 263: 800; Shirai et al. (1996) FEBSLetters, 399: 1).
Bibliotecas de ligandos e/ou domínios de ligação podem ser
projetados em que certos comprimentos de arcos e resíduos chave foram escolhidos por garantir que a conformação de cadeia principal de membros seja conhecida. Vantajosamente, estas são conformações reais de superfamília de moléculas de imunoglobulina observadas em estado natural, para minimizar as chances de estes não serem não funcionais, como debatido acima. Segmentos de gene V de linha de germe serve com uma estrutura básica adequada para construção de anticorpo ou bibliotecas de receptor celular T; outras seqüências também são usadas. Variações podem ocorrer em uma baixa freqüência, tal que um número pequeno de membros funcionais podem possuir uma conformação de cadeia principal alterada, que não é afetada nesta função.
Teoria de estrutura canônica é também usada para avaliar diversas conformações de cadeia principal diferentes codificadas por ligandos, predizendo a conformação de cadeia principal com base nas seqüências de ligando específico duplo e aos resíduos de escolha por diversificação que não afetam a estrutura canônica. É conhecido que, no domínio Vk humano, o arco Ll pode adotar de um a quatro estruturas canônicas, o arco L2 tem uma estrutura canônica simples e que 90 % dos domínios Vk humanos adotam de um a quatro ou cinco estruturas canônicas para o arco L3 (Tomlinson et al. (1995) supra); deste modo, no domínio sozinho, estruturas canônicas diferentes podem combinar para criar uma faixa de conformações de cadeia principal diferentes. Dado que o domínio νλ codifica uma faixa diferente de estruturas canônicas pelos arcos LI, L2 e L3 e que domínios Vk e νλ podem formar pares com qualquer domínio Vh que pode codificar diversas estruturas canônicas para os arcos Hl e H2, diversas combinações de estrutura canônica observados por estes cinco arcos é muito grande. Isto implica que a geração de diversidade na conformação de cadeia principal pode ser essencial para a produção de uma ampla faixa de especifícidades de ligação. Entretanto, pela construção de uma biblioteca de anticorpo com base em uma conformação de cadeia principal conhecida simples foi observada, contrário a expectativa, que a diversidade na conformação de cadeia principal não é requerida para gerar diversidade suficiente para alvejar substancialmente todos os antígenos. Ainda mais surpreendentemente, a conformação de cadeia principal simples não necessita ser uma estrutura de consenso de uma conformação de ocorrência natural simples pode ser usada como a base por uma biblioteca total. Deste modo, em um aspecto preferido, os ligandos da invenção possuem uma conformação de cadeia principal conhecida simples.
A conformação de cadeia principal simples que é escolhida é preferivelmente lugar comum entre as moléculas da superfamília de tipo imunoglobulina em questão. Uma conformação é um lugar comum quando um número significante de moléculas de ocorrência natural são observadas serem adotadas por esta. Conseqüentemente, em um aspecto preferido da invenção, a ocorrência natural de conformações de cadeia principal diferentes por cada arco de ligação de um domínio de imunoglobulina são considerados e então uma ocorrência natural de domínio variável seja escolhido o qual possuem a combinação desejada de conformações de cadeia principal pelos arcos diferentes. Se nenhum é disponível, o equivalente mais próximo pode ser escolhido. Este é preferível que a combinação desejada de conformações de cadeia principal pelos arcos diferentes seja criada por seleção de segmentos de gene de linha de germe que codificam as conformações de cadeia principal desejadas. Isto é mais preferível, que o selecionado de segmentos de gene de linha de germe seja freqüentemente expressado de forma natural, e mais preferível que este seja mais freqüentemente expressado de todos os segmentos de gene de linha de germe.
No projeto de íigandos (por exemplo, ds-dAbs) ou bibliotecas destes a incidência de conformações de cadeia principal diferentes para cada dos seis arcos de ligação de antígeno pode ser considerado separadamente. Para Hl, H2, LI, L2 e L3, a conformação dada que é adotada entre 20 % e 100 % dos arcos de ligação de antígeno das moléculas de ocorrência natural é escolhida. Tipicamente, sua incidência observada está acima de 35 % (isto é entre 35 % e 100 %) e, idealmente, acima de 50 % ou ainda acima de 65 %. Visto que a vasta maioria de arcos H3 não tem estruturas canônicas, isto é preferível para selecionar uma conformação de cadeia principal que é em lugar comum entre aqueles arcos que apresentam estruturas canônicas. Para cada dos arcos, a conformação que é observada mais freqüentemente no repertório natural é portanto selecionada. Em anticorpos humanos, as estruturas canônicas mais populares (CS) para cada arco são como seguintes: Hl - CS 1 (79 % do repertório expressado), H2 - CS 3 (46 %), Ll - CS 2 de Vk (39 %), L2 - CS 1 (100 %), L3 - CS 1 de Vk (36 %) (cálculo assume uma razão κ:λ de 70:30, Hood et ai. (1967) Cold Spring Harbor Symp. Quant Biol., 48: 133). Para arcos H3 que tem estruturas canônicas, um comprimento de CDR3 (Rabat et al. (1991) Sequences of proteins of immunological interest, U.S. Department of Health and Human Services) de sete resíduos com uma ponte de sal do resíduo 94 ao resíduo 101 parecem ser os mais comuns. Aqui são pelo menos 16 seqüências de anticorpo humano na biblioteca de dado EMBL com o requerido comprimento H3 e resíduos chave para formar esta conformação e pelo menos duas estruturas cristalográficas no banco de dados da proteína que pode ser usada como uma base por modelagem de anticorpo (2cgr e 1 tet). Os segmentos de gene de linha de germe mais expressados freqüentemente que esta combinação de estruturas canônicas são o segmento Vh 3-23 (DP-47), o segmento Jh JH4b, o segmento Vk 02/012 (DPK9) e o segmento Jic JicI. Os segmentos Vh DP45 e DP38 também são adequados. Estes segmentos podem ser portanto usados em combinação como uma base para construir uma biblioteca com a conformação de cadeia principal simples desejada.
Alternativamente, em vez de escolher uma conformação de cadeia principal simples com base na ocorrência natural de conformações de cadeia principal diferentes por cada um dos arcos de ligação em isolamento, a ocorrência natural de combinações de conformações de cadeia principal é usada como a base para escolher as conformação de cadeia principal simples. No caso de anticorpos, por exemplo, a ocorrência natural de combinações de estrutura canônica por qualquer dois, três, quatro, cinco ou todos os seis dos arcos de ligação de antígeno podem ser determinados. Aqui, este é preferível que a conformação escolhida seja um lugar comum em uma ocorrência natural de anticorpos e mais preferível que esta seja observada mais freqüentemente no repertório de forma natural. Deste modo, em anticorpos humanos, por exemplo, quando as combinações naturais de cinco arcos de ligação de antígeno, Hl, H2, LI, L2 e L3, são consideradas, a combinação mais freqüente de estruturas canônicas é determinada e então combinada com a conformação mais popular para o arco H3, como uma base pela escolha da conformação de cadeia principal simples. Diversificação de seqüência canônica
Tendo diversas conformações de cadeia principal conhecidas selecionadas ou, preferivelmente a conformação de cadeia principal conhecida simples, ligandos específicos duplos (por exemplo, ds-dAbs) ou bibliotecas para o uso na invenção pode ser construída por cada local e ligação variado da molécula a fim de gerar um repertório com diversidade estrutural e/ou funcional. Estes significam que variantes são geradas tal que estas possuem diversidade suficiente na sua estrutura e/ou na sua função de modo que estas são capazes de fornecer uma faixa de atividades. A diversidade desejada é tipicamente gerada pela molécula selecionada variada em uma ou mais posições. As posições a serem mudadas podem ser escolhidas aleatoriamente ou são preferivelmente selecionadas. A variação pode então ser atingida pela randomisação, durante o qual aminoácido residente é substituído por qualquer aminoácido ou análogo destes, natural ou sintético, produzindo um número muito grande de variantes ou pela substituição do aminoácido residente com um ou mais de um subgrupo definido de aminoácidos, produzindo um maior número limitado de variantes.
Vários métodos foram relatados pela introdução de tal diversidade. PCR propenso ao erro (Hawkins et al. (1992) J. Mol. BioLj 226: 889), mutagênese química (Deng et al. (1994) J. Biol. Chein., 269: 9533) ou cepas de mutação bacterianas (Low et al. (1996) J. Mol. Biol., 260: 359) pode ser usado para introduzir mutações aleatórias nos genes que codificam a molécula. Os métodos para posições selecionadas de mutação também são bem conhecidas na técnica e incluem o uso de oligonucleotídeos de divergência ou oligonucleotídeos degenerados, com ou sem o uso de PCR. Por exemplo, diversas bibliotecas de anticorpo sintéticas foram criadas por mutações de alvejamento aos arcos de ligação de antígeno. A região H3 de uma ligação toxóide de tétano humano Fab foi tornada aleatória para criar uma faixa de novas especificidades de ligação (Barbas et al. (1992) Proc. Natl. Acad. Sei. USA, 89: 4457). Regiões H3 e L3 aleatórias ou semi- aleatórias foram anexadas por segmentos de gene V de linha de germe para produzir bibliotecas grandes com regiões de estrutura não mutadas (Hoogenboom & Winter (1992) J. Mol. Biol., 227: 381; Barbas et al. (1992) Proc. NatL Acad. Sei. USA, 89: 4457; Nissim et al. (1994) EMBO J., 13: 692; Griffiths et al. (1994) EMBO J., 13: 3245; De Kruifet al. (1995) J. Mol. Biol., 248: 97). Tal diversificação foi estendida para incluir alguns ou todos os outros arcos de ligação de antígeno (Crameri et al. (1996) Nature Med., 2: 100; Riechmann et al. (1995) Bio/Technology, 13: 475; Morphosys, W097/08320, supra).
Visto que a randomização de arco tem potencial para criar aproximadamente mais do que IO15 estruturas por H3 sozinho e similarmente um grande número de variantes para os outros cinco arcos, isto não é praticável usando tecnologia de transformação de corrente ou Ainda pelo uso de sistemas livre celulares produzindo uma biblioteca representando todas as combinações possíveis. Por exemplo, em uma das bibliotecas maiores construídas até hoje, 6 χ IO10 de anticorpos diferentes, que é apenas uma fração da diversidade potencial para uma biblioteca deste projeto, foram geradas (Griffiths et al. (1994) supra).
Preferivelmente, apenas os resíduos que estão diretamente envolvidos na criação ou modificação da função desejada de cada molécula de domínio do ligando específico duplo são diversificados. Para muitas moléculas, a função de cada domínio será ligar-se ao alvo e portanto a diversidade deverá ser concentrada no local de ligação alvo, enquanto evita-se mudanças de resíduos que são cruciais para o empacotamento total da molécula ou para manter a conformação de cadeia principal escolhida. Diversificação de seqüência canônica como aplicado aos domínios de anticorpos
No caso de ligandos com base em anticorpos (por exemplo, ds- dAbs), o local de ligação para cada alvo é mais freqüentemente o local de ligação de antígeno. Deste modo, preferivelmente apenas aqueles resíduos no local de ligação de antígeno são variados. Estes resíduos são extremamente diversos no repertório de anticorpo humano e são conhecidos por fazer contatos em complexos de alta resolução de anticorpo/antígeno. Por exemplo, em L2 é conhecido que as posições 50 e 53 são diversas em anticorpos de ocorrência natural e são observados por fazer contato com o antígeno. Em contraste, o método convencional seria para diversificar todos os resíduos na região de determinação complementar correspondente (CDRl) como definido por Rabat et ai. (1991, supra), nos sete resíduos comparados aos dois diversificados na biblioteca para uso de acordo com a invenção. Estes representam uma melhoria significante em termos de diversidade funcional requerida por criar uma faixa de especificidades de ligação de antígeno.
Na natureza, a diversidade de anticorpo é o resultado de dois processos: recombinação somática de linha de germe V, D e J segmentos do gene para criar um repertório primário simples (denominado linha de germe e diversidade de junção) e hipermutação somática de genes V redispostos resultantes. Análise de seqüências de anticorpo humano tem mostrado que a diversidade no repertório primário é focado no centro do local de ligação de antígeno visto que a hipermutação somática expande a diversidade para regiões na periferia do local de ligação de antígeno que são altamente conservadas no repertório primário (ver Tomlinson et ai. (1996) J. Mol. Biol., 256: 813). Esta complementaridade provavelmente desenvolvido como uma estratégia eficiente por espaço de seqüência de procura e, embora evidentemente único para anticorpos, pode ser facilmente aplicado por outros repertórios de polipeptídeo. Os resíduos que são variados são um subgrupo daqueles que formam o local de ligação para o alvo. Subgrupos diferentes (incluindo sobreposição) de resíduos no local de ligação alvo são diversificados em estágios diferentes durante a seleção, se desejado.
No caso de um repertório de anticorpo, um repertório 'simples' inicial pode ser criado onde algum, mas não todos, dos resíduos no local de ligação de antígeno são diversificados. Como usado neste contexto, o termo "simples" refere-se à moléculas de anticorpo que não tem nenhum alvo pré-determinado. Estas moléculas assemelham-se aquelas que são codificadas pelos genes de imunoglobulina de um indivíduo que não sofreu diversificação imune, como é o caso com indivíduos fetais e recém-nascidos, de quem o sistema imune ainda não foi provocado por uma ampla variedade de estímulos antigênicos. Este repertório é então selecionado contra uma faixa de antígenos ou epítopos. Se requerido, a diversidade adicional pode ser então introduzida fora da região diversificada no repertório inicial. Este repertório amadurecido pode ser selecionado pela função modificada, especificidade ou afinidade.
Repertórios simples de domínios de ligação para a construção dos ligandos específicos duplos em que alguns ou todos dos resíduos no local de ligação de antígeno são variados são conhecidos na técnica. (Ver, WO 2004/058821, WO 2004/003019, e WO 03/002609). A biblioteca " primária" imita o repertório primário natural, com diversidade restringida por resíduos ao centro do local de ligação de antígeno que são diversos nos segmentos de gene V de linha de germe (diversidade de linha de germe) ou diversificado durante o processo de recombinação (diversidade de junção). Aqueles resíduos que são diversificados incluem, mas não limitam a, H50, H52, H52a, H53, H55, H56, H58, H95, H96, H97, H98, L50, L53, L91, L92, L93, L94 e L96. Na biblioteca "somática", a diversidade é restringida por resíduos que são diversificados durante o processo de recombinação (diversidade de junção) ou são altamente mutados de maneira somática. Aqueles resíduos que são diversificados incluem, mas não são limitados a: H31, H33, H35, H95, H96, H97, H98, L30, L31, L32, L34 e L96. Todos os resíduos listados acima como adequados por diversificação nestas bibliotecas são conhecidos por fazer contatos em um ou mais complexos de antígeno de anticorpo. Visto que ambas bibliotecas, não todas dos resíduos no local de ligação de antígeno são variados, a diversidade adicional é incorporada durante a seleção pela variação dos resíduos remanescentes, se isto for desejado ser feito. Isto deve ser evidente por uma pessoa habilitada na técnica que qualquer subgrupo de qualquer destes resíduos (ou resíduos adicionais que compreendem o local de ligação de antígeno) podem ser usados pela diversificação inicial e/ou subseqüente do local de ligação de antígeno.
Na construção de bibliotecas para o uso na invenção, a diversificação de posições escolhidas são tipicamente atingidas no nível de ácido nucleico, pela alteração da seqüência codificadora que especifica uma seqüência de polipeptídeo tal que um número de aminoácidos possíveis (todos ou um subgrupo deste) podem ser incorporados nesta posição. Usando a nomenclatura IUPAC, o códon mais versátil é NNKj que codifica todos os aminoácidos bem como o códon de interrupção TAG. O códon NNK é preferivelmente usado a fim de introduzir a diversidade requerida. Outros códons que atingem a mesma extremidade também são usadas, incluindo o códon NNN, que leva a produção dos códons de interrupção adicionais TGA e TAA.
Uma característica da diversidade de cadeia secundária no local de ligação de antígeno de anticorpos humanos é uma linha inclinada pronunciada que favorece certos resíduos de aminoácidos. Se a composição de aminoácido de dez mais diversas posições em cada uma das regiões VH, Vk e νλ são somadas, mais do que 76 % da diversidade de cadeia secundária tornando-se de apenas sete resíduos diferentes, estes sendo, serina (24 %), tirosina (14 %), asparagina (11 %), glicina (9 %), alanima (7 %), aspartato (6 %) e treonina (6 %). Estas linhas inclinadas com respeito aos resíduos hidrofílicos e pequenos resíduos que podem fornecer conformações de cadeia principal flexíveis provavelmente refletindo a evolução de superfícies que são pré-dispostas pela ligação de uma ampla faixa de antígenos ou epítopos e podem ajudar a explicar a mistura desordenada requerida de anticorpos no repertório primário.
Visto que isto é preferível por imitar esta distribuição de aminoácidos, a distribuição de aminoácidos nas posições a serem variadas preferivelmente imitam o que vêem no local de ligação de antígeno de anticorpos. Tais linhas inclinadas na substituição de aminoácidos que permitem a seleção de certos polipeptídeos (polipeptídeos de anticorpos não justo) contra uma faixa de antígenos alvos é facilmente aplicado por qualquer repertório de polipeptídeo. Aqui são vários métodos para influenciar a distribuição de aminoácido na posição a ser variada (incluindo o uso de mutagênese de tri-nuclotídeo, ver W097/08320), de que o método preferido, devido a facilidade da síntese, é o uso de códons de degeneração convencionais. Por comparação ao perfil de aminoácido codificado por todas as combinações de códons de degeneração (com degeneração simples, dupla, tripla, e quádrupla em razões iguais em cada posição) com o uso de aminoácido natural é possível calcular o códon mais representativo. Os códons (AGT)(AGC)T, (AGT)(AGC)C e (AGT)(AGC)(CT) - que é, DVT, DVC e DVY5 respectivamente usando Nomenclatura IUPAC - são aqueles mais próximos do perfil de aminoácido desejado: estes codificam 22 % de serina e 11 % de tirosina, asparagina, glicina, alanina, aspartato, treonina e cisteína. Preferivelmente, portanto, as bibliotecas são construídas usando os códons DVT, DVC ou DVY em cada das posições diversificadas. Composições terapêuticas e de diagnóstico e usos
A invenção fornece composições que compreendem os ligandos da invenção e um carregador farmaceuticamente aceitável, diluente ou excipiente, e métodos terapêuticos e de diagnóstico que utiliza os ligandos ou composições da invenção. Os ligandos de acordo com o método da presente invenção pode ser utilizado em aplicações terapêuticas ou profiláticas in vivo, aplicações de diagnóstico in vivo e outras.
Os usos terapêuticos e profiláticos dos ligandos da invenção envolve a administração dos ligandos de acordo com a invenção para um mamífero receptor, tal como um humano. Os ligandos ligam-se aos alvos com alta afinidade e/ou avidez. Em algumas formas de realização, tal como ligandos semelhantes ao IgG, os ligandos podem permitir recrutamento de células citotóxicas para medir a morte de células cancerígenas, por exemplo por anticorpo dependente da citoxicidade celular.
Substancialmente os ligandos puros de pelo menos 90 a 95 % de homogeneidade são preferidos para administração a um mamífero, e 98 a 99 % ou mais homogeneidade é mais preferida por usos farmacêuticos, especialmente quando o mamífero é um humano. Uma vez purificado, parcialmente ou por homogeneidade como desejado, os ligandos podem ser usados diagnosticamente ou terapêuticos (incluindo extracorporalmente) ou em desenvolvimentos e realização de procedimentos de ensaio, tingimentos imunofluorescentes e outros (Lefkovite e Pernis, (1979 e 1981) Immunological Methods, Volumes I e II, Academic Press, NY).
Por exemplo, os ligandos da presente invenção tipicamente encontrarão o uso na prevenção, supressão ou tratamento do estado da doença. Por exemplo, os ligandos podem ser administrados por tratar, suprimir ou prevenir uma doença inflamatória crônica, hipersensibilidade alérgica, câncer, infecção bacteriana ou viral, distúrbios autoimunes (que incluem, mas não limitam a, diabete tipo I, asma, esclerose múltipla, artrite reumatóide, artrite reumatóide juvenil, artrite psoriática, espondilartropatia (por exemplo, espondilite ansilosante), lúpus eritematoso sistêmico, doença inflamatória do intestino (por exemplo, doença de Crohn, colite ulcerativa), miastenia grave e síndrome de Behcet, psoríase, endometriose, e adesões abdominais (por exemplo, pós-cirurgia abdominal).
Os ligandos são úteis para o tratamento de doenças infecciosas em que células infectadas com um agente infeccioso contém altos níveis de EGFR de superfície celular do que células não infectadas ou que contém um ou mais alvos de superfícies celulares que não estão presentes em células infectadas, tal como uma proteína que é codificada pelo agente infeccioso (por exemplo, bactéria, vírus).
Os ligandos de acordo com a invenção que são capazes de ligar-se ao EGFR podem ser internalizados por células que expressam EGFR (por exemplo, submetidas à endocitose), e podem liberar agentes terapêuticos (por exemplo, uma toxina) intracelularmente (por exemplo, liberar um dAb que liga-se a um alvo intracelular). Além disso, os ligandos fornecem os meios pelo qual o domínio de ligação (por exemplo, um monômero dAb) que é especialmente capaz de ligar-se a um alvo intracelular pode ser liberado para um ambiente intracelular. Esta estratégia requer, por exemplo, um domínio de ligação com propriedades físicas que o permite permanecer funcional dentro da célula. Alternativamente, se o compartimento intracelular de destinação final estiver oxidando, um bom ligando flexível pode não necessitar ser isento de bissulfeto.
No presente pedido, o termo "prevenção" envolve a administração de composição protetora antes da indução da doença. A "supressão" refere-se a administração de uma composição após um evento indutivo, mas antes do aparecimento clínico da doença. O "tratamento" envolve a administração de composição protetora após os sintomas da doença tornar-se manifestantes. O tratamento inclui melhorar os sintomas associados com a doença, e também prevenção ou atrasar o início da doença e também diminuir a gravidade ou freqüência dos sintomas da doença.
O termo "câncer" refere-se a condição patológica em mamíferos que é tipicamente caracterizada pela proliferação celular desregulada ou sobrevivência. Exemplos de câncer incluem, mas não limitam a, carcinoma, linfoma, blastoma, sarcoma, e leucemia e malignidades linfóides. Mais exemplos particulares de cânceres incluem câncer de célula escamosa (por exemplo câncer de célula escamosa epitelial), câncer de pulmão (por exemplo, carcinoma de pulmão de pequenas células, carcinoma de pulmão de célula não pequena, adenocarcinoma de pulmão, carcinoma escamoso de pulmão), câncer de peritôneo, câncer hepatocelular, câncer gástrico ou estomacal incluindo câncer gastrointestinal, câncer pancreático, glioblastoma, câncer cervical, câncer ovariano, câncer de fígado, câncer de bexiga, câncer da vesícula biliar, hepatoma, câncer de mama, câncer de cólon, câncer retal, câncer colorretal, mieloma múltiplo, leucemia mielogênica crônica, leucemia mielogênica aguda, carcinoma endometrial ou uterino, carcinoma de glândula salivar, câncer do rim ou renal, câncer de próstata, câncer de vulva, câncer de tireóide, carcinoma hepático, carcinoma anal, carcinoma peniano, câncer de cabeça e pescoço, e outros. Cânceres pela expressão de EGFR na superfície de células cancerosas (cânceres que expressam EGFR) incluem, por exemplo, câncer de bexiga, câncer ovariano, câncer colorretal, câncer de mama, câncer de pulmão (por exemplo, carcinoma de pulmão de célula não pequena), câncer gástrico, câncer pancreático, câncer de próstata, câncer de cabeça e pescoço, câncer renal e câncer da vesícula biliar.
Sistemas de modelo animal que podem ser usados para avaliar a eficácia dos ligandos da invenção no tratamento da prevenção ou supressão da doença (por exemplo, câncer) são disponíveis. Modelos adequados de câncer incluem, por exemplo, modelos de xenoenxerto ou ortotópicos de cânceres humanos em modelos de animais, tal como o modelo de mieloma SCID-hu (Epstein J, e Yaccoby, S., Methods Mol Med. 113:183-90 (2005), Tassone P, et ai, Clin Câncer Res. 11(11):4251-8 (2005)), modelos de camundongo de câncer humano de pulmão (por exemplo, Meuwissen R e Berns A, Genes Dev.l9(6):643-64 (2005)), e modelos de camundongo de cânceres metastáticos (por exemplo, Kubota T., J Cell Biochem. 56(l):4-8 (1994)).
No geral, os presentes ligandos serão utilizados na forma purificada junto com carregadores apropriados farmacologicamente. Tipicamente, estes carregadores incluem soluções aquosas ou alcóolicas/aquosas, emulsões ou suspensões, incluindo solução salina e/ou meio tamponado. Veículos parenterais incluem solução de cloreto de sódio, dextrose de Ringer, dextrose e cloreto de sódio e de Ringer lactado. Os adjuvantes aceitáveis fisiologicamente adequados, se necessário mantém um complexo de polipeptídeo na suspensão, pode ser escolhido a partir de espessadores, tais como carboximetilcelulose, polivinilpirrolidona, gelatina e alginatos.
Os veículos intravenosos incluem enchedores de fluido e nutriente e enchedores de eletrólito, tal como aquele com base em dextrose de Ringer. Os conservantes e outros aditivos, tais como antimicrobianos, antioxidantes, agentes quelantes e gases inertes, também podem estar presentes (Mack (1982) RemingtontS Pharmaceutical Sciences, 16° Edição). Uma variedade de formulações adequadas podem ser usadas, incluindo formulações de liberação estendida.
Os ligandos da presente invenção podem ser usados como composições administradas separadamente ou em conjunção com outros agentes. Os ligandos podem ser administrados e ou formulados junto com um ou mais agentes terapêuticos ou ativos adicionais. Quando um ligando é administrado com um agente terapêutico adicional, o ligando pode ser administrado antes, simultaneamente com ou subseqüente para administração do agente adicional. No geral, o ligando e o agente adicional são administrados em uma maneira que fornece uma sobreposição do efeito terapêutico. Os agentes adicionais que podem ser administrados ou formulados com os ligando da invenção incluem, por exemplo, vários medicamentos imunoterapêuticos, tal como ciclosporina, metotrexato, adriamicina ou cisplatina, antibióticos, antimicóticos, agentes anti-virais e imunotoxinas. Por exemplo, quando o antagonista é administrado por prevenir, suprimir ou tratar inflamação do pulmão ou uma doença respiratória, este pode ser administrado em conjunção com inibidores de fosfodiesterase (por exemplo, inibidores de fosfodiesterase 4), broncodilatadores (por exemplo, beta2-agonistas, anticolinérgicos, teofilina), agonistas beta de ativação curta (por exemplo, albuterol, salbutamol, bambuterol, fenoterol, isoeterina, isoproterenol, levalbuterol, metaproterenol, pirbuterol, terbutalina e tornlato), agonistas beta de ativação longa (por exemplo, formoterol e salmeterol), anticolinérgicos de ativação curta (por exemplo, brometo de ipratrópio e brometo de oxitrópio), anticolinérgicos de ativação longa (por exemplo, tiotrópio), teofilina (por exemplo formulação de ativação curta, formulação de ativação longa), esteróides inalados (por exemplo, beclometasona, beclometasona, budesonida, flunisolida, proprianato de fluticasona e triamcinolona), esteróides orais (por exemplo, metilprednisolona, prednisolona, prednisolona e prednisona), agonistas beta de ativação curta combinada com anticolinérgicos (por exemplo, albuterol/salbutamol/ipratópio, e fenoterol/ipratópio), agonistas beta de ativação longa combinada com esteróides inalados (por exemplo, salmeterol/fluticasona, e formoterol/budesonida) e agentes mucólitos (por exemplo, erdosteina, acetlcisteína, bromheksina, carbocisteína, guiafenesina e glicerol iodado).
Os ligandos da invenção podem ser co-administrados (por exemplo, para tratar o câncer, uma doença inflamatória ou outras doenças) com uma variedade de co-agentes terapêuticos adequados, incluindo citocinas, analgésicos/antipiréticos, antieméticos, e quimioterapêuticos. Os co-agentes terapêuticos adicionais adequados incluem agentes imunossupressivos selecionados do grupo que consiste de ciclosporina, azatioprina, ácido micofenólico, micofenolato mofetil, corticosteróides, metotrexato, sais de ouro, sulfasalazina, antimalarianos, brequinar, leflunomida, mizoribina, 15-desoxispergualina, 6-mercaptopurina, ciclofosfamida, rapamicina, tacrolimus (FK-506), 0KT3, e globulina anti- timócito, agentes anti-inflamatórios selecionados do grupo que consiste de aspirina, outros salicilatos, medicamentos esteroidais, NSAIDs (medicamentos anti-inflamatórios não esteroidais), inibidores Cox-2, e DMARDs (medicamentos anti-reumáticos de modificação de doença); agentes anti-psoríase selecionados do grupo que consiste de alcatrão de hulha, vitamina A, antralina, calcipotrieno, tarazoteno, corticosteróides, metotrexato, retinóides, ciclosporina, etanercept, alefacept, efaluzimab, 6-tioguanina, micofenolato mofetil, tacrolimus (FK-506), e hidroxiuréia.
As citocinas incluem, sem limitação, uma linfocina, fatores de necrose de tumor, citocina semelhante ao fator de necrose de tumor, linfotoxina, interferon, proteína inflamatória de macrófago, fator de estimulação de colônia de monócito granulócito, interleucina (incluindo, sem limitação, interleucina-1, interleucina-2, interleucina-6, interleucina-12, interleucina-15, interleucina-18), fatores de desenvolvimento, que incluem, sem limitação, (por exemplo, hormônio de desenvolvimento, fator 1 e 2 de desenvolvimento semelhante à insulina (IGF-1 e IGF-2), fator de estimulação de colônia granulócito (GCSF), fator de desenvolvimento derivado de plaqueta (PGDF), fator de desenvolvimento epidérmico (EGF), e agentes por estimulação eritropoiese, por exemplo, eritropoietina humana recombinante (Epoetina alfa), EPO, um agonista hormonal, antagonistas hormonais (por exemplo, flutamida, tamoxifeno, acetato de leuprolida (LUPRON)), e esteróides (por exemplo, dexametasona, retinóide, betametasona, cortisol, cortisona, prednisona, desidrotestosterona, glucocorticóide, mineralocorticóide, estrogênio, testosterona, progestina).
Os analgésicos/antipiréticos podem incluir, sem limitação, por exemplo, aspirina, acetaminofeno, ibuprofeno, naproxeno sódico, cloridreto de buprenorfma, cloridreto de propoxifeno, napsilato de propoxifeno, cloridreto de meperidina, cloridreto de hidromorfona, sulfato de morfina, cloridreto de oxicodona, fosfato de codeína, bitartarato de diidrocodeína, cloridreto de pentazocina, bitartarato de hidrocodona, tartarato de levorfanol, diflunisal, salicilato de trolamina, cloridreto de nalbufina, ácido mefenâmico, tartarato de butorfanol, salicilato de colina, butalbital, citrato de feniltoloxamina, citrato de difenidramina, metotrimeprazina, cloridreto de cinamedrina, meprobainato, e outros.
Os antieméticos também podem ser co-administrados para prevenir ou tratar náusea e vômito por exemplo, antieméticos adequados incluem cloridreto de meclizina, nabilona, proclorperazina, dimenidrinato, cloridreto de prometazina, tietilperazina, escopolamina, e outros.
Os agentes quimioterapêuticos, como aquele termo é usado neste, incluem, mas não limitam a, por exemplo agentes antimicrotúbulo, por exemplo, taxol (paclitaxel), taxotero (docetaxel); agentes alquilantes, por exemplo, ciclofosfamida, carmustina, lomustina, clorambucila; antibióticos citotóxicos, por exemplo, dactinomicina, doxorubicina, mitomicina-C, e bleomicina; antimetabólitos, por exemplo, citarabina, gemcitatina, metotrexato, e 5-fluorouracila; antimióticos, por exemplo, vincristina vinca alcalóides, por exemplo, etoposida, vinblastina, e vincristina; e outros tais como cisplatina, dacarbazina, procarbazina, e hidroxiuréia; e combinações destes.
Os ligandos da invenção podem ser usados para tratar o câncer em combinação com um outro agente terapêutico. Por exemplo, um ligando da invenção pode ser administrado em combinação com um agente quimioterapêutico ou uma composição antineoplástica que compreende um (pelo menos um) agente quimioterapêutico. Vantajosamente, um tal método terapêutico, uma quantidade de agente quimioterapêutico que deve ser administrado para ser efetivo pode ser reduzido. Deste modo a invenção fornece um método de tratamento de câncer que compreende administrar em um paciente em necessidade deste uma quantidade terapeuticamente eficaz de um ligando da invenção e um agente quimioterapêutico, em que o agente quimioterapêutico é administrado em uma dose baixa. No geral a quantidade de agente quimioterapêutico que é co-administrada com um ligando da invenção é cerca de 80 %, ou cerca de 70 %, ou cerca de 60 %, ou cerca de 50 %, ou cerca de 40 %, ou cerca de 30 %, ou cerca de 20 %, ou cerca de 10 % ou menos, das doses do agente quimioterapêutico sozinho que é normalmente administrado em um paciente. Deste modo, coterapia é particularmente vantajosa quando o agente quimioterapêutico causam efeitos colaterais nocivos ou indesejáveis que podem ser reduzidos ou eliminados em uma dose inferior.
A composição farmacêutica podem incluir "coquetéis" de vários citotóxicos ou outros agentes em conjunção com os ligandos da presente invenção, ou ainda em combinações de ligandos de acordo com a presente invenção tendo especificidades diferentes, tais como ligandos selecionados usando antígenos alvos diferentes ou epítopos, se estas forem unidas antes da administração ou não.
A via de administração da composição farmacêuticas de acordo com a invenção pode ser qualquer via adequada, tal como qualquer daqueles comumente conhecidos à aqueles de habilidade comum na técnica. Para terapia, incluindo sem limitação imunoterapia, os ligandos da invenção podem ser administrados em qualquer paciente de acordo com as técnicas padrão. A administração pode ser por qualquer modo apropriado, incluindo parenteralmente, intravenosamente, intramuscularmente,
intraperitonealmente, transdermicamente, intratecalmente,
intraarticularmente, por intermédio da via pulmonar, ou também, apropriadamente, pela infusão direta (por exemplo, com uma catéter). A dosagem e freqüência da administração dependerá da idade, sexo e condição do paciente, a administração concorrente de outros medicamentos, contraindicações e outros parâmetros devem ser levados em conta pelo médico. A administração pode ser local (por exemplo, liberação local ao pulmão pela administração pulmonar, (por exemplo, administração intranasal) ou injeção local diretamente no tumor) ou sistêmico como indicado.
Os ligandos desta invenção podem ser liofilizados para armazenamento e reconstituído em um carregador adequado antes do uso. Estas técnicas foram mostradas a ser efetivas com imunoglobulinas convencionais e liofilização conhecida na técnica e técnicas de reconstituição podem ser utilizadas. Será estimado por aqueles habilitados na técnica que a liofilização e reconstituição podem levar ao grau de variação de perda de atividade de anticorpo (por exemplo com imunoglobulinas convencionais, anticorpos IgM tende-se a ter perda da atividade maior do que de anticorpos IgG) e que usa níveis podendo ser ajustada ascendente para compensar.
As composições contendo os ligandos podem ser administrados pelos tratamentos profiláticos e/ou terapêuticos. Em certas aplicações terapêuticas, uma quantidade adequada para realizar pelo menos a inibição parcial, supressão, modulação, morte, ou alguns outros parâmetros mensuráveis, de uma população de células selecionadas é definida como uma "dose efetiva terapeuticamente". As quantidades necessárias para atingir esta dosagem dependerá da gravidade da doença e do estado geral da saúde do paciente, mas no geral faixas de 0,005 a 5,0 mg de ligando por quilograma de peso corporal, com doses de 0,05 a 2,0 mg/kg/dose sendo mais comumente usada. Para aplicações profiláticas, as composições contendo os presentes ligandos ou coquetéis destes também podem ser administradas em dosagens similares ou levemente inferior, para prevenir, inibir, atrasar o início da doença (por exemplo, para sustentar remissão ou imutabilidade, ou para prevenir fases agudas). O médico habilitado será capaz de determinar o intervalo de dose apropriado para tratar, suprimir ou prevenir a doença. Quando um ligando é administrado por tratar, suprimir ou prevenir uma doença, este pode ser administrado até quatro vezes por dia, duas vezes semanalmente, uma vez semanalmente, uma vez a cada duas semanas, uma vez por mês, ou uma vez a cada dois meses, em uma dose de, por exemplo, cerca de 10 μg/kg a cerca de 80 mg/kg, cerca de 100 μg/kg a cerca de 80 mg/kg, cerca de 1 mg/kg a cerca de 80 mg/kg, cerca de 1 mg/kg a cerca de 70 mg/kg, cerca de 1 mg/kg a cerca de 60 mg/kg, cerca de 1 mg/kg a cerca de 50 mg/kg, cerca de 1 mg/kg a cerca de 40 mg/kg, cerca de 1 mg/kg a cerca de 30 mg/kg, cerca de 1 mg/kg a cerca de 20 mg/kg , cerca de 1 mg/kg a cerca de 10 mg/kg, cerca de 10 Mg/kg a cerca de 10 mg/kg, cerca de 10 μg/kg a cerca de 5 mg/kg, cerca de 10 μg/kg a cerca de 2,5 mg/kg, cerca de 1 mg/kg, cerca de 2 mg/kg, cerca de 3 mg/kg, cerca de 4 mg/kg, cerca de 5 mg/kg, cerca de 6 mg/kg, cerca de 7 mg/kg, cerca de 8 mg/kg, cerca de 9 mg/kg ou cerca de 10 mg/kg. Em formas de realização particulares, os ligando específicos duplos são administrados por tratar, suprimir ou prevenir uma doença inflamatória crônica uma vez a cada duas semanas ou uma vez por mês em uma dose de cerca de 10 μg/kg a cerca de 10 mg/kg (por exemplo, cerca de 10 μg/kg, cerca de 100 μ g/kg, cerca de 1 mg/kg, cerca de 2 mg/kg, cerca de 3 mg/kg, cerca de 4 mg/kg, cerca de 5 mg/kg, cerca de 6 mg/kg, cerca de 7 mg/kg, cerca de 8 mg/kg, cerca de 9 mg/kg ou cerca de 10 mg/kg.)
Em formas de realização particulares, os ligando da invenção são administrados em uma dose que fornece a saturação de EGFR ou uma concentração de soro in vivo desejado. O médico pode determinar a dose apropriada para atingir a saturação, por exemplo pela titulação do ligando e monitoramento da quantidade de locais de ligação livres em células que expresssam EGFR ou a concentração de soro do ligando. Os regimentos terapêuticos que envolvem administrar um agente terapêutico para atingir a saturação alvo ou uma concentração de soro desejada de agente são comuns na técnica, particularmente no campo da oncologia.
O tratamento ou terapia realizada usando as composições descritas neste é considerada "efetiva" se um ou mais sintomas são reduzidos (por exemplo, por pelo menos 10 % ou pelo menos um ponto em uma escala de estimativa clínica), relativo aos tais sintomas presentes antes do tratamento, ou relativo aos tais sintomas em um indivíduo (humano ou modelo animal) não tratado com tal composição ou outros controles adequados. Os sintomas variarão obviamente dependendo da doença ou distúrbio alvejado, mas pode ser medido por um clínico ou técnico de habilidade comum. Tais sintomas podem ser medidos, por exemplo, pelo monitoramento do nível de um ou mais indicadores bioquímicos da doença ou distúrbio (por exemplo, níveis de uma enzima ou metabólito correlacionados com a doença, número de células afetadas, etc.), pelo monitoramento de manifestações físicas (por exemplo, inflamação, tamanho do tumor, etc.), ou por uma escala de estimativa clínica aceita, por exemplo, a escala do estado de incapacidade expandida (por esclerose múltipla), o questionário da doença inflamatória do intestino de Irvine (a estimativa de 32 pontos avalia a qualidade de vida com respeito à função do intestino, sintomas sistêmicos, função social e estados emocionais - faixas de contagem de 32 a 224, com altas contagens indicando uma maior qualidade de vida), a escala de artrite reumatóide de qualidade de vida, ou outra escala de estimativa clínica aceitável como conhecido no campo. Uma redução sustentada (por exemplo, um dia ou mais, preferivelmente mais longo) nos sintomas da doença ou distúrbio por pelo menos 10 % ou por um ou mais pontos em uma escala clínica dada é indicativa do tratamento "efetivo". Similarmente, profilaxia realizada usando uma composição como descrito neste é "efetiva" se no início ou gravidade de um ou mais sintomas seja atrasado, reduzido ou anulado relativo a tais sintomas em um indivíduo similar (humano ou modelo animal) não tratado com a composição.
Uma composição contendo ligandos de acordo com a presente invenção pode ser utilizado no ajuste profilático e terapêutico para ajudar na alteração, inativação, morte ou remoção de uma população de célula alvo selecionada em um mamífero. Além disso, os ligandos e repertórios de polipeptídeos selecionados descritos neste podem ser usados extracorporalmente ou seletivamente in vitro para matar, esgotar ou de outra maneira remover eficazmente uma população de célula alvo a partir de uma coleção heterogênea de células. O sangue de um mamífero pode ser combinado extracorporalmente com os ligandos, por exemplo anticorpos, receptores de superfície celular ou proteínas de ligação destes pelo qual as células indesejadas são mortas ou de outra maneira removidas do sangue para retornar ao mamífero de acordo com técnicas padrão.
Em uma forma de realização, a invenção diz respeito a um método por terapia anti-angiogênica de liberação (terapia anti-VEGF) por um local contendo células que expressam ou super-expressam EGFR, que compreende administrar uma quantidade efetiva de um ligando que tem especificidade de ligação para VEGF e para EGFR a um paciente em necessidade deste.
A invenção também diz respeito ao uso de um ligando que tem especificidade de ligação para VEGF e para EGFR pela terapia anti- angiogênica de liberação (terapia anti-VEGF) por um local contendo células que expressam ou super-expressam EGFR. A invenção também relata o uso de um ligando que tem especificidade de ligação para VEGF e para EGFR para a fabricação de um medicamento pela terapia anti-angiogênica de liberação (terapia anti-VEGF) por um local contendo células que expressam ou super-expressam EGFR ou para inibir angiogênese em um local contendo células que expressam ou super-expressam EGFR.
Em formas de realização particulares, a invenção diz respeito a um método de tratamento de câncer que compreende administrar a um paciente em necessidade deste, uma quantidade terapeuticamente eficaz de um ligando, como descrito neste, que tem especificidade de ligação para VEGF e para EGFR. Em formas de realização particulares, o paciente tem um câncer que expressa EGFR, tal como, câncer de bexiga, câncer ovariano, câncer colorretal, câncer de mama, câncer de pulmão (por exemplo, carcinoma de pulmão de célula não pequena), câncer gástrico, câncer pancreático, câncer de próstata, câncer de cabeça e pescoço, câncer renal, câncer de vesícula biliar.
Em outras formas de realização, a invenção diz respeito a um método para o tratamento de câncer, que compreende administrar a um
paciente em necessidade deste uma quantidade efetiva terapeuticamente do ligando, como descrito neste, (por exemplo, um ligando que tem especificidade de ligação para VEGF, um ligando que tem especificidade de ligação para EGFR, um ligando que tem especificidade de ligação para VEGF e EGFR) e uma composição anti-neopástica, em que a dita composição anti- neoplástica compreende pelo menos um agente quimioterapêutico selecionado a partir do grupo que consiste de agentes alquilantes, antimetabólitos, análogos de ácido fólico, análogos de pirimidina, análogos de purina e inibidores relacionados, vinca alcalóides, epipodofilotoxinas, antibióticos, Ε- Ι 0 Asparaginase, inibidor de topoisomerase, interferons, complexos coordenadores de platina, uréia substituída por antracenodiona, derivados de metil hidrazina, supressor adrenocortical, adrenocorticoesteróides, progestinas, estrogênios, antiestrogênio, androgênios, antiandrogênio, e análogo de hormônio de liberação de gonadotropina. Em algumas formas de realização, o agente quimioterapêutico é selecionado do grupo que consiste de cisplatina, dicarbazina, dactinomicina, mecloretamina, eestreptozocina, ciclofosfamida, capecitabina, carmustina, lomustina, doxorubicina, daunorubicina, procarbazina, mitomicina, citarabina, etoposida, metotrexato, 5-fluorouracila, vinbiastina, vincristina, bleomicina, paclitaxel, docetaxel, doxetaxe, aldesleucina, asparaginase, busulfan, carboplatina, cladribina, dacarbazina, floxuridina, fludarabina, hidroxiuréia, ifosfamida, interferon alfa, iiinotecan, leuprolida, leucovorina, megestrol, melfalan, mercaptopurina, oxaliplatina, plicamicina, mitotano, pegaspargase, pentostatina, pipobroman, plicamicina, estreptozocina, tamoxifeno, teniposida, testolactona, tioguanina, tiotepa, mostarda de uracila, vinorelbina, clorambucila, taxol, um antagonista de receptor de fator de desenvolvimento adicional, e uma combinação de acordo com qualquer um dos precedentes.
Ensaios para avaliação dos ligandos
Os ligandos da invenção pode ser submetidos a ensaio usando qualquer ensaio in vitro ou in vivo adequado. Por exemplo, usando o receptor de ensaio de ligação ou bioensaios descritos neste. Bioensaio para atividade VEGF:
Este bioensaio mede a capacidade do ligandos (por exemplo, dAbs) para neutralizar a proliferação induzida por VEGF de células HUVE (endotelial vascular humano). As células HUVE colocadas em placas de 96 reservatórios são incubadas por 72 horas com proteína VEGF e DAb pré-equilibradas. O número celular é então medido usando corante de viabilidade celular.
O ensaio é realizado como seguinte. As células HUVE são tripsinizadas a partir de um frasco de 175 cm2 sub-confluente. O meio é aspirado, as células são lavadas com 5ml de tripsina e então incubadas com 2ml de tripsina em temperatura ambiente por 5 minutos. As células são gentilmente desalojadas da base do frasco batendo-se contra sua mão. 8ml de meio de indução são então adicionadas no frasco, pipetando-se as células para dispersar quaisquer pedaços. As células viáveis são contadas usando tingimento azul tripano.
As células são rotacionadas e lavadas 2X no meio de indução, rotacionado-se as células e aspirando o meio após cada lavada. Após a aspiração final, as células são diluídas a IO5 células/ml (no meio de indução) e colocadas a 100 μΐ por reservatório em uma placa de 96 reservatório (10.000 células/reservatório). A placa é incubada por >2h @ 37C para permitir a ligação de células.
60μ1 de proteína dAb e 60μ1 de meio de indução contendo 40ng/ml VEGF165 (por uma concentração final de lOng/ml) é adicionada a uma placa de 96 reservatório de fundo em ν e selada com película. A mistura dAb/VEGF é então incubada a 37C por 0,5-1 hora.
A placa dAb/VEGF é removida da incubadora e ΙΟΟμΙ de solução adicionada para cada reservatório de placa contendo HUVEC (volume final de 200μ1). Esta placa é então retornada à incubadora por 37° C por um período de pelo menos 72 horas.
Reservatórios de controle incluem os seguintes: reservatórios t
contendo células, mas nenhum VEGF; reservatórios contendo células, um anticorpo anti-VEGF que neutraliza o controle positivo e VEGF; e reservatórios de controle contendo células e VEGF apenas.
A viabilidade celular é avaliada pela adição de 20μ1 por reservatório de reagente Celltiter96, e a placa é incubada a 37° C por 2 a 4 horas até um cor marrom desenvolver-se. A reação é interrompida pela adição de 20μΐ por reservatório de 10 % (p/v) de SDS. A absorbância é então lida em 490mm usando um leitor de microplaca Wallac.
A absorbância dos reservatórios de controle VEGF é subtraída .10 a partir de todos os outros valores. A Absorbância é proporcional ao número de células. Os reservatórios de controle contendo controle de anticorpos anti- VEGF também devem exibir proliferação celular mínima. Os reservatórios contendo apenas VEGF deverão exibir proliferação celular máxima. EXEMPLOS
EXEMPLO 1. Ensaio de ligação do receptor VEGF
VEGF é um mitogênio específico por células endoteliais in vitro e um fator angiogênico potente in vivo, com altos níveis de proteína sendo expressadas em vários tipos de tumores. Este é uma glicoproteína 45kDa que é ativa como um homodímero. Diversos isoformas foram descritos que ocorreram através da união de mRNA alternativos. Destes isoformas VEGF-121 e VEGF-165 parecem ser mais abundantes.
A ação específica de VEGF em células endoteliais é principalmente regulada por dois tipos de receptores de tirosina de quinase (RTK), VEGF Rl (Flt-1), e VEGF R2 (KDR/Flk-1). Entretanto, mostram as atividades VEGF tal como mitogenicidade, quimiotaxia, e indução de mudanças morfológicas que são mediadas por VEGF R2, ainda através de ambos receptores sofrendo fosforilação na ligação de VEGF. Ensaio de ligação de receptor 2 VEGF
Este método descreve um ensaio de ligação de receptor VEGF por medir a capacidade dos ligandos (por exemplo, dAbs) para evitar ligação de VEGF-165 a receptor 2 VEGF. Uma quimera de VEGF R2/Fc recombinante humana ser usada neste ensaio, que compreende o domínio extracelular do VEGF humano R2 fundido a uma região Fc de IgGi humano. Brevemente, o receptor foi capturado em uma placa ELISA, e então a placa foi bloqueada para evitar ligação não específica. Uma mistura de VEGF-165 e ligando foi então adicionado, a placa foi lavada e o receptor ligado ao VEGF-165 detectando o uso de um anticorpo anti-VEGF biotinilatado e uma peroxidase de rábano silvestre (HRP) conjugado com anticorpo anti-biotina. A placa foi desenvolvida usando um substrato colorimétrico e a leitura de OD em 450nm. Se o dAb bloquear a ligação VEGF ao receptor então nenhuma cor será detectada.
0 ensaio foi realizado com seguintes. Uma placa de ensaio Nunc Maxisorp de 96 reservatórios foi revestida durante a noite a 4o C com 100 μΐ por reservatório de VEGF R2/Fc recombinante humano (R&D Systems, Cat. N0: 357-KD-050) em uma concentração de 0,5 μg/ml em tampão de carbonato. Os reservatórios foram lavados 3 vezes com 0,05 % de Tween/PBS e 3 vezes com PBS. 200μ1 por reservatório de 2 % de BSA em PBS foi adicionado para bloquear a placa e a placa foi incubada por um mínimo de 1 hora em temperatura ambiente.
Os reservatórios foram lavados (como acima), e então 50μ1 por reservatório de ligando foi adicionado para cada reservatório. 50μ1 de VEGF, em uma concentração de 6ng/ml em diluente (por uma concentração final de 3ng/ml), foi então adicionado para cada reservatório e a placa foi incubada por 2 horas em temperatura ambiente (por ensaios de sobrenadantes; 80μ1 de sobrenadante foi adicionado para cada reservatório e então 200 de VEGF em uma concentração de 15ng/ml).
Os seguintes controles foram incluídos: Ong/ml de VEGF (apenas diluente); 3ng/ml de VEGF (R&D Systems, Cat N°: 293-VE-050); 3ng/ml de VEGF com 0,1 μg/ml anti-VEGF neutralizando o anticorpo (R&D Systems cat#MAB293).
A placa foi lavada (como acima) e então ΙΟΟμΙ de anticorpo anti-VEGF biotinilatado (R&D Systems, Cat N°: BAF293), 0^g/ml em diluente, foi adicionado e incubado por 2 horas em temperatura ambiente.
Os reservatórios foram lavados (como acima) e então 1 ΟΟμΙ de HRP conjugado com o anticorpo anti-biotina (1:5000 de diluição em diluente; Stratech, Cat N°: 200-032-096) foi adicionado. A placa foi então incubada por 1 hora em temperatura ambiente.
A placa foi lavada (como acima) garantindo que quaisquer traços de Tween-20 foram removidos para limitar os fundamentos no ensaio de peroxidase subseqüente e para ajudar a prevenção de bolhas nos reservatórios nas placas de ensaio que devem dar leituras de OD imprecisas.
ΙΟΟμΙ de solução de peroxidade SureBlue I-Component TMB MicroWell foi adicionada para cada reservatório, e a placa foi levada em temperatura ambiente por até 20 minutos. Um produto solúvel azul escuro desenvolvido como ligação HRP rotulado, conjugado e reagido com o substrato. A reação foi interrompida pela adição de ΙΟΟμΙ de IM de ácido clorídrico (a cor azul tornou-se amarela). O OD, em 450nm, da placa foi lida em um leitor de placa de 96 reservatórios dentro de 30 minutos da adição do ácido. O OD450nm é proporcional à quantidade de ligação de HRP estreptavidina conjugada.
Para alguns ensaios a proteína L foi adicionada. A proteína L reticula dois monômeros dAb.
Os resultados esperados a partir do controles são como os seguintes: Ong/ml de VEGF deve dar um sinal baixo de <0,15 OD; 3ng/ml de VEGF deve dar um sinal de >0,5 OD; e 3ng/ml de VEGF pré-incubado com 0,1 μ£/ιη1 neutralizando o anticorpo deve dar um sinal <0,2 OD. Ensaio de ligação de receptor 1 de VEGF
Este ensaio mede a ligação de VEGF-165 a VEGF Rl e a capacidade dos ligandos para bloquear esta interação. Uma quimera de VEGF Rl/Fc recombinante humana foi aqui adicionada, que compreende o domínio extracelular do VEGF humano Rl fundido a uma região Fc de IgGi humano. O receptor foi capturado em uma placa ELISA e então a placa foi bloqueada para evitar a ligação não específica. Uma mistura de VEGF-165 e ligando foi então adicionado, aplaca foi lavada e o receptor ligado VEGF-165 detectando o uso um anticorpo anti-VEGF biotinilatado e um HRP conjugado com anticorpo anti-biotina. A placa foi desenvolvida usando um substrato colométrico e uma leitura OD em 450nm.
O ensaio foi realizado como seguintes. Uma placa de ensaio Nunc Maxisorp de 96 reservatórios foi revestida durante a noite a 4o C com ΙΟΟμΙ por reservatório de VEGF Rl/Fc de recombinante humano (R&D Systems, Cat N°: 321-FL-050) @ 0,1 μg/ml em tampão de carbonato. Os reservatórios foram lavados 3 vezes com 0,05 % de Tween/PBS e 3 vezes com PBS.
200 μΐ por reservatório de 2 % de BSA em PBS foi adicionado para bloquear a placa e a placa foi incubada por um mínimo de 1 hora em temperatura ambiente.
Os reservatórios foram lavados (como acima), e então 50μ1 por reservatório de proteína dAb purificada foi adicionada para cada reservatório. 50μ1 de VEGF, em uma concentração de lng/ml em diluente (por uma concentração final de 500pg/ml), foi então adicionado para cada reservatório e a placa incubada por 1 hora em temperatura ambiente (ensaio de sobrenadantes; 80μ1 de sobrenadante foi adicionado para cada reservatório e então 20μ1 de VEGF @ 2,5ng/ml).
Os seguintes controles foram incluídos: Ong/ml de VEGF (apenas diluente); 500pg/ml de VEGF; e 500pg/ml de VEGF com 1 μg/ml de anticorpo anti-VEGF (R&D Systems cat#MAB293).
A placa foi lavada (como acima) e então 100 μΐ de anticorpo anti-VEGF biotinilado, 50ng/ml em diluente, foi adicionado e incubado por 1 hora em temperatura ambiente. Os reservatórios foram lavados (como acima) então ΙΟΟμΙ de HRP conjugado com o anticorpo anti-biotina foi adicionado (1:5000 de diluição em diluente). A placa foi então incubada por 1 hora em temperatura ambiente.
A placa foi lavada (como acima), garantindo que quaisquer traços de Tween-20 foram removidos para limitar fundamentos no ensaio de peroxidase subseqüente e para ajudar a prevenção de bolhas nos reservatórios nas placas de ensaio que devem dar leituras de OD imprecisas.
ΙΟΟμΙ de solução de peroxidade SureBlue I-Component TMB MicroWell foram adicionados a cada reservatório e a placa foi levada em temperatura ambiente por até 20 minutos.
Um produto solúvel azul escuro desenvolvido como ligação HRP rotulado, conjugado e reagido com o substrato. A reação foi interrompida pela adição de ΙΟΟμΙ de IM de ácido clorídrico. O OD, em 450nm, da placa foi lido em um leitor de placa de 96 reservatórios dentro de minutos da adição do ácido. O OD450 nm é proporcional à quantidade de ligação de HRP estreptavidina conjugada.
O resultado esperado dos controles: 0 ng/ml de VEGF deve dar um sinal baixo de <0,15 OD; 500pg/ml de VEGF deve dar um sinal de >0,8 OD; e 500pg/ml de VEGF pré-incubado com 1 μg/ml neutralizando o anticorpo deve dar um sinal <0,3 OD Tabela 1
dAb I RBA ÇVEGFR2) i IC50 - proteína L (nM) RBA (VEGFR2) 1C50 + proteína L (nM) TARl 5-1 VK 171 7,4 TARl 5-10 VK 12,2 0,3 TARI5-16 VK 31 1,7 TAK15-17 VK 38 0,5 .............. TAKl 5-18 VK Π4 j 0,4 TARl 5-20 VK 28 J Qi3 O TAR15-1 tem um Kd de 50 a 80 nM quando testados em várias concentrações em um chip BIAcore de densidade baixa. Outros VK dAbs foram passados no chip de densidade baixa em uma concentração (50nM). Os dAbs diferentes mostraram cinéticas de ligação diferentes. Tabela 2
dAb mais do que 50% de redução em sobrenadante RBA (VEGFR2)* TARl 5-5 VH + TAIU 5-6 VH 4- TARl 5-7 VH + TARI5-8 VH •f TAR15-23 VH +■ TARIS-M VH + TARl 5-25 VH + TARl 5-26 VH 4- TARl 5-27 VH + TARl 5-29 VH + TARl 5-30 VH +
* dAb foi submetido ao ensaio em 50nM
Os VH dAbs foram passados no chip VEGF de densidade baixa em um BlAcore em uma concentração (5 OnM). Os dAbs diferentes mostraram cinéticas de ligação diferentes. EXEMPLO 2. Ligação de EGFR Ensaio de ligação de EGFR
25ul de ligando (por exemplo, dAb) foram colocados em uma placa de 96 reservatórios e então 25ul de estreptavidina-Alexa Fluor (lug/ml) (Molecular Probes) e 25 ul de células A431 (ATCC N0. CRL-1555) (8xl05/ml) foram adicionados. Todos os reagentes foram preparados em PBS/1 % de BSA. A placa foi incubada por 30 minutos em temperatura ambiente.
Sem perturbar as células, 25ul de EGF biotinilatado (Invitrogen) em 40ng/ml foi adicionado para cada reservatório, e a placa foi incubada por três horas em temperatura ambiente. A fluorescência foi medida usando o sistema de detecção celular AB8200 (Applied Biosystems).
Os ligandos (por exemplo, dAbs) que inibem a ligação do EGF biotinilatado ao EGFR expressado nas células A431 resulta na contagens de fluorescência inferior. Os reservatórios sem ligandos fornecem uma referência de fluorescência máxima (isto é, ligação de EGF biotinilatado) e reservatórios sem ligandos ou EGF biotinilatado fornecem uma referência de nível de fundamentos de fluorescência. Estes controles foram incluídos em todos os ensaios.
Os resultados obtidos neste ensaio usando certos dAb anti- EGFRs são apresentados na Tabela 3. Ensaio de quinase EGFR
Em uma placa de 96 reservatórios, 5xl04 de células A431 (ATCC N0. CRL-1555) foram colocados por reservatório em RPMI-1640 suplementado com 10 % de soro fetal bovino. A placa foi incubada durante a noite a 37° Ci 5 % de CO2 para deixar as células aderirem, e então o meio foi recolocado com RPMI-1640. A placa foi incubada por 4 horas a 37° C / 5 % de CO2- O ligando (preparado em RPMI-1640) foi adicionado aos reservatórios e a placa foi incubada por 45 minutos a 37° C / 5 % de CO2. EGF (Invitrogen) foi adicionado aos reservatórios para dar uma concentração final de lOOng/ml e a placa foi incubada por 10 minutos em temperatura ambiente. Os reservatórios foram lavados duas vezes com PBS gelado. O tampão de Iise gelado (1 % de NP-40, 20mM de Tris, 137mM de NaCl, 10 % de glicerol, 2mM de EDTA, ImM de ortovanadato de sódio, lOug/ml de aprotinina, lOug/ml de leupeptina) foi adicionado e a placa foi incubada em gelo por 10 minutos.
Os sobrenadantes foram transferidos por uma placa ELISA que tem sido revestida durante a noite com anticorpo anti-EGFR (R&D Systems) em lug/ml em tampão de carbonato. A placa ELISA foi incubada por 2 horas em temperatura ambiente. A placa foi lavada três vezes com PBS/0,05 % de Tween 20. Anticorpo anti-fosfotirosina conjugado a peroxidase de rábano silvestre (Upstate Biotechnology) em lug/ml foi adicionado e a placa foi incubada por 1 hora em temperatura ambiente. A placa foi lavada três vezes com PBS/Tween e três vezes com PBS. A reação foi desenvolvida com substrato de peroxidades de micro-reservatório de 1 componente SureBlue TMB (KPL) e a reação foi interrompida com IM HCl após 25 minutos. A absorbância foi lida usando um leitor de placa Wallac.
Os resultados obtidos neste ensaio usando certos dAb anti- EGFRs são apresentados na Tabela 3.
Tabela 3
dAb KD (nM) Ensaio de ligação de receptor IC50 (nM)* Ensaio de quinase IC50 (nM)* DOM 16-3 9 27,3 28,68 to 112,6 (56,84) 31,16 to 100,9 (56,07) DOMl 6-200 15,3 12,47 to 37,88 (21,74) 30,29 to 111,9 (58,21) DOM16-39-87 6,81 4,471 to 10,39 (6,8) 11,95 to 252,4 (54,92) DOM16-39-100 1,24 1,007 to 2,757 (1,67) 9,142 tO 17,56 (12,67) DOM 16-39-107 7,09 1,472 to 4,208 (2,49) 12,00 to 34,99' (20,49) DOM 16-39-109 1,01 0,746 to 1,472 (1,05) 6,817 to 11,08 (8,69) DOM16-39-115 6,90 1,085 to 6,886 (2,73) 21,52 to 83,34 (42,35) ERBITUX (cetuximab, Imclone Systems, Inc,) 1,422 to 5,388 (2,77) 3,875 to 7,689 (5,46)
EXEMPLO 3. Formatos semelhante ao IgG que tem especificidade de
ligação para VEGF e EGFR.
Vetores
A cadeia principal pBudCE4.1 (Invitrogen) foi usada para clonagem de regiões constantes de imunoglobulina, tal como a região constante de cadeia pesada IgGl e região constante capa de cadeia leve (ver FIG. 16 para resumo). Um condutor de cadeia capa Ig foi usado para facilitar a secreção da proteína expressada. As regiões constantes Ig (IgGl humano e CK) foram produzida pelo GeneArt (Alemanha).
A região constante de cadeia pesada e peptídeo de sinal foram clonados em pBudCE4.1 como um fragmento Hind III/BglII nos locais de restrição HindIII/BamH I.
A região constante de cadeia leve e peptídeo de sinal foram clonados em pBudCE4.1 como um fragmento Notl/Mlul.
A clonagem de dAb em vetores IgG e produção de formatos semelhante ao IgG VK dAb (específico a VEGF ou EGFR) foi clonado no vetor IgG como um fragmento SalI/BsiWI. O VH dAb (específico a VEGF ou EGFR foi clonado no vetor IgG como um fragmento BamHI/XhoI.
O plasmídeo foi então produzido em células HEK293T (ATCC CRL-I 1268) e IgG foi expressado transitoriamente por cinco dias. O IgG produzido foi purificado usando a proteína A aperfeiçoada.
O IgG purificado foi verificado na redução e não redução de gel SDS e faixas de tamanho esperado foram observados.
Diversos dAbs que ligam ao VEGF ou EGFR foram formatados em formatos semelhante ao IgG que tem especificidade de ligação para VEGF e EGFR. Os formatos semelhante ao IgG foram preparados por produzir a construção que codifica uma cadeia pesada IgG em que VH é um dAb, e uma cadeia leve capa em que VK é um dAb. Os formatos semelhante ao IgG que foram preparados são mostrados na Tabela 4, e os resultados obtidos por alguns dos formatos semelhante ao IgG no ensaio são apresentados na Tabela 5. (Dummy VH e Dummy VK são seqüências de linha de germe que não ligam-se ao VEGF ou EGFR). Tabela 4
formato semelhante ao IgG N0 região V de cadeia pesada região V de cadeia pesada 1 DOMl 6-39 VK DOMl 6-39 VIC 2 DOMl 6-32 VK DOMl 5-10 VK 3 DOM16-39 VIC DOM15-10 VK 4 DOMl 6-72 VK DOMl 5-10 VK DOMl 5-26 VH DOMl 6-32 VK 6 DOMl 5-26 VH DOMl 6-39 VK 7 DOMl 5-26 VH DOMl 6-72 VK 8 DOMl 5-26 VH DOM15-10 VIC 9 DOMl 6-52 VH DOMl 5-10 VK DOMl 5-26 VH DOMl 6-52 VH 11 DOMl 5-10 VK DOMl 5-26 VH 12 DOM15-10 VIC DOMl 5-10 VK 13 DOMl 6-200 VK DOMl 6-200 VIC 14 DOMl 5-10 VIC DOMl 6-200 VK DOM15-1Ü VIC DOMl 6-32 VK 16 DOMl 5-10 VK DOMl 6-72 VK 17 DOMl 5-10 VK DOMl 6-39 VK 18 DOMl5-26 VH DOMl 6-200 VIC 19 DOMl 5-26 VH Dummy VK DOMl5-26 VH dCDRl/DOMl 6-200 VIC 21 DOMl 5-26 VH dCDR2/DOMl6-200 VK 22 DOMl 5-26 VH dCDR3/DOMl 6-200 VK 23 DOMl 5-26-501 VH DOMl 6-200 VIC 24 DOMl 5-6-506VH DOMl 6-200 VK DOM15-8-505 VH DOMl 6-200 VK 26 DOMl 5-26 VH DOMl 5-26 VH 27 DOMl 5-26-534 VH DOMl 6-200 VK 28 DOM15-26-501 VH DOMl 6-39-500 VK 29 DOMl 5-26-501 VH DOMl 6-39-201 VK 29a DOMl 5-26-501 VH DOMl 6-39-501 VK DOM15-26-501 VH DOMl 6-39-502 VK 31 DOMl 5-26-534 VH DOMl 6-39-501 VK 32 Dummy VH DOMl 6-200 VK 33 Dummy VH DOMl 6-39-201 VK 34 DOMl 5-26-501 VH DOMl 6-39-204 VK DOM15-26-501 VH DOM16-39-206 VK 36 DOM15-26-501 VH DOMl 6-39-207 VK 37 DOMl 5-26-501 VH DOMl 6-39-209 VIC 38 DOMl 5-26-501 VH DOM16-39-203 VK 39 DOM15-26-501 VH DOMl 6-39-214 VK 40 DOMl 5-26-501 VH DOMl 6-39-217 VK 41 DOM15-26-501 VH Dummy VIC VK r
Tabela 5
IgG CH CK VEGF (bioensaio) ND50 (nM) VEGF (RBA) IC50 (nM) EGFR (célula RBA) EC50 (nM) (ensaio de quinase) EGFR ND50 (nM) 1 DOMl 6-39 VK DOMl 6-39 VK 17 22 3 DOMl 6-39 VK DOMl 5-1OVK 1,5 4 DOMl 6-72 VK DOMl 5-10 VK 6 DOMl 5-26 VH DOMl 6-39 VK 1 126 22 DOM15-26 VH DOMl 6-52 VH 0,2 0,05 11 DOMl 5-1OVK DOMl 5-26 VH 0,03 ia DOMl 5-26 VH 200 VK 0,4 5 19 DOM15-26 VH Dummy VK 4,8 DOMl 5-26 VH dCDRl/DOM 16- 200 VK 4,1 21 DOMl 5-26 VH dCDR2/DOM 16- 200 VK 0,1 23 DOMl5-26- 501 VH DOM16-200 VK 0,16 0,16 23 24 DOMl5-6- 506VH DOMl 6-200 VK 12 26 DOMl5-8- 505 VH DOMl6-200 VK 34 27 DOMl5-26- 534 VH DOMl 6-200 VK 0,5 137 28 DOMl5-26- 501 VH DOMl6-39- 500 VK 0,8 43 DOMl5-26- 501 VH DOMl 6-39- 502 VK 0,2 17
EXEMPLO 4. Formatos em linha específicos duplos
O domínio de anticorpos que ligam-se ao VEGF ou EGFR foram incorporados na fusão de polipeptídeos que contém um dAb anti- VEGFR e um dAb anti-EGFR em uma cadeia de polipeptídeo simples. Algumas das fusões de polipeptídeos também incluem uma região Fc de anticorpo (-CH2-CH3 do IgGl humano). Exemplos específicos da fusão de polipeptídeos que foram clonadas e expressadas incluem TAR15-10 fundido a DOMl6-39-206 e a Fc (SEQID N°: 715), DOM16-39-206 fundido a TAR15- .10 10 e a Fc (SEQ ID N°: 716); DOM16-39-206 fundido a TAR15-26-501 e a Fc (SEQ ID N°: 717); TAR15-26-501 fundido a DOM16-39-206 e a Fc (SEQ ID N°: 718); TAR15-10 fundido a DOM16-39-206 (SEQ ID N0: 719); DOM16- 39-206 fundido a TAR15-10 (SEQ ID N°: 720); DOM16-39-206 fundido a TARl5-26-501 (SEQ JD N°: 721); e TAR15-26-501 fundido a DOM16-39-206 (SEQ ID N°: 722). As posições das fusões precedentes são listadas como aparecem na fusão de proteínas a partir do terminal amino ao terminal carbóxi. O DNA que codifica dAbs foi amplificado por PCR e clonado nos vetores de expressão usando métodos padrão. Em linha de fusão de polipeptídeos foram produzidas pelo que expressa os vetores de expressão em Pichia (fusão que não contém uma região Fc) ou em células HDEK 293T (fusões contendo região Fc). Fusões em linha foram ligados por batelada e afinidade purificada na proteína A aperfeiçoada e resinas de proteína L aperfeiçoada por células HEK 293T (Fc-rotulado) e construções expressadas em Pichia respectivamente.
As porções de diversas fusões que contém Fc são listadas na Tabela 6 como aparecem na fusão de proteínas, a partir do terminal amino ao terminal carbóxi. Conseqüentemente, a estrutura de proteínas de fusão podem ser estimadas pela leitura da Tabela da esquerda para direita. A primeira proteína de fusão apresentada na Tabela 6 tem a estrutura, a partir do terminal amino ao terminal carbóxi, DOM15-10-Ligador I-DOMl6-39-206-Ligador 2- Fc. As atividades de ligação de fusões foram avaliadas usando o ensaio de ligação de EGFR descrito no Exemplo 2, e o ensaio de ligação de receptor 2 VEGF descrito no Exemplo 1.
A robustez e resistência gerais a uma degradação foram testadas por submeter as fusões em linha por proteólise com tripsina. Uma solução de ligando específico duplo e tripsina (1/25 (p/p) tripsina ao ligando) foi preparada e incubada a 30° C. As amostras foram retiradas em 0 minutos (isto é, antes da adição de tripsina), 60 minutos, 180 minutos, e 24 horas. Nos pontos de tempo dados, a reação foi interrompida pela adição de coquetel inibidor de protease completa a 2X da concentração final (Código Roche: 11 836 145 001) com pigmento de carregamento PAGE, seguido por congelamento rápido das amostras em nitrogênio líquido. As amostras foram analisadas por SDS-PAGE, e faixas de proteínas foram visualizadas por revelar um curso de tempo para a degradação de protease das fusões.
Estes experimentos mostram que as fusões em linha tendo um ligador "natural' (KVEIKRTVAAPS (SEQ ID N°: 706), que contém aminoácidos de terminal carbóxi de Vk e aminoácidos de terminal amino de Ckj foram susceptíveis a proteólise rápida, com degradação evidente logo após o ponto de tempo de 10 minutos. A análise de SDS-PAGE revela que a degradação ocorre nos ligadores entre dAbs e nos ligadores entre dAb e Fc.
Ligadores novos foram projetados para conter menos resíduos Lys e Arg, que são pontos de clivagem para tripsina e são abundantes no ligador natural. As fusões que contém os ligadores projetados (LVTVSSAST (SEQ ID N°: 707)) ou (LVTVSSGGGGSGGGS (SEQ ID N°: 708)) mostrou resistência muito melhorada a proteólise de tripsina.
Os ensaios de ligação adicionais foram realizados para avaliar a potência das fusões em linha que contém os ligadores projetados. Os resultados revelados de ligadores projetados não tem qualquer efeito adverso substancial na potência.
Tabela 6 Polipeptídeos de fusão que contém Fc
dAbl Ligador 1 dAb2 Ligador 2 Ensaio dAbl (nM) Ensaio dAb2 (nM) DOM15- IO(VK) KVEIKRTVAAPS DOMl 6- 39-206 (VK) KVEIKRTVAAPS 0,45 23,8 DOM16- 39-206 (VK) ■KVEIKRTVAAPS DOMl 5- 10 (VK) KVEIKRTVAAPS 3,7 0,88 DOMl 6- 39-206 (VK) KVEIKRTVÀAPS DOMl 5- 26-501 (VH) LVTVSSASTKGPS 20,7 21,3 DOMl 5- 26-501 (VH) LVTVSSASTKGPS DOMl 6- 39-206 (VK) KVEIKRTVAAPS 5,7 7,7 DOMl 6- 39-601 (VK) LVTVSSAST DOMl 5- 10 (VK) LVTVSSAST 0,68 10,8 DOMl 6- 39-601 (VK) KVEIKRTVAAPS DOMl 5- 10 (Vk) KVEIKRTVAAPS 0,77 2,9 DOMl 5- IO(VK) LVTVSSAST DOMl 6- 39-601 (VK) LVTVSSAST 1,2 4,2 DOMl 6- 39-601 (VK) LVTVSSGGGGSGG GS DOMl 5-1 0 (VK) LVTVSSGGGGSGG GS 5,7 0,2 DOMl 5- 10 (VK) LVTVSSGGGGSGG GS DOMl 6-3 9-601 LVTVSSGGGGSGG GS 0,8 3,1
EXEMPLO 5. Ligadores projetados adicionais Diversas mutações projetadas foram introduzidas à região de terminal C de Vk dAbs expressado na cadeia leve de formatos semelhante ao IgG para reduzir a sensibilidade de protease. O "ligador natural" foi GQGTKWIKRTVAAPS (SEQID N°: 709 que contém os aminoácidos de terminal carbóxi de Vk e aminoácidos terminal amino de Ck). Os ligadores variantes 1-3 foram projetados com substituição de aminoácido que substitui alguns ou todos os resíduos carregados positivamente no ligador natural com as substituições mais conservadores que não são positivamente carregadas em pH fisiológico. É provavelmente que o resíduo de arginina no ligador natural é menos responsável pela alteração devido as interações iônicas formadas dentro do domínio CL.
O ligador variante 1 (GQGTNVEINRTVAAPS (SEQ ID N°:
710)) substitui ambas lisinas no ligador natural com asparaginas. O ligador variante 1, e ligador variante 2 (GQGTNVEINQTVAAPS (SEQ ID N°:
711)), que adicionalmente muda a arginina no ligador natural por glutamina, introduzindo um local de glicosilação N (NxT) no ligador. A análise de SDS- PAGE de formatos semelhante ao IgG contendo ligador variante 1 ou ligador variante 2 mostrou que a cadeia leve tem um peso molecular mais alto, consistente com um evento de glicosilação Ν. O ligador variante 3 (GQGTNVEIQRTVAAPS (SEQ ID N°: 712) remove o local de glicosilação N enquanto leva a arginina no ligador natural no lugar. O ligador variante 4 (GQGTLVTVSSTVAAPS (SEQ ID N°: 713)) substitui os aminoácidos de terminal C seis de domínio Vk com os resíduos correspondentes a partir de um domínio VH, e é desprovido de cargas positivas.
A resistência de protease (resistência de tripsina avaliada como descrito em Exemplo 4) dos formatos semelhante ao IgG que contém ligadores variantes 1-4 revelam que os formatos semelhantes ao IgG que contém ligadores variantes projetados foram mais resistentes a protease do que um formato semelhante ao IgG que contém o ligador natural. EXEMPLO 6. Fusões de dAb albumina de DOM16 dAb-anti-soro As fusões de dAb albumina de DOM 16 dAb-anti-soro foram projetadas e expressadas como uma fusão de um dAb anti-EGFR a um dAb albumina anti-soro (um DOM7 dAb). As porções das fusões são listadas na Tabela 7 como aparecem nas proteínas de fusão, a partir do terminal amino ao terminal carbóxi. Conseqüentemente, a estrutura das proteínas de fusão podem ser estimadas pela leitura da Tabela da esquerda para direita. A primeira proteína de fusão apresentada na Tabela 7 tem a estrutura, a partir do terminal amino ao terminal carbóxi, DOM16-39-618(S12P)-Ligador-DOM7h-14.
O DOM 16-3 9-618 contém uma serina por mutação de prolina na posição 12, que interrompe a ligação para proteína L e evita a agregação de cadeia leve. O ÍDOM7 dAbs são mutados de modo como a ligação anula a albumina, e deste modo são inativados.
Tabela 7
dAb de terminal N ligador dAb de terminai C DOMl6-39-618 (S12P) TVAAPS DOM7H-I4 DOM16-39-6Í8 (SI2F) TVAAPS ÍDOM71i-J4 DOMTh-14 TVAAPS DOMl 6-3 9-618 (S12P) DOMTh-! 4 TVAAFS DOMl 6-3 9-618 (S12P) DOM 16-3 9-618 (S12F) TVAAFS DOM7r-16 DOMl 6-39-618 (S12P) TVAAFS iDOM7r-16 DOM7r-16 TVAAPS DOMló-3.9-éÍ8{SI2P) DOM7r-l6 TVAAFS DOMl 6-39-618 (S12P)
EXEMPLO 7. Mapeamento de epítopo EGFR
O mapeamento do epítopo foi conduzido nos ensaios de ligação competitivos usando dAb anti-EGFRs, EGF e ERBITUX (cetuximab; Imclone Systems). Um estudo das ligações foi realizado usando um biossensor BIAcore. O DOMl 6-39-200 foi usado como uma referência nestes estudo. O DOMl6-39-200, e outros dAbs denominados DOM-16-39-X, são variantes maduras de afinidade de DOMl6-39. Conseqüentemente, todos os dAbs nas séries DOM-16-3 9 terão substancialmente as mesmas especificidades epitópicas, porque a maturação de afinidade produz dAbs que ligam-se com a afinidade mais alta, mas não altera a especificidade do dAb.
Os resultados mostram que DOM 16-72, DOMl 6-79 e DOM16-112 competem com DOM16-39-200 por ligação ao EGFR, indicando que estes dAbs ligam-se aos epítopos de sobreposição. Entretanto, DOM 16-32, DOMl6-52 e DOMI6-8O foram mostrados ligar-se a um epítopo diferente. O ERBITUX (cetuximab; Imclone Systems) é conhecido por inibir a ligação de EGF ao EGFR (cetuximab e EGF que liga-se aos epítopos de sobreposição em EGFR). Os resultados deste estudo também demonstram que DOM16-39-200 e Cetuximab competem pela ligação ao EGFR, indicando que o epítopo de sobreposição DOM 16-3 9-200 com o epítopo cetuximab, e com o local de ligação para EGF.
Enquanto esta invenção foi particularmente mostrada e descrita com referência as formas de realização preferidas destas, será entendido por aqueles habilitados na técnica que várias mudanças nas formas e detalhes podem ser feitas neste sem divergir do escopo da invenção abrangidas pelas reivindicações anexas. LISTAGEM DE SEQÜÊNCIAS
<110> Domantis Limited Ignatovich, Olga Holmes, Steve Beckmann, Roland Liu, Haiqun de Wildt, Rudolf Μ.T. Jespers, Laurent S. Steward, Michael
<120> "LIGANDOS QUE TÊM ESPECIFICIDADE DE LIGAÇÃO QUANTO A EGFR E/OU VEGF E MÉTODOS DE USO DESTES"
<130> 3440.1007002
<150> 60/758,355 <151> 2006-01-11
<160> 728
<170> FastSEQ for Windows Versão 4.0
<210> 1
<211> 324
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 1
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60
atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt cctgagttaa gttggtacca gcagaaacca 120
gggaaagccc ctaagctcct gatctatcat ggttccattt tgcaaagtgg ggtcccatca 180
cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240
gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag cgtatgtatc ggcctgctac gttcggccaa 300
gggaccaagg tggaaatcaa acgg 324
<210> 2
<211> 324
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 2
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60
atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt agggagttaa agtggtatca gcagaaacca 120
gggaaagccc ctaggctcct gatctatcat ggttccgtgt tgcaaagtgg ggtcccatca 180
cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240
gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gatttttttg ttcctgatac gttcggccaa 300 gggaccaagg tggaaatcaa acgg 324
<210> 3
<211> 324
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 3
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60
atcacttgcc gggcaagtca ggatattgcg aatgatttaa tgtggtacca gcagaaacca 120
gggaaagccc ctaagctcct gatctatcgt aattcccgtt tgcaaggtgg ggtcccatca 180
cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240
gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag cttgttcatc gcccttatac gatcggccaa 300
gggaccaagg tggaaatcaa acgg 324 <210> 4 <211> 324
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 4
gacatccaga
atcacttgcc
gggaaagccc
cgtttcagtg
gaagatttcg
gggaccaagg
tgacccagtc gggcaagtca ctaagctcct gcagtggatc ctacgtacta tgaaaatcaa
tccatcctcc gtttattggg gatctatcat tgggacagat ctgtcaacag gcgg
ctgtctgcat ccgcatttaa tcttccttgt ttcactctca tatatgtatt
ctgtaggaga cgtggtatca tgcaaagtgg ccatcagcag atccttctac
ccgtgtcacc 60 gcagaaacca 120 ggtcccatca 180 tctgcagcct 240 gttcggccaa 300 324
<210> 5
<211> 324
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 5
gacatccaga
atcacttgcc
gggaaagccc
cgtttcagtg
gaagattttg
gggaccaagg
tgacccagtc gggcaagtca ctaagctcct gcagtggatc ctacgtacta tggaaatcag
tccatcctcc gtggattggt gatctatcat tgggacagat ctgtcaacag acgg
ctgtctgcat ccggagttaa acgtccattt ttcactctca tatatgtttc
ctgtaggaga gttggtacca tgcaaagtgg ccatcagcag agcctaggac
ccgtgtcacc 60 gcagaaacca 120 ggtcccatca 180 tctgcaacct 240 gttcggccaa 300 324
<210> 6
<211> 324
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 6
gacatccaga
atcacttgcc
gggaaagccc
cgtttcagtg
gaagattttg
gggaccaagg
tgatccagtc gggcaagtca ctaagctcct gcagtggatc ctacgtacta tggaaatcaa
tccatcctcc gtttattggt gatctatcat tgggacagat ctgtcaacag acgg
ctgtccgcat aatgagttaa gcttccagtt ttcactctca gttctgggtt
ctgtaggaga gttggtatca tgcaaagtgg ccatcagcag atccttatac
ccgtgtcacc 60 gcagaaacca 120 ggtcccatca 180 tctgcaacct 240 gttcggccaa 300 324
<210> 7
<211> 324
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 7
gacatccaga
atcacttgcc
gggaaagccc
cgtttcagtg
gaagattttg
gggaccaagg
tgacccagtc gggcaagtca ctaagctcct gcagtggatc ctacgtacta tggaaatcaa
tccatcctcc gtggattggt gatctatcat tgggacagat ctgtcaacag acgg
ctgtctgcat cctgagttaa ggttccattt ttcactctca gttctgtata
ctgtaggaga gttggtacca tgcaaagtgg ccatcagcag gtcctttgac
ccgtgtcacc 60 gcagaaacca 12 0 ggtcccatca 180 tctgcaacct 240 gttcggccaa 300 324
<210> 8
<211> 324
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 8
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60
atcacttgcc gggcaagtca gtggattggg aatgagttaa agtggtatca gcagaaacca 120
gggaaagccc ctaagctcct gatctatatg tcttcccttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180
cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 &G gaagatttag ctacgtacta ctgtcaacag acgcttttgc ttccttttac gttcggccaa 300 gggaccaagg tggaaatcaa acgg 324
<210> 9
<211> 324
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 9
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60
atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt cctgagttaa gttggtacca gcagaaacca 120
gggaaagccc ctaagctcct gatctatcat ggttccattt tgcaaagtgg ggtcccatca 180
cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240
gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag cgtctgtatt atcctggtac gttcggccaa 300
gggaccaagg tggaaatcaa acgg 324
<210> 10
<211> 324
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<4 00> 10
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60
atcacttgcc gggcaagtca gtctattggg cgtgagttaa gttggtacca gcagaaacca 120
gggaaagccc ctatgctcct gatctatcat agttccaatt tgcaaagtgg ggtcccatca 180
cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240
gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggatgtatt ggccttatac gttcggccaa 300
gggaccaagg tggaaatcaa acgg 324
<210> 11
<211> 324
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<4 00> 11
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 atcacttgcc gggcaagtca gtggattaag ccggccttac attggtacca gcagaaacca 120 gggaaagccc ctaagctcct gatctatcat ggttccattt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccattagcag tctgcaacct 240 gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag actcttttta tgccttatac gttcggccaa 300 gggaccaagg tggaaatcaa acgg 324
<210> 12
<211> 324
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<4 00> 12
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60
atcacttgcc gggcaagtca gtctattagt actgcgttac tgtggtatca gcagaaacca 120
gggaaagccc ctaagctcct gatctataat ggttccatgt tgccaaatgg ggtcccatca 180
cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag acttgggata ctcctatgac gttcggccaa 300 gggaccaagg tggaaatcaa acgg 324
<210> 13
<211> 324
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<4 00> 13
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 atcacttgcc gggcaagtca gtggattggg catgatttat cgtggtacca gcagaaacca 120 gggaaagccc ctaagctcct cgtttcagtg gcagtggatc gaagatgttg ctacgtacta gggaccaagg tggaaatcaa
<210> 14
<211> 324
<212> DNA
<213> Homo sapiens
gatctatcat tcgtcctctt
tgggacagat ttcactctca ctgtcaacag cttatgggtt acgg
tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ccatcagcag tctgcaacct 240 atccttttac gttcggccaa 300
324
<4 00> 14
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 atcacttgcc gggcaagtca ggatattggg ggtttgttag tgtggtatca gcagaaacca 120 gggaaagccc ctaagctcct gatctaccgg agttcctatt tgcaaagtgg ggtcccatca 180
cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gaagatttcg ctacgtacta ctgtcaacag acgtggggta ttcctcatac gttcggccaa 300 gggaccaagg tggaaatcaa acgg 324
<210> 15
<211> 324
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<4 00> 15
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60
atcacttgcc gggcaagtca gaagattttt aatggtttaa gttggtatca gcagaaacca 120
gggaaagccc ctaagctcct gatctatcat agttccacgt tgcaaagtgg ggtcccatca 180
cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240
gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gttcttctgt atccttatac gttcggccaa 300
gggaccaagg tggaaatcaa acgg 324
<210> 16
<211> 324
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 16
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60
atcacttgcc gggcaagtca gagtattggg actaatttat cttggtacca gcagaaacct 120
gggaaagccc ctaggctcct gatctatcgg acgtccatgt tgcaaagtgg ggtcccatca 180
cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240
gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag cagttttttt ggcctcatac gttcggccaa 300
gggaccaagg tggaaatcaa acgg 324
<210> 17
<211> 354
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<4 0 0> 17
gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgcgtctc 60 tcctgtgcag cctccggatt cacctttagg ttgtatgata tggtttgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg gtctggagtg ggtctcatat attagttctg ggggttctgg tacatactac 180 gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tcccgcgaca attccaagaa cacgctgtat 240 ctgcaaatga acagcctgcg tgccgaggac accgcggtat attactgtgc gaaagcgggg 300 gggcgggcta gttttgacta ctggggtcag ggaaccctgg tcaccgtctc gagc 354
<210> 18
<211> 348
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<4 00> 18 gaggtgcagc tcctgtgcag ccagggaagg gcagactccg ctgcaaatga actcagtttg
tgttggagtc cctccggatt gtctagagtg tgaagggccg acagcctgcg actactgggg
tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgcgtctc 60
cacctttcat ctttatgata tgatgtgggt ccgccaggct 120
ggtctcattt attggggggg atggtcttaa tacatactac 180
gttcaccatc tcccgcgaca attccaagaa cacgctgtat 240
tgccgaggac accgcggtat attactgtgc gaaagcgggg 300
tcagggaacc ctggtcaccg tctcgagc 348
<210> 19
<211> 357
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 19
gaggtgcagc
tcctgtgcag
ccagggaagg
gcagactccg
ctgcaaatga
cagattctgt
tgttggagtc cctccggatt gtctagagtg tgaagggccg acagcctgcg ctaattttga
tgggggaggc cacctttaat ggtctcagag gttcaccatc tgccgaggac ctactggggt
ttggtacagc aagtatccta atttctccgt tcccgcgaca accgcggtat cagggaaccc
ctggggggtc tgatgtgggt ctggtcagga attccaagaa attactgtgc tggtcaccgt
cctgcgtctc 60 ccgccaggct 12 0 tacatactac 18 0 cacgctgtat 240 gaaaaatcct 300 ctcgagc 357
<210> 20
<211> 372
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 20
gaggtgcagc
tcctgtgcgg
ccagggaagg
gcagactccg
ctgcaaatga
gatcgtacgg
accgtctcga
tgttggagtc cctccggatt gtcttgagtg tgaagggccg acagcctgcg ctgggtctag gc
tgggggaggc cacctttcag ggtctcactg gttcaccatc tgccgaggac gggtaattct
ttggtacagc tggtatccta attgaggggc tcccgcgaca accgcggtat tttgactact
ctggggggtc tgtggtgggt agggtgatag attccaagaa attactgtgc ggggtcaggg
cctgcgtctc 60 ccgccaggct 120 gacatactac 180 cacgctgtat 240 gaaagcgggg 300 aaccctggtc 360 372
<210> 21
<211> 363
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 21
gaggtgcagc
tcctgtgcag
ccagggaagg
gcagactccg
ctgcaaatga
attagtccta
age
tgttggagtc cctccggatt gtctggagtg tgaagggccg acagcctgcg ctccgttggg
tgggggaggc cacctttaag ggtctcaggt gttcaccatc tgccgaggat gtttgactac
ttggtacagc gcttatgaga atttctccta tcccgcgaca accgcggtat tggggtcagg
ctggggggtc tgggttgggt atggtggttg attccaagaa attactgtgc gaaccctggt
cctgcgtctc 60 ccgccaggct 120 gacatactac 180 cacgctgtat 240 gaaagagtcg 300 caccgtctcg 360 363
<210> 22
<211> 348
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 22
gaggtgcagc
tcctgtgcag
ccagggaagg
gcagactccg
ctgcaaatga
actatgtttg
tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgcgtctc 60
cctccggatt cacctttact gggtatgaga tggggtgggt ccgccaggct 120
gtctagagtg ggtctcatat atttctaggg gtggtcggtg gacatactac 180
tgaagggccg gttcaccatc tcccgcgaca attccaagaa cacgctgtat 24 0
acagcctgcg tgccgaggac accgcggtat attactgtgc gaaatcggat 300
actactgggg tcagggaacc ctggtcaccg tctcgagc 348
<210> 23 <211> 348 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 23
gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc tcctgtgcag cctccggatt cacctttagt ccagggaagg gtctagagtg ggtctcattt gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc ctgcaaatga acagcctgcg tgccgaggac gaggattttg actactgggg tcagggaacc
ttggtacagc ctggggggtc cctgcgtctc 60 gcttatgaga tgggttgggt ccgccaggct 120 atttctgggg ggggtcggtg gacatactac 180 tcccgcgaca attccaagaa cacgctgtat 240 accgcggtat attactgtgc gaaatattcg 300 ctggtcaccg tctcgagc 348
<210> 24
<211> 348
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 24
gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc tcctgtgcag cctccggatt cacctttggg ccagggaagg gtctagagtg ggtctcagag gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc ctgcaaatga acagcctgcg tgccgaggac cggaagtttg actactgggg tcagggaacc
ttggtacagc ctggggggtc cctgcgtctc 60
gcttatccga tgatgtgggt ccgccaggct 120 atttcgcctt cgggttctta tacatactac 180
tcccgcgaca attccaagaa cacgctgtat 240 accgcggtat attactgtgc gaaagatcct 300
ctggtcaccg tctcgagc 348
<210> 25
<211> 369
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 25
gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc tcctgtgcag cctccggatt cacctttcag ccggggaagg gtctagagtg ggtctcatct gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc ctgcaaatga acagcctgcg tgccgaggac ggggggcctc ctacgtatgt tgtgtatttt gtctcgagc
ttggtacagc ctggggggtc cctgcgtctc 60 ttttataaga tgggttgggt ccgccaggct 120 attagtagtg tgggtgatgc gacatactac 180 tcccgcgaca attccaagaa cacgctgtat 240 accgcggtat attactgtgc gaaaatgggg 300 gactactggg gtcagggaac cctggtcacc 360
369
<210> 26
<211> 369
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 26
gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc tcctgtgcag cctccggatt cacctttggg ccagggaagg gtctagagtg ggtctcatct gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc ctgcaaatga acaacctgcg tgccgaggat ctttcgtctg agggtttttc gcgttctttt gtctcgagc
<210> 27
<211> 369
<212> DNA
<213> Homo sapiens
ttggtacagc ctggggggtc cctgcgtctc 60 gagtatggga tgtattgggt ccgccaggct 120 attagtgagc gtggtcggtt gacatactac 180 tcccgcgaca attccaagaa cacgctgtat 240 accgcggtat attactgtgc gaaatcggcg 300 gactactggg gtcagggaac cctggtcacc 360
369
<400> 27
gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc tcctgtgcag cctccggatt cacctttagt ccagggaagg gtctagagtg ggtctcatcg gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc ctgcaaatga acagcctgcg tgccgaggac
ttggtacagc ctggggggtc cctgcgtctc 60 gattatgcga tgtattgggt ccgccaggct 120 attacggcta ggggttttat tacatactac 180 tcccgcgaca attccaagaa cacgctgtat 240 accgcggtat attactgtgc gaaatcgggt 300 tttccgcata agtcgggttc gaattatttt gactactggg gtcagggaac cctggtcacc 360 gtctcgagc 369
<210> 28
<211> 348
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 28
gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc tcctgcgcag cctccggatt cacctttagg ccagggaagg gtctagagtg ggtctcattt gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc ctgcaaatga acagcctgcg tgccgaggac cggaagtttg actactgggg tcagggaacc
<210> 29
<211> 348
<212> DNA
<213> Homo sapiens
ttggtacagc ctggggggtc cctgcgtctc 60
ttgtacgata tgatgtgggt ccgccaggct 120
attggggggg atggtcttaa tacatactac 180
tcccgcgaca attccaagaa cacgctgtat 240
accgcggtat attactgtgc gaaagatcct 300
ctggtcaccg tctcgagc 348
<400> 29
gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc tcctgtgcag cctccggatt caccttttcc ccagggaagg gtctagagtg ggtctcattt gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc ctgcaaatga acagcctgcg tgccgaggac actcagtttg actactgggg tcagggaacc
<210> 30
<211> 348
<212> DNA
<213> Homo sapiens
ttggtacagc ctggggggtc cctgcgtctc 60
ttcttcgata tgatgtgggt ccgccaggct 120 attggggggg atggtcttaa tacatactac 180
tcccgcgaca attccaagaa cacgctgtat 24 0 accgcggtat attactgtgc gaaagcgggg 300
ctggtcaccg tctcgagc 348
<400> 30
gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc tcctgtgcag cctccggatt cacctttatg ccagggaagg gtctagagtg ggtctcattt gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc ctgcaaatga acagcctgcg tgccgaggac actcagtttg actactgggg tcagggaacc
<210> 31
<211> 348
<212> DNA
<213> Homo sapiens
ttggtacagc ctggggggtc cctgcgtctc 60 ctcttcgata tgatgtgggt ccgccaggct 120 attggggggg atggtcttaa tacatactac 180 tcccgcgaca attccaagaa cacgctgtat 240 accgcggtat attactgtgc gaaagcgggg 300 ctggtcaccg tctcgagc 34 8
<400> 31
gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc tcctgtgcag cctccggatt cacctttccg ccagggaagg gtctagagtg ggtctcattt gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc ctgcaaatga acagcctgcg tgccgaggac actcagtttg actactgggg tcagggaacc
<210> 32
<211> 348
<212> DNA
<213> Homo sapiens
ttggtacagc ctggggggtc cctgcgtctc 60 ttgtacgata tgatgtgggt ccgccaggct 120 attggggggg atggtcttaa tacatactac 180 tcccgcgaca attccaagaa cacgctgtat 240 accgcggtat attactgtgc gaaagcgggg 300 ctggtcaccg tctcgagc 348
<400> 32
gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgcgtctc 60 tcctgtgcag cctccggatt cacctttccc ctctacgata tgatgtgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg gtctagagtg ggtctcattt attggggggg atggtcttaa tacatactac 180 gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tcccgcgaca attccaagaa cacgctgtat 240 ctgcaaatga acagcctgcg tgccgaggac accgcggtat attactgtgc gaaagcgggg 300 actcagtttg actactgggg tcagggaacc ctggtcaccg tctcgagc 348
<210> 33
<211> 348
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 33
gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgcgtctc 60 tcctgtgcag cctccggatt cacctttcag tacttcgata tgatgtgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg gtctagagtg ggtctcattt attggggggg atggtcttaa tacatactac 180 gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tcccgcgaca attccaagaa cacgctgtat 240 ctgcaaatga acagcctgcg tgccgaggac accgcggtat attactgtgc gaaagcgggg 300 actcagtttg actactgggg tcagggaacc ctggtcaccg tctcgagc 348
<210> 34
<211> 348
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 34
gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgcgtctc 60
tcctgtgcag cctccggatt cacctttcat ctttatgata tgatgtgggt ccgccaggct 120
ccagggaagg gtctagagtg ggtctcattt attggggggg atggtcttaa tacatactac 180
gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tcccgcgaca attccaagaa cacgctgtat 240
ctgcaaatga acagcctgcg tgccgaggac accgcggtat attactgtgc gaaatccccc 300
cgccagtttg actactgggg tcagggaacc ctggtcaccg tctcgagc 348
<210> 35
<211> 348
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 35
gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgcgtctc 60
tcctgtgcag cctccggatt cacctttcat ctttatgata tgatgtgggt ccgccaggct 120
ccagggaagg gtctagagtg ggtctcattt attggggggg atggtcttaa tacatactac 180
gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tcccgcgaca attccaagaa cacgctgtat 240
ctgcaaatga acagcctgcg tgccgaggac accgcggtat attactgtgc gaaaaacccc 300
aggcagtttg actactgggg tcagggaacc ctggtcaccg tctcgagc 348
<210> 36
<211> 348
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 36
gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgcgtctc 60
tcctgtgcag cctccggatt cacctttcat ctttatgata tgatgtgggt ccgccaggct 120
ccagggaagg gtctagagtg ggtctcattt attggggggg atggtcttaa tacatactac 180
gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tcccgcgaca attccaagaa cacgctgtat 240
ctgcaaatga acagcctgcg tgccgaggac accgcggtat attactgtgc gaaaaagtcg 300
atgcagtttg actactgggg tcagggaacc ctggtcaccg tctcgagc 348
<210> 37
<211> 348
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 37 gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgcgtctc 60 tcctgtgcag cctccggatt cacctttcat ctttatgata tgatgtgggt ccgccaggct 120
ccagggaagg gtctagagtg ggtctcattt attggggggg atggtcttaa tacatactac 180
gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tcccgcgaca attccaagaa cacgctgtat 24 0
ctgcaaatga acagcctgcg tgccgaggac accgcggtat attactgtgc gaaatccccc 300
cgcaagtttg actactgggg tcagggaacc ctggtcaccg tctcgagc 34 8
<210> 38
<211> 348
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 38
gaggtgcagc
tcctgtgcag
ccagggaagg
gcagactccg
ctgcaaatga
cggaagtttg
tgttggagtc cctccggatt gtctagagtg tgaagggccg acagcctgcg actactgggg
tgggggaggc cacctttcat ggtctcattt gttcaccatc tgccgaggac tcagggaacc
ttggtacagc ctttatgata
attggggggg tcccgcgaca accgcggtat ctggtcaccg
ctggggggtc tgatgtgggt atggtcttaa attccaagaa attactgtgc tctcgagc
cctgcgtctc 60 ccgccaggct 120 tacatactac 180 cacgctgtat 240 gaaagatcct 300 348
<210> 39
<211> 357
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 39
gaggtgcagc
tcctgtgcgg
gagtgggtct
ggccggttca
ctgcgcgccg
tctaggggta
tgttggagtc cctccggata cactgattga ccatctcccg aggacaccgc attcttttga
tgggggaggc ccctatgtgg ggggcagggt cgacaattcc ggtatattac ctactggggt
ttggtacagc tgggtccgcc gataggacat aagaacacgc tgtgcgaaag cagggaaccc
ctggggggtc aggctccagg actacgcaga tgtatctgca cgggggatcg tggtcaccgt
cctgcgtctc 60 gaagggtcct 120 ctccgtgaag 180 aatgaacagc 240 tacggctggg 300 ctcgagc 357
<210> 40
<211> 372
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 40
gaggtgcagc
tcctgtgcgg
ccagggaagg
gcagactccg
ctgcaaatga
gatcgtacgg
accgtctcga
tgttggagtc cctccggatt gt cttgagtg tgaagggccg acagcctgcg ctgggtctag gc
tgggggaggc cacctttcag ggtctcactg gttcaccatc tgccgaggac gggtaattct
ttggtacagc tgggccccca attgaggggc tcccgcgaca accgcggtat tttgactact
ctggggggtc tgccctgggt agggtgatag attccaagaa attactgtgc ggggtcaggg
cctgcgtctc 60 ccgccaggct 120 gacatactac 180 cacgctgtat 240 gaaagcgggg 300 aaccctggtc 360 372
<210> 41
<211> 372
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 41
gaggtgcagc
tcctgtgcgg
ccagggaagg
gcagactccg
ctgcaaatga
gatcgtacgg
accgtctcga
tgttggagtc cctccggatt gtcttgagtg tgaagggccg acagcctgcg ctgggtctag gc
tgggggaggc cacctttcag ggtctcactg gttcaccatc tgccgaggac gggtaattct
ttggtacagc tggccccaca attgaggggc tcccgcgaca accgcggtat tttgactact
ctggggggtc tgccctgggt agggtgatag attccaagaa attactgtgc ggggtcaggg
cctgcgtctc ccgccaggct gacatactac cacgctgtat gaaagcgggg aaccctggtc
60 120 180 240 300 360 372
<210> 42 <211> 372 <212> DNA
<213> Homo sapiens
<220>
<221> unsure <222> 88, 90 <223> η = Α,Τ,C or G
<400> 42
gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgcgtctc 60
tcctgtgcgg cctccggatt cacctttnan tggccccaca tgcactgggt ccgccaggct 120
ccagggaagg gtcttgagtg ggtctcactg attgaggggc agggtgatag gacatactac 180
gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tcccgcgaca attccaagaa cacgctgtat 240
ctgcaaatga acagcctgcg tgccgaggac accgcggtat attactgtgc gaaagcgggg 300
gatcgtacgg ctgggtctag gggtaattct tttgactact ggggtcaggg aaccctggtc 360
accgtctcga gc 372
<210> 43
<211> 372
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 43
gaggtgcagc tgttggagtc tcctgtgcgg cctccggatt ccagggaagg gtcttgagtg gcagactccg tgaagggccg ctgcaaatga acagcctgcg gatcgttggg tgttgtctag accgtctcga gc
tgggggaggc ttggtacagc cacctttcag tggtatccta ggtctcactg attgaggggc gttcaccatc tcccgcgaca tgccgaggac accgcggtat gggtaattct tttgactact
ctggggggtc cctgcgtctc 60 tgtggtgggt ccgccaggct 120 agggtgatag gacatactac 180 attccaagaa cacgctgtat 240 attactgtgc gaaagcgggg 300 ggggtcaggg aaccctggtc 360
372
<210> 44
<211> 372
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 44
gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgcgtctc 60
tcctgtgcgg cctccggatt cacctttcag tggtatccta tgtggtgggt ccgccaggct 120
ccagggaagg gtcttgagtg ggtctcactg attgaggggc agggtgatag gacatactac 180
gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tcccgcgaca attccaagaa cacgctgtat 240
ctgcaaatga acagcctgcg tgccgaggac accgcggtat attactgtgc gaaagcgggg 300
gatcgtcgct tcctctctag gggtaattct tttgactact ggggtcaggg aaccctggtc 360
accgtctcga gc 372
<210> 45
<211> 372
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 45
gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgcgtctc 60
tcctgtgcgg cctccggatt cacctttcag tggtatccta tgtggtgggt ccgccaggct 120
ccagggaagg gtcttgagtg ggtctcactg attgaggggc agggtgatag gacatactac 180
gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tcccgcgaca attccaagaa cacgctgtat 240
ctgcaaatga acagcctgcg tgccgaggac accgcggtat attactgtgc gaaagcgggg 300
gatcgtcaca ggacctctag gggtaattct tttgactact ggggtcaggg aaccctggtc 360 accgtctcga gc 372
<210> 46
<211> 372
<212> DNA
<213> Homo sapiens <400> 46
gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc tcctgtgcgg cctccggatt cacctttcag ccagggaagg gtcttgagtg ggtctcactg gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc ctgcaaatga acagcctgcg tgccgaggac ccccccttcg ctgggtctag gggtaattct accgtctcga gc
<210> 47
<211> 372
<212> DNA
<213> Homo sapiens
ttggtacagc ctggggggtc cctgcgtctc 60
tggtatccta tgtggtgggt ccgccaggct 120 attgaggtgc agggtgatag gacatactac 180
tcccgcgaca attccaagaa cacgctgtat 240 accgcggtat attactgtgc gaaagcgggg 300
tttgactact ggggtcaggg aaccctggtc 360
372
<400> 47
gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc tcctgtgcgg cctccggatt cacctttcag ccagggaagg gtcttgagtg ggtctcactg gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc ctgcaaatga acagcctgcg tgccgaggac accaacaacg ctgggtctag gggtaattct accgtctcga gc
<210> 48
<211> 372
<212> DNA
<213> Homo sapiens
ttggtacagc ctggggggtc cctgcgtctc 60
tggtatccta tgtggtgggt ccgccaggct 120 attgaggggc agggtgatag gacatactac 180
tcccgcgaca attccaagaa cacgctgtat 240 accgcggtat attactgtgc gaaagcgggg 300 tttgactact ggggtcaggg aaccctggtc 360
372
<400> 48
gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc tcctgtgcgg cctccggatt cacctttcag ccagggaagg gtcttgagtg ggtctcactg gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc ctgcaaatga acagcctgcg tgccgaggac gatcgtacgg ctcagaacag cggtaattct accgtctcga gc
ttggtacagc ctggggggtc cctgcgtctc 60 tggtatccta tgtggtgggt ccgccaggct 120 attgaggggc agggtgatag gacatactac 180 tcccgcgaca attccaagaa cacgctgtat 240 accgcggtat attactgtgc gaaagcgggg 300 tttgactact ggggtcgggg aaccctggtc 360
372
<210> 49
<211> 372
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 49
gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc tcctgtgcgg cctccggatt cacctttcag ccagggaagg gtcttgagtg ggtctcactg gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc ctgcaaatga acagcctgcg tgccgaggac aacagcaacg ctgggtctag gggtaattct accgtctcga gc
<210> 50
<211> 348
<212> DNA
<213> Homo sapiens
ttggtacagc ctggggggtc cctgcgtctc 60 tggtatccta tgtggtgggt ccgccaggct 120 attgaggggc agggtgatag gacatactac 180 tcccgcgaca attccaagaa cacgctgtat 240 accgcggtat attactgtgc gaaagcgggg 300 tttgactact ggggtcaggg aaccctggtc 360
372
<400> 50
gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc tcctgtgcag cctccggatt cacctttccc ccagggaagg gtctagagtg ggtctcagag gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc ctgcaaatga acagcctgcg tgccgaggac
ttggtacagc ctggggggtc cctgcgtctc 60 gcttatccga tgatgtgggt ccgccaggct 120 atttcgcctt cgggttctta tacatactac 180 tcccgcgaca attccaagaa cacgctgtat 240 accgcggtat attactgtgc gaaagatcct 300 cggaagtttg actactgggg tcagggaacc ctggtcaccg tctcgagc 34:
<210> 51
<211> 348
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 51
gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc tcctgtgcag cctccggatt cacctttaag ccagggaagg gtctagagtg ggtctcagag gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc ctgcaaatga acagcctgcg tgccgaggac cggaagtttg actactgggg tcagggaacc
<210> 52
<211> 348
<212> DNA
<213> Homo sapiens
ttggtacagc ctggggggtc cctgcgtctc 60 gcttatccga taatgtgggt ccgccaggct 120 atttcgcctt cgggttctta tacatactac 180 tcccgcgaca attccaagaa cacgctgtat 240 accgcggtat attactgtgc gaaagatcct 300 ctggtcaccg tctcgagc 348
<400> 52
gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc tcctgtgcag cctccggatt cacctttacg ccagggaagg gtctagagtg ggtctcagag gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc ctgcaaatga acagcctgcg tgccgaggac cggaagtttg actactgggg tcagggaacc
<210> 53
<211> 348
<212> DNA
<213> Homo sapiens
ttggtacagc ctggggggtc cctgcgtctc 60 gcttatccga tgatgtgggt ccgccaggct 120 atttcgcctt cgggttctta tacatactac 180 tcccgcgaca attccaagaa cacgctgtat 240 accgcggtat attactgtgc gaaagatcct 300 ctggtcaccg tctaaagc 348
<400> 53
gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc tcctgtgcag cctccggatt cacctttggg ccagggaagg gtctagagtg ggtctcagag gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc ctgcaaatga acagcctgcg tgccgaggac cggaagtttg actactgggg tcagggaacc
<210> 54
<211> 348
<212> DNA
<213> Homo sapiens
ttggtacagc ctggggggtc cctgcgtctc 60 tggtatccga tgatgtgggt ccgccaggct 120 atttcgcctt cgggttctta tacatactac 180 tcccgcgaca attccaagaa cacgctgtat 240 accgcggtat attactgtgc gaaagatcct 300 ctggtcaccg tctcgagc 348
<400> 54
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<212> DNA
<213> Homo sapiens
ttggtacagc ctggggggtc cctgcgtctc 60 ctctatccga tgatgtgggt ccgccaggct 120 atttcgcctt cgggttctta tacatactac 180 tcccgcgaca attccaagaa cacgctgtat 240 accgcggtat attactgtgc gaaagatcct 300 ctggtcaccg tctagagc 348
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gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc tcctgtgcag cctccggatt cacctttctg ccagggaagg gtctagagtg ggtctcagag
ttggtacagc ctggggggtc cctgcgtctc 60 gcttatccga tgatgtgggt ccgccaggct 120 atttcgcctt cgggttctta tacatactac 180 gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc ctgcaaatga acagcctgcg tgccgaggac cggaagtttg actactgggg tcagggaacc
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<212> DNA
<213> Homo sapiens
tcccgcgaca attccaagaa cacgctatat 240 accgcggtat attactgtgc gaaagatcct 300 ctggtcaccg tctcgagc 348
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<212> DNA
<213> Homo sapiens
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<212> DNA
<213> Homo sapiens
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<212> DNA
<213> Homo sapiens
ttggtacagc ctggggggtc cctgcgtctc 60 gcttatccga tgttgtgggt ccgccaggct 120 atttcgcctt cgggttctta tacatactac 180 tcccgcgaca attccaagaa cacgctgtat 240 accgcggtat attactgtgc gaaagatcct 300 ctggtcaccg tctcgagc 348
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<212> DNA
<213> Homo sapiens
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<211> 348
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<213> Homo sapiens
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<213> Homo sapiens
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cggaagtttg actactgggg tcagggaacc ctggtcaccg tctcgagc 348
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<212> DNA
<213> Homo sapiens <400> 65
gaggtgcagc tgttggagtc tcctgtgcag cctccggatt ccagggaagg gtctagagtg gcagactccg tgaagggccg ctgcaaatga acagcctgcg cggaagtttg actactgggg
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<212> DNA
<213> Homo sapiens
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<213> Homo sapiens
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cacctttagg gcttatccga
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tgccgaggac accgcggtat
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<213> Homo sapiens
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<212> DNA
<213> Homo sapiens
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<212> DNA
<213> Homo sapiens
ttggtacagc ctggggggtc cctgcgtctc 60 gcttatccga tgatgtgggt ccgccaggct 120 atttcgcctt cgggttctta tacatactac 180 tcccgcgaca attccaagaa cacgctgtat 240 accgcggtat attactgtgc gaaagatcct 300 ctggtcaccg tctagagc 348
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<213> Homo sapiens
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<213> Homo sapiens
ttggtacagc ctggggggtc cctgcgtctc 60 gcttatccga taatgtgggt ccgccaggct 120 atttcgcctt cgggttctta tacatactac 180 tcccgcgaca attccaagaa cacgctgtat 240 accgcggtat attactgtgc gaaaaccccc 300 ctggtcaccg tctcgagc 348
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<213> Homo sapiens
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ttggtacagc ctggggggtc cctgcgtctc 60 gcttatccga tattgtgggt ccgccaggct 120 atttcgcctt cgggttctta tacatactac 180 tcccgcgaca attccaagaa cacgctgtat 240 ctgcaaatga acagcctgcg tgccgaggac accgcggtat attactgtgc gaaagatcct 300 cggaagtttg actactgggg tcagggaacc ctggtcaccg tctcgagc 34 8
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<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 85
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<212> DNA
<213> Homo sapiens
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<213> Homo sapiens
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<212> DNA
<213> Homo sapiens
ttggtacagc ctggggggtc cctgcgtctc 60 gcttatccga taatgtgggt ccgccaggct 120 atttcgcctt cgggttctta tacatactac 180 tcccgcgaca attccaagaa cacgctgtat 240 accgcggtat attactgtgc gaaagatccc 300 ctggtcaccg tctcgagc 348
<400> 88
gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc tcctgtgcag cctccggatt cacctttaag ccagggaagg gtctagagtg ggtctcagag gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc ctgcaaatga acagcctgcg tgccgaggac cgcaagtttg actactgggg tcagggaacc
<210> 89
<211> 348
<212> DNA
<213> Homo sapiens
ttggtacagc ctggggggtc cctgcgtctc 60 gcttatccga taatgtgggt ccgccaggct 120 atttcgccct ccggttctta tacatactac 180 tcccgcgaca attccaagaa cacgctgtat 240 accgcggtat attactgtgc gaaaaccccc 300 ctggtcaccg tctcgagc 348
<400> 89
gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgcgtctc 60 tcctgtgcag cctccggatt cacctttaag gcttatccga taatgtgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg gtctagagtg ggtctcagag gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc ctgcaaatga acagcctgcg tgccgaggac cgggagtttg actactgggg tcagggaacc
<210> 90
<211> 348
<212> DNA
<213> Homo sapiens
atttcgcctt cgggtcagat gaggtactac 180 tcccgcgaca attccaagaa cacgctgtat 240 accgcggtat attactgtgc gaaagatcct 300 ctggtcaccg tctcgagc 348
<400> 90
gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc tcctgtgcag cctccggatt cacctttaag ccagggaagg gtctagagtg ggtctcagag gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc ctgcaaatga acagcctgcg tgccgaggac cgggagtttg actactgggg tcagggaacc
<210> 91
<211> 348
<212> DNA
<213> Homo sapiens
ttggtacagc ctggggggtc cctgcgtctc 60 gcttatccga taatgtgggt ccgccaggct 120 atttcgcctt cgggtaggtc gcggtactac 180 tcccgcgaca attccaagaa cacgctgtat 240 accgcggtat attactgtgc gaaagatcct 300 ctggtcaccg tctcgagc 348
<400> 91
gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc tcctgtgcag cctccggatt cacctttaag ccagggaagg gtctagagtg ggtctcagag gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc ctgcaaatga acagcctgcg tgccgaggac cggcgctttg actactgggg tcagggaacc
<210> 92
<211> 348
<212> DNA
<213> Homo sapiens
ttggtacagc ctggggggtc cctgcgtctc 60 gcttatccga taatgtgggt ccgccaggct 120 atttcgcctt cgggtaggta cagctactac 180 tcccgcgaca attccaagaa cacgctgtat 240 accgcggtat attactgtgc gaaagatccc 300 ctggtcaccg tctcgagc 348
<400> 92
gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc tcctgtgcag cctccggatt cacctttaag ccagggaagg gtctagagtg ggtctcagag gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc ctgcaaatga acagcctgcg tgccgaggac cgcgcctttg actactgggg tcagggaacc
<210> 93
<211> 348
<212> DNA
<213> Homo sapiens
ttggtacagc ctggggggtc cctgcgtctc 60 gcttatccga taatgtgggt ccgccaggct 120 atttcgcctt cgggtgaggc gaggtactac 180 tcccgcgaca attccaagaa cacgctgtat 240 accgcggtat attactgtgc gaaagatccc 300 ctggtcaccg tctcgagc 348
<400> 93
gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc tcctgtgcag cctccggatt cacctttagg ccagggaagg gtctagagtg ggtctcagag gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc ctgcaaatga acagcctgcg tgccgaggac cgcgcctttg actactgggg tcagggaacc
<210> 94
<211> 348
<212> DNA
<213> Homo sapiens
ttggtacagc ctggggggtc cctgcgtctc 60 gcttatccga taatgtgggt ccgccaggct 120 atttcgcctt cgggtgagaa gcggtactac 180 tcccgcgaca attccaagaa cacgctgtat 240 accgcggtat attactgtgc gaaagatccc 300 ctggtcaccg tctcgagc 348
<400> 94 gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc tcctgtgcag cctccggatt cacctttaag ccagggaagg gtctagagtg ggtctcagag gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc ctgcaaatga acagcctgcg tgccgaggac cgcgcctttg actactgggg tcagggaacc
<210> 95
<211> 348
<212> DNA
<213> Homo sapiens
ttggtacagc ctggggggtc cctgcgtctc 60
gcttatccga taatgtgggt ccgccaggct 120
atttcgcctt cgggtgagga ggagtactac 180
tcccgcgaca attccaagaa cacgctgtat 240
accgcggtat attactgtgc gaaagatccc 300
ctggtcaccg tctcgagc 348
<400> 95
gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc tcctgtgcag cctccggatt cacctttaag ccagggaagg gtctagagtg ggtctcagag gcagactccg tgcagggccg gttcaccatc ctgcaaatga acagcctgcg tgccgaggac cgcgcctttg actactgggg tcagggaacc
<210> 96
<211> 348
<212> DNA
<213> Homo sapiens
ttggtacagc ctggggggtc cctgcgtctc 60
gcttatccga taatgtgggt ccgccaggct 120
atttcgcctt cgggtaagaa gacgtactac 180
tcccgcgaca attccaagaa cacgctgtat 240
accgcggtat attactgtgc gaaagatccc 300
ctggtcaccg tctcgagc 348
<400> 96
gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc tcctgtgcag cctccggatt cacctttaag ccagggaagg gtctagagtg ggtctcagag gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc ctgcaaatga acagcctgcg tgccgaggac cgcgcctttg actactgggg tcagggaacc
<210> 97
<211> 348
<212> DNA
<213> Homo sapiens
ttggtacagc ctggggggtc cctgcgtctc 60
gcttatccga taatgtgggt ccgccaggct 120
atttcgcctt cgggtaagaa gaagtactac 180
tcccgcgaca attccaagaa cacgctgtat 240
accgcggtat attactgtgc gaaagatccc 300 ctggtcaccg tctcgagc 348
<400> 97
gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc tcctgtgcag cctccggatt cacctttaag ccagggaagg gtctagagtg ggtctcagag gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc ctgcaaatga acagcctgcg tgccgaggac cggaagtttg actactgggg tcagggaacc
<210> 98
<211> 348
<212> DNA
<213> Homo sapiens
ttggtacagc ctggggggtc cctgcgtctc 60 gcttatccga taatgtgggt ccgccaggct 120 atttcgcctt cgggtgggta tacatactac 180 tcccgcgaca attccaagaa cacgctgtat 240 accgcggtat attactgtgc gaaagatcct 300 ctggtcaccg tctcgagc 348
<400> 98
gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc tcctgtgcag cctccggatt cacctttaag ccagggaagg gtctagagtg ggtctcagag gcagacgagg tgaagggccg gttcaccatc ctgcaaatga acagcctgcg tgccgaggac cggaagtttg actactgggg tcagggaacc
<210> 99
<211> 348
<212> DNA
<213> Homo sapiens
ttggtacagc ctggggggtc cctgcgtctc 60 gcttatccga taatgtgggt ccgccaggct 120 atttcgcctt cgggttctta tacatactac 180 tcccgcgaca attccaagaa cacgctgtat 240 accgcggtat attactgtgc gaaagatcct 300 ctggtcaccg tctcgagc 348 <4O0> 99
gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgcgtctc 60
tcctgtgcag cctccggatt cacctttaag gcttatccga taatgtgggt ccgccaggct 120
ccagggaagg gtctagagtg ggtctcagag atttcgcctt cgggtcacaa caagtactac 180
gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tcccgcgaca attccaagaa cacgctgtat 240
ctgcaaatga acagcctgcg tgccgaggac accgcggtat attactgtgc gaaagatcct 300
cggaggtttg actactgggg tcagggaacc ctggtcaccg tctcgagc 348
<210> 100 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 100
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr 20 Ile Thr Cys Arg Ala 25 Ser Gln Trp Ile Gly 30 Pro Glu Leu Ser Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr His Gly Ser Ile Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Met Tyr Arg Pro Ala 85 90 95 Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 101 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens
<4 00> 101 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly Arg Glu 20 25 30 Leu Lys Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Arg 45 Leu Leu Ile Tyr His Gly Ser Val Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Asp Phe Phe Val Pro Asp 85 90 95 Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 102 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 102
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ala Asn Asp 25 30 Leu Met Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Arg Asn Ser Arg Leu Gln Gly Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr 85 Tyr Cys Gln Gln 90 Leu Val His Arg Pro 95 Tyr Thr Ile Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu Ile 105 Lys Arg
<210> 103 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <4 00> 103
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Phe Ile Gly Pro His 20 25 30 Leu Thr Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr His Ser Ser Leu Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Tyr Met Tyr Tyr Pro 95 Ser Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Lys 105 Ile Lys Arg
<210> 104 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <4 00> 104
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr 20 Ile Thr Cys Arg Ala 25 Ser Gln Trp Ile Gly 30 Pro Glu Leu Ser Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Ile Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Met Phe Gln Pro Arg 85 90 95 Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Arg Arg
<210> 105 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 105
Asp Ile Gln Met Ile Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Phe Ile Gly Asn Glu 20 25 30 Leu Ser Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr His Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Val Leu Gly Tyr Pro Tyr 85 90 95 Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 106 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <4 0 0> 106
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr 20 Ile Thr Cys Arg Ala 25 Ser Gln Trp Ile Gly 30 Pro Glu Leu Ser Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr His Gly Ser Ile Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Val Leu Tyr Ser Pro 95 Leu Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 107 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens
< 4 0 0 > 107
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly Asn Glu 20 25 30 Leu Lys Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Met Ser Ser Leu Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Leu Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Thr Leu Leu Leu Pro 95 Phe Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 108 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <4 00> 108 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr 20 Ile Thr Cys Arg Ala 25 Ser Gln Trp Ile Gly 30 Pro Glu Leu Ser Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr His Gly Ser Ile Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Leu Tyr Tyr Pro Gly 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 109 <211> 108
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<4 0 0> 109 Asp Ile Gln Met 1
Asp Arg Val Thr
20
Leu Ser Trp Tyr
35
Tyr His Ser Ser 50
Ser Gly Ser Gly 65
Glu Asp Phe Ala
Thr Phe Gly Gln 100
<210> 110 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens
<4 0 0> 110
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Lys Pro Ala 20 25 30 Leu His Trp Tyr 35 Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr His Gly Ser Ile Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Thr Leu Phe Met Pro Tyr 85 90 95 Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 111
Thr Gln Ser Pro Ser Ser
10
Ile Thr Cys Arg Ala Ser
25
Gln Gln Lys Pro Gly Lys
40
Asn Leu Gln Ser Gly Val
55
Thr Asp Phe Thr Leu Thr 70
Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln 85 90
Gly Thr Lys Val Glu Ile 105
Leu Ser Ala Ser Val Gly 15
Gln Ser Ile Gly Arg Glu 30
Ala Pro Met Leu Leu Ile 45
Pro Ser Arg Phe Ser Gly 60
Ile Ser Ser Leu Gln Pro 75 80
Gly Met Tyr Trp Pro Tyr
95
Lys Arg <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens
<4 00> 111
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Thr Ala 20 25 30 Leu Leu Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Asn Gly Ser Met Leu Pro Asn Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Thr Trp Asp Thr Pro Met 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 112 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens
< 4 0 0 > 112
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly His Asp 20 25 30 Leu Ser Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr His Ser Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Val Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Leu Met Gly Tyr Pro 95 Phe Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 113 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens
<40 0> 113 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Giy 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Gly Gly Leu 20 25 30 Leu Val Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Arg Ser Ser Tyr Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Thr Trp Gly Ile Pro 95 His Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg <210> 114 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <4 00> 114
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Lys Ile Phe Asn Gly 20 25 30 Leu Ser Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr His Ser Ser Thr Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Val Leu Leu Tyr Pro Tyr 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 115 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <4 00> 115
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr 20 Ile Thr Cys Arg Ala 25 Ser Gln Ser Ile Gly 30 Thr Asn Leu Ser Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Arg 45 Leu Leu Ile Tyr Arg Thr Ser Met Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gln Phe Phe Trp Pro His 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 116 <211> 118 <212> PRT
<213> Homo sapiens <4 00> 116
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly
1 5
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala 20
Asp Met Val Trp Val Arg Gln Ala
40
Ser Tyr Ile Ser Ser Gly Gly Ser
50 55
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg 65 70
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala
Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
15
Ser Gly Phe Thr Phe Arg Leu Tyr 30
Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 45
Gly Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 60
Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
75 80
Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95
Ala Lys Ala Gly Gly Arg Ala Ser Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
IOO 105 110
Leu Val Thr Val Ser Ser 115
<210> 117 <211> 116 <212> PRT
<213> Homo sapiens <4 00> 117
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe His Leu Tyr 20 25 30 Asp Met Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Phe Ile Gly Gly Asp Gly Leu Asn Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 80 65 70 75 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Ala Gly 100 Thr Gln Phe Asp Tyr Trp 105 Gly Gln Gly Thr 110 Leu Val Thr Val Ser 115 Ser
<210> 118 <211> 119 <212> PRT
<213> Homo sapiens <4 00> 118
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asn Lys Tyr 20 25 30 Pro Met Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Glu Ile Ser Pro Ser Gly Gln Asp Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 80 65 70 75 Leu Gln Met Asn Ser 85 Leu Arg Ala Glu Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr 95 Cys Ala Lys Asn Pro 100 Gln Ile Leu Ser Asn Phe 105 Asp Tyr Trp Gly 110 Gln Gly Thr Leu Val 115 Thr Val Ser Ser
<210> 119 <211> 124 <212> PRT <213> Horao sapiens
<400> 119
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Gln Trp Tyr 20 25 30 Pro Met Trp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Leu Ile Glu Gly Gln Gly Asp Arg Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 80 65 70 75 Leu Gln Met Asn Ser 85 Leu Arg Ala Glu Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr 95 Cys Ala Lys Ala Gly Asp Arg Thr Ala Gly Ser Arg Gly Asn Ser Phe Asp 100 105 110 Tyr Trp Gly 115 Gln Gly Thr Leu Val Thr 120 Val Ser Ser
<210> 120 <211> 121 <212> PRT
<213> Homo sapiens <4 00> 120
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu 20 Ser Cys Ala Ala Ser 25 Gly Phe Thr Phe Lys 30 Ala Tyr Glu Met Gly Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Gly 50 Ile Ser Pro Asn Gly Gly 55 Trp Thr Tyr Tyr 60 Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 80 65 70 75 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Glu Ser 100 Ile Ser Pro Thr Pro 105 Leu Gly Phe Asp Tyr 110 Trp Gly Gln Gly Thr 115 Leu Val Thr Val Ser 120 Ser
<210> 121 <211> 116 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 121
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Thr Gly Tyr
25 30
Glu Met Gly Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
40 45
Ser Tyr Ile Ser Arg Gly Gly Arg Trp Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Ser Asp Thr Met Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
100 105 HO
Thr Val Ser Ser 115 <210> 122 <211> 116 <212> PRT <213> Homo sapiens
<4 0 0 > 122
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ala Tyr 20 25 30 Glu Met Gly Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Phe Ile Ser Gly Gly Gly Arg Trp Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser 85 Leu Arg Ala Glu Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr 95 Cys Ala Lys Tyr Ser 100 Glu Asp Phe Asp Tyr 105 Trp Gly Gln Gly Thr 110 Leu Val Thr Val Ser 115 Ser
<210> 123 <211> 116 <212> PRT
<213> Homo sapiens <4 00> 123
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Gly Ala Tyr 20 25 30 Pro Met Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Glu Ile Ser Pro Ser Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Asp Pro 100 Arg Lys Phe Asp Tyr 105 Trp Gly Gln Gly Thr 110 Leu Val Thr Val Ser 115 Ser
<210> 124 <211> 123 <212> PRT <213> Homo sapiens
<4 00> 124
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly
1 5
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala 20
Lys Met Gly Trp Val Arg Gln Ala
40
Ser Ser Ile Ser Ser Val Gly Asp 50 55
Gly Gly 10 Leu Val Gln Pro Gly 15 Gly Ser Gly Phe Thr Phe Gln Phe Tyr 30 Pro Gly Lys Gly Leu 45 Ala Glu Trp Val Ala Thr Tyr Tyr Asp Ser Val
60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg 65 70 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala 85 Ala Lys Met Gly Gly Gly Pro Pro 100 Trp Gly Gln 115 Gly Thr Leu Val Thr 120
Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
75 80
Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
90 95
Thr Tyr Val Val Tyr Phe Asp Tyr 105 HO
Val Ser Ser
<210> 125 <211> 123 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 125
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Gly Glu Tyr 20 25 30 Gly Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Ser Ile Ser Glu Arg Gly Arg Leu Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 80 65 70 75 Leu Gln Met Asn Asn Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Ser Ala Leu Ser Ser Glu Gly Phe Ser Arg Ser Phe Asp Tyr 100 105 110 Trp Gly Gln 115 Gly Thr Leu Val Thr 120 Val Ser Ser
<210> 126 <211> 123 <212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 126 Glu Val Gln Leu 1
Ser Leu Arg Leu
20
Ala Met Tyr Trp
35
Ser Ser Ile Thr
50
Lys Gly Arg Phe 65
Leu Gln Met Asn
Ala Lys Ser Gly
100
Trp Gly Gln Gly 115
Leu Glu Ser Gly 5
Ser Cys Ala Ala
Val Arg Gln Ala
40
Ala Arg Gly Phe 55
Thr Ile Ser Arg 70
Ser Leu Arg Ala 85
Phe Pro His Lys
Thr Leu Val Thr 120
Gly Gly Leu Val 10
Ser Gly Phe Thr 25
Pro Gly Lys Gly
Ile Thr Tyr Tyr
60
Asp Asn Ser Lys
75
Glu Asp Thr Ala 90
Ser Gly Ser Asn 105
Val Ser Ser
Gln Pro Gly Gly
15
Phe Ser Asp Tyr 30
Leu Glu Trp Val 45
Ala Asp Ser Val
Asn Thr Leu Tyr
80
Val Tyr Tyr Cys 95
Tyr Phe Asp Tyr
110
<210> 127 <211> 116 <212> PRT
<213> Homo sapiens <4 00> 127 Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg Leu Tyr 20 25 30 Asp Met Met 35 Trp Val Arg Gln Ala 40 Pro Gly Lys Gly Leu 45 Glu Trp Val Ser Phe Ile Gly Gly Asp Gly Leu Asn Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 80 65 70 75 Leu Gln Met Asn Ser 85 Leu Arg Ala Glu Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr 95 Cys Ala Lys Asp Pro 100 Arg Lys Phe Asp Tyr Trp 105 Gly Gln Gly Thr 110 Leu Val Thr Val Ser 115 Ser
<210> 128 <211> 116 <212> PRT
<213> Homo sapiens <4 00> 128
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu 20 Ser Cys Ala Ala Ser Gly 25 Phe Thr Phe Ser 30 Phe Phe Asp Met Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Phe Ile Gly Gly Asp Gly Leu Asn Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 80 65 70 75 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Ala Gly 100 Thr Gln Phe Asp Tyr Trp 105 Gly Gln Gly Thr 110 Leu Val Thr Val Ser 115 Ser
<210> 129 <211> 116 <212> PRT
<213> Horao sapiens
<400> 129
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu 20 Ser Cys Ala Ala Ser 25 Gly Phe Thr Phe Met 30 Leu Phe Asp Met Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Phe Ile Gly Gly Asp Gly Leu Asn Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 80 65 70 75 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Ala Gly 100 Thr Gln Phe Asp Tyr 105 Trp Gly Gln Gly Thr 110 Leu Val Thr Val Ser Ser 115
<210> 130 <211> 116 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 130
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Pro Leu Tyr 20 25 30 Asp Met Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Phe Ile Gly Gly Asp Gly Leu Asn Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 80 65 70 75 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Ala Gly 100 Thr Gln Phe Asp Tyr 105 Trp Gly Gln Gly Thr 110 Leu Val Thr Val Ser 115 Ser
<210> 131 <211> 116 <212> PRT <213> Homo sapiens
<4 00> 131
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Pro Leu Tyr 20 25 30 Asp Met Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Phe Ile Gly Gly Asp Gly Leu Asn Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 80 65 70 75 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Ala Gly 100 Thr Gln Phe Asp Tyr 105 Trp Gly Gln Gly Thr 110 Leu Val Thr Val Ser 115 Ser
<210> 132 <211> 116 <212> PRT <213> Homo sapiens
<4 00> 132
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly
1 5
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala 20
Asp Met Met Trp Val Arg Gln Ala
Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
15
Ser Gly Phe Thr Phe Gln Tyr Phe 30
Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35
Ser Phe Ile
50
Lys Gly Arg 65
Leu Gln Met
Ala Lys Ala
Thr Val Ser 115
<210> 133 <211> 116 <212> PRT <213> Homo sapiens
<4 00> 133
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe His Leu Tyr 20 25 30 Asp Met Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Phe Ile Gly Gly Asp Gly Leu Asn Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 80 65 70 75 Leu Gln Met Asn Ser 85 Leu Arg Ala Glu Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr 95 Cys Ala Lys Ser Pro 100 Arg Gln Phe Asp Tyr 105 Trp Gly Gln Gly Thr 110 Leu Val Thr Val Ser 115 Ser
<210> 134 <211> 116 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 134
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe His Leu Tyr 20 25 30 Asp Met Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Phe Ile Gly Gly Asp Gly Leu Asn Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 80 65 70 75 Leu Gln Met Asn Ser 85 Leu Arg Ala Glu Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr 95 Cys Ala Lys Asn Pro 100 Arg Gln Phe Asp Tyr 105 Trp Gly Gln Gly Thr 110 Leu Val Thr Val Ser 115 Ser
40
Gly Gly Asp Gly Leu Asn Thr 55
Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn 70
Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp
85 90
Gly Thr Gln Phe Asp Tyr Trp 100 105
Ser
45
Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 60
Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 75 80
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
95
Gly Gln Gly Thr Leu Val 110
<210> 135 <211> 116 <212> PRT
<213> Homo sapiens <4 00> 135
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe His Leu Tyr 20 25 30 Asp Met Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Phe Ile Gly Gly Asp Gly Leu Asn Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser 85 Leu Arg Ala Glu Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 95 Ala Lys Lys Ser 100 Met Gln Phe Asp Tyr 105 Trp Gly Gln Gly Thr 110 Leu Val Thr Val Ser 115 Ser
<210> 136 <211> 116 <212> PRT
<213> Homo sapiens <4 00> 136
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe His Leu Tyr 20 25 30 Asp Met Met 35 Trp Val Arg Gln Ala Pro 40 Gly Lys Gly Leu 45 Glu Trp Val Ser Phe Ile Gly Gly Asp Gly Leu Asn Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 80 65 70 75 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Ser Pro 100 Arg Lys Phe Asp Tyr 105 Trp Gly Gln Gly Thr 110 Leu Val Thr Val Ser 115 Ser
<210> 137 <211> 116 <212> PRT
<213> Homo sapiens <4 00> 137
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe His Leu Tyr 20 25 30 Asp Met Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Phe Ile Gly Gly Asp Gly Leu Asn Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 80 65 70 75 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95
Ala Lys Asp Pro Arg Lys Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
100 105 HO
Thr Val Ser Ser 115
<210> 138 <211> 119 <212> PRT
<213> Homo sapiens
<4 00> 138 Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Tyr Pro Met Trp Trp Val 20 25 30 Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Pro Glu Trp Val Ser Leu Ile Glu Gly 35 40 45 Gln Gly Asp Arg Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr 50 55 60 Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser 65 70 75 80 Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys Ala Gly Asp 85 90 95 Arg Thr Ala Gly Ser Arg Gly Asn Ser Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly 100 105 110 Thr Leu Val 115 Thr Val Ser Ser
<210> 139 <211> 124 <212> PRT <213> Homo sapiens <4 00> 139 Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly 1 5 Ser Leu Arg Leu 9 Π Ser Cys Ala Ala Pro Met Pro ώ υ Trp Val Arg Gln Ala 40 Ser Leu Ile Glu Gly Gln Gly Asp 50 55 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg 65 70 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala 85 Ala Lys Ala Gly Asp Arg Thr Ala 100 Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
115 120
Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
15
Ser Gly Phe Thr Phe Gln Trp Ala 30
Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 45
Arg Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 60
Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
75 80
Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
90 95
Gly Ser Arg Gly Asn Ser Phe Asp 105 HO
Thr Val Ser Ser
<210> 140 <211> 124 <212> PRT <213> Homo sapiens
<4 00> 140
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala 20
His Met Pro Trp Val Arg Gln Ala
40
Ser Leu Ile Glu Gly Gln Gly Asp
50 55
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg 65 70
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala 85
Ala Lys Ala Gly Asp Arg Thr Ala 100
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 115 120
Ser Gly Phe Thr Phe Gln Trp Pro 30
Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 45
Arg Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 60
Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
75 80
Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
90 95
Gly Ser Arg Gly Asn Ser Phe Asp 105 HO
Thr Val Ser Ser
<210> 141 <211> 124 <212> PRT
<213> Homo sapiens <220>
<221> UNSURE <222> 30
<223> Xaa = Qualquer aminoácido
<400> 141
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Xaa Trp Pro 20 25 30 His Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Leu Ile Glu Gly Gln Gly Asp Arg Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Ala Gly Asp Arg Thr Ala Gly Ser Arg Gly Asn Ser Phe Asp 100 105 110 Tyr Trp Gly 115 Gln Gly Thr Leu Val 120 Thr Val Ser Ser
<210> 142 <211> 124 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 142
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Gln Trp Tyr 20 25 30 Pro Met Trp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Leu Ile Glu Gly Gln Gly Asp Arg Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 80 65 70 75 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95 Ala Lys Ala Gly Asp Arg Trp Val
100
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 115 120
Leu Ser Arg Gly Asn Ser Phe Asp 105 no
Thr Val Ser Ser
<210> 143
<211> 124 <212> PRT
<213> Homo sapiens <4 00> 143
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Gln Trp Tyr
25 30
Pro Met Trp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
40 45
Ser Leu Ile Glu Gly Gln Gly Asp Arg Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Ala Gly Asp Arg Arg Phe Leu Ser Arg Gly Asn Ser Phe Asp
100 105 HO
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120
<210> 144 <211> 124 <212> PRT <213> Homo sapiens
<400> 144
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1S 10 I5
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Gln Trp Tyr
25 30
Pro Met Trp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
40 45
Ser Leu Ile Glu Gly Gln Gly Asp Arg Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Ala Gly Asp Arg His Arg Thr Ser Arg Gly Asn Ser Phe Asp
100 105 HO
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120
<210> 145 <211> 124 <212> PRT <213> Homo sapiens
<400> 145
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1S 10 I5
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Gln Trp Tyr 20 25 30 Pro Met Trp 35 Trp Val Arg Gln Ala 40 Pro Gly Lys Gly Leu 45 Glu Trp Val Ser Leu 50 Ile Glu Val Gln Gly Asp 55 Arg Thr Tyr Tyr 60 Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser 85 Leu Arg Ala Glu Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr 95 Cys Ala Lys Ala Gly Pro Pro Phe Ala Gly Ser Arg Gly Asn Ser Phe Asp 100 105 110 Tyr Trp Gly 115 Gln Gly Thr Leu Val 120 Thr Val Ser Ser
<210> 146 <211> 124 <212> PRT
<213> Homo sapiens <4 00> 146
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu 20 Ser Cys Ala Ala Ser 25 Gly Phe Thr Phe Gln 30 Trp Tyr Pro Met Trp 35 Trp Val Arg Gln Ala 40 Pro Gly Lys Gly Leu 45 Glu Trp Val Ser Leu Ile Glu Gly Gln Gly Asp Arg Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser 85 Leu Arg Ala Glu Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr 95 Cys Ala Lys Ala Gly Thr Asn Asn Ala Gly Ser Arg Gly Asn Ser Phe Asp 100 105 110 Tyr Trp Gly 115 Gln Gly Thr Leu Val 120 Thr Val Ser Ser
<210> 147 <211> 124 <212> PRT
<213> Homo sapiens <4 00> 147
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu 20 Ser Cys Ala Ala Ser 25 Gly Phe Thr Phe Gln 30 Trp Tyr Pro Met Trp 35 Trp Val Arg Gln Ala 40 Pro Gly Lys Gly Leu 45 Glu Trp Val Ser Leu Ile Glu Gly Gln Gly Asp Arg Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser 85 Leu Arg Ala Glu Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr 95 Cys Ala Lys Ala Gly 100 Asp Arg Thr Ala Gln 105 Asn Ser Gly Asn Ser 110 Phe Asp Tyr Trp Gly 115 Arg Gly Thr Leu Val 120 Thr Val Ser Ser <210> 148 <211> 124 <212> PRT <213> Horao sapiens
<400> 148
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Gln Trp Tyr 20 25 30 Pro Met Trp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Leu Ile Glu Gly Gln Gly Asp Arg Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 80 65 70 75 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Ala Gly Asn Ser Asn Ala Gly Ser Arg Gly Asn Ser Phe Asp 100 105 110 Tyr Trp Gly 115 Gln Gly Thr Leu Val 120 Thr Val Ser Ser
<210> 149 <211> 116 <212> PRT <213> Homo sapiens
< 4 0 0 > 149
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Pro Ala Tyr
25 30
Pro Met Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
40 45
Ser Glu Ile Ser Pro Ser Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Asp Pro Arg Lys Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
100 105 HO
Thr Val Ser Ser 115
<210> 150 <211> 116 <212> PRT
<213> Homo sapiens
< 4 0 0 > 150
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly
1 5
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala 20
Pro Ile Met Trp Val Arg Gln Ala
40
Ser Glu Ile Ser Pro Ser Gly Ser
50 55
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg
Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
15
Ser Gly Phe Thr Phe Lys Ala Tyr 30
Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 45
Tyr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 60
Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Asp Pro Arg Lys Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser 115
<210> 151 <211> 114 <212> PRT
<213> Homo sapiens
<4 00> 151
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Thr Ala Tyr 20 25 30 Pro Met Met 35 Trp Val Arg Gln Ala 40 Pro Gly Lys Gly Leu 45 Glu Trp Val Ser Glu 50 Ile Ser Pro Ser Gly Ser 55 Tyr Thr Tyr Tyr 60 Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 80 65 70 75 Leu Gln Met Asn Ser 85 Leu Arg Ala Glu Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr 95 Cys Ala Lys Asp Pro 100 Arg Lys Phe Asp Tyr 105 Trp Gly Gln Gly Thr 110 Leu Val Thr Val
<210> 152 <211> 116 <212> PRT
<213> Homo sapiens <4 00> 152
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Gly Trp Tyr 20 25 30 Pro Met Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Glu Ile Ser Pro Ser Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 80 65 70 75 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Asp Pro 100 Arg Lys Phe Asp Tyr 105 Trp Gly Gln Gly Thr 110 Leu Val Thr Val Ser 115 Ser
<210> 153
<211> 114 <212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 153 Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Gly Leu Tyr 20 25 30 Pro Met Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Glu 50 Ile Ser Pro Ser Gly 55 Ser Tyr Thr Tyr Tyr 60 Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Asp Pro 100 Arg Lys Phe Asp Tyr 105 Trp Gly Gln Gly Thr 110 Leu Val Thr Val
<210> 154 <211> 116 <212> PRT <213> Homo sapiens
<4 00> 154
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Leu Ala Tyr 20 25 30 Pro Met Met 35 Trp Val Arg Gln Ala 40 Pro Gly Lys Gly Leu 45 Glu Trp Val Ser Glu Ile Ser Pro Ser Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 80 65 70 75 Leu Gln Met Asn Ser 85 Leu Arg Ala Glu Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr 95 Cys Ala Lys Asp Pro Arg Lys Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 100 105 110 Thr Val Ser 115 Ser
<210> 155 <211> 116 <212> PRT <213> Homo sapiens
<400> 155
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Gly Arg Tyr 20 25 30 Pro Met Met 35 Trp Val Arg Gln Ala 40 Pro Gly Lys Gly Leu 45 Glu Trp Val Ser Glu 50 Ile Ser Pro Ser Gly 55 Ser Tyr Thr Tyr Tyr 60 Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 80 65 70 75 Leu Gln Met Asn Ser 85 Leu Arg Ala Glu Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr 95 Cys Ala Lys Asp Pro 100 Arg Lys Phe Asp Tyr 105 Trp Gly Gln Gly Thr 110 Leu Val Thr Val Ser Ser 115
<210> 156 <211> 116 <212> PRT
<213> Horao sapiens <4 00> 156
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Gly Ala Phe 20 25 30 Pro Met Met 35 Trp Val Arg Gln Ala 40 Pro Gly Lys Gly Leu 45 Glu Trp Val Ser Glu 50 Ile Ser Pro Ser Gly 55 Ser Tyr Thr Tyr Tyr 60 Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser 85 Leu Arg Ala Glu Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr 95 Cys Ala Lys Asp Pro 100 Arg Lys Phe Asp Tyr 105 Trp Gly Gln Gly Thr 110 Leu Val Thr Val Ser 115 Ser
<210> 157 <211> 116 <212> PRT
<213> Homo sapiens
<4 00> 157 Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Gly Ala Tyr 20 25 30 Pro Met Leu Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Glu 50 Ile Ser Pro Ser Gly 55 Ser Tyr Thr Tyr Tyr 60 Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Asp Pro Arg Lys Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 100 105 110 Thr Val Ser 115 Ser
<210> 158 <211> 116 <212> PRT
<213> Horao sapiens <4 00> 158
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Leu Phe
25 30
Pro Met Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 40 45 Ser Glu 50 Ile Ser Pro Ser Gly 55 Ser Tyr Thr Tyr Tyr 60 Ala Asp Ser Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu 65 70 75 Leu Gln Met Asn Ser 85 Leu Arg Ala Glu Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr 95 Ala Lys Asp Pro 100 Arg Lys Phe Asp Tyr 105 Trp Gly Gln Gly Thr 110 Leu Thr Val Ser 115 Ser
<210> 159
<211> 116 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 159
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu 20 Ser Cys Ala Ala Ser 25 Gly Phe Thr Phe Phe 30 Leu Phe Pro Met Met 35 Trp Val Arg Gln Ala Pro 40 Gly Lys Gly Leu 45 Glu Trp Val Ser Glu 50 Ile Ser Pro Ser Gly 55 Ser Tyr Thr Tyr Tyr 60 Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser 85 Leu Arg Ala Glu Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr 95 Cys Ala Lys Asp Pro Arg Lys Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 100 105 110 Thr Val Ser 115 Ser
<210> 160 <211> 116 <212> PRT
<213> Homo sapiens <4 00> 160
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu 20 Ser Cys Ala Ala Ser 25 Gly Phe Thr Phe Ser 30 Tyr Phe Pro Met Met 35 Trp Val Arg Gln Ala Pro 40 Gly Lys Gly Leu 45 Glu Trp Val Ser Glu 50 Ile Ser Pro Ser Gly 55 Ser Tyr Thr Tyr Tyr 60 Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser 85 Leu Arg Ala Glu Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr 95 Cys Ala Lys Asp Pro Arg Lys Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 100 105 110 Thr Val Ser 115 Ser
<210> 161 <211> 116 <212> PRT <213> Homo sapiens <4 00> 161
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu 20 Ser Cys Ala Ala Ser 25 Gly Phe Thr Phe Ala 30 Phe Ala Pro Met Met 35 Trp Val Arg Gln Ala 40 Pro Gly Lys Gly Leu 45 Glu Trp Val Ser Glu 50 Ile Ser Pro Ser Gly 55 Ser Tyr Thr Tyr Tyr 60 Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser 85 Leu Arg Ala Glu Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr 95 Cys Ala Lys Asp Pro 100 Arg Lys Phe Asp Tyr 105 Trp Gly Gln Gly Thr 110 Leu Val Thr Val Ser 115 Ser
<210> 162 <211> 116 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 162
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu 20 Ser Cys Ala Ala Ser 25 Gly Phe Thr Phe Ala 30 Pro Tyr Pro Met Met 35 Trp Val Arg Gln Ala 40 Pro Gly Lys Gly Leu 45 Glu Trp Val Ser Glu 50 Ile Ser Pro Ser Gly 55 Ser Tyr Thr Tyr Tyr 60 Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser 85 Leu Arg Ala Glu Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr 95 Cys Ala Lys Asp Pro 100 Arg Lys Phe Asp Tyr 105 Trp Gly Gln Gly Thr 110 Leu Val Thr Val Ser 115 Ser
<210> 163 <211> 116 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 163
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Thr Ser His 20 25 30 Pro Met Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Glu Ile Ser Pro Ser Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95 Ala Lys Asp Pro Arg Lys Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
100 105 no
Thr Val Ser Ser 115
<210> 164 <211> 116 <212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 164
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu 20 Ser Cys Ala Ala Ser 25 Gly Phe Thr Phe Thr 30 Ser His Pro Met Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Glu Ile Ser Pro Ser Gly Ser Tyr- Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Ala Leu Tyr 80 65 70 75 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Asp Pro Arg Lys Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 100 105 110 Thr Val Ser 115 Ser
<210> 165 <211> 116 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 165
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1S 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe His Ala Tyr
25 30
Pro Met Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
40 45
Ser Glu Ile Ser Pro Ser Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Asp Pro Arg Lys Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
100 105 HO
Thr Val Ser Ser 115
<210> 166 <211> 116 <212> PRT
<213> Homo sapiens <4 00> 166
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1S 10 I5
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg Ala Tyr 25 30
Pro Met Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Glu Ile Ser Pro Ser Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 80 65 70 75 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Lys Asp Pro Arg Lys Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 100 105 110 Thr Val Ser 115 Ser
<210> 167 <211> 116 <212> PRT <213> Homo sapiens <4 00> 167 Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly 1 5 Ser Leu Arg Leu 9 η Ser Cys Ala Ala Pro Met Met U . Trp Val Arg Gln Ala 35 40 Ser Glu Ile Ser Pro Ser Gly Ser 50 55 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg 65 70 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala 85 Ala Lys Asp Pro Arg Lys Phe Asp 100 Thr Val Ser Ser 115
Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
15
Ser Gly Phe Thr Phe Leu Ala Tyr 30
Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 45
Tyr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 60
Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
75 80
Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
90 95
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Vál 105 no
<210> 168 <211> 116 <212> PRT <213> Homo sapiens
<4 00> 168
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly 1 5 Ser Leu Arg Leu 20 Ser Cys Ala Ala Pro Met Met 35 Trp Val Arg Gln Ala 40 Ser Glu 50 Ile Ser Pro Ser Gly 55 Ser Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg 65 70 Leu Gln Met Asn Ser 85 Leu Arg Ala Ala Lys Asp Pro 100 Arg Lys Phe Asp Thr Val Ser 115 Ser
Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
15
Ser Gly Phe Thr Phe Leu Ala Tyr 30
Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 45
Tyr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 60
Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
75 80
Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
90 95
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 105 no <210> 169 <211> 116
<212> PRT
<213> Horao sapiens
<400> 169 Glu Val Gln Gln Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Glv 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Trp Ala Tyr 20 25 30 Pro Met Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Glu Ile Ser Pro Ser Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 80 65 70 75 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Asp Pro Arg Lys Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 100 105 110 Thr Val Ser 115 Ser
<210> 170 <211> 114 <212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 170
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
10 I5
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Gln Ala Tvr
25 30
Pro Met Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
40 45
Ser Glu Ile Ser Pro Ser Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Asp Pro Arg Lys Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 100 105 no
Thr Val
<210> 171 <211> 116 <212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 171 Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly 1 5 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala 20 Pro Met Met Trp Val Arg Gln Ala 35 40 Ser Glu Ile Ser Pro Ser Gly Ser 50 55 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg
Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
15
Ser Gly Phe Thr Phe Gly His Tyr
30
Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 45
Tyr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 60
Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65
Leu Gln Met Asn
Ala Lys Asp Pro
100
Thr Val Ser Ser 115
70
Ser Leu Arg Ala 85
Arg Lys Phe Asp
75
Glu Asp Thr Ala 90
Tyr Trp Gly Gln 105
80
Val Tyr Tyr Cys
95
Gly Thr Leu Val 110
<210> 172 <211> 116 <212> PRT
<213> Homo sapiens
<4 00> 172 Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly 1 5 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala 20 Pro Met Met Trp Val Arg Gln Ala 35 40 Ser Glu Ile Ser Pro Ser Gly Ser 50 55 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg 65 70 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala 85 Ala Lys Asp Pro Arg Lys Phe Asp 100 Thr Val Ser Ser
115
Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
I5
Ser Gly Phe Thr Phe Gly Leu Tyr 30
Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 45
Tyr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 60
Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
75 80
Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
90 95
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 105 no
<210> 173 <211> 116 <212> PRT
<213> Homo sapiens
<4 00> 173
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1S 10 I5
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Gly Trp Tyr
25 30
Pro Met Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
40 45
Ser Glu Ile Ser Pro Ser Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Asp Pro Arg Lys Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
100 105 no
Thr Val Ser Ser 115
<210> 174 <211> 116 <212> PRT
<213> Homo sapiens
<4 00> 174 Glu Val 1
Ser Leu
Pro Met
Ser Glu
50 Lys Gly 65
Leu Gln Ala Lys Thr Val
Gln Leu Leu
5
Arg Leu Ser 20
Met Trp Val 35
Ile Ser Pro Arg Phe Thr
Met Asn Ser
85
Asp Pro Arg 100 Ser Ser 115
Glu Ser Gly Cys Ala Ala
Arg Gln Ala
40
Ser Gly Ser 55
Ile Ser Arg
70
Leu Arg Ala Lys Phe Asp
Gly Gly 10
Ser Gly 25
Pro Gly
Tyr Thr
Asp Asn
Glu Asp 90
Tyr Trp 105
Leu Val Gln Pro Phe Thr
Lys Gly
Tyr Tyr
60
Ser Lys 75
Thr Ala Gly Gln
Phe Gly
30 Leu Glu 45
Ala Asp
Asn Thr
Val Tyr
Gly Thr 110
Gly Gly 15
Ala Phe
Trp Val
Ser Val
Leu Tyr 80 Tyr Cys 95
Leu Val
<210> 175 <211> 116 <212> PRT
<213> Homo sapiens <4 00> 175
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Lys Ala Tyr 20 25 30 Pro Ile Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Glu Ile Ser Pro Ser Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 80 65 70 75 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Asp Pro Arg Ala Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 100 105 110 Thr Val Ser 115 Ser
<210> 176 <211> 116 <212> PRT
<213> Homo sapiens <4 00> 176
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Lys Ala Tyr 20 25 30 Pro Ile Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Glu Ile Ser Pro Ser Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 80 65 70 75 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Ser Pro 100 Arg Lys Phe Asp Tyr 105 Trp Gly Gln Gly Thr 110 Leu Val
Thr Val Ser Ser
115 <210> 177 <211> 116 <212> PRT
<213> Homo sapiens <4 0 0> 177
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
I5
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Lvs Ala Tvr
25 30
Pro Ile Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
40 45
Ser Glu Ile Ser Pro Ser Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Thr Pro Arg Lys Phe Asp Tyr Trp Gly Arg Gly Thr Leu Val
100 105 HO
Thr Val Ser Ser 115
<210> 178 <211> 116 <212> PRT <213> Homo sapiens
<400> 178
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
10 I5
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Lys Ala Tyr
25 30
Pro Ile Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
40 45
Ser Glu Ile Ser Pro Ser Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
5O 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 7O 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Asp Pro Arg Glu Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
100 105 HO
Thr Val Ser Ser 115
<210> 179
<211> 116
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<40 0> 179
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1S 10 I5
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Lys Ala Tvr
25 30
Pro Ile Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
40 45
Ser Glu Ile Ser Pro Ser Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Asp Pro Arg Arg Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
100 105 no
Thr Val Ser Ser 115
<210> 180 <211> 116 <212> PRT <213> Homo sapiens
<4 00> 180
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly 1 5 Ser Leu Arg Leu 20 Ser Cys Ala Ala Pro Ile Met 35 Trp Val Arg Gln Ala 40 Ser Glu 50 Ile Ser Pro Ser Gly 55 Ser Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg 65 70 Leu Gln Met Asn Ser 85 Leu Arg Ala Ala Lys Asp Pro 100 Arg Phe Phe Asp Thr Val Ser 115 Ser
Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
15
Ser Gly Phe Thr Phe Lys Ala Tyr 30
Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 45
Tyr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 60
Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
75 80
Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
90 95
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 105 HO
<210> 181 <211> 116 <212> PRT
<213> Homo sapiens
<4 00> 181
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Lys Ala Tyr 20 25 30 Pro Ile Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Glu Ile Ser Pro Ser Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 80 65 70 75 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Thr Pro 100 Ile Lys Phe Asp Tyr 105 Trp Gly Gln Gly Thr 110 Leu Val
Thr Val Ser Ser
115
<210> 182 <211> 116 <212> PRT <213> Homo sapiens <4 00> 182 Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Lys Ala Tyr 20 25 30 Pro Ile Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Glu Ile Ser Pro Ser Gly Ser His Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 80 65 70 75 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Asp Phe Ser Gln Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 100 105 110 Thr Val Ser 115 Ser
<210> 183 <211> 116 <212> PRT <213> Homo sapiens <4 00> 183 Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly 1 5 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala 20 Pro Ile Leu Trp Val Arg Gln Ala 35 40 Ser Glu Ile Ser Pro Ser Gly Ser 50 55 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg 65 70 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Ala Lys Asp Pro O O Arg Lys Phe Asp 100 Thr Val Ser Ser
115
Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
15
Ser Gly Phe Thr Phe Lys Ala Tyr 30
Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 45
Tyr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 60
Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
75 80
Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
90 95
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 105 HO
<210> 184 <211> 116 <212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 184
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Lys Ala Tyr 20 25 30 Pro Ile Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Glu Ile Ser Pro Ser Gly Lys Met Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 80 65 70 75 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Thr Pro Arg Lys Phe Asp Tyr Trp Gly Arg Gly Thr Leu Val 100 105 110
Thr Val Ser Ser 115
<210> 185 <211> 116 <212> PRT
<213> Homo sapiens
<4 00> 185
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Lys Ala Tyr
25 30
Pro Ile Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
40 45
Ser Glu Ile Ser Pro Thr Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Ser Pro Arg Lys Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
100 105 HO
Thr Val Ser Ser 115
<210> 186 <211> 116 <212> PRT
<213> Homo sapiens
<4 00> 186 Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Lys Ala Tyr 20 25 30 Pro Ile Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Glu 50 Ile Ser Pro Ser Gly 55 Ser Tyr Thr Tyr Tyr 60 Ala Asn Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Asp Pro Arg Ala Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 100 105 110 Thr Val Ser Ser
115
<210> 187 <211> 116 <212> PRT
<213> Homo sapiens
<4 00> 187
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly
1 5
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala 20
Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
15
Ser Gly Phe Thr Phe Lys Ala Tyr 30 Pro Ile Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Glu Ile Ser Pro Ser Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 80 65 70 75 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Thr Pro Arg Lys Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 100 105 110
Thr Val Ser Ser
115
<210> 188 <211> 116 <212> PRT <213> Homo sapiens <4 00> 188 Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly 1 5 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala 20 Pro Ile Met Trp Val Arg Gln Ala 35 40 Ser Glu Ile Ser Pro Ser Gly Gln 50 55 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg 65 70 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala 85 Ala Lys Asp Pro Arg Glu Phe Asp 100 Thr Val Ser Ser
115
Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
15
Ser Gly Phe Thr Phe Lys Ala Tyr 30
Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 45
Met Arg Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 60
Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
75 80
Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
90 95
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 105 HO
<210> 189 <211> 116 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 189 Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly 1 5 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala 20 Pro Ile Met Trp Val Arg Gln Ala 35 40 Ser Glu Ile Ser Pro Ser Gly Arg 50 55 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg 65 70 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala 85 Ala Lys Asp Pro Arg Glu Phe Asp 100 Thr Val Ser Ser
115
Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
15
Ser Gly Phe Thr Phe Lys Ala Tyr 30
Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 45
Ser Arg Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
60
Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
75 80
Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
90 95
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 105 HO
<210> 190 <211> 116 <212> PRT <213> Homo sapiens
<400> 190
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Lys Ala Tyr 20 25 30 Pro Ile Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Glu Ile Ser Pro Ser Gly Arg Tyr Ser Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Asp Pro 100 Arg Arg Phe Asp Tyr 105 Trp Gly Gln Gly Thr 110 Leu Val Thr Val Ser 115 Ser
<210> 191 <211> 116 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 191
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Lys Ala Tyr 20 25 30 Pro Ile Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Glu Ile Ser Pro Ser Gly Glu Ala Arg Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Asp Pro 100 Arg Ala Phe Asp Tyr 105 Trp Gly Gln Gly Thr 110 Leu Val Thr Val Ser 115 Ser
<210> 192 <211> 116 <212> PRT
<213> Homo sapiens <4 00> 192
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly
1 5
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala 20
Pro Ile Met Trp Val Arg Gln Ala
40
Ser Glu Ile Ser Pro Ser Gly Glu
50 55
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg 65 70
Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
15
Ser Gly Phe Thr Phe Arg Ala Tyr 30
Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 45
Lys Arg Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 60
Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 75 80 Leu Gln Met
Ala Lys Asp
Thr Val Ser 115
<210> 193 <211> 116 <212> PRT <213> Homo sapiens
<4 00> 193
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Lys Ala Tyr 20 25 30 Pro Ile Met 35 Trp Val Arg Gln Ala 40 Pro Gly Lys Gly Leu 45 Glu Trp Val Ser Glu Ile Ser Pro Ser Gly Glu Glu Glu Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 80 65 70 75 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Asp Pro 100 Arg Ala Phe Asp Tyr 105 Trp Gly Gln Gly Thr 110 Leu Val Thr Val Ser 115 Ser
<210> 194 <211> 116 <212> PRT
<213> Homo sapiens <4 00> 194
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Lys Ala Tyr 20 25 30 Pro Ile Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Glu Ile Ser Pro Ser Gly Lys Lys Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Gln Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 80 65 70 75 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Asp Pro 100 Arg Ala Phe Asp Tyr 105 Trp Gly Gln Gly Thr 110 Leu Val Thr Val Ser 115 Ser
<210> 195 <211> 116 <212> PRT <213> Homo sapiens
Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Pro Arg Ala Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 100 105 HO
Ser
<400> 195
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Lys Ala Tyr 20 25 30 Pro Ile Met 35 Trp Val Arg Gln Ala 40 Pro Gly Lys Gly Leu 45 Glu Trp Val Ser Glu Ile Ser Pro Ser Gly Lys Lys Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 80 65 70 75 Leu Gln Met Asn Ser 85 Leu Arg Ala Glu Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr 95 Cys Ala Lys Asp Pro 100 Arg Ala Phe Asp Tyr 105 Trp Gly Gln Gly Thr 110 Leu Val Thr Val Ser 115 Ser
<210> 196 <211> 116 <212> PRT
<213> Homo sapiens < 4 0 0 > 196
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu 20 Ser Cys Ala Ala Ser 25 Gly Phe Thr Phe Lys 30 Ala Tyr Pro Ile Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Glu 50 Ile Ser Pro Ser Gly Gly 55 Tyr Thr Tyr Tyr 60 Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 80 65 70 75 Leu Gln Met Asn Ser 85 Leu Arg Ala Glu Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr 95 Cys Ala Lys Asp Pro 100 Arg Lys Phe Asp Tyr 105 Trp Gly Gln Gly Thr 110 Leu Val Thr Val Ser 115 Ser
<210> 197 <211> 116 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 197
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu 20 Ser Cys Ala Ala Ser 25 Gly Phe Thr Phe Lys 30 Ala Tyr Pro Ile Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Glu 50 Ile Ser Pro Ser Gly 55 Ser Tyr Thr Tyr Tyr 60 Ala Asp Glu Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 80 65 70 75 Leu Gln Met Asn Ser 85 Leu Arg Ala Glu Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr 95 Cys Ala Lys Asp Pro 100 Arg Lys Phe Asp Tyr 105 Trp Gly Gln Gly Thr 110 Leu Val Thr Val Ser 115 Ser <210> 198 <211> 116 <212> PRT <213> Homo sapiens
<4 00> 198
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu 20 Ser Cys Ala Ala Ser 25 Gly Phe Thr Phe Lys 30 Ala Tyr Pro Ile Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Glu 50 Ile Ser Pro Ser Gly 55 His Asn Lys Tyr Tyr 60 Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser 85 Leu Arg Ala Glu Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr 95 Cys Ala Lys Asp Pro 100 Arg Arg Phe Asp Tyr 105 Trp Gly Gln Gly Thr 110 Leu Val
Thr Val Ser Ser
115
<210> 199 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
< 4 0 0 > 199
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc
atcacttgcc gggcaagtca gtatattggt
gggaaagccc ctaagctcct gatctattgg
cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat
gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag
gggaccaagg tggagatcaa acgggc
<210> 200
<211> 326
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 200
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc
atcacttgcc gggcaagtca gtatattggt
gggaaagccc ctaagctcct gatctattgg
cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat
gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag
gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 201 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 201
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca ggatattttt gggaaagccc ctacgctcct gatctattct cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 gcggagttat cctggtacca gcagaaacca 120 atttccgagt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 tctagtaata ctccttatac gttcggccaa 300
326
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 attaatttaa tttggtacca gcagaaacca 120 gcttccgttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 tcggtgtatg atcctcctac gtacggccaa 300
326
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 tggttgttat cttggtacca gcagaaacca 120 acttccattt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 tattatcttg atcctcctac gttcagccaa 300 gggaccaagg tggaaatcaa acgggc 326
<210> 202 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 202
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtttattggt gggaaagccc ctaggctcct gatctatttg cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 203 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 gttaatttaa attggtacca gcagaaacca 120 tcgtccattc tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 acttatgata ttcctactac gttcggccaa 300
326
<400> 203
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gaacattggt aggaaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 204 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 attaatttgc agtggtatca gcagaaacca 120 gcttccattt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gattatgata ctccttttac gttcggccaa 300
326
<4 00> 204
gacatccaga tgacccagtt tccatcctcc atcacttgcc gggcgagtca gcatattgag gggaaagccc ctaagctcct gatctatcgt cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 205 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 aggtggttaa attggtatca gcagaaacca 120 tcgtcctatt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 24 0 gatgctattc ttcctcatac gttcggccaa 300
326
<400> 205
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca ggggattggg gggaaagccc ctaagctcct gatctatttt cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 206 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 gtgaatttac agtggtacca gcagaaacca 120 agttccgtgt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gattttgatt ttcctcagac gttcggccaa 300
326
<400> 206
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gaatattggt
aggaaagccc ctaagctcct gatctattat
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 attaatttgc agtggtatca gcagaaacca 120 gcttccattt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 207 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gagtatgatt atcctaatac gttcggccaa 300
326
<400> 207
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtag tagtattggg gggaaagccc ctaagctcct gatcgttggg cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcggcag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 208 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 tcggggttag agtggtacca gcagaaacca 120 tggtccgggt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 tgtgtgggtt tgccttgtac gttcggccaa 300
326
<400> 208
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggg gggaaagccc ctaagctcct gatctattgg cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 209 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 gtggagttaa gttggtatca gcagaaacca 120 ggttccgagt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 ttggcgttac ctccttttac gttcggccaa 300
326
<400> 209
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca tgatattggg gggaaagccc ctaagctcct gatcgtgtgg cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtctgcag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 210 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 gtgagtttag attggtacca gcagaaacca 120 gcgtccgtgt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gtgggtgctg ggcctatgac gttcggccaa 300
326
<400> 210
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cggtgtcacc 60 atcacttgcc gggcaagtca gtatattggt attgatttag cgtggtacca gcggaaacca 120 gggaaagccc ctaggctcct gatctataag gcttccgctt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag tatgcggatt atcctgctac gttcggccaa 300 gggaccaagg tggaaatcaa acgggc 326
<210> 211 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 211
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 atcacttgcc gggcaagtca ggagattgag gggaaagccc ctaagctcct gatctatctt cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 212 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
cattatttat cttggtacca gcagaaacca 120 tcgtcccgtt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaaccc 240 aatgtgcagc tgcctattac gttcggccaa 300
326
<400> 212
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca ggagattggt gggaaagccc ctaagctcct gatctattgg cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 213 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 gttagtttat cgtggtacca gcagaaacca 120 ggttccgagt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gatcataatt ggcctatgac gttcggccaa 300
326
<400> 213
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 atcacttgcc gggcaagtgc tcttattatg ggggatttag attggtacca gcagaaacca 120
gggaaagccc ctaagctcct gatcgcgggt gtgtcctttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180
cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240
gaagattttg ctacgtacta ctgtgctcag tctaggtcgt ggccttatac gttcggccaa 300 gggaccaagg tggaaatcaa acgggc 326
<210> 214 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 214
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtaa gatgattgat gggaaagccc ctaagctcct gatccttcgg cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcatcag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 215 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 gagaatttag cttggtacca gcagaaacca 120 agttccgggt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 ggtcattctg ctcctggtac gttcggccaa 300
326
<400> 215
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtcg gtatattggg gggaaagccc ctaagctcct gatcatgtgg cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtttgcag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 216 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 gtgtctttag attggtacca gcagaaacca 120 ggttccgcgt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 tctgcggcgc cgcctgcgac gttcggccaa 300
326 <400> 216
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca ggagattggt gggaaagccc ctaagctcct gatctattgg cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 217 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 gtgagtttaa gttggtacca gcagaaacca 120 gcgtccgcgt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 tcttatttgc ctcctgatac gttcggccaa 300
326
< 4 0 0 > 217
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca ggagattgct gggaaagccc ctaagctcct gatctataat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaatgg gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 218 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 agtgatttac tttggtatca gcagaaacca 120 gggtcctcgt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag actgcaacct 240 ttgtggagtg agcctttgac gttcggccaa 300
326
<400> 218
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gcatattggt gggaaagccc ctaagctcct gatctattgg cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tgaaaatcaa acgggc
<210> 219 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 gatgcgttat ggtggtatca gcagaaacca 120 acttccaatt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 actattcgtc ggccttatac gttcggccaa 300
326
< 4 0 0 > 219
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt ggggaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 220 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 attttgttag attggtacca gcagaaacca 120 gcttcctttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gctaatccgg cgcctctgac gttcggccaa 300
326
<400> 220
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gaatattggt aggaaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 attaatttgc agtggtatca gcagaaacca 120 gcttccattt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 tcttatgatt tgcctaagac gttcggccaa 300
326
<210> 221 <211> 326 <212> DNA <213> Horao sapiens
<400> 221
gacatccaga tgatccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca ggagattggt gggaaagccc ctaagctcct gatctattgg cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg taggaatcaa acgggc
<210> 222 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 gttagtttat cgtggtacca gcagaaacca 120 ggttccgagt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 tggtatggtt ggcctgatac gttcggccaa 300
326
<400> 222
gacatccaga tgacccagtc tccatcttcc atcacttgcc gggcaagtca gcatattggg gggaaagccc ctaagctcct gatctattgg cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagatttcg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 223 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 attgagttaa attggtatca gcagaaacca 120 gcttccgttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 24 0 agtgtttatg ttcctactac gttcggccaa 300
326
<400> 223
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt gggaaagccc ctaagctcct gatctattgg cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcagcag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 224 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 gcggagttag tgtggtatca gcagaaacca 120 agttccgttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 24 0 gctgctcata gtcctcctac gttcggccaa 300
326
<400> 224
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca ggatattagt gggaaagccc ctaggcttct gatctatatg cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 225 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 cgtagtttag cttggtacca gcggaaacca 120 tcttccactt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 tatgattctt atccttcgac gttcggccaa 300
326
<400> 225
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtag gatgattggg gggaaagccc ctaagctcct gatcacgtat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtgctcag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 ggtatgttac tttggtacca gcagaaacca 120 gggtccgtgt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gagttttggt ggcctcatac gttcggccaa 300
326
<210> 226 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 226
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtcg gcctattggg gggaaagccc ctaagctcct gatctcgtgg cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcgtcag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 227 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 gataggttaa cgtggtacca gcagaaacca 120 gtttccgttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 cttgggggtg ggccttttac gttcggccaa 300
326
<400> 227
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtatattggg gggaaagccc ctaagctcct gatctatttt cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 228 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 gtgtcgttaa gttggtacca gcagaaacca 120 gcttccgcgt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gatcgtgatt ggcctgcgac gttcggccaa 300
326
<400> 228
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtgg tgctattggg gggaaagccc ctaagctcct gatctcttgg cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtgtgcag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 229 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 gatcgtttaa agtggtacca gcagaaacca 120 gcgtccgttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gggccggggg tgcctctgac gttcggccaa 300
326
<400> 229
gacatccaga tgactcagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gccgattgct gggaaagccc ctaagctcct gatctatggt cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 230 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtccgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 cgttggttag cttggtacca gcagaaacca 120 tcttccgttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gatttgaggt tgcctccgac gttcggccaa 300
326
<400> 230
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gaatattggt gggaaagccc ctaggctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 gtgtcgttat cgtggtacca gcagaaacca 120 gggtccaatt tgctaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gagttttcgt ggcctgtgac gttcggccaa 300
326 <210> 231 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 231
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtct tccgattgat gggaaagccc ctaagctcct gatctgtggg cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtggtcag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 232 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 gatggtttag gttggtacca gcagaaacca 120 gtgtccggtt tgcaaagtgg ggtcccatta 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gggcaggttc agcctagtac gttcggccaa 300
326
<400> 232
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gaatattggt aggaaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 233 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 attaatttgc agtggtatca gcagaaacca 120 gcttccattt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 tcgtatgatg cgcctactac gttcggccaa 300
326
<400> 233
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtctattggg gggaaagccc ctaagctcct gatctatttt cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagactttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 234 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 gttaatttaa tgtggtacca gcagaaacca 120 gcttccattt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 aattatgata ttcctaagac gttcggccaa 300
326
<400> 234
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt gggaaagccc ctaagctcct aatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 235 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 atttctttat cttggtatca gcagaaacca 120 gggtccgtgt tgcaaagtgg ggtcccatcc 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 tctcatgatc ttcctgtgac gtttggccaa 300
326
<400> 235
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt
gggaaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 gttagtttat cttggtatca gcagaaacca 120 gcgtccattt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gagatgtcgt atcctcctac gttcggccaa 300 gggaccaagg tggaaatcaa acgggc 326
<210> 236 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 236
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 atcacttgcc gggcaagcca ggatattggt gttagtttag agtggtatca gcagaaacca 120 gggaaagccc ctaagctcct gatctattgg agttccgctt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gaagatttgg ctacgtacta ctgtcaacag gggcatacgt atcctagtac gttcggccaa 300 gggaccaagg tggaaatcaa acgggc 32 6
<210> 237 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 237
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtatattggt gggaaagccc ctaagctcct gatctattgg cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 238 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 gtttatttaa gttggtatca gcagaaacca 120 gcgtcccttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 actgttaggg atcctattac gttcggccaa 300
326
<400> 238
gacatccaga tgacccagtc tccatccttc atcacttgcc gggcaagtca gtctatttat gggaaagccc ctaagctcct gatctatcgt cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattctg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 239 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 actatgttaa attggtatca gcagaaacca 120 gcttcctatt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgctacct 240 gatttttcgt atcctagtac gttcggccaa 300
326
<400> 239
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60
atcacttgcc gggcaagtca gtatattggg gcgaatttaa gttggtatca gcagaaacca 120
gggaaagccc ctaagctcct gatctattat atttccgttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180
cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240
gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gagctttata ctcctcatac gttcggccaa 300
gggaccaagg tggaaatcaa acgggc 32 6
<210> 240 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 240
gacatccagt tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 atcacttgcc gggcaagtca gtatattggt gtgactttaa tgtggtatca gcagaaacca 120 gggaaagccc ctaagctcct gatctattat gcttcccagt tgcaaagtgg ggtcccatca 180
cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240
gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gaggttagtt atccttatac gttcggccaa 300
gggaccaagg tggaaatcaa acgggc 326
<210> 241 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 241
gacatccaga tgacccagtc tccatcctct ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60
atcacttgcc gggcaagtca gcatattggt gtgagtttaa cttggtacca gcagaaacca 120
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cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240
gaagattatg ctacgtacta ctgtcaacag gatatgtctt atcctcctac gttcggccaa 300
gggaccaagg tgggaatcaa acgggc 326
<210> 242 <211> 326 <212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 242
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 atcacttgcc gggcaagtca ggatattggt atcagtttag agtggtatca gcagaaacca 120 gggaaagccc ctaagctcct gatctatttt gcttcccagt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gtgtatgatt ttcctaatac gttcggccaa 300 gggaccaagg tggaaatcaa acgggc 326
<210> 243 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 243
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60
atcacttgcc gggcaagtca gcatattggt gtgagtttaa attggtatca gcagaaacca 120
gggaaagtcc ctaagctcct gatctattgg gcttccattt tgcaaagtgg ggtcccatca 180
cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240
gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gagcatacta ttccttctac gttcggccaa 300
gggaccaagg tggaaatcaa acgggc 326
<210> 244 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 244
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60
atcacttgcc gggcaagtca gcatattggg gtttcgttag attggtacca gcagaaacca 120
gggaaagccc ctaagctcct gatctattat ggttccgagt tgcaaagtgg ggtcccatca 180
cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240
gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag tatgttactc atcctacgac gttcggccaa 300
gggaccaagg tggaaatcaa acgggc 326
<210> 245 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 245 gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60
atcacttgcc gggcaagtca gaggattggt atgatgttag attggtatca gcagaaacca 120
gggaaagccc ctaagctcct gatctatggg ggttccaagt tgcaaagtgg ggtcccatca 180
cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240
gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacac cggggttggt atcctctgac gttcggccaa 300
gggaccaagg tggaaatcaa acgggc 326
<210> 246 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 246
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcâcc 60
atcacttgcc gggcaagtca gcctattggt gatcgtttaa gttggtacca gcagaaafcca 120
gggaaagccc ctaagctcct gatctatttt tcttccgttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180
cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240
gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag catggtttgc ggcctgatac gttcggdcaa 300 gggaccaagg tggaaatcaa acgggc 326
<210> 247 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 247
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt gggaaagccc ctaagctcct gatctattgg cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaaag tggaaatcaa acgggc
<210> 248 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat cagtaggaga ccgtgtàacc 60 agtagtttaa tgtggtatca gcagaalcca 120 gcttccgagt tgcaaagtgg ggtcccátcg 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcadcct 240 gagtatagtt atcctagtac gttcggccaa 300
326
<400> 248
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca ggatattggt gggaaagccc ctaagctcct gatctatttt cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 249 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 gtttcgttag cttggtacca gcagaaacctf 120 ggttccgtgt cgctaagtgg ggtcccatcá 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 tctcatcttc ctcctactac gttcggccaa 300
326
<400> 249
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggg gggaaagccc ctaagctcct gatctattgg cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 250 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 gtggagttaa attggtatca gcagaaacca 120 acgtccattt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gttattaata gtccctatac gttcggccaa 300
326 <400> 250
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca ggatattggt gggaaagccc ctaagctcct gatcggggcg cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtgttcag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 251 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 aagtggttag agtggtacca gcagaaacca 120 acgtcctggt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 24 0 caggggaggc gtcctgggac gttcggccaa 300
326
<400> 251
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt ggggaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacgg gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 252 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 attttgttag attggtacca gcagaaacca 120 gcttcctttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 tcggatctgt ctcctctgac gttcggccaa 300
326
<400> 252
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gaatatttat gggaaagccc ctaagctcct gatcgttttt cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcggcag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 253 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 atgaatttag agtggtacca gcagaaacca 120 ggttcctggt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 actgaggcgc cgccttctac gttcggccaa 300
326
<400> 253
gacatccgga
atcacttgcc
gggaaagccc
cgtttcagtg
gaagattttg
gggaccaagg
tgacccagtc gggcaagtca ctaagctcct gcagtggatc ctacgtacta tggaaatcaa
tccatcctcc gcatattggg gatctattat tgggacagat ctgtcaacag acgggc
ctgtctgcat tcgtcgttat gcctccgttt ttcactctca gagtattctt
ctgtaggaga cttggtacca tgcaaagtgg ccatcagcag ggcctcctac
ccgtgtcacc 60 gcagaaacca 120 ggtcccatca 180 tctgcaacct 240 gctcggccaa 300 326
<210> 254 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 254
gacatccaga
atcacttgcc
gggaaagccc
cgtttcagtg
gaagattttg
gggaccaagg
<210> 255 <211> 326
tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60
gggcaagtca ggatattcgg acgctgttac ggtggtacca gcagaaacca 120
ctaagctcct gatctattgg tcttccgagt tgcaaagtgg ggtcccatca 180
gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240
ctacgtacta ctgtcaacag acgtttcatg cgcctaatac gttcggccaa 300 tggaaatcaa acgggc 32 6 <212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 255
gacatccgga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtatattggg gggaaagccc ctaagctcct gatctatttg cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 256 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 aagtatttaa gttggtacca gcagaaacca 120 tcgtccacgt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 aatgatcgtt tacctcttac gctcggccaa 300
326
<400> 256
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc aggcaagtca gctgattggg gggaaagccc ctacgctcct gatctatatt cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 257 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 aatatgttat cttggtacca gcagaaacca 12 0 ggttcctctt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 acgtattttg atcctcctac gttcggccaa 300
326
<400> 257
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtatattggt gggaaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 258 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 attaatttaa ggtggtacca gcagaaacca 120 agttccactt tgctaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 tcttatgatt ctcctgttac gttcggccaa 300
326
<400> 258
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagttg ggctattggt gggaaagccc ctaagctcct gatcgcgtgg cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgttctcag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 259 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 gatcgtttag agtggtacca gcagaaacca 120 gggtccgtgt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 ctgggttcgc ggcctcgtac gttcggccaa 300
326
<400> 259
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtcgattgat ggggaagccc ctaagctcct gatctatggt cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 aattggttag cgtggtacca gcagaaacca 120 acgtcccggt tgcaaagtgg ggtcccatcg 180 tttactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 tataattttt ttccttctac gttcggccaa 300
326 <210> 260 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 260
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60
atcacttgcc gggcaagtac ttttattggt aatgtgttaa attggtacca gcagaaacca 120
gggaaagccc ctaagctcct gatctcttat gtgtccatgt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240
gaagattttg ctacgtacta ctgttgtcag tcgtatgatg tgccttttac gttcggccaa 300
gggacccagg tggaaatcaa acgggc 326
<210> 261
<211> 326
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 261
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60
atcacttgcc gggcaagtca gtggattggg gttagtttag tttggtatca gcagaaacca 120
gggaaagccc ctaagctcct gatctattgg gcttccgttt tgcaaagtgg agtcccatca 180
cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240
gaggattttg ctacgtacta ctgtcaacag acgcatgcag ggcctcatac gttcggccaa 300
gggaccaagg tggaaatcaa acgggc 326
<210> 262
<211> 326
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 262
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60
atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt attttgttag attggtacca gcagaaacca 120
ggggaagccc ctaagctcct gatctattat gcttcctttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180
cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag tcttctgtgg atcctcttac gttcggccaa 300 gggaccaagg tggaaatcaa acgggc 326
<210> 263 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 263
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60
atcacttgcc gggcaagtca ggatattggt gtgtcgttaa ggtggtatca gcagaaacca 120
gggaaagccc ctaagctcct gatctattgg gcttccgagt tgcaaagtgg ggtcccatca 180
cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240
gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag ctttatgatt atcctccgac gttcggccaa 300 gggaccaagg tggaaatcaa acgggc 326
<210> 264 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 264
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60
atcacttgcc gggcaagtcg ttttattgct tctggtttag attggtacca gcagaaacca 120
gggaaagccc ctaagctcct gatctcgcgg ttttccgggt tgcaaagtgg ggtcccatca 180
cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240
gaagattttg ctacgtacta ctgtaagcag gggtttgggg ctcctgcgac gttcggccaa 300 gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 265 <211> 329 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 265
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtatatttct gggaaagccc ctaagctcct gatctattcg cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag caagggacca aggtggaaat caaacgggc
<210> 266 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 266
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt
gggcaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat
gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag
gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 267
<211> 326
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 267
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc
atcacttgcc gggcaagtca ggttattggg
gggaaagccc ctaagctcct gatctatttt
cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat
gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag
gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 268 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 268
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtatattggt gggaaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaattaa acgggc
<210> 269 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 269
gacatccaga tgacccagtc tccatccacc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt gggaaagccc ctaagctcct gatctattat
326
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 acggagttag agtggtatca gcagaaacca 120 agttccatgt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 agtgcttcgg cgcttcctct gacgttcggc 300
329
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 gcgtctttac agtggtacca gcagaaacca 120 atgtccgtgt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 24 0 acggctttga ctcctgctac gttcggccaa 300
326
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 gattatttat cttggtacca gcagaaacca 120 cgttccgttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 aattggaatt tgcctgttac gttcggccaa 300
326
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 gtgaatttat cgtggtacca gcagaaacca 120 gtttccgttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 24 0 acttatgata ttccttctac gttcggccaa 300
326
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 gtgtctttat cgtggtacca gcagaaacca 120 acgtcctatt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacatacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 270 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gagacgacgt ggccttatac gttcggccaa 300
326
<400> 270.
gacatccaga tgacccagtc atcacttgcc gggcaagtca gggaaagccc ctaagctcct cgtttcagtg gcagtggatc gaagattttg ctacgtacta gggaccaagg tggaaatcaa
tccatcctcc ttgtctgcat gtatattggg gcggagttaa gatctattgg acttccgtgt tgggacagat ttcactctca ctgtcaacag gcgattctgg acgggc
ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 attggtacca gcagaaacca 120 tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ccatcagcag tctgcaacct 240 cgcctcttac gttcggccaa 300
326
<210> 271 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 271
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60
atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt gttagtttaa attggtatca gcagaaacca 120
gggaaagccc ctaagctcct gatctacttt gcgtccgtgt tgcagagtgg ggtcccatca 180
cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240
gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag aatgcgtttt atcctgatac gttcggccaa 300
gggaccaagg tggaaatcaa acgggc 326
<210> 272 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 272
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt gggaaagccc ctaagctcct gatctattgg cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 gcggagttaa attggtatca gcagaaacca 120 atgtccgtgt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 acttcttttt ttcctattac gttcggccaa 300
326
<210> 273 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 273
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcct ctgtaggaga ccgtgtcgcc 60
atcacttgcc gggcaagtca ggatattcgg acgcttttag cttggtacca gcagaaacca 120
gggaaagccc ctatgctcct gatctattgg gcttccgagt tgcaaagtgg ggtcccatca 180
cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240
gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag tctctttctt ggccttcgac gttcggccaa 300
gggaccaagg tggaaatcaa acgggc 32 6
<210> 274 <211> 325 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 274
acatccagat gacccagtct ccatcctccc tgtctgcatc tgtaggagac cgtgtcacca 60 tcacttgccg ggcaagtcag ggaaagcccc taagctcctg gtttcagtgg cagtggatct aagattttgc tacgtactac ggaccaaggt ggaaatcaaa
<210> 275 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
tatattgggg tgagtttaga atctattata gttccatgtt gggacagatt tcactctcac tgtcaacagt attatactgt cgggc
ttggtaccag cagaaaccag 120 gcaaagtggg gtcccatcac 180 catcagcagt ctgcaacctg 24 0 tcctgatacg ttcggccaag 300
325
<400> 275
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagttg gccgattggt gggaaagccc ctaagctcct gatcgcttgg cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtgggcag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 276 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 gatcgtttaa attggtacca gcagaaacca 120 gtttccgttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 ttggggggtg ggcctcggac gttcggccaa 300
326
<400> 276
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtttattggg gggaaagccc ctatgctcct gatctatccg cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 277 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtctcc 60 tgggagttag cttggtacca gcagaaacca 120 tattccacgt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 24 0 ctggctggtt ttccttatac gttcggccaa 300
326
<400> 277
gacatccaga tgacccagtc atcacttgcc gggcaagtca gggaaagccc ctaagctcct cgtttcagtg gcagtggatc gaagattttg ctacgtacta gggaccaagg tggaaatcaa
tccatcctcc ctgtctgcat gcctattggt gatcgtttat gatctatttt gtgtcccagt tgggacagat ttcactctca ctgtcaacag agtcatccta acgggc
ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 cttggtacca gcagaaacca 120 tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ccatcagcag tctgcaacct 24 0 atcctaagac gtttggccaa 300
326
<210> 278 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 278
gacatccaga tgacccagtc atcacttgcc gggcaagtca gggaaagccc ctaagctcct cgtttcagtg gcagtggatc gaagattttg ctacgtacta gggaccaagg tggaaatcaa
<210> 279 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
tccatcctcc ctgtctgcat gtggattggg gtggagttaa gatctattgg ggttccgagt tgggacagat ttcactctca ctgtcaacag ttggcgttac acgggc
ctgtaggaga cggtgtcacc 60 gttggtatca gcagaaacca 120 tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ccatcagcag tctgcaacct 24 0 ctccttttac gttcggccaa 300
326 <4OO> 279
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca ggagatcggg gggaaagccc ctaagctcct gatctattgg cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 280 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 gctagtttag agtggtacca gcagaaacca 120 gcttccgtgt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 atgcatcata ctccttttac gttcggccaa 300
326
<400> 280
gacatccaga tgacccaatc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gcatattggg gggaaagccc ctaagctcct gatctatttg cgtttcagtg gtagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 281 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtccgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 cagtttttaa gttggtacca gcagaagcca 120 gcttccaggt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gttgatagga ttcctgttac gttcggccaa 300
326
<400> 281
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca ggggattgat gggaaagccc ctaagctcct gatctatttt cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 282 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 cattttttat cgtggtacca gcagaaacca 120 gcgtccacgt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 aatgcgagta ttcctattac gttcggccaa 300
326
<400> 282
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gaatattggt gagaaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 283 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 actaatttaa agtggtatca gcagaaacca 120 gggtcccttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gattatgatt ttccttatac gttcggccaa 300
326
<400> 283
gacatccaga tgacccagtc tccatcttcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggg gggaaagccc ctaagctcct gatctattgg cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtctcc 60 ggagagttaa attggtacca gcagaaacca 120 gtttccacgt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacca 240 attgcgcggt atcctgcgac gttcggccaa 300
326
<210> 284 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 284
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gaatattggt gggaaagccc ctaggctcct gatctatttt cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 285 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 gtgaatttaa tttggtacca gcagaaacca 120 tcttcccttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gattatgatg ttcctcagac gttcggccaa 300
326
<400> 285
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gaatattggg gggaaagccc ctaagctcct gatcgtttct cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtggtcag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 286 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 agtgggttac attggtacca gcagaaacca 120 tggtccggtt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gatgtgttgg gtcctcctac gttcggccaa 300
326
<400> 286
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggg gggaaagccc ctaagctcct gatctatttt cgttttagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 287 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 gcgtcgttag cttggtacca gcagaaacca 120 atgtccgagt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gattatggtt atcctactac gttcggccaa 300
326
<400> 287
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt gggaaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 288 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 gttaatttat tgtggtacca gcagaaacca 120 ggttccattt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gattatcatg ggccttatac gttcggccaa 300
326
<400> 288
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc ggacaagtca ggatattggg gggaaagccc ctaagctcct gatctatatg cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacat gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 tctctgttat cgtggtacca gcagaaacca 120 gtttccatgt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 aattcgtggt atcctattac gttcggccaa 300
326
<210> 289 <211> 325 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 289
acatccagat gacccagtct ccatcctccc tcacttgccg ggcaagtcag tttatttata ggaaagcccc taagctcctg atctatagga gtttcagtgg cagtggatct gggacagatt aagattttgc tacgtactac tgtcaacagg ggaccaaggt ggaaatcaaa cgggc
<210> 290 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
tgtctgcatc tgtaggagac cgtgtcacca 60 ctatgttaaa ttggtaccag cagaaaccag 120 cgtcctggtt gcaaagtggg gtcccatcac 180 tcactctcac catcagcagt ctgcaacctg 240 attatgcgtc gccttttacg ttcggccaag 300
325
<400> 290
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt ggggaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatt tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 291 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgttggaga ccgtgtcacc 60 attttgttag attggtacca gcagaaacca 120 gcttcctttt tgcaaagcgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gctaatccgg cgcctctgac gttcggccaa 300
326
<400> 291
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt ggggaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattctg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 292 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 attttgatag attggtacca gcagaaacca 120 gcttcctttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gctaatccgg cgcctctgac gttcggccaa 300
326
<400> 292
gacatccagt tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt ggggaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 293 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgagtcacc 60 attttgttag attggtacca gcagaaacca 120 gcttcctttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcaacag tctgcaacct 240 gctaatccgg cgcctctgac gttcggccaa 300
326
<400> 293
gacatccaga tgacccagtc tccatccttc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt ggggaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 attttgttag attggtacca gcagaaacca 120 gcttcctttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gctaatccgg cgcctctgac gttaggccaa 300
326 <210> 294 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 294
gacatccaga tgacccagtc atcacttgcc gggcaagtca ggggaagccc ctaagctcct cgtttcagtg gcagtggatc gaagattttg ctacgtacta gggaccaagg tggaaatcaa
<210> 295 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
tccatcctcc ctgtctgcat
gtggattggt attttggtag
gatctattat gcttcctttt
tgggacagat ttcactctca
ctgtcaacag gctaatccgg acgggc
ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 attggtacca gcagaaacca 120 tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ccatcagcag tctgcaacct 240 cgcctctgag gttcggccaa 300
326
<400> 295
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt ggggaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 296 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 attttgttag attggtacca gcagaaacca 120 gcttcctttt tgcaaaatgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gctaatccgg cgcctctgac gttcggccaa 300
326
<400> 296
gacatccaga tgatccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt ggggaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 297 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 attttgttag attggtacca gcagaaacca 120 gcttcctttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagtaa tctgcaacct 240 gctaatccgg cgcctctgac gttcggccaa 300
326
<400> 297
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt ggggaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagcg gcagtggatt tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 298 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtgggaga ccgtgtcacc 60 attttggtag attggtacca gcagaaacca 120 gcttcctttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcatcct 240 gctaatccgg cgcctctgac gttcggccaa 300
326
<400> 298
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt ggggaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 attttgttag attggtacca gcagaaacca 120 gcttcctttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcaa tctgcaacct 240 gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gctgatccgg cgcctctgac gttcggccaa 300 gggaccaagg tggaaatcaa acgggc 326
<210> 299 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 299
gacatccaga tgacccagtc tccatcttcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagtgtcacc 60
atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt attttgttag attggtacca gcagaaacca 120
ggggaagccc ctaagctcct gatctattat gcttcctttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180
cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240
gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gctaatccgg cgcctctgac gttcggccaa 300
gggacaaagg tggaaatcaa acgggc 326
<210> 300 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 300
gacatccaga tgacccagta tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt ggggaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg gtacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 301 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 attttgttag attggtacca gcagaaacca 120 gcctcctttt tgcagagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gctaatccgg cgcctctgac gttcggccaa 300
326
<400> 301
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt ggggaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 302 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtatgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 attttgttag attggtacca gcagaaacca 120 gcttcctttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gctaatccgg cgcctctgac gttcggccaa 300
326
<400> 302
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt ggggaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaaccg gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 303 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 attttgttag attggtacca gcagaaacca 120 gcttcctttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gctaatccgg cacctctgac gttcggccaa 300
326
<400> 303
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 atcacttgcc ggtcaagtcg gtggattggt attttgttag attggtacca gcagaaacca 120 ggggaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtgggtc tgggacagat gaagatgttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 304 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
gcttcctttt tgcaaagtgg ggtcccctca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gctaatccgg cgcctctgac gttcggccaa 300
326
<400> 304
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 atcacttgcc gggcaagtca gtggatcggt attttggtag attggtacca gcagaaacca 120 ggggaagccc ctaagctcct gatctattat gcttcctttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 cgtttcagtg gcagtggatc agggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240
gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gctaatccgg cgcctctgac gttcggccaa 300
gggaccaagg tggaaatcaa acgggc 326
<210> 305 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 305
gacatccagt tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60
atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt attttgttag attggtacca gcagaaacca 120
ggggaagccc ctaagctcct gatctattat gcttcctttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180
cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240
gaagattttg ctacgtacta ttgtcaacag gctaatccgg cgcctctgac gttcggccaa 300 gggaccaagg tggaaatcaa acgggc 326
<210> 306 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 306
gacatccaga tgacccagtc tccaacctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt ggggaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcggtggatt tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 307 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 aatttgttag attggtacca gcagaaacca 120 gcttcctttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gctaatccgg cgcctctgac gttcggccaa 300
326
<400> 307
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt ggggaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 308 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 attttgttag attggtacca gcagaaacca 120 gcttcctttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gctaatccgg cgcctccgac gttcggccaa 300
326
<400> 308 gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt ggggaagacc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgccaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 309 <211> 326 <212> DNA <213> Horao sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 attttgttag attggtacca gcagaaacca 120 gcttcctttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gctaatccgg cgcctctgac gttcggccaa 300
326
<400> 309
gacatccaga tgacccagtc tccaacctcc ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60
atcacctgca gggcaagtca gtggattggt attttgttag attggtacca gcagaaacca 120
ggggaagccc ctaagctcct gatctattat gcttcctttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180
cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240
gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gctaatccgg cgcctctgac gttcggccaa 300
gggaccaagg tggaaatcaa acgggc 326
<210> 310 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 310
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt attttggtag attggtacca gcagaaacca 120 ggggaagccc ctaagctcct gatctattat ggttcctttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gctaatccgg cgcctctgac gttcggccaa 300 gggaccaagg tggaaatcaa acgggc 326
<210> 311 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
<4 0 0> 311
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt ggggaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcag acgggc
<210> 312 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 attttgttag attggtacca gcagaaacca 120 gcttcctttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gctaatccgg cgcctctgac gttcggccaa 300
326
<400> 312
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt ggggaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggata tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgccaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 313 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 attttgttag attggtacca gcagaaacca 120 gcttcctttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tttgcaacct 240 gctaatccgg cgcctctgac gttcggccaa 300
326 <400> 313
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt ggggaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatgaa acgggc
<210> 314 <211> 326 <212> DNA <213> Horao sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 attttgttag attggtatca gcagaaacca 120 gcttcctttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gctaatccgg cgcctctgac gttcggccaa 300
326
<400> 314
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt ggggaagacc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagcggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 315 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 attttgttag attggtacca gcagaaacca 120 gcttcctttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gctaatccgg cgcctctgat gttcggccaa 300
326
<400> 315
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt gggaaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 316 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 attttgttag attggtacca gcagaaacca 120 gcttcctttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gctaatccgg cgcctctgac gttcggccaa 300
326
<400> 316
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt gggaaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 317 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 attttggtag attggtacca gcagaaacca 120 gcttcctttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gctaatccgg cgcctctgac gttcggccaa 300
326
<400> 317
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt gggaaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 attttgttag attggtacca gcagaaacca 120 gcttcctttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gctaatccgg cgcctctgag gttcggccaa 300
326
<210> 318 <211> 326 <212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 318
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt gggaaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 319 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 attttgatag attggtacca gcagaaacca 120 gcttcctttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gctaatccgg cgcctctgac gttcggccaa 300
326
<400> 319
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt gggaaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 320 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 aatttggtag attggtacca gcagaaacca 120 gcttcctttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gctaatccgg cgcctctgac gttcggccaa 300
326
<400> 320
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt gggaaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 321 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 aatttggtag attggtacca gcagaaacca 120 gcttcctttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gctaatccgg cgcctccgac gttcggccaa 300
326
<400> 321
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt gggaaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
<210> 322 <211> 326 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 atcaacttag actggtacca gcagaaacca 120 gcttcctttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaaccg 24 0 gctaatccgg cgcctctgac gttcggccaa 300
326
<400> 322
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gaacattggc gggaaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatt tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgggc
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 aacttgttag attggtacca gcagaaacca 120 gcttcctttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gctaatccgg cgcctctgac gttcggccaa 300
326 <210> 323
<211> 326
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 323
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60
atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt atcaacttag actggtacca gcagaaacca 120
gggaaagccc ctaggctcct gatctattat gcttcctttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180
cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240
gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gctaatccgg cgcctctgac gttcggccaa 300
gggaccaagg tggaaatcaa acgggc 326
<210> 324 <211> 357 <212> DNA <213> Horao sapiens
<400> 324
gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgcgtctc 60
tcctgtgctg cctccggatt cacctttgct gagcagccga tgacttgggc ccgccaggct 120
ccagggaagg gtctagagtg ggtctcaagt atttctagtt ttggtgatct tacatactac 180
gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tcccgcgaca attccaagaa cacgctgtat 240
ctgcaaatga acagcctgcg tgccgaggac accgcggtat attactgtgc gaaaggtgtg 300
tatcggatta gtcggtttga ctactggggt cagggaaccc tggtcaccgt ctcgagc 357
<210> 325 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 325
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Tyr Ile Gly Ala Glu 20 25 30 Leu Ser Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Trp Ile Ser Glu Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Ser Asn Thr Pro Tyr 85 90 95 Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 326 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 326 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Tyr Ile Gly Ile Asn 20 25 30 Leu Ile Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Trp Ala Ser Val Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys
85
Thr Tyr Gly Gln Gly Thr Lys Val 100
75 80
Gln Gln Ser Val Tyr Asp Pro Pro
90 95
Glu Ile Lys Arg 105
<210> 327 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 327
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr 20 Ile Thr Cys Arg Ala 25 Ser Gln Asp Ile Phe 30 Trp Leu Leu Ser Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Thr 45 Leu Leu Ile Tyr Ser Thr Ser Ile Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Tyr Tyr Leu Asp Pro 95 Pro Thr Phe Ser Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 328 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 328
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Phe Ile Gly Val Asn 20 25 30 Leu Asn Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Arg 45 Leu Leu Ile Tyr Leu Ser Ser Ile Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Thr Tyr Asp Ile Pro 95 Thr Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 329 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 329
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asn Ile Gly Ile Asn
25 30
Leu Gln Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Arg Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 40 45 Tyr Tyr Ala Ser Ile Leu Gln Ser 50 55 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr 65 70 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys 85 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val
100
Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 60
Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
75 80
Gln Gln Asp Tyr Asp Thr Pro Phe
90 95
Glu Ile Lys Arg 105
<210> 330 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 330
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<210> 331 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 331
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr 20 Ile Thr Cys Arg Ala 25 Ser Gln Gly Ile Gly 30 Val Asn Leu Gln Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Phe 50 Ser Ser Val Leu Gln 55 Ser Gly Val Pro Ser 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Asp Phe Asp Phe Pro 95 Gln Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 332 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens
<400> 332
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asn Ile Gly Ile Asn 20 25 30 Leu Gln Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Arg Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Tyr 50 Ala Ser Ile Leu Gln 55 Ser Gly Val Pro Ser 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Glu Tyr Asp Tyr Pro 95 Asn Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu Ile 105 Lys Arg
<210> 333 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 333
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr 20 Ile Thr Cys Arg Ala 25 Ser Ser Ser Ile Gly 30 Ser Gly Leu Glu Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Val Gly Trp Ser Gly Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Arg Gln 90 Cys Val Gly Leu Pro 95 Cys Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 334 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 334
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<210> 335 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 335 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr 20 Ile Thr Cys Arg Ala 25 Ser His Asp Ile Gly 30 Val Ser Leu Asp Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Val Trp 50 Ala Ser Val Leu Gln 55 Ser Gly Val Pro Ser 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Val Gly Ala Gly Pro Met 85 90 95 Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 336 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 336
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<210> 337 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 337
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<213> Homo sapiens <400> 339
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<400> 340
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<211> 108
<212> PRT
<213> Homo sapiens
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Asp Arg Val Thr
20
Leu Asp Trp Tyr
35
Met Trp Gly Ser
50
Ser Gly Ser Gly 65
Glu Asp Phe Ala
Thr Phe Gly Gln 100
<210> 342 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens
<400> 342
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<213> Homo sapiens <400> 343
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Thr Gln Ser Pro Ser Ser
10
Ile Thr Cys Arg Ala Ser 25
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Thr Asp Phe Thr Leu Thr 70
Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln 85 90
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Leu Ser Ala Ser Val Gly
15
Arg Tyr Ile Gly Val Ser 30
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Pro Ser Arg Phe Ser Gly 60
Ile Ser Ser Leu Gln Pro 75 80
Ser Ala Ala Pro Pro Ala
95
Lys Arg 100 105
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<400> 344
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
10 I5
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln His Ile Gly Asp Ala
25 30
Leu Trp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
40 45 '
Tyr Trp Thr Ser Asn Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Glv
50 "55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Thr Ile Arg Arg Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Lys Ile Lys Arg 100 105
<210> 345 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens
<400> 345
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr 20 Ile Thr Cys Arg Ala 25 Ser Gln Trp Ile Gly 30 Ile Leu Leu Asp Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Glu Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Ala Asn Pro Ala Pro 95 Leu Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 346 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 346
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1S ίο I5
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asn Ile Gly Ile Asn
25 30
Leu Gln Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Arg Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
40 45
Tyr Tyr Ala Ser Ile Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Tyr Asp Leu Pro Lys
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg
100 105
<210> 347 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 347
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<210> 348 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 348
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr 20 Ile Thr Cys Arg Ala 25 Ser Gln His Ile Gly 30 Ile Glu Leu Asn Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Val Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Ser Val Tyr Val Pro 95 Thr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 349 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens
<400> 349
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1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly Ala Glu
25 30
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40 45
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<213> Homo sapiens <400> 350
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<210> 351 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 351
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<210> 352 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 352
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1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Arg Pro Ile Gly Asp Arg 25 30 Leu Thr Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Ser Trp Val Ser Val Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Arg Gln Leu Gly Gly Gly Pro Phe 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
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<210> 354 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens
<400> 354
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<210> 355 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 355
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100 105
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<400> 357
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<213> Homo sapiens
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<213> Homo sapiens
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<213> Homo sapiens <400> 361
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<213> Homo sapiens
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<213> Homo sapiens
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<400> 364
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<210> 365 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 365
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Tyr Ile Gly Ala Asn 20 25 30 Leu Ser Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Tyr Ile Ser Val Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Glu Leu Tyr Thr Pro 95 His Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 366 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens
<400> 366
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1 5
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg
20
Leu Met Trp Tyr Gln Gln Lys Pro
40
Tyr Tyr Ala Ser Gln Leu Gln Ser
50 55
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr 65 70
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys
Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
15
Ala Ser Gln Tyr Ile Gly Val Thr 30
Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 45
Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
60
Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
75 80
Gln Gln Glu Val Ser Tyr Pro Tyr 85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 367 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 367
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln His Ile Gly Val Ser 20 25 30 Leu Thr Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Phe 50 Ala Ser Ile Leu Gln 55 Ser Gly Val Pro Ser 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Tyr Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Asp Met Ser Tyr Pro 95 Pro Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Gly 105 Ile Lys Arg
<210> 368 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 368
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr 20 Ile Thr Cys Arg Ala 25 Ser Gln Asp Ile Gly 30 Ile Ser Leu Glu Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Phe Ala Ser Gln Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Val Tyr Asp Phe Pro 95 Asn Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 369
<211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 369
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro
1 5
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg 20
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro
40
Tyr Trp Ala Ser Ile Leu Gln Ser 50 55
Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
15
Ala Ser Gln His Ile Gly Val Ser 30
Gly Lys Val Pro Lys Leu Leu Ile 45
Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Glu His Thr Ile Pro Ser 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105 <210> 370 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 370 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln His Ile Gly Val Ser 20 25 30 Leu Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 40 45 Tyr Tyr Gly Ser Glu Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Val Thr His Pro Thr 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105 <210> 371 <211> 108 <212> PRT <213> Homo : sapiens <400> 371 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Arg Ile Gly Met Met 20 25 30 Leu Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 40 45 Tyr Gly Gly Ser Lys Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His Arg Gly Trp Tyr Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105 <210> 372 <211> 108 <212> PRT <213> Homo . sapiens <400> 372 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Pro Ile Gly Asp Arg 20 25 30 Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35
Tyr Phe Ser Ser
50
Ser Gly Ser Gly 65
Glu Asp Phe Ala
Thr Phe Gly Gln 100
40
Val Leu Gln Ser
55
Thr Asp Phe Thr
70
Thr Tyr Tyr Cys 85
Gly Thr Lys Val
Gly Val Pro Ser
60
Leu Thr Ile Ser
75
Gln Gln His Gly
90
Glu Ile Lys Arg
105
45
Arg Phe Ser Gly
Ser Leu Gln Pro 80
Leu Arg Pro Asp 95
<210> 373 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 373
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr 20 Ile Thr Cys Arg Ala 25 Ser Gln Trp Ile Gly 30 Ser Ser Leu Met Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Trp 50 Ala Ser Glu Leu Gln 55 Ser Gly Val Pro Ser 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Glu Tyr Ser Tyr Pro 95 Ser Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 374 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 374
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Gly Val Ser 20 25 30 Leu Ala Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Phe Gly Ser Val Ser Leu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Ser His Leu Pro Pro 95 Thr Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 375 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 375
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 10 15 Asp Arg Val Thr 20 Ile Thr Cys Arg Ala 25 Ser Gln Trp Ile Gly 30 Val Glu Leu Asn Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Trp Thr Ser Ile Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Val Ile Asn Ser Pro Tyr 85 90 95 Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 376 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens
<400> 376
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr 20 Ile Thr Cys Arg Ala 25 Ser Gln Asp Ile Gly 30 Lys Trp Leu Glu Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Gly Ala 50 Thr Ser Trp Leu Gln 55 Ser Gly Val Pro Ser 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Val Gln Gln Gly Arg Arg Pro Gly 85 90 95 Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 377 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 377
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr 20 Ile Thr Cys Arg Ala 25 Ser Gln Trp Ile Gly 30 Ile Leu Leu Asp Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Glu Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Arg 90 Ser Asp Leu Ser Pro 95 Leu Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 378 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 378
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro
1 5
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg 20
Leu Glu Trp Tyr Gln Gln Lys Pro
40
Val Phe Gly Ser Trp Leu Gln Ser
50 55
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr 65 70
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys 85
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val 100
Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
15
Ala Ser Gln Asn Ile Tyr Met Asn 30
Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 45
Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 60
Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
75 80
Arg Gln Thr Glu Ala Pro Pro Ser
90 95
Glu Ile Lys Arg 105
<210> 379 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 379 Asp Ile Arg Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr 20 Ile Thr Cys Arg Ala 25 Ser Gln His Ile Gly 30 Ser Ser Leu Ser Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Tyr Ala Ser Val Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Glu Tyr Ser Trp Pro Pro 85 90 95 Thr Leu Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 380 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 380
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro
1 5
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg 20
Leu Arg Trp Tyr Gln Gln Lys Pro
40
Tyr Trp Ser Ser Glu Leu Gln Ser
50 55
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr 65 70
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys 85
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val 100
Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
15
Ala Ser Gln Asp Ile Arg Thr Leu 30
Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 45
Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
60
Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
75 80
Gln Gln Thr Phe His Ala Pro Asn
90 95
Glu Ile Lys Arg 105
<210> 381 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 381
Asp Ile Arg Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Tyr Ile Glv Lvs Tvr
25 30
Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
40 45
Tyr Leu Ser Ser Thr Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Asn Asp Arg Leu Pro Leu
85 90 95
Thr Leu Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 382 <211> 108 <212> PRT
<213> Horao sapiens <400> 382
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln Leu Ile Gly Asn Met 20 25 30 Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Thr Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Ile Gly Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 80 65 70 75 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Thr Tyr Phe Asp Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 383 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 383
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Tyr Ile Gly Ile Asn 20 25 30 Leu Arg Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Tyr Ser Ser Thr Leu Leu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 80 65 70 75 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Tyr Asp Ser Pro Val 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105 <210> 384 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 384 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser 1 5 10 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser 20 25 Leu Glu Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys 40 Ala Trp Gly Ser Val Leu Gln Ser Gly Val 50 55 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr 65 70 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Ser Gln 85 90 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile 100 105
15
Trp Ala Ile Gly As]
30
Ala Pro Lys Leu Lei 45
Pro Ser Arg Phe Se] 60
Ile Ser Ser Leu Glr 75
Leu Gly Ser Arg Prc 95
<210> 385 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 385 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser 1 5 10 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser 20 25 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Glu 40 Tyr Gly Thr Ser Arg Leu Gln Ser Gly Val 50 55 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr 65 70 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln 85 90 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile 100 105
15
Gln Ser Ile Asp Asj
30
Ala Pro Lys Leu Lei 45
Pro Ser Arg Phe Se] 60
Ile Ser Ser Leu Glr
75
Tyr Asn Phe Phe Prc 95
<210> 386 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 386
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 io 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Thr Phe Ile Gly Asn Val
25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
40 45
Ser Tyr Val Ser Met Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Glv
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Cys Gln Ser Tyr Asp Val Pro Phe 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Gln Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 387 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 387
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
10 I5
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly Val Ser
25 30
Leu Val Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
40 45
Tyr Trp Ala Ser Val Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Glv
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Thr His Ala Gly Pro His
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 388 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens
<400> 388
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro
1 5
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg 20
Leu Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro
40
Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser
50 55
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr 65 70
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys 85
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val 100
Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
15
Ala Ser Gln Trp Ile Gly Ile Leu 30
Gly Glu Ala Pro Lys Leu Leu Ile 45
Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 60
Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
75 80
Gln Gln Ser Ser Val Asp Pro Leu
90 95
Glu Ile Lys Arg 105
<210> 389 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 389
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro
1 5
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg 20
Leu Arg Trp Tyr Gln Gln Lys Pro
40
Tyr Trp Ala Ser Glu Leu Gln Ser
50 55
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr
Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
I5
Ala Ser Gln Asp Ile Gly Val Ser 30
Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 45
Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 60
Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys
85
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val 100
75 80
Gln Gln Leu Tyr Asp Tyr Pro Pro
90 95
Glu Ile Lys Arg 105
<210> 390 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 390
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
10 I5
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Arg Phe Ile Ala Ser Glv
25 30
Leu Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
40 45
Ser Arg Phe Ser Gly Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Glv
5O 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 7O 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Lys Gln Gly Phe Gly Ala Pro Ala
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 391 <211> 109 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 391
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
10 I5
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Tyr Ile Ser Thr Glu
2O 25 30
Leu Glu Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
40 45
Tyr Ser Ser Ser Met Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arq Phe Ser Glv
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Ala Ser Ala Leu Pro
85 90 95
Leu Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arq 100 105
<210> 392 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 392
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro
1 5
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg 20
Leu Gln Trp Tyr Gln Gln Lys Pro 40
Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
15
Ala Ser Gln Trp Ile Gly Ala Ser
30
Gly Gln Ala Pro Lys Leu Leu Ile 45 Tyr Tyr Met Ser Val Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Thr Ala Leu Thr Pro 95 Ala Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 393 <211> 108 <212> PRT
<213> Horno sapiens
<400> 393 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Val Ile Gly Asp Tyr 20 25 30 Leu Ser Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Phe Arg Ser Val Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Asn Trp Asn Leu Pro 95 Val Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 394 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 394
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Tyr Ile Gly Val Asn 20 25 30 Leu Ser Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Tyr Val Ser Val Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 80 65 70 75 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Thr Tyr Asp Ile Pro Ser 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 395 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 395
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly
10 I5
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly Val Ser 25 30
Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
40 45
Tyr Tyr Thr Ser Tyr Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arq Phe Ser Glv
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 7O 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Glu Thr Thr Trp Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 396 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens
<400> 396
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 io 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Tyr Ile Gly Ala Glu
25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
40 45
Tyr Trp Thr Ser Val Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Glv
5O 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Ile Leu Ala Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 397 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 397
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
10 I5
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly Val Ser
25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
40 45
Tyr Phe Ala Ser Val Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Glv
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Asn Ala Phe Tyr Pro Asp
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 398 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 398 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly Ala Glu 20 25 30 Leu Asn Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Trp Met Ser Val Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 80 65 70 75 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Thr Ser Phe Phe Pro 95 Ile Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 399 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens
<400> 399 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Ala 20 Ile Thr Cys Arg Ala 25 Ser Gln Asp Ile Arg 30 Thr Leu Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Met Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Trp Ala Ser Glu Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 80 65 70 75 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Leu Ser Trp Pro Ser Thr 85 90 95 Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 400 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 400 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro 1 5 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg 20 Leu Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro 35 40 Tyr Tyr Ser Ser Met Leu Gln Ser 50 55 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr 65 70 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys 85 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val
100
Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
15
Ala Ser Gln Tyr Ile Gly Val Ser 30
Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 45
Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 60
Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
75 80
Gln Gln Tyr Tyr Thr Val Pro Asp
90 95
Glu Ile Lys Arg 105
<210> 401 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 401
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Trp Pro Ile Gly Asp Arq
25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
40 45
Ala Trp Val Ser Val Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 6^ 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gly Gln Leu Gly Gly Gly Pro Arg
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 402 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens
<400> 402
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 I0 15
Asp Arg Val Ser Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Phe Ile Gly Trp Glu
25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Met Leu Leu Ile
40 45
Tyr Pro Tyr Ser Thr Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arq Phe Ser Glv
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Leu Ala Gly Phe Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 403 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens
<400> 403
Asp ι Ile Gln Met Thr C Gln Ser Pro Asp Arg Val Thr 0 Ile Thr Cys Arg 20 Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro 35 40 Tyr Phe Val Ser Gln Leu Gln Ser 50 55 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr 65 70 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys 85 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val 100
Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
I5
Ala Ser Gln Pro Ile Gly Asp Arg 30
Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 45
Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 60
Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
75 80
Gln Gln Ser His Pro Asn Pro Lys
90 95
Glu Ile Lys Arg 105 <210> 404 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 404
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Gly Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly Val Glu 20 25 30 Leu Ser Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Trp Gly Ser Glu Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Leu Ala Leu Pro Pro 95 Phe Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu Ile 105 Lys Arg
<210> 405 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 405
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Glu Ile Gly Ala Ser 20 25 30 Leu Glu Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Trp Ala Ser Val Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Met His His Thr Pro Phe 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 406 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 4 06 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr 20 Ile Thr Cys Arg Ala 25 Ser Gln His Ile Gly 30 Gln Phe Leu Ser Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Leu Ala Ser Arg Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Val Asp Arg Ile Pro Val 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 407 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 407
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr 20 Ile Thr Cys Arg Ala 25 Ser Gln Gly Ile Asp 30 His Phe Leu Ser Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Phe Ala Ser Thr Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Asn Ala Ser Ile Pro 95 Ile Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 408 <211> 108 <212> PRT
<213> Horao sapiens <400> 408
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr 20 Ile Thr Cys Arg Ala 25 Ser Gln Asn Ile Gly 30 Thr Asn Leu Lys Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Glu Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Tyr Gly Ser Leu Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Asp Tyr Asp Phe Pro 95 Tyr Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 409 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 409
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro
1 5
Asp Arg Val Ser Ile Thr Cys Arg 20
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro
40
Tyr Trp Val Ser Thr Leu Gln Ser
50 55
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr 65 70
Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
15
Ala Ser Gln Trp Ile Gly Gly Glu 30
Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 45
Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 60
Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ile Ala Arg Tyr Pro Ala
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg
100 105
<210> 410 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 410
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asn Ile Gly Val Asn 20 25 30 Leu Ile Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Arg 45 Leu Leu Ile Tyr Phe Ser Ser Leu Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Asp Tyr Asp Val Pro 95 Gln Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 411
<211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 411
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asn Ile Gly Ser Gly 20 25 30 Leu His Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Val Ser Trp Ser Gly Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gly Gln 90 Asp Val Leu' Gly Pro 95 Pro Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 412 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 412
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly Ala Ser
25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
40 45
Tyr Phe Met Ser Glu Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr 65 70
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys 85
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val 100
60
Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
75 80
Gln Gln Asp Tyr Gly Tyr Pro Thr
90 95
Glu Ile Lys Arg 105
<210> 413 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 413
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly Val Asn 20 25 30 Leu Leu Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Tyr 50 Gly Ser Ile Leu Gln 55 Ser Gly Val Pro Ser 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Asp Tyr His Gly Pro 95 Tyr Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 414 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 414
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Thr Ser Gln Asp Ile Gly Ser Leu
25 30
Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
40 45
Tyr Met Val Ser Met Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His Asn Ser Trp Tyr Pro Ile
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 415 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 415
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Phe Ile Tyr Thr Met 25 30 Leu Asn Trp 35
Tyr Arg Thr 50
Ser Gly Ser
65
Glu Asp Phe Thr Phe Gly
<210> 416 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens
<400> 416 Asp Ile Gln Met 1
Asp Arg Val Thr 20
Leu Asp Trp Tyr 35
Tyr Tyr Ala Ser
50
Ser Gly Phe Gly
65
Glu Asp Phe Ala
Thr Phe Gly Gln 100
<210> 417 <211> 108 <212> PRT <213> Homo ; sapiens <400> 417 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly Ile Leu 20 25 30 Ile Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Glu Ala Pro Lys Leu Leu Ile 40 45 Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Ser Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Pro Ala Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 418 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens
Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Ser Trp Leu Gln 55 Ser Gly Val Pro Ser 60 Arg Phe Ser Gly Gly Thr Asp 70 Phe Thr Leu Thr Ile 75 Ser Ser Leu Gln Pro 80 Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Asp Tyr Ala Ser Pro 95 Phe Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
10 15
Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly Ile Leu
30
Gln Gln Lys Pro Gly Glu Ala Pro Lys Leu Leu Ile
40 45
Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
55 60
Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
70 75 80
Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Pro Ala Pro Leu 85 90 95
Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 105
<400> 418
Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly ίο I5
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly Ile Leu
25 30
Leu Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Glu Ala Pro Lys Leu Leu Ile
40 45
Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Glv
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asn Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Pro Ala Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 419 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens
<400> 419 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr 20 Ile Thr Cys Arg Ala 25 Ser Gln Trp Ile Gly 30 Ile Leu Leu Asp Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Glu Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 80 65 70 75 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Ala Asn Pro Ala Pro 95 Leu Thr Leu Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 420 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens
<400> 420 Asp 1 Ile Gln Met Thr C Gln Ser Pro Asp Arg Val Thr 0 Ile Thr Cys Arg 20 Val Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro 35 40 Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser 50 55 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr 65 70 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys 85 Arg Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val 100
Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
15
Ala Ser Gln Trp Ile Gly Ile Leu 30
Gly Glu Ala Pro Lys Leu Leu Ile 45
Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 60
Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
75 80
Gln Gln Ala Asn Pro Ala Pro Leu
90 95
Glu Ile Lys Arg 105
<210> 421 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 421
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro 1 5 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg 20 Leu Asp Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Tyr Tyr 50 Ala Ser Phe Leu Gln 55 Asn Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr 65 70 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val
Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
15
Ala Ser Gln Trp Ile Gly Ile Leu 30
Gly Glu Ala Pro Lys Leu Leu Ile 45
Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 60
Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
75 80
Gln Gln Ala Asn Pro Ala Pro Leu
90 95
Glu Ile Lys Arg 105
<210> 422 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 422 Asp Ile Gln Met Ile Gln Ser Pro 1 5 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg 20 Leu Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro 35 40 Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser 50 55 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr 65 70 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys 85 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val
100
Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
15
Ala Ser Gln Trp Ile Gly Ile Leu 30
Gly Glu Ala Pro Lys Leu Leu Ile 45
Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 60
Leu Thr Ile Ser Asn Leu Gln Pro
75 80
Gln Gln Ala Asn Pro Ala Pro Leu
90 95
Glu Ile Lys Arg 105
<210> 423 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 423
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly Ile Leu 20 25 30 Val Asp Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Glu Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Phe Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu His Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Ala Asn Pro Ala Pro 95 Leu Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 424 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 424
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly Ile Leu 20 25 30 Leu Asp Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Glu Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Asn Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Ala Asp Pro Ala Pro 95 Leu Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 425 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 425
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Ser Val Thr 20 Ile Thr Cys Arg Ala 25 Ser Gln Trp Ile Gly 30 Ile Leu Leu Asp Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Glu Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Ala Asn Pro Ala Pro 95 Leu Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 426 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 426
Asp Ile Gln Met Thr Gln Tyr Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr 20 Ile Thr Cys Arg Ala 25 Ser Gln Trp Ile Gly 30 Ile Leu Leu Asp Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Glu Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Gly Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Ala Asn Pro Ala Pro 95 Leu Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg <210> 427 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens
<400> 427
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Tyr Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr 20 Ile Thr Cys Arg Ala 25 Ser Gln Trp Ile Gly 30 Ile Leu Leu Asp Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Glu Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Ala Asn Pro Ala Pro 95 Leu Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 428 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 428
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr 20 Ile Thr Cys Arg Ala 25 Ser Gln Trp Ile Gly 30 Ile Leu Leu Asp Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Glu Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Pro 90 Ala Asn Pro Ala Pro 95 Leu Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 429 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens
<400> 429
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro
1 5
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg
20
Leu Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro
40
Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser
50 55
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr 65 70
Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys
Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
15
Ser Ser Arg Trp Ile Gly Ile Leu 30
Gly Glu Ala Pro Lys Leu Leu Ile 45
Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
60
Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
75 80
Gln Gln Ala Asn Pro Ala Pro Leu 85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 430 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 430
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
10 I5
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly Ile Leu
25 30
Val Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Glu Ala Pro Lys Leu Leu Ile
40 45
Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arq Phe Ser Glv
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Pro Ala Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 431 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 431
Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
I0 I5
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly Ile Leu
25 30
Leu Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Glu Ala Pro Lys Leu Leu Ile
40 45
Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arq Phe Ser Glv
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Pro Ala Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 432
<211> 108
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 432
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro
1 5
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg 20
Leu Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro
40
Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser 50 55
Thr Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
I5
Ala Ser Gln Trp Ile Gly Asn Leu 30
Gly Glu Ala Pro Lys Leu Leu Ile 45
Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 60 Gly Gly Phe Gly Thr Asp Phe Thr
65 70
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys
85
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val 100
Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
75 80
Gln Gln Ala Asn Pro Ala Pro Leu
90 95
Glu Ile Lys Arg 105
<210> 433 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 433 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly Ile Leu 20 25 30 Leu Asp Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Glu Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 80 65 70 75 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Ala Asn Pro Ala Pro 95 Pro Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg
100 105
<210> 434 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens
<400> 434 Asp 1 Ile Gln Met Thr C Gln Ser Pro Asp Arg Val Thr O Ile Thr Cys Arg 20 Leu Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro 35 40 Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser 50 55 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr 65 70 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys 85 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val
100
Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
15
Ala Ser Gln Trp Ile Gly Ile Leu 30
Gly Glu Asp Pro Lys Leu Leu Ile 45
Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 60
Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
75 80
Gln Gln Ala Asn Pro Ala Pro Leu
90 95
Glu Ile Lys Arg 105
<210> 435
<211> 108
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 435
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro
1 5
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg
20
Leu Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro
Thr Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
I5
Ala Ser Gln Trp Ile Gly Ile Leu 30
Gly Glu Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln 65 70 75 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Pro Ala Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 436 <211> 108 <212> PRT
<213> Horao sapiens
<400> 436
Asp 1 Ile Gln Met Thr C Gln Ser Pro Asp Arg Val Thr Ό Ile Thr Cys Arg 20 Val Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro 35 40 Tyr Tyr Gly Ser Phe Leu Gln Ser 50 55 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr 65 70 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys 85 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val 100
Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
15
Ala Ser Gln Trp Ile Gly Ile Leu 30
Gly Glu Ala Pro Lys Leu Leu Ile 45
Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 60
Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
75 80
Gln Gln Ala Asn Pro Ala Pro Leu
90 95
Glu Ile Lys Arg 105
<210> 437 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens
<400> 437
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 ίο 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly Ile Leu
25 30
Leu Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Glu Ala Pro Lys Leu Leu Ile
40 45
Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Glv
5O 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Pro Ala Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Arg Arg 100 105
<210> 438
<211> 108
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 438
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 I0 I5 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg 20 Leu Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro 35 40 Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser 50 55 Ser Gly Tyr Gly Thr Asp Phe Thr 65 70 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys 85 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val
100
Ala Ser Gln Trp Ile Gly Ile Leu 30
Gly Glu Ala Pro Lys Leu Leu Ile 45
Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 60
Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
75 80
Gln Gln Ala Asn Pro Ala Pro Leu
90 95
Glu Ile Lys Arg 105
<210> 439 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 439
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 I0 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly Ile Leu
25 30
Leu Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Glu Ala Pro Lys Leu Leu Ile
40 45
Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Glv
5° 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Pro Ala Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Met Lys Arg 100 105
<210> 440 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 440
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
10 I5
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly Ile Leu
25 30
Leu Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Glu Asp Pro Lys Leu Leu Ile
40 45
Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Glv
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 ™ 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Pro Ala Pro Leu
85 90 95
Met Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 441 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <4O0> 441
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 ίο 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly Ile Leu
25 30
Leu Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
40 45
Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arq Phe Ser Glv
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 7O 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Pro Ala Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 442 <211> 108
<212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 442
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
10 I5
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly Ile Leu
25 30
Val Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
40 45
Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 7O 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Pro Ala Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 443 <211> 108
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 443
Asp 1 Ile Gln Met Thr C Gln Ser Pro Asp Arg Val Thr O Ile Thr Cys Arg 20 Leu Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro 35 40 Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser 50 55 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr 65 70 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys 85 Arg Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val 100
Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
15
Ala Ser Gln Trp Ile Gly Ile Leu 30
Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 45
Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
60
Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
75 80
Gln Gln Ala Asn Pro Ala Pro Leu
90 95
Glu Ile Lys Arg 105
<210> 444 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 444
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly Ile Leu 20 25 30 Ile Asp Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 80 65 70 75 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Ala Asn Pro Ala Pro 95 Leu Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 445 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 445
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro
1 5
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg 20
Val Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro
40
Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser
50 55
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr 65 70
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys 85
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val 100
Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 10 15 Ala Ser Gln Trp Ile Gly Asn Leu 30 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Gly Val Pro Ser 60 Arg Phe Ser Gly Leu Thr Ile 75 Ser Ser Leu Gln Pro 80 Gln Gln 90 Ala Asn Pro Ala Pro 95 Leu Glu Ile Lys Arg
105
<210> 446 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 446
Asp χ Ile Gln Met Thr C Gln Ser Pro Asp Arg Val Thr D Ile Thr Cys Arg 20 Val Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro 35 40 Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser 50 55 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr 65 70 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys 85 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val
100
Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
I5
Ala Ser Gln Trp Ile Gly Asn Leu 30
Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 45
Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 60
Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
75 80
Gln Gln Ala Asn Pro Ala Pro Pro
90 95
Glu Ile Lys Arg 105 <210> 447 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 447
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
10 I5
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly Ile Asn
25 30
Leu Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
40 45
Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Glv
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 7O 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Pro Ala Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 448 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 448
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
I0 I5
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asn Ile Gly Asn Leu
25 30
Leu Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
40 45
Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Phe Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 7O 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gl η Ala Asn Pro Ala Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 449 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 449
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
10 I5
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly Ile Asn
25 30
Leu Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Arg Leu Leu Ile
40 45
Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arq Phe Ser Glv
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Pro Ala Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 450 <211> 119 <212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 450 Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu 20 Ser Cys Ala Ala Ser Gly 25 Phe Thr Phe Ala 30 Glu Gln Pro Met Thr Trp Ala Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Ser Ile Ser Ser Phe Gly Asp Leu Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Gly Val Tyr Arg Ile Ser Arg Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly 100 105 110 Thr Leu Val 115 Thr Val Ser Ser
<210> 451 <211> 127 <212> PRT
<213> Desconhecido <220>
<223> Camelideo <400> 451
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Asn Tyr 20 25 30 Val Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Asp Phe Val 35 40 45 Val Gly Ile Gly Arg Ser Gly Gly Asp Asn Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser 50 55 60 Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Trp Asp Asn Ala Lys Asn Thr Met 65 70 75 80 Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr 85 90 95 Cys Ala Ala Ser Thr Tyr Ser Arg Asp Thr Ile Phe Thr Lys Trp Ala 100 105 110 Asn Tyr Asn 115 Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 120 Gln Val Thr Val 125 Ser Ser
<210> 452 <211> 127 <212> PRT
<213> Desconhecido
<220>
<223> Camelideo <400> 452 Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Ala Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Val Met Gly 35 Trp Phe Arg Gln Ala 40 Pro Gly Lys Glu Arg 45 Glu Phe Val Gly Ala Ile His Trp Ser Gly Gly Arg Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ser Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr 80 65 70 75 Leu Gln Met Asn Ser 85 Leu Lys Pro Glu Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr 95 Cys Ala Ala Ser Arg Ile Ile Tyr Ser Tyr Val Asn Tyr Val Asn Pro Gly 100 105 110 Glu Tyr Asp 115 Tyr Trp Gly Gln Gly 120 Thr Gln Val Thr Val 125 Ser Ser
<210> 453 <211> 122 <212> PRT <213> Desconhecido
<220>
<223> Camelideo <4 00> 453
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu 20 Ser Cys Ala Ala Ser 25 Gly Phe Thr Phe Ser 30 Ser His Tyr Met Ser 35 Trp Phe Arg Gln Ala 40 Pro Gly Lys Glu Arg 45 Glu Phe Val Ala Ala Ile Thr Ser Ser Ser Arg Thr Tyr Tyr Thr Glu Ser Val Lys 50 55 60 Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr Leu 65 70 75 80 Gln Met Asn Ser Leu 85 Lys Ser Glu Asp Thr 90 Ala Val Tyr Tyr Cys 95 Ala Ala Asp Arg Thr 100 Phe Tyr Gly Ser Thr 105 Trp Ser Lys Tyr Asp 110 Tyr Arg Gly Gln Gly 115 Thr Gln Val Thr Val 120 Ser Ser
<210> 454 <211> 129 <212> PRT
<213> Desconhecido <220>
<223> Camelideo <400> 454
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Lys Tyr
25 30
Ala Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
40 45
Ser Ala Ile Ser Trp Ser Asp Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg 65 70 Leu Gln Val Asn Ser P ^ Leu Lys Pro Ala Ala Thr Tyr 100 o D Leu Val Asp Val Pro Tyr Glu 115 Tyr Asp Tyr Trp Gly 120
Ser
Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr
75 BO
Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
90 95
Trp Ala Val His Val Pro Ile Arg 105 HO
Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser 125
<210> 455 <211> 125 <212> PRT
<213> Desconhecido
<220>
<223> Camelideo <400> 455
Gln Val Gln Leu Gln Asp Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Asp 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ser Phe Gly Gly Tyr 20 25 30 Ala Met Gly 35 Trp Phe Arg Gln Ala 40 Pro Gly Lys Glu Arg 45 Glu Phe Val Ala Ala Ile Ser Trp Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Leu 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Ala Gly Leu Arg Pro Ser Pro Asn Tyr Asn His Glu Arg Ser Tyr 100 105 110 Asp Tyr Trp 115 Gly Gln Gly Thr Gln 120 Val Thr Val Ser Ser 125
<210> 456 <211> 129 <212> PRT
<213> Desconhecido
<220>
<223> Camelideo <400> 456
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Leu Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Ala Met Gly 35 Trp Phe Arg Gln Ala 40 Pro Gly Lys Glu Arg 45 Glu Phe Val Ala Ala Ile Asn Trp Ser Gly Gly Ser Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Thr Lys Asn Thr Val Tyr 80 65 70 75 Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Ala Phe Tyr Cys 85 90 95 Ala Ala Thr Tyr Asn Pro Tyr Ser Arg Asp His Tyr Phe Pro Arg Met 100 105 110 Thr Thr Glu 115 Tyr Asp Tyr Trp Gly 120 Gln Gly Thr Gln Val 125 Thr Val Ser
Ser <210> 457 <211> 122 <212> PRT
<213> Desconhecido
<220>
<223> Camelideo <400> 457
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Gly Arg Leu Val Gln Thr Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Gly Thr Phe Gly Thr Tyr 20 25 30 Ala Leu Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val 35 40 45 Ala Ala Ile Ser Arg Phe Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 60 Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Asn Asn Thr Val Tyr Leu 65 70 75 80 Glu Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Ala Arg Glu Gly Val Ala Leu Gly Leu Arg Asn Asp Ala Asn Tyr Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 458 <211> 121 <212> PRT <213> Desconhecido <220> <223> Camelideo <4O0> 458 Gln Val Gln Leu Gln Asp Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Ala Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val 35 40 45 Ala Ala Ile Gly Leu Asn Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg 50 55 60 Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr Leu Gln Met 65 70 75 80 Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Ala Arg 85 90 95 Thr Ser Gly Val Val Gly Gly Thr Pro Lys Arg Tyr Asp Tyr Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 459
<211> 122 <212> PRT
<213> Desconhecido
<220>
<223> Caraelideo <400> 459 Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Gly Phe Ser Arg Tyr 20 25 30 Ala Met Gly 35 Trp Phe Arg Gln Ala 40 Pro Gly Gln Asp Arg 45 Glu Phe Val Ala Thr 50 Ile Ser Trp Thr Asn Ser 55 Thr Asp Tyr Ala 60 Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Ala Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Ala Tyr Leu 65 70 75 80 Gln Met Asn Ser Leu 85 Lys Pro Glu Asp Thr 90 Ala Val Tyr Tyr Cys 95 Ala Ala Asp Lys Trp 100 Ala Ser Ser Thr Arg 105 Ser Ile Asp Tyr Asp 110 Tyr Trp Gly Gln Gly 115 Ile Gln Val Thr Val 120 Ser Ser
<210> 460 <211> 123 <212> PRT
<213> Desconhecido
<220>
<223> Camelideo <400> 460
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu 20 Ser Cys Ala Ala Ser 25 Gly Arg Thr Phe Ser 30 Asn Tyr Ala Met Gly 35 Trp Phe Arg Gln Ala Pro 40 Gly Lys Glu Arg 45 Glu Phe Val Ala Ala 50 Ile Asn Trp Gly Gly Gly Asn 55 Thr Tyr Tyr 60 Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser 85 Leu Lys Pro Glu Asp Thr 90 Ala Val Tyr Tyr 95 Cys Ala Ala Ser Glu 100 Trp Gly Gly Ser Asp 105 Tyr Asp His Asp Tyr 110 Asp Tyr Trp Gly Gln 115 Gly Thr Gln Val Thr Val 120 Ser Ser
<210> 461 <211> 123 <212> PRT
<213> Desconhecido <220>
<223> Camelideo <400> 461
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ser Phe Ser Ser Tyr
25 30
Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
40 45
Ala Ala Ile Ser Trp Gly Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Val Ser Val 50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr 65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Arg Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Asp Glu Thr Phe His Ser Ser Ala Tyr Gly Glu Tyr Glu Tyr
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser 115 120
<210> 462 <211> 133 <212> PRT
<213> Desconhecido
<220>
<223> Camelideo <400> 462
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Ala Met Gly 35 Trp Phe Arg Gln Thr 40 Pro Gly Lys Glu Arg 45 Glu Phe Val Ala Ala Ile Thr Ser Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Ser Thr Met Tyr 80 65 70 75 Leu Gln Met Asp Ser Leu Met Leu Asp Asp Thr Ser Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Ala Asp Ser Ser Arg Pro Gln Tyr Ser Asp Ser Ala Leu Arg Arg 100 105 110 Ile Leu Ser Leu Ser Asn Ser Tyr Pro Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln 115 120 125 Val Thr 130 Val Ser Ser
<210> 463 <211> 120 <212> PRT
<213> Desconhecido
<220>
<223> Camelideo
<221> VARIANTE <222> 3, 13 <223> Xaa=Orn
<400> 463 Glu Val Xaa Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Xaa Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ala Asp Tyr 20 25 30 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Gln Trp Val 35 40 45 Ser Ser Ile Ser Tyr Asn Gly Asp Thr Thr Tyr Tyr Ala Glu Ser Met 50 55 60 Lys Asp Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ser Ser Gly Ser Tyr Tyr Pro Gly His Phe Glu Ser Trp Gly Gln
100 105 no
Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser 115 120
<210> 464 <211> 121
<212> PRT
<213> Desconhecido
<220>
<223> Camelideo <400> 464
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
10 I5
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Gly Tvr
25 30
Ala Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Glu Glu Arg Glu Phe Val
40 45
Ala Ala Ile Ser Trp Arg Gly Thr Ser Thr Tyr Tyr Gly Asp Ser Ala
5O 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr 65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Gly Ser His Ser Asp Tyr Ala Pro Asp Tyr Asp Tyr Trp Gly
100 105 no
Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser 115 120
<210> 465 <211> 123 <212> PRT
<213> Desconhecido
<220>
<223> Camelideo <400> 465
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
10 I5
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Ser Tyr
25 30
Ala Ile Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
40 45
Ala Ala Ile Ser Trp Gly Gly Ser Asn Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
5O 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr 65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Gly Glu Val Ser Asn Ser Asp Tyr Ala Tyr Glu Tyr Asp Tyr
100 105 no
Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser 115 120
<210> 466 <211> 122 <212> PRT
<213> Desconhecido
<220>
<223> Camelideo <400> 466
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Thr Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu 20 Ser Cys Ala Ala Ser 25 Gly Arg Tyr Ile Met 30 Gly Trp Phe Arg Gln 35 Ala Pro Gly Lys Glu 40 Arg Glu Phe Val Ala 45 Gly Ile Ser Arg Ser 50 Gly Ala Ser Thr Ala 55 Tyr Ala Asp Ser Val 60 Lys Asp Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Ser Ala Leu Asn Thr Val Tyr Leu Gln Met Asn 65 70 75 80 Ser Leu Lys Ala Glu 85 Asp Thr Ala Val Tyr 90 Phe Cys Ala Ala Ala 95 Leu Ala Ile Arg Leu Gly Ile Pro Arg Gly Glu Thr Glu Tyr Glu Tyr Trp 100 105 110 Gly Gln Gly 115 Thr Gln Val Thr Val 120 Ser Ser
<210> 467 <211> 121 <212> PRT
<213> Desconhecido
<220>
<223> Camelideo <400> 467
Gln Val Lys Leu Glu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ser Ala Ser Gly Leu Thr Phe Ser Asn Tyr 20 25 30 Ala Met Ala 35 Trp Phe Arg Gln Ala 40 Pro Gly Lys Glu Arg 45 Glu Phe Val Ala Thr Ile Ser Gln Arg Gly Gly Met Arg His Tyr Leu Asp Ser Val 50 55 60 Lys Asp Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr 80 65 70 75 Leu Gln Met Asn Ser 85 Leu Lys Pro Asp Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr 95 Cys Ala Ala Asp Leu 100 Met Tyr Gly Val Asp 105 Arg Arg Tyr Asp Tyr 110 Trp Gly Arg Gly Thr 115 Gln Val Thr Val Ser 120 Ser
<210> 468 <211> 127 <212> PRT
<213> Desconhecido
<220>
<223> Camelideo <400> 468
Gln Val Lys Leu Glu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Asp 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ser Phe Ser Ser Ile 20 25 30 Thr Met Gly 35 Trp Phe Arg Gln Ala 40 Pro Gly Lys Glu Arg 45 Gln Phe Val Ser Ala Ile Asn Ser Asn Gly Asn Arg Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 60 Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr Leu 65 70 75 80 Gln Met Asn Ser Leu 85 Lys Pro Glu Asp Thr 90 Ala Val Tyr Tyr Cys 95 Ala Ala Val Gln Ala Tyr Ser Ser Ser Ser Asp Tyr Tyr Ser Gln Glu Gly 100 105 110 Ala Tyr Asp 115 Tyr Trp Gly Gln Gly 120 Thr Gln Val Thr Val 125 Ser Ser
<210> 469 <211> 126 <212> PRT
<213> Desconhecido
<220>
<223> Camelideo <400> 469
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Arg Thr Phe Ser Ser Met 20 25 30 Gly Trp Phe 35 Arg Gln Ala Pro Gly 40 Lys Glu Arg Glu Phe 45 Val Ala Thr Ile Asn Leu Ser Gly Asp Arg Thr Asp Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly 50 55 60 Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Pro Lys Asn Thr Val Tyr Leu Gln 65 70 75 80 Met Asp Ser Leu Glu Pro Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Gly 85 90 95 Thr Ser Leu Tyr Pro Ser Asn Leu Arg Tyr Tyr Thr Leu Pro Gly Thr 100 105 110 Tyr Ala Asp Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser 115 120 125
<210> 470 <211> 126 <212> PRT
<213> Desconhecido <220>
<223> Camelideo <400> 470
Gln Val Lys Leu Glu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu 20 Ser Cys Ala Ala Ser 25 Gly Ser Ile Phe Ser 30 Ile Asn Ala Met Gly 35 Trp Tyr Arg Gln Ala 40 Pro Gly Lys Gln Arg 45 Glu Leu Val Ala Arg Ile Thr Gly Thr Gly Thr Gly Ile Thr Gly Ala Val Ser Thr 50 55 60 Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn 65 70 75 80 Ala Arg Asn
Thr Ala Val
Pro Asp Tyr 115
<210> 471 <211> 126 <212> PRT <213> Desconhecido
<220>
<223> Camelideo <400> 471
Gln Val Gln Leu Gln Asp Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Arg Phe Ser Ser Ala Gln Tyr 20 25 30 Ala Ile Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val 35 40 45 Ser Tyr Ile Thr Phe Ser Gly Gly Pro Thr Gly Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Val Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr 80 65 70 75 Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Ala Arg Pro 100 Tyr Thr Arg Pro Gly 105 Ser Met Trp Val Ser 110 Ser Leu Tyr Asp Asn Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser 115 120 125
<210> 472 <211> 123 <212> PRT
<213> Desconhecido
<220>
<223> Camelídeo <400> 472
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Gly Arg Leu Val Gln Ala Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Glu His Thr Phe Arg Gly Tyr 20 25 30 Ala Ile Gly 35 Trp Phe Arg Gln Ala 40 Pro Gly Lys Glu Arg 45 Glu Phe Val Ser Ser Ile Thr Tyr Asp Gly Thr Leu Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Thr Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr 80 65 70 75 Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Val Cys 85 90 95 Ala Ala Gly Tyr Ser Tyr Arg Tyr Thr Thr Leu Asn Gln Tyr Asp Ser 100 105 110 Trp Gly Gln 115 Gly Thr Gln Val Thr 120 Val Ser Ser
Thr Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp
85 90 95
Tyr Tyr Cys Ala Ala Asp Arg Ser Arg Thr Ile Val Val
100 105 no
Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser 120 125
<210> 473 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 473
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ile Lys His 20 25 30 Leu Lys Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Gly Ala Ser Arg Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Ala Arg Trp Pro Gln 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 474 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 474
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Phe Arg His 20 25 30 Leu Lys Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Arg Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Val Ala Leu Tyr Pro Lys 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 475 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 475
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Tyr Tyr His 20 25 30 Leu Lys Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Lys Ala Ser Thr Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Val Arg Lys Val Pro Arg 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 10 0 105 <210> 476 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens
<400> 476
Asp Ile Gln Thr Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Tyr Ile Gly Arg Tyr 20 25 30 Leu Arg Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Asp Ser Ser Val Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Tyr Arg Met Pro Tyr 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 477 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 477
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Tyr Ile Gly Arg Tyr 20 25 30 Leu Arg Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Asp Ser Ser Val Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Arg Tyr Met Gln Pro 95 Phe Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 478
<211> 108
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 478
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro
1 5
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg
20
Leu Arg Trp Tyr Gln Gln Lys Pro
40
Tyr Asn Gly Ser Gln Leu Gln Ser
50 55
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr 65 70
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys
Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
15
Ala Ser Gln Trp Ile Gly Arg Tyr 30
Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 45
Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
60
Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
75 80
Gln Gln Arg Tyr Leu Gln Pro Tyr 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105 <210> 479 <211> 108 <212> PRT <213> Homo ; sapiens <400> 479 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Tyr Ile Ser Arg Gln 20 25 30 Leu Arg Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Arg Leu Leu Ile 40 45 Tyr Gly Ala Ser Val Leu Gln Ser Gly Ile Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Tyr Ile Thr Pro Tyr 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Val Lys Arg 100 105
<210> 480 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 480
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Tyr Ile Gly Arg Tyr 20 25 30 Leu Arg Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Asp Ser Ser Val Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Arg Tyr Ser Ser Pro 95 Tyr Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 481 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens
<400> 481
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro
1 5
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg 20
Leu Lys Trp Tyr Gln Gln Lys Pro
40
Tyr Tyr Ala Ser Ile Leu Gln Ser 50 55
Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
15
Ala Ser Gln Trp Ile His Arg Gln 30
Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 45
Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln 65 70 75 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Thr Phe Ser Lys Pro 95 Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 482 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 482
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr 20 Ile Thr Cys Arg Ala 25 Ser Gln Lys Ile Ala 30 Thr Tyr Leu Asn Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Arg Ser Ser Ser Leu Gln Ser Ala Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Val Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Thr Tyr Ala Val Pro 95 Pro Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 483
<211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 483
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr 20 Ile Thr Cys Arg Ala 25 Ser Gln Trp Ile Asp 30 Thr Gly Leu Ala Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Arg 45 Leu Leu Ile Tyr Asn 50 Val Ser Arg Leu Gln 55 Ser Gly Val Pro Ser 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Tyr Trp Gly Ser Pro 95 Thr Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 484 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 484
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Glu Ile Tyr Ser Trp
25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Asn 50 Ala Ser His Leu Gln Ser 55 Gly Val Pro Ser 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Val Ile Gly Asp Pro 95 Val Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu Ile 105 Lys Arg
<210> 485 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 485
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr 20 25 30 Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Thr Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Arg Leu Ser Val Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Thr Tyr Asn Val Pro 95 Pro Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 486 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 486
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr 20 25 30 Leu Asn Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Arg Asn Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Thr Tyr Thr Val Pro 95 Pro Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Gln
<210> 487 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 487
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr 20 25 30 Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Arg Asn Ser Gln Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Thr Phe Ala Val Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg
100 105
<210> 488
<211> 35
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> Consenso
<221> VARIANTE <222> 30, 31
<223> Xaa = Qualquer aminoácido
<400> 488
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly
1 5
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala 20
Asn Met Ser 35
Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
15
Ser Gly Phe Thr Phe Xaa Xaa Tyr 30
<210> 489 <211> 123 <212> PRT <213> Homo sapiens
<400> 489
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu 20 Ser Cys Ala Ala Ser 25 Gly Phe Thr Phe Ser 30 Lys Tyr Trp Met Ser 35 Trp Val Arg Gln Ala 40 Pro Gly Lys Gly Leu 45 Glu Trp Val Ser Ser 50 Ile Asp Phe Met Gly 55 Pro His Thr Tyr Tyr 60 Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser 85 Leu Arg Ala Glu Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr 95 Cys Ala Lys Gly Arg 100 Thr Ser Met Leu Pro 105 Met Lys Gly Lys Phe 110 Asp Tyr Trp Gly Gln 115 Gly Thr Leu Val Thr 120 Val Ser Ser
<210> 490 <211> 118 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 490
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly 1 5 Ser Leu Arg Leu 20 Ser Cys Ala Ala Asn Met Ser 35 Trp Val Arg Gln Ala 40 Ser Thr Ile Thr His Thr Gly Gly 50 55 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg 65 70 Leu Gln Met Asn Ser 85 Leu Arg Ala Ala Lys Gln Asn 100 Pro Ser Tyr Gln Leu Val Thr 115 Val Ser Ser
Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
15
Ser Gly Phe Thr Phe Tyr Asp Tyr 30
Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 45
Val Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
60
Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
75 80
Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
90 95
Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 105 110
<210> 491 <211> 118 <212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 491
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly 1 5 Ser Leu Arg Leu 20 Ser Cys Ala Ala Ser Met Ser 35 Trp Val Arg Gln Ala 40 Ser Thr 50 Ile Leu Pro Gly Gly Asp 55 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg 65 70 Leu Gln Met Asn Ser 85 Leu Arg Ala Ala Lys Gln Thr 100 Pro Asp Tyr Met Leu Val Thr 115 Val Ser Ser
Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
15
Ser Gly Phe Thr Phe His Arg Tyr 30
Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 45
Val Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 60
Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
75 80
Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
90 95
Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 105 110
<210> 492 <211> 117 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 492
Glu Val Gln Leu Leu
1 5
Ser Leu Arg Leu Ser
20
Asn Met Ala Trp Val
35
Ser Thr Ile Leu Gly 50
Lys Gly Arg Phe Thr 65
Leu Gln Met Asn Ser
85
Ala Lys Thr Met Asp
Glu Ser Gly Gly Gly 10
Cys Ala Ala Ser Gly
25
Arg Gln Ala Pro Gly 40
Glu Gly Asn Asn Thr 55
Ile Ser Arg Asp Asn
70
Leu Arg Ala Glu Asp
90
Tyr Lys Phe Asp Tyr
Leu Val Gln Pro Gly Gly
15
Phe Thr Phe Trp Lys Tyr
30
Lys Gly Leu Glu Trp Val 45
Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 60
Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 75 80
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
95
Trp Gly Gln Gly Thr Leu 100 105 110
Val Thr Val Ser Ser 115
<210> 493 <211> 118 <212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 493
Glu Val Glri Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asp Glu Tyr
25 30
Asn Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
40 45
Ser Thr Ile Leu Pro His Gly Asp Arg Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Gln Asp Pro Leu Tyr Arg Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Leu Val Thr Val Ser Ser 115
<210> 494 <211> 120 <212> PRT
<213> Horno sapiens
<400> 494
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asp Leu Tyr
25 30
Asp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
40 45
Ser Ser Ile Val Asn Ser Gly Val Arg Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Leu Asn Gln Ser Tyr His Trp Asp Phe Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120
<210> 495 <211> 118 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 495
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 25 30 Arg Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
40 45
Ser Thr Ile Ile Ser Asn Gly Lys Phe Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Gln Asp Trp Met Tyr Met Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Leu Val Thr Val Ser Ser 115
<210> 496 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 496
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr
25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
40 45
Tyr Arg Asn Ser Pro Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Thr Tyr Arg Val Pro Pro
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 497 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 497
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln His Ile His Arg Glu
25 30
Leu Arg Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
40 45
Tyr Gln Ala Ser Arg Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Lys Tyr Leu Pro Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 498 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 498
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln His Ile His Arg Glu
25 30
Leu Arg Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
40 45
Tyr Gln Ala Ser Arg Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Tyr Arg Val Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 499 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 499
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Gly Arg Arg
25 30
Leu Lys Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Ala Ala Pro Arg Leu Leu Ile
40 45
Tyr Arg Thr Ser Trp Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Thr Ser Gln Trp Pro His
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 500 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens
<400> 500
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Lys Ile Tyr Lys Asn
25 30
Leu Arg Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
40 45
Tyr Asn Ser Ser Ile Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Tyr Leu Ser Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 501 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 501
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Lys Ile Tyr Asn Asn
25 30
Leu Arg Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
40 45
Tyr Asn Thr Ser Ile Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Trp Arg Ala Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 502 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 502
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Tyr Lys Ser
25 30
Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
40 45
Tyr Gln Ser Ser Leu Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr His Gln Met Pro Arg
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 503 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 503
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Tyr Arg His
25 30
Leu Arg Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
40 45
Tyr Asp Ala Ser Arg Leu Gln Ser Gly Val Pro Thr Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Thr His Asn Pro Pro Lys
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105 <210> 504 <211> 116 <212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 504
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Trp Pro Tyr
25 30
Thr Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
40 45
Ser Thr Ile Ser Pro Phe Gly Ser Thr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Gly Gly Lys Asp Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser 115
<210> 505 <211> 117 <212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 505
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Trp Pro Tyr
25 30
Thr Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
40 45
Ser Thr Ile Ser Pro Phe Gly Ser Thr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Gly Asn Leu Glu Pro Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser 115
<210> 506 <211> 117 <212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 506
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Trp Pro Tyr
25 30
Thr Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
40 45
Ser Thr Ile Ser Pro Phe Gly Ser Thr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 80 65 70 75 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Lys Leu 100 Ser Asn Gly Phe Asp Tyr 105 Trp Gly Gln Gly 110 Thr Leu Val Thr Val 115 Ser Ser
<210> 507 <211> 118 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 507
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Trp Pro Tyr 20 25 30 Thr Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Thr Ile Ser Pro Phe Gly Ser Thr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 80 65 70 75 Leu Gln Met Asn Ser 85 Leu Arg Ala Glu Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr 95 Cys Ala Lys Val Val 100 Lys Asp Asn Thr Phe Asp 105 Tyr Trp Gly Gln 110 Gly Thr Leu Val Thr 115 Val Ser Ser
<210> 508 <211> 118 <212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 508 Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Trp Pro Tyr 20 25 30 Thr Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Thr Ile Ser Pro Phe Gly Ser Thr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 80 65 70 75 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Asn Thr 100 Gly Gly Lys Gln Phe 105 Asp Tyr Trp Gly Gln 110 Gly Thr Leu Val Thr 115 Val Ser Ser
<210> 509 <211> 118 <212> PRT <213> Homo sapiens <4O0> 509
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly
1 5
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala 20
Thr Met Ser Trp Val Arg Gln Ala
40
Ser Thr Ile Ser Pro Phe Gly Ser
50 55
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg 65 70
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala 85
Ala Lys Lys Thr Gly Pro Ser Ser 100
Leu Val Thr Val Ser Ser 115
Gly Gly 10 Leu Val Gln Pro Gly 15 Gly Ser Gly Phe Thr Phe Trp Pro Tyr 30 Pro Gly Lys Gly Leu 45 Glu Trp Val Thr Thr Tyr Tyr 60 Ala Asp Ser Val Asp Asn Ser 75 Lys Asn Thr Leu Tyr 80 Glu Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr 95 Cys Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 105 110
<210> 510 <211> 120 <212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 510
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly 1 5 Ser Leu Arg Leu 9 π Ser Cys Ala Ala Thr Met Ser U Trp Val Arg Gln Ala 35 40 Ser Thr Ile Ser Pro Phe Gly Ser 50 55 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg 65 70 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala 85 Ala Lys Arg Thr Glu Asn Arg Gly 100 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120
Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 10 15 Ser Gly Phe Thr Phe Trp Pro Tyr 30 Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 45 Thr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 60 Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 75 80 Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 90 95 Val Ser Phe Asp Tyr Trp Gly Gln 105 110
<210> 511 <21l> 122 <212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 511
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu 20 Ser Cys Ala Ala Ser 25 Gly Phe Thr Phe Trp 30 Pro Tyr Thr Met Ser 35 Trp Val Arg Gln Ala 40 Pro Gly Lys Gly Leu 45 Glu Trp Val Ser Thr 50 Ile Ser Pro Phe Gly Ser 55 Thr Thr Tyr Tyr 60 Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser 85 Leu Arg Ala Glu Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr 95 Cys Ala Lys Ser Asp 100 Val Leu Lys Thr Gly 105 Leu Asp Gly Phe Asp 110 Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120
<210> 512 <211> 120 <212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 512 Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Met Ala Tyr 20 25 30 Gln Met Ala 35 Trp Val Arg Gln Ala 40 Pro Gly Lys Gly Leu 45 Glu Trp Val Ser Thr 50 Ile His Gln Thr Gly 55 Phe Ser Thr Tyr Tyr 60 Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser 85 Leu Arg Ala Glu Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr 95 Cys Ala Lys Val Arg Ser Met Arg Pro Tyr Lys Phe Asp Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120
<210> 513 <211> 120 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 513
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Lys Asp Tyr 20 25 30 Asp Met Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Met 50 Ile Ser Ser Ser Gly 55 Leu Trp Thr Tyr Tyr 60 Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Gly Phe Arg Leu Phe Pro Arg Thr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Leu 115 Val Thr Val Ser Ser 120
<210> 514 <211> 121 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 514
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly
1 5
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala 20
Val Met Gly Trp Ala Arg Gln Ala
Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
15
Ser Gly Phe Thr Phe His Asp Tyr 30
Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35
Ser Leu Ile
50
Lys Gly Arg 65
Leu Gln Met Ala Lys Gly
Gln Gly Thr
115
<210> 515 <211> HB <212> PRT <213> Homo sapiens
<400> 515
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg His Tyr 20 25 30 Arg Met Gly Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Trp 50 Ile Arg Pro Asp Gly 55 Thr Phe Thr Tyr Tyr 60 Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser 85 Leu Arg Ala Glu Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr 95 Cys Ala Lys Ser Tyr Met Gly Asp Arg Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr 115 Val Ser Ser
<210> 516 <211> 116 <212> PRT <213> Homo sapiens
<400> 516
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Met Trp Asp 20 25 30 Lys Met Gly Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Val Ser Phe Ile Gly Arg Glu Gly Tyr Gly Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser 85 Leu Arg Ala Glu Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr 95 Cys Ala Lys Ser Val Ala Ser Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 100 105 110 Thr Val Ser 115 Ser
40 45
Lys Pro Asn Gly Ser Pro Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 55 60 Phe Thr Ile 70 Ser Arg Asp Asn Ser 75 Lys Asn Thr Leu Tyr 80 Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Arg Gly Arg Phe Asn Val Leu Gln Phe Asp Tyr Trp Gly 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ser
120
<210> 517 <211> 117 <212> PRT
<213> Homo sapiens < 4 0 0 > 517
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu 20 Ser Cys Ala Ala Ser 25 Gly Phe Thr Phe Trp 30 Ala Tyr Pro Met Ser 35 Trp Val Arg Gln Ala 40 Pro Gly Lys Gly Leu 45 Glu Trp Val Ser Ser 50 Ile Ser Ser Trp Gly 55 Thr Gly Thr Tyr Tyr 60 Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser 85 Leu Arg Ala Glu Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr 95 Cys Ala Lys Gly Gly Gln Gly Ser Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu 100 105 110 Val Thr Val 115 Ser Ser
<210> 518 <211> 115 <212> PRT
<213> Desconhecido
<220>
<223> Camelideo <400> 518
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Glu Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Phe 20 25 30 Gly Met Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Val Glu Trp Val 35 40 45 Ser Gly Ile Ser Ser Leu Gly Asp Ser Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser 85 Leu Lys Pro Glu Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr 95 Cys Thr Ile Gly Gly Ser Leu Asn Pro Gly Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser 115
<210> 519 <211> 115 <212> PRT
<213> Desconhecido
<220>
<223> Camelideo < 4 O O > 519
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly
1 5
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala
20
Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala
Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Asn
15
Ser Gly Phe Thr Phe Arg Asn Phe 30
Pro Gly Lys Glu Pro Glu Trp Val 40 45 Ser Ser Ile Ser Gly Ser Gly Ser Asn Thr Ile Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Asp Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Ser Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Thr Ile Gly Gly Ser Leu Ser Arg Ser Ser Gln Gly Thr- Gln Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser 115 <210> 520 <211> 114 <212> PRT <213> Desconhecido <22 0> <223> Camelideo <400> 520 Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Thr Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe 20 25 30 Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 40 45 Ser Ala Ile Ser Ser Asp Ser Gly Thr Lys Asn Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Lys Met Leu Phe 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Val Ile Gly Arg Gly Ser Pro Ser Ser Gln Gly Thr Gln Val Thr Val 100 105 110 Ser Ser <210> 521 <211> 114 <212> PRT <213> Desconhecido <220> <223> Camelideo <400> 521 Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Thr Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg Ser Phe 20 25 30 Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 40 45 Ser Ala Ile Ser Ala Asp Gly Ser Asp Lys Arg Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Gly Lys Lys Met Leu Thr 65 70 75 80 Leu Asp Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Val Ile Gly Arg Gly Ser Pro Ala Ser Gln Gly Thr Gln Val Thr Val 100 105 110 Ser Ser <210> 522 <211> 128 <212> PRT
<213> Desconhecido
<220>
<223> Camelideo <400> 522
Ala Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Asp
10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Val Ser Gly Thr Thr Phe Ser Ser Ala
25 30
Ala Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
40 45
Gly Ala Ile Lys Trp Ser Gly Thr Ser Thr Tyr Tyr Thr Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Val Lys Asn Thr Val Tyr 65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Asn Leu Lys Pro Glu Asp Thr Gly Val Tyr Thr Cys
85 90 95
Ala Ala Asp Arg Asp Arg Tyr Arg Asp Arg Met Gly Pro Met Thr Thr
100 105 110
Thr Asp Phe Arg Phe Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser 115 120 125
<210> 523 <211> 124 <212> PRT
<213> Desconhecido <220>
<223> Camelideo
<400> 523
Gln Val Lys Leu Glu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Thr Gly Gly
10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Ser Phe
25 30
Ala Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Arg Glu Arg Glu Phe Val
40 45
Ala Ser Ile Gly Ser Ser Gly Ile Thr Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr 65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Gly Leu Cys Tyr Cys
85 90 95
Ala Val Asn Arg Tyr Gly Ile Pro Tyr Arg Ser Gly Thr Gln Tyr Gln
100 105 110
Asn Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser 115 120
<210> 524 <211> 120 <212> PRT
<213> Desconhecido
<220> <223> Camelideo <400> 524 Glu Val Gln Leu Glu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Leu Thr Phe Asn Asp Tyr 20 25 30 Ala Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Asp Met Val 35 40 45 Ala Thr Ile Ser Ile Gly Gly Arg Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 60 Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr Leu 65 70 75 80 Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Val 85 90 95 Ala His Arg Gln Thr Val Val Arg Gly Pro Tyr Leu Leu Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser 115 120
<210> 525 <211> 123 <212> PRT <213> Desconhecido
<220>
<223> Camelideo <4O0> 525
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Lys Leu Val Gln Ala Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Asn Tyr 20 25 30 Ala Met Gly 35 Trp Phe Arg Gln Ala 40 Pro Gly Lys Glu Arg 45 Glu Phe Val Ala Gly 50 Ser Gly Arg Ser Asn 55 Ser Tyr Asn Tyr Tyr 60 Ser Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser 85 Leu Lys Pro Glu Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr 95 Cys Ala Ala Ser Thr 100 Asn Leu Trp Pro Arg 105 Asp Arg Asn Leu Tyr 110 Ala Tyr Trp Gly Gln 115 Gly Thr Gln Val Thr 120 Val Ser Ser
<210> 526 <211> 125 <212> PRT <213> Desconhecido
<220>
<223> Camelideo <400> 526
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Asp
10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ser Leu Gly Ile Tyr
25 30
Arg Met Gly Trp Phe Arg Gln Val Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val 40 45 Ala Ala 50 Ile Ser Trp Ser Gly Gly 55 Thr Thr Arg Tyr 60 Leu Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Ser Thr Lys Asn Ala Val Tyr 80 65 70 75 Leu Gln Met Asn Ser 85 Leu Lys Pro Glu Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr 95 Cys Ala Val Asp Ser Ser Gly Arg Leu Tyr Trp Thr Leu Ser Thr Ser Tyr 100 105 110 Asp Tyr Trp 115 Gly Gln Gly Thr Gln 120 Val Thr Val Ser Ser 125
<210> 527 <211> 125 <212> PRT
<213> Desconhecido <220>
<223> Camelideo <400> 527
Gln Val Gln Leu Val Glu Phe Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Asp 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ser Leu Gly Ile Tyr 20 25 30 Lys Met Ala 35 Trp Phe Arg Gln Val 40 Pro Gly Lys Glu Arg 45 Glu Phe Val Ala Ala 50 Ile Ser Trp Ser Gly Gly 55 Thr Thr Arg Tyr 60 Ile Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Leu Ser Arg Asp Asn Thr Lys Asn Met Val Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser 85 Leu Lys Pro Asp Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr 95 Cys Ala Val Asp Ser Ser Gly Arg Leu Tyr Trp Thr Leu Ser Thr Ser Tyr 100 105 110 Asp Tyr Trp 115 Gly Gln Gly Thr Gln 120 Val Thr Val Ser Ser 125
<210> 528 <211> 124 <212> PRT
<213> Desconhecido
<220>
<223> Camelideo
<400> 528
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Ser Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30 Thr Met Gly 35 Trp Phe Arg Gln Ala 40 Pro Gly Lys Glu Arg 45 Glu Phe Leu Ala Gly Val Thr Trp Ser Gly Ser Ser Thr Phe Tyr Gly Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ala Ser Arg Asp Ser Ala Lys Asn Thr Val Thr 65 70 75 80 Leu Glu Met Asn Ser Leu Asn Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Ala Ala Tyr 100 Gly Gly Gly Leu Tyr 105 Arg Asp Pro Arg Ser 110 Tyr Asp Tyr Trp Gly 115 Arg Gly Thr Gln Val 120 Thr Val Ser Ser <210> 529 <211> 131 <212> PRT
<213> Desconhecido
<220>
<223> Camelideo <400> 529
Ala Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Leu Asp Ala Trp 20 25 30 Pro Ile Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val 35 40 45 Ser Cys Ile Arg Asp Gly Thr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly 50 55 60 Arg Phe Thr Ile Ser Ser Asp Asn Ala Asn Asn Thr Val Tyr Leu Gln 65 70 75 80 Thr Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Ala 85 90 95 Pro Ser Gly Pro Ala Thr Gly Ser Ser His Thr Phe Gly Ile Tyr Trp 100 105 110 Asn Leu Arg Asp Asp Tyr Asp Asn Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr 115 120 125
Val Ser Ser 130
<210> 530 <211> 126 <212> PRT
<213> Desconhecido
<220>
<223> Camelideo <400> 530
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu 20 Ser Cys Ala Ala Ser 25 Gly Phe Thr Phe Asp 30 His Tyr Thr Ile Gly 35 Trp Phe Arg Gln Val 40 Pro Gly Lys Glu Arg 45 Glu Gly Val Ser Cys 50 Ile Ser Ser Ser Asp 55 Gly Ser Thr Tyr Tyr 60 Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ser Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr 80 65 70 75 Leu Gln Met Asn Thr 85 Leu Glu Pro Asp Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr 95 Cys Ala Ala Gly Gly Leu Leu Leu Arg Val Glu Glu Leu Gln Ala Ser Asp 100 105 110 Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Ile Gln Val Thr Val Ser Ser 115 120 125
<210> 531 <211> 128 <212> PRT
<213> Desconhecido <220>
<223> Camelideo
<400> 531
Ala Val Gln Leu Val Asp Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Leu Asp Tyr Tyr 20 25 30 Ala Ile Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val 35 40 45 Ala Cys 50 Ile Ser Asn Ser Asp 55 Gly Ser Thr Tyr Tyr 60 Gly Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Thr Thr Val Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Thr Ala Asp Arg His Tyr Ser Ala Ser His His Pro Phe Ala Asp 100 105 110 Phe Ala Phe 115 Asn Ser Trp Gly Gln 120 Gly Thr Gln Val Thr 125 Val Ser Ser
<2I0> 532 <211> 120 <212> PRT
<213> Desconhecido
<220>
<223> Camelideo <400> 532
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Tyr Gly Leu Thr Phe Trp Arg Ala 20 25 30 Ala Met Ala Trp Phe Arg Arg Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Leu Val 35 40 45 Val Ala Arg Asn Trp Gly Asp Gly Ser Thr Arg Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Ala Val Arg Thr Tyr Gly Ser Ala Thr Tyr Asp Ile Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Gln 115 Val Thr Val Ser Ser 120
<210> 533 <211> 123 <212> PRT
<213> Desconhecido
<220>
<223> Camelideo <400> 533
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly
1 5
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ile Phe 20
Ala Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala
Gly Gly Leu Val Gln Asp Gly Gly
15
Ser Gly Arg Thr Phe Ala Asn Tyr 30
Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val 35 40 45 Ala Ala 50 Ile Asn Arg Asn Gly 55 Gly Thr Thr Asn Tyr 60 Ala Asp Ala Leu Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Thr Lys Asn Thr Ala Phe 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser 85 Leu Lys Pro Asp Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr 95 Cys Ala Ala Arg Glu Trp Pro Phe Ser Thr Ile Pro Ser Gly Trp Arg Tyr 100 105 110 Trp Gly Gln 115 Gly Thr Gln Val Thr Val 120 Ser Ser
<210> 534 <211> 125 <212> PRT
<213> Desconhecido
<220>
<223> Camelideo
<400> 534 Asp Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Trp Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu 20 Ser Cys Ala Ala Ser 25 Gly Pro Thr Ala Ser 30 Ser His Ala Ile Gly 35 Trp Phe Arg Gln Ala 40 Pro Gly Lys Glu Arg 45 Glu Phe Val Val Gly Ile Asn Arg Gly Gly Val Thr Arg Asp Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Ala Val Ser Arg Asp Asn Val Lys Asn Thr Val Tyr 80 65 70 75 Leu Gln Met Asn Arg 85 Leu Lys Pro Glu Asp 90 Ser Ala Ile Tyr Ile Cys 95 Ala Ala Arg Pro Glu Tyr Ser Phe Thr Ala Met Ser Lys Gly Asp Met 100 105 110 Asp Tyr Trp 115 Gly Lys Gly Thr Leu 120 Val Thr Val Ser Ser 125
<210> 535
<211> 324
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 535
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt cctgagttaa gttggtacca gcagaaacca 120 gggaaagccc ctaagctcct gatctatcat ggttccattt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag tatatgacgt atcctccgac gttcggccaa 300 gggaccaagg tggaaatcaa acgg 324
<210> 536 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 536
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ccgtaggaga ccgtgtcacc 60
atcacttgcc gggcaagtca gtttattggg aaggagttac gttggtatca gcagaaacca 120
gggaaagccc ctaagctcct gatctatcat cagtccttgt tgcaaagtgg ggtcccatca 180
cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcattctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag catatgtata ggccttttac gttcggccaa 300 gggaccaagg tggaaatcaa acga 324
<210> 537 <211> 348 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 537
gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgcgtctc 60 tcctgtgcag cctccggatt cacctttaag gcttatccga taatgtgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg gtctagagtg ggtctcagag atttcgcctt cgggttctga gacatactac 180 gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tcccgcgaca attccaagaa cacgctgtat 240 ctgcaaatga acagcctgcg tgccgaggac accgcggtat attactgtgc gaaagatcct 300 cggaagtttg actactgggg tcagggaacc ctggtcaccg tctcgagc 348
<210> 538 <211> 348 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 538
gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgcgtctc 60
tcctgcgcag cctccggatt cacctttaag gcttatccga taatgtgggt ccgccaggct 120
ccagggaagg gtctagagtg ggtctcagag atttcgcctt cgggttctcg gacatactac 180
gcagactctg tgaagggccg gttcaccatc tcccgcgaca attccaagaa cacgctgtat 240
ctgcaaatga acagcctgcg tgccgaggac accgcggtat attactgtgc gaaagatcct 300
cggaagtttg actactgggg tcagggaacc ctggtcaccg tctcgagc 348
<210> 539 <211> 116 <212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 539
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Lys Ala Tyr
25 30
Pro Ile Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
40 45
Ser Glu Ile Ser Pro Ser Gly Ser Glu Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Asp Pro Arg Lys Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser 115
<210> 540 <211> 116 <212> PRT <213> Homo sapiens
<400> 540
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Lys Ala Tyr 25 30 Pro Ile Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Glu 50 Ile Ser Pro Ser Gly Ser 55 Arg Thr Tyr Tyr 60 Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 80 65 70 75 Leu Gln Met Asn Ser 85 Leu Arg Ala Glu Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr 95 Cys Ala Lys Asp Pro 100 Arg Lys Phe Asp Tyr 105 Trp Gly Gln Gly Thr 110 Leu Val Thr Val Ser 115 Ser
<210> 541 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 541
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr 20 Ile Thr Cys Arg Ala 25 Ser Gln Trp Ile Gly 30 Ile Leu Leu Asp Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Arg 45 Leu Leu Ile Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Arg Glu Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Ala Asn Pro Ala Pro 95 Leu Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 542 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 542
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly Ile Leu 20 25 30 Leu Asp Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Ala Glu Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Ala Asn Pro Ala Pro 95 Leu Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 543 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <4 00> 543 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr 20 Ile Thr Cys Arg Ala 25 Ser Gln Trp Ile Gly 30 Ile Leu Leu Asp Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Asn Lys Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Ala Asn Pro Ala Pro 95 Leu Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 544 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 544
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<210> 545 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens
<400> 545
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<213> Homo sapiens <400> 546
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<213> Homo sapiens <400> 547
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<213> Homo sapiens <400> 548
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<400> 549
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<400> 550
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<210> 551 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens
<400> 551
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85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 552
<211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 552
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr 20 Ile Thr Cys Arg Ala 25 Ser Gln Trp Ile Gly 30 Ile Leu Leu Asp Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Ala Asn Pro Ile Pro 95 Pro Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 553 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 553
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr 20 Ile Thr Cys Arg Ala 25 Ser Gln Trp Ile Gly 30 Ile Leu Leu Asp Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Pro 90 Ala Asn Pro Thr Pro 95 Pro Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 554 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 554
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly Ile Leu
25 30
Leu Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Glu Ala Pro Lys Leu Leu Ile
40 45
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50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80
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85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 555 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 555
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr 20 Ile Thr Cys Arg Ala 25 Ser Gln Trp Ile Gly 30 Ile Leu Leu Asp Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Asn Asn Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Asn Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Ala Asn Pro Ala Pro 95 Leu Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 556 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 556
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly Ile Leu 20 25 30 Leu Asp Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Ala Pro Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Ala Asn Pro Ala Pro 95 Leu Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 557 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 557
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly Ile Leu
25 30
Leu Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 40 45 Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Asn Ser 50 55
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr 65 70
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys 85
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val
100
170
Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
60
Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
75 80
Gln Gln Ala Asn Pro Ala Pro Leu
90 95
Glu Ile Lys Arg 105
<210> 558 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 558
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly Ile Leu 20 25 30 Leu Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Glu Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Lys Gln Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Pro Ala Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg
100 105
<210> 559 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 559
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly Ile Leu 20 25 30 Leu Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Asn Asn Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Pro Ala Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg
100 105
<210> 560 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 560
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
10 15
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<210> 561 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 561
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<210> 562 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens
<400> 562
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr 20 Ile Thr Cys Arg Ala 25 Ser Gln Trp Ile Gly 30 Ile Leu Leu Asp Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Glu Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Pro 90 Ala Asn Pro Thr Pro 95 Pro Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 563 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens
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100 105
<210> 564 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 564
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly Ile Leu
25 30
Leu Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Glu Ala Pro Lys Leu Leu Ile
40 45
Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
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Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Pro Tyr Pro Thr
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 565 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 565
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr 20 Ile Thr Cys Arg Ala 25 Ser Gln Trp Ile Gly 30 Ile Leu Leu Asp Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro Gly 40 Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Tyr 50 Ala Ser Phe Leu Ala 55 Pro Gly Val Pro Ser 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Ala Asn Pro Ala Pro 95 Leu Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg
100 105
<210> 566 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 566
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr 20 Ile Thr Cys Arg Ala 25 Ser Gln Trp Ile Gly 30 Ile Leu Leu Asp Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Pro 90 Ala Asn Pro His Pro 95 Pro Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 567 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 567
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr 20 Ile Thr Cys Arg Ala 25 Ser Gln Trp Ile Gly 30 Ile Leu Val Asp Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Pro Glu Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Ala Asn Pro Ala Pro 95 Leu Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 568 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 568
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr 20 Ile Thr Cys Arg Ala 25 Ser Gln Trp Ile Gly 30 Ile Leu Val Asp Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Ala Asn Pro Val Pro 95 Pro Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg <210> 569 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 569
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr 20 Ile Thr Cys Arg Ala 25 Ser Gln Trp Ile Gly 30 Ile Leu Ile Asp Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Pro Glu Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Ala Asn Pro Ala Pro 95 Leu Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 570 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens
<400> 570
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr 20 Ile Thr Cys Arg Ala 25 Ser Gln Trp Ile Gly 30 Ile Leu Ile Asp Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Ala Asn Pro Val Pro 95 Pro Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 571 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens
<400> 571
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<400> 572
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<213> Homo sapiens <400> 573
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<213> Homo sapiens
<400> 574
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<213> Homo sapiens <400> 576
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1 5
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<213> Homo sapiens
<400> 585
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<213> Homo sapiens <400> 586
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<213> Homo sapiens
<400> 587
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<213> Homo sapiens <400> 588
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<213> Homo sapiens
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100 105
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<213> Homo sapiens <400> 594
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10 15
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<213> Homo sapiens <400> 596
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<213> Homo sapiens
<400> 597
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10 15
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25 30
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<213> Homo sapiens <400> 598
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85 90 95
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<213> Homo sapiens <400> 599
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asn Ile Gly Asn Leu
25 30
Leu Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
40 45
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50 55 60
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85 90 95
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<212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 600
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10 15
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100
185
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60
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75 80
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90 95
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<213> Homo sapiens
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100 105
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<213> Homo sapiens
<400> 603
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100 105
<210> 606 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 606 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly Ile Gln 20 25 30 Leu Asp Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Pro Ala Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 607 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 607
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly Ile Thr 20 25 30 Leu Asp Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Pro Ala Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 608 <211> 108 <212> PRT
<213> Horao sapiens
<400> 608
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly Asn Leu 20 25 30 Leu Asp Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Pro Val Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 609 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 609
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Tyr Ile Gly Asn Leu 20 25 30 Leu Asp Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Pro Val Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 610 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 610
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln His Ile Gly Asn Leu 20 25 30 Leu Asp Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Pro Val Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 611 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens
<4 00> 611
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 ' 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly Ile Asn 20 25 30 Leu Asp Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Pro Val Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg <210> 612 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens
<400> 612 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Tyr Ile Gly Ile Asn 20 25 30 Leu Asp Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Pro Val Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 613 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 613
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly Asn Asn 20 25 30 Leu Asp Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Ala Asn Pro Val Pro 95 Pro Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 614 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens
<400> 614
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly Asn Leu 20 25 30 Leu Asp Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Pro Thr Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg <210> 615 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 615 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Tyr Ile Gly Asn Leu 20 25 30 Leu Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Pro Thr Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg
100 105
<210> 616 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 616 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln His Ile Gly Asn Leu 20 25 30 Leu Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Pro Thr Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg
100 105
<210> 617 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 617
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly Ile Asn 20 25 30 Leu Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Pro Thr Pro Pro 85 90
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
95
<210> 618 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 618
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Tyr Ile Gly Ile Asn 20 25 30 Leu Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Pro Thr Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 619 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 619
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln His Ile Gly Ile Asn 20 25 30 Leu Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Pro Thr Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 620 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 620
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro
1 5
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg 20
Leu Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro
40
Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser 50 55
Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
15
Ala Ser Gln Trp Ile Gly Asn Asn 30
Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 45
Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 60 Ser Gly Tyr Gly Thr Asp Phe Thr 65 70
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys 85
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val 100
Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
75 80
Gln Gln Ala Asn Pro Thr Pro Pro
90 95
Glu Ile Lys Arg 105
<210> 621 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens
<400> 621 Val Gly Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly Asn Leu 20 25 30 Leu Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Phe Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Pro Val Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 622 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 622
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly Asn Leu 20 25 30 Leu Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Gly Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Pro Glu Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser 50 55 60 Ser Gly Phe Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Pro Val Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 623 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 623
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggctagtca gtggattggt gggaaagccc ctaggctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60
attttgttag attggtacca gcagaaacca 120
gcttccttct tgagggaggg ggtcccatca 180
ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240
gctaatccgg cgcctctgac gttcggccaa 300 gggaccaagg tggaaatcaa acgg
<210> 624 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 624
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt gggaaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgg
<210> 625 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 attttgttag attggtacca gcagaaacca 120 gcttccttct tggcggaggg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gctaatccgg cgcctctgac gttcggccaa 300
324
<400> 625
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt gggaaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgg
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 attttgttag attggtacca gcagaaacca 120 gcttcctttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gctaatcccc accctcccac gttcggccaa 300
324
<210> 626 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 626
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt gggaaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgg
<210> 627 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 attttgttag attggtacca gcagaaacca 120 gcttcctttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gctaatccca cccctcccac gttcggccaa 300
324
<400> 627
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt gggaaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag ggaaccaagg tggaaatcaa acgg
<210> 628 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 attttgttag attggtatca gcagaaacca 120 gcttccttct tgaacaaggg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gctaatccgg cgcctctgac gttcggccaa 300
324
<400> 628
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt gggaaagccc ctaagctcct gatctattat
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 attttgttag attggtacca gcagaaacca 120 gcttccttct tgaggcccgg ggtcccatca 180 cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gctaatccgg cgcctctgac gttcggccaa 300 gggaccaagg tggaaatcaa acgg 324
<210> 629 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 629
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt gggaaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgg
<210> 630 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 attttgttag attggtatca gcagaaacca 120 gcttccttct tgccggaggg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gctaatccgg cgcctctgac gttcggccaa 300
324
<400> 630
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt gggaaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgg
<210> 631 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 attttgttag attggtacca gcagaaacca 120 gcttcctttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gctaatccgc accctaccac gttcggccaa 300
324
<400> 631
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt gggaaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagatttcg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgg
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 attttgttag attggtacca gcagaaacca 120 gcttcctttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gctaatcccg tccctaccac gttcggccaa 300
324
<210> 632 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 632
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60
atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt attttgttag attggtacca gcagaaacca 120
gggaaagccc ctaagctcct gatctattat gcttcctttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180
cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gctaatccgg tccctcccac gttcggccaa 300 gggaccaagg tggaaatcaa acgg 324
<210> 633 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 633
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt gggaaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgg
<210> 634 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
attttgttag attggtacca gcagaaacca 120 gcttcctttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gctaatccgc tgcctcccac gttcggccaa 300
<400> 634
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc
atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt
gggaaagccc ctaagctcct gatctattat
cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat
gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgg
<210> 635
<211> 324
<212> DNA
<213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 attttgttag attggtacca gcagaaacca 120 gcttcctttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 actaatccca tccctcccac gttcggccaa 300
324
<400> 635
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt gggaaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaaccg gggaccaagg tggaaatcaa acgg
<210> 636
<211> 324
<212> DNA
<213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 attttgttag attggtacca gcagaaacca 120 gcttcctttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 actaatccca cccctcccac gttcggccaa 300
324
<400> 636
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt ggggaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgg
<210> 637
<211> 324
<212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60
attttgttag attggtacca gcagaaacca 120
gcttcctttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180
ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240
actaatcccg tccctgtcac gttcggccaa 300
* 324
<400> 637
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc
atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt
gggaaagccc ctaagctcct gatctattat
cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat
gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgg
<210> 638
<211> 324
<212> DNA
<213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 attttgttag attggtacca gcagaaacca 120 gcttccttct tgaacaacgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcaa tctgcaacct 240 gctaatccgg cgcctctgac gttcggccaa 300 <400> 638
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt gggaaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgg
<210> 639 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 attttgttag attggtacca gcagaaacca 120 gcttccttct tggcgcccgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gctaatccgg cgcctctgac gttcggccaa 300
324
<400> 639
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt gggaaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgg
<210> 640 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 attttgttag attggtacca gcagaaacca 120 gcttccttct tgaactccgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gctaatccgg cgcctctgac gttcggccaa 300
324
<400> 640
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60
atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt attttgttag attggtacca gcagaaacca 120
gggaaagccc ctgagctcct gatctattat gcttccttct tgaagcaggg ggtcccatca 180
cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240
gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gctaatccgg cgcctctgac gttcggccaa 300
gggaccaagg tggaaatcaa acgg 324
<210> 641 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 641
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60
atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt attttgttag attggtacca gcagaaacca 120
gggaaagccc ctaagctcct gatctattat gcttccttct tgaacaacgg ggtcccatca 180
cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240
gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gctaatccgg cgcctctgac gttcggccaa 300
gggaccaagg tggaaatcaa acgg 324
<210> 642 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 642
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt gggaaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgg
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 attttgttag attggtacca gcagaaacca 120 gcttccttct tgtcgcccgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gctaatccgg cgcctctgac gttcggccaa 300
324
<210> 643 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 643
gacatccaga tgacccagtc atcacttgcc gggcaagtca ggggaagccc ctaagctcct cgtttcagtg gcagtggatc gaagattttg ctacgtacta gggaccaagg tggaaatcaa
tccatcctcc ctgtctgcat gtggattggt attttgttag gatctattat gcttcctttt tgggacagat ttcactctca ctgtcaacag gctaatccca acgg
ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 attggtacca gcagaaacca 120 tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ccatcagcag tctgcaacct 240 cccctcccac gttcggccaa 300
324
<210> 644 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 644
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt ggggaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaaccg gggaccaagg tggaaatcaa acgg
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 attttgttag attggtatca gcagaaacca 120 gcttcctttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 24 0 gctaatccca cccctcccac gttcggccaa 300
324
<210> 645 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 645
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt gggaaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgg
<210> 646 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 attttggtag attggtacca gcagaaacca 120 gcttccttct tgccggaggg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gctaatccgg cgcctctgac gttcggccaa 300
324
<400> 646
gacatccaga tgacccagtc atcacttgcc gggcaagtca gggaaagccc ctaagctcct cgtttcagtg gcagtggatc gaagattttg ctacgtacta gggaccaagg tggaaatcaa
tccatcctcc ctgtctgcat gtggattggt attttgatag gatctattat gcttccttct tgggacagat ttcactctca ctgtcaacag gctaatccgg acgg
ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 attggtacca gcagaaacca 120 tgccggaggg ggtcccatca 180 ccatcagcag tctgcaacct 240 cgcctctgac gttcggccaa 300
324
<210> 647 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 647
gacatccaga tgacccagtc atcacttgcc gggcaagtca ggggaagccc ctaagctcct cgtttcagtg gcagtggatc gaagattttg ctacgtacta gggaccaagg tggaaatcaa
tccatcctcc ctgtctgcat gtggattggt attttgttag gatctattat gcttcctttt tgggacagat ttcactctca ctgtcaacag gctaatccct acgg
ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 attggtacca gcagaaacca 120 tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ccatcagcgg tctgcaacct 240 accctaccac gttcggccaa 300
324
<210> 648 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 648
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60
atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt attttgttag attggtacca gcagaaacca 120
ggggaagccc ctaagctcct gatctattat gcttcctttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180
cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240
gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gctaatccct accctaccac gttcggccaa 300
gggaccaagg tggaaatcaa acgg 324
<210> 649 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 649
gacatccaga tgactcagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60
atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt attttgttag attggtatca gcagaaacca 120
gggaaagccc ctaagctcct gatctattat gcttccttct tggcgcccgg ggtcccatca 180
cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240
gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gctaatccgg cgcctctgac gttcggccaa 300
gggaccaagg tggaaatcaa acgg 324
<210> 650
<211> 324
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 650
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt gggaaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaaccg gggaccaagg tggaaatcaa acgg
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 attttgttag attggtacca gcagaaacca 120 gcttcctttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gctaatcccc accctcccac gttcggccaa 300
324
<210> 651 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 651
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt gggaaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgg
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 attttgatag attggtacca gcagaaacca 120 gcttcctttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gctaatccgg tccctcccac gttcggccaa 300
324
<210> 652 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 652
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt gggaaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgg
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 attttgttag attggtatca gcagaaacca 120 gcttccttct tgccggaggg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gctaatccgg tccctcccac gttcggccaa 300
324 <210> 653 <211> 324 <212> DNA <213> Horao sapiens
<400> 653
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt gggaaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgg
<210> 654 <211> 324 <212> DNA <213> Horao sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 atcaacttag actggtacca gcagaaacca 120 gcttccttct tgccggaggg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gctaatccgg cgcctctgac gttcggccaa 300
324
<400> 654
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt gggaaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgg
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 atcaacttag actggtacca gcagaaacca 120 gcttcctttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gctaatccgg tccctcccac gttcggccaa 300
324
<210> 655 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 655
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt gggaaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgg
<210> 656 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 attttggtag attggtacca gcagaaacca 120 gcttccttct tgccggaggg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gctaatccgg tccctcccac gttcggccaa 300
324
<400> 656
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt gggaaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgg
<210> 657 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 attttgatag attggtacca gcagaaacca 120 gcttccttct tgccggaggg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gctaatccgg tccctcccac gttcggccaa 300
324
<400> 657
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt gggaaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat
ctgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60
atcaacttag actggtacca gcagaaacca 120
gcttccttct tgccggaggg ggtcccatca 180
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<210> 658 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 658
gatatccaga tgacccagag cccttcaagc ttgagcgcca gcgtgggcga cagagtgacc 60
atcacctgcc gggccagcca gtggatcggc attaacctgg actggtatca gcagaagccc 120
ggcaaggccc ccaagctgct gatctactac gccagcttcc tgcagagcgg cgtgcccagc 180
cggtttagcg gcagcggctc cggcaccgac ttcaccctga ccatcagcag cctgcagccc 240
gaggacttcg ccacctacta ctgccagcag gccaaccctg tgccccctac cttcggccag 300
ggtaccaagg tggagatcaa gcgt 324
<210> 659 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 659
gatatccaga tgacccagag cccttcaagc ttgagcgcca gcgtgggcga cagagtgacc 60
atcacctgcc gggccagcca gtggatcggc attaacctgg actggtatca gcagaagccc 120
ggcaaggccc ccaagctgct gatctactac gccagcttcc tgcagagcgg cgtgcccagc 180
cggtttagcg gcagcggctc cggcaccgac ttcaccctga ccatcagcag cctgcagccc 240
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ggtaccaagg tggagatcaa gcgt 324
<210> 660 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 660
gatatccaga tgacccagag cccttcaagc ttgagcgcca gcgtgggcga cagagtgacc 60
atcacctgcc gggccagcca gtggatcggc attaacctgg actggtatca gcagaagccc 120
ggcaaggccc ccaagctgct gatctactac gccagcttcc tgcagagcgg cgtgcccagc 180
cggtttagcg gcagcggctc cggcaccgac ttcaccctga ccatcagcag cctgcagccc 240
gaggacttcg ccacctacta ctgcgggcag gccaaccctg tgcccccgac cttcggccag 300
ggtaccaagg tggagatcaa gcgt 324
<210> 661 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 661
gatatccaga tgacccagag cccttcaagc ttgagcgcca gcgtgggcga cagagtgacc 60
atcacctgcc gggccagcca gtggatcggc attaacctgg actggtatca gcagaagccc 120
ggcaaggccc ccaagctgct gatctactac gccagcttcc tgcagagcgg cgtgcccagc 180
cggtttagcg gcagcggctc cggcaccgac ttcaccctga ccatcagcag cctgcagccc 240
gaggacttcg ccacctacta ctgccagcag gccaaccctg tgccccctgg cttcggccag 300
ggtaccaagg tggagatcaa gcgt 324
<210> 662 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 662
gatatccaga tgacccagag cccttcaagc ttgagcgcca gcgtgggcga cagagtgacc 60 atcacctgcc gggccagcca gtggatcggc attaacctgg actggtatca gcagaagccc 120 ggcaaggccc ccaagctgct gatctactac gccagcttcc tgcagagcgg cgtgcccagc 180
cggtttagcg gcagcggctc cggcaccgac ttcaccctga ccatcagcag cctgcagccc 240
gaggacttcg ccacctacta ctgccagcag gccaaccctg tgcccaccac cttcggccag 300
ggtaccaagg tggagatcaa gcgt 324
<210> 663 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 663
gatatccaga tgacccagag cccttcaagc ttgagcgcca gcgtgggcga cagagtgacc 60
atcacctgcc gggccagcca gtggatcggc attaacctgg actggtatca gcagaagccc 120
ggcaaggccc ccaagctgct gatctactac gccagcttcc tgcagagcgg cgtgcccagc 180
cggtttagcg gcagcggctc cggcaccgac ttcaccctga ccatcagcag cctgcagccc 24 0
gaggacttcg ccacctacta ctgccagcag gccaaccctt accccaccac cttcggccag 300 ggtaccaagg tggagatcaa gcgt 324
<210> 664 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 664
gatatccaga tgacccagag cccttcaagc ttgagcgcca gcgtgggcga cagagtgacc 60
atcacctgcc gggccagcca gtggatcggc attaacctgg actggtatca gcagaagccc 120
ggcaaggccc ccaagctgct gatctactac gccagcttcc tgcagagcgg cgtgcccagc 180
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<210> 665 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 665
gatatccaga tgacccagag cccttcaagc ttgagcgcca gcgtgggcga cagagtgacc 60 atcacctgcc gggccagcca gtggatcggc aacctgctgg actggtatca gcagaagccc 120 ggcaaggccc ccaagctgct gatctactac gccagcttcc tgcagagcgg cgtgcccagc 180 cggtttagcg gcagcggctc cggcaccgac ttcaccctga ccatcagcag cctgcagccc 24 0 gaggacttcg ccacctacta ctgccagcag gccaaccctg cccccctgac cttcggccag 300 ggtaccaagg tggagatcaa gcgt 324
<210> 666 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 666
gatatccaga tgacccagag cccttcaagc ttgagcgcca gcgtgggcga cagagtgacc 60
atcacctgcc gggccagcca gtggatcggc aacctgctgg actggtatca gcagaagccc 120
ggcaaggccc ccaagctgct gatctactac gccagcttcc tgcagagcgg cgtgcccagc 180
cggtttagcg gcagcggctt cggcaccgac ttcaccctga ccatcagcag cctgcagccc 240
gaggacttcg ccacctacta ctgccagcag gccaaccctg cccccctgac cttcggccag 300
ggtaccaagg tggagatcaa gcgt 324
<210> 667 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 667 gatatccaga tgacccagag cccttcaagc ttgagcgcca gcgtgggcga cagagtgacc 60
atcacctgcc gggccagcca gtggatcggc aacctgctgg actggtatca gcagaagccc 120
ggcaaggccc ccaagctgct gatctactac gccagcttcc tgcagagcgg cgtgcccagc 180
cggtttagcg gcagcggcta cggcaccgac ttcaccctga ccatcagcag cctgcagccc 240
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<210> 668 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 668
gatatccaga tgacccagag cccttcaagc atcacctgcc gggccagcca gtggatcggc ggcaaggccc ccaagctgct gatctactac cggtttagcg gcagcggctg gggcaccgac gaggacttcg ccacctacta ctgccagcag ggtaccaagg tggagatcaa gcgt
ttgagcgcca gcgtgggcga cagagtgacc 60 aacctgctgg actggtatca gcagaagccc 120 gccagcttcc tgcagagcgg cgtgcccagc 180 ttcaccctga ccatcagcag cctgcagccc 240 gccaaccctg cccccctgac cttcggccag 300
324
<210> 669 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 669
gatatccaga tgacccagag cccttcaagc ttgagcgcca gcgtgggcga cagagtgacc 60
atcacctgcc gggccagcca gtggatcggc aacctgctgg actggtatca gcagaagccc 120
ggcaaggccc ccaagctgct gatctactac gccagcttcc tgcagagcgg cgtgcccagc 180
cggtttagcg gcagcggccg gggcaccgac ttcaccctga ccatcagcag cctgcagccc 24 0
gaggacttcg ccacctacta ctgccagcag gccaaccctg cccccctgac cttcggccag 300 ggtaccaagg tggagatcaa gcgt 324
<210> 670 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 670
gatatccaga tgacccagag cccttcaagc ttgagcgcca gcgtgggcga cagagtgacc 60
atcacctgcc gggccagcca gtggatcggc aacctgctgg actggtatca gcagaagccc 120
ggcaaggccc ccaagctgct gatctactac gccagcttcc tgcagagcgg cgtgcccagc 180
cggtttagcg gcagcggcga gggcaccgac ttcaccctga ccatcagcag cctgcagccc 240
gaggacttcg ccacctacta ctgccagcag gccaaccctg cccccctgac cttcggccag 300 ggtaccaagg tggagatcaa gcgt 324
<210> 671 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 671
gatatccaga tgacccagag cccttcaagc ttgagcgcca gcgtgggcga cagagtgacc 60
atcacctgcc gggccagcca gtggatcggc attaacctgg actggtatca gcagaagccc 120
ggcaaggccc ccaagctgct gatctactac gccagcttcc tgcagagcgg cgtgcccagc 180
cggtttagcg gcagcggctc cggcaccgac ttcaccctga ccatcagcag cctgcagccc 24 0
gaggacttcg ccacctacta ctgccagcag gccaaccctg cccccctgac cttcggccag 300 ggtaccaagg tggagatcaa gcgt 324
<210> 672 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 672
gatatccaga tgacccagag cccttcaagc atcacctgcc gggccagcca gtggatcggc ggcaaggccc ccaagctgct gatctactac cggtttagcg gcagcggctt cggcaccgac gaggacttcg ccacctacta ctgccagcag ggtaccaagg tggagatcaa gcgt
<210> 673 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
ttgagcgcca gcgtgggcga cagagtgacc 60 attaacctgg actggtatca gcagaagccc 120 gccagcttcc tgcagagcgg cgtgcccagc 180 ttcaccctga ccatcagcag cctgcagccc 240 gccaaccctg cccccctgac cttcggccag 300
324
<400> 673
gatatccaga tgacccagag cccttcaagc atcacctgcc gggccagcca gtggatcggc ggcaaggccc ccaagctgct gatctactac cggtttagcg gcagcggcta cggcaccgac gaggacttcg ccacctacta ctgccagcag ggtaccaagg tggagatcaa gcgt
ttgagcgcca gcgtgggcga cagagtgacc 60 attaacctgg actggtatca gcagaagccc 120 gccagcttcc tgcagagcgg cgtgcccagc 180 ttcaccctga ccatcagcag cctgcagccc 240 gccaaccctg cccccctgac cttcggccag 300
324
<210> 674 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 674
gatatccaga tgacccagag cccttcaagc atcacctgcc gggccagcca gtggatcggc ggcaaggccc ccaagctgct gatctactac cggtttagcg gcagcggctg gggcaccgac gaggacttcg ccacctacta ctgccagcag ggtaccaagg tggagatcaa gcgt
<210> 675 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
ttgagcgcca gcgtgggcga cagagtgacc 60 attaacctgg actggtatca gcagaagccc 120 gccagcttcc tgcagagcgg cgtgcccagc 180 ttcaccctga ccatcagcag cctgcagccc 240 gccaaccctg cccccctgac cttcggccag 300
324
<400> 675
gatatccaga tgacccagag cccttcaagc atcacctgcc gggccagcca gtggatcggc ggcaaggccc ccaagctgct gatctactac cggtttagcg gcagcggccg gggcaccgac gaggacttcg ccacctacta ctgccagcag ggtaccaagg tggagatcaa gcgt
<210> 676 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
ttgagcgcca gcgtgggcga cagagtgacc 60 attaacctgg actggtatca gcagaagccc 120 gccagcttcc tgcagagcgg cgtgcccagc 180 ttcaccctga ccatcagcag cctgcagccc 240 gccaaccctg cccccctgac cttcggccag 300
324
<400> 676
gatatccaga tgacccagag cccttcaagc atcacctgcc gggccagcca gtggatcggc ggcaaggccc ccaagctgct gatctactac cggtttagcg gcagcggcga gggcaccgac gaggacttcg ccacctacta ctgccagcag ggtaccaagg tggagatcaa gcgt
ttgagcgcca gcgtgggcga cagagtgacc 60 attaacctgg actggtatca gcagaagccc 120 gccagcttcc tgcagagcgg cgtgcccagc 180 ttcaccctga ccatcagcag cctgcagccc 240 gccaaccctg cccccctgac cttcggccag 300
324
<210> 677 <211> 324 <212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 677
gatatccaga tgacccagag cccttcaagc ttgagcgcca gcgtgggcga cagagtgacc 60
atcacctgcc gggccagcca gtacatcggc aacctgctgg actggtatca gcagaagccc 120
ggcaaggccc ccaagctgct gatctactac gccagcttcc tgcagagcgg cgtgcccagc 180
cggtttagcg gcagcggcta cggcaccgac ttcaccctga ccatcagcag cctgcagccc 240
gaggacttcg ccacctacta ctgccagcag gccaaccctg cccccctgac cttcggccag 300
ggtaccaagg tggagatcaa gcgt 324
<210> 678 <211> 324 <212> DNA <213> Horno sapiens
<400> 678
gatatccaga tgacccagag cccttcaagc ttgagcgcca gcgtgggcga cagagtgacc 60
atcacctgcc gggccagcca gcacatcggc aacctgctgg actggtatca gcagaagccc 120
ggcaaggccc ccaagctgct gatctactac gccagcttcc tgcagagcgg cgtgcccagc 180
cggtttagcg gcagcggcta cggcaccgac ttcaccctga ccatcagcag cctgcagccc 240
gaggacttcg ccacctacta ctgccagcag gccaaccctg cccccctgac cttcggccag 300
ggtaccaagg tggagatcaa gcgt 324
<210> 679
<211> 324
<212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 679
gatatccaga tgacccagag cccttcaagc atcacctgcc gggccagcca gcagatcggc ggcaaggccc ccaagctgct gatctactac cggtttagcg gcagcggcta cggcaccgac gaggacttcg ccacctacta ctgccagcag ggtaccaagg tggagatcaa gcgt
ttgagcgcca gcgtgggcga cagagtgacc 60 aacctgctgg actggtatca gcagaagccc 120 gccagcttcc tgcagagcgg cgtgcccagc 180 ttcaccctga ccatcagcag cctgcagccc 240 gccaaccctg cccccctgac cttcggccag 300
324
<210> 680 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 680'
gatatccaga tgacccagag cccttcaagc atcacctgcc gggccagcca gaacatcggc ggcaaggccc ccaagctgct gatctactac cggtttagcg gcagcggcta cggcaccgac gaggacttcg ccacctacta ctgccagcag ggtaccaagg tggagatcaa gcgt
ttgagcgcca gcgtgggcga cagagtgacc 60 aacctgctgg actggtatca gcagaagccc 120 gccagcttcc tgcagagcgg cgtgcccagc 180 ttcaccctga ccatcagcag cctgcagccc 240 gccaaccctg cccccctgac cttcggccag 300
324
<210> 681 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 681
gatatccaga tgacccagag cccttcaagc atcacctgcc gggccagcca gtacatcggc ggcaaggccc ccaagctgct gatctactac cggtttagcg gcagcggcta cggcaccgac gaggacttcg ccacctacta ctgccagcag ggtaccaagg tggagatcaa gcgt
ttgagcgcca gcgtgggcga cagagtgacc 60 attaacctgg actggtatca gcagaagccc 120 gccagcttcc tgcagagcgg cgtgcccagc 180 ttcaccctga ccatcagcag cctgcagccc 240 gccaaccctg cccccctgac cttcggccag 300
324 <210> 682 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 682
gatatccaga tgacccagag cccttcaagc atcacctgcc gggccagcca gcacatcggc ggcaaggccc ccaagctgct gatctactac cggtttagcg gcagcggcta cggcaccgac gaggacttcg ccacctacta ctgccagcag ggtaccaagg tggagatcaa gcgt
<210> 683 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
ttgagcgcca gcgtgggcga cagagtgacc 60 attaacctgg actggtatca gcagaagccc 120 gccagcttcc tgcagagcgg cgtgcccagc 180 ttcaccctga ccatcagcag cctgcagccc 240 gccaaccctg cccccctgac cttcggccag 300
324
<400> 683
gatatccaga tgacccagag cccttcaagc atcacctgcc gggccagcca gcagatcggc ggcaaggccc ccaagctgct gatctactac cggtttagcg gcagcggcta cggcaccgac gaggacttcg ccacctacta ctgccagcag ggtaccaagg tggagatcaa gcgt
<210> 684 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
ttgagcgcca gcgtgggcga cagagtgacc 60 attaacctgg actggtatca gcagaagccc 120 gccagcttcc tgcagagcgg cgtgcccagc 180 ttcaccctga ccatcagcag cctgcagccc 240 gccaaccctg cccccctgac cttcggccag 300
324
<400> 684
gatatccaga tgacccagag cccttcaagc atcacctgcc gggccagcca gaacatcggc ggcaaggccc ccaagctgct gatctactac cggtttagcg gcagcggcta cggcaccgac gaggacttcg ccacctacta ctgccagcag ggtaccaagg tggagatcaa gcgt
<210> 685 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
ttgagcgcca gcgtgggcga cagagtgacc 60 attaacctgg actggtatca gcagaagccc 120 gccagcttcc tgcagagcgg cgtgcccagc 180 ttcaccctga ccatcagcag cctgcagccc 240 gccaaccctg cccccctgac cttcggccag 300
324
<400> 685
gatatccaga tgacccagag cccttcaagc atcacctgcc gggccagcca gtggatcggc ggcaaggccc ccaagctgct gatctactac cggtttagcg gcagcggcta cggcaccgac gaggacttcg ccacctacta ctgccagcag ggtaccaagg tggagatcaa gcgt
<210> 686
<211> 324
<212> DNA
<213> Homo sapiens
ttgagcgcca gcgtgggcga cagagtgacc 60 aacaacctgg actggtatca gcagaagccc 120 gccagcttcc tgcagagcgg cgtgcccagc 180 ttcaccctga ccatcagcag cctgcagccc 240 gccaaccctg cccccctgac cttcggccag 300
324
<400> 686
gatatccaga tgacccagag cccttcaagc atcacctgcc gggccagcca gtggatcggc ggcaaggccc ccaagctgct gatctactac cggtttagcg gcagcggcta cggcaccgac gaggacttcg ccacctacta ctgccagcag
ttgagcgcca gcgtgggcga cagagtgacc 60 accctgctgg actggtatca gcagaagccc 120 gccagcttcc tgcagagcgg cgtgcccagc 180 ttcaccctga ccatcagcag cctgcagccc 240 gccaaccctg cccccctgac cttcggccag 300 ggtaccaagg tggagatcaa gcgt 324
<210> 687 <211> 324 <212> DNA <213> Horao sapiens
<400> 687
gatatccaga tgacccagag cccttcaagc ttgagcgcca gcgtgggcga cagagtgacc 60
atcacctgcc gggccagcca gtggatcggc attcagctgg actggtatca gcagaagccc 120
ggcaaggccc ccaagctgct gatctactac gccagcttcc tgcagagcgg cgtgcccagc 180
cggtttagcg gcagcggcta cggcaccgac ttcaccctga ccatcagcag cctgcagccc 240
gaggacttcg ccacctacta ctgccagcag gccaaccctg cccccctgac cttcggccag 300
ggtaccaagg tggagatcaa gcgt 324
<210> 688 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 688
gatatccaga tgacccagag cccttcaagc ttgagcgcca gcgtgggcga cagagtgacc 60
atcacctgcc gggccagcca gtggatcggc attaccctgg actggtatca gcagaagccc 120
ggcaaggccc ccaagctgct gatctactac gccagcttcc tgcagagcgg cgtgcccagc 180
cggtttagcg gcagcggcta cggcaccgac ttcaccctga ccatcagcag cctgcagccc 24 0
gaggacttcg ccacctacta ctgccagcag gccaaccctg cccccctgac cttcggccag 300
ggtaccaagg tggagatcaa gcgt 324
<210> 689 <211> 324 <212> DNA <213> Horao sapiens
<400> 689
gatatccaga tgacccagag cccttcaagc ttgagcgcca gcgtgggcga cagagtgacc 60
atcacctgcc gggccagcca gtggatcggc aacctgctgg actggtatca gcagaagccc 120
ggcaaggccc ccaagctgct gatctactac gccagcttcc tgcagagcgg cgtgcccagc 180
cggtttagcg gcagcggcta cggcaccgac ttcaccctga ccatcagcag cctgcagccc 240
gaggacttcg ccacctacta ctgccagcag gccaaccctg tgccccctac cttcggccag 300
ggtaccaagg tggagatcaa gcgt 324
<210> 690 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 690
gatatccaga tgacccagag cccttcaagc ttgagcgcca gcgtgggcga cagagtgacc 60
atcacctgcc gggccagcca gtacatcggc aacctgctgg actggtatca gcagaagccc 120
ggcaaggccc ccaagctgct gatctactac gccagcttcc tgcagagcgg cgtgcccagc 180
cggtttagcg gcagcggcta cggcaccgac ttcaccctga ccatcagcag cctgcagccc 24 0
gaggacttcg ccacctacta ctgccagcag gccaaccctg tgccccctac cttcggccag 300
ggtaccaagg tggagatcaa gcgt 324
<210> 691 <211> 324 <212> DNA <213> Horao sapiens
<400> 691
gatatccaga tgacccagag cccttcaagc ttgagcgcca gcgtgggcga cagagtgacc 60
atcacctgcc gggccagcca gcacatcggc aacctgctgg actggtatca gcagaagccc 120
ggcaaggccc ccaagctgct gatctactac gccagcttcc tgcagagcgg cgtgcccagc 180 cggtttagcg gcagcggcta cggcaccgac ttcaccctga ccatcagcag cctgcagccc 240 gaggacttcg ccacctacta ctgccagcag gccaaccctg tgccccctac cttcggccag 300 ggtaccaagg tggagatcaa gcgt 324
<210> 692 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 692
gatatccaga
atcacctgcc
ggcaaggccc
cggtttagcg
gaggacttcg
ggtaccaagg
tgacccagag gggccagcca ccaagctgct gcagcggcta ccacctacta tggagatcaa
cccttcaagc gtggatcggc gatctactac cggcaccgac ctgccagcag gcgt
ttgagcgcca attaacctgg gccagcttcc ttcaccctga gccaaccctg
gcgtgggcga actggtatca tgcagagcgg ccatcagcag tgccccctac
cagagtgacc 60 gcagaagccc 120 cgtgcccagc 180 cctgcagccc 240 cttcggccag 300 324
<210> 693 <211> 324 <212> DNA <213> Horao sapiens
<400> 693
gatatccaga
atcacctgcc
ggcaaggccc
cggtttagcg
gaggacttcg
ggtaccaagg
tgacccagag gggccagcca ccaagctgct gcagcggcta ccacctacta tggagatcaa
cccttcaagc gtacatcggc gatctactac cggcaccgac ctgccagcag gcgt
ttgagcgcca attaacctgg gccagcttcc ttcaccctga gccaaccctg
gcgtgggcga cagagtgacc 60 actggtatca gcagaagccc 120 tgcagagcgg cgtgcccagc 180 ccatcagcag cctgcagccc 240 tgccccctac cttcggccag 300 324
<210> 694 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 694
gatatccaga
atcacctgcc
ggcaaggccc
cggtttagcg
gaggacttcg
ggtaccaagg
tgacccagag gggccagcca ccaagctgct gcagcggcta ccacctacta tggagatcaa
cccttcaagc gtggatcggc gatctactac cggcaccgac ctgccagcag gcgt
ttgagcgcca aacaacctgg gccagcttcc ttcaccctga gccaaccctg
gcgtgggcga cagagtgacc 60 actggtatca gcagaagccc 120 tgcagagcgg cgtgcccagc 180 ccatcagcag cctgcagccc 240 tgccccctac cttcggccag 300 324
<210> 695 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 695
gatatccaga
atcacctgcc
ggcaaggccc
cggtttagcg
gaggacttcg
ggtaccaagg
tgacccagag gggccagcca ccaagctgct gcagcggcta ccacctacta tggagatcaa
cccttcaagc gtggatcggc gatctactac cggcaccgac ctgccagcag gcgt
ttgagcgcca aacctgctgg gccagcttcc ttcaccctga gccaacccta
gcgtgggcga actggtatca tgcagagcgg ccatcagcag ccccccctac
cagagtgacc 60 gcagaagccc 120 cgtgcccagc 180 cctgcagccc 240 cttcggccag 300 324
<210> 696 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 696
gatatccaga tgacccagag cccttcaagc ttgagcgcca gcgtgggcga cagagtgacc 60 atcacctgcc gggccagcca gtacatcggc aacctgctgg actggtatca gcagaagccc 120
ggcaaggccc ccaagctgct gatctactac gccagcttcc tgcagagcgg cgtgcccagc 180
cggtttagcg gcagcggcta cggcaccgac ttcaccctga ccatcagcag cctgcagccc 240
gaggacttcg ccacctacta ctgccagcag gccaacccta ccccccctac cttcggccag 300
ggtaccaagg tggagatcaa gcgt 324
<210> 697 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 697
gatatccaga tgacccagag atcacctgcc gggccagcca ggcaaggccc ccaagctgct cggtttagcg gcagcggcta gaggacttcg ccacctacta ggtaccaagg tggagatcaa
<210> 698 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
cccttcaagc ttgagcgcca
gcacatcggc aacctgctgg gatctactac gccagcttcc cggcaccgac ttcaccctga ctgccagcag gccaacccta gcgt
gcgtgggcga cagagtgacc 60 actggtatca gcagaagccc 120 tgcagagcgg cgtgcccagc 180 ccatcagcag cctgcagccc 240 ccccccctac cttcggccag 300 324
<400> 698
gatatccaga tgacccagag cccttcaagc ttgagcgcca gcgtgggcga cagagtgacc 60
atcacctgcc gggccagcca gtggatcggc attaacctgg actggtatca gcagaagccc 120
ggcaaggccc ccaagctgct gatctactac gccagcttcc tgcagagcgg cgtgcccagc 180
cggtttagcg gcagcggcta cggcaccgac ttcaccctga ccatcagcag cctgcagccc 240
gaggacttcg ccacctacta ctgccagcag gccaacccta ccccccctac cttcggccag 300 ggtaccaagg tggagatcaa gcgt 324
<210> 699 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 699
gatatccaga tgacccagag atcacctgcc gggccagcca ggcaaggccc ccaagctgct cggtttagcg gcagcggcta gaggacttcg ccacctacta ggtaccaagg tggagatcaa
cccttcaagc ttgagcgcca gtacatcggc attaacctgg gatctactac gccagcttcc cggcaccgac ttcaccctga ctgccagcag gccaacccta gcgt
gcgtgggcga cagagtgacc 60 actggtatca gcagaagccc 120 tgcagagcgg cgtgcccagc 180 ccatcagcag cctgcagccc 240 ccccccctac cttcggccag 300 324
<210> 700 <211> 324 <212> DNA <213> Horno sapiens
<400> 700
gatatccaga tgacccagag atcacctgcc gggccagcca ggcaaggccc ccaagctgct cggtttagcg gcagcggcta gaggacttcg ccacctacta ggtaccaagg tggagatcaa
cccttcaagc ttgagcgcca
gcacatcggc attaacctgg gatctactac gccagcttcc cggcaccgac ttcaccctga ctgccagcag gccaacccta gcgt
gcgtgggcga cagagtgacc 60 actggtatca gcagaagccc 120 tgcagagcgg cgtgcccagc 180 ccatcagcag cctgcagccc 240 ccccccctac cttcggccag 300 324
<210> 701 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 701
gatatccaga
atcacctgcc
ggcaaggccc
cggtttagcg
gaggacttcg
ggtaccaagg
tgacccagag gggccagcca ccaagctgct gcagcggcta ccacctacta tggagatcaa
cccttcaagc gtggatcggc gatctactac cggcaccgac ctgccagcag gcgt
ttgagcgcca aacaacctgg gccagcttcc ttcaccctga gccaacccta
gcgtgggcga actggtatca tgcagagcgg ccatcagcag ccccccctac
<210> 702 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 702
gatattcaaa
atcacctgcc
ggcaaggccc
cggtttagcg
gaggacttcg
gggaccaagg
tgacccagag gggccagcca ccaagctgct gcagcggctt ccacctacta tggaaatcaa
cccttcaagc gtggattggc gatctactac cggcaccgac ctgccagcag acgg
ttgagcgcca aacctgctgg gccagcttcc ttcaccctga gccaaccctg
gcgtgggcga actggtatca tgcagagcgg ccatcagcag tgccccctac
<210> 703 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
cagagtgacc 60 gcagaagccc 120 cgtgcccagc 180 cctgcagccc 240 cttcggccag 300 324
cagagtgacc 60 gcagaagccc 120 cgtgcccagc 18 0 cctgcagccc 24 0 cttcggccag 300 324
<400> 703
gacatccaga
atcacctgcc
ggcaaggccc
cggtttagcg
gaggacttcg
gggaccaagg
tgacccagtc gggccagcca ccaagctgct gcagcggctt ccacctacta tggaaatcaa
tccttcaagc gtggattggc gatctactac cggcaccgac ctgccagcag acgg
ttgagcgcca aacctgctgg gccagcttcc ttcaccctga gccaaccctg
gcgtgggcga actggtatca tgccggaggg ccatcagcag tgccccctac
cagagtgacc 60 gcagaagccc 120 cgtgcccagc 180 cctgcagccc 24 0 cttcggccag 300 324
<210> 704 <211> 116 <212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 704
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu 20 Ser Cys Ala Ala Ser 25 Gly Phe Thr Phe Lys 30 Ala Tyr Pro Met Met 35 Trp Val Arg Gln Ala 40 Pro Gly Lys Gly Leu 45 Glu Trp Val Ser Glu 50 Ile Ser Pro Ser Gly 55 Ser Tyr Thr Tyr Tyr 60 Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser 85 Leu Arg Ala Glu Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr 95 Cys Ala Lys Asp Pro 100 Arg Lys Phe Asp Tyr 105 Trp Gly Gln Gly Thr 110 Leu Val
Thr Val Ser 115
Ser
<210> 705 <211> 348 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 705 gaggtgcagc tcctgtgcag ccagggaagg gcagactccg ctgcaaatga cggaagtttg
<210> 706 <211> 12 <212> PRT <213> Homo
<400> 706
Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser 10
<210> 707 <211> 9 <212> PRT <213> Seqüência Artificial
<220>
<223> Ligador <400> 707
Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr 1 5
<210> 708 <211> 15 <212> PRT <213> Seqüência Artificial
<220>
<223> Ligador
<400> 708
Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser
10 15
<210> 709
<211> 16
<212> PRT
<213> Horao sapiens
<400> 709
Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser
10 15
<210> 710 <211> 16 <212> PRT
<213> Seqüência Artificial
<220>
<223> Ligador <400> 710
tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgcgtctc 60
cctccggatt cacctttaag gcttatccga tgatgtgggt ccgccaggct 120
gtctagagtg ggtctcagag atttcgcctt cgggttctta tacatactac 180
tgaagggccg gttcaccatc tcccgcgaca attccaagaa cacgctgtat 240
acagcctgcg tgccgaggac accgcggtat attactgtgc gaaagatcct 300
actactgggg tcagggaacc ctggtcaccg tctcgagc 348
sapiens Gly Gln Gly Thr Asn Val Glu Ile Asn Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser 10 15
<210> 711 <211> 16 <212> PRT
<213> Seqüência Artificial
<220>
<223> Ligador
<400> 711
Gly Gln Gly Thr Asn Val Glu Ile Asn Gln Thr Val Ala Ala Pro Ser 10 15
<210> 712 <211> 16 <212> PRT
<213> Seqüência Artificial
<220>
<223> Ligador <400> 712
Gly Gln Gly Thr Asn Val Glu Ile Gln Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser 10 15
<210> 713 <211> 16 <212> PRT
<213> Seqüência Artificial <220>
<223> Ligador
<400> 713
Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Thr Val Ala Ala Pro Ser 10 15
<210> 714 <211> 6 <212> PRT
<213> Seqüência Artificial
<220>
<223> Ligador <400> 714
Thr Val Ala Ala Pro Ser 1 5
<210> 715 <211> 454 <212> PRT
<213> Seqüência Artificial
<220>
<223> Fusão especifica dupla <400> 715 Asp Ile Gln
1
Asp Arg Val
Leu Ser Trp 35
Tyr His Thr
50
Ser Gly Ser 65
Glu Asp Phe
Thr Phe Gly
Pro Ser Asp 115
Val Gly Asp
130 Ile Asn Leu
145
Leu Ile Tyr
Ser Gly Ser
Gln Pro Glu 195
Pro Leu Thr 210 Ala Ala Pro
225
Leu Leu Gly
Thr Leu Met
Val Ser His 275
Val Glu Val
290 Ser Thr Tyr 305
Leu Asn Gly Ala Pro Ile
Pro Gln Val
355
Gln Val Ser
370
Ala Val Glu
385
Thr Pro Pro Leu Thr Val
Ser Val Met
435
Ser Leu Ser 450
Met Thr
5
Thr Ile
20
Tyr Gln Ser Ile Gly Thr
Ala Thr
85 Gln Gly 100
Ile Gln Arg Val Asp Trp
Tyr Ala
165 Gly Ser 180
Asp Phe
Phe Gly
Ser Gly
Gly Pro 245 Ile Ser 260
Glu Asp
His Asn
Arg Val
Lys Glu 325 Glu Lys
340
Tyr Thr
Leu Thr
Trp Glu
Val Leu 405 Asp Lys
420
His Glu
Gln
Thr
Gln
Leu
Asp
70
Tyr
Thr
Met
Thr
Tyr 150 Ser
Gly
Ala
Gln
Thr
230 Ser
Arg
Pro
Ala
Val 310 Tyr
Thr
Leu
Cys
Ser 390 Asp
Ser Ala Pro Gly Lys
Ser Pro Ser
Cys Arg Ala 25
Lys Pro Gly 40
Gln Ser Gly
55
Phe Thr Leu
Tyr Cys Gln
Lys Val Glu 105
Thr Gln Ser 120 Ile Thr Cys 135
Gln Gln Lys Phe Leu Gln
Thr Asp Phe
185
Thr Tyr Tyr 200 Gly Thr Lys
215
His Thr Cys Val Phe Leu
Thr Pro Glu
265
Glu Val Lys 280 Lys Thr Lys 295
Ser Val Leu Lys Cys Lys
Ile Ser Lys
345
Pro Pro Ser
360 Leu Val Lys
375
Asn Gly Gln Ser Asp Gly
Arg Trp Gln
425
Leu His Asn 440
Ser 10 Ser
Lys
Val
Thr
Gln
90
Ile
Pro
Arg
Pro
Ser 170 Thr
Cys
Val
Pro
Phe
250 Val
Phe
Pro
Thr
Val 330 Ala
Arg
Gly
Pro
Ser 410 Gln
His
Leu Pro Gln Trp Ala Pro
Pro Ser
60
Ile Ser
75
Tyr Met
Lys Arg
Ser Ser
Ala Ser 140 Gly Lys 155
Gly Val
Leu Thr
Gln Gln
Glu Ile 220 Pro Cys
235
Pro Pro
Thr Cys
Asn Trp
Arg Glu 300 Val Leu 315
Ser Asn
Lys Gly
Asp Glu
Phe Tyr 380 Glu Asn
395
Phe Phe Gly Asn Tyr Thr
Ala
Ile
Lys
45
Arg
Ser
Phe
Thr
Leu 125 Gln
Ala
Pro
Ile
Ala
205 Lys
Pro
Lys
Val
Tyr 285 Glu
His
Lys
Gln
Leu
365 Pro
Asn
Leu
Val
Gln 445
Ser
Gly
30
Leu
Phe
Leu
Gln
Val 110 Ser
Trp
Pro
Ser
Ser 190 Asn
Arg
Ala
Pro
Val 270 Val
Gln
Gln
Ala
Pro
350 Thr
Ser
Tyr
Tyr
Phe 430 Lys
Val
15
Pro
Leu
Ser
Gln
Pro
95
Ala
Ala
Ile
Lys
Arg 175 Ser
Pro
Thr
Pro
Lys
255 Val
Asp
Tyr
Asp
Leu 335 Arg
Lys
Asp
Lys
Ser 415 Ser
Ser
Gly
Glu
Ile
Gly
Pro 80 Arg
Ala
Ser
Gly
Leu 160 Phe
Leu
Ala
Val
Glu 240 Asp
Asp
Gly
Asn
Trp
320 Pro
Glu
Asn
Ile
Thr 400 Lys
Cys
Leu
<210> 716 <211> 454 <212> PRT
<213> Seqüência Artificial
<220>
<223> Fusão especifica dupla
<400> 716
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Pro Ala Ser Val Gly
10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly Ile Asn
25 30
Leu Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
40 45
Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Pro Ala Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser
115 120 125
Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly
130 135 140
Pro Glu Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu 145 150 155 160
Leu Ile Tyr His Thr Ser Ile Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe
165 170 175
Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu
180 185 190
Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Met Phe Gln
195 200 205
Pro Arg Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val
210 215 220
Ala Ala Pro Ser Gly Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu 225 230 235 240
Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
245 250 255
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
260 265 270
Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
275 280 285
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
290 295 300
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp 305 310 315 320
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
325 330 335
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
340 345 350
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn
355 360 365
Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
370 375 380
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr 385 390 395 400
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
405 410 415
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
420 425 430
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu 435 440 445
Ser Leu Ser Pro Gly Lys 450
<210> 717 <211> 463 <212> PRT
<213> Seqüência Artificial
<220>
<223> Fusão especifica dupla
<400> 717 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly Ile Asn 20 25 30 Leu Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Pro Ala Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro 115 120 125 Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Lys 130 135 140 Ala Tyr Pro Ile Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu 145 150 155 160 Trp Val Ser Glu Ile Ser Pro Ser Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Ala Asp 165 170 175 Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr 180 185 190 Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr 195 200 205 Tyr Cys Ala Lys Asp Pro Arg Lys Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 210 215 220 Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Gly Thr His 225 230 235 240 Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val 245 250 255 Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr 260 265 270 Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu 275 280 285 Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys 290 295 300 Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser 305 310 315 320 Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys 325 330 335 Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile 340 345 350 Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro 355 360 365 Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu 370 375 380 Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn 385 390 395 400
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser
405 410 415
Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg
420 425 430
Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu
435 440 445
His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 450 455 460
<210> 718 <211> 463 <212> PRT
<213> Seqüência Artificial
<220>
<223> Fusão específica dupla <400> 718
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Lys Ala Tyr
25 30
Pro Ile Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
40 45
Ser Glu Ile Ser Pro Ser Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Asp Pro Arg Lys Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Asp Ile Gln Met Thr
115 120 125
Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile
130 135 140
Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly Ile Asn Leu Asp Trp Tyr Gln 145 150 155 160
Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Tyr Ala Ser Phe
165 170 175
Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr
180 185 190
Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr
195 200 205
Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Pro Ala Pro Leu Thr Phe Gly Gln Gly
210 215 220
Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Gly Thr His 225 230 235 240
Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val
245 250 255
Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
260 265 270
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu
275 280 285
Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys
290 295 300
Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser 305 310 315 320
Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
325 330 335
Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile 340 345 350 Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro 355 360 365 Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu 370 375 380 Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn 385 390 395 400 Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser 405 410 415 Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 420 425 430 Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu 435 440 445 His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
450 455 460
<210> 719 <211> 222 <212> PRT
<213> Seqüência Artificial
<220>
<223> Fusão especifica dupla
<400> 719
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Pro Ala Ser Val Gly
10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly Pro Glu
25 30
Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
40 45
Tyr His Thr Ser Ile Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Met Phe Gln Pro Arg
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser
115 120 125
Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly
130 135 140
Ile Asn Leu Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu 145 150 155 160
Leu Ile Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe
165 170 175
Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu
180 185 190
Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Pro Ala
195 200 205
Pro Leu Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 210 215 220
<210> 720 <211> 222 <212> PRT
<213> Seqüência Artificial
<220>
<223> Fusão especifica dupla <400> 720
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Pro Ala Ser Val Gly
10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly Ile Asn
25 30
Leu Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
40 45
Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Pro Ala Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser
115 120 125
Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly
130 135 140
Pro Glu Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu 145 150 155 160
Leu Ile Tyr His Thr Ser Ile Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe
165 170 175
Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu
180 185 190
Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Met Phe Gln
195 200 205
Pro Arg Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 210 215 220
<210> 721 <211> 230 <212> PRT
<213> Seqüência Artificial
<220>
<223> Fusão especifica dupla
<400> 721
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly Ile Asn
25 30
Leu Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
40 45
Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Pro Ala Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro
115 120 125
Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Lys
130 135 140
Ala Tyr Pro Ile Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu 145 150 155 160
Trp Val Ser Glu Ile Ser Pro Ser Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Ala Asp 165 170 175 Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr 180 185 190 Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr 195 200 205 Tyr Cys Ala Lys Asp Pro Arg Lys Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 210 215 220 Leu Val Thr Val Ser Ser 225 230 <210> 722 <211> 231 <212> PRT <213> Seqüência Artificial <220> <223> Fusão específica dupla <4O0> 722 Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Lys Ala Tyr 20 25 30 Pro Ile Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Glu Ile Ser Pro Ser Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Asp Pro Arg Lys Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 100 105 110 Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Asp Ile Gln Met Thr 115 120 125 Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile 130 135 140 Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly Ile Asn Leu Asp Trp Tyr Gln 145 150 155 160 Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Tyr Ala Ser Phe 165 170 175 Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr 180 185 190 Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr 195 200 205 Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Pro Ala Pro Leu Thr Phe Gly Gln Gly 210 215 220 Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 225 230
<210> 723 <211> 7 <212> PRT
<213> Seqüência Artificial
<220>
<223> Ligador
<400> 723
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 1 5 <210> 724 <211> 13 <212> PRT
<213> Seqüência Artificial
<220>
<223> Ligador <400> 724
Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser
10
<210> 725 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens
<400> 725
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr 20 Ile Thr Cys Arg Ala 25 Ser Gln Trp Ile Gly 30 Ile Leu Val Asp Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Phe Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu His Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Ala Asn Pro Ala Pro 95 Leu Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 726 <211> 108 <212> PRT
<213> Homo sapiens <400> 726
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Thr Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Trp Ile Gly Asn Leu 20 25 30 Leu Asp Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu Ile Tyr Tyr Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Gly Gly Phe Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Ala Asn Pro Ala Pro 95 Leu Thr Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 Ile Lys Arg
<210> 727 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 727
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc
atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt
gggaaagccc ctaagctcct gatctattat
cgtttcagcg gcagtggatt tgggacagat
gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag
gggaccaagg tggaaatcaa acgt
<210> 728 <211> 324 <212> DNA <213> Homo sapiens
<400> 728
gacatccaga tgacccagtc tccaacctcc atcacttgcc gggcaagtca gtggattggt gggaaagccc ctaagctcct gatctattat cgtttcagtg gcggtggatt tgggacagat gaagattttg ctacgtacta ctgtcaacag gggaccaagg tggaaatcaa acgt
ctgtctgcat ctgtgggaga ccgtgtcacc 60 attttggtag attggtacca gcagaaacca 120 gcttcctttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag tctgcatcct 240 gctaatccgg cgcctctgac gttcggccaa 300
324
ttgtctgcat ctgtaggaga ccgtgtcacc 60 aatttgttag attggtacca gcagaaacca 120 gcttcctttt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag cctgcaacct 240 gctaatccgg cgcctctgac gttcggccaa 300
324

Claims (196)

1. Ligando, caracterizado pelo fato de que tem especificidade de ligação para o fator de crescimento endotelial vascular (VEGF) e receptor do fator de crescimento epidérmico (EGFR), compreendendo pelo menos uma porção de proteína que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF e pelo menos uma porção de proteína que tem um local de ligação com especificidade de ligação para EGFR.
2. Ligando de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que cada dita porção de proteína que tem um local de ligação com especificidade de ligação para EGFR compete para a ligação ao EGFR com um anticorpo de domínio anti EGFR (dAb) selecionado do grupo que consiste de DOM16-39 (SEQ ID N°: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N°: 420), DOM16-39-100 (SEQ ID N°: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM 16-39-109 (SEQ ID N°: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N°: 438) e DOMl6-39-200 (SEQ ID N0: 441).
3. Ligando de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que cada dita porção de proteína que tem um local de ligação com especificidade de ligação para EGFR compete para a ligação ao EGFR com um anticorpo de domínio anti-EGFR (dAb) selecionado do grupo que consiste de DOMl6-39-521 (SEQ ID N0: 577), DOMl6-39-541 (SEQ ID N°: 585), DOMl6-39-542 (SEQ ID N0: 586), DOM16-39-551 (SEQ ID N°: 591), DOM16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOM16-39-604 (SEQ ID N°: 611), DOMl6-39-618 (SEQ ID N°: 621) e DOM16-39-619 (SEQ ID N°: 622).
4. Ligando de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que cada dita porção de proteína que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF compete para a ligação ao VEGF com um anticorpo de domínio anti-VEGF (dAb) selecionado do grupo que consiste de TAR15-6 (SEQ ID N°: 117), TAR15-8 (SEQ ID N°: 119) e TARl 5-26 (SEQ ID N°: 123) e em que cada dita porção de proteína que tem um local de ligação com especificidade de ligação para EGFR compete para a ligação ao EGFR com um anticorpo de domínio anti-EGFR (dAb) selecionado do grupo que consiste de DOM16-39 (SEQ ID N°: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N°: 420), DOM16-39-100 (SEQ ID N°: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N°:430), DOM16-39-109 (SEQ ID N°: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N°: 438) e DOM16-39-200 (SEQ ID N0: 441).
5. Ligando de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que cada dita porção de proteína que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF compete para a ligação ao VEGF com um anticorpo de domínio anti-VEGF (dAb) selecionado do grupo que consiste de TAR15-6 (SEQ ID N0: 117), TAR15-8 (SEQ ID N°: 119) e TARl5-26 (SEQ ID N°: 123) e em que cada dita porção de proteína que tem um local de ligação com especificidade de ligação para EGFR compete para a ligação ao EGFR com um anticorpo de domínio anti-EGFR (dAb) selecionado do grupo que consiste de DOM 16-39-521 (SEQ ID N°: 577), DOM16-39-541 (SEQ ID N0: 585), DOM16-39-542 (SEQ ID N°: 586), DOMl6-39-551 (SEQ ID N°: 591), DOM16-39-601 (SEQ ID N0: 608), DOM 16-39-604 (SEQ ID N°: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID N0: 621) e DOM16-39-619 (SEQ ID N°: 622).
6. Ligando de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que cada dita porção de proteína que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF compete para a ligação ao VEGF com bevacizumab.
7. Ligando de acordo com a reivindicação 1 ou reivindicação 4, caracterizado pelo fato de que cada dita porção de proteína que tem um local de ligação com especificidade de ligação para EGFR compete para a ligação ao EGFR com cetuximab.
8. Ligando de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 7, caracterizado pelo fato de que a cada dita porção de proteína que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF compete para a ligação ao VEGF com bevacizumab e em que cada dita porção de proteína que tem um local de ligação com especificidade de ligação para EGFR compete para a ligação ao EGFR com cetuximab.
9. Ligando de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 8, caracterizado pelo fato de que cada porção de proteína que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF e cada porção de proteína que tem um local de ligação com especificidade de ligação para EGFR é fornecido por um fragmento de anticorpo.
10. Ligando de acordo com a reivindicação 9, caracterizado pelo fato de que o dito fragmento de anticorpo é um domínio variável simples de imunoglobulina.
11. Ligando, caracterizado pelo fato de que tem especificidade de ligação para o fator de crescimento endotelial vascular (VEGF) e receptor do fator de crescimento epidérmico (EGFR), compreendendo pelo menos um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF e pelo menos um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR5 em que cada dito domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR compete para a ligação ao EGFR com um anticorpo de domínio anti-EGFR (dAb) selecionado do grupo que consiste de DOMl6-39 (SEQ ID N°: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N°: 420), DOM16-39-100 (SEQ ID N0: 423), DOM 16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM16-39-1G9 (SEQ ID N°: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N°: 438) e DOM16-39-200 (SEQ ID N°: 441).
12. Ligando, caracterizado pelo fato de que tem especificidade de ligação para o fator de crescimento endotelial vascular (VEGF) e receptor do fator de crescimento epidérmico (EGFR), compreendendo pelo menos um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF e pelo menos um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR, em que cada dito domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR compete para a ligação ao EGFR com um anticorpo de domínio anti-EGFR (dAb) selecionado do grupo que consiste de DOM 16-3 9-521 (SEQ ID N°: 577), DOM16-39-541 (SEQ ID N°: 585), DOM16-39-542 (SEQ ID N°: 586), DOMl6-39-551 (SEQ ID N°: 591), DOM16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOMl6-39-604 (SEQ ID N°: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID N°: 621) e DOM16-39-619 (SEQ ID N0: 622).
13. Ligando de acordo com a reivindicação 11 ou reivindicação 12, caracterizado pelo fato de que cada dito domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR é fundido a uma região Fc de um anticorpo.
14. Ligando de acordo com a reivindicação 11 ou reivindicação 12, caracterizado pelo fato de que cada dito domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF é fundido a uma região Fc de um anticorpo.
15. Ligando de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato de que cada dito domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR compreende uma seqüência de aminoácido que tem pelo menos cerca de 85 % de identidade de seqüência de aminoácido com a seqüência de aminoácido de um dAb selecionado do grupo que consiste de DOM16-39 (SEQ ID N0: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N°: 420), DOM16-39-100 (SEQ ID N°: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM16-39-109 (SEQ ID N0: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N°: 438) e DOM16-39-200 (SEQ ID N°: 441).
16. Ligando de acordo com a reivindicação 12, caracterizado pelo fato de que cada o dito domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR compreende uma seqüência de aminoácido que tem pelo menos cerca de 85 % de identidade de seqüência de aminoácido com a seqüência de aminoácido de um dAb selecionado do grupo que consiste de DOM16-39-521 (SEQ ID N°: 577), DOM16-39-541 (SEQ ID N°: 585), DOM16-39-542 (SEQ ID N°: 586), DOM16-39-551 (SEQ ID N°: 591), DOM16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOM16-39-604 (SEQ ID N°: 611), DOM 16-39-618 (SEQ IDN0: 621) e DOM16-39-619 (SEQ ID N°: 622).
17. Ligando, caracterizado pelo fato de que tem especificidade de ligação para o fator de crescimento endotelial vascular (VEGF) e receptor do fator de crescimento epidérmico (EGFR), compreendendo pelo menos um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF e pelo menos um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR, em que cada dito domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF compete para a ligação ao VEGF com um anticorpo de domínio anti-VEGF (dAb) selecionado do grupo que consiste de TARl5-6 (SEQ ID N0: 117), TAR15-8 (SEQ ID N°: 119) e TAR15-26 (SEQIDN0: 123); e cada dito domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR compete para a ligação ao EGFR com um anticorpo de domínio anti-EGFR (dAb) selecionado do grupo que consiste de DOM 16-39 (SEQ ID N°: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N°: 420), DOM 16-39-100 (SEQ ID N0: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOMl6-39-109 (SEQ ID N0: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N°: 438) e DOMl6-39-200 (SEQ ID N°: 441).
18. Ligando, caracterizado pelo fato de que tem especificidade de ligação para o fator de crescimento endotelial vascular (VEGF) e receptor do fator de crescimento epidérmico (EGFR), compreendendo pelo menos um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF e pelo menos um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR, em que cada dito domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF compete para a ligação ao VEGF com um anticorpo de domínio anti-VEGF (dAb) selecionado do grupo que consiste de TARl5-6 (SEQ ID N0: 117), TAR15-8 (SEQ ID N0: 119) e TAR15-26 (SEQIDN0: 123) e cada dito domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR compete para a ligação ao EGFR com um anticorpo de domínio anti-EGFR (dAb) selecionado do grupo que consiste de DOMl6-39-521 (SEQ ID N°: 577), DOMl6-39-541 (SEQ ID N°: 585), DOMl6-39-542 (SEQ ID N°: 586), DOM16-39-551 (SEQ ID N°: 591), DOM16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOM16-39-604 (SEQ ID N°: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID N°: 621) e DOM16-39-619 (SEQ ID N0: 622).
19. Ligando de acordo com a reivindicação 17, caracterizado pelo fato de que cada dito domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF compreende uma seqüência de aminoácido que tem pelo menos cerca de 85 % de identidade de seqüência de aminoácido com a seqüência de aminoácido de um dAb selecionado do grupo que consiste de TAR15-6 (SEQ ID N0: 117), TAR15-8 (SEQ ID N°: 119) e TARl5-26 (SEQ ID N°: 123) e cada dito domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR compete para a ligação ao EGFR com um anticorpo de domínio anti-EGFR (dAb) selecionado do grupo que consiste de DOM 16-39 (SEQ ID N0: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N°: 420), DOM 16-39-100 (SEQ ID N0: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM 16-39-109 (SEQ ID N°: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N°: 438) e DOMl6-39-200 (SEQ ID N°: 441).
20. Ligando de acordo com a reivindicação 18, caracterizado pelo fato de que cada dito domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF compreende uma seqüência de aminoácido que tem pelo menos cerca de 85 % de identidade de seqüência de aminoácido com a seqüência de aminoácido de um dAb selecionado do grupo que consiste de TAR15-6 (SEQ ID N°: 117), TAR15-8 (SEQ ID N°: 119) e TARl5-26 (SEQ ID N°: 123) e cada dito domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR compete para a ligação ao EGFR com um anticorpo de domínio anti-EGFR (dAb) selecionado do grupo que consiste de DOMl6-39-521 (SEQ ID N°: 577), DOM16-39-541 (SEQ ID N0: 585), DOM 16-39-542 (SEQ ID N°: 586), DOM16-39-551 (SEQ ID N°: 591), DOM 16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOM16-39-604 (SEQ ID N°: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID N0: 621) e DOM16-39-619 (SEQ ID N°: 622).
21. Ligando de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 19, caracterizado pelo fato de que o dito ligando inibe a ligação do fator de crescimento epidérmico (EGF) e/ou fator de crescimento transformante alfa (TGFalfa) ao EGFR.
22. Ligando de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 19, caracterizado pelo fato de que o dito ligando inibe a atividade de EGFR.
23. Ligando de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 19, caracterizado pelo fato de que o dito ligando inibe a atividade de EGFR sem inibir substancialmente a ligação do fator de crescimento epidérmico (EGF) e/ou fator de crescimento transformante alfa (TGFalfa) ao EGFR.
24. Ligando de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 23 > caracterizado pelo fato de que o dito ligando inibe a ligação de VEGF ao receptor do fator de crescimento endotelial vascular 1 (VEGFRl) e/ou receptor do fator de crescimento endotelial vascular 2 (VEGFR2).
25. Ligando de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 23 > caracterizado pelo fato de que o dito ligando inibe a atividade de
26. Ligando de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 23, caracterizado pelo fato de que o dito ligando inibe a atividade de VEGF sem inibir substancialmente a ligação de VEGF ao receptor do fator de crescimento endotelial vascular 1 (VEGFRl) e/ou receptor do fator de crescimento endotelial vascular 2 (VEGFR2).
27. Ligando de acordo com qualquer uma das reivindicações de 10 a 26, caracterizado pelo fato de que cada dito domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF liga o VEGF com uma afinidade (KD) que está entre cerca de 100 nM e cerca de 1 pM, como determinado pela ressonância de plasmônio de superfície.
28. Ligando de acordo com qualquer uma das reivindicações de 10 a 26, caracterizado pelo fato de que cada dito domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR liga o EGFR com uma afinidade (KD) que está entre cerca de 100 nM e cerca de 1 pM, como determinado pela ressonância de plasmônio de superfície.
29. Ligando de acordo com a reivindicação 28, caracterizado pelo fato de que cada dito domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR liga EGFR com uma afinidade (KD) que está entre cerca de 10 nM e cerca de 100 pM, como determinado pela ressonância de plasmônio de superfície.
30. Ligando de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 26, caracterizado pelo fato de que o dito ligando liga o VEGF com uma afinidade (KD) que está entre cerca de 100 nM e cerca de 1 pM, como determinado pela ressonância de plasmônio de superfície.
31. Ligando de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 26 e 30, caracterizado pelo fato de que o dito ligando liga o EGFR com uma afinidade (KD) que está entre cerca de 100 nM e cerca de 1 pM, como determinado pela ressonância de plasmônio de superfície.
32. Ligando de acordo com a reivindicação 31, caracterizado pelo fato de que o dito ligando liga o EGFR com uma afinidade (KD) que está entre cerca de 10 nM e cerca de 100 pM, como determinado pela ressonância de plasmônio de superfície.
33. Ligando de acordo com qualquer uma das reivindicações de 10 a 32, caracterizado pelo fato de que o dito ligando compreende uma domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF que é um Vhh e/ou um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR que é um Vhh-
34. Ligando de acordo com qualquer uma das reivindicações de 10 a 32, caracterizado pelo fato de que cada dito domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF e cada dito domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR são independentemente selecionados do grupo que consiste de um Vh humano e um Vl humano.
35. Ligando de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 34, caracterizado pelo fato de que o dito ligando é um formato semelhante ao IgG que compreende dois domínios variáveis simples de imunoglobulinas com especificidade de ligação para VEGF e dois domínios variáveis simples de imunoglobulinas com especificidade de ligação para EGFR.
36. Ligando de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 35, caracterizado pelo fato de que o dito ligando compreende uma região de Fc de anticorpo.
37. Ligando, caracterizado pelo fato de que tem especificidade de ligação para o fator de crescimento endotelial vascular (VEGF) e receptor do fator de crescimento epidérmico (EGFR), compreendendo pelo menos um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF e pelo menos um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR, em que cada dito domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF compete para a ligação ao VEGF com um anticorpo de domínio anti-VEGF (dAb) selecionado do grupo que consiste de TAR15-6 (SEQ ID N0: 117), TAR15-8 (SEQ ID N°: 119) e TAR15-26 (SEQ IDN°: 123) e cada dito domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR compete para a ligação ao EGFR com cetuximab.
38. Ligando de acordo com a reivindicação 37, caracterizado pelo fato de que cada dito domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF compreende uma seqüência de aminoácido que tem pelo menos cerca de 85 % de identidade de seqüência de aminoácido com a seqüência de aminoácido de um dAb selecionado do grupo que consiste de TAR15-6 (SEQ ID N0: 117), TAR15-8 (SEQ ID N°: 119) e TARl5-26 (SEQ ID N°: 123).
39. Ligando, caracterizado pelo fato de que tem especificidade de ligação para o fator de crescimento endotelial vascular (VEGF) e receptor do fator de crescimento epidérmico (EGFR), compreendendo pelo menos um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF e pelo menos um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR, em que cada dito domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF compete para a ligação ao VEGF com bevacizumab e cada dito domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR compete para a ligação ao EGFR com um anticorpo de domínio anti-EGFR (dAb) selecionado do grupo que consiste de DOMl6-39 (SEQ ID N°: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N°: 420), DOM16-39-100 (SEQ ID N°: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM16-39-109 (SEQ ID N0: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N°: 438) e DOMl6-39-200 (SEQ ID N0: 441).
40. Ligando, caracterizado pelo fato de que tem especificidade de ligação para o fator de crescimento endotelial vascular (VEGF) e receptor do fator de crescimento epidérmico (EGFR), compreendendo pelo menos um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF e pelo menos um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR, em que cada dito domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF compete para a ligação ao VEGF com bevacizumab e cada dito domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR compete para a ligação ao EGFR com um anticorpo de domínio anti-EGFR (dAb) selecionado do grupo que consiste de DOM16-39-521 (SEQ ID N°: 577), DOM16-39-541 (SEQ ID N°: 585), DOMl6-39-542 (SEQ ID N0: 586), DOM16-39-551 (SEQ ID N°: 591), DOM16-39-601 (SEQ ID N0: 608), DOM16-39-604 (SEQ ID N0: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID N°: 621) e DOM16-39-619 (SEQ ID N0: 622).
41. Ligando de acordo com a reivindicação 39, caracterizado pelo fato de que cada dito domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR compreende uma seqüência de aminoácido que tem pelo menos cerca de 85 % de identidade de seqüência de aminoácido com a seqüência de aminoácido de um dAb selecionado do grupo que consiste de DOM16-39 (SEQ ID N°: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N°: 420), DOM16-39-100 (SEQ ID N°: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM16-39-109 (SEQ ID N0: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N0: 438) e DOMl 6-39-200 (SEQ ID N°: 441).
42. Ligando de acordo com a reivindicação 40, caracterizado pelo fato de que cada dito domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR compreende uma seqüência de aminoácido que tem pelo menos cerca de 85 % de identidade de seqüência de aminoácido com a seqüência de aminoácido de um dAb selecionado do grupo que consiste de DOM16-39-521 (SEQ ID N°: 577), DOM16-39-541 (SEQ ID N°: 585), DOM16-39-542 (SEQ ID N°: 586), DOM16-39-551 (SEQ ID N°: 591), DOMl6-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOMl6-39-604 (SEQ ID N°: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID N°: 621) e DOM16-39-619 (SEQ ID N°: 622).
43. Ligando, caracterizado pelo fato de que tem especificidade de ligação para o fator de crescimento endotelial vascular (VEGF) e receptor do fator de crescimento epidérmico (EGFR), compreendendo um primeiro domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF e um segundo domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR, em que o dito primeiro domínio variável simples de imunoglobulina compete para a ligação ao VEGF com bevacizumab e o dito segundo domínio variável simples de imunoglobulina compete para a ligação ao EGFR com cetuximab.
44. Ligando de acordo com qualquer uma das reivindicações 20 de 37 a 43, caracterizado pelo fato de que o dito ligando inibe a ligação do fator de crescimento epidérmico (EGF) e/ou fator de crescimento transformante alfa (TGFalfa) ao EGFR.
45. Ligando de acordo com qualquer uma das reivindicações de 37 a 43, caracterizado pelo fato de que o dito ligando inibe a atividade de EGFR.
46. Ligando de acordo com qualquer uma das reivindicações de 37 a 43, caracterizado pelo fato de que o dito ligando inibe a atividade de EGFR sem inibir substancialmente a ligação do fator de crescimento epidérmico (EGF) e/ou fator de crescimento transformante alfa (TGFalfa) ao EGFR.
47. Ligando de acordo com qualquer uma das reivindicações de 37 a 46, caracterizado pelo fato de que o dito ligando inibe a ligação de VEGF ao receptor do fator de crescimento endotelial vascular 1 (VEGFRl) 5 e/ou receptor do fator de crescimento endotelial vascular 2 (VEGFR2).
48. Ligando de acordo com qualquer uma das reivindicações de 37 a 46, caracterizado pelo fato de que o dito ligando inibe a atividade de VEGF.
49. Ligando de acordo com qualquer uma das reivindicações de 37 a 46, caracterizado pelo fato de que o dito ligando inibe a atividade de VEGF sem inibir substancialmente a ligação de VEGF ao receptor do fator de crescimento endotelial vascular 1 (VEGFRl) e/ou receptor do fator de crescimento endotelial vascular 2 (VEGFR2).
50. Ligando de acordo com qualquer uma das reivindicações de 37 a 49, caracterizado pelo fato de que cada dito domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF liga o VEGF com uma afinidade (KD) que está entre cerca de 100 nM e cerca de 1 pM, como determinado pela ressonância de plasmônio de superfície.
51. Ligando de acordo com qualquer uma das reivindicações de 37 a 50, caracterizado pelo fato de que cada dito domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR liga o EGFR com uma afinidade (KD) que está entre cerca de 100 nM e cerca de 1 pM, como determinado pela ressonância de plasmônio de superfície.
52. Ligando de acordo com a reivindicação 51, caracterizado pelo fato de que cada dito domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR liga o EGFR com uma afinidade (KD) que está entre cerca de 10 nM e cerca de 100 pM, como determinado pela ressonância de plasmônio de superfície.
53. Ligando de acordo com qualquer uma das reivindicações de 37 a 49, caracterizado pelo fato de que o dito ligando liga o VEGF com uma afinidade (KD) que está entre cerca de 100 nM e cerca de 1 pM, como determinado pela ressonância de plasmônio de superfície.
54. Ligando de acordo com qualquer uma das reivindicações de 37 a 49 e 53, caracterizado pelo fato de que o dito ligando liga o EGFR com uma afinidade (KD) que está entre cerca de 100 nM e cerca de 1 pM, como determinado pela ressonância de plasmônio de superfície.
55. Ligando de acordo com a reivindicação 54, caracterizado pelo fato de que o dito ligando liga o EGFR com uma afinidade (KD) que está entre cerca de 10 nM e cerca de 100 pM, como determinado pela ressonância de plasmônio de superfície.
56. Ligando de acordo com qualquer uma das reivindicações de 37 a 55, caracterizado pelo fato de que o dito ligando compreende um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF que é um VHh e/ou um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR que é um VHh-
57. Ligando de acordo com qualquer uma das reivindicações de 37 a 55, caracterizado pelo fato de que cada dito domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF e cada dito domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR são selecionados do grupo que consiste de a Vh humano e um Vl humano.
58. Ligando de acordo com qualquer uma das reivindicações de 37 a 57, caracterizado pelo fato de que o dito ligando é um formato semelhante a IgG que compreende dois domínios variáveis simples de imunoglobulinas com especificidade de ligação para VEGF e dois domínios variáveis simples de imunoglobulinas com especificidade de ligação para EGFR.
59. Ligando de acordo com qualquer uma das reivindicações de 37 a 58, caracterizado pelo fato de que o dito ligando compreende uma região de Fc de anticorpo.
60. Ligando, caracterizado pelo fato de que tem especificidade de ligação para o receptor do fator de crescimento epidérmico (EGFR)s compreendendo pelo menos um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR, em que cada dito domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR compete para a ligação ao EGFR com um anticorpo de domínio anti-EGFR (dAb) selecionado do grupo que consiste de DOMl6-39 (SEQ ID N°: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N0: 420), DCM16-39-100 (SEQ ID N°: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM16-39-109 (SEQ ID N0: 432), DOM 16-39-115 (SEQ ID N0: 438) e DOM16-39-200 (SEQ ID N0: 441).
61. Ligando, caracterizado pelo fato de que tem especificidade de ligação para o receptor do fator de crescimento epidérmico (EGFR), compreendendo pelo menos um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR, em que cada dito domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR compete para a ligação ao EGFR com um anticorpo de domínio anti-EGFR (dAb) selecionado do grupo que consiste de DOM 16-3 9-521 (SEQ ID N°: 577), DOM16-39-541 (SEQ ID N0: 585), DOM16-39-542 (SEQ ID N°: 586), DOM16-39-551 (SEQ ID N°: 591), DOM16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOM 16-39-604 (SEQ ID N°: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID N°: 621) e DOM16-39-619 (SEQ ID N°: 622).
62. Ligando de acordo com a reivindicação 60 ou reivindicação 61, caracterizado pelo fato de que dito ligando inibe a ligação de fator de crescimento epidérmico (EGF) e/ou fator de crescimento transformante alfa (TGFalfa) ao EGFR.
63. Ligando de acordo com a reivindicação 60 ou reivindicação 61, caracterizado pelo fato de que o dito ligando inibe a atividade de EGFR.
64. Ligando de acordo com a reivindicação 60 ou reivindicação 61, caracterizado pelo fato de que o dito ligando inibe a atividade de EGFR sem inibir substancialmente a ligação do fator de crescimento epidérmico (EGF) e/ou fator de crescimento transformante alfa (TGFalfa) ao EGFR.
65. Ligando de acordo com qualquer uma das reivindicações de 60 â 64, caracterizado pelo fato de que cada dito domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR liga o EGFR com uma afinidade (KD) que está entre cerca de 100 nM e cerca de 1 pM, como determinado pela ressonância de plasmônio de superfície.
66. Ligando de acordo com a reivindicação 65, caracterizado pelo fato de que cada dito domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR liga o EGFR com uma afinidade (KD) que está entre cerca de 10 nM e cerca de 100 pM, como determinado pela ressonância de plasmônio de superfície.
67. Ligando de acordo com qualquer uma das reivindicações de 60 a 64, caracterizado pelo fato de que o dito ligando liga o EGFR com uma afinidade (KD) que está entre cerca de 100 nM e cerca de 1 pM, como determinado pela ressonância de plasmônio de superfície.
68. Ligando de acordo com a reivindicação 67, caracterizado pelo fato de que o dito ligando liga o EGFR com uma afinidade (KD) que está entre cerca de 10 nM e cerca de 100 pM, como determinado pela ressonância de plasmônio de superfície.
69. Ligando de acordo com qualquer uma das reivindicações de 60 â 68, caracterizado pelo fato de que o dito ligando compreende uma domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR que é um Vhh.
70. Ligando de acordo com qualquer uma das reivindicações de 60 a caracterizado pelo fato de que cada dito domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR é independentemente selecionado do grupo que consiste de um Vh humano e um Vl humano.
71. Ligando de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 70, caracterizado pelo fato de que o dito ligando ainda compreende uma toxina.
72. Ligando de acordo com a reivindicação 71, caracterizado pelo fato de que a dita toxina é uma toxina ativa na superfície.
73. Ligando de acordo com a reivindicação 72, caracterizado pelo fato de que a dita toxina ativa na superfície compreende um gerador de radical livre ou um radionucleotídeo.
74. Ligando de acordo com a reivindicação 73, caracterizado pelo fato de que a dita toxina é uma citotoxina, gerador de radical livre, antimetabólito, proteína, polipeptídeo, peptídeo, agente fotoativo, composto anti-sentido, quimioterapêutico, radionuclídeo ou intracorpo.
75. Ligando de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 74, caracterizado pelo fato de que o dito ligando ainda compreende uma porção extensora de meia vida.
76. Ligando de acordo com a reivindicação 75, caracterizado pelo fato de que a dita porção extensora de meia vida é uma porção de polialquileno glicol, albumina de soro ou um fragmento deste, receptor de transferrina ou uma porção de ligação de transferrina deste ou uma porção que compreende um local de ligação para a polipeptídeo que intensifica a meia vida in vivo.
77. Ligando de acordo com a reivindicação 76, caracterizado pelo fato de que a dita porção extensora de meia vida é uma porção que compreende um local de ligação para a polipeptídeo que intensifica a meia vida in vivo selecionado do grupo que consiste de um anticorpo, um domínio de SpA, um domínio de classe A do receptor de LDL, um domínio de EGF e um avímero.
78. Ligando de acordo com a reivindicação 76, caracterizado pelo fato de que a dita porção extensora de meia vida é uma porção de polietileno glicol.
79. Ligando de acordo com a reivindicação 76, caracterizado pelo fato de que a dita porção extensora de meia vida é um anticorpo ou fragmento de anticorpo que compreende um local de ligação para albumina de soro ou receptor de Fc neonatal.
80. Ligando de acordo com a reivindicação 79, caracterizado pelo fato de que o dito anticorpo ou fragmento de anticorpo que compreende um local de ligação para albumina de soro ou receptor de Fc neonatal é um fragmento de anticorpo e o dito fragmento de anticorpo é um domínio variável simples de imunoglobulina que compreende um local de ligação para albumina de soro.
81. Ligando de acordo com a reivindicação 80, caracterizado pelo fato de que o dito domínio variável simples de imunoglobulina que compreende um local de ligação para albumina de soro compete para a ligação à albumina de soro humana com um dAb selecionado do grupo que consiste de DOM7m-16 (SEQ ID N°: 473), DOM7m-12 (SEQ ID N°: 474), DOM7m-26 (SEQ ID N°: 475), DOM7r-l (SEQ ID N0: 476), DOM7r-3 (SEQ ID N0: 477), DOM7r-4 (SEQ ID N°: 478), DOM7r-5 (SEQ ID N°: 479), DOM7r-7 (SEQ ID N°: 480), DOM7r-8 (SEQ ID N°: 481), DOM7h-2 (SEQ ID N°: 482), DOM7h-3 (SEQ ID N°: 483), DOM7h-4 (SEQ ID N0: 484), DOM7h-6 (SEQ ID N0: 485), DOM7h-l (SEQ ID N°: 486), DOM7h-7 (SEQ ID N°: 487), DOM7h-22 (SEQ ID N0: 489), DOM7h-23 (SEQ ID N°: 490), DOM7h-24 (SEQ ID N0: 491), DOM7h-25 (SEQ ID N°:492), DOM7h- 26 (SEQ ID N0: 493), DOM7h-21 (SEQ ID N°: 494), DOM7h27 (SEQ ID N°: 495), DOM7h-8 (SEQ ID N0: 496), DOM7r-13 (SEQ ID N°: 497), DOM7r-14 (SEQ ID N°: 498), DOM7r-15 (SEQ ID N°: 499), DOM7r-16 (SEQ ID N°: 500), DOM7r-17 (SEQ ID N°: 501), DOM7r-18 (SEQ ID N°: 502), DOM7r-19 (SEQ ID N°: 503), DOM7r-20 (SEQ ID N°:504), DOM7r-21 (SEQ ID N°: 505), DOM7r-22 (SEQ ID N°: 506), DOM7r-23 (SEQ ID N°: 507), DOM7r-24 (SEQ ID N°: 508), DOM7r-25 (SEQ ID N°: 509), DOM7r-26 (SEQ ID N°: 510), DOM7r-27 (SEQ ID N°: 511), DOM7r-28 (SEQ ID N0: 512), DOM7r-29 (SEQ ID N°: 513), DC>M7r-30 (SEQ ID N°:514), DOM7r-31 (SEQ ID N0: 515), DOM7r-32 (SEQ ID N°:516) e DOM7r-33 (SEQ ID N0: 517).
82. Ligando de acordo com a reivindicação 80, caracterizado pelo fato de que o dito domínio variável simples de imunoglobulina que compreende um local de ligação para albumina de soro compreende uma seqüência de aminoácido que tem pelo menos 85 % de identidade de seqüência de aminoácido com a seqüência de aminoácido de um dAb selecionado do grupo que consiste de DOM7m-16 (SEQ ID N°: 473), DOM7m-12 (SEQ ID N°: 474), DOM7m-26 (SEQ ID N°: 475), DOM7r-l (SEQ ID N°: 476), DOM7r-3 (SEQ ID N°: 477), DOM7r-4 (SEQ ID N°:478), DOM7r-5 (SEQ ID N0: 479), DOM7r-7 (SEQ ID N°: 480), DOM7r-8 (SEQ ID N0: 481), DOM7h-2 (SEQ ID N°: 482), DOM7h-3 (SEQ ID N°:483), DOM7h-4 (SEQ ID N0: 484), DOM7h-6 (SEQ ID N°: 485), DOM7h-l (SEQ ID N0: 486), DOM7h-7 (SEQ ID N°: 487), DOM7h-22 (SEQ ID N°:489), DOM7h-23 (SEQ ID N°: 490), DOM7h-24 (SEQ ID N°:491), DOM7h- (SEQ ID N°: 492), DOM7h-26 (SEQ ID N°: 493), DOM7h-21 (SEQ ID N°: 494), DOM7h-27 (SEQ ID N°: 495), DOM7h-8 (SEQ ID N°: 496), DOM7r-13 (SEQ ID N0: 497), DOM7r-14 (SEQ ID N°: 498), DOM7r-15 (SEQ ID N0: 499), DOM7r-16 (SEQ ID N°: 500), DOM7r-17 (SEQ ID N°:501), DOM7r-18 (SEQ ID N0: 502), DOM7r-19 (SEQ ID N°: 503), DOM7r- (SEQ ID N°: 504), DOM7r-21 (SEQ ID N°: 505), DOM7r-22 (SEQ ID N°: 506), DOM7r-23 (SEQ ID N°: 507), DOM7r-24 (SEQ ID N°: 508), DOM7r-25 (SEQ ID N0: 509), DOM7r-26 (SEQ ID N°: 510), DOM7r-27 (SEQ ID N°: 511), DOM7r-28 (SEQ ID N°: 512), DOM7r-29 (SEQ ID N0:513), DC)M7r-30 (SEQ ID N0: 514), DOM7r-31 (SEQ ID N°:515), DOM7r-32 (SEQ ID N°: 516) e DOM7r-33 (SEQ ID N°: 517).
83. Ligando de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 70, caracterizado pelo fato de que é para o uso na terapia ou diagnóstico.
84. Ligando de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 70, caracterizado pelo fato de que é para o uso no tratamento de câncer.
85. Ligando de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 70, caracterizado pelo fato de que é para o tratamento de células cancerígenas que super-expressam EGFR e/ou VEGF.
86. Uso do ligando como definido em qualquer uma das reivindicações de 1 a 70, caracterizado pelo fato de ser para a fabricação de um medicamento para o tratamento de câncer.
87. Uso do ligando como definido em qualquer uma das reivindicações de 1 a 70, caracterizado pelo fato de ser para a fabricação de um medicamento para o tratamento de células cancerígenas que super- expressam EGFR e/ou VEGF.
88. Método para tratar câncer, caracterizado pelo fato de que compreende administrar a um indivíduo em necessidade deste, uma quantidade terapeuticamente eficaz de ligando como definido em qualquer uma das reivindicações de 1 a 70.
89. Método para tratar câncer, caracterizado pelo fato de que compreende administrar a um indivíduo em necessidade deste, uma quantidade terapeuticamente eficaz de ligando como definido em qualquer uma das reivindicações de 1 a 70 e um agente quimioterapêutico.
90. Método para tratar câncer, caracterizado pelo fato de que compreende administrar a um indivíduo em necessidade deste, uma quantidade terapeuticamente eficaz de ligando como definido em qualquer uma das reivindicações de 1 a 70 e uma composição antineoplástica, em que a dita composição antineoplástica compreende pelo menos um agente quimioterapêutico selecionado do grupo que consiste de agentes alquilantes, antimetabólitos, análogos de ácido fólico, análogos de pirimidina, análogos de purina e inibidores relacionados, vinca alcalóides, epipodofilotoxinas, antibióticos, L-Asparaginase, inibidor de topoisomerase, interferons, complexos de coordenação de platina, uréia substituída por antracenodiona, derivados de metil hidrazina, supressor adrenocortical, adrenocorticoesteróides, progestinas, estrogênios, antiestrogênio, androgênios, antiandrogênio e análogo de hormônio de liberação de gonadotropina.
91. Método de acordo com a reivindicação 90, caracterizado pelo fato de que o agente quimioterapêutico é selecionado do grupo que consiste de cisplatina, dicarbazina, dactinomicina, mecloretamina, estreptozocina, ciclofosfamida, capecitabina, carmustina, lomustina, doxorubicina, daunorubicina, procarbazina, mitoinicina, citarabina, etoposida, metotrexato, 5-fluorouracila, vinbiastina, vincristina, bleomicina, paclitaxel, docetaxel, doxetaxo, aldesleucina, asparaginase, busulfan, carboplatina, cladribina, dacarbazina, floxuridina, fludarabina, hidroxiuréia, ifosfamida, interferon alfa, irinotecano, leuprolida, leucovorina, megestrol, melfalan, mercaptopurina, oxaliplatina, plicamicina, mitotano, pegaspargase, pentostatina, pipobroman, plicamicina, estreptozocina, tamoxifeno, teniposida, testolactona, tioguanina, tiotepa, uracil mostarda, vinorelbina, clorambucila, taxol, um antagonista receptor de fator de crescimento adicional e uma combinação de acordo com qualquer um dos precedentes.
92. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações de 88 a 91, caracterizado pelo fato de que o câncer é câncer de bexiga, câncer ovariano, câncer colo-retal, câncer de mama, câncer de pulmão, câncer gástrico, câncer pancreático, câncer de próstata, câncer de cabeça e pescoço, câncer renal e câncer de bexiga.
93. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações de88 a 91, caracterizado pelo fato de que o câncer é carcinoma de pulmão de célula não pequena ou carcinoma de colo-retal.
94. Método para administrar um tratamento anti-VEGF e tratamento anti-EGFR a um indivíduo, caracterizado pelo fato de que compreende a administração simultânea de um tratamento anti-VEGF e um tratamento anti-EGFR pela administração ao dito indivíduo, uma quantidade terapeuticamente eficaz de um ligando como definido em qualquer uma das reivindicações de 1 a 59.
95. Composição, caracterizada pelo fato de que compreende um ligando como definido em qualquer uma das reivindicações de 1 a 70 e um carreador fisiologicamente aceitável.
96. Composição de acordo com a reivindicação 95, caracterizada pelo fato de que a dita composição compreende um veículo para a administração intravenosa, intramuscular, intraperitoneal, intra-arterial, intratecal, intra-articular ou subcutânea.
97. Composição de acordo com a reivindicação 95, caracterizada pelo fato de que a dita composição compreende um veículo é para a administração pulmonar, intranasal, vaginal ou retal.
98. Dispositivo de dispensação de droga, caracterizado pelo fato de que compreende a composição como definida na reivindicação 95.
99. Dispositivo de dispensação de droga para administrar simultaneamente tratamento anti-VEGF e tratamento anti-EGFR a um indivíduo, caracterizado pelo fato de que o dispositivo compreende um ligando como definido em qualquer uma das reivindicações de 1 a 59.
100. Dispositivo de dispensação de droga de acordo com a reivindicação 98 ou 99, caracterizado pelo fato de que o dito dispositivo compreende uma pluralidade de doses terapeuticamente eficazes de ligando.
101. Dispositivo de dispensação de droga de acordo com qualquer uma das reivindicações de 98 a 100, caracterizado pelo fato de que o dito dispositivo de dispensação de droga é selecionado do grupo que consiste de um dispositivo de dispensação parenteral, dispositivo de dispensação intravenoso, dispositivo de dispensação intramuscular, dispositivo de dispensação intraperitoneal, dispositivo de dispensação transdérmico, dispositivo de dispensação pulmonar, disposição de liberação intra-arterial, dispositivo de dispensação intratecal, dispositivo de dispensação intra- articular, dispositivo de dispensação subcutânea, dispositivo de dispensação intranasal, dispositivo de dispensação vaginal e dispositivo de dispensação retal.
102. Dispositivo de dispensação de droga de acordo com a reivindicação 101, caracterizado pelo fato de que o dito dispositivo é selecionado do grupo que consiste de uma seringa, um dispositivo de dispensação transdérmica, uma cápsula, um tablete, um nebulizador, um inalador, um atomizador, um aerossolizador, um vaporizador, um inalador de pó seco, um inalador de dose medida, um pulverizador de dose medida, um vaporizador de dose medida, um atomizador de dose medida, a cateter.
103. Uso do ligando como definido em qualquer uma das reivindicações de 1 a 70, caracterizado pelo fato de ser para a fabricação de um medicamento para matar seletivamente as células cancerígenas sobre as células normais.
104. Uso do ligando como definido em qualquer uma das reivindicações de 1 a 70, caracterizado pelo fato de ser para a fabricação de um medicamento para matar as células.
105. Uso de acordo com a reivindicação 104, caracterizado pelo fato de que o dito ligando compreende uma região de Fc de anticorpo.
106. Ácido nucleico isolado ou recombinante, caracterizado pelo fato de que codifica um ligando como definido em qualquer uma das reivindicações de 1 a 70.
107. Vetor, caracterizado pelo fato de que compreende o ácido nucleico recombinante como definido na reivindicação 106.
108. Célula hospedeira, caracterizada pelo fato de que compreende o ácido nucleico recombinante como definido na reivindicação 106 ou o vetor como definido na reivindicação 107.
109. Método para produzir um ligando, caracterizado pelo fato de que compreende manter a célula hospedeira como definida na reivindicação 108 sob as condições adequadas para a expressão do dito ácido nucleico ou vetor, por meio do qual um ligando é produzido.
110. Método de acordo com a reivindicação 109, caracterizado pelo fato de que ainda compreende isolar o ligando.
111. Composição, caracterizada pelo fato de que compreende uma construção de polipeptídeo de anticorpo de domínio simples que antagoniza a ligação de EGFR humano a um receptor, em que a dita construção de polipeptídeo de anticorpo de domínio simples compreende uma seqüência de CDR3 que é a mesma como a seqüência de CDR3 de um dAb selecionado do grupo que consiste de DOM16-39 (SEQ ID N0: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N0: 420), DOM16-39-100 (SEQ ID N0: 423), DOM 16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM16-39-109 (SEQ ID N0: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N°: 438) e DOM16-39-200 (SEQ ID N°: 441).
112. Composição, caracterizada pelo fato de que compreende uma construção de polipeptídeo de anticorpo de domínio simples que antagoniza a ligação de EGFR humano a um receptor, em que a dita construção de polipeptídeo de anticorpo de domínio simples compreende uma seqüência de CDR3 que é a mesma como a seqüência de CDR3 de um dAb selecionado do grupo que consiste de DOM16-39-521 (SEQ ID N0: 577), DOM16-39-541 (SEQ ID N°: 585), DOM16-39-542 (SEQ ID N°: 586), DOM16-39-551 (SEQ ID N°: 591), DOM16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOMl6-39-604 (SEQ ID N°: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID N°: 621) e DOM16-39-619 (SEQ ID N0: 622).
113. Composição, caracterizada pelo fato de que compreende uma construção de polipeptídeo de anticorpo de domínio simples que antagoniza a ligação de EGFR humano a um receptor, em que a dita construção de polipeptídeo de anticorpo de domínio simples compreende uma seqüência de aminoácido selecionada do grupo que consiste de DOMl6-39 (SEQ ID N°: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N°: 420), DOM16-39-100 (SEQ ID N°: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM16-39-109 (SEQ ID N°: 432), DOMl6-39-115 (SEQ ID N°: 438), DOM16-39-200 (SEQ ID N°: 441) e uma seqüência pelo menos 85 % idêntica a qualquer uma das precedentes.
114. Composição, caracterizada pelo fato de que compreende uma construção de polipeptídeo de anticorpo de domínio simples que antagoniza a ligação de EGFR humano a um receptor, em que a dita construção de polipeptídeo de anticorpo de domínio simples compreende uma seqüência de aminoácido selecionada do grupo que consiste de DOMl 6-39-521 (SEQ ID N0: 577), DOM16-39-541 (SEQ ID N0:585), DOM16-39-542 (SEQ ID N°: 586), DOM16-39-551 (SEQ ID N0: 591), DOM16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOM16-39-604 (SEQ ID N°: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID N0: 621), DOM 16-39-619 (SEQ ID N°: 622) e uma seqüência pelo menos 85 % idêntica a qualquer uma das precedentes.
115. Composição, caracterizada pelo fato de que compreende uma construção de polipeptídeo de anticorpo de domínio simples que antagoniza a ligação de EGFR humano a um receptor, em que a dita construção de polipeptídeo de anticorpo de domínio simples compreende uma seqüência de aminoácido selecionada do grupo que consiste de DOM16-39 (SEQ ID N°: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N°: 420), DOM16-39-100 (SEQ ID Ν°: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM16-39-109 (SEQ ID N°: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N°: 438), DOM16-39-200 (SEQ ID N°: 441) e uma seqüência pelo menos 85 % idêntica a qualquer uma das precedentes.
116. Composição, caracterizada pelo fato de que compreende uma construção de polipeptídeo de anticorpo de domínio simples que antagoniza a ligação de EGFR humano a um receptor, em que a dita construção de polipeptídeo de anticorpo de domínio simples compreende uma seqüência de aminoácido selecionada do grupo que consiste de DOM 16-3 9- 521 (SEQ ID N°: 577), DOM16-39-541 (SEQ ID N°:585), DOM16-39-542 (SEQ IDN°: 586), DOM16-39-551 (SEQ IDN0: 591), DOM16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOM16-39-604 (SEQ ID N°: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID N0: 621), DOM 16-3 9-619 (SEQ ID N0: 622) e uma seqüência pelo menos 85 % idêntica a qualquer uma das precedentes.
117. Composição, caracterizada pelo fato de que compreende uma construção de polipeptídeo de anticorpo de domínio simples que antagoniza a ligação de EGFR humano a um receptor, em que a dita construção de polipeptídeo de anticorpo de domínio simples compreende uma seqüência de aminoácido selecionada do grupo que consiste de DOM 16-3 9 (SEQ ID N°: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N°: 420), DOM16-39-100 (SEQ ID N°: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM16-39-109 (SEQ ID N0: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N°: 438), DOM16-39-200 (SEQ ID N°: 441) e uma seqüência pelo menos 92 % idêntica a qualquer uma das precedentes.
118. Composição, caracterizada pelo fato de que compreende uma construção de polipeptídeo de anticorpo de domínio simples que antagoniza a ligação de EGFR humano a um receptor, em que a dita construção de polipeptídeo de anticorpo de domínio simples compreende uma seqüência de aminoácido selecionada do grupo que consiste de DOMl 6-39- .521 (SEQ ID N°: 577), DOM16-39-541 (SEQ ID N°: 585), DOM16-39-542 (SEQ ID N°: 586), DOM16-39-551 (SEQ ID N0: 591), DOM16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOM16-39-604 (SEQ ID N°: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID N°: 621), DOM16-39-619 (SEQ ID N°: 622) e uma seqüência pelo menos 92 % idêntica a qualquer uma das precedentes.
119. Composição, caracterizada pelo fato de que compreende uma construção de polipeptídeo de anticorpo de domínio simples que antagoniza a ligação de EGFR humano a um receptor, em que a dita construção de polipeptídeo de anticorpo de domínio simples compreende uma seqüência de aminoácido selecionada do grupo que consiste de DOMl6-39 (SEQ ID N°: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N0: 420), DOM16-39-100 (SEQ ID N°: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM16-39-109 (SEQ ID N0: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N°: 438), DOM16-39-200 (SEQ ID N°:441) e uma seqüência pelo menos 94 % idêntica a qualquer uma das precedentes.
120. Composição, caracterizada pelo fato de que compreende uma construção de polipeptídeo de anticorpo de domínio simples que antagoniza a ligação de EGFR humano a um receptor, em que a dita construção de polipeptídeo de anticorpo de domínio simples compreende uma seqüência de aminoácido selecionada do grupo que consiste de DOMl6-39-521 (SEQ ID N°: 577), DOM16-39-541 (SEQ ID N°:585), DOM16-39-542 (SEQ ID N0: 586), DOM16-39-551 (SEQ ID N0: 591), DOM16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOM16-39-604 (SEQ ID N°: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID N0: 621), DOM 16-39-619 (SEQ ID N°: 622) e uma seqüência pelo menos 94 % idêntica a qualquer uma das precedentes.
121. Composição, caracterizada pelo fato de que compreende uma construção de polipeptídeo de anticorpo de domínio simples que antagoniza a ligação de EGFR humano a um receptor, em que a dita construção de polipeptídeo de anticorpo de domínio simples compreende uma seqüência de aminoácido selecionada do grupo que consiste de DOMl6-39 (SEQ ID N°: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N°: 420), DOM16-39-100 (SEQ ID N°: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM16-39-109 (SEQ ID N0: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N°: 438), DOM16-39-200 (SEQ ID N°: 441) e uma seqüência pelo menos 96 % idêntica a qualquer uma das precedentes.
122. Composição, caracterizada pelo fato de que compreende uma construção de polipeptídeo de anticorpo de domínio simples que antagoniza a ligação de EGFR humano a um receptor, em que a dita construção de polipeptídeo de anticorpo de domínio simples compreende uma seqüência de aminoácido selecionada do grupo que consiste de DOM16-39- 521 (SEQ ID N°: 577), DOM16-39-541 (SEQ ID N°: 585), DOM16-39-542 (SEQ ID N°: 586), DOM16-39-551 (SEQ ID N°: 591), DOM16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOM16-39-604 (SEQ ID N0: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID N°: 621), DOM 16-39-619 (SEQ ID N0: 622) e uma seqüência pelo menos 96 % idêntica a qualquer uma das precedentes.
123. Composição, caracterizada pelo fato de que compreende uma construção de polipeptídeo de anticorpo de domínio simples que antagoniza a ligação de EGFR humano a um receptor, em que a dita construção de polipeptídeo de anticorpo de domínio simples compreende uma seqüência de aminoácido selecionada do grupo que consiste de DOM16-39 (SEQ ID N°: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N0: 420), DOM16-39-100 (SEQ ID N°: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N0: 430), DOM16-39-109 (SEQ ID N0: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N°: 438), DOM16-39-200 (SEQ ID N°: 441) e uma seqüência pelo menos 98 % idêntica a qualquer uma das precedentes.
124. Composição, caracterizada pelo fato de que compreende uma construção de polipeptídeo de anticorpo de domínio simples que antagoniza a ligação de EGFR humano a um receptor, em que a dita construção de polipeptídeo de anticorpo de domínio simples compreende uma seqüência de aminoácido selecionada do grupo que consiste de DOMl 6-39-521 (SEQ ID N°: 577), DOM16-39-541 (SEQ ID N°:585), DOM16-39-542 (SEQ ID N0: 586), DOM16-39-551 (SEQ ID N0: 591), DOM16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOM16-39-604 (SEQ ID N°: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID N°: 621), DOM16-39-619 (SEQ ID N°: 622) e uma seqüência pelo menos 98 % idêntica a qualquer uma das precedentes.
125. Composição, caracterizada pelo fato de que compreende uma construção de polipeptídeo de anticorpo de domínio simples que antagoniza a ligação de EGFR humano a um receptor, em que a dita construção de polipeptídeo de anticorpo de domínio simples compreende uma seqüência de aminoácido selecionada do grupo que consiste de DOMl 6-39 (SEQ ID N°: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N0: 420), DOM16-39-KX) (SEQ ID N°: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM16-39-109 (SEQ ID N°: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N0: 438), DOM16-39-200 (SEQ ID N°:441) e uma seqüência pelo menos 99 % idêntica a qualquer uma das precedentes.
126. Composição, caracterizada pelo fato de que compreende uma construção de polipeptídeo de anticorpo de domínio simples que antagoniza a ligação de EGFR humano a um receptor, em que a dita construção de polipeptídeo de anticorpo de domínio simples compreende uma seqüência de aminoácido selecionada do grupo que consiste de DOMl 6-39-521 (SEQ ID N°: 577), DOM16-39-541 (SEQ ID N°:585), DOM16-39-542 (SEQ ID N0: 586), DOM16-39-551 (SEQ ID N0: 591), DOM16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOM16-39-604 (SEQ ID N0: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID N°: 621), DOMl6-39-619 (SEQ ID N°: 622) e uma seqüência pelo menos 99 % idêntica a qualquer uma das precedentes.
127. Composição de acordo com qualquer uma das reivindicações de 111 a 125, caracterizada pelo fato de que a dita construção de polipeptídeo de anticorpo de domínio simples compreende uma construção de polipeptídeo de anticorpo específico duplo tetravalente que compreende: a) uma primeira cópia de uma primeira proteína de fusão que compreende um polipeptídeo de anticorpo de domínio simples que liga um primeiro epítopo, fundido a um domínio constante de cadeia pesada de IgG; b) uma segunda cópia da dita primeira proteína de fusão; c) uma primeira cópia de uma segunda proteína de fusão que compreende um polipeptídeo de anticorpo de domínio simples que liga um segundo epítopo, fundido a um domínio constante de cadeia leve; d) uma segunda cópia da dita segunda proteína de fusão; em que a dita primeira e a dita segunda cópias da dita proteína de fusão são bissulfeto ligado um ao outro por intermédio de seus domínios constantes de cadeia pesada de IgG respectivos e em que o dito domínio constante de cadeia leve da dita primeira cópia da dita Segunda proteína de fusão é bissulfeto ligado ao domínio constante de cadeia pesada de IgG da dita primeira cópia da dita primeira proteína de fusão e em que o dito domínio constante de cadeia leve da dita segunda cópia da segunda proteína de fusão é bissulfeto ligado ao domínio constante de cadeia pesada de IgG da dita segunda cópia da dita primeira proteína de fusão e em que a dita construção de polipeptídeo liga o dito primeiro e o dito segundo epítopos.
128. Composição de acordo com a reivindicação 111, caracterizado pelo fato de que o dito primeiro e/ou dito segundo epítopo é um epítopo de EGFR.
129. Polipeptídeo de domínio variável simples de imunoglobulina que liga-se ao EGFR, caracterizado pelo fato de que o polipeptídeo tem uma seqüência de aminoácido que é idêntica à seqüência de aminoácido de DOM16-39 (SEQ ID N°: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N°: 420), DOM16-39-100 (SEQ ID N0: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM 16-39-109 (SEQ ID N°: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N°: 438) e DOM16-39-200 (SEQ ID N0: 441) ou difere da seqüência de aminoácido de DOMl6-39 (SEQ ID N°: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N°: 420), DOM16-39-100 (SEQ ID N°: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM16-39-109 (SEQ ID N0: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N°: 438) e DOM16-39-200 (SEQ ID N°: 441) e não mais do que 25 posições de aminoácido e têm uma seqüência de CDRl que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDRl de DOM16-39 (SEQ ID N0: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N°: 420), DOM16-39-100 (SEQ ID N°: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM16-39-109 (SEQ ID N0: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N°:438) e DOMl6-39-200 (SEQ ID N°: 441).
130. Polipeptídeo de domínio variável simples de imunoglobulina que liga-se ao EGFR, caracterizado pelo fato de que o polipeptídeo tem uma seqüência de aminoácido que é idêntica à seqüência de aminoácido de DOM16-39-521 (SEQ ID N°: 577), DOM16-39-541 (SEQ ID N0: 585), DOM16-39-542 (SEQ ID N°: 586), DOM16-39-551 (SEQ ID N°:591), DOM16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOM16-39-604 (SEQ ID N°: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID N0: 621) e DOM16-39-619 (SEQ ID N0: 622) ou diferem da seqüência de aminoácido de DOM16-39-521 (SEQ ID N°: 577), DOM 16-39-541 (SEQ ID N°: 585), DOM16-39-542 (SEQ ID N°: 586), DOM16-39-551 (SEQ ID N°: 591), DOM16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOM16-39-604 (SEQ ID N0: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID N°: 621) e DOM16-39-619 (SEQ ID N°: 622) e não mais do que 25 posições de aminoácido e têm uma seqüência de CDRl que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDRl de DOM16-39-521 (SEQ ID N°: 577), DOM16-39-541 (SEQ ID N0: 585), DOM16-39-542 (SEQ ID N°:586), DOM16-39-551 (SEQ ID N°: 591), DOM16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOMl6-39-604 (SEQ ID N°: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID N°: 621) e DOM16-39-619 (SEQ IDN0: 622).
131. Polipeptídeo de domínio variável simples de imimoglobulina que liga-se ao EGFR, caracterizado pelo fato de que o polipeptídeo tem uma seqüência de aminoácido que é idêntica à seqüência de aminoácido de DOM16-39 (SEQ ID N°: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N°:420), DOM16-39-100 (SEQ ID N0: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM16-39-109 (SEQ ID N0: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N°: 438) e DOM 16-39-200 (SEQ ID N0: 441) ou difere da seqüência de aminoácido de DOMl6-39 (SEQ ID N°: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N°: 420), DOM16-39-100 (SEQ ID N0: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N0: 430), DOM16-39-109 (SEQ ID N0: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N°: 438) e DOM16-39-200 (SEQ ID N°: 441) e não mais do que 25 posições de aminoácido e têm uma seqüência de CDR2 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR2 de DOM16-39 (SEQ ID N°: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N°: 420), DOM16-39-100 (SEQ ID N°: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM16-39-109 (SEQ ID N0: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N°:438) e DOM 16-39-200 (SEQ ID N°: 441).
132. Polipeptídeo de domínio variável simples de imunoglobulina que liga-se ao EGFR, caracterizado pelo fato de que o polipeptídeo tem uma seqüência de aminoácido que é idêntica à seqüência de aminoácido de DOM16-39-521 (SEQ ID N°: 577), DOM16-39-541 (SEQ ID N0: 585), DOM 16-39-542 (SEQ ID N°: 586), DOM16-39-551 (SEQ ID N°:591), DOM16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOM16-39-604 (SEQ ID N°: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID N0: 621) e DOM16-39-619 (SEQ ID N°: 622) ou diferem da seqüência de aminoácido de DOM16-39-521 (SEQ ID N°: 577), DOM16-39-541 (SEQ ID N°: 585), DOM16-39-542 (SEQ ID N°: 586), DOM16-39-551 (SEQ ID N0: 591), DOM16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOMl6-39-604 (SEQ ID N0: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID N°: 621) e DOM16-39-619 (SEQ ID N0: 622) e não mais do que 25 posições de aminoácido e têm uma seqüência de CDR2 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR2 de DOM16-39-521 (SEQ ID N0: 577), DOM16-39-541 (SEQ ID N0: 585), DOM16-39-542 (SEQ ID N°:586), DOMl6-39-551 (SEQ ID N0: 591), DOM16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOMl6-39-604 (SEQ ID N0: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID N°: 621) e DOM16-39-619 (SEQ ID N°: 622).
133. Polipeptídeo de domínio variável simples de imunoglobulina que liga-se ao EGFR, caracterizado pelo fato de que o polipeptídeo tem uma seqüência de aminoácido que é idêntica à seqüência de aminoácido de DOM16-39 (SEQ ID N°: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N°:420), DOMl6-39-100 (SEQ ID N°: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N0: 430), DOM16-39-109 (SEQ ID N0: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N°: 438) e DOMl6-39-200 (SEQ ID N°: 441) ou difere da seqüência de aminoácido de DOM 16-39 (SEQ ID N°: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N°: 420), DOM16-39-100 (SEQ ID N°: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM16-39-109 (SEQ ID N°: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N°: 438) e DOM16-39-200 (SEQ ID N0: 441) e não mais do que 25 posições de aminoácido e têm uma seqüência de CDR3 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR3 de DOM16-39 (SEQ ID N°: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N0: 420), DOM16-39-100 (SEQ ID N0: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N0: 430), DOM16-39-109 (SEQ ID N0: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N°:438) e DOMl6-39-200 (SEQ ID N°: 441).
134. Polipeptídeo de domínio variável simples de imunoglobulina que liga-se ao EGFR, caracterizado pelo fato de que o polipeptídeo tem uma seqüência de aminoácido que é idêntica à seqüência de aminoácido de DOM16-39-521 (SEQ ID N°: 577), DOM16-39-541 (SEQ ID N°: 585), DOM16-39-542 (SEQ ID N°: 586), DOM16-39-551 (SEQ ID N°:591), DOM16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOM16-39-604 (SEQ ID N°: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID Ν°: 621) e DOM16-39-619 (SEQ ID N°: 622) ou diferem da seqüência de aminoácido de DOM16-39-521 (SEQ ID N°: 577), DOM16-39-541 (SEQ ID N°: 585), DOM16-39-542 (SEQ ID N°: 586), DOM16-39-551 (SEQ ID N°: 591), DOM16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOMl6-39-604 (SEQ ID N°: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID N°: 621) e DOM16-39-619 (SEQ ID N°: 622) e não mais do que 25 posições de aminoácido e têm uma seqüência de CDR3 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR3 de DOM16-39-521 (SEQ ID N°: 577), DOM16-39-541 (SEQ ID N°: 585), DOM16-39-542 (SEQ ID N°:586), DOM16-39-551 (SEQ ID N°: 591), DOM16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOM16-39-604 (SEQ ID N0: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID N°: 621) e DOM 16-39-619 (SEQ ID N0: 622).
135. Polipeptídeo de domínio variável simples de imunoglobulina que liga-se ao EGFR, caracterizado pelo fato de que o polipeptídeo tem uma seqüência de aminoácido que é idêntica à seqüência de aminoácido de DOM16-39 (SEQ ID N°: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N°:420), DOMl6-39-100 (SEQ ID N°: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM16-39-109 (SEQ ID N°: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N°: 438) e DOM16-39-200 (SEQ ID N0: 441) ou difere da seqüência de aminoácido de DOM 16-39 (SEQ ID N0: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N°: 420), DOM16-39-100 (SEQ ID N°: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM16-39-109 (SEQ ID N0: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N°: 438) e DOM16-39-200 (SEQ ID N°: 441) e não mais do que 25 posições de aminoácido e têm uma seqüência de CDRl que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDRl de DOM16-39 (SEQ ID N°: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N°: 420), DOM16-39-100 (SEQ ID N°: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM16-39-109 (SEQ ID N°: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N°:438) e DOM 16-3 9-200 (SEQ ID N0: 441) e têm uma seqüência de CDR2 tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR2 de DOMl6-39 (SEQ ID Ν°: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N°: 420), DOM16- 39-100 (SEQ ID N°: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM16-39-109 (SEQ ID N°: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N°: 438) e DOM16-39-200 (SEQ ID N0: 441).
136. Polipeptídeo de domínio variável simples de imunoglobulina que liga-se ao EGFR, caracterizado pelo fato de que o polipeptídeo tem uma seqüência de aminoácido que é idêntica à seqüência de aminoácido de DOM16-39-521 (SEQ ID N°: 577), DOM16-39-541 (SEQ ID N°: 585), DOMl6-39-542 (SEQ ID N°: 586), DOM16-39-551 (SEQ ID N°: 591), DOM16-39-601 (SEQ ID N0: 608), DOM16-39-604 (SEQ ID N°: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID N°: 621) e DOM16-39-619 (SEQ ID N°: 622) ou difere da seqüência de aminoácido de DOM16-39-521 (SEQ ID N°: 577), DOM16-39-541 (SEQ ID N°: 585), DOM16-39-542 (SEQ ID N°: 586), DOM16-39-551 (SEQ ID N°: 591), DOM16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOM16-39-604 (SEQ ID N0: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID N°: 621) e DOM16-39-619 (SEQ ID N°: 622) em não mais do que 25 posições de aminoácido e têm uma seqüência de CDRl que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDRl de DOM16-39-521 (SEQ ID N°: 577), DOM16-39-541 (SEQ ID N0: 585), DOM16-39-542 (SEQ ID N°: 586), DOM16-39-551 (SEQ ID N°: 591), DOM16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOM16-39-604 (SEQ ID N0: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID N°: 621) e DOM16-39-619 (SEQ ID N°: 622) e têm uma seqüência de CDR2 tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR2 de DOMl 6-39- 521 (SEQ ID N0: 577), DOM16-39-541 (SEQ ID N°:585), DOM16-39-542 (SEQ ID N°: 586), DOM16-39-551 (SEQ ID N°: 591), DOM16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOM16-39-604 (SEQ ID N°: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID N°: 621) e DOM16-39-619 (SEQ ID N°: 622).
137. Polipeptídeo de domínio variável simples de imunoglobulina que liga-se ao EGFR, caracterizado pelo fato de que o polipeptídeo tem uma seqüência de aminoácido que é idêntica à seqüência de aminoácido de DOM16-39 (SEQ ID N°: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N°:420), DOM16-39-100 (SEQ ID N°: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM 16-39-109 (SEQ ID N0: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N°: 438) e DOM 16-3 9-200 (SEQ ID N°: 441) ou difere da seqüência de aminoácido de DOMl6-39 (SEQ ID N0: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N°: 420), DOM16-39-100 (SEQ ID N°: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM16-39-109 (SEQ ID N°: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N°: 438) e DOM16-39-200 (SEQ ID N°: 441) e não mais do que 25 posições de aminoácido e têm uma seqüência de CDR2 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR2 de DOM16-39 (SEQ ID N0: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N°: 420), DOM16-39-100 (SEQ ID N0: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM16-39-109 (SEQ ID N°: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N°:438), e DOM16-39-200 (SEQ ID N0: 441) e têm uma seqüência de CDR3 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR3 de DOM 16-39 (SEQ ID N°: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N°: 420), DOM16-39-100 (SEQ ID N°: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM16-39-109 (SEQ ID N°: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N°: 438) e DOM16-39-200 (SEQ ID N0: 441).
138. Polipeptídeo de domínio variável simples de imunoglobulina que liga-se ao EGFR, caracterizado pelo fato de que o polipeptídeo tem uma seqüência de aminoácido que é idêntica à seqüência de aminoácido de DOM16-39-521 (SEQ ID N°: 577), DOM16-39-541 (SEQ ID N°: 585), DOM16-39-542 (SEQ ID N°: 586), DOM16-39-551 (SEQ ID N°:591), DOM16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOM16-39-604 (SEQ ID N°: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID N0: 621) e DOM16-39-619 (SEQ ID N°: 622) ou diferem da seqüência de aminoácido de DOM16-39-521 (SEQ ID N°: 577), DOM16-39-541 (SEQ ID N0: 585), DOM16-39-542 (SEQ ID N°: 586), DOM16-39-551 (SEQ ID N°: 591), DOM16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOMl6-39-604 (SEQ ID N0: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID N°: 621) e DOM16-39-619 (SEQ ID N°: 622) e não mais do que 25 posições de aminoácido e têm uma seqüência de CDR2 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR2 de DOM16-39-521 (SEQ ID N°: 577), DOM16-39-541 (SEQ ID N°: 585), DOM16-39-542 (SEQ ID N0:586), DOM16-39-551 (SEQ ID N°: 591), DOM16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOM16-39-604 (SEQ ID N0: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID N°: 621) e DOM16-39-619 (SEQ ID N0: 622) e têm uma seqüência de CDR3 tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR3 de DOMl6-39-521 (SEQ ID N°: 577), DOM16-39-541 (SEQ ID N°: 585), DOM16-39-542 (SEQ ID N°: 586), DOM16-39-551 (SEQ ID N0: 591), DOM16-39-601 (SEQ ID N0: 608), DOM16-39-604 (SEQ ID N°: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID N°: 621) e DOM16-39-619 (SEQ ID N°: 622).
139. Polipeptídeo de domínio variável simples de imunoglobulina que liga-se ao EGFR, caracterizado pelo fato de que o polipeptídeo tem uma seqüência de aminoácido que é idêntica à seqüência de aminoácido de DOM16-39 (SEQ ID N°: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N°:420), DOM16-39-100 (SEQ ID N°: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM16-39-109 (SEQ ID N°: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N°: 438) e DOMl6-39-200 (SEQ ID N0: 441) ou difere da seqüência de aminoácido de DOM 16-39 (SEQ ID N°: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N°: 420), DOM16-39-100 (SEQ ID N°: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N0: 430), DOM16-39-109 (SEQ ID N°: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N°: 438) e DOM16-39-200 (SEQ ID N°: 441) e não mais do que 25 posições de aminoácido e têm uma seqüência de CDRl que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDRl de DOM16-39 (SEQ ID N0: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N°: 420), DOM16-39-100 (SEQ ID N°: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM 16-39-109 (SEQ ID N°: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N°:438), e DOM16-39-200 (SEQ ID N°: 441) e têm uma seqüência de CDR3 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR3 de DOM 16-39 (SEQ ID N0: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N°: 420), DOM16- 39-100 (SEQ ID N°: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM16-39-109 (SEQ ID N°: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N°: 438) e DOM16-39-200 (SEQ ID N°: 441).
140. Polipeptídeo de domínio variável simples de imunoglobulina que liga-se ao EGFR, caracterizado pelo fato de que o polipeptídeo tem uma seqüência de aminoácido que é idêntica à seqüência de aminoácido de DOM16-39-521 (SEQ ID N°: 577), DOM16-39-541 (SEQ ID N°: 585), DOM16-39-542 (SEQ ID N°: 586), DOM16-39-551 (SEQ ID N°: 591), DOM16-39-601 (SEQ ID N0: 608), DOM16-39-604 (SEQ ID N0: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID N0: 621) e DOM16-39-619 (SEQ ID N°: 622) ou difere da seqüência de aminoácido de DOM16-39-521 (SEQ ID N0: 577), DOM 16-39-541 (SEQ ID N°: 585), DOM16-39-542 (SEQ ID N°: 586), DOM16-39-551 (SEQ ID N0: 591), DOM16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOM16-39-604 (SEQ ID N°: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID N°: 621) e DOM 16-39-619 (SEQ ID N°: 622) e não mais do que 25 posições de aminoácido e têm uma seqüência de CDRl que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDRl de DOM 16-39-521 (SEQ ID N°: 577), DOM16-39-541 (SEQ ID N°: 585), DOM16-39-542 (SEQ ID N°: 586), DOM16-39-551 (SEQ ID N°: 591), DOM16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOM16-39-604 (SEQ ID N0: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID N°: 621) e DOM16-39-619 (SEQ ID N0: 622) e têm uma seqüência de CDR3 tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR3 de DOMl 6-39- 521 (SEQ ID N°: 577), DOM16-39-541 (SEQ ID N°:585), DOM16-39-542 (SEQ ID N0: 586), DOM16-39-551 (SEQ ID N°: 591), DOM16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOM16-39-604 (SEQ ID N°: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID N°: 621) e DOM16-39-619 (SEQ ID N°: 622).
141. Polipeptídeo de domínio variável simples de imunoglobulina que liga-se ao EGFR, caracterizado pelo fato de que o polipeptídeo tem uma seqüência de aminoácido que é idêntica à seqüência de aminoácido de DOM16-39 (SEQ ID N°: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N°:420), DOM16-39-100 (SEQ ID N°: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM16-39-109 (SEQ ID N0: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N°: 438) e DOM16-39-200 (SEQ ID N0: 441) ou difere da seqüência de aminoácido de DOMl6-39 (SEQ ID N0: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N°: 420), DOM16-39-100 (SEQ ID N°: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM16-39-109 (SEQ ID N°: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N°: 438) e DOM16-39-200 (SEQ ID N0: 441) e não mais do que 25 posições de aminoácido e têm uma seqüência de CDRl que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDRl de DOM16-39 (SEQ ID N0: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N°: 420), DOMló-39-lOO (SEQ ID N°: 423), DOM 16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOMl6-39-109 (SEQ ID N°: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N°:438) e DOM16-39-200 (SEQ ID N0: 441) e têm uma seqüência de CDR2 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR2 de DOMl6-39 (SEQ ID N°: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N°: 420), DOM16-39-100 (SEQ ID N°: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM16-39-109 (SEQ ID N0: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N0: 438) e DOM16-39-200 (SEQ ID N0: 441) e têm uma seqüência de CDR3 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR3 de DOM 16-3 9 (SEQ ID N°:345), DOM16-39-87 (SEQ ID N°: 420), DOM16-39-100 (SEQ ID N°: 423), DOM 16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM16-39-109 (SEQ ID N°: 432), DOM 16-39-115 (SEQ ID N°: 438) e DOM16-39-200 (SEQ ID N°: 441).
142. Polipeptídeo de domínio variável simples de imunoglobulina que liga-se ao EGFR, caracterizado pelo fato de que o polipeptídeo tem uma seqüência de aminoácido que é idêntica à seqüência de aminoácido de DOM16-39-521 (SEQ ID N°: 577), DOM16-39-541 (SEQ ID N°: 585), DOM 16-39-542 (SEQ ID N°: 586), DOM16-39-551 (SEQ ID N°: .591), DOM16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOM16-39-604 (SEQ ID N°: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID N°: 621) e DOM16-39-619 (SEQ ID N°: 622) ou diferem da seqüência de aminoácido de DOM16-39-521 (SEQ ID N°: 577), DOM16-39-541 (SEQ ID N°: 585), DOM16-39-542 (SEQ ID N0: 586), DOM16-39-551 (SEQ ID N°: 591), DOM16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOMl6-39-604 (SEQ ID N0: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID N0: 621) e DOMl6-39-619 (SEQ ID N°: 622) e não mais do que 25 posições de aminoácido e têm uma seqüência de CDRl que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDRl de DOM16-39-521 (SEQ ID N°: 577), DOM16-39-541 (SEQ ID N°: 585), DOM16-39-542 (SEQ ID N0:586), DOM16-39-551 (SEQ ID N0: 591), DOM16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOM16-39-604 (SEQ ID N0: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID N°: 621) e DOM16-39-619 (SEQ ID N°: 622) e têm uma seqüência de CDR2 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR2 de DOM16-39-521 (SEQ ID N0: 577), DOM16-39-541 (SEQ ID N0: 585), DOM16-39-542 (SEQ ID N0: 586), DOM16-39-551 (SEQ ID N°: 591), DOM16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOM16-39-604 (SEQ ID N0: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID N°: 621) e DOM16-39-619 (SEQ ID N°: 622) e têm uma seqüência de CDR3 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR3 de DOM16-39-521 (SEQ ID N°: 577), DOM16-39-541 (SEQ ID N0: 585), DOM16-39-542 (SEQ ID N°: 586), DOM16-39-551 (SEQ ID N°: 591), DOM16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOM16-39-604 (SEQ ID N0: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID N°: 621) e DOM16-39-619 (SEQ ID N°: 622).
143. Antagonista de EGFR, caracterizado pelo fato de que tem a seqüência de CDRl que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDRl de DOM16-39 (SEQ ID N0: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N°: 420), DOMló-39-lOO (SEQ ID N°: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N0: 430), DOM 16-39-109 (SEQ ID N°: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N°: (438) e DOM 16-39-200 (SEQID N0: 441).
144. Antagonista de EGFR, caracterizado pelo fato de que a seqüência de CDRl que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDRl de DOM16-39-521 (SEQ ID N°: 577), DOM16-39-541 (SEQIDN0: 585), DOM16-39-542 (SEQ ID N0: 586), DOM16-39-551 (SEQ ID N°: 591), DOM16-39-601 (SEQ ID N0: 608), DOM16-39-604 (SEQ ID N0: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID N°: 621) e DOM16-39-619 (SEQ ID N°: 622).
145. Antagonista de EGFR caracterizado pelo fato de que tem a seqüência de CDR2 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR2 de DOM16-39 (SEQ ID N0: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N°: 420), DOM16-39-100 (SEQ ID N°: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM16-39-109 (SEQ ID N°: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N°: 438) e DOM16-39-200 (SEQ ID N°: 441).
146. Antagonista de EGFR, caracterizado pelo fato de que tem a seqüência de CDR2 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR2 de DOM 16-39-521 (SEQ ID N°: 577), DOM16-39-541 (SEQ ID N0: 585), DOM16-39-542 (SEQ ID N°: 586), DOM16-39-551 (SEQ ID N°: 591), DOM16-39-601 (SEQ ID N0: 608), DOM16-39-604 (SEQ ID N0: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID N°: 621) e DOM16-39-619 (SEQ ID N°: 622).
147. Antagonista de EGFR, caracterizado pelo fato de que tem a seqüência de CDR3 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR3 de DOM16-39 (SEQ ID N0: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N°: 420), DOM16-39-100 (SEQ ID N°: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N0: 430), DOM 16-39-109 (SEQ ID N°: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N°: 438) e DOM16-39-200 (SEQ ID N°: 441).
148. Antagonista de EGFR, caracterizado pelo fato de que tem a seqüência de CDR3 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR3 de DOM16-39-521 (SEQ ID N0: 577), DOM16-39-541 (SEQIDN0: 585), DOM16-39-542 (SEQ IDN0: 586), DOM16-39-551 (SEQ ID N0: 591), DOM16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOM16-39-604 (SEQ ID N°: 611), DOM 16-39-618 (SEQ ID N0: 621) e DOM16-39-619 (SEQ ID N°:622).
149. Antagonista de EGFR, caracterizado pelo fato de que tem a seqüência de CDRl que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDRl de DOM16-39 (SEQ ID N0: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N0: 420), DOM16-39-100 (SEQ ID N°: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N0: 430), DOM16-39-109 (SEQ ID N°: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N°:438) e DOM16-39-200 (SEQ ID N°: 441) e a seqüência de CDR2 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR2 de DOMl6-39 (SEQ ID N°: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N0: 420), DOM16-39-100 (SEQ ID N°: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM16-39-15 109 (SEQ ID N°: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N°: 438) E DOM16-39-200 (SEQ ID N°: 441).
150. Antagonista de EGFR, caracterizado pelo fato de que tem a seqüência de CDRl que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDRl de DOM16-39-521 (SEQ ID N0: 577), DOM16-39-541 (SEQ ID N°: 585), DOM16-39-542 (SEQ ID N0: 586), DOM16-39-551 (SEQ ID N0: 591), DOM16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOM16-39-604 (SEQ ID N°: 611), DOMl6-39-618 (SEQ ID N0: 621) e DOM16-39-619 (SEQ ID N°:622) e a seqüência de CDR2 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR2 de DOM16-39-521 (SEQ ID N°: 577), DOM16-39-541 (SEQ ID N0: 585), DOM16-39-542 (SEQ ID N°: 586), DOM16-39-551 (SEQ ID N0: 591), DOM16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOM 16-39-604 (SEQ ID N0: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID N°: 621) e DOM16-39-619 (SEQ ID N°: 622).
151. Antagonista de EGFR, caracterizado pelo fato de que tem a seqüência de CDR2 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR2 de DOM16-39 (SEQ ID N°: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N°: 420), DOM16-39-100 (SEQ ID N0: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM16-39-109 (SEQ ID N0: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N°:438) e DOM 16-39-200 (SEQ ID N°: 441) e a seqüência de CDR3 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR3 de DOMl6-39 (SEQ ID N°: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N°: 420), DOM16-39-100 (SEQ ID N°: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM16-39-109 (SEQ ID N°: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N°: 438) e DOM16-39-200 (SEQIDN0:441).
152. Antagonista de EGFR, caracterizado pelo fato de que tem a seqüência de CDR2 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR2 de DOM16-39-521 (SEQ ID N°: 577), DOM16-39-541 (SEQ ID N°: 585), DOM16-39-542 (SEQ ID N0: 586), DOM16-39-551 (SEQ ID N°: 591), DOM16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOM16-39-604 (SEQ ID N0: 611), DOM 16-39-618 (SEQ ID N°: 621) e DOM16-39-619 (SEQ ID N°:622) e a seqüência de CDR3 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR3 de DOM16-39-521 (SEQ ID N°: 577), DOM16-39-541 (SEQ ID N°: 585), DOM16-39-542 (SEQ ID N°: 586), DOM16-39-551 (SEQ ID N0: 591), DOM16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOM16-39-604 (SEQ ID N0: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID N°: 621), e DOM16-39-619 (SEQ ID N0: 622).
153. Antagonista de EGFR, caracterizado pelo fato de que tem a seqüência de CDRl que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDRl de DOM16-39 (SEQ ID N°: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N°: 420), DOM16-39-100 (SEQ ID N0: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM16-39-109 (SEQ ID N°: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N°:438) e DOM16-39-200 (SEQ ID N°: 441) e a seqüência de CDR3 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR3 de DOMl6-39 (SEQ ID N°: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N°: 420), DOM16- 39-100 (SEQ ID N°: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM16-39- 109 (SEQ ID N°: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N°: 438) e DOM16-39-200 (SEQ ID N°: 441).
154. Antagonista de EGFR, caracterizado pelo fato de que tem a seqüência de CDRl que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDRl de DOM16-39-521 (SEQ ID N°: 577), DOM16-39-541 (SEQ ID N°: 585), DOM16-39-542 (SEQ ID N0: 586), DOM16-39-551 (SEQ ID N°: 591), DÜM16-39-601 (SEQ ID N0: 608), DOM16-39-604 (SEQ ID N°: 611), DOMl6-39-618 (SEQ ID N°: 621) e DOM16-39-619 (SEQ ID N°: 622) e a seqüência de CDR3 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR3 de DOM16-39-521 (SEQ ID N°: 577), DOM16-39-541 (SEQ ID N°: 585), DOM16-39-542 (SEQ ID N°: 586), DOM16-39-551 (SEQ ID N°: 591), DOM16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOM 16-39-604 (SEQ ID N°: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID N°: 621) e DOM16-39-619 (SEQ ID N0: 622).
155. Antagonista de EGFR5 caracterizado pelo fato de que tem a seqüência de CDRl que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDRl de DOM16-39 (SEQ ID N0: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N°: 420), DOM16-39-100 (SEQ ID N0: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM16-39-109 (SEQ ID N°: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N°: 438) e DOM16-39-200 (SEQ ID N0: 441) e a seqüência de CDR2 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR2 de DOMl6-39 (SEQ ID N°: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N°: 420), DOM16- 39-100 (SEQ ID N°: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM16-39- 109 (SEQ ID N°: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N°: 438) e DOM16-39-200 (SEQ ID N°: 441) e a seqüência de CDR3 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR3 de DOM16-39 (SEQ ID N0: 345), DOMl6-39-87 (SEQ ID N°: 420), DOM16-39-100 (SEQ ID N°: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM 16-39-109 (SEQ ID N°: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N0: 438) e DOM16-39-200 (SEQ ID N°: 441).
156. Antagonista de EGFRj caracterizado pelo fato de que tem a seqüência de CDRl que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDRl de DOM16-39-521 (SEQ ID N0: 577), DOM16-39-541 (SEQ ID N°: 585), DOM16-39-542 (SEQ ID N0: 586), DOM16-39-551 (SEQ ID N°: 591), DOM16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DCM16-39-604 (SEQ ID N°: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID N°: 621) e DOM16-39-619 (SEQ ID N°:622) e a seqüência de CDR2 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR2 de DOM16-39-521 (SEQ ID N°: 577), DOM16-39-541 (SEQ ID N°: 585), DOM16-39-542 (SEQ ID N°: 586), DOM16-39-551 (SEQ ID N°: 591), DOM16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOM16-39-604 (SEQ ID N°: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID N°: 621) e DOM 16-39-619 (SEQ ID N0: 622) e a seqüência de CDR3 que tem pelo menos 50 % de identidade com relação à seqüência de CDR3 de DOM16-39-521 (SEQ ID N0: 577), DOM16-39-541 (SEQ ID N°: 585), DOM16-39-542 (SEQ ID N°: 586), DOM16-39-551 (SEQ ID N0: 591), DOM16-39-601 (SEQ ID N0: 608), DOM16-39-604 (SEQ ID N°: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID N°: 621) e DOM16-39-619 (SEQ ID N°: 622).
157. Ligando, caracterizado pelo fato de que tem especificidade de ligação para o fator de crescimento endotelial vascular (VEGF) e receptor do fator de crescimento epidérmico (EGFR), compreendendo pelo menos uma porção de proteína que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF, pelo menos uma porção de proteína que tem um local de ligação com especificidade de ligação para EGFR e uma região Fc de um anticorpo.
158. Ligando de acordo com a reivindicação 157, caracterizado pelo fato de que a dita porção de proteína que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF é um anticorpo de domínio (dAb) que liga o VEGF.
159. Ligando de acordo com a reivindicação 158, caracterizado pelo fato de que o dito dAb que liga o VEGF compete para a ligação ao VEGF com um dAb anti-VEGF selecionado do grupo que consiste de TARl5-6 (SEQ ID N°: 117), TAR15-8 (SEQ ID N0: 119) e TAR15-26 (SEQ IDN0: 123).
160. Ligando de acordo com a reivindicação 158, caracterizado pelo fato de que o dito dAb que liga o VEGF compete para a ligação ao VEGF com TARl5-26-555 (SEQ ID N°: 704).
161. Ligando de acordo com qualquer uma das reivindicações 157 a 160, caracterizado pelo fato de que a dita porção de proteína que tem um local de ligação com especificidade de ligação para EGFR é um anticorpo de domínio (dAb) que liga o EGFR.
162. Ligando de acordo com a reivindicação 161, caracterizado pelo fato de que o dito dAb que liga o EGFR compete para a ligação ao EGFR com um anti-EGFR dAb selecionado do grupo que consiste de DOM 16-39 (SEQ ID N°: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N°: 420), DOM 16-39-100 (SEQ ID N°: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N°: 430), DOM16-39-109 (SEQ ID N0: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N°: 438) e DOMl6-39-200 (SEQ ID N0: 441).
163. Ligando de acordo com a reivindicação 161, caracterizado pelo fato de que o dito dAb que liga o EGFR compete para a ligação ao EGFR com um anti-EGFR dAb selecionado do grupo que consiste de DOM16-39-521 (SEQ ID N°: 577), DOM16-39-541 (SEQ ID N°: 585), DOM 16-39-542 (SEQ ID N°: 586), DOM16-39-551 (SEQ ID N°: 591), DOM16-39-601 (SEQ ID N°: 608), DOM16-39-604 (SEQ ID N°: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID N°: 621) e DOM16-39-619 (SEQ ID N°: 622).
164. Ligando, caracterizado pelo fato de que tem especificidade de ligação para o fator de crescimento endotelial vascular (VEGF), compreendendo pelo menos uma porção de proteína que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF e uma região Fc de um anticorpo.
165. Ligando de acordo com a reivindicação 164, caracterizado pelo fato de que a dita porção de proteína que tem um local de ligação com especificidade de ligação para VEGF é um anticorpo de domínio (d Ab).
166. Ligando de acordo com a reivindicação 165, caracterizado pelo fato de que o dito dAb compete para a ligação ao VEGF com um dAb anti-VEGF selecionado do grupo que consiste de TARl 5-6 (SEQ ID N°: 117), TAR15-8 (SEQ ID N°: 119) e TAR15-26 (SEQ ID N°: 123).
167. Ligando de acordo com a reivindicação 165, caracterizado pelo fato de que o dito dAb compete para a ligação ao VEGF com TARl5-26-555 (SEQ ID N°: 704).
168. Ligando, caracterizado pelo fato de que tem especificidade de ligação para o receptor do fator de crescimento epidérmico (EGFR), compreendendo pelo menos uma porção de proteína que tem um local de ligação com especificidade de ligação para EGFR e uma região Fc de um anticorpo.
169. Ligando de acordo com a reivindicação 168, caracterizado pelo fato de que a dita porção de proteína que tem um local de ligação com especificidade de ligação para EGFR é um anticorpo de domínio (dAb).
170. Ligando de acordo com a reivindicação 169, caracterizado pelo fato de que o dito dAb compete para a ligação ao EGFR com um anti-EGFR dAb selecionado do grupo que consiste de DOMl 6-39 (SEQ ID N°: 345), DOM16-39-87 (SEQ ID N0: 420), DOM16-39-100 (SEQ ID N°: 423), DOM16-39-107 (SEQ ID N0: 430), DQM16-39-109 (SEQ ID Ν°: 432), DOM16-39-115 (SEQ ID N°: 438) e DCM16-39-200 (SEQ ID N°: 441).
171. Ligando de acordo com a reivindicação 169, caracterizado pelo fato de que o dito dAb compete para a ligação ao EGFR com um anti-EGFR dAb selecionado do grupo que consiste de DOM 16-39- 521 (SEQ ID N°: 577), DOM16-39-541 (SEQ ID N°: 585), DOM16-39-542 (SEQ IDN°: 586), DOM16-39-551 (SEQ IDN°: 591), DOM16-39-601 (SEQ ID N0: 608), DOM16-39-604 (SEQ ID N°: 611), DOM16-39-618 (SEQ ID N°: 621) e DOM16-39-619 (SEQ ID N°: 622).
172. Ligando de acordo com a reivindicação 168, caracterizado pelo fato de que o dito ligando compreende pelo menos duas porções de proteína que têm locais de ligação com especificidade de ligação para EGFR e uma região Fc de um anticorpo.
173. Ligando, caracterizado pelo fato de que tem especificidade de ligação para o fator de crescimento endotelial vascular (VEGF) e receptor do fator de crescimento epidérmico (EGFR), compreendendo pelo menos um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF, pelo menos um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR e um ligador, em que o dito domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para o EGFR é ligado por intermédio de um ligador ao dito domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF.
174. Ligando5 caracterizado pelo fato de que tem especificidade de ligação para o fator de crescimento endotelial vascular (VEGF) e receptor do fator de crescimento epidérmico (EGFR), compreendendo pelo menos um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF, pelo menos um domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR, em que o dito domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR está diretamente fundido ao dito domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF.
175. Ligando de acordo com a reivindicação 173, caracterizado pelo fato de que o dito ligador é selecionado do grupo que consiste de SEQ ID N°: 706, SEQ ID N°: 707, SEQ ID N0: 708, SEQ ID N°: 709, SEQ ID N0: 710, SEQ ID N°: 711, SEQ ID N°: 712, SEQ ID N°: 713, SEQ ID N°: 714, SEQID N°: 723 e SEQ ID N°: 724.
176. Ligando de acordo com a reivindicação 173 ou 175, caracterizado pelo fato de que o dito ligando ainda compreende uma região Fc de um anticorpo.
177. Ligando de acordo com qualquer uma das reivindicações 176, caracterizado pelo fato de que o dito ligando ainda compreende um segundo ligador e em que um dos domínios variáveis simples de imunoglobulina é ligado por intermédio do segundo ligador à dita região de Fc.
178. Ligando de acordo com a reivindicação 177, caracterizado pelo fato de que o dito segundo ligador é selecionado do grupo que consiste de SEQ ID N°: 706, SEQ ID N°: 707, SEQ ID N°: 708, SEQ ID N0: 709, SEQ ID N°: 710, SEQ ID N0: 711, SEQ ID N°: 712, SEQ ID N°: 713, SEQ ID N0: 714, SEQID N°: 723 e SEQ ID N°: 724.
179. Ligando de acordo com a reivindicação 174, caracterizado pelo fato de que o dito ligando ainda compreende um ligador e uma região Fc de um anticorpo, e em que um dos ditos domínios variáveis simples de imunoglobulina é ligado por intermédio de um ligador à dita região Fc de um anticorpo.
180. Ligando de acordo com a reivindicação 179, caracterizado pelo fato de que o dito ligador é selecionado do grupo que consiste de SEQ ID N°: 706, SEQ ID N0: 707, SEQ ID N°: 708, SEQ ID N°: .709, SEQ ID Ν°: 710, SEQ ID N0: 711, SEQ ID Ν°: 712, SEQ ID Ν°: 713, SEQID Ν°: 714, SEQID N0: 723 e SEQID Ν°: 724.
181. Ligando de acordo com qualquer uma das reivindicações 173-180, caracterizado pelo fato de que a, o dito domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF é um domínio variável de cadeia pesada e o dito domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR é um domínio variável de cadeia leve; b, o dito domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF é um domínio variável de cadeia leve e o dito domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR é um domínio variável de cadeia pesada; c, o dito domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF é um domínio variável de cadeia pesada e o dito domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR é um domínio variável de cadeia pesada ou d, o dito domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para VEGF é um domínio variável de cadeia leve e o dito domínio variável simples de imunoglobulina com especificidade de ligação para EGFR é um domínio variável de cadeia leve.
182. Ligando de acordo com a reivindicação 181, caracterizado pelo fato de que o dito domínio variável de cadeia pesada é um VHou Vhh-
183. Ligando de acordo com a reivindicação 181, caracterizado pelo fato de que o dito domínio variável de cadeia pesada é um Vh humano.
184. Ligando de acordo com a reivindicação 181, caracterizado pelo fato de que o dito domínio variável de cadeia leve é um VK.
185. Ligando, caracterizado pelo fato de que tem especificidade de ligação para o fator de crescimento endotelial vascular (VEGF) e/ou receptor do fator de crescimento epidérmico (EGFR), compreendendo um primeiro domínio variável simples de imunoglobulina, um segundo domínio variável de imunoglobulina simples e uma região Fc de um anticorpo.
186. Ligando de acordo com a reivindicação 185, caracterizado pelo fato de que o dito ligando tem a fórmula, do terminal amino para o terminal carbóxi, dAbl-dAb2-Fc, em que dAbl é o dito primeiro domínio variável simples de imunoglobulina, dAb2 é o dito segundo domínio variável simples de imunoglobulina e Fc é a dita região Fc de um anticorpo, em que dAbl é ligado ao dAb 2 diretamente ou através de um primeiro ligador e dAb2 é ligado ao Fc diretamente ou através de um segundo ligador.
187. Ligando de acordo com a reivindicação 186, caracterizado pelo fato de que o dAbl e o dAb2 são os mesmos.
188. Ligando de acordo com a reivindicação 186 ou 187, caracterizado pelo fato de que dAbl e dAb2 são, cada um, um domínio variável simples de cadeia leve.
189. Ligando de acordo com a reivindicação 188, caracterizado pelo fato de que o dAbl e o dAb2 são, cada, um Vk.
190. Ligando de acordo com a reivindicação 186 ou 187, caracterizado pelo fato de que dAbl e dAb2 são, cada um, um domínio variável simples de cadeia pesada.
191. Ligando de acordo com qualquer uma das reivindicações de 185 a 190, caracterizado pelo fato de que o dito primeiro domínio variável simples de imunoglobulina e o dito segundo domínio variável simples de imunoglobulina, cada um tem especificidade de ligação para EGFR.
192. Ligando de acordo com qualquer uma das reivindicações .185 a 190, caracterizado pelo fato de que o dito primeiro domínio variável simples de imunoglobulina e o dito segundo domínio variável simples de imunoglobulina cada um tem especificidade de ligação para VEGF.
193. Ligando de acordo com qualquer uma das reivindicações 186 e de 188 a 190, caracterizado pelo fato de que dAbl tem especificidade de ligação para EGFR e dAb2 tem especificidade de ligação para VEGF.
194. Ligando de acordo com qualquer uma das reivindicações 186 e de 188 a 190, caracterizado pelo fato de que dAbl tem especificidade de ligação para VEGF e dAb2 tem especificidade de ligação para EGFR.
195. Ligando, caracterizado pelo fato de que o dito ligando é um dímero que compreende um primeiro ligando e um segundo ligado, em que dito primeiro ligando e o dito segundo ligando estão, cada um, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 185 a 194.
196. Ligando de acordo com a reivindicação 195, caracterizado pelo fato de que o dito dímero compreende uma ligação de bissulfeto entre o dito primeiro ligando e o dito segundo ligando.
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