BRPI0619519A2 - compostos de propionamida como agentes antiinflamatórios - Google Patents

Abstract

COMPOSTOS DE PROPIONAMIDA COMO AGENTES ANTIINFLAMATóRIOS. A presente invenção refere-se a compostos de fórmula (I), no qual R^1^, R^2^ e R^3^ são como definidos aqui e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos. A invenção refere-se também a métodos de uso dos compostos de fórmula (I) e composição farmaceuticas compreendendo os compostos de fórmula (I).

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "COMPOS- TOS DE PRÒPIONAMIDA COMO AGENTES ANTIINFLAMATÓRIOS".

Compostos de Propionamida como Agentes Antiinflamatórios

A presente invenção refere-se aos compostos de propionamida e às composições e aos métodos associados para utilização dos mesmos como agentes terapêuticos.

Os glicocorticóides constituem uma forma eficaz de tratamento para as doenças inflamatórias como a asma e a artrite reumatóide. Contudo, os seus severos efeitos colaterais sistêmicos limitam a dose que pode ser administrada e a sua utilidade em longo prazo. Estes efeitos colaterais inclu- em a supressão do eixo hipotálamo-hipófise-adrenal (HHA), a osteoporose, M a redução do crescimento ósseo nos mais jovens, alterações comportamen- tais e desordens do metabolismo lipídico e glicêmico.

O receptor do glicocorticóide (GRs) é membro da família genéti- ca conhecida como receptores hormonais. Estes receptores são ativados após se ligarem ao seu Iigante cognato, sendo capazes de regular a trans- crição de forma positiva ou negativa. O mecanismo detalhado desta regula- ção, apesar de não ser completamente compreendido, vêm se tornando ca- da vez mais claro. Os glicocorticóides podem circular livremente através das membranas plasmáticas para dentro das células onde se ligam aos GRs presentes no citoplasma. Uma vez ligados, uma alteração conformacional nos receptor causa a liberação de uma série de proteínas chaperones, per- mitindo que o complexo GR/ligante se transloque para o núcleo, forme díme- ros e se ligue especifica e firmemente a seqüências palindrômicas de DNA nos promotores dos genes regulados. O receptor ligado ao hormônio então recruta um grupo de proteínas conhecidas como o complexo coativador. Es- te complexo é requerido para o início da transcrição e funciona através do recrutamento de ambos o maquinário transcritor da célula e as acetiltransfe- rases da histona envolvidas na abertura da cromatina nas imediações do promotor. A transcrição de um número de genes que contêm GREs (elemen- tos responsivos aos glicocorticóides) nos seus promotores é ativada pelos GRs. Estes incluem genes envolvidos na gliconeogênese, no metabolismo intermediário e na resposta de estresse.

Em adição ao controle transcritivo exercido pelos GRs nos GREs, vários genes, particularmente aqueles envolvidos na resposta de in- flamação, devem ser controlados através de mecanismos alternativos uma vez que nenhum GRE aparece nos promotores destes genes. Os promoto- res de vários genes pró-inflamatórios de fato contêm sítios de ligação para os fatores de transcrição NF-kB e AP-1. Já se demonstrou que o complexo GR/ligante suprime a transcrição dos genes pró-inflamatórios ao interagir diretamente com o NF-kB ou o AP-1, prevenindo a regulação (aumento) transcricional pelos fatores de transcrição. Estudos in vitro com GRs mutan- tes incapazes de se ligarem ao DNA demonstraram que a trans-supressão mediada pelos GRs pode ser geneticamente dissociada da transativação. Esta dissociação é também apoiada por um estudo onde foram gerados ca- mundongos transgênicos "knock in" nos quais o tipo selvagem do GR foi substituído por um mutante de domínio de ligação de DNA similar. Esses camundongos não foram capazes da regulação de genes alvo dos GRs de- pendentes dos GREs, tais como o da enzima tirosina aminotransferase (TAT) ou genes que são regulados de forma negativa através da interação com um GRE negativo, tal como a pró-opiomelanocortina (POMC). Por outro lado, esses camundongos foram capazes da trans-supressão de genes ati- vados pelo NF-kB ou AP-1, Portanto, o modelo atualmente aceito do controle da inflamação pelos corticosteróides predisse que os GRs, o NF-kB e o AP-1 interagem dentro de uma complexa rede regulatória levando à supressão da expressão das citocinas.

De acordo com este modelo, um modulador glicocorticóide que retivesse a atividade de trans-supressão e liberasse a atividade de transati- vação possuiria menos dos efeitos colaterais associados à supressão adre- nal, às alterações comportamentais e à gliconeogênese. O efeito antiinflama- tório seria mantido.

A presente invenção diz respeito aos compostos de Fórmula I: <formula>formula see original document page 4</formula>

em que

R1 é H ou C1-C6 alquila; e

R2 e R3 são de forma independente H, CF3, NO2, um anel hete- roarila de 5 membros opcionalmente substituído, ou são selecionados dentre o grupo consistindo em -CH-(OH)-C(=O)-O-R4, -C(=O)-O-R5, e -C-(R6)=N-O- R7 em que R41 R51 R6 e R7 são de forma independente C1-C6 alquilas; e aos sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos,

Um outro aspecto da invenção diz respeito a um método de se tratar uma doença inflamatória através da modulação de um receptor de gli- cocorticóide envolvendo a administração de um composto de Fórmula I con- forme acima definido e sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo a um sujeito em necessidade do mesmo.

Um outro aspecto da invenção refere-se a uma composição far- macêutica contendo uma quantidade eficaz de um composto de Fórmula I conforme acima definido e sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo; e a um excipiente farmaceuticamente aceitável.

Todas as publicações citadas nesta descrição são a ele incorpo- radas na sua totalidade como referência.

A menos que explicitado de outra forma, os termos utilizados no Relatório a seguir, inclusive nas especificações e reivindicações, possuem as definições dadas abaixo. Deve-se notar que, da forma como utilizadas nas especificações e nas reivindicações anexas, as formas singulares, "um", "uma", "o" e "a" incluem seus referentes no plural a menos que o contexto dite claramente o contrário.

O termo "alquila" refere-se aos grupamentos lineares ou ramifi- cados monovalentes de hidrocarbonetos saturados, consistindo integralmen- te em átomos de carbono e hidrogênio, tendo de 1 a 12 átomos de carbono. O termo "alquila inferior" refere-se a um grupo alquila de 1 a 6 átomos de carbono, isto é, C1-C6 alquila. Exemplos de grupos alquila incluem, porém não se limitam a, metila, etila, propila, isopropila, isobutila, sec-butila, terc-butila, pentila, n-hexila, octila, dodecila, e similares.

O termo "arila" refere-se as porções de hidrocarbonetos cíclicos aromáticos monovalentes consistindo em um anel aromático mono-, bi- ou tricíclico. O grupamento arila pode ser opcionalmente substituído conforme aqui definido. Exemplos de grupamentos arila incluem, porém não se limitam a, fenila opcionalmente substituída, a naftila, a fenantrila, a flourenila, a inde- nila, a pentalenila, a azulenila, oxidifenila, bifenila, metilenodifenila, aminodi- fenila, difenilsulfidila, difenilsulfonila, difenilisopropilidenila, benzodioxanila, benzofuranila, benzodioxilila, benzopiranila, benzoxazilina, benzoxazinonila, benzopiperadinila, benzopiperazinila, benzopirrolidinila, benzomorfolinila, metilenodioxifenila, etilenodioxifenila, e similares, incluindo os derivados par- cialmente hidrogenados dos mesmos.

Os termos "halo", "halógeno" e "halóide" são equivalents entre si e refere-sem a um substituínte flúor, cloro, bromo ou iodo.

O termo "haloalquila" refere-se a uma alquila conforme aqui de- finida na qual um ou mais hidrogênios foram substituídos por um mesmo halogênio diferente. Exemplares de haloalquilas incluem -CH2CI, -CH2CF3, —CH2CCIs, perfluoroalquilas (exemplo, -CF3), e similares.

O termo "heteroarila" refere-se aos radicais monocíclicos ou bi- cíclicos com de 5 a 12 átomos anelares tendo pelo menos um anel aromáti- co contendo um, dois, ou três heteroátomos selecionados dentre Ν, O ou S, sendo os átomos restantes C, compreendendo-se que o ponto de ligação do radical heteroarila será no anel aromático. O anel heteroarila pode ser op- cionalmente substituído conforme aqui definido. Exemplos de porções de heteroarila incluem, porém não se limitam a, imidazolina, oxazolina, isoxazo- lila, tetrazolila, tiazolila, isotiazolila, oxadiazolila, tiadiazolila, pirazinila, tienila, benzotienila, tiofenila, furanila, piranila, piridila, pirrolila, pirazolila, pirimidila, quinolinila, isoquinolinila, benzofurila, benzotiofenila, benzotiopiranila, benzi- midazolila, benzooxazolila, benzooxadiazolila, benzotiazolila, benzotiadiazoli- la, benzopiranila, indolila, isoindolila, triazolila, triazinila, quinoxalinila, purini- la, quinazolinila, quinolizinila, naftiridinila, pteridinila, carbazolila, azepinila, diazepinila, acridinila opcionalmente substituídas e similares, incluindo os derivados parcialmente hidrogenados dos mesmos.

O termo "heterociclila" refere-se à porções saturada monovalen- te, consistindo em um a três anéis, incorporando um, dois, ou três ou quatro heteroátomos (escolhidos dentre nitrogênio, oxigênio ou enxofre). O anel heterociclila pode ser opcionalmente substituído conforme aqui definido. E- xemplos de porções heterociclila incluem, porém não se limitam a, piperidini- la, piperazinila, homopiperazinila, azepinila, pirrolidinila, pirazolidinila, imida- zolinila, imidazolidinila, piridinila, piridazinila, pirimidinila, oxazolidinila, isoxa- zolidinila, morfolinila, tiazolidinila, isotiazolidinila, quinuclidinila, quinolinila, 1,1 isoquinolinila, benzimidazolila, tiadiazolilidinila, benzotiazolidinila, benzoazoli- lidinila, dihidrofurila, tetrahidrofurila, dihidropiranila, tetrahidropiranila, tiamor- folina, tiamorfolinilsulfóxido, tiamorfolinilsulfona, dihidroquinolinila, dihidriso- quinolinila, tetrahidrisoquinolinila opcionalmente substituídas e similares.

O termo "opcionalmente substituída", quando utilizado em asso- ciação com os termos "arila", "fenila", "heteroarila", "ciclohexila" ou "heteroci- clila", refere-se à arila, fenila, heteroarila, ciclohexila ou heterociclila substitu- ídas opcional e independentemente com de um a quatro substituintes, prefe- rivelmente um ou dois substituintes selecionados dentre alquila, cicloalquila, cicloalquilalquila, heteroalquila, hidroxialquila, halo, nitro, oxo, ciano, hidróxi, alcóxi, amina, acilamina, mono-alquilamina, mono-alquilamina, dialquilamina, haloalquila, haloalcóxi, heteroalquila, -COR (onde R é um hidrogênio, uma alquila, uma fenila ou uma fenilalquila), -(CR'R")n-COOR (onde η é um nú- mero inteiro de 0 a 5, R' e R" são de forma independente um hidrogênio ou uma alquila e R é um hidrogênio, uma alquila, uma cicloalquila, uma cicloal- quilalquila, uma fenila, ou uma fenilalquila), ou -(CR'R")n-CONRaRb (onde η é um número inteiro de 0 a 5, R' e R" são de forma independente um hidrogê- nio ou uma alquila, e Ra e Rb são de forma independente um do outro hidro- gênio, alquila, cicloalquila, cicloalquilalquila, fenila, ou fenilalquila).

O termo "farmaceuticamente aceitável" refere-se àquilo útil para o preparo de uma composição farmacêutica que é, em geral, seguro, não tóxico, e não biologicamente ou de qualquer outra forma indesejável, incluin- do aquilo que é aceitável para uso veterinário tanto quanto para uso farma- cêutico em seres humanos.

O termo "sais farmaceuticamente aceitáveis" de um composto refere-se aos sais que são, conforme aqui definido, farmaceuticamente acei- táveis, possuindo a atividade farmacológica desejada do composto original.

Tais sais incluem:

sais ácidos de adição formados a partir de ácidos inorgânicos tal como o ácido clorídrico, o ácido bromídrico, o ácido sulfúrico, o ácido nítrico, o ácido fosfórico e similares; ou formados a partir de ácidos orgânicos, tal como o ácido acético, o ácido benzenossulfônico, o ácido benzóico, o ácido canforsulfônico, o ácido cítrico, o ácido etanossulfônico, o ácido fumárico, o ácido glucoheptônico, o ácido glicônico, o ácido glutâmico, o ácido glicólico, o ácido hidroxinaftóico, o ácido 2-hidroxietanossulfônico, o ácido lático, o ácido maléico, o ácido málico, o ácido malônico, o ácido mandélico, o ácido metanossulfônico, o ácido mucônico, o ácido 2-naftalenossulfônico, o ácido propiônico, o ácido salicílico, o ácido succínico, o ácido tartárico, o ácido p- toluenossulfônico, o ácido trimetilacético, e similares; ou

sais formados quando um próton acídico presente no composto original é substituído por um íon metálico, como, por exemplo, um íon de um metal alcalino, um íon de um metal alcalino terroso ou um íon de alumínio; ou se coordena com uma base orgânica ou inorgânica. Bases orgânicas a- ceitáveis incluem a dietanolamina, a etanolamina, a N-metilglucamina, a trie- tanolamina, a trometamina, e similares. Bases inorgânicas aceitáveis inclu- em o hidróxido de alumínio, o hidróxido de cálcio, o hidróxido de potássio, o carbonato de sódio e o hidróxido de sódio.

Os sais farmaceuticamente aceitáveis preferenciais são aqueles formados a partir do ácido acético, do ácido clorídrico, do ácido sulfúrico, do ácido metanossulfônico, do ácido maléico, do ácido fosfórico, do ácido tartá- rico, do ácido cítrico, do sódio, do potássio, do cálcio, do zinco, e do magné- sio.

Deve-se compreender que todas as referências aos sais farma- ceuticamente aceitáveis incluem as formas de adição de solvente (solvato) ou formas cristalinas (polimorfos) conforme aqui definidas, dos mesmos sais ácidos de adição.

O termo "modular" refere-se à habilidade de alterar a função de uma molécula alvo através da, por exemplo, ligação a e estimulação ou ini- bição das respostas funcionais da molécula alvo. O termo "modulador" refe- re-se a uma molécula que interage com e modula uma molécula alvo. As interações incluem, mas não se limitam a, as interações agonistas, antago- nistas e similares, conforme aqui definidas.

O termo "Agonista" refere-se a uma molécula que interage com e exacerba ou aumenta a função de uma molécula alvo. Assim sendo, os agonistas incluem os agonistas parciais e os agonistas plenos.

O termo "Antagonista" refere-se a uma molécula que inibe ou suprime direta ou indiretamente a função de uma molécula alvo. Assim sen- do, os antagonistas incluem os antagonistas parciais e os antagonistas to- tais.

Os termos "Doença" e "Estado Mórbido" refere-sem a qualquer doença, condição, sintoma, desordem ou indicação.

O termo "Doença inflamatória" refere-se às indicações e aos es- tados mórbidos que são acompanhados por processos inflamatórios, alérgi- cos e/ou proliferativos, podendo incluir:

(i) Doenças pulmonares: doenças pulmonares crônicas obstruti- vas de qualquer origem, particularmente a asma brônquica e a doença pul- monar obstrutiva crônica (COPD); síndrome do desconforto respiratório do adulto (ARDS); bronquiectasia; bronquite de origens diversas; todas as do- enças respiratórias restritivas, particularmente a alveolite alérgica; todas as formas de edema pulmonar, particularmente o edema pulmonar tóxico; todas as formas de doenças pulmonares intersticiais de qualquer origem, por e- xemplo, a pneumonite por radiação; e sarcoidoses e granulomatoses, parti- cularmente a doença de Boeck.

(ii) Doenças reumáticas ou doenças auto-imunes ou doenças articulares: todas as formas de doenças reumáticas, especialmente a artrite reumatóide, a febre reumática aguda e a polimialgia reumática; artrite reati- va; reumatismo de partes moles; as doenças inflamatórias das partes moles de qualquer origem; sintomas artríticos nas doenças degenerativas das arti- culações (artroses); artrite traumática; as colagenoses de qualquer origem, por exemplo, o lúpus eritematoso sistêmico, a esclerodermia, a polimiosite, a dermatomiosite, a síndrome de Sjõgren, a doença de Still e a síndrome de Felty;

(iii) Doenças alérgicas: todas as formas de reações alérgicas, por exemplo, o edema angioneurótico, a febre do feno, as mordidas de inse- tos, as reações alérgicas a fármacos, derivados sangüíneos, agentes de contraste e etc., o choque anafilático (anafilaxia), a urticária, o edema angio- neurótico e a dermatite de contato;

(iv) Vasculites: panarterite nodosa, poliarterite nodosa, arterite temporal, granulomatose de Wegener, arterite de células gigantes e eritema nodoso;

(v) Doenças dermatológicas: dermatite atópica, particularmente em crianças; psoríase; pitiríase rubra pilar; doenças eritematosas desenca- deadas por diferentes agentes, por exemplo, raios, produtos químicos, queimaduras, etc.; dermatose bolhosa; doenças do complexo liquenóide; prúrido (por exemplo, de origem alérgica); dermatite seborréica; rosácea; pênfigo vulgar; eritema exsudativo multiforme; balanite; vulvite; perda de ca- belo, tal como ocorre na alopecia areata; e Iinfoma cutâneo de células T;

(vi) Doenças renais: síndrome nefrótica; e todos os tipos de ne- frite, por exemplo, a glomerulonefrite;

(vii) Doenças hepáticas: desintegração aguda das células hepá- ticas; hepatite aguda de várias origens, por exemplo, viral, tóxica, induzida pelo consumo de fármacos; e hepatite agressiva crônica e/ou hepatite a- gressiva intermitente;

(viii) Doenças do trato gastrointestinal: doenças intestinais infla- matérias, por exemplo, enterite regional (doença de Crohn), colite ulcerosa; gastrite; esofagite péptica (esofagite de refluxo); e gastroenterites de outras origens, por exemplo, a doença celíaca; (ix) Doenças proctológicas: eczema anal; fissuras; hemorróidas; e proctite idiopática;

(x) Doenças oftalmológicas: ceratite alérgica, uveíte ou irite; con- juntivite; blefarite; neurite óptica; coroidite; e oftalmia simpática;

(xi) Doenças otorrinolaringológicas (ENT): rinite alérgica ou febre do feno; otite externa, por exemplo, causada por eczema de contato, infec- ção, etc.; e otite média;

(xii) Doenças neurológicas: edema cerebral, particularmente os edemas cerebrais relacionados a presença de tumores; esclerose múltipla; encefalomielite aguda; meningite; lesão aguda da medula vertebral; AVC; e várias formas de convulsões, por exemplo, espasmos em flexão;

M (xiii) Doenças hematológicas: anemia hemolítica adquirida; e trombocitopenia idiopática;

(xiv) Doenças tumorais: leucemia linfática aguda; Iinfoma malig- no; linfogranulomatose; linfossarcoma; metástases extensas, particularmente

nos carcinomas mamários, brônquicose prostáticos;

(xv) Doenças endócrinas: oftalmopatia endócrina; orbitopatia endócrina; crise tireotóxica; tireoidite de Quervain; tireoidite de Hashimoto; bócio difuso tóxico; tireoidite granulomatosa; estruma limfomatosa; e doença de Grave;

(xvi) Transplante de órgãos e tecidos e as doenças de enxerto contra hospedeiro;

(xvii) Estados severos de choque, por exemplo, o choque sépti- co, o choque anafilático, e a síndrome da resposta inflamatória sistêmica

(SIRS);

(xviii) Terapia substitutiva em: insuficiência adrenal primária con- gênita, por exemplo, na síndrome adrenogenital; insuficiência adrenal primá- ria adquirida, por exemplo, na doença de Addison, na adrenalite auto-imune, no pós-infecção, tumores, metástases, etc.; insuficiência adrenal secundária congênita, por exemplo, hipopituitarismo congênito; e insuficiência adrenal secundária adquirida, por exemplo, no pós-infecção, tumores, metástases, etc.; (xix) Dor de origem inflamatória, por exemplo, lumbago; e

(xx) vários outros estados mórbidos ou condições, incluindo o diabetes tipo 1 (diabetes insulino-dependente), a osteoartrite, a síndrome de Guillain-Barré, a reestenose seguida à angioplastia transluminal percutânea,

o Mal de Alzheimer, as dores agudas e crônicas, a aterosclerose, as lesões de reperfusão, as doenças da reabsorção óssea, a insuficiência cardíaca congestiva, o infarto do miocárdio, as lesões térmicas, as lesões orgânicas múltiplas secundárias a um trauma, meningite purulenta aguda, a enterocoli- te necrotizante e as síndromes associadas à hemodiálise, à Ieucoferese e à transfusão de granulócitos.

O termo "sujeito" refere-se aos mamíferos e aos não mamíferos. O termo "mamíferos" refere-se a qualquer membro da classe Mammalia, in- cluindo, mas não se limitando a, os seres humanos; os primatas não huma- nos tais como os chimpanzés e outras espécies de símios e macacos; ani- mais de fazenda tais como gado, cavalos, ovelhas, cabras e suínos; animais domésticos tais como coelhos, cachorros e gatos; animais de laboratório incluindo roedores tal como ratos, camundongos, porquinhos da índia e simi- lares. Exemplos de não mamíferos incluem, porém não se limitam a, os pás- saros e similares. O termo "sujeito" não denota uma idade ou um sexo em particular.

Os termos "tratando", "tratar" ou "tratamento" de um estado mór- bido refere-sem:

(i) a prevenção do estado mórbido, isto é, fazer com que não haja manifestação ou desenvolvimento dos sintomas clínicos em um sujeito que tenha sido exposto a ou se mostre predisposto para um estado mórbido, mas que ainda não experimentou ou manifestou os sintomas do estado mór- bido;

(ii) a inibição do estado mórbido, isto é, brecar o desenvolvimen- to de um estado mórbido ou de seus sintomas clínicos; ou

(iii) o alívio do estado mórbido, isto é, causar uma regressão temporária ou permanente do estado mórbido ou dos seus sintomas clínicos.

Os termos "tratando", "colocando em contato" e "reagindo", quando em se tratando de reações químicas, refere-sem à adição ou mistura de dois ou mais reagentes sob as condições apropriadas a fim de produzir os produtos indicados e/ou desejados. Deve-se levar em consideração que a reação que gera o produto indicado e/ou desejado pode não necessariamen- te resultar diretamente da combinação de dois reagentes que tenham sido inicialmente adicionados, isto é, pode haver um ou mais intermediários pro- duzidos na mistura que por fim levem a formação do produto indicado e/ou desejado.

Em uma modalidade, a presente invenção oferece um composto de fórmula I no qual R1 é um H. Em outra de suas apresentações, a presen- te invenção oferece um composto de fórmula I no qual R1 é uma C1-C6 alquia.

Em uma modalidade, a presente invenção oferece um composto de fórmula I no qual R2 é um H.

Em uma modalidade, a presente invenção oferece um composto de fórmula I no qual R3 é CF3, NO2, um anel heteroarila de cinco membros opcionalmente substituído, -CH-(0H)-C(=0)-0-R4, -C(=0)-0-R5 ou -C- (R6)=N-O-R7 no qual R4, R5, R6 e R7 são de forma independente C1-C6 alqui- la. Em outra modalidade, a presente invenção oferece um composto de fór- mula I no qual R3 é um anel heteroarila de cinco membros opcionalmente substituído.

Os compostos de Fórmula I podem ser preparados através do método do Esquema I abaixo:

<formula>formula see original document page 12</formula> <formula>formula see original document page 13</formula>

A 2-trifluorometil-fenil acetonitrila foi misturada ao 1,2- dibromopropano para produção do composto de ciclobutanocarbonitrila, que posteriormente foi reagido com o hidreto de diisobutilalumínio em tolueno, resultando no intermediário de ciclobutanocarbaldeído da Fórmula (II). Este intermediário foi então misturado ao etil éster de ácido dietóxi-fosforil-etóxi- acético, ao que se seguiram duas etapas de hidrólise para produção do áci- do 2-oxo-3-[1-2(trifluorometil-fenil)-ciclobutil-propiônico da Fórmula (III). A reação com as fenilaminas da Fórmula (IV) na presença de cloreto de tionila e dimetilacetamida resulta nos intermediários de propionamida da Fórmula (V). Uma nova reação com o trimetilsilano-trifluorometano oferece os com- postos da Fórmula (I) da invenção.

Em geral, a nomenclatura utilizada neste pedido de patente se baseia AUTONOM® v.4,0, um sistema computadorizado do Beilstein Institute para a geração da nomenclatura sistemática da IUPAC.

As estruturas químicas aqui apresentadas foram preparadas a- través da utilização do ISIS® version 2,2. Qualquer valência aberta apare- cendo em um átomo de carbono, oxigênio ou nitrogênio nas estruturas aqui (diferente de um radical substituinte) indica a presença de um hidrogênio.

A presente invenção inclui composições farmacêuticas compre- endendo pelo menos um composto da presente invenção, ou isômero indivi- dual, mistura racêmica ou não racêmica de isômeros ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo, em combinação com pelo menos um carreador farmaceuticamente aceitável e, opcionalmente, outros Ingredi- entes profiláticos e/ou terapêuticos.

Em geral, os compostos da presente invenção serão administra- dos em quantidades terapeuticamente eficazes através de qualquer uma das vias de administração para agentes que servem às utilidades similares. As faixa de dosagem adequadas são de 1-500mg diários, tal como de 1-1 OOmg diários ou de 1 -30mg diários, dependendo de uma série de fatores, tais co- mo a severidade da doença a ser tratada, a idade e o estado de saúde rela- tivo do sujeito, a potência do composto utilizado, a rota e a forma de admi- nistração, a indicação para a qual se dirige a administração e a preferência e experiência dos profissionais médicos envolvidos. Um versado na técnica de tratar tais doenças será capaz de determinar quantidades terapeuticamente eficazes dos compostos da presente invenção para o tratamento de doenças específicas sem experimentações desnecessárias, utilizando somente méto- dos conhecidos para a estipulação das doses e as revelações deste relató- rio.

Em geral, os compostos da presente invenção serão administra- dos como formulações farmacêuticas incluindo aquelas adequadas para a 1,1 administração oral (incluindo as bucais e sublinguais), retal, nasal, tópica, pulmonar, vaginal ou parenteral (incluindo as intramusculares, as intra- arteriais, as intratecais, as subcutâneas e as intravenosas) ou em uma forma adequada para a administração por inalação ou insuflação. A maneira prefe- rida de administração é geralmente a oral, utilizando um regime conveniente de doses diárias que pode ser ajustado de acordo com o grau de aflição.

Um ou mais compostos da presente invenção, em combinação com um ou mais adjuvantes convencionais, carreadores ou diluentes podem ser colocados na forma de composições farmacêuticas e doses unitárias. As composições farmacêuticas e as formas de dose unitária podem ser consti- tuídas por ingredientees convencionais em proporções convencionais, com ou sem compostos ou princípios ativos adicionais, sendo que as formas de dose unitária podem conter qualquer quantidade eficaz adequada do ingre- diente ativo comensurada com a faixa de dosagem diária que se pretenda empregar. As composições farmacêuticas podem ser empregadas como só- lidos, tais como comprimidos ou cápsulas, semi-sólidos, pós, formulações de liberação prolongada, ou líquidos, tais como soluções, suspensões, emul- sões, elixires ou cápsulas para utilização oral; ou na forma de supositórios para a administração retal ou vaginal; ou na forma de soluções injetáveis estéreis para a utilização parenteral. As formulações contendo em torno de 1mg de ingrediente ativo ou, mais amplamente, de em torno de 0,01 mg a em torno de 100 mg, por comprimido, são formas de dose unitária represen- tativas adequadas em conformidade.

Os compostos da presente invenção podem ser formulados em uma grande variedade de formas de dosagem para administração oral. As composições farmacêuticas e formas de dosagem podem compreender, co- mo componente ativo, um ou mais compostos da presente invenção ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos. Os carreadores farmaceutica- mente aceitáveis podem tanto ser sólidos quanto líquidos. As preparações em forma sólida incluem pós, comprimidos, pílulas, cápsulas, cachets, supo- sitórios e grânulos dispersíveis. Carreadores sólidos podem ser uma ou mais substâncias que podem também agir como diluentes, agentes flavorizantes, solubilizantes, lubrificantes, agentes suspensivos, ligantes, conservantes, agentes desintegrantes de comprimidos, ou materiais de encapsulação. Em pós, o carreador é geralmente um sólido finamente dividido que é uma mis- tura com o componente ativo finamente dividido. Em comprimidos, o compo- nente ativo é geralmente misturado a um carreador tendo a capacidade Ii- gante necessária em proporções adequadas e compactado na forma e ta- manho desejado. Os pós e comprimidos contêm preferivelmente em torno de 1 a 70% do composto ativo. Carreadores adequados incluem, mas não se limitam a, carbonato de magnésio, estearato de magnésio, talco, açúcar, lactose, pectina, dextrina, amido, gelatina, tragacanto, metilcelulose, carbo- ximetilcelulose de sódio, cera de baixo ponto de fusão, manteiga de cacau e similares. Subentende-se que o termo "preparação" inclua a formulação do componente ativo com material encapsulante como carreador, oferecendo uma cápsula na qual o componente ativo, com ou sem carreadores, é cerca- do por um carreador, que está em associação com ele. De forma similar, cachets e pastilhas estão incluídos. Os comprimidos, pós, cápsulas, pílulas, balas e pastilhas podem estar em formas sólidas adequadas à administração oral.

Outras formas adequadas à administração oral incluem prepara- ções em formas líquidas incluindo emulsões, xaropes, elixires, soluções a- quosas, suspensões aquosas, ou formas sólidas para conversão em prepa- rações em formas líquidas imediatamente antes do uso. Emulsões podem ser preparadas em soluções, por exemplo, em solução aquosa de propileno glicol ou podem conter agentes emulsificantes, por exemplo, tais como a lecitina, o monooleato de sorbitano ou a acácia. Soluções aquosas podem ser preparadas através da dissolução do componente ativo em água e da adição de agentes corantes, flavorizantes, estabilizantes e espessantes a- dequados. As soluções aquosas podem ser preparadas pela dispersão do componente ativo finamente dividido em água com material viscoso, tal co- mo gomas naturais ou sintéticas, resinas, metilcelulose, carboximetilcelulose de sódio, e outros agentes suspensivos bem conhecidos. Formulações em formas sólidas incluem soluções, suspensões e emulsões, podendo conter, 1,1 em adição ao componente ativo, agentes corantes, flavorizantes, estabilizan- tes, tampões, adoçantes naturais e artificiais, dispersantes, espessantes, solubilizantes e similares.

Os compostos da presente invenção podem ser formulados para a administração parenteral (por exemplo, por injeção, por exemplo, em bolus ou infusão contínua), podendo se apresentar em doses unitárias em ampo- las, seringas preenchidas, infusões de baixo volume, ou em recipientes para múltiplas doses com a adição de um conservante. As composições podem tomar tais formas como suspensões, soluções ou emulsões em veículos a- quosos ou oleosos, por exemplo, soluções em polietileno glicol aquoso. E- xemplos de carreadores, diluentes, solventes ou veículos oleosos ou não aquosos incluem o propileno glicol, polietileno glicol, óleos vegetais (por e- xemplo, o óleo de oliva), e ésteres orgânicos injetáveis (por exemplo, o etil oleato), podendo conter agentes formulatórios tais como conservantes, u- mectantes, emulsificantes, ou agentes estabilizantes, suspensivos e/ou dis- persantes. De forma alternativa, o ingrediente ativo pode estar em forma de pó, obtida por isolação asséptica do sólido estéril ou pela liofilização da solu- ção para constituição antes do uso com um veículo adequado, por exemplo, água esterilizada livre de pirógenos.

Os compostos da presente invenção podem ser formulados para administração tópica à epiderme na forma de ungüentos, cremes, loções, ou como adesivos transdérmicos. Os ungüentos e cremes podem, por exemplo, ser formulados com bases aquosas ou oleosas com a adição de agentes espessantes e/ou geleificantes adequados. As loções podem ser formuladas com bases aquosas ou oleosas e em geral também conterão um ou mais agentes emulsificantes, agentes estabilizantes, agentes dispersantes, agen- tes suspensivos, agentes espessantes, ou agentes colorantes. Formulações adequadas para a administração tópica na boca incluem comprimidos con- tendo agentes ativos em uma base flavorizada, habitualmente sacarosa e acácia ou tragacanto; pastilhas contendo o ingrediente ativo em uma base inerte tal como gelatina e glicerina ou sacarose e acácia; e enxaguantes bu- cais contendo o ingrediente ativo em um carreador líquido adequado.

Os compostos da presente invenção podem ser formulados para a administração como supositórios. Uma cera com baixo ponto de fusão, tal como uma mistura de glicerídeos de ácidos graxos ou manteiga de cacau, é derretida e então o componente ativo é nela disperso de forma homogênea, por exemplo, pela agitação. A mistura homogênea derretida é então envasa- da em moldes de tamanhos convenientes, permitindo-se que esfrie e solidifi- que.

Os compostos da presente invenção podem ser formulados para a administração vaginal. Pessários, tampões, cremes, géis, pastas, sabões ou sprays contendo em adição ao Ingrediente ativo carreadores tais como aqueles conhecidos na técnica como apropriados.

Os compostos da presente invenção podem ser formulados para a administração nasal. As soluções ou suspensões são aplicadas diretamen- te na cavidade nasal por meios convencionais, por exemplo, com um conta- gotas, uma pipeta ou um spray. As formulações podem ser oferecidas em formas de dose unitária ou múltipla. No último caso de um conta-gotas ou pipeta, isto pode ser realizado pela administração pelo paciente de um volu- me predeterminado apropriado da solução ou suspensão. No caso do spray, isto pode ser realizado, por exemplo, através de bombas dosadoras.

Os compostos da presente invenção podem ser formulados para a administração com aerossol, particularmente no trato respiratório e incluin- do a administração nasal. O composto em geral terá um tamanho de partícu- la pequeno, por exemplo, da ordem de cinco (5) mícrons ou menos. Tal ta- manho de particular pode ser obtido através de meios conhecidos na ciên- cia, por exemplo, a micronização. O Ingrediente ativo é oferecido em um pa- cote pressurizado com um propelente adequado tal como o clorofluorcarbo- no (CFC), por exemplo, o diclorodifluorometano, o triclorofluorometano, ou o diclorotetrafluoroetano, ou o dióxido de carbono ou outros gases adequados. O aerossol pode também, de forma conveniente, conter um surfactante, tal como a lecitina. A dose do fármaco pode ser controlada por uma válvula de medição. De forma alternativa, os Ingredientees ativos podem ser oferecidos na forma de um pó seco, por exemplo, uma mistura em pó do composto em uma base adequada em pó tal como lactose, amido, derivados de amido tais como a polivinilpirrolidina (PVP). O carreador em pó irá formar um gel na cavidade nasal. A composição em pó pode se apresentar em formas de do- se unitária, por exemplo, em cápsulas ou cartuchos de, por exemplo, gelati- na, ou blisters dos quais o pó pode ser administrado pela utilização de um inalador.

Quando desejado, as formulações podem ser preparadas com revestimentos entéricos adaptados para a administração prolongada ou con- trolada do Ingrediente ativo. Por exemplo, os compostos da presente inven- ção podem ser formulados em dispositivos transdérmicos ou subcutâneos de liberação do fármaco. Estes sistemas de liberação são vantajosos quando a administração prolongada do composto é necessária e quando a aderência do paciente a um tratamento é crucial. Os compostos em sistemas de admi- nistração transdérmicos são freqüentemente afixados a um suporte sólido adesivo. O composto de interesse pode ainda ser combinado a um estimu- lante da penetração, por exemplo, a Azona (1-dodecilazacicloheptan-2-ona). Os sistemas de administração prolongada são inseridos de forma subcutâ- nea na camada subdérmica por cirurgia ou injeção. Os implantes subdérmi- cos encapsulam o composto em uma membrane lipídica solúvel, por exem- plo, de borracha de silicone, ou um polímero biodegradável, por exemplo, o ácido polilático. As preparações farmacêuticas estão preferivelmente em formas de dose unitária. Em tal forma, a preparação é subdividida em doses unitá- rias contendo quantidades apropriadas do componente ativo. As formas de dose unitária podem ser preparações embaladas, a embalagem contendo quantidades discretas da preparação, tais como comprimidos, cápsulas e pós contidos em frascos e ampolas. Ainda, as formas de dose unitária po- dem ser cápsulas, comprimidos, comprimidos ou pastilhas, ou podem ser o número apropriado das mesmas em forma embalada.

Outros carreadores farmacêutico adequados e suas formulações são descritos em fíemington: The Science e Practice of Pharmacy 1995, pu- blicado pela Martin, Mack Publishing Company, 19° edição, Easton, Pensil- vânia. Formulações farmacêuticas representativas contendo um composto da presente invenção são descritas nos Exemplos 6-12,

Exemplos

As preparações e exemplos a seguir são oferecidos para permitir que aqueles versados na técnica compreendam e pratiquem a presente in- venção de forma mais clara. Eles não devem ser considerados limitadores do escopo da invenção, mas meramente como ilustrações e representações da mesma. Nos Exemplos a sigla TA significa temperatura ambiente.

Exemplo 1: 3.3.3-triflúor-2-hidróxi-N-(4-oxazol-2-il-fenil)-2-n -(2-trifluorometil- feniD-ciclobutilmetill-propionamida

Precursores

1-(2-Trifluorometil-fenil)-ciclobutanocarbonitrila

Uma solução de 12,6 g de (2-trifluorometil-fenil)-acetonitrila e 7,6 ml de 1,2-dibromopropano em 36 ml de éter foram vagarosamente adiciona- dos através de um funil conta-gotas a uma suspensão de 3,62 g de hidreto de sódio em 85 ml de DMSO a 0°C. Depois da adição, permitiu-se que o ba- nho de água gelada esquentasse até a TA lentamente e amistura da reação foi mexida em TA ao longo da noite. A reação foi cuidadosamente tempera- da com isopropila e H2O. A suspensão se tornou clara. A camada orgânica foi separada, e a camada aquosa foi extraída duas vezes com éter. Os extra- tos orgânicos combinados foram combinados, secos e concentrados por e- vaporação a vácuo. O resíduo foi purificado através da cromatografia em coluna com silica-gel (EtOAc-hexano 2%-4%) para produzir 8,5 g de produto na forma de um sólido branco.

1H-RMN (CDCI3)1 δ 7,72 (dd, 1H), 7,58(t, 1H), 7,45(, 1H), 7,33(d, 1H) 2,92(m, 2H), 2,71(m, 2H), 2,54(m, 1H), 1,96(m, 1H).

1-(2-Trifluorometil-fenil)-ciclobutanocarbaldeído 50,7 ml de hidreto de diisobutilalumínio foi adicionado gota a go- tadurante 2 horas a uma solução de 8,5 g de 1-(2-trifluorometil-fenil)- ciclobutanocarbonitrila em 85 ml de tolueno a 0°C. Depois da adição, permi- tiu-se que o banho de água gelada esquentasse até a TA lentamente e a mistura da reação foi mexida em TA ao longo da noite. A mistura da reação foi vertida em 200 ml de ácido súlfurico a 5% em água gelada, e mexida por 10 minutos. A mistura foi precipitada quatro vezes com éter. Os extratos de éter combinados foram secos e concentrados por evaporação a vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna com silica-gel (EtOAc- hexano 5%) para produzir 6,2 g do produto.

1H-RMN (CDCI3), δ 9,7(s, 1H), 7,68(d, 1H), 7,57(t, 1H), 7,4(t, 1H), 7,27(d, 1H), 2,77(m, 2H), 2,62(m, 2H), 2,12(m, 1H), 1,87(m, 1H)

Etil éster de ácido 2-Etóxi-3-[1-(2-trifluorometil-fenil)-ciclobutil]- acrílico

4,4 ml (11 mmol) n-butil-lítio foi adicionado gota à gota uma solução de 1,28 ml (9,2 mmols) de diisopropilamina em 25 ml tetrahidrofuranoo a 0°C e me- xida por mais 30 minutos a 0°C. Então adicionou-se gota a gota 1,97 g (7,4 mmols) de fosfonato, etil éster de ácido (dietóxi-fosforil)-etóxi-acético e me· xeu-se por mais 20 minutos a 0°C. Adicionou-se gota a gota 1,4 g (6,1 mmols) de 1-(2-trifluorometil-fenil)-ciclobutanocarbaldeído em 5 ml de tetra- hidrofurano a 0°C. Permitiu-se que o banho de água gelada esquentasse até a TA lentamente e a mistura da reação foi mexida em TA ao longo do final de semana. A reação foi temperada com cloreto de amônio aquoso satura- do. A mistura resultante foi precipitada com acetato de etila. A solução de acetato de etila foi lavada com uma solução de cloreto de sódio saturada, seca e concentrada por evaporação a vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna com silica-gel (EtOAc-hexano 3%) para produzir 0,61 g do produto.

1H-RMN (CDCI3), δ 6,93-7,61 (m, 3H), 7,27(q, 1H), 6,75*( d, 1H), 5,77*(d, 1H)3,92(q, 2H), 3,79(q, 2H), 2,42-2,73(m, 4H), 2,07(m, 1H), 1,78(m, 1H)1,32(t, 3H), 1,11(t, 3H). *mistura de syn e anti, a razão é de em torno de 2:1,

ácido 2-Etóxi-3-[1-(2-trifluorometil-fenil)-ciclobutil]-acrílico

4,6 g de etil ester de ácido 2-Etóxi-3-[1-(2-trifluorometil-fenil)- ciclobutil]-acrílico, 4,3 g de hidróxido de sódio , 100 ml de etanol e 50 ml de água (etanol-água 2:1) foram misturados e mexidos por 2 horas a TA. O sol- vente foi evaporado a vácuo, o resíduo foi distribuído entre água e acetato de etila, então a solução aquosa foi acidificada com 1N ácido clorídrico, e precipitada com acetato de etila. Os extratos de acetato de etila foram lava- dos com uma solução aquosa de cloreto de sódio saturada, seca e concen- trada por evaporação a vácuo. 4,3 g de produto foram obtidos e utilizados para a próxima reação sem mais purificações.

1H-RMN (CDCI3), δ 7,629 (d, 1H), 7,42(q, 1H), 7,28(q, 1H), 7,18(t, 1H), 6,87(b, 1H), 3,97(q, 2H), 2,55(m, 4H), 2,12(m, 1H), 1,85(m, 1H), 1,17(t, 3H).

2-Oxo-3-[1 -(2-trifluorometil-fenil)-ciclobutil]-ácido propiônico

4,6 g de 2-Etóxi-3-[1-(2-trifluorometil-fenil)-ciclobutil]-ácido acríli- co foi mexido em 100 ml de 1M ácido sulfúrico e 15 ml de ácido acético con- centrado ao longo da noite a 100°C. Adicionou-se água, precipitou-se a mis- tura com acetato de etila, e a solução de acetato de etila foi separada, seca e concentrada por evaporação a vácuo. Obteve-se 4,1 g do produto na for- ma de um óleo marrom.

1H-RMN (CDCI3), δ 7,62(d, 1H), 7,42(t, 1H), 7,3(d, 1H), 7,22(d, 1H), 3,56(s, 2H), 2,57(m, 4H), 2,15(m, 1H), 1,85(m, 1H). EM (ei): M(+)-H=285 4-Oxazol-2-il-fenilamina

1,268 g de 1-(2-oxazol)-4-nitro-benzeno em 100 ml de etanol e 50 ml de acetato de etila foi reduzido à pressão normal na presença de palá- dio/carbono (10%) com um balão cheio de hidrogênio. Não sobrou matéria- prima após a condução da hidrogenação ao longo da noite, conforme mos- trado pelo TLC. O catalisador foi filtrado e o filtrato foi por evaporação a vá- cuo a fim de produzir 1,017 g de produto na forma de um pó esbranquiçado.

1H-RMN (CDCI3)1 δ 7,83(d, 2H), 7,62(s, 1H), 7,15(s, 1H), 6,77(d, 2H), 3,92(b, 2H). EM (ei): M(+)+H=161

N-(4-Oxazol-2-il-fenil)-2-oxo-3-[1 -(2-trifluorometil-fenil)-ciclobutil]- propionamida

0,052 ml de cloreto de tionila foi adicionado a uma solução de 0,1g de 2-oxo-3-[1-(2-trifluorometil-fenil)-ciclobutil]-ácido propiônico em 2 ml de dimetilacetamida a -5°C, e mexido por 30 minutos a -5°C. Então 56 mg de 4-oxazol-2-il-fenilamina foram adicionados em forma sólida e mexidos por 1 h a TA. Adicionou-se carbonato de potássio e mexeu-se ao longo da noite a TA. A reação foi temperada com água e precipitada com acetato de etila. Os extratos combinados de acetato de etila foram lavados duas vezes com água, secos e concentrados por evaporação. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna com silica-gel (EtÕAc-hexano 10%-2Ò%) para pro- duzir 63 mg do produto.

1H-RMN (CDCI3), δ 8,62(s,1H), 8,0(d, 2H), 7,7(s, 1H), 7,6(m, 3H), 7,39(t, 1H), 7,27(m, 2H), 3,68(s, 2H), 2,58(m, 4H), 2,16(m,1H), 1,86(m, 1H). EM (ei): M(+)+H=429, M+-H=427

3,3,3-triflúor-2-hidróxi-N-(4-oxazol-2-il-fenil)-2-[1-(2-trifluorometil- fenil)-ciclobutilmetil]-propionamida

<formula>formula see original document page 22</formula>

63 mg (0,15 mmol) de N-(4-oxazol-2-il-fenil)-2-oxo-3-[1-(2- trifluorometil-fenil)-ciclobutil]-propionamida em 2 ml de dimetilformamida fo- ram mexidos a 0°C com 48,7 mg (0,15 mmol) de carbonato de césio e 0,14 ml (0,88 mmol) de trimetilsilano-trifluorometano (CF3 TMS). A mistura da re- ação foi mexida ao longo da noite a TA. 0,1 ml de 1M de fluoreto de tetra- butilamônio em tetrahidrofurano foi adicionado e mexido ao longo de um final de semana a TA. A reação foi temperada com água e precipitada com aceta- to de etila. Os extratos combinados de acetato de etila foram lavados duas vezes com água, secos e concentrados por evaporação. O resíduo foi purifi- cado por TLC preparativa (EtOAc-hexano 30%) para produzir 3,3 mg de pro- duto.

EM (ei): M(+)+H =499, M+-H =497

Exemplo 2: 3.3,3-triflúor-2-hidróxi-N-(3-oxazol-5-il-fenil)-2-[1-(2-trifluorometil- fenil]-ciclobutilmetin-propionamida

<formula>formula see original document page 23</formula>

foi obtida de forma análoga à 3,3,3-triflúor-2-hidróxi-N-(4-oxazol-2-il-fenil)-2- [1-(2-trifluorometil-fenil)-ciclobutilmetil]-propionamida com a utilização do 2- oxo-3-[1-(2-trifluorometil-fenil)-ciclobutil]-ácido propiônico e da 3-oxazol-5-il- fenilamina.

EM (ei): M(+)1 =429, M(+)-1 =427

Exemplo 3: 3,3,3-triflúor-2-hidróxi-N-r4-(3-metil-[1,2,4]oxadiazol-5-il-)-fenil]-2- [1-(2-trifluorometil-fenil)-ciclobutilmetil]-propionamida

<formula>formula see original document page 23</formula>

foi obtida de forma análoga à 3,3,3-triflúor-2-hidróxi-N-(4-oxazol-2-il-fenil)-2- [1-(2-trifluorometil-fenil)-ciclobutilmetil]-propionamida com a utilização do 2- oxo-3-[1 -(2-trifluorometil-fenil)-ciclobutil]-ácido propiônico e 4-(3-metil- [1,2,4]oxadiazol-5-il)-fenilamina.

EM (ei): M(+)+H=514, M+-1=512

Exemplo 4: Ácido Etil éster de hidróxi-(4-(3,3,3-triflúor-2-hidróxi-2-f1-(2- trifluorometil-fenil)-ciclobutilmetil]-propionilamina}-fenil)-acético

<formula>formula see original document page 24</formula>

foi obtido de forma análoga à 3,3,3-triflúor-2-hidróxi-N-(4-oxazol- 2-il-fenil)-2-[1-(2-trifluorometil-fenil)-ciclobutilmetil]-propionamida com a utili- zação do ácido 2-oxo-3-[1-(2-trifluorometil-fenil)-ciclobutil]-propiônico e do etil éster de ácido (4-amino-fenil)-hidróxi-acético.

EM (ei): M(+)+H=534

Exemplo 5: Formulações

Preparações farmacêuticas para a administração por rotas di- versas são formuladas conforme mostrado nas tabelas a seguir. Os termos "Ingrediente ativo" ou "Composto ativo", conforme utilizados nas tabelas, refere-sem a um ou mais dos compostos de Fórmula I.

Composição para Administração Orai

<table>table see original document page 24</column></row><table>

Os ingredientes são misturados e envasados em cápsulas con- tendo em torno de 100 mg cada; uma cápsula se aproximaria da dose total diária.

Composição para Administração Oral

<table>table see original document page 24</column></row><table>

Os ingredientes são combinados e granulados utilizando um sol- vente como o metanol. A formulação é então seca e colocada na forma de comprimidos (contendo em torno de 20 mg do composto ativo) com uma maquina de comprimidos adequada.

Composição para Administração Oral

<table>table see original document page 25</column></row><table>

O ingrediente ativo é dissolvido em uma porção de água para injeção. Uma quantidade suficiente de cloreto de sódio é então adicionada conforme se mexe a fim de tornar a solução isotônica. A solução é fabricada para carregar o restante da água para injeção, filtrada através de um filtro com uma membrane de 0,2 mícrons e embalada sob condições estéreis.

Formulações em Supositório <table>table see original document page 26</column></row><table>

Os ingredients são derretidos combiriadamente e misturados em um banho de vapor, então são vertidos em moldes contendo 2,5 g de peso total.

Formulação Tópica

<table>table see original document page 26</column></row><table>

Todos os ingredientes, com exceção da água, são combinados e aquecidos a em torno de 60°C conforme se mexe. Uma quantidade suficien- te de água a em torno de 60°C é então adicionada conforme se mexe vigo- rosamente para emulsificar os ingredientes e a água então adicionada q.s. em torno de 100 g.

Formulações em Sprav Nasal

Várias suspensões aquosas contendo de em torno de 0,025 a 0,5% do composto ativo são preparadas na condição de formulações para sprays nasais. As formulações contêm de forma opcional ingredientes inati- vos tais como, por exemplo, celulose microcristalina, carboximetilcelulose sódica, dextrose, e similares. Pode-se adicionara ácido clorídrico ou hidróxi- do de sódio para se ajustar o pH. As formulações para sprays nasais podem ser administradas com uma bomba dosadora liberando em torno de 50-100 μL da formulação por atuação. Uma típica escala de dosagem é a de 2-4 borrifos a cada 4-12 horas.

Exemplo 6: Ensaio de ligação com o Receptor Glicocorticóide

A afinidade dos antagonistas dos receptores de glicocorticóides pelos receptores de glicocorticóides foi determinada em ensaios de ligação competitiva através da habilidade do antagonista para competir com a de- xametasona.

Todas as etapas do ensaio foram realizadas em placas de 96 cavidades. A solução Iigante conteve 10mM fosfato de potássio de pH 7,4, 20 mM Na2Mo4, 100 μΜ de EDTA, 2% DMSO1 e 5 mM DTT. Foram utiliza- dos receptores de glicocorticóides humanos recombinantes purificados a 1 nM. Os compostos testados apresentaram concentrações finais de até 2% DMSO.

A condição de ligação não específica foi 1 μΜ dexametasona. O radioligante utilizado para o ensaio de competitividade foi o 2 nM 3H- Dexametasona (83 Ci/mmol solução-mãe). Tampões, compostos ou veícu- los, GR1 e radioligantes foram incubados a 4°C ao longo da noite. As placas de 96 cavidades GF/B Unifilter foram tratadas com PEI a 0,5% após a incu- bação. As amostras foram transferidas para placas de filtragem por coletor celular. As placas de filtragem foram lavadas cinco vezes com 50 mM Tris pH 7,5 e 5 mM EDTA tampão. As amostras foram secas a 65°C por em torno de 1hora. Adicionou-se fluido de cintilação às placas de filtragem a 50 μL/cavidade e foram medidos o 3H cpm no contador de cintilância TopCount. Os resultados do ensaio de ligação de vários compostos da presente inven- ção são mostrados na Tabela 1,

Tabela 1

<table>table see original document page 27</column></row><table> Exemplo 7: Atividade de transsupressão: Inibicão da produção de citocinas nas células sangüíneas periféricas de humanos estimulada pelo LPS

Coletou-se sangue de voluntários humanos saudáveis através de venipuntura em tubos heparinizados. O sangue foi diluído na proporção de 1:1 em solução salina fosfato-tamponada Dulbecco (PBS) e disposto em camadas sobre o Histopaque-1,077 em tubos de 50 ml da centrífuga. Os tubos são centrifugados a 800 χ g por 25 minutos a TA. As células mononu- cleares na interface plasma/Histopaque são coletadas, lavadas três vezes com PBS e ressuspensas a 1 χ 106 células/ml em RPMI 1640 suplementado do meio com 10% soro fetal bovino (FBS) e 100 unidades/ml penicilina/100 μg/ml streptomicina. Alíquotas (250 μΙ) desta suspensão celular são pré- 1,1 incubadas com compostos de várias diluições (a concentração final de DM- SO é 0,5%) em placas de polipropileno esterilizadas por 30 minutos a 37°C, 5% CO2. A LPS é adicionada a 1 ng/ml e as placas são retornadas para a incubadora por mais 3 horas. As alíquotas do meio são removidas e conge- ladas a -80°C. Os níveis de citocinas (TNFot, IL6 e IL8) nestas amostras são determinadas utilizando kits BD-Pharmingen OptEIA em conformidade com as instruções do fabricante. O IC50 é definico como a concentração do com- posto que reduz a produção de citocinas em resposta à 1 ng/ml LPS a 50% daquela nos cavidades de controle sem compostos da invenção.

Exemplo 8: Atividade de Transativacão: atividade da tirosina aminotransfe- rase em células hepáticas de ratos

Células de hepatoma de ratos H4IIE foram colocadas em placas (4 χ 105 células/ml em uma placa de cavidades) em cDMEM suplementado com 10% FBS e incubadas por 24 horas a 37°C, 5% CO2, Os compostos em várias diluições (a concentração final de DMSO é 0,5%) são adicionados e as placas são incubadas por um período adicional de 24 horas. A porção media é removida, a monocamada celular é cuidadosamente lavada com PBS uma vez, e 0,2 ml tampão de lise celular (10 mM Tris pH 7,5, 10 mM EDTA, 0,25M sacarose) é adicionado. As placas podem ser armazenadas a -70°C. As células são quebradas pelo congelamento e derretimento por 3 vezes; os Iisatos são clareados por centrifugação por 5 minutos. Adiciona-se 40 μl/cavidade de p-hidroxibenzaldeído como padrão, controle tampão, ou alíquotas de Iisato a uma placa de 96 cavidades limpa. Adiciona-se 20 μl/cavidade de tampão TAT (50 mM KH2PO4 pH 7,6, 5 mg/ml BSA, 1 mM EDTA, 0,1 mM DTT), seguindo-se a mistura de 140 μl/cavidade do ensaio (8,2 mM solução de tirosina, 0,125 M KH2PO4, 20 mM a-cetoglutarato, 0,3 mM piridoxal 5-fosfato). As reações são incubadas a 37°C por 15 minutos, e encerradas pela adição de 20 μl/cavidade de 7N KOH, seguida pela incuba- ção a 37°C por 30 minutos no escuro. A formação do produto é monitorada pela absorção a 340 nm, sendo expressa em nmols/min/mg de proteína, conforme calculado a partir da curva padrão do p-hidroxibenzaldeído. O EC5O para cada composto é definido como a concentração do composto re- sultando em 50% da indução máxima de TAT para aquele composto.

Claims (7)

1. Composto de fórmula I: <formula>formula see original document page 30</formula> em que R1 é um H ou uma C1-C6 alquila; e R2 e R3 são de forma independente H1 CF3, NO2, um anel hete- roarila de cinco membros opcionalmente substituído, ou é selecionado den- tre o grupo consistindo em -CH-(0H)-C(=0)-0-R4, -C(=0)-0-R5, e -C- M (R6)=N-O-R7 em que R4, R51 R6 e R7 são de forma independente CrC6 alquila; e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.

2. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que R1 é um H e R2 é selecionado dentre o grupo consistindo em oxazolila, isoxazolila, õxãdiâzolilã életrâ^

3. Composto de acordo com a reivindicação 1 selecionado den- tre o grupo consistindo em: -3,3,3-triflúor-2-hidróxi-N-(3-oxazol-5-il-fenil)-2-[1 -(2-trifluorometil-fenil)- ciclobutilmetil]-propionamida; -3,3,3-triflúor-2-hidróxi-N-[4-(3-metil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-fenil]-2-[1 -(2- trifluorometil-fenil)-ciclobutilmetil]-propionamida; -3,3,3-triflúor-2-hidróxi-N-(4-isoxazol-5-il-fenil)-2-[1-(2-trifluorometil-fenil)- ciclobutilmetil]-propionamida; -3,3,3-triflúor-2-hidróxi-N-(4-oxazol-2-il-fenil)-2-[1 -(2-trifluorometil-fenil)- ciclobutilmetil]-propionamida; -3,3,3-triflúor-2-hidróxi-N-[3-(3-metil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-fenil]-2-[1-(2- trifluorometil-fenil)-ciclobutilmetil]-propionamida; -3,3,3-triflúor-2-hidróxi-N-[4-(etoxicarbonil-hidróxi-metil)-fenil]-2-[1-(2- trifluorometil-fenil)-ciclobutilmetil]-propionamida; e -3,3,3-triflúor-2-hidróxi-N-metil-N-[3-(1-metoxiimino-etil)-4-metoxicarbonil- fenil]-2-[1-(2-trifluorometil-fenil)-ciclobutilmetil]-propionamida.

4. Método para o tratamento de doenças inflamatórias através da modulação dos receptores dos glicocorticóides envolvendo a administra- ção a um sujeito em necessidade do mesmo de um composto de Fórmula I como definido na reivindicação 1 e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.

5. Composição farmacêutica, compreendendo uma quantidade eficaz de um composto de fórmula I em como definido na reivindicação 1 e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos e um excipiente farmaceuti- camente aceitável.

6. Uso de um composto de fórmula I de acordo com a reivindica- ção 1 ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos para a preparação de um medicamento para o tratamento de uma doença inflamatória através da modulação de um receptor de glicocorticóide.

7. Invenção conforme acima descrita.