BRPI0619602A2

BRPI0619602A2 - n-(flúor-pirazinil)-fenilsulfonamidas como moduladores de receptores ccr4 de quimiocina

Info

Publication number: BRPI0619602A2
Application number: BRPI0619602-0A
Authority: BR
Inventors: David Cheshire; Nicholas Kindon; Antonio Mete; Bryan Roberts
Original assignee: Astrazeneca Ab
Priority date: 2005-12-12
Filing date: 2006-12-11
Publication date: 2011-10-11
Also published as: EP1968951A1; IL191761A0; CN101370793A; US20080293742A1; ES2366807T3; TW200730512A; RU2008122401A; JP2009519332A; UY29999A1; KR20080091139A; AR058319A1; ATE513819T1; EP1968951B1; HK1121760A1; NO20083070L; AU2006325573A1; ZA200804921B; ECSP088603A; WO2007069978A1; CN101370793B

Abstract

N-(FLúOR-PIRAZINIL)-FENILSULFONAMIDAS COMO MODULADORES DE RECEPTORES CCR4 DE QUIMIOCINA. A presente invenção refere-se a N-(flúor-pirazinil)-fenilsulfonamidas de Fórmula (I) em que R^ 1^-R^ 5^ são como definidos no relatório descritivo; processos e intermediários usados em sua preparação, composições farmacêuticas contendo-os e seu uso em terapia.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "N-(FLÚOR- PIRAZINIL)-FENILSULFONAMIDAS COMO MODULADORES DE RECEP- TORES CCR4 DE QUIMIOCINA".

A presente invenção refere-se a N-(flúor-pirazinil)-fenilsulfonami- das, processos e intermediários usados em sua preparação, composições farmacêuticas contendo-as e seu uso em terapia.

As quimiocinas desempenham um importante papel em respostas em várias doenças e distúrbios, incluindo asma e doenças alérgicas, bem co- mo patologias auto-imunes tais como artrite e aterosclerose. Estas pequenas moléculas secretadas são uma superfamília de cultivo de proteínas 8-14 kDa caracterizada por um motivo de quatro cisteínas conservado. No presente momento, a superfamília quimiocina compreende três grupos exibindo moti- vos estruturais característicos, as famílias Cys-X-Cys (C-X-C), Cys-Cys (C-C) e Cys-X3-Cys (C-X3-C). As famílias C-X-C e C-C têm seqüência semelhante e são distintas uma da outra na base de uma inserção de aminoácido simples entre o par proximal de NH de resíduos de cisteína. A família C-X3-C é distinta das outras duas famílias com base de ter uma inserção tripla de aminoácido entre o par proximal de NH de resíduos de cisteína.

As quimiocinas C-X-C incluem diversos quimioatrativos potentes e ativadores de neutrófilos tais como interleucina-8 (IL-8) e peptídeo 2 de ativação de neutrófilo (NAP-2).

As quimiocinas C-C incluem quimioatrativos potentes de monóci- tos e linfócitos, porém não neutrófilos. Exemplos incluem proteínas quimiotá- ticas de monócito 1-3 (MCP-1, MCP-2 e MCP-3), RANTES (Regulados em Ativação, Normal T Expresso e Secretado), eotaxina e as proteínas inflama- tórias de macrófagos 1a e 1β (MIP-1a e MIP-1 β), Timo e Quimiocina Regu- lados por Ativação (TARC, CCL17) e Quimiocina Derivada de Macrófago (MDC, CCL22). A quimiocina C-X3-C (também conhecida como fractalquina) é um potente quimioatrativo e ativador de microglia no sistema nervoso cen- trai (CNS) bem como de monócitos, células T1 células NK e mastócitos.

Estudos demonstraram que as ações de quimiocinas são medi- adas por subfamílias de receptores acoplados à proteína G, entre as quais estão os receptores designados CCR1, CCR2, CCR2A, CCR2B, CCR3, C- CR4, CCR5, CCR6, CCR7, CCR8, CCR9, CCR10 e CCR11 (para a família C- C); CXCR1, CXCR2, CXCR3, CXCR4 e CXCR5 (para a família C-X-C) e CX3CRI para a família C-X3-C. Estes receptores representam bons alvos para desenvolvimento de fármaco desde que os agentes que modulam estes re- ceptores sejam úteis no tratamento de distúrbios e doenças tais como aquelas mencionadas acima. Agentes eficazes em modular os receptores CCR4 são de particular interesse para uso no tratamento de doenças inflamatórias.

WO 03/051870 e WO 03/059893 descrevem uma série de com- postos de sulfonamida referida a ser útil para o tratamento de várias doen- ças. Foi surpreendentemente descoberto que uma classe estrita de compos- 1,1 tos geralmente descrita no WO 03/059893 exibe propriedades farmacêuticas vantajosas. Por exemplo, além disso, os compostos de alta potência da pre- sente invenção também exibem baixa ligação de proteína de plasma ao plasma humano, que aumenta a eficácia in vivo.

A presente invenção fornece um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável deste:

<formula>formula see original document page 3</formula>

onde

R1 é selecionado de metila, cloro e flúor;

R2 é selecionado de metila, cloro e flúor;

R3 é metóxi;

um de R4 e R5 é flúor e o outro de R4 e R5 é selecionado de hi- drogênio e hidroximetila.

Sais farmaceuticamente aceitáveis adequados de Fórmula (I) incluem sais de metal, tal como um sal de metal de álcali (por exemplo, um sal de sódio ou potássio) ou um sal de metal alcalino-terroso (por exemplo, magnésio ou cálcio), ou um sal de amina orgânico, por exemplo, amônia, trietilamina, piperidina, piperazina ou dibenzilamina.

Será entendido que certos compostos da presente invenção e sais farmaceuticamente aceitáveis destes podem existir em forma solvata- das, por exemplo, hidratadas, bem como não solvatadas. Deve-se entender que a presente invenção abrange todas as tais formas solvatadas. A presen- te invenção também abrange quaisquer tautômeros de compostos de Fór- mula (I), ou misturas destes.

Em uma modalidade da invenção, R1 é selecionado de cloro e flúor, e

R2 é selecionado de cloro e flúor. Em uma modalidade da invenção, R1 é cloro e R2 é cloro.

Em uma modalidade da invenção, R4 é flúor e R5 é selecionado de hidrogênio e hidroximetila.

Em uma modalidade da invenção, R5 é flúor e R4 é selecionado de hidrogênio e hidroximetila.

Em uma modalidade da invenção, um de R4 e R5 é flúor e o ou- tro de R4 e R5 é hidrogênio.

Em uma modalidade da invenção, um de R4 e R5 é flúor e o ou- tro de R4 e R5 é hidroximetila.

Em uma modalidade da invenção, R4 é hidrogênio e R5 é flúor. Em uma modalidade da invenção, R4 é hidroximetila e R5 é flúor. Em uma modalidade da invenção, R4 é flúor e R5 é hidrogênio. Em uma modalidade da invenção, R4 é flúor e R5 é hidroximetila. Em uma modalidade da presente invenção o composto de Fór- mula (I) é selecionado:

2-cloro-3-flúor-N-(5-flúor-3-metoxipirazin-2-il)- benzenossulfonamida, 2,3-dicloro-N-(5-flúor-3-metoxipirazin-2-il)-benzenossulfonamida, 2,3-dicloro-N-(6-flúor-3-metoxipirazin-2-il)-benzenossulfonamida, 2,3-dicloro-N-[6-flúor-5-(hidroximetil)-3-metoxipirazin-2-il]- benzenossulfonamida, 3-cloro-2-flúor-N-(5-flúor-3-metoxipirazin-2-il)- benzenossulfonamida, 2,3-dicloro-N-[5-flúor-6-(hidroximetil)-3-metoxipirazin-2-il]- benzenossulfonamida,

3-cloro-N-(5-flúor-3-metoxipirazin-2-il)-2-metil- benzenossulfonamida,

ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.

Compostos farmacêuticos podem ser metabolizados para formar outros compostos in vivo. Para de sulfonamidas de N-pirazinil-fenila, um tipo de metabolito que pode ser formado in vivo é um derivado de aminopirazina. Alguns derivados de aminopirazina exibem mutagenicidade, isto é, eles são AMES +ve de acordo com o procedimento teste de Maron e Ames descrito em Mutation Res. 1983; 113:173-215. É uma outra vantagem dos compos- tos da presente invenção o fato de que seus derivados de aminopirazina não 1,1 são mutagênicos.

De acordo com a presente invenção é fornecido também um processo para a preparação de um composto de Fórmula (I) ou um sal far- maceuticamente aceitável deste, que compreende

(a) reagir um composto de Fórmula (II), onde R1, R2 e R3 são como definidos na Fórmula (I) e um de R6 e R7 é hidrogênio e o outro de R6 e R7 é NH2, como um sal de nitrila na presença de um agente de fluoração,

<formula>formula see original document page 5</formula>

ou

(b) reagir um composto de Fórmula (III), onde R1, R2 e R3 são como definidos na Fórmula (I) e um de R8 e R9 é flúor e o outro de R8 e R9 é bromo, com hidrogênio na presença de um catalisador de paládio,

<formula>formula see original document page 5</formula>

ou

(c) onde um de R4 e R5 é hidroximetila, reagir um composto de Fórmula (III) como descrito em (b), com monóxido de carbono na presença de um catalisador de paládio, e subseqüentemente tratar o ácido resultante (ou éster de C1-4 alquila deste) com um agente de redução adequado, ou

(d) onde um de R4 e R5 é flúor e o outro de R4 e R5 é hidrogênio, reagir um composto de Fórmula (IV), onde R3 é como definido na Fórmula (I) e onde um de R10 e R11 é flúor e o outro de R10 e R11 é hidrogênio,

<formula>formula see original document page 6</formula>

com um composto de Fórmula (V), onde R1 e R2 são como definidos na Fórmula (I)

<formula>formula see original document page 6</formula>

ou

(e) onde R2 é flúor e R1 é cloro, reagir um composto de Fórmula

(VI) onde

R3, R4 e R5 são como definidos na Fórmula (I), com hexacloroe- 15 tano na presença de uma base de amida de lítio ou lítio de alquila,

H^N^NH

(VI)1

e opcionalmente após (a), (b), (c), (d) ou (e) realizar um ou mais dos seguin- tes:

20 · converter o composto em um outro composto da invenção ou • formar um sal farmaceuticamente aceitável do composto.

Será entendido por aqueles versados na técnica que em com- postos de Fórmula (II) o átomo de hidrogênio que está localizado em R6 ou R7 não será submetido à transformação no processo (a) e será o átomo de 25 hidrogênio em R4 ou R5 no composto resultante de Fórmula (I). Similarmen- te, em compostos de Fórmula (III) o átomo de flúor que está localizado em R8 ou R9 não será submetido à transformação no processo (b) e será o áto- mo de flúor em R4 ou R5 no composto resultante de Fórmula (I). Em compos- tos de Fórmula (IV), os substituintes em R10 e R11 não serão submetidos à transformação no processo (d) e eles correspondem diretamente com os substituintes em R4 ou R5 no composto resultante de Fórmula (I).

No processo (a) a reação pode ser realizada em um solvente tal como acetonitrila, em uma temperatura na faixa de -IO0C a 50°C. O sal de nitrita pode ser nitrito de sódio (na forma de uma solução aquosa ou sólida) e o agente de fluoração pode, por exemplo, ser ácido tetrafluorobórico ou hidrogênio-fluoreto em piridina.

No processo (b) a reação pode ser realizada em um solvente adequado tal como acetato de etila em uma pressão de hidrogênio de, por exemplo, 10,1 Mpa (1 bar), na presença de uma base adequada tal como trietilamina e um catalisador de paládio tal como 5% Paládio sobre carvão vegetal, em uma temperatura na faixa de 0 a 50°C.

No processo (c) a reação inicial pode ser realizada em um sol- vente adequado tal como metanol, etanol em uma pressão de monóxido de carbono de, por exemplo, 0,3-0,7 MPa (3-7 bar), na presença de uma de amina terciária adequada tal como trietilamina ou diisopropiletilamina e a catalisador de paládio adequado tal como aduzido de diclorometano de di- cloro[1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]paládio(ll), e em uma temperatura na faixa de 70 a 100°C. Quando realizado na presença de um solvente de ál- cool, o ácido resultante será convertido no éster de alquila correspondente, por exemplo, o éster de metila será formado quando o metanol for o solven- te. A reação pode também ser realizada em um solvente tal como dimetil- formamida, em cujo caso o ácido será obtido. Redução subseqüente do és- ter de alquila no álcool pode ser realizada em um solvente adequado tal co- mo tetraidrofurano usando um agente de redução adequado tal como trietil- boroidreto de lítio em uma temperatura na faixa de 0 a 30°C. A redução do ácido no álcool pode ser obtida usando química convencional.

No processo (d) a reação pode ser realizada em um solvente adequado tal como 1,2-dimetoxietano ou tetraidrofurano, em uma temperatu- ra na faixa de 0 a 50 °C, sob a influência de uma base tal como NaH ou terc- butóxido de potássio. No processo (e) a reação pode ser realizada em solvente ade- quado tal como tetraidrofurano ou hexano ou misturas destes, por tratamen- to com uma base adequada tal como diisopropilamida de lítio, seguido pela adição de hexacloroetano, em uma temperatura na faixa de -78 a O0C.

Os compostos de Fórmulas (II), (III) ou (V) são comercialmente disponíveis, são conhecidos na literatura ou podem ser preparados usando técnicas conhecidas. Exemplos de métodos de preparação para alguns des- tes compostos são fornecidos a seguir nos Exemplos. Outros exemplos po- dem ser preparados por métodos análogos.

Por exemplo, compostos de Fórmula (II) onde R6 é NH2 e R7 é - hidrogênio podem ser preparados de acordo com o Esquema 1, onde R1, R2 e R3 são como definidos na Fórmula (I).

Esquema 1

<formula>formula see original document page 8</formula>

De acordo com o Esquema 1, compostos de Fórmula (VII) são con- vertidos nos compostos de Fórmula (VIII) reagindo-se (VII) com ácido nítrico fumegante em um solvente adequado tal como ácido acético em uma tempera- tura a partir de 50 a 100°C, ou alternativamente reagir (VII) com tetraf Iuorobora- to de nitrônio em um solvente adequado tal como acetonitrila ou sulfolano em uma temperatura a partir de 0 a 50 0C. Subseqüentemente, (VIII) é convertido em um composto de Fórmula (II) onde R6 é NH2 e R7 é hidrogênio, por hidroge- nação 0,1 - 0,3 Mpa (1-3 bar) em um solvente adequado tal como ácido acético ou misturas de ácido acético/acetato de etila com um catalisador de hidrogena- ção adequado tal como 5-10% paládio sobre carvão vegetal em uma tempera- tura a partir de 20 a 70°C, ou alternativamente reagindo-se (VIII) com um metal tal como pó de ferro em um solvente adequado tal como acetato de etila con- tendo ácido clorídrico concentrado aquecido em uma temperatura a partir de 50 a 100°C. Compostos de Fórmula (VII) podem ser preparados por métodos de acordo ou análogos àqueles descritos no W003/059893. Alternativamente, compostos de Fórmula (II) podem ser prepa- rados de acordo com o Esquema 2, onde R1, R2 e R3 são como definidos na Fórmula (I).

Esquema 2

<formula>formula see original document page 9</formula>

De acordo com o Esquema 2, (IX) é convertido em (X) reagindo- se (IX) com monóxido de carbono 0,3 - 0,7 Mpa (3-7 bar) em um solvente adequado tal como metanol na presença de uma de amina terciária adequa- da tal como trietilamina ou diisopropiletilamina e catalisador de paládio ade- quado tal como diclorometano de dicloro[1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]pa- ládio(ll) em uma temperatura a partir de 60 a 100°C, seguido por hidrólise do éster de metila para produzir (X). (X) É convertido em carbamato (XI) reagin- do-se (X) com azida de difenilfosforila e para álcool metoxibenzílico ou buta- nol terciário, na presença de uma base de amina adequada tal como trietila- mina em um solvente adequado tal como tetraidrofurano aquecido para re- fluxo. Carbamato (XI) é convertido em (II) por tratamento com um ácido ade- quado tal como HCI (por exemplo, a 4M) em dioxano. Compostos de Fórmu- la (IX) podem ser preparados por métodos de acordo ou análogos àqueles descritos no W003/059893.

Compostos de Fórmula (III) podem, por exemplo, ser preparados por como descrito no Esquema 3, onde R1, R2 e R3 são como definidos na Fórmula (I).

Esquema 3

<formula>formula see original document page 9</formula>

De acordo com o Esquema 3, os compostos de Fórmula (XII) são convertidos nos compostos de Fórmula (XIII), onde um de R12 e R13 é NO2 e o outro de R12 e R13 é bromo, reagindo-se (XII) com ácido nítrico fumegante em um solvente adequado tal como ácido acético em uma temperatura a partir de 50 a 100°C, ou alternativamente reagir (XII) com tetrafluoroborato de nitrônio em um solvente adequado tal como acetonitrila ou sulfolano em uma temperatura a partir de 0 a 50°C. Subseqüentemente, (XIII) é convertido em (XIV), onde um de R14 e R15 é NH2 e o outro de R14 e R15 é bromo, por hidrogenação 0,1 - 0,3 MPa (1-3 bar) em um solvente adequado tal como ácido acético ou misturas de ácido acético/acetato de etila com um catalisador de hidrogenação adequado tal como 5-10% paládio sobre carvão vegetal em uma temperatura a partir de 20 a 70°C, ou alternativamente tratando-se (XIII) com um metal tal como pó de ferro em um solvente adequado tal como acetato de etila contendo ácido clorídrico concentrado aquecido em uma temperatura a partir de 50 a 100°C. (XIV) pode ser em seguida convertido em (III) reagindo-se (XIV) como um sal de nitrito na presença de agente de fluora- ção em um método análogo àquele descrito no processo (a) aqui acima. Compostos de Fórmula (XM) podem ser peraparados por métodos de acordo ou análogos àqueles descritos no W003/059893.

Compostos de Fórmula (IV) onde R10 é flúor e R11 é hidrogênio podem ser preparados como descrito no Esquema 4.

Esquema 4

<formula>formula see original document page 10</formula>

De acordo com o Esquema 4, o composto (XV) é convertido em (XVI) reagindo-se (XV) com acetonilacetona na presença de ácido para- toluenossulfônico em um solvente adequado tal como tolueno em uma tem- peratura a partir de 80 a 110°C. (XVI) é em seguida convertido em (XVII) por reação por (XVI) com fluoreto de potássio na presença de 18-coroa-6 em um solvente adequado tal como éter de 2-metoxietila em uma temperatura a partir de 100 a 130°C. O tratamento de (XVII) com ácido clorídrico em água e um solvente adequado tal como dioxano em uma temperatura a partir de 40 a 60°C produziu (XVIII), que é convertido em um composto de Fórmula (IV), onde R10 é flúor e R11 é hidrogênio, reagindo-se (XVIII) com metóxido de sódio em metanol em uma temperatura a partir de 0 a 30 ºC. Compostos de Fórmula (IV) onde R11 é flúor e R10 é hidrogênio podem ser preparados por química análoga.

Compostos intermediários de Fórmula (IV) não foram previamen- te preparados. Conseqüentemente, em um outro aspecto a presente inven- ção também fornece um composto de Fórmula (IV),

<formula>formula see original document page 11</formula>

onde R3 é metóxi; um de R-10 e R11 é flúor e o outro de R10 e R" é hidrogênio. Em uma modalidade da invenção R10 é flúor e R" é hidrogênio. Em outra modalidade da invenção de R11 é flúor e Rl0 é hidrogênio.

Compostos de Fórmula (V) são conhecidos na literatura ou po- dem ser preparados por métodos conhecidos.

Compostos de Fórmula (VI) podem, por exemplo, ser prepara- dos por métodos análogos àqueles descritos aqui acima para a formação de compostos de Fórmula (I).

Será apreciado por aqueles versados na técnica que nos proces- sos da presente invenção, certos grupos funcionais tais como grupos hidroxi- la, carboxila ou amino nos reagentes de partida ou compostos intermediários podem necessitar ser protegidos por grupos de proteção. Desse modo, a pre- paração dos compostos de Fórmula (I) pode envolver em um certo estágio a adição/remoção de um ou mais grupos de proteção. A proteção e desproteção de grupos funcionais são descritas em 'Protective Groups in Organic Synthe- sis", 2a edição, T.W. Greene e P.G.M. Wuts, Wiley-Interscience (1991) e 'Pro- tecting Groups', P.J. Kocienski, Georg Thieme Verlag (1994).

Os compostos da invenção, ou sais farmaceuticamente aceitá- veis destes, têm atividade como farmacêuticos, em particular como moduladores de atividade de receptor de quimiocina (especialmente CCR4). Doenças e condições que podem ser tratadas com os compostos incluem:

1. trato respiratório: doenças obstrutivas das vias aéreas incluin- do: asma, incluindo asma brônquica, alérgica, intrísica, extrínsica, induzida por exercício, induzida por fármaco (incluindo induzida por aspirina e NSAID) e induzida por poeira, tanto intermitente quanto persistente e de todas as gravi- dades, e outras causas de hipersensibilidade das vias aéreas; doença pulmo- nar obstrutiva crônica (COPD); bronquite, incluindo bronquite infecciosa e eo- sinófila; enfisema; bronquiectasia; fibrose cística; sarcoidose; pulmão de fa- zendeiro e doenças relacionadas; pneumonite por hipersensibilidade; fibrose pulmonar, incluindo alveolite fibrosante critptônico, pneumonias intersticais idiopáticas, terapia antineoplásica de complicação de fibrose e infecção crôni- ca, incluindo tuberculose e aspergilose e outras infecções fúngicas; complica- ções de transplante de pulmão; distúrbios vasculíticos e trombóticos da vascu- Iatura pulmonar, e hipertensão pulmonar; atividade antitussígena incluindo tratamento de tosse crônica associada com condições inflamatórias e secretá- rias das vias aéreas, e tosse iatrogênica; rinite aguda e crônica incluindo rinite medicamentosa, e rinite vasomotora; rinite alérgica perene e sazonal incluindo rinite nervosa (febre do feno); polipose nasal; infecção viral aguda incluindo o resinado comum, e infecção devido ao vírussincicial respiratório, influenza, coronavírus (incluindo SARS) e adenovírus;

2. osso e articulações: artrítides associadas com ou incluindo osteoartrite/osteoartrose, tanto primária quanto secundária à, por exemplo, displasia do quadril congênita; espondilite cervical e lombar, e dor do dorso inferior e pescoço; artrite reumatóide e doença de Still; espondiloartropatia soropositivas incluindo espondilite ancilosante, artrite psoriática, artrite reati- va e espondartropatia não diferenciada; artrite séptica e outras artropatias relacionadas com infecção e distúrbios ósseos tal como tuberculose, incluin- do doença de Potts e síndrome de Poncet; sinovite induzida por cristal agu- do e crônico incluindo gota de urato, doença de deposição de pirofosfato de cálcio, e tendão relacionado com apatia de cálcio, inflamação bursal e sino- vial; doença de Behcet; síndrome de Sjogren primária e secundária; esclero- se sistêmica e escleroderma limitada; lúpus eritematoso sistêmico, doença de tecido conectivo misto, e doença de tecido conectivo não diferenciado; miopatias inflamatórias incluindo dermatomiosite e polimiosite; polimalgia reumática; artrite juvenil incluindo artrítides inflamatórias idiopáticas seja qual for a distribuição de articulação e síndromes associadas, e febre reumática e suas complicações sistêmicas; vasculites incluindo arterite celular gigante, arterite de Takayasu, síndrome Churg-Strauss, poliarterite nodosa, poliarteri- te microscópica, e vasculitite associada com infecção viral, reações de hi- persensibilidade, crioglobulinas, e paraproteínas; dor do dorso inferior; febre Mediterrânea familiar, síndrome Muckle-Wells, e Febre Hiberniana Familiar, doença Kikuchi; artalgias induzidas por fármaco, tendonite, e miopatias;

3. dor e remodelagem de tecido conectivo de distúrbios musco- esqueietais devido à lesão [por exemplo, lesão de esportes] ou doença: artrí- tides (por exemplo, artrite reumatóide, osteoartrite, atropagia de gota ou cris- tal), outras doenças de articulação (tal como degeneração de disco interver- M tebral ou degeneração de articulação temporomandibular), doença de remo- delagem óssea (tal como osteoporose, doença de Paget ou osteonecrose), policondritite, escleroderma, distúrbio de tecido conectivo misto, espondiloar- tropatias ou doença periodontal (tal como periodontite);

4. pele: psoríase, dermatite atópica, dermatite de contato ou ou- tras dematoses eczematosas, e reações de hipersensibilidade do tipo retar- dada; fito- e fotodermatite; dermatite seborréica, dermatite herpetiforme, Ii- quen plano, líquen escleroso e atrófico, pioderma gangrenoso, sarcóide de pele, lúpus eritematoso discóide, pênfigo, penfigóide, epidermólise bulhosa, urticária, angioedema, vasculitides, eritemas tóxicas, eosinofilias cutânea, alopécia em áreas, calvície-padrão masculina, síndrome de Sweet, síndrome Weber-Christian, eritema multiforme; celulite, tanto infecciosa quanto não infecciosa; paniculite; Iinfomas cutâneos, câncer de pele de não melanona e outras lesões displásicas; distúrbios induzidos por fármaco incluindo erup- ções de fármaco fixas;

5. olhos: blefarite; conjuntivite, incluindo conjuntivite alérgica pe- rene e vernal; irite; uveíte anterior e posterior; coroidite; auto-imune; distúrbios degenerativos ou inflamatórios atentando a retina; oftalmite incluindo oftalmite simpática; sarcoidose; infecções incluindo virais, fúngicas, e bacterianas;

6. trato gastrointestinal·, glossite, gengivite, periodontite; oesofagite, incluindo refluxo; gastro-enterite eosinofílico, mastocitose, doença de Crohn, colite incluindo colite ulcerativa, proctite, prurido anal; doença celíaca, síndrome do intestino irritável, e alergias relacionadas a alimentos que podem ter efeitos remotos a partir do intestino (por exemplo, hemicrânia, rinite ou eczema);

7. abdominal·, hepatite, incluindo auto-imune, alcóolica e viral; fi- brose e cirrose do fígado; colecistite; pancreatite, tanto aguda quanto crônica;

8. genitourinária: nefrite incluindo intersticial e glomerulonefrite; síndrome nefrótica; cistite incluindo cistite aguda e crônica (intersticial) e úl- cera de Hunner; uretrite aguda e crônica, prostatite, epididimite, ooforite e salpingite; vulvo-vaginite; doença de Peyronie; disfunção eréctil (tanto de homem quanto de mulher);

9. rejeição a aloenxerto: aguda e crônica seguindo, por exemplo, transplante de rim, coração, fígado, pulmão, medula óssea, pele ou córnea ou seguindo tranfusão de sangue; ou doença do enxerto crônica versus hos- pedeiro;

10. CNSm. doença de Alzheimer e outros distúrbios de demência incluindo CJD e nvCJD; amiloidose; esclerose múltipla e outras síndromes desmielinizantes; ateroesclerose cerebral e vasculite; arterite temporal; mias- tenia grave; dor aguda e crônica (aguda, intermitente ou persistente se de origem central ou periférica) incluindo dor visceral, cefaléia, hemicrânia, neu- ralgia trigeminal, dor facial atípica, dor óssea e de articulação, dor originan- do-se a partir do câncer e invasão de tumor, síndromes de dores neuropáti- cas incluindo diabéticas, pós-herpéticas, e neuropatias associadas com HIV; neurosarcoidose; complicações de sistema nervoso central e periférico de processos malignos, infecciosos ou auto-imunes;

11. outros distúrbios auto-imunes e alérgicos incluindo tireoidite de Hashimoto, doença de Graves, doença de Addison, diabetes melito, púr- pura trombocitopênica idiopática, fasciíte eosinofílica, síndrome hiper-IgE, síndrome antifosfolípideo;

12. Outros distúrbios com um componente inflamatório ou imu- nológico; incluindo síndrome da deficiência imuno adquirida (AIDS), lepra, síndrome Sezary, e síndromes paraneoplásicas;

13. cardiovascular. ateroesclerose, afetando a circulação corona- riana e periférica; pericardite; miocardite, cardiomiopatias inflamatórias e auto- imunes incluindo sarcóide miocárdica; lesões de reperfusão isquêmica; endo- cardite, valvulite, e aortite incluindo infecciosa (por exemplo, sifilítica); vasculi- tides; distúrbios das veias proximais e periféricas incluindo flebite e trombose, incluindo trombose de via profunda e complicações de veias varicosas;

14. oncologia: tratamento de cânceres comuns incluindo tumores de próstata, mama, pulmão, ovário, pancrêas, intestino e cólon, estômago, pele e cérebro malignidades que afetam a medula óssea (incluindo as Ieu- cemias) e sistemas linfoproliferativos, tais como Iinfoma de Hodgkin e não Hodgkin; incluindo a prevenção e tratamento de doença metástica e recor- rências de tumores, e síndromes paraneoplásicas; e

15. trato gastrointestinal·, doença celíaca, proctite, gastro-enterite eosinopílica, mastocitose, doença de Crohn, colite ulcerativa, colite microscópi- ca, colite indeterminada, distúrbio do intestino irritável, síndrome do intestino irritável, diarréia não inflamatória, alergias relacionadas com alimento que têm efeitos remotos a partir do intestino, por exemplo, hemicrânia, rinite e eczema.

Conseqüentemente, a presente invenção também fornece um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, co- mo anteriormente definido para uso em terapia.

Os compostos da presente invenção podem ser tratados para tratar doenças modulando-se a atividade de uma subfamília de receptor de quimiocina CC, em particular, modulando-se atividade do receptor de CCR4. Condições particulares que podem ser tratadas com o composto da inven- ção são asma, rinite e distúrbios inflamatórios de pele, doenças em que exis- tem níveis de TARC, MDC ou CCR4 aumentados.

Em um outro aspecto, a presente invenção fornece o uso de um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, como anteriormente definido na fabricação de um medicamento para uso em terapia.

Ainda em um outro aspecto, a presente invenção fornece o uso de um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, como anteriormente definido na fabricação de um medicamento para o trata- mento de doenças ou condições humanas em que modulação de atividade de receptor de quimiocina, particularmente atividade de CCR4, é benéfica.

Ainda em um outro aspecto, a presente invenção fornece o uso de um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável des- te, como anteriormente definido na fabricação de um medicamento para o tratamento de doenças ou condições humanas em que modulação do recep- tor de CCR4 é benéfica.

Ainda em um outro aspecto, a presente invenção fornece o uso de um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável des- te, como anteriormente definido na fabricação de um medicamento para o tratamento de asma.

Ainda em um outro aspecto, a presente invenção fornece o uso de um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável des- te, como anteriormente definido na fabricação de um medicamento para o tratamento de doença pulmonar obstrutiva crônica.

No contexto do presente relatório descritivo, o termo "terapia" também inclui "profiíaxia" a menos que existam indicações específicas ao contrário. Os termos "terapêutico" e "terapeuticamente" devem ser conse- qüentemente construídos.

A invenção, todavia também fornece um método de tratamento de uma doença mediada por quimiocina onde a quimiocina liga-se a um re- ceptor de quimiocina (especialmente CCR4), que compreende administrar a um paciente uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, como anterior- mente definido.

A invenção, todavia também fornece método de tratamento de uma doença mediada pelo receptor de CCR4, que compreende administrar a um paciente uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, como anterior- mente definido.

A invenção também fornece um método de tratamento de uma doença respiratória, tal como asma e rinite, especialmente asma, em um paciente sofrendo de, ou um risco de, referida doença, que compreende ad- ministrar ao paciente uma quantidade terapeuticamente eficaz de um com- posto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, como anteriormente definido.

Para os usos terapêuticos acima mencionados a dosagem ad- ministrada, evidentemente, variará com o composto empregado, o modo de administração, o tratamento desejado e o distúrbio indicado.

O composto de Fórmula (I) e sais farmaceuticamente aceitáveis deste podem ser usados sozinhos, porém, geralmente serão administrados na forma de uma composição farmacêutica em que o composto/sal de Fór- mula (I) (ingrediente ativo) está em associação com um adjuvante, diluente ou veículo farmaceuticamente aceitável. Dependendo do modo de adminis- 1,1 tração, a composição farmacêutica preferivelmente compreenderá de 0,05 a 99% em peso (por cento em peso), mais preferivelmente de 0,05 a 80% em peso, ainda mais preferivelmente de 0,10 a 70% em peso, e ainda mais pre- ferivelmente de 0,10 a 50% em peso, de ingrediente ativo, todas as porcen- tagens em peso sendo baseadas em uma composição total.

A presente invenção também fornece uma composição farma- cêutica compreendendo um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuti- camente aceitável deste, como anteriormente definido, em associação com um adjuvante, diluente ou veículo farmaceuticamente aceitável.

A invenção também fornece um processo para a preparação de uma composição farmacêutica da invenção que compreende misturar um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, co- mo anteriormente definido, com um adjuvante, diluente ou veículo farmaceu- ticamente aceitável.

As composições farmacêuticas podem ser administradas topi- camente (por exemplo, ao pulmão e/ou vias aéreas ou à pele) na forma de soluções, suspensões, aerossóis de heptafluoroalcano e formulações de pó seco; ou sistemicamente, por exemplo, por administração oral na forma de comprimidos, cápsulas, xaropes ou grânulos, ou por administração parente- ral na forma de soluções ou suspensões, ou por administração subcutânea ou por administração retal na forma de supositórios ou transdermicamente. Convenientemente o composto da invenção é administrado oralmente.

A invenção também refere-se à terapias de combinação onde um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, ou uma composição farmacêutica ou formulação compreendendo um composto da invenção, é administrado concorrente ou seqüencialmente ou como pre- paração combinada com outro agente ou agentes terapêuticos, para o tra- tamento de uma ou mais das condições listadas.

Em particular, para o tratamento das doenças inflamatórias tais como (porém, não restritas à) artrite reumatóide, osteoartrite, asma, rinite alérgica, doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD), psoríase, e doença do intestino inflamatória, os compostos da invenção podem ser combinados com agentes listados abaixo.

Agentes antiinflamatórios não esteroidais (a seguir NSAI Ds) in- cluindo inibidores de ciclooxigenase não seletiva COX-1/COX-2 se aplicados topicamente ou sistematicamente (tal como piroxicam, diclofenaco, ácidos propiônicos tais como naproxen, flurbiprofen, fenoprofen, cetoprofen e ibu- profen, fenamatos tais como ácido mefenâmico, indometacina, sulindac, a- zapropazona, pirazolonas tais como fenilbutazona, salicilatos tal como aspi- rina); inibidores de COX-2 seletivos (tais como meloxicam, celecoxib, rofeco- xib, valdecoxib, lumarocoxib, parecoxib e etoricoxib); doadores de oxido ní- trico inibidores de ciclooxigenase (CINODs); glicocorticosteróides (se admi- nistrados por rotinas tópicas, orais, intramusculares, intravenosas, ou intraar- ticulares); metotrexato; leflunomida; hidroxicloroquina; d-penicillamina; aura- nofina ou outras preparações parenterais ou ouro oral; analgésicos; diacere- ína; terapias intraarticulares tais como derivados de ácido hialurônico; e su- plementos nutricionais tais como glicosamina.

A presente invenção, todavia também refere-se à combinação de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, juntamente com uma citocina ou agonista ou antagonista de função de cito- cina, (incluindo agentes que atuam nas séries de reação de sinalização de citocina tal como moduladores do sistema SOCS ) incluindo alfa-, beta-, e gama-interferons; fator de crescimento semelhante à insulina tipo (IGF-1); interleucinas (IL) incluindo IL1 a 17, e inibidores ou antagonistas de interleu- cina tal como anacinra; inibidores de fator alfa de necrose de tumor (TNF-a) tais como anticorpos monoclonais anti-TNF (por exemplo infliximab; adali- mumab, e CDP-870) e antagonistas de receptor de TNF incluindo moléculas de imunoglobulina (tal como etanercept) e agentes de baixo peso molecular tal como pentoxifilina.

Além disso, a invenção refere-se a uma combinação de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, com um anticorpo monoclonal alvejando B-Linfócitos (tal como CD20 (rituximab), MRA-alLI6R e T-Linfócitos, CTLA4-lg, HuMax 11-15).

A presente invenção, todavia também refere-se à combinação de M um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, com um modulador de função de receptor de quimiocina tal como um antagonista de CCR1, CCR2, CCR2A, CCR2B, CCR3, CCR5, CCR6, CCR7, CCR8, Ο- CR9, CCR10 e CCR11 (para a família C-C); CXCR1, CXCR2, CXCR3, CX- CR4 e CXCR5 (para a família C-X-C) e CX3CRI para a família C-X3-C.

A presente invenção também refere-se à combinação de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, com um inibidor de metaloprotease matriz (MMPs), isto é, as estromelisinas, as colagenases, e as gelatinases, bem como agrecanase; especialmente cola- genase-1 (MMP-1), colagenase-2 (MMP-8), colagenase-3 (MMP-13), estro- melisina-1 (MMP-3), estromelisina-2 (MMP-10), e estromelisina-3 (MMP-11) e MMP-9 e MMP-12, incluindo agentes tal como doxiciclina.

A presente invenção, todavia também refere-se à combinação de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, e um inibidor de biossíntese de leucotrieno, inibidor de 5-lipoxigenase (5-LO) ou antagonista de proteína de ativação de 5-lipoxigenase (FLAP) tal como; zileuton; ABT-761; fenleuton; tepoxalin; Abbott-79175; Abbott-85761; uma N- (5-substituída-tiofeno-2-alquilsulfonamida; 2,6-di-terc-butilfenolhidrazonas; um metoxitetraidropirano tal como Zeneca ZD-2138; o composto SB-210661; um composto de 2-cianonaftaleno substituído por a piridinila tal como L- 739,010; um composto de 2-cianoquinolina tal como L-746,530; ou um com- posto de indol ou quinolina tal como MK-591, MK-886, e BAY x 1005.

A presente invenção também refere-se à combinação de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, e um antagonista de receptor para leucotrienos (LT) B4, LTC4, LTD4, e LTE4 se- lecionado do grupo consistindo em fenoltiazin-3-1s tal como L-651,392; compostos de amidino tais como CGS-25019c; benzoxalaminas tais como ontazolast; benzenocarboximidamidas tais como BIIL 284/260; e compostos tais como zafirlukast, ablukast, montelukast, pranlukast, verlukast (MK-679), RG-12525, Ro-245913, iralukast (CGP 45715A), e BAY x 7195.

A presente invenção, todavia também refere-se à combinação de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, e um inibidor de fosfodiesterase (PDE) tal como uma metilxantanina incluindo teofilina e aminofilina; um inibidor de isoenzima de PDE seletivo incluindo um inibidor de PDE4 um inibidor da isoforma PDE4D, ou um inibidor de PDE5.

A presente invenção também refere-se à combinação de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, e um antagonista de receptor de histamina tipo 1 tal como cetirizina, loratadina, desloratadina, fexofenadina, acrivastina, terfenadina, astemizol, azelastina, levocabastina, clorfeniramina, prometazina, ciclizina, ou mizolastina; aplica- da oral, tópica ou parenteralmente.

A presente invenção, todavia também refere-se à combinação de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, e um inibidor de bomba de próton (tal como omeprazol) ou um antagonista de receptor de histamina tipo 2 gastroprotetora.

A presente invenção também refere-se à combinação de ura composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, e um antagonista do receptor de histamina tipo 4.

A presente invenção, todavia também refere-se à combinação de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, e agente simpatomimético vasoconstritor agonista de adrenoreceptor alfa- 1/alfa-2, tal como propilexedrina, fenilefrina, fenilpropanolamina, efedrina, pseudoefedrina, cloridrato de nafazolina, cloridrato de oximetazolina, clori- drato de tetraidrozolina, cloridrato de xilometazolina, cloridrato de tramazoli- na ou cloridrato de etilnorepinefrina.

A presente invenção também refere-se à combinação de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, e a- gentes anticolinérgicos incluindo antagonistas de receptor muscarínico (M1, M2, e M3) tal como atropina, hioscina, glicopirrrolato, brometo de ipratrópio, brometo de tiotrópio, brometo de oxitrópio, pirenzepina ou telenzepina.

A presente invenção, todavia também refere-se à combinação de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, e agonista de beta-adrenoceptor (incluindo beta receptor subtipos 1-4) tal como isoprenalina, salbutamol, formoterol, salmeterol, terbutalina, orciprena- 1,1 lina, mesilato de bitolterol, ou pirbuterol, ou um enantiômero quiral destes.

A presente invenção também refere-se à combinação de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, e uma cromona, tal como cromoglicato de sódio ou sódio de nedocromila.

Ã presente invenção, todavia também refere-se à combinação de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, com a glicocorticóide, tal como flunisolida, acetonida de triamcinolona, dipro- pionato de beclometasona, budesonida, propionato de fluticasona, ciclesoni- da ou furoato de mometasona.

A presente invenção também refere-se à combinação de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, com um agente que modula um receptor de hormônio nuclear tal como PPARs.

A presente invenção, todavia também refere-se à combinação de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, juntamente com uma imunoglobulina (Ig) ou preparação de Ig ou um agonis- ta ou anticorpo modulando a função de Ig tal como anti-IgE (por exemplo omalizumab).

A presente invenção também refere-se à combinação de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, e ou- tro agente antiinfamatório aplicado sistêmico ou topicalmente, tal como tali- domida ou um derivado deste, um retinóide, ditranol ou calcipotriol. A presente invenção, todavia também refere-se à combinação de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, e combinações de aminossalicilatos e sulfapiridina tal como sulfasalazina, mesalazina, balsalazida, e olsalazina; e agentes imunomodulatórios tais co- mo as tiopurinas, e corticosteróides tais como budesonida.

A presente invenção também refere-se à combinação de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, junta- mente com um agente antibacteriano tal como um derivado de penicilia, uma tetraciclina, um macrolídeo, um beta-lactama, uma fluoroquinolona, metroni- dazol, um aminoglicosídeo inalado; um agente agente antiviral incluindo aci-- clovir, famciclovir, valaciclovir, ganciclovir, cidofovir, amantadina, rimantadi- na, ribavirin, zanamavir e oseltamavir; um inibidor de protease tal como indi- navir, nelfinavir, ritonavir, e saquinavir; um inibidor de transcriptase reversa de nucleotídeo tal como didanosina, lamivudina, estavudina, zalcitabina ou zidovudina; ou um inibidor de transcriptase reversa de não nucleotídeo tal como nevirapina ou efavirenz.

A presente invenção, todavia também refere-se à combinação de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, e um agente cardiovascular tal como um bloqueador de canal de cálcio, um bloqueador de beta-adrenoceptor , um inibidor de enzima conversora de an- giotensina (ACE), um antagonista de receptor de angiotensina-2; um agente de diminuição de lipídeo tal como uma estatina ou um fibrato; um modulador de morfologia de célual sangüínea tal como pentoxifillina; trombolítica, ou um anticoagulante tal como um inibidor de agregação de plaquetas.

A presente invenção também refere-se à combinação de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, e um agente de CNS tal como um antidepressivo (tal como sertralina), um fármaco anti-Parkinsoninano (tal como deprenil, L-dopa, ropinirol, pramipexol, um inibidor de MAOB tal como selegina e rasagilina, um inibidor de comP tal como tasmar, um inibidor de A-2, um inibidor de recaptação dopamina, um antagonista de NMDA, um agonista de nicotina, um agonista de dopamina ou um inibidor de sintase de oxido nítrico), ou um fármaco de anti-Alzheimer tal como donepezil, rivastigmina, tacrina, um inibidor de COX-2, propentofilli- na ou metrifonato.

A presente invenção, todavia também refere-se à combinação de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, e um agente para o tratamento de dor aguda ou crônica, tal como um anal- gésico agindo central ou perifericamente (por exemplo, um opióide ou deri- vado deste), carbamazepina, fenitoína, valproato de sódio, amitriptilina ou outros agentes antidepressivos, paracetamol, ou um agente antiinflamatórios não esteroidais.

A presente invenção também refere-se à combinação de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, junta- 1,1 mente com um agente analgésico local aplicado parenteral ou topicamente (incluindo inalado) tal como lignocaína ou um derivado deste.

Um composto da presente invenção, ou um sal farmaceutica- mente aceitável deste, pode ser usado em combinação com um agente anti- osfeoporose incluindo um agente hormonal taf como raloxifeno, ou a bifosfo- nato tal como alendronato.

A presente invenção, todavia também refere-se à combinação de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, juntamente com um: (i) inibidor de triptase; (ii) antagonista de fator de ativa- ção de plaquetas (PAF); (iii) inibidor de enzima conversora de interleucina (ICE); (iv) inibição de IMPDH; (v) inibidores de molécula de adesão incluindo antagonista de VLA-4; (vi) catepsina; (vii) inibidor de cinase tal como um ini- bidor de tirosina cinase (tal como Btk, Itk, Jak3 ou MAP, por exemplo Gefiti- nib ou Imatinib mesilato), uma serina/treonina cinase (tal como um inibidor de uma MAP cinase tal como p38, JNK, proteína cinase A, B ou C, ou IKK), ou uma cinase envolvida em regulação de ciclo celular (tal como uma cinase dependente de ciclina); (viii) inibidor de desidrogenase de fostato de glicose- 6; (ix) antagonista de receptor de cinina-B1. - ou B2. -; (x) agente antigota, por exemplo, colcicina; (xi) inibidor de xantina oxidase, por exemplo, alopuri- nol; (xii) agente uricossúrico, por exemplo, probenecida, sulfinpirazona ou benzbromarona; (xiii) secretagogo de hormônio de desenvolvimento; (xiv) fator de desenvolvimento de transformação (TGFP); (xv) fator de desenvol- vimento derivado de plaqueta (PDGF); (xvi) fator de desenvolvimento de fi- broblasto, por exemplo, fator de desenvolvimento de fibroblasto básico (bFGF); (xvii) fator de estimulação de colônia de granulócito-macrófago (GM- CSF); (xviii) creme de capsaicina; (xix) antagonista de receptor de taquicini- na NK1 ou NK3 tal como NKP-608C, SB-233412 (talnetant) ou D-4418; (xx) inibidor de elastase tal como UT-77 ou ZD-0892; (xxi) inibidor de enzima conversora de TNF-alfa (TACE); (xxii) inibidor de sintase de oxido nítrico in- duzido (iNOS); (xxiii) moléculas homólogas de receptor quimioatraente ex- pressa em células TH2, (tal como um antagonista de CRTH2); (xxiv) inibidor de P38; (xxv) agente modulando a função de receptores semelhantes a do- bre de sino (TLR), (xxvi) agente modulando a atividade de receptores puri- nérgicos tal como P2X7; ou (xxvii) inibidor de ativação de fator de transcrip- ção tal como NFkB, API, ou STATS.

Um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente acei- tável deste, pode também ser usado em combinação com um agente tera- pêutico existente para o tratamento de câncer, por exemplo, agentes ade- quados incluem:

(i) um fármaco antiproliferativo/antineoplásico ou uma combinação destes, como usado em oncologia médica, tal como um agente de alquilação (por exemplo, cis-platina, carboplatina, ciclofosfamida, mostarda de nitrogênio, melfalan, clorambucil, busulfan ou uma nitrossouréia); um antimetabolito (por exemplo, um antifolato tal como a 5-fluorouracila semelhante à fluoropirimidina ou tegafur, raltitrexed, metotrexato, citosina arabinosídeo, hidroxiuréia, genci- tabina ou paclitaxel); um antibiótico antitumor (por exemplo, uma antraciclina tal como adriamicina, bleomicina, doxorrubicina, daunomicina, epirrubicina, idarrubicina, mitomicin-C, dactinomicina ou mitramicina); um agente antimitóti- co (por exemplo, um alcalóide vinca tal como vincristina, vinblastina, vindesina ou vinorelbina, ou um taxóide tal como taxol ou taxotero); ou um inibidor de topoisomerase (por exemplo, uma epipodofillotoxina tal como etoposídeo, te- niposídeo, ansacrina, topotecana ou a camptotecina);

(ii) um agente citostático tal como um antioestrogênio (por exem- pio, tamoxifeno, toremifeno, raloxifeno, droloxifeno ou iodoxifeno), um sub- regulador de receptor de estrogênio (por exemplo, fulvestrant), um antiandro- gênio (por exemplo, acetato de ciproterona, bicalutamida, flutamida, ou nilu- tamida), um antagonista de LHRH ou agonista de LHRH (por exemplo, gose- relina, Ieuprorelina ou buserelina), um progestogênio (por exemplo, acetato de megestrol), um inibidor de aromatase (por exemplo, como anastrozol, letrozol, vorazol ou exemestane) ou um inibidor de 5oc-reductase tal como finasterida;

(iii) um agente que inibe a invasão celular de câncer (por exem- plo, um inibidor de Ioproteinase de metal como marimastat ou um inibidor de função de receptor ativador de plasminogênio de urocinase);

(iv) um inibidor de função de fator de desenvolvimento, por exem- pio: um anticorpo de fator de desenvolvimento (por exemplo, o anticorpo an- ti-erbb2 trastuzumab, ou o anticorpo anti-erbbl cetuximab [C225]), um inibidor de farnesila transferase, um inibidor de tirosina cinase ou um inibidor de seri- na/treonina cinase, um inibidor da família de fator de desenvolvimento epi- dérmico (por exemplo, um inibidor de tirosina cinase de família EGFR tal co- mo N-(3-cloro-4-fluorofenil)-7-metóxi-6-(3-morfolinopropóxi)quinazolin-4-amina (gefitinib, AZD1839), N-(3-etinilfenil)-6,7-bis(2-metoxietóxi)quinazolin-4-amina (erlotinib, OSI-774) ou 6-acrilamido-N-(3-cloro-4-fluorofenil)-7-(3-morfolinopro- póxi)quinazolin-4-amina (Cl 1033)), um inibidor da família de fator de desen- volvimento derivado de plaqueta, ou um inibidor da família de fator de desen- volvimento de hepatócito;

(v) um agente antiangiogênico tal como aquele que inibe os efei- tos de fator de desenvolvimento endotelial vascular (por exemplo, o anticor- po de fator de desenvolvimento celular endotelial antivascular bevacizumab, um composto descrito no WO 97/22596, WO 97/30035, WO 97/32856 ou WO 98/13354), ou um composto que trabalha por outro mecanismo (por e- xemplo, linomida, um inibidor de função de ανβ3 ou uma angiostatina);

(vi) um agente de lesão vascular tal como combretastatin A4, ou um composto descrito no WO 99/02166, WO 00/40529, WO 00/41669, WO 01/92224, WO 02/04434 ou WO 02/08213;

(vii) um agente usado na terapia anti-sentido, por exemplo, a- quele direcionado a um dos alvos acima listados, tal como ISIS 2503, um anti-sentido anti-ras;

(viii) um agente usado em um método de terapia de gene, por exemplo, métodos para substituir genes aberrantes tais como p53 aberrante ou BRCA1 ou BRCA2, GDEPT aberrante (terapia de pró-fármaco direciona- da ao gene) métodos tais como aqueles que empregam a citosina, timidina cinase ou uma enzima de nitroreductase bacteriana e métods para aumentar a tolerância do paciente à quimioterapia ou radioterapia tal como terapia de gene resistente à múltiplos fármacos; ou

(ix) um agente usado em um método imunoterapêutico, por e- xemplo, métodos ex-vivo e in-vivo para aumentar a imunogenicidade de célu- las de tumor de paciente, tal como transfecção com citocinas tal como inter- leucina 2, interleucina 4 ou fator de estimulação de colônia granulócito- macrófago, métodos para diminuir a energia de célula T, métodos que empre- gam as células imunes transfectadas tais como células dendríticas transfecta- das por citocina, métodos que empregam linhagem de células de tumor trans- fectadas por citocina e métodos que empregam anticorpos antiidiotípicos.

A presente invenção será agora explicada por referência aos seguintes exemplos ilustrativos. Nos exemplos, os espectros de RMN foram avaliados em um espectrômetro Varian Unity em uma freqüência de próton de 300 ou 400 MHz. Os espectros de MS foram avaliados em um espectrô- metro Agilent 1100 MSD G1946D ou um espectrômetro Hewlett Packard HP1100 MSD G1946A. Separações por HPLC preparativa foram realizadas usando uma coluna Waters Symmetry® ou Xterra® usando 0,1% de ácido trifluoroacético aquoso: acetonitrila, 0,1% de amônia aquosa: acetonitrila ou 0,1% de acetato de amônia: acetonitrila como o eluente.

Exemplo 1

2-cloro-3-flúor-N-(5-flúor-3-metoxipirazin-2-il)-benzenossulfonamida

<formula>formula see original document page 26</formula> a) 3.5-dibromo-2-(2,5-dimetil-1H-pirrol-1-il)-pirazina

<formula>formula see original document page 27</formula>

3,5-Dibromo-2-pirazinamina (Synthesis, 1990, p659-660) (6,33g), acetilacetona (4,42g) e ácido p-toluenossulfônico (0,4g) em tolueno (100 ml) foi aquecido sob refluxo usando uma armadilha Dean e Stark. Após 2 horas, a mis- tura reacional foi deixada resfriar, evaporada sob pressão reduzida para apro- ximadamente 15 ml. A solução foi diluída com diclorometano e passada através de uma coluna de sílica-gel eluindo com diclorometano. Após evaporação do solvente, o produto cristalizado em repouso. Rendimento 8,00g. m/e 330/332/334 (M+1)

b) 2-(2,5-dimetil-1 H-pirrol-1-il)-3,5-diflúor-pirazina

<formula>formula see original document page 27</formula>

3,5-Dibromo-2-(2,5-dimetil-1H-pirrol-1-il)-pirazina (produto de etapa a) (7,3g), fluoreto de potássio anidroso (4,2g) e 18-coroa-6 (0,2g) em 2-metoxietil éter anidroso (30 ml), sob nitrogênio foram aquecidos a 120°C durante 16 horas. Após resfriar, a mistura foi dividida entre água e dicloro- metano. A solução de diclorometano foi lavada com água e em seguida pas- sada através de uma grande almofada de sílica-gel eluindo com diclorome- tano. O solvente foi evaporado para produzir o produto. Rendimento 4,5g.

1H RMN (D6-DMSO) δ 8,37 (1 Η, dd), 5,96 (2H, s), 2,07 (6H, s).

c) 3.5-diflúor-2-pirazinamina

<formula>formula see original document page 27</formula>

2-(2,5-Dimetil-1H-pirrol-1-il)-3,5-diflúor-pirazina (produto de eta- pa b) (0,4g) em água (6 ml) e HCI em dioxano (20 ml de uma solução a 4M) foram aquecidos a 50°C durante 16 horas. A solução foi em seguida concen- trada para cerca de 8 ml e dividida entre água e acetato de etila. A camada de acetato de etila foi secada (MgSCXt) e evaporada. A purificação foi feita por cromatografia de sílica-gel eluindo com acetato de etila:iso-hexanos 1:3. O solvente foi evaporado para produzir o produto. Rendimento 0,09g. 1H RMN (CDCI3) δ 7.77 (1H1 dd), 4,70 (2H, br s).

d) 5-flúor-3-metóxi-2-pirazinamina

<formula>formula see original document page 28</formula>

3,5-diflúor-2-pirazinamina (produto de etapa c) (0,09g) e metóxi- do de sódio (0,3 ml de uma solução a 25% em metanol) em metanol (2 ml) foram agitados em temperatura ambiente. Após 0,5 hora, a solução foi divi- dida entre acetato de etila e cloreto de amônio aquoso saturado. A camada de acetato de etila foi secada (MgSO4) e evaporada para fornecer o produto. Rendimento 0,06 g.

1H RMN (CDCI3) δ 7.37 (1H, d), 4.65 (2H, br s), 4.00 (3H, s). e) 3-flúor-/V-(5-flúor-3-metoxipirazin-2-il)-benzenossulfonamida

<formula>formula see original document page 28</formula>

Terc-butóxido de potássio (4 ml de solução a 1M em tetraidrofu- rano) foi adicionado gota a gota a uma solução agitada de 5-flúor-3-metóxi- 2-pirazinamina (produto de etapa d) (0,25g) e cloreto de 3-fluorobenze- nossulfonila (0,43g) em tetraidrofurano seco (5 ml) resfriado em um banho de gelo. Após 0,5 hora, a mistura reacional foi saciada com de ácido clorídri- co aquoso a 2M (50 ml). A mistura foi extraída com acetato de etila. A cama- da de acetato de etila foi secada (MgSO4) e evaporada. A purificação foi feita por cromatografia de sílica-gel eluindo com acetato de etila:iso-hexanos 1:3. O solvente foi evaporado para produzir o produto. Rendimento 0,42g.

1H RMN (D6-DMSO) δ 11,27 (1 Η, br s), 7,73-7,90 (3H, m), 7,67- 7,73 (1H, m), 7,50-7,60 (1H, m), 3,92 (3H, s).

f) 2-cloro-3-flúor-yV-(5-flúor-3-metoxipirazin-2-il)-benzenossulfonamida

3-flúor-A/-(5-flúor-3-metoxipirazin-2-il)-benzenossulfonamida (produto de etapa e) (0,19g) em tetraidrofurano seco (3 ml) foi adicionado gota a gota a uma solução agitada de LDA (feita adicionando-se 0,56 ml de BuLi a 2,5M em hexanos para diisopropilamina (0,18g)) em tetraidrofurano seco (7 ml) a -78°C. Após 15 minutos, hexacloroetano (0,6g) em tetraidrofu- rano seco (3 ml) foi adicionado gota a gota. Após 1 hora, o banho de resfri- amento foi removido e a solução deixada aquecer para temperatura ambien- te. A mistura reacional foi dividida entre acetato de etila e de ácido clorídrico aquoso a 2M. A camada orgânica foi evaporada. A purificação foi feita por cromatografia de sílica-gel eluindo com acetato de etila:iso-hexanos 1:3. O solvente foi evaporado para produzir o produto. Rendimento 0,13g.

m/e 336/338 (M+1) -

1H RMN (D6-DMSO) δ 11,54 (1H, br s), 7,91 (1H, dd), 7,7-7,8 (2H, m), 7,61 (1H, dt), 3,90 (3H, s),

13C RMN (D6-DMSO) δ 157,9 (d, J 249 Hz), 154,7 (d, J 248 Hz), 149,4 (d, J 8,8 Hz), 140,4, 134,1 (d, J 3,6 Hz), 128,7 (d, J 8,2 Hz), 126,7 (d, J 3,2 Hz), 121,0 (d, J 21,8 Hz), 118,1 (d, J 38,3), 117,8 (d, 20,4 Hz), 54,7.

Exemplo 2

2,3-dicloro-N-(5-flúor-3-metoxipirazin-2-il)-benzenossulfonamida

<formula>formula see original document page 29</formula>

a) 2,3-dicloro-N-(3-metóxi-5-nitropirazin-2-il)-benzenossulfonamida

<formula>formula see original document page 29</formula>

Ácido nítrico fumegante (1,26g) foi adicionado gota a gota a uma suspensão agitada de 2,3-dicloro-N-(3-metoxipirazin-2-il)-benzenossulfona- mida (W02003059893, exemplo 30) (4,5g) em ácido acético (45 ml) em temperatura ambiente. A reação foi cuidadosamente aquecida para 75°C. Após 1 hora, a mistura reacional foi deixada resfriar e o produto cristalino branco foi coletado por filtragem. Rendimento 3,94g.

1H RMN (D6-DMSO) δ 8,53 (1H, s), 8,16 (1H, d), 7,95 (1H, d), 7,61 (1H,t) 4,02 (3H,s).

b) N-(5-amino-3-metoxipirazin-2-il)-2,3-dicloro-benzenossulfonamida

<formula>formula see original document page 30</formula>

2,3-dicloro-N-(3-metóxi-5-nitropirazin-2-il)-benzenossulfonamida (produto de etapa 2a) (4g) e paládio sobre carvão vegetal a 5% (pasta John- son Matthey tipo 440) (0,8g) em ácido acético (40 ml) foram aquecidos a 60°C sob uma atmosfera de hidrogênio (0,1 Mpa) (1 bar) até que a captação de hidrogênio cessar (16 horas). Após resfriar para temperatura ambiente o produto precipitado e catalisador de paládio foi coletado por filtragem e lava- do com um pouco de ácido acético. O sólido foi suspenso em tetraidrofurano (500 ml) e agitado durante 1 hora. O catalisador de paládio foi removido por filtragem através de celita. A solução de tetraidrofurano foi evaporada até secura e tolueno adicionado ao sólido e evaporado sob pressão reduzida para fornecer um sólido marrom-claro. Rendimento: 2,6g

1H RMN (D6-DMSO) δ 10,04 (1H, s), 7,91-7,88 (2H, m), 7,50 (1H, t), 7,08 (1H, s), 6,43 (2H, br s), 3,59 (3H, s).

c) 2,3-dicloro-/S/-(5-flúor-3-metoxipirazin-2-il)-benzenossulfonamida

Nitrito de sódio (0,44g) foi adicionado em porções a uma solução agitada de

N-(5-amino-3-metoxipirazin-2-il)-2,3-dicloro-benzenossulfonami- da (produto de etapa 2b) (2g) em acetontrilo (10 ml) e 48% de HBF4 aquoso (25 ml) resfriado em um banho de gelo. Após 1 hora, a mistura reacional foi despejada em água (250 ml) e extraída com acetato de etila. A solução de acetato de etila foi evaporada até a secura e o produto purificado por croma- tografia de sílica-gel eluindo com acetato de etila:iso-hexanos 1:4. O solven- te foi evaporado para produzir o produto. Rendimento 0,4g. m/e 350/352/354 (M-1)

1H RMN (D6-DMSO) δ 8,05 (1H, dd), 7,95 (1H, dd), 7,73 (1H, d), 7,59 (1H, t), 3,90 (3H, s) 13C RMN (D6-DMSO) δ 154,2 (d, J 256 Hz), 149,0 (d, J 7,9 Hz), 140,3, 134,1, 133,6, 133,2, 129,4, 128,1, 127,9, 117,5 (d, J 37,5 Hz), 54,2. Exemplo 3

2,3-dicloro-N-(6-flúor-3-metoxipirazin-2-il)-benzenossulfonamida

<formula>formula see original document page 31</formula>

a) N-(5-Bromo-3-metóxi-6-nitropirazin-2-il)-2,3-dicloro-benzenossulfonamida

<formula>formula see original document page 31</formula>

Tetrafluoroborato de nitrônio (7,5g) foi adicionado em porções durante cerca de 15 minutos a uma suspensão agitada de N-(5-bromo-3- metoxipirazin-2-il)-2,3-dicloro-benzenossulfonamida (W02003059893, exem- plo 8) (10,Og) em acetonitrila (100 ml). Após 2 horas, mais tetrafluoroborato de nitrônio (0,75g) foi adicionado. Após mais 1 hora, a mistura reacional foi despejada em gelo/água e extraída com diclorometano. Os extratos foram secados (MgSO4) e evaporados. A purificação foi feita por cromatografia de sílica-gel eluindo com acetato de etila;iso-hexanos 1:1. O solvente foi evapo- rado para produzir o produto. Rendimento 8,4g.

1H RMN (CDCI3) δ 8,36 (1H, m), 7,74 (1H, m), 7,49 (1H, t), 4,18 (3H,s).

b) N-(6-Amino-5-bromo-3-metoxipirazin-2-il)-2,3-dicloro-benzenossulfonamida

<formula>formula see original document page 31</formula>

N-(5-Bromo-3-metóxi-6-nitropirazin-2-il)-2,3-dicloro-benzenos- sulfonamida (produto de etapa 3a) (7,4g) em acetato de etila (100 ml) e áci- do acético (50 ml) contendo paládio sobre carvão vegetal a 5% (pasta John- son Matthey tipo 39) (3,2g) foram colocados sob hidrogênio 0,1 mpa (1 bar) com agitação vigorosa. Após 3 horas, a mistura reacional foi filtrada através de uma almofada de celita e evaporada. Rendimento 6,5g.

m/e 427/429 (M+1)

c) N-(5-Bromo-6-flúor-3-metoxipirazin-2-in-2.3-dicloro-benzenossulfonamida

<formula>formula see original document page 32</formula>

Nitrito de sódio (2,4g) foi adicionado em porções durante cerca de 20 minutos a uma solução agitada de N-(6-Amino-5-bromo-3-metoxipira- zin-2-il)-2,3-dicloro-benzenossulfonamida (produto de etapa 3b) (7,4g) em fluoreto de hidrogênio-piridina (poli(hidrogênio fluoreto de piridínio)) (30 ml) resfriado para -10°C. Após 0,5 hora, água foi adicionada e a solução extraí- da com diclorometano (x2). Os extratos combinados foram lavados com á- gua e em seguida passada através de uma almofada de sílica-gel eluindo com 1,25% de metanol em diclorometano. A purificação foi feita por croma- tografia de sílica-gel eluindo com metanokdiclorometano 1:100. O solvente foi evaporado para produzir o produto. Rendimento 4,1g.

m/e 430/432 (M+1)

d) 2,3-dicloro-/V-(6-flúor-3-metoxipirazin-2-il)-benzenossulfonamida

N-(5-Bromo-6-fiuor-3-metoxipirazin-2-il)-2,3-dicloro-benzenossul- fonamida (produto de etapa 3c) (0,2 g) em acetato de etila (10 ml) e trietila- mina (1 ml) contendo paládio sobre carvão vegetal a 5% (pasta Johnson Matthey tipo 39) (0,4g) foram colocados sob hidrogênio 0,1 mpa (1 bar) com agitação vigorosa. Após 0,5 hora, a mistura reacional foi filtrada através de uma almofada de celita e evaporada. A purificação foi feita por cromatografia de sílica-gel eluindo com acetato de etila:iso-hexanos 1:4. O solvente foi e- vaporado para produzir o produto. Rendimento 0,06g.

m/e 352/354/356 (M+1)

1H RMN (D6-DMSO) δ 8,13 (1H, dd), 7,95 (1H, dd), 7,75 (1H, d), 7,62 (1H, t), 3,91 (3H, s)

13C RMN (D6-DMSO) δ 152,7 (d, J 240,4 Hz), 147,7 (d, J 147,7 Hz), 140,0, 134,9, 134,1 (d, J 10,3Hz), 133,8, 130,6, 128,8, 128,4, 118,9 (d 39 Hz), 54,5.

Exemplo 4

2.3-dicloro-N-[6-flúor-5-(hidroximetil)-3-metoxipirazin-2-il1-benzenossulfona- mida

<formula>formula see original document page 33</formula>

a 5-{[(2,3-diclorofenil)sulfonil1amino)-3-flúor-6-metoxipirazina-2-carboxilato de metila

<formula>formula see original document page 33</formula>

N-(5-Bromo-6-flúor-3-metoxipiraz-2-inil)-2,3-dicloro-benzenossul- fonamida (produto de exemplo 3c) (0,4g) e aduzido de diclorometano de di- cloro[1,1'-bis(difenilfosfino)ferreceno] paládio(ll) (0,06g) em metanol (15 ml) e trietilamina (5 ml) foram aquecidos a 90-100°C sob uma atmosfera de mo- nóxido de carbono 0,6 Mpa (6 bar). Após 3 horas, a reação foi deixada res- friar e a solução evaporada. O resíduo foi dividido entre acetato de etila e ácido cioríarico aquoso a 2M. A camada aquosa foi extraída com acetato de etila e os extratos combinados secados (MgSO4) e evaporados. A purifica- ção foi feita por cromatografia de sílica-gel eluindo com acetato de etila. O solvente foi evaporado para produzir o produto. Rendimento 0,25 g. m/e 410/412 (M+1)

b) 2.3-dicloro-N-[6-flúor-5-(hidroximetil)-3-metoxipirazin-2-il]-benzenossulfo- namida

<formula>formula see original document page 33</formula>

Trietilboroidreto de Iftio (Superhidreto, 2 ml de solução de tetraidro- furano a 1M) foi adicionado durante 1 minuto a uma solução agitada de 5-{[(2,3- diclorofenil)sulfonil]amino}-3-flúor-6-metoxipirazina-2-carboxilato de metila (pro- duto de etapa 4a) (0,17g) em tetraidrofurano seco (5 ml) resfriado em um banho de gelo. Após 20 minutos, a mistura reacional foi dividida entre acetato de etila e ácido cítrico aquoso saturado. O extrato de acetato de etila combinado foi lavado com água, secado (MgSO4) e evaporado. A purificação foi feita por cro- matografia de sílica-gel eluindo com acetato de etila:iso-hexanos 1:1. O solven- te foi evaporado para produzir o produto. Rendimento: 0,035g.

m/e 382/384/386 (M+1).

1H RMN (D6-DMSO) 8,11 (1H, dd), 7,95 (1H, dd), 7,61 (1H, t), 4,37 (2H, s) 3,91 (3H, s)

13C RMN (D6-DMS0) δ 150,1 (d, J 241,1 Hz), 147,1 (d, J 2 Hz), 140,0, 134,9, 133,8, 132,8 (d, J 10,1 Hz), 130,9 (d, J 30,4 Hz), 130,6, 128,7, 128,4,58,2,54,5

Exemplo 5

3-cloro-2-flúor-N-(5-flúor-3-metoxipirazin-2-il)-benzenossulfonamida

<formula>formula see original document page 34</formula>

a) 3-cloro-2-flúor-N-(3-metoxipirazin-2-il)-benzenossulfonamida

<formula>formula see original document page 34</formula>

Preparado pelo método do exemplo 1 etapa e usando cloreto de 3- cloro-2-fluorobenzenossulfonila (2,5g) e 3-metóxi-2-pirazinamina (1,25g). Após preparação os extratos de acetato de etila combinados foram secados (MgSO4) e evaporados para fornecer um sólido marrom-claro. Rendimento: 3,3 g.

m/e 318/320 (M+1)

b) 3-cloro-2-flúor-N-(3-metóxi-5-nitropirazin-2-il)-benzenossulfonamida

<formula>formula see original document page 34</formula>

3-cloro-2-flúor-N-(3-metoxipirazin-2-il)-benzenossulfonamida (produto de etapa 5a) (2,5g) foi adicionado a tetrafluoroborato de nitrônio em sulfolano (50 ml de solução a 0,5M) e a mistura aquecida a 50°C. Após 6 horas, mais tetrafluoroborato de nitrônio em sulfolano e (20 ml) foi adiciona- do. Após mais 3 horas, a mistura foi resfriada e despejada em gelo/água. O óleo resultante foi dissolvido em acetato de etila e separado. Os extratos de acetato de etila combinados foram secados (MgSO4) e evaporados até a secura para fornecer um óleo laranja. A purificação foi feita por cromatogra- fia de sílica-gel eluindo com diclorometano para remover o sulfolano em se- guida acetato de etila para coletar o produto. O produto foi dissolvido em diclorometano e lavado com água para remover o sulfolano residual. A solu- ção orgânica foi secada (MgSO4) e evaporada. Rendimento: 1,2g.

1H RMN (D6-DMSO) δ 8,53 (1H, s), 7,95 (1H, t), 7,88 (1H, t), 7,42 (1H, t), 3,99 (3H, s)

c)N-(5-Amino-3-metoxipirazin-2-il)-3-cloro-2-flúor-benzenossulfonamida

<formula>formula see original document page 35</formula>

3-cloro-2-flúor-N-(3-metóxi-5-nitropirazin-2-il)-benzenossulfona- mida (produto de etapa 5b) (0,8g), pó de ferro (0,8g) e cloreto de amônio (0,8g) em etanol (40 ml) e água (40 ml) foram aquecidos sob refluxo. Após 1 hora, a reação foi deixada resfriar e filtrada através cie" celita, lavando-se bem com metanol. A solução foi evaporada até a secura em seguida dividida entre acetato de etila e água. A camada orgânica foi secada (MgSO4) e eva- porada. A purificação foi feita por cromatografia de sílica-gel eluindo com acetato de etila. O solvente foi evaporado para produzir o produto. Rendi- mento 0,28g.

1H RMN (D6-DMS0) δ 7,87 (1H, t), 7,67 (1H, t), 7,35 (1H, t), 7,11 (1H, s), 6,47 (2H, s), 3,58 (3H, s).

d) 3-cloro-2-flúor-N-(5-flúor-3-metoxipirazin-2-il)-benzenossulfonamida

O composto do título foi preparado usando o método do Exem- plo 2 etapa c usando N-(5-amino-3-metoxipirazin-2-il)-3-cloro-2-flúor-benze- nossulfonamida (produto de etapa 5c) (0,27g). A purificação foi feita por cromatografia de sílica-gel eluindo com acetato de etila: iso-hexanos 1:3. O solvente foi evaporado para produzir o produto. Rendimento: 0,11g. m/e 336/338 (M+1)

1H RMN (D6-DMSO) δ 7,92 (1H, t), 7,86 (1H, t), 7,76 (1H, d), 7,43 (1H, t), 3,90 (3H, s)

13C RMN (D6-DMSO) δ 154,8 (d, J 249 Hz), 153,5 (d, J 258 Hz), 149,7 (d, J 9,1 Hz), 135,4, 133,9 (d, J 3,9 Hz), 130,7 (d, 13,4 Hz), 129,1, 125,5 (d, J 5,0 Hz), 121,1 (d, J 17,2 Hz), 118,1 (d, J 38,3 Hz), 54,7.

Exemplo 6 2,3-dicloro-N-[5-flúor-6-(hidroximetil)-3-metoxipirazin-2-il]-benzenossulfona- mida

<formula>formula see original document page 36</formula>

a) 2,3-dicloro-N-(5-flúor-3-metóxi-6-nitropirazin-2-il)-benzenossulfonamida

<formula>formula see original document page 36</formula>

Tetrafluoroborato de nitrônio (0,4g) foi adicionado em porções a uma suspensão agitada de 2,3-dicloro-N-(5-flúor-3-metoxipirazin-2-il)-benze- nossulfonamida (exemplo 2) (0,5g) em acetonitrila (10 ml). Após 2 horas, a reação foi dividida entre acetato de etila e água. O extrato de acetato de etila foi secado (MgSO4) e evaporado. A purificação foi feita por cromatografia de sílica-gel eluindo com acetato de etila:iso-hexanos 1:1.0 solvente foi evapo- rado para produzir o produto. Rendimento: 0,3 g.

1H RMN (D6-DMSO) δ 8,25 (1 Η, dd), 7,94 (1 Η, dd), 7,61 (1 Η, t), 4,03 (3H, s)

b) N-(6-Amino-5-flúor-3-metoxipirazin-2-il)-2,3-dicloro-benzenossulfonamida

<formula>formula see original document page 36</formula> 2,3-dicloro-N-(5-flúor-3-metóxi-6-nitropirazin-2-il)-benzenossulfo- namida (produto de etapa 6a) (0,95g) em acetato de etila (10 ml) e ácido acético (5 ml) contendo paládio sobre carvão vegetal a 5% (pasta Johnson Matthey tipo 39) (0,3g) foram colocados sob hidrogênio 0,1 Mpa (1 bar) com agitação vigorosa. Após 16 horas, a mistura reacional foi filtrada através de uma almofada de celita e evaporada. Rendimento: 0,75g.

m/s 367/369/371 (M+1)

c)N-(6-Bromo-5-flúor-3-metoxipirazin-2-il)-2,3-dicloro-benzenossulfonamida

<formula>formula see original document page 37</formula>

Nitrito de sódio (0,2g) foi adicionado em porções a uma solução agitada de N-(6-Amino-5-flúor-3-metoxipirazin-2-il)-2,3-dicloro-benzenossul- fonamida (produto de etapa 6b) (0,5g) em acetonitrila (5 ml) e 48% de HBr aquoso (5 ml) resfriado para -10°C. Após 20 minutos, a mistura reacional foi dividida entre diclorometano e água. O extrato orgânico foi secado (MgSO4) e evaporado. A purificação foi feita por cromatografia de sílica-gel eluindo com diclorometano. O solvente foi evaporado para produzir o produto. Ren- dimento: 0,15g. m/s 430/432 (M+1)

d) 6-([(2,3-diclorQfenil)sulfonillamino)-3-flúor-5-metoxipirazina-2-carboxilato de metila

<formula>formula see original document page 37</formula>

N-(6-Bromo-5-flúor-3-metoxipirazin-2-il)-2,3-dicloro-benzenos- sulfonamida (produto de exemplo 6c) (0,14g) e aduzido de diclorometano de dicloro[1,1'-bis(difenilfosfino)ferreceno] paládio(II) (0,2g) em metanol (10 ml) e trietilamina (5 ml) foram aquecidos a 90-100°C sob uma atmosfera de mo- nóxido de carbono 0,6 Mpa (6 bar). Após 16 horas, a reação foi deixada res- friar e a solução evaporada. O resíduo foi dividido entre acetato de etila e ácido clorídrico aquoso a 2M. A camada aquosa foi extraída com acetato de etila e os extratos combinados secados (MgSO4) e evaporados. A purifi- cação foi feita por cromatografia de sílica-gel eluindo com acetato de eti- la:iso-hexanos 1:2. O solvente foi evaporado para produzir o produto. Ren- dimento: 0,1 g. m/e 410/412 (M+1).

e) 2.3-dicloro-/V-r5-flúor-6-(hidroximetil)-3-metoxipirazinin-benzenossulfonamida Trietilboroidreto de lítio (Superhidreto, 1,5 ml de solução a 1M em tetraidrofurano) foi adicionado durante 1 minuto a uma solução agitada de 6-{[(2,3-diclorofenil)sulfonil] amino}-3-flúor-5-metoxipirazina-2-carboxilato de metila (produto de etapa 6d) (0,1 g) em tetraidrofurano seco (2 ml) resfri- ado em um banho de gelo. Após 20 minutos, a mistura reacional foi dividida entre acetato de etila e HCI aquoso a 2M. O extrato de acetato de etila com- binado foi lavado com água, secado (MgSO4) e evaporado. A purificação foi feita por cromatografia de sílica-gel eluindo com acetato de etila:iso-hexanos 2:1. O solvente foi evaporado para produzir o produto. Rendimento: 0,02 g.

m/e 382/384/386 (M+1). 1H RMN (D6-DMSO) δ 11,49 (1H, br s), 8,10 (1H, dd), 7,94 (1H, dd), 7,59 (1H, t), 4,25 (2H, s), 3,85 (3H, s). Exemplo 7

3-cloro-N-(5-flúor-3-metoxipirazin-2-il)-2-metil-benzenossulfonamida

O composto do título foi preparado a partir de cloreto de 3-cloro- 2-metilbenzenossulfonila (0,18g) e 5-flúor-3-metóxi-2-pirazinamina (produto de exemplo 2 etapa d) (0,1g) usando-se o método do Exemplo 1 etapa e. A purificação foi feita por cromatografia de sílica-gel eluindo com acetato de etila:iso-hexanos 1:4. O solvente foi evaporado para produzir o produto.

Rendimento: 0,15 g.

H RMN (D6-DMSO) δ 11,34 (1 Η, br s), 7,95 (1H, d), 7,73 (1H, d), 7,70 (1H, d), 7,43 (1H, t), 3,92 (3H, s), 2,66 (3H, s).

Dados farmacolóqicos

Ensaio de ligação de célula inteira FMAT Células

Células CHO-K1 estavelmente expressando o receptor de CCR4 recombinante humano (Euroscreen; Brussels, Bélgica) foram cultivadas em meio NUT.MIX.F_12(HAM) com glutamax-1, contendo 10% de (volume/volu- me) soro bovino fetal e 400 μg ml'1 de geneticina.

As células foram colhidas a aproximadamente 70% de confluên- cia por tratamento com um tampão de dissociação celular, e semeadas em meio de cultura de 5x103 células/100μl em placas de microtítulo de 96 cavi- dades de base transparente Costar preta. As placas foram incubadas duran- te a noite a 37°C em 5% de CO2 e usadas no dia seguinte. Ensaio

Antes do uso, as placas celulares foram lavadas duas vezes com 100 μl de solução de sal balanceado Hanks (HBSS). A cada cavidade foram em seguida adicionados 65 yl de HBSS, 10 μL de 10% de DMSO em HBSS ± composto do teste e em seguida 25 μί de 2,8 nM FB-MDC (Applied Biosystemsj. Esta sonda fluorescente foi preparada a partir de uma matéria- prima de 10 μΜ em 0,08% (volume/volume) TFA/16% (volume/volume) ace- tonitrila, diluído em HBSS.

Após incubação de duas horas no escuro em temperatura ambi- ente, as places foram analisadas em uma leitora FMAT8100 (Applied Biosys- tems) para avaliar a fluorescência que foi asociada com ligação de FB-MDC às células. A atividade do composto foi determinada como uma pIC50 [- log(concentração de composto que resulta em 50% de inibição)], comparan- do a fluorescência em cavidades de controle e de base.

Avaliação de Ligação de Proteína de Plasma

A extensão de ligação de proteína de plasma foi determinada por meio de diálise de equilíbrio de um composto entre plasma humano e tampão aquoso a 37°C e determinação de uma concentração de composto no plasma e tampão por HPLC-MS/MS.

Método

Células de diálise (corte em peso molecular 5000) foram prepa- radas exangüando-se com água, em seguida por embebimento no tampão de diálise durante um mínimo de 1 hora. O tampão de diálise foi solução sa- lina tamponada isotônica pH 7,4. Soluções de matéria-prima de composto em dimetilsulfóxido foram preparadas em uma concentração de 1 mM. Plasma humano em lago congelado foi obtido de voluntários.

A solução de DMSO de matéria-prima de um composto foi adi- cionada ao plasma em uma taxa de 10 μl de DMSO a cada ml de plasma. Isto forneceu um DMSO de 1% em solução de plasma com cada composto em uma concentração de 10 μΜ.

As células de diálise foram em seguida preparadas e uma metade da célula carregada com 750 μl de tampão de diálise e a outra metade da célu- la com 750 μl de solução de plasma de composto. Uma vez preparadas as cé- lulas foram seladas e imersas em um banho de água a 37°C. Estas células fo- ram em seguida centrifugadas durante um mínimo de 4 horas para equilibrar.

Após equilíbrio 500 μl das amostras de tampão foram removidos e adicionados a frasconetes de HPLC juntamente com 100 μl de plasma (a- mostra em plasma diluído 6 vezes), e 100 μl das amostras de plasma foram removidos e adicionados a frasconetes de HPLC juntamente com 500 μl de tampão de diálise (amostra em plasma diluído 6 vezes).

As amostras foram em seguida analisadas usando HPLC- MS/MS. Uma curva de calibração de quatro pontos foi obtida por diluições das soluções de matéria-prima com plasma diluído 6 vezes em concentra- ções de 0,05 μΜ, 0,15 μΜ, 0,5 μΜ e 2,5 μΜ que foram injetadas nesta or- dem seguida pela amostra de tampão e em seguida a amostra de plasma.

Cálculo

As concentrações de composto nas amostras foram determina- das usando o software MassLynx versão 4.0 (produzido por Waters/Micro- mass) que automaticamente calculou a curva de calibração e a concentra- ção de composto nas células. A ligação de proteína de plasma foi determi- nada a partir da curva de calibração como a percentagem de composto Iiga- do em plasma humano (% de ligação) usando a seguinte equação onde o fator no numerador é responsável pela pequena diluição das amostras a- quosa com plasma e o fator de 6 no denominador serve para corrigir a dilui- ção de 6 vezes das amostras de plasma com tampão;

% de ligação = 100-100

<formula>formula see original document page 41</formula>

Potência de Sangue Total

A potência de sangue total predita é uma medida dos efeitos com- binados de CCR4 e ligação de proteína de plasma, e é calculada pela fórmula: Potência de Sangue Total = CCR4 plC50 + Log ((100-% de Ligação)/100).

Resultados

Tabela 1 mostra a plC50de CCR4 , ligação de proteína de plas- ma (% de ligação) figuras e potência de sangue total predita para os Exemplos 1 -7 de acordo com a presente invenção e compostos comparati- vos de W003/059893. Os compostos comparativos são compostos análogos contendo bromo e contendo cloro exemplificados no W003/059893 (Exem- plo 5, 2,3-dicloro-N-(5-cloro-3-metóxi-2-pirazinil)benzenossulfonamida; e E- xemplo 8, 2,3-dicloro-N-(5-bromo-3-metóxi-2-pirazinil)benzenossulfonamida) e Exemplo 30 (2,3-dicloro-N-(3-metóxi-2-pirazinil)benzenossulfonamida).

Tabela 1

<table>table see original document page 41</column></row><table>

A potência de sangue total dos compostos da presente inven- ção, onde o anel pirazina é substituído com flúor nas posições 5 ou 6, é sig- nificantemente maior do que para os compostos comparativos onde a pirazi- na é substituída com cloro ou bromo. A combinação de potência muito alta e baixa ligação de proteína de plasma ao plasma humano torna os compostos contendo flúor da presente invenção mais eficazes in vivo.

Teste de Metabolito

5-flúor-3-metóxi-2-pirazinamina e 6-flúor-3-metóxi-2-pirazinamina foram testados quanto a mutagenicidade de acordo com o procedimento tes- te de Maron e Ames descrito em Mutation Res. 1983; 113:173-215 usando linhagens LT2 salmonella typhimurium TA98 e XA100. Para ativação meta- bólica, um homogenado de fígado de ratos tratados com Aroclor 1254 (fra- ção pós-mitocondrial (S9) adquiridos de Molecular Toxicology Inc., Boone, Carolina do Norte, Estados unidos da América) foi adicionado às placas de ágar (sem histidina) juntamente com o composto do teste e linhagens testa- doras bacterianas; o sistema de ativação completo empregado foi: tampão de fosfato (0,1 mol/L, pH 7.4): 100 mmol/L; cloreto de magnésio: 8 mmol/L; cloreto de potássio: 33 mmol/L; fosfato de dinucleotídeo de adenina de nico- tinamida: 4 mmol/L; glicose-6-fosfato:5 mmol/L; e homogenado de fígado de rato (fração S9):10% de volume/volume. O número médio de colônias rever- tantes e desvio-padrão de amostra (de placas de controle) foram calculados para cada grupo de teste. Um composto do teste considerado a ser mutagê- nico quando os seguintes critérios foram satisfeitos: i) o número de colônias revertantes em qualquer linhagem aumentada na presença de uma ou mais dose de composto do teste, com ou sem ativação metabólica ii) houve um aumento relacionado com a dose no número de colônias revertantes, e iii) todo o aumento foi reproduzível.

Tanto para 5-flúor-3-metóxi-2-pirazinamina quanto 6-flúor-3-me- tóxi-2-pirazinamina o resultado do teste foi negativo indicando que os com- postos não são mutagênicos nas condições de teste.

Claims

1. Composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente acei- tável do mesmo: <formula>formula see original document page 43</formula> onde R1 é selecionado de metila, cloro e flúor; R2 é selecionado de metila, cloro e flúor; R3 é metóxi; um de R4 e R5 é flúor e o outro de R4 e R5 é selecionado de hidrogênio e hi- droximetila.

2. Composto de acordo com a reivindicação 1, ou um sal farma- ceuticamente aceitável do mesmo, em que R1 é selecionado de cloro e flúor, e R2 é selecionado de cloro e flúor...............................

3. Composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que R4 é flúor e R5 é seleciona- do de hidrogênio e hidroximetila.

4. Composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, em que R5 é flúor e R4 é selecionado de> hidrogênio e hidroximetila.

5. Composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que um de R4 e R5 é flúor e o outro de R4 e R5 é hidrogênio.

6. Composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que um de R4 e R5 é flúor e o outro de R4 e R5 é hidroximetila.

7. Composto de acordo com a reivindicação 1, que é seleciona- do de -2-cloro-3-flúor-N-(5-flúor-3-metoxipirazin-2-il)- benzenossulfonamida, -2,3-dicloro-N-(5-flúor-3-metoxipirazin-2-il)-benzenossulfonamida, -2,3-dicloro-N-(6-flúor-3-metoxipirazin-2-il)-benzenossulfonainida, -2,3-dicloro-N-[6-flúor-5-(hidroximetil)-3-metoxipirazin-2-il]- benzenossulfonamida, -3-cloro-2-flúor-N-(5-flúor-3-metoxipirazin-2-il)- benzenossulfonamida, -2,3-dicloro-N-[5-flúor-6-(hidroximetil)-3-metoxipirazin-2-il]- benzenossulfonamida, -3-cloro-N-(5-flúor-3-metoxipirazin-2-il)-2-metil- benzenossulfonamida ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

8. Composição farmacêutica compreendendo um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, como defini- do em qualquer uma das reivindicações 1 a 7 em associação com um adju- vante, diluente ou veículo farmaceuticamente aceitável.

9. Composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente acei- tável do mesmo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7 para uso em terapia.

10. Uso de um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceutica- mente aceitável do mesmo, como definido em qualquer uma das reivindicações -1 a 7 na fabricação de um medicamento para uso no tratamento de asma.

11. Método de tratamento de uma doença mediada pelo receptor de CCR4, que compreende administrar a um paciente uma quantidade tera- peuticamente eficaz de um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuti- camente aceitável do mesmo, como definido em qualquer uma das reivindi- cações 1 a 7.

12. Método de tratamento de asma em um paciente que está sofrendo com, ou um risco de, a referida doença, que compreende adminis- trar ao paciente uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, como de- finido em qualquer uma das reivindicações 1 a 7.

13. Processo para a preparação de um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, que compreende (a) reagir um composto de Fórmula (II), em que R11 R2 e R3 são como definidos na Fórmula (I) e um de R6 e R7 é hidrogênio e o outro de R6 e R7 é NH2, como um sal de nitrila na presença de um agente de fluoração, <formula>formula see original document page 45</formula> ou (b) reagir um composto de Fórmula (III), em que R1, R2 e R3 são como definidos na Fórmula (I) e um de R8 e R9 é flúor e o outro de R8 e R9 é bromo, com hidrogênio na presença de um catalisador de paládio, <formula>formula see original document page 45</formula> ou (c) em que um de R4 e R5 é hidroximetila, reagir um composto de Fórmula (III) como descrito em (b), com monóxido de carbono na presença de um catalisador de paládio, e subseqüentemente tratando o ácido resul- tante (ou C1-4 alquil éster deste) com um agente de redução adequado, ou (d) em que um de R4 e R5 é flúor e o outro de R4 e R5 é hidrogê- nio, reagir um composto de Fórmula (IV)rem que R3 é como definido na Fórmula (I) e em que um de R10 e R11 é flúor e o outro de R10 e R11 é hidrogê- nio, <formula>formula see original document page 45</formula> com um composto de Fórmula (V), em que R1 e R2 são como definidos na Fórmula (I) <formula>formula see original document page 45</formula> ou (e) em que R2 é flúor e R1 é cloro, reagir um composto de Fór- mula (VI) em que R3, R4 e R5 são como definidos na Fórmula (I), com hexacloroe- tano na presença de uma base de amida de lítio ou alquil lítio, <formula>formula see original document page 46</formula> e opcionalmente após (a), (b), (c), (d) ou (e) realizando um ou mais dos se- guintes: • converter o composto em um outro composto da invenção ou • formar um sal farmaceuticamente aceitável do composto.

14. Composto de Fórmula (IV), <formula>formula see original document page 46</formula> em que R3 é metóxi; um de R10 e R11 é flúor e o outro de R10e R" é hidrogê- nio.