BRPI0620027A2 - inibidores da protease soft e formas pró-soft - Google Patents

Abstract

INIBIDORES DA PROTEASE SOFT E FORMAS PRO-SOFT A invenção fornece compostos e métodos para inibição de proteases. Um aspecto da invenção apresenta inibidores pró-soft que reagem com uma protease de ativação para liberar um grupo inibidor ativo na proximidade de uma protease alvo. Em certas instâncias, os compostos inibem proteasomas e/ou enzimas de clivagem pós-prolina (PPCE), como a dipeptidil peptidase IV. Os compostos da invenção fornecem um melhor índice terapêutico, devido em parte à toxicidade reduzida e/ou especificidade melhorada para a protease alvo.

Description

INIBIDORES DA PROTEASE SOFT E FORMAS PRÓ-SOFT Pedidos Relacionados

Este pedido reivindica o beneficio de prioridade ao Pedido de Patente Provisional dos Estados Unidos, número de série 60/752.017, arquivado em 19 de dezembro de 2005. Antecedentes da Invenção

As proteases são enzimas que clivam proteínas em ligações peptidicas específicas. As proteases podem ser classificadas em quatro classes genéricas: serina, tiol ou cisteinil, ácido ou aspartil, e metaloproteases (Cuypers et al., J. Biol. Chem. 1982, 257, 7086. As proteases são essenciais a uma variedade de atividades biológicas, como a digestão, formação e dissolução de coágulos sangüíneos, reprodução e reação imune a células e organismos estranhos. No entanto, a proteólise aberrante está associada a várias doenças em humanos e outros mamíferos. Conseqüentemente, em geral é benéfico interromper a função de uma ou mais enzimas proteolíticas no curso de tratamento de um paciente.

O sítio da ligação para um substrato peptídico consiste em uma sucessão de "especificidade de subsítios" sobre toda a superfície da enzima. 0 termo "especificidade de subsítio" se refere a uma bolsa ou outro lugar sobre a enzima capaz de interagir com uma porção de um substrato da enzima. Na discussão das interações de peptídeos com proteases, por exemplo, proteinases de serina e cisteína, o presente pedido utiliza a nomenclatura de Schechter and Berger (Biochem. Biophys. Res. Commun. 1967, 27, 157-162). Os resíduos de aminoácidos individuais de um substrato ou inibidor são designados por PI, P2, etc. e os subsítios correspondentes da enzima são designados S1, S2, etc., iniciando com o resíduo carboxi-terminal produzido na reação de clivagem. A ligação clivável do substrato é a ligação amida entre P1-P1' do substrato. Portanto, para um peptídeo Xaal-Xaa2-Xaa3-Xaa4, que é clivado entre os resíduos Xaa3 e Xaa4, o resíduo Xaa3 é referido com o resíduo Pl e se liga ao subsítio Sl da enzima, Xaa2 é referido com o resíduo P2 e se liga ao subsítio S2 da enzima e assim por diante.

A dipeptidil peptidase IV (DPIV ou DPPIV) é uma protease de serina que cliva os dipeptídeos N-terminal a partir de uma cadeia de peptídeos que contenha, preferivelmente, o resíduo prolina na penúltima posição, por exemplo, na posição PI. A DPIV pertence a um grupo de peptidases associadas à membrana celular e, como a maioria das peptidases de superfície celular, é uma proteína integral de membrana tipo II, estando ancorada à membrana do plasma através de sua seqüência de sinal. A DPIV é encontrada em uma variedade de epitélios, endotélios e células e tecidos hematopoiéticos diferenciados de mamíferos, incluindo aqueles de origem Iinfóide nos quais é encontrado especificamente na superfície de células CD4+ T. A DPIV tem sido identificada como o marcador de diferenciação de leucócitos CD26.

Os proteasomas são complexos celulares que abrangem a proteases responsáveis pela maioria da degradação e renovação de proteína intracelular em células eucarióticas, incluindo a degradação proteolítica de proteínas danificadas, oxidadas ou mal dobradas, bem como pelo processamento ou degradação de proteínas reguladoras fundamentais, requeridas para várias funções celulares, tais como a progressão do ciclo celular. Por exemplo, o proteasoma 26S é uma protease multicatalítica que contém em seu núcleo catalítico o proteasoma 20S, um complexo multi- unidade de peso molecular de aproximadamente 700 kDa. Embora sirva a um papel fisiológico essencial, o proteasoma também é responsável pela degradação inapropriada ou acelerada de proteínas que ocorre com resultado ou causa de estados patológicos nos quais os processos celulares normais se tornam desregulados. Um exemplo notável ê o câncer, no qual a degradação desregulada, mediada por proteasoma, de proteínas reguladoras do ciclo celular, incluindo as ciclinas, inibidores da quinase dependente de ciclina, e genes supressores de tumor, resulta em uma mitose acelerada e descontrolada, que promove dessa forma o crescimento e propagação do câncer. (Goldberg et al. Chem. & Biol. 1995, 2, 503-508; Coux et al. Ann. Rev. Biochem., 1996, 65, 801-847; Deshaies, Trends Cell Biol. 1995, 5, 428-434). A inibição da função enzimática do proteasoma é promissora para o impedimento ou enfraquecimento da progressão de doenças em estados como o câncer ou inflamação.

Tem sido mostrado que os inibidores de proteasoma, por exemplo, a lactacistina e seus análogos, bloqueiam o desenvolvimento dos estágios pré-eritrocíticos e eritrocíticos de Plasmodium spp, os parasitas da malária. Durante seus estágios hepáticos e eritrocíticos, o parasita passa por mudanças morfológicas radicais e muitas rodadas de replicação, eventos que provavelmente requerem a atividade do proteasoma. Foi descoberto que a lactacistina modifica covalentemente as treoninas N-terminal catalíticas dos sítios ativos de proteasomas, inibindo a atividade de todos os proteasomas examinados, incluindo aqueles em células de mamíferos, protozoários, e arquebactérias.

(Gantt et al. Antimicrob. Agents Chemother. 1998, 42, 2731- 2738) .

A proteína de ativação de proteoblasto humano (FAPa) é uma molécula de superfície celular de Mr 95.000 identificada originalmente com anticorpo monoclonal (mAb) F19 (Rettig et al. Proc. Natl. Acad. Sei. USA 1988, 85, 3110-3114; Rettig et al. Câncer Res. 1993, 53, 3327-3335). O cDNA da FAPa codifica uma proteína integral de membrana tipo II com um vasto domínio extracelular, segmento trans- membrana e curta cauda citoplasmática (Scanlan et al. Proc. WatI. Acad. Sei. USA 1994, 91, 5657-5661; WO 97/34927). A FAPa mostra uma identidade de seqüência de aminoácidos de 48% para o antígeno de ativação CD26 da célula T, também conhecido como dipeptidil peptidase IV (DPP IV) , uma proteína ligada à membrana com atividade de dipeptidil peptidase (Scanlan et al. ) . A FAPa tem atividade enzimática e é membro da família da protease de serina, com a serina 624 sendo crítica para a função enzimática (WO 97/34927) . Um trabalho usando ensaio de sobreposição de membrana revelou que os dímeros de FAPa são capazes de clivar dipeptídeos de Ala-Pro-7-amino-4-trifluorometil coumarina, Gli-Pro-7-amino-4-trifluorometil coumarina, e Lis-Pro-7-amino-4-trifluorometil coumarina (W0 97/34927).

A FAPa é expressa seletivamente em fibroblastos de estroma reativos de muitos tipos histológicos de cânceres epiteliais humanos, tecidos de granulação de feridas em cicatrização, e células malignas de certos sarcomas de tecidos moles e ósseos. Tecidos adultos normais são geralmente desprovidos de FAPa detectável, mas alguns tecidos mesenquimáticos fetais expressam temporariamente a molécula. Em contraste, a maioria dos tipos comuns de cânceres de epitélio, incluindo mais de 90% dos carcinomas de mama, pulmonares de células não pequenas, e coloretais, contêm fibroblastos de estroma FAPa-reativos (Scanlan et al. ) . Esses fibroblastos FAPa+ acompanham os vasos sangüíneos de tumores recém formados, formando um compartimento celular distinto interposto entre o endotélio capilar do tumor e o aspecto basal de agrupamentos de células epiteliais malignas (Welt et al. J. Clin. Oncol. 1994, 12, 1193-1203). Embora os fibroblastos de estroma FAPa+ são encontrados em carcinomas primários e metásticos, lesões epiteliais benignas e pré-malignas testadas (Welt et al. ) , tais como f ibroademonas da mama e adenomas coloretais, apenas raramente contêm células de estroma FAPa+. Com base no padrão de distribuição restrito da FAPa em tecidos normais e sua expressão uniforme no suporte do estroma em muitos tumores malignos, ensaios clínicos com mAb F19 marcada com 131I têm sido iniciados em pacientes com carcinomas de cólon metásticos (Welt et al.) Sumário da Invenção

Um aspecto da presente invenção apresenta compostos que inibem a protease. Em certas instâncias, o composto é um inibidor pró-soft. O inibidor pró-soft é um agente inativo que é ativado, isto é, clivado por uma "protease de ativação", para liberar um grupo inibidor ativo na proximidade de uma "protease alvo". A identidade da protease de ativação e da protease alvo pode ser a mesma ou diferente. Após a ativação do inibidor pró-soft, o grupo inibidor ativo é submetido à auto-ativação e proto- desboronação. Outro aspecto da presente invenção é que a etapa de proto-desboronação produz ácido bórico inócuo, do qual se espera que produza um perfil de segurança melhorado (menos efeitos colaterais).

A invenção apresenta inibidores para um amplo conjunto de proteases. Por exemplo, o inibidor da invenção pode inibir enzimas de clivagem pós-prolina (PPCE), como a dipeptidil peptidase IV. Em certas instâncias, o inibidor da invenção inibe a atividade do proteasoma. Em outras instâncias, a invenção fornece um inibidor pró-soft que é ativado por uma proteína de ativação de fibroblasto para liberar um composto que inibe o antígeno específico da próstrata (PSA). Em outras instâncias, a invenção fornece um inibidor pró-soft que é ativado pelo antígeno específico da próstrata (PSA) para liberar um composto que inibe a atividade do proteasoma. Em uma certa concretização, a presente invenção apresenta inibidores pró-soft que inibem enzimas de clivagem pós-prolina, como a dipeptidil peptidase IV.

Certos compostos da invenção têm duração estendida. Conseqüentemente, em certas concretizações, o inibidor é selecionado, e a quantidade de inibidor formulada, para fornecer uma dosagem que iniba os níveis séricos de DPP IV em no mínimo 5 0% por no mínimo 4 horas após uma dose simples, e ainda mais preferivelmente por no mínimo 8 horas ou ainda 12 ou 16 horas após a dose simples. Por exemplo, em certas concretizações, a dosagem é selecionada em uma quantidade efetiva para melhorar um ou mais índices aberrantes associados a transtornos do metabolismo da glicose (por exemplo, intolerância à glicose, resistência à insulina, hiperglicemia, hiperinsulinemia e diabetes Tipo I e II) durante um período de 24 horas.

Um outro aspecto da invenção se refere ao um método de tratamento de transtornos e estados de saúde pela administração de um inibidor de protease da invenção. Em certas instâncias, o transtorno é mediado por DPP IV. Em certas instâncias, os inibidores expostos podem ser usados para regular positivamente as atividades de GIP e GLP-1, por exemplo, aumentando a meia-vida desses hormônios ou como parte de um tratamento para regular os níveis e/ou metabolismo de glicose. Em certas instâncias, os inibidores podem ser usados para reduzir a resistência à insulina, tratar a hiperglicemia, hiperinsulinemia, obesidade, hiperlipidemia, hiperlipoproteínemia (tais como quilomicrons, VLDL e LDL) , e/ou regular a gordura corporal e mais geralmente os depósitos de lipídeos. Em certas instâncias, os inibidores da invenção podem ser usados para tratar transtornos do metabolismo, tais como aqueles associados a diabetes, obesidade e arteriosclerose. Embora não aspirando a um vínculo com qualquer teoria particular, observa-se que os compostos da invenção que inibem DPP IV são capazes de melhorar a tolerância à glicose através de mecanismos que envolvem a inibição de DPP IV.

Em outras concretizações, a invenção apresenta um método de administração de um inibidor de DPP IV pró-soft em uma quantidade efetiva para melhorar índices aberrantes associados à obesidade. As células de gordura liberam o hormônio leptina, que viaja no fluxo sangüíneo até o cérebro, no qual, através dos receptores de leptina, estimula a produção de GLP-I. O GLP-1, por sua vez, produz a sensação de saciedade. A teoria principal é que as células gordurosas da maioria das pessoas obesas produzem provavelmente leptina suficiente, mas a leptina não é capaz de se encaixar adequadamente aos receptores de leptina no cérebro, e, portanto não estimula a produção de GLP-I. Assim sendo existe uma grande quantidade de pesquisa no sentido da utilização de preparações de GLP-I como um supressor do apetite. 0 método da invenção apresenta um meio para aumentar a meia-vida de GLP-I, tanto endógena como adicionada ectopicamente, no tratamento de transtornos associados à obesidade.

Os inibidores de DPP IV têm atividades hipoglicêmica e antidiabética, e podem ser usados no tratamento de transtornos marcados pelo metabolismo aberrante da glicose (incluindo armazenamento). Em concretizações particulares, os inibidores da invenção são úteis como agentes insulinotrópicos, ou para potencializar os efeitos insulinotrópicos de moléculas como o GLP-I. Sob esse aspecto, a invenção também fornece métodos para o tratamento e/ou profilaxia de uma variedade de transtornos, incluindo um ou mais de: hiperlipidemia, hiperglicemia, insuficiência de tolerância à glicose, resistência à insulina e complicações diabéticas.

Outro aspecto da invenção apresenta métodos e compostos inibidores pró-soft para alteração da farmacocinética de uma variedade de hormônios polipeptideos diferentes através da inibição da proteólise de um ou mais hormônios peptídeos pela DPP IV ou alguma outra atividade proteolítica. Por exemplo, o metabolismo põs-secretor é um elemento importante na homeostase geral de peptídeos reguladores, e outras enzimas envolvidas nesses processos podem ser alvos apropriados para a intervenção farmacológica pelo método desta invenção. Em certas instâncias, o método exposto pode ser usado para aumentar a meia-vida de outros peptídeos derivados de proglucagon, como a glicentina (correspondente ao PG-1-69), oxintomodulina (PG 33-69), polipeptídio pancreático relacionado à glicentina (GRPP, PG 1-30), peptídeo-2 interveniente (IP-2, PG 111-122 amida), e peptídeo-2 semelhante à glucagon (GLP-2, PG 126-158). O GLP-2, por exemplo, tem sido identificado como um fator responsável pela indução da proliferação do epitélio intestinal. Veja, por exemplo, Drucker et al. Proc. Natl. Acad. Sei. USA 1996, 93, 7911. Os inibidores de DPP IV também podem ser usados como parte de um regime para o tratamento de injúria, inflamação ou ressecção do tecido intestinal, por exemplo, quando o crescimento e reparo aumentado do epitélio da mucosa intestinal é desejável, como no tratamento da doença de Crohn ou Doença Intestinal Inflamatória (IBD).

Outro aspecto da invenção se relaciona ao um método de tratamento de crianças com deficiência de hormônio do crescimento ou para melhorar a nutrição ou alterar a composição corporal (músculo versus gordura) em adultos. O DPP IV tem sido implicado no metabolismo e inativação do fator de liberação do hormônio do crescimento (GHRF). O GHRF é um membro da família de peptídeos homólogos que incluem o glucagon, secretina, peptídeo intestinal vasoativo (VIP), peptídeo histidina isoleucina (PHI), peptídeo ativador da adenilato ciclase pituitária (PACAP) , peptídeo inibidor gástrico (GIP) e helodermina. Kubiak et al. Peptide Res. 1994, 7, 153. O GHRF é secretado pelo hipotálamo, e estimula a liberação do hormônio do crescimento (GH) a partir da pituitária anterior. 0 método exposto também pode ser usado na prática veterinária, por exemplo, para desenvolver uma produção e rendimento mais alto da produção leiteira, gado com pouca gordura.

Os inibidores de DPP IV da invenção podem ser usados para alterar a meia-vida plasmática da secretina, VIP, PHI, PACAP, GIP e/ou helodermina. Em certas instâncias, os inibidores também podem ser usados para alterar a farmacocinética do Peptídeo YY e neuropeptídeo Y, ambos os membros da família de polipeptídios pancreáticos, porque o DPP IV tem sido implicado no processamento daqueles peptídeos de uma maneira que altera a seletividade do receptor. Em outras concretizações, os inibidores de DPP IV podem ser usados para estimular a hematopoiese. Em ainda outras concretizações, os inibidores de DPP IV podem ser usados para inibir o crescimento ou vascularização de célula/tecidos transformados, por exemplo, para inibir a proliferação celular como aquela associada ao crescimento de tumor e metástase, e para inibir a angiogênese em uma massa celular proliferativa anormal. Em ainda outras concretizações, os inibidores de DPP IV expostos podem ser usados para reduzir as respostas imunológicas, por exemplo, como um imunossupressor.

Em ainda outros exemplos, os inibidores de DPP IV, de acordo com a presente invenção, podem ser usados para tratar enfermidades do SNC como derrames, tumores, isquemia, doença de Parkinson, perda de memória, perda de audição, perda de visão, enxaquecas, injúria cerebral, injúria da medula espinhal, doença de Alzheimer e esclerose lateral amiotrófica (que tenha um componente do CNS) . Adicionalmente, os inibidores de DPP IV podem ser usados para tratar transtornos que tenham uma natureza mais periférica, incluindo esclerose múltipla e neuropatia diabética.

Outro aspecto da presente invenção fornece um método para a estimulação de células hematopoiéticas em cultura ou in vivo. Em certas concretizações, os pró-inibidores de DPP IV expostos incluem um grupo local que é substrato para uma protease que é expressa na medulo óssea. Os inibidores de DPP IV da invenção podem ser usados para restaurar ou prevenir uma deficiência no número de células hematopoiéticas em um indivíduo. Tais deficiências podem surgir, por exemplo, de anormalidades genéticas, doença, estresse, quimioterapia, e tratamento por radiação.

Outro aspecto da presente invenção apresenta compostos que inibem a função de proteasoma. Em certas concretizações, os inibidores pró-soft produzem grupos inibidores que são inibidores potentes e altamente seletivos do proteasoma e podem ser empregados para inibir a função do proteasoma. A inibição da função do proteasoma tem várias aplicações terapêuticas e profiláticas práticas. Por exemplo, as concretizações de pró-inibidores de proteasoma podem incluir grupos locais que são substrato para proteases que são expressas em tumores ou outras células que passam por proliferação indesejada, ou expressa no tecido circundante ao tumor ou outras células proliferativas alvo.

Em certas concretizações, os pró-inibidores de proteasoma da presente invenção fornecem um método de redução da taxa de degradação de supressores tumorais. Em outras concretizações, os compostos da presente invenção inibem o crescimento de células de câncer. Em ainda outras concretizações, os compostos da presente invenção podem ser formulados na forma tópica para tratamento de transtornos da pele. Tais pró-inibidores são contemplados como possuidores de aplicação prática importante no tratamento de doenças celulares proliferativas, como câncer, restenose e psoríase.

Breve Descrição dos Desenhos

A Figura 1 representa Ala-boroPro Tioxamida.

A Figura 2 representa o comportamento dependente de pH de Ala-boroPro Tioxamida e Ala-boroPro.

A Figura 3 representa uma comparação do valor IC50 de

Ala-boroPro Tioxamida em relação a DPP IV, DP8, e DP9. Os valores IC50 para a inibição de Ala-boroPro Tioxamida de DPP IV, DP8 e DP9 foram medidos em 5 0 mM de fosfato de sódio em pH 7,8. O inibidor e a enzima foram incubados em várias concentrações do inibidor antes da adição do substrato Ala-Pro-paranitroanalida em uma concentração igual ao Km para cada enzima (20 μΜ para DPP IV e 100 μΜ para DP8 e DP9) . As misturas de reação foram incubadas a 37°C por 30 min. e então a absorbância foi lida em 410 nm.

Os dados foram normalizados à taxa de reação inibida para cada enzima. A Figura 4 representa o K'i de Ala-boroPro Tioxamida em um ensaio que mede a inibição de DPP IV. 0 DPP IV purificado a partir de placenta humana foi incubado com o inibidor em 50 mM HEPES, pH 8,0, 0,14 M NaCl a 23 0C para permitir a ligação completa. O substrato cromogênico Ala- Pro-paranitroanalida foi adicionado ao complexo inibidor de enzima em 5 vezes o valor de Km e a reação ofi monitorada para medir a absorbância em 410 nm por 2 min. A concentração da enzima foi determinada independentemente. A Taxa versus Concentração do Inibidor foi ajustada a um modelo de equilíbrio simples para obter o valor de K'i (Gutheil and Bachovchin, 1993 Biochemistry 32(34) 8723- 8731).

A Figura 5 representa resultados de um desafio de glicose oral usando Ala-boroPro Tioxamide. Após um jejum durante a noite, sete camundongos C57BL/6 receberam a droga ou veículo (0.25% metilcelulose), por engorda oral, duas horas antes da dose oral de 5 g/kg de glicose. Sangue foi retirado da veia da cauda e a glicose medida com um medidor de glicose sangüínea antes da droga, antes da glicose, e a 20, 40, 60 e 12 0 min. após a glicose. 0 AUC foi calculado para os dados a partir de zero até 12 0 min.

A Figura 6 representa os resultados de inibição de DPP IV do plasma de rato usando Ala-boroPro Tioxamida. Grupos de quatro ratos receberam cada dose de Ala-Pro tioxamida. Amostras sangüíneas foram retiradas da via da cauda e o DPP IV do plasma foi medido pela adição de 10 μL de plasma até 150 μL, de 30 μΜ Ala-Pro paranitroanalida em 50 mM HEPES, pH 8, 0,14 M NaCl. A mudança na absorbância em 410 nm foi registrada após 1 hora. Os dados foram normalizados ao valor médio pré-dose para cada grupo.

A Figura 7 representa a inativação de Ala-boroPro Tioxamida em pH 7,8. Ala-boroPro tioxamida foi pré- equilibrada em pH 2 e então o pH aumentou rapidamente para pH 7,8 pela adição de tampão de fosfato de sódio 0,6 M. 0 espectro 1H NMR foi registrado como uma função do tempo em pH 7,8. Duas ressonâncias com boa resolução representando as formas ativa (pH 2) e inativa (pH 7,8) da droga foram integradas e a integral como um função do tempo foi ajustada a uma exponencial simples. 0 mesmo procedimento foi seguido para a inativação de Ala-boroPro. A meia-vida para a reação foi de 60 min. para Ala-boroPro tioxamide e 30 min. para Ala-boroPro.

A Figura 8 representa a inativação de Ala-boroPro Tioxamide em pH 7,8. Ala-boroPro e Ala-boroPro tioxamida foram pré-equilibradas em pH 2 e então o pH aumentou rapidamente para pH 7,8 pela adição de tampão de fosfato de sódio 0,5 Μ. A inibição de DPP IV foi medida em vários tempos após o aumento do pH e os valores IC50 foram plotados em função do tempo. A partir do valor IC50, a fração molar do inibidor ativo foi calculada assumindo que a amostra de pH 2 foi 100% ativa. 0 valor foi ajustado a uma exponencial simples. As meias-vidas obtidas a partir desses ajustamentos foram de 47 min. para Ala-boroPro tioxamide e 24 min. para Ala-boroPro.

A Figura 9 representa os resultados da análise 1H NMR de Ala-boroPro Tioxamida.

A Figura 10 representa as medidas Ki de Ala-boroPro Tioxamida.

A Figura 11 representa uma comparação das taxas de desativação para Ala-boroPro e Ala-boroPro Tioxamida.

A Figura 12 representa OGTT com Ala-boroPro Tioxamida.

A Figura 13 representa uma comparação de Ala-boroPro e Ala-boroPro Tioxamide contra DPPIV.

A Figura 14 representa a atividade de DPP IV do plasma de rato na presença de Ala-boroPro Tioxamida.

A Figura 15 representa Ala-boroPro Tioxamide, NVP LAF327, e MK0431.

A Figura 16 representa os resultados de Ala-boroPro Tioxamida, NVP LAF327, e MK04 31 em um ensaio que mede a inibição de DPP IV de plasma de rato.

A Figura 17 representa os resultados de Ala-boroPro Tioxamida, NVP LAF327, e MK04 31 em um ensaio que mede a inibição da excursão de glicose.

A Figura 18 representa os valores Ki e IC50 para Ala- boroPro Tioxamide, NVP LAF3 27, e MK0431.

A Figura 19 representa os resultados de Ala-boroPro Tioxamida, NVP LAF327, e MK04 31 em um ensaio que mede a atividade de DPP IV de plasma após uma dose oral simples (1 mg/kg).

A Figura 2 0 representa os resultados de Ala-boroPro Tioxamida, NVP LAF327, e MK0431 em um ensaio que mede a inibição de DPP IV de plasma de rato.

A Figura 21 representa OGTT com Ala-boroPro Tioxamida e LAF327.

A Figura 22 representa os resultados de Ala-boroPro Tioxamide em um ensaio de desafio de glicose oral em camundongos normais.

A Figura 23 representa os resultados de NVP LAF327 em um ensaio de desafio de glicose oral em camundongos normais.

A Figura 24 representa os resultados de MK0431 em um ensaio de desafio de glicose oral em camundongos normais. See Kim et al. J. Med. Chem. 2005, 48, 141-51.

A Figura 25 representa o Ki de AbP tioxamida e NVP LAF237.

A Figura 2 6 representa o Ki para MK0431.

A Figura 27 representa a ligação/liberação de MK0431 com DPP IV. Na taxa: Misture simultaneamente enzima, substrato e inibidor. A curva de resposta representa uma ligação lenta. Fora da taxa: Pré-incube a enzima com o inibidor em uma concentração alta. Então, dilua a mistura e adicione o substrato. A curva reflete a liberação lenta do inibidor após a diluição.

A Figura 2 8 representa certos compostos da invenção. A Figura 2 9 representa certos compostos da invenção.

A Figura 3 0 representa certos compostos da invenção.

A Figura 31 representa certos compostos da invenção.

A Figura 32 representa certos compostos da invenção.

Descrição Detalhada da Invenção

Visão Geral

A presente invenção apresenta inibidores da protease e métodos de uso de inibidores da protease. A invenção apresenta inibidores para um amplo conjunto de proteases.

Por exemplo, o inibidor da invenção pode inibir enzimas de clivagem pós-prolina (PPCE), como a dipeptidil peptidase IV. A invenção também apresenta compostos que inibem a atividade de proteasoma. Em certas instâncias, o inibidor da protease é um inibidor pró-soft. O inibidor pró-soft é

um agente inativo que é ativado, isto é, clivado por uma "protease de ativação", para liberar um grupo inibidor ativo na proximidade de uma "protease alvo". A identidade da protease de ativação e da protease alvo pode ser a mesma ou diferente. Após a ativação do inibidor pró-soft, o grupo inibidor ativo é submetido a auto-ativação e proto- desboronação. Em certas instâncias, a invenção apresenta inibidores de ácido borônico dipeptídio do tipo Xaa- boroPro, sendo que Xaa se refere a qualquer aminoácido que ocorra de modo natural ou não natural incluindo um grupo tioxamida, e boroPro se refere ao análogo da prolina no qual o carboxilato C-terminal foi substituído por um grupo boronil. Tais compostos são inibidores potentes de dipeptidil amino peptidase tipo IV (DPP IV) . Os compostos de ácido borônico dipeptídio existem na forma de cadeia aberta sob condições acidíferas, mas sofrem proto- desboronação em condições neutras e básicas. A forma de cadeia aberta é ativa como inibidor enzimático; o composto formado a partir da reação de proto-desboronação é substancialmente inativo como inibidor enzimático. Os inibidores pró-soft da presente invenção não passam eles próprios por proto-desboronação e podem ser construídos de modo que não inibam a enzima alvo selecionada ou outras enzimas em qualquer extensão significativa, antes de serem clivados pela protease de ativação.

Uma das características que tornam as moléculas de inibidor pró-soft da presente invenção diferentes dos pró- fármacos típicos é que o grupo inibidor, após ser gerado na forma ativa próximo ao alvo, passa por inativação com o passar do tempo, por exemplo, à medida que ele se difunde para longe da enzima alvo, reduzindo desse modo a possibilidade de efeitos colaterais deletérios que podem resultar da inibição de enzimas que ocorrem em outras partes do paciente. Essa combinação de liberação em uma forma ativa nas proximidades da enzima alvo juntamente com esse mecanismo de desativação "programada" torna as moléculas da invenção mais específicas, efetivas, e seguras (isto é, com menos efeitos colaterais) do que o grupo inibidor usado sozinho.

As características vantajosas para os compostos da presente invenção incluem: melhores índices terapêuticos, devidos em parte à toxicidade reduzida e/ou especificidade melhorada para a protease visada; melhor disponibilidade oral; prazo de validade aumentado; e/ou duração de ação aumentada (como formulações de dosagem oral que são efetivas por mais de 4 horas, e ainda mais preferivelmente por mais de 8, 12, ou 16 horas. Em certas instâncias, um composto da invenção tem um Ki para a inibição de DPIV de aproximadamente 5 0,0 nm ou menos, more pref erivelmente de cerca de 10,0 nm ou menos, e ainda mais pref erivelmente de cerca de 1,0, 0,1, ou ainda 0,01 nM ou menos. Na verdade, os inibidores com valores K1 na faixa picomolar e mesmo femtomolar são contemplados.

Outra característica vantajosa para os compostos da presente invenção é que a proto-desboronação libera ácido bórico inócuo de modo irreversível. O LD50 do ácido bórico é aproximadamente igual àquele do sal de mesa comum. Conseqüentemente, espera-se que a terapia crônica de longo- prazo com os compostos da presente invenção produza um perfil de segurança melhorado (poucos efeitos colaterais).

Os compostos da presente invenção podem ser usados como parte de tratamentos para uma variedade de transtornos/estados de saúde, tais como aqueles que são mediados por DPIV. Por exemplo, os compostos podem ser usados para regular positivamente as atividades de GIP e GLP-1, por exemplo, pelo aumento da meia-vida desses hormônios, como parte do tratamento de regulação dois níveis e/ou metabolismo de glicose, por exemplo, para reduzir a resistência ã insulina, tratar a hiperglicemia, hiperinsulinemia, obesidade, hiperlipidemia, hiperlipoproteinemia (como quilomicrons, VLDL e LDL), e para regular a gordura corporal e mais geralmente os depósitos de lipxdeos, e, mais geralmente, para a melhora de transtornos do metabolismo, especialmente aqueles associados á diabetes, obesidade e/ou arteriosclerose.

Certos compostos da invenção exposta têm duração estendida. Conseqüentemente, em certas concretizações, o composto é selecionado, e a quantidade do composto formulada, para fornecer uma dosagem que iniba os níveis de PPCE sêrico (por exemplo, DPPIV) em no mínimo 50% por no mínimo 4 horas após uma dose simples, e ainda mais pref erivelmente por no mínimo 8 horas ou ainda 12 ou 16 horas após uma dose simples.

Por exemplo, em certas concretizações, o método envolve a administração de um inibidor de DPIV, preferivelmente em um tempo predeterminado durante um período de 24 horas, em uma quantidade efetiva para melhorar um ou mais índices aberrantes associados a transtornos do metabolismo da glicose (por exemplo, intolerância à glicose, resistência à insulina, hiperglicemia, hiperinsulinemia e diabetes Tipos I e II). Em outras concretizações, o método envolve a administração de um inibidor de DPIV em uma quantidade efetiva para melhora índices aberrantes associados à obesidade. As células de gordura liberam o hormônio leptina, que viaja no fluxo sangüíneo até o cérebro, no qual, através dos receptores de leptina, estimula a produção de GLP-1. 0 GLP-1, por sua vez, produz a sensação de saciedade. A teoria principal é que as células gordurosas da maioria das pessoas obesas produzem provavelmente leptina suficiente, mas a leptina não é capaz de se encaixar adequadamente aos receptores de leptina no cérebro, e portanto não estimula a produção de GLP-I. Assim sendo existe uma grande quantidade de pesquisa no sentido da utilização de preparações de GLP-I como um supressor do apetite. O método da invenção apresenta um meio para aumentar a meia-vida de GLP-1, tanto endógena como adicionada ectopicamente, no tratamento de transtornos associados à obesidade.

Em um sentido mais geral, a presente invenção apresenta métodos e composições para alteração da farmacocinética de uma variedade de hormônios polipeptídios diferentes através da inibição da proteólise de um ou mais hormônios peptídeos pela DPIV ou alguma outra atividade proteolítica. 0 metabolismo pós-secretor é um elemento importante na homeostase geral de peptídeos reguladores, e outras enzimas envolvidas nesses processos podem ser alvos apropriados para a intervenção farmacológica pelo método exposto aqui. Por exemplo, o método exposto pode ser usado para aumentar a meia-vida de outros peptídeos derivados de proglucagon, como a glicentina (correspondente ao PG-1-69), oxintomodulina (PG 33-69), polipeptídio pancreático relacionado à glicentina (GRPP, PG 1-30), peptídeo-2 interveniente (IP-2, PG 111-122 amida), e peptídeo-2 semelhante a glucagon (GLP-2, PG 126-158).

GLP-2, por exemplo, tem sido identificado como um fator responsável pela indução da proliferação do epitélio intestinal. Veja, por exemplo, Drucker et al. Proc. Natl. Acad. Sei. USA 1996, 93, 7911. O método exposto também pode ser usado como parte de um regime para o tratamento de injúria, inflamação ou ressecção do tecido intestinal, por exemplo, quando o crescimento e reparo aumentado do epitélio da mucosa intestinal é desejado, como no tratamento da doença de Crohn ou Doença Intestinal Inflamatória (IBD).

O DPIV também tem sido implicado no metabolismo e inativação do fator de liberação do hormônio do crescimento (GHRF) . 0 GHRF é um membro da família de peptídeos homólogos que incluem o glucagon, secretina, peptídeo intestinal vasoativo (VIP), peptídeo histidina isoleucina (PHI), peptídeo ativador da adenilato ciclase pituitária (PACAP), peptídeo inibidor gástrico (GIP) e helodermina (Kubiak et al. Peptide Res. 1994, 7, 153). 0 GHRF é secretado pelo hipotálamo, e estimula a liberação do hormônio do crescimento (GH) a partir da pituitária anterior. Portanto, o método exposto pode ser usado para melhorar a terapia clínica para certas crianças com deficiência de hormônio do crescimento, e na terapia clínica de adultos para melhorar a nutrição e alterar a composição corporal (músculo versus gordura). 0 método exposto também pode ser usado na prática veterinária, por exemplo, para desenvolver uma produção e rendimento mais alto da produção leiteira, gado com pouca gordura.

Da mesma forma, Os inibidores de DPIV da invenção podem ser usados para alterar a meia-vida plasmática da secretina, VIP, PHI, PACAP, GIP e/ou helodermina. Adicionalmente, o método exposto também pode ser usado para alterar a farmacocinética do Peptldeo YY e neuropeptídeo Y, ambos os membros da família de polipeptídios pancreáticos, porque o DPP IV tem sido implicado no processamento daqueles peptídeos de uma maneira que altera a seletividade do receptor.

Em outras concretizações, os compostos podem ser usados para estimular a hematopoiese. Em ainda outras concretizações, os compostos podem ser usados para inibir o crescimento ou vascularização de células/tecidos transformados, por exemplo, inibir a proliferação celular como aquela associada com o crescimento tumoral e metástase, e para inibição da angiogênese em uma massa proliferativa anormal. Em ainda outras concretizações, os compostos podem ser usados para reduzir respostas imunológicas, por exemplo, como um imunossupressor. Em ainda outros exemplos, os inibidores de DPIV, de acordo com a presente invenção, podem ser usados para tratar enfermidades do CNS como derrames, tumores, isquemia, doença de Parkinson, perda de memória, perda de audição, perda de visão, enxaquecas, injúria cerebral, injúria da medula espinhal, doença de Alzheimer e esclerose lateral amiotrófica (que tenha um componente do CNS). Adicionalmente, os inibidores de DPIV podem ser usados para tratar transtornos que tenham uma natureza mais periférica, incluindo esclerose múltipla e neuropatia diabética.

Um outro aspecto da invenção se relaciona às composições farmacêuticas de inibidores enzimáticos que clivam a pós-prolina, particularmente os inibidores DPIV, e seus usos no tratamento e/ou prevenção de transtornos que podem ser melhorados pela alteração da horaeostase de hormônios peptidicos. Em uma certa concretização, os compostos têm atividades hipoglicêmica e antidiabética, e podem ser usados no tratamento de transtornos marcados pelo metabolismo aberrante da glicose (incluindo armazenamento) . Em concretizações particulares, as composições dos métodos expostos são úteis como agentes insulinotrópicos, ou para potencializar os efeitos insulinotrópicos de moléculas como o GLP-I. Sob esse aspecto, a invenção também fornece métodos para o tratamento e/ou profilaxia de uma variedade de transtornos, incluindo um ou mais de: hiperlipidemia, hiperglicidemia, obesidade, insuficiência de tolerância à glicose, resistência à insulina e complicações diabéticas.

Em certas instâncias, os compostos do método exposto são moléculas pequenas, por exemplo, com pesos moleculares de menos de 7500 amu, preferivelmente menos de 5000 amu, e ainda mais pref erivelmente menos de 2000 ou ainda menos que 1000 amu. Em certas concretizações, os compostos são oralmente ativos.

Em certa.s instâncias, os compostos da invenção são usados em combinação com um ou mais agentes farmacêuticos. Um grande número de agentes farmacêuticos é conhecido da técnica e são acessíveis para o uso em composições farmacêuticas da invenção. O termo "agente farmacêutico" inclui sem limitação, medicamentos; vitaminas; suplementos minerais; substâncias usadas para o tratamento, prevenção, diagnósticos, cura ou mitigação de doença ou enfermidade; ou substâncias que afetam a estrutura ou função do organismo; ou pró-fármacos, que se tornam biologicamente ativos ou mais ativos após terem sido colocados em um ambiente fisiológico predeterminado.

Exemplos não limitantes de amplas categorias de agentes farmacêuticos úteis incluem as seguintes categorias: agentes anabólicos, antiácidos, agentes antiasmáticos, anticolesterolêmicos e antilipídeos, anticoagulantes, anticonvulsivos, antidiarréicos, antieméticos, antiinfecciosos, antiinflamatórios, antimaníacos, antináuseas, antineoplásicos, antiobesidade, antipiréticos e analgésicos, antiespasmódicos, antitrombóticos, antiuricêmicos, antiangina, antihistamínicos, antitussígenos, supressores do apetite, preparações biológicas, dilatadores cerebrais, dilatadores coronarianos, descongestionantes, diuréticos, agentes diagnósticos, eritropoiéticos, expectorantes, sedativos gastrointestinais, agentes hiperglicêmicos, hipnóticos, agentes hipoglicêmicos, resinas de troca de íon, laxantes, suplementos minerais, agentes mucolíticos, drogas neuromusculares, vasodilatadores periféricos, psicotrópicos, sedativos, estimulantes, agentes tireoidianos e antitireoidianos, relaxantes uterinos, vitaminas, e pró-fármacos.

Mais especificamente, exemplos não limitantes de agentes farmacêuticos úteis incluem as seguintes categorias terapêuticas: analgésicos, como drogas antiinflamatórias não esteróides, antagonistas opiãceos e salicilatos; antihistamínicos, como bloqueadores de Hi e H2 ; agentes antiinfecciosos, tais como anti-helmínticos, antianaeróbicos, antibióticos, antibióticos aminoglicosideos, antibióticos antifúngicos, antibióticos de cefalosporina, antibióticos macrolídeos, antibióticos de beta-lactam e miscelânea, antibióticos de penicilina, antibióticos quinolônicos, antibióticos de sulfonamida, antibióticos de tetraciclina, antimicobactericidas, antituberculosos e antimicobactericidas, antiprotozoários, 10 antiprotozoários antimaláricos, agentes antivirais, agentes antiretrovirais, escabicidas, e antiinfecciosos urinários; agentes antineoplásicos, como agentes alquilantes, agentes alquilantes de nitrogênio mostarda, agentes alquilantes de nitrosouréia, antimetabólitos, antimetabólitos análogos da purina, antimetabólitos análogos da pirimidina, antineoplásicos hormonais, antineoplásicos naturais, antineoplásicos antibióticos naturais, antineoplásicos naturais vinca alcalóides; agentes autonômicos, tais como anticolinérgicos, anticolinérgicos antimuscarínicos, alcalóides ergot, parasimpatomiméticos, parasimpatomiméticos agonistas colinérgicos, parasimpatomiméticos inibidores da colinesterase, simpatolíticos, simpatoliticos alfa-bloqueadores, simpatolíticos beta-bloqueadores, simpatomiméticos, e simpatomiméticos agonistas adrenérgicos; agentes cardiovasculares, como antiangina, betabloqueadores antiangina, bloqueadores dos canais de cálcio antiangina, nitrato antiangina, antiarrítmicos, antiarrítmicos glicosídeos cardíacos, antiarrítmicos de classe I, antiarrítmicos de classe II, antiarrítmicos de classe III, antiarrltmicos de classe IV, agentes antihipertensivos, antihipertensivos alfa-bloqueadores, antihipertensivos inibidores de enzima conversora de angiotensina (inibidores ACE), antihipertensivos beta-bloqueadores, antihipertensivos bloqueadores dos canais de cálcio, antihipertensivos adrenérgicos de ação central, agentes antihipertensivos diuréticos, antihipertensivos periféricos vasodilatadores, antilipemicos, antilipemicos seqüestradores de ácido biliares, antilipemicos inibidores da HMG-CoA redutase, inotrópicos, inotrõpicos glicosídeos cardíacos, e agentes tromboliticos; agentes dermatológicos, como anti-histaminas, agentes antiinflamatórios, agentes antiinflamatórios corticosteróides, anestésicos antipruriticos/locais, antiinfecciosos tópicos, antiinfecciosos tópicos antifúngicos, antiinfecciosos tópicos antivirais, e antineoplásicos tópicos; agentes eletrolíticos e renais, como agentes acidificantes, agentes alcalinizantes, diuréticos, diuréticos inibidores da anidrase carbônica, diuréticos de alça, diuréticos osmóticos, diuréticos poupadores de potássio, diuréticos de tiazida, repositores de eletrólitos, e agentes úricosuricos; enzimas, como as enzimas pancreáticas e enzimas trombolíticas; agentes gastrointestinais, como antidiarreicos, antieméticos, agentes antiinflamatórios gastrointestinais, agentes antiinflamatórios gastrointestinais de salicilatos, agentes antiácidos antiúlcera, agentes antiúlcera inibidores da bomba de ácido gástrico, agentes antiúlcera da mucosa gástrica, agentes antiúlcera bloqueadores de H2, agentes colelitolíticos, digestivos, eméticos, laxantes e amolecedores de fezes, e agentes procinéticos; anestésicos gerais, como anestésicos inalantes, anestésicos inalantes halogenados, anestésicos intravenosos, anestésicos intravenosos barbitúricos, anestésicos intravenosos benzodiazepinicos, e anestésicos intravenosos agonistas de opiáceos; agentes hematológicos, como agentes antianemicos, agentes antianemicos hematopoiéticos, agentes coagulantes, agentes coagulantes hemostáticos, agentes coagulantes inibidores de plaquetas, agentes coagulantes de enzima trombolítica, expansores do volume do plasma; hormônios e modificadores de hormônios, tais como abortíferos, agentes adrenais, agentes adrenais corticosteróides, andrógenos, antiandrógenos, agentes antidiabéticos, agentes antidiabéticos sulfoniluréia, agentes antihipoglicêmicos, contraceptivos orais, contraceptivos de progestina, estrógenos, agentes fertilizadores, ocitócicos, agentes paratireóideos, hormônios pituitários, progestinas, agentes antitireoidianos, hormônios da tireóide, e tocolíticos; agentes imunobiológicos, como imunoglobulinas, imunossupressores, toxóides e vacinas; anestésicos locais, como anestésicos locais tipo amida e anestésicos locais tipo éster local; agentes musculoesqueléticos, como agentes antiinflamatórios antigota, agentes antiinflamatórios corticosteróides, agentes antiinflamatórios compostos de ouro, agentes antiinflamatórios imunossupressores, drogas antiinflamatórias não esteróides oftálmicas (NSAIDs) , agentes antiinflamatórios salicilatos, relaxantes musculoesqueléticos, relaxantes musculoesqueléticos com bloqueador neuromuscular, relaxantes musculoesqueléticos com bloqueador neuromuscular reverso; agentes neurológicos, como anticonvulsivos, anticonvulsivos barbituratos, anticonvulsantes benzodiazepínicos, agentes antienxaqueca, agentes antiparkinsonianos, agentes antivertigo, agonistas opiáceos, e antagonistas opiáceos; agentesoftálmicos, como agentes antiglaucoma, agentes antiglaucoma betabloqueadores, agentes antiglaucoma mióticos, midriáticos, midriáticos agonistas adrenérgicos, midriáticos antimuscarinicos, anestésicos oftálmicos, antiinfecciosos oftálmicos, antiinfecciosos oftálmicos aminoglicosideos, antiinfecciosos oftálmicos macrolídeos, antiinfecciosos oftálmicos quinolônicos, antiinfecciosos oftálmicos tipo sulfonamida, antiinfecciosos oftálmicos tipo tetraciclina, agentes antiinflamatórios oftálmicos, agentes antiinflamatórios oftálmicos corticosteróides, e drogas antiinflamatórias não esteróides oftálmicas (NSAIDs) ; agentes psicotrópicos, como antidepressivos, antidepressivos heterocíclicos, inibidores da monoamino oxidase (MAOIs), inibidores seletivos da recaptação da serotonina (SSRIs), antidepressivos tricíclicos, antimanlacos, antipsicóticos, antipsicóticos fenotiazinicos, ansioliticos, sedativos, e hipnóticos, barbituratos sedativos e hipnóticos, ansiolíticos benzodiazepínicos, sedativos, e hipnóticos, e psicoestimulantes; agentes respiratórios, como antitussigenos, broncodilatadores, broncodilatadores agonistas adrenérgicos, broncodilatadores antimuscarinicos, expectorantes, agentes mucolíticos, agentes antiinflamatórios respiratórios, e agentes antiinflamatórios respiratórios corticosteróides; agentes toxicológicos, como antídotos, agentes quelantes/antagonistas de metais pesados, agentes de abuso de substâncias, agentes dissuasores de substâncias abusivas, agentes de retirada de substâncias abusivas; minerais; e vitaminas, como a vitamina A, vitamina B, vitamina C, vitamina D, vitamina E, e vitamina K.

As classes preferidas de agentes farmacêuticos úteis das categorias acima incluem: (1) drogas antiinflamatórias não esteróides (NSAIDs) analgésicos, como diclofenaco, ibuprofen, cetoprofen, e naproxen; (2) analgésicos agonistas opiáceos, como codeína, fentanil, hidromorfona, e morfina; (3) analgésicos salicilatos, como aspirina (ASA) (ASA entérico revestido); (4) anti-histaminas bloqueadoras de Ηχ, como a clemastina e terfenadina; (5) anti-histaminas bloqueadoras de H2, como a cimetidina, famotidina, nizadina, e ranitidina; (6) agentes antiinfecciosos, como o mupirocin; (7) agentes antiinfecciosos antianaeróbicos, como cloramfenicol e clindamicina; (8) antiinfecciosos antibióticos antifúngicos, como a amfotericina b, clotrimazol, fluconazol, e cetoconazol; (9) antiinfecciosos antibióticos macrolídeos, como a azitromicina e eritromicina; (10) antiinfecciosos antibióticos beta-lactam diversos, como o aztreonam e imipenem; (11) antiinfecciosos antibióticos penicilínicos, como nafcilina, oxacilina, penicilina G, e penicilina V; (12) antiinfecciosos antibióticos quinolônicos, como a ciprofloxacina e norfloxacina; (13) antiinfecciosos antibióticos tetraciclinas, como doxiciclina, minociclina, e tetraciclina; (14) antiinfecciosos antimicobacterianos antituberculose como isoniazida (INH), e rifampina; (15) antiinfecciosos antiprotozoários, como a atovaquona e dapsona; (16) antiinfecciosos antiprotozoários antimaláricos, como a cloroquina e pirimetamina; (17) antiinfecciosos antiretrovirais, como o ritonavir e zidovudina; (18) agentes antiinfecciosos antivirais, como o aciclovir, ganciclovir, interferon alfa, e rimantadina; (19) agentes antineoplãsicos alquilantes, como a carboplatina e cisplatina; (20) agentes antineoplásicos alquilantes de nitrosouréia, como a carmustina (BCNU); (21) agentes antineoplásicos antimetabólitos, como o metotrexato; (22) agentes antineoplásicos antimetabólitos análogos a pirimidina, como a fluorouracila (5-FU) e gemcitabina; (23) antineoplásicos hormonais, como o goserelin, leuprolide, e tamoxifen; (24) antineoplásicos naturais, como a aldesleucina, interleucina-2, docetaxel, etoposide (VP-16), interferon alfa, paclitaxel, e tretinoína (ATRA); (25) antineoplásicos antibióticos naturais, como a bleomicina, dactinomicina, daunorubicina, doxorubicina, e mitomicina; (26) antineoplásicos naturais vinca alcalóides, como a vinblastina e vincristina; (27) agentes autonômicos, como a nicotina; (28) agentes autonômicos anticolinérgicos, como a benztropina e trihexifenidil; (29) agentes autonômicos anticolinérgicos antimuscarínicos, como a atropina e oxibutinin; (30) agentes autonômicos alcalóides ergot, como a bromocriptina; (31) agonistas colinérgicos parasimpatomiméticos, como a pilocarpina; (32) inibidores parasimpatomiméticos colinesterase, como a piridostigmina; (33) simpatolíticos alfa-bloqueadores, como o prazosin; (34) simpatollticos beta-bloqueadores, como o atenolol; (35) simpatomiméticos agonistas adrenérgicos, como o albuterol e dobutamina; (36) agentes cardiovasculares, como a aspirina (ASA) (ASA entéricos revestidos); (37) betabloqueadores antiangina, como o atenolol e propranolol; (38) bloqueadores dos canais de cálcio antiangina, como a nifedipina e verapamil; (39) nitratos antiangina, como o isosorbide dinitrato (ISDN); (40) antiarritmicos glicosídeos cardíacos, como a digoxina; (41) antiarritmicos de classe I, como a lidocaína, mexiletino, fenitoina, procainamida, e quinidina; (42) antiarritmicos de classe III, como a atenolol, metoprolol, propranolol, and timolol; (43) antiarritmicos de classe III, como a amiodarona; (44) antiarritmicos de classe IV, como o diltiazem e verapamil; (45) antihipertensivos alfa- bloqueadores, como a prazosina; (46) inibidor enzimático conversor da angiotensina (inibidor ACE) antihipertensivos, como o captopril e enalapril; (47) antihipertensivos betabloqueadores, como o atenolol, metoprolol, nadolol, e propanolol; (48) agentes antihipertensivos bloqueadores dos canais de cálcio, como diltiazem e nifedipina; (49) antihipertensivos adrenérgicos de ação central, como a clonidina e metildopa; (50) agentes antihipertensivos diuréticos, como a amilorida, furosemida, hidroclorotiazida (HCTZ), e spironolactona; (51) antihipertensivos vasodilatores periféricos, como a hidralazina e minoxidil; (52) antilipemicos, como o gemfibrozil e probucol; (53) antilipemicos seqüestradores biliares, como a colestiramina; (54) antilipemicos inibidores da redutase HMG-CoA, como a lovastatina e pravastatina; (55) inotrópicos, como a amrinona, dobutamina, e dopamina; (56) inotrópicos glicosideos cardíacos, como a digoxina; (57) agentes trombolíticos, como o alteplase (TPA), anistreplase, streptoquinase, e uroquinase; (58) agentes dermatológicos, como a colchicina, isotretinoína, metotrexato, minoxidil, tretinoína (ATRA); (59) agentes antiinflamatórios dermatológicos corticosteróides, como a betametasona e dexametasona; (60) antiinfecciosos tópicos antifüngicos, como a amfotericina B, clotrimazol, miconazol, e nistatina; (61) antiinfecciosos tópicos antivirais, como o aciclovir; (62) antineoplásicos tópicos, como a fluorouracila (5-FU); (63) agentes renais e eletrolíticos, como a lactulose; (64) diuréticos de alça, como a furosemida; (65) diuréticos poupadores de potássio, como o triamtereno; (66) diuréticos de tiazida, como a hidroclorotiazida (HCTZ) ; (67) agentes úricosuricos, como o probenecid; (68) enzimas como a RNase e DNase; (69) enzimas tromboliticas, como o alteplase, anistreplase, streptoquinase e uroquinase; (70) antieméticos, como a proclorperazina; (71) agentes antiinflamatórios gastrointestinais salicilatos, como a sulfasalazina; (72) agentes antiúlcera inibidores da bomba de ácido gástrico, como o omeprazol; (73) agentes antiúlcera bloqueadores de H2, como a cimetidina, famotidina, nizatidina, e ranitidina; (74) digestivos, como a pancrelipase; (75) agentes procinéticos, como a eritromicina; (76) anestésicos intravenosos agonistas de opiáceo como o fentanil; (77) agentes antianemia hematopoiéticos, como a eritropoietina, filgrastim (G-CSF), e sargramostim (GM-CSF); (78) agentes coagulantes, como os fatores anti-hemofilicos 1-10 (AHF 1- 10) ; (79) anticoagulantes, como a varfarina; (80) agentes coagulantes enzimáticos trombolíticos, como o alteplase, anistreplase, streptoquinase e uroquinase; (81) hormônios e modificadores de hormônios, como a bromocriptina; (82) abortíferos, como o metotrexato; (83) agentes antidiabéticos, como a insulina; (84) contraceptivos orais, como o estrogênio e a progestina; (85) contraceptivos de progestina, como o levonorgestrel e norgestrel; (86) estrógenos como os estrógenos conjugados, dietilstilbestrol (DES), estrógenos (estradiol, estrona e estropipato); (87) agentes de fertilidade, como o clomifeno, gonadatropina coriônica humana (HCG), e menotropinas; (88) agentes paratireóideos como a calcitonina; (89) hormônios pituitários, como a desmopressina, goserelina, oxitocina, e vasopressina (ADH); (90) progestinas, como a medroxiprogesterona, noretindrona, e progesterona; (91) hormônios tireóideos, como a levotiroxina; (92) agentes imunobiológicos, como o interferon beta-lb e interferon gama-Ib; (93) imunoglobulinas, como a imunoglobulina IM, IMIG, IGIM e imunoglobulina IV, IVIG, IGIV; (94) anestésicos locais tipo amida, como a lidocaína; (95) anestésicos locais tipo éster local, como a benzocaína e procaína; (96) agentes antiinflamatórios corticosteróides musculoesqueléticos, como a beclometasona, betametasona, cortisona, dexametasona, hidrocortisona, e prednisona; (97) agentes antiinflamatórios musculoesqueléticos imunossupressores, como a azatioprina, ciclofosfamida, e metotrexato; (98) drogas antiinflamatórias musculoesqueléticas não esteróides (NSAIDs), como o diclofenaco, ibuprofen, cetoprofen, ketorolac, e naproxen; (99) relaxantes musculoesqueléticos, como o baclofen, ciclobenzaprina, e diazepam; (100) relaxantes musculoesqueléticos com bloqueador neuromuscular reverso, como a piridostigmina; (101) agentes neurológicos, como a nimodipina, riluzol, tacrina e ticlopidina; (102) anticonvulsivos, como a carbamazepina, gabapentina, lamotrigina, fenitoina, e ácido valpróico; (103) anticonvulsivos barbituratos, como o fenobarbital e primidona; (104) anticonvulsivos benzodiazepínicos, como o clonazepam, diazepam, e lorazepam; (105) agentes antiparkisonianos, como a bromocriptina, levodopa, carbidopa, e pergolida; (106) agentes antivertigem, como a meclizina; (107) agonistas opiáceos, como a codeína, fentanil, hidromorfona, metadona, e morfina; (108) antagonistas opiáceos, como a naloxona; (10 9) agentes antiglaucoma beta -bloqueadores, como o timolol; (110) agentes antiglaucoma mióticos, como a pilocarpina; (111) antiinfecciosos oftálmicos aminoglicosideos, como a gentamicina,neomicina,e tobramicina; (112) antiinfecciosos oftálmicos quinolônicos, como a ciprofloxacina, norfloxacina, e ofloxacina; (113) agentes antiinflamatõrios corticosteróides oftálmicos, como a dexametasona prednisolona; (114) drogas antiinflamatórias não esteróides oftálmicas (NSAIDs) , como o diclofenaco; (115) antipsicóticos, como a clozapina, haloperidol, e risperidona; (116) ansiolíticos benzodiazepínicos, sedativos e hipnóticos, como o clonazepam, diazepam, lorazepam, oxazepam, e prazepam; (117) psicoestimulantes, como o metilfenidato e pemolina; (118) antitussígenos, como a codeína; (119) broncodilatores, como a teofilina; (120) broncodilatores agonistas adrenérgicos, como o albuterol; (121) agentes antiinflamatõrios corticosteróides respiratórios, como a dexametasona; (122) antídotos, como o flumazenil e naloxona; (123) agentes quelantes/antagonistas de metais pesados, como a penicilamina; (124) agentes dissuasores de substâncias abusivas, como o disulfiram, naltrexona, e nicotina; (125) agentes de retirada de substâncias abusivas, como a bromocriptina; (126) minerais, como o ferro, cálcio, e magnésio; (127) compostos de vitamina B, como a cianocobalamina (vitamina B12) e niacina (vitamina B3) ; (128) compostos de vitamina C, como o ácido ascórbico; e (12 9) compostos de vitamina D, como o calcitriol.

Em adição às precedentes, as seguintes drogas menos comuns também podem ser usadas: clorexidina; cipionato de estradiol em óleo; valerato de estradiol em óleo; flurbiprofen; flurbiprofen sódico; ivermectina; levodopa; nafarelina; e somatropina. Além disso, as seguintes drogas também podem ser usadas: beta-glucan recombinante; concentrado de imunoglobulina bovina; dismutase superóxido bovino; a formulação contendo fluorouracila, epinefrina, e colágeno bovino; hirudina recombinante (r-Hir), antígeno HIV-I; anticorpo anti-TAC humano; hormônio do crescimento recombinante humano (r-hGH); hemoglobina recombinante humana (r-Hb) ; mecasermina recombinante humana (r-IGF-1) ; interferon beta-la recombinante; lenograstima (G-CSF) ; olanzapina; hormônio estimulador da tireóide recombinante (r-TSH); e topotecan.

Além disso, ainda os seguintes produtos intravenosos podem ser usados: aciclovir sódico; aldesleucina; atenolol; sulfato de bleomicina, calcitonina humana; calcitonina de salmão; carboplatina; carmustina; dactinomicina, daunorubicina HCl; docetaxel; doxorubicina HCl; epoetina alfa; etoposide (VP-16); fluorouracila (5-FU); ganciclovir sódico; sulfato de gentamicina; interferon alfa; acetato de leuprolide; meperidina HCl; metadona HCl; metotrexato sódico; paclitaxel; ranitidina HCl; sulfato de vinblastina; e zidovudine (AZT).

Exemplos adicionais específicos de agentes farmacêuticos úteis das categorias acima incluem: (a) antineoplásicos como inibidores de andrógeno, antimetabólitos, agentes citotóxicos, e imunomoduladores; (b) antitussígenos como o dextrometorfan, hidrobrometo de dextrometorfan, noscapina, citrato de carbetapentano, e hidrocloreto de clorfedianol; (c) antihistamínicos como o maleato de clorfeniramina, tartarato de fenindamina, maleato de pirilamina, succinato de doxilamina, e citrato de feniltoloxamina; (d) descongestionantes como hidrocloreto de fenilefrina, hidrocloreto de fenilpropanolamina, hidrocloreto de pseudo-efedrina, e efedrina; (e) vários alcalóides como o fosfato de codeíne, sulfato de codeína e morfina; (f) suplementos minerais como cloreto de potássio, cloreto de zinco, carbonatos de cálcio, óxido de magnésio, e outros sais alcalinos metálicos e alcalino terrosos metálicos; (g) resinas de troca de íon como a colestiramina; (h) antiarrítmicos como N-acetilprocainamida; (i) antipiréticos e analgésicos como o acetaminofen, aspirina e ibuprofen; (j) supressores do apetite como o hidrocloreto de fenilpropanolamina ou cafeína; (k) expectorantes como a guaifenesina; (1) antiácidos como o hidróxido de alumínio de hidróxido de magnésio; (m) substâncias biológicas como peptídeos, polipeptídios, proteínas e aminoácidos, hormônios, interferons ou citoquinas, e outros compostos peptídicos bioactivos, como as interleucinas 1-18 incluindo mutantes e análogos, RNase, DNase, hormônio liberador do hormônio luteinizante (LHRH) e análogos, hormônio liberador de gonadatropina (GnRH), fator-beta transformador de crescimento (TGF-beta), fator de crescimento de fibroblasto (FGF), fator-alfa & beta de necrose tumoral (TNF-alfa & beta), fator de crescimento do nervo (NGF), fator liberador de hormônio do crescimento (GHRF), fator de crescimento epidérmico (EGF), fator homólogo ao fator de crescimento de fibroblasto (FGFHF), fator de crescimento de hepatócito (HGF) , fator de crescimento de insulina (IGF) , fator-2 inibidor de invasão (IIF-2), proteínas 1-7 morfogenêticas ósseas (BMP 1-7) , somatostatina, timosina-alfa-1, gamaglobulina, superóxido dismutase (SOD), fatores de complemento, hGH, tPA, calcitonina, ANF, EPO e insulina; e (n) agentes antiinfecciosos como antifúngicos, antivirais, anti-sépticos e antibióticos.

Alternativamente, o agente farmacêutico pode ser um radiossensíveis, como a metoclopramida, sensamida ou neusensamida (fabricados pela Oxigene); profiromicina (feita pela Vion); RSR13 (feito pela Allos); Thymitaq (feito pela Agouron), etanidazol ou lobenguane (fabricados pela Nycomed); gadolinium texafrina (feito pela

Pharmacyclics); BuDR/Broxina (feito pela NeoPharm); IPdR (feito pela Sparta) ; CR2412 (feito pela Cell Therapeutic) ; LlX (feito pela Terrapin); ou semelhantes.

Preferivelmente, a substância biológica ativa é selecionada do grupo que consiste em peptídeos, polipeptldios, proteínas, aminoácidos, polissacarídeos, fatores de crescimento, hormônios, fatores antiangiogênese, interferons ou citoquinas, e pró-fármacos. Em uma concretização particular, a substância biológica ativa é uma droga ou pró-fármaco, mais preferivelmente uma droga selecionada do grupo que consiste em agentes quimioterápicos e outros antineoplásicos como o paclitaxel, antibióticos, antivirais, antifúngicos, antiinflamatórios, e anticoagulantes.

As substâncias biologicamente ativas são usadas em quantidade que são terapeuticamente efetivas. Embora a quantidade efetiva de uma substância biologicamente ativa dependa do material especifico usado, quantidades da substância biologicamente ativa de cerca de 1% a cerca de 65% podem ser desejáveis. Quantidades menores podem ser usadas para alcançar níveis de eficácia do tratamento para certas substâncias biologicamente ativas. Definições

O termo "alta afinidade", conforme usado aqui, significa uma forte afinidade de ligação entre moléculas com uma constante de dissociação Kd não maior que 1 μΜ. Em um caso preferível, o Kd é menor que 100 nM, 10 nM, 1 nM, 100 pM, ou mesmo 10 pM ou menos. Em uma certa concretização, as duas moléculas podem estar covalentemente ligadas (KD é essencialmente 0).

O termo "boro-Ala" se refere ao análogo da alanina na qual o grupo carboxilato (COOH) é substituído por um grupo boronil. (B(OH)2). Da mesma forma, o termo "boro-Pro" se refere ao análogo da prolina na qual o grupo carboxilato (COOH) é substituído por um grupo boronil. (B(OH)2). Mais geralmente, o termo "boro-Xaa", no qual Xaa é o resíduo de aminoácido, se refere ao análogo de um aminoácido no qual o grupo carboxilato (COOH) é substituído por um grupo boronil. (B(OH)2).

O termo "Ala-boroPro" se refere a

<formula>formula see original document page 40</formula>

0 termo "Ala-boroPro tioxo amida" se refere a

<formula>formula see original document page 40</formula>

O termo "Pro-boroPro" se refere a

<formula>formula see original document page 40</formula>

O termo "tioxam" usado em associação com a nomenclatura química se refere ao composto no qual no mínimo um grupo amida foi substituído por no mínimo um grupo tioxamida. Por exemplo, Pro(tioxam) se refere a um resíduo de prolina no qual o grupo amida foi substituído por um grupo tioxamida.

Um "paciente" ou "indivíduo" a ser tratado pelo método exposto pode significar um indivíduo humano ou não humano.

Indivíduos não humanos incluem animais de fazenda (por exemplo, vacas, cavalos, porcos, ovelhas) e animais de companhia (por exemplo, gatos, cães).

O termo "ED50" significa a dose de uma droga que, em 50% dos pacientes, apresentou uma melhora ou mudança clínica relevante em uma medida fisiológica, como a responsividade à glicose, aumento no hematócrito, diminuição no volume de tumor, etc.

O termo "IC50" significa a dose da droga que inibe a atividade biológica em 50%, por exemplo, a quantidade de composto requerido para inibir ao menos 50% da atividade de DPIV (ou outro PPCE) in vivo.

Diz-se que um composto tem "atividade insulinotrópica" se ele é capaz de estimular, ou causar a estimulação da síntese ou expressão do hormônio insulinico.

O termo "interagir", conforme usado aqui, pretende incluir todas as interações (por exemplo, interações bioquímicas, químicas, ou biofísicas) entre moléculas, como as interações proteína-proteína, proteína-ácido nucléico, ácido nucléico-ácido nucléico, proteína- molécula pequena, ácido nucléico-molécula pequena, ou molécula pequena- molécula pequena.

O termo "LD50" significa a dose de uma droga que é letal em 50% dos indivíduos testados.

O termo "tratamento profilático ou terapêutico" é reconhecido da técnica e inclui a administração ao hospedeiro de uma ou mais das composições expostas. Se ele é administrado antes da manifestação clínica do estado indesejável (por exemplo, doença ou outro estado indesejado do animal hospedeiro) então o tratamento é profilático (i.e, ele protege o hospedeiro contra o desenvolvimento do estado indesejável) , enquanto que se é administrado após a manifestação do estado indesejado, o tratamento é terapêutico (isto é, ele pretende diminuir, melhorar, ou estabilizar o estado indesejável existente ou os efeitos colaterais dele).

O termo "prevenir" é reconhecido da técnica, e quando usado em relação a um estado de saúde, como uma recorrência local (por exemplo, dor) , uma doença como câncer, uma síndrome complexa como a insuficiência cardíaca ou qualquer outro estado médico, é bem compreendido na técnica, e inclui a administração de uma composição que reduz a freqüência de, ou retarda o inicio de, ou de outra forma inibe os sintomas de um estado médico em um indivíduo em relação a outro indivíduo que não recebe a composição.

Portanto, a prevenção do câncer inclui, por exemplo, a redução do número de crescimentos cancerosos detectáveis em uma população de pacientes que recebem um tratamento profilático em relação a uma população controle não tratada, e/ou retarda o aparecimento de crescimentos cancerosos detectáveis em uma população tratada versus uma população controle, por exemplo, por uma quantidade clinica ou estatisticamente significante. A prevenção de uma infecção inclui, por exemplo, a redução do número de diagnósticos da infecção em uma população tratada versus uma população controle não tratada, e/ou retarda o início dos sintomas da infecção em uma população tratada versus uma população controle não tratada. A prevenção da dor inclui, por exemplo, a redução da magnitude, ou alternativamente o retardo de, sensações de dor experimentadas por indivíduos em uma população tratada versus uma população controle não tratada.

O termo "índice terapêutico" se refere ao índice terapêutico de uma droga definida como LD50/ED50.

Uma "quantidade terapeuticamente efetiva" de um composto, por exemplo, como um inibidor de DPIV da presente invenção, em relação ao método de tratamento exposto, se refere a uma quantidade do composto(s) em uma preparação que, quando administrada como parte de um regime de dosagem desejável (a um mamífero, preferivelmente um humano) alivia um sintoma, melhora um estado, ou atrasa o início de estados da doença de acordo com padrões clinicamente aceitáveis para o transtorno ou estado a ser tratado ou o propósito cosmético, por exemplo, em um taxa beneficio/risco razoável aplicável a qualquer tratamento médico.

Uma "formulação de dose oral simples" é a dose que fornece uma quantidade da droga para produzir uma concentração terapêutica maior que o EC50 para aquela droga, mas menor que o LD50. Uma outra medida de formulação de dose oral simples é aquela fornece uma quantidade da droga necessária para produzir uma concentração sérica maior que o EC50 para aquela droga, mas menor que o LD50. Para qualquer medida, de formulação de dose oral simples é preferivelmente uma quantidade de droga que produz uma concentração sérica no mínimo 10% menor que o LD50, e ainda mais pref erivelmente 50%, 75%, ou mesmo 90% menos que o LD50 da droga.

Uma cadeia alifática abrange as classes de alquila, alquenila, e alquinila definidas abaixo. Uma cadeia alifática reta é limitada a porções de cadeia de carbono não ramificadas. Conforme usado aqui, o termo "grupo alifático" se refere a uma cadeia reta, cadeia ramificada ou grupo hidrocarboneto alifático cíclico e inclui grupos alifáticos saturados e insaturados, como um grupo alquila, alquenila, ou alquinila.

"Alquila" se refere a uma porção de cadeia de carbono cíclica ou acíclica, ramificada ou não ramificada, completamente saturada, ou até 3 0 átomos de carbono se nenhuma especificação é feita. Por exemplo, alquila de 1 a 8 átomos de carbono se refere a grupos como metil, etil, propil, butil, pentil, hexil, heptil, e octil, e aquelas porções que são isômeros de posição dessas porções. Alquila de 10 a 3 0 átomos de carbono inclui decil, undecil, dodecil, tridecil, tetradecil, pentadecil, hexadecil, heptadecil, octadecil, nonadecil, eicosil, heneicosil, docosil, tricosil e tetracosil. Em certas concretizações, uma alquila de cadeia reta ou ramificada tem 30 ou menos átomos de carbono em sua espinha doral (por exemplo, C1-C30 para cadeias retas, C3-C30 para cadeias ramificadas), e mais preferivelmente 20 ou menos. Da mesma forma, cicloalquilas preferidas têm 3-10 átomos de carbono em sua estrutura de anel, e mais pref erivelmente 5, 6, ou 7 carbono na estrutura de anel.

A menos que o número de carbonos seja especificado de outra forma, "alquila inferior", conforme usada aqui, significa um grupo alquila, como definido acima, mas que tem de um a dez carbonos, mais pref erivelmente de um a seis átomos de carbono em sua espinha dorsal como metil, etil, n-propil, isopropil, n-butil, isobutil, sec-butil, e tec- butil. Da mesma forma, "alquenila inferior" e "alquinila inferior" têm comprimentos de cadeia similares. Do início ao fim do pedido, os grupos alquila preferidos são as alquilas inferiores. Em certas concretizações, um substituinte designado aqui como alquila é uma alquila inferior.

O termo "alquilatio" se refere a um grupo alquila, conforme definido acima, que tem um grupo enxofre anexado a ele. Em certas concretizações, a porção "alquilatio" é representada por uma de - (S)-alquila, - (S)-alquenila, - (S) - alquinila, e -(S)-(CH2)m-R1/ sendo que m e R1 são definidos abaixo. Grupos alquilatio representativos incluem metiltio, etiltio, e semelhantes.

"Alquenila" se refere a uma porção de carbono cíclica ou acíclica, ramificada ou não ramificada, que tem um número de átomos de carbono especificado, ou até 26 átomos de carbono se não há especificação do número de átomos de carbono, e tendo uma ou mais duplas ligações na porção. Alquenila de 6 a 26 átomos de carbono é exemplificada por hexenil, heptenil, octenil, nonenil, decenil, undecenil, dodenil, tridecenil, tetradecenil, pentadecenil, hexadecenil, heptadecenil, octadecenil, nonadecenil, eicosenil, heneicosoenil, docosenil, tricosenil, e tetracosenil, em suas várias formas isoméricas, sendo que a(s) ligação(ões) insaturada(s) podem ser localizadas em qualquer lugar da porção e podem ter a configuração (Z) ou (E) na(s) dupla(s) ligação(ões).

"Alquinila" se refere a porções hidrocarbonila do escopo da alquenila, mas tendo uma ou mais triplas ligações na porção.

Substituições análogas podem ser feitas para grupos alquenila e alquinila para produzir, por exemplo, aminoalquenila, aminoalquinilas, aminoalquenila, aminoalquinilas, aminoalquenila, aminoalquinilas, tioalquenilas, tioalquinilas, alquenilas ou alquinilas substituídas por carbonil.

O termo "alcoxil" ou "alcoxi" conforme usado aqui se refere a um grupo alquila, conforme definido abaixo, tendo uma porção oxigênio anexada a ele. Grupos alcoxil representativos incluem metoxi, etoxi, propoxim terc- butoxi, e semelhantes. Um "éter" significa dois hidrocarbonetos ligados covalentemente a um oxigênio. Conseqüentemente, o substituinte de uma alquila que dá àquela alquila um éter é ou parece um alcoxil, como pode ser representado por um de -O-alquila, -O-alquenila, -O- alquinila, -O-(CH2)m-R1/ sendo que m e R1 são descritos abaixo.

Os termos "araina" e "amino" são reconhecidos da técnica e se referem a aminas substituídas ou insubstituídas, por exemplo, um grupo que pode ser representado pelas fórmulas:

<formula>formula see original document page 46</formula>

nas quais R3, R5 e R5 representam cada um, independentemente, um hidrogênio, uma alquila, uma alquenila, -(CH2)m-R1/ ou R3 e R5 tomados junto com o átomos de N ao qual eles estão anexados completa um heterociclo tendo de 4 a 8 átomos na estrutura de a anel; R1 representa uma alquenila, arila, cicloalquila, uma cicloalquenila, um heterociclil, ou um policiclil; e m é zero ou um número inteiro que varia de 1 a 8. Em certas concretizações, somente uma de R3 ou R5 pode ser uma carbonila, por exemplo, R3, R5, e o nitrogênio juntos não formam uma imida. Em concretizações ainda mais particulares, R3 e R5 (e opcionalmente R6) são cada um independentemente representados por um hidrogênio, uma alquila, uma alquenila, ou -(CH2)m-R1. Portanto, o termo "alquilamina", conforme usado aqui, significa um grupo amina, conforme definido acima, que tem uma alquila substituída ou insubstituída anexada a ele, isto é, no mínimo um de R3 e R5 é um grupo alquila. Em concretizações particulares, um grupo amino ou alquilamina é básico, o que significa que ele tem um ácido conjugado com um pKa > 7.00, isto é, as formas protonadas desses grupos funcionais têm pKas relativamente à água acima de aproximadamente 7,00.

O termo "arila", conforme usado aqui, inclui grupos aromáticos de anel simples, substituídos ou insubstituídos de 5-, 6-, e 7- membros nos quais cada átomo do anel é carbono (isto é, arila carbocíclica) ou quando um ou mais átomos são heteroátomos (isto é, heteroarila) . 0 termo "arila" também inclui sistemas de anéis policíclicos que têm dois ou mais anéis cíclicos nos quais dois ou mais carbonos são comuns a dois anéis adjacentes nos quais ao menos um dos anéis é aromãtico, por exemplo, os outros anéis cíclicos podem ser cicloalquilas, cicloalquenilas, cicloalquinilas, arilas, heteroarilas, e/ou heterociclils. Os grupos arila carbocíclicos incluem benzeno, naftaleno, fenantreno, fenol, anilina, e semelhantes. Grupos

heteroarila incluem estruturas de anel substituídas ou insubstituídas de 5 a 7 membros, mais preferivelmente de 5 a 6 membros, cujas estruturas de anel incluem um a quatro heteroátomos. Os grupos heteroarila incluem, por exemplo, pirrol, furan, tiofeno, imidazol, oxazol, tiazol, triazo, pirazol, piridina, pirazia, piridazina e pirimidina, e semelhantes.

O termo "carbonila" é reconhecido da técnica e inclui tais porções conforme podem ser representadas pela fórmula:

<formula>formula see original document page 47</formula> na qual X é uma ligação ou representa um oxigênio ou enxofre, e R7 representa um hidrogênio, uma alquila, uma alquenila, -(CH2)m-R1 ou um sal farmaceuticamente aceitável, R8 representa um hidrogênio, uma alquila, uma alquenila ou -(CH2)m-R1, sendo que m e R1 são conforme definido acima. Quando X é um oxigênio e R7 ou R8 não é hidrogênio, a fórmula representa um "éster". Quando X é um oxigênio, e R7 é conforme definido acima, e grupo é referido aqui como um grupo carboxila, e particularmente quando R7 é um hidrogênio, a fórmula representa um "ácido carboxílico" . Quando X é um oxigênio, e R8 é um hidrogênio, a fórmula representa um "formato". Em geral, quando o átomo de oxigênio da fórmula acima é substituído por um enxofre, a fórmula representa um grupo "tiocarbonil". Quando X é um enxofre e R7 ou R8 não é hidrogênio, a fórmula representa um "tioéster". Quando X é um enxofre e R7 é um

hidrogênio, a fórmula representa um "ácido tiocarboxílico" . Quando X é um enxofre e R8 é um hidrogênio, a fórmula representa um grupo "tioformato". Por outro lado, quando X é uma ligação, e R7 não é hidrogênio, a fórmula acima representa um grupo "cetona". Quando X é uma ligação e R7 é um hidrogênio, a fórmula representa um grupo "aldeído".

Os termo "heterociclil" ou "grupo heterocíclico" se refere a estruturas de anel de 3 a 10 membros, mais preferivelmente anéis de 3 a 7 membros, cujas estruturas de anel incluem um a quatro heteroátomos. Heterociclos também podem ser policiclos. Grupos heterociclo incluem, por exemplo, tiofeno, tiantreno, furano, pirano, isobenzofurano, cromeno, xanteno, fenoxatiina, pirrol, imidazol, pirazol, isotiazol, isoxazol, piridina, pirazina, pirimidina, piridazina, indolizina, isoindol, indol, indazol, purina, quinolizina, isoquinolina, quinolina, ftalazina, naftiridina, quinoxalina, quinazolina, cinolina, pteridina, carbazol, carbolina, fenantridina, acridina, pirimidina, fenantrolina, fenazina, fenarsazina, fenotiazina, furazano, fenoxazina, pirrolidina, oxolano, tiolano, oxazol, piperidina, piperazina, morfolina, lactonas, lactams como azetidinonas e pirrolidinonas, sultams, sultonos, e semelhantes. O anel heterocíclico pode ser substituído em uma ou mais posições com os substituintes descritos acima, como por exemplo, halogênio, alquila, aralquila, alquenila, alquinila, cicloalquila, hidroxila, amino, nitro, sulfidril, imino, amido, fosfato, fosfonato, fosfinato, carbonil, carboxil, silil, sulfamoil, sulfinil, éter, alquilatio, sulfonil, cetona, aldeído, éster, um heterociclil, um grupo aromático ou heteroaromático, -CF3, -CN, e semelhantes.

Conforme usado aqui, o termo "substituído" é contemplado para incluir todos os substituintes permissíveis de compostos orgânicos. Em um amplo aspecto, substituintes permissíveis incluem substituintes acíclicos e cíclicos, ramificados ou não ramificados, carbocíclicos e heterocíclicos, aromáticos e não aromáticos dos compostos orgânicos. Substituintes ilustrativos incluem, por exemplo, aqueles descritos acima. Os substituintes permissíveis podem ser um ou mais e os mesmos ou diferentes para os compostos orgânicos apropriados. Para fins desta invenção, os heteroátomos como o nitrogênio podem ter substituintes de hidrogênio e/ou quaisquer substituintes permissíveis de compostos orgânicos descritos aqui para satisfazer as valências dos heteroátomos. Esta invenção não pretende ser limitada de modo algum pelos substituintes permissíveis de compostos orgânicos.

O termo "hidrocarbil" se refere a uma porção hidrocarboneto monovalente composta por cadeias de carbono ou anéis de até 26 carbonos aos quais os átomos de hidrogênio estão anexados. O termo inclui grupos alquila, cicloalquila, alquenila, alquinila e arila, grupos que têm uma mistura de ligações saturadas e insaturadas, anéis carbocíclicose inclui combinações de tais grupos. Ele pode se referir a uma cadeia reta, ramificada estruturas cíclicas, ou combinações delas.

O termo "hidrocarbileno" se refere a uma porção hidrocarbil divalente. Exemplos representativos incluem alquileno, fenileno, ou ciclohexileno. Preferivelmente, a cadeia de hidrocarbileno é completamente saturada e/ou tem uma cadeia de 1 a 10 átomos de carbono.

Conforme usado aqui, o termo "nitro" significa -NO2; o termo "halogênio" designa -F, -Cl, -Br, or -I; o termo "sulfidril" significa -SH; o termo "hidroxila" significa - OH; o termo "sulfonil" significa -SO2-; o termo "azido" significa -N3; o termo "ciano" significa -CN; o termo "isocianato" significa -NCO; o termo "tiocianato" significa —SCN; o termo "isotiocianato" significa -NCS; e o termo "cianato" significa -OCN.

Será entendido que "substituição" ou "substituído com" inclui a ressalva implícita de que tal substituição está de acordo com a valência permitida do átomo substituído e do substituinte, e que a substituição resulta em um composto estável, por exemplo, que não sofre transformação espontaneamente como por através de rearranjo, ciclização, eliminação, etc.

O termo "sulfamoil" é reconhecido da técnica e inclui

uma porção que pode ser representada pela fórmula:

<formula>formula see original document page 51</formula>

na qual R3 e R5 são conforme definidos acima.

O termo "sulfato" é reconhecido da técnica e inclui uma porção que pode ser representada pela fórmula:

<formula>formula see original document page 51</formula>

na qual R7 é conforme definido acima.

O termo "sulfanamida" é reconhecido da técnica e inclui uma porção que pode ser representada pela fórmula:

<formula>formula see original document page 51</formula>

na qual R3 e R8 são conforme definidos acima.

O termo "sulfonato" é reconhecido da técnica e inclui uma porção que pode ser representada pela fórmula:

<formula>formula see original document page 51</formula>

na qual R7 é um par de elétron, hidrogênio, alquila, cicloalquila, ou arila.

O termo "sulfóxido" ou wSulfinil, conforme usado aqui, ser refere a uma porção que pode ser representada pela fórmula:

<formula>formula see original document page 51</formula>

na qual R12 é selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, alquila, alquenila, alquinila, cicloalquila, heterociclil, aralquila, ou arila.

O termo "tioxamida", conforme usado aqui, ser refere a um grupo que pode ser representado pela fórmula:

<formula>formula see original document page 52</formula>

na qual Rt é selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, alquila, cicloalquila, aralquila, ou arila, preferivelmente hidrogênio ou alquila. Além disso, compostos "derivados de tioxamida" ou "análogos a tioxamida" se referem a compostos nos quais um ou mais grupos amida foram substituídos por um ou mais grupos tioxamida correspondentes. Tioxamidas também são referidas na especialidade como "tioamidas".

Conforme usada aqui, a definição de cada expressão, por exemplo, alquila, m, n, etc., quando ocorre mais de uma vez em qualquer estrutura, pretende ser independente de sua definição de outra parte na mesma estrutura.

"Amida biohidrolizável" se refere a uma porção amida que é clivada (por exemplo, para formar uma hidroxila e um ácido carboxílico) sob condições fisiológicas. Condições fisiológicas incluem os ambientes ácidos e básicos do trata digestivo (por exemplo, estômago, intestinos, etc.), clivagem enzimática, metabolismo e outros processos biológicos, e preferivelmente se refere a condições fisiológicas em um vertebrado, como um mamífero.

"Éster biohidrolizável" se refere a uma porção éster que é clivada (por exemplo, para formar uma hidroxila e um ácido carboxílico) sob condições fisiológicas. Condições fisiológicas incluem os ambientes ácidos e básicos do trata digestivo (por exemplo, estômago, intestinos, etc.), clivagem enzimática, metabolismo, e outros processos biológicos, e preferivelmente se refere a condições fisiológicas em um vertebrado, como um mamífero.

"Imida biohidrolizável" se refere a uma porção imida que é clivada (por exemplo, para formar uma hidroxila e um ácido carboxilico) sob condições fisiológicas. Condições fisiológicas incluem os ambientes ácidos e básicos do trata digestivo (por exemplo, estômago, intestinos, etc.), clivagem enzimática, metabolismo, e outros processos biológicos, e preferivelmente se refere a condições fisiológicas em um vertebrado, como um mamífero.

Os termos "resíduo de aminoácido" e "resíduo de peptídeo" significam uma molécula de aminoácido ou peptídeos sem o -OH de seu grupo carboxil. Em geral, as abreviações usadas aqui para designar aminoácidos e os grupos protetores são baseadas em recomendações da Comissão sobre Nomenclatura Bioquímica da IUPAC-IUB (ver Biochemistry 1972, 11, 1726-1732). Por exemplo, Met, lie, Leu, Ala, e Gli representam "resíduos" de metionina, isoleucina, leucina, alanina, e glicina, respectivamente. Resíduo significa um grupo derivado do α-aminoácido correspondente por eliminação da porção OH do grupo carboxil e a porção H do grupo a-amino. 0 termo "cadeia lateral de aminoácido" é aquela parte do aminoácido exclusiva da porção -CH(NH2)COOH, conforme definido por K. D. Kopple, Peptides and Amino Acids; Benjamin: New York, 1966; pp. 2 e 33; exemplos de tais cadeias laterais dos aminoácidos comuns são -CH2CH2SCH3 (a cadeia lateral da metionina), -CH2(CH3)-CH2CH3 (a cadeia lateral da isoleucina), -CH2CH(CH3)2 (a cadeia lateral da leucina) ou H-(a cadeia lateral da glicina).

Na maioria das vezes, os aminoácidos usados no pedido desta invenção são aqueles que ocorrem naturalmente, sendo encontrados em proteínas, ou produtos anabólicos ou catabólitos de tais aminoácidos, os quais contêm grupos amino e carboxil. Particularmente, cadeias laterais de aminoácidos adequados incluem cadeias laterais selecionadas a partir daquelas dos seguintes aminoácidos: glicina, alanina, valina, cisteína, leucina, isoleucina, serina, treonina, metionina, ácido glutâmico, ácido aspártico, glutamina, asparagina, lisina, arginina, prolina, histidina, fenilalanina, tirosina, e triptofano, e aqueles aminoácidos e análogos de aminoácidos que têm sido identificados como constituintes das paredes celulares de peptideoglicano de bactérias.

O termo resíduo de aminoácido ainda inclui análogos, derivados, e congêneres de qualquer aminoácido específico referido aqui, bem como derivados de aminoácidos C-terminal ou N-terminal protegidos (por exemplo, modificados com um grupo protetor C-terminal ou N-terminal). Por exemplo, a presente invenção contempla o uso de análogos de aminoácidos no qual a cadeia lateral é encurtada ou alongada enquanto ainda fornece um grupo carboxil, amino ou outro grupo funcional precursor reativo para ciclização, bem como análogos de aminoácidos que tenham cadeias laterais variantes com grupos funcionais apropriados. Por exemplo, o composto exposto pode incluir um análogo de aminoácido como, por exemplo, cianoalanina, canavanina, ácido djencólico, norleucina, 3-fosfoserina, homoserina, dihidroxi-fenilalanina, 5-hidroxitriptofano, 1-metilhistidina, 3-metilhistidina, ácido diaminopimélico, ornitina, ou ácido diaminobutírico. Outros metabólitos ou precursores de aminoácidos de ocorrência natural que têm cadeias laterais adequadas serão reconhecidos por técnicos habilitados na técnica e são incluídos no escopo da presente invenção.

Também estão incluídos os estereoisômeros (D) e (L) de tais aminoácidos quando a estrutura do mesmo admite formas estereoisoméricas. A configuração dos aminoácidos e resíduos de aminoácidos são designados aqui pelos símbolos apropriados (D), (L) ou (DL), além disso, quando a configuração não é designada, o aminoácido ou resíduo pode ter a configuração (D), (L), ou (DL). Será observado que a estrutura de alguns dos compostos desta invenção incluem átomos de carbono assimétrico. Deve ser entendido, conseqüentemente, que os isômeros que surgem a partir dessa assimetria estão incluídos dentro do escopo desta invenção. Tais isômeros podem ser obtidos na forma substancialmente pura por técnicas de separação clássicas e por síntese estericamente controlada. Para os fins deste pedido, a menos que seja expressamente observado o contrário, um aminoácido citado deve ser interpretado de modo a incluir os estereoisômeros (D) e (L).

A expressão "grupo protetor", conforme usado aqui, significa substituintes que protegem o grupo funcional reativo de reações químicas não desejadas. Exemplos de tais grupos protetores incluem ésteres de ácidos carboxílicos e ácidos borônicos, éteres de álcoois, e acetais e cetais de aldeídos e cetonas. Por exemplo, a expressão "grupo protetor N-terminal" ou "grupo amino protetor" conforme usada aqui se refere a vários grupos amino-protetores que podem ser empregados para proteger o N-terminais de aminoácidos ou peptídeos de reação indesejáveis durante procedimentos sintéticos. Exemplos de grupos adequados incluem grupos protetores acil como, para ilustrar, formil, dansil, acetil, benzoil, trifluoroacetil, succinil, e metoxisuccinil; grupos protetores uretano aromáticos, como por exemplo, benziloxicarbonil (Cbz); e grupos protetores uretano alifáticos como t-butoxicarbonil (Boc) ou 9-Fluorenilmetoxicarbonil (Fmoc).

Conforme observado acima, certos compostos da presente invenção podem existir em formas geométricas ou estereoisoméricas específicas. A presente invenção contempla todos os compostos, incluindo os isômeros eis- e trans-, R- e S-enantiômeros, diastereômeros, (D)-isômeros, (L)-isômeros as misturas racêmicas deles, e outras misturas deles, na medida em que cabem dentro do escopo da invenção. Átomos de carbono assimétrico adicionais podem estar presentes em um substituinte como um grupo alquila. Todos esses isômeros, bem como as misturas deles, devem ser incluídos nesta invenção. Em certas concretizações em que um enantiômero particular é preferido, um composto da presente invenção é enriquecido para ter >60%, >70%, >80%, >90%, >95%, ou mesmo mais que 98% ou 99% do enantiômero preferido, em oposição a um racemato em que dois enantiômeros estão presentes cada um na proporção de 50%.

Se, por exemplo, um enantiômero particular de um composto da presente invenção é desejado, ele pode ser preparado por síntese assimétrica ou por derivação com um auxiliar quiral, sendo que a mistura diastereomérica resultante é separada e o grupo auxiliar clivado para fornecer o enantiômero puro desejado. De modo alternativo, quando a molécula contém um grupo funcional básico, como o amino, ou grupo funcional ácido, como um carboxil, os sais diastereoméricos são formados com um ácido ou base oticamente ativo apropriado, seguido pela resolução dos diastereômeros formados por meios de cristalização ou cromatografia fracionada bem conhecidos da técnica, e recuperação subseqüente do enantiômero puro.

Para os fins desta invenção, os elementos químicos são identificados de acordo com a Tabela Periódica de Elementos, versão CAS, Handbook of Chemistry and Physics, 67th ed., 1986-87, capa interna.

Diz-se que um composto tem "atividade insulinotrópica" se ele é capaz de estimular, ou causar a estimulação da síntese ou expressão do hormônio insulínico.

O termo "grupo protetor amino-terminal", conforme usado aqui, se refere aos grupos protetores de terminais amino que são tipicamente empregados em síntese orgânica, especialmente síntese de peptídeos. Quaisquer das categorias conhecidas de grupos protetores podem ser empregadas, incluindo grupos protetores acil, como acetil, e benzoil; grupos protetores uretanos aromáticos, como benziloxicarbonil; e grupos protetores uretano alifáticos, como o terc-butoxicarbonil. Ver, por exemplo, Gross and Mienhoffer, Eds., The Peptides, Academic Press: New York, 1981;, Vol. 3, 3-88; and Green, T. W.; Wuts, P. G. M., Protective Groups in Organic Synthesis, 2nd ed, Wiley: New York, 1991. Os grupos protetores preferidos incluem porções arila-, aralquila-, heteroarila- e heteroarilalquila- carbonila e sulfonil.

O termo "análogo de aminoácido" se refere a um composto estruturalmente similar a um aminoácido de ocorrência natural no qual o grupo carboxi C-terminal, ou grupo amino N-terminal, ou o grupo funcional de cadeia lateral foi quimicamente modificado. Por exemplo, o ácido aspártico-(beta-metil éster) é um aminoácido análogo do ácido aspártico; a N-etilglycina é um aminoácido análogo da glicina; ou a alanina carboxamida é um aminoácido análogo da alanina.

Os termos "inflamação gastrointestinal", "doença intestinal inflamatória", e "inflamação do trato intestinal" são usados aqui intercambiavelmente para significar inflamação de qualquer porção do trato gastrointestinal, desde o esôfago até o cólon sigmóide ou do término do cólon até o reto. A inflamação pode ser aguda, mas em geral, a composição desta invenção é usada para tratar condições crônicas.

Um "formulação de dose oral simples" é a dose que fornece uma quantidade da droga para produzir uma concentração terapêutica maior que o EC50 para aquela droga, mas menor que o LD50. Uma outra medida de formulação de dose oral simples é que fornece uma quantidade da droga necessária para produzir uma concentração sérica maior que o EC50 para aquela droga, mas menor que o LD50. Para qualquer medida, de formulação de dose oral simples é preferivelmente uma quantidade de droga que produz uma concentração sérica no mínimo 10% menor que o LD50, e ainda mais pref erivelmente 50%, 75%, ou mesmo 90% menos que o LD50. A expressão "farmaceuticamente aceitável" é empregada aqui para se referir àqueles compostos, materiais, composições, e/ou formas de dosagem que estão, dentro do escopo do julgamento médico correto, adequados para uso em contato com tecidos de seres humanos e animais sem toxicidade excessiva, irritação, resposta alérgica, ou outro problema ou complicação, comensurado a uma taxa benefício/risco razoável.

A expressão "catalisador farmaceuticamente aceitável", conforme usada aqui, significa um material, composição ou veículo farmaceuticamente aceitável, tal como um preenchedor líquido ou sólido, diluente, excipiente, solvente ou material encapsulador, envolvido no transporte os carregamento dos inibidores da presente invenção de um órgão, ou porção do corpo, a outro órgão, ou porção do corpo. Cada catalisador deve ser "aceitável" no sentido de ser compatível com outros ingredientes da formulação e não ser prejudicial ao paciente. Alguns exemplos de materiais que podem servir como catalisadores farmaceuticamente aceitáveis incluem: (1) açúcares, como lactose, glicose e sacarose; (2) amidos, como amido de milho e amido de batata; (3) celulose, e seus derivados, como carboximetilcelulose sódica, etil celulose e acetato de celulose; (4) tragacanto em pó; (5) malte; (6) gelatina; (7) talco; (8) excipientes, excipientes como manteiga de cacau e cera de supositórios; (9) óleos, como óleo de amendoim, óleo de semente de algodão, óleo de açafrão, óleo de sésamo, óleo de oliva, óleo de milho e óleo de soja; (10) glicóis, como o propilenoglicol; (11) polióis, como a glicerina sorbitol, manitol e polietilenoglicol; (12) ésteres, como o etil oleato e etil laureato; (13) ágar;

(14) agentes tamponantes, como hidróxido de magnésio e hidróxido de alumínio; (15) ácido algínico; (16) água livre de pirogênio; (17) solução salina isotônica; (18) solução de Ringer; (19) álcool etílico; (20) soluções tampão de fosfato; e (21) outras substâncias compatíveis não tóxicas empregadas em formulações farmacêuticas.

O termo "sais farmaceuticamente aceitáveis" nesses exemplos se referem aos sais de adição básica orgânicos e inorgânicos, relativamente não tóxicos, dos compostos da presente invenção.

O termo "derivado farmaceuticamente funcional" se refere a qualquer derivado farmaceuticamente aceitável de um inibidor da presente invenção, por exemplo, um éster ou uma amida, que na administração a um mamífero é capaz de fornecer (direta ou indiretamente) o inibidor. Tais derivados são reconhecíveis por aquelas pessoas habilitadas na ciência farmacêutica, sem experimentação indevida. Contudo é feita referência aos ensinamentos do Burger's Medicinal Chemistry and Drug Discovery, 5th ed. , Vol 1.

Conforme usado aqui, o termo "condições fisiológicas" se refere à temperatura, pH, força iônica, viscosidade, e parâmetros bioquímicos semelhantes que são compatíveis com um organismo viável, e/ou que exista tipicamente na forma intracelular em uma célula viável de mamífero.

O termo "pró-fármaco", conforme usado aqui, abrange compostos que, sob condições fisiológicas, são convertidos em agentes terapeuticamente ativos. Um método comum de fazer um pró-fármaco é incluir grupos selecionados que estejam hidrolisados sob condições fisiológicas para revelar a molécula desejada. Em outras concretizações, o pró-fármaco é convertido através de uma atividade enzimática do animal hospedeiro.

O termo "prazo de validade" se refere tipicamente ao período de tempo para o qual as características de desempenho de um inibidor permanecem no pico. Conforme usado aqui, o termo "T90" se refere à quantidade de tempo que leva para a preparação do inibidor degradar-se ao ponto em que ele tenha 9 0% da atividade da amostra inicial, por exemplo, uma diminuição de 10%. Da mesma forma, o termo "T50" se refere à quantidade de tempo que leva para a preparação do inibidor degradar-se ao ponto em que ele tenha 50% da atividade da amostra inicial, por exemplo, uma diminuição de 50%. 0 prazo de validade, se relatado como T90 ou T50, para uma dada preparação farmacêutica de um inibidor é medido para a preparação conforme ela é embalada para o uso por uma instituição de saúde ou paciente.

Conforme usado aqui, o termo "substancialmente solúvel" se refere a inibidores que podem ser dissolvidos em uma mistura de propulsor inalante para formar uma solução substancialmente clara a turva que não será separada em camadas ou formará um precipitado quando deixada sem agitação por no mínimo 24 horas à temperatura ambiente.

Por "adesivo transdérmico" entenda-se um sistema capaz de fornecer uma droga a um paciente através da pele, ou qualquer superfície externa adequada, incluindo as membranas mucosas, como aquelas encontradas dentro da boca. Tais sistemas de entrega geralmente abrangem um suporte flexível, um adesivo e uma matriz de retenção da droga, o suporte protegendo o adesivo e a matriz e o adesivo segurando o conjunto sobre a pele do paciente. Em contato com a pele, a matriz de retenção da droga libera o inibidor na pele e a droga passa através da pele para o sistema do paciente.

O termo "agente quaternizante" se refere a um composto químico que converte um átomo de nitrogênio com menos de quatro substituintes em um átomo de nitrogênio carregado positivamente com quatro substituintes. Exemplos de "agentes quaternizantes" incluem haletos de alquila inferior, como cloretos, brometos, e iodetos de metil, etil, propil, e butil; sulfatos dialquila como dimetil, dietil, dibutil, e sulfatos diamil, haletos de cadeia longa como cloretos, brometos e iodetos de decil, lauril, miristil, e estearil, haletos aralquila como brometos benzil, e fenetil, e outros.

O termo "índice terapêutico" se refere ao Índice terapêutico de uma droga definido como LD50/ED50.

Uma "quantidade terapeuticamente efetiva" de um composto, por exemplo, como um inibidor dipeptidil peptidase da presente invenção, em relação ao método de tratamento exposto, se refere a uma quantidade do composto(s) em uma preparação que, quando administrada como parte de um regime de dosagem desejável (a um mamífero, preferivelmente um humano) alivia um sintoma, melhora um estado, ou atrasa o início de estados de doença de acordo com padrões clinicamente aceitáveis para o transtorno ou estado a ser tratado ou o propósito cosmético, por exemplo, em um taxa benefício/risco razoável, aplicável a qualquer tratamento médico. Uma "quantidade terapeuticamente efetiva" de um composto, por exemplo, como um inibidor da presente invenção, em relação ao método de tratamento exposto, se refere a uma quantidade do composto(s) em uma preparação que, quando administrada como parte de um regime de dosagem desejável (a um mamífero, preferivelmente um humano) alivia um sintoma, melhora um estado, ou atrasa o início de estados da doença de acordo com padrões clinicamente aceitáveis para o transtorno ou estado a ser tratado ou o propósito cosmético, por exemplo, em um taxa benefício/risco razoável aplicável a qualquer tratamento médico.

Deve ser entendido que todas as estruturas genéricas citadas aqui, em relação às combinações apropriadas de substituintes, pretendem cobrir aquelas concretizações permitidas pela valência e estabilidade. Concretizações Exemplares

(i). Compostos

Compostos úteis serão descritos abaixo usando várias fórmulas. Em cada caso, as variáveis nas fórmulas são definidas especificamente para cada fórmula individual. Uma definição de uma variável para uma fórmula não deve ser usada para alterar a definição fornecida por uma outra formula, embora uma variável que não tenha sido definida para uma fórmula possa ser interpretada por analogia com uma definição em outra parte para uma fórmula similar.

Concretização A

Uma classe representativa dos compostos para uso no método da presente invenção é representada pela fórmula I: <formula>formula see original document page 64</formula>

na qual

A representa um heterociclo de 4-8 membros incluindo N e o carbono Ca;

Z representa C ou N;

W representa um grupo funcional que reage com um resíduo de sitio ativo da protease alvo, como por exemplo, -CN, -CH=NR5,

<formula>formula see original document page 64</formula>

R1 representa um resíduo de aminoácido ou análogo de aminoácido ligado de modo C-terminal, ou um peptídeo ou análogo de peptídeo, ou <formula>formula see original document page 64</formula> ; em que a ligação entre R1 e N é uma ligação tioxamida;

R2 é ausente ou representa uma ou mais substituições no anel A, cada um dos quais é independentemente, um halogênio, alquila inferior, alquenila inferior, alquinila inferior, carbonil (como um carboxil, éster, formato, ou cetona), tiocarbonil (como um tioéster, tioacetato, ou tioformato), amino, acilamino, amido, nitro, sulfato, sulfonato, sulfonamida, -(CH2)m-R7, -(CH2)m-OH, -(CH2)m-O- alquila inferior, -(CH2)m-0-alquenila inferior, -(CH2)n-O- (CH2)m-R7, -(CH2)m-SH, - (CH2)m-S-alquila inferior, -(CH2)m- S-alquenila inferior, ou -(CH2)n-S-(CH2)m-R7- azido, ciano, isocianato, tiocianato, isotiocianato, cianato,

<formula>formula see original document page 64</formula> quando Z é Nf R3 é ausente;

quando Z é C, R3 representa um hidrogênio ou um halogênio, alquila inferior, alquenila inferior, alquinila inferior, carbonil, tiocarbonil, amino, acilamino, amido, nitro, sulfato, sulfonato, sulfonamido, -(CH2)m-R7,

(CH2)m-OH, - (CH2)m-0-alquila inferior, - (CH2)m-0-alquenila inferior, -(CH2)n-O-(CH2)m-R7, -(CH2)m-SH, - (CH2)m-S-alquila inferior, - (CH2) m-S-alquenila inferior, ou -(CH2)n-S-(CH2)m- R7- azido, ciano, isocianato, tiocianato, isotiocianato, cianato, ------N ========C ou ----- C==== C------ R5;

R5 representa H, alquila, alquenila, alquinila, C(X1)(X2)X3, -(CH2)m-R7, -(CH2)n-OH, - (CH2) n-0-alquila, - (CH2) n-0-alquenila, - (CH2) n-0-alquinila, -(CH2)n-O-(CH2)ra-R7, -(CH2)n-SH, - (CH2) n-S-alkyl, - (CH2) n-S-alquenila, -(CH2)n-S- alquinila, -(CH2)n-S-(CH2)m-R7, -C(O)C(O)NH2, ou C (O)C (O) OR'7;

R6 representa hidrogênio, halogênio, alquila, alquenila, alquinila, arila, -(CH2)m-R7, -(CH2)m-OH, (CH2) m-0-alquila, - (CH2) m-0-alquenila, - (CH2)m-0-alquinila, -(CH2)m-O-(CH2)m-R7, -(CH2)m-SH, -(CH2)m-S-alkyl, -(CH2)m-S- alquenila, - (CH2) m-S-alquinila, - (CH2) m-S-(CH2) m-R7,

<formula>formula see original document page 65</formula>

R7 representa, para cada ocorrência, uma arila, aralquila, cicloalquila, cicloalquenila, ou heterociclo substituído ou insubstituído; R' 7 representa, para cada ocorrência, hidrogênio, uma alquila, alquenila, arila, aralquila, cicloalquila, cicloalquenila, ou heterociclo; e

Y1 e Y2 podem independentemente ou juntos ser OH, ou um grupo capaz de ser hidrolisado por um grupo hidroxila, incluindo derivativos cíclicos em que Y1 e Y2 são conectados através de um anel tendo de 5 a 8 átomos na estrutura de anel (como um pinacol ou semelhante) ,

R50 representa O ou S;

R51 representa N3, SH2, NH2, NO2 ou OR'7;

R52 representa hidrogênio, uma alquila inferior, amina, OR'7, ou um sal farmaceuticamente aceitável, ou R5^ e R52 tomados juntos com o átomo fosforoso ao qual eles estão anexados completam um anel heterocíclico que tem de 5 a 8 átomos na estrutura de anel;

X1 representa um halogênio;

X2 e X3; cada um, representam um hidrogênio ou um halogênio;

m é zero ou um número inteiro na faixa de 1 a 8; e η é um número inteiro na faixa de 1 a 8.

Em certas concretizações, o anel A é um anel de 5, 6, ou 7 membros, por exemplo, representado por

<formula>formula see original document page 66</formula>

e mais preferivelmente um anel de 5 ou 6 membros. 0 anel pode ainda, opcionalmente, ser substituído.

Em certas concretizações, W representa

<formula>formula see original document page 66</formula> Em certas concretizações, R1 é

<formula>formula see original document page 67</formula>

sendo que R36 é um pequeno grupo hidrofóbico, por exemplo, uma alquila inferior ou um halogênio e R38 hidrogênio, ou, R36 e R38 juntos formam um heterociclo de 4-7 membros incluindo o N e o carbono Ca, conforme definido para A acima; e R40 representa um resíduo de aminoãcido ou análogo de aminoácido ligado de forma C-terminal, ou um peptídeo ou análogo de peptídeo ligado de forma C-terminal, ou um grupo protetor amino.

Em certas concretizações, R2 é ausente, ou representa um pequeno grupo hidrofóbico como uma alquila inferior ou um halogênio.

Em certas concretizações, R3 é um hidrogênio, ou representa um pequeno grupo hidrofóbico como uma alquila inferior ou um halogênio.

Em certas concretizações, R5 é um hidrogênio, ou uma alquila inferior halogenada.

Em certas concretizações, Xi é flúor, e X2 e X3, se forem halogênios, são flúor.

Também são considerados equivalentes quaisquer compostos que possam ser convertidos hidroliticamente em quaisquer dos compostos acima mencionados incluindo ésteres de ácido borônicos e haletos, e equivalentes carbonil incluindo acetais, hemiacetais, cetais, e hemicetais, e análogos dipeptídeos cíclicos.

Seqüências de peptídeos mais longas são necessárias para a inibição de certas proteases e para melhorar a especificidade da inibição em alguns casos.

Em certas concretizações, o método exposto utiliza, como um inibidor DPIV, um análogo de ácido borônico de aminoácido ou derivado de aminoácido, como o aminoácido de tioxamida modificado. Por exemplo, a presente invenção contempla o uso de derivados de boro-prolil no método exposto. Inibidores derivados de ácido borônico exemplares da presente invenção são representados pela fórmula II:

<formula>formula see original document page 68</formula>

na qual

R1 representa um resíduo de aminoácido ou análogo de aminoácido ligado de modo C-terminal, ou um peptídeo ou análogo de peptídeo ligado de modo C-terminal, ou <formula>formula see original document page 68</formula> em que a ligação entre Ri e N é uma ligação tioxamida;

R6 representa hidrogênio, halogênio, alquila, alquenila, alquinila, arila, -(CH2)m-R7, -(CH2)m-OH, (CH2)m-0-alquila, - (CH2)m-0-alquenila, - (CH2)m-0-alquinila, -(CH2)m-O-(CH2)m-R7, -(CH2)m-SH, -(CH2)m-S-alkyl, -(CH2)m-S- alquenila, - (CH2) m-S-alquinila, -(CH2)m-S-(CH2)m-R7,

<formula>formula see original document page 68</formula>

R7 representa uma arila, uma cicloalquila, uma cicloalquenila, ou um heterociclo; R8 © R9 cada um, independentemente, representam hidrogênio, alquila, alquenila, -(CH2)m-R7, -C(=0)-alquila, -C(=0)-alquenila, -C(=0)-alquinila, -C(=0)-(CH2) m-R7,

ou R8 e R9 tomados juntamente com o átomo de N ao qual eles estão anexados, completam um anel heterocíclico que tem de 4 a 8 átomos na estrutura de anel;

R11 e R12 , cada um, independentemente, representam hidrogênio, uma alquila, ou um sal farmaceuticamente aceitável, ou R11 e R12 tomados juntamente como os átomos O-B-O aos quais eles estão anexados completam a um anel heterocíclico que tem de 5 a 8 átomos na estrutura de anel;

m é zero ou um número inteiro na faixa de 1 a 8; e η é um número inteiro na faixa de 1 a 8.

Em outras concretizações, os compostos incluem análogos aldeídos de derivados de prolina ou prolil, como derivados de tioxamida. Compostos derivados de aldeído exemplares da presente invenção são representados pela fórmula III:

<formula>formula see original document page 69</formula>

na qual

R1 representa um resíduo de aminoácido ou análogo de aminoácido ligado de modo C-terminal, ou um peptídeo ou análogo de peptídeo ligado de modo C-terminal, ou 5

<formula>formula see original document page 69</formula>

em que a ligação entre Ri e N é uma ligação tioxamida; R6 representa hidrogênio, halogênio, alquila, alquenila, alquinila, arila, -(CH2)m-R7, -(CH2)m-OH, (CH2) m-Q-alquila, -(CH2)m-0-alquenila, - (CH2)m-0-alquinila, -(CH2)m-O-(CH2)m-R7, -(CH2)m-SH, - (CH2)m-S-alkyl, -(CH2)m-S- alquenila, - (CH2) m-S-alquinila, -(CH2)m-S-(CH2)m-R7,

<formula>formula see original document page 70</formula>

R7 representa uma arila, uma cicloalquila, uma cicloalquenila, ou um heterociclo;

R8 e R9, cada um, independentemente, representam hidrogênio, alquila, alquenila, -(CH2)m-R7, -C(=0)-alquila, -C (=O)-alquenila, -C (=0)-alquinila, -C (=0) - (CH2) m-R7,

ou R8 e R9 tomados juntamente com o átomo de N ao qual eles estão anexados, completam um anel heterocíclico que tem de 4 a 8 átomos na estrutura de anel; e

m é zero ou um número inteiro na faixa de 1 a 8; e η é um número inteiro na faixa de 1 a 8.

Em concretizações adicionais, os compostos incluem um análogo de cetona halo-metílica de um aminoácido ou derivado de aminoácido, como um aminoácido modificado de tioxamida. Compostos exemplares dessa classe incluem os compostos representados pela fórmula IV:

<formula>formula see original document page 70</formula>

na qual

R1 representa um resíduo de aminoácido ou análogo de aminoácido ligado de modo C-terminal, ou um peptídeo ou análogo de peptídeo ligado de modo C-terminal, ou <formula>formula see original document page 70</formula> em que a ligação entre R1 e N é uma ligação tioxamida,-

R6 representa hidrogênio, halogênio, alquila, alquenila, alquinila, arila, -(CH2)m-R7, -(CH2)m-OH, (CH2)m-O-alquila, - (CH2)m-O-alquenila, - (CH2)m-O-alquinila, -(CH2)m-O-(CH2)m-R7, -(CH2)m-SH, - (CH2)m-S-alkyl, -(CH2)m-S- alquenila, - (CH2) m-S-alquinila, -(CH2)m-S-(CH2)m-R7,

<formula>formula see original document page 71</formula>

R7 representa uma arila, uma cicloalquila, uma cicloalquenila, ou um heterociclo;

R8 e R9, cada um, independentemente, representam hidrogênio, alquila, alquenila, -(CH2)m-R7, -C(=O)-alquila, -C(=O)-alquenila, -C(=O)-alquinila, -C(=O)- (CH2)m-R7,

ou R8 e R9 tomados juntamente com o átomo de N ao qual eles estão anexados, completam uma anel heterocíclico que tem de 4 a 8 átomos na estrutura de anel;

X1, X2 e X3, cada um, representam um hidrogênio ou um halogênio; e

m é zero ou um número inteiro na faixa de 1 a 8; e η é um número inteiro na faixa de 1 a 8.

Em certas concretizacoes, os compostos sao peptideos ou peptideomiméticos incluindo um grupo prolil ou análogo dele na posição de especificidade PI, e um aminoácido não polar na posição de especificidade P2, por exemplo, um aminoácido não polar como alanina, leucina, isoleucina, valina, prolina, fenilalamina, triptofano ou metionina, e um análogo desses, como um análogo de tioxamida. Por exemplo, o composto pode incluir uma seqüência dipetídeo Ala-Pro ou Pro-Pro ou equivalente, e é representado nas fórmulas V e VI:

<formula>formula see original document page 72</formula>

Em certas concretizações, o anel A é um anel de 5, 6, ou 7 membros, por exemplo, representado por

<formula>formula see original document page 72</formula>

Em certas concretizações, R32 é um pequeno grupo hidrofóbico, por exemplo, uma alquila inferior ou um halogênio.

Em certas concretizações, R30 representa um resíduo de aminoácido ou análogo de aminoácido ligado de forma C- terminal, ou um peptídeo ou análogo de peptídeo ligado de forma C-terminal, ou um grupo protetor amino em que opcionalmente, quando aplicável, a ligação entre R30 e o N ao qual ele está anexado é uma ligação tioxamida.

Em certas concretizações, R30 é H.

Em certas concretizações, R2 é ausente, ou é um halogênio, azido, ciano, isocianato, tiocianato, isotiocianato, cianato, -ΝΞΞΞΟ.-c=c-R8 ou pequeno grupo hidrofóbico como uma alquila inferior.

Em certas concretizações, Z é C e R3 é um hidrogênio, ou um pequeno grupo hidrofóbico como uma alquila inferior ou um halogênio.

Outra classe representativa dos compostos para uso no método exposto inclui peptideos e peptideomiméticos de (D) - Ala-(L)-Ala, por exemplo, preservando a orientação diastereomérica, na qual um ou mais grupos amida são substituídos por um ou mais grupos tioxamida. Tais compostos incluem compostos representados pela fórmula VII:

<formula>formula see original document page 73</formula>

na qual

W representa um grupo funcional que reage com um resíduo de sítio ativo da protease alvo, como por exemplo, -CN, -CH=NRc5,

<formula>formula see original document page 73</formula>

R1 representa um resíduo de aminoácido ou análogo de aminoácido, ou um peptídeo ou análogo de peptídeo ligado de forma C-terminal, ou um grupo protetor amino, ou

<formula>formula see original document page 73</formula>

em que, opcionalmente quando aplicável, a ligação entre R1 e o N ao qual ele está anexado é uma ligação tioxamida.

R6 representa hidrogênio, halogênio, alquila, alquenila, alquinila, arila, -(CH2)m-R7, -(CH2)m-OH, (CH2)m-0-alquila, - (CH2)m-0-alquenila, - (CH2)m-O-alquinila, -(CH2)m-O-(CH2)m-R7, -(CH2)m-SH, - (CH2)m-S-alkyl, -(CH2)m-S- alquenila, - (CH2) m-S-alquinila, -(CH2)m-S-(CH2)m-R7,

<formula>formula see original document page 74</formula>

R7 representa, para cada ocorrência, uma arila, aralquila, cicloalquila, cicloalquenila, ou heterociclo substituído ou insubstituído;

R'7 representa, para cada ocorrência, hidrogênio, uma alquila, alquenila, arila, aralquila, cicloalquila, cicloalquenila, ou heterociclo substituído ou insubstituído;

R61 e R-62' independentemente, representam pequenos grupos hidrofóbicos;

Y1 e Y2 podem independentemente ou juntos ser OH, ou um grupo capaz de ser hidrolisado por um grupo hidroxila, incluindo derivativos cíclicos em que Y1 e Y2 são conectados através de um anel tendo de 5 a 8 átomos na estrutura de anel (como um pinacol ou semelhante) ,

R50 representa O ou S;

R51 representa N3, SH2, NH2, NO2 ou OR'7;

R52 representa hidrogênio, uma alquila inferior, amina, OR'7, ou um sal farmaceuticamente aceitável, ou R51 e R52 tomados juntos com o átomo fosforoso ao qual eles estão anexados completam um anel heterocíclico que tem de 5 a 8 átomos na estrutura de anel; X1 representa um halogênio;

X2 e X3, cada um, representam um hidrogênio ou um halogênio

m é zero ou um número inteiro na faixa de 1 a 8; e

η um número inteiro na faixa de 1 a 8.

Em certas concretizações, Ri é sendo que R36 é um pequeno grupo hidrofóbico, por exemplo, uma alquila inferior ou um halogênio e R38 hidrogênio, ou, R36 e R38 juntos formam um heterociclo de 4-7 membros incluindo o N e o carbono Ca , conforme definido para A acima; e R40 representa um resíduo de aminoácido ou análogo de aminoácido ligado de forma C-terminal, ou um peptídeo ou análogo de peptídeo ligado de forma C-terminal, ou um grupo protetor amino.

Em certas concretizações, Z é C e R3 é um hidrogênio, ou um pequeno grupo hidrofóbico como uma alquila inferior ou um halogênio.

Em certas concretizações, R5 é um hidrogênio, ou uma alquila inferior halogenada.

Em certas concretizações, Xx é flúor, e X2 e X3, se forem halogênios, são flúor.

Em certas concretizações, R61 e R62, independentemente, representam alquila inferiores, como metil, etil, propil, isopropil, terc-butil ou semelhantes.

Concretização B

Uma outra classe representativa dos compostos para uso no método da presente invenção é representada pela fórmula VIII:

<formula>formula see original document page 76</formula>

na qual

R1 representa hidrogênio, halogênio ou alquila inferior, alquenila inferior, ou alquinila inferior, preferivelmente alquila inferior como metil, etil, etc., opcionalmente substituídos por um ou mais substituintes como halogênio, hidroxi, alcoxi, etc.

R2 representa uma alquila inferior ramificada, aralquila, arila, heteroaralquila, heteroarila, cicloalquila, ou cicloalquilalquila, preferivelmente um grande grupo hidrofóbico, como ciclohexil, t-butil, etc., opcionalmente substituído por um ou mais pequenos substituintes como halogênio, hidroxi, alcoxi, etc..

R3 representa hidrogênio ou um grupo protetor amino, preferivelmente hidrogênio;

R4 representa hidrogênio, um resíduo de aminoácido ou análogo de aminoácido ligado de forma C-terminal, ou um peptídeo ou análogo de peptídeo ligado de forma C-terminal, ou um grupo protetor amino, ou

<formula>formula see original document page 76</formula>

preferivelmente hidrogênio, em que, opcionalmente, quando aplicável, a ligação entre R4 e o N ao qual ele está anexado é uma ligação tioxamida.

R6 representa hidrogênio, halogênio, alquila, alquenila, alquinila, arila, -(CH2)m-R7, -(CH2)m-OH, (CH2)m-0-alquila, - (CH2)m-0-alquenila, - (CH2)m-0-alquinila, -(CH2)m-O-(CH2)m-R7, -(CH2)m-SHi -(CH2)m-S-alkyl, -(CH2)m-S- alquenila, - (CH2) m-S-alquinila, -(CH2)m-S-(CH2)m-R7,

R7 representa, para cada ocorrência, uma arila, aralquila, cicloalquila, cicloalquenila, ou heterociclo substituído ou insubstituído;

R11 e R12, cada um, independentemente, representam hidrogênio, uma alquila, ou um sal farmaceuticamente aceitável, ou R11 e R12 tomados juntamente com os átomos Ο- B-O aos quais eles estão anexados completam a um anel heterocíclico que tem de 5 a 8 átomos na estrutura de anel; m é zero ou um número inteiro na faixa de 1 a 8.

Em outras concretizações, os compostos incluem análogos aldeídos de derivados de alanina ou alanil, como derivados de tioxamida modificados. Compostos exemplares da presente invenção são representados pela fórmula IX:

<formula>formula see original document page 77</formula>

na qual

R1 representa hidrogênio, halogênio ou alquila inferior, alquenila inferior, ou alquinila inferior, preferivelmente alquila inferior como metil, etil, etc., opcionalmente substituídos por um ou mais substituintes como halogênio, hidroxi, alcoxi, etc.

R2 representa uma alquila inferior ramificada, aralquila, arila, heteroaralquila, heteroarila, cicloalquila, ou cicloalquilalquila, preferivelmente um grande grupo hidrofóbico, como ciclohexil, t-butil, etc., opcionalmente substituído por um ou mais pequenos substituintes como halogênio, hidroxi, alcoxi, etc.

R3 representa hidrogênio ou um grupo protetor amino, preferivelmente hidrogênio;

R4 representa hidrogênio, um resíduo de aminoácido ou análogo de aminoácido ligado de forma C-terminal, ou um peptídeo ou análogo de peptídeo ligado de forma C-terminal, ou um grupo protetor amino, ou

<formula>formula see original document page 78</formula>

preferivelmente hidrogênio, em que opcionalmente, quando aplicável, a ligação entre R4 e o N ao qual ele está anexado é uma ligação tioxamida.

R6 representa hidrogênio, halogênio, alquila, alquenila, alquinila, arila, -(CH2)m-R7, -(CH2)m-OH, (CH2)m-O-alquila, - (CH2)m-O-alquenila, - (CH2)m-O-alquinila, -(CH2)m-O-(CH2)m-R7, -(CH2)m-SH, - (CH2)m-S-alkyl, -(CH2)m-S- alquenila, - (CH2) m-S-alquinila, -(CH2)m-S-(CH2)m-R7,

R7 representa, para cada ocorrência, uma arila, aralquila, cicloalquila, cicloalquenila, ou heterociclo substituído ou insubstituído;

m é zero ou um número inteiro na faixa de 1 a 8. Em concretizações adicionais, os compostos são análogos de halo-metil cetona de um aminoácido ou aminoácido modificado de tioxamida. Inibidores exemplares dessa classe incluem os compostos representados pela fórmula X:

<formula>formula see original document page 78</formula> na qual

R1 representa hidrogênio, halogênio ou alquila inferior, alquenila inferior, ou alquinila inferior, preferivelmente alquila inferior como metil, etil, etc., opcionalmente substituídos por um ou mais substituintes como halogênio, hidroxi, alcoxi, etc.

R2 representa uma alquila inferior ramificada, aralquila, arila, heteroaralquila, heteroarila, cicloalquila, ou cicloalquilalquila, preferivelmente um grande grupo hidrofóbico, como ciclohexil, t-butil, etc., opcionalmente substituído por um ou mais pequenos substituintes como halogênio, hidroxi, alcoxi, etc..

R3 representa hidrogênio ou um grupo protetor amino, preferivelmente hidrogênio;

R4 representa hidrogênio, um resíduo de aminoácido ou análogo de aminoácido ligado de forma C-terminal, ou um peptídeo ou análogo de peptídeo ligado de forma C-terminal, ou um grupo protetor amino, ou

<formula>formula see original document page 79</formula>

preferivelmente hidrogênio, em que opcionalmente, quando aplicável, a ligação entre R4 e o N ao qual ele está anexado é uma ligação tioxamida.

R5 representa hidrogênio, halogênio, alquila, alquenila, alquinila, arila, -(CH2)m-R7, -(CH2)m-OH, (CH2)m-0-alquila, - (CH2)m-0-alquenila, - (CH2)m-0-alquinila, -(CH2)m-O-(CH2)m-R7, -(CH2)m-SH, -(CH2)m-S-alkyl, -(CH2)m-S- alquenila, - (CH2) m-S-alquinila, -(CH2)m-S-(CH2)m-R7,

R7 representa, para cada ocorrência, uma arila, aralquila, cicloalquila, cicloalquenila, ou heterociclo substituído ou insubstituído;

X1, X2 e X3, cada um, representam um hidrogênio ou um halogênio;

m é zero ou um número inteiro na faixa de 1 a 8.

Em certas concretizações, o composto é um peptídeo ou peptidomimético incluindo um grupo alaninil ou análogo dele, com um análogo de tioxamida, na posição de especificidade PI, e um aminoácido de ocorrência não natural na posição de especificidade P2, ou um análogo dele, como um análogo de tioxamida. Por exemplo, o composto pode incluir uma seqüência dipetídeo Ciclohexilglicina-Ala ou t-butilglicina-Ala ou equivalente, e é representado na fórmula XI:

R1 representa hidrogênio, halogênio ou alquila inferior, alquenila inferior, ou alquinila inferior, preferivelmente alquila inferior como metil, etil, etc., opcionalmente substituídos por um ou mais substituintes como halogênio, hidroxi, alcoxi, etc.

R2 representa uma alquila inferior ramificada, aralquila,arila, heteroaralquila, heteroarila, cicloalquila, ou cicloalquilalquila, preferivelmente um grande grupo hidrofóbico, como ciclohexil, t-butil, etc., opcionalmente substituído por um ou mais pequenos substituintes como halogênio, hidroxi, alcoxi, etc..

R3 representa hidrogênio ou um grupo protetor amino, preferivelmente hidrogênio;

<formula>formula see original document page 80</formula> R4 representa hidrogênio, um resíduo de aminoácido ou

análogo de aminoácido ligado de forma C-terminal, ou um

peptídeo ou análogo de peptídeo ligado de forma C-terminal,

ou um grupo protetor amino, ou

<formula>formula see original document page 81</formula>

preferivelmente hidrogênio, em que opcionalmente, quando aplicável, a ligação entre R4 e o N ao qual ele está anexado é uma ligação tioxamida.

R6 representa hidrogênio, halogênio, alquila, alquenila, alquinila, arila, -(CH2)m-R7, -(CH2)m-OH, (CH2)m-0-alquila, - (CH2)m-0-alquenila, - (CH2)m-0-alquinila, -(CH2)m-O-(CH2)m-Rv, -(CH2)m-SH, -(CH2)m-S-alkyl, -(CH2)m-S- alquenila, - (CH2) m-S-alquinila, -(CH2)m-S-(CH2)m-R7,

R7 representa, para cada ocorrência, uma arila, aralquila, cicloalquila, cicloalquenila, ou heterociclo substituído ou insubstituído;

W representa um grupo funcional que reage com um resíduo de sítio ativo da protease alvo, como por exemplo,

<formula>formula see original document page 81</formula>

preferivelmente

<formula>formula see original document page 81</formula>

Y1 e Y2 são, independentemente, 0H, ou um grupo capaz de ser hidrolisado, por exemplo, sob condições fisiológicas, por um grupo hidroxila, incluindo derivativos cíclicos em que Y1 e Y2 são conectados através de um anel tendo de 5 a 8 átomos na estrutura de anel (como um pinacol ou semelhante),

R50 representa O ou S;

R51 representa N3, SH, NH2, NO2 or OR'7;

R52 representa hidrogênio, uma alquila inferior, amina, OR'7, ou um sal farmaceuticamente aceitável, ou R5I e R52 tomados junto com o átomo fosforoso ao qual eles estão anexados completam um anel heterociclico que tem de 5 a 8 átomos na estrutura de anel;

R53 representa H, alquila, alquenila, alquinila, C(X1)(X2)X3, -(CH2)m-R7, -(CH2)n-OH, - (CH2) n-O-alquila, - (CH2) n-Ο-alquenila, - (CH2)n-O-alquinila, -(CH2)n-O-(CH2)m-R7, -(CH2)n-SH, - (CH2)n-S-alquila, - (CH2) n-S-alquenila, -(CH2)n- S-alquinila, -(CH2)n-S-(CH2)m-R7, -C(O)C(O)NH2, ou C(O)C(O)OR'7; preferivelmente um hidrogênio, ou uma alquila inferior halogenada;

X1 representa um halogênio, preferivelmente um flúor; m é zero ou um número inteiro na faixa de 1 a 8; e η um número inteiro na faixa de 1 a 8.

Uma outra classe representativa de compostos para uso no método exposto inclui peptideos de peptidomiméticos de (L)-Ala-(L)-Ciclohexilglicina ou análogos de tioxamida deles, por exemplo, preservando a disposição estérica dos grupos. Tais inibidores incluem compostos representados pela fórmula XII:

<formula>formula see original document page 82</formula>

na qual

R1 representa hidrogênio, halogênio ou alquila inferior, alquenila inferior, ou alquinila inferior, preferivelmente alquila inferior como metil, etil, etc., opcionalmente substituídos por um ou mais substituintes como halogênio, hidroxi, alcoxi, etc.

R2 representa uma alquila inferior ramificada, aralquila,arila, heteroaralquila, heteroarila, cicloalquila, ou cicloalquilalquila, preferivelmente um grande grupo hidrofóbico, como ciclohexil, t-butil, etc., opcionalmente substituído por um ou mais pequenos substituintes como halogênio, hidroxi, alcoxi, etc.;

R3 representa hidrogênio ou um grupo protetor amino, preferivelmente hidrogênio;

R4 representa hidrogênio, um resíduo de aminoácido ou análogo de aminoácido ligado de forma C-terminal, ou um peptídeo ou análogo de peptídeo ligado de forma C-terminal,

ou um grupo protetor amino, ou

<formula>formula see original document page 83</formula>

preferivelmente hidrogênio, em que opcionalmente, quando aplicável, a ligação entre R4 e o N ao qual ele está anexado é uma ligação tioxamida.

R6 representa hidrogênio, halogênio, alquila, alquenila, alquinila, arila, -(CH2)m-R7, -(CH2)m-OH, (CH2)m-0-alquila, -(CH2)m-0-alquenila, - (CH2)m-0-alquinila, -(CH2)m-O-(CH2)m-R7, -(CH2)m-SH, - (CH2)m-S-alkyl, -(CH2)m-S- alquenila, - (CH2) m-S-alquinila, -(CH2)m-S-(CH2)m-R7,

R7 representa, para cada ocorrência, uma arila, aralquila, cicloalquila, cicloalquenila, ou heterociclo substituído ou insubstituído;

W representa um grupo funcional que reage com um resíduo de sítio ativo da protease alvo, como por exemplo, -CN, -CH=NR53,

<formula>formula see original document page 84</formula>

preferivelmente

<formula>formula see original document page 84</formula>

Y1 e Y2 são, independentemente, OH, ou um grupo capaz de ser hidrolisado, por exemplo, sob condições fisiológicas, por um grupo hidroxila, incluindo derivativos cíclicos em que Y1 e Y2 são conectados através de um anel tendo de 5 a 8 átomos na estrutura de anel (como um pinacol ou semelhante),

R50 representa O ou S;

R5I representa N3, SH, NH2, NO2 or OR'7;

R52 representa hidrogênio, uma alquila inferior, amina, OR'7, ou um sal farmaceuticamente aceitável, ou R5i e

R52 tomados juntos com o átomo fosforoso ao qual eles estão anexados completam um anel heterocíclico que tem de 5 a 8 átomos na estrutura de anel;

R53 representa H, alquila, alquenila, alquinila, C(X1)(X2)X3, -(CH2)m-R7, -(CH2)n-OH, - (CH2) n-0-alquila, - (CH2) η-0-alquenila, - (CH2) n-0-alquinila, -(CH2)n-O-(CH2)m-R7, -(CH2)n-SH, - (CH2) n-S-alquila, - (CH2) n-S-alquenila, -(CH2)n- S-alquinila, -(CH2)n-S-(CH2)ra-R7, -C(O)C(O)NH2, ou C(O)C(O)OR'η; preferivelmente um hidrogênio, ou uma alquila inferior halogenada;

Xi representa um halogênio, preferivelmente um flúor; m é zero ou um número inteiro na faixa de 1 a 8; e n um número inteiro na faixa de 1 a 8.

Concretização C

Uma classe representativa dos compostos para uso no método da presente invenção é representada pela

fórmula XIII:

A-G (XIII)

ou um sal farmaceuticamente aceitável dela, em que

A representa um grupo peptidil que é substrato para uma protease de ativação;

A e G são covalentemente ligados por uma ligação que é clivada por uma protease de ativação;

G representa um inibidor de uma protease alvo que, quando clivada a partir de A pela protease de ativação serina, é caracterizada por um ou ambos dos seguintes: é submetida à proto-desboronação e/ou inibe a protease alvo com um Ki de 100nM ou menos; e

o composto de Fórmula XIII abrange um ou mais grupos tioxamida.

Em certas concretizações, a protease de ativação pode ser a protease serina, uma protease cisteina ou uma metaloprotease. Do mesmo modo, a protease alvo pode ser a protease serina, uma protease cisteina ou uma metaloprotease. Em certas concretizações, as proteases alvo e de ativação são proteases de serina.

Em certas concretizações, a protease de ativação é uma protease de clivagem pós-prolil, como a selecionada do grupo que consiste em DPP IV, DPP II, Prolil oligopeptidase (PO) , Proteína de Ativação de Fibroblasto (FAP) e prolil carboxipeptidase. Em certas concretizações, protease de clivagem pós-prolil é uma endopeptidase, e A inclui um terminal amino bloqueado.

Em outras concretizações, a protease de ativação é selecionada do grupo que consiste em trombina (Fator X), matriptase, falcipaina, antigenos específico da próstata (PSA), e homólogos de proteases.

Em certas concretizações, a protease alvo é uma protease de clivagem pós-prolil, como a selecionada do grupo que consiste em DPP IV, DPP II, Prolil oligopeptidase (PO), Proteína de Ativação de Fibroblasto (FAP), e prolil carboxipeptidase.

Em certas concretizações, G é um grupo dipeptidil, por exemplo, derivado de aminoácido de ocorrência natural ou análogos deles.

Em certas concretizações, G representa um inibidor de uma protease alvo que, quando clivada de A pela protease de ativação serina, inibe a protease alvo com um Ki de 100 nM ou menos, e em certas concretizações, 10, 1 ou 0,1 nM ou menos.

Em certas concretizações, o tempo de meia-vida (T1/2) sérico para o inibidor G é de menos de 24 horas, e ainda mais preferivelmente menos de 10 horas, 1 hora ou mesmo 10 min.

Em certas concretizações, a porção de destino A representa um peptídeo ou análogo de peptídeo ligado de forma C-terminal, por exemplo, de 2-10 resíduos de aminoácido, mais preferivelmente 2-4 resíduos, que é um substrato para a enzima de ativação. Em certas

concretizações, A é uma porção dipeptidil ou tripeptidil. Em certas concretizações, A é derivado de aminoácidos de ocorrência natural ou análogos desses, e em certas concretizações, no mínimo um resíduo de A é um análogo de aminoácido de ocorrência não natural.

Em certas concretizações, como quando a porção de destino A é um substrato de DPP IV, o terminal amino do peptídeo ou análogo de peptídeo é bloqueado com um grupo protetor amino-terminal, preferivelmente uma alquila inferior como um grupo metil.

Em certas concretizações, a porção G inibidor é uma porção dipeptidil e um grupo funcional eletrofílico que pode formar uma adução covalente com um resíduo no sítio ativo de uma protease que repõe o terminal carboxil da porção dipeptidil. Por exemplo, a porção inibidor G pode ser representada na fórmula XIV:

Xaa1 - Xaa2-W (xiv)

na qual

Xaa1 é um aminoácido de ocorrência natural ou análogo desse, no qual Xaa1 contém um grupo tioxamida;

Xaa2 é um aminoácido de ocorrência natural ou análogo desse;

W representa um grupo funcional que reage com um resíduo de sítio ativo da protease alvo para formar uma adução covalente, como por exemplo, -CN, -CH=NR5,

<formula>formula see original document page 87</formula>

R5 representa H, alquila, alquenila, alquinila, C(X1)(X2)X3, -(CH2)m-R6, -(CH2)n-OH, - (CH2) n-0-alquila, - (CH2) η-Ο-alquenila, - (CH2) n-0-alquinila, - (CH2) n-0-(CH2) m-R6, -(CH2)n-SH, - (CH2) n-S-alquila, - (CH2) n-S-alquenila, -(CH2)n- S-alquinila, - (CH2)n-S-(CH2)m-R6, -C(O)C(O)NH2, ou C(O) C(O) OR' 7;

R6 representa uma arila, aralquila, cicloalquila, cicloalquenila, ou heterociclo substituído ou insubstituído;

R7 representa, independentemente para cada ocorrência, hidrogênio, uma alquila, alquenila, arila, aralquila, cicloalquila, cicloalquenila, ou heterociclo substituído ou insubstituído; e

Y1 e Y2 podem independentemente ou juntos ser 0H, ou um grupo capaz de ser hidrolisado por um grupo hidroxila, incluindo derivados cíclicos em que Y1 e Y2 são conectados através de um anel tendo de 5 a 8 átomos na estrutura de anel (como um pinacol ou semelhante) ,

R50 representa O ou S;

R51 representa N3, SH2, NH2, NO2 ou OR7;

R52 representa hidrogênio, uma alquila inferior, amina, OR7, ou um sal farmaceuticamente aceitável, ou R51 e

R52 tomados juntos com o átomo fosforoso ao qual eles estão anexados completam um anel heterocíclico que tem de 5 a 8 átomos na estrutura de anel;

X1 representa um halogênio;

X2 e X3, cada um, representam um hidrogênio ou um halogênio;

m é zero ou um número inteiro na faixa de 1 a 8; e η é um número inteiro na faixa de 1 a 8.

Os inibidores pró-soft da presente invenção não passam eles próprios por proto-desboronação e podem ser

interpretados de modo que não inibam a enzima alvo selecionada ou outras enzimas em qualquer extensão significativa, antes de serem clivados pela protease de ativação. Ou seja, os inibidores pró-soft são em si inativos, mas produzem uma porção inibidor G ativa no organismo quando a porção de destino A é removida do inibidor pró-soft.

Uma das características que tornam as moléculas de inibidor pró-soft da presente invenção diferentes dos pró- fármacos típicos é que a porção inibidora, após ser gerada na forma ativa próxima ao alvo, passa por inativação com o passar do tempo, por exemplo, ã medida que ele se difunde para longe da enzima alvo, reduzindo desse modo a possibilidade de efeitos colaterais deletérios que podem resultar da inibição de enzimas que ocorrem em outras partes do paciente. Essa combinação de liberação em uma forma ativa nas proximidades da enzima alvo juntamente com esse mecanismo de desativação "programada" torna as moléculas da invenção mais específicas, efetiva, e seguras (isto é, com menos efeitos colaterais) do que a porção inibidora usada sozinha.

Em certas concretizações, a porção inibidora G é uma porção dipeptidil, por exemplo, derivada de aminoácidos de ocorrência natural ou análogos de aminoácido que abrangem uma porção tioamida.

Em certas concretizações, a porção inibidora G é um inibidor de uma protease alvo que, quando clivada a partir de um inibidor pró-soft pela protease de ativação, inibe a protease alvo com um Ki de 100nM (10-7M) ou menos, e ainda mais preferivelmente, um Ki menor do que 25nM, 10nM (10" 8M), InM (10-9M) , ou 0,1 nM (10-10M). Em certas concretizações, os Ki menores que 10"11M e mesmo 10"12M foram medidos ou estimados para porções inibidoras expostas.

Em certas concretizações, o índice terapêutico do inibidor pró-soft é no mínimo 2 vezes maior do que o índice terapêutico para o grupo inibidor apenas, e mesmo mais preferivelmente 5, 10, 50 ou mesmo 100 vezes maior.

Para muitos dos inibidores pró-soft da invenção, um outro progresso em relação ao grupo inibidor sozinho é o aumento da estabilidade em preparações farmacêuticas, como em solução, óleos ou formulações sólidas. Tal estabilidade pode ser expressa em termos de prazo de validade. Em certas concretizações, o inibidor pró-soft tem um T90 de no mínimo 7 dias, e ainda mais preferivelmente de no mínimo 20, 50, 100 ou mesmo 200 dias. Em certas concretizações, o inibidor pró-soft tem um T90 de no mínimo 20 dias, e ainda mais pref erivelmente de no mínimo 50, 100, 200 ou mesmo 400 dias. Em certas concretizações, o inibidor pró-soft tem um T90 como uma formulação sólida, e dose oral simples, de no mínimo 20, 50, 100 ou mesmo 200 dias. Em certas concretizações, o inibidor pró-soft tem um T90 como uma formulação líquida, em suspensão de dose simples, de no mínimo 20, 50, 100 ou mesmo 200 dias.

As preparações farmacêuticas preferidas dos inibidores pró-soft da invenção são substancialmente livres de pirogênio. Por exemplo, em certas concretizações, a concentração de endotoxina da preparação exposta, conforme análise através do método gel-coágulo (como um teste limite em comparação ao limite máximo permitido pela FDA, conforme declarado no apêndice E do Guia de Endotoxinas) , é de menos que 10 EU/mL ou EU/formulação de dose única, e ainda mais pref erivelmente menos de 5, 1, ou mesmo 0,1 EU/mL ou EU/formulação de dose única.

Em certas concretizações, uma administração única do inibidro prõ-soft, como em injeção de bolus, dose oral ou dose inalada, pode produzir um efeito sustentado in vivo, de modo a fornecer uma quantidade terapeuticamente efetiva (concentração (> ED50) da porção inibidora G por um período de no mínimo 4 horas, e ainda mais pref erivelmente de no mínimo 8, 12, ou mesmo 16 horas.

Em certas concretizações, a porção inibidora G liberada, e particularmente o composto inativo, tem meia- vida (por exemplo, relativa à decomposição em fragmentos de peso molecular mais baixo) no soro ou outro fluido biologicamente relevante maior que 10 horas, e ainda mais pref erivelmente uma meia-vida maior que 24, 4 8 ou 120 horas.

As formulações da presente invenção incluem aquelas formuladas especialmente para a administração oral, bucal, parenteral, transdérmica, por inalação, intranasal, transmucosa, por implante, ou retal. Em certas

concretizações, os inibidores são disponíveis oralmente, e podem ser fornecidos na forma de formulações de doses sólidas adequadas para administração oral a um paciente humano. Em certas concretizações, os inibidores são transdermicamente ativos, e podem ser fornecidos na forma de creme tópico ou suspensão ou adesivo transdérmico.

Um outro aspecto da invenção fornece uma embalagem farmacêutica que inclui um ou mais dos inibidores pró-soft, e instruções (escritas e/ou ilustradas) descrevendo a administração da formulação a um paciente. Meramente ilustrativas, as embalagens exemplares são apropriadamente dosadas e incluem instruções para ou mais de: tratamento ou profilaxia de transtornos metabólicos, gastrointestinais, virais e inflamatórios, diabetes, obesidade, hiperlipidemia, transtornos dermatológicos ou de membrana mucosa, psoríase, cólicas intestinais, constipação, transtornos auto-imunes, encefalomielite, transtornos mediados por complemento, glomerulonefrite, lipodistrofia, dano de tecido; transtornos psicossomáticos, depressivos e neuropsiquiátricos, infecção por HIV, alergias, inflamação, artrite, rejeição de transplante, pressão alta, insuficiência cardíaco-congestiva, tumores, e abortos induzidos por estresse.

Preferivelmente, a embalagem inclui um ou mais inibidores pró-soft com uma formulação de dose oral única.

Quando o inibidor pró-soft incluir um ou mais centros quirais, em certas concretizações, o inibidor pró-soft é fornecido como no mínimo 75 % em mol do eutômero (relativo ao distômero) daquele inibidor pró-soft, e ainda mais preferivelmente no mínimo 85, 90, 95 ou mesmo 99 % em mol. Geralmente, o eutômero com o L-enantiômero (em relação ao carbono Ca) de um aminoácido ou análogo de amino ácido.

Em certas concretizações, o inibidor pró-soft é um grupo tetrapeptidil representado na fórmula XV:

Xaa1'-Xaa2'-Xaa1-Xaa2-W (XV)

na qual

Xaa1', Xaa2', e Xaa2 representam, independentemente, um aminoácido ou análogo de aminoácido de ocorrência natural;

Xaa1 é um aminoácido de ocorrência natural ou análogo desse, no qual Xaa1 contém um grupo tioxamida; W representa um grupo funcional que reage com um resíduo de sítio ativo da protease alvo para formar uma adução covalente, como por exemplo, -CN, -CH=NR5,

<formula>formula see original document page 93</formula>

R5 é independentemente para cada ocorrência, H, alquila, alquenila, alquinila, -C(X1) (X2)X3, -(CH2)ra-Re/ (CH2)n-OH, - (CH2) n-0-alquila, - (CH2) n-0-alquenila, -(CH2)n-O- alquinila, -(CH2)n-O-(CH2)m-R6, -(CH2)n-SH, -(CH2)n-S- alquila, - (CH2) n-S-alquenila, - (CH2) n-S-alquinila, -(CH2)n- S-(CH2)m-R6, -C(O)C(O)NH2, OU -C(O)C(O)OR17;

R5 representa independentemente, para cada ocorrência, uma arila, aralquila, cicloalquila, cicloalquenila, ou heterociclo substituído ou insubstituído;

R7 representa, independentemente para cada ocorrência, hidrogênio, uma alquila, alquenila, arila, aralquila, cicloalquila, cicloalquenila, ou heterociclo substituído ou insubstituído;

Y1 e Y2 podem independentemente ou juntos ser OH, ou um grupo capaz de ser hidrolisado por um grupo hidroxila, incluindo derivativos cíclicos em que Y1 e Y2 são conectados através de um anel tendo de 5 a 8 átomos na estrutura de anel (como um pinacol ou semelhante) , R50 representa O ou S;

R5I representa N3, SH2, NH2, NO2 ou OR7;

R52 representa hidrogênio, uma alquila inferior, amina, OR7, ou um sal farmaceuticamente aceitável, ou R51 e R52 tomados juntos com o átomo fosforoso ao qual eles estão anexados completam um anel heterocíclico que tem de 5 a 8 átomos na estrutura de anel;

X1 representa um halogênio;

X2 e X3, cada um, representam um hidrogênio ou um halogênio;

m é zero ou um número inteiro na faixa de 1 a 8; e η é um número inteiro na faixa de 1 a 8.

Em certas concretizações, Xaa1' inclui um grupo protetor amino-terminal.

Em certas concretizações, Xaa1' é um análogo de aminoácido que tem um carbono CP tetrasubstituído, por exemplo, um carbono tendo quatro substituintes, nenhum dos quais sendo hidrogênio. Por exemplo, Xaa1' pode ser um análogo de aminoácido representado na fórmula:

<formula>formula see original document page 94</formula>

na qual: R8 e R9 representam, independentemente, uma alquila inferior ou halogênio; R10 representa uma alquila inferior, uma arila, um grupo hidroxila ou -(CH2)m-COOH; Z representa um hidrogênio ou um grupo protetor amino- terminal; e m = 0, 1 ou 2. Em certas concretizações, R8 e

R9 representam, cada um, independentemente, uma alquila, mais preferivelmente metil, etil ou propil, e ainda mais preferivelmente um metil. Em certas concretizações, R10 representa uma alquila inferior, mais preferivelmente metil, etil, ou propil, e ainda mais preferivelmente um metil. Em certas concretizações, Ri0 representa uma arila, como fenil ou hidroxifenil (preferivelmente parahidroxi) . Em ainda outras concretizações, Ri0 representa um grupo hidroxila. Em certas concretizações, Ri0 representa -(CH2)m- COOH, sendo que m = 0, 1 ou 2, e pref erivelmente quando m é 0 ou 1.

Em certas concretizações, W é -B(Yi) (Y2) .

Em certas concretizações, R2 é ausente ou representa um halogênio ou alquila inferior.

Em certas concretizações, R4 representa um halogênio ou alquila inferior.

Em certas concretizações, R5 representa um H ou alquila.

Em certas concretizações, Y1 e Y2 são 0H.

Em certas concretizações, W é -B(OH)2.

Em geral, os inibidores pró-soft expostos podem ser divididos em dois grupos distintos com base na sua ativação por uma mesma enzima, ou por uma enzima diferente conforme a enzima alvo do grupo inibidor. 0 primeiro tipo será referido como Inibidores da Protea.se Inteligentes Ativados

pelo alvo ou tipo 1 (TASPI) , o segundo será referido como Inibidores da Protease Inteligentes Direcionados pelo Alvo (TDSPI) ou Tipo 2. Ambas as concretizações dos inibidores pró-soft providenciam a entrega específica do componente ativo à enzima alvo e providenciam a atenuação da atividade inibitória à medida que o grupo inibidor se difunde para longe da enzima alvo.

Os TDSPIs da presente invenção oferecem possibilidades adicionais para a inibição celular específica ou de tecido de enzimas alvo. Em outras palavras, os TDSPIs oferecem a possibilidade de inibir uma dada enzima em um dado tipo celular ou de tecido, mas não em outro. Por exemplo, cada célula do corpo contém um complexo de protease proteasoma. A inibição da função do proteasoma tem várias aplicações terapêuticas e profiláticas práticas. No entanto, é difícil fornecer a inibição da atividade de proteasoma de uma maneira seletiva a um tipo específico de célula ou tecido. Em certas concretizações da presente invenção, os TDSPIs podem ser formados para entregar um grupo inibidor do proteasoma de maneira seletiva pelo uso de um inibidor pró-soft que tenha um grupo de destino para uma protease que é expressa nas células ou tecidos alvo ou em células e tecidos adjacentes. Para ilustrar, ele pode ser ativado inibidora resultante G é um inibidor do proteasoma.

Em certas concretizações de TDSPIs, a porção de destino A não é um substrato eficiente para a protease alvo. Por exemplo, como substrato, a porção de destino A preferivelmente tem um número de rotatividade como um substrato para a proteína alvo de menos que l/segundo, e mais preferivelmente de menos que 0,l/segundo, 0,001/segundo ou mesmo 0,0001/segundo.

Em certas concretizações dos inibidores pró-soft expostos, o grupo de destino é um substrato para uma protease de ativação selecionada entre proteases de serina, proteases de cisteína e metaloproteases. De mesma forma, o grupo inibidor pode ser um inibidor dipeptidil para uma protease alvo selecionada de proteases de serina, proteases de cisteína e metaloproteases. Em certas concretizações, a protease alvo é uma protease de serina. Os inibidores prõ-soft da presente invenção podem ser designados para funcionar com proteases de serina alvo e de ativação incluindo, mas não se limitando a, dipeptidil peptidase-11 (DPP-XI), dipeptidil peptidase IV (DPP IV), dipeptidil peptidase (DPP VIII), dipeptidil peptidase 9 (DPP IX) , aminopeptidase P, proteína alfa de ativação do fibroblasto (seprase), prolil tripeptidil peptidase, prolil oligopeptidase (endoproteinase Pro-C), atratina (dipeptidil-aminopeptidase solúvel), acilaminoacil- peptidase (N-acilpeptideo hidrolase; fMet aminopeptidase) e carboxipeptidase Pro-X lisossômica (angiotensinase C, prolil carboxipeptidase).

Os inibidores prõ-soft da presente invenção podem ser designados para funcionar com metaloproteases alvo e de ativação incluindo carboxipeptidase Pro-X de membrana (carboxipeptidase Ρ) , enzima conversora de angiotensina (Peptidil-dipeptidase A multipeptidase] , colagenase I (colagenase intersticial; matriz metaloproteinase 1; MMP-l; Mcol-A), ADAM 10 (alfa-secretase, metaloproteínas e disintegrina associada à mielina), neprilisina (atriopeptidase; CALLA; CDlO; endopeptidase 24.1 1; encefalinase) , elastase de macrófago (metaloelastase; matriz metaloproteinase 12; MMP-12], Matrilisin (matriz metaloproteinase 7; MMP-7), e neurolisina (endopeptidase 24.16; endopeptidase microssômica; oligopeptidase mitocondrial).

Em certas concretizações, a protease de ativação é uma protease de clivagem pós-prolil, como a selecionado do grupo que consiste em DPP IV, DPP II, Prolil oligopeptidase (PO) , Proteína de Ativação de Fibroblasto (FAP) , e prolil carboxipeptidase. Em certas concretizações quando a protease de clivagera pós-prolil é uma endopeptidase, o terminal amino de A é bloqueado com um grupo protetor amino-terminal, preferivelmente uma alquila inferior como um grupo metil.

Em certas concretizações, o composto é representado pela fórmula XVI:

<formula>formula see original document page 98</formula>

na qual

A representa um heterociclo de 4-8 membros incluindo N e o carbono Ca;

W representa um grupo funcional que reage com um resíduo de sítio ativo da protease alvo para formar uma adução covalente, como por exemplo, -CN, -CH=NR5,

<formula>formula see original document page 98</formula>

R1 representa um peptídeo ou análogo de peptídeo ligado de forma C-terminal que é substrato para uma enzima de ativação;

R2 é ausente ou representa uma ou mais substituições no anel A, cada um dos quais é, independentemente, um halogênio, alquila inferior, alquenila inferior, alquinila inferior, carbonil (como um carboxil, éster, formato, ou cetona), tiocarbonil (como um tioéster, tioacetato, ou tioformato), amino, acilamino, amido, nitro, sulfato, sulfonato, sulfonamido, -(CH2)m-R7, -(CH2)m-OH, -(CH2)m-O- alquila inferior, - (CH2)m-0-alquenila inferior, -(CH2)n-O- (CH2)m-R7, -(CH2)m-SH, -(CH2)m-S-alquila inferior, -(CH2)m- S-alquenila inferior, ou -(CH2)n-S-(CH2)m-R7- azido, ciano, isocianato, tiocianato, isotiocianato, cianato,

<formula>formula see original document page 99</formula>

R3 representa um hidrogênio ou um substituinte que não conjuga o par de elétrons do nitrogênio ao qual ele está anexado, como uma alquila inferior.

R4 representa hidrogênio, halogênio, uma alquila inferior, alquenila inferior, alquinila inferior, arila, ou aralquila;

R5 representa H, alquila, alquenila, alquinila, C(X1)(X2)X3, - (CH2 ) m-R6 , -(CH2)n-OH, - (CH2) n-0-alquila, - (CH2) n-0-alquenila, - (CH2) n-0-alquinila, - (CH2) n-0- (CH2) m-R6 , -(CH2)n-SH, - (CH2)n-S-alquila, - (CH2) n-S-alquenila, -(CH2)n- S-alquinila, - (CH2) n-S-(CH2) m-R6, -C(O)C(O)NH2, ou C(O)C(O)OR'7;

R6 representa independentemente, para cada ocorrência, uma arila, aralquila, cicloalquila, cicloalquenila, ou heterociclo substituído ou insubstituldo;

R7 representa, independentemente para cada ocorrência, hidrogênio, uma alquila, alquenila, arila, aralquila, cicloalquila, cicloalquenila, ou heterociclo substituído ou insubstituído;

R8 representa hidrogênio, -CH3, or -(CH2)n-CH3; Y1 e Y2 podem independentemente ou juntos ser 0H, ou um grupo capaz de ser hidrolisado por um grupo hidroxila, incluindo derivados cíclicos em que Y1 e Y2 são conectados através de um anel tendo de 5 a 8 átomos na estrutura de anel (como um pinacol ou semelhante);

R50 representa 0 ou S;

R51 representa N3, SH2, NH2, NO2 ou OR7;

R52 representa hidrogênio, uma alquila inferior, amina, OR7, ou um sal farmaceuticamente aceitável, ou R51 e R52 tomados juntos com o átomo fosoforoso ao qual eles estão anexados completam um anel heterocíclico que tem de 5 a 8 átomos na estrutura de anel;

X1 representa um halogênio;

X2 e X3, cada um, representam um hidrogênio ou um halogênio;

m é zero ou um número inteiro na faixa de 1 a 8; e η é um número inteiro na faixa de 1 a 8.

Em certas concretizações, R2 é ausente, ou representa um pequeno grupo hidrofóbico.

Em certas concretizações, A representa um heterociclo de 5 membros incluindo Neo carbono Ca;

Em certas concretizações, W é -B(Y1) (Y2) .

Em certas concretizações, R2 é ausente ou representa um halogênio ou alquila inferior.

Em certas concretizações, R4 representa um halogênio ou alquila inferior.

Em certas concretizações, R5 representa um H ou alquila.

Em certas concretizações, Y1 e Y2 são 0H.

Em certas concretizações, W é -B(OH)2.

Em certas concretizações, W é -B(OH)2, e A representa um heterociclo de 5 membros incluindo Neo carbono Ca;

Em certas concretizações, W é -B(OH)2, e A representa um heterociclo de 5 membros incluindo Neo carbono Ca, e R2 é ausente ou representa halogênio ou alquila inferior.

Em certas concretizações, W é -B(OH)2, e A representa um heterociclo de 5 membros incluindo Neo carbono Ca, e R2 é ausente ou representa halogênio ou alquila inferior, e R4 representa hidrogênio ou alquila inferior.

Em outras concretizações, W é -B(OH)2, A representa um heterociclo de 5 membros incluindo o N e o carbono Ca, R4 representa hidrogênio ou alquila inferior, e R2 é azido, ciano, isocianato, tiocianato, isotiocianato, cianat <formula>formula see original document page 101</formula>:

Em certas concretizações, R1 é um dos seguintes:

<formula>formula see original document page 101</formula>

Em certas concretizações, W é -B(OH)2, e A representa um heterociclo de 5 membros incluindo Neo carbono Ca, e R2 é ausente ou representa halogênio ou alquila inferior, e R1 é um dos seguintes: <formula>formula see original document page 102</formula>

Em outras concretizações, W é -B(OH)2, A representa um heterociclo de 5 membros incluindo o N e o carbono Ca, R4 representa hidrogênio ou alquila inferior, e R2 é azido, ciano, isocianato, tiocianato, isotiocianato, cianato, <formula>formula see original document page 102</formula> ; e R1 é um dos seguintes:

<formula>formula see original document page 102</formula>

Em certas concretizações, o composto é representado pela fórmula XVII:

<formula>formula see original document page 102</formula> na qual R1, R3, R4 e W são definidos acima, e ρ é um número inteiro de 1 a 3. Em certas concretizações, ρ é 1, e R3 é um hidrogênio em cada ocorrência.

Em certas concretizações das estruturas de compostos acima, W representa:

<formula>formula see original document page 103</formula>

Em certas concretizações das estruturas de compostos acima, R5 é um hidrogênio ou -C(X1) (X2)X3, sendo que Xi é flúor, e X2 e X3, se halogênios, também são flúor.

Em certas concretizações das estruturas de compostos acima, R4 é alquila inferior. Em certas concretizações das estruturas de compostos acima, R4 representa uma cadeia lateral de um resíduo de aminoácido selecionado de Gli, Ala, Val, Ser, Thr, Ile e Leu.

Em certas concretizações das estruturas de compostos acima, R1 é um grupo peptidil que é substrato para uma enzima de clivagem pós-prolina.

Em certas concretizações das estruturas de inibidor pró-soft XVI e XVII, R4 representa uma cadeia latral de um resíduo de aminoácido representado na fórmula:

<formula>formula see original document page 103</formula>

na qual

R4a e R4b representam, cada um, independentemente, um hidrogênio, alquila inferior, heteroalquila, cicloalquila, heterocicloalquila, arila, heteroarila, alcoxil, carboxil, carboxamida, carbonil, ou ciano, com a advertência de que tanto ambos como nenhum de R4a e R4b são hidrogênio;

R4c representa um halogênio, uma amina, uma alquila, heteroalquila, cicloalquila, heterocicloalquila, arila, heteroarila, alkoxil, carboxil, carboxamida, carbonil, ou ciano; e

z é zero ou um número inteiro na faixa de 0 a 3.

Em certas concretizações das estruturas XIV e XV, R4 representa uma cadeia lateral de um resíduo de aminoácido representado na fórmula:

na qual: R8 e R9 representam, cada um, independentemente, uma alquila inferior ou um halogênio; R10 representa a alquila inferior, uma arila, um grupo hidroxila ou -(CH2)m- COOH. Em certas concretizações, R8 e R9 representam, cada um, independentemente, uma alquila inferior, mais preferivelmente metil, etil, ou propil, e ainda mais preferivelmente um metil. Em certas concretizações, R10 representa uma alquila inferior, mais preferivelmente metil, etil, ou propil, e ainda mais preferivelmente um metil. Em certas concretizações, R10 representa uma arila, como fenil ou hidroxifenil (preferivelmente parahidroxi). Em ainda outras concretizações, R10 representa um grupo hidroxila. Em certas concretizações, R10 representa -(CH2)m- COOH, sendo que m = 0, 1 ou 2, e preferivelmente quando m é 0 ou 1.

Em certas concretizações, o inibidor pró-soft é ativado por uma protease e inibe outra protease diferente. Por exemplo, ele pode ser ativado por FAP e o inibidor G resultante ser seletivo para o proteasoma. Em certas concretizações das estruturas dos compostos acima, Ri não é um substrato eficiente para a protease alvo. Por exemplo, como substrato, R1 preferivelmente tem um número de rotatividade como um substrato para a proteína alvo de menos que l/segundo, e mais pref erivelmente de menos que 0,l/segundo, 0,001/segundo ou mesmo 0,0001/segundo .

Em certas concretizações, A é uma porção peptidil de 2 a 5 resíduos de aminoácidos ou equivalentes dele. Em certas concretizações, A é uma porção dipeptidil, por exemplo, derivado de aminoácido de ocorrência natural ou análogos deles.

Em certas concretizações, a espinha dorsal uma porção peptidil A pode incluir um ou mais análogos não hidrolisáveis de uma ligação peptídica, exceto para a ligação que liga A a G.

Em certas concretizações, A é representado por:

<formula>formula see original document page 105</formula>

Em certas concretizações da presente invenção, os compostos representados pela fórmula: A-G não inibem a enzima alvo selecionada, ou outras enzimas em um grau apreciável. Em certas concretizações da presente invenção, os inibidores pró-soft são em si inativos, mas tornam-se ativados no organismo quando o grupo R-A é removido para liberar a porção inibidora G da enzima.

Em certas concretizações, a presente invenção se refere ao composto anteriormente mencionado, no qual Ri é um dos seguintes: <formula>formula see original document page 106</formula>

Concretização D

Uma classe representativa dos compostos para uso no método da presente invenção é representada pela fórmula XVIII:

<formula>formula see original document page 106</formula>

ou um sal farmaceuticamente aceitável dela, em que

R1 representa H, alquila, alcoxi, alquenila, alquinila, amino, alquilamino, acilamino, ciano, sulfonilamino, aciloxi, arila, cicloalquila, heterociclil, heteroarila, ou uma cadeia polipeptídica de 1 a 8 resíduos de aminoácidos;

R2 e R3 representam, cada um, independentemente H, alquila inferior, e aralquila, ou R2 e R3 junto com os átomos aos quais eles estão anexados, formam um anel heterociclico de 4 a 6 membros;

R4 e R5 representam, cada um, independentemente H, halogênio, ou alquila, ou R4 e R5 junto com os átomos aos quais eles estão anexados, formam um anel carbocíclico ou heterocíclico de 3 a 6 membros;

R6 representa um grupo funcional que reage com um resíduo de sítio ativo de uma protease alvo para forma um aducto covalente;

R7 é ausente ou representa um ou mais substituintes no anel A, cada um dos quais é independentemente selecionado de H, alquila inferior, alquenila inferior, alquinila inferior, hidroxil, oxo, éter, tioéter, halogênio, carbonil, tiocarbonil, amino, amido, ciano, nitro, azido, alquilamino, acilamino, aminoacil, ciano, sulfate, sulfonate, sulfonil, sulfonilamino, aminosulfonil, alcoxicarbonil, aciloxi, arila, cicloalquila, heterociclil, heteroarila, ou cadeias polipeptídicas de 1 a 8 resíduos de aminoácido;

R8 representa H, arila, alquila, aralquila, cicloalquila, heterociclil, heteroarila, heteroaralquila, ou uma cadeia polipeptídica de 1 a 8 resíduos de aminoácido;

L é ausente ou representa alquila, alquenila, alquinila, -(CH2)mO(CH2)ra-,

-(CH2)mNR2(CH2)m-, ou - (CH2)mS (CH2)m-;

X é ausente ou representa -N(R8) -, -O-, ou -S-;

Y é ausente ou representa -C(=0)-, -C(=S)-, ou -SO2-;

m é independe temente para cada ocorrência, um número

inteiro de 0 a 10; e

n é um número inteiro de 0 a 3, pref erivelmente 0 ou 1.

Em certas concretizações, R1 representa H ou alquila inferior, R2 e R3 representam cada um, independentemente, Η, alquila inferior, ou aralquila, ou R2 e R3 juntamente com os átomos aos quais eles estão anexados, formam um anel heterocíclico de 5 membros, R4 representa H ou alquila inferior, e R5 representa H.

Em uma certa concretização adicional, as designações estereoquimicas em C3 e C4 são R e S, respectivamente.

Em outras concretizações, R6 representa ciano, ácido borônico, -SO2Z1, -P(=0)z\ -P (=R9) R10R11, -C(=NH)NH2, CH=NR12, ou -C {=0) -R12, nos quais: R9 representa O ou S;

R10 representa N3, SH2, NH2, NO2, ou OLR13, e R11 representa alquila inferior, amino, OLR13, ou um sal farmaceuticamente aceitável deles, ou

R10 e R11, juntamente com o fósforo ao qual eles estão anexados, formam um anel heterocíclico de 5 a 8 membros;

R12 representa H, alquila, alquenila, alquinila, (CH2)p- R13, -(CH2)q-OH, - (CH2)q-0-alquila, -(CH2)q-O- alquenila, - (CH2) q-0-alquinila, -(CH2)q-O-(CH2)p- R13, (CH2)q-SH, - (CH2) q-S-alquila, - (CH2) q-S-alquenila, -(CH2)q-S- alquinila, -(CH2)q-S-(CH2)p- R13, -C (0) C (0) NH2, ou C(O)C(O)O R14, ou -C(Zx) (Ζ2) (Z3) ;

R13 representa H, alquila, alquenila, arila, cicloalquila, cicloalquenil, ou heterociclil ;

R14 representa H, alquila, alquenila, ou LR13;

Z1 representa um halogênio;

Z2 e Z3 representam independentemente H ou halogênio; ρ é, independentemente para cada ocorrência, um número inteiro de 0 a 8; e

q é, independentemente para cada ocorrência, um número inteiro de 0 a 8. Em uma outra concretização, R6 representa CN, CHO, ou C(=0) C(Z1) (Ζ2) (Ζ3) , sendo que Z1 representa um halogênio, e Z2 e Z3 representam H ou halogênio. Em uma outra concretização, R6 representa C (=0) C (Ζ1) (Ζ2) (Ζ3) , sendo que Z1 representa um flúor, e Z2 e Z3 representam H ou flúor.

Em certas concretizações, R6 é um grupo representado por B(Y1l) (Y2) sendo que Y1 e Y2 são independentemente OH ou um grupo que ê hidrolisável a OH (isto é, para formar ácido borônico) , juntamente com o átomo de boro ao qual eles estão anexados, formam um anel de 5 a 8 membros que é hidrolisável a ácido borônico.

Concretização E

Uma classe representativa dos compostos para uso no método da presente invenção é representada pela fórmula XIX:

<formula>formula see original document page 109</formula>

na qual

R1 representa H, alquila, alcoxi, alquenila, alquinila, amino, alquilamino, acilamino, ciano, sulfonilamino, aciloxi, arila, cicloalquila, heterociclil, heteroarila, ou uma cadeia polipeptídica de 1 a 8 resíduos de aminoácidos;

R2 representa H, alquila inferior, ou aralquila; R3 e R4 representam independentemente H, halogênio, ou alquila, ou R3 e R4 juntos com os átomos aos quais eles estão anexados, formam um anel heterocíclico de 3 a 6 membros;

R5 representa Η, halogênio, alquila inferior, ou aralquila;

R6 representa um grupo funcional que reage com um resíduo de sitio ativo de uma protease alvo para formar um aducto covalente;

R7 representa H, arila, alquila, aralquila, cicloalquila, heterociclil, heteroarila, heteroaralquila, ou uma cadeia polipeptídica de 1 a 8 resíduos de aminoãcido;

L é ausente ou representa alquila, alquenila, alquinila, -(CH2)mO(CH2)m-, -(CH2)mNR2(CH2)m-, e -(CH2)mS(CH2)m-;

X é ausente ou representa -N(R7)-, -O-, ou -S-;

Y é ausente ou representa -C(=0)-, -C(=S)-, ou -SO2-;

m é independentemente para cada ocorrência, um número inteiro de 0 a 10; e

η é um número inteiro de 1 a 6.

Em certas concretizações, R1 representa H ou alquila inferior, R3 e R4 juntos com os átomos aos quais eles estão anexados formam um anel de 5 membros, e η é 2.

Em outras concretizações R1 representa H ou alquila inferior, R3 representa H, R4 representa H ou alquila inferior, R5 representa H, e η é 2.

Em certas concretizações, R1 é uma cadeia polipeptídica de 2 a 8 resíduos de aminoácidos, sendo que a prolina é o resíduo que é diretamente anexado. Mais preferivelmente, R1 é uma cadeia polipeptídica de 2 resíduos de aminoácidos.

Em certas concretizações acima, R6 representa ciano, ácido borônico, -SO2Z1, -P (=O)Z1, -P (=R8) R10R11, -C(=NH)NH2, -CH=NR12, ou -C (=O) -R11, nos quais:

R8 representa O ou S;

R9 representa N3, SH2, NH2, NO2, ou OLR12, e

R10 representa alquila inferior, amino, OLR12, ou um sal farmaceuticamente aceitável deles, ou

R9 e R10, juntamente com o fósforo ao qual eles estão anexados, formam um anel heterocíclico de 5 a 8 membros;

R11 representa H, alquila, alquenila, alquinila, (CH2)p-R12, -(CH2)q-OH, - (CH2) q-O-alquila, -(CH2)q-O- alquenila, - (CH2) q-O-alquinila, -(CH2)q-O-(CH2)p-R12, -(CH2)q- SH, -(CH2) q-S-alquila, - (CH2) q-S-alquenila, -(CH2)q-S- alquinila, -(CH2)q-S-(CH2)p-R12, -C(O)C(O)NH2, -C(O)C(O)OR13, ou -C(Z1) (Ζ2) (Z3);

R12 representa H, alquila, alquenila, arila, cicloalquila, cicloalquenil, ou heterociclil;

R13 representa H, alquila, alquenila, ou LR12;

Z1 representa um halogênio;

Z2 e Z3 independentemente representam H ou halogênio;

p é independentemente para cada ocorrência, um número inteiro de 0 a 8; e

q é independentemente para cada ocorrência, um número inteiro de 1 a 8.

Em uma outra concretização, R6 representa CN, CHO, ou C (=O) C (Ζ1) (Ζ2) (Ζ3), sendo que Z1 representa um halogênio, e Z2 e Z3 representa H ou halogênio. Em uma outra concretização, R6 representa C (=O) C (Ζ1) (Ζ2) (Ζ3), sendo que Z1 representa um flúor, e Z2 e Z3 representa H ou flúor.

Em certas concretizações, R6 é um grupo representado por -B(Y1) (Y2) sendo que Y1 e Y2 são independentemente OH ou um grupo que é hidrolisãvel a OH (isto é, para formar ácido borônico), juntamente com o átomo de boro ao qual eles estão anexados, formam um anel de 5 a 8 membros que é hidrolisável a ácido borônico.

Em certas concretizações, R3 e R4 juntamente com os átomos aos quais eles estão anexados formam um anel de 5 membros, que é substituído com um ou mais grupos selecionados de hidroxila, alquila inferior (por exemplo, metil), alquenila inferior, alquinila inferior, alcoxi inferior, hidroxialquila inferior (por exemplo, hidroximetil), e alcoxialquila inferior.

Em concretizações mais especificas, o grupo substituinte é selecionado do grupo que consiste em alquila inferior, hidroxialquila inferior, e alcoxialquila inferior. Em tais concretizações mais preferidas, o grupo substituinte é localizado na posição 5 do anel.

Em outras concretizações mais específicas, o grupo substituinte é hidroxil, que é preferivelmente localizada na posição 4 do anel.

Em certas concretizações, o grupo substituinte no anel de 5 membros contendo R3 e R4 é selecionado do grupo que consiste em alquila inferior (por exemplo, metil), hidroxil, hidroxialquila inferior (por exemplo, hidroximetil), e alcoxialquila inferior. Em tais concretizações preferidas, o grupo substituinte tem um relacionamento estereoquímico eis com R6. Tais

relacionamentos estereoquímicos são particularmente vantajosos para compostos que têm substituintes na posição 4 ou 5 do anel de 5 membros, conforme discutido imediatamente acima. Em certas concretizações da invenção, o composto tem a estrutura de Fórmula XX:

<formula>formula see original document page 113</formula>

ou um sal farmaceuticamente aceitável dela, em que:

R1 representa H, alquila, alcoxi, alquenila, alquinila, amino, alquilamino, acilamino, ciano, sulfonilamino, aciloxi, arila, cicloalquila, heterociclil, heteroarila, ou uma cadeia polipeptídica de 1 a 8 resíduos de aminoácidos;

R2 representa H, alquila inferior, ou aralquila;

R3 e R4 representam independentemente H, halogênio, ou alquila, ou R3 e R4 juntos com o carbono ao qual eles estão anexados, formam um anel heterocíclico de 3 a 6 membros;

R5 representa H, halogênio, alquila inferior, ou aralquila, preferivelmente H ou alquila inferior;

R6 representa um grupo funcional que reage com um resíduo de sitio ativo da protease alvo para formar um aducto covalente;

R7 representa H, arila, alquila, aralquila, cicloalquila, heterociclil, heteroarila, heteroaralquila, ou uma cadeia polipeptídica de 1 a 8 resíduos de aminoácido;

R14 representa H, alquila, alcoxi, alquenila, alquinila, ou aralquila, preferivelmente H;

A é ausente ou representa -NHC (=NH)-, ou R14 e A junto com o nitrogênio ao qual eles estão anexados, formam um anel heteroclclico;

L é ausente ou representa alquila, alquenila, alquinila, -(CH2)mO(CH2)m-,

-(CH2)mNR2(CH2)m-, e - (CH2)mS (CH2)m-;

X é ausente ou representa -N(R7)-, -O-, ou -S-;

Y é ausente ou representa -C(=0)-, -C(=S)-, ou -SO2-;

m é independentemente para cada ocorrência, um número inteiro de 0 a 10; e

η é um número inteiro de 1 a 6.

Em certas concretizações, R1 representa H ou alquila inferior, R3 e R4 junto com o carbono ao qual eles estão anexados formam um anel de 5 membros, e η é um número inteiro de 1 a 4.

Em certas concretizações, R14 é Η, A é ausente, e η é 4. Em outras concretizações específicas, R14 é Η, A é - NHC(=NH)-, e η é 3.

Em certas concretizações, A e R14 junto com o nitrogênio ao qual eles estão anexados foram um anel imidazol, e η é 1.

Em certas concretizações, R6 representa ácido borônico, CN, -SO2Z1, -P (=0) Z1f -P (=R8) R10R11, -C(=NH)NH2, - CH=NR11, ou -Ci=O-R11, nos quais:

R8 é 0 ou S ;

R9 representa N3, SH2, NH2, NO2, ou OLR12, e

R10 representa alquila inferior, amino, OLR12, ou um sal farmaceuticamente aceitável deles, ou

R9 e R10, juntamente com o fósforo ao qual eles estão anexados, formam um anel heterocíclico de 5 a 8 membros;

R11 representa H, alquila, alquenila, alquinila, NH2, - (CH2)p-R12, -(CH2)q-OH, - (CH2) q-0-alquila, -(CH2)q-O- alquenila, - (CH2) q-0-alquinila, -(CH2)q-O-(CH2)p-R12, -(CH2)q- SH, - (CH2) q-S-alquila, - (CH2) q-S-alquenila, -(CH2)q-S- alquinila, -(CH2)q-S-(CH2)p-R12, -C(O)NH2, -C(O)OR13, ou - C(Zx) (Ζ2) (Z3) ;

R12 representa H7 alquila, alquenila, arila, heteroarila, cicloalquila, cicloalquenila, ou heterociclil; R13 representa H, alquila, alquenila, ou LR12; Z1 representa um halogênio;

Z2 e Z3 independentemente representam H ou halogênio; pé independentemente para cada ocorrência, um número inteiro de 0 a 8; e

q é independentemente para cada ocorrência, um número inteiro de 1 a 8.

Em certas concretizações especificas, R6 representa CN, CH0, ou C (=0) C (Ζ1) (Z2) (Z3) , sendo que Z1 representa um halogênio, e Z2 e Z3 representam H ou halogênio. Em uma outra concretização, R5 representa C (=0) C (Ζ1) (Ζ2) (Ζ3) , sendo que Z1 representa um flúor, e Z2 e Z3 representam H ou flúor.

Em certas concretizações, R6 é um grupo -B(Y1)JY2) sendo que Y1 e Y2 são independentemente OH ou um grupo que é hidrolisável a 0H, ou juntamente com o átomo de boro ao qual eles estão anexados, formam um anel de 5 a 8 membros que é hidrolisável a ácido borônico.

Em certas concretizações, R3 e R4 juntamente com os átomos aos quais eles estão anexados formam um anel de 5 membros, que é substituído com um ou mais grupos selecionados de hidroxila, alquila inferior (por exemplo, metil), alquenila inferior, alquinila inferior, alcoxi inferior, hidroxialquila inferior (por exemplo, hidroximetil) e alcoxialquila inferior.

Em certas concretizações, o grupo substituinte é selecionado do grupo que consiste em alquila inferior, hidroxialquila inferior e alcoxialquila inferior. Em tais concretizações mais preferidas, o grupo substituinte é localizado na posição 5 do anel.

Em outras concretizações mais especificas, o grupo substituinte é hidroxila, que é preferivelmente localizada na posição 4 do anel.

Em certas concretizações, o grupo substituinte no anel de 5 membros contendo R3 e R4 é selecionado do grupo que consiste em alquila inferior (por exemplo, metil) , hidroxil, hidroxialquila inferior (por exemplo, hidroximetil)e alcoxialquila inferior. Em tais concretizações preferidas, o grupo substituinte tem um relacionamento eis-estereoquimico com R6. Tais relacionamentos estereoquimicos são particularmente vantajosos para compostos que têm substituintes na posição 4 ou 5 do anel de 5 membros, conforme discutido imediatamente acima.

Em certas concretizações da invenção, o composto tem a estrutura de Fórmula XXI:

<formula>formula see original document page 116</formula>

ou um sal farmaceuticamente aceitável dela, em que:

R1 representa H, alquila, alcoxi, alquenila, alquinila, amino, alquilamino, acilamino, ciano, sulfonilamino, aciloxi, arila, cicloalquila, heterociclil, heteroarila, ou uma cadeia polipeptídica de 1 a 8 resíduos de aminoácidos;

R2 representa H, alquila inferior, ou aralquila;

R3 e R4 representam independentemente H, halogênio, ou alquila, ou R3 e R4 junto com o carbono ao qual eles estão anexados, formam um anel heterocíclico de 3 a 6 membros;

R5 representa H, halogênio, alquila inferior, ou aralquila, preferivelmente H ou alquila inferior;

R6 representa um grupo funcional que reage com um resíduo de sítio ativo de uma protease alvo para formar um aducto covalente,·

R7 representa H, arila, alquila, aralquila, cicloalquila, heterociclil, heteroarila, heteroaralquila, ou uma cadeia polipeptídica de 1 a 8 resíduos de aminoãcido;

R15 é um grupo funcional que tem uma carga positiva ou negativa em um pH fisiológico, preferivelmente uma amina ou ácido carboxílico.

L é ausente ou representa alquila, alquenila, alquinila, -(CH2)mO(CH2)m-, -(CH2)mNR2(CH2)m-, e -(CH2)mS(CH2)m-;

X é ausente ou representa -N(R7)-, -O-, ou -S-;

Y é ausente ou representa -C(=0)-, -C(=S)-, ou -SO2-;

m é independentemente para cada ocorrência, um número inteiro de 0 a 10; e

η é um número inteiro de 1 a 6.

Em certas concretizações, R1 representa H ou alquila inferior, R3 é H e R4 é alquila inferior, ou R3 e R4 juntos com o carbono ao qual eles estão anexados formam um anel de 5 membros, e n é um número inteiro de 1 a 4.

Em certas concretizações específicas, η é um número inteiro de 1 a 4 e R15 é um grupo funcional que tem carga positiva ou negativa em pH fisiológico. Em certas concretizações mais específicas, n é um número inteiro de 1 a 4 e R15 é selecionado do grupo que consiste em amina, ácido carboxílico, imidazol, ou funcionalidade guanidina.

Em certas concretizações, R5 representa ácido borônico, CN, -SO2Z1, -P(=O)Z1, -P (=R8) R9R10, -C(=NH)NH2, - CH=NR11, ou -C(=O)-R1:l, nos quais:

R8 é O ou S ;

R9 representa N3, SH2, NH2, NO2, ou OLR12, e

R10 representa alquila inferior, amino, OLR12, ou um sal farmaceuticamente aceitável deles, ou

R9 e R10, juntamente com o fósforo ao qual eles estão anexados, formam um anel heterocíclico de 5 a 8 membros;

R11 representa H, alquila, alquenila, alquinila, NH2, - (CH2)p-R12, -(CH2)q-OH, - (CH2) g-0-alquila, -(CH2)q-O- alquenila, - (CH2) q-0-alquinila, -(CH2)q-O-(CH2)p-R12, -(CH2)q- SH, - (CH2)q-S-alquila, - (CH2) q-S-alquenila, -(CH2)q-S- alquinila, -(CH2)q-S-(CH2)p-R12, -C(O)NH2, -C(O)OR13, ou - C (Z1) (Ζ2) (Z3) ;

R12 representa H, alquila, alquenila, arila, heteroarila, cicloalquila, cicloalquenila, ou heterociclil;

R13 representa H, alquila, alquenila, ou LR12;

Z1 representa um halogênio;

Z2 e Z3 independentemente representam H ou halogênio;

p é independentemente para cada ocorrência, um número inteiro de 0 a 8; e

q é independentemente para cada ocorrência, um número inteiro de 1 a 8.

Em certas concretizações específicas, R6 representa CN, CHO, ou C (=O) C (Ζ1) (Ζ2) (Ζ3) , sendo que Z1 representa um halogênio, e Z2 e Z3 representam H ou halogênio. Em uma outra concretização, R6 representa C (=0) C (Ζ1) (Ζ2) (Ζ3) , sendo que Z1 representa um flúor, e Z2 e Z3 representam H ou flúor.

Em certas concretizações, R6 é um grupo -B(Yx) (Y2) sendo que Y1 e Y2 são independentemente OH ou um grupo que é hidrolisável a OH, ou juntamente com o átomo de boro ao qual eles estão anexados, formam um anel de 5 a 8 membros que é hidrolisável a ácido borônico.

Em certas concretizações específicas, R3 e R4 juntamente com os átomos aos quais eles estão anexados formam um anel de 5 membros substituído com um ou mais grupos selecionados de hidroxila, alquila inferior (por exemplo, metil), alquenila inferior, alquinila inferior, alcoxi inferior, hidroxialquila inferior (por exemplo, hidroximetil)e alcoxialquila inferior.

Em certas concretizações, o grupo substituinte é selecionado do grupo que consiste em alquila inferior, hidroxialquila inferior e alcoxialquila inferior. Em tais concretizações mais preferidas, o grupo substituinte é localizado na posição 5 do anel.

Em outras concretizações mais específicas, o grupo substituinte é hidroxila, que é preferivelmente localizada na posição 4 do anel.

Em certas concretizações, o grupo substituinte no anel de 5 membros contendo R3 e R4 é selecionado do grupo que consiste em alquila inferior (por exemplo, metil) , 119/202

hidroxil, hidroxialquila inferior (por exemplo, hidroximetil)e alcoxialquila inferior. Em tais concretizações preferidas, o grupo substituinte tem um relacionamento cis-estereoquímico com R6. Tais

5 relacionamentos estereoquímicos são particularmente vantajosos para compostos que têm substituintes na posição 4 ou 5 do anel de 5 membros, conforme discutido imediatamente acima.

Um outro aspecto da invenção se refere a inibidores 10 que têm uma estrutura de fórmula XXII:

<formula>formula see original document page 120</formula>

ou um sal farmaceuticamente aceitável dela, em que A é selecionado do grupo que consiste em um

heterociclo de 4 a 8 membros incluindo o N e um carbono Ca; Z ê C ou N;

W é selecionado do grupo que consiste em CN, -CH=NR5, um grupo funcional que reage com o resíduo de sítio ativo da protease alvo,

<formula>formula see original document page 120</formula>

R1 é selecionado do grupo que consiste em aminoácido

ou análogo de aminoácido ligado de modo C-terminal, ou um peptídeo ou análogo de peptídeo, ou

<formula>formula see original document page 120</formula>

; ou em que a ligação entre R1 e N é uma ligação tioxamida;

R2 é ausente ou representa uma ou mais substituições no anel A, cada um dos quais é, independentemente, um halogênio, alquila inferior, alquenila inferior, alquinila inferior, carbonil, carboxil, éster, formato, cetona, tiocarbonil, tioéster, tioacetato, tioformato, amino, acilamino, amido, nitro, sulfato, sulfonato, sulfonamido, -(CH2)m-R7, -(CH2)m-OH, - (CH2)m-0-alquila inferior, -(CH2)m- O-alquenila inferior, -(CH2)n-O-(CH2)m-R7, -(CH2)m-SH, (CH2)m-S-alquila inferior, - (CH2)m-S-alquenila inferior, ou -(CH2)n-S-(CH2)m-R7- azido, ciano, isocianato, tiocianato, isotiocianato, cianato,

<formula>formula see original document page 121</formula>

ou

<formula>formula see original document page 121</formula>

sendo que no mínimo um R2 é selecionado do grupo que consiste em -OH, alquila inferior, alcoxi inferior, hidroxialquila inferior e alcoxialquila inferior, preferivelmente no mínimo um de alquila inferior(por exemplo, metil), alcoxi inferior, hidroxialquila inferior (por exemplo, hidroximetil)e alcoxialquila inferior;

quando Z é N, R3 é ausente;

quando Z é C, R3 é selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, halogênio, alquila inferior, alquenila inferior, alquinila inferior, carbonil, tiocarbonil, amino, acilamino, amido, nitro, azido, sulfato, sulfonato, sulfonamido, -(CH2)m-R7, -(CH2)m-OH, - (CH2) m-O-alquila inferior, - (CH2) m-O-alquenila inferior, -(CH2)n-O-(CH2)m-R7, -(CH2)m-SH, - (CH2)m-S-alquila inferior, - (CH2)m-S-alquenila inferior, e -(CH2)n-S-(CH2)m-R7;

R5 é selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, alquila, alquenila, alquinila, -C(X1)(X2)X3, -(CH2)m-R7, -(CH2)n-OH, - (CH2) n-O-alquila, - (CH2) n-O-alquenila, -(CH2)n- O-alquinila, -(CH2)n-O-(CH2)m-R7, -(CH2)n-SH, -(CH2)n-S- alquila, - (CH2) n-S-alquenila, - (CH2) n-S-alquinila, -(CH2)n-S- (CH2)m-R7, -C(O)C(O)NH2, e -C(O)C(O)OR7'; R6 é selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, halogênio, alguila, alquenila, alquinila, arila, -(CH2)m-R7, -(CH2)m-OH, - (CH2) m-O-alquila, - (CH2) m-O-alquenila, -(CH2)m- O-alquinila, -(CH2)m-O-(CH2)m-R7, -(CH2)m-SH, -(CH2)m-S- 5 alquila, - (CH2) m-S-alquenila, - (CH2) m-S-alquinila, - (CH2) m-S- (CH2) m-R7 ,

<formula>formula see original document page 122</formula>

cada R7 é independentemente selecionado de arila, aralquila, cicloalquila, cicloalquenila, e heterociclil;

cada R7 é independentemente selecionado de hidrogênio, alquila, alquenila, arila, aralquila, cicloalquila, cicloalquenila, e heterociclil;

R8 e R9, cada um, independentemente selecionados de hidrogênio, alquila, alquenila, -(CH2)m-R7, -C(=O)-alquila, -C(=O)-alquenila, -C(=O)-alquinila, -C(=O)-(CH2)m-R7; ou

R8 e R9 tomados juntamente com o átomo de N ao qual eles estão anexados, completam um anel heterocíclico que tem de 4 a 8 átomos na estrutura de anel;

R10 representa hidrogênio, -CH3, or -(CH2)n-CH3; R50 é O ou S;

R51 é selecionado do grupo que consiste em N3, SH, NH2, NO2, e OR7' ;

R52 é selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, alquila inferior, amina, OR7', ou um sal farmaceuticamente aceitável deles, ou

R51 e R52 tomados juntamente com o átomo de P ao qual eles estão anexados, completam um anel heterocíclico de 5 a 8 átomos na estrutura de anel; X1 é um halogênio;

X2 e X3 são, cada um, selecionados de hidrogênio e halogênio;

Y1 e Y2 são, cada um, independentemente, selecionados de OH e um grupo capaz de ser hidrolisado a 0H, incluindo derivados cíclicos em que Y1 e Y2 são conectados através de um anel que tem 5 a 8 átomos na estrutura de anel;

m é zero ou um número inteiro na faixa de 1 a 8; e η um número inteiro na faixa de 1 a 8.

Em certas concretizações, W é selecionado do grupo que consiste em CN e B(Yil) (Y2) . Em certas concretizações específicas, A é um anel de cinco membros, Z é C, e W é B(Yx) (Y2) . Em concretizações mais específicas, Z tem a configuração estereoquímica absoluta de L-prolina.

Em certas concretizações, A é um anel de 5 membros, Z é C, e R2 é selecionado do grupo que consiste em hidroxil, alquila inferior, alquenila inferior, alquinila inferior, alcoxi inferior, hidroxialquila inferior e alcoxialquila inferior.

Em tais concretizações preferidas, R2 é selecionado do grupo que consiste em hidroxialquila inferior e alcoxialquila inferior. Em tais concretizações mais preferidas, R2 é localizado na posição 5 do anel.

Em certas concretizações, A é um anel de 5 membros, Z é C, e R2 é selecionado do grupo que consiste em hidroxil, alquila inferior (como metil), hidroxialquila inferior (como hidroximetil)e alcoxialquila inferior. Em tais concretizações preferidas, Z tem configuração estereoquímica absoluta de L-prolina e R2 é localizado na posição 5 do anel para alquila inferior, hidroxialquila inferior, e alcoxialquila inferior e na posição 4 para hidroxil. Em tais concretizações mais preferidas, R2 tem um relacionamento cis-estereoquímico com W.

Um outro aspecto da invenção se refere a inibidores que têm uma estrutura de fórmula XXIII:

<formula>formula see original document page 124</formula>

ou um sal farmaceuticamente aceitável dela, em que

R1 é selecionado do grupo que consiste em aminoácido ou análogo de aminoácido ligado de modo C-terminal, ou um peptideo ou análogo de peptldeo, ou

<formula>formula see original document page 124</formula>

; ou em que a ligação entre Ri e N é uma ligação tioxamida;

R2 representa uma ou mais substituições no anel A, cada um dos quais é, independentemente, um halogênio, alquila inferior, alquenila inferior, alquinila inferior, carbonil (como carboxil, éster, formato ou cetona) tiocarbonil (como tioéster, tioacetato ou tioformato) , amino, acilamino, amido, nitro, sulfato, sulfonato, sulfonamido, -(CH2)m-R7, -(CH2)m-OH, - (CH2) m-0-alquila inferior, - (CH2) m-0-alquenila inferior, -(CH2)n-O-(CH2)m-R7, -(CH2)m-SH, - (CH2)m-S-alquila inferior, - (CH2)m-S-alquenila inferior, ou -(CH2)n-S-(CH2)m-R7, azido, ciano, isocianato, tiocianato, isotiocianato, cianato,

<formula>formula see original document page 124</formula>

N=C, ou

<formula>formula see original document page 124</formula>

-C=C-R10; sendo que no mínimo um R é selecionado do grupo que consiste em -0H, alquila inferior, alcoxi inferior, hidroxialquila inferior, e alcoxialquila inferior, preferivelmente no mínimo um de alquila inferior (por exemplo, metil), alcoxi inferior, hidroxialquila inferior (por exemplo, hidroximetil) , e alcoxialquila inferior;

R6 é selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, halogênio, alquila, alquenila, alquinila, arila, -(CH2)m-R7/ -(CH2)m-OH, - (CH2) m-0-alquila, - (CH2) m-0-alquenila, -(CH2)m- O-alquinila, -(CH2)m-O-(CH2)m-R7, -(CH2)m-SH, -(CH2)m-S- alquila, - (CH2) m-S-alquenila, - (CH2) m-S-alquinila, -(CH2)m-S- (CH2) m-R7,

<formula>formula see original document page 125</formula>

R7 é selecionado do grupo que consiste em arila, cicloalquila, cicloalquenila, e heterociclil;

R8 e R9, cada um, independentemente selecionados de hidrogênio, alquila, alquenila, -(CH2)m-R7, -C (=0)-alquila, -C(=0)-alquenila, -C(=0)-alquinila, -C(=0)-(CH2)m-R7;

ou R8 e R9 tomados juntamente com o átomo de N ao qual eles estão anexados, completam uma anel heterociclico que tem de 4 a 8 átomos na estrutura de anel;

R10 representa hidrogênio, -CH3, or -(CH2)n-CH3;

Y1 e Y2 são, cada um, independentemente, selecionados de OH e um grupo capaz de ser hidrolisado a 0H, incluindo derivados cíclicos em que Y1 e Y2 são conectados através de um anel que tem 5 a 8 átomos na estrutura de anel;

m é zero ou um número inteiro na faixa de 1 a 8; e η um número inteiro na faixa de 1 a 8.

Em certas concretizações, o carbono que carrega B(Y1) (Y2) tem a configuração estereoquímica absolta de L- prolina. Em tais concretizações preferidas, R2 ê selecionado do grupo que consiste em hidroxil, alquila inferior, hidroxialquila inferior e alcoxialquila inferior. Em tais concretizações mais preferidas, R2 é localizado na posição 5 do anel para alquila inferior (como metil), hidroxialquila inferior (como hidroximetil) e alcoxialquila inferior ou na posição 4 para hidroxil. Em tais concretizações mais preferidas, R2 tem um relacionamento cis-estereoquímico com B(Yx) (Y2) .

Um outro aspecto da invenção se refere a compostos que têm uma estrutura de Fórmula XXIV:

<formula>formula see original document page 126</formula>

ou um sal farmaceuticamente aceitável dela, em que

A é um heterociclo de 3-8 membros incluindo Neo carbono Cct;

W é um grupo funcional que reage com um resíduo de sítio ativo de uma protease alvo para formar um aducto covalente;

R1 é selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, um aminoácido ou peptídeo ou análogo deles ligado de forma C-terminal, e um grupo protetor amino; sendo que opcionalmente quando aplicável, a ligação entre R1 e o N ao qual ele está anexado é uma ligação tioxamida.

R2 representa uma ou mais substituições no anel A, cada um dos quais é, independentemente, um halogênio, alquila inferior, alquenila inferior, alquinila inferior, carbonil (como carboxil, éster, formato ou cetona) tiocarbonil (como tioéster, tioacetato ou tioformato), amino, acilamino, amido, nitro, sulfato, sulfonato, sulfonamido, -(CH2)m-R7, -(CH2)m-OH, - (CH2) m-0-alquila inferior, - (CH2) m-0-alquenila inferior, -(CH2)n-O-(CH2)m-R7, -(CH2)m-SH, - (CH2)m-S-alquila inferior, - (CH2)m-S-alquenila inferior, ou -(CH2)n-S-(CH2)m-R7, azido, ciano, isocianato, tiocianato, isotiocianato, cianato, <formula>formula see original document page 127</formula> , ou <formula>formula see original document page 127</formula> sendo que no mínimo um R2 é selecionado do grupo que consiste em -OH, alquila inferior, alcoxi inferior, hidroxialquila inferior, e alcoxialquila inferior, preferivelmente no mínimo um de alquila inferior (por exemplo, metil), alcoxi inferior, hidroxialquila inferior (por exemplo, hidroximetil) , e alcoxialquila inferior;

R3a é selecionado do grupo que consiste em hidrogênio e um substituinte que não conjuga o para de elétron do nitrogênio do qual ele pende;

R4a e R4b são, cada um, independentemente, selecionados de hidrogênio, alquila inferior, heteroalquila, cicloalquila, heterocicloalquila, arila, heteroarila, alcoxil, carboxil, carboxamida, carbonil, ou ciano, desde que tanto ambos como nenhum de R4a e R4b são hidrogênio;

R4c é selecionado do grupo que consiste em halogênio, uma amina, uma alquila, heteroalquila, cicloalquila, heterocicloalquila, arila, heteroarila, alkoxil, carboxil, carboxamida, carbonil, ou ciano;

cada R6 é independentemente selecionado de arila, aralquila, cicloalquila, cicloalquenila, e heterociclil;

z é zero ou um número inteiro na faixa de 1 a 3.

m é zero ou um número inteiro na faixa de 1 a 8; e η um número inteiro na faixa de 1 a 8. Em certas concretizações, W é selecionado do grupo que consiste em CN e BiY1) (Υ2) , sendo que Y1 e Y2 são cada um, independentemente, ou OH, ou um grupo capaz de ser hidrolisada em OH 0H, incluindo derivados cíclicos em que Y1 e Y2 são conectados através de um anel que tem de 5 a 8 átomos na estrutura de anel. Em certas concretizações especificas, A é um anel de cinco membros, e W é B(Yil) (Y2) . Em concretizações mais específicas, Ca tem a configuração estereoquímica absoluta de L-prolina.

Em certas concretizações, A é um anel de 5 membros, e R2 é selecionado do grupo que consiste em hidroxil, alquila inferior, alquenila inferior, alquinila inferior, alcoxi inferior, hidroxialquila inferior, e alcoxialquila inferior. Em tais concretizações preferidas, R2 é selecionado do grupo que consiste em alquila inferior (como metil), hidroxialquila inferior (como hidroximetil) e alcoxialquila inferior. Em tais concretizações mais preferidas, R2 é localizado na posição 5 do anel.

Em certas concretizações, A é um anel de 5 membros, e R2 é selecionado do grupo que consiste em hidroxil, alquila inferior, hidroxialquila inferior, e alcoxialquila inferior. Em tais concretizações preferidas, Ca tem configuração estereoquímica absoluta de L-prolma e R e localizado na posição 5 do anel para alquila inferior (como metil), hidroxialquila inferior (como hidroximetil) , e alcoxialquila inferior e na posição 4 para hidroxil. Em tais concretizações mais preferidas, R2 tem um relacionamento cis-estereoquímico com W.

Um outro aspecto da invenção se refere a compostos que têm uma estrutura de Fórmula XXV:

<formula>formula see original document page 129</formula>

ou um sal farmaceuticamente aceitável dela, em que

R17 R2, R3a, R4a, R4b, R4c e W são conforme definidos acima para a Fórmula XXIV, e ρ é um número inteiro de 1 a 3. Em certas concretizações específicas, ρ é 1 e R3a é hidrogênio.

Em certas concretizações, W é selecionado do grupo que consiste em CN e B(Yx) (Υ2) , sendo que Y1 e Y2 são, cada um, independentemente, ou 0H, ou um grupo capaz de ser hidrolisado em 0H, incluindo derivados cíclicos em que Y1 e Y2 são conectados através de um anel que tem de 5 a 8 átomos na estrutura de anel. Em certas concretizações específicas, W é B(Yil) (Y2) . Em concretizações mais específicas, o carbono que carrega W tem a configuração estereoquímica absoluta de L-prolina.

Em certas concretizações, R2 é selecionado do grupo que consiste em hidroxil, alquila inferior, alquenila inferior, alquinila inferior, alcoxi inferior, hidroxialquila inferior, e alcoxialquila inferior. Em tais concretizações preferidas, R2 é selecionado do grupo que consiste em hidroxialquila inferior (como hidroximetil) e alcoxialquila inferior. Em tais concretizações mais preferidas, ρ é um e R2 ê localizado na posição 5 do anel.

Em certas concretizações, R2 é selecionado do grupo que consiste em hidroxil, alquila inferior, hidroxialquila inferior e alcoxialquila inferior. Em tais concretizações preferidas, p é 1, e o carbono que carrega W tem configuração estereoquímica absoluta de L-prolina e R2 é localizado na posição 5 do anel para alquila inferior (como metil), hidroxialquila inferior (como hidroximetil), e alcoxialquila inferior e na posição 4 para hidroxil. Em tais concretizações mais preferidas, R2 tem um relacionamento cis-estereoquímico com W.

Em certas concretizações, R2 é azido, ciano, isocianato, tiocianato, isotiocianato, cianato,

<formula>formula see original document page 130</formula>

ou

<formula>formula see original document page 130</formula>

Em certas concretizações específicas, p é 1, o carbono que carrega W tem configuração estereoquímica absoluta de L-prolina e R2 é localizado na posição 5 do anel.

Ainda um outro aspecto da presente invenção se refere a compostos que têm uma estrutura de Fórmula XXVI:

<formula>formula see original document page 130</formula>

ou um sal farmaceuticamente aceitável dela, em que

A é um heterociclo de 3 a 8 membros incluindo Neo carbono Ca;

B é um anel C3-8, ou sistema C7-14 bicíclico ou tricíclico fundido;

W representa um grupo funcional que reage com um resíduo de sítio ativo da protease alvo para formar uma aducto covalente, como por exemplo, -CN, -CH=NR5,

<formula>formula see original document page 130</formula>

R1 é selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, um aminoácido ou peptídeo ou análogo deles ligado de forma C-terminal, e um grupo protetor amino; sendo que opcionalmente guando aplicável, a ligação entre R1 e o N ao qual ele está anexado é uma ligação tioxamida.

R2 representa uma ou mais substituições no anel A, cada um dos quais é, independentemente, um halogênio, alquila inferior, alquenila inferior, alquinila inferior, carbonil (como carboxil, éster, formato ou cetona) tiocarbonil (como tioéster, tioacetato ou tioformato) , amino, acilamino, amido, nitro, sulfato, sulfonato, sulfonamido, -(CH2)m-R7, -(CH2)m-OH, - (CH2) m-0-alquila inferior, - (CH2) m-0-alquenila inferior, -(CH2)n-O-(CH2)m-R7, -(CH2)m-SH, -(CH2)m-S-alquila inferior, - (CH2)m-S-alquenila inferior, ou -(CH2)n-S-(CH2)m-R7, azido, ciano, isocianato, tiocianato, isotiocianato, cianato, N=C, ou -C=C-R10; sendo que no mínimo um R2 é selecionado do grupo que consiste em -OH, alquila inferior, alcoxi inferior, hidroxialquila inferior, e alcoxialquila inferior, preferivelmente no mínimo um de alquila inferior (por exemplo, metil), alcoxi inferior, hidroxialquila inferior (por exemplo, hidroximetil) , e alcoxialquila inferior;

R5 é selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, alquila, alquenila, alquinila, -C(X1)(X2)X3, -(CH2)m-R6, -(CH2)n-OH, - (CH2) n-0-alquila, - (CH2) n-0-alquenila, -(CH2)n- O-alquinila, - (CH2) n-0- (CH2) m-R6, -(CH2)n-SH, -(CH2)n-S- alquila, - (CH2) n-S-alquenila, - (CH2) n-S-alquinila, -(CH2)n-S- (CH2)m-R6, -C(O)C(O)NH2, e -C(O)C(O)OR7';

cada R6 é independentemente selecionado de arila, aralquila, cicloalquila, cicloalquenila, e heterociclil;

cada R7 é independentemente selecionado de hidrogênio, alquila, alquenila, arila, aralquila, cicloalquila, cicloalquenila, e heterociclo;

R8 representa hidrogênio, -CH3, or -(CH2)n-CH3; Y1 e Y2 são, cada um, independentemente selecionados de -OH, ou um grupo capaz de ser hidrolisado por um grupo hidroxil, incluindo derivados cíclicos em que Y1 e Y2 são conectados através de um anel tendo de 5 a 8 átomos na estrutura de anel (como um pinacol ou semelhante) , R50 é 0 ou S;

R51 é selecionado do grupo que consiste em N3, SH2, NH2, NO27 OU OR7';

R52 representa hidrogênio, uma alquila inferior, amina, OR7, ou um sal farmaceuticamente aceitável, ou R51 e R52 tomados juntos com o átomo fosforoso ao qual eles estão anexados completam um anel heterocíclico que tem de 5 a 8 átomos na estrutura de anel;

X1 representa um halogênio;

X2 e X3 são, cada um, independentemente selecionados de hidrogênio e halogênio; m é zero ou um número inteiro na faixa de 1 a 8; e η é um número inteiro na faixa de 1 a 8. Em certas concretizações, W é selecionado do grupo que consiste em CN e B(Y1)(Yz), sendo que Y1 e Y2 são cada um, independentemente, ou OH, ou um grupo capaz de ser hidrolisado em OH, incluindo derivados cíclicos em que Y1 e Y2 são conectados através de um anel que tem de 5 a 8 átomos na estrutura de anel. Em certas concretizações específicas, A é um anel de cinco membros, e W é B(Yx) (Y2) . Em concretizações mais específicas, Ca tem a configuração estereoquímica absoluta de L-prolina. Em certas concretizações, A é um anel de 5 membros, e R2 é selecionado do grupo que consiste em hidroxil, alquila inferior, alquenila inferior, alquinila inferior, alcoxi inferior, hidroxialquila inferior, e alcoxialquila inferior. Em tais concretizações preferidas, R2 é selecionado do grupo que consiste em hidroxialquila inferior (hidroximetil) e alcoxialquila inferior. Em tais concretizações mais preferidas, R2 é localizado na posição 5 do anel.

Em certas concretizações, A é um anel de 5 membros, e R2 é selecionado do grupo que consiste em hidroxil, alquila inferior, hidroxialquila inferior, e alcoxialquila inferior. Em tais concretizações preferidas, Cα tem a configuração estereoquimica absoluta de L-prolina e R2 é localizado na posição 5 do anel para alquila inferior (tal como metil), hidroxialquila inferior (tal como hidroximetil) e alcoxialquila inferior e na posição 4 para hidroxil. Em tais concretizações mais preferidas, R2 tem um relacionamento cis-estereoquímico com W.

Em certas concretizações, R2 é azido, ciano, isocianato, tiocianato, isotiocianato, cianato, N=C, ou ------ C=== C ---- R8. Em certas concretizações específicas, ρ Cα tem a configuração estereoquimica absoluta de L- prolina e R2 é localizado na posição 5 do anel.

Um outro aspecto da invenção se refere a compostos que têm uma estrutura de Fórmula XXVII:

<formula>formula see original document page 133</formula> ou um sal farmaceuticamente aceitável dela, em que

B, R1, R2 e W são conforme definido acima para a Fórmula XXVI, e ρ é um número inteiro de 1 a 3. Em certas concretizações especificas, ρ é 1.

Em certas concretizações, W é selecionado do grupo que consiste em CN e B(Yil) (Υ2) , sendo que Y1 e Y2 são cada um, independentemente, ou OH, ou um grupo capaz de ser hidrolisado em OH, incluindo derivados cíclicos, em que Y1 e Y2 são conectados através de um anel que tem de 5 a 8 átomos na estrutura de anel. Em certas concretizações específicas, W é B(Y1) (Y2). Em concretizações mais específicas, o carbono que carrega W tem a configuração estereoquímica absoluta de L-prolina.

Em certas concretizações, R2 é selecionado do grupo que consiste em hidroxil, alquila inferior, alquenila inferior, alquinila inferior, alcoxi inferior, hidroxialquila inferior, e alcoxialquila inferior. Em tais concretizações preferidas, R2 é selecionado do grupo que consiste em hidroxialquila inferior (como hidroximetil) e alcoxialquila inferior. Em tais concretizações mais preferidas, R2 é localizado na posição 5 do anel.

Em certas concretizações, R2 é selecionado do grupo que consiste em hidroxil, alquila inferior, hidroxialquila inferior e alcoxialquila inferior. Em tais concretizações preferidas, ρ é 1 e o carbono que carrega W tem configuração estereoquímica absoluta de L-prolina e R2 é localizado na posição 4 do anel para hidroxil, e na posição 5 para alquila inferior (como metil), hidroxialquila inferior (como hidroximetil), e alcoxialquila inferior. Em tais concretizações mais preferidas, R2 tem um relacionamento cis-estereoqulmico com W.

Em certas concretizações, R2 é azido, ciano, isocianato, tiocianato, isotiocianato, cianato, <formula>formula see original document page 135</formula> ou <formula>formula see original document page 135</formula>. Em certas concretizações específicas, p é 1, o carbono que carrega W tem configuração estereoquímica absoluta de L-prolina e R2 é localizado na posição 5 do anel.

Um outro aspecto da invenção se refere a compostos que têm uma estrutura de Fórmula XXVIII:

<formula>formula see original document page 135</formula>

ou um sal farmaceuticamente aceitável dela, em que

A é um heterociclo de 4-8 membros incluindo Neo carbono Ca;

W representa um grupo funcional que reage com um resíduo de sítio ativo da protease alvo para formar uma aduto covalente, como por exemplo, -CN, -CH=NR5,

<formula>formula see original document page 135</formula>

R1 representa um peptídeo ou análogo de peptídeo ligado de forma C-terminal que é substrato para uma enzima de ativação; sendo que opcionalmente a ligação entre R1 e o N ao qual ele está ligado é uma ligação tioxamida;

R2 representa uma ou mais substituições no anel A, cada um dos quais é, independentemente, um halogênio, alquila inferior, alquenila inferior, alquinila inferior, carbonil (como carboxil, éster, formato ou cetona) tiocarbonil (como tioéster, tioacetato ou tioformato) , amino, acilamino, amido, nitro, sulfato, sulfonato, sulfonamido, -(CH2)m-R7, -(CH2)m-OH, - (CH2) m-O-alquila inferior, - (CH2) m-O-alguenila inferior, -(CH2)n-O-(CH2)m-R7i -(CH2)m-SH, - (CH2)m-S-alquila inferior, - (CH2)m-S-alquenila inferior, ou -(CH2)n-S-(CH2)m-R7, azido, ciano, isocianato, tiocianato, isotiocianato, cianato,

<formula>formula see original document page 136</formula>

ou

<formula>formula see original document page 136</formula>

; sendo que no mínimo um R2 é selecionado do grupo que consiste em-OH, alquila inferior, alcoxi inferior, hidroxialquila inferior, e alcoxialquila inferior, preferivelmente no mínimo um de alquila inferior (por exemplo, metil), alcoxi inferior, hidroxialquila inferior (por exemplo, hidroximetil), e alcoxialquila inferior;

R3 ê selecionado do grupo que consiste emhidrogênio ou um substituinte que não conjuga o par de elétrons do nitrogênio ao qual ele está anexado, como uma alquila inferior;

R4 é selecionado do grupo que consiste emhidrogênio e um pequeno grupo hidrofóbico como um halogênio, alquila inferior, alquenila inferior, ou alquinila inferior;

R5 é selecionado do grupo que consiste emhidrogênio, alquila, alquenila, alquinila, -C(X1)(X2)X3, -(CH2Jm-R6, - (CH2) n-OH, - (CH2)n-O-alquila, - (CH2) n-O-alquenila, -(CH2)n-O- alquinila, - (CH2) n-O-(CH2) m-R6, -(CH2)n-SH, - (CH2) n-S-alquila, - (CH2)n-S-alquenila, - (CH2) n-S-alquinila, - (CH2) n-S-(CH2) m-R6, -C(O) C(O)NH2, -C (O) C (O) OR7;

R6 representa, para cada ocorrência, uma arila, aralquila, cicloalquila, cicloalquenila, ou heterociclo substituído ou insubstituído;

R7 representa, para cada ocorrência, hidrogênio, uma alquila, alquenila, arila, aralquila, cicloalquila, cicloalquenila, ou heterociclo substituído ou insubstituído;

R8 representa hidrogênio, -CH3, or -(CH2)n-CH3; e

Y1 e Y2 podem independentemente ou juntos ser OH, ou um grupo capaz de ser hidrolisado por um grupo hidroxil, incluindo derivativos cíclicos em que Y1 e Y2 são conectados através de um anel tendo de 5 a 8 átomos na estrutura de anel (como um pinacol ou semelhante),

R50 ê O ou S ;

R51 é selecionado do grupo que consiste emN3, SH2, NH2, NO2 , e OR7 ;

R52 é selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, alquila inferior, amina, OR7, ou um sal farmaceuticamente aceitável deles; ou

R51 e R52 tomados juntamente com o átomo fosforoso ao qual eles estão anexados, completam um anel heterocíclico de 5 a 8 átomos na estrutura de anel;

X1 é um halogênio;

X2 e X3 são cada um, independentemente selecionados de hidrogênio e halogênio;

m é zero ou um número inteiro na faixa de 1 a 8; e n é um número inteiro na faixa de 1 a 8. Em certas concretizações, W é selecionado do grupo que consiste em CN e B(Yx) (Y2). Em certas concretizações específicas, A é um anel de cinco membros, e W é B(Yx) (Y2) .

Em concretizações mais específicas, Ca tem a configuração estereoquímica absoluta de L-prolina.

Em certas concretizações, A é um anel de 5 membros, Z é C, e R2 é selecionado do grupo que consiste em hidroxil, alquila inferior, alquenila inferior, alquinila inferior, alcoxi inferior, hidroxialquila inferior, e alcóxialquila inferior. Em tais concretizações preferidas, R2 é

selecionado do grupo que consiste em hidroxialquila inferior (como hidroximetil) e alcóxialquila inferior. Em tais concretizações mais preferidas, R2 é localizado na posição 5 do anel.

Em certas concretizações, A é um anel de 5 membros, e R2 é selecionado do grupo que consiste em hidroxil, alquila inferior, hidroxialquila inferior, e alcóxialquila inferior. Em tais concretizações preferidas, Ca tem a configuração estereoqulmica absoluta de L-prolina e R2 é localizado na posição 5 do anel para alquila inferior, hidroxialquila inferior, e alcóxialquila inferior e na posição 4 para hidroxil. Em tais concretizações mais preferidas, R2 tem um relacionamento estereoquímico eis com W.

Em certas concretizações, R2 é azido, ciano, isocianato, tiocianato, isotiocianato, cianato,

<formula>formula see original document page 138</formula> ou

<formula>formula see original document page 138</formula>

Em certas concretizações mais específicas, Ca tem a configuração estereoqulmica absoluta de L-prolina. Em concretizações mais específicas, R2 é localizado na posição 5 do anel.

Um outro aspecto da invenção se refere a compostos que têm uma estrutura de Fórmula XXIX:

<formula>formula see original document page 138</formula>

ou um sal farmaceuticamente aceitável dela, em que L é ausente ou é -XC(O)-;

R1 é selecionado do grupo que consiste em H, alquila inferior, acila inferior, aralquila inferior, aracila inferior, heteroaracila inferior, carbociclil, arila, e ArSO2-; em que opcionalmente, quando L é ausente, a ligação entre R1 e o N ao qual ele está ligado é uma ligação tioxamida;

R2 representa uma ou mais substituições no anel A, cada um dos quais é, independentemente, um halogênio, alquila inferior, alquenila inferior, alquinila inferior, carbonil (como carboxil, éster, formato ou cetona) tiocarbonil (como tioéster, tioacetato ou tioformato), amino, acilamino, amido, nitro, sulfato, sulfonato, sulfonamido, -(CH2)m-R7, -(CH2)m-OH, - (CH2) m-0-alquila inferior, - (CH2) m-0-alquenila inferior, -(CH2)n-O-(CH2)m-R7, -(CH2)m-SH, - (CH2)m-S-alquila inferior, - (CH2)m-S-alquenila inferior, ou -(CH2)n-S-(CH2)m-R7, azido, ciano, isocianato, tiocianato, isotiocianato, cianato, <formula>formula see original document page 139</formula> , ou <formula>formula see original document page 139</formula> ; sendo que no mínimo um R2 é selecionado do grupo que consiste em -0H, alquila inferior, alcoxi inferior, hidroxialquila inferior, e alcoxialquila inferior, preferivelmente no mínimo um de alquila inferior (por exemplo, metil), alcoxi inferior, hidroxialquila inferior (por exemplo, hidroximetil), e alcoxialquila inferior;

R3 é selecionado do grupo que consiste emhidrogênio, alquila inferior, hidroxialquila inferior, tioalquila inferior, e aralquila inferior;

R4 é selecionado do grupo que consiste em H e alquila inferior, ou R1 e R4 juntos são ftaloil, formando desse modo um anel;

R6 representa, para cada ocorrência, uma arila, aralquila, cicloalquila, cicloalquenila, ou heterociclo substituído ou insubstituído;

R8 representa hidrogênio, -CH3, or -(CH2)n-CH3;

W é selecionado do grupo que consiste em B(Yx) (Y2) e CN;

Y1 é Y2 são independentemente selecionados de OH ou um grupo que é hidrolisável a um OH, ou junto com o átomo de ao qual ele está anexado foram um anel de 5 a 8 membros que é hidrolisável a OH;

X é selecionado do grupo que consiste em O e NH.

Em certas concretizações, W é BiY1) (Y2). Em certas concretizações, R2 é selecionado do grupo que consiste em hidroxil, alquila inferior, alquenila inferior, alquinila inferior, alcoxi inferior, hidroxialquila inferior, e alcoxialquila inferior. Em tais concretizações mais

preferidas, R2 é selecionado do grupo que consiste em hidroxialquila inferior e alcoxialquila inferior. Em tais concretizações mais preferidas, R2 é localizado na posição 5 do anel.

Em certas concretizações, R2 é selecionado do grupo que consiste em hidroxil, alquila inferior, hidroxialquila inferior e alcoxialquila inferior. Em tais concretizações preferidas, Ca tem a configuração estereoquímica absoluta de L-prolina e R2 é localizado na posição 5 do anel para alquila inferior, hidroxialquila inferior, e alcoxialquila inferior e na posição 4 para hidroxil. Em tais concretizações mais preferidas, R2 tem um relacionamento estereoquímico eis com W. Concretização F

Uma classe representativa dos compostos para uso no método da presente invenção é representada pela fórmula XXX:

<formula>formula see original document page 141</formula>

R2

na qual

R1 é selecionado do grupo que consiste em H, alquila, alcoxi, alquenila, alquinila, amino, alquilamino, acilamino, ciano, sulfonilamino, aciloxi, arila, cicloalquila, heterociclil, heteroarila, ou uma cadeia polipeptídica de 1 a 8 resíduos de aminoácidos;

R2 é selecionado do grupo que consiste em H, alquila inferior, e aralquila;

R3 é selecionado do grupo que consiste em

(a) alquila inferior;

(b) RaRbN(CH2)m- em que

Ra é uma fração piridinil ou pirimidinil opcionalmente substituída com (C1-4)alquila, (C1-4)alcoxi, halogênio, trifluorometil, ciano ou nitro; ou fenil opcionalmente mono- ou independentemente disubstituído com (C1-4)alquila, (C1-4) alcoxi ou halogênio;

Rb é hidrogênio (C1-8) alquila e m é 2 ou 3 ;

(c) (C3-X2) cicloalquila opcionalmente monosubstituída na posição 1 com (C1-3)hidroxialquila;

(d) Rc(CH2)n- sendo que Rc é fenil opcionalmente substituído com (C1-4) alquila, (C1-4) alcoxi, halogênio ou feniltio opcionalmente monosubstituído no anel fenil com hidroximetil; ou é (C1-8) alquila; um grupo carbocíclico [3.1.1]bicíclico opcionalmente substituído com (C1- 8)alquila; um grupo piridinil ou naftil opcionalmente substituído com (C1-4)alquila, (C1-4)alcoxi ou halogênio; ciclohexeno; ou adamantil e η é 1 a 3; ou Rc é fenoxi opcionalmente substituído com (C1-4) alquila, (C1-4)alcoxi ou halogênio e n é 2 ou 3;

(e) (Rd)2CH(CH2)2- sendo que cada Rd é independentemente fenil opcionalmente substituído com (C1- 4)alquila, (C1-4) alcoxi, ou halogênio;

(f) Re(CH2)p- sendo que Re é 2-oxopirrolidinil ou (C2- 4)alcoxi e p é 2 a 4; e

(g) R9 sendo que Rg é: indanil; uma fração pirrolidinil ou piperidinil opcionalmente substituída com benzil; um grupo carbocíclico [2.2.1]- ou [3 .1.1]bicíclico opcionalmente substituído com (C1-S) alquila; adamantil; ou (C1-8) alquila opcionalmente substituído com hidroxi, hidroximetil ou fenil opcionalmente substituído com (C1- 4) alquila, (C1-4)alcoxi ou halogênio;

R4 é selecionado do grupo que consiste em H, halogênio, e alquila inferior;

R5 é selecionado do grupo que consiste em H, halogênio, alquila inferior, e aralquila; preferivelmente H ou alquila inferior;

R6 representa um grupo funcional que reage com um resíduo de sítio ativo da protease alvo para formar um aduto covalente;

R7 é selecionado do grupo que consiste em alquila, alcoxi, alquenila, alquinila, aminoalquila, aminoacil, aciloxi, arila, aralquila, cicloalquila, heterociclil, heteroarila, ou heteroaralquila; R8 é selecionado do grupo que consiste em H, arila, alquila, aralquila,cicloalquila,heterociclil, heteroarila, heteroaralquila, ou uma cadeia polipeptídica de 1 a 8 resíduos de aminoácido;

L é ausente ou selecionado do grupo que consiste em alquila, alquenila,alquinila,-(CH2)mO(CH2)m-, -(CH2)mNR2(CH2)m-, e -(CH2)mS(CH2)m-;

X é ausente ou selecionado do grupo que consiste em- N (R8)-, -O-, e -S-;

Y é ausente ou selecionado do grupo que consiste em- C(=0)-C(=S)-, e -SO2-;

m é independentemente para cada ocorrência, um número inteiro de 0 a 10; e

η é um número inteiro de 1 a 6.

Em certas concretizações, R1 é H ou alquila inferior e

R4 e R5 são ambos hidrogênio. Em tais concretizações específicas, R3 é alquila inferior. Em tais concretizações preferidas, R3 é selecionado do grupo que consiste emmetil, etil e isopropil.

Em certas concretizações, R3 é uma alquila inferior substituída. Em certas concretizações, R3 é substituído com um grupo selecionado de halogênio, hidroxil, carbonil, tiocarbonil, alcoxi, amino, amido, amidina, ciano, nitro, alquilatio, heterociclil, arila, e heteroarila.

Em certas concretizações, X, Y, e L são ausentes e R1 é uma cadeia polipeptídica de 2 a 8 resíduos de aminoácido. Em tais concretizações específicas, R1 é uma cadeia polipeptídica de 2 resíduos de aminoácidos. Em tais concretizações, a ligação entre R1 e N pode ser uma ligação tioxamida. Em outras concretizações específicas, R6 é selecionado do grupo que consiste emciano, ácido borônico, -SO2Z1, -P(=0)Z1, -P (=R9) R10R11, -C(=NH)NH2, -CH=NR12, OU -C(=0)-R12, nos quais:

R9 é selecionado do grupo que consiste em 0 e S; R10 ê selecionado do grupo que consiste emN3, SH2, NH2, NO2, e OR13; e

R11 é selecionado do grupo que consiste em alquila inferior, amina, e OLR13, ou um sal f armaceuticamente aceitável deles; ou

R10 e R11, juntamente com o fósforo ao qual eles estão anexados, formam um anel heterocíclico de 5 a 8 membros;

R12 é selecionado do grupo que consiste em H, alquila, alquenila, alquinila, NH2, -(CH2)p-R13, -(CH2)q-OH, -(CH2)q-O- alquila, - (CH2) q-0-alquenila, - (CH2) q-0-alquinila, -(CH2)q-O- (CH2)p-R13, -(CH2)q-SH, - (CH2) q-S-alquila, -(CH2)q-S-

alquenila, - (CH2) q-S-alquinila, -(CH2)q-S-(CH2)p-R13, C(O)NH2, -C(O)OR14, e C(Z1) (Z2) (Z3) ;

R13 é selecionado do grupo que consiste em H, alquila, alquenila, arila, heteroarila, cicloalquila, cicloalquenila, e heterociclil;

R14 é selecionado do grupo que consiste em H, alquila, alquenila e LR13;

Z1 é um halogênio; Z2 e Z3 são independentemente selecionados de H e halogênio;

ρ é independentemente para cada ocorrência, um número inteiro de 0 a 8; e

q é independentemente para cada ocorrência, um número inteiro de 1 a 8. Em certas concretizações, R6 é selecionado do grupo que consiste em CN, CHO, e C (=O) C (Ζ1) (Ζ2) (Ζ3), sendo que Z1 é um halogênio e Z2 e Z3 são independentemente selecionados de H e halogênio. Em certas concretizações, R6 é selecionado do grupo que consiste em C (=0) C (Ζ1) (Ζ2) (Ζ3), sendo que Z1 é um flúor e Z2 e Z3 são independentemente selecionados de H e flúor.

Em certas concretizações, R6 é um grupo -B(Y1) (Y2) sendo que Y1 e Y2 são independentemente OH ou um grupo que é hidrolisável a um ácido borônico, ou juntamente com o átomo de boro ao qual eles estão anexados, formam um anel de 5 a 8 membros que é hidrolisável a ácido borônico.

Em certas concretizações, os compostos exemplos da presente invenção incluem:

<formula>formula see original document page 145</formula>

ou enantiômeros ou diastereômeros deles.

Também estão incluídos os compostos de Fórmulas I a XXX, nas quais um ou mais grupos amida são repostos por um ou mais grupos tioxamida.

Também estão incluídos peptidomiméticos como as olefinas, fosfonatos, análogos de aza-aminoácido e semelhantes.

Também são considerados equivalentes quaisquer compostos que possam ser convertidos hidroliticamente em quaisquer dos compostos acima mencionados incluindo ésteres de ácido borônicos e haletos, e equivalentes carbonil incluindo acetais, hemiacetais, cetais, e hemicetais, e análogos dipeptídeos cíclicos.

Conforme usada aqui, a definição de cada expressão, por exemplo, alquila, m, n, etc., quando ocorre mais de uma vez em qualquer estrutura, pretende ser independente de sua definição de outra parte na mesma estrutura.

Os sais farmaceuticamente aceitáveis dos compostos expostos incluem os sais não tóxicos convencionais ou sais de amônio quaternário dos compostos, por exemplo, de ácidos orgânicos ou inorgânicos não tóxicos. Por exemplo, sais não tóxicos convencionais incluem aqueles derivados de ácidos inorgânicos como hidrocloreto, hidrobrômico, sulfúrico, sulfâmico, fosfórico, nítrico, e semelhantes; e os sais preparados a partir de ácidos orgânicos como ácido acético, propiônico, succínico, glicólico, esteárico, láctico, málico, tartárico, cltrico, ascórbico, palmítico, maleico, hidroximaleico, fenilacético, glutâmico, benzóico, salicílico, sulfanílico, 2-acetoxibenzóico, fumárico, toluenesulfônico, metanosulfônico, etano disulfônico, oxálico, isotônico, e semelhantes.

Os sais farmaceuticamente aceitáveis da presente invenção podem ser sintetizados a partir do composto que contenha um grupo ácido ou básico através de métodos químicos convencionais. Geralmente, os sais são preparados pela reação de uma base ou ácido livre como quantidades estequiométricas ou com um excesso do ácido ou base orgânico ou inorgânico formadores de sal em um solvente adequado. Os sais farmaceuticamente aceitáveis dos ácidos dos compostos apresentados também são prontamente disponíveis a partir de procedimentos convencionais como o tratamento de um ácido da presente invenção com uma quantidade apropriada de uma base como um hidróxido metílico alcalino ou alcalino terroso, (por exemplo, sódio, potássio, litio, cálcio ou magnésio) ou uma base orgânica como uma amina, piperidina, pirrolidina, benzilamina e semelhantes, ou um hidróxido de amônio quaternário como hidróxido de tetrametilamônio e semelhantes.

Os equivalentes contemplados dos compostos descritos acima incluem compostos que de outro modo correspondem a isso, e que têm as mesmas propriedades gerais deles (por exemplo, a capacidade de inibir a proteólise de GLP-I ou outro hormônio peptídico ou precursor dele), no qual uma ou mais variações simples de substituintes são feitas de modo a não afetar adversamente a eficácia dos compostos em uso no método contemplado. Em geral, os compostos da presente invenção podem ser preparados pelos métodos ilustrados nos esquemas de reação gerais, como, por exemplo, descritos abaixo, ou por modificações desses, usando materiais de partida, reagentes e procedimentos de síntese prontamente disponíveis. Nessas reações, também é possível fazer uso de variantes bem conhecidas, mas não são mencionadas aqui.

Em certas concretizações, os compostos são inibidores de DPIV com um Ki para a inibição de DPIV de aproximadamente 10 nm ou menos, mais pref erivelmente de cerca de 1,0 nm ou menos, e ainda mais pref erivelmente de cerca de 0,1, ou ainda 0,01 nM ou menos. Na verdade, os inibidores com valores Ki na faixa picomolar e mesmo femtomolar são contemplados.

Um outro aspecto da invenção se refere às composições farmacêuticas de inibidores dipeptidilpeptidase revelados aqui, particularmente composto(s) e seus usos no tratamento e/ou prevenção (inibição) de transtornos que podem ser melhorados pela alteração da homeostase de hormônios peptídicos. Em uma certa concretização, os compostos têm atividades hipoglicêmica e antidiabética, e podem ser usados no tratamento de transtornos marcados pelo metabolismo aberrante da glicose (incluindo armazenamento). Em concretizações particulares, as composições dos métodos expostos são úteis como agentes insulinotrópicos, ou para potencializar os efeitos insulinotrópicos de moléculas como o GLP-1. Sob esse aspecto, a invenção também fornece métodos para o tratamento e/ou profilaxia de uma variedade de transtornos, incluindo um ou mais de: hiperlipidemia, hiperglicidemia, obesidade, insuficiência de tolerância ã glicose, resistência à insulina e complicações diabéticas.

Por exemplo, em certas concretizações, o método envolve a administração de um composto, preferivelmente em intervalo(s) pré-determinado(s) durante um período de 24 horas, em uma quantidade efetiva para melhorar um ou mais índices aberrantes associados a transtornos do metabolismo da glicose (por exemplo, intolerância à glicose, resistência ã insulina, hiperglicemia, hiperinsulinemia e diabetes Tipo II) . A quantidade eficaz do composto pode ser de cerca de 0,01, 0,1, 1, 10, 30, 50, 70, 100, 150, 200, 500, ou 1000 mg/kg.

(ii). Agonismo de efeitos de GLP-I

Os compostos úteis nos métodos expostos possuem, em certas concretizações, a capacidade de baixar os níveis de glicose no sangue, combater a obesidade, aliviar a tolerância à glicose prejudicada, inibir a neogênese de glicose hepática, e baixar os níveis de lipídeos no sangue e inibir a aldose redutase. Eles são úteis na prevenção e/ou terapia de hiperglicemia, obesidade, hiperlipidemia, complicações diabéticas (incluindo retinopatia, nefropatia, neuropatia, cataratas, doença da artéria coronária e arteriosclerose), e, além disso, para a hipertensão e osteoporose relacionada à obesidade.

O diabetes mellitus é uma doença caracterizada por hiperglicemia que ocorre a partir da diminuição relativa ou absoluta na secreção de insulina, diminuição na sensibilidade à insulina, ou resistência à insulina. A morbidade e mortalidade dessa doença é resultado de complicações vasculares, renais, e neurológicas. Um teste de tolerância oral à glicose é um teste clínico usado para diagnosticar o diabetes. Em um teste de tolerância oral à glicose, é avaliada a resposta fisiológica de um paciente a uma carga ou estímulo de glicose. Após a ingestão de glicose, é avaliada a resposta fisiológica de um paciente ao estímulo de glicose. Geralmente, isso é realizado pela determinação dos níveis sangüíneos de glicose do paciente (a concentração de glicose no plasma, soro, ou sangue do paciente) para vários pontos pré-determinados no tempo.

Em uma concretização, a presente invenção fornece um método para agonizar a ação de GLP-I. Foi determinado que as isoformas de GLP-I (GLP-1(7-37) e GLP-I(7-36)), que são derivadas de pré-proglucagon no intestino e no cérebro posterior têm atividade insulinotrópica, isto é, elas modulam o metabolismo de glicose. O DPIV cliva as isoformas em peptideos ativos. Portanto, em certas concretizações, o(s) composto(s) da presente invenção pode(m) agonizar a atividade insulinotrópica pela interferência na degradação de peptideos GLP-1 bioativos.

(iii). Agonismo dos efeitos de outros hormônios peptídicos

Em outras concretizações, os agentes expostos podem ser usados para agonizar (por exemplo, imitar ou potencializar) a atividade de hormônios peptidicos, por exemplo GLP-2, GIP e NPY.

Ainda para ilustrar, a presente invenção fornece um método para agonizar a ação de GLP-2. Foi determinado que o GLP-2 atua com um agente trófico, para promover o crescimento do tecido gastrointestinal. O efeito de GLP-2 é marcado particularmente pelo crescimento aumentado do intestino delgado e é, portanto referido aqui como um efeito "intestinotrófico". DPIV é conhecido para a clivagem de GLP-2 em um peptídeo biologicamente inativo. Portanto, em uma concretização, a inibição de DPIV interfere na degradação de GLP-2, por meio disso aumenta a meia-vida plasmática daquele hormônio.

Em ainda outras concretizações, o método exposto pode ser usado para aumentar a meia-vida de outros peptideos derivados de próglucagon, como a glicentina, oxintomodulina, polipeptidio pancreático relacionado à glicentina (GRPP), e/ou peptídeo-2 interveniente (IP-2). Por exemplo, demonstrou-se que a glicentina causa a proliferação da mucosa intestinal e também inibe a peristalse do estômago, e tem sido elucidado como um agente terapêutico útil para doenças do trato digestivo, exemplificando por isso a presente invenção.

Portanto, em um aspecto, a presente invenção se refere ao uso terapêutico e usos relacionados do(s) composto(s) para promover o crescimento e proliferação do tecido gastrointestinal, mais particularmente do tecido do intestino delgado. Por exemplo, o método exposto pode ser usado como parte de um regime de tratamento de injúria, inflamação, ou ressecção do tecido intestinal, por exemplo, quando se deseja o crescimento e reparo aumentado do epitélio da mucosa intestinal.

Em relação ao tecido do intestino delgado, tal crescimento é medido convenientemente como um aumento na massa e comprimento do intestino delgado, em relação a um controle não tratado. Os efeitos dos compostos sobre o intestino delgado também se manifesta no aumento da altura da cripta mais o eixo de vilosidade. Tal atividade é denominada aqui com uma atividade "intestinotrófica" . A eficácia do método expostos também pode ser detectável como um aumento na proliferação celular da cripta e/ou uma diminuição na apoptose do epitélio do intestino delgado. Esses efeitos celulares podem ser observados mais significativamente em relação ao jejuno, incluindo o jejuno distai, e particularmente o jejuno proximal, e também no ileo distai. Um composto é considerado como tendo "efeito intestinotrófico" se um teste animal exibe um aumento significativo no peso do intestino delgado, aumento da altura da cripta mais o eixo de vilosidade ou aumento na proliferação celular da cripta, ou diminuição da apoptose do epitélio do intestino delgado quando tratado com o composto (ou geneticamente engenheirado para expressá-los) . Um modelo adequado para determinação de tal crescimento gastrointestinal é descrito pela Patente dos EUA 5.834.428.

Em geral, os pacientes que se beneficiariam de um aumento na massa do intestino delgado e conseqüente aumento da função da mucosa do intestino delgado são candidatos ao tratamento pelo método apresentado. Condições especificas que podem ser tratadas incluem várias formas de psilose, incluindo psilose celíaca que resulta de uma reação tóxica a uma α-gliadin do trigo, e é marcada por uma enorme perda das vilosidades do intestino; psilose tropical que resulta da infecção e é marcada pelo achatamento parcial das vilosidades; psilose hipogamaglobulinêmica que é observada comumente em pacientes com imunodeficiência variável comum ou hipogamaglobulinemia e é marcada por uma diminuição significativa na altura da vilosidade. A eficácia terapêutica do tratamento pode ser monitorada por biôpsia entêrica para examinar a morfologia da vilosidade, ou avaliação bioquímica de absorção de nutrientes, pelo ganho de peso corporal pelo paciente, ou por melhora dos sintomas associados a esses estados. Outros estados que podem ser tratados pelo método exposto, ou para os quais o método exposto pode ser profilaticamente útil, incluem enterite de radiação, enterite infecciosa ou pós-infecciosa, enterite regional (doença de Crohn), dano ao intestino delgado devido a agentes tóxicos ou outros quimioterápicos, e pacientes com sindrome do intestino encurtado.

Mais geralmente, a presente invenção fornece um método terapêutico para tratamento de doenças do trato digestivo. O termo "trato digestivo", conforme usado aqui, significa um tubo através do qual passa o alimento, incluindo estômago e intestino. O termo "doenças do trato digestivo" conforme usado aqui, significa doenças acompanhadas por anormalidade qualitativa ou quantitativa na mucosa do trato digestivo, que inclui, por exemplo, doença inflamatõria ou ulcerativa; transtorno de digestão e absorção congênito ou adquirido incluindo síndrome de má absorção; doença causada por perda de uma função de barreira da mucosa do intestino, da gastroenteropatia por perda de proteína. A doença ulcerativa inclui, por exemplo, úlcera gástrica, úlcera duodenal, úlcera do intestino delgado, úlcera do cólon e úlcera retal. A doença inflamatória inclui, por exemplo, esofagite, gastrite, duodenite, enterite, colite, doença de Crohn, proctite, Behcet gastroinstestinal, enterite de radiação, colite de radiação, proctite de radiação, e medicamentosa. A síndrome de má-absorção inclui a síndrome de má-absorção essencial como a deficiência da enzima de decomposição de dissacarídeos, má-absorção de glicose- galactose, má-absorção de frutose; síndrome de má-absorção secundária, por exemplo, o transtorno causado por atrofia da mucosa no trato digestivo através de nutrição intravenosa ou parenteral ou dieta elementar, a doença causada pela ressecção e vazamento do intestino delgado tal como a síndrome do intestino encurtado, síndrome de cul-de- sac; e síndrome de má-absorção não digerível, como a doença causada pela ressecção do estômago, por exemplo, síndrome de esvaziamento.

O termo "agente terapêutico para doenças do trato digestivo", conforme usado aqui, significa agentes de prevenção e tratamento de doenças do trato digestivo, que incluem, por exemplo, o agente terapêutico para úlcera do trato digestivo, o agente terapêutico para doença inflamatória do trato digestivo, o agente terapêutico para atrofia da raucosa do trato digestivo, o agente terapêutico para uma ferida do trato digestivo, um agente de melhora para a função do trato digestivo incluindo o agente para recuperação da função de barreira da mucosa, e o agente de melhora para a função digestiva e absortiva. Úlceras incluem úlceras e erosões digestivas, e úlceras agudas, chamadas de lesões agudas da mucosa.

O método exposto, por causa da promoção da proliferação da mucosa intestinal, pode ser usado no tratamento e prevenção de estados patológicos ou insuficiência na digestão e absorção, ou seja, tratamento e prevenção da atrofia da mucosa, ou tratamento de hipoplasia dos tecidos do trato digestivo e diminuição nesses tecidos por remoção cirúrgica bem como melhora da digestão e absorção. Além disso, o método exposto pode ser usado no tratamento de estados patológicos da mucosa devido a doenças inflamatórias como enterite, doença de Crohn, e colite ulcerativa, e também no tratamento e redução na função do trato digestivo após operação, por exemplo, na síndrome de esvaziamento bem como no tratamento de úlcera duodenal em conjunto com a inibição da peristalse do estômago e migração rápida de alimento do estômago para o jejuno. Além do mais, a glicentina pode ser usada efetivamente na promoção da cura de cirurgia invasiva, bem como na melhora das funções do trato digestivo. Portanto, a presente invenção também fornece um agente terapêutico para atrofia da mucosa do trato intestinal, um agente terapêutico para feridas no trato digestivo e uma droga para melhorar as funções do trato digestivo que abrange a glicentina como ingredientes ativos.

Da mesma forma, o(s) composto(s) da invenção podem ser usados para alterar a meia-vida plasmática da secretina, VIP, PHI, PACAP, GIP e/ou helodermina. Adicionalmente, o método exposto também pode ser usado para alterar a farmacocinêtica do Peptxdeo YY e neuropeptideo Y, ambos os membros da família de polipeptídios pancreáticos, porque o DPP IV tem sido implicado no processamento daqueles peptídeos de uma maneira que altera a seletividade do receptor.

Acredita-se que o neuropeptideo Y (NPY) atua na regulação do tônus muscular vascular liso, bem como na regulação da pressão sangüínea. 0 NPY também diminui a contratilidade cardíaca. 0 NPY é também conhecido como o estimulante do apetite mais poderoso (Wilding et al. , J. Endocrinology 1992, 132, 299-302) . 0 efeito da ingestão de alimento evocada centralmente (estimulação do apetite) é mediado predominantemente pelos receptores de NPY Yl e causa um aumento nas reservas de gordura corporal e obesidade (Stanley et al. , Physiology and Behavior 1989, 46, 173-177).

De acordo com a presente invenção, um método para o tratamento da anorexia abrange a administração a um hospedeiro de uma quantidade afetiva de um composto(s) para estimular o apetite e aumentar as reservas de gordura corporal, o que alivia substancialmente os sintomas de anorexia.

Um método para tratamento da hipotensão abrange a administração a um hospedeiro de uma quantidade afetiva de um composto(s) da presente invenção para mediar a vasoconstrição e aumentar a pressão sangüínea, que dessa forma alivia substancialmente os sintomas de hipotensão.

O DPIV também tem sido implicado no metabolismo e inativação do fator de liberação do hormônio do crescimento (GHRF) . O GHRF é um membro da família de peptídeos homólogos que incluem o glucagon, secretina, peptídeo intestinal vasoativo (VIP), peptídeo histidina isoleucina (PHI), peptídeo ativador da adenilato ciclase pituitária (PACAP), peptídeo inibidor gástrico (GIP) e helodermina (Kubiak et al. Peptide Res. 1994, 7, 153) . O GHRF é secretado pelo hipotálamo, e estimula a liberação do hormônio do crescimento (GH) a partir da pituitária anterior. Portanto, o método exposto pode ser usado para melhorar a terapia clínica para certas crianças com deficiência de hormônio do crescimento, e na terapia clínica de adultos para melhorar a nutrição e alterar a composição corporal (músculo versus gordura). O método exposto também pode ser usado na prática veterinária, por exemplo, para desenvolver uma produção e rendimento mais alto da produção leiteira, gado com pouca gordura.

(iv) . Ensaios de Atividade Insulinotrópica

Na seleção de um composto adequado para uso no método exposto, deve ser observado que a propriedade insulinotrópica de um composto pode ser determinada fornecendo aquele composto a células animais, ou injetando o composto em animais e monitorando a liberação de insulina imunoreativa (IRI) dentro do meio ou sistema circulatório do animal, respectivamente. A presença de IRI pode ser detectada através do uso de radioimunoensaio que pode detectar insulina especificamente.

O camundongo db/db é uma linhagem de camundongo diabética e geneticamente obesa. O camundongo db/db desenvolve hiperglicemia e hiperinsulinemia concomitante com o desenvolvimento de obesidade e serve portanto como um modelo de diabetes tipo 2 obesa (NIDDM). Os camundongos db/db podem ser adquiridos de, por exemplo, The Jackson Laboratories (Bar Harbor, Me.) . Em uma concretização exemplar, para o tratamento de camundongos com um regime que inclui um composto(s) ou controle, amostras sangüíneas da cavidade sub-orbital são retiradas e em certo tempo (por exemplo, 6 0 min.) após a administração da dose a cada animal. As medidas de glicose sangüínea podem ser feitas por quaisquer das várias técnicas convencionais, como pelo uso de um medidor de glicose. Os níveis de glicose sangüínea dos animais controle e dos que receberam o(s) composto(s) são comparados.

O destino metabólico de GLP-I exógeno também pode ser acompanhado em indivíduos não diabéticos ou diabéticos tipo II, e o efeito do(s) composto(s) candidato pode ser determinado. Por exemplo, uma combinação de cromatografia líquida de alta-pressão (HPLC), radioimunoensaio específicos (RIAs), e ensaio de imunoabsorvente ligado à enzima (ELISA) podem ser usados, e dessa forma o GLP-I biologicamente ativo intacto e seus metabólitos podem ser detectados. Veja, por exemplo, Deacon et al. Diabetes, 1995, 44, 1126-1131. Para ilustrar, após a administração de GLP-1, o peptídeo intacto pode ser medido usando-se o RIA ou ELISA direcionado de forma NH2-terminal, enquanto que a diferença na concentração entre esses ensaios e um RIA específico ao COOH-terminal permite a determinação de metabólitos truncados de forma NH2-terminal. Sem o composto, o GLP-I subcutâneo é rapidamente degradado de modo dependente do tempo, formando um metabõlito que co- elui em HPLC com GLP-I (9-36) amida e tem o mesmo perfil imunoreativo. Por exemplo, 30 min, após a administração subcutânea de GLP-I a pacientes diabéticos (n = 8) , o metabólito é responsável por 88,5 + 1,9% do aumento da imunoreatividade no plasma determinada pelo RIA COOH- terminal, que foi mais alto que os níveis medidos em indivíduos saudáveis (78,4 + 3,2%; η = 8; P < 0,05). Veja Deacon et al. , supra. 0 GLP-I em infusão intravenosa também foi extensivamente degradado. (v). Administração conjunta

Um outro aspecto da invenção fornece uma terapia conjunta na qual um ou mais outros agentes terapêuticos são administrados com o composto. Tal tratamento conjunto pode ser alcançado por meio de administração de doses simultâneas, seqüenciais, ou separadas dos componentes individuais do tratamento.

Em uma concretização, um composto(s) é administrado conjuntamente com insulina ou outros agentes insulinotrópicos, como o GLP-1, hormônios peptídicos, como GLP-2, GIP, ou NPY, um vetor de terapia genética que causa a expressão ectópica de tais agentes e hormônios peptídicos. Em certas concretizações, os agentes ou hormônios peptídicos citados podem ser variantes de um hormônio peptídico sintético ou de ocorrência natural, em que um ou mais aminoácidos foram adicionados, deletados, ou substituídos.

Em outra concretização ilustrativa, os compostos podem ser administrados conjuntamente com um antagonista de receptor Ml. Agentes colinérgicos são moduladores potentes da liberação de insulina que atua através de receptores muscarínicos. Além do mais, o uso de tais agentes pode ter o benefício adicional de diminuir os níveis de colesterol, enquanto aumenta os níveis de HDL. Antagonistas de receptores muscarínicos adequados incluem substâncias que bloqueiam direta ou indiretamente a ativação de receptores colinérgicos muscarínicos. Preferivelmente, tais substâncias são seletivas (ou são usadas em quantidades que promovem tal seletividade) para o receptor Ml. Exemplos não limitantes incluem aminas quaternárias (como metantelina, ipratrópio, e propantelina), aminas terciárias (por exemplo, diciclomina e escopolamina), e aminas tricíclicas (por exemplo, telenzepina). A pirenzepina e metil escopolamina são preferidas. Outros antagonistas de receptores muscarínicos adequados incluem a benztropina (disponível comercialmente como COGENTIN, da Merck), hidrocloreto de hexahidro-sila-difenidol (hidrocloreto de HHSID revelado em Lambrecht et al. Trends in Pharmacol. Sei. 1989, IO(Supl), 60; (+/-)-3-quinuclidinil xanteno-9- carboxilato hemioxalato (QNX-hemioxalato; Birdsall et al., Trends in Pharmacol. Sei. 1983, 4, 459; dihidrocloreto de telenzepina (Coruzzi et al. Arch. Int. Pharmacodyn. Ther. 1989, 302, 232; e Kawashima et al. Gen. Pharmacol. 1990, 21, 17), e atropina. As doses de tais antagonistas de receptores muscarínicos estarão geralmente sujeitas a otimização conforme destacado acima. No caso de transtornos do metabolismo de lipídeos, a otimização da dose administrada pode ser necessária independentemente da administração ser programada em referência à janela de responsividade do metabolismo de lipídeos ou não.

Em termos de regulação da insulina e metabolismo de lipídeos e redução dos transtornos precedentes, o(s) composto(s) também pode(m) agir sinergicamente com inibidores da prolactina tais como os agonistas dopamina d2 (por exemplo, bromocriptina) . Consequentemente, o método exposto pode incluir a administração conjunta de tais inibidores da prolactina como alcalóides e agonistas de dopamina inibidores da prolactina. Exemplos de tais compostos adequados incluem 2-bromo-alfa-ergocriptina, 6- metil- 8 -beta-carbobenziloxiaminoetil-10-alf a-ergolina, 8- acilaminoergolinas, 6-metil-8-alfa- (N-acil) amino-9- ergolina, 6-metil-8-alfa-(N-fenilacetil)amino-9-ergolina, ergocornina, 9,10-dihidroergocornina, ergolinas D-2-halo-6- alquila-8 -substituídas , D-2-bromo-6-metil-8- cianometilergolina, carbidopa, benserazida, e outros inibidores da dopadecarboxilase, L-dopa, dopamina, e sais não tóxicos deles.

O(s) composto (s) usado de acordo com a invenção também pode ser usado conjuntamente com agentes que atuam sobre o canal de potássio das β-células dependentes de ATP, como glibenclamida, glipizida, gliclazida, e AG-EE 623 ZW. Os compostos também podem ser vantajosamente aplicados em combinação com outros agentes orais como metfomina e compostos relacionados ou inibidores que glucosidase, por exemplo, acarbose.

(vi). Agonistas hematopoiéticos Em ainda outro aspecto, a presente invenção fornece um método para a estimulação de células hematopoiéticas em cultura ou in vivo. Em certas concretizações, os pró- inibidores de DPP IV expostos incluem um grupo local que é substrato para uma protease que é expressa na medulo óssea.

De acordo com um aspecto da presente invenção, é fornecido um método para estimulação de células hematopoiéticas in vitro. 0 método envolve (1) o contato de células hematopoiéticas com uma quantidade suficiente de um pró-inibidor DPP IV para aumentar o número de células hematopoiéticas e/ou a diferenciação de tais células hematopoiéticas em relação ao número e diferenciação de células hematopoiéticas.

Um aspecto importante da invenção envolve a restauração ou prevenção de uma deficiência no número de células hematopoiéticas em um indivíduo. Tais deficiências podem surgir, por exemplo, de anormalidades genéticas, de doenças, estresse, quimioterapia (por exemplo, tratamento com droga citotóxica, tratamento com droga esteróides, tratamento com droga imunossupressora, etc.) e de tratamento com radiação.

Os pró-inibidores da invenção podem ser administrados sozinhos, ou em combinação com agentes adicionais para o tratamento do estado de saúde, por exemplo, um agente diferente que estimula a ativação ou proliferação das células hematopoiéticas ou linfócitos. Por exemplo, os pró- inibidores podem ser administrados em conjunto com fatores de crescimento exógenos e citoquinas que são selecionadas especificamente para alcançar um resultado desejável. Por exemplo, se é desejável estimular um tipo de célula hematopoiética particular, então são usados os fatores de crescimento e citoquinas que estimulam a proliferação e diferenciação de tal tipo de célula.

Portanto, é conhecido que as interleucinas-1, 2,3, 4,5, 6,7, 9,10, 11,12, 13, e 17 estão envolvidas na diferenciação de linfõcitos. As interleucinas 3 e 4 estão envolvidas na diferenciação de células mastro. 0 fator estimulador da colônia de macrófagos granulócitos (GMCSF) , interleucina 3 e interleucina 5 estão envolvidos na diferenciação de eosinófilos. 0 GMCSF, fator estimulador da colônia de macrófagos (MCSF) e IL-3 estão envolvidos na diferenciação de macrófagos.

GMCSF, GCSF e IL-3 estão envolvidos na diferenciação de neutrófilos. GMSCF, IL-3, IL-6, IL-Il e TPO estão envolvidos na diferenciação de plaquetas. 0 ligante Flt3 está envolvido no crescimento de células dendríticas. GMCSF, e IL-3 e eritropoetina estão envolvidos na diferenciação de eritrócitos.

Finalmente, a auto-renovação de células progenitores pluripotentes, primitivas, capazes de sustentar a hematopoiese requer SCF, ligante Flt3, G-CSF, IL-3, IL-6 e IL-II. Várias combinações para alcançar o resultado desejado serão aparentes para aquelas pessoas com habilidade ordinária na técnica.

(vii). Inibidores do Proteasoma.

Em outras concretizações, os inibidores prõ-soft produzem algumas frações inibidoras que são inibidoras de proteassoma potentes e altamente seletivas e podem ser empregadas para inibir a função dos proteassomas. A inibição da função dos proteassomas possui inúmeras aplicações profiláticas e terapêuticas práticas. Todavia, por causa dos proteassomas serem onipresentes para as células vivas, há uma vontade em prover concretizações do pró-inibidor em questão que libere um inibidor de proteassoma usando um grupo de destino para fundir-se com as células-alvo visadas ou nas proximidades delas. Por exemplo, as concretizações dos pró-inibidores de proteassomas podem incluir grupos de destino que são substratos para proteases que estão presentes em tumores ou outras células que estão passando por uma proliferação não desejada ou presentes em tecidos circundantes do tumor ou outras células alvo em proliferação. Por exemplo, a fração de destino pode ser um substrato presente na camada do estroma adjacente a um tumor.

Em algumas concretizações, os pró-inibidores de proteassomas da presente invenção fornecem um método de redução da taxa de degradação de p53 e outros supressores de tumores.

Tais pró-inibidores são observados como importantes aplicações práticas controladas no tratamento das doenças prolifetivas das células, tais como câncer, re-estenose e psoríase.

Em algumas concretizações, pró-inibidores de proteassomas podem ser usados para inibir o processo de internalização celular ou de antígenos virais em peptídeos antigênicos que comprometem as moléculas MHC em um animal e são ainda úteis para o tratamento de doenças auto-imunes e na prevenção da rejeição de tecidos estranhos, tais como órgãos transplantados ou enxertos.

Finalmente, a presente invenção relaciona-se com o uso de pró-inibidores de proteassomas para tratar condições específicas em animais que são mediadas ou exarcebadas, direta ou indiretamente, por funções dos proteassomas. Estas condições incluem condições inflamatórias, tais como rejeição de tecidos, rejeição de órgãos, artrites, infecções, dermatoses, doença inflamatória nos intestinos, asma, osteoporose, osteo-artrite e doenças auto-imunes tais como lúpus e esclerose múltipla; doenças proliferativas das células, tais como câncer, psoríase e re-estenose e queda acelerada de proteínas musculares que acompanham vários estados fisiológicos e patológicos e é responsável em grande parte pela perda de massa muscular (atrofia) que se segue a lesão nos nervos, abstinência, febre, acidose e certas endocrinopatias.

Compostos da presente invenção inibem o crescimento de células de câncer. Dessa forma, os compostos podem ser empregados no tratamento do câncer, psoríase, re-estenose ou outras doenças de proliferação de células em um paciente que necessite dos mesmos.

O termo "tratamento de câncer" ou "tratando câncer" é a descrição planejada da atividade dos compostos da presente invenção em que a dita atividade previne ou alivia ou melhora qualquer dos fenômenos específicos conhecidos pela ciência por estarem associados com a patologia comumente conhecida como "câncer". 0 termo "câncer" refere-se ao espectro dos sintomas patológicos associados com o início ou progressão, também conhecido como metástase, de tumores malignos. Pelo termo "tumor" compreende-se, para o propósito da presente invenção, um novo crescimento de tecido no qual a multiplicação de células é descontrolada e progressiva. 0 tumor o qual é particularmente relevante para a invenção é o tumor maligno, no sentido que o tumor primário tem as propriedades de invasão ou metástase ou que demonstra um grau maior de anaplasia do que os tumores benignos.

Dessa forma, "tratamento de câncer" ou "tratando câncer" refere-se ã uma atividade que previne, alivia ou melhora qualquer um dos fenômenos primários (início, progressão, metástase) ou sintomas secundários associados com a doença. Cânceres que são tratáveis são em geral divididos em categorias de carcinoma, linfoma e sarcoma. Exemplos de carcinomas que podem ser tratados pela composição da presente invenção incluem, mas não estão limitadas à: Adenocarcinoma, adenocarcinoma de célula actínica, carcinoma córtico-adrenal, carcinoma de célula alveolar, carcinoma anaplásico, carcinoma de células basalóides, carcinoma baso-celular, carcinoma bronquiolar, carcinoma broncogênico, carcinoma relanadínico, carcinoma embrionário, carcinoma anometróidico, carcinoma de célula fibromolar do fígado, carcinomas foliculares, carcinoma de célula gigante, carcinoma hepatocelular, carcinoma intra- epidérmico, carcinoma intra-epitelial, carcinoma leptomeninge, carcinoma medular, carcinoma melanótico, carcinoma menigual, carcinoma mesometonéfrico, carcinoma de célula pequena, carcinoma de célula escalar, carcinoma de glândula sudorípara, carcinoma de célula transicional e carcinoma de célula tubular. Sarcomas que podem ser tratados pela composição da presente invenção incluem, mas não estão limitadas à: Sarcoma ameloblástico, sarcoma angiolítico, sarcoma botriõide, sarcoma estrorao endometrial, sarcoma de Ewing, sarcoma fascicular, sarcoma de célula gigante, sarcoma granulosístico, sarcoma imunoblástico, sarcoma osteogênico juxacordial, sarcoma copse, sarcoma leucocístico (leucemia), sarcoma linfático (Iinfo sarcoma), sarcoma medular, sarcoma mielóide (sarcoma granulocístico), sarcoma austiogenci, sarcoma periósteo, sarcoma mielóide (sarcoma histiocistico) , sarcoma de célula redonda, sarcoma de células espiraladas, sarcoma sinovial e sarcoma telangiectásico audiogênico.

Linfomas que podem ser tratados pela composição da presente invenção incluem, mas não estão limitadas à: Doença de Hodgkin e Iinfomas Iinfociticos, tais como Iinfoma de Burkitt, NPDL, NML, NH e Iinfomas difusos.

Em outras concretizações, determinados pró-inibidores de proteassomas empregados na prática da presente invenção são capazes de prevenir a ativação de NF-kB.

O bloqueio da atividade de NF-kB é considerado como o domínio de uma aplicação prática importante em várias áreas da medicina, por exemplo, inflamação, septicemia, AIDS e semelhantes.

Em certas concretizações, os compostos da presente invenção podem ser formulados na forma tópica para tratamento de enfermidades da pele selecionadas da psoriase, dermatite, líquen plano, acne e enfermidades caracterizadas pela hiperproliferação de células da pele.

Em certas caracterizações, os compostos da presente invenção podem ser formulados em forma tópica para tratamento de crescimento de cabelo descontrolado.

(viii). Composições Farmacêuticas Embora seja possível para o composto da presente invenção ser administrado sozinho, em certos casos é preferível administrar o composto como uma fórmula farmacêutica (composição). Inibidores de protease de acordo com a invenção podem ser formulados para administração de qualquer maneira conveniente para uso na medicina humana ou veterinária. Em certas concretizações, o composto incluído no preparado farmacêutico pode ser ativo por si mesmo ou pode ser um pró-fãrmaco, por exemplo, capaz de ser convertida para um composto ativo em um ambiente fisiológico.

Compostos preparados como descrito aqui podem ser administrados em várias formas, dependendo da enfermidade a ser tratada e a idade, condição e peso corporal do paciente, como é bem conhecido pela ciência. Por exemplo, quando os compostos são administrados via oral, eles podem ser formulados como tabletes, grânulos, pós ou xaropes; ou para administração parenteral eles podem ser formulados como injeções (intravenosas, intramusculares ou subcutânea), preparação para infusão em gotas ou supositórios. Para aplicação por via da mucosa da membrana oftálmica, eles podem ser formulados como gotas ou ungüentos oftalmológicos. Estas formulações podem ser preparadas através de meios convencionais e, se desejado, o ingrediente ativo pode ser misturado com qualquer aditivo convencional, tal como um excipiente, um aglutinante, um agente fragmentador, um lubrificante, um corretor, um agente solubilizante, um auxiliar para suspensão, um agente emulsificante ou um agente para revestimento. Embora a dosagem varie dependendo dos sintomas, idade e peso corporal do paciente, a natureza e severidade da enfermidade a ser tratada ou prevenida, a rota de administração e a forma da droga, geralmente, uma dose diária de cerca de 0,01 a 2000 mg do composto é recomendada para um paciente humano adulto e este pode ser administrado em dose única ou em doses separadas.

O tempo preciso de administração e/ou a quantidade do composto que irá fornecer o resultado mais efetivo em termos de eficácia do tratamento em determinado paciente irão depender da atividade, farmacocinética e biodisponibilidade de um composto particular, condição fisiológica do paciente (incluindo idade, sexo e tipo e estágio da doença, condição física geral, receptividade para uma determinada dosagem e tipo da medicação) , via de administração, etc. Todavia, as diretrizes acima podem ser usadas como base para um tratamento mais ajustado, por exemplo, determinando o melhor tempo e/ou quantidade da administração, os quais irão requerer não mais que uma rotina de experimentação consistindo de monitoramento do paciente e ajuste da dosagem e/ou tempo.

A frase "farmaceuticamente aceitável" é empregada aqui se referindo aqueles ligantes, materiais, composições e/ou doses formuladas as quais estão, dentro do escopo do julgamento médico, adequados para uso em contato com os tecidos de seres humanos e animais sem toxidade excessiva, irritação, resposta alérgica ou outros problemas ou complicações, proporcionando um razoável grau de benefício/risco.

A frase "portador farmaceuticamente aceitável" como é usada aqui significa material farmaceuticamente aceitável, composição ou veículo, tais como um enchimento líquido ou sólido, diluente, excipiente, solvente ou material encapsulante. Cada portador precisa ser "aceitável" no sentido de ser compatível com outros ingredientes da formulação e não causar danos ao paciente. Alguns exemplos de materiais que podem servir como portadores farmaceuticamente aceitáveis incluem: (1) açúcares, tais como lactose, glucose e sucrose; (2) amidos, tais como amido de milho e de batata; (3) celulose e seus derivados, tais como celulose carboximetila de sódio, etil celulose e acetato de celulose; (4) goma de tragacanto em pó; (5) malte; (6) gelatina; (7) talco; (8) excipientes, tais como manteiga de cacau e ceras para supositório; (9) óleos, tais como óleo de amendoim, óleo de semente de algodão, óleo de açafrão, óleo de gergelim, óleo de oliva, óleo de milho e óleo de soja; (10) glicóis, tal como propileno glicol; (11) polialcoóis, tais como glicerina, sorbitol, manitol e polietileno glicol; (12) ésteres, tais como oleato de etila e laurato de etila; (13) Agar; (14) agentes tampões, tais como hidróxido de magnésio e hidróxido de alumínio; (15) ácido algínico; (16) água esterilizada; (17) isotônico salino; (18) solução de Ringer; (19) álcool etílico; (20) soluções tampões fosfatadas e (21) outras substâncias não- tóxicas compatíveis, empregadas na formulação farmacêutica.

Em algumas concretizações, composições farmacêuticas da presente invenção são não-piréticas, isto é, não induzem elevações significantes de temperatura quando administradas para um paciente.

O termo "sais farmaceuticamente aceitáveis" refere-se aos sais de ácidos orgânicos e inorgânicos, relativamente não-tóxicos, adicionados aos compostos. Estes sais podem ser preparados no local durante o isolamento final e purificação do(s) composto(s) ou reagindo separadamente o(s) composto (s) puro na sua forma básica com um ácido orgânico ou inorgânico adequado e isolando o sal então formado. Sais representativos incluem sais de hidrobrometo, hidrocloreto, sulfato, bisulfato, fosfato, nitrato, acetato, valerato, oleato, palmitato, estearato, laurato, benzoato, lactato, fosfato, tosilato, citrato, maleato, fumarato, sucinato, tartarato, naftalato, mesilato, glucoheptonato, lactobionato e laurilsulfonato, e seus semelhantes. (veja, por exemplo, Berge et al. J.

Pharm. Sci. 1977, 66, 1-19)

Em outros casos, os compostos úteis nestes métodos da presente invenção podem conter um ou mais grupos ácidos 15 funcionais e, então, serem capazes de formar sais farmaceuticamente aceitáveis com bases f armaceuticamente aceitáveis. O termo "sais farmaceuticamente aceitáveis" nestes exemplos refere-se aos sais de bases orgânicas e inorgânicas, relativamente não-tóxicas, adicionadas a um composto. Esses sais podem igualmente serem preparados no local durante a isolação final e purificação do(s) composto (s) ou reagindo separadamente o(s) composto(s) ou por reações separadas do(s) composto(s) puro na forma de ácidos livres em uma base adequada, tais como hidróxido, carbonato ou bicarbonato de cátion metálico farmaceuticamente aceitáveis, como amônia ou com uma amina orgânica primária, secundária ou terciária, farmaceuticamente aceitável. Sais alcalinos ou alcalino- terrosos representativos incluindo os sais de lítio, sódio, potássio, cálcio, magnésio e alumínio e seus semelhante. Aminas orgânicas representativas úteis para formação de bases para adição de sais incluindo etilamina, dietilamina, etanolamina, dietanolamina, piperazina e semelhantes (ver, por exemplo, Berge et al. supra).

Agentes umectantes, emulsificantes e lubrificantes, tais como sulfato de sódio-lauril e estearato de magnésio, assim como agentes corantes, agentes de liberação, agentes de revestimento, adoçantes, flavorizantes e agentes odorizantes, preservativos e antioxidantes podem também estar presentes nas composições.

Exemplos de antioxidantes farmaceuticamente aceitáveis incluem: Antioxidantes solúveis em água, tais como ácido ascórbico, hidrocloreto de cisteina, bisulfato de sódio, metabisulfito de sódio, sulfeto de sódio e semelhantes; (2) antioxidantes solúveis em óleo, tais como palmitato ascórbico, hidroxianisol butilatado (BHA), hidroxitolueno butilatado (BHT), lecitina, gaiato propílico, alfa- tocoferol e semelhantes; e (3) agentes quelantes metálicos, tais como ácido citrico, ácido etilenodiamino tetra-acético (EDTA), sorbitol, ácido tartárico, ácido fosfórico e os semelhantes.

Formulações úteis nos métodos da presente invenção incluem aqueles adequados para administração oral, nasal, tópica (incluindo bucal e sublingual) , retal, vaginal, aerossol e/ou parenteral. As formulações podem convenientemente ser apresentadas em forma de dose única e serem preparadas por qualquer um dos métodos conhecidos da ciência farmacêutica. A quantidade do ingrediente ativo que pode ser combinado com o material portador para produzir uma dose única irá variar dependendo do recebedor sendo tratado e o modo de administração particular. A quantidade do ingrediente ativo que pode ser combinado com o material portador para produzir uma dose única irá geralmente ser aquela quantidade do composto que produza um efeito terapêutico. Geralmente, dentre 100%, esta quantidade irá variar de cerca de 1% para cerca de 99% do ingrediente ativo, preferencialmente de cerca de 5% para cerca de 70%, mais preferencialmente de cerca de 10% para cerca de 30%.

Métodos de preparo destas formulações ou composições incluem a etapa de associar um(ns) composto(s) com o portador e, opcionalmente, um ou mais ingredientes acessórios. Em geral, as formulações são preparadas pela associação uniforme e íntima de um ligante com portadores líquidos ou finamente divididos em portadores sólidos, ou ambos e então, se necessário, formatar o produto.

Formulações adequadas para administração oral podem ser na forma de cápsulas, sinetes, pílulas, tabletes, losangos (usando uma base flavorizante, usualmente sucrose e goma arábica ou tragacanto) , pó, granulados ou como uma solução ou uma suspensão em um líquido aquoso ou não- aquoso, ou como uma emulsão líquida de óleo em água ou de água em óleo, ou como um elixir ou xarope, ou como pastilhas (usando uma base inerte, tal como gelatina e glicerina, ou sucrose e goma arábica) e/ou como enxaguatório bucal e semelhante, cada um contendo uma quantidade predeterminada do(s) composto(s) como um ingrediente ativo. Um composto também pode ser administrado como um bolo, etuário ou pasta.

Em forma de dose sólida para administração oral (cápsulas, tabletes, pílulas, drágeas, pós, granulados e semelhantes) , o ingrediente ativo é misturado com um ou mais portadores farmaceuticamente aceitáveis, tal como citrato de sódio ou dicálcio fosfato e/ou qualquer dos seguintes: (1) Enchimentos ou extensores, tais como amidos, lactose, sucrose, glucose, manitol e/ou ácido silícico; (2) aglutinantes tais como, por exemplo, carboximetilcelulose, alginatos, gelatina, pirrolidina polivinilica, sucrose e/ou goma arábica; (3) umectantes, tal como glicerol; (4) agentes desintegrantes, tais como Agar-agar, carbonato de cálcio, amido de batata ou mandioca, ácido algínico, certos silicatos e carbonato de sódio; (5) agentes retardadores de solução, tal como parafina; (6) aceleradores de absorção, tais como compostos quaternários de amônia; (7) agentes umedecedores, tais como, por exemplo, álcool acetílico e monoestearato de glicerol; (8) absorventes, tais como caulim e cinza vulcânica; (9) lubrificantes, como talco, estearato de cálcio, estearato de magnésio, polietileno glicóis sólidos, sulfato de lauril sódio e misturas destes; e (10) agentes corantes. No caso de cápsulas, tabletes e pílulas, as composições farmacêuticas podem também incluir agentes tampões. Composições sólidas de um tipo similar podem também ser empregadas como enchimentos em cápsulas gelatinosas duras e macias usando tais excipientes como lactose ou açúcares de leite, como também polietileno glicóis de alto peso molecular e semelhantes.

Um tablete pode ser feito por compressão ou modelagem, opcionalmente com um ou mais ingredientes acessórios. Tabletes comprimidos podem ser preparados usando um aglutinante (por exemplo, gelatina ou hidroxipropilmetil celulose), lubrificante, diluente inerte, conservante, desintegrante (por exemplo, goma de glicolato de sódio ou sódio carboximetil celulose ligada transversalmente) agente tensoativo ou dispersante. Tabletes moldados podem ser feitos pela moldagem em uma máquina uma mistura de peptídeo em pó ou peptideo mimetizado umedecido com um diluente líquido inerte.

Tabletes e outras formas de doses sólidas, tais como drágeas, cápsulas, pílulas e granulados podem opcionalmente ser conseguidos ou preparados com revestimentos e casca, tais como revestimentos entéricos e outros revestimentos bem conhecidos na ciência de formulação farmacêutica. Eles também podem ser formulados de maneira a proporcionar liberação vagarosa ou controlada do ingrediente ativo usando nisto, por exemplo, hidroxipropilmetil celulose em diversas proporções para proporcionar o perfil de liberação desejado, outras matrizes poliméricas, liposomos e/ou micro-esferas. Eles podem ser esterilizados, por exemplo, por filtragem através de um filtro retentor de bactérias ou pela incorporação de agentes esterelizantes na forma de composições estéreis sólidas que podem ser dissolvidas em água estéril ou algum outro meio injetável estéril imediatamente antes do uso. Estas composições também podem opcionalmente conter agentes opacificantes e podem estar em uma composição que libere somente o(s) ingrediente(s) ativo(s), ou preferencialmente, em certa porção do trato gastrointestinal, opcionalmente, de uma maneira retardada. Exemplos de composições incorporadas que podem ser usadas incluem substâncias poliméricas e ceras. 0 ingrediente ativo também pode estar na forma micro-encapsulada, se apropriada, com um ou mais dos excipientes descritos anteriormente.

Dosagens em forma liquida para administração oral incluem emulsões farmaceuticamente aceitáveis, micro- emulsões, soluções, suspensões, xaropes e elixires. Em adição ao ingrediente ativo, as formas de dosagem líquidas podem conter diluentes inertes comumente usados na ciência, tais como, por exemplo, água ou outros solventes, agentes solubilizantes e emulsificantes tais como álcool etílico, álcool isopropílico, carbonato etílico, acetato etílico, álcool benzilico, propileno glicol, 1,3-butileno glicol, óleos (em particular, óleos de semente de algodão, amendoim, milho, sementes, oliva, castor e gergelim), glicerol, álcool tetrahidrofuril, polietileno glicóis e ésteres de ácidos graxos de sorbitano e misturas deles.

Além de diluentes inertes, composições orais também podem incluir adjuvantes tais como agentes umidificadores, emulsificantes e agentes de suspensões, adoçantes, flavorizantes, corantes, odorizantes e agentes preservativos.

Suspensões, em adição ao(s) composto(s) ativo podem conter agentes de suspensão como, por exemplo, álcoois etoxilatados de isostearil, polioxietileno sorbitol e ésteres de sorbitam, celulose micro cristalina, metahidróxido de alumínio, bentonita, agar-agar e tragacanto e misturas destes.

Formulações para administração retal ou vaginal podem ser apresentadas como um supositório que pode ser preparado pela mistura de um ou mais compostos com um ou mais excipientes não irritantes adequados ou portadores contendo, por exemplo, manteiga de cacau, polietileno glicol um supositório de cera ou um salicilato, que é sólido a temperatura ambiente, mas líquido na temperatura do corpo e, por isso, irá derreter na cavidade retal ou vaginal e liberar o agente ativo.

Formulações que são adequadas para administração vaginal também incluem pessários, tampões, cremes, géis, pastas, espumas ou formulações em spray contendo tais portadores como são conhecidos na ciência por serem apropriados.

Formas de dosagem para administração tópica ou transdérmica do(s) composto(s) incluem pós, sprays, ungüentos, pastas, cremes, loções, géis, soluções, emplastros e inalantes. O componente ativo pode ser mistura sob condições estéreis com um portador farmaceuticamente aceitável e com quaisquer preservativos, tampões ou propelentes que possam ser requeridos.

Os ungüentos, pastas, cremes e géis podem conter, em adição ao(s) composto(s), excipientes, tais como gordura animal e vegetal, óleos, ceras, parafinas, amidos, tragacanto, derivados de celulose, polietileno glicóis, silicones, bentonitas, ácido silícico, talco e óxido de zinco ou mistura destes.

Pós e sprays podem conter, em adição ao(s) composto(s), excipientes tais como lactose, talco, ácido silícico, hidróxido de alumínio, silicatos de cálcio e pó de poliamida ou misturas destas substâncias. Sprays podem conter adicionalmente propelentes convencionais, tais como alorofluorhidrocarbonetos e hidrocarbonetos não

substituídos voláteis, tais como butano e propano. 0(s) composto (s) pode ser alternativamente administrado por aerossol. Isto é realizado pela preparação de um aerossol aquoso, preparação liposomal ou partículas sólidas contendo o composto. Uma suspensão não-aquosa (por exemplo, propelente de fluorcarbono) pode ser usada.

Nebulizadores ultra-sônicos são preferenciais porque eles minimizam a exposição do agente ao corte, o que pode resultar na degradação do composto.

Comumente, um aerossol aquoso é feito pela formulação de uma solução aquosa ou suspensão do agente junto com portadores farmaceuticamente aceitáveis e estabilizantes. Os portadores e estabilizantes variam com os requisitos do composto em particular, mas incluem normalmente surfactantes não iônicos (detergentes, pluronicos ou polietileno glicol), proteínas inócuas como soro albumina, ésteres de sorbitam, ácido oléico, lecitina, aminoácidos tais como glicina, tampões, sais, açúcares ou álcoois de açúcar. Aerosóis geralmente são preparados a partir de soluções isotônicas.

Medicamentos que podem ser administrados por formulações em inalantes ou aerossol de acordo com a invenção incluem pró-fármacos inibidores de protease úteis na terapia por inalação que pode ser apresentada numa forma que seja solúvel ou substancialmente solúvel no sistema propelente selecionado.

O tamanho das partículas do medicamento particionado deve ser tal que permita a inalação de substancialmente todo o medicamento pelos pulmões sob a administração da formulação em aerossol e deve ser desejavelmente menor que 20 microns, preferencialmente numa variação de 1 a 10 microns, por exemplo, 1 a 5 microns. 0 tamanho da partícula do medicamento pode ser reduzido por meios convencionais, por exemplo, por moagem ou micronização.

A administração do medicamento pode ser indicada para o tratamento de sintomas leves, moderados ou severamente agudos ou crônicos ou para tratamento profilático. Deve ser avaliado que a precisão da dose administrada depende da idade e condição do paciente, do medicamento particionado em particular usado e da freqüência de administração e ficará enfim a critério do médico atendente. Quando combinações de medicamentos são empregadas, a dose de cada componente da combinação irá ser, em geral, a dose empregada de cada componente quando usado sozinho. Tipicamente, a administração pode ser de uma ou mais vezes, por exemplo, de 1 a 8 vezes por dia, dando por 1,2,3 ou 4 sopros cada vez. Preferencialmente a administração pode ser uma vez por dia.

Para administração, a droga é adequadamente inalada a partir de um nebulizador, de um inalador de dose única (MDI) pressurizado ou como um pó seco a partir de um inalador de pó seco (por exemplo, vendido como TURBUHALERe) ou a partir de um inalador de pó seco utilizando gelatina, plástico ou outras cápsulas, cartuchos ou embalagem do tipo blister.

Um diluente ou portador, geralmente não-tóxico e quimicamente inerte para o medicamento; por exemplo, lactose, dextran, manitol, glucose ou quaisquer aditivos que darão ao medicamento um sabor desejado, pode ser adicionado ao medicamento em pó.

A mistura micronizada pode ser suspensa ou dissolvida em uma mistura líquida propelente que é retida em um container que é selado com uma válvula medidora e encaixado em um acionador plástico. Os propelentes usados podem ser halocarbonetos de diferentes fórmulas químicas. Os propelentes de halocarbonetos mais freqüentemente usados são o triclorofluormetano, diclorodifluormetano, diclorotetrafluroetano, tetrafluroetano e 1,1- difluoroetano. Baixas concentrações de um surfactante tais como trioleato de sorbitan, lecitina, dioctilsufosucinato de disódio ou ácido oléico podem também ser usados para aumentar a estabilidade física.

Emplastros transdérmicos tem a vantagem adicional de fornecer uma liberação controlada de um(ns) composto(s) para o corpo. Tais formas podem ser feitas dissolvendo ou dispersando o agente no meio apropriado. Ampliadores de absorção podem também ser usados para aumentar o fluxo do composto através da pele. A taxa deste fluxo pode ser controlada tanto por uma membrana controladora de vazão ou pela dispersão de peptídeos mimetizados em um polímero ou gel.

Formulações oftálmicas, ungüentos oculares, pós, soluções e semelhantes, também são contemplados igualmente no escopo desta invenção.

Composições farmacêuticas desta invenção adequadas para administração parenteral compreendem um ou mais composto (s) em combinação com uma ou mais soluções isotônicas aquosas ou não-aquosas farmaceuticamente aceitáveis, dispersões, suspensões ou emulsões ou pós- estéreis que possam ser reconstituídos em soluções injetáveis estéreis ou dispersões prontas para uso imediato, que podem conter antioxidantes, tampões, bacteriostáticos, solutos que tornam a formulação isotônica com o sangue do recipiente pretendido ou agentes de suspensão ou espessantes.

Exemplos de portadores aquosos e não-aquosos adequados que podem ser empregados nas composições farmacêuticas da invenção incluem água, etanol, polióis (tais como glicerol, propileno glicol, polietileno glicol e semelhantes) e misturas adequadas destes, óleos vegetais, tal como óleo de oliva e ésteres orgânicos injetáveis tal como oleato de etila. A fluidez correta pode ser mantida, por exemplo, pelo uso de materiais de revestimento, tal como lecitina, pela manutenção do tamanho requerido das partículas nos casos de dispersões e pelo uso de surfactantes.

Estas composições também podem conter adjuvantes tais como preservativos, agentes umectantes, agentes emulsificantes e agentes dispersantes. A prevenção contra a ação de microrganismos pode ser assegurada pela inclusão de vários agentes antibacterianos e antifúngicos, por exemplo, parabeno, clorobutanol, ácido sórbico fenol e semelhantes.

Também pode ser desejável incluir agentes isotônicos, tais como açúcares, cloreto de sódio e semelhantes nas composições. Em adição, a absorção prolongada da forma farmacêutica injetável pode ser conseguida pela inclusão de agentes que retardem a absorção tais como monoestearato de alumínio e gelatina.

Em alguns casos, de maneira a prolongar o efeito da droga, é desejável reduzir a absorção da mesma a partir de injeção subcutânea ou intramuscular. Isto pode ser obtido pelo uso de uma suspensão líquida de material cristalino ou amorfo com baixa solubilidade em água. A taxa de absorção da droga então dependerá da taxa de dissolução que, por sua vez, pode depender do tamanho do cristal ou forma cristalina. Alternativamente, a absorção retardada da administração da droga na forma parenteral é obtida dissolvendo ou suspendendo a droga em um veiculo oleoso.

Formas injetáveis armazenadas são feitas pela formação de matrizes micro encapsuladas do(s) composto(s) em polímeros biodegradáveis tal como polilactídeo- poliglicolldeo. Dependendo da razão da droga para o polímero e de natureza particular do polímero empregado, a taxa de liberação da droga poderá ser controlada. Exemplos de outros polímeros biodegradáveis incluem poli (ortoésteres) e poli (anidridos). Formulações injetáveis armazenadas também são preparadas pela captura da droga em liposomas ou micro emulsões que são compatíveis com o tecido humano.

Quando o(s) composto(s) da presente invenção é administrado como produto farmacêutico para humanos e animais, ele pode ser dado per se ou como uma composição farmacêutica contendo, por exemplo, 0,1 a 99,5%(mais preferencialmente 0,5 a 90%) do ingrediente ativo em combinação com um portador farmaceuticamente aceitável.

As preparações dos agentes podem ser dadas por via oral, parenteral, tópica ou retal. Elas são fornecidas, naturalmente, em formas adequadas para cada via de administração. Por exemplo, elas são administradas em forma de tabletes ou cápsulas, por injeção, inalação, loção ocular, ungüento, supositório, infusão; topicamente por loção ou ungüento e por supositórios por via retal. A administração por via oral é preferível. As expressões, "administração parenteral" e "administrado parenteralmente", como usadas aqui significam outros modos de administração do que administração enteral e tópica, comumente por injeção e inclui, sem limitação, injeção intravenosa, intramuscular, intra-arterial, raquidiana, intracapsular, intra-orbital, intracardíaca, intradérmica, intraperitoneal, transtraqueal, subcutânea, subcuticular, intra-articular, subcapsular, sub-aracnóide, intra-espinhal e intra-external e infusão.

As expressões "administração sistêmica", "administrado sistemicamente", "administração periférica" e "administradas perifericamente" como usadas aqui significam administração de um ligante, droga ou outro material, exceto diretamente no sistema nervoso central, tal que entre no sistema do paciente e, então, seja metabolizado e outro processo semelhante, por exemplo, administração subcutânea.

Este(s) composto(s) pode ser administrado para humanos e outros animais para terapia por qualquer via de administração adequada, incluindo via oral, nasal, como por exemplo, um spray, via retal, intravaginal, parenteral, intralinf ática e topicamente como por pós, ungüentos ou gotas, incluindo via bucal e sublingual.

A adição do composto ativo da invenção para ração animal é preferencialmente acompanhada pelo preparo de uma mistura de ração apropriada contendo o composto ativo em quantidade efetiva e incorporando esta mistura na ração completa.

Alternativamente, um concentrado intermediário ou suplemento alimentar contendo o ingrediente ativo pode ser misturado à ração. A maneira como tais misturas

alimentares e as rações completas podem ser preparadas e administradas está descrita em livros de referência (tal como nApplied Animal Nutrition"; San Francisco: Freedmani 1969; ou Livestock Feeds and Feeding; Corvallis: 0 & B Books, 1977).

Indiferente da rota de administração selecionada, o(s) composto(s), que podem ser usados na forma hidratada adequada e/ou as composições farmacêuticas da presente invenção, são formulados em formas de doses farmaceuticamente aceitáveis por métodos convencionais como aqueles conhecidos pela técnica farmacêutica.

Os presentes níveis da dose dos ingredientes ativos nas composições farmacêuticas desta invenção podem ser variados de maneira a obter uma quantidade do ingrediente ativo que seja efetiva para achar a resposta terapêutica desejada para um paciente em particular, composição e modo de administração, sem que seja tóxico para o paciente. (ix). Produção e Embalagens Farmacêuticas.

Um aspecto da presente invenção fornece um produto farmacêutico embalado compreendendo um ou mais inibidores da presente invenção formulados em um excipiente farmaceuticamente aceitável, em associação com instruções (escritas e/ou ilustradas) descrevendo a dose recomendada e/ou administração da formulação para o paciente. Tais instruções podem incluir detalhes para o tratamento ou prevenção de doenças e, opcionalmente, avisos dos possíveis efeitos colaterais e interações entre a droga e outras drogas e entre alimentos.

Outro aspecto da invenção relata o uso dos inibidores em questão na produção de um medicamento para o tratamento de um distúrbio para o qual a inibição da protease alvo da fração inibidora G provê um benefício terapêutico para o paciente. Exemplos de distúrbios estão enumerados abaixo:

Ainda, outro aspecto da invenção apresenta um método para a condução de negócios farmacêuticos, o qual inclui:

a. Produzir um ou mais dos inibidores em questão; e

b. comercializar para provedores de serviços médicos os benefícios de usar a preparação para tratar ou prevenir qualquer uma das doenças ou indicações citadas aqui.

Em certas concretizações, o método de negócio pode incluir a preparação de uma rede de distribuição para a venda da preparação. Também pode incluir o fornecimento de material de instrução para pacientes ou médicos para uso da preparação para o tratamento e prevenção de qualquer uma das doenças ou indicações citadas aqui.

(x). Bibliotecas Combinatórias

Os compostos da presente invenção, particularmente bibliotecas de variações possuindo várias classes representativas de substituintes são acessíveis para a química combinatória e outros esquemas paralelos de síntese (veja, por exemplo, PCT WO 94/08051). 0 resultado é que amplas bibliotecas de compostos relacionados, por exemplo, Uma variada biblioteca dos compostos representados acima, pode ser filtrada rapidamente, com exames de alto rendimento de maneira a identificar potenciais compostos preferenciais inibidores de protease, assim como aprimorar a especificidade, toxidade e/ou o perfil citotóxico- cinético de um composto preferencial.

Simplesmente para ilustração, uma biblioteca combinatorial para os propósitos da presente invenção ê uma mistura de compostos químicos relacionados que podem ser filtrados juntos para uma propriedade desejada. A preparação de muitos compostos relacionados em uma simples reação reduz muito e simplifica o número de processos de filtragem que são necessários para serem executados. A filtragem pelas propriedades físicas apropriadas pode ser realizada pelos métodos convencionais.

A diversidade na biblioteca pode ser criada em uma variedade de diferentes níveis. Por exemplo, os grupos do substrato arila usados em reações combinatórias podem ser diversos em termos do núcleo do grupo arila, por exemplo, uma diversidade em termos da estrutura do anel e/ou podem ser variados com respeito aos outros substituintes.

Uma variedade de técnicas está disponível na técnica para gerar bibliotecas combinatórias de moléculas orgânicas pequenas tais como os inibidores de protease em questão. Veja, por exemplo, Blondelle et al. Chem. 1995, 14, 83; the Affymax U.S. Patents 5,359,115 and 5,362,899: the Ellman U.S. Patents 5,288,514: the Still et al. PCT publication WO 94/08051; the ArQule U.S. Patents 5,736,412 and 5,712,171; Chen et al. J. Am. Chem. Soe. 1994, 116, 2661: Kerr et al. J. Am. Chem. Soe. 1993, 215, 252; PCT publications W092/10092, WO93/09668 and WO91/07087; and the Lerner et al. PCT publication WO93/20242).

Conseqüentemente, uma variedade de bibliotecas da ordem de cerca de 100 a 1.000.000 ou mais diversomeros dos inibidores de protease em questão podem ser sintetizados e filtrados por atividade em particular ou propriedade.

Em uma concretização de exemplo, uma biblioteca de diversomeros candidatos à inibidores de protease podem ser sintetizados utilizando um esquema adaptado para as técnicas descritas em Still et al. PCT publication WO 94/08051, por exemplo, Sendo conectados a uma gota de polímero por um grupo hidrolisável ou fotolisável, opcionalmente localizado em uma das posições dos agonistas candidatos ou um substituinte do intermediário sintético. De acordo com a técnica de Still et al. , A biblioteca é sintetizada em um grupo de gotas, cada gota incluindo um grupo de etiquetas identificando o diversomero em particular naquela gota. A biblioteca de gotas pode então ser "incrustada" com proteases para as quais um inibidor é procurado. Os diversomeros podem ser liberados da conta, por exemplo, por hidrólise.

As estruturas dos compostos úteis na presente invenção proporcionam prontamente sínteses eficientes. A natureza das estruturas dos compostos em questão como geralmente está estabelecida acima, permite a rápida construção combinatorial dos ditos compostos. Por exemplo, como no esquema estabelecido abaixo, um grupo aril ativado, tal como um triflato ou brometo de arila, ligado a uma gota ou outro suporte sólido pode ser conectada a outro grupo aril pela realização de uma ligação de Stille ou Suzuki com um ácido aril estânico ou aril borônico. Se o segundo grupo arila é f uncionalizado com um aldeído, uma amina substituinte pode ser adicionada através de uma aminação redutiva. Alternativamente, o segundo grupo aril pode ser funcionalizado com o grupo restante, tal como um triflato, tosilato ou halóide, capaz de ser deslocado por uma amina.

Ou, o segundo grupo aril pode ser funcionalizado com um grupo amina capaz de resistir a uma aminação redutiva com uma amina, por exemplo, CyKNH2. Outras técnicas possíveis de ligação incluem reação de arilação de amina mediadas por metais. A amina secundária resultante pode então ser mais funcionalizada por uma acilação. Alquilação ou arilação para gerar uma amina terciária ou amido que pode ser dividida a partir da resina ou suporte.. Estas reações geralmente são completamente brandas e têm sido aplicadas com sucesso nos esquemas combinatórios de síntese de fase sólida. Além disso, a ampla variedade de substrato e parceiros para ligação adequados e disponíveis para estas reações 'permite a rápida construção de bibliotecas de compostos grandes e diversas para testar em ensaios como foi estabelecido aqui. Para certos esquemas e para certas substituições nos vários substituintes dos compostos em questão, uma das técnicas da ciência farmacêutica reconhece a necessidade de disfarçar certos grupos funcionais com um grupo protetor adequado. Tais técnicas são bem conhecidas na ciência farmacêutica e são facilmente aplicáveis para esquemas de síntese combinatorial.

<formula>formula see original document page 187</formula>

Muitas variações no que foi apresentado acima e nos caminhos apresentados permitem a síntese de bibliotecas dos compostos largamente diversificadas as quais podem ser testadas como inibidores de protease.

Variações, modificações e outras implementações do que está descrito aqui ocorrerão para aqueles com as habilidades usuais sem se afastar do espirito e do escopo da invenção. Conseqüentemente, a invenção não está limitada somente para as descrições explicadas anteriormente. Para explicações de características adicionais que podem ser usadas com a invenção, incluindo concretizações descritas aqui, consulte os documentos listados acima e incorpore-os para referência em sua totalidade. Todas as combinações operacionais entre as explicações das concretizações descritas acima e aquelas características descritas abaixo são consideradas a ser concretizações potencialmente patenteáveis da invenção.

Exemplificação

A invenção agora sendo descrita de modo geral, será mais prontamente compreendida pela referência para os seguintes exemplos que estão incluídos meramente para os propósitos de ilustração de certos aspectos e concretizações da presente invenção, e não tem a intenção de limitá-la.

Exemplo 1

Procedimento geral para síntese de Análogos Contendo (boro)Aminoácido (Xaa-(C(S))-(boro)Xaaf de Dipeptídeo Contendo Tioxo-Amida Visão Geral

Inicialmente, uma forma protegida B-terminal de um análogo (boro)aminoácido é acilada com uma forma ativada de um aminoácido N-protegido (ou oligopeptídeo) para dar um análogo de dipeptídeo (ou oligopeptídeo) contendo (boro)aminoácido B-protegido e N-protegido. O análogo de (boro)aminoácido B-protegido e N-protegido é, então, transformado no composto tioxo-amida correspondente usando, por exemplo, Reagente de Lawesson. Finalmente, o análogo de dipeptídeo (ou oligopeptídeo) de (boro)aminoácido contendo tioxo-amida é desprotegido para fornecer o dipeptídeo (ou oligopeptídeo) de (boro)aminoácido contendo tioxo-amida.

Aplicação para preparação de Ala-boroPro (tioxo amida)

<formula>formula see original document page 189</formula>

A uma solução agitada de N-Boc - L- Alanina (1,9 g, 10 mmol) e L -boroPro(pn) HCl (2,9 g, 10 mmol) em DMF anidro (30 mL) foram adicionados HATU (4,0, 10,5 mmol) e N,N~ diisopropiletilamina (DIPEA, 4,0 mL, 23 mmol) a 0°C sob uma atmosfera de argônio. O banho refrigerante foi removido e a mistura resultante foi agitada a temperatura ambiente por 1 hoar e, então, foi concentrada in vácuo a 30°C. O resíduo foi dissolvido em acetato de etila (100 mL) , lavado em seqüência com KHSO4 (0,1 M, 3 x 15 mL) , NaHCO3 aquoso (5%, 3 x 10 mL) , salmoura (3 x 10 mL) e seco (MgS04) e evaporado. O produto bruto foi purificado por cromatografia de coluna flash sobre sílica gel (1:1, hexanos/EtOAc) para fornecer o produto puro de acoplamento como um pó branco que foi adicionado para uma suspensão agitada de reagente de Lawesson (1,8 g, 4,5 mmol) em tolueno anidro (100 mL) a temperatura ambiente. A mistura resultante foi, então, agitada a 8 0°C por 4 h. Depois da remoção do solvente, o produto bruto foi purificado por cromatografia de coluna flash sobre sílica gel (2:1, hexanos/EtOAc) para fornecer W-Boc-Ala - boropro(pn) (tioxo amida) como um pó branco. 3,1 g desta tioxo amida (7,1 mmol) foram dissolvidos em diclorometano anidro (40 mL) , resfriados a -78° C, uma solução de tricloreto de boro em diclorometano (35 ML, 1,0 M) foi adicionada e agitada por 1 h. A mistura resultante foi evaporada até ser secada sob pressão reduzida e co-evaporada usando metanol anidro (3 χ 15 mL) . O resíduo foi então particionado entre água (30 mL) e éter (30 mL) . A fase aquosa foi separada e lavada com éter (2 χ 20 mL) . A fase aquosa foi concentrada in vácuo e então purificada por RP-HPLC semipreparativa, liofilizada para fornecer o composto alvo Ala -boroPro (tioxo amida) como um pó branco. 1H NMR (D2O, pH 2,01, δ): 1,51 (d, J = 15 6,7 Hz, 3H, CH3), 1,83 - 1,90 (m, 1H, -CH2CHAHBCHB-) , 2,08 - 2,25 (m, 3Η, -CH2CHaHbCHB-) , 3,50 - 3,56 (m, IH, CH2CH2CHB-), 3,62 - 3,69 (m, 1H, -NCHaHb CH2CH2-), 3,92 - 4,00 (m, IH, -NCHaHbCH2CH2-), 4,55 (q, J= 6,6 Hz, IH, CH3CHNH2-); 11B NMR (D2O, pH 2,01, δ): 9,5; LC-MS (ESI + ) for 20 C7H15BN2O2S m/z (intensidade rei.): 369,2 ( [2 χ (M - H2O) + H]+, 21), 203,1 ( [M + H]+, 58), 186,1 ( [M - NH2]+, 100). HRMS: calculada para C7H16BN2O2S, [M + H]+, 203,1026, encontrada 203,1030.030.

Exemplo 2

Ensaio de inibição DPIV

A solução do inibidor é preparada pela dissolução 3 - 5 mg de inibidor em solução pH 2 (0,01 N HCl) , tal que a concentração da solução seja igual a 1 mg/10pL. Uma amostra de 10 pL desta solução é então adicionada a 990 pL de um tampão pH 8 (0,1 M HEPES, 0,14 M NaCl) e a solução é deixada descansar a temperatura ambiente durante a noite.

A solução de enzima é preparada pela diluição de 20 pL de DPIV (concentração 2,5 μΜ) em 4 0 mL de tampão pH 8.

A solução substrato é preparada pela dissolução de 2,0 mg L-alanil-L-prolina-para-nitroanilida em 20 mL de tampão pH 8.

250 pL da solução de enzima são adicionados ao poço #B1 a #H1, #A2 a #H2 e #A3 a #H3 de uma placa de 96 poços, enquanto o poço #A1 recebe 250 pL · do tampão pH 8 ao invés da solução de enzima. 90 pL do tampão pH 8 são então adicionados à coluna 5 (do poço #A5 para #H5) .

Uma diluição 1:10 é então realizada pela adição de solução de inibidor a #A5 e a solução é misturada bem antes de transferir 10 pL desta solução de #A5 para #B5. A solução em #B5 é então misturada bem antes de transferir 10 pL desta solução de #B5 para #C5. A solução em #C5 é então misturada bem antes de transferir 10 pL desta solução de #C5 para #D5. A solução em #D5 é então misturada bem antes de transferir 10 pL desta solução de #D5 para #E5. A solução em #E5 é então misturada bem antes de transferir 10 pL desta solução de #E5 para #F5. A solução em #F5 é então misturada bem antes de transferir 10 pL desta solução de #F5 para #G5. A solução em #G5 é então bem misturada antes de transferir 10 pL desta solução de #G5 para #H5.

Uma parte de 3 0 pL é então transferida de #H5 para #H3 para fileira H e os conteúdos são bem misturados. O procedimento análogo é repetido para as fileiras G, F, E, D, C, BeA seqüencialmente. A placa é então agitada em um agitador de placas por 5 min antes de deixar a placa incubar a temperatura ambiente por 5 min adicionais. Uma vez que a placa tenha sido deixada incubar, 30 μL do substrato são adicionados a cada poço exceto poço #A1. A placa é então agitada em um agitador de placas por 5 min antes de deixar a placa incubar a temperatura ambiente por 25 min. A absorvância é então imediatamente lida a um comprimento de onda de 410 nm. Exemplo 3

Seletivida.de para Isoformas de Dipeptil Peptidase

O ensaio descrito no Exemplo 2 é usado para determinar os valores IC50 para vários compostos da invenção. Neste exemplo, o ensaio é conduzido para DPIV e DP8 ou DP9. A proporção dos valores IC50 para cada composto testado é calculada de maneira a determinar a seletividade para a isoforma DPIV. Os valores IC50 foram medidos no mesmo pH durante o ensaio.

Os compostos preferidos da invenção inibiram DPIV ao menos 10 vezes, preferencialmente ao menos 100 vezes, mais fortemente que eles inibiram DP8 e/ou DP9, isto é, possuem um IC50 ao menos 10 (ou 100) vezes menor contra DPIV do que contra DP8 e/ou DP9.

<table>table see original document page 192</column></row><table> A atividade inibidora de um composto pode ser facilmente testada. DP-IV é purificado de um cõrtex de um rim de porco pelo método de Barth et al. (Acta Biol. Med. Germ. 32:157, 1974) e Wolf et al. (Acta Biol. Med. Germ.

37:409, 1978) e de uma placenta humana pelo método de Puschel et al. (Eur. J. Biochem. 126:359, 1982). Um composto é então separado pela sua habilidade de inibir a atividade da protease de DP-IV com respeito ao substrato natural. Por exemplo, a atividade de DP-IV, isolado a partir de um rim de porco pelo método de Wolf et al. (ACTA Bio. Mes. Ger. 37:409, 1972), foi mensurada usando como um substrato Ala-Pro-p-nitroanilida. Resumidamente, uma

reação contendo 50 micromoles de HEPES sódio (pH 7,8), 10 micromoles de Ala-Pro-p-nitroanilida, 6 miliunidades de DP- IV e 2%(vol/vol) de dimetilformamida em um volume total de 1,0 mL. A reação foi iniciada pela adição da enzima e as taxas da reação foram medidas a 25°C, a formação do produto da reação (para-nitroanilida) na presença e ausência de um composto teste pode ser detectada fotometricamente, por exemplo, a 410 nm. <table>table see original document page 194</column></row><table> <table>table see original document page 195</column></row><table> <table>table see original document page 196</column></row><table> <table>table see original document page 197</column></row><table>

Exemplo 5

Inibição de Proteassoma X-BoroLeu Tioxamida ν Oxoamida

O proteassoma 26S é a protease multi catalítica responsável pela maioria das mudanças nas proteínas intracelulares em células eucarióticas, incluindo degradação proteolítica de proteínas defeituosas, oxidadas ou mal dobradas, assim como processamento ou degradação das proteínas regulatórias chaves requeridas por várias funções celulares (Ciechanover, Cell 79: 13-21 (1994); Coux et al. , Ann. Rev. Biochem. 65:801-847 (1995); Goldberg et al., Chemistry & Biology 2:503-508 (1995)). Substratos protéicos são primeiro marcados para degradação por conjugação covalente para múltiplas moléculas por uma pequena proteína,ubiquitina. Aproteína resultante poliubiquitinada é então reconhecida e degradada pelo proteassoma 26S. Formando o núcleo catalitico do proteassoma 26S está o proteassoma 2OS, um complexo multi subunidade de aproximadamente 7 00 kDa de peso molecular. Coux et al. (Ann. Rev. Biochem. 65:801-847 (1995)) ensina que o proteassoma 20S não degrada por si mesmo as proteínas ubiquitinadas, mas controla múltiplas atividades de peptidases. Baseado nas preferências dos substratos, Coux et al. caracteriza estas atividades como similares a cimotripsina, similar a tripsina, após glutamila hidrolase, preferencial por aminoácido de cadeia não linear e preferencial por aminoácido levemente neutro. Coux et al., também ensinam que uma ativação radical da atividade do proteassoma 2OS pode ser induzida por vários tratamentos in vitro, tais como aquecimento a 55 graus C, incubação com polipeptideos básicos ou por reguladores fisiológicos tais como PA28 ou PA700. McCormack et al. (Biochemistry 37:7792- 7800 (1998)) ensinam que uma variedade de substratos de peptídeos, incluindo Suc-Leu-Leu-Val-Tyr-AMC, Z-Leu-Leu- Arg-AMC, e Z-Leu-Leu-Glu-2NA, onde Suc é N-succinil, AMC é 7-amino-4-metilcoumarina e 2 NA é 2-naf ti lamina, são clivados pelo proteassoma 20S.

0 caminho de proteassoma ubiquitinada desempenha uma função central em um grande número de processos fisiológicos. Deshaies (Trends in Cell Biol. 5: 428-434 (1995)) e Hoyt (Cell 91:149-151 (1997)) mostram que a proteólise regulada de células cíclicas de proteínas, incluído ciclinas, inibidores quinase dependentes de ciclina e proteínas supressoras de tumor, é requerida para o controle da progressão de células cíclicas e que a proteólise destas proteínas ocorre através do caminho do proteassoma ubiquitina. Palombella et al. , WO 95/25533 mostra que a ativação do fator de transcrição NF-kappa-B, que desempenha uma função central na regulação de genes envolvidos nas respostas imunológicas e inflamatórias, é dependente da degradação mediada por proteassoma de uma proteína inibidora, Ikappa-B-alfa. Goldberg e Rock, WO 94/17816 discorre que a mudança continua de proteínas celulares pelo caminho do proteassoma ubiquitina desempenha uma função essencial na apresentação de antígenos.

A inibição da atividade do proteassoma então oferece uma nova abordagem promissora para intervenção terapêutica destas e de outras condições direta ou indiretamente mediadas pela função proteolítica do proteassoma. Goldberg et al. (Chemistry & Biology 2:503-508 (1995)) mostra que inibidores de proteassomas bloqueiam a resposta inflamatória in vivo em modelos animais de doenças humanas.

Os compostos podem ser separados pela sua habilidade para inibir o processo de degradação dependente de ATP- ubiquitina pela proteólise mensurada em células cultivadas (Rock et al., Cell, vol. 78:761 (1994)). Por exemplo, a degradação de proteínas intracelulares duradouras pode ser mensurada em células do mioblasto de ratos C2C12. As células são incubadas com metionina 3 5S por 4 8 horas por etiquetas de proteínas duradouras e então perseguidas por 2 horas em meio contendo metioninas não etiquetadas. Após o período de perseguição, as células são incubadas por 4 horas na presença ou ausência do composto teste. A quantidade de proteína degradada na célula pode ser mensurada pela quantificação da radioatividade do ácido tricloroacético solúvel liberado pelas proteínas pré- etiquetadas no crescimento do meio (um indicador da proteólise intracelular).

Os compostos também podem ser testados pela sua habilidade para redução da destruição muscular in vivo. A excreção urinaria do aminoãcido 3-metilhistidina (3-MDH) modificado é provavelmente o método mais bem caracterizado para o estudo da degradação da proteína miofibrilar in vivo (veja Young and Munro, Federation Proc. 37:229-2300 (1978) ) . A 3-metilhistidina é um aminoãcido pós- translacional modificado o qual não pode ser reutilizado para síntese de proteínas e é sabido que somente ocorre em actina e miosina. Isto ocorre em actina isolada de todas as fontes, incluindo actina citoplasmática de vários diferentes tipos de células. Isto também ocorre na miosina de cadeia pesada de fibras musculares de rápida contração (branca, tipo II) , mas ela é ausente na miosina do músculo cardíaco e da miosina de fibras musculares de contração vagarosa (vermelhas, tipo I) . Devido a sua presença na actina de outros tecidos que os dos músculos esqueléticos, outros tecidos irão contribuir para o 3-MH urinário. Os músculos esqueléticos têm sido estimados em contribuir com 38-74% do 3 -MH urinário em ratos normais e 79-86% do 3-MH urinário em ratos tratados com corticosterona (100 mg/kg/dia subcutaneamente) por 2-4 dias (Millward and Bates, Biochem. J. 214:607-615 (1983); Kayali, et al., Am. J. Physiol. 252:E621-E626 (1987)).

O tratamento de altas doses de glucocorticóide pode ser usado para induzir um estado de enfraquecimento muscular em ratos. O tratamento de ratos com injeções diárias de corticosterona subcutânea (100 mg/kg) causa um aumento de aproximadamente 2 vezes no 3-MH urinário. O aumento da excreção do 3-MH é transitório, com um aumento do pico após 2-4 dias de tratamento e um retorno aos valores basais após 6-7 dias de tratamento (Odedra, et al., Biochem. J. 214:617-627 (1983); Kayali, et al. , Am. J. Physiol. 252:E621-E626 (1987)). Os glucocorticóides têm sido apresentados para ativar a via proteolítica das ATP ubiquitino-dependentes em músculos do esqueleto (Wing and Goldberg, Am. J. Physiol. 264:E668-E676 (1993)) e inibidores de proteassomas são entretanto esperados para inibir o enfraquecimento muscular que ocorre após o tratamento com glucocorticóides.

<table>table see original document page 201</column></row><table> <table>table see original document page 202</column></row><table> Incorporação por Referência

Todas as patentes do EUA e publicações de pedidos de patente dos EUA citados aqui estão incorporados por referência.

Equivalentes

Aquelas pessoas habilitadas na técnica reconhecerão, ou serão capazes de averiguar com o uso de experimentação de rotina, muitos equivalentes para as concretizações especificas da invenção descrita aqui. Tais equivalentes pretendem ser abrangidos pelas seguintes reivindicações.

Claims (64)

1. Composto caracterizado por ser representado por: <formula>formula see original document page 204</formula> no qual A representa um heterociclo de 4-8 membros incluindo Neo carbono Ca; R1 representa um resíduo de aminoácido ou análogo de aminoácido ligado de modo C-terminal, ou um peptídeo ou análogo de peptídeo ligado de modo C-terminal, ou <formula>formula see original document page 204</formula> em que a ligação entre R1 e N é uma ligação tioxamida; R2 é ausente ou representa uma ou mais substituições no anel A, cada uma das quais é, independentemente, um halogênio, alquila inferior, alquenila inferior, alquinila inferior, carbonil, carboxil, éster, formato, cetona, tiocarbonil, tioéster, tioacetato, tioformato, amino, acilamino, amido, nitro, sulfato, sulfonato, sulfonamido, -(CH2)m-R7, -(CH2)m-OH, -(CH2)m-O- alquila inferior, - (CH2)m-O-alquenila inferior, -(CH2)n-O- (CH2)m-R7, -(CH2)m-SH, - (CH2)m-S-alquila inferior, -(CH2)m- S-alquenila inferior, ou -(CH2)n-S-(CH2)m-R7- azido, ciano, isocianato, tiocianato, isotiocianato, cianato, <formula>formula see original document page 204</formula> ou <formula>formula see original document page 204</formula> R3 representa hidrogênio ou um halogênio, alquila inferior, alquenila inferior, alquinila inferior, carbonil, tiocarbonil, amino, acilamino, amido, nitro, sulfato, sulfonato, sulfonamido, -(CH2)m-R7, -(CH2)m-OH7 -(CH2)m-O- alquila inferior, - (CH2)m-O-alquenila inferior, -(CH2)n-O- (CH2)m-R7, -(CH2)m-SH, -(CH2)m-S-alquila inferior, -(CH2)m- S-alquenila inferior, ou - (CH2)n-S-(CH2)m-R7- azido, ciano, isocianato, tiocianato, isotiocianato, cianato, <formula>formula see original document page 205</formula> ou <formula>formula see original document page 205</formula> R6 representa hidrogênio, halogênio, alquila, alquenila, alquinila, arila, -(CH2)m-R7, -(CH2)m-OH, (CH2)m-O-alquila, - (CH2)m-0-alquenila, - (CH2)m-O-alquinila, -(CH2)m-O-(CH2)m-R7, -(CH2)m-SH, - (CH2)m-S-alquila, -(CH2)m- S-alquenila, - (CH2) m-S-alquinila, -(CH2)m-S-(CH2)m-R7, <formula>formula see original document page 205</formula> R7 representa, para cada ocorrência, uma arila, aralquila, cicloalquila, cicloalquenila, ou heterociclo substituído ou insubstituído; R8 representa hidrogênio, -CH3, or -(CH2)n-CH3; Y1 e Y2 são, independentemente, OH, ou um grupo capaz de ser hidrolisado por um grupo hidroxil, ou Y1 e Y2 são conectados através de um anel que tem de 5 a 8 átomos na estrutura de anel que é capaz de ser hidrofilizada a dois grupos hidroxil. m é zero ou um número inteiro na faixa de 1 a 8; e η um número inteiro na faixa de 1 a 8.

2. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que Y1 e Y2 são, independentemente, OH.

3. Composto, de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo fato de que o composto citado é representado por: <formula>formula see original document page 206</formula>

4. Composto, de acordo com a reivindicação 3, caracterizado pelo fato de que R2 está presente; e R2 é azido, ciano, isocianato, tiocianato, isotiocianato, cianato, <formula>formula see original document page 206</formula>.

5. Composto, de acordo com a reivindicação 3, caracterizado pelo fato de que R2 está presente; e R2 é azido, ciano, isocianato, tiocianato, isotiocianato, cianato, <formula>formula see original document page 206</formula>

6. Composto, de acordo com a reivindicação 3, caracterizado pelo fato de que R2 está presente; e R2 é <formula>formula see original document page 206</formula>

7. Composto, de acordo com a reivindicação 3, caracterizado pelo fato de que R2 está presente; e R2 é <formula>formula see original document page 206</formula>.

8. Composto, de acordo com a reivindicação 3, caracterizado pelo fato de que R2 está presente; e R2 é <formula>formula see original document page 206</formula>.

9. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 ou 8, caracterizado pelo fato de que R1 é <formula>formula see original document page 206</formula> no qual R36 é uma alquila inferior ou um halogênio; R38 é hidrogênio; ou R36 e R38 juntos formam um heterociclo de 4-7 membros incluindo o N e o carbono Ca, e R40 representa um resíduo de aminoácido ou análogo de aminoácido ligado de forma C-terminal, ou um peptídeo ou análogo de peptídeo ligado de forma C-terminal, ou um grupo protetor amino.

10. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 ou 9, caracterizado pelo fato de que R2 é ausente, ou representa uma alquila inferior ou halogênio.

11. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 ou 10, caracterizado pelo fato de que R3 é hidrogênio.

12. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 ou 11, caracterizado pelo fato de que o carbono Ca existe substancialmente na configuração R.

13. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 ou 12, caracterizado pelo fato de que o carbono Ca existe substancialmente na configuração S.

14. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 ou 13, caracterizado pelo fato de que o carbono Ca existe em uma mistura racêmica de configurações R e S.

15. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13 ou -14, caracterizado pelo fato de que Y1 e Y2 são OH.

16. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, -14 ou 15, caracterizado pelo fato de que Ri é uma prolina, glutamato, ou alanina.

17. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, -14, 15 ou 16, caracterizado pelo fato de que Ri é um resíduo de alanina.

18. Composto caracterizado por ser selecionado do grupo que consiste em: <formula>formula see original document page 208</formula> enantiômeros, diastereômeros e sais dele.

19. Composto caracterizado por ser representado <formula>formula see original document page 208</formula> ou enantiômeros ou diastereômeros dele.

20. Composto caracterizado por ser representado <formula>formula see original document page 208</formula> ou enantiômeros ou diastereômeros dele.

21. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, -14, 15, 16, 17, 18, 19 ou 20, caracterizado pelo fato de que o composto é um inibidor de protease.

22. Composto, de acordo com a reivindicação 21, caracterizado pelo fato de que o composto inibe dipeptidil peptidase IV com um Ki de 50 nM ou menos.

23. Composto, de acordo com a reivindicação 22, caracterizado pelo fato de que o composto inibe a dipeptidil peptidase VIII e IX com um Ki de 100 microM ou maior.

24. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, -14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22 ou 23, caracterizado pelo fato de que o composto é eficaz quando administrado oralmente.

25. Composto caracterizado por ser representado por: Xaa1'-Xaa2'-Xaa1-Xaa2-W no qual Xaai' , Xaa2' , e Xaa2 representam, independentemente, um aminoãcido ou análogo de aminoácido de ocorrência natural; Xaa1 é um aminoácido de ocorrência natural ou análogo desse, no qual Xaa1 contém um grupo tioxamida; <formula>formula see original document page 209</formula> <formula>formula see original document page 210</formula> R5 representa Η, alquila, alquenila, alquinila, C(X1)(X2)X3, -(CH2)m-R6, -(CH2)n-OH, - (CH2) n-O-alquila, - (CH2) n-Ο-alquenila, - (CH2) n-O-alquinila, - (CH2) n-O-(CH2) m-R6, -(CH2)n-SH, - (CH2)n-S-alquila, - (CH2) n-S-alquenila, -(CH2)n- S-alquinila, - (CH2) n-S-(CH2) m-R6 , -C(O)C(O)NH2, ou C(O)C(O)ORi7; R6 representa independentemente, para cada ocorrência, uma arila, aralquila, cicloalquila, cicloalquenila, ou heterociclo substituído ou insubstituído; R7 representa, independentemente para cada ocorrência, hidrogênio, uma alquila, alquenila, arila, aralquila, cicloalquila, cicloalquenila, ou heterociclo substituído ou insubstituído; Y1 e Y2 podem independentemente ou juntos ser OH, ou um grupo capaz de ser hidrolisado por um grupo hidroxila, incluindo derivados cíclicos em que Y1 e Y2 são conectados através de um anel tendo de 5 a 8 átomos na estrutura de anel; R50 representa 0 ou S; R51 representa N3, SH, NH2, NO2 ou OR7; R52 representa hidrogênio, uma alquila inferior, amina, OR7, ou um sal farmaceuticamente aceitável, ou R5X e R52 tomados junto com o átomo fosforoso ao qual eles estão anexados completam um anel heterocíclico que tem de 5 a 8 átomos na estrutura de anel; X1 representa um halogênio; X2 e X3, cada um, representa um hidrogênio ou um halogênio; m é zero ou um número inteiro na faixa de 1 a 8; e n é um número inteiro na faixa de 1 a 8.

26. Composto caracterizado por ser representado por: <formula>formula see original document page 211</formula> no qual A representa um heterociclo de 4-8 membros incluindo Neo carbono Ca; W representa -CN, -CH=NR5, <formula>formula see original document page 211</formula> R1 representa um peptídeo ou análogo de peptídeo ligado de forma C-terminal que é substrato para uma enzima de ativação; R2 é ausente ou representa uma ou mais substituições no anel A, cada um dos quais é, independentemente, um halogênio, alquila inferior, alquenila inferior, alquinila inferior, carbonil, tiocarbonil, amino, acilamino, amido, nitro, sulfato, sulfonato, sulfonamido, -(CH2)m-R6, -(CH2)m-OH, -(CH2)m-O- alquila inferior, - (CH2)m-0-alquenila inferior, -(CH2)n-O- (CH2)m-R6, -(CH2)m-SH, - (CH2)m-S-alquila inferior, -(CH2)m- S-alquenila inferior, ou - (CH2) n-S-(CH2) m-R6. azido, ciano, isocianato, tiocianato, isotiocianato, cianato, -N=C, <formula>formula see original document page 212</formula> ou <formula>formula see original document page 212</formula>; R3 representa um hidrogênio ou alquila inferior; R4 representa hidrogênio, halogênio, alquila inferior, alquenila inferior, ou alquinila inferior; R5 representa independentemente para cada ocorrência, H, alquila, alquenila, alquinila, -C(X1)(X2)X3, -(CH2)m-R6, -(CH2)n-OH, - (CH2) n-0-alquila, -(CH2)n-O- alquenila, - (CH2) n-0-alquinila, -(CH2)n-O-(CH2)m-R6, -(CH2)n- SH, - (CH2) n-S-alquila, - (CH2) n-S-alquenila, -(CH2)n-S- alquinila, -(CH2)n-S-(CH2)m-R6, -C(O)C(O)NH2, ou C(O)C(O)OR7; R6 representa independentemente, para cada ocorrência, uma arila, aralquila, cicloalquila, cicloalquenila, ou heterociclo substituído ou insubstituido; R7 representa, independentemente para cada ocorrência, hidrogênio, uma alquila, alquenila, arila, aralquila, cicloalquila, cicloalquenila, ou heterociclo substituído ou insubstituido; R8 representa hidrogênio, -CH3, or -(CH2)n-CH3; Y1 e Y2 podem independentemente ou juntos ser 0H, ou um grupo capaz de ser hidrolisado por um grupo hidroxila, incluindo derivados cíclicos em que Y1 e Y2 são conectados através de um anel tendo de 5 a 8 átomos na estrutura de anel; R50 representa O ou S; R51 representa N3, SH, NH2, NO2 ou OR7; R52 representa hidrogênio, uma alquila inferior, amina, OR7, ou um sal farmaceuticamente aceitável, ou R51 e R52 tomados junto com o átomo fosforoso ao qual eles estão anexados completam um anel heterociclico que tem de 5 a 8 átomos na estrutura de anel; X1 representa um halogênio; X2 e X3, cada um, representa um hidrogênio ou um halogênio; m é zero ou um número inteiro na faixa de 1 a 8; e η é um número inteiro na faixa de 1 a 8.

27. Composto, de acordo com a reivindicação 26, caracterizado pelo fato de que A representa um heterociclo de 5 membros incluindo Neo carbono Ca;

28. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 26 ou 27, caracterizado pelo fato de que W é -B (Y1) (Y2) .

29. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 26, 27 ou 28, caracterizado pelo fato de que R2 é ausente, ou representa halogênio ou uma alquila inferior.

30. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 26, 27, 28 ou 29, caracterizado pelo fato de que R4 representa hidrogênio ou alquila inferior.

31. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 26, 27, 28, 29 ou 30, caracterizado pelo fato de que R5 representa H ou alquila.

32. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 26, 27, 28, 29, 30 ou 31, caracterizado pelo fato de que Y1 e Y2 são OH.

33. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 26, 27, 28, 29, 30 ou 31, caracterizado pelo fato de que W é -B(OH)2.

34. Composto, de acordo com a reivindicação 26, caracterizado pelo fato de que o composto citado é representado por: <formula>formula see original document page 214</formula>

35. Composto, de acordo com a reivindicação 34, caracterizado pelo fato de que R2 é ausente ou representa halogênio, alquila inferior, azido, ciano, isocianato, tiocianato, isotiocianato, cianato, <formula>formula see original document page 214</formula>

36. Composto, de acordo com a reivindicação 34, caracterizado pelo fato de que R4 representa hidrogênio ou alquila inferior.

37. Composto, de acordo com a reivindicação 34, caracterizado pelo fato de que R2 está presente; e R2 é azido, ciano, isocianato, tiocianato, isotiocianato, cianato, <formula>formula see original document page 214</formula>

38. Composto, de acordo com a reivindicação 34, caracterizado pelo fato de que R2 está presente; e R2 é azido, ciano, isocianato, tiocianato, isotiocianato, cianato, <formula>formula see original document page 214</formula>

39. Composto, de acordo com a reivindicação 34, caracterizado pelo fato de que R2 está presente; e R2 é <formula>formula see original document page 214</formula>

40. Composto, de acordo com a reivindicação 34, caracterizado pelo fato de que R2 está presente; e R2 é -CE=CH ou -C=C-CH3.

41. Composto, de acordo com a reivindicação 26, caracterizado pelo fato de que o composto citado é representado por: <formula>formula see original document page 215</formula>

42. Composto, de acordo com a reivindicação 41, caracterizado pelo fato de que R2 representa hidrogênio, halogênio, alquila inferior, azido, ciano, isocianato, tiocianato, isotiocianato, cianato, -N=C, ou C=C R8.

43. Composto, de acordo com a reivindicação 41, caracterizado pelo fato de que R4 representa hidrogênio ou alquila inferior.

44. Composto, de acordo com a reivindicação 41, caracterizado pelo fato de que R2 é azido, ciano, isocianato, tiocianato, isotiocianato, cianato, N=C, ou C=C R8.

45. Composto, de acordo com a reivindicação 41, caracterizado pelo fato de que R2 é azido, ciano, isocianato, tiocianato, isotiocianato, cianato, ou -N==C.

46. Composto7 de acordo com a reivindicação 41, caracterizado pelo fato de que R2 é -C=C-R8.

47. Composto, de acordo com a reivindicação 41, caracterizado pelo fato de que R2 é C=CH ou -C=C-CH3.

48. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, -37, 38, 38, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46 ou 47, caracterizado pelo fato de que Ri é: <formula>formula see original document page 216</formula>

49. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fao de que compreende um catalisador farraaceuticamente aceitável; e um composto de quaisquer das reivindicações 1 a 48 ou um sal farmaceuticamente aceitável dele.

50. Método para inibição da atividade proteolítica de uma enzima de clivagem pós-prolina, caracterizado pelo fato de que compreende o contato da enzima citada com um composto de quaisquer das reivindicações 1 a 48.

51. Método, de acordo com a reivindicação 50, caracterizado pelo fato de que a enzima citada é uma dipeptidil peptidase IV (DPP IV) de mamífero.

52. Método para inibição da atividade proteolítica de uma enzima de clivagem pós-prolina em um paciente, caracterizado pelo fato de que compreende a administração a um paciente que necessite de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de quaisquer das reivindicações 1 a 48.

53. Método, de acordo com a reivindicação 52, caracterizado pelo fato de que o método aumenta as concentrações plasmáticas relativas a um hormônio peptídico do paciente, selecionado do grupo que consiste empeptídeo similar a glucagon, NPY, PPY, secretina, GLP-I, GLP-2, e GIP.

54. Método de regulação do metabolismo de glicose em um paciente, caracterizado pelo fato de que compreende a administração a um paciente que necessite de uma quantidade terapeuticamente efetiva de um composto de quaisquer das reivindicações 1 a 48.

55. Método, de acordo com a reivindicação 54, caracterizado pelo fato de que o paciente sofre de diabetes Tipo II, resistência à insulina, intolerância a glicose, hiperglicemia, hipoglicemia, hiperinsulinemia, obesidade, hiperlipidemia, ou hiperlipoproteinemia.

56. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 54 ou 55, caracterizado pelo fato de que compreende ainda a administração ao paciente citado de uma quantidade terapeuticamente eficaz de insulina, um agente insulinotrópico ou ambos.

57. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 54, 55 ou 56, caracterizado pelo fato de que compreende ainda a administração ao paciente citado de uma quantidade terapeuticamente efetiva de um antagonista receptor de Ml, um inibidor da prolactina, um agente que atue no canal de β-células dependente de ATP, metformina, um inibidor de glicosidase ou uma combinação de quaisquer deles.

58. Método para inibição da atividade proteolítica de um proteasoma, DP8, DP9, ou antígeno específico da próstata, caracterizado pelo fato de que compreende o contato de um proteasoma, DP8, DP9, ou antígeno específico da próstata com um composto de quaisquer das reivindicações 1 a 48.

59. Método para inibição da atividade proteolítica de um proteasoma, DP8, DP9, ou antígeno específico da próstata em um paciente, caracterizado pelo fato de que compreende a administração a um paciente que necessite de uma quantidade terapeuticamente efetiva de um composto de quaisquer das reivindicações 1 a 48.

60. Produto farmacêutico embalado, caracterizado pelo fato de que compreende um composto de quaisquer das reivindicações 1 a 48; e instruções de uso do mesmo.

61. Produto farmacêutico embalado, de acordo com a reivindicação 60, caracterizado pelo fato de que as instruções citadas se referem ao uso na regulação do metabolismo da glicose ou inibição de uma enzima de clivagem pós-prolina.

62. Produto farmacêutico embalado, de acordo com a reivindicação 60, caracterizado pelo fato de que as instruções citadas se referem ao uso na inibição de um proteasoma, DP8, DP9, ou antígeno específico da próstata.

63. Produto farmacêutico embalado, de acordo com a reivindicação 60, caracterizado pelo fato de que o composto é co-formulado com ou co-embalado com insulina, um agente insulinotrópico ou ambos.

64. Produto farmacêutico embalado, de acordo com a reivindicação 60, caracterizado pelo fato de que o composto é co-formulado com ou co-embalado com um antagonista receptor de Ml, um inibidor da prolactina, um agente que atue no canal de β-células dependente de ATP, metformina, um inibidor de glicosidase ou uma combinação de quaisquer deles.