BRPI0708962A2 - sal de alisquireno com ácido sulfúrico - Google Patents

Abstract

SAL DE ALISQUIRENO COM áCIDO SULFúRICO. A presente invenção refere-se a um novo sal de alisquireno, sua respectiva produção e uso, e preparações farmacêuticas contendo esse sal.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "SAL DEALISQUIRENO COM ÁCIDO SULFÚRICO".

A presente invenção refere-se a um novo sal do inibidor derenina 2(S),4(S)I5(S)I7(S)-N-(3-amino-2,2-dimetil-3-oxopropil)-2,7-di(1-metiletil)-4-hidróxi-5-amino-8-[4-metóxi-3-(3-metóxi-propóxi)fenil]-octanamde fórmula

<formula>formula see original document page 2</formula>

Este composto com o nome alisquireno, de acordo com INN1 éespecificamente descrito em EP 678503 A.

O ingrediente ativo alisquireno é a base livre que é descrita es-pecificamente em EP 678503 A e tem um grupo básico, o grupo amino daposição 5. Este grupo tem um pKa de 9,79. Assim, um grupo ácido pode seligar ao par de elétrons livres do nitrogênio (nitrogen Ione pairs) do grupo amino.

EP 678503 A descreve o sal cloridrato (exemplo 137) e o salhemifumarato (exemplo 83) como sais específicos de alisquireno. Entretan-to, não menciona quaisquer propriedades especiais destes sais. Enquantoisso, o ingrediente ativo alisquireno na forma do sal hemifumarato está emdesenvolvimento como um agente anti-hipertensivo. Em contraste com abase livre e o sal HCI, o sal hemifumarato é mais fácil de manusear, tem acapacidade de cristalizar pelo menos parcialmente sendo prontamente dis-ponível. Além disso, foi postulado na técnica que ácidos fortes em contrastecom ácidos fracos não produzem um sal estável com alisquireno.

O sal hemifumarato tem um ponto de fusão em cadinho abertode 96,6°C (taxa de aquecimento de 10 K/min) e uma entalpia de fusão de28,9 J g"1.

Hemifumarato de alisquireno é difícil de formular. Tipicamente,em uma formulação galênica incluindo hemifumarato de alisquireno, é nor-malmente necessária uma grande quantidade de substância de fármaco(DS) com propriedades que tornam difícil a formulação de comprimidos.

Por exemplo, hemifumarato de alisquireno tem um hábito crista-Iino em forma de agulha, que tem uma influência negativa nas propriedadesde massa da substância de fármaco, por exemplo, propriedades de fluxo edensidade aparente. O comportamento de compressão do fármaco é defici-ente, levando a ligações interparticuladas fracas e alterações de polimorfis-mo sob pressão e/ou amortização sob compressão. Hemifumarato de alis-quireno possui um forte componente elástico que também leva ao enfraque-cimento das ligações interparticuladas. A alta dose (de até 300 ou 600 mgde base livre por comprimido) torna necessária uma alta carga de fármacopara atingir um tamanho razoável de comprimido.

A qualidade de substância dé fármaco é muito variável com efei-to na processabilidade do comprimido, por exemplo, distribuição de tamanhode partícula, densidade aparente, escoabilidade, comportamento de molha-mento, área superficial e tendência à adesão. Além disso, alisquireno é al-tamente higroscópico. Em contato com água, o polimorfismo de substânciade fármaco muda para um estado amorfo, que mostra estabilidade inferiorcomparado ao estado cristalino. A combinação destes problemas torna oprocesso de fabricação de um comprimido-padrão extremamente difícil.

Compressão direta não é uma opção factível para produção ro-tineira por causa, por exemplo, da alta higroscopicidade, da estrutura de par-tícula em forma de agulha, da escoabilidade deficiente com resultantes pro-blemas de processabilidade e problemas de uniformidade de dosagem. Umprocesso de compactação com rolo leva a uma redução do alto volume apa-rente da substância de fármaco. Além disso, a pré-compressão da substân-cia de fármaco durante a compactação com rolo torna a compressão adicio-nal em comprimidos com dureza e resistência a friabilidade suficientes, semgrande quantidade de excipientes, extremamente difícil, dada a baixa com-pressibilidade de substância de fármaco. Foi verificado que um comprimidocom carga de fármaco de alisquireno superior a cerca de 35% não resultaem comprimidos robustos (por exemplo, friabilidade, dureza) e processo ro-busto (por exemplo, adesão e "picking" durante a compactação com rolo eformação dos comprimidos).

Como explicado acima, a baixa cristalinidade, higroscopicidadee relativamente baixa estabilidade, em particular na presença de umidade,conduz a um processo de fabricação mais complicado, em particular quandodo isolamento do produto final. Especificamente, como processos como fil-tração e secagem podem ser muito longos, resultado das propriedades me-nos desejáveis acima mencionadas do hemifumarato de alisquireno. Hemi-fumarato de alisquireno é também sensível ao processo de granulação.

Assim, a despeito da contribuição importante do alisquireno, aspropriedades indesejáveis reportadas foram um impedimento com relação àeconomia do processo.

Portanto, existe uma necessidade de formas de alisquireno maisestáveis, por exemplo, formas cristalinas, que são mais fáceis de lidar nosprocessos de secagem, filtração ou granulação realizados após o estágiofinal do processo de preparação química, além de nas etapas de preparaçãodas formulações farmacêuticas. Muitas tentativas inúteis foram feitas paradescobrir formas melhoradas através de formação de sal, as formas ideaissendo as mais cristalinas possíveis, bem como física e quimicamente está-veis. Somente o sal de acordo com a invenção, solvatos e formas polimórfi-cas do mesmo apresentam as propriedades melhoradas desejadas.

A formação de sais de alisquireno com as propriedades vantajo-sas desejadas provou ser difícil. Na maioria dos casos, por exemplo, saisamorfos com pouca estabilidade são obtidos (como espumas duras, cerasou óleos). Pesquisa ampla mostrou que o sal de alisquireno de acordo coma invenção provou ser particularmente vantajoso comparado com o sal he-mifumarato de alisquireno.

A presente invenção refere-se a um sal de um composto defórmula I

<formula>formula see original document page 4</formula>

com ácido sulfúrico, ou respectivamente, uma forma amorfa, um solvato,especialmente hidrato, bem como uma forma polimórfica do mesmo.

Sais preferidos são, por exemplo, selecionados entre sal sulfato(SO42") e sal de hidrogenosulfato (HSO4). No caso do sal sulfato, há duasmoléculas de alisquireno por um mol de sulfato presentes. No caso do salde hidrogenosulfato, há uma molécula de alisquireno por um mol de hidro-genossulfato presente. Mais preferivelmente, o sal é o sal de hidrogenosulfato.

Sais preferidos são, por exemplo, selecionados entre sal de a -Iisquireno em forma amorfa; ou sal de alisquireno em forma cristalina ouparcialmente cristalina, especialmente na forma de solvato, do mesmo.

O sal de acordo com a invenção preferivelmente existe em forma isolada eessencialmente pura, por exemplo, em um grau de pureza de >95%, preferi-velmente >98%, principalmente >99%. A pureza enantiomérica dos sais deacordo com a invenção é >98%, preferivelmente >99%.

Comparado ao hemifumarato, o sal de acordo com a invenção,incluindo as formas amorfas, solvatos como sais hidratados, além das for-mas polimórficas correspondentes do mesmo, tem propriedades inespera-damente vantajosas. Em dadas condições, o sal, em particular o sal cristali-no ou parcialmente cristalino incluindo solvatos do sal, tem um ponto de fu-são claro que está ligado a uma entalpia de fusão endotérmica marcada. Osal de acordo com a invenção, em particular a forma cristalina ou parcial-mente cristalina do mesmo, é estável e é de melhor qualidade do que o he-mifumarato de alisquireno também durante a estocagem e distribuição.

Além disso, tanto os sais cristalinos quanto os amorfos de acor-do com a invenção são menos higroscópicos do que o sal hemifumarato,com, em particular, menos de 40% de umidade relativa. Assim, o sal de a-cordo com a invenção provou ser fisicamente estável. Esta propriedade éconsiderada como principalmente devida ao fato de que embora os pontosde fusão de ambos os sais sejam comparáveis, a entalpia de fusão do salde acordo com a invenção é consideravelmente superior.

Propriedades físico-químicas melhoradas de certos sais ou cer-tos solvatos de sal são de grande importância, tanto quando produzidos co-mo uma substância farmaceuticamente ativa, quanto quando produzidos,estocados e aplicados em preparação galênica. Deste modo, a partida comconstância melhorada dos parâmetros físicos pode ser garantia de uma qua-Iidade ainda mais alta das formulações. A alta estabilidade do sal ou solva-tos do sal também fornece a possibilidade de manter as vantagens econô-micas permitindo etapas de processo mais simples durante o processamen-to. A cristalinidade preferivelmente alta do sal ou solvato de sal permite ouso de uma escolha de métodos analíticos, especialmente os vários méto-dos de raios X, cujo uso permite uma análise simples e clara de sua libera-ção. Este fator é também de grande importância para a qualidade da subs-tância ativa e de suas formas galênicas durante a produção, estocagem eadministração aos pacientes. Além disso, provisões complexas para estabi-Iizar o ingrediente ativo na formulação galênica podem ser evitadas.

Assim, foi inesperadamente descoberto que, ao contrário do co-nhecimento geral, um ácido forte, a saber ácido sulfúrico, pode formar umsal estável com alisquireno.

A invenção, portanto, refere-se a sais cristalinos, parcialmentecristalinos e amorfos de alisquireno. Preferivelmente, o sal possui um graude cristalinidade de mais de 30%, mais preferivelmente de mais de 40%,ainda mais preferivelmente de mais de 50%, como 55-60%.

Além de solvatos, como hidratos, a invenção também se refere aformas polimórficas dos sais de acordo com a invenção.

Solvatos e também hidratos dos sais de acordo com a invençãopodem estar presentes, por exemplo, como hemi-, mono-, di-, tri-, tetra-,penta-, hexassolvatos ou hidratos, respectivamente. Solventes usados paracristalização, como acetonitrila, alcoóis, especialmente metanol, etanol, al-deídos, cetonas, especialmente acetona, ésteres, por exemplo acetato deetila, ou alcanos, especialmente pentano, hexano, heptano ou cicloexano,podem ser embutidos na grade do cristal. Um solvato preferido é um solvatode acetonitrila. A extensão à qual um solvente selecionado ou água leva aum solvato ou hidrato na cristalização e nas etapas subseqüentes do pro-cesso ou leva diretamente à base livre é geralmente imprevisível e dependedas combinações de condições de processo e das várias interações entrealisquireno e o solvente selecionado, especialmente acetonitrila. A respecti-va estabilidade dos sólidos cristalinos ou amorfos resultantes na forma desais, solvatos e hidratos, bem como os solvatos de sal ou hidratos de salcorrespondentes, deve ser determinada por experimentação. Assim, não épossível focalizar somente a composição química e a razão estequiométricadas moléculas no sólido resultante, já que nessas circunstâncias tanto sóli-dos cristalinos diferentes quanto substâncias amorfas diferentes podem serproduzidos.

Os solvatos ou hidratos de sal podem ser preferidos, na medidaem que moléculas de solvente ou água na estrutura cristalina são ligadaspor forças intermoleculares fortes e assim representam um elemento essen-ciai de formação de estrutura desses cristais que, em parte, são extraordina-riamente estáveis. Isto está em contraste forte com o sal hemifumarato ondequalquer solvato formado é instável. Entretanto, moléculas de solvente ouágua também existem em certas redes cristalinas que são ligadas por forçasintermoleculares um tanto fracas. Tais moléculas estão mais ou menos inte-gradas na formação da estrutura cristalina, mas com efeito energético me-nor. O teor de solvente ou água nos sólidos amorfos pode, em geral, serclaramente determinado, como em solvatos ou hidratos cristalinos, mas sãofortemente dependentes da secagem e condições ambientais. Em contraste,no caso de solvatos ou hidratos estáveis, há claras razões estequiométricasentre a substância farmacêutica ativa e o solvente ou água. Em muitos ca-sos estas razões não preenchem completamente o valor estequiométrico;normalmente a aproximação se faz por valores menores em comparaçãocom a teoria por causa de certos defeitos no cristal. A razão das moléculasorgânicas para moléculas de solvente ou água para a água de ligação maisfraca pode variar consideravelmente, por exemplo se estendendo a di-, tri-ou tetrahidratos. Por outro lado, em sólidos amorfos, a classificação da es-trutura molecular do solvente ou água não é estequiométrica; a classificaçãopode no entanto também ser estequiométrica somente por acaso.

Em alguns casos, não é possível classificar a estequiométriaexata das moléculas de solvente ou água, já que são formadas estruturasem camadas de modo que as moléculas de solvente ou água embutidas nãopodem ser determinadas de forma definida.Em uma modalidade preferida, existem duas partes de solvatopara três partes do sal.

Para os sólidos cristalinos que possuem composição químicaidêntica, as diferentes grades cristalinas resultantes são resumidas no termopolimorfismo.

Qualquer referência acima ou abaixo aos sais de acordo com ainvenção deve ser entendida como se referindo aos solvatos corresponden-tes, como hidratos, e modificações polimórficas, além de formas amorfas,como apropriado.

O diagrama de difração de raios χ de pós do sal possui um nú-mero de reflexões discretas de raios X e sinais de porções não cristalinas ouamorfas. O grau de cristalinidade é surpreendentemente alto.

Este processo para determinação da estrutura de um cristalpermite, em condições normais, como alta pureza física, química e enantio-mérica dos cristais medidos, uma determinação clara da estrutura a ser rea-lizada em um nível molecular ou atômico, a saber, simetria e tamanho dascélulas elementares, posições de átomos e fatores de temperatura, e a partirda determinação do volume da célula, a densidade por raios X é mostradacom base no peso molecular. Ao mesmo tempo, a determinação da estrutu-ra por raios X supre detalhes de sua qualidade.

Em um recipiente de amostra aberto, para uma taxa de aqueci-mento de Tr = 10 K-min o ponto de fusão é de 97,10C e a entalpia de fu-são de 39,3 J g"1. O ponto de fusão indicado é um ponto de fusão que sópode ser medido em um recipiente de amostra aberto.

Estas duas características termodinâmicas ilustram as proprie-dades físicas vantajosas, comparadas ao hemifumarato, com os dois dadoscorrespondentes, a saber, um ponto de fusão no sistema aberto de 96,6°C euma entalpia de fusão de 28,9 J g"1. Estes dados termodinâmicos provam aalta estabilidade de sua grade cristalina. Eles são a base para a resistênciafísica e química do sal de hidrogenossulfato de alisquireno.

Uma medida do espectro de absorção em infravermelho do salde hidrogenosulfato de alisquireno em um comprimido de brometo de potás-sio prensado mostra as seguintes bandas significativas expressas em núme-ros de onda recíprocos por unidade de comprimento (cm"1 ): as intensidadesdas bandas de absorção são indicadas como a seguir: (w) = weak - (fraca);(m) = médium (média); e (st) = strong (forte). Medição do espectro infraver-melho também ocorre por meio de um microscópio FTIR em transmissãousando o microscópio Hiperion da Bruker Optics, Alemanha. A margem deerro para todas as bandas de absorção de ATR-IR é de ± 2 cm"1. 3353 (br),3078, 2960, 2935, 2876, 1660 (C=O), 1516 (amid II), 1470, 1444, 1425,1389, 1371, 1260, 1234 (AriI-O)1 1191, 1163, 1140, 1047, 872, 809, 768,723.

Caracterização adicional do sal de hidrogenosulfato de alisqui-reno é efetuada usando as distâncias entre planos reticulares determinadaspor um padrão de raios X em pó. Medição dos padrões de raios X em pó foifeita com um difratômetro de pó Scintag XDS2000 em geometria de refle-xão, usando radiação Cu-Kai+2 com um detector de dispersão de energiaem temperatura ambiente. A caracterização preferida do sal de hidrogenos-sulfato de alisquireno é obtida a partir das distâncias entre planos reticularesd nos diagramas de difração de raios X determinados, por meio dos quais, aseguir, valores médios são indicados com os limites de erro apropriados.

As reflexões mais intensas no diagrama de difração de raios Xmostram as seguintes distâncias entre planos reticulares:

d em [Á] (±0,1 Á): 21,3, 12,4, 10,7, 10,1, 8,4, 7,9, 6,7, 6,0, 5,3,4,9, 4,7, 4,5, 4,4, 4,1.

Uma característica essencial para a qualidade de uma substân-cia ativa pura tanto em procedimentos físico-químicos como secagem, pe-neiramento, moagem, quanto nos processos galênicos que são realizadoscom excipientes farmacêuticos, a saber, em processos de mistura, em gra-nulação, em secagem por pulverização, em produção de comprimidos, é aabsorção de água ou perda de água desta substância ativa dependendo datemperatura e da umidade relativa do meio ambiente em questão. Com cer-tas formulações, água livre e ligada é, sem dúvida, introduzida com excipien-tes e/ou água é adicionada à massa do processo por razões associadascom o respectivo processo de formulação. Desta forma, a substância farma-cêutica ativa é exposta à água livre durante períodos de tempo bastantelongos, dependendo da temperatura da atividade diferente (pressão parcialde vapor).

Uma caracterização clara desta propriedade é obtida por meiode medições de isotermas em intervalos de tempo predeterminados e umi-dade relativa predeterminada usando sorção dinâmica de vapor DVS dacompanhia Surface Measurement Systems LTD, Marlow, Buckinghamshire,UK). A Tabela 4 ilustra a alteração de massa, isto é a absorção ou perda deágua em função da umidade relativa a 25°C para uma amostra de 9,5 mg dosal de hidrogenossulfato de alisquireno e por um período de 4 horas. Os se-guintes ciclos de alteração em umidade relativa são mostrados: 40-0; 0-95%de umidade relativa:

Tabela 4

<table>table see original document page 10</column></row><table>

O erro de medição deste método de sorção baseado em termo-gravimetria é de cerca de 0,1%. Portanto, o sal de hidrogenosulfato de alis-quireno nas condições empregadas, que são realísticas do ponto de vistafarmacêutico-galênico, mostra absorção ou perda significativa de água aci-ma de 40% de umidade relativa. Isto é comparável, em larga extensão, àspropriedades dadas do hemifumarato, mas abaixo de 40% de umidade rela-tiva o sal de hidrogenosulfato não absorve tanta água quanto o hemifumara-to. Esta propriedade é importante nos estágios finais da fabricação químicae também na prática de todos os estágios de processos galênicos das dife-rentes formas de dosagem.

Devido às propriedades vantajosas do sal de hidrogenosulfato,este sal é adequado para prensagem direta para formar formulações decomprimido correspondentes.

Além das boas propriedade físico-químicas do sal de hidrogeno-sulfato, é também vantajoso usar este sal para melhorar e simplificar o pro-cesso de fabricação do fármaco como um todo. Por exemplo, quando seemprega, por exemplo, o processo descrito em EP 678503 A, o salhemifumarato deve ser formado em uma etapa separada após N-desproteção. Quando se emprega ácido sulfúrico, no entanto, a N-desproteção e a formação de sal podem ser realizadas em uma única etapa,tornando, assim, o processo de fabricação mais eficiente.

Um outro objetivo da invenção é a preparação dos sais de acor-do com a invenção.

Os sais de acordo com a invenção, incluindo formas amorfas oucristalinas dos mesmos, podem ser preparados como a seguir:

para formar o sal, o processo é realizado em um sistema solven-te em que os dois reagentes, a saber a base alisquireno e o respectivo áci-do, são suficientemente solúveis. É adequado usar um solvente ou misturade solventes, em que o sal resultante é somente ligeiramente solúvel ou ab-solutamente não solúvel, para obter cristalização ou precipitação. Uma vari-ante para o sal de acordo com a invenção seria o uso de um solvente emque este sal é muito solúvel, e subseqüentemente adicionar um anti-solvente a essa solução, isto é um solvente no qual o sal resultante possuisomente solubilidade deficiente. Uma outra variante para cristalização do salconsiste em concentrar a solução salina, por exemplo, por aquecimento, senecessário em pressão reduzida, ou evaporar vagarosamente o solvente,por exemplo, em temperatura ambiente, ou por semeadura com a adição decristais-semente, ou por ajuste da atividade de água necessária para a for-mação de hidrato.

Os solventes que podem ser usados são, por exemplo, C3-C7-alquilnitrilas, especialmente acetonitrila, C1-C5-alcanóis, preferivelmente eta-nol e isopropanol, ésteres, especialmente ácido alcano carboxílico C2-C7alquil éster C1-C5, como acetato de etila ou isopropila, di-(C1-C5-alquil)-éteres, como t-butil metil éter, além de tetraidrofurano, e C5-C8-alcanos, es-pecialmente pentano, hexano, cicloexano ou heptano e misturas destes sol-ventes com água. O solvente mais preferido é acetonitrila.

Para produzir hidratos, é usado, em particular um processo dedissolução e cristalização, ou um processo de cristalização equilibrado comágua.

O processo de dissolução e cristalização é caracterizado pelasseguintes etapas:

(i) base livre de alisquireno é dissolvido em um solvente orgânico,

(ii) ácido sulfúrico, preferivelmente como uma solução aquosa, éacrescentado a uma solução obtida em (i),

(iii) a solução é deixada em repouso para induzir a cristalização,

(iv) os cristais são filtrados e secos, para obter o sal.

No processo de dissolução (i), o solvente orgânico empregado évantajosamente um álcool, como etanol ou isopropanol, ou uma alquilnitrila,especialmente acetonitrila, e água. Se necessário, o solvente pode ser a-quecido à temperatura acima da ambiente, por exemplo, 25 a 60°C, maispreferivelmente 30 a 50'C.

Na etapa de processo (ii), a solução aquosa empregada é vanta-josamente uma solução de ácido sulfúrico a uma concentração de 10 a30%, mais preferivelmente a 15 a 25%, como a 20%.

Na etapa de processo (iii), a solução é vantajosamente deixadaem repouso de modo a evaporar lentamente o solvente. Isto é preferivel-mente realizado resfriando a uma temperatura ambiente ou inferior à ambi-ente, mais preferivelmente a -10 a 20°C, ainda mais preferivelmente -5 a10°C, no máximo de preferência a 0 a 5°C. A concentração de uma soluçãopode também ocorrer por aquecimento a uma temperatura acima da ambi-ente, por exemplo a >25 a 100°C, mais preferivelmente 30 a 70°C. Esta étipicamente deixada em repouso por 8 a 48 h, preferivelmente 17 a 36 h, nomáximo de preferência 20 a 30 h.

Na etapa de processo (iv), a secagem é preferivelmente realiza-da a temperaturas elevadas, mais preferivelmente a 20 a 50 0C1 no máximode preferência 30 a 40 0C. A pressão é preferivelmente selecionada na faixade 0,1 a 10 Pa (1 a 100 mbar), preferivelmente de 1 a 5 Pa (10 a 50 mbar),mais preferivelmente de 2 a 4 Pa (20 a 40 mbar), como 3 Pa (30 mbar). Asecagem tipicamente ocorre até ser obtida uma massa constante. Depen-dendo das condições de secagem, a secagem pode levar de 5 a 48 h, prefe-rivelmente de 10 a 24 h como 15 a 20 h.

Os processos para formação de sais são também objetivos dapresente invenção.

Em uma variante preferida, cristalização pode ser otimizada, porexemplo, acelerada, adicionando pelo menos um cristal-semente.

Os sais de acordo com a invenção podem ser usados, por e-xemplo, na forma de preparações farmacêuticas que contêm a substânciaativa, por exemplo, em um montante terapeuticamente eficaz de substânciaativa, opcionalmente junto com um veículo farmaceuticamente aceitável, porexemplo com um veículo farmaceuticamente aceitável inorgânico ou orgâni-co, sólido ou opcionalmente também líquido farmaceuticamente aceitável,que é adequado para administração enteral, por exemplo, oral, ou parenteral.

A invenção refere-se em particular a uma composição farmacêu-tica, especialmente em uma unidade de dosagem sólida, preferivelmentepara administração oral, opcionalmente junto com um veículo farmaceutica-mente aceitável.

Preparações farmacêuticas deste tipo podem ser usadas, porexemplo, para a profilaxia e tratamento de doenças ou condições que po-dem ser inibidas por bloqueio do receptor AT1, por exemplo, uma doença oucondição selecionada no grupo que consiste em

(a) hipertensão, insuficiência cardíaca congestiva, insuficiênciarenal, especialmente insuficiência renal crônica, restenose após angioplastiatransluminal percutânea, e restenose após cirurgia de bypass de artéria co-ronariana;

(b) aterosclerose, resistência à insulina e síndrome X, diabetesmelito tipo 2, obesidade, nefropatia, insuficiência renal, por exemplo, insufi-ciência renal crônica, hipotiroidismo, sobrevivência pós-infarto do miocárdio(Ml), doenças cardíacas coronarianas, hipertensão nos idosos, hipertensãodislipidêmica familiar, aumento da formação de colágeno, fibrose, e remode-lagem após hipertensão (efeito antiproliferativo da combinação), todas estasdoenças ou condições associadas com ou sem hipertensão;

(c) disfunção endotelial com ou sem hipertensão,

(d) hiperlipidemia, hiperlipoproteinemia, aterosclerose e hiperco-lesterolemia, e

(e) glaucoma.

Usos principais são para o tratamento de alta pressão sangüí-nea e insuficiência cardíaca congestiva, bem como pós-infarto do miocárdio.

A pessoa versada na técnica pertinente está totalmentehabilitada a selecionar um modelo de teste animal relevante e padrão paraprovar as indicações terapêuticas e efeitos benéficos indicados acima eabaixo.

As atividades farmacêuticas efetuadas por administração derepresentantes dós sais da presente invenção ou da combinação deagentes ativos usados de acordo com a presente invenção podem serdemonstradas, por exemplo, usando modelos farmacológicoscorrespondentes conhecidos na técnica pertinente. A pessoa versada natécnica pertinente está totalmente habilitada a selecionar um modelo deteste animal relevante para as indicações terapêuticas e efeitos benéficosacima e abaixo indicados.

A eficácia de fármacos é avaliada com vários modelos animaisincluindo rato acetato de desoxicorticosterona -sal (DOCA-sal), e rato espon-taneamente hipertenso (SHR)1 seja mantido em dieta normal de sal ou comcarga de sal (4-8% de sal na comida do rato ou 1% NaCI na água de beber).

O modelo de teste DOCA-sal utiliza protocolo de estudo agudoou crônico. Um procedimento de estudo agudo envolve a avaliação dos efei-tos de várias substâncias de teste ao longo de um período experimental deseis horas usando ratos com cateteres permanentes femorais arteriais e ve-nosos. O Procedimento de Estudo Agudo avalia substâncias de teste quantoa sua capacidade de reduzir a pressão sangüínea durante a fase estabele-cida de hipertensão DOCA-sal. Em contraste, o Procedimento de EstudoCrônico avalia a capacidade de substâncias de teste em prevenir ou atrasara elevação de pressão sangüínea durante a fase de desenvolvimento dehipertensão DOCA-sal. Portanto, a pressão sangüínea será monitorada noprocedimento de estudo crônico por meio de um radiotransmissor. O radio-transmissor é implantado cirurgicamente na aorta abdominal de ratos, antes do início do tratamento DOCA-sal e assim antes da indução de hipertensão.A pressão sangüínea é cronicamente monitorada em períodos de até 6 se-manas (aproximadamente uma semana antes da administração de DOCA-sal e durante 5 semanas após).

Ratos são anestesiados com isoflurano a 2-3% em oxigênio ina-Iante seguido por amital sódico (amobarbital) 100 mg/kg, ip. O nível de anes-tesia é avaliado por um padrão de respiração de ritmo estável.Procedimento de estudo agudo:

Ratos são submetidos à nefrectomia unilateral na ocasião daimplantação de DOCA. O flanco esquerdo e a parte traseira do pescoço têmo pêlo cortado e são limpos com chumaços com álcool estéril e povido-na/iodo. Durante a cirurgia, os ratos são colocados em uma almofada deaquecimento para manter a temperatura do corpo a 37°C.

Uma incisão de 20 mm é feita através da pele e músculo subja-cente para expor o rim esquerdo. O rim é liberado do tecido que o circunda,exteriorizado e duas ligaduras (seda 3-0) são seguramente atadas ao redorda veia e da artéria renal próximo a sua ligação com a aorta. A artéria renale a veia são então cortadas e o rim removido. As feridas de músculo e pelesão fechadas com sutura de seda 4-0 e clipes de ferida de aço inoxidável,respectivamente. Ao mesmo tempo, uma incisão de 15 mm é feita na partede trás do pescoço e um pélete para liberação em 3 semanas (InnovativeResearch de America, Sarasota, Florida) contendo acetato de desoxicorti-costerona (100 mg/kg) é implantado subcutaneamente. A ferida é então fe-chada com clipes de aço inoxidável e ambas as feridas são tratadas compovidona/iodo; os ratos recebem uma injeção intramuscular pós-cirúrgica depenicilina G proteína (100.000 U) e buprenorfina (0,05 - 0,1 mg/kg) s.c. Osratos são imediatamente colocados para consumir água de beber com 1%NaCI + 0,2% KCI; este tratamento continua por pelo menos 3 semanas eneste tempo os animais tornaram-se hipertensos e disponíveis para o expe-rimento.

Quarenta e oito horas antes do experimento, os animais sãoanestesiados com isoflurano e cateteres são implantados na artéria e veiafemorais para medição da pressão arterial, coleta de sangue e administra-ção de compostos de teste. Ratos são deixados amarrados em recuperaçãodurante 48 horas em uma gaiola de Plexiglas que serve também como câ-mara experimental.

Procedimento de estudo crônico:

Este procedimento é o mesmo descrito acima com a exceção deque os ratos recebem implantes de radiotransmissores, 7-10 dias antes danefrectomia unilateral e início de DOCA e sal. Além disso, os ratos não sãosubmetidos à cirurgia para implantação de cateteres femorais arteriais e ve-nosos. Radiotransmissores são implantados como descrito por M.K. Bazil,C. Krulan e R.L. Webb. em J. Cardiovasc. Pharmacol. 22: 897-905, 1993.

São, então, instalados em computador protocolos para mediçãode pressão sangüínea, freqüência cardíaca, etc., em pontos predetermina-dos no tempo. Dados de linha de base são coletados em vários momentos eao longo de intervalos de tempo variados. Por exemplo, valores de linha debase ou pré-dosagem consistem usualmente de coleta de dados e formaçãode médias durante 3 períodos de tempo consecutivos de 24 horas antes daadministração do fármaco.Pressão sangüínea, freqüência cardíaca e atividade são deter-minadas em vários momentos pré-selecionados antes, durante e após aadministração do fármaco. Todas as medições são feitas com animais nãocontidos e não perturbados. O tempo máximo do estudo, determinado pelavida da bateria, pode chegar a nove meses. Para estudos desta duração,ratos recebem doses orais (1-3 ml/kg veículo), não mais que duas vezes pordia ou o fármaco é administrados via água de beber ou misturado com ali-mento. Para estudos de duração mais curta, isto é, até 8 semanas, fárma-cos são administrados por meio de minibombas osmóticas implantadas sub-cutaneamente. Minibombas osmóticas são selecionadas com base na taxade liberação do fármaco e no tempo. Dosagens de alisquireno (base livre)ficam na faixa de 1 a 10 mg/kg/dia.

Adicionalmente, ratos SHR são utilizados para estudar os efeitosde alisquireno. O antecedente hipertensivo do SHR é modificado seja porcarga de sal crônica em um esforço para suprimir o sistema renina angio-tensina (RAS) ou depleção crônica de sal para ativar o RAS no SHR. Estasmanipulações são feitas para avaliar mais extensamente a eficácia das vá-rias substâncias de teste. Experimentos feitos em ratos espontaneamentehipertensivos (SHR) são supridos por Taconic Farms, Germantown, NewYork (Tac:N(SHR)fBR). Um dispositivo radiotelemétrico (Data Sciences In-ternational, Inc., St. Paul, Minnesota) é implantado na aorta abdominal infe-rior de todos os animais de teste entre as idades de 14 a 16 semanas. To-dos os SHR são deixados em recuperação do implante cirúrgico durantepelo menos 2 semanas antes do início dos experimentos. Parâmetros cardi-ovasculares são continuamente monitorados por meio do radiotransmissor etransmitidos a um receptor onde o sinal digitalizado é coletado e estocadousando um sistema de aquisição de dados computadorizado. Pressão san-güínea (média arterial, pressão sistólica e diastólica) e freqüência cardíacasão monitoradas em ratos SHR conscientes, com movimentação livre e nãoperturbados em suas gaiolas. A pressão arterial sangüínea e a freqüênciacardíaca são medidas a cada 10 min durante 10 segundos e registradas.Dados registrados para cada rato representam valores médios em períodode 24 horas resultantes de 144 amostras de 10 min coletadas cada dia. Osvalores de linha de base para pressão sangüínea e freqüência cardíacaconsistem em médias de três conjuntos consecutivos de 24 horas de leiturasfeitas antes do início dos tratamentos com fármacos. Todos os ratos sãoindividualmente alojados em uma sala com temperatura e umidade contro-ladas e são mantidos em um ciclo claro-escuro de 12 horas.

Além dos parâmetros cardiovasculares, determinações sema-nais de peso corporal são também registradas para todos os ratos. Trata-mentos são administrados na água de beber, via gavagem oral diária ou porminibombas osmóticas como mencionado acima. Se administrados na águade beber, o consumo de água é medido cinco vezes por semana. Doses dealisquireno (base livre) para ratos individuais são então calculadas com baseno consumo de água para cada rato, a concentração do fármaco na água debeber, e os pesos corporais individuais. Todas as soluções de fármacos naágua de beber são renovadas cada três ou quatro dias. Dosagens típicaspara alisquireno (base livre) em água de beber ficam na faixa de 3 a 30mg/kg/dia. Entretanto, em casos em que a taxa de resposta é aumentadacom o tratamento em combinação, as dosagens são idênticas às usadas namonoterapia.

Quando fármacos são administrados por gavagem oral, a dosede alisquireno (base livre) fica na faixa de 1 to 50 mg/kg/dia.

Completados os estudos crônicos, ratos SHR ou DOCA-sal sãoanestesiados e o coração rapidamente removido. Após separação e remo-ção dos apêndices atriais, o ventrículo esquerdo e ventrículo esquerdo maisdireito (total) têm pesos determinados e registrados. As massas ventricularesquerda e ventricular total são então normalizadas em relação ao pesocorporal e registradas. Todos os valores registrados para pressão sangüíneae massa cardíaca representam médias de grupo + sem.

Função vascular e estrutura são avaliadas após o tratamentopara verificar os efeitos benéficos da combinação. SHR são estudados deacordo com os métodos descritos por Intengan HD, Thibault G, Li JS, Schif-frin EL, Circulation 100 (22): 2267-2275, 1999. Similarmente, a metodologiapara avaliação da função vascular em ratos DOCA-sal é descrita em Inten-gan HD1 Park JB, Schiffrin1 EL, Hypertension 34 (4 Parte 2): 907-913, 1999.

As presentes preparações farmacêuticas, que, se assim deseja-do, podem conter outras substâncias farmacologicamente ativas, são prepa-radas de maneira conhecida em si, por exemplo por meio de processosconvencionais de mistura, granulação, revestimento, dissolução ou Iiofiliza-ção, e contêm de cerca de 0,1% a 100%, especialmente de cerca de 1% acerca de 50%, de Iiofilisados até 100% da substância ativa.

A invenção refere-se similarmente a composições contendo ossais de acordo com a invenção.

A invenção refere-se similarmente ao uso dos sais de acordocom a invenção preferivelmente para a produção de preparações farmacêu-ticas, especialmente para a profilaxia e também para o tratamento de doen-ças ou condições que podem ser moduladas por inibição de renina. Usosprincipais são para o tratamento de alta pressão sangüínea, insuficiênciarenal, disfunção ventricular esquerda e insuficiência cardíaca.

A invenção refere-se similarmente ao uso para a profilaxia e tra-tamento de doenças ou condições que podem ser moduladas por inibiçãode renina, caracterizado pelo fato que um paciente, incluindo um pacientehumano necessitado de tal tratamento, recebe uma quantidade terapeuti-camente eficaz de um sal de acordo com a invenção, opcionalmente emcombinação com pelo menos uma composição para o tratamento de doen-ças cardiovasculares e condições relacionadas e doenças listadas acima ouabaixo.

A invenção refere-se similarmente a combinações, por exemplo,a combinações farmacêuticas contendo um sal da presente invenção ou emcada caso um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo em combinaçãocom pelo menos uma composição para o tratamento de doenças cardiovas-culares e condições e doenças relacionadas como listadas acima ou abaixo,ou em cada caso um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Combina-ções com outras composições para o tratamento de doenças cardiovascula-res e condições e doenças relacionadas listadas acima ou abaixo, ou emcada caso um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo são também obje-tos da presente invenção.

A combinação pode ser feita, por exemplo, com as seguintescomposições, selecionadas no grupo que consiste em:

(i) inibidor de HMG-Co-A redutase ou um sal farmaceuticamenteaceitável do mesmo,

(ii) inibidor de enzima conversora de angiotensina (ACE) ou umsal farmaceuticamente aceitável da mesma,

(Ni) bloqueador de canal de cálcio ou um sal farmaceuticamenteaceitável do mesmo,

(iv) inibidor de aldosterona sintase ou um sal farmaceuticamenteaceitável do mesmo,

(v) antagonista de aldosterona ou um sal farmaceuticamenteaceitável do mesmo,,

(vi) inibidor dual de enzima conversora de angiotensi-na/endopeptidase neutra (ACE/NEP) ou um sal farmaceuticamente aceitáveldo mesmo,

(vii) antagonista de endotelina ou um sal farmaceuticamente a-ceitável do mesmo,

(viii) bloqueadores de receptores de angiotensina Il (ARB) ou umsal farmaceuticamente aceitável sal dos mesmos, e

(ix) diurético ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

Inibidores de HMG-Co-A redutase (também denominados inibi-dores de p-hidróxi-p-metilglutaril-co-enzima-A redutase) são entendidos co-mo aqueles agentes ativos que podem ser usados para abaixar os níveis delipídios incluindo colesterol no sangue.

A classe de inibidores de HMG-Co-A redutase inclui compostosque possuem características estruturais diferentes. Por exemplo, pode serfeita menção aos compostos que são selecionados no grupo que consisteem atorvastatina, cerivastatina, compactina, dalvastatina, diidrocompactina,fluindostatina, fluvastatina, lovastatina, pitavastatina, mevastatina,pravastatina, rivastatina, sinvastatina, e velostatina, ou, em cada caso, umsal farmaceuticamente aceitável dos mesmos.

Inibidores de HMG-Co-A redutase são aqueles agentes queforam comercializados, sendo mais preferidos fluvastatina e pitavastatinaou, em cada caso, um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos.

A interrupção da degradação enzimática de angiotensina I paraangiotensina Il com os assim denominados inibidores de ACE (tambémdenominados inibidores de enzima conversora de angiotensina) é umavariante de sucesso para o controle da pressão sangüínea e assim tambémtorna disponível um método terapêutico para o tratamento de insuficiênciacardíaca congestiva.

A classe de inibidores de ACE inclui compostos com diferentescaracterísticas estruturais. Por exemplo, pode ser feita menção aoscompostos que são selecionados no grupo que consiste em alaceprila,benazeprila, benazeprilat, captoprila, ceronaprila, cilazaprila, delaprila,enalaprila, enaprilat, fosinoprila, imidaprila, lisinoprila, moveltoprila,perindoprila, quinaprila, ramiprila, espiraprila, temocaprila, e trandolaprila,ou, em cada caso, um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos.

Inibidores de ACE preferidos são aqueles agentes que foramcomercializados, sendo os mais preferidos benazeprila e enalaprila.

A classe de CCBs inclui essencialmente diidropiridinas (DHPs) enão-DHPs como CCBs do tipo diltiazem e verapamila.

Um CCB útil na referida combinação é preferivelmente um DHPrepresentativo selecionado no grupo que consiste em amlodipina, felodipina,ryosidina, isradipina, lacidipina, nicardipina, nifedipina, niguldipina,niludipina, nimodipina, nisoldipina, nitrendipina, e nivaldipina, e épreferivelmente um representativo não-DHP selecionado no grupo queconsiste em flunarizina, prenilamina, diltiazem, fendilina, galopamila,mibefradila, anipamila, tiapamila e verapamila, e em cada caso, um salfarmaceuticamente aceitável dos mesmos. Todos estes CCBs sãoterapeuticamente utilizados, por exemplo, como fármacos anti-hipertensivos,antiangina pectoris ou antiarritmia.

CCBs preferidos incluem amlodipina, diltiazem, isradipina,nicardipina, nifedipina, nimodipina, nisoldipina, nitrendipina, θ verapamila,ou, por exemplo, dependendo do CCB específico, um salfarmaceuticamente aceitável dos mesmos. Especialmente preferidos comoDHP é amlodipina ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma,especialmente o besilato, da mesma. Um representante especialmentepreferido de não-DHPs é verapamila ou um sal farmaceuticamenteaceitável, especialmente o cloridrato, do mesmo.

Inibidor de aldosterona sintase é uma enzima que convertecorticosterona em aldosterona por hidroxilação de corticosterona paraformar 18-OH-corticosterona, e 18-OH-corticosterona em aldosterona. Aclasse de inibidores de aldosterona sintase que é conhecida por suaaplicação no tratamento de hipertensão e aldosteronismo primário incluitanto inibidores de aldosterona sintase esteroidais quanto não esteroidais, oúltimo sendo mais preferido.

Preferência é dada a inibidores de aldosterona sintasecomercialmente disponíveis ou a inibidores de aldosterona sintase queforam aprovados pelas autoridades de saúde.

A classe de inibidores de aldosterona sintase inclui compostosque possuem características estruturais diferenciadas. Por exemplo, é feitamenção aos compostos que são selecionados no grupo que consiste eminibidores de aromatase não esteroidais anastrozol, fadrozol (incluindo o (+)-enantiômero dos mesmos), bem como o inibidor de aromatase esteroidalexemestane, ou, em cada caso onde aplicável, um sal farmaceuticamenteaceitável do mesmo.

O inibidor de aldosterona sintase não esteroidal mais preferido éo (+)-enantiômero do cloridrato de fadrozol (Patentes US 4 617 307 e 4 889861) de fórmula

Um antagonista esteroidal de aldosterona preferido éeplerenona de fórmula<formula>formula see original document page 23</formula>

espironolactona.

Um inibidor dual de enzima conversora de angiotensina/en-dopetidase neutra(ACE/NEP) preferido é, por exemplo, omapatrilato (cf. EP629627), fasidotrila ou fasidotrilato, ou, se apropriável, um salfarmaceuticamente aceitável dos mesmos.

Um antagonista de endotelina preferido é, por exemplo,bosentan (cf. EP 526708 A), além de tezosentan (cf. WO 96/19459), ou emcada caso, um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos.

Bloqueadores de receptores de angiotensina Il adequados, quepodem ser empregados em uma combinação da presente invenção incluemantagonistas de receptores de AT1 tendo diferentes características estrutu-rais, sendo preferidos aqueles com as estruturas não peptídicas. Por exem-plo, pode ser feita menção aos compostos que são selecionados no grupoque consiste em valsartano (EP 443983), Iosartano (EP 253310), candesar-tano (EP 459136), eprosartano (EP 403159), irbesartano (EP 454511), ol-mesartano (EP 503785), tasosartano (EP 539086), telmisartano (EP522314), o composto com a designação E-4177 da fórmulao composto com a designação SC-52458 da seguinte fórmulae o composto com a designação ZD-8731 da fórmulaou, em cada caso, um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos.

Antagonistas de receptores ATi preferidos são aqueles agentesque alcançaram o mercado, sendo o mais preferido valsartano, ou um salfarmaceuticamente aceitável do mesmo.

Um diurético é, por exemplo, um derivado de tiazida selecionadono grupo que consiste em clorotiazida, hidroclorotiazida, metilclotiazida, eclorotalidon. O mais preferido é hidroclorotiazida.

Preferivelmente, os montantes, em conjunto, terapeuticamenteefetivos dos agente ativos de acordo com a combinação da presenteinvenção podem ser administrados simultaneamente ou seqüencialmenteem qualquer ordem, separadamente ou em uma combinação fixa.

As estruturas dos agentes ativos identificados por nomesgenéricos ou comerciais podem ser retiradas da edição atual do compêndio-padrão "The Merck Index" ou de bancos de dados, por exemplo PatentsInternational (por exemplo, IMS World Publications). O conteúdocorrespondente dos mesmos é aqui incorporado por referência. Qualquerpessoa versada na técnica está totalmente habilitado a identificar os agen-tes ativos e, com base nestas referências, também capacitados a fabricar etestar as indicações farmacêuticas e propriedades em modelos de teste-padrão, tanto in vitro quanto in vivo.

Os correspondentes ingredientes ativos ou saisfarmaceuticamente aceitáveis dos mesmos podem também ser usados naforma de um solvato, como um hidrato ou incluindo outros solventes, usadospara a cristalização.

Os compostos a serem combinados podem estar presentescomo sais farmaceuticamente aceitáveis. Se estes compostos possuem, porexemplo, pelo menos um centro básico, eles podem formar sais de adiçãode ácido. Sais de adição de ácido correspondentes podem também ser for-mados tendo, se desejado, um centro básico adicionalmente presente. Oscompostos tendo um grupo ácido (por exemplo, COOH) podem tambémformar sais com bases.

Em uma variação da mesma, a presente invenção refere-setambém a um "kit de partes", por exemplo, no sentido de que oscomponentes a serem combinados de acordo com a presente invençãopodem ser dosados independentemente ou com o uso de diferentescombinações fixas com montantes distintos dos componentes, isto é,simultaneamente ou em diferentes ocasiões. As partes do kit de partespodem então ser administradas simultaneamente ou cronologicamenteescalonadas, isto é, em diferentes ocasiões e com intervalos de tempoiguais ou diferentes para qualquer parte do kit de partes. Preferivelmente, osintervalos de tempo são escolhidos de forma que o efeito na doença oucondição tratada do uso combinado das partes é maior do que o efeito queseria obtido com o uso somente de qualquer um dos componentesindividualmente.

A invenção refere-se adicionalmente a uma embalagemcomercial contendo uma combinação de acordo com a presente invençãojunto com instruções para uso simultâneo, separado ou seqüencial.

Dosagem de alisquireno (base livre) pode depender de váriosfatores, como modo de aplicação, espécie, idade e/ou condição individual.

Por exemplo, as doses a serem administradas a animais de sangue quente,inclusive o homem, de aproximadamente 75 kg de peso corporal, especial-mente as doses eficazes para inibição de atividade de renina, por exemplo,no abaixamento da pressão sangüínea, são de cerca de 3 mg a cerca de 3g, preferivelmente de cerca de 10 mg a cerca de 1 g, por exemplo, de 20 a200 mg/pessoa/dia, divididos preferivelmente em 1 a 4 doses individuais quepodem, por exemplo, ser do mesmo tamanho. Usualmente, crianças rece-bem cerca de metade da dose do adulto. A dose necessária para cada indi-víduo pode ser monitorada, por exemplo, medindo a concentração de sorodo ingrediente ativo, e ajustada a um nível ótimo. Doses individuais incluem,por exemplo, 75 mg, 150 mg ou 300 mg por paciente adulto com base nabase livre.

A invenção é ilustrada em particular pelos exemplos e tambémse refere aos novos compostos chamados nos exemplos e a seu uso e aosmétodos para preparação dos mesmos.

Os seguintes exemplos servem para ilustrar a invenção sem li-mitá-la de qualquer modo.

Exemplo 1:

Produção do sal de hidrogenosulfato de (2(S),4(S),5(S),7(S)-N-(3-amino-2,2-dimetil-3-oxopropil)-2,7-di(1-metiletil)-4-hidróxi-5-amino-8-[4-metóxi-3-(3-metóxi-propóxi)fenil]-octanamida.

11 g de (2(S),4(S)>5(S)>7(S)-N-(3-amino-2,2-dimetil-3-oxopropil)-2,7-di(1-metiletil)-4-hidróxi-5-amino-8-[4-metóxi-3-(3-metoxi-propoxi)fenil]-octanamida, base livre (0,019 mol), foram dissolvidos em acetonitrila (10ml).

A essa solução foi adicionada, em gotas, com agitação, uma solução aquo-sa de ácido sulfúrico (4,9 g, solução a 20%, 0,01 mol). A solução foi resfria-da (0-5°C) durante um período de 1 h e mantida por várias horas, tipicamen-te 10 a 48 h nesta temperatura para induzir cristalização. Os cristais são fil-trados e secos em vácuo 3,9 Pa (39 mbar), 40°C, 18h) para obter 8,21 g dosal incolor.

O ponto de fusão para o sal sulfato de alisquireno, produzido deacordo com o exemplo 1, em um cadinho aberto é de 96,6°C (10 K/min detaxa de aquecimento) com uma entalpia de fusão de 28,9 J.g-1.

A pureza enantiomérica do sal produzido de acordo com o e-xemplo 1 é determinada por um método HPLC estereoespecífico. A separa-ção estereoespecífica é obtida por uma coluna quiral (Chiral AGP). A purezaenantiomérica é determinada como ee = 100%.

Cálculo da distância entre planos reticulares a partir do padrãode raios X em pó obtido com um difratômetro de pó Scintag XDS2000 é oseguinte para as linhas mais importantes para esta batelada do sal sulfatode alisquireno:

d in [ Á ]: 21,3, 12,4, 10,7, 10,1, 8,4, 7,9, 6,7, 6,0, 5,3, 4,9, 4,7, 4,5, 4,4, 4,1.

Uma medição do espectro 1H RMN em DMSO-d6a mostra osseguintes picos significativos:

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 0,81 (d, 6,8Hz, 3H), 0,82 (d,6,8Hz, 3H), 0,86 (d, 6,6Hz, 6H, H-C(l), H-C(m) e H-C(9)); 1,06 (s, 6H, h, h');1,25-1,8 (m, 6H, H-C(3, 6, 7, 8)); 1,95 (quinteto, 2H, H-C(d)); 2,24 (m, 1H, H-C(2)); 2,45 (AB, 2H, H-C(b)); 2,69 (br.s, 1H, H-N(n')); 3,07 (dd, 5,5Hz,13,1Hz, 2H) e 3,31 (dd, 6,8Hz, 13,3Hz, 2H, H-C(i)); 3,24 (s, 3H, H-C(f)); 3,71(s, 3H, H-C(g)); 3,47 (t, 6,3Hz, 2H, H-C(e)); 3,96 (t, 6,5Hz, 2H, H-C(c)); 5,3(br.s, 1H, OH); 6,68 (d, 8,1 Hz, 1H, H-C(a')); 6,67 (d, 1,8Hz, 1H, H-C(a"));6,82 (d, 8,1Hz, 1H, H-C(a)); 6,83 e 7,13 (s, 1H cada, H-N(n)); 7,46 (br. t, 1H,Η-Ν(η'); 7,6 (s muito amplo, 3H, H3N+).

<formula>formula see original document page 27</formula>

Análise elementar fornece os seguintes valores medidos doselementos presentes em alisquireno sulfato de hidrogênio e de acetonitrila.

As descobertas da análise elementar, dentro dos limites de erro, correspon-dem à fórmula soma 3*(C3oH53N306*HS03)+2*CH3CN - o sal de hidrogeno-sulfato contendo acetonitrila (40 % em mol ou 4% em g).Encontrado C: 55,00% H: 8,34% N: 7,57% O: 23,66% S: 4,60%Calculado* C: 55,66% H: 8,34% N: 7,57% O: 23,66% S: 4,74%

Claims (12)

1. Sal de um composto de fórmula Icom ácido sulfúrico.

2. Sal de acordo com a reivindicação 1, como hidrogenossulfato.

3. Sal de acordo com a reivindicação 1 ou 2, em forma cristalina,parcialmente cristalina ou amorfa.

4. Sal de acordo com uma das reivindicações 1-3, caracterizadopelo fato de que(i) um padrão de raios X em pó obtido com um difratômetro depó Scintag XDS2000 contendo as seguintes distâncias entre planos reticula-res:d em [À] (+0,1 Á): 21,3, 12,4, 10,7, 10,1, 8,4, 7,9, 6,7, 6,0, 5,3,-4,9, 4,7, 4,5, 4,4, 4,1; ou(ii) um espectro ATR-IR tendo as seguintes bandas de absorçãoexpressas em números de ondas recíprocas (cm1): 3353 (br), 3078, 2960,-2935, 2876, 1660 (C=O), 1516 (amid II), 1470, 1444, 1425, 1389, 1371,-1260, 1234 (Aril-O), 1191, 1163, 1140, 1047, 872, 809, 768, 723.

5. Sal de acordo com uma das reivindicações 1 -4, na forma deum solvato.

6. Sal de acordo com a reivindicação 5, na forma do solvato deacetonitrila.

7. Sal de acordo com uma das reivindicações 1-6, na forma deum hidrato.

8. Sal de acordo com uma das reivindicações 1-7, em uma for-ma selecionada no grupo que consiste em(i) uma forma cristalina;(ii) uma forma parcialmente cristalina;(iii) uma forma amorfa; e(iv) uma forma polimorfa.

9. Preparação farmacêutica contendo um composto como defi-nido em uma das reivindicações 1 a 8, e um excipiente ou aditivo farmaceu-ticamente aceitável.

10. Preparação farmacêutica de acordo com a reivindicação 9,contendo um sal como definido em uma das reivindicações 1-8, em combi-nação com pelo menos um componente selecionado no grupo que consiste em:(i) inibidor de HMG-Co-A redutase ou um sal farmaceuticamenteaceitável do mesmo,(ii) inibidor de enzima conversora de angiotensina (ACE) ou umsal farmaceuticamente aceitável da mesma,(iii) bloqueador de canal de cálcio ou um sal farmaceuticamenteaceitável do mesmo,(iv) inibidor de aldosterona sintase ou um sal farmaceuticamenteaceitável do mesmo,(v) antagonista de aldosterona ou um sal farmaceuticamenteaceitável do mesmo,(vi) inibidor dual de enzima conversora de angiotensi-na/endopeptidase neutra (ACE/NEP) ou um sal farmaceuticamente aceitáveldo mesmo,(vii) antagonista de endotelina ou um sal farmaceuticamente a-ceitável do mesmo,(viii) bloqueadores de receptores de angiotensina Il (ARB) ou umsal farmaceuticamente aceitável sal dos mesmos, e(ix) diurético ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

11. Uso de um composto como definido em uma das reivindica-ções 1 a 8, na preparação de um medicamento para a profilaxia ou trata-mento de doenças e condições que podem ser moduladas por inibição derenina.

12. Processo para fabricação de um sal como definido na reivin-dicação 1, caracterizado pelo fato de que(i) alisquireno base livre é dissolvido em um solvente orgânico,(ii) ácido sulfúrico, preferivelmente como solução aquosa, é adi-cionado a uma solução obtida em (i),(iii) a solução é deixada em repouso para induzir a cristalização,(iv) os cristais são filtrados e secos para obtenção do sal.