BRPI0709075A2 - tratamento de cáncer de mama triplo receptor negativo - Google Patents

Abstract

TRATAMENTO DE CáNCER DE MAMA TRIPLO RECEPTOR NEGATIVO. A presente invenção refere-se ao uso de preparação lipossómica para a fabricação de uma composição farmacêutica e ao uso de tal composição para o tratamento de câncer de mama triplo receptor negativo.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "TRATAMEN- TO DE CÂNCER DE MAMA TRIPLO RECEPTOR NEGATIVO".

Antecedente da Invenção

A presente invenção refere-se ao uso de uma preparação Iipos- sômica para a fabricação de uma composição farmacêutica e ao uso de uma composição para o tratamento de câncer de mama triplo receptor negativo.

Atualmente, o tratamento sistêmico do câncer de mama oferece três principais modalidades de tratamento diferentes e a aplicabilidade des- sas três opções de tratamento diferentes é substancialmente dependente da condição do receptor do paciente (Bernard-Marty e outros, 2004). A terapia endócrina e biológica requer a presença dos respectivos receptores nas cé- lulas cancerosas, ao passo que a quimioterapia citotóxica é independente daqueles receptores especificados.

Em pacientes com câncer de mama hormônio-receptor positivo, a terapia endócrina ou uma combinação da mesma, é geralmente o trata- mento de escolha (Bernard-Marty e outros, 2004; Gradishar, 2004). Na pre- sença de receptor de estrogênio (ER)e/ou receptor de progesterona, foram observadas taxas de resposta superiores a 80%. Em geral, pacientes pós- menopausadas apresentam expressão de ER e PgR mais alta do que paci- entes pré-menopausadas.

O padrão ouro na terapia endócrina tem sido o modulador seleti- vo de ER denominado tamoxifeno. Ele inibe a ligação de estrogênio ao re- ceptor de estrogênio, rompendo assim uma série de mecanismos celulares que regulam a replicação celular. Apesar de ser bem-tolerado na maioria dos casos, o tamoxifeno está associado a vários eventos adversos. Embora o fármaco tenha uma alta taxa de resposta total, recidivas e resistência tem sido observada em muitas pacientes. A resistência pode estar relacionada à interação alterada entre o tamoxifeno e o receptor de estrogênio.

Para superar a resistência, terapias endócrinas alternativas vem sendo desenvolvidas como um desafio ao papel do tamoxifeno (Bernard- Marty e outros, 2004) (Gradishar, 2004). Inibidores de aromatase interferem diretamente com a biossíntese do estrogênio, inibindo a enzima aromatase que converte androstenodiona em estradiol. A última geração desses inibido- res compreende fármacos não-esteroides tais como o letrozol, anastrozol e vostrozol, bem como fármacos esteroides tal como o exemestano. As taxas favoráveis de segurança e resposta dessa classe de medicamentos confir- maram os inibidores de aromatase como a terapia endócrina-padrão para o tratamento de câncer de mama metastático em mulheres pós- menopausadas.

O antiestrogênico fulvestrante dribla os problemas de resistência relacionados ao tamoxifeno através de um mecanismo diferente de ação. Liga o ER, inibindo assim a ligação ao DNA e reduz a concentração de ER1 promovendo sua degradação.

Em mulheres pré-menopausadas positivas para ER e PgR, as terapias endócrinas, além do tamoxifeno, incluem ablação ovariana median- te cirurgia ou radioterapia e análogos de hormônio liberador de hormônio luteinizante (LHRH) (Bernard-Marty e outros, 2004). Nessas pacientes, os ovários são a principal fonte de síntese estrogênica e a ablação ovariana era a terapia original para o câncer de mama. Para evitar os eventos adversos decorrentes de ablação ovariana através de cirurgia ou irradiação, a função ovariana pode ser suprimida por análogos LHRH. O análogo LHRH tal como goserelina, leuprolídeo e triptorelina suprimem a produção de estrogênio pe- lo ovário através da infrarregulação de liberação pituitária de gonadotropinas através de sua ação antagonista sobre os receptores de GnRH (hormônios Iiberadores de gonadotropinas). (Prowell and Davidson1 2004).

Com o crescente entendimento e intensa pesquisa da biologia do câncer de mama, diversos novos alvos definidos para a terapia antitumo- ral surgiram nos últimos anos. Entre esses, o HER-2/neu foi estabelecido como um dos principais alvos para a terapia. O receptor de fator de cresci- mento endotelial humano 2 (HER-2) é amplificado e/ou superexpressado em aproximadamente 30% dos tumores de câncer de mama (Slamon e ou- tros1987) sendo alvejado pelo anticorpo inibidor trastuzumabe. Como o tras- tuzumabe é um dos poucos agentes que levam a uma melhora na taxa de sobrevivência total no caso de câncer de mama metastático, a avaliação da condição do HER-2 tornou-se indispensável para o tratamento ótimo (Ber- nard-Marty e outros, 2004).

O trastuzumabe é aprovado para o tratamento de segunda linha de câncer de mama metastático para pacientes HER-2 positivas que tenham recebido um ou mais regimes de quimioterapia ou para o tratamento de pri- meira linha em combinação com o paclitaxel. O trastuzumabe é geralmente utilizado até progressão da doença. É geralmente bem-tolerado, sendo seu efeito colateral mais importante a insuficiência cardíaca congestiva. O uso de trastuzumabe é constantemente avaliado em diferentes monoterapias ou terapias combinadas com diferentes populações de pacientes e esquemas de dosagem.

A condição do receptor para ER, PgR e HER-2 pode ser deter- minada através de ensaios-padrão imuno-histoquímicos ou enzimáticos (IHC) (Chebil e outros, 2003; Yamashita e outros, 2006) (Schaller e outros, 2001). A condição do HER-2 pode também ser avaliada através da detecção de amplificação gênica através de hibridização por fluorescência in situ. (Fl- SH) (Kallioniemi et. Al., 1992).

Geralmente, as terapias que dependem da condição do receptor da paciente demonstraram ser muito benéficas no tratamento de câncer de mama.

Infelizmente, cerca de 15% de todos os casos de câncer de mama são negativos para ER, PgR e HER-2. Nesses casos, o prognóstico é muito precário com uma taxa de recidiva de 80% e uma sobrevivência média de apenas 6 meses.

Para pacientes negativas para ER1 PGR e HER-2, bem como para pacientes com doença resistente à terapia endócrina, a quimioterapia é a única opção terapêutica. Os fármacos quimioterápicos freqüentemente aplicados em câncer de mama são fármacos da classe da antraciclina e do taxano, e, em menor extensão, dos antimetabolitos, como por exemplo, ca- pecitabina, gemcitabina, agentes alquilantes, e alcalóides da vinca. Esses fármacos são usados em dois esquemas básicos de aplicação. Os fármacos podem ser aplicados como agentes únicos de forma seqüencial ou num re- gime combinado. Obviamente, as duas modalidades de tratamento podem ser combinadas até certo ponto.

As antraciclinas e especialmente a doxorrubicina e epirrubicina demonstraram ser agentes ativos no tratamento de câncer de mama e os regimes combinados contendo antraciclina são tratamentos comuns de pri- meira linha em pacientes que não tenham recebido antraciclinas num trata- mento adjuvante. O tratamento combinado comum consiste, por exemplo, em doxorrubicina/epirrubicina mais ciclofosfamida, doxorrubicina/epirrubicina mais ciclofosfamida e 5-fluorouracila, ou combinações de antraciclinas e ca- pecitabina ou gemcitabina (0'Shaughnessy, 2005).

Com o uso comum de antraciclinas nos estágios iniciais do tra- tamento de câncer de mama, porém, a probabilidade de formas de câncer de mama resistentes à antraciclina aumenta. (Bernard-Marty e outros, 2004).

A introdução dos taxanos paclitaxel e docetaxel no tratamento melhorou ainda mais o controle da doença no tratamento de primeira e se- gunda linha. O paclitaxel possui um mecanismo exclusivo de ação e um am- plo espectro de atividade antiproliferativa, pois o paclitaxel liga-se a microtú- bulos, promove a polimerização de tubulina e estabiliza os microtúbulos montados. Como resultado, o paclitaxel bloqueia o ciclo celular na pró-fase, resultando num acúmulo de células na fase G2/M.

Infelizmente, o paclitaxel possui estabilidade em água extrema- mente baixa, o que torna difícil prover uma forma de dosagem adequada. Atualmente, o paclitaxel é formulado e administrado num veículo contendo Cremophor EL (um óleo de rícino polietoxilado) e etanol numa relação 50:50 (vol/vol). Essa solução é diluída em solução salina 1:1 antes de ser adminis- trada em seres humanos. Porém, diversas reações colaterais severas, tais como reações hipertensivas e de hipersensibilidade, nefrotoxicidade e neu- rotoxicidade, por exemplo, foram relatadas em pacientes devido à formula- ção de Cremophor EL.

As patentes americanas Nss US 5.648.090, US N0 5.424.073 e US N0 6.146.659 (Rahman etr al) proveem paclitaxel lipossômico encapsula- do num método para tratamento de câncer em mamíferos. Essas patentes descrevem um método para administrar ao hospedeiro uma composição farmacêutica de uma quantidade terapeuticamente eficaz de Iipossomas que inclui um material formador de lipossoma, cardiolipina, e um agente, tal co- mo paclitaxel, ou um derivado antineoplásico de paclitaxel, ou uma mistura dos mesmos, com um excipiente farmaceuticamente aceitável.

A patente US 5.837.283 descreve que Iipossomas catiônicos preferencialmente direcionam as células endoteliais angiogênicas em tumo- res sólidos. O relatório da patente WO 2005/0309533 (Teifel e outros) des- creve que um tratamento com paclitaxel encapsulado em Iipossomas catiô- nicos mostrou-se benéfico em diversas indicações de câncer. O documento descreve a aplicação de formulações de paclitaxel lipossômico catiônico em seres humanos que sofrem de melanoma, câncer de próstata, pancreático, gastrointestinal, colorretal, e de mama. O pedido também descreve o uso de formulações de paclitaxel lipossômico catiônico em modelos animais diferen- tes de câncer pancreático, sarcoma de útero, carcinoma de cólon, bem como carcinoma de células escamosas de cabeça e pescoço.

As formulações lipossômicas são também conhecidas como fármacos antraciclínicos. A doxorrubicina é encapsulada em Iipossomas não- carregados tratados ou não com PEG (polietileno glicol) no tratamento de câncer de mama. Essas formulações têm sido usadas no tratamento de cân- cer de mama em um esquema de tratamento de primeira linha (Chan e ou- tros, 2004) e de segunda linha (Keller e outros, 2004).

Em sumário, a maioria das opções terapêuticas atuais para o câncer de mama são dependentes da condição do receptor das pacientes. Especialmente as pacientes do subgrupo triplo receptor negativo não são elegíveis para as terapias endócrinas altamente eficazes. As opções para tratamento quimioterápico são limitadas e uma resistência contra os regimes existentes, tal como as antraciclinas, é freqüentemente observada. Conse- quentemente, há uma grande necessidade médica ainda não atendida de novas terapias nessa indicação.

Assim, a presente invenção consiste em prover uma melhora no tratamento de câncer de mama triplo receptor negativo, especialmente para pacientes que tenham se tornado refratárias ao tratamento com antracicli- nas.

Descrição da Invenção

O problema foi solucionado provendo uma nova composição farmacêutica para o tratamento de câncer de mama triplo receptor negativo. A composição pode ser aplicada em diferentes esquemas seja como mono- terapia ou como terapia combinada.

Um primeiro aspecto da presente invenção refere-se ao uso de uma preparação lipossômica catiônica compreendendo pelo menos um lipí- deo catiônico, um agente antimitótico e, opcionalmente, pelo menos um lipí- deo neutro e/ou aniônico para a fabricação de uma composição farmacêutica no tratamento de câncer de mama triplo receptor negativo em seres huma- nos ou animais.

Em uma concretização preferida, a preparação lipossômica cati- ônica compreende pelo menos um lipídeo catiônico de aproximadamente 30 % em mois a aproximadamente 99,9 % em mois, um agente antimitótico em uma quantidade de pelo menos aproximadamente 0,1 % em mois e, opcio- nalmente, pelo menos um lipídeo neutro e/ou aniônico de aproximadamente 0 % em mol a 70 % em mois.

O agente antimitótico é preferivelmente um taxano, preferivel- mente paclitaxel ou um derivado do mesmo tal como docetaxel. Agentes an- timitóticos ainda mais adequados são antraciclinas, preferivelmente doxoru- bicina ou epirubicina, talidomida, alcalóides de vinca tais como vinebrelina ou vincristina, outros agentes interagem com microtúbulos tais como disco- dermolida, laulimalida, isolaulimalida, eleuterobina.sarcodictina AeB.

A preparação lipossômica catiônica pode ser usada em monote- rapia ou em terapia combinada, por exemplo em terapia combinada com uma dose terapeuticamente eficaz de pelo menos outro agente ativo, que possa ser administrado como uma preparação, que não seja uma prepara- ção lipossômica catiônica, por exemplo, uma preparação não-lipossômica. O outro agente ativo pode ser um agente quimioterápico tal como uma antraci- clina, e/ou um outro taxano, por exemplo paclitaxel. No caso do tratamento de câncer de mama triplo receptor nega- tivo os inventores supõem que a aplicação de um agente antimitótico, por exemplo um taxano, formulado em Iipossomas catiônicos, apresenta uma relação melhorada de resposta clínica / efeitos colaterais através da aplica- ção de um agente antimitótico em uma formulação não-lipossômica. Esse efeito não foi prognosticado no estado da técnica, já que Iipossomas catiôni- cos miram o fármaco para células endoteliais de um tumor que constitui a- penas uma pequena parte da totalidade do tumor.

Além disso, os inventores supõem que uma terapia combinada de um agente antimitótico em uma formulação lipossômica com um outro agente, por exemplo, um agente antimitótico em uma formulação não lipos- sômica possui uma relação melhorada de resposta clínica / efeito colateral em comparação com a aplicação de uma formulação não-lipossômica so- mente, quando aplicada em doses similarmente acumuladas. Esse efeito sinergístico não foi prognosticado no estado da técnica. Conforme mencio- nado anteriormente, as diferentes formulações miram os fármacos para dife- rentes locais dentro do tumor. Não foi prognosticado que fármacos com o mesmo modo de ação, como os agentes antimitóticos, apresentam um efeito sinergístico quando agem em diferentes células dentro de um tumor.

Exemplos preferidos para o uso de composições farmacêuticas, compreendendo paclitaxel em Iipossomas catiônicos para o tratamento de vários tumores em seres humanos são descritos no documento de patente WO 2005/0309533 (Tiefel e outros)

A presente invenção oferece, de forma especialmente vantajosa, um novo tratamento para um subtipo de câncer de mama que tinha somente opções limitadas de tratamento devido às suas propriedades biológicas. Po- rém, verificou-se que a terapia combinada acima também é útil em outras indicações médicas, por exemplo para o tratamento de distúrbios hiperproli- ferativos, por exemplo distúrbios angiogênicos e/ou vasculares ou câncer em geral.

Uma vantagem especial da terapia combinada é que são reduzi- dos os efeitos colaterais dos agentes ativos. Consequentemente, é extre- mamente vantajoso aumentar as doses aplicadas de agentes quimioterápi- cos administrando uma combinação de agentes em formulações lipossômi- cas e não-lipossômicas sem aumentar os efeitos colaterais. Em comparação ao tratamento tradicional de pacientes que sofrem de câncer triplo receptor negativo ou de outras doenças, a terapia combinada melhora a eficácia do tratamento e diminui os efeitos colaterais.

Um outro aspecto da invenção refere-se à combinação de

a) uma preparação lipossômica catiônica, compreendendo pelo menos um lipídeo catiônico, um agente antimitótico e, opcionalmente, pelo menos um lipídeo neutro e/ou aniônico e

b) uma preparação não-lipossômica, compreendendo um agente antimitótico, para administração simultânea, se- parada e/ou seqüencial em seres humanos ou em animais.

Ainda um outro aspecto da invenção refere-se a uma combina- ção de:

a) uma preparação lipossômica catiônica conforme descrita acima, que compreende preferivelmente pelo menos um lipídeo catiônico de aproximadamente 30 % em mois a 99,9 % em mois, um agente antimitótico, por exemplo um taxano em uma quantidade de pelo menos aproximadamente 0,1 % em mois e, opcionalmente, pelo menos um lipídeo neutro e/ou aniônico de cerca 0 mol por cento a cerca de 70 % em mois, e

b) uma preparação não-lipossômica, compreendendo um agente antimitótico, para uso simultâneo, separado ou seqüencial em corpo humano ou corpo animal.É preferido o tratamento de câncer.

Ainda um outro aspecto da invenção refere-se a um método de tratamento de câncer de mama triplo receptor negativo, compreendendo a administração de uma preparação lipossômica catiônica contendo pelo me- nos um lipídeo catiônico, um agente antimitótico e, opcionalmente, pelo me- nos um lipídeo neutro e/ou aniônico e, preferivelmente compreendendo pelo menos um lipídeo catiônico de cerca de 30 % em mois a cerca de 99,9 % em mols, um agente antimitótico, por exemplo um taxano em uma quantidade de pelo menos aproximadamente 0,1 % em mols e, opcionalmente pelo menos um lipídeo neutro e/ou aniônico de cerca de 0 % em mol a cerca de 70 % em mols em uma dose terapeuticamente eficaz para um paciente que necessite dela.

Ainda um outro aspecto da invenção refere-se a um método de tratamento de distúrbio hiperproliferativo, compreendendo a administração de uma combinação, conforme acima descrita, em uma dose terapeutica- mente eficaz para um paciente que necessite dela.

Concretizações especialmente preferidas da invenção referem- se a preparações lipossômicas catiônicas, combinações de uma preparação lipossômica catiônica e uma preparação não-lipossômica para o tratamento de câncer de mama triplo receptor negativo, são descritas mais detalhada- mente nas seguintes especificações e exemplos.

"Aproximadamente" no contexto de valores quantitativos refere- se a um desvio médio de no máximo +/-20%, preferivelmente +/- 10% com base no valor indicado. Por exemplo, uma quantidade de aproximadamente 30 % em mols de lipídeo catiônico refere-se a 30 % em mols +/- 6 % em mols e preferivelmente 30 % em mols +/- 3 % em mols lipídeo catiônico com relação ao total de molaridade lipídica/ anfifílica.

"Agente ativo" refere-se a um agente que é terapeuticamente eficaz.

"Carreador" refere-se a um diluente, adjuvante, excipiente, ou veículo que é adequado para administrar um agente diagnóstico ou terapêu- tico. O termo também refere-se a um componente farmaceuticamente acei- tável (s) que contém complexos ou é diferentemente associado a um agente para facilitar o transporte de um agente até seu local-alvo pretendido. Veícu- los incluem aqueles conhecidos como lipossomas, polímeros, complexos lipídicos, albumina sérica, anticorpos, ciclodextrinas e dextranos, quelatos, ou outras montagens supramoleculares.

"Combinação" ou "coadministração" refere-se a um esquema de administração que é síncrono, serial, sobreposto, alternante, paralelo, ou qualquer outro esquema de tratamento no qual os diversos agentes ou tera- pias são administradas como parte de um regime único de tratamento, pres- crição ou indicação ou no qual os intervalos de tempo durante os quais os vários agentes ou terapias que são diferentemente administrados, coincidem parcial ou completamente.

O termo "derivado" refere-se a um composto derivado de algum outro composto enquanto mantém suas características estruturais gerais. Derivados podem ser obtidos, por exemplo, através de funcionalização ou derivatização química.

Os termos "lipossoma" e "preparação lipossômica" são usados como sinônimos ao longo do presente pedido. "Lipossoma" refere-se a uma vesícula esférica microscópica encerrada em membrana (com aproximada- mente 50-2000 nm de diâmetro). O termo "lipossoma" abrange qualquer compartimento encerrado por uma bicamada lipídica. Lipossomas também são referidos como vesículas lipídicas. Para formar um lipossoma as molé- culas lipídicas apresentam porções (hidrofóbicas) não-polares e porções (hi- drofílicas) polares alongadas. As porções hidrofóbicas e hidrofílicas da molé- cula são preferivelmente posicionadas nas duas extremidades de uma estru- tura molecular alongada. Quando tais lipídeos são dispersados em água eles formam espontaneamente membranas formadas por bicamadas referidas como lamelas. As Iamelas são compostas de duas lâminas monocamada de moléculas lipídicas com suas superfícies (hidrofóbicas) não-polares voltadas uma para outra e suas superfícies (hidrofílicas) polares voltadas para o meio aquoso. As membranas formadas pelos lipídeos encerram uma porção da fase aquosa de modo similar àquele de uma membrana celular que encerra os conteúdos de uma célula.

Assim, a bicamada de um lipossoma possui similaridades com a membrana celular sem os componentes proteicos presentes em uma mem- brana celular. Quando usado em conexão com a presente invenção, o termo lipossoma inclui Iipossomas multilamelares, que em geral apresentam um diâmetro na faixa de aproximadamente 1 a 10 micrômetros e são constituí- dos em qualquer lugar de duas a centenas de camadas lipídicas concêntri- cas alternando com camadas de uma fase aquosa, e também inclui vesícu- las unilamelares que são constituídas por uma única camada lipídica e ge- ralmente apresentam um diâmetro na faixa de aproximadamente 20 a 400 nanômetros (nm), aproximadamente 50 a 300 nm, aproximadamente 300 a 400 nm, aproximadamente 100 a 200 nm, podendo essas vesículas serem produzidas sujeitando Iipossomas multilamelares a ultrassom, através de extrusão sob pressão através de membranas que apresentam poros de ta- manho definido, ou mediante homogeneização à alta pressão. Lipossomas preferidos podem ser vesículas unilamelares, que apresentam uma única bicamada lipídica e um diâmetro na faixa de aproximadamente 25-400 nm.

O termo "taxano", conforme usado aqui, refere-se à classe de agentes antineoplásicos que apresentam um mecanismo de ação microtubu- Iar e uma estrutura que inclui a estrutura anular de taxano incomum e uma cadeia lateral estereoespecífica que é exigida para atividade citoestática. Estão também inclusos no termo "taxano" uma variedade de derivados co- nhecidos, incluindo tanto os derivados hidrofílicos como os derivados hidro- fóbicos. Derivados de taxano incluem, não se restringem a eles, derivados da galactose e manose descritos no pedido de patente internacional No. WO 99/18113; piperazina e outros derivados descritos no documento WO 99/14209; derivados de taxano no documento WO 99/09021, WO 98/22451, e na patente americana N0 5.869.680; 6-tio derivados descritos no documen- to WO 98/28288; derivados de sulfenamida descritos na patente americana N0 5.821.263; e derivado de taxoldescrito na patente americana N0 5.415.869. O agente ativo paclitaxel e docetaxel pertencem à classe taxano.

"Paclitaxel" (que neste caso pode incluir análogos, formulações, e derivados como por exemplo, docetaxel, taxotere (uma formulação de do- cetaxel), análogos 10-desacetila de paclitaxel e análogos 3'N-desbenzoil- 3'N-t-butoxicarbonila de paclitaxel) pode ser rapidamente preparado utilizan- do-se técnicas conhecidas ao habilitado na técnica (vide também WO 94/07882, WO 94/07881, WO 94/07880, WO 94/07876, WO 93/23555, WO 93/10076; U.S. Pat. Nas 5.294.637; 5.283.253; 5.279.949; 5.274.137; 5.202.448; 5.200.534; 5.229.529; e EP 590.267), ou obtido a partir de uma variedade de fontes comerciais, incluindo por exemplo, Sigma Chemical Co. St. Louis1 Mo. (T7402 da Taxus brevifolia; ou T-1912 da Taxus yannanen- sis). Paclitaxel refere-se neste caso não somente à forma de paclitaxel co- mumente disponível quimicamente, mas também a análogos (por exemplo, taxotere, conforme observado acima) e a conjugados paclitaxel (como por exemplo, paclitaxel-PEG, paclitaxeldextrano, ou paclitaxel-xilose).

Uma "dose terapeuticamente eficaz" é a dose de um agente ati- vo ou de uma composição farmacêutica que seja suficiente para atingir o resultado terapêutico desejado no indivíduo tratado.

O termo "potencial-zeta" refere-se a um potencial elétrico medi- do de uma partícula, como por exemplo lipossoma, medido com um instru- mento tal como por exemplo Zetasizer 300 utilizando-se microeletroforese Laser Doppler sob condições especificadas. O potencial-zeta descreve o potencial no limite entre solução-padrão e a região de cisalhamento hidrodi- nâmico ou camada difusa. O termo é sinônimo de "potencial eletrocinético" pois ele é o potencial das partículas que agem exteriormente e é responsá- vel pelo comportamento eletrocinético da partícula.

Onde existir a unidade mg/m2 bs ou apenas mg/m2, geralmente refere-se a mg de agente ativo, por exemplo paclitaxel, por m2 de superfície de corpo humano (bs).

Os lipídeos catiônicos preferidos da preparação lipossômica são sais de N-[1-(2,3-dioleoilóxi)propil]-N,N,N-trimetil amônio, por exemplo o me- tilsulfato (DOTAP). Outros lipídeos úteis para a presente invenção podem incluir:

DDAB, brometo de dimetildioctadecil amônio; propanos de 1,2-diacilóxi-3-trimetilamônio, (incluindo porém não restrito a: dioleoila, dimiristoila, dilauroila, dipalmitoila e distearoila; também duas ca- deias de acila diferentes podem ser ligadas à cadeia principal glicerol); N-[1- (2,3-dioloilóxi)propil]-N,N-dimetil amina (DODAP); propanos de 1,2-diacilóxi- 3-dimetil amônio, (incluindo mas não restrito a: dioleoila, dimiristoila, dilauroi- la, dipalmitoila e distearoila; também duas cadeias de acila diferentes podem ser ligadas à cadeia principal glicerol); cloreto de N-[1-(2,3-dioleilóxi)propil]- Ν,Ν,Ν-trimetil amônio (DOTMA); propanos de 1,2-dialquilóxi-3-dimetil amô- nio, (incluindo mas não restrito a: dioleila, dimiristila, dilaurila, dipalmitila e distearila; também podendo duas cadeias acila diferentes serem ligadas à cadeia principal glicerol); dioctadecilamidoglicilespermina (DOGS); 3β-[Ν- (N',N'-dimetilamino-etano)carbamoil]colesterol (DC-Chol); trifluoro-acetato de 2,3-dioleoilóxi-N-(2-(esperminecarboxamido)-etil)-N,N-dimetil-1- propanaminio (DOSPA); β-alanil colesterol; brometo de cetil trimetil amônio (CTAB); diC14-amidina; cloreto de N-fer-butil-N'-tetradecil-3-tetradecilamino- propionamidina; 14Dea2; N-(alfa-trimetilamonioacetil)didodecil-D-glutamato (TMAG); cloreto de 0,0'-ditetradecanoil-N-(trimetilamônio- acetil)dietanolamina; 1,3-dioleoilóxi-2-(6-carbóxi-espermil)-propilamida (DOSPER); iodeto de N,N,N,,N,-tetrametil-N,N,-bis(2-hidroxiletil)-2,3- dioleoilóxi-1,4-butanediamonio; derivados de cloreto de 1-[2-(acilóxi)etil]2- alquil(alquenil)-3-(2-hidroxietil)-imidazolinio conforme descritos por Solodin e outros (Solodin e outros, 1995), tais como cloreto de 1-[2-(9(Z)- octadecenoilóxi)etil]-2-(8(Z)-heptadecenil-3-(2-hidroxietil)imidazolinio (DO- TIM), cloreto de 1-[2-(hexadecanoilóxi)etil]-2-pentadecil-3-(2- hidroxietil)imidazolinio (DPTIM), derivados do composto de 2,3- dialquiloxipropil amônio quartenário, contendo uma porção hidroxialquila na amina quartenária, conforme descrito por exemplo por Felgner e outros (Felgner e outros, 1994) tais como: brometo de 1,2-dioleoil-3-dimetil- hidroxietil amônio (DORI), brometo de 1,2-dioleiloxipropil-3-dimetil-hidroxietil amônio (DORIE), brometo de 1,2-dioleiloxipropil-3-dimetil-hidroxipropil amô- nio (DORIE-HP), brometo de 1,2-dioleiloxipropil-3-dimetil-hidroxibutil amônio (DORIE-HB), 1,2-dioleiloxipropil-3-dimetil-hidroxipentil amônio (DORIE-Hpe), brometo de 1,2-dimiristiloxipropil-3-dimetil-hidroxiletil amônio (DMRIE), 1,2- dipalmitiloxipropil-3-dimetil-hidroxietil amônio (DPRIE), brometo de 1,2- disteriloxipropil-3-dimetil-hidroxietil amônio (DSRIE); ésteres catiônicos de acil carnitinas conforme mencionados por Santaniello e outros [US5498633J; ctriesteres catiônicos de fosfatidilcolina, por exemplo, 1,2-diacil-sn-glicerol-3- etilfosfocolinas, sendo que as cadeias de hidrocarbono podem ser saturadas ou insaturadas e ramificadas ou não-ramificadas com um comprimento de cadeia de C12 a C24, não sendo as duas cadeias acila necessariamente idênticas.

Em uma concretização preferida, a preparação lipossômica compreende opcionalmente pelo menos um lipídeo neutro e/ou aniônico.

Lipídeos neutros são lipídeos que possuem uma carga líquida neutra. Lipi- deos aniônicos ou anfífilos são moléculas que apresentam uma carga líquida negativa. Eles podem ser selecionados a partir de esteroides ou lipídeos tais como colesterol, fosfolipídeos, lisolipídeos, lisofosfolipídeos, esfingolipídeos ou lipídeos peguilados com uma carga líquida neutra ou negativa. Lipídeos aniônicos e neutros usuais portanto incluem: fosfatidilserina, fosfatidilglicerol, fosfatidilinositol (não-limitado a um açúcar específico), ácidos graxos, este- róis, contendo um grupo ácido carboxílico, por exemplo, colesterol, 1,2- diacil-sn-glicero-3-fosfoetanolamina, incluindo, mas não-limitado a, DOPE, 1,2-diacil-glicero-3-fosfocolinas e esfingomielina. Os ácidos graxos ligados à cadeia principal glicerol não são limitados a um comprimento específico ou número de ligação dupla. Fosfolipídeos também podem apresentar dois dife- rentes ácidos graxos. Preferivelmente os outros lipídeos estão na condição cristalina líquida a temperatura ambiente e são miscíveis (ou seja, uma fase uniforme pode ser formada e não ocorre separação de fase ou formação de domínio), com o lipídeo catiônico empregado, na relação conforme são apli- cados. Em uma concretização preferida o lipídeo neutro é DOPC.

Uma outra concretização preferida, a preparação lipossômica compreende, opcionalmente, lipídeos neutros e/ou aniônicos, preferivelmen- te DOPC em uma quantidade de aproximadamente 30 % em mois a aproxi- madamente 70 % em mois, preferivelmente aproximadamente 40 % em mois a aproximadamente 60 % em mois e mais preferivelmente aproximadamente 45 % em mois a aproximadamente 55 % em mois.

É também objeto da presente invenção que a preparação lipos- sômica catiônica, usada neste caso, possa ser desidratada, armazenada por períodos prolongados, enquanto estiver desidratada, e então ser re- hidratada quando e onde ela for usada, sem perder a porção substancial de seu conteúdo durante os processos de desidratação, armazenagem e re- hidratação. Para tanto, um ou mais agentes protetores, tais como agentes crioprotetores, podem estar presentes. Desse modo, a preparação lipossô- mica catiônica, de acordo com a invenção, compreende preferivelmente um agente crioprotetor, sendo que o crioprotetor é selecionado de açúcares ou álcoois ou combinações dos mesmos. Preferivelmente, o criprotetor é sele- cionado de trealose, maltose, sacarose, glucose, lactose, dextrano, manitol, sorbitol ou combinações dos mesmos. Em uma concretização preferida, a preparação lipossômica compreende trealose na faixa de aproximadamente 5% (m/v) a aproximadamente 15 & (m/v) com relação ao volume total da preparação.

Em uma concretização peferida da presente invenção, o taxano é paclitaxel ou um derivado do mesmo. A preparação lipossômica catiônica pode compreender paclitaxel em uma quantidade de pelo menos aproxima- damente % em mois a aproximadamente 8 % em mois, preferivelmente de pelo menos 2.5 % em mois a aproximadamente 3.5 % em mois.

Em uma concretização especialmente preferida a preparação lipossômica catiônica DOTAP, DOPC e paclitaxel está em uma relação de aproximadamente 50:45:3. Essa formulação também é designada MBT-0206 ou Endo TAG-1. Endo TAG-1 apresenta um teor lipídico de 10 mM em uma solução de di-hidrato de trealose a 10 m/m. A fabricação de uma formulação desse tipo é descrita no documento WO 2004/0002468, aqui incorporado por referência.

Preferivelmente, a preparação lipossômica apresenta um poten- cial-zeta na faixa de aproximadamente OmV a aproximadamente 100 mV, preferivelmente na faixa de aproximadamente mV a aproximadamente 100mV em solução com aproximadamente 0,05 mM de KCL com pH de a- proximadamente 7,5.

Os lipossomas descritos são usados para a fabricação de uma composição farmacêutica para o tratamento de câncer de mama que não pode ser tratado com terapia endócrina e terapia relacionada a HER-2. Pre- ferivelmente é tratado o câncer de mama triplo receptor negativo. A indica- ção de câncer de mama triplo receptor negativo compreende câncer de ma- ma com uma condição de receptor negativo para o receptor estrógeno (ER) receptor de progesterona (PgR) e receptor de HER-2 (Her-2). Determinação da condição de receptor é um procedimento diagnóstico estabelecido para câncer de mama e conhecido no estado da técnica. A condição de ER1 PgR e HER-2 pode ser determinada através da imuno-histoquímica ou enzima baseada em ensaios (IHC), ensaios (Chebil e outros, 2003; Yamashita e ou- tros, 2006) (Schaller e outros, 2001). A condição de HER-2 também pode ser avaliada pela detecção de amplificação genênica por hibridização in situ de- tectada por fluorescência (FISH) (Kallioniemi e outros, 1992).

A composição farmacêutica pode ser usada em um tratamento de primeira, segunda e terceira linha. Pacientes que são tratadas podem ter sido submetidas à cirurgia para extração do tumor, radioterapia e/ou quimio- terapia. Uma quimioterapia freqüente para câncer de mama são regimes combinados à base de antraciclina. Tipicamente esses regimes combinados compreendem um fármaco antraciclínico, por exemplo, doxorubicina ou epi- rubicina. O tratamento de primeira linha pode envolver uma terapia combi- nada de um fármaco antraciclínico e uma fármaco taxano. As pacientes po- dem ser pré ou pos-menopausadas. O câncer a ser tratado pode estar em diferentes estágios clínicos de acordo com o tamanho, distribuição e o grau de formação de metástases.

A composição farmacêutica pode ser administrada à paciente em uma dose terapeuticamente eficaz pelo menos uma vez por semana mas também pode ser administrada várias vezes por semana. Em uma concreti- zação preferida a composição farmacêutica é administrada uma ou duas vezes por semana. A composição também pode ser administrada em inter- valos variados por semana durante o período de tratamento.

A aplicação da composição pode ser suspensa por pelo menos uma semana durante o programa de tratamento. Dependendo da duração do tratamento e dos efeitos colaterais observados, a aplicação também pode ser suspensa por várias vezes durante o período de tratamento.

Preferivelmente, a preparação lipossômica é administrada em doses únicas de aproximadamente 1 mg/m2 a aproximadamente 50 mg/m2 por administração. Em uma concretização preferida a preparação é adminis- trada em uma dose entre aproximadamente 20 mg/m2 e aproximadamente 50 mg/m2 por administração. Em uma concretização especialmente preferida a preparação é administrada em uma dose de aproximadamente 22 mg/m2 ou aproximadamente 44 mg/m2. Em outra concretização especialmente pre- ferida da invenção, a preparação é administrada duas vezes por semana em uma dose de aproximadamente 44 mg/m2. Em uma concretização a mais preferida da invenção, a preparação lipossômica é administrrada nos dias 1,5,8, 11,15,18, 22,25, 29,32, 36 e 39 do ciclo de tratamento seguido por um intervalo livre de tratamento de 14 dias ou nos dias 1,4,8, 11,15 e 18 do ciclo de tratamento por um intervalo livre de tratamento de 10 dias. Os ciclos de tratamento podem ser repetidos diversas vezes quando necessário, isto é, 2,3 ou 4 vezes.

Um outro aspecto importante da invenção é que a formulação lipossômica catiônica pode ser usada em uma terapia combinada simultâ- nea, separada ou seqüencial. A terapia combinada envolve adicionalmente a administração de uma dose terapeuticamente eficaz de pelo menos um outro agente ativo. Em uma concretização o outro agente ativo está em uma for- mulação não-lipossômica. A terapia combinada pode envolver uma adminis- tração simultânea, separada e/ou seqüencial a um ser humano ou a um a- nimal. Na terapia combinada simultânea a preparação lipossômica e o outro agente ativo são administrados no mesmo dia.

A preparação lipossômica e o outro agente ativo podem ser ad- ministrados em diferentes intervalos no mesmo dia ou em dias diferentes. Em uma concretização preferida a preparação lipossômica é administrada antes do agente ativo adicional, preferivelmente menos de uma hora, mas não mais de 12 horas antes da aplicação do agente ativo adicional.

O agente ativo adicional pode ser selecionado de substâncias citotóxicas ou citostáticas tais como uma substância ativa de células antitu- morais e antiendoteliais, um agente quimioterápico ou uma substância ativa imunológica, um composto que reduz ou elimina reações de hipersensibili- dade ou um quimiossensibilizador ou combinações dos mesmos. Em uma concretização preferida, o agente ativo adicional é sele- cionado de um agente antineoplásico, especialmente um agente antimitótico com o taxano, uma antraciclina preferivelmente doxorubicina ou epirubicina, uma estatina, uma depsipeptida, talidomida, outros agentes que interagem com microtúbulos tais como discodermolida, laulimalida, isolaulimalida, eleu- terobina, Sarcodictiina A e B1 agentes alquilantes especialmente platina con- tendo compostos como cisplatina, carboplatina, agentes inibidores de DNA topoisomerase como camptotecina, antimetabólitos de RNA/DNA, especial- mente 5-fluorouracil, gemcitabina ou capecitabina. Em uma concretização ainda mais preferida, o agente é selecionado de paclitaxel, docetaxel, camp- totecina ou qualquer derivado dos mesmos.

O composto que reduz ou elimina reações de hipersensibilidade pode ser selecionado do grupo compreendendo esteroides, anti-histaminas, antagonistas do receptor H2, e combinações dos mesmos em uma quanti- dade suficiente para prevenir reações anafiláticas fatais. Dito composto tam- bém pode ser selecionado do grupo compreendendo ranitidina, Dexameta- sona, Difenidramina, Famotidina, Hidrocortisona, Clemastina, Cimetidina, Prednisolona, Clorfeniramina, Clorfenamina, Maleato de dimetindeno, e Prometazina.

O quimiossensibilizador pode ser selecionado do grupo compre- endendo moduladores de ciclo celular, substâncias que revertem resistência a um fármaco como verapamil, substâncias vasoativas como fármacos anti- hipertensivos, e substâncias que modificam interações de Iipossomas catiô- nicos com componentes sangüíneos como protamina.

Uma concretização preferida da invenção consiste em usar uma preparação lipossômica em uma terapia combinada junto com um taxano não-lipossômico tal como paclitaxel ou um derivado do mesmo. Preferivel- mente, o paclitaxel é formulado em Cremophore EL ou como conjugado de albumina. Em umaconcretização ainda mais preferida, uma preparação li- possômica compreendendo DOTAP, DPC e paclitaxel, é usada em uma te- rapia combinada junto com um taxano não-lipossômico, isto é, paclitaxel ou um derivado do mesmo. Um outro aspecto da presente invenção é que na terapia combi- nada, o taxano não-lipossômico pode ser aplicado em uma dose semanal mais baixa em comparação com a monoterapia-padrão. Em uma concretiza- ção preferida a preparação lipossômica é administrada em uma dose sema- nal entre aproximadamente 20 mg/m2 e 50 mg/m2 e a formulação com taxa- no não-lipossômico é administrada em uma dose semanal entre 25 m/m2 a 100 mg/m2

Em uma concretização preferida a preparação lipossômica e o taxano não-lipossômico são administrados uma vez por semana.

Em esquemas de tratamento corrente, 80 a 150 mg/m2de pacli- taxel não-lipossômico é administrado uma vez por semana. Docetaxel é ad- ministrado em 35 a 40 mg/m2 ou aproximadamente em 70 mg/m2 no regime de aplicação semanal única (Eniu e outros, 2005).

Em uma concretização preferida da invenção a preparação li- possômica é administrada uma vez por semana em combinação com apro- ximadamente 60mg/m2 de paclitaxel não-lipossômico. Em outra concretiza- ção preferida da invenção a preparação lipossômica é administrada uma vez por semana em combinação com aproximadamente 25-35 mg/m2 de doceta- xel não-lipossômico.

Em uma concretização mais ainda preferida a preparação lipos- sômica é administrada uma vez por semana em uma dose de aproximada- mente 22mg/m2 e paclitael ou um derivado é administrado uma vez por se- mana, em uma dose de aproximadamente 60 mg/m2 ou aproximadamente 70mg/m2 preferível mente no mesmo dia.

Em uma concretização ainda mais preferida, uma composição é aplicada junto com a formulação não-lipossômica nos dias 1,8, 15, 22, 29, 36 de um ciclo de tratamento seguido por um intervalo livre de tratamento de 14 dias, ou nos dias 1,8, 15 de um ciclo de tratamento seguido por um intervalo livre de tratamento de 13 dias. Os ciclos de tratamento podem ser repetidos diversas vezes quando necessário, isto é, pelo menos 2, 3 ou 4 vezes.

A preparação lipossômica pode ser administrada sistematica- mente, preferivelmente por via intravenosamente. A preparação lipossômica pode ser administrada junto com veículos fisiologicamente aceitáveis tais como tampão.

Normalmente , a composição farmacêutica pode ser aplicada em uma forma desidratada. Antes da aplicação, a composição é hidratada em água com grau farmacêutico ou sal com grau farmacêutico ou em outro lí- quido adequado, preferivelmente compreendendo veículos fisiologicamente aceitáveis tais como um tampão. Legendas de figura Figura 1

Ensaio clínico de EndoTAG®-1 em câncer de mama triplo recep- tor negativo.

Diagrama esquemático de um esquema de dose, comparando a administração de Taxol^ com a administração de EndoTAG®-1 isoladamen- te ou em combinação com Taxol^ em mulheres que sofrem de câncer de mama triplo receptor negativo e que receberam tratamento adjuvante à base de antraciclina, pelo menos até 6 meses antes. Grupo 1: Taxol® (70 mg/m^) em combinação com EndoTAG®-1 (22 mg/m^ de paclitaxel lipossômico) é administrado nos dias 1, 8, 15 de cada ciclo. Grupo 2: EndoTAG®-1 (44 mg/m2 paclitaxel lipossômico) é administrado nos dias 1, 4, 8, 11, 15, 18 de cada ciclo. Grupo 3: Taxol® (90 mg/m^) é administrado nos dias 1, 8, 15 de cada ciclo (grupo de controle). Exemplos

Exemplo 1. Protocolo geral de tratamento com terapia em seres huma- nos.

O exemplo diz respeito a protocolos para tratamento de câncer de mama triplo receptor negativo em pacientes humanas.

A preparação lipossômica catiônica pode ser administrada como uma monoterapia ou em combinação com um agente ativo adicional. O a - gente ativo da preparação lipossômica e o agente ativo adicional podem ser os mesmos ou diferentes. Os agentes são selecionados de acordo com di- versos fatores. Esses fatores referem-se ao estado exato patológico do pa- ciente, o tratamento prévio que a paciente recebeu, refratariedade ao fárma- co ou efeitos colaterais de outro agente ativo.

Os vários elementos de conduzir um ensaio clínico, incluindo tratamento e monitoramento de pacientes, é conhecido ao habilitado na téc- nica à luz da presente descrição.

Pacientes escolhidas para um ensaio clínico apresentam doen- ças objetivamente mensuráveis conforme determinado pelo exame físico, técnicas laboratoriais, ou procedimentos radiográficos. Essas pacientes tam- bém não apresentam preferivelmente histórico de doenças cardíacas ou re- nais clinicamente relevante e qualquer quimioterapia é suspensa pelo menos 2 semanas antes de ingressar para o estudo.

As formulações descritas podem ser administradas através de um período de infusão curto a médio. A infusão feita em qualquer nível de dose depende da toxicidade obtida após cada infusão. Desse modo, se for atingido o grau II de toxicidade depois de qualquer infusão única, ou em um período particular para dose em infusão contínua, doses adicionais serão suspensas ou a infusão em dose contínua interrompida a não ser que a toxi- cidade tenha melhorado. Doses crescentes são administradas a grupos de até aproximadamente 60% de pacientes que apresentaram grau inaceitável III ou IV de toxicidade em qualquer categoria. Doses que são 2/3 desse valor são definidas como dose de segurança.

Exame físico, medições tumorais e testes laboratorias são, obvi- amente, realizados antes do tratamento e em intervalos de aproximadamen- te 3-4 semanas mais parte. Teste laboratoriais devem incluir contagens san- güíneas completas, creatinina sérica, creatina cinase, eletrólitos, uréia, nitro- gênio, SGOT, bilirrubina, albumina e proteína sérica total.

Respostas clínicas podem ser definidas por medições aceitáveis ou alterações em valores laboratoriais, por exemplo, marcadores tumorais. Por exemplo, uma resposta completa pode ser definida pelo desaparecimen- to de toda a doença mensurável por pelo menos um mês, ao passo que uma resposta parcial pode ser definida por uma redução em 50% ou mais.

Algumas variações na dosagem ocorrerá necessariamente de- pendendo da condição do indivíduo que está sendo tratado. A pessoa res- ponsável pela administração, em qualquer evento, determinará a dose apro- priada para a paciente individual. Além disso, para administração em seres humanos, as preparações devem observar padrões de esterilização, piroge- nicidade, segurança geral e de limpeza conforme exigido pelos padrões es- tabelecidos pelo FDA Office of Biologics.

Antes da aplicação, a formulação pode ser reconstituída em uma solução aquosa no caso em que a formulação estava secada por congela- mento. Conforme citado acima, o volume requerido para aplicação é calcu- lado a partir do peso corporal da paciente e do esquema de dose. A via para administração compreende preferivelmente administração peritoneal ou pa- renteral. A via de administração típica será intravenosa.

Para uso, de acordo com a presente invenção, "a dose terapeu- ticamente eficaz" de uma composição ou agente ativo administrado em um indivíduo varia dependendo da ampla faixa de fatores. A quantidade depen- derá do tamanho, idade, sexo peso e condição da paciente, como também da potência da substância que está sendo administrada. Tendo mencionado que existe uma variabilidade considerável em termos de dosagem, acredita- se que o habilitado na técnica, utilizando a presente descrição, poderá de- terminar rapidamente a dosagem apropriada ao administrar inicialmente quantidades extremamente pequenas e aumentando a dose até serem obti- dos os resultados desejados.

Exemplo 2. Fase-Il do ensaio para avaliar a eficácia do Endo Endo- TAG?-1 em pacientes com câncer de mama triplo receptor negativo. 2.1 Lógica do estudo

Mulheres que sofrem de câncer "triplo negativo" para estrogênio (ER), receptores de progesterona (PR) e HER2/neu (HER2), normalmente apresentam uma ecassez de opções de tratamento. A condição "triplo nega- tivo" está associada a prognóstico desfavorável em pacientes com câncer de mama precoce. O termo "triplo negativo" é usualmente usado com um subs- tituto clínico para câncer de mama tipo basal: 80% de cânceres de mama triplo-negativos são "tipo basal". Os cânceres de mama "tipo basal" são um subtipo distinto dos cânceres de mama definidos por perfilação de expressão gênica (Brenton e outros, 2005) (Sotiriou e outros, 2003) (Sorlie e outros, 2001).

2.2 Desenho de estudo

Um total de 135 pacientes com câncer de mama triplo negativo, que atendem todos os critérios de eligibilidade de estudo, são randomizadas para um dos dois seguintes grupos de tratamento :

• Grupo 1: Taxol® (70 mg/m2) em combinação com EndoTAG®-1 (22 mg/m2 paclitaxel lipossômico) nos dias 1,8, 15 de cada ciclo seguido por um intervalo livre de tratamento de 13 dias

• Grupo 2: EndoTAG®-1 (44 mg/m2 paclitaxel lipossômico) monoterapia nos dias 1, 4, 8, 11, 15, 18 de cada ciclo seguida por um intervalo livre de tratamento de 10 dias

• Grupo 3: Taxol® (90 mg/m2) monoterapia nos dias 1,8, 15 de cada ciclo seguida por um intervalo livre de tratamento de 13 dias (grupo de controle).

A randomização é feita para obter uma relação de 2:2:1 entre grupos de tratamento e estratificados para tratamento adjuvante com antra- ciclina isoladamente ou com antraciclina + Taxol®.

Cada ciclo de tratamento compreende 3 semanas de tratamento seguido por 1 semana de resto, isto é, um total de 4 semanas.

Pacientes são primeiramente tratadas por um mínimo de 4 ci- clos. Depois de uma análise da resposta tumoral e respondedores de segu- rança, isto é, CR, PR e SD), possuem a opção de continuar o tratamento, até ocorrer PD ou toxicidade inaceitável.

Todas as pacientes são tratadas até progressão da doença ou toxicidade e acompanhadas pela sobrevivência. 2.3. Objetivos

Objetivo primário: Para avaliar a eficácia do EndoTAG®-1 + Taxol® (terapia combinada) e do EndoTAG®-1 (monoterapia) como uma te- rapia de resgate de pacientes com câncer de mama triplo receptor negativo refratário a antraciclina +/- Taxol® .

Objetivo secundário: Para avaliar a segurança e tolerabilidade do EndoTAG®-1 + Taxol® (terapia combinada) e do EndoTAG®-1 (monotera- pia) nessa população de pacientes.

2.4. Pontos finais

Parâmetro de eficácia primária:

* Taxa de sobrevivência livre de progressão (PFS) por 4 meses calcula- da pela taxa de pacientes randomizadas que não apresentam progressão da doença e estão vivas 16 semanas após a primeira infusão do fármaco de estudo.

Parâmetros de eficácia secundária:

• Período médio PFS Respostatumoral (CR/ PR/SD/PD) nas semanas 8, 16 e 24

• analisada pelas seguintes variáveis:

- número de respondedores ao tratamento, isto é, resposta objetiva (OR = resposta completa (CR) + resposta parcial (PR)

- número de pacientes com doença estável (SD)

- duração média de resposta objetiva e doença estável

• Taxa de sobrevivência por 4 meses calculada pela taxa de pacientes radomizadas vivas 16 semanas após a primeira infusão do fármaco de estu- do.

• Período médio de sobrevivência global (OS) • Avaliação da intensidade de dor (VAS)

- alteração média por semana da linha basal ao fim do tratamento com me- dicamento de estudo

- percentual de pacientes com melhora de pelo menos 10 mm da linha basal durante o tratamento com medicamento de estudo.

- percentual de pacientes com deterioração de pelo menos 10 mm da linha basal durante o tratamento com medicamento de estudo.

• Avaliação de benefício clínico via escala de qualidade de vida (QoL) (Ques- tionário EORTC-QoL-C3O)

- Alteração média por semana da linha basal até o término do tratamento com medicamento de estudo.

- percentual de pacientes com melhora de pelo menos 10 pontos da linha basal durante o tratamento com medicamento de estudo - percentual de pacientes com deterioração de pelo menos 10 pontos da li- nha basal durante o tratamento com medicamento de estudo. Parâmetros de segurança:

• eventos adversos: incidência e porcentagem de pacientes com emer- gente de tratamento AEs

• Valores laboratoriais: número de valores laboratoriais anormais clini- camente importantes

• Variação de dose: porcentagem de pacientes que possuem reduções de dose elevada, protelamento ou descontinuação do medicamento de estudo

2.5 Número de indivíduos/pacientes

135 mulheres que sofrem de câncer de mama triplo receptor ne- gativo localmente recorrente ou metastático, previamente submetidas a qui- mioterapia com antraciclina +/- Taxol®, são randomizadas a razão de 2:2:1 (54 pacientes com terapia combinada a base de EndoTAG®-1 + Taxol®, 54 pacientes com monoterapia a base de EndoTAG®-1 e 27 pacientes com mo- noterapia a base de Taxol®).

2.6 Critério de inclusão:

1. Acusaram histologicamente câncer de mama triplo receptor negativo com biopsia do tumor

2. Condição hormonal negativa para estrogênio (ER)1 progeste- rona (PR) e HER2

3. idade £ 18 anos

4. lesões tumorais de acordo com o critério RCIST

5. Pacientes não-lactantes ou não-grávidas

6. Condição de desempenho ECOG 0-2

7. Mínimo de 6 meses após quimioterapia a base de antraciclina sistêmica antecedente em tratamento adjuvante isoladamente ou em combi- nação com quimioterapia.

8. Função cardíaca normal (avaliação de LIVEF por MUGA scan ou por ecocardiografia acima do limite mínimo do normal para a Instituição)

9. Função orgânica adequada (conforme definido por neutrófilos ≥ 1,5 χ 109-L, plaquetas > 100 x 109/L, Hemoglobina ≥ 10 g/dL, bilirrubina total ≥ 1,5 UNL, ASAT (SGOT) e ALAT (SGPT) > 2,5 UNL, fosfatase alcalina ≥2,5 UNL, creatinina ≥ 150 pmol/L (1,5 mg/dL).

10. Nenhuma outra enfermidade ou condição médica grave co- mo : a) insuficiência cardíaca congestiva ou angina pectoris instável, históri- co prévio de infarto do miocárdio dentro de 1 ano a contar da data de início do estudo, hipertensão incontrolada ou arritmias incontroladas de alto risco; b) histórico de distúrbio neurológico ativo ou importante e/ou distúrbio psi- quiátrico que poderia impedir de entender e dar um consentimento informa- do, e interferir na avaliação clínica e radiológica do sistema nervoso central durante o experimento; c) infecção ativa descontrolada; d) úlcera péptica ativa, diabetes melittus instável.

11. Sem histórico passado ou corrente de outro neoplasma ex- ceto aquele tratado e curado: a) câncer de pele de célula basal. B) carcino- ma in situ da cervical.

12. Sem tratamento concomitante com outros fármacos experi- mentais. Participação em outro experimento clínico com qualquer fármaco investigacional não comercializado dentro de 30 dias antes da data de início do estudo.

13. Consentimento informado por escrito

2.7 Administração da droga

EndoTAG®-1 e Taxol® são administrados por via intravenosa.

EndoTAG®-1 é administrado com inicialmente 0,5 ml/min. Após 15 min a velocidade de administração é aumentada para 1,0 ml/min e após mais 15 min a velocidade de administração é ajustada em 1,5 ml/min.

2.8 Parâmetro de eficácia primária

A taxa PFS na semana 16 no grupo de tratamento combinado a base de EndoTAG®-1 + Taxol® é o parâmetro primário.

A hipótese de H0: p ≤ 30% versus H1: p ≥ 50% é testada no gru- po de tratamento combinado usando um desenho de estágio único em um nível de importância de a=0,05.

Se a taxa de resposta tumoral verdadeira for de 50% na terapia a base de Taxol® + EndoTAG®-1 o teste terá um poder de 1-β = 0.90.

A mesma hipótese é testada para a monoterapia a base de En- doTAG®-1.

Exemplo 3. Aplicação de EndoTAG-1 em combinação com Taxotere®

Mulheres que sofrem de câncer de mama triplo receptor negati- vo localmente recorrente ou metastático, previamente submetidas à quimio- terapia com antraciclina +/- Taxotere®, são tratadas com uma terapia com- binada semanal de EndoTAG-1 em combinação com Taxotere®. Taxotere® compreende o fármaco docetaxel como ingrediente farmaceuticamente ativo.

3.2 Critério mínimo de elegibilidade

- Demonstraram histologicamente câncer de mama com biópsia do tumor

- condição hormonal negativa para estrogênio (ER)1 progestero- na (PR), e HER2, conforme mostrado pelo IHC, ensaio enzimático ou FISH

- pacientes não-lactantes ou grávidas

- condição de desempenho ECOG 0-1

- mínimo de 56 meses após quimioterapia com antraciclina sis- têmica antecedente em tratamento adjuvante

- função cardíaca normal (avaliação de LIVEF por MUGA scan ou por ecocardiografia acima do limite mínimo do normal para a Instituição).

- função orgânica adequada (conforme definido por neutrófilos > 1,5 χ 109 -L, plaquetas > 100 χ 109/L, Hemoglobina > 10 g/dL, bilirrubina total > 1,5 UNL, ASAT (SGOT) e ALAT (SGPT) > 2,5 UNL, fosfatase alcalina >2,5 UNL, creatinina > 150 μιηοΙ/L (1,5 mg/dL).

3.3 Esquema de tratamento

- EndoTAG®-1 é administrado em uma dose de 22 mg/m2 pacli- taxel lipossômico nos dias 1,8, 15, 22, 29, 36 de cada ciclo seguido de um período livre de tratamento de 14 dias.

- Taxotere® é administrado em uma dose de 30 mg/m2 docetaxel nos dias 1, 8, 15, 22, 29, 36 de cada ciclo seguido de um período livre de tratamento de 14 dias.

- ambos os fármacos são administrados por intravenosamente. - pacientes são tratadas até progressão da doença ou toxicida- de.

Todas as composições e métodos descritos e reivindicados aqui podem ser preparadas e realizadas sem experimentação indevida a luz da presente descrição. Desde que as composições e métodos desta invenção tenham sido descritas em termos de concretizações preferidas, fica claro ao habilitado na técnica que variações poderão ser aplicadas à composição, métodos e nas etapas ou na seqüência de etapas do método aqui descrito sem abandonar o conceito, espírito e escopo da invenção. Mais especifica- mente, fica claro que determinados agentes, ambos química e fisiologica- mente associados, podem ser substituídos pelos agentes aqui descritos, desde que sejam obtidos os mesmos resultados ou resultados similares. To- dos os substitutos e modificações similares, evidentes ao habilitado na téc- nica, são considerados como estando dentro do espírito, escopo e conceito da invenção conforme definido pelas reivindicações anexas. Referências Bibliográficas

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Claims (32)

1. Uso de uma preparação lipossômica catiônica, caracterizado pelo fato de compreender pelo menos um lipídio catiônico, um agente antimi- tótico e, opcionalmente, pelo menos um lipídio neutro e/ou aniônico para a fabricação de uma composição farmacêutica para o tratamento de câncer de mama triplo receptor negativo num ser humano ou animal.

2. Uso, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a dita preparação lipossômica catiônica compreende pelo menos um lipídio catiônico de cerca de 30 moles por cento a cerca de 99,9 moles por cento, um agente antimitótico numa quantidade de cerca de pelo menos 0,1 mol por cento, e, opcionalmente pelo menos um lipídio neutro e/ou aniônico de cerca de 0 mol por cento a cerca de 70 moles por cento.

3. Uso, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que o dito agente antimitótico é um taxano, preferivelmente paclitaxel ou um derivado do mesmo.

4. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo fato de que a dita preparação lipossômica catiônica com- preende paclitaxel numa quantidade de cerca de pelo menos 2 moles por cento a cerca de 8 moles por cento, preferivelmente de pelo menos 2,5 mo- les por cento a cerca de 3,5 moles por cento.

5. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado pelo fato de que a dita preparação lipossômica catiônica com- preende DOTAP, DOPC e paclitaxel.

6. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizado pelo fato de que a dita preparação lipossômica catiônica tem um potencial-zeta na faixa de cerca de + 20 mV a 100 mV em solução de KCl de cerca de 0,05 mM a um pH de cerca de 7,5.

7. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado pelo fato de que é aplicado na administração de uma dose terapeuticamente eficaz pelo menos uma vez por semana.

8. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, caracterizado pelo fato de que é aplicado na administração de uma dose terapeuticamente eficaz pelo menos duas vezes por semana.

9. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, caracterizado pelo fato de que a administração é retirada por pelo menos uma semana pelo menos uma vez num esquema de tratamento.

10. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, caracterizado pelo fato de que é aplicado na administração de dose única entre 1 mg/m2 e 50 mg/m2 por administração.

11. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10, caracterizado pelo fato de que é aplicado na administração de uma dose entre 20 mg/m2 e 50/m2 por administração, preferivelmente 22 ou 44 mg/m2.

12. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 11, caracterizado pelo fato de que é aplicado na administração de uma dose de -44 mg/m2 duas vezes por semana.

13. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 12, caracterizado pelo fato de que a composição é para terapia combinada si- multânea, separada ou seqüencial com uma dose eficaz de pelo menos um outro agente ativo e/ou calore/ou radiação.

14. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 13, caracterizado pelo fato de que a composição é empregada em terapia com- binada com uma dose terapeuticamenge eficaz de pelo menos um outro a- gente ativo.

15. Uso, de acordo com a reivindicação 13 ou 14, caracterizado pelo fato de o outro agente ativo é formulado na forma de uma preparação não-lipossômica.

16. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 13 a -15, caracterizado pelo fato de que a composição é administrada antes de dito outro agente ativo, preferivelmente mais de uma hora, porém não mais do que doze horas antes da aplicação do outro agente ativo.

17. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 13 a -16, caracterizado pelo fato de que o dito outro agente ativo é uma substância citotóxica ou citostática, tal como uma substância antitumoral ou antiendote- Iial ativa, um agente quimioterápico, uma substância imunológica ativa, um composto que reduz ou elimina as reações de hipersensibilidade ou um qui- miossensibilizador.

18. Uso1 de acordo com qualquer uma das reivindicações 13 a -17, caracterizado pelo fato de que o dito outro agente ativo é selecionado de agentes antineoplásicos especialmente agentes antimitóticos como o taxano, tais como paclitaxel ou derivados do mesmo, agentes alquilantes especial- mente composto contendo platina, tais como cisplatina ou carboplatina, a- gentes inibidores de topoisomerase em DNA tais como camptotecina, antra- ciclinas tais como doxorrubicina, antimetabólitos de RNA/DNA, especialmen- te 5-fluorouracil, gemcitabina ou capecitabína.

19. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 13 a -18, caracterizado pelo fato de que é aplicado na administração da composi- ção numa dose semanal entre 20mg/m a 50 mg/m2 e para administração de taxano não-lipossômico numa dose semanal entre 20 mg/m2 e 100 mg/m2.

20. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 13 a -19, caracterizado pelo fato de que é aplicado na administração da composi- ção e do outro agente ativo uma vez por semana.

21. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 13 a -20, caracterizado pelo fato de que é aplicado na administração uma vez por semana a uma dose de cerca de 22mg/m2 e para administração de paclita- xel não lipossômico ou de um derivado uma vez por semana a uma dose de cerca de 70 mg/m2.

22. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 21, caracterizado pelo fato de que a dita composição farmacêutica é administra- da sistemicamente, preferivelmente intravenosamente.

23. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 22, caracterizado pelo fato de que a dita composição é administrada juntamente com veículos fisiologicamente aceitáveis, tal como um tampão.

24. Combinação, caracterizada pelo fato de que compreende: (a) preparação lipossômica catiônica compreendendo pelo me- nos um lipídio catiônico, um agente antimitótico e, opcionalmente, pelo me- nos um lipídio neutro e/ou aniônico e (a) uma preparação não lipossômica compreendendo um agente antimitótico, para administração simultânea, separada e/ou seqüencial num ser humano ou animal.

25. Combinação, caracterizada pelo fato de compreende: (a) preparação lipossômica catiônica compreendendo pelo me- nos um lipídio catiônico de cerca de 30 moles por cento a cerca de 99,9 mo- les por cento, um agente antimitótico numa quantidade de cerca de pelo me- nos 0,1 mol por cento e, opciolnalmente pelo menos um lipídio neutro e/ou aniônico de cerca de 0 mol por cento a cerca de 70 moles por cento, e (b) uma preparação não-lipossômica compreendendo um agente antimitótico, para administração simultânea, separada e/ou seqüencial a um ser humano ou animal.

26. Combinação, de acordo com a reivindicação 24 ou 25, carac- terizada pelo fato de dito agente antimitótico é um fármaco de taxano, prefe- rivelmente paclitaxel ou um derivado do mesmo.

27. Combinação, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 24 a 26, caracterizada pelo fato de que a dita preparação lipossômica catiônica compreende paclitaxel numa quantidade de cerca de pelo menos 2 moles por cento a cerca de 8 moles por cento, preferivelmente de pelo me- nos 2,5 moles por cento a cerca de 3,5 moles por cento.

28. Combinação, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 24 a 27, caracterizada pelo fato de que a dita preparação lipossômica catiônica possui um potencial-zeta na faixa de cerca de + 20 mV a 100 mV em solução de KCl de cerca de 0,05 mM a um pH de cerca de 7,5.

29. Combinação, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 24 a 28, caracterizada pelo fato de que a dita preparação lipossômica catiônica compreender DOTAP, DOPC e paclitaxel.

30. Combinação, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 24 a 29, caracterizada pelo fato de que é empregada no tratamento do câncer.

31. Método para tratar câncer de mama triplo receptor negativo, caracterizado pelo fato de que compreende a administração de uma compo- sição farmacêutica, como definida em qualquer uma das reivindicações 1 a -30, numa dose terapeuticamente eficaz num indivíduo necessitado da mes- ma.

32. Método para tratar distúrbio hiperproliferativo, caracterizado pelo fato de que compreende a administração de uma combinação, como definida em qualquer uma das reivindicações 24 a 30, numa dose terapeuti- camente eficaz num indivíduo necessitado da mesma.