BRPI0710867A2 - inulina de cadeia longa, processo para objeção da mesma, gênero alimentìcio, suplemento de dieta, preparação cosmética, uso da inulina, pasta aquosa de inulina e uso da mesma - Google Patents

Abstract

INULINA DE CADEIA LONGA, PROCESSO PARA OBJEçãO DA MESMA, GêNERO ALIMENTìCIO, SUPLEMENTO DE DIETA, PREPARAçãO COSMéTICA, USO DA INULINA, PASTA AQUOSA DE INULINA E USO DA MESMA. A presente invenção refere-se a uma inulina de cadeia longa e sua preparação a partir de raízes de alcachofra, ao seu uso em gêneros alimentícios e preparações cosméticas e a gêneros alimentícios e preparações cosméticas que compreendem uma inulina de cadeia longa.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "INULINA DECADEIA LONGA, PROCESSO PARA OBJEÇÃO DA MESMA, GÊNEROALIMENTÍCIO, SUPLEMENTO DE DIETA, PREPARAÇÃO COSMÉTICA,USO DA INULINA, PASTA AQUOSA DE INULINA E USO DA MESMA ".

A presente invenção refere-se a uma inulina de cadeia particu-

larmente longa e sua preparação a partir de raízes de alcachofra, ao seu usoem gêneros alimentícios e preparações cosméticas e a gêneros alimentíciose preparações cosméticas que compreendem a inulina de cadeia particular-mente longa.

A demanda por gêneros alimentícios que contenham pouca gor-dura e matérias-primas mais naturais aumentou bastante nas últimas déca-das. Muitas substâncias já foram propostas como substitutos para gorduras,tal como produtos à base de carboidratos ou proteína ou substitutos paragordura sintéticos tal como poliésteres de açúcar de ácidos graxos. No en-tanto, esses sempre têm desvantagem tal como uma estabilidade térmicabaixa, uma "sensação na boca" insatisfatória ou um efeito indesejado sobreas pessoas ou o ambiente.

Sabe-se há muito tempo que inulina é adequada para uso emprodutos alimentícios. A inulina tem um valor energético muito baixo disponí-vel para humanos e então o uso de inulina como um substituto para gorduraassegura uma redução grande no valor calorífico do produto final. Ainda,inulina é usada como um agente de adição e de massa prebiótico em gêne-ros alimentícios.

A inulina é um polissacarídeo pertencente ao grupo frutano. Elaconsiste em uma cadeia beta-2-1-ligada de moléculas de frutose, e esta ca-deia pode ter uma unidade alfa-D-glicose na extremidade de redução. A inu-lina acontece em quantidades economicamente recuperáveis" em váriasplantas tal como, por exemplo, raízes de chicória, alcachofra Jerusalém etubérculos Dahlia. Os comprimentos de cadeia médios das várias inulinas esuas propriedades físico-químicas diferem de espécie de planta para espé-cie de planta.

As inulinas empregadas até agora no setor de gênero alimentíciosão totalmente satisfatórias em suas propriedades de processamento talcomo, por exemplo, viscosidade em forma de pasta aquosa, estabilidadetérmica e estabilidade a ácido, capacidade emulsificável e ligação à água.

Há ainda uma necessidade de inulinas com propriedades defermentação aperfeiçoadas e um efeito prebiótico maior.

Um problema maior é que quando da extração de inulina comágua quente do tecido de planta o extrato contém além da inulina bruta depolímero também monossacarídeos tal como glicose e frutose, dissacarí-deos tal como sacarose e fruto-oligossacarídeos (DP 3-10). Esses subprodu-tos (mono- e dissacarídeos, fruto-oligossacarídeos (DP 3-10) podem interfe-rir com processamento adicional da inulina. Por exemplo, mono- e dissacarí-deos são indesejados na fabricação de produtos alimentícios dietéticos. Ogosto doce dos mono- e dissacarídeos e fruto-oligossacarídeos (DP 3-10)interfere com certas aplicações no setor de produtos alimentícios. Fruto-oligossacarídeos (DP 3-10) podem, por causa de sua higroscopicidade epegajosidade, interferir muito com o uso de inulina bruta em produtos ali-mentícios ambos durante processamento e durante armazenamento. Duran-te processamento adicional da inulina bruta, por exemplo, através de deriva-tização química, mono- e dissacarídeos e fruto-oligossacarídeos (DP 3-10) podem levar a misturas indefinidas de produtos que podem ser purificadosapenas através de métodos caros ou não podem de modo algum. Ainda,• uma alta proporção de açúcares de redução tem a desvantagem que emprocessos térmicos na presença de compostos amino pode haver reaçõesque ficam marrons indesejadas, a formação de sabores estranhos e a pro-dução de acrilamida (reação Maillard).

A presente invenção é baseada no objeto de provisão de umainulina com a qual é possível resolver os problemas definidos acima.

A intenção era particularmente atingir propriedades de proces-samento vantajosas para aplicações na indústria de cosmético e gêneros.,,alimentícios. Seus exemplos são um comportamento de viscosidade vanta-joso, uma estabilidade térmica alta e estabilidade a ácido, uma capacidadede emulsificação boa e uma capacidade de ligação à água alta.

Um problema ao qual a invenção se dirige foi prover adicional-mente uma inulina tendo propriedades de fermentação aperfeiçoadas e efei-to probiótico aperfeiçoado para aplicações de gêneros alimentícios.

Finalmente, era desejável prover uma inulina que, através decomparação com inulina bruta, tivesse um teor menor de mono- e dissacarí-deos e de fruto-oligossacarídeos (DP 3-10).

Os problemas acima são revolvidos através da provisão dasmodalidades definidas nas reivindicações.

A presente invenção refere-se a uma inulina que tem um grau depolimerização médio DPw entre 83 e 103, de preferência entre 84 e 100, commais preferência entre 83 e 98, com mais preferência ainda entre 85 e 98,com mais preferência ainda 85 e 95, com mais preferência ainda entre 86 e97 e com mais preferência entre 86 e 94.

Com relação a isso e com relação à presente invenção, o termo"entre" pretende também incluir os limites numéricos respectivamente indi-cados.

O termo "inulina" pretende significar em conexão com a presenteinvenção um polifrutano que consiste em cadeia beta-2-1-ligada de molécu-las de frutose. Esta cadeia tem de preferência como sua extremidade umaunidade alfa-D-glicose de redução.

Em conexão com a presente invenção, o termo "grau de polime-rização médio DPw" (peso DP médio) significa o quociente da massa mole-cular ponderai média Mw e da massa molecular do monômero M0. A massamolecular ponderai média resulta de

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" onde Ni é o número de moléculas com massa molecular Mi.

O "grau médio de polimerização DPw" é de preferência medidoem conexão com a presente invenção através do método de "cromatografiade permeação em gel com espalhamento de luz e detecção de índice refrati-vo (sistema GPC-RI-MALLS)" descrito a seguir.

A inulina da invenção exibe, em comparação com inulinas des-critas na técnica anterior, a surpreendente desvantagem que ela pode serprocessada para cremes que exibem estabilidade raramente alta em trata-mento com calor ou tratamento ácido, de modo que eles são mais adequa-dos, por exemplo, para aplicações industriais particulares ou aplicações nasindústrias cosmética e/ou de produtos alimentícios. Ainda, cremes compre-endendo a inulina da invenção mostram uma estabilidade inesperadamentealta com relação a forças de cisalhamento. A inulina da invenção então exibea vantagem adicional, comparado com inulina convencional, que ela podeser processada melhor em processos industriais onde forças de cisalhamen-to fortes agem.

A inulina da invenção é ainda notável pelas propriedades de vis-cosidade particularmente vantajosas e uma resistência de gel alta e umasolubilidade muito baixa, o que é vantajoso para aplicações de gêneros ali-mentícios.

Ainda, a inulina da invenção mostra surpreendentemente boaspropriedades como substituto de gordura em gêneros alimentícios com exce-lentes propriedades sensoriais na boca.

A inulina da invenção também mostra através de comparaçãocom produtos previamente empregados uma fermentação mais lenta, que évantajosa na prevenção de doenças no intestino grosso posterior. A fermen-tação mais lenta é acompanhada por uma formação reduzida de gás no in-testino, especialmente hidrogênio.

A inulina da invenção tem adicionalmente através de compara-ção com produtos previamente empregados um efeito prebiótico maior. Emparticular, a inulina da invenção estimula a geração de bifidobactérias deuma maneira vantajosa com uma redução simultânea de bactérias indeseja-das e/ou patogênicas. A inulina da invenção é então adequada para uso emgêneros alimentícios e/ou medicamentos para a prevenção e tratamento dedisfunções e doenças do intestino, especialmente no intestino grosso poste-rior.

Finalmente, a inulina da invenção também confere várias propri-edades de uso vantajosas de gêneros alimentícios tal como, por exemplo,aumento da viscosidade, capacidade emulsificável, capacidade de ligaçãode água e formação de miolo. A inulina da invenção surpreendentementeconfere propriedades de cozedura aperfeiçoadas a produtos de padaria eaumenta o rendimento da massa. A inulina da invenção é, além disso, ummeio eficaz para modificação de sabor e estabilização de espuma.

Em uma modalidade adicional, a inulina da invenção tem umteor de fruto-oligossacarídeos (oligofrutanos) tendo um DP de a partir de 3 a10 que é menos do que 3%, de preferência menos do que 1,5%, particular-mente de preferência menos do que 0,7%, muito particularmente de prefe-rência menos do que 0,3%.

Em uma modalidade adicional, a inulina da invenção tem umteor de glicose de menos do que 2%, de preferência menos do que 1%, par-ticularmente de preferência menos do que 0,5%, muito particularmente depreferência menos do que 0,2% e com mais preferência menos do que0,1%.

Em uma modalidade adicional, a inulina da invenção tem umteor de frutose de menos do que 2,5%, de preferência menos do que 1,5%,particularmente de preferência menos do que 1,0%, muito particularmentede preferência menos do que 0,3% e com mais preferência menos do que0,15%.

Em uma modalidade adicional, a inulina da invenção tem umteor de sucrose de menos do que 2%, de preferência menos do que 1 %, par-ticularmente de preferência menos do que 0,5%, muito particularmente depreferência menos do que 0,3% e com mais preferência menos do que0,1%.

Em uma modalidade da inulina da invenção que é particularmen-te vantajosa para aplicações de gêneros alimentícios, o teor de mono- e dis-sacarídeos é menos do que 0,5%.

Todas as porcentagens são, a menos que de outro modo indica-do, porcentagem em peso com base no peso seco total de inulina e subs-tâncias adicionais. "Substâncias adicionais" são todas as substâncias namistura seca que são diferentes de inulina.

O teor de frutose, glicose e sucrose é medido em conexão com apresente invenção através do método enzimático óptico descrito abaixo (mé-todos gerais: "determinação de açúcar").Em uma modalidade adicional, que pode incluir as modalidadesanteriores, a inulina da invenção tem um peso molecular ponderai médio Mwentre 13.400 g/mol e 16.700 g/mol, de preferência entre 13.600 e 16.200g/mol, com mais preferência entre 13.750 g/mol e 15.900 g/mol e particular-mente de preferência entre 13.900 g/mol e 15.750 g/mol e com mais prefe-rência entre 13.900 g/mol e 15.250 g /mol.

O peso molecular ponderai médio Mw é de preferência medidoem conexão com a presente invenção através do método de "cromatografiade permeação em gel com espalhamento de luz e detecção de índice refrati-vo (sistema GPC-RI-MALLS)" descrito a seguir.

Em uma modalidade adicional, que pode incluir as modalidadesanteriores, a inulina da invenção tem um grau médio de polimerização DPn(gpc) medido através de cromatografia de permeação em gel (GPC) entre 66e 89, de preferência entre 68 e 85, particularmente de preferência entre 70 e85 e com mais preferência ainda entre 72 e 84.

O "grau médio de polimerização DPn" é medido em conexão coma presente invenção de preferência através do método de "cromatografia depermeação em gel com espalhamento de luz e detecção de índice refrativo(sistema GPC-RI-MALLS)" descrito a seguir.

Em conexão com a presente invenção, o termo "grau médio depolimerização DPn" (significa número DP) significa o quociente da massamolecular numérica média Mn e da massa molecular do monômero ligado M0(anidrofrutose = 162 g/mol). A massa molecular numérica média Mn resultade

onde Ni é o número de moléculas com massa molecular Mi.

Em uma modalidade adicional, que pode incluir as modalidadesanteriores, a inulina da invenção tem uma distribuição de peso molecular nafaixa de a partir de 650 a 48.000, com mais preferência 970 a 40.000 g/mol,com mais preferência ainda 1.300 g/mol a 34.000 g/mol e com mais prefe-rência de a partir de 4.000 g/mol a 26.800 g/mol.Ainda em uma modalidade adicional, que pode incluir as modali-dades anteriores, a inulina da invenção mostra uma massa total de molécu-las de inulina tendo um peso molecular de < 10.000 g/mol com base namassa total de todas as moléculas de inulina de 20-36% e uma massa totalde moléculas de inulina tendo um peso molecular de > 20.000 g/mol combase na massa total de todas as moléculas de inulina de 7-23%. É aindamais preferido que a massa total das moléculas de inulina tendo um pesomolecular de < 10.000 g/mol com base na massa total das moléculas de inu-lina seja 25-31% e a massa total das moléculas de inulina tendo um pesomolecular de > 20.000 g/mol com base na massa total de todas as molécu-las de inulina seja 12-18%.

A distribuição de peso molecular é de preferência medida emconexão com a presente invenção através do método de "cromatografia depermeação em gel com espalhamento de luz e detecção de índice refrativo(sistema GPC-RI-MALLS)" descrito a seguir.

Em uma modalidade da inulina da invenção com propriedadesparticularmente vantajosas, o grau de ramificação é 0,5-2,0% em mol, commais preferência 0,7-2,0% em mol, com mais preferência ainda 0,9 a 2,0%em mol e com mais preferência 1,1a 2,0% em mol. O grau de ramificação édefinido aqui como o número percentual de monômeros de frutose beta-2-1 -Iigada com ponto de ramificação adicional na posição 6 do monômero defrutose (também abreviado para "2-1,6-" a seguir) com base no número totalde todos os monômeros de inulina medidos em uma amostra da inulina dainvenção com pesos moleculares aleatoriamente distribuídos. Na sua posi-ção 6, um monômero de "2-1,6-" frutose dentro de uma cadeia de polifrutoseé ligado a outra cadeia de polifrutose, consistindo em pelo menos dois mo-nômeros de frutose beta-2-1-ligada, ou a um monômero de frutose único. Otermo "ponto de ramificação" designa uma posição de um monômero de fru-tose, com uma cadeia de polifrutose, ao qual outra cadeia de polifrutoseconsistindo em pelo menos dois monômeros de frutose beta-2-1-ligada ouum monômero de frutose unido é ligada. O grau de ramificação é medidoatravés do método de análise de metilação padrão ou alternativamente atra-vés do método de degradação redutiva após metilação. Ambos métodos sãodescritos em detalhes nos exemplos apensos.

Uma modalidade da inulina da invenção que é particularmentevantajosa em suas propriedades e que pode incluir as modalidades previa-mente descritas tem uma distribuição de peso molecular particularmente es-treita expressa pelo quociente entre o grau de peso médio de polimerizaçãoe o grau de número médio de polimerização DPw/DPn. Esta quantidade étambém referida como um índice de polidispersidade. Em uma modalidadepreferida, o quociente DPw/DPn é menos do que 1,25, em uma modalidademais preferida é menos do que 1,20, em uma modalidade ainda mais prefe-rida é menos do que 1,15 e na modalidade mais preferida é menos do que1,10. Os valores de DPw e DPn são nesta conexão medidos através do mé-todo de "cromatografia de permeação em gel com espalhamento de luz edetecção de índice refrativo (sistema GPC-RI-MALLS)" descrito a seguir. Opeso molecular de um monômero para cálculos de conversão é ajustadoigual a 162 g/mol.

A invenção refere-se ainda a uma pasta aquosa da inulina dainvenção que é obtenível através de dispersão da inulina em água, cisalhan-do a dispersão resultante até homogênea, armazenando o produto obtidodesta maneira a 4-15°C por 12-24 horas e, após condicionamento para tem-peratura ambiente, agitar para dar uma pasta homogênea. Uma pasta prefe-rida compreende água e 1-40% em peso, com mais preferência 1-35% empeso, com mais preferência ainda 1-30% em peso, com mais preferênciaainda 2-25% em peso, com mais preferência ainda 2-20% em peso e parti-cularmente de preferência 10-20% em peso de inulina com base no pesototal da pasta. O termo "pasta" é de acordo com a presente invenção equiva-lente a uma suspensão de inulina cristalina e/ou amorfa. Deste modo, o ter-mo "pasta aquosa" deve ser compreendido como uma suspensão de inulinacristalina e/ou amorfa em fase aquosa. A fase aquosa é baseada em águaque pode opcionalmente compreender substâncias dissolvidas ou suspen-sas adicionais, tal como sais, outros carboidratos, proteínas, aminoácidos.Em uma modalidade vantajosa a inulina na pasta é uma inulina seca compulverização, isto é, uma inulina que foi seca com pulverização antes daformação da pasta.A pasta descrita acima pode ser usada como um componenteem sistemas aquosos. Sistemas aquosos preferidos são gêneros alimentí-cios em base aquosa e cosméticos, onde o termo "gênero alimentício" é de-finido em outro lugar na presente descrição. Exemplos de gêneros alimentí-5 cios preferidos são também listados em outro lugar na presente descrição.Em gêneros alimentícios e cosméticos, uma pasta de acordo com a inven-ção pode ser usada como componente de oferecimento de estrutura, agentede espessamento, agente de estruturação, agente de aumento da estabili-dade ou agente de formação de viscosidade, onde a pasta nesta conexãopode realizar uma ou mais das funções acima mencionadas. Em gênerosalimentícios, uma pasta de acordo com a invenção pode ser também usadacomo um substituto para gordura, substituto para óleo, agente prebióticoe/ou componente de fibra dietética, onde a pasta nesta conexão pode reali-zar uma ou mais das funções acima mencionadas. O uso mais preferido é ouso como um óleo ou substituto para gordura. Os gêneros alimentícios maispreferidos onde uma pasta de acordo com a invenção é usada como umcomponente são produtos laticínios tal como iogurte, bebidas de iogurte,creme fresco, coalhada, manteiga, leite, especialmente leite desnatado, sorode leite, leite azedo, bebida láctea ácida, queijo, tal como queijo cremoso,queijo mole, queijo fatiado, queijo duro, soro, leite em pó, bebidas à base deleite.

A inulina da invenção mostra uma estabilidade surpreendente-mente alta a ácido. Em particular, uma pasta aquosa da inulina da invençãomostra uma alta estabilidade a ácido. A estabilidade a cisalhamento de umapasta de inulina aquosa da invenção é da mesma maneira excepcional atra-vés de comparação com produtos comercialmente disponíveis.

A inulina da invenção é distinguida de outras inulinas comercial-mente disponíveis por uma resistência de gel surpreendentemente alta. Re-sistências de gel de 4-100 N, mais vantajosamente 10-100 N, ainda maisvantajosamente 20-100 N e mais..vantajosamente 40-100 N, são consegui-das em uma concentração de 1-35% (p/p), com mais preferência 1-30%(p/p), com mais preferência ainda 2-25% (p/p), com mais preferência 2-20%(p/p), com mais preferência cerca de 20% (p/p) da inulina da invenção emágua quando inulina é dissolvida a 90°C e então armazenada em temperatu-ra ambiente (23°C) por um período de 24 horas. Resistências de gel altasconforme indicado previamente podem ser conseguidas particularmente bemcom inulinas da invenção que são secas com pulverização e então empre-gadas para formação de gel. Os géis obtidos desta maneira de preferênciamostram um caráter de partícula (géis de partícula). O método de mediçãopara determinação da resistência de gel é descrito em detalhes na seção deexemplos (formação de estrutura por inulinas após aquecimento em água).

A presente invenção refere-se em um aspecto adicional a umprocesso para obtenção de inulina onde

a) raízes de alcachofra são moídas,

b) um extrato é obtido através de tratamento das raízes moídascom água,

c) constituintes de coloração são removidos do extrato obtido,

d) inulina é precipitada do extrato,

e) a inulina é reprecipitada pelo menos uma vez.

O processo é particularmente adequado para obtenção das inu-linas previamente descritas da invenção, mas não é restrito a elas.

Raízes de alcachofra são usadas como material de partida, maso processo não é restrito a uma variedade particular. A moagem é vantajo-samente precedida por remoção de quaisquer contaminantes aderentes dasraízes, por exemplo, através de lavagem vigorosa com água com um limpa-dor de alta pressão. É vantajosamente possível lavar as raízes em estadocongelado profundo a fim de minimizar a perda de massa de material de raiz.

Se necessário, as raízes são inicialmente moídas de modo gros-so, por exemplo, cortando. Picadores são preferidos para a moagem adicio-nal. O produto obtido é material de raiz moído na forma de lascas fibrosas.

Na modalidade mais vantajosa do processo, raízes de alcacho-fra com as características que seguem são usadas: raízes maduras com re-lação à formação de massa seca e inulina. O grau de maturação pode serestabelecido a partir da razão do teor de inulina para teor de matéria seca ea razão de teor de frutose para teor de inulina. O teor de inulina está de pre-ferência na faixa de 30-70% em peso, com mais preferência 40-65% em pe-so, com mais preferência ainda 50-60% em peso, com base no peso total damatéria seca de raízes, e a razão de frutose/inulina está de preferência nafaixa de 3-24% em peso, com mais preferência 3-12% em peso, com maispreferência menos do que 6% em peso. O teor de matéria seca das raízesde alcachofra limpas é de preferência 20-50% em peso, com mais preferên-cia 30-40% em peso, com mais preferência 30-35% em peso, com base nopeso total de raízes limpas.

No caso de raízes de alcachofra terem que ser armazenadasantes de usá-las no processo da presente invenção, as raízes devem serconservadas a fim de prevenir contaminação microbiana, enraizamento oudiminuição de peso molecular de inulina devido à degradação enzimática.Métodos preferidos para conservação das raízes são congelamento ou se-cagem com ar quente de raízes moídas para armazenamento.

Após a moagem, o material de raiz moído é extraído com água,de preferência em uma temperatura de 60°C a 95°C, com mais preferência80-95°C. A extração de preferência acontece na faixa de pH neutro a ligei-ramente alcalino. Uma temperatura de pelo menos 60°C em pH 7-9 é vanta-josa porque neste caso hidrólise enzimática e ácida é suprimida. A concen-tração de material de raiz moído na água é de preferência 10-40% em peso,com mais preferência 20-30% em peso, medida em peso fresco de raízescom base no peso total da mistura de extração.

De preferência uma razão entre a matéria seca do material pica-do usado e a água como meio de extração é estabelecida que leva a um teorde matéria seca no extrato de 8-12% em peso e um teor de inulina de maisdo que 6% em peso, de preferência 6-8% em peso, com base no peso doextrato. Uma escolha correspondentemente adequada de condições de ex-tração, tal como a razão de água para peso de raiz, pode levar a uma trans-ferência de 80-90% em peso dar inulina presente nas raízes para o extrato.As condições acima mencionadas são adequadas para atingir uma cristali-zação favorável e um alto rendimento da inulina do extrato, com base naobservação que a inulina de alto peso molecular cristaliza do extrato mesmoem uma concentração tão baixa quanto 5% em peso, com base no peso doextrato.Não há nenhuma restrição especial quanto ao equipamento deextração, e técnicas de extração convencionais para material de planta po-dem ser aplicadas. É mais preferido de acordo com a invenção que a extra-ção aconteça em um extrator aquecido com revestimento com agitador. Emoutra modalidade altamente preferida uma tina de filtragem (Iaunter turí) quepode ser aquecida é usada como extrator agitado. Então, a extração da inu-Iina das raízes é combinada com a separação do extrato das lascas usadasatravés de filtragem, conforme descrito abaixo. O tempo de extração apósequilíbrio da mistura de raiz/água é de preferência 30 minutos - 4 horas, depreferência 1-2 horas. Após este tempo, o extrato é separado das lascasusadas, por exemplo, bombeando ou coando ou filtrando.

Após separação do extrato das lascas usadas, onde apropriado,materiais fibrosos e fragmentos de planta podem permanecer como materi-ais suspensos no extrato. Se presentes, esses materiais suspensos são pro-vavelmente removidos do extrato. Nesta variante do processo, a etapa b) doprocesso é então seguida, antes da etapa c), por uma etapa onde materiaissuspensos, principalmente consistindo em fibras, são removidos do extrato.A quantidade aceitável de materiais suspensos e se remoção vai acontecerserão decididas pelo versado na técnica de caso para caso. Remoção dosmateriais suspensos pode acontecer através de técnicas de separação con-vencionais, com centrifugação ou filtragem. Um separador deslodante pro-vou ser particularmente adequado. Uma tela ou filtro com finura apropriadapode ser também usada.

Em uma modalidade altamente preferida, o material suspensopode ser filtrado usando as lascas usadas como o material de filtro. Nestamodalidade as lascas usadas são precipitadas no fundo do recipiente deextração equipado com uma peneira no fundo, igual a uma tina de filtragem.A peneira é de preferência uma peneira com fenda. As lascas usadas preci-pitadas são usadas como um leito de filtragem através do qual o extrato flui.Usando esta técnica uma remoção quase quantitativa de material suspensoé possível sem uso de etapas de filtragem adicionais antes de refinamentoou abrilhantamento adicional do extrato ou cristalização da inulina.

Os extratos são coloridos devido ao seu teor de constituintes decoloração e matéria colorizada coloidalmente suspensa. Os constituintes decoloração consistem, interalia, em taninas e flavonoides e geralmente confe-rem uma cor amarela ou amarelo-amarronzado e/ou amarronzado-escuro aoextrato. As inulinas que podem ser obtidas diretamente a partir de tais extra-tos não estão de acordo com as condições necessárias com relação à corneutra. É então necessário remover os constituintes de coloração do extratona etapa c) do processo. A etapa c) do processo da invenção para remoçãode constituintes de coloração dos extratos de planta é geralmente tambémreferida como descoloração, clarificação ou "abrilhantamento" de extratos deplanta. Esses termos são equivalentes no contexto da presente invenção.

O abrilhantamento pode acontecer de acordo com a invençãoadicionando cal e subsequente combinação (adição de CO2). O processo deadição de cal é conhecido da técnica anterior e é usado, por exemplo, naobtenção de sucrose a partir de beterraba açucareira. Em um processo deabrilhantamento alternativo, os constituintes de interferência são removidosusando um trocador de íon.

Em uma modalidade particularmente vantajosa do processo, osconstituintes de coloração são removidos na etapa c) através de

i) mistura de íons de magnésio (Mg2+) ao extrato de planta,

ii) mistura de pelo menos um componente alcalino ao extrato deplanta,

iii) formação de um precipitado, e

iv) remoção do precipitado que se formou do extrato de planta.

As etapas i) - iv) nesta variante particularmente preferida sãosubetapas de etapa c) do processo.

Esta variante de processo torna descoloração mais eficaz doextrato possível comparado com o processo de abrilhantamento de cal. Ain-da, os auxiliares empregados, sais de magnésio e álcalis, são de custo bai-xo. O processo é então de menos custo do que ouso de um trocador de íon.O gasto com aparelho: e tempo para realizar esta etapa do processo é tam-bém particularmente baixo. Finalmente, este tipo de abrilhantamento tam-bém remove simultaneamente materiais causando turbidez do extrato.íons de magnésio (Mg2+) são misturados de acordo com a in-venção ao extrato de planta aquoso. É possível em uma variante de etapa i)adicionar uma solução aquosa de um sal de magnésio ao extrato de planta.Em uma variante adicional, mais preferida, um sal de magnésio é adicionadodiretamente em forma sólida ao extrato de planta e dissolvido nele.

Se sal de magnésio for adicionado, é preferido um sal que, devi-do ao seu produto de alta solubilidade, é muito prontamente solúvel em á-gua. Sais de magnésio particularmente adequados são selecionados de clo-reto de magnésio, sulfato de magnésio, nitrato de magnésio, sais de magné-sio de ácidos graxos inferiores tal como acetato de magnésio e propionato, esuas misturas.

Um componente alcalino em ii) significa de acordo com a inven-ção um componente que compreende íons de hidróxido (OH") ou forma íonsde hidróxido no extrato após combinação com o extrato de planta. O compo-nente alcalino pode ser líquido, sólido ou gasoso. Um componente alcalinolíquido é de preferência empregado.

Quando da adição de íons de magnésio e um componente alca-lino conforme descrito nas etapas i) e ii) do processo, um precipitado é for-mado através de uma reação de precipitação. As etapas i) e ii) podem nocontexto do presente processo a princípio ser realizadas simultaneamente,especialmente se uma solução de íons de magnésio for usada na etapa i) eum líquido alcalino for usado na etapa ii). No entanto, é preferido realizar aetapa i) primeiro e então a etapa ii) do processo.

É vantajoso para a etapa c) do processo que ambos íons demagnésio e o componente alcalino sejam distribuídos o mais homogenea-mente possível no extrato de modo que a reação de precipitação no extratoseja também homogênea e o mais quantitativa possível. É então preferidoempregar como componente alcalino líquidos alcalinos aquosos tal como,por exemplo, soluções alcalinas ou suspensões alcalinas que podem serrapidamente e homogeneamente misturadas no extrato de planta.

Uma solução ou suspensão alcalina compreende de acordo com.a invenção íons de hidróxido (OH ) ou os forma após combinação com o ex-trato de planta.

Em uma variante de processo muito preferida, um sal de mag-nésio é homogeneamente dissolvido no extrato primeiro na etapa i). Subse-qüentemente, na etapa ii), uma solução ou suspensão alcalina aquosa é adi-cionada.

Em uma modalidade, o componente alcalino é uma solução oususpensão aquosa de um hidróxido de metal alcalino ou metal alcalinoterro-so. O hidróxido é de preferência selecionado dos hidróxidos dos metais alca-Iinos e alcalinoterrosos, tal como hidróxido de lítio, hidróxido de sódio, hidró-xido de potássio, hidróxido de cálcio e hidróxido de bário.

Em uma variante muito particularmente preferida, o componentealcalino é uma suspensão de hidróxido de cálcio. A vantagem de uso de hi-dróxido de cálcio é que uma quantidade particularmente pequena de centri-fugado é obtida na etapa iii). Ainda, a precipitação simultânea de hidróxidode magnésio e sulfato de cálcio atinge uma taxa de sedimentação maior euma compressibilidade maior do precipitado. O precipitado tem consistênciaparticularmente pouco gelatinosa. A ligação de inulina no precipitado entãopermanece particularmente baixa nesta variante de processo.

Um componente alcalino adicional que pode ser usado é amô-nia, de preferência em solução aquosa. Nem é excluído a princípio usar a-mônia gasosa, mas isto é menos preferido do que o uso de uma soluçãoaquosa.

Em uma modalidade adicional, o componente alcalino é umasolução ou suspensão aquosa de uma base orgânica tal como etilenodiami-na ou trietanolamina.

Sais de ácidos orgânicos fracos tal como acetatos de metal alca-lino ou metal alcalinoterroso, especialmente acetato de sódio, acetato depotássio, acetato de cálcio e acetato de magnésio, podem ser também usa-dos.

Hidróxido de magnésio é formado como precipitado. Os constitu-intes de coloração do extrato aquoso permanecem de acordo com a inven-ção no precipitado e são então separados da fase líquida. Um extrato subs-tancialmente descobrido é obtido. As quantidades de íons de Mg2+ e com-ponente alcalino empregado, e então a quantidade de precipitado formado,determinam inter alia quão quantitativa a descoloração é. Otimização dasquantidades dos reagentes está dentro da competência de um versado natécnica. No caso de sulfato de magnésio, a concentração preferida está nafaixa de 0,5-3% em peso, com mais preferência 0,5-2% em peso do extratoaquoso.

Na variante preferida de etapa c), conforme acima descrito, arazão molar de íons de hidróxido para íons de magnésio OH":Mg2+ é de pre-ferência de a partir de 2,2:1 a 1,8:1. É mais preferido que a razão seja exa-tamente estequiométrica, isto é, OH":Mg2+= 2:1. A quantidade de componen-te alcalino deve então ser escolhida de modo que a quantidade apropriadade íons de hidróxido esteja presente para os íons de magnésio.

A dissolução do sal de magnésio e mistura do componente alca-lino nas etapas i) e ii) de processo de preferência acontecem com agitação afim de atingir dissolução e homogeneização o mais rápido possível e entãouma reação rápida. No entanto, não há quaisquer restrições adicionais parti-culares sobre as técnicas de mistura. Então, o processo pode ser realizado,por exemplo, também através de outras técnicas de mistura familiares aoversado na técnica.

Para promover o processo, a etapa i) é de preferência.realizadaem uma temperatura de 60-80°C. O tempo de reação após adição do com-ponente alcalino é geralmente de a partir de cerca de 1 a 15 minutos, emmédia cerca de 10 minutos.

A etapa de remoção iv) de preferência acontece através de se-dimentação ou filtragem. A sedimentação pode ser tornada mais rápida atra-vés de uma centrífuga, de preferência uma centrífuga de disco, em particularuma centrífuga de deslodamento. No entanto, outras técnicas de separaçãofamiliares ao versado na técnica podem ser também usadas. Essas podemser também realizadas em combinação umas com as outras, por exemplo,deslodamento centrífugo do extrato abrilhantado com filtragem subsequentedo extrato deslodado, por exemplo, com um filtro de placa.

A etapa c) toda do processo da invenção pode se necessário sertambém realizada mais de uma vez. Se a variante da etapa c) preferida pre-viamente descrita com subetapas i) - iv) for usada, é também possível queas subetapas individuais i) - iv) sejam realizadas mais de uma vez.Após a etapa c), inulina é um precipitado do extrato na etapa d).A precipitação pode ser realizada, por exemplo, adicionando álcoois tal co-mo etanol, metanol ou isopropanol. Neste caso, dependendo da quantidadede álcool adicionada ou da polaridade ajustada da fase líquida, frações deinulina de peso molecular inicialmente alto são precipitadas, de modo que épossível influenciar, através da quantidade de álcool adicionada, quão quan-titativamente a inulina presente no extrato é precipitada e quais frações depeso molecular são predominantemente obtidas. Além do álcool, é possívelempregar outros líquidos orgânicos não-polares que sejam miscíveis comágua.

Para este propósito, em uma modalidade particularmente vanta-josa desta etapa de processo, para limitar o uso de álcool, especialmenteetanol e isopropanol, o extrato preparado é inicialmente concentrado, de pre-ferência para um quarto a um quinto de seu volume inicial. A concentraçãopode acontecer através de evaporação ou filtragem em membrana e umacombinação de ambos processos. Deve-se tomar cuidado neste caso que oconcentrado seja mantido quente durante a concentração, de preferência a60-95°C, a fim de evitar precipitação da inulina. Uma vantagem de filtragemde membrana é a depleção, associada com ela, em substâncias de pesomolecular baixo acompanhando a inulina. A precipitação subsequente dainulina do concentrado pode ser controlada pela escolha de concentraçõesde álcool altas de modo que a inulina é fracionada de acordo com as faixasde tamanho molecular que são caracterizadas, por exemplo, pelo grau depeso médio de polimerização (DPw). Dependendo da escolha das condiçõesde precipitação, o resultado são frações que têm o DPw de acordo com ainvenção. Dependendo da pureza desejada.

É mais preferido obter inulina esfriando o extrato do que atravésde precipitação alcoólica. As condições preferidas são tais de modo que oextrato é esfriado para uma temperatura de 2-10°C, com mais preferência 2-8°C e mantido nesta temperatura durante um período de a partir de^6 a 140horas, de preferência 6 a 48 horas, durante o qual a inulina precipita. A taxade esfriamento e a temperatura e a duração do esfriamento influenciam aprecipitação da inulina a partir do extrato e a largura da distribuição de pesomolecular e então ao mesmo tempo a quantidade. Escolha de um períodomais longo e temperatura menor resulta em precipitação de inulinas de pesomolecular mais baixo e uma distribuição de peso molecular mais ampla eentão um peso molecular médio menor da fração precipitada. A inulina pre-cipitada é separada da fase líquida através de técnicas de separação con-vencionais tal como, por exemplo, centrifugação, decantação, filtragem.

Em uma modalidade preferida, inulina é cristalizada pela primei-ra vez após a etapa de extração b) e antes da etapa c) do processo acimadescrito. Tal cristalização é de preferência feita conforme descrito anterior-mente. Cristalização antes da etapa c) leva a um aumento no rendimento deinulina de peso molecular alto comparado com abrilhantamento direto doextrato, e economiza o uso dos agentes de abrilhantamento, isto é, compos-to de magnésio e o componente alcalino. É vantajoso abrilhantar o extratoapós a primeira cristalização da inulina como neste caso apenas os constitu-intes de coloração ligados aos cristais de inulina têm que ser removidos, oque leva a uma quantidade similarmente menor de inulina ligada ao sedi-mento de abrilhantamento.

Uma primeira precipitação e remoção da inulina precipitada podeser seguida por esfriamento renovado do extrato ou adição de álcool a fimde obter quaisquer frações de inulina que estejam ainda dissolvidas. Umadecisão sobre repetição é feita de caso para caso de acordo com quãoquantitativamente a inulina deve ser obtida das plantas e qual distribuição depeso molecular no produto final é desejada.

A concentração de inulina no extrato depende substancialmentedo teor de inulina das raízes e da concentração das raízes moídas no extratoe é uma variável adicional que tem um efeito sobre a precipitação da inulinaatravés de esfriamento do extrato. A dependência da precipitação sobre aconcentração pode então ser utilizada a fim de concentrar a fase líquida a-pós a primeira precipitação, por exemplo, através de evaporação, a fim detambém precipitar as frações de peso molecular baixo se isto for.desejado.

Na última etapa de processo e), a inulina precipitada é reprecipi-tada. "Reprecipitação" significa no contexto da presente invenção que a inu-lina sólida, resultante da etapa de processo anterior, é redissolvida e entãoprecipitada e/ou cristalizada da solução novamente. Então, a etapa e) doprocesso pode ser também expressa como: a inulina é dissolvida e precipi-tada e/ou cristalizada novamente, onde esta etapa é feita pelo menos umavez. A cristalização difere da precipitação pelo fato de que estruturas predo-minantemente cristalinas são obtidas.

A inulina é de preferência dissolvida sob a influência de calor ede preferência em água. Água com uma temperatura de 70-100°C, em parti-cular 90-1OO0C, é particularmente adequada.

A precipitação na etapa e) pode acontecer através de precipita-ção alcoólica conforme previamente descrito. No entanto, a inulina é de pre-ferência obtida esfriando a solução para 2-10°C, com mais preferência 2-8°Cdurante um período de 6 a 140 horas, de preferência 12-48 horas.

A precipitação da inulina dissolvida na etapa e) pode ser repeti-da a fim de obter a inulina ainda restante na fase líquida. Uma decisão sobre15 repetição deve ser feita de caso para caso de acordo com quão quantitati-vamente a inulina deve ser obtida das plantas e qual distribuição de pesomolecular no produto final é desejada. A fase líquida pode ser concentrada afim de simplificar a precipitação.

Após reprecipitação, o sólido de inulina resultante é separado dafase líquida através de técnicas de separação convencionais tal como, porexemplo, centrifugação, decantação, filtragem.

A fim de influenciar a distribuição de massa molecular e purezado produto de inulina resultante, a etapa de processo e) pode ser realizadamais de uma vez. Aconteceu que as médias do peso molecular e as médiasdo grau de polimerização são mudadas para valores mais altos quando darepetição da etapa de reprecipitação e). É então possível ajustar várias mé-dias do peso molecular/grau de polimerização da inulina da invenção dentroda faixa reivindicada.

Se impurezas de partícula fina estiverem ainda presentes, é van-tajoso inserir uma ou mais das etapas de filtragem no processo. Quaisquerimpurezas de partícula fina presentes são removidas na filtragem. A finurado filtro é escolhida pelo versado na técnica dependendo do tamanho departícula da impureza.A(s) etapa(s) de filtragem pode(m) ser inserida(s) em qualquerlugar no processo após obtenção do extrato. Uma etapa de filtragem direta-mente após obtenção do extrato na etapa b), por exemplo, é vantajosa. Aetapa de filtragem deve ser distinguida da remoção de materiais suspensosconforme descrito previamente, porque as partículas removidas pela filtra-gem são mais finas do que os materiais suspensos, que consistem princi-palmente de fibras. Em uma modalidade preferida adicional, a etapa de fil-tragem é realizada antes da etapa d).

A etapa de filtragem é de preferência combinada com uma re-precipitação conforme descrito para a etapa e) do processo. Isto confere ainulina sendo dissolvida conforme previamente descrito para e etapa e), e asolução então sendo filtrada. Após a filtragem, a inulina é precipitada ou cris-talizada da solução filtrada. A inulina sólida resultante após a precipitação oucristalização pode ser separada da fase líquida através de técnicas de sepa-ração convencionais, tal como, por exemplo, centrifugação, decantação efiltragem.

Em alguns casos a inulina resultante pode ser descolorida porsubstâncias que não podem ser removidas através de filtragem. Em tais ca-sos, é preferido remover as impurezas de coloração através de um tratamen-20 to com carbono ativado. Em uma modalidade carvão ativado é suspenso emágua e adicionado a uma solução de inulina em uma temperatura de cercade 80°C, de preferência acima de 90°C. No caso de uma solução de inulinade 20% em peso, a quantidade de carbono ativado está de preferência emuma faixa de 1-10% em peso, de preferência 2-6% em peso, com mais pre-ferência 2-3% em peso, com base no peso da solução de inulina. Após ad-sorção das impurezas de coloração, o carbono ativado é removido atravésde centrifugação e/ou filtragem. A suspensão de carbono ativado pode serpré-clarificada através de separação centrífuga do sedimento de carbonoativado e então clarificada por filtragem de dois estágios, por exemplo, com

Uma combinação de um filtro de diatomito de pré-revestimento e um filtro defolha. É importante que durante a separação do carvão ativado da soluçãode inulina a temperatura seja mantida acima de 80°C, de preferência acimade 90°C, a fim de manter a inulina em solução. Após remoção do carvão ati-vo, a inulina pode ser precipitada ou cristalizada e separada da fase líquidaconforme acima descrito.

Após separação da fase líquida, o produto final pode ser lavadonovamente com água ou uma mistura de água/álcool. Lavagem com águafria em uma temperatura de 2-100C é preferida. Para este propósito, o preci-pitado de inulina é transformado em pasta fluida em água e a inulina é entãosedimentada novamente.

A inulina resultante é de preferência seca em uma última etapade processo, adicional. A secagem pode acontecer através de secagem porcongelamento, secagem por pulverização ou secagem por tambor.

Em uma modalidade preferida, a inulina da invenção está emforma seca por pulverização. Parâmetros de secagem por pulverização ade-quados são descritos nos exemplos apensos. É evidente que no caso de umprocesso de secagem por pulverização uma inulina precipitada ou cristaliza-da deve ser trazida para suspensão (em água abaixo de 80°C) ou em solu-ção (em água acima de 80°C) novamente. Alternativamente, uma última eta-pa de precipitação ou cristalização, conforme acima descrito, pode ser omiti-da e a inulina suspensa ou dissolvida do processo pode ser diretamente se-ca por pulverização. É possível adicionar inulinas secas com pulverização dainvenção a produtos alimentícios preparados líquidos para que a viscosidadeseja aumentada particularmente eficazmente. Da adição de quantidades i-guais de inulina da invenção, um aumento maior em viscosidade é conse-guido com uma inulina seca com pulverização comparado com uma inulinaseca de outro modo (por exemplo, secagem por congelamento).

Em ainda uma modalidade preferida adicional, a inulina da in-venção está em uma forma granulada por pulverização. Inulina granuladapor pulverização é obtida através de processos conhecidos, por exemplo,introduzindo um material previamente seco por pulverização como sementede granulação e secagem por pulverização de inulina adicional. Uma inulinacom um tamanho de partícula de 10-100 pm, por exemplo, pode servir comouma carga inicial. Condições de granulação por pulverização adequadassão, por exemplo, uma composição de alimentação de 70% de água e 30%de inulina e uma temperatura de alimentação de 90°C.A inulina da invenção tem muito particularmente de preferênciaum diâmetro de partícula médio de 50-350 μιη, com mais preferência 80-300μιτι, com mais preferência ainda 100-250 μιτι e com mais preferência 100-200 μιη. Tal inulina é então um aspecto adicional da presente invenção.

O diâmetro de partícula médio pode ser determinado ambos a-través de análise de peneira de uma amostra seca e através de espalha-mento de luz. O método preferido é, no entanto, análise de peneira de modoque a inulina da invenção tem de preferência um diâmetro de partícula mé-dio de 50-350 μιη, com mais preferência 80-300 μιτι, com mais preferênciaainda 100-250 μιτι e com mais preferência 100-200 μηι, determinado atravésde análise de peneira.

Em uma modalidade, a inulina da invenção tendo os tamanhosde partícula descritos é obtida através de processo de secagem por pulveri-zação ou granulação por pulverização. Uma inulina seca por pulverização ougranulada por pulverização tendo os tamanhos de partícula previamentedescritos é então um aspecto adicional da presente invenção.

É possível ajustar o diâmetro de partícula médio preferido deuma inulina seca por meio de fracionamento por peneira no caso de, apóssecagem, ela eatar ainda fora da faixa preferida. Seleção do tamanho depeneira adequado se encontra dentro da competência do versado comum natécnica.

As partículas de inulina da invenção de preferência têm uma fra-ção cristalina de menos do que 45%, com mais preferência menos do que40%, com mais preferência ainda menos do que 35%. Em uma modalidadepreferida adicional, menos do que 20%, com mais preferência ainda menosdo que 10%. Na modalidade mais preferida, o grau de cristalização é menosdo que 1%. Os graus declarados de cristalinidade são determinados atravésdo método de Ruland-Vonk (W. Ruland, Acta Cryst., 14, 1180 (1961); C.G.

- Vonk, J. Appl. Cryst. 6, 148 (1973)). O método para determinação do grau decristalinidade é descrito em detalhes nos exemplos-apensos. Um grau baixode cristalinidade confere melhores propriedades de dissolução à inulina, oque é vantajoso em certas aplicações de gêneros alimentícios.

Em um aspecto adicional, a invenção também se refere a com-posições que compreendem a inulina previamente descrita da invenção eum ou mais ingredientes comestíveis ou farmaceuticamente aceitáveis.Composições típicas incluem gêneros alimentícios para humanos e animais,bebidas, gêneros alimentícios funcionais, medicamentos e composiçõesfarmacêuticas (incluindo composições profiláticas e composições terapêuti-cas) e seus intermediários.

Um gênero alimentício funcional significa no contexto da presen-te invenção um gênero alimentício que além de nutrientes tradicionais com-preende um ingrediente que podem ter um efeito de promoção de saúde (de-finição do Institute of Medicine of the National Academy of Sciences, USA,1994).

Os ditos ingredientes comestíveis ou farmaceuticamente aceitá-veis são de preferência selecionados do grupo consistindo em açúcares (porexemplo, glicose, frutose, sucrose, lactose, galactose, maltose, isomaltose,polidextrose), polióis (por exemplo, sorbitol, lactitol, maltitol, isomalte, mani-tol, xilitol), maltodextrinas, adoçantes, xaropes de glicose hidrogenada, adi-ções a alimentos humanos e animais, intermediários para alimentos huma-nos e animais, produtos alimentícios humanos e animais, líquidos comestí-veis, bebidas, fontes disponíveis de animais, veículoes farmaceuticamenteaceitáveis, substâncias farmaceuticamente e terapeuticamente ativas, com-posições farmacêuticas e medicamentos.

Uma composição particularmente preferida da presente inven-ção inclui a inulina da invenção na presença de uma fonte de minerais bio-disponível, comestível ou farmaceuticamente aceitável, especialmente umafonte de cálcio e/ou magnésio e/ou ferro, tal como, por exemplo, produto lati-cínios e sais e complexos de cálcio, magnésio e ferro.

Conforme acima explicado, o objetivo da presente invenção eraprover uma inulina com propriedades particularmente vantajosas para usoem gêneros alimentícios, com os termos produto alimentício e gêneros ali-mentícios sendo equivalentes de acordo com a invenção. Em um aspectoadicional, a presente invenção refere-se então também a gêneros alimentí-cios e suplementos de dieta que compreendem a inulina previamente descri-ta. Os termos gêneros alimentícios incluem de acordo com a presente inven-ção ambos gêneros alimentícios para humanos e gêneros alimentícios paraanimal ou alimento para animal. Os suplementos de dieta incluem suplemen-tos de dieta para humanos e para animais.

Um gênero alimentício particularmente preferido é selecionadode produtos de laticínio, iogurtes, sorvetes, sorvetes à base de leite, guarni-ções à base de leite, pudins, milkshakes, creme de ovos, queijo, barras decereais, barras de energia, barras de café da manhã, doce, produtos de pa-daria, crackers, bolachas, biscoitos, cereais, lanches, chá gelado, sorvetefeito de suco de fruta, bebidas diet, bebidas acabadas, bebidas esportivas,bebidas de estamina, misturas de bebida energética para suplementaçãodietética, alimento para criança e bebê, suco de laranja suplementado comcálcio, pão, croissants, cereais para café da manhã, talharins, geléias, bis-coitos e chocolates sem açúcar, comprimidos mastigável de cálcio, produtosde carne, maionese, molhos para salada, manteiga de noz, refeições conge-ladas, molhos, sopas e refeições prontas para servir. O gênero alimentíciocompreendendo a inulina da invenção é com mais preferência um produtolaticínio, especialmente um iogurte. A inulina da invenção mostra um efeitoparticularmente bom sobre a estabilidade, a textura, o corpo e a sensaçãona boca de produtos laticínios, especialmente iogurte, possibilidades sendoiogurte ou bebidas de iogurte agitadas ou fermentadas no pote.

Outros produtos laticínios úteis de acordo com a presente inven-ção são creme, creme fresco, coalhada, manteiga, leite, especialmente leitedesnatado, soro de leite, leite azedo, bebida láctea ácida, queijo, tal comoqueijo cremoso, queijo mole, queijo fatiado, queijo duro, soro, leite em pó,bebidas à base de leite.

Um nível preferido de inulina em gêneros alimentícios, especial-mente em iogurte, é 0,2-5% em peso, de preferência 0,5-4,5% em peso deinulina seca, com base no peso total de todos os componentes do gêneroalimentício, laticínio ou iogurte.

Em uma modalidade.da invenção, o gênero alimentício é um gê-nero alimentício fabricado através de um processo de extrusão, tal como, porexemplo, um cereal de café da manhã.

Em um aspecto adicional, a presente invenção refere-se a pre-parações cosméticas que compreendem a inulina previamente descrita. Apreparação cosmética particularmente de preferência toma a forma de cre-mes, em particular cremes para a pele e face.

Em um aspecto adicional, a presente invenção também se refereao uso da inulina previamente descrita como adição em gêneros alimentí-cios, gêneros alimentícios funcionais e preparações cosméticas. O uso tam-bém se refere em particular a todos os gêneros alimentícios específicos epreparações cosméticas conforme acima mencionado.

Em ainda um aspecto adicional, a presente invenção refere-seao uso da inulina da invenção para a fabricação de uma composição farma-cêutica ou medicamento.

A inulina da invenção pode vantajosamente ser usada em gêne-ros alimentícios, gêneros alimentícios funcionais, composições farmacêuti-cas ou medicamentos que servem para modificar ou regular a composiçãoda flora bacteriana no intestino grosso, especialmente na região distai dointestino grosso, de humanos, mamíferos e outros vertebrados.

É da mesma maneira possível usar a inulina da invenção emgêneros alimentícios, gêneros alimentícios funcionais, composições farma-cêuticas ou em medicamentos que servem para modificar ou regular o pa-drão de fermentação de inulina no intestino grosso, especialmente na regiãodistai do intestino grosso, de humanos, mamíferos e outros vertebrados.

Um uso preferido adicional da inulina da invenção é o uso comosubstituto de gordura ou óleo e/ou como uma fibra de dieta em gêneros ali-mentícios, onde o termo "gênero alimentício" compreende pelo menos todosos gêneros alimentícios acima mencionados, especialmente todos os produ-tos laticínios acima mencionados. É vantajoso que as propriedades sensori-ais, especialmente a sensação na boca, sejam excelentes comparado cominulinas convencionais. Então, inulina da presente invenção pode ser tam-bém usada como um aumentador de propriedades sensoriais, especialmentecomo um aumentador de sensação na boca, em gêneros alimentícios.

Um uso adicional de inulina da invenção é o uso como um agen-te texturizante, agente de aumento de estabilidade, agentes de formação deviscosidade, especialmente em gêneros alimentícios e cosméticos. O termo"gênero alimentício" compreende pelo menos todos os gêneros alimentíciosacima mencionados, especialmente todos os produtos laticínio acima men-cionados.

Finalmente, a inulina da invenção pode ser usada em gênerosalimentícios, gêneros alimentícios funcionais, composições farmacêuticas ouem medicamentos que têm os efeitos vantajosos que seguem: efeitos dematerial áspero, regulagem de função intestinal, efeito prebiótico e/ou bifido-genicidade, absorção de minerais aumentada, por exemplo, de cálcio, mag-nésio e ferro, aumento em densidade mineral óssea, aumento no teor demineral do osso, aumento na massa óssea máxima, melhora em estruturaóssea, redução na perda de densidade mineral óssea, redução na perda deestrutura óssea, regulagem de metabolismo de lipídeo, estimulação do sis-tema imune, prevenção de câncer e redução do risco de câncer, prevençãode câncer do intestino grosso e redução do risco de câncer do intestinogrosso e prevenção de câncer de mama.

A invenção é explicada abaixo por meio de exemplos que nãopretendem restringir o conceito inventivo geral.ExemplosMétodos Gerais

1. Determinação de Frutano

1.1 Determinação de frutano através de hidrólise com exoinulinase

As soluções de inulina a serem medidas são preparadas pesan-do 50,0 +/- 5,0 mg de inulina precisamente em um frasco graduado de 1 ml.700 μΙ de H2O dd são adicionados para dissolver. A amostra é então agitadaa fim de separar o material de amostra bem como possível da base do reci-piente, e é então posta em um banho de água quase fervente (~99°C) por 8minutos. Durante a incubação, o frasco graduado é agitado a cada 30 se-gundos. Após a incubação, a amostra é deixada esfriar para temperaturaambiente e é então levada até a marca de 1 ml com H2O dd. A solução deamostra tem uma concentração de inulina de 5,0 +/- 0,5%.

Para determinação de açúcar antes da digestão, 200 μΙ são re-movidos e congelados a -20°C. Antes da medição de açúcar, esta amostra édescongelada em temperatura ambiente, misturada, dissolvida agitando a140 rpm em um bloco de aquecimento a 95°C por 5 minutos e centrifugada a4000 rpm por 2 minutos. Para a hidrólise, 50 μΙ de solução de inulina de a-proximadamente 5% de resistência são postos na mistura de digestão con-sistindo em 50 μΙ de citrato de Na a 1M pH 4,6, 25 μΙ de exoinulinase (Me-gazyme International Ireland, Ltd. Wicklow, Ireland, artigo No. E-EX01, 2,5U/μΙ) e 375 μΙ de H2O dd. A digestão é misturada e centrifugada a 4000 rpmpor 1 minuto. A digestão é então incubada em um bloco de aquecimento a40°C por 4 horas. Todas as amostras digeridas são congeladas a -20°C. An-tes da medição de açúcar, essas amostras são descongeladas em tempera-tura ambiente, misturadas e centrifugadas a 4000 rpm por 2 minutos. Para amedição de frutose, uma diluição 1:10 é preparada adicionando 10 μΙ de di-gestão a 90 μΙ de H2O dd.

Para determinar a frutose e a glicose liberadas na digestão, umamedição fotométrica de glicose e frutose é realizada em todas as amostrasconforme descrito sob "determinação de açúcar (glicose, frutose, sucrose)".Além de glicose e frutose, também sucrose é determinada na amostra antesda digestão.

A solução de inulina de resistência a 5% não-diluída é usadapara medição de açúcar antes da digestão. 10 μΙ desta solução são adicio-nados a 200 μΙ de tampão de medição. Para medição de glicose nas amos-tras digeridas, 10 μΙ das amostras não-diluídas são adicionados a 200 μΙ detampão de medição. Para medição de frutose nas amostras digeridas, 10 μΙde amostras diluídas 1:10 são adicionados a 200 μΙ de tampão de medição.

O cálculo é baseado, como na determinação de açúcar, em umcoeficiente de extinção molar de 6,23 1*mmol"1*cm~1 para a conversão deNADP em NADPH. A concentração de glicose e frutose presentes antes dadigestão é subtraída das concentrações de glicose e frutose nas amostrasdigeridas. Da mesma maneira, a glicose e a frutose que seriam liberadas dasucrose hidrolisada presentes na amostra antes da digestão são subtraídas.

As concentrações de frutose e glicose formadas durante a diges-tão de inulina são então obtidas. O teor de frutano é obtido através da adiçãodos teores de glicose e frutose e com inclusão do fator 162/180 para conver-são das hexoses livres medidas nas hexoses ligadas no frutano.2. Determinação de açúcar (glicose, frutose e sucrose)

Os teores de glicose, frutose e sucrose foram determinados a-través de fotometria em um ensaio enzimático através de conversão deNADP (nicotinamida adenina dinucleotídeo fosfato) em NADPH (nicotinami-da adenina dinucleotídeo reduzida). O caráter aromático do anel nicotinami-da é perdido na redução, e então o espectro de absorção é mudado. Estamudança no espectro de absorção pode ser detectada através de fotometria.

Glicose e frutose são convertidas por meio da enzima hexocina-se e adenosina trifosfato (ATP) em glicose-6-fosfato e frutose-6-fosfato. Aglicose-6-fosfato é então oxidada pela enzima glicose-6-fosfato desidroge-nase em 6-fosfogluconato. NADP+ é reduzido em NADPH nesta reação, e aquantidade de NADPH formada é medida através de fotometria. A razão deNADPH formado para a glicose presente no extrato é 1:1, de modo que oteor de glicose pode ser calculado do teor de NADPH usando o coeficientede extinção molar de NADPH (6,23 1 mmol"1 cm"1) de acordo com a lei deLambert-Beer.

Após a oxidação da glicose 6-fosfato estar completa, a frutose 6-fosfato que é da mesma maneira produzida na solução é convertida pelaenzima fosfoglucoisomerase em glicose 6-fosfato, que por sua vez é oxidadaem 6-fosfogluconato. A razão de frutose e a quantidade de NADPH formadaé também 1:1.0 teor de frutose é calculado a partir da quantidade de NAD-PH formado, conforme descrito para glicose.

Subseqüentemente, a sucrose presente no extrato é clivada pelaenzima sucrase (da Megazyme) em glicose e frutose. As moléculas de glico-se e frutose liberadas são então convertidas pelas enzimas acima mencio-nadas na reação dependente de NADP+ em 6-fosfonogluconatò. Duas molé-culas de NADPH são formadas na conversão de uma molécula de sucroseem 6-fosfogluconato. A quantidade de NADPH formado é da mesma manei-ra medida através de fotometria, e o teor de sucrose é calculado a partir delausando o coeficiente de extinção molar de NADPH.

Uma solução de inulina de 5% de resistência conforme descritosob "Determinação de frutano através de hidrólise com exoinulinase" é usa-da para a medição de açúcar. 10 μΙ desta solução são adicionados a 200 μΙde tampão de medição. A medição acontece como determinação duplicataem placas de microtitulação usando os fotômetros SPECTRAmax (MolecularDevices). Todas as soluções de enzima usadas são feitas em tampão demedição consistindo em HCI de imidazol a 50 mM pH 6,9, MgCI2 a 2,5 mM,ATP a 1 mM e NADP a 0,4 mM. A conversão de NADP em NADPH é segui-da em um comprimento de onda de 340 nm.

A determinação de glicose acontece adicionando 2 μΙ de misturade hexocinase (de levedura, 0,3 U/μΙ) e glicose-6-fosfato desidrogenase (delevedura, 0,14 U/μΙ). Após conversão da glicose estar completa, 2 μΙ de fos-foglicose isomerase (de levedura, 0,14 U/μΙ) são adicionados para determi-nar frutose. Quando a frutose está completamente convertida, 2 μΙ de sucra-se (da Megazyme, 0,2 U/μΙ) são adicionados para clivar a sucrose presente.O cálculo de glicose, frutose e sucrose acontece conforme descrito.3. Análise da distribuição de peso molecular

3.1 Cromatoarafia de permeacão em gel com espalhamento de luz e detec-ção de índice refrativo (sistema GPC-RI-MALLS)

As inulinas/frutanos são dissolvidos em água extrapura em umaconcentração de 1% (p/v). Entre 5 e 10 mg são pesados em 2 ml de recipi-entes Eppendorf. As soluções são aquecidas a 95°C em um agitador térmico(Eppendorf) a 300 rpm por 10 minutos. Após esfriar para temperatura ambi-ente, soluções a 0,5% (p/v) são preparadas através de diluição 1:2 com á-gua extrapura. Filtragem acontece através de filtros centrífugos de 0,22 μιτι(Spin-x, Costar) a 4000 rpm por 2 minutos. Os polímeros são analisados u-sando um Dionex System (Dionex Corporation, Sunnyvale, USA) consistindonos componentes que seguem: Bomba de HPLC P680, AutoamostradorAS50, compartimento de coluna termoajustada TCC-100. Um detector deespalhamento de luz DAWN-EOS (Wyatt Technology, Santa Barbara, USA) ~com AO = 690 nm e 15 detectores na faixa de ângulos de 25,9 a 163,3° efluxo de célula K5 acoplado a um detector Shodex RI-101 (Shodex Denko,K.K., Kanagawa, Japão) é usado para a detecção. Os polímeros são fracio-nados em uma pré-coluna e três colunas (Suprema 30, Suprema Lux 1000,Suprema 30000) (Suprema-Gel, PSS Polymer Standards Service GmbH,Mainz, Alemanha). 90 μΙ de solução são injetados. O fracionamento aconte-ce em uma temperatura de 30°C e uma taxa de fluxo de 0,8 ml/minuto comNaNO3 a 0,05M como eluente. O programa Astra V 5.1.8.0 (da Wyatt Tech-nology, Santa Barbara, USA) é usado para analisar a distribuição de pesomolecular das amostras.

3.2 Cromatografia de permeacão em gel com detecção de índice refrativo(sistema GPC-RI)

As inulinas são dissolvidas no eluente (DMSOn-NaNO3 a 90 mM)em uma concentração de 1% (p/v) agitando suavemente em um agitadortérmico a 95°C por 10 minutos. Após breve resfriamento, a solução de inuli-na é diluída para 0,1% com eluente (100 μΙ de solução de inulina + 900 μΙ deeluente) e imediatamente posta em um autoamostrador a 60°C. Os políme-ros são analisados usando o aparelho que segue: Bomba Dionex P580, au-toamostrador AS50, forno de coluna Dionex modelo 585 (Dionex GmbH, Ids-tein, Alemanha), detector Shodex RI-71 (Shodex/Shoko Co., LTD., Tóquio,Japão). Os sistemas são controlados pelo software Chromeleon (DionexGmbH, Idstein, Alemanha). Os polímeros são fracionados em um PSSGRAM, 10 μ, pré-coluna e a PSS GRAM 3000, 10 μ e PSS GRAM 100, co-lunas de separação de 10 μ (PSS Polymer Standards Service GmbH, Mainz,Alemanha). 50 μΙ da solução de inulina a 0,1% são injetados para a análise.O fracionamento acontece no forno de coluna em uma temperatura de 60°Ce com uma taxa de fluxo de 0,7 ml/min com o eluente DMS0+NaN03 a 90mM. Para determinar as massas moleculares, o sistema é calibrado com ospadrões dextrano que seguem (No. do produto 31430, Fluka Riedel-deHaen,Seelze, Alemanha): dextrano T1 (Mw 1270), T5 (Mw 5220), T12 (Mw 11600),T25 (Mw 23.800), T50 (Mw 48.600), T80 (Mw 80.900), T150 (Mw 147.600),T270 (Mw 273.000), T410 (Mw 409.800), T670 (667.800). O programa V.6.20compacto PSS" WinGPC (PSS, Mainz, Alemanha) é usado para analisar adistribuição de peso molecular das amostras.

4. Determinação do teor de água

O teor de água é determinado usando um titulador AQUA 40.00Karl-Fischer (da analytikjena AG). Hydranal-Coulomat AG (Riedel-deHãen,artigo No. 34 863) é usado como anolito. A substância de referência usada édiidrato de tartrato de sódio dibásico (Riedel-deHãen, artigo No. 32 323) comum teor de umidade de 15,61-15,71%· 10-20 mg de amostra são pesadosem garrafas de amostra de 5 ml (N20-5DIN, Machery-Nagel, artigo No. 70204.36), as garrafas são fechadas com crimped caps (N20 TS/ao, Machery-Nagel, artigo No. 702 815) e o teor de água da amostra é determinado usan-do o titulador Karl-Fischer.

5. Determinação do grau de ramificação

As inulinas são inicialmente permetiladas e o término da metilação échecado através de espectroscopia ATR-IR (vide abaixo quanto a aparelho econdições). As amostras foram então decompostas por hidrólise ácida (aná-Iise de metilação padrão) ou alternativamente através de degradação reduti-va em seus blocos de formação de monômero, e a composição molar relati-va foi determinada através de cromatografia de gás (vide abaixo quanto aaparelho e condições) e espectroscopia de massa por cromatografia de gás(GC-MS, vide abaixo quanto a aparelho e condições) dos alditol acetatosparcialmente metilados e anidroalditol acetatos.ATR-IR

Aparelho: Bruker Tensor 27Técnica: Diamond ATRGC:

Aparelho: Cario Erba HRGC 5160 Mega Series

Coluna: Chrompack CPSN8CB (25 m) com lacuna de retenção(1,5 m)

Dl: 0,25 mm FD: 0,25 gmGás veículo: He (80 kPa)Detector: FID

Injetor: na coluna

Integrador: Merck Hitachi D-2500 Chromato-Integrator

Programa de temperatura: 60°C (1 min isotérmico), 10°C/min a 170°C, 3o/min a 230°C, 20°C/min a 290°C (20 minutos isotérmico)GC-MS _

GC: Aparelho: Agilent 6890 GCColuna: HP-5, 30 m

Gás veículo: HeInjetor: Split 5:1

Prog. de Temp.: 60°C (1 min isotérmico), 10°C/min a 170°C, 3°C/min a230°C, 20°C/min a 290°C (20 min isotérmico)

MS: Aparelho: espectrômetro de campo de setor de foco duplo JEOLGCmate

Modo: El, 70 eV

Avaliação: AMDIS32, Wsearch32

5.1 Permetilacão

(de acordo com Ciucanu e Kerek/Ciucanu, I. & Kerek, F. (1984)"A simple and rapid method for the permethylation of carbohydrates", Car-bohydr. Res. 131, 209-217).

Cerca de 50 mg de amostra são dissolvidos em 2,5 ml de sulfó-xido de dimetila. Então 3 eq/OH de hidróxido de sódio finamente moído e 3eq/OH de iodeto de metila são adicionados e agitados em temperatura am-biente por 24 horas. Então metade da quantidade de cada um dos reagentesé adicionada novamente. As amostras são subseqüentemente dialisadascontra água destilada por quatro dias (Dialysemembran Spectra/Por MWCO3500, Spectrum Laboratories, Rancho Dominguez, CA, USA) e secas comcongelamento. O término da metilação é checado através de espectroscopiaATR-IR. A vibração de estiramento de OH na faixa de 3300-3400 cm"1deve ter desaparecido se houver permetilação.

5.2 Análise de metilação padrãoHidrólise

Cerca de 2 mg de inulina permetilada são misturados em um25 frasco V de 1 ml com 0,9 ml de ácido trifluoracético a 0,5M e hidrolisadosatravés de agitação a 90°C por uma hora. Após a solução ter esfriado ela éevaporada até secar em uma corrente de nitrogênio. Resíduos de ácido tri-fluoracético são removidos através de codestilação com tolueno.Redução

A amostra hidrolisada é misturada com 500 μΙ de uma soluçãode NaBD4 a 0,5 M em NH3 a 2M e aquecida a 60°C por Uma hora. Após es-friar, boroidreto de sódio em excesso é decomposto através da adição dealgumas gotas de ácido acético glacial. Borato resultante é removido atravésde co-destilação com ácido acético metanólico a 15% de resistência.Acetilação

Os álcoois de açúcar parcialmente metilados resultantes da re-dução são misturados com 200 μΙ de anidrido acético e 50 μΙ de piridina eacetilados a 90° C por 2 horas. A solução é esfriada e então solução de bi-carbonato de sódio saturada é adicionada até que nenhuma formação degás adicional seja observada. Ela é então extraída quatro vezes com 15 mlde diclorometano cada vez. As fases orgânicas combinadas são lavadasduas vezes com 15 ml de solução de NaHC03 saturada cada vez, uma vezcom 20 ml de HCI a 0,1 M frio e uma vez com 25 ml de água destilada. A so-lução é então seca em cloreto de cálcio e concentrada a vácuo, e absorvidaem diclorometano para a medição de GC.5.3 Degradação redutiva

Cerca de 1 mg da amostra permetilada é dissolvido em 500 μΙ dediclorometano em um frasco de vidro de tampa de atarraxar, misturado com6 eq/glicosídeo ligado em trietilsilano e 4 eq de triflato de TMS e agitado emtemperatura ambiente por 2 horas. Após adição de 20 μΙ de anidrido acético,agitação é continuada em temperatura ambiente por 2 horas. A reação éentão parada através da adição de solução de NaHCO3 aquosa saturada eagitação é continuada por 1 hora. Processamento acontece através de ex-tração com diclorometano e subsequente lavagem das fases orgânicascombinadas com solução de NaHCO3 aquosa saturada e água destilada. Asolução é finalmente seca em cloreto de cálcio, concentrada em uma corren-te de nitrogênio e absorvida em diclorometano para a medição de GC.

5.4 Análise qualitativa e quantitativa

Os produtos de degradação foram analisados quantitativamenteatravés de cromatografia de gás com injeção em coluna e detector de ioni-zação de chama (FID). As áreas de pico foram corrigidas de acordo com suaresposta de carbono eficaz. Os picos foram designados com base em seuespectro de massa (GC-MS) e os tempos de retenção de amostras de com-paração conhecidas.

6. Calorimetria de varredura diferencial de inulina40 ml de uma solução de inulina de 15% de resistência (p/v) fo-ram preparados em 50 ml de tubos de polipropileno graduados (30,0 χ 115mm, da Greiner1 número de ordem 227261). Isto foi feito adicionando o res-pectivo pó à água duplamente destilada e agitação. Subseqüentemente, to-das as suspensões preparadas são postas em um banho de água (95°C) edissolvidas agitando várias vezes. Após 20 minutos, é estabelecido visual-mente que todas as suspensões foram completamente dissolvidas. As solu-ções preparadas são então divididas em partes iguais para dois tubos depolipropileno graduados de 50 ml (30,0 χ 115 mm, da Greiner, número deordem 227261) e imediatamente congeladas profundamente em nitrogêniolíquido. As soluções congeladas foram então secas por congelamento pordois dias (teor de água de cerca de 10%) e moídas em um pilão. O teor deágua das amostras é determinado usando um titulador Karl-Fischer automá-tico (vide métodos gerais 4 abaixo).

Para uma medição de DSC, cerca de 10 mg de substância secade inulina são pesados em um cadinho de aço inoxidável (volume de 50 μΙ),o peso exato é encontrado, e 30 μΙ de água destilada são adicionados. Oscadinhos são então hermeticamente vedados. Um cadinho de aço inoxidávelvazio é usado como referência. A amostra é aquecida em um aparelho deDSC com autoamostrador (Perkin Elmer; Diamond) de 10-160°C em umataxa de aquecimento de 10°C/min. A análise de dados é realizada pelo pro-grama software PYRIS 7.0 (Perkin Elmer, 63110 Rodgau-Jugesheim, Ale-manha). Isto conferiu determinação de T0 (início) e a entalpia livre dH.7. Determinação de viscosidade

Soluções de inulina aquosa de várias concentrações (peso porvolume de água destilada) foram preparadas agitando a 98°C, e as soluçõesclaras foram medidas imediatamente após um tempo de dissolução não ex-cedendo 13 minutos. As medições foram realizadas em um BOHLIN GeminiAdvanced Rheometer (Malvern Instruments; Herrenberg, Alemanha) usandoo modo de viscosimetria isotérmica (90°C) em uma sistema de~cone-placa„CP4°/40 mm. A lacuna de medição foi coberta com uma camada de óleo deparafina extraleve. Uma taxa de cisalhamento de 10 s"1 por 60 s com umtempo de relaxamento de 10 s foi usada para pré-cisalhamento. O cisalha-mento foi medido em etapas logarítmicas em um modo de taxa de cisalha-mento. A taxa de cisalhamento inicial era 20 s\ a taxa de cisalhamento finalera 30 s"1 em um aumento com um tempo de detenção de 20 s e um tempode integração de 10 s. Os dados são baseados nos valores médios na faixade a partir de 20 s"1 a 30 s"1 e são as médias de três medições independen-tes por ponto de dados. Todas as medições especificadas como discrepan-tes não são incluídas nos valores médios. A definição de "discrepante" acon-tece pelo chamado "método quartile". Essas discrepâncias conferidas sendoespecificadas como todas as medições que estão fora do critério de faixa Q2- k*(Q3-Qi) ^ nenhuma discrepância < Q2 - k* (Q3-Qi) (SACHS, Lothar: An-gewandte Statistik , 10a edição, Springer-Verlag Berlin (2002), pp. 364 et seq.).Qi e Q3 aqui são o 1o quartil e o 3o quartil, respectivamente, e Q2 é a média(50% quartile) dos dados medidos. Um valor de 1,5 foi usado para o fator k.8. Determinação de resistência de gel e comportamento viscoelástico

70 g de uma suspensão a 17% em peso de inulina em água(destilada) foram postos em um copo de medição MV de um viscosímetroHaake Rotovisco VT 550. Um agitador de pá foi então inserido e montado noaparelho preaquecido (90°C, revestimento de aquecimento). A mistura foientão aquecida com agitação a 128 rpm por 15 minutos.

Após 15 minutos, a mistura foi transferida a 90°C para um reci-piente que consistia em uma base e uma parede composta de dois anéiscilíndricos de folha acrílica (cada uma de 20 mm de altura, 30 mm de diâme-tro) que foram postos um em cima do outro e foram unidos por meio de umafita adesiva (19 mm de largura). A mistura foi introduzida no recipiente sembolhas até que o nível fosse cerca de 5 mm abaixo da borda superior. O re-cipiente foi então hermeticamente coberto com uma folha de alumínio e dei-xado descansar em temperatura ambiente (23°C) da noite para o dia.

~ A resistência do gel foi medida após armazenamento em tempe-ratura ambiente (23°C) por cerca de 20 horas usando um analisador de tex-tura TA XT2. Para tornar a medição da resistência de .gel possível em umasuperfície não-seca, lisa, primeiro a fita adesiva que mantida dos dois anéiscilíndricos do recipiente juntos foi removida. O gel foi então dividido com umalâmina de barbear entre os dois anéis de modo que a parte inferior do gelexibia uma superfície lisa.A resistência do gel foi medida com um analisador de textura TAXT2 por um uma cúpula de nível (diâmetro 24,5 mm) penetrando (1 mm) nogel. Os ajustes no analisador de textura foram como segue:Princípio de medição: força em direção de pressãoVelocidade para a frente: 2 mm/sVelocidade de teste: 2 mm/sValor de disparada: 0,01 NVelocidade reversa: 2 mm/sMovimento: 1 mm

O valor máximo com uma penetração única da cúpula em new-tons é indicado.

Exemplo 1

Caracterização da inulina a partir de raízes de alcachofra

1 .Cultivo das plantas de alcachofra

As plantas de alcachofra da variedade Madrigal foram cultivadasna vizinhança de Valência, Espanha. As sementes foram semeadas em abrilde 2005 e as plantas foram colhidas em agosto/setembro 2005. As raízesforam separadas da parte acima do solo, tiveram solo aderente retirado esecas. As raízes foram então transportadas sem esfriamento da Espanhapara a Alemanha. As raízes foram armazenadas a -20°C até que inulina fos-se extraída.

2. Preparação de inulina a partir de raízes de alcachofra

Raízes de plantas de alcachofra da variedade Madrigal de cercade 4-5 meses de vida são usadas para preparar a inulina, 60 kg de raízestêm os constituintes do solo aderidos a elas retirados através de lavagem noestado de congelamento profundo com um limpador de alta pressão(Kárcher 240) antes delas serem processadas mais em lascas em um pica-- dor (picador de jardim Gloria Universal natura 2800L). As lascas são postas-em um extrator aquecido encamisado com agitador "gate" contendo água preaquecida para 80-90°C. A quantidade total de água adicionada é 180 kg.O pH do extrato é ajustado para 9,0 através da adição de NaOH. Após a-quecimento rápido da malha de lasca de 40°C a 80-85°C através do reves-timento do extrator, a malha é agitada a 80-85°C por cerca de 60 minutos aim de extrair a inulina das lascas (frutano). Após este tempo, o extrato brutoé separado das lascas através de bombeamento.

O extrato bruto é descobrido em um processo de dois estágiosatravés de formação de um total de 0,7 g de Mg(OH2)/"! 00 ml de extrato. Noprimeiro estágio, 3400 g de MgSO4 * 7 H2O (equivalente a 0,5 g deMg(OH2)/"! 00 de extrato) são dissolvidos em 170 L de extrato colorido mar-rom-escuro com agitação durante o curso de 10 minutos. Subseqüentemen-te, 1015 g de Ca(OH)2 de resistência a 96% são adicionados como suspen-são em 3 L de água e agitados por 10 minutos. Um pH de 9,4 é ajustado. Amistura de precipitação toda é quantitativamente clarificada em um separa-dor de placa (tipo GEA Westfalia SC-606-076) durante o curso de 120 minu-tos. A solução de extração descoloria tem uma cor amarelo-pálida e é livrede materiais que causam turbidez. Uma fase sólida na forma de uma pastaespessa é obtida como fração de sedimento removido. Toda a etapa de des-coloração é repetida na solução de extração obtida desta maneira e com-preendendo 150 L com MgSO4 * 7 H2O (equivalente a 0,2 g de Mg(OH2)/100ml de extrato) de 410 g de Ca(OH)2 de resistência de 96% como suspensãoem 1,5L de água. Toda a mistura de precipitação é quantitativamente clarifi-cada em um separador de placa durante o curso de 30 minutos. A solução20 de extração descobrida com um pH de 9,4 é clara, tem uma cor amarelopálido e é livre de materiais que causam turbidez. Um centrifugado na formade uma pasta espessa é novamente obtido como fração de sedimento.

Inulina sólida é obtida do extrato abrilhantado deste modo atra-vés de esfriamento em uma temperatura de 4°C durante um período de 48horas. A inulina é obtida como um sedimento tipo lodo através de deposiçãocentrífuga usando o separador de placa.

O sedimento é purificado mais duas vezes em sucessão namesma concentração conforme apresentado no extrato abrilhantado atravésdissolução da inulina em água quente e precipitação renovada através dearmazenamento a 2°C por 48 horas. O sedimento de inulina finalmente obti-do é novamente completamente dissolvido na mesma concentração confor-me previamente usado em água com entrada de calor. A solução quente éentão filtrada através de um filtro de placa com camadas de filtro. A inulina ésubseqüentemente precipitada através de esfriamento da solução (2°C, 48h) e o produto final é seco com congelamento.

A Figura 1 mostra uma representação diagramática do progres-so da extração.

Durante o processo de extração, a distribuição de polímero foianalisada após as etapas de extração e purificação individuais através decromatografia de permeação em gel com detecção de índice refrator e cali-bragem com padrões dextrano (GPC-RI, vide Método 3.2 em "Métodos Ge-rais"). Como evidente a partir da Figura 2, a distribuição de polímero de ex-trato (B) após a extração com água quente é comparável com aquela nasraízes lavadas (A). A Figura 2 mostra uma análise GPC-RI da distribuição depolímero nas raízes de alcachofra lavadas (A) e o extrato após a extraçãocom água quente de inulina (B).

Análise da distribuição de polímero após o fracionamento a frio(4°C) da inulina mostrou que uma fração de inulina de peso molecular alto(C) foi separada de uma fração de peso molecular baixo (D) (Figura 3). AFigura 3 mostra uma análise GPC-RI da distribuição de polímero no extratoapós a extração com água quente de inulina (B), no sedimento após a preci-pitação de inulina a 4°C (C) e na série superior obtida após centrifugação dainulina após precipitação (D).

Um enriquecimento adicional de inulina de alto peso molecular euma depleção de substâncias de baixo peso molecular, especialmente mo-no· e dissacarídeos, foram conseguidos através de reprecipitação da fraçãode inulina de alto peso molecular (Figura 4). A Figura 4 mostra uma análiseGPC-RI da distribuição de polímero na inulina precipitada a 4°C (C)1 na se-dimentação após a primeira reprecipitação (F) e na fase clara I após a pri-meira reprecipitação (E).

Inulina com um grau menor de polimerização permaneceu nafase clara da mesma maneira após a precipitação renovada de inulina após afiltragem em água quente (Figura 5). A Figura Amostra uma análise GPC-RI dadistribuição de polímero na solução de inulina após filtragem (G)1 a inulina sedi-mentada após a cristalização (K) e a fase clara Ill após a cristalização (H).3. Determinação da pureza da inulina preparadaA pureza da inulina de aleachofra obtida na seção 2 foi determi-nada através da determinação dos teores de frutano e água do material secocom congelamento. O teor de água determinado para a inulina de alcachofrafoi 2,9% (vide método "Determinação do teor de água"). O teor de frutano foideterminado através de hidrólise da inulina com a enzima exoinulinase (videmétodo "Determinação de frutano através de hidrólise com eixoinulinase"). Apureza baseada em matéria seca (DM) foi encontrada a partir do teor de fru-tano e o teor de água. Pureza = teor de frutano χ 100 / (100 - teor de água).

Como é evidente a partir da Tabela 1, o grau médio de purezada inulina de alcachofra preparada é 96% da matéria seca (DM).

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Tabela 1: Determinação da pureza da inulina de alcachofra preparada

4. Determinação de peso molecular através de GPC-RI-MALLS

Soluções aquosas a 0,5% (p/v) foram preparadas a partir da inu-lina de alcachofra purificada obtida na seção 2, e das amostras de referênciacompradas da Raftline HP (da Orafti1 batelada: HPBNH4DNH4) e inulina detubérculos dahlia (da Sigma, número do artigo I-3754, batelada: 75H7065) ea distribuição da massa molecular das inulinas foi determinada através decromatografia de permeação em gel (vide método 3.1). Esta distribuição émostrada na Figura 5, e as massas moleculares (anidrofrutose = 162 g/mol)e comprimentos de cadeia médios calculados a partir delas foram sumariza-dos na Tabela 2.

Análise da distribuição de peso molecular usando o sistemaGPC-RI-MALLS resultou em uma massa molecular ponderai média Mw de13.995 g/mol e uma massa molecular numérica média Mn de 11.620 g/molpara a inulina de alcachofra. Isto corresponde a um comprimento de cadeiamédio de 86 para DP w e de 72 para DPn. Os comprimentos de cadeia dainulina de alcachofra purificada são em média distintamente mais longos doque aqueles de Raftiline HP (DPW=36, DPn=29) e de inulina de dahlia(DPW=41, DPn=33). Isto é também refletido nas massas moleculares míni-mas e máximas, que são distintamente maiores para inulina de alcachofra.

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Tabela 2: Distribuição de massa molecular de várias inulinas

5. Resultados de determinação de glicose, frutose e sucrose

A proporção de glicose, frutose e sucrose na inulina de alcacho-fra obtida na seção 2 foi determinada através de determinação fotométricados açúcares em soluções de inulina de 5% de resistência conforme descritono Método 3 ("Determinação de açúcar").

Como é evidente a partir da Tabela 4, os teores de glicose, fru-tose e sucrose na inulina de alcachofra purificada são menos do que 0,1%do pó de inulina.

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Tabela 3: Teor de glicose, frutose e sucrose em inulina de alcachofra purifi-cada

6. Grau de ramificação

6.1 Análise de metilacão padrão

O grau de ramificação foi medido em uma amostra de inulina dainvenção tendo um DPw de 90 e um DPn de 84.

Os exemplos comparativos usados foram Raftline HP (da Orafti,bateladas HBPN03DN03 e HPBNH4DNH4) e inulinas de tubérculos dahlia(da Sigma, número do artigo I-3754, batelada: 022K7045 ou 75H7065) e raí-zes de alcachofra Jerusalem (Sigma, número do artigo I-2880 bateladas111H7045 e 88F7220) o grau de ramificação foi determinado por meio deanálise de metilação (vide Métodos Gerais, 5.1).

Hidrólise, redução e acetilação de frutanos 2-1-ligados resulta-ram em 1,2,5-tri-0-acetil-3,4,6-tri-0-metil-D-manitol e -sorbitol. Os radicaisfrutosila terminais deram 2,5-di-0-acetil-1,3,4,6-tetra-0-metil-D-manitol e-sorbitol. Uma unidade glucopiranosila terminal resulta em 1,5-di-O-acetil-2,3,4,6-tetra-O-metil-D-sorbitol. Blocos de formação adicionalmente ramifi-cados na posição 6 dão os 1,2,5,6-tetra-0-acetil-3,4-di-0-metilalditóis.

Além dos produtos indicando ligação 2-1, era possível detectarem todas as amostras de frutano aqueles dos blocos de formação de frutosee glicose terminais. Os cromatogramas mostraram adicionalmente dianidridodifrutose (DFDA, aproximadamente 3% em mol) que é formado da remoçãode TFA em uma corrente de nitrogênio de frutose 2-1 ligada.

A partir dos espectros de massa foi adicionalmente possível i-dentificar produtos resultantes de uma ligação 2-1,6 em todas as amostras.Compostos 1,3- e 1,4-acetilados foram também identificados, que poderiamsurgir com ramificações nas posições 3 e 4, respectivamente, mas podemtambém derivar de metilação incompleta. A ocorrência não-específica deprodutos 1,3- e 1,4-acetilados é um indicador de submetilação. Supondo queposição 6 seja afetada por submetilação ao mesmo ponto que as posições 3e 4, a proporção não-específica (média de compostos 1,3-Ac e 1,4-Ac) ésubtraída da proporção de unidades de frutose ramificadas 2-1,6. A Tabela 4abaixo mostra os resultados disto.Tabela 4

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Avaliação da análise de metilação revelou um grau de ramificaçãode 1,4% em mol para a inulina de alcachofra. O grau de ramificação desta inu-Iina é então distintamente maior do que aquele nas inulinas das amostras dereferência de chicória (Raftiline HP), alcachofra dahlia e Jerusalem.6.2 Degradação redutiva

De acordo com a análise de metilação padrão, é possível identi-ficar através de clivagem de glicosídeo redutiva os produtos corresponden-tes de glicopiranose terminal (1,5-anidro-2,3,4,6-tetra-0-metil-D-sorbitol), defrutofuranose terminal (2,5-anidro-1,3,4,6-tetra-0-metil-D-manitol e -sorbitol)e frutofuranose 2-1 ligada (1-0-acetil-2,5-anidro-3,4,6-tri-0-metil-D-manitol e-sorbitol) em todas as amostras. É também possível para todos os frutanosdetectar a partir dos espectros de massa os produtos resultantes quandouma ligação 2-1,6 está presente (1,6-di-0-acetil-2,5-anidro-3,4-di-0-metil-D-manitol e -sorbitol). Ainda, 2,6-di-0-acetil-1,5-anidro-3,4-di-0-metilmanitolacontece, a qual é um produto de rearranjo resultante de unidades de fruto-se 2-1,6-ligada.

Mais uma vez, produtos de submetilação não-específica (vide6.1) foram detectados na GC-MS. Uma pequena proporção de alditóis decadeia aberta não-separados também apareceu. Essas pequenas propor-ções foram levadas em consideração na ligação 2-1. Subtração das propor-ções não-específicas resulta em um grau de ramificação (=proporção de fru-tose 2-1,6-ligada) de 1,7% em mol para a inulina da invenção.

Exemplo 2

Propriedades da inulina de raízes de alcachofra

Todas as investigações que seguem referem-se à inulina de al-cachofra da invenção previamente detalhada na Tabela 2. As inulinas Raftili-ne HP e Dahlia são da mesma maneira aquelas detalhadas no Exemplo 1.1. Investigação de calorimetria de varredura diferencial de inulina

Análise calorimétrica de varredura diferencial de inulina (quantoao procedimento: vide métodos) mostrou diferenças distintas entre os váriosmateriais (vide Tabela 5) em relação ao comportamento de fusão. Ambasamostras de inulina diferenciavam muito em relação à entalpia de fusão. Istoera acima de 25,2 J/g para inulina de alcachofra e apenas 22,8 J/g para Raf-tiline HP. As diferenças em TiníCio (T0) eram da mesma maneira pronuncia-das. A temperatura de fusão inicial para inulina de alcachofra era 41,4°C queera mais do que 3°C maior do que para a inulina de chicória comparativa.Esta estabilidade térmica aumentada de inulina de alcachofra pode ser umavantagem considerável em certos processos térmicos no setor de produtosalimentícios, porque a inulina de alcachofra é distintamente menos sensívela altas temperaturas do que a inulina de chicória.

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Tabela 5

2. Viscosidade

Tabela 6: Comparação da viscosidade dinâmica de inulina de chicória e inu-lina de alcachofra em água como uma função da concentração (T=90°C)

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Como é evidente a partir da tabela acima, ambas inulinas mos-traram em concentrações de até 24% (p/v) viscosidades muito baixas a 90°C(água = 1 mPas). A inulina da invenção se tornou viscosa em concentraçõesde 26% (p/v) e especialmente em 28%, enquanto Raftiline HP permaneceumuito similar em sua viscosidade para água até 28% (p/v).3. Tamanho de partícula após secagem por congelamento

A amostra seca por congelamento do exemplo 1 DPw = 86 foimoída em um moedor de faca (Grindomix GM200, Retsch Technologie Gm-bH, Haan, Alemanha) e o tamanho de partícula foi determinado através deanálise de peneira (máquina de peneira vibratória "Analysette 3" da Fritsch,freqüência 2.0, auxiliares de peneiramento: 8 bolas de ágata (10 mm0)/peneira, tempo de peneiramento 1-2 min, quantidade carregada cerca de50 g). O resultado é mostrado na Tabela 7 abaixo. Foi possível determinar odiâmetro de partícula médio através de análise de peneira como 108 pm.Uma inulina preparada em analogia ao Exemplo 1 e tendo um DPw de 93-94foi também seca por congelamento, moída em um moedor de faca e investi-gada através de análise de peneira (Tabela 8). Um tamanho de partículamédio de 160 pm resultou.Tabela 7: Análise de peneira de inulina DPw = 86:

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Tabela 8: Análise de peneira de inulina DPw = 94:

<table>table see original document page 45</column></row><table>Tabela 8: -continuação-

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4. Secagem por pulverização

A inulina (DPw = 86, Tabela 2) preparada no Exemplo 1, No. 2,foi,, após uma secagem por congelamento intermediária, redissolvida e entãoseca por pulverização em uma unidade de secagem por pulverização de lei-to fluidizado Glatt GPCG3.1. Para este propósito, inulina seca por congela-mento foi introduzida em água, aquecida para 85-90°C e dissolvida. A solu-ção aquecida foi seca com pulverização com temperatura de ar de saídavariável, e as propriedades do processo e propriedades do produto foramobservadas. A temperatura de entrada foi mantida constante a 120°C.

Tabela 9. Parâmetros de secagem por pulverização

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Uma granulação por pulverização (Teste 5) foi também realizadaem adição à secagem por pulverização. Os parâmetros de processo relevan-tes são detalhados na tabela abaixo. Inicialmente introduzidos como semen-tes de granulação foram 70 g de material seco por pulverização que foi pre-parado como segue: secador por pulverização Buchi B-191, alimentação: 20g de água e 4 g de inulina (DPW: 86), T (alimentação) = 80-90°C, T (entrada)= 120°C, T (ar de saída) = 93-94°C, taxa de aspirador 80%, taxa de bomba10%, bocal de fluxo de ar 450 l/h. Os grânulos resultantes eram de muitoboa qualidade em forma e consistência. A granulação foi possível até umatemperatura de ar de saída de 52°C.Tabela 10: Granulação por pulverização<table>table see original document page 47</column></row><table>

Uma análise de peneira conforme acima descrito revelou os di-âmetros de particular médios que seguem:Teste 2 85 μ mTeste 5 300 pmCristalinidade

Amostras de inulina em forma de pó foram preparadas sem pré-tratamento adicional em um veículo de amostra de 2 mm de espessura (pa-drão) entre duas películas de cobertura de PET. Um veículo de amostra de 1mm foi usado para amostra 2 (vide abaixo). As medições de raios χ foramrealizadas com um difractômetro de dois círculos D5000 da Bruker-AXS emtransmissões simétricas usando radiação de Cu-Ka monocromática (mono-cromador Ge(111)). Os registros foram feitos a 30 mA e 40 kV na faixa deângulo de 2Θ de 3-29° (largura da etapa Δ2Θ = 0,1°) e 29,5-104 (largura daetapa/A20 : 60 segundos.

Software baseado no método Ruland-Vonk (WAXS 7, desenvol-vido pelo Fraunhofer Institut für angewandte Polymerforschung, Potsdam(Alemanha), descrito no http://edocs.tuberlin.de//diss/2003/rihm_rainer.pdf,pp. 19 e seq.) foi usado para encontrar o grau de cristalinidade Xc, os tama-nhos de cristalinidade D(hki) e o parâmetro de desordem k, que é uma medidada perturbação do látice nos cristalitos, dos gráficos de difração. O gráfico dedifração para a amostra 2 (vide abaixo) foi usado como arquivo de back-ground amorfo. Frutose foi usada como base química, calculada com umadensidade de 1,65 g/cm3. Os tamanhos de cristalito D(hki) foram determina-dos a partir das meias-larguras das reflexões de raios χ pela fórmula Scher-rer nas duas primeiras interferências principais a 2Θ = 8o e 12°.

As amostras dos testes de secagem por pulverização 1 -5 deta-Ihadas acima, e as amostras que seguem, foram medidas:

Teste 6: Inulina com DPw = 86, preparada conforme descrito no Exemplo 1,

No. 2 e secam por congelamento.

Teste 7: Amostra 1 dissolvida em água a 80-90°C e seca por pulverizaçãosob as condições que seguem:

Secador por pulverização Buchi 190, T (alimentação) = 80-90°C,T (entrada) = 120°C, T (ar de saída) = 80°C, fluxo de ar 450 l/h, concentra-ção de inulina = 20% em peso.

Teste 8: Amostra 1 suspensa em água a 25°C e seca por pulverização sobas condições que seguem: ,

Secador por pulverização Büchi 190, T (alimentação) = 80-90°C,T (entrada) = 120°C, T (ar de saída) = 80°C, fluxo de ar 450 l/h, concentra-ção de inulina = 20% em peso.

Os graus medidos de cristalinidade e parâmetros de distúrbiossão indicados na Tabela 11 abaixo.

Tabela 11

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6. Formação de estrutura das inulinas após aquecimento em água

Porções de 15 ml de suspensões de 20% de resistência da inuli-na em água foram cada uma constituídas em béqueres de alumínio (béque-res RVA-3d da Winopal Forschungsbedarf GmbH; volume de cerca de 70 ml,diâmetro 38 mm), agitadas e equipadas com uma barra de agitação magné-tica e finalmente cobertas. As suspensões foram aquecidas usando um agi-tador multitérmico (VARIOMAG Multitherm 15 da H+P Labortechnik AG) comagitação. A temperatura foi controlada neste caso usando uma sonda PT100 (acessório para o VARIOMAG Multitherm 15) que ficou em um béquerde referência coberto com água destilada no bloco de aquecimento. O agita-dor multitérmico foi preaquecido de modo que a temperatura da amostra dereferência permaneceu estável a 90°C. As suspensões a serem aquecidasforam postas no agitador multitérmico e agitadas a 90°C por 8 minutos. Asamostras foram então removidas do agitador multitérmico armazenadas emtemperatura ambiente por 24 horas. A resistência dos géis resultantes foientão medida usando um analisador de textura TA-TX2 (Stable Micro Sys-tems). Esta medição foi realizada usando o êmbolo de penetração SMSP/0,5R076 (Stable Micro Systems) com um diâmetro de 12 mm como sistema demedição. Os parâmetros que seguem foram aplicados para a medição de TAcom a célula de medição de 5 kg:

• Opções: medir força em direção de pressão

• Teste único

• Parâmetro: velocidade adiante 2,00 mm/s

• Velocidade de teste: 0,50 mm/s

· Velocidade reversa: 0,50 mm/s

• Curso (profundidade de penetração): 3 mm

• Força de disparo: 2 g

O comportamento de formação de estrutura de várias inulinasapós tratamento térmico em água foi investigado. Ficou evidente a partir dis-to que a inulina de chicória (Raftiline HP® e Beneo HPX®) não forma estrutu-ras do tipo gel sob essas condições (Tabela 12). Em contraste com elas, asinulinas da invenção (DPw = 86 ou 94 de secagem por congelamento) for-mam estruturas muito fortes. Surpreendentemente, a amostra onde a inulinaseca por pulverização com DPw = 86 foi usada também formou géis conside-ravelmente mais fortes do que as amostras comparáveis onde a inulina foiseca por congelamento. Isto é particularmente claro a partir do fato de queas resistências de gel encontradas com concentração de apenas 15% (p/p)de inulina empregada foram ainda distintamente maiores do que aquelascom as amostras comparativas secas por congelamento a 20%.Tabela 12: Formação de estrutura da inulina após aquecimento em água

<table>table see original document page 50</column></row><table>

*- η = 2

** - η = 4

7. Propriedades prebióticas

O efeito prebiótico de inulina de acordo com a invenção foi in-vestigado em um estudo de modelo in vivo em um sistema de fermentaçãode três estágios (modelo de intestino). Os tipos de bactérias que colonizam osistema de fermentação, e suas atividade metabólicas (formação de ácidosgraxos de cadeia curta), foram averiguados.

1. Materiais e métodos:

a) Sistema de cultura de três estágios contínuo:Um sistema de cultura de três estágios contínuo que foi anteri-ormente descrito por Pereira e outros (2003) Appl. Environ. Microbiol 69(8),4743-4752 e Probert e outros (2004) Appl. Environ. Microbiol. 70, 4505-4511, foi usado neste estudo. O modelo de intestino consistia em três recipi-entes de cultura V1, V2 e V3 com volumes de trabalho de 0,28, 0,30 e 0,30litro que foram dispostos em série. Cada recipiente foi provido com um agi-tador magnético, a temperatura foi mantida a 37°C por meio de um banho deágua e òpH nos recipientes individuais foi controlado por um controlador depH Electrolab. O sistema todo (incluindo reservatório de meio) foi operadosob condições anaeróbicas passando nitrogênio livre de oxigênio estéril pelolíquido. O pH nos três recipientes foi ajustado adicionando a quantidade a-propriada de HCI a 0,5M-NaOH a 5,5 (V1), 6,2 (V2) e 6,8 (V3). O recipiente 1simulou as condições bacterianas no intestino grosso anterior. Ele era relati-vamente rico em nutrientes, tinha um pH relativamente mais ácido e umtempo de residência mais curto do que o recipiente 3 com um pH mais neu-tro e comparativamente pouco substrato. O recipiente 3 simulou a parte pos-terior do intestino grosso. O recipiente 2 serviu de modelo para a partetransversal, central, do intestino grosso (colo transverso).

Nitrogênio livre de oxigênio foi continuamente soprado no meiode cultura estéril, e ele foi introduzido por meio de uma bomba peristálticaem V1 que levou seqüencialmente a V2 e V3. O meio de cultura consistianos componentes que seguem em água destilada (g/L): amido de batata,5,0; pectina (citrus), 2,0; caseína (sal de sódio), 3,0; Raftiline LS (Orafti, Tie-ne; BE), 1,0; xilano (casca de aveia), 2,0; arabinogalactano (Fluka), 2,0; go-ma guar, 1,0; mucina (tipo gástrico de porco III), 4,0; triptona (Oxoide), 5,0;água peptona (Oxoide), 5,0; extrato de levedura (Oxoide); 4,5; sais de bileNo. 3 (Oxoide), 0,4; HCI L-cisteína, 0,8; NaHCO3 (Fishcer Scientific), 1,5;hemina, 0,05; NaCI (Fisher Scientific), 4,5; KCI (Fisher Scientific), 4,5; Ca-CI2x6H20 (BDH), 0,15; KH2PO4 (BDH), 0,5; FeS04x7H20 (BDH), 0,005; Mg-S04x7H20 (Fisher Scientific), 1,25. Ainda, 1,0 ml de Tween 80 (BDH) e 10microlitros de vitamina K foram adicionados. Uma concentração de 4 ml deuma solução a 0,025% (p/v) de resazurina foi adicionada ao meio de cresci-mento como indicador de condições anaeróbicas. O meio foi autoclavado a1210C por 15 minutos e esfriado sob uma atmosfera de nitrogênio. A menosque de outro modo indicado, todos os agentes químicos foram compradosda Sigma Chemical Co., UK.

Coleta e preparação de material fecal:

O volume restante de cada recipiente foi composto com suspen-são fecal recém-preparada de um homem de 30 anos de idade que não ti-nha tomado quaisquer antibióticos por três meses antes do teste. A suspen-são fecal fresca a 20% (p/v) foi preparada com solução salina tamponadacom fosfato reduzida previamente (PBS) e digerida em velocidade normalpor 2 minutos em um aparelho de digestão (estômago). Resíduos de comidagrandes foram removidos através de um saco do filtro. Cem ml da suspen-são resultante foram então empregados ao inoculato de cada um dos trêsrecipientes de fermentação. O sistema foi inicialmente operado como culturaem batelada usando o meio de cultura durante 48 horas. Após 48 horas defermentação de cultura em batelada, o meio de cultivo complexo que simulaa composição de fluido intestinal foi introduzido em V1 e então em V2 e V3através da bomba peristáltica. O tempo de residência (R) foi calculado comotaxa de diluição recíproca para cada recipiente. O tempo de residência foiajustado em 27,1 horas, e o sistema foi operado por 12 dias após o períodode equilíbrio de 48 horas para assegurar um estado uniforme. O tempo deresidência total foi o total dos tempos de residência individuais R de cadafermentador.

Amostragem:

A primeira amostra (5 ml) (dia 0) foi obtida após fermentação por24 horas. A fermentação continuou até que um estado uniforme fosse atingi-do (após 10-12 dias) (SS1). Neste estágio, amostras do líquido de culturaforam removidas de cada recipiente para análise subsequente de bactérias eácidos graxos de cadeia curta e usadas como indicador de SS1. Após SS1ter sido atingido, o substrato de teste foi posto no recipiente 1 cada dia porum período adicional de 10-12 dias. A fermentação foi continuada até queum estado uniforme adicional (SS2) foi atingido e novamente amostras foramobtidas do líquido de cultura de cada recipiente para análise subsequente.

Contagem e bactérias em amostras fecais e amostras do modelode intestino Através de análise FISH:

Amostras de recipientes individuais do sistema de fermentaçãoforam tratadas conforme mostrado abaixo. Preparação da amostra: Amos-tras (375 μΙ) foram removidas das culturas de batelada, adicionadas a 1125μΙ de solução de paraformaldeído filtrada 4% (p/v) (pH 7,2), misturadas earmazenadas a 4°C da noite para o dia a fim de fixar as células. A's célulasfixadas foram centrifugadas a 13.000 rpm por 5 minutos e lavadas duas ve-zes em solução tampão de fosfato filtrada e ressuspensas em 150 μΙ dePBS. Etanol (150 μΙ) foi adicionado e a amostra foi misturada e armazenadaa -20°C até ser usada, mas não por mais de 3 meses.Hibridização:

As células fixadas (16 μΙ) foram adicionadas a 264 μΙ de tampãode-hibridização filtrado preaquecido (forno) (preaquecido em X (Tris-HCI a 30mM, NaCI a 1,36 M, pH 7,2, dodecilsulfato de sódio a 0,1% v/v, SDS) e mis-turadas. A mistura foi adicionada à sonda marcada com Cy3 (50 ng/μΙ) emuma razão de 9:1 (v/v), misturada e posta no forno de hibridização em umatemperatura adequada da noite para o dia.Lavagem e filtragem:

A amostra hibridizada (alíquotas adequadas para atingir de 30 a150 células por campo de visão) foi adicionada a 5 ml de tampão de hibridi-zação filtrado, preaquecido (Tris-HCI a 20 mM, NaCI a 0,9M, pH 7,2) juntocom 20 μΙ de DAPI (4',6-diamono-2-fenilindol, 500 ng/μΙ) e deixada na tem-peratura de hibridização adequada por 30 minutos. A mistura foi posta emum filtro de membrana preto com um tamanho de poro de 0,2 μηη (GTPB01300, Millipore Corporation). Slowfade-Light Antifade (Molecular ProbesEurope, Leiden, NL) foi posto no filtro a fim de prevenir desaparecimento dafluorescência, e os apoios foram armazenados no escuro a 4°C por um má-ximo de 3 dias.

Um mínimo de 15 campos de visão por apoio foi examinado comum microscópio de fluorescência Nikon Microphot EPI (1000 χ amplificação).O filtro DM510 (550 nm) foi usado a fim de contar as células hibridizadas, e ofiltro de extração DM400 foi usado para as células tingidas com DAPI.

A fórmula que segue foi usada para calcular a concentração decélulas C (células/ml) em cada amostra:C = NxI 5,56 χ 14.873,74 χ (1000/q)

Ν: número médio de células contadas por campo de visãoq: volume de mistura de hibridização usada14.873.74: constante de ampliação15,56: fator para todas as diluições feitas

Sondas de oligonucleotídeo direcionadas a rRNA de 16S específi-cas de gênero marcadas com corante fluorescente Cy 3 que tinham sido previ-amente projetadas e validadas foram usadas para contar grupos importantesde bactérias. As sondas usadas foram Bif 164, específica para bifidobacterium(Langedijk (1995), Appi Environ. Microbioi 61, 3069-3075), Bac303, específicapara bacteroides (Manz e outros (1996) Microbiology 142, 1097-1106), Hisl 50,específica para o subgrupo Clostridium histolyticum e Erec482, específicapara o grupo retal Clostridium coccoides-Eubacterium (Franks e outros(1998) Appi Environ. Microbioi 64, 3336-3345), LabM 58, específica paraLactobacillus/Enterococcus (Harmsen e outros (1999) Microb. Ecoi HealthDis. 11, 3-12), Ato291, específica para grupo Atopobium. O corante de ácidonucleico 4',6-diamino-2-fenilindol (DAPI) foi usado para contagem de célulatotal (Tabela 13).

Tabela 13

<table>table see original document page 54</column></row><table>

Análise de ácidos qraxos de cadeia curta:

Ácidos graxos de cadeia curta (SCFA) em amostras obtidas devários recipientes do modelo de intestino foram analisados conforme descritoem Pereira e outros, Appl. Environ. Microbiol. (2003) 69(8), 4743-4752. Asamostras foram centrifugadas (6000 g, 10 minutos) a fim de remover bacté-rias e sólidos e então filtradas em um filtro de HPLC de polissulfona com umtamanho de poro de 0,2 pm. Então 200 μΙ de cada sobrenadante filtrado fo-ram diluídos com 800 μΙ de acetonitrila (1:4) que continha ácido 2-etilbutíricoa 3,7 μΜ como padrão interno. Os ácidos graxos foram determinados atra-vés de cromatografia de gás usando um sistema de GC HP 5890 série Ilmento não-significante foi observado nos outros recipientes. Um aumentoem bifidobactérias no recipiente 1 foi observado, mas não foi significante,com a amostra comparativa. A população de Iactobacilos no recipiente 3 foisignificantemente maior (P<0,05), mas nenhuma mudança foi observada napopulação de Clostridia. Grupo de bacteroides e Clostridium coccoides-E.rectale foi significantemente menor no recipiente 2 (P<0,05).

A Figura 12 mostra uma comparação da concentração de ácidosgraxos de cadeia curta (SCFA) em todos os recipientes entre estado unifor-me 1 (linha de base) (SS1) e estado uniforme 2 (SS2) após tratamento cominulina da invenção. Os ácidos graxos individuais são postos em gráfico emcada caso como diagrama de bile para cada recipiente e estado uniforme(por exemplo, V1-SS1). Da esquerda para a direita: ácido acético, ácido pro-piônico, ácido isobutírico, ácido butírico, ácido isovalérico, ácido n-valérico,ácido caproico.

A Figura 13 mostra a comparação da concentração de ácidos

graxos de cadeia curta (SCFA) em todos os recipientes entre o estado uni-forme 1 (linha de base) (SS1) e estado uniforme 2 (SS2) após tratamentocom a amostra comparativa.

Houve um aumento na concentração propiônica em todos os três recipientes após adição de inulina da invenção, e o aumento no recipi-ente 2 foi significante. A concentração de butirato aumentou nos recipientes1 e 2. Adição da amostra comparativa ao modelo de intestino levou a umaumento na concentração de acetato, propionato e butirato em todos os re-cipientes, mas isto foi significante apenas no recipiente 2.

8. Massa e propriedades de cozeduraMaterial

O material usado para os testes de cozedura compreendia mis-turas de farinha compostas da farinha de trigo Americana "King Midas"®mais Raftiline HP® fornecida pela Orafti ou inulina da invenção com DPw =86, 8% da farinha foram substituídos com inulina. A farinha misturada e ocontrole sem substituição foram então submetidos a medições de reologiade massa e testes de cozedura.Métodos:provido com uma coluna capilar envolvida com sílica fundida (PermabonFFAP, Macherey Nagel, DE) (25 m χ 0,32 mm, espessura da película 0,25μιτι). Hélio foi usado como gás veículo com um fluxo volumétrico de 2,42ml/min. A temperatura da coluna era 140°C e a temperatura do injetor e de-tector era 240°C. 5 minutos após injeção da amostra, a temperatura da colu-na foi aumentada em etapas de 20°C/min para 240°C e o sistema foi deixa-do ativar por mais 5 minutos. A composição do gás foi analisada usando umChemStation Apg-top Software HP 3365 série II, Versão A0.03.34. Os ácidosseguem foram usados como padrões externos, cada um com concen-trações na faixa de a partir de 0,5 a 40 mM: ácido acético, ácido propiônico,ácido n-butírico, ácido n-valérico, ácido isovalérico (Fluka), ácido isobutírico(FIuka) e ácido n-caproico. A menos que de outro modo indicado, todos osácidos foram comprados da Sigma e eram mais de 99% puros. As concen-trações de SCFA foram calculadas usando uma calibragem padrão interna eexpressas em mM por litro.2. Resultados

As inulinas que seguem foram testadas no modelo de intestinodescrito abaixo:

Inulina da invenção: DPw = 95

Amostra de comparação: Raftiline HP® (Orafti), DPw = 33

Comparação foi feita entre o segundo estado uniforme (SS2) e oprimeiro estado uniforme (SS1) e os dados foram analisados usando o testet de Student.

A Figura 6 mostra a comparação da população bacteriana norecipiente 1 (V1) entre estado uniforme 1 (SS1) e estado uniforme 2 (SS2)após tratamento com inulina da invenção. As Figuras 7 e 8 mostram compa-rações correspondentes para recipientes 2 (V2) e 3 (V3).

A figura 9 mostra a comparação da população bacteriana no re-cipiente 1 (V1) entre estado uniforme 1 (SS1) e estado uniforme 2 (SS2) a-pós tratamento com a amostra comparativa. As Figuras 10 e 11 mostramcomparações correspondentes para os recipientes 2 (V2) e 3 (V3).

Adição da inulina da invenção no modelo de intestino levou a umaumento significante nas bifidobactérias no recipiente 1 (P<0,05). Um au-1) Farinograma (obediência aos Padrões ICC e AACC):

O farinograma é usado para averiguar a capacidade de absor-ção de água da farinha e avaliar as propriedades de amassamento da mas-sa preparada.

Reagentes: água destilada

Equipamento:

Farinograph® E com porta USB fornecido pela Brabender, AlemanhaAmassador de 10 g com 2 lâminas para amassamento (Brabender)Os parâmetros que seguem foram determinados e avaliadosquanto às características de qualidade da farinha de teste:

Absorção de água da farinha: definida como a quantidade de águaem ml requerida por 100 g de farinha com teor de umidade de 14% quando amassa atingiu uma consistência de massa máxima de 500 FU (UnidadesFarinograph).

A consistência da massa é a resistência da massa em revolu-ções constantes (53 rpm), que é mostrada em FU.

O tempo de desenvolvimento da massa é definido como o tempoem minutos entre o início do teste (adição de água) e o pico máximo.

2) Teste de cozedura (pão de forma branco):Equipamento

• Farinograph com câmara de amassamento de farinha de 300 gfornecido pela Brabender, Alemanha

• Forno (MIWE gusto, Alemanha)

• Fermentador completamente automático (Foster RBC Mk3, daHobart, Alemanha)

• Máquina pesando 2 kg (Sartorius)

• Amassador (Brabender, Alemanha)Ingredientes para a massa:

300 g de farinha (com 14% de umidade de farinha)12 g de levedura (fresca)6 g de sal (sal de mesa)15 g de gordura para forno3 g de açúcarÁgua (equivalente à absorção de massa menos de 2,5%)Processamento da massa:

As farinhas e os ingredientes foram misturados na câmara deamassamento por 1 minuto e então a quantidade apropriada de água foi adi-cionada. Após amassar por 2 minutos, o equipamento foi desligado a fim deretornar a massa da parede da câmara de amassamento para a massa. Oprocesso de amassamento foi continuado por 6 minutos ou 12 minutos paraas farinhas suplementadas com inulina, de acordo com os dados do farino-grama (tempo de desenvolvimento da massa em minutos). A temperaturafinal das massas era cerca de 26°C. Após o término no amassamento, amassa foi deixada descansar por 10 minutos e então o peso total da massafoi determinado. A divisão e medição do peso dos pedaços de massa acon-teceram dentro de 10 minutos. A massa foi dividida em dois pedaços demassa de tamanho igual e amassada em torno do amassador (Brabender)por 10 segundos e então amassada em oblongos. Os pedaços de massaforam postos nos moldes de cozedura de pão e levados a fermentador com-pletamente automático (32°C, umidade 87%) por 60 minutos (tempo de fer-mentação). O forno foi preaquecido para 250°C. Os pedaços fermentados demassa foram pulverizados com água e postos no forno. Após um tempo decozedura de 30 minutos em cerca de 200°C, os pães foram removidos e dei-xados esfriar em temperatura ambiente por 1 hora. O volume do pão foi me-dido através do deslocamento de sementes de colza. As propriedades demiolo foram investigadas visualmente e usando o analisador de textura TA-TX2 (Stable Micro Systems). A resistência do miolo foi medida em pedaçosde pão de cerca de 1,5 cm de espessura usando o furador de penetraçãoSMSP/0,5 R076 (Stable Micro Systems) com um diâmetro de 12 mm. Osparâmetros que seguem foram usados na medição de TA com a célula demedição de 5 kg. A medição aconteceu após o ajuste que segue:

• Opções: mede de força em direção de pressão

· Teste único

• Parâmetro: velocidade avançada 2,00 mm/s

• Velocidade de teste 0,50 mm/s

• Velocidade reversa 0,50 mm/s• Curso (profundidade de penetração) 7 mm

Força de disparo 2 g

Resultados:

Definição de termos:

Rendimento da massa (DY): é a quantidade de massa de 100partes em peso de farinha. É uma característica tornar possível comparar acapacidade de absorção de água e resistências de farinha. Uma massa feitade 100 kg de farinha e 60 kg de água com um DY de 160 é um exemplo. Orendimento da massa tem várias definições:

Rendimento de massa líquido: é a quantidade de massa de 100partes em peso de farinha e a água

Rendimento de massa bruto: é a quantidade de massa de 100partes em peso de farinha, a água e os outros ingredientes

Rendimento de massa prático: é o rendimento de massa brutolevando em consideração processamento, fermentação e perdas de peso.

Perda de cozedura: a perda de cozedura é compreendida peloversado na técnica pela perda em peso da massa ou pedaços de massa du-rante a cozedura. Isto é principalmente composto de água evaporada damassa, e quantidades mínimas de outros constituintes voláteis tal como ál-cool, ácidos e ésteres orgânicos; o versado na técnica então também fala de"perda de água" da mesma maneira.

A perda de peso (= perda de cozedura) é sempre baseada nopeso da massa e representa a razão de peso de massa para peso de pão.

Ela é calculada como segue:

Perda de cozedura = peso da massa - peso do pão χ 100peso da massa

Perdas de cozedura altas têm efeitos desvantajosos sobre orendimento de produto de padaria e então sobre o peso e número de produ-tos assados a serem vendidos. Ainda", as perdas de água durante o proces-so de cozedura têm efeitos desvantajosos sobre o frescor dos produtos as-sados, que então se tornam velhos, isto é, "envelhecidos", logo.Rendimento de produto (também rendimento de pão):O rendimento de pão (BY) é a quantidade de produto assadoobtido de 100 partes de farinha. O rendimento de pão é baseado na quanti-dade de farinha processada.

Exemplo: 40 kg de farina resultam em 60 kg de pão e um BY de150.

Tabela 14: Dados de farinograma

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A investigação da reologia da massa revelou um aumento distin-tQ„em capacidade de absorção de água da massa com substituição pe!a iny-lina da invenção (Tabela 14). Ela é quase 9 por cento maior do que aquelada farinha comparativa que continha Raftiline HP e é ainda 3% maior do queaquela da farinha comparativa onde nenhuma substituição foi feita. O rendi-mento da massa, que é de interesse comercial particular, é consequente-mente claramente maior para a massa contendo a inulina da invenção (Ta-bela 15). Isto é surpreendente porque a massa à qual Raftiline HP® foi adi-cionada mostra uma redução maior no rendimento de massa comparadocom a massa controle. A consistência da massa com inulina da invenção étambém vantajosa em comparação com a massa com Raftiline HP®. O ren-dimento de pão é o mais alto para o pão com inulina da invenção, enquantoele é o menor para o pão contendo Raftiline HP®. O volume específico dosdois pães onde há substituição de farinha é similar, enquanto os outros pa-râmetros de qualidade tal como cor do miolo, elasticidade, porosidade oudesprendimento são um pouco melhores para o pão com inulina da invençãodo que para o pão comparativo com Raftiline HP® e o controle sem substitui-ção. O pão contendo inulina da invenção mostra uma vantagem particularem relação à manutenção do frescor. Isto é melhorado conforme mostradopela resistência do miolo comparado com o pão controle e o pão contendoRaftiline HP. Uma propriedade vantajosa adicional é também o teor de águamaior do miolo fresco e armazenado, que está associado em particular commelhora sensorial além de um envelhecimento reduzido.3) Produção de pasta:

Uma aplicação adicional das amostras de inulina foi testada emprodução de pasta. Neste caso, 5% e 10% da farinha de trigo foram substitu-ídos por inulina.

1) Material

Farinha de trigo DurumInulina da invenção com DPw = 86Raftiline HP®.

2) Preparação da massa de macarrão:

A massa de macarrão foi preparada usando 200 g de mistura defarinha-inulina com adição de 34,5 g ou 35% de água. A massa controle (fa-rinha de trigo sem substituição) foi preparada com adição de 34% de água.Uma vez que as massas com inulina eram ligeiramente mais secas do queaquelas do controle, a adição de água foi consequentemente aumentada. Asmassas de macarrão foram preparadas usando a máquina de macarrão "Lu-na" da HÃUSSLER. O tempo de fabricação de massa foi 5 minutos. Pastalarga foi produzida usando um molde com uma largura de 9,5 mm.

3) Método:

Uma parte dos fios de macarrão recém-extrudados foi, imedia-tamente após deixar a máquina, tratados com 3 tempos de cozimento dife-rentes. A segunda parte foi deixada secar ao ar sob condições ambientespor 2 dias. Para o teste de cozimento, em cada caso 3 fios de macarrão(frescos) foram pesados e passados por um falcon (50 ml) carregado com 45ml de água fervente. O macarrão foi fervido em cerca de 100°C por 2, 3 ou 5minutos e então deixado escorrer em uma peneira por um tempo constante.Os pesos dos fios de macarrão cozidos foram então determinados. O in-chamento do macarrão foi determinado a partir dos pesos dos fios de macar-rão antes e após cozimento.

Os fios de macarrão que tinham secos por 2 dias foram da mesmamaneira cozidos, mas pelos tempos de 5, 10 e 15 minutos. Nesses casos, oíndice de inchamento do macarrão foi também determinado.

A fórmula que segue foi usada para calcular o índice de inchamento:índice de inchamento: (peso após cozimento/peso antes do co-zimento)4) Resultado:

A adição maior de água para preparar a massa de macarrãocom inulina suplementada correspondentemente aumentou o rendimento damassa de macarrão. O aumento no rendimento é vantajoso em questões co-merciais. Pode ser também estabelecido do teste de cozimento que o macar-rão com inulina suplementada da invenção deve distintamente aumentar oinchamento comparado com o controle e também com o macarrão suplemen-tado com Raftiline HP®. Este aumento está entre 5 e 20% (vide Tabela 16).

Tabela 16:

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9. Produção de iogurte

As receitas de iogurte são listadas na Tabela 17. A inulina dainvenção (inulina de cadeia muito longa, VLCI) correspondia à inulina do E-xemplo 1/Tabela 2, foi seca por pulverização sob as condições da Tabela 9,Teste 2, e tinha um grau de polimerização médio DPw de 86; a amostracomparativa Beneo HP® tinha um DPw de 34. Todas as porcentagens se re-ferem à porcentagem em peso com base na composição total, a menos quede outro modo indicado.

Os ingredientes secos foram misturados a fim de facilitar a dis-persão de inulina e leite em pó sem gordura, e então adicionados ao leitecom cisalhamento moderado a fim de formar a base de iogurte. A base pa-dronizada foi mantida a 4°C por 3 horas de modo que o leite em pó sem gor-dura pudesse dissolver completamente. Cada batelada foi pasteurizada a80°C por 30 minutos, rapidamente esfriada para 44°C e inoculada com Yo-Flex 88 (Streptococcus thermophilus e Lactobacillus delbrueckii, da Chr.Hansen Inc.) em uma concentração de 3,6 g/l. Para iogurte fermentado depote (iogurte estilo creme de ovos), base inoculada foi vertida em embala-gens finais antes da incubação. As misturas de base foram incubadas a44°C por 4-6 horas até que atingiram pH 4,5 (pH inicial de cerca de 6,8).Quando o iogurte atingiu pH 4,5, as amostras de iogurte tipo creme de ovosforam esfriadas para 4°C e mantidas aí por 48 horas a fim de atingir a visco-sidade máxima. A viscosidade foi medida com um viscômetro Brookfield comum adaptador helipath.

A Tabela 17 mostra os resultados com iogurte fermentado empote (estilo creme de ovos). Inulina seca por pulverização a 2,5% da inven-ção causou um aumento maior na viscosidade do que 4,5% de inulina doexemplo comparativo. O iogurte com inulina da invenção também tinha umaviscosidade maior do que o iogurte comparativo com um teor de produtos degordura de 3,35%.

Tabela 17

<table>table see original document page 64</column></row><table>Tabela 17 -continuação-

<table>table see original document page 65</column></row><table>

Todos os dados em porcentagem com base na massa total, ex-ceto viscosidade e pH.

Claims (33)

1. Inulina, caracterizada pelo fato de que em um grau de polimeri-zação médio DPw entre 83 e 98.

2. Inulina de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelofato de que tem um grau de polimerização médio DPw entre 85 e 95.

3. Inulina de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizadapelo fato de que tem um grau de ramificação entre 0,5 e 2,0% em mol demonômeros de frutose 2-1,6 ligada com base em todos os monômeros deinulina.

4. Inulina de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3,caracterizada pelo fato de que o quociente DPw/DPn é menos do que 1,25.

5. Inulina de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3,caracterizada pelo fato de que o quociente DPw/DPn é menos do que 1,20.

6. Inulina de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3,caracterizada pelo fato de que o quociente DPw/DPn é menos do que 1,15.

7. Inulina de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6,caracterizada pelo fato de que o teor de glicose é menos do que 2% em pe-so com base no peso seco total.

8. Inulina de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6,caracterizada pelo fato de que o teor de glicose é menos do que 1% em pesocom base no peso seco total.

9. Inulina de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8,caracterizada pelo fato de que o teor de frutose é menos do que 2,5% empeso com base no peso seco total.

10. Inulina de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a-8, caracterizada pelo fato de que o teor de frutose é menos do que 1,5% empeso com base no peso seco total.

11. Inulina de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10,caracterizada pelo fato de que é uma inulina seca por pulverização.

12. Inulina de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 11-,caracterizada pelo fato de que está na forma de partículas com um diâmetromédio de 100-250 μιη.

13. Processo para obtenção de inulina, caracterizado pelo fatode quea) raízes de alcachofra são moídas,b) um extrato é obtido através de tratamento das raízes moídascom água,c) constituintes de coloração são removidos do extrato obtido,d) inulina é precipitada do extrato,e) a inulina é reprecipitada pelo menos uma vez.

14. Processo de acordo com a reivindicação 13, caracterizadopelo fato de que compreende uma etapa de filtragem adicional.

15. Processo de acordo com a reivindicação 13 ou 14, caracteri-zado pelo fato de que os constituintes de coloração são removidos na etapac) através dei) mistura de íons de magnésio (Mg2+) ao extrato de planta,ii) mistura de pelo menos um componente alcalino ao ex-trato de planta,iii) formação de um precipitado, eiv) remoção do precipitado que se formou do extrato de planta.

16. Processo de acordo com a reivindicação 15, caracterizadopelo fato de que um sal de magnésio é misturado na etapa i).

17. Processo de acordo com a reivindicação 16, caracterizadopelo fato de que o sal de magnésio é selecionado de cloreto de magnésio,sulfato de magnésio, nitrato de magnésio, acetato de magnésio e propionatode magnésio.

18. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações-15 a 17, caracterizado pelo fato de que a etapa i) é realizada em uma tempe-ratura de 60-80°C.

19. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações-15 a 18, caracterizado pelo fato de que a quantidade de componente alcalinoé escolhida de modo que o ajuste da razão molar de OH":Mg2+ é 2,2:1 -*-1,8:1.

20. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações-15 a 19, caracterizado pelo fato de que o componente alcalino é uma solu-ção ou suspensão aquosa de um hidróxido de metal alcalino ou hidróxido demetal alcalinoterroso.

21. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações-15 a 20, caracterizado pelo fato de que o componente alcalino é uma sus-pensão de hidróxido de cálcio.

22. Gênero alimentício, caracterizado pelo fato de que compre-ende inulina tendo um grau médio de polimerização DPw dentre 83 e 103.

23. Gênero alimentício de acordo com a reivindicação 22, carac-terizado pelo fato de que é selecionado de produtos de laticínio, iogurtes,sorvetes, sorvete à base de leite, guarnições à base de leite, pudins, milk-shakes, creme de ovos, queijo, barras de cereais, barras de energia, barrasde café da manhã, doce, produtos de padaria, crackers, bolachas, biscoitos,cereais, lanches, chá gelado, sorvete feito de suco de fruta, bebidas diet,bebidas acabadas, bebidas esportivas, bebidas de estamina, misturas debebida energética para suplementação dietética, alimento para criança ebebê, suco de laranja suplementado com cálcio, pão, croissants, cereais pa-ra café da manhã, talharins, geléias, biscoitos e chocolates sem açúcar, cál-cio mastigável, produtos de carne, maionese, molhos para salada, manteigade nozes, refeições congeladas, molhos, sopas e refeições prontas paraservir.

24. Gênero alimentício de acordo com a reivindicação 22 ou 23,caracterizado pelo fato de que é um produto de extrusão.

25. Suplemento de dieta, caracterizado pelo fato de que com-preende inulina tendo um grau de polimerização médio DPw entre 83 e 103.

26. Preparação cosmética, caracterizado pelo fato de que com-preende inulina tendo um grau de polimerização médio DPw entre 83 e 103.

27. Uso de inulina tendo um grau de polimerização médio DPwentre 83 e 1Ό3, caracterizado pelo fato de ser como adição a gêneros ali-mentícios.

28. Uso de inulina de acordo com a reivindicação 27, caracterizadopelo fato de ser como adição com propriedades prebióticas, agente de textu-rização, agente de aumento de estabilidade, agente de formação de viscosi-dade e/ou fibra dietética.

29. Uso de inulina tendo um grau de polimerização médio DPwentre 83 e 103, carácterizado pelo fato de ser como substituto de gordura ouóleo em gêneros alimentícios.

30. Uso de inulina tendo um grau de polimerização médio DPwentre 83 e 103, caracterizado pelo fato de ser como adição em preparaçõescosméticas.

31. Uso de inulina de acordo com a reivindicação 30, caracteri-zado pelo fato de ser como agente de texturização, agente de aumento deestabilidade e/ou agente de formação de viscosidade.

32. Pasta aquosa de inulina, caracterizada pelo fato de que temum grau de polimerização médio DPw entre 83 e 103.

33. Uso de uma pasta aquosa de acordo com a reivindicação 32,caracterizado pelo fato de ser como componente de proporcionamento deestrutura, substituto de gordura, substituto de óleo, agente de texturização,agente de aumento de estabilidade e/ou agente de formação de viscosidadeem gêneros alimentícios ou preparações cosméticas.